HU225851B1 - Fermentative preparation process for epothilone cytostatics - Google Patents
Fermentative preparation process for epothilone cytostatics Download PDFInfo
- Publication number
- HU225851B1 HU225851B1 HU0100855A HUP0100855A HU225851B1 HU 225851 B1 HU225851 B1 HU 225851B1 HU 0100855 A HU0100855 A HU 0100855A HU P0100855 A HUP0100855 A HU P0100855A HU 225851 B1 HU225851 B1 HU 225851B1
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- cyclodextrin
- epothilone
- medium
- epothilones
- group
- Prior art date
Links
- 229930013356 epothilone Natural products 0.000 title claims abstract description 77
- 150000003883 epothilone derivatives Chemical class 0.000 title claims description 53
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 14
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 title 1
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 title 1
- HESCAJZNRMSMJG-HGYUPSKWSA-N epothilone A Natural products O=C1[C@H](C)[C@H](O)[C@H](C)CCC[C@H]2O[C@H]2C[C@@H](/C(=C\c2nc(C)sc2)/C)OC(=O)C[C@H](O)C1(C)C HESCAJZNRMSMJG-HGYUPSKWSA-N 0.000 claims abstract description 89
- HESCAJZNRMSMJG-KKQRBIROSA-N epothilone A Chemical class C/C([C@@H]1C[C@@H]2O[C@@H]2CCC[C@@H]([C@@H]([C@@H](C)C(=O)C(C)(C)[C@@H](O)CC(=O)O1)O)C)=C\C1=CSC(C)=N1 HESCAJZNRMSMJG-KKQRBIROSA-N 0.000 claims abstract description 77
- QXRSDHAAWVKZLJ-OXZHEXMSSA-N Epothilone B Natural products O=C1[C@H](C)[C@H](O)[C@@H](C)CCC[C@@]2(C)O[C@H]2C[C@@H](/C(=C\c2nc(C)sc2)/C)OC(=O)C[C@H](O)C1(C)C QXRSDHAAWVKZLJ-OXZHEXMSSA-N 0.000 claims abstract description 54
- QXRSDHAAWVKZLJ-PVYNADRNSA-N epothilone B Chemical compound C/C([C@@H]1C[C@@H]2O[C@]2(C)CCC[C@@H]([C@@H]([C@@H](C)C(=O)C(C)(C)[C@@H](O)CC(=O)O1)O)C)=C\C1=CSC(C)=N1 QXRSDHAAWVKZLJ-PVYNADRNSA-N 0.000 claims abstract description 54
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 40
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 29
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 16
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims abstract description 5
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 claims description 133
- -1 piperidinocarbonyl group Chemical group 0.000 claims description 80
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 78
- HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N schardinger α-dextrin Chemical compound O1C(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(O)C2O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC2C(O)C(O)C1OC2CO HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 55
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 41
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 41
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 40
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 39
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 38
- 229940097362 cyclodextrins Drugs 0.000 claims description 36
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 29
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 24
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 23
- 239000001116 FEMA 4028 Substances 0.000 claims description 19
- 229960004853 betadex Drugs 0.000 claims description 19
- 239000012071 phase Substances 0.000 claims description 17
- WHGYBXFWUBPSRW-FOUAGVGXSA-N beta-cyclodextrin Chemical compound OC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)CO)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1CO WHGYBXFWUBPSRW-FOUAGVGXSA-N 0.000 claims description 15
- 235000011175 beta-cyclodextrine Nutrition 0.000 claims description 15
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N ether Substances CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N nitrogen Substances N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 125000003178 carboxy group Chemical class [H]OC(*)=O 0.000 claims description 11
- 230000000536 complexating effect Effects 0.000 claims description 11
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 11
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 claims description 10
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 10
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims description 9
- 229940080345 gamma-cyclodextrin Drugs 0.000 claims description 9
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 9
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 125000004453 alkoxycarbonyl group Chemical group 0.000 claims description 8
- GDSRMADSINPKSL-HSEONFRVSA-N gamma-cyclodextrin Chemical compound OC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)CO)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1CO GDSRMADSINPKSL-HSEONFRVSA-N 0.000 claims description 8
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 8
- 229920001450 Alpha-Cyclodextrin Polymers 0.000 claims description 7
- 241001532577 Sorangium Species 0.000 claims description 7
- HFHDHCJBZVLPGP-RWMJIURBSA-N alpha-cyclodextrin Chemical compound OC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)CO)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1CO HFHDHCJBZVLPGP-RWMJIURBSA-N 0.000 claims description 7
- 238000013452 biotechnological production Methods 0.000 claims description 7
- 125000003917 carbamoyl group Chemical group [H]N([H])C(*)=O 0.000 claims description 7
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 7
- 238000012545 processing Methods 0.000 claims description 7
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 claims description 7
- 229940043377 alpha-cyclodextrin Drugs 0.000 claims description 6
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 claims description 6
- YTCJPMWRBDVDMB-ZQMQSLPDSA-N (1S,3R,4S,6R,7S,9R,10R,11R,12S,14R,16R,17S,19R,21R,22S,24R,26R,27S,29R,31R,32S,34R,36R,37S,39R,41R,42S,44R,46R,47S,49R,51R,52S,54R,56R,57S,59R,61R,62S,64R,65R,66R,67R,69R,70R,71R,72R,73R,74R,75R,76R,77R,78R,79R,80R,81R,82R,83R,84R,85R,86R,87R,88R,89R,91S)-6,16,21,26,31,36,41,46,51,56,61,67,89-tridecakis(hydroxymethyl)-2,5,8,13,15,18,20,23,25,28,30,33,35,38,40,43,45,48,50,53,55,58,60,63,68,90-hexacosaoxatetradecacyclo[62.2.2.29,12.214,17.219,22.224,27.229,32.234,37.239,42.244,47.249,52.254,57.259,62.13,7]hennonacontane-4,10,11,65,66,69,70,71,72,73,74,75,76,77,78,79,80,81,82,83,84,85,86,87,88,91-hexacosol Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@@H]2O[C@@H]3[C@@H](CO)O[C@H](O[C@@H]4[C@@H](CO)O[C@H](O[C@@H]5[C@@H](CO)O[C@H](O[C@@H]6[C@@H](CO)O[C@H](O[C@@H]7[C@@H](CO)O[C@H](O[C@@H]8[C@@H](CO)O[C@H](O[C@@H]9[C@@H](CO)O[C@H](O[C@@H]%10[C@@H](CO)O[C@H](O[C@@H]%11[C@@H](CO)O[C@H](O[C@@H]%12[C@@H](CO)O[C@H](O[C@@H]%13[C@@H](CO)O[C@H](O[C@@H]%14[C@@H](CO)O[C@H](O[C@H]1[C@@H]2O)[C@H](O)[C@H]%14O)[C@H](O)[C@H]%13O)[C@H](O)[C@H]%12O)[C@H](O)[C@H]%11O)[C@H](O)[C@H]%10O)[C@H](O)[C@H]9O)[C@H](O)[C@H]8O)[C@H](O)[C@H]7O)[C@H](O)[C@H]6O)[C@H](O)[C@H]5O)[C@H](O)[C@H]4O)[C@H](O)[C@H]3O YTCJPMWRBDVDMB-ZQMQSLPDSA-N 0.000 claims description 5
- 125000001589 carboacyl group Chemical group 0.000 claims description 5
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 5
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 claims description 5
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 5
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 5
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims description 4
- 239000002808 molecular sieve Substances 0.000 claims description 4
- 125000006518 morpholino carbonyl group Chemical group [H]C1([H])OC([H])([H])C([H])([H])N(C(*)=O)C1([H])[H] 0.000 claims description 4
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 4
- URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N sodium aluminosilicate Chemical compound [Na+].[Al+3].[O-][Si]([O-])=O.[O-][Si]([O-])=O URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- HUKYUKIIXNZRBF-HZKYAONISA-N ε-cyclodextrin Chemical compound OC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)CO)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1CO HUKYUKIIXNZRBF-HZKYAONISA-N 0.000 claims description 4
- DHKHKXVYLBGOIT-UHFFFAOYSA-N acetaldehyde Diethyl Acetal Natural products CCOC(C)OCC DHKHKXVYLBGOIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 125000004435 hydrogen atom Chemical class [H]* 0.000 claims description 3
- 125000002768 hydroxyalkyl group Chemical group 0.000 claims description 3
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 claims description 3
- 239000002798 polar solvent Substances 0.000 claims description 3
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 claims description 3
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 claims description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 claims description 2
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000001033 ether group Chemical group 0.000 claims 3
- 206010029897 Obsessive thoughts Diseases 0.000 claims 2
- 125000005011 alkyl ether group Chemical group 0.000 claims 2
- 125000002566 glucosaminyl group Chemical group 0.000 claims 2
- 125000003047 N-acetyl group Chemical group 0.000 claims 1
- MDFFNEOEWAXZRQ-UHFFFAOYSA-N aminyl Chemical group [NH2] MDFFNEOEWAXZRQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 125000004181 carboxyalkyl group Chemical group 0.000 claims 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims 1
- 125000003147 glycosyl group Chemical group 0.000 claims 1
- 125000001183 hydrocarbyl group Chemical group 0.000 claims 1
- 125000004964 sulfoalkyl group Chemical group 0.000 claims 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 abstract description 7
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 abstract description 7
- 239000013078 crystal Substances 0.000 abstract description 5
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 27
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 27
- 239000000047 product Substances 0.000 description 25
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 19
- 239000003978 infusion fluid Substances 0.000 description 17
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 16
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 16
- 241000862997 Sorangium cellulosum Species 0.000 description 14
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 14
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 14
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 13
- 150000005215 alkyl ethers Chemical class 0.000 description 12
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 12
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 11
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 10
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 10
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 10
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 9
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 9
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 9
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 9
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 9
- 150000002430 hydrocarbons Chemical group 0.000 description 9
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 9
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 8
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 8
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical group OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 8
- 229960001031 glucose Drugs 0.000 description 8
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 8
- 150000002825 nitriles Chemical class 0.000 description 8
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 8
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 8
- 241000863434 Myxococcales Species 0.000 description 7
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 7
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 7
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 7
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 7
- 229920005990 polystyrene resin Polymers 0.000 description 7
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 7
- RCINICONZNJXQF-XAZOAEDWSA-N taxol® Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(CC(C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3(C21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-XAZOAEDWSA-N 0.000 description 7
- ODLHGICHYURWBS-LKONHMLTSA-N trappsol cyclo Chemical compound CC(O)COC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)COCC(O)C)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1COCC(C)O ODLHGICHYURWBS-LKONHMLTSA-N 0.000 description 7
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 6
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 6
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 6
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 6
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 6
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 6
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 6
- 229920001592 potato starch Polymers 0.000 description 6
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 6
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 6
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 6
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 6
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 5
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 5
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 5
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 5
- YZOUYRAONFXZSI-SBHWVFSVSA-N (1S,3R,5R,6R,8R,10R,11R,13R,15R,16R,18R,20R,21R,23R,25R,26R,28R,30R,31S,33R,35R,36R,37S,38R,39S,40R,41S,42R,43S,44R,45S,46R,47S,48R,49S)-5,10,15,20,25,30,35-heptakis(hydroxymethyl)-37,39,40,41,42,43,44,45,46,47,48,49-dodecamethoxy-2,4,7,9,12,14,17,19,22,24,27,29,32,34-tetradecaoxaoctacyclo[31.2.2.23,6.28,11.213,16.218,21.223,26.228,31]nonatetracontane-36,38-diol Chemical compound O([C@@H]([C@H]([C@@H]1OC)OC)O[C@H]2[C@@H](O)[C@@H]([C@@H](O[C@@H]3[C@@H](CO)O[C@@H]([C@H]([C@@H]3O)OC)O[C@@H]3[C@@H](CO)O[C@@H]([C@H]([C@@H]3OC)OC)O[C@@H]3[C@@H](CO)O[C@@H]([C@H]([C@@H]3OC)OC)O[C@@H]3[C@@H](CO)O[C@@H]([C@H]([C@@H]3OC)OC)O3)O[C@@H]2CO)OC)[C@H](CO)[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](OC)[C@H](OC)[C@H]3[C@@H](CO)O1 YZOUYRAONFXZSI-SBHWVFSVSA-N 0.000 description 4
- DURPTKYDGMDSBL-UHFFFAOYSA-N 1-butoxybutane Chemical compound CCCCOCCCC DURPTKYDGMDSBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 4
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 4
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 4
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 4
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 4
- MTHSVFCYNBDYFN-UHFFFAOYSA-N diethylene glycol Chemical compound OCCOCCO MTHSVFCYNBDYFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 4
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 4
- 239000008298 dragée Substances 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 239000002024 ethyl acetate extract Substances 0.000 description 4
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 4
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 4
- JMMWKPVZQRWMSS-UHFFFAOYSA-N isopropanol acetate Natural products CC(C)OC(C)=O JMMWKPVZQRWMSS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940011051 isopropyl acetate Drugs 0.000 description 4
- GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-N isovaleric acid Chemical compound CC(C)CC(O)=O GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 4
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 4
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 4
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- AZUXKVXMJOIAOF-UHFFFAOYSA-N 1-(2-hydroxypropoxy)propan-2-ol Chemical compound CC(O)COCC(C)O AZUXKVXMJOIAOF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QCDWFXQBSFUVSP-UHFFFAOYSA-N 2-phenoxyethanol Chemical compound OCCOC1=CC=CC=C1 QCDWFXQBSFUVSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LYKRIFJRHXXXDZ-UHFFFAOYSA-N 4-(4-hydroxybutoxy)butan-1-ol Chemical class OCCCCOCCCCO LYKRIFJRHXXXDZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- NZAQRZWBQUIBSF-UHFFFAOYSA-N 4-(4-sulfobutoxy)butane-1-sulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)CCCCOCCCCS(O)(=O)=O NZAQRZWBQUIBSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000208199 Buxus sempervirens Species 0.000 description 3
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 3
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 3
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 3
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 3
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 3
- 102000029749 Microtubule Human genes 0.000 description 3
- 108091022875 Microtubule Proteins 0.000 description 3
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 description 3
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 3
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 3
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 3
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 3
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 3
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 3
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 3
- FBYFHODQAUBIOO-UHFFFAOYSA-N carboxyethyl ether Natural products OC(=O)C(C)OC(C)C(O)=O FBYFHODQAUBIOO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000002057 carboxymethyl group Chemical group [H]OC(=O)C([H])([H])[*] 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 3
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 3
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 3
- 238000003795 desorption Methods 0.000 description 3
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 3
- SZXQTJUDPRGNJN-UHFFFAOYSA-N dipropylene glycol Chemical class OCCCOCCCO SZXQTJUDPRGNJN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 3
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 3
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 3
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 3
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 3
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 3
- 229940014259 gelatin Drugs 0.000 description 3
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 3
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 3
- 125000002791 glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 3
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 3
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 description 3
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Substances [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 3
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 3
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 3
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 3
- XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N methyl 1-acetylthieno[3,2-c]pyrazole-5-carboxylate Chemical compound CC(=O)N1N=CC2=C1C=C(C(=O)OC)S2 XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000004688 microtubule Anatomy 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- CQDGTJPVBWZJAZ-UHFFFAOYSA-N monoethyl carbonate Chemical compound CCOC(O)=O CQDGTJPVBWZJAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000005445 natural material Substances 0.000 description 3
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 3
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 3
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 description 3
- WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N pentadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCC(O)=O WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 3
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 3
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 3
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 3
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 239000011877 solvent mixture Substances 0.000 description 3
- 125000000020 sulfo group Chemical group O=S(=O)([*])O[H] 0.000 description 3
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 3
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 3
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 3
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 description 3
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 3
- FCCNKYGSMOSYPV-DEDISHTHSA-N (-)-Epothilone E Natural products O=C1[C@H](C)[C@H](O)[C@@H](C)CCC[C@H]2O[C@H]2C[C@@H](/C(=C\c2nc(CO)sc2)/C)OC(=O)C[C@H](O)C1(C)C FCCNKYGSMOSYPV-DEDISHTHSA-N 0.000 description 2
- UKIMCRYGLFQEOE-RLHMMOOASA-N (-)-Epothilone F Natural products O=C1[C@H](C)[C@H](O)[C@@H](C)CCC[C@@]2(C)O[C@H]2C[C@@H](/C(=C\c2nc(CO)sc2)/C)OC(=O)C[C@H](O)C1(C)C UKIMCRYGLFQEOE-RLHMMOOASA-N 0.000 description 2
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N (±)-α-Tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LMSDCGXQALIMLM-UHFFFAOYSA-N 2-[2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl-(carboxymethyl)amino]acetic acid;iron Chemical compound [Fe].OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O LMSDCGXQALIMLM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DVLFYONBTKHTER-UHFFFAOYSA-N 3-(N-morpholino)propanesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)CCCN1CCOCC1 DVLFYONBTKHTER-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 2
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000304886 Bacilli Species 0.000 description 2
- DPUOLQHDNGRHBS-UHFFFAOYSA-N Brassidinsaeure Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCCCCCC(O)=O DPUOLQHDNGRHBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 2
- BEFZAMRWPCMWFJ-JRBBLYSQSA-N Epothilone C Natural products O=C1[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)CCC/C=C\C[C@@H](/C(=C\c2nc(C)sc2)/C)OC(=O)C[C@H](O)C1(C)C BEFZAMRWPCMWFJ-JRBBLYSQSA-N 0.000 description 2
- XOZIUKBZLSUILX-SDMHVBBESA-N Epothilone D Natural products O=C1[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)CCC/C(/C)=C/C[C@@H](/C(=C\c2nc(C)sc2)/C)OC(=O)C[C@H](O)C1(C)C XOZIUKBZLSUILX-SDMHVBBESA-N 0.000 description 2
- UKIMCRYGLFQEOE-UHFFFAOYSA-N Epothilone F Natural products O1C(=O)CC(O)C(C)(C)C(=O)C(C)C(O)C(C)CCCC2(C)OC2CC1C(C)=CC1=CSC(CO)=N1 UKIMCRYGLFQEOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AMQJEAYHLZJPGS-UHFFFAOYSA-N N-Pentanol Chemical compound CCCCCO AMQJEAYHLZJPGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- 229920002685 Polyoxyl 35CastorOil Polymers 0.000 description 2
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 2
- GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N Titan oxide Chemical compound O=[Ti]=O GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920004482 WACKER® Polymers 0.000 description 2
- 238000002441 X-ray diffraction Methods 0.000 description 2
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 2
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 2
- YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N arachidonic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 2
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 229920003123 carboxymethyl cellulose sodium Polymers 0.000 description 2
- 229940063834 carboxymethylcellulose sodium Drugs 0.000 description 2
- 239000004359 castor oil Substances 0.000 description 2
- 235000019438 castor oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 description 2
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 2
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 2
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 2
- BEFZAMRWPCMWFJ-UHFFFAOYSA-N desoxyepothilone A Natural products O1C(=O)CC(O)C(C)(C)C(=O)C(C)C(O)C(C)CCCC=CCC1C(C)=CC1=CSC(C)=N1 BEFZAMRWPCMWFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XOZIUKBZLSUILX-UHFFFAOYSA-N desoxyepothilone B Natural products O1C(=O)CC(O)C(C)(C)C(=O)C(C)C(O)C(C)CCCC(C)=CCC1C(C)=CC1=CSC(C)=N1 XOZIUKBZLSUILX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 235000021186 dishes Nutrition 0.000 description 2
- UKMSUNONTOPOIO-UHFFFAOYSA-N docosanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O UKMSUNONTOPOIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N dodecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCC(O)=O POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- BEFZAMRWPCMWFJ-QJKGZULSSA-N epothilone C Chemical compound O1C(=O)C[C@H](O)C(C)(C)C(=O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)CCC\C=C/C[C@H]1C(\C)=C\C1=CSC(C)=N1 BEFZAMRWPCMWFJ-QJKGZULSSA-N 0.000 description 2
- XOZIUKBZLSUILX-GIQCAXHBSA-N epothilone D Chemical compound O1C(=O)C[C@H](O)C(C)(C)C(=O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)CCC\C(C)=C/C[C@H]1C(\C)=C\C1=CSC(C)=N1 XOZIUKBZLSUILX-GIQCAXHBSA-N 0.000 description 2
- FCCNKYGSMOSYPV-UHFFFAOYSA-N epothilone E Natural products O1C(=O)CC(O)C(C)(C)C(=O)C(C)C(O)C(C)CCCC2OC2CC1C(C)=CC1=CSC(CO)=N1 FCCNKYGSMOSYPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FCCNKYGSMOSYPV-OKOHHBBGSA-N epothilone e Chemical compound C/C([C@@H]1C[C@@H]2O[C@@H]2CCC[C@@H]([C@@H]([C@@H](C)C(=O)C(C)(C)[C@@H](O)CC(=O)O1)O)C)=C\C1=CSC(CO)=N1 FCCNKYGSMOSYPV-OKOHHBBGSA-N 0.000 description 2
- UKIMCRYGLFQEOE-RGJAOAFDSA-N epothilone f Chemical compound C/C([C@@H]1C[C@@H]2O[C@]2(C)CCC[C@@H]([C@@H]([C@@H](C)C(=O)C(C)(C)[C@@H](O)CC(=O)O1)O)C)=C\C1=CSC(CO)=N1 UKIMCRYGLFQEOE-RGJAOAFDSA-N 0.000 description 2
- CYEDOLFRAIXARV-UHFFFAOYSA-N ethyl propyl carbonate Chemical compound CCCOC(=O)OCC CYEDOLFRAIXARV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 2
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 2
- 210000004211 gastric acid Anatomy 0.000 description 2
- ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N glycerol triricinoleate Natural products CCCCCC[C@@H](O)CC=CCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCC=CC[C@@H](O)CCCCCC)OC(=O)CCCCCCCC=CC[C@H](O)CCCCCC ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N 0.000 description 2
- KEMQGTRYUADPNZ-UHFFFAOYSA-N heptadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O KEMQGTRYUADPNZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N hexadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 2
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 2
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 2
- KKQAVHGECIBFRQ-UHFFFAOYSA-N methyl propyl carbonate Chemical compound CCCOC(=O)OC KKQAVHGECIBFRQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000000740 n-pentyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 description 2
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 2
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QUANRIQJNFHVEU-UHFFFAOYSA-N oxirane;propane-1,2,3-triol Chemical compound C1CO1.OCC(O)CO QUANRIQJNFHVEU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004014 plasticizer Substances 0.000 description 2
- 239000008389 polyethoxylated castor oil Substances 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 2
- FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N potassium nitrate Chemical compound [K+].[O-][N+]([O-])=O FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 2
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 2
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 2
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 2
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 2
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical class [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 2
- SZHOJFHSIKHZHA-UHFFFAOYSA-N tridecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCC(O)=O SZHOJFHSIKHZHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 2
- CWGBFIRHYJNILV-UHFFFAOYSA-N (1,4-diphenyl-1,2,4-triazol-4-ium-3-yl)-phenylazanide Chemical compound C=1C=CC=CC=1[N-]C1=NN(C=2C=CC=CC=2)C=[N+]1C1=CC=CC=C1 CWGBFIRHYJNILV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LNAZSHAWQACDHT-XIYTZBAFSA-N (2r,3r,4s,5r,6s)-4,5-dimethoxy-2-(methoxymethyl)-3-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3,4,5-trimethoxy-6-(methoxymethyl)oxan-2-yl]oxy-6-[(2r,3r,4s,5r,6r)-4,5,6-trimethoxy-2-(methoxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxane Chemical compound CO[C@@H]1[C@@H](OC)[C@H](OC)[C@@H](COC)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](OC)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](OC)[C@H](OC)O[C@@H]2COC)OC)O[C@@H]1COC LNAZSHAWQACDHT-XIYTZBAFSA-N 0.000 description 1
- OYHQOLUKZRVURQ-NTGFUMLPSA-N (9Z,12Z)-9,10,12,13-tetratritiooctadeca-9,12-dienoic acid Chemical compound C(CCCCCCC\C(=C(/C\C(=C(/CCCCC)\[3H])\[3H])\[3H])\[3H])(=O)O OYHQOLUKZRVURQ-NTGFUMLPSA-N 0.000 description 1
- VKWZWOKLRQWMPC-UHFFFAOYSA-N 1-(2-hydroxybutoxy)butan-2-ol Chemical compound CCC(O)COCC(O)CC VKWZWOKLRQWMPC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-2,4-dioxo-1,3-diazinane-5-carboximidamide Chemical compound CN1CC(C(N)=N)C(=O)NC1=O IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- OIQOAYVCKAHSEJ-UHFFFAOYSA-N 2-[2,3-bis(2-hydroxyethoxy)propoxy]ethanol;hexadecanoic acid;octadecanoic acid Chemical compound OCCOCC(OCCO)COCCO.CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O OIQOAYVCKAHSEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100033350 ATP-dependent translocase ABCB1 Human genes 0.000 description 1
- 235000019489 Almond oil Nutrition 0.000 description 1
- 241000416162 Astragalus gummifer Species 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 235000021357 Behenic acid Nutrition 0.000 description 1
- NLZUEZXRPGMBCV-UHFFFAOYSA-N Butylhydroxytoluene Chemical compound CC1=CC(C(C)(C)C)=C(O)C(C(C)(C)C)=C1 NLZUEZXRPGMBCV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- LCGLNKUTAGEVQW-UHFFFAOYSA-N Dimethyl ether Chemical compound COC LCGLNKUTAGEVQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- URXZXNYJPAJJOQ-UHFFFAOYSA-N Erucic acid Natural products CCCCCCC=CCCCCCCCCCCCC(O)=O URXZXNYJPAJJOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001856 Ethyl cellulose Substances 0.000 description 1
- ZZSNKZQZMQGXPY-UHFFFAOYSA-N Ethyl cellulose Chemical compound CCOCC1OC(OC)C(OCC)C(OCC)C1OC1C(O)C(O)C(OC)C(CO)O1 ZZSNKZQZMQGXPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 239000005639 Lauric acid Substances 0.000 description 1
- 240000007472 Leucaena leucocephala Species 0.000 description 1
- 235000010643 Leucaena leucocephala Nutrition 0.000 description 1
- 239000007993 MOPS buffer Substances 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010047230 Member 1 Subfamily B ATP Binding Cassette Transporter Proteins 0.000 description 1
- 229940119336 Microtubule stabilizer Drugs 0.000 description 1
- SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N N-Methylpyrrolidone Chemical compound CN1CCCC1=O SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N N-Vinyl-2-pyrrolidone Chemical class C=CN1CCCC1=O WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N Oleic acid Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 description 1
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 1
- 235000021314 Palmitic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000005662 Paraffin oil Substances 0.000 description 1
- 235000019483 Peanut oil Nutrition 0.000 description 1
- 102000007982 Phosphoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010089430 Phosphoproteins Proteins 0.000 description 1
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical class CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019764 Soybean Meal Nutrition 0.000 description 1
- 229910000831 Steel Inorganic materials 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 229920001615 Tragacanth Polymers 0.000 description 1
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 1
- 244000098338 Triticum aestivum Species 0.000 description 1
- 102000004243 Tubulin Human genes 0.000 description 1
- 108090000704 Tubulin Proteins 0.000 description 1
- 229930003427 Vitamin E Natural products 0.000 description 1
- 150000001241 acetals Chemical class 0.000 description 1
- 238000005377 adsorption chromatography Methods 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000001335 aliphatic alkanes Chemical class 0.000 description 1
- OENHQHLEOONYIE-UKMVMLAPSA-N all-trans beta-carotene Natural products CC=1CCCC(C)(C)C=1/C=C/C(/C)=C/C=C/C(/C)=C/C=C/C=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C OENHQHLEOONYIE-UKMVMLAPSA-N 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- 239000008168 almond oil Substances 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-DVKNGEFBSA-N alpha-D-glucose Chemical group OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-DVKNGEFBSA-N 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002216 antistatic agent Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- 235000021342 arachidonic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940114079 arachidonic acid Drugs 0.000 description 1
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940116226 behenic acid Drugs 0.000 description 1
- 208000036815 beta tubulin Diseases 0.000 description 1
- 239000011648 beta-carotene Substances 0.000 description 1
- TUPZEYHYWIEDIH-WAIFQNFQSA-N beta-carotene Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2=CCCCC2(C)C TUPZEYHYWIEDIH-WAIFQNFQSA-N 0.000 description 1
- 235000013734 beta-carotene Nutrition 0.000 description 1
- 229960002747 betacarotene Drugs 0.000 description 1
- 229920001222 biopolymer Polymers 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000011138 biotechnological process Methods 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 235000010354 butylated hydroxytoluene Nutrition 0.000 description 1
- FUFJGUQYACFECW-UHFFFAOYSA-L calcium hydrogenphosphate Chemical compound [Ca+2].OP([O-])([O-])=O FUFJGUQYACFECW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- CJZGTCYPCWQAJB-UHFFFAOYSA-L calcium stearate Chemical compound [Ca+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O CJZGTCYPCWQAJB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000008116 calcium stearate Substances 0.000 description 1
- 235000013539 calcium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 229940105329 carboxymethylcellulose Drugs 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 1
- 230000000973 chemotherapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000002385 cottonseed oil Substances 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 229960002086 dextran Drugs 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 235000019700 dicalcium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-MDZDMXLPSA-N elaidic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C\CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-MDZDMXLPSA-N 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- DPUOLQHDNGRHBS-KTKRTIGZSA-N erucic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCCCCC(O)=O DPUOLQHDNGRHBS-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 1
- 125000004185 ester group Chemical group 0.000 description 1
- 229960004756 ethanol Drugs 0.000 description 1
- 235000019325 ethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920001249 ethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 239000010685 fatty oil Substances 0.000 description 1
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 description 1
- 210000002196 fr. b Anatomy 0.000 description 1
- 210000003918 fraction a Anatomy 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N gamma-tocopherol Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC1CCC2C(C)C(O)C(C)C(C)C2O1 WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 1
- 238000012239 gene modification Methods 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 230000005017 genetic modification Effects 0.000 description 1
- 235000013617 genetically modified food Nutrition 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 239000007952 growth promoter Substances 0.000 description 1
- 239000003906 humectant Substances 0.000 description 1
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001866 hydroxypropyl methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010979 hydroxypropyl methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920003088 hydroxypropyl methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N hydroxypropyl methyl cellulose Chemical compound OC1C(O)C(OC)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC2C(C(O)C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C(CO)O2)O)C(CO)O1 UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940031704 hydroxypropyl methylcellulose phthalate Drugs 0.000 description 1
- 229920003132 hydroxypropyl methylcellulose phthalate Polymers 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 239000011261 inert gas Substances 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N iron Substances [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000000959 isobutyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N isooleic acid Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCCC(O)=O QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- XUGNVMKQXJXZCD-UHFFFAOYSA-N isopropyl palmitate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC(C)C XUGNVMKQXJXZCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012792 lyophilization process Methods 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960001855 mannitol Drugs 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 231100000682 maximum tolerated dose Toxicity 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- CXQDPEWAQYKXEJ-UHFFFAOYSA-N methyl 4-(4-methoxy-4-oxobutoxy)butanoate Chemical compound COC(=O)CCCOCCCC(=O)OC CXQDPEWAQYKXEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 229960002900 methylcellulose Drugs 0.000 description 1
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000036457 multidrug resistance Effects 0.000 description 1
- 125000004108 n-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000004123 n-propyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Polymers 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 125000005740 oxycarbonyl group Chemical group [*:1]OC([*:2])=O 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000312 peanut oil Substances 0.000 description 1
- 239000001814 pectin Substances 0.000 description 1
- 235000010987 pectin Nutrition 0.000 description 1
- 229920001277 pectin Polymers 0.000 description 1
- 125000001147 pentyl group Chemical group C(CCCC)* 0.000 description 1
- XNGIFLGASWRNHJ-UHFFFAOYSA-L phthalate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)C1=CC=CC=C1C([O-])=O XNGIFLGASWRNHJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 238000007747 plating Methods 0.000 description 1
- 229940068886 polyethylene glycol 300 Drugs 0.000 description 1
- 229940068918 polyethylene glycol 400 Drugs 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 150000004804 polysaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 235000010333 potassium nitrate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004323 potassium nitrate Substances 0.000 description 1
- 229940116317 potato starch Drugs 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DPBVJRXPSXTHOL-UHFFFAOYSA-N propyl tetradecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC(=O)OCCC DPBVJRXPSXTHOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000013772 propylene glycol Nutrition 0.000 description 1
- 208000023958 prostate neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000005086 pumping Methods 0.000 description 1
- 238000011403 purification operation Methods 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000008261 resistance mechanism Effects 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 229940100486 rice starch Drugs 0.000 description 1
- 235000003441 saturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000004671 saturated fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000002914 sec-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000008159 sesame oil Substances 0.000 description 1
- 235000011803 sesame oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000004760 silicates Chemical class 0.000 description 1
- 235000010413 sodium alginate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000661 sodium alginate Substances 0.000 description 1
- 229940005550 sodium alginate Drugs 0.000 description 1
- 229960002668 sodium chloride Drugs 0.000 description 1
- 239000007901 soft capsule Substances 0.000 description 1
- 238000005063 solubilization Methods 0.000 description 1
- 230000007928 solubilization Effects 0.000 description 1
- 239000004455 soybean meal Substances 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 229960004274 stearic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000010959 steel Substances 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 229920003002 synthetic resin Polymers 0.000 description 1
- 239000000057 synthetic resin Substances 0.000 description 1
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- TUNFSRHWOTWDNC-HKGQFRNVSA-N tetradecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCC[14C](O)=O TUNFSRHWOTWDNC-HKGQFRNVSA-N 0.000 description 1
- 229920001169 thermoplastic Polymers 0.000 description 1
- 239000004408 titanium dioxide Substances 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 235000010487 tragacanth Nutrition 0.000 description 1
- 239000000196 tragacanth Substances 0.000 description 1
- 229940116362 tragacanth Drugs 0.000 description 1
- DPUOLQHDNGRHBS-MDZDMXLPSA-N trans-Brassidic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C\CCCCCCCCCCCC(O)=O DPUOLQHDNGRHBS-MDZDMXLPSA-N 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
- 229940078499 tricalcium phosphate Drugs 0.000 description 1
- 235000019731 tricalcium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000391 tricalcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000009281 ultraviolet germicidal irradiation Methods 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 235000019165 vitamin E Nutrition 0.000 description 1
- 229940046009 vitamin E Drugs 0.000 description 1
- 239000011709 vitamin E Substances 0.000 description 1
- 238000010792 warming Methods 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 229940100445 wheat starch Drugs 0.000 description 1
- OENHQHLEOONYIE-JLTXGRSLSA-N β-Carotene Chemical compound CC=1CCCC(C)(C)C=1\C=C\C(\C)=C\C=C\C(\C)=C\C=C\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C OENHQHLEOONYIE-JLTXGRSLSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/18—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms containing at least two hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system, e.g. rifamycin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D493/00—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system
- C07D493/02—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system in which the condensed system contains two hetero rings
- C07D493/04—Ortho-condensed systems
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
- C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/16—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms containing two or more hetero rings
- C12P17/167—Heterorings having sulfur atoms as ring heteroatoms, e.g. vitamin B1, thiamine nucleus and open chain analogs
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/18—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms containing at least two hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system, e.g. rifamycin
- C12P17/181—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring heteroatoms in the condensed system, e.g. Salinomycin, Septamycin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2299/00—Coordinates from 3D structures of peptides, e.g. proteins or enzymes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Virology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
Description
A találmány olyan új biotechnológiai előállítási eljárásra vonatkozik, amely ipari léptékben alkalmazható epothilone és származékai előállítására, különösen ezen vegyületek tápközegben (táptalajban) való dúsítási eljárására és a vegyületek fermentációs előállítására szolgáló új tápközegre is vonatkozik.
A tumorok kezelésére felhasználható citotoxikus hatóanyagok között a Taxol® (Paclitexel; BristolMeyers Squibb), egy mikrotubulusstabilizáló szer játszik fontos szerepet és rendelkezik figyelemre méltó kereskedelmi sikerrel. A Taxolnak azonban számos hátránya van. Különösen problematikus nagyon csekély mértékű vízoldhatósága. Ezért vált szükségessé, hogy a Taxol®-t Cremophor EL®-rel (polioxi-etilezett castorolaj; BASF, Ludwigshafen, Németország) alkotott készítmény formájában adagolják. A Cremophor EL®-nek súlyos mellékhatásai vannak; például allergiákat idéz elő, amelyek legalább egy esetben a beteg halálát okozták.
Bár a mikrotubulusokat stabilizáló rákellenes szerek közé tartozó Taxan vegyületcsoportról elismerőleg nyilatkoztak mint „talán a legfontosabb hozzájárulás a rák elleni gyógyszeres arzenálhoz az elmúlt évtizedben” [lásd Rowinsky E. K., Ann. rév. Med. 48, 353-374 (1997)], és a Taxol® kereskedelmi sikere ellenére úgy tűnik, hogy ezek a vegyületek mégsem képviselnek valóban nagy áttörést a rák kemoterápiás kezelésében. A Taxol®-lal végzett kezelés egy sor jelentős mellékhatással jár, és a kis kiterjedésű tumorok néhány primer osztálya, nevezetesen a vastagbél- és a prosztatatumor csak kismértékben reagál a vegyületre (lásd többek között Rowinsky E. K.). Ezenfelül a Taxol hatékonyságát gyengíthetik, sőt teljesen semlegesíthetik a szerzett rezisztencia mechanizmusok, különösen azok, amelyek foszfoproteinek túlzott mértékű kifejeződésén alapulnak, amely jelenség a hatóanyagra nézve kiszivattyúzó hatású, úgymint a „multidrogrezisztencia a multidrog transzport szerepet játszó glükoprotein, a „P-glükoprotein” túlzott mértékű kifejeződése következtében.
Az epothilone A és B a mikrotubulusokat stabilizáló citotoxikus hatóanyagok új osztályát képviseli [lásd Gerth, K. et al., J. Antibiot., 49, 560 (1966)]. A vegyületek szerkezete az (I) általános képletnek felel meg, ahol R jelentése lehet hidrogénatom (epothilone A) vagy metilcsoport (epothilone B).
Ezeknek a vegyületeknek az előnye a Taxol®-lal szemben a következő;
a) Jobb a vízoldhatóságuk, ennélfogva könnyebben dolgozhatók fel gyógyszerkészítményekké.
b) Beszámoltak arról, hogy sejttenyészet-kísérietekben a sejtosztódással szemben is hatékonyak, ami - a P-glükoprotein-elszívó (efflux pump) hatás következtében „multidrogrezisztenssé” téve a sejteket - a kezeléssel szembeni rezisztenciát mutat más kemoterápiás szerek, ezek között a Taxol® esetében [lásd Bolag, D. M., et al., „Epothilones, a new eláss of microtubule-stabilizing agents with a Taxollike mechanism of action”, Cancer Research, 55, 2325-33 (1995)].
c) Ki lehetett mutatni továbbá, hogy in vitro körülmények között nagyon hatékonyak még egy módosított β-tubulint tartalmazó, Taxol®-rezisztens petefészekkarcinóma-sejtvonallal szemben is [lásd Kowalski, R. J., et al., J. Bioi. Chem., 272 (4), 2534-2541 (1997)].
Az epothilone-ok a Taxolhoz hasonlóan, azzal analóg módon alkalmazhatók a gyógyászatban például tumorok kezelésére, itt utalunk az 5,641,803; 5,496,804 és 5,565,478 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásokra.
Annak érdekében azonban, hogy az epothiloneszármazékokat nagyobb léptékben használhassuk fel gyógyszerészeti célokra, kellő mennyiségben kell előállítani ezeket a vegyületeket.
Eddig ismert volt a szakirodalomból a természetes anyagok extrakciója myxobaktériumok révén, különösen az epothilone-ok kinyerése a Sorangium Cellulosum Soce 90 sejtvonalból (letétbe helyezve a 6773 számom a német mikroorganizmusgyűjteményben, lásd a WO 93/10121 közzétételi számú PCT szabadalmi bejelentést). Annak érdekében, hogy a természetes anyagokat, különösen az epothilone-okat kielégítő koncentrációban kapják meg a tápközegben a termelést követő extrahálás (kinyerés) céljára, a tápközeghez előzőleg mindig polisztirolalapú adszorpciós gyantát adtak, például Amberlite XAD-1180 (Rohm & Haas, Frankfurt, Németország) gyantát.
Ennek az eljárásnak azonban az a hátránya, hogy nagyléptékben végrehajtva számos problémát idéz elő. A szelepeket károsítják a gyanta gömböcskéi, a csővezetékek eltömődhetnek, és a berendezés nagyobb kopásnak lehet kitéve a mechanikai súrlódás miatt. A gyanta gömböcskéi porózusak és ezért nagy a belső felületük (körülbelül 825 m2/gramm gyanta). Problémát jelent a sterilizálás, mert a gyantában lévő levegőt nem sterilizálják az autoklávban. Ennél fogva az eljárást gyakorlatilag nem lehet nagy léptékben kivitelezni gyanta adagolásával.
Másrészt, ha nem adagolnak gyantagömböket, nem tudják elérni a tápközegben a kielégítő epothilonekoncentrációt.
Felismertük a fenti hátrányok kiküszöbölésének módját. Felismertük ugyanis azt az utat, amellyel meglepő módon gyanták adagolása nélkül lehet a tápközegben a mikroorganizmusokból, így az epothiloneszármazékokat, úgymint az epothilone A-t vagy B-t termelő myxobaktériumokból kinyerhető természetes anyagok kielégítő koncentrációját, különösen az epothilone A és B koncentrációját elérni, és ezáltal ezeket a vegyületeket, különösen az epothilone-származékokat ipari léptékben, a fenti hátrányok nélkül termelni.
A találmány tárgya eljárás epothilone-származékok, speciálisan epothilone A és/vagy B, különösen epothilone B dúsítására tápközegben abból a célból, hogy ezeket a vegyületeket biotechnológiai léptékben termeljük, amely eljárásban az e vegyületeket termelő mikroorganizmusokat, különösen myxobaktériumokat (mint természetes anyagokat termelő szervezeteket) alkalmazunk, mimellett a tápközeghez olyan komplexképző komponsenst adunk, amely oldódik a tápközegben.
A találmány további tárgya a megfelelő tápközeg (táptalaj), amely megfelelő komplexképző komponenst,
HU 225 851 Β1 továbbá olyan mikroorganizmusokat, speciálisan myxobaktériumokat, különösen a Sorangium nemzetségbe tartozó myxobaktériumokat tartalmaz, amelyek alkalmasak epothilone-ok, különösen epothilone A és/vagy B termelésére.
A találmány tárgya továbbá eljárás epothilone-ok, különösen epothilone A és/vagy B, különösen a két tiszta vegyület, főként epothilone B előállítására, amely eljárást az jellemez, hogy az epothilone-okat az e vegyületek biotechnológiai előállítására szolgáló tápközeg feldolgozásával nyerjük, amely tápközeg a természetes anyagokat termelő szervezetként mikroorganizmusokat, speciálisan myxobaktériumokat tartalmaz, amelyek ezeket a vegyületeket termelik, és amely tápközeghez olyan komplexképzö komponenst adunk, amely oldódik a tápközegben, majd a vegyületeket ezután tisztítjuk, és kívánt esetben elválasztjuk az epothilone-okat, például az epothilone A és B-t.
A találmány tárgya továbbá eljárás epothilone-ok, különösen epothilone A és B egymástól való elválasztására, azzal jellemezve, hogy fordított fázisú oszlopon kromatográfiás elválasztást végzünk, és eluensként rövid szénláncú alkil-cianidot használunk.
A leírásban alkalmazott szakkifejezések jelentését a következőkben adjuk meg.
A leírásban megadott hivatkozások a szükséges mértékben beépülnek a leírásba.
A „rövid szénláncú azt jelzi, hogy a megfelelően elnevezett csoport előnyösen legfeljebb 7 szénatomot, különösen legfeljebb 4 szénatomot tartalmaz, és egyenes láncú vagy elágazó láncú. így például a rövid szénláncú alkilcsoport lehet egyenes láncú vagy egyszer vagy többször elágazó láncú csoport, jelentése tehát például metilcsoport, etilcsoport, propilcsoport, úgymint izopropil- vagy n-propil-csoport, butilcsoport, úgymint izobutil-, szek-butil-, terc-butil- vagy n-butil-csoport, vagy lehet pentilcsoport is, úgymint amilcsoport vagy n-pentilcsoport.
