KR20190025055A - 아릴- 또는 헤테로아릴-치환된 벤젠 화합물 - Google Patents

아릴- 또는 헤테로아릴-치환된 벤젠 화합물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 아릴- 또는 헤테로아릴-치환된 벤젠 화합물에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 이들 화합물을 함유하는 약학 조성물, 및 이들 화합물 및 약학 조성물을 암의 치료가 필요한 대상체에게 투여하여 암을 치료하는 방법에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 연구 또는 다른 비-치료 목적을 위한 이러한 화합물의 용도에 관한 것이다.

Description

아릴- 또는 헤테로아릴-치환된 벤젠 화합물{ARYL- OR HETEROARYL-SUBSTITUTED BENZENE COMPOUNDS}
관련 출원
본원은 2011년 4월 13일자로 출원된 미국 가출원 제61/474,821호 및 2011년 6월 21일자로 출원된 미국 가출원 제61/499,595호(이들 각각의 전체 내용은 전체적으로 본원에 참고로 도입됨)의 우선권 및 이익을 주장한다.
서열목록의 참고도입
2012년 3월 28일자로 생성되었고 크기가 2 KB인, "41478507001WOST25.txt"로 명명된 텍스트 파일의 내용은 전체적으로 본원에 참고로 도입된다.
진핵세포에서, DNA는 히스톤(histone)으로 팩킹되어 염색질(chromatin)을 형성한다. 염색질의 정돈된 구조에서의 변화는 관련된 유전자들의 전사에서의 변경을 초래할 수 있다. 염색질 구조에서의 변화(및 이로 인한 전사의 변화)의 조절은 히스톤, 특히 그들의 N 말단 꼬리에 대한 공유변경에 의해 매개된다. 이들 변경은 유전자 발현에서의 유전가능한 변화를 초래할 수 있으나 DNA 자체의 서열에 영향을 미치지 않기 때문에 종종 후성적(epigenetic) 변경으로서 지칭된다. 아미노산 측쇄의 공유변경(예를 들면, 메틸화, 아세틸화, 인산화 및 유비퀴틴화)은 효소에 의해 매개된다. 히스톤 상의 특정 아미노산 부위에의 메틸 기의 선택적 추가는 히스톤 메틸트랜스퍼라제(HMT)로서 공지된 독특한 효소 패밀리(family)의 작용에 의해 조절된다.
전사 조절 뒤의 생화학적 시스템의 조직화된 수집은 세포 생장 및 분화가 최적으로 진행되게 하기 위해 엄격히 조절되어야 한다. 질환 상태는 이들 조절이 DNA 및 히스톤 변경을 담당하는 효소의 비정상적 발현 및/또는 활성에 의해 파괴될 때 발생된다. 예를 들면, 인간 암에서, 이상조절된 후성적 효소 활성이 암과 관련된 비조절된 세포 증식뿐만 아니라 다른 암 관련 표현형, 예컨대, 향상된 세포 이동 및 침습에도 기여한다는 것을 암시하는 증가하는 일련의 증거가 존재한다. 암 이외에, 대사 질환(예컨대, 당뇨병), 염증 질환(예컨대, 크론병), 신경퇴행성 질환(예컨대, 알쯔하이머병) 및 심혈관 질환을 포함하는 다수의 다른 인간 질환들에서 후성적 효소의 역할에 대한 증가하는 증거가 존재한다. 따라서, 후성적 효소의 비정상적 작용을 선택적으로 조절하는 것은 다양한 질환들의 치료를 가능하게 할 수 있다.
폴리콤(Polycomb) 군(PcG) 및 트라이쏘락스(trithorax) 군(trxG) 단백질은 세포 기억 시스템의 일부인 것으로 공지되어 있다. 예를 들면, 문헌(Francis et al. (2001) Nat Rev Mol Cell Biol 2:409-21) 및 문헌(Simon et al. (2002) Curr Opin Genet Dev 12:210-8)을 참조한다. 일반적으로, PcG 단백질은 "오프(off) 상태"를 유지하는 전사 억제제이고, trxG 단백질은 "온(on) 상태"를 유지하는 전사 활성화제이다. PcG 및 trxG 단백질의 구성원이 고유의 히스톤 메틸트랜스퍼라제(HMTase) 활성을 함유하기 때문에, PcG 및 trxG 단백질은 코어 히스톤의 메틸화를 통해 세포 기억에 참여할 수 있다. 예를 들면, 문헌(Beisel et al. (2002) Nature 419:857-62); 문헌(Cao et al. (2002) Science 298:1039-43); 문헌(Czermin et al. (2002) Cell 111:185-96); 문헌(Kuzmichev et al. (2002) Genes Dev 16:2893-905); 문헌(Milne et al. (2002) Mol Cell 10:1107-17); 문헌(Muller et al. (2002) Cell 111:197-208); 및 문헌(Nakamura et al. (2002) Mol Cell 10:1119-28)을 참조한다.
생화학적 및 유전적 연구는 드로소필라(Drosophila) PcG 단백질이 2종 이상의 상이한 단백질 복합체, 즉 폴리콤 억제 복합체 1(PRC1) 및 ESC-E(Z) 복합체(폴리콤 억제 복합체 2(PRC2)로서도 공지되어 있음)에서 작용한다는 증거를 제공하였다(Otte et al. (2003) Curr Opin Genet Dev 13:448-54). 드로소필라에서의 연구는 ESC-E(Z)/EED-EZH2(즉, PRC2) 복합체가 고유의 히스톤 메틸트랜스퍼라제 활성을 갖는다는 것을 입증하였다. 상이한 군으로 분리된 상기 복합체들의 조성이 약간 상이하지만, 이들은 일반적으로 EED, EZH2, SUZ12 및 RbAp48, 또는 이들의 드라소필라 상동체를 함유한다. 그러나, EED, EZH2 및 SUZ12만을 포함하는 재구성된 복합체는 히스톤 H3의 라이신 27에 대한 히스톤 메틸트랜스퍼라제 활성을 보유한다(미국 특허 제7,563,589호).
PRC2 복합체를 구성하는 다양한 단백질들 중 EZH2(제스트(Zeste) 상동체 2의 인핸서)는 촉매 서브유닛이다. EZH2의 촉매 부위는 트라이쏘락스 군 및 폴리콤 군 둘다의 구성원을 포함하는 여러 염색질 관련 단백질들에서 발견되는 고도로 보존된 서열 모티프인 SET 도메인(Su(var)3-9, 제스트의 인핸서 및 트라이쏘락스를 따서 명명됨) 내에 존재한다. SET 도메인은 H3-K79 메틸트랜스퍼라제 DOT1을 제외한 모든 공지된 히스톤 라이신 메틸트랜스퍼라제의 특징이다.
PRC2 매개 히스톤 H3-K27 메틸화는 Hox 유전자 침묵 이외에 X-불활성화에 참여하는 것으로 밝혀져 있다(Plath et al. (2003) Science 300:131-5; Silva et al. (2003) Dev Cell 4:481-95). PRC2 복합체의 Xi로의 동원 및 히스톤 H3-K27 상에서의 후속 트라이메틸화는 X-불활성화의 초기 단계 동안 일어나고 Xist RNA에 의존한다. 나아가, EZH2 및 이의 관련 히스톤 H3-K27 메틸트랜스퍼라제 활성은 다능성 배반엽상층 세포 및 분화된 영양외배엽을 상이하게 표시하고 다능성 배반엽상층 세포의 후성적 변경 패턴을 유지하는 데에 있어서의 EZH2의 역할과 일치하는 것으로 발견되었고, EZH2의 Cre 매개 결실은 상기 세포들에서 히스톤 H3-K27 메틸화의 상실을 야기한다(Erhardt et al. (2003) Development 130:4235-48). 추가로, 전립선암 및 유방암 세포주 및 조직에서의 연구는 EZH2 및 SUZ12의 수준과 이들 암들의 침습성 사이의 강한 상관관계를 보여주었는데, 이것은 PRC2 복합체의 기능장애가 암에 기여할 수 있다는 것을 암시한다(Bracken et al. (2003) EMBO J 22:5323-35; Kirmizis et al. (2003) Mol Cancer Ther 2:113-21; Kleer et al. (2003) Proc Natl Acad Sci USA 100:11606-11; Varambally et al. (2002) Nature 419:624-9).
최근에, EZH2의 티로신 641의 체세포 돌연변이(Y641C, Y641F, Y641N, Y641S 및 Y641H; 종종 각각 Y646C, Y646F, Y646N, Y646S 및 Y646H로서도 지칭됨)는 여포성 림프종(FL) 및 미만성 거대 B 세포 림프종(DLBCL)의 배중심 B 세포 유사(GCB) 하위형과 관련되어 있다고 보고되었다(Morin et al. (2010) Nat Genet 42:181-5). 모든 경우, 돌연변이체 EZH2 유전자의 발생은 이형접합성 발생인 것으로 발견되었고, 야생형 및 돌연변이체 대립형질 둘다의 발현은 전사체(transcriptome) 서열분석에 의해 프로파일링된 돌연변이체 샘플에서 검출되었다. EZH2의 돌연변이체 형태들 모두가 다중단백질 PRC2 복합체 내로 도입될 수 있었으나, 발생된 복합체가 펩티드성 기질의 H3-K27 등가 잔기의 메틸화를 촉진하는 능력을 결여하였다는 것도 입증되었다. 따라서, EZH2의 Tyr641에서의 질환 관련 변화가 EZH2에 의해 촉진되는 H3-K27 메틸화에 대한 기능의 상실을 야기하였다는 결론이 내려졌다.
한 양태에서, 본 발명은 하기 화학식 I의 아릴- 또는 헤테로아릴-치환된 벤젠 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 에스테르를 특징으로 한다:
[화학식 I]
Figure pat00001
상기 식에서,
X1은 N 또는 CR11이고;
X2는 N 또는 CR13이고;
Z는 NR7R8, OR7, S(O)nR7 또는 CR7R8R14이고, 이때 n은 0, 1 또는 2이고;
R1, R5, R9 및 R10은 각각 독립적으로 H이거나, 할로, 하이드록실, COOH, C(O)O-C1-C6 알킬, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬 및 5원 또는 6원 헤테로아릴로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬이고;
R2, R3 및 R4는 각각 독립적으로 -Q1-T1이고, 이때 Q1은 결합이거나 할로, 시아노, 하이드록실 또는 C1-C6 알콕시로 임의적으로 치환된 C1-C3 알킬 연결기이고, T1은 H, 할로, 하이드록실, COOH, 시아노 또는 RS1이고, 이때 RS1은 C1-C3 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C1-C6 알콕실, C(O)O-C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬, 또는 5원 또는 6원 헤테로아릴이고, RS1은 할로, 하이드록실, 옥소, COOH, C(O)O-C1-C6 알킬, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬 및 5원 또는 6원 헤테로아릴로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환되고;
R6은 C6-C10 아릴, 또는 5원 또는 6원 헤테로아릴이고, 이들 각각은 하나 이상의 -Q2-T2로 임의적으로 치환되고, 이때 Q2는 결합이거나 할로, 시아노, 하이드록실 또는 C1-C6 알콕시로 임의적으로 치환된 C1-C3 알킬 연결기이고, T2는 H, 할로, 시아노, -ORa, -NRaRb, -(NRaRbRc)+A-, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -C(O)NRaRb, -NRbC(O)Ra, -NRbC(O)ORa, -S(O)2Ra, -S(O)2NRaRb 또는 RS2이고, 이때 Ra, Rb 및 Rc는 각각 독립적으로 H 또는 RS3이고, A-는 약학적으로 허용가능한 음이온이고, RS2 및 RS3은 각각 독립적으로 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬, 또는 5원 또는 6원 헤테로아릴이거나, Ra 및 Rb는 이들이 부착된 N 원자와 함께 0개 또는 1개의 추가 헤테로원자를 갖는 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬 고리를 형성하고, RS2, RS3, 및 Ra와 Rb에 의해 형성된 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬 고리 각각은 하나 이상의 -Q3-T3으로 임의적으로 치환되고, 이때 Q3은 결합이거나 할로, 시아노, 하이드록실 또는 C1-C6 알콕시로 각각 임의적으로 치환된 C1-C3 알킬 연결기이고, T3은 할로, 시아노, C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬, 5원 또는 6원 헤테로아릴, ORd, COORd, -S(O)2Rd, -NRdRe 및 -C(O)NRdRe로 구성된 군으로부터 선택되고, 이때 Rd 및 Re는 각각 독립적으로 H 또는 C1-C6 알킬이거나; -Q3-T3은 옥소이거나; 임의의 2개 인접하는 -Q2-T2는 이들이 부착된 원자와 함께 N, O 및 S로부터 선택된 1개 내지 4개의 헤테로원자를 임의적으로 함유하고 할로, 하이드록실, COOH, C(O)O-C1-C6 알킬, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬 및 5원 또는 6원 헤테로아릴로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환된 5원 또는 6원 고리를 형성하고;
R7은 -Q4-T4이고, 이때 Q4는 결합, C1-C4 알킬 연결기 또는 C2-C4 알케닐 연결기이고, 이때 연결기 각각은 할로, 시아노, 하이드록실 또는 C1-C6 알콕시로 임의적으로 치환되고, T4는 H, 할로, 시아노, NRfRg, -ORf, -C(O)Rf, -C(O)ORf, -C(O)NRfRg, -C(O)NRfORg, -NRfC(O)Rg, -S(O)2Rf 또는 RS4이고, 이때 Rf 및 Rg는 각각 독립적으로 H 또는 RS5이고, RS4 및 RS5는 각각 독립적으로 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬, 또는 5원 또는 6원 헤테로아릴이고, RS4 및 RS5 각각은 하나 이상의 -Q5-T5로 임의적으로 치환되고, 이때 Q5는 결합, C(O), C(O)NRk, NRkC(O), S(O)2 또는 C1-C3 알킬 연결기이고, 이때 Rk는 H 또는 C1-C6 알킬이고, T5는 H, 할로, C1-C6 알킬, 하이드록실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬, 5원 또는 6원 헤테로아릴 또는 S(O)qRq이고, 이때 q는 0, 1 또는 2이고, Rq는 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬, 또는 5원 또는 6원 헤테로아릴이고, T5가 H, 할로, 하이드록실 또는 시아노인 경우를 제외하고 T5는 할로, C1-C6 알킬, 하이드록실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬 및 5원 또는 6원 헤테로아릴로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환되거나; -Q5-T5는 옥소이고;
R8, R11, R12 및 R13은 각각 독립적으로 H, 할로, 하이드록실, COOH, 시아노, RS6, ORS6 또는 COORS6이고, 이때 RS6은 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 사이클로알킬, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노 또는 다이-C1-C6 알킬아미노이고, RS6은 할로, 하이드록실, COOH, C(O)O-C1-C6 알킬, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노 및 다이-C1-C6 알킬아미노로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환되거나; R7 및 R8은 이들이 부착된 N 원자와 함께 0개 내지 2개의 추가 헤테로원자를 갖는 4원 내지 11원 헤테로사이클로알킬 고리를 형성하거나; R7 및 R8은 이들이 부착된 C 원자와 함께 C3-C8 사이클로알킬 또는 1개 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 4원 내지 11원 헤테로사이클로알킬 고리를 형성하고, R7과 R8에 의해 형성된 4원 내지 11원 헤테로사이클로알킬 고리 또는 C3-C8 사이클로알킬 각각은 하나 이상의 -Q6-T6으로 임의적으로 치환되고, 이때 Q6은 결합, C(O), C(O)NRm, NRmC(O), S(O)2 또는 C1-C3 알킬 연결기이고, 이때 Rm은 H 또는 C1-C6 알킬이고, T6은 H, 할로, C1-C6 알킬, 하이드록실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬, 5원 또는 6원 헤테로아릴 또는 S(O)pRp이고, 이때 p는 0, 1 또는 2이고, Rp는 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬, 또는 5원 또는 6원 헤테로아릴이고, T6이 H, 할로, 하이드록실 또는 시아노인 경우를 제외하고 T6은 할로, C1-C6 알킬, 하이드록실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬 및 5원 또는 6원 헤테로아릴로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환되거나; -Q6-T6은 옥소이고;
R14는 부재하거나, H이거나, 할로, 하이드록실, COOH, C(O)O-C1-C6 알킬, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬 및 5원 또는 6원 헤테로아릴로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬이다.
화학식 I의 화합물의 한 하위세트는 하기 화학식 Ia의 화합물을 포함한다:
[화학식 Ia]
Figure pat00002
화학식 I의 화합물의 또 다른 하위세트는 하기 화학식 Ib, Ic 또는 Id의 화합물을 포함한다:
[화학식 Ib]
Figure pat00003
[화학식 Ic]
Figure pat00004
[화학식 Id]
Figure pat00005
화학식 I의 화합물의 또 다른 하위세트는 하기 화학식 Ie, Ig, II 또는 IIa의 화합물을 포함한다:
[화학식 Ie]
Figure pat00006
[화학식 Ig]
Figure pat00007
[화학식 II]
Figure pat00008
[화학식 IIa]
Figure pat00009
화학식 I, Ia, Ib, Ic, Id, Ie, Ig, II 또는 IIa의 화합물들은 하기 특징들 중 하나 이상의 특징을 포함할 수 있다:
X1은 CR11이고, X2는 CR13이다.
X1은 CR11이고, X2는 N이다.
X1은 N이고, X2는 CR13이다.
X1은 N이고, X2는 N이다.
Z는 NR7R8이다.
Z는 CR7R8R14이다.
Z는 OR7이다.
Z는 S(O)nR7이고, 이때 n은 0, 1 또는 2이다.
R6은 비치환된 C6-C10 아릴 또는 비치환된 5원 또는 6원 헤테로아릴이다.
R6은 하나 이상의 -Q2-T2로 치환된 C6-C10 아릴 또는 하나 이상의 -Q2-T2로 치환된 5원 또는 6원 헤테로아릴이다.
R6은 하나 이상의 -Q2-T2로 치환된 페닐이다.
R6은 N, O 및 S로부터 선택된 1개 내지 3개의 추가 헤테로원자를 함유하고 하나 이상의 -Q2-T2로 임의적으로 치환된 5원 또는 6원 헤테로아릴이다.
R6은 퀴놀리닐, 테트라졸릴, 옥사졸릴, 이속사졸릴, 티아졸릴, 이소티아졸릴, 푸릴 또는 티에닐이고, 이들 각각은 하나 이상의 -Q2-T2로 임의적으로 치환된다.
T2는 C1-C6 알킬, C6-C10 아릴, 할로, -ORa, -NRaRb, -(NRaRbRc)+A-, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -C(O)NRaRb, -NRbC(O)Ra, -NRbC(O)ORa, -S(O)2Ra 또는 -S(O)2NRaRb이다.
T2는 -NRaRb이고, 이때 Ra 및 Rb는 각각 독립적으로 H 또는 C1-C6 알킬이거나, Ra 및 Rb는 이들이 부착된 N 원자와 함께 0개 또는 1개의 추가 헤테로원자를 갖는 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬 고리를 형성하고, 이때 상기 C1-C6 알킬 및 상기 4원 내지 12원(예를 들면, 4원 내지 7원) 헤테로사이클로알킬 고리는 하나 이상의 -Q3-T3으로 임의적으로 치환된다.
Q2는 할로 또는 하이드록실로 임의적으로 치환된 C1-C3 알킬 연결기이다.
Q2는 결합, 또는 메틸 또는 에틸 연결기이고, T2는 H, 할로, -ORa, -NRaRb, -(NRaRbRc)+A- 또는 -S(O)2NRaRb이다.
R7은 H가 아니다.
R7은 하나 이상의 -Q5-T5로 각각 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬 또는 4원 내지 12원(예를 들면, 4원 내지 7원) 헤테로사이클로알킬이다.
R7은 하나 이상의 -Q5-T5로 임의적으로 치환된 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬이다.
R7은 1개의 -Q5-T5로 각각 임의적으로 치환된 피페리디닐, 테트라하이드로피란, 사이클로펜틸 또는 사이클로헥실이다.
T5는 H, 할로, C1-C6 알킬, C1-C6 알콕실, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴 또는 4원 내지 12원(예를 들면, 4원 내지 7원) 헤테로사이클로알킬이다.
Q5는 결합이고, T5는 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬 또는 4원 내지 12원(예를 들면, 4원 내지 7원) 헤테로사이클로알킬이다.
Q5는 CO, S(O)2 또는 NHC(O)이고, T5는 C1-C6 알킬, C1-C6 알콕실, C3-C8 사이클로알킬 또는 4원 내지 12원(예를 들면, 4원 내지 7원) 헤테로사이클로알킬이다.
Q5는 C1-C3 알킬 연결기이고, T5는 H 또는 C6-C10 아릴이다.
Q5는 C1-C3 알킬 연결기이고, T5는 C3-C8 사이클로알킬, 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬 또는 S(O)qRq이다.
R11은 H이다.
R7은 1개의 -Q5-T5로 각각 임의적으로 치환된 사이클로펜틸 또는 사이클로헥실이다.
Q5는 NHC(O)이고, T5는 C1-C6 알킬 또는 C1-C6 알콕시이다.
R7은 이소프로필이다.
R2 및 R4는 각각 독립적으로 H이거나 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노 또는 C6-C10 아릴로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬이다.
R2 및 R4 각각은 메틸이다.
R1은 H이다.
R12는 H, 메틸, 에틸, 에테닐 또는 할로이다.
R12는 메틸이다.
R12는 에틸이다.
R12는 에테닐이다.
R8은 H, 메틸 또는 에틸이다.
R8은 메틸이다.
R8은 에틸이다.
R8은 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬, 예를 들면, 테트라하이드로피란이다.
Z는 NR7R8 또는 CR7R8R14이고, 이때 R7 및 R8은 이들이 부착된 원자와 함께 1개의 -Q6-T6으로 각각 임의적으로 치환된 피페리디닐, 모르폴리닐, 피페라지닐 및 사이클로헥세닐로 구성된 군으로부터 선택된 고리를 형성한다.
R13은 H 또는 메틸이다.
R13은 H이다.
R3은 H이다.
A-는 Br- 또는 Cl-이다.
본 발명은 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 담체 및 본원에 개시된 임의의 화학식의 화합물들로부터 선택된 하나 이상의 화합물을 포함하는 약학 조성물도 제공한다.
본 발명의 또 다른 양태는 암을 치료하거나 예방하는 방법이다. 상기 방법은 본원에 개시된 임의의 화학식의 화합물들로부터 선택된 하나 이상의 화합물을 암의 치료 또는 예방이 필요한 대상체에게 치료 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다.
달리 기재되어 있지 않은 한, 치료 방법의 임의의 설명은 본 명세서에 기재된 바와 같은 치료 또는 예방을 제공하기 위한 상기 화합물들의 용도뿐만 아니라 이러한 병태(condition)를 치료하거나 예방하는 약제의 제조를 위한 상기 화합물들의 용도도 포함한다. 치료는 설치류 및 다른 질환 동물을 포함하는 인간 또는 비-인간 동물의 치료를 포함한다.
예를 들면, 상기 방법은 본원에 개시된 임의의 화학식의 하나 이상의 화합물을, 비정상적인 H3-K27 메틸화를 갖는 암을 앓는 대상체에게 유효량으로 투여하는 단계를 포함하고, 이때 상기 화합물(들)은 EZH2의 히스톤 메틸트랜스퍼라제 활성을 억제하여 암을 치료한다. 비정상적인 H3-K27 메틸화의 예에는 암세포 염색질 내에서 H3-K27 다이메틸화 또는 트라이메틸화의 전반적인 증가 및/또는 변경된 분포가 포함될 수 있다.
예를 들면, 암은 EZH2 또는 다른 PRC2 서브유닛을 과다발현하거나, H3-K27 데메틸라제(demethylase), 예컨대, UTX에서 기능 상실 돌연변이를 함유하거나, 보조 단백질, 예컨대, EZH2 활성을 증가시키고/시키거나 잘못 위치시킬 수 있는 PHF19/PCL3을 과다발현하는 암들로 구성된 군으로부터 선택된다(문헌(Sneeringer et al. Proc Natl Acad Sci USA 107(49):20980-5, 2010) 참조).
예를 들면, 상기 방법은 본원에 개시된 임의의 화학식의 하나 이상의 화합물을, EZH2를 과다발현하는 암을 앓는 대상체에게 치료 유효량으로 투여하는 단계를 포함하고, 이때 상기 화합물(들)은 EZH2의 히스톤 메틸트랜스퍼라제 활성을 억제하여 암을 치료한다.
예를 들면, 상기 방법은 본원에 개시된 임의의 화학식의 하나 이상의 화합물을, H3-K27 데메틸라제 UTX에서 기능 상실 돌연변이를 갖는 암을 앓는 대상체에게 치료 유효량으로 투여하는 단계를 포함하고, 이때 상기 화합물(들)은 EZH2의 히스톤 메틸트랜스퍼라제 활성을 억제하여 암을 치료한다.
예를 들면, 상기 방법은 본원에 개시된 임의의 화학식의 하나 이상의 화합물을, PRC2의 보조 성분(들), 예컨대, PHF19/PCL3을 과다발현하는 암을 앓는 대상체에게 치료 유효량으로 투여하는 단계를 포함하고, 이때 상기 화합물(들)은 EZH2의 히스톤 메틸트랜스퍼라제 활성을 억제하여 암을 치료한다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 히스톤 H3 상의 라이신 27(H3-K27)의 모노메틸화 내지 트라이메틸화를 촉진하는 PRC2 복합체의 촉매 서브유닛인 야생형 EZH2의 활성을 조절하는 방법에 관한 것이다. 예를 들면, 본 발명은 세포에서 EZH2의 활성을 억제하는 방법에 관한 것이다. 이 방법은 시험관내에서 또는 생체내에서 수행될 수 있다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 대상체에서 트라이메틸화된 H3-K27로의 H3-K27의 전환을 억제하는 방법을 특징으로 한다. 상기 방법은 본원에 개시된 임의의 화학식의 하나 이상의 화합물을 대상체에게 치료 유효량으로 투여하여 EZH2의 히스톤 메틸트랜스퍼라제 활성을 억제함으로써 상기 대상체에서 트라이메틸화된 H3-K27로의 H3-K27의 전환을 억제하는 단계를 포함한다.
예를 들면, 상기 방법은 본원에 개시된 임의의 화학식의 하나 이상의 화합물을, EZH2의 Y641 돌연변이체를 발현하는 암을 앓는 대상체에게 치료 유효량으로 투여하는 단계를 포함하고, 이때 상기 화합물(들)은 EZH2의 히스톤 메틸트랜스퍼라제 활성을 억제하여 암을 치료한다.
예를 들면, 암은 여포성 림프종 및 배중심 B 세포 유사(GCB) 하위형의 미만성 거대 B 세포 림프종(DLBCL)으로 구성된 군으로부터 선택된다. 예를 들면, 암은 림프종, 백혈병 또는 흑색종이다. 바람직하게는, 림프종은 비-호지킨 림프종, 여포성 림프종 또는 미만성 거대 B 세포 림프종이다. 대안적으로, 백혈병은 만성 골수성 백혈병(CML), 급성 골수성 백혈병, 급성 림프구성 백혈병 또는 혼합된 계통의 백혈병이다.
전암성 병태는 골수형성이상 증후군(MDS, 이전에 전백혈병으로서 공지됨)이다.
예를 들면, 암은 혈액암이다.
예를 들면, 상기 방법은 본원에 개시된 임의의 화학식의 하나 이상의 화합물을, EZH2의 Y641 돌연변이체를 발현하는 암을 앓는 대상체에게 치료 유효량으로 투여하는 단계를 포함하고, 이때 상기 화합물(들)은 EZH2의 Y641 돌연변이체의 히스톤 메틸트랜스퍼라제 활성을 선택적으로 억제하여 암을 치료한다.
예를 들면, 상기 방법은 암을 앓는 대상체로부터의 암세포를 포함하는 샘플에서 EZH2의 Y641 돌연변이체를 검출하는 어세이를 수행하는 단계를 추가로 포함한다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 히스톤 H3 상의 라이신 27(H3-K27)의 모노메틸화 내지 트라이메틸화를 촉진하는 PRC2 복합체의 촉매 서브유닛인 야생형 및 돌연변이체 히스톤 메틸트랜스퍼라제 EZH2의 활성을 조절하는 방법에 관한 것이다. 예를 들면, 본 발명은 세포에서 EZH2의 일부 돌연변이체 형태의 활성을 억제하는 방법에 관한 것이다. EZH2의 돌연변이체 형태는 야생형 EZH2의 티로신 641(Y641 또는 Tyr641)을 또 다른 아미노산 잔기로 치환시킨 것을 포함한다. 상기 방법은 세포를 본원에 개시된 임의의 화학식의 하나 이상의 화합물 유효량과 접촉시키는 단계를 포함한다. 이 방법은 시험관내에서 또는 생체내에서 수행될 수 있다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 대상체에서 트라이메틸화된 H3-K27로의 H3-K27의 전환을 억제하는 방법을 특징으로 한다. 상기 방법은 본원에 개시된 임의의 화학식의 하나 이상의 화합물을, EZH2의 Y641 돌연변이체를 발현하는 대상체에게 치료 유효량으로 투여하여 EZH2의 히스톤 메틸트랜스퍼라제 활성을 억제함으로써 상기 대상체에서 트라이메틸화된 H3-K27로의 H3-K27의 전환을 억제하는 단계를 포함한다. 예를 들면, 억제되는 히스톤 메틸트랜스퍼라제 활성은 EZH2의 Y641 돌연변이체의 히스톤 메틸트랜스퍼라제 활성이다. 예를 들면, 본 발명의 화합물은 EZH2의 Y641 돌연변이체의 히스톤 메틸트랜스퍼라제 활성을 선택적으로 억제한다. 예를 들면, EZH2의 Y641 돌연변이체는 Y641C, Y641F, Y641H, Y641N 및 Y641S로 구성된 군으로부터 선택된다.
대상체에서 트라이메틸화된 H3-K27로의 H3-K27의 전환을 억제하는 방법은 본원에 개시된 임의의 화학식의 하나 이상의 화합물을, EZH2의 Y641 돌연변이체를 발현하는 대상체에게 치료 유효량으로 투여하기 전에 상기 대상체로부터의 샘플에서 EZH2의 Y641 돌연변이체를 검출하는 어세이를 수행하는 단계도 포함할 수 있다. 예를 들면, EZH2의 Y641 돌연변이체를 검출하는 어세이를 수행하는 단계는 EZH2의 Y641 돌연변이체를 코딩하는 핵산을 검출하는 전체 게놈 재서열분석 또는 표적 영역 재서열분석을 포함한다. 예를 들면, EZH2의 Y641 돌연변이체를 검출하는 어세이를 수행하는 단계는 샘플을 EZH2의 Y641 돌연변이체의 특징적인 폴리펩티드 또는 이의 단편에 특이적으로 결합하는 항체와 접촉시키는 단계를 포함한다. 예를 들면, EZH2의 Y641 돌연변이체를 검출하는 어세이를 수행하는 단계는 고도 엄격성 조건 하에 샘플을 EZH2의 Y641 돌연변이체의 특징적인 폴리펩티드 또는 이의 단편을 코딩하는 핵산에 혼성화하는 핵산 프로브와 접촉시키는 단계를 포함한다.
추가로, 본 발명은 EZH2의 Y641 돌연변이체의 억제제를 확인하는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 EZH2의 단리된 Y641 돌연변이체를 히스톤 기질, 메틸 기 공여체 및 시험 화합물과 조합하는 단계로서, 이때 상기 히스톤 기질이 비메틸화된 H3-K27, 모노메틸화된 H3-K27, 다이메틸화된 H3-K27 및 이들의 임의의 조합물로 구성된 군으로부터 선택된 형태의 H3-K27을 포함하는 것인 단계; 및 히스톤 기질에서 H3-K27의 메틸화(예를 들면, 트라이메틸화된 H3-K27의 형성)를 검출하는 어세이를 수행함으로써, 시험 화합물의 존재 하에서의 H3-K27의 메틸화(예를 들면, 트라이메틸화된 H3-K27의 형성)가 시험 화합물의 부재 하에서의 H3-K27의 메틸화(예를 들면, 트라이메틸화된 H3-K27의 형성)보다 더 적을 때 상기 시험 화합물을 EZH2의 Y641 돌연변이체의 억제제로서 확인하는 단계를 포함한다.
한 실시양태에서, 히스톤 기질에서 H3-K27의 메틸화를 검출하는 어세이를 수행하는 단계는 표지된 메틸 기의 도입을 측정하는 단계를 포함한다.
한 실시양태에서, 표지된 메틸 기는 동위원소로 표지된 메틸 기이다.
한 실시양태에서, 히스톤 기질에서 H3-K27의 메틸화를 검출하는 어세이를 수행하는 단계는 히스톤 기질을 트라이메틸화된 H3-K27에 특이적으로 결합하는 항체와 접촉시키는 단계를 포함한다.
EZH2의 Y641 돌연변이체의 선택적 억제제를 확인하는 방법도 본 발명의 범위 내에 있다. 상기 방법은 EZH2의 단리된 Y641 돌연변이체를 히스톤 기질, 메틸 기 공여체 및 시험 화합물과 조합하여 시험 혼합물을 형성하는 단계로서, 이때 상기 히스톤 기질이 모노메틸화된 H3-K27, 다이메틸화된 H3-K27, 및 모노메틸화된 H3-K27과 다이메틸화된 H3-K27의 조합물로 구성된 군으로부터 선택된 형태의 H3-K27을 포함하는 것인 단계; 단리된 야생형 EZH2를 히스톤 기질, 메틸 기 공여체 및 시험 화합물과 조합하여 대조군 혼합물을 형성하는 단계로서, 이때 상기 히스톤 기질이 모노메틸화된 H3-K27, 다이메틸화된 H3-K27, 및 모노메틸화된 H3-K27과 다이메틸화된 H3-K27의 조합물로 구성된 군으로부터 선택된 형태의 H3-K27을 포함하는 것인 단계; 상기 시험 혼합물 및 상기 대조군 혼합물 각각에서 히스톤 기질의 트라이메틸화를 검출하는 어세이를 수행하는 단계; (a) EZH2의 Y641 돌연변이체 및 시험 화합물(M+)을 사용한 경우의 트라이메틸화 대 (b) 시험 화합물(M-) 없이 EZH2의 Y641 돌연변이체를 사용한 경우의 트라이메틸화의 비를 계산하는 단계; (c) 야생형 EZH2 및 시험 화합물(WT+)을 사용한 경우의 트라이메틸화 대 (d) 시험 화합물(WT-) 없이 야생형 EZH2를 사용한 경우의 트라이메틸화의 비를 계산하는 단계; 비 (a)/(b)를 비 (c)/(d)와 비교하는 단계; 및 상기 비 (a)/(b)가 상기 비 (c)/(d)보다 더 적을 때 상기 시험 화합물을 EZH2의 Y641 돌연변이체의 선택적 억제제로서 확인하는 단계를 포함한다.
본 발명은 본 발명의 하나 이상의 화합물을 사용한 치료를 위한 후보자로서 대상체를 확인하는 방법을 추가로 제공한다. 상기 방법은 대상체로부터의 샘플에서 EZH2의 Y641 돌연변이체를 검출하는 어세이를 수행하는 단계; 및 EZH2의 Y641 돌연변이체를 발현하는 대상체를 본 발명의 하나 이상의 화합물을 사용한 치료를 위한 후보자로서 확인하는 단계로서, 이때 상기 화합물(들)이 EZH2의 히스톤 메틸트랜스퍼라제 활성을 억제하는 것인 단계를 포함한다.
본 발명의 또 다른 양태는 트라이메틸화된 H3-K27로의 H3-K27의 전환을 억제하는 방법이다. 상기 방법은 EZH2의 Y641 돌연변이체를, H3-K27을 포함하는 히스톤 기질 및 유효량의 본 발명의 화합물과 접촉시켜 트라이메틸화된 H3-K27로의 H3-K27의 전환을 억제하는 단계를 포함하고, 이때 상기 화합물은 EZH2의 히스톤 메틸트랜스퍼라제 활성을 억제한다.
추가로, 본원에 기재된 화합물 또는 방법은 연구(예를 들면, 후성적 효소의 연구) 및 다른 비-치료 목적을 위해 사용될 수 있다.
달리 정의되어 있지 않은 한, 본원에서 사용된 모든 기술 용어들 및 과학 용어들은 본 발명이 속하는 분야에서 통상의 기술을 가진 자에 의해 통상적으로 이해되는 의미와 동일한 의미를 갖는다. 본 명세서에서, 문맥이 달리 명시하지 않은 한, 단수형은 복수형도 포함한다. 본원에 기재된 방법 및 물질과 유사하거나 동등한 방법 및 물질이 본 발명의 실시 또는 시험에서 사용될 수 있지만, 적합한 방법 및 물질이 후술되어 있다. 본원에서 언급된 모든 공개문헌, 특허출원, 특허 및 다른 참고문헌은 참고로 도입된다. 본원에서 인용된 참고문헌은 특허청구된 발명에 대한 선행기술인 것으로 인정되지 않는다. 불일치가 존재하는 경우, 정의를 포함하는 본 명세서가 우선할 것이다. 또한, 물질, 방법 및 실시예는 단지 예시를 위한 것이고 한정하기 위한 것이 아니다.
본 발명의 다른 특징 및 장점은 하기 상세한 설명 및 특허청구범위로부터 명확해질 것이다.
도 1a는 대수기(log-phase) 세포 생장 동안 기하급수적 증식을 보이는, 시간의 함수로서 작도된 세포 카운트(즉, 세포 수)의 이상적인 도표이다.
도 1b는 도 1a로부터의 데이터에 대한 시간의 함수로서 작도된 ln(세포 카운트)의 이상적인 도표이다.
도 2는 항증식 화합물의 존재 하에서의 이상(biphasic) 세포 생장 곡선을 보여주는 그래프이고, 이때 세포 생장에 대한 상기 화합물의 영향이 현실화되기 전에 지체기가 존재한다. 상기 화합물은 "영향의 개시"로 표지된 시점에서 세포 생장에 영향을 미치기 시작한다. 짙은 원은 화합물로 처리되지 않은 비히클(또는 용매) 대조군 샘플에 대한 이상적인 데이터를 나타낸다. 다른 부호들은 상이한 농도의 화합물(즉, 약물)로 처리된 세포에 대한 이상 생장 곡선을 나타낸다.
도 3은 세포독성 물질에 대한 LCC의 그래픽 측정을 보여주는, (도 3a) 세포증식억제 화합물 및 (도 3b) 세포독성 화합물에 대한 화합물 농도의 함수로서 재작도된 kp의 도표이다. 세포증식억제 화합물(도 3a)의 경우 kp의 값이 결코 0 미만으로 떨어질 수 없다는 것을 주목한다.
도 4는 7일 동안 화합물 87로 치료받은 마우스의 WSU-DLCL2 종양에서 전체적인 H3K27me3 메틸화를 보여주는 도표이다.
도 5는 7일 동안 화합물 141로 치료받은 마우스의 WSU-DLCL2 종양에서 전체적인 H3K27me3 메틸화를 보여주는 도표이다.
도 6은 비히클 또는 화합물 141로 치료받은 29일의 치료 과정에 걸쳐 WSU-DLCL2 이종이식편 보유 마우스의 종양 성장을 보여주는 도표이다.
도 7은 화합물 44로 치료받은 WSU-DLCL2 이종이식편 보유 마우스의 종양 성장을 보여주는 도표이다.
도 8은 28일 및 7일 동안 화합물 44로 치료받은 마우스의 WSU-DLCL2 종양에서 전체적인 H3K27me3 메틸화를 보여주는 도표이다.
도 9는 상이한 투약 스케쥴로 화합물 44 치료를 제공받은 WSU-DLCL2 이종이식편 보유 마우스의 종양 성장을 보여주는 도표이다.
도 10은 28일 동안 상이한 투약 스케쥴로 화합물 44로 치료받은 마우스의 WSU-DLCL2 종양에서 전체적인 H3K27me3 메틸화를 보여주는 도표이다.
도 11은 마우스 체중에 대한 화합물 44의 효과를 보여주는 도표이다. 데이터는 평균±SD(n=9)를 나타낸다. 사망을 야기한 용량은 작도되어 있지 않다.
도 12는 마우스에서 미만성 거대 B 세포 림프종 KARPAS-422 이종이식편에 대한 경구 투여된 화합물 44의 항종양 효과를 보여주는 도표이다. 데이터는 평균±SD(n=9)를 나타낸다. * 29일째 날(반복 측정 ANOVA에 이어서 던넷(Dunnett)형 다중 비교 검정)에 비히클 대조군과 대비되었을 때 P는 0.05 미만이다. 사망을 야기한 용량은 작도되어 있지 않다.
본 발명은 신규 아릴- 또는 헤테로아릴-치환된 벤젠 화합물, 이 화합물을 제조하는 합성 방법, 상기 화합물을 함유하는 약학 조성물 및 상기 화합물의 다양한 용도를 제공한다.
1. 아릴- 또는 헤테로아릴-치환된 벤젠 화합물
본 발명은 하기 화학식 I의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 에스테르를 제공한다:
[화학식 I]
Figure pat00010
상기 식에서,
X1은 N 또는 CR11이고;
X2는 N 또는 CR13이고;
Z는 NR7R8, OR7, S(O)nR7 또는 CR7R8R14이고, 이때 n은 0, 1 또는 2이고;
R1, R5, R9 및 R10은 각각 독립적으로 H이거나, 할로, 하이드록실, COOH, C(O)O-C1-C6 알킬, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬 및 5원 또는 6원 헤테로아릴로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬이고;
R2, R3 및 R4는 각각 독립적으로 -Q1-T1이고, 이때 Q1은 결합이거나 할로, 시아노, 하이드록실 또는 C1-C6 알콕시로 임의적으로 치환된 C1-C3 알킬 연결기이고, T1은 H, 할로, 하이드록실, COOH, 시아노 또는 RS1이고, 이때 RS1은 C1-C3 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C1-C6 알콕실, C(O)O-C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬, 또는 5원 또는 6원 헤테로아릴이고, RS1은 할로, 하이드록실, 옥소, COOH, C(O)O-C1-C6 알킬, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬 및 5원 또는 6원 헤테로아릴로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환되고;
R6은 C6-C10 아릴, 또는 5원 또는 6원 헤테로아릴이고, 이들 각각은 하나 이상의 -Q2-T2로 임의적으로 치환되고, 이때 Q2는 결합이거나 할로, 시아노, 하이드록실 또는 C1-C6 알콕시로 임의적으로 치환된 C1-C3 알킬 연결기이고, T2는 H, 할로, 시아노, -ORa, -NRaRb, -(NRaRbRc)+A-, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -C(O)NRaRb, -NRbC(O)Ra, -NRbC(O)ORa, -S(O)2Ra, -S(O)2NRaRb 또는 RS2이고, 이때 Ra, Rb 및 Rc는 각각 독립적으로 H 또는 RS3이고, A-는 약학적으로 허용가능한 음이온이고, RS2 및 RS3은 각각 독립적으로 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬, 또는 5원 또는 6원 헤테로아릴이거나, Ra 및 Rb는 이들이 부착된 N 원자와 함께 0개 또는 1개의 추가 헤테로원자를 갖는 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬 고리를 형성하고, RS2, RS3, 및 Ra와 Rb에 의해 형성된 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬 고리 각각은 하나 이상의 -Q3-T3으로 임의적으로 치환되고, 이때 Q3은 결합이거나 할로, 시아노, 하이드록실 또는 C1-C6 알콕시로 각각 임의적으로 치환된 C1-C3 알킬 연결기이고, T3은 할로, 시아노, C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬, 5원 또는 6원 헤테로아릴, ORd, COORd, -S(O)2Rd, -NRdRe 및 -C(O)NRdRe로 구성된 군으로부터 선택되고, 이때 Rd 및 Re는 각각 독립적으로 H 또는 C1-C6 알킬이거나; -Q3-T3은 옥소이거나; 임의의 2개 인접하는 -Q2-T2는 이들이 부착된 원자와 함께 N, O 및 S로부터 선택된 1개 내지 4개의 헤테로원자를 임의적으로 함유하고 할로, 하이드록실, COOH, C(O)O-C1-C6 알킬, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬 및 5원 또는 6원 헤테로아릴로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환된 5원 또는 6원 고리를 형성하고;
R7은 -Q4-T4이고, 이때 Q4는 결합, C1-C4 알킬 연결기 또는 C2-C4 알케닐 연결기이고, 이때 연결기 각각은 할로, 시아노, 하이드록실 또는 C1-C6 알콕시로 임의적으로 치환되고, T4는 H, 할로, 시아노, NRfRg, -ORf, -C(O)Rf, -C(O)ORf, -C(O)NRfRg, -C(O)NRfORg, -NRfC(O)Rg, -S(O)2Rf 또는 RS4이고, 이때 Rf 및 Rg는 각각 독립적으로 H 또는 RS5이고, RS4 및 RS5는 각각 독립적으로 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬, 또는 5원 또는 6원 헤테로아릴이고, RS4 및 RS5 각각은 하나 이상의 -Q5-T5로 임의적으로 치환되고, 이때 Q5는 결합, C(O), C(O)NRk, NRkC(O), S(O)2 또는 C1-C3 알킬 연결기이고, 이때 Rk는 H 또는 C1-C6 알킬이고, T5는 H, 할로, C1-C6 알킬, 하이드록실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬, 5원 또는 6원 헤테로아릴 또는 S(O)qRq이고, 이때 q는 0, 1 또는 2이고, Rq는 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬, 또는 5원 또는 6원 헤테로아릴이고, T5가 H, 할로, 하이드록실 또는 시아노인 경우를 제외하고 T5는 할로, C1-C6 알킬, 하이드록실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬 및 5원 또는 6원 헤테로아릴로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환되거나; -Q5-T5는 옥소이고;
R8, R11, R12 및 R13은 각각 독립적으로 H, 할로, 하이드록실, COOH, 시아노, RS6, ORS6 또는 COORS6이고, 이때 RS6은 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 사이클로알킬, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노 또는 다이-C1-C6 알킬아미노이고, RS6은 할로, 하이드록실, COOH, C(O)O-C1-C6 알킬, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노 및 다이-C1-C6 알킬아미노로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환되거나; R7 및 R8은 이들이 부착된 N 원자와 함께 0개 내지 2개의 추가 헤테로원자를 갖는 4원 내지 11원 헤테로사이클로알킬 고리를 형성하거나; R7 및 R8은 이들이 부착된 C 원자와 함께 C3-C8 사이클로알킬 또는 1개 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 4원 내지 11원 헤테로사이클로알킬 고리를 형성하고, R7과 R8에 의해 형성된 4원 내지 11원 헤테로사이클로알킬 고리 또는 C3-C8 사이클로알킬 각각은 하나 이상의 -Q6-T6으로 임의적으로 치환되고, 이때 Q6은 결합, C(O), C(O)NRm, NRmC(O), S(O)2 또는 C1-C3 알킬 연결기이고, 이때 Rm은 H 또는 C1-C6 알킬이고, T6은 H, 할로, C1-C6 알킬, 하이드록실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬, 5원 또는 6원 헤테로아릴 또는 S(O)pRp이고, 이때 p는 0, 1 또는 2이고, Rp는 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬, 또는 5원 또는 6원 헤테로아릴이고, T6이 H, 할로, 하이드록실 또는 시아노인 경우를 제외하고 T6은 할로, C1-C6 알킬, 하이드록실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬 및 5원 또는 6원 헤테로아릴로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환되거나; -Q6-T6은 옥소이고;
R14는 부재하거나, H이거나, 할로, 하이드록실, COOH, C(O)O-C1-C6 알킬, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬 및 5원 또는 6원 헤테로아릴로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬이다.
예를 들면, X1은 CR11이고, X2는 CR13이다.
예를 들면, X1은 CR11이고, X2는 N이다.
예를 들면, X1은 N이고, X2는 CR13이다.
예를 들면, X1은 N이고, X2는 N이다.
예를 들면, Z는 NR7R8이다.
예를 들면, Z는 CR7R8R14이다.
예를 들면, Z는 OR7이다.
예를 들면, Z는 S(O)nR7이고, 이때 n은 0, 1 또는 2이다.
예를 들면, Z는 SR7이다.
예를 들면, R6은 비치환된 C6-C10 아릴 또는 비치환된 5원 또는 6원 헤테로아릴이다.
예를 들면, R6은 하나 이상의 -Q2-T2로 치환된 C6-C10 아릴 또는 하나 이상의 -Q2-T2로 치환된 5원 또는 6원 헤테로아릴이다.
예를 들면, R6은 비치환된 페닐이다.
예를 들면, R6은 하나 이상의 -Q2-T2로 치환된 페닐이다.
예를 들면, R6은 N, O 및 S로부터 선택된 1개 내지 3개의 추가 헤테로원자를 함유하고 하나 이상의 -Q2-T2로 임의적으로 치환된 5원 또는 6원 헤테로아릴이다.
예를 들면, R6은 피리디닐, 피라졸릴, 피리미디닐, 퀴놀리닐, 테트라졸릴, 옥사졸릴, 이속사졸릴, 티아졸릴, 이소티아졸릴, 푸릴 또는 티에닐이고, 이들 각각은 하나 이상의 -Q2-T2로 임의적으로 치환된다.
예를 들면, Q2는 결합이다.
예를 들면, Q2는 비치환된 C1-C3 알킬 연결기이다.
예를 들면, T2는 하나 이상의 -Q3-T3으로 각각 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬 또는 C6-C10 아릴이다.
예를 들면, T2는 메틸, 에틸, n-프로필, i-프로필, n-부틸, s-부틸, t-부틸, n-펜틸, s-펜틸 및 n-헥실을 포함하나 이들로 한정되지 않는 비치환된 또는 치환된 직쇄 C1-C6 또는 분지쇄 C3-C6 알킬이다.
예를 들면, T2는 페닐이다.
예를 들면, T2는 할로(예를 들면, 불소, 염소, 브롬 및 요오드)이다.
예를 들면, T2는 하나 이상의 -Q3-T3으로 임의적으로 치환된 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬(예를 들면, 아제티디닐, 옥세타닐, 티에타닐, 피롤리디닐, 이미다졸리디닐, 피라졸리디닐, 옥사졸리디닐, 이속사졸리디닐, 트라이아졸리디닐, 테트라하이드로푸라닐, 피페리디닐, 1,2,3,6-테트라하이드로피리디닐, 피페라지닐, 테트라하이드로-2H-피라닐, 3,6-다이하이드로-2H-피라닐, 테트라하이드로-2H-티오피란, 모르폴리닐, 1,4-다이아제파닐, 1,4-옥사제파닐, 2-옥사-5-아자비사이클로[2.2.1]헵타닐, 2,5-다이아자비사이클로[2.2.1]헵타닐, 2-옥사-6-아자스피로[3.3]헵타닐, 2,6-다이아자스피로[3.3]헵타닐 등)이다.
예를 들면, T2는 -ORa, -NRaRb, -(NRaRbRc)+A-, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -C(O)NRaRb, -NRbC(O)Ra, -NRbC(O)ORa, -S(O)2Ra 또는 -S(O)2NRaRb이다.
예를 들면, T2는 -NRaRb 또는 -C(O)NRaRb이고, 이때 Ra 및 Rb는 각각 독립적으로 H 또는 C1-C6 알킬이거나, Ra 및 Rb는 이들이 부착된 N 원자와 함께 0개 또는 1개의 추가 헤테로원자를 갖는 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬 고리를 형성하고, 이때 상기 C1-C6 알킬 및 상기 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬 고리는 하나 이상의 -Q3-T3으로 임의적으로 치환된다.
예를 들면, Q2는 할로 또는 하이드록실로 임의적으로 치환된 C1-C3 알킬 연결기이다.
예를 들면, Q2는 결합 또는 메틸 연결기이고, T2는 H, 할로, -ORa, -NRaRb, -(NRaRbRc)+A- 또는 -S(O)2NRaRb이다.
예를 들면, Ra, Rb 및 Rc는 각각 독립적으로 H이거나 하나 이상의 -Q3-T3으로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬이다.
예를 들면, Ra, Rb 및 Rc 중 하나는 H이다.
예를 들면, Ra 및 Rb는 이들이 부착된 N 원자와 함께 상기 N 원자 이외의 0개 또는 1개의 추가 헤테로원자를 갖는 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬 고리(예를 들면, 아제티디닐, 피롤리디닐, 이미다졸리디닐, 피라졸리디닐, 옥사졸리디닐, 이속사졸리디닐, 트라이아졸리디닐, 피페리디닐, 1,2,3,6-테트라하이드로피리디닐, 피페라지닐, 모르폴리닐, 1,4-다이아제파닐, 1,4-옥사제파닐, 2-옥사-5-아자비사이클로[2.2.1]헵타닐, 2,5-다이아자비사이클로[2.2.1]헵타닐, 2-옥사-6-아자스피로[3.3]헵타닐, 2,6-다이아자스피로[3.3]헵타닐 등)를 형성하고, 상기 고리는 하나 이상의 -Q3-T3으로 임의적으로 치환된다.
예를 들면, -Q3-T3은 옥소이다.
예를 들면, T2는 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬 또는 C3-C8 사이클로알킬이고, 하나 이상의 -Q3-T3은 옥소이다.
예를 들면, Q3은 결합, 또는 비치환된 또는 치환된 C1-C3 알킬 연결기이다.
예를 들면, T3은 H, 할로, 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬, C1-C3 알킬, ORd, COORd, -S(O)2Rd 또는 -NRdRe이다.
예를 들면, Rd 및 Re 중 하나는 H이다.
예를 들면, R7은 H가 아니다.
예를 들면, R7은 -C(O)Rf이다.
예를 들면, R7은 -C(O)Rf이고, 이때 Rf는 C3-C8 사이클로알킬이다.
예를 들면, R7은 하나 이상의 -Q5-T5로 치환된 C6-C10 아릴이다.
예를 들면, R7은 하나 이상의 -Q5-T5로 임의적으로 치환된 페닐이다.
예를 들면, R7은 하나 이상의 -Q5-T5로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬이다.
예를 들면, R7은 하나 이상의 -Q5-T5로 임의적으로 치환된 C3-C8 사이클로알킬이다.
예를 들면, R7은 하나 이상의 -Q5-T5로 임의적으로 치환된 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬(예를 들면, 아제티디닐, 옥세타닐, 티에타닐, 피롤리디닐, 이미다졸리디닐, 피라졸리디닐, 옥사졸리디닐, 이속사졸리디닐, 트라이아졸리디닐, 테트라하이드로푸라닐, 피페리디닐, 1,2,3,6-테트라하이드로피리디닐, 피페라지닐, 테트라하이드로-2H-피라닐, 3,6-다이하이드로-2H-피라닐, 테트라하이드로-2H-티오피란 및 모르폴리닐 등)이다.
예를 들면, R7은 하나 이상의 -Q5-T5로 임의적으로 치환된 5원 또는 6원 헤테로사이클로알킬이다.
예를 들면, R7은 이소프로필이다.
예를 들면, R7은 1개의 -Q5-T5로 각각 임의적으로 치환된 피롤리디닐, 피페리디닐, 테트라하이드로피란, 사이클로펜틸, 사이클로헥실 또는 사이클로헵틸이다.
예를 들면, R7은 1개의 -Q5-T5로 각각 임의적으로 치환된 사이클로펜틸 또는 사이클로헥실이다.
예를 들면, R7은 하나 이상의 -Q5-T5로 각각 임의적으로 치환된 피롤리디닐, 피페리디닐, 테트라하이드로피란, 테트라하이드로-2H-티오피라닐, 사이클로펜틸, 사이클로헥실 또는 사이클로헵틸이다.
예를 들면, R7은 하나 이상의 -Q5-T5로 각각 임의적으로 치환된 사이클로펜틸, 사이클로헥실 또는 테트라하이드로-2H-티오피라닐이다.
예를 들면, 하나 이상의 -Q5-T5는 옥소이다.
예를 들면, R7은 1-옥사이드-테트라하이드로-2H-티오피라닐 또는 1,1-다이옥사이드-테트라하이드로-2H-티오피라닐이다.
예를 들면, Q5는 결합이고, T5는 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노 또는 다이-C1-C6 알킬아미노이다.
예를 들면, Q5는 NHC(O)이고, T5는 C1-C6 알킬 또는 C1-C6 알콕시이다.
예를 들면, -Q5-T5는 옥소이다.
예를 들면, T4는 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬 또는 C3-C8 사이클로알킬이고, 하나 이상의 -Q5-T5는 옥소이다.
예를 들면, T5는 H, 할로, C1-C6 알킬, C1-C6 알콕실, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴 또는 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬이다.
예를 들면, Q5는 결합이고, T5는 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬 또는 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬이다.
예를 들면, Q5는 CO, S(O)2 또는 NHC(O)이고, T5는 C1-C6 알킬, C1-C6 알콕실, C3-C8 사이클로알킬 또는 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬이다.
예를 들면, T5는 할로, 하이드록실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노 또는 C3-C8 사이클로알킬로 각각 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬 또는 C1-C6 알콕실이다.
예를 들면, Q5는 C1-C3 알킬 연결기이고, T5는 H 또는 C6-C10 아릴이다.
예를 들면, Q5는 C1-C3 알킬 연결기이고, T5는 C3-C8 사이클로알킬, 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬 또는 S(O)qRq이다.
예를 들면, R11은 H이다.
예를 들면, R2 및 R4는 각각 독립적으로 H이거나, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노 또는 C6-C10 아릴로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬이다.
예를 들면, R2 및 R4는 각각 독립적으로 C1-C6 알콕실로 임의적으로 치환된 C1-C3 알킬이다.
예를 들면, R2 및 R4 각각은 메틸이다.
예를 들면, R1은 H이다.
예를 들면, R12는 H, 메틸, 에틸, 에테닐 또는 할로이다.
예를 들면, R12는 메틸이다.
예를 들면, R12는 에틸이다.
예를 들면, R12는 에테닐이다.
예를 들면, R8은 H, 메틸, 에틸 또는 에테닐이다.
예를 들면, R8은 메틸이다.
예를 들면, R8은 에틸이다.
예를 들면, R8은 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬(예를 들면, 아제티디닐, 옥세타닐, 티에타닐, 피롤리디닐, 이미다졸리디닐, 피라졸리디닐, 옥사졸리디닐, 이속사졸리디닐, 트라이아졸리디닐, 테트라하이드로푸라닐, 피페리디닐, 1,2,3,6-테트라하이드로피리디닐, 피페라지닐, 테트라하이드로-2H-피라닐, 3,6-다이하이드로-2H-피라닐, 테트라하이드로-2H-티오피란, 모르폴리닐, 1,4-다이아제파닐, 1,4-옥사제파닐, 2-옥사-5-아자비사이클로[2.2.1]헵타닐, 2,5-다이아자비사이클로[2.2.1]헵타닐, 2-옥사-6-아자스피로[3.3]헵타닐, 2,6-다이아자스피로[3.3]헵타닐 등)이다.
예를 들면, R8은 테트라하이드로피란이다.
예를 들면, R8은 테트라하이드로피란이고, R7은 -Q4-T4이고, 이때 Q4는 결합 또는 C1-C4 알킬 연결기이고, T4는 H, C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬 또는 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬이다.
예를 들면, Z는 NR7R8 또는 CR7R8R14이고, 이때 R7 및 R8은 이들이 부착된 원자와 함께 1개 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 4원 내지 11원 헤테로사이클로알킬 고리(예를 들면, 아제티디닐, 옥세타닐, 티에타닐, 피롤리디닐, 이미다졸리디닐, 피라졸리디닐, 옥사졸리디닐, 이속사졸리디닐, 트라이아졸리디닐, 테트라하이드로푸라닐, 피페리디닐, 1,2,3,6-테트라하이드로피리디닐, 피페라지닐, 테트라하이드로-2H-피라닐, 3,6-다이하이드로-2H-피라닐, 테트라하이드로-2H-티오피란, 모르폴리닐, 1,4-다이옥사-8-아자스피로[4.5]데카닐 등) 또는 C3-C8 사이클로알킬을 형성하고, 이들 각각은 하나 이상의 -Q6-T6으로 임의적으로 치환된다.
예를 들면, R7과 R8에 의해 형성된 고리는 1개의 -Q6-T6으로 각각 임의적으로 치환된 아제티디닐, 피롤리디닐, 피페리디닐, 모르폴리닐, 피페라지닐, 1,4-다이옥사-8-아자스피로[4.5]데카닐 및 사이클로헥세닐로 구성된 군으로부터 선택된다.
예를 들면, -Q6-T6은 옥소이다.
예를 들면, T6은 H, 할로, C1-C6 알킬, C1-C6 알콕실, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴 또는 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬이다.
예를 들면, Q6은 결합이고, T6은 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬 또는 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬이다.
예를 들면, Q6은 CO, S(O)2 또는 NHC(O)이고, T6은 C1-C6 알킬, C1-C6 알콕실, C3-C8 사이클로알킬 또는 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬이다.
예를 들면, T6은 할로, 하이드록실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노 또는 C3-C8 사이클로알킬로 각각 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬 또는 C1-C6 알콕실이다.
예를 들면, Q6은 C1-C3 알킬 연결기이고, T6은 H 또는 C6-C10 아릴이다.
예를 들면, Q6은 C1-C3 알킬 연결기이고, T6은 C3-C8 사이클로알킬, 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬 또는 S(O)pRp이다.
예를 들면, Rp 및 Rq는 각각 독립적으로 C1-C6 알킬이다.
예를 들면, R13은 H 또는 메틸이다.
예를 들면, R13은 H이다.
예를 들면, R3은 H이다.
예를 들면, A-는 Br- 또는 Cl-이다.
예를 들면, R5, R9 및 R10 각각은 H이다.
본 발명은 하기 화학식 Ia의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 에스테르를 제공한다:
[화학식 Ia]
Figure pat00011
상기 식에서,
X1은 N 또는 CR11이고;
X2는 N 또는 CR13이고;
Z는 NR7R8, OR7, S(O)nR7 또는 CR7R8R14이고, 이때 n은 0, 1 또는 2이고;
R1 및 R5는 각각 독립적으로 H이거나, 할로, 하이드록실, COOH, C(O)O-C1-C6 알킬, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬 및 5원 또는 6원 헤테로아릴로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬이고;
R2, R3 및 R4는 각각 독립적으로 -Q1-T1이고, 이때 Q1은 결합이거나 할로, 시아노, 하이드록실 또는 C1-C6 알콕시로 임의적으로 치환된 C1-C3 알킬 연결기이고, T1은 H, 할로, 하이드록실, COOH, 시아노 또는 RS1이고, 이때 RS1은 C1-C3 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C1-C6 알콕실, C(O)O-C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬, 또는 5원 또는 6원 헤테로아릴이고, RS1은 할로, 하이드록실, 옥소, COOH, C(O)O-C1-C6 알킬, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬 및 5원 또는 6원 헤테로아릴로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환되고;
R6은 C6-C10 아릴, 또는 5원 또는 6원 헤테로아릴이고, 이들 각각은 하나 이상의 -Q2-T2로 임의적으로 치환되고, 이때 Q2는 결합이거나 할로, 시아노, 하이드록실 또는 C1-C6 알콕시로 임의적으로 치환된 C1-C3 알킬 연결기이고, T2는 H, 할로, 시아노, -ORa, -NRaRb, -(NRaRbRc)+A-, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -C(O)NRaRb, -NRbC(O)Ra, -NRbC(O)ORa, -S(O)2Ra, -S(O)2NRaRb 또는 RS2이고, 이때 Ra, Rb, 및 Rc는 각각 독립적으로 H 또는 RS3이고, A-는 약학적으로 허용가능한 음이온이고, RS2 및 RS3은 각각 독립적으로 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬, 또는 5원 또는 6원 헤테로아릴이거나, Ra 및 Rb는 이들이 부착된 N 원자와 함께 0개 또는 1개의 추가 헤테로원자를 갖는 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬 고리를 형성하고, RS2, RS3, 및 Ra와 Rb에 의해 형성된 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬 고리 각각은 하나 이상의 -Q3-T3으로 임의적으로 치환되고, 이때 Q3은 결합이거나 할로, 시아노, 하이드록실 또는 C1-C6 알콕시로 각각 임의적으로 치환된 C1-C3 알킬 연결기이고, T3은 할로, 시아노, C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬, 5원 또는 6원 헤테로아릴, ORd, COORd, -S(O)2Rd, -NRdRe 및 -C(O)NRdRe로 구성된 군으로부터 선택되고, 이때 Rd 및 Re는 각각 독립적으로 H 또는 C1-C6 알킬이거나; -Q3-T3은 옥소이거나; 임의의 2개 인접하는 -Q2-T2는 이들이 부착된 원자와 함께 N, O 및 S로부터 선택된 1개 내지 4개의 헤테로원자를 임의적으로 함유하고 할로, 하이드록실, COOH, C(O)O-C1-C6 알킬, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬, 및 5원 또는 6원 헤테로아릴로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환된 5원 또는 6원 고리를 형성하고;
R7은 -Q4-T4이고, 이때 Q4는 결합, C1-C4 알킬 연결기 또는 C2-C4 알케닐 연결기이고, 이때 연결기 각각은 할로, 시아노, 하이드록실 또는 C1-C6 알콕시로 임의적으로 치환되고, T4는 H, 할로, 시아노, NRfRg, -ORf, -C(O)Rf, -C(O)ORf, -C(O)NRfRg, -C(O)NRfORg, -NRfC(O)Rg, -S(O)2Rf 또는 RS4이고, 이때 Rf 및 Rg는 각각 독립적으로 H 또는 RS5이고, RS4 및 RS5는 각각 독립적으로 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬, 또는 5원 또는 6원 헤테로아릴이고, RS4 및 RS5 각각은 하나 이상의 -Q5-T5로 임의적으로 치환되고, 이때 Q5는 결합, C(O), C(O)NRk, NRkC(O), S(O)2 또는 C1-C3 알킬 연결기이고, 이때 Rk는 H 또는 C1-C6 알킬이고, T5는 H, 할로, C1-C6 알킬, 하이드록실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬, 5원 또는 6원 헤테로아릴 또는 S(O)qRq이고, 이때 q는 0, 1 또는 2이고, Rq는 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬, 또는 5원 또는 6원 헤테로아릴이고, T5가 H, 할로, 하이드록실 또는 시아노인 경우를 제외하고 T5는 할로, C1-C6 알킬, 하이드록실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬 및 5원 또는 6원 헤테로아릴로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환되거나; -Q5-T5는 옥소이고;
R8, R11, R12 및 R13은 각각 독립적으로 H, 할로, 하이드록실, COOH, 시아노, RS6, ORS6 또는 COORS6이고, 이때 RS6은 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 사이클로알킬, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노 또는 다이-C1-C6 알킬아미노이고, RS6은 할로, 하이드록실, COOH, C(O)O-C1-C6 알킬, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노 및 다이-C1-C6 알킬아미노로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환되거나; R7 및 R8은 이들이 부착된 N 원자와 함께 0개 내지 2개의 추가 헤테로원자를 갖는 4원 내지 11원 헤테로사이클로알킬 고리를 형성하거나; R7 및 R8은 이들이 부착된 C 원자와 함께 C3-C8 사이클로알킬 또는 1개 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 4원 내지 11원 헤테로사이클로알킬 고리를 형성하고, R7과 R8에 의해 형성된 4원 내지 11원 헤테로사이클로알킬 고리 또는 C3-C8 사이클로알킬 각각은 하나 이상의 -Q6-T6으로 임의적으로 치환되고, 이때 Q6은 결합, C(O), C(O)NRm, NRmC(O), S(O)2 또는 C1-C3 알킬 연결기이고, 이때 Rm은 H 또는 C1-C6 알킬이고, T6은 H, 할로, C1-C6 알킬, 하이드록실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬, 5원 또는 6원 헤테로아릴 또는 S(O)pRp이고, 이때 p는 0, 1 또는 2이고, Rp는 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬, 또는 5원 또는 6원 헤테로아릴이고, T6이 H, 할로, 하이드록실 또는 시아노인 경우를 제외하고 T6은 할로, C1-C6 알킬, 하이드록실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬 및 5원 또는 6원 헤테로아릴로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환되거나; -Q6-T6은 옥소이고;
R14는 부재하거나, H이거나, 할로, 하이드록실, COOH, C(O)O-C1-C6 알킬, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬 및 5원 또는 6원 헤테로아릴로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬이다.
예를 들면, X2는 CR13이다.
예를 들면, X2는 N이다.
예를 들면, Z는 NR7R8이다.
예를 들면, Z는 CR7R8R14이다.
예를 들면, Z는 OR7이다.
예를 들면, Z는 S(O)nR7이고, 이때 n은 0, 1 또는 2이다.
예를 들면, Z는 SR7이다.
예를 들면, R6은 비치환된 C6-C10 아릴 또는 비치환된 5원 또는 6원 헤테로아릴이다.
예를 들면, R6은 하나 이상의 -Q2-T2로 치환된 C6-C10 아릴 또는 하나 이상의 -Q2-T2로 치환된 5원 또는 6원 헤테로아릴이다.
예를 들면, R6은 비치환된 페닐이다.
예를 들면, R6은 하나 이상의 -Q2-T2로 치환된 페닐이다.
예를 들면, R6은 N, O 및 S로부터 선택된 1개 내지 3개의 추가 헤테로원자를 함유하고 하나 이상의 -Q2-T2로 임의적으로 치환된 5원 또는 6원 헤테로아릴이다.
예를 들면, R6은 피리디닐, 피라졸릴, 피리미디닐, 퀴놀리닐, 테트라졸릴, 옥사졸릴, 이속사졸릴, 티아졸릴, 이소티아졸릴, 푸릴 또는 티에닐이고, 이들 각각은 하나 이상의 -Q2-T2로 임의적으로 치환된다.
예를 들면, Q2는 결합이다.
예를 들면, Q2는 비치환된 C1-C3 알킬 연결기이다.
예를 들면, T2는 하나 이상의 -Q3-T3으로 각각 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬 또는 C6-C10 아릴이다.
예를 들면, T2는 메틸, 에틸, n-프로필, i-프로필, n-부틸, s-부틸, t-부틸, n-펜틸, s-펜틸 및 n-헥실을 포함하나 이들로 한정되지 않는 비치환된 또는 치환된 직쇄 C1-C6 또는 분지쇄 C3-C6 알킬이다.
예를 들면, T2는 페닐이다.
예를 들면, T2는 할로(예를 들면, 불소, 염소, 브롬 및 요오드)이다.
예를 들면, T2는 하나 이상의 -Q3-T3으로 임의적으로 치환된 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬(예를 들면, 아제티디닐, 옥세타닐, 티에타닐, 피롤리디닐, 이미다졸리디닐, 피라졸리디닐, 옥사졸리디닐, 이속사졸리디닐, 트라이아졸리디닐, 테트라하이드로푸라닐, 피페리디닐, 1,2,3,6-테트라하이드로피리디닐, 피페라지닐, 테트라하이드로-2H-피라닐, 3,6-다이하이드로-2H-피라닐, 테트라하이드로-2H-티오피란, 모르폴리닐, 1,4-다이아제파닐, 1,4-옥사제파닐, 2-옥사-5-아자비사이클로[2.2.1]헵타닐, 2,5-다이아자비사이클로[2.2.1]헵타닐, 2-옥사-6-아자스피로[3.3]헵타닐, 2,6-다이아자스피로[3.3]헵타닐 등)이다.
예를 들면, T2는 -ORa, -NRaRb, -(NRaRbRc)+A-, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -C(O)NRaRb, -NRbC(O)Ra, -NRbC(O)ORa, -S(O)2Ra 또는 -S(O)2NRaRb이다.
예를 들면, T2는 -NRaRb 또는 -C(O)NRaRb이고, 이때 Ra 및 Rb는 각각 독립적으로 H 또는 C1-C6 알킬이거나, Ra 및 Rb는 이들이 부착된 N 원자와 함께 0개 또는 1개의 추가 헤테로원자를 갖는 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬 고리를 형성하고, 이때 상기 C1-C6 알킬 및 상기 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬 고리는 하나 이상의 -Q3-T3으로 임의적으로 치환된다.
예를 들면, Q2는 할로 또는 하이드록실로 임의적으로 치환된 C1-C3 알킬 연결기이다.
예를 들면, Q2는 결합 또는 메틸 연결기이고, T2는 H, 할로, -ORa, -NRaRb, -(NRaRbRc)+A- 또는 -S(O)2NRaRb이다.
예를 들면, Ra, Rb 및 Rc는 각각 독립적으로 H이거나 하나 이상의 -Q3-T3으로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬이다.
예를 들면, Ra, Rb 및 Rc 중 하나는 H이다.
예를 들면, Ra 및 Rb는 이들이 부착된 N 원자와 함께 상기 N 원자 이외의 0개 또는 1개의 추가 헤테로원자를 갖는 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬 고리(예를 들면, 아제티디닐, 피롤리디닐, 이미다졸리디닐, 피라졸리디닐, 옥사졸리디닐, 이속사졸리디닐, 트라이아졸리디닐, 피페리디닐, 1,2,3,6-테트라하이드로피리디닐, 피페라지닐, 모르폴리닐, 1,4-다이아제파닐, 1,4-옥사제파닐, 2-옥사-5-아자비사이클로[2.2.1]헵타닐, 2,5-다이아자비사이클로[2.2.1]헵타닐, 2-옥사-6-아자스피로[3.3]헵타닐, 2,6-다이아자스피로[3.3]헵타닐 등)를 형성하고, 상기 고리는 하나 이상의 -Q3-T3으로 임의적으로 치환된다.
예를 들면, -Q3-T3은 옥소이다.
예를 들면, T2는 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬 또는 C3-C8 사이클로알킬이고, 하나 이상의 -Q3-T3은 옥소이다.
예를 들면, Q3은 결합, 또는 비치환된 또는 치환된 C1-C3 알킬 연결기이다.
예를 들면, T3은 H, 할로, 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬, C1-C3 알킬, ORd, COORd, -S(O)2Rd 또는 -NRdRe이다.
예를 들면, Rd 및 Re 중 하나는 H이다.
예를 들면, R7은 H가 아니다.
예를 들면, R7은 -C(O)Rf이다.
예를 들면, R7은 -C(O)Rf이고, 이때 Rf는 C3-C8 사이클로알킬이다.
예를 들면, R7은 하나 이상의 -Q5-T5로 치환된 C6-C10 아릴이다.
예를 들면, R7은 하나 이상의 -Q5-T5로 임의적으로 치환된 페닐이다.
예를 들면, R7은 하나 이상의 -Q5-T5로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬이다.
예를 들면, R7은 하나 이상의 -Q5-T5로 임의적으로 치환된 C3-C8 사이클로알킬이다.
예를 들면, R7은 하나 이상의 -Q5-T5로 임의적으로 치환된 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬(예를 들면, 아제티디닐, 옥세타닐, 티에타닐, 피롤리디닐, 이미다졸리디닐, 피라졸리디닐, 옥사졸리디닐, 이속사졸리디닐, 트라이아졸리디닐, 테트라하이드로푸라닐, 피페리디닐, 1,2,3,6-테트라하이드로피리디닐, 피페라지닐, 테트라하이드로-2H-피라닐, 3,6-다이하이드로-2H-피라닐, 테트라하이드로-2H-티오피란 및 모르폴리닐 등)이다.
예를 들면, R7은 하나 이상의 -Q5-T5로 임의적으로 치환된 5원 또는 6원 헤테로사이클로알킬이다.
예를 들면, R7은 이소프로필이다.
예를 들면, R7은 1개의 -Q5-T5로 각각 임의적으로 치환된 피롤리디닐, 피페리디닐, 테트라하이드로피란, 사이클로펜틸, 사이클로헥실 또는 사이클로헵틸이다.
예를 들면, R7은 1개의 -Q5-T5로 각각 임의적으로 치환된 사이클로펜틸 또는 사이클로헥실이다.
예를 들면, R7은 하나 이상의 -Q5-T5로 각각 임의적으로 치환된 피롤리디닐, 피페리디닐, 테트라하이드로피란, 테트라하이드로-2H-티오피라닐, 사이클로펜틸, 사이클로헥실 또는 사이클로헵틸이다.
예를 들면, R7은 하나 이상의 -Q5-T5로 각각 임의적으로 치환된 사이클로펜틸, 사이클로헥실 또는 테트라하이드로-2H-티오피라닐이다.
예를 들면, 하나 이상의 -Q5-T5는 옥소이다.
예를 들면, R7은 1-옥사이드-테트라하이드로-2H-티오피라닐 또는 1,1-다이옥사이드-테트라하이드로-2H-티오피라닐이다.
예를 들면, Q5는 결합이고, T5는 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노 또는 다이-C1-C6 알킬아미노이다.
예를 들면, Q5는 NHC(O)이고, T5는 C1-C6 알킬 또는 C1-C6 알콕시이다.
예를 들면, -Q5-T5는 옥소이다.
예를 들면, T4는 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬 또는 C3-C8 사이클로알킬이고, 하나 이상의 -Q5-T5는 옥소이다.
예를 들면, T5는 H, 할로, C1-C6 알킬, C1-C6 알콕실, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴 또는 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬이다.
예를 들면, Q5는 결합이고, T5는 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬 또는 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬이다.
예를 들면, Q5는 CO, S(O)2 또는 NHC(O)이고; T5는 C1-C6 알킬, C1-C6 알콕실, C3-C8 사이클로알킬 또는 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬이다.
예를 들면, T5는 할로, 하이드록실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노 또는 C3-C8 사이클로알킬로 각각 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬 또는 C1-C6 알콕실이다.
예를 들면, Q5는 C1-C3 알킬 연결기이고, T5는 H 또는 C6-C10 아릴이다.
예를 들면, Q5는 C1-C3 알킬 연결기이고, T5는 C3-C8 사이클로알킬, 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬 또는 S(O)qRq이다.
예를 들면, R11은 H이다.
예를 들면, R2 및 R4는 각각 독립적으로 H이거나, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노 또는 C6-C10 아릴로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬이다.
예를 들면, R2 및 R4는 각각 독립적으로 C1-C6 알콕실로 임의적으로 치환된 C1-C3 알킬이다.
예를 들면, R2 및 R4 각각은 메틸이다.
예를 들면, R1은 H이다.
예를 들면, R5는 H이다.
예를 들면, R12는 H, 메틸, 에틸, 에테닐 또는 할로이다.
예를 들면, R12는 메틸이다.
예를 들면, R12는 에틸이다.
예를 들면, R12는 에테닐이다.
예를 들면, R8은 H, 메틸, 에틸 또는 에테닐이다.
예를 들면, R8은 메틸이다.
예를 들면, R8은 에틸이다.
예를 들면, R8은 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬(예를 들면, 아제티디닐, 옥세타닐, 티에타닐, 피롤리디닐, 이미다졸리디닐, 피라졸리디닐, 옥사졸리디닐, 이속사졸리디닐, 트라이아졸리디닐, 테트라하이드로푸라닐, 피페리디닐, 1,2,3,6-테트라하이드로피리디닐, 피페라지닐, 테트라하이드로-2H-피라닐, 3,6-다이하이드로-2H-피라닐, 테트라하이드로-2H-티오피란, 모르폴리닐, 1,4-다이아제파닐, 1,4-옥사제파닐, 2-옥사-5-아자비사이클로[2.2.1]헵타닐, 2,5-다이아자비사이클로[2.2.1]헵타닐, 2-옥사-6-아자스피로[3.3]헵타닐, 2,6-다이아자스피로[3.3]헵타닐 등)이다.
예를 들면, R8은 테트라하이드로피란이다.
예를 들면, R8은 테트라하이드로피란이고, R7은 -Q4-T4이고, 이때 Q4는 결합 또는 C1-C4 알킬 연결기이고, T4는 H, C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬 또는 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬이다.
예를 들면, Z는 NR7R8 또는 CR7R8R14이고, 이때 R7 및 R8은 이들이 부착된 원자와 함께 1개 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 4원 내지 11원 헤테로사이클로알킬 고리(예를 들면, 아제티디닐, 옥세타닐, 티에타닐, 피롤리디닐, 이미다졸리디닐, 피라졸리디닐, 옥사졸리디닐, 이속사졸리디닐, 트라이아졸리디닐, 테트라하이드로푸라닐, 피페리디닐, 1,2,3,6-테트라하이드로피리디닐, 피페라지닐, 테트라하이드로-2H-피라닐, 3,6-다이하이드로-2H-피라닐, 테트라하이드로-2H-티오피란, 모르폴리닐, 1,4-다이옥사-8-아자스피로[4.5]데카닐 등) 또는 C3-C8 사이클로알킬을 형성하고, 이들 각각은 하나 이상의 -Q6-T6으로 임의적으로 치환된다.
예를 들면, R7과 R8에 의해 형성된 고리는 1개의 -Q6-T6으로 각각 임의적으로 치환된 아제티디닐, 피롤리디닐, 피페리디닐, 모르폴리닐, 피페라지닐, 1,4-다이옥사-8-아자스피로[4.5]데카닐 및 사이클로헥세닐로 구성된 군으로부터 선택된다.
예를 들면, -Q6-T6은 옥소이다.
예를 들면, T6은 H, 할로, C1-C6 알킬, C1-C6 알콕실, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴 또는 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬이다.
예를 들면, Q6은 결합이고, T6은 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬 또는 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬이다.
예를 들면, Q6은 CO, S(O)2 또는 NHC(O)이고, T6은 C1-C6 알킬, C1-C6 알콕실, C3-C8 사이클로알킬 또는 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬이다.
예를 들면, T6은 할로, 하이드록실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노 또는 C3-C8 사이클로알킬로 각각 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬 또는 C1-C6 알콕실이다.
예를 들면, Q6은 C1-C3 알킬 연결기이고, T6은 H 또는 C6-C10 아릴이다.
예를 들면, Q6은 C1-C3 알킬 연결기이고, T6은 C3-C8 사이클로알킬, 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬 또는 S(O)pRp이다.
예를 들면, Rp 및 Rq는 각각 독립적으로 C1-C6 알킬이다.
예를 들면, R13은 H 또는 메틸이다.
예를 들면, R13은 H이다.
예를 들면, R3은 H이다.
예를 들면, A-는 Br- 또는 Cl-이다.
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[화학식 Ib]
Figure pat00012
[화학식 Ic]
Figure pat00013
[화학식 Id]
Figure pat00014
상기 식에서,
Z, X2, R1, R2, R3, R4, R5, R6, R11 및 R12는 본원에서 정의된 바와 같다.
화학식 I의 화합물의 또 다른 하위세트는 하기 화학식 Ie 또는 Ig의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 에스테르를 포함한다:
[화학식 Ie]
Figure pat00015
[화학식 Ig]
Figure pat00016
상기 식에서,
Z, X2, R2, R3, R4, R6 및 R12는 본원에서 정의된 바와 같다.
예를 들면, R2, R4 및 R12는 각각 독립적으로 C1-C6 알킬이다.
예를 들면, R6은 C6-C10 아릴 또는 5원 또는 6원 헤테로아릴이고, 이들은 각각 독립적으로 하나 이상의 -Q2-T2로 임의적으로 치환되고, 이때 Q2는 결합 또는 C1-C3 알킬 연결기이고, T2는 H, 할로, 시아노, -ORa, -NRaRb, -(NRaRbRc)+A-, -C(O)NRaRb, -NRbC(O)Ra, -S(O)2Ra 또는 RS2이고, 이때 Ra 및 Rb는 각각 독립적으로 H 또는 RS3이고, RS2 및 RS3은 각각 독립적으로 C1-C6 알킬이거나, Ra 및 Rb는 이들이 부착된 N 원자와 함께 0개 또는 1개의 추가 헤테로원자를 갖는 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬 고리를 형성하고, RS2, RS3, 및 Ra와 Rb에 의해 형성된 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬 고리는 각각 독립적으로 하나 이상의 -Q3-T3으로 임의적으로 치환되고, 이때 Q3은 결합 또는 C1-C3 알킬 연결기이고, T3은 할로, C1-C6 알킬, 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬, ORd, -S(O)2Rd 및 -NRdRe로 구성된 군으로부터 선택되고, 이때 Rd 및 Re는 각각 독립적으로 H 또는 C1-C6 알킬이거나; -Q3-T3은 옥소이거나; 임의의 2개 인접하는 -Q2-T2는 이들이 부착된 원자와 함께 N, O 및 S로부터 선택된 1개 내지 4개의 헤테로원자를 임의적으로 함유하는 5원 또는 6원 고리를 형성한다.
화학식 I의 화합물의 또 다른 하위세트는 하기 화학식 II의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 에스테르를 포함한다:
[화학식 II]
Figure pat00017
상기 식에서,
Q2는 결합 또는 메틸 연결기이고;
T2는 H, 할로, -ORa, -NRaRb, -(NRaRbRc)+A- 또는 -S(O)2NRaRb이고;
R7은 1개의 -Q5-T5로 각각 임의적으로 치환된 피페리디닐, 테트라하이드로피란, 사이클로펜틸 또는 사이클로헥실이고;
R8은 에틸이고;
Ra, Rb 및 Rc는 본원에서 정의된 바와 같다.
예를 들면, Q2는 결합이다.
예를 들면, Q2는 메틸 연결기이다.
예를 들면, T2는 -NRaRb 또는 -(NRaRbRc)+A-이다.
화학식 I의 화합물의 또 다른 하위세트는 하기 화학식 IIa의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 에스테르를 포함한다:
[화학식 IIa]
Figure pat00018
상기 식에서,
R7, R8, Ra, Rb 및 Rc는 본원에서 정의된 바와 같다.
화학식 II 또는 IIa의 화합물은 하기 특징들 중 하나 이상의 특징을 포함할 수 있다:
예를 들면, Ra 및 Rb는 각각 독립적으로 H이거나 하나 이상의 -Q3-T3으로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬이다.
예를 들면, Ra 및 Rb 중 하나는 H이다.
예를 들면, Ra 및 Rb는 이들이 부착된 N 원자와 함께 상기 N 원자 이외의 0개 또는 1개의 추가 헤테로원자를 갖는 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬 고리(예를 들면, 아제티디닐, 피롤리디닐, 이미다졸리디닐, 피라졸리디닐, 옥사졸리디닐, 이속사졸리디닐, 트라이아졸리디닐, 피페리디닐, 1,2,3,6-테트라하이드로피리디닐, 피페라지닐, 모르폴리닐, 1,4-다이아제파닐, 1,4-옥사제파닐, 2-옥사-5-아자비사이클로[2.2.1]헵타닐, 2,5-다이아자비사이클로[2.2.1]헵타닐 등)를 형성하고, 상기 고리는 하나 이상의 -Q3-T3으로 임의적으로 치환된다.
예를 들면, Ra 및 Rb는 이들이 부착된 N 원자와 함께 아제티디닐, 피롤리디닐, 이미다졸리디닐, 피라졸리디닐, 옥사졸리디닐, 이속사졸리디닐, 트라이아졸리디닐, 테트라하이드로푸라닐, 피페리디닐, 1,2,3,6-테트라하이드로피리디닐, 피페라지닐 또는 모르폴리닐을 형성하고, 상기 고리는 하나 이상의 -Q3-T3으로 임의적으로 치환된다.
예를 들면, 하나 이상의 -Q3-T3은 옥소이다.
예를 들면, Q3은 결합, 또는 비치환된 또는 치환된 C1-C3 알킬 연결기이다.
예를 들면, T3은 H, 할로, 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬, C1-C3 알킬, ORd, COORd, -S(O)2Rd 또는 -NRdRe이다.
예를 들면, Rd 및 Re 중 하나는 H이다.
예를 들면, R7은 하나 이상의 -Q5-T5로 각각 임의적으로 치환된 C3-C8 사이클로알킬 또는 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬이다.
예를 들면, R7은 하나 이상의 -Q5-T5로 각각 임의적으로 치환된 피페리디닐, 테트라하이드로피란, 테트라하이드로-2H-티오피라닐, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 피롤리디닐 또는 사이클로헵틸이다.
예를 들면, R7은 하나 이상의 -Q5-T5로 각각 임의적으로 치환된 사이클로펜틸, 사이클로헥실 또는 테트라하이드로-2H-티오피라닐이다.
예를 들면, Q5는 NHC(O)이고, T5는 C1-C6 알킬 또는 C1-C6 알콕시이다.
예를 들면, 하나 이상의 -Q5-T5는 옥소이다.
예를 들면, R7은 1-옥사이드-테트라하이드로-2H-티오피라닐 또는 1,1-다이옥사이드-테트라하이드로-2H-티오피라닐이다.
예를 들면, Q5는 결합이고, T5는 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노 또는 다이-C1-C6 알킬아미노이다.
예를 들면, Q5는 CO, S(O)2 또는 NHC(O)이고; T5는 C1-C6 알킬, C1-C6 알콕실, C3-C8 사이클로알킬 또는 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬이다.
예를 들면, R8은 H이거나, 할로 하이드록실, COOH, C(O)O-C1-C6 알킬, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노 및 다이-C1-C6 알킬아미노로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬이다.
예를 들면, R8은 H, 메틸 또는 에틸이다.
화학식 I의 화합물의 또 다른 하위세트는 하기 화학식 III의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 에스테르를 포함한다:
[화학식 III]
Figure pat00019
상기 식에서,
R3은 수소, C1-C3 알킬 또는 할로이고;
R4는 C1-C3 알킬이고;
R7은 하나 이상의 Rs로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬 또는 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬이고;
R8은 C1-C6 알킬이고;
Rh는 -Qh-Th이고, 이때 Qh는 결합, C1-C3 알킬 연결기 또는 N(RN)이고, Th는 ORh1 또는 -NRh1Rh2이고, 이때 Rh1 및 Rh2는 독립적으로 수소 또는 C1-C6 알킬이거나, Rh1 및 Rh2 중 하나는 메틸이고 나머지 하나는 1개 또는 2개의 메틸로 임의적으로 치환된 6원 N 함유 헤테로사이클로알킬이거나, Rh1 및 Rh2는 이들이 부착된 N 원자와 함께 산소 및 질소로부터 선택된 0개 또는 1개의 추가 헤테로원자를 갖는 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬 고리를 형성하고, 이때 상기 헤테로사이클로알킬 고리는 하나 이상의 Ri로 임의적으로 치환되고;
Ri는 C1-C3 알킬, -NRN1RN2, C3-C8 사이클로알킬, 또는 5원 또는 6원 헤테로환이고, 이때 상기 사이클로알킬 또는 상기 헤테로환은 각각 독립적으로 Rj로 임의적으로 치환되고;
RN은 수소, C1-C6 알킬 또는 C3-C8 사이클로알킬이고;
Rj는 C1-C3 알킬, -NRN1RN2 또는 -NC(O)RN이고;
RN1 및 RN2는 각각 독립적으로 수소, C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, 또는 5원 또는 6원 헤테로환이고, 상기 사이클로알킬 또는 상기 헤테로환은 각각 독립적으로 Rj로 임의적으로 치환된다.
예를 들면, R3은 수소이다.
예를 들면, R3은 할로겐, 예를 들면, 플루오로 또는 클로로이다. 예를 들면, R3은 플루오로이다.
예를 들면, R4는 메틸, 에틸, 프로필 또는 이소프로필이다. 예를 들면, R4는 메틸이다. 예를 들면, R4는 이소프로필이다.
예를 들면, R7은 4원 내지 7원 헤테로사이클로알킬(예를 들면, 아제티디닐, 옥세타닐, 티에타닐, 피롤리디닐, 이미다졸리디닐, 피라졸리디닐, 옥사졸리디닐, 이속사졸리디닐, 트라이아졸리디닐, 테트라하이드로푸라닐, 피페리디닐, 1,2,3,6-테트라하이드로피리디닐, 피페라지닐, 테트라하이드로-2H-피라닐, 3,6-다이하이드로-2H-피라닐, 테트라하이드로-2H-티오피란 및 모르폴리닐 등)이다.
예를 들면, R7은 5원 또는 6원 사이클로알킬 또는 헤테로사이클로알킬이다.
예를 들면, R7은 6원 사이클로알킬 또는 헤테로사이클로알킬이다.
몇몇 실시양태에서, R7은 피페리디닐, 테트라하이드로피라닐, 사이클로펜틸 또는 사이클로헥실이다.
몇몇 실시양태에서, Rj는 메틸이다. 몇몇 실시양태에서, Rj는 NH2이다.
예를 들면, R8은 C1, C2 또는 C3 알킬이다. 예를 들면, R8은 메틸이다. 예를 들면, R8은 에틸이다.
몇몇 실시양태에서, Qh는 결합이다. 다른 실시양태에서, Qh는 메틸렌이다.
몇몇 실시양태에서, Th는 N(CH3)2이다.
몇몇 실시양태에서, Rh1 및 Rh2 중 하나는 메틸이고, 나머지 하나는 1개 또는 2개의 메틸로 임의적으로 치환된 6원 N 함유 헤테로사이클로알킬이다. 예를 들면, 상기 6원 N 함유 헤테로사이클로알킬은 고리 내에 추가 헤테로원자를 함유하지 않는다. 예를 들면, 상기 6원 N 함유 헤테로사이클로알킬은 상기 1개 또는 2개의 메틸 기 이외에 더 치환되지 않는다.
몇몇 실시양태에서, Rh1 및 Rh2는 이들이 부착된 N과 함께 6원 고리를 형성한다. 예를 들면, Th는 피페리딘, 모르폴린, 피페라진 및 N-메틸 피페라진으로부터 선택된다.
예를 들면, Th는 모르폴린이다.
몇몇 실시양태에서, Ri는 메틸 또는 N(CH3)2이다. 몇몇 실시양태에서, Ri는 C3-C8 사이클로알킬, 또는 5원 또는 6원 헤테로환이다. 예를 들면, Ri는 0개 또는 1개의 Rj로 치환된 6원 사이클로알킬 또는 헤테로환이다,
몇몇 실시양태에서, RN은 H 또는 메틸이다.
화학식 III의 일부 화합물인 화학식 IIIa의 화합물에서, R3은 수소이고, R4는 CH3이고, Qh는 메틸렌이다.
화학식 III의 일부 화합물인 화학식 IIIb의 화합물에서, R3은 플루오로이고, R4는 이소프로필이고, Qh는 결합이다.
화학식 III의 일부 화합물인 화학식 IIIc의 화합물에서, R3은 수소이고, R4는 프로필 또는 이소프로필이고, Qh는 메틸렌이다.
화학식 III의 일부 화합물인 화학식 IIId의 화합물에서, R3은 수소이고, R4는 프로필 또는 이소프로필이고, Qh는 결합이다.
화학식 III의 일부 화합물에는 하기 화학식 IIIe의 화합물이 포함된다:
[화학식 IIIe]
Figure pat00020
상기 식에서,
R3은 H 또는 F이고;
R4는 메틸, i-프로필 또는 n-프로필이고;
Rh는
Figure pat00021
이고, Ri는 H, 메틸 또는
Figure pat00022
이다.
본 발명의 대표적인 화합물은 표 1에 나열된 화합물들을 포함한다. 하기 표에서
Figure pat00023
의 각각의 존재는
Figure pat00024
로서 해석되어야 한다.
[표 1]
Figure pat00025
Figure pat00026
Figure pat00027
Figure pat00028
Figure pat00029
Figure pat00030
Figure pat00031
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Figure pat00061
Figure pat00062
Figure pat00063
Figure pat00064
Figure pat00065
Figure pat00066
Figure pat00067
Figure pat00068
Figure pat00069
Figure pat00070
본원에서 사용된 바와 같이, "알킬", "C1, C2, C3, C4, C5 또는 C6 알킬" 또는 "C1-C6 알킬"은 C1, C2, C3, C4, C5 또는 C6 직쇄(선형) 포화 지방족 탄화수소 기, 및 C3, C4, C5 또는 C6 분지쇄 포화 지방족 탄화수소 기를 포함하기 위한 것이다. 예를 들면, C1-C6 알킬은 C1, C2, C3, C4, C5 및 C6 알킬 기를 포함한다. 알킬의 예에는 1개 내지 6개의 탄소 원자를 갖는 모이어티(moiety), 예컨대, 메틸, 에틸, n-프로필, i-프로필, n-부틸, s-부틸, t-부틸, n-펜틸, s-펜틸 또는 n-헥실이 포함되나 이들로 한정되지 않는다.
일부 실시양태에서, 직쇄 또는 분지쇄 알킬은 6개 이하의 탄소 원자를 갖고(예를 들면, 직쇄의 경우 C1-C6, 분지쇄의 경우 C3-C6), 또 다른 실시양태에서 직쇄 또는 분지쇄 알킬은 4개 이하의 탄소 원자를 갖는다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "사이클로알킬"은 3개 내지 30개의 탄소 원자(예를 들면, C3-C10)를 갖는 포화 또는 불포화 비방향족 탄화수소 단일고리 또는 다중고리(예를 들면, 융합된, 가교된 또는 스피로 고리) 시스템을 의미한다. 사이클로알킬의 예에는 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 사이클로헵틸, 사이클로옥틸, 사이클로펜테닐, 사이클로헥세닐, 사이클로헵테닐 및 아다만틸이 포함되나 이들로 한정되지 않는다. 용어 "헤테로사이클로알킬"은, 달리 특정되어 있지 않은 한, 하나 이상의 헤테로원자(예컨대, O, N, S 또는 Se)를 갖는 포화 또는 불포화 비방향족 3원 내지 8원 단환형 고리 시스템, 7원 내지 12원 이환형 고리 시스템(융합된, 가교된 또는 스피로 고리), 또는 11원 내지 14원 삼환형 고리 시스템(융합된, 가교된 또는 스피로 고리)을 의미한다. 헤테로사이클로알킬 기의 예에는 피페리디닐, 피페라지닐, 피롤리디닐, 다이옥사닐, 테트라하이드로푸라닐, 이소인돌리닐, 인돌리닐, 이미다졸리디닐, 피라졸리디닐, 옥사졸리디닐, 이속사졸리디닐, 트라이아졸리디닐, 테트라하이드로푸라닐, 옥시라닐, 아제티디닐, 옥세타닐, 티에타닐, 1,2,3,6-테트라하이드로피리디닐, 테트라하이드로피라닐, 다이하이드로피라닐, 피라닐, 모르폴리닐, 1,4-다이아제파닐, 1,4-옥사제파닐, 2-옥사-5-아자비사이클로[2.2.1]헵타닐, 2,5-다이아자비사이클로[2.2.1]헵타닐, 2-옥사-6-아자스피로[3.3]헵타닐, 2,6-다이아자스피로[3.3]헵타닐, 1,4-다이옥사-8-아자스피로[4.5]데카닐 등이 포함되나 이들로 한정되지 않는다.
용어 "임의적으로 치환된 알킬"은 비치환된 알킬을 의미하거나 탄화수소 골격의 하나 이상의 탄소 상의 하나 이상의 수소 원자를 치환시키는 지정된 치환기를 갖는 알킬을 의미한다. 이러한 치환기는 예를 들면, 알킬, 알케닐, 알키닐, 할로겐, 하이드록실, 알킬카보닐옥시, 아릴카보닐옥시, 알콕시카보닐옥시, 아릴옥시카보닐옥시, 카복실레이트, 알킬카보닐, 아릴카보닐, 알콕시카보닐, 아미노카보닐, 알킬아미노카보닐, 다이알킬아미노카보닐, 알킬티오카보닐, 알콕실, 포스페이트, 포스포네이토, 포스피네이토, 아미노(알킬아미노, 다이알킬아미노, 아릴아미노, 다이아릴아미노 및 알킬아릴아미노를 포함함), 아실아미노(알킬카보닐아미노, 아릴카보닐아미노, 카바모일 및 우레이도를 포함함), 아미디노, 이미노, 설프하이드릴, 알킬티오, 아릴티오, 티오카복실레이트, 설페이트, 알킬설피닐, 설포네이토, 설파모일, 설폰아미도, 니트로, 트라이플루오로메틸, 시아노, 아지도, 헤테로사이클릴, 알킬아릴, 또는 방향족 또는 헤테로방향족 모이어티를 포함할 수 있다.
"아릴알킬" 또는 "아르알킬" 모이어티는 아릴(예를 들면, 페닐메틸(벤질))로 치환된 알킬이다. "알킬아릴" 모이어티는 알킬(예를 들면, 메틸페닐)로 치환된 아릴이다.
본원에서 사용된 바와 같이, "알킬 연결기"는 C1, C2, C3, C4, C5 또는 C6 직쇄(선형) 포화 2가 지방족 탄화수소 기, 및 C3, C4, C5 또는 C6 분지쇄 포화 지방족 탄화수소 기를 포함한다. 예를 들면, C1-C6 알킬 연결기는 C1, C2, C3, C4, C5 및 C6 알킬 연결기를 포함한다. 알킬 연결기의 예에는 1개 내지 6개의 탄소 원자를 갖는 모이어티, 예컨대, 메틸(-CH2-), 에틸(-CH2CH2-), n-프로필(-CH2CH2CH2-), i-프로필(-CHCH3CH2-), n-부틸(-CH2CH2CH2CH2-), s-부틸(-CHCH3CH2CH2-), i-부틸(-C(CH3)2CH2-), n-펜틸(-CH2CH2CH2CH2CH2-), s-펜틸(-CHCH3CH2CH2CH2-) 또는 n-헥실(-CH2CH2CH2CH2CH2CH2-)이 포함되나 이들로 한정되지 않는다.
"알케닐"은 전술된 알킬과 길이 및 가능한 치환 면에서 유사하나 하나 이상의 이중 결합을 함유하는 불포화 지방족 기를 포함한다. 예를 들면, 용어 "알케닐"은 직쇄 알케닐 기(예를 들면, 에테닐, 프로페닐, 부테닐, 펜테닐, 헥세닐, 헵테닐, 옥테닐, 노네닐, 데세닐), 및 분지쇄 알케닐 기를 포함한다. 일부 실시양태에서, 직쇄 또는 분지쇄 알케닐 기는 그의 골격에서 6개 이하의 탄소 원자를 갖는다(예를 들면, 직쇄의 경우 C2-C6, 분지쇄의 경우 C3-C6). 용어 "C2-C6"은 2개 내지 6개의 탄소 원자를 함유하는 알케닐 기를 포함한다. 용어 "C3-C6"은 3개 내지 6개의 탄소 원자를 함유하는 알케닐 기를 포함한다.
용어 "임의적으로 치환된 알케닐"은 비치환된 알케닐을 의미하거나 하나 이상의 탄화수소 골격 탄소 원자 상의 하나 이상의 수소 원자를 치환시키는 지정된 치환기를 갖는 알케닐을 의미한다. 이러한 치환기는 예를 들면, 알킬, 알케닐, 알키닐, 할로겐, 하이드록실, 알킬카보닐옥시, 아릴카보닐옥시, 알콕시카보닐옥시, 아릴옥시카보닐옥시, 카복실레이트, 알킬카보닐, 아릴카보닐, 알콕시카보닐, 아미노카보닐, 알킬아미노카보닐, 다이알킬아미노카보닐, 알킬티오카보닐, 알콕실, 포스페이트, 포스포네이토, 포스피네이토, 아미노(알킬아미노, 다이알킬아미노, 아릴아미노, 다이아릴아미노 및 알킬아릴아미노를 포함함), 아실아미노(알킬카보닐아미노, 아릴카보닐아미노, 카바모일 및 우레이도를 포함함), 아미디노, 이미노, 설프하이드릴, 알킬티오, 아릴티오, 티오카복실레이트, 설페이트, 알킬설피닐, 설포네이토, 설파모일, 설폰아미도, 니트로, 트라이플루오로메틸, 시아노, 헤테로사이클릴, 알킬아릴, 또는 방향족 또는 헤테로방향족 모이어티를 포함할 수 있다.
"알키닐"은 전술된 알킬과 길이 및 가능한 치환 면에서 유사하나 하나 이상의 삼중 결합을 함유하는 불포화 지방족 기를 포함한다. 예를 들면, "알키닐"은 직쇄 알키닐 기(예를 들면, 에티닐, 프로피닐, 부티닐, 펜티닐, 헥시닐, 헵티닐, 옥티닐, 노니닐, 데시닐) 및 분지쇄 알키닐 기를 포함한다. 일부 실시양태에서, 직쇄 또는 분지쇄 알키닐 기는 그의 골격에서 6개 이하의 탄소 원자를 갖는다(예를 들면, 직쇄의 경우 C2-C6, 분지쇄의 경우 C3-C6). 용어 "C2-C6"은 2개 내지 6개의 탄소 원자를 함유하는 알키닐 기를 포함한다. 용어 "C3-C6"은 3개 내지 6개의 탄소 원자를 함유하는 알키닐 기를 포함한다.
용어 "임의적으로 치환된 알키닐"은 비치환된 알키닐을 의미하거나 하나 이상의 탄화수소 골격 탄소 원자 상의 하나 이상의 수소 원자를 치환시키는 지정된 치환기를 갖는 알키닐을 의미한다. 이러한 치환기는 예를 들면, 알킬, 알케닐, 알키닐, 할로겐, 하이드록실, 알킬카보닐옥시, 아릴카보닐옥시, 알콕시카보닐옥시, 아릴옥시카보닐옥시, 카복실레이트, 알킬카보닐, 아릴카보닐, 알콕시카보닐, 아미노카보닐, 알킬아미노카보닐, 다이알킬아미노카보닐, 알킬티오카보닐, 알콕실, 포스페이트, 포스포네이토, 포스피네이토, 아미노(알킬아미노, 다이알킬아미노, 아릴아미노, 다이아릴아미노 및 알킬아릴아미노를 포함함), 아실아미노(알킬카보닐아미노, 아릴카보닐아미노, 카바모일 및 우레이도를 포함함), 아미디노, 이미노, 설프하이드릴, 알킬티오, 아릴티오, 티오카복실레이트, 설페이트, 알킬설피닐, 설포네이토, 설파모일, 설폰아미도, 니트로, 트라이플루오로메틸, 시아노, 아지도, 헤테로사이클릴, 알킬아릴, 또는 방향족 또는 헤테로방향족 모이어티를 포함할 수 있다.
다른 임의적으로 치환된 모이어티(예컨대, 임의적으로 치환된 사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴)는 비치환된 모이어티, 및 하나 이상의 지정된 치환기를 갖는 모이어티 둘다를 포함한다. 예를 들면, 치환된 헤테로사이클로알킬은 하나 이상의 알킬 기, 예컨대, 2,2,6,6-테트라메틸-피페리디닐 및 2,2,6,6-테트라메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리디닐을 포함한다.
"아릴"은 방향성을 갖는 기("공액" 기를 포함함), 또는 하나 이상의 방향족 고리를 갖는 다환형 시스템을 포함하고, 고리 구조에서 임의의 헤테로원자를 함유하지 않는다. 예에는 페닐, 벤질, 1,2,3,4-테트라하이드로나프탈레닐 등이 포함된다.
"헤테로아릴" 기는 고리 구조에서 1개 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 것을 제외하고 상기 정의된 바와 같은 아릴 기이고, "아릴 헤테로환" 또는 "헤테로방향족"으로서도 지칭될 수 있다. 본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "헤테로아릴"은 탄소 원자; 및 질소, 산소 및 황으로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택된 하나 이상의 헤테로원자, 예를 들면, 1개, 1개 또는 2개, 1개 내지 3개, 1개 내지 4개, 1개 내지 5개, 또는 1개 내지 6개의 헤테로원자, 또는 예를 들면, 1개, 2개, 3개, 4개, 5개 또는 6개의 헤테로원자로 구성된 안정한 5원, 6원 또는 7원 단환형, 또는 7원, 8원, 9원, 10원, 11원 또는 12원 이환형 방향족 헤테로환형 고리를 포함한다. 질소 원자는 치환될 수 있거나 비치환될 수 있다(즉, N 또는 NR, 이때 R은 H 또는 상기 정의된 바와 같은 다른 치환기이다). 질소 및 황 헤테로원자는 임의적으로 산화될 수 있다(즉, N→O 및 S(O)p, 이때 p = 1 또는 2). 방향족 헤테로환에서 S 및 O 원자의 총 수는 1을 초과하지 않는다는 것을 인식해야 한다.
헤테로아릴 기의 예에는 피롤, 푸란, 티오펜, 티아졸, 이소티아졸, 이미다졸, 트라이아졸, 테트라졸, 피라졸, 옥사졸, 이속사졸, 피리딘, 피라진, 피리다진, 피리미딘 등이 포함된다.
나아가, 용어 "아릴" 및 "헤테로아릴"은 다환형 아릴 및 헤테로아릴 기, 예를 들면, 삼환형, 이환형, 예를 들면, 나프탈렌, 벤즈옥사졸, 벤조다이옥사졸, 벤조티아졸, 벤조이미다졸, 벤조티오펜, 메틸렌다이옥시페닐, 퀴놀린, 이소퀴놀린, 나프티리딘, 인돌, 벤조푸란, 푸린, 벤조푸란, 데아자푸린 및 인돌리진을 포함한다.
다환형 방향족 고리의 경우, 모든 고리들이 방향족일 수 있지만(예를 들면, 퀴놀린), 고리들 중 하나만이 방향족일 필요가 있다(예를 들면, 2,3-다이하이드로인돌). 제2 고리도 융합될 수 있거나 가교될 수 있다.
사이클로알킬, 헤테로사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴 고리는 하나 이상의 고리 위치(예를 들면, 고리 형성 탄소 또는 헤테로원자, 예컨대, N)에서 전술된 치환기, 예를 들면, 알킬, 알케닐, 알키닐, 할로겐, 하이드록실, 알콕시, 알킬카보닐옥시, 아릴카보닐옥시, 알콕시카보닐옥시, 아릴옥시카보닐옥시, 카복실레이트, 알킬카보닐, 알킬아미노카보닐, 아르알킬아미노카보닐, 알케닐아미노카보닐, 알킬카보닐, 아릴카보닐, 아르알킬카보닐, 알케닐카보닐, 알콕시카보닐, 아미노카보닐, 알킬티오카보닐, 포스페이트, 포스포네이토, 포스피네이토, 아미노(알킬아미노, 다이알킬아미노, 아릴아미노, 다이아릴아미노 및 알킬아릴아미노를 포함함), 아실아미노(알킬카보닐아미노, 아릴카보닐아미노, 카바모일 및 우레이도를 포함함), 아미디노, 이미노, 설프하이드릴, 알킬티오, 아릴티오, 티오카복실레이트, 설페이트, 알킬설피닐, 설포네이토, 설파모일, 설폰아미도, 니트로, 트라이플루오로메틸, 시아노, 아지도, 헤테로사이클릴, 알킬아릴, 또는 방향족 또는 헤테로방향족 모이어티로 치환될 수 있다. 아릴 및 헤테로아릴 기는 방향족이 아닌 지환형 또는 헤테로환형 고리와 융합되거나 가교되어 다환형 시스템(예를 들면, 테트랄린, 메틸렌다이옥시페닐)을 형성할 수도 있다.
본원에서 사용된 바와 같이, "탄소환" 또는 "탄소환형 고리"는 특정된 수의 탄소를 갖는 임의의 안정한 일환형, 이환형 또는 삼환형 고리(이들 중 임의의 고리가 포화, 불포화 또는 방향족 고리일 수 있음)를 포함한다. 탄소환은 사이클로알킬 및 아릴을 포함한다. 예를 들면, C3-C14 탄소환은 3개, 4개, 5개, 6개, 7개, 8개, 9개, 10개, 11개, 12개, 13개 또는 14개의 탄소 원자를 갖는 단환형, 이환형 또는 삼환형 고리를 포함한다. 탄소환의 예에는 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로부테닐, 사이클로펜틸, 사이클로펜테닐, 사이클로헥실, 사이클로헵테닐, 사이클로헵틸, 사이클로헵테닐, 아다만틸, 사이클로옥틸, 사이클로옥테닐, 사이클로옥타다이에닐, 플루오레닐, 페닐, 나프틸, 인다닐, 아다만틸 및 테트라하이드로나프틸이 포함되나 이들로 한정되지 않는다. 예를 들면, [3.3.0]비사이클로옥탄, [4.3.0]비사이클로노난, [4.4.0]비사이클로데칸 및 [2.2.2]비사이클로옥탄을 포함하는 가교된 고리도 탄소환의 정의에 포함된다. 가교된 고리는 하나 이상의 탄소 원자가 2개의 비인접 탄소 원자를 연결할 때 발생된다. 한 실시양태에서, 가교된 고리는 1개 또는 2개의 탄소 원자이다. 가교는 단환형 고리를 삼환형 고리로 언제나 전환시킨다는 것이 인식된다. 고리가 가교된 경우, 이 고리에 대해 언급된 치환기는 가교 상에 존재할 수도 있다. 융합된(예를 들면, 나프틸, 테트라하이드로나프틸) 및 스피로 고리도 포함된다.
본원에서 사용된 바와 같이, "헤테로환" 또는 "헤테로환형 기"는 하나 이상의 고리 헤테로원자(예를 들면, N, O 또는 S)를 함유하는 임의의 고리 구조(포화, 불포화 또는 방향족)를 포함한다. 헤테로환은 헤테로사이클로알킬 및 헤테로아릴을 포함한다. 헤테로환의 예에는 모르폴린, 피롤리딘, 테트라하이드로티오펜, 피페리딘, 피페라진, 옥세탄, 피란, 테트라하이드로피란, 아제티딘 및 테트라하이드로푸란이 포함되나 이들로 한정되지 않는다.
헤테로환형 기의 예에는 아크리디닐, 아족시닐, 벤즈이미다졸릴, 벤조푸라닐, 벤조티오푸라닐, 벤조티오페닐, 벤즈옥사졸릴, 벤즈옥사졸리닐, 벤즈티아졸릴, 벤즈트라이아졸릴, 벤즈테트라졸릴, 벤즈이속사졸릴, 벤즈이소티아졸릴, 벤즈이미다졸리닐, 카바졸릴, 4aH-카바졸릴, 카보리닐, 크로마닐, 크로메닐, 신놀리닐, 데카하이드로퀴놀리닐, 2H,6H-1,5,2-다이티아지닐, 다이하이드로푸로[2,3-b]테트라하이드로푸란, 푸라닐, 푸라자닐, 이미다졸리디닐, 이미다졸리닐, 이미다졸릴, 1H-인다졸릴, 인돌레닐, 인돌리닐, 인돌리지닐, 인돌릴, 3H-인돌릴, 이사티노일, 이소벤조푸라닐, 이소크로마닐, 이소인다졸릴, 이소인돌리닐, 이소인돌릴, 이소퀴놀리닐, 이소티아졸릴, 이속사졸릴, 메틸렌다이옥시페닐, 모르폴리닐, 나프티리디닐, 옥타하이드로이소퀴놀리닐, 옥사다이아졸릴, 1,2,3-옥사다이아졸릴, 1,2,4-옥사다이아졸릴, 1,2,5-옥사다이아졸릴, 1,3,4-옥사다이아졸릴, 1,2,4-옥사다이아졸-5(4H)-온, 옥사졸리디닐, 옥사졸릴, 옥스인돌릴, 피리미디닐, 페난쓰리디닐, 페난쓰롤리닐, 페나지닐, 페노티아지닐, 페녹사티닐, 페녹사지닐, 프탈라지닐, 피페라지닐, 피페리디닐, 피페리도닐, 4-피페리도닐, 피페로닐, 프테리디닐, 푸리닐, 피라닐, 피라지닐, 피라졸리디닐, 피라졸리닐, 피라졸릴, 피리다지닐, 피리도옥사졸, 피리도이미다졸, 피리도티아졸, 피리디닐, 피리딜, 피리미디닐, 피롤리디닐, 피롤리닐, 2H-피롤릴, 피롤릴, 퀴나졸리닐, 퀴놀리닐, 4H-퀴놀리지닐, 퀴녹살리닐, 퀴누클리디닐, 테트라하이드로푸라닐, 테트라하이드로이소퀴놀리닐, 테트라하이드로퀴놀리닐, 테트라졸릴, 6H-1,2,5-티아다이아지닐, 1,2,3-티아다이아졸릴, 1,2,4-티아다이아졸릴, 1,2,5-티아다이아졸릴, 1,3,4-티아다이아졸릴, 티안쓰레닐, 티아졸릴, 티에닐, 티에노티아졸릴, 티에노옥사졸릴, 티에노이미다졸릴, 티오페닐, 트라이아지닐, 1,2,3-트라이아졸릴, 1,2,4-트라이아졸릴, 1,2,5-트라이아졸릴, 1,3,4-트라이아졸릴 및 잔테닐이 포함되나 이들로 한정되지 않는다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "치환된"은 지정된 원자 상의 임의의 하나 이상의 수소 원자가 표시된 기들로부터 선택된 기로 치환되되, 상기 지정된 원자의 정상 원자가가 초과되지 않고 치환이 안정한 화합물을 발생시킨다는 것을 의미한다. 치환기가 옥소 또는 케토(즉, =O)인 경우, 원자 상의 2개의 수소 원자가 치환된다. 케토 치환기는 방향족 모이어티 상에 존재하지 않는다. 본원에서 사용된 바와 같이, 고리 이중 결합은 2개의 인접한 고리 원자들 사이에 형성된 이중 결합(예를 들면, C=C, C=N 또는 N=N)이다. "안정한 화합물" 및 "안정한 구조"는 유용한 순도까지 반응 혼합물로부터 단리하고 효과적인 치료제로 제제화하는 과정에서 살아남을 정도로 충분히 강력한 화합물을 표시하기 위한 것이다.
치환기와의 결합이 고리 내의 2개의 원자들을 연결하는 결합과 교차하는 것으로 표시되어 있는 경우, 이러한 치환기는 고리 내의 임의의 원자에 결합될 수 있다. 치환기를 주어진 화학식의 화합물의 나머지에 결합시키는 원자를 표시하지 않으면서 상기 치환기가 나열되어 있는 경우, 이러한 치환기는 이러한 화학식에서 임의의 원자를 통해 결합될 수 있다. 치환기 및/또는 가변기의 조합이 안정한 화합물을 발생시키는 경우에만 이러한 조합이 허용된다.
임의의 가변기(예를 들면, R1)가 화합물에 대한 임의의 구성성분 또는 화학식에서 1회 초과의 빈도로 존재하는 경우, 각각의 존재에서 그의 정의는 모든 다른 존재에서의 그의 정의와 무관하다. 따라서, 예를 들면, 기가 0개 내지 2개의 R1 모이어티로 치환되는 것으로 표시되어 있는 경우, 상기 기는 2개 이하의 R1 모이어티로 임의로 치환될 수 있고, 각각의 존재에서 R1은 R1의 정의로부터 독립적으로 선택된다. 또한, 치환기 및/또는 가변기의 조합이 안정한 화합물을 발생시키는 경우에만 이러한 조합이 허용된다.
용어 "하이드록시" 또는 "하이드록실"은 -OH 또는 -O-를 갖는 기를 포함한다.
본원에서 사용된 바와 같이, "할로" 또는 "할로겐"은 플루오로, 클로로, 브로모 및 요오도를 의미한다. 용어 "과할로겐치환된"은 일반적으로 모든 수소 원자들이 할로겐 원자로 치환되어 있는 모이어티를 의미한다. 용어 "할로알킬" 또는 "할로알콕실"은 하나 이상의 할로겐 원자로 치환된 알킬 또는 알콕실을 의미한다.
용어 "카보닐"은 이중 결합에 의해 산소 원자에 연결된 탄소를 함유하는 화합물 및 모이어티를 포함한다. 카보닐을 함유하는 모이어티의 예에는 알데하이드, 케톤, 카복실산, 아미드, 에스테르, 무수물 등이 포함되나 이들로 한정되지 않는다.
용어 "카복실"은 -COOH 또는 이의 C1-C6 알킬 에스테르를 의미한다.
"아실"은 아실 라디칼(R-C(O)-) 또는 카보닐 기를 함유하는 모이어티를 포함한다. "치환된 아실"은 하나 이상의 수소 원자가 예를 들면, 알킬 기, 알키닐 기, 할로겐, 하이드록실, 알킬카보닐옥시, 아릴카보닐옥시, 알콕시카보닐옥시, 아릴옥시카보닐옥시, 카복실레이트, 알킬카보닐, 아릴카보닐, 알콕시카보닐, 아미노카보닐, 알킬아미노카보닐, 다이알킬아미노카보닐, 알킬티오카보닐, 알콕실, 포스페이트, 포스포네이토, 포스피네이토, 아미노(알킬아미노, 다이알킬아미노, 아릴아미노, 다이아릴아미노 및 알킬아릴아미노를 포함함), 아실아미노(알킬카보닐아미노, 아릴카보닐아미노, 카바모일 및 우레이도를 포함함), 아미디노, 이미노, 설프하이드릴, 알킬티오, 아릴티오, 티오카복실레이트, 설페이트, 알킬설피닐, 설포네이토, 설파모일, 설폰아미도, 니트로, 트라이플루오로메틸, 시아노, 아지도, 헤테로사이클릴, 알킬아릴, 또는 방향족 또는 헤테로방향족 모이어티에 의해 치환되어 있는 아실 기를 포함한다.
"아로일"은 카보닐 기에 결합된 아릴 또는 헤테로방향족 모이어티를 갖는 모이어티를 포함한다. 아로일 기의 예에는 페닐카복시, 나프틸카복시 등이 포함된다.
"알콕시알킬", "알킬아미노알킬" 및 "티오알콕시알킬"은 하나 이상의 탄화수소 골격 탄소 원자가 산소, 질소 또는 황 원자로 치환되어 있는, 전술된 바와 같은 알킬 기를 포함한다.
용어 "알콕시" 또는 "알콕실"은 산소 원자에 공유결합된 치환된 및 비치환된 알킬, 알케닐 및 알키닐 기를 포함한다. 알콕시 기 또는 알콕실 라디칼의 예에는 메톡시, 에톡시, 이소프로필옥시, 프로폭시, 부톡시 및 펜톡시 기가 포함되나 이들로 한정되지 않는다. 치환된 알콕시 기의 예에는 할로겐화된 알콕시 기가 포함된다. 알콕시 기는 알케닐, 알키닐, 할로겐, 하이드록실, 알킬카보닐옥시, 아릴카보닐옥시, 알콕시카보닐옥시, 아릴옥시카보닐옥시, 카복실레이트, 알킬카보닐, 아릴카보닐, 알콕시카보닐, 아미노카보닐, 알킬아미노카보닐, 다이알킬아미노카보닐, 알킬티오카보닐, 알콕실, 포스페이트, 포스포네이토, 포스피네이토, 아미노(알킬아미노, 다이알킬아미노, 아릴아미노, 다이아릴아미노 및 알킬아릴아미노를 포함함), 아실아미노(알킬카보닐아미노, 아릴카보닐아미노, 카바모일 및 우레이도를 포함함), 아미디노, 이미노, 설프하이드릴, 알킬티오, 아릴티오, 티오카복실레이트, 설페이트, 알킬설피닐, 설포네이토, 설파모일, 설폰아미도, 니트로, 트라이플루오로메틸, 시아노, 아지도, 헤테로사이클릴, 알킬아릴, 또는 방향족 또는 헤테로방향족 모이어티와 같은 기로 치환될 수 있다. 할로겐으로 치환된 알콕시 기의 예에는 플루오로메톡시, 다이플루오로메톡시, 트라이플루오로메톡시, 클로로메톡시, 다이클로로메톡시 및 트라이클로로메톡시가 포함되나 이들로 한정되지 않는다.
용어 "에테르" 또는 "알콕시"는 2개의 탄소 원자 또는 헤테로원자에 결합된 산소를 함유하는 화합물 또는 모이어티를 포함한다. 예를 들면, 상기 용어는 알킬 기에 공유결합된 산소 원자에 공유결합된 알킬, 알케닐 또는 알키닐 기를 의미하는 "알콕시알킬"을 포함한다.
용어 "에스테르"는 카보닐 기의 탄소에 결합된 산소 원자에 결합된 탄소 또는 헤테로원자를 함유하는 화합물 또는 모이어티를 포함한다. 용어 "에스테르"는 알콕시카복시 기, 예컨대, 메톡시카보닐, 에톡시카보닐, 프로폭시카보닐, 부톡시카보닐, 펜톡시카보닐 등을 포함한다.
용어 "티오알킬"은 황 원자에 연결된 알킬 기를 함유하는 화합물 또는 모이어티를 포함한다. 티오알킬 기는 알킬, 알케닐, 알키닐, 할로겐, 하이드록실, 알킬카보닐옥시, 아릴카보닐옥시, 알콕시카보닐옥시, 아릴옥시카보닐옥시, 카복실레이트, 카복시산, 알킬카보닐, 아릴카보닐, 알콕시카보닐, 아미노카보닐, 알킬아미노카보닐, 다이알킬아미노카보닐, 알킬티오카보닐, 알콕실, 아미노(알킬아미노, 다이알킬아미노, 아릴아미노, 다이아릴아미노 및 알킬아릴아미노를 포함함), 아실아미노(알킬카보닐아미노, 아릴카보닐아미노, 카바모일 및 우레이도를 포함함), 아미디노, 이미노, 설프하이드릴, 알킬티오, 아릴티오, 티오카복실레이트, 설페이트, 알킬설피닐, 설포네이토, 설파모일, 설폰아미도, 니트로, 트라이플루오로메틸, 시아노, 아지도, 헤테로사이클릴, 알킬아릴, 또는 방향족 또는 헤테로방향족 모이어티와 같은 기로 치환될 수 있다.
용어 "티오카보닐" 또는 "티오카복시"는 이중 결합을 통해 황 원자에 연결된 탄소를 함유하는 화합물 및 모이어티를 포함한다.
용어 "티오에테르"는 2개의 탄소 원자 또는 헤테로원자에 결합된 황 원자를 함유하는 모이어티를 포함한다. 티오에테르의 예에는 알크티오알킬, 알크티오알케닐 및 알크티오알키닐이 포함되나 이들로 한정되지 않는다. 용어 "알크티오알킬"은 알킬 기에 결합된 황 원자에 결합된 알킬, 알케닐 또는 알키닐 기를 갖는 모이어티를 포함한다. 유사하게, 용어 "알크티오알케닐"은 알킬, 알케닐 또는 알키닐 기가 알케닐 기에 공유결합된 황 원자에 결합되어 있는 모이어티를 의미하고, "알크티오알키닐"은 알킬, 알케닐 또는 알키닐 기가 알키닐 기에 공유결합된 황 원자에 결합되어 있는 모이어티를 의미한다.
본원에서 사용된 바와 같이, "아민" 또는 "아미노"는 비치환된 또는 치환된 -NH2를 의미한다. "알킬아미노"는 -NH2의 질소가 하나 이상의 알킬 기에 결합되어 있는 화합물의 기를 포함한다. 알킬아미노 기의 예에는 벤질아미노, 메틸아미노, 에틸아미노, 펜에틸아미노 등이 포함된다. "다이알킬아미노"는 -NH2의 질소가 2개 이상의 추가 알킬 기에 결합되어 있는 기를 포함한다. 다이알킬아미노 기의 예에는 다이메틸아미노 및 다이에틸아미노가 포함되나 이들로 한정되지 않는다. "아릴아미노" 및 "다이아릴아미노"는 질소가 각각 하나 이상의 아릴 기 또는 2개의 아릴 기에 결합되어 있는 기를 포함한다. "아미노아릴" 및 "아미노아릴옥시"는 아미노로 치환된 아릴 및 아릴옥시를 의미한다. "알킬아릴아미노", "알킬아미노아릴" 또는 "아릴아미노알킬"은 하나 이상의 알킬 기 및 하나 이상의 아릴 기에 결합된 아미노 기를 의미한다. "알크아미노알킬"은 알킬 기에 결합된 질소 원자에 결합된 알킬, 알케닐 또는 알키닐 기를 의미한다. "아실아미노"는 질소가 아실 기에 결합되어 있는 기를 포함한다. 아실아미노의 예에는 알킬카보닐아미노, 아릴카보닐아미노, 카바모일 및 우레이도 기가 포함되나 이들로 한정되지 않는다.
용어 "아미드" 또는 "아미노카복시"는 카보닐 또는 티오카보닐 기의 탄소에 결합된 질소 원자를 함유하는 화합물 또는 모이어티를 포함한다. 상기 용어는 카보닐 또는 티오카보닐 기의 탄소에 결합된 아미노 기에 결합된 알킬, 알케닐 또는 알키닐 기를 포함하는 "알크아미노카복시" 기를 포함한다. 또한, 상기 용어는 카보닐 또는 티오카보닐 기의 탄소에 결합된 아미노 기에 결합된 아릴 또는 헤테로아릴 모이어티를 포함하는 "아릴아미노카복시" 기를 포함한다. 용어 "알킬아미노카복시", "알케닐아미노카복시", "알키닐아미노카복시" 및 "아릴아미노카복시"는 알킬, 알케닐, 알키닐 및 아릴 모이어티 각각이 카보닐 기의 탄소에 결합된 질소 원자에 결합되어 있는 모이어티를 포함한다. 아미드는 치환기, 예컨대, 직쇄 알킬, 분지쇄 알킬, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴 또는 헤테로환으로 치환될 수 있다. 아미드 기 상의 치환기는 더 치환될 수 있다.
질소를 함유하는 본 발명의 화합물은 산화제(예를 들면, 3-클로로퍼록시벤조산(m-CPBA) 및/또는 과산화수소)를 사용한 처리에 의해 N-산화물로 전환되어 본 발명의 다른 화합물을 제공할 수 있다. 따라서, 원자가 및 구조에 의해 허용되는 경우, 기재되고 특허청구된 모든 질소 함유 화합물들은 기재된 화합물 및 이의 N-산화물 유도체(N→O 또는 N+-O-로서 표시될 수 있음) 둘다를 포함하는 것으로 간주된다. 나아가, 다른 경우, 본 발명의 화합물에서 질소는 N-하이드록시 또는 N-알콕시 화합물로 전환될 수 있다. 예를 들면, N-하이드록시 화합물은 산화제, 예컨대, m-CPBA에 의한 모 아민의 산화에 의해 제조될 수 있다. 또한, 원자가 및 구조에 의해 허용되는 경우, 기재되고 특허청구된 모든 질소 함유 화합물은 기재된 화합물 및 이의 N-하이드록시(즉, N-OH) 및 N-알콕시(즉, N-OR, 이때 R은 치환된 또는 비치환된 C1-C6 알킬, C1-C6 알케닐, C1-C6 알키닐, 3원 내지 14원 탄소환 또는 3원 내지 14원 헤테로환임) 유도체 둘다를 포함하는 것으로 간주된다.
본 명세서에서, 화합물의 구조식은 몇몇 경우 편의를 위해 일부 이성질체를 나타내지만, 본 발명은 모든 이성질체들, 예컨대, 기하이성질체, 비대칭 탄소에 기초한 광학이성질체, 입체이성질체, 호변이성질체 등을 포함하고, 모든 이성질체들이 동일한 수준의 활성을 갖지 않을 수 있다는 것이 이해된다. 추가로, 화학식으로 표시된 화합물에 대한 결정 다형성이 존재할 수 있다. 임의의 결정 형태, 결정 형태 혼합물, 또는 이들의 무수물 또는 수화물이 본 발명의 범위 내에 포함된다는 것이 인식된다. 나아가, 본 발명의 화합물의 생체내 분해에 의해 생성되는 소위 대사물질이 본 발명의 범위 내에 포함된다.
"이성질체화"는 동일한 분자식을 갖지만 그들의 원자의 결합 순서 또는 공간에서의 그들의 원자의 배열에서 상이한 화합물들을 의미한다. 공간에서의 그들의 원자의 배열에서 상이한 이성질체는 "입체이성질체"로 명명된다. 서로의 거울상이 아닌 입체이성질체는 "부분입체이성질체"로 명명되고, 서로의 중첩불가능한 거울상인 입체이성질체는 "거울상이성질체" 또는 종종 광학이성질체로 명명된다. 반대 키랄성의 개별 거울상이성질체 형태들을 동등한 양으로 함유하는 혼합물은 "라세미체 혼합물"로 명명된다.
4개의 동일하지 않은 치환기들에 결합된 탄소 원자는 "키랄 중심"으로 명명된다.
"키랄 이성질체"는 하나 이상의 키랄 중심을 갖는 화합물을 의미한다. 하나 초과의 키랄 중심을 갖는 화합물은 개별 부분입체이성질체로서 존재할 수 있거나 "부분입체이성질체 혼합물"로 명명된 부분입체이성질체의 혼합물로서 존재할 수 있다. 1개의 키랄 중심이 존재하는 경우, 입체이성질체는 그 키랄 중심의 절대 배위(R 또는 S)를 특징으로 할 수 있다. 절대 배위는 키랄 중심에 부착된 치환기들의 공간에서의 배열을 의미한다. 고려되는 키랄 중심에 부착된 치환기들은 칸-인골드-프렐로그(Cahn, Ingold and Prelog)의 순서 규칙에 따라 등급이 매겨진다(Cahn et al., Angew. Chem. Inter. Edit. 1966, 5, 385; errata 511; Cahn et al., Angew. Chem. 1966, 78, 413; Cahn and Ingold, J. Chem. Soc. 1951 (London), 612; Cahn et al., Experientia 1956, 12, 81; Cahn, J. Chem. Educ. 1964, 41, 116).
"기하이성질체"는 이중 결합 또는 사이클로알킬 연결기(예를 들면, 1,3-사이클로부틸) 주위의 방해된 회전으로 인해 존재하는 부분입체이성질체를 의미한다. 이들 배위들은 기가 칸-인골드-프렐로그 규칙에 따라 분자에서 이중 결합의 동일 또는 반대 면 상에 존재한다는 것을 표시하는 접두사 시스 및 트랜스, 또는 Z 및 E에 의해 그들의 명칭에서 구별된다.
본 발명의 화합물은 상이한 키랄 이성질체 또는 기하이성질체로서 표시될 수 있다는 것이 이해되어야 한다. 화합물이 키랄 이성질체 또는 기하이성질체 형태를 갖는 경우, 모든 이성질체 형태들이 본 발명의 범위 내에 포함되고 화합물의 명명이 임의의 이성질체 형태를 배제하지 않는다는 것도 이해되어야 하고, 모든 이성질체들이 동일한 수준의 활성을 갖지 않을 수 있다는 것이 이해되어야 한다.
나아가, 본 발명에서 논의된 구조 및 다른 화합물은 이들의 모든 아트로픽(atropic) 이성질체를 포함하고, 모든 아트로픽 이성질체들이 동일한 수준의 활성을 갖지 않을 수 있다는 것이 이해되어야 한다. "아트로픽 이성질체"는 2종의 이성질체들의 원자들이 공간에서 상이하게 배열되어 있는 입체이성질체의 한 유형이다. 아트로픽 이성질체는 중심 결합 주위의 큰 기의 회전 방해에 의해 야기된 제한된 회전으로 인해 존재한다. 이러한 아트로픽 이성질체는 전형적으로 혼합물로서 존재하지만, 크로마토그래피 기법의 최근 진보의 결과로서, 선택 경우에서 2종의 아트로픽 이성질체들의 혼합물을 분리하는 것이 가능하게 되었다.
"호변이성질체"는 평형 상태에서 존재하고 한 이성질체 형태로부터 또 다른 이성질체 형태로 용이하게 전환되는 2종 이상의 구조이성질체들 중 하나이다. 이 전환은 인접 공액 이중 결합의 전환을 수반하는 수소 원자의 형식적 이동을 초래한다. 호변이성질체는 용액 중의 호변이성질체 세트의 혼합물로서 존재한다. 호변이성질체화가 가능한 용액에서, 호변이성질체의 화학 평형이 도달될 것이다. 호변이성질체의 정확한 비는 온도, 용매 및 pH를 포함하는 여러 인자들에 의존한다. 호변이성질체화에 의해 상호전환될 수 있는 호변이성질체의 개념은 호변이성질화로서 지칭된다.
가능한 호변이성질화의 다양한 유형들 중에서 2 유형이 통상적으로 관찰된다. 케토-에놀 호변이성질화에서, 전자 및 수소 원자의 동시적인 이동이 발생한다. 고리 쇄 호변이성질화는 당 쇄 분자의 알데하이드 기(-CHO)가 동일한 분자의 하이드록시 기(-OH)들 중 하나와 반응하여 글루코스에 의해 나타나는 환형(고리형) 형태를 제공한 결과로서 발생한다.
통상의 호변이성질체 쌍은 다음과 같다: 케톤-에놀, 아미드-니트릴, 락탐-락팀, 헤테로환형 고리(예를 들면, 뉴클레오염기, 예컨대, 구아닌, 티민 및 사이토신)에서의 아미드-이미드산 호변이성질화, 이민-엔아민 및 엔아민-엔아민. 케토-에놀 평형의 한 예는 하기 나타낸 바와 같은 피리딘-2(1H)-온과 상응하는 피리딘-2-올 사이의 평형이다.
Figure pat00071
본 발명의 화합물이 상이한 호변이성질체로서 표시될 수 있다는 것이 이해되어야 한다. 화합물이 호변이성질체 형태를 갖는 경우, 모든 호변이성질체 형태들이 본 발명의 범위 내에 포함되고, 화합물의 명명이 임의의 호변이성질체 형태를 배제하지 않는다는 것도 이해되어야 한다. 일부 호변이성질체들은 다른 호변이성질체들보다 더 높은 수준의 활성을 가질 수 있다는 것이 이해될 것이다.
용어 "결정 다형체", "다형체" 또는 "결정 형태"는 화합물(또는 이의 염 또는 용매화물)이 상이할 결정 팩킹 배열들(이들 모두 동일한 원소 조성을 가짐)로 결정화할 수 있는 결정 구조를 의미한다. 상이한 결정 형태들은 통상적으로 상이한 X-선 회절 패턴, 적외선 스펙트럼, 융점, 밀도 경도, 결정 형태, 광학적 및 전기적 성질, 안정성 및 가용성을 갖는다. 재결정화 용매, 결정화 속도, 저장 온도 및 다른 인자들은 한 결정 형태가 우세하게 할 수 있다. 화합물의 결정 다형체는 상이한 조건 하에 결정화에 의해 제조될 수 있다.
본원에 개시된 임의의 화학식의 화합물들은 화합물들 자체뿐만 아니라, 적용가능한 경우 이들의 염, 이들의 에스테르, 이들의 용매화물 및 이들의 전구약물도 포함한다. 예를 들면, 염은 아릴- 또는 헤테로아릴-치환된 벤젠 화합물 상의 음이온과 양으로 하전된 기(예를 들면, 아미노) 사이에 형성될 수 있다. 적합한 음이온은 클로라이드, 브로마이드, 요오다이드, 설페이트, 비설페이트, 설파메이트, 니트레이트, 포스페이트, 시트레이트, 메탄설포네이트, 트라이플루오로아세테이트, 글루타메이트, 글루쿠로네이트, 글루타레이트, 말레이트, 말레에이트, 석시네이트, 푸마레이트, 타르트레이트, 토실레이트, 살리실레이트, 락테이트, 나프탈렌설포네이트 및 아세테이트(예를 들면, 트라이플루오로아세테이트)를 포함한다. 용어 "약학적으로 허용가능한 음이온"은 약학적으로 허용가능한 염을 형성하기에 적합한 음이온을 의미한다. 마찬가지로, 염은 아릴- 또는 헤테로아릴-치환된 벤젠 화합물 상의 양이온과 음으로 하전된 기(예를 들면, 카복실레이트) 사이에 형성될 수도 있다. 적합한 양이온은 나트륨 이온, 칼륨 이온, 마그네슘 이온, 칼슘 이온 및 암모늄 양이온, 예컨대, 테트라메틸암모늄 이온을 포함한다. 아릴- 또는 헤테로아릴-치환된 벤젠 화합물은 4차 질소 원자를 함유하는 염도 포함한다. 전구약물의 예에는 대상체에게 투여되었을 때 활성 아릴- 또는 헤테로아릴-치환된 벤젠 화합물을 제공할 수 있는 에스테르 및 다른 약학적으로 허용가능한 유도체가 포함된다.
추가로, 본 발명의 화합물, 예를 들면, 화합물의 염은 수화된 또는 비수화된(무수) 형태로 존재할 수 있거나 다른 용매 분자와 함께 용매화물로서 존재할 수 있다. 수화물의 비한정적 예에는 일수화물, 이수화물 등이 포함된다. 용매화물의 비한정적 예에는 에탄올 용매화물, 아세톤 용매화물 등이 포함된다.
"용매화물"은 화학양론적 또는 비화학양론적 양의 용매를 함유하는 용매 부가 형태를 의미한다. 몇몇 화합물들은 결정질 고체 상태에서 고정된 몰 비의 용매 분자를 포획하여 용매화물을 형성하는 경향을 갖는다. 용매가 물인 경우, 형성된 용매화물은 수화물이고, 용매가 알코올인 경우, 형성된 용매화물은 알코올레이트이다. 수화물은 하나 이상의 물 분자와 하나의 물질 분자의 조합에 의해 형성되고, 이때 물은 H2O로서 그의 분자 상태를 보유한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "유사체"는 서로 구조적으로 유사하나 (상이한 원소의 원자에 의한 하나의 원자의 치환, 특정 작용기의 존재, 또는 또 다른 작용기에 의한 하나의 작용기의 치환에서와 같이) 조성에서 약간 상이한 화합물을 의미한다. 따라서, 유사체는 작용 및 외관에서 기준 화합물과 유사하거나 비슷하지만 구조 또는 기원에서 기준 화합물과 유사하거나 비슷하지 않은 화합물이다.
본원에서 정의된 바와 같이, 용어 "유도체"는 공통된 모핵 구조를 갖고 본원에 기재된 다양한 기들로 치환된 화합물을 의미한다. 예를 들면, 화학식 I로 표시되는 모든 화합물들이 아릴- 또는 헤테로아릴-치환된 벤젠 화합물이고 공통된 모핵으로서 화학식 I을 갖는다.
용어 "생동배체(bioisostere)"는 원자 또는 원자 군을 또 다른 대체로 유사한 원자 또는 원자 군으로 치환시킴으로써 발생된 화합물을 의미한다. 생동배체성 치환의 목적은 모 화합물과 유사한 생물학적 성질을 갖는 신규 화합물을 생성하는 것이다. 생동배체 치환은 물리화학 또는 위상기하학에 기초할 수 있다. 카복실산 생동배체의 예에는 아실 설폰이미드, 테트라졸, 설포네이트 및 포스포네이트가 포함되나 이들로 한정되지 않는다. 예를 들면, 문헌(Patani and LaVoie, Chem. Rev. 96, 3147-3176, 1996)을 참조한다.
본 발명은 본 화합물에 존재하는 원자들의 모든 동위원소들을 포함하고자 한다. 동위원소는 동일한 원자 번호를 갖되 상이한 질량 수를 갖는 원자를 포함한다. 한정 없이 일반적으로 예를 들면, 수소의 동위원소는 삼중수소 및 이중수소를 포함하고, 탄소의 동위원소는 C-13 및 C-14를 포함한다.
2. 아릴- 또는 헤테로아릴-치환된 벤젠 화합물의 합성
본 발명은 본원에 개시된 임의의 화학식의 화합물의 합성 방법을 제공한다. 본 발명은 실시예에 나타낸 하기 반응식에 따라 본 발명의 다양한 개시된 화합물들을 합성하는 상세한 방법도 제공한다.
명세서 전체에서, 조성물이 특정 성분을 갖거나, 포괄하거나 포함하는 것으로서 기재되어 있는 경우, 조성물은 본질적으로 언급된 성분들로 구성되거나 언급된 성분들로 구성된다는 것도 고려된다. 유사하게, 방법 또는 공정이 특정 공정 단계를 갖거나, 포괄하거나 포함하는 것으로서 기재되어 있는 경우, 공정은 또한 본질적으로 언급된 공정 단계로 구성되거나 언급된 공정 단계로 구성된다. 추가로, 본 발명이 작동가능한 상태를 유지하는 한, 단계의 순서 또는 일부 작업을 수행하는 순서는 중요하지 않다는 것이 이해되어야 한다. 더욱이, 2개 이상의 단계 또는 작업이 동시에 수행될 수 있다.
본 발명의 합성 공정은 매우 다양한 작용기들을 견뎌낼 수 있으므로 다양한 치환된 출발 물질들이 사용될 수 있다. 일부 경우 화합물을 이의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르 또는 전구약물로 더 전환시키는 것이 바람직할 수 있지만, 상기 공정은 일반적으로 전체 공정의 말기에 또는 말기 근처에 원하는 최종 화합물을 제공한다.
당업자에게 공지되어 있거나 본원의 교시에 비추어 볼 때 당업자에게 자명한 표준 합성 방법 및 절차를 이용함으로써, 상업적으로 입수가능한 출발 물질, 문헌에서 공지되어 있는 화합물 또는 용이하게 제조된 중간체를 사용하는 다양한 방식으로 본 발명의 화합물을 제조할 수 있다. 유기 분자의 제조, 및 작용기 변환 및 조작에 대한 표준 합성 방법 및 절차는 관련 과학 문헌 또는 당분야의 표준 교재로부터 입수될 수 있다. 어느 한 출처 또는 여러 출처로 한정되지 않지만, 본원에 참고로 도입되는 고전 교재, 예컨대, 문헌(Smith, M. B., March, J., March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, 5th edition, John Wiley & Sons: New York, 2001); 문헌(Greene, T.W., Wuts, P.G. M., Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd edition, John Wiley & Sons: New York, 1999); 문헌(R. Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers (1989)); 문헌(L. Fieser and M. Fieser, Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1994)); 및 문헌(L. Paquette, ed., Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1995))이 당업자에게 공지되어 있는 유기 합성의 유용한 인정된 참고교재이다. 합성 방법의 하기 설명은 본 발명의 화합물의 제조에 대한 일반적인 절차를 한정하기 위해서가 아니라 예시하기 위해 기재되어 있다.
본 발명의 화합물은 당업자에게 익숙한 다양한 방법들에 의해 편리하게 제조될 수 있다. 본원에 개시된 임의의 화학식으로 표시되는 본 발명의 화합물은 상업적으로 입수가능한 출발 물질 또는 문헌 절차의 이용을 통해 제조될 수 있는 출발 물질로부터 하기 반응식 1 내지 10에 나타낸 절차에 따라 제조될 수 있다. 달리 특정되어 있지 않은 한, 반응식 1 내지 10에서 Z 및 R 기(예컨대, R1, R2, R3, R4, R6, R7, R8 및 R12)는 본원에 개시된 임의의 화학식에서 정의된 바와 같다.
당분야에서 통상의 기술을 가진 자는 본원에 기재된 반응 순서 및 합성 반응식 동안 일부 단계들, 예컨대, 보호기의 도입 및 제거의 순서가 변화될 수 있다는 것을 인식할 것이다.
당분야에서 통상의 기술을 가진 자는 일부 기들이 보호기의 사용을 통해 반응 조건으로부터의 보호를 필요로 할 수 있다는 것을 인식할 것이다. 보호기는 분자의 유사한 작용기들을 구별하는 데에도 사용될 수 있다. 보호기들의 목록 및 이들 기들을 도입하고 제거하는 방법은 문헌(Greene, T.W., Wuts, P.G. M., Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd edition, John Wiley & Sons: New York, 1999)에서 발견될 수 있다.
바람직한 보호기는 하기 보호기들을 포함하나 이들로 한정되지 않는다:
하이드록실 모이어티의 경우: TBS, 벤질, THP, Ac
카복실산의 경우: 벤질 에스테르, 메틸 에스테르, 에틸 에스테르, 알릴 에스테르
아민의 경우: Cbz, BOC, DMB
다이올의 경우: Ac(x2) TBS(x2), 또는 합쳐진 경우 아세토나이드
티올의 경우: Ac
벤즈이미다졸의 경우: SEM, 벤질, PMB, DMB
알데하이드의 경우: 다이-알킬 아세탈, 예컨대, 다이메톡시 아세탈 또는 다이에틸 아세틸.
본원에 기재된 반응식에서, 다수의 입체이성질체들이 생성될 수 있다. 특정 입체이성질체가 표시되어 있지 않은 경우, 이것은 반응으로부터 생성될 수 있었던 모든 가능한 입체이성질체들을 의미하는 것으로 이해된다. 당분야에서 통상의 기술을 가진 자는 1종의 이성질체를 우세하게 제공하도록 반응을 최적화할 수 있거나, 단일 이성질체를 생성하도록 신규 반응식을 고안할 수 있다는 것을 인식할 것이다. 혼합물이 생성되는 경우, 기법, 예컨대, 분취용 박층 크로마토그래피, 분취용 HPLC, 분취용 키랄 HPLC 또는 분취용 SFC를 이용하여 이성질체를 분리할 수 있다.
하기 약어들이 본 명세서 전체에서 사용되고 다음과 같이 정의된다:
AA: 암모늄 아세테이트
CN: 아세토니트릴
Ac: 아세틸
AcOH: 아세트산
atm: 대기압
aq.: 수성
BID 또는 b.i.d.: 하루 두 번(1일 2회)
tBuOK: 칼륨 t-부톡사이드
Bn: 벤질
BOC: tert-부톡시 카보닐
BOP: (벤조트라이아졸-1-일옥시)트라이스(다이메틸아미노)-포스포늄헥사플루오로포스페이트
Cbz: 벤질옥시 카보닐
CDCl3: 중수소로 치환된 클로로포름
CH2Cl2: 다이클로로메탄
COMU: (1-시아노-2-에톡시-2-옥소에틸리덴아미노옥시)다이메틸-아미노-모르폴리노-카베늄 헥사플루오로포스페이트
d: 일
DBU: 1,8-다이아자비사이클로[5.4.0]운덱-7-엔
DCE: 1,2-다이클로로에탄
DCM: 다이클로로메탄
DEAD: 다이에틸 아조다이카복실레이트
DIAD: 다이이소프로필 아조다이카복실레이트
DiBAL-H: 다이이소부틸 알루미늄 하이드라이드
DIPEA: N,N-다이이소프로필에틸아민(후니그(Hunig) 염기)
DMA: 다이메틸아세트아미드
DMAP: N,N-다이메틸-4-아미노피리딘
DMB: 2,4-다이메톡시 벤질
DMF: N,N-다이메틸포름아미드
DMSO: 다이메틸 설폭사이드
DPPA: 다이페닐포스포닉 아자이드
EA 또는 EtOAc: 에틸 아세테이트
EDC 또는 EDCI: N-(3-다이메틸아미노프로필)-N'-에틸카보다이이미드
Et2O: 다이에틸 에테르
ELS: 증발 광 산란
ESI-: 전자분무 음성 모드
ESI+: 전자분무 양성 모드
Et3N 또는 TEA: 트라이에틸아민
EtOH: 에탄올
FA: 포름산
FC 또는 FCC: 플래쉬 크로마토그래피
h: 시
H2O: 물
HATU: O-(7-아자벤조트라이아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸유로늄 헥사플루오로포스페이트
HOAT: 1-하이드록시-7-아자벤조트라이아졸
HOBt: 1-하이드록시벤조트라이아졸
HO-Su: N-하이드록시석신이미드
HCl: 염화수소 또는 염산
HPLC: 고성능 액체 크로마토그래피
K2CO3: 탄산칼륨
KHMDs: 칼륨 헥사메틸다이실라자이드
LC/MS 또는 LC-MS: 액체 크로마토그래피 질량 스펙트럼
LDA: 리튬 다이이소프로필아미드
LiHMDs: 리튬 헥사메틸다이실라자이드
LG: 이탈기
M: 몰
m/z: 질량/전하 비
m-CPBA: 메타-클로로퍼벤조산
MeCN: 아세토니트릴
MeOD: d4-메탄올
MeI: 메틸 요오다이드
MS3Å: 3Å 분자체
MgSO4: 황산마그네슘
min: 분
Ms: 메실
MsCl: 메실 클로라이드
MsO: 메실레이트
MS: 질량 스펙트럼
MWI: 마이크로파 조사
Na2CO3: 탄산나트륨
Na2SO4: 황산나트륨
NaHCO3: 중탄산나트륨
NaHMDs: 나트륨 헥사메틸다이실라자이드
NaOH: 수산화나트륨
NaHCO3: 중탄산나트륨
Na2SO4: 황산나트륨
NIS: N-요오도석신이미드
NMR: 핵 자기 공명
o/n 또는 O/N: 밤새
Pd/C: 탄소 상 팔라듐
Pd(dppf)Cl2.DCM: [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]다이클로로팔라듐(II), 다이클로로메탄과의 착물
PPAA: 1-프로판포스폰산 환형 무수물
Pd(OH)2: 팔라듐 다이하이드록사이드
PE: 석유 에테르
PG: 보호기
PMB: 파라-메톡시벤질
p.o.: 경구로(경구 투여)
ppm: 백만분율
pre HPLC: 분취용 고성능 액체 크로마토그래피
prep TLC: 분취용 박층 크로마토그래피
p-TsOH: 파라-톨루엔설폰산
PyBOP: (벤조트라이아졸-1-일옥시)트라이피롤리디노포스포늄헥사플루오로포스페이트
QD 또는 q.d.: 하루에 한번(1일 1회)
RBF: 환저 플라스크
RP-HPLC: 역상 고성능 액체 크로마토그래피
Rt 또는 RT: 실온
SEM: (트라이메틸실릴)에톡시메틸
SEMCl: (트라이메틸실릴)에톡시메틸 클로라이드
SFC: 초임계 크로마토그래피
SGC: 실리카 겔 크로마토그래피
STAB: 나트륨 트라이아세톡시 보로하이드라이드
TBAF: 테트라-n-부틸암모늄 플루오라이드
TBME: tert-부틸 메틸 에테르
TEA: 트라이에틸아민
TFA: 트라이플루오로아세트산
TfO: 트라이플레이트
THF: 테트라하이드로푸란
THP: 테트라하이드로피란
TID 또는 t.i.d: 하루에 세 번(1일 3회)
TLC: 박층 크로마토그래피
TMSCl: 트라이메틸실릴 클로라이드
Ts: 토실
TsOH: 토스산(tosic acid)
UV: 자외선
반응식 1
Figure pat00072
반응식 1은 잘 확립된 화학반응을 이용하는 일반적인 경로에 따른 변경된 아릴 유사체의 합성을 보여준다. 치환된 니트로벤조산(이들 중 대다수는 상업적으로 입수될 수 있거나 적절한 치환된 벤조산의 니트레이트화 또는 당업자에게 공지되어 있는 다른 화학반응에 의해 제조될 수 있음)을 적절한 온도, 예컨대, 60℃에서 적절한 염기, 예컨대, 탄산나트륨의 존재 하에 극성 용매, 예컨대, DMF 중의 메틸 요오다이드로 처리하여 그들의 메틸 에스테르로 전환시킬 수 있다(단계 1). 적절한 온도, 예컨대, 80℃에서 양성자성 용매, 예컨대, 에탄올 중의 산, 예컨대, 염화암모늄의 존재 하에 적절한 환원제, 예컨대, 철을 사용하여 니트로 기를 아민으로 환원시킬 수 있다(단계 2). 적절한 용매, 예컨대, 메탄올 중의 적절한 환원제, 예컨대, 나트륨 시아노보로하이드라이드 및 촉매 산, 예컨대, 아세트산의 존재 하에 적절한 케톤 또는 알데하이드를 사용한 환원성 아민화를 이용하여 R7의 도입을 수행할 수 있다. 적절한 온도, 예컨대, 80℃에서 적절한 극성 용매, 예컨대, 아세토니트릴 중의 약염기, 예컨대, 탄산세슘의 존재 하에 R8-LG(이때, LG는 이탈기, 예컨대, 요오드임)를 사용하여 알킬화함으로써 다양한 R8 기들을 도입할 수 있다(단계 4). 대안적으로, 적절한 용매, 예컨대, 메탄올 중의 적절한 환원제, 예컨대, 나트륨 시아노보로하이드라이드 및 촉매 산, 예컨대, 아세트산의 존재 하에 R8-케톤 또는 R8-알데하이드를 사용한 환원성 아민화를 이용하여 R8 기들을 도입할 수 있다. 표준 2 단계 프로토콜을 이용하여 에스테르 모이어티를 아미드로 전환시킬 수 있다. 극성 용매, 예컨대, 에탄올 중의 적절한 염기, 예컨대, 수산화나트륨을 사용하여 에스테르를 상응하는 산으로 가수분해할 수 있다(단계 5). 그 다음, 상기 산을 표준 아미드 커플링 반응(이때, 적절한 아민이 적절한 용매, 예컨대, DMSO 중의 적절한 아미드 커플링 시약, 예컨대, PyBOP와 함께 첨가될 것임)으로 처리하여 원하는 아미드를 제공할 것이다(단계 6).
반응식 2
Figure pat00073
R6 치환기의 성질에 따라, 추가 화학적 변경을 이용하여 R6 치환기를 대안적 R6 치환기로 전환시킬 수 있다. 이러한 변경의 대표적인 예에는 수소첨가, 보호기 제거 후 추가 아미드 커플링 반응, 팔라듐에 의해 촉진된 커플링 반응, 환원성 아민화 반응 또는 알킬화 반응이 포함될 수 있다. 예를 들면, 반응식 2에 표시된 바와 같이, R6이 브로마이드인 경우, 연결점으로서 이탈기, 예컨대, 브로마이드에 의존하는 표준 전이 금속 기초 프로토콜을 이용하여 대안적 R6 치환기를 도입할 수 있다. 브로마이드를 승온에서 극성 용매, 예컨대, 다이옥산/물 중의 약염기 및 팔라듐 촉매의 존재 하에 적절한 보론산 에스테르 유도체와 조합하여 원하는 신규 R6 치환기를 제공할 것이다(즉, 스즈키 반응). 예를 들면, 반응식 3에 표시된 바와 같이, 포르밀 기를 보유하는 보론산 에스테르 유도체를 사용하여 스즈키 반응을 수행하는 경우, 일차 아민 및 이차 아민(예를 들면, 모르폴린, 다이메틸아민)을 사용한 환원성 아민화 반응으로 추가 변경을 수행하여 아민 기를 도입할 수 있다.
반응식 3
Figure pat00074
R7 치환기의 성질에 따라, 반응식 1의 단계 6 후 추가 화학 변경을 이용하여 R7 치환기를 대안적 R7 치환기로 전환시킬 수 있다. 예를 들면, R7 내에 함유된 보호된 아미노 기를 탈보호 반응(예를 들면, Boc 기 절단)으로 처리하여 자유 아미노 기를 제공할 수 있다. 이러한 자유 아미노 기를 환원성 아민화 반응 또는 알킬화 반응으로 처리하여 치환된 아민을 제공할 수 있다.
반응식 4는 2,6-이치환된 이소니코틴아미드 화합물의 일반 합성을 보여준다. 단계 1에서 아릴 보론산 화합물과 메틸 2,6-다이클로로이소니코티네이트 출발 물질의 스즈키 반응을 이용함으로써, 추가 변환에 적합한 작용기 X로 치환될 수 있는 아릴 기를 도입할 수 있다. 이러한 X 기는 단계 2에서 다양한 Y 기로 용이하게 변환될 수 있는 포르밀 또는 하이드록시메틸을 포함한다. 이러한 Y 기는 아미노메틸, 모노알킬아미노메틸 및 다이알킬아미노메틸 기를 포함한다. 후자는 X가 포르밀인 경우 환원성 아민화에 의해 제조될 수 있거나, X = 하이드록시메틸을 브로모메틸로 전환시킨 후 아민으로 알킬화함으로써 제조될 수 있다. 후속 단계인 에스테르 가수분해는 적절한 3-(아미노메틸)-피리딘-2(1H)-온과 커플링되어 끝에서 두 번째 화합물인 2-클로로-6-아릴-이소니코틴 아미드 중간체를 제공할 수 있는 산 중간체를 제공한다. 그 다음, 스즈키 반응 또는 아민화 반응은 2-위치에서 Z 기로 치환된 화합물을 제공한다. 아민화 반응의 경우, Z의 예는 모노알킬아미노 또는 다이알킬아미노일 수 있다. 스즈키 반응의 경우, Z는 아릴, 다이하이드로아릴 또는 테트라하이드로아릴, 예컨대, 사이클로헥세닐일 수 있다.
반응식 4
Figure pat00075
반응식 5는 4-위치에서 모노알킬아미노 또는 다이알킬아미노 기를 갖는 6-아릴-3-메틸-피콜린아미드의 일반 합성을 보여준다. N-산화물로의 메틸 3-브로모-6-클로로피콜리네이트 산화로부터 시작한 후, 인 옥시클로라이드를 사용한 염소첨가를 수행하여 메틸 3-브로모-4,6-다이클로로피콜리네이트를 제공한다. 4-클로로 기는 후기 단계에서 비차폐될 수 있는 작용기 또는 보호된 작용기도 함유할 수 있는 다양한 모노알킬 아민 및 다이알킬 아민으로 선택적으로 치환될 수 있다. 테트라메틸 주석을 사용하여 팔라듐에 의해 촉진된 메틸화를 수행한 후 에스테르 가수분해 및 적절한 3-(아미노메틸)-피리딘-2(1H)-온과의 아미드 커플링을 수행하여 끝에서 두 번째 화합물인 2-클로로 피리딘 중간체를 생성한다. 이들 중간체와 아릴 보론산의 스즈키 커플링 반응은 아릴 기에 의한 2-클로로 기의 치환을 야기한다. 따라서, 이것은 4-위치에 모노알킬아미노 또는 다이알킬아미노 기를 갖는 6-아릴-3-메틸-피콜린아미드를 생성한다. 상기 아릴 기는 최종 생성물에 남아 있거나 탈보호 또는 작용기 전환 반응, 예를 들면, 환원성 아민화에 의해 또 다른 기로 전환되는 작용기 X로 치환될 수 있다.
반응식 5
Figure pat00076
반응식 1의 아미드 커플링 반응을 위한 3-(아미노메틸)-피리딘-2(1H)-온 중간체의 일반 합성은 하기 반응식 6에 표시되어 있다. 한 방법에서, 다이케톤을 극성 용매, 예컨대, 에탄올 중의 적절한 시약, 예컨대, 피페리딘 아세테이트의 존재 하에 2-시아노아세트아미드와 축합시켜 시아노피리돈을 제공할 수 있다(단계 9). 또 다른 방법에서, R3이 H인 경우, 적절하게 치환된 알키닐 케톤을 극성 용매, 예컨대, 에탄올 중의 적절한 시약, 예컨대, 피페리딘 아세테이트의 존재 하에 2-시아노아세트아미드와 축합시켜 시아노피리돈을 제공할 수 있다(단계 11). 시아노 기를 극성 용매 중의 촉매 레이니 니켈, 예컨대, 메탄올 중의 암모늄의 존재 하에 적절한 조건, 예컨대, 수소첨가 하에 환원시켜 아민을 제공할 수 있다(단계 10).
반응식 6
Figure pat00077
추가로, R2, R3 또는 R4 기의 성질에 따라, 추가 화학 변경을 이용하여 이들을 각각 독립적으로 대안적 치환기로 전환시킬 수 있다. 이러한 변경의 대표적인 예에는 수소첨가, 보호기 제거 후 추가 아미드 커플링 반응, 팔라듐에 의해 촉진된 커플링 반응, 환원성 아민화 반응 및 알킬화 반응이 포함될 수 있다. 반응식 4는 2-치환된(치환기는 R12 기임) 메틸 3-아미노-5-브로모-벤조에이트 출발 물질에 기초한 반응식 1의 일반 합성 경로의 변경된 경로를 보여준다. 이들 출발 물질들은 상업적으로 입수될 수 있거나 2-치환된 벤조산의 니트레이트화에 의해 제조될 수 있는 2-치환된 3-니트로-벤조산으로부터 제조될 수 있다. 따라서, 적절한 시약, 예컨대, 1,3-다이브로모-5,5-다이메틸-2,4-이미다졸리딘다이온을 사용한 2-치환된 3-니트로-벤조산의 브롬첨가는 적절한 2-치환된 3-니트로-5-브로모-벤조산을 제공한다. 그 다음, 다양한 에스테르화 후 니트로 기 환원 방법을 순차적으로 수행하여 2-치환된 3-니트로-5-브로모-벤조산으로부터 2-치환된 메틸 3-아미노-5-브로모-벤조에이트 출발 물질을 제조할 수 있다.
반응식 7
Figure pat00078
반응식 7에 표시된 바와 같이, 적절한 용매, 예컨대, 메탄올 중의 적절한 환원제, 예컨대, 나트륨 시아노보로하이드라이드 및 촉매 산, 예컨대, 아세트산의 존재 하에 적절한 R7-케톤 또는 R7-알데하이드를 사용한 환원성 아민화를 이용하여 단계 1의 2-치환된 메틸 3-아미노-5-브로모-벤조에이트로부터 R7 기를 도입할 수 있다. 유사하게, 적절한 용매, 예컨대, 메탄올 중의 적절한 환원제, 예컨대, 나트륨 시아노보로하이드라이드 및 촉매 산, 예컨대, 아세트산의 존재 하에 R8-케톤 또는 R8-알데하이드를 사용한 환원성 아민화를 이용하여 단계 2에서 R8 기를 도입할 수 있다. 대안적으로, 적절한 온도, 예컨대, 80℃에서 적절한 극성 용매, 예컨대, 아세토니트릴 중의 약염기, 예컨대, 탄산세슘의 존재 하에 R8-LG(이때, LG는 이탈기, 예컨대, 요오드임)를 사용하여 알킬화함으로써 다양한 R8 기들을 도입할 수 있다. 단계 3에서, 승온에서 극성 용매, 예컨대, 다이옥산/물 중의 약염기 및 팔라듐 촉매의 존재 하에 중간체 브로마이드를 적절한 아릴 보론산 또는 에스테르 유도체, 예를 들면, X-Ar-B(OH)2와 스즈키 반응시켜 R6에 상응하는 아릴 기를 도입할 수 있다. X-Ar-B(OH)2에서 X 기는 아릴 고리 상의 완전히 정교해진 치환기일 수 있거나 작용기 변경에 의해 또 다른 기로 전환될 수 있는 작용기일 수 있다. 이러한 변경의 대표적인 예에는 수소첨가, 보호기 제거 후 추가 아미드 커플링 반응, 팔라듐에 의해 촉진된 커플링 반응, 환원성 아민화 반응 또는 알킬화 반응이 포함될 수 있다. 예를 들면, 포르밀 기를 보유하는 보론산 유도체를 사용하여 스즈키 반응을 수행하는 경우, 일차 아민 및 이차 아민(예를 들면, 모르폴린, 다이메틸아민)을 사용한 환원성 아민화 반응으로 추가 변경을 수행하여 아민 기를 도입할 수 있다. 단계 4에서, 극성 용매, 예컨대, 에탄올 중의 적절한 염기, 예컨대, 수산화나트륨을 사용하여 에스테르 모이어티를 상응하는 산으로 가수분해할 수 있다. 단계 5에서, 상기 산을 표준 아미드 커플링 반응(이때, 적절한 아민이 적절한 용매, 예컨대, DMSO 중의 적절한 아미드 커플링 시약, 예컨대, PyBOP와 함께 첨가될 것임)으로 처리하여 원하는 아미드를 제공할 수 있다. R7 치환기의 성질에 따라, 반응식 4의 단계 5 후 추가 화학 변경을 이용하여 R7 치환기를 대안적 R7 치환기로 전환시킬 수 있다. 예를 들면, R7 내에 함유된 보호된 아미노 기를 탈보호 반응(예를 들면, Boc 기 절단)으로 처리하여 자유 아미노 기를 제공할 수 있다. 이러한 자유 아미노 기를 환원성 아민화 반응 또는 알킬화 반응으로 처리하여 치환된 아민을 제공할 수 있다.
하기 반응식 8은 2-모노알킬아미노 및 2-다이알킬아미노-3-치환된-6-아릴-이소니코틴아미드의 일반 합성을 보여주는데, 이때 3-치환기는 화학식 I에서 R12에 상응하고, 6-아릴 기는 화학식 I에서 R6에 상응한다. 단계 1에서, 3-치환기는 문헌(Epsztain J. et al. Tetrahedron, 1991, v. 47, 1697-16708)에 기재된 방법에 의해, 또는 n-부틸리튬에 의한 2-클로로-이소니코틴아닐라이드의 금속첨가 후 알킬 요오다이드, 예컨대, 메틸 요오다이드 또는 알데하이드 또는 다른 친전자성 기에 의한 포획에 의해 도입될 수 있다.
반응식 8
Figure pat00079
포획 시약이 작용기를 갖는 치환기를 제공하는 경우, 이 기를 차폐시킬 수 있거나 후속 화학 단계에 적합한 또 다른 작용기로 전환시킬 수 있다. 단계 2에서, 표준 산성 조건 하에 아닐라이드 아미드 가수분해를 수행한 후, 예를 들면, 표시된 바와 같은 표준 조건 하에 메틸 요오다이드 및 염기를 사용한 메틸 에스테르 합성을 수행하여 상응하는 메틸 2-클로로-3-치환된 이소니코티네이트를 제공할 수 있다. 단계 4에서, 알킬아미노 기를 R7NH2 모노알킬아민과 메틸 2-클로로-3-치환된 이소니코티네이트의 부크왈드 커플링 반응으로 도입할 수 있다. 이 반응이 화학 문헌에서 다양한 2-클로로피리딘 시스템에 대해 이용된 많은 전례가 있다. 임의적 단계 5에서, 다이알킬아미노 화합물의 경우, 적절한 용매, 예컨대, 메탄올 중의 적절한 환원제, 예컨대, 나트륨 시아노보로하이드라이드 및 촉매 산, 예컨대, 아세트산의 존재 하에 R8-케톤 또는 R8-알데하이드를 사용한 환원성 아민화를 이용하여 R8 기를 도입할 수 있다. 대안적으로, 적절한 온도, 예컨대, 80℃에서 적절한 극성 용매, 예컨대, 아세토니트릴 중의 약염기, 예컨대, 탄산세슘의 존재 하에 R8-LG(이때, LG는 이탈기, 예컨대, 요오드임)를 사용하여 알킬화함으로써 다양한 R8 기들을 도입할 수 있다. 단계 6에서, N-산화물로의 산화 후 인 옥시클로라이드를 사용한 염소첨가를 수행하여 6-클로로-2-모노알킬 또는 다이알킬아미노-3-치환된 이소니코티네이트를 제공한다. 단계 7에서, 극성 용매, 예컨대, 에탄올 중의 적절한 염기, 예컨대, 수산화나트륨을 사용하여 에스테르 모이어티를 상응하는 산으로 가수분해할 수 있다. 단계 8에서, 상기 산을 표준 아미드 커플링 반응(이때, 적절한 아민 또는 치환된 3-(아미노메틸)-피리딘-2(1H)-온이 적절한 용매, 예컨대, DMSO 중의 적절한 아미드 커플링 시약, 예컨대, PyBOP와 함께 첨가될 것임)으로 처리하여 원하는 아미드를 제공할 수 있다. 단계 9에서, 승온에서 극성 용매, 예컨대, 다이옥산/물 중의 약염기 및 팔라듐 촉매의 존재 하에 중간체 브로마이드를 적절한 아릴 보론산 또는 에스테르 유도체, 예를 들면, X-Ar-B(OH)2와 스즈키 반응시켜 R6에 상응하는 아릴 기를 도입할 수 있다. X-Ar-B(OH)2에서 X 기는 아릴 고리 상의 완전히 정교해진 치환기일 수 있거나 작용기 변경에 의해 또 다른 기로 전환될 수 있는 작용기일 수 있다. 이러한 변경의 대표적인 예에는 수소첨가, 보호기 제거 후 추가 아미드 커플링 반응, 팔라듐에 의해 촉진된 커플링 반응, 환원성 아민화 반응 또는 알킬화 반응이 포함될 수 있다. 예를 들면, 포르밀 기를 보유하는 보론산 유도체를 사용하여 스즈키 반응을 수행하는 경우, 일차 아민 및 이차 아민(예를 들면, 모르폴린, 다이메틸아민)을 사용한 환원성 아민화 반응으로 추가 변경을 수행하여 아민 기를 도입할 수 있다. R7 치환기의 성질에 따라, 추가 화학 변경 단계를 이용하여 R7 치환기를 대안적 R7 치환기로 전환시킬 수 있다. 예를 들면, R7 내에 함유된 보호된 아미노 기를 탈보호 반응(예를 들면, Boc 기 절단)으로 처리하여 자유 아미노 기를 제공할 수 있다. 이러한 자유 아미노 기를 환원성 아민화 반응 또는 알킬화 반응으로 처리하여 치환된 아민을 제공할 수 있다.
반응식 9
Figure pat00080
반응식 9는 잘 확립된 화학반응을 이용하는 일반 경로를 따른 변경된 아릴 유사체의 합성을 보여준다. 치환된 벤조산, 예컨대, 5-클로로-2-메틸벤조산으로부터 출발하여, 표준 조건을 이용한 니트레이트화, 예컨대, 농축 H2SO4 및 농축 HNO3을 사용한 처리는 니트로 유사체를 제공할 수 있다. 극성 용매, 예컨대, DMF 중의 염기, 예컨대, 탄산나트륨의 존재 하에 알킬화제, 예컨대, 메틸 요오다이드를 사용하여 산의 에스테르화를 달성할 수 있다. 조건, 예컨대, 일정한 온도, 예컨대, 80℃까지 가열하면서 양성자성 용매, 예컨대, 에탄올 중의 철 및 염화암모늄을 사용하여 니트로 기를 환원시킬 수 있다. 샌드메이어(Sandmeyer) 반응, 예컨대, 용매, 예컨대, 아세토니트릴 중의 CuBr2 및 t-부틸 니트라이트를 사용한 처리를 이용하여 발생된 아닐린을 브로마이드로 전환시킬 수 있다. 임의적으로 일정한 온도, 예컨대, 100℃까지 가열하면서 용매, 예컨대, 1,4-다이옥산 중의 염기, 예컨대, N,N-다이이소프로필 에틸아민의 존재 하에 리간드, 예컨대, 잔트포스와 함께 팔라듐 공급원, 예컨대, Pd(OAc)2를 사용하여 팔라듐에 의해 촉진된 티올과 브로마이드의 커플링을 달성할 수 있다. 에스테르를 수성 염기, 예컨대, 물 중의 NaOH로 가수분해할 수 있다. 표준 아미노산 커플링 조건, 예컨대, DMSO 중의 PyBOP를 사용하여 발생된 산을 3-(아미노메틸)-4,6-다이메틸피리딘-2(1H)-온과 커플링시킬 수 있다. 용매, 예컨대, DCM 중의 적절한 당량의 산화제, 예컨대, m-CPBA를 사용하여 발생된 티오에테르를 상응하는 설폭사이드 또는 설폰으로 산화시킬 수 있다. 팔라듐 커플링, 예컨대, 전술된 스즈키 반응을 이용하여 아릴 치환기를 도입할 수 있다.
반응식 10
Figure pat00081
반응식 10은 잘 확립된 화학반응을 이용하는 일반 경로에 따른 변경된 아릴 유사체의 합성을 보여준다. 치환된 아닐린, 예컨대, 메틸 3-아미노-5-클로로-2-메틸벤조에이트로부터 출발하여, 샌드메이어 반응, 예컨대, 수성 산, 예컨대, 50% H2SO4 중의 수성 NaNO2 용액을 사용한 처리를 이용하여 상기 아닐린을 페놀로 전환시킬 수 있다. 임의적으로 일정한 온도, 예컨대, 80℃까지 가열하면서 극성 용매, 예컨대, DMF 중의 적절한 염기, 예컨대, 탄산세슘의 존재 하에 알킬화제, 예컨대, 테트라하이드로-2H-피란-4-일 4-메틸벤젠설포네이트를 사용하여 상기 페놀을 알킬화할 수 있다. 에스테르를 수성 염기, 예컨대, 물 중의 NaOH로 가수분해할 수 있다. 표준 아미노산 커플링 조건, 예컨대, DMSO 중의 PyBOP를 사용하여 발생된 산을 3-(아미노메틸)-4,6-다이메틸피리딘-2-(1H)-온과 커플링시킬 수 있다. 팔라듐 커플링, 예컨대, 전술된 스즈키 반응을 이용하여 아릴 치환기를 도입할 수 있다.
3. 치료 방법
본 발명의 화합물은 EZH2 또는 이의 돌연변이체의 히스톤 메틸트랜스퍼라제 활성을 억제하므로, 본 발명은 히스톤 또는 다른 단백질의 메틸화 상태의 조절에 의해 영향을 받을 수 있는 경과를 갖는 병태 및 질환을 치료하는 방법도 제공하는데, 이때 상기 메틸화 상태는 적어도 부분적으로 EZH2의 활성에 의해 매개된다. 본 발명의 한 양태에서, 본원에 개시된 일부 화합물들은 일부 병태들 및 질환들의 치료 또는 예방을 위한 후보물질이다. 히스톤의 메틸화 상태의 조절은 메틸화에 의해 활성화되는 표적 유전자 및/또는 메틸화에 의해 억제되는 표적 유전자의 발현 수준에 영향을 미칠 수 있다. 상기 방법은 치료 유효량의 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 전구약물, 대사물질, 다형체, 용매화물 또는 입체이성질체를 상기 치료가 필요한 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.
EZH2 매개 단백질 메틸화가 일정한 역할을 수행하는 질환은 암 또는 전암성 병태일 수 있다. 본 발명은 EZH2 매개 단백질 메틸화의 조절에 의해 영향을 받을 수 있는 경과를 갖는 암 또는 전암의 치료에 있어서, 또는 이러한 암 또는 전암의 치료에 유용한 약제의 제조를 위한 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 전구약물, 대사물질, 다형체 또는 용매화물의 용도를 추가로 제공한다. 치료될 수 있는 예시적 암은 비호지킨 림프종, 여포성 림프종(FL) 및 미만성 거대 B 세포 림프종(DLBCL)을 포함하는 림프종; 흑색종; 및 CML을 포함하는 백혈병을 포함한다. 예시적 전암성 병태는 골수형성이상 증후군(MDS; 이전에 전백혈병으로서 공지됨)을 포함한다.
본 발명은 치료 유효량의 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 전구약물, 대사물질, 다형체 또는 용매화물을 이러한 치료가 필요한 대상체에게 투여함으로써 EZH2 매개 단백질 메틸화가 일정한 역할을 수행하는 질환으로부터의 보호가 필요한 대상체에서 상기 질환으로부터 보호하는 방법도 제공한다. 상기 질환은 암, 예를 들면, EZH2 매개 단백질 메틸화가 일정한 역할을 수행하는 암일 수 있다. 또한, 본 발명은 적어도 부분적으로 EZH2 매개 단백질 메틸화와 관련된 세포 증식 질환의 예방에 유용한 약제의 제조를 위한 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 전구약물, 대사물질, 다형체, 용매화물 또는 입체이성질체의 용도를 제공한다.
본 발명의 화합물은 단백질(예를 들면, 히스톤) 메틸화의 조절, 예를 들면, 히스톤 메틸트랜스퍼라제 또는 히스톤 데메틸라제 효소 활성의 조절을 위해 사용될 수 있다. 본 발명의 화합물들 중 적어도 일부는 단백질 메틸화의 조절을 위해 생체내에서 또는 시험관내에서 사용될 수 있다. 히스톤 메틸화는 암에서의 일부 유전자들의 비정상적인 발현 및 비신경세포에서의 신경 유전자들의 침묵에 관여하는 것으로 보고되어 있다. 본원에 기재된 적어도 일부 화합물들은 이들 질환들을 치료하는 데에, 즉 메틸화를 감소시키거나 메틸화를 상응하는 정상 세포 내의 대략적인 그의 수준까지 복귀시키는 데에 적합한 후보물질이다.
메틸화 조절제인 화합물은 세포 증식의 조절을 위해 사용될 수 있다. 예를 들면, 몇몇 경우 과도한 증식은 메틸화를 감소시키는 물질에 의해 감소될 수 있는 반면, 불충분한 증식은 메틸화를 증가시키는 물질에 의해 자극될 수 있다. 따라서, 본 발명의 화합물에 의해 치료될 수 있는 질환은 과다증식 질환, 예컨대, 양성 세포 생장 및 악성 세포 생장을 포함할 수 있다.
본원에서 사용된 바와 같이, "이를 필요로 하는 대상체"는 EZH2 매개 단백질 메틸화가 일정한 역할을 수행하는 질환을 갖는 대상체, 또는 일반 대중에 비해 상대적으로 이러한 질환을 발달시킬 증가된 위험을 갖는 대상체이다. 이를 필요로 하는 대상체는 전암성 병태를 가질 수 있다. 바람직하게는, 이를 필요로 하는 대상체는 암을 갖는다. "대상체"는 포유동물을 포함한다. 포유동물은 예를 들면, 인간 또는 적절한 비인간 포유동물, 예컨대, 영장류, 마우스, 래트, 개, 고양이, 소, 말, 염소, 낙타, 양 또는 돼지일 수 있다. 상기 대상체는 조류 또는 가금류일 수도 있다. 한 실시양태에서, 포유동물은 인간이다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "세포 증식 질환"은 세포의 비조절된 또는 비정상적인 생장, 또는 이들 둘다가 암성 병태 또는 질환일 수 있거나 암성 병태 또는 질환이 아닐 수 있는 원치 않는 병태 또는 질환의 발달을 초래할 수 있는 병태를 의미한다. 본 발명의 화합물로 치료될 수 있는 예시적 세포 증식 질환은 세포 분열이 탈조절되어 있는 다양한 병태들을 포괄한다. 예시적 세포 증식 질환은 신생물, 양성 종양, 악성 종양, 전암성 병태, 상피내 종양, 캡슐화된 종양, 전이성 종양, 액상 종양, 고형 종양, 면역학적 종양, 혈액 종양, 암, 암종, 백혈병, 림프종, 육종 및 신속히 분열하는 세포를 포함하나 이들로 한정되지 않는다. 본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "신속히 분열하는 세포"는 동일한 조직 내의 인접하는 세포들 또는 나란히 놓여있는 세포들 사이에서 예측된 또는 관찰된 속도를 초과하거나 이 속도보다 더 높은 속도로 분열하는 임의의 세포로서 정의된다. 세포 증식 질환은 전암 또는 전암성 병태를 포함한다. 세포 증식 질환은 암을 포함한다. 본원에서 제공된 방법 및 용도는 암 증상의 치료 또는 완화, 또는 이러한 목적에 적합한 후보물질의 확인을 위해 사용될 수 있다. 용어 "암"은 고형 종양뿐만 아니라 혈액 종양 및/또는 악성 종양도 포함한다. "전암 세포" 또는 "전암성 세포"는 전암 또는 전암성 병태인 세포 증식 질환을 나타내는 세포이다. "암세포" 또는 "암성 세포"는 암인 세포 증식 질환을 나타내는 세포이다. 임의의 재현가능한 측정 수단을 이용하여 암세포 또는 전암성 세포를 확인할 수 있다. 암세포 또는 전암성 세포는 조직 샘플(예를 들면, 생검 샘플)의 조직학적 분류 또는 등급화에 의해 확인될 수 있다. 암세포 또는 전암성 세포는 적절한 분자 마커의 사용을 통해 확인될 수 있다.
본 발명의 하나 이상의 화합물을 사용하여 치료할 수 있는 예시적 비-암성 병태 또는 질환은 류마티스성 관절염; 염증; 자가면역 질환; 림프증식 병태; 말단비대증; 류마티스성 척추염; 골관절염; 통풍, 다른 관절염성 병태; 패혈증; 패혈증성 쇼크; 내독성 쇼크; 그람 음성 패혈증; 독성 쇼크 증후군; 천식; 성인 호흡 곤란 증후군; 만성 폐쇄성 폐 질환; 만성 폐 염증; 염증성 장 질환; 크론병; 건선; 습진; 궤양성 결장염; 췌장 섬유증; 간 섬유증; 급성 및 만성 신장 질환; 과민성 장 증후군; 발열; 재협착증; 뇌 말라리아; 뇌졸중 및 허혈성 손상; 신경 외상; 알쯔하이머병; 헌팅톤병; 파킨슨병; 급성 및 만성 통증; 알레르기성 비염; 알레르기성 결막염; 만성 심부전; 급성 관상동맥 증후군; 악액질; 말라리아; 한센병; 리슈만편모충증; 라임병; 레이터 증후군; 급성 활막염; 근육 퇴행; 윤활낭염; 건염; 건막염; 헤르니아, 파열 또는 탈출 추간판 증후군; 골화석증; 혈전증; 재협착증; 규폐증; 폐 췌육증; 골 흡수 질환, 예컨대, 골다공증; 이식편-대-숙주 반응; 다발성 경화증; 루푸스; 섬유근육통; AIDS 및 다른 바이러스 질환, 예컨대, 대상포진, 헤르페스 심플렉스 I 또는 II, 인플루엔자 바이러스 및 사이토메갈로바이러스; 및 당뇨병을 포함하나 이들로 한정되지 않는다.
본 발명의 하나 이상의 화합물을 사용하여 치료할 수 있는 예시적 암은 부신피질암종, AIDS 관련 암, AIDS 관련 림프종, 항문암, 항문직장암, 항문관암, 충수암, 소아 소뇌 성상세포종, 소아 뇌 성상세포종, 기저세포암종, 피부암(비흑색종), 담낭암, 간외담관암, 간내담관암, 방광암, 요로방광암, 골 및 관절 암, 골육종 및 악성 섬유 조직구종, 뇌암, 뇌종양, 뇌간 신경아교종, 소뇌 성상세포종, 뇌 성상세포종/악성 신경아교종, 뇌실막종, 수모세포종, 천막상원시신경외배엽 종양, 시각 경로 및 시상하부 신경아교종, 유방암, 기관지 선암종/카르시노이드, 카르시노이드 종양, 위장암, 신경계암, 신경계 림프종, 중추신경계암, 중추신경계 림프종, 자궁경부암, 소아암, 만성 림프구성 백혈병, 만성 골수성 백혈병, 만성 골수증식 질환, 결장암, 결장직장암, 경피 T 세포 림프종, 림프 신생물, 균상식육종, 세지아리(Seziary) 증후군, 자궁내막암, 식도암, 두개외 생식세포 종양, 성선외 생식세포 종양, 간외담관암, 안암, 안구내 흑색종, 망막모세포종, 담낭암, 위(복부)암, 위장 카르시노이드 종양, 위장 간질 종양(GIST), 생식세포 종양, 난소 생식세포 종양, 임신 영양막 종양 신경아교종, 두경부암, 간세포(간)암, 호지킨 림프종, 하인두암, 안구내 흑색종, 안구암, 췌도 세포 종양(내분비 췌장), 카포시 육종, 신장암, 신암, 신장암, 후두암, 급성 림프모구성 백혈병, 급성 골수성 백혈병, 만성 림프구성 백혈병, 만성 골수성 백혈병, 모발세포 백혈병, 입술구강암, 간암, 폐암, 비소세포 폐암, 소세포 폐암, AIDS 관련 림프종, 비호지킨 림프종, 원발성 중추신경계 림프종, 발덴스트람(Waldenstram) 거대글로불린혈증, 수모세포종, 흑색종, 안구내(안) 흑색종, 메르켈(merkel) 세포 암종, 악성 중피종, 중피종, 전이성 편평경부암, 입암, 설암, 다발성 내분비 신생물 증후군, 균상식육종, 골수형성이상 증후군, 골수형성이상/골수증식 질환, 만성 골수성 백혈병, 급성 골수성 백혈병, 다발성 골수종, 만성 골수증식 질환, 비인두암, 신경모세포종, 구암, 구강암, 구인두암, 난소암, 난소상피암, 난소 저악성 잠재(low malignant potential) 종양, 췌장암, 췌도 세포 췌장암, 부비동 및 비강암, 부갑상선암, 음경암, 인두암, 크롬친화세포종, 송과체모세포종 및 천막상원시신경외배엽 종양, 뇌하수체 종양, 혈장 세포 신생물/다발성 골수종, 흉막폐 모세포종, 전립선암, 직장암, 신우 및 요관암, 전이세포암, 망막모세포종, 횡문근육종, 타액선암, 에윙(ewing) 육종 종양 패밀리, 카포시 육종, 연조직 육종, 자궁암, 자궁육종, 피부암(비흑색종), 피부암(흑색종), 메르켈 세포 피부암종, 소장암, 연조직 육종, 편평세포암종, 복부(위)암, 천막상원시신경외배엽 종양, 정소암, 인후암, 흉선종, 흉선종 및 흉선암종, 갑상선암, 신우, 요관 및 다른 뇨기관의 전이세포암, 임신 영양막 종양, 요도암, 자궁내막 자궁암, 자궁육종, 자궁체부암, 질암, 음문암 및 윌름 종양을 포함하나 이들로 한정되지 않는다.
"혈액 시스템의 세포 증식 질환"은 혈액 시스템의 세포를 수반하는 세포 증식 질환이다. 혈액 시스템의 세포 증식 질환은 림프종, 백혈병, 골수성 신생물, 비만 세포 신생물, 척수형성이상증, 양성 단일클론 감마글로불린병증, 림프종모양 육아종증, 림프종모양 구진증, 진성적혈구증가증, 만성 골수세포성 백혈병, 원인불명 골수화생 및 본태성 혈소판혈증을 포함할 수 있다. 혈액 시스템의 세포 증식 질환은 혈액 시스템의 세포의 과다형성증, 형성이상증 및 화생을 포함할 수 있다. 한 양태에서, 본 발명의 조성물은 본 발명의 혈액암 또는 본 발명의 혈액 세포 증식 질환으로 구성된 군으로부터 선택된 암을 치료하는 데에 사용될 수 있거나 이러한 목적에 적합한 후보물질을 확인하는 데에 사용될 수 있다. 본 발명의 혈액암은 다발성 골수종, 림프종(호지킨 림프종, 비호지킨 림프종, 소아 림프종, 및 림프구 및 경피 유래의 림프종을 포함함), 백혈병(소아 백혈병, 모발세포 백혈병, 급성 림프구성 백혈병, 급성 골수세포성 백혈병, 만성 림프구성 백혈병, 만성 골수세포성 백혈병, 만성 골수성 백혈병 및 비만 세포 백혈병을 포함함), 골수성 신생물 및 비만 세포 신생물을 포함할 수 있다.
"폐의 세포 증식 질환"은 폐 세포를 수반하는 세포 증식 질환이다. 폐의 세포 증식 질환은 폐 세포에 영향을 미치는 모든 형태의 세포 증식 질환을 포함할 수 있다. 폐의 세포 증식 질환은 폐암, 폐의 전암 또는 전암성 병태, 폐의 양성 증식물 또는 병변, 폐의 악성 증식물 또는 병변, 및 폐 이외의 신체 조직 및 장기의 전이성 병변을 포함할 수 있다. 한 양태에서, 본 발명의 조성물은 폐암 또는 폐의 세포 증식 질환을 치료하는 데에 사용될 수 있거나 이러한 목적에 적합한 후보물질을 확인하는 데에 사용될 수 있다. 폐암은 모든 형태의 폐암을 포함할 수 있다. 폐암은 악성 폐 신생물, 상피내암종, 전형적인 카르시노이드 종양 및 비전형적인 카르시노이드 종양을 포함할 수 있다. 폐암은 소세포 폐암("SCLC"), 비소세포 폐암("NSCLC"), 편평세포암종, 선암종, 소세포암종, 대세포암종, 선편평세포암종 및 중피종을 포함할 수 있다. 폐암은 "반흔암종", 기관지폐포암종, 거대세포암종, 방추세포암종 및 대세포 신경내분비암종을 포함할 수 있다. 폐암은 조직학적 및 초미세구조적 불균질성(예를 들면, 혼합된 세포 유형)을 갖는 폐 신생물을 포함할 수 있다.
폐의 세포 증식 질환은 폐 세포에 영향을 미치는 모든 형태의 세포 증식 질환을 포함할 수 있다. 폐의 세포 증식 질환은 폐암 및 폐의 전암성 병태를 포함할 수 있다. 폐의 세포 증식 질환은 폐의 과다형성증, 화생 및 형성이상증을 포함할 수 있다. 폐의 세포 증식 질환은 석면에 의해 유도된 과다형성증, 편평 화생 및 양성 반응성 중피 화생을 포함할 수 있다. 폐의 세포 증식 질환은 중층 편평 상피에 의한 원주 상피의 치환 및 점막 형성이상증을 포함할 수 있다. 흡입된 손상성 환경 물질, 예컨대, 담배 연기 및 석면에 노출된 개체는 폐의 세포 증식 질환을 발달시킬 증가된 위험에 있을 수 있다. 개체가 폐의 세포 증식 질환의 발달에 취약하게 만들 수 있는 기존 폐 질환은 만성 간질 폐 질환, 괴사 폐 질환, 공피증, 류마티스성 질환, 사르코이드증, 간질 폐렴, 결핵, 반복된 폐렴, 특발성 폐 섬유증, 육아종, 석면증, 섬유화 폐포염 및 호지킨병을 포함할 수 있다.
"결장의 세포 증식 질환"은 결장의 세포를 수반하는 세포 증식 질환이다. 바람직하게는, 결장의 세포 증식 질환은 결장암이다. 한 양태에서, 본 발명의 조성물은 결장암 또는 결장의 세포 증식 질환을 치료하는 데에 사용될 수 있거나 이러한 목적에 적합한 후보물질을 확인하는 데에 사용될 수 있다. 결장암은 모든 형태의 결장암을 포함할 수 있다. 결장암은 산발성 결장암 및 유전성 결장암을 포함할 수 있다. 결장암은 악성 결장 신생물, 상피내암종, 전형적인 카르시노이드 종양 및 비전형적인 카르시노이드 종양을 포함할 수 있다. 결장암은 선암종, 편평세포암종 및 선편평세포암종을 포함할 수 있다. 결장암은 유전성 비용종증 결장직장암, 가족성 선종성 용종증, 가드너(Gardner) 증후군, 포이츠-제거스(Peutz-Jeghers) 증후군, 터코트(Turcot) 증후군 및 소아 용종증으로 구성된 군으로부터 선택된 유전성 증후군과 관련될 수 있다. 결장암은 유전성 비용종증 결장직장암, 가족성 선종성 용종증, 가드너 증후군, 포이츠-제거스 증후군, 터코트 증후군 및 소아 용종증으로 구성된 군으로부터 선택된 유전성 증후군에 의해 야기될 수 있다.
결장의 세포 증식 질환은 결장 세포에 영향을 미치는 모든 형태의 세포 증식 질환을 포함할 수 있다. 결장의 세포 증식 질환은 결장암, 결장의 전암성 병태, 결장의 선종성 용종 및 결장의 속발성 병변을 포함할 수 있다. 결장의 세포 증식 질환은 선종을 포함할 수 있다. 결장의 세포 증식 질환은 결장의 과다형성증, 화생 및 형성이상증을 특징으로 할 수 있다. 개체가 결장의 세포 증식 질환의 발생에 취약하게 만들 수 있는 기존 결장 질환은 기존 결장암을 포함할 수 있다. 개체가 결장의 세포 증식 질환의 발생에 취약하게 만들 수 있는 현행 질환은 크론병 및 궤양성 결장염을 포함할 수 있다. 결장의 세포 증식 질환은 p53, ras, FAP 및 DCC로 구성된 군으로부터 선택된 유전자에서의 돌연변이와 관련될 수 있다. 개체는 p53, ras, FAP 및 DCC로 구성된 군으로부터 선택된 유전자에서의 돌연변이의 존재로 인해 결장의 세포 증식 질환을 발달시킬 상승된 위험을 가질 수 있다.
"췌장의 세포 증식 질환"은 췌장의 세포를 수반하는 세포 증식 질환이다. 췌장의 세포 증식 질환은 췌장 세포에 영향을 미치는 모든 형태의 세포 증식 질환을 포함할 수 있다. 췌장의 세포 증식 질환은 췌장암, 췌장의 전암 또는 전암성 병태, 췌장의 과다형성증, 췌장의 형성이상증, 췌장의 양성 증식물 또는 병변, 췌장의 악성 증식물 또는 병변, 및 췌장 이외의 신체 조직 및 장기의 전이성 병변을 포함할 수 있다. 췌장암은 모든 형태의 췌장암을 포함한다. 췌장암은 관선암종, 선편평암종, 다형성 거대세포암종, 점액소 선암종, 파골세포 유사 거대세포암종, 점액소 낭선암종, 세엽암종, 비분류된 대세포암종, 소세포암종, 췌장모세포종, 유두 신생물, 점액소 낭선종, 유두 낭성 신생물 및 장액 낭선종을 포함할 수 있다. 췌장암은 조직학적 및 초미세구조적 불균질성(예를 들면, 혼합된 세포 유형)을 갖는 췌장 신생물도 포함할 수 있다.
"전립선의 세포 증식 질환"은 전립선의 세포를 수반하는 세포 증식 질환이다. 전립선의 세포 증식 질환은 전립선 세포에 영향을 미치는 모든 형태의 세포 증식 질환을 포함할 수 있다. 전립선의 세포 증식 질환은 전립선암, 전립선의 전암 또는 전암성 병태, 전립선의 양성 증식물 또는 병변, 전립선의 악성 증식물 또는 병변, 및 전립선 이외의 신체 조직 및 장기의 전이성 병변을 포함할 수 있다. 전립선의 세포 증식 질환은 전립선의 과다형성증, 화생 및 형성이상증을 포함할 수 있다.
"피부의 세포 증식 질환"은 피부의 세포를 수반하는 세포 증식 질환이다. 피부의 세포 증식 질환은 피부 세포에 영향을 미치는 모든 형태의 세포 증식 질환을 포함할 수 있다. 피부의 세포 증식 질환은 피부의 전암 또는 전암성 병태, 피부의 양성 증식물 또는 병변, 흑색종, 악성 흑색종 및 피부의 다른 악성 증식물 또는 병변, 및 피부 이외의 신체 조직 및 장기의 전이성 병변을 포함할 수 있다. 피부의 세포 증식 질환은 피부의 과다형성증, 화생 및 형성이상증을 포함할 수 있다.
"난소의 세포 증식 질환"은 난소의 세포를 수반하는 세포 증식 질환이다. 난소의 세포 증식 질환은 난소 세포에 영향을 미치는 모든 형태의 세포 증식 질환을 포함할 수 있다. 난소의 세포 증식 질환은 난소의 전암 또는 전암성 병태, 난소의 양성 증식물 또는 병변, 난소의 악성 증식물 또는 병변, 및 난소 이외의 신체 조직 및 장기의 전이성 병변을 포함할 수 있다. 난소의 세포 증식 질환은 난소의 과다형성증, 화생 및 형성이상증을 포함할 수 있다.
"유방의 세포 증식 질환"은 유방의 세포를 수반하는 세포 증식 질환이다. 유방의 세포 증식 질환은 유방 세포에 영향을 미치는 모든 형태의 세포 증식 질환을 포함할 수 있다. 유방의 세포 증식 질환은 유방암, 유방의 전암 또는 전암성 병태, 유방의 양성 증식물 또는 병변, 유방의 악성 증식물 또는 병변, 및 유방 이외의 신체 조직 및 장기의 전이성 병변을 포함할 수 있다. 유방의 세포 증식 질환은 유방의 과다형성증, 화생 및 형성이상증을 포함할 수 있다.
유방의 세포 증식 질환은 유방의 전암성 병태일 수 있다. 본 발명의 조성물은 유방의 전암성 병태를 치료하는 데에 사용될 수 있다. 유방의 전암성 병태는 유방의 비전형적인 과다형성증, 상피내관암종(DCIS), 관내암종, 상피내소엽암종(LCIS), 소엽 신생물, 및 유방의 0 기 또는 0 등급 증식물 또는 병변(예를 들면, 0 기 또는 0 등급 유방암 또는 상피내암종)을 포함할 수 있다. 유방의 전암성 병태는 미국 암연합회(AJCC)에 의해 채택된 TNM 분류 체계에 따라 병기분류될 수 있고, 이때 원발성 종양(T)은 T0 또는 Tis 기로 배정되고, 국부 림프절(N)은 N0 기로 배정되고, 원위 전이(M)는 M0 기로 배정된다.
유방의 세포 증식 질환은 유방암일 수 있다. 한 양태에서, 본 발명의 조성물은 유방암을 치료하는 데에 사용될 수 있거나 이러한 목적에 적합한 후보물질을 확인하는 데에 사용될 수 있다. 유방암은 모든 형태의 유방암을 포함할 수 있다. 유방암은 원발성 상피 유방암을 포함할 수 있다. 유방암은 유방이 다른 종양, 예컨대, 림프종, 육종 또는 흑색종에 의해 영향을 받는 암을 포함할 수 있다. 유방암은 유방의 암종, 유방의 관암종, 유방의 소엽암종, 유방의 미분화된 암종, 유방의 낭육종 엽상, 유방의 혈관육종, 및 유방의 원발성 림프종을 포함할 수 있다. 유방암은 I, II, IIIA, IIIB, IIIC 및 IV 기 유방암을 포함할 수 있다. 유방의 관암종은 침습성 암종, 관내성분이 우세한 침습성 상피내암종, 염증성 유방암, 및 면포형, 점액소(콜로이드)형, 수질형, 림프구성 침윤물을 갖는 수질형, 유두형, 경화형 및 관형으로 구성된 군으로부터 선택된 조직학적 유형을 갖는 유방의 관암종을 포함할 수 있다. 유방의 소엽암종은 상피내성분이 우세한 침습성 소엽암종, 침습성 소엽암종 및 침윤성 소엽암종을 포함할 수 있다. 유방암은 파게트(Paget)병, 관내암종을 갖는 파게트병, 및 침습성 관암종을 갖는 파게트병을 포함할 수 있다. 유방암은 조직학적 및 초미세구조적 불균질성(예를 들면, 혼합된 세포 유형)을 갖는 유방 신생물을 포함할 수 있다.
본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 전구약물, 대사물질, 다형체 또는 용매화물은 유방암을 치료하는 데에 사용될 수 있거나 이러한 목적에 적합한 후보물질을 확인하는 데에 사용될 수 있다. 치료될 유방암은 가족성 유방암을 포함할 수 있다. 치료될 유방암은 산발성 유방암을 포함할 수 있다. 치료될 유방암은 남성 대상체에서 발생할 수 있다. 치료될 유방암은 여성 대상체에서 발생할 수 있다. 치료될 유방암은 폐경 전 여성 대상체 또는 폐경 후 여성 대상체에서 발생할 수 있다. 치료될 유방암은 30세 이상의 대상체, 또는 30세 미만의 대상체에서 발생할 수 있다. 치료될 유방암은 50세 이상의 대상체, 또는 50세 미만의 대상체에서 발생할 수 있다. 치료될 유방암은 70세 이상의 대상체, 또는 70세 미만의 대상체에서 발생할 수 있다.
치료될 유방암은 BRCA1, BRCA2 또는 p53에서의 가족성 또는 자연발생적 돌연변이를 확인하기 위해 분류될 수 있다. 치료될 유방암은 HER2/neu 유전자 증폭을 갖는 유방암, HER2/neu를 과다발현하는 유방암, 또는 낮은, 중간 또는 높은 수준의 HER2/neu 발현을 갖는 유방암으로서 분류될 수 있다. 치료될 유방암은 에스트로겐 수용체(ER), 프로게스테론 수용체(PR), 인간 표피 성장인자 수용체-2, Ki-67, CA15-3, CA 27-29 및 c-Met로 구성된 군으로부터 선택된 마커에 대해 분류될 수 있다. 치료될 유방암은 ER-비공지된 유방암, ER-풍부 유방암 또는 ER-부족 유방암으로서 분류될 수 있다. 치료될 유방암은 ER-음성 유방암 또는 ER-양성 유방암으로서 분류될 수 있다. 유방암의 ER 분류는 임의의 재현가능한 수단에 의해 수행될 수 있다. 유방암의 ER 분류는 문헌(Onkologie 27: 175-179 (2004))에 기재된 바와 같이 수행될 수 있다. 치료될 유방암은 PR-비공지된 유방암, PR-풍부 유방암 또는 PR-부족 유방암으로서 분류될 수 있다. 치료될 유방암은 PR-음성 유방암 또는 PR-양성 유방암으로서 분류될 수 있다. 치료될 유방암은 수용체 양성 유방암 또는 수용체 음성 유방암으로서 분류될 수 있다. 치료될 유방암은 CA 15-3 또는 CA 27-29, 또는 이들 둘다의 상승된 혈중 수준과 관련되어 있는 유방암으로서 분류될 수 있다.
치료될 유방암은 유방의 국소화된 종양을 포함할 수 있다. 치료될 유방암은 음성 감시림프절(SLN) 생검과 관련되어 있는 유방의 종양을 포함할 수 있다. 치료될 유방암은 양성 감시림프절(SLN) 생검과 관련되어 있는 유방의 종양을 포함할 수 있다. 치료될 유방암은 하나 이상의 양성 액와림프절과 관련되어 있는 유방의 종양을 포함할 수 있고, 이때 상기 액와림프절은 임의의 적용가능한 방법에 의해 병기분류되어 있다. 치료될 유방암은 림프절 음성 상태(예를 들면, 림프절 음성) 또는 림프절 양성 상태(예를 들면, 림프절 양성)를 갖는 종양으로서 분류되어 있는 유방의 종양을 포함할 수 있다. 치료될 유방암은 신체의 다른 위치로 전이되어 있는 유방의 종양을 포함할 수 있다. 치료될 유방암은 골, 폐, 간 및 뇌로 구성된 군으로부터 선택된 위치로 전이되어 있는 유방암으로서 분류될 수 있다. 치료될 유방암은 전이성, 국소화, 국부화, 국소-국부화, 국소 진행, 원위 전이, 다심성, 양측성, 동측성, 반대측성, 신규 진단, 재발성 및 수술불가능성으로 구성된 군으로부터 선택된 특성에 따라 분류될 수 있다.
본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 전구약물, 대사물질, 다형체 또는 용매화물은 일반 대중에 비해 상대적으로 유방암을 발달시킬 증가된 위험을 갖는 대상체에서 유방의 세포 증식 질환을 치료하거나 예방하는 데에 사용될 수 있거나, 유방암을 치료하거나 예방하는 데에 사용될 수 있거나, 이러한 목적에 적합한 후보물질을 확인하는 데에 사용될 수 있다. 일반 대중에 비해 상대적으로 유방암을 발달시킬 증가된 위험을 갖는 대상체는 유방암의 가족력 또는 개인적 병력을 갖는 여성 대상체이다. 일반 대중에 비해 상대적으로 유방암을 발달시킬 증가된 위험을 갖는 대상체는 BRCA1 또는 BRCA2, 또는 이들 둘다에서 생식세포주 또는 자연발생적 돌연변이를 갖는 여성 대상체이다. 일반 대중에 비해 상대적으로 유방암을 발달시킬 증가된 위험을 갖는 대상체는 유방암의 가족력을 갖고 BRCA1 또는 BRCA2, 또는 이들 둘다에서 생식세포주 또는 자연발생적 돌연변이를 갖는 여성 대상체이다. 일반 대중에 비해 상대적으로 유방암을 발달시킬 증가된 위험을 갖는 대상체는 30세 초과, 40세 초과, 50세 초과, 60세 초과, 70세 초과, 80세 초과 또는 90세 초과의 연령을 갖는 여성이다. 일반 대중에 비해 상대적으로 유방암을 발달시킬 증가된 위험을 갖는 대상체는 유방의 비전형적인 과다형성증, 상피내관암종(DCIS), 관내암종, 상피내소엽암종(LCIS), 소엽 신생물, 또는 유방의 0 기 증식물 또는 병변(예를 들면, 0 기 또는 0 등급 유방암, 또는 상피내암종)을 갖는 대상체이다.
치료될 유방암은 스카프-블룸-리차드슨(Scarff-Bloom-Richardson) 시스템에 따라 조직학적으로 등급이 매겨질 수 있는데, 이때 유방 종양은 1, 2 또는 3의 유사분열 카운트 점수; 1, 2 또는 3의 핵 다형성 점수; 1, 2 또는 3의 관 형성 점수; 및 3 내지 9의 총 스카프-블룸-리차드슨 점수를 배정받는다. 치료될 유방암은 유방암 치료에 대한 국제합의위원회에 따라 1 등급, 1-2 등급, 2 등급, 2-3 등급 및 3 등급으로 구성된 군으로부터 선택된 종양 등급을 배정받을 수 있다.
치료될 암은 미국 암연합회(AJCC) TNM 분류 시스템에 따라 병기분류될 수 있는데, 이때 종양(T)은 TX, T1, T1mic, T1a, T1b, T1c, T2, T3, T4, T4a, T4b, T4c 또는 T4d 기를 배정받고, 국부 림프절(N)은 NX, N0, N1, N2, N2a, N2b, N3, N3a, N3b 또는 N3c 기를 배정받고, 원위 전이(M)는 MX, MO 또는 M1 기를 배정받을 수 있다. 치료될 암은 미국 암연합회(AJCC) 분류에 따라 I 기, IIA 기, IIB 기, IIIA 기, IIIB 기, IIIC 기 또는 IV 기로서 병기분류될 수 있다. 치료될 암은 AJCC 분류에 따른 등급, 예컨대, GX 등급(예를 들면, 평가될 수 없는 등급), 1 등급, 2 등급, 3 등급 또는 4 등급을 배정받을 수 있다. 치료될 암은 pNX, pN0, PN0(I-), PN0(I+), PN0(mol-), PN0(mol+), PN1, PN1(mi), PN1a, PN1b, PN1c, pN2, pN2a, pN2b, pN3, pN3a, pN3b 또는 pN3c의 AJCC 병리학적 분류(pN)에 따라 병기분류될 수 있다.
치료될 암은 약 2 cm 이하의 직경을 갖는 것으로 측정된 종양을 포함할 수 있다. 치료될 암은 약 2 cm 내지 약 5 cm의 직경을 갖는 것으로 측정된 종양을 포함할 수 있다. 치료될 암은 약 3 cm 이상의 직경을 갖는 것으로 측정된 종양을 포함할 수 있다. 치료될 암은 5 cm 초과의 직경을 갖는 것으로 측정된 종양을 포함할 수 있다. 치료될 암은 현미경관찰에 의해 확인된 외관에 의해 잘 분화된, 적절하게 분화된, 약하게 분화된 또는 미분화된 암으로서 분류될 수 있다. 치료될 암은 현미경관찰에 의해 확인된 외관에 의해 유사분열 카운트(예를 들면, 세포 분열의 양) 또는 핵 다형성(예를 들면, 세포의 변화) 면에서 분류될 수 있다. 치료될 암은 현미경관찰에 의해 확인된 외관에 의해 괴사 영역(예를 들면, 사멸하거나 퇴행하는 세포의 영역)과 관련된 암으로서 분류될 수 있다. 치료될 암은 비정상적인 핵형을 갖는 암, 비정상적인 염색체 수를 갖는 암, 또는 외관에서 비정상적인 하나 이상의 염색체를 갖는 암으로서 분류될 수 있다. 치료될 암은 홀배수체, 삼배수체 또는 사배수체 암으로서 분류될 수 있거나 변경된 배수성을 갖는 암으로서 분류될 수 있다. 치료될 암은 염색체 전위, 전체 염색체의 결실 또는 중복, 또는 염색체의 일부의 결실, 중복 또는 증폭 영역을 갖는 암으로서 분류될 수 있다.
치료될 암은 DNA 세포분석, 유세포분석 또는 이미지 세포분석에 의해 평가될 수 있다. 치료될 암은 세포 분열의 합성 단계(예를 들면, 세포 분열의 S 기)에서 세포의 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80% 또는 90%를 갖는 암으로서 분류될 수 있다. 치료될 암은 낮은 S 기 분율 또는 높은 S 기 분율을 갖는 암으로서 분류될 수 있다.
본원에서 사용된 바와 같이, "정상 세포"는 "세포 증식 질환"의 부분으로서 분류될 수 없는 세포이다. 정상 세포는 원치 않는 병태 또는 질환의 발생을 유발할 수 있는 비조절된 또는 비정상적인 생장, 또는 이들 둘다를 결여한다. 바람직하게는, 정상 세포는 정상적으로 작용하는 세포 주기 확인점 조절 기작을 보유한다.
본원에서 사용된 바와 같이, "세포를 접촉시키는"은 화합물 또는 다른 물질 조성물이 세포와 직접적으로 접촉하고 있거나 세포에서 원하는 생물학적 효과를 유도할 정도로 충분히 가깝게 있는 상태를 의미한다.
본원에서 사용된 바와 같이, "후보 화합물"은 이 화합물이 세포, 조직, 시스템, 동물 또는 인간에서 연구원 또는 임상의에 의해 추구되는 원하는 생물학적 또는 의학적 반응을 이끌어낼 가능성이 있는지를 확인하기 위해 하나 이상의 시험관내 또는 생체내 생물학적 어세이에서 시험되거나 시험될 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 전구약물, 대사물질, 다형체 또는 용매화물을 의미한다. 후보 화합물은 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 전구약물, 대사물질, 다형체 또는 용매화물이다. 상기 생물학적 또는 의학적 반응은 암의 치료일 수 있다. 상기 생물학적 또는 의학적 반응은 세포 증식 질환의 치료 또는 예방일 수 있다. 생물학적 반응 또는 효과는 시험관내에서 또는 동물 모델에서 일어나는 세포 증식 또는 생장의 변화뿐만 아니라 시험관내에서 관찰될 수 있는 다른 생물학적 변화도 포함할 수 있다. 시험관내 또는 생체내 생물학적 어세이는 효소 활성 어세이, 전기영동에서의 이동성 변동 어세이, 레포터 유전자 어세이, 시험관내 세포 생존능 어세이 및 본원에 기재된 어세이를 포함할 수 있으나 이들로 한정되지 않는다.
본원에서 사용된 바와 같이, "단일요법"은 단일 활성 또는 치료 화합물을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 의미한다. 바람직하게는, 단일요법은 치료 유효량의 활성 화합물의 투여를 포함할 것이다. 예를 들면, 암 단일요법은 본 발명의 화합물 중 하나, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 전구약물, 대사물질, 유사체 및 유도체를 암의 치료가 필요한 대상체에게 투여하는 것을 포함한다. 단일요법은 다수의 활성 화합물들의 조합물이 바람직하게는 치료 유효량으로 존재하는 상기 조합물의 각각의 성분과 함께 투여되는 병용요법과 대조될 수 있다. 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 전구약물, 대사물질, 다형체 또는 용매화물을 사용한 단일요법은 원하는 생물학적 효과를 유도하는 데에 있어서 병용요법보다 더 효과적일 수 있다.
본원에서 사용된 바와 같이, "치료하는" 또는 "치료한다"는 질환, 병태 또는 장애에 대항하는 것을 목적으로 하는 환자의 관리 및 보호를 기술하고 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 전구약물, 대사물질, 다형체 또는 용매화물을 투여하여 질환, 병태 또는 장애의 증상 또는 합병증을 완화시키거나 상기 질환, 병태 또는 장애를 제거하는 것을 포함한다. 용어 "치료한다"는 시험관내에서의 세포 치료 또는 동물 모델에서의 세포 치료도 포함할 수 있다.
또한, 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 전구약물, 대사물질, 다형체 또는 용매화물은 관련 질환, 병태 또는 장애를 예방하는 데에 사용될 수 있거나 이러한 목적에 적합한 후보물질을 확인하는 데에 사용될 수 있다. 본원에서 사용된 바와 같이, "예방하는" 또는 "예방한다"는 이러한 질환, 병태 또는 장애의 증상 또는 합병증의 발생을 감소시키거나 제거하는 것을 기술한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "완화시킨다"는 질환의 징후 또는 증상의 중증도가 감소되는 과정을 기술하기 위한 것이다. 중요하게는, 징후 또는 증상은 제거되지 않고 완화될 수 있다. 본 발명의 약학 조성물의 투여는 징후 또는 증상의 제거를 유발할 수 있으나, 제거가 요구되는 것은 아니다. 유효 용량은 징후 또는 증상의 중증도를 감소시킬 것으로 예측되어야 한다. 예를 들면, 다수의 위치들에서 발생할 수 있는 질환, 예컨대, 암의 징후 또는 증상은 암의 중증도가 다수의 위치들 중 하나 이상의 위치 내에서 감소되는 경우 완화된다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "중증도"는 전암성 또는 양성 상태로부터 악성 상태로 형질전환되는 암의 잠재력을 기술하기 위한 것이다. 대안적으로 또는 추가로, 중증도는 예를 들면, (국제암연맹(UICC) 및 미국 암연합회(AJCC)에 의해 채택된) TNM 시스템에 따라, 또는 당분야에서 인정된 다른 방법으로 암 병기를 기술하기 위한 것이다. 암 병기는 인자, 예컨대, 원발성 종양의 위치, 종양 크기, 종양의 수 및 림프절 관련성(림프절 내로의 암의 퍼짐)에 기초한 암의 정도 또는 중증도를 의미한다. 대안적으로 또는 추가로, 중증도는 당분야에서 인정된 방법(국립 암연구소(www.cancer.gov) 참조)으로 종양 등급을 기술하기 위한 것이다. 종양 등급은 암세포가 현미경 하에 얼마나 비정상적으로 보이는지 및 종양이 얼마나 신속히 성장하고 퍼질 가능성이 있는지의 면에서 암세포를 분류하는 데에 사용되는 시스템이다. 종양 등급을 결정할 때 세포의 구조 및 생장 패턴을 포함하는 많은 인자들이 고려된다. 종양 등급을 결정하는 데에 사용된 특정 인자는 암의 각각의 유형에 따라 달라진다. 또한, 중증도는 얼마나 많은 종양 세포들이 동일한 조직 유형의 정상 세포와 유사한지를 의미하는, 분화로도 지칭되는 조직학적 등급을 기술한다(국립 암연구소(www.cancer.gov) 참조). 나아가, 중증도는 종양 세포의 핵의 크기 및 형태, 및 분열하는 종양 세포의 백분율을 의미하는 핵 등급을 기술한다(국립 암연구소(www.cancer.gov) 참조).
중증도는 종양이 성장인자를 분비하거나, 세포외 매트릭스를 분해하거나, 혈관을 형성하게 되거나, 나란히 놓여있는 조직에의 접착을 상실하거나 전이되는 정도를 기술할 수도 있다. 뿐만 아니라, 중증도는 원발성 종양이 전이되어 있는 위치의 수를 기술할 수 있다. 마지막으로, 중증도는 다양한 유형 및 위치의 종양을 치료하는 어려움을 포함할 수 있다. 예를 들면, 수술불가능한 종양, 다수의 신체 시스템에 더 잘 접근하는 암(혈액 종양 및 면역학적 종양), 및 전통적인 치료에 대한 가장 높은 저항성을 갖는 암이 가장 심각한 것으로 간주된다. 이들 상황들에서, 대상체의 기대 수명을 연장시키고/시키거나 통증을 감소시키고, 암세포의 비율을 감소시키거나 세포를 한 시스템에 국한시키고, 암 병기/종양 등급/조직학적 등급/핵 등급을 개선하는 것이 암의 징후 또는 증상을 완화시키는 것으로 간주된다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "증상"은 질환, 질병, 손상, 또는 신체 내에서 무엇인가가 알맞지 않다는 것의 표시로서 정의된다. 증상은 이 증상을 경험하는 개체에 의해 감지되거나 인식되지만, 다른 개체들에 의해 용이하게 인식될 수 없다. 상기 다른 개체들은 건강관리 비전문가로서 정의된다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "징후"도 신체 내에서 무엇인가가 알맞지 않다는 것의 표시로서 정의된다. 그러나, 징후는 의사, 간호사 또는 다른 건강관리 전문가에 의해 관찰될 수 있는 것으로서 정의된다.
암은 거의 임의의 징후 또는 증상을 야기할 수 있는 질환 군이다. 징후 및 증상은 암이 존재하는 위치, 암의 크기, 및 암이 근처 장기 또는 구조에 얼마나 많은 영향을 미치는지에 의존할 것이다. 암이 퍼지는(전이되는) 경우, 증상은 신체의 상이한 부분들에서 나타날 수 있다.
암은 성장함에 따라 근처 장기, 혈관 및 신경을 압박하기 시작한다. 이 압력은 암의 징후 및 증상의 일부를 생성한다. 암이 중요한 영역, 예컨대, 뇌의 일부 부분에 존재하는 경우, 가장 작은 종양조차도 초기 증상을 야기할 수 있다.
그러나, 종종 암은 암이 꽤 크게 성장할 때까지 임의의 증상을 야기하지 않는 위치에서 시작한다. 예를 들면, 췌장암은 통상적으로 신체의 외부로부터 감지될 정도로 충분히 크게 성장하지 않는다. 몇몇 췌장암들은 이들이 근처 신경 주변에서 성장하기 시작할 때까지(이것은 요통을 야기함) 증상을 야기하지 않는다. 다른 췌장암들은 담관 주변에서 성장하여 담즙의 유동을 차단하고 황달로서 공지된 피부의 황색화를 초래한다. 췌장암이 이들 징후들 또는 증상들을 야기할 때까지 췌장암은 통상적으로 진행된 병기에 도달한다.
암은 증상, 예컨대, 발열, 피로 또는 체중 손실을 야기할 수도 있다. 이것은 암세포가 신체의 에너지 공급의 대부분을 사용하거나 신체의 대사를 변화시키는 물질을 방출하기 때문일 수 있다. 또는, 암은 면역 시스템이 이들 증상들을 생성하는 방식으로 반응하게 할 수 있다.
종종, 암세포는 통상적으로 암으로부터 발생되는 것으로 생각되지 않는 증상을 야기하는 물질을 혈류 내로 방출한다. 예를 들면, 몇몇 췌장암들은 혈괴가 다리의 정맥에서 발달하게 하는 물질을 방출할 수 있다. 몇몇 폐암들은 혈중 칼슘 수준에 영향을 미쳐 신경 및 근육에 영향을 미치고 쇠약 및 현기증을 야기하는 호르몬 유사 물질을 만든다.
암은 다양한 하위형의 암세포들이 존재할 때 발생하는 여러 일반적인 징후 또는 증상을 제공한다. 암을 갖는 대부분의 사람들은 그들의 질환의 어느 시점에서 체중을 손실할 것이다. 10 파운드 이상의 설명되지 않는(비의도적) 체중 손실은 암, 특히 췌장암, 위암, 식도암 또는 폐암의 첫 번째 징후일 수 있다.
발열은 암에서 매우 흔하지만, 진행된 질환에서 더 빈번히 관찰된다. 암을 갖는 거의 모든 환자들은 특히, 암 또는 이의 치료가 면역 시스템에 영향을 미치고 신체가 감염에 대항하기에 더 어렵게 만드는 경우 어느 시점에서 발열을 가질 것이다. 덜 빈번하게는, 발열은 암, 예컨대, 백혈병 또는 림프종의 초기 징후일 수 있다.
피로는 암이 진행됨에 따라 중요한 증상일 수 있다. 그렇지만, 피로는 암, 예컨대, 백혈병에서 초기에 발생할 수 있거나 몇몇 결장암들 또는 위암들에서와 같이 암이 계속된 혈액 손실을 야기하는 경우 초기에 발생할 수 있다.
통증은 몇몇 암들, 예컨대, 골암 또는 정소암에서 초기 증상일 수 있다. 그러나, 가장 빈번한 통증은 진행된 질환의 증상이다.
피부암(다음 단락 참조)과 함께, 몇몇 내부 암들은 관찰될 수 있는 피부 징후를 야기할 수 있다. 이들 변화는 더 어둡게 보이는 피부(과다색소침착), 황색으로 보이는 피부(황달) 또는 적색으로 보이는 피부(홍반); 소양증; 또는 과도한 모발 성장을 포함한다.
대안적으로 또는 추가로, 암 하위형은 특정 징후 또는 증상을 제공한다. 배변 습관 또는 방광 기능의 변화는 암을 표시할 수 있다. 장기간 변비, 설사 또는 대변 크기의 변화는 결장암의 징후일 수 있다. 배뇨 통증, 소변 중의 혈액, 또는 방광 기능의 변화(예컨대, 보다 더 빈번한 또는 보다 덜 빈번한 배뇨)는 방광암 또는 전립선암과 관련될 수 있다.
피부 상태의 변화 또는 새로운 피부 상태의 출현은 암을 표시할 수 있다. 피부암은 출혈을 야기할 수 있고 치유할 수 없는 욕창처럼 보인다. 특히, 흡연하거나, 담배를 씹거나 알코올을 빈번하게 마시는 환자에서 오래 지속되는 구강내 욕창은 구강암일 수 있다. 음경 또는 질 상의 욕창은 감염 또는 초기 암의 징후일 수 있다.
비정상적인 출혈 또는 분비물은 암을 표시할 수 있다. 비정상적인 출혈은 초기 또는 진행된 암에서 발생할 수 있다. 객담(점액질) 중의 혈액은 폐암의 징후일 수 있다. 대변 중의 혈액(또는 어두운 또는 흑색 대변)은 결장암 또는 직장암의 징후일 수 있다. 자궁경부 또는 자궁내막(자궁의 내층)의 암은 질 출혈을 야기할 수 있다. 소변 중의 출혈은 방광암 또는 신장암의 징후일 수 있다. 유두로부터의 혈액 분비물은 유방암의 징후일 수 있다.
유방 또는 신체의 다른 부분에서의 비후화 또는 종괴는 암의 존재를 표시할 수 있다. 많은 암들이 주로 유방, 고환, 림프절(샘) 및 신체의 연조직에서 피부를 통해 감지될 수 있다. 종괴 또는 비후화는 암의 초기 또는 후기 징후일 수 있다. 임의의 종괴 또는 비후화는 특히 새로 형성된 것이거나 크기에서 성장하는 경우 암을 표시할 수 있다.
소화불량 또는 삼키기 곤란함은 암을 표시할 수 있다. 이들 증상들은 통상적으로 다른 원인을 갖지만, 소화불량 또는 삼키는 문제는 식도암, 위암 또는 인두(인후)암의 징후일 수 있다.
사마귀 또는 모반의 최근 변화는 암을 표시할 수 있다. 색채, 크기 또는 형태에서 변화되거나 그의 명확한 경계를 상실한 임의의 사마귀, 모반 또는 주근깨는 암의 잠재적 발달을 표시한다. 예를 들면, 상기 피부 병변은 흑색종일 수 있다.
지속적인 기침 또는 쉰소리는 암을 표시할 수 있다. 사라지지 않는 기침은 폐암의 징후일 수 있다. 쉰소리는 후두(성대)암 또는 갑상선암의 징후일 수 있다.
상기 나열된 징후들 및 증상들이 암에서 관찰된 보다 흔한 징후들 및 증상들이지만, 덜 흔하고 여기에 나열되어 있지 않은 많은 다른 징후들 및 증상들이 존재한다.
암의 치료는 종양 크기의 감소를 유발할 수 있다. 종양 크기의 감소는 "종양 퇴행"으로서도 지칭될 수 있다. 바람직하게는, 치료 후, 종양 크기는 치료 전 그의 크기에 비해 상대적으로 5% 이상 감소될 것이고, 보다 바람직하게는, 종양 크기는 10% 이상 감소되고, 보다 바람직하게는 20% 이상 감소되고, 보다 바람직하게는 30% 이상 감소되고, 보다 바람직하게는 40% 이상 감소되고, 훨씬 더욱 바람직하게는 50% 이상 감소되고, 가장 바람직하게는 75% 이상 감소된다. 종양의 크기는 임의의 재현가능한 측정 수단에 의해 측정될 수 있다. 종양의 크기는 종양의 직경으로서 측정될 수 있다.
암의 치료는 종양 부피의 감소를 유발할 수 있다. 바람직하게는, 치료 후, 종양 부피는 치료 전 그의 크기에 비해 상대적으로 5% 이상 감소될 것이고, 보다 바람직하게는, 종양 부피는 10% 이상 감소되고, 보다 바람직하게는 20% 이상 감소되고, 보다 바람직하게는 30% 이상 감소되고, 보다 바람직하게는 40% 이상 감소되고, 훨씬 더욱 바람직하게는 50% 이상 감소되고, 가장 바람직하게는 75% 이상 감소된다. 종양 부피는 임의의 재현가능한 측정 수단에 의해 측정될 수 있다.
암의 치료는 종양 수의 감소를 유발할 수 있다. 바람직하게는, 치료 후, 종양 수는 치료 전 종양 수에 비해 상대적으로 5% 이상 감소될 것이고, 보다 바람직하게는, 종양 수는 10% 이상 감소되고, 보다 바람직하게는 20% 이상 감소되고, 보다 바람직하게는 30% 이상 감소되고, 보다 바람직하게는 40% 이상 감소되고, 훨씬 더욱 바람직하게는 50% 이상 감소되고, 가장 바람직하게는 75% 이상 감소된다. 종양의 수는 임의의 재현가능한 측정 수단에 의해 측정될 수 있다. 종양의 수는 육안으로 볼 수 있거나 특정된 배율에서 볼 수 있는 종양을 카운팅함으로써 측정될 수 있다. 바람직하게는, 상기 특정된 배율은 2배, 3배, 4배, 5배, 10배 또는 50배이다.
암의 치료는 원발성 종양 부위로부터 멀리 떨어져 있는 다른 조직 또는 장기에서 전이성 병변의 수의 감소를 유발할 수 있다. 바람직하게는, 치료 후, 전이성 병변의 수는 치료 전 전이성 병변의 수에 비해 상대적으로 5% 이상 감소될 것이고, 보다 바람직하게는, 전이성 병변의 수는 10% 이상 감소되고, 보다 바람직하게는 20% 이상 감소되고, 보다 바람직하게는 30% 이상 감소되고, 보다 바람직하게는 40% 이상 감소되고, 훨씬 더욱 바람직하게는 50% 이상 감소되고, 가장 바람직하게는 75% 이상 감소된다. 전이성 병변의 수는 임의의 재현가능한 측정 수단에 의해 측정될 수 있다. 전이성 병변의 수는 육안으로 볼 수 있거나 특정된 배율에서 볼 수 있는 전이성 병변을 카운팅함으로써 측정될 수 있다. 바람직하게는, 상기 특정된 배율은 2배, 3배, 4배, 5배, 10배 또는 50배이다.
암의 치료는 담체만을 제공받은 집단에 비해 치료된 대상체 집단의 평균 생존 시간의 증가를 유발할 수 있다. 바람직하게는, 상기 평균 생존 시간은 30일 초과, 보다 바람직하게는 60일 초과, 보다 바람직하게는 90일 초과, 가장 바람직하게는 120일 초과의 수준까지 증가될 것이다. 집단의 평균 생존 시간의 증가는 임의의 재현가능한 수단에 의해 측정될 수 있다. 집단의 평균 생존 시간의 증가는 예를 들면, 활성 화합물을 사용한 치료의 개시 후 집단에 대해 평균 생존 시간을 계산함으로써 측정될 수 있다. 집단의 평균 생존 시간의 증가는 예를 들면, 활성 화합물을 사용한 제1차 치료의 완결 후 집단에 대해 평균 생존 시간을 계산함으로써 측정될 수도 있다.
암의 치료는 비치료된 대상체 집단에 비해 치료된 대상체 집단의 평균 생존 시간의 증가를 유발할 수 있다. 바람직하게는, 상기 평균 생존 시간은 30일 초과, 보다 바람직하게는 60일 초과, 보다 바람직하게는 90일 초과, 가장 바람직하게는 120일 초과의 수준까지 증가될 것이다. 집단의 평균 생존 시간의 증가는 임의의 재현가능한 수단에 의해 측정될 수 있다. 집단의 평균 생존 시간의 증가는 예를 들면, 활성 화합물을 사용한 치료의 개시 후 집단에 대해 평균 생존 시간을 계산함으로써 측정될 수 있다. 집단의 평균 생존 시간의 증가는 예를 들면, 활성 화합물을 사용한 제1차 치료의 완결 후 집단에 대해 평균 생존 시간을 계산함으로써 측정될 수도 있다.
암의 치료는 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 전구약물, 대사물질, 유사체 또는 유도체가 아닌 약물을 사용한 단일요법을 제공받은 집단에 비해 치료된 대상체 집단의 평균 생존 시간의 증가를 유발할 수 있다. 바람직하게는, 상기 평균 생존 시간은 30일 초과, 보다 바람직하게는 60일 초과, 보다 바람직하게는 90일 초과, 가장 바람직하게는 120일 초과의 수준까지 증가될 것이다. 집단의 평균 생존 시간의 증가는 임의의 재현가능한 수단에 의해 측정될 수 있다. 집단의 평균 생존 시간의 증가는 예를 들면, 활성 화합물을 사용한 치료의 개시 후 집단에 대해 평균 생존 시간을 계산함으로써 측정될 수 있다. 집단의 평균 생존 시간의 증가는 예를 들면, 활성 화합물을 사용한 제1차 치료의 완결 후 집단에 대해 평균 생존 시간을 계산함으로써 측정될 수도 있다.
암의 치료는 담체만을 제공받은 집단에 비해 치료된 대상체 집단의 사망률의 감소를 유발할 수 있다. 암의 치료는 비치료된 집단에 비해 치료된 대상체 집단의 사망률의 감소를 유발할 수 있다. 암의 치료는 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 전구약물, 대사물질, 유사체 또는 유도체가 아닌 약물을 사용한 단일요법을 제공받은 집단에 비해 치료된 대상체 집단의 사망률의 감소를 유발할 수 있다. 바람직하게는, 상기 사망률은 2% 초과, 보다 바람직하게는 5% 초과, 보다 바람직하게는 10% 초과, 가장 바람직하게는 25% 초과의 수준까지 감소될 것이다. 치료된 대상체 집단의 사망률의 감소는 임의의 재현가능한 수단에 의해 측정될 수 있다. 집단의 사망률의 감소는 예를 들면, 활성 화합물을 사용한 치료의 개시 후 집단에 대해 단위 시간 당 질환 관련 사망의 평균 수를 계산함으로써 측정될 수 있다. 집단의 사망률의 감소는 예를 들면, 활성 화합물을 사용한 제1차 치료의 완결 후 집단에 대해 단위 시간 당 질환 관련 사망의 평균 수를 계산함으로써 측정될 수도 있다.
암의 치료는 종양 성장률의 감소를 유발할 수 있다. 바람직하게는, 치료 후, 종양 성장률은 치료 전 종양 성장률에 비해 상대적으로 5% 이상 감소될 것이고, 보다 바람직하게는, 종양 성장률은 10% 이상 감소될 것이고, 보다 바람직하게는 20% 이상 감소될 것이고, 보다 바람직하게는 30% 이상 감소될 것이고, 보다 바람직하게는 40% 이상 감소될 것이고, 훨씬 더욱 바람직하게는 50% 이상 감소될 것이고, 가장 바람직하게는 75% 이상 감소될 것이다. 종양 성장률은 임의의 재현가능한 측정 수단에 의해 측정될 수 있다. 종양 성장률은 단위 시간 당 종양 직경의 변화에 따라 측정될 수 있다.
암의 치료는 종양 재성장의 감소를 유발할 수 있다. 바람직하게는, 치료 후, 종양 재성장은 5% 미만일 것이고, 보다 바람직하게는, 종양 재성장은 10% 미만, 보다 바람직하게는 20% 미만, 보다 바람직하게는 30% 미만, 보다 바람직하게는 40% 미만, 훨씬 더욱 바람직하게는 50% 미만, 가장 바람직하게는 75% 미만일 것이다. 종양 재성장은 임의의 재현가능한 측정 수단에 의해 측정될 수 있다. 종양 재성장은 예를 들면, 치료 후 일어나는 선행 종양 수축 후 종양 직경의 증가를 측정함으로써 측정될 수 있다. 종양 재성장의 감소는 치료가 중단된 후 종양 재발의 실패에 의해 표시된다.
세포 증식 질환의 치료 또는 예방은 세포 증식률의 감소를 유발할 수 있다. 바람직하게는, 치료 후, 세포 증식률은 5% 이상, 보다 바람직하게는 10% 이상, 보다 바람직하게는 20% 이상, 보다 바람직하게는 30% 이상, 보다 바람직하게는 40% 이상, 훨씬 더욱 바람직하게는 50% 이상, 가장 바람직하게는 75% 이상 감소될 것이다. 세포 증식률은 임의의 재현가능한 측정 수단에 의해 측정될 수 있다. 세포 증식률은 예를 들면, 단위 시간 당 조직 샘플 중의 분열 세포의 수를 측정함으로써 측정된다.
세포 증식 질환의 치료 또는 예방은 증식 세포의 비율의 감소를 유발할 수 있다. 바람직하게는, 치료 후, 증식 세포의 비율은 5% 이상, 보다 바람직하게는 10% 이상, 보다 바람직하게는 20% 이상, 보다 바람직하게는 30% 이상, 보다 바람직하게는 40% 이상, 훨씬 더욱 바람직하게는 50% 이상, 가장 바람직하게는 75% 이상 감소될 것이다. 증식 세포의 비율은 임의의 재현가능한 측정 수단에 의해 측정될 수 있다. 바람직하게는, 증식 세포의 비율은 예를 들면, 조직 샘플 중의 비분열 세포의 수에 비해 상대적으로 분열 세포의 수를 정량함으로써 측정된다. 증식 세포의 비율은 유사분열 지수와 동등할 수 있다.
세포 증식 질환의 치료 또는 예방은 세포 증식 영역 또는 대역의 크기의 감소를 유발할 수 있다. 바람직하게는, 치료 후, 세포 증식 영역 또는 대역의 크기는 치료 전 그의 크기에 비해 상대적으로 5% 이상 감소될 것이고, 보다 바람직하게는 10% 이상 감소될 것이고, 보다 바람직하게는 20% 이상 감소될 것이고, 보다 바람직하게는 30% 이상 감소될 것이고, 보다 바람직하게는 40% 이상 감소될 것이고, 훨씬 더욱 바람직하게는 50% 이상 감소될 것이고, 가장 바람직하게는 75% 이상 감소될 것이다. 세포 증식 영역 또는 대역의 크기는 임의의 재현가능한 측정 수단에 의해 측정될 수 있다. 세포 증식 영역 또는 대역의 크기는 세포 증식 영역 또는 대역의 직경 또는 폭으로서 측정될 수 있다.
세포 증식 질환의 치료 또는 예방은 비정상적인 외관 또는 형상을 갖는 세포의 수 또는 비율의 감소를 유발할 수 있다. 바람직하게는, 치료 후, 비정상적인 형상을 갖는 세포의 수는 치료 전 그의 수에 비해 상대적으로 5% 이상 감소될 것이고, 보다 바람직하게는 10% 이상 감소될 것이고, 보다 바람직하게는 20% 이상 감소될 것이고, 보다 바람직하게는 30% 이상 감소될 것이고, 보다 바람직하게는 40% 이상 감소될 것이고, 훨씬 더욱 바람직하게는 50% 이상 감소될 것이고, 가장 바람직하게는 75% 이상 감소될 것이다. 비정상적인 세포 외관 또는 형상은 임의의 재현가능한 측정 수단에 의해 측정될 수 있다. 비정상적인 세포 형상은 현미경관찰, 예를 들면, 도립 조직 배양 현미경의 이용을 통해 측정될 수 있다. 비정상적인 세포 형상은 핵 다형성의 형태를 취할 수 있다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "선택적으로"는 또 다른 집단에서보다 한 집단에서 보다 높은 빈도로 일어나는 경향을 의미한다. 비교된 집단은 세포 집단일 수 있다. 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 전구약물, 대사물질, 다형체 또는 용매화물은 암세포 또는 전암성 세포에 선택적으로 작용할 수 있으나 정상 세포에는 작용하지 않는다. 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 전구약물, 대사물질, 다형체 또는 용매화물은 한 분자 표적(예를 들면, 표적 단백질 메틸트랜스퍼라제)을 선택적으로 조절하는 작용을 할 수 있으나 또 다른 분자 표적(예를 들면, 비표적 단백질 메틸트랜스퍼라제)을 유의하게 조절하지 않는다. 본 발명은 효소, 예컨대, 단백질 메틸트랜스퍼라제의 활성을 선택적으로 억제하는 방법도 제공한다. 바람직하게는, 사건이 집단 B에 비해 집단 A에서 2배 초과의 수준으로 더 빈번하게 일어나는 경우 상기 사건은 집단 B에 비해 집단 A에서 선택적으로 일어난다. 사건이 집단 A에서 5배 초과의 수준으로 더 빈번하게 일어나는 경우 상기 사건은 선택적으로 일어난다. 사건이 집단 B에 비해 집단 A에서 10배 초과의 수준, 보다 바람직하게는 50배 초과의 수준, 훨씬 더 바람직하게는 100배 초과의 수준, 가장 바람직하게는 1000배 초과의 수준으로 더 빈번하게 일어나는 경우 상기 사건은 선택적으로 일어난다. 예를 들면, 세포 사멸이 정상 세포에 비해 암세포에서 2배 초과의 수준으로 빈번하게 일어나는 경우 상기 세포 사멸은 암세포에서 선택적으로 일어난다고 기재될 것이다.
본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 전구약물, 대사물질, 다형체 또는 용매화물은 분자 표적(예를 들면, 표적 단백질 메틸트랜스퍼라제)의 활성을 조절할 수 있다. 조절은 분자 표적의 활성을 자극하거나 억제하는 것을 의미한다. 바람직하게는, 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 전구약물, 대사물질, 다형체 또는 용매화물은 상기 화합물의 존재만을 결여한다는 점을 제외하고 동일한 조건 하에서의 분자 표적의 활성에 비해 상대적으로 상기 분자 표적의 활성을 2배 이상 자극하거나 억제하는 경우 상기 분자 표적의 활성을 조절한다. 보다 바람직하게는, 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 전구약물, 대사물질, 다형체 또는 용매화물은 상기 화합물의 존재만을 결여한다는 점을 제외하고 동일한 조건 하에서의 분자 표적의 활성에 비해 상대적으로 상기 분자 표적의 활성을 5배 이상, 10배 이상, 20배 이상, 50배 이상 또는 100배 이상 자극하거나 억제하는 경우 상기 분자 표적의 활성을 조절한다. 분자 표적의 활성은 임의의 재현가능한 수단에 의해 측정될 수 있다. 분자 표적의 활성은 시험관내에서 또는 생체내에서 측정될 수 있다. 예를 들면, 분자 표적의 활성은 효소 활성 어세이 또는 DNA 결합 어세이에 의해 시험관내에서 측정될 수 있거나, 분자 표적의 활성은 레포터 유전자의 발현의 어세이에 의해 생체내에서 측정될 수 있다.
본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 전구약물, 대사물질, 다형체 또는 용매화물은 상기 화합물의 첨가가 상기 화합물의 존재만을 결여한다는 점을 제외하고 동일한 조건 하에서의 분자 표적의 활성에 비해 상대적으로 상기 분자 표적의 활성을 10% 초과의 수준까지 자극하거나 억제하지 않는 경우 상기 분자 표적의 활성을 유의하게 조절하지 않는다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "동종효소(isozyme) 선택적"은 효소의 제2 동형체에 비해 효소의 제1 동형체의 우세한 억제 또는 자극(예를 들면, 단백질 메틸트랜스퍼라제 동종효소 베타에 비해 단백질 메틸트랜스퍼라제 동종효소 알파의 우세한 억제 또는 자극)을 의미한다. 바람직하게는, 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 전구약물, 대사물질, 다형체 또는 용매화물은 생물학적 효과를 달성하는 데에 요구되는 용량에서 최소 4배 차이, 바람직하게는 10배 차이, 보다 바람직하게는 50배 차이를 나타낸다. 바람직하게는, 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 전구약물, 대사물질, 다형체 또는 용매화물은 억제 범위에 걸쳐 이 차이를 나타내고, 상기 차이는 관심 있는 분자 표적에 대한 IC50, 즉 50% 억제로 예시된다.
본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 전구약물, 대사물질, 다형체 또는 용매화물을 이를 필요로 하는 세포 또는 대상체에게 투여하여 관심 있는 단백질 메틸트랜스퍼라제의 활성의 조절(즉, 자극 또는 억제)을 유발할 수 있다.
본 발명은 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 전구약물, 대사물질, 다형체 또는 용매화물의 생물학적 활성을 평가하는 방법, 또는 EZH2의 Y641 돌연변이체의 억제제로서 시험 화합물을 확인하는 방법을 제공한다. 한 실시양태에서, 상기 방법은 EZH2의 단리된 Y641 돌연변이체를 히스톤 기질, 메틸 기 공여체(예컨대, S-아데노실메티오닌(SAM)) 및 시험 화합물과 조합하는 단계로서, 이때 상기 히스톤 기질이 비메틸화된 H3-K27, 모노메틸화된 H3-K27, 다이메틸화된 H3-K27 및 이들의 임의의 조합물로 구성된 군으로부터 선택된 형태의 H3-K27을 포함하는 것인 단계; 및 상기 히스톤 기질에서 H3-K27의 메틸화를 검출하는 어세이를 수행함으로써, 시험 화합물의 존재 하에서의 H3-K27의 메틸화가 시험 화합물의 부재 하에서의 H3-K27의 메틸화보다 더 적을 때 상기 시험 화합물을 EZH2의 Y641 돌연변이체의 억제제로서 확인하는 단계를 포함한다. H3-K27의 메틸화를 검출하는 어세이는 메틸화의 속도, 메틸화의 정도, 또는 메틸화의 속도 및 정도 둘다를 측정하도록 선택될 수 있다.
EZH2의 Y641 돌연변이체는 PRC2 복합체 또는 이의 기능적 등가물로서 단리된다. 본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "단리된"은 상기 복합체가 천연 상태로 존재하는 경우 상기 복합체와 함께 발견될 수 있는 다른 성분들로부터 실질적으로 분리된 것을 의미한다. 화합물은 반드시 정제될 필요 없이 단리될 수 있다. 한 실시양태에서, EZH2의 돌연변이체는 EED 및 SUZ12와 함께 EZH2의 Y641 돌연변이체의 복합체로서 단리된다. 또 다른 실시양태에서, EZH2의 돌연변이체는 EED, SUZ12 및 RbAp48과 함께 EZH2의 Y641 돌연변이체의 복합체로서 단리된다. 적절한 조건 하에, PRC2 복합체 또는 이의 기능적 등가물은 H3-K27에 대한 히스톤 메틸트랜스퍼라제 활성을 나타낸다. 한 실시양태에서, 상기 복합체는 재조합적으로 발현된 성분 폴리펩티드, 예를 들면, (RbAp48과 함께 또는 RbAp48 없이) EZH2, EED 및 SUZ12로 구성된다.
EZH2의 단리된 Y641 돌연변이체는 히스톤 기질과 조합된다. 히스톤 기질은 EZH2에 대한 기질로서 사용될 수 있는 히스톤 폴리펩티드 또는 이의 단편의 임의의 적합한 공급원을 포함한다. 한 실시양태에서, 히스톤 기질은 대상체로부터 단리된 히스톤을 포함한다. 히스톤은 임의의 적합한 방법의 이용을 통해 대상체의 세포로부터 단리될 수 있고, 이러한 방법은 당업자에게 잘 공지되어 있고 여기서 더 특정될 필요는 없다. 예를 들면, 문헌(Fang et al. (2004) Methods Enzymol 377:213-26)을 참조한다. 하기 실시예에 따라, 한 실시양태에서 히스톤 기질은 뉴클레오좀(nucleosome)으로서 제공된다. 하기 실시예에 따라, 한 실시양태에서 히스톤 기질은 조류(닭) 적혈구 뉴클레오좀으로서 제공된다.
이로써 제공된 히스톤 기질은 H3-K27 메틸화 상태 특이적 항체를 사용한 웨스턴 블롯팅에 의해 판단되었을 때 H3-K27 메틸화의 다양한 상태를 포함하는 히스톤 변경 상태의 혼합물을 포함할 수 있다. 한 실시양태에서, 히스톤 기질은 정제된 전장 히스톤 H3으로서 제공될 수 있다. 이러한 정제된 전장 히스톤 H3은 H3-K27 메틸화 상태 면에서 균질한 제제로서 제공될 수 있거나 다양한 H3-K27 메틸화 상태의 혼합물로서 제공될 수 있다. H3-K27 메틸화 상태 면에서 균질한 단리된 히스톤 H3 제제는 부분적으로 적절한 H3-K27 메틸화 상태 특이적 항체로 적재된 면역친화성 컬럼 상에 통과시킴으로써 제조될 수 있거나 적절한 H3-K27 메틸화 상태 특이적 항체로 코팅된 자성 비드를 사용한 면역침전에 의해 제조될 수 있다. 대안적으로 또는 추가로, H3-K27의 메틸화 상태는 어세이 수행의 일부로서 특징규명될 수 있다. 예를 들면, 출발 물질인 히스톤 기질은 50%의 비메틸화된 H3-K27, 40%의 모노메틸화된 H3-K27, 10%의 다이메틸화된 H3-K27 및 0%의 트라이메틸화된 H3-K27을 함유하는 것으로서 특징규명될 것이다.
한 실시양태에서, 히스톤 기질은 특히 H3-K27을 포함하는 서열을 포함하는, 히스톤 H3과 관련된 하나 이상의 아미노산 서열을 포함하는 펩티드 라이브러리 또는 적절한 펩티드를 포함한다. 예를 들면, 한 실시양태에서, 히스톤 기질은 히스톤 H3의 아미노산 잔기 21 내지 44에 상응하는 펩티드 단편이다. 상기 펩티드 라이브러리 또는 펩티드는 당분야에서 잘 공지되어 있는 기법에 따라 펩티드 합성에 의해 제조될 수 있고 임의적으로 H3-K27에 상응하는 라이신의 임의의 원하는 정도의 메틸화를 도입하도록 변경될 수 있다. 하기 실시예에 기재된 바와 같이, 이러한 펩티드는 다운스트림 어세이의 수행에 유용한 표지, 예컨대, 바이오틴을 도입하도록 변경될 수도 있다. 한 실시양태에서, 상기 표지는 펩티드(들)의 아미노(N) 말단에 부착된다. 한 실시양태에서, 상기 표지는 펩티드(들)의 카복시(C) 말단에 부착된다.
임의의 적절한 방법을 이용하여 H3-K27의 메틸화의 검출을 달성할 수 있다. 한 실시양태에서, 공여체 메틸 기의 공급원은 검출가능한 표지로 표지된 메틸 기를 포함한다. 한 실시양태에서, 검출가능한 표지는 동위원소 표지, 예를 들면, 삼중수소이다. 다른 유형의 표지는 예를 들면, 형광 표지를 포함할 수 있다.
임의의 적절한 방법을 이용하여 트라이메틸화된 H3-K27의 형성의 검출을 달성할 수 있다. 예를 들면, 임의적으로 크로마토그래피 또는 표지된 생성물을 크기별로 분리하는 다른 방법, 예를 들면, 폴리아크릴아미드 겔 전기영동(PAGE), 모세관 전기영동(CE) 또는 고압 액체 크로마토그래피(HPLC)와 병용된, 표지된 메틸 기의 도입을 검출하는 어세이(예컨대, 전술된 어세이)를 이용하여 트라이메틸화된 H3-K27의 형성의 검출을 달성할 수 있다. 대안적으로 또는 추가로, 트라이메틸화된 H3-K27의 형성의 검출은 트라이메틸화된 H3-K27에 대해 특이적인 항체를 사용함으로써 달성될 수 있다.
임의의 적절한 방법을 이용하여 다이메틸화된 H3-K27로의 모노메틸화된 H3-K27의 전환의 검출을 달성할 수 있다. 한 실시양태에서, 모노메틸화된 H3-K27 및 다이메틸화된 H3-K27에 대해 특이적인 항체를 사용함으로써 상기 전환을 측정한다. 예를 들면, 모노메틸화된 H3-K27 및 다이메틸화된 H3-K27에 대해 특이적인 적절한 항체를 사용하여 모노메틸화된 H3-K27 및 다이메틸화된 H3-K27의 출발 양 또는 농도를 측정할 수 있다. 효소, 기질, 메틸 기 공여체 및 시험 화합물의 조합 후, 모노메틸화된 H3-K27 및 다이메틸화된 H3-K27에 대해 특이적인 적절한 항체를 사용하여 모노메틸화된 H3-K27 및 다이메틸화된 H3-K27의 최종 양 또는 농도를 측정할 수 있다. 그 다음, 모노메틸화된 H3-K27 및 다이메틸화된 H3-K27의 초기 양 또는 농도와 최종 양 또는 농도를 비교할 수 있다. 그 다음, 대안적으로 또는 추가로, 모노메틸화된 H3-K27 및 다이메틸화된 H3-K27의 초기 양 또는 농도 및 최종 양 또는 농도를 음성 대조군으로부터의 상응하는 양 또는 농도와 비교할 수 있다. 시험 물질이 어세이에 포함되지 않은 음성 대조군 반응을 동시에 또는 과거 대조군으로서 실시할 수 있다. 임의적으로, 이러한 대조군 반응의 결과를 전술된 비교의 수행 전에 또는 전술된 비교의 수행과 동시에 실험 반응의 상응하는 결과로부터 차감할 수 있다.
H3-K27의 다이메틸화된 형태가 동일한 어세이에서 더 메틸화될 수 있기 때문에, 모노메틸화된 H3-K27의 양 또는 농도의 감소는 다이메틸화된 H3-K27의 증가에 직접적으로 상응하는 것으로 보이지 않을 수 있다. 그러나, 이 경우, 모노메틸화된 H3-K27의 양 또는 농도의 감소는 그 자체가 다이메틸화된 H3-K27로의 모노메틸화된 H3-K27의 전환을 반영한다고 추정될 수 있다.
임의의 적절한 방법을 이용하여 트라이메틸화된 H3-K27로의 다이메틸화된 H3-K27의 전환의 검출을 달성할 수 있다. 한 실시양태에서, 다이메틸화된 H3-K27 및 트라이메틸화된 H3-K27에 대해 특이적인 항체를 사용하여 상기 전환을 측정한다. 예를 들면, 다이메틸화된 H3-K27 및 트라이메틸화된 H3-K27에 대해 특이적인 적절한 항체를 사용하여 다이메틸화된 H3-K27 및 트라이메틸화된 H3-K27의 출발 양 또는 농도를 측정할 수 있다. 그 다음, 효소, 기질 및 시험 화합물의 조합 후, 다이메틸화된 H3-K27 및 트라이메틸화된 H3-K27에 대해 특이적인 적절한 항체를 사용하여 다이메틸화된 H3-K27 및 트라이메틸화된 H3-K27의 최종 양 또는 농도를 측정할 수 있다. 그 다음, 다이메틸화된 H3-K27 및 트라이메틸화된 H3-K27의 초기 양 또는 농도와 최종 양 또는 농도를 비교할 수 있다. 그 다음, 대안적으로 또는 추가로, 다이메틸화된 H3-K27 및 트라이메틸화된 H3-K27의 초기 양 또는 농도 및 최종 양 또는 농도를 음성 대조군으로부터의 상응하는 양 또는 농도와 비교할 수 있다. 시험 물질이 어세이에 포함되지 않은 음성 대조군 반응을 동시에 또는 과거 대조군으로서 실시할 수 있다. 임의적으로, 이러한 대조군 반응의 결과를 전술된 비교의 수행 전에 또는 전술된 비교의 수행과 동시에 실험 반응의 상응하는 결과로부터 차감할 수 있다.
시험 물질은 시험 화합물을 사용한 경우의 H3-K27의 메틸화가 시험 화합물을 사용하지 않은 경우의 H3-K27의 메틸화보다 더 적을 때 EZH2의 Y641 돌연변이체의 억제제로서 확인된다. 한 실시양태에서, 시험 물질은 시험 화합물의 존재 하에서의 트라이메틸화된 H3-K27의 형성이 시험 화합물의 부재 하에서의 트라이메틸화된 H3-K27의 형성보다 더 적을 때 EZH2의 Y641 돌연변이체의 억제제로서 확인된다.
본 발명은 EZH2의 Y641 돌연변이체의 선택적 억제제를 확인하는 방법도 제공한다. 한 실시양태에서, 상기 방법은 EZH2의 단리된 Y641 돌연변이체를 히스톤 기질, 메틸 기 공여체(예를 들면, SAM) 및 시험 화합물과 조합하여 시험 혼합물을 형성하는 단계로서, 이때 상기 히스톤 기질이 모노메틸화된 H3-K27, 다이메틸화된 H3-K27, 및 모노메틸화된 H3-K27과 다이메틸화된 H3-K27의 조합물로 구성된 군으로부터 선택된 형태의 H3-K27을 포함하는 것인 단계; 단리된 야생형 EZH2를 히스톤 기질, 메틸 기 공여체(예를 들면, SAM) 및 시험 화합물과 조합하여 대조군 혼합물을 형성하는 단계로서, 이때 상기 히스톤 기질이 모노메틸화된 H3-K27, 다이메틸화된 H3-K27, 및 모노메틸화된 H3-K27과 다이메틸화된 H3-K27의 조합물로 구성된 군으로부터 선택된 형태의 H3-K27을 포함하는 것인 단계; 상기 시험 혼합물 및 상기 대조군 혼합물 각각에서 히스톤 기질의 트라이메틸화를 검출하는 어세이를 수행하는 단계; (a) EZH2의 Y641 돌연변이체 및 시험 화합물(M+)을 사용한 경우의 트라이메틸화 대 (b) 시험 화합물(M-) 없이 EZH2의 Y641 돌연변이체를 사용한 경우의 트라이메틸화의 비를 계산하는 단계; (c) 야생형 EZH2 및 시험 화합물(WT+)을 사용한 경우의 트라이메틸화 대 (d) 시험 화합물(WT-) 없이 야생형 EZH2를 사용한 경우의 트라이메틸화의 비를 계산하는 단계; 비 (a)/(b)를 비 (c)/(d)와 비교하는 단계; 및 상기 비 (a)/(b)가 상기 비 (c)/(d)보다 더 적을 때 상기 시험 화합물을 EZH2의 Y641 돌연변이체의 선택적 억제제로서 확인하는 단계를 포함한다. 한 실시양태에서, 상기 방법은 시험 혼합물 및 대조군 혼합물 중 어느 하나 또는 둘다에 대해 시험 화합물을 갖지 않는 음성 대조군을 고려하는 단계를 추가로 포함한다.
몇몇 어세이에서, 면역학적 시약, 예를 들면, 항체 및 항원이 사용된다. 형광은 몇몇 어세이에서 효소 활성의 측정에 사용될 수 있다. 본원에서 사용된 바와 같이, "형광"은 분자가 동일한 분자에 의해 보다 높은 에너지의 유입 광자를 흡수한 결과로서 광자를 방출하는 과정을 의미한다. 개시된 화합물의 생물학적 활성을 평가하는 특정 방법이 실시예에 기재되어 있다.
본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 전구약물, 대사물질, 다형체 또는 용매화물을 이를 필요로 하는 세포 또는 대상체에게 투여하여 세포내 표적(예를 들면, 기질)의 활성의 조절(즉, 자극 또는 억제)을 유발할 수 있다. 단백질 메틸트랜스퍼라제를 포함하나 이것으로 한정되지 않는 여러 세포내 표적들을 본 발명의 화합물로 조절할 수 있다.
활성화는 물질 조성물(예를 들면, 단백질 또는 핵산)이 원하는 생물학적 기능을 수행하기에 적합한 상태에 놓이게 하는 것을 의미한다. 활성화될 수 있는 물질 조성물은 불활성화된 상태도 갖는다. 활성화된 물질 조성물은 억제 또는 자극 생물학적 기능, 또는 이들 둘다를 가질 수 있다.
상승은 물질 조성물(예를 들면, 단백질 또는 핵산)의 원하는 생물학적 활성의 증가를 의미한다. 상승은 물질 조성물의 농도 증가를 통해 일어날 수 있다.
본원에서 사용된 바와 같이, "세포 주기 확인점 경로"는 세포 주기 확인점의 조절에 관여하는 생화학적 경로를 의미한다. 세포 주기 확인점 경로는 세포 주기 확인점을 포함하는 하나 이상의 기능에 대한 자극 또는 억제 효과, 또는 이들 둘다를 가질 수 있다. 세포 주기 확인점 경로는 세포 주기 확인점의 조절에 기여하는 2종 이상의 물질 조성물, 바람직하게는 단백질로 구성된다. 세포 주기 확인점 경로는 이 세포 주기 확인점 경로의 하나 이상의 구성원의 활성화를 통해 활성화될 수 있다. 바람직하게는, 세포 주기 확인점 경로는 생화학적 신호전달 경로이다.
본원에서 사용된 바와 같이, "세포 주기 확인점 조절제"는 적어도 부분적으로 세포 주기 확인점의 조절에서 작용할 수 있는 물질 조성물을 의미한다. 세포 주기 확인점 조절제는 세포 주기 확인점을 포함하는 하나 이상의 기능에 대한 자극 또는 억제 효과, 또는 이들 둘다를 가질 수 있다. 세포 주기 확인점 조절제는 단백질일 수 있거나 단백질이 아닐 수 있다.
암 또는 세포 증식 질환의 치료는 세포 사멸을 유발할 수 있고, 바람직하게는 세포 사멸은 집단 내의 세포 수의 10% 이상의 감소를 유발할 것이다. 보다 바람직하게는, 세포 사멸은 20% 이상의 감소, 보다 바람직하게는 30% 이상의 감소, 보다 바람직하게는 40% 이상의 감소, 보다 바람직하게는 50% 이상의 감소, 가장 바람직하게는 75% 이상의 감소를 의미한다. 집단 내의 세포 수는 임의의 재현가능한 수단에 의해 측정될 수 있다. 집단 내의 세포 수는 형광 활성화된 세포 분류(FACS), 면역형광 현미경관찰 및 광학 현미경관찰에 의해 측정될 수 있다. 세포 사멸을 측정하는 방법은 문헌(Li et al., Proc Natl Acad Sci U S A. 100(5): 2674-8, 2003)에 나타낸 바와 같다. 한 양태에서, 세포 사멸은 아폽토시스에 의해 일어난다.
바람직하게는, 유효량의 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 전구약물, 대사물질, 다형체 또는 용매화물은 정상 세포에 대한 유의한 세포독성을 나타내지 않을 것이다. 치료 유효량의 화합물은 치료 유효량의 상기 화합물의 투여가 10% 초과의 정상 세포에서 세포 사멸을 유도하지 않는 경우 정상 세포에 대한 유의한 세포독성을 나타내지 않는다. 치료 유효량의 화합물은 치료 유효량의 상기 화합물의 투여가 10% 초과의 정상 세포에서 세포 사멸을 유도하지 않는 경우 정상 세포의 생존능에 유의한 영향을 미치지 않는다. 한 양태에서, 세포 사멸은 아폽토시스에 의해 일어난다.
세포와 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 전구약물, 대사물질, 다형체 또는 용매화물의 접촉은 암세포에서 세포 사멸을 선택적으로 유도할 수 있거나 활성화시킬 수 있다. 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 전구약물, 대사물질, 다형체 또는 용매화물을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하여 암세포에서 세포 사멸을 선택적으로 유도할 수 있거나 활성화시킬 수 있다. 세포와 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 전구약물, 대사물질, 다형체 또는 용매화물의 접촉은 세포 증식 질환에 의해 영향을 받은 하나 이상의 세포에서 세포 사멸을 선택적으로 유도할 수 있다. 바람직하게는, 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 전구약물, 대사물질, 다형체 또는 용매화물을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하여 세포 증식 질환에 의해 영향을 받은 하나 이상의 세포에서 세포 사멸을 선택적으로 유도할 수 있다.
본 발명의 한 양태는 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 전구약물, 대사물질, 다형체 또는 용매화물을 암의 치료 또는 예방이 필요한 대상체에게 투여함으로써 암(예를 들면, 이의 경과는 EZH2 매개 단백질 메틸화의 조절에 의해 영향을 받을 수 있음)을 치료하거나 예방하는 방법에 관한 것으로서, 이때 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 전구약물, 대사물질, 다형체 또는 용매화물의 투여는 하기 효과들 중 하나 이상의 효과를 발생시킨다: 세포 주기의 하나 이상의 단계(예를 들면, G1, G1/S, G2/M)에서의 세포의 축적에 의한 암세포 증식의 예방, 세포 노화의 유도 또는 종양 세포 분화의 촉진; 정상 세포에서의 유의한 양의 세포 사멸 없이 세포독성, 괴사 또는 아폽토시스를 통한 암세포에서의 세포 사멸의 촉진; 및 동물에서 2 이상의 치료 지수를 갖는 항종양 활성. 본원에서 사용된 바와 같이, "치료 지수"는 허용되는 최대 용량을 유효 용량으로 나눈 값이다. 또한, 본 발명은 암의 치료 또는 예방에 적합한 후보물질을 확인하는 데에 이용되는 방법에 관한 것이다.
당업자는 본원에 논의되어 있는 공지된 기법들 또는 등가 기법들의 상세한 설명을 위해 일반 참고교재들을 참조할 수 있다. 이들 교재들은 교재(Ausubel et al., Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley and Sons, Inc. (2005)); 교재(Sambrook et al., Molecular Cloning, A Laboratory Manual (3rd edition), Cold Spring Harbor Press, Cold Spring Harbor, New York (2000)); 교재(Coligan et al., Current Protocols in Immunology, John Wiley & Sons, N.Y.); 교재(Enna et al., Current Protocols in Pharmacology, John Wiley & Sons, N.Y.); 교재(Fingl et al., The Pharmacological Basis of Therapeutics (1975)); 및 교재(Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, PA, 18th edition (1990))를 포함한다. 물론, 이들 교재들은 본 발명의 양태를 만들거나 이용하는 데에 있어서 참조될 수도 있다.
본원에서 사용된 바와 같이, "병용요법" 또는 "공-요법(co-therapy)"은 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 전구약물, 대사물질, 다형체 또는 용매화물; 및 치료제들의 공-작용(co-action)으로부터 유리한 효과를 제공하기 위한 특정 치료법의 일부로서 적어도 제2 약제의 투여를 포함한다. 병용의 유리한 효과는 치료제들의 병용으로부터 발생되는 약동학적 또는 약력학적 공-작용을 포함하나 이것으로 한정되지 않는다. 이들 치료제들의 병용 투여는 전형적으로 정해진 시간(선택된 병용에 따라 통상적으로 분, 시, 일 또는 주)에 걸쳐 수행된다. "병용요법"은 우연히 및 임의로 본 발명의 병용을 유발하는, 분리된 단일요법의 일부로서 이들 치료제들 중 2종 이상의 치료제들의 투여를 포함할 수 있으나 일반적으로는 그러하지 않다.
"병용요법"은 각각의 치료제가 상이한 시간에서 투여되는 순차적인 방식으로 이들 치료제들을 투여하는 것뿐만 아니라 실질적으로 동시적인 방식으로 이들 치료제들 또는 치료제들 중 2종 이상의 치료제들을 투여하는 것도 포함한다. 실질적으로 동시적인 투여는 예를 들면, 고정된 비의 각각의 치료제를 갖는 단일 캡슐을 대상체에게 투여하거나 각각의 치료제에 대한 단일 캡슐들을 대상체에게 다회 투여함으로써 달성될 수 있다. 각각의 치료제의 순차적인 또는 실질적으로 동시적인 투여는 경구 경로, 정맥내 경로, 근육내 경로, 및 점막 조직을 통한 직접적인 흡수를 포함하나 이들로 한정되지 않는 임의의 적절한 경로에 의해 수행될 수 있다. 치료제는 동일한 경로 또는 상이한 경로에 의해 투여될 수 있다. 예를 들면, 선택된 병용의 제1 치료제는 정맥내 주사에 의해 투여될 수 있는 반면, 상기 병용의 다른 치료제는 경구 투여될 수 있다. 대안적으로, 예를 들면, 모든 치료제들이 경구 투여될 수 있거나 모든 치료제들이 정맥내 주사에 의해 투여될 수 있다. 치료제들이 투여되는 순서는 엄밀히 중요하지 않다.
"병용요법"은 다른 생물학적 활성 성분 및 비약물 요법(예를 들면, 수술 또는 방사선 치료)과 추가 병용된 상기 치료제들의 투여도 포함한다. 병용요법이 비약물 치료를 추가로 포함하는 경우, 치료제와 비약물 치료의 병용의 공-작용으로부터 유리한 효과가 달성되는 한, 상기 비약물 치료는 임의의 적절한 시간에 수행될 수 있다. 예를 들면, 적절한 경우, 비약물 치료가 아마도 수일 또는 심지어 수주 동안 치료제의 투여로부터 일시적으로 제거되는 때에도 상기 유리한 효과는 여전히 달성된다.
본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 전구약물, 대사물질, 유사체 또는 유도체는 제2 화학치료제와 함께 투여될 수 있다. 제2 화학치료제(항신생물제 또는 항증식제로서도 지칭됨)는 일킬화제; 항생제; 항대사물질; 해독제; 인터페론; 다중클론 또는 단일클론 항체; EGFR 억제제; HER2 억제제; 히스톤 데아세틸라제(de아세틸ase) 억제제; 호르몬; 유사분열 억제제; MTOR 억제제; 다중-키나제(kinase) 억제제; 세린/쓰레오닌 키나제 억제제; 티로신 키나제 억제제; VEGF/VEGFR 억제제; 탁산 또는 탁산 유도체; 아로마타제(aromatase) 억제제; 안쓰라사이클린; 마이크로튜불 표적화 약물; 토포이소머라제(topoisomerase) 독성 약물; 분자 표적 또는 효소(예를 들면, 키나제 또는 단백질 메틸트랜스퍼라제)의 억제제; 사이티딘 유사체 약물; 또는 웹사이트(www.cancer.org/docroot/cdg/cdg_0.asp)에 나열된 임의의 화학치료제, 항신생물제 또는 항증식제일 수 있다.
예시적 알킬화제는 사이클로포스프아미드(사이톡산(Cytoxan); 네오사르(Neosar)); 클로람부실(chlorambucil)(류케란(Leukeran)); 멜팔란(melphalan)(알케란(Alkeran)); 카무스틴(carmustine)(BiCNU); 부설판(busulfan)(부설펙스(Busulfex)); 로무스틴(lomustine)(CeeNU); 다카바진(dacarbazine)(DTIC-Dome); 옥살리플라틴(oxaliplatin)(엘록사틴(Eloxatin)); 카무스틴(글리아델(Gliadel)); 이포스프아미드(ifosfamide)(이펙스(Ifex)); 메클로레타민(mechlorethamine)(무스타겐(Mustargen)); 부설판(마일레란(Myleran)); 카보플라틴(carboplatin)(파라플라틴(Paraplatin)); 시스플라틴(cisplatin)(CDDP; 플라티놀(Platinol)); 테모졸로마이드(temozolomide)(테모다르(Temodar)); 티오테파(thiotepa)(티오플렉스(thioplex)); 벤다무스틴(bendamustine)(트레안다(Treanda)); 또는 스트렙토조토신(streptozocin)(자노사르(Zanosar))을 포함하나 이들로 한정되지 않는다.
예시적 항생제는 독소루비신(doxorubicin)(아드리아마이신(Adriamycin)); 독소루비신 리포좀(독실(Doxil)); 미톡산트론(mitoxantrone)(노반트론(Novantrone)); 블레오마이신(bleomycin)(블레녹산(Blenoxane)); 다우노루비신(daunorubicin)(세루비딘(Cerubidine)); 다우노루비신 리포좀(다우노솜(DaunoXome)); 닥티노마이신(dactinomycin)(코스메겐(Cosmegen)); 에피루비신(epirubicin)(엘렌스(Ellence)); 이다루비신(idarubicin)(이다마이신(Idamycin)); 플리카마이신(plicamycin)(미쓰라신(Mithracin)); 미토마이신(mitomycin)(무타마이신(Mutamycin)); 펜토스타틴(pentostatin)(니펜트(Nipent)); 또는 발루비신(valrubicin)(발스타(Valstar))을 포함하나 이들로 한정되지 않는다.
예시적 항대사물질은 플루오로우라실(플루오로uracil)(애드루실(Adrucil)); 카페시타빈(capecitabine)(젤로다(Xeloda)); 하이드록시우레아(하이드레아(Hydrea)); 머캡토푸린(푸린에톨(Purinethol)); 페메트렉세드(pemetrexed)(알림타(Alimta)); 플루다라빈(fludarabine)(플루다라(Fludara)); 넬라라빈(nelarabine)(아라논(Arranon)); 클라드리빈(cladribine)(클라드리빈 노바플러스(Cladribine Novaplus)); 클로파라빈(clofarabine)(클로라르(Clolar)); 사이타라빈(cytarabine)(사이토사르(Cytosar)-U); 데시타빈(decitabine)(다코겐(Dacogen)); 사이타라빈 리포좀(데포사이트(DepoCyt)); 하이드록시우레아(드록시아(Droxia)); 프랄라트렉세이트(pralatrexate)(폴로틴(Folotyn)); 플록수리딘(floxuridine)(FUDR); 젬시타빈(gemcitabine)(젬자르(Gemzar)); 클라드리빈(cladribine)(류스타틴(Leustatin)); 플루다라빈(fludarabine)(오포르타(Oforta)); 메토트렉세이트(methotrexate)(MTX; 류마트렉스(Rheumatrex)); 메토트렉세이트(트렉살(Trexall)); 티오구아닌(타블로이드(Tabloid)); TS-1; 또는 사이타라빈(타라빈(Tarabine) PFS)을 포함하나 이들로 한정되지 않는다.
예시적 해독제는 아미포스틴(amifostine)(에티올(Ethyol)) 또는 메스나(mesna)(메스넥스(Mesnex))를 포함하나 이들로 한정되지 않는다.
예시적 인터페론은 인터페론 알파-2b(인트론 A) 또는 인터페론 알파-2a(로페론-A)를 포함하나 이들로 한정되지 않는다.
예시적 다중클론 또는 단일클론 항체는 트라스투주맙(trastuzumab)(헤르셉틴(Herceptin)); 오파투무맙(ofatumumab)(아제라(Arzerra)); 베바시주맙(bevacizumab)(아바스틴(Avastin)); 리툭시맙(rituximab)(리툭산(Rituxan)); 세툭시맙(cetuximab)(에르비툭스(Erbitux)); 파니투무맙(panitumumab)(벡티빅스(Vectibix)); 토시투모맙(tositumomab)/요오드131 토시투모맙(벡사르(Bexxar)); 알렘투주맙(alemtuzumab)(캄패스(Campath)); 이브리투모맙(ibritumomab)(제발린(Zevalin); In-111; Y-90 제발린); 젬투주맙(gemtuzumab)(마일로타르그(Mylotarg)); 에쿨리주맙(eculizumab)(솔리리스(Soliris)); 또는 데노수맙(denosumab)을 포함하나 이들로 한정되지 않는다.
예시적 EGFR 억제제는 제피티닙(gefitinib)(이레사(Iressa)); 라파티닙(lapatinib)(타이커브(Tykerb)); 세툭시맙(에르비툭스); 에를로티닙(erlotinib)(타세바(Tarceva)); 파니투무맙(벡티빅스); PKI-166; 캐너티닙(canertinib)(CI-1033); 마투주맙(matuzumab)(Emd7200); 또는 EKB-569를 포함하나 이들로 한정되지 않는다.
예시적 HER2 억제제는 트라스투주맙(헤르셉틴), 라파티닙(타이커브) 또는 AC-480을 포함하나 이들로 한정되지 않는다.
히스톤 데아세틸라제 억제제는 보리노스타트(vorinostat)(졸린자(Zolinza))를 포함하나 이것으로 한정되지 않는다.
예시적 호르몬은 타목시펜(tamoxifen)(솔타목스(Soltamox); 놀바덱스(Nolvadex)); 랄록시펜(raloxifene)(에비스타(Evista)); 메게스트롤(megestrol)(메가스(Megace)); 류프롤라이드(leuprolide)(루프론(Lupron); 루프론 데포(Depot); 엘리가드(Eligard); 비아두르(Viadur)); 풀베스트란트(fulvestrant)(파슬로덱스(Faslodex)); 레트로졸(letrozole)(페마라(Femara)); 트립토렐린(triptorelin)(트렐스타(Trelstar) LA; 트렐스타 데포); 엑세메스탄(exemestane)(아로마신(Aromasin)); 고세렐린(goserelin)(졸라덱스(Zoladex)); 비칼루타마이드(bicalutamide)(카소덱스(Casodex)); 아나스트로졸(anastrozole)(아리미덱스(Arimidex)); 플루옥시메스테론(fluoxymesterone)(안드록시(Andr옥시); 할로테스틴(Halotestin)); 메드록시프로게스테론(medroxyprogesterone)(프로베라(Provera); 데포-프로베라); 에스트라무스틴(estramustine)(엠사이트(Emcyt)); 플라타마이드(flutamide)(유렉신(Eulexin)); 토레미펜(toremifene)(파레스톤(Fareston)); 데가렐릭스(degarelix)(퍼마곤(Firmagon)); 닐루타마이드(nilutamide)(닐란드론(Nilandron)); 아바렐릭스(abarelix)(플레낙시스(Plenaxis)); 또는 테스토락톤(testolactone)(테슬락(Teslac))을 포함하나 이들로 한정되지 않는다.
예시적 유사분열 억제제는 파클리탁셀(paclitaxel)(탁솔(Taxol); 온솔(Onxol); 아브락산(Abraxane)); 독세탁셀(docetaxel)(탁소테레(Taxotere)); 빈크리스틴(vincristine)(온코빈(Oncovin); 빈카사르(Vincasar) PFS); 빈블라스틴(vinblastine)(벨반(Velban)); 에토포사이드(etoposide)(토포사르(Toposar); 에토포포스(Etopophos); 베페시드(VePesid)); 테니포사이드(teniposide)(부몬(Vumon)); 익사베필론(ixabepilone)(익셈프라(Ixempra)); 노코다졸(nocodazole); 에포틸론(epothilone); 비노렐빈(vinorelbine)(나벨빈(Navelbine)); 캄프토테신(camptothecin)(CPT); 이리노테칸(irinotecan)(캄프토사르(Camptosar)); 토포테칸(topotecan)(하이캄틴(Hycamtin)); 암사크린(amsacrine); 또는 라멜라린(lamellarin) D(LAM-D)를 포함하나 이들로 한정되지 않는다.
예시적 MTOR 억제제는 에버롤리무스(everolimus)(아피니토르(Afinitor)) 또는 템시롤리무스(temsirolimus)(토리셀(Torisel)); 라파뮨(rapamune); 리다포롤리무스(ridaforolimus); 또는 AP23573을 포함하나 이들로 한정되지 않는다.
예시적 다중-키나제 억제제는 소라페닙(sorafenib)(넥사바르(Nexavar)); 수니티닙(sunitinib)(수텐트(Sutent)); BIBW 2992; E7080; Zd6474; PKC-412; 모테사닙(motesanib); 또는 AP24534를 포함하나 이들로 한정되지 않는다.
예시적 세린/쓰레오닌 키나제 억제제는 루복시스타우린(ruboxistaurin); 에릴(eril)/이수딜(easudil) 하이드로클로라이드; 플라보피리돌(flavopiridol); 셀리시클립(seliciclib)(CYC202; 로스코비트린(Roscovitrine)); SNS-032(BMS-387032); Pkc412; 브리오스타틴(bryostatin); KAI-9803; SF1126; VX-680; Azd1152; Arry-142886(AZD-6244); SCIO-469; GW681323; CC-401; CEP-1347; 또는 PD 332991을 포함하나 이들로 한정되지 않는다.
예시적 티로신 키나제 억제제는 에를로티닙(타세바); 제피티닙(이레사); 이마티닙(imatinib)(글리벡(Gleevec)); 소라페닙(넥사바르); 수니티닙(수텐트); 트라스투주맙(헤르셉틴); 베바시주맙(아바스틴); 리툭시맙(리툭산); 라파티닙(타이커브); 세툭시맙(에르비툭스); 파니투무맙(벡티빅스); 에버롤리무스(아피니토르); 알렘투주맙(캄패스); 젬투주맙(마일로타르그); 템시롤리무스(토리셀); 파조파닙(pazopanib)(보트리엔트(Votrient)); 다사티닙(dasatinib)(스프라이셀(Sprycel)); 닐로티닙(nilotinib)(타시그나(Tasigna)); 바탈라닙(vatalanib)(Ptk787; ZK222584); CEP-701; SU5614; MLN518; XL999; VX-322; Azd0530; BMS-354825; SKI-606 CP-690; AG-490; WHI-P154; WHI-P131; AC-220; 또는 AMG888을 포함하나 이들로 한정되지 않는다.
예시적 VEGF/VEGFR 억제제는 베바시주맙(아바스틴); 소라페닙(넥사바르); 수니티닙(수텐트); 라니비주맙(ranibizumab); 페갭타닙(pegaptanib); 또는 반데티닙(vandetinib)을 포함하나 이들로 한정되지 않는다.
예시적 마이크로튜불 표적화 약물은 파클리탁셀, 독세탁셀, 빈크리스틴, 빈블라스틴, 노코다졸, 에포틸론 및 나벨빈을 포함하나 이들로 한정되지 않는다.
예시적 토포이소머라제 독성 약물은 테니포사이드, 에토포사이드, 아드리아마이신, 캄프토테신, 다우노루비신, 닥티노마이신, 미톡산트론, 암사크린, 에피루비신 및 이다루비신을 포함하나 이들로 한정되지 않는다.
예시적 탁산 또는 탁산 유도체는 파클리탁셀 및 독세탁솔을 포함하나 이들로 한정되지 않는다.
예시적 일반 화학치료제, 항신생물제 또는 항증식제는 알트레타민(altretamine)(헥살렌(Hexalen)); 이소트레티노인(isotretinoin)(아큐탄(Accutane); 암네스팀(Amnesteem); 클라라비스(Claravis); 소트레트(Sotret)); 트레티노인(tretinoin)(베사노이드(Vesanoid)); 아자시티딘(azacitidine)(비다자(Vidaza)); 보테조밉(bortezomib)(벨케이드(Velcade)); 아스파라기나제(asparaginase)(엘스파르(Elspar)); 레바미솔(levamisole)(에르가미솔(Ergamisol)); 미토탄(mitotane)(라이소드렌(Lysodren)); 프로카바진(procarbazine)(마툴란(Matulane)); 페가스파르가제(pegaspargase)(온카스파르(Oncaspar)); 데닐류킨 디프티톡스(denileukin diftitox)(온탁(Ontak)); 포피머(porfimer)(포토프린(Photofrin)); 알데스류킨(aldesleukin)(프로류킨(Proleukin)); 레날리도마이드(lenalidomide)(레블리미드(Revlimid)); 벡사로텐(bexarotene)(타그레틴(Targretin)); 탈리도마이드(thalidomide)(탈로미드(Thalomid)); 템시롤리무스(토리셀); 비소 삼산화물(트라이세녹스(Trisenox)); 버테포핀(verteporfin)(비수다인(Visudyne)); 미모신(mimosine)(류세놀(Leucenol)); (1 M 테가푸르(tegafur) - 0.4 M 5-클로로-2,4-다이하이드록시피리미딘 - 1 M 칼륨 옥소네이트); 또는 로바스타틴을 포함하나 이들로 한정되지 않는다.
또 다른 양태에서, 제2 화학치료제는 사이토카인, 예컨대, G-CSF(과립구 콜로니 자극 인자)일 수 있다. 또 다른 양태에서, 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 전구약물, 대사물질, 유사체 또는 유도체는 방사선요법과 함께 투여될 수 있다. 방사선요법은 본 발명의 화합물 또는 본원에 기재된 또 다른 화학치료제와 함께 다중 약제 요법의 일부로서 투여될 수도 있다. 또 다른 양태에서, 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 전구약물, 대사물질, 유사체 또는 유도체는 표준 화학요법 조합물, 예컨대, CMF(사이클로포스프아미드, 메토트렉세이트 및 5-플루오로우라실), CAF(사이클로포스프아미드, 아드리아마이신 및 5-플루오로우라실), AC(아드리아마이신 및 사이클로포스프아미드), FEC(5-플루오로우라실, 에피루비신 및 사이클로포스프아미드), ACT 또는 ATC(아드리아마이신, 사이클로포스프아미드 및 파클리탁셀), 리툭시맙, 젤로다(카페시타빈), 시스플라틴(CDDP), 카보플라틴, TS-1(1:0.4:1 몰비의 테가푸르, 지메스타트(gimestat) 및 오타스타트(otastat) 칼륨), 캄프토테신-11(CPT-11, 이리노테칸 또는 캄프토사르™), CHOP(사이클로포스프아미드, 하이드록시다우노루비신, 온코빈 및 프레드니손 또는 프레드니솔론), R-CHOP(리툭시맙, 사이클로포스프아미드, 하이드록시다우노루비신, 온코빈, 프레드니손 또는 프레드니솔론), 또는 CMFP(사이클로포스프아미드, 메토트렉세이트, 5-플루오로우라실 및 프레드니손)(그러나, 이들로 한정되지 않음)과 함께 투여될 수 있다.
바람직한 실시양태에서, 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 전구약물, 대사물질, 다형체 또는 용매화물은 효소, 예컨대, 수용체 또는 비수용체 키나제의 억제제와 함께 투여될 수 있다. 수용체 및 비수용체 키나제는 예를 들면, 티로신 키나제 또는 세린/쓰레오닌 키나제이다. 본원에 기재된 키나제 억제제는 소분자, 폴리핵산, 폴리펩티드 또는 항체이다.
예시적 키나제 억제제는 베바시주맙(표적 VEGF), BIBW 2992(표적 EGFR 및 Erb2), 세툭시맙/에르비툭스(표적 Erb1), 이마티닙/글리벡(표적 Bcr-Abl), 트라스투주맙(표적 Erb2), 제피티닙/이레사(표적 EGFR), 라니비주맙(표적 VEGF), 페갭타닙(표적 VEGF), 에를로티닙/타세바(표적 Erb1), 닐로티닙(표적 Bcr-Abl), 라파티닙(표적 Erb1 및 Erb2/Her2), GW-572016/라파티닙 다이토실레이트(표적 HER2/Erb2), 파니투무맙/벡티빅스(표적 EGFR), 반데티닙(표적 RET/VEGFR), E7080(RET 및 VEGFR을 포함하는 다수의 표적), 헤르셉틴(표적 HER2/Erb2), PKI-166(표적 EGFR), 캐너티닙/CI-1033(표적 EGFR), 수니티닙/SU-11464/수텐트(표적 EGFR 및 FLT3), 마투주맙/Emd7200(표적 EGFR), EKB-569(표적 EGFR), Zd6474(표적 EGFR 및 VEGFR), PKC-412(표적 VEGR 및 FLT3), 바탈라닙/Ptk787/ZK222584(표적 VEGR), CEP-701(표적 FLT3), SU5614(표적 FLT3), MLN518(표적 FLT3), XL999(표적 FLT3), VX-322(표적 FLT3), Azd0530(표적 SRC), BