RU2158758C2 - Питательная среда для накопления листерий - Google Patents
Питательная среда для накопления листерий Download PDFInfo
- Publication number
- RU2158758C2 RU2158758C2 RU98119902A RU98119902A RU2158758C2 RU 2158758 C2 RU2158758 C2 RU 2158758C2 RU 98119902 A RU98119902 A RU 98119902A RU 98119902 A RU98119902 A RU 98119902A RU 2158758 C2 RU2158758 C2 RU 2158758C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- medium
- nutrient
- nalidixic acid
- listeria
- sodium chloride
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение предназначено для клинической микробиологии, в частности для бактериологической диагностики листериоза. В качестве основного источника азота среда содержит питательный бульон для культивирования микроорганизмов и витаминный препарат "ЭКД". "ЭКД" характеризуется высоким содержанием аминокислот и комплексом витаминов. Среда содержит глюкозу, обеспечивающую энергетическое питание. Она содержит также комплекс минеральных солей - динатрий фосфат и натрий хлористый. Минеральные соли придают среде изотонические свойства. Налидиксовая кислота и полимиксин В используются как ингибитор сопутствующей микрофлоры. Среда ингибирует полностью рост сопутствующей микрофлоры и обладает высокой чувствительностью и эффективностью накопления листерий. Среда сконструирована из отечественных гостированных ингредиентов, проста в приготовлении и имеет более низкую себестоимость. 1 табл.
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к клинической микробиологии, наиболее эффективно может быть использовано для бактериологической диагностики листериоза.
Значительное увеличение роли листериоза в инфекционной патологии человека, трудности, связанные с проведением эпидемиологического анализа этих инфекций, широкое инфицирование листериями пищевых продуктов обусловливают необходимость совершенствования микробиологической диагностики, что требует наличия эффективных питательных сред [1].
В настоящее время для этих целей используют бульон Левинталя (по Раловичу), питательную среду, содержащую ацетат талия и налидиксовую кислоту (TN) [2,3].
Недостатком этих сред является введение в состав сред ех tempore дефибринированной овечьей крови, трипафлавина. Кроме того, эти среды дорогостоящие и недоступны практическим лабораториям, занимающимся диагностикой листериоза.
Наиболее близким решением задачи того же назначения к заявляемому изобретению по совокупности признаков является триптозно-фосфатный бульон с полимиксином В (Бойсен-Мюллер), содержащий в качестве азотистого питания триптозу, а также декстрозу, хлорид натрия, динатрий фосфат, а в качестве ингибитора сопутствующей микрофлоры ex tempore вносят полимиксин В [2].
К причинам, препятствующим достижению указанного технического результата при использовании известной среды, принятой за прототип, является то, что триптозно-фосфатный бульон с полимиксином В является недостаточно селективной средой и, кроме того, данная питательная среда импортного производства, дорогостоящая.
Задача предлагаемого изобретения - повышение селективных свойств среды за счет использования отечественного сырья.
Указанный технический результат при осуществлении изобретения достигается тем, что в качестве основного источника азотистого питания в предлагаемой среде используется питательный бульон для культивирования микроорганизмов, в качестве стимулятора роста витаминный препарат "ЭКД", характеризующийся высоким содержанием аминокислот и комплекса витаминов, а также глюкоза, входящая в состав среды, обеспечивающая энергетическое питание, комплекс минеральных солей - динатрий фосфат и натрий хлористый, придающие среде изотонические свойства, налидиксовая кислота и полимиксин В как ингибитор сопутствующей микрофлоры, при следующем соотношении компонентов, г/л:
Питательный бульон для культивирования микроорганизмов - 15,0
Витаминный препарат "ЭКД" - 2,0
Д(+) глюкоза - 1,0
Динатрий фосфат - 2,5
Натрий хлористый - 3,0
Налидиксовая кислота - 0,04
ex tempore полимиксин В - 0,003
Вода дистиллированная - Остальное
Содержание в предлагаемой среде налидиксовой кислоты и полимиксина В полностью ингибирует рост сопутствующей микрофлоры, кроме того, среда обладает высокой чувствительностью, отмечается рост колоний при посеве из разведения 10-7. Также среда обладает высокими накопительными свойствами. Эффективность накопления в 10 и более раз. Время генерации, т.е. удвоение массы культуры от 30 до 40 мин. Среда сконструирована из отечественных гостированных ингредиентов на основе питательного бульона для культивирования микроорганизмов и витаминного препарата "ЭКД", имеющих промышленный выпуск на предприятии НПО "Питательные среды" (4,5,6,7,8).
