SK287293B6 - Spôsob fermentácie polymyxínu B pomocou produkčného mikroorganizmu Bacillus polymyxa - Google Patents
Spôsob fermentácie polymyxínu B pomocou produkčného mikroorganizmu Bacillus polymyxa Download PDFInfo
- Publication number
- SK287293B6 SK287293B6 SK90-2006A SK902006A SK287293B6 SK 287293 B6 SK287293 B6 SK 287293B6 SK 902006 A SK902006 A SK 902006A SK 287293 B6 SK287293 B6 SK 287293B6
- Authority
- SK
- Slovakia
- Prior art keywords
- fermentation broth
- fermentation
- polymyxin
- concentration
- range
- Prior art date
Links
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 title claims abstract description 48
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 title claims abstract description 48
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 18
- 241000194105 Paenibacillus polymyxa Species 0.000 title claims abstract description 16
- 108010093965 Polymyxin B Proteins 0.000 title claims description 12
- 229920000024 polymyxin B Polymers 0.000 title claims description 12
- 229960005266 polymyxin b Drugs 0.000 title claims description 12
- 244000005700 microbiome Species 0.000 title claims description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 21
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims abstract description 16
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims abstract description 16
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims abstract description 9
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 6
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 claims abstract description 6
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 claims abstract 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N ammonia Natural products N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract 2
- -1 ammonia ions Chemical class 0.000 claims abstract 2
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 claims description 17
- 239000002689 soil Substances 0.000 claims description 12
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 5
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 5
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 4
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 claims description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 claims description 3
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonium chloride Substances [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 claims 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 claims 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 claims 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 abstract description 7
- 238000005273 aeration Methods 0.000 abstract description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 abstract description 3
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 abstract description 2
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 abstract description 2
- 108010040201 Polymyxins Proteins 0.000 description 21
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 13
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 11
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 9
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 9
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 6
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 6
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 5
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 5
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 5
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 5
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 5
- 229940041153 polymyxins Drugs 0.000 description 5
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 5
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 3
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 235000015099 wheat brans Nutrition 0.000 description 3
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 2
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 2
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 2
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 2
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 2
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000013587 production medium Substances 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- ZVKWUIGNYNHTJW-VDQHJUMDSA-N (2s)-2-amino-4-methylpentanoic acid;(2s)-2-amino-4-methylsulfanylbutanoic acid Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O.CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ZVKWUIGNYNHTJW-VDQHJUMDSA-N 0.000 description 1
- 235000017060 Arachis glabrata Nutrition 0.000 description 1
- 244000105624 Arachis hypogaea Species 0.000 description 1
- 235000010777 Arachis hypogaea Nutrition 0.000 description 1
- 235000018262 Arachis monticola Nutrition 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N D-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N 0.000 description 1
- 229930182832 D-phenylalanine Natural products 0.000 description 1
- 241000588722 Escherichia Species 0.000 description 1
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 206010028400 Mutagenic effect Diseases 0.000 description 1
- 241000588769 Proteus <enterobacteria> Species 0.000 description 1
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 1
- 241000607720 Serratia Species 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- 125000006294 amino alkylene group Chemical group 0.000 description 1
- 239000001166 ammonium sulphate Substances 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000005187 foaming Methods 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- SURQXAFEQWPFPV-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate heptahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.[Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O SURQXAFEQWPFPV-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 1
- WRUGWIBCXHJTDG-UHFFFAOYSA-L magnesium sulfate heptahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.[Mg+2].[O-]S([O-])(=O)=O WRUGWIBCXHJTDG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940061634 magnesium sulfate heptahydrate Drugs 0.000 description 1
- 231100000243 mutagenic effect Toxicity 0.000 description 1
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 1
- MUZYEKLWXWDOOD-IPWQJAHISA-N n-[(2s)-4-amino-1-[[(2s,3r)-1-[[(2s)-4-amino-1-oxo-1-[[(3r,6s,9s,12s,15r,18s,21s)-6,9,18-tris(2-aminoethyl)-15-benzyl-3-[(1r)-1-hydroxyethyl]-12-(2-methylpropyl)-2,5,8,11,14,17,20-heptaoxo-1,4,7,10,13,16,19-heptazacyclotricos-21-yl]amino]butan-2-yl]amino] Polymers N1C(=O)[C@H](CCN)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCN)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCN)NC(=O)CCCCCCC)CCNC(=O)[C@@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCN)NC(=O)[C@H](CCN)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]1CC1=CC=CC=C1 MUZYEKLWXWDOOD-IPWQJAHISA-N 0.000 description 1
- 125000002801 octanoyl group Chemical group C(CCCCCCC)(=O)* 0.000 description 1
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 description 1
- 108010089148 polymyxin B2 Proteins 0.000 description 1
- SGPYLFWAQBAXCZ-RUDZPDEXSA-N polymyxin B2 Polymers N1C(=O)[C@H](CCN)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCN)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCN)NC(=O)CCCCC(C)C)CCNC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCN)NC(=O)[C@H](CCN)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]1CC1=CC=CC=C1 SGPYLFWAQBAXCZ-RUDZPDEXSA-N 0.000 description 1
- 239000003910 polypeptide antibiotic agent Substances 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 235000019156 vitamin B Nutrition 0.000 description 1
- 239000011720 vitamin B Substances 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
- C12P21/02—Preparation of peptides or proteins having a known sequence of two or more amino acids, e.g. glutathione
Abstract
Riešenie sa týka spôsobu vedenia fermentácie s produkčným kmeňom Bacillus polymyxa pri priemyselnej výrobe antibiotika polymyxínu B s výťažnosťou od 1,8 do 2,8 g/l filtrátu fermentačnej pôdy pri teplote 28 °C, pretlaku 40 - 70 kPa, vzdušnení od 0,4 do 1 vvm, koncentrácii rozpusteného kyslíka minimálne 60 % udržiavaním pH a optimálnej koncentrácie glukózy a amoniakálnych iónov.
