RU2161502C2 - Композиция для пролонгированного высвобождения гормона роста человека - Google Patents
Композиция для пролонгированного высвобождения гормона роста человека Download PDFInfo
- Publication number
- RU2161502C2 RU2161502C2 RU97119935/14A RU97119935A RU2161502C2 RU 2161502 C2 RU2161502 C2 RU 2161502C2 RU 97119935/14 A RU97119935/14 A RU 97119935/14A RU 97119935 A RU97119935 A RU 97119935A RU 2161502 C2 RU2161502 C2 RU 2161502C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- hgh
- polymer
- metal cation
- growth hormone
- composition according
- Prior art date
Links
- 102000002265 Human Growth Hormone Human genes 0.000 title claims abstract description 250
- 108010000521 Human Growth Hormone Proteins 0.000 title claims abstract description 250
- 239000000854 Human Growth Hormone Substances 0.000 title claims abstract description 247
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 71
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 title claims description 36
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 title claims description 36
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 claims abstract description 45
- 239000002184 metal Substances 0.000 claims abstract description 45
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 claims abstract description 44
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 claims abstract description 13
- RKDVKSZUMVYZHH-UHFFFAOYSA-N 1,4-dioxane-2,5-dione Chemical compound O=C1COC(=O)CO1 RKDVKSZUMVYZHH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 229920000249 biocompatible polymer Polymers 0.000 claims abstract description 10
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 claims abstract description 10
- JJTUDXZGHPGLLC-UHFFFAOYSA-N lactide Chemical compound CC1OC(=O)C(C)OC1=O JJTUDXZGHPGLLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 9
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Polymers OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 7
- PTFCDOFLOPIGGS-UHFFFAOYSA-N Zinc dication Chemical compound [Zn+2] PTFCDOFLOPIGGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 7
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 5
- 239000005556 hormone Substances 0.000 claims abstract description 4
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 claims abstract description 4
- 239000004417 polycarbonate Substances 0.000 claims abstract description 4
- 229920001610 polycaprolactone Polymers 0.000 claims abstract description 3
- 229920000515 polycarbonate Polymers 0.000 claims abstract description 3
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 claims abstract 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims description 94
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 39
- 239000011701 zinc Substances 0.000 claims description 31
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- -1 poly (alkenoxalate) Polymers 0.000 claims description 5
- ZOIORXHNWRGPMV-UHFFFAOYSA-N acetic acid;zinc Chemical compound [Zn].CC(O)=O.CC(O)=O ZOIORXHNWRGPMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 claims description 3
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000004246 zinc acetate Substances 0.000 claims description 3
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 claims description 2
- 229920002732 Polyanhydride Polymers 0.000 claims description 2
- 229920002463 poly(p-dioxanone) polymer Polymers 0.000 claims description 2
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 claims description 2
- 229920002635 polyurethane Polymers 0.000 claims description 2
- 239000004814 polyurethane Substances 0.000 claims description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 229940065514 poly(lactide) Drugs 0.000 claims 2
- 229920001710 Polyorthoester Polymers 0.000 claims 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims 1
- 229920001308 poly(aminoacid) Polymers 0.000 claims 1
- 239000002745 poly(ortho ester) Substances 0.000 claims 1
- 239000004632 polycaprolactone Substances 0.000 claims 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 claims 1
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 25
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 abstract description 8
- 239000008280 blood Substances 0.000 abstract description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 abstract description 5
- 206010062767 Hypophysitis Diseases 0.000 abstract description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 abstract description 3
- 238000011282 treatment Methods 0.000 abstract description 3
- 229920000954 Polyglycolide Polymers 0.000 abstract 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 52
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 35
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 27
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 27
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 19
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 17
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 17
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 15
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 15
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 14
- FMRLDPWIRHBCCC-UHFFFAOYSA-L Zinc carbonate Chemical compound [Zn+2].[O-]C([O-])=O FMRLDPWIRHBCCC-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 13
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 13
- 239000011667 zinc carbonate Substances 0.000 description 13
- 235000004416 zinc carbonate Nutrition 0.000 description 13
- 229910000010 zinc carbonate Inorganic materials 0.000 description 13
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 11
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 10
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 9
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 9
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 8
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 8
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 7
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 7
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 7
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 6
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 6
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 6
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 6
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 6
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 5
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 5
- 230000036571 hydration Effects 0.000 description 5
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N Pentane Chemical compound CCCCC OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 4
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 4
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 4
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 4
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 4
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 3
- 108090000723 Insulin-Like Growth Factor I Proteins 0.000 description 3
- 241000282560 Macaca mulatta Species 0.000 description 3
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 229920002988 biodegradable polymer Polymers 0.000 description 3
- 239000004621 biodegradable polymer Substances 0.000 description 3
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 3
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 3
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 3
- 230000003628 erosive effect Effects 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 3
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 3
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 3
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004218 Insulin-Like Growth Factor I Human genes 0.000 description 2
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 2
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 239000012062 aqueous buffer Substances 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 2
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000003405 delayed action preparation Substances 0.000 description 2
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 2
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 2
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 210000003635 pituitary gland Anatomy 0.000 description 2
- 238000012667 polymer degradation Methods 0.000 description 2
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 2
- 229940068977 polysorbate 20 Drugs 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 238000000935 solvent evaporation Methods 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 2
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 2
- 206010003497 Asphyxia Diseases 0.000 description 1
- 206010013883 Dwarfism Diseases 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000792859 Enema Species 0.000 description 1
- 101001044927 Homo sapiens Insulin-like growth factor-binding protein 3 Proteins 0.000 description 1
- 102100022708 Insulin-like growth factor-binding protein 3 Human genes 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 102000013275 Somatomedins Human genes 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 1
- 230000006472 autoimmune response Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920003123 carboxymethyl cellulose sodium Polymers 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 238000005266 casting Methods 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 230000000536 complexating effect Effects 0.000 description 1
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 1
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 239000007920 enema Substances 0.000 description 1
- 229940079360 enema for constipation Drugs 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000013265 extended release Methods 0.000 description 1
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 1
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 229920001480 hydrophilic copolymer Polymers 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 230000000899 immune system response Effects 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 238000001155 isoelectric focusing Methods 0.000 description 1
- 238000012153 long-term therapy Methods 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000008447 perception Effects 0.000 description 1
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005191 phase separation Methods 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 230000001817 pituitary effect Effects 0.000 description 1
- 238000002264 polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 229920002721 polycyanoacrylate Polymers 0.000 description 1
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 1
- 239000003505 polymerization initiator Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000004845 protein aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000002731 protein assay Methods 0.000 description 1
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 238000013222 sprague-dawley male rat Methods 0.000 description 1
- 238000012453 sprague-dawley rat model Methods 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- IHBMMJGTJFPEQY-UHFFFAOYSA-N sulfanylidene(sulfanylidenestibanylsulfanyl)stibane Chemical compound S=[Sb]S[Sb]=S IHBMMJGTJFPEQY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B82—NANOTECHNOLOGY
- B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
- B82Y5/00—Nanobiotechnology or nanomedicine, e.g. protein engineering or drug delivery
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
- A61K38/27—Growth hormone [GH], i.e. somatotropin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
- A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
- A61K9/1611—Inorganic compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
- A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
- A61K9/1629—Organic macromolecular compounds
- A61K9/1641—Organic macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, poloxamers
- A61K9/1647—Polyesters, e.g. poly(lactide-co-glycolide)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/02—Drugs for disorders of the endocrine system of the hypothalamic hormones, e.g. TRH, GnRH, CRH, GRH, somatostatin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/06—Drugs for disorders of the endocrine system of the anterior pituitary hormones, e.g. TSH, ACTH, FSH, LH, PRL, GH
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nanotechnology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Изобретение может быть использовано в медицине для лечения пациентов, страдающих от карликовости в связи с гипофункцией гипофиза. Композиция содержит гормон человеческого роста в виде комплексного соединения с катионом металла и биосовместимый полимер. Молярное отношение катионов металла к человеческому гормону роста больше, чем 4:1 и меньше или равно 10:1. Катионом металла может быть Zn(II), Mg(II). Предпочтительным биосовместим полимером может быть полилактид, полигликолид, сополимер лактида и гликолида, поликапролактон, поликарбонат и др. Катионы металла при получении комплекса могут быть введены в виде водорастворимых солей. Состав композиции обеспечивает стабильное и длительное обеспечение заданных уровней содержания человеческого гормона роста в крови, и повышенный терапевтический эффект. 17 з.п. ф-лы, 2 табл.
Description
Человеческий гормон роста (hGH, или ЧГР) - это белок, который секретируется гипофизом и может быть получен также методом рекомбинантной генной инженерии. ЧГР вызывает рост всех тканей организма, которые способны расти.
Обычно ЧГР применяется при лечении пациентов, страдающих от карликовости в связи с гипофункцией гипофиза. В настоящее время водный раствор ЧГР вводится пациентам подкожно, в виде болюса три раза в неделю или ежедневно для того, чтобы поддерживать требуемый уровень ЧГР в сыворотке крови. У больных, постоянно принимающих ЧГР, частые инъекции могут приводить к проблемам переносимости данного режима лечения.
Чтобы разрешить проблемы, связанные с повторными инъекциями водных растворов ЧГР, предпринимались попытки создать препараты с контролируемым высвобождением ЧГР, содержащие более высокие дозы ЧГР, чем при инъекциях болюса, и капсулированные внутри полимерной матрицы, с тем чтобы высвобождение ЧГР in vivo происходило в течение недели или более длительного периода.
Однако подобные препараты с контролируемым высвобождением часто давали высокое начальное высвобождение ЧГР с минимальной скоростью высвобождения впоследствии. Кроме того, в связи с высокой концентрацией ЧГР внутри подобных препаратов с контролируемым высвобождением спустя несколько дней наблюдалась тенденция к агрегации молекул ЧГР с образованием агрегированного ЧГР, который является иммуногеном in vivo и, вероятно, имеет пониженную биологическую активность.
Известна также композиция для пролонгированного высвобождения человеческого гормона роста, предложенная в международной заявке PCT/US93/11621, принадлежащей заявителю настоящего изобретения и опубликованной как документ WO 94/12158. Эта композиция - биосовместимый полимер, частицы человеческого гормона роста и катионы металла, присутствующие в виде солей, например, цинка.
В указанной композиции молярное отношение соли металла к человеческому гормону роста рекомендуется выбирать в интервале от 1:10 до 4:1, причем отношение молярное отношение катиона металла к указанному гормону не превышает 4:1.
