JP4522699B2 - アジュバント化されたMeningococcus組成物 - Google Patents
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Description
本明細書中に引用される全ての文書は、その全体を参考として援用される。
本発明は、ワクチンに関し、より詳細には、Neisseria meningitidisに対するワクチンに関する。
Neisseria meningitidis(髄膜炎菌)血清群A(1)およびB(2,3)に対するゲノム配列が報告された。血清群Bは、ワクチン抗原(例えば、参考4〜9)を同定するために研究されてきており、候補抗原は、異種発現を改善するように操作される(例えば、参考10〜12)。
ナイセリア抗原は、タンパク質抗原、タンパク質抗原をコードする核酸、またはサッカリド抗原であり得る。抗原は、好ましくは、レシピエント哺乳動物において、殺菌性または保護免疫応答(例えば、抗体応答)を生じる。
参考文献4、5、6、7、8または9のいずれか1つに開示されるタンパク質(特に、参考文献4に開示される446個の偶数配列番号(すなわち、2、4、6、...、890、892)、参考文献5に開示される45個の偶数配列番号(すなわち、2、4、6、...、88、90)および参考文献6に開示される1674個の偶数配列番号2〜3020、偶数配列番号3040〜3114、および全ての配列番号3115〜3241);
・参考文献4、5、6、7、8または9のいずれか1つに開示される1つ以上のタンパク質の免疫原性フラグメントを含む、タンパク質;
・参考文献4、5、6、7、8または9のいずれか1つに開示される1つ以上のタンパク質に対して配列同一性(好ましくは、50%より高い(例えば、60%、70%、80%、90%、95%、99%またはそれ以上))を有する配列を含むタンパク質;
・参考文献10、11または12のいずれか1つに開示されるタンパク質;
・参考文献10、11または12のいずれか1つに開示される1つ以上のタンパク質に対して配列同一性(好ましくは、50%より高い(例えば、60%、70%、80%、90%、95%、99%またはそれ以上))を有する配列を含むタンパク質。
CpGオリゴヌクレオチドは、ワクチンアジュバントとしての使用により公知であり[例えば、参考文献28]、そしてこれらは、強力なTh1免疫応答を誘導する。これらは、非経口アジュバントおよび粘膜アジュバントとして有用である[29]。
CpGオリゴヌクレオチドアジュバントの例は、参考文献30〜55に見出される。
生分解性ポリマー微粒子は、ワクチンアジュバントとしての使用により公知である[例えば、参考文献56]。これらは、非経口アジュバントおよび粘膜アジュバントとして有用である。
種々の物理的関係が、本発明の組成物の3つの基本成分の間で可能である。これらは、微粒子が内部容量および表面を有し、これらのいずれかがCpG−オリゴヌクレオチドおよび/または抗原を位置決めするために使用され得ることに起因して、生じる。
薬学的使用のために、本発明の組成物は、一般的に、薬学的に受容可能なキャリアを含む。これにより、本発明の薬学的組成物が与えられる。薬学的に受容可能なキャリアは、それ自体、この組成物を受容する患者に対して有害な抗体の産生を誘導せず、かつ過度の毒性を伴わずに投与され得る任意の物質であり得る。適切なキャリアは、大きく、徐々に代謝される高分子(例えば、タンパク質、多糖、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリマーアミノ酸、アミノ酸コポリマー、および不活性ウイルス粒子)であり得る。そのようなキャリアは、当業者に周知である。薬学的に受容可能なキャリアとしては、液体(例えば、水、生理食塩水、グリセロール、およびエタノール)が挙げられ得る。補助的物質(例えば、湿潤剤もしくは乳化剤、pH緩衝物質など)もまた、そのようなビヒクル内に存在し得る。リポリームは、適切なキャリアである。薬学的キャリアの徹底的な議論は、参考文献78において利用可能である。
本発明の組成物は、治療的に(すなわち、既存のナイセリア感染を処置するために)または予防的に(すなわち、未来のナイセリア感染を予防するために)用いられ得る。