Az epothilone-származékok biotechnológiai előállítására szolgáló tápközeg, amely az ezen vegyületeket termelő mikroorganizmusokat, különösen a myxobaktériumokat mint természetes anyagokat termelő mikroorganizmusokat tartalmazza, elsősorban olyan közeg, amely valamely megfelelő (természetesen előforduló vagy tenyésztéssel vagy különösen genetikai módosítással is nyerhető) mikroorganizmust tartalmaz; különösen olyan myxobaktériumtörzset, amely képes ezen vegyületeket termelni, különösen a Sorangium nemzetségbe tartozó valamely myxobaktériumot, előnyösen (különösen az epothilone-termelés céljára) Sorangium Cellulosum Soce 90 típusú mikroorganizmust (lásd a WO 93/10121 számú nemzetközi szabadalmi bejelentést) vagy az abból származtatott, vagy ennek a myxobaktériumnak a részeiből származtatott biológiai anyagot (például mutagenezissel vagy rekombináns géntechnológiával nyert biológiai anyagot), különösen egy megfelelően származtatott törzset, különösen a BCE 33/10 azonosítási jelű törzset vagy annak mutánsát. Ezenfelül a tápközeg vizet tartalmaz és a vízzel együtt előnyösen más szokásos és megfelelő táptalaj-összetevőket, úgymint biopolimereket, cukrot, aminosavakat, sókat, nukleinsavakat, vitaminokat, antibiotikumokat, szemiokemikáliákat, növekedésserkentő anyagokat, biológiai anyagok extraktumait, úgymint élesztő- vagy más sejtkivonatokat, szójalisztet, keményítőt, úgymint burgonyakeményítőt és/vagy nyomelemeket, például vasionokat komplex formában, vagy ezen alkotórészek vagy ezek egy részének alkalmas kombinációit és/vagy további analóg összetevőket. A megfelelő tápközegek ismertek a szakember számára vagy a szakember ismert eljárásokkal előállíthatja azokat (lásd például a jelen leírásban szereplő példákat vagy a WO 93/10121 közzétételi számú nemzetközi szabadalmi bejelentést).
Előnyös myxobaktérium egy olyan UV mutagenezissel és szelekcióval nyert törzs, amelyet a Sorangium cellulosum Soce 90 törzsből megnövekedett epothilone A és/vagy B termelésre szelektáltunk, amelyet a DSMben 6773 számon helyeztünk letétbe, különösen a BCE 33/10 mutáns, amelyet 1998. február 9-én DSM 11999 számon helyeztünk letétbe a Német Mikroorganizmus és Sejtkultúra Gyűjteményben (DSMZ, Braunschweig, Németország).
A BCE 33/10 törzs törzstenyészete és morfológiai leírása: A törzs növekedésre képes a következő összetevőket tartalmazó táptalajon: cellulóz mint egyedüli szénás energiaforrás, kálium-nitrát mint egyedüli nitrogénforrás, például szűrőpapíron ST 21 ásványi sókat tartalmazó agaron (0,1% KNO3; 0,1% MgSO4*7 H2O; 0,1% CaCI2*2 H2O; 1% K2HPO4; 0,01% MnSO4*7 H2O; 0,02% FeCI3; 0,002% élesztőkivonat; standard nyomelem oldat; 1% agar). Ezen a táptalajon sötét vörösesbama-feketésbarna termőtestek képződnek. Kis sporangiolumokból állnak (körülbelül 15-30 pm átmérőjűek) és különféle méretű sűrű csomókban és csoportokban (heaps and packs) fordulnak elő.
A vegetatív bacillusok alakja a Sorangiumra tipikus (viszonylag kicsiny, a fáziskontraszt mikroszkóp alatt sötét, hengeres bacillusok széles kerek végekkel, átlagosan 3-6 μίτι hosszúak és 1 μπι vastagok).
Az epothilone-ok közé tartozik elsősorban az epothilone A és/vagy B, de vannak más epothilon-ok is, így például az epothilone C és D, amelyeket a WO 97/19086 és a WO 98/22461 közzétételi számú PCT szabadalmi bejelentések neveznek meg, az epothilone E és F, amelyeket a WO 98/22461 közzétételi számú PCT bejelentés ismertet, és további epothilone-származékokat nyerhetünk ki a megfelelő mikroorganizmosokból.
Vízoldható komplexképző komponens elsősorban valamely vízoldható oligo- vagy polipeptidszármazék vagy különösen valamely gyűrűs vagy helixszerkezetű oligo- vagy poliszacharidszármazék, amely intramolekuláris üreget képez, amely elegendően hidrofób tulajdonságai miatt képes megkötni az epothilone-okat, különösen az epothilone A és/vagy epothilone B molekulákat. Különösen előnyös vízoldható komplexképző komponensek a ciklodextrinek vagy (különösen) a ciklodextrinszármazékok, vagy ezek elegyek
A ciklodextrinek az α-D-glükopiranóz gyűrűs szerkezetű (a-1,4)-helyzetben kapcsolódó oligoszacharid3
HU 225 851 Β1 jai, amelyeknek viszonylag hidrofób központi ürege és hidrofil külső felülete van.
A találmány szerinti eljárásban (a zárójelben lévő számok a glükózegységek számát jelentik molekulánként): az a-ciklodextrin (6), β-ciklodextrin (7), γ-ciklodextrin (8), δ-ciklodextrin (9), ε-ciklodextrin (10), ζ-ciklodextrin (11), η-ciklodextrin (12) és θ-ciklodextrin (13) alkalmazható. Különösen előnyösek a következők: a δ-ciklodextrin és főként az α-ciklodextrin, a β-ciklodextrin vagy a γ-ciklodextrin vagy ezek elegyei.
A ciklodextrinszármazékok elsősorban a fent említett ciklodextrinek származékai, különösen az a-ciklodextrin, β-ciklodextrin vagy γ-ciklodextrin származékai, elsősorban azok, amelyekben egy vagy több, akár az összes hidroxicsoport (glükózcsoportonként 3) éterezve vagy észterezve van.
Éterszármazékok elsősorban az alkil-éterek, különösen a rövid szénláncú alkil-éterek, úgymint a metil-éter vagy etil-éter, továbbá a propil- vagy butil-éter; az aril(hidroxi-alkil)-éterek, úgymint a fenil-[hidroxi-(rövid szénláncú alkil)]-éterek, különösen a fenil-(hidroxi-etil)-éter; a hidroxi-alkil-éterek, különösen a hidroxi-(rövid szénláncú alkil)-éterek, speciálisan a 2-hidroxi-etil-éter, a hidroxipropil-éterek, úgymint a 2-hidroxi-propil-éter vagy a hidroxi-butil-éterek, úgymint a 2-hidroxi-butil-éter; a karboxialkil-éterek, különösen a karboxi-(rövid szénláncú alkil)éterek, különösen a karboxi-metil- vagy a karboxi-etiléter; a származékká alakított karboxi-alkil-éterek, különösen a származékká alakított karboxi-(rövid szénláncú alkil)-éterek, amelyekben a származékká alakított karboxicsoport éterezett vagy amidezett karboxicsoport (elsősorban amino-karbonil-csoport, mono- vagy di(rövid szénláncú alkil)-amino-karbonil-csoport, morfolino-karbonil-csoport, piperidino-karbonil-csoport, pirrolidino-karbonil- vagy piperazino-karbonil-csoport vagy alkil-oxikarbonil-csoport), különösen (rövid szénláncú alkoxi-karbonil)-(rövid szénláncú alkil)-éterek, például a metil-oxikarbonil-propil-éter vagy etil-oxi-karbonil-propil-éter; a szulfo-alkil-éterek, különösen a szulfo-(rövid szénláncú alkil)-éterek, speciálisan a szulfo-butil-éter; továbbá az olyan ciklodextrinek, amelyekben egy vagy több hidroxicsoport egy (II) általános képletű csoporttal van éterezve, ahol a képletben alk jelentése alkilcsoport, különösen rövid szénláncú alkilcsoport, és n értéke 2-től 12-ig, különösen 2-től 5-ig terjedő egész szám, főként 2 vagy 3; olyan ciklodextrinek, amelyekben egy vagy több hidroxicsoport egy (III) általános képletű csoporttal van éterezve, ahol a képletben R’ jelentése hidrogénatom, hidroxicsoport, -O-(alk-O)z-H vagy —O—(alk(—R)—Ο—)p—H vagy -O-(alk(-R)-O-)q-alk-CO-Y általános képletű csoport; amelyekben alk jelentése minden esetben alkilcsoport, különösen rövid szénláncú alkilcsoport; m, n, p, q és z értéke 1-től 12-ig, előnyösen 1-től 5-ig terjedő egész szám, különösen 1, 2 vagy 3; és Y jelentése 0R1 vagy NR2R3 általános képletű csoport, ahol R1f R2 és R3 jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom vagy rövid szénláncú alkilcsoport, vagy R2 és R3 együttvéve a kapcsolódó nitrogénatommal együtt morfolinocsoportot, piperidinocsoportot, pirrolidinocsoportot vagy piperazinocsoportot jelent;
vagy az elágazó ciklodextrinek, amelyek más cukormolekulákkal alkotott éterkötéseket vagy acetálkötéseket tartalmaznak, különösen a glükozil- és diglükozil-(G2-6-ciklodextrin), a maltozil- vagy dimaltozil-ciklodextrin vagy az N-acetil-glükózaminil-ciklodextrin, a glükózaminil-ciklodextrin, az N-acetil-galaktózaminilvagy galaktózaminil-ciklodextrin.
Észterek elsősorban az alkanoil-észterek, különösen a rövid szénláncú alkanoil-észterek, úgymint a ciklodextrinek acetil-észterei.
Alkalmazhatunk olyan ciklodextrineket is, amelyekben az előbb felsoroltak közül két vagy több különböző éter- és észtercsoport van egyidejűleg jelen.
Használhatjuk továbbá az előbbiekben említett vegyületek közül két vagy több ciklodextrin és/vagy ciklodextrinszármazék elegyét is.
Előnyben részesítjük különösen az α-, β- vagy γ-ciklodextrineket vagy ezek rövid szénláncú alkilétereit, úgymint a metil-ő-ciklodextrint vagy különösen a 2,6-di(O-metil)-6-ciklodextrint vagy különösen ezek hidroxi-(rövid szénláncú alkil)-étereit, úgymint a 2-(hidroxi-propil)-a-, a 2-(0ϊ0ΓθΧΐ-ρΓορίΙ)-β- vagy a 2-(hidroxipropil)-y-ciklodextrint.
A ciklodextrineket vagy ciklodextrinszármazékokat előnyösen 0,02-10,0; előnyösen 0,05-5,0; különösen 0,1-4,0; például 0,1-2,0 tömegszázalék (w/v) koncentrációban adagoljuk a tápközeghez (tápoldathoz).
A ciklodextrinek vagy ciklodextrinszármazékok ismertek vagy ismert eljárásokkal állíthatók elő, az erre vonatkozó szakirodalom például: a 3,459,731; 4,383,992; 4,535,152; 4,659,696 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírások; az EP 0 094 157; EP 0 149 197; EP 0 197 571;
EP 0 300 526; EP 0 320 032; EP 0 499 322;
EP 0 503 710; EP 0 818 469 számú európai szabadalmi leírások; a WO 90/12035; WO 91/11200; WO 93/19061; WO 95/08993; WO 96/14090 közzétételi számú PCT szabadalmi bejelentések; a 2,189,245 számú nagy-britanniai; a DE 3,118,218, DE 3,317,064 számú német szövetségi köztársaságbeli szabadalmi leírások, valamint az azokban említett szakirodalom, amely szintén a ciklodextrinek vagy a ciklodextrinszármazékok szintézisére vonatkozik, vagy a további szakirodalom is: T. Loftsson és Μ. E. Brewster: Pharmaceutical Applications of Cyclodextrins: Drug Solubilization and Stabilization: Journal of Pharmaceutical Science 85 (10), 1017-1025 (1996); R. A. Rajewski és V. J. Stella: Pharmaceutical Applications of Cyclodextrins: In Vivő Drug Delivery: Journal of Pharmaceutical Science 85 (11), 1142-1169 (1996).
A következőkben, a feldolgozási és tisztítási műveletek ismertetésében epothilone-vegyületen olyan epothilone-t értünk, amely a megfelelő mikroorganizmusból nyerhető, előnyösen epothilone C, D, E, F-et vagy speciálisan A-t vagy különösen B-t. Eltérő utalás hiányában ha „epothilone-okat” említünk, az egy olyan általános fogalmat jelent, amely magában foglalja az egyes epothilone-okat vagy elegyeket is.
Az epothilone-ok feldolgozását hagyományos módszerekkel végezzük. Elsősorban a tenyészetet szűrés4
HU 225 851 Β1 sel vagy centrifugálással (csőcentrifuga vagy szeparátor) szétválasztjuk folyadékfázisra (centrifugátumra, felülúszóra vagy szűrletre) és szilárd fázisra (sejtekre). Az epothilone-ok túlnyomó részét, ami a felülúszóban vagy a szűrletben van, ezután közvetlenül összekeverjük egy szintetikus gyantával, például polisztriolmátrixalapú gyantával (a továbbiakban egyszerűsítve polisztirolgyantának nevezzük), ilyen például az Amberlite XAD-16 [Rohm & Haas GmbH, Frankfurt, Németország], vagy a Diaion HP-20 [Resindion S.R.L., Mitsubishi Chemical Co., Milano]. Előnyösen úgy járunk el, hogy a folyadékfázis-térfogat: gyantatérfogat arány körülbelül a 10:1-100:1 tartományban, előnyösen körülbelül 50:1 legyen. Egy érintkeztetési időtartam után, ami 0,25-50 óra, speciálisan 0,8-22 óra, a gyantát például szűréssel vagy centrifugálással elválasztjuk. Kívánt esetben az adszorpció után a gyantát erősen poláros oldószerrel, előnyösen vízzel mossuk. Az epothilone-származékok, deszorpcióját ezután megfelelő oldószerrel, speciálisan valamely alkohollal, különösen izopropanollal végezzük. Az oldószerfázist, különösen az izopropanolfázist ezután eltávolítjuk az oldószerből, előnyösen megelőzően, egyidejűleg vagy azt követően víz hozzáadásával, különösen keringtető bepárlóban, ezáltal szükség esetén töményítjük, majd a kapott vizes fázist olyan oldószerrel extraháljuk, amely alkalmas arra, hogy egy második fázist képezzen, úgymint észterrel, például (rövid szénláncú alkanol)-(rövid szénláncú alkanoát)-tal, tipikusan etil-acetáttal vagy izopropil-acetáttal. Az epothilone-termékeket ezáltal a szerves fázisba visszük át. Ezután a szerves fázist a szükséges mértékig töményítjük, előnyösen szárazra pároljuk, például rotációs bepárló alkalmazásával.
Ezt követően további feldolgozás következik az alábbiakban felsorolt lépések alkalmazásával. A következő lépések közül feltalálói tevékenységen alapuló és ennélfogva elengedhetetlen lépés az a tisztítás, amit fordított fázisú kromatográfiával végzünk eluensként nitrilt alkalmazva. A további lépéseket adott esetben, nem szükségszerűen végezzük. A feldolgozás tehát a következőkből áll:
- molekulaszűrést (gélkromatográfiát) végzünk, például egy olyan anyagból készült oszlopon, mint amilyen a Sephadex LH-20 (Pharmacia, Uppsala, Svédország), eluensként alkoholt, úgymint metanolt alkalmazva;
- az epothilone-termékeket elválasztjuk fordított fázisú kromatográfiával azt követően, hogy azokat alkalmas oldószerben felvettük, és az elúciót nitril/víz eleggyel végezzük (kötelező lépés), ezt a lépést előnyösen az jellemzi, hogy a kromatográfiás elválasztást olyan anyagból készült oszlopon, különösen RP-18 anyag oszlopon végezzük, amely RP-18 anyag szubsztituensként szénhidrogénláncokat, úgymint 18 szénatomos szénhidrogénláncokat tartalmaz, és olyan eluenst használunk, amely valamely nitrilt, különösen rövid szénláncú alkil-nitrilt, elsősorban acetonitrilt tartalmaz, különösen nitril/víz elegyet használunk, speciálisan acetonitril/víz elegyet, előnyösen olyan elegyet, amelyben a nitrilnek a vízre vonatkoztatott aránya körülbelül 1:99-99:1 tartományban van, különösen 1:9 és 9:1 között, például 2:8 és 7:3 között, például 3:7 vagy 4:6;
- a maradékot egyszer vagy többször extraháljuk (különösen bepárlás után) kétfázisú rendszerben, amely vizet és egy vízzel nem elegyedő oldószert, előnyösen észtert, különösen (rövid szénláncú alkil)-(rövid szénláncú alkanoát)-ot, úgymint etil-acetátot vagy izopropil-acetátot tartalmaz;
- adszorpciós kromatográfiát végzünk, különösen úgy, hogy szilikagél oszlopra visszük fel az anyagot, és megfelelő oldószerrel vagy oldószereleggyel eluáljuk, speciálisan észter/szénhidrogén eleggyel, például rövid szénláncú alkilalkanoát/4-10 szénatomos alkán elegyével, speciálisan etil- vagy izopropil-acetát/n-hexán elegyével, amelyben az észter és a szénhidrogén közötti arány előnyösen 99:1-1:99 tartományban van, előnyösen 10:1-1:10, így például 4:1;
- a maradékot, amelyet a töményítés után kaphattunk, feloldjuk alkalmas oldószerben, úgymint alkoholban, például metanolban;
- az oldatot aktív szénnel elegyítjük, majd az aktív szenet eltávolítjuk;
- átkristályosítást végzünk például megfelelő oldószerekből vagy oldószerelegyekből, például észterekből, észter/szénhidrogén elegyekből vagy alkoholokból, speciálisan etil-acetát vagy izopropil-acetát:toluol 1:10-10:1 arányú, előnyösen 2:3 arányú elegyéből (epothilone A) vagy metanolból vagy etil-acetátból (epothilone B);
mimellett mindegyik alkalmazott lépés között a kapott oldatokat vagy szuszpenziókat szükség szerint töményítjük, és/vagy a folyadék és a szilárd fázisú komponenseket elválasztjuk egymástól, különösen az oldatok/szuszpenziók szűrésével vagy centrifugálásával. Az alábbiakban közölt pontosabb definíciókat alkalmazzuk előnyösen e felsorolt lépésekben.
A feldolgozást és a tisztítást előnyösen a következő módon végezzük. A fermentáció befejezése után a tenyészetet folyadékfázisra (felülúszó, centrifugátum) és szilárd fázisra (sejtek) választjuk szét centrifugálással (csőcentrifugával vagy szeparátorral). Az epothilonetermékek fő tömege a felülúszóban található. A felülúszót elválasztás után közvetlenül polisztirolgyantával keverjük össze, úgymint Amberlite XAD-16 [Rohm & Haas Germany GmbH, Frankfurt] vagy Diaion HP-20 [Residion S.R.L., Mitsubishi Chemical Co., Milano] gyantával; a felülúszó:gyanta térfogatarányt előnyösen körülbelül 10:1-100:1, előnyösen 50:1 értékek között választjuk meg; majd az elegyet rázógép alkalmazásával keverjük. Ebben a lépésben az epothilonetermékeket a ciklodextrinből a gyantára visszük át. Körülbelül 1 órás érintkeztetési idő után a gyantát centrifugálással vagy szűréssel elválasztjuk. Az epothilonetermékeket úgy is adszorbeáltathatjuk a gyantára, hogy az adszorpciót kromatográfiás oszlopban végezzük, ekkor a gyantát az oszlopba töltjük, és a felülúszót
HU 225 851 Β1 átengedjük a gyantán. Az adszorpció után a gyantát vízzel mossuk. Az epothilone-termékeknek a gyantáról történő deszorpcióját izopropanollal végezzük. Az izopropanolos fázist ezután megszabadítjuk az izopropanoltól, előnyösen víz hozzáadásával, különösen cirkulációs bepártóban, és a kapott vizes fázist etil-acetáttal extraháljuk. Az epothilone-termékeket tehát így átvisszük a vizes fázisból az etil-acetát fázisba. Ezután az etil-acetátos extraktumot rotációs bepárló alkalmazásával szárazra pároljuk. Az epothilone-termékek első dúsítását ezután molekulaszűréssel végezzük (például Sephadex LH-20 [Pharmacia, Uppsala, Svédország] molekulaszűrővel és metanol eluenssel). A molekulaszűrés csúcsfrakciói tartalmazzák az epothilone A és B-t, és összes epothilone-tartalmuk >10%. Ezeket a csúcsfrakciókat, amelyek az epothilone A és B-t elegyben tartalmazzák, ezután elválasztjuk az egyes komponensekre „fordított fázison” végzett kromatográfiával, például RP-18 fázison (amely fázis 18 szénatomos alkilcsoportokkal módosítva van) alkalmas eluenssel, például nitrilt, úgymint acetonitrilt tartalmazó eluenssel (ez jobb elválasztást eredményez mint például az alkoholok, úgymint a metanol). Az epothilone A az epothilone B előtt eluálódik. Az epothilone B csúcsfrakciók még tartalmazhatnak kis mennyiségű epothilone A-t, amit RP-18 fázison végezett további elválasztással távolíthatunk el. Végül az epothilone A frakciót közvetlenül kristályosítjuk etil-acetát:toluol=2:3 elegyből, és az epothilone B frakciót metanolból vagy etil-acetátból.
