PT93094B

PT93094B - Processo para a preparacao de 1,3-oxatiolanos substituidos e de composicoes farmaceuticas que os contem

Info

Publication number: PT93094B
Application number: PT93094A
Authority: PT
Inventors: Bernard Belleau; Pierette Belleau; Nghe Nguyen-Ba
Original assignee: Iaf Biochem Int
Priority date: 1989-02-08
Filing date: 1990-02-08
Publication date: 1995-12-29
Also published as: NL960025I2; CA2009637A1; DE69026971D1; EP0711771A2; DE69034119D1; AP136A; ATE254125T1; AU4920190A; SK279175B6; CA2009637C; HRP940040B1; YU48840B; HRP940040A2; LU88809I2; JPH037282A; NL960025I1; YU24390A; AP9000163A0; IE72184B1; AU630913B2

Description

PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE 1,3-ΟΧATIOLANOS SUBSTITUÍDOS

E DE COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS QUE OS CONTEM

A presente invenção refere-se a novos compostos cicli^ cos de 1,3-oxatiolano substituídos com actividade farmacológica, a processos para preparar produtos intermédios utilizados na sua preparação, a composições farmacêuticas que os contêm e à aplica_ ção destes compostos no tratamento antivírico de mamíferos.

As infecções retrovíricas são uma causa grave de doeri ça, muito especialmente do sindrome de imunodeficiência adquirida (SIDA). 0 vírus da imunodeficiência humana (HIV) tem sido reconhecido como o agente etiológico da SIDA e os compostos que exibem um efeito inibidor da multiplicação de HIV têm sido acti vamente procurados.

Mitsuaya et al., 3'-azido-3ídesoxitimidina (BW A509U): Um agente antiviral que inibe a infectividade e efeito citopático de o vírus T-linfotrópico humano de tipo III/vírus associado com a linfadenopatia in vitro, Proc. Natl. Acad. Sei. E.U.A., 82;

( 1985 ) pp. 7096-7100, refere-se a um composto de fórmula (A), 3'-azido-2',3 '-didesoxitimidina , correntemente referido como AZT. Este composto diz-se ser aplicável para proporcionar alguma pro. tecção aos portadores de SIDA contra o efeito citopatogénico do vírus de imunodeficiência (HIV).

/ f

Mitsuya et al., Inibição in vitro da infectividade e efeito citopático de o vírus T-linfotrópico humano de tipo III/vírus associado com a linfadenopatia (HTL V/111/LAV) pelos 2'p'-didesoxinucleosidos, Proc. Natl. Acad. Sei. E.U.A., 86, pp. 1911-15 (1986 ), refere também um grupo de 2 ' 3 '-didesoxinucleosidos representados pela fórmula (B) que se diz possuir em actividade protectora contra o efeito citopatogénico induzido por HIV.

(B)

Balzarini ti-HTLV-III/LAV de

-didesoxicitidina et al., Potente e selectiva actividade an2,'3 '-didesoxi ci t idi neno , o derivado de 2 ' ,3 ’ —

Biochem. Biophys. Res. Comm., 140, pp. 735-42 (1986), referem-se a um análogo insaturado destes nucleosi. dos 2'_f 3 '-didesoxicitidina representados pela fórmula (C) como

s* caracterizados por actividade anti-retrovírica.

(C)

Baba et al., 2j3'-didesoxitimidina e o seu derivado insaturado 2',3' (2 ' ,3 ¹-didesoxitimidineno) são potentes e s£ lectivos inibidores da replicação do vírus de imunodeficiência humana in vitro. Biochem. Biophys. Res. Comm., 142, pp. 128-34 (1987 ), refere-se ao análogo 2',3 ¹-insaturado, representado pela fórmula (D) de 2 ' , 3'-didesoxitimidina . Este análogo é suposto ser um inibidor selectivo potente da replicação de ΗIV.

O

(D)

Os análogos de AZT conhecidos como 3 '-azido-2 ' ,3 ¹ -didesoxiuridina representados pela fórmula geral (E) na qual V representa um átomo de bromo ou iodo, têm sido referidos como possuindo uma actividade inibidora contra a leucémia murina de Moloney em T.S. Lin et al., Síntese e actividade antiviral de vários análogos 3'-azido, 3'-amino, 23 '-insaturado e 2',3'

-didesoxi de pirimidina, desoxi-ribonucleosidos contra vírus, J.· Med. Chem. , 30, pp . 440-41 (1987 ).

retroFinalmente, os análogos de 3'-flúor de 2 ' ,3 ¹-didesoxicitidina, representados na fórmula (F) e 2 ' ,3 '-didesoxitimidina representados pela fórmula (G), são referidos por Herdwijn et al . ; 3 ¹-substituted 2 ' ,3¹ -dideoxynuc1eoside analogues as potential anti-Η IV(ΗTLV-111/LAV agents; J. Med. Chem., 30; (1987 )

p. 1270-41 como possuindo actividade antivírica potente.

Os compostos anti-HIV mais potentes, adiante referidos são 2 ' ,3 ¹-didesoxinucleosidos e mais particularmente 2’,3'-didesoxicitidina (ddCyd) e 3'-azido-2',3 ¹ -didesoxitimidina (AzddThd ou AZT). Estes compostos são também activos contra outros tipos de retrovírus tais como o vírus da leucémia murina

de Moloney. Devido à incidência acrescida e às caracteristicas ameaçadoras da vida da SIDA, têm sido envidados esforços para descobrir e desenvolver novos inibidores potentes e não tóxicos de HIV e bloqueadores da sua infectividade. E portanto um objectivo desta invenção proporcionar compostos eficazes anti-HIV de toxicidade baixa e uma síntese destes novos compostos facilmente realizável.

Uma classe estruturalmente distinta de compostos conhecidos como 1,3-oxatiolanos 2,5-substituídos foi agora descoberta e verificou-se possuírem actividade anti-retrovírica.

Em particular, verificou-se que estes compostos actuam como agentes inibidores não tóxicos da replicação de HIV-1 nos linfócitos-T durante períodos prolongados.

Deste modo, proporciona-se, num primeiro aspecto, cora postos de fórmula geral

na qual,

Rl representa um átomo de hidrogénio;

R^ representa uma base purínica ou pirimidínica ou um análogo ou um seu derivado;

Z representa um átomo de enxofre ou um grupo S=0 ou SO2 ; e os seus sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico.

Os técnicos nesta matéria entendem que os compostos de fórmula geral I contêm pelo menos dois centros quirálicos marcados com um

asterisco na fórmula geral I e, portanto, exi£ tem sob a forma de dois pares de isómeros ópticos, isto é, de enantiómeros, e suas misturas racémicas. Portanto, os compostos de fórmula geral I podem ser quer isómeros cis, como repre_ sentado pela fórmula geral II, quer isómeros trans como representado pela fórmula geral III ou as suas misturas. Cada um dos isómeros cis ou trans pode existir sob a forma de um ou dois enantiómeros ou as suas misturas incluindo as misturas r£ cémicas. Todos estes isómeros e suas misturas, incluindo as z · ; misturas racémicas são abrangidos pelo âmbito da presente invenção .

Qs compostos de fórmula geral I apresentam-se, de preferência, sob a forma de isómeros cis.

Também se compreenderá que quando o símbolo Z representa um grupo S=0, os compostos existem em mais duas formas isoméricas como se demonstra pelas fórmulas gerais lia e Ilb,

.-»· que diferem na configuração do átomo de oxigénio do óxido relativo aos substituintes 2,5. Os compostos da presente invenção adicionalmente abragem estes isómeros e as suas misturas.

(Ha)

(Ilb)

As bases purínica ou pirimidínica ou os seus análogos ou derivados representados pelo símbolo estarão ligados na posição 9 ou 1, respectivamente.

Por base de purina ou pirimidina ou um seu análogo ou derivado significa-se uma base purínica ou pirimidínica que se encontre nos nucleosidos naturais ou um seu análogo que imita estas bases porque as suas estruturas (tipos de átomos e sua disposição) são idênticas às bases naturais mas podem possuir ou não adicionalmente certas propriedades funcionais das bases naturais. Estes análogos incluem aqueles derivados de substitui^ ção de um grupo CH2 P°r um átomo de azoto, por exemplo 5-azapif

rimidinas tal como 5-azacitosina ou vice-versa, por exemplo 7-diazapurinas (por exemplo 7-diazadenosido ou 7-desazaguanosina ou ambas, por exemplo 7-desaza, 8-azapurinas ) .

Por derivados ou análogos destas bases referem-se os compostos em que os substituintes do núcleo são incluídos ou removidos ou modificados por substituintes convencionais conhq eidos, por exemplo, átomos de halogéneo, grupos hidroxilo, ami_ no, alquilo C. Estas bases de purina ou de pirimidina, os seus análogos e os derivados são bem conhecidos.

Convenientemente o grupo R₂ é escolhido entre um grq po de fórmula

Em que representa um átomo de hidrogénio, um grupo hidroximetilo ou um grupo alquilo C^_g eventualmente insaturado;

R^ e R^ representam, cada um, independentemente, um átomo de hidrogénio, bromo, cloro, flúor ou iodo ou um grupo hidroximetilo, trif1uorometi1 o ou alquilo (C»-C_z) eventualmente substituído e insaturado;

Rg representa um átomo de hidrogénio ou um grupo cia no, carboxi, etoxicarbonilo, carboxamido ou tiocarbamo ί 1 e

X e Y representam, cada um, independentemente, um át£ mo de hidrogénio, bromo, cloro, flúor ou iodo ou um grupo amino ou hidroxi grupo preferido representado pelo símbolo R^ é um grupo de fórmula geral

O'

na qual,

R-j e R^ têm os significados definidos antes;

Z representa, de preferência, um átomo de enxofre.

Por um derivado aceitável do ponto de vista farmacêutico entende-se qualquer sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, éster ou sal desse éster, de um composto de fór_ fumla geral I ou de outro composto que, após administração a um receptor, é capaz de proporcionar directa ou indirectamente um composto de fórmula geral I ou um metabolito antivírico acti_ vo ou um seu residuo.

Os técnicos nesta matéria aperceber-se-ão que os com postos de fórmula geral I se podem modificar para proporcionar os seus derivados, aceitáveis do ponto de vista farmacêutico, nos grupos funcionais nos dois radicais base, R^ e no grupo hidroximeti1 o do núcleo de oxatiolano.

A modificação em todos estes grupos funcionais é abran gida pelo âmbito da presente invenção. Contudo, têm particular interesse os seus derivados aceitáveis do ponto de vista farma cêutico, por exemplo os ésteres, obtidos por modificação do grupo 2-hidroximeti1ico do núcleo oxatiolano.

Os ésteres preferidos dos compostos de fórmula geral I, incluem os compostos em que o símbolo R^ representa uma fun8 ção carboxilo de fórmula geral R—C na qual o símbolo R representa a fracção não carbonilo do grupo éster escolhida entre um átomo de hidrogénio, ou um grupo alquilo de cadeia linear ou ramificada como por exemplo metilo, etilo, n-propilo, t-butilo, n-butilo; alcoxi-a 1qui1 o, como por exemplo metoximeti1 o ; aralquilo, por exemplo benzilo; ariloxialquilo, por exemplo fenox_i metilo; arilo, por exemplo fenilo comportando eventualmente

como substituínte um átomo de halogêneo ou um grupo alquilo C^ ou alcoxi di-hidro-piridini1 o substituído, por exemplo N-meti1-di-hidro-piridiηi1 o, ésteres de sulfonato como alquil- ou aralquilossulfonilo, por exemplo metanossulfonilo; ésteres de sulfato; ésteres de aminoácidos, por exemplo L-valilo ou L-isoleucilo ; e ésteres mono-, di- ou trifosfatados .

