NO321596B1 - Fremgangsmate for separasjon av epotiloner - Google Patents

Fremgangsmate for separasjon av epotiloner Download PDF

Info

Publication number
NO321596B1
NO321596B1 NO20052034A NO20052034A NO321596B1 NO 321596 B1 NO321596 B1 NO 321596B1 NO 20052034 A NO20052034 A NO 20052034A NO 20052034 A NO20052034 A NO 20052034A NO 321596 B1 NO321596 B1 NO 321596B1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
epothilones
epothilone
water
phase
resin
Prior art date
Application number
NO20052034A
Other languages
English (en)
Other versions
NO20052034L (no
Inventor
Hans Hofmann
Marion Mahnke
Klaus Memmert
Frank Petersen
Ernst Kuesters
Michael Mutz
Thomas Schupp
Original Assignee
Novartis Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Publication of NO20052034L publication Critical patent/NO20052034L/no
Application filed by Novartis Ag filed Critical Novartis Ag
Publication of NO321596B1 publication Critical patent/NO321596B1/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
    • C12P17/18—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms containing at least two hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system, e.g. rifamycin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D493/00—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system
    • C07D493/02—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D493/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
    • C12P17/16—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms containing two or more hetero rings
    • C12P17/167—Heterorings having sulfur atoms as ring heteroatoms, e.g. vitamin B1, thiamine nucleus and open chain analogs
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
    • C12P17/18—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms containing at least two hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system, e.g. rifamycin
    • C12P17/181—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring heteroatoms in the condensed system, e.g. Salinomycin, Septamycin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2299/00—Coordinates from 3D structures of peptides, e.g. proteins or enzymes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
  • Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)

Abstract

Foreliggende oppfinnelse gjelder en fremgangsmåte for oppkonsentrering av epotiloner i dyrkningsmedier, en fremgangsmåte for fremstilling av epotiloner, en fremgangsmåte for å skille epotilon A og B fra hverandre og en stamme erholdt ved mutagenese for fremstilling av epotiloner, såvel som beslektede utførelser. Krystallformer av epotilon B beskrives også.

