CZ288147B6 - Preparation for prolonged release of human growth hormone - Google Patents
Preparation for prolonged release of human growth hormone Download PDFInfo
- Publication number
- CZ288147B6 CZ288147B6 CZ19973907A CZ390797A CZ288147B6 CZ 288147 B6 CZ288147 B6 CZ 288147B6 CZ 19973907 A CZ19973907 A CZ 19973907A CZ 390797 A CZ390797 A CZ 390797A CZ 288147 B6 CZ288147 B6 CZ 288147B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- hgh
- growth hormone
- human growth
- biocompatible
- zinc
- Prior art date
Links
- 102000002265 Human Growth Hormone Human genes 0.000 title claims abstract description 256
- 108010000521 Human Growth Hormone Proteins 0.000 title claims abstract description 256
- 239000000854 Human Growth Hormone Substances 0.000 title claims abstract description 253
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 title abstract description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title abstract description 4
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims abstract description 88
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 101
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 claims description 74
- 239000002184 metal Substances 0.000 claims description 74
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 claims description 66
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 claims description 46
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 claims description 46
- 229920001606 poly(lactic acid-co-glycolic acid) Polymers 0.000 claims description 44
- 239000011701 zinc Substances 0.000 claims description 33
- 229920000249 biocompatible polymer Polymers 0.000 claims description 27
- 229920002988 biodegradable polymer Polymers 0.000 claims description 27
- 239000004621 biodegradable polymer Substances 0.000 claims description 27
- FMRLDPWIRHBCCC-UHFFFAOYSA-L Zinc carbonate Chemical compound [Zn+2].[O-]C([O-])=O FMRLDPWIRHBCCC-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 24
- 239000011667 zinc carbonate Substances 0.000 claims description 24
- 235000004416 zinc carbonate Nutrition 0.000 claims description 24
- 229910000010 zinc carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 24
- PTFCDOFLOPIGGS-UHFFFAOYSA-N Zinc dication Chemical compound [Zn+2] PTFCDOFLOPIGGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 claims description 12
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 claims description 12
- -1 zinc cations Chemical class 0.000 claims description 12
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 claims description 10
- ZOIORXHNWRGPMV-UHFFFAOYSA-N acetic acid;zinc Chemical compound [Zn].CC(O)=O.CC(O)=O ZOIORXHNWRGPMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000004246 zinc acetate Substances 0.000 claims description 8
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 claims description 6
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- 229920000954 Polyglycolide Polymers 0.000 claims description 4
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 claims description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 4
- 229940006486 zinc cation Drugs 0.000 claims description 4
- JIAARYAFYJHUJI-UHFFFAOYSA-L zinc dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Zn+2] JIAARYAFYJHUJI-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Polymers OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229920002732 Polyanhydride Polymers 0.000 claims description 3
- 229920001710 Polyorthoester Polymers 0.000 claims description 3
- 229920001610 polycaprolactone Polymers 0.000 claims description 3
- 239000004632 polycaprolactone Substances 0.000 claims description 3
- 229920000515 polycarbonate Polymers 0.000 claims description 3
- 239000004417 polycarbonate Substances 0.000 claims description 3
- 229920006149 polyester-amide block copolymer Polymers 0.000 claims description 3
- 239000004814 polyurethane Substances 0.000 claims description 3
- 229920002635 polyurethane Polymers 0.000 claims description 3
- NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L zinc sulfate Chemical compound [Zn+2].[O-]S([O-])(=O)=O NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 2
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- UEGPKNKPLBYCNK-UHFFFAOYSA-L magnesium acetate Chemical compound [Mg+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O UEGPKNKPLBYCNK-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- 239000011654 magnesium acetate Substances 0.000 claims description 2
- 235000011285 magnesium acetate Nutrition 0.000 claims description 2
- 229940069446 magnesium acetate Drugs 0.000 claims description 2
- ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L magnesium carbonate Chemical compound [Mg+2].[O-]C([O-])=O ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- 239000001095 magnesium carbonate Substances 0.000 claims description 2
- 229910000021 magnesium carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000004337 magnesium citrate Substances 0.000 claims description 2
- 229960005336 magnesium citrate Drugs 0.000 claims description 2
- 235000002538 magnesium citrate Nutrition 0.000 claims description 2
- VTHJTEIRLNZDEV-UHFFFAOYSA-L magnesium dihydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Mg+2] VTHJTEIRLNZDEV-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- 239000000347 magnesium hydroxide Substances 0.000 claims description 2
- 229910001862 magnesium hydroxide Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 claims description 2
- 229940091250 magnesium supplement Drugs 0.000 claims description 2
- 239000002745 poly(ortho ester) Substances 0.000 claims description 2
- 239000004633 polyglycolic acid Substances 0.000 claims description 2
- 239000004626 polylactic acid Substances 0.000 claims description 2
- PLSARIKBYIPYPF-UHFFFAOYSA-H trimagnesium dicitrate Chemical compound [Mg+2].[Mg+2].[Mg+2].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O.[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O PLSARIKBYIPYPF-UHFFFAOYSA-H 0.000 claims description 2
- WGIWBXUNRXCYRA-UHFFFAOYSA-H trizinc;2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylate Chemical compound [Zn+2].[Zn+2].[Zn+2].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O.[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O WGIWBXUNRXCYRA-UHFFFAOYSA-H 0.000 claims description 2
- 239000011592 zinc chloride Substances 0.000 claims description 2
- 235000005074 zinc chloride Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000011746 zinc citrate Substances 0.000 claims description 2
- 235000006076 zinc citrate Nutrition 0.000 claims description 2
- 229940068475 zinc citrate Drugs 0.000 claims description 2
- 239000011686 zinc sulphate Substances 0.000 claims description 2
- 235000009529 zinc sulphate Nutrition 0.000 claims description 2
- 102000018997 Growth Hormone Human genes 0.000 claims 1
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 claims 1
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 claims 1
- 229920002463 poly(p-dioxanone) polymer Polymers 0.000 claims 1
- 229920001281 polyalkylene Polymers 0.000 claims 1
- 229920002721 polycyanoacrylate Polymers 0.000 claims 1
- 239000000622 polydioxanone Substances 0.000 claims 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 abstract description 33
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 2
- 150000001457 metallic cations Chemical class 0.000 abstract 4
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 abstract 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 abstract 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 50
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 32
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 29
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 29
- 238000000034 method Methods 0.000 description 22
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 20
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 20
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 19
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 18
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 16
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 14
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 12
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 11
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 10
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 10
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 9
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 9
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 8
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 8
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 7
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 7
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 7
- 230000008569 process Effects 0.000 description 7
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 7
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 7
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 6
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 6
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 6
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 6
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 5
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 5
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 5
- 230000036571 hydration Effects 0.000 description 5
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 5
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 5
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N Pentane Chemical compound CCCCC OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 4
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 4
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 4
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 4
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 4
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 4
- RKDVKSZUMVYZHH-UHFFFAOYSA-N 1,4-dioxane-2,5-dione Chemical compound O=C1COC(=O)CO1 RKDVKSZUMVYZHH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 3
- 108090000723 Insulin-Like Growth Factor I Proteins 0.000 description 3
- 102000004218 Insulin-Like Growth Factor I Human genes 0.000 description 3
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 3
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 3
- 239000004067 bulking agent Substances 0.000 description 3
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 3
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 3
- 230000003628 erosive effect Effects 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 3
- 238000012667 polymer degradation Methods 0.000 description 3
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 3
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 3
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 3
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 238000000935 solvent evaporation Methods 0.000 description 3
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000282560 Macaca mulatta Species 0.000 description 2
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 2
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 238000005266 casting Methods 0.000 description 2
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 2
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 230000000366 juvenile effect Effects 0.000 description 2
- JJTUDXZGHPGLLC-UHFFFAOYSA-N lactide Chemical compound CC1OC(=O)C(C)OC1=O JJTUDXZGHPGLLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 2
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 2
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 2
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 2
- 229940068977 polysorbate 20 Drugs 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 238000012453 sprague-dawley rat model Methods 0.000 description 2
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 2
- 229910000368 zinc sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-M Acrylate Chemical compound [O-]C(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010003497 Asphyxia Diseases 0.000 description 1
- 206010013883 Dwarfism Diseases 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000792859 Enema Species 0.000 description 1
- 101000599951 Homo sapiens Insulin-like growth factor I Proteins 0.000 description 1
- 101001044927 Homo sapiens Insulin-like growth factor-binding protein 3 Proteins 0.000 description 1
- 206010062767 Hypophysitis Diseases 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- JLFVIEQMRKMAIT-UHFFFAOYSA-N ac1l9mnz Chemical compound O.O.O JLFVIEQMRKMAIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 1
- 239000012062 aqueous buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006472 autoimmune response Effects 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920003123 carboxymethyl cellulose sodium Polymers 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000009918 complex formation Effects 0.000 description 1
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 1
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002086 displacement chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 1
- 239000007920 enema Substances 0.000 description 1
- 229940095399 enema Drugs 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- BCQZXOMGPXTTIC-UHFFFAOYSA-N halothane Chemical compound FC(F)(F)C(Cl)Br BCQZXOMGPXTTIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003132 halothane Drugs 0.000 description 1
- 102000044162 human IGF1 Human genes 0.000 description 1
- 102000057148 human IGFBP3 Human genes 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 230000000899 immune system response Effects 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 238000001155 isoelectric focusing Methods 0.000 description 1
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical class CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000005923 long-lasting effect Effects 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005191 phase separation Methods 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 210000003635 pituitary gland Anatomy 0.000 description 1
- 229920001308 poly(aminoacid) Polymers 0.000 description 1
- 229920000117 poly(dioxanone) Polymers 0.000 description 1
- 238000002264 polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 1
- 239000003505 polymerization initiator Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000004845 protein aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000011158 quantitative evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000002791 soaking Methods 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- IHBMMJGTJFPEQY-UHFFFAOYSA-N sulfanylidene(sulfanylidenestibanylsulfanyl)stibane Chemical compound S=[Sb]S[Sb]=S IHBMMJGTJFPEQY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 238000011179 visual inspection Methods 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- YZYKBQUWMPUVEN-UHFFFAOYSA-N zafuleptine Chemical compound OC(=O)CCCCCC(C(C)C)NCC1=CC=C(F)C=C1 YZYKBQUWMPUVEN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001763 zinc sulfate Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B82—NANOTECHNOLOGY
- B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
- B82Y5/00—Nanobiotechnology or nanomedicine, e.g. protein engineering or drug delivery
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
- A61K38/27—Growth hormone [GH], i.e. somatotropin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
- A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
- A61K9/1611—Inorganic compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
- A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
- A61K9/1629—Organic macromolecular compounds
- A61K9/1641—Organic macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, poloxamers
- A61K9/1647—Polyesters, e.g. poly(lactide-co-glycolide)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/02—Drugs for disorders of the endocrine system of the hypothalamic hormones, e.g. TRH, GnRH, CRH, GRH, somatostatin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/06—Drugs for disorders of the endocrine system of the anterior pituitary hormones, e.g. TSH, ACTH, FSH, LH, PRL, GH
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Nanotechnology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
Prostředek pro prodloužené uvolňování lidského růstového hormonu
Oblast techniky
Vynález se týká prostředku pro prodloužené uvolňování lidského růstového hormonu a jeho použití pro výrobu léčiva.
Dosavadní stav techniky
Lidský růstový hormon (hGH) je protein, který je sekretován hypofýzou a který může být vyráběn způsobem rekombinantního genetického inženýrství. hGH způsobuje růst všech tělesných tkání, které jsou schopny růst.
hGH se typicky používá pro léčení pacient, kteří trpí hypopitoitámím nanismem. Vodný hGH se pacientům běžně podává jako subkutánní bolus třikrát týdně nebo jednou denně, aby se udržely vhodné hladiny hGH v séru. U pacientů, kteří chronicky dostávají hGH, vedou časté injekce k problémům snášenlivosti.