Хотя данная композиция, приготавливаемая в виде микросфер, более эффективна, чем другие композиции этого типа, стабильность выделения ЧГР при ее применении все же недостаточнo высока.
В связи с этим продолжает существовать потребность в средствах обеспечения стабильного пролонгированного высвобождения биологически активного ЧГР in vivo, не вызывающих реакцию иммунной системы в течение периода высвобождения ЧГР.
Сущность изобретения
Настоящее изобретение относится к композиции, а также к способам формирования и использования этой композиции для пролонгированного высвобождения биологически активного, стабилизированного человеческого гормона роста (ЧГР). Композиция по настоящему изобретению, обеспечивающая пролонгированное высвобождение ЧГР, содержит полимерную матрицу на основе биосовместимого полимера и частицы биологически активного ЧГР, стабилизированного катионом металла, причем указанные частицы диспергированы по биосовместимому полимеру.
Настоящее изобретение относится к композиции, а также к способам формирования и использования этой композиции для пролонгированного высвобождения биологически активного, стабилизированного человеческого гормона роста (ЧГР). Композиция по настоящему изобретению, обеспечивающая пролонгированное высвобождение ЧГР, содержит полимерную матрицу на основе биосовместимого полимера и частицы биологически активного ЧГР, стабилизированного катионом металла, причем указанные частицы диспергированы по биосовместимому полимеру.
Способ приготовления композиции пролонгированного высвобождения ЧГР согласно настоящему изобретению включает растворение биосовместимого полимера в растворителе для полимера с образованием полимерного раствора, диспергирование в этом полимерном растворе биологически активного стабилизированного ЧГР и последующее отвердевание полимера с формированием полимерной матрицы, содержащей указанные диспергированные частицы ЧГР.
Способ использования композиции для пролонгированного высвобождения ЧГР согласно настоящему изобретению включает обеспечение терапевтически эффективного содержания биологически активного неагрегированного гормона роста человека в крови пациента для стабильного пролонгированного снабжения пациента соответствующими дозами указанной композиции пролонгированного высвобождения.
Достоинствами указанной композиции для пролонгированного высвобождения ЧГР являются более стабильное и длительное обеспечение заданных уровней содержания ЧГР в крови in vivo, меньшие начальные всплески уровня ЧГР и повышенный терапевтический эффект благодаря устранению флуктуаций уровня ЧГР в сыворотке крови. Среди других достоинств - лучшее восприятие со стороны пациентов в связи с сокращением необходимого количества инъекций. Еще одним достоинством является возможность использования меньших количеств ЧГР по сравнению со способом инъекций болюсов, поскольку уровень содержания ЧГР в сыворотке крови поддерживается более близким к терапевтическому порогу.
Сведения, подтверждающие возможность осуществления изобретения
Человеческий гормон роста (ЧГР), используемый в настоящем изобретении, - это биологически активный ЧГР в молекулярной (мономерной, или неагрегированной) форме. Как правило, молекулярный ЧГР является неиммуногенным.
Человеческий гормон роста (ЧГР), используемый в настоящем изобретении, - это биологически активный ЧГР в молекулярной (мономерной, или неагрегированной) форме. Как правило, молекулярный ЧГР является неиммуногенным.
Агрегированный ЧГР может вызывать иммунологический ответ, приводящий к образованию антител, воздействующих на ЧГР. Это может снижать эффективность длительной терапии ЧГР. Кроме того, агрегированный ЧГР может стимулировать аутоиммунную реакцию на эндогенный ЧГР.
Пролонгированное высвобождение биологически активного неагрегированного человеческого гормона роста приводит к поддержанию измеримого уровня биологически активного мономерного ЧГР в течение более длительного периода, чем после прямого введения ЧГР в водном растворе. Предпочтительно, чтобы пролонгированное высвобождение ЧГР продолжалось в течение примерно недели или долее, еще более предпочтительно - в течение не менее двух недель.
Пролонгированное высвобождение биологически активного неагрегированного ЧГР из полимерной матрицы может быть непрерывным или прерывистым, с относительно постоянной или варьируемой скоростью высвобождения. Непрерывность высвобождения ЧГР и уровень высвобождения ЧГР могут, среди прочих способов, обеспечиваться использованием одного или нескольких типов полимерной композиции, варьированием содержания ЧГР и/или выбором наполнителей, обеспечивающих желаемый эффект.
Стабилизированный ЧГР содержит биологически активный неагрегированный ЧГР, образующий комплексное соединение по меньшей мере с многовалентным катионом металла одного типа, имеющим валентность +2 и выше, из компонента катиона металла. Стабилизированный ЧГР входит в композицию пролонгированного высвобождения в форме частиц.
Подходящие многовалентные катионы металлов включают катионы металлов в состав биосовместимых компонентов катионов металлов. Компонент катиона металла (или металло-катионный компонент) является биосовместимым, если этот компонент в применяемых количествах нетоксичен для реципиента и, кроме того, если он не создает никаких вредных или нежелательных эффектов для тела реципиента, таких как иммунологическая реакция в месте инъекции.
В типичном случае молярное отношение металло-катионного компонента к ЧГР применительно к катиону металла для стабилизации ЧГР выбирается в интервале от примерно 4:1 до примерно 10:1.
Предпочтительным катионом для стабилизации ЧГР является Zn+2. В предпочтительном варианте осуществления молярное отношение компонента, содержащего катионы Zn+2, к ЧГР составляет примерно 6:1.
Пригодность катиона металла для стабилизации ЧГР может быть определена специалистом в данной области путем выполнения различных процедур, указывающих на стабильность, таких как электрофорез в полиакриламидном геле, изоэлектрофокусировка, обратнофазовая хроматография, жидкостная хроматография высокого давления, а также тесты действенности с использованием лиофилизованных частиц ЧГР, содержащих катионы металла, для определения действенности ЧГР после лиофилизации и длительности его высвобождения из микрочастиц. В случае стабилизированного ЧГР тенденция ЧГР к агрегации в пределах микрочастицы во время гидратации in vivo и/или к потере биологической активности (или действенности) в связи с гидратацией, а также вследствие процесса формирования композиции с пролонгированным высвобождением или в связи с химическими характеристиками подобной композиции, ослабляется путем комплексирования с ЧГР по меньшей мере одного типа катиона металла перед введением ЧГР в контакт с раствором полимера.
Стабилизация ЧГР предотвращает существенную агрегацию in vivo в течение всего времени пролонгированного высвобождения. Существенная агрегация определяется как агрегация примерно 15% или более от начального количества инкапсулированного мономера ЧГР. Предпочтительно, чтобы агрегация поддерживалась на уровне менее 5% от начальной дозы инкапсулированного мономера ЧГР. Еще более предпочтительным является уровень ниже 2% от начальной дозы.
ЧГР в составе композиции пролонгированного высвобождения ЧГР может также смешиваться с другими компонентами, такими как наполнители или дополнительные стабилизирующие добавки, например, буферными веществами для стабилизации ЧГР во время лиофилизации.
Наполнители обычно содержат инертные материалы. Подходящие наполнители известны специалистам в данной области.
Полимеры, или полимерные матрицы, подходящие для использования в композиции пролонгированного высвобождения, должны быть биосовместимыми. Полимер считается биосовместимым, если он и любые продукты его деградации нетоксичны для реципиента и, кроме того, не создают никаких вредных или нежелательных эффектов для тела реципиента, таких как иммунологическая реакция в месте инъекции.
Полимер, входящий в композицию пролонгированного высвобождения, должен также быть биодеградируемым. Применительно к изобретению это означает, что композиция будет деградировать, или разрушаться in vivo с образованием более мелких химических образований. Деградация может являться результатом ферментативных, химических и физических процессов.
К подходящим биосовместимым биодеградируемым полимерам относятся, например, поли(лактиды), поли(гликолиды), сополимеры лактидов и гликолидов, полимеры молочной кислоты, полимеры гликолевой кислоты, сополимеры молочной кислоты и гликолевой кислоты, поликапролактоны, поликарбонаты, полиамидоэфиры, полиангидриды, полиаминокислоты, полиортоэфиры, полицианакрилаты, поли(p-диоксанон), поли(алкеноксалаты), биодеградируемые полиуретаны, а также их смеси и сополимеры.
При этом концевые группы полимера могут быть модифицированы. Например, полиэфиры могут являться или не являться блокированными, а также представлять собой смесь блокированных и неблокированных полимеров. Блокированный полимер, например, специфически имеет блокированные концевые карбоксильные группы. В общем случае блокирующая группа происходит из инициатора полимеризации, как правило, является алкильной группой. Характерной особенностью неблокированных полимеров является наличие свободных концевых карбоксильных групп.
Приемлемые молекулярные массы полимеров, используемых согласно данному изобретению, могут быть установлены специалистом в данной области техники с учетом таких факторов, как желаемая скорость деградации полимера, его физические свойства, такие как механическая прочность и скорость растворения в растворителе. Типичный диапазон приемлемых молекулярных масс составляет от примерно 2000 дальтон до примерно 2000000 дальтон. В предпочтительном варианте изобретения используется биодеградируемый полимер или сополимер. В более предпочтительном варианте полимер представляет собой сополимер лактида и гликолида (далее обозначаемый как СЛГ) с соотношением лактид/гликолид примерно 1: 1 и с молекулярной массой от примерно 5000 дальтон до примерно 70000 дальтон. В еще более предпочтительном варианте осуществления изобретения молекулярная масса используемого СЛГ составляет от примерно 5000 дальтон до примерно 42000 дальтон. Согласно еще более предпочтительному варианту осуществления изобретения используемый СЛГ имеет молекулярную массу в интервале от примерно 6000 до примерно 31000 дальтон.
Количество ЧГР, которое содержится в одной дозе микрочастиц пролонгированного высвобождения или в альтернативных вариантах систем пролонгированного высвобождения, содержащих частицы биологически активного стабилизированного ЧГР, соответствует терапевтически или профилактически эффективному количеству, которое может быть определено специалистом в данной области с учетом таких факторов, как вес тела, состояние, подлежащее лечению, тип используемого полимера, а также скорость высвобождения из полимера.
В одном из вариантов осуществления, ЧГР-композиция пролонгированного высвобождения содержит от около 0,01% (по весу) до около 50% (по весу) биологически активных стабилизированных частиц ЧГР. Количество таких используемых частиц будет изменяться в зависимости от желаемого действия ЧГР, планируемых уровней высвобождения, а также интервала времени, в течение которого должен высвобождаться ЧГР. Предпочтительным является диапазон содержания частиц ЧГР от примерно 0,1% (по весу) до примерно 30% (по весу). Более предпочтительный диапазон содержания частиц ЧГР заключен между примерно 0,1% (по весу) и примерно 20% (по весу). Наиболее предпочтительным является содержание биологически активных стабилизированных частиц ЧГР на уровне около 15% (по весу).
