RU2325184C2 - Улучшенные везикулы наружной мембраны бактерий - Google Patents

Улучшенные везикулы наружной мембраны бактерий Download PDF

Info

Publication number
RU2325184C2
RU2325184C2 RU2005108994/15A RU2005108994A RU2325184C2 RU 2325184 C2 RU2325184 C2 RU 2325184C2 RU 2005108994/15 A RU2005108994/15 A RU 2005108994/15A RU 2005108994 A RU2005108994 A RU 2005108994A RU 2325184 C2 RU2325184 C2 RU 2325184C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
outer membrane
vesicles
bacteria
protein
centrifugation
Prior art date
Application number
RU2005108994/15A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2005108994A (ru
Inventor
Мари граци ПИЦЦА (IT)
Марияграция ПИЦЦА
Давиде СЕРРУТО (IT)
Давиде СЕРРУТО
Рини РАППУОЛИ (IT)
Рини РАППУОЛИ
Original Assignee
Чирон Срл
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=9943238&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RU2325184(C2) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Чирон Срл filed Critical Чирон Срл
Publication of RU2005108994A publication Critical patent/RU2005108994A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2325184C2 publication Critical patent/RU2325184C2/ru

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/095—Neisseria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/06—Lysis of microorganisms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N13/00—Treatment of microorganisms or enzymes with electrical or wave energy, e.g. magnetism, sonic waves
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55555—Liposomes; Vesicles, e.g. nanoparticles; Spheres, e.g. nanospheres; Polymers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
    • C07K14/22—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Neisseriaceae (F)

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Manufacturing Of Micro-Capsules (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Materials For Medical Uses (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Abstract

Данное изобретение относится к медицине и фармакологии и может быть использовано для изготовления лекарственного средства для усиления иммунного ответа у пациентов. Настоящий способ получения препарата везикул наружной мембраны из бактерий рода Neisseria предусматривает разрушение оболочки бактерий и сбор везикул наружной мембраны в присутствии ≤0,05% дезоксихолатного детергента, причем бактерии в избыточном количестве экспрессируют TbpA. Изобретение позволяет сохранить важные бактериальные иммуногенные компоненты, в частности (i) защитный поверхностный белок NspA, (ii) белок '287' и (iii) белок '741'. 4 н. и 13 з.п. ф-лы, 2 табл., 3 ил.