Description
Vynález sa týka spôsobu vedenia fermentácie produkčného mikroorganizmu Bacillus polymyxa s produkciou polymyxínu B.
Doterajší stav techniky
Polymyxíny patria medzi cyklické polypeptidové antibiotiká. Prvé zmienky o polymyxíne ako antibiotiku pochádzajú z obdobia päťdesiatych rokov minulého storočia. Rozlišujeme polymyxíny A, B, C, D, E, F, M ,S a T.
Polymyxín B predstavuje zmes polymyxínov BI, B2, B3 a BIL Zloženie uvedených polymyxínov a zastúpenie jednotlivých aminokylenín a mastných kyselín sú nasledovné:
| Antibiotikum | L-Threonin | L-Leucin | D-Fenylalanin | L-DBA | Mastná kyselina |
| Polymyxín BI | 2 | 1 | 1 | 6 | MOA |
| Polymyxín B2 | 2 | 1 | 1 | 6 | MHA |
| Polymyxín B3 | 2 | 1 | 1 | 6 | Octanoyl |
DBA - 2,4 diaminobutyrát
MOA - 6-metyloktanoát
MHA - 6 - metylheptanoát
Polymyxín B je antibiotikum na humánne účely účinné na Gram-negatívne tyčinky, predovšetkým Shigely, Salmonely, Escherichie a Klebsiely. Je neúčinné na kmene Proteus, Providentia, Bacterioides a Serratia a na väčšinu húb a Gram-pozitívnych baktérií. Z tráviaceho traktu sa prakticky nevstrebáva, slabo preniká do tkanív, nepenetruje do bunky a vylučuje sa obličkami.
Produkčný mikroorganizmus: Bacillus polymyxa
Publikované patenty týkajúce sa oblasti fermentácie polymyxínu B biosyntézou pomocou kmeňa Bacillus polymyxa sú nasledovné:
1. United states patent office 2,595,605
V patente je opísané zloženie fermentačného média. Prídavok kukuričnej múky zvýšil produkciu antibiotika z 1200 IU/ml na 1800 - 2000 IU/ml za 88 h kultivácie, čo zodpovedá koncentrácii polymyxínu 0,251 g/1, stanoveného metódou kvapalinovej chromatografie, vzhľadom na vtedajší stupeň poznania nie je spomenuté, o aký konkrétny typ polymyxínu ide.
2. United states patent office 2,571,104
V patente je opísaný mutagénny účinok UV žiarenia na bunky produkčného kmeňa, čím sa získal izolát s 5-násobne vyššiou produkciou polymyxínu oproti rodičovským izolátom. Získaný izolát má označenie Bacillus polymyxa NRRL B-719, je stabilný, svoje produkčné vlastnosti si zachováva po 40. generáciu, asimiluje nasledovné uhlíkaté substráty: glukóza, xylóza, škrob, ako zdroj aminokyselín je vhodný com-steep, arašidová múka, sójová múka, kvasničný extrakt, mleté zrno.
V patente je opísaný i spôsob jednorazového príkrmu fermentačného média v 72. hodine kultivácie. Uvádzaná dosiahnutá výťažnosť polymyxínu 1000 IU/ml za 116 h kultivácie zodpovedá koncentrácii 0,125 g/1.
3. United states patent office 2,602,041
Patent opisuje zlepšený izolačný proces a umŕtvovanie buniek producenta pomocou 0,4 % roztoku chloroformu. Podľa vykonanej patentovej rešerše bol nájdený ruský patent, týkajúci sa spôsobu fermentácie polymyxinu M a japonské patenty, týkajúce sa fermentácie polymyxínov F, TI, SI.
Podstata vynálezu
Vynález sa vzťahuje na vedenie fermentačného procesu s dosiahnutím produkcie antibiotika Polymyxín B v koncentrácii 2,8 g/1 dosiahnutej v laboratórnom fermentore s objemom 80 1. Produkčný kmeň Bacillus polymyxa rastie na agarovej pôde, ktorej hlavným zdrojom aminokyselín je sójová múka. Bakteriálna suspenzia produkčného kmeňa naočkovaná na Petriho misky s agarovou pôdou sa kultivuje v termostate pri teplote 28 °C počas od 68 do 72 h. V laboratórnom meradle fermentácia prebieha na trepacom stroji pri miešaní 240 ot/min. pri teplote 28 °C. Najlepšie izoláty dosahujú produkciu cca 1,8 g polymyxínu B/ 1 filtrátu fermentačnej pôdy, stanovených metódou HPLC za 30 hodín kultivácie s vyhovujúcim zastúpením jednotlivých polymyxínov a s tvorbou vedľajšieho produktu do 3 %.
Inokulum v objeme od 1 do 10 % z objemu fermentačného média sa kultivuje v inokulačnom fermentore. Inokulačné médium, zloženie ktorého môže byť zhodné s produkčným médiom, sa očkuje od 0,05 % do 1 % bakteriálnej suspenzie, pripravenej zo šikmých agarov. Kultivácia prebieha za prísne aseptických podmienok od 18 do 24 h za pretlaku od 40 do 50 kPa, vzdušnenia od 0,4 do 1 vvm a intenzívneho miešania. Pre dobre narastené inokulum je charakteristické: pH v oblasti od 5,2 do 6,5 v závislosti od použitej pôdy, pohyblivé krátke tyčinky produkčného mikroorganizmu v exponenciálnej fáze rastovej krivky.