本発明の組成物は、CpG−オリゴヌクレオチドおよびポリマー微粒子に加えてアジュバントを含み得る。好ましいさらなるアジュバントとしては、以下が挙げられるが、これらに限定されない:(A)アルミニウム化合物(例えば、水酸化アルミニウム、リン酸アルミニウム、アルミニウムヒドロキシホスフェート、オキシヒドロキシド、オルトホスフェート、スルフェートなど(例えば、参考文献13の第8章および第9章を参照のこと))、または異なるアルミニウム化合物の混合物であり、この化合物は任意の適切な形態(例えば、ゲル、結晶、非結晶など)をとり、そして吸着性(adsorption)であることが好ましい、化合物;(B)MF59(マイクロフルイダイザーを用いてサブミクロン粒子へと処方される、5% Squalene、0.5% Tween 80、および0.5% Span 85)(13の第10章を参照のこと;参考文献80もまた参照のこと);(C)リポソーム(参考文献13の第13章および第14章を参照のこと);(D)ISCOM(参考文献13の第23章を参照のこと)、これは、さらなる界面活性剤が全くなくてもよい(81);(E)10% Squalane、0.4% Tween 80、5%プルロニック(pluronic)ブロックポリマーL121、およびサブミクロン乳濁液にマイクロフルイダイズされるかまたはより大きな粒子サイズの乳濁液を作製するようにボルテックスされたかのいずれかのthr−MDPを含む、SAF(参考文献13の第12章を参照のこと);(F)2% Squalene、0.2% Tween 80、および以下:モノリン脂質A(MPL)、トレハロースジミコレート(TDM)、および細胞壁骨格(CWS)(好ましくは、MPL+CWS(DetoxTM))からなる群、からの細菌細胞壁成分の1つ以上を含む、RibiTMアジュバント系(RAS))(Ribi Immunochem);(G)QuilAまたはQS21(参考文献13の第22章を参照のこと)(StimulonTMとしても公知である)のようなサポニンアジュバント(82);(H)キトサン(例えば、83);(I)フロイント完全アジュバント(CFA)およびフロイント不完全アジュバント(IFA);(J)インターロイキン(例えば、IL−1、IL−2、IL−4、IL−5、IL−6、IL−7、IL−12など)、インターフェロン(例えば、インターフェロンγ)、マクロファージコロニー刺激因子、腫瘍壊死因子などのようなサイトカイン(参考文献13の第27章および第28章を参照のこと);(K)モノリン脂質A(MPL)または3−O−デアシル化MPL(3dMPL)(例えば、参考文献13の第21章);(L)3dMPLと、例えば、QS21および/または水中油乳濁液との組み合わせ(84);(M)ポリオキシエチレンエーテルまたはポリオキシエチレンエステル(85);(N)オクトキシノールと組み合わせたポリオキシエチレンソルビタンエステル界面活性剤(86)または少なくとも1つの追加の非イオン性界面活性剤(例えば、オクトキシノール)と組み合わせたポリオキエチレンアルキルエーテル界面活性剤またはポリオキエチレンアルキルエステル界面活性剤(87);(N)金属塩の粒子(88);(O)サポニンおよび水中油乳液(89);(P)サポニン(例えば、QS21)+3dMPL+IL−12(必要に応じて+ステロール)(90);(Q)E.coli熱不安定性腸毒素(「LT」)、またはK63もしくはR72変異体のようなそれらの無毒化変異体(例えば、参考文献91の第5章);(R)コレラ毒素(「CT」)またはその無毒化変異体(例えば、参考文献91の第5章);(S)二本鎖RNAならびに(T)組成物の効果を増強するような免疫刺激因子として作用する他の物質(例えば、参考文献13の第7章を参照のこと)。ミョウバン(alum)(特に、リン酸アルミニウムおよび/または水酸化アルミニウム)ならびにMF59は、非経口的免疫化にとって好ましいさらなるアジュバントである。変異体毒素は、好ましい粘膜アジュバントである。
−CagA(92〜95)、VacA(96、97)、NAP(98、99、100)、HopX(例えば、101)、HopY(例えば、101)および/もしくはウレアーゼのようなHelicobacter pylori由来の抗原。
