PT831852E - Nucleósidos com actividade anti-vírus da hepatite b - Google Patents

Nucleósidos com actividade anti-vírus da hepatite b Download PDF

Info

Publication number
PT831852E
PT831852E PT96919349T PT96919349T PT831852E PT 831852 E PT831852 E PT 831852E PT 96919349 T PT96919349 T PT 96919349T PT 96919349 T PT96919349 T PT 96919349T PT 831852 E PT831852 E PT 831852E
Authority
PT
Portugal
Prior art keywords
nucleotide
hydrogens
phosphate moiety
hbv
replaced
Prior art date
Application number
PT96919349T
Other languages
English (en)
Inventor
Jean-Pierre Sommadossi
Jean-Louis Imbach
Raymond F Schinazi
Gilles Grosselin
Original Assignee
Uab Research Foundation
Univ Emory
Centre Nat Rech Scient
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Uab Research Foundation, Univ Emory, Centre Nat Rech Scient filed Critical Uab Research Foundation
Publication of PT831852E publication Critical patent/PT831852E/pt

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7068—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7068—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid
    • A61K31/7072—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid having two oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. uridine, uridylic acid, thymidine, zidovudine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7076—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines containing purines, e.g. adenosine, adenylic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • A61K38/21—Interferons [IFN]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A61K47/543—Lipids, e.g. triglycerides; Polyamines, e.g. spermine or spermidine
    • A61K47/544—Phospholipids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Virology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Description

