RU98110005A - Экстракты акульего хряща, обладающие противоколлагенолитическим, противовоспалительным, антиангиогенным и противоопухолевым действием; способ получения, способы применения и содержащие их композиции - Google Patents

Claims (44)

1. Способ получения жидкого экстракта из хряща, содержащего значительную часть биологически активных водорастворимых компонентов, присутствующих в исходном хряще, включающий следующие стадии а) гомогенизации хряща в водном растворе при условиях, совместимых с сохранением целостности указанных биологически активных компонентов, до тех пор, пока хрящ не измельчится до частиц, размер которых меньше или равен 500 мкм, с образованием в результате смеси частиц и неочищенного жидкого экстракта, содержащего указанные биологически активные компоненты; б) центрифугирования указанного гомогената для отделения частиц от неочищенного жидкого экстракта; в) дальнейшей сепарации неочищенного жидкого экстракта таким образом, что получают конечный жидкий экстракт, содержащий молекулы составляющих хряща с молекулярной массой меньше или равной примерно 500 килодальтон (кД); и г) концентрирования указанного конечного жидкого экстракта, при котором не происходит существенной потери указанных биологически активных водорастворимых компонентов указанного конечного жидкого экстракта.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанные условия включают рабочую температуру примерно 0 - 20^oC для стадии а) и примерно 0 - 10°С для стадий б), в) и г).

3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанные условия включают рабочий интервал рН указанного водного раствора примерно 6 - 8.

4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что стадию а) выполняют в пределах от 15 мин до 24 ч.

5. Способ по п. 4, отличающийся тем, что стадию а) выполняют в пределах от 15 мин до 1 ч.

6. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанный хрящ и водный раствор находятся в соотношении от 1 килограмма на, по меньшей мере, примерно 1 литр.

7. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанную стадию концентрирования г) выполняют посредством фильтрации указанного конечного жидкого экстракта через мембрану с величиной отсекаемой молекулярной массы примерно 0,1 кД, причем посредством этого удаляются молекулы с молекулярной массой меньше отсекаемой величины.

8. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанная стадия концентрирования г) включает лиофилизацию указанного конечного жидкого экстракта.

9. Способ по п. 8, отличающийся тем, что указанную лиофилизацию выполняют в присутствии стабилизаторов или защитных средств, добавляемых к указанному жидкому экстракту в количестве достаточном для улучшения сохранности указанных биологически активных компонентов.

10. Способ по п. 8 или 9, отличающийся тем, что указанный хрящ берут от акулы.

11. Способ получения жидкого экстракта из хряща акулы, содержащего противоколлагенолитические и антиангиогенные водорастворимые компоненты, присутствующие в исходном хряще, включающий следующие стадии: а) гомогенизации хряща в водном растворе .при условиях, совместимых с сохранением целостности указанных биологически активных компонентов, до тех пор, пока хрящ не измельчится до частиц, размер которых меньше или равен 500 мкм, с образованием в результате смеси частиц и общего жидкого экстракта, содержащего указанные биологически активные компоненты; б) центрифугирования указанного гомогената для отделения частиц от общего жидкого экстракта; в) дальнейшей сепарации общего жидкого экстракта таким образом, что получают конечный жидкий экстракт, содержащий молекулы составляющих хряща с молекулярной массой меньше или равной примерно 500 килодальтон (кД); г) фильтрации указанного конечного жидкого экстракта через мембрану с величиной отсекаемой молекулярной массы примерно 100 дальтон; и д) извлечения фракции, содержащей молекулы с молекулярной массой примерно 0 - 0,1 кД.

12. Способ получения жидкого экстракта из хряща акулы, содержащего антиангиогенные водорастворимые компоненты, присутствующие в исходном хряще включающий стадии а) гомогенизации хряща в водном растворе при условиях, совместимых с сохранением целостности указанных биологически активных компонентов, до тех пор, пока хрящ не измельчится до частиц, размер которых меньше или равен 500 мкм, с образованием в результате смеси частиц и общего жидкого экстракта, содержащего указанные биологически активные компоненты; б) центрифугирования указанного гомогената для отделения частиц от общего жидкого экстракта; в) дальнейшей сепарации общего жидкого экстракта таким образом, что получают конечный жидкий экстракт, содержащий молекулы составляющих хряща с молекулярной массой меньше или равной примерно 500 килодальтон (кД); г) фильтрации указанного конечного жидкого экстракта через мембрану с величиной отсекаемой молекулярной массы примерно 10 кД; д) извлечения фракции, содержащей молекулы с молекулярной массой свыше, примерно, 100 кД; е) фракционирования этой фракции на колонке для анионообменной хроматографии; и ж) извлечения фракции, которая элюируется в промежутке 0,8-1,0 M NaCl.

13. Хрящевой экстракт, полученный из акулы, и полученный по способу по любому из пп. 1-6.

14. Хрящевой экстракт, полученный из акулы, и полученный по способу по п. 7.

15. Хрящевой экстракт, полученный по способу по п. 10.

16. Противоколлагенолитический и антиангиогенный хрящевой экстракт, полученный по способу по п. 11.

17. Антиангиогенный хрящевой экстракт, полученный по способу по п. 12.