Aby se vyřešily problémy, které souvisejí s opakovanými injekcemi vodného hGH, byly dělány pokusy připravit zařízení pro regulované uvolňování obsahující vyšší dávky hGH než bolus injekce, které by byly obaleny polymemí matricí, přičemž hGH by se uvolňoval in vivo po dobu kolem jednoho týdne nebo delší.
Tato zařízení pro regulované uvolňování však často vykazují vyšší počáteční uvolnění hGH a minimální následující uvolňování hGH. Dále pak díky vysoké koncentraci hGH v zařízeních s tímto regulovaným uvolňováním mají molekuly hGH tendenci po několika dnech agregovat za vzniku agregovaného hGH, který je imunogenní in vivo a pravděpodobně má sníženou biologickou aktivitu.
Existuje tedy potřeba prostředků pro trvalé uvolňování biologicky aktivního hGH in vivo, aniž by toto uvolňování způsobilo imunitní systémovou odpověď po dobu uvolňování hGH.
Podstata vynálezu
Předmětem vynálezu je prostředek pro prodloužené uvolňování lidského růstového hormonu. Jeho podstata je v tom, že obsahuje
a) polymer, který je biokompatibilní a biodegradovatelný, a
b) lidský růstový hormon v částicové formě, stabilizovaný komplexem kovového kationtu, přičemž molámí poměr kovové kationtové složky k lidskému růstovému hormonu, potřebný pro stabilizování lidského růstového hormonu kovovým kationtem, je 4:1 až 10:1 a kovový kation je vícemocný.
Prostředek podle vynálezu s výhodou obsahuje kovovou kationtovou složku v molámím poměru k lidskému růstovému hormonu alespoň 6:1.
Prostředek podle vynálezu výhodně jako kovovou kationtovou složku obsahuje zinečnaté kationty Zn2+.
-1 CZ 288147 B6
Prostředek podle vynálezu obsahuje výhodně kovový kation ve formě soli rozpustné ve vodě.
Při jednom výhodném provedení vynálezu prostředek obsahuje kovový kation ve formě octanu zinečnatého.
Při jiném výhodném provedení obsahuje prostředek podle vynálezu lidský růstový hormon, stabilizovaný komplexem kovového kationtu, dispergovaný v biokompatibilním a biodegradovatelném polymeru.
S výhodou obsahuje prostředek podle vynálezu biokompatibilní a biodegradovatelný polymer vybraný ze skupiny zahrnující polylaktid, polyglykosid, poly(laktid-ko-glykolid), polymléčnou kyselinu, polyglykolovou kyselinu, polykaprolakton, polykarbonát, polyesteramid, polyanhydrid, polyaminokyselinu, polyorthoester, polykyanoakrylát, polydioxanon, polyalkylenoxalát, polyurethan a jejich směsi a kopolymery.
Dalším provedením vynálezu je prostředek, který obsahuje biokompatibilní a biodegradovatelný polymer vybraný ze skupiny zahrnující polylaktid, polyglykolid a poly(laktid-ko-glykolid).
Jiným provedením vynálezu je prostředek, který obsahuje lidský růstový hormon stabilizovaný komplexem kovového kationtu, obsažený v biokompatibilním a biodegradovatelném polymeru, v koncentraci 0,1 až 30 % hmotn., s výhodou 0,1 až 20 %, vztaženo na hmotnost prostředku.
Prostředek podle vynálezu s výhodou obsahuje lidský růstový hormon stabilizovaný komplexem kovového kationtu, obsažený v biokompatibilním a biodegradovatelném polymeru, v koncentraci 14 až 16 % hmotn., vztaženo na hmotnost prostředku.
Dalším výhodným provedením vynálezu je prostředek obsahující biokompatibilní a biodegradovatelný polymer, ktferý dále obsahuje druhou kovovou kationtovou složku.
S výhodou v tomto případě prostředek podle vynálezu obsahuje biokompatibilní a biodegradovatelný polymer, který jako druhou kovovou kationtovou složku obsahuje zineěnaté kationty Zn2+.
Prostředek podle vynálezu pak s výhodou obsahuje biokompatibilní a biodegradovatelný polymer, který obsahuje druhou kovovou kationtovou složku vybranou ze skupiny zahrnující uhličitan zinečnatý ZnCO3, citran zinečnatý Zn3(C6H5O7)2, octan zinečnatý Zn(OAc)2, síran zinečnatý ZnSO4 a chlorid zinečnatý ZnCh.
Další provedení tohoto vynálezu představuje prostředek obsahující biokompatibilní a biodegradovatelný polymer, který jako druhou kovovou kationtovou složku obsahuje hořečnaté kationty Mg2*.
S výhodou zde prostředek podle vynálezu obsahuje biokompatibilní a biodegradovatelný polymer, který obsahuje druhou kovovou složku vybranou ze skupiny zahrnující hydroxid hořečnatý Mg(OH)2, uhličitan hořečnatý MgCO3, citran hořečnatý MgXCeHsChh, octan hořečnatý Mg(OAc)2, síran hořečnatý MgSO4 a chlorid hořečnatý MgCl2.
Dalším výhodným provedením tohoto vynálezu je prostředek, který obsahuje biokompatibilní a biodegradovatelný polymer, v němž poměr druhé kovové kationtové složky k polymeru je v rozsahu 1:99 až 1:2 hmotnostně, s výhodou 1 % hmotn., vztaženo na hmotnost prostředku.
Jiným výhodným provedením vynálezu je prostředek pro prodloužené uvolňování lidského růstového hormonu, který obsahuje
-2CZ 288147 B6
a) biokompatibilní a biodegradovatelný poly(laktid-ko-glykolid), v němž je dispergován zinek ve formě uhličitanu zinečnatého ZnCO3, a
b) lidský růstový hormon, stabilizovaný komplexem zinečnatých kationtů, v částicové formě, přičemž lidský růstový hormon obsahuje zinečnaté kationty ve formě octanu zinečnatého v molámím poměru octanu zinečnatého ku lidskému růstovému hormonu 9:1 až 11:1 a lidský růstový hormon, stabilizovaný komplexem zinečnatých kationtů, je obsažen v biokompatibilním a biodegradovatelném polymeru v koncentraci 14 až 16% hmotn., vztaženo na hmotnost prostředku.
Posledním provedením tohoto vynálezu je pak prostředek, v němž molámí poměr kovové kationtové složky k lidskému růstovému hormonu, potřebný pro stabilizování lidského růstového hormonu kovovým kationtem, je 10:1.
Předmětem vynálezu je též použití prostředku podle vynálezu pro výrobu léčiva k léčení nemocí vyžadujících prodloužené uvolňování lidského růstového hormonu.
Způsob přípravy prostředku pro trvalé uvolňování hGH podle vynálezu zahrnuje rozpuštění biosloučitelného polymeru v polymemím rozpouštědle za vzniku polymemího roztoku dispergujícího částice biologicky aktivního stabilizovaného hGH v polymemím roztoku a potom zpevnění polymeru za vzniku polymemí matrice obsahující disperzi hGH částic.
Způsob používání prostředku s trvalým uvolňováním podle předloženého vynálezu zahrnuje dosažení terapeuticky účinné hladiny biologicky aktivního, neagregovaného lidského růstového hormonu v krvi subjektu pro dobu trvalého uvolňování podáváním dávky prostředku s trvalým uvolňováním tomuto subjektu.
Výhody tohoto prostředku s trvalým uvolňováním hGH zahrnují delší, konzistentnější hladiny hGH v krvi in vivo, nižší počásteční vzestup hGH a zvýšené terapeutické výhody odstraněním kolísání množství hGH v séru. Tyto výhody zahrnují také zvýšenou snášenlivost pacientem a snížení potřebného počtu injekcí. Mezi tyto výhody dále patří schopnost používat menší množství hGH při srovnání s režimem bolus injekcí, protože hladiny hGH v séru jsou udržovány blíže terapeutického prahu.
Lidský růstový hormon (hGH) používaný podle tohoto vynálezu je biologicky aktivní hGH ve své molekulární (monomemí nebo neagregované) formě. Molekulární hGH je typicky neimunogenní.
Agregovaný hGH může indukovat imunitní odpověď vedoucí k protilátkám vzniklým proti hGH. To může vést proti účinnosti dlouhotrvající hGH terapie. Agregovaný hGH může také stimulovat auto-imunitní odpověď na endogenní hGH.
Trvalé uvolňování biologicky aktivního neagregovaného lidského růstového hormonu znamená uvolňování, které vede k měřitelným hladinám biologicky aktivního monomemího hGH v séru po delší období než je období přímého podávání vodného hGH. Je výhodné, aby trvalé uvolňování znamenalo uvolňování hGH po dobu týdne nebo po delší dobu, výhodněji po dobu dvou nebo více týdnů.
Trvalé uvolňování biologicky aktivního neagregovaného hGH z polymemí matrice může znamenat kontinuální nebo nekontinuální uvolňování s relativně stálou nebo měnící se rychlostí uvolňování. Kontinuita uvolňovaného hGH a hladina uvolňovaného hGH může být dána použitím, mimo jiné, jednoho nebo více typů polymemích prostředků, náplní hGH a/nebo výběrem excipientů, které poskytují žádaný účinek.
-3CZ 288147 B6
Stabilizovaný (hGH) obsahuje biologicky aktivní neagregovaný hGH, kteiý je komplexován s alespoň jedním typem vícemocného kationtu kovu, který má vaznost +2 nebo více, ze složky kationtu kovu. Stabilizovaný hGH v prostředku s trvalým uvolňováním podle předloženého vynálezu je ve formě částeček.
Mezi vhodné vícemocné kationty kovů patří kationty kovů obsažené v biokompatibilních složkách kationtu kovu. Složka kationtu kovu je biokompatibilní, jestliže složka kationtu není toxická pro příjemce v používaných množstvích a jestliže také nepředstavuje významné škodlivé nebo nevhodné účinky pro tělo příjemce, jako je imunologická reakce v místě injekce.
Molámí poměr složky kationtu kovu k hGH je pro kation kovu stabilizující hGH typicky mezi 4:1 a 10:1.
Výhodným kationtem kovu používaným pro stabilizování hGH je zinečnatý kation. Ve výhodnějším provedení je molámí poměr složky kationtu kovu, obsahující zinečnaté kationty, k hGH 6:1.
Vhodnost kationtu kovu pro stabilizování hGH může stanovit zručný odborník pomocí rozmanitých způsobů indukujících stabilitu, jako je elektroforesa na polyakrylamidovém gelu, isoelektrická fokusace, chromatografie na obrácené fázi, HPLC a testy účinnosti na částicích lyofilizovaného hGH obsahujícího kationty kovu, aby se stanovila aktivita hGH po lyofilizaci a po dobu trvání uvolňování z mikročástic. U stabilizovaného hGH je tendence hGH agregovat v mikročásticích během hydratace in vivo a/nebo ztráta biologické aktivity nebo účinnosti během hydratace nebo díky procesu tvoření prostředku s trvalým uvolňováním nebo díky chemickým vlastnostem prostředku s trvalým uvolňováním snížena vytvořením komplexu alespoň jednoho typu kationtu kovu shGH před uvedením hGH do kontaktu s roztokem polymeru.
Stabilizovaný hGH je typicky stabilizován proti vvznamné agregaci in vivo po dobu trvalého uvolňování. Významná ty ; d<. nc na o takov..' agregL.v, kteří ve’ k agregaci 15 nebo více % hmotn. z původního množství monomeru hGH uzavřeného v tobolce. Agregace se s výhodou udržuje pod 5 % hmotn. z původní dávky monomeru hGH. Agregace se výhodněji udržuje pod 2 % hmotn. z původní dávky.
hGH v prostředku s trvalým uvolňováním hGH se může smíchat také s jinými excipienty, jako jsou činidla zvětšující objem nebo další stabilizační činidla, jako jsou pufry, aby se hGH během lyofilizace stabilizoval.
Činidla zvětšující objem typicky obsahující inertní materiály. Vhodná činidla zvětšující objem jsou známa odborníkům z oblasti techniky.