A találmány tárgya előnyösen eljárás epothilone-ok, speciálisan epothilone A és/vagy B, különösen epothilone B táptalajban (tápközegben) való dúsítására ezen vegyület(ek) biotechnológiai előállítása céljából. A táptalaj olyan mikroorganizmust tartalmaz, amely alkalmas erre az előállításra, különösen valamely Sorangium törzset, különösen Sorangium Cellulosum Soce 90 típusú törzset vagy annak mutánsát, különösen a BCE 33/10 azonosítási számú törzset, a táptalaj tartalmaz továbbá vizet és a táptalajok szokásos összetevőit, mimellett ciklodextrint vagy ciklodextrinszármazékot vagy ezek közül kettőnek vagy többnek az elegyét adjuk a táptalajhoz, különösen egy vagy több, előnyösen egy vagy két vagy több ciklodextrint, amelyeket a következők közül választunk ki: a-ciklodextrin (6), β-ciklodextrin (7), γ-ciklodextrin (8), δ-ciklodextrin (9), ε-ciklodextrin (10), ζ-ciklodextrin (11), η-ciklodextrin (12) és θ-ciklodextrin (13), különösen a-ciklodextrin, β-ciklodextrin vagy γ-ciklodextrin; vagy elsősorban valamely ciklodextrinszármazék vagy ciklodextrinszármazékok elegye, ahol a ciklodextrinek származékai lehetnek olyan ciklodextrinek, amelyekben egy vagy több, akár az összes hidroxicsoport éterezve van úgy, hogy ezek az éterezett származékok lehetnek alkil-éterek, különösen rövid szénláncú alkil-éterek, úgymint metil-éter vagy etil-éter, továbbá propil- vagy butiléter; aril-(hidroxi-alkil)-éterek, úgymint fenil-[hidroxi-(rövid szénláncú alkil)]-éterek, különösen fenil-(hidroxietil)-éter; hidroxi-alkil-éterek, különösen hidroxi-(rövid szénláncú alkil)-éterek, speciálisan 2-hidroxi-etil-éter, hidroxi-propil-éterek, úgymint 2-hidroxi-propil-éter vagy hidroxi-butiléterek, úgymint 2-hidroxi-butil-éter; karboxialkil-éterek, különösen karboxi-(rövid szénláncú alkil)éterek, különösen karboxi-metil- vagy karboxi-etil-éter; származékká alakított karboxi-alkil-éterek, különösen származékká alakított karboxi-(rövid szénláncú alkil)éterek, amelyekben a származékká alakított karboxicsoport amino-karbonil-csoport, mono- vagy di(rövid szénláncú alkil)-amino-karbonil-csoport, morfolino-karbonil-csoport, piperidino-karbonil-csoport, pirrolidinokarbonil- vagy piperazino-karbonil-csoport vagy alkiloxi-karbonil-csoport, különösen rövid szénláncú alkiloxi-karbonil-csoport, úgymint előnyösen (rövid szénláncú alkoxi-karbonil)-(rövid szénláncú alkil)-éterek, például metil-oxi-karbonil-propil-éter vagy etil-oxi-karbonil-propil-éter; lehetnek szulfo-alkil-éterek, különösen szulfo-(rövid szénláncú alkil)-éterek, speciálisan szulfo-butil-éter; lehetnek továbbá olyan ciklodextrinek, amelyekben egy vagy több hidroxicsoport egy (II) általános képletű csoporttal van éterezve, ahol a képletben alk jelentése alkilcsoport, különösen rövid szénláncú alkilcsoport, és n értéke 2-től 12-ig, különösen 2-től 5-ig terjedő egész szám, főként 2 vagy 3; lehetnek olyan ciklodextrinek, amelyekben egy vagy több hidroxicsoport egy (III) általános képletű csoporttal van éterezve, ahol a képletben R' jelentése hidrogénatom, hidroxicsoport, -O-(alk-O)z-H vagy -O-(alk(-R)-O-)p-H vagy -O-(alk(-R)-O-)q-alk-CO-Y általános képletű csoport; amelyekben alk jelentése minden esetben alkilcsoport, különösen rövid szénláncú alkilcsoport; m, n, p, q és z értéke 1-től 12-ig, előnyösen 1-től 5-ig terjedő egész szám, különösen 1, 2 vagy 3; és Y jelentése OR3 vagy NR2R3 általános képletű csoport, ahol Rv R2 és R3 jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom vagy rövid szénláncú alkilcsoport, vagy R2 és R3 együttvéve a kapcsolódó nitrogénatommal együtt morfolinocsoportot, piperidinocsoportot, pirrolidinocsoportot vagy piperazinocsoportot jelent; vagy lehetnek a származékok elágazó ciklodextrinek, amelyek más cukormolekulákkal alkotott éterkötéseket vagy acetálkötéseket tartalmaznak, különösen glükozil- és diglükozil(G2-6-ciklodextrin), maltozil- vagy dimaltozil-ciklodextrin vagy N-acetil-glükózaminil-ciklodextrin, glükózaminil-ciklodextrin, N-acetil-galaktózaminil- vagy galaktózaminil-ciklodextrin; vagy lehetnek rövid szénláncú alkanoilszármazékok, úgymint valamely ciklodextrin acetil-észtere.
Különösen előnyös az olyan kivitelű eljárás, amelyben a ciklodextrint és/vagy a ciklodextrinszármazékot 0,02-10, előnyösen 0,005-10, előnyösebben 0,05-5, legelőnyösebben 0,1-4, például 0,1-2 tömegszázalék (w/v) koncentrációtartományban adagoljuk a tápközeghez.
Speciálisan előnyös az előbbi két bekezdésben ismertetett eljárások bármelyike, amely esetén a ciklodextrinszármazékot a következők közül választjuk meg: valamely ciklodextrin, különösen β-ciklodextrin és valamely hidroxi-(rövid szénláncú alkil)-ciklodextrin, különösen 2-(hidroxi-propil)-a-, -β- vagy -γ-ciklodextrin; vagy ezek közül egynek vagy többnek az elegye; ahol
HU 225 851 Β1 is a 2-(hidroxi-propil)-p-ciklodextrin önmagában is különösen előnyös.
Szintén a találmány tárgya az olyan tápközeg (táptalaj), amely ciklodextrint, ciklodextrinszármazékot vagy a ciklodextrinek és ciklodextrinszármazékok köréből megválasztott két vagy több komplexképző komponenst tartalmaz, különösen a fentiekben, az utolsó bekezdéstől számított harmadik bekezdésben definiált ciklodextrin vagy ciklodextrinszármazékok közül, különösen a fenti utolsó előtti bekezdésben foglaltak szerint vagy e vegyületek közül egynek vagy többnek az elegyét, tartalmaz továbbá olyan mikroorganizmust, amely alkalmas epothilone-ok, különösen epothilone A és/vagy B termelésére, amely mikroorganizmus előnyösen a Sorangium nemzetséghez tartozik, speciálisan egy Sorangium Cellulosum törzs, például a Soce 90 törzs, vagy az ebből származó mutáns, különösen a BCE 33/10 törzs.
A találmány további tárgya eljárás epothilone A és/vagy B előállítására, különösen a két tiszta vegyület, főleg epothilone B előállítására, azzal jellemezve, hogy az epothilone-termékeket például centrifugálással szilárd fázisra és folyadékfázisra (felülúszó) szétválasztjuk olyan módon, hogy feldolgozzuk az ezen vegyületek biotechnológiai termelésére szolgáló tápközeget - a fentiek szerint -, amely tápközeghez olyan komplexképző komponenst adagolunk, amely oldódik a tápközegben, különösen ciklodextrint, ciklodextrinszármazékot vagy két vagy több ciklodextrin és/vagy ciklodextrinszármazék elegyét; a folyadékfázist (centrifugátumot) gyantával keverjük, különösen polisztirolgyantával, vagy átengedjük egy ilyen gyantával töltött oszlopon; a gyantát szükség szerint vízzel mossuk; az epothilone-(oka)t deszorbeáljuk a gyantáról poláros oldószer, különösen alkohol, elsősorban rövid szénláncú alkohol, úgymint izopropanol alkalmazásával; szükség szerint dúsítjuk úgy, hogy vizet adagolunk előzetesen, egyidejűleg vagy a műveletet követően; vízzel nem elegyedő szerves oldószert, például észtert, úgymint etilacetátot adunk az elegyhez, és az epothilone-(oka)t átvisszük a szerves fázisba például rázással (agitating) vagy keveréssel (stirring); szükség szerint a szerves fázist töményítjük; az epothilone-származékokat a szerves oldatból kis molekulatömegű anyagok számára alkalmas molekulaszitával kinyerjük; majd az epothilone-származékokat, különösen az epothilone A-t és/vagy B-t tartalmazó frakciókat fordított fázisú oszlopon elválasztjuk, előnyösen úgy, hogy azokat nitrilt, úgymint acetonitrilt tartalmazó eluenssel (vagy ehelyett alkoholt, úgymint metanolt tartalmazó eluenssel) eluáljuk; miáltal az epothilone A-t és az epothilone B-t külön extraháljuk, és kívánt esetben átkristályosítással tovább dúsítjuk.
A találmány előnyös tárgya eljárás epothilone-ok elválasztására, különösen epothilone A és B egymástól való elválasztására, azzal jellemezve, hogy kromatográfiás eljárást végzünk fordított fázisú oszlopon rövid szénláncú alkil-cianidot tartalmazó eluenssel, ahol a kromatográfiás eljárást olyan oszlopanyagon végezzük, speciálisan olyan RP-18 anyagon, amelyen szubsztituensként szénhidrogénláncok, úgymint 18 szénatomos szénhidrogénláncok vannak, és eluensként nitrilt, speciálisan rövid szénláncú alkilnitrilt, különösen acetonitrilt tartalmazó eluenst alkalmazunk, speciálisan nitril/víz elegyet, különösen acetonitril/víz elegyét, előnyösen olyan elegyet, amelyben a nitrilnek a vízre vonatkoztatott aránya körülbelül 1:99-99:1, elsősorban 1:9-9:1 tartományban, például 2:8 és 7:3 között van, például 3:7 vagy 4:6. Ezt az elválasztást követően szűrést végezhetünk molekulaszitával, vagy előnyösen közvetlenül hajtjuk végre az elválasztást felhasználva a maradékot az epothilone-oknak komplexképző komponenst tartalmazó táptalajból gyantára történő adszorpciója után. A rövid szénláncú alkil-cianidot tartalmazó eluenssel végzett elválasztás egy előnye az alkoholokat, úgy metanolt alkalmazó elválasztással szemben az, hogy az előbbi úton jobban választható el az epothilone A és B.
A találmány előnyösen epothilone-származékok előállítási eljárásra vonatkozik, amely eljárás
a) magában foglal egy eljárást epothilone-ok, speciálisan epothilone A és/vagy B, különösen epothilone B dúsítására az ezen vegyület(ek) előállítására szolgáló táptalajban, amely olyan mikroorganizmust tartalmaz, amely alkalmas erre az előállításra, speciálisan Sorangium Cellulosum Soce 90 típusú törzset vagy annak mutánsát, különösen a BCE 33/10 referencia számú törzset, tartalmaz a táptalaj továbbá vizet és a táptalajok más, szokás szerint alkalmas összetevőit, mimellett ciklodextrint vagy ciklodextrinszármazékot vagy e vegyületek közül kettőnek vagy többnek az elegyét adjuk a táptalajhoz, speciálisan egyet vagy többet, előnyösen egy vagy több ciklodextrint, amelyeket a következők közül választunk meg: a-ciklodextrin (6), β-ciklodextrin (7), γ-ciklodextrin (8), δ-ciklodextrin (9), ε-ciklodextrin (10), ζ-ciklodextrin (11), η-ciklodextrin (12) és θ-ciklodextrin (13), különösen a-ciklodextrin, β-ciklodextrin vagy γ-ciklodextrin; vagy elsősorban valamely ciklodextrinszármazék vagy ciklodextrinszármazékok elegye, ahol a ciklodextrinek származékai lehetnek olyan ciklodextrinek, amelyekben egy vagy több, akár az összes hidroxicsoport éterezve van úgy, hogy ezek az éterezett származékok lehetnek alkil-éterek, különösen rövid szénláncú alkil-éterek, úgymint metil-éter vagy etil-éter, továbbá propil- vagy butil-éter; aril(hidroxi-alkil)-éterek, úgymint fenil-[hidroxi-(rövid szénláncú alkil)]-éterek, különösen fenil-(hidroxi-etil)-éter; hidroxi-alkil-éterek, különösen hidroxi-(rövid szénláncú alkil)-éterek, speciálisan 2-hidroxi-etil-éter, hidroxi-propil-éterek, úgymint 2-hidroxi-propil-éter vagy hidroxibutil-éterek, úgymint 2-hidroxi-butil-éter; karboxi-alkiléterek, különösen karboxi-(rövid szénláncú alkil)-éterek, különösen karboxi-metil- vagy karboxi-etil-éter; származékká alakított karboxi-alkil-éterek, különösen származékká alakított karboxi-(rövid szénláncú alkil)éterek, amelyekben a származékká alakított karboxicsoport amino-karbonil-csoport, mono- vagy di(rövid szénláncú alkil)-amino-karbonil-csoport, morfolino-karbonil-csoport, piperidino-karbonil-csoport, pirrolidinokarbonil- vagy piperazino-karbonil-csoport vagy alkil7
HU 225 851 Β1 oxi-karbonil-csoport, különösen rövid szénláncú alkiloxi-karbonil-csoport, úgymint előnyösen (rövid szénláncú alkoxi-karbonil)-(rövid szénláncú alkil)-éterek, például metil-oxi-karbonil-propil-éter vagy etil-oxi-karbonil-propil-éter; szulfoalkil-éterek, különösen szulfo(rövid szénláncú alkil)-éterek, speciálisan szulfo-butiléter; lehetnek továbbá olyan ciklodextrinek, amelyekben egy vagy több hidroxicsoport egy (II) általános képletű csoporttal van éterezve, ahol a képletben alk jelentése alkilcsoport, különösen rövid szénláncú alkilcsoport, és n értéke 2-től 12-ig, különösen 2-től 5-ig terjedő egész szám, főként 2 vagy 3; lehetnek olyan ciklodextrinek, amelyekben egy vagy több hidroxicsoport egy (III) általános képletű csoporttal van éterezve, ahol a képletben R' jelentése hidrogénatom, hidroxicsoport, -O-(alk-O)z-H vagy -O-(alk(-R)-O-)p-H vagy -O-(alk(-R)-O-)q-alk-CO-Y általános képletű csoport; amelyekben alk jelentése minden esetben alkilcsoport, különösen rövid szénláncú alkilcsoport; m, n, p, q és z értéke 1-től 12-ig, előnyösen 1-től 5-ig terjedő egész szám, különösen 1, 2 vagy 3; és Y jelentése OR.( vagy NR2R3 általános képletű csoport, ahol R1t R2 és R3 jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom vagy rövid szénláncú alkilcsoport, vagy R2 és R3 együttvéve a kapcsolódó nitrogénatommal együtt morfolinocsoportot, piperidinocsoportot, pirrolidinocsoportot vagy piperazinocsoportot jelent;
vagy lehetnek a származékok elágazó ciklodextrinek, amelyek más cukormolekulákkal alkotott éterkötéseket vagy acetálkötéseket tartalmaznak, különösen glükozilés diglükozil-(G2-p-ciklodextrin), maltozil- vagy dimaltozil-ciklodextrin vagy N-acetil-glükózaminil-ciklodextrin, glükózaminil-ciklodextrín, N-acetil-galaktózaminil- vagy galaktózaminil-ciklodextrin; vagy lehetnek rövid szénláncú alkanoilszármazékok, úgymint valamely ciklodextrin acetil-észtere; és
b) magában foglal egy lépést az epothilone-származékok, különösen az epothilone A és B egymástól való elválasztására, amely lépést az jellemez, hogy kromatográfiás eljárást végzünk fordított fázisú oszlopon rövid szénláncú alkil-cianidot tartalmazó eluenssel, a kromatográfiás eljárást olyan oszlopanyagon végezzük, különösen olyan RP-18 anyagon, amely szénhidrogénláncokkal, úgymint 18 szénatomos szénhidrogénláncokkal szubsztituálva van, és olyan eluenst alkalmazunk, amely rövid szénláncú alkil-nitrilt, speciálisan acetonitrilt tartalmaz, különösen rövid szénláncú alkil-nitril/víz elegyet, előnyösen acetonitril/víz elegyet, előnyösen olyan elegyet, amelyben a rövid szénláncú alkil-nitrilnek a vízre vonatkoztatott aránya körülbelül 1:99-99:1, elsősorban 1:9-9:1 tartományban, például 2:8 és 7:3 között van, például 3:7 vagy 4:6, mimellett kívánt esetben további feldolgozási és tisztítási lépéseket végezhetünk.
A találmány különösen a Sorangium cellulosum Soce 90 törzsből származó mutánsokra is vonatkozik, különösen olyan Sorangium cellulosum törzsre, amelyet mutagenezissel nyerhetünk, előnyösen úgy, hogy UV-besugárzás által (különösen a 200-400 nm, speciálisan a 250-300 nm tartományú UV-besugárzás által) indukált egy vagy több mutagenezislépést végzünk, és mindegyik lépés után megkeressük azokat a mutánsokat, amelyek megnövekedett mértékben termelik az epothilone-származékokat (különösen a táptalaj nagyobb epothilone-koncentrációját eredményezik), így a találmány tárgya egy olyan törzs, amely egyébként azonos körülmények között több epothilone-származékot, különösen több epothilone A és/vagy B-t speciálisan több epothilone B-t termel mint a Sorangium cellulosum Soce 90, speciálisan a BCE 33/10 jelű Sorangium cellulosum törzs.
A találmány különösen azokra az egyes eljárási lépésekre vonatkozik, amelyek a példákban szerepelnek, vagy ezek bármely kombinációjára, a példákban megadott táptalajokra (tápközegekre), kristályformákra és törzsekre.
A találmány szerinti eljárással előállított epothiloneokat gyógyszerkészítmények hatóanyagaként alkalmazhatjuk.
Gyógyszerkészítmények előállítása céljából például olyan módon használhatjuk a hatóanyagot, hogy a gyógyszerkészítmények a hatóanyag hatékony mennyiségét tartalmazzák egy vagy több szerves vagy szervetlen, folyékony vagy szilárd, gyógyszerészetileg elfogadható hordozóanyaggal együtt.
A gyógyszerkészítmények, amelyek alkalmasak meleg vérű állatoknak, különösen embereknek való beadásra proliferaktív betegség, úgymint tumor kezelésére, amely gyógyszerkészítmények a hatóanyagot az adott betegség kezelésére alkalmas mennyiségben, gyógyszerészetileg elfogadható segédanyagokkal együtt tartalmazzák.
A gyógyszerkészítmények lehetnek meleg vérű állatoknak, különösen embereknek szánt enterális, különösen nazális, rektális vagy orális adagolásra, vagy előnyösen parenterális, különösen intramuszkuláris vagy intravénás adagolásra alkalmas gyógyszerkészítmények, és e készítmények a hatóanyag hatékony dózisát önmagában vagy jelentős mennyiségű gyógyszerészetileg elfogadható hordozóanyaggal együtt tartalmazhatják. A hatóanyag dózisa függ a meleg vérű állat típusától, a testtömegtől, a kortól és az egyéni állapottól, az egyéni farmakokinetikai szituációktól, a kezelendő betegségtől és az adagolás típusától.
A gyógyszerkészítmények körülbelül 0,0001 %-95%, előnyösen 0,001 %-tól 10% vagy 20%, körülbelül 90% tartományban tartalmazzák a hatóanyagot. A találmány szerinti gyógyszerkészítmények például egységdózisformákban lehetnek, úgymint ampullák, fiolák, kúpok, drazsék, tabletták vagy kapszulák formájában. A gyógyszerkészítményeket ismert eljárásokkal állíthatjuk elő, például szokásos oldási, liofilizálási, keverési, granulálási vagy gyártási eljárásokkal.
Előnyös módon a hatóanyag oldatait, de szuszpenzióit is, különösen vizes oldatait vagy szuszpenzióit alkalmazzuk, és az is lehetséges, hogy például liofilizált kompozíciók esetén, amelyek a hatóanyagot önmagában vagy gyógyszerészetileg elfogadható segédanyaggal együtt, például mannitollal együtt tartalmazzák, az oldatokat vagy szuszpenziókat a beadás előtt készít8
HU 225 851 Β1 sük. A gyógyszerkészítményeket sterilizálhatjuk, és/vagy tartalmazhatnak segédanyagokat is, például tartósítószereket, stabilizátorokat, nedvesség-visszatartó szereket és/vagy emulzióképző szereket, oldódást elősegítő anyagokat, az ozmózisnyomás szabályozása céljából sókat és/vagy pufferokat, és a készítményeket ismert eljárásokkal, például szokásos oldási vagy liofilizálási eljárásokkal állíthatjuk elő. Az említett oldatok vagy szuszpenziók tartalmazhatnak viszkozitást növelő anyagokat, úgymint karboxi-metil-cellulóznátriumot, karboxi-metil-cellulózt, dextránt, poli(vinilpirrolidon)-t vagy zselatint.
Az olajos szuszpenziók olajkomponensként olyan növényi olajokat, szintetikus olajokat vagy félszintetikus olajokat tartalmaznak, amelyek szokásosan használhatók injekciós célokra. Fontosabb példák ezekre különösen a hosszú szénláncú, 8-22 szénatomos, különösen 12-22 szénatomos zsírsavak észterei, például a laurinsav, tridecilsav, mirisztinsav, pentadecilsav, palmitinsav, margarinsav, sztearinsav, arachidonsav, behénsav vagy a megfelelő telítetlen savak, például az olajsav, elaidinsav, erukasav, brasszidinsav vagy linolsav észterei, ezekhez kívánt esetben antioxidánsokat, például E-vitamint, β-karotint vagy 3,5-di(terc-butil)-4hidroxi-toluolt adagolunk. Ezen zsírsav-észterek alkoholkomponensei előnyösen legfeljebb 6 szénatomos alkoholok, és lehetnek mono- vagy polihidroxi-alkoholok, például mono-, di- vagy trihidroxi-alkoholok, melyekre példa a metanol, etanol, propanol, butanol vagy pentanol, vagy ezek izomerjei, de különösen a glikol és a glicerin. A zsírsav-észterekre a következő példák említhetők meg különösen: propil-mirisztát, izopropil-palmitát, „Labrafil M 2375” [poli(oxi-etilén)-glicerin-trioleát, Gattefossé, Párizs], „Miglyol 812” (8-12 szénatomos telített zsírsavak trigliceridje, Hüls AG, Németország), de különösen a növényi olajok, úgymint a gyapotmagolaj, mandulaolaj, olívaolaj, castorolaj, szezámolaj, szójaolaj és különösen a mogyoróolaj.
