RU2345793C2 - Ультразвуковые контрастные вещества и способ их получения - Google Patents
Ультразвуковые контрастные вещества и способ их получения Download PDFInfo
- Publication number
- RU2345793C2 RU2345793C2 RU2005127634/15A RU2005127634A RU2345793C2 RU 2345793 C2 RU2345793 C2 RU 2345793C2 RU 2005127634/15 A RU2005127634/15 A RU 2005127634/15A RU 2005127634 A RU2005127634 A RU 2005127634A RU 2345793 C2 RU2345793 C2 RU 2345793C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- phospholipid
- emulsion
- gas
- microbubbles
- aqueous
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 91
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title abstract description 8
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 claims abstract description 137
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 claims abstract description 116
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims abstract description 60
- 238000009826 distribution Methods 0.000 claims abstract description 52
- 239000002872 contrast media Substances 0.000 claims abstract description 42
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims abstract description 36
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 22
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 15
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 10
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 117
- 239000007789 gas Substances 0.000 claims description 113
- -1 perfluorobenzo a Chemical compound 0.000 claims description 75
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 44
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims description 35
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 33
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 31
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims description 30
- 239000003446 ligand Substances 0.000 claims description 27
- 230000008685 targeting Effects 0.000 claims description 26
- KLFKZIQAIPDJCW-HTIIIDOHSA-N Dipalmitoylphosphatidylserine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC KLFKZIQAIPDJCW-HTIIIDOHSA-N 0.000 claims description 25
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 claims description 24
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 23
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 claims description 23
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 claims description 23
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 claims description 23
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 23
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 23
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 21
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- NRJAVPSFFCBXDT-HUESYALOSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC NRJAVPSFFCBXDT-HUESYALOSA-N 0.000 claims description 19
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 claims description 19
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerol Natural products OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 19
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 claims description 19
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 claims description 19
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 claims description 18
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 18
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 claims description 17
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 17
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 claims description 17
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 claims description 17
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims description 16
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 claims description 15
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 claims description 15
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 claims description 14
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 claims description 14
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims description 14
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 claims description 13
- 239000003570 air Substances 0.000 claims description 13
- YFWHNAWEOZTIPI-DIPNUNPCSA-N 1,2-dioctadecanoyl-sn-glycerol-3-phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC YFWHNAWEOZTIPI-DIPNUNPCSA-N 0.000 claims description 12
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 claims description 11
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 11
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 10
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 10
- FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N isomaltotriose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)O1 FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N 0.000 claims description 10
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 10
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- HXVNBWAKAOHACI-UHFFFAOYSA-N 2,4-dimethyl-3-pentanone Chemical compound CC(C)C(=O)C(C)C HXVNBWAKAOHACI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 8
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 8
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 8
- IVSZLXZYQVIEFR-UHFFFAOYSA-N m-xylene Chemical compound CC1=CC=CC(C)=C1 IVSZLXZYQVIEFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 claims description 8
- TXEYQDLBPFQVAA-UHFFFAOYSA-N tetrafluoromethane Chemical compound FC(F)(F)F TXEYQDLBPFQVAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 claims description 7
- FVJZSBGHRPJMMA-IOLBBIBUSA-N PG(18:0/18:0) Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@@H](O)CO)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC FVJZSBGHRPJMMA-IOLBBIBUSA-N 0.000 claims description 7
- OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N Pentane Chemical group CCCCC OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 7
- 239000008365 aqueous carrier Substances 0.000 claims description 7
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims description 7
- 150000008282 halocarbons Chemical class 0.000 claims description 7
- TVMXDCGIABBOFY-UHFFFAOYSA-N octane Chemical compound CCCCCCCC TVMXDCGIABBOFY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- LGUZHRODIJCVOC-UHFFFAOYSA-N perfluoroheptane Chemical compound FC(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)F LGUZHRODIJCVOC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- ZJIJAJXFLBMLCK-UHFFFAOYSA-N perfluorohexane Chemical compound FC(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)F ZJIJAJXFLBMLCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 150000008104 phosphatidylethanolamines Chemical class 0.000 claims description 7
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims description 7
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims description 7
- WKJDWDLHIOUPPL-JSOSNVBQSA-N (2s)-2-amino-3-({[(2r)-2,3-bis(tetradecanoyloxy)propoxy](hydroxy)phosphoryl}oxy)propanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC WKJDWDLHIOUPPL-JSOSNVBQSA-N 0.000 claims description 6
- KILNVBDSWZSGLL-KXQOOQHDSA-N 1,2-dihexadecanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC KILNVBDSWZSGLL-KXQOOQHDSA-N 0.000 claims description 6
- LVNGJLRDBYCPGB-UHFFFAOYSA-N 1,2-distearoylphosphatidylethanolamine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP([O-])(=O)OCC[NH3+])OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC LVNGJLRDBYCPGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 claims description 6
- RGSFGYAAUTVSQA-UHFFFAOYSA-N Cyclopentane Chemical compound C1CCCC1 RGSFGYAAUTVSQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 229920001612 Hydroxyethyl starch Polymers 0.000 claims description 6
- 229920001202 Inulin Polymers 0.000 claims description 6
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims description 6
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 6
- 229940050526 hydroxyethylstarch Drugs 0.000 claims description 6
- JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N inulin Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)OC[C@]1(OC[C@]2(OC[C@]3(OC[C@]4(OC[C@]5(OC[C@]6(OC[C@]7(OC[C@]8(OC[C@]9(OC[C@]%10(OC[C@]%11(OC[C@]%12(OC[C@]%13(OC[C@]%14(OC[C@]%15(OC[C@]%16(OC[C@]%17(OC[C@]%18(OC[C@]%19(OC[C@]%20(OC[C@]%21(OC[C@]%22(OC[C@]%23(OC[C@]%24(OC[C@]%25(OC[C@]%26(OC[C@]%27(OC[C@]%28(OC[C@]%29(OC[C@]%30(OC[C@]%31(OC[C@]%32(OC[C@]%33(OC[C@]%34(OC[C@]%35(OC[C@]%36(O[C@@H]%37[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O%37)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%36)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%35)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%34)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%33)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%32)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%31)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%30)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%29)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%28)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%27)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%26)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%25)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%24)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%23)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%22)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%21)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%20)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%19)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%18)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%17)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%16)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%15)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%14)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%13)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%12)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%11)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%10)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O9)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O8)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O7)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O6)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O5)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N 0.000 claims description 6
- 229940029339 inulin Drugs 0.000 claims description 6
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 claims description 6
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 229960004624 perflexane Drugs 0.000 claims description 6
- NJCBUSHGCBERSK-UHFFFAOYSA-N perfluoropentane Chemical compound FC(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)F NJCBUSHGCBERSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims description 6
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 6
- OZSITQMWYBNPMW-GDLZYMKVSA-N 1,2-ditetradecanoyl-sn-glycerol-3-phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC OZSITQMWYBNPMW-GDLZYMKVSA-N 0.000 claims description 5
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 claims description 5
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 claims description 5
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 claims description 5
- 150000001335 aliphatic alkanes Chemical class 0.000 claims description 5
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 claims description 5
- WJTCGQSWYFHTAC-UHFFFAOYSA-N cyclooctane Chemical compound C1CCCCCCC1 WJTCGQSWYFHTAC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000004914 cyclooctane Substances 0.000 claims description 5
- 229940052308 general anesthetics halogenated hydrocarbons Drugs 0.000 claims description 5
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- KAVGMUDTWQVPDF-UHFFFAOYSA-N perflubutane Chemical compound FC(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)F KAVGMUDTWQVPDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 claims description 5
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 claims description 5
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 claims description 5
- IJFVSSZAOYLHEE-SSEXGKCCSA-N 1,2-dilauroyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCC IJFVSSZAOYLHEE-SSEXGKCCSA-N 0.000 claims description 4
- SNKAWJBJQDLSFF-NVKMUCNASA-N 1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC SNKAWJBJQDLSFF-NVKMUCNASA-N 0.000 claims description 4
- TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoserine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 0.000 claims description 4
- KWKAKUADMBZCLK-UHFFFAOYSA-N 1-octene Chemical compound CCCCCCC=C KWKAKUADMBZCLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- LJARBVLDSOWRJT-UHFFFAOYSA-O 2-[2,3-di(pentadecanoyloxy)propoxy-hydroxyphosphoryl]oxyethyl-trimethylazanium Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCC LJARBVLDSOWRJT-UHFFFAOYSA-O 0.000 claims description 4
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 claims description 4
- XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N Cyclohexane Chemical compound C1CCCCC1 XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical compound C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N Isoflurane Chemical compound FC(F)OC(Cl)C(F)(F)F PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 claims description 4
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- GQPLMRYTRLFLPF-UHFFFAOYSA-N Nitrous Oxide Chemical compound [O-][N+]#N GQPLMRYTRLFLPF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- GOOHAUXETOMSMM-UHFFFAOYSA-N Propylene oxide Chemical compound CC1CO1 GOOHAUXETOMSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229910018503 SF6 Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 claims description 4
- 229930182558 Sterol Natural products 0.000 claims description 4
- DSNRWDQKZIEDDB-GCMPNPAFSA-N [(2r)-3-[2,3-dihydroxypropoxy(hydroxy)phosphoryl]oxy-2-[(z)-octadec-9-enoyl]oxypropyl] (z)-octadec-9-enoate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OCC(O)CO)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC DSNRWDQKZIEDDB-GCMPNPAFSA-N 0.000 claims description 4
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 claims description 4
- 150000001336 alkenes Chemical class 0.000 claims description 4
- 150000001924 cycloalkanes Chemical class 0.000 claims description 4
- JPGQOUSTVILISH-UHFFFAOYSA-N enflurane Chemical compound FC(F)OC(F)(F)C(F)Cl JPGQOUSTVILISH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 claims description 4
- 150000002314 glycerols Chemical class 0.000 claims description 4
- 239000008101 lactose Substances 0.000 claims description 4
- 125000000250 methylamino group Chemical group [H]N(*)C([H])([H])[H] 0.000 claims description 4
- 238000001471 micro-filtration Methods 0.000 claims description 4
- BKIMMITUMNQMOS-UHFFFAOYSA-N nonane Chemical compound CCCCCCCCC BKIMMITUMNQMOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- YWAKXRMUMFPDSH-UHFFFAOYSA-N pentene Chemical compound CCCC=C YWAKXRMUMFPDSH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- QMMOXUPEWRXHJS-UHFFFAOYSA-N pentene-2 Natural products CCC=CC QMMOXUPEWRXHJS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229960004692 perflenapent Drugs 0.000 claims description 4
- 239000008107 starch Substances 0.000 claims description 4
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 claims description 4
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 claims description 4
- SFZCNBIFKDRMGX-UHFFFAOYSA-N sulfur hexafluoride Chemical compound FS(F)(F)(F)(F)F SFZCNBIFKDRMGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229960000909 sulfur hexafluoride Drugs 0.000 claims description 4
- VZGDMQKNWNREIO-UHFFFAOYSA-N tetrachloromethane Chemical compound ClC(Cl)(Cl)Cl VZGDMQKNWNREIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- RFVFQQWKPSOBED-PSXMRANNSA-N 1-myristoyl-2-palmitoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)O[C@@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)COC(=O)CCCCCCCCCCCCC RFVFQQWKPSOBED-PSXMRANNSA-N 0.000 claims description 3
- NEZDNQCXEZDCBI-UHFFFAOYSA-N 2-azaniumylethyl 2,3-di(tetradecanoyloxy)propyl phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCCN)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC NEZDNQCXEZDCBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 claims description 3
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 claims description 3
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 claims description 3
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 claims description 3
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 claims description 3
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 claims description 3
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims description 3
- 125000005210 alkyl ammonium group Chemical group 0.000 claims description 3
- 150000005215 alkyl ethers Chemical class 0.000 claims description 3
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 claims description 3
- 150000002191 fatty alcohols Chemical class 0.000 claims description 3
- DMEGYFMYUHOHGS-UHFFFAOYSA-N heptamethylene Natural products C1CCCCCC1 DMEGYFMYUHOHGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 125000004435 hydrogen atom Chemical class [H]* 0.000 claims description 3
- 229950011087 perflunafene Drugs 0.000 claims description 3
- UWEYRJFJVCLAGH-IJWZVTFUSA-N perfluorodecalin Chemical compound FC1(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)[C@@]2(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)[C@@]21F UWEYRJFJVCLAGH-IJWZVTFUSA-N 0.000 claims description 3
- 150000003432 sterols Chemical class 0.000 claims description 3
- FROLUYNBHPUZQU-IIZJPUEISA-N (2R,3R,4S,5R)-2-(hydroxymethyl)-6-[3-[3-[(3R,4S,5R,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxypropoxy]propoxy]oxane-3,4,5-triol Chemical compound OC[C@H]1OC(OCCCOCCCOC2O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]2O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O FROLUYNBHPUZQU-IIZJPUEISA-N 0.000 claims description 2
- SQGBPXZJXZCRMK-HBGLRBBFSA-N (2R,3R,4S,5R,6S)-2-(aminomethyl)-6-[6-[[(3S,8S,9S,10R,13R,14S,17R)-10,13-dimethyl-17-[(2R)-6-methylheptan-2-yl]-2,3,4,7,8,9,11,12,14,15,16,17-dodecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-3-yl]oxy]hexylsulfanyl]oxane-3,4,5-triol Chemical compound O([C@@H]1CC2=CC[C@H]3[C@@H]4CC[C@@H]([C@]4(CC[C@@H]3[C@@]2(C)CC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)CCCCCCS[C@@H]1O[C@H](CN)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SQGBPXZJXZCRMK-HBGLRBBFSA-N 0.000 claims description 2
- WPWJFABXGZAMQI-SFHVURJKSA-N (2s)-2-(hexadecanoylamino)-4-sulfanylbutanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCS WPWJFABXGZAMQI-SFHVURJKSA-N 0.000 claims description 2
- UVWPNDVAQBNQBG-UHFFFAOYSA-N 1,1,1,2,2,3,3,4,4,5,5,6,6,7,7,8,8,9,9,9-icosafluorononane Chemical compound FC(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)F UVWPNDVAQBNQBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- SLGOCMATMKJJCE-UHFFFAOYSA-N 1,1,1,2-tetrachloro-2,2-difluoroethane Chemical compound FC(F)(Cl)C(Cl)(Cl)Cl SLGOCMATMKJJCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- PWMJXZJISGDARB-UHFFFAOYSA-N 1,1,2,2,3,3,4,4,5,5-decafluorocyclopentane Chemical compound FC1(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C1(F)F PWMJXZJISGDARB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- ZVXOHSHODRJTCP-UHFFFAOYSA-N 1,1,2,2,3,3,4-heptafluoro-4-(trifluoromethyl)cyclobutane Chemical compound FC(F)(F)C1(F)C(F)(F)C(F)(F)C1(F)F ZVXOHSHODRJTCP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- TXGPGHBYAPBDAG-UHFFFAOYSA-N 1,1,2,2,3,3-hexafluoro-4,4-bis(trifluoromethyl)cyclobutane Chemical compound FC(F)(F)C1(C(F)(F)F)C(F)(F)C(F)(F)C1(F)F TXGPGHBYAPBDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- YUFJLVUCHXMKKM-UHFFFAOYSA-N 1,1,2,2,3-pentafluoro-3,4,4-tris(trifluoromethyl)cyclobutane Chemical compound FC(F)(F)C1(F)C(F)(F)C(F)(F)C1(C(F)(F)F)C(F)(F)F YUFJLVUCHXMKKM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- ZVJOQYFQSQJDDX-UHFFFAOYSA-N 1,1,2,3,3,4,4,4-octafluorobut-1-ene Chemical compound FC(F)=C(F)C(F)(F)C(F)(F)F ZVJOQYFQSQJDDX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- LGPPATCNSOSOQH-UHFFFAOYSA-N 1,1,2,3,4,4-hexafluorobuta-1,3-diene Chemical compound FC(F)=C(F)C(F)=C(F)F LGPPATCNSOSOQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- DURPTKYDGMDSBL-UHFFFAOYSA-N 1-butoxybutane Chemical compound CCCCOCCCC DURPTKYDGMDSBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229920000945 Amylopectin Polymers 0.000 claims description 2
- 229920000856 Amylose Polymers 0.000 claims description 2
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 claims description 2
- 239000004386 Erythritol Substances 0.000 claims description 2
- UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N Erythritol Natural products OCC(O)C(O)CO UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylethanolamin Natural products NCCOP(O)(=O)OCC(O)CO JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- REYJJPSVUYRZGE-UHFFFAOYSA-N Octadecylamine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCN REYJJPSVUYRZGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- FBPFZTCFMRRESA-NQAPHZHOSA-N Sorbitol Polymers OCC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-NQAPHZHOSA-N 0.000 claims description 2
- XLLNINGEDIOQGQ-UHFFFAOYSA-N [acetyloxy(hydroxy)phosphoryl] acetate Chemical compound CC(=O)OP(O)(=O)OC(C)=O XLLNINGEDIOQGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 claims description 2
- 150000004945 aromatic hydrocarbons Chemical class 0.000 claims description 2
- 229920001400 block copolymer Polymers 0.000 claims description 2
- UBAZGMLMVVQSCD-UHFFFAOYSA-N carbon dioxide;molecular oxygen Chemical compound O=O.O=C=O UBAZGMLMVVQSCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000004359 castor oil Substances 0.000 claims description 2
- 235000019438 castor oil Nutrition 0.000 claims description 2
- 229940106189 ceramide Drugs 0.000 claims description 2
- 150000001783 ceramides Chemical class 0.000 claims description 2
- DIOQZVSQGTUSAI-NJFSPNSNSA-N decane Chemical compound CCCCCCCCC[14CH3] DIOQZVSQGTUSAI-NJFSPNSNSA-N 0.000 claims description 2
- RNPXCFINMKSQPQ-UHFFFAOYSA-N dicetyl hydrogen phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCOP(O)(=O)OCCCCCCCCCCCCCCCC RNPXCFINMKSQPQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229940093541 dicetylphosphate Drugs 0.000 claims description 2
- 229960000305 enflurane Drugs 0.000 claims description 2
- UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N erythritol Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)CO UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N 0.000 claims description 2
- 229940009714 erythritol Drugs 0.000 claims description 2
- 235000019414 erythritol Nutrition 0.000 claims description 2
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 claims description 2
- ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N glycerol triricinoleate Natural products CCCCCC[C@@H](O)CC=CCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCC=CC[C@@H](O)CCCCCC)OC(=O)CCCCCCCC=CC[C@H](O)CCCCCC ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N 0.000 claims description 2
- WMIYKQLTONQJES-UHFFFAOYSA-N hexafluoroethane Chemical compound FC(F)(F)C(F)(F)F WMIYKQLTONQJES-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- HCDGVLDPFQMKDK-UHFFFAOYSA-N hexafluoropropylene Chemical compound FC(F)=C(F)C(F)(F)F HCDGVLDPFQMKDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000011261 inert gas Substances 0.000 claims description 2
- 229960002725 isoflurane Drugs 0.000 claims description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 2
- UAEPNZWRGJTJPN-UHFFFAOYSA-N methylcyclohexane Chemical compound CC1CCCCC1 UAEPNZWRGJTJPN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- DIOQZVSQGTUSAI-UHFFFAOYSA-N n-butylhexane Natural products CCCCCCCCCC DIOQZVSQGTUSAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000001272 nitrous oxide Substances 0.000 claims description 2
- BCCOBQSFUDVTJQ-UHFFFAOYSA-N octafluorocyclobutane Chemical compound FC1(F)C(F)(F)C(F)(F)C1(F)F BCCOBQSFUDVTJQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 235000019407 octafluorocyclobutane Nutrition 0.000 claims description 2
- QYSGYZVSCZSLHT-UHFFFAOYSA-N octafluoropropane Chemical compound FC(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)F QYSGYZVSCZSLHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 150000002482 oligosaccharides Polymers 0.000 claims description 2
- 239000010695 polyglycol Substances 0.000 claims description 2
- 229920000151 polyglycol Polymers 0.000 claims description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 claims description 2
- 125000001453 quaternary ammonium group Chemical group 0.000 claims description 2
- 229940066675 ricinoleate Drugs 0.000 claims description 2
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 claims description 2
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 claims description 2
- 235000017709 saponins Nutrition 0.000 claims description 2
- 125000003696 stearoyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 2
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 claims description 2
- SLKDGVPOSSLUAI-PGUFJCEWSA-N 1,2-dihexadecanoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine zwitterion Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OCCN)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC SLKDGVPOSSLUAI-PGUFJCEWSA-N 0.000 claims 2
- WTBFLCSPLLEDEM-JIDRGYQWSA-N 1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phospho-L-serine Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC WTBFLCSPLLEDEM-JIDRGYQWSA-N 0.000 claims 2
- LHCZDUCPSRJDJT-UHFFFAOYSA-N dilauroyl phosphatidylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCC(O)CO)OC(=O)CCCCCCCCCCC LHCZDUCPSRJDJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- MWRBNPKJOOWZPW-CLFAGFIQSA-N dioleoyl phosphatidylethanolamine Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCCN)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC MWRBNPKJOOWZPW-CLFAGFIQSA-N 0.000 claims 2
- OKIYQFLILPKULA-UHFFFAOYSA-N 1,1,1,2,2,3,3,4,4-nonafluoro-4-methoxybutane Chemical compound COC(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)F OKIYQFLILPKULA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- SORGEQQSQGNZFI-UHFFFAOYSA-N [azido(phenoxy)phosphoryl]oxybenzene Chemical compound C=1C=CC=CC=1OP(=O)(N=[N+]=[N-])OC1=CC=CC=C1 SORGEQQSQGNZFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- BIABMEZBCHDPBV-UHFFFAOYSA-N dipalmitoyl phosphatidylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCC(O)CO)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC BIABMEZBCHDPBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 238000001585 disappearance potential spectroscopy Methods 0.000 claims 1
- MPTVOJQMOKMTNP-UHFFFAOYSA-N ethylbenzene;toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1 MPTVOJQMOKMTNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 125000002791 glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 claims 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 claims 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 claims 1
- 229940104873 methyl perfluorobutyl ether Drugs 0.000 claims 1
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 claims 1
- 229950003332 perflubutane Drugs 0.000 claims 1
- 229960004065 perflutren Drugs 0.000 claims 1
- HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N schardinger α-dextrin Chemical compound O1C(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(O)C2O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC2C(O)C(O)C1OC2CO HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 11
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 8
- 238000000859 sublimation Methods 0.000 abstract description 4
- 230000008022 sublimation Effects 0.000 abstract description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 25
- 239000000047 product Substances 0.000 description 25
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 24
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 20
- 238000004945 emulsification Methods 0.000 description 19
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 18
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 18
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 17
- ATUOYWHBWRKTHZ-UHFFFAOYSA-N Propane Chemical compound CCC ATUOYWHBWRKTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 14
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 14
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 13
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 13
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 12
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 12
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 12
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 11
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 10
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 10
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 10
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 9
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 9
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 9
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 9
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 description 9
- 229920002560 Polyethylene Glycol 3000 Polymers 0.000 description 8
- 229920001030 Polyethylene Glycol 4000 Polymers 0.000 description 8
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 8
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 8
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N hexadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 8
- 230000008569 process Effects 0.000 description 8
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 8
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 8
- 238000012285 ultrasound imaging Methods 0.000 description 8
- BIABMEZBCHDPBV-MPQUPPDSSA-N 1,2-palmitoyl-sn-glycero-3-phospho-(1'-sn-glycerol) Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@@H](O)CO)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC BIABMEZBCHDPBV-MPQUPPDSSA-N 0.000 description 7
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 description 7
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 description 7
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 7
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 7
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 7
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 7
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 7
- 229920002523 polyethylene Glycol 1000 Polymers 0.000 description 7
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 7
- 239000001294 propane Substances 0.000 description 7
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 7
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 7
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N arachidonic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N 0.000 description 6
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 6
- 229940050410 gluconate Drugs 0.000 description 6
- 239000001307 helium Substances 0.000 description 6
- 229910052734 helium Inorganic materials 0.000 description 6
- SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N helium atom Chemical compound [He] SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 6
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 6
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 5
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 5
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 5
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 5
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 5
- 229940039231 contrast media Drugs 0.000 description 5
- 208000033921 delayed sleep phase type circadian rhythm sleep disease Diseases 0.000 description 5
- 239000002961 echo contrast media Substances 0.000 description 5
- 229930182480 glucuronide Natural products 0.000 description 5
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 5
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 5
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 5
- 229940067605 phosphatidylethanolamines Drugs 0.000 description 5
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 5
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 5
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 5
- 229910052724 xenon Inorganic materials 0.000 description 5
- FHNFHKCVQCLJFQ-UHFFFAOYSA-N xenon atom Chemical compound [Xe] FHNFHKCVQCLJFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M Cetrimonium bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)C LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 235000021314 Palmitic acid Nutrition 0.000 description 4
- RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N Poloxamer Chemical compound C1CO1.CC1CO1 RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 4
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 4
- PSLWZOIUBRXAQW-UHFFFAOYSA-M dimethyl(dioctadecyl)azanium;bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CCCCCCCCCCCCCCCCCC PSLWZOIUBRXAQW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- UKMSUNONTOPOIO-UHFFFAOYSA-N docosanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O UKMSUNONTOPOIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N dodecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCC(O)=O POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000002592 echocardiography Methods 0.000 description 4
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 4
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 4
- 125000001153 fluoro group Chemical group F* 0.000 description 4
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 4
- VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N methane Chemical compound C VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N n-Pentadecanoic acid Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)=O WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940098695 palmitic acid Drugs 0.000 description 4
- 229920001993 poloxamer 188 Polymers 0.000 description 4
- 229960004274 stearic acid Drugs 0.000 description 4
- TXLHNFOLHRXMAU-UHFFFAOYSA-N 2-(4-benzylphenoxy)-n,n-diethylethanamine;hydron;chloride Chemical compound Cl.C1=CC(OCCN(CC)CC)=CC=C1CC1=CC=CC=C1 TXLHNFOLHRXMAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoethan-1-ol Chemical compound NCCO HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-M D-gluconate Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C([O-])=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-M 0.000 description 3