Polymer nebo polymemí matrice, které jsou vhodné pro prostředek s trvalým uvolňováním podle předloženého vynálezu, musí být bioslučitelné. Polymer je bioslučitelný, jestliže polymer nebo jakékoliv degradační produkty polymeru nejsou pro příjemce toxické a jestliže také neznamenají významné škodlivé nebo nevhodné účinky pro tělo příjemce, jako je imunologická reakce v místě injekce.
Polymer prostředku s trvalým uvolňováním hGH musí být také biodegradovatelný. Biodegradovatelný, jako je zde definováno, znamená, že prostředek bude degradovat nebo erodovat in vivo za vzniku menších chemických částic. Degradace může být důsledkem například enzymatických, chemických a fyzikálních procesů.
Mezi vhodné bioslučitelné, biodegradovatelné polymery patří například poly(laktidy), poly(glykolidy), poly(laktid-ko-glykolidy), poly(mléčné kyseliny), poly(glykolové kyseliny), poly(mléčná kyselina-ko-glykolová kyselina), polykaprolakton, polyuhličitany, polyesteramidy,
-4CZ 288147 B6 polyanhydridy, poly(aminové kyseliny), polyorthoestery, polykyanakryláty, poly(p-dioxanony), poly(alkylen-oxaláty), biodegradovatelné polyurethany, jejich směsi a jejich kopolymeiy.
Koncové funkční skupiny polymeru mohou být také modifikovány. Například polyestery mohou být blokovány, neblokovány nebo mohou znamenat směs blokovaných a neblokovaných polymerů. Blokovaný polymer je klasicky definován v oblasti techniky, specificky s blokovanými karboxylovými koncovými skupinami. Obecně jsou blokující skupiny odvozeny od iniciátoru polymerace a typicky znamenají alkylovou skupinu. Neblokovaný polymer je klasicky definován v oblasti techniky, specificky jako polymer s volnými karboxylovými koncovými skupinami.
Přijatelné molekulové hmotnosti polymerů používaných podle tohoto vynálezu mohou být stanoveny osobou z oblasti techniky, která vezme v úvahu takové faktory, jako je žádaná rychlost degradace polymeru, fyzikální vlastností, jako je mechanická pevnost, a rychlost rozpouštění polymeru v rozpouštědle. Přijatelný rozsah molekulových hmotností je typicky v rozmezí od 2000 do 2 000 000. Ve výhodném provedení polymer znamená biodegradovatelný polymer nebo kopolymer. Ve výhodnějším provedení polymer znamená poly(laktid-ko-glykolid) (zde dále označovaný „PLGA“) s poměrem laktid:glykolid 1:1a molekulovou hmotností 5000 až 70 000.
V ještě výhodnějším provedení má PLGA použitý podle předloženého vynálezu molekulovou hmotnost 6000 až 31 000.
Množství hGH, které je obsaženo v dávce mikročástic s trvale uvolňováním nebo v jiném zařízení s trvalým uvolňováním, obsahujícím biologicky aktivní, stabilizované hGH částice, je terapeuticky nebo profylakticky efektivní množství, které může být stanoveno odborníkem z oblasti techniky, přičemž se berou v úvahu takové faktoiy, jako je tělesná hmotnost, stav, který má být léčen, typ použitého polymeru a rychlost uvolňování z polymeru.
V jednom provedení prostředek s trvalým uvolňováním hGH obsahuje od 0,01 do 50% hmotn. biologicky aktivních částic se stabilizovaným hGH. Množství používaných částic hGH se bude měnit podle žádaného účinku hGH, podle plánovaného uvolňovaného množství, podle doby, po kterou by se hGH měl uvolňovat, a podle času, po který se hGH bude uvolňovat. Výhodné rozmezí náplně částic hGH je mezi 0,1 a 30 % hmotn. částic hGH. Výhodnější rozmezí náplně částic hGH je mezi 0,1 a 20 % hmotn. částic hGH. Nej výhodnější náplň biologicky aktivních částic je stabilizovaným hGH je 15 % hmotn.
V jiném provedení prostředek s trvalým uvolňováním hGH obsahuje také druhou složku kationtu kovu, která není obsažena v částicích se stabilizovaným hGH a která je dispergována v polymeru. Druhá složka kationtu kovu s výhodou obsahuje stejné druhy kationtu kovu jako kation ve stabilizovaném hGH. Druhá složka kationtu kovu může také obsahovat jeden nebo více různých druhů kationtů kovu.
Druhá složka kationtu kovu působí jako modulace uvolnění hGH z polymemí matrice prostředku s trvalým uvolňováním, jako je působení jako zásobník kationtů kovu pro další prodloužení doby, po kterou je hGH stabilizován kationtem kovu, aby se zvýšila stabilita hGH v prostředku.
Složka kationtu kovu používaná při modulaci uvolňování typicky obsahuje alespoň jeden typ vícemocného kationtu kovu. Příklady druhých složek kationtu kovu, které jsou vhodné pro modulaci uvolňování hGH, zahrnují nebo obsahují například Mg(OH)2, MgCO3 (jako je 4 MgCO3.Mg(OH)2.5 H2O), ZnCO3 (jako je 3 Zn(OH)2.2 ZnCO3), CaCO3, Zn3(C6H5O7)2, Mg(OAc)2, MgSO4, MgSO4, Zn(OAc)2, ZnSO4, ZnCl2, MgCl2 a Mg3(C6HsO7)2. Vhodný poměr druhé složky kationtu kovu k polymeru je mezi 1:99 a 1:2 hmotn. dílů. Optimální poměr závisí na použitém polymeru a na použité druhé složce kationtu kovu.
Polymemí matrice obsahující dispergovanou složku kationtu kovu pro modulaci uvolnění biologicky aktivního činidla z polymemí matrice je dále popsána v dokumentu US č. 5 656 297,
-5CZ 288147 B6 podané 3. května 1994, a v doprovázejícím dokumentu US č. 5 912 015, jejichž celé popisy jsou zde zahrnuty jako odkazy.
Prostředek pro trvalé uvolňování hGH podle tohoto vynálezu se může vyrábět v mnoha různých tvarech, jako je film, peleta, váleček, disk nebo mikročástice. Mikročástice, jak je zde definována, obsahuje polymemí složku s průměrem menším než 1 mm, která obsahuje dispergované částice stabilizované hGH. Mikročástice mohou mít kulovitý, nekulovitý nebo nepravidelný tvar. Je výhodné, aby mikročástice znamenaly mikrokuličky. Mikročástice budou mít typicky takový tvar, který je vhodný pro injekční podávání. Výhodným rozmezím velikosti mikročástic je rozmezí průměru částic od 1 do 180 pm.
Podle způsobu výroby prostředku pro trvalé uvolňování biologicky aktivního, neagregovaného hGH podle tohoto vynálezu se vhodné množství částic biologicky aktivního, stabilizovaného hGH disperguje v polymemím roztoku.
Vhodný polymemí roztok obsahuje mezi 1 a 30 % hmotn. vhodného bioslučitelného polymeru, přičemž biosloučitelný polymer je typicky rozpuštěn ve vhodném polymemím rozpouštědle. Polymemí roztok s výhodou obsahuje 2 až 20 % hmotn. polymeru. Nejvýhodnější je takový polymemí roztok, který obsahuje 5 až 10 % hmotn. polymeru.
Vhodným polymemím rozpouštědlem, jak je zde definováno, je takové rozpouštědlo, v němž je polymer rozpustný, ale v němž jsou částice stabilizovaného hGH v podstatě nerozpustné a nereaktivní. Mezi příklady vhodných polymemích rozpouštědel patří polární organické kapaliny, jako je methylenchlorid, chloroform, ethylacetát a aceton.
Při přípravě biologicky aktivních částic stabilizovaného hGH se hGH smíchá ve vhodném vodném rozpouštědle s alespoň jednou vhodnou složkou kationtu kovu za takových podmínek pH, které jsou vhodné pro vytvoření komplexu kationtu kovu s hGH. Komplexovaný hGH bude typicky ve formě mléčné sraženiny, která je suspendována v rozpouštědle. Komplexovaný hGH však může být také v roztoku. V ještě výhodnějším provedení je hGH komplexován se zinečnatými ionty.
Mezi vhodné podmínky pH pro vytvoření komplexu hGH typicky patří pH hodnoty mezi 7,0 a 7,4. Vhodné podmínky pH se typicky dosáhnou použitím vodného pufru, jako je hydrogenuhličitan sodný, jako rozpouštědla.
Vhodnými rozpouštědly jsou taková rozpouštědla, v nichž hGH a složka kationtu kovu jsou alespoň mírně rozpustné, jako je tomu ve vodném pufru hydrogenuhličitanu sodného. U vodných rozpouštědel je výhodné, aby použitou vodou byla buď deionizovaná voda, nebo voda pro injekce (WFI).
Tomu je třeba rozumět tak, že hGH může být ve formě pevné látky nebo v rozpuštěném stavu před tím, než je uveden do kontaktu se složkou kationtu kovu. Tomu je třeba rozumět také tak, že složka kationtu kovu může být v pevném stavu nebo v rozpuštěném stavu před tím, než je uvedena do kontaktu s hGH. Ve výhodném provedení se pufrovaný vodný roztok hGH smíchá s vodným roztokem složky kationtu kovu.
Komplexovaný hGH bude existovat typicky ve formě mléčné sraženiny, která je suspendována v rozpouštědle. Komplexovaný hGH však může být také v roztoku. V ještě výhodnějším provedení je hGH komplexován se zinečnatými ionty.
Komplexovaný hGH se pak vysuší, jako příklad lyofilizaci, za vzniku stabilizovaného hGH ve formě částeček. Komplexovaný hGH, který je suspendován nebo který je v roztoku, se může lyofilizovat ve velkém měřítku nebo ho lze rozdělit na menší objem a potom lyofilizovat. Ve výhodném provedení je suspenze komplexovaného hGH mikronizována, jako například použitím
-6CZ 288147 B6 ultrazvukové trysky, načež se lyofílizuje za vzniku částic stabilizovaného hGH. Přijatelnými prostředky pro lyofilizaci směsi komplexovaného hGh jsou ty prostředky, které jsou známy z oblasti techniky.
Průměr částic stabilizovaného hGH je s výhodou mezi 1 a 6 pm. Částice hGH se mohou fragmentovat odděleně. Částice hGH se mohou také fragmentovat po tom, co jsou přidány k polymemímu roztoku, jako například ultrazvukovou sondou nebo ultrazvukovou tryskou.
V jiném provedení se druhá složka kationtu kovu, která není obsažena v částicích stabilizovaného hGH, také disperguje v polymemím roztoku.
Tomu je třeba rozumět tak, že druhá složka kationtu kovu a stabilizovaný hGH se mohou dispergovat v polymemím roztoku postupně, v obráceném pořadí, střídavě, odděleně nebo současným přidáváním. Polymer, druhá složka kationtu kovu a stabilizovaný hGH se mohou také vnímat do polymemího rozpouštědla postupně, v obráceném pořadí, střídavě, odděleně nebo současným přidáváním.
Způsob výroby prostředku pro modulaci uvolňování biologicky aktivního činidla z biodegradovatelného polymeru je dále popsán v doprovázejícím USA patentu č. 5 656 297.
Podle tohoto způsobu se polymemí rozpouštědlo nechá ztuhnout za vzniku polymemí matrice obsahující disperzi částic stabilizovaného hGH.
Jiným vhodným způsobem vytvoření prostředku s trvalým uvolňováním hGH z polymemího roztoku je způsob odpařování rozpouštědla popsaný v USA patentu č. 3 737 337 Schnoringa a spol., USA patentu č. 3 523 906 Vrancheana a spol., USA patentu č. 3 691 090 Kitajamy a spol. nebo v USA patentu č. 4 389 330 Ticeho a spol. Odpaření rozpouštědla se typicky používá jako způsob výroby mikročástic pro trvalé uvolňování hGH.