В другом варианте осуществления изобретения, ЧГР-композиция пролонгированного высвобождения содержит также второй металло-катионный компонент, который не входит в состав стабилизированных частиц ЧГР и диспергирован по полимеру. Этот второй компонент предпочтительно содержит катион металла того же типа, который содержится в стабилизированном ЧГР. В качестве альтернативы второй металло-катионный компонент может содержать один или несколько катионов металла другого типа.
Второй металло-катионный компонент модулирует скорость высвобождения ЧГР из полимерной матрицы композиции пролонгированного высвобождения, действуя как бы в качестве резервуара катионов металла для дополнительного увеличения периода времени, в течение которого катионы металла стабилизируют ЧГР, повышая тем самым стабильность ЧГР в композиции.
В типичном случае металло-катионный компонент, применяемый для модификации высвобождения, содержит по меньшей мере многовалентный катион металла одного типа. Примерами второго катиона металла, пригодного для модификации высвобождения ЧГР, могут служить Mg(OH)2, MgCO3 (например, 4MgCO3·Mg(OH)2·5H2O), ZnCO3 (например, 3Zn(OH)2·2ZnCO3), CaCO3, Zn3(C6H5O7)2, Mg(OAc)2, MgSO4, Zn(OAc)2, ZnSO4, ZnCl2, и Mg3(C6H5O7)2. Рекомендуемое отношение второго металло-катионного компонента к полимеру находится в интервале от примерно 1:99 до 1:2 по весу. Оптимальное отношение зависит от используемого полимера и компонента катиона металла.
Полимерная матрица, содержащая диспергированный металло-катионный компонент, предназначенный для модификации высвобождения биологически активного агента из полимерной матрицы, подробно описана в патенте США N 5656297 и в международной заявке N PCT/US95/05511, сведения из которых включены в настоящее описание путем ссылки на указанную заявку.
Композиции ЧГР пролонгированного высвобождения в соответствии с настоящим изобретением может быть придана различная форма, например пленки, таблетки, цилиндра, диска или микрочастицы. Микрочастица, рассматриваемая в контексте настоящего изобретения, содержит полимерный компонент с размерами менее 1 мм, внутри которого диспергированы стабилизированные частицы ЧГР. Микрочастица может иметь сферическую, несферическую или неправильную форму. Предпочтительно, чтобы микрочастица была микросферой. В типичном случае размеры микрочастицы должны быть удобны для ее инъекции. Предпочтительный диапазон размеров микрочастиц составляет примерно от 1 до 180 мкм в диаметре.
Согласно способу формирования композиции для пролонгированного высвобождения биологически активного неагрегированного ЧГР, соответствующее количество частиц биологически активного стабилизированного ЧГР диспергируют в растворе полимера.
Подходящий раствор полимера содержит от примерно 1% (по весу) до примерно 30% (по весу) соответствующего биосовместимого полимера, растворенного в подходящем растворителе. Предпочтительно раствор полимера содержит от примерно 2% (по весу) до примерно 20% (по весу). Наиболее предпочтительным является раствор, содержащий от 5% до примерно 10% полимера (по весу).
В качестве подходящего растворителя полимера здесь рассматривается растворитель, в котором растворяется полимер, но который практически не растворяет стабилизированные частицы ЧГР и не реагирует с ними. Примерами подходящих растворителей полимеров могут служить полярные органические жидкости, такие как метиленхлорид, хлороформ, этилацетат и ацетон.
Для того чтобы приготовить активные стабилизированные частицы ЧГР, ЧГР смешивают в подходящем водном растворителе с по меньшей мере одним металло-катионным компонентом при pH, подходящем для формирования комплекса катион металла - ЧГР.
Уровень pH, подходящий для формирования комплекса ЧГР, в типичном случае лежит в интервале от примерно 7,0 до примерно 7,4. Этот уровень обычно обеспечивается использованием в качестве растворителя водного буфера, такого как гидрокарбонат натрия.
В качестве подходящих растворителей рассматриваются такие, в которых обеспечивается хотя бы слабая растворимость ЧГР и катиона металла, например водный буфер на основе гидрокарбоната натрия. Применительно к водным растворителям желательно, чтобы использовалась деионизированная вода или вода для инъекций.
Следует учитывать, что до вступления в контакт с металло-катионным компонентом ЧГР может находиться как в твердом, так и в растворенном состоянии. Аналогично указанный компонент до вступления в контакт с ЧГР также может находиться как в твердом, так и в растворенном состоянии. В предпочтительном варианте буферный водный раствор ЧГР смешивают с водным раствором металло-катионного компонента.
В типичном случае комплексное соединение ЧГР имеет вид мутного осадка, который суспензирован в растворе. Однако он может существовать и в растворенной форме. В еще более предпочтительном варианте осуществления ЧГР образует комплексное соединение с Zn+2.
Затем комплексное соединение ЧГР высушивают, например лиофилизацией, с образованием частиц стабилизированного ЧГР. Лиофилизации могут быть подвергнуты либо вся порция полученного комплекса ЧГР в виде суспензии или раствора, либо последовательно небольшие части этой порции. Согласно предпочтительному варианту суспензию комплексного ЧГР подвергают сначала тонкому измельчению, например с помощью ультразвукового сопла, а затем лиофилизации с образованием частиц стабилизированного ЧГР. При осуществлении лиофилизации комплексного ЧГР применяют известные специалистам средства, предназначенные для этой цели.
Предпочтительно, чтобы частицы стабилизированного ЧГР имели размеры порядка от 1 до 6 мкм в диаметре. Частицы ЧГР могут быть подвергнуты раздельной фрагментации, как это описано в патентной заявке США N 08/006682 того же заявителя с приоритетом 21 июня 1993 г., которая относится к способу получения малых частиц биологически активных агентов (описание к этой заявке полностью включено в настоящее описание путем ссылки на него). В качестве альтернативы частицы ЧГР могут быть фрагментированы после добавления их в полимерный раствор, например с применением ультразвукового зонда или сопла.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения второй металло-катионный компонент, который не содержится в стабилизированных частицах ЧГР, также диспергируют в полимерном растворе.
Подразумевается, что второй металло-катионный компонент и стабилизированный ЧГР могут быть диспергированы в полимерный раствор путем добавления поочередно, в обратном порядке, чередующимися порциями, раздельно или одновременно. В альтернативном варианте полимер, второй металло-катионный компонент и стабилизированный ЧГР могут быть смешаны с образованием полимерного раствора путем добавления поочередно, в обратном порядке, чередующимися порциями, раздельно или одновременно.
Способ формирования композиции для модуляции высвобождения биологически активного агента из биодеградируемого полимера дополнительно описан в патентной заявке США N 08/237057 того же заявителя.
Согласно этому способу на следующем этапе растворитель полимера переводят в твердую фазу, формируя тем самым полимерную матрицу, содержащую диспергированные в ней частицы стабилизированного ЧГР.
Подходящий способ формирования композиции ЧГР с пролонгированным высвобождением из полимерного раствора состоит в испарении растворителя, как это описано в патентах США N 3737337, 3523906, 3691090, 4389330. Испарение растворителя - это типичный способ получения микрочастиц ЧГР с пролонгированным высвобождением.
При использовании метода испарения растворителя полимерный раствор, содержащий диспергированные в нем частицы стабилизированного ЧГР, перемешивают с жидкой фазой, частично смешиваемой с полимерный раствором, для образования эмульсии. В качестве жидкой фазы обычно используют водный растворитель. С целью стабилизации эмульсии часто в жидкую фазу добавляют эмульгаторы. Затем осуществляют испарение полимерного раствора в течение нескольких часов и более с образованием полимерной матрицы, внутри которой диспергированы частицы стабилизированного ЧГР.
Предпочтительный способ формирования микрочастиц ЧГР пролонгированного высвобождения из полимерного раствора раскрыт в патенте США N 5019400, а также в патентной заявке США N 08/443726 с приоритетом 14 мая 1995 г., опубликованной 21 ноября 1996 г. как документ WO 96/36317, сведения из которых полностью включены в настоящее описание посредством ссылки на них. По сравнению с другими способами, например с фазовым разделением, этот способ формирования микросфер дополнительно уменьшает количество ЧГР, необходимое для получения композиции пролонгированного высвобождения с заданным содержанием ЧГР.
Согласно этому способу полимерный раствор, содержащий диспергированные в нем частицы стабилизированного ЧГР, обрабатывают с образованием капелек, по меньшей мере существенная часть которых содержит полимерный раствор и стабилизированные частицы ЧГР. Эти капельки затем замораживают с использованием средств, позволяющих сформировать микрочастицы. Варианты обработки полимерного раствора с образованием капелек включают подачу дисперсии через ультразвуковое сопло, подачу к соплу под давлением, формирование струи и другие известные средства получения капелек.
Средства, пригодные для замораживания капель с образованием микрочастиц, включают подачу капель в сжиженный газ, такой как жидкий аргон или жидкий азот, или в смежную с ним зону для получения микрокапелек, которые затем отделяют от сжиженного газа. После этого замороженные микрокапельки вводят в контакт с нерастворяющейся жидкостью, такой как этанол или смесь этанола с гексаном или пентаном.
Растворитель, входящий в состав замороженных микрокапелек, экстрагируется в нерастворяющую жидкость в виде твердого вещества и/или жидкости с формированием микрочастиц, содержащих стабилизированный ЧГР. Смешивание этанола с другими нерастворяющими жидкостями, такими как гексан или пентан, может привести к повышению скорости экстракции растворителя из некоторых полимеров, таких как сополимер лактида и гликолида, по сравнению с применением только этанола.
Варьируя размер капелек, например изменением диаметра ультразвукового сопла, можно формировать микрочастицы с пролонгированным высвобождением ЧГР в широком диапазоне размеров. Если требуются очень большие микрочастицы, их можно экструдировать через шприц непосредственно в холодную жидкость. Повышение вязкости раствора полимера также может привести к увеличению диаметра микрочастиц. Размеры микрочастиц, формируемых по данному способу, могут варьировать в диапазоне от более 1000 мкм в диаметре до 1 мкм и менее.
Еще один способ формирования композиции ЧГР пролонгированного высвобождения из полимерного раствора состоит в отливке пленки из раствора, с использованием соответствующей формы. Например, после заливки полимерного раствора, содержащего диспергированные в нем частицы стабилизированного ЧГР, в форму с использованием средств, известныx специалистам, удаляют растворитель полимера или понижают температуру полимерного раствора до получения пленки с постоянным сухим весом. Отливка пленки из полимерного раствора, содержащего биологически активный агент, подробно описана в патентной заявке США N 08/237057 того же заявителя, информация из которой включена в настоящее описание путем ссылки на нее.