Description

Все приведенные в настоящем описании документы полностью включены в него в качестве ссылки.
Область техники
Данное изобретение относится к области получения везикул в целях иммунизации.
Предшествующий уровень техники
Одним из различных подходов к иммунизации против инфекции N.meningitidis является применение везикул наружной мембраны (OMV). Эффективная вакцина OMV против серологической группы В была изготовлена Норвежским национальным институтом общественного здравоохранения [см. ссылку 1], но, хотя указанная вакцина безопасна и предотвращает заболевание менингитом В, ее эффективность ограничена штаммом, используемым для изготовления вакцины.
Вакцина "RIVM" основана на содержащих везикулы шести различных подтипах PorA, и было показано, что она иммуногенна у детей на II фазе клинических испытаний [2].
В ссылке 3 раскрыта вакцина против различных патогенных серологических типов менингококка серологической группы В на основе OMV, которые сохраняют белковый комплекс 65 кДа. В ссылке 4 раскрыта вакцина, содержащая OMV из штаммов менингококков, полученных методами генной инженерии, причем OMV содержали по меньшей мере один белок наружной мембраны класса 1 (ОМР), но не содержали ОМР класса 2/3. В ссылке 5 раскрыты OMV, содержащие ОМР, которые имеют мутации в их поверхностных петлях, и OMV, включающие в себя производные менингококкового липополисахарида (LPS).
В ссылке 6 раскрыты композиции, включающие в себя OMV с добавками белков, связывающих трансферрин (например, TbpA и TbpB), и/или Cu,Zn-супероксиддисмутазы. В ссылке 7 раскрыты композиции, включающие в себя OMV с добавками различных белков. В ссылке 8 раскрыты препараты везикул мембраны, полученные из N.meningitidis модифицированным геном fur.
Так же как серологическая группа В N.meningitidis, везикулы были получены для других бактерий. В ссылке 9 раскрыт способ получения вакцин на основе OMV для менингококка серологической группы А. В ссылках 10 и 11 раскрыты везикулы из N.gonorrhoeae. В ссылке 12 раскрыты препараты из N.Lactamica. Везикулы также получали из Moraxella catarrhalis [13, 14], Shigella flexneri [15, 16], Pseudomonas aeruginosa [15, 16], Porphyromonas gingivalis [17], Treponema pallidum [18], Haemophilus influenzae [19 и 20] и Helicobacter pylori [21].
Один недостаток препаратов везикул бактерий состоит в том, что отсутствуют важные защитные антигены. Для сохранения антигенов, таких как NspA, в препаратах OMV, в ссылке 20 речь идет о том, что экспрессия nspA должна подвергаться стимулирующей регуляции сопутствующим «выбиванием» porA и cps. Целью изобретения является предоставление дополнительных и улучшенных препаратов везикул вместе со способами их изготовления. В частности, целью изобретения является предоставление везикул, которые сохраняют важные бактериальные иммуногенные компоненты из N.meningitidis.
Описание изобретения
Способы с применением препарата менингококковых OMV включают в себя использование детергента во время разрушения бактериальной мембраны [например, см. ссылку 22, где используется дезоксихолатный детергент]. Изобретение основано на удивительном открытии, что разрушение мембраны по существу в отсутствие детергента приводит к получению OMV, которые сохраняют важные бактериальные иммуногенные компоненты, в частности (i) защитный поверхностный белок NspA, (ii) белок '287' и (iii) белок '741'.
Поэтому изобретение предоставляет способ изготовления препарата везикул наружной мембраны из бактерии, где бактериальную мембрану разрушают по существу в отсутствие детергента. Предоставляются также препараты OMV, которые можно получить способами согласно изобретению.
Для получения везикул NspA+ve способ согласно изобретению гораздо проще, чем выполнение множественных генетических манипуляций, как описано в ссылке 20.
Способ согласно изобретению обычно должен включать в себя следующие основные этапы: (а) обработку бактериальных клеток по существу в отсутствие детергента; (b) центрифугирование композиции, полученной на этапе (а), для отделения везикул наружной мембраны от обработанных клеток и клеточного дебриса и сбор надосадочной жидкости; (с) выполнение высокоскоростного центрифугирования надосадочной жидкости, полученной на этапе (b), и сбор везикул наружной мембраны в осадке в пробирке после центрифугирования; (d) повторное диспергирование в пробирке полученного после центрифугирования осадка с этапа (с) в буфере; (е) выполнение второго высокоскоростного центрифугирования в соответствии с этапом (с), сбор везикул наружной мембраны в осадке, полученном в пробирке после центрифугирования, (f) повторное диспергирование осадка, полученного в пробирке после центрифугирования на этапе (е) в водной среде.
Способ может также включать в себя следующие этапы: (g) выполнение стерильной фильтрации по меньшей мере через 2 фильтра с уменьшающимся размером пор повторно диспергированной композиции, полученной на этапе (f); и (h) необязательно включение композиции, полученной на этапе (g), в фармацевтически приемлемый носитель и/или композицию адъюванта.
Этап (а) дает получение везикул наружной мембраны бактерий, и везикулы в целом включают в себя компоненты наружной мембраны по существу в их нативной форме. Преимущество заключается в сохранении компонентов NspA, '287' и '741'.
Этап (b) должен обычно включать в себя центрифугирование примерно при 5000-10000 g в течение до 1 ч.
Этапы (с) и (е) должны обычно включать центрифугирование примерно при 35000-100000 g в течение периода вплоть до 2 ч.
Этапы центрифугирования предпочтительно выполняются при температуре от 2 до 8°С.
Любой подходящий буфер можно использовать на этапе (d), например Трис-буфер, фосфатный буфер, гистидиновый буфер и т.д.
Этап (f) может также включать в себя использование буфера, который может представлять собой такой же буфер, который используется на этапе (d), или может просто включать в себя использование воды (например, воды для инъекций).
Этап (g) предпочтительно заканчивается фильтрованием через фильтр с размером пор примерно 0,2 мкм.
Изобретение также представляет собой композицию везикул N.meningitidis, отличающуюся тем, что везикулы содержат (i) белок NspA, (ii) белок '287' и (iii) белок '741'.
Бактерия
Бактерия, из которой получают OMV, может быть грамположительной, но она предпочтительно является грамотрицательной. Бактерия может быть из рода Moraxella, Shigella, Pseudomonas, Treponema, Porphyromonas или Helicobacter (предпочтительные виды см. выше), но предпочтительно она из рода Neisseria. Предпочтительными видами Neisseria являются N.meningitidis и N.gonorrhoeae. В пределах N.meningitidis можно использовать любую из серологических групп А, С, W135 и Y, но предпочтительно получать везикулы из серологической группы В. Предпочтительными штаммами в пределах серогруппы В являются МС58, 2996, Н4476 и 394/98.
Для снижения пирогенной активности предпочтительно, чтобы бактерия имела низкие уровни эндотоксина (LPS). Подходящие мутантные бактерии известны, например, мутантная Neisseria [23] и мутантная Helicobacter [24]. Способ получения наружных мембран с истощенными запасами LPS грамотрицательных бактерий раскрыты в ссылке 25.
Бактерия может представлять собой бактерию дикого типа или она может представлять собой рекомбинантную бактерию. Предпочтительные рекомбинантные бактерии избыточно экспрессируют (относительно соответствующего штамма дикого типа) иммуногены, такие как NspA, '287' и '741', TbpA, TbpB, супероксиддисмутаза [6] и т.д. Бактерия может экспрессировать более чем один белок наружной мембраны класса I PorA, например, 2, 3, 4, 5 или 6 подтипов PorA: Р1.7,16; Р1.5,2; Р1.19,15; Р1.5 с,10; Р1.12,13; и Р1.7h,4 [например, ссылки 26, 27].
Способ согласно изобретению обычно должен включать в себя начальный этап культивирования бактерий, необязательно с последующим этапом концентрирования культивированных клеток.
Разрушение мембраны
Разрушение мембраны для образования везикул выполняется по существу в отсутствие детергента.
В частности, разрушение мембраны может выполняться по существу в отсутствие дезоксихолатного детергента, причем присутствие других детергентов необязательно.
Разрушение мембраны может выполняться по существу в отсутствие ионного детергента, причем присутствие неионного детергента необязательно. Альтернативно, оно может выполняться по существу в отсутствие неионного детергента, причем присутствие ионного детергента необязательно. В некоторых вариантах реализации не присутствует ни ионный, ни неионный детергент.
Этапы после разрушения мембраны и образования везикул могут включать в себя использование детергента. Таким образом, способ, при котором разрушение мембраны происходит в отсутствие детергента, но детергент добавляется к полученным везикулам позднее, входит в объем данного изобретения.
Термин «по существу в отсутствие» означает, что рассматриваемый детергент присутствует в концентрации не более чем 0,05% (например, ≤0,025%, ≤0,015%, ≤0,010%, ≤0,005%, ≤0,002%, ≤0,001% или даже 0%) во время разрушения мембраны. Таким образом, способы, где микроколичества детергента присутствуют во время получения везикул, не исключаются.
Разрушение мембраны в отсутствие детергента может выполняться на интактных бактериях с использованием физических методик, например, обработки ультразвуком, гомогенизации, микрофлюидизации, кавитации, осмотического шока, помола, французского пресса, перемешивания и т.д.
Везикулы
Способы согласно изобретению продуцируют везикулы наружной мембраны. OMV получают из наружной мембраны культивированных бактерий. Их можно получить из бактерий, выращенных в бульоне или в твердой культуральной среде, предпочтительно путем отделения бактериальных клеток от культуральной среды (например, путем фильтрации или высокоскоростного центрифугирования для осаждения клеток), лизирования клеток (без детергента) и отделения фракции наружной мембраны от цитоплазматических молекул (например, путем фильтрации, дифференциального осаждения или агрегации наружных мембран и/или OMV, способами аффинного разделения с использованием лигандов, которые специфически распознают молекулы наружной мембраны, или высокоскоростного центрифугирования, которое осаждает наружные мембраны и/или OMV.
OMV можно отличить от микровезикул (MV [28]) и нативных OMV ('NOMV' [66]), которые представляют собой естественно встречающиеся везикулы мембраны, которые спонтанно образуются во время роста бактерий, и которые высвобождаются в культуральную среду. MV можно получить путем культивирования Neisseria в бульонной культуральной среде путем отделения цельных клеток от бульонной культуральной среды (например, путем фильтрации или низкоскоростного центрифугирования для осаждения только клеток, а не более мелких везикул), а затем сбора MV, которые присутствуют в среде, лишенной клеток (например, путем фильтрации, дифференциального осаждения или агрегации MV, высокоскоростного центрифугирования для осаждения MV). Штаммы для использования при продукции MV можно в целом отобрать на основании количества MV, продуцированного в культуре. В ссылках 29 и 30 описаны Neisseria с высокой продукцией MV.
Сохраненные бактериальные иммуногенные компоненты