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical class CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 description 3
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 3
- 229940114079 arachidonic acid Drugs 0.000 description 3
- 235000021342 arachidonic acid Nutrition 0.000 description 3
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 3
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 3
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 3
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 3
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 238000002059 diagnostic imaging Methods 0.000 description 3
- 229960005160 dimyristoylphosphatidylglycerol Drugs 0.000 description 3
- BPHQZTVXXXJVHI-AJQTZOPKSA-N ditetradecanoyl phosphatidylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@@H](O)CO)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC BPHQZTVXXXJVHI-AJQTZOPKSA-N 0.000 description 3
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 3
- HQPMKSGTIOYHJT-UHFFFAOYSA-N ethane-1,2-diol;propane-1,2-diol Chemical compound OCCO.CC(O)CO HQPMKSGTIOYHJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 239000010408 film Substances 0.000 description 3
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 3
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 3
- 229910052743 krypton Inorganic materials 0.000 description 3
- DNNSSWSSYDEUBZ-UHFFFAOYSA-N krypton atom Chemical compound [Kr] DNNSSWSSYDEUBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 3
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 3
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 3
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 description 3
- 239000004417 polycarbonate Substances 0.000 description 3
- 229920000515 polycarbonate Polymers 0.000 description 3
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 3
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- 235000013772 propylene glycol Nutrition 0.000 description 3
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 3
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- TUNFSRHWOTWDNC-HKGQFRNVSA-N tetradecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCC[14C](O)=O TUNFSRHWOTWDNC-HKGQFRNVSA-N 0.000 description 3
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 3
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 3
- BQPPJGMMIYJVBR-UHFFFAOYSA-N (10S)-3c-Acetoxy-4.4.10r.13c.14t-pentamethyl-17c-((R)-1.5-dimethyl-hexen-(4)-yl)-(5tH)-Delta8-tetradecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren Natural products CC12CCC(OC(C)=O)C(C)(C)C1CCC1=C2CCC2(C)C(C(CCC=C(C)C)C)CCC21C BQPPJGMMIYJVBR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N (22E)-(24xi)-24-methylcholesta-5,22-dien-3beta-ol Natural products C1C=C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)C=CC(C)C(C)C)C1(C)CC2 OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RQOCXCFLRBRBCS-UHFFFAOYSA-N (22E)-cholesta-5,7,22-trien-3beta-ol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)C=CCC(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 RQOCXCFLRBRBCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GMBQZIIUCVWOCD-UQHLGXRBSA-N (25R)-5beta-spirostan-3beta-ol Chemical compound O([C@@H]1[C@@H]([C@]2(CC[C@@H]3[C@@]4(C)CC[C@H](O)C[C@H]4CC[C@H]3[C@@H]2C1)C)[C@@H]1C)[C@]11CC[C@@H](C)CO1 GMBQZIIUCVWOCD-UQHLGXRBSA-N 0.000 description 2
- CHGIKSSZNBCNDW-UHFFFAOYSA-N (3beta,5alpha)-4,4-Dimethylcholesta-8,24-dien-3-ol Natural products CC12CCC(O)C(C)(C)C1CCC1=C2CCC2(C)C(C(CCC=C(C)C)C)CCC21 CHGIKSSZNBCNDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N (E)-8-Octadecenoic acid Natural products CCCCCCCCCC=CCCCCCCC(O)=O WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LVNGJLRDBYCPGB-LDLOPFEMSA-N (R)-1,2-distearoylphosphatidylethanolamine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[NH3+])OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC LVNGJLRDBYCPGB-LDLOPFEMSA-N 0.000 description 2
- QIROQPWSJUXOJC-UHFFFAOYSA-N 1,1,2,2,3,3,4,4,5,5,6-undecafluoro-6-(trifluoromethyl)cyclohexane Chemical compound FC(F)(F)C1(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C1(F)F QIROQPWSJUXOJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CITHEXJVPOWHKC-UUWRZZSWSA-N 1,2-di-O-myristoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC CITHEXJVPOWHKC-UUWRZZSWSA-N 0.000 description 2
- PORPENFLTBBHSG-MGBGTMOVSA-N 1,2-dihexadecanoyl-sn-glycerol-3-phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC PORPENFLTBBHSG-MGBGTMOVSA-N 0.000 description 2
- ZPDQFUYPBVXUKS-YADHBBJMSA-N 1-stearoyl-sn-glycero-3-phosphoserine Chemical class CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](O)COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O ZPDQFUYPBVXUKS-YADHBBJMSA-N 0.000 description 2
- XYTLYKGXLMKYMV-UHFFFAOYSA-N 14alpha-methylzymosterol Natural products CC12CCC(O)CC1CCC1=C2CCC2(C)C(C(CCC=C(C)C)C)CCC21C XYTLYKGXLMKYMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KSXTUUUQYQYKCR-LQDDAWAPSA-M 2,3-bis[[(z)-octadec-9-enoyl]oxy]propyl-trimethylazanium;chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(C[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC KSXTUUUQYQYKCR-LQDDAWAPSA-M 0.000 description 2
- RFVNOJDQRGSOEL-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxyethyl octadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCCO RFVNOJDQRGSOEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 20:1omega9c fatty acid Natural products CCCCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FPTJELQXIUUCEY-UHFFFAOYSA-N 3beta-Hydroxy-lanostan Natural products C1CC2C(C)(C)C(O)CCC2(C)C2C1C1(C)CCC(C(C)CCCC(C)C)C1(C)CC2 FPTJELQXIUUCEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 7-Dehydrostigmasterol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)C=CC(CC)C(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 9-Heptadecensaeure Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000021357 Behenic acid Nutrition 0.000 description 2
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000703769 Culter Species 0.000 description 2
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N D-gluconic acid Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 2
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DNVPQKQSNYMLRS-NXVQYWJNSA-N Ergosterol Natural products CC(C)[C@@H](C)C=C[C@H](C)[C@H]1CC[C@H]2C3=CC=C4C[C@@H](O)CC[C@]4(C)[C@@H]3CC[C@]12C DNVPQKQSNYMLRS-NXVQYWJNSA-N 0.000 description 2
- YNQLUTRBYVCPMQ-UHFFFAOYSA-N Ethylbenzene Chemical compound CCC1=CC=CC=C1 YNQLUTRBYVCPMQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N Formamide Chemical compound NC=O ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BKLIAINBCQPSOV-UHFFFAOYSA-N Gluanol Natural products CC(C)CC=CC(C)C1CCC2(C)C3=C(CCC12C)C4(C)CCC(O)C(C)(C)C4CC3 BKLIAINBCQPSOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylserin Natural products OC(=O)C(N)COP(O)(=O)OCC(O)CO ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VQTUBCCKSQIDNK-UHFFFAOYSA-N Isobutene Chemical compound CC(C)=C VQTUBCCKSQIDNK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LOPKHWOTGJIQLC-UHFFFAOYSA-N Lanosterol Natural products CC(CCC=C(C)C)C1CCC2(C)C3=C(CCC12C)C4(C)CCC(C)(O)C(C)(C)C4CC3 LOPKHWOTGJIQLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000005639 Lauric acid Substances 0.000 description 2
- OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-N Linoleic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/CCCCCCCC(O)=O OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-N 0.000 description 2
- PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N Maleimide Chemical compound O=C1NC(=O)C=C1 PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- CAHGCLMLTWQZNJ-UHFFFAOYSA-N Nerifoliol Natural products CC12CCC(O)C(C)(C)C1CCC1=C2CCC2(C)C(C(CCC=C(C)C)C)CCC21C CAHGCLMLTWQZNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 description 2
- ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N Oleic acid Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 2
- QQONPFPTGQHPMA-UHFFFAOYSA-N Propene Chemical compound CC=C QQONPFPTGQHPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GMBQZIIUCVWOCD-WWASVFFGSA-N Sarsapogenine Chemical compound O([C@@H]1[C@@H]([C@]2(CC[C@@H]3[C@@]4(C)CC[C@H](O)C[C@H]4CC[C@H]3[C@@H]2C1)C)[C@@H]1C)[C@]11CC[C@H](C)CO1 GMBQZIIUCVWOCD-WWASVFFGSA-N 0.000 description 2
- RTMWIZOXNKJHRE-UHFFFAOYSA-N Tigogenin Natural products CC1COC2CC(C)(OC12)C3CCC4C5CCC6CC(O)CCC6(C)C5CCC34C RTMWIZOXNKJHRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 2
- ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N [1-[2,3-dihydroxypropoxy(hydroxy)phosphoryl]oxy-3-hexadecanoyloxypropan-2-yl] (9e,12e)-octadeca-9,12-dienoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCC(O)CO)OC(=O)CCCCCCC\C=C\C\C=C\CCCCC ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N alpha-glycerophosphate Natural products OCC(O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000020661 alpha-linolenic acid Nutrition 0.000 description 2
- DTOSIQBPPRVQHS-PDBXOOCHSA-N alpha-linolenic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCCCCC(O)=O DTOSIQBPPRVQHS-PDBXOOCHSA-N 0.000 description 2
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 2
- 229940116226 behenic acid Drugs 0.000 description 2
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 2
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000001793 charged compounds Chemical class 0.000 description 2
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 2
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 239000007799 cork Substances 0.000 description 2
- MWKFXSUHUHTGQN-UHFFFAOYSA-N decan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCO MWKFXSUHUHTGQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N deoxycholic acid Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QBSJHOGDIUQWTH-UHFFFAOYSA-N dihydrolanosterol Natural products CC(C)CCCC(C)C1CCC2(C)C3=C(CCC12C)C4(C)CCC(C)(O)C(C)(C)C4CC3 QBSJHOGDIUQWTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960003724 dimyristoylphosphatidylcholine Drugs 0.000 description 2
- DNVPQKQSNYMLRS-SOWFXMKYSA-N ergosterol Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H](CC[C@]3([C@H]([C@H](C)/C=C/[C@@H](C)C(C)C)CC[C@H]33)C)C3=CC=C21 DNVPQKQSNYMLRS-SOWFXMKYSA-N 0.000 description 2
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 2
- 150000002334 glycols Chemical class 0.000 description 2
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 2
- BXWNKGSJHAJOGX-UHFFFAOYSA-N hexadecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCO BXWNKGSJHAJOGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZWGTVKDEOPDFGW-UHFFFAOYSA-N hexadecylazanium;chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCCCCCCCC[NH3+] ZWGTVKDEOPDFGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000589 high-performance liquid chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- RNYJXPUAFDFIQJ-UHFFFAOYSA-N hydron;octadecan-1-amine;chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCCCCCCCCCC[NH3+] RNYJXPUAFDFIQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VKOBVWXKNCXXDE-UHFFFAOYSA-N icosanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O VKOBVWXKNCXXDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 2
- NNPPMTNAJDCUHE-UHFFFAOYSA-N isobutane Chemical compound CC(C)C NNPPMTNAJDCUHE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N isooleic acid Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCCC(O)=O QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QWTDNUCVQCZILF-UHFFFAOYSA-N isopentane Chemical compound CCC(C)C QWTDNUCVQCZILF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940058690 lanosterol Drugs 0.000 description 2
- 229940033355 lauric acid Drugs 0.000 description 2
- 235000020778 linoleic acid Nutrition 0.000 description 2
- 229960004232 linoleic acid Drugs 0.000 description 2
- OYHQOLUKZRVURQ-IXWMQOLASA-N linoleic acid Natural products CCCCC\C=C/C\C=C\CCCCCCCC(O)=O OYHQOLUKZRVURQ-IXWMQOLASA-N 0.000 description 2
- 229960004488 linolenic acid Drugs 0.000 description 2
- KQQKGWQCNNTQJW-UHFFFAOYSA-N linolenic acid Natural products CC=CCCC=CCC=CCCCCCCCC(O)=O KQQKGWQCNNTQJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 2
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 2
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 2
- 230000002107 myocardial effect Effects 0.000 description 2
- 229910052754 neon Inorganic materials 0.000 description 2
- GKAOGPIIYCISHV-UHFFFAOYSA-N neon atom Chemical compound [Ne] GKAOGPIIYCISHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052756 noble gas Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000012454 non-polar solvent Substances 0.000 description 2
- GLDOVTGHNKAZLK-UHFFFAOYSA-N octadecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCO GLDOVTGHNKAZLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 2
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 2
- 235000021313 oleic acid Nutrition 0.000 description 2
- 229960002969 oleic acid Drugs 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 2
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 2
- YVBBRRALBYAZBM-UHFFFAOYSA-N perfluorooctane Chemical compound FC(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)F YVBBRRALBYAZBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000008105 phosphatidylcholines Chemical class 0.000 description 2
- 229960000502 poloxamer Drugs 0.000 description 2
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- XGRLSUFHELJJAB-JGSYTFBMSA-M sodium;[(2r)-2-hydroxy-3-[(z)-octadec-9-enoyl]oxypropyl] hydrogen phosphate Chemical class [Na+].CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@@H](O)COP(O)([O-])=O XGRLSUFHELJJAB-JGSYTFBMSA-M 0.000 description 2
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- HLZKNKRTKFSKGZ-UHFFFAOYSA-N tetradecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCO HLZKNKRTKFSKGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 2
- FLCQLSRLQIPNLM-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 2-acetylsulfanylacetate Chemical compound CC(=O)SCC(=O)ON1C(=O)CCC1=O FLCQLSRLQIPNLM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YKIOPDIXYAUOFN-YACUFSJGSA-N (2-{[(2r)-2,3-bis(icosanoyloxy)propyl phosphonato]oxy}ethyl)trimethylazanium Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCCCC YKIOPDIXYAUOFN-YACUFSJGSA-N 0.000 description 1
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 description 1
- NTWLPZMPTFQYQI-UHFFFAOYSA-N (3alpha)-olean-12-ene-3,23-diol Natural products C1CC(O)C(C)(CO)C2CCC3(C)C4(C)CCC5(C)CCC(C)(C)CC5C4=CCC3C21C NTWLPZMPTFQYQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BHQCQFFYRZLCQQ-UHFFFAOYSA-N (3alpha,5alpha,7alpha,12alpha)-3,7,12-trihydroxy-cholan-24-oic acid Natural products OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 BHQCQFFYRZLCQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DNIAPMSPPWPWGF-GSVOUGTGSA-N (R)-(-)-Propylene glycol Chemical compound C[C@@H](O)CO DNIAPMSPPWPWGF-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- WSJULBMCKQTTIG-OWOJBTEDSA-N (e)-1,1,1,2,3,4,4,4-octafluorobut-2-ene Chemical compound FC(F)(F)C(/F)=C(\F)C(F)(F)F WSJULBMCKQTTIG-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 1
- COQIQRBKEGPRSG-UHFFFAOYSA-N 1,1,1,2,3,3,3-heptafluoro-2-(trifluoromethyl)propane Chemical compound FC(F)(F)C(F)(C(F)(F)F)C(F)(F)F COQIQRBKEGPRSG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940083937 1,2-diarachidoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Drugs 0.000 description 1
- BIABMEZBCHDPBV-BEBVUIBBSA-N 1,2-dihexadecanoyl-sn-glycero-3-phosphoglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OCC(O)CO)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC BIABMEZBCHDPBV-BEBVUIBBSA-N 0.000 description 1
- VXNZUUAINFGPBY-UHFFFAOYSA-N 1-Butene Chemical compound CCC=C VXNZUUAINFGPBY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RRVPPYNAZJRZFR-VYOBOKEXSA-N 1-oleoyl-2-palmitoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)O[C@@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)COC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC RRVPPYNAZJRZFR-VYOBOKEXSA-N 0.000 description 1
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 1
- YKIOPDIXYAUOFN-UHFFFAOYSA-N 2,3-di(icosanoyloxy)propyl 2-(trimethylazaniumyl)ethyl phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCCCC YKIOPDIXYAUOFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ODWNBAWYDSWOAF-UHFFFAOYSA-N 2,4,4-trimethylpentan-2-yloxybenzene Chemical compound CC(C)(C)CC(C)(C)OC1=CC=CC=C1 ODWNBAWYDSWOAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003923 2,5-pyrrolediones Chemical class 0.000 description 1
- LRYZPFWEZHSTHD-HEFFAWAOSA-O 2-[[(e,2s,3r)-2-formamido-3-hydroxyoctadec-4-enoxy]-hydroxyphosphoryl]oxyethyl-trimethylazanium Chemical class CCCCCCCCCCCCC\C=C\[C@@H](O)[C@@H](NC=O)COP(O)(=O)OCC[N+](C)(C)C LRYZPFWEZHSTHD-HEFFAWAOSA-O 0.000 description 1
- MIJYXULNPSFWEK-GTOFXWBISA-N 3beta-hydroxyolean-12-en-28-oic acid Chemical compound C1C[C@H](O)C(C)(C)[C@@H]2CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@@]5(C(O)=O)CCC(C)(C)C[C@H]5C4=CC[C@@H]3[C@]21C MIJYXULNPSFWEK-GTOFXWBISA-N 0.000 description 1
- XIIQDZOQBSLDBF-UHFFFAOYSA-N 4-[1,3-di(hexadecanoyloxy)propan-2-yloxy]-4-oxobutanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCC(O)=O)COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC XIIQDZOQBSLDBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010001857 Cell Surface Receptors Proteins 0.000 description 1
- 229920002101 Chitin Polymers 0.000 description 1
- 239000004380 Cholic acid Substances 0.000 description 1
- PMPVIKIVABFJJI-UHFFFAOYSA-N Cyclobutane Chemical compound C1CCC1 PMPVIKIVABFJJI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N D-gluconic acid Natural products OCC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AEMOLEFTQBMNLQ-AQKNRBDQSA-N D-glucopyranuronic acid Chemical compound OC1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-AQKNRBDQSA-N 0.000 description 1
- 230000004568 DNA-binding Effects 0.000 description 1
- UCTLRSWJYQTBFZ-UHFFFAOYSA-N Dehydrocholesterol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)CCCC(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 UCTLRSWJYQTBFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920005682 EO-PO block copolymer Polymers 0.000 description 1
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 1
- JKLISIRFYWXLQG-UHFFFAOYSA-N Epioleonolsaeure Natural products C1CC(O)C(C)(C)C2CCC3(C)C4(C)CCC5(C(O)=O)CCC(C)(C)CC5C4CCC3C21C JKLISIRFYWXLQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OTMSDBZUPAUEDD-UHFFFAOYSA-N Ethane Chemical compound CC OTMSDBZUPAUEDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N Galacturonsaeure Natural products O=CC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010007979 Glycocholic Acid Proteins 0.000 description 1
- 229930186217 Glycolipid Natural products 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- GCGBHJLBFAPRDB-UHFFFAOYSA-N Hederagenin Natural products CC1(C)CCC2(CCC3(C)C4CCC5C(C)(CO)C(O)CCC5(C)C4CC=C3C2C1)C(=O)O GCGBHJLBFAPRDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101001078143 Homo sapiens Integrin alpha-IIb Proteins 0.000 description 1
- AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N Hydroxylamine Chemical compound ON AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 1
- 238000012404 In vitro experiment Methods 0.000 description 1
- 102100025306 Integrin alpha-IIb Human genes 0.000 description 1
- 108090001090 Lectins Proteins 0.000 description 1
- 102000004856 Lectins Human genes 0.000 description 1
- 108010028921 Lipopeptides Proteins 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- RFDAIACWWDREDC-UHFFFAOYSA-N Na salt-Glycocholic acid Natural products OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(=O)NCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 RFDAIACWWDREDC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 1
- YBRJHZPWOMJYKQ-UHFFFAOYSA-N Oleanolic acid Natural products CC1(C)CC2C3=CCC4C5(C)CCC(O)C(C)(C)C5CCC4(C)C3(C)CCC2(C1)C(=O)O YBRJHZPWOMJYKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MIJYXULNPSFWEK-UHFFFAOYSA-N Oleanolinsaeure Natural products C1CC(O)C(C)(C)C2CCC3(C)C4(C)CCC5(C(O)=O)CCC(C)(C)CC5C4=CCC3C21C MIJYXULNPSFWEK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 description 1
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 1
- 108010022425 Platelet Glycoprotein GPIIb-IIIa Complex Proteins 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- 229920002586 Polyethylene Glycol 7000 Polymers 0.000 description 1
- 229920002367 Polyisobutene Polymers 0.000 description 1
- 229920001214 Polysorbate 60 Polymers 0.000 description 1
- GCGBHJLBFAPRDB-KCVAUKQGSA-N Scutellaric acid Natural products CC1(C)CC[C@@]2(CC[C@@]3(C)[C@@H]4CC[C@H]5[C@@](C)(CO)[C@H](O)CC[C@]5(C)[C@H]4CC=C3[C@@H]2C1)C(=O)O GCGBHJLBFAPRDB-KCVAUKQGSA-N 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Natural products NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010073929 Vascular Endothelial Growth Factor A Proteins 0.000 description 1
- GCSPRLPXTPMSTL-IBDNADADSA-N [(2s,3r,4s,5s,6r)-2-[(2s,3s,4s,5r)-3,4-dihydroxy-2,5-bis(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl] dodecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCC(=O)O[C@@]1([C@]2(CO)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GCSPRLPXTPMSTL-IBDNADADSA-N 0.000 description 1
- ZPVGIKNDGJGLCO-VGAMQAOUSA-N [(2s,3r,4s,5s,6r)-2-[(2s,3s,4s,5r)-3,4-dihydroxy-2,5-bis(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl] hexadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)O[C@@]1([C@]2(CO)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O ZPVGIKNDGJGLCO-VGAMQAOUSA-N 0.000 description 1
- SZYSLWCAWVWFLT-UTGHZIEOSA-N [(2s,3s,4s,5r)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)-2-[(2r,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyoxolan-2-yl]methyl octadecanoate Chemical compound O([C@@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)[C@]1(COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O SZYSLWCAWVWFLT-UTGHZIEOSA-N 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 125000003172 aldehyde group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001337 aliphatic alkines Chemical class 0.000 description 1
- 150000001447 alkali salts Chemical class 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- HSFWRNGVRCDJHI-UHFFFAOYSA-N alpha-acetylene Natural products C#C HSFWRNGVRCDJHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- UMGDCJDMYOKAJW-UHFFFAOYSA-N aminothiocarboxamide Natural products NC(N)=S UMGDCJDMYOKAJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 210000000702 aorta abdominal Anatomy 0.000 description 1
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 1
- 150000001555 benzenes Chemical group 0.000 description 1
- 239000003833 bile salt Substances 0.000 description 1
- 229940093761 bile salts Drugs 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 238000009530 blood pressure measurement Methods 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 1
- DNSISZSEWVHGLH-UHFFFAOYSA-N butanamide Chemical compound CCCC(N)=O DNSISZSEWVHGLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001273 butane Substances 0.000 description 1
- IAQRGUVFOMOMEM-UHFFFAOYSA-N butene Natural products CC=CC IAQRGUVFOMOMEM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920005549 butyl rubber Polymers 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 210000005242 cardiac chamber Anatomy 0.000 description 1
- 210000000748 cardiovascular system Anatomy 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000003850 cellular structure Anatomy 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 125000001549 ceramide group Chemical group 0.000 description 1
- 229930183167 cerebroside Natural products 0.000 description 1
- 150000001784 cerebrosides Chemical class 0.000 description 1
- 229960000541 cetyl alcohol Drugs 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N cholic acid Chemical class C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N 0.000 description 1
- 235000019416 cholic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960002471 cholic acid Drugs 0.000 description 1
- 229960001231 choline Drugs 0.000 description 1
- OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N choline Chemical compound C[N+](C)(C)CCO OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004581 coalescence Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 238000005056 compaction Methods 0.000 description 1
- 238000002591 computed tomography Methods 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000010411 cooking Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 238000009295 crossflow filtration Methods 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 229940097362 cyclodextrins Drugs 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010908 decantation Methods 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N deoxycholic acid Chemical class C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N 0.000 description 1
- 229960003964 deoxycholic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 1
- 229960002086 dextran Drugs 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 150000005690 diesters Chemical class 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- AFABGHUZZDYHJO-UHFFFAOYSA-N dimethyl butane Natural products CCCC(C)C AFABGHUZZDYHJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- LQZZUXJYWNFBMV-UHFFFAOYSA-N dodecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCO LQZZUXJYWNFBMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-M dodecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCC([O-])=O POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 1
- 235000013345 egg yolk Nutrition 0.000 description 1
- 210000002969 egg yolk Anatomy 0.000 description 1
- 229920001971 elastomer Polymers 0.000 description 1
- 239000000806 elastomer Substances 0.000 description 1
- 230000009881 electrostatic interaction Effects 0.000 description 1
- 210000003038 endothelium Anatomy 0.000 description 1
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 1
- IRJUVCRYBRYRNT-UHFFFAOYSA-N ethanol Chemical compound CCO.CCO.CCO.CCO.CCO IRJUVCRYBRYRNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000002534 ethynyl group Chemical group [H]C#C* 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 239000011152 fibreglass Substances 0.000 description 1
- 238000005188 flotation Methods 0.000 description 1
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 230000005251 gamma ray Effects 0.000 description 1
- 150000002270 gangliosides Chemical class 0.000 description 1
- 239000000174 gluconic acid Substances 0.000 description 1
- 235000012208 gluconic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229950006191 gluconic acid Drugs 0.000 description 1
- 229940097043 glucuronic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000002321 glycerophosphoglycerophosphoglycerols Chemical class 0.000 description 1
- RFDAIACWWDREDC-FRVQLJSFSA-N glycocholic acid Chemical class C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 RFDAIACWWDREDC-FRVQLJSFSA-N 0.000 description 1
- 229940099347 glycocholic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000002339 glycosphingolipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 125000005179 haloacetyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 description 1
- 230000009931 harmful effect Effects 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- PGOYMURMZNDHNS-MYPRUECHSA-N hederagenin Chemical compound C1C[C@H](O)[C@@](C)(CO)[C@@H]2CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@@]5(C(O)=O)CCC(C)(C)C[C@H]5C4=CC[C@@H]3[C@]21C PGOYMURMZNDHNS-MYPRUECHSA-N 0.000 description 1
- WBCLXFIDEDJGCC-UHFFFAOYSA-N hexafluoro-2-butyne Chemical compound FC(F)(F)C#CC(F)(F)F WBCLXFIDEDJGCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VBZWSGALLODQNC-UHFFFAOYSA-N hexafluoroacetone Chemical compound FC(F)(F)C(=O)C(F)(F)F VBZWSGALLODQNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 description 1
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 description 1
- 229940042795 hydrazides for tuberculosis treatment Drugs 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 239000007972 injectable composition Substances 0.000 description 1
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 125000003010 ionic group Chemical group 0.000 description 1
- 239000001282 iso-butane Substances 0.000 description 1
- ZBKFYXZXZJPWNQ-UHFFFAOYSA-N isothiocyanate group Chemical group [N-]=C=S ZBKFYXZXZJPWNQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CAHGCLMLTWQZNJ-RGEKOYMOSA-N lanosterol Chemical compound C([C@]12C)C[C@@H](O)C(C)(C)[C@H]1CCC1=C2CC[C@]2(C)[C@H]([C@H](CCC=C(C)C)C)CC[C@@]21C CAHGCLMLTWQZNJ-RGEKOYMOSA-N 0.000 description 1
- 238000002356 laser light scattering Methods 0.000 description 1
- 229940070765 laurate Drugs 0.000 description 1
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 1
- 239000002523 lectin Substances 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000002595 magnetic resonance imaging Methods 0.000 description 1
- 238000013507 mapping Methods 0.000 description 1
- 102000006240 membrane receptors Human genes 0.000 description 1
- 239000002082 metal nanoparticle Substances 0.000 description 1
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 description 1
- 125000001419 myristoyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 229940043348 myristyl alcohol Drugs 0.000 description 1
- IJDNQMDRQITEOD-UHFFFAOYSA-N n-butane Chemical compound CCCC IJDNQMDRQITEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 1
- 229920005615 natural polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 1
- 108010087904 neutravidin Proteins 0.000 description 1
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 1
- 125000003835 nucleoside group Chemical group 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 1
- 229940100243 oleanolic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 1
- 238000013021 overheating Methods 0.000 description 1
- 150000002942 palmitic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000000123 paper Substances 0.000 description 1
- 239000000813 peptide hormone Substances 0.000 description 1
- 239000000816 peptidomimetic Substances 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 1
- 150000008103 phosphatidic acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000003905 phosphatidylinositols Chemical class 0.000 description 1
- 150000008106 phosphatidylserines Chemical class 0.000 description 1
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 1
- 239000002798 polar solvent Substances 0.000 description 1
- 229940044519 poloxamer 188 Drugs 0.000 description 1
- 229920001992 poloxamer 407 Polymers 0.000 description 1
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 1
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 1
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 1
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- UMSVPCYSAUKCAZ-UHFFFAOYSA-N propane;hydrochloride Chemical compound Cl.CCC UMSVPCYSAUKCAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004063 propylene glycol Drugs 0.000 description 1
- HZLWUYJLOIAQFC-UHFFFAOYSA-N prosapogenin PS-A Natural products C12CC(C)(C)CCC2(C(O)=O)CCC(C2(CCC3C4(C)C)C)(C)C1=CCC2C3(C)CCC4OC1OCC(O)C(O)C1O HZLWUYJLOIAQFC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 150000003242 quaternary ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- WBHHMMIMDMUBKC-QJWNTBNXSA-M ricinoleate Chemical compound CCCCCC[C@@H](O)C\C=C/CCCCCCCC([O-])=O WBHHMMIMDMUBKC-QJWNTBNXSA-M 0.000 description 1
- 235000003441 saturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000004671 saturated fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950002323 smilagenin Drugs 0.000 description 1
- 239000011343 solid material Substances 0.000 description 1
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 150000003408 sphingolipids Chemical class 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 108020003113 steroid hormone receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000005969 steroid hormone receptors Human genes 0.000 description 1
- 229920001059 synthetic polymer Polymers 0.000 description 1
- 150000003866 tertiary ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 239000010409 thin film Substances 0.000 description 1
- 238000003325 tomography Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N triton Chemical compound [3H+] GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
- 231100000402 unacceptable toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000003828 vacuum filtration Methods 0.000 description 1
- 239000012808 vapor phase Substances 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 210000001835 viscera Anatomy 0.000 description 1
- 238000007794 visualization technique Methods 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/22—Echographic preparations; Ultrasound imaging preparations ; Optoacoustic imaging preparations
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/22—Echographic preparations; Ultrasound imaging preparations ; Optoacoustic imaging preparations
- A61K49/222—Echographic preparations; Ultrasound imaging preparations ; Optoacoustic imaging preparations characterised by a special physical form, e.g. emulsions, liposomes
- A61K49/223—Microbubbles, hollow microspheres, free gas bubbles, gas microspheres
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Acoustics & Sound (AREA)
- Radiology & Medical Imaging (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Hydrogenated Pyridines (AREA)
- Ultra Sonic Daignosis Equipment (AREA)
- Measuring And Recording Apparatus For Diagnosis (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относится к способу получения лиофилизованной матрицы и, после ее восстановления, соответствующего пригодного для инъекций контрастного вещества, содержащего жидкую водную суспензию наполненных газом микропузырьков, стабилизированную преимущественно фосфолипидом. Способ включает приготовление эмульсии из водной среды, фосфолипида и не смешиваемого с водой органического растворителя. Затем эмульсию высушивают сублимацией, после чего восстанавливают в водную суспензию наполненных газом микропузырьков. Способ позволяет получить суспензии, содержащие микропузырьки с относительно малым диаметром и узким распределением по размерам. 5 н. и 31 з.п. ф-лы, 12 табл.