Também se incluem no âmbito da presente invenção os ésteres provenientes de ácidos polifuncionais como os de ácidos carboxílicos, comportando mais do que um grupo carboxilo, por exemplo, ácidos dicarboxí 1 icos de- fórmula geral HC^C (CH^ ^CC^H na qual o símbolo n representa um número inteiro de 1 a 10, por exemplo o ácido succínico, ou os ácidos fosfóricos. Os métodos para a preparação destes ésteres são conhecidos. Consultar por exemplo Hahn et al., Nucleotide Dimers as Anti Human Immunodeficiency Vírus Agents, Nucleotides Analogues; (1989) p. 156-159 e Busso et al., Nucleotide Dimers Suppress HIV Expression In Vitro; AIDS Research and Human Retroviruses ; 4(6); (1988 );

p. 449-455. Quando os ésteres são derivados destes ácidos, cada grupo ácido é esterificado preferencialmente por um composto de fórmula geral I ou outros seus nucleosidos ou análogos ou derivados para proporcionar os ésteres de formula geral

(IV)

na qual, W representa um grupo de fórmula geral 0 0

-0-C-(CH„) -C-Ó e n representa um número z n

II a 10 ou representa um grupo -0-P-0- ou I

0“ inteiro de

S

II

-0-P-0-,

J representa qualquer nucleosido ou um seu análogo ou derivado e Z e têm os significados definidos antes. Entre os nucleosidos e nucleosidos análogos preferidos encontram-se 3 '-azido-2 '5 '-didesoxitimidina , 2 ' , 3 '-didesoxi^ timidina, 2^l/3'-didesoxicitidina, 2',3'-didesoxiadenosina, 2',3'-didesoxi-inosina, 2 ' ,3 '-didesoxi-2 ' ,3 ¹ - dides-hidro-1imidina e ¹ ,3 '-didesoxi-2 ¹ ,3 ¹-dides-hidrocitidina ou ribavirina e aqueles nucleosidos cujas bases estão descritas nas páginas 7 e 8 desta memória descritiva. Prefere-se principalmente um homodimero cons^ tituido por dois nucleosidos de fórmula geral I.

No que se refere aos ésteres citados anteriormente, a menos que especificado de outro modo, qualquer grupo alquilo presente deverá vantajosamente conter 1 a 16 átomos de carbono, de preferência 1 a 4 átomos de carbono e poderá conter uma ou mais ligações duplas. Qualquer grupo arilo presente nestes ésteres contém, vantajosamente, um grupo fenilo.

Em particular estes ésteres podem ser ésteres alquílicos C. ou benzoilésteres eventualmente substituídos conten

1-16 — do como substituintes pelo menos 1 átomo de halogéneo (bromo, cloro, flúor ou iodo), grupos alquilo eventua1mente insatu rados ou alcoxi C. , facultativamente insaturados, nitro ou tri i-o — fluorometilo .

Os sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico dos compostos de fórmula geral I incluem os derivados de ácidos orgânicos ou

inorgânicos e bases aceitáveis em farmácia. Exemplos de ácidos apropriados incluem ácido clorídrico, ácido bromidrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido perclórico, ácido fumárico, áci_ do maleico, ácido fosfórico, ácido glicólico, ácido láctico, ác£ do salicílico, ácido succínico, ácido p-toluenossulfónico, ácido tartárico, ácido acético, ácido citrico, ácido metanossu1fónico, ácido fórmico, ácido benzóico, ácido malónico, ácido 2-naftalenossulfónico ou ácido benzenossulfónico . Outros ácidos como o oxálico, embora não sejam aceitáveis por si do ponto de vista farmacêutico, podem ser úteis na preparação de sais aplicáveis como intermédios para a obtenção dos compostos da presen te invenção e dos seus sais de adição de ácido aceitáveis do pojn to de vista farmacêutico.

Os sais derivados de bases apropriadas incluem os sais de metais alcalinos, por exemplo sódio, metais alcalinoterrosos, por exemplo magnésio, amónio e de fórmula geral NR^ + na qual R representa um grupo alquilo C^_^.

As referências posteriores aos compostos de acordo com a presente invenção incluem os compostos de fórmula geral I e os seus derivados aceitáveis do ponto de vista farmacêutico.

Compostos específicos de fórmula geral I incluem: cis-2hidroximetil-5 - (citosin-1 '-il )-l,3-oxatiolano, trans-2-h i droximeti1-5-(citosin-1 ¹ -i1)-1,3-oxatiolano e as suas misturas; cis-2-benzoiloximetil-5-(citosin-1'-il)-1,3-oxatiolano, trans-2-benzi1oximeti1-5-£itosin-1'-i1 )-1,3-oxatiolano e as suas mi_s turas ;

cis-2-hidroximetil-5-(N^_l-acetil-citosin-l'-il)-1,3-oxatiolano, trans-2-hidroximetil-5-(i-acetil-citosin-1'-il)-1,3-oxatiolano e as suas misturas;

cis-2-benzoiloximetil-5-(N4 '-acetil-citosin-1 ' - il )-l,3-oxatio1 ano, trans-2-benzoi1ox imetil- 5-('-acetil-citosin-1¹-il)-1,3-oxatiolano e as suas misturas; e cis-2-hidroximetil-5-(citosin-1'-il)-3-oxo-l,3-oxatiolano ; cis-2-hidroximetil-5-(N-dimetilamino-metilenocitosin-1 '-il ) -1,3-oxatiolano ;

bis-cis-2-succiniloximetil-5-(citosin-l'-il)-l,3-oxatiolano; cis-2-benzoiloximetil-5-(6'-cloropurin-N-9'-il)-l,3-oxatiolano, trans-2-benzoiloximetil-5-(6Icloropurin-N-9'-il)-l,3-oxatiolano e as suas misturas;

cis-2-hidroximetil-5-(6'-cloropurin-N-9 '-il)-l,3-oxatiolano ; cis-2-benzoiloximetil-5(uracil-N-l'-il )-1,3-oxatiolano, trans-2-benzoiloximeti 1-5-uracil-Ν-1'-i1)-1,3-oxatiolano e as suas misturas ;

cis-2-benzoiloximetil-5-(timin-N-l '-il ) -1,3-oxatiolano, trans-2-benzoiloximetil-5- cis-2-hidroximetil-5-(uracil-N-l '-il )-1,3-oxatiolano ;

(timin-N-1'-il )-1,3-oxatiolano e as suas misturas;

cis-2-hidroximetil-5-(timin-N-l'-il)-1,3-oxatiolano ;

sob a forma de uma mistura racémica ou de um único enantiómero.

Os compostos da presente invenção por si ou os compostos metabolizáveis nestes apresentam actividade antivírica.

Em particular estes compostos são eficazes na inibição da replicaç-ão de retrovírus incluindo retrovírus humanos como os v.1 rus de imu no deficiência humana Η I V, agentes causadores da SIDA.

Portanto, proporciona-se, como um outro aspecto desta invenção, compostos de fórmula geral I ou os seus derivados aceitáveis do ponto de vista farmacêutico, como agentes terapêuticos activos utilizáveis em particular como agentes antiví-

/

-15ricos, por exemplo no tratamento de infecções retrovíricas.

Num outro aspecto ou num aspecto alternativo, proporciona-se um método para o tratamento de uma infecção viri_ ca, em particular de uma infecção causada por um retrovírus, tal como HIV, num mamífero, incluindo o homem, que consiste na administração de uma quantidade efectiva de um composto antivírico de fórmula geral I ou de um seu derivado aceitável do ponto de vista farmacêutico.

Também se proporciona, num outro aspecto alternativo desta invenção, a aplicação dum composto de fórmula geral I ou de um seu derivado aceitável do ponto de vista farmacêutico para a preparação de medicamentos destinados ao tratamento de infecções víricas.

Os compostos desta invenção são também aplicáveis no tratamento de situações relacionadas com a SIDA tais como o con plexo relacionado com a SIDA designado por ARC, 1infadenopatia generalizada persistente (PGL), doenças neurológicas relaciona, das com a SIDA como a demência, condições positivas de anticor pos anti-HIV ou de HIV positivo, sarcoma de Kaposi, trombocitq pénia purpúrea e infecções oportunísticas .

Os compostos desta invenção também são úteis na prevenção ou progressão de doença clínica em indivíduos cujo anticorpo HIV ou o antigénio-HIV são positivos e na profilaxia que se segue à exposição a HIV.

Os compostos de fórmula geral I ou os seus derivados aceitáveis do ponto de vista farmacêutico podem também utilizar-se na prevenção da contaminação vírica de líquidos biológicos como o sangue ou o sémen in vitro.

Alguns dos compostos de fórmula geral I são ainda apli^

-16cáveis como intermédios na preparação de outros compostos de£ ta invenção .

Os técnicos nesta matéria reconhecerão que as referências feitas aqui ao tratamento abragem a profilaxia assim como o tratamento designado para infecções ou sintomas.

Deverá ainda ser reconhecido que a quantidade do corn posto desta invenção necessária para a aplicação em tratamento variará não somente com o composto particular escolhido mas airi da com a via de administração, a natureza e situação a tratar e a idade e condição do doente e como última circunstância estará à discrição do médico ou do veterinário assistente.

Em geral, contudo uma dose apropriada deverá estar com preendida entre cerca de 1 e cerca de 750 mg/Kg de massa corpo ral por dia, tal como entre 3 e cerca de 120 mg/Kg de massa cor poral do recipiente por dia, de preferência compreendida entre 6 e 90 mg/Kg por dia e ainda com maior preferência entre 15 e 60 mg/Kg por dia.

A dose apropriada pode, de um modo conveniente, ser apresentada numa dose única ou em doses repartidas administradas com intervalos adequados, por exemplo 2,3,4 ou mais sub-dq ses por dia.

	Os	compostos são convenientemente administrados	numa
forma	de dose	unitária; por exemplo contendo de 10 a 1500	mg ,
de uma	forma	conveniente 20 a 1000 mg, e de um modo ainda	mais

apropriado 50 a 700 mg de componente activo por forma posológ_i ca unitária .

Idealmente, o componente activo deve administrar-se de forma a alcançar a concentração plasmática máxima do componente activo entre cerca de 1 e 75 uM, de preferência cerca de

a 50 yjM, ainda com maior preferência entre 3 e cerca de 30 Pode obter-se isto, por exemplo, por injecção endovenosa de uma solução entre 0,1 e 5% de componente activo, eventualmente em solução de cloreto de sódio ou administrar-se em bolus com cerca de 0,1 a cerca de 110 mg/Kg do componente acti_ vo. Os niveis sanguíneos desejáveis podem ser mantidos por perfusão contínua a fim de proporcionarem cerca de 0,01 a cerca de 5,0 mg/Kg/hora ou por perfusão intermitente contendo cerca de 0,4 a cerca de 15 mg/Kg de componente activo.

Embora seja possível que, para a aplicação terapêuti. ca, um composto desta invenção se possa administrar na forma química tal qual, é preferível apresentar o componente activo sob a forma de uma composição farmacêutica.

Esta invenção, portanto, proporciona ainda uma composição farmacêutica contendo o composto de fórmula geral I ou um seu derivado aceitável em farmácia conjuntamente com um ou mais veículos farmacêuticos aceitáveis e, eventualmente, outros componentes terapêuticos e/ou profilácticos. Os veículos podem ser aceitáveis no sentido de serem compatíveis com os outros componentes da composição e não prejudiciais ao seu recipiente.

As composições farmacêuticas incluem as composições apropriadas para administração oral, rectal, nasal, tópica (iq cluindo a bocal e sub-lingual ) , vaginal ou parentérica (incluir^ do a via intramuscular, sub-cutânea e endovenosa) ou sob uma forma apropriada para administração por inalação ou insuflação. As composições podem, quando apropriado, apresentarem-se de um modo conveniente em forma de dosagem independentes, e podem pre. parar-se por qualquer método conhecido na tecnologia farmacêutica. Todos os métodos incluem a fase de formação de associação

-18do composto activo com veículos líquidos ou veículos sólidos muito divididos ou ambos e em seguida, se necessário, a formação do produto na formulação apropriada. As composições fa£ macêuticas apropriadas para administração oral podem ser apr£ sentadas de uma forma conveniente sob a forma de unidades separadas, tais como cápsulas, hóstias ou comprimidos, contendo cada uma uma quantidade pré-determinada do componente activo; sob a forma de pó ou de grânulos; ou de uma solução; ou suspensão; ou ainda de uma emulsão. 0 componente activo pode aijn da apresentar-se sob a forma de um bolus, electuário ou pasta.

Os comprimidos e cápsulas para administração oral p£ dem conter excipientes convencionais tais como agentes de ligja ção, cargas, agentes lubrificantes, agentes de desagregação ou agentes molhantes. Os comprimidos podem ser revestidos de acor do com métodos convencionais bem conhecidos pelos especialistas. As preparações orais líquidas podem apresentar-se sob a forma, por exemplo, de suspensões aquosas ou oleosas, soluções, emulsões xaropes ou elixires ou podem apresentar-se sob a forma de um produto seco para reconstituição com água ou com outro veículo apropriado, antes do uso. Estas preparações líquidas podem conter aditivos convencionais tais como agentes de suspensão, agentes de emulsão, veículos não aquosos que podem incluir óleos comestíveis, ou agentes conservantes.

Os compostos de acordo com a presente invenção podem ainda preparar-se para administração parentérica, por exemplo por injecção ou por injecção em bolus ou por perfusão contínua, e podem ser apresentados sob a forma de doses unitárias em ampolas, seringas pré-cheias, perfusão do pequeno volume em conten tores multidose adicionados de um agente conservante. As compo /

-19sições podem ainda apresentar-se sob a forma de suspensões, s£ luções ou emulsões, em veículos oleosos ou aquosos e conterem, eventualmente, agentes de formulação tais como agentes de suspensão, agentes estabilizantes e/ou agentes dispersantes. Alternativamente, o componente activo pode apresentar-se em pó obtido por isolamento asséptico do sólido estéril ou por liof_i lização de uma solução para reconstituição com um veículo apr£ piado, por exemplo água esterilizada isenta de pirogénios, antes do uso .

Para administração tópica na epiderme, os compostos de acordo com a presente invenção podem apresentar-se sob a fo£ ma de pomadas, cremes ou loções ou sob a forma de um penso trans dérmico. As pomadas e cremes podem, por exemplo, ser compostas com uma base aquosa ou oleosa em adição com agentes espessantes e/ou de gelificação. As loções podem formular-se com bases oleosas ou aquosas e de um modo geral poderão conter um ou mais agentes emulsionantes, agentes estabilizantes, agentes dispersantes, agentes de suspensão, agentes espessantes e agentes de coloração.

As composições apropriadas para administração tópica na boca incluem as pastilhas contendo o ingrediente activo numa base aromatizada, usualmente sacarose, acácia ou tragacanta; as pastilhas contêm o ingrediente activo e uma base inerte tal como gelatina, glicerina ou sacarose e acácia; e os elixires para lavagem da boca compreendem o ingrediente activo num veículo líquido apropriado.

As composições farmacêuticas apropriadas para adminis; tração rectal em que o veículo é um sólido, são preferencialmente apresentadas sob a forma de supositórios em doses unitárias.

-20/ /

Os veículos apropriados incluem a manteiga de cacau e outros materiais correntemente utilizados e os supositórios podem ser constituídos de um modo conveniente por mistura do componente activo com um veiculo brando ou fundente seguido de arrefecimento e moldagem.

As composições apropriadas para administração vaginal podem apresentar-se em pessários, tampões, cremes, geles, pastas, espumas ou sprays contendo além do componente activo os veículos conhecidos como apropriados.

'z Para administração intranasal os compostos da presen te invenção podem utilizar-se sob a forma de um spray líquido ou de um pó dispersível ou sob a forma de gota.

As gotas podem ser preparadas com uma base aquosa ou não aquosa e conterem também um ou mais agentes dispersantes, agentes de solubilização ou agentes de suspensão.

Os sprays líquidos são de um modo geral acondicionados em embalagens pressurizadas.

Para administração por inalação, os compostos de acor

L do com a presente invenção são apresentados de um modo convenieri

-'4 te num insuflador, nebulisador, ou numa embalagem pressurizada ou outro meio conveniente de dispersão de um aerossol. As embalagens pressurizadas podem conter um agente propelente aproprija do tal como o diclorodifluorometano, triclorofluorometano, dicl£ rotetrafluoroetano, dióxido de carbono ou outro gás apropriado No caso de um aerossol pressurizado a dosagem unitária pode determinar-se para proporcionar um dispositivo em válvula para libertar uma quantidade estabelecida.

Alternativamente, para administração por inalação ou insuflação, os compostos de acordo com a presente invenção podem apresentar-se sob a forma de uma composição em pó seco, por exem

-21pio uma mistura em pó constituída por um composto e um pó apropriado como base, tal como a lactose ou o amido. As compo sições em pó podem apresentar-se sob a forma de dosagem unitá_ ria, por exemplo em cápsulas ou em cartuchos ou por exemplo em embalagens blister ou gelatina a partir do qual se pode administrar o pó com auxilio de um dispositivo inalador ou insuflador.

Quando apropriado, as composições referidas anteriormente podem utilizar-se de forma a adaptarem-se para fornecerem uma libertação controlada do componente activo.

As composições farmacêuticas, de acordo com a preseji te invenção, podem ainda conter outros componentes activos tais como agentes antimicrobianos ou agentes conservantes.

Os compostos da presente invenção podem utilizar-se em associação com outros agentes terapêuticos, por exemplo outros agentes anti-inf ecciosos . Em particular, os compostos deja ta invenção podem aplicar-se conjuntamente com agentes antivíricos conhecidos.

Esta invenção, portanto, proporciona, num outro aspecto, uma associação que consiste num composto de fórmula geral I ou um seu derivado fisiologicamente compatível conjuntamente com outro agente activo do ponto de vista terapêutico, em particular com um agente antivlrico.

As preparações referidas anteriormente podem, de uma forma conveniente, apresentar-se para aplicação sob a forma de uma composição farmacêutica e portanto as composições contêm uma associação, como definida anteriormente, com um veículo aceitável do ponto de vista farmacêutico o que, portanto, consiste num outro aspecto desta invenção.

Agentes terapêuticos apropriados para utilizar nestas associações incluem os nucleosidos acíclicos tais como aciclovir, ganci clovir, interferons tais como alfa-, beta- e gama-interferon ; ini bidores da glucuronização tais como o probenicid; inibidores do transporte nucleosídico como o dipiridamol; análogos nucleosídicos tais como 3'-azido-2',3'-didesoxitimidina, 2', 3'-didesoxicitidina, 2', 3 -didesoxiadenosina,2 ¹ ,3‘-didesoxi-inosina, 2' ,3'-didesoxitimidina, 2',3'-didesoxi-2',3'-didesidrotimidina e 2',3'-didesoxi-2',3'-didesidrocitidina ou ribavirina; imunomodeladores como a interleucina II (IL2) e o factor estimulante de colónias de macrófagos granulociticos (GM-CSF), eritropoietina, ampligene, timomodulina, timopentina, foscarnete, inibidores da glicosilação tais como a 2-desoxi-D-glucose, castanoespermina, 1-desoxinorjirimicina, e inibidores da ligação de HIV aos receptores CD4 tais como os fragmentos CD4, CD4 solúvel e moléculas híbridas

CD4 .

Os componentes individuais destas associações podem administrar-se quer sequencialmente quer simultaneamente em s£ parado ou associado com composições farmacêuticas.

Quando o composto de fórmula geral I ou um seu derivado aceitável do ponto de vista farmacêutico é utilizado em associação com um segundo agente terapêutico activo contra o mesmo vírus, a dose de cada composto pode ser igual ou diferente da que se utiliza quando o composto é utilizado isoladamente. Doses apropriadas poderão ser facilmente determinadas por um técnico.

Os compostos de fórmula geral I e os seus derivados aceitáveis em farmácia podem preparar-se por métodos conhecidos da tecnologia destinados à preparação de compostos de estrutura análoga.

Os símbolos e R2, utilizados posteriormente, têm o significado definido antes, a menos que especificado de outro modo .

Em um destes processos (A) um 1,3-oxatiolano de fór mula geral

(VIII) na qual R^ rpresenta um átomo de hidrogénio ou um grtj po de protecção de hidroxilo, como definido antes e o grupo anomérico representado por L é um átomo ou grupo eliminável, faz-se reagir com uma base apropriada. Grupos apropriados representados por L incluem os grupos alcoxicarbonilo tal como etoxicarbonilo ou os átomos de haiogéneo, por exemplo iodo, bromo ou cloro ou grupos de fórmula geral -OR na qual R representa um grupo alquilo eventualmente insubstituído e insaturado, por exemplo um grupo alquilo ^{como me}tilo ou símbolo R representa um grupo acilo alifático ou aromático eventualmente substituido, por exemplo um grupo acilo alifático C,-C_z tal como acetilo e um grupo acilo aromático tal como i o benzoílo .

Os compostos de fórmula geral VIII fazem-se reagir de um modo conveniente com uma base de purina ou de pirimidina apropriadas, de fórmula geral R2-H (previamente sililada com um agente de sililação tal como o hexametildi-silazano) num dissol-24vente compatível, como o cloreto de metileno, utilizando um ácido de Lewis (tal como o tetracloreto de titânio ou o cloreto estânico) ou trimeti1silitrif1 ato.

Os 1,3-oxatiolanos de fórmula geral VIII podem pre. parar-se, por exemplo, por relação de um aldeído de fórmula geral VII com um mercaptoacetal de fórmula geral VI, num dissol. vente orgânico apropriado, tal como o tolueno, na presença de um catalisador ácido com o ácido p-1oluenossu 1 fónico ou um áci^ do de Lewis, por exemplo cloreto de zinco.