18. Композиция для лечения заболеваний или состояний с одним или несколькими компонентами, выбираемых из группы, состоящей из пролиферации опухоли, ангиогенеза, воспаления и коллагенолиза, содержащая эффективное количество хрящевого экстракта по любому из пп. 13, 14 и 15 и фармацевтически приемлемый носитель.

19. Композиция для лечения заболеваний или состояний с коллагенолитическим компонентом, содержащая эффективное количество хрящевого экстракта по п. 16.

20. Композиция для лечения заболеваний или состояний с ангиогенным компонентом, содержащая эффективное количество хрящевого экстракта по п. 16 или 17, или комбинацию хрящевых экстрактов по п. 16 и 17.

21. Композиция по п. 18 для интраперитонеального, чрезкожного, глазного, назального, перорального, ректального, подъязычного внутримышечного, интрадермального или трансдермального применения.

22. Композиция по п. 18, являющаяся композицией для местного применения.

23. Композиция по п. 22, отличающаяся тем, что указанный хрящевой экстракт добавляют до достижения конечного массового содержания твердых веществ примерно 1 - 50 мг на мл композиции.

24. Композиция для местного применения для лечения акне, содержащая на мл композиции примерно 2 мг хрящевого экстракта, в пересчете на массовое содержание твердых веществ который, как терапевтически эффективный ингредиент, можно получить по способу по любому из пп. 7, 8 и 9, в соединении с фармацевтически подходящим носителем.

25. Композиция для местного применения для лечения псориаза, содержащая на мл композиции примерно 30-50 мг хрящевого экстракта, в пересчете на массовое содержание твердых веществ, который, как терапевтически эффективный ингредиент, можно получить по способу по любому из пп. 7, 8 и 9, в соединении с фармацевтически подходящим носителем.

26. Композиция для лечения рака, содержащая терапевтически эффективное количество хрящевого экстракта, который можно получить по способу по любому из пп. 7, 8 и 9, в соединении с фармацевтически подходящим носителем.

27. Композиция по п. 26, отличающаяся тем, что указанный хрящевой экстракт дозируют для достижения общей массы в сухом состоянии указанного экстракта 0,01 - 200 мг на килограмм массы тела пациента.

28. Композиция по п. 27, являющаяся композицией, которую вводят пациенту, нуждающемуся в таком лечении, перорально или под язык.

29. Способ лечения воспаления у пациента, нуждающегося в таком лечении, включающий пероральное введение эффективного против воспаления количества хрящевого экстракта по любому из пп. 13, 14 или 15 в соединении с приемлемым фармацевтическим носителем.

30. Способ ингибирования ангиогенеза у пациента, нуждающегося в таком лечении, включающий пероральное введение эффективного против ангиогенеза количества хрящевого экстракта по любому из пп. 13, 14 или 15 в соединении с приемлемым фармацевтическим носителем.

31. Способ улучшения функции кожного барьера в коже млекопитающего, включающий стадию нанесения на кожу композиции по п. 22.

32. Способ смягчения кожи млекопитающего, включающий стадию нанесения на кожу композиции по п. 22.

33. Способ уменьшения воспаления кожи млекопитающего, включающий стадию нанесения на кожу композиции по п. 22.

34. Способ по п. 33, отличающийся тем, что указанное воспаление вызвано физическим нарушением.

35. Способ по п. 33, отличающийся тем, что указанное воспаление вызвано химическим раздражителем.

36. Способ ингибирования коллагеназной активности в коже млекопитающего, включающий стадию нанесения на кожу композиции по п. 22.

37. Способ регулирования образования морщин или атрофии в коже млекопитающего, включающий стадию нанесения на кожу композиции по п. 22.

38. Способ ослабления акне в коже млекопитающего, включающий стадию нанесения на кожу композиции по п. 24.

39. Способ лечения псориаза на коже млекопитающего, включающий стадию нанесения на кожу композиции по п. 25.

40. Способ замедления преждевременного старения кожи млекопитающего, включающий стадию нанесения на кожу композиции по п. 22.

41. Способ лечения заболеваний или состояний с одним или несколькими компонентами, выбираемыми из группы, состоящей из пролиферации опухоли, ангиогенеза, воспаления и коллагенолиза, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, композиции по п. 18.

42. Способ по п. 41, отличающийся тем, что указанные заболевания или состояния выбирают из группы, состоящий из рака, папулосквамозной болезни кожи, артрита, акне, сосудистых звездочек, варикозных вен, темных кругов вокруг глаз, гипертрофического рубца, алопеции, экземы, бородавок, рассеянного склероза, фиброза, воспалительного заболевания кишечника, склеродермии, вазоконстрикционных заболеваний, корнеальной неоваскуляризации, корнеальной инфекции, неоваскулярной глаукомы, герпетического кератита, диабетической ретинопатии и отторжения трансплантата.

43. Способ ингибирования пролиферации эндотелиальных клеток, включающий стадию контактирования указанных эндотелиальных клеток с композицией, содержащей хрящевой экстракт по любому из пп. 13, 14 и 15.

44. Способ ингибирования дифференцировки активированных кератиноцитов, включающий стадию контактирования кератиноцитов с композицией, содержащей хрящевой экстракт по любому из пп. 13, 14 и 15.