Description

Foreliggende oppfinnelse gjelder en ny fremgangsmåte for separasjon av epotiloner, fortrinnsvis epotilon A og B.
Av de eksisterende cytotoksiske aktive bestanddeler for behandling av tumorer spiller Taxol® (Paclitaxel; Bristol-Myers Squibb), et mikrotubulistabiliserende middel, en viktig rolle og har en bemerkelsesverdig kommersiell suksess. Imidlertid har Taxol<®> en rekke ulemper. Særlig er den svært lave løselighet i vann et problem. Det ble derfor nødvendig å tilføre 'Taxol" i et preparat sammen med "Cremophor EL"
(polyoksyetylert lakserolje, BASF, Ludwigshafen, Tyskland). "Cremophor EL" har alvorlige bivirkninger og forårsaker for eksempel allergier som i minst ett tilfelle har ført til en pasients død.
Selv om Taxan-klassen av mikrotubulistabiliserende anti-cancermidler har blitt anbefalt som "kanskje det viktigste tilskudd til det farmasøytiske arsenal mot cancer i det siste tiår "(se Rowinsky E.K., Ann. Rev. Med. 48,353-374 (1997)), og trass i den kommersielle suksess til "Taxol" synes disse forbindelser fortsatt ikke å representere et virkelig stort gjennombrudd innen cancerkjemoterapi. Behandling med "Taxol" er forbundet med en serie av betydelige bivirkninger, og noen få primærklasser av kompakte tumorer, nemlig kolontumorer og prostatatumorer, responderer på denne forbindelse kun i lite omfang (se Rowinsky E.K., inter alia). I tillegg kan virkningen av Taxol svekkes og til og med fullstendig nøytraliseres ved ervervede resistens-mekanismer, særlig slike basert på overekspresjon av fosfoproteiner som fungerer som utstrømningspumper for aktive bestanddeler, for eksempel "flermedikamentsresistens" grunnet overekspresjon av flermedikaments-transportglykoprotein "P-glykoprotein".
Epotilon A og B representerer en ny klasse av mikrotubulistabiliserende, cytotoksiske aktive bestanddeler (se Gerth, K. Et al., J. Antibiot. 49,560-3 (1966)) med formelen:
hvori R står for hydrogen (epotilon A) eller metyl (epotilon B).
Disse forbindelser har følgende fordeler framfor "Taxol":
a) De har bedre vannløselighet og er således lettere tilgjengelig for preparatdannelse. b) Det har blitt rapportert at de i cellekultureksperimenter også er aktive mot proliferasjon av celler som, grunnet aktiviteten av P-glycoproteinpumpen er "flermedikamentresistente", viser resistens overfor behandling med andre kjemoterapeutiske midler, innbefattet Taxol (se Bolag, D. M., et al., "Epothilones, a new class of microtubule-stabilizing agents with a Taxol-like mechanism of action", Cancer Research 55,2325-33 (1995)), og c) Det kunne vises at de fortsatt er svært effektive in vitro mot en 'Taxol"-resistent ovariekarsinomcellelinje med modifisert P-tubulin (se Kowalski, R.J., et al., J.
Biol. Chem. 272(4)M 2534-2541 (1997)).
Farmasøytisk anvendelse av epotilonene, for eksempel for tumorbehandlmg, er mulig på analog måte til den beskrevet for Taxol, se for eksempel US 5.641.802; US 5.496.804; US 5.565.478.
Oppfinnelsen gjelder en fremgangsmåte for separasjon av epotiloner, nærmere bestemt epotilon A og B, fra hverandre, som særpreges ved kromatografi på en reversfase-kolonne med et elueringsmiddel som omfatter et lavere alkylcyanid.
De generelle begreper som benyttes heri ovenfor og nedenfor har fortrinnsvis betydningene gitt nedenfor: Når det heri ovenfor eller nedenfor vises til dokumenter, inkorporeres disse heri i den grad det er nødvendig.
Forstavelsen "lavere" angir alltid at det således betegnede radikal inneholdes fortrinnsvis opp til maksimum 7 karbonatomer, mer foretrukket opp til 4 karbonatomer, og er forgrenet eller uforgrenet. Lavere alkyl kan for eksempel være uforgrenet eller forgrenet en eller flere ganger og er f. eks. metyl, etyl, propyl som isopropyl eller n-propyl, butyl som isobutyl, sec.-butyl, tert.-butyl eller n-butyl, eller også pentyl, for eksempel amyl eller n-pentyl.
Et dyrkningsmedium for bioteknologisk fremstilling av epotiloner som inneholder mikroorganismer som produserer disse forbindelser, særlig myksobakterier, som produsenter av naturlige forbindelser er primært er medium som omfatter en tilsvarende (naturlig forekommende, eller også er holdbar ved dyrking eller, fortrinnsvis, ved genetisk modifisering) mikroorganisme, nærmere bestemt en myksobakteriestamme som kan produsere disse forbindelser, fortrinnsvis en myksobakterie fra slekten Sorangium, ytterligere foretrukket (særlig for epotilonproduksjon) en mikroorganisme av typen Sorangium Cellulosum Soce90 (se WO 93/10121) eller et biomateriale avledet fra denne (for eksempel ved mutagenese eller rekombinant genteknologi) eller fra deler av denne myksobakterie, fortrinnsvis en tilsvarende avledet stamme, spesielt foretrukket stammen med referansebetegnelsen BCE33/10 eller mutanter av denne, og i tillegg, sammen med vann, fortrinnsvis andre konvensjonelle og nødvendige bestanddeler av dyrkningsmedier som biopolymerer, sukker, aminosyrer, salter, nukleinsyrer, vitaminer, antibiotika, semiokjemikalier, dyrkningsmedier, ekstrakter fra biomaterialer som gjær eller andre celleekstrakter, soyamel, stivelse, for eksempel potetstivelse, og/eller spormetaller, for eksempel jemjoner i kompleksbundet form, eller egnede kombinasjoner av alle eller noen av disse bestanddeler og/eller også analoge tilsetninger. Det tilsvarende dyrkningsmedium er kjent blant fagfolk eller kan fremstilles ved kjente prosesser (se for eksempel dyrkningsmediene i eksemplene i den foreliggende beskrivelse eller i WO 93/10121).
En foretrukket myksobakterie er en stamme selektert ved UV-mutagenese og seleksjon for økt dannelse av epotilon A og/eller B sammenlignet med Sorangium cellulosum Soce90 som er deponert hos DSM under aksesjonsnummeret 6773, særlig mutanten BCE33/10, som ble deponert under aksesjonsbetegnelsen DSM 11999 den 9. Februar 1998 hos Den Tyske Samling av Mikroorganismer og Celleculturer (DSMZ, Braunschweig, Tyskland).
Dyrking og morfologisk beskrivelse av stamme BCE 33/10: Stammen kan dyrke med cellulose som eneste karbon- og energikilde med kaliumnitrat som eneste nitrogenkilde f.eks. på filterpapir (ST21 mineralsaltagar (0.1% KN03; 0.1% MgS04 x 7 H20; 0.1% CaCl2 x 2 H20; 0.1% K2HP04; 0.01% MnS04 x 7 H20; 0.02% FeCl3; 0.002% gjærekstrakt, standard spormetalløsmng, 1% agar). På dette medium dannes mørkt rødbrune til svartbrune fruktlegemer. Disse består av små sporangioler (tilnærmet 15 til 30 um diameter) og foreligger i tette hoper og klumper av varierende størrelse.
Den vegetative basillus har form som er typisk for Sorangium (relativt kompakt, under fasekontrastmikroskop en mørk, sylindrisk basillus med brede, avrundede ender, gjennomsnittlig 3 til 6 um lang og 1 um tykk).
Epotiloner er hovedsakelig epotilon A og/eller 6, men også andre epotiloner, for eksempel epotilon C og D, navngitt i internasjonal pantentsøknad WO 97/19086 og WO 98/22461, epotilon E og F navngitt i WO 98/22461, og ytterligere epotiloner tilgjengelige fra tilsvarende mikroorganismer.
En vannløselig, kompleksdannende bestanddel er hovedsakelig et vannløselig oligo-eller polypeptidderivat eller, fortrinnsvis, et oligo- eller polysakkairdderivat med cyklisk eller helisk struktur som danner et intramolekylært hulrom, som grunnet sine tilstrekkelig hydrofobe egenskaper er i stand til å binde epotiloner, særlig epotilon A og/eller epotilon B. En vannløselig, kompleksdannende bestanddel som foretrekkes spesielt er en som er utvalgt blant cyklodekstriner eller (fortrinnsvis) cyklodekstrin-derivater eller blandinger av disse.
I den påfølgende beskrivelse av opparbeidelsen og rensingen er epotilon ment å være et epotilon som kan erholdes fra den tilsvarende mikroorganisme, fortrinnsvis epotilon C, D, E, F, eller mer foretrukket A, eller spesielt foretrukket epotilon B. Dersom ikke annet er angitt når "epotiloner" nevnes er dette ment å være et generelt begrep som omfatter enkeltepotiloner eller blandinger av disse.
Opparbeidelse av epotilonene oppnås ved konvensjonelle fremgangsmåter, først ved å skille en kultur i en væskefase (et sentrifugat eller filtrat) og en fastfase (celler) ved hjelp av filtrering eller sentrifugering (rørsentrifuge eller separator). Den del eller hoveddel av epotilonene som foreligger i sentrifugatet eller filtratet blandes så direkte med et syntetisk resin, for eksempel et resin basert på polystyren som støttemedium (i det påfølgende også for enkelthets skyld betegnet et polysytrenresin), for eksempel Amberlite XAD-16 [Rohm & Haas Germany GmbH, Frankfurt] eller Diaion HP-20 [Resindion S.R.L., Mitsubishi Chemical Co., Milano] (fortrinnsvis med et forhold mellom sentrifugat og resin på tilnærmet 10:1 til 100:1 (vol/vol), fortrinnsvis tilnærmet 50:1 (vol/vol)). Etter et kontakttidsrom på fortrinnsvis 0.25 til 50 timer, mer foretrukket 0.8 til 22 timer, separeres resinet, for eksempel ved filtrering eller sentrifugering. Etter adsorpsjonen vaskes resinet om nødvendig med et kraftig polart løsemiddel, fortrinnsvis med vann. Desorpsjon av epotilonene oppnås så med et egnet løsemiddel, fortrinnsvis med en alkohol, mest foretrukket isopropanol. Væskefasen, fortrinnsvis isopropanolfasen, fjernes så fira løsemiddelet, fortrinnsvis ved hjelp av forutgående, samtidig eller påfølgende tilsetning av vann, fortrinnsvis i en sirkulasjonsevaporator, hvorved væskefasen konsentreres om nødvendig, og den resulterende vannfase ekstraheres med et løsemiddel som er egnet for dannelse av en ny fase, for eksempel en ester, for eksempel et lavere alkanol-lavere alkanoat, typisk etylacetat eller isopropylacetat. Epotilonene overføres ved dette til den organiske fase. Deretter konsentreres den organiske fase etter behov, fortrinnsvis til tørrhet, for eksempel ved benyttelse av en rotasjonsevaporator.