DESCRIÇÃO "NUCLEÓSIDOS COM ACTIVIDADE ΑΝΤΙ-VÍRUS DA HEPATITE B"
Antecedentes da Invenção
Esta invenção proporciona a utilização de uma quantidade eficaz de um ou mais dos compostos activos aqui revelados, ou de um pró-fármaco ou derivado farmaceuticamente aceitável de um destes compostos, para a preparação de um medicamento para o tratamento de um doente infectado com virus da hepatite B (também referido como "HBV"). 0 HBV é apenas superado pelo tabaco como uma causa do cancro humano. 0 mecanismo pelo qual o HBV induz o cancro é desconhecido, embora seja postulado que possa desencadear, directamente, o desenvolvimento do tumor ou desencadear, indirectamente, o desenvolvimento do tumor através de inflamação crónica, cirrose e regeneração celular associada com a infecção. 0 virus da hepatite B atingiu níveis epidémicos a nível mundial. Após um período de incubação de dois a seis meses, durante o qual o hospedeiro não se apercebe da infecção, a infecção por HBV pode conduzir a hepatite aguda e danos hepáticos, que provocam dor abdominal, icterícia e níveis sanguíneos elevados de certas enzimas. 0 HBV pode provocar hepatite fulminante, uma forma rapidamente progressiva, muitas vezes fatal, da doença, na qual são destruídas grandes secções do fígado. Normalmente, os doentes recuperam da hepatite virai aguda. No entanto, nalguns doentes, os elevados níveis de 1 sangue durante um período antigénio virai persistem no prolongado ou indefinido, provocando uma infecção crónica. As infecções crónicas podem conduzir a hepatite persistente crónica. Os doentes infectados com HBV persistente crónica são muito comuns em países em desenvolvimento. Em meados de 1991, existiam, aproximadamente, 225 milhões de portadores crónicos de HBV apenas na Ásia e quase 300 milhões de portadores a nível mundial. A hepatite persistente crónica pode provocar fadiga, cirrose do fígado e carcinoma hepatocelular, um cancro hepático primário. Nos países ocidentais industrializados, os grupos de elevado risco para a infecção por HBV incluem aqueles em contacto com portadores de HBV ou suas amostras de sangue. A epidemiologia do HBV é, de facto, muito semelhante ao da síndrome da imunodeficiência adquirida, que explica porque a infecção por HBV é comum entre doentes com infecções associadas com SIDA e VIH. No entanto, o HBV é mais contagioso que o VIH.
Os tratamentos diários com interferão-α, uma proteína de engenharia genética manuseada, mostraram ser promissores. Também foi desenvolvida uma vacina derivada de soro humano para imunizar doentes contra o HBV. As vacinas têm sido produzidas através de engenheira genética. Embora a vacina tenha demonstrado ser eficaz, a produção da vacina é problemática porque o fornecimento de soro humano de portadores crónicos é limitado e o processo de purificação é longo e dispendioso. Além disso, cada lote da vacina preparado a partir de soro diferente deve ser testado em chimpanzés, de modo a garantir segurança. Além disso, a vacina não ajuda os doentes já infectados com o vírus. O Pedido de Patente Europeia N° 92304530.6 revela que um grupo de nucleósidos 1,2-oxatiolano são úteis no tratamento de 2 infecções por hepatite B. Foi referido que o 2-hidroximetil-5-(citosin-l-il)-1,3-oxatiolano apresenta actividade anti-hepatite B. Doong, et ai., Proc. of Natl. Acad. Sei. USA, 88, 8495-8499 (1991); Chang, et ai., J. of Biological Chem., Vol 267(20), 13938-13942. A actividade anti-hepatite B dos enantiómeros (+) e (-) do 2-hidroximetil-5-(5-fluorocitosin-l-il)-1,3-oxatiolano foi publicada por Furman, et ai., em Antimicrobial Agents and Chemotherapy, Dez. 1992, páginas 2686-2692. O documento PCT/US92/03144 (Publicação Internacional N° WO 92/18517), apresentado pela Yale University, revela vários β-L-nucleósidos para o tratamento de HBV e VIH. Outros fármacos explorados para o tratamento do HBV incluem adenosina arabinósido, timosina, aciclovir, fosfonoformato, zidovudina, (+)-cianidanol, quinacrina e 2'-fluoroarabinosil-5-iodouracilo.
Um passo essencial no modo de acção dos nucleósidos de purina e pirimidina contra as doenças virais e, em particular, HBV e VIH, é a sua activação metabólica por cinases celulares e virais, para proporcionar derivados mono-, di- e trifosfatos. A espécie biologicamente activa de muitos nucleósidos é a forma trifosfato, que inibe a polimerase de ADN ou a transcriptase reversa ou provoca a interrupção da cadeia. Os derivados nucleósidos que foram desenvolvidos para o tratamento de HBV e VIH até ao momento, foram apresentados para administração, ao hospedeiro, na forma não fosforilada, não obstante o facto de que o nucleósido deve ser fosforilado na célula, antes de exibir o seu efeito antiviral, porque a forma trifosfato foi, normalmente, ou desfosforilada antes de alcançar a célula ou é pouco absorvida pela célula. Em geral, os nucleótidos atravessam as membranas celulares de um modo muito pouco eficaz e não são, geralmente, muito potentes in vitro. As tentativas de modificar 3 nucleótidos para aumentar a absorção e potência dos nucleótidos foram descritas por R. Jones e N. Bischofberger, Antiviral Research, 27 (1995) 1-17. 0 documento WO 93/00910 descreve certos análogos modificados com lipido, para o tratamento de HBV. Hostetler et al., (Antiviral Rsch, 24: 59-67 (1994)) descrevem pró-fármacos de fosfolipido de β-D-didesoxicitidina. Perigand et al., (Bioch. Pharm., 48: 11-14(1994)) revelam a eficácia de fosfotriésteres de β-D-didesoxiadenosina no VIH. À luz do facto de que o virus da hepatite B atingir niveis epidémicos a nivel mundial e ter efeitos graves e, muitas vezes, trágicos nos doentes infectados, existe uma forte necessidade para proporcionar novos agentes farmacêuticos, eficazes para tratar humanos infectados com o virus, que apresentem baixa toxicidade para o hospedeiro.
Assim, é outro objectivo da presente invenção proporcionar uma composição para o tratamento de doentes humanos ou outros hospedeiros infectados com HBV.
Sumário da Invenção A utilização de um pró-fármaco de nucleótido de β-]1-2' , 3' -didesoxiadenosina para a preparação de um medicamento para o tratamento de um doente infectado com a hepatite B, em que: a) o nucleótido é 5'-mono, di- ou tri-fosforilado no carbono 5' ; 4 b) um ou mais hidrogénios na porção fosfato são substituídos por uma porção independentemente seleccionada de alquilo, arilo, esteróide, hidrato de carbono, 1,2-diacilglicerol, álcool e S-acil-2-tioetilo, e c) o nucleótido está, pelo menos, 95% livre do seu β-D-enantiómero oposto.
Numa forma de realização preferida, o nucleósido é proporcionado como o enantiómero indicado e substancialmente na ausência do seu enantiómero correspondente (í. e., na forma enantiomericamente enriquecida).
Um pró-fármaco, como aqui utilizado, refere-se a um derivado farmaceuticamente aceitável do nucleósido especificamente revelado, que é convertido no nucleósido após administração in vivo, ou que apresenta actividade por si próprio. Exemplos não limitantes são derivados acilados ou alquilados de 5' e N6-purina do composto activo. 0 nucleósido é proporcionado como um derivado monofosfato, difosfato ou trifosfato (i. e., um pró-fármaco de nucleótido), por exemplo, um éster, que estabiliza o fosfato in vivo.
Os pró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis revelados de formulações farmaceuticamente aceitáveis de β-Ι,-2' , 3' -didesoxiadenosina contendo estes compostos são úteis na prevenção e tratamento de infecções por HBV e outras patologias relacionados, tais como patologias positivas para anticorpo anti-HBV e positivas para o HBV, inflamação hepática crónica provocada por HBV, cirrose, hepatite aguda, hepatite 5 fulminante, hepatite crónica persistente e fadiga. Estes compostos ou formulações podem também ser utilizados profilaticamente para prevenir ou retardar a progressão da doença clínica em indivíduos que são positivos para o anticorpo anti-HBV ou para o antigénio HBV ou que foram expostos ao HBV.
Numa forma de realização da invenção, um ou mais dos compostos activos é administrado alternado ou combinado com outro ou outros agentes anti-HBV, para proporcionar tratamento anti-HBV eficaz. Exemplos de agentes anti-HBV que podem ser utilizados em terapia alternada ou combinada incluem mas não estão limitados a 2-hidroximetil-5-(5 — fluorocitosin-l-il)-1,3-oxatiolano ("FTC", ver documento WO 92/14743), um seu derivado fisiologicamente aceitável ou um seu sal fisiologicamente aceitável; o 2-hidroximetil-5-(citosin-l-il)-1,3-oxatiolano (incluindo a forma BCH-189 racémica ou 3TC (BCH-189 enriquecido com o (-)-enantiómero)), um seu derivado fisiologicamente aceitável ou um seu sal fisiologicamente aceitável; 2'-fluoro-5-etil-arabinosiluracilo (FEAU); carbovir ou interferão.
Pode ser utilizado qualquer método alternado que proporcione tratamento ao doente. Exemplos não limitantes de padrões alternados incluem 1-6 semanas de administração de uma quantidade eficaz de um agente, seguida por 1-6 semanas de administração de uma quantidade eficaz de um segundo agente anti-HBV. 0 programa alternado pode incluir períodos sem tratamento. A terapia de combinação inclui, geralmente, a administração simultânea de uma proporção eficaz de dosagens de dois ou mais agentes anti-HBV.
Uma vez que o HBV é, muitas vezes, observado em doentes que também são positivos para o anticorpo anti-VIH ou para o 6 antigénio mY, ou que foram expostos ao VIH, os compostos activos anti-HBV aqui revelados ou seus derivados ou pró-fármacos podem ser administrados, na circunstância apropriada, em combinados ou alternados com medicamentos anti-VIH, incluindo mas não limitado a 3'-azido-3'-desoxitimidina (AZT), 2',3'-didesoxiinosina (DDI), 2',3'-didesoxicitidina (ddC), 2',3'-didesoxi-2' , 3' -dide-sidrotimidina (D4T), 2-hidroximetil-5-(5-fluorocitosin-l-il)-1,3-oxatiolano (FTC) ou 2-hidroximetil-5-(citosin-l-il)-1,3-oxatiolano (BCH-189 racémico ou BCH-189 enriquecido com o (-)-enantiómero, 3TC) . Os inibidores da RT não nucleósidos, tais como a classe Tibo de compostos, nevirapina ou pirimidinona podem também ser administrados em combinação com os compostos reivindicados.
Os agentes activos anti-HBV também podem ser administrados em combinação com outros antibióticos, outros compostos antivirais, agentes antifúngicos ou outros agentes farmacêuticos administrados para o tratamento de infecções secundárias.
Numa forma de realização, o nucleósido é proporcionado como um derivado fosfato que é estabilizado para diminuir ou eliminar a desfosforilação antes da entrada na célula infectada. São conhecidos e têm sido publicados na literatura vários grupos do derivado fosfato estabilizado na posição 5' do nucleósido. Numa forma de realização, o nucleósido é administrado como um derivado SATE, como revelado em maior detalhe abaixo. Qualquer derivado fosfato estabilizado alternativo pode ser colocado na posição 5' que não afecte, adversamente, de forma relevante a actividade do composto. 7
Breve Descrição das Figuras A Figura 1 é uma ilustração das estruturas quimicas de β-Ιι-2' , 3' -didesoxicitidina (β-L-ddC) , β-ϋ-2',3'-didesoxicitidina (β-D-ddC), β-ύ-2',3'-didesoxi-5- fluorocitidina (β-L-FddC) , (-) ^-L-2-hidroximetil-5- (5- fluorocitosin-l-il)-1,3-oaatiolano ((-)-β-L-FTC), (+)-β-D-2-hidroximetil-5-(5-fluorocitosin-l-il)-1,3-dioxolano ((+)-β-D-FDOC) e β-]1-2-3ΐη1ηο-β-(R4)-9-[ (4-hidroximetil)-tetra-hidrofuran-l-il]purina. A Figura 2 é uma ilustração do esquema de numeração utilizado na nomenclatura quimica para os nucleósidos neste texto.
Descrição Detalhada da Invenção
Como aqui utilizado, o termo "enantiomericamente pura" refere-se a uma composição de nucleósido que inclui, pelo menos, aproximadamente 95% e, de um modo preferido, aproximadamente, 97%, 98%, 99% ou 100% de um único enantiómero desse nucleósido. O termo alquilo, como aqui utilizado, excepto quando especificado o contrário, refere-se a um hidrocarboneto de Ci a Cio, primário, secundário ou terciário, de cadeia linear, ramificada ou ciclica saturada e inclui, especificamente, metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, t-butilo, pentilo, ciclopentilo, isopentilo, neopentilo, hexilo, iso-hexilo, ciclo-hexilo, ciclo-hexilmetilo, 3-metilpentilo, 2,2-dimetilbutilo e 2,3-dimetilbutilo. O grupo alquilo pode ser opcionalmente substituído com uma ou mais porções seleccionadas do grupo consistindo de hidroxilo, amino, alquilamino, arilamino, alcoxilo, ariloxilo, nitro, ciano, ácido sulfónico, sulfato, ácido fosfórico, fosfato ou fosfonato, quer desprotegido ou protegido como necessário, como conhecido pelos especialistas na técnica, por exemplo, como explicado em Greene, et al., "Protective Groups in Organic Synthesis," John Wiley and Sons, Segunda Edição, 1991. 0 termo alquilo inferior, como aqui utilizado e excepto se especificado em contrário, refere-se a um grupo alquilo Ci a C4, etilo, propilo, butilo, pentilo, hexilo, isopropilo, isobutilo, sec-butilo ou t-butilo.
Como aqui utilizado, o termo acilo inclui, especificamente, mas não está limitado a acetilo, propionilo, butirilo, pentanoilo, 3-metilbutirilo, hidrogenossuccinato, 3-clorobenzoato, benzoílo, acetilo, pivaloílo, mesilato, valerilo, capróico, caprílico, capríco, láurico, miristico, palmitico, esteárico e oleico. 0 termo arilo, como aqui utilizado e excepto se especificado em contrário, refere-se a fenilo, bifenilo ou naftilo e, de um modo preferido, fenilo. 0 grupo arilo pode ser opcionalmente substituído com uma ou mais porções seleccionadas do grupo consistindo de hidroxilo, amino, alquilamino, arilamino, alcoxilo, ariloxilo, nitro, ciano, ácido sulfónico, sulfato, ácido fosfónico, fosfato ou fosfonato, quer desprotegido ou protegido consoante necessário, como conhecido pelos especialistas na técnica, por exemplo, como explicado em Greene, et al., "Protective Groups in Organic Synthesis," John Wiley and Sons, Segunda Edição, 1991. 0 termo base purina ou pirimidina inclui, mas não está limitado a adenina, N6-alquilpurinas, N6-acilpurinas (em que 9 acilo é C(O)(alquilo, arilo, alquilarilo ou arilalquilo), N -benzilpurina, N6-acetilénica, N-halopurina, N6-acilpurina, N6-vinilpurina, purma N-hidroxialquilpurina, N6-tioalquilpurina, N2-alquilpurinas, N2-alquil-6-tiopurinas, timina, citosina, 6-azapirimidina, 2- e/ou 4-mercaptopirimidina, uracilo, C5-alquilpirimidinas, C5-benzilpirimidinas, C5-halopirimidinas, C5-vinilpirimidina, pirimidina C -acetilénica, C5-acilpirimidina, C5-hidroxialquilpurina, C5-amidopirimidina, C-cianopirimidina, C5-nitropirimidina, C5-aminopirimidina, 5-azacitidinilo, 5-azauracililo, triazolopiridinilo, imidazolopiridinilo, pirrolopirimidinilo, pirazolopirimidinilo. Os grupos funcionais de oxigénio e azoto na base podem ser protegidos consoante necessário ou desejado. Os grupos de protecção adequados são bem conhecidos pelos especialistas na técnica e incluem trimetilsililo, dimetil-hexilsililo, t-butildimetilsililo e t-butildifenilsililo, tritilo, grupos alquilo, grupos acilo, tais como acetilo e propionilo, metilsulfonilo e p-toluilsulfonilo.
Como aqui utilizado, o termo aminoácido natural inclui mas não está limitado a, alanilo, valinilo, leucinilo, isoleucinilo, prolinilo, fenilalaninilo, triptofanilo, metioninilo, glicinilo, serinilo, treoninilo, cisteinilo, tirosinilo, asparaginilo, glutaminilo, aspartoilo, glutaoilo, lisinilo, argininilo e histidinilo. A invenção reivindicação 1. como aqui revelada como descrita na 10 I. Estrutura e Preparação de Nucleósidos Activos
Estereoquímica
Os compostos utilizados são enantiómeros de 2' , 3' -didesoxicitidina, 2',3'-didesoxi-5-(halogeno ou metil)citidina, 2-hidroximetil-5-(5-fluorocitosin-l-il)-1,3- dioxolano ou 2-amino-6-(OH, Cl, NH2 ou H)-9-[(4-hidroximetil)-tetra-hidrofuran-l-il]purina.