Предполагается, что высвобождение ЧГР может происходить по двум различным механизмам. Во-первых, высвобождение ЧГР может быть связано с его диффузией через заполненные водой каналы, которые образуются в полимерной матрице, например за счет растворения ЧГР, или через полости, возникающие при удалении растворителя полимера в процессе синтеза композиции с пролонгированным высвобождением.
Второй механизм состоит в высвобождении ЧГР за счет деградации полимера. Скорость деградации можно регулировать путем изменения свойств полимера, которые влияют на скорость его гидратации. Такими свойствами являются, например, соотношение различных мономеров, образующих полимер, в частности, лактида и гликолида; использование L-изомера мономера, вместо рацемической смеси; а также молекулярный вес полимера. Эти свойства могут влиять на гидрофильность и кристалличность, которые, в свою очередь, определяют скорость гидратации полимера. Гидрофильные наполнители, такие как соли, углеводороды и поверхностно-активные вещества, также могут быть применены, чтобы увеличить гидратацию и тем самым изменить скорость эрозии полимера.
Изменяя свойства полимера, можно контролировать вклад диффузии и/или деградации полимера в высвобождение ЧГР. Например, повышение содержания гликолида в сополимере лактида и гликолида и уменьшение молекулярной массы полимера может усилить гидролиз полимера и таким образом обеспечить ускоренное высвобождение ЧГР за счет эрозии полимера.
Кроме того, скорость гидролиза полимера увеличивается при значениях pH, отличных от нейтральных. Поэтому для того, чтобы изменить скорость эрозии полимера, в полимерный раствор, используемый для формирования микросфер, могут добавляться кислотные или основные наполнители.
Композиция согласно настоящему изобретению может вводиться в организм человека или животного для обеспечения лечения ЧГР при различных медицинских показаниях путем инъекции, имплантации (подкожно, внутримышечно, внутрибрюшинно, интракраниально или интрадермально), введения в слизистые мембраны (например интраназально или с использованием суппозитория), а также доставки in situ с помощью клизм или аэрозольных спрэев, с соблюдением требуемой дозировки ЧГР, основываясь на известных параметрах.
Далее изобретение будет более подробно раскрыто на следующих примерах.
Пример 1
Получение ЧГР, стабилизированного Zn+2
Этот пример относится к человеческому гормону (ЧГР), последовательность ДНК которого описана в патенте США N 4898830. Человеческий гормон роста стабилизировался за счет образования нерастворимых комплексов с цинком.
Получение ЧГР, стабилизированного Zn+2
Этот пример относится к человеческому гормону (ЧГР), последовательность ДНК которого описана в патенте США N 4898830. Человеческий гормон роста стабилизировался за счет образования нерастворимых комплексов с цинком.
ЧГР растворяли в образцах буфера на основе бикарбоната натрия с концентрацией 4 мМ при pH 7,2 для получения растворов ЧГР с концентрациями ЧГР от 0,1 до 0,5 мМ. С использованием деионизированной воды и первичного кислого ацетата цинка приготовляли раствор Zn2+ концентрацией 0,9 мМ, который затем добавляли к растворам ЧГР для формирования комплекса Zn+2 - ЧГР. pH раствора комплекса Zn+2 - ЧГР доводили до 7,0-7,4 путем добавления 1%-ной уксусной кислоты. Получали мутный суспендированный осадок, содержащий ЧГР, стабилизированного Zn+2.
Затем суспензию ЧГР, стабилизированного Zn+2, измельчали посредством ультразвукового сопла (типа VIA фирмы Sonics and Materials, США) и распыляли в полипропиленовую ванночку (диаметром 17 см и глубиной 8 см), содержащую жидкий азот для формирования замороженных частиц. После этого полипропиленовую ванночку помещали в холодильник с температурой - 80oC до испарения жидкого азота. Затем замороженные частицы, содержавшие ЧГР, стабилизированный Zn+2, подвергались лиофилизации с образованием частиц ЧГР, стабилизированного Zn+2.
Пример 2
Приготовление микросфер СЛГ, содержащих биологически активный ЧГР, стабилизированный против агрегации
Микросферы, содержащие человеческий гормон роста (ЧГР), стабилизированный Zn+2, приготавливали из гидрофильного сополимера лактида и гликолида (СЛГ) марки RG502H со свободными карбоксильными концевыми группами (далее называемого "неблокированным СЛГ") (50:50 СЛГ, 9300 дальтон, производство фирмы Boehringer Ingelheim Chemicals, Inc.) или более гидрофобного полимера СЛГ с блокированными концевыми карбоксильными группами (далее называемого "блокированный СЛГ") (50:50 СЛГ, 10000 дальтон, партия # 115-56-01; производство фирмы Birmingham Polymers, Inc., США).
Приготовление микросфер СЛГ, содержащих биологически активный ЧГР, стабилизированный против агрегации
Микросферы, содержащие человеческий гормон роста (ЧГР), стабилизированный Zn+2, приготавливали из гидрофильного сополимера лактида и гликолида (СЛГ) марки RG502H со свободными карбоксильными концевыми группами (далее называемого "неблокированным СЛГ") (50:50 СЛГ, 9300 дальтон, производство фирмы Boehringer Ingelheim Chemicals, Inc.) или более гидрофобного полимера СЛГ с блокированными концевыми карбоксильными группами (далее называемого "блокированный СЛГ") (50:50 СЛГ, 10000 дальтон, партия # 115-56-01; производство фирмы Birmingham Polymers, Inc., США).
Полимер растворяли в метиленхлориде при комнатной температуре. К полимерному раствору добавляли лиофилизованные частицы ЧГР, а также карбонат цинка. Затем на смесь воздействовали ультразвуком для получения гомогенной суспензии. Суспензию дробили на капельки, пропуская через ультразвуковое сопло на слой жидкого азота, под которым расположен замороженный этанол. Сосуд с полученными микросферами выдерживали при -80oC, чтобы экстрагировать метиленхлорид, а затем подвергали лиофилизации и получали сыпучий порошок.
Пример 3
Анализ инкапсулированного белка ЧГР
Целостность инкапсулированного ЧГР определяли, растворяя негидратированные микросферы в метиленхлориде и ацетоне, собирая белок, подвергая его лиофильной сушке и растворяя в HEPES-буфере, содержащем 10 мМ ЭДТА.
Анализ инкапсулированного белка ЧГР
Целостность инкапсулированного ЧГР определяли, растворяя негидратированные микросферы в метиленхлориде и ацетоне, собирая белок, подвергая его лиофильной сушке и растворяя в HEPES-буфере, содержащем 10 мМ ЭДТА.
Соответствующие контроли были поставлены, чтобы гарантировать, что процесс экстракции не нарушает целостность белка.
Целостность ЧГР анализировалась измерением методом гель-фильтрации доли мономера ЧГР, содержавшейся в ЧГР после капсулирования. Результаты анализа целостности ЧГР в микросферах ЧГР пролонгированного высвобождения приведены в таблице 1.
Как показали результаты, процесс капсулирования не вызывает агрегации белка. Выход белка после процедуры экстракции (относительно количества, определенного по измерению содержания азота в микросферах) варьировал от 40 до 98%. Этот разброс предположительно связан с потерей материала на этапах переноса, и процесс экстракции в настоящее время модифицируется с целью повышения выхода белка.
Пример 4
Установление влияния карбоната цинка на кинетику высвобождения in vitro
Микросферы были приготовлены так, как это описано в примере 2, и содержали 15% по весу ЧГР (комплекс с соотношением Zn:белок ЧГР, равным 6:1); 0, 1, 6, 10 или 20% по весу карбоната цинка и сополимер лактида и гликолида.
Установление влияния карбоната цинка на кинетику высвобождения in vitro
Микросферы были приготовлены так, как это описано в примере 2, и содержали 15% по весу ЧГР (комплекс с соотношением Zn:белок ЧГР, равным 6:1); 0, 1, 6, 10 или 20% по весу карбоната цинка и сополимер лактида и гликолида.
Кинетику высвобождения из микросфер композиции пролонгированного высвобождения ЧГР, содержащих карбонат цинка в различных концентрациях, определяли путем суспендирования аликвот (10 мг) микросфер каждого типа в разных образцах HEPES-буфера объемом 1,5 мл (50 мМ HEPES, 10 мМ KCl, 0,1% NaN) при pH 7,2 с последующей инкубацией при 37oC. Количественное определение высвобожденного белка осуществляли путем отбора проб буфера через 1, 3, 7, 10, 14, 21, 28 дней после инкубации с добавлением чистого буфера до первоначального объема после каждого отбора пробы.
Строили кумулятивную кривую зависимости от времени процента высвобожденного ЧГР (относительно исходного содержания ЧГР в начальной массе микросфер). Пробы высвобожденного белка для каждой временной точки анализировались на содержание мономера ЧГР методом гель-фильтрации.
Предполагается, что карбонат цинка действует в качестве фонда ионов цинка, что способствует образованию комплекса Zn-ЧГР и препятствует диссоциации до растворимого ЧГР. Поскольку растворимость карбоната цинка в воде низка, высвобождение ионов цинка из фонда происходит медленно, за счет чего модулируется растворимость белка.
Проведенный анализ показал, что в отсутствие карбоната цинка скорость высвобождения капсулированного ЧГР была очень высокой и весь белок ЧГР высвобождался в течение очень короткого времени.
Пример 5
Исследование ЧГР после деградации in vivo микросфер блокированного СЛГ с ЧГР, стабилизированным Zn+2
Микросферы блокированного СЛГ, содержащие 15% по весу ЧГР, стабилизированного Zn+2, и 0, 6, 10 или 20% ZnCO3, формировали способом, описанным в примере 2. Группам испытуемых крыс производили подкожную инъекцию проб (50 мг), содержащих различные микросферы ЧГР. Через 60 дней крыс забивали и вырезали образцы кожи из зон инъекции. Полученные образцы помещали в 10%-ный нейтральный забуференный формалин не меньше чем на 24 ч. Затем бритвой удаляли с образцов избыток кожи и помещали их в PBS (забуференный фосфатом физиологический раствор).