Description
Настоящее изобретение относится к способу получения сухой или лиофилизованной композиции, пригодной для получения газа, содержащего контрастное вещество, пригодное для использования в диагностической интроскопии, и к способу получения указанного газа, содержащего контрастное вещество.
Изобретение включает также сухие композиции, полученные этим способом, которые могут быть восстановлены с образованием суспензий контрастного вещества, пригодных в диагностической интроскопии. Кроме того, изобретение включает суспензии наполненных газом микропузырьков, пригодных в диагностической интроскопии, полученных с использованием сухих композиций согласно изобретению, а также контейнеров или двухкомпонентных наборов, содержащих сухие композиции изобретения.
Предпосылки изобретения
В результате быстрого развития ультразвуковых контрастных веществ в последние годы был создан ряд различных композиций, пригодных для ультразвуковой визуализации органов и тканей тела человека или животных. Эти вещества предназначены для использования прежде всего как внутривенные или внутриартериальные инъекции в связи с применением медицинского эхографического оборудования, в котором используется, например, формирование двумерных изображений (на основе пространственного распределения свойств обратного рассеяния тканей) или обработка доплеровского сигнала (на основе обработки ультразвуковых эхосигналов в режиме незатухающих волн или в импульсном доплеровском режиме) для определения параметров тока крови или жидкостей.
Класс пригодных для инъекций композиций, пригодных в качестве ультразвуковых контрастных веществ, включает суспензии пузырьков газа с диаметром несколько микрон, диспергированных в водной среде.
Применение суспензий пузырьков газа в жидкости-носителе как эффективных ультразвуковых отражателей хорошо известно в уровне техники. Развитие микропузырьковых суспензий как эхофармацевтиков для улучшения ультразвуковой визуализации последовало за ранними наблюдениями, что быстрые внутривенные инъекции водных растворов могут вызывать выход растворенных газов из раствора, образуя пузырьки. Было обнаружено, что из-за существенного различия их акустического сопротивления и сопротивления крови эти внутрисосудистые пузырьки газа являются прекрасными отражателями ультразвука. Инъекция суспензий пузырьков газа в жидкости-носителе в кровоток живого организма существенно интенсифицирует ультразвуковую эхографическую визуализацию, улучшая тем самым визуализацию внутренних органов. Поскольку получение изображений органов и глубоко находящихся тканей может быть решающим при установлении медицинского диагноза, много усилий было направлено на создание стабильных суспензий высококонцентрированных пузырьков газа, которые в то же самое время были бы просты в приготовлении и приеме, содержали бы минимум неактивных соединений и были бы способны в долгому хранению и простому распространению.
Однако простое распределение свободных пузырьков газа в водной среде имеет ограниченный практический интерес, так как эти пузырьки, как правило, недостаточно стабильны, чтобы быть пригодными в качестве ультразвуковых контрастных веществ.
Соответственно, был проявлен интерес к способам стабилизации газовых пузырьков для эхографии и других ультразвуковых исследований, например, путем использования эмульгаторов, масел, загустителей или сахаров или путем включения или инкапсулирования газа или его прекурсора в различные системы. Эти стабилизированные пузырьки газа в уровне техники обычно называют "микровезикулами", и их можно разделить на две основные категории.
Первую категорию стабилизированных пузырьков, или микровезикул, обычно в данной области называют "микропузырьками", сюда относятся водные суспензии, в которых пузырьки газа удерживаются на границе раздела газ/жидкость очень тонкой пленкой, содержащей ПАВ (т.е. амфифильный материал), расположенный на границе раздела газа и жидкости. Вторую категорию микровезикул обычно в уровне техники называют "микросферами " или "микрокапсулами", к ней относятся суспензии, в которых пузырьки газа окружены оболочкой из твердого материала, образованного из натуральных или синтетических полимеров. Примеры микросфер и их получение описаны, например, в Европейской патентной заявке EP 0458745. Другой вид ультразвукового контрастного вещества включает суспензии пористых микрочастиц из полимера или других твердых частиц, которые несут пузырьки газа захваченными в порах микрочастиц. Настоящее изобретение относится, в частности, к контрастным веществам для диагностической интроскопии, включающим водную суспензию микропузырьков газа, т.е. микровезикул, которые стабилизированы в основном слое амфифильного материала.
Микропузырьковые суспензии обычно готовят путем приведения порошкообразных амфифильных материалов, например осушенных сублимацией заранее готовых липосом или осушенных сублимацией или распылением фосфолипидных суспензий, в контакт с воздухом или другим газом и затем с водным носителем, перемешивая для создания микропузырьковой суспензии, которую затем нужно будет принимать вскоре после ее приготовления.
Примеры водных суспензий микропузырьков газа и их получение можно найти, например, в документах US 5271928, US 5445813, US 5413774, US 5556610, 5597549, US 5827504.
В патенте WO 97/29783 раскрывается альтернативный способ получения суспензий микропузырьков газа, включающий образование дисперсии микропузырьков газа в подходящей водной среде, содержащей фосфолипиды, после этого дисперсию подвергают лиофилизации для получения сухого восстанавливаемого продукта. Приготовленные таким образом сухие продукты могут быть восстановлены в водных средах при необходимости лишь минимального перемешивания. Как упомянуто в указанном документе, размер образованных таким образом микропузырьков может всегда воспроизводиться и на практике не зависит от количества энергии смешения, прикладываемой для восстановления, а определяется размером микропузырьков, образованных в исходной микропузырьковой дисперсии. Заявитель, однако, обнаружил, что количество энергии перемешивания, приложенной для создания дисперсии микропузырьков газа в водной среде, содержащей фосфолипиды, может быть излишне высоким, в частности, когда должны быть получены микропузырьки малого диаметра (например, 23000 об/мин в течение 10 минут для получения дисперсии пузырьков средним по объему диаметром примерно 3 мкм). Эта высокая энергия перемешивания может вызвать локальный перегрев в водной дисперсии микропузырьков, что может, в свою очередь, вызвать деградацию фосфолипидов, содержащихся в водной среде. Кроме того, влияние излишне высокой энергии перемешивания обычно трудно контролировать, и это может привести к неконтролируемому распределение конечных микропузырьков по размерам. Кроме того, этот процесс предусматривает постоянный поток газа в водную среду при образовании микропузырьков, что требует, таким образом, применения больших количеств газов.
В документе WO 94/01140 описан следующий способ получения суспензий микровезикул, восстанавливаемых в водной среде, который включает лиофилизацию водных эмульсий, содержащих парантерально приемлемые эмульгаторы, неполярные жидкости и жидкие структурообразователи, растворимые в липидах или не растворимые в воде. В качестве парантерально приемлемых эмульгаторов упоминались полоксамеры и фосфолипиды, а смеси двух из них применялись в рабочих примерах. Холестерин является предпочтительным водонерастворимым структурообразователем, который применяется в рабочих примерах. Затем лиофилизованный продукт восстанавливают в воде, чтобы получить водную суспензию наполненных газом микровезикул. Наполненные газом микровезикулы, полученные в результате стадии восстановления, являются, таким образом, ограниченными оболочкой из различных материалов, в том числе эмульгаторов, таких как полоксамеры, и водонерастворимых структурообразователей, таких как холестерин.
Указано, что процесс приводит к эмульсии с размером частиц менее 4 мкм, предпочтительно менее 2 мкм и до 0,5 мкм. Однако заявитель отметил, что хотя этап восстановления может в конечном счете привести к микровезикулам, имеющим среднечисленный диаметр менее 2 мкм, тем не менее соответствующее распределение популяции микровезикул по размерам является относительно широким. Кроме того, стадия превращения из микрочастиц эмульсии, полученной в вышеуказанном процессе, в газовые микропузырьки дает в итоге довольно низкий выход.
Теперь заявитель обнаружил, что может быть получено намного более узкое распределение микропузырьков по размерам, если в качестве основного эмульгатора в вышеуказанной эмульсии использовать фосфолипид и если вышеуказанный процесс проводить по существу при отсутствии вышеуказанных водонерастворимых структурообразователей. Кроме того, почти полное отсутствие указанных водонерастворимых структурообразователей позволяет существенно увеличить степень превращения микрочастиц эмульсии в газовые микропузырьки. Кроме того, заявитель обнаружил, что вышеуказанный процесс может привести к еще более узкому распределению микропузырьков по размерам и к увеличенному выходу, если фосфолипид является по существу единственным эмульгатором, присутствующим в эмульсии.
Заявитель нашел также, что прилагая достаточно низкую энергию перемешивания к водно-органической эмульсии во время процесса, какой описан выше, можно получить микропузырьки, имеющие очень маленький диаметр и более узкое распределение по размерам.
Суть изобретения
Один аспект настоящего изобретения относится к способу получения лиофилизованной матрицы, которая при контакте с водной жидкостью-носителем и газом может быть восстановлена в суспензию наполненных газом микропузырьков, стабилизированную преимущественно фосфолипидом, причем указанный способ включает стадии:
a) приготовление водно-органической эмульсии, содержащей i) водную среду, ii) органический растворитель, по существу не смешиваемый с водой; iii) эмульгирующий состав амфифильных материалов, содержащий более 50 вес.% фосфолипида, и iv) лиопротективный агент;
b) лиофилизация указанной эмульгированной смеси с получением лиофилизованной матрицы, содержащей указанный фосфолипид.
Другой аспект настоящего изобретения относится к способу получения впрыскиваемого контрастного вещества, содержащего жидкую водную суспензию наполненных газом микропузырьков, стабилизированных преимущественно фосфолипидом, который включает стадии:
a) приготовление водно-органической эмульсии, содержащей i) водную среду, ii) органический растворитель, по существу не смешиваемый с водой; iii) эмульгирующий состав амфифильных материалов, содержащий более 50 вес.% фосфолипида, и iv) лиопротективный агент;
b) лиофилизация указанной эмульсии для получения лиофилизованной матрицы, содержащей указанный фосфолипид;
c) контактирование указанной лиофилизованной матрицы с биосовместимым газом;
d) восстановление указанной лиофилизованной матрицы путем растворения ее в физиологически приемлемой водной жидкости-носителе с получением суспензии наполненных газом микропузырьков, стабилизированных преимущественно указанным фосфолипидом.
Предпочтительно стадия a) приготовления эмульсии включает:
a1) приготовление суспензии путем диспергирования эмульгирующего состава амфифильных материалов и лиопротективного агента в водной среде;
a2) смешивание полученной суспензии с органическим растворителем;
a3) регулируемое перемешивание смеси с получением эмульсии.
Предпочтительно регулируемое перемешивание согласно стадии a3) получается при применении гомогенизатора высокого давления или, более предпочтительно, роторно-статорного гомогенизатора.
Следующий аспект изобретения относится к впрыскиваемому контрастному веществу, содержащему суспензию наполненных газом микропузырьков, стабилизированных стабилизирующим слоем, преимущественно содержащим фосфолипид в водной жидкости-носителе, причем указанные микропузырьки имеют среднечисленный диаметр (DN) менее 1,70 мкм и медианный диаметр объемного распределения (DV50) такой, что отношение DV50/DN составляет примерно 2,00 или меньше.
Подробное описание изобретения
Как указано выше, один аспект настоящего изобретения относится к способу получения лиофилизованной матрицы восстанавливаемой суспензии наполненных газом микропузырьков, стабилизированных преимущественно фосфолипидом, причем указанный способ включает приготовление водно-органической эмульсии, содержащей: i) водную среду, ii) органический растворитель, по существу не смешиваемый с водой; iii) фосфолипид и iv) лиопротективный агент, и последующую лиофилизацию указанной эмульсии.
Водная среда предпочтительно является физиологически приемлемым носителем. Термин "физиологически приемлемый" включает любое соединение, материал или композицию, которые могут приниматься пациентом в выбранном количестве без негативного воздействия или без существенного изменения здоровья или нормального функционирования его организма (например, без фиксирования какого-либо статуса неприемлемой токсичности, вызывающей любой экстремальный или неконтролируемый аллергический отклик, или без установления каких-либо ненормальных патологических условий или состояния болезни).
Подходящими водными жидкими носителями являются вода, обычно стерильная, не содержащая пирогенов вода (чтобы предотвратить по возможности загрязнение промежуточного лиофилизованного продукта), водные растворы, такие как солевые растворы (которые могут быть преимущественно сбалансированы так, чтобы конечный продукт для инъекций не был гипотоническим), или водные растворы одной или более субстанций, регулирующих тонус, как соли или сахара, сахарные спирты, гликоли или другие неионные полиоловые материалы (например, глюкоза, сахароза, сорбит, маннитол, глицерин, полиэтиленгликоли, пропиленгликоли и им подобные).
Органический растворитель
Используемый здесь термин "по существу не смешиваемый с водой", относящийся к органическому растворителю, означает, что когда указанный растворитель смешан с водой, образуются две отдельные фазы. Не смешиваемые с водой растворители обычно известны в уровне техники как аполярные или неполярные растворители, в отличие от полярных растворителей (таких, как вода). Не смешиваемые с водой растворители, как правило, почти не растворимы в воде. Для целей настоящего изобретения органическими растворителями, подходящими для эмульгирования с водным растворителем, являются растворители с растворимостью в воде менее примерно 10 г/л. Предпочтительно растворимость указанного растворителя в воде составляет примерно 1,0 г/л или меньше, более предпочтительно примерно 0,2 г/л или меньше и, намного более предпочтительно, примерно 0,01 г/л или меньше. Особенно предпочтительными растворителями являются растворители с растворимостью в воде 0,001 г/л или меньше. В частности, нерастворимые органические растворители (например, перфторуглероды) могут иметь растворимость вплоть до примерно 1,0·10-6 г/л (например, перфтороктан 1,66·10-6 г/л).
Органический растворитель предпочтительно является лиофилизуемым, т.е. указанный растворитель имеет достаточно высокое давление пара при температурах лиофилизации, например, между -30°C и 0°C, чтобы позволить эффективное и полное испарение/сублимацию в пределах приемлемых времен, например 24-48 часов. Предпочтительно давление пара органического растворителя выше примерно 0,2 кПа при 25°C.
Органический растворитель может быть выбран из широкого круга растворителей любой химической природы, то есть не смешиваемых с водой и лиофилизуемых, как указано выше, и которые предпочтительно являются жидкими при комнатной температуре (25°C). Если используется растворитель с точкой кипения ниже, чем комнатная температура, емкость, содержащая эмульгирующую смесь, может преимущественно быть охлаждена ниже точки кипения указанного растворителя, например, до 5°C или 0°C. Поскольку указанный растворитель будет полностью удален во время стадии лиофилизации, не существует никаких особых ограничений, за исключением того, что он не должен содержать загрязняющих веществ, которые не могут быть удалены путем лиофилизации или которые неприемлемы для применения в составах для инъекций.
Подходящие органические растворители включают, без ограничений, алканы, такие как разветвленные или предпочтительно прямые (C5-C10)-алканы, например пентан, гексан, гептан, октан, нонан, декан; алкены, такие как (C5-C10)-алкены, например, 1-пентен, 2-пентен, 1-октен; циклоалканы, такие как (C5-C8)-циклоалканы, возможно замещенные одной или двумя метильными группами, например циклопентан, циклогексан, циклооктан, 1-метилциклогексан; ароматические углеводороды, такие как бензол и производные бензола, замещенные одной или двумя метильными или этильными группами, например бензол, толуол, этилбензол, 1,2-диметилбензол, 1,3-диметилбензол; простые алкиловые эфиры и кетоны, такие как дибутиловый эфир и диизопропилкетон; галогенированные углеводороды или простые эфиры, такие как хлороформ, четыреххлористый углерод, 2-хлор-1-(дифторметокси)-1,1,2-трифторэтан (энфлюран), 2-хлор-2-(дифторметокси)-1,1,1-трифторэтан (изофлюран), тетрахлор-1,1-дифторэтан и, в частности, перфторированные углеводороды или простые эфиры, такие как перфторпентан, перфторгексан, перфторгептан, перфторметилциклогексан, перфтороктан, перфторнонан, перфторбензол и перфтордекалин, метилперфторбутиловый эфир, метилперфторизобутиловый эфир, этилперфторбутиловый эфир, этилперфторизобутиловый эфир и их смеси.
Количество растворителя обычно составляет от примерно 1 до примерно 50 об.% от количества воды, используемой для эмульсии. Предпочтительно указанное количество равно от примерно 1% до примерно 20%, более предпочтительно от примерно 2% до примерно 15% и еще более предпочтительно от примерно 5% до примерно 10%. При желании можно использовать смесь двух или более перечисленных выше органических растворителей, причем полное количество органического растворителя в эмульгирующей смеси находится в вышеуказанном диапазоне.
Лиопротективный агент
Термин лиопротективный агент или "лиопротектор" относится к соединению, которое, будучи включено в лиофилизуемую композицию, будет защищать химические соединения от отрицательных воздействий замораживания и вакуумирования, таких как воздействия, обычно сопровождающие лиофилизацию, например повреждение, адсорбция и потери от вакуума, применяемого в лиофилизации. Кроме того, после стадии лиофилизации указанный лиопротективный агент предпочтительно дает в результате твердую матрицу ("массу"), которая держит лиофилизованный фосфолипид.
Настоящее изобретение не ограничено применением конкретного лиопротектора; примеры подходящих лиопротекторов включают, без ограничений, углеводороды, такие как сахариды, моно-, ди- или полисахариды, например глюкозу, галактозу, фруктозу, сахарозу, трегалозу, мальтозу, лактозу, амилозу, амилопектин, циклодекстрины, декстран, инулин, растворимый крахмал, гидроксиэтилкрахмал (HES), сахарные спирты, например маннитол, сорбит и полигликоли, такие как полиэтиленгликоли. Основательный список веществ с лиопротективным действием приведен в публикации Acta Pharm. Technol. 34 (3), pp. 129-139 (1988), содержание которого введено здесь ссылкой. Указанные лиопротективные агенты могут применяться по отдельности или как смеси одного или более соединений.
Предпочтительные лиопротекторы включают маннитол и полисахариды, такие как декстраны (в частности, с молекулярным весом более 1500 дальтон), инулин, растворимый крахмал и гидроксиэтилкрахмал.
Превосходные результаты дают также смеси маннитола или полисахаридов, таких как декстраны, инулин, растворимый крахмал, гидроксиэтилкрахмал, с сахаридами, такими как глюкоза, мальтоза, лактоза, сахароза, трегалоза и эритритол.
Также настоящее изобретение не ограничено каким-либо конкретным количеством используемого лиопротектора. Однако оптимальная весовая концентрация лиопротективных агентов в эмульсии до лиофилизации составляет от примерно 1 до примерно 25%, предпочтительно от примерно 2 до примерно 20% и еще более предпочтительно от примерно 5 до примерно 10%.
Более высокое количество может применяться, если лиофилизованному продукту необходимо также придать желаемую "массу".
Лиопротективный агент предпочтительно добавляют в водно-органическую смесь перед ее эмульгированием, следовательно, в этом случае эмульгирование водно-органической смеси проводится в присутствии лиопротективных агентов. Альтернативно, лиопротектор может быть добавлен в водно-органическую смесь после ее эмульгирования. В первом случае лиопротектор предпочтительно добавляют в водную среду перед смешиванием ее с органическим растворителем. При желании можно также комбинировать оба способа, например, добавляя часть лиопротективного агента в водную фазу, используемую для получения эмульсии, а часть - в полученную таким образом эмульсию. При желании в эмульсию могут, кроме того, добавляться также криозащитные агенты, такие как глицерин, для защиты химических соединений от отрицательного воздействия замораживания.
Фосфолипиды
В соответствии с настоящим описанием и формулой изобретения подразумевается, что термин фосфолипид охватывает любое амфифильное фосфолипидное соединение, молекулы которого способны образовывать пленку материала (типично в виде мономолекулярного слоя) на поверхности раздела газ-вода в конечной суспензии микропузырьков. Соответственно эти материалы обозначаются в уровне техники также "пленкообразующими фосфолипидами". Аналогично, в эмульгированной смеси эти амфифильные соединения обычно расположены на границе раздела между водной средой и органическим растворителем, по существу не растворимым в воде, тем самым стабилизируя эмульгированные микрокапли растворителя. Пленка, образованная этими соединениями на границе раздела газ-вода или вода-растворитель, может быть непрерывной или дискретной. Однако в последнем случае разрывы в пленке не должны быть такими, чтобы ухудшать стабильность (например, сопротивление давлению, устойчивость к коалесценции и т.д.) суспендированных микропузырьков или эмульгированных микрокапель соответственно.
Термин "амфифильное соединение", как он используется здесь, включает соединения, имеющие молекулу с гидрофильной полярной головкой (например, полярную или ионную группу), способную взаимодействовать с водной средой, и гидрофобную органическую хвостовую часть (например, углеводородную цепь), способную взаимодействовать, например, с органическим растворителем. Следовательно, эти соединения действуют, как правило, как "поверхностно-активное вещество", т.е. как соединения, которые способны стабилизировать смеси материалов, по-иному обычно несмешивающихся, таких как смеси двух несмешивающихся жидкостей (например, вода и масло), смеси жидкостей с газами (например, микропузырьки газа в воде) или смеси жидкостей с нерастворимыми частицами (например, металлические наночастицы в воде).
Амфифильные фосфолипидные соединения обычно содержат по меньшей мере одну фосфатную группу и по меньшей мере одну, предпочтительно две липофильные длинноцепочечные углеводородные группы.
Примеры подходящих фосфолипидов включают сложные эфиры глицерина с одним или предпочтительно двумя (одинаковыми или разными) остатками жирных кислот и с фосфорной кислотой, причем остаток фосфорной кислоты, в свою очередь, присоединен к гидрофильной группе, такой как холин (фосфатидилхолины - PC), серин (фосфатидилсерины - PS), глицерин (фосфатидилглицерины - PG), этаноламин (фосфатидилэтаноламины - PE), инозитол (фосфатидилинозитол) и им подобным группам. Сложные эфиры фосфолипидов с единственным остатком жирной кислоты обычно называют в уровне техники "лизо"-формами фосфолипида. Жирнокислотные остатки, присутствующие в фосфолипидах, являются обычно длинноцепочечными алифатическими кислотами, обычно содержащими от 12 до 24 атомов углерода, предпочтительно от 14 до 22; алифатическая цепь может содержать одну или более ненасыщенность или предпочтительно является полностью насыщенной. Примерами подходящих жирных кислот, содержащихся в фосфолипидах, являются, например, лауриновая кислота, миристиновая кислота, пальмитиновая кислота, стеариновая кислота, арахидоновая кислота, бегеновая кислота, олеиновая кислота, линолевая кислота и линоленовая кислота. Предпочтительно применяются насыщенные жирные кислоты, такие как миристиновая кислота, пальмитиновая кислота, стеариновая кислота и арахидоновая кислота.
Дальнейшими примерами фосфолипидов являются фосфатидные кислоты, т.е. сложные диэфиры глицерина и фосфорной кислоты с жирными кислотами; сфинголипиды, такие как сфингомиелины, т.е. такие аналоги фосфатидилхолина, в которых остаток диэфира глицерина и жирных кислот замещен церамидной цепью; кардиолипины, т.е. сложные эфиры 1,3-дифосфатидилглицерина и жирной кислоты, гликолипиды, такие как ганглиозиды GM1 (или GM2) или цереброзиды, глюколипиды, сульфатиды и гликосфинголипиды.
Используемый здесь термин фосфолипиды включает встречающиеся в природе полусинтетические либо синтетические продукты, которые могут применяться по отдельности или как смеси.
Примерами встречающихся в природе фосфолипидов являются натуральные лецитины (производные фосфатидилхолина (PC)), такие как, обычно, соевые бобы или лецитины яичного желтка.
Примерами полусинтетических фосфолипидов являются частично или полностью гидрогенизированные производные природного лецитина. Предпочтительными фосфолипидами являются сложные диэфиры жирных кислот и фосфатидилхолина, этилфосфатидилхолина, фосфатидилглицерина, фосфатидной кислоты, фосфатидилэтаноламина, фосфатидилсерина или сфингомиелина.
Примерами предпочтительных фосфолипидов являются, например, дилауроилфосфатидилхолин (DLPC), димиристоилфосфатидилхолин (DMPC), дипальмитоилфосфатидилхолин (DPPC), диарахидоилфосфатидилхолин (DAPC), дистеароилфосфатидилхолин (DSPC), диолеоилфосфатидилхолин (DOPC), 1,2-дистеароил-sn-глицеро-3-этилфосфохолин (Этил-DSPC), дипентадеканоилфосфатидилхолин (DPDPC), 1-миристоил-2-пальмитоилфосфатидилхолин (MPPC), 1-пальмитоил-2-миристоилфосфатидилхолин (PMPC), 1-пальмитоил-2-стеароилфосфатидилхолин (PSPC), 1-стеароил-2-пальмитоилфосфатидилхолин (SPPC), 1-пальмитоил-2-олеилфосфатидилхолин (POPC), 1-олеил-2-пальмитоилфосфатидилхолин (OPPC), дилауроилфосфатидилглицерин (DLPG) и его соли с щелочными металлами, диарахидоилфосфатидилглицерин (DAPG) и его соли с щелочными металлами, димиристоилфосфатидилглицерин (DMPG) и его соли с щелочными металлами, дипальмитоилфосфатидилглицерин (DPPG) и его соли с щелочными металлами, дистеароилфосфатидилглицерин (DSPG) и его соли с щелочными металлами, диолеоилфосфатидилглицерин (DOPG) и его соли с щелочными металлами, димиристоилфосфатидная кислота (DMPA) и ее соли с щелочными металлами, дипальмитоилфосфатидная кислота (DPPA) и ее соли с щелочными металлами, дистеароилфосфатидная кислота (DSPA), диарахидоилфосфатидная кислота (DAPA) и ее соли с щелочными металлами, димиристоилфосфатидилэтаноламин (DMPE), дипальмитоилфосфатидилэтаноламин (DPPE), дистеароилфосфатидилэтаноламин (DSPE), диолеилфосфатидилэтаноламин (DOPE), диарахидоилфосфатидилэтаноламин(DAPE), дилинолеилфосфатидилэтаноламин (DLPE), димиристоилфосфатидилсерин (DMPS), диарахидоилфосфатидилсерин (DAPS), дипальмитоилфосфатидилсерин (DPPS), дистеароилфосфатидилсерин (DSPS), диолеоилфосфатидилсерин (DOPS), дипальмитоилсфингомиелин (DPSP), дистеароилсфингомиелин (DSSP).
Термин фосфолипид включает, кроме того, модифицированный фосфолипид, например фосфолипиды, где гидрофильная группа соединена, в свою очередь, с другой гидрофильной группой. Примерами модифицированных фосфолипидов являются фосфатидилэтаноламины, модифицированные полиэтиленгликолем (ПЭГ), т.е. фосфатидилэтаноламины, в которых гидрофильная этаноламиновая часть связана с молекулой ПЭГ различного молекулярного веса, например от 300 до 5000 дальтон, такие как DPPE-ПЭГ или DSPE-ПЭГ, т.е. DPPE (или DSPE), к которым присоединен полимер ПЭГ. Например, DPPE-ПЭГ2000 означает DPPE, к которому присоединен полимер ПЭГ со средним молекулярным весом примерно 2000. Как подробно поясняется далее, эти ПЭГ-модифицированные фосфолипиды предпочтительно применяются в комбинации с немодифицированными фосфолипидами.