(vi) hsch₂ch(oc₂h₅)₂ c₆h₅cooch₂cho (VII)

Os mercaptoacetais de fórmula geral VI podem preparar-se por métodos conhecidos, por exemplo G. Hesse e I. Jorder, Mercaptoacetaldehyde and dioxy-1,4-dithiane ; Chem. Ber; 85; 1952; p. 924-932.

Os aldeídos de fórmula geral VII podem preparar-se por métodos conhecidos, por exemplo E.G. Halloquist e H. Hibbert;

Studies on reactions relating to carbohydrates and polysaccarides. Parte XLIV: Synthesis of isomeric bicyclic acetal ethers, Can .

J. Research 8; 1933; p. 120-136.

Num segundo processo (B), pode converter-se um compos to de fórmula geral I num outro composto de fórmula geral I por interconversão de bases. Esta interconversão pode ser efectuada por simples transformação quimica, por exemplo a conversão da base uracilo em citosina ou por uma conversão enzimática utilizando, por exemplo, uma desoxi-ribosil transferase. Estes mét£ dos e condições para interconversões de bases são conhecidos na tecnologia química dos nucleosidos.

/-25Num terceiro processo (C), os compostos de fórmula geral I podem preparar-se por reacção de um composto de fórmu la geral

HO

(IX)

HZ com um composto de fórmula geral

PO.

(X)

CHO na qual P representa um grupo de protecção, seguida da eliminação deste grupo.

Os compostos de fórmula geral IX podem preparar-se por reacção de um epóxido apropriado de fórmula geral

(XI) com um composto apropriado que contém enxofre, por exemplo tioace tato de sódio. Os compostos de fórmula geral XI são conhecidos ou podem obter-se por processos análogos.

Num quarto processo (D) um composto de fórmula gerai

pode converter-se num composto de fórmula geral I por conversão de um grupo NH^ anomérico na base requerida, por métodos conhecidos na química dos nucleosidos.

Muitas das reacçoes descritas anteriormente têm sido referidas frequentemente no contexto da síntese de nucleosidos de purina, por exemplo em Nucleoside Analogues - Chemistry, Biology and Medicai Applications; R.T. Walker et al . , Eds. Plenum Press, Nova Yorque (1979) nas páginas 193-223, texto cuja referência aqui se incorpora.

Deve considerar-se que as reacçoes citadas anteriormente podem exigir o uso de, ou a aplicação de forma conveniente de materiais iniciais com grupos funcionais protegidos e a desprotecção deve, portanto, ser necessária como uma fase inte£ média ou final para obtenção do composto desejado. A protecção e desprotecção dos grupos funcionais pode efectuar-se por meios convencionais. Assim, por exemplo, os grupos amino podem ser prR tegidos por um grupo escolhido entre grupos aralquilo, por exemplo benzilo, acilo ou arilo, por exemplo 2,4 - d i n i t r o f e n i 1 o , subse quente eliminação do grupo de protecção efectuada, quando apropriado, por hidrólise ou hidrogenólise utilizando condições padrão. Os grupos hidróxilo podem proteger-se utilizando qualquer grupo de protecção de hidroxilo convencional, por exemplo, como descrito em Protective Groups in Organic Chemistry, Ed. J.F.W. McOmie (Plenum Press, 1973) ou Protective Groups in Organic

-2 7Synthesis por Theodora W. Greene (Jonh Wiley and Sons, 1981). Exemplos de grupos de protecção hidroxilo apropriados incluem os grupos escolhidos entre grupos alquilo, por exemplo metilo, t-butilo ou metoximetilo, aralquilo, por exemplo benzilo, difenilmetilo ou trifenilmetilo, grupos heterocíclicos como tetra-hidropiranilo, acilo como por exemplo acetilo ou benzoilo, e grupos sililo tais como trialqui1sililo , por exemplo t-butildimetilsililo. Os grupos de protecção do hidroxilo podem eliminar-se por técnicas convencionais. Assim, por exemplo, os grupos alquilo, sililo, acilo e heterocíclicos podem eliminar-se por solvólise, por exemplo por hidrólise em condições ácidas ou básicas. Os grupos aralquilo tais como trifenilmetilo podem, de um modo idêntico, eliminar-se por solvólise, por exemplo por hidrólise em condições em condições ácidas ou básicas. Os grupos aralquilo tais como benzilo podem cindir-se, por exemplo, mediari te tratamento com trifluoreto de boro/eterato e anidrido acético seguido da eliminação dos grupos acetato formados deste modo no estádio apropriado da síntese. Os grupos sililo também podem ser eliminados de uma forma conveniente aplicando-se uma fonte de iões flúor tal como o fluoreto de tetra-n-butilamónio .

Nos processos citados anteriormente, os compostos de fórmula geral I obtêm-se geralmente sob a forma de isómeros cis ou trans .

Estes isómeros podem separar-se, por exemplo, por acetilação, por exemplo com anidrido acético, seguida de separação por meios físicos, por exemplo por cromatografia em gel de síli ca, e desacetilação, por exemplo com amónia metanólica ou por cristalização fraccionada.

Os sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico dos

-28compostos da presente invenção podem preparar-se como descrito na patente de invenção norte-americana n^ 4 383 114, cuja descrição aqui se incorpora como referência. Assim, por exemplo, quando se pretende preparar um sal de adição de ácido de um composto de fórmula geral I, o produto de qualquer dos processos citados anteriormente pode converter-se num sal mediante tratamento da base livre resultante com um ácido apropriado utilizando-se métodos convencionais. Os sais de adição de ácido aceitáveis do ponto de vista farmacêutico podem preparar-se fazendo reagir a base livre com um ácido apropriado, eventualmente na presença de um dissolvente adequado, tal como um éster, por exemplo o acetato de etilo ou de um álcool, por exemplo o metanol, o etanol ou o isapropanol. Os sais básicos inorgânicos podem preparar-se fazendo-se reagir a base livre com uma base apropriada como por exemplo um alcóxido, como metóxido de sódio, eventualmente na presença de um dissolvente como um álcool, por exemplo o metanol. Os sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico podem preparar-se a partir de outros sais incluindo outros sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico dos compostos de fórmula geral I através de aplicação de meios convencionais .

Os compostos de fórmula geral I podem converter-se num fosfato aceitável do ponto de vista farmacêutico ou outro éster por meio de reacção com um agente de fosfori 1ação, tal como o tricloreto de fosforilo ou com um agente de esterificação apropriado tal como um halogeneto ou anidrido de ácido adequados. Um éster ou um sal de um composto de fórmula geral I podem converter-se no composto principal, por exemplo, por hidrólise.

Quando se pretende um composto de fórmula geral I sob

.¾

-29a forma isomérica simples este pode obter-se por resolução do produto final ou por síntese estereoespecíf ica do material ini^ ciai isomericamente puro ou de qualquer composto intermédio con veniente .

A resolução do produto final ou de um intermédio ou material inicial portanto, pode efectuar-se de acordo com qual quer método apropriado conhecido. Consultar, por exemplo, Stereochemistry of Carbon Compouds, por E.L.Eliel (Mcgraw Hill, 1962) e Tables of Resolving Agents, por S.H. Wilen.

A presente invenção será mais completamente descrita pelos exemplos que se seguem que não são entendidos como limite desta invenção em qualquer sentido. Todas as temperaturas são citadas em graus Celsius.

EXEMPLOS

Exemplo 1 acetaldeído-dieti1aceta1 de 2-tiobenzoi1 o c₆h₅cos-ch₂ch(oc₂h₅)₂ (V)

A uma solução constituída por 11,5 de t-butóxido de potássio (0,11 mole) em 100 ml de dimetilformamida, adicionaram-se 17 g (0,11 mole) de ácido tiobenzóico e evaporou-se par. cialmente a solução no vácuo. Adicionou-se benzeno em duas po£ ções consecutivas de 30 ml e evaporou-se de cada vez no vácuo.

Adicionou-se dietilacetal de bromoaceta1 deído (20,3 g, 0,1 mole) à solução de dimetilformamida residual e agitou-se a mistura durante 15 horas à temperatura de 120°C. Após arrefeci mento verteu-se em 500 ml de água e extraíu-se o produto por três vezes com 200 ml de éter dietílico. Lavou-se o extracto com

-30 uma solução aquosa de carbonato de hidrogénio e sódio, seguida de água e em seguida eliminou-se o dissolvente no vácuo. Destilou-se o resíduo no vácuo para se obterem 17,2g do composto de fórmula V puro, com ponto de ebulição 131°-l33°/0,07 mm. Caracterizou-se

RMN ? Λ	> (ppm	em CDC13 ) :
97	(d,	2H;	aromático )
7,	47	(m,	3H;	aromático )
	59	(t,	1H ;	-ch(oc₂h₅)₂) )
3,66	(m,	4H ;	2 x OCH₂CH₃)
3,	30	(d,	2H ;	sch₂- )
1,	23	(t,	6H ;	2 x OCH₂CH₃)

Exemplo 2 dietilacetal de mercaptoacetaldeído hsch₂ch(oc₂h₅)₂ (VI )

Dissolveu-se o derivado tiobenzoí1ico anterior (V), na quantidade de 17,2 g em 100 ml de tetra-hidrofurano seguido da adição de 6 g de hidróxido de sódio em 20 ml de água. Submeteu-se a mistura a refluxo em atmosfera de azoto durante 15 ho ras, em seguida arrefeceu-se e dilui-se com 200 ml de água e extraíu-se o produto por três vezes com 200 ml de éterdietílico Secou-se o extracto, eliminou-se o dissolvente no vácuo e destilou-se o resíduo também no vácuo para se obterem 7,1 g do com posto VI puro, p.e. 60°-62°/18 mm. Caracterizou-se por H RMN

S	(ppm	em	CDC1₃):
4,51	(t,	IH;	ch(oc₂h₅)₂)
3,51	(m,	4H;	2 x OCH₂CH₃)
2,65	(dd,	2H	; HS-CH₂)
1,54	(t,	1 H ;	HS-)
1,23	(t,	6H ;	2 x OCH CH )

Exempla 3 benzoiloxiacetaldeído c₆h₅cooch₂cho (VII)

Este intermédio conhecido preparou-se pelo método dejs crito anteriormente a partir de 1-benzoi1-glicerol também conh£ eido. Portanto, 50 g deste último, numa mistura de 500 ml de cloreto de metileno e 25 ml de água foi submetida a tratamento com porções de 80 g de periodato de sódio sob agitação vigorosa à temperatura ambiente. Após a adição, continuou-se a agitação durante 2 horas decorridas as quais se adicionaram 100 g de sul_ fato de magnésio e se agitou mais 50 minutos. Filtrou-se a mistura e evaporou-se o filtrado no vácuo e destilou-se o resíduo também no vácuo para se obterem 26 g do composto VII puro, p.e. 92°-94°/0,25 mm. H RMN (200 MH^; TMS como referência interna)

S (ppm em CDC1^, ) :

9,71	(s,	1H;	-CHO )
8,11	(d,	2H;	aromát ico)
7,60	(m,	1H;	aromático )
7,46	(m,	2H;	aromático
4,88	(s ,	2H;	-ch₂cho)

Exemplo 4

2-benzoiloximetil-5-etoxi-l,5-oxatiolano

CeHsCOOCHz

OCrt (XIII) /

-3 2Misturaram-se Ί g do acetal de mercaptoacetaldeído anterior (VI) em 100 ml de tolueno com 7 g do benzoiloxiacetaldeído descrito anteriormente (VII), adicionaram-se alguns, poucos, cristais de ácido p-toluenossulfónico e colocou-se a mistura num banho de óleo à temperatura de 120° em atmosfera de azoto. Destilou-se o etanol formado e manteve-se a mistura à temperatura de 120°C durante mais 30 minutos após os quais se arrefeceu e lavou com uma solução aquosa de carbonato de hidrq génio sódio, secou-se e evaporou-se no vácuo. Destilou-se o resíduo no vácuo para se obterem 9,8 g do composto XIII puro sob a forma de uma mistura de isómeros cis e trans, p.e. 140°-143°/0,l mm; RfO,51 (hexano-EtOAc).