По существу отсутствующий детергент в способах согласно изобретению приводит к получению препаратов везикул, которые сохраняют иммуногенные компоненты бактериальной поверхности, которые при использовании основанных на детергентах способов предшествующего уровня техники иначе были бы утрачены или содержание которых уменьшилось бы. В N.meningitidis 3 иммуногена, которые преимущественно сохраняются при применении изобретения, включают в себя, не ограничиваясь ими: (1) NspA; (2) белок '741' и (3) белок '287'.
NspA (белок А поверхности Neisseria) раскрыт в ссылках 31-37 и в виде последовательностей SEQ ID 4008-4033 из ссылки 38. Это перспективная вакцина для предотвращения заболевания, вызванного менингококками. Она очень сохранна у различных штаммов. Однако несмотря на существовавшую надежду, в настоящее время считается, что NspA сам по себе не будет адекватным защитным антигеном, и его нужно будет вводить с дополнительными антигенами [например, ссылка 36 и пример 11 из ссылки 38]. Было обнаружено, что NspA удалялся при использовании способов получения предшествующего уровня техники на основе детергента. Однако в соответствии с настоящим изобретением, NspA может сохраняться в везикулах. Такие везикулы NspA+ve имеют преимущество, потому что комбинацию двух известных активных иммуноглобулинов (т.е. везикул + NspA) получают в одном способе при усилении каждым иммуногеном эффективности другого.
Белок '741' раскрыт в виде 'NMB1870' в ссылке 39 (GenBank: AAF2204, GI:7227128). Он также раскрыт в ссылках 40 и 41. Он вызывает продукцию сильных бактерицидных антител. Было обнаружено, что белок '741' частично удаляется в носителях, полученных способами на основе детергентов предшествующего уровня техники. Однако в соответствии с настоящим изобретением, '741' может сохраняться в везикулах. Такие везикулы NspA+ve имеют преимущество, потому что комбинацию двух известных активных иммуноглобулинов (т.е. везикул+741) получают в едином процессе, при усилении каждым иммуногеном эффективности другого.
Белок '287' раскрыт под видом 'NMB2132' в ссылке 39 (GenBank: AAF2240, GI:7227388). Он также раскрыт в ссылках 40 и 42. Он вызывает продукцию сильных бактерицидных антител. Белок '287' обычно не присутствует в везикулах, полученных способами на основе детергентов предшествующего уровня техники, и ранее предлагалось, что для предотвращения его удаления к препаратам OMV можно добавлять 287 [43]. Однако в соответствии с настоящим изобретением, '287' может сохраняться в везикулах. Такие везикулы 287+ve имеют преимущество, потому что комбинацию двух известных активных иммуноглобулинов (т.е. везикул + 287) получают в едином процессе, при усилении каждым иммуногеном эффективности другого.
Предпочтительный NspA (а) имеет по меньшей мере идентичность последовательности α% с аминокислотной последовательностью GI:1518522 и/или (b) включает в себя фрагмент по меньшей мере χ аминокислот из аминокислотной последовательности GI:1518522. Предпочтительный '741' (а) имеет по меньшей мере идентичность последовательности b% с аминокислотной последовательностью GI:7227128 и/или (b) включает в себя фрагмент по меньшей мере из χ аминокислот из аминокислотной последовательности GI:7227128. Предпочтительный '287' (а) имеет по меньшей мере идентичность последовательности с% с аминокислотной последовательностью GI:7227388 и/или (b) включает в себя фрагмент по меньшей мере из χ аминокислот из аминокислотной последовательности GI:7227388. Величины а, b и с независимы друг от друга, но каждая величина составляет по меньшей мере 70 (например, 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5 или 100). Величины x, y и z независимы друг от друга, но каждая величина составляет, по меньшей мере, 8 (например, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 25, 30, 35, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 150, 200, 250 и т.д.). Фрагменты предпочтительно включают в себя эпитопы.
Предпочтительные белки NspA, 287 и 741 по существу сохраняют способность белков дикого типа (как обнаружено в интактных бактериях) вызывать продукцию бактерицидных антител у пациентов.
Иммуногенные фармацевтические композиции
Способ согласно изобретению обеспечивает получение везикул. Для введения пациенту везикулы предпочтительно составлены в виде иммуногенных композиций, а предпочтительнее, в виде композиций, подходящих для использования в качестве вакцины для человека (например, детей или взрослых). Вакцины согласно изобретению могут быть или профилактическими (т.е. для предотвращения инфекции), или терапевтическими (т.е. для лечения заболевания после инфекции), но обычно профилактическими.
Композиция согласно изобретению является предпочтительно стерильной.
Композиция согласно изобретению является предпочтительно лишенной пирогенов.
Композиция согласно изобретению в целом имеет рН от 6,0 до 7,0, предпочтительнее, от 6,3 до 6,9, например, 6,6±0,2. Композиция предпочтительно забуферена при данном рН.
Другие компоненты, подходящие для введения человеку, раскрыты в ссылке 44.
Композиция должна в целом включать в себя адъювант. Предпочтительные адъюванты для усиления эффективности композиции включают в себя, не ограничиваясь ими, (А) MF59 (5% Squalene, 0,5% Tween 80 и 0,5% Span 85, составленные в субмикронные частицы с использованием микрофлюидизаторов) [см. главу 10 ссылки 45; см. также ссылку 46]; (В) микрочастицы (т.е. частицы диаметром от ~100 нм до ~150 мкм, предпочтительнее, диаметром от ~200 нм до ~30 мкм, а наиболее предпочтительно, диаметром от ~500 нм до ~10 мкм), образованные из материалов, которые являются биологически разлагаемыми и нетоксичными (например, поли(α-гидроксикислоту), полигидроксимасляную кислоту, сложный полиортоэфир, полиангидрид, поликапролактон и т.д.), причем предпочтительнее поли(лактид-когликолид), необязательно имеющий заряженную поверхность (например, путем добавления катионного, анионного или неионного детергента, такого как SDS (отрицательного) или СТАВ (положительного) [например, ссылки 47 и 48]); [см. главу 23 ссылки 45], (С) липосомы [см. главы 13 и 14 ссылки 45]; (D) ISCOM [см. главу 23 ссылки 45], которые могут быть лишены дополнительного детергента [49]; (E) SAF, содержащий 10% Squalane, 0,4% Tween 80, 5% плюроник-блок-полимер L121 и thr-MDP, или микрофлюидизированный в субмикронную эмульсию, или перемешанный в вихревой мешалке для создания эмульсии с частицами большего размера [см. главу 12 ссылки 45]; (F) систему адъюванта Ribi™ (RAS), (Ribi Immunochem), содержащую 2% Squalane, 0,2% Tween 80, и один или несколько компонентов стенок бактериальных клеток из группы, состоящей из монофосфориллипида А (MPL), димиколата трегалозы (TDM) и каркаса клеточной стенки (CWS), предпочтительно, MPL+CWS (Detox™); (G) адъюванты сапонина, такие как QuilA или QS21 [см. главу 22 ссылки 45], также известные как Stimulon™; (H) хитозан [например, 50]; (I) полный адъювант Фрейнда (CFA) и неполный адъювант Фрейнда (IFA); (J) цитокины, такие как интерлейкины (например, IL-1, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-12 и т.д.), интерфероны (например, интерферон-γ), колониестимулирующий фактор макрофагов, фактор некроза опухоли и т.д. [см. главы 27 и 28 ссылки 45]; (K) сапонин (например, QS21)+3dMPL+IL-12 (необязательно + стерин) [51]; (L) монофосфориллипид А (MPL) или 3-О-дезацилированный MPL (3dMPL) [например, глава 21 ссылки 45]; (М) комбинации 3dMPL, например, с QS21 и/или эмульсиями масло-в-воде [52]; (N) олигонуклеотиды, содержащие мотивы CpG [53], т.е. содержащие по меньшей мере один динуклеотид CG, с 5-метилцитозином, необязательно используемым вместо цитозина; (О) простой полиоксиэтиленовый эфир или сложный полиоксиэтиленовый эфир [54]; (P) поверхностно-активный сложный полиоксиэтиленовый эфир сорбитана в комбинации с октоксинолом [55] или поверхностно-активный простой или сложный полиоксиэтиленалкиловый эфир в комбинации по меньшей мере с одним дополнительным неионным поверхностно-активным веществом, таким как октоксинол [56]; (Q) иммуностимулирующий олигонуклеотид (например, олигонуклеотид CpG) и сапонин [57]; (R) иммуностимулятор и частицу соли металла [58]; (S) сапонин и эмульсию масло-в-воде [59]; (T) термолабильный энтеротоксин E.coli ("LT") или его детоксифицированные мутанты, такие как мутанты К63 или R72 [например, глава 5 ссылки 60]; (U) холерный токсин («СТ») или его детоксифицированные мутанты [например, глава 5 ссылки 60]; (V) двунитевую РНК; (W) соли алюминия, такие как гидроокиси алюминия (включая оксигидроокиси), фосфаты алюминия (включая гидроксифосфаты), сульфат алюминия и т.д. [главы 8 и 9 в ссылке 61]; (X) имитаторы монофосфорилового липида А, такие как производные фосфата аминоалкилглюкозаминида, например, RC-529 [62]; (Y) полифосфазен (РСРР); или (Z) биоадгезивное вещество [63], такое как микросферы эстерифицированной гиалуроновой кислоты [64], или мукоадгезивное вещество, выбранное из группы, состоящей из поперечно сшитых производных поли(акриловой кислоты), поливинилового спирта, поливинилпирролидона, полисахаридов и карбоксиметилцеллюлозы. Можно также использовать другие вещества, которые действуют в качестве иммуностимулирующих средств для усиления эффективности композиции [например, см. главу 7 ссылки 45]. Соли алюминия (особенно фосфаты и/или гидроокиси алюминия) представляют собой предпочтительные адъюванты для парентеральной иммунизации. Мутантные токсины представляют собой адъюванты слизистой мембраны.
Везикулы в композициях согласно изобретению должны присутствовать в «иммунологически эффективных количествах», т.е. введение такого количества индивиду либо в однократной дозе, либо в виде части серии введений эффективно для лечения или предотвращения заболевания. Данное количество варьируется, в зависимости от здоровья и физического состояния индивида, которого предстоит лечить, возраста, таксономической группы индивида, которого предстоит лечить (например, нечеловекообразного примата, примата и т.д.), способности иммунной системы индивида синтезировать антитела, степени необходимой защиты, состава вакцины, оценки медицинской ситуации лечащим врачом, а также других релевантных факторов. Ожидается, что это количество подпадет под относительно широкий диапазон, который можно определить посредством стандартных испытаний. Дозировка лечения может представлять собой схему с однократной дозой или схему с множеством доз (например, включая бустерные дозы). Вакцину можно вводить в сочетании с другими иммунорегуляторными средствами.
Обычно композиции согласно изобретению получают в виде препаратов для инъекций. Прямая доставка композиций обычно осуществляется парентеральной (например, путем инъекции, либо подкожно, внутрибрюшинно, внутривенно, либо внутримышечно, либо путем доставки в интерстициальное пространство ткани), либо через слизистую оболочку (например, перорально или интраназально [65, 66]). Композиции можно также вводить в очаг поражения.
После составления композиции согласно изобретению можно вводить непосредственно индивиду. Индивиды, подлежащие лечению, могут представлять собой животных; в частности, можно лечить человека. Вакцины особенно полезны для вакцинации детей и подростков.
Композиция может включать в себя везикулы из нескольких серологических подтипов N.meningitidis [28]. Аналогичным образом, композиция может включать в себя несколько типов везикул, например как MV, так и OMV.
Так же как везикулы, композиция согласно изобретению может включать в себя другие антигены. Например, композиция может включать в себя один или несколько из следующих дополнительных антигенов:
- антигены из Helicobacter pylori, такие как CagA [67-70], VacA [71, 72], NAP [73, 74, 75], HopX [например, 76], HopY [например, 76] и/или уреаза;
- сахаридный антиген из N.meningitidis серогруппы А, С, W135 и/или Y, такой как олигосахарид, раскрытый в ссылке 77, из серогруппы С [см. также ссылку 78], или олигосахариды ссылки 79;
- сахаридный антиген из Streptococcus pneumoniae [например, 80, 81, 82];
- антиген из вируса гепаптита А, такой как инактивированный вирус [например, 83, 84];
- антиген из вируса гепаптита В, такой как поверхностные и/или сердцевинные антигены [например, 84, 85];
- антиген из Bordetella pertussis, такой как коклюшный голотоксин (РТ) и нитевидный гемагглютинин (FHA) из B.pertussis, необязательно также в комбинации с пертактином и/или агглютиногенами 2 и 3 [например, ссылки 86 и 87];
- дифтерийный антиген, такой как дифтерийный токсоид [например, глава 3 ссылки 88], например, мутант CRM197 [например, 89];
- столбнячный антиген, такой как столбнячный токсоид [например, глава 4 ссылки 108];
- сахаридный антиген из Haemophilus influenzae B [например, 78];
- антиген из вируса гепатита С [например, 90];
- антиген из N.gonorrhoeae [например, 91, 92, 93, 94];
- антиген из Chlamydia pneumoniae [например, ссылки 95-101];
- антиген из Chlamydia trachomatis [например, 102];
- антиген из Porphyromonas gingivalis [например, 103];
- антиген(ы) полиомиелита [например, 104, 105], такой как OPV, или, предпочтительно, IPV;
- антиген(ы) бешенства [например, 106], такой как лиофилизированный инактивированный вирус [например, 107, RabAvert™];
- антигены вирусов кори, эпидемического паротита и/или краснухи [например, главы 9, 10 и 11 ссылки 108];
- антиген(ы) вируса гриппа [например, глава 19 ссылки 108], такие как гемагглютинин и/или поверхностные белки нейраминидазы;
- антиген из Moraxella catarrhalis [например, 109];
- белковый антиген из Streptococcus agalactiae (стрептококк группы В) [например, 110, 111];
- сахаридный антиген из Streptococcus agalactiae (стрептококк группы В);
- антиген из Streptococcus pyrogenes (стрептококк группы А) [например, 111, 112, 113];
- антиген из Streptococcus aureus [например, 114];
- антиген из Bacillus anthracis [например, 115, 116, 117];
- антиген из вируса из семейства Flaviviridae (род Flavivirus), такого как вирус желтой лихорадки, вирус японского энцефалита, 4 серотипа вируса денге, вируса клещевого энцефалита, вируса западного Нила;
- антиген пестивируса, такого как классический вирус свиной лихорадки, вирус коровьей вирусной диареи и/или вирус пограничного заболевания;
- антиген парвовируса, например, из парвовируса В19;
- белок приона (например, белок приона CJD);
- амилоидный белок, такой как пептид бета [118];
- раковый антиген, такой как антигены, перечисленные в табл.1 ссылки 119, или в табл.3 и 4, ссылки 120.
Композиция может включать в себя один или несколько из указанных дополнительных антигенов.
Токсические белковые антигены можно при необходимости детоксифицировать (например, дектоксификация коклюшного токсина химическими и/или генетическими средствами [87]).
Когда дифтерийный антиген включается в композицию, предпочтительно также включить столбнячный антиген и коклюшный антиген. Аналогичным образом, когда включен столбнячный антиген, предпочтительно также включить дифтерийный и коклюшный антигены. Аналогичным образом, когда включен коклюшный антиген, предпочтительно также включить дифтерийный и столбнячный антигены. Таким образом, предпочтительны комбинации DTP (дифтерийного, столбнячного и коклюшного антигенов).
Сахаридные антигены представлены предпочтительно в форме конъюгатов. Белки-носители для конъюгатов включают в себя белок наружной мембраны N.meningitidis [121], синтетические пептиды [122, 123], белки теплового шока [124, 125], белки коклюшного возбудителя [126, 127], белок D из H.influenzae [128], цитокины [129], лимфокины [129], гормоны [129], ростовые факторы [129], токсин А и В из C.difficile [130], захватывающие железо белки [131] и т.д. Предпочтительным белком-носителем является дифтерийный токсоид CRM197 [132].
Антигены серогруппы В N.meningitidis можно также добавлять к композициям OMV. В частности, можно добавить белковый антиген, такой как антиген, раскрытый в ссылках 133-139.
Антигены в композиции должны обычно присутствовать в концентрации по меньшей мере 1 мкг/мл каждый. В целом концентрация любого данного антигена должна быть достаточной для того, чтобы вызвать иммунную реакцию против указанного антигена.
В качестве альтернативы использованию белковых антигенов, в композиции согласно изобретению можно использовать нуклеиновую кислоту, кодирующую антиген. Таким образом, белковые компоненты композиций согласно изобретению можно заменить нуклеиновой кислотой (предпочтительно, ДНК, например, в форме плазмиды), которая кодирует белок.
Способы лечения пациентов
Изобретение обеспечивает везикулы согласно изобретению для применения в качестве лекарственных средств.
Изобретение также обеспечивает способ усиления иммунного ответа у пациента, включающий в себя введение пациенту композиции согласно изобретению. Иммунный ответ предпочтительно защищает против менингококкового заболевания и может включать в себя гуморальный иммунный ответ и/или клеточный иммунный ответ. Пациентом предпочтительно является ребенок.
Способ может повысить вторичный иммунный ответ у пациента, который уже был подвергнут первичной иммунизации против N.meningitidis. Схемы подкожной и интраназальной первичной/вторичной иммунизации для OMV раскрыты в ссылке 65.
Изобретение также предполагает применение везикул согласно изобретению при изготовлении лекарственного средства для усиления иммунного ответа у пациента. Лекарственное средство представляет собой предпочтительно иммуногенную композицию (например, вакцину). Лекарственное средство предпочтительно предназначено для предотвращения и/или лечения заболевания, вызванного Neisseria (например, вызывающими менингит, септицемию, гонорею и т.д.).
Способы и виды применения изобретения могут включать в себя введение везикул из нескольких серологических подтипов N.meningitidis [например, ссылка 28].
Композиция OMV
Изобретение обеспечивает композицию, содержащую везикулы наружной мембраны менингококков, адъювант гидроокиси алюминия, гистидиновый буфер и хлорид натрия, где (а) концентрация хлорида натрия больше чем 7,5 мг/мл; и/или (b) концентрация OMV составляет менее чем 100 мкг/мл.
Концентрация хлорида натрия составляет предпочтительно больше чем 8 мг/мл, а предпочтительнее, примерно 9 мг/мл.
Концентрация OMV составляет предпочтительно менее чем 75 мкг/мл, например, примерно 50 мкг/мл.
Гистидиновый буфер обеспечивает предпочтительно диапазон от рН 6,3 до рН 6,7, например, рН 6,5.
Адъювант можно использовать в концентрации примерно 3,3 мг/мл (выраженной в виде концентрации Al3+).
Определения
Ссылки на степень идентичности (в процентах) последовательностей между двумя аминокислотными последовательностями означают, что при выравнивании процентное содержание аминокислот одинаково при сравнении двух последовательностей. Указанное выравнивание и процентную гомологию или идентичность последовательностей можно определить с использованием пакетов программного обеспечения, известных в данной области, например тех, которые описаны в разделе 7.7.18 ссылки 140. Предпочтительный ряд определяется алгоритмом поиска гомологии Смита-Уотермана с использованием поиска аффинного гэпа со штрафом за «открытый гэп», составляющим 12, и штрафом за «протяженность гэпа», составляющим 2, матрицы BLOSUM из 62. Алгоритм поиска гомологии Смита-Уотермана хорошо известен и раскрыт в ссылке 141.
Термин «охватывающий» означает «включающий в себя», а также «состоящий», например композиция, «включающая в себя» Х, может либо состоять исключительно из Х, либо может включать в себя что-то дополнительное, например X+Y.
Термин «примерно» в отношении числовой величины χ означает, например, χ±10%.
Слово «по существу» не исключает «полностью», например, композиция, которая «по существу свободна» от Y, может быть полностью свободна от Y. При необходимости, слово «по существу» может быть опущено из определения изобретения.
Краткое описание чертежей
На Фиг.1 и 2 показано присутствие/отсутствие (1) белка '287' и (2) белка '741' в бактерии («ТОТ») и везикулах наружной мембраны ("OMV"), полученных из штаммов МС58, Н4476 и 394/98 N.meningitidis. Стрелка показывает положение '287' на фиг.1 и '741' на фиг.2.
На фиг.3 показаны аминокислотные последовательности, занесенные в банк генов GenBank GI:7227128, GI:7227388 и GI:1518522 от 29 августа 2002 г.
Способы осуществления изобретения
Получение OVM
OMV получали или «норвежскими» способами предшествующего уровня техники (штаммы Н4476 и 394/98), или следующим способом (штамм МС58):
- Бактерии из 2-5 чашек собирают в 10 мл буфера 10 мМ Трис-HCl (рН 8,0) и убивают нагреванием при 56°С в течение 45 мин. Образцы затем обрабатывают ультразвуком на льду (рабочий цикл 50 в течение 10 мин наконечником на 6/7) для разрушения мембран.
- Клеточный дебрис удаляют центрифугированием при 5000 g в течение 30 мин при 4°С или 10000 g в течение 10 мин.
- Надосадочную жидкость повторно центрифугируют при 50000 g в течение 75 мин при 4°С.
- Осадок в пробирке после центрифугирования повторно суспендируют в 7 мл 2% N-лауроилсаркозината (саркозил) в 10 мл 10 мМ Трис-HCl (рН 8,0) в течение 20 мин при комнатной температуре для солюбилизации цитоплазматических мембран.
- Образец центрифугируют при 10000 g в течение 10 мин для удаления материалов в виде частиц, а надосадочную жидкость центрифугируют при 75000 g в течение 75 мин при 4°С. Образец промывают в 10 мМ Трис-HCl (рН 8,0) и центрифугируют при 75000 g в течение 75 мин.
- Осадок в пробирке после центрифугирования повторно суспендируют в 10 мМ Трис-HCl (рН 8,0) или дистиллированной воде.
Бактерии и препараты OVM тестировали методом вестерн-блоттинга на присутствие NspA, 287 и 741 (фиг.1 и 2); полученные результаты сведены в следующую таблицу:
Штамм Детергент NspA 287 741
Бактерии OMV Бактерии OMV Бактерии OMV
MC58 - +++ +++ +++ +++ +++ +++
H44/76 + +++ -[20] +++ - +++ +
394/98 + +++ n.d. +++ ++ +++ +
В отличие от способов предшествующего уровня техники на основе детергентов, отсутствие детергента приводит к сохранению NspA и позволяет избежать потери 287 и 741.
Составление композиции OVM, полученных из новозеландского штамма MenB
OVM получают из штамма 394/98 серогруппы В N.meningitidis. Их включали в композиции двумя различными путями, причем компоненты имеют следующие концентрации:
  Композиция «А» Композиция «В»
OVM 50 мкг/мл 50 мкг/мл
Адъювант гидроокиси алюминия 3,3 мкг/мл 3,3 мкг/мл
Сахароза 3% -
Гистидиновый буфер, рН 6,5 - 5 мМ
Хлорид натрия - 9 мг/мл
Было обнаружено, что композиция «В» в иммунологическом отношении лучше композиции «А». Композиция «В» отличается от композиции, раскрытой в ссылке 142, тем, что в ней содержится половина концентрации OMV, выше концентрации NaCl, и она несколько отличается значением рН.
Следует понимать, что изобретение было описано только в качестве примера, и модификации могут производиться в пределах объема и сущности изобретения.
Figure 00000002
Figure 00000003
Figure 00000004
Figure 00000005
Figure 00000006
Figure 00000007
Figure 00000008