U způsobu odpařování rozpouštědla se polymerový roztok obsahující disperzi částic stabilizovaného hGH vmíchá do nebo se promíchá s kontinuální fází, v níž je polymemí rozpouštědlo částečně mísitelné, za vzniku emulze. Kontinuální fáze je obvykle ve vodném rozpouštědle. Do kontinuální fáze jsou často zahrnuta emulgační činidla, aby se emulze stabilizovala. Polymemí rozpouštědlo se pak během několika hodin nebo během delší doby odpaří, čímž se polymer ztuží tak, že se vytvoří polymemí matrice, která v sobě obsahuje disperzi částic stabilizovaného hGH.
Výhodný způsob vzniku mikročástic s trvalým uvolňováním hGH z polymemího roztoku je popsán v USA patentu č. 5 019 400 Gombotze a spol. a v doprovázejícím USA patentu č. 5 922 253, podané 18. května 1995, jejich popisy jsou zcela celé uvedeny jako odkazy. Tento způsob vzniku mikrokuliček, při srovnání s jinými způsoby, jako je dělení fází, dále snižuje množství hGH, kterého je potřeba pro výrobu prostředku s trvalým uvolňováním se specifickým obsahem hGH.
Podle tohoto způsobu se polymemí roztok, který obsahuje disperzi částic stabilizovaného hGH, zpracuje tak, aby se vytvořily kapičky, přičemž alespoň významná část těchto kapiček obsahuje polymemí roztok a částice stabilizovaného hGH. Tyto kapičky se pak nechají zmrznout prostředky vhodnými pro vznik mikročástic. Příklady prostředků pro zpracování disperze polymemího roztoku za vzniku kapiček zahrnují směrování disperze do ultrazvukové trysky, tlakové trysky, Rayleighovy trysky nebo jiných známých prostředků pro tvoření kapiček z roztoku.
Prostředky, které jsou vhodné pro zmrazování kapiček, zahrnují směrování kapiček do nebo blízko zkapalněného plynu, jako je kapalný argon a kapalný dusík, přičemž se vytvoří zmrazené mikrokapičky, které se pak oddělí od kapalného plynu. Zmrazené mikrokapičky, které se pak oddělí od kapalného plynu. Zmrazené mikrokapičky se pak vystaví působení kapalného nerozpouštědla, jako je ethanol nebo směs ethanolu s hexanem nebo pentanem.
-7CZ 288147 B6
Rozpouštědlo ve zmrazených mikrokapičkách se extrahuje jako pevná látka a/nebo kapalina do nerozpouštědla za vzniku mikročástic obsahujících stabilizovaný hGH. Smíchání ethanolu s jinými ne-rozpouštědly, jako je hexan nebo pentan, může zvýšit rychlost extrakce rozpouštědlem nad rychlost dosaženou samotným ethanolem, z některých polymerů, jako je poly(laktid-koglykolid)ové polymery.
Velký rozsah velikostí mikročástic s trvalým uvolňováním hGH lze vyrobit měněním velikostí kapiček, například měněním průměru ultrazvukové trysky. Jestliže jsou žádoucí velmi velké mikročástice, mikročástice mohou být vytlačovány jehlou přímo do chladné kapaliny. Zvýšením viskozity polymerovaného roztoku se může zvýšit také velikost mikročástic. Tímto způsobem se mohou vyrábět mikročástice o velikosti například v rozmezí v průměru větším než od 1000 do 1 pm.
Jestliže jiný způsob vzniku prostředku s trvalým uvolňováním hGH z polymerovaného roztoku zahrnuje lití filmu, jako například do forem, za vzniku filmu nebo nějakého tvaru. Například po vlití polymerového roztoku obsahujícího disperzi částic stabilizovaného hGH do formy se polymerový roztok odstraní způsoby známými v oblasti techniky nebo se teplota polymerového roztoku sníží, dokud se nezíská film nebo tvar se stálou suchou hmotností. Odlévání filmu polymerového roztoku, který obsahuje biologicky aktivní činidlo, je dále popsáno v doprovázejícím USA patentu č. 5 656 297, jejíž popis je zde celý zahrnut jako odkaz.
Předpokládá se, že k uvolnění hGH může docházet dvěma různými mechanismy. hGH se může uvolňovat difúzí vodou naplněnými kanálky, které vzniknou v polymemí matrici, jak se rozpouští hGH, nebo prázdnými místy vytvořenými odstraněním polymerových rozpouštědel během syntézy prostředku s trvalým uvolňováním.
Druhým mechanismem je uvolňování hGH degradací polymeru. Rychlost degradace může být regulována měněním vlastností polymeru, které ovlivňují rychlost hydratace polymeru. Mezi tyto vlastnosti například patří poměr různých monomerů, jako je laktid a glykolid, obsaženým v polymeru, použití L-isomeru monomeru místo racemické směsi a molekulová hmotnost polymeru. Tyto vlastnosti mohou ovlivňovat hydrofílnost a krystalickou schopnost, které regulují rychlost hydratace polymeru. Do prostředku lze zahrnout také hydrofilní excipienty, jako jsou soli, cukry a povrchově aktivní činidla, aby se zvýšila hydratace. Tyto excipienty mohou měnit rychlost eroze polymeru.
Měněním vlastností polymeru lze regulovat příspěvky difúze a/nebo degradace polymeru na uvolňování hGH. Například zvýšením obsahu glykolidu v poly(laktid-ko-glykolid)ovém polymeru a snížením molekulové hmotnosti polymeru lze zvýšit hydrolýzou polymeru a tedy dosáhnout zvýšeného uvolňování hGH z polymerové eroze.
Rychlost hydrolýzy polymeruje zvýšena také při ne-neutrálním pH. K polymerovému roztoku se tedy mohou přidávat kyselé nebo bazické excipienty, používané při vzniku mikrokuliček, aby se změnila rychlost eroze polymeru.
Prostředek podle tohoto vynálezu se může podávat člověku nebo jinému živočichovi injekčně, implantací (např. subkutánně, intramuskulámě, intraperitoneálně, intrakraniálně, intravaginálně a intradermálně), podáváním do mukózních membrán (např. intranazálně nebo pomocí čípků) nebo podáváním in šitu (např. klystýrem nebo aerosolovým sprejem), aby se dosáhla žádaná dávka hGH na základě známých parametrů pro léčení hGH různých lékařských stavů.
Vynález bude nyní dále a podrobně popsán následujícími příklady.
-8CZ 288147 B6
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Tvorba hGH stabilizovaného zinečnatými ionty
V tomto případu byl použit lidský růstový hormon (hGH), jehož DNA sekvence je popsána v USA patentu 4 898 830 Goeddela a spol. Lidský růstový hormon byl stabilizován vytvořením nerozpustných komplexů se zinkem.
hGH byl rozpuštěn ve vzorcích 4mM pufru hydrogenuhličitanu sodného (pH 7,2). Vznikly hGH roztoky s 0,1 a 0,5mM koncentrací hGH. Z neionizované vody a dihydrátu octanu zinečnatého se připraví 0,9mM roztok zinečnatý iontů a ten se pak přidá k hGH roztokům za vzniku Zn2+-hGH komplexu. pH tohoto komplexu se pak přidáním 1% (hmotn.) kyseliny octové upraví na 7,0 až 7,4. Vytvoří se mléčná suspendovaná sraženina obsahující vytvořený hGH stabilizovaný zinečnatými ionty.
Na suspenzi hGH stabilizovaného zinečnatými ionty se pak ultrazvukovou tryskou (typ VIA, Sonics and Materials, Danbury, Kt.) působí ultrazvukem a pak se tato suspenze nastříká do polypropylenové nádoby (průměr 17 cm, výška 8 cm), která obsahuje kapalný dusík. Vytvoří se zmrzlé částice. Polypropylenová nádoba se pak umístí do mrazáku nastaveného na -80 °C, pokud se kapalný dusík neodpaří. Zmrazené částice, které obsahují hGH stabilizovaný zinečnatými ionty, se pak lyofilizují za vzniku částic hGH stabilizovaného zinečnatými ionty.
Příklad 2
Příprava PLGA mikročástic obsahujících biologicky aktivní hGH stabilizovaný proti agregaci
Mikrokuličky, které obsahují lidský růstový hormon (hGH) stabilizovaný zinečnatými ionty, se připraví z hydrofilního poly(laktid-ko-glykolid)ového polymeru RG502H, kteiý má volné karboxylové koncové skupiny (zde dále „neblokovaný PLGA“) (50:50 PLGA, molekulová hmotnost 9300, Boehringer Ingelheim Chemicals, lne.) nebo hydrofóbnějšího PLGA polymeru s blokovanými karboxylovými koncovými skupinami (zde dále „blokovaný PLGA“) (50:50 PLGA, molekulová hmotnost 10 000, šarže č. 115-56-1, Birmingham Polymers, lne., Birmingham, Al.).
Polymer se rozpustí v methylenchloridu za teploty místnosti. Částice lyofilizovaného hGH se přidají k polymerovému roztoku a přidá se také uhličitan zinečnatý. Na směs se pak působí ultrazvukem. Získá se homogenní suspenze. Tato suspenze se atomizuje ultrazvukovou tryskou do vrstvy zmrazeného ethanolu převrstveného kapalným dusíkem. Nádoba, která obsahuje mikrokuličky, se skladuje při -80 °C, aby se extrahoval methylenchlorid, a potom se vysuší vymražením. Získá se tak volně sypký prášek.
Příklad 3
Analýza hGH proteinu uzavřeného v tobolkách
Integrita hGH uzavřeného v tobolkách se stanovuje rozpuštěním nehydratovaných mikrokuliček v methylenchloridu a acetonu obsahujícím protein, vysušením vymražením a opětovným uvedením do HEPES pufru, který obsahuje lOmM EDTA. Provedou se příslušné kontroly, aby se zajistilo, že proces extrakce neovlivňuje integritu proteinu.
-9CZ 288147 B6
Integrita hGH uzavřeného v tobolkách se analyzuje vytěsňovací chromatografií (SEC) změřením procent monomeru hGH obsaženého v hGH po uzavření do tobolek.
Výsledky této SEC analýzy integrity hGH mikrokuliček s trvalým uvolňováním hGH jsou uvedeny níže:
| prostředek (polymer; procenta uhličitanu zinečnatého) | % monomeru (SEC) |
| 31K neblokovaný; 6 % ZnCO3 | 98,6 |
| 31K neblokovaný; 6 % ZnCO3 | 99,2 |
| 31K neblokovaný; 3 % ZnCO3 | 97,7 |
| 31K neblokovaný; 3 % ZnCO3 | 97,8 |
| 31K neblokovaný; 1 % ZnCO3 | 97,6 |
| 31K neblokovaný; 0 % ZnCO3 | 97,8 |
| 31K neblokovaný; 0 % ZnCO3 | 97,1 |
| 10K blokovaný; 1 % ZnCO3 | 98,2 |
| 10K blokovaný; 1 % ZnCO3 | 98,4 |
| 8K neblokovaný; 0 % ZnCO3 | 98,5 |
| 10K blokovaný; 1 % ZnCO3 | 98,4 |
Výsledky ukazují, že způsob zahrnutí do tobolek nezpůsobuje agregaci proteinu. Výtěžek (v procentech) proteinu izolovaného postupem extrakce (vzhledem k množství měřeného obsahem dusíku mikrokuliček) je v rozmezí od 40 do 98% hmotn. Předpokládá se, že proměnlivost souvisí se ztrátami materiálu během stupňů přenosu během postupu. Postup extrakce je modifikován tak, aby se zvýšil výtěžek proteinu.
Příklad 4
Stanovení účinku uhličitanu zinečnatého na kinetiky uvolňování in vitro
Mikrokuličky byly vyrobeny podle toho, jak je to popsáno v příkladu 2, a obsahovaly 15 % hmotn. hGH (komplex Zn:hGH protein 6:1), 0,1,6,10 nebo 20 % hmotn. uhličitanu zinečnatého a poly(laktid-ko-glykolid)ový polymer.