Как нейтральные, так и заряженные фосфолипиды, а также их смеси могут удовлетворительно применяться в способе согласно настоящему изобретению. Как он используется здесь и в предшествующем уровне, термин "заряженный" в отношении "фосфолипидов" означает, что индивидуальные молекулы фосфолипида имеют суммарный ненулевой заряд, положительный или, чаще, отрицательный.
Примерами фосфолипидов, несущих суммарный отрицательный заряд, являются производные, в частности, жирнокислотных сложных диэфиров фосфатидилсерина, такие как DMPS, DPPS, DSPS; фосфатидной кислоты, такие как DMPA, DPPA, DSPA; фосфатидилглицерина, такие как DMPG, DPPG и DSPG. Также в качестве отрицательно заряженных молекул могут применяться модифицированные фосфолипиды, в частности ПЭГ-модифицированные фосфатидилэтаноламины, такие как DMPE-ПЭГ750, DMPE-ПЭГ1000, DMPE-ПЭГ2000, DMPE-ПЭГ3000, DMPE-ПЭГ4000, DMPE-ПЭГ5000, DPPE-ПЭГ750, DPPE-ПЭГ1000, DPPE-ПЭГ2000, DPPE-ПЭГ3000, DPPE-ПЭГ4000, DPPE-ПЭГ5000, DSPE-ПЭГ750, DSPE-ПЭГ1000, DSPE-ПЭГ2000, DSPE-ПЭГ3000, DSPE-ПЭГ4000, DSPE-ПЭГ5000, DAPE-ПЭГ750, DAPE-ПЭГ1000, DAPE-ПЭГ2000, DAPE-ПЭГ3000, DAPE-ПЭГ4000 или DAPE-ПЭГ5000. Также в качестве отрицательно заряженного соединения могут с успехом применяться лизоформы вышеуказанных фосфолипидов, такие как производные лизофосфатидилсерина (например, лизо-DMPS, -DPPS или -DSPS), производные лизофосфатидной кислоты (например, лизо-DMPA, -DPPA или -DSPA) и производные лизофосфатидилглицерина (например, лизо-DMPG, -DPPG или -DSPG).
Примерами фосфолипидов, несущих суммарный положительный заряд, являются производные этилфосфатидилхолина, в частности сложные эфиры этилфосфатидилхолина и жирных кислот, такие как 1,2-дистеароил-sn-глицеро-3-этилфосфохолин (Этил-DSPC или DSEPC), 1,2-дипальмитоил-sn-глицеро-3-этилфосфохолин (Этил-DPPC или DPEPC).
Предпочтительно применяются смеси двух или более фосфолипидов, по меньшей мере одного незаряженного и по меньшей мере одного с суммарным ненулевым зарядом. Более предпочтительно применяются смеси двух или более фосфолипидов, по меньшей мере одного незаряженного и по меньшей мере одного с отрицательным суммарным зарядом. Количество заряженного фосфолипида может изменяться от примерно 95 до примерно 5 вес.% от полного количества фосфолипида, предпочтительно от 80 до 20 вес.%. Присутствие по меньшей мере небольших количеств, таких как от 5 до 20 вес.% от полного веса фосфолипида, (отрицательно) заряженного фосфолипида может помочь предотвратить агрегацию пузырьков или капель эмульсии. Однако можно использовать и один фосфолипид, нейтральный или заряженный, или смесь двух или более фосфолипидов, из которых все являются нейтральными или все имеют суммарный ненулевой заряд.
Предпочтительными фосфолипидами являются DAPC, DPPA, DSPA, DMPS, DPPS, DSPS, DPPE, DSPE, DSPG, DPPG и Этил-DSPC. Наиболее предпочтительны DSPA, DPPS или DSPS.
Предпочтительными смесями фосфолипидов являются смеси DPPS с DPPC, DSPC или DAPC (от 95/5 до 5/95 вес./вес.), смеси DSPA с DSPC или DAPC (от 95/5 до 5/95 вес./вес.), смеси или DSPG, или DPPG с DSPC, или смеси DSPC с Этил-DSPC. Наиболее предпочтительны смеси DPPS/DSPC (от 50/50 до 10/90 вес./вес.) или DSPA/DSPC (от 50/50 до 20/80 вес./вес.).
Количество фосфолипида обычно составляет от примерно 0,005 до примерно 1,0 вес.% от полного веса эмульгированной смеси. Конечно, могут применяться и более высокие количества, но принимая во внимание, что конечный продукт является впрыскиваемым контрастным веществом, предпочтительно не применять избыточное количество добавок, только если это не является строго необходимым для получения стабильного и пригодного продукта. Вообще, при использовании большего количества фосфолипида, чем указанное в качестве верхнего предела вышеуказанного диапазона, не наблюдается никакого или очень незначительное улучшение с точки зрения популяции пузырьков, распределения пузырьков по размерам и стабильности пузырьков. Обычно более высокие количества фосфолипида требуются, когда используются повышенные объемы органического растворителя. Таким образом, когда объем органического растворителя доходит до примерно 50% объема водной фазы, в эмульсию может быть с успехом добавлено примерно 1% (вес./вес.) фосфолипида. Предпочтительно количество фосфолипида составляет от 0,01 до 1,0 вес.% от общего веса эмульгированной смеси, более предпочтительно от примерно 0,05 до 0,5 вес.%.
Как указано выше, микропузырьки, полученные согласно способу изобретения, стабилизированы преимущественно фосфолипидом, как определенный выше. В частности, оболочка, окружающая наполненные газом микропузырьки, образована более чем на 50% (вес./вес.), предпочтительно по меньшей мере на 80% и намного более предпочтительно по меньшей мере на 90% из фосфолипидного материала, как определенный выше. Обычно стабилизирующая оболочка микропузырьков по существу полностью образована фосфолипидом.
Однако с фосфолипидом могут быть смешаны другие амфифильные материалы, образующие стабилизирующую оболочку наполненных газом микропузырьков, в количестве менее 50% от полного веса эмульгирующего состава.
Примеры подходящих дополнительных стабилизирующих оболочку амфифильных материалов включают, например, лизолипиды; жирные кислоты, такие как пальмитиновая кислота, стеариновая кислота, лауриновая кислота, миристиновая кислота, арахидиновая кислота, арахидоновая кислота, бегеновая кислота, олеиновая кислота, линолевая кислота или линоленовая кислота и их соответствующие соли с щелочами или щелочными металлами; липиды, несущие полимеры, такие как хитин, гиалуроновая кислота, поливинилпирролидон или полиэтиленгликоль (ПЭГ), называемые также "пегилированными липидами"; липиды, имеющие сульфированные моно-, ди-, олиго- или полисахариды; липиды с жирными кислотами, связанными простой или сложноэфирной связью; полимеризованные липиды; диацетилфосфат; дицетилфосфат; стеариламин; церамиды; полиоксиэтилированные сложные эфиры жирной кислоты (такие, как полиоксиэтилированные стеараты жирных кислот); полиоксиэтилированные жирные спирты; полиоксиэтилированных простые эфиры жирных спиртов; полиоксиэтилированные сложные эфиры сорбита и жирной кислоты, модифицированный полиоксиэтиленом глицеринрицинолеат; этоксилированные стерины соевых бобов; этоксилированное касторовое масло; блок-сополимеры этиленоксида (ЭО) и пропиленоксида (ПО); стериновые сложные эфиры сахарных кислот, в том числе глюкурониды холестерина, глюкорониды ланостерина, 7-дегидрохолестеринглюкоронид, эргостеринглюкоронид, холестеринглюконат, ланостеринглюконат или эргостеринглюконат; сложные эфиры сахарных кислот и спиртов, в том числе лаурилглюкоронид, стеарилглюкоронид, миристоилглюкоронид, лаурилглюконат, миристоилглюконат или стеароилглюконат; сложные эфиры сахаров с алифатическими кислотами, в том числе лаурат сахарозы, лаурат фруктозы, пальмитат сахарозы, стеарат сахарозы, глюкуроновая кислота, глюконовая кислота или полиуроновая кислота; сложные эфиры глицерина с (C12-C24)-, предпочтительно (C14-C22)-дикарбоновыми жирными кислотами и их соответствующими солями с щелочью или солями с щелочными металлами, такие как 1,2-дипальмитоил-sn-3-сукцинилглицерин или 1,3-дипальмитоил-2-сукцинилглицерин; сапонины, в том числе сарсасапогенин, смилагенин, гедерагенин, олеаноловая кислота или дигитоксигенин; длинноцепочечные (Cl2-C24)-спирты, в том числе н-дециловый спирт, лауриловый спирт, миристиловый спирт, цетиловый спирт или н-октадециловый спирт; 6-(5-холестен-3β-илокси)-1-тио-β-D-галактопиранозид; дигалактозилдиглицерид; 6-(5-холестен-3β-илокси)-гексил-6-амино-6-деокси-1-тио-β-D-галактопиранозид; 6-(5-холестен-3β-илокси)гексил-6-амино-6-деоксил-1-тио-β-D-маннопиранозид; 12-(((7'-диэтиламинокумарин-3-ил)карбонил)метиламино)-октадекановая кислота; N-[12-(((7'-диэтиламинокумарин-3-ил)карбонил)метиламино)октадеканоил]-2-аминопальмитиновая кислота; N-сукцинил-диолеилфосфатидилэтаноламин; 1-гексадецил-2-пальмитоилглицерофосфоэтаноламин; пальмитоилгомоцистеин; алкиламмониевые соли, содержащие по меньшей мере одну (C10-C20), предпочтительно (C14-C18)-алкильную цепь, такие как, например, стеариламмонийхлорид, гексадециламмонийхлорид, диметилдиоктадециламмонийбромид (DDAB), гексадецилтриметиламмонийбромид (CTAB); соли третичного или четвертичного аммония, содержащие один или предпочтительно два (C10-C20)-, предпочтительно (C14-C18)-остатка ацилового сложного эфира, такие как, например, 1,2-дистеароил-3-триметиламмонийпропан (DSTAP), 1,2-дипальмитоил-3-триметиламмонийпропан (DPTAP), 1,2-олеоил-3-триметиламмонийпропан (DOTAP), 1,2-дистеароил-3-диметиламмонийпропан (DSDAP) и их смеси или комбинации.
Небольшие количества жирных кислот и лизоформ фосфолипидов могут также образовываться как продукты разложения исходных фосфолипидных продуктов, например, вследствие нагрева эмульсии.
Предпочтительными дополнительными стабилизирующими оболочку амфифильными материалами являются также соединения, которые содержат один или два жирнокислотных остатка в своей молекуле, в частности одну или две линейные (C10-C20)-ацильные, предпочтительно (C14-C18)-ацильные цепи, такие как, например, вышеперечисленные жирные кислоты, их соответствующие соли и производные.
Особенно предпочтительными дополнительными стабилизирующими оболочку амфифильными материалами являются также соединения, способные дать суммарный ненулевой заряд стабилизирующей оболочке, т.е. соединения, несущие суммарный положительный или отрицательный заряд. Примерами подходящих положительно или отрицательно заряженных соединений являются, например, лизофосфолипиды, т.е. лизоформы вышеуказанных фосфолипидов, такие как производные лизофосфатидилсерина (например, лизо-DMPS, -DPPS или -DSPS), производные лизофосфатидной кислоты (например, лизо-DMPA, -DPPA или -DSPA) и производные лизофосфатидилглицерина (например, лизо-DMPG, -DPPG или -DSPG); соли желчных кислот, такие как соли холевой кислоты, соли деоксихолевой кислоты или соли гликохолевой кислоты; соли (C12-C24)-, предпочтительно (C14-C22)-жирных кислот, такие как, например, соль пальмитиновой кислоты, соль стеариновой кислоты, соль 1,2-дипальмитоил-sn-3-сукцинилглицерина или соль 1,3-дипальмитоил-2-сукцинилглицерина; соли алкиламмония с галогеновым противоионом (например, хлором или бромом), содержащие по меньшей мере одну (C10-C20)-алкильную цепь, предпочтительно (C14-C18)-алкильную цепь, такие как, например, стеариламмонийхлорид, гексадециламмонийхлорид, диметилдиоктадециламмонийбромид (DDAB), гексадецилтриметиламмонийбромид (CTAB); соли третичного или четвертичного аммония с галогеновым противоионом (например, хлором или бромом), содержащие одну или предпочтительно две (C10-C20)-ацильные цепи, предпочтительно (C14-C18)-остаток ацилового эфира, такие как, например, 1,2-дистеароил-3-триметиламмонийпропан (DSTAP), 1,2-дипальмитоил-3-триметиламмонийпропан (DPTAP), 1,2-олеоил-3-триметиламмонийпропан (DOTAP), 1,2-дистеароил-3-диметиламмонийпропан (DSDAP).
Если желательно получить ультразвуковые контрастные вещества-"мишени", т.е. контрастные вещества, содержащие микропузырьки, которые могут избирательно присоединяться к конкретному месту после приема in vitro или in vivo, согласно способу настоящего изобретения возможно также исходить непосредственно из фосфолипида, по меньшей мере часть которого была модифицирована введением выбранного соответствующим образом нацеливающего лиганда, или, альтернативно и предпочтительно, исходя из фосфолипида, по меньшей мере часть которого содержит реакционноспособную группу, возможно защищенную, способную на более поздней стадии связываться с соответствующим образом выбранным нацеливающим лигандом, содержащим дополнительную реакционноспособную функциональную группу, (например, связь авидин-биотин).
Таким образом, в этом конкретном контексте подразумевается, что термин "фосфолипид" охватывает как модифицированные, так и немодифицированные фосфолипиды, таким образом, включая фосфолипиды, модифицированные путем связывания нацеливающего лиганда или защитной реакционноспособной группы с амфифильной молекулой фосфолипида.
Термин "нацеливающий лиганд" охватывает своим значением любое соединение, участок или остаток, имеющий направленную активность микропузырьков согласно изобретению или способный направить эту активность к любому биологическому или патологическому месту в живом организме. Материалы или вещества, которые могут служить нацеливающими лигандами, включают, например, но без ограничений, белки, в том числе антитела, фрагменты антител, рецепторные молекулы, молекулы, связывающиеся с рецепторами, гликопротеины и лектины; пептиды, в том числе олигопептиды и полипептиды; пептидомиметики; сахариды, в том числе моно- и полисахариды; витамины; стероиды, аналоги стероидов, гормоны, кофакторы, биологически активные вещества и генетический материал, в том числе нуклеозиды, нуклеотиды и полинуклеотиды. Мишени, с которыми могут ассоциироваться нацеливающие лиганды, включают ткани, такие как, например, ткани миокарда (в том числе миокардиальные клетки и кардиомицеты), мембранные ткани (в том числе эндотелий и эпителий), пластинки, соединительные ткани (в том числе интерстиций) или опухоли; кровяные сгустки; и рецепторы, такие как, например, рецепторы клеточной поверхности для пептидных гормонов, нейромедиаторы, антигены, фрагменты комплемента и рецепторы иммуноглобулина и цитоплазматические рецепторы для стероидных гормонов.
Примеры подходящих мишеней и нацеливающих лигандов раскрыты, например, в патенте США № 6139819, который введен здесь ссылкой.
В одном предпочтительном варианте исполнения нацеливающие лиганды могут быть присоединены к амфифильным молекулам, образуя стабилизирующую оболочку путем ковалентной связи.
В таком случае конкретный реакционноспособный компонент, который должен присутствовать в фосфолипиде или липидной молекуле, когда желают получить целевую амфифильную молекулу, будет зависеть от конкретного нацеливающего лиганда, который должен к ней присоединяться. Для примера, если нацеливающий лиганд может быть присоединен к амфифильной молекуле через аминогруппу, подходящими реакционноспособными компонентами для амфифильной молекулы могут быть изотиоцианатные группы (которые будут образовывать тиомочевинную связь), реакционноспособные сложные эфиры (для образования амидной связи), альдегидные группы (для образование иминовой связи, которая будет восстановлена в алкиламиновую связь) и т.д.; если нацеливающий лиганд может быть присоединен к амфифильной молекуле через тиоловую группу, подходящие дополняющие реакционноспособные компоненты амфифильной молекулы включают галоацетильные производные или малеимиды (для образования тиоэфирной связи); и если нацеливающий лиганд может быть присоединен к амфифильной молекуле через карбоксильную группу, подходящими реакционноспособными компонентами амфифильной молекулы могли бы быть амины и гидразиды (для образования амидных или алкидамидных связей). Реакционноспособные компоненты могут быть присоединены либо напрямую к фосфолипидной молекуле, либо к модифицирующему компоненту (например, ПЭГ), соединенному с фосфолипидом.
Как указано выше, в предпочтительном варианте исполнения, когда желательно контрастное вещество, содержащее микропузырьки-мишени, по меньшей мере часть исходного фосфолипида будет содержать подходящий реакционноспособный компонент, и нацеливающий лиганд, содержащий дополняющую функциональность, будет соединен с ней либо на любой стадии до лиофилизации, путем добавления нацеливаюшего лиганда, содержащего дополнительную функциональность, в фазу, содержащую функционализированные фосфолипиды/липиды, либо перед, во время или после образования эмульсии или непосредственно перед этапом восстановления. В этом последнем случае было бы возможным полностью использовать гибкость системы, так как микропузырьки, содержащие по меньшей мере часть пленкообразующих фосфолипидов или ассоциированных липидов, соответствующим образом функционализованных, могли бы затем быть соединены с любым желательным нацеливающим лигандом, разделяя эту реакционноспособную дополнительную группу.
Однако нет необходимости, чтобы нацеливающий лиганд соединялся с амфифильными молекулами ковалентной связью. Нацеливающие лиганды могут также быть соответствующим образом связаны с микропузырьками путем взаимодействий физического и/или электростатического типа. Для примера, функциональный компонент, имеющий высокое сродство и селективность к дополняющему компоненту, может быть введен в молекулу фосфолипида, а дополняющий компонент будет присоединен к нацеливающему лиганду. Например, компонент авидин (или стрептавидин), имеющий высокое сродство к биотину, может быть ковалентно связан с фосфолипидом, стабилизирующим микропузырьки, а дополняющий биотиновый компонент может быть введен в подходящий нацеливающий лиганд, например пептид или антитело. Меченный биотином нацеливающий лиганд будет, таким образом, ассоциирован с меченным авидином микропузырьком посредством связующей системы авидин-биотин. Согласно альтернативному варианту осуществления, биотин-содержащий фосфолипид может быть использован как соединение для образования стабилизирующей оболочки микропузырька; в таком случае биотин-содержащий фосфолипид, внедренный в стабилизирующую оболочку, реагирует сначала с авидином (или нейтравидином) и затем с биотин-содержащим лигандом. Примеры введения меток биотин/авидин в фосфолипиды и пептиды изложены также в цитированном выше документе US 6139819. Альтернативно, нацеливающий лиганд и амфифильная молекула могут ассоциироваться или соединяться путем взаимодействия Ван-дер-Ваальса, путем электростатических взаимодействий и путем других ассоциативных процессов.
Примерами подходящих конкретных мишеней, на которые могут быть направлены микропузырьки согласно изобретению, являются, например, фибрин, αvβ3-рецептор или рецептор GPIIbIIIa на активированных тромбоцитах. Фибрин и тромбоциты фактически всегда присутствуют в "тромбах", т.е. сгустках, которые могут образовываться в кровотоке и вызывать закупорку сосудов. Подходящие связывающие пептиды раскрыты, например, в цитированном выше документе US 6139819. Другие связывающие пептиды, специфические для фибриновых мишеней, раскрыты, например, в международной патентной заявке WO 02/055544, которая введена здесь ссылкой.
Другие примеры важных мишеней включают рецепторы в чувствительных бляшках и тумор-специфические рецепторы, такие как участки домена киназы (KDR) и комплекс VEGF (фактор роста сосудистого эндотелия)/KDR. Связывающие пептиды, подходящие для KDR или комплекса VEGF/KDR, раскрыты, например, в международных патентных заявках WO 03/74005 и WO 03/084574, обе введены здесь ссылкой.
Процесс
Стадия эмульгирования a) способа согласно настоящему изобретению может проводиться путем подвергания водной среды и основного растворителя в присутствии по меньшей мере одного фосфолипида любому подходящему методу создания эмульсии, известному в уровне техники, такому как, например, обработка ультразвуком, взбалтывание, гомогенизация при высоком давлении, микросмешение, мембранное эмульгирование, интенсивное перемешивание или смешение с высоким сдвигом, например, применяя роторно-статорный гомогенизатор. Например, применяется такой роторно-статорный гомогенизатор, как Polytrone® PT3000. Скорость перемешивания роторно-статорного гомогенизатора может быть выбрана в зависимости от компонентов эмульсии, объема эмульсии и диаметра емкости, содержащей эмульсию, и желательного конечного диаметра микрокапель растворителя в эмульсии. Вообще, было найдено, что при применении роторно-статорного гомогенизатора, имеющего насадку диаметром примерно 3 см, погруженную в 50-80 мл смеси, содержащейся в лабораторном стакане диаметром 3,5-5 см, обычно достаточна скорость перемешивания примерно 8000 об/мин для получения микрокапель, имеющих значительно сниженный среднечисленный диаметр, чтобы получить после лиофилизации и восстановления лиофилизованной матрицы наполненные газом микропузырьки с диаметром менее примерно 1,8 мкм. Путем увеличения скорости перемешивания до примерно 12000 об/мин обычно можно получить наполненные газом микропузырьки со среднечисленным диаметром менее примерно 1,5 мкм, тогда как при скорости перемешивания примерно 14000-15000 об/мин могут быть, как правило, получены наполненные газом микропузырьки со среднечисленным диаметром примерно 1,0 мкм или меньше. Было обнаружено, что обычно при увеличении скорости перемешивания выше примерно 18000 об/мин получается незначительное дальнейшее снижение размера микропузырьков.
Альтернативно, для эмульгирования смеси может также применяться техника микросмешения. Как известно, ммикросмеситель обычно содержит по меньшей мере два входных отверстия и по меньшей мере одно выходное отверстие. Таким образом, органический растворитель вводят в смеситель через первое входное отверстие (со скоростью подачи, например, 0,05-5 мл/мин), а водную фазу вводят через второе входное отверстие (например, со скоростью подачи 2-100 мл/мин). Затем выходное отверстие микросмесителя соединяют с сосудом, содержащим водную фазу, так что водная фаза, удаленная из указанного сосуда в следующие моменты времени и введенная в микросмеситель, содержит повышенное количество эмульгированного растворителя. Когда будет добавлен весь объем растворителя, эмульсию из контейнера можно держать в условиях рециркуляции в микросмесителе в течение дальнейшего, заранее определенного периода времени, например, 5-120 минут, для завершения образования эмульсии.
В зависимости от техники эмульгирования органический растворитель можно вводить постепенно в течение стадии эмульгирования или целиком перед началом стадии эмульгирования. Альтернативно водную среду можно добавлять постепенно в не смешиваемый с водой растворитель на стадии эмульгирования или целиком перед началом стадии эмульгирования. Предпочтительно, фосфолипид диспергируют в водной среде до того, как этот последний будет смешан с органическим растворителем. Альтернативно, фосфолипид может быть диспергирован в органическом растворителе или его можно добавлять отдельно в водно-органическую смесь перед или во время стадии эмульгирования.
Эмульгирование стадии a) обычно проводится при комнатной температуре, например при температуре 22±5°C, или при более высоких температурах, например 50-60°C (например, в случае основного растворителя с высокими точками кипения), или при более низких температурах, например 0-10°C (например, в случае основного растворителя с точкой кипения, близкой к комнатной температуре). Температуру предпочтительно удерживают ниже температуры кипения органического растворителя, предпочтительно по меньшей мере на 5°C ниже указанной температуры, более предпочтительно по меньшей мере на 10°C ниже. Поскольку длительное воздействие на смесь высоких температур (например, 90°C или более) может вызвать возможную деградацию фосфолипидов с последующим образованием соответствующих лизо-производных, обычно предпочтительно избегать такого продолжительного нагрева при высоких температурах.
При необходимости водную среду, содержащую фосфолипиды, можно подвергать регулируемому нагреву, чтобы облегчить ее диспергирование. Например, фосфолипид, содержащий водную суспензию, можно нагревать при примерно 60-70°C в течение примерно 15 минут и затем оставлять охлаждаться до температуры, при которой затем проводят стадию эмульгирования.
Как упоминалось ранее, в эмульгирующую смесь, содержащую фосфолипид, также могут быть введены дополнительные амфифильные материалы, такие как перечисленные ранее. Количество указанных дополнительных амфифильных соединений предпочтительно не выше, чем примерно 50 вес.% от полного веса амфифильного материала, более предпочтительно не выше 20 вес.% и вплоть до количества, например, примерно в 0,1%.
При желании водная среда может содержать, кроме того, один или более наполнителей.
Используемый здесь термин "наполнитель" относится к любой добавке, пригодной в настоящем изобретении, такой как добавки, применяемые для увеличения стабильности эмульсии или промежуточного лиофилизата и/или чтобы получить фармацевтически приемлемые и стабильные конечные композиции.
Типичными наполнителями в этом отношении являются, например, усилители вязкости и/или улучшители растворимости для фосфолипидов.
Усилителями вязкости и улучшителями растворимости, которые могут подходящим образом применяться, являются, например, моно- или полисахариды, такие как глюкоза, лактоза, сахароза и декстраны, алифатические спирты, такие как изопропиловый спирт и бутиловый спирт, полиолы, такие как глицерин, 1,2-пропандиол, и подобные агенты. Однако, вообще говоря, заявители нашли, что вводить такие добавки, как усилители вязкости, обычно применяемые во многих существующих композициях контрастных веществ, в контрастные вещества согласно настоящему изобретению нет необходимости. Это представляет собой следующее преимущество настоящего изобретения, так как число компонентов, устанавливаемых для тела объекта, сохраняется минимальным, и вязкость контрастных веществ поддерживается как можно более низкой.
Как отмечалось ранее, заявитель нашел по существу ненужным добавлять в эмульгирующую смесь водонерастворимые структурообразователи, такие как холестерин. Собственного говоря, было найдено, что количество холестерина в 0,05% (вес./вес. от полного веса эмульгирующей смеси) заметно снижает степень превращения микрокапель в наполненные газом микровезикулы, приводя далее к широкой дисперсии размеров везикул. Таким образом, количество водонерастворимых соединений в эмульгирующей смеси, в частности соединений, не содержащих один или два жирнокислотных остатка в своей структуре, предпочтительно меньше, чем 0,050%, более предпочтительно меньше, чем примерно 0,030 вес.% от полного веса эмульсии.
Эмульсии, произведенные согласно стадии a), могут преимущественно подвергаться одной или более стадиям промывки до лиофилизации на стадии b), чтобы удалить избыток фосфолипидов в водной фазе (не соединенных с эмульсией) и отделить и удалить возможные добавки, такие как усилители вязкости и улучшители растворимости, а также нежелательный материал, такой как коллоидные частицы и нежелательные и/или с завышенным размером капли эмульсии. Такая промывка может быть проведена известным самим по себе способом, причем эмульсию разделяют, используя такие методы, как декантация, флотация, центрифугирование, фильтрация в поперечном потоке и тому подобное.
Если предусмотрена стадия промывки, и если лиопротективный агент присутствовал в первоначальной водной фазе до образования эмульсии, указанные стадии промывки могут быть осуществлены в водных растворах, содержащих один или более лиопротективных агента, чтобы заменить количество лиопротективных агентов, частично удаленных во время промывания. С другой стороны, если лиопротектора в эмульгированной водно-органической смеси не было, образованная эмульсия может быть промыта водным раствором, содержащим лиопротектор, чтобы ввести лиопротектор в эмульгированную смесь, или альтернативно лиопротектор может быть добавлен после стадий промывки, до лиофилизации.
При желании эмульсию (либо как есть, либо после стадии промывки) можно подвергнуть стадии ультрафильтрации или микрофильтрации перед лиофилизацией, чтобы еще снизить количество микропузырьков большого размера в конечной восстановленной суспензии. При микрофильтрации, например, с фильтром 5 мкм или 3 мкм микрокапли большого размера фактически удерживаются на фильтре и отделяются от остальных микрокапель малого размера, предотвращая тем самым образование микропузырьков большого размера при восстановлении лиофилизованного материала. Микрофильтрация может быть осуществлена обычными методами, такими как положительная фильтрация, вакуумная фильтрация или инлайновая фильтрация. Фильтрационными мембранами могут быть мембраны из нейлона, стекловолокна, целлюлозы, бумаги, поликарбоната или полиэфира (Nuclepore®).