Исследование ЧГР после деградации in vivo микросфер блокированного СЛГ с ЧГР, стабилизированным Zn+2
Микросферы блокированного СЛГ, содержащие 15% по весу ЧГР, стабилизированного Zn+2, и 0, 6, 10 или 20% ZnCO3, формировали способом, описанным в примере 2. Группам испытуемых крыс производили подкожную инъекцию проб (50 мг), содержащих различные микросферы ЧГР. Через 60 дней крыс забивали и вырезали образцы кожи из зон инъекции. Полученные образцы помещали в 10%-ный нейтральный забуференный формалин не меньше чем на 24 ч. Затем бритвой удаляли с образцов избыток кожи и помещали их в PBS (забуференный фосфатом физиологический раствор).
Дальнейшая обработка образцов ткани была проведена фирмой Pathology Associates, Inc. (США). Образцы кожи заливали в гликометакрилат, приготавливали срезы и анализировали на присутствие ЧГР, используя окрашивающий набор Histoscan/Lymphoscan Staining Kit (артикул N 24-408М, фирма Accurate Chemical & Scientific Corp., США) согласно инструкции изготовителя. Образцы тканей оценивались на присутствие или отсутствие окраски, которая указывала на присутствие или отсутствие в образце ЧГР.
Для всех образцов кожи из зон инъекции микросфер ЧГР тесты на присутствие ЧГР оказались положительными, указывая тем самым на то, что микросферы с блокированным СЛГ продолжали сохранять в своем составе ЧГР, даже через 60 дней in vivo.
Способ, описанный в примере 2, использовали для получения микросфер путем капсулирования 0 или 15% по весу ЧГР в форме комплекса Zn:ЧГР, а также 0, 1 или 6% соли ZnCO3 внутрь блокированного СЛГ и неблокированного СЛГ.
Сравнение деградации in vivo микросфер неблокированного и блокированного СЛГ производилось путем инъекции образцов микросфер крысам с последующим анализом микросфер, остающихся в зоне инъекции в различные моменты времени после инъекции. Каждая порция образца с микросферами в каждой временной точке тестировалась на трех крысах. В день введения микросфер 750 мкл носителя (3%-ная карбоксиметилцеллюлоза, КМЦ низкой вязкости и 1%-ный солевой раствор Tween-20) добавляли в пробирки, содержащие 50±1 мг микросфер. Сразу же после этого пробирки энергично встряхивали для образования суспензии, которая затем всасывалась в шприц объемом 1,0 см3 без иглы.
Самцов крыс линии Sprague-Dawley подвергали анестезии смесью галотан-кислород. Зоны инъекции (межлопаточная область) обривались и маркировались постоянной татуировкой для того, чтобы точно пометить участки кожи, вырезаемые в моменты отбора образцов. Каждой крысе, используя иглы калибра с 18 по 21, вводили все содержимое пробирки с микросферами.
В заданные дни (дни 15, 30, 59 и 90-й после инъекции для животных, которым вводили микросферы неблокированного СЛГ или дни 7, 14, 21, 28 и 45-й после инъекции для животных, которым вводили микросферы блокированного СЛГ) крыс умерщвляли посредством асфиксии с использованием газообразного CO2 и вырезали участок кожи из зоны инъекции (вместе с микросферами). Поскольку микросферы имели тенденцию к образованию комочков в зоне инъекции, их присутствие или отсутствие определяли визуально.
Визуальное наблюдение показало, что микросферы с неблокированным СЛГ деградировали существенно быстрее, чем микросферы с блокированным СЛГ, причем добавление ZnCO3 к блокированному СЛГ существенно замедляло деградацию полимера. Например, у крыс, которым были инъецированы микросферы неблокированного СЛГ, содержащие 0% ЧГР и 0 или 1% ZnCO3, на 21-й день не наблюдалось никаких микросфер. Кроме того, у крыс, которым были инъецированы микросферы блокированного СЛГ, содержащие 0% ЧГР и 0% ZnCO3, на 60-й день наблюдалось только небольшое количество микросфер и не наблюдалось никаких микросфер в день 90-й. Тогда как у крыс, которым были инъекцированы микросферы блокированного СЛГ, содержащие 0 или 15% ЧГР и 6% ZnCO3, микросферы наблюдались и на 90-й день.
Пример 6
Фармокинетические исследования in vivo микросфер с пролонгированным высвобождением ЧГР в крысах
Исследования на крысах проводились с целью скрининга различных вариантов микросфер с ЧГР, определения фармокинетических параметров после введения ЧГР внутривенно (ВВ), подкожно (ПК) и с применением подкожно осмотического насоса Alzet, а также для оценки характеристик сыворотки и скорости высвобождения in vivo для различных вариантов микросфер.
Фармокинетические исследования in vivo микросфер с пролонгированным высвобождением ЧГР в крысах
Исследования на крысах проводились с целью скрининга различных вариантов микросфер с ЧГР, определения фармокинетических параметров после введения ЧГР внутривенно (ВВ), подкожно (ПК) и с применением подкожно осмотического насоса Alzet, а также для оценки характеристик сыворотки и скорости высвобождения in vivo для различных вариантов микросфер.
Крыс Sprague-Dawley разделяли на рандомизированные по весу группы по три особи в каждой, и каждой группе вводили один определенный вариант микросфер с ЧГР. Крысам подкожно инъецировалось около 7,7 мг ЧГР в 50 мг микросфер одного определенного типа (различного для разных групп), ресуспендированных в 0,75 мл водного инъекционного носителя. Носитель содержал 3% КМЦ (низкой вязкости) и 1% Полисорбата-20 в 0,9%-ном NaCl. Введенную дозу микросфер определяли косвенно, взвешиванием остатка в пробирке, из которой проводилась инъекция, и коррекцией на остаток носителя. После этого рассчитывали дозу ЧГР по содержанию белка в микросферах, определенному анализом на содержание азота.
В течение периода до 30 дней через заданные интервалы времени брали пробы крови. В течение первых 24 ч брали пробы объемом 250 мкл, а затем через каждые 24 ч - объемом не меньше 400 мкл. После коагуляции проб крови определяли концентрацию ЧГР в сыворотке, применяя радиоиммуноанализ с использованием специального аттестованного комплекта (фирма ICN).
Для нахождения фармокинетических параметров инъецировали крысам ЧГР в физиологическом растворе подкожно или внутривенно или же вводили посредством осмотического насоса (модель Alzet 1ML4), имплантируемого подкожно.
Три группы крыс получили однократную подкожную инъекцию ЧГР в 0,9%-ном NaCl с дозой 0,5 или 7,5 мг/кг при объеме дозы 1,0 мл/кг, и две группы получили однократную внутривенную инъекцию ЧГР в 0,9%-ном растворе NaCl с дозой около 1,0 мг и 5,0 мг/кг при объеме дозы 1,0 мл/кг. В исследовании с применением насоса Alzet крыс разделили на четыре группы по три крысы в каждой, с рандомизацией по весу, при дозах примерно 20 мг/мл и 40 мг/мл ЧГР в 0,9%-ном солевом растворе, введенных в насосы (модели Alzet 2002, 200 мкл, освобождение в течение 14 дней) и 4 мг/мл и 12 мг/мл ЧГР в 0,9%-ном солевом растворе, введенных в насосы (модели Alzet 2ML4, 2 мл, освобождение в течение 28 дней). Ожидаемые скорости освобождения насосами соответствовали примерно 2% и от 4 до 6% дозы ProLease ЧГР (около 15 мг/кг) в день соответственно. Насосы Alzet имплантировали подкожно в межлопаточную область после погружения на 1-2 мин в стерильный солевой раствор.
Микросферы с ЧГР пролонгированного высвобождения, синтезированные, как это описано в примере 2, содержали 15% по весу ЧГР в виде комплекса с Zn в соотношении Zn:ЧГР 6:1; 0, 1, 3 или 6% карбоната цинка и неблокированный СЛГ 8К, блокированный СЛГ 10К или неблокированный СЛГ 31К.
Для оценки различных вариантов композиции ЧГР пролонгированного высвобождения использовали индексы Cmax, Cd5 и Cmax/Cd5, где Cmax - максимальная наблюдаемая концентрация в сыворотке, Cd5 - концентрация в сыворотке на 5-й день, которая должна примерно соответствовать концентрации в стационарном состоянии. Полученные результаты приведены в таблице 2.
Результаты скрининга показали, что два неблокированных полимера (8К и 31К) имели кинетику высвобождения in vivo, отличную от кинетики исходного варианта, в котором использовался блокированный СЛГ 10К и 6% по весу карбоната цинка. Значения Cmax в целом были ниже для вариантов с неблочными полимерами, чем для основного варианта; это позволило предположить, что "всплеск" in vivo для составов с неблочным полимером может быть ниже. "Всплеск" определялся как процент ЧГР, высвобожденный в первые 24 ч после инъекции. Значения "всплеска" in vitro находились между 8 и 22%. Не обнаружено, что содержание в композициях карбоната цинка оказывает какое-то влияние на "всплеск" или на профиль высвобождения in vitro.
Концентрации в сыворотке в период между 4-м и 6-м днями сохранялись на достаточно постоянном уровне относительно базовой линии (или уровней до взятия крови) в случае составов с неблокированным полимером, в то время как концентрации в сыворотке для составов с блокированным полимером в тех же временных точках находятся ближе к базовым уровням. Данные о высвобождении in vitro в период до 7 дней показали, что высвобождаемый белок ЧГР был мономерным. Полезные данные в период после 6-го дня не могли быть получены in vivo в связи с образованием у крыс антител к ЧГР.
Пример 7
Фармокинетическое исследование на макаках-резусах
Цель этого исследования на приматах состояла в оценивании фармокинетических профилей различных составов ЧГР пролонгированного высвобождения по сравнению с более традиционными способами введения ЧГР (например, подкожных инъекций болюса, ежедневных подкожных инъекций и подкожных инъекций в сочетании с применением осмотического насоса), а также в определении, какой состав с ЧГР пролонгированного высвобождения давал оптимальный профиль концентрации ЧГР в крови.
Фармокинетическое исследование на макаках-резусах
Цель этого исследования на приматах состояла в оценивании фармокинетических профилей различных составов ЧГР пролонгированного высвобождения по сравнению с более традиционными способами введения ЧГР (например, подкожных инъекций болюса, ежедневных подкожных инъекций и подкожных инъекций в сочетании с применением осмотического насоса), а также в определении, какой состав с ЧГР пролонгированного высвобождения давал оптимальный профиль концентрации ЧГР в крови.