Etter dette foregår den videre prosessering ved benyttelse av følgende trinn, hvori rensetrinnet ved hjelp av revers-fasekromatografi med evaluering med et nitril er det oppfinneriske trinn og således obligatorisk, mens de andre trinn er valgfrie: molekylifltrering (gelkromatografi), f.eks. på en kolonne med materiale som Sephadex LH-20 (Pharmacia, Uppsala, Sverige) med en alkohol, for eksempel metanol, som elueringsmiddel,
separasjon av epotilonene ved revers-fasekromatografi etter at de er løst i et egnet løsemiddel, og eluering med en blanding av nitril/vann (obligatorisk), fortrinnsvis karakterisert ved at kromatografien utføres på en kolonne med materiale, fortrinnsvis et RP-18-materiale, som er ladet med hydrokarbonkjeder, for eksempel hydrokarbonskjeder med 18 karbonatomer, og et elueringsmiddel som omfatter et nitril, fortrinnsvis et lavere alkylnitril, mest foretrukket acetonitril, benyttes, fortrinnsvis benyttes en blanding av nitril og vann, mest foretrukket en blanding av acetonitril og vann, fortrinnsvis med et forhold mellom nitril og vann på tilnærmet 1:99 til 99:1, mer foretrukket mellom 1:9 og 9:1, f.eks. mellom 2:8 og 7:3, f.eks. 3:7 eller 4:6.
en eller flere ganger ekstraksjon av restmaterialet (fortrinnsvis etter inndamping) i et to-fasesystem som består av vann og et løsemiddel som ikke er blandbart med vann, fortrinnsvis en ester, særlig et lavere alkyl-lavere alkanoat, for eksempel etylacetat eller isopropylacetat,
adsorpsjonskromatografi, fortrinnsvis ved tilsetning til en kieselgelkolonne og elusjon med et egnet løsemiddel eller en løsemiddelblanding, fortrinnsvis en blanding av ester og hydrokarbon, for eksempel lavere alkylalkanoat/C4-Cio-alkan, fortrinnsvis etyl- eller isopropylacetat/n-heksan, i hvilken forholdet mellom esteren
og hydrokarbonet fortrinnsvis ligger i området 99:1 til 1:99, fortrinnsvis 10:1 til 1:10, for eksempel 4:1,
oppløsning av restmaterialet som kan erholdes etter konsentrering i et egnet
løsemiddel, for eksempel en alkohol som metanol,
sammenblanding med aktivt karbon og fjerning av dette,,
rekrystallisering, f.eks. fra egnede løsemidler eller løsemiddelblandinger som for eksempel består av estere, ester/hydrokarbonblandinger eller alkoholer, fortrinnsvis etyl- eller isopropylacetat: toluen 1:10 til 10:1, fortrinnsvis 2:3 (epotilon A) eller metanol eller etylacetat (epotilon 8),
hvorved de resulterende løsninger eller suspensjoner konsentreres mellom hvert benyttede trinn om nødvendig og/eller væskekomponenter og faste komponenter skilles fra hverandre, fortrinnsvis ved filtrering eller sentrifugering av løsninger/suspensjoner. De mer presise definisjoner som nevnes nedenfor kan fortrinnsvis benyttes i enkelt-trinnene ovenfor.
Opparbeidelse og rensing utføres fortrinnsvis som følger: Etter høsting separeres en kultur i væskefase (sentrifugat) og fastfase (celler) ved hjelp av sentrifugering (rørsentrifuge eller separator). Hovedmengden av epotilonene foreligger i sentrifugatet, som så direkte blandes med et polystyrenresin, for eksempel Amberlite XAD-16 [Rohm & Haas Germany GmbH, Frankfurt] eller Diaion HP-20 [Resindion S.R.L., Mitsubishi Chemical Co., Milano] (fortrinnsvis med et forhold mellom sentrifugat og resin på tilnærmet 10:1 til 100:1 (vol/vol), fortrinnsvis tilnærmet 50: (vol/vol)) og omrøres i en rystemaskin. I dette trinn overføres epotilonene fra cyklodekstrinet til resinet. Etter et kontakttidsrom på tilnærmet 1 time separeres resinet ved sentrifugering eller filtrering. Adsorpsjon av epotilonene til resinet kan også oppnås i en kromatografisøyle ved å plassere resinet i søylen og la sentrifugatet renne gjennom resinet. Etter adsorpsjon vaskes resinet med vann. Desorpsjon av epotilonene fra resinet oppnås med isopropanol. Isopropanol fjernes så fra isopropanolfasen, fortrinnsvis ved tilsetning av vann, fortrinnsvis i en sirkulasjonevaporator, og den resulterende vannfase ekstraheres med etylacetat. Epotilonene overføres fira vannfasen til etylacetatfasen. Så konsentreres etylacetatekstraktet til tørrhet ved benyttelse av en rotasjonsevaporator. En utgangs-konsentrasjon av epotilonene oppnås så ved hjelp av molekylfiltrering (f.eks. Sephadex LH-20 [Pharmacia, Uppsala, Sverige] med metanol som elueringsmiddel). Toppfraksjonene fra molekylfiltreringen inneholder epotilon A og B og har et totalinnhold av epotiloner på > 10%. Separasjon av disse topp fraksjoner, som inneholder epotilon A og B i blanding, i enkeltbestanddelene følger så ved hjelp av kromatografi på en "reversfase", f.eks. en RP-18-fase (en fase som er modifisert med alkylradikaler med 18 karbonatomer pr. kjede) med et egnet elueringsmiddel, fortrinnsvis et som inneholder et nitril som for eksempel acetonitril (dette gir bedre separasjon enn for eksempel alkoholer som metanol). Epotilon A elueres før epotilon B. Toppfraksjonene med epotilon B kan fortsatt inneholde små mengder epotilon A, som kan fjernes ved ytterligere separasjon på RP-18. Endelig krystalliseres epotilon A-fraksjonen direkte fra etylacetat: Toluen~2:3, og epotilon B-fraksjonen fra metanol eller etylacetat.
Oppfinnelsen gjelder en fremgangsmåte for separasjon av epotiloner, fortrinnsvis epotilon A og B, fra hverandre, som særpreges ved kromatografi på en revers-fasekolonne med et elueringsmiddel som inneholder et lavere alkylcyanid, hvor kromatografien utføres på et kolonnemateriale, fortrinnsvis et RP-18-materiale, som er ladet med hydrokarbonkjeder, for eksempel kjeder med 18 karbonatomer, og benyttelse av et elueringsmiddel som inneholder et nitril, fortrinnsvis et lavere alkylnitril, mer foretrukket acetonitril, fortrinnsvis en blanding av nitril og vann, mer foretrukket en blanding av acetonitril og vann, fortrinnsvis med et forhold mellom nitril og vann på tilnærmet 1:99 til 99:1, mer foretrukket 1:9 til 9:1, f.eks. mellom 2:8 og 7:3, f.eks. 3:7 eller 4:6. Denne separasjon kan følge en filtrering med en molekylsikt eller utføres fortrinnsvis direkte ved benyttelse av restmaterialet etter adsorpsjon av epotilonene fra dyrkningsmediet som inneholder en kompleksdannende bestanddel til resinet. En fordel ved separasjon med et elueringsmiddel som inneholder et lavere alkylcyanid fremfor benyttelse av alkoholer, for eksempel metanol, er bedre separasjon av epotilon A og B.
Det påfølgende eksempel skal bidra til å illustrere oppfinnelsen uten å begrense dens område.
Forsiktig: Ved håndtering av epotiloner må egnede beskyttelsestiltak iverksettes etter behov, deres høye giftighet tas i betraktning.
Formentoren på 750 liter som ble benyttet i det påfølgende er en fermentor av raffinert stål fra firmaet Alpha AG, Nidau,Sveits.
Eksempel: Opparbeidelse av epotilonene: Isolering fra en hovedkultur på
500 liter:
Hovedkultur: 500 liter fermentering med 1% 2-(hydroksypropyl)-p- cyklodekstrin): Fermenteringen utføres i en 750 liter fermentor. Mediet inneholder 10 g/l 2-(Hydroksypropyl)-(J-cyklodekstrin. Forløpet av fermenteringen er vist i tabell. Kulturen høstes etter 7 dager og opparbeides.
Høstningsvolumet fra hovedkulturen på 500 liter over er på 450 liter og det separeres ved benyttelse en Westfalia klarningsseparator Type S A-20-06 (rpm = 6500) i væskefase (sentrifugat + vaskevann = 650 liter) og fastfase (celler = tilnærmet 15 kg). Hovedmengden av epotiloner foreligger i sentrifugatet. Den nedsentrifugerte cellemasse inneholder <15% av det målte epotiloninnhold og prosesseres ikke videre. Sentrifugatet på 650 liter plasseres så i rørekar på 4000 liter, blandes med 10 liter Amberlite XAD-16 (sentrifugatrresinvolum = 65:1) og omrøres. Etter et kontakttidsrom på tilnærmet 2 timer frasentrifugeres resinet i en Heine overstrømssentrifuge (beholdervolum 40 liter,
rpm = 2800). Resinet fjernes fra sentrifugen og vaskes med 10-15 liter deionisert vann. Desorpsjon oppnås ved å omrøre resinet to ganger, hver gang med 30 liter isopropanol i rørekar på 30 liter av glass i 30 minutter. Separasjon av isopropanolfasen fra resinet finner sted ved benyttelse av et sugefilter. Isopropanol fjernes så fra de sammenslåtte isopropanolekstrakter ved tilsetning av 15-20 liter vann i en sirkulasjonsevaporator under vakuum (Schmid-Verdampfer), og den resulterende vannfase på tilnærmet 10 liter ekstraheres tre ganger, hver gang med 10 liter etylacetat. Ekstraksjonen utføres i rørekar
av glass på 30 liter. Etylacetatekstraktet konsentreres til 3-5 liter i en sirkulasjonsevaporator under vakuum (Schmid-Verdampfer), og konsentreres deretter til tørrhet i rotasjonsevaporator (Btichi-type) under vakuum. Resultatet er et etylacetatekstrakt på 50-2 g. Etylacetatekstraktet løses i 500 ml metanol, den uløselige del frafiltreres ved benyttelse av et foldefilter, og løsningen påsettes en 10 kg Sephadex LH 20-kolonne (Pharmacia, Uppsala, Sverige) (kolonnediameter 20 cm, høyde tilnærmet 1.2 m). Elueringen utføres med metanol som elueringsmiddel. Epotilon A og B foreligger hovedsakelig i fraksjonene 21-23 (med en fraksjonsstørrelse på 1 liter). Disse fraksjoner konsentreres til tørrhet under vakuum i en rotasjonsevaporator (totalvekt 9.0 g). Disse toppfraksjoner fra Sephadex (9.0 g) oppløses så i 92 ml acetonitril:-vann:-metylenklorid - 50:40:2, løsningen filtreres gjennom et foldefilter og påsettes en RP-kolonne (utstyr: Prepbar 200, Merck, 2.0 kg LiChrospher RP-18 Merck, partikkelstørrelse 12 um kolonnediameter 10 cm, høyde 42 cm, Merck, Darmstadt, Tyskland). Elueringen utføres med acetonitril: vann = 3:7 (gjennomstrømningshastighet ~ 500 ml/min., retensjonstid for epotilon A = tilnærmet 51-59 minutter, retensjonstid for epotilon B = ca. 60-69 minutter). Fraksjoneringen følges med en UV-detektor ved 250 nm. Fraksjonene konsentreres til tørrhet under vakuum i en Buchi-Rotavapor rotasjonsevaporator. Vekten av toppfraksjonen av epotilon A er 700 mg, og ifølge HPLC (extern standard) er innholdet 75.1%. Toppfraksjonen for epotilon B veier 1980 mg, og innholdet ifølge HPLC (ekstern standard) er 86.6%.