Narastené inokulum je naočkované do sterilného produkčného média v objeme od 1 do 10 %. Podmienky na fermentáciu polymyxínu v produkčnom fermentore sú: pretlak od 40 do 70 kPa, vzdušnenie od 0,5 do 0,8 vvm, regulácia pH v rozpätí od 5,2 do 5,6 roztokom čpavku, udržiavanie koncentrácie glukózy v rozmedzí od 0,5 do 2,5 g/1 pomocou kontinuálneho dávkovania roztoku glukózy (60 %), udržiavanie koncentrácie amoniakálnych iónov v rozmedzí od 0,3 do 0,6 g/1 pomocou dávkovania roztoku síranu amónneho (20 %), v prípade penenia dávkovanie rastlinného a syntetického odpeňovadla. Celý proces fermentácie prebieha za prísnych aseptických podmienok. Počas fermentácie sa koncentrácia rozpusteného kyslíka vo fermentačnej pôde udržuje nad 30 % nasýtenia. Zdrojom aminokyselín vo fermentačnom médiu sú sójová múka v koncentrácii od 0,5 do 2,0 %, pšeničná múka od 0,5 do 5 %, pšeničné otruby v koncentrácii 5 až 15 g/1, com-steep od 0,2 do 2,5 %, ďalšie zložky sú glukóza v koncentrácii od 0,5 do 5 %, síran amónny od 0,1 do 1 %, dihydrofosforečnan draselný od 0,01 do 0,1 %, heptahydrát síranu horečnatého od 0,01 % do 0,1 %, heptahydrát síranu železnatého od 0,001 do 0,01 %, mikroelementy a vitamíny B v minimálnych koncentráciách. Fermentáciu považujeme za ukončenú pri náhlom vzostupe koncentrácie rozpusteného kyslíka a zastavení utilizácie glukózy.
Uvedený postup vedenia fermentačného procesu s produkčným kmeňom Bacillus polymyxa v štvrťprevádzkových objemoch do 35 1 fermentačnej pôdy obvykle trvá od 40 do 55 h. Dosiahnuté výťažnosti polymyxínu vo filtrate fermentačnej pôdy sú na úrovni od 1,8 do 2,8 g polymyxínu/1 filtrátu fermentačnej pôdy stanovené metódou HPLC. Takto opísaná fermentačná technológia, zloženie fermentačných médií a výťažnosti polymyxínu dosiaľ neboli patentované.
Opis kmeňa: Bacillus polymyxa
Morfológia: - gram-pozitívne sporulujúce tyčinky Optimálne pH kultivácie: od 5 do 7
Utilizácia uhlíkatého substrátu: dobre utilizuje glukózu Utilizácia aminokyselín z organických zdrojov: sójová múka, pšeničná múka, pšeničné otruby, com-steep Optimálna teplota kultivácie: 28 ± 1 °C Zastúpenie polymyxínov: BI, BII, B2, B3
Príklady uskutočnenia vynálezu
Príklad 1
Vegetatívne inokulum sa kultivuje v laboratórnych fermentoroch s objemom 30 1 počas 18 až 20 hodín pri teplote 28 °C pri miešaní od 200 do 300 ot./min. v inokulačnej pôde zloženia: com-steep liquid 20 g/1, glukóza 50 g/1, síran amónny 4 g/1, uhličitan vápenatý 3 g/1, chlorid sodný 1 g/1, pH pôdy sa upraví pred sterilizáciou na hodnotu 6,8 až 7,0. Inokulum sa očkuje 0,1 % bakteriálnej suspenzie produkčného kmeňa Bacillus polymyxa pripravenej zo šikmého agaru. Fermentácia polymyxínu prebieha v laboratórnom fermentore plnenom 35 1 fermentačnej pôdy zloženia: pšeničná múka 12 g/1, sójová múka 12 g/1, glukóza 15 g/1, síran amónny 3 g/1, dihydrofosforečnan draselný 0,3 g/1, uhličitan vápenatý 1 g/1, pH pôdy sa upraví pred sterilizáciou na 6,8 až 7,0. Pôda sa naočkuje 4 % vegetatívneho inokula a kultivuje sa pri teplote 28 °C, vzdušnení od 21 do 28 1, pretlaku 40 až 60 kPa. Intenzita miešania v priebehu fermentácie sa reguluje tak, aby bola zabezpečená saturácia rozpusteného kyslíka v pôde minimálne 60 %. Od 22. hodiny kultivácie sa prikrmuje roztokom glukózy na koncentráciu 1,5 až 2,5 g/1 a roztokom síranu amónneho na koncentráciu amoniakálnych iónov od 0,3 do 0,5 g/1. Pri poklese pH fermentačnej pôdy na hodnotu 5,2 sa dávkuje čpavková voda na udržanie hodnôt pH v rozmedzí od 5,2 do 5,6. Fermentačná pôda sa odpeňuje rastlinným olejom a syntetickým odpeňovadlom. Za týchto podmienok produkčný kmeň Bacillus polymyxa dosahuje výťažnosť 2,3 g polymyxínu v 1 1 filtrátu fermentačnej pôdy.
