PL182113B1 - Kompleks czasteczki GLP-1 i zasocjowanego z nia kationu cynku oraz zawierajace go kompozycje farmaceutyczne PL PL PL PL PL PL PL PL - Google Patents

Kompleks czasteczki GLP-1 i zasocjowanego z nia kationu cynku oraz zawierajace go kompozycje farmaceutyczne PL PL PL PL PL PL PL PL

Info

Publication number
PL182113B1
PL182113B1 PL95308783A PL30878395A PL182113B1 PL 182113 B1 PL182113 B1 PL 182113B1 PL 95308783 A PL95308783 A PL 95308783A PL 30878395 A PL30878395 A PL 30878395A PL 182113 B1 PL182113 B1 PL 182113B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
glp
gly
glu
val
ala
Prior art date
Application number
PL95308783A
Other languages
English (en)
Other versions
PL308783A1 (en
Inventor
John A Galloway
James A Hoffmann
Original Assignee
Lilly Co Eli
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Lilly Co Eli filed Critical Lilly Co Eli
Publication of PL308783A1 publication Critical patent/PL308783A1/xx
Publication of PL182113B1 publication Critical patent/PL182113B1/pl

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K17/00—Carrier-bound or immobilised peptides; Preparation thereof
    • C07K17/14—Peptides being immobilised on, or in, an inorganic carrier
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575—Hormones
    • C07K14/605—Glucagons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S977/00—Nanotechnology
    • Y10S977/70—Nanostructure
    • Y10S977/773—Nanoparticle, i.e. structure having three dimensions of 100 nm or less
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S977/00—Nanotechnology
    • Y10S977/902—Specified use of nanostructure
    • Y10S977/904—Specified use of nanostructure for medical, immunological, body treatment, or diagnosis
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S977/00—Nanotechnology
    • Y10S977/902—Specified use of nanostructure
    • Y10S977/904—Specified use of nanostructure for medical, immunological, body treatment, or diagnosis
    • Y10S977/915—Therapeutic or pharmaceutical composition

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

1 . Kompleks czasteczki GLP-I skladajacy sie ze zwiazku o wzorze: R1 X-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Y-Gly-Gln-Ala-Ala- Lys-Z-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-R2, w którym R1 oznacza L-histydyne, X oznacza Val, Y oznacza Glu, Z oznacza Glu, oraz R2 oznacza Gly-OH, i z zasocjowanego z nim kationu cynku. 2. Kompozycja farmaceutyczna do leczenia cukrzycy, zawierajaca substancje czynna w polaczeniu z jednym lub wiecej farmaceutycznie dopuszczalnych nosników, rozcienczalni- ków lub srodków pomocniczych, znamienna tym, ze jako substancje czynna zawiera kom- pleks czasteczki GLP-1 skladajacy sie ze zwiazku o wzorze: R 1 -X-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Y-Gly-Gln-Ala-Ala- Lys-Z-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-R2, w którym R1 oznacza L-histydyne, X oznacza Val, Y oznacza Glu, Z oznacza Glu, oraz R2 oznacza Gly-OH, i z zasocjowanego z nim kationu cynku. PL PL PL PL PL PL PL PL