Uma vez que os carbonos 1' e 4' do açúcar ou porção dioxolanilo (abaixo referido, genericamente, como a porção açúcar) dos nucleósidos são quirais, os seus substituintes não hidrogénio (CH2OR e a base pirimidina ou purina, respectivamente) pode ser cis (no mesmo lado) ou trans (em lados opostos) em relação ao sistema de anel açúcar. Os quatro isómeros ópticos são, por isso, representados pelas seguintes configurações (quando orientando a porção açúcar num plano horizontal, de modo que o oxigénio "primário" (aquele entre os átomos Cl' e C4'; ver Figura 2) esteja atrás): cis (com ambos os grupos "em cima", que corresponde à configuração de nucleósidos que ocorrem naturalmente), cis (com ambos os grupos "em baixo", que é a configuração que ocorre não naturalmente) , trans (com o substituinte C2 "em cima" e o substituinte C5 "em baixo") e trans (com o substituinte C2 "em baixo" e o substituinte C5 "em cima"). Como esquematicamente indicado na Figura 1, os "D-nucleósidos" são nucleósidos cis numa configuração natural e os "L-nucleósidos" são nucleósidos cis na configuração que não ocorre naturalmente.
Os nucleósidos úteis na preparação de um medicamento para o tratamento de infecção por HBV são β-L-enantiómeros, com a 11 excepção de FDOC, que é utilizado na sua forma enantiomérica, porque se verificou que o β-D-enantiómero de FDOC é, surpreendentemente, menos tóxico que o β-L-enantiómero de FDOC.
Formulações de Pró-fármaco 0 nucleósido β-Ιι-2', 3' -didesoxiadenosina aqui revelado pode ser administrado como qualquer derivado que após administração ao receptor, é capaz de proporcionar directamente ou indirectamente, o composto activo derivado ou que exibe actividade por si próprio. Numa forma de realização, o hidrogénio do grupo 5'-OH é substituído por um alquiloCi-C2o, incluindo alquilo Ci a C5; acilo no qual a porção não carbonilo do grupo éster é seleccionada de alquiloCi-C2o linear, ramificada ou cíclica, incluindo alquilo Ci a C5, fenilo ou benzilo; um aminoácido que ocorre naturalmente ou não naturalmente; alcoxialquilo incluindo metoximetilo; aralquilo incluindo benzilo; ariloxialquilo tal como fenoximetilo; arilo incluindo fenilo opcionalmente substituído com halogéneo, alquiloCi a C4 ou alcoxilo Ci a C4; um ácido dicarboxí lico, tal como ácido succínico; ésteres de sulfonato, tal como alquilo ou aralaquilsulfonilo incluindo metanossulfonilo; ou um éster de mono, di ou trifosfato.
Um ou ambos os hidrogénios dos grupos amino na base purina podem ser substituídos por um alquiloCi-C2o, incluindo alquilo Ci a C5; acilo no qual a porção não carbonilo do grupo éster é seleccionada de alquiloCi-C2o linear, ramificada ou cíclica, incluindo alquilo Ci a C5, fenilo ou benzilo; alcoxialquilo incluindo metoximetilo; aralquilo incluindo benzilo; ariloxialquilo, tal como fenoximetilo; arilo incluindo fenilo 12 opcionalmente substituído com halogéneo, alquilo Ci a C4 ou alcoxiloCi a C4. O nucleósido activo também pode ser proporcionado como um 5'-éter de lípido, como revelado na seguinte referências, que são aqui incorporadas por referência: Kucera, L.S., N. Iyer, E. Leake, A. Raben, Modest E.J., D. L.W. e C. Piantadosi. 1990. Novel membrane-interactive ether lipid analogs that inhibit infectious HIV-1 production and induce defective virus formation. AIDS Res Hum Retrovíruses. 6: 491-501/ Piantadosi, C., J. Marasco CJ., S.L. Morris-Natschke, K.L. Meyer, F. Gumus, J.R. Surles, K.S. Ishaq, L.S. Kucera, N. Iyer, C.A. Wallen, S. Piantadosi, e E.J. Modest. 1991. Synthesis and evaluation of novel ether lipid nucleoside conjugates for anti-HIV activity. J Med Chem. 34: 1408-1414; Hostetler, K.Y., D.D. Richman, D.A.
Canon, L.M. Stuhmiller, G.M. T. van Wijk, e H. van den Bosch. 1992. Greatly enhanced inhibition of human immunodeficiency virus type 1 replication in CEM and HT4-6C cells by 3'-deoxythymidine diphosphate dimyristoylglycerol, a lipid prodrug of 3,-deoxythymidine. Antimicrob Agents Chemother. 36: 2025.2029; Hostetler, K.Y., L.M. Stuhmiller, H.B. Lenting, H. van den Bosch, e D.D. Richman, 1990. Synthesis and antiretroviral activity of phospholipid analogs of azidothymidine and other antiviral nucleosides. J. Biol Chem. 265: 6112.7.
Pró-Fármacos de Nucleótidos A β-Β-2',3'-didesoxiadenosina aqui descrita é administrada, ou qualquer outro nucleósido que apresente actividade anti-hepatite B pode ser administrado, como um pró-fármaco de 13 nucleótido para aumentar a actividade, biodisponibilidade, estabilidade ou, de outro modo, alternar as propriedades do nucleósido. São conhecidas vários ligandos do pró-fármaco nucleótido. Um pró-fármaco nucleótido, como aqui descrito, refere-se a uma nucleósido que tem um derivado fosfato na posição 5' que é mais estável in vivo que o fosfato derivado, e que não afecta de modo substancialmente adverso a actividade anti-hepatite B do nucleósido. Os fosfonatos são incluídos como derivados fosfato. Em geral, a alquilação, alcilação ou outra modificação lipofilica do mono, di ou trifosfato do nucleósido irá aumentar a estabilidade do nucleótido. Exemplos de grupos substituintes que podem substituir um ou mais hidrogénios na porção fosfato são alquilo, arilo, esteróides, hidratos de carbono incluindo açúcares, 1,2-diacilglicerol e álcoois. Muitos são descritos em R. Jones e N. Bischofberger, Antiviral Research, 27 (1995) 1-17. Qualquer um destes pode ser utilizado em combinação com o nucleósido β-ύ-2',3'-didesoxiadenosina revelado, para alcançar um efeito desejado. Exemplos de pró-fármacos de nucleótidos são descritos nas seguintes referências.
Ho, D.H.W. (1973) Distribution of Kinase and deaminase of Ιβ-D-arabinofuranosylçytosine in tissues of man and muse. Câncer Res. 33, 2816-2820/ Holy, A. (1993) Isopolar phosphorous-modified nucleotide analogues. Em: De Clercq (Ed.), Advances in Antiviral Drug Design, Vol. I, JAI Press, pp. 179-231; Hong, C.L, Nechaev, A., e West, C.R. (1979a) Synthesis and antitumor activity of Ιβ-D-arabinofuranosylcytosine conjugates of cortisol and cortisone. Biochem. Biophys. Rs. Commun. 88, 1223-1229; Hong, C.I., Nechaev, A., Kirisits, A.J. Buchheit, DJ. e West, C.R. (1980) Nucleoside conjugates as potential antitumor agents. 3. Synthesis and antitumor activity of 1-(β-D-arabinofuranosyl)cytosine conjugates of corticosteriods 14 and selected lipophilic alcohols. J. Med. Chem. 28, 171-177; Hostetler, K.Y., Stuhmiller, L.M., Lenting, H.B.M. van den Bosch, H. e Richman, D.D. (1990) Synthesis and antiretroviral activity of phospholipid analogs of azidothymidine and other antiviral nucleosides. J. Biol. Chem. 265, 6112-6117; Hostetler, K.Y., Carson, D.A. e Richman, D.D. (1991); Phosphatidylazidothymidine: mechanism of antiretroviral action in CEM cells. J. Biol. Chem. 266, 11714-11717; Hostetler, K.Y., Korba, B. Sridhar, C., Gardener, M. (1994a) Antiviral activity of phosphatidyl-dideoxycytidine in hepatitis B-infected cells and enhanced hepatic uptake in mice. Antiviral Res. 24, 59-67; Hostetler, K.Y., Richman, D.D., Sridhar, C.N. Felgner, P.L, Felgner, J., Ricci, J., Gardener, M.F. Selleseth, D.W. e Ellis, M.N. (1994b) Phosphatidylazidothymidine and phosphatidyl-ddC: Assessment of uptake in mouse lymphoid tissues and antiviral activities in human immunodeficiency virus-infected cells and in rauscher leukemia virus-infected mice. Antimicrobial Agents Chemother. 38, 2792-2797; Hunston, R.N., Jones, A.A. McGuigan, C., Walker, R.T., Balzarini, J., e De Clercq, E. (1984) Synthesis and biological properties of some cyclic phosphotriesters derived from 2'-deoxy-5-fluorouridine. J. Med. Chem. 27, 440-444; Ji, Y.H., Moog, C., Schmitt, G., Bischoff, P. e Luu, B. (1990); Monophosphoric acid diesters of 7β-hydroxycholesterol and of pyrimidine nucleosides as potential antitumor agents: synthesis and preliminary evaluation of antitumor activity. J. Med. Chem. 33, 2264-2270; Jones, A.S., McGuigan, C., Walker, R.T., Balzarini, J. e DeClercq, E. (1984) Synthesis, properties, and biological activity of some nucleoside cyclic phosphoramidates. J. Chem. Soc. Perkin Trans. I, 1471-1474; Juodka, B.A. e Smrt, J. (1974) Synthesis of ditribonucleoside phosph(P->N) amino acid derivatives. Coll. Czech. Chem. Comm. 39, 363-968; Kataoka, S., Imai, J., Yamaji, 15 N., Kato, Μ., Saito, Μ., Kawada, Τ. e Imai, S. (1989) Alkylacted cAMP derivatives; selective synthesis and biological activities. Nucleic Acids Res. Sym. Ser., 21, 1-2; Kataoka, S., Uchida, R. e Yamaji, N. (1991) A convenient synthesis of adenosine 3',5'cyclic phosphate (cAMP) benzyl and methyl triesters. Heterocycles 32, 1351-1356; Kinchington, D., Harvey, J.J., 0'Connor, T.J., Jones, B.C.N.M., Devine, K.G., Taylor-Robinson, D., Jeffries, D.J. e McGuigan, C. (1992) Comparison of antiviral effects of zidovudine phosphoramidate and phosphorodiamidate derivatives against HIV and ULV in vitro. Antiviral Chem. Chemother. 3, 107-112; Kodama, K., Morozumi, M., Saitoh, K.I., Kuninaka, H., Yoshino, H. e Saneyoshi, M. (1989) Antitumor activity and pharmacology of Ι-β-D-arabinofuranosylcytosine-S'-stearylphosphate; an orally active derivative of Ι-β-D-arabinofuranosylcytosine. Jpn. J. Câncer Res. 80, 679-685; Korty, M. e Engels, J. (1979) The effects of adenosine- and guanosine 3',5'phosphoric and acid benzyl esters on guinea-pig ventricular myocardium. Naunyn-Schmiedeberg's Arch. Pharmacol. 310, 103-111; Kumar, A., Goe, P.L., Jones, A.S. Walker, R.T. Balzarini, J. e De Clercq, E. (1990) Synthesis and biological evaluation of some cyclic phosphoramidate nucleoside derivatives. J. Med. Chem. 33, 2368-2375; LeBec, C., e Huynh-Dinh, T. (1991) Synthesis of lipophilic phosphate triester derivatives of 5-fluorouridine and arabinocytidine as anticancer prodrugs. Tetrahedron Lett. 32,6553-6556; Lichtenstein, J., Barner, H.D. e Cohen, S.S. (1960) The metabolism of exogenously supplied nucleotides by Escherichia coli., J. Biol. Chem. 235, 457-465; Lucthy, J., Von Daeniken, A., Friederich, J. Manthey, B., Zweifel, J., Schlatter, C. e Benn, M.H. (1981) Synthesis and toxicological properties of three naturally occurring cyanoepithioalkanes. Mitt. Geg. Lebensmittelunters. Hyg. 72, 131-133 (Chem. Abstr. 95, 127093); McGuigan, C. Tollerfield, 16 S.M. e Riley, P.A. (1989) Synthesis and biological evaluation of some phosphate triester derivatives of the anti-viral drug Ara. Nucleic Acids Res. 17, 6065-6075; McGuigan, C., Devine, K.G., O'Connor, T.J., Galpin, S.A., Jeffries, D.J. e Kinchington, D. (1990a) Synthesis and evaluation of some novel phosphoramidate derivatives of 3'-azido-3'-deoxythymidine (AZT) as anti-HIV compounds. Antiviral Chem. Chemother. 1, 107-113; McGuigan, C., 0'Connor, T.J., Nicholls, S.R. Nickson, C. e Kinchington, D. (1990b) Synthesis and anti-IUV activity of some novel substituted dialky phosphate derivatives of AZT and ddCyd. Antiviral Chem. Chemother. 1, 355-360; McGuigan, C., Nicholls, S.R., 0'Connor, T.J., e Kinchington, D. (1990c) Synthesis of some novel dialkyl phosphate derivative of 3'-modified nucleosides as potential anti-AIDS drugs. Antiviral Chem. Chemother. 1, 25-33; McGuigan, C., Devine, K.G., 0'Connor, T.J., e Kinchington, D. (1991) Synthesis and anti-HIV activity of some haloalky phosphoramidate derivatives of 3'-azido-3'deoxythylmidine (AZT); potent activity of the trichloroethyl methoxyalaninyl compound. Antiviral Res. 15, 255-263; McGuigan, C., Pathirana, R.N., Mahmood, N., Devine, K.G. e Hay, A.J. (1992) Aryl phosphate derivatives of AZT retain activity against HIV 1 in cell lines which are resistant to the action of AZT. Antiviral Res. 17, 311-321; McGuigan, C., Pathirana, R.N., Choi, S.M., Kinchington, D. e 0'Connor, T.J. (1993a) Phosphoramidate derivatives of AZT as inhibitors of HIV; studies on the carboxyl terminus. Antiviral Chem. Chemother. 4, 97-101; McGuigan, C., Pathirana, R.N., Balzarini, J. e De Clercq, E. (1993b) Intracellular delivery of bioactive AZT nucleotides by aryl phosphate derivatives of AZT. J. Med. Chem. 36, 1048-1052.
Alky hydrogen phosphonate derivatives of the anti-HIV agent AZT may be less toxic than the parent nucleoside analogue. 17
Antiviral Chem. Chemother. 5, 271-277; Meyer, R. B., Jr., Shuman, D.A. e Robins, R.K. (1973) Synthesis of purine nucleoside 3',5'-cyclic phosphoramidates. Tetrahedron Lett. 269-272; Nagyvary, J. Gohil, R.N., Kirchner, C.R. e Stevens, J.D. (1973) Studies on neutral esters of cyclic AMP, Biochem. Biophys. Res. Commun. 55, 1072-1077; Namane, A. Gouyette, C.,
Fillion, M.P., Fillion, G. e Huynh-Dinh, T. (1992) Improved brain delivery of AZT using a glycosyl phosphotriester prodrug. J. Med. Chem. 35, 3039-3044; Nargeot, J. Nerbonne, J.M. Engels, J. e Leser, H.A. (1983) Natl. Acad. Sei. U.S.A. 80, 2395-2399; Nelson, K.A., Bentrude, W.G., Stser, W.N. e Hutchinson, J.P. (1987) The question of chair-twist equilibria for the phosphate rings of nucleoside cyclic 3',5'monophosphates. 1HNMR and x-ray crystallographic study of the diasteromers of thymidine phenyl cyclic 3',5'-monophosphate. J. Am. Chem. Soc. 109, 4058-4064;
Nerbonne, J.M., Richard, S., Nargeot, J. e Lester, H.A. (1984) New photoactivatable cyclic nucleotides produce intracellular jumps in cyclic AMP and cyclic GMP concentrations. Nature 301, 74-76; Neumann, J.M., Hervé, M., Debouzy, J.C., Guerra, F.I., Gouyette, C., Dupraz, B. e Huynh-Dinh, T. (1989) Synthesis and transmembrane transport studies by NMR of a glucosyl phospholipid of thymidine. J. Am. Chem. Soc. 111, 4270-4277;
Ohno, R., Tatsumi, N., Hirano, M., Imai, K. Mizoguchi, H., Nakamura, T., Kosaka, M., Takatuski, K., Yamaya, T., Toyama, K., Yoshida, T., Masaoka, T., Hashimoto, S., Ohshima, T., Kimura, I., Yamada, K. e Kimura, J. (1991) Treatment of myelodysplastic syndromes with orally administered Ι-β-D-rabinofuranosylcytosine -5'stearylphosphate. Oncology 48, 451-455. Palomino, E., Kessle, D. and Horwitz, J.P. (1989) A dihydropyridine carrier system for sustained delivery of 2',3'dideoxynucleosides to the brain. J. Med. Chem. 32, 622-625; Perkins, R.M., Barney, S., Wittrock, R.,
Clark, P.H., Levin, R. Lambert, D.M., Petteway, S.R., 18
Serafinowska, H.T., Bailey, S.M., Jackson, S., Harnden, M.R. Ashton, R., Sutton, D., Harvey, J.J. e Brown, A.G. (1993) Activity of BRL47923 and its oral prodrug, SB203657A against a rauscher murine leukemia vírus infection in mice. Antiviral Res. 20 (Suppl. I). 84; Piantadosi, C., Marasco, C.J., Jr., Morris-
Natschke, S.L., Meyer, K.L., Gumus, F., Surles, J.R., Ishaq, K.S., Kucera, L.S. Iyer, N., Wallen, C.A., Piantadosi, S. e Modest, E.J. (1991) Synthesis and evaluation of novel ether lipid nucleoside conjugates for anti-HIV-1 activity. J. Med. Chem. 34, 1408-1414; Pompon, A., Lefebvre, I., Imbach, J.L.,
Kahn, S. e Faiquhar, D. (1994) Decomposition pathways of the mono- and bis(pivaloyloxymethyl) esters of azidothymidine-5'-monophosphate in cell extract and in tissue culture médium; an application of the 'on-line ISRP-cleaning' HPLC technique. Antiviral Chem. Chemother. 5, 91-98; Postemark, T. (1974) Cyclic AMP and cyclic GMP. Annu. Rev. Pharmacol. 14, 23-33; Prisbe, E.J., Martin, J.C.M., McGee, D.P.C., Barker, M.F., Smee, D.F. Duke, A.E., Matthews, T.R. e Verheyden, J.P.J. (1986) Synthesis and antiherpes virus activity of phosphate an phosphonate derivatives of 9-[(1,3-dihydroxy-2-propoxy)methyl] guanine. J. Med. Chem. 29, 671-675; Pucch, F., Gosselin, G., Lefebvre, I.,
Pompon, A., Aubertin, A.M. Dim, A. e Imbach, J.L. (1993) Intracellular delivery of nucleoside monophosphate through a reductase-mediated activation process. Antiviral Res. 22, 155-174; Pugaeva, V.P., Klochkeva, S.I., Mashbits, F.D. e Eizengart, R.S. (1969).
Toxicological assessment and health Standard ratings for ethylene sulfide in the industrial atmosphere. Gig. Trf. Prof. Zabol. 13, 47-48 (Chem. Abstr. 72, 212); Robins, R.K. (1984) The potential of nucleotide analogs as inhibitors of retrovíruses and tumors. Pharm. Res. 11-18; Rosowsky, A., Kim. S.H., Ross e 19 J. Wick, M.M. (1982) Lipophilic 5'-(alkylphosphate) esters of Ι-β-D-arabinofuranosylcytosine and its N4-acyl and 2.2'-anhydro-3'0-acyl derivatives as potential prodrugs. J. Med. Chem. 25, 171-178; Ross, W. (1961) Increased sensitivity of the walker turnout towards aromatic nitrogen mustards carrying basic side chains following glucose pretreatment. Biochem. Pharm. 8, 235-240; Ryu, e.K., Ross, R.J. Matsushita, T., MacCoss, M., Hong, C.I. e West, C.R. (1982). Phospholipid-nucleoside conjugates. 3. Synthesis and preliminary biological evaluation of Ι-β-D-arabinofuranosylcytosine 5'diphosphate[-], 2-diacylglycerols. J. Med. Chem. 25, 1322-1329; Saffhill, R. e