Claims (17)

1. Способ получения препарата везикул наружной мембраны (OMV) из бактерий рода Neisseria, предусматривающий разрушение оболочки бактерий и сбор везикул наружной мембраны, отличающийся тем, что бактериальную оболочку разрушают в присутствии ≤0,05% дезоксихолатного детергента, а бактерии в избыточном количестве экспрессируют TbpA.
2. Способ по п.1, согласно которому бактериальную мембрану разрушают, по существу, в отсутствие какого бы то ни было детергента.
3. Способ по п.1 или 2, предусматривающий следующие основные стадии: (а) обработку бактериальных клеток, по существу, в отсутствие детергента; (b) центрифугирование композиции, полученной на стадии (а), для отделения везикул наружной мембраны от обработанных клеток и клеточного дебриса и сбор надосадочной жидкости; (с) выполнение высокоскоростного центрифугирования надосадочной жидкости, полученной на стадии (b), и сбор везикул наружной мембраны в осадке, полученном после центрифугирования; (d) повторное диспергирование осадка, полученного на стадии (с), в буфере; (е) выполнение второго высокоскоростного центрифугирования, в соответствии со стадией (с), сбор везикул наружной мембраны в осадке, полученном после центрифугирования; (f) повторное диспергирование осадка, полученного на стадии (е), в водной среде.
4. Способ по п.3, где стадия (b) включает в себя центрифугирование примерно при 5000-10000 g в течение периода вплоть до 1 ч, а стадии (с) и (е) включают в себя центрифугирование примерно при 50000 g в течение 75 мин.
5. Способ по п.1 или 2, где разрушение мембраны производится путем обработки ультразвуком.
6. Способ по п.3, где буфер, используемый на стадии (d) и/или стадии (f), представляет собой Трис-буфер.
7. Способ по п.1, где бактерия представляет собой N.meningitidis или N.gonorrhoeae.
8. Способ по п.7, где Neisseria meningitidis относится к серогруппе В.
9. Способ по п.3, где бактерия представляет собой Neisseria meningitidis серогруппы В штамма Н4476.
10. Способ получения иммуногенной композиции, содержащий препарат везикул наружной мембраны из бактерий рода Neisseria, полученный способом по любому из пп.1-3, дополнительно включающий в себя стадию составления иммунологически эффективного количества везикул наружной мембраны в качестве иммуногенной композиции.
11. Препарат везикул наружной мембраны из бактерий рода Neisseria meningitidis, который можно получить способом по любому из пп.1-3.
12. Иммуногенная композиция везикул наружной мембраны из бактерий рода Neisseria meningitidis, отличающаяся тем, что включает в себя эффективное количество везикул наружной мембраны, указанных в п.1, содержащих (i) белок NspA, (ii) белок '287' и (iii) белок '741'; приблизительно 3,3 мг/мл гидроокиси алюминия в качестве адъюванта, адъюванта, более 7,5 мг/мл хлорида натрия и гистидиновый буфер в количестве, обеспечивающем диапазон рН приблизительно от 6,3 до 6,7.
13. Препарат по п.11, отличающийся тем, что композиция является стерильной и/или лишенной пирогенов и/или забуференной при рН от 6,0 до 7,0.
14. Препарат по п.11 для использования в качестве лекарственного средства.
15. Препарат по п.11, используемый в изготовлении лекарственного средства для усиления иммунного ответа у пациента.
16. Препарат по п.13 для использования в качестве лекарственного средства.
17. Препарат по п.13, используемый в изготовлении лекарственного средства для усиления иммунного ответа у пациента.
RU2005108994/15A 2002-08-30 2003-09-01 Улучшенные везикулы наружной мембраны бактерий RU2325184C2 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GBGB0220194.5A GB0220194D0 (en) 2002-08-30 2002-08-30 Improved vesicles
GB0220194.5 2002-08-30

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2005108994A RU2005108994A (ru) 2006-02-10
RU2325184C2 true RU2325184C2 (ru) 2008-05-27

Family

ID=9943238

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2005108994/15A RU2325184C2 (ru) 2002-08-30 2003-09-01 Улучшенные везикулы наружной мембраны бактерий

Country Status (21)

Country Link
US (2) US20060166344A1 (ru)
EP (5) EP1864679B1 (ru)
JP (3) JP2006503822A (ru)
CN (2) CN102188700A (ru)
AT (1) ATE366117T1 (ru)
AU (1) AU2003263534B2 (ru)
BR (1) BRPI0314094A8 (ru)
CA (1) CA2497165C (ru)
CY (3) CY1107737T1 (ru)
DE (1) DE60314756T2 (ru)
DK (3) DK2258389T3 (ru)
ES (4) ES2520392T3 (ru)
FR (1) FR13C0046I2 (ru)
GB (1) GB0220194D0 (ru)
LU (1) LU92239I2 (ru)
MX (1) MXPA05002316A (ru)
NZ (1) NZ538673A (ru)
PT (3) PT1864679E (ru)
RU (1) RU2325184C2 (ru)
SI (2) SI1864679T1 (ru)
WO (1) WO2004019977A2 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2607021C2 (ru) * 2011-07-07 2017-01-10 Де Стат Дер Недерланден, Верт. Дор Де Министер Ван Ввс Способ бездетергентного получения везикул наружной мембраны грамотрицательной бактерии