Description

Przedmiotem wynalazku jest nowy związek i zawierające go kompozycje farmaceutyczne, użyteczne do zwiększania wytwarzania insuliny w komórkach B wysp trzustkowy u ssaków i do leczenia cukrzycy u dorosłych ssaków1.
Wydzielanie wewnętrzne wysp trzustkowych znajduje się pod złożoną kontrolą nie tylko metabolitów przenoszonych przez krew (glukozy, aminokwasów, katecholoamin i podobnych) lecz również miejscowych wpływów parahormonalnych. Główne hormony wysp trzustkowych (glukagon, insulina i somatostatyna) oddziaływują ze specyficznymi dla nich typami komórek (odpowiednio A, B i D) modulując odpowiedzi wydzielnicze stosownie do wpływu wymienionych powyżej metabolitów. Jakkolwiek wydzielanie insuliny jest w głównej mierze regulowane przez poziom glukozy we krwi, to somatostatyna hamuje wydzielanie insuliny w odpowiedzi na glukozę. Poza zakładaną międzywyspową regulacją parahormonalną wydzielania insuliny, istnieje dowód na występowanie czynników insulinotropowych w jelitach. Koncepcja ta wynika z obserwacji, że glukoza podana doustnie jest znacznie silniejszym stymulatorem wydzielania insuliny niż glukoza podana dożylnie w porównywalnej ilości.
Hormon ludzki, glukagonjest hormonem peptydowym złożonym z 29 aminokwasów, wytwarzanych w trzustkowych komórkach A. Hormon ten należy do wielogenowej rodziny strukturalnie pokrewnych peptydów obejmujących sekretynę, peptyd hamujący wydzielanie soku żołądkowego, naczyniowo-czynny peptyd jelitowy i glicentynę. Peptydy te w różnym stopniu regulują metabolizm węglowodanów, ruchliwość żołądkowo-jelitową i procesy wydzielnicze. Głównymi poznanymi działaniami glukagonu trzustkowego są jednak zwiększanie glikogenolizy i glukoneogenezy w wątrobie i w wyniku tego, podwyższanie poziomu cukru we krwi. Po tym względem, działanie glukagonu jest przeciwstawne do działania insuliny i może się przyczyniać do hiperglikemii i towarzyszącej cukrzycy (Lund P.K. i wsp., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 79, 345-349, 1982).
Wykazano, że glukagon ma zdolność wiązania się ze specyficznymi receptorami leżącymi na powierzchni komórek wytwarzających insulinę. Glukagon, związany z tymi receptorami stymuluje natychmiastową syntezę cAMP w tych komórkach. Wykazano, że z kolei cAMP stymuluje wytwarzanie insuliny (Korman L.Y. i wsp., Diabetes, 34, 717-722, 1985). Insulina hamuje syntezę glukagonu (Ganong W.F., Review of Medical Physiology, Lange Publications, Los Al182 113 tos, Kalifornia, str. 273,1979). Wytwarzanie glukagonu jest zatem dokłanie regulowane przez insulinę, a ostatecznie przez poziom glukozy w surowicy.
Translacja genu glukagonu przebiega od prekursora o długości 360 par zasad z wytworzeniem polipeptydu, preproglukagonu (Lund i wsp., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 79, 345-349,1982). Ten polipeptyd jest następnie przetwarzany do proglukagonu. Patzelt C. i wsp. (Nature, 282. 260-266,1979) wykazał, że proglukagonjest dalej rozszczepiany do glukagonu i drugiego polipeptydu. Następne prace Lund'a P.K., Lopez'a L.C. i wsp. (Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 80, 5485-5489, 1983) i Bell'a G.I. i wsp. (Nature 302. 716-718, 1983) wykazywały, że cząsteczka proglukagonu ulega rozszczepianiu w miejscu bezpośrednio za resztami lizyna-arginina. Badania proglukagonu wytwarzanego przez zębacza kanałowego (lctalurus punctata) wykazały, że glukagon z tego zwierzęcia ulega również rozszczepieniu proteolitycznemu za sąsiadującymi resztami dwupeptydowymi lizyna-arginina (Andrews P.C. i wsp., J. Biol. Chem. 260,3910-3914, 1985, Lopez L.C. i wsp., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 80, 5485-5489,1983). Bell G.I. i wsp. (jak wyżej) wykrył, że proglukagon ssaków jest rozszczepiany w miejscu występowania dwupeptydów: lizyna-arginina albo arginina-arginina i wykazał, że cząsteczka proglukagonu zawiera trzy oddzielne cząsteczki peptydowe o wysokim stopniu homologii, nazwane odpowiednio: glukagonem, glukagono-podobny mpeptydem 1 (GLP-1)ighkagono-podobnympeptydem2 (GLP-2). Lopez i wsp. wykazali, że glukagono-podobny peptyd 1 składa się z 37 reszt aminokwasowych, a glukagono-podobny peptyd 2 zawiera 34 reszty aminokwasowe. Analogiczne badania struktury preproglukagonu szczura ujawniły podobne zasady rozszczepienia proteolitycznego pomiędzy sąsiadującymi resztami dwupeptydowymi: lizyna-arginina albo arginina-arginina, prowadzące do powstania glukagonu, GLP-1- i GLP-2- (Heinrich G. i wsp., Endocrinol., 115, 2176-2181, 1984). Ghiglione M. i wsp. (Diabetologia, 27, 599-600, 1984) wykazał identyczność sekwencji GLP-1- człowieka, szczura, bydląt i chomika.
Wyniki badań Lopez'a i wsp. odnośnie rozmiarów GLP-1 zostały potwierdzone w pracach Uttenthal'a L.O. i wsp. (J. Clin, Endocrinol. Metabol. 61 472-479,1985). Uttenthal i wsp. badali formy molekularne GlP- 1 - obecne w trzustce ludzkiej. Ich badania wykazały, że GLP-1 i GLP-2 występują w trzustkach jako peptydy złożone z odpowiednio 37 i 34 aminokwasów.
Podobieństwo GLP-1 i glukagonu nasuwało myśl dawniej szym badaczom, że GLP-1 może wykazywać aktywność biologiczną. Jakkolwiek niektórzy badacze stwierdzili, że GLP-1 może indukować komórki mózgu szczura do syntezy cAMP (Hoosein N.M. i wsp., Febs Lett. 178. 8386,1984) to innym nie udało się określić jakiejkolwiek fizjologicznej roli GLP-1 (Lopez L.C. i wsp.). Niepowodzenia w identyfikacji znaczenia fizjologicznego GLP-1 spowodowały, że zaczęto się zastanawiać, czy GLP-1-jest rzeczywiście hormonem, czy pokrewieństwo między glukagonem a GLP-1 jest artefaktem.
Warianty GLP-1 (7-37) oraz jego analogi również zostały ujawnione. Do takich wariantów bądź analogów należą na przykład: Gln9-Gln-1 (7-37), D-Gln9-GLP-1 (7-37), acetyloLys9-GLP-1 (7-37), Thr,6-Lys’8-GLP-1 (7-37), Lys18-GLP-1 (7-37) i podobne związki oraz ich pochodne, obejmujące przykładowo sole addycyjne z kwasami, sole z grupą karboksylową, niższe estry alkilowe i amidy (np. opis zgłoszenia patentowego PCT, WO 91/11457). Wiadomo, że generalnie różne ujawnione formy GLP-1 stymulująwydzielanie insuliny (działanie insulinotropowe) i tworzenie się cAMP (patrz. np. Mojsov S., Int. J. Peptide Protein Research 40,333-343, 1992).
Jest sprawąważną, że wielu autorów wykazało związek miedzy badaniami laboratoryjnymi a odpowiedziami insulinotropowymi u ssaków, zwłaszcza u ludzi, na egzogenne podawanie GLP-1, zwłaszcza GLP-1 (7-36)NH2 i GLP-1 (7-37) (Nauck M.A. i wsp., Diabetologia 36. 741-744, 1993; Gutniak M. i wsp., New England J. Medicine 326 (20), 1316-1322, 192; Nauck M.A. i wsp., J. Clin. Invest., 91, 301-307, 1993 oraz Thorens B. i wsp., Diabetes 42, 1219-1225, 1993).
Ponadto stwierdzono, że podstawowymi defektami powodującymi hiperglikemię w cukrzycy dorosłych są: upośledzenie wydzielania endogennej insuliny i oporność na działanie insuliny w mięśniach i w wątrobie. (Galloway J.S., Diabetes Care, 13,1209-1239,1990). Ten drugi
182 113 defekt jest wynikiem nadmiernego wytwarzania glukozy w wątrobie. Podczas gdy w organizmie normalnego osobnika uwalnianie glukozy zachodzi z szybkościąokoło 2 mg/kg/minutę, u pacjentów dorosłych z cukrzycą ilość ta zwykle przekracza 2,5 mg/kg/minutę, co daje nadmiar netto na poziomie co najmniej 70 g glukozy na 24 godziny. Z faktu istnienia nadzwyczaj wysokiej korelacji między wytwarzaniem glukozy w wątrobie, poziomem glukozy we krwi na czczo i całkowitą regulacją metaboliczną, na co wskazują pomiary poziomu glikohemoglobiny (Galloway J.A., jak wyżej i Galloway J.A. i wsp., Clin. Therap., 12,460-472, 1990) jasno wynika, że kontrola poziomu glukozy we krwi na czczo jest bezwzględnym warunkiem osiągnięcia ogólnej normalizacji metabolizmu w stopniu wystarczającym do zapobieżenia komplikacjom hiperglikemicznym. Ze względu na to, że obecnie dostępne formy insuliny rzadko normalizują wytwarzanie glukozy w wątrobie bez powodowania znaczącej hiperinsulinemii i hipoglikemii (Galloway J.A. i Galloway J.A. i wsp.., jak wyżej) potrzebne są alternatywne podejścia terapeutyczne.
Dożylne infuzje GLIP-1 (7-36)NH2 podane w ilości dającej dwukrotnie wyższe stężenie w surowicy w stosunku do normy wywołują efekty wykazane w poniższej tabeli:
Zdrowi osobnicy Pacjenci z cukrzycą dorosłych
Glikemia po posiłku niezmieniona zmniejszona
Glikemia na czczo<2) - - zmniejszona
(2) Glukagon na czczo - - zmniejszony
Glukagon poposiłkowy^ - - zmniejszony
Wydzielanie endogennej insuliny w odpowiedzi na posiłek1^ niezmienione zwiększone
Wolne kwasy tłuszczowe zmniejszone0’ zmniejszone(1 2) 3
(1) Gutniak M. i wsp., jak wyżej (2) Nauck M. A. i wsp., Diabetologia, jak wyżej (3) Orskov C. i wsp., Diabetes 42. 65-8-661, 1993
Kwestionuje się jednak długoterminową stabilność GLP-1, zwłaszcza GLP-1 jako składnika kompozycji farmaceutycznych przeznaczonych dla ssaków. Rzeczywiście, podczas przechowywania w tak niskiej temperaturze jak 4°C wykryto produkty uboczne GLP-1 (7-37) już po 11 miesiącach od wytworzenia próbki (Majsov S., jak wyżej).
Istnieje więc zapotrzebowanie na bardziej stabilny związek GLP-1, który można było bezpiecznie podawać ssakom wymagajacym leczenia tym związkiem.
Poza tym, biologiczny okres półtrwania cząsteczek GLP-1, zwłaszcza tych cząsteczek, które podlegają działaniu dipeptydylo-peptydazy IV (DPP IV) jest całkiem krótki.
Przykładowo, biologiczny okres półtrwania GLP-1 (7-37) wynosi zaledwie 3 do 5 minut i podlega dalszym wpływom w wyniku szybkiej absorpcj i po podaniu paranteralnym do organizmu ssaka. Istnieje zatem potrzeba otrzymania związku GLP-1 o opóźnionej absorpcji po podaniu.
Ze stanu techniki, np. opisu patentowego EP 587255, EP 619322 czy publikacji WO 95/05848, znane są cząsteczki GLP zawierające sekwencje z alaniną na pozycji 8, która odpowiada podstawnikowi X według niniejszego zgłoszenia.
Niniejszy wynalazek rozwiązuje problem nietrwałości w surowicy i krótkiego okresu półtrwania w surowicy, charakterystycznego dla natywnych cząstek GLP-1. Związek według wynalazku charakteryzuje się ponadto spowolnioną absorpcją po podaniu parenteralnym, w wyniku czego powiny mieć dłuższe biologiczne okresy półtrwania.
Przedmiotem wynalazku są również kompozycje farmaceutyczne zawierające związek według wynalazku.
Dokładniej, przedmiotem wynalazku jest kompleks cząsteczki GLP-1 składającej się ze związku o wzorze:
182 113
Ri -X-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Y-Gly-G ln-Ala-Ala-Lys-ZPhe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-R2 w którym R1 oznacza L-histydynę, X oznacza Val, Y oznacza Glu, Z oznacza Glu, R1 oznacza Gly-OH, i z zasocjowanego z nim kationu cynku.
Kompozycja farmaceutyczna według wynalazku zawiera związek według wynalazku w połączeniu z jednym lub z większą ilością dopuszczalnych farmaceutycznych nośników, rozcieńczalników bądź środków pomocniczych.
Związek według wynalazku jest przydatny do leczenia cukrzycy dorosłych ssaków. Podając skuteczną ilość związku według wynalazku do komórek B wysp trzustkowych ssaka, następuje zwiększenie procesu wytwarzania insuliny.
Kompleks według wynalazku, składa się z cząsteczki GLP-1 posiadającej punkt izoelektryczny w zakresie od około 6,0 do około 9,0, skompleksowanej z cynkiem.
W niniejszym opisie patentowym termin „cząsteczka GLP-1” odnosi się do występujących w stanie naturalnym GLP-1 (7-37) oraz ich naturalnych i syntetycznych analogów funkcjonalnych i pochodnych oraz soli.
Występowanie i wytwarzanie wielu naturalnych i syntetycznych analogów funkcyjnych i pochodnych cząsteczek GLP-1 (7-36)NH2 i GLP-1 (7-37) jest opisane w piśmiennictwie np. opisy patentowe Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 5.120.712 i 5.118.666; Orsakov C. i wsp., J. Biol.Chem., 264 (22), 12826-12829, 1989 i opis patentowy zgłoszenia PCT W0 91/11457 (Buckley D.I. i wsp. opublikowany 8 sierpnia 1991 r.).
Jak wiadomo ze stanu techniki, reszty aminokwasowe mogąwystępować w formie chronionej, w której zarówno grupy zabezpieczające, w formie częściowo chronionej, w której albo grupy aminowe albo grupy karboksylowe posiadają odpowiednie grupy zabezpieczające lub w formie niechronionej, w której ani grupy aminowe ani grupy karboksylowe nie posiadąjąodpowiednich grup zebezpieczających. W wielu standardowych pracach są opisane różne reakcje służące do tworzenia lub usuwania tych grup zabezpieczających, np. w pracy: „Protective Groups in Organic Chemistry”, Plenum Press (Londyn i Nowy Jork, 1973), Green T.H., „Protective Groups in Organic Sy^thesis”, Wiley (Nowy Jork, 1981) i „The Peptides”, tom I, echroder i Lubke, Academic Press (Londyn i Nowy Jork, 1965).
Do reprezentatywnych grup chroniących grupę aminową należą przykładowo: grupa formylowa, acetylowa, izopropylowa, butoksykarbonylowa, fluorenylometoksykarbonylowa, karbobenzyloksylowa i podobne.
Do reprezentatywnych grup chroniących grupę karboksylową należą przykładowo: ester benzylowy, ester metylowy, ester etylowy, ester tert-butylowy, ester p-nitrofenylowy i podobne.
Poza formami chronionymi, w których zarówno grupy aminowe jak i karboksylowe posiadają odpowiednie grupy zabezieczające, termin „chroniony” obejmuje również takie cząsteczki GLP-1, które wykazują oporność lub obniżoną wrażliwość na dipeptydylo-peptydazę IV (np. Mentlein R. i wsp., Eur. J. Biochem. 214,829-835,1993). Poza gLp-1 (7-36)nH2, korzystne są te cząsteczki, które są zabezpieczone przed aktywnością DPP IV, a bardziej korzystna jest Val8-GLP-1 (7-37)OH,.
Pochodnymi występującymi w stanie naturalnym cząsteczek GLP- 1są takie peptydy, które otrzymuje się przez fragmentacje sekwencji występującej w stanie naturalnym albo syntezuje się w oparciu o znajomość sekwencji materiału genetycznego (DNA albo RNA) kodującego naturalną sekwencję aminokwasową. Termin „pochodne” obejmuje również naturalne i syntetyczne cząsteczki GLP-1 poddane chemicznej modyfikacji. Sposoby wytwarzania tych pochodnych są dobrze znane specjalistom z zakresu chemii organicznej i chemii peptydów (np. opis patentowy zgłoszenia PCT, W0 91/11457, cytowany wyżej).
Cząsteczka GLP-1 w kompleksie według wynalakzu posiada wystarczająco kwasowe, wystarczająco zasadowe albo obydwa rodzaje grup funkcyjnych i stosownie do tego może reagować z jedną z wielu zasad nieorganicznych i kwasów nieorganicznych bądź organicznych, tworząc sól. Do kwasów powszechnie stosowanych do wytwarzania soli addycyjnych z kwasami należą kwasy nieorganiczne, takie jak kwas chlorowodorowy, bromowodorowy,jodowodorowy,
182 113 siarkowy, fosforowy i podobne i kwasy organiczne, takie jak kwas p-toluenosulfonowy, metanosulfonowy, szczawiowy, p-bromofenylosulfonowy, węglowy, bursztynowy, cytrynowy, benzoesowy, octowy i podobne. Przykłady takich soli obejmują siarczany, pirosiarczany, dwusiarczany, siarczyny, dwusiarczyny, fosforany, monowodorofosforany, dwuwodorofosforany, metafosforany, pirofosiorany, chlorki, bromki, jodki, octany, propioniany, dekanoniany, kaprylany, akrylany, mrówczany, izomaślany, kaproniany, heptanoniany, propiolany, szczawiany, maloniany, bursztyniany, suberyniany, sebacyniany, fumarany, malenniany, butyno-1,4-diolany, heksyno-1,6-diolany, benzoesany, chlorobenzoesany, metylobenzoesany, dinitrobenzoesany, hydroksybenzoesany, metoksybenzoesany, ftalany, sulfoniany, ksylenosulfoniany, fenyłooctany, fenylopropioniany, fenylomaślany, cytryniany, mleczany, gamma-hydroksymaślany, glikolany, winiany, metanosulfoniany, propanosulfoniany, naftaleno-1 -sulfoniany, naftaleno-2-sulfoniany, migdalany i podobne. Korzystnymi solami addycyjnymi z kwasami są sole tworzone z kwasami nieorganicznymi, takimi jak kwas chlorowodorowy i bromowodorowy, a szczególnie kwas chlorowodorowy.
Sole addycyjne z zasadmi obejmują sole utworzone z zasadami nieorganicznymi, takimi jak amoniowa albo wodorotlenki, węglany, dwuwęglany metali alkalicznych lub ziem alkalicznych i podobne. Do zasad użytecznych do wytwarzania soli należą: wodorotlenek sodowy, wodorotlenek potasowy, wodorotlenek amonowy, węglan potasowy i podobne. Formy soli są szczególnie korzystne.
Jeśli związek według wynalazku stosuje się do celów farmakoterapeutycznych, związek ten również może występować w formie soli ale taka sól musi być dopuszczalna farmaceutycznie.
Cząsteczka GLP-1 w kompleksie według wynalazku wykazuje aktywność insulinotropową. Termin „aktywność insulinotropowa” odnosi się do zdolności substancji do stymulowania albo powodowania stymulowania przez inny czynnik, syntezy albo ekspresji insuliny.
Insulinotropową własność związku można oznaczyć dostarczając ten związek do komórek zwierzęcia albo podając zwierzęciu iniekcję związku i monitorując uwalnianie immunoreaktywnej insuliny (IRI) odpowiednio do środowiska albo do układu krążenia zwierzęcia. Obecność IRI wykrywa się w próbie radioimmunologicznej swoiście wykrywającej insulinę.
Jakkolwiek można zastosować dowolną próbę radioimmunologiczną, w której wykrywa się obecność IRI, korzystne jest zastosowanie modyfikacji metody Albano J.D.M. i wsp. (Acta Endocrinol., 70,487-509,1972). W modyfikacji tej stosuje się bufor fosforanowo-albuminowy o wartości pH = 7,4. Inkubacje przygotowuje się dodając kolejno 500 pl buforu fosforanowego, 50 μΐ próbki i perfuzatu albo standardu insuliny szczura w perfuzacie, 100 pl antysurowicy antyinsulinowej (Wellcome Laboratories; rozcieńczenie 1:40 000) i 100 pl znaczonej [’25'J-insuliny, co daje całkowitą objętość 750 pl w szklanej probówce o wymiarach 10 x 75 mm. Po inkubacji w czasie 2 - 3 dni w temperaturze 4°C oddziela się wolną insulinę od insuliny związanej z przeciwciałem przez rozdział na węglu. Czułość metody wynosi 1 - 2 mikrojednostek/ml. W celu oznaczenia uwalniania IRI do środowiska hodowli komórek rosnących w hodowli tkankowej, wprowadza się korzystnie znacznik radioaktywny do proinsuliny. Jakkolwiek można użyć dowolny znacznik radioaktywny zdolny do znaczenia polipeptydu, dla uzyskania znakowanej proinsuliny, korzystnejest użycie 3H-leucyny. Można znakować dla dowolnego czasu wystarczającego do powstania wykrywalnej puli cząsteczek proinsuliny, jednak korzystne jest inkubowanie komórek w obecności znacznika radioaktywnego znaczącego na okres 60 minut.