Claims (2)

1. Fremgangsmåte for separasjon av epotiloner fira hverandre, fortrinnsvis epotilon A og B, karakterisert ved at den omfatter kromatografi på en reversefasekolonne med et elueringsmiddel som inneholder et lavere alkylcyanid.
2. Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at det benyttes et kolonnemateriale som er ladet med hydrokarbonkjeder som inneholder IS karbonatomer og at elueringsmiddelet som benyttes er en blanding av vann og acetonitril.
NO20052034A 1998-02-19 2005-04-26 Fremgangsmate for separasjon av epotiloner NO321596B1 (no)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CH39698 1998-02-19
CH100798 1998-05-05
PCT/EP1999/001025 WO1999042602A2 (en) 1998-02-19 1999-02-17 Fermentative preparation process for cytostatics and crystal forms thereof

Publications (2)

Publication Number Publication Date
NO20052034L NO20052034L (no) 2000-10-17
NO321596B1 true NO321596B1 (no) 2006-06-06

Family

ID=25684443

Family Applications (4)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO20004114A NO322588B1 (no) 1998-02-19 2000-08-17 Fremgangsmate for oppkonsentrering og fremstilling av epotiloner og dyrkningsmedium.
NO20052034A NO321596B1 (no) 1998-02-19 2005-04-26 Fremgangsmate for separasjon av epotiloner
NO20061736A NO20061736L (no) 1998-02-19 2006-04-20 Krystallform av epotilon B
NO20061735A NO329063B1 (no) 1998-02-19 2006-04-20 Stamme av sorangium cellulosum

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO20004114A NO322588B1 (no) 1998-02-19 2000-08-17 Fremgangsmate for oppkonsentrering og fremstilling av epotiloner og dyrkningsmedium.

Family Applications After (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO20061736A NO20061736L (no) 1998-02-19 2006-04-20 Krystallform av epotilon B
NO20061735A NO329063B1 (no) 1998-02-19 2006-04-20 Stamme av sorangium cellulosum

Country Status (25)

Country Link
US (8) US6194181B1 (no)
EP (2) EP1054994B1 (no)
JP (3) JP3681109B2 (no)
KR (4) KR100595774B1 (no)
CN (2) CN1229502C (no)
AT (1) ATE282710T1 (no)
AU (1) AU746294B2 (no)
BR (1) BR9908119A (no)
CA (1) CA2318818A1 (no)
CZ (1) CZ301517B6 (no)
DE (1) DE69921966T2 (no)
DK (1) DK1054994T3 (no)
ES (1) ES2233028T3 (no)
HK (1) HK1034100A1 (no)
HU (1) HU225851B1 (no)
IL (4) IL137691A0 (no)
NO (4) NO322588B1 (no)
NZ (2) NZ506138A (no)
PL (2) PL404926A1 (no)
PT (1) PT1054994E (no)
RU (1) RU2268306C2 (no)
SI (1) SI1054994T1 (no)
SK (3) SK288058B6 (no)
TR (2) TR200002431T2 (no)
WO (1) WO1999042602A2 (no)