Families Citing this family (82)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2210945B1 (en) * 1998-01-14 2013-06-26 Novartis Vaccines and Diagnostics S.r.l. Neisseria meningitidis antigens
DK1079857T3 (da) 1998-05-29 2007-01-29 Novartis Vaccines & Diagnostic Meningitidis B/C-kombinationsvacciner
ES2563677T3 (es) 1999-05-19 2016-03-15 Glaxosmithkline Biologicals Sa Composiciones de combinaciones de Neisseria
GB9928196D0 (en) 1999-11-29 2000-01-26 Chiron Spa Combinations of B, C and other antigens
DE60142772D1 (de) 2000-01-17 2010-09-23 Novartis Vaccines & Diagnostic Membranvesikel (omv) impfstoff, der n. meningitidis serogruppe b membranproteine enthält
BRPI0112928B1 (pt) 2000-07-27 2017-08-29 Children's Hospital & Research Center At Oakland A composition comprising preparations comprising outer membrane vesicles (OMV), microvesicles (MV) or both MVO and MV
MX339524B (es) 2001-10-11 2016-05-30 Wyeth Corp Composiciones inmunogenicas novedosas para la prevencion y tratamiento de enfermedad meningococica.
GB0227346D0 (en) 2002-11-22 2002-12-31 Chiron Spa 741
GB0316560D0 (en) 2003-07-15 2003-08-20 Chiron Srl Vesicle filtration
GB0323103D0 (en) 2003-10-02 2003-11-05 Chiron Srl De-acetylated saccharides
CU23377A1 (es) * 2003-11-04 2009-05-28 Ct De Ingenieria Genetica Y Biotecnologia Metodo para la incorporacion de antigenos en vesiculas de membrana externa de bacterias y formulaciones resultantes
GB0416120D0 (en) 2004-07-19 2004-08-18 Health Prot Agency Stable compositions containing OMV's
US7968324B2 (en) 2004-08-13 2011-06-28 Barry J Marshall Helicobacter system and uses thereof
US8029777B2 (en) 2004-08-13 2011-10-04 Marshall Barry J Helicobacter system and uses thereof
GB0419627D0 (en) * 2004-09-03 2004-10-06 Chiron Srl Immunogenic bacterial vesicles with outer membrane proteins
GB0424092D0 (en) 2004-10-29 2004-12-01 Chiron Srl Immunogenic bacterial vesicles with outer membrane proteins
EP2682126B1 (en) 2005-01-27 2016-11-23 Children's Hospital & Research Center at Oakland GNA1870-based vesicle vaccines for broad spectrum protection against diseases caused by Neisseria meningitidis
CN101203529A (zh) * 2005-02-18 2008-06-18 诺华疫苗和诊断公司 来自脑膜炎/脓毒症相关性大肠杆菌的蛋白质和核酸
WO2006123164A2 (en) * 2005-05-19 2006-11-23 The Edward Jenner Institute For Vaccine Research Lps-binding and bactericidal cytokines and interferons
KR20130122810A (ko) 2005-06-27 2013-11-08 글락소스미스클라인 바이오로지칼즈 에스.에이. 백신 제조 방법
GB0524066D0 (en) 2005-11-25 2006-01-04 Chiron Srl 741 ii
AU2016204760A1 (en) * 2006-04-26 2016-07-28 Wyeth Llc Novel formulations which stabilize and inhibit precipitation of immunogenic compositions
AU2014268186C1 (en) * 2006-04-26 2017-12-07 Wyeth Llc Novel formulations which stabilize and inhibit precipitation of immunogenic compositions
AR064642A1 (es) 2006-12-22 2009-04-15 Wyeth Corp Polinucleotido vector que lo comprende celula recombinante que comprende el vector polipeptido , anticuerpo , composicion que comprende el polinucleotido , vector , celula recombinante polipeptido o anticuerpo , uso de la composicion y metodo para preparar la composicion misma y preparar una composi
BR122016015627A2 (pt) 2007-10-19 2018-10-30 Novartis Ag kit, composição antigênica liofilizada e método para preparação de uma composição imunogênica
RU2475496C2 (ru) 2008-02-21 2013-02-20 Новартис Аг МЕНИНГОКОККОВЫЕ ПОЛИПЕПТИДЫ fHBP
GB0819633D0 (en) * 2008-10-25 2008-12-03 Isis Innovation Composition
GB0822634D0 (en) 2008-12-11 2009-01-21 Novartis Ag Meningitis vaccines
CA2747340A1 (en) 2008-12-17 2010-06-24 Novartis Ag Meningococcal vaccines including hemoglobin receptor
CA2756522C (en) 2009-03-24 2018-06-26 Novartis Ag Adjuvanting meningococcal factor h binding protein
WO2010127172A2 (en) * 2009-04-30 2010-11-04 Children's Hospital & Research Center At Oakland Chimeric factor h binding proteins (fhbp) and methods of use
AU2010258677B2 (en) 2009-06-10 2016-10-06 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Benzonaphthyridine-containing vaccines
WO2011022228A2 (en) * 2009-08-20 2011-02-24 Srisuda Dhamwichukorn Apparatus and method for enhanced disruption and extraction of intracellular materials from microbial cells
WO2011024071A1 (en) 2009-08-27 2011-03-03 Novartis Ag Adjuvant comprising aluminium, oligonucleotide and polycation
JP2013502918A (ja) 2009-08-27 2013-01-31 ノバルティス アーゲー 髄膜炎菌ｆＨＢＰ配列を含むハイブリッドポリペプチド
EP2494865A4 (en) 2009-09-01 2014-05-14 Aeon Medix Inc EXTRACELLULAR VESICLES OBTAINED FROM THE DARMFLORA, AND METHOD FOR SEARCHING FOR A DISEASE MODEL, VACCINE AND CANDIDATE AND DIAGNOSTIC METHOD THEREFOR
WO2011027956A2 (ko) 2009-09-04 2011-03-10 주식회사이언메딕스 그람 양성 박테리아에서 유래한 세포밖 소포체 및 이를 이용한 질병 모델
JO3257B1 (ar) 2009-09-02 2018-09-16 Novartis Ag مركبات وتركيبات كمعدلات لفاعلية tlr
DK2459216T3 (da) 2009-09-02 2013-12-09 Novartis Ag Immunogene sammensætninger omfattende tlr-aktivitetsmodulatorer
GB0917003D0 (en) 2009-09-28 2009-11-11 Novartis Vaccines Inst For Global Health Srl Purification of bacterial vesicles
CN102724988B (zh) 2009-09-30 2014-09-10 诺华股份有限公司 脑膜炎球菌fHBP多肽的表达
WO2011051893A1 (en) 2009-10-27 2011-05-05 Novartis Ag Modified meningococcal fhbp polypeptides
WO2011057148A1 (en) 2009-11-05 2011-05-12 Irm Llc Compounds and compositions as tlr-7 activity modulators
SG10201501980SA (en) 2009-12-15 2015-05-28 Novartis Ag Homogeneous suspension of immunopotentiating compounds and uses thereof
CN102802662A (zh) 2010-03-18 2012-11-28 诺华有限公司 用于脑膜炎球菌血清组b的含佐剂疫苗
CA2792938C (en) 2010-03-23 2018-07-31 Irm Llc Compounds (cystein based lipopeptides) and compositions as tlr2 agonists used for treating infections, inflammations, respiratory diseases etc.
WO2012002760A2 (ko) 2010-07-01 2012-01-05 포항공과대학교 산학협력단 세균유래 마이크로베시클을 이용한 암치료 및 암진단 방법
PL3246044T5 (pl) 2010-08-23 2024-06-17 Wyeth Llc Stabilne preparaty antygenów rLP2086 Neisseria meningitidis
ES2759484T3 (es) 2010-09-10 2020-05-11 Glaxosmithkline Biologicals Sa Meningococo que sobreexpresa NadA y/o NHBA y vesículas de la membrana externa derivadas del mismo
MY166172A (en) 2010-09-10 2018-06-07 Wyeth Llc Non-lipidated variants of neisseria meningitidis orf2086 antigens
EP2707009A1 (en) 2011-05-12 2014-03-19 Novartis AG Antipyretics to enhance tolerability of vesicle-based vaccines
ES2654613T3 (es) 2012-02-02 2018-02-14 Glaxosmithkline Biologicals Sa Promotores para una expresión aumentada de proteínas en meningococos
ES2750366T3 (es) 2012-03-08 2020-03-25 Glaxosmithkline Biologicals Sa Ensayo de potencia in vitro para vacunas meningocócicas basadas en proteína
SA115360586B1 (ar) 2012-03-09 2017-04-12 فايزر انك تركيبات لعلاج الالتهاب السحائي البكتيري وطرق لتحضيرها
NZ628449A (en) 2012-03-09 2016-04-29 Pfizer Neisseria meningitidis compositions and methods thereof
WO2013151706A2 (en) 2012-04-06 2013-10-10 Cornell University Subunit vaccine delivery platform for robust humoral and cellular immune responses
CA2876138C (en) 2012-06-14 2023-09-19 Novartis Ag Vaccines for serogroup x meningococcus
EP2877492A1 (en) 2012-07-27 2015-06-03 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM) Cd147 as receptor for pilus-mediated adhesion of meningococci to vascular endothelia
CN104602705A (zh) 2012-09-06 2015-05-06 诺华股份有限公司 血清组b脑膜炎球菌和d/t/p的联合疫苗
RU2662970C2 (ru) 2012-09-18 2018-07-31 Новартис Аг Везикулы наружной мембраны
EP2953620A1 (en) 2013-02-07 2015-12-16 GlaxoSmithKline Biologicals SA Pharmaceutical compositions comprising vesicles
ES2685894T3 (es) 2013-03-08 2018-10-15 Pfizer Inc. Polipéptidos de fusión inmunogénicos
KR101905278B1 (ko) 2013-09-08 2018-10-08 화이자 인코포레이티드 나이세리아 메닌지티디스 조성물 및 그의 방법
BR112016019735A2 (pt) 2014-02-28 2017-10-17 Glaxosmithkline Biologicals Sa fhbp, polipeptídeo, plasmídeo ou outro ácido nucleico, célula hospedeira, vesículas de membrana, e, composição imunogênica
EP3270959A1 (en) 2015-02-19 2018-01-24 Pfizer Inc Neisseria meningitidis compositions and methods thereof
WO2016184860A1 (en) 2015-05-18 2016-11-24 Universita' Degli Studi Di Trento Immunogenic compositions containing bacterial outer membrane vesicles and therapeutic uses thereof
AU2016354444B2 (en) * 2015-11-10 2021-04-01 Ohio State Innovation Foundation Methods and compositions related to accelerated humoral affinity
CA3035320A1 (en) 2016-09-02 2018-03-08 Glaxosmithkline Biologicals Sa Vaccines for neisseria gonorrhoeae
US11447738B2 (en) 2016-10-28 2022-09-20 Vedanta Biosciences, Inc. Methods and compositions for preserving bacteria
SG11201906519RA (en) 2017-01-31 2019-08-27 Pfizer Neisseria meningitidis compositions and methods thereof
US11633466B2 (en) * 2017-03-31 2023-04-25 Indian Council Of Medical Research Enteric fever vaccine based on outer membrane vesicles from two different strains of typhoidal Salmonelle species
US10793865B2 (en) 2018-06-05 2020-10-06 The Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary Of The Navy Transferrable mechanism of generating inducible, BAR domain protein-mediated bacterial outer membrane extensions
EP3607967A1 (en) 2018-08-09 2020-02-12 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Modified meningococcal fhbp polypeptides
JP7469302B2 (ja) 2018-11-06 2024-04-16 グラクソスミスクライン バイオロジカルズ ソシエテ アノニム 免疫原性組成物
EP3927356A2 (en) * 2019-02-22 2021-12-29 Evelo Biosciences, Inc. Bacterial membrane preparations
WO2021031270A1 (zh) * 2019-08-22 2021-02-25 四川大学 细菌膜囊泡及其分离制备系统和方法
CN110563829B (zh) * 2019-09-17 2021-03-26 中国人民解放军国防科技大学 用于调控脂质体囊泡行为、功能的反光蛋白体系及其应用
EP3799884A1 (en) 2019-10-01 2021-04-07 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Immunogenic compositions
BR112023003571A2 (pt) 2020-09-11 2023-04-04 Glaxosmithkline Biologicals Sa Vesículas de membrana externa
GB202115077D0 (en) 2021-10-21 2021-12-08 Glaxosmithkline Biologicals Sa Assay
WO2023097652A1 (en) * 2021-12-03 2023-06-08 National Center For Nanoscience And Technology An engineered cell and application thereof
GB202211033D0 (en) 2022-07-28 2022-09-14 Glaxosmithkline Biologicals Sa Purification process