Príklad 2
Vegetatívne inokulum sa kultivuje v laboratórnych fermentoroch s objemom 30 1 20 hodín na inokulačnej pôde zloženia: com-steep liquid 20 g/1, glukóza 20 g/1, síran amónny 4 g/1, uhličitan vápenatý 3 g/1, chlorid sodný 1 g/1, za rovnakých podmienok, ako je uvedené v príklade 1. Fermentácia polymyxínu prebieha v laboratórnom fermentore plnenom 35 1 fermentačnej pôdy zloženia: pšeničná múka 40 g/1, pšeničné otruby 10 g/1, glukóza 15 g/1, síran amónny 4 g/1, dihydrofosforečnan draselný 0,3 g/1, uhličitan vápenatý 3 g/1, pH pôdy sa upraví pred sterilizáciou na 6,8 až 7,0. Pôda sa naočkuje 4 % vegetatívneho inokula a kultivuje sa pri teplote 28 °C a podmienok, ako je uvedené v príklade 1. Za týchto podmienok produkčný kmeň Bacillus polymyxa dosahuje výťažnosť 2,4 g polymyxínu B/l filtrátu fermentačnej pôdy.
Príklad 3
Vegetatívne inokulum sa pripravuje v dvoch stupňoch. Inokulačná pôda v oboch stupňoch obsahuje: com-steep, síran amónny, uhličitan vápenatý a glukózu, pH pôdy sa upraví pred sterilizáciou na hodnotu 6,8 až 7,0. Prvý stupeň inokula sa očkuje 1,0 % bakteriálnej suspenzie produkčného kmeňa Bacillus polymyxa zo šikmého agaru. Kultivuje sa v Erlenmayerových bankách na trepacom stroji pri teplote 28 a miešaní 240 ot/min. počas 14 až 18 hodín. Vegetatívne inokulum sa v množstve 0,1 % preočkuje do druhého inokulačného stupňa a kultivuje v laboratórnom fermentore 14 až 18 h. Vegetatívne inokulum v objeme 4 % sa naočkuje do fermentačnej pôdy nasledovného zloženia: pšeničná múka 12 g/1, sójová múka 12 g/1, glukóza 15 g/1, síran amónny 3 g/1, dihydrofosforečnan draselný 0,3 g/1, uhličitan vápenatý 1 g/1, pH pôdy sa upraví pred sterilizáciou na 6,8 až 7,0. Fermentácia v objeme 35 1 prebieha 44 až 54 hodín za podmienok, ako je uvedené v príklade 1 a 2. Fermentácia je ukončená pri zastavení utilizácie glukózy, zastavení biosyntézy polymyxínu B a náhleho vzostupu koncentrácie kyslíka vo fermentačnej pôde. Za týchto podmienok produkčný kmeň Bacillus polymyxa dosahuje výťažnosť 2,8 g polymyxínu B/l filtrátu fermentačnej pôdy.
Priemyselná využiteľnosť
Produkčný mikroorganizmus Bacillus polymyxa počas fermentácie v priemyselnej výrobe produkuje antibiotikum polymyxín B v koncentrácii od 1,8 do 2,8 g /1 filtrátu fermentačnej pôdy.
PATENTOVÉ NÁROKY
Claims (9)
1. Spôsob kultivácie produkčného mikroorganizmu Bacillus polymyxa, vyznačujúci sa tým, že sa realizuje pri teplote 28 °C vo fermentore miešaním a prevzdušňovaním fermentačnej pôdy, pričom sa udržiava hodnota pH v rozmedzí 5,3 až 5,6, koncentrácia glukózy pomocou glukózového roztoku na úrovni 0,5 až 2,5 g/1, koncentrácia amoniakálnych iónov na úrovni 0,3 až 0,6 g/1 a dosiahnutá koncentrácia produkovaného polymyxínu B je v rozpätí 1,8 až 2,8 g na 1 1 filtrátu fermentačnej pôdy za 44 až 56 hodín kultivácie stanovených metódou HPLC.
2. Spôsob podľa nároku 1,vyznačujúci sa tým, že fermentačná pôda má počiatočnú koncentráciu fosfátu v rozpätí 50 až 80 mg/1.
3. Spôsob podľa nároku la 2, vyznačujúci sa tým, že fermentačná pôda má počiatočnú koncentráciu glukózy v rozpätí 10 až 20 g/1.
4. Spôsob podľa nároku l,2a3,vyznačujúci sa tým, že fermentačná pôda má počiatočnú koncentráciu amoniakálnych iónov v rozpätí 0,5 až 1,5 g/1.
5. Spôsob podľa nároku 1, 2, 3a 4, vyznačujúci sa tým, že sa udržuje pH pôdy roztokom čpavku.
6. Spôsob podľa nároku 1,2, 3, 4a 5, vyznačujúci sa tým, že fermentačná pôda sa naočkuje vegetatívnym inokulom v množstve od 1 do 10 % objemu fermentačnej pôdy.
7. Spôsob podľa nároku 1,2, 3, 4, 5a 6, vyznačujúci sa tým, že sa intenzita miešania reguluje tak, aby bola zabezpečená saturácia rozpusteného kyslíka v pôde na hodnotu minimálne 60%.
8. Spôsob podľa nároku 1, 2, 3, 4, 5, 6, a 7, v y z n a č u j ú c i sa t ý m , že inokulum sa očkuje bakteriálnou suspenziou v množstve od 0,05 % do 1 % objemu inokulačnej pôdy.
9. Spôsob podľa nároku 1, 2, 3,4, 5, 6, 7a 8, vyznačujúci sa tým, že inokulum je kultivované v 1 alebo v 2 stupňovom procese.