Dla oceny, czy dany związek wykazuje działanie insulinotropowe można użyć wiele linii komórkowych zdolnych do ekspresji insuliny, jednak korzystne jest użycie komórek gruczolaka wysepkowatokomórkowego szczura, a zwłaszcza linii szczurzych komórek gruczolaka wysepkowatokomórkowego RIN-38. Wzrost tych komórek można prowadzić w dowolnej odpowiedniej pożywce, jednak korzystne jest użycie pożywki DME zawierającej 0,1% BSA i 25 mM glukozy.
Właściwości insulinotropowe związku można również oznaczyć metodą infuzji trzustkowej. Izolowany in situ, perfundowany preparat trzustki szczura jest modyfikacją preparatu stosowanego w metodzie Penhos'a J.C. i wsp. (Diabetes 18, 733-738, 1969). Głodzone samce
182 113 szczurów białych, szczepu Charles River o wadze 350-600 g usypia się dootrzewnową iniekcją soli sodowej amobarbitalu (Amytal; Eli Lilly and Co., 160 ng/kg). Podwiązuje się naczynia krwionośne nerkowe, nadnerczowe, żołądkowe i niższe okrężnicze. Wycina się całe jelita za wyjątkiem około 4 cm dwunastnicy i zstepującej okrężnicy i odbytnicy. Tak więc, perfundowana jest jedynie mała część jelita, co minimalizuje możliwą interferencję substancji jelitowych z immunoreaktywnością glukagono-podobną. Jako płyn perfuzyjny stosuje się zmodyfikowany dwuwęglanowy bufor Krebsa-Ringera z dodatkiem 4% dekstranu T70 i 0,2% albuminy surowicy bydlęcej (frakcji V), przepuszczając przez ten płyn gaz składajacy się z 95% O2 i 5% CO2. Stosuje się przepływ niepulsacyjny, pompę z 4-kanałowym łożyskiem wałeczkowym (Buchler polystatic, Buchler Instruments Division, Nuclear-Chicago Corp.) a przełączanie z jednego źródła perfuzatu do drugiego odbywa się przez przełączanie trójdzielnego kurka odcinającego. Sposób prowadzenie perfuzji, jej monitorowania i analizy jest powtórzeniem metody Weifa G.C. i wsp. (J.Clin. Investigat. 54, 1403-1412, 1974) wprowadzonej do niniejszego opisu jak odnośnik.
Cząsteczki GLP-1 posiadają na końcu aminowym funkcyjne grupy histydyny lub mogą również posiadać grupy funkcyjne zmodyfikowanej histydyny.
Termin „zmodyfikowana histydyna” odnosi się do grup funkcyjnych histydyny, które zostały zmienione na drodze chemicznej lub biologicznej lub do zmienionych grup funkcyjnych histydyny, która została zsyntetyzowana de novo, ale z zachowaniem własności wiązania metalu.
Znanych jest wiele pochodnych histydyny ze zmodyfikowanymi grupami funkcyjnymi histydynowymi i ich wytwarzanie. Należą do nich przykładowo: D-histydyna (opis patentowy PCT, W0 91/11457), desamino-histydyna (opis patentowy PCT, W0 92/18531), 2amino-histydyna (Levine-Pinto H, i wsp. Biochem. Biophys. Res. Commun, 103 (4), 11211130, 1981), β-hydroksy-L-histydyna (Owa T. i wsp., Chemistry Letters, str. 1873-1874, 1988), L-homohistydyna (Altman J. i wsp., Synthetic Commun., 19,11 i 12), 2069-2076,1089), α-fluorometylo-histydyna (opis patentowy Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 4.347.374) i α-metylohistydyna (O'Donnell M. J., Synthetic Commun. 19, (7 i 8), 1157-1165, 1989).
Sposoby wytwarzania cząsteczek GLP-1 według wynalazku są znane specjalistom z zakresu chemii peptydów.
W jednym ze sposobów, cząsteczki GLP-1 wytwarza się znaną technika syntezy peptydów w fazie stałej opisanąprzez Merrifield'a J.M. Chem. Soc. 85,2149,1962) oraz Stewarta i Young'a („Solid Phase Peptide Synthesis, str. 24-66, wyd. Freeman, San Francisco, 1969). Możliwe jest jednak otrzymanie fragmentów polipeptydu proglukagonu lub GLP-1 (7-37) przez fragmentację występującej w stanie naturalnym sekwencji aminokwasów stosując np. enzym proteolityczny. Można również otrzymać żądane fragmenty tego peptydu proglukanu albo GLP-1 (7-37) stosując technologię rekombinacji DNA opisanąprzez Maniatisa T. i wsp. (Molecular Biology: A Laboratory Manual, CSH (Cold Spring Harbor, 1982).
Podobnie, stan wiedzy w dziedzinie biologii molekularnej dostarcza specjalistom innych narzędzi, za pomocą których można otrzymać związek według wynalazku. Chociaż można go wytwarzać techniką syntezy peptydów w fazie stałej albo metodami rekombinacji DNA, metody rekombinacji DNA są bardziej korzystne gdyż możliwe jest osiągnięcie wyższych wydajności. Podstawowe etapy wytwarzania metodą rekombinacji DNA obejmują:
a) izolację naturalnej sekwencji DNA kodującej cząsteczkę GLP-1 albo skonstruowanie syntetycznej lub półsyntetycznej sekwencji DNA kodującej cząsteczkę GLP-1,
b) umieszczenie tej sekwencji kodującej w wektorze ekspresyjnym w sposób pozwalajacy na ekspresję białek albo jako takich albo w postaci białek fuzyjnych,
c) transformowanie odpowiedniej eukariotycznej albo prokariotycznej komórki gospodarza tym wektorem ekspresyjnym,
d) · hodowlę transformowanej komórki gospodarza w warunkach pozwalających na ekspresję cząsteczki GLP-1 i
e) wyodrębnienie i oczyszczenie wytworzonej techniką rekombinacji cząseczki GLP-1.
Jak podano powyżej, można stosować sekwencje kodujące w pełni syntetyczne albo wytworzone przez modyfikację większego, natywnego DNA kodującego glukagon. Sekwencja
DNA kodująca preproglukagon jest opisana przez Lund'a i wsp. (Proc. Natl. Acad Sci. U.S.A. 79. 345-349, -982). Może ona być użyta jako materiał wyjściowy w półsyntetycznym sposobie wytwarzania związków według wynalazku na drodze zmienienia sekwencji natywnej w taki sposób, aby uzyskać żądany produkt.
Syntetyczne geny, których transkrypcja i translacja in vitro albo in vivo prowadzi do wytwarzania cząsteczki GLP-1, można konstruować wykorzystując znane techniki. Uwzględniając naturalną degenerację kodu genetycznego, specjalista będzie wiedział, że można konstruować duże ale jednak określone ilości sekwencji DNA, z których wszystkie kodują cząsteczki GLP-1.
Sposoby syntetycznej konstrukcji genu są dobrze znane. Są one opisane przez Brown'a i wsp. w „Methods in Enzymology” (Academic Press, Nowy Jork, tom 68, str. 109-151,1979). W oparciu o ujawnione tu sekwencje aminokwasowe można zaprojektować sekwencje DNA kodujące cząsteczkę GLP-1. Po zaprojektowaniu, samą sekwencję można uzyskać stosując aparaturę do syntezy DNA, np. syntetyzery DNA, modele 380A albo 380B (PE-Applied Biosystems, Inc., 850 Lincoln Center Drive, Froster City, CA 94404).
W celu przeprowadzenia ekspresji cząsteczki GLP-1 dokonuje się insercji tej zsyntetyzowanej sekwencji dNa wjednym z wielu odpowiednich do tego celu rekombinantowych wektorów ekspresyjnych DNA, stosując odpowiednie endonukleazy restrykcyjne. Ogólne zasady tych operacj i sąpodane przez Maniatis'a i wsp., w podręczniku: „Molecular Cloning; A Laboratory Manual, Cold Springs Harbor Laboratory Press, Nowy Jork, tomy 1-3, (1989). Na jednym z końców sekwencji DNA kodującej cząsteczkę GLP-1 wprowadza się miejsca rozszczepiane przez endonukleazę restrykcyjną w celu ułatwienia wyizolowania ze znanych wektorów amplifikacyjnych i ekspresyjnych oraz ułatwienia integracji z tymi wektorami. Wybór danej endonukleazy będzie podyktowany układem miejsc rozszczepianych przez endonukleazę restrykcyjną w pierwszym (rodzicielskim) wektorze ekspresyjnym, który ma być użyty. Miejsca restrykcyjne dobiera się tak, aby prawidłowo zorientować sekwencję kodującą w stosunku do sekwencji kontrolnych, dzięki czemu odczyt będzie przebiegał w zgodnej fazie odczytu i w wyniku będzie zachodziła ekspresja żądanego białka. Sekwencję kodującą należy usytuować również tak, aby znajdowała się ona w fazie odczytu zgodnej z promotorem i z miejscem wiązania rybosomu w wektorze ekspresyjnym, przy czym zarówno promotor jak i miejsce wiązania rybosomu powinny być funkcjonalne w komórce gospodarza, w której ma przebiegać ekspresja białka.
Dla uzyskania wydajnej transkrypcji syntetycznego genu, musi on być operacyjnie związany z rejonem promotora-operatora. Rejon promotora-operatora tego syntetycznego genu umieszcza się w tej samej orientacji sekwencji w odniesieniu do kodonu startu ATG tego syntetycznego genu.
Znanych jest wiele różnych wektorów ekspresyjnych nadających się do transformowania komórek prokariotycznych i eukariotycznych. Są one opisane w katalogu: „The Promega Biological Research Products Catalogue”, 1992 (Promega Corp., 2800 Woods Hollow Road, Madison, WI, 53711-5399) oraz w „The Stratagene Cloning Systems Catalogue, 1992 (Stratagene Corp., 11011 Morth Torrey Pines Road, La Jolla, CA, 92037). Ponadto w opisie patentowym Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 4.170.473 ujawnione sąkoliste plazmidy DNAjako wektory transformacyjne nadające się do ekspresji egzogennych genów w bakterii E. Coli z wysoką wydajnością. Plazmidy te są użyteczne jako wektory transformacyjne w procedurach rekombinacji DNA, a ponadto, (a) posiadają cechę autonomicznej replikacji w komórce gospodarza, (b) autonomiczna replikacja plazmidujest regulowana temperaturą, w której utrzymywane są hodowle komórek gosodarza, (c) plazmidy te trwale utrzymują się w populacji komórek gospodarza, (d) bezpośrednia synteza produktu białkowego wskazuje na utrzymywanie się plazmidu w pupulacji komórek gospodarza, (e) posiadają unikalne dla danego plazmidu serie miejsc rozpoznawanych przez endonukleazę restrykcyjną, (f) kończą transkrypcję mRMA.
182 113
Te koliste plazmidy DNA są użyteczne jako wektory w procedurach rekombinacji DNA, zapewniając wysokie poziomy ekspresji egzogennych genów.
Po przygotowaniu wektora ekspresyjnego dla cząsteczki GLP-1, w następnym etapie umieszcza się ten wektor w odpowiedniej komórce, konstruując w ten sposób rekombinantową komórkę gospodarza mającą zdolność ekspresji tego polipeptydu. Techniki transformowania komórek rekombinacyjnymi wektorami DNA są znane. Informacje na ten temat sąpodane w cytowanym powyżej podręczniku Maniatis'a i wsp.. Transformowane komórki gospodarza mogą pochodzić z komórek eukariotycznych lub prokariotycznych.
Prokariotyczne komórki gospodarza na ogół wytwarzają białko z wyższymi wydajnościami i są łatwiejsze do hodowli. Białko wytwarzane z wysokąwydajnością. w bakteryjnych układach , ekspresyjnych charakterystycznie skupiają się w granulki albo ciała inkluzyjne zawierające wysokie poziomy wytwarzanego w nadmiarze białka. Takie agregaty białkowe na ogół musząbyć solubilizowane, denaturowane i rozwijane z zastosowaniem znanych odpowiednich technik (Kreuger i wsp., „Protein Folding”, wyd. Gierasch and King, 1990, str. 135-142, American Association for the Advancement ofScience Publication nr. 89- 18S, Washington, D.C. opis patentowym Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 4.923.967).
Po otrzymaniu żądanej cząsteczki GLP-1 charakteryzującej się punktem izoelektrycznym w zakresie od około 6,0 do około 9,0, przygotowuje się kompleks według wynalazku na drodze kompleksowania żądanej cząsteczki GLP-1 z kationem metalu dwuwartościowego sposobami znnaymi w technice. Jako kationy metali stosuje się Zn+.
Na ogół, żądaną cząsteczkę GLP-1 charakteryzującą się żądanym punktem izoelektrycznym łączy się z mieszaniną odpowiedniego bufora i odpowiedniej formy kationu metalu.
Buforami odpowiednimi do tego procesu są te, które utrzymują mieszaninę w zakresie pH od około 6,0 do około 9,0 ale nie wpływają na reakcję. Do kozrystnych buforów należą: bufory Goode'a, zwłaszcza bufor HEPES, bufor Tris i octanu Tris.
Formami kationów metali nadającymi się do tego celu są dowolne formy kationów metali dwuwartościowych, które tworzą kompleksy z cząsteczką GLP-1. Korzystnie stosuje się sól z kationem metalu dwuwartościowego, taką jak chlorek cynku, w takim nadmiarze aby uzyskać stosunek molowy wynoszący do około 50 cząsteczek kationu metalu dwuwartościowego na każdą cząsteczkę substratu GLP-1.
W tym etapie stosuje się temperaturę zapewniającą przeprowadzenie reakcji do końca. Na ogół reakcję prowadzi się w temperaturze otoczenia..
Produkt reakcji według wynalazku jest krystaliczną albo amorficzną zawiesiną. Izoluje się go i oczyszcza stosując techniki standardowe.
Przedmiotem wynalazku są również kompozycje farmaceutyczne zawierające związek według wynalazku w połączeniu z dopuszczalnym farmaceutycznie nośnikiem, rozcieńczalnikiem lub innym środkiem pomocniczym. Te kompozycje farmaceutyczne wytwarza się w sposób znany w technologii farmaceutycznej i stosuje w monoterapii albo w połączeniu z innymi środkami leczniczymi, korzystnie drogą parenteralną. Szczególnie korzystne jest podawanie domięśniowe i podskórne.
Przy podawaniu pareateralaym, dawka dzienna, korzystnie pojedyncza dawka dzienna, wynosi od około 1 pg/kg do około 1.000 pg/kg masy ciała, chociaż można stosować dawki niższe lub wyższe. Wymagane dawki będą zależeć od stopnia zaawansowania stanu chorobowego pacjenta oraz od takich czynników jak wysokość i masa ciała, płeć, wiek i historia choroby.
Przy sporządzaniu kompozycji według wynalazku, składnik aktywny, stanowiący związek według wynalazku zazwyczaj miesza się ze środkiem pomocniczym albo rozcieńcza się tym środkiem pomocniczym. Środek pomocniczy stosowany w charakterze rozcieńczalnika może występować w formie materiału stałego, półstałego lub ciekłego, służącego jako nośnik lub środowisko dla składnika aktywnego.
Podczas przygotowania formy farmaceutycznej, dla przygotowania związku aktywnego o odpowiedniej wielkości cząsteczek przed połączeniem go z innymi składnikami, może być potrzebne zmielenie tego składnika. Jeśli składnik aktywny jest w zasadzie nierozpuszczalny, wówczas miele się go na cząstki o wielkości poniżej około 0,074 mm. Jeśli składnik aktywnyjest w zasadzie rozpuszczalny w wodzie, wówczas na ogół przez mielenie przygotowuje się cząstki o wielkości, zapewniającej zasadniczo jednorodny rozkład w formie farmaceutycznej, np. około 0,42 mm.
Przykłady odpowiednich środków pomocniczych obejmują laktozę, glukozę, sacharozę, trehalozę. sorbitol i mannitol. Przez stosowanie znanych metod technologii farmaceutycznej można wytwarzać kompozycj e według wynalazku, z których po podaniu pacj entowi składnik aktywny uwalnia się szybko, w sposób spowolniony lub opóźniony.
Kompozycje te korzystnie wytwarza się w postaci jednostkowych form dawkowania, przy czym każda forma jednostkowa zazwyczaj zawiera od około 50 pg do około 100 mg, częściej od około 1 mg do około 10 mg składnika aktywnego. Termin ..jednostkowa forma dawkowania” oznacza oddzielne fizyc/niejednostki dostosowane dojednokrotnego podania człowiekowi lub innemu ssakowi, przy czym każdajednostka zawiera z góry określoną ilość składnika aktywnego, tak wyliczoną aby wywarła żądane działanie lecznicze w połączeniu z dogodnym farmaceutycznie środkiem pomocniczym.
Do celów podawania parenteralnego, kompozycje zawierające związek według wynalazku, korzystnie łączy się z wodą destylowaną i doprowadza się pH do wartości od około 6,0 do około 9,0.
W celu kontroli czasu trwania działania można stosować dodatkowe techniki farmaceutyczne. Preparaty o kontrolowanym uwalnianiu można wytwarzać przez zastosowanie polimerów do kompleksowania lub absorbowania związku według wynalazku. Szybkość uwalniania związku można regulować przez dobór odpowiednich makrocząsteczek (np. poliestrów, poliaminokwasów, poliwinylopirolidonu, winylooctanu etylu, metylocelulozy, karboksymetylocelulozy i siarczanu protaminy) i ich stężenia jak również przez wybór sposobu inkorporowania.
Innym możliwym sposobem kontrolowania czasu działania preparatów o kontrolowanym uwalnianiu jest wprowadzanie związku według wynalazku do cząstek materiału polimerycznego, takiego jak poliestry, poliaminokwasy, hydrożele, kopolimery: poli(kwasu mlekowego) lub winylooctanu etylenu.
Alternatywnie, zamiast wprowadzania związku do tych cząstek polimerowych, istnieje możliwość zamknięcia związku według wynalazku w mikrokapsułkach, wytworzonych na przykład z zastosowaniem technik koacerwacji albo polimeryzacji mied/yfazowrj, na przykład, odpowiednio w mikrokapsułkach hydroksymetylocelulozowych lub żelatynowych, albo w koloidalnych układach dostarczania, np. w liposomach, w mikrosferach albuminowych, w mikrormulsjach. nanocząsteczkach i nanokapsułkach albo w makroemulsjach. Techniki te opisane są w encyklopedii: „Remington's Pharmaceutical Science”, (1980).
Związek według wynalazku wykazuje działanie insulinotropowe. Tak więc, wynalazek rozwią/ujr problem dostarczania produktu użytecznego w sposobie zwiększania ekspresji insuliny, polegającym na wprowadzeniu do komórek wysp trzustkowych typu B ssaka, skutecznej ilości związku według wynalazku.
Wynalazek jest bardziej szczegółowo zilustrowany w następującym przykładzie. Przykład ten nie ma na celu ograniczania zakresu wynalazku.
Przykład 1. Cząsteczkę GLP-1 wytworzono stosując znany sposób syntezy peptydów w fazie stałej. Poszczególne ilości tego związku liofilizowano w małych fiolkach. Do tych próbek dodawano buforu 0.1M HEPES [kwas N-(2-hydroksyrtylo)piprrazyno-N'-(2-etanosulfonowy)] o wartości pH 7,4, zawierający różne stężenia chlorku cynku w ilości potrzebnej do ustawienia stężenia białka w roztworze na poziomie około 0,1 mg/ml. Próbki mieszano i pozostawiano w temperaturze otoczenia (22°C) przez około 18 godzin. Następnie mieszaniny te wirowano w czasie 5 minut w mikrowirówce typu „Fisher Model 235C”. Klarowne supernanty pobierano z probówek pipetą. Zawartość białka w supernantach oznaczano przez pomiar absorbancji przy długości fali 280 nm w spektrofotometrze typu „Gliford 260”. Teoretyczna wartość absorbancji dla roztworu zawierajacego 0,1 mg/ml cząsteczki GLP-1 przy tej długości fali w kuwecie 1 cm wynosi 0,207.
Wyniki doświadczeń przedstawiono poniżej.
Cząsteczka Zn/GLP-1 stosunek molowy Absorbancja przy 280 nm Val8-GLP-1 (7-37) OH
0 0,187
0,3 0,191
0,5 0,184
0,7 0,180
1,0 0,173
3,0 0,110
Niniejszy przykład pokazuje, że do skompleksowania i wytrącenia znacznej ilości cząsteczek GLP-1 z rozcieńczonych roztworów wystarczają niewielkie ilości cynku.
Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 60 egz
Cena 4,00 zł.