Hume, W.J. (1986) The degradation of 5-iododeoxyurindine and 5-bromoeoayuridine by serum from different sources and its consequences for the use of these compounds for incorporation into DNA. Chem. Biol. Interact. 57, 347-355; Saneyoshi, M.,
Morozumi, M., Kodama, K., Machida, J., Kuninaka, A. e Yoshino, H. (1980) Synthetic nucleosides and nucleotides. XVI. Synthesis and biological evaluations of a series of Ι-β-D-arabinofuranosylcytosine 5'-alky or arylphosphates. Chem. Pharm. Buli. 28, 2915-2923; Sastry, J.K., Nehete, P.N., Khan, 5., Nowak, B.J., Plunkett, W., Arlinghaus, R.B. e Farquhar, D. (1992) Membrane-permeable dideoxyuridine 5'-monophosphate analogue inhibits human immunodeficiency virus infection. Mol. Pharmacol. 41, 441-445; Shaw, J.P., Jones, R.J. Arimilli, M.N.,
Louie, M.S., Lee, W.A. e Cundy, K.C. (1994) Oral bioavailability of PMEA from PMEA prodrugs in male Sprague-Dawley rats. 9th Annual AAPS Meeting. San Diego, CA (Abstract) . Shuto, S., Ueda,
5., Imamura, S., Fukukawa, K. Matsuda, A. e Ueda, T. (1987) A facile one-step synthesis of 5'phosphatidylnucleosides by an enzymatic two-phase reaction. Tetrahedron Lett. 28, 199-202;
Shuto, S., Itoh, H., Ueda, S., Imamura, S., Kukukawa, K., Tsujino, M., Matsuda, A. e Ueda, T. (1988) A facile enzymatic 20 synthesis of 5'- (3-sn-phosphatidyl)nucleosides and their antileukemic activities. Chem. Pharm. Buli. 36, 209-217. Um grupo pró-fármaco fosfato preferido é o grupo S-acil-2-tioetilo, também referido como "SATE".
Preparação dos Compostos Activos
Os nucleósidos utilizados na preparação de um medicamento para o tratamento de infecções por HBV, num organismo hospedeiro, podem ser preparados de acordo com os métodos publicados. Os β-L-nucleósidos podem ser preparados a partir de métodos revelados, ou modificações convencionais de métodos revelados, por exemplo, nas seguintes publicações: Jeong, et al., J. of Med. Chem., 3_6, 182-195, 1993; Pedido de Publicação de Patente Europeia N° 0285884; Génu-Dellac, C., G. Gosselin, A.-M. Aubertin, G. Obert, A. Kim, e J.-L. Imbach, 3-Substituted thymine α-L-nucleoside derivatives as potential antiviral agents; synthesis and biological evaluation, Antiviral Chem, Chemother. 2:83-92 (1991); Johansson, K. N. G., B. G. Lindborg, e R. Noreen, Pedido de Patente Europeia 352248; Mansuri, Μ. M., V. Farina, J. E. Starrett, D. A. Benigni, V. Brankovan e J. C. Martin, Preparation of the geometric isomers of ddC, ddA, D4C and D4T as potential anti-HIV agents; Bioorg, Med, Chem, Lett, 1:65-68(1991); Fujimori, S., N. Iwanami, Y. Hashimoto e K. Shudo, A convenient and stereoselective synthesis of 2'-deoxy-p-L-ribonucleosides, Nucleosides & Nucleotides 11:341-349 (1992); Génu-Dellac, C., G. Gosselin, A.-M. Aubertin, G. Obert, A. Kim, e J.-L. Imbach, 3-Substituted thymine α-L-nucleoside derivatives as potential antiviral agents; synthesis and biological evaluation, Antiviral Chem. Chemother. 2:83-92 (1991); Holy, A, Synthesis of 2'-deoxy-L-uridine, Tetrahedron Lett. 2: 21 189-192 (1992)/ Holy, A., Nucleic acid components and their analogs. CLIII. Preparation of 2'-deoxy-L-ribonucleosides of the pyrimidine series. Collect Czech Chem Coinmun. 37:4072-4087 (1992); Holy, A, 2'-deoxy-L-uridine: Total synthesis of a uracil 2'-deoxynucleoside from a sugar 2-aminooxazoline through a 2.2'-anhydronucleoside intermediate. Em: Townsend LB, Tipson RS, ed. Nucleic Acid Chem. New York: Wiley, 1992: 347-353. vol 1) (1992); Okabe, M., R.-C. Sun, S. Tan, L. Todaro e D. L. Coffen, Synthesis of the dideoxynucleosides ddC and CNT from glutamic acid, ribonolactone, and pyrimidine bases. J Org Chem. 53: 4780-4786 (1988); Robins, M. J., T. A. Khw j a e R. K. Robins. Purine nucleosides. XXTX. Synthesis of 21-deoxy-L-adenosine and 21-deoxy-L-guanosine and their alpha anomers. J Org Chem. 35:363-639 (1992); Génu-Dellac. C., Gosselin G., Aubertin A-M,
Obert G., Kim A. e Imbach J-L, 3'-Substituted thymine α-L-nucleoside derivatives as potential antiviral agents; synthesis and biological evaluation. Antiviral Chem. Chemother, 2(2): 83-92 (1991); Génu-Dellac, C., Gosselin G., Imbach J-L;
Synthesis of new 2'-deoxy-3'-substituted-a-L-threo- pentofuranonucleosides of thymine as a potential antiviral agents. Tet Lett 32(1):79-82 (1991); Génu-Dellac, C., Gosselin G., Imbach J-L. Preparation of new acylated derivatives of L-arabino-furanose and 2-deoxy-l-erythro-pentofuranose as precursors for the synthesis of 1-pentofuranosyl nucleosides. 216: 240-255 (1991); e Génu-Dellac, C., Gosselin G., Puech F, et al. Systematic synthesis and antiviral evaluation of a-L-arabinofuranosyl and 2'-deoxy-a-L-erythro-pentofuranosyl nucleosides of the five naturally occurring nuclei acid bases. 10 (b) : 1345-1376 (1991) . A 2',3'-didesoxicitidina (ddC) é um composto conhecido. O D-enantiómero da DDC está actualmente a ser comercializado por 22
Hoffman-LaRoche sob o nome Zalcitabine para utilização no tratamento de pessoas infectadas com VIH. Ver Patentes U.S. N° 4879277 e 4900828.
Os β-D-dioxolano-nucleósidos enantiomericamente puros, tais como β-D-FDOC podem ser preparados como revelado em detalhe no documento PCT/US91/09124. O processo envolve a preparação inicial de (2R,4R)- e (2R,4S)-4-acetoxi-2-(oximetil protegido)-dioxolano a partir de 1,6-anidromanose, um açúcar que contém toda a estequiometria necessária para o produto final enantiomericamente puro, incluindo a configuração diastereomérica correcta em redor da posição 1 do açúcar (que se torna a posição 4' no nucleósido formado em último). O (2R,4R)-e (2R,4S)-4-acetoxi-2-(oximetil protegido)-dioxolano é condensado com uma base heterociclica desejada na presença de SnCl4, outro ácido de Lewis ou triflato de trimetilsililo num solvente orgânico, tal como dicloroetano, acetonitrilo ou cloreto de metileno, para proporcionar o dioxolano-nucleósido estereoquimicamente puro.
Os métodos enzimáticos para a separação dos enantiómeros D e L de cis-nucleósidos são revelados em, por exemplo,
Nucleosides and Nucleotides, 12(2), 225-236 (1993); Pedidos de
Patente Europeia N° 92304551.2 e 92304552.0 apresentados por Biochem Pharma, Inc.; e Publicações PCT N° WO 91/11186, WO 92/14729 e WO 92/14743 apresentados por Emory University. A separação da mistura racémica acilada ou alquilada de enantiómeros D e L de cis-nucleósidos pode ser efectuada por cromatografia liquida de alto desempenho com fases estacionárias quirais, como revelado na Publicação PCT N° WO 92/14729. 23 0 derivado mono, di e trifosfato dos nucleósidos activos podem ser preparados como descrito de acordo com os métodos publicados. 0 monofosfato pode ser preparado de acordo com o processo de Imai et al., J. Qrg. Chem., 34(6), 1547-1550 (Junho de 1969). O difosfato pode ser preparado de acordo com o processo de Davisson et al., J. Qrg. Chem., 52(9), 1794-1801 (1987). O trifosfato pode ser preparado de acordo com o processo de Hoard et al., J. Am. Chem. Soc., 87(8), 1785-1788 (1965).
Processos Gerais para a Preparação de Bis(S-acil-2-tioetil)Fosfoéster de β-L-didesoxinucleósidos [Bis (SATE) β-L ddx MP]
Bis(SATE)β-L-ddxMP Y1, Y2, Y3 e Y4 são independentemente H, OH, N3, NR^2, NO2, NOR3, -O-alquilo, -O-arilo, halo (incluindo F, Cl, Br ou I) , -CN, -C(0)NH2, SH, -S-alquilo ou -S-arilo e em que, tipicamente, três de Y1, Y2, Y3 e Y4 são quer H ou OH. O substituinte -OH, quando 24 presente, é tipicamente um grupo Y1 ou Y3. Como ilustrado na estrutura, Y2 e Y4 estão na configuração arabino (eritro) e Y1 e Y3 estão na configuração treo (ribose) . A base é uma purina ou pirimidina. Alternativamente, a porção pseudo-açúcar é um 1,3-oxatiolano (como em FTC e BCH-189 ou 3TC) ou é um derivado de 1,3-di oxo lano. (i) ICH2CH2OH, DBU/C6H5CH3; (ii) Cl2PN(iPr)2. NEts/THF; (iii) β-L-didesoxinucleósido, lH-tetrazole/THF, depois, foi adicionado ClC6H4C03H/CH2Cl2lH-Tetrazole (0,21 g, 3,0 mmol) a uma solução agitada de β-L-didesoxinucleósido (1,0 mmol) e a fosforamidite C apropriada (1,2 mmol) em tetra-hidrofurano (2 mL) à temperatura ambiente. Após 30 minutos, a mistura reaccional foi arrefecida para -40 °C e foi adicionada uma solução de ácido 3-cloroperoxibenzóico (0,23 g, 1,3 mmol) em diclorometano (2,5 mL); a mistura foi depois deixada a aquecer até à temperatura ambiente durante 1 h. Foi adicionado sulfito de sódio (solução a 10%, 1,3 mL) à mistura para destruir o excesso de ácido 3-cloroperoxibenzóico, após o qual a camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi lavada com diclorometano (2 x 10 mL) . As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com hidrogenocarbonato de sódio aquoso saturado (5 mL) , depois água (3x5 mL) , secas sob sulfato de sódio, filtradas e evaporadas até à secura sob pressão reduzida. A cromatografia em coluna do residuo em silica gel proporcionou o Bis(SATE) β-L-ddxMP do titulo. 25 de EXEMPLO = bis(2-pivaloiltioetil)fosfato p-L-2',3'-didesoxiadenosin-5'-ilo [Bis (SATE) β-L-ddAMP]. -PN(iPr)s 2 (CHjJjC— ^CH2-0 S—CH* p-L-ddA, lH-treazole/THF depois, CIC6CO3H/CH2CI2 depois, cromatogra£ia em coluna de silica gel NHj O O (CHjíjC-C^ xCH2-o4~P j2
N
N
Bis (SATE) β-L-ddAMP
Seguindo o processo geral anterior, o Bis (SATE) β-L-ddAMP^ puro foi obtido como um óleo incolor num rendimento de 72% após cromatografia em coluna de silica gel [eluente: gradiente faseado de metanol (0-3%) em diclorometano] ; ^MN (DMSO - dô) δ ppm: 8,26 e 8,13 (2s, cada um 2H, H-2 e H-8) , 7,20 (br s, 2H, NH2), 6,24 (t, 1H, H-l'; J=6, 0 Hz), 4,35-4,25 (m, 1H, H-4'), -4,00 (m, 2H, H-5', 5"), 3, 96 (m, 4H, 2 SCH2CH2O) , 3,04 (t, 2 SCH2CH2O; J = 6,3 Hz), 2,5- -2,4 (m, 2H, H-2',2") 2,2-2,0 (m, H-3',3"), 1,15 [s, 18H, 2 (CH3) 3C] ; RMN de 31P (DMSQ-de) 1 δ = -0,76 (s) ; UV (EtOH) , ^max = 259 nm (ε 15400); espectro de massa (efectuado em: glicerol, tioglicerol, 1:1, v/v), FAB>0 604 (M+H)+, 136 (BH2) + . 26
Esquema geral para a sintese estereoespecifica de β-L-didesoxinucleósidos substituídos em 3'
OH
Composto 8 [Ver Fig. 1/2 da patente Francesa]
Ver Anexo 4 i iJ γ -t/ ox i
Base conf iguração _«eritro»
HO
O
II II V =acil (CHj-C, CeHj-C) X = Grupo abandonante [CH3 SO2, CH3 ΟδΗ4 SO2, CF3 SO2] Y, Y' = F, N3, NR4R2 [Ri,R2 = H, alquilo, arilo], NO2, NOR [R = H, alquilo, acilo], O-alquilo, O-arilo, etc. 27
Esquema Geral para a Síntese Estereoespecifica de β-L-didesoxinucleósidos substituídos em 2'
OM
I
RO
1 Baa· I ) HO configuração «eritro»
Bas*
o o
II II V =acil [CHj-C QHj-C] X = Grupo abandonante [CH3 SO2, CH3 06¾ SO2, H, CF3 SO2] Y, Y' = F, N3, NRíRz [Ri,R2 = H, alquilo, arilo], NO2, NOR [R = H, alquilo, acilo], 0-alquilo, 0-arilo, etc. 28 ezo
OH °'/V° ÓZ QHjCoci
I ^ / piridina HO / (CHjQ)j °—/-Z° (CH,Si)jSiH. AIBN /Tolueno L-Xilose
(CH3)2CO, H2S04, CuS04 Depois NH4OH ^l/^2^/depois NaHC0s/H20 OBz .o-Jywxn^ CH)COOH BzO CjHjN-CHCIi (CHjCO)jO h,so4
^OAc condensação glicosidica &t° BzO 1) CHjOOOH 85» I h,so4 I 2) (CHjOO)jO.
<*OAc
AcO O-3
á I -olá 8*° Já
O piridina Nh2NH2 H20 /piridina - CHaCOOH OBzBzO
Base condensação glicosidica 3-]Λ Aco\/In·.....12 )C*H^C(S)a I DMAP/CHjCN I ) BojSnH. AIBN * /dioxano OBz BzO-
I CHjONa / CHjOH ou NHj / CHjOHBase
-oJL2 2) BujSoH. AIBN /Tolueno ____—. Base o Jfl jf (R*eMTf) 'L OU p (ReTBOPSi) ou
-0‘ £ O6 NHj/CHjOH 1 OH | _ flacf3/ H0V- 1 o 2 /CHjOH (R“ Bzer Ac) RC1 /piridina IOH i 0βββ t)QHjOC(5)CI RO DMAP/CHjQJ 2)BojSnH, AIBN /dioxano 3/
Base
‘0* j
Bases = purinas ou pirimidinas, eventualmente,
Esquema I:protegidas de um modo conveniente; R = Benzoílo (Bz), Acetilo (Ac) , monornetoxitritilo (mMTr)(TBDPSI) ou terc-butildifenilsililo 29 II. Actividade Anti-HBV dos Nucleósidos A capacidade dos compostos activos em inibir o HBV pode ser determinada através de várias técnicas experimentais. O ensaio aqui utilizado para avaliar a capacidade dos compostos revelados para inibir a replicação do HBV é descrito em detalhe em Korba e Gerin, Antiviral Res. 19: 55-70 (1992). Apenas para objectivos de ilustração, os resultados da avaliação da toxicidade e actividade anti-HBV são proporcionados abaixo para 3-L-2',3'-didesoxicitidina (β-L-ddC), B-L-2',3'-didesoxi-5-auorocitidina (β-L-FddC) e (+)-p-D-2-hidroximetil-5-(5-fluorocitosin-l-il)-1,3-dioxolano ((+)-B-D-FPOC). A toxicidade e actividade anti-HBV de (-)-p-L-2-hidroximetil-5-(5-fluorocitosin-l-il)-1,3-oxatiolano ( (-)-β-L-FTC) e β-ϋ-2',3'-didesoxicytidina (β-D-ddC) são incluídos como controlo. Os outros compostos aqui revelados podem ser avaliados de um modo semelhante.
As amostras de β-L-ddC e β-L-S-FddC utilizadas nos ensaios anti-HBV foram caracterizadas como abaixo. 2 1,31 -Didesoxi^-L-citidina (β-L-ddC) . p.f. = 220-220 °C; UV (EtOH 95) max 273 nm, Xmin 252 nm; RMN de 2Η (DMSO-d6) õppm = 7,89 (d. 1H. H-6; J = 7,4 Hz). 7,15-6,95 (d largo, 2H, NH2) , 5,91 (dd. 1H, H-l'; J = 3,0 e 6,5 Hz), 5,66 (d, 1H, H-5; J = 7,4 Hz), 4,99 [t 1H, OH-5'; J - 5,2 Hz]. 4,05-3, 95 (m, 1H, H-4' ) , 3,60-3,70 (m, 1H, H-5'; após troca por D2O: dd, 3,64 ppm, J = 3, 6 e 12,0 Hz). 3, 60-3, 50 (m. 1H, H-5~; após troca por D20: dd, 3,50 ppm, J = 4,1 e 12,0 Hz), 2,30-2,15 (m. 1H, H-2' ) , 1,9-1,65 (m. 3H, H-2", 3' e 3"); [a] D20-103, 6 (c 0,8 MeOH) ; espectro de massa (efectuado em: glicerol-tioglicerol, 50:50. v/v); 30 FAB>0423 [2Μ+Η]+, 304 [M+glicerol+H]+. 212 [M+H]+, 112 [13¾]% 101 [s]+; FAB<0 210 [M-H]". Anal. Cale. para C9H13N3O3 (M = 211,21); C 51,18; H 6,20; N 19,89 verificado; C 51,34; H 6,25; N 20,12. 2 1,3 ' -Didesoxi-p-L-5-fluorocitidina__(β-Ιι-5-FddC) . p.f. = 158-160 °C; UV (EtOH 95) Àmax 281 nm (ε, 8100) e 237 nm (ε, 8500); min 260 nm (ε, 5700) e 225 nm (ε, 7800); RMN de XH (DMSO-d6) õppm 8,28 (d, 1H, H-6; J = 7,4 Hz), 7,7-7,4 (d largo, 2H, NH2) , 5,83 (dd pouco resolvida, 1H, H-l'), 5,16 (t, 1H,
OH-5'; J = 5,1 Hz), 4,05-3,95 (m, 1H, H-4'), 3,8-3,70 [m, 1H, H 5'; após troca por D20: dd, 3,71 ppm. J = 2,7 e 12,3 Hz], 3,60-3,50 [m. 1H, H-5"; após troca por D20: dd, 3,52 ppm; J = 3,3 e 12,3 Hz], 2,35-2,15 (m, 1H, H-2'), 1,95-1,75 (m, 3H, H-2", 3' e 3"): [oí]d20-80,0 (— c 1,0, DMSO) ; Espectro de massa [efectuado em: álcool 3-nitrobenzílico] FAB>0 230 [M+H]+ e 101 [s]+; FAB<0 228 [M-II]-. Anal. Calculada para CgH^NsFOs (M = 229,21); C 47,16; H 5,28; N 18,33, F 8,29, Verificada. C 16,90; H 5,28; N 18,07; F 8,17 .
As avaliações antivirais foram efectuadas em duas passagens de células separadas, duas culturas por passagem (4 culturas no total). Todos os poços, em todas as placas, foram semeados à mesma densidade e ao mesmo tempo.
Devido a variações inerentes aos niveis do ADN do HBV intracelular e extracelular, apenas depressões superiores a 3,0 vezes (para o ADN do virião HBV) ou 2,5 vezes (para intermediários da replicação do ADN de HBV) a partir de niveis médios destas formas de ADN de HBV em células não tratadas são, geralmente, consideradas como sendo estatisticamente significativas [P<0,05] (Korba e Gerin, Antiviral Res. 19: 55-70, 1992). Os niveis de ADN de HBV integrado em cada 31 preparação de ADN celular (que nestas experiências permanece constante numa base por célula) foram utilizados para calcular os niveis de formas de ADN de HBV intracelular eliminando, deste modo, as variações técnicas inerentes nos ensaios de hibridação por transferência.
Os valores tipicos para o ADN do virião de HBV extracelular em células não tratadas variam de 50 a 150 pg/mL de meio de cultura (em média, aproximadamente, 76 Pg/mL). Os intermediários da replicação de ADN de HBV intracelular em células não tratadas variam de 50 a 100 pg/yg de ADN de célula (em média, aproximadamente, 74 pg/pg de ADN de célula). Em geral, as depressões nos níveis de ADN de HBV intracelular devido ao tratamento com compostos antivirais são menos pronunciadas e ocorrem mais lentamente do que depressões nos niveis de ADN do virião HBV.