Kinetiky in vitro uvolňování prostředků mikrokuliček s trvalým uvolňováním hGH obsahujících různé koncetrace uhličitanu zinečnatého byly stanoveny suspendováním podílu (10 mg) každého typu mikrokuliček v různých l,5ml vzorcích pufru HEPES (50mM HEPES, lOmM KC1, 0,1% (hmotn.) NaN3), pH 7,2, a potom byly inkubovány při 37 °C. Množství uvolněného proteinu bylo kvantitativně stanoveno odebráním vzorků pufru 1., 3., 7., 10., 14., 21. a 28. den po inkubaci a nahrazením čerstvým pufrem po každém odebrání.
Byla vynesena křivka souhrnného počtu uvolněných procent (vzhledem k původnímu obsahu hGH v počáteční hmotě mikrokuliček) proti času. Vzorky uvolněného proteinu z každého bodu byly testovány na obsah monomeru hGH vytěsňovací chromatografií.
O uhličitanu zinečnatém se předpokládá, že působí jako nádržka zinečnatých iontů, takže je zvýhodněna tvorba komplexu Zn-hGH a znevýhodněna disociace na rozpustný hGH. Protože rozpustnost uhličitanu zinečnatého ve vodě je nízká, je uvolňování zinečnatých iontů ze zásobníku pomalé, což moduluje rozpustnost proteinu.
Analýza zjistila, že v nepřítomnosti uhličitanu zinečnatého byla rychlost uvolňování hGH uzavřeného v tobolce velmi lychlá a všechen protein byl uvolněn ve velmi krátké době.
-10CZ 288147 B6
Příklad 5
Test hGH po in vivo degradaci mikrokuliček blokovaných PLGA s hGH stabilizovaným zinečnatými ionty
Mikrokuličky blokovaného PLGA, obsahující 15% hmotn. hGH stabilizovaného zinečnatými ionty a 0, 6, 10 nebo 20% hmotn. uhličitanu zinečnatého, byly vyrobeny podle způsobu z příkladu 2. Skupinám testovaných krys byly injekčně subkutánně podány 50 mg vzorky různých mikrokuliček hGH. Krysy byly po 60 dnech usmrceny a z míst injekce byly odebrány vzorky kůže. Vzorky odebrané kůže byly umístěny do 10 % (hmotn.) neutrálního pufrovaného formalinu na alespoň 24 h. Potom byly ořezány žiletkou, aby se odstranila nadbytečná kůže a byly umístěny do PBS.
Vzorky tkáně byly zpracovány v Pathology Associates, lne. (Frederick, Md.). Vzorky kůže byly uloženy do glykomethakrylátu, byly z nich připraveny řezy a ty byly analyzovány na přítomnost hGH použitím sestavy HistoScan/LymphoScan Staining Kit (výrobek č. 24-408M, Accurate Chemical and Scientific Corp., Westbury, N.Y.) podle pokynů výrobce. Vzorky tkání byly vyhodnoceny na přítomnost nebo nepřítomnost obarvení, které indikovalo přítomnost nebo nepřítomnost hGH ve vzorku.
Všechny vzorky kůže, které souvisely s injekcemi mikrokuliček hGH, byly testovány pozitivně na přítomnost hGH, což tedy ukazuje, že mikrokuličky blokovaného PLGA obsahovaly hGH ještě po 60 dnech in vivo.
Způsob popsaný v příkladu 2 byl použit pro přípravu mikrokuliček zahrnutím do tobolek 0 nebo 15% hmotn. hGH ve formě komplexu Zn:hGH a také 0, 1 nebo 6% hmotn. soli uhličitanu zinečnatého v blokovaném PLGA a v neblokovaném PLGA.
In vivo degradace mikrokuliček neblokovaného PLGA byly srovnávány s mikrokuličkami blokovaného PLGA podáním injekcí vzorků mikrokuliček krysám a následným analyzováním mikrokuliček zbývajících v místě injekce v různých dobách po injekci. V každém čase byly testovány tři krysy na každý vzorek mikrokuliček. V den podání mikrokuliček bylo do ampulek obsahujících 50 ± 1 mg mikrokuliček přidáno 750 μΐ ředidla 3 % (hmotn.) karboxymethylcelulózy (o nízké viskozitě) a 1 % hmotn. Tweenu 20 v solném roztoku). Ampulky se pak hned intenzivně třepou. Vytvoří se suspenze, která se pak přenese do lml injekční stříkačky bez jehly.
Krysy (samci Sprague-Dawley) byly anestetizovány směsí halothanu a kyslíku. Místa vpichu injekce (intraskapulámí oblast) byla oholena a označena stálou tetovací barvou, aby se získalo přesné místo kůže, kam byl vzorek podán. Každé kryse byla injekčně podána celá ampulka mikrokuliček jehlou o velikosti 18 až 21 gauge.
V předem určený den (15., 30., 59. a 90. po injekci, kterou zvíře obdrželo mikrokuličky blokovaného PLGA, nebo 7., 14., 21., 28. 45. den po podání injekce zvířeti, kterou obdrželo mikrokuličky neblokovaného PLGA) byly krysy usmrceny udušením oxidem uhličitým a kůže v místě vpichu (včetně mikrokuliček) byla odebrána. Jelikož mikrokuličky mají tendenci tvořit v místě vpichu shluky, přítomnost nebo nepřítomnost mikrokuliček byla stanovena vizuálně.
Vizuální inspekce zjistila, že mikrokuličky neblokovaného PLGA degradovaly podstatně rychleji než mikrokuličky blokovaného PLGA a že přidání uhličitanu zinečnatého k blokovanému PLGA podstatně zpomalilo polymemí degradaci. Například u krys, kterým byly injekčně podány mikrokuličky neblokovaného PLGA, které obsahují 0 % hmotn. hGH a 0 nebo 1 % hmotn. uhličitanu zinečnatého, nebyly vidět žádné kuličky 21. den. Navíc u krys, kterým byly injekčně podány mikrokuličky blokovaného PLGA obsahující 0 % hmotn. hGH a 0 % hmotn. uhličitanu zinečnatého, bylo několik mikrokuliček vidět 60. den, žádná nebyla vidět 90. den. Navíc u krys,
-11CZ 288147 B6 kterým byly injekčně podány mikrokuličky blokovaného PLGA, které obsahují 0 nebo 15 % hmotn. hGH a 6 % hmotn. uhličitanu zinečnatého, byly mikrokuličky vidět 90. den.
Příklad 6
Farmakokinetické studie in vivo mikrokuliček s trvalým uvolňováním hGH u krys
U krys byly provedeny studie, které testovaly různé prostředky mikrokuliček shGH. Byly stanoveny farmakokinetické parametry po intravenózním (i.v.) podání, subkutánním (s.k.) podání a podání SC osmitickou pumpou (Alzet) hGH. Byly vyhodnoceny profily v séru a in vivo rychlosti uvolňování různých prostředků mikrokuliček hGH.
Krysy Sprague-Dawley byly rozděleny do skupin po třech zvířatech, náhodně podle tělesné hmotnosti, a každé skupině byl podán jeden prostředek mikrokuliček hGH. Krysám bylo injekčně subkutánně podáno přibližně 7,5 mg hGH v 50 mg jednoho typu různých mikrokuliček, suspendovaných v 0,75 ml vodného ředidla pro injekce. Prostředek ředidla obsahoval 3 % hmotn. CMC (s nízkou viskozitou) a 1 % hmotn. Polysorbátu 20 v 0,9 % (hmotn.) NaCl. Podaná dávka mikrokuliček byla stanovena nepřímo odvážením zbylé dávky v injekční ampulce a opravou na zbylé injekční ředidlo. Dávka hGH byla vypočtena pro každou náplň proteinu mikrokuliček stanovením analýzy dusíku.
Vzorky krve byly odebrány v předem stanovených intervalech až do 30 dnů po injekci. Vzorky krve po 250 μΐ byly odebírány během prvních 24 h a alespoň po 400 μΐ v každém časovém bodu po 24 h. Vzorky krve byly sraženy a koncentrace hGH v séru byly stanoveny radioimunotestem. Radioimunotestovací (RIA) sestava od ICN byla otestována a použita pro stanovení hladin hGH v krysím séru.
Po stanovení farmakokinetických parametrů byl hGH v solném roztoku podáván krysám subkutánní bolus injekcí, intravenózně nebo byl podáván osmotickou pumpou (Alzet model 2ML4), která byla subkutánně implantována.
Tři skupiny krys dostaly jedinou subkutánní injekci hGH v 0,9% (hmotn.) NaCl v dávce 0,5 nebo
7,5 mg/kg při objemu dávky 1,0 mg/kg. Dvě skupiny dostaly jedinou intravenózní bolu injekci hGH v 0,9% (hmotn.) NaCl v dávce 1,0 a 5,0 mg hGH na kg krysy při objemu dávky 1,0 mg/kg. U studia s Alzetovou pumpou byly krysy rozděleny do čtyř skupin po třech krysách, náhodně podle tělesné hmotnosti, a dostaly dávku 20 mg/ml a 40 mg/ml hGH v 0,9% (hmotn.) NaCl naplněnou v pumpách (Alzet model 2002, 200 μΐ, uvolňování 14 dnů) a dávku 4 mg/ml a 12 mg/ml hGH v 0,9% (hmotn.) solném roztoku naplněném v pumpách (Alzet model 2ML4, 2 ml, uvolňování 28 dnů). Očekávaná rychlost uvolňování z pump odpovídala 2 a 4 až 6 % hmotn. dávky ProLaese hGH (kolem 15 mg/kg) za den. Alzetovy pumpy byly implantovány subkutánně v interskapulámí oblasti po namočení ve sterilním solném roztoku po dobu 1 až 2 minut.
Prostředky mikrokuliček s trvalým uvolňováním hGH, syntetizované jako popsáno v příkladu 2, obsahovaly 15 % hmotn. hGH komplexovaného se Zn v poměru 6:1 (Zn:hGH), 0, 1, 3 nebo 6 % hmotn. uhličitanu zinečnatého a 8K neblokovaný PLGA, 10K blokovaný PLGA nebo 31K neblokovaný PLGA.
Pro vyhodnocení různých prostředků s trvalým uvolňováním hGH byly použity in vivo indexy Cmax, Cd5 a Cmax/Cd5, kde Cmax znamená maximální pozorovanou koncentraci v séru a Cd5 znamená koncentraci v séru 5. den, což by měla přibližně být koncentrace ve stabilním stavu. Výsledky byly následující:
-12CZ 288147 B6
| prostředek | „zvýšení“ in vitro (% hmotn.) | % hmotn. monomeru 7. den | Cmax (ng/ml) | Cd5 (ng/ml) | Cmax/Css |
| 8K PLGA | 22,0± | 99,3* | 323,3± | 20,4± | 19,5± |
| neblokovaný 0 % ZnCO3 | 0,9 | 98,6 | 14,2 | 10,6 | |
| 8K PLGA | 16,4± | 97,3* | 309,0+ | 20,4± | 39,5± |
| neblokovaný 1% ZnCO3 | 1,6 | 67,1 | 14,2 | 17,7 | |
| 8K PLGA | 15,9± | 98,7 | 670,5± | 9,0± | 44,8± |
| neblokovaný 3 % ZnCO3 | 6,9 | 244,4 | 4,2 | 22,6 | |
| 8KPLGA | 17,6± | 99,3 | 358,0± | 18,8± | 42,4± |
| neblokovaný 6 % ZnCO3 | 2,7 | 58,9 | 14,7 | 6,8 | |
| 31KPLGA | 12,3± | 98,2 | 592,0+ | 4,5+ | 132,5± |
| neblokovaný 0 % ZnCO3 | 1,1 | 318,2 | 1,5 | 47,9 | |
| 31KPLGA | 11,4± | 98,8 | 432,7± | 5,1± | 84,1± |
| neblokovaný 1 % ZnCO3 | 1,3 | 91,6 | 0,3 | 14,9 | |
| 31KPLGA | 7,9± | 99,4 | 643,6+ | 8,0± | 93,3± |
| neblokovaný 3 % ZnCO3 | 1,9 | 203,9 | 2,6 | 62,0 | |
| 31KPLGA | 15,8± | 99,8 | 1691,8± | 6,6± | 262,2± |
| neblokovaný 6 % ZnCO3 | 0,5 | 340,0 | 0,8 | 83,5 | |
| 10KPLGA | 12,7± | 99,3 | 615,9± | 4,5± | 155,6± |
| blokovaný 1 % ZnCO3 | 0,1 | 384,3 | 1,0 | 126,8 | |
| 1 OK PLGA | 18,1± | 99,6 | 1053,2± | 3,6+ | 291,7+ |
| blokovaný 3 % ZnCO3 | 3,2 | 293,3 | 0,8 | 71,1 | |
| 10K PLGA | 9,9± | 99,0 | 1743,5+ | 4,9± | 516,1± |
| blokovaný 6 % ZnCO3 | 1,4 | 428,4 | 2,7 | 361,6 |
* Hodnoty získané z dvojité dávky stejného prostředku.