Families Citing this family (124)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PT873341E (pt) 1995-11-17 2004-02-27 Biotechnolog Forschung Mbh Gbf Derivados de epotilona preparacao e utilizacao
ATE267197T1 (de) * 1996-11-18 2004-06-15 Biotechnolog Forschung Gmbh Epothilon d, dessen herstellung und dessen verwendung als cytostatisches mittel bzw. als pflanzenschutzmittel
US20050043376A1 (en) * 1996-12-03 2005-02-24 Danishefsky Samuel J. Synthesis of epothilones, intermediates thereto, analogues and uses thereof
US6204388B1 (en) * 1996-12-03 2001-03-20 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Synthesis of epothilones, intermediates thereto and analogues thereof
DE69734362T2 (de) 1996-12-03 2006-07-20 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Synthese von epothilonen, zwischenprodukte dazu, analoga und verwendungen davon
US6605599B1 (en) * 1997-07-08 2003-08-12 Bristol-Myers Squibb Company Epothilone derivatives
US6365749B1 (en) 1997-12-04 2002-04-02 Bristol-Myers Squibb Company Process for the preparation of ring-opened epothilone intermediates which are useful for the preparation of epothilone analogs
US6194181B1 (en) * 1998-02-19 2001-02-27 Novartis Ag Fermentative preparation process for and crystal forms of cytostatics
FR2775187B1 (fr) * 1998-02-25 2003-02-21 Novartis Ag Utilisation de l'epothilone b pour la fabrication d'une preparation pharmaceutique antiproliferative et d'une composition comprenant l'epothilone b comme agent antiproliferatif in vivo
US6498257B1 (en) 1998-04-21 2002-12-24 Bristol-Myers Squibb Company 2,3-olefinic epothilone derivatives
US6380395B1 (en) 1998-04-21 2002-04-30 Bristol-Myers Squibb Company 12, 13-cyclopropane epothilone derivatives
JP4662635B2 (ja) 1998-11-20 2011-03-30 コーサン バイオサイエンシーズ， インコーポレイテッド エポチロンおよびエポチロン誘導体を生成するための組換え方法および材料
US6410301B1 (en) 1998-11-20 2002-06-25 Kosan Biosciences, Inc. Myxococcus host cells for the production of epothilones
US6518421B1 (en) 2000-03-20 2003-02-11 Bristol-Myers Squibb Company Process for the preparation of epothilone analogs
US6593115B2 (en) * 2000-03-24 2003-07-15 Bristol-Myers Squibb Co. Preparation of epothilone intermediates
US6589968B2 (en) 2001-02-13 2003-07-08 Kosan Biosciences, Inc. Epothilone compounds and methods for making and using the same
KR20070092334A (ko) * 2000-04-28 2007-09-12 코산 바이오사이언시즈, 인코포레이티드 폴리케타이드의 제조방법
US6998256B2 (en) 2000-04-28 2006-02-14 Kosan Biosciences, Inc. Methods of obtaining epothilone D using crystallization and /or by the culture of cells in the presence of methyl oleate
UA75365C2 (en) * 2000-08-16 2006-04-17 Bristol Myers Squibb Co Epothilone analog polymorph modifications, a method for obtaining thereof (variants), a pharmaceutical composition based thereon
US6989450B2 (en) 2000-10-13 2006-01-24 The University Of Mississippi Synthesis of epothilones and related analogs
GB0029895D0 (en) * 2000-12-07 2001-01-24 Novartis Ag Organic compounds
IL156580A0 (en) * 2001-01-25 2004-01-04 Bristol Myers Squibb Co A method for formulating an epothilone analog for parenteral use and pharmaceutical preparations including an epothilone analog
EP1353668B1 (en) 2001-01-25 2008-03-19 Bristol-Myers Squibb Company Processes for the preparation of pharmaceutical preparations containing epothilone analogues for the treatment of cancer
WO2002058699A1 (en) * 2001-01-25 2002-08-01 Bristol-Myers Squibb Company Pharmaceutical forms of epothilones for oral administration
US6893859B2 (en) 2001-02-13 2005-05-17 Kosan Biosciences, Inc. Epothilone derivatives and methods for making and using the same
CN1774253A (zh) 2001-02-20 2006-05-17 布里斯托尔-迈尔斯斯奎布公司 用环氧丙酯酮衍生物治疗顽固性肿瘤
JP2004522771A (ja) 2001-02-20 2004-07-29 ブリストル−マイヤーズ　スクイブ　カンパニー 治療抵抗性腫瘍の処置用エポチロン誘導体
ES2384789T3 (es) 2001-03-14 2012-07-12 Bristol-Myers Squibb Company Combinación de un análogo de epotilona y agentes quimioterapéuticos para el tratamiento de enfermedades proliferativas
CA2449077A1 (en) * 2001-06-01 2002-12-12 Gregory D. Vite Epothilone derivatives
TWI315982B (en) 2001-07-19 2009-10-21 Novartis Ag Combinations comprising epothilones and pharmaceutical uses thereof
TWI287986B (en) * 2001-12-13 2007-10-11 Novartis Ag Use of Epothilones for the treatment of the carcinoid syndrome
CN1615136A (zh) 2002-01-14 2005-05-11 诺瓦提斯公司 包含埃坡霉素和抗代谢物的组合
TW200303202A (en) * 2002-02-15 2003-09-01 Bristol Myers Squibb Co Method of preparation of 21-amino epothilone derivatives
AU2003212457A1 (en) * 2002-03-01 2003-09-16 University Of Notre Dame Derivatives of epothilone b and d and synthesis thereof
WO2003077903A1 (en) * 2002-03-12 2003-09-25 Bristol-Myers Squibb Company C12-cyano epothilone derivatives
TW200403994A (en) * 2002-04-04 2004-03-16 Bristol Myers Squibb Co Oral administration of EPOTHILONES
DE60328772D1 (de) * 2002-05-01 2009-09-24 Novartis Ag Epothilonderivat zur behandlung von hepatoma und anderen krebserkrankungen
TW200400191A (en) * 2002-05-15 2004-01-01 Bristol Myers Squibb Co Pharmaceutical compositions and methods of using C-21 modified epothilone derivatives
AU2003296878A1 (en) * 2002-05-20 2004-12-13 Kosan Biosciences, Inc. Methods to administer epothilone d
AU2003243561A1 (en) * 2002-06-14 2003-12-31 Bristol-Myers Squibb Company Combination of epothilone analogs and chemotherapeutic agents for the treatment of proliferative diseases
US6921769B2 (en) 2002-08-23 2005-07-26 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Synthesis of epothilones, intermediates thereto and analogues thereof
DK1767535T3 (da) 2002-08-23 2010-04-12 Sloan Kettering Inst Cancer Syntese af epothiloner, mellemprodukter deraf, analoge og deres anvendelse
US7649006B2 (en) 2002-08-23 2010-01-19 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Synthesis of epothilones, intermediates thereto and analogues thereof
KR100606016B1 (ko) * 2002-09-13 2006-07-26 삼성전자주식회사 이동 통신시스템에서 양방향 데이터 서비스 제공 방법
KR20050053681A (ko) 2002-09-23 2005-06-08 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 에포틸론 ｂ의 제조, 분리 및 정제 방법, 및 에포틸론 ｂ의ｘ-선 결정 구조
EP1551425A4 (en) * 2002-10-09 2006-09-20 Kosan Biosciences Inc THERAPEUTIC FORMULATIONS
EP1670487A4 (en) * 2003-10-09 2008-05-21 Kosan Biosciences Inc THERAPEUTIC FORMULATIONS
RU2358729C2 (ru) * 2003-10-09 2009-06-20 Козан Байосайенсиз, Инк. Терапевтические композиции
DK2253614T3 (da) 2004-04-07 2013-01-07 Novartis Ag IAP-inhibitorer
US20060121511A1 (en) 2004-11-30 2006-06-08 Hyerim Lee Biomarkers and methods for determining sensitivity to microtubule-stabilizing agents
GB0510390D0 (en) 2005-05-20 2005-06-29 Novartis Ag Organic compounds
JP2009510073A (ja) 2005-09-27 2009-03-12 ノバルティス アクチエンゲゼルシャフト カルボキシアミン化合物およびその使用方法
CN1312286C (zh) * 2005-10-19 2007-04-25 华南理工大学 一种利用纤维堆囊菌高效生产埃博霉素的方法
NO20220050A1 (no) 2005-11-21 2008-08-12 Novartis Ag Neuroendokrin tumorbehandling
GB0605120D0 (en) 2006-03-14 2006-04-26 Novartis Ag Organic Compounds
JP2009532503A (ja) 2006-04-05 2009-09-10 ノバルティス アクチエンゲゼルシャフト 癌を処置するための治療剤の組合せ
CN102861338A (zh) 2006-04-05 2013-01-09 诺瓦提斯公司 用于治疗癌症、包含bcr-abl/c-kit/pdgf-r tk抑制剂的组合
AU2007247112B2 (en) 2006-05-09 2010-08-26 Novartis Ag Combination comprising an iron chelator and an anti-neoplastic agent and use thereof