Питательный бульон для культивирования микроорганизмов - 15,0
Витаминный препарат "ЭКД" - 2,0
Д(+) глюкоза - 1,0
Динатрий фосфат - 2,5
Натрий хлористый - 3,0
Налидиксовая кислота - 0,04
ex tempore полимиксин В - 0,003
Вода дистиллированная - Остальное
Содержание в предлагаемой среде налидиксовой кислоты и полимиксина В полностью ингибирует рост сопутствующей микрофлоры, кроме того, среда обладает высокой чувствительностью, отмечается рост колоний при посеве из разведения 10-7. Также среда обладает высокими накопительными свойствами. Эффективность накопления в 10 и более раз. Время генерации, т.е. удвоение массы культуры от 30 до 40 мин. Среда сконструирована из отечественных гостированных ингредиентов на основе питательного бульона для культивирования микроорганизмов и витаминного препарата "ЭКД", имеющих промышленный выпуск на предприятии НПО "Питательные среды" (4,5,6,7,8).
Среду получают следующим образом.
Пример 1. В 1 л дистиллированной воды растворяют следующие ингредиенты среды, взятые в количестве (минимальное): питательный бульон для культивирования микроорганизмов - 14,0 г; витаминный препарат "ЭКД" - 1,5 г; Д (+)-глюкоза - 0,8 г; динатрий фосфат - 2,0 г; натрий хлористый - 2,5 г. Среду доводят до кипения и кипятят 2 мин. Перед стерилизацией вносят налидиксовую кислоту (0,35 г налидиксовой кислоты растворяют в 0,5 мл 1% p-pa Na ОН при добавлении 4,5 мл дистиллированной воды) в 1 л питательной среды. Среду стерилизуют автоклавированием при температуре 121oC в течение 15 мин. После автоклавирования вносят 0,0025 г полимиксина В. Разливают в стерильные пробирки.
Пример 2. Отличается от примера 1 тем, что растворяют следующие ингредиенты среды, взятые в следующих количествах (оптимальное): питательный бульон для культивирования микроорганизмов - 15,0 г; витаминный препарат "ЭКД" - 2,0 г; Д (+)- глюкоза - 1,0 г; динатрий фосфат - 2,5 г; натрий хлористый - 3,0 г. Среду доводят до кипения и кипятят 2 мин. Перед стерилизацией вносят налидиксовую кислоту (0,5 г налидиксовой кислоты растворяют в 0,5 мл 1% p-pa NaOH при добавлении 4,5 мл дистиллированной воды) и вносят в 1 л питательной среды. Среду стерилизуют автоклавированием при температуре 121oC в течение 15 мин. После автоклавирования вносят 0,003 г полимиксина В. Разливают в стерильные пробирки.
Пример 3. Отличается от примера 1, 2 тем, что растворяют следующие ингредиенты среды, взятые в следующих количествах (максимальное): питательный бульон для культивирования микроорганизмов - 16,0 г; витаминный препарат "ЭКД" - 2,5 г; Д (+)-глюкоза - 1,2 г; динатрий фосфат - 3,0 г; натрий хлористый - 3,5 г. Среду доводят до кипения и кипятят 2 мин. Перед стерилизацией вносят налидиксовую кислоту (0,55 г налидиксовой кислоты в 0,5 мл 1% p-pa NaOH при добавлении 4,5 мл дистиллированной воды) в 1 л питательной среды. Среду стерилизуют, автоклавируют при температуре 121oC в течение 15 мин, после чего вносят 0,003 5 г полимиксина В. Разливают в стерильные пробирки.