Para referência, o modo pelo qual foram efectuadas as análises de hibridação para estas experiências, resultam numa equivalência de, aproximadamente, 1,0 pg de ADN de HBV intracelular/pg de ADN celular para 2-3 cópias genómicas por célula e 1,0 pg de ADN de HBV extracelular/mL de meio de cultura para 3 x 105 de partículas viárias/mL.
As análises de toxicidade foram efectuadas de modo a avaliar se qualquer um dos efeitos antivirais observados fora devido a um efeito geral na viabilidade celular. O método utilizado foi baseado na entrada de corante vermelho neutro, um ensaio convencional e amplamente utilizado para a viabilidade celular em vários sistemas vírus-hospedeiro, incluindo HSV (vírus herpes simplex) e VIH. 32
Os compostos de teste foram utilizados na forma de soluções armazenamento curto 40 mM em DMSO (congeladas em gelo seco) . Foram preparadas aliquotas diárias das amostras teste e congeladas a -20 °C para que cada aliquota individual possa ser submetida a um único ciclo de congelação-descongelação. As aliquotas de teste diárias foram descongeladas, suspensas em meio de cultura à temperatura ambiente e imediatamente adicionadas às culturas celulares. Os compostos foram testados a 0,01 até 10 μΜ para a actividade antiviral. Os compostos foram testados para a toxicidade a concentrações de 1 a 300 μΜ. Os resultados são proporcionados na Tabela 1.
Tabela 1 EFEITO DE D-ddC, L-ddC, L-FddC, FDOC e (-)-FTC CONTRA O VÍRUS DA HEPATITE B EM CÉLULAS HEPG-2 (2.2.15) TRANSFECTADAS Composto Viriã< EC50 SD 3 HBV“ ECg0 SD RI HE EC50 SD 1V“ EC90 SD Citotoxicidade ic50_sd índice de Selectividade IC50 / EC90 Virião RI β-D-ddC 1,3 0,2C 1, 5_0, 7 2,1 0,3 9,4 2,5 8.1 1,7 3.2 0,6 12,0_2,4 11,0_2,0 219 28c 216 22 104 23 18 20 β-L-ddC 0,033_0,003 Cs] O 1 1—1 1—1 0,107 0,012 cs] 0 1 co t—1 493 64 448 274 β-L-FddC O O 1 CM O O co 0 1 0 0 OJ O 1 co CM to 0 1 co 438 57 1,460 91 (+)-β-D-FDOC 0,020_0,003 0,195_0,027 0,062 0,012 0,23_0,02 251 23 1,287 1,091 (-)-β-L-FTC 0,017_0,005 CM O O 1 LO 0 0,049 0,008 CO 0 0 1 co 0 292 13 1, 947 1, 622 a ADN Extracelular b Intermediários Replicativos (ADN Intracelular) c μΜ 33
Exemplo 2 Toxicidade dos Compostos
Foi avaliada a capacidade dos compostos activos para inibirem o crescimento de virus em culturas celulares 2.2.15 (células HepG2 transformadas com virião da hepatite). Como ilustrado na Tabela 1, não foi observada toxicidade significativa (superior a 50% de depressão nos níveis de absorção do corante, observados em células não tratadas) para qualquer um dos compostos de teste, a concentrações de 100 μΜ. Os compostos foram moderadamente tóxicos a 300 μΜ, no entanto, todos os três compostos exibiram menos toxicidade a esta concentração que o β-D-ddC. Parece que o IC50 do β-L-ddC e β-L-FddC é, aproximadamente, duas vezes superior ao do β- D-ddC.
As análises de toxicidade foram efectuadas em placas de cultura de tecidos de fundo plano de 96 poços. As células para as análises de toxicidade foram cultivadas e tratadas com os compostos de teste com o mesmo calendário como utilizado para as avaliações antivirais. Cada composto foi testado em 4 concentrações, cada um em culturas em triplicado. A absorção de corante vermelho neutro foi utilizada para determinar o nível relativo de toxicidade. A absorvância do corante internalizado a 510 nM (A510) foi utilizada para a análise quantitativa. Os valores são apresentados como uma percentagem dos valores médios de A510 (± desvios padrões) em 9 culturas separadas de células não tratadas mantidas na mesma placa de 96 poços como os compostos de teste. A percentagem de absorção de corante nas 9 culturas de controlo na placa 40 foi de 100 ± 3. Nestes ensaios, a 150-190 μΜ de β-D-ddC, é tipicamente observada uma redução de 2 vezes na absorção de corante (versus os níveis observados em 34 culturas não tratadas) (Korba e Gerin, Antiviral Res. 19: 55-70, 1992).
Exemplo 3 Actividade Anti-Vírus da Hepatite B O controlo de tratamento positivo, β-ϋ-2',3'-didesoxicitosina [β-D-ddC], induziu depressões significativas na replicação do ADN de HBV na concentração utilizada. Estudos anteriores indicaram que com 9-12 μΜ de β-D-ddC, é tipicamente observada uma depressão de 90% na RI de HBV (em relação a niveis médios em células não tratadas), neste sistema de ensaio (Korba e Gerin, Antiviral Res. 19: 55-70, 1992). Isto é consistente com os dados apresentados na Tabela 1.
Os dados apresentados na Tabela 1 indicam que todos os três compostos de teste ((β-L-FddC), (β-L-ddC) e β-D-FDOC)), foram potentes inibidores da replicação do HBV, provocando depressão do ADN do virião do HBV e RI do HBV para um nivel comparável ao, ou superior ao, observado após tratamento com β-D-ddC.
Exemplo 4 seleccionados contra a B em células Hep G-2 O efeito dos derivados β-L replicação do virus da Hepatite transfectadas é descrito na Tabela 4. 35
Tabela 1: Efeito de derivados L contra a replicação do virus da Hepatite B em células Hep G-2 (2.2.15) transfectadas.
Composto Viriãoa DBV EC50 RIb HBV EC50 Citotoxicidade IC50 índice de Selectividade IC50/EC50 Virião RI β-L-ddA u 0 LO O LO 250 50 50 Bis (Sate) β-L-ddAMP 0,45 0,35 200 445 571 β-L-AZT >10 >10 1000 NA NA Bis (Sate) β-L-AZTMP 7,5 8 200 27 25 2 ' -F^-L-5FddC 1,7 O LO 210 124 42 a ADN Extracelular b Intermediários Replicativos (ADN Intracelular) c μΜ
Exemplo 5 0 Efeito inibidor comparativo dos trifosfatos seleccionados na ADN polimerase do virus da hepatite de marmota é apresentado na Tabela 5. 36
Tabela 2: Actividades inibidoras comparativas de trifosfatos de L-nucleósido na ADN polimerase do virus da hepatite de marmota e na ADN polimerase <x e β humana.
Inibidor ADN Pol de WHB ADN Pol α ADN Pol β IC50 (μΜ) Ki(μΜ) Ki (μΜ) β-L-AZTPP 0,2 >100 > 100 β-L-ddATP 2,1 >100 > 100 3-TC-TP 1,0 >100 > 100 β-ύ-5ΕάάΟΤΡ 2,0 >100 > 100 III. Preparação de Composições Farmacêuticas
Os compostos aqui revelados e seus sais farmaceuticamente aceitáveis, pró-fármacos e derivados são úteis na prevenção e tratamento de infecções por HBV e outras patologias relacionadas, tais como patologias positiva para anticorpo anti-HBV e positiva para HBV, inflamação hepática crónica provocada por HBV, cirrose, hepatite aguda, hepatite fulminante, hepatite crónica persistente e fadiga. Estes compostos ou formulações podem também ser utilizados profilaticamente para prevenir ou retardar a progressão doença clinica em indivíduos que são positivos para o anticorpo anti-HBV ou antigénio HBV ou que foram expostos ao HBV.
Os humanos que sofrem de qualquer uma destas patologias podem ser tratados por administração, ao doente, de uma quantidade eficaz de tratamento para HBV de um ou uma mistura dos compostos activos aqui descritos ou um seu sal ou derivado farmaceuticamente aceitável, opcionalmente num veiculo ou 37 diluente farmaceuticamente aceitável. Os materiais activos podem ser administrados por qualquer via apropriada, por exemplo, oralmente, parentericamente, intravenosamente, intrademicamente, subcutaneamente ou topicamente, numa forma liquida ou sólida. 0 composto activo é incluindo no veiculo ou diluente farmaceuticamente aceitável numa quantidade suficiente para distribuir, a um doente, uma quantidade terapeuticamente eficaz, sem provocar efeitos tóxicos graves num doente tratado.
Uma dose preferida do composto activo para todas as patologias acima mencionadas estará na gama desde cerca de 1 a 60 mg/kg, de um modo preferido, 1 a 20 mg/kg, de peso corporal por dia, de um modo mais geral, 0,1 até cerca de 100 mg por quilograma de peso corporal do receptor por dia. A gama de dosagem eficaz dos derivados farmaceuticamente eficazes pode ser calculada com base no peso do nucleósido derivado a ser distribuído. Se o derivado exibir actividade por ele próprio, a dosagem eficaz pode ser estimada como acima, utilizado o peso do derivado, ou por outros meios conhecidos pelos especialistas na técnica. Numa forma de realização, o composto activo é administrado como descrito no produto inserido ou Physician's Desk Reference para 3'-azido-3'-desoxitimidina (AZT), 2',3'-didesoainoaina (DDI), 2',3'-didesoxicitidina (ddC) ou 2',3,'-didesoxi-2',3'-dide-hidrotimidina (D4T) para a infecção por VIH. O composto é convenientemente administrado em qualquer forma de dosagem unitária adequada, incluindo mas não limitada a uma contendo 7 a 3000 mg, de um modo preferido, 70 a 1400 mg de ingrediente activo por forma de dosagem unitária. É normalmente conveniente uma dosagem oral de 50-1000 mg. 38
Idealmente, o ingrediente activo deve ser administrado para alcançar concentrações plasmáticas máximas do composto activo de cerca de 0,2 a 70 μΜ, de um modo preferido, cerca de 1,0 a 10 μΜ. Isto pode ser alcançado, por exemplo, pela injecção intravenosa de uma solução 0,1 a 5% do ingrediente activo, opcionalmente, em solução salina ou administrada como um bolus do ingrediente activo. O composto activo pode ser proporcionado na forma de sais farmaceuticamente aceitáveis. Como aqui utilizado, o termo sais ou complexos farmaceuticamente aceitáveis refere-se a sais ou complexos dos nucleósidos que retêm a actividade biológica desejada do composto derivado e exibe efeitos toxicológicos indesejados minimos, se alguns. Exemplos não limitantes de tais sais são (a) sais de adição de ácido formados com ácidos inorgânicos (por exemplo, ácido cloridrico, ácido bromidrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, ácido nitrico e semelhantes) e sais formados com ácidos orgânicos, tais como ácido acético, ácido oxálico, ácido tartárico, ácido succinico, ácido málico, ácido ascórbico, ácido benzóico, acido tânico, ácido pamóico, ácido alginico, ácido poliglutâmico, ácidos naftalenossulfónico, ácidos naftalenodissulfónicos e ácido poligalacturónico; (b) sais de adição de base formados com catiões, tais como sódio, potássio, zinco, cálcio, bismuto, bário, magnésio, aluminio, cobrem, cobalto, níquel, cádmio, sódio, potássio e semelhantes ou com um catião orgânico formado a partir de N,N-dibenziletileno-diamina, amónio ou etilenidiamina; ou (c) combinações de (a) e (b) ; e. g., um sal de tanato de zinco ou semelhante. 39
As modificações do composto activo, especificamente nas posições N6 ou N4 e 5'-0, podem afectar a biodisponibilidade e taxa de metabolismo das espécies activas proporcionado, assim, controlo sobre a distribuição das espécies activas. A concentração do composto activo na composição do fármaco irá depender das taxas de absorção, inactivação e excreção do fármaco, bem como outros factores conhecidos para os especialistas na técnica. Deve notar-se que os valores da dosagem irão também variar com a gravidade da patologia a ser aliviada. É também evidente que para qualquer indivíduo em particular, os regimes de dosagem específicos devem ser ajustados ao longo do tempo de acordo com a necessidade individual e a decisão da pessoa que está a administrar ou supervisionar a administração das composições, e que as gamas de concentração aqui estabelecidas são apenas exemplos e não têm como intenção limitar o âmbito ou prática da composição reivindicada. 0 ingrediente activo pode ser administrado de uma vez, ou pode ser dividido em várias doses mais pequenas a serem administradas a tempos com intervalos variados.
Um modo de administração preferido do composto activo é a oral. As composições orais irão, geralmente, incluir um diluente inerte ou um veículo comestível. Podem ser incluídas em cápsulas de gelatina ou preparadas em comprimidos. Para o propósito de administração terapêutica oral, o composto activo pode ser incorporado com excipientes e utilizado na forma de comprimidos, pastilhas ou cápsulas. Os agentes de ligação farmaceuticamente compatíveis e/ou materiais adjuvantes podem ser incluídos como parte da composição. 40
Os comprimidos, pílulas, cápsulas, pastilhas e semelhantes, podem conter qualquer um dos seguintes ingredientes ou compostos de uma natureza semelhante: um ligando, tal como celulose microcristalina, goma de tragacanto ou gelatina; um excipiente, tal como amido ou lactose, um agente desintegrante, tal como ácido algínico, Primogel ou amido de milho; um lubrificante, tal como estearato de magnésio ou Sterotes; um deslizante, tal como dióxido de silício coloidal; um agente adoçante, tal como sacarose ou sacarina; ou um agente aromatizante, tal como hortelã-pimenta, salicilato de metilo ou aroma de laranja. Quando a forma de dosagem unitária é uma cápsula, pode conter, para além do material do tipo anterior, um veículo líquido, tal como um óleo gordo. Além disso, as formas de dosagem unitárias podem conter muitos outros materiais que modificam a forma física da dosagem unitária, por exemplo, revestimentos de açúcar, goma-laca ou outros agentes entéricos. 0 composto activo ou seu sal ou derivado farmaceuticamente aceitável pode ser administrado como um componente de um elixir, suspensão, xarope, hóstia, pastilha elástica ou semelhante. Um xarope pode conter, para além dos compostos activos, sacarose como um agente adoçante e certos conservantes, corantes e tintas e aromas. O composto activo, ou seu sal ou derivado farmaceuticamente aceitável, pode também ser misturado com outros materiais activos que não prejudiquem a acção desejada, ou com materiais que suplementem a acção desejada, tal como antibióticos, antifúngicos, anti-inflamatórios ou outros antivirais, incluindo agentes anti-HBV, anticitomegalovírus ou anti-VIH. 41
As soluções ou suspensões utilizadas para aplicação parentérica, intradérmica, subcutânea ou tópica podem incluir os seguintes componentes: um diluente estéril, tal como água para injecção, solução salina, óleos fixos, polietilenoglicóis, glicerina, propilenoglicóis ou outros solventes sintéticos; agentes antibacterianos, tais como álcool benzilico ou parabenos de metilo; antioxidantes, tais como ácido ascórbico ou bissulfito de sódio; agentes quelantes, tais como ácido etilenodiaminotetraacético; tampões, tais como acetatos, citratos ou fosfatos e agentes para o ajuste da tonicidade, tais como cloreto de sódio ou dextrose. A preparação parentérica pode ser incluída em ampolas, seringas ou frascos de doses múltiplas descartáveis feitos de vidro ou plástico.
Se administrada intravenosamente, os veículos preferidos são solução salina fisiológica ou solução salina tamponada com fosfato (PBS). Numa forma de realização preferida, os compostos activos são preparados com veículos que irão proteger o composto contra a rápida eliminação do corpo, tal como formulação de libertação controlada, incluindo implantes e sistemas de distribuição microencapsulados. Podem ser utilizados polímeros biocompatíveis biodegradáveis, tais como acetato de etilenovinilo, polianidridos, ácido poliglicólico, colagénio, poliortoésteres e ácido poliláctico. Os métodos para a preparação de tais formulações serão evidentes para os especialistas na técnica. Os materiais também podem ser obtidos comercialmente de Alza Corporation e Nova Pharmaceuticals, Inc.
As suspensões lipossomais (incluindo lipossomas direccionados para células infectadas com anticorpos monoclonais para antigénios virais) são também preferidas como veículos farmaceuticamente aceitáveis. Estas podem ser preparadas de 42 acordo com os métodos conhecidos pelos especialistas na técnica, por exemplo, como descrito na Patente U.S. N° 4522811.
Por exemplo, as formulações lipossomais podem ser preparadas por dissolução do(s) lipido(s) apropriado(s) (tais como estearoilfosfatidiletanolamina, estearoilfosfatidilcolina, aracadoilfosfatidilcolina e colesterol) num solvente inorgânico que é, depois, evaporado deixando para trás um filme fino, de lipido seco, na superfície do recipiente. É depois introduzida uma solução aquosa do composto activo ou seu derivado monofosfato, difosfato e/ou trifosfato no recipiente. 0 recipiente é depois agitado à mão para libertar o material lipídico dos lados do recipiente e para dispersar os agregados lipídicos formando, assim, a suspensão lipossomal.
Esta invenção foi descrita com referência às suas formas de realização preferidas. As variações e modificações da invenção serão óbvias aos especialistas na técnica a partir da descrição anterior detalhada da invenção.
Lisboa, 24 de Janeiro de 2007 43