CA2658475A1 (en) * 2006-08-16 2008-02-21 Novartis Ag Organic compounds
WO2008037477A1 (en) 2006-09-29 2008-04-03 Novartis Ag Pyrazolopyrimidines as p13k lipid kinase inhibitors
US8463852B2 (en) * 2006-10-06 2013-06-11 Oracle International Corporation Groupware portlets for integrating a portal with groupware systems
WO2008100985A2 (en) 2007-02-15 2008-08-21 Novartis Ag Combination of lbh589 with other therapeutic agents for treating cancer
EP2241566B1 (en) * 2008-02-01 2013-08-21 Zhejiang Hisun Pharmaceutical Co. Ltd. A method for the separation and purification of epothilones
PT2268612E (pt) 2008-03-24 2014-11-13 Novartis Ag Inibidores de metaloprotease de matriz à base de arilsulfonamidas
PL2260020T3 (pl) 2008-03-26 2015-01-30 Novartis Ag Hydroksamianowe inhibitory deacetylaz B
CA2744937C (en) * 2008-11-28 2017-02-28 Novartis Ag Pharmaceutical combination comprising a hsp 90 inhibitor and a mtor inhibitor
WO2010083617A1 (en) 2009-01-21 2010-07-29 Oncalis Ag Pyrazolopyrimidines as protein kinase inhibitors
SI2391366T1 (sl) 2009-01-29 2013-01-31 Novartis Ag Substituirani benzimidazoli za zdravljenje astrocitomov
UA105794C2 (uk) 2009-06-26 2014-06-25 Новартіс Аг 1,3-ДИЗАМІЩЕНІ ПОХІДНІ ІМІДАЗОЛІДИН-2-ОНУ ЯК ІНГІБІТОРИ Cyp17
US8389526B2 (en) 2009-08-07 2013-03-05 Novartis Ag 3-heteroarylmethyl-imidazo[1,2-b]pyridazin-6-yl derivatives
WO2011018454A1 (en) 2009-08-12 2011-02-17 Novartis Ag Heterocyclic hydrazone compounds and their uses to treat cancer and inflammation
IN2012DN01453A (no) 2009-08-20 2015-06-05 Novartis Ag
BR112012008075A2 (pt) 2009-08-26 2016-03-01 Novartis Ag compostos de heteroarila tetrassubstituídos e seu uso como moduladores de mdm2 e/ou mdm4
MX2012005293A (es) 2009-11-04 2012-06-19 Novartis Ag Derivados de sulfonamida heterociclicos utiles como inhibidores de mek.
CN102648188A (zh) 2009-12-08 2012-08-22 诺瓦提斯公司 杂环磺酰胺衍生物
CU24130B1 (es) 2009-12-22 2015-09-29 Novartis Ag Isoquinolinonas y quinazolinonas sustituidas
US8440693B2 (en) 2009-12-22 2013-05-14 Novartis Ag Substituted isoquinolinones and quinazolinones
JP5881254B2 (ja) 2010-05-18 2016-03-09 セルリアン・ファーマ・インコーポレイテッド 自己免疫疾患およびその他の疾患の治療のための組成物および方法
UA112517C2 (uk) 2010-07-06 2016-09-26 Новартіс Аг Тетрагідропіридопіримідинові похідні
EP2627648A1 (en) 2010-09-16 2013-08-21 Novartis AG 17aHYDROXYLASE/C17,20-LYASE INHIBITORS
WO2012107500A1 (en) 2011-02-10 2012-08-16 Novartis Ag [1, 2, 4] triazolo [4, 3 -b] pyridazine compounds as inhibitors of the c-met tyrosine kinase
MX359399B (es) 2011-04-28 2018-09-27 Novartis Ag Inhibidores de 17alfa-hidroxilasa/c17-20-liasa.
KR20140034898A (ko) 2011-06-09 2014-03-20 노파르티스 아게 헤테로시클릭 술폰아미드 유도체
US8859535B2 (en) 2011-06-20 2014-10-14 Novartis Ag Hydroxy substituted isoquinolinone derivatives
EP2721007B1 (en) 2011-06-20 2015-04-29 Novartis AG Cyclohexyl isoquinolinone compounds
CA2840315A1 (en) 2011-06-27 2013-01-03 Novartis Ag Solid forms and salts of tetrahydro-pyrido-pyrimidine derivatives
ES2691650T3 (es) 2011-09-15 2018-11-28 Novartis Ag 3-(quinolin-6-il-tio)-[1,2,4]-triazolo-[4,3-a]-piridinas 6-sustituidas como inhibidores de tirosina quinasa c-Met
WO2013080141A1 (en) 2011-11-29 2013-06-06 Novartis Ag Pyrazolopyrrolidine compounds
EP2794594A1 (en) 2011-12-22 2014-10-29 Novartis AG Quinoline derivatives
JP5903499B2 (ja) 2011-12-22 2016-04-13 ノバルティス アーゲー ジヒドロ−ベンゾ−オキサジンおよびジヒドロ−ピリド−オキサジン誘導体
CA2859862A1 (en) 2011-12-23 2013-06-27 Novartis Ag Compounds for inhibiting the interaction of bcl2 with binding partners
CN104136429A (zh) 2011-12-23 2014-11-05 诺华股份有限公司 用于抑制bcl2与结合配偶体相互作用的化合物
MX2014007725A (es) 2011-12-23 2015-01-12 Novartis Ag Compuestos para inhibir la interaccion de bcl2 con los componentes de enlace.
CN104125954A (zh) 2011-12-23 2014-10-29 诺华股份有限公司 用于抑制bcl2与结合配偶体相互作用的化合物
AU2012355624A1 (en) 2011-12-23 2014-07-17 Novartis Ag Compounds for inhibiting the interaction of BCL2 with binding partners
UY34591A (es) 2012-01-26 2013-09-02 Novartis Ag Compuestos de imidazopirrolidinona
DK2861579T5 (da) 2012-05-15 2022-10-24 Novartis Ag Benzamidderivater til at hæmme aktiviteten af ABL1, ABL2 og BCR-ABL1
AU2013261128B2 (en) 2012-05-15 2015-11-12 Novartis Ag Benzamide derivatives for inhibiting the activity of ABL1, ABL2 and BCR-ABL1
BR112014027244A2 (pt) 2012-05-15 2017-06-27 Novartis Ag derivados de benzamida para inibição da atividade de abl1, abl2 e bcr-abl1
CA2870339C (en) 2012-05-15 2020-06-02 Novartis Ag Compounds and compositions for inhibiting the activity of abl1, abl2 and bcr-abl1
JP6171003B2 (ja) 2012-05-24 2017-07-26 ノバルティス アーゲー ピロロピロリジノン化合物
AU2013274101B2 (en) 2012-06-15 2017-09-07 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Compositions for treating cancer and methods for making the same
US20150203453A1 (en) 2012-10-02 2015-07-23 Epitherapeutics Aps Inhibitors of histone demethylases
TW201422625A (zh) 2012-11-26 2014-06-16 Novartis Ag 二氫－吡啶并－□衍生物之固體形式
CN103910742B (zh) * 2013-01-07 2016-07-13 浙江海正药业股份有限公司 一种制备埃博霉素b无定形粉末的方法
WO2014115077A1 (en) 2013-01-22 2014-07-31 Novartis Ag Substituted purinone compounds
US9556180B2 (en) 2013-01-22 2017-01-31 Novartis Ag Pyrazolo[3,4-d]pyrimidinone compounds as inhibitors of the P53/MDM2 interaction
WO2014128612A1 (en) 2013-02-20 2014-08-28 Novartis Ag Quinazolin-4-one derivatives
CN105263906B (zh) 2013-02-27 2018-11-23 吉利德科学公司 组蛋白脱甲基酶的抑制剂
US20150018376A1 (en) 2013-05-17 2015-01-15 Novartis Ag Pyrimidin-4-yl)oxy)-1h-indole-1-carboxamide derivatives and use thereof
CN103275098B (zh) * 2013-06-07 2015-07-08 江苏迪沃特仪器设备科技有限公司 用动态轴向压缩柱分离纯化埃博霉素的方法
UY35675A (es) 2013-07-24 2015-02-27 Novartis Ag Derivados sustituidos de quinazolin-4-ona
US9227969B2 (en) 2013-08-14 2016-01-05 Novartis Ag Compounds and compositions as inhibitors of MEK
WO2015022663A1 (en) 2013-08-14 2015-02-19 Novartis Ag Compounds and compositions as inhibitors of mek
WO2015022664A1 (en) 2013-08-14 2015-02-19 Novartis Ag Compounds and compositions as inhibitors of mek
MY184292A (en) 2013-09-22 2021-03-30 Sunshine Lake Pharma Co Ltd Substituted aminopyrimidine compounds and methods of use
WO2015148867A1 (en) 2014-03-28 2015-10-01 Calitor Sciences, Llc Substituted heteroaryl compounds and methods of use
JP2017512804A (ja) 2014-03-31 2017-05-25 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド ヒストン脱メチル化酵素の阻害剤
BR112016022499A2 (pt) 2014-04-03 2017-08-15 Invictus Oncology Pvt Ltd Produtos terapêuticos combinatórios supramoleculares
BR112017003442A2 (pt) 2014-08-27 2017-11-28 Gilead Sciences Inc compostos e métodos para inibir histona desmetilases
EP3347097B1 (en) 2015-09-11 2021-02-24 Sunshine Lake Pharma Co., Ltd. Substituted aminopyrimidine derivatives as modulators of the kinases jak, flt3 and aurora
WO2019099311A1 (en) 2017-11-19 2019-05-23 Sunshine Lake Pharma Co., Ltd. Substituted heteroaryl compounds and methods of use
EP3740468A4 (en) 2018-01-20 2021-10-06 Sunshine Lake Pharma Co., Ltd. SUBSTITUTED AMINOPYRIMIDINE COMPOUNDS AND METHOD OF USING
FR3087650B1 (fr) 2018-10-31 2021-01-29 Bio Even Flavine adenine dinucleotide (fad) pour son utilisation pour la prevention et/ou le traitement de cancer