Výsledky testování ukázaly, že dva neblokované polymery (8K a 31K) měly odlišné in vivo kinetiky uvolňování při srovnání s původním prostředkem, který používá blokovaný 10K PLGA a 6 % hmotn. uhličitanu zinečnatého. Cmax hodnoty byly obecně nižší u prostředků s neblokovaným polymerem než u vedoucího prostředku, což předpokládá, že počáteční „zvýšení“ může být nižší u prostředků s neblokovaným polymerem. „Zvýšení“ bylo definováno jako procento uvolnění hGH v prvních 24 h po injekci. Hodnoty „zvýšení“ in vitro byly mezi 8 a 22 % hmot. Obsah uhličitanu zinečnatého v prostředcích neměl vliv na „zvýšení“ nebo na in vitro profil uvolňování.
Koncentrace v séru mezi 4. a 6. dnem byly udržovány na dost konstantní hladině nad základní hladinou (nebo hladinami před vykrvácením) u prostředků s neblokovaným polymerem, zatímco koncentrace v séru u blokovaných polymerů byl ve stejné době blízko základních hladin. Data uvolňování in vitro až do 7 dnů ukázala, že uvolňování hGH protein byl monomemí. Užitečná data nelze získat po 6. dnu kvůli tvorbě prostředku anti-hGH protilátky u krys.
Příklad 7
Farmakokinetické studie u opice Rhesus
Předmětem této studie na primátech bylo vyhodnotit farmakokinetické profily různých prostředků trvale uvolňujících hGH při srovnání s tradičnějšími způsoby podávání hGH (např. bolus s.k. injekcí, denní s.k. injekcí a s.k. injekcí kombinovanou s použitím osmotické pumpy) a stanovit, jestli prostředek s trvalým uvolňováním hGH poskytuje optimální koncentrační profil hGH v krvi.
-13CZ 288147 B6
Prostředky mikrokuliček s trvalým uvolňováním hGH, které byly testovány, představovaly
1)15% hmotn. hGH (komplexovaný se Zn v poměru hGH:Zn 1:6), 6% hmotn. uhličitanu zinečnatého a 10K. blokovaný PLGA, 2) 15% hmotn. hGH (komplexovaný se Zn v poměru hGH:Zn 1:6), 1 % hmotn. uhličitanu zinečnatého a 8K neblokovaný PLGA („RG502H“ PLGA 5 polymer) a 3) 15% hmotn. hGH (komplexovaný sZn v poměru hGH:Zn 1:6), 1 % hmotn.
uhličitanu zinečnatého a 31K neblokovaný PLGA („RG503H“ PLGA polymer).
V každé skupině byly čtyři opice a každé zvíře dostalo jednu subkutánní injekci do dorsální cervikální oblasti 1. den. Dávka 160 mg mikrokuliček s trvalým uvolňováním hGH (24 mg hGH) 10 byla podávána každé opici v 1,2 ml injekčního ředidla jednou o velikosti 20 gauge. Injekčním ředidlem bylo vodné ředidlo obsahující 3 % hmotn. karboxymethylcelulózy (sodná sůl), 1 % hmot. Tweenu 20 (polysorbat 20) a 0,9 % hmotn. chloridu sodného.
Dávka hGH byla taková, aby poskytla měřitelné koncentrace hGh v séru pro farmakokinetické 15 studie. Pro získání farmakokinetických parametrů byly zahrnuty do studie další skupiny po čtyřech zvířatech, specificky 1) jedna subkutánní injekce (24 mg hGH), 2) denně subkutánní injekce (24 mg/28 dnů = 0,86 mg hGH/den), 3) subkutánní injekce (3,6 mg hGH) kombinovaná s Alzetovou osmotickou pumpou (20,4 mg hGH) (celková dávka 24 mg hGH) a 4) subkutánní injekce injekčního ředidla jako kontrola (pro kontrolní skupinu s ředidlem byly použity pouze tři 20 opice).
Pro analýzy hGH, IGF1, IGFBP3 a anti-hGH protilátky byly vzorky krve shromažďovány v následujících časech: -7., -5., -3. den před dávkou, půl hodiny po dávce, 1., 2., 3., 5., 8., 10.,
12., 24., 28., 32. a 48. hodinu a 5., 4., 6., 8., 11., 14., 17., 20., 23., 26., 29., 32., 25., 28., 41., 44., 25 47., 50., 53. a 56. den po dávce.
Byly měřeny koncentrace IGF-1 a hGH v séru. Pro kvantitativní vyhodnocení hGH v séru opic byla použita sestava IRMA kit od RADIM (dodávána Wien Laboratories, P.O. Box 227, Succasunna, N.H.). Test IRMA měl limit kvantitativního hodnocení v PBS pufru 0,1 ng/ml 30 a v sebraném séru juvenilní opice Rhesus 1,5 ng/ml se základní hladinou GH kolem 4 ng/ml.
Test IRMA byl vyhodnocován při koncentracích 1,5 až 75 ng/ml u sebraného séra juvenilní opice Rhesus. Přednost měření je v mezích ± 10 %.
Výsledky ukázaly, že mikrokuličky s trvalým uvolňováním hGH uvolňovaly významné trvalé hladiny hGH déle než jeden měsíc, zatímco subkutánní injekce nebyly schopny udržovat v séru stejné hladiny.
Sérový profil IGF-1 ukazoval, že koncentrace IGF-1 v séru byly vyhodnocovány nad základními 40 hodnotami mezi 2. a 29. dnem po podání mikročástic. To ukazuje, že se z mikrokuliček s trvalým uvolňováním hGH uvolňuje dostatek hGH, aby způsobil farmakodynamický efekt. To také ukazuje, že uvolňovaný hGh byl biologicky aktivní, což předpokládá, že proces zahrnutí do tobolek neovlivňuje nepříznivě biologickou aktivitu hGH.
Zručný odborník z oblasti techniky rozpozná nebo je schopen použitím ne více než rutinního experimentování rozpoznat mnoho ekvivalentů ke specifickým provedením vynálezu, která jsou zde specificky popsána. Tyto ekvivalenty jsou zamýšleny jako ekvivalenty, které jsou zahrnuty v rozsahu následujících nároků.
Claims (18)
1. Prostředek pro prodloužené uvolňování lidského růstového hormonu, vyznačující setím, že obsahuje
a) polymer, který je biokompatibilní a biodegradovatelný, a
b) lidský růstový hormon v částicové formě, stabilizovaný komplexem kovového kationtu, přičemž molámí poměr kovové kationtové složky k lidskému růstovému hormonu, potřebný pro stabilizování lidského růstového hormonu kovovým kationtem, je 4:1 až 10:1 a kovový kationt je vícemocný.
2. Prostředek podle nároku 1, vyznačující se tím, že obsahuje kovovou kationtovou složku v molárním poměru k lidskému růstovému hormonu alespoň 6:1.
3. Prostředek podle nároku 1 nebo 2, vyznačující se tím, že jako kovovou kationtovou složku obsahuje zinečnaté kationty Zn2+.
4. Prostředek podle některého z předchozích nároků, vyznačující se tím, že obsahuje kovový kationt ve formě soli rozpustné ve vodě.
5. Prostředek podle nároku 4, vyznačující se tím, že obsahuje kovový kationt ve formě octanu zinečnatého.
6. Prostředek podle některého z předchozích nároků, vyznačující se tím, že obsahuje lidský růstový hormon, stabilizovaný komplexem kovového kationtu, dispergovaný v biokompatibilním a biodegradovatelném polymeru.
7. Prostředek podle nároku 6, vyznačující se tím, že obsahuje biokompatibilní a biodegradovatelný polymer vybraný ze skupiny zahrnující polylaktid, polyglykosid, poly(laktid-ko-glykolid), polymléčnou kyselinu, polyglykolovou kyselinu, polykaprolakton, polykarbonát, polyesteramid, polyanhydrid, polyaminokyselinu, polyorthoester, polykyanoakrylát, polydioxanon, polyalkylenoxalát, polyurethan a jejich směsi a kopolymery.
8. Prostředek podle nároku 7, vyznačující se tím, že obsahuje biokompatibilní a biodegradovatelný polymer vybraný ze skupiny zahrnující polylaktid, polyglykolid apoly(laktid-ko-glykolid).
9. Prostředek podle některého z předchozích nároků, vyznačující se tím, že obsahuje lidský růstový hormon stabilizovaný komplexem kovového kationtu, obsažený v biokompatibilním a biodegradovatelném polymeru, v koncentraci 0,1 až 30 % hmotn., s výhodou 0,1 až 20 %, vztaženo na hmotnost prostředku.
10. Prostředek podle nároku 9, vyznačující se tím, že obsahuje lidský růstový hormon stabilizovaný komplexem kovového kationtu, obsažený v biokompatibilním a biodegradovatelném polymeru, v koncentraci 14 až 16 % hmotn., vztaženo na hmotnost prostředku.
11. Prostředek podle některého z předchozích nároků, vyznačující se tím, že obsahuje biokompatibilní a biodegradovatelný polymer, který dále obsahuje druhou kovovou kationtovou složku.
-15CZ 288147 B6
12. Prostředek podle nároku 11, vyznačující se tím, že obsahuje biokompatibilní a biodegradovatelný polymer, který jako druhou kovovou kationtovou složku obsahuje zinečnaté kationty Zn2+.
13. Prostředek podle nároku 12, vyznačující se tím, že obsahuje biokompatibilní a biodegradovatelný polymer, který obsahuje druhou kovovou kationtovou složku vybranou ze skupiny zahrnující uhličitan zinečnatý ZnCO3, citran zinečnatý Zn3(C6H5O7)2, octan zinečnatý Zn(OAc)2, síran zinečnatý ZnSO4 a chlorid zinečnatý ZnCl2.
14. Prostředek podle nároku 11, vyznačující se tím, že obsahuje biokompatibilní a biodegradovatelný polymer, který jako druhou kovovou kationtovou složku obsahuje hořečnaté kationty Mg2+.
15 15. Prostředek podle nároku 12, vyznačující se tím, že obsahuje biokompatibilní a biodegradovatelný polymer, který obsahuje druhou kovovou složku vybranou ze skupiny zahrnující hydroxid hořečnatý Mg(OH)2, uhličitan hořečnatý MgCO3, citran hořečnatý MgsíCýHsOjfy, octan hořečnatý Mg(OAc)2, síran hořečnatý MgSO4 a chlorid hořečnatý MgCl2.
20
16. Prostředek podle některého z nároků 12 až 15, vyznačující se tím, že obsahuje biokompatibilní a biodegradovatelný polymer, v němž poměr druhé kovové kationtové složky k polymeru je v rozsahu 1:99 až 1:2 hmotnostně, s výhodou 1 % hmotn., vztaženo na hmotnost prostředku.