Согласно альтернативному варианту осуществления, дополнительное амфифильное соединение может быть добавлено после образования эмульсии согласно вышеуказанной доктрине, без стадий промывки или с ними. В частности, чтобы добавить указанное соединение к стабилизирующей оболочке, водную суспензию желательного соединения добавляют в образованную эмульсию предпочтительно при перемешивании и нагреве (предпочтительно при менее 80°C, например 40-80°C, в частности 50-70°C). Этот альтернативный вариант осуществления особенно подходит для последующего введения в стабилизирующий слой амфифильных соединений, которые в противном случае могут отрицательно повлиять на свойства конечного продукта, если их вводить в начальную смесь эмульсии. Примерами амфифильных соединений, которые могут быть легко введены в таком случае как дополнительные компоненты стабилизирующей оболочки после приготовления начальной эмульсии, являются, например, ПЭГ-модифицированные фосфолипиды, в частности ПЭГ-модифицированные фосфатидилэтаноламины, такие как DMPE-ПЭГ750, DMPE-ПЭГ1000, DMPE-ПЭГ2000, DMPE-ПЭГ3000, DMPE-ПЭГ4000, DMPE-ПЭГ5000, DPPE-ПЭГ750, DPPE-ПЭГ1000, DPPE-ПЭГ2000, DPPE-ПЭГ3000, DPPE-ПЭГ4000, DPPE-ПЭГ5000, DSPE-ПЭГ750, DSPE-ПЭГ1000, DSPE-ПЭГ2000, DSPE-ПЭГ3000, DSPE-ПЭГ4000, DSPE-ПЭГ5000, DAPE-ПЭГ750, DAPE-ПЭГ1000, DAPE-ПЭГ2000, DAPE-ПЭГ3000, DAPE-ПЭГ4000 или DAPE-ПЭГ5000. Аналогично, затем согласно этому способу могут быть обычно введены также ПЭГ-модифицированные фосфолипиды, несущие реакционноспособные компоненты или нацеливающие лиганды (например, содержащие биотин, малеимид или малеимид-пептид). Кроме того, этот метод также может быть использован для позднейшего добавления в композицию стабилизирующего слоя других компонентов, таких как липопептиды или полимерные ПАВы. Примерами полимерных ПАВов, которые могут обычно быть введены после образования эмульсии, являются, например, блок-сополимеры этиленоксида и пропиленоксида, такие как плюроник F68, плюроник F108, плюроник F-127 (Sigma Aldrich, Missouri, USA); полиоксиэтилированные простые алкиловые эфиры, такие как Brij® 78 (Sigma Aldrich, Missouri, USA); полиоксиэтилированные сложные эфиры жирных кислот, такие как Myrj® 53 или Myrj® 59 (Sigma Aldrich, Missouri, USA); сложные эфиры полиоксиэтиленсорбита и жирной кислоты, такие как Tween® 60 (Sigma Aldrich, Missouri, USA); или полиэтиленгликоль трет-октилфениловый эфир, такой как Triton® X-100 (Sigma Aldrich, Missouri, USA).
Фактически заявитель обнаружил, что применение смеси, содержащей ограниченное количество (например, менее 10 вес.%) ПЭГ-модифицированного фосфолипида (например, DSPE-ПЭГ или DPPE-ПЭГ) вместе с пленкообразующим фосфолипидом (например, DPPS или смесью DAPC/DPPS 50:50) для получения эмульсии согласно способу изобретения, может вызвать существенное расширение распределения конечного продукта по размерам по сравнению с распределением по размерам микропузырьков, полученных из эмульсии, содержащей только пленкообразующий фосфолипид. С другой стороны, если сначала готовили эмульсию, содержащую только пленкообразующий фосфолипид, а затем в полученную эмульсию добавляли водную суспензию ПЭГ-модифицированного фосфолипида (например, при перемешивании в течении 1 часа, при температуре примерно 60°C), было обнаружено, что в стабилизирующую оболочку может быть введено достаточно высокое количество (типично более 30 вес.%) ПЭГ-модифицированного фосфолипида без существенного влияния на распределение конечного продукта по размерам.
Согласно предпочтительному варианту исполнения, перед стадией лиофилизации эмульсию подвергают обработке регулируемым дополнительным нагревом. Дополнительный нагрев эмульсии предпочтительно проводят в герметично закрытом контейнере. Тепловая обработка может длиться от примерно 15 минут до примерно 90 минут при температурах, составляющих от примерно 60°C до примерно 125°C, предпочтительно от примерно 80°C до примерно 120°C. Вообще, чем выше температура, тем короче время тепловой обработки. Во время нагрева эмульсию можно при желании продолжать перемешивать.
Как обнаружил заявитель, хотя эта дополнительная тепловая обработка может привести к частичной деградации фосфолипидов (например, с содержанием примерно 5-20% вес./вес. лизолипидов в конечном продукте, когда эмульсию нагревают до примерно 100-120°C в течение примерно 30 мин), тем не менее ее большим преимуществом является возможность существенного сужения распределения по размерам и увеличения полного числа микропузырьков в конечной суспензии, независимо от рабочих условий на начальной стадии эмульгирования (например, тип органического растворителя, метод эмульгирования, возможные стадии промывки и т.д.).
Термически обработанную эмульсию можно затем подвергать лиофилизации, обычно без необходимости дальнейших стадий промывки.
Лиофилизация эмульсии согласно стадии b) может быть проведена путем первоначального замораживания эмульсии с последующей лиофилизацией замороженной эмульсии широко известными сами по себе способами и устройствами. Поскольку высушенный лиофилизованный продукт будет в норме восстановлен до приема посредством добавления жидкости-носителя, эмульсию перед лиофилизацией можно с успехом наливать в запаивающиеся флаконы, с тем чтобы получить флаконы, каждый из которых содержит надлежащее количество, например однократную дозу, лиофилизованного сухого продукта для восстановления в пригодную для инъекций форму. Благодаря проведению лиофилизации эмульсии в индивидуальных флаконах, а не в массе, предотвращается обращение с деликатной ячеистой структурй лиофилизованного продукта и риск по меньшей мере частичной деградации этой структуры.
После лиофилизации вакуум из лиофилизатора может быть удален путем введения желательного газа для образования микропузырьков в конечной композиции контрастного вещества. Это позволит заполнить свободное пространство флакона желательным газом и затем герметично закрыть флакон подходящим укупорочным средством. Альтернативно, флакон можно оставлять под вакуумом и герметично закрывать, а газ добавлять на более поздней стадии, например, непосредственно перед приемом, например, когда газ является радиоактивным или гиперполяризованным.
Полученный таким путем лиофилизованный продукт в присутствии подходящего газа может сохраняться стабильным в течение нескольких месяцев перед тем, как быть восстановленным путем растворения в водной жидкости-носителе для получения суспензии наполненных газом микропузырьков.
Чтобы наполнить вышеуказанные микровезикулы, может применяться любой биосовместимый газ, прекурсор газа или их смесь, причем газ выбирают в зависимости от выбранного метода воздействия.
Газ может содержать, например, воздух, азот, кислород, двуокись углерода, водород, закись азота, благородный или инертный газ, такой как гелий, аргон, ксенон или криптон, радиоактивный газ, такой как 133Xe или 81Kr, гиперполяризованный благородный газ, такой как гиперполяризованный гелий, гиперполяризованный ксенон или гиперполяризованный неон, низкомолекулярный углеводород (например, содержащий до 7 атомов углерода), например алкан, такой как метан, этан, пропан, бутан, изобутан, пентан или изопентан; циклоалкан, такой как циклобутан или циклопентан; алкен, такой как пропен, бутен или изобутен; или алкин, такой как ацетилен; простой эфир; кетон; сложный эфир; галогенированные газы, предпочтительно фторированные газы, такие как галогенированные, фторированные или перфторированные низкомолекулярные углеводороды (например, содержащие до 7 атомов углерода); или смесь любого из вышеупомянутого. Если используется галогенированный углеводород, то предпочтительно по меньшей мере несколько, более предпочтительно все атомы галогена в указанном соединении являются атомами фтора.
Предпочтительны фторированные газы, в частности перфторированные газы, особенно в области ультразвуковой визуализации. Фторированные газы включают материалы, которые содержат по меньшей мере один атом фтора, такие как, например, фторированные углеводороды (органические соединения, содержащие один или более атомов углерода и фтора); гексафторид серы; фторированные, предпочтительно перфторированные, кетоны, такие как перфторацетон; и фторированные, предпочтительно перфторированные, простые эфиры, такие как перфтордиэтиловый эфир. Предпочтительными соединениями являются перфторированные газы, такие как SF6 или перфторуглероды (перфторированные углеводороды), т.е. углеводороды, в которых все атомы водорода замещены атомами фтора, которые, как известно, образуют особенно стабильные микропузырьковые суспензии, как раскрыто, например, в документе EP 0554 213, который введен здесь ссылкой.
Термин перфторуглерод включает насыщенные, ненасыщенные и циклические перфторуглероды. Примерами биосовместимых, физиологически приемлемых перфторуглеродов являются: перфторалканы, такие как перфторметан, перфторэтан, перфторпропаны, перфторбутаны (например, перфтор-н-бутан, возможно в смеси с другими изомерами, такими как перфторизобутан), перфторпентаны, перфторгексаны или перфторгептаны; перфторалкены, такие как перфторпропены, перфторбутены (например, перфторбут-2-ен) или перфторбутадиен; перфторалкины (например, перфторбут-2-ин) и перфторциклоалканы (например, перфторциклобутан, перфторметилциклобутан, перфтордиметилциклобутаны, перфтортриметилциклобутаны, перфторциклопентан, перфторметилциклопентан, перфтордиметилциклопентаны, перфторциклогексан, перфторметилциклогексан и перфторциклогептан). Предпочтительные насыщенные перфторуглероды имеют формулу CnFn+2, где n меняется от 1 до 12, предпочтительно от 2 до 10, наиболее предпочтительно от 3 до 8, еще более предпочтительно от 3 до 6. Подходящие перфторуглероды включают, например, CF4, C2F6, C3F8, C4F8, C4F10, C5F12, C6F12, C6F14, C7F14, C7F16, C8F18 и C9F20.
Особенно предпочтительными газами являются SF6 или перфторуглероды, выбранные из CF4, C2F6, C3F8, C4F8, C4F10 или их смесей; особенно предпочтительны SF6, C3F8 или C4F10.
Также может быть выгодным использовать смесь любых из вышеуказанных газов в любом отношении. Например, смесь может содержать обычный газ, такой как азот, воздух или двуокись углерода, и газ, образующий стабильную микропузырьковую суспензию, такой как гексафторид серы или перфторуглерод, как указанный выше. Примеры подходящих газовых смесей могут быть найдены, например, в патенте WO 94/09829, который введен здесь ссылкой. Особенно предпочтительны следующие комбинации: смесь газов (A) и (B), в которых газ (B) является фторированным газом, предпочтительно выбранным из SF6, CF4, C2F6, C3F6, C3F8, C4F6, C4F8, C4F10, C5F10, C5F12 или их смесей, а (A) выбран из воздуха, кислорода, азота, двуокиси углерода или их смесей. Количество газа (B) может составлять от примерно 0,5% до примерно 95% об./об. от полной смеси, предпочтительно от примерно 5% до 80%.
В некоторых случаях может быть желательным включать в газовую субстанцию прекурсор (т.е. материал, который способен превращаться в газ in vivo). Предпочтительно прекурсор газа и газ, произведенный из него, являются физиологически приемлемыми. Газовый прекурсор может быть pH-активируемым, фотоактивируемым, термоактивируемым и т.д. Например, определенные перфторуглероды могут использоваться как термоактивируемые прекурсоры газа. Эти перфтоуглероды, такие как перфторпентан или перфторгексан, имеют температуру фазового перехода жидкость/газ выше комнатной температуры (или температуры, при которой производятся и/или хранятся эти агенты), но ниже температуры тела; таким образом, они испытывают фазовый переход жидкость/газ и превращаются в газ внутри человеческого тела. Кроме того, термин "газ", как он используется здесь, включает смеси, находящиеся при нормальной температуре человеческого тела 37°C в паровой форме. В этом случае для получения смеси, которая при 37°C находится в паровой фазе, в смеси с другими газообразными соединениями также могут в ограниченных количествах использоваться соединения, которые при температуре 37°C являются жидкими.
Биосовместимые газ или газовая смесь для ультразвуковой эхографии предпочтительно выбраны из воздуха, азота, двуокиси углерода, гелия, криптона, ксенона, аргона, метана, галогенированных углеводородов (в том числе фторированных газов, таких как перфтоуглероды и гексафторид серы) или их смесей. С успехом могут использоваться перфтоуглероды (в частности, C4F10 или C3F8) или SF6, возможно в смеси с воздухом или азотом.
Для применения в МР-томографии микропузырьки должны предпочтительно содержать гиперполяризованный благородный газ, такой как гиперполяризованный неон, гиперполяризованный гелий, гиперполяризованный ксенон или их смеси, возможно, в смеси с воздухом, CO2, кислородом, азотом, гелием, ксеноном или любым из галогенированных углеводородов, какие определены выше.
Для применения в гамма-томографии микропузырьки согласно изобретению должны предпочтительно содержать радиоактивные газы, такие как 133Xe или 81Kr, или их смеси, возможно, в смеси с воздухом, CO2, кислородом, азотом, гелием, криптоном или любым из галогенированных углеводородов, какие определены выше.
Затем лиофилизованная композиция в контакте с газом может быть легко восстановлена путем добавления соответствующей стерильной водной пригодной для инъекций и физиологически приемлемой жидкости-носителя, такой как стерильная не содержащая пирогена вода для инъекций, водный раствор, такой как соляной раствор (который может преимущественно быть сбалансированным так, чтобы конечный продукт для инъекции не был гипотоничным), или водный раствор одной или более субстанций, регулирующих тонус, таких как соли (например, катионы плазмы с физиологически приемлемыми противоионами), или сахара, сахарные спирты, гликоли и другие неионные полиоловые материалы (например, глюкоза, сахароза, сорбит, маннитол, глицерин, полиэтиленгликоли, пропиленгликоли и им подобные), требующие лишь минимального перемешивания, такого, какое может, например, быть обеспечено легким ручным встряхиванием.
Как было обнаружено заявителем, полученные таким путем восстановленные микропузырьки имеют обычно среднечисленный диаметр, который немного меньше, чем среднечисленный диаметр, измеренный для микрокапель эмульсии. Среднечисленный диаметр микропузырьков обычно составляет от примерно 60% до примерно 90% от среднечисленного диаметра микрокапель эмульсии. В большинстве случаев наблюдался среднечисленный диаметр микропузырьков примерно 70-75% от среднечисленного диаметра микрокапель.
Если высушенный продукт содержится во флаконе, тот обычно герметически закрыт перегородкой, через которую может впрыскиваться жидкость-носитель, используя шприц, возможно, наполненный заранее; альтернативно высушенный продукт и жидкость-носитель могут подаваться вместе в двухкамерное устройство, такое как шприц с двумя отделениями. Может быть выгодным перемешивать или легко встряхивать продукт после восстановления. Однако, как отмечено выше, в стабилизированных контрастных веществах согласно изобретению размер микропузырьков газа может быть по существу независим от количества энергии смешения, прилагаемой для восстановления сухого продукта. Следовательно, для получения воспроизводимых продуктов с совместимым размером микропузырьков может потребоваться всего лишь легкое ручное встряхивания.
Микропузырьковые суспензии, образованные при восстановлении в воде или водном растворе, могут быть стабильны в течение по меньшей мере 12 часов, давая таким образом значительную гибкость в отношении времени, когда восстанавливать сухой продукт до инъекции.
Лиофлизованный остаток, за исключением случая, когда он содержит гиперполяризованный газ, который, как известно, требует специальных условий хранения, может храниться и транспортироваться без необходимости температурного контроля его среды, и, в частности, он может поставляться в больницы и врачам для приготовления на месте готовой к употреблению суспензии, не требуя от таких пользователей наличия специальных складов.
В таком случае он предпочтительно может поставляться в виде двухкомпонентного комплекта.
Указанный двухкомпонентный комплект может включать два отдельных контейнера или двухкамерный контейнер. В первом случае контейнер предпочтительно является обычным перегороженным перегородкой флаконом, причем флакон, содержащий лиофилизованный остаток со стадии b), герметично закрыт перегородкой, через которую может быть впрыснута жидкость-носитель с помощью шприца, возможно, наполненного заранее. В таком случае шприц, использованный как контейнер для второго компонента, применяется затем также для инъекции контрастного вещества. В последнем случае двухкамерный контейнер предпочтительно является шприцем с двумя отделениями, и, как только лиофилизат был восстановлен и затем соответствующим образом смешан или мягко встряхнут, контейнер может использоваться непосредственно для инъекции контрастного вещества. В обоих случаях обеспечиваются средства, направляющие энергию или позволяющие приложить достаточно энергии к содержимому контейнера для образования пузырьков. Однако, как отмечено выше, в стабилизованных контрастных веществах согласно изобретению размер газовых микропузырьков по существу не зависит от количества энергии смешения, приложенной к восстанавливаемому сухому продукту. Соответственно, обычно требуется не более чем мягкое ручного встряхивание, чтобы получить восстанавливаемые продукты с соответствующим размером микропузырьков.
Специалисты среднего уровня в данной области могут понять, что другие двухкамерные системы для восстановления, способные соединять сухой порошок с водным раствором стерильным способом, также находятся в границах настоящего изобретения. В таких системах особенно выгодно, если водная фаза может быть помещена между водонерастворимым газом и окружающей средой, чтобы увеличить срок хранения продукта. Если материал, необходимый для образования контрастного вещества, уже не присутствует в контейнере (например, нацеливающий лиганд, который должен быть связан с фосфолипидом при восстановлении), он может быть упакован с другими компонентами комплекта, предпочтительно в форме или контейнере, приспособленном для облегчения легкого соединения с другими компонентами набора.
Не требуется никаких особых контейнеров, флаконов или соединяющих систем; в настоящем изобретении могут использоваться обычные контейнеры, флаконы и переходные устройства. Единственным требованием является хорошая герметичность между пробкой и контейнером. Качество уплотнения, таким образом, становится вопросом первой важности; любое ухудшение целостности уплотнения может позволить нежелательным субстанциям попасть в пузырек. Кроме того, для обеспечения стерильности в случае продуктов, закупоренных при атмосферном или пониженном давлении, важно сохранение вакуума для обеспечения надежного и должного восстановления. Что касается пробки, она может быть соединением или многокомпонентной композицией на основе эластомера, такого как полиизобутиленовый или бутиловый каучук.
Контрастные вещества, получаемые по способу настоящего изобретения, могут применяться во многих методах диагностической визуализации, в том числе, в частности, для ультразвукового и магнитного резонанса. Возможные другие приложения диагностической визуализации включают гамма-томографию, световую визуализацию и рентгеновское исследование, в том числе рентгеноконтрастное исследование.
Их применение в диагностической ультразвуковой визуализации и в магнитно-резонансной томографии, например, в качестве чувствительных контрастных веществ и в качестве гиперполяризованных пузырьков газа составляет предпочтительные характеристики изобретения. В ультразвуковых приложениях могут применяться самые разные методы визуализации, например, включая фундаментальную и гармоническую двухмерную визуализацию, визуализацию в импульсном режиме или режиме инверсии фаз и доплеровскую визуализацию, основную и с обработкой гармонических сигналов; при желании можно применять трехмерные методы визуализации.
Ультразвуковые тесты in vivo на кроликах, собаках и свиньях показали, что контрастные вещества согласно изобретению могут увеличивать интенсивность сигнала обратного рассеяния от миокарда на 15-25 дБ после внутривенной инъекции дозы всего лишь до 0,001 мл/кг веса тела. Сигналы могут наблюдаться даже при меньших дозах при использовании более чувствительных методов, таких как цветное доплеровское картрирование или инверсии импульса. При этих малых дозах было найдено, что ослабление в наполненных кровью отделениях, таких как камер сердца, является достаточно низким, чтобы позволить визуализацию интересующих областей сердечно-сосудистой системы. Тесты показали также, что такие введенные внутривенно контрастные вещества распределены по всему пулу крови, усиливая тем самым эхогенность всех васкуляризированных тканей, и рециркулируют. Было также обнаружено, что они пригодны как усилители полного доплеровского сигнала и могут дополнительно быть полезны в ультразвуковой компьютерной томографии и в инициируемой физиологически визуализации или визуализации в прерывистом режиме.
Для ультразвуковых приложений, таких как эхокардиография, чтобы позволить свободное прохождение через легочную систему и достичь резонанса при предпочтительных частотах визуализации примерно 0,1-15 МГц, обычно применяются микропузырьки со средним размером 0,1-10 мкм, например 0,5-7 мкм. Как описано выше, контрастные вещества согласно изобретению могут быть получены с очень узким распределением по размерам в микропузырьковой дисперсии, в интервале, предпочтительном для эхокардиографии, тем самым заметно усиливая их эхогенность, а также их безопасность in vivo и придавая контрастным веществам особые преимущество в таких приложениях, как измерения давления крови, мониторинг кровотока и ультразвуковая томография.
В ультразвуковых приложениях контрастные вещества изобретения могут, например, приниматься в таких дозах, что количество впрыснутого фосфолипида лежит в интервале 0,1-200 мкг/кг веса тела, обычно 10-200 мкг/кг в отсутствие стадии промывки для эмульсии и 0,1-30 мкг/кг, если эмульсию до лиофилизации промывали. Следует принять во внимание, что применение таких низких уровней фосфолипида является существенным достоинством, так как минимизируются возможные токсичные побочные эффекты. Кроме того, низкие уровни фосфолипидов, присутствующих в эффективных дозах, могут позволить увеличение дозировки для увеличения времени наблюдения без вредных эффектов.
Согласно предпочтительному варианту исполнения изобретения, способ изобретения позволяет получить наполненные газом микропузырьки малого диаметра, имеющие чрезвычайно узкое распределение по размерам. Таким образом, выбирая соответствующим образом компоненты смеси и, в частности, количество энергии смешения, прилагаемой для эмульгирования водно-органической смеси, можно получить наполненные газом микропузырьки с желаемым среднечисленным диаметром и распределением по размерам.
В частности, применяя способ согласно настоящему изобретению, можно получить контрастные вещества, содержащие стабилизированные фосфолипидом газовые микропузырьки малого размера, отличающиеся относительно малыми средними размерами и в частности, подходящим узким и контролируемым распределением по размерам.
Как известно специалистам в данной области, размеры микро/наночастиц и их соответствующее распределение по размерам может характеризоваться рядом параметров, наиболее часто используются среднечисленный диаметр DN, медианный диаметр числового распределения DN50, среднеобъемный диаметр DV и медианный диаметр объемного распределения DV50. Если численные диаметры указывают среднечисленные размеры частиц, объемный диаметр дает информацию о том, как распределен полный объем частиц по популяции в целом. Так как присутствие очень малого количества частиц большого объема в популяции частиц в основном малого объема может вызвать сдвиг соответствующего значения DV в сторону больших значений, иногда для оценки распределения популяции частиц значение DV50 более удобно использовать. DV50 является расчетной величиной, показывающей, что половина внутреннего объема частиц находится в частицах, имеющих диаметр ниже DV50; это позволяет снизить влияние образованных случайно частиц большого объема при оценке распределения по размерам. Очевидно, монодисперные частицы имеют одинаковые значения DN, DN50, DV и DV50. С другой стороны, расширение распределения частиц приводит к большей разнице между этими различными величинами при соответствующем изменении их соответствующих отношений (например, увеличение отношения DV/DN). Например, популяции частиц, содержащих главным образом малые частицы (например, частицы с диаметром около 2 мкм) с тем не менее малой процентной долей больших частиц (например, частицы с диаметром выше 8 мкм), имеют более высокие значения DV или DV50 по сравнению со значением DN при соответственно более высоких отношениях DV/DN или DV50/DN.
Таким образом, способ настоящего изобретения оказался особенно подходящим для получения микропузырьков со среднечисленным диаметром (DN) менее 1,70 мкм и медианным диаметром объемного распределения (DV50) таким, что отношение DV50/DN составляет примерно 2,30 или меньше, предпочтительно менее 2,10. Предпочтительно указанное значение DN составляет 1,60 мкм или меньше, более предпочтительно 1,50 мкм или меньше, намного более предпочтительно 1,30 мкм или меньше. Микропузырьки с более низкими значениями DN, например примерно 1 мкм или даже ниже, например 0,85 мкм и до 0,80 мкм, могут легко быть получены способом согласно изобретению. Отношение DV50/DN предпочтительно составляет примерно 1,80 или меньше, более предпочтительно примерно 1,60 или меньше, намного более предпочтительно примерно 1,50 или меньше. Легко могут быть получены микропузырьки с более низкими значениями отношения DV50/DN, например 1,20, и даже ниже, например 1,05.
Кроме того, в суспензиях микропузырьков малого размера с узким распределением, получаемых согласно способу изобретения, было обнаружено, что количество микропузырьков с диаметром более 3 мкм (выраженное как процентная доля частиц от общего числа частиц), в частности для микропузырьков с DN менее чем примерно 1,5 мкм и отношением DV50/DN менее примерно 2,00, обычно ниже, чем примерно 3% от полного числа микропузырьков в суспензии, предпочтительно ниже, чем примерно 2%, более предпочтительно ниже, чем примерно 1%. Концентрация микропузырьков в восстановленной суспензии обычно составляет по меньшей мере 1х108 частиц на миллилитр, предпочтительно по меньшей мере 1x109 частиц на миллилитр.
Вышеуказанные значения DV50, DN и число микропузырьков относятся к измерению, сделанному на счетчике Культера, аппарат Mark II, снабженному апертурой 30 мкм с диапазоном измерений от 0,7 до 20 мкм.
Эта особая категория контрастных веществ особенно ценна в ультразвуковом отображении, в частности, для техники визуализации, основанной на нелинейном рассеянии микропузырьков, как объясняется ниже.
Наиболее современные способы ультразвуковой контрастной визуализации используют нелинейные характеристики рассеяния ультразвуковых контрастных веществ. Из литературы (например, Eatock et al., Journal of the Acoustical Society of America, vol. 77(5), pp. 1692-1701, 1985) известно, что нелинейное рассеяние существенно только для микропузырьков, которые меньше, чем резонансный размер, или близки к нему. В частности, обычно могут применяться микропузырьки с размерами половины резонансного размера. "Половина резонансного размера" является размером микропузырька с резонансной частотой, равной удвоенной центральной частоте проходящей ультразвуковой волны (которая для конкретных приложений может составлять до примерно 60 МГц). При получении изображения объема, содержащего ультразвуковое контрастное вещество на основе микропузырьков, обнаружительная способность эхосигналов микропузырька от эхосигналов ткани усиливается путем повышения уровня нелинейного рассеяния микропузырьками и снижается при ослаблении, вызванном микропузырьками, находящимися между зондом и интересующей областью. Ослабление вдоль пути передачи уменьшает ультразвуковую энергию, доступную для генерации нелинейного отклика на пузырек; ослабление вдоль пути приема уменьшает эхо-энергию, способную достичь ультразвуковой зонд. В случае суспензии, содержащей пузырьки с широким диапазоном размеров, микропузырьки при резонансном размере и больше, чем резонансный размер, вносят вклад в основном в приемопередающее ослабление, не внося большого вклада в нелинейные эхосигналы. Следовательно, полный акустический отклик на нелинейную визуализацию сильно выигрывает от использования калиброванного множества микропузырьков, имеющих узкое распределение по размерам и средний размер, близкий к половине резонансного размера. Предпочтительно применяются микропузырьковые препараты с распределение по размерам, соответствующим отношению DV50/DN примерно 2,30 или меньше, более предпочтительно 2,10 или меньше и намного более предпочтительно 2,00 или меньше. Предпочтительно средний размер применяемых микропузырьков отличается от половины резонансного размера не более чем примерно на ±10%, более предпочтительно не более чем на примерно ±5%.