RMN S (ppm em CDCl-j):

8,05	(m,	2H;	aromático)
7,57	(m ,	1H;	aromático)
7,43	(m,	2H;	aromático )
5,55	(m ,	2H;	c₅-h, c₂-h)
4,55	(m,	2H;	^C2^-C6^H5^C02^CH2 ⁾
3,80	(m,	1H ;	c₂-c₆h₅co₂ch₂) H
3,76	(m,	1H;	c₅-ochch₃) H
3,17	(m,	2H ;	c₄-h₂)
1,21	(t,	3H;	c.-och₂ch.)

/

-33Exemplo 5 cis- e trans-2-benzoiloximetil-5-(citosin-1'-il)-l,3-oxatiolanos

Submeteu-se a aquecimento à temperatura de refluxo e atmosfera de azoto anidra até à obtenção de uma solução transparente (3 horas), uma mistura de 2,7 g de citosina, 30 ml de hexametildi-silazano (HMDS) e 0,3 ml de cloreto de trimetilsilino e evaporaram-se no vácuo os reagentes em excesso. Eliminaram-se os produtos voláteis restantes em vácuo potente, 15 minutos e extraiu-se o resíduo sólido com 250 ml de 1 , 2-d i cl or oe tja no e adicionaram-se 5 g do composto intermédio chave citado anteriormente (XIII) em 50 ml de dicloroetano, em atmosfera de árgon, seguido de 4,7 ml de triflato de trimetilsililo (TMST ). Após 3 dias de aquecimento à temperatura de refluxo e atmosfera de árgon, arrefeceu-se e verteu-se em 300 ml de uma solução aquosa saturada de carbonato de hidrogénio e sódio. Recolheu-se a fase orgânica, extraíu-se a fase aquosa por duas vezes com

100 ml de cloreto de metileno e os extractos reunidos lavaram-se com água, secaram-se e evaporaram-se no vácuo. Purificou-se o resíduo por cromatografia em gel de sílica utilizando cloreto de meti1eno : á1coo 1 metílico a 9:1 como eluente para se obterem 2,5 g de uma mistura pura numa relação cis- e trans-(XIV) 1:1 como determinado por ressonância magnética nuclear protónica. Separaram-se os isómeros sob a forma dos derivados N-acetilo como descrito no exemplo seguinte.

-'3 4

Exemplo 6

Isómeros cis- e trans- de 2-benzoiloximetil-5-(N_/i ^l-acetil-citosin — 1 '-il ) —I,3-oxatiolano

CçHsCOOCHb

(XV)

Tratou-se a mistura obtida anteriormente (XIV) (2,5 g) em 100 ml de piridina anidra contendo 0,1 g de 4-dimetilaminopiridina (DMAP), com 7 ml de anidrido acético à temperatura ambiejn te e, após 16 horas, verteu-se a mistura sobre água arrefecida seguida de extracção com 3x150 ml de cloreto de metileno. Lavot£ -se o extracto com água, secou-se e evaporou-se no vácuo. Adicionou-se tolueno ao resíduo, em seguida evaporou-se no vácuo e purificou-se o óleo residual por cromatografia em gel de sílica utilizando uma mistura de acetato de etilo:álcool metllico a 99:1 como eluente para se obterem 1,35 g do composto trans— (XV) puro como o produto de mobilidade maior e 1,20 g de cis-(XV) como produto de menor mobilidade. Caracterizaram-se por espectroscopia de ressonância magnética nuclear protónica.

trans-(XV): p.f. 158°-160°; R_f: 0,48 EtOA:CH₃OH 95:5

U.V.: (CHjOH) Lambda max: 297 nm

H RMN S	(ppm	em	CDC1	3^):
9	, 00	(b,	1H ;	^c4'-NH-Ac)
8	, 06	(m,	2H;	aromático
7	,74	(d,	1H;	c₆'-h)
7	,56	(m,	1H;	aromático
7	,56	(m,	1H;	aromático )

-3 5-

7,47	(d,	1H;	c₅'-h)
7,45	(m,	2H;	aromático )
6,53	(dd,	1H :	; c₅-h)
5,89	(dd,	1 H :	; ^c2-h)
4,46	(dd,	2H :	; C₂-CH₂0C0C₆H₅)
3,66	(dd,	1H :	i C₄-H)
3,32	(dd,	1 H :
2,25	(s,	3H;	NH-COCH.)

Cis-(XV) : p.f. 150°-152°; R_f: 0,40 Et0Ac:Me0H 95:5)

U.V.: (CH^OH) Lambda max: 297 nm
RMN S (ppm em CDCl})	NH-Ac)
9,03	(b,	1H;
8 , 21	(d ,	1H;
8,05	(m,	2H;	aromático )
7,60	(m,	1H;	aromático )
7,50	(m,	2H;	aromático )
7,29	(d,	1H;	c₅'-h)
6,34	(dd ,	1H;	c -h)
5,52	(dd,	1H,	c₂-h)
4,80	(dd ,	2H;	c₂ch₂ococ
3,66	(dd,	1H;	c₄-h)
3,24	(dd ,	1H;	c₄-h)
2 , 23	(s ,	3H ;	NH-COCH )

Z *5»

Exemplo 7 cis- e trans-2-hidroximetil-5-(citosin-1'-il)-1,3-oxatiolanos

(XVI)

a) Trans-(XVI) : Disso 1veram-se 375 mg de trans-(XV) obtido anteriormente em 100 ml de amoníaco metanólico a 24° e, após agitação durante 16 horas, eliminou-se o dissolvente no vácuo e cristalizou-se o resíduo no seio de éter dietílico. E s^ te recristalizou-se no seio de etanol/éter dietílico para se obterem 174 mg do produto puro p.f.>220° (com decomposição). Caracterizou-se do seguinte modo. e RMN.

1H RMN S (ppm em DMSO-d^):

7,57	(d,	1H;	c₆'-h)
7,18	(d,	2H;	c₄'-nh₂)
6, 30	(dd ,	1H;	c₅-h)
5,68	(d ,	1H;	C₅ ’-H)
5,48	(t ,	1H;	c₂-h)
5,18	(t,	1H;	C₂-CH₂OH)
3,45	(m ,	3H;	C„-CH„OH + C.H) 2 —2 4—
3, 06	(dd ,	1 H ;	c₄-h)

U.V.: (CH^OH) Lambda max: 270 nm ¹³C RMN (DMS0-d₆, Varian XL-300); $ em ppm:

c₂' c · c₅' c₆' c₅ c₄ c₂ çh₂oh

154,71 165,70 93,47 140,95 87,77 36,14 86,80 64,71

b) Cis- (X VI) : trataram-se 375 mg de Cis - (X V-) pelo processo descrito anteriormente obtendo-se 165 mg do produto puro após recristalização no seio de etanol/éter, p.f. 171°-173°. Carac terizou-se por H e ^C RMN.

RMN: S (ppm em DMSO-d^):

7,80 (d, 1H; C^-H)

7,20 (d, 2H; C^-NH?)

6,18 (t, 1H; C₅-H)

5.70 (d, 1H; C^-H)

5,14 (t, 1H; C₂-CH₂OH)

3.71 (m, 2H; C₂-CH₂0H)

3,40 (dd, 1H; C^-K)

2,99 (dd, 1H; C^-H) .

U.V. (CH-jOH) Lambda max : 270 nm

¹³C RMN S (ppm em DMS0-d₆	c₅ c₄ c₂ ch₂oh
C ¹ z	CC_c' C ' 4 5 6
154,63	165,59 93,86 140,91	86,47 36,22 85,75 62,79
Exemplo	8

cis-2-hidroximetil-5-(citosin-1¹ — i1)-3-oxo-I,3-oxatiolano

Tratou-se o composto obtido anteriormente cis-(XVI),

100 mg em 30 ml de metanol arrefecido em gelo, foi tratado com 93 mg de ácido meta-cloroperbenzóico e após agitação durante

minutos separou-se um sólido branco que se recolheu e lavou com 10 ml de metanol para se obterem 45 mg do isómero a do sul fóxido puro. Os filtrados de metanol incorporaram-se em vácuo e lavou-se o resíduo com 15 ml de etanol/éter dietílico 1:1 e em seguida com 30 ml de éter dietílico para se obterem 50 mg do isómero R do sulfóxido puro. Caracterizaram-se os isómeros por ¹H RMN.

Isómero (XVII)a: P.F. >270° (dec); R_f:0₇30 ( 0Η_? Cl _£-Me OH -3 :1 )

U.V.: (CH^OH) Lambda max: 270 nm ¹H RMN S (ppm em DMS0-d . ):

O

7,68	(d ,	1H;	ο₆--η)
7,36	(s ,	2H;	c₄'-nh	2
6,69	(dd ,	1H.
5,76	(d,	1H;	C₅íH)
5,47	(t,	1H;	c₂-ch₂	0H)
4,63	(dd	1H;	c₂-h)
3,88	(m ,	1H;	C₂-CH-	0H )
			H
3,72	(m ,	1H;	C₂-CH-	0H )
			H
3, 36	(dd ,	1H :	; C₄-H)
3,05	(dd ,	1H :	; C₄-H)

Isómero (XVII)b: P.F. >220° (dec); R_f:0,32 CH₂Cl₂:MeOH 3:1 ¹H RMN S (ppm em DMSO-d^):

7 , 76	(d ,	1H;	0 ' 6	-H)
7 , 28	(d ,	2H;	^C4'	-nh₂ )
6,66	(dd ,	, 1H	; c₅	-H)
5,77	(d ,	1H;	^C5'	-H)

5,45 (t, 1H; C₂-CH₂0H)

4.64 (t, 1H; C₂-H)

3,77 (t, 2H; C₂-CH₂0H)

3.65 (dd, 1H; C^H)

3,17 (dd, 1H; C₄~H)

Exemplo 9 cis-2-hidroximetil-5-(N-dimetilamino-metileno-citosin-1 '-il ) -1,3-oxatiolano

(XVIII)

Fez-se uma suspensão de 300 mg de cis-2-hidroximetil- 5-(cito si η-1 ¹ -i1 )-1,3-oxatio 1 ano em 10 ml de dimetilformamida-dimetilacetal (DMF-dimetiaceta 1). Agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante a noite (18 horas). Eliminou-se o material volátil por evaporação a pressão reduzida. Cristalizou-se o resíduo no seio de etanol/éter dietílico para se obterem 345 mg do produto puro (rendimento 9 3 ?□) . P.F. 162°-164°C; R^ 0,56 em CH Cl^MeOH 4:1

U.V.: Lambda max: 325 nm

H RMN 8 (ppm em D M S 0 - d ^ ) :