25
17. Prostředek podle nároku 1 pro prodloužené uvolňování lidského růstového hormonu, vyznačující se tím, že obsahuje
a) biokompatibilní a biodegradovatelný poly(laktid-ko-glykolid), v němž je dispergován zinek ve formě uhličitanu zinečnatého ZnCO3, a
b) lidský růstový hormon, stabilizovaný komplexem zinečnatých kationtů, v částicové formě, přičemž lidský růstový hormon obsahuje zinečnaté kationty ve formě octanu zinečnatého vmolámím poměru octanu zinečnatého ku lidskému růstovému hormonu 9:1 až 11:1 a lidský 35 růstový hormon, stabilizovaný komplexem zinečnatých kationtů, je obsažen v biokompatibilním a biodegradovatelném polymeru v koncentraci 14 až 16% hmotn., vztaženo na hmotnost prostředku.
18. Prostředek podle nároku 1, vyznačující se tím, že je v něm molámí poměr 40 kovové kationtové složky k lidskému růstovému hormonu, potřebný pro stabilizování lidského růstového hormonu kovovým kationtem, 10:1.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US08/473,544 US5654010A (en) | 1992-12-02 | 1995-06-07 | Composition for sustained release of human growth hormone |
| US08/477,725 US5667808A (en) | 1992-12-02 | 1995-06-07 | Composition for sustained release of human growth hormone |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ390797A3 CZ390797A3 (cs) | 1998-07-15 |
| CZ288147B6 true CZ288147B6 (en) | 2001-05-16 |
Family
ID=27044171
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ19973907A CZ288147B6 (en) | 1995-06-07 | 1996-06-03 | Preparation for prolonged release of human growth hormone |
Country Status (22)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0831787B1 (cs) |
| JP (1) | JPH11506740A (cs) |
| CN (1) | CN1102854C (cs) |
| AT (1) | ATE204468T1 (cs) |
| AU (1) | AU708756B2 (cs) |
| BR (1) | BR9608542A (cs) |
| CA (1) | CA2223436A1 (cs) |
| CZ (1) | CZ288147B6 (cs) |
| DE (1) | DE69614685T2 (cs) |
| DK (1) | DK0831787T3 (cs) |
| ES (1) | ES2161366T3 (cs) |
| HK (1) | HK1009089A1 (cs) |
| HU (1) | HUP9900870A3 (cs) |
| IL (1) | IL122385A (cs) |
| MX (1) | MX9709698A (cs) |
| NO (1) | NO316104B1 (cs) |
| NZ (1) | NZ310644A (cs) |
| PL (1) | PL184531B1 (cs) |
| PT (1) | PT831787E (cs) |
| RU (1) | RU2161502C2 (cs) |
| SK (1) | SK281571B6 (cs) |
| WO (1) | WO1996040072A2 (cs) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CZ297078B6 (cs) * | 1997-04-18 | 2006-09-13 | Ipsen Pharma Biotech | Prostredek ve forme mikrokapslí nebo implantátu |
Families Citing this family (94)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2224381A1 (en) * | 1995-06-27 | 1997-01-16 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Method of producing sustained-release preparation |
| KR20000057693A (ko) | 1996-12-20 | 2000-09-25 | 다케다 야쿠힌 고교 가부시키가이샤 | 지효성 제제의 제조 방법 |
| WO1999060127A2 (en) | 1998-05-15 | 1999-11-25 | Genentech, Inc. | Il-17 homologous polypeptides and therapeutic uses thereof |
| US6306826B1 (en) | 1997-06-04 | 2001-10-23 | The Regents Of The University Of California | Treatment of heart failure with growth hormone |
| US6113947A (en) * | 1997-06-13 | 2000-09-05 | Genentech, Inc. | Controlled release microencapsulated NGF formulation |
| US6663899B2 (en) | 1997-06-13 | 2003-12-16 | Genentech, Inc. | Controlled release microencapsulated NGF formulation |
| US6191107B1 (en) | 1997-09-26 | 2001-02-20 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Complex of human growth hormone and zinc |
| EP2050762A3 (en) | 1998-03-10 | 2009-07-08 | Genentech, Inc. | Human cornichon-like protein and nucleic acids encoding it |
| EP3112468A1 (en) | 1998-05-15 | 2017-01-04 | Genentech, Inc. | Il-17 homologous polypeptides and therapeutic uses thereof |
| US20020172678A1 (en) | 2000-06-23 | 2002-11-21 | Napoleone Ferrara | EG-VEGF nucleic acids and polypeptides and methods of use |
| EP1953173B1 (en) | 1999-06-15 | 2009-11-18 | Genentech, Inc. | Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids endoding the same |
| EP1690872A3 (en) | 1999-12-01 | 2006-08-23 | Genentech, Inc. | Composition and methods for the diagnosis of tumours |
| EP1897944B1 (en) | 1999-12-23 | 2011-08-10 | Genentech, Inc. | IL-17 homologous polypeptides and therapeutic uses thereof |
| ES2323220T3 (es) | 2000-01-13 | 2009-07-09 | Genentech, Inc. | Polipeptidos humanos stra6. |
| US6740520B2 (en) | 2000-03-21 | 2004-05-25 | Genentech, Inc. | Cytokine receptor and nucleic acids encoding the same |
| DE60120372T2 (de) | 2000-03-24 | 2007-07-05 | Genentech Inc., San Francisco | Verwendung von insulin zur behandlung von knorpelkrankheiten |
| US6998137B2 (en) * | 2000-04-07 | 2006-02-14 | Macromed, Inc. | Proteins deposited onto sparingly soluble biocompatible particles for controlled protein release into a biological environment from a polymer matrix |
| AU6531101A (en) | 2000-06-02 | 2001-12-17 | Genentech Inc | Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same |
| DE60136281D1 (de) | 2000-08-24 | 2008-12-04 | Genentech Inc | Methode zur inhibierung von il-22 induziertem pap1 |
| EP1944317A3 (en) | 2000-09-01 | 2008-09-17 | Genentech, Inc. | Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same |
| US6673580B2 (en) | 2000-10-27 | 2004-01-06 | Genentech, Inc. | Identification and modification of immunodominant epitopes in polypeptides |
| EP1356809A4 (en) | 2000-12-28 | 2008-05-14 | Takeda Pharmaceutical | SUSTAINED RELEASE PREPARATIONS |
| US7271150B2 (en) | 2001-05-14 | 2007-09-18 | United States Of America, Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Modified growth hormone |
| US20070160576A1 (en) | 2001-06-05 | 2007-07-12 | Genentech, Inc. | IL-17A/F heterologous polypeptides and therapeutic uses thereof |
| ES2554106T3 (es) | 2001-06-21 | 2015-12-16 | Genentech, Inc. | Formulación de liberación sostenida |
| WO2003072740A2 (en) | 2002-02-25 | 2003-09-04 | Genentech, Inc. | Novel type-1 cytokine receptor glm-r |
| PT1610820E (pt) | 2003-04-04 | 2010-12-16 | Novartis Ag | Formulações de elevada concentração de anticorpos e proteínas |
| KR20110117728A (ko) | 2003-06-06 | 2011-10-27 | 제넨테크, 인크. | Ｈｇｆ 베타 쇄와 ｃ-ｍｅｔ 사이의 상호작용의 변조 |
| MX341074B (es) | 2003-07-08 | 2016-08-05 | Genentech Inc | Polipeptidos heterologos il-17 a/f y usos terapeuticos de los mismos. |
| AU2004298483A1 (en) | 2003-12-11 | 2005-06-30 | Genentech, Inc. | Methods and compositions for inhibiting c-met dimerization and activation |
| US7481997B1 (en) | 2004-02-12 | 2009-01-27 | Montana State University | Snow mountain virus genome sequence, virus-like particles and methods of use |
| PL1745069T3 (pl) | 2004-03-30 | 2009-10-30 | Nsgene As | Zastosowanie terapeutyczne czynnika wzrostu NSG33 |
| KR101150242B1 (ko) | 2004-10-27 | 2012-06-13 | 유니버시티 오브 덴버 | 부신피질 자극 호르몬 유사체 및 관련 방법 |
| CA2590136A1 (en) | 2004-12-10 | 2006-06-15 | Talima Therapeutics, Inc. | Compositions and methods for treating conditions of the nail unit |
| US20060275230A1 (en) | 2004-12-10 | 2006-12-07 | Frank Kochinke | Compositions and methods for treating conditions of the nail unit |
| NZ563341A (en) | 2005-06-06 | 2009-10-30 | Genentech Inc | Methods for identifying agents that modulate a gene that encodes for a PRO1568 polypeptide |
| US8389469B2 (en) | 2005-06-06 | 2013-03-05 | The Rockefeller University | Bacteriophage lysins for Bacillus anthracis |
| HUE029021T2 (en) | 2005-06-21 | 2017-02-28 | Xoma (Us) Llc | IL-1beta-binding antibodies and fragments thereof |
| US7582291B2 (en) | 2005-06-30 | 2009-09-01 | The Rockefeller University | Bacteriophage lysins for Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium and other bacteria |
| CA2619577A1 (en) | 2005-08-15 | 2007-02-22 | Genentech, Inc. | Gene disruptions, compositions and methods relating thereto |
| WO2007024628A2 (en) | 2005-08-24 | 2007-03-01 | The Rockefeller University | Ply-gbs mutant lysins |
| JP2009516514A (ja) | 2005-11-21 | 2009-04-23 | ジェネンテック・インコーポレーテッド | 新規遺伝子破壊、それらに関する組成物および方法 |
| US20080032343A1 (en) | 2005-12-22 | 2008-02-07 | Genentech, Inc. | Recombinant Production of Heparin Binding Proteins |
| ZA200807714B (en) | 2006-02-17 | 2010-01-27 | Genentech Inc | Gene disruptions, compositions and methods relating thereto |
| CA2647107A1 (en) | 2006-03-23 | 2007-09-27 | Novartis Ag | Anti-tumor cell antigen antibody therapeutics |
| AU2007238186B2 (en) | 2006-04-10 | 2014-01-09 | Genentech, Inc. | Disheveled PDZ modulators |
| CA2649387A1 (en) | 2006-04-19 | 2008-03-27 | Genentech, Inc. | Novel gene disruptions, compositions and methods relating thereto |
| PT2059260E (pt) * | 2006-08-31 | 2013-09-03 | Novartis Ag | Composições farmacêuticas compreendendo hgh para distribuição oral |
| CA2673592C (en) | 2006-12-20 | 2014-03-25 | Xoma Technology Ltd. | Methods for the treatment of il-1.beta. related diseases |
| CN101361968B (zh) | 2007-08-06 | 2011-08-03 | 健能隆医药技术（上海）有限公司 | 白介素-22在治疗脂肪肝中的应用 |
| AU2008287340A1 (en) * | 2007-08-15 | 2009-02-19 | Amunix, Inc. | Compositions and methods for modifying properties of biologically active polypeptides |
| DK2391650T3 (en) | 2007-12-20 | 2015-01-12 | Xoma Us Llc | Methods of treating gout |
| GB0812742D0 (en) | 2008-07-11 | 2008-08-20 | Critical Pharmaceuticals Ltd | Process |
| EP2488643A4 (en) | 2009-10-15 | 2013-07-03 | Hoffmann La Roche | CHIMERIC FIBROBLAST GROWTH FACTORS WITH CHANGED RECEPTOR SPECIFICITY |
| WO2011056561A1 (en) | 2009-10-27 | 2011-05-12 | Beth Israel Deaconess Medical Center | Methods and compositions for the generation and use of conformation-specific antibodies |
| JP5878477B2 (ja) | 2010-01-15 | 2016-03-08 | ユニバーシティ オブ メディスン アンド デンティストリー オブ ニュー ジャージー | 骨の治癒を加速するためのバナジウム化合物の使用 |
| EP3513810A1 (en) | 2010-03-22 | 2019-07-24 | F. Hoffmann-La Roche AG | Compositions and methods useful for stabilizing protein- containing formulations |