Az injekciós vagy infúziós készítményeket szokásos eljárásokkal, steril körülmények között állítjuk elő; ugyanez érvényes a kompozícióknak ampullákba vagy fiolákba és lezárt tartályokba való töltésére.
Előnyben részesítjük az olyan infúziós oldatokat, amelyek hatóanyagot és gyógyszerészetileg elfogadható szerves oldószert tartalmaznak.
Az egyes gyógyszerformák esetén alkalmazható gyógyszerészetileg elfogadható szerves oldószert a szakember előtt ismert valamennyi ilyen oldószer közül választhatunk. Ez az oldószer előnyösen lehet egy alkohol, például abszolút etanol, etanol/víz elegy, előnyösen 70%-os etanol, polietilénglikol 300, polietilénglikol 400, polipropilénglikol és N-metil-pirrolidon, különösen polipropilénglikol vagy 70%-os etanol.
A gyógyszerformában a hatóanyag 0,001-100 mg/ml, előnyösen körülbelül 0,05-5 mg/ml vagy 5-50 mg/ml koncentrációban van jelen.
Az ilyen típusú formulák könnyen tárolhatók fiolák vagy ampullák formájában. A fiolák vagy ampullák tipikusan üvegből, például boroszilikátból készülnek. A fiolák vagy ampullák bármilyen, a technika állása szerinti térfogat tárolására megfelelők lehetnek. Előnyös módon elegendő méretűek ahhoz, hogy 0,5-5,0 ml gyógyszerformát fogadjanak be.
A gyógyszerformulákat beadás előtt intravénás adagolásra alkalmas vizes közeggel hígítani kell, mielőtt a hatóanyagot beadhatjuk a betegnek.
Előnyös, ha az infúziós oldatok azonos vagy alapvetően azonos ozmózisos nyomással rendelkeznek, mint a testfolyadékok. Ennek következtében a vizes közeg tartalmaz egy izotóniás szert, amelynek az a hatása, hogy azonos vagy alapvetően azonos értéken tartsa az infúziós oldat ozmózisos nyomását, mint amilyen a testfolyadékok ozmózisos nyomása.
Az izotóniás szer lehet bármely, a szakember számára ismert ilyen célú szer, lehet például mannitol, dextróz, glükóz vagy nátrium-klorid. Az izotóniás szereket olyan mennyiségekben alkalmazzuk, amelyek az infúziós oldatok ozmózisos nyomását a testfolyadékokéval azonos vagy alapvetően azonos értékre állítják be. A szükséges pontos mennyiségek rutinszerű kísérletekkel határozhatók meg, és az infúziós oldat összetételétől és az izotóniás szer típusától függenek.
A vizes közegben lévő izotonizáló szer koncentrációja az egyes alkalmazott szer típusától függ. Ha glükózt használunk, akkor azt előnyösen 1-5% (tömeg/térfogat; w/v), előnyösen 5% tömeg/térfogat koncentrációban alkalmazzuk. Ha az izotonizáló szer nátrium-klorid, akkor azt előnyösen legfeljebb 1%, előnyösen körülbelül 0,9% (tömeg/térfogat, w/v) mennyiségben alkalmazzuk.
Az infúziós oldatot hígíthatjuk a vizes közeggel. A vizes közeg mennyiségét aszerint választjuk meg, hogy az infúziós oldatban milyen hatóanyag-koncentrációt kívánunk beállítani. Az infúziós oldatot előnyösen úgy állítjuk elő, hogy egy fiola vagy egy ampulla tartalmát, amely az infúziós koncentrátumot (lásd fent) tartalmazza, a vizes közeggel elegyítjük úgy, hogy a vizes közeggel 200 ml és 1000 ml közötti térfogatot éljünk el. Az infúziós oldatok tartalmazhatnak más adalékokat is, mint amelyeket szokásosan használunk intravénás adagolás esetén. Az ilyen adalékok közé tartoznak az antioxidánsok.
Antioxidánsokat abból a célból használhatunk, hogy megvédjük a hatóanyagot az oxidáció révén bekövetkező bomlástól. Az antioxidánsokat azon vegyületek közül választhatjuk meg, amelyek a szakember számára ismertek, és amelyek intravénás gyógyszerformák céljára alkalmasak. Az antioxidáns mennyiségét rutinkísérletekkel határozhatjuk meg. Az antioxidánsok adagolásának alternatívája vagy annak kiegészítése az antioxidáns hatás olyan módon való elérése, hogy megakadályozzuk az oxigén (levegő) érintkezését az infúziós oldattal. Ezt egyszerűen érhetjük el úgy, hogy az infúziós oldatot tartalmazó edényt inért gázzal, például nitrogénnel vagy argonnal öblítjük.
Infúziós oldatokat úgy állíthatunk elő, hogy egy ampullát vagy egy fiolát a vizes közeggel elegyítünk, például 5%-os glükózoldattal (WFI-ben), megfelelő tartályban, például infúziós zacskóban vagy infúziós üvegben.
HU 225 851 Β1
Az infúziós oldatok számára azok közül a szokásos tartályok közül választhatunk tárolóedényt, amelyek nem reagálnak az infúziós oldattal. Ezek között alkalmasak az üvegtartályok, különösen a boroszilikáttartályok, de a műanyag tartályokat, úgymint a műanyag infúziós zacskókat, előnyben részesítjük.
A műanyag tartályok készülhetnek termoplasztikus polimerekből is. A műanyag alapanyag tartalmazhat adalék anyagokat is, például lágyítókat, töltőanyagokat, antioxidánsokat, antisztatikus szereket vagy más szokásos adalékokat is.
A találmány céljaira alkalmas műanyagoknak ellenállóknak kell lenniük a megemelt hőmérsékletnek, amelyen a sterilizálást végezzük. Az infúziós zacskók anyaga előnyösen PVC, ami a járatos szakember számára ismert.
A tárolóedények mérete tág határok között változhat. A tárolóedények méretének megválasztásakor a következő tényezőket kell figyelembe vennünk: különösen az epothilone-okat a vizes közegben való oldhatósága, könnyű kezelhetőség, és ha az helyénvaló, az edény tárolása. Előnyösen olyan tartályokat használunk, amelyek körülbelül 200 mg és 1000 ml közötti infúziós oldat tárolására képesek.
Jó formulálható tulajdonságaiknak köszönhetően az epothilone B-nek a találmány szerinti új kristályformái különösen alkalmasak az említett infúziós oldatok egyszerű és reprodukálható előállítására. Az új kristályformák azonban különösen alkalmasak az olyan gyógyszerformák előállítására, amelyek szilárd formában tartalmazzák a hatóanyagot, például orális formák előállítására.
Az orális alkalmazásra szánt gyógyszerformákat úgy állíthatjuk elő, hogy a hatóanyagot szilárd hordozóanyagokkal elegyítjük, kívánt esetben a kapott keveréket granuláljuk, és kívánt esetben vagy szükség szerint megfelelő adjuvánsok hozzáadása után, a keveréket a továbbiakban tablettákká, drazsémagokká és kapszulákká dolgozzuk fel. Az is lehetséges, hogy beágyazzuk a vegyületeket olyan műanyag szubsztrátumokban, amelyek lehetővé teszik, hogy a hatóanyag meghatározott mennyiségekben diffundáljon vagy felszabaduljon.
Megfelelő gyógyszerészetileg alkalmazható hordozóanyagok különösen a töltőanyagok, úgymint a laktóz, szacharóz, mannitol vagy szorbitol, a cellulózkészítmények és/vagy kalcium-foszfátok, például trikalcium-foszfát vagy kalcium-hidrogén-foszfát, valamint a kötőanyagok, úgymint a keményítők, például a kukorica-, búza-, rizs- vagy burgonyakeményítő, zselatin, tragakant, metil-cellulóz, hidroxi-propil-metil cellulóz, karboxi-metil-cellulóz-nátrium és/vagy a poli(vinil-pirrolidon), és/vagy kívánt esetben a szétesést elősegítő anyagok, úgymint az előbb említett keményítők, a térhálósított vinil-pirrolidonok, agar, alginsav vagy sója, úgymint a nátrium-alginát. Adjuvánsok különösen az áramlást javító szerek és a lubrikánsok, például a szilikátok, talkum, sztearinsav vagy sója, úgymint a magnézium- vagy kalcium-sztearát és/vagy a polietilénglikol. Drazsémagvakat állíthatunk elő kívánt esetben megfelelő, gyomorsavnak ellenálló bevonatokkal, amelyekhez többek között tömény cukoroldatokat, gumiarábikumot, talkumot, poli(vinil-pirrolidon)-t, polietilénglikolt és/vagy titán-dioxidot vagy megfelelő szerves oldószerekkel készült bevonóoldatokat használunk, vagy abból a célból, hogy a gyomorsavnak ellenálló bevonatokat állítsunk elő, a megfelelő cellulózkészítmények oldatait, úgymint etil-cellulóz-ftalátot vagy (hidroxi-propil)-metil-cellulóz-fta!átot használunk. A kapszulák zselatinból vagy pektinből és szükség szerint lágyítóból, úgymint glicerinből vagy szorbitolból álló száraz kapszulák. A száraz kapszulák a hatóanyagot granulátum formájában tartalmazhatják, például töltőanyagokkal, úgymint laktózzal, kötőanyagokkal, úgymint keményítőkkel és/vagy lubrikánsokkal, úgymint talkummal vagy magnézium-sztearáttal, és ahol helyénvaló, stabilizátorokkal együtt. A lágy kapszulákban a hatóanyag oldott vagy előnyösen szuszpendált formában van, amely esetben olajos adjuvánsokat, úgymint zsíros olajokat, paraffinolajat vagy folyékony propilénglikolokat adagolunk: ugyancsak adagolhatunk stabilizátorokat és/vagy antibakteriális adalékokat. Színezékeket vagy pigmenteket adhatunk a tablettákhoz vagy drazsébevonatokhoz, például a jobb azonosítás céljából vagy a hatóanyag különböző dózisainak megkülönböztetése érdekében.
Ha proliferaktív betegség kezelésében alkalmazzuk a B és különösen az A kristályforma valamelyikét, akkor úgy járunk el, hogy a kristályformát (előnyösen infúziós oldat készítésére alkalmas módon, amint azt a fentiekben leírtuk) meleg vérű állatnak, különösen embereknek olyan dózisban adjuk be, amelyet a legnagyobb elviselhető dózis (Maximum Tolerated Dose, MTD) alapján, annak 20%-a és 133%-a között, előnyösen 25%-a és 100%-a között határozhatunk meg. Ezt a meghatározást standardmódszerekkel, például módosított Fibronacci-sorozat felhasználásával végezzük, amelyben a dózisok növekedése az egymást követő mennyiségekre 100%, 67%, 50% és 40%, amelyet 33% követ minden egymást követő dózisra. Szükség esetén egy vagy több további dózist adunk be az első dózisra fent megadott dózistartományon belül, mindegyik dózist egy olyan időtartam után, amely elegendő lehetőséget ad a páciensnek arra, hogy felépüljön a megelőző kezelés után, különösen egy két vagy hosszabb idő után az első beadást követően, előnyösen 2-10 hét, különösen 3-6 hét időtartam után mindegyik előbbi kezelés után. Ez a kezelési séma, amelyben nagy dózist adunk be egyszer, kétszer vagy számos alkalommal úgy, hogy elegendően hosszú időszakokat hagyunk az egyes adagolások között a felépülésre, általában előnyös azzal az eljárással szemben, hogy gyakrabban adagolva kisebb dózisokkal végezzük a kezelést, mivel a kórházi elhelyezés ritkább és rövidebb ideig tart, és jobb daganatellenes hatás várható. Az epothilone B dózisa humán felhasználásra előnyösen 0,1 és 50 mg/m2 közötti, előnyösen 0,2 és 10 mg/m2 közötti érték.
A következő példák a találmány bemutatására szolgálnak, azonban az igényelt oltalmi kör korlátozása nélkül.
HU 225 851 Β1
Figyelmeztetés: az epothilone-okkal végzett munka során szükség szerint megfelelő óvintézkedéseket kell tenni, tekintettel arra, hogy a vegyületek erősen mérgezőek.
A kísérletekben 750 literes, finomított acél fermentort használtunk, amelyet az Alpha AG (Nidau, Svájc) cég állít elő.
1. példa: A BCE 33/10 törzs előállítása mutációval és szelekcióval
Az alkalmazott törzs a BCE 33/10 jelű mutáns [letétbe helyezve a Mikroorganizmusok és Sejtkultúrák Német Gyűjteményében (Germán Collection of Microorganisms and Cell Cultures) DSM 11999 számon 1998. február 9-én], amelyet mutációval és szelekcióval származtatunk a Sorangium cellulosum Soce 90 törzsből az alábbiakban leírt módon. Folyékony tápközegben a BCE 33/10 mutáns a Sorangiumokra jellemző bacillusformát mutat, lekerekített végekkel, hossza 3-6 pm, szélessége körülbelül 1 pm. A Sorangium cellulosum Soce 90 törzset a Mikroorganizmusok Német Gyűjteményéből szereztük be, ahol az azonosítási száma DSM 6773.
A BCE 33/10 mutánst három mutációs lépésben úgy állítjuk elő, hogy UV fénnyel besugárzást végzünk, és az egyes telepeket szelektáljuk. Az eljárást részletesen a következőkben ismertetjük.
Tenyésztés az ampullából: A DSM 6773 ampulla sejtjeit 10 ml G52 tápközegbe/táptalajba visszük át, amely táptalaj 50 ml-es Erlenmeyer-lombikban van, és 6 napon át inkubáljuk rázógépen (agitátor) 30 °C-on 180 rpm fordulatszámon. Ennek a tenyészetnek 5 ml-ét 50 ml G52 táptalajba visszük át (a táptalaj 200 ml-es Erlenmeyer-lombikban van), és 180 rpm fordulatszámon 3 napon át inkubáljuk rázatással 30 °C-on.
Első UV-mutáciős lépés és szelekció: A fenti tenyészet 0,1 ml-es részleteit szélesztjük úgy, hogy több Petri-csészében lévő S42 agar táptalaj lemezekre visszük fel. A lemezeket ezután UV fénnyel besugározzuk (maximális sugárzási tartomány 250-300 nm) 90 vagy 120 másodpercig 500 p watt/cm2 teljesítménnyel. A lemezeket ezután 7-9 napon át inkubáljuk 30 °C-on, amíg az egyes telepek mérete 1-2 mm lesz. Ezután 100-150 telep sejtjeit külön-külön szélesztjük az egyes telepekből úgy, hogy műanyag kacs (loop) segítségével S42 agar táptalajt tartalmazó Petri-csészék szektoraiba visszük át (lemezenként 4 szektor), és a lemezeket 7 napon át 30 °C-on inkubáljuk. Azokat a sejteket, amelyek körülbelül 1 cm2 területen fejlesztettek telepet az agaron, műanyag kacs segítségével 10 ml G52 táptalajba (amely 50 ml-es Erlenmeyer-lombikban van) visszük át és 7 napon át 180 rpm-en végzett rázatás mellett inkubáljuk 30 °C-on. Ennek a tenyészetnek az 5 ml-ét 50 ml G52 táptalajba (amely 200 ml-es Erlenmeyer-lombikban van) visszük át, és 180 rpm fordulatszámon 3 napon át inkubáljuk rázógépen 30 °C-on. Ennek a tenyészetnek 10 ml-ét 50 ml 23B3 táptalajba visszük át, és 7 napon át inkubáljuk 180 rpm fordulatszámon rázógépen 30 °C-on.
Az epothilone A és epothilone B mennyiségét, amely ebben a tenyészetben termelődött, a következőképpen határozzuk meg. Az 50 ml tenyészoldatot átszűrjük egy nejlonszitán (pórusmérete 150 pm), és az Amberlite XAD16 polisztirolgyantát, ami visszamaradt a szitán, egy kevés vízzel átöblítjük, majd a szűrlettel együtt egy 50 ml-es centrifugacsőben (Falcon Labware, Becton Dickinson AG Immengasse 7, 4056 Bázel) adagoljuk. 10 ml izopropanolt (>99%) adagolunk a szűrietet tartalmazó csőhöz. Ezután a jól lezárt csövet 1 órán át rázzuk 180 rpm-en, hogy az epothilone A és B, amely a gyantához van kötve, feloldódjék az izopropanolban. Ezután a folyadék 1,5 ml-ét centrifugáljuk, és a felülúszónak körülbelül 0,8 ml-ét pipetta segítségével egy HPLC csőbe adagoljuk. E minták HPLC analízisét úgy végezzük el, amint azt a termékek analízisére vonatkozó részben az alábbiakban majd ismertetjük. A HPLC analízissel meghatározzuk, melyik tenyészetnek a legnagyobb az epothilone-B-tartalma. A megfelelő telep fent ismertetett szektor lemezéből (a lemezeket időközben 4 °C-on tároljuk) körülbelül 1 cm2 agarterület sejtjeit műanyag kacs segítségével átvisszük 10 ml G52 táptalajba, ami 50 ml-es Erlenmeyer-lombikban van, és 7 napon át inkubáljuk 180 rpm fordulatszámon rázatva 30 °C-on. Ennek a tenyészetnek 5 ml-ét 50 ml G52 tápoldatba (200 ml-es Erlenmeyer-lombikban van) visszük át, és 180 rpm-en 3 napon át 30 °C-on rázatva inkubáljuk.
Második és harmadik UV-mutációs lépés és szelektáció: Az eljárást pontosan ugyanúgy végezzük, amint azt az első UV-mutációs lépésnél leírtuk úgy, hogy az első UV-mutációban legjobbnak bizonyult telep tenyészetét választjuk ki a második mutagenezisre. A harmadik mutagenezisre ennek megfelelően a második mutagenezisből származó legjobb telep tenyészetét használjuk fel. Az UV-mutációs lépések ezen harmadik ciklusa után a legjobb telep azt követően, hogy kiválasztottuk az epothilone-B-termelés szempontjából tökéletesített törzset, megfelel a BCE 33/10 mutánsnak.
A törzs fenntartása
G52 táptalajban lévő három napja fenntartott tenyészet (50 ml táptalaj 200 ml Erlenmeyer-lombikban, 30 °C és 180 rpm) 10 ml-ét 50 ml 23B3 táptalajba visszük át (amely egy 200 ml-es Erlenmeyer-lombikban van), és 3 napon át inkubáljuk 30 °C-on 180 rpm-en végzett rázatás mellett. Ennek a tenyészetnek 1 ml-es részleteit eltávolítjuk olyan formában, amennyire homogén az lehet (minden eltávolítás előtt az Erlenmeyerlombikban lévő tenyészetet kézzel megrázzuk) az Amberlite XAD16 polisztirolgyantával együtt (polisztirol adszorpciós gyanta, Rohm & Haas, Frankfurt, Németország), majd 1,8 ml Nunc fagyasztócsövekbe (A/S Nunc, DK 4000 Roslide, Dánia) töltjük, és vagy -70 °C-on vagy folyékony nitrogénben tároljuk.
Ezekből az ampullákból a törzsek tenyésztését úgy végezzük, hogy levegőben szobahőmérsékletre melegítjük azokat, majd ezt követően a fagyasztócső (cryo tűbe) egész tartalmát átvisszük egy 50 ml-es Erlenmeyer-lombikban lévő 10 ml-nyi G52 tápközegbe, és 5-7 napon át inkubáljuk 180 rpm fordulatszámon működő rázógépen 30 °C-on.
HU 225 851 Β1
Tápközegek:
| G52 táptalaj: | |
| élesztőkivonat, kis sótartalmú (Springer, Maison Alfort, Franciaország) MgSO4 (7 H2O) | 2 g/l 1 g/l |
| CaCI2 (2 H2O) zsírtalanított szójaliszt (Mucedola S.r.l., | 1 g/l |
| Settimo Milano, Olaszország) burgonyakeményítő Noredux | 2 g/l |
| (Blattmann, Vádenswil, Svájc) | 8 g/l |
| vízmentes glükóz Fe-EDTA 8 g/l (Product No. 03625, | 2 g/l |
| Fluka Chemie AG, CH) pH 7,4; KOH-val beállítva Sterilizálás: 20 perc 120 °C-on | 1 ml/l |
S42 Agár táptalaj: S. Jaoua et al. Plasmid 28,157-165 (1992) cikke szerint 23B3 táptalaj:
glükóz 2 g/l burgonyakeményítő Noredux (Blattmann, Wádenswil, Svájc) 20 g/l zsírtalanított szójaliszt (Mucedola S.R.I., Settimo Milano, Olaszország) 16 g/l
Fe-EDTA (Product No. 03625,
Fluka, Buchs, Svájc) 8 g/l
HEPES (Fluka, Buchs, Svájc) 5 g/l polisztirolgyanta XAD16 (Rohm and Haas) 2% v/v ionmentesített víz pH 7,8; NaOH-val beállítva Sterilizálás: 20 perc, 120 °C-on
HEPES=4-(2-hidroxi-etil)-piperazin-1-etánszulfonsav
2. példa: Tenyésztés az epothilone-vegyületek termelése céljából
Törzs: Sorangium cellulosum Soce90 BCE 33/10 (hivatkozunk az 1. példára)
A törzs fenntartása: folyékony nitrogénben, mint az 1. példában
Tápközegek: Előtenyészetek és köztes tenyészetek: G52
Főtenyészet: 1B12
G52 táptalaj:
élesztőkivonat, kis sótartalmú (BioSpringer, Maison Alfort,
Franciaország) 2 g/l
MgSO4 (7 H2O) 1 g/l
CaCI2 (2 H2O) 1 g/l zsírtalanított szójaliszt (Soyamine 50T) (Lucas Meyer, Hamburg, Németország) 2 g/l burgonyakeményítő Noredux A-150 (Blattmann, Vádenswil, Svájc) 8 g/l vízmentes glükóz 2 g/l
EDTA-Fe(lll)-Na-só (8 g/l) 1 ml/l pH 7,4; KOH-val beállítva Sterilizálás: 20 perc 120 °C-on
1B12 táptalaj:
burgonyakeményítö Noredux A-150 (Blattmann, Wádenswil, Svájc) 20 g/l zsírtalanított szójaliszt Soyamine 50T (Lucas Meyer, Hamburg, Németország) 11 g/l EDTA-Fe(lll)-Na-só 8 mg/l pH 7,8; KOH-val beállítva
Sterilizálás: 20 perc, 120 °C.