Еще один дальнейший аспект настоящего изобретения относится к способу диагностической интроскопии, который включает прием объектом усиливающего контрастность количества контрастного вещества, содержащего наполненные газом микропузырьки с определенными выше размером и распределением по размерам, и получение изображения по меньшей мере части указанного объекта. В частности, указанная диагностическая визуализация включает облучение ультразвуком указанного объекта с помощью ультразвукового устройства, генерируя ультразвуковые волны с заранее определенной частотой пропускания, которая определяет соответствующий резонансный размер микропузырьков, и прием контрастного вещества, содержащего наполненные газом микропузырьки с узким распределением по размерам и средним размером, близким к половине резонансного размера. Предпочтительно узкое распределение по размерам и средний размер микропузырьков являются такими, как определено выше. Например, в методе диагностической интроскопии может использоваться ультразвуковая машина HDI 5000 производства Philips (например, в режиме импульсной инверсии, с зондом L7-4 и механическим индексом 0,07). Согласно этому методу, указанный объект является позвоночным, и указанное контрастное вещество вводится в сосудистую систему или в полость тела указанного позвоночного. Указанное контрастное вещество может поставляться как комплект, такой как описанные ранее, содержащий лиофилизованный продукт в контакте с газом и водной средой для восстановления.
Следующие неограничивающие примеры даны для лучшей иллюстрации изобретения.
ПРИМЕРЫ
В следующих примерах были использованы следующие материалы.
ФОСФОЛИПИДЫ:
DPPS | дипальмитоилфосфатидилсерин (Genzyme) IUPAC: 1,2-дипальмитоил-sn-глицеро-3-фосфохолин |
DPPG | натриевая соль дипальмитоилфосфатидилглицерина (Genzyme) IUPAC: 1,2-дипальмитоил-sn-глицеро-3-[фосфо-рац-(1-глицерин)] |
DSPA | натриевая соль дистеароилфосфатидной кислоты (Genzyme) IUPAC: 1,2-дистеароил-sn-глицеро-3-фосфат |
DSPG | натриевая соль дистеароилфосфатидилглицерина (Genzyme) IUPAC: 1,2-дистеароил-sn-глицеро-3-фосфосерин |
DSPC | дистеароилфосфатидилхолин (Genzyme) IUPAC: 1,2-дистеароил-sn-глицеро-3-фосфохолин |
DSEPC | дистеароилэтилфосфатидилхолин (Avanti Polar Lipids) IUPAC: 1,2-дистеароил-sn-глицеро-3-этилфосфохолин |
DAPC | диарахидоилфосфатидилхолин (Avanti Polar Lipids) IUPAC: 1,2-диарахидоил-sn-глицеро-3-фосфохолин |
DSTAP | 1,2-дистеароил-3-триметиламмонийпропанхлорид (Avanti Polar Lipids) |
DSPE-ПЭГ2000 | дистеароилфосфатидилэтаноламин, модифицированный ПЭГ2000, натриевая соль (Nektar Therapeutics) |
DSPE-ПЭГ5000 | дистеароилфосфатидилэтаноламин, модифицированный ПЭГ5000, натриевая соль (Nektar Therapeutics) |
DSPE-ПЭГ2000-малеимид | дистеароилфосфатидилэтаноламин, модифицированный ПЭГ2000-малеимидом (Avanti Polar Lipids) |
SATA | N-сукцинимидил-S-ацетилтиоацетат (Pierce) |
КПВ-4С | H-Ala-Cys-Asp-Cys-Arg-Gly-Asp-Cys-Phe-Cys-Gly-NH2 (AnaSpec Inc.) |
РАСТВОРИТЕЛИ:
Перфтор-н-гексан (C6F14), Fluka
Перфторметилциклогексан (CF3-цикло-C6F11), Fluka
Перфтор-н-гептан (C7F16), Fluka
Перфтор-н-нонан (C9F20), Aldrich
Перфтордекалин, Aldrich
Циклогексан, Fluka
Циклооктан, Fluka
н-Декан, Fluka
н-Октан, Fluka
Метаксилен, Fluka
Диизопропилкетон, Fluka
CCl4, Fluka
ЛИОПРОТЕКТОРЫ:
Манноза, Fluka
Глюкоза, Fluka
Сорбит, Fluka
Маннитол, Fluka
Мальтоза, Fluka
Декстран 6000, Fluka
Декстран 15000, Fluka
Декстран 40000, Fluka
Инулин, Fluka
ХАРАКТЕРИЗОВАНИЕ МИКРОКАПЕЛЬ И МИКРОПУЗЫРЬКОВ
Распределение по размерам микрокапель эмульсии было определено:
a) с помощью счетчика Культера (аппарат Counter Mark II, снабженного апертурой 30 мкм с диапазоном измерения от 0,7 до 20 мкм), когда эмульсию подвергали стадии промывки; 10 мкл эмульсии разбавляли в 100 мл соляного раствора при комнатной температуре и оставляли уравновешиваться на 3 минуты до измерения;
b) с помощью анализатора размеров частиц лазерным светорассеянием (Malvern Mastersizer, разбавление 200x, фокусное расстояние 45 мм, стандартные характеристики), если эмульсию не подвергали стадии промывки.
Распределение по размерам, объемные концентрации и число микропузырьков (после лиофилизации и восстановления в водной фазе) определяли, используя аппарат Coulter Counter Mark II, снабженный апертурой 30 мкм с диапазоном измерений от 0,7 до 20 мкм; 50 мкл образцов микропузырьков разбавляли в 100 мл соляного раствора при комнатной температуре и оставляли уравновешиваться на 3 минуты перед измерением.
Количество фосфолипидов в конечных препаратах (эмульсия микропузырьковой суспензии) было определено ВЭЖХ-МС анализом со следующими параметрами: хроматограф Agilent 1100 LC, колонка MN CC 125/2 мм-5 C8 от Maherey Nagel, детектор Agilent MSD G1946D.
ЛИОФИЛИЗАЦИЯ
Методология и аппаратура для лиофилизации были следующими. Эмульсию (возможно, после стадии промывки, если она есть) сначала замораживают при -45°C на 5 минут и затем сушат сублимацией (лиофилизируют) при комнатной температуре и давлении 0,2 мбар, используя сублимационную установку Christ-Alpha 2-4.
ПРИМЕР 1 (ПРЕПАРАТЫ 1а-1n)
10 мг DPPS добавляют к примерно 10 мл 10%-ного (вес./вес.) водного раствора маннитола; суспензию нагревают при 65°C в течение 15 минут и затем охлаждают при комнатной температуре (22°C). В эту водную фазу добавляют перфторгептан (8% об./об.) и эмульгируют в лабораторном стакане диаметром примерно 4 см, используя высокоскоростной гомогенизатор (Polytron T3000, диаметр насадки 3 см) в течение 1 минуты при скорости, указанной в таблице 1. Полученные в результате медианный диаметр объемного распределения (DV50) и среднечисленный диаметр (DN) микрокапель эмульсии показаны в таблице 1. Затем эмульсию центрифугируют (800-1200 об/мин в течение 10 минут, центрифуга Sigma 3K10), чтобы устранить избыток фосфолипида, и отделенные гранулы (микрокапли) выделяют и снова суспендируют в том же начальном объеме 10%-ного водного раствора маннитола.
Затем промытую эмульсию собирают в 100-миллилитровый баллон для лиофилизации, замораживают и затем сушат сублимацией согласно вышеуказанной стандартной процедуре. Затем лиофилизат выставляют в атмосферу, содержащую 35% перфтор-н-бутана и 65% азота, и затем диспергируют в объеме воды, вдвое большем, чем первоначальный, путем легкого ручного встряхивания. Микропузырьковую суспензию, полученную после восстановления с дистиллированной водой, анализируют, используя счетчик Культера. Концентрация микропузырьков в полученных суспензиях была примерно 1x109 частиц на 1 мл. Соответствующие медианный диаметр объемного распределения микропузырьков (DV50), среднеобъемный диаметр (DV), среднечисленный диаметр (DN), количество микропузырьков с диаметром более 3 мкм (процент от общего числа микропузырьков) приведены в таблице 1. Если проводилось более одного примера при одной и той же скорости перемешивания, значения, указанные в таблице 1, относятся к рассчитанному усредненному значению каждого параметра.
Таблица 1 | ||||||||
Пр. | Эмульсия | Наполненные газом микропузырьки | ||||||
Перемешивание (об/мин) | DV50 (мкм) | DN (мкм) | DV50 (мкм) | DV (мкм) | DN (мкм) |
DV50/DN | >3 мкм (%) |
|
1a | 8000 | 4,58 | 1,77 | 2,92 | 3,33 | 1,51 | 1,93 | 5,44 |
1b | 9000 | 4,66 | 1,94 | 3,19 | 3,45 | 1,53 | 2,08 | 6,61 |
1с | 10000 | 3,04 | 1,74 | 2,16 | 2,53 | 1,33 | 1,62 | 1,88 |
1d | 11000 | 3,05 | 1,80 | 2,17 | 3,33 | 1,32 | 1,65 | 1,55 |
1e | 12000 | 2,84 | 1,69 | 1,86 | 2,17 | 1,24 | 1,50 | 0,93 |
1f | 12500 | 2,79 | 1,68 | 1,75 | 2,05 | 1,22 | 1,44 | 0,65 |
1g | 14000 | 2,20 | 1,52 | 1,39 | 2,45 | 1,08 | 1,29 | 0,23 |
1h | 14500 | 2,00 | 1,38 | 1,19 | 1,39 | 1,01 | 1,19 | 0,06 |
1i | 15000 | 1,88 | 1,39 | 1,22 | 2,20 | 1,01 | 1,21 | 0,06 |
1j | 15500 | 2,19 | 1,48 | 1,24 | 1,46 | 1,02 | 1,22 | 0,11 |
1k | 16000 | 1,83 | 1,32 | 1,27 | 3,08 | 0,99 | 1,28 | 0,10 |
1l | 17000 | 1,40 | 1,12 | 0,91 | 1,03 | 0,87 | 1,05 | 0,01 |
ПРИМЕР 2 (ПРЕПАРАТЫ 2а-2j)
Следовала та же процедура, что и принятая для примера 1, с той только разницей, что фосфолипид являлся смесью DPPS (20% вес./вес.) и DSPC (80% вес./вес.), причем полное количество фосфолипида оставалось неизменным. Результаты сведены в таблице 2.
Таблица 2 | ||||||||
Пр. | ЭМУЛЬСИЯ | Наполненные газом микропузырьки | ||||||
Перемешивание (об/мин) |
DV50 (мкм) |
DN (мкм) |
DV50 (мкм) |
DV (мкм) |
DN (мкм) |
DV50/DN | >3 мкм (%) |
|
2a | 6000 | 8,75 | 3,07 | 7,55 | 9,05 | 2,27 | 3,33 | 21,81 |
2b | 10000 | 3,54 | 1,90 | 3,00 | 3,71 | 1,47 | 2,04 | 5,05 |
2c | 12000 | 3,04 | 1,83 | 2,45 | 3,73 | 1,32 | 1,85 | 2,15 |
2d | 12500 | 2,85 | 1,76 | 2,21 | 3,24 | 1,27 | 1,74 | 1,57 |
2e | 13000 | 2,98 | 1,83 | 2,25 | 3,04 | 1,28 | 1,76 | 1,76 |
2f | 13500 | 2,91 | 2,05 | 1,88 | 2,46 | 1,20 | 1,57 | 0,87 |
2g | 14000 | 2,45 | 1,67 | 1,82 | 2,66 | 1,16 | 1,57 | 0,57 |
2h | 14500 | 2,18 | 1,55 | 1,58 | 3,04 | 1,09 | 1,44 | 0,38 |
2i | 15000 | 1,94 | 1,42 | 1,34 | 1,96 | 1,04 | 1,28 | 0,31 |
2j | 16000 | 1,81 | 1,38 | 1,35 | 2,30 | 1,03 | 1,31 | 0,14 |
ПРИМЕР 3 (ПРЕПАРАТЫ 3a-3p)
Следовала та же процедура, что и принятая для примера 2, с той только разницей, что весовое отношение DPPS/DSPC менялось, как указано в таблице 3. Результаты сведены в таблице 3.
Таблица 3 | ||||||||
Пр. | Отношение DPPS/ DSPC |
ЭМУЛЬСИЯ | Наполненные газом микропузырьки | |||||
Перемешивание (об/мин) |
DV50 (мкм) |
DV (мкм) |
DV50 (мкм) |
DN (мкм) |
DV50/ DN |
>3 мкм (%) |
||
3a | 80/20 | 12000 | 2,44 | 1,54 | 1,68 | 1,19 | 1,41 | 0,48 |
3b | 75/25 | 12000 | 2,53 | 1,66 | 1,73 | 1,18 | 1,47 | 0,62 |
3c | 60/40 | 11000 | 3,53 | 1,86 | 2,75 | 1,45 | 1,90 | 4,00 |
3d | 60/40 | 12000 | 2,62 | 1,60 | 1,78 | 1,21 | 1,47 | 0,72 |
3e | 60/40 | 14000 | 2,36 | 1,60 | 1,59 | 1,13 | 1,41 | 0,36 |
3f | 50/50 | 12000 | 2,81 | 1,68 | 2,28 | 1,30 | 1,75 | 2,05 |
3g | 40/60 | 11000 | 3,00 | 1,72 | 2,44 | 1,32 | 1,85 | 2,31 |
3h | 40/60 | 12000 | 2,88 | 1,75 | 2,07 | 1,27 | 1,63 | 1,45 |
3i | 40/60 | 13000 | 2,61 | 1,69 | 1,76 | 1,16 | 1,52 | 0,57 |
3j | 40/60 | 14000 | 2,06 | 1,43 | 1,41 | 1,07 | 1,31 | 0,23 |
3k | 40/60 | 14500 | 2,39 | 1,67 | 1,64 | 1,15 | 1,43 | 0,49 |
3l | 30/70 | 11000 | 3,12 | 1,75 | 2,64 | 1,37 | 1,93 | 2,76 |
3m | 30/70 | 12000 | 3,08 | 1,81 | 2,38 | 1,34 | 1,78 | 2,45 |
3n | 25/75 | 11000 | 3,15 | 1,85 | 2,46 | 1,31 | 1,88 | 2,15 |
3o | 10/90 | 11000 | 3,72 | 2,26 | 3,14 | 1,47 | 2,13 | 4,60 |
3p | 5/95 | 11000 | 4,53 | 2,23 | 4,08 | 1,54 | 2,65 | 6,35 |
Пример 4
Следовала та же процедура, что и принятая для примера 2, с той только разницей, что готовились смеси DSPA и DPPS с различными весовыми отношениями.
Результаты сведены в таблице 4.
Таблица 4 | ||||||||
Пр. | Отношение DSPA/DPPS | Эмульсия | Наполненные газом микропузырьки | |||||
Перемешивание (об/мин) | DV50 (мкм) |
DV (мкм) |
DV50 (мкм) |
DN (мкм) |
DV50/DN | >3 мкм (%) |
||
4a | 25/75 | 12000 | 2,61 | 1,63 | 1,94 | 1,24 | 1,56 | 1,07 |
4b | 50/50 | 11000 | 2,81 | 1,86 | 2,35 | 1,39 | 1,69 | 2,67 |
4c | 50/50 | 12000 | 2,35 | 1,57 | 1,84 | 1,19 | 1,55 | 0,74 |
4d | 75/25 | 12000 | 2,50 | 1,65 | 2,11 | 1,27 | 1,66 | 1,45 |
ПРИМЕР 5 (ПРЕПАРАТЫ 5a-5i)
Следовала та же процедура, что и принятая для примера 1, с той только разницей, что применялась фосфолипидная смесь DPPG и DSPC в отношении 1/1 (вес./вес.) (полная концентрация 1,0 мг/мл) в смеси с 10% вес./вес. (от общего веса фосфолипида) пальмитиновой кислоты. Результаты сведены в таблице 5.
Таблица 5 | |||||||
Пр. | ЭМУЛЬСИЯ | Наполненные газом микропузырьки | |||||
Перемешивание (об/мин) | DV50 (мкм) |
DV (мкм) |
DV50 (мкм) |
DN (мкм) |
DV50/DN | >3 мкм (%) |
|
5a | 6000 | 10,02 | 2,64 | 6,87 | 2,07 | 3,32 | 18,00 |
5b | 8000 | 5,31 | 2,49 | 3,73 | 1,62 | 2,30 | 7,97 |
5c | 9000 | 5,04 | 2,69 | 3,20 | 1,55 | 2,06 | 6,22 |
5d | 10000 | 3,82 | 2,02 | 2,85 | 1,38 | 2,07 | 2,65 |
5e | 10500 | 3,36 | 1,96 | 2,51 | 1,32 | 1,89 | 2,44 |
5f | 11000 | 3,22 | 1,87 | 2,31 | 1,28 | 1,81 | 1,41 |
5g | 12000 | 2,69 | 1,61 | 1,74 | 1,14 | 1,53 | 0,52 |
5h | 13000 | 2,28 | 1,56 | 1,56 | 1,07 | 1,46 | 0,23 |
5i | 14000 | 2,00 | 1,44 | 1,30 | 1,00 | 1,30 | 0,26 |
ПРИМЕР 6
Следовала та же процедура, что и принятая для примера 1, с той только разницей, что в качестве фосфолипида применялся DSEPC, а в качестве органического растворителя - перфторгексан. Использованная скорость вращения составляет 11000 об/мин. Размеры, распределение по размерам и процент микропузырьков с диаметром более 3 мкм были следующими:
DV50 (мкм) | DN (мкм) | DV50/DN | >3 мкм (%) |
1,65 | 1,11 | 1,49 | 0,30 |
ПРИМЕР 7 (ПРЕПАРАТЫ 7a-7l)
Дистиллированную воду (10 мл), содержащую DPPS (10 мг) в качестве фосфолипида, нагревают до 70°C в течение 15 минут и затем охлаждают до комнатной температуры. 0,8 мл Органического растворителя, как определенный в следующей таблице 6, было эмульгировано в этой водной фазе, используя высокоскоростной гомогенизатор (Polytron T3000) при 10000 об/мин в течение 1 минуты. Эмульсию добавляют к 10 мл 15%-ного раствора декстрана 15000, замораживают и лиофилизуют (0,2 мбар, 24 часа). После лиофилизации в лиофилизатор вводят воздух. Микропузырьковую суспензию, полученную после восстановления с дистиллированной водой, анализируют, используя счетчик Культера. В таблице 6 суммированы результаты в терминах размеров и распределения микропузырьков по размерам.
Таблица 6 | ||||
Пр. | Растворитель | DV50 (мкм) |
DN (мкм) |
DV50/DN |
7a | C6F14 | 2,77 | 1,44 | 1,92 |
7b | CF3-цикло-C6F11 | 2,24 | 1,30 | 1,72 |
7c | C7F16 | 2,48 | 1,40 | 1,77 |
7d | C9F20 | 2,46 | 1,36 | 1,81 |
7e | Перфтордекалин | 3,76 | 1,52 | 2,47 |
7f | Циклогексан | 2,61 | 1,41 | 1,85 |
7g | Циклооктан | 2,43 | 1,35 | 1,80 |
7h | Декан | 2,01 | 1,12 | 1,79 |
7i | Октан | 2,87 | 0,96 | 2,99 |
7j | Метаксилен | 2,45 | 1,21 | 2,02 |
7k | Диизопропилкетон | 1,83 | 1,05 | 1,74 |
7l | CCl4 | 1,90 | 1,27 | 1,50 |
ПРИМЕР 8
Вышеуказанный пример 7 повторяют с той же методологией, используя перфторгексан как органический растворитель и другие лиопротективные агенты при различных концентрациях, как указано в таблице 7. В таблице 7 суммированы полученные результаты в терминах размеров и распределения микропузырьков по размерам.
Таблица 7 | ||||
Пр. | Лиопротектор и концентрация (вес./вес.) | DV50 (мкм) |
DN (мкм) |
DV50/DN |
8a | Манноза 5% | 4,35 | 1,90 | 2,29 |
8b | Глюкоза 5% | 2,59 | 0,96 | 2,70 |
8c | Сорбит 5% | 3,84 | 1,40 | 2,74 |
8d | Маннитол 10% | 2,22 | 1,22 | 1,82 |
8e | Маннитол 5% | 2,24 | 1,21 | 1,85 |
8f | Маннитол 4% | 2,54 | 1,45 | 1,75 |
8g | Мальтоза 5% | 3,42 | 0,99 | 3,45 |
8h | Декстран 6000 7,5% | 3,30 | 1,48 | 2,23 |
8j | Декстран 15000 5% | 2,55 | 1,31 | 1,95 |
8k | Декстран 15000 7,5% | 2,77 | 1,44 | 1,92 |
8i | Декстран 40000 7,5% | 2,54 | 1,32 | 2,29 |
8l | Инулин 5% | 3,58 | 1,43 | 2,70 |
ПРИМЕР 9 (ПРЕПАРАТЫ 9a-9e)
Повторяют пример 1, эмульгируя смесь при скорости 10000 об/мин. Кроме того, тот же пример повторяют, добавляя в водную фазу до эмульгирования различные количества плюроника F68 (полоксамер, соответствующий полоксамеру 188), как указано в таблице 8. В таблице 8 показаны результаты сравнительного эксперимента в терминах распределения по размерам и степени превращения микропузырьков. Степень превращения дана как процент наполненных газом микропузырьков, образованных после восстановления лиофилизованной матрицы, относительно числа микрокапель, измеренных в эмульсии.
Таблица 8 | |||||
Пример | Плюроник* (мг/мл) | DV50 (мкм) |
DN (мкм) |
DV50/DN | Степень превращения (%) |
9a | 0 | 2,42 | 1,38 | 1,75 | 28,0 |
9b | 0,25 | 4,64 | 1,97 | 2,36 | 18,8 |
9c | 0,5 | 13,85 | 1,38 | 10,04 | 7,3 |
9d | 1,0 | 12,59 | 1,49 | 8,45 | 3,2 |
9e | 2,0 | 15,80 | 1,23 | 12,85 | 0,5 |
*Концентрация относится к объему водной фазы |
Вышеуказанные результаты показывают, что концентрация полоксамера, соответствующая половине концентрации фосфолипида (т.е. примерно 33% от полного количества ПАВов в смеси), отрицательно повлияла и на степень превращения, и на распределение микропузырьков по размерам.
ПРИМЕР 10 (ПРЕПАРАТЫ 10a-10d)
Повторяют пример 9, но вместо добавления плюроника F68 к водной фазе до эмульгирования добавляют различные количества холестерина (от Fluka) в органическую фазу, как указано в таблице 9. В таблице 9 показаны результаты сравнительного эксперимента в терминах распределения по размерам и степени превращения микропузырьков (из микрокапель эмульсии).
Таблица 9 | |||||
Пример | Холестерин* (мг/мл) | DV50 (мкм) |
DN (мкм) |
DV50/DN | Степень конверсии (%) |
10a | 0 | 2,42 | 1,38 | 1,75 | 28,0 |
10b | 0,10 | 3,79 | 1,31 | 2,89 | 17,8 |
10c | 0,25 | 1,35 | 1,05 | 1,28 | 5,7 |
10d | 0,50 | 14,02 | 1,70 | 8,25 | 0,8 |
*Концентрация относится к объему водной фазы |
Приведенные выше результаты показывают, что концентрация холестерина в водной фазе, равная 0,050% (вес./вес.), очень отрицательно влияет как на степень превращения, так и на распределение микропузырьков по размерам. Концентрация 0,025%, хотя и может обеспечить приемлемые размеры и распределение микропузырьков по размерам, все же приводит к относительной низкой степени превращения.
ПРИМЕР 11
Дистиллированную воду (30 мл), содержащую 60 мг DPPS и 3 г маннитола, нагревают до 70°C в течение 15 минут, затем охлаждают до комнатной температуры.
Перфторгептан эмульгируют в этой водной фазе, применяя высокоскоростной гомогенизатор (Polytron®, 12500 об/мин, 1 минута).
Полученную эмульсию с медианным диаметром объемного распределения (DV50) 2,3 мкм и среднечисленным диаметром (DN) 2,0 мкм один раз промывают при центрифугировании, повторно суспендируют в 30 мл 10%-ного раствора маннитола в дистиллированной воде и затем разделяют на три порции (3x10 мл).
Первую порцию (A) используют как есть для последующей стадии лиофилизации. Вторую порцию (B) набирают в шприц и впрыскивают вручную через 5-микронный фильтр Nuclepore® (47 мм - поликарбонат). Третью порция (C) фильтруют через 3-микронный фильтр Nuclepore® (47 мм - поликарбонат) по тому же методу.
Эмульсии замораживали в 100-миллилитровом баллоне (-45°C в течение 5 минут), затем сушили сублимацией (0,2 мбар, 72 часа).
Атмосферное давление восстанавливали введением смеси C4F10 и воздуха в отношении 35/65. Соответствующие лиофилизаты диспергировали в дистиллированной воде (10 мл). Полученные таким образом микропузырьковые суспензии анализировали, используя счетчик Культера, результаты приведены в следующей таблице.
DV50 | DN | DV50/DN | |
Часть A | 1,71 | 1,12 | 1,53 |
Часть B | 1,65 | 1,12 | 1,47 |
Часть C | 1,57 | 1,09 | 1,44 |
Как показывают приведенные выше результаты, дополнительная стадия фильтрации позволяет еще более уменьшить размер микропузырьков и сузить соответствующее распределение по размерам.
ПРИМЕР 12
Повторяли пример 1, используя 10 мг смеси DSPC/DSTAP в отношении 7/3 (вес./вес.), при скорости перемешивания 11000 об/мин.
Характеристики капель эмульсии и микропузырьков были следующими:
Капли эмульсии | Наполненные газом микропузырьки | |||
DV50 | DN | DV50 | DN | > 3 мкм |
2,36 | 1,48 | 2,10 | 1,12 | 0,63 |
Пример 13
Повторяли получение примера 1, эмульгируя смесь при скорости 10000 об/мин (пример 13a).
Указанное получение повторяли, добавляя далее примерно 0,9 мг DSPE-ПЭГ2000 (примерно 8,3% от полного количества диспергированных фосфолипидов) в исходную водную суспензию (пример 13b).
Ни в одном из двух приготовлений промывку при центрифугировании не проводили.
В таблице 10 показаны характеристики этих двух препаратов, как эмульсии, так и микропузырьковой суспензии.
Таблица 10 | ||||||
Эмульсия | Микропузырьки | |||||
Пример | DV50 (мкм) |
DN (мкм) |
DV50 (мкм) |
DN (мкм) |
DV50/DN | степень превращения (%) |
13a | 3,19 | 1,66 | 2,66 | 1,33 | 2,00 | 29,5 |
13b | 4,32 | 1,43 | 5,81 | 1,18 | 4,92 | 18,8 |
Приведенные выше результаты показывают, что концентрация DSPE-ПЭГ менее 10 вес.% (от общего количества фосфолипидов) отрицательно влияет и на степень превращения, и на распределение микропузырьков по размерам.
ПРИМЕР 14
Повторяют получение примера 11, заменяя DPPS тем же количеством смеси DAPC/DPPS в отношении 1:1 (вес./вес.).
Полученную эмульсию разделяют на три порции по 10 мл, не промывая при центрифугировании.
Водные суспензии DSPE-ПЭГ2000 и DSPE-ПЭГ5000 готовят отдельно, диспергируя 25 мг соответствующего DSPE-ПЭГ в 5 мл 10%-ного раствора маннитола в условиях обработки ультразвуком (ультразвуковой зонд 3 мм, сонификатор Branson 250, выход 30%, в течение 5 минут).
Затем в первую порцию эмульсии добавляют аликвоту 2,5 мл 10%-ного раствора маннитола (пример 14a).
Во вторую порцию эмульсии добавляют аликвоту 2,5 мл приготовленной суспензии DSPE-ПЭГ2000 (пример 14b).
В третью порцию эмульсии добавляют аликвоту 2,5 мл приготовленной суспензии DSPE-ПЭГ5000 (пример 14c).
Все три смеси нагревают при 60°C при перемешивании в течение часа. После охлаждения при комнатной температуре определяют размер микрокапель с помощью анализатора размеров Malvern Mastersizer. Результаты приведены в таблице 11.
Затем эмульсии сушат сублимацией согласно процедуре примера 11. Атмосферное давление восстанавливают введением смеси C4F10 и воздуха при отношении 35/65. Соответствующие лиофилизаты диспергировали в дистиллированной воде (10 мл). Полученные таким образом микропузырьковые суспензии анализировали, используя счетчик Культера (смотри таблицу 11).
Затем микропузырьковые суспензии дважды промывали дистиллированной водой при центрифугировании (180 г/10 мин) и снова лиофилизовали согласно вышеуказанной процедуре. Количество DSPE-ПЭГ в высушенной композиции определяли с помощью ВЭЖХ-МС. Результаты приведены в следующей таблице 11.