| BR112012027828A2 (pt) | 2010-05-03 | 2016-08-09 | Genentech Inc | composição de matéria, artigo de fabricação e método de redução da viscosidade de uma formulação contendo proteína e de preparação de uma formulação aquosa contendo proteína |
| MX339666B (es) | 2010-06-24 | 2016-06-03 | Genentech Inc * | Composiciones y metodos para estabilizar formulaciones que contienen proteinas. |
| CN102380091A (zh) | 2010-08-31 | 2012-03-21 | 健能隆医药技术（上海）有限公司 | 白介素-22在治疗病毒性肝炎中的应用 |
| ES2584068T3 (es) | 2010-10-01 | 2016-09-23 | Nsgene A/S | Uso de meteorina para el tratamiento de alodinia, hiperalgesia, dolor espontáneo y dolor fantasma |
| KR101687060B1 (ko) | 2010-10-08 | 2016-12-15 | 상하이 켁신 바이오테크 씨오., 엘티디. | 모에신 조절제 및 그의 용도 |
| US9345765B2 (en) | 2010-10-08 | 2016-05-24 | Shanghai Kexin Biotech Co., Ltd. | Diagnostic and therapeutic uses of moesin fragments |
| WO2012092539A2 (en) | 2010-12-31 | 2012-07-05 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Antibodies to dll4 and uses thereof |
| US10487114B2 (en) | 2011-04-27 | 2019-11-26 | Beth Israel Deaconess Medical Center, Inc. | Methods for administering peptides for the generation of effective c/s conformation-specific antibodies to a human subject in need thereof |
| CN102875683B (zh) * | 2011-07-11 | 2014-06-11 | 旭华（上海）生物研发中心有限公司 | 长效重组人生长激素的Fc融合蛋白 |
| MX363226B (es) | 2011-10-31 | 2019-03-15 | Genentech Inc | Formulaciones de anticuerpos. |
| JP6320300B2 (ja) | 2011-12-19 | 2018-05-09 | ゾーマ （ユーエス） リミテッド ライアビリティ カンパニー | 座瘡を治療するための方法 |
| AU2013208007A1 (en) | 2012-01-09 | 2014-07-31 | The Scripps Research Institute | Humanized antibodies with ultralong CDR3 |
| CA2863224A1 (en) | 2012-01-09 | 2013-07-18 | The Scripps Research Institute | Ultralong complementarity determining regions and uses thereof |
| CA2904703A1 (en) | 2013-03-14 | 2014-10-02 | Hallux, Inc. | Method of treating infections, diseases or disorders of nail unit |
| CN105283196B (zh) | 2013-03-15 | 2018-10-12 | 贝丝以色列女执事医疗中心 | 用于产生和使用构象-特异性抗体的方法和组合物 |
| EP3022224A2 (en) | 2013-07-18 | 2016-05-25 | Fabrus, Inc. | Antibodies with ultralong complementarity determining regions |
| CN105814074B (zh) | 2013-07-18 | 2020-04-21 | 图鲁斯生物科学有限责任公司 | 具有超长互补决定区的人源化抗体 |
| KR102302634B1 (ko) | 2013-09-13 | 2021-09-14 | 더 스크립스 리서치 인스티튜트 | 변형된 치료제 및 이의 조성물 |
| CN105829349B (zh) | 2013-10-15 | 2023-02-03 | 斯克利普斯研究所 | 肽嵌合抗原受体t细胞开关和其用途 |
| WO2015057852A1 (en) | 2013-10-15 | 2015-04-23 | The California Institute For Biomedical Research | Chimeric antigen receptor t cell switches and uses thereof |
| CN104623637A (zh) | 2013-11-07 | 2015-05-20 | 健能隆医药技术（上海）有限公司 | Il-22二聚体在制备静脉注射药物中的应用 |
| CN104623639A (zh) | 2013-11-07 | 2015-05-20 | 健能隆医药技术（上海）有限公司 | 白介素22二聚体在制备治疗胰腺炎药物中的应用 |
| JP6564369B2 (ja) | 2013-12-09 | 2019-08-21 | デュレクト コーポレイション | 薬学的活性剤複合体、ポリマー複合体、ならびにこれらを伴う組成物及び方法 |
| AU2014364589B2 (en) | 2013-12-18 | 2020-02-27 | The California Institute For Biomedical Research | Modified therapeutic agents, stapled peptide lipid conjugates, and compositions thereof |
| NL2014230B1 (en) | 2015-02-04 | 2016-10-12 | Stichting Vu-Vumc | Wound healing formulation. |
| MA41629A (fr) | 2015-03-04 | 2018-01-09 | Center For Human Reproduction | Compositions et méthodes d'utilisation de l'hormone anti-müllérienne pour le traitement de l'infertilité |
| US10800828B2 (en) | 2015-03-26 | 2020-10-13 | The Scripps Research Institute | Switchable non-scFv chimeric receptors, switches, and methods of use thereof to treat cancer |
| US11091546B2 (en) | 2015-04-15 | 2021-08-17 | The Scripps Research Institute | Optimized PNE-based chimeric receptor T cell switches and uses thereof |
| CN107921098A (zh) | 2015-06-17 | 2018-04-17 | 加州生物医学研究所 | 修饰的治疗剂及其组合物 |
| WO2017181143A1 (en) | 2016-04-15 | 2017-10-19 | Generon (Shanghai) Corporation, Ltd. | Use of il-22 in treating necrotizing enterocolitis |
| EP3529268A1 (en) | 2016-10-19 | 2019-08-28 | The Scripps Research Institute | Chimeric antigen receptor effector cell switches with humanized targeting moieties and/or optimized chimeric antigen receptor interacting domains and uses thereof |
| AU2020254582A1 (en) | 2019-04-01 | 2021-09-30 | Genentech, Inc. | Compositions and methods for stabilizing protein-containing formulations |
| US12098212B2 (en) | 2019-08-12 | 2024-09-24 | Purinomia Biotech, Inc. | Methods and compositions for promoting and potentiating T-cell mediated immune responses through ADCC targeting of CD39 expressing cells |
| JP2022554187A (ja) | 2019-10-24 | 2022-12-28 | ミノトール セラピューティクス インコーポレイテッド | キメラサイトカイン改変抗体およびその使用方法 |
| EP4329887A1 (en) | 2021-04-28 | 2024-03-06 | Minotaur Therapeutics, Inc. | Humanized chimeric bovine antibodies and methods of use |
| JP2024518433A (ja) | 2021-05-06 | 2024-05-01 | ホバ セラピューティクス エーピーエス | 化学療法誘発性神経障害性疼痛の予防及び治療 |
| CA3239550A1 (en) | 2021-12-10 | 2023-06-15 | Kenneth Petersen | Treatment of nociceptive pain |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5656297A (en) * | 1992-03-12 | 1997-08-12 | Alkermes Controlled Therapeutics, Incorporated | Modulated release from biocompatible polymers |
| JPH08503950A (ja) * | 1992-12-02 | 1996-04-30 | アルカーメス・コントロールド・セラピユーテイクス・インコーポレーテツド | 徐放性成長ホルモン含有マイクロスフェア |
| PT779806E (pt) * | 1994-09-09 | 2001-02-28 | Takeda Chemical Industries Ltd | Preparacao de libertacao sustentada contendo um sal metalico de um peptido |
-
1996
- 1996-06-03 PT PT96919016T patent/PT831787E/pt unknown
- 1996-06-03 EP EP96919016A patent/EP0831787B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-06-03 IL IL12238596A patent/IL122385A/xx not_active IP Right Cessation
- 1996-06-03 CA CA002223436A patent/CA2223436A1/en not_active Abandoned
- 1996-06-03 JP JP9500870A patent/JPH11506740A/ja active Pending
- 1996-06-03 CN CN96194614A patent/CN1102854C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1996-06-03 ES ES96919016T patent/ES2161366T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1996-06-03 HU HU9900870A patent/HUP9900870A3/hu unknown
- 1996-06-03 BR BR9608542-8A patent/BR9608542A/pt not_active Application Discontinuation
- 1996-06-03 NZ NZ310644A patent/NZ310644A/xx unknown
- 1996-06-03 SK SK1671-97A patent/SK281571B6/sk unknown
- 1996-06-03 CZ CZ19973907A patent/CZ288147B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1996-06-03 DK DK96919016T patent/DK0831787T3/da active
- 1996-06-03 RU RU97119935/14A patent/RU2161502C2/ru not_active IP Right Cessation
- 1996-06-03 PL PL96323832A patent/PL184531B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1996-06-03 AT AT96919016T patent/ATE204468T1/de not_active IP Right Cessation
- 1996-06-03 WO PCT/US1996/008086 patent/WO1996040072A2/en not_active Application Discontinuation
- 1996-06-03 DE DE69614685T patent/DE69614685T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1996-06-03 AU AU61469/96A patent/AU708756B2/en not_active Ceased
-
1997
- 1997-12-05 NO NO19975708A patent/NO316104B1/no unknown
- 1997-12-05 MX MX9709698A patent/MX9709698A/es not_active IP Right Cessation
-
1998
- 1998-08-19 HK HK98110029A patent/HK1009089A1/xx not_active IP Right Cessation
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CZ297078B6 (cs) * | 1997-04-18 | 2006-09-13 | Ipsen Pharma Biotech | Prostredek ve forme mikrokapslí nebo implantátu |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ATE204468T1 (de) | 2001-09-15 |
| JPH11506740A (ja) | 1999-06-15 |
| PL184531B1 (pl) | 2002-11-29 |
| NO316104B1 (no) | 2003-12-15 |
| NO975708D0 (no) | 1997-12-05 |
| CN1102854C (zh) | 2003-03-12 |
| RU2161502C2 (ru) | 2001-01-10 |
| SK167197A3 (en) | 1998-06-03 |
| AU708756B2 (en) | 1999-08-12 |
| PT831787E (pt) | 2002-02-28 |
| CA2223436A1 (en) | 1996-12-19 |
| EP0831787B1 (en) | 2001-08-22 |
| ES2161366T3 (es) | 2001-12-01 |
| NO975708L (no) | 1998-02-05 |
| IL122385A0 (en) | 1998-06-15 |
| DE69614685D1 (de) | 2001-09-27 |
| MX9709698A (es) | 1998-07-31 |
| WO1996040072A3 (en) | 1997-01-23 |
| NZ310644A (en) | 1999-08-30 |
| HUP9900870A3 (en) | 2001-04-28 |
| EP0831787A2 (en) | 1998-04-01 |
| WO1996040072A2 (en) | 1996-12-19 |
| AU6146996A (en) | 1996-12-30 |
| SK281571B6 (sk) | 2001-05-10 |
| BR9608542A (pt) | 1999-11-30 |
| HK1009089A1 (en) | 1999-09-10 |
| CZ390797A3 (cs) | 1998-07-15 |
| HUP9900870A2 (hu) | 1999-09-28 |
| IL122385A (en) | 2001-01-11 |
| CN1187120A (zh) | 1998-07-08 |
| DK0831787T3 (da) | 2001-12-17 |
| DE69614685T2 (de) | 2002-06-27 |
| PL323832A1 (en) | 1998-04-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CZ288147B6 (en) | Preparation for prolonged release of human growth hormone | |
| US5891478A (en) | Composition for sustained release of human growth hormone | |
| US5674534A (en) | Composition for sustained release of non-aggregated erythropoietin | |
| AU705451B2 (en) | Composition for sustained release of non-aggregated erythropoietin | |
| JP4979843B2 (ja) | 微粒子の形のポリペプチド含有投薬形 | |
| US5711968A (en) | Composition and method for the controlled release of metal cation-stabilized interferon | |
| EP0758227B1 (en) | Modulated release from biocompatible polymers | |
| US6465425B1 (en) | Microencapsulation and sustained release of biologically active acid-stable or free sulfhydryl-containing proteins | |
| US6514533B1 (en) | Device for the sustained release of aggregation-stabilized, biologically active agent | |
| AU705968B2 (en) | Device for releasing aggregation-stabilized, biologically active agent | |
| US20040224016A1 (en) | Composition for sustained release of non-aggregated erythropoietin | |
| EP1080718A1 (en) | Composition for sustained release of human growth hormone | |
| AU5836599A (en) | composition for sustained release of human growth hormone |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD00 | Pending as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20080603 |