Claims (2)

  1. Zastrzeżenia patentowe
    1. Kompleks cząsteczki GLP-1 składający się ze związku o wzorze:
    Ri-X-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-SerrTyrrLeu-Y-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-ZPhe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-R2, w którym Ri oznacza L-histydynę, X oznacza Val, Y oznacza Glu, Z oznacza Glu, oraz R2 oznacza Gly-OH, i z zasocjowanego z nim kationu cynku.
  2. 2. Kompozycja farmaceutyczna do leczenia cukrzycy, zawierająca substancję czynną w połączeniu z jednym lub więcej farmaceutycznie dopuszczalnych nośników, rozcieńczalników lub środków pomocniczych, znamienna tym, że jako substancję czynną zawiera kompleks cząsteczki GLP-1 składający się ze związku o wzorze:
    Rl-X-Glu-Gly-'Πlr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Y-Glr-Gln-Ala-Ala-Lys-ZPhe-Ile-A-a-Trp-Leu-Va--Lrs-G-r-Arg-R2, w którym Ri oznacza L-histydynę, X oznacza Val, Y oznacza Glu, Z oznacza Glu, oraz R2 oznacza Gly-OH, i z zasocjowanego z nim kationu cynku.
PL95308783A 1995-03-21 1995-05-25 Kompleks czasteczki GLP-1 i zasocjowanego z nia kationu cynku oraz zawierajace go kompozycje farmaceutyczne PL PL PL PL PL PL PL PL PL182113B1 (pl)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US08/407,831 US5705483A (en) 1993-12-09 1995-03-21 Glucagon-like insulinotropic peptides, compositions and methods

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL308783A1 PL308783A1 (en) 1996-09-30
PL182113B1 true PL182113B1 (pl) 2001-11-30

Family

ID=23613700

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL95308783A PL182113B1 (pl) 1995-03-21 1995-05-25 Kompleks czasteczki GLP-1 i zasocjowanego z nia kationu cynku oraz zawierajace go kompozycje farmaceutyczne PL PL PL PL PL PL PL PL

Country Status (28)

Country Link
US (7) US5705483A (pl)
EP (2) EP1364967B1 (pl)
JP (3) JP3502694B2 (pl)
KR (1) KR100388583B1 (pl)
CN (1) CN1185257C (pl)
AT (2) ATE264869T1 (pl)
AU (1) AU708159B2 (pl)
BR (1) BR9503036A (pl)
CA (1) CA2150080A1 (pl)
CO (1) CO4650140A1 (pl)
CZ (1) CZ292972B6 (pl)
DE (2) DE69532914T2 (pl)
DK (2) DK0733644T3 (pl)
ES (2) ES2250789T3 (pl)
FI (1) FI952536L (pl)
HU (1) HUT74729A (pl)
IL (2) IL113809A (pl)
MY (1) MY134820A (pl)
NO (1) NO322837B1 (pl)
NZ (1) NZ272186A (pl)
PE (1) PE23296A1 (pl)
PL (1) PL182113B1 (pl)
PT (1) PT733644E (pl)
RU (1) RU2147588C1 (pl)
SI (1) SI1364967T1 (pl)
TW (1) TW389769B (pl)
UA (1) UA44696C2 (pl)
ZA (1) ZA954141B (pl)