Family Cites Families (51)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3459731A (en) 1966-12-16 1969-08-05 Corn Products Co Cyclodextrin polyethers and their production
HU181703B (en) 1980-05-09 1983-11-28 Chinoin Gyogyszer Es Vegyeszet Process for producing aqueus solutuins of water insoluble or hardly soluble vitamines, steroides, localanesthetics, prostanoides and non-steroid and antiphlogistic agents
US4383992A (en) 1982-02-08 1983-05-17 Lipari John M Water-soluble steroid compounds
JPS58179496A (ja) 1982-04-12 1983-10-20 Takeda Chem Ind Ltd ランカシジンの改良製造法
DE3372705D1 (en) 1982-04-30 1987-09-03 Takeda Chemical Industries Ltd Pharmaceutical composition and its use
US4659696A (en) 1982-04-30 1987-04-21 Takeda Chemical Industries, Ltd. Pharmaceutical composition and its nasal or vaginal use
HU191101B (en) 1983-02-14 1987-01-28 Chinoin Gyogyszer Es Vegyeszeti Termekek Gyara Rt,Hu Process for preparing water-soluble cyclodextrin polymers substituted with ionic groups
DE3317064A1 (de) 1983-05-10 1984-11-15 Consortium für elektrochemische Industrie GmbH, 8000 München Verfahren zur herstellung von cyclooctaamylose
DE3346123A1 (de) 1983-12-21 1985-06-27 Janssen Pharmaceutica, N.V., Beerse Pharmazeutische praeparate von in wasser schwerloeslichen oder instabilen arzneistoffen und verfahren zu ihrer herstellung
GB8506792D0 (en) 1985-03-15 1985-04-17 Janssen Pharmaceutica Nv Derivatives of y-cyclodextrin
EP0216731B1 (de) * 1985-09-13 1990-03-14 Gesellschaft für Biotechnologische Forschung mbH (GBF) Makrozyklische Antibiotika
US4920214A (en) 1986-04-16 1990-04-24 American Maize-Products Company Process for producing modified cyclodextrins
NZ224497A (en) 1987-05-18 1990-04-26 Janssen Pharmaceutica Nv Pharmaceutical composition comprising flunarizine
NZ225045A (en) 1987-07-01 1990-06-26 Janssen Pharmaceutica Nv Antiviral pharmaceutical compositions containing cyclodextrin and an antiviral agent
MY104343A (en) 1987-11-23 1994-03-31 Janssen Pharmaceutica Nv Novel pyridizinamine deravatives
EP0465535B1 (en) 1989-04-03 1998-06-03 Janssen Pharmaceutica N.V. Regioselective substitutions in cyclodextrins
GB8910069D0 (en) 1989-05-03 1989-06-21 Janssen Pharmaceutica Nv Method of topically treating acne vulgaris
EP0455789B1 (en) 1989-11-22 1994-03-16 Janssen Pharmaceutica N.V. Method of preventing or limiting reperfusion damage
GB9001987D0 (en) 1990-01-29 1990-03-28 Janssen Pharmaceutica Nv Improved cyclodextrin based erythropietin formulation
IL100856A (en) 1991-02-15 1998-03-10 Janssen Pharmaceutica Nv History of carboxyl (alkyloxyalkyl of cyclodextrins, their preparation and pharmaceutical preparations containing them
CA2061891A1 (en) 1991-03-08 1992-09-09 Robert F. Van Ginckel Flunarizine containing anti-neoplastic compositions
DE4138042C2 (de) 1991-11-19 1993-10-14 Biotechnolog Forschung Gmbh Epothilone, deren Herstellungsverfahren sowie diese Verbindungen enthaltende Mittel
DE4207092A1 (de) * 1992-03-06 1993-09-16 Schott Glaswerke Endoskop
DE4207922A1 (de) 1992-03-13 1993-09-23 Pharmatech Gmbh Wasserloesliche einschlussverbindungen und verfahren zu deren herstellung
ES2158859T3 (es) 1992-03-18 2001-09-16 Janssen Pharmaceutica Nv Estereoisomeros itraconazol y saperconazol.
IL105553A (en) 1992-05-06 1998-01-04 Janssen Pharmaceutica Inc Solid dosage forms consisting of a porous network of matrix that releases a substance that dissipates rapidly in water
CA2086874E (en) 1992-08-03 2000-01-04 Renzo Mauro Canetta Methods for administration of taxol
US5395951A (en) * 1992-11-17 1995-03-07 Council Of Scientific & Industrial Research Triterpene derivatives of azadirachtin having insect antifeedant and growth inhibitory activity and a process for extracting such compounds from the neem plant
CA2092271C (en) 1993-03-09 2009-10-13 Eddie Reed Use of g-csf for treating taxol side-effects
HU213200B (en) 1993-05-12 1997-03-28 Chinoin Gyogyszer Es Vegyeszet The cyclodextrin or cyclodextrin derivative cluster complexes of taxol, taxotere, or taxus, pharmaceutical preparations containing them and process for their production
PH31594A (en) 1993-09-30 1998-11-03 Janssen Pharmaceutica Nv Oral formulations on an antifungal.
US5565478A (en) 1994-03-14 1996-10-15 The United States Of America As Represented By The Department Of Health & Human Services Combination therapy using signal transduction inhibitors with paclitaxel and other taxane analogs
TW438601B (en) 1994-05-18 2001-06-07 Janssen Pharmaceutica Nv New mucoadhesive emulsion compositions and a process for the preparation thereof
WO1996014090A1 (en) 1994-11-07 1996-05-17 Janssen Pharmaceutica N.V. Compositions comprising carbazoles and cyclodextrins
PT873341E (pt) 1995-11-17 2004-02-27 Biotechnolog Forschung Mbh Gbf Derivados de epotilona preparacao e utilizacao
IL123654A (en) 1995-11-23 2001-08-08 Janssen Pharmaceutica Nv Process for the preparation of solid mixtures of cyclodextrins and pharmaceutical preparations containing such solid mixtures
JP3865436B2 (ja) 1996-07-11 2007-01-10 塩水港精糖株式会社 分岐シクロデキストリンの製造方法
NZ334821A (en) 1996-08-30 2000-12-22 Novartis Ag Method for producing epothilones
ATE267197T1 (de) 1996-11-18 2004-06-15 Biotechnolog Forschung Gmbh Epothilon d, dessen herstellung und dessen verwendung als cytostatisches mittel bzw. als pflanzenschutzmittel
DE69734362T2 (de) * 1996-12-03 2006-07-20 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Synthese von epothilonen, zwischenprodukte dazu, analoga und verwendungen davon
US6441186B1 (en) 1996-12-13 2002-08-27 The Scripps Research Institute Epothilone analogs
US6605599B1 (en) 1997-07-08 2003-08-12 Bristol-Myers Squibb Company Epothilone derivatives
AU9340998A (en) 1997-08-09 1999-03-01 Schering Aktiengesellschaft New epothilone derivatives, method for producing same and their pharmaceutical use
US6242489B1 (en) * 1997-09-25 2001-06-05 Ecological Technologies Corporation Malodorant compositions
US6194181B1 (en) * 1998-02-19 2001-02-27 Novartis Ag Fermentative preparation process for and crystal forms of cytostatics
DE19826988A1 (de) 1998-06-18 1999-12-23 Biotechnolog Forschung Gmbh Epothilon-Nebenkomponenten
EE04852B1 (et) * 1999-02-22 2007-06-15 Gesellschaft Fuer Biotechnologische Forschung Mbh C-21 modifitseeritud epotioloonid, nende valmistamise meetod ning kasutamine ja ravimkoostise kasutamine vähkkasvajate või teiste proliferatiivsete haiguste ravimisel
US6291684B1 (en) * 1999-03-29 2001-09-18 Bristol-Myers Squibb Company Process for the preparation of aziridinyl epothilones from oxiranyl epothilones
UA75365C2 (en) * 2000-08-16 2006-04-17 Bristol Myers Squibb Co Epothilone analog polymorph modifications, a method for obtaining thereof (variants), a pharmaceutical composition based thereon
GB0029895D0 (en) * 2000-12-07 2001-01-24 Novartis Ag Organic compounds
GB0230024D0 (en) * 2002-12-23 2003-01-29 Novartis Ag Organic compounds