Priority Applications (8)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SK90-2006A SK287293B6 (sk) | 2006-06-15 | 2006-06-15 | Spôsob fermentácie polymyxínu B pomocou produkčného mikroorganizmu Bacillus polymyxa |
| EP07748763A EP2027280B1 (en) | 2006-06-15 | 2007-05-21 | Process for the preparation of polymyxin b employing (paeni)bacillus polymyxa |
| SI200730376T SI2027280T1 (sl) | 2006-06-15 | 2007-05-21 | Postopek za pripravo polimiksina b z uporabo (paeni)bacillus polymyxa |
| PCT/SK2007/050011 WO2007145602A1 (en) | 2006-06-15 | 2007-05-21 | Process for the preparation of polymyxin b employing ( paeni ) bacillus polymyxa |
| US12/304,321 US8119371B2 (en) | 2006-06-15 | 2007-05-21 | Process for the preparation of polymyxin B employing (PAENI) Bacillus polymyxa |
| ES07748763T ES2349188T3 (es) | 2006-06-15 | 2007-05-21 | Procedimiento para la preparación de polimixina b utilizando (paeni) bacillus polymyxa. |
| PL07748763T PL2027280T3 (pl) | 2006-06-15 | 2007-05-21 | Sposób wytwarzania polimyksyny B wykorzystujący (paeni) bacillus polymyxa |
| AT07748763T ATE474060T1 (de) | 2006-06-15 | 2007-05-21 | Verfahren zur herstellung von polymyxin b unter verwendung von (paeni)bacillus polymyxa |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SK90-2006A SK287293B6 (sk) | 2006-06-15 | 2006-06-15 | Spôsob fermentácie polymyxínu B pomocou produkčného mikroorganizmu Bacillus polymyxa |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SK902006A3 SK902006A3 (sk) | 2008-02-05 |
| SK287293B6 true SK287293B6 (sk) | 2010-05-07 |
Family
ID=38328655
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SK90-2006A SK287293B6 (sk) | 2006-06-15 | 2006-06-15 | Spôsob fermentácie polymyxínu B pomocou produkčného mikroorganizmu Bacillus polymyxa |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US8119371B2 (sk) |
| EP (1) | EP2027280B1 (sk) |
| AT (1) | ATE474060T1 (sk) |
| ES (1) | ES2349188T3 (sk) |
| PL (1) | PL2027280T3 (sk) |
| SI (1) | SI2027280T1 (sk) |
| SK (1) | SK287293B6 (sk) |
| WO (1) | WO2007145602A1 (sk) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101171862B1 (ko) | 2009-09-18 | 2012-08-31 | 한국생명공학연구원 | 재조합 바실러스 균을 이용한 폴리믹신 생산방법 |
| WO2010058427A2 (en) | 2008-11-24 | 2010-05-27 | Reliance Life Sciences Pvt. Ltd. | Process for production and purification of polymyxin b sulfate |
| CN103509839B (zh) * | 2013-10-12 | 2015-02-25 | 河北圣雪大成制药有限责任公司 | 一种降低多粘菌素e发酵液中氨氮含量的方法 |
| CN103540633B (zh) * | 2013-10-24 | 2016-01-20 | 河北圣雪大成制药有限责任公司 | 一种发酵法生产多粘菌素b的方法 |
| CN104774892B (zh) * | 2014-01-13 | 2018-11-30 | 上海医药工业研究院 | 一种用于生产多黏菌素b的发酵培养基及其制备方法和用途 |
| CN110551786B (zh) * | 2019-09-12 | 2021-12-07 | 浙江海正药业股份有限公司 | 一种提高a40926 b0产量的发酵培养基及其方法 |
| CN113755548A (zh) * | 2021-09-02 | 2021-12-07 | 河北圣雪大成制药有限责任公司 | 一种提高多粘菌素b发酵水平的方法 |
Family Cites Families (87)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US2565057A (en) | 1946-12-21 | 1951-08-21 | Burroughs Wellcome Co | Polymyxin antibiotic |
| US2602041A (en) * | 1947-04-21 | 1952-07-01 | Burroughs Wellcome Co | Method for the manufacture of polymyxin |
| US2571104A (en) * | 1948-05-07 | 1951-10-16 | Robert G Benedict | Polymyxin production |
| US2595605A (en) * | 1948-08-07 | 1952-05-06 | American Cyanamid Co | Method of producing polymyxin |
| GB742589A (en) | 1953-01-03 | 1955-12-30 | Distillers Co Yeast Ltd | Recovery of polymyxin |
| FR1096978A (fr) | 1953-02-13 | 1955-06-28 | Schaefer Brewing Co | Perfectionnements apportés aux traitements de fermentations pour lesquels on utilise des levures |
| GB757246A (en) | 1953-02-13 | 1956-09-19 | Schaefer Brewing Co | Improvements relating to the treatment of fermentations employing yeasts |
| GB755370A (en) | 1953-07-23 | 1956-08-22 | Schaefer Brewing Co | Improvements relating to the control of micro-biological growth in beer |
| US2964406A (en) | 1953-12-08 | 1960-12-13 | Schaefer Brewing Co | Inhibiting microbiological growth in fermentations employing yeast |
| GB782926A (en) | 1955-01-06 | 1957-09-18 | Distillers Co Yeast Ltd | Purification of polymyxin |
| GB874188A (en) | 1957-11-27 | 1961-08-02 | Pfizer & Co C | Preparation of steroids |
| US3094460A (en) | 1959-01-20 | 1963-06-18 | Upjohn Co | Decoyinine |
| CH392779A (fr) | 1960-03-29 | 1965-05-31 | Chinoin Gyogyszer Es Vegyeszet | Verfahren zur Herstellung eines Heilmittels gegen Polycythaemie |
| US3132994A (en) | 1961-03-10 | 1964-05-12 | Burroughs Wellcome Co | Polymyxin purification |
| GB991602A (en) | 1961-03-10 | 1965-05-12 | Wellcome Found | Antibiotics and their purification |
| US3281331A (en) | 1961-11-08 | 1966-10-25 | Astra Ab | Process of isolating and separating proteolytic enzymes |
| FR1357969A (fr) | 1962-05-19 | 1964-04-10 | Hoechst Ag | Procédé pour augmenter la croissance de bactéries et de streptomycètes et la production de métabolites par ces organismes |
| GB979887A (en) | 1962-06-12 | 1965-01-06 | Gert Svanholm | Improvements in or relating to the recovery and purification of amphoteric and basic antibiotics |
| GB1064300A (en) | 1962-12-17 | 1967-04-05 | Bristol Banyu Res Inst Ltd | A new antibiotic coumermycin |
| GB1089765A (en) | 1963-08-30 | 1967-11-08 | Wellcome Found | Purification of polymyxin |
| US3318867A (en) | 1964-08-20 | 1967-05-09 | Upjohn Co | Process for separating nitrogen-basic materials from aqueous solution |
| GB1119668A (en) | 1965-08-26 | 1968-07-10 | Walter Koch | Method of testing microbial sensitivity to drugs |
| FR1473145A (fr) | 1966-01-17 | 1967-03-17 | Rhone Poulenc Sa | Procédé de fabrication de l'acide d. lactique et de ses sels |
| US3679742A (en) | 1969-05-08 | 1972-07-25 | Zaidan Hojin Biseibutsu | Negamycin |
| JPS5544597B1 (sk) | 1969-06-09 | 1980-11-13 | ||
| US3929571A (en) | 1973-05-24 | 1975-12-30 | Ajinomoto Kk | Process for preparing L-lysine |
| JPS5831918B2 (ja) | 1976-10-27 | 1983-07-09 | 塩野義製薬株式会社 | 新規抗生物質ポリミキシンｓ↓１ |
| JPS5946502B2 (ja) | 1977-02-02 | 1984-11-13 | 塩野義製薬株式会社 | 新規抗生物質ポリミキシンｔ↓１ |
| DE2733091C2 (de) * | 1977-07-22 | 1982-08-12 | Friedhelm 4600 Dortmund Heymann | Vorrichtung zur Bearbeitung der Oberfläche von unregelmäßige Konturen aufweisenden Körpern |
| JPS54128501A (en) | 1978-03-22 | 1979-10-05 | Squibb & Sons Inc | Polymyxin f and its manufacture |
| USRE32455E (en) | 1978-10-16 | 1987-07-07 | Eli Lilly And Company | A-21978 antibiotics and process for their production |
| JPS5581584A (en) | 1978-12-14 | 1980-06-19 | Eiken Kagaku Kk | Culture for isolating serratia |
| JPS5648897A (en) | 1979-09-25 | 1981-05-02 | Nitsusui Seiyaku Kk | Selective isolation medium for cholera bacillus |
| US4444883A (en) | 1982-08-09 | 1984-04-24 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Method for the isolation and presumptive diagnosis of Bacillus cereus and tellurite medium therefor |
| CA1205029A (en) | 1984-02-21 | 1986-05-27 | George L. Evans | Selective agent for group a streptococci |
| JPS60184100A (ja) | 1984-03-02 | 1985-09-19 | Toray Ind Inc | ポリミキシンの固定化方法 |
| JPH062049B2 (ja) | 1984-03-24 | 1994-01-12 | 栄研化学株式会社 | レジオネラ菌選択分離用培地 |
| EP0173937A2 (en) | 1984-09-07 | 1986-03-12 | Miles Laboratories, Inc. | Method of increasing the permeability of yeast cells |
| CA1267374A (en) | 1984-09-07 | 1990-04-03 | George Boguslawski | Enhanced inhibition of yeast cell growth |
| US4912036A (en) | 1986-09-24 | 1990-03-27 | Eastman Kodak Company | Rapid differentiation of bacteria using cyclic polypeptide antibiotics |
| GB8624253D0 (en) | 1986-10-09 | 1986-11-12 | Harvey W | Endotoxin assay |
| US4870158A (en) | 1987-01-05 | 1989-09-26 | University Of Pittsburgh Of The Commonwealth System Of Higher Education | Polymyxin lipopolysaccharide antigen and associated method |
| JPS63180860A (ja) | 1987-01-22 | 1988-07-25 | Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd | 抗ｇ−ｃｓｆモノクロ−ナル抗体 |
| EP0328256A1 (en) | 1988-01-21 | 1989-08-16 | Owens-Corning Fiberglas Corporation | Glass fibers coated with agarose for use as column packing or chromatographic media for bioseparations |
| JPH0773509B2 (ja) | 1988-05-23 | 1995-08-09 | 味の素株式会社 | ビブリオ属細菌の迅速検出方法 |
| JP3085310B2 (ja) | 1990-04-26 | 2000-09-04 | 日本バイリーン株式会社 | 微生物除去材 |
| JPH04270965A (ja) | 1990-05-18 | 1992-09-28 | Burton W Blais | オリゴペプタイド吸着担体の調製方法、及びこれを使用したリポ多糖類の検定と除去方法 |
| JPH0471478A (ja) | 1990-07-09 | 1992-03-06 | Bio Material Kenkyusho:Kk | 細胞培養用容器およびその製造方法 |
| US5080209A (en) | 1990-10-15 | 1992-01-14 | General Electric Company | Manual override of an automatic ratio controller in a hydromechanical transmission |
| JPH04200388A (ja) | 1990-11-29 | 1992-07-21 | Chemo Sero Therapeut Res Inst | 流行性非ａ非ｂ型肝炎ウイルス抗原ペプチドおよびこれをコードする核酸断片 |