Families Citing this family (236)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6849708B1 (en) 1986-05-05 2005-02-01 The General Hospital Corporation Insulinotropic hormone and uses thereof
US5614492A (en) * 1986-05-05 1997-03-25 The General Hospital Corporation Insulinotropic hormone GLP-1 (7-36) and uses thereof
US7138486B2 (en) 1986-05-05 2006-11-21 The General Hospital Corporation Insulinotropic hormone derivatives and uses thereof
FR2686899B1 (fr) 1992-01-31 1995-09-01 Rhone Poulenc Rorer Sa Nouveaux polypeptides biologiquement actifs, leur preparation et compositions pharmaceutiques les contenant.
US6284727B1 (en) 1993-04-07 2001-09-04 Scios, Inc. Prolonged delivery of peptides
US5705483A (en) * 1993-12-09 1998-01-06 Eli Lilly And Company Glucagon-like insulinotropic peptides, compositions and methods
US20020006899A1 (en) * 1998-10-06 2002-01-17 Pospisilik Andrew J. Use of dipeptidyl peptidase IV effectors for lowering blood pressure in mammals
DE69739172D1 (de) * 1996-08-08 2009-01-29 Amylin Pharmaceuticals Inc Regulation gastrointestinaler beweglichkeit
DK1629849T4 (en) * 1997-01-07 2017-12-04 Amylin Pharmaceuticals Llc Pharmaceutical compositions comprising exedins and agonists thereof
WO1998043658A1 (en) * 1997-03-31 1998-10-08 Eli Lilly And Company Glucagon-like peptide-1 analogs
CA2283834A1 (en) * 1997-03-31 1998-10-08 James Arthur Hoffmann Glucagon-like peptide-1 analogs
US7157555B1 (en) * 1997-08-08 2007-01-02 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Exendin agonist compounds
EP1066314B1 (en) 1997-11-14 2007-12-26 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Novel exendin agonist compounds
US7220721B1 (en) * 1997-11-14 2007-05-22 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Exendin agonist peptides
WO1999029336A1 (en) 1997-12-05 1999-06-17 Eli Lilly And Company Glp-1 formulations
US6380357B2 (en) 1997-12-16 2002-04-30 Eli Lilly And Company Glucagon-like peptide-1 crystals
FR2777283B1 (fr) * 1998-04-10 2000-11-24 Adir Nouveaux composes peptidiques analogues du glucagon-peptide- 1 (7-37), leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
DE19823831A1 (de) * 1998-05-28 1999-12-02 Probiodrug Ges Fuer Arzneim Neue pharmazeutische Verwendung von Isoleucyl Thiazolidid und seinen Salzen
DE19828113A1 (de) * 1998-06-24 2000-01-05 Probiodrug Ges Fuer Arzneim Prodrugs von Inhibitoren der Dipeptidyl Peptidase IV
EP1100530B1 (en) * 1998-07-31 2003-10-08 Novo Nordisk A/S In-vitro stimulation of beta cell proliferation
US6720407B1 (en) * 1998-08-28 2004-04-13 Eli Lilly And Company Method for administering insulinotropic peptides
EP1666054A1 (en) 1998-08-28 2006-06-07 Eli Lilly &amp; Company Method for administering insulinotropic peptides
AU765584B2 (en) 1998-09-17 2003-09-25 Eli Lilly And Company Protein formulations
US20030176357A1 (en) * 1998-10-06 2003-09-18 Pospisilik Andrew J. Dipeptidyl peptidase IV inhibitors and their uses for lowering blood pressure levels
US7259136B2 (en) * 1999-04-30 2007-08-21 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for treating peripheral vascular disease
US6284725B1 (en) * 1998-10-08 2001-09-04 Bionebraska, Inc. Metabolic intervention with GLP-1 to improve the function of ischemic and reperfused tissue
NZ511931A (en) * 1998-12-07 2004-01-30 Sod Conseils Rech Applic Analogues of glucagon like peptide-1
KR100458748B1 (ko) * 1998-12-07 2004-12-03 더 어드미니스트레이터즈 오브 더 튜래인 어듀케이셔널 훤드 Ｇｌｐ-1 유사체
SI1140148T1 (sl) * 1998-12-22 2006-04-30 Lilly Co Eli Stabilna formulacija raztopine glukagonu podobnega peptida-1
ES2249933T3 (es) * 1998-12-22 2006-04-01 Eli Lilly And Company Formulacion autoestable de peptido 1 tipo glucagon.
US20050272652A1 (en) 1999-03-29 2005-12-08 Gault Victor A Peptide analogues of GIP for treatment of diabetes, insulin resistance and obesity
US6605648B1 (en) * 1999-04-06 2003-08-12 Phillips Plastics Corporation Sinterable structures and method
PT1180121E (pt) 1999-05-17 2004-03-31 Conjuchem Inc Peptidos insulinotropicos de longa duracao
US6514500B1 (en) 1999-10-15 2003-02-04 Conjuchem, Inc. Long lasting synthetic glucagon like peptide {GLP-!}
US20090175821A1 (en) * 1999-05-17 2009-07-09 Bridon Dominique P Modified therapeutic peptides with extended half-lives in vivo
CA2349865C (en) * 1999-06-21 2014-08-19 Eli Lilly And Company Synergistic use of thiazolidinediones with glucagon-like peptide-1 and agonists thereof to treat metabolic instability associated with non-insulin dependent diabetes
US6864234B1 (en) * 1999-06-25 2005-03-08 Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques, S.A.S. Somatostatin agonists
PT1808438E (pt) 1999-06-29 2015-01-14 Mannkind Corp Purificação e estabilização de péptidos e proteínas em agentes farmacêuticos
US9006175B2 (en) 1999-06-29 2015-04-14 Mannkind Corporation Potentiation of glucose elimination
DE19940130A1 (de) * 1999-08-24 2001-03-01 Probiodrug Ges Fuer Arzneim Neue Effektoren der Dipeptidyl Peptidase IV zur topischen Anwendung
ES2487897T3 (es) 2000-01-21 2014-08-25 Novartis Ag Combinaciones que consisten de inhibidores de la dipeptidilpeptidasa-IV y agentes antidiabéticos
US6448045B1 (en) * 2000-03-10 2002-09-10 The Regents Of The University Of California Inducing insulin gene expression in pancreas cells expressing recombinant PDX-1
DK1283735T4 (da) * 2000-03-31 2013-02-04 Royalty Pharma Collection Trust Fremgangsmåde til forbedring signalering af øceller ved diabetes mellitus og til forebyggelse deraf
EP1803730A1 (en) 2000-04-12 2007-07-04 Human Genome Sciences, Inc. Albumin fusion proteins
EP1294757B1 (en) * 2000-06-16 2006-11-22 Eli Lilly And Company Glucagon-like peptide-1 analogs
KR100407792B1 (ko) * 2000-08-02 2003-12-01 한국생명공학연구원 인간 글루카곤 유사펩타이드를 융합파트너로 이용한재조합 단백질의 제조방법
AR033390A1 (es) 2000-08-22 2003-12-17 Novartis Ag Una composicion farmaceutica que comprende un antagonista del receptor at1 y un potenciador de la secrecion de insulina, el uso de dicha composicion para la fabricacion de un medicamento y un kit de partes
JP2004510716A (ja) * 2000-10-02 2004-04-08 ユーエスヴイ　リミテッド メトフォルミン含有持続性放出薬理組成物とその製造方法
ES2309108T3 (es) * 2000-10-27 2008-12-16 Probiodrug Ag Tratamiento de enfermedades neurologicas y neuropsicologicas.
DE60136958D1 (de) 2000-12-01 2009-01-22 Takeda Pharmaceutical Verfahren zur herstellung einer zubereitung mit einer bioaktiven substanz
WO2002048192A2 (en) * 2000-12-13 2002-06-20 Eli Lilly And Company Amidated glucagon-like peptide-1
MXPA03005135A (es) 2000-12-13 2003-12-04 Lilly Co Eli Regimen de tratamiento cronico usando peptidos insulinotropicos similares al glucagon.
US20040143015A1 (en) * 2001-03-12 2004-07-22 Villhauer Edwin Bernard Combination of organic compounds
US6573237B2 (en) 2001-03-16 2003-06-03 Eli Lilly And Company Protein formulations
US7368421B2 (en) * 2001-06-27 2008-05-06 Probiodrug Ag Use of dipeptidyl peptidase IV inhibitors in the treatment of multiple sclerosis
US20030130199A1 (en) * 2001-06-27 2003-07-10 Von Hoersten Stephan Dipeptidyl peptidase IV inhibitors and their uses as anti-cancer agents
WO2003002136A2 (en) * 2001-06-28 2003-01-09 Novo Nordisk A/S Stable formulation of modified glp-1
UA74912C2 (en) * 2001-07-06 2006-02-15 Merck & Co Inc Beta-aminotetrahydroimidazo-(1,2-a)-pyrazines and tetratriazolo-(4,3-a)-pyrazines as inhibitors of dipeptylpeptidase for the treatment or prevention of diabetes
US6642003B2 (en) 2001-08-02 2003-11-04 Cedars-Sinai Medical Center Human glucose-dependent insulin-secreting cell line
EP1492525A2 (en) * 2001-08-16 2005-01-05 Probiodrug AG Use of inhibitors of proline endopeptidase to modulate inositol (1,4,5) triphosphate concentration dependent on intracellular signal cascades
WO2003020201A2 (en) * 2001-08-28 2003-03-13 Eli Lilly And Company Pre-mixes of glp-1 and basal insulin
US6844316B2 (en) * 2001-09-06 2005-01-18 Probiodrug Ag Inhibitors of dipeptidyl peptidase I
US6911324B2 (en) 2001-10-18 2005-06-28 The Regents Of The University Of California Induction of beta cell differentiation in human cells
CA2463803A1 (en) * 2001-10-19 2003-05-01 Eli Lilly And Company Biphasic mixtures of glp-1 and insulin
US7332819B2 (en) * 2002-01-09 2008-02-19 Micron Technology, Inc. Stacked die in die BGA package
EP1997829A1 (en) 2001-12-21 2008-12-03 Human Genome Sciences, Inc. Albumin fusion proteins
CA2484556A1 (en) * 2001-12-21 2003-07-24 Human Genome Sciences, Inc. Albumin fusion proteins
US7105489B2 (en) * 2002-01-22 2006-09-12 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for treating polycystic ovary syndrome
MXPA04008068A (es) * 2002-02-20 2004-11-26 Lilly Co Eli Metodo para administrar moleculas de glp-1.
US7141240B2 (en) * 2002-03-12 2006-11-28 Cedars-Sinai Medical Center Glucose-dependent insulin-secreting cells transfected with a nucleotide sequence encoding GLP-1
ATE385193T1 (de) 2002-03-20 2008-02-15 Mannkind Corp Inhalationsgerät
US20030232761A1 (en) * 2002-03-28 2003-12-18 Hinke Simon A. Novel analogues of glucose-dependent insulinotropic polypeptide
US20030191056A1 (en) 2002-04-04 2003-10-09 Kenneth Walker Use of transthyretin peptide/protein fusions to increase the serum half-life of pharmacologically active peptides/proteins
JP5685355B2 (ja) 2002-07-04 2015-03-18 ジーランド ファーマ アクティーゼルスカブ Ｇｌｐ−１および糖尿病の処置方法
US20080260838A1 (en) * 2003-08-01 2008-10-23 Mannkind Corporation Glucagon-like peptide 1 (glp-1) pharmaceutical formulations
US20040058876A1 (en) * 2002-09-18 2004-03-25 Torsten Hoffmann Secondary binding site of dipeptidyl peptidase IV (DP IV)
WO2004031374A2 (en) * 2002-09-18 2004-04-15 Prosidion Ltd. Secondary binding site of dipeptidyl peptidase iv (dp iv)
CA2500021A1 (en) 2002-09-25 2004-04-08 Theratechnologies Inc. Modified glp-1 peptides with increased biological potency
US7544657B2 (en) * 2002-10-02 2009-06-09 Zealand Pharma A/S Stabilized Exendin-4 compounds
EP1569680B1 (en) * 2002-10-22 2009-01-21 Waratah Pharmaceuticals, Inc. Treatment of diabetes
US7790681B2 (en) * 2002-12-17 2010-09-07 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Treatment of cardiac arrhythmias with GLP-1 receptor ligands
US20040209803A1 (en) * 2002-12-19 2004-10-21 Alain Baron Compositions for the treatment and prevention of nephropathy
RU2234703C1 (ru) * 2002-12-18 2004-08-20 Мищенко Борис Петрович Способ количественного определения гликогемоглобина
JP2006514990A (ja) * 2002-12-27 2006-05-18 ディオベックス， インコーポレイテッド インスリン誘発性低血糖の予防および制御のための組成物および方法
US7655618B2 (en) * 2002-12-27 2010-02-02 Diobex, Inc. Compositions and methods for the prevention and control of insulin-induced hypoglycemia
CA2513213C (en) 2003-01-22 2013-07-30 Human Genome Sciences, Inc. Albumin fusion proteins
CA2513307A1 (en) * 2003-02-19 2004-09-02 Zheng Xin Dong Analogues of glp-1
HRP20050683A2 (en) * 2003-03-19 2006-07-31 Eli Lilly And Company Polyethylene glycol linked glp-1 compounds
MXPA05010926A (es) * 2003-04-15 2005-11-25 Opperbas Holding Bv Composicion farmaceutica que comprende proteinas y/o polipeptidos y particulas coloidales.
KR20060009902A (ko) * 2003-05-05 2006-02-01 프로비오드룩 아게 글루타미닐 및 글루타메이트 사이클라제의 이펙터의 용도
WO2004098591A2 (en) * 2003-05-05 2004-11-18 Probiodrug Ag Inhibitors of glutaminyl cyclase and their use in the treatment of neurological diseases
WO2005000222A2 (en) * 2003-05-30 2005-01-06 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Novel methods and compositions for enhanced transmucosal delivery of peptides and proteins
EP1633391B1 (en) * 2003-06-03 2011-10-19 Novo Nordisk A/S Stabilized pharmaceutical peptide compositions
CN1812808B (zh) * 2003-06-03 2012-07-04 诺沃挪第克公司 稳定化的药物肽组合物
KR101308912B1 (ko) * 2003-06-03 2013-09-23 노보 노르디스크 에이/에스 안정화된 약학적 펩티드 조성물
AU2004283461B2 (en) * 2003-10-15 2010-02-11 Probiodrug Ag Use of effectors of glutaminyl and glutamate cyclases
EP1687019B1 (en) * 2003-11-20 2017-11-22 Novo Nordisk A/S Propylene glycol-containing peptide formulations which are optimal for production and for use in injection devices
EP1694278A4 (en) * 2003-12-16 2009-08-12 Ipsen Pharma GLP-1 PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS
EP2210900A3 (en) 2003-12-16 2010-08-11 Ipsen Pharma Analogues of GLP-1
US20060286129A1 (en) * 2003-12-19 2006-12-21 Emisphere Technologies, Inc. Oral GLP-1 formulations
US20090202494A1 (en) * 2004-01-30 2009-08-13 Antonio Cruz Combined use of glp-1 agonists and gastrin for regulating blood glucose levels
EP1713780B1 (en) 2004-02-05 2012-01-18 Probiodrug AG Novel inhibitors of glutaminyl cyclase
HUE027902T2 (en) * 2004-02-09 2016-11-28 Human Genome Sciences Inc Corp Service Company Albumin fusion proteins
ES2347902T3 (es) * 2004-04-23 2010-11-22 Conjuchem Biotechnologies Inc. Canadian Corporation 4528590 Fase solida para uso en un procedimiento para la purificacion de conjugados de albumina.
US20090069226A1 (en) * 2004-05-28 2009-03-12 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Transmucosal delivery of peptides and proteins
BRPI0514263B8 (pt) 2004-08-20 2021-05-25 Mannkind Corp método para a síntese de bis-3,6-[4-aminobutil]-2,5-dicetopiperazina n-protegida
CN104436170B (zh) 2004-08-23 2018-02-23 曼金德公司 用于药物输送的二酮哌嗪盐
PL1789434T3 (pl) * 2004-08-31 2014-07-31 Novo Nordisk As Zastosowanie tris(hydroksymetylo)aminometanu do stabilizacji peptydów, polipeptydów i białek
DE102004043153B4 (de) * 2004-09-03 2013-11-21 Philipps-Universität Marburg Erfindung betreffend GLP-1 und Exendin
EP2494983B1 (en) * 2004-11-12 2019-04-24 Novo Nordisk A/S Stable formulations of glp-1
WO2006069697A1 (en) * 2004-12-30 2006-07-06 F. Hoffmann-La Roche Ag Colorimetrically assessing peptide characteristics
WO2006069779A1 (en) * 2004-12-30 2006-07-06 F. Hoffmann-La Roche Ag Preparing of peptides with excellent solubility
SG159551A1 (en) 2005-02-11 2010-03-30 Amylin Pharmaceuticals Inc Gip analog and hybrid polypeptides with selectable properties
US8263545B2 (en) 2005-02-11 2012-09-11 Amylin Pharmaceuticals, Inc. GIP analog and hybrid polypeptides with selectable properties
WO2006097535A2 (en) * 2005-03-18 2006-09-21 Novo Nordisk A/S Peptide agonists of the glucagon family with secretin like activity