Ciklodextrinek és ciklodextrinszármazékok
A ciklodextrineket (Fluka, Buchs, Svájc vagy Wacker Chemie, München, Németország)! különböző koncentrációban külön sterilizáljuk, majd az 1B12 táptalajhoz beoltás előtt adagoljuk.
Tenyésztés: Folyékony nitrogénben tárolt Sorangium cellulosum Soce 90 BCE 33/10 törzs szuszpenziójának 1 ml-ét az ampullából 10 ml G52 táptalajba (amely 50 ml-es Erlenmeyer-lombikban van) visszük át, és 3 napon át inkubáljuk 180 rpm-en végzett rázatás mellett 30 °C-on, 25 mm elmozdulással. Ennek a tenyészetnek 5 ml-ét 45 ml G52 tápközeghez (amely 200 ml-es Erlenmeyer-lombikban van) adjuk, és 3 napon át inkubáljuk rázógépen 180 rpm-en, 30 °C-on, 25 mm elmozdulással. Ezután ennek a tenyészetnek 50 ml-ét hozzáadjuk 450 ml G52 táptalajhoz (amely 2 literes Erlenmeyer-lombikban van), és 3 napon át inkubáljuk rázógépen 180 rpm-en, 30 °C-on, 50 mm elmozdulással.
A tenyészet fenntartása (fenntartótenyészet): A tenyészetet 3-4 naponként átoltjuk úgy, hogy annak 50 ml-ét 450 ml G52 táptalajba (amely 2 literes Erlenmeyer-lombikban van) adagoljuk. Minden kísérletet és fermentációt úgy végzünk, hogy az eljárást a tenyészet ilyen módon való fenntartásával kezdjük.
Lombikvizsgálatok (I) Előtenyészet rázatott lombikban
500 ml fenntartótenyészettel indítjuk a kísérletet, 1 *450 ml 652 tápközeget oltunk be 50 ml fenntartótenyészettel, és 4 napon át 180 rpm fordulatszámon inkubáljuk rázógépen, 30 °C-on, 50 mm elmozdulással.
(ii) Főtenyészet rázatott lombikban:
ml 1B12 táptalajt és 5 g/l 4-morfolin-propánszulfonsavat (=MOPS), amely por alakban van, 200 ml-es Erlenmeyer-lombikban összekeverünk 5 ml 10*koncentrált ciklodextrin oldattal, beoltjuk 10 ml előkultúrával, és 5 napon át inkubáljuk rázógépen, 180 rpm fordulatszámmal, 30 °C-on, 50 mm elmozdulás mellett.
Fermentáció: A fermentációkat 10 literes, 100 literes és 500 literes léptékben végezzük; 20 literes és 100 literes léptékben végzett fermentációk szolgálnak köztes tenyésztési lépésként. Míg az előkultúrákat és a köztes (intermedier) kultúrákat úgy oltjuk be, mint a fenntartótenyészetet, 10% (v/v) arányban, a főtenyészetet a köztes tenyészet 20%-ával (v/v) oltjuk be. Fontos körülmény: a rázatott tenyészetekkel szemben, a fermentáció céljára a táptalaj összetevőit a végtérfogat alapján számítjuk, és a végtérfogat magában foglalja az inokulumot is. Így például ha 18 liter táptalajt/tápközeget és 2 liter inokulumot elegyítünk, akkor az anyagokat 20 literre számítva mérjük be, de csak 18 literrel keverjük össze!
Előtenyészet rázatott lombikban
A kísérletet az 500 ml térfogatú fenntartótenyészettel indítjuk, 4x450 ml G52 táptalajt (2 literes Erien12
HU 225 851 Β1 meyer-lombikban) beoltunk a fenntartótenyészet 50-50 ml-ével, és 4 napon át inkubálunk rázógépen 180 rpm-en, 30 °C-on, 50 mm elmozdulással.
vetkezők: 30 °C; 120 prm; 0,5 liter levegő/liter folyadék/perc; 0,5 bar túlnyomás; a pH-t H2SO4/KOH-val pH=7,6±0,5 értékre állítjuk be.
literes vagy 100 literes térfogatú köztes tenyészet literes köztes tenyészet: 18 liter G52 táptalajt 30 liter össztérfogatú fermentorba mérünk be, és 2 literes előtenyészettel beoltjuk. A tenyésztés 3-4 napon át tart, és a körülmények a következők: 30 °C; 250 rpm; 0,5 liter levegő/liter folyadék/perc; 0,5 bar túlnyomás; a pH-t nem szabályozzuk.
100 literes köztes tenyészet: 90 liter G52 táptalajt 150 literes össztérfogatú fermentorba mérünk be, beoltunk a 20 literes köztes tenyészet 10 literével. A tenyésztés 3-4 napon át tart, és a körülmények a következők: 30 °C; 150 rpm; 0,5 liter levegő/literes folyadék/perc; 0,5 bar túlnyomás; a pH-t nem szabályozzuk.
liter, 100 liter vagy 500 liter térfogatú főtenyészet literes főtenyészet: 10 literre számított 1B12 táptalaj tápanyagait 7 liter vízben sterilizáljuk, majd 1 liter steril 10%-os 2-(hidroxi-propil)-p-ciklodextrin oldatot adunk hozzá, és beoltjuk a 20 literes köztes tenyészet 2 liternyi mennyiségével. A főtenyészet tenyészideje 6-7 nap; és a körülmények a következők: 30 °C; 250 prm; 0,5 liter levegő/liter folyadék/perc; 0,5 bar túlnyomás; a pH-t H2SO4/KOH-val pH=7,6±0,5 értékre állítjuk be (vagyis nem szabályozzuk pH=7,1 és 8,1 érték között).
100 literes főtenyészet: 100 literre számított 1B12 táptalaj tápanyagait 70 liter vízben sterilizáljuk, majd 10 liter steril 10%-os 2-(hidroxi-propil)-p-ciklodextrin oldatot adunk hozzá, és beoltjuk a 20 literes köztes tenyészet 20 liternyi mennyiségével. A főtenyészet tenyészideje 6-7 nap; és a körülmények a következők: 30 °C; 250 prm; 0,5 liter levegő/liter folyadék/perc; 0,5 bar túlnyomás; a pH-t H2SO4/KOH-val pH=7,6±0,5 értékre állítjuk be. A 100 literes fermentáció átoltási láncát a Folyamatábra szemlélteti.
500 literes főtenyészet: 500 literre számított 1B12 táptalaj tápanyagait 350 liter vízben sterilizáljuk, majd 50 liter steril 10%-os 2-(hidroxi-propil)-p-ciklodextrin-oldatot adunk hozzá, és beoltjuk a 100 literes köztes tenyészet 100 liternyi mennyiségével. A főtenyészet tenyészideje 6-7 nap; és a körülmények a kö10
Termékanalizis A minta előkészítése ml mintát 2 ml Amberlite XAD16 polisztirolgyantával (Rohm & Haas, Frankfurt, Németország) elegyítünk, és 180 rpm fordulatszámon 30 C-on egy órán át rázzuk. Ezután a gyantát 150 pm-es nejlonszitával szűrjük, kevés vízzel mossuk, majd a szűrlettel együtt 15 ml térfogatú Nunc csőbe adagoljuk.
A termék eluálása a gyantáról ml izopropanolt (>99%) adagolunk a szűrletet és a gyantát tartalmazó csőbe. Ezután a lezárt csövet 30 percen át rázzuk szobahőmérsékleten Rota-Mixerrel (Labinco BV, Hollandia). Ezután a folyadék 2 ml-ét centrifugáljuk, és a felülúszót pipettával HPLC csövekbe adagoljuk.
HPLC analízis
Oszlop: Waters-Symetry C18, 100*4 mm,
3,5 μίτι WAT066220+előoszlop 3,9*20 mm
Oldószer:
Gradiens:
Kályhahőmérséklet:
Detektálás:
Injektált térfogat: Retenciós idő:
WAT054225
A: 0,02%-os foszforsav B: acetonitril (HPLC minőség) 41% B 0-7 perc 100% B 7,2-7,8 perc 41% B 8-12 perc 30 °C
250 nm, UV-DAD detektálás 10 μΙ
Epo A: 4,30 prc Epo B: 5,38 perc
2A. példa: A ciklodextrin és ciklodextrinszármazékok adagolásának hatása az elért epothilone-koncentrációra
Az e példában vizsgált valamennyi ciklodextrinszármazékot a Fluka (Buchs, CA) cégtől szereztük be.
A vizsgálatokat 200 ml-es lombikokban, rázatás mellett végezzük, a tenyészet térfogata 50 ml. Kontrollként Amberlite XAD-16 (Rohm & Haas, Frankfurt, Németország) adszorbergyantával és bármilyen adszorber adagolása nélkül készítünk mintákat. A mintákat 5 napig inkubáljuk, ezután az 1. táblázatban foglalt epothilonetitereket határozhatjuk meg HPLC-vel.
1. táblázat
Az adalékok hatása az elérhető epothilone-koncentrációra
| Adalék | Rendelési szám | Koncentráció (%W/V)1 | Epo A (mg/l) | EpoB (mg/l) |
| Amberlite XAD-16 (vív) | 2,0 (%v/v) | 9,2 | 3,8 | |
| 2-(hidroxi-propil)-p-ciklodextrin | 56 332 | 0,1 | 2,7 | 1,7 |
| 2-(hidroxi-propil)-p-ciklodextrin | 0,5 | 4,7 | 3,3 | |
| 2-(hidroxi-propil)-p-ciklodextrin | ,, | 1,0 | 4,7 | 3,4 |
| 2-(hidroxi-propil)-6-ciklodextrin | 2,0 | 4,7 | 4,1 | |
| 2-(hidroxi-propil)-p-ciklodextrin | 5,0 | 1,7 | 0,5 |
HU 225 851 Β1
1. táblázat (folytatás)
| Adalék | Rendelési szám | Koncentráció (%w/v)1 | Epo A (mg/l) | EpoB (mg/l) |
| 2-(hidroxi-propil)-a-ciklodextrin | 56 330 | 0,5 | 1,2 | 1,2 |
| 2-(hidroxi-propil)-a-ciklodextrin | 1,0 | 1,2 | 1,2 | |
| 2-(hidroxi-propil)-a-ciklodextrin | 5,0 | 2,5 | 2,3 | |
| β-ciklodextrin | 28 707 | 0,1 | 1,6 | 1,3 |
| β-ciklodextrin | 0,5 | 3,6 | 2,5 | |
| β-ciklodextrin | 1,0 | 4,8 | 3,7 | |
| β-ciklodextrin | n | 2,00 | 4,8 | 2,9 |
| β-ciklodextrin | 5,0 | 1,1 | 0,4 | |
| metil^-ciklodextrin | 66 292 | 0,5 | 0,8 | <0,3 |
| metil-p-ciklodextrin | 1,0 | <0,3 | <0,3 | |
| metil-p-ciklodextrin | 2,0 | <0,3 | <0,3 | |
| 2,6-d i (O-meti Ι)-β-ά klodextri n | 39 915 | 1,0 | <0,3 | <0,3 |
| 2-(hidroxi-propil)-Y-ciklodextrin | 56 334 | 0,1 | 0,3 | <0,3 |
| 2-(hidroxi-propil)-Y-ciklodextrin | ,, | 0,5 | 0,9 | 0,8 |
| 2-(hidroxi-propil)-Y-ciklodextrin | 1,0 | 1,1 | 0,7 | |
| 2-(hidroxi-propil)-Y-ciklodextrin | 2,0 | 2,6 | 0,7 | |
| 2-(hidroxi-propil)-Y-ciklodextrin | 5,0 | 5,0 | 1,1 | |
| adalék nélkül | 0,5 | 0,5 |
1) Az Ambertite koncentrációt (%v/v) kivéve minden százalékot tömegszázalékban (%w/v) adunk meg.
A vizsgált ciklodextrinek közül néhány, így a 2,6di(O-metil)-p-ciklodextrin, a metil-p-ciklodextrin, nem mutat hatást vagy negatív hatást fejt ki az epothilonetermelésre az adott koncentrációkban. 1—2%-nyi 2-(hidroxi-propil)-p-ciklodextrin és β-ciklodextrin a pél- 35 da szerint 6-8-szorosára növeli az epothilone-termelést a ciklodextrin nélkül végzett kísérletekhez viszonyítva.
2B. példa: 10 literes léptékben végzett fermentáció
1% 2-(hidroxi-propil)-fi-ciklodextrin alkalmazásával 40
A fermentációt 15 literes üvegfermentorban végezzük. A tápközeg 10 g/l 2-(hidroxi-propil)-p-ciklodextrint tartalmaz, amelyet a Wacker Chemie (München, Németország) cégtől szereztünk be. A fermentáció folyamatát a 2. táblázatban összefoglalt adatok szemlélte- 45 tik. A fermentáció 6 nap után befejeződik, és ezután feldolgozzuk a terméket.
2. táblázat literes léptékű fermentáció folyamata 50
| Tenyésztési idő (nap) | Epothilone A (mg/l) | Epothilone B (mg/l) |
| 0 | 0 | 0 |
| 1 | 0 | 0 |
| 2 | 0,5 | 0,3 |
| 3 | 1,8 | 2,5 |
| 4 | 3,0 | 5,1 |
| Tenyésztési idő (nap) | Epothilone A (mg/l) | Epothilone B (mg/l) |
| 5 | 3,7 | 5,9 |
| 6 | 3,6 | 5,7 |
2C. példa: 100 literes léptékben végzett fermentáció 1% 2-(hidroxi-propil)-fi-ciklodextrin alkalmazásával
A fermentációt 150 literes fermentorban végezzük. A tápközeg 10 g/l 2-(hidroxi-propil)-p-ciklodextrint tartalmaz. A fermentáció folyamatát a 3. táblázatban összefoglalt adatok szemléltetik. A fermentációt 7 nap múlva fejezzük be, és ezután feldolgozzuk az anyagot.
3. táblázat
100 literes léptékű fermentáció folyamata
| Tenyésztési idő (nap) | Epothilone A (mg/l) | Epothilone B (mg/l) |
| 0 | 0 | 0 |
| 1 | 0 | 0 |
| 2 | 0,3 | 0 |
| 3 | 0,9 | 1,1 |
| 4 | 1,5 | 2,3 |
| 5 | 1,6 | 3,3 |
HU 225 851 Β1
3. táblázat (folytatás)
| Tenyésztési idő (nap) | Epothilone A (mg/l) | Epothilone B (mg/l) |
| 6 | 1,8 | 3,7 |
| 7 | 1,8 | 3,5 |
2D. példa: 500 literes léptékben végzett fermentáció 1% 2-(hidroxi-propil)-$-ciklodextrin alkalmazásával
A fermentációt 750 literes fermentorban végezzük. A tápközeg 10 g/l 2-(hidroxi-propil)-p-ciklodextrint tartalmaz. A fermentáció folyamatát a 4. táblázatban összefoglalt adatok szemléltetik, A fermentációt 7 nap múlva fejezzük be, majd a terméket feldolgozzuk.
4. táblázat
500 literes léptékű fermentáció folyamata
| Tenyésztési idő (nap) | Epothilone A (mg/l) | Epothilone B (mg/l) |
| 0 | 0 | 0 |
| 1 | 0 | 0 |
| 2 | 0 | 0 |
| 3 | 0,6 | 0,6 |
| 4 | 1,7 | 2,2 |
| 5 | 3,1 | 4,5 |
| 6 | 3,1 | 5,1 |
2E. példa: A 10 literes léptékű fermentációs példa összehasonlítása adszorbens adagolása nélkül végbemenő folyamattal
A fermentációt 15 literes üvegfermentorban végezzük. A tápközeg nem tartalmaz sem ciklodextrint, sem más adszorbenst. A fermentáció folyamatát az 5. táblázatban összefoglalt adatok szemléltetik. A terméket nem nyerjük ki és nem dolgozzuk fel.
5. táblázat
A 10 literes léptékben, adszorbens nélkül végzett fermentáció folyamata
| Tenyésztési idő (nap) | Epothilone A (mg/l) | Epothilone B (mg/l) |
| 0 | 0 | 0 |
| 1 | 0 | 0 |
| 2 | 0 | 0 |
| 3 | 0 | 0 |
| 4 | 0,7 | 0,7 |
| 5 | 0,7 | 1,0 |
| 6 | 0,8 | 1,3 |
3. példa: Az epothilone-termékek feldolgozása: Elkülönítés az 500 literes főtenyészetből A 2D. példa szerinti 500 literes főtenyészet termékének térfogata 450 liter. Ezt a terméket Westfalia derítő szeparátorral választjuk szét folyadékfázisra és szilárd fázisra. A szeparátor típusa SA-20-06, az elválasztást rpm=6500 fordulatszámon végezzük. A folyadékfázis a centrifugátumot és az öblítővizet tartalmazza, térfogata 650 liter. A szilárd fázis tartalmazza a sejteket, ennek tömege körülbelül 15 kg. Az epothilonetermékek főtömege a centrifugátumban van, a centrifugált sejtmassza a meghatározott epothilone-résznek kevesebb mint 15%-át tartalmazza, és a továbbiakban a sejttömeget nem dolgozzuk fel. A 650 liter centrifugátumot ezután 4000 literes keverőtartályba töltjük, 10 liter Amberlite XAD-16 gyantával (centrifugátum:gyanta térfogat=65:1) elegyítjük, és keverjük. Körülbelül 2 óra érintkeztetési idő után a gyantát Heine túlfolyó centrifugával (a kosár űrtartalma 40 liter; rpm=2800) elválasztjuk. A gyantát eltávolítjuk a centrifugából, és 10-15 liter ionmentesített vízzel mossuk. A deszorpciót úgy segítjük elő, hogy a gyantát kétszer keverjük, mindkét alkalommal 30 liter izopropanolrészletekkel 30 literes üveg keverőedényekben 30 percig. A gyantát szívószűrővel választjuk el az izopropanolfázistól. Az izopropanolt ezután eltávolítjuk az egyesített izopropanolos fázisokból úgy, hogy 15-20 liter vizet adunk hozzá egy vákuum alatt működő keringtető bepárlóban (Schmid-Verdampfer), és a kapott vizes fázist, amelynek térfogata körülbelül 10 liter, háromszor extraháljuk, minden alkalommal 10-10 liter etil-acetáttal. Az extrakciót 30 literes üveg keverőedényekben végezzük. Az etil-acetátos extraktumot 3-5 liter térfogatra bepároljuk vákuum alatt működő keringtető bepárlóban (SchmidVerdampfer), és ezután vákuumban szárazra pároljuk rotációs bepárlóban (Büchi típus). Az etil-acetátos extraktum hozama 50,2 g. Az etil-acetátot extraktumot 500 ml metanolban oldjuk, az oldhatatlan részeket hajtogatott szűrő alkalmazásával leszűrjük, és az oldatot egy 10 kg töltetű Sephadex LH 20 oszlopra (Pharmacia, Uppsala, Sweden) adagoljuk. Az oszlopátmérője 20 cm, a töltetszint körülbelül 1,2 m). Az elúciót metanol eluenssel végezzük. Az epothilone A és B döntően a 21-23. frakciókban van jelen (a frakciók mérete 1 liter). Ezeket a frakciókat vákuumban, rotációs bepárlóban szárazra pároljuk. Az össztömeg 9,0 g. Ezeket a Sephadex csúcsfrakciókat (9,0 g) ezután 92 ml térfogatú acetonitril:víz:metilén-klorid=50:40:2 arányú oldószerelegyben oldjuk, az oldatot hajtogatott szűrőn keresztül leszűrjük, és egy RP oszlopra adagoljuk. (Prepbar 200, Merck berendezés; 2,0 kg LiChrospher RP-18 Merck, szemcseméret 12 pm, oszlopátmérő 10 cm, töltési szint 42 cm; Merck, Darmstadt, Germany). Az elúciót acetonitril:víz=3:7 eleggyel végezzük (áramlási sebesség 500 ml/perc; az epothilone A retenciós ideje körülbelül 51-59 perc; az epothilone B retenciós ideje körülbelül 60-69 perc). A frakcionálást UV-detektorral 250 nm-en követjük. A frakciókat vákuumban szárazra pároljuk Bücki-Rotavapor rotációs bepárlóban. Az epothilone A csúcsfrakció tömege
HU 225 851 Β1
700 mg, és HPLC analízis szerint (külső standard) 75,1%-ot tartalmaz. Az epothilone B csúcsfrakció tömege 1980 mg, és HPLC analízis szerint (külső standard) 86,6%-ot tartalmaz. Végül az epothilone A frakciót (700 mg) 5 ml etil-acetát:toluol=2:3 oldószerelegyből kristályosítjuk, az epothilone A tiszta kristályosított termék hozama 170 mg [tartalma HPLC analízis szerint (a terület %-a)=94,3%]. Az epothilone B frakciót (1980 mg) 18 ml metanolból kristályosítjuk, így 1440 mg epothilone B tiszta kristályos terméket kapunk [tartalma HPLC analízis szerint (a terület %-a)=99,2%]. Olvadáspont (epothilone B): például 124-125 °C; 1H-NMR adatok az epothilone B-re vonatkozóan: 500 MHz-NMR, oldószer: DMSO-d6. Kémiai eltolódás: δ ppm-ben TMS-hez viszonyítva. s=szingulett; d=dublett; m=multiplett.
δ (Multiplicitás)
7,34 (s)
6,50 (s)
5,28 (d)
5,08 (d)
4.46 (d)
4,08 (m)
3.47 (m)
3,11 (m)
2.83 (dd)
2,64 (s)
2,36 (m)
2,09 (s)
2,04 (m)
1.83 (m)
1,61 (m)
1,47-1,24 (m)
1,18 (s)
1,13 (m)
1,06 (d)
0,89 (d+s, átfedő)
Integrál (H száma)
1 1 1
6 2 6 6
Σ=41
Ebben a példában (3. példa) az epothilone B-t az A kristálymódosulatban nyertük, amelyet az A módosulat röntgendiffraktogramja jellemez (utalunk a leírás általános részére).