−不活化ウイルスのような、A型肝炎ウイルス由来の抗原(例えば、109、110)。
用語「含む(comprising)」は、「含む(including)」および「からなる(consisting)」を意味する。例えば、Xを「含む」組成物は、排他的にXからなり得るか、またはさらなる何かを含み得る(例えば、X+Y)。
(Neisseria meningitidis血清群B抗原を用いる、非経口プライムおよび粘膜ブースト)
参考文献6は、血清群BのN.meningitidis由来のタンパク質(「287」と称される)を開示する。参考文献10〜12は、その発現を改善する方法を開示する。1つの方法は、このタンパク質のN末端を6つの反復グリシン残基まで(その反復グリシン残基を含む)を欠失させることを包含する。このタンパク質は、「ΔG287」と称される。
ΔG287を種々のアジュバントと共に処方し、そしてマウスに投与した。マウスからの血清を殺菌抗体(BCA)アッセイを用いて評価し、そして、力価は以下の通りであった:
アジュバント活性に対する吸着の効果を試験した。タンパク質ΔG287を、DSS界面活性剤またはSDSを用いてPLG微粒子に吸着させるか、または、単に粒子と混合させた。免疫を0日目、21日目および35日目に実施し、そして力価を35日目および49日目に評価した。結果は以下の通りである:
PLG、CpGおよびミョウバンの種々の組合せを、タンパク質ΔG287について試験し、Hisタグ化産物として発現した。3つの免疫後の、血清殺菌力価は、以下である:
アジュバント性に対する吸着の効果を、タンパク質ΔG287およびタンパク質961cについて、単独および合わせて研究した。3用量後の抗体力価は以下の通りであった:
Claims (18)
- (a)ナイセリア抗原;
(b)CpGオリゴヌクレオチド;および
(c)生体分解性ポリマー微粒子
を含む免疫原性組成物であり、
ここで該ナイセリア抗原はナイセリア・メニンギチジス(Neisseria meningitidis)ΔG287タンパク質を含み、レシピエント哺乳動物におけるナイセリア・メニンギチジスに対する殺菌性免疫応答を誘導し得る抗原である、
免疫原性組成物。 - 前記CpGオリゴヌクレオチドが、6〜100のデオキシリボヌクレオチドを含む、請求項1に記載の組成物。
- 前記生体分解性ポリマー微粒子が、ポリ(α−ヒドロキシ酸)を含む、請求項1または2に記載の組成物。
- 前記微粒子が、ポリ(D,L−ラクチド−co−グリコリド)を含む、請求項3に記載の組成物。
- ナイセリア抗原が前記微粒子中に捕捉されている、請求項1〜4のいずれか1項に記載の組成物。
- ナイセリア抗原が前記微粒子に吸着されている、請求項1〜5のいずれか1項に記載の組成物。
- CpGオリゴヌクレオチドが前記微粒子中に捕捉されている、請求項1〜6のいずれか1項に記載の組成物。
- CpGオリゴヌクレオチドが前記微粒子に吸着されている、請求項1〜7のいずれか1項に記載の組成物。
- アジュバントをさらに含む、請求項1〜8のいずれか1項に記載の組成物。
- MF59アジュバントを含む、請求項9に記載の組成物。
- アルミニウム塩アジュバントを含む、請求項9に記載の組成物。
- 少なくとも1つの非ナイセリア抗原をさらに含む、請求項1〜11のいずれか1項に記載の組成物。
- 薬学的に受容可能なキャリアをさらに含む、請求項1〜12のいずれかに記載の組成物。
- 医薬として使用するための、請求項1〜13のいずれか1項に記載の組成物。
- 哺乳動物における抗体応答を惹起するための、請求項1〜13のいずれか1項に記載の組成物。
- ナイセリア感染および/または疾患に罹患した哺乳動物を処置するための、請求項1〜13のいずれか1項に記載の組成物。
- ナイセリア感染および/または疾患に対して哺乳動物を保護するための、請求項1〜13のいずれか1項に記載の組成物。
- 哺乳動物における疾患および/または感染を予防または処置するための医薬の製造における、(a)ナイセリア・メニンギチジス(Neisseria meningitidis)ΔG287タンパク質を含むナイセリア抗原、(b)CpGオリゴヌクレオチド、および(c)生体分解性ポリマー微粒子の使用。
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