WO2006133333A2 (en) 2005-06-07 2006-12-14 The Rockefeller University Stimulation of pancreatic b cell proliferation
US20070004616A1 (en) * 2005-06-30 2007-01-04 Roland Cherif-Cheikh GLP-1 pharmaceutical compositions
CN101258163B (zh) * 2005-06-30 2013-08-21 益普生制药股份有限公司 Glp-1药物组合物
GT200600381A (es) 2005-08-25 2007-03-28 Compuestos organicos
AU2006290870B2 (en) 2005-09-14 2013-02-28 Mannkind Corporation Method of drug formulation based on increasing the affinity of active agents for crystalline microparticle surfaces
RS51319B (sr) 2005-09-22 2010-12-31 Biocompatibles Uk Limited GLP-l (GLUKAGON-LIKE PEPTID-l) FUZIONI POLIPEPTIDI SA POVEĆANOM OTPORNOSTI NA PEPTIDAZE
WO2007051987A1 (en) * 2005-11-01 2007-05-10 Activotec Spp Limited Insulinotropic compounds and uses thereof
GB0522295D0 (en) * 2005-11-01 2005-12-07 Activotec Spp Ltd Peptides and uses thereof
US8039432B2 (en) * 2005-11-09 2011-10-18 Conjuchem, Llc Method of treatment of diabetes and/or obesity with reduced nausea side effect
CN100374462C (zh) * 2005-11-21 2008-03-12 大连帝恩生物工程有限公司 截短胰高血糖素样肽1(sGLP-1)、制法及其应用
US20130172274A1 (en) 2005-12-20 2013-07-04 Duke University Methods and compositions for delivering active agents with enhanced pharmacological properties
US8178495B2 (en) 2008-06-27 2012-05-15 Duke University Therapeutic agents comprising a GLP-1 receptor agonist and elastin-like peptide
CN101384272B (zh) 2005-12-20 2013-05-01 杜克大学 用于递送具有增强的药理性质的活性剂的方法和组合物
US8841255B2 (en) 2005-12-20 2014-09-23 Duke University Therapeutic agents comprising fusions of vasoactive intestinal peptide and elastic peptides
CN101384623B (zh) * 2005-12-22 2013-07-24 常山凯捷健生物药物研发（河北）有限公司 白蛋白与治疗剂的预成型偶联物的制备方法
JP5599975B2 (ja) 2006-02-22 2014-10-01 マンカインド コーポレイション ジケトピペラジン及び活性薬剤を含有する微粒子の製剤特性の改善方法
WO2007124461A2 (en) * 2006-04-20 2007-11-01 Amgen Inc. Glp-1 compounds
PT2035451E (pt) * 2006-06-23 2010-06-09 Hoffmann La Roche Síntese de péptidos insulinotrópicos
EA200970131A1 (ru) * 2006-07-18 2009-08-28 Сентокор, Инк. Миметические антитела для glp-1 человека, композиции, способы и применения
US8497240B2 (en) 2006-08-17 2013-07-30 Amylin Pharmaceuticals, Llc DPP-IV resistant GIP hybrid polypeptides with selectable properties
UY30820A1 (es) * 2006-12-21 2008-07-03 Centocor Inc Uso de agonistas del receptor de glp-1 de accion prolongada para mejorar la sensibilidad a la insulina y los perfiles lipidicos
JP2008169195A (ja) 2007-01-05 2008-07-24 Hanmi Pharmaceutical Co Ltd キャリア物質を用いたインスリン分泌ペプチド薬物結合体
GB2448895A (en) * 2007-05-01 2008-11-05 Activotec Spp Ltd GLP-1 like compounds and uses thereof
JP2010538049A (ja) 2007-09-05 2010-12-09 ノボ・ノルデイスク・エー／エス 切断型ｇｌｐ−１誘導体及びその治療的使用
JP5476304B2 (ja) * 2007-09-05 2014-04-23 ノボ・ノルデイスク・エー／エス グルカゴン様ペプチド−１誘導体及びそれらの医薬用途
EP2214647A2 (en) 2007-10-24 2010-08-11 MannKind Corporation Delivery of active agents
US8785396B2 (en) 2007-10-24 2014-07-22 Mannkind Corporation Method and composition for treating migraines
EP2211842B1 (en) * 2007-10-24 2015-08-12 MannKind Corporation An inhalable dry powder formulation comprising glp-1 for use in the treatment of hyperglycemia and diabetes by pulmonary administration
WO2009053315A1 (en) * 2007-10-27 2009-04-30 F. Hoffmann-La Roche Ag Insulinotropic peptide synthesis using solid and solution phase combination techniques
US20090181037A1 (en) * 2007-11-02 2009-07-16 George Heavner Semi-Synthetic GLP-1 Peptide-FC Fusion Constructs, Methods and Uses
JP2011506442A (ja) * 2007-12-11 2011-03-03 コンジュケム バイオテクノロジーズ インコーポレイテッド インスリン分泌性ペプチド結合体の製剤
US20100317057A1 (en) 2007-12-28 2010-12-16 Novo Nordisk A/S Semi-recombinant preparation of glp-1 analogues
US8499757B2 (en) 2008-06-13 2013-08-06 Mannkind Corporation Dry powder inhaler and system for drug delivery
US8485180B2 (en) 2008-06-13 2013-07-16 Mannkind Corporation Dry powder drug delivery system
ES2904623T3 (es) 2008-06-20 2022-04-05 Mannkind Corp Aparato interactivo para establecer un perfil en tiempo real de esfuerzos de inhalación
TWI614024B (zh) 2008-08-11 2018-02-11 曼凱公司 超快起作用胰島素之用途
RS59913B1 (sr) 2008-10-17 2020-03-31 Sanofi Aventis Deutschland Kombinacija insulina i glp-1-agonista
JP5514831B2 (ja) * 2008-11-17 2014-06-04 メルク・シャープ・アンド・ドーム・コーポレーション 糖尿病の治療のための置換二環式アミン
US8314106B2 (en) 2008-12-29 2012-11-20 Mannkind Corporation Substituted diketopiperazine analogs for use as drug delivery agents
US8538707B2 (en) 2009-03-11 2013-09-17 Mannkind Corporation Apparatus, system and method for measuring resistance of an inhaler
KR101338555B1 (ko) 2009-05-15 2013-12-09 노파르티스 아게 알도스테론 신타제 억제제로서의 아릴 피리딘
CA2761853A1 (en) 2009-05-15 2010-11-18 Novartis Ag Benzoxazolone derivatives as aldosterone synthase inhibitors
MA33364B1 (fr) 2009-05-28 2012-06-01 Novartis Ag Dérivés aminobutyriques substitués en tant qu'inhibiteurs de néprilysine
CA2763572C (en) 2009-05-28 2017-10-17 Novartis Ag Substituted aminopropionic derivatives as neprilysin inhibitors
RU2509555C2 (ru) 2009-06-12 2014-03-20 Маннкайнд Корпорейшн Микрочастицы дикетопиперазина с определенными удельными площадями поверхности
SG10201403840VA (en) 2009-07-06 2014-10-30 Sanofi Aventis Deutschland Aqueous insulin preparations containing methionine
PL3311828T3 (pl) * 2009-08-14 2021-11-22 Phasebio Pharmaceuticals, Inc. Zmodyfikowane wazoaktywne peptydy jelitowe
CA2778698A1 (en) 2009-11-03 2011-05-12 Mannkind Corporation An apparatus and method for simulating inhalation efforts
SI2498802T1 (sl) 2009-11-13 2015-05-29 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Farmacevtski sestavek, ki vsebuje agonist GLP-1, inzulin in metionin
PL2498801T3 (pl) 2009-11-13 2018-08-31 Sanofi Aventis Deutschland Kompozycja farmaceutyczna zawierająca desPro<sup>36</sup>eksendyno-4(1-39)-Lys6-NH2 i metioninę
EP2501678B1 (en) 2009-11-17 2015-09-23 Novartis AG Aryl-pyridine derivatives as aldosterone synthase inhibitors
JO2967B1 (en) 2009-11-20 2016-03-15 نوفارتس ايه جي Acetic acid derivatives of carbamoyl methyl amino are substituted as new NEP inhibitors
JP5575913B2 (ja) 2009-11-30 2014-08-20 ノバルティス アーゲー アルドステロン合成酵素阻害剤としてのイミダゾール誘導体
WO2011123943A1 (en) 2010-04-09 2011-10-13 Mount Sinai Hospital Methods for treating disorders of the gastrointestinal tract using a glp-1 agonist
AU2011247452B2 (en) 2010-04-27 2016-03-17 Zealand Pharma A/S Peptide conjugates of GLP-1 receptor agonists and gastrin and their use
BR112012029248B1 (pt) 2010-05-17 2021-09-28 Betta Pharmaceuticals Co., Ltd Análogo de glp-1 de fórmula i ou a sua composição, análogo de glp-1 de fórmula viii ou um sal farmaceuticamente aceitável ou a composição do mesmo, composição farmacêutica e uso de um composto
MX359281B (es) 2010-06-21 2018-09-21 Mannkind Corp Sistema y metodos para suministrar un farmaco en polvo seco.
BR112013004756B1 (pt) 2010-08-30 2020-04-28 Sanofi Aventis Deutschland uso de ave0010 para a fabricação de um medicamento para o tratamento da diabetes melito tipo 2
US8673974B2 (en) 2010-11-16 2014-03-18 Novartis Ag Substituted amino bisphenyl pentanoic acid derivatives as NEP inhibitors
US8877815B2 (en) 2010-11-16 2014-11-04 Novartis Ag Substituted carbamoylcycloalkyl acetic acid derivatives as NEP
PT2651398T (pt) 2010-12-16 2018-03-09 Novo Nordisk As Composições sólidas compreendendo um agonista de glp-1 e um sal de ácido n-(8-(2-hidroxibenzoil)amino) caprílico
WO2012098188A1 (en) * 2011-01-19 2012-07-26 Novo Nordisk A/S Glp-1 particles and compositions
US8925726B2 (en) 2011-04-01 2015-01-06 Mannkind Corporation Blister package for pharmaceutical cartridges
HUE031405T2 (en) 2011-04-12 2017-07-28 Novo Nordisk As Double-acylated GLP-1 derivatives
US9821032B2 (en) 2011-05-13 2017-11-21 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Pharmaceutical combination for improving glycemic control as add-on therapy to basal insulin
CA2873553C (en) 2011-06-06 2020-01-28 Phasebio Pharmaceuticals, Inc. Use of modified vasoactive intestinal peptides in the treatment of hypertension
WO2012174472A1 (en) 2011-06-17 2012-12-20 Mannkind Corporation High capacity diketopiperazine microparticles
CA2846413C (en) 2011-08-29 2021-11-02 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Pharmaceutical combination for use in glycemic control in diabetes type 2 patients
TWI559929B (en) 2011-09-01 2016-12-01 Sanofi Aventis Deutschland Pharmaceutical composition for use in the treatment of a neurodegenerative disease
BR112014009686A2 (pt) 2011-10-24 2018-08-07 Mannkind Corp composição analgésica inalável, pó seco e método para tratar dor
MX2014005351A (es) 2011-11-03 2014-05-28 Zealand Pharma As Conjugados de gastrina peptidicos de agonistas de receptor glp-1.
JP6046161B2 (ja) 2011-12-29 2016-12-14 ノヴォ ノルディスク アー／エス 非タンパク質新生アミノ酸を含むジペプチド
HUE062740T2 (hu) 2012-03-22 2023-12-28 Novo Nordisk As GLP-1 peptidek készítményei és elõállításuk
ES2715308T3 (es) 2012-03-22 2019-06-03 Novo Nordisk As Composiciones que comprenden un agente de suministro y su preparación
EP2863895B1 (en) 2012-06-20 2021-04-14 Novo Nordisk A/S Tablet formulation comprising a peptide and a delivery agent
EP2873422A4 (en) 2012-07-10 2015-12-30 Takeda Pharmaceutical PHARMACEUTICAL PREPARATION FOR INJECTION
MX354163B (es) 2012-07-12 2018-02-15 Mannkind Corp Sistemas y métodos de suministro de fármaco en polvo seco.
JP6534927B2 (ja) 2012-07-23 2019-06-26 ジーランド ファーマ アクティーゼルスカブ グルカゴン類似体
TWI608013B (zh) 2012-09-17 2017-12-11 西蘭製藥公司 升糖素類似物
EP2911690A1 (en) 2012-10-26 2015-09-02 MannKind Corporation Inhalable influenza vaccine compositions and methods
UY35144A (es) 2012-11-20 2014-06-30 Novartis Ag Miméticos lineales sintéticos de apelina para el tratamiento de insuficiencia cardiaca
TWI641381B (zh) 2013-02-04 2018-11-21 法商賽諾菲公司 胰島素類似物及／或胰島素衍生物之穩定化醫藥調配物
WO2014126979A1 (en) 2013-02-14 2014-08-21 Novartis Ag Substituted bisphenyl butanoic phosphonic acid derivatives as nep (neutral endopeptidase) inhibitors
SG10201708090TA (en) 2013-03-15 2017-11-29 Mannkind Corp Microcrystalline diketopiperazine compositions and methods
US20160067184A1 (en) 2013-05-02 2016-03-10 Novo Nordisk A/S Oral Dosing of GLP-1 Compounds
KR102321339B1 (ko) 2013-07-18 2021-11-02 맨카인드 코포레이션 열-안정성 건조 분말 약제학적 조성물 및 방법
TW201536814A (zh) 2013-07-25 2015-10-01 Novartis Ag 用於治療心臟衰竭之合成環狀多肽
AU2014293387B2 (en) 2013-07-25 2017-04-20 Novartis Ag Bioconjugates of synthetic apelin polypeptides
CA2920488C (en) 2013-08-05 2022-04-26 Mannkind Corporation Insufflation apparatus and methods
US9988429B2 (en) 2013-10-17 2018-06-05 Zealand Pharma A/S Glucagon analogues
PE20160683A1 (es) 2013-10-17 2016-07-21 Zealand Pharma As Analogos de glucagon acilados
US10131702B2 (en) 2013-11-06 2018-11-20 Zealand Pharma A/S Glucagon-GLP-1-GIP triple agonist compounds
MX2016005556A (es) 2013-11-06 2016-07-15 Zealand Pharma As Compuestos agonistas duales de gip-glp-1 y procedimientos.
RU2016132340A (ru) 2014-01-09 2018-02-14 Санофи Стабилизированные фармацевтические составы на основе инсулина аспарта
EP3091965A1 (en) 2014-01-09 2016-11-16 Sanofi Stabilized glycerol free pharmaceutical formulations of insulin analogues and/or insulin derivatives
CA2932877A1 (en) 2014-01-09 2015-07-16 Sanofi Stabilized pharmaceutical formulations of insulin analogues and/or insulin derivatives
US10307464B2 (en) 2014-03-28 2019-06-04 Mannkind Corporation Use of ultrarapid acting insulin
CA2947982C (en) 2014-05-08 2022-11-29 Phasebio Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for treating cystic fibrosis
US10561806B2 (en) 2014-10-02 2020-02-18 Mannkind Corporation Mouthpiece cover for an inhaler
ES2883345T3 (es) 2014-10-29 2021-12-07 Zealand Pharma As Compuestos agonistas del GIP y métodos
TWI758239B (zh) 2014-12-12 2022-03-21 德商賽諾菲阿凡提斯德意志有限公司 甘精胰島素/利司那肽固定比率配製劑
CN105820233B (zh) * 2015-01-04 2021-06-15 甘李药业股份有限公司 一种胰岛素衍生物的制备方法
MA41580A (fr) 2015-01-23 2017-11-29 Novartis Ag Conjugués d'acides gras de l'apeline synthétique présentant une demi-vie améliorée
CA2976038A1 (en) 2015-02-09 2016-08-18 Phasebio Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for treating muscle disease and disorders
TWI748945B (zh) 2015-03-13 2021-12-11 德商賽諾菲阿凡提斯德意志有限公司 第２型糖尿病病患治療
TW201705975A (zh) 2015-03-18 2017-02-16 賽諾菲阿凡提斯德意志有限公司 第２型糖尿病病患之治療
AU2016247499B2 (en) 2015-04-16 2020-09-03 Zealand Pharma A/S Acylated glucagon analogue
JOP20190086A1 (ar) 2016-10-21 2019-04-18 Novartis Ag مشتقات نافثيريدينون جديدة واستخدامها في معالجة عدم انتظام ضربات القلب
BR112019010624A2 (pt) 2016-12-09 2019-10-22 Zealand Pharma As agonistas duplos de glp-1/glp-2 acilados e composição
CA3082033A1 (en) 2017-08-24 2019-02-28 Novo Nordisk A\S Glp-1 compositions and uses thereof
KR102647171B1 (ko) 2018-02-02 2024-03-15 노보 노르디스크 에이/에스 Glp-1 작용제 및 n-(8-(2-하이드록시벤조일)아미노)카프릴산의 염을 포함하는 고형 조성물
UY38072A (es) 2018-02-07 2019-10-01 Novartis Ag Compuestos derivados de éster butanoico sustituido con bisfenilo como inhibidores de nep, composiciones y combinaciones de los mismos
EP3887388A1 (en) 2018-11-27 2021-10-06 Novartis AG Cyclic peptides as proprotein convertase subtilisin/kexin type 9 (pcsk9) inhibitors for the treatment of metabolic disorders
WO2020110008A1 (en) 2018-11-27 2020-06-04 Novartis Ag Cyclic pentamer compounds as proprotein convertase subtilisin/kexin type 9 (pcsk9) inhibitors for the treatment of metabolic disorder
PY1998404A (es) 2018-11-27 2021-06-17 Novartis Ag Compuestos tetrámeros cíclicos como inhibidores de proproteína convertasa subtilisina/kexina tipo 9 (pcsk9) para el tratamiento de trastornos metabólicos
GB201917723D0 (en) * 2019-12-04 2020-01-15 Nv Rose Llc Stable liquid formulations of glucagon-like peptide 1 or analogues thereof
US11318191B2 (en) 2020-02-18 2022-05-03 Novo Nordisk A/S GLP-1 compositions and uses thereof
TW202333563A (zh) 2021-11-12 2023-09-01 瑞士商諾華公司 用於治療疾病或障礙之二胺基環戊基吡啶衍生物
AR127698A1 (es) 2021-11-23 2024-02-21 Novartis Ag Derivados de naftiridinona para el tratamiento de una enfermedad o un trastorno
WO2024123812A1 (en) 2022-12-05 2024-06-13 Shattuck Labs, Inc. Fusion proteins for the treatment of cardiometabolic diseases
US20240391941A1 (en) 2023-05-24 2024-11-28 Novartis Ag Naphthyridinone derivatives for the treatment of a disease or disorder