Испытывались следующие варианты микросфер с ЧГР пролонгированного высвобождения: 1) 15% ЧГР (в комплексе с Zn при соотношении Zn:ЧГР 6:1), 6% по весу карбоната цинка и блокированный СЛГ 10К; 2) 15% ЧГР (в комплексе с Zn при соотношении Zn: ЧГР 6:1), 1% по весу карбоната цинка и неблокированный СЛГ 8К (марки "RG502H") и 3) 15% ЧГР (в комплексе с Zn при соотношении Zn: ЧГР 6: 1), 1% по весу карбоната цинка и неблокированный СЛГ 8К (марки "RG503H").
В каждой группе было по 4 обезьяны, и каждому животному в день делалась одна подкожная инъекция в дорсальной цервикальной области. Каждой обезьяне вводилась доза 160 мг микросфер с ЧГР пролонгированного высвобождения (24 мг чГР) в виде инъекции 1,2 мл наполнителя через иглу калибра 20. В качестве наполнителя использовался водный раствор 3% в/о карбоксиметилцеллюлозы (натриевая соль), 1% по объему Полисорбата-20 (Tween-20) и 0,9% хлорида натрия.
Доза ЧГР подбиралась таким образом, чтобы обеспечить измеримую концентрацию ЧГР в сыворотке для проведения фармокинетического анализа. Чтобы определить фармокинетические параметры, были сформированы дополнительные группы по четыре обезьяны в каждой при следующих вариантах инъекций: 1) однократная подкожная инъекция (25 мг чГР), 2) ежедневные подкожные инъекции ЧГР (24 мг/28 дней = 0,86 мг/день), 3) подкожная инъекция (3,6 мг чГР) в сочетании с осмотическим насосом Alzet (20,4 мг чГР; суммарная доза 24 мг чГР) и 4) подкожная инъекция наполнителя в качестве контроля (в контрольную группу были включены только 3 обезьяны).
Пробы крови брались для анализов на ЧГР, IGF1 (IGF - инсулиноподобный фактор роста), IGFBP3 и на антитела к чГР: -7, -5, -3, перед инъекцией, а также через 0,5, 1, 2, 3, 5, 8, 10, 12, 24, 28, 32 и 48 ч и через 5, 4, 6, 8, 11, 14, 17, 20, 23, 26, 29, 32, 25, 41, 44, 47, 50, 53, 56 дней после инъекции.
Измерялись концентрации IGF1 и ЧГР в сыворотке. Для количественных определений ЧГР в сыворотке крови обезьян применялся комплект IRMA от RADIM (дистрибьютор - фирма Wein Laboratories, США). Предельное содержание для количественных определений по методу IRMA составляло 0,1 нг/мл в случае использования буфера PBS и 1,5 нг/мл для объединенной сыворотки крови молодых макак-резусов при базальном уровне ЧГР около 4,5 нг/мл.
Достоверность результатов IRMA-анализа была подтверждена в диапазоне концентраций 1,5 - 75 нг/мл для объединенной сыворотки крови молодых макак-резусов. Сходимость и точность результатов измерений находились в пределах ±10%.
Полученные результаты показали, что микросферы пролонгированного высвобождения ЧГР обеспечивали высвобождение значительных стабильных количеств ЧГР в течение периода, превышающего 1 месяц, тогда как поддерживать такие же уровни ЧГР в сыворотке подкожными инъекциями было невозможно.
Исследование профиля содержания IGF-1 в сыворотке показало, что концентрации IGF-1 в сыворотке крови превышали базовые значения в период между 2-м и 29-м днями после введения микрочастиц. Это показывает, что количество ЧГР, высвобождаемого из микросфер пролонгированного высвобождения ЧГР, было достаточным для создания фармакодинамического эффекта. Кроме того, это свидетельствует о том, что высвобождаемый ЧГР обладал биологически активностью, т.е. процесс капсулирования не оказал неблагоприятного воздействия на действенность ЧГР.
ЭКВИВАЛЕНТЫ
Специалисты в данной области техники, не выходя за пределы рутинных экспериментов, обнаружат или смогут установить много вариантов осуществления изобретения, эквивалентных конкретным примерам, приведенным выше. Подобные эквиваленты также охватываются пунктами формулы настоящего изобретения.
Специалисты в данной области техники, не выходя за пределы рутинных экспериментов, обнаружат или смогут установить много вариантов осуществления изобретения, эквивалентных конкретным примерам, приведенным выше. Подобные эквиваленты также охватываются пунктами формулы настоящего изобретения.
Claims (17)
1. Композиция для пролонгированного высвобождения человеческого гормона роста, содержащая: а) биосовместимый полимер; б) частицы человеческого гормона роста; в) катионы металла, отличающаяся тем, что гормон человеческого роста находится в виде комплексного соединения с катионом металла, при этом молярное отношение катиона металла к человеческому гормону роста выбрано большим, чем 4 : 1, и меньшим или равным 10 : 1.
2. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что указанное молярное отношение выбрано по меньшей мере около 6 : 1, предпочтительно около 10 : 1.
3. Композиция по п. 1 или 2, отличающаяся тем, что в качестве катиона металла выбран Zn(II).
4. Композиция по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что катион металла добавлен к человеческому гормону роста в виде водорастворимой соли.
5. Композиция по п. 4, отличающаяся тем, что указанный катион металла добавлен к человеческому гормону роста в виде ацетата цинка.
6. Композиция по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что указанные частицы человеческого гормона роста в комплексе с катионом металла диспергированы в указанном биосовместимом полимере.
7. Композиция по п.6, отличающаяся тем, что указанный полимер выбран из группы, состоящей из поли(лактида), поли(гликолида), сополимера лактида и гликолида, полимера молочной кислоты, полимера гликолевой кислоты, поликапролактона, поликарбоната, полиамидоэфира, полиангидрида, полиаминокислоты, полиортоэфира, полицианакрилата, поли(р-диоксанона), поли(алкеноксалата), полиуретана, а также их смесей и сополимеров.
8. Композиция по п.7, отличающаяся тем, что указанный полимер выбран из группы, состоящей из поли(лактида), поли(гликолида) и сополимера лактида и гликолида.
9. Композиция по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что указанные частицы человеческого гормона роста в комплексе с катионом металла присутствуют в указанном полимере в концентрации от около 0,1% до около 30% по весу, предпочтительно от около 0,1% до около 20% по весу.
10. Композиция по п.9, отличающаяся тем, что указанные частицы человеческого гормона роста в комплексе с катионом металла, присутствуют в указанном полимере в концентрации около 15% по весу.
11. Композиция по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что биосовместимый полимер дополнительно содержит компонент катиона металла.
12. Композиция по п.11, отличающаяся тем, что в качестве катиона металла в компоненте катиона металла выбран Zn(II).
13. Композиция по п.12, отличающаяся тем, что компонент катиона металла выбран из группы, состоящей из ZnCO3, Zn3(C6H5O7)2, Zn(OAe)2, ZnSO4 и ZnCl2. 14. Композиция по п.11, отличающаяся тем, что в качестве катиона металла в компоненте катиона металла выбран Mg(II).
15. Композиция по п.14, отличающаяся тем, что компонент катиона металла выбран из группы, состоящей из Mg(OH)2, MgCO3, Mg3(C6H5O7)2, Mg(OAe)2, MgSO4 MgCl2.
16. Композиция по любому из пп.12 - 15, отличающаяся тем, что соотношение компонента катиона металла к полимеру выбрано в интервале от около 1 : 99 до около 1 : 2 по весу, предпочтительно около 1% по весу.
17. Композиция для пролонгированного высвобождения человеческого гормона роста по п.1, отличающаяся тем, что она содержит: а) биосовместимый сополимер лактида и гликолида с диспергированным в нем ионами Zn(II), введенными в виде ZnCO3, и б) частицы человеческого гормона роста (ЧГР) в комплексе с Zn(II), который добавлен к человеческому гормону роста в виде ацетата цинка при молярном соотношении Zn : ЧГР около 10 : 1, при этом указанные частицы человеческого гормона роста в комплексе с Zn(II) присутствуют в указанном полимере в концентрации около 15% по весу.
18. Композиция по любому из предшествующих пунктов для использования при приготовлении медикаментов для терапии.