Family Cites Families (89)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2848965A1 (de) 1978-11-11 1980-05-22 Behringwerke Ag Verfahren zur herstellung von membranproteinen aus neisseria meningitidis und diese enthaltende vaccine
US4707543A (en) * 1985-09-17 1987-11-17 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army Process for the preparation of detoxified polysaccharide-outer membrane protein complexes, and their use as antibacterial vaccines
RU2023448C1 (ru) 1987-07-30 1994-11-30 Сентро Насьональ Де Биопрепарадос Способ получения вакцины против различных патогенных серотипов менингита нейссера группы в
DE3841091A1 (de) 1988-12-07 1990-06-13 Behringwerke Ag Synthetische antigene, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung
ES2070312T5 (es) 1988-12-19 2003-05-16 American Cyanamid Co Vacuna de proteina de membrana exterior meningococica de clase 1.
EP0378881B1 (en) 1989-01-17 1993-06-09 ENIRICERCHE S.p.A. Synthetic peptides and their use as universal carriers for the preparation of immunogenic conjugates suitable for the development of synthetic vaccines
HU212924B (en) 1989-05-25 1996-12-30 Chiron Corp Adjuvant formulation comprising a submicron oil droplet emulsion
AU651949B2 (en) 1989-07-14 1994-08-11 American Cyanamid Company Cytokine and hormone carriers for conjugate vaccines
IT1237764B (it) 1989-11-10 1993-06-17 Eniricerche Spa Peptidi sintetici utili come carriers universali per la preparazione di coniugati immunogenici e loro impiego per lo sviluppo di vaccini sintetici.
DE69113564T2 (de) 1990-08-13 1996-05-30 American Cyanamid Co Faser-Hemagglutinin von Bordetella pertussis als Träger für konjugierten Impfstoff.
US5552146A (en) 1991-08-15 1996-09-03 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods and compositions relating to useful antigens of Moraxella catarrhalis
US5993826A (en) 1993-03-02 1999-11-30 Board Of Regents, The University Of Texas Methods and compositions relating to useful antigens of moraxella catarrhalis
WO1993018150A1 (en) 1992-03-02 1993-09-16 Biocine S.P.A. Helicobacter pylori proteins useful for vaccines and diagnostics
IT1262896B (it) 1992-03-06 1996-07-22 Composti coniugati formati da proteine heat shock (hsp) e oligo-poli- saccaridi, loro uso per la produzione di vaccini.
FR2692592B1 (fr) * 1992-06-19 1995-03-31 Pasteur Merieux Serums Vacc Fragments d'ADN codant pour les sous-unités du récepteur de la transferrine de Neisseria meningitidis et procédés les exprimant.
DE69327599T2 (de) 1992-06-25 2000-08-10 Smithkline Beecham Biolog Adjuvantien enthaltende Impfstoffzusammensetzung
IL102687A (en) 1992-07-30 1997-06-10 Yeda Res & Dev Conjugates of poorly immunogenic antigens and synthetic pepide carriers and vaccines comprising them
NL9201716A (nl) 1992-10-02 1994-05-02 Nederlanden Staat Buitenmembraanvesikel dat voorzien is van een groep polypeptiden welke ten minste de immuunwerking van aan membraan gebonden buitenmembraaneiwitten (OMP's) hebben, werkwijze ter bereiding ervan alsmede een vaccin dat een dergelijk buitenmembraanvesikel omvat.
DE69423383T2 (de) 1993-05-13 2000-08-24 American Cyanamid Co Herstellung und Verwendungen von LOS-verminderten Aussenmembran-Proteinen von Gram-negativen Kokken
GB9326253D0 (en) 1993-12-23 1994-02-23 Smithkline Beecham Biolog Vaccines
WO1995029662A2 (en) * 1994-04-20 1995-11-09 U.S. Department Of The Army Vaccine against gram-negative bacterial infections
CA2194237A1 (en) 1994-07-01 1996-01-18 Dermot Kelleher Helicobacter pylori antigenic protein preparation and immunoassays
CA2194761C (en) 1994-07-15 2006-12-19 Arthur M. Krieg Immunomodulatory oligonucleotides
US6207646B1 (en) 1994-07-15 2001-03-27 University Of Iowa Research Foundation Immunostimulatory nucleic acid molecules
IL117483A (en) 1995-03-17 2008-03-20 Bernard Brodeur MENINGITIDIS NEISSERIA shell protein is resistant to proteinase K.
US6180111B1 (en) 1995-05-18 2001-01-30 University Of Maryland Vaccine delivery system
GB9513261D0 (en) 1995-06-29 1995-09-06 Smithkline Beecham Biolog Vaccines
BR9609882A (pt) 1995-08-04 1999-07-27 Univ Guelph Vacina processos para preparar a mesma para tratar uma doença infecciosa para inserir uma molécula de ácido nucleico em uma célula de marcaç o para administrar um agente terapêutico a um hospedeiro e para triar um antígeno imunogênico de um patógeno uso de uma vesícula de membrana composição farmacêutica sistema de liberação de drogas e vesícula de membrana
GB2324093A (en) 1996-01-04 1998-10-14 Rican Limited Helicobacter pylori bacterioferritin
DE19630390A1 (de) 1996-07-26 1998-01-29 Chiron Behring Gmbh & Co Proteine, insbesondere Membranproteine von Helicobacter pylori, ihre Herstellung und Verwendung
DE69733020T2 (de) 1996-10-11 2006-02-16 The Regents Of The University Of California, Oakland Immunostimulierende oligonucleotidekonjugate
NZ337054A (en) 1997-01-30 2001-03-30 Chiron Corp Microparticles PLA and PLG with adsorbed viral antigen to stimulate immune responses particularly for intracellular viruses such as HSV-1 or HSV-2, varicella zoster virus. epstein-barr virus or cytomegalovirus (CMV)
US6214806B1 (en) 1997-02-28 2001-04-10 University Of Iowa Research Foundation Use of nucleic acids containing unmethylated CPC dinucleotide in the treatment of LPS-associated disorders
JP5087758B2 (ja) 1997-03-10 2012-12-05 オタワ ホスピタル リサーチ インスティチュート アジュバントとして非メチル化ＣｐＧジヌクレオチドを含む核酸の使用
WO1998052581A1 (en) 1997-05-20 1998-11-26 Ottawa Civic Hospital Loeb Research Institute Vectors and methods for immunization or therapeutic protocols
US6225292B1 (en) 1997-06-06 2001-05-01 The Regents Of The University Of California Inhibitors of DNA immunostimulatory sequence activity
GB9711964D0 (en) 1997-06-09 1997-08-06 Medical Res Council Live attenuated vaccines
GB9712347D0 (en) 1997-06-14 1997-08-13 Smithkline Beecham Biolog Vaccine
GB9713156D0 (en) 1997-06-20 1997-08-27 Microbiological Res Authority Vaccines
CA2297072A1 (en) * 1997-07-17 1999-01-28 North American Vaccine, Inc. Immunogenic conjugates comprising a group b meningococcal porin and an h. influenzae polysaccharide
DK0991761T3 (da) 1997-08-21 2008-05-19 Nederlanden Staat Hidtil ukendte mutaner af gramnegative mucosale bakterier og anvendelse deraf i vacciner
WO1999011241A1 (en) 1997-09-05 1999-03-11 Smithkline Beecham Biologicals S.A. Oil in water emulsions containing saponins
AU9363798A (en) 1997-11-06 1999-05-31 Chiron S.P.A. Neisserial antigens
ATE352624T1 (de) 1997-11-21 2007-02-15 Serono Genetics Inst Sa Chlamydia pneumoniae genomische sequenzen und polypeptiden, fragmenten und anwendungen davon für nachweis, prevention und heilung
GB9725084D0 (en) 1997-11-28 1998-01-28 Medeva Europ Ltd Vaccine compositions
EP2228385A1 (en) 1997-11-28 2010-09-15 Merck Serono Biodevelopment Chlamydia trachomatis genomic sequence and polypeptides, fragments thereof and uses thereof, in particular for the diagnosis, prevention and treatment of infection
EP2210945B1 (en) 1998-01-14 2013-06-26 Novartis Vaccines and Diagnostics S.r.l. Neisseria meningitidis antigens
GB9806456D0 (en) * 1998-03-25 1998-05-27 Smithkline Beecham Biolog Vaccine composition
TR200002930T2 (tr) 1998-04-09 2000-12-21 Smithkline Beecham Biologicals S.A. Kolaylaştırıcı kompozisyonlar
AU761780B2 (en) 1998-05-01 2003-06-12 Glaxosmithkline Biologicals Sa Neisseria meningitidis antigens and compositions
GB9817052D0 (en) 1998-08-05 1998-09-30 Smithkline Beecham Biolog Vaccine
AU1202200A (en) 1998-10-09 2000-05-01 Chiron Corporation Neisseria genomic sequences and methods of their use
CZ301212B6 (cs) 1998-10-16 2009-12-09 Smithkline Beecham Biologicals S. A. Vakcinacní prostredek
GB9823978D0 (en) 1998-11-02 1998-12-30 Microbiological Res Authority Multicomponent meningococcal vaccine
JP2002529069A (ja) 1998-11-12 2002-09-10 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア クラミジア・ニューモニエのゲノム配列
GB9828000D0 (en) 1998-12-18 1999-02-10 Chiron Spa Antigens
PT1150712E (pt) * 1999-02-05 2008-12-22 Merck & Co Inc Formulações para a vacina do vírus do papiloma humano
EP1852125A3 (en) 1999-02-22 2010-09-22 Health Protection Agency Neisserial vaccine compositions and methods
US7081244B2 (en) * 1999-02-22 2006-07-25 Health Protection Agency Neisserial vaccine compositions and methods
ES2350306T3 (es) 1999-02-26 2011-01-20 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Uso de bioadhesivos y adyuvantes para la administración de antígenos por vía mucosa.
AR022963A1 (es) 1999-03-19 2002-09-04 Smithkline Beecham Biolog Vacuna
US6245568B1 (en) * 1999-03-26 2001-06-12 Merck & Co., Inc. Human papilloma virus vaccine with disassembled and reassembled virus-like particles
JP2002541808A (ja) 1999-04-09 2002-12-10 テクラブ， インコーポレイテッド ポリサッカリド結合体ワクチンのための組換えトキシンａタンパク質キャリア
DE60014076T2 (de) 1999-04-19 2005-10-13 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Adjuvans-zusammensetzung, enthaltend saponin und ein immunstimulatorisches oligonukleotid
US7368261B1 (en) 1999-04-30 2008-05-06 Novartis Vaccines And Diagnostics Srl Conserved Neisserial antigens
AUPQ005499A0 (en) * 1999-04-30 1999-05-27 Townsend, Roy Leslie Printing process
ES2563677T3 (es) 1999-05-19 2016-03-15 Glaxosmithkline Biologicals Sa Composiciones de combinaciones de Neisseria
GB9918319D0 (en) * 1999-08-03 1999-10-06 Smithkline Beecham Biolog Vaccine composition
EP1221971A2 (en) 1999-09-24 2002-07-17 SmithKline Beecham Biologics SA Use of the combination of polyoxyethylene sorbitan ester and octoxynol as adjuvant and its use in vaccines
CN1399539A (zh) 1999-09-24 2003-02-26 史密丝克莱恩比彻姆生物有限公司 含有聚氧乙烯烷基醚或聚氧乙烯烷基酯以及至少一种非离子表面活性剂的佐剂
WO2001034642A2 (en) 1999-11-12 2001-05-17 University Of Iowa Research Foundation Control of neisserial membrane synthesis
DE60142772D1 (de) 2000-01-17 2010-09-23 Novartis Vaccines & Diagnostic Membranvesikel (omv) impfstoff, der n. meningitidis serogruppe b membranproteine enthält
GB0007433D0 (en) * 2000-03-27 2000-05-17 Microbiological Res Authority Recombinant transferrin binding proteins
GB0007432D0 (en) 2000-03-27 2000-05-17 Microbiological Res Authority Proteins for use as carriers in conjugate vaccines
NO20002828D0 (no) 2000-06-02 2000-06-02 Statens Inst For Folkehelse Proteinholdig vaksine mot Neisseria meningtidis serogruppe samt fremgangsmÕte ved fremstilling derav
AU2001276619A1 (en) 2000-07-03 2002-01-14 Chiron S.P.A. Immunisation against chlamydia pneumoniae
GB0017149D0 (en) 2000-07-12 2000-08-30 Chiron Spa Helicobacter pylori mutants
BRPI0112928B1 (pt) * 2000-07-27 2017-08-29 Children's Hospital & Research Center At Oakland A composition comprising preparations comprising outer membrane vesicles (OMV), microvesicles (MV) or both MVO and MV
GB0103170D0 (en) 2001-02-08 2001-03-28 Smithkline Beecham Biolog Vaccine composition
MXPA03002643A (es) 2000-09-28 2003-06-19 Chiron Corp Composiciones de microparticulas y metodos para producirlas.
EP2277894A1 (en) 2000-10-27 2011-01-26 Novartis Vaccines and Diagnostics S.r.l. Nucleic acids and proteins from streptococcus groups A & B
GB0103171D0 (en) * 2001-02-08 2001-03-28 Smithkline Beecham Biolog Vaccine composition
GB0103424D0 (en) 2001-02-12 2001-03-28 Chiron Spa Gonococcus proteins
GB0115176D0 (en) 2001-06-20 2001-08-15 Chiron Spa Capular polysaccharide solubilisation and combination vaccines
CN100350972C (zh) 2001-07-26 2007-11-28 启龙股份公司 含有铝佐剂和组氨酸的疫苗
GB0118249D0 (en) * 2001-07-26 2001-09-19 Chiron Spa Histidine vaccines
GB0121591D0 (en) 2001-09-06 2001-10-24 Chiron Spa Hybrid and tandem expression of neisserial proteins
GB0130123D0 (en) * 2001-12-17 2002-02-06 Microbiological Res Agency Outer membrane vesicle vaccine and its preparation
PT1524993E (pt) * 2002-08-02 2013-06-12 Glaxosmithkline Biolog Sa Composições de vacina de neisseria compreendendo uma combinação de antigénios