Claims (23)

  1. REIVINDICAÇÕES 1. Utilização de um pró-fármaco de nucleótido de p-L-2',3'-didesoxiadenosina para a preparação de um medicamento, para o tratamento de um doente infectado com hepatite B, em que: a) o nucleótido é 5'-mono, di-, ou tri-fosforilado no carbono 5'; b) um ou mais hidrogénios na porção fosfato são substituídos por uma porção independentemente seleccionada de alquilo, arilo, esteróide, hidrato de carbono, 1,2-diacilglicerol, álcool e S-acil-2-tioetilo, e c) o nucleótido está, pelo menos, 95% livre do seu β-D-enantiómero oposto.
  2. 2. Utilização da reivindicação 1, em que o nucleótido é um monofosfato.
  3. 3. Utilização da reivindicação 1, em que o nucleótido é um difosfato.
  4. 4. Utilização da reivindicação 1, em que o nucleótido é um trifosfato.
  5. 5. Utilização da reivindicação 1, em que um ou mais hidrogénios na porção fosfato são substituídos por alquilo. 1
  6. 6. Utilização da reivindicação 1, em que um ou mais hidrogénios na porção fosfato são substituídos por arilo.
  7. 7. Utilização hidrogénios esteróide. da reivindicação 1, em que um ou mais na porção fosfato são substituídos por um
  8. 8. Utilização hidrogénios hidrato de da reivindicação na porção fosfato carbono. 1, em que um são substituídos ou mais por um
  9. 9. Utilização da reivindicação 1, em que um ou mais hidrogénios na porção fosfato são substituídos por 1,2-diacilglicerol.
  10. 10. Utilização da reivindicação 1, em que um ou mais hidrogénios na porção fosfato são substituídos por um álcool.
  11. 11. Utilização da reivindicação 1, em que o nucleósido é fosforilado e um dos hidrogénios na porção fosfato é substituído por um grupo S-acil-2-tioetilo de fórmula -CH2-CH2-S-C(0)-C(CH3)3.
  12. 12. Utilização da reivindicação 1, compreendendo também a utilização no tratamento de uma quantidade eficaz de um segundo composto seleccionado do (-)-enantiómero ou mistura racémica de 2-hidroximetil-5-(5-fluorocitosin-l-il)-1,3-oxatiolano ou seu sal fisiologicamente aceitável; um enantiómero ou mistura racémica de 2'-fluoro-5-etil- arabinosiluracilo (FEAU) ou seu sal fisiologicamente aceitável; carbovir ou interferão. 2
  13. 13. Pró-fármaco do nucleótido de β-]1-2' , 3' -didesoxiadenosina, em que: a) o nucleótido é 5'-mono, di-, ou tri-fosforilado no carbono 5'; b) um ou mais hidrogénios na porção fosfato são substituídos por uma porção independentemente seleccionada de alquilo, arilo, esteróide, hidrato de carbono, 1,2-diacilglicerol, álcool e S-acil-2-tioetilo, e c) o nucleótido está, pelo menos, 95% livre do seu β-D-enantiómero oposto.
  14. 14. Pró-fármaco do nucleótido da reivindicação 13, em que o nucleótido é um monofosfato.
  15. 15. Pró-fármaco do nucleótido da reivindicação 13, em que o nucleótido é um difosfato.
  16. 16. Pró-fármaco do nucleótido da reivindicação 13, em que o nucleótido é um trifosfato.
  17. 17. Pró-fármaco do nucleótido da reivindicação 13, em que um ou mais hidrogénios na porção fosfato são substituídos por alquilo.
  18. 18. Pró-fármaco do nucleótido da reivindicação 13, em que um ou mais hidrogénios na porção fosfato são substituídos por arilo. 3
  19. 19. Pró-fármaco do nucleótido da reivindicação 13, em que um ou mais hidrogénios na porção fosfato são substituídos por um esteróide.
  20. 20. Pró-fármaco do nucleótido da reivindicação 13, em que um ou mais hidrogénios na porção fosfato são substituídos por um hidrato de carbono.
  21. 21. Pró-fármaco do nucleótido da reivindicação 13, em que um ou mais hidrogénios na porção fosfato são substituídos por um 1,2-diacilglicerol.
  22. 22. Pró-fármaco do nucleótido da reivindicação 13, em que um ou mais hidrogénios na porção fosfato são substituídos por um álcool.
  23. 23. Composição farmacêutica compreendendo o pró-fármaco da reivindicação 13. Lisboa, 24 de Janeiro de 2007 4
PT96919349T 1995-06-07 1996-06-07 Nucleósidos com actividade anti-vírus da hepatite b PT831852E (pt)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US48571695A 1995-06-07 1995-06-07