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US08/477,725 US5667808A (en) | 1992-12-02 | 1995-06-07 | Composition for sustained release of human growth hormone |
US08/473,544 | 1995-06-07 | ||
US08/473,544 US5654010A (en) | 1992-12-02 | 1995-06-07 | Composition for sustained release of human growth hormone |
US08/477,725 | 1995-06-07 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU97119935A RU97119935A (ru) | 1999-11-10 |
RU2161502C2 true RU2161502C2 (ru) | 2001-01-10 |
Family
ID=27044171
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU97119935/14A RU2161502C2 (ru) | 1995-06-07 | 1996-06-03 | Композиция для пролонгированного высвобождения гормона роста человека |
Country Status (22)
Country | Link |
---|---|
EP (1) | EP0831787B1 (ru) |
JP (1) | JPH11506740A (ru) |
CN (1) | CN1102854C (ru) |
AT (1) | ATE204468T1 (ru) |
AU (1) | AU708756B2 (ru) |
BR (1) | BR9608542A (ru) |
CA (1) | CA2223436A1 (ru) |
CZ (1) | CZ288147B6 (ru) |
DE (1) | DE69614685T2 (ru) |
DK (1) | DK0831787T3 (ru) |
ES (1) | ES2161366T3 (ru) |
HK (1) | HK1009089A1 (ru) |
HU (1) | HUP9900870A3 (ru) |
IL (1) | IL122385A (ru) |
MX (1) | MX9709698A (ru) |
NO (1) | NO316104B1 (ru) |
NZ (1) | NZ310644A (ru) |
PL (1) | PL184531B1 (ru) |
PT (1) | PT831787E (ru) |
RU (1) | RU2161502C2 (ru) |
SK (1) | SK281571B6 (ru) |
WO (1) | WO1996040072A2 (ru) |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US8354095B2 (en) | 2004-12-10 | 2013-01-15 | Hallux, Inc. | Compositions and methods for treating conditions of the nail unit |
RU2493868C2 (ru) * | 2006-08-31 | 2013-09-27 | Новартис Аг | ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ, СОДЕРЖАЩИЕ чГР, ДЛЯ ПЕРОРАЛЬНОГО ВВЕДЕНИЯ |
US8591870B2 (en) | 2004-12-10 | 2013-11-26 | Hallux, Inc. | Compositions and methods for treating conditions of the nail unit |
US9375558B2 (en) | 2013-03-14 | 2016-06-28 | Hallux, Inc. | Method of treating infections, diseases or disorders of nail unit |
Families Citing this family (91)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CA2224381A1 (en) * | 1995-06-27 | 1997-01-16 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Method of producing sustained-release preparation |
ZA9711385B (en) | 1996-12-20 | 1999-06-18 | Takeda Chemical Industries Ltd | Method of producing a sustained-release preparation |
MY118835A (en) * | 1997-04-18 | 2005-01-31 | Ipsen Pharma Biotech | Sustained release compositions and the process for their preparation |
US6306826B1 (en) | 1997-06-04 | 2001-10-23 | The Regents Of The University Of California | Treatment of heart failure with growth hormone |
US6663899B2 (en) | 1997-06-13 | 2003-12-16 | Genentech, Inc. | Controlled release microencapsulated NGF formulation |
US6113947A (en) * | 1997-06-13 | 2000-09-05 | Genentech, Inc. | Controlled release microencapsulated NGF formulation |
US6191107B1 (en) | 1997-09-26 | 2001-02-20 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Complex of human growth hormone and zinc |
NZ525914A (en) | 1998-03-10 | 2004-03-26 | Genentech Inc | Novel polypeptides and nucleic acids encoding the same |
EP3112468A1 (en) | 1998-05-15 | 2017-01-04 | Genentech, Inc. | Il-17 homologous polypeptides and therapeutic uses thereof |
NZ508878A (en) | 1998-05-15 | 2003-08-29 | Genentech Inc | IL-17B and IL-17Cactive variants of IL-17 which stimulates epithelial, endothelial and fibroblastic cells |
US20020172678A1 (en) | 2000-06-23 | 2002-11-21 | Napoleone Ferrara | EG-VEGF nucleic acids and polypeptides and methods of use |
EP1953173B1 (en) | 1999-06-15 | 2009-11-18 | Genentech, Inc. | Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids endoding the same |
EP1686134A3 (en) | 1999-12-01 | 2006-08-09 | Genentech, Inc. | Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same |
EP1897945B1 (en) | 1999-12-23 | 2012-01-18 | Genentech, Inc. | IL-17 homologous polypeptides and therapeutic uses thereof |
ATE424457T1 (de) | 2000-01-13 | 2009-03-15 | Genentech Inc | Menschliche stra6 polypeptide |
US6740520B2 (en) | 2000-03-21 | 2004-05-25 | Genentech, Inc. | Cytokine receptor and nucleic acids encoding the same |
WO2001072323A2 (en) | 2000-03-24 | 2001-10-04 | Genentech, Inc. | Use of insulin for the treatment of cartilagenous disorders |
US6998137B2 (en) * | 2000-04-07 | 2006-02-14 | Macromed, Inc. | Proteins deposited onto sparingly soluble biocompatible particles for controlled protein release into a biological environment from a polymer matrix |
AU6531101A (en) | 2000-06-02 | 2001-12-17 | Genentech Inc | Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same |
ATE412009T1 (de) | 2000-08-24 | 2008-11-15 | Genentech Inc | Methode zur inhibierung von il-22 induziertem pap1 |
EP1944317A3 (en) | 2000-09-01 | 2008-09-17 | Genentech, Inc. | Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same |
US6673580B2 (en) | 2000-10-27 | 2004-01-06 | Genentech, Inc. | Identification and modification of immunodominant epitopes in polypeptides |
WO2002053136A1 (fr) | 2000-12-28 | 2002-07-11 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Preparations a liberation soutenue |
WO2002092619A2 (en) | 2001-05-14 | 2002-11-21 | The Gouvernment Of The United States Of America, Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Modified growth hormone |
US20070160576A1 (en) | 2001-06-05 | 2007-07-12 | Genentech, Inc. | IL-17A/F heterologous polypeptides and therapeutic uses thereof |
ES2554106T3 (es) | 2001-06-21 | 2015-12-16 | Genentech, Inc. | Formulación de liberación sostenida |
CA2477249A1 (en) | 2002-02-25 | 2003-09-04 | Genentech, Inc. | Novel type-1 cytokine receptor glm-r |
AU2004229335C1 (en) | 2003-04-04 | 2010-06-17 | Genentech, Inc. | High concentration antibody and protein formulations |
ATE425463T1 (de) | 2003-06-06 | 2009-03-15 | Genentech Inc | Modulation der wechselwirkung zwischen hgf-beta- kette und c-met |
KR100835786B1 (ko) | 2003-07-08 | 2008-06-09 | 제넨테크, 인크. | Il-17a/f 이종 폴리펩티드 및 그의 치료 용도 |
KR101195291B1 (ko) | 2003-12-11 | 2012-10-26 | 제넨테크, 인크. | C-met 이량체화 및 활성화를 억제하는 방법 및조성물 |
US7481997B1 (en) | 2004-02-12 | 2009-01-27 | Montana State University | Snow mountain virus genome sequence, virus-like particles and methods of use |
NZ550542A (en) | 2004-03-30 | 2009-03-31 | Nsgene As | Therapeutic use of a growth factor, NsG33 |
JP2008518026A (ja) | 2004-10-27 | 2008-05-29 | ユニバーシティ・オブ・デンバー | 副腎皮質刺激ホルモンアナログおよびこれに関連する方法 |
US7858843B2 (en) | 2005-06-06 | 2010-12-28 | Genentech, Inc. | Gene disruptions, compositions and methods relating thereto |
WO2008018854A2 (en) | 2005-06-06 | 2008-02-14 | The Rockefeller University | Bactiophage lysins for bacillus anthracis |
DE602006010072D1 (de) | 2005-06-21 | 2009-12-10 | Chen Gang | Il-1 bindende antikörper und fragmente davon |
US7582291B2 (en) | 2005-06-30 | 2009-09-01 | The Rockefeller University | Bacteriophage lysins for Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium and other bacteria |
US7931902B2 (en) | 2005-08-15 | 2011-04-26 | Genentech, Inc. | Gene disruptions, compositions and methods relating thereto |
ATE491026T1 (de) | 2005-08-24 | 2010-12-15 | Univ Rockefeller | Ply-gbs-lysinmutanten |
CA2630432A1 (en) | 2005-11-21 | 2007-07-19 | Genentech, Inc. | Novel gene disruptions, compositions and methods relating thereto |
US20080032343A1 (en) | 2005-12-22 | 2008-02-07 | Genentech, Inc. | Recombinant Production of Heparin Binding Proteins |
EP2050335A1 (en) | 2006-02-17 | 2009-04-22 | Genentech, Inc. | Gene disruptions, compositions and methods relating thereto |
CN101437536A (zh) | 2006-03-23 | 2009-05-20 | 诺华有限公司 | 抗肿瘤细胞抗原抗体治疗 |
JP5290148B2 (ja) | 2006-04-10 | 2013-09-18 | ジェネンテック, インコーポレイテッド | Disheveled(Dvl)PDZ修飾因子 |
US20090288176A1 (en) | 2006-04-19 | 2009-11-19 | Genentech, Inc. | Novel Gene Disruptions, Compositions and Methods Relating Thereto |
EP2094306A2 (en) | 2006-12-20 | 2009-09-02 | XOMA Technology Ltd. | Treatment of il-1-beta related diseases |
CN101361968B (zh) | 2007-08-06 | 2011-08-03 | 健能隆医药技术(上海)有限公司 | 白介素-22在治疗脂肪肝中的应用 |
AU2008287340A1 (en) * | 2007-08-15 | 2009-02-19 | Amunix, Inc. | Compositions and methods for modifying properties of biologically active polypeptides |
CN101945891A (zh) | 2007-12-20 | 2011-01-12 | 爱克索马技术有限公司 | 治疗痛风的方法 |
GB0812742D0 (en) | 2008-07-11 | 2008-08-20 | Critical Pharmaceuticals Ltd | Process |
MX2012004303A (es) | 2009-10-15 | 2012-06-25 | Genentech Inc | Factores de crecimiento de fibroblasto quimericos con especificacion de receptor alterada. |
WO2011056561A1 (en) | 2009-10-27 | 2011-05-12 | Beth Israel Deaconess Medical Center | Methods and compositions for the generation and use of conformation-specific antibodies |
JP5878477B2 (ja) | 2010-01-15 | 2016-03-08 | ユニバーシティ オブ メディスン アンド デンティストリー オブ ニュー ジャージー | 骨の治癒を加速するためのバナジウム化合物の使用 |
CN106983862A (zh) | 2010-03-22 | 2017-07-28 | 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 | 对于稳定含有蛋白质的制剂有用的组合物和方法 |
MX2012012743A (es) | 2010-05-03 | 2012-11-23 | Genentech Inc | Composiciones y metodos utiles para reducir la viscosidad de formulaciones que contienen proteina. |
KR101924653B1 (ko) | 2010-06-24 | 2018-12-03 | 제넨테크, 인크. | 단백질-함유 제제를 안정화시키기 위한 알킬글리코시드 함유 조성물 및 방법 |
CN102380091A (zh) | 2010-08-31 | 2012-03-21 | 健能隆医药技术(上海)有限公司 | 白介素-22在治疗病毒性肝炎中的应用 |
WO2012041328A1 (en) | 2010-10-01 | 2012-04-05 | Nsgene A/S | Use of meteorin for the treatment of allodynia, hyperalgesia, spontaneous pain and phantom pain |
CA2814030C (en) | 2010-10-08 | 2019-04-30 | Shanghai Kexin Biotech Co., Ltd. | Diagnostic and therapeutic uses of moesin fragments |