Also Published As

Publication number Publication date
PL342423A1 (en) 2001-06-04
AU746294B2 (en) 2002-04-18
EP1428826A3 (en) 2004-10-27
CZ301517B6 (cs) 2010-03-31
CN1286839C (zh) 2006-11-29
RU2268306C2 (ru) 2006-01-20
KR100873526B1 (ko) 2008-12-11
HUP0100855A2 (hu) 2001-06-28
EP1054994B1 (en) 2004-11-17
KR20010041068A (ko) 2001-05-15
IL159631A0 (en) 2004-06-01
US20030220379A1 (en) 2003-11-27
US20030194787A1 (en) 2003-10-16
NO20004114D0 (no) 2000-08-17
KR20060032222A (ko) 2006-04-14
SK12402000A3 (sk) 2001-05-10
US20040142990A1 (en) 2004-07-22
US7101702B2 (en) 2006-09-05
CA2318818A1 (en) 1999-08-26
DE69921966T2 (de) 2005-11-03
DE69921966D1 (de) 2004-12-23
SK288058B6 (sk) 2013-03-01
NZ525622A (en) 2004-10-29
JP3681109B2 (ja) 2005-08-10
IL137691A0 (en) 2001-10-31
HU225851B1 (en) 2007-11-28
IL159631A (en) 2007-07-04
HUP0100855A3 (en) 2005-05-30
CN1535971A (zh) 2004-10-13
KR100595774B1 (ko) 2006-07-03
NO329063B1 (no) 2010-08-09
PT1054994E (pt) 2005-04-29
WO1999042602A3 (en) 1999-11-25
JP2005068156A (ja) 2005-03-17
TR200101634T2 (tr) 2002-06-21
EP1054994A4 (en) 2001-06-19
NO20004114L (no) 2000-10-17
BR9908119A (pt) 2000-10-24
CZ20002994A3 (cs) 2000-11-15
KR20070058021A (ko) 2007-06-07
NO20052034L (no) 2000-10-17
CN1291239A (zh) 2001-04-11
HK1034100A1 (en) 2001-10-12
US6656711B2 (en) 2003-12-02
JP2002504346A (ja) 2002-02-12
JP2010099089A (ja) 2010-05-06
NO322588B1 (no) 2006-10-30
NZ506138A (en) 2003-07-25
ES2233028T3 (es) 2005-06-01
EP1428826A2 (en) 2004-06-16
US20090326239A1 (en) 2009-12-31
US20020165256A1 (en) 2002-11-07
US6380227B1 (en) 2002-04-30
ATE282710T1 (de) 2004-12-15
SK287677B6 (sk) 2011-05-06
TR200002431T2 (tr) 2001-01-22
WO1999042602A2 (en) 1999-08-26
SI1054994T1 (en) 2005-06-30
PL404926A1 (pl) 2013-12-09
US6194181B1 (en) 2001-02-27
SK286517B6 (sk) 2008-12-05
KR20080070781A (ko) 2008-07-30
NO20061736L (no) 1999-08-20
AU3028799A (en) 1999-09-06
DK1054994T3 (da) 2005-03-14
CN1229502C (zh) 2005-11-30
NO20061735L (no) 1999-08-20
IL137691A (en) 2007-12-03
PL196787B1 (pl) 2008-01-31
US20070197611A1 (en) 2007-08-23
EP1054994A2 (en) 2000-11-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
NO321596B1 (no) Fremgangsmate for separasjon av epotiloner
EP1652926B1 (en) Crystalline epothilone d
US7241899B2 (en) Methods for the preparation, isolation and purification of epothilone B, and X-ray crystal structures of epothilone B
KR101372563B1 (ko) 에포틸론 함유물질로부터 에포틸론 ａ와 ｂ의 추출 및 정제 방법
MXPA00008115A (en) Fermentative preparation process for cytostatics and crystal forms thereof

Legal Events

Date Code Title Description
MM1K Lapsed by not paying the annual fees