Таблица 11 | |||||
Эмульсия | Микропузырьки | ||||
Пример | DV50 (мкм) |
DN (мкм) |
DV50 (мкм) |
DN (мкм) |
DSPE-ПЭГ (% вес/вес) |
14a | 2,6 | 2,3 | 1,9 | 1,1 | 0,0 |
14b | 2,5 | 2,3 | 3,4 | 1,3 | 35,5 |
14c | 2,5 | 2,3 | 2,2 | 1,2 | 37,9 |
Как можно заключить из приведенных выше результатов, последовательное добавление суспензии DSPE-ПЭГ к образованной эмульсии позволяет ввести в состав стабилизирующего слоя относительно высокие количества DSPE-ПЭГ (в данном случае более 30% от полного веса фосфолипидов, образующих стабилизирующую оболочку), не влияя негативно на конечные свойства микропузырьков.
Сходные результаты были получены с другими ПЭГ-модифицированными фосфолипидами, в частности DSPE-ПЭГ2000-биотин или DSPE-ПЭГ2000-малеимид, и с фосфолипидами, несущими пептиды, в частности DSPE-ПЭГ2000-малеимид-SATA-RGD4C. Этот последний фосфолипид, несущий пептиды, может быть получен согласно известным методам путем реакции пептида RGD-4C с SATA, удалением защиты с тиоловой группы SATA и реакции незащищенного RGD4C-SATA с DSPE-ПЭГ2000-малеимидом. Обычно может применяться способ приготовления, описанный в работе "Development of EGF-conjugated liposomes for targeted delivery of boronated DNA-binding agents", by Bohl Kullberg et al., Bioconjugate chemistry 2002, 13, 737-743 (описывается внедрение белка EGF в молекулу DSPE-ПЭГ-малеимида).
ПРИМЕР 15
10 мг смеси DPPS/DSPC в отношении 1:1 (вес./вес.) добавляют к примерно 10 мл 10%-ного (вес./вес.) водного раствора маннитола.
Смесь нагревают при 70°C в течение 15 минут и затем охлаждают при комнатной температуре (22°C). При скорости подачи 0,2 мл/мин через входное отверстие микросмесителя (стандартный микросмеситель с прорезями Interdigidital, корпус SS 316Ti с вкладками никель-на-меди, 40 мкм x300 мкм, Institut fur Microtechnik Mainz GmbH) в водную фазу, циркулирующую при 20 мл/мин при комнатной температуре, добавляют циклооктан до полного количества органического растворителя 7,4% (об./об.). По завершении добавления органического растворителя эмульсия дополнительно циркулирует в микросмесителе еще 20 минут.
Затем эмульсию разделяют на пять аликвот по 2 мл каждая и вводят в пять ампул DIN8R. Четыре ампулы герметично закрывают и нагревают в течение 30 минут при температурах 60, 80, 100 и 120°C соответственно, как указано в таблице 12, а пятую не нагревают.
Затем эмульсии охлаждают до комнатной температуры и содержимое пяти ампул подвергают лиофилизации согласно следующей процедуре. 1 мл Каждой эмульсии собирают в ампулу DIN8R и замораживают при -5°C; температуру снижают до -45°C в течение 1 часа и затем эмульсию сушат сублимацией при -25°C и 0,2 мбар в течение 12 часов (лиофилизатор Telstar Lyobeta35), с конечной стадией сушки при 30°C и 0,2 мбар в течение 5 часов.
Затем лиофилизованный продукт выставляют в атмосферу, содержащую 35% перфтор-н-бутана и 65% азота, и затем диспергируют в объеме воды, вдвое превышающем начальный объем, путем легкого встряхивания вручную. В таблице 12 показаны результаты определения характеристик конечной суспензии микропузырьков.
Таблица 12 | ||||
Нагрев | DV50 | DN | DV50/DN | Число микропузырьков на мл эмульсии |
Без нагрева | 10,45 | 1,63 | 6,41 | 5,34x107 |
60°°C | 4,85 | 1,32 | 3,67 | 7,83x107 |
80°C | 5,34 | 1,29 | 4,14 | 8,51x107 |
100°C | 6,96 | 1,66 | 4,19 | 4,92x108 |
120°C | 3,05 | 1,50 | 2,03 | 8,69x108 |
Из приведенных выше результатов видно, что тепловая обработка образованной эмульсии позволяет сузить распределение по размерам конечной микропузырьковой суспензии при увеличении также полного числа микропузырьков. В частности, увеличивая температуру нагрева выше 100°C, возможно получить относительно узкое распределение микропузырьков по размерам также в отсутствие стадии промывки эмульсии, а также увеличение полного числа микропузырьков в суспензии.
ПРИМЕР 16
Дистиллированную воду (10 мл), содержащую 10 мг DPPS и 1 г маннитола, нагревают до 70°C в течение 15 минут, затем охлаждают до комнатной температуры. Добавляют DPPE-MPB (1,2-дипальмитоил-sn-глицеро-3-фосфоэтаноламин-N-[4-(p-малеимидофенил)бутирамид], натривая соль, Avanti Polar Lipids) (4,8 вес.% - 0,5 мг). Этот фосфолипид диспергируют в водной фазе, используя ультразвуковую баню (Branson 1210 - 3 минуты).
Перфторгептан (0,8 мл от Fluka) эмульгируют в этой водной фазе (охлажденной на ледяной бане), используя высокоскоростной гомогенизатор (Polytron® T3000, 15000 об/мин, 1 минута).
Полученная эмульсия имеет медианный диаметр объемного распределения (DV50) 2,3 мкм и среднечисленный диаметр (DN) 2,1 мкм, как определено с помощью анализатора размеров Malvern Mastersizer.
Эмульсию дважды промывают при центрифугировании и затем повторно суспендируют в 9,5 мл 10%-ного раствора маннитола в дистиллированной воде. Промытую эмульсию замораживают (-45°C, 5 минут), затем сушат сублимацией (при 0,2 мбар в течение 24 часов).
Атмосферное давление восстанавливают путем введения смеси C4F10 и воздуха в отношении 35/65. Лиофилизат диспергируют в дистиллированной воде (20 мл), микропузырьки один раз промывают при центрифугировании и затем повторно диспергируют в 4 мл ЭДТА, содержащем соляной раствор, буферированный фосфатом (мольный состав: 10 мМ фосфата, 2,7 мМ KCl, 137 мМ NaCl, 10 мМ ЭДТА), содержащий 3,4 мг тиоацетилированного авидина, к незащищенной тиоловой группе тиоацетилированного авидина добавляли 400 мкл раствора гидроксиламина (13,92 мг в PBS 50 мМ, pH: 7,5).
Суспензию перемешивают инверсией на дисковом вращающем устройстве (Fisher Scientific) в течение 2 часов. Затем добавляют 150 мкл 1 н. NaOH.
Полученные таким образом микропузырьки, меченные авидином, дважды промывали PBS при центрифугировании (10000 об/мин, 10 минут, центрифуга 3K10 от Sigma). Полученную микропузырьковую суспензию анализировали на счетчике Культера, она показала диаметр DV50 1,6 мкм и DN 1,2 мкм.
Эффективность микропузырьковой композиции-мишени проверяли как in vitro, так и in vivo.
Эксперимент in vitro:
Чтобы проверить эффективность связывания ацетилированного авидина с поверхностью микропузырьков, было приготовлено два набора лунок, содержащих фибрин. В первом наборе находилась только поверхность фибрин. Во втором наборе фибрин предварительно обрабатывали антифибриновым пептидом, меченным биотином (DX-278, описан в документе WO 02/055544). В лунки добавляли микропузырьковые суспензии, приготовленные, как описано выше (5x108 микропузырьков на лунку). После 2 часов инкубирования (вверх дном) и нескольких промывок поверхности фибрина в двух наборах лунок рассматривали с помощью оптического микроскопа. Тогда как в лунках без биотинилированного антифибринового пептида по существу не наблюдалось микропузырьков, в лунках, содержащих биотинилированный антифибриновый пептид, наблюдали сплошное покрытие микропузырьков.
Эксперимент in vivo:
Образовывали тромб в брюшной аорте двух кроликов по методу FeCl3 (Lockyer et al, 1999, Journal of Cardiovascular Pharmacology, vol 33, pp 718-725).
Эхо-сигналы получали с помощью ультразвуковой машины HDI 5000 (Philips), режим импульсной инверсии, зонд L7-4, MI: 0,07.
Затем двум кроликам внутривенно впрыскивали ботинилированное антитело (CD41, специфический для рецептора GPIIB/IIIA активированных тромбоцитов).
Через 30 минут первому кролику внутривенно впрыскивали микропузырьковую суспензию, содержащую меченные авидином микропузырьки (1х109 микропузырьков/мл). Через пятнадцать минут после инъекции наблюдалась сильное затемнение тромба для суспензии. Это затемнение оставалось видимым после по меньшей мере одного часа после инъекции.
Такое же количество микропузырьковой суспензии без меченных авидином микропузырьков впрыскивают внутривенно второму кролику. Наблюдалось лишь легкое затемнение тромба.
Claims (36)
1. Способ получения лиофилизованной матрицы, которая после контакта с водной жидкостью-носителем и газом может быть восстановлена в суспензию наполненных газом микропузырьков, стабилизированную преимущественно фосфолипидом, причем указанный способ включает стадии:
a) приготовление водно-органической эмульсии, содержащей i) водную среду, включающую воду, ii) органический растворитель, по существу не смешиваемый с водой; iii) эмульгирующий состав амфифильных материалов, содержащий более 50 вес.% фосфолипида и iv) лиопротективный агент;
b) лиофилизацию указанной эмульгированной смеси с получением лиофилизованной матрицы, содержащей указанный фосфолипид.
a) приготовление водно-органической эмульсии, содержащей i) водную среду, включающую воду, ii) органический растворитель, по существу не смешиваемый с водой; iii) эмульгирующий состав амфифильных материалов, содержащий более 50 вес.% фосфолипида и iv) лиопротективный агент;
b) лиофилизацию указанной эмульгированной смеси с получением лиофилизованной матрицы, содержащей указанный фосфолипид.
2. Способ по п.1, в котором стадия а) приготовления эмульсии включает следующие стадии:
а1) приготовление суспензии путем диспергирования эмульгирующего состава и лиопротективного агента в водной среде;
а2) смешение полученной суспензии с органическим растворителем;
а3) регулируемое перемешивание смеси с получением эмульсии.
а1) приготовление суспензии путем диспергирования эмульгирующего состава и лиопротективного агента в водной среде;
а2) смешение полученной суспензии с органическим растворителем;
а3) регулируемое перемешивание смеси с получением эмульсии.
3. Способ по п.1, в котором растворимость органического растворителя в воде составляет менее 10 г/л.
4. Способ по п.3, в котором растворимость органического растворителя в воде составляет 0,001 г/л или меньше.
5. Способ по п.1, в котором органический растворитель выбран из разветвленных или прямых алканов, алкенов, циклоалканов, ароматических углеводородов, простых алкиловых эфиров, кетонов, галогенированных углеводородов, перфторированных углеводородов и их смесей.
6. Способ по п.5, в котором растворитель выбран из пентана, гексана, гептана, октана, нонана, декана, 1-пентена, 2-пентена, 1-октена, циклопентана, циклогексана, циклооктана, 1-метилциклогексана, бензола, толуола, этилбензола, 1,2-диметилбензола, 1,3-диметилбензола, дибутилового эфира и диизопропилкетона, хлороформа, четыреххлористого углерода, 2-хлор-1-(дифторметокси)-1,1,2-трифторэтана (энфлюрана), 2-хлор-2-(дифторметокси)-1,1,1-трифторэтана (изофлюрана), тетрахлор-1,1-дифторэтана, перфторпентана, перфторгексана, перфторгептана, перфторнонана, перфторбензола, перфтордекалина, метилперфторбутилового эфира, метилперфторизобутилового эфира, этилперфторбутилового эфира, этилперфторизобутилового эфира и их смесей.
7. Способ по одному из предыдущих пунктов, в котором количество органического растворителя составляет от примерно 1 до примерно 50 об.% от количества воды.
8. Способ по п.1, в котором лиопротективный агент выбран из углеводородов, сахарных спиртов, полигликолей и их смесей.
9. Способ по п.8, в котором лиопротективный агент выбран из глюкозы, галактозы, фруктозы, сахарозы, трегалозы, мальтозы, лактозы, амилозы, амилопектина, циклодекстрина, декстрана, инулина, растворимого крахмала, гидроксиэтилкрахмала (HES), эритрита, маннита, сорбита, полиэтиленгликолей и их смесей.
10. Способ по п.1, в котором количество лиопротективного агента составляет от примерно 1 до примерно 25 вес.% от веса воды.
11. Способ по п.1, в котором фосфолипид выбран из дилауроилфосфатидилхолина (DLPC), димиристоилфосфатидилхолина (DMPC), дипальмитоилфосфатидилхолина (DPPC), диарахидоилфосфатидилхолина (DAPC), дистеароилфосфатидилхолина (DSPC), диолеоилфосфатидилхолина (DOPC), 1,2-дистеароил-sn-глицеро-3-этилфосфохолина (Этил-DSPC), дипентадеканоилфосфатидилхолина (DPDPC), 1-миристоил-2-пальмитоилфосфатидилхолина (МРРС), 1-пальмитоил-2-миристоилфосфатидилхолина (РМРС), 1-пальмитоил-2-стеароилфосфатидилхолина (PSPC), 1-стеароил-2-пальмитоилфосфатидилхолина (SPPC), 1-пальмитоил-2-олеилфосфатидилхолина (РОРС), 1-олеил-2-пальмитоилфосфатидилхолина (ОРРС), дилауроилфосфатидилглицерина (DLPG) и его солей с щелочными металлами, диарахидоилфосфатидилглицерина (DAPG) и его солей с щелочными металлами, димиристоилфосфатидилглицерина (DMPG) и его солей с щелочными металлами, дипальмитоилфосфатидилглицерина (DPPG) и его солей с щелочными металлами, дистеароилфосфатидилглицерина (DSPG) и его солей с щелочными металлами, диолеоилфосфатидилглицерина (DOPG) и его солей с щелочными металлами, димиристоилфосфатидной кислоты (DMPA) и ее солей с щелочными металлами, дипальмитоилфосфатидной кислоты (DPPA) и ее солей с щелочными металлами, дистеароилфосфатидной кислоты (DSPA), диарахидоилфосфатидной кислоты (DAPA) и ее солей с щелочными металлами, димиристоилфосфатидилэтаноламина (DMPE), дипальмитоилфосфатидилэтаноламина (DPPE), дистеароилфосфатидилэтаноламина (DSPE), диолеилфосфатидилэтаноламина (DOPE), диарахидоилфосфатидилэтаноламина (DAPE), дилинолеилфосфатидилэтаноламина (DLPE), модифицированного полиэтиленгликолем димиристоилфосфатидилэтаноламина (DMPE-ПЭГ), модифицированного полиэтиленгликолем дипальмитоилфосфатидилэтаноламина (DPPE-ПЭГ), модифицированного полиэтиленгликолем дистеароилфосфатидилэтаноламина (DSPE-ПЭГ), модифицированного полиэтиленгликолем диолеилфосфатидилэтаноламина (DOPE-ПЭГ), модифицированного полиэтиленгликолем диарахидоилфосфатидилэтаноламина (DAPE-ПЭГ), модифицированного полиэтиленгликолем дилинолеилфосфатидилэтаноламина (DLPE-ПЭГ), димиристоилфосфатидилсерина (DMPS), диарахидоилфосфатидилсерина (DAPS), дипальмитоилфосфатидилсерина (DPPS), дистеароилфосфатидилсерина (DSPS), диолеоилфосфатидилсерина (DOPS), дипальмитоилсфингомиелина (DPSP), дистеароилсфингомиелина (DSSP) и их смесей.
12. Способ по п.1, в котором эмульгирующий состав амфифильных материалов содержит фосфолипид, несущий суммарный ненулевой заряд, или амфифильный материал, несущий суммарный ненулевой заряд.
13. Способ по п.1, в котором количество фосфолипида составляет от примерно 0,005 до примерно 1,0 вес.% от полного веса эмульгированной смеси.
14. Способ по п.13, в котором количество фосфолипида составляет от 0,01 до 1,0 вес.% от полного веса эмульгированной смеси.
15. Способ по п.1, в котором фосфолипид включает нацеливающий лиганд или защитную реакционноспособную группу, способную взаимодействовать с нацеливающим лигандом.
16. Способ по п.1, в котором эмульсия дополнительно содержит амфифильный материал, выбранный из лизолипидов, жирных кислот и их соответствующих солей с щелочью или щелочными металлами, полимеров, несущих липиды; сульфированных моно-, ди-, олиго- или полисахаридов, несущих липиды; липидов, связанных с жирными кислотами простой или сложноэфирной связью; полимеризованных липидов; диацетилфосфата; дицетилфосфата; стеариламина; церамидов; полиоксиэтилированных сложных эфиров жирных кислот; полиоксиэтилированных жирных спиртов; полиоксиэтилированных простых эфиров жирных спиртов; полиоксиэтилированных сложных эфиров сорбита и жирных кислот; модифицированного полиэтиленгликолем глицеринрицинолеата; этоксилированных стеринов соевых бобов; этоксилированного касторового масла; блок-сополимеров этиленоксида (ЭО) и пропиленоксида (ПО); стериновых сложных эфиров сахарных кислот; сложных эфиров сахаров с алифатическими кислотами;
сложных эфиров глицерина с (C12-C24) дикарбоновыми жирными кислотами и их соответствующими солями с щелочами или солями щелочных металлов; сапонинов; длинноцепочечных (С12-С24)-спиртов; 6-(5-холестен-3β-илокси)-1-тио-β-D-галактопиранозида; дигалактозилдиглицерида; 6-(5-холестен-3β-илокси) гексил-6-амино-6-деокси-1-тио-β-D-галактопиранозида; 6-(5-холестен-3β-илокси)гексил-6-амино-6-деоксил-1-тио-β-D-маннопиранозида; 12-(((7'-диэтиламинокумарин-3-ил)карбонил)метиламино)-октадекановой кислоты; N-[12-(((7'-диэтиламинокумарин-3-ил)карбонил)метиламино)октадеканоил]-2-аминопальмитиновой кислоты; N-сукцинилдиолеилфосфатидилэтаноламина; 1-гексадецил-2-пальмитоилглицерофосфоэтаноламина; пальмитоилгомоцистеина; алкиламмониевых солей, содержащих по меньшей мере одну (С10-С20) алкильную цепь; солей третичного или четвертичного аммония, содержащих по меньшей мере одну (С10-С20)-ацильную цепь, соединенную с атомом N через (С3-С6)-алкиленовый мостик, и их смесей или комбинаций.
сложных эфиров глицерина с (C12-C24) дикарбоновыми жирными кислотами и их соответствующими солями с щелочами или солями щелочных металлов; сапонинов; длинноцепочечных (С12-С24)-спиртов; 6-(5-холестен-3β-илокси)-1-тио-β-D-галактопиранозида; дигалактозилдиглицерида; 6-(5-холестен-3β-илокси) гексил-6-амино-6-деокси-1-тио-β-D-галактопиранозида; 6-(5-холестен-3β-илокси)гексил-6-амино-6-деоксил-1-тио-β-D-маннопиранозида; 12-(((7'-диэтиламинокумарин-3-ил)карбонил)метиламино)-октадекановой кислоты; N-[12-(((7'-диэтиламинокумарин-3-ил)карбонил)метиламино)октадеканоил]-2-аминопальмитиновой кислоты; N-сукцинилдиолеилфосфатидилэтаноламина; 1-гексадецил-2-пальмитоилглицерофосфоэтаноламина; пальмитоилгомоцистеина; алкиламмониевых солей, содержащих по меньшей мере одну (С10-С20) алкильную цепь; солей третичного или четвертичного аммония, содержащих по меньшей мере одну (С10-С20)-ацильную цепь, соединенную с атомом N через (С3-С6)-алкиленовый мостик, и их смесей или комбинаций.
17. Способ по п.1, в котором водно-органическую эмульсию со стадии а) подвергают стадии промывки перед стадией лиофилизации b).
18. Способ по п.1, в котором водно-органическую эмульсию со стадии а) подвергают стадии микрофильтрации перед стадией лиофилизации b).
19. Способ по п.1, который включает дополнительно добавление водной суспензии, содержащей дополнительное амфифильное соединение, в водно-органическую эмульсию, полученную согласно стадии а), перед стадией лиофилизации b), с получением, таким образом, второй водно-органической эмульсии, содержащую указанное дополнительное амфифильное соединение.
20. Способ по п.19, который включает дополнительно нагрев смеси указанной водной суспензии и указанной водно-органической эмульсии.
21. Способ по п.19, в котором указанную смесь нагревают при температуре от примерно 40°С до примерно 80°С.
22. Способ по п.19, в котором указанное амфифильное соединение является ПЭГ-модифицированным фосфолипидом, причем ПЭГ-модифицированный фосфолипид имеет реакционноспособный компонент, или ПЭГ-модифицированный фосфолипид имеет нацеливающий лиганд.
23. Способ по п.1, который включает дополнительно до стадии лиофилизации b), регулируемый нагрев водно-органической эмульсии.
24. Способ по п.19, который включает дополнительно до стадии лиофилизации b), регулируемый нагрев водно-органической эмульсии.
25. Способ по п.23 или 24, в котором указанный регулируемый нагрев осуществляют при температуре от примерно 60°С до 125°С.
26. Способ по п.25, в котором указанную эмульсию помещают в запаивающийся флакон.
27. Способ получения пригодного для инъекций контрастного вещества, содержащего жидкую водную суспензию наполненных газом микропузырьков, стабилизированную преимущественно фосфолипидом, который включает стадии
получения лиофилизированной матрицы в соответствии со способом по одному из пп.1-24;
контактирование указанной лиофилизованной матрицы с биосовместимым газом и
восстановление указанной лиофилизованной матрицы путем растворения ее в физиологически приемлемой водной жидкости-носителе, с получением суспензии наполненных газом микропузырьков, стабилизированной преимущественно указанным фосфолипидом.
получения лиофилизированной матрицы в соответствии со способом по одному из пп.1-24;
контактирование указанной лиофилизованной матрицы с биосовместимым газом и
восстановление указанной лиофилизованной матрицы путем растворения ее в физиологически приемлемой водной жидкости-носителе, с получением суспензии наполненных газом микропузырьков, стабилизированной преимущественно указанным фосфолипидом.
28. Способ по п.27, в котором биосовместимый газ выбран из воздуха, азота, кислорода, двуокиси углерода, водорода, закиси азота, инертных газов, низкомолекулярного углеводорода, в том числе (С1-С7)-алкана, (C4-С7)-циклоалкана, (С2-С7)-алкена и (С2-С7)-алкина, простого эфира, кетона, сложного эфира, галогенированного (С1-С7)углеводорода, кетона или простого эфира, или смесей любых из вышеупомянутых веществ.
29. Способ по п.28, в котором галогенированный углеводородный газ является перфторированным углеводородом или гексафторидом серы.
30. Способ по п.29, в котором перфорированный углеводородный газ является перфторметаном, перфторэтаном, перфторпропаном, перфторбутаном, перфторпентаном, перфторгексаном, перфторгептаном; перфторпропеном, перфторбутеном, перфторбутадиеном, перфторбут-2-ином, перфторциклобутаном, перфторметилциклобутаном, перфтордиметилциклобутаном, перфтортриметилциклобутаном, перфторциклопентаном, перфторметилциклопентаном, перфтордиметилциклопентаном, перфторциклогексаном, перфторметилциклогексаном, перфторметилциклогексаном и их смесями.
31. Пригодное для инъекции контрастное вещество, включающее жидкую водную суспензию наполненных газом микропузырьков, полученное в соответствии со способом по п.27, причем указанные микропузырьки имеют среднечисленный диаметр (DN) менее 1,70 мкм и медианный диаметр объемного распределения (DV50) такой, что отношение DV50/DN составляет примерно 2,00 или меньше.
32. Контрастное вещество по п.31, в котором указанные микропузырьки имеют значение DN 1,60 мкм или меньше, предпочтительно 1,50 мкм или меньше, более предпочтительно 1,30 мкм или меньше.
33. Контрастное вещество по п.31, в котором указанные микропузырьки имеют отношение DV50/DN примерно 1,80 или меньше, предпочтительно примерно 1,60 или меньше, более предпочтительно примерно 1,50 или меньше.
34. Контрастное вещество для применения в диагностической интроскопии, где контрастное вещество определено в любом из пп.31-33.
35. Способ диагностической интроскопии, включающий введение пациенту улучшающего контрастность количества контрастного вещества по любому из пп.31-33 и получение изображения по меньшей мере части указанного пациента.