Family Cites Families (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4347374A (en) * 1980-07-21 1982-08-31 Merck & Co., Inc. Acid addition salts of N-trityl-α-fluoromethylhistidine enantiomer derivatives
EP0305387B2 (en) * 1986-05-05 1996-08-28 The General Hospital Corporation Insulinotropic hormone
US5118666A (en) * 1986-05-05 1992-06-02 The General Hospital Corporation Insulinotropic hormone
US5120712A (en) * 1986-05-05 1992-06-09 The General Hospital Corporation Insulinotropic hormone
US5545618A (en) * 1990-01-24 1996-08-13 Buckley; Douglas I. GLP-1 analogs useful for diabetes treatment
DK0512042T3 (da) * 1990-01-24 1998-05-11 Douglas I Buckley GLP-1-analoger anvendelige ved diabetesbehandling
JPH05507939A (ja) * 1991-04-09 1993-11-11 エフ・ホフマン―ラ　ロシユ　アーゲー 成長ホルモン放出因子の類似体
DK36392D0 (da) * 1992-03-19 1992-03-19 Novo Nordisk As Anvendelse af kemisk forbindelse
AU671117B2 (en) * 1992-06-15 1996-08-15 Scios Inc. Glucagon-like peptide and insulinotropin derivatives
US6284727B1 (en) * 1993-04-07 2001-09-04 Scios, Inc. Prolonged delivery of peptides
NZ250844A (en) * 1993-04-07 1996-03-26 Pfizer Treatment of non-insulin dependant diabetes with peptides; composition
AU7531094A (en) * 1993-08-24 1995-03-21 Novo Nordisk A/S Protracted glp-1
EP0658568A1 (en) * 1993-12-09 1995-06-21 Eli Lilly And Company Glucagon-like insulinotropic peptides, compositions and methods
US5705483A (en) 1993-12-09 1998-01-06 Eli Lilly And Company Glucagon-like insulinotropic peptides, compositions and methods