8,64 (s,lH N = CH-N)

8,04 (d, 1H, C₆ '-H, J = 7,2 Hz )

6,22 (t, 1H, C₅-H, J = 4,9 Hz)

5,97 (d, 1H, C '-H, J = 7,2 Hz)

5,37 (t, 1H, -0H, J = 5,8 Hz, D0^ troca

-4 0 ζ

5,22	(t,	1H, C₂-H, J =	4,4 Hz )
3,77	(t,	2H, C₂-CH₂0H,	J = 4,9 Hz)
3,50	(dd,	1H, C₄-H, J	= 4,9 e 9,9 Hz)
3,17	(3H,	-ch₃)
3,12	(dd,	1H, C^-H, J	= 4,2 e 11,9 Hz
3,04	(s,	3H, -CH-j)

Exemplo 10 bis-cis-2-succiniloximetil-5-(citosin-1'-il ) -1,3-oxatiolano

Dissolveram-se 284 mg de cis-2-hidroximeti1-5- ( N, N-dimetilamino-metileno-citosin-1 '-il ) -1 , 3 — oxatiolano em 10 ml de piridina anidra e arrefeceram-se para a temperatura de 0°C com um banho de gelo. Adicionaram-se 60 ^il de cloreto de succinilo por meio de uma seringa. Agitou-se a mistura durante a noite, 18 horas e verteu-se em 50 ml de uma solução aquosa saturada de carbonato de hidrogénio e sódio. Extraíu-se a mistura com 3x50 ml de cloreto de metileno. Lavou-se a solução de cloreto de metileno lavou-se com água por duas vezes com 50 ml e secou-se com sulfato de magnésio. Após filtração eliminou-se o dissolvente por evaporação a pressão reduzida. Dissolveu-se uma espuma residual em 10 ml de cloreto de metileno contendo 5 ml de metanol. Adicionaram-se 2 ml / -41de ácido acético aquoso a 805o e agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante a noite. Evaporou-se a mistura até à secagem e purificou-se o resíduo sólido em gel de sílica utilizando cloreto de metileno-álcool metílico a 4:1 como eluente. Obtiveram-se 145 mg do produto puro (rendimento de 54%).

P.F. Dec > 230°C; R_f: 0,23 ( em CH₂Cl₂:MeOH 4:1)

U.V.: (MeOH) Lambda max: 271 nm ''H-NMR S (ppm em DMSO-d^)

7,69	(d ,	2H,	2 x	C₆’-H, J = 7,6 Hz)
7,28	(d,	4H,	2 x	NH₂, J - 24,9Hz, D₂0 troca)
6,24	(t,	2H,	2 x	C₅-H, J = 5,6 Hz)
5,76	(d,	2H,	2 x	C₅’-H ; J - 7,4 Hz )
5,35	(t,	2H,	2 x	C₂-H, J - 4,5 Hz )
4,37	(d,	4H,	2 x	C₂-CH₂O-)
3,42	(dd ,	2H	, 2 x	C₄-H, J = 5,5 e 10,9 Hz)
3,10	(dd,	2H	, 2 x	C^-H, J = 5,6 e 11,7 Hz)
2, 60	(s,	4H,	2 x -	CH₂-C-O)

Exemplo 11 cis- e t r ans-2-benzo i 1 ox ime t i 1 - 5-( 6 ¹-cl oropur i η - N-9 ¹ - i 1 )-1 , 3 -oxatiolano

N

K /

-42Aqueceram-se a refluxo 1,7 g de 6-cloropurina em 50 ml de hexameti1 disi1 azano (HMDS) contendo 50 mg de sulfato de amónio até à obtenção de uma solução límpida (1 hora). Eliminou-se o excesso de HMDS a pressão reduzida, secou-se o resíduo oleoso em vácuo potente durante 1 hora e em seguida dissolveu-se em 100 ml de 1,2-dicloroetano anidro.

Secaram-se 2,7 g de 2-benzoi1 oximeti 1-5-etoxi-1,3-oxitiolano (XIII) num frasco de fundo redondo de 500 ml, por evaporação duas vezes com 50 ml de benzeno e dissolveram-se em 200 ml de 1,2-dicloroetano anidro.

Em seguida transferiu-se a solução de 6-cloropurina sililada para uma solução de 1,3-oxatiolano, por meio de um tubo em atmosfera de árgon. Ao recipiente da reacção adicionaram-se 11 ml de trif1uorornetano-su1fonato de trimeti1si1i1 ο 1M (TMS—triflato). Aqueceu-se a mistura à temperatura de refluxo durante 5 horas e em seguida arrefeceu-se para a temperatura ambiente. Verteu-se a mistura em 300 ml de uma solução saturada de carbonato de hidrogénio e sódio sob agitação. Recolheu-se a fase orgânica e extraíu-se a fase aquosa por duas vezes com 100 ml de cloreto de metileno. As fases orgânicas reunidas lavaram-se com água, secaram-se com sulfato de magnésio, filtraram-se e evaporaram-se a pressão reduzida. Purificou-se e separou-se o resíduo em gel de sílica uti1izando-se hexano-acetato de etilo 7:3 como eluente. Obtiveram-se 1,05 g do produto de menor polaridade (rendimento 2 8%) que se identificou como o isómero alfa- ou trans- sob a forma de uma espuma e 710 mg do produto de menor polaridade identificado com betaou cis-isómero . 0 rendimento total foi de 46,1% na relação cis : trans de 1:1,4.

/ -43

Ζ

Rf.: 0,43 em Hexano:EtOAc 1:1 isómero - trans (0( -isómero U.V.: (MeOH) Lambda max 264,7 nm 1h-RMn5 (ppm em CDCl^):

isómero

8,76	(s, 1H,	c₈'-_H)
8,48	(s, 1H,	C₂'-H)
8,06	(m, 2H,	aromático )
7,56	(m, 1H,	aromático )
7,45	(m, 2H,	aromático )
6,90	(dd, 1H,	C₅-H, j =	5,0	Hz )
5,78	(dd, 1H,	C₂-H, j =	6_z0	Hz )
4,56	(m, 2H,	C₂-CH₂0C0C	6^H5>
5,74	(m, 2H,	C₄-H)
cis	(beta-isómero ) : R_f :	0:35	em

U . V . : (MeOH) Lambda max 264^,7 nm H - R Μ N 5 (ppm em C D C1 , ) :

8,72	(s,	1H,	^C8'-^H)
8,51	(s,	1H,	C₂'-H)
8 , 00	(m,	2H,	aromático)
7,56	(m,	1H,	aromático )
7,44	(m ,	2H,	aromático )
6,61	(t,	1H,	C₅-H, J - 4,7	Hz )
5,62	(t,	1H,	C₂-H, J = 4,9	Hz )
4,69	(m ,	2H,	C „ - CH _o 0 C0 C , H _q	)
3, 66	(m ,	2H,	C₄-H)

/

Exemplo 12 cis-2-hidroximetil-5- (6 '-hidroxipurin-N-9'-il)-1,3-oxatiolano (derivado de inosina)

(XXI)

Dissolveram-se 533 mg de cis-2-benzoiloximetil-5 - (6 '- cl oropu r i η-N-9 '-i 1 )-1 , 3-ox a t io 1 ano em 25 ml de metanol. Adicio. naram-se 5 g de hidróxido de sódio e 3 ml de água à solução. Aqu£ ceu-se a mistura à temperatura de refluxo durante 5 horas e arrefeceu-se à temperatura ambiente. Em seguida diluiu-se a solução com 100 ml de água, neu t r al i zou - se com resina de piridínio e f i 1^ trou-se. 0 resíduo de resina filtrou-se com 100 ml de metanol.

filtrado reunido evaporou-se a pressão reduzida. Purificou-se o resíduo em gel de sílica utilizando cloreto de metileno/metanol a 4:1 como eluente. Obtiveram-se 183 mg do produto puro (rendimento 51%) que se identificou como o derivado de inosina. P.F.: 208°-210°C; R_f: 0,27 em Et0Ac:Me0H 4:1

U.V.: (MeOH) Lambda max: 246 nm ^H-RMN: & (ppm em DMSO-d^)

12	,42	(s ,	, 1H,	, -NH, D0	troca )
8,	36	(s ,	1H,	c₈'-h)
8,	07	(s ,	1H,	C₂ '-H)
6,	37	(t,	1H,	^C5-H, J =	5,1 Hz)

/-4 5-

5,29	(t,	1H,	-0H, J = 6,0 Hz, D₂0 troca)
5,24	(t,	1H,	C₂-H, J = 4,9 Hz )
3,63	(m,	4H,	2H de C₄-H e 2H de CH₂-0H)

Exemplo 13 cis- e trans-2-benzoiloximetil-5-(uracil-N-l '-il)-l,3-oxatiolanos

Aqueceram-se à temperatura de refluxo 760 mg de uraci. lo em 30 ml de HMDS na presença de 50 mg de sulfato de amónio até à obtenção de uma solução límpida. Evaporou-se a mistura a pressão reduzida, secou-se o resíduo em vácuo durante 1 hora e dissolveu-se em 100 ml de 1,2 - dic1 oreta no anidro.

Secaram-se 1,5 g de 2-b e η z o i 1 o x ime t i 1 - 5-e t o x i-1 , 3-o x a_ tiolano por evaporação duas vezes com 50 ml de benzeno de cada vez, num frasco de 500 ml de fundo redondo e dissolveu-se em 150 ml de 1 , 2 - dic1oroeta no anidro.

Transferiu-se a solução de uracilo sililada para uma solução de oxatiolano por meio de um tubo em atmosfera de árgon e adicionaram-se 1,5 de triflato de trimeti1si1i1 o em 20 ml de 1,2 - dic1 oroetano . Aqueceu-se a mistura reacional à temperatura de refluxo e em atmosfera de árgon durante 48 horas, arrefeceu-se para a temperatura ambiente e verteu-se em 300 ml de uma solução aquosa sa_ turada de carbonato de hidrogénio e sódio. Recolheu-se a fase orgânica. Extraíu-se a fase aquosa por duas vezes com 100 ml de cio-46 reto de metileno. As fases orgânicas reunidas lavaram-se com duas vezes 200 ml de água, uma vez com 150 ml de solução de cloreto de sódio e secou-se com sulfato de magnésio. Após fi_l tração eliminou-se o dissolvente por evaporação em vácuo e purificou-se o resíduo em gel de sílica utilizando hexano/acetato de etilo 1:1 como eluente. Obtiveram-se 594 mg do produto puro (rendimento 32?í). 0 produto mostrou apenas uma mancha na cromatografia em camada fina. Contudo, o espectro ^H-RMN indi_ cou a presença de dois isómeros cis e trans na proporção de 1:1,2 e que neste estádio não foram separados.

R^: 0,35 em Hexano:EtoAc 3:7

U.V.: (MeOH) Lambda max: 261 nm ^H-RMN S (ppm em CDCl^)

8,88	(s	largo	, 1H, N₃'-H
8,05	(m,	2H,	aromático )
Λ71	(d ,	1H,	Cg ' -H cis, J	-	8,2 Hz )
7,57	(m ,	1H,	aromático )
7,45	(m,	5H,	aromático e	N₃·	-H)
6, 55	(dd	, 1H,	C^-H trans,	J	= 2,4 e 5,4 Hz)
6,35	(dd	, 1H,	C^-H cis, J	=	4,1 e 5,6 Hz
5,79	(t,	1H,	C _Q - H trans,	J =	5,4 Hz)
5,73	(d,	1H,	C^'-H trans,	J	= 8,2 Hz )
5,57	(d,	1H,	C _c ' -H cis, J	=	8,2 Hz )
5,46	(t,	1H,	C_Q-H cis, J	= 3	,9 Hz)
4,73	(d ,	2H,	-CH₂O-COCgH₅	)
4,45	(t,	2H,	-CH₂0C0CgH₅ )
3,57	(m ,	1H,	C₄-H)
3,17	(m ,	1H,	C₄-H)

Exemplo 14 cis-2-hidroximetil-5-(uracil-N-l^l-il)-l,3-oxatiolano

HO

(XXIII)

Dissolveram-se 300 mg de uma mistura de cis- e trans-2-benzoiloximeti1-5-(uraci1-N-l '-i1 )-1 , 3-oxatiolanos e 75 ml de amoníaco metanólico. Agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante a noite. Evaporou-se a solução até à secagem. Purificou-se o resíduo e separaram-se os dois isómeros em gel de sílica utilizando acetato de etilo/metanol 98:2 como eluente.

Isolou-se o produto do topo sob a forma de um produto sólido e identificou-se como o isómero cis

Cis-isómero p.f. 162°-164°C; R_f 0,57 em EtoAc:MeOH 95:5

U.V.: (MeOH) Lambda majç 261,4 nm

1H-RΜN è (ppm em DMSO-d^:

11,36 (s,lH, N₃’-H)

7,88	(d,	1H,	c₆'-h, j	= 8,1 Hz)
6,18	(t,lH	^,C5	H, J r 4,8	Hz )
5,62	(d,	1H,	C₅'-H, j	= 8,1 Hz )
5,33	(t,	1H,	C -H, J =	5,7 Hz)
5,17	(t,	1H,	-OH, D₂0	troca )
3,72	(t,	2H,	c₂-ch₂oh,	J = 4,6 Hz)
3,41	(dd ,	1H	, C.-H, J H·	= 5,7 e 12	Hz )
3,20	(dd ,	1H	, c₄-h,j =	4,6 e 9,9	Hz )

Exemplo 15 cis e trans-2-benzoiloximeti1-5-(timin-N-1 ¹ -i1 )-1,3-oxatiolanos

Aqueceram-se 1,7 g de timina à temperatura de refluxo em 50 ml de hexametildisilazano contendo 50 mg de sulfato de amónio até à obtenção de uma solução límpida. Evaporou-se a mistura a pressão reduzida. Secou-se o resíduo no vácuo durante 1 hora e dissolveu-se em 150 ml de 1,2-dicloroetano .

Secaram-se 3 g de 2-benzoi1oximeti 1-5-etoxi-1,3-oxatiolano por evaporação duas vezes com 75 ml de benzeno e dissol_ veram-se em 150 ml de 1,2-dic1 oroetano anidro.

Transferiu-se a solução de timina sililada para o oxa tiolano através de um tubo em atmosfera de árgon.

Introduziram-se 3,3 ml de triflato de trimetilsililo em 30 ml de 1,2-dic1 oroetano anidro na mistura reaccional por meio de um tubo, em atmosfera de árgon. Aqueceu-se a solução à temperatura de refluxo em atmosfera de árgon durante 36 horas, arrefeceu-se até à temperatura ambiente e verteu-se sobre 300 ml de uma solução aquosa saturada de carbonato de hidrogénio e sódio. Recolheu-se a fase orgânica e extraíu-se a fase aquosa por duas vezes com 100 ml de cloreto de metileno de cada vez. As fases orgânicas reunidas lavaram-se duas vezes com 200 ml de água

-4 9-

de cada vez e uma vez com 150 ml de uma solução de cloreto de sódio e secou-se sobre sulfato de magnésio. Filtrou-se a solq ção, evaporou-se o filtrado no vácuo e purificou-se o resíduo em gel de sílica utilizando hexano/acetato de etilo 1:1 como eluente. Obtiveram-se 1,3 g do produto puro (rendimento 35?í).

produto exibiu apenas uma mancha na cromatografia em camada fina mas o espectro de H-RMN indicou a presença de dois isómeros cis e trans na proporção de 1:1,2.

Rf.: 0,30 em Hexano:EtOAc 2:3

U.V.: (MeOH) Lambda max: 266 nm

1H-RΜN & (ppm em C D C1 ^ ) :

8,60 (singleto largo, Ν^'-Η)

8,06(m, 2H,	aromático )
7,59 (m, 1H,	aromático)
7,49 (m, 2H,	aromático )
7,38 (d, 1H,	C₆ '-H-cis, J = 1,3 Hz)
7,28 (d, 1H,	¹ -H-trans, J = 1,3 Hz)
6,55 (dd, 1H	, C^-H-trans isómero, J = 3,1 e 5,
6,38 (t, 1H,	C^-H-cis isómero, J = 5,5 Hz)
5,78 (dd,lH,C_?	-H-trans, J = 4,4 e 6,4 Hz)
5,46 (t, 1H,	C_n-H -cis-isómero , J = 4,3 Hz)
4,69 (d, 2H,	C₂-CH₂0C0C₆H₅, J = 4,2 Hz)
4,45 (m, 2H,	c₂-ch₂ococ₆h₅)
3,58 (m, 1H,	C^-H)
3,13 (m, 1H,	C^-H)
1,93 (d, 1H,	C_c ¹ -CH^-trans isómero J = 1,2 Hz)
1,78 (d, 1H,	Cr'-CH_o-cis isómero, J = 1,2 Hz)

*9

Exemplo 16 cis-2-hidroximetil-5-(timin-N-l'-il)-l,3-oxatiolanos

HN

(XXV)

Dissolveram-se 500 mg de uma mistura cis e trans de 2-benzoi1oximeti1-5-(timin-N-l '-i1 )-1,3-oxatio 1 anos (XXIV) em 100 ml de amoníaco metanólico saturado. Agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante a noite (18 horas). Em seguida evaporou-se a mistura até à secagem a pressão reduzida. Separou-se o resíduo em gel de sílica utilizando acetato de etilo/ /metanol 98:2 como eluente. Identificou-se o produto de menor polaridade como o isómero cis, p.f. 167°-168°C; R^: em EtOAc: MeOH 95:5

U.V.: (MeOH) Lambda max: 266 nm 'H-RMN & (ppm em DMSO-d^)

11	,38	(s,	1H,	n₃ ’-h)
7,	73	(d,	1H,	C₆ '-H, J = 1,1	L Hz )
⁶,	16	(t,	1H,	C₅-H, J = 5,5	Hz )
5,	31	(t,	1H,	C₂-H, J = 5,9	Hz )
5,	14	(t,	1H,	0H, D₂0 trocai	)
3,	70	(t,	2H,	c₂-ch₂oh, J =	5,1 Hz)
3,	36	( dd ,	1H,	C^-H J = 5,7	e 1,7 Hz )
3,	16	(dd ,	1H,	C^-H, J = 5,í	'> e 11,7 Hz )

1,75 (d, 3H, C₅ '-CH-j, J = 1,7 Hz )

Exemplo 17

Composições de comprimidos

A. Preparou-se a composição seguinte por granulação húmida dos componentes com uma solução aquosa de povidona, secagem e calibração, seguida de adição de estearato de magnésio e compressão.

mg/comprimido

(a)	Ingrediente activo	250
(b)	Lactose Β.P.	210
(c )	Povidona Β.P.	15
(d)	Glicolato de amido e sódio	20
(e )	Estearato de magnésio	5

500

Β. A composição que se segue preparou-se por compressão directa; a lactose era do tipo de compressão directa.

mg/comprimido

Ingrediente	activo	250
Lactose		145
Avicel		100
Estearato de	magnésio	5 500
C.	Composição de libertação controlada.	A composição

preparou-se por granulação húmida dos componentes indicados em seguida, com uma solução aquosa de povidona, secagem e calibração seguida de adição de estearato de magnésio e compressão.

/ mg/comprimido

(a) Ingrediente activo	500
(b) Hidroxipropilmetilcelulose
(Methocel K4M Premium)	112
(c ) Lactose B.P.	53
(d) Povidona B.P.	28
(e) Estearato de magnésio	7
	700
Exemplo 18
Composição de cápsulas
A composição de uma cápsul	a prepara-se por mistura
dos componentes citados em seguida e	enchimento em cápsulas
gelatina dura de duas partes.	mg/cápsula
Ingrediente activo	125
Lactose	72,5
Avicel	50
Estearato de magnésio	2,5

250

Exemplo 19

Composição injectável

Componente activo 0,200 g

Solução de hidróxido de sódio 0,1M q.b.p. ^im pH de cerca de 11. Agua esterilizada q.b.p. 10 ml.

Faz-se uma suspensão do componente activo numa parte da água, que pode estar aquecida, e ajustou-se o pH para cerca de 11 com a solução de hidróxido de sódio. Em seguida preparou-

3-se o lote acertando o volume e filtrando através duma membrana esterilizada para um frasco-ampola de 10 ml esterilizado e fechou-se com fechos esterilizados e enviou-se.

Exemplo 20

Supositórios mg/supositório

Componente activo 250

Gordura dura, B.P. 1770

2020

Funde-se um quinto do material gordo duro num banho de vapor à temperatura máxima de 45°C. Passa-se o componente activo através de um peneiro de 200 yum e adiciona-se à base fun dida com agitação utilizando um agitador de alta velocidade até à obtenção de uma boa dispersão. Mantendo-se a mistura à temperatura de 45°C, adiciona-se o restante material gordo duro à suspensão e agita-se até à obtenção da homogeneidade. Passa-se toda a suspensão através de uma rede de aço inoxidável de 250 jjm e, com agitação contínua, mantem-se a arrefecer até 40°C. Enche-se a mistura a uma temperatura entre 38°-40°C, com uma distribuição de 2,02 g por cada molde de plástico de 2 ml. De_i xam-se os supositórios a arrefecer até à temperatura ambiente.

Exemplo 21

Actividade antivírica

Conduziu-se o ensaio in vitro de vários dos compostos da presente invenção para se determinarem as suas capacidades inibidoras. Os resultados apresentam-se nos quadros 1 e 2. As concentrações referidas estão em jjg/ml nos meios de incubação o que afecta a susceptibilidade de uma linha contínua de célu-54 las T desenvolvida no Lady Davis Institute for Medicai Research (Montreal) pelo Dr. Mark A. Wainberg, relativamente à infeção por HIV seguindo-se um protocolo idêntico ao descrito por H. Mitsuya e S. Broder; Inhibition of the in vitro infectivity and cytopathic effect of human T-lymphotropic virus type III/ /lymphadenopathy-associated virus (HTLV-111/LAV) by 2^3'-dideoxy nucleosides. Proc. Natl. Acad. Sei. USA, 83; 1986 p. 1911-15. Controlou-se a protecção da infecção da linha de células pela coloração com anticorpos monoclonais contra proteínas víricas, de um modo convencional (Quadro 1). Em todas as experier^ cias fizeram-se comparações com o fármaco AZT como controlo.

A fim de confirmar os resultados, controlaram-se os efeitos do fármaco avaliando a actividade de transcriptase inversa (TI) na linha de células U-937 de células monocíticas humanas, de acordo com o método habitual de ensaio com trifosfato de timidina tritiado (TTP, Quadro 2). Einalmente, mediram-se os efeitos do fármaco sobre a viabilidade celular pelos efeitos citolíticos bem conhecidos de HIV-1 sobre a linha de células MT-4 avaliados do modo habitual (Quadro 1).

Toxicidade

Não se observaram, nos testes citados anteriormente, efeitos tóxicos.

Quadro 1

Inibição de HIV-1 pelos compostos de fórmula geral I em células MT-4

a) Contagem de células viáveis (em cultura de 6 dias), utilizani do 2 ug/ml de composto.

-5 5-

Composto_Viabilidade celular %

Nenhum fármaco		6,	47
AZT			88 ,	6
c i s - X V I			87,	4
trans-XVI			24
cis-XVII(b)			14
cis-XXV			11
cis-XXI			18
cis-XXIII			14
b) Imunofluorescência de P-24
Tempo de cultura		Células imunofluorescentes °á
(Dias )	Nenhum fármaco	2pg/ml AZT		2ug/ml cis-XVI
3	5,9	1,0		—-- 1,0
6	99	1,0		7,6
c ) Ensaio com	transcriptase	inversa
Tempo de cultura		Actividade do	TI	(CPM X 1000)/ml
(Dias)	Nenhum fármaco	2pq/ml AZT		2 pq/ml cis-XVI
3	36,43	1,564		2,381
6	339,0	1,748		2,301

Quadro 2

Inibição da produção de HIV-1 pelos compostos de fórmula geral I em células H-9

Ensaio de transcriptase inversa

Tempo de cultura Actividade de TI (CPM X 1000)/ml

Dias_Nenhum fármaco_2pg/ml AZT 2 pg/ml cis-XVI

5	9,117	3, 346	3,077
8	438,5	3,414	5,853
11	2550	2,918	3,560
14	2002	8,320	2,872
17	584,5	2,997	2,399
21	356,2	3,111	2,907
25	436,4	15,88	4,020
29	92,38	32,08	3,756
33	111 , 1	612,2	3,803
37	32,28	878,2	4,193
41	384,4	994, 0	4,515
45	33,64	32,91	3,441

Claims

1.- Processo para a preparaçao de compostos de fórmula geral na qual

R representa um átomo de hidrogénio, r₂ representa uma base purínica ou pirimidínica ou um seu análogo ou derivado,

Z representa um átomo de enxofre ou um grupo S=0 ou so₂, dos seus isómeros geométricos e ópticos e misturas destes isómeros e ainda derivados de todos estes compostos, aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto (a) de se fazer reagir um composto de fórmula geral ^Rl° (VIII)

-58na qual

R^ representa um átomo de hidrogénio ou um grupo protector do radical hidroxi,

L representa um átomo ou um grupo eliminãvel,

Z tem os significados definidos antes, com uma base de fórmula geral

R^^-H na qual

R₂ tem os significados definidos antes;

(b) de se realizar uma interconversão no grupo da base de um composto de fórmula geral I em um outro composto de fórmula geral I;

(c) de se fazer reagir um composto de fórmula geral

HO (IX)

HZ na qual

R₂ e Z têm os significados definidos antes, com um composto de fórmula geral

PO.

(X)

CHO na qual

P representa um grupo protector, ou (d) de se converter um composto de' fórmula geral na qual

R^ e Z têm os significados definidos antes, em um composto de fórmula geral I;

e de se submeter, eventualmente, o composto preparado nas fases (a) a (d) a uma ou ãs duas reacções seguintes:

(i) eliminação de qualquer grupo protector;

(ii) conversão de um composto de fórmula geral I ou um seu sal em um sal aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.

2.- Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de se obter os compostos de fórmula geral I sob a forma de isómeros cis.

3.- Processo de acordo com as reivindicações 1 ou 2, para a preparação de compostos de fórmula geral I na qual Z representa um ãtomo de enxofre, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.

4.- Processo de acordo com uma qualquer das reivindicações 1 a 3, para a preparação de compostos de fórmula geral I na qual R₂ representa um grupo

N em que R^ representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo C_n_g; R₄ e R- representam, cada um, inãependenremente, um átomo de hidrogénio, bromo, cloro, flúor ou iodo ou um grupo hidroximetilo, trifluorometilo ou alquilo eventualmente saturado e eventualmente substituído,- R_r reDresenta um átomo de hidrogénio O ou um grupo ciano, carboxilo, etoxicarbonilo, carboxamido ^ou tiocarbamoílo; e X e Y representam, cada um, independentemente, um átomo de hidrogénio, bromo, cloro, flúor ou iodo ou um grupo amino ou hidroxi, caracrerizado pelo f acro de se urilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.

5.- Processo de acordo com uma qualguer das reivindicações 1 a 4, para a preparação de compostos de fórmula geral I na gual R^ represenra um grupo de fórmula geral /

-62NHR

R '4 na qual R^ representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo ^Cl-6 ^{e R}4 ^reP^{resenta 111:1} átomo de hidrogénio, bromo, cloro, fluor ou iodo ou um grupo hidroximetilo, trifluorometilo ou alquilo eventualmente substituído e eventualmente saturado, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.

6.- Processo de acordo com uma qualquer das reivindicações 1 a 5 para a preparação de

Cis-2-hidroximetil-5-(citosin-l-il)-1,3-oxatiolano, trans-2-hidroximetil-5-(citosin-1'-il)-1,3-oxatiolano, e as suas misturas ;

Cis-2-benzoiloximetil-5-(citosin-l-il)-1,3-oxatiolano, trans-2-benzoiloximeti1-5-(citosin)-1'-il)-1,3-oxatiolano, e as suas misturas;

Cis-2-hidroximeti1-5-(N'-acetil-citosin-1'-il)-1,3-oxatiolano, trans-2-hidroximeti1-5-(N'-acetil-citosin-1'-il)-1,3-oxatiolano, e as suas misturas;

Cis-2-benzoiloximetil-5-(N'-acetil-citosin-1'-il)-1,3-oxatiolano, trans-2-benzoiloximetil-5-(N'-acetil-citosin-63-

-1'-il)-1,3-oxatiolano, e as suas misturas; e

Cis-2-hidroximetil-5- (citosin-1' -il) -3-oxo-l, 3-oxatiolano ;

Cis-2-hidroximetil-5-(N-dimetilamino-metileno-citosin-1'-il)-1,3-oxatiolano;

Bis-Cis-2-succiniloximetil-5-(citosin-1'-il)-1,3-oxatiolano;

Cis-2-benzoiloximetil-5-(6'-cloropurin-N-9'-il)-1,3-oxatiolano ; trans-2-benzoiloximetil-5-(6'cloropurin-N-9’-il)-1,3-oxatiolano, e as suas misturas;

Cis-2-hidroximetil-5-(6 '-hidroxipurin-N-9'-il)-1,3-oxatiolano;

Cis-2-benzoiloximetil-5-(uracil-N-1'-il)-1,3-oxatiolano, trans-2-benzoiloximetil-5-(uracil-N-1'-il)-1,3-oxatiolano, e as suas misturas;

Cis-2-hidroximetil-5-(uracil-N-1¹-il)-1,3-oxatiolano;

Cis-2-benzoiloximetil-5-(timin-N-1¹-il)-1,3-oxatiolano, trans-2-benzoiloximetil-5-(timin-N-1¹-il)-1,3-oxatiolano, e as suas misturas;

Cis-2-nidroximetil-5-(timin-N-1'-il)-1,3-oxatiolano; e dos seus derivados aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico sob a forma de uma mistura racémica ou de um enantiõmero individual, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.

7,- Processo de acordo com uma qualquer das reivindicações 1 a 5, para a preparação do cis-2-hidroximetil-5-(citosin-1'-il)-1,3-oxatiolano e dos seus derivados aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.

8. - Processo de acordo com uma qualquer das reivindicações 1 a 7, caracterizado pelo facto de se obter os compostos de formula geral I sob a forma de uma mistura racémica.

9. - Processo de acordo com uma qualquer das reivindicações 1 a 7, caracterizado pelo facto de se obter os compostos de fórmula geral I sob a forma de um enantiómero individual.

10.- Processo para a preparação de compostos intermédios de fórmula geral

R,0 (VIII) na qual

R^ representa um átomo de hidrogénio ou um grupo protector do radical hidroxi;

L representa um átomo de iodo, bromo ou cloro, um grupo alcoxicarbonilo ou um grupo de fórmula geral —OR na qual R representa um- grupo alquilo eventualmente substituído ou eventualmente saturado ou acilo aromático ou alifático eventualmente saturado ou eventualmente substituído; e

Z tem os significados definidos antes, caracterizado pelo facto de se fazer reagir un aldeído de fórmula

C₆H₅COOCK₂CHO (VII) com um mercapto-acetal de fórmula hsch₂ch(oc₂h₅)₂ (VI) no seio de um dissolvente orgânico compatível como, por exemplo, tolueno e na presença de um catalisador ãcido como, por exemplo, o ácido p-toluenosulfónico ou um ãcido de Lewis como, por exemplo, cloreto de zinco.

11.- Processo para a preparação de compostos de fórmula geral (IV) na qual

W representa um anião PO.^- ou SPOr ou um gruoo de fórmula

0 0 ^{4 3}

II II qeral -O-C-(CH_) -C-0- na aual n representa um numero 2 n * inteiro de 1 a 10;

J representa um nucleosido ou um seu análogo ou derivado;

Z representa um átomo de enxofre ou um grupo S=0 ou SO?: e R₂ representa uma base purínica ou pirimidínica ou um seu análogo ou derivado, caracterizado pelo facto de se esterificar cada grupo carboxilo ,ζ de um ãcido policarboxílico com um composto de fórmula geral I ou outros nucleosidos ou análogos e os seus derivados.

12.- Processo de acordo com a reivindicação 11, para a preparação de compostos de fórmula geral IV na qual J representa um grupo de fórmula geral na qual Z e R₂ têm os significados definidos antes, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.

13. - Processo de acordo com uma qualquer das reivindicações 1 a 9, caracterizado pelo facto de se utilizar na fase (a) um grupo representado pelo símbolo L escolhido entre átomos de iodo, bromo ou cloro, grupos alcoxi-carbonilo ou grupos de fórmula geral -0R na qual R representa um grupo alquilo eventualmente substituído e eventualmente saturado ou acilo aromático ou alifático eventualmente substituído.

14. - Processo de acordo com uraa qualquer das reivindicações

1 a 9 e 13, caracterizado pelo facto de se fazer reagir na fase (a) um composto de fórmula geral VIII, citada antes, com uma base purínica ou pirimidínica sililada no seio de um dissolvente comf -67- patível e na presença de um ãcido de Lewis ou de trimetilsililtriflato.

15.- Processo para a preparação de composições farmacêuticas utilizadas no tratamento de infecções virais, caracterizado pelo facto de se misturar uma quantidade efectiva de um composto de fórmula geral I quando preparado pelo processo de acordo com a reivindicação 1, como ingrediente activo, ou um seu derivado aceitável sob o ponto de vista farmacêutico, com um veículo aceitável em farmácia.