36. Способ по п.35, который включает обработку ультразвуком указанного пациента с помощью ультразвукового прибора, генерирующего ультразвуковые волны с заранее установленной выходной частотой, определяющей соответствующий резонансный размер микропузырьков, и введение контрастного вещества, содержащего наполненные газом микропузырьки с узким распределением по размерам и средним размером, близким к половине резонансного размера.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP03002375.8 | 2003-02-04 | ||
EP03002375 | 2003-02-04 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2005127634A RU2005127634A (ru) | 2006-01-20 |
RU2345793C2 true RU2345793C2 (ru) | 2009-02-10 |
Family
ID=32842689
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2005127634/15A RU2345793C2 (ru) | 2003-02-04 | 2004-02-03 | Ультразвуковые контрастные вещества и способ их получения |
Country Status (16)
Country | Link |
---|---|
US (4) | US9364569B2 (ru) |
EP (1) | EP1590006B1 (ru) |
JP (1) | JP4670083B2 (ru) |
KR (1) | KR101076053B1 (ru) |
CN (1) | CN100374165C (ru) |
AT (1) | ATE480263T1 (ru) |
AU (1) | AU2004210221B2 (ru) |
CA (1) | CA2512454C (ru) |
DE (1) | DE602004029010D1 (ru) |
DK (1) | DK1590006T3 (ru) |
ES (1) | ES2352087T3 (ru) |
IL (1) | IL169677A (ru) |
MX (1) | MXPA05007730A (ru) |
NO (1) | NO331966B1 (ru) |
RU (1) | RU2345793C2 (ru) |
WO (1) | WO2004069284A2 (ru) |
Cited By (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2444296C2 (ru) * | 2010-03-24 | 2012-03-10 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Уральская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" (ГОУ ВПО УГМА Росздрава) | Способ использования суспензий наночастиц оксидов металлов в качестве контрастных веществ для ультразвуковой визуализации сердца и сосудов |
RU2485976C2 (ru) * | 2011-05-17 | 2013-06-27 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Сибирский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (ГОУ ВПО СибГМУ Минздравсоцразвития России) | Контрастное средство для ультразвуковой визуализации |
WO2013188470A1 (en) * | 2012-06-11 | 2013-12-19 | The Regents Of The University Of California | Method and system for in vivo hydrogen peroxide detection with ultrasound |
US10058616B2 (en) | 2012-02-10 | 2018-08-28 | Tlc Biopharmaceuticals, Inc. | Pharmaceutical compositions to reduce complications of ocular steroid |
RU2803236C2 (ru) * | 2018-07-06 | 2023-09-11 | Бракко Суисс Са | Лиофилизированный состав для заполненных газом микровезикул |
Families Citing this family (68)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US7261876B2 (en) | 2002-03-01 | 2007-08-28 | Bracco International Bv | Multivalent constructs for therapeutic and diagnostic applications |
US7794693B2 (en) | 2002-03-01 | 2010-09-14 | Bracco International B.V. | Targeting vector-phospholipid conjugates |
US8623822B2 (en) | 2002-03-01 | 2014-01-07 | Bracco Suisse Sa | KDR and VEGF/KDR binding peptides and their use in diagnosis and therapy |
EP1587944A4 (en) | 2002-03-01 | 2007-03-21 | Dyax Corp | KDR AND VEGF / KDR BINDING PEPTIDES AND THEIR USE FOR DIAGNOSTIC AND THERAPEUTIC PURPOSES |
US9364569B2 (en) | 2003-02-04 | 2016-06-14 | Bracco Suisse S.A. | Ultrasound contrast agents and process for the preparation thereof |
CA2547024C (en) | 2003-12-22 | 2013-12-17 | Bracco Research Sa | Gas-filled microvesicle assembly for contrast imaging |
CA2554239C (en) † | 2004-01-20 | 2015-05-12 | Sunnybrook And Women's College Health Sciences Centre | High frequency ultrasound imaging using contrast agents |
CA2575677C (en) * | 2004-08-18 | 2013-01-22 | Bracco Research Sa | Gas-filled microvesicles composition for contrast imaging |
EP1714642A1 (en) | 2005-04-18 | 2006-10-25 | Bracco Research S.A. | Pharmaceutical composition comprising gas-filled microcapsules for ultrasound mediated delivery |
CN101374955B (zh) | 2005-12-09 | 2013-03-27 | 布拉科瑞士有限公司 | 靶向载体-磷脂缀合物 |
EP1797919A1 (en) | 2005-12-16 | 2007-06-20 | Bracco Research S.A. | Liquid transfer device for medical dispensing containers |
US8328724B2 (en) * | 2006-05-15 | 2012-12-11 | Mayo Foundation For Medical Education And Research | Method for imaging intracavitary blood flow patterns |
WO2008008936A2 (en) * | 2006-07-13 | 2008-01-17 | The Regents Of The University Of Colorado | Echo particle image velocity (epiv) and echo particle tracking velocimetry (eptv) system and method |
WO2008016992A1 (en) | 2006-08-01 | 2008-02-07 | Scimed Life Systems, Inc. | Pulse inversion sequences for nonlinear imaging |
EP2061517B1 (en) * | 2006-09-05 | 2010-06-02 | Bracco Research S.A. | Gas-filled microvesicles with polymer-modified lipids |
WO2008042841A2 (en) * | 2006-10-02 | 2008-04-10 | Dr. Reddy's Laboratories Limited | Docetaxel compositions |
EP2117603A2 (en) | 2006-12-19 | 2009-11-18 | Bracco International B.V. | Targeting and therapeutic compounds and gas-filled microvesicles comprising said compounds |
WO2009043031A2 (en) * | 2007-09-27 | 2009-04-02 | Children's Medical Center Corporation | Microbubbles and methods for oxygen delivery |
EP2090322A1 (en) | 2008-02-18 | 2009-08-19 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Use of fsh receptor ligands for diagnosis and therapy of cancer |
JP2010005512A (ja) * | 2008-06-25 | 2010-01-14 | Kao Corp | 微細気泡前駆体組成物 |
GB0811856D0 (en) | 2008-06-27 | 2008-07-30 | Ucl Business Plc | Magnetic microbubbles, methods of preparing them and their uses |
CN102202694B (zh) | 2008-10-07 | 2014-03-12 | 博莱科瑞士股份有限公司 | 包含抗-聚合物抗体的靶向构建体和结合它们的脂质体或微泡 |
US20110045095A1 (en) * | 2008-10-08 | 2011-02-24 | The Regents Of The University Of California | Polymer-phospholipid shelled microbubbles |
CN101745126B (zh) * | 2008-12-10 | 2012-04-25 | 温州医学院 | 一种包载水溶性药物超声造影剂的制备方法 |
KR101630190B1 (ko) | 2008-12-16 | 2016-06-14 | 브라코 스위스 에스.에이. | 조영제의 볼러스 투여를 위한 장치 |
CN102869348A (zh) * | 2010-04-30 | 2013-01-09 | Hrd有限公司 | 药物递送中的高剪切力应用 |
KR101893423B1 (ko) * | 2010-08-09 | 2018-08-31 | 브라코 스위스 에스.에이. | 표적화 기체-충전 미세소포 |
US20140010848A1 (en) * | 2010-11-12 | 2014-01-09 | Children's Medical Center Corporation | Gas-filled microbubbles and systems for gas delivery |
EP2668961A4 (en) | 2010-11-19 | 2016-07-06 | Univ Sapporo Medical | PHARMACEUTICAL COMBINATION PREPARATION |
CN103269717B (zh) * | 2010-12-24 | 2016-08-03 | 博莱科瑞士股份有限公司 | 气体填充微囊泡用作疫苗 |
US10357450B2 (en) * | 2012-04-06 | 2019-07-23 | Children's Medical Center Corporation | Process for forming microbubbles with high oxygen content and uses thereof |
KR102157909B1 (ko) | 2012-04-30 | 2020-09-18 | 지이 헬스케어 에이에스 | 용기를 발포성 조성물로 충전시키는 방법 |
CN103099780B (zh) * | 2012-12-11 | 2015-11-25 | 中国科学院深圳先进技术研究院 | 制备含氢气微泡水溶液的方法,其产品及应用 |
WO2014096165A2 (en) * | 2012-12-21 | 2014-06-26 | Bracco Suisse Sa | Gas-filled microvesicles |
US10577554B2 (en) | 2013-03-15 | 2020-03-03 | Children's Medical Center Corporation | Gas-filled stabilized particles and methods of use |
US10926112B2 (en) | 2013-07-03 | 2021-02-23 | Koninklijke Philips N.V. | Devices and methods for the ultrasound treatment of ischemic stroke |
KR101520443B1 (ko) * | 2013-11-06 | 2015-05-14 | 서울대학교산학협력단 | 유기 마이크로 버블 복합 입자의 제조 방법, 유기 마이크로 버블 복합 입자 및 조영제 |
KR101595795B1 (ko) * | 2014-03-19 | 2016-02-22 | (주)아이엠지티 | 약물을 함유한 나노입자가 결합된 이중-목적 pat/초음파 조영제 및 이의 제조방법 |
EP3127915B1 (en) | 2014-04-02 | 2020-08-26 | Nitto Denko Corporation | Rbp-derived targeting molecule and utilization thereof |
ES2726924T3 (es) | 2014-12-18 | 2019-10-10 | Bracco Suisse Sa | Formulación de microvesículas dirigidas rellenas de gas |
US10537622B2 (en) | 2014-12-22 | 2020-01-21 | Bracco Suisse S.A. | Gas-filled microvesicles for use as vaccine |
CN104622848A (zh) * | 2015-02-13 | 2015-05-20 | 西安交通大学 | 一种等离子体活化包膜微气泡 |
US10688199B2 (en) * | 2015-06-10 | 2020-06-23 | Teikyo University | Theranostic bubble preparation (TB), and method for using same |
EP3386589B1 (en) | 2015-12-09 | 2022-02-09 | Koninklijke Philips N.V. | Interleaved beam pattern for sonothrombolysis and other vascular acoustic resonator mediated therapies |
CN108883204A (zh) * | 2016-02-01 | 2018-11-23 | 博信生物科技股份有限公司 | 脂质微泡及其制备方法 |
KR20180104166A (ko) | 2016-02-09 | 2018-09-19 | 브라코 스위스 에스.에이. | 셀렉틴 표적화를 위한 재조합 키메라 단백질 |
CN107233583B (zh) * | 2016-03-29 | 2020-04-24 | 北京飞锐达医疗科技有限公司 | 一种具有超长持续时间的超声造影剂及其制备方法 |
WO2017214468A1 (en) * | 2016-06-09 | 2017-12-14 | Tien Yang Der | Nanodroplet compositions for the efficient delivery of anti-cancer agents |
WO2018041906A1 (en) | 2016-08-30 | 2018-03-08 | Bracco Suisse Sa | Preparation of size-controlled microparticles |
KR102052945B1 (ko) | 2016-09-29 | 2019-12-11 | 연세대학교 산학협력단 | 나노 조영제의 재분산 방법 |
WO2018160752A1 (en) | 2017-02-28 | 2018-09-07 | Children's Medical Center Corporation | Stimuli-responsive particles encapsulating a gas and methods of use |
WO2018198008A1 (en) | 2017-04-24 | 2018-11-01 | Abdolahad Mohammad | In-situ microbubbles generation for ultrasonic biomedical applications |
KR20210003737A (ko) * | 2018-03-07 | 2021-01-12 | 브라코 스위스 에스.에이. | 크기-제어 미세소포의 제조 |
FR3082422B1 (fr) * | 2018-06-14 | 2021-01-22 | Univ D'avignon Et Des Pays De Vaucluse | Emulsion pour la chirurgie d'ablation ultrasonore |
JP2022513886A (ja) | 2018-12-21 | 2022-02-09 | ブラッコ・スイス・ソシエテ・アノニム | リガンドを含むガス充填微小胞 |
KR102180629B1 (ko) * | 2018-12-24 | 2020-11-20 | 서강대학교 산학협력단 | 세포외 소포 기반의 초음파 조영제용 마이크로버블 및 이의 제조방법 |
CN110051630A (zh) * | 2019-02-03 | 2019-07-26 | 彭盛 | 一种载氧聚合物微泡及其制备方法 |
US20200360289A1 (en) | 2019-05-15 | 2020-11-19 | Bracco Suisse Sa | Freeze-dried product and gas-filled microvesicles suspension |
US11717570B2 (en) | 2019-05-15 | 2023-08-08 | Bracco Suisse Sa | Gas-filled microvesicles |
KR20220044244A (ko) * | 2019-06-05 | 2022-04-07 | 마이크로바스큘러 테라퓨틱스 엘엘씨 | 혈전증 및 혈관 플라크의 검출 및 치료하기 위한 조성물 및 방법 |
US20220409749A1 (en) * | 2019-06-25 | 2022-12-29 | Bracco Suisse Sa | Freeze-dried composition for preparing calibrated gas-filled microvesicles |
DK3990032T3 (da) * | 2019-06-25 | 2023-12-18 | Bracco Suisse Sa | Frysetørret sammensætning til fremstilling af kalibrerede gasfyldte mikrovesikler |
JP7321015B2 (ja) | 2019-07-12 | 2023-08-04 | 株式会社コーセー | バイセル構造体を含有する組成物 |
WO2021086806A1 (en) * | 2019-10-29 | 2021-05-06 | The Chemist's Cabinet, Llc | Cannabinoid products with high bioavailability |
CA3165200A1 (en) | 2020-02-11 | 2021-08-19 | Victor Jeannot | Gas-filled microvesicles for therapeutic use |
CN111939122B (zh) * | 2020-08-06 | 2022-04-05 | 温州医科大学 | 肺动脉高压靶向治疗的速效制剂 |
CN113041365B (zh) * | 2021-03-25 | 2022-04-08 | 黑龙江中医药大学 | 一种增强颈动脉硬化超声诊断的靶向超声造影剂及其制备方法 |
WO2024033540A1 (en) * | 2022-08-12 | 2024-02-15 | Bracco Suisse Sa | Freeze-dried nanodroplets with fluorinated compound |
Family Cites Families (77)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4276885A (en) * | 1979-05-04 | 1981-07-07 | Rasor Associates, Inc | Ultrasonic image enhancement |
AU2698684A (en) * | 1983-07-01 | 1985-02-07 | Battelle Memorial Institute | Polypeptide biodegradable et son utilisation pour le relargage progressif de medicaments |
SE463651B (sv) * | 1983-12-21 | 1991-01-07 | Nycomed As | Diagnostikum och kontrastmedel |
ATE60340T1 (de) * | 1984-10-19 | 1991-02-15 | Battelle Memorial Institute | Durch mikroorganismen abbaubares polypeptid und seine verwendung fuer die fortschreitende abgabe von medikamenten. |
CH667874A5 (fr) * | 1985-12-19 | 1988-11-15 | Battelle Memorial Institute | Polypeptide synthetique biodegradable et son utilisation pour la preparation de medicaments. |
IE61591B1 (en) | 1987-12-29 | 1994-11-16 | Molecular Biosystems Inc | Concentrated stabilized microbubble-type ultrasonic imaging agent and method of production |
US5776429A (en) | 1989-12-22 | 1998-07-07 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Method of preparing gas-filled microspheres using a lyophilized lipids |
US5088499A (en) * | 1989-12-22 | 1992-02-18 | Unger Evan C | Liposomes as contrast agents for ultrasonic imaging and methods for preparing the same |
US6088613A (en) * | 1989-12-22 | 2000-07-11 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Method of magnetic resonance focused surgical and therapeutic ultrasound |
US5733572A (en) * | 1989-12-22 | 1998-03-31 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Gas and gaseous precursor filled microspheres as topical and subcutaneous delivery vehicles |
US6146657A (en) * | 1989-12-22 | 2000-11-14 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Gas-filled lipid spheres for use in diagnostic and therapeutic applications |
US5922304A (en) * | 1989-12-22 | 1999-07-13 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Gaseous precursor filled microspheres as magnetic resonance imaging contrast agents |
US5580575A (en) | 1989-12-22 | 1996-12-03 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Therapeutic drug delivery systems |
US5556610A (en) * | 1992-01-24 | 1996-09-17 | Bracco Research S.A. | Gas mixtures useful as ultrasound contrast media, contrast agents containing the media and method |
IN172208B (ru) | 1990-04-02 | 1993-05-01 | Sint Sa | |
US5445813A (en) * | 1992-11-02 | 1995-08-29 | Bracco International B.V. | Stable microbubble suspensions as enhancement agents for ultrasound echography |
AU636481B2 (en) * | 1990-05-18 | 1993-04-29 | Bracco International B.V. | Polymeric gas or air filled microballoons usable as suspensions in liquid carriers for ultrasonic echography |
US5562099A (en) * | 1990-10-05 | 1996-10-08 | Massachusetts Institute Of Technology | Polymeric microparticles containing agents for imaging |
US5487390A (en) * | 1990-10-05 | 1996-01-30 | Massachusetts Institute Of Technology | Gas-filled polymeric microbubbles for ultrasound imaging |
JP2974083B2 (ja) | 1990-11-26 | 1999-11-08 | 株式会社 小松製作所 | 静油圧―機械式伝動機の制御装置 |
JPH06511481A (ja) * | 1991-07-05 | 1994-12-22 | ユニバーシティ オブ ロチェスター | 気泡を取り込む超微小非凝集多孔質粒子 |
IL104084A (en) * | 1992-01-24 | 1996-09-12 | Bracco Int Bv | Sustainable aqueous suspensions of pressure-resistant and gas-filled blisters, their preparation, and contrast agents containing them |
DE4208527A1 (de) | 1992-03-17 | 1993-09-23 | Max Planck Gesellschaft | Liposomen mit negativer ueberschussladung |
WO1994001140A1 (de) * | 1992-07-03 | 1994-01-20 | Byk Gulden Lomberg Chemische Fabrik Gmbh | Echokontrastmittelzubereitung |
US5464696A (en) * | 1992-08-13 | 1995-11-07 | Bracco International B.V. | Particles for NMR imaging |
AU694135B2 (en) * | 1993-07-30 | 1998-07-16 | Imcor Pharmaceutical Company | Stabilized microbubble compositions for ultrasound |
US5798091A (en) * | 1993-07-30 | 1998-08-25 | Alliance Pharmaceutical Corp. | Stabilized gas emulsion containing phospholipid for ultrasound contrast enhancement |
US7083572B2 (en) * | 1993-11-30 | 2006-08-01 | Bristol-Myers Squibb Medical Imaging, Inc. | Therapeutic delivery systems |
JPH10508284A (ja) * | 1993-12-15 | 1998-08-18 | ブラッコ リサーチ ソシエテ アノニム | 超音波造影媒体、この媒体を含む造影剤及び方法 |
NO940711D0 (no) | 1994-03-01 | 1994-03-01 | Nycomed Imaging As | Preparation of gas-filled microcapsules and contrasts agents for diagnostic imaging |
EP0699445A3 (en) * | 1994-08-04 | 1996-04-17 | Gakko Houjin Toin Gakuen | Process for the preparation of an ultrasonic microbubble contrast agent with a surfactant |
GB9417941D0 (en) | 1994-09-06 | 1994-10-26 | Nycomed Imaging As | Improvements in or relating to contrast agents |
EP0783295A1 (en) | 1994-09-23 | 1997-07-16 | The Liposome Company, Inc. | Method of producing a lyophilized liposome product |
US6333021B1 (en) * | 1994-11-22 | 2001-12-25 | Bracco Research S.A. | Microcapsules, method of making and their use |
IL116328A (en) * | 1994-12-16 | 1999-09-22 | Bracco Research Sa | Frozen suspension of gas microbubbles in frozen aqueous carrier for use as contrast agent in ultrasonic imaging |
US6139819A (en) * | 1995-06-07 | 2000-10-31 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Targeted contrast agents for diagnostic and therapeutic use |
US5833948A (en) | 1995-06-15 | 1998-11-10 | Bracco Research S.A. | Blood-pool imaging composition comprising micelles containing a lipophilic chelating agent and a non-ionic surfactant |
CN1092988C (zh) * | 1996-02-19 | 2002-10-23 | 奈科姆成像有限公司 | 热稳定的造影剂 |
EE04224B1 (et) | 1996-02-19 | 2004-02-16 | Nycomed Imaging As | Gaasi mikromullide dispersioon ja selle lüofiliseeritud jääk, ultraheli kontrastaine ja selle valmistamismeetod, mikromulle eraldav maatriks ning ultraheli kontrastaine kompositsioon |
US6165442A (en) * | 1996-02-19 | 2000-12-26 | Nycomed Imaging As | Thermally stabilized ultrasound contrast agent |
GB2330505B (en) | 1996-07-22 | 2001-02-07 | Seagate Technology | Phase detector estimator |
CZ28999A3 (cs) * | 1996-08-02 | 1999-07-14 | Nycomed Imaging As | Použití kontrastního prostředku |
AP885A (en) * | 1996-10-21 | 2000-11-03 | Nycomed Imaging As | Ultrasonic visualisation using a gas containing contrast agent. |
WO1998018501A2 (en) | 1996-10-28 | 1998-05-07 | Marsden, John, Christopher | Improvements in or relating to diagnostic/therapeutic agents |
HUP0000357A2 (hu) | 1996-10-28 | 2000-06-28 | Nycomed Imaging A/S | Továbbfejlesztett diagnosztikai/terápiás szerek |
US6331289B1 (en) * | 1996-10-28 | 2001-12-18 | Nycomed Imaging As | Targeted diagnostic/therapeutic agents having more than one different vectors |
GB9701237D0 (en) | 1997-01-22 | 1997-03-12 | Nycomed Imaging As | Improvements in or relating to contrast agents |
US6120751A (en) | 1997-03-21 | 2000-09-19 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Charged lipids and uses for the same |
US6143276A (en) | 1997-03-21 | 2000-11-07 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Methods for delivering bioactive agents to regions of elevated temperatures |
US6416740B1 (en) | 1997-05-13 | 2002-07-09 | Bristol-Myers Squibb Medical Imaging, Inc. | Acoustically active drug delivery systems |
US6245318B1 (en) * | 1997-05-27 | 2001-06-12 | Mallinckrodt Inc. | Selectively binding ultrasound contrast agents |
GB9717589D0 (en) * | 1997-08-19 | 1997-10-22 | Nycomed Imaging As | Improvements in or relating to contrast agents |
JP2001520207A (ja) | 1997-10-21 | 2001-10-30 | ニユコメド・イメージング・アクシエセルカペト | 微小血管に標的設定された造影剤および血管拡張剤による超音波造影 |
US20020169138A1 (en) * | 1997-10-24 | 2002-11-14 | Southern Research Institute | Delivery vehicles for bioactive agents and uses thereof |
US20010003580A1 (en) | 1998-01-14 | 2001-06-14 | Poh K. Hui | Preparation of a lipid blend and a phospholipid suspension containing the lipid blend |
NZ506051A (en) | 1998-02-09 | 2003-08-29 | Bracco Res S | Targeted delivery of biologically active media |
GB9808599D0 (en) | 1998-04-22 | 1998-06-24 | Nycomed Imaging As | Improvements in or realting to contrast agents |
GB9809084D0 (en) | 1998-04-28 | 1998-06-24 | Nycomed Imaging As | Improvements in or relating to diagnostic/therapeutic agents |
FR2782006B1 (fr) * | 1998-08-07 | 2002-04-19 | Gattefosse Ets Sa | Composition a liberation prolongee apte a former une micro-emulsion |
JP2000143550A (ja) | 1998-11-10 | 2000-05-23 | Toin Gakuen | 超音波造影剤 |
DE10013850A1 (de) | 2000-03-15 | 2001-09-20 | Schering Ag | Gasgefüllte Mikrokapseln enthaltend funktionalisiertes Polyalkylcyanacrylat, sowie Verfahren zu deren Herstellung |
AU2002248222B2 (en) | 2000-12-23 | 2006-04-27 | Dyax Corp. | Fibrin binding polypeptides useful inter alia in medical imaging processes |
US6793626B2 (en) * | 2001-01-17 | 2004-09-21 | Fuji Photo Film Co., Ltd. | Ultrasonic scatterer, ultrasonic imaging method and ultrasonic imaging apparatus |
JP2002212108A (ja) | 2001-01-17 | 2002-07-31 | Fuji Photo Film Co Ltd | 超音波散乱体 |
US7179449B2 (en) * | 2001-01-30 | 2007-02-20 | Barnes-Jewish Hospital | Enhanced ultrasound detection with temperature-dependent contrast agents |
ES2243350T3 (es) * | 2001-01-31 | 2005-12-01 | Bracco International B.V. | Agente de contraste liofizable que comprende microburbujas de gas. |
WO2003005029A2 (en) | 2001-07-03 | 2003-01-16 | Governors Of The University Of Alberta | Magnetic nanoparticles for bioseparation application and methods for producing same |
CN1620314A (zh) | 2001-08-16 | 2005-05-25 | 布里斯托尔-迈尔斯斯奎布药品公司 | 气体微球脂质体复合体 |
WO2003074005A2 (en) | 2002-03-01 | 2003-09-12 | Dyax Corp. | Kdr and vegf/kdr binding peptides and their use in diagnosis and therapy |
EP1482987B1 (en) | 2002-03-01 | 2014-08-13 | Bracco Suisse SA | Multivalent constructs for therapeutic and diagnostic applications |
CA2489287C (fr) | 2002-06-19 | 2011-04-05 | Dimitrios Patsalaridis | Dispositif de support ancrable dans le sol |
WO2004083902A2 (en) * | 2002-10-25 | 2004-09-30 | Georgia Tech Research Corporation | Multifunctional magnetic nanoparticle probes for intracellular molecular imaging and monitoring |
US9364569B2 (en) | 2003-02-04 | 2016-06-14 | Bracco Suisse S.A. | Ultrasound contrast agents and process for the preparation thereof |
CA2547024C (en) | 2003-12-22 | 2013-12-17 | Bracco Research Sa | Gas-filled microvesicle assembly for contrast imaging |
EP1696965B1 (en) | 2003-12-22 | 2014-12-10 | Bracco Suisse SA | Assembly of gas-filled microvesicle with active component for contrast imaging |
CA2554239C (en) | 2004-01-20 | 2015-05-12 | Sunnybrook And Women's College Health Sciences Centre | High frequency ultrasound imaging using contrast agents |
CA2575677C (en) | 2004-08-18 | 2013-01-22 | Bracco Research Sa | Gas-filled microvesicles composition for contrast imaging |
-
2004
- 2004-02-03 US US10/544,123 patent/US9364569B2/en active Active
- 2004-02-03 EP EP04707586A patent/EP1590006B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2004-02-03 AU AU2004210221A patent/AU2004210221B2/en not_active Ceased
- 2004-02-03 MX MXPA05007730A patent/MXPA05007730A/es active IP Right Grant
- 2004-02-03 KR KR1020057013951A patent/KR101076053B1/ko active IP Right Grant
- 2004-02-03 JP JP2006502384A patent/JP4670083B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2004-02-03 CN CNB2004800029752A patent/CN100374165C/zh not_active Expired - Lifetime
- 2004-02-03 RU RU2005127634/15A patent/RU2345793C2/ru active
- 2004-02-03 DE DE602004029010T patent/DE602004029010D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2004-02-03 WO PCT/IB2004/000243 patent/WO2004069284A2/en active Application Filing
- 2004-02-03 AT AT04707586T patent/ATE480263T1/de active
- 2004-02-03 DK DK04707586.6T patent/DK1590006T3/da active
- 2004-02-03 CA CA2512454A patent/CA2512454C/en not_active Expired - Lifetime
- 2004-02-03 ES ES04707586T patent/ES2352087T3/es not_active Expired - Lifetime
-
2005
- 2005-07-14 IL IL169677A patent/IL169677A/en active IP Right Grant
- 2005-08-11 US US11/202,008 patent/US20060034770A1/en not_active Abandoned
- 2005-09-02 NO NO20054089A patent/NO331966B1/no not_active IP Right Cessation
-
2011
- 2011-03-03 US US13/039,838 patent/US20110236320A1/en not_active Abandoned
-
2012
- 2012-12-10 US US13/710,189 patent/US20130101522A1/en not_active Abandoned
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
АБЕЛЬСКАЯ И.С. и др. Клинические приложения контрастной ультразвуковой технологии (Материалы конференции Новые технологии в медицине: диагностика, лечение, реабилитация. - Минск: 21-22 ноября, 2002, т.1, 10-12). * |
Cited By (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2444296C2 (ru) * | 2010-03-24 | 2012-03-10 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Уральская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" (ГОУ ВПО УГМА Росздрава) | Способ использования суспензий наночастиц оксидов металлов в качестве контрастных веществ для ультразвуковой визуализации сердца и сосудов |
RU2485976C2 (ru) * | 2011-05-17 | 2013-06-27 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Сибирский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (ГОУ ВПО СибГМУ Минздравсоцразвития России) | Контрастное средство для ультразвуковой визуализации |
US10058616B2 (en) | 2012-02-10 | 2018-08-28 | Tlc Biopharmaceuticals, Inc. | Pharmaceutical compositions to reduce complications of ocular steroid |
WO2013188470A1 (en) * | 2012-06-11 | 2013-12-19 | The Regents Of The University Of California | Method and system for in vivo hydrogen peroxide detection with ultrasound |
US9713459B2 (en) | 2012-06-11 | 2017-07-25 | The Regents Of The University Of California | Method and system for in vivo hydrogen peroxide detection with ultrasound |
RU2803236C2 (ru) * | 2018-07-06 | 2023-09-11 | Бракко Суисс Са | Лиофилизированный состав для заполненных газом микровезикул |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
NO20054089D0 (no) | 2005-09-02 |
CN1744921A (zh) | 2006-03-08 |
CA2512454A1 (en) | 2004-08-19 |
DE602004029010D1 (de) | 2010-10-21 |
KR101076053B1 (ko) | 2011-10-21 |
KR20050096959A (ko) | 2005-10-06 |
ATE480263T1 (de) | 2010-09-15 |
ES2352087T3 (es) | 2011-02-15 |
CA2512454C (en) | 2012-10-30 |
EP1590006A2 (en) | 2005-11-02 |
DK1590006T3 (da) | 2010-12-20 |
US20060034770A1 (en) | 2006-02-16 |
US20130101522A1 (en) | 2013-04-25 |
US20110236320A1 (en) | 2011-09-29 |
US9364569B2 (en) | 2016-06-14 |
NO20054089L (no) | 2005-10-05 |
NO331966B1 (no) | 2012-05-14 |
WO2004069284A2 (en) | 2004-08-19 |
JP4670083B2 (ja) | 2011-04-13 |
AU2004210221A1 (en) | 2004-08-19 |
EP1590006B1 (en) | 2010-09-08 |
WO2004069284A3 (en) | 2004-11-25 |
US20060051297A1 (en) | 2006-03-09 |
CN100374165C (zh) | 2008-03-12 |
AU2004210221B2 (en) | 2008-11-20 |
RU2005127634A (ru) | 2006-01-20 |
IL169677A (en) | 2011-07-31 |
JP2006520754A (ja) | 2006-09-14 |
MXPA05007730A (es) | 2006-01-31 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2345793C2 (ru) | Ультразвуковые контрастные вещества и способ их получения | |
US20070128117A1 (en) | Ultrasound contrast agents and process for the preparation thereof | |
JP5513708B2 (ja) | 造影イメージング用の気体封入マイクロベシクル・アセンブリー | |
EP2061517B1 (en) | Gas-filled microvesicles with polymer-modified lipids | |
US11071792B2 (en) | Targeted gas-filled microvesicles formulation | |
US20080008658A1 (en) | Contrast Agent Formulations for the Visualization of the Lymphatic System | |
EP2934740B1 (en) | Gas-filled microvesicles | |
EP3990033A1 (en) | Freeze-dried composition for preparing calibrated gas-filled microvesicles |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PC41 | Official registration of the transfer of exclusive right |
Effective date: 20121026 |
|
PD4A | Correction of name of patent owner |