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2607021C2 (ru) * 2011-07-07 2017-01-10 Де Стат Дер Недерланден, Верт. Дор Де Министер Ван Ввс Способ бездетергентного получения везикул наружной мембраны грамотрицательной бактерии
US9707286B2 (en) 2011-07-07 2017-07-18 De Staat Der Nederlanden, Vert. Door De Minister Van Vws Ministerie Van Volksgezondheid, Welzun En Sport Process for detergent-free production of outer membrane vesicles of a gram-negative bacterium

Also Published As

Publication number Publication date
EP2258388A1 (en) 2010-12-08
JP2013139471A (ja) 2013-07-18
EP1864679A2 (en) 2007-12-12
CN102188700A (zh) 2011-09-21
ES2483592T3 (es) 2014-08-06
ES2520392T3 (es) 2014-11-11
CY1114570T1 (el) 2017-01-25
EP1534326B1 (en) 2007-07-04
GB0220194D0 (en) 2002-10-09
US20150258188A1 (en) 2015-09-17
DK1864679T3 (da) 2014-08-25
AU2003263534B2 (en) 2010-08-05
CY1107737T1 (el) 2013-04-18
PT1864679E (pt) 2014-09-25
EP1864679B1 (en) 2014-06-18
JP2006503822A (ja) 2006-02-02
AU2003263534A1 (en) 2004-03-19
CN1688334A (zh) 2005-10-26
ES2423019T3 (es) 2013-09-17
JP5808358B2 (ja) 2015-11-10
ES2289351T3 (es) 2008-02-01
EP2258390A1 (en) 2010-12-08
JP2010150287A (ja) 2010-07-08
MXPA05002316A (es) 2005-06-08
FR13C0046I1 (ru) 2013-09-06
BR0314094A (pt) 2005-11-16
CA2497165C (en) 2015-10-20
SI2258389T1 (sl) 2013-07-31
RU2005108994A (ru) 2006-02-10
LU92239I2 (fr) 2013-09-04
WO2004019977A2 (en) 2004-03-11
FR13C0046I2 (fr) 2014-05-16
BRPI0314094A8 (pt) 2018-04-03
EP2258389B1 (en) 2013-06-05
NZ538673A (en) 2008-04-30
CY1115777T1 (el) 2017-01-25
US20060166344A1 (en) 2006-07-27
EP1864679A3 (en) 2008-04-02
EP1534326A2 (en) 2005-06-01
DE60314756T2 (de) 2008-03-06
EP2258389A1 (en) 2010-12-08
SI1864679T1 (sl) 2014-10-30
PT2258389E (pt) 2013-08-22
WO2004019977A3 (en) 2004-07-15
EP2258388B1 (en) 2014-08-13
DK1534326T3 (da) 2007-10-22
DK2258389T3 (da) 2013-08-26
DE60314756D1 (de) 2007-08-16
ATE366117T1 (de) 2007-07-15
CA2497165A1 (en) 2004-03-11
PT1534326E (pt) 2007-10-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2325184C2 (ru) Улучшенные везикулы наружной мембраны бактерий
ES2369852T3 (es) Ultrafiltración y ultracentrifugación para preparar vesículas de membrana externa.
JP6077983B2 (ja) 外膜タンパク質を有する免疫原性細菌小胞
RU2475496C2 (ru) МЕНИНГОКОККОВЫЕ ПОЛИПЕПТИДЫ fHBP
JP5220658B2 (ja) 莢膜性多糖類の可溶化および組合せワクチン
JP2011236254A (ja) 髄膜炎菌外膜ベシクルに関する改良
JP2003514868A (ja) 血清型ＢおよびＣ由来のＮｅｉｓｓｅｒｉａｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ抗原、ならびにさらなる抗原を含む組成物
US20110262484A1 (en) Outer membrane vesicle prime-protein boost vaccine
JP4522699B2 (ja) アジュバント化されたＭｅｎｉｎｇｏｃｏｃｃｕｓ組成物
RU2360699C2 (ru) Композиции менингококковых вакцин с адъювантами
CN116898960A (zh) 细菌多糖蛋白缀合物及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
PD4A Correction of name of patent owner
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20160902