Also Published As

Publication number Publication date
US5977071A (en) 1999-11-02
FI952536A7 (fi) 1996-09-22
AU2026895A (en) 1996-10-03
FI952536A0 (fi) 1995-05-24
UA44696C2 (uk) 2002-03-15
DE69532914D1 (de) 2004-05-27
US6133235A (en) 2000-10-17
EP1364967A3 (en) 2004-01-28
EP0733644B1 (en) 2004-04-21
DK1364967T3 (da) 2006-03-27
PT733644E (pt) 2004-07-30
DE69534678D1 (de) 2006-01-12
FI952536L (fi) 1996-09-22
IL113809A0 (en) 1995-08-31
RU2147588C1 (ru) 2000-04-20
JP2004002480A (ja) 2004-01-08
ES2218536T3 (es) 2004-11-16
US5705483A (en) 1998-01-06
CO4650140A1 (es) 1998-09-03
HUT74729A (en) 1997-02-28
CZ292972B6 (cs) 2004-01-14
TW389769B (en) 2000-05-11
RU95108231A (ru) 1997-03-20
KR960034219A (ko) 1996-10-22
US20020165342A1 (en) 2002-11-07
PL308783A1 (en) 1996-09-30
DE69532914T2 (de) 2005-03-31
ATE312119T1 (de) 2005-12-15
JP3502694B2 (ja) 2004-03-02
CA2150080A1 (en) 1996-09-22
MY134820A (en) 2007-12-31
CN1131674A (zh) 1996-09-25
AU708159B2 (en) 1999-07-29
JPH08269097A (ja) 1996-10-15
NO322837B1 (no) 2006-12-11
BR9503036A (pt) 1997-09-23
SI1364967T1 (sl) 2006-04-30
EP1364967A2 (en) 2003-11-26
IL134853A0 (en) 2001-05-20
NO952034D0 (no) 1995-05-23
JP2003048899A (ja) 2003-02-21
US6410513B1 (en) 2002-06-25
PE23296A1 (es) 1996-06-15
US6388053B1 (en) 2002-05-14
NO952034L (no) 1996-09-23
ES2250789T3 (es) 2006-04-16
DK0733644T3 (da) 2004-08-16
CN1185257C (zh) 2005-01-19
ATE264869T1 (de) 2004-05-15
US7232879B2 (en) 2007-06-19
IL113809A (en) 2000-07-26
EP1364967B1 (en) 2005-12-07
CZ132195A3 (en) 1996-10-16
US6703365B2 (en) 2004-03-09
ZA954141B (en) 1996-11-22
EP0733644A1 (en) 1996-09-25
US20040127399A1 (en) 2004-07-01
NZ272186A (en) 1997-01-29
DE69534678T2 (de) 2006-09-07
KR100388583B1 (ko) 2003-09-13
HU9501508D0 (en) 1995-07-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
PL182113B1 (pl) Kompleks czasteczki GLP-1 i zasocjowanego z nia kationu cynku oraz zawierajace go kompozycje farmaceutyczne PL PL PL PL PL PL PL PL
EP0708179B1 (en) Glucagon-like insulinotropic peptide analogs, compositions, and methods of use
US6849708B1 (en) Insulinotropic hormone and uses thereof
US7138486B2 (en) Insulinotropic hormone derivatives and uses thereof
US5614492A (en) Insulinotropic hormone GLP-1 (7-36) and uses thereof
EP0658568A1 (en) Glucagon-like insulinotropic peptides, compositions and methods
EP0464022B1 (en) Insulinotropic hormone
EP0587255A1 (en) Insulinotropic hormone
RS49562B (sr) Insulinotropski kompleksi, kompozicije i postupci

Legal Events

Date Code Title Description
LAPS Decisions on the lapse of the protection rights

Effective date: 20070525