Каждый вариант среды получали отдельно. Посев микробной взвеси тест-штамма осуществляли в пробирку с питательным бульоном, перемешивали и инкубировали при температуре 37oC в течение 24 ± 2 ч.
Результаты биологических показателей предлагаемой и известной сред приведены в таблице.
Из данных таблицы видно, что предлагаемая питательная среда имеет преимущество, так как на питательной среде полностью ингибируется рост сопутствующей микрофлоры по сравнению со средой-прототипом, ингибирующей рост сопутствующей микрофлоры частично. Кроме того, чувствительность и эффективность накопления предлагаемой среды выше по сравнению с прототипом.
Питательная среда разработана на основе отечественных ингредиентов, проста в приготовлении, намного дешевле среды- прототипа.
Таким образом, питательная среда обладает высокими селективными и накопительными свойствами. В процессе изготовления использовано отечественное сырье.
Библиографические данные
1. Лабораторная диагностика листерий животных и людей, меры борьбы и профилактика (инструктированные документы) М., 1987 г.
1. Лабораторная диагностика листерий животных и людей, меры борьбы и профилактика (инструктированные документы) М., 1987 г.
2. Бакулов И. А. , Васильев Д.А. Листериоз как пищевая инфекция. Ульяновск, 1991 г.
3. Бакулов И.А., Васильев Д.А. Методические рекомендации по бактериологическому контролю пищевых продуктов на наличие листерий. Ульяновск, 1992 г.
4. ФС 42-3505 - 98.
5. ФС 42-386 ВС-91.
6. Химические реактивы и высокочистые химические вещества. Каталог. -М.: Химия, 1983 г.
7. ГФХ, стр.426.
8. ТУ 64-6-254-83.
Claims (1)
- Питательная среда для накопления листерий, содержащая глюкозу, натрий хлористый, динатрий фосфат, ингибитор сопутствующей микрофлоры - полимиксин В, дистиллированную воду, отличающаяся тем, что, с целью повышения селективных свойств среды, в качестве стимулятора роста введен витаминный препарат "ЭКД", в качестве питательной основы - питательный бульон для культивирования микроорганизмов, в качестве дополнительного ингибитора сопутствующей микрофлоры введена налидиксовая кислота при следующем соотношении компонентов, г/л:
Питательный бульон для культивирования микроорганизмов - 14,0 - 16,0
Витаминный препарат "ЭКД" - 1,5 - 2,5
Д(+) - глюкоза - 0,8 - 1,2
Динатрий фосфат - 2,0 - 3,0
Натрий хлористый - 2,5 - 3,5
Налидиксовая кислота - 0,35 - 0,55
Полимиксин В - 0,0025 - 0,0035
Вода дистиллированная - Остальное
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU98119902A RU2158758C2 (ru) | 1998-11-02 | 1998-11-02 | Питательная среда для накопления листерий |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU98119902A RU2158758C2 (ru) | 1998-11-02 | 1998-11-02 | Питательная среда для накопления листерий |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU98119902A RU98119902A (ru) | 2000-09-20 |
RU2158758C2 true RU2158758C2 (ru) | 2000-11-10 |
Family
ID=20211928
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU98119902A RU2158758C2 (ru) | 1998-11-02 | 1998-11-02 | Питательная среда для накопления листерий |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2158758C2 (ru) |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US7951913B2 (en) | 2006-06-02 | 2011-05-31 | Biotika A.S. | Method of polymyxin B recovery from fermentation broth |
US8119371B2 (en) | 2006-06-15 | 2012-02-21 | Biotika A.S. | Process for the preparation of polymyxin B employing (PAENI) Bacillus polymyxa |
RU2525637C2 (ru) * | 2012-11-12 | 2014-08-20 | Федеральное казенное учреждение здравоохранения Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека | Питательная среда плотная для культивирования возбудителя листериоза |