4. példa: Az epothilone B vegyület B kristálymódosulata mg epothilone B-t (melyet például az előbbiek szerint nyertünk) 1 ml izopropanolban szuszpendálunk, és 24 órán át 25 °C-on rázunk. A terméket szűrjük és szárítjuk. Nagy vákuumban végzett szárítás után az epothilone B-t fehér kristályok formájában kapjuk meg. A termék kristálymódosulatát a B módosulatnak megfelelő röntgendiffraktogram jellemzi (utalunk a leírás általános részére).
Claims (12)
1) egy ciklodextrin, amelyben egy vagy több, akár az összes hidroxicsoport éterezve van alkil-étercsoporttá; egy aril-(hidroxi-alkil)-éter-csoporttá;
15 hidroxi-alkil-éter-csoporttá; karboxi-alkil-étercsoporttá; egy (karboxi-származék)-(rövid szénláncú alkil)-éter-csoporttá, ahol a karboxi-származék jelentése amino-karbonil-csoport, mono- vagy di(rövid szénláncú alkil)-amino-karbonil-csoport, morfoli20 no-karbonil-csoport, piperidino-karbonil-csoport, pirrolidino-karbonil- vagy piperazino-karbonil-csoport vagy alkoxi-karbonil-csoport; vagy egy szulfoalkil-éter-csoporttá;
1. Eljárás epothilone-vegyületek dúsítására az ezen vegyületeknek biotechnológiai előállítására szolgáló tápközegben, azzal jellemezve, hogy az eljárás során mikroorganizmusokat tenyésztünk egy tápközegben, mely mikroorganizmusok az adott tápközegben ezeket a vegyületeket termelik, és a tápközeghez komplexformáló komponensként egy vagy több ciklo5 dextrint adunk, mely ciklodextrinek az alábbiak közül választhatók:
a) a-ciklodextrin, β-ciklodextrin, γ-ciklodextrin, δ-ciklodextrin, ε-ciklodextrin, ζ-ciklodextrin, η-ciklodextrin és θ-ciklodextrin; vagy
2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy mikroorganizmusként valamely myxobaktériumot alkalmazzuk.
2) egy ciklodextrin, amelyben egy vagy több hidro25 xicsoport egy
-O-[alk-O-]n-H (II) általános képletű csoporttal van éterezve, ahol a képletben alk jelentése alkilcsoport, és n értéke 2-től 12-ig terjedő egész szám,
30 3) egy ciklodextrin, amelyben egy vagy több hidroxicsoport egy
R' O
35 (Alk-O)m—Alk--f (III) / \ általános képletű csoporttal van éterezve, ahol a 40 képletben R’ jelentése hidrogénatom, hidroxicsoport, -O-(alk-O)z-H általános képletű csoport; m értéke 1-től 12-ig terjedő egész szám; Y jelentése
OR1 vagy NR2R3 általános képletű csoport, ahol R1f R2 és R3 jelentése egymástól függetlenül hidro45 génatom vagy rövid szénláncú alkilcsoport, vagy R2 és R3 a kapcsolódó nitrogénatommal együtt morfolino-, piperidino- pirrolidino- vagy piperazinocsoportot jelent, és alk jelentése alkilcsoport; vagy 4) egy elágazó láncú ciklodextrin, amely más cukor50 molekulákkal alkotott éterkötéseket vagy acetálkötéseket tartalmaz, melyek a következők közül választhatók: glükozil- és diglükozil-(G2-8-ciklodextrin), maltozil- és dimaltozil-ciklodextrin, vagy N-acetil-glükózaminil-, glükózaminil-, N-acetil-galaktóz55 aminil- vagy galaktózaminil-ciklodextrin; lehetnek továbbá a származékok a ciklodextrinek rövid szénláncú alkanoil-, úgymint acetil-észterei egy ciklodextrinnek; vagy
c) a fenti ciklodextrinek és/vagy ciklodextrinszármazé60 kok közül kettőnek vagy többnek az elegyei,
HU 225 851 Β1 ahol a „rövid szénláncú” maximum 7 szénatomos csoportot jelent.
3. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan tápközeget alkalmazunk, mely egy, az epothilone-ok termelésére alkalmas Sorangium törzset, vizet és más megfelelő komplexképző komponenst tartalmaz, mely komponens egy (III) általános képletű csoporttal van éterezve, ahol az általános képletben R’, m, alk és Y jelentése az 1. igénypont 3) pontjában megadott.
4. A 3. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a ciklodextrint és/vagy a ciklodextrinszármazékot 0,05-10 tömegszázalék (tömeg/térfogat) mennyiségben adjuk a tápközeghez.
5. A 4. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a ciklodextrint és/vagy a ciklodextrinszármazékot 0,1-2 tömegszázalék mennyiségben adjuk a tápközeghez.
6. A 3. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a ciklodextrinszármazékot valamely ciklodextrin és valamely hidroxi-(rövid szénláncú alkil)-ciklodextrin - ahol a rövid szénláncú maximum 7 szénatomos láncot jelent - továbbá ezek egy vagy több elegye közül választjuk meg.
7. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy komplexképző komponensként 2-(hidroxi-propil)β-ciklodextrint alkalmazunk.
8. Tápközeg, mely egy vagy több 1. igénypontban megadott ciklodextrint és epothilone-származékok termelésére alkalmas mikroorganizmust tartalmaz.
9. A 8. igénypont szerinti tápközeg, mely mikroorganizmusként egy myxobaktériumot tartalmaz.
10. Eljárás epothilone-ok előállítására, azzal jellemezve, hogy az epothilone-okat az ezen vegyületek biotechnológiai előállítására szolgáló tápközeg feldolgozásával nyerjük, mely tápközeg olyan mikroorganizmus(oka)t - mint természetes anyagot termelő mikroorganizmus(oka)t - tartalmaz, mely(ek) alkalmas(ak) epothilone-ok termelésére, és a tápközeghez egy vagy több 1. igénypont szerinti ciklodextrint adunk, ezt követően az epothilone-okat tisztítjuk, és kívánt esetben a kapott epothilone-okat elkülönítjük.
10 b) a ciklodextrinszármazékok, melyeket az alábbiak közül választhatunk
11. A 10. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az eljárásnál a Sorangium nemzetségbe tartozó myxobaktériumot alkalmazunk, a tenyészetet centrifugálással szilárd és folyadékfázisra (centrifugátumra) szétválasztjuk; a folyadékfázist valamely gyantával elegyítjük vagy átengedjük egy ilyen gyantával töltött oszlopon; az epothilone-(oka)t poláros oldószerrel deszorbeáljuk a gyantáról; vízzel nem elegyedő szerves oldószert adunk az elegyhez, és az epothilone-(oka)t átvisszük a szerves fázisba; az epothilone-okat a szerves oldatból kis molekulatömegű anyagok számára alkalmas molekulaszita alkalmazásával koncentráljuk; majd ezt követően az epothilone-származékokat tartalmazó frakciókat fordított fázisú oszlopon elválasztjuk; miáltal az epothilone A-t és az epothilone B-t egymástól elkülönítve nyerjük, melyeket kívánt esetben átkristályosítással tovább dúsítjuk.
12. Eljárás epothilone-ok előállítására, azzal jellemezve, hogy
a) az epothilone-származékokat dúsítjuk az ezen vegyületek biotechnológiai előállítására szolgáló tápközegben, amely tápközeg a vegyületek termelésére alkalmas mikroorganizmust, továbbá vizet és más szokásos tápközeg-alkotórészeket tartalmaz, így ciklodextrint vagy ciklodextrinszármazékot, vagy e vegyületek közül kettőt vagy többet tartalmazó elegyet adunk a tápközeghez; és
b) az epothilone-származékokat elkülönítjük, azzal jellemezve, hogy az elkülönítést kromatográfiás eljárással fordított fázisú oszlopon végezzük, rövid szénláncú alkil-cianidot tartalmazó eluens alkalmazásával, mimellett a kromatográfiás oszlop töltete szénhidrogénláncokat és az eluens egy rövid szénláncú alkilnitrilt tartalmaz.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CH39698 | 1998-02-19 | ||
| CH100798 | 1998-05-05 | ||
| PCT/EP1999/001025 WO1999042602A2 (en) | 1998-02-19 | 1999-02-17 | Fermentative preparation process for cytostatics and crystal forms thereof |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HUP0100855A2 HUP0100855A2 (hu) | 2001-06-28 |
| HUP0100855A3 HUP0100855A3 (en) | 2005-05-30 |
| HU225851B1 true HU225851B1 (en) | 2007-11-28 |
Family
ID=25684443
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU0100855A HU225851B1 (en) | 1998-02-19 | 1999-02-17 | Fermentative preparation process for epothilone cytostatics |
Country Status (25)
| Country | Link |
|---|---|
| US (8) | US6194181B1 (hu) |
| EP (2) | EP1054994B1 (hu) |
| JP (3) | JP3681109B2 (hu) |
| KR (4) | KR100595774B1 (hu) |
| CN (2) | CN1229502C (hu) |
| AT (1) | ATE282710T1 (hu) |
| AU (1) | AU746294B2 (hu) |
| BR (1) | BR9908119A (hu) |
| CA (1) | CA2318818A1 (hu) |
| CZ (1) | CZ301517B6 (hu) |
| DE (1) | DE69921966T2 (hu) |
| DK (1) | DK1054994T3 (hu) |
| ES (1) | ES2233028T3 (hu) |
| HK (1) | HK1034100A1 (hu) |
| HU (1) | HU225851B1 (hu) |
| IL (4) | IL137691A0 (hu) |
| NO (4) | NO322588B1 (hu) |
| NZ (2) | NZ506138A (hu) |
| PL (2) | PL404926A1 (hu) |
| PT (1) | PT1054994E (hu) |
| RU (1) | RU2268306C2 (hu) |
| SI (1) | SI1054994T1 (hu) |
| SK (3) | SK288058B6 (hu) |
| TR (2) | TR200002431T2 (hu) |
| WO (1) | WO1999042602A2 (hu) |
Families Citing this family (124)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| PT873341E (pt) | 1995-11-17 | 2004-02-27 | Biotechnolog Forschung Mbh Gbf | Derivados de epotilona preparacao e utilizacao |
| ATE267197T1 (de) * | 1996-11-18 | 2004-06-15 | Biotechnolog Forschung Gmbh | Epothilon d, dessen herstellung und dessen verwendung als cytostatisches mittel bzw. als pflanzenschutzmittel |
| US20050043376A1 (en) * | 1996-12-03 | 2005-02-24 | Danishefsky Samuel J. | Synthesis of epothilones, intermediates thereto, analogues and uses thereof |
| US6204388B1 (en) * | 1996-12-03 | 2001-03-20 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | Synthesis of epothilones, intermediates thereto and analogues thereof |
| DE69734362T2 (de) | 1996-12-03 | 2006-07-20 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | Synthese von epothilonen, zwischenprodukte dazu, analoga und verwendungen davon |
| US6605599B1 (en) * | 1997-07-08 | 2003-08-12 | Bristol-Myers Squibb Company | Epothilone derivatives |
| US6365749B1 (en) | 1997-12-04 | 2002-04-02 | Bristol-Myers Squibb Company | Process for the preparation of ring-opened epothilone intermediates which are useful for the preparation of epothilone analogs |
| US6194181B1 (en) * | 1998-02-19 | 2001-02-27 | Novartis Ag | Fermentative preparation process for and crystal forms of cytostatics |
| FR2775187B1 (fr) * | 1998-02-25 | 2003-02-21 | Novartis Ag | Utilisation de l'epothilone b pour la fabrication d'une preparation pharmaceutique antiproliferative et d'une composition comprenant l'epothilone b comme agent antiproliferatif in vivo |
| US6498257B1 (en) | 1998-04-21 | 2002-12-24 | Bristol-Myers Squibb Company | 2,3-olefinic epothilone derivatives |
| US6380395B1 (en) | 1998-04-21 | 2002-04-30 | Bristol-Myers Squibb Company | 12, 13-cyclopropane epothilone derivatives |
| JP4662635B2 (ja) | 1998-11-20 | 2011-03-30 | コーサン バイオサイエンシーズ， インコーポレイテッド | エポチロンおよびエポチロン誘導体を生成するための組換え方法および材料 |
| US6410301B1 (en) | 1998-11-20 | 2002-06-25 | Kosan Biosciences, Inc. | Myxococcus host cells for the production of epothilones |
| US6518421B1 (en) | 2000-03-20 | 2003-02-11 | Bristol-Myers Squibb Company | Process for the preparation of epothilone analogs |
| US6593115B2 (en) * | 2000-03-24 | 2003-07-15 | Bristol-Myers Squibb Co. | Preparation of epothilone intermediates |
| US6589968B2 (en) | 2001-02-13 | 2003-07-08 | Kosan Biosciences, Inc. | Epothilone compounds and methods for making and using the same |
| KR20070092334A (ko) * | 2000-04-28 | 2007-09-12 | 코산 바이오사이언시즈, 인코포레이티드 | 폴리케타이드의 제조방법 |
| US6998256B2 (en) | 2000-04-28 | 2006-02-14 | Kosan Biosciences, Inc. | Methods of obtaining epothilone D using crystallization and /or by the culture of cells in the presence of methyl oleate |
| UA75365C2 (en) * | 2000-08-16 | 2006-04-17 | Bristol Myers Squibb Co | Epothilone analog polymorph modifications, a method for obtaining thereof (variants), a pharmaceutical composition based thereon |
| US6989450B2 (en) | 2000-10-13 | 2006-01-24 | The University Of Mississippi | Synthesis of epothilones and related analogs |
| GB0029895D0 (en) * | 2000-12-07 | 2001-01-24 | Novartis Ag | Organic compounds |
| IL156580A0 (en) * | 2001-01-25 | 2004-01-04 | Bristol Myers Squibb Co | A method for formulating an epothilone analog for parenteral use and pharmaceutical preparations including an epothilone analog |
| EP1353668B1 (en) | 2001-01-25 | 2008-03-19 | Bristol-Myers Squibb Company | Processes for the preparation of pharmaceutical preparations containing epothilone analogues for the treatment of cancer |
| WO2002058699A1 (en) * | 2001-01-25 | 2002-08-01 | Bristol-Myers Squibb Company | Pharmaceutical forms of epothilones for oral administration |
| US6893859B2 (en) | 2001-02-13 | 2005-05-17 | Kosan Biosciences, Inc. | Epothilone derivatives and methods for making and using the same |
| CN1774253A (zh) | 2001-02-20 | 2006-05-17 | 布里斯托尔-迈尔斯斯奎布公司 | 用环氧丙酯酮衍生物治疗顽固性肿瘤 |
| JP2004522771A (ja) | 2001-02-20 | 2004-07-29 | ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニー | 治療抵抗性腫瘍の処置用エポチロン誘導体 |
| ES2384789T3 (es) | 2001-03-14 | 2012-07-12 | Bristol-Myers Squibb Company | Combinación de un análogo de epotilona y agentes quimioterapéuticos para el tratamiento de enfermedades proliferativas |
| CA2449077A1 (en) * | 2001-06-01 | 2002-12-12 | Gregory D. Vite | Epothilone derivatives |
| TWI315982B (en) | 2001-07-19 | 2009-10-21 | Novartis Ag | Combinations comprising epothilones and pharmaceutical uses thereof |
| TWI287986B (en) * | 2001-12-13 | 2007-10-11 | Novartis Ag | Use of Epothilones for the treatment of the carcinoid syndrome |
| CN1615136A (zh) | 2002-01-14 | 2005-05-11 | 诺瓦提斯公司 | 包含埃坡霉素和抗代谢物的组合 |
| TW200303202A (en) * | 2002-02-15 | 2003-09-01 | Bristol Myers Squibb Co | Method of preparation of 21-amino epothilone derivatives |
| AU2003212457A1 (en) * | 2002-03-01 | 2003-09-16 | University Of Notre Dame | Derivatives of epothilone b and d and synthesis thereof |
| WO2003077903A1 (en) * | 2002-03-12 | 2003-09-25 | Bristol-Myers Squibb Company | C12-cyano epothilone derivatives |
| TW200403994A (en) * | 2002-04-04 | 2004-03-16 | Bristol Myers Squibb Co | Oral administration of EPOTHILONES |
| DE60328772D1 (de) * | 2002-05-01 | 2009-09-24 | Novartis Ag | Epothilonderivat zur behandlung von hepatoma und anderen krebserkrankungen |
| TW200400191A (en) * | 2002-05-15 | 2004-01-01 | Bristol Myers Squibb Co | Pharmaceutical compositions and methods of using C-21 modified epothilone derivatives |
| AU2003296878A1 (en) * | 2002-05-20 | 2004-12-13 | Kosan Biosciences, Inc. | Methods to administer epothilone d |
| AU2003243561A1 (en) * | 2002-06-14 | 2003-12-31 | Bristol-Myers Squibb Company | Combination of epothilone analogs and chemotherapeutic agents for the treatment of proliferative diseases |
| US6921769B2 (en) | 2002-08-23 | 2005-07-26 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | Synthesis of epothilones, intermediates thereto and analogues thereof |
| DK1767535T3 (da) | 2002-08-23 | 2010-04-12 | Sloan Kettering Inst Cancer | Syntese af epothiloner, mellemprodukter deraf, analoge og deres anvendelse |
| US7649006B2 (en) | 2002-08-23 | 2010-01-19 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | Synthesis of epothilones, intermediates thereto and analogues thereof |
| KR100606016B1 (ko) * | 2002-09-13 | 2006-07-26 | 삼성전자주식회사 | 이동 통신시스템에서 양방향 데이터 서비스 제공 방법 |
| KR20050053681A (ko) | 2002-09-23 | 2005-06-08 | 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 | 에포틸론 ｂ의 제조, 분리 및 정제 방법, 및 에포틸론 ｂ의ｘ-선 결정 구조 |
| EP1551425A4 (en) * | 2002-10-09 | 2006-09-20 | Kosan Biosciences Inc | THERAPEUTIC FORMULATIONS |
| EP1670487A4 (en) * | 2003-10-09 | 2008-05-21 | Kosan Biosciences Inc | THERAPEUTIC FORMULATIONS |
| RU2358729C2 (ru) * | 2003-10-09 | 2009-06-20 | Козан Байосайенсиз, Инк. | Терапевтические композиции |
| DK2253614T3 (da) | 2004-04-07 | 2013-01-07 | Novartis Ag | IAP-inhibitorer |
| US20060121511A1 (en) | 2004-11-30 | 2006-06-08 | Hyerim Lee | Biomarkers and methods for determining sensitivity to microtubule-stabilizing agents |
| GB0510390D0 (en) | 2005-05-20 | 2005-06-29 | Novartis Ag | Organic compounds |
| JP2009510073A (ja) | 2005-09-27 | 2009-03-12 | ノバルティス アクチエンゲゼルシャフト | カルボキシアミン化合物およびその使用方法 |
| CN1312286C (zh) * | 2005-10-19 | 2007-04-25 | 华南理工大学 | 一种利用纤维堆囊菌高效生产埃博霉素的方法 |
| NO20220050A1 (no) | 2005-11-21 | 2008-08-12 | Novartis Ag | Neuroendokrin tumorbehandling |
| GB0605120D0 (en) | 2006-03-14 | 2006-04-26 | Novartis Ag | Organic Compounds |
| JP2009532503A (ja) | 2006-04-05 | 2009-09-10 | ノバルティス アクチエンゲゼルシャフト | 癌を処置するための治療剤の組合せ |
| CN102861338A (zh) | 2006-04-05 | 2013-01-09 | 诺瓦提斯公司 | 用于治疗癌症、包含bcr-abl/c-kit/pdgf-r tk抑制剂的组合 |
| AU2007247112B2 (en) | 2006-05-09 | 2010-08-26 | Novartis Ag | Combination comprising an iron chelator and an anti-neoplastic agent and use thereof |
| CA2658475A1 (en) * | 2006-08-16 | 2008-02-21 | Novartis Ag | Organic compounds |
| WO2008037477A1 (en) | 2006-09-29 | 2008-04-03 | Novartis Ag | Pyrazolopyrimidines as p13k lipid kinase inhibitors |
| US8463852B2 (en) * | 2006-10-06 | 2013-06-11 | Oracle International Corporation | Groupware portlets for integrating a portal with groupware systems |
| WO2008100985A2 (en) | 2007-02-15 | 2008-08-21 | Novartis Ag | Combination of lbh589 with other therapeutic agents for treating cancer |
| EP2241566B1 (en) * | 2008-02-01 | 2013-08-21 | Zhejiang Hisun Pharmaceutical Co. Ltd. | A method for the separation and purification of epothilones |
| PT2268612E (pt) | 2008-03-24 | 2014-11-13 | Novartis Ag | Inibidores de metaloprotease de matriz à base de arilsulfonamidas |
| PL2260020T3 (pl) | 2008-03-26 | 2015-01-30 | Novartis Ag | Hydroksamianowe inhibitory deacetylaz B |
| CA2744937C (en) * | 2008-11-28 | 2017-02-28 | Novartis Ag | Pharmaceutical combination comprising a hsp 90 inhibitor and a mtor inhibitor |
| WO2010083617A1 (en) | 2009-01-21 | 2010-07-29 | Oncalis Ag | Pyrazolopyrimidines as protein kinase inhibitors |
| SI2391366T1 (sl) | 2009-01-29 | 2013-01-31 | Novartis Ag | Substituirani benzimidazoli za zdravljenje astrocitomov |
| UA105794C2 (uk) | 2009-06-26 | 2014-06-25 | Новартіс Аг | 1,3-ДИЗАМІЩЕНІ ПОХІДНІ ІМІДАЗОЛІДИН-2-ОНУ ЯК ІНГІБІТОРИ Cyp17 |
| US8389526B2 (en) | 2009-08-07 | 2013-03-05 | Novartis Ag | 3-heteroarylmethyl-imidazo[1,2-b]pyridazin-6-yl derivatives |
| WO2011018454A1 (en) | 2009-08-12 | 2011-02-17 | Novartis Ag | Heterocyclic hydrazone compounds and their uses to treat cancer and inflammation |
| IN2012DN01453A (hu) | 2009-08-20 | 2015-06-05 | Novartis Ag | |
| BR112012008075A2 (pt) | 2009-08-26 | 2016-03-01 | Novartis Ag | compostos de heteroarila tetrassubstituídos e seu uso como moduladores de mdm2 e/ou mdm4 |
| MX2012005293A (es) | 2009-11-04 | 2012-06-19 | Novartis Ag | Derivados de sulfonamida heterociclicos utiles como inhibidores de mek. |