KR101687060B1 (ko) | 2010-10-08 | 2016-12-15 | 상하이 켁신 바이오테크 씨오., 엘티디. | 모에신 조절제 및 그의 용도 |
WO2012092539A2 (en) | 2010-12-31 | 2012-07-05 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Antibodies to dll4 and uses thereof |
WO2012149334A2 (en) | 2011-04-27 | 2012-11-01 | Beth Israel Deaconess Medical Center, Inc. | Methods and compositions for the generation and use of conformation-specific antibodies |
CN102875683B (zh) * | 2011-07-11 | 2014-06-11 | 旭华(上海)生物研发中心有限公司 | 长效重组人生长激素的Fc融合蛋白 |
AU2012332767C1 (en) | 2011-10-31 | 2017-02-02 | Genentech, Inc. | Antibody formulations |
WO2013096516A1 (en) | 2011-12-19 | 2013-06-27 | Xoma Technology Ltd. | Methods for treating acne |
CN104520321A (zh) | 2012-01-09 | 2015-04-15 | 斯克利普斯研究所 | 超长互补决定区及其用途 |
EP2802601B1 (en) | 2012-01-09 | 2019-11-13 | The Scripps Research Institute | Humanized antibodies with ultralong cdr3s |
CN105283196B (zh) | 2013-03-15 | 2018-10-12 | 贝丝以色列女执事医疗中心 | 用于产生和使用构象-特异性抗体的方法和组合物 |
EP3022224A2 (en) | 2013-07-18 | 2016-05-25 | Fabrus, Inc. | Antibodies with ultralong complementarity determining regions |
AU2014290361B2 (en) | 2013-07-18 | 2019-04-18 | Taurus Biosciences, Llc | Humanized antibodies with ultralong complementarity determining regions |
ES2927607T3 (es) | 2013-09-13 | 2022-11-08 | Scripps Research Inst | Agentes terapéuticos modificados y composiciones de los mismos |
CA2926698C (en) | 2013-10-15 | 2021-06-22 | The California Institute For Biomedical Research | Chimeric antigen receptor t cell switches and uses thereof |
EP3057994B1 (en) | 2013-10-15 | 2020-09-23 | The Scripps Research Institute | Peptidic chimeric antigen receptor t cell switches and uses thereof |
CN104623639A (zh) | 2013-11-07 | 2015-05-20 | 健能隆医药技术(上海)有限公司 | 白介素22二聚体在制备治疗胰腺炎药物中的应用 |
CN104623637A (zh) | 2013-11-07 | 2015-05-20 | 健能隆医药技术(上海)有限公司 | Il-22二聚体在制备静脉注射药物中的应用 |
US20160303242A1 (en) | 2013-12-09 | 2016-10-20 | Durect Corporation | Pharmaceutically Active Agent Complexes, Polymer Complexes, and Compositions and Methods Involving the Same |
EP4212180A1 (en) | 2013-12-18 | 2023-07-19 | The Scripps Research Institute | Modified therapeutic agents, stapled peptide lipid conjugates, and compositions thereof |
NL2014230B1 (en) | 2015-02-04 | 2016-10-12 | Stichting Vu-Vumc | Wound healing formulation. |
MA41629A (fr) | 2015-03-04 | 2018-01-09 | Center For Human Reproduction | Compositions et méthodes d'utilisation de l'hormone anti-müllérienne pour le traitement de l'infertilité |
US10800828B2 (en) | 2015-03-26 | 2020-10-13 | The Scripps Research Institute | Switchable non-scFv chimeric receptors, switches, and methods of use thereof to treat cancer |
WO2016168773A2 (en) | 2015-04-15 | 2016-10-20 | The California Institute For Biomedical Research | Optimized pne-based chimeric receptor t cell switches and uses thereof |
CN107921098A (zh) | 2015-06-17 | 2018-04-17 | 加州生物医学研究所 | 修饰的治疗剂及其组合物 |
EP3442562B1 (en) | 2016-04-15 | 2022-09-21 | Evive Biotechnology (Shanghai) Ltd | An il-22 dimer for use in treating necrotizing enterocolitis |
CN110267982B (zh) | 2016-10-19 | 2024-02-23 | 斯克利普斯研究所 | 具有人源化靶向部分和/或经过优化的嵌合抗原受体相互作用结构域的嵌合抗原受体效应细胞开关以及其用途 |
CN113660953A (zh) | 2019-04-01 | 2021-11-16 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 用于稳定含蛋白质制剂的组合物和方法 |
TW202120551A (zh) | 2019-08-12 | 2021-06-01 | 美商普瑞諾生物科技公司 | 藉由adcc靶向cd39表現細胞促進及增強t細胞介導免疫反應之方法及組合物 |
EP4048405A2 (en) | 2019-10-24 | 2022-08-31 | Minotaur Therapeutics, Inc. | Chimeric cytokine modified antibodies and methods of use thereof |
EP4329887A1 (en) | 2021-04-28 | 2024-03-06 | Minotaur Therapeutics, Inc. | Humanized chimeric bovine antibodies and methods of use |
JP2024518433A (ja) | 2021-05-06 | 2024-05-01 | ホバ セラピューティクス エーピーエス | 化学療法誘発性神経障害性疼痛の予防及び治療 |
AU2022405685A1 (en) | 2021-12-10 | 2024-07-11 | Hoba Therapeutics Aps | Treatment of nociceptive pain |
Family Cites Families (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5656297A (en) * | 1992-03-12 | 1997-08-12 | Alkermes Controlled Therapeutics, Incorporated | Modulated release from biocompatible polymers |
DE69329295T2 (de) * | 1992-12-02 | 2001-03-15 | Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. | Wachstumhormon enthaltende mikrosphaeren mit kontrollierter freisetzung |
PT779806E (pt) * | 1994-09-09 | 2001-02-28 | Takeda Chemical Industries Ltd | Preparacao de libertacao sustentada contendo um sal metalico de um peptido |
-
1996
- 1996-06-03 AU AU61469/96A patent/AU708756B2/en not_active Ceased
- 1996-06-03 PL PL96323832A patent/PL184531B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1996-06-03 AT AT96919016T patent/ATE204468T1/de not_active IP Right Cessation
- 1996-06-03 CZ CZ19973907A patent/CZ288147B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1996-06-03 RU RU97119935/14A patent/RU2161502C2/ru not_active IP Right Cessation
- 1996-06-03 PT PT96919016T patent/PT831787E/pt unknown
- 1996-06-03 SK SK1671-97A patent/SK281571B6/sk unknown
- 1996-06-03 EP EP96919016A patent/EP0831787B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-06-03 NZ NZ310644A patent/NZ310644A/xx unknown
- 1996-06-03 BR BR9608542-8A patent/BR9608542A/pt not_active Application Discontinuation
- 1996-06-03 DK DK96919016T patent/DK0831787T3/da active
- 1996-06-03 CA CA002223436A patent/CA2223436A1/en not_active Abandoned
- 1996-06-03 CN CN96194614A patent/CN1102854C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1996-06-03 JP JP9500870A patent/JPH11506740A/ja active Pending
- 1996-06-03 ES ES96919016T patent/ES2161366T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1996-06-03 IL IL12238596A patent/IL122385A/xx not_active IP Right Cessation
- 1996-06-03 DE DE69614685T patent/DE69614685T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1996-06-03 WO PCT/US1996/008086 patent/WO1996040072A2/en not_active Application Discontinuation
- 1996-06-03 HU HU9900870A patent/HUP9900870A3/hu unknown
-
1997
- 1997-12-05 MX MX9709698A patent/MX9709698A/es not_active IP Right Cessation
- 1997-12-05 NO NO19975708A patent/NO316104B1/no unknown
-
1998
- 1998-08-19 HK HK98110029A patent/HK1009089A1/xx not_active IP Right Cessation
Cited By (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US8354095B2 (en) | 2004-12-10 | 2013-01-15 | Hallux, Inc. | Compositions and methods for treating conditions of the nail unit |
US8591870B2 (en) | 2004-12-10 | 2013-11-26 | Hallux, Inc. | Compositions and methods for treating conditions of the nail unit |
US8747820B2 (en) | 2004-12-10 | 2014-06-10 | Hallux, Inc. | Methods for treating conditions of the nail unit |
US9446009B2 (en) | 2004-12-10 | 2016-09-20 | Hallux, Inc. | Methods for treating conditions of the nail unit |
RU2493868C2 (ru) * | 2006-08-31 | 2013-09-27 | Новартис Аг | ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ, СОДЕРЖАЩИЕ чГР, ДЛЯ ПЕРОРАЛЬНОГО ВВЕДЕНИЯ |
US9375558B2 (en) | 2013-03-14 | 2016-06-28 | Hallux, Inc. | Method of treating infections, diseases or disorders of nail unit |
US9498612B2 (en) | 2013-03-14 | 2016-11-22 | Hallux, Inc. | Method of treating infections, diseases or disorders of nail unit |
US10456568B2 (en) | 2013-03-14 | 2019-10-29 | Hallux, Inc. | Method of treating infections, diseases or disorders of nail unit |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
IL122385A (en) | 2001-01-11 |
EP0831787B1 (en) | 2001-08-22 |
NO975708D0 (no) | 1997-12-05 |
CA2223436A1 (en) | 1996-12-19 |
NO975708L (no) | 1998-02-05 |
MX9709698A (es) | 1998-07-31 |
NZ310644A (en) | 1999-08-30 |
DK0831787T3 (da) | 2001-12-17 |
PT831787E (pt) | 2002-02-28 |
CZ288147B6 (en) | 2001-05-16 |
CN1187120A (zh) | 1998-07-08 |
PL323832A1 (en) | 1998-04-27 |
HUP9900870A2 (hu) | 1999-09-28 |
IL122385A0 (en) | 1998-06-15 |
DE69614685T2 (de) | 2002-06-27 |
ATE204468T1 (de) | 2001-09-15 |
SK167197A3 (en) | 1998-06-03 |
CZ390797A3 (cs) | 1998-07-15 |
PL184531B1 (pl) | 2002-11-29 |
AU6146996A (en) | 1996-12-30 |
BR9608542A (pt) | 1999-11-30 |
HUP9900870A3 (en) | 2001-04-28 |
AU708756B2 (en) | 1999-08-12 |
NO316104B1 (no) | 2003-12-15 |
EP0831787A2 (en) | 1998-04-01 |
DE69614685D1 (de) | 2001-09-27 |
JPH11506740A (ja) | 1999-06-15 |
CN1102854C (zh) | 2003-03-12 |
WO1996040072A2 (en) | 1996-12-19 |
ES2161366T3 (es) | 2001-12-01 |
SK281571B6 (sk) | 2001-05-10 |
HK1009089A1 (en) | 1999-09-10 |
WO1996040072A3 (en) | 1997-01-23 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2161502C2 (ru) | Композиция для пролонгированного высвобождения гормона роста человека | |
US5654010A (en) | Composition for sustained release of human growth hormone | |
AU705451B2 (en) | Composition for sustained release of non-aggregated erythropoietin | |
US5674534A (en) | Composition for sustained release of non-aggregated erythropoietin | |
AU772910B2 (en) | Method of producing submicron particles of a labile agent | |
EP1028746B1 (en) | Method for producing igf-i sustained-release formulations | |
HU221602B (hu) | Fémkationnal komplexet képező, interferont tartalmazó, szabályozott hatóanyag-leadású gyógyszerkészítmény | |
EP0758227A1 (en) | Modulated release from biocompatible polymers | |
AU705968B2 (en) | Device for releasing aggregation-stabilized, biologically active agent | |
US20040224016A1 (en) | Composition for sustained release of non-aggregated erythropoietin | |
CN1526372A (zh) | 一种抑制突释效应的长效注射剂 | |
AU5836599A (en) | composition for sustained release of human growth hormone | |
EP1080718A1 (en) | Composition for sustained release of human growth hormone | |
CN117427046A (zh) | 一种用于装载多肽类药物的缓释微球及其制备方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20050604 |