RU2535980C2 (ru) * | 2013-03-22 | 2014-12-20 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Северо-Кавказский федеральный университет" | Способ получения стимулятора роста listeria monocytogenes из активированной эмбрионально-яичной массы перепелок |
-
1998
- 1998-11-02 RU RU98119902A patent/RU2158758C2/ru active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Бакулов И.А., Васильев Д.А. Листериоз как пищевая инфекция. - Ульяновск: 1991. * |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US7951913B2 (en) | 2006-06-02 | 2011-05-31 | Biotika A.S. | Method of polymyxin B recovery from fermentation broth |
US8119371B2 (en) | 2006-06-15 | 2012-02-21 | Biotika A.S. | Process for the preparation of polymyxin B employing (PAENI) Bacillus polymyxa |
RU2525637C2 (ru) * | 2012-11-12 | 2014-08-20 | Федеральное казенное учреждение здравоохранения Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека | Питательная среда плотная для культивирования возбудителя листериоза |
RU2535980C2 (ru) * | 2013-03-22 | 2014-12-20 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Северо-Кавказский федеральный университет" | Способ получения стимулятора роста listeria monocytogenes из активированной эмбрионально-яичной массы перепелок |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Dubos et al. | Media for tubercle bacilli | |
Udaka | Screening method for microorganisms accumulating metabolites and its use in the isolation of Micrococcus glutamicus | |
Fairbrother et al. | A Text-book of Bacteriology | |
Dahlén et al. | Screening plate method for detection of bacterial β-glucuronidase | |
AU2015249274A1 (en) | Microbiological growth media and methods of using the same | |
RU2158758C2 (ru) | Питательная среда для накопления листерий | |
Greaves | New methods for the isolation of Legionella pneumophila. | |
CN101485300B (zh) | 一种拟丽突线虫的培养方法 | |
Fitzgerald et al. | Inhibition of oral spirochetes by antibiotic agents in vitro | |
Hirsch | The resistance of tubercle bacilli to the bactericidal action of benzalkonium chloride (Zephiran®) | |
RU2388489C1 (ru) | Способ изготовления вакцины ассоциированной против псевдомоноза и энтерококковой инфекции нутрий | |
Khan et al. | Biomass production of Pasteurella multocida using biofermenter | |
RU2711914C1 (ru) | Питательная среда для выделения и идентификации парагемолитических вибрионов (варианты) и способ её получения (варианты) | |
CN106635865A (zh) | 一种用于牛鼻支原体分离纯化的培养基及其制备方法和应用 | |
RU2214453C2 (ru) | Питательная среда для накопления сибиреязвенного микроба | |
US3262864A (en) | Procedure for developing antimicrobial activity in non-pathogenic organisms | |
Fairbrother | A text-book of medical bacteriology | |
RU2748808C1 (ru) | Универсальная питательная среда плотная для выращивания биомассы бруцелл | |
RU2201957C2 (ru) | Питательная среда для идентификации листерий | |
RU2266956C2 (ru) | Питательная среда для выделения бруцелл | |
RU2193061C1 (ru) | Питательная среда для культивирования микобактерий туберкулеза (мбт-бульон) | |
RU2041947C1 (ru) | Питательная среда для выделения дифтерийного микроба | |
RU2203939C2 (ru) | ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ Cl. PERFRINGENS | |
RU2336305C1 (ru) | Элективная питательная среда для выделения возбудителя псевдотуберкулеза | |
RU1549227C (ru) | Способ получения комплекса литических ферментов |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PC43 | Official registration of the transfer of the exclusive right without contract for inventions |
Effective date: 20180419 |