| US5147441A (en) | 1991-05-31 | 1992-09-15 | Megeed Mohamed E A | Biological product for soil improvement and method of application to soil |
| DE4227682C1 (de) | 1992-08-21 | 1993-10-07 | Em Te Vertrieb Erika Prochaska | Modifiziertes bakteriologisches Transportmedium |
| US6579696B1 (en) | 1992-12-21 | 2003-06-17 | Promega Corporation | Polymyxin B conjugates |
| CA2261433A1 (en) | 1993-12-09 | 1995-06-10 | Belinda Sanchez Ramirez | Composition comprising autologous epidermal growth factor |
| RU2115721C1 (ru) | 1994-01-05 | 1998-07-20 | Закрытое акционерное общество "Гекта" | Штамм bacillus polymyxa - продуцент антибиотика полимиксина м |
| US5648343A (en) | 1994-02-28 | 1997-07-15 | The University Of Georgia Research Foundation | Method for treating LPS-mediated disorders |
| JP3652388B2 (ja) | 1994-10-03 | 2005-05-25 | 日水製薬株式会社 | セレウス菌分離用培地 |
| JP3687859B2 (ja) | 1994-10-31 | 2005-08-24 | ▲いん▼▲てつ▼ 小林 | 微生物輸送用培地 |
| EP0757888A4 (en) | 1994-12-13 | 1997-11-26 | Yoshitomi Pharmaceutical | MONGOLIA GERBILLE COLONIZED BY HELICOBACTER PYLORI, METHOD FOR CARRYING OUT THIS COLONIZATION, MEDIUM FOR SEPARATING HELICOBACTER PYLORI AND PRELIMINARY ASSESSMENT METHOD OF ACTIVE SUBSTANCES AGAINST HELICOBACTER PYLORI |
| CN1056407C (zh) | 1995-06-30 | 2000-09-13 | 齐涵 | 含有枯草芽胞杆菌的活菌制剂及其在烧伤治疗中的应用 |
| JP3215309B2 (ja) | 1995-11-07 | 2001-10-02 | 渡邊 定治 | 顆粒球マクロファージコロニー刺激因子の製造方法 |
| RU2113471C1 (ru) | 1996-06-05 | 1998-06-20 | Башкирский государственный медицинский университет | Штамм бактерий proteus mirabilis - продуцент термолабильного энтеротоксина |
| RU2113472C1 (ru) | 1996-06-05 | 1998-06-20 | Башкирский государственный медицинский университет | Штамм бактерий proteus mirabilis - продуцент термолабильного энтеротоксина |
| RU2132880C1 (ru) | 1997-07-31 | 1999-07-10 | Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт | Способ выявления возбудителя бруцеллеза |
| RU2139348C1 (ru) | 1997-10-06 | 1999-10-10 | Институт биохимии и физиологии микроорганизмов им.Г.К.Скрябина РАН | Средство для лизиса клеток грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов |
| US20030008355A1 (en) | 1998-08-28 | 2003-01-09 | Peter Harrison | High-affinity antibodies |
| RU2158758C2 (ru) | 1998-11-02 | 2000-11-10 | Научно-производственное объединение "Питательные среды" | Питательная среда для накопления листерий |
| US6719973B1 (en) | 1998-12-24 | 2004-04-13 | National University Of Singapore | Recombinant proteins and peptides for endotoxin biosensors, endotoxin removal, and anti-microbial and anti-endotoxin therapeutics |
| CA2376053A1 (en) | 1999-06-03 | 2000-12-14 | The United States Of America, As Represented By The Secretary Of Agricul Ture | Selective media for recovery and enumeration of campylobacters |
| AU1083501A (en) | 1999-10-13 | 2001-04-23 | Kallestad Laboratories, Inc. | Antibiotic-metal complex and methods |
| RU2223499C2 (ru) | 2000-04-12 | 2004-02-10 | Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт | Способ индикации возбудителя сибирской язвы в объектах внешней среды |
| DE10045016B4 (de) | 2000-09-12 | 2004-07-29 | Heinrich-Pette-Institut | Retrovirale Vektoren mit Fremdsequenzinsertion zwischen retroviraler Primerbindungsstelle und retroviralem Spleißdonor |
| RU2203317C2 (ru) | 2001-05-04 | 2003-04-27 | Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт | Спрособ обнаружения bacillus anthracis в молоке |
| RU2213779C2 (ru) | 2001-08-27 | 2003-10-10 | Научно-производственное объединение "Питательные среды" | Питательная среда для выделения лактобактерий |
| RU2214453C2 (ru) | 2001-08-29 | 2003-10-20 | Научно-производственное объединение "Питательные среды" | Питательная среда для накопления сибиреязвенного микроба |
| JP4071478B2 (ja) | 2001-11-12 | 2008-04-02 | 株式会社ユタカ技研 | 流体伝動装置用羽根車 |
| RU2223313C2 (ru) | 2001-12-26 | 2004-02-10 | Государственный научный центр прикладной микробиологии | Дифференциально-диагностическая среда для выделения листерий |
| RU2260040C2 (ru) | 2002-02-11 | 2005-09-10 | Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" | Способ получения инозина и инозин 5'-монофосфата, штамм бактерии, принадлежащей к роду bacillus - продуцент инозина (варианты) |
| RU2218395C2 (ru) | 2002-02-20 | 2003-12-10 | Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина | ШТАММ БАКТЕРИЙ Proteus vulgaris № 25, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ИЗГОТОВЛЕНИЯ ИММУННЫХ ПРЕПАРАТОВ |
| CN1384200A (zh) | 2002-03-13 | 2002-12-11 | 杜念兴 | 畜禽去势基因疫苗(dna疫苗)的基因工程体 |
| MD2078G2 (ro) | 2002-03-14 | 2003-08-31 | Государственный Медицинский И Фармацевтический Университет "Nicolae Testemitanu" Республики Молдова | Mediu nutritiv pentru cultivarea Campylobacter jejuni şi Campylobacter coli |
| MD2285G2 (ro) | 2002-09-27 | 2004-04-30 | Государственный Медицинский И Фармацевтический Университет "Nicolae Testemitanu" Республики Молдова | Mediu nutritiv pentru cultivarea Campylobacter jejuni şi Campylobacte coli |
| RU2225441C1 (ru) | 2003-03-05 | 2004-03-10 | Закрытое акционерное общество "Научно-производственное предприятие "Тринита" | Способ получения препарата коллагеназы |
| CN1292794C (zh) | 2003-08-22 | 2007-01-03 | 福建省农业科学院畜牧兽医研究所 | 嗜水气单胞菌中溶血素的免疫刺激复合物的制备工艺 |
| US20070028055A1 (en) | 2003-09-19 | 2007-02-01 | Matsushita Electric Industrial Co., Ltd | Cache memory and cache memory control method |
| BR0305373A (pt) | 2003-11-06 | 2005-06-28 | Iseu Da Silva Nunes Nelson Edu | Imunomodulador agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amÈnia e magnésio e processo de sua obtenção e formulação |
| JP4200388B2 (ja) | 2006-06-23 | 2008-12-24 | セイコーエプソン株式会社 | 印刷用紙、印刷制御プログラムを記録した媒体、印刷制御装置および印刷制御方法 |
-
2006
- 2006-06-15 SK SK90-2006A patent/SK287293B6/sk not_active IP Right Cessation
-
2007
- 2007-05-21 ES ES07748763T patent/ES2349188T3/es active Active
- 2007-05-21 WO PCT/SK2007/050011 patent/WO2007145602A1/en active Application Filing
- 2007-05-21 SI SI200730376T patent/SI2027280T1/sl unknown
- 2007-05-21 AT AT07748763T patent/ATE474060T1/de active
- 2007-05-21 EP EP07748763A patent/EP2027280B1/en active Active
- 2007-05-21 PL PL07748763T patent/PL2027280T3/pl unknown
- 2007-05-21 US US12/304,321 patent/US8119371B2/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2007145602A1 (en) | 2007-12-21 |
| US8119371B2 (en) | 2012-02-21 |
| EP2027280A1 (en) | 2009-02-25 |
| EP2027280B1 (en) | 2010-07-14 |
| PL2027280T3 (pl) | 2010-12-31 |
| SI2027280T1 (sl) | 2010-12-31 |
| US20090197305A1 (en) | 2009-08-06 |
| SK902006A3 (sk) | 2008-02-05 |
| ATE474060T1 (de) | 2010-07-15 |
| ES2349188T3 (es) | 2010-12-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US11821016B2 (en) | Method for culturing bacillus bacterium, and method for producing useful substance | |
| JP5587795B2 (ja) | 発酵培地、及びそのプロセス | |
| SK287293B6 (sk) | Spôsob fermentácie polymyxínu B pomocou produkčného mikroorganizmu Bacillus polymyxa | |
| Frengova et al. | Use of whey ultrafiltrate as a substrate for production of carotenoids by the yeast Rhodotorula rubra | |
| CN111394280A (zh) | 一种适合地衣芽孢杆菌生长的培养基及其应用 | |
| Elisashvili et al. | Extracellular polysaccharide production by culinary-medicinal Shiitake mushroom Lentinus edodes (Berk.) Singer and Pleurotus (Fr.) P. Karst. species depending on carbon and nitrogen source | |
| CN110468051B (zh) | 一种k252a发酵培养基及其制备方法 | |
| Haider | Bioconversion of saw dust powder acid hydrolysis to single cell protein by the yeast Candida tropicalis | |
| RU1314667C (ru) | Способ выращивания метанолокислящих бактерий | |
| US20060270004A1 (en) | Fermentation processes with low concentrations of carbon-and nitrogen-containing nutrients | |
| SU908092A1 (ru) | Способ получени рибофлавина | |
| KR102630101B1 (ko) | 아미노산을 포함하는 허비시딘 생산용 배지 조성물 | |
| Sarma et al. | Process optimization for enhanced production of cell biomass and metabolites of fluorescent pseudomonad R81 | |
| CN111979283B (zh) | 一种利用复合菌种发酵生产阿维菌素的方法 | |
| RU2302462C2 (ru) | Способ получения лимонной кислоты | |
| KR0169061B1 (ko) | 배양조건 최적화를 통한 자일리톨의 제조방법 | |
| CN116144645A (zh) | 一种利用氧化还原电极调控枯草芽孢杆菌生长进行芽孢生产的方法 | |
| KR900007000B1 (ko) | 칸디다 유틸리스의 변이주 sh 8636 및 이를 이용한 단세포단백질의 제조방법 | |
| SU1479513A1 (ru) | Способ получени формиатдегидрогеназы | |
| SU745942A1 (ru) | Способ выращивани | |
| RU2081175C1 (ru) | Штамм bacillus subtilis - продуцент рибофлавина (варианты) | |
| SU1423588A1 (ru) | Способ получени ноурзеотрицина | |
| RU2426793C2 (ru) | Способ биосинтеза цефалоспорина с с использованием нового штамма acremonium chrysogenum вкм f-4081d | |
| KR880001680B1 (ko) | 발효에 의한 시소마이신의 제조방법 | |
| SU990812A1 (ru) | Способ получени бактериальных амилаз |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of maintenance fees |
Effective date: 20230615 |