RU2158758C2 - Питательная среда для накопления листерий - Google Patents

Питательная среда для накопления листерий Download PDF

Info

Publication number
RU2158758C2
RU2158758C2 RU98119902A RU98119902A RU2158758C2 RU 2158758 C2 RU2158758 C2 RU 2158758C2 RU 98119902 A RU98119902 A RU 98119902A RU 98119902 A RU98119902 A RU 98119902A RU 2158758 C2 RU2158758 C2 RU 2158758C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
medium
nutrient
nalidixic acid
listeria
sodium chloride
Prior art date
Application number
RU98119902A
Other languages
English (en)
Other versions
RU98119902A (ru
Inventor
С.М. Омарова
Э.М. Ахмедова
Г.М. Тагирова
Ш.М. Меджидов
Original Assignee
Научно-производственное объединение "Питательные среды"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Научно-производственное объединение "Питательные среды" filed Critical Научно-производственное объединение "Питательные среды"
Priority to RU98119902A priority Critical patent/RU2158758C2/ru
Publication of RU98119902A publication Critical patent/RU98119902A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2158758C2 publication Critical patent/RU2158758C2/ru

Links

Images

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

Изобретение предназначено для клинической микробиологии, в частности для бактериологической диагностики листериоза. В качестве основного источника азота среда содержит питательный бульон для культивирования микроорганизмов и витаминный препарат "ЭКД". "ЭКД" характеризуется высоким содержанием аминокислот и комплексом витаминов. Среда содержит глюкозу, обеспечивающую энергетическое питание. Она содержит также комплекс минеральных солей - динатрий фосфат и натрий хлористый. Минеральные соли придают среде изотонические свойства. Налидиксовая кислота и полимиксин В используются как ингибитор сопутствующей микрофлоры. Среда ингибирует полностью рост сопутствующей микрофлоры и обладает высокой чувствительностью и эффективностью накопления листерий. Среда сконструирована из отечественных гостированных ингредиентов, проста в приготовлении и имеет более низкую себестоимость. 1 табл.

Description

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической микробиологии, наиболее эффективно может быть использовано для бактериологической диагностики листериоза.
Значительное увеличение роли листериоза в инфекционной патологии человека, трудности, связанные с проведением эпидемиологического анализа этих инфекций, широкое инфицирование листериями пищевых продуктов обусловливают необходимость совершенствования микробиологической диагностики, что требует наличия эффективных питательных сред [1].
В настоящее время для этих целей используют бульон Левинталя (по Раловичу), питательную среду, содержащую ацетат талия и налидиксовую кислоту (TN) [2,3].
Недостатком этих сред является введение в состав сред ех tempore дефибринированной овечьей крови, трипафлавина. Кроме того, эти среды дорогостоящие и недоступны практическим лабораториям, занимающимся диагностикой листериоза.
Наиболее близким решением задачи того же назначения к заявляемому изобретению по совокупности признаков является триптозно-фосфатный бульон с полимиксином В (Бойсен-Мюллер), содержащий в качестве азотистого питания триптозу, а также декстрозу, хлорид натрия, динатрий фосфат, а в качестве ингибитора сопутствующей микрофлоры ex tempore вносят полимиксин В [2].
К причинам, препятствующим достижению указанного технического результата при использовании известной среды, принятой за прототип, является то, что триптозно-фосфатный бульон с полимиксином В является недостаточно селективной средой и, кроме того, данная питательная среда импортного производства, дорогостоящая.
Задача предлагаемого изобретения - повышение селективных свойств среды за счет использования отечественного сырья.
Указанный технический результат при осуществлении изобретения достигается тем, что в качестве основного источника азотистого питания в предлагаемой среде используется питательный бульон для культивирования микроорганизмов, в качестве стимулятора роста витаминный препарат "ЭКД", характеризующийся высоким содержанием аминокислот и комплекса витаминов, а также глюкоза, входящая в состав среды, обеспечивающая энергетическое питание, комплекс минеральных солей - динатрий фосфат и натрий хлористый, придающие среде изотонические свойства, налидиксовая кислота и полимиксин В как ингибитор сопутствующей микрофлоры, при следующем соотношении компонентов, г/л:
Питательный бульон для культивирования микроорганизмов - 15,0
Витаминный препарат "ЭКД" - 2,0
Д(+) глюкоза - 1,0
Динатрий фосфат - 2,5
Натрий хлористый - 3,0
Налидиксовая кислота - 0,04
ex tempore полимиксин В - 0,003
Вода дистиллированная - Остальное
Содержание в предлагаемой среде налидиксовой кислоты и полимиксина В полностью ингибирует рост сопутствующей микрофлоры, кроме того, среда обладает высокой чувствительностью, отмечается рост колоний при посеве из разведения 10-7. Также среда обладает высокими накопительными свойствами. Эффективность накопления в 10 и более раз. Время генерации, т.е. удвоение массы культуры от 30 до 40 мин. Среда сконструирована из отечественных гостированных ингредиентов на основе питательного бульона для культивирования микроорганизмов и витаминного препарата "ЭКД", имеющих промышленный выпуск на предприятии НПО "Питательные среды" (4,5,6,7,8).
Среду получают следующим образом.
Пример 1. В 1 л дистиллированной воды растворяют следующие ингредиенты среды, взятые в количестве (минимальное): питательный бульон для культивирования микроорганизмов - 14,0 г; витаминный препарат "ЭКД" - 1,5 г; Д (+)-глюкоза - 0,8 г; динатрий фосфат - 2,0 г; натрий хлористый - 2,5 г. Среду доводят до кипения и кипятят 2 мин. Перед стерилизацией вносят налидиксовую кислоту (0,35 г налидиксовой кислоты растворяют в 0,5 мл 1% p-pa Na ОН при добавлении 4,5 мл дистиллированной воды) в 1 л питательной среды. Среду стерилизуют автоклавированием при температуре 121oC в течение 15 мин. После автоклавирования вносят 0,0025 г полимиксина В. Разливают в стерильные пробирки.
Пример 2. Отличается от примера 1 тем, что растворяют следующие ингредиенты среды, взятые в следующих количествах (оптимальное): питательный бульон для культивирования микроорганизмов - 15,0 г; витаминный препарат "ЭКД" - 2,0 г; Д (+)- глюкоза - 1,0 г; динатрий фосфат - 2,5 г; натрий хлористый - 3,0 г. Среду доводят до кипения и кипятят 2 мин. Перед стерилизацией вносят налидиксовую кислоту (0,5 г налидиксовой кислоты растворяют в 0,5 мл 1% p-pa NaOH при добавлении 4,5 мл дистиллированной воды) и вносят в 1 л питательной среды. Среду стерилизуют автоклавированием при температуре 121oC в течение 15 мин. После автоклавирования вносят 0,003 г полимиксина В. Разливают в стерильные пробирки.
Пример 3. Отличается от примера 1, 2 тем, что растворяют следующие ингредиенты среды, взятые в следующих количествах (максимальное): питательный бульон для культивирования микроорганизмов - 16,0 г; витаминный препарат "ЭКД" - 2,5 г; Д (+)-глюкоза - 1,2 г; динатрий фосфат - 3,0 г; натрий хлористый - 3,5 г. Среду доводят до кипения и кипятят 2 мин. Перед стерилизацией вносят налидиксовую кислоту (0,55 г налидиксовой кислоты в 0,5 мл 1% p-pa NaOH при добавлении 4,5 мл дистиллированной воды) в 1 л питательной среды. Среду стерилизуют, автоклавируют при температуре 121oC в течение 15 мин, после чего вносят 0,003 5 г полимиксина В. Разливают в стерильные пробирки.
Каждый вариант среды получали отдельно. Посев микробной взвеси тест-штамма осуществляли в пробирку с питательным бульоном, перемешивали и инкубировали при температуре 37oC в течение 24 ± 2 ч.
Результаты биологических показателей предлагаемой и известной сред приведены в таблице.
Из данных таблицы видно, что предлагаемая питательная среда имеет преимущество, так как на питательной среде полностью ингибируется рост сопутствующей микрофлоры по сравнению со средой-прототипом, ингибирующей рост сопутствующей микрофлоры частично. Кроме того, чувствительность и эффективность накопления предлагаемой среды выше по сравнению с прототипом.
Питательная среда разработана на основе отечественных ингредиентов, проста в приготовлении, намного дешевле среды- прототипа.
Таким образом, питательная среда обладает высокими селективными и накопительными свойствами. В процессе изготовления использовано отечественное сырье.
Библиографические данные
1. Лабораторная диагностика листерий животных и людей, меры борьбы и профилактика (инструктированные документы) М., 1987 г.
2. Бакулов И. А. , Васильев Д.А. Листериоз как пищевая инфекция. Ульяновск, 1991 г.
3. Бакулов И.А., Васильев Д.А. Методические рекомендации по бактериологическому контролю пищевых продуктов на наличие листерий. Ульяновск, 1992 г.
4. ФС 42-3505 - 98.
5. ФС 42-386 ВС-91.
6. Химические реактивы и высокочистые химические вещества. Каталог. -М.: Химия, 1983 г.
7. ГФХ, стр.426.
8. ТУ 64-6-254-83.

Claims (1)

  1. Питательная среда для накопления листерий, содержащая глюкозу, натрий хлористый, динатрий фосфат, ингибитор сопутствующей микрофлоры - полимиксин В, дистиллированную воду, отличающаяся тем, что, с целью повышения селективных свойств среды, в качестве стимулятора роста введен витаминный препарат "ЭКД", в качестве питательной основы - питательный бульон для культивирования микроорганизмов, в качестве дополнительного ингибитора сопутствующей микрофлоры введена налидиксовая кислота при следующем соотношении компонентов, г/л:
    Питательный бульон для культивирования микроорганизмов - 14,0 - 16,0
    Витаминный препарат "ЭКД" - 1,5 - 2,5
    Д(+) - глюкоза - 0,8 - 1,2
    Динатрий фосфат - 2,0 - 3,0
    Натрий хлористый - 2,5 - 3,5
    Налидиксовая кислота - 0,35 - 0,55
    Полимиксин В - 0,0025 - 0,0035
    Вода дистиллированная - Остальное
RU98119902A 1998-11-02 1998-11-02 Питательная среда для накопления листерий RU2158758C2 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU98119902A RU2158758C2 (ru) 1998-11-02 1998-11-02 Питательная среда для накопления листерий

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU98119902A RU2158758C2 (ru) 1998-11-02 1998-11-02 Питательная среда для накопления листерий

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU98119902A RU98119902A (ru) 2000-09-20
RU2158758C2 true RU2158758C2 (ru) 2000-11-10

Family

ID=20211928

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU98119902A RU2158758C2 (ru) 1998-11-02 1998-11-02 Питательная среда для накопления листерий

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2158758C2 (ru)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7951913B2 (en) 2006-06-02 2011-05-31 Biotika A.S. Method of polymyxin B recovery from fermentation broth
US8119371B2 (en) 2006-06-15 2012-02-21 Biotika A.S. Process for the preparation of polymyxin B employing (PAENI) Bacillus polymyxa
RU2525637C2 (ru) * 2012-11-12 2014-08-20 Федеральное казенное учреждение здравоохранения Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека Питательная среда плотная для культивирования возбудителя листериоза
RU2535980C2 (ru) * 2013-03-22 2014-12-20 Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Северо-Кавказский федеральный университет" Способ получения стимулятора роста listeria monocytogenes из активированной эмбрионально-яичной массы перепелок

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Бакулов И.А., Васильев Д.А. Листериоз как пищевая инфекция. - Ульяновск: 1991. *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7951913B2 (en) 2006-06-02 2011-05-31 Biotika A.S. Method of polymyxin B recovery from fermentation broth
US8119371B2 (en) 2006-06-15 2012-02-21 Biotika A.S. Process for the preparation of polymyxin B employing (PAENI) Bacillus polymyxa
RU2525637C2 (ru) * 2012-11-12 2014-08-20 Федеральное казенное учреждение здравоохранения Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека Питательная среда плотная для культивирования возбудителя листериоза
RU2535980C2 (ru) * 2013-03-22 2014-12-20 Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Северо-Кавказский федеральный университет" Способ получения стимулятора роста listeria monocytogenes из активированной эмбрионально-яичной массы перепелок

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Dubos et al. Media for tubercle bacilli
Udaka Screening method for microorganisms accumulating metabolites and its use in the isolation of Micrococcus glutamicus
Fairbrother et al. A Text-book of Bacteriology
Dahlén et al. Screening plate method for detection of bacterial β-glucuronidase
AU2015249274A1 (en) Microbiological growth media and methods of using the same
RU2158758C2 (ru) Питательная среда для накопления листерий
Greaves New methods for the isolation of Legionella pneumophila.
CN101485300B (zh) 一种拟丽突线虫的培养方法
Fitzgerald et al. Inhibition of oral spirochetes by antibiotic agents in vitro
Hirsch The resistance of tubercle bacilli to the bactericidal action of benzalkonium chloride (Zephiran®)
RU2388489C1 (ru) Способ изготовления вакцины ассоциированной против псевдомоноза и энтерококковой инфекции нутрий
Khan et al. Biomass production of Pasteurella multocida using biofermenter
RU2711914C1 (ru) Питательная среда для выделения и идентификации парагемолитических вибрионов (варианты) и способ её получения (варианты)
CN106635865A (zh) 一种用于牛鼻支原体分离纯化的培养基及其制备方法和应用
RU2214453C2 (ru) Питательная среда для накопления сибиреязвенного микроба
US3262864A (en) Procedure for developing antimicrobial activity in non-pathogenic organisms
Fairbrother A text-book of medical bacteriology
RU2748808C1 (ru) Универсальная питательная среда плотная для выращивания биомассы бруцелл
RU2201957C2 (ru) Питательная среда для идентификации листерий
RU2266956C2 (ru) Питательная среда для выделения бруцелл
RU2193061C1 (ru) Питательная среда для культивирования микобактерий туберкулеза (мбт-бульон)
RU2041947C1 (ru) Питательная среда для выделения дифтерийного микроба
RU2203939C2 (ru) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ Cl. PERFRINGENS
RU2336305C1 (ru) Элективная питательная среда для выделения возбудителя псевдотуберкулеза
RU1549227C (ru) Способ получения комплекса литических ферментов

Legal Events

Date Code Title Description
PC43 Official registration of the transfer of the exclusive right without contract for inventions

Effective date: 20180419