| CN102648188A (zh) | 2009-12-08 | 2012-08-22 | 诺瓦提斯公司 | 杂环磺酰胺衍生物 |
| CU24130B1 (es) | 2009-12-22 | 2015-09-29 | Novartis Ag | Isoquinolinonas y quinazolinonas sustituidas |
| US8440693B2 (en) | 2009-12-22 | 2013-05-14 | Novartis Ag | Substituted isoquinolinones and quinazolinones |
| JP5881254B2 (ja) | 2010-05-18 | 2016-03-09 | セルリアン・ファーマ・インコーポレイテッド | 自己免疫疾患およびその他の疾患の治療のための組成物および方法 |
| UA112517C2 (uk) | 2010-07-06 | 2016-09-26 | Новартіс Аг | Тетрагідропіридопіримідинові похідні |
| EP2627648A1 (en) | 2010-09-16 | 2013-08-21 | Novartis AG | 17aHYDROXYLASE/C17,20-LYASE INHIBITORS |
| WO2012107500A1 (en) | 2011-02-10 | 2012-08-16 | Novartis Ag | [1, 2, 4] triazolo [4, 3 -b] pyridazine compounds as inhibitors of the c-met tyrosine kinase |
| MX359399B (es) | 2011-04-28 | 2018-09-27 | Novartis Ag | Inhibidores de 17alfa-hidroxilasa/c17-20-liasa. |
| KR20140034898A (ko) | 2011-06-09 | 2014-03-20 | 노파르티스 아게 | 헤테로시클릭 술폰아미드 유도체 |
| US8859535B2 (en) | 2011-06-20 | 2014-10-14 | Novartis Ag | Hydroxy substituted isoquinolinone derivatives |
| EP2721007B1 (en) | 2011-06-20 | 2015-04-29 | Novartis AG | Cyclohexyl isoquinolinone compounds |
| CA2840315A1 (en) | 2011-06-27 | 2013-01-03 | Novartis Ag | Solid forms and salts of tetrahydro-pyrido-pyrimidine derivatives |
| ES2691650T3 (es) | 2011-09-15 | 2018-11-28 | Novartis Ag | 3-(quinolin-6-il-tio)-[1,2,4]-triazolo-[4,3-a]-piridinas 6-sustituidas como inhibidores de tirosina quinasa c-Met |
| WO2013080141A1 (en) | 2011-11-29 | 2013-06-06 | Novartis Ag | Pyrazolopyrrolidine compounds |
| EP2794594A1 (en) | 2011-12-22 | 2014-10-29 | Novartis AG | Quinoline derivatives |
| JP5903499B2 (ja) | 2011-12-22 | 2016-04-13 | ノバルティス アーゲー | ジヒドロ−ベンゾ−オキサジンおよびジヒドロ−ピリド−オキサジン誘導体 |
| CA2859862A1 (en) | 2011-12-23 | 2013-06-27 | Novartis Ag | Compounds for inhibiting the interaction of bcl2 with binding partners |
| CN104136429A (zh) | 2011-12-23 | 2014-11-05 | 诺华股份有限公司 | 用于抑制bcl2与结合配偶体相互作用的化合物 |
| MX2014007725A (es) | 2011-12-23 | 2015-01-12 | Novartis Ag | Compuestos para inhibir la interaccion de bcl2 con los componentes de enlace. |
| CN104125954A (zh) | 2011-12-23 | 2014-10-29 | 诺华股份有限公司 | 用于抑制bcl2与结合配偶体相互作用的化合物 |
| AU2012355624A1 (en) | 2011-12-23 | 2014-07-17 | Novartis Ag | Compounds for inhibiting the interaction of BCL2 with binding partners |
| UY34591A (es) | 2012-01-26 | 2013-09-02 | Novartis Ag | Compuestos de imidazopirrolidinona |
| DK2861579T5 (da) | 2012-05-15 | 2022-10-24 | Novartis Ag | Benzamidderivater til at hæmme aktiviteten af ABL1, ABL2 og BCR-ABL1 |
| AU2013261128B2 (en) | 2012-05-15 | 2015-11-12 | Novartis Ag | Benzamide derivatives for inhibiting the activity of ABL1, ABL2 and BCR-ABL1 |
| BR112014027244A2 (pt) | 2012-05-15 | 2017-06-27 | Novartis Ag | derivados de benzamida para inibição da atividade de abl1, abl2 e bcr-abl1 |
| CA2870339C (en) | 2012-05-15 | 2020-06-02 | Novartis Ag | Compounds and compositions for inhibiting the activity of abl1, abl2 and bcr-abl1 |
| JP6171003B2 (ja) | 2012-05-24 | 2017-07-26 | ノバルティス アーゲー | ピロロピロリジノン化合物 |
| AU2013274101B2 (en) | 2012-06-15 | 2017-09-07 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Compositions for treating cancer and methods for making the same |
| US20150203453A1 (en) | 2012-10-02 | 2015-07-23 | Epitherapeutics Aps | Inhibitors of histone demethylases |
| TW201422625A (zh) | 2012-11-26 | 2014-06-16 | Novartis Ag | 二氫－吡啶并－□衍生物之固體形式 |
| CN103910742B (zh) * | 2013-01-07 | 2016-07-13 | 浙江海正药业股份有限公司 | 一种制备埃博霉素b无定形粉末的方法 |
| WO2014115077A1 (en) | 2013-01-22 | 2014-07-31 | Novartis Ag | Substituted purinone compounds |
| US9556180B2 (en) | 2013-01-22 | 2017-01-31 | Novartis Ag | Pyrazolo[3,4-d]pyrimidinone compounds as inhibitors of the P53/MDM2 interaction |
| WO2014128612A1 (en) | 2013-02-20 | 2014-08-28 | Novartis Ag | Quinazolin-4-one derivatives |
| CN105263906B (zh) | 2013-02-27 | 2018-11-23 | 吉利德科学公司 | 组蛋白脱甲基酶的抑制剂 |
| US20150018376A1 (en) | 2013-05-17 | 2015-01-15 | Novartis Ag | Pyrimidin-4-yl)oxy)-1h-indole-1-carboxamide derivatives and use thereof |
| CN103275098B (zh) * | 2013-06-07 | 2015-07-08 | 江苏迪沃特仪器设备科技有限公司 | 用动态轴向压缩柱分离纯化埃博霉素的方法 |
| UY35675A (es) | 2013-07-24 | 2015-02-27 | Novartis Ag | Derivados sustituidos de quinazolin-4-ona |
| US9227969B2 (en) | 2013-08-14 | 2016-01-05 | Novartis Ag | Compounds and compositions as inhibitors of MEK |
| WO2015022663A1 (en) | 2013-08-14 | 2015-02-19 | Novartis Ag | Compounds and compositions as inhibitors of mek |
| WO2015022664A1 (en) | 2013-08-14 | 2015-02-19 | Novartis Ag | Compounds and compositions as inhibitors of mek |
| MY184292A (en) | 2013-09-22 | 2021-03-30 | Sunshine Lake Pharma Co Ltd | Substituted aminopyrimidine compounds and methods of use |
| WO2015148867A1 (en) | 2014-03-28 | 2015-10-01 | Calitor Sciences, Llc | Substituted heteroaryl compounds and methods of use |
| JP2017512804A (ja) | 2014-03-31 | 2017-05-25 | ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド | ヒストン脱メチル化酵素の阻害剤 |
| BR112016022499A2 (pt) | 2014-04-03 | 2017-08-15 | Invictus Oncology Pvt Ltd | Produtos terapêuticos combinatórios supramoleculares |
| BR112017003442A2 (pt) | 2014-08-27 | 2017-11-28 | Gilead Sciences Inc | compostos e métodos para inibir histona desmetilases |
| EP3347097B1 (en) | 2015-09-11 | 2021-02-24 | Sunshine Lake Pharma Co., Ltd. | Substituted aminopyrimidine derivatives as modulators of the kinases jak, flt3 and aurora |
| WO2019099311A1 (en) | 2017-11-19 | 2019-05-23 | Sunshine Lake Pharma Co., Ltd. | Substituted heteroaryl compounds and methods of use |
| EP3740468A4 (en) | 2018-01-20 | 2021-10-06 | Sunshine Lake Pharma Co., Ltd. | SUBSTITUTED AMINOPYRIMIDINE COMPOUNDS AND METHOD OF USING |
| FR3087650B1 (fr) | 2018-10-31 | 2021-01-29 | Bio Even | Flavine adenine dinucleotide (fad) pour son utilisation pour la prevention et/ou le traitement de cancer |
Family Cites Families (51)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3459731A (en) | 1966-12-16 | 1969-08-05 | Corn Products Co | Cyclodextrin polyethers and their production |
| HU181703B (en) | 1980-05-09 | 1983-11-28 | Chinoin Gyogyszer Es Vegyeszet | Process for producing aqueus solutuins of water insoluble or hardly soluble vitamines, steroides, localanesthetics, prostanoides and non-steroid and antiphlogistic agents |
| US4383992A (en) | 1982-02-08 | 1983-05-17 | Lipari John M | Water-soluble steroid compounds |
| JPS58179496A (ja) | 1982-04-12 | 1983-10-20 | Takeda Chem Ind Ltd | ランカシジンの改良製造法 |
| DE3372705D1 (en) | 1982-04-30 | 1987-09-03 | Takeda Chemical Industries Ltd | Pharmaceutical composition and its use |
| US4659696A (en) | 1982-04-30 | 1987-04-21 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Pharmaceutical composition and its nasal or vaginal use |
| HU191101B (en) | 1983-02-14 | 1987-01-28 | Chinoin Gyogyszer Es Vegyeszeti Termekek Gyara Rt,Hu | Process for preparing water-soluble cyclodextrin polymers substituted with ionic groups |
| DE3317064A1 (de) | 1983-05-10 | 1984-11-15 | Consortium für elektrochemische Industrie GmbH, 8000 München | Verfahren zur herstellung von cyclooctaamylose |
| DE3346123A1 (de) | 1983-12-21 | 1985-06-27 | Janssen Pharmaceutica, N.V., Beerse | Pharmazeutische praeparate von in wasser schwerloeslichen oder instabilen arzneistoffen und verfahren zu ihrer herstellung |
| GB8506792D0 (en) | 1985-03-15 | 1985-04-17 | Janssen Pharmaceutica Nv | Derivatives of y-cyclodextrin |
| EP0216731B1 (de) * | 1985-09-13 | 1990-03-14 | Gesellschaft für Biotechnologische Forschung mbH (GBF) | Makrozyklische Antibiotika |
| US4920214A (en) | 1986-04-16 | 1990-04-24 | American Maize-Products Company | Process for producing modified cyclodextrins |
| NZ224497A (en) | 1987-05-18 | 1990-04-26 | Janssen Pharmaceutica Nv | Pharmaceutical composition comprising flunarizine |
| NZ225045A (en) | 1987-07-01 | 1990-06-26 | Janssen Pharmaceutica Nv | Antiviral pharmaceutical compositions containing cyclodextrin and an antiviral agent |
| MY104343A (en) | 1987-11-23 | 1994-03-31 | Janssen Pharmaceutica Nv | Novel pyridizinamine deravatives |
| EP0465535B1 (en) | 1989-04-03 | 1998-06-03 | Janssen Pharmaceutica N.V. | Regioselective substitutions in cyclodextrins |
| GB8910069D0 (en) | 1989-05-03 | 1989-06-21 | Janssen Pharmaceutica Nv | Method of topically treating acne vulgaris |
| EP0455789B1 (en) | 1989-11-22 | 1994-03-16 | Janssen Pharmaceutica N.V. | Method of preventing or limiting reperfusion damage |
| GB9001987D0 (en) | 1990-01-29 | 1990-03-28 | Janssen Pharmaceutica Nv | Improved cyclodextrin based erythropietin formulation |
| IL100856A (en) | 1991-02-15 | 1998-03-10 | Janssen Pharmaceutica Nv | History of carboxyl (alkyloxyalkyl of cyclodextrins, their preparation and pharmaceutical preparations containing them |
| CA2061891A1 (en) | 1991-03-08 | 1992-09-09 | Robert F. Van Ginckel | Flunarizine containing anti-neoplastic compositions |
| DE4138042C2 (de) | 1991-11-19 | 1993-10-14 | Biotechnolog Forschung Gmbh | Epothilone, deren Herstellungsverfahren sowie diese Verbindungen enthaltende Mittel |
| DE4207092A1 (de) * | 1992-03-06 | 1993-09-16 | Schott Glaswerke | Endoskop |
| DE4207922A1 (de) | 1992-03-13 | 1993-09-23 | Pharmatech Gmbh | Wasserloesliche einschlussverbindungen und verfahren zu deren herstellung |
| ES2158859T3 (es) | 1992-03-18 | 2001-09-16 | Janssen Pharmaceutica Nv | Estereoisomeros itraconazol y saperconazol. |
| IL105553A (en) | 1992-05-06 | 1998-01-04 | Janssen Pharmaceutica Inc | Solid dosage forms consisting of a porous network of matrix that releases a substance that dissipates rapidly in water |
| CA2086874E (en) | 1992-08-03 | 2000-01-04 | Renzo Mauro Canetta | Methods for administration of taxol |
| US5395951A (en) * | 1992-11-17 | 1995-03-07 | Council Of Scientific & Industrial Research | Triterpene derivatives of azadirachtin having insect antifeedant and growth inhibitory activity and a process for extracting such compounds from the neem plant |
| CA2092271C (en) | 1993-03-09 | 2009-10-13 | Eddie Reed | Use of g-csf for treating taxol side-effects |
| HU213200B (en) | 1993-05-12 | 1997-03-28 | Chinoin Gyogyszer Es Vegyeszet | The cyclodextrin or cyclodextrin derivative cluster complexes of taxol, taxotere, or taxus, pharmaceutical preparations containing them and process for their production |
| PH31594A (en) | 1993-09-30 | 1998-11-03 | Janssen Pharmaceutica Nv | Oral formulations on an antifungal. |
| US5565478A (en) | 1994-03-14 | 1996-10-15 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health & Human Services | Combination therapy using signal transduction inhibitors with paclitaxel and other taxane analogs |
| TW438601B (en) | 1994-05-18 | 2001-06-07 | Janssen Pharmaceutica Nv | New mucoadhesive emulsion compositions and a process for the preparation thereof |
| WO1996014090A1 (en) | 1994-11-07 | 1996-05-17 | Janssen Pharmaceutica N.V. | Compositions comprising carbazoles and cyclodextrins |
| PT873341E (pt) | 1995-11-17 | 2004-02-27 | Biotechnolog Forschung Mbh Gbf | Derivados de epotilona preparacao e utilizacao |
| IL123654A (en) | 1995-11-23 | 2001-08-08 | Janssen Pharmaceutica Nv | Process for the preparation of solid mixtures of cyclodextrins and pharmaceutical preparations containing such solid mixtures |
| JP3865436B2 (ja) | 1996-07-11 | 2007-01-10 | 塩水港精糖株式会社 | 分岐シクロデキストリンの製造方法 |
| NZ334821A (en) | 1996-08-30 | 2000-12-22 | Novartis Ag | Method for producing epothilones |
| ATE267197T1 (de) | 1996-11-18 | 2004-06-15 | Biotechnolog Forschung Gmbh | Epothilon d, dessen herstellung und dessen verwendung als cytostatisches mittel bzw. als pflanzenschutzmittel |
| DE69734362T2 (de) * | 1996-12-03 | 2006-07-20 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | Synthese von epothilonen, zwischenprodukte dazu, analoga und verwendungen davon |
| US6441186B1 (en) | 1996-12-13 | 2002-08-27 | The Scripps Research Institute | Epothilone analogs |
| US6605599B1 (en) | 1997-07-08 | 2003-08-12 | Bristol-Myers Squibb Company | Epothilone derivatives |
| AU9340998A (en) | 1997-08-09 | 1999-03-01 | Schering Aktiengesellschaft | New epothilone derivatives, method for producing same and their pharmaceutical use |
| US6242489B1 (en) * | 1997-09-25 | 2001-06-05 | Ecological Technologies Corporation | Malodorant compositions |
| US6194181B1 (en) * | 1998-02-19 | 2001-02-27 | Novartis Ag | Fermentative preparation process for and crystal forms of cytostatics |
| DE19826988A1 (de) | 1998-06-18 | 1999-12-23 | Biotechnolog Forschung Gmbh | Epothilon-Nebenkomponenten |
| EE04852B1 (et) * | 1999-02-22 | 2007-06-15 | Gesellschaft Fuer Biotechnologische Forschung Mbh | C-21 modifitseeritud epotioloonid, nende valmistamise meetod ning kasutamine ja ravimkoostise kasutamine vähkkasvajate või teiste proliferatiivsete haiguste ravimisel |
| US6291684B1 (en) * | 1999-03-29 | 2001-09-18 | Bristol-Myers Squibb Company | Process for the preparation of aziridinyl epothilones from oxiranyl epothilones |
| UA75365C2 (en) * | 2000-08-16 | 2006-04-17 | Bristol Myers Squibb Co | Epothilone analog polymorph modifications, a method for obtaining thereof (variants), a pharmaceutical composition based thereon |
| GB0029895D0 (en) * | 2000-12-07 | 2001-01-24 | Novartis Ag | Organic compounds |
| GB0230024D0 (en) * | 2002-12-23 | 2003-01-29 | Novartis Ag | Organic compounds |
-
1999
- 1999-02-12 US US09/248,910 patent/US6194181B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-02-17 SK SK5029-2009A patent/SK288058B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1999-02-17 NZ NZ506138A patent/NZ506138A/en not_active IP Right Cessation
- 1999-02-17 AU AU30287/99A patent/AU746294B2/en not_active Ceased
- 1999-02-17 JP JP2000532542A patent/JP3681109B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1999-02-17 RU RU2000124168/13A patent/RU2268306C2/ru not_active IP Right Cessation
- 1999-02-17 BR BR9908119-9A patent/BR9908119A/pt active Search and Examination
- 1999-02-17 EP EP99911678A patent/EP1054994B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-02-17 CA CA002318818A patent/CA2318818A1/en not_active Abandoned
- 1999-02-17 HU HU0100855A patent/HU225851B1/hu not_active IP Right Cessation
- 1999-02-17 KR KR1020007009107A patent/KR100595774B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1999-02-17 TR TR2000/02431T patent/TR200002431T2/xx unknown
- 1999-02-17 KR KR1020087017482A patent/KR20080070781A/ko not_active Application Discontinuation
- 1999-02-17 KR KR1020067004228A patent/KR100873526B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1999-02-17 IL IL13769199A patent/IL137691A0/xx active IP Right Grant
- 1999-02-17 DK DK99911678T patent/DK1054994T3/da active
- 1999-02-17 DE DE69921966T patent/DE69921966T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1999-02-17 NZ NZ525622A patent/NZ525622A/en not_active IP Right Cessation
- 1999-02-17 WO PCT/EP1999/001025 patent/WO1999042602A2/en active Application Filing
- 1999-02-17 SK SK1240-2000A patent/SK286517B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1999-02-17 PT PT99911678T patent/PT1054994E/pt unknown
- 1999-02-17 KR KR1020077011230A patent/KR20070058021A/ko not_active Application Discontinuation
- 1999-02-17 ES ES99911678T patent/ES2233028T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1999-02-17 PL PL404926A patent/PL404926A1/pl unknown
- 1999-02-17 TR TR2001/01634T patent/TR200101634T2/xx unknown
- 1999-02-17 SK SK5014-2008A patent/SK287677B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1999-02-17 EP EP04002632A patent/EP1428826A3/en not_active Withdrawn
- 1999-02-17 AT AT99911678T patent/ATE282710T1/de active
- 1999-02-17 SI SI9930738T patent/SI1054994T1/xx unknown
- 1999-02-17 CZ CZ20002994A patent/CZ301517B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1999-02-17 CN CNB998031216A patent/CN1229502C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1999-02-17 PL PL342423A patent/PL196787B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1999-02-17 CN CNB200410034240XA patent/CN1286839C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1999-02-17 IL IL15963199A patent/IL159631A0/xx active IP Right Grant
-
2000
- 2000-08-03 IL IL137691A patent/IL137691A/en not_active IP Right Cessation
- 2000-08-17 NO NO20004114A patent/NO322588B1/no not_active IP Right Cessation
- 2000-09-07 US US09/656,954 patent/US6380227B1/en not_active Expired - Fee Related
-
2001
- 2001-04-25 HK HK01102978A patent/HK1034100A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2002
- 2002-01-29 US US10/059,587 patent/US6656711B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2003
- 2003-01-08 US US10/338,336 patent/US20030194787A1/en not_active Abandoned
- 2003-06-12 US US10/459,762 patent/US7101702B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2003-12-29 IL IL159631A patent/IL159631A/en not_active IP Right Cessation
-
2004
- 2004-01-08 US US10/754,661 patent/US20040142990A1/en not_active Abandoned
- 2004-09-30 JP JP2004287797A patent/JP2005068156A/ja active Pending
-
2005
- 2005-04-26 NO NO20052034A patent/NO321596B1/no not_active IP Right Cessation
-
2006
- 2006-04-20 NO NO20061736A patent/NO20061736L/no unknown
- 2006-04-20 NO NO20061735A patent/NO329063B1/no not_active IP Right Cessation
-
2007
- 2007-02-05 US US11/671,357 patent/US20070197611A1/en not_active Abandoned
-
2009
- 2009-03-04 US US12/397,620 patent/US20090326239A1/en not_active Abandoned
-
2010
- 2010-01-27 JP JP2010015022A patent/JP2010099089A/ja active Pending
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| HU225851B1 (en) | Fermentative preparation process for epothilone cytostatics | |
| EP2280014B1 (en) | Methods for the preparation, isolation and purification of epothilone B | |
| AU2002300841B2 (en) | Fermentative preparation process for cytostatics and crystal forms thereof | |
| MXPA00008115A (en) | Fermentative preparation process for cytostatics and crystal forms thereof | |
| JP2005247725A (ja) | 新規抗生物質ａ−８４８３０ａ |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Lapse of definitive patent protection due to non-payment of fees |