Publications (1)

Publication Number Publication Date
PT831852E true PT831852E (pt) 2007-02-28

Family

ID=23929192

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PT96919349T PT831852E (pt) 1995-06-07 1996-06-07 Nucleósidos com actividade anti-vírus da hepatite b

Country Status (11)

Country Link
US (4) US6245749B1 (pt)
EP (2) EP0831852B1 (pt)
JP (2) JP4413996B2 (pt)
AT (1) ATE346651T1 (pt)
AU (1) AU722214B2 (pt)
CA (1) CA2219132C (pt)
DE (1) DE69636734T2 (pt)
DK (1) DK0831852T3 (pt)
ES (1) ES2276404T3 (pt)
PT (1) PT831852E (pt)
WO (1) WO1996040164A1 (pt)

Families Citing this family (42)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6069252A (en) * 1990-02-01 2000-05-30 Emory University Method of resolution and antiviral activity of 1,3-oxathiolane nucleoside enantiomers
WO1995007086A1 (en) * 1993-09-10 1995-03-16 Emory University Nucleosides with anti-hepatitis b virus activity
US20020120130A1 (en) 1993-09-10 2002-08-29 Gilles Gosselin 2' or 3' -deoxy and 2', 3' -dideoxy-beta-L-pentofuranonucleo-side compounds, method of preparation and application in therapy, especially as anti- viral agents
AU722214B2 (en) 1995-06-07 2000-07-27 Centre National De La Recherche Scientifique (Cnrs) Nucleosides with anti-hepatitis B virus activity
US20030100532A1 (en) * 1997-02-14 2003-05-29 Gary S. Jacob Use of n-substituted-1,5-dideoxy-1,5-imino-d-glucitol compounds in combination therapy for treating hepatitis virus infections
EP1754710A3 (en) * 1998-02-25 2007-12-19 Emory University 2'-Fluoroncucleosides
ES2276515T3 (es) * 1998-02-25 2007-06-16 Emory University 2'-fluoronucleosidos.
KR100886653B1 (ko) 1998-02-25 2009-03-04 에모리 유니버시티 2'-플루오로뉴클레오사이드
US6531590B1 (en) * 1998-04-24 2003-03-11 Isis Pharmaceuticals, Inc. Processes for the synthesis of oligonucleotide compounds
US6444652B1 (en) 1998-08-10 2002-09-03 Novirio Pharmaceuticals Limited β-L-2'-deoxy-nucleosides for the treatment of hepatitis B
MXPA01001507A (es) 1998-08-10 2003-09-10 Novirio Pharmaceuticals Ltd °l-2'desoxi-nucleosidos para el tratamiento de hepatitis b.
KR100618028B1 (ko) 1998-11-05 2006-08-30 쌍트르 나쉬오날 드 라 르쉐르스 쉬앙티피끄 항-ｂ형 간염 활성을 가진 뉴클레오시드
US6407077B1 (en) 1998-11-05 2002-06-18 Emory University β-L nucleosides for the treatment of HIV infection
US6545021B1 (en) * 1999-02-12 2003-04-08 G.D. Searle & Co. Use of substituted-1,5-dideoxy-1,5-imino-D-glucitol compounds for treating hepatitis virus infections
US6121437A (en) * 1999-03-16 2000-09-19 Isis Pharmaceuticals, Inc. Phosphate and thiophosphate protecting groups
US6787526B1 (en) 2000-05-26 2004-09-07 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating hepatitis delta virus infection with β-L-2′-deoxy-nucleosides
US6875751B2 (en) 2000-06-15 2005-04-05 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 3′-prodrugs of 2′-deoxy-β-L-nucleosides
EP1411954B1 (en) 2000-10-18 2010-12-15 Pharmasset, Inc. Modified nucleosides for treatment of viral infections and abnormal cellular proliferation
US7589077B2 (en) 2001-05-18 2009-09-15 Rakesh Kumar Antiviral nucleosides
US7049303B2 (en) * 2001-11-07 2006-05-23 Medical Research Council Inhibition of viruses
US7211570B2 (en) 2001-12-20 2007-05-01 Pharmasset, Inc. Treatment of EBV and KHSV infection
SE521676C2 (sv) * 2002-01-02 2003-11-25 Dilafor Ab Användning av glykosaminoglykaner för prevention och behandling av värksvaghet vid fullgången graviditet
TWI244393B (en) 2002-08-06 2005-12-01 Idenix Pharmaceuticals Inc Crystalline and amorphous forms of beta-L-2'-deoxythymidine
WO2004024095A2 (en) 2002-09-13 2004-03-25 Idenix (Cayman) Limited ß-L-2'-DEOXYNUCLEOSIDES FOR THE TREATMENT OF RESISTANT HBV STRAINS AND COMBINATION THERAPIES
CN1293884C (zh) * 2002-10-29 2007-01-10 南京长澳医药科技有限公司 6－甲氧基双脱氧鸟苷在制备抗乙肝药物中的应用
WO2004041837A1 (en) * 2002-10-31 2004-05-21 Metabasis Therapeutics, Inc. Novel cytarabine monophosphate prodrugs
KR20060008297A (ko) 2003-03-20 2006-01-26 마이크로 바이올로지카 퀴미카 이 파마슈티카 리미티드 2'-데옥시-β-Ｌ-뉴클레오시드의 제조방법
US20040200730A1 (en) * 2003-04-14 2004-10-14 Kyo Jibiki Hydrometallurgical copper recovery process
US7595390B2 (en) 2003-04-28 2009-09-29 Novartis Ag Industrially scalable nucleoside synthesis
BRPI0412031A (pt) 2003-06-30 2006-09-19 Idenix Cayman Ltd sìntese de beta-l-2'-deóxi-nucleosìdeos
NO324263B1 (no) * 2005-12-08 2007-09-17 Clavis Pharma Asa Kjemiske forbindelser, anvendelse derav ved behandling av kreft, samt farmasoytiske preparater som omfatter slike forbindelser
GB0625283D0 (en) * 2006-12-19 2007-01-24 Cyclacel Ltd Combination
US7951789B2 (en) 2006-12-28 2011-05-31 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
WO2011123586A1 (en) 2010-04-01 2011-10-06 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
EP2691409B1 (en) 2011-03-31 2018-02-21 Idenix Pharmaceuticals LLC. Compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
US9487534B2 (en) 2011-08-02 2016-11-08 Scripps Research Institute, A Not-For-Profit Public Benefit Corporation Of California Modulators of virus assembly as antiviral agents
HRP20220911T1 (hr) 2013-09-11 2022-10-28 Emory University Sastav nukleotida i nukleozida i njihova uporaba
EP3105238A4 (en) 2014-02-13 2017-11-08 Ligand Pharmaceuticals, Inc. Prodrug compounds and their uses
WO2016003812A1 (en) 2014-07-02 2016-01-07 Ligand Pharmaceuticals, Inc. Prodrug compounds and uses therof
JOP20170038B1 (ar) * 2016-02-12 2021-08-17 Merck Sharp & Dohme مركبات للاستخدام لعلاج عدوى بفيروس hiv والوقاية منه
CN111788196A (zh) 2018-01-09 2020-10-16 配体药物公司 缩醛化合物及其治疗用途
WO2022204014A1 (en) * 2021-03-25 2022-09-29 Per Os Biosciences, Llc. Compositions and methods for treating coronavirus

Family Cites Families (83)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4000137A (en) 1975-06-10 1976-12-28 American Home Products Corporation Antitumor derivatives of periodate-oxidized nucleosides
US4140761A (en) 1977-04-11 1979-02-20 The United States Of America As Represented By The Department Of Health, Education & Welfare Modification of hepatitis B virus infection in chronic carriers of hepatitis B surface antigen
JPS5668674A (en) 1979-11-08 1981-06-09 Shionogi & Co Ltd 5-fluorouracil derivative
US5223263A (en) 1988-07-07 1993-06-29 Vical, Inc. Liponucleotide-containing liposomes
US4724232A (en) * 1985-03-16 1988-02-09 Burroughs Wellcome Co. Treatment of human viral infections
WO1987001284A1 (en) 1985-08-26 1987-03-12 United States Of America, Represented By The Unite Inhibition of in vitro infectivity and cytopathic effect of htlv-iii/lav by 2',3'-dideoxynosine, 2',3'-dideoxyguanosine, or 2',3'-dideoxyadenosine
US4879277A (en) 1985-08-26 1989-11-07 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Antiviral compositions and methods
ATE190064T1 (de) 1985-09-17 2000-03-15 Wellcome Found Kombination therapeutische nukleoside mit weiteren therapeutisch wirksamen komponenten.
US4916122A (en) 1987-01-28 1990-04-10 University Of Georgia Research Foundation, Inc. 3'-Azido-2',3'-dideoxyuridine anti-retroviral composition
US4788181A (en) * 1986-09-29 1988-11-29 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services 5-substituted-2',3'-dideoxycytidine compounds with anti-HTLV-III activity
US4963533A (en) 1986-10-24 1990-10-16 Stichting Rega Vzw (Rega) Therapeutic application of dideoxycytidinene
AU613026B2 (en) 1987-03-24 1991-07-25 Nycomed As 2',3' dideoxyribofuranoxide derivatives
US5185437A (en) 1987-04-09 1993-02-09 Burroughs Wellcome Co. Therapeutic nucleosides
SE8701605D0 (sv) 1987-04-16 1987-04-16 Astra Ab Novel medicinal compounds
WO1989002733A1 (en) 1987-09-22 1989-04-06 The Regents Of The University Of California Liposomal nucleoside analogues for treating aids
US5270315A (en) 1988-04-11 1993-12-14 Biochem Pharma Inc. 4-(purinyl bases)-substituted-1,3-dioxlanes
NZ228645A (en) 1988-04-11 1991-09-25 Iaf Biochem Int 1,3-dioxolane derivatives substituted in the 5th position by a purine or pyrimidine radical; treatment of viral infections
US5047407A (en) 1989-02-08 1991-09-10 Iaf Biochem International, Inc. 2-substituted-5-substituted-1,3-oxathiolanes with antiviral properties
US5466806A (en) 1989-02-08 1995-11-14 Biochem Pharma Inc. Processes for preparing substituted 1,3-oxathiolanes with antiviral properties
US5041449A (en) 1988-04-11 1991-08-20 Iaf Biochem International, Inc. 4-(nucleoside base)-substituted-1,3-dioxolanes useful for treatment of retroviral infections
US4900828A (en) 1988-05-12 1990-02-13 Hoffmann-Laroche Inc. Intermediate compounds and an improved procedure for the synthesis of 2',3'-dideoxycytidine
GB8815265D0 (en) 1988-06-27 1988-08-03 Wellcome Found Therapeutic nucleosides
SE8802687D0 (sv) 1988-07-20 1988-07-20 Astra Ab Nucleoside derivatives
DE68922903T2 (de) 1988-12-19 1995-11-23 Wellcome Found Antivirale Pyrimidin- und Purinverbindungen, Verfahren zu ihrer Herstellung und sie enthaltende pharmazeutische Präparate.
UA45942A (uk) 1989-02-08 2002-05-15 Біокем Фарма, Інк. 1,3-оксатіолан, його похідні, спосіб (варіанти) його одержання та фармацевтична композиція
PT674634E (pt) 1989-02-08 2003-09-30 Iaf Biochem Int Processos para preparar 1,3-oxatiolanos substituidos com propriedades antivirais
NZ233197A (en) 1989-04-13 1991-11-26 Richard Thomas Walker Aromatically substituted nucleotide derivatives, intermediates therefor and pharmaceutical compositions
US5059690A (en) 1990-03-01 1991-10-22 E. R. Squibb & Sons, Inc. Purinyl tetrahydrofurans
US5411947A (en) 1989-06-28 1995-05-02 Vestar, Inc. Method of converting a drug to an orally available form by covalently bonding a lipid to the drug
US5194654A (en) 1989-11-22 1993-03-16 Vical, Inc. Lipid derivatives of phosphonoacids for liposomal incorporation and method of use
US5463092A (en) 1989-11-22 1995-10-31 Vestar, Inc. Lipid derivatives of phosphonacids for liposomal incorporation and method of use
IE904378A1 (en) 1989-12-20 1991-07-03 Abbott Lab Analogs of oxetanyl purines and pyrimidines
US5276151A (en) 1990-02-01 1994-01-04 Emory University Method of synthesis of 1,3-dioxolane nucleosides
US5204466A (en) 1990-02-01 1993-04-20 Emory University Method and compositions for the synthesis of bch-189 and related compounds
GB9009861D0 (en) 1990-05-02 1990-06-27 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
AU7872491A (en) 1990-05-07 1991-11-27 Vical, Inc. Lipid prodrugs of salicylate and nonsteroidal anti-inflammatory drugs
EP0531452A4 (en) 1990-05-29 1993-06-09 Vical, Inc. Synthesis of glycerol di- and triphosphate derivatives
DK0533833T3 (da) 1990-06-13 1996-04-22 Arnold Glazier Phosphorprolægemidler
FR2663636B1 (fr) 1990-06-26 1992-10-09 Centre Nat Rech Scient Procede de fonctionnalisation d'un oligonucleotide.
SE9003151D0 (sv) 1990-10-02 1990-10-02 Medivir Ab Nucleoside derivatives
US5543390A (en) 1990-11-01 1996-08-06 State Of Oregon, Acting By And Through The Oregon State Board Of Higher Education, Acting For And On Behalf Of The Oregon Health Sciences University Covalent microparticle-drug conjugates for biological targeting
US5256641A (en) 1990-11-01 1993-10-26 State Of Oregon Covalent polar lipid-peptide conjugates for immunological targeting
US5149794A (en) 1990-11-01 1992-09-22 State Of Oregon Covalent lipid-drug conjugates for drug targeting
US5543389A (en) 1990-11-01 1996-08-06 State Of Oregon, Acting By And Through The Oregon State Board Of Higher Education On Behalf Of The Oregon Health Sciences University, A Non Profit Organization Covalent polar lipid-peptide conjugates for use in salves
US5587480A (en) 1990-11-13 1996-12-24 Biochem Pharma, Inc. Substituted 1,3-oxathiolanes and substituted 1,3-dithiolanes with antiviral properties
DK0560794T3 (da) 1990-11-13 1996-12-23 Iaf Biochem Int Substituerede 1,3-oxathiolaner med antivirale egenskaber
US5444063A (en) 1990-12-05 1995-08-22 Emory University Enantiomerically pure β-D-dioxolane nucleosides with selective anti-Hepatitis B virus activity
US5179104A (en) 1990-12-05 1993-01-12 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Process for the preparation of enantiomerically pure β-D-(-)-dioxolane-nucleosides
WO1992010496A1 (en) 1990-12-05 1992-06-25 University Of Georgia Research Foundation, Inc. ENANTIOMERICALLY PURE β-L-(-)-1,3-OXATHIOLANE NUCLEOSIDES
US5248776A (en) 1990-12-05 1993-09-28 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Process for enantiomerically pure β-L-1,3-oxathiolane nucleosides
US5925643A (en) 1990-12-05 1999-07-20 Emory University Enantiomerically pure β-D-dioxolane-nucleosides
IL100502A (en) 1991-01-03 1995-12-08 Iaf Biochem Int PHARMACEUTICAL PREPARATIONS CONTAINING CIS-4-AMINO-1-) 2-HYDROXIMETHIL-1,3-OXETYOLEN-5-IL (-
NZ241625A (en) * 1991-02-22 1996-03-26 Univ Emory 1,3-oxathiolane derivatives, anti-viral compositions containing such and method of resolving racemic mixture of enantiomers
GB9104740D0 (en) 1991-03-06 1991-04-17 Wellcome Found Antiviral nucleoside combination
DE69233693T2 (de) 1991-03-06 2008-01-24 Emory University Salze und Amide von (-) cis 5-Fluoro-2'-deoxy-3'-thiacytidine geeignet für die Behandlung von Hepatitis B
WO1992018517A1 (en) 1991-04-17 1992-10-29 Yale University Method of treating or preventing hepatitis b virus
GB9110874D0 (en) 1991-05-20 1991-07-10 Iaf Biochem Int Medicaments
ZA923641B (en) * 1991-05-21 1993-02-24 Iaf Biochem Int Processes for the diastereoselective synthesis of nucleosides
GB9111902D0 (en) 1991-06-03 1991-07-24 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
JPH07500573A (ja) * 1991-07-12 1995-01-19 ネクススター・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド 抗ウィルス性リポヌクレオシド：ｂ型肝炎の治療
US5554728A (en) 1991-07-23 1996-09-10 Nexstar Pharmaceuticals, Inc. Lipid conjugates of therapeutic peptides and protease inhibitors
GB9116601D0 (en) 1991-08-01 1991-09-18 Iaf Biochem Int 1,3-oxathiolane nucleoside analogues
FR2684997A1 (fr) 1991-12-12 1993-06-18 Centre Nat Rech Scient Derives de la 9-(beta-d-xylofurannosyl) adenine et de la 1-(beta-d-xylofurannosyl) cytosine, leur preparation et leur application en therapeutique.
FR2685331A1 (fr) 1991-12-12 1993-06-25 Centre Nat Rech Scient Phosphotriesters de la ddu, leur preparation et leur application en therapeutique.
FR2684996A1 (fr) 1991-12-12 1993-06-18 Centre Nat Rech Scient Derives de 2',3'-didesoxy-3'-aminothymidine, leur preparation et leur application en therapeutique.
US5849905A (en) 1994-11-23 1998-12-15 Centre National De La Recherche Scientifique Biologically active phosphotriester-type nucleosides and methods for preparing same
US5770725A (en) 1992-05-25 1998-06-23 Gosselin; Gilles Phosphotriester type biologically active compounds
FR2692265B1 (fr) 1992-05-25 1996-11-08 Centre Nat Rech Scient Composes biologiquement actifs de type phosphotriesters.
WO1994005300A1 (en) 1992-09-03 1994-03-17 Biochem Pharma Inc. Use of rapamycin in the treatment of aids
GB9226927D0 (en) * 1992-12-24 1993-02-17 Iaf Biochem Int Dideoxy nucleoside analogues
WO1994026273A1 (en) 1993-05-12 1994-11-24 Hostetler Karl Y Acyclovir derivatives for topical use
FR2705099B1 (fr) 1993-05-12 1995-08-04 Centre Nat Rech Scient Oligonucléotides phosphorothioates triesters et procédé de préparation.
TW374087B (en) * 1993-05-25 1999-11-11 Univ Yale L-2',3'-dideoxy nucleotide analogs as anti-hepatitis B(HBV) and anti-HIV agents
US5627160A (en) * 1993-05-25 1997-05-06 Yale University L-2',3'-dideoxy nucleoside analogs as anti-hepatitis B (HBV) and anti-HIV agents
EP0631783A1 (en) * 1993-06-03 1995-01-04 Mitsubishi Chemical Corporation Antiviral combinations of 2',3'-di-deoxyribonucleosides with 6-benzyl-1-ethoxymethyl-5-substituted uracil derivatives
WO1995007086A1 (en) 1993-09-10 1995-03-16 Emory University Nucleosides with anti-hepatitis b virus activity
FR2709754B1 (fr) 1993-09-10 1995-12-01 Centre Nat Rech Scient Composés 2' ou 3'-déoxy- et 2', 3'-didéoxy-beta-L-pentofuranonucléosides, procédé de préparation et application thérapeutique, notamment anti-virale.
FR2711655A1 (fr) 1993-10-21 1995-05-05 Centre Nat Rech Scient Composés 3'-phosphononucléosides et procédé de préparation.
US5587362A (en) 1994-01-28 1996-12-24 Univ. Of Ga Research Foundation L-nucleosides
US5696277A (en) 1994-11-15 1997-12-09 Karl Y. Hostetler Antiviral prodrugs
AU722214B2 (en) * 1995-06-07 2000-07-27 Centre National De La Recherche Scientifique (Cnrs) Nucleosides with anti-hepatitis B virus activity
US6444652B1 (en) * 1998-08-10 2002-09-03 Novirio Pharmaceuticals Limited β-L-2'-deoxy-nucleosides for the treatment of hepatitis B
MXPA01001507A (es) * 1998-08-10 2003-09-10 Novirio Pharmaceuticals Ltd °l-2'desoxi-nucleosidos para el tratamiento de hepatitis b.

Also Published As

Publication number Publication date
DE69636734T2 (de) 2007-10-18
EP0831852A1 (en) 1998-04-01
EP0831852B1 (en) 2006-11-29
AU722214B2 (en) 2000-07-27
US20020107221A1 (en) 2002-08-08
DE69636734D1 (de) 2007-01-11
US20050277616A1 (en) 2005-12-15
WO1996040164A1 (en) 1996-12-19
ATE346651T1 (de) 2006-12-15
EP1655033A1 (en) 2006-05-10
AU6170796A (en) 1996-12-30
JP2007204485A (ja) 2007-08-16
US6245749B1 (en) 2001-06-12
JP4413996B2 (ja) 2010-02-10
DK0831852T3 (da) 2007-03-19
CA2219132A1 (en) 1996-12-19
US20090105185A1 (en) 2009-04-23
ES2276404T3 (es) 2007-06-16
JPH11507381A (ja) 1999-06-29
EP0831852A4 (en) 1999-03-31
US7468357B2 (en) 2008-12-23
CA2219132C (en) 2007-03-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0831852B1 (en) Nucleosides with anti-hepatitis b virus activity
ES2531928T3 (es) Beta-L-2'-desoxi-nucleósidos para el tratamiento de la hepatitis B
US6444652B1 (en) β-L-2'-deoxy-nucleosides for the treatment of hepatitis B
JP2011246469A (ja) Ｂ型肝炎ウイルス活性を持ったヌクレオシド
AU2006246473B2 (en) Nucleosides with anti-hepatitus B virus activity
CA2538205C (en) Nucleosides with anti-hepatitis b virus activity
RU2237479C2 (ru) Нуклеозиды, обладающие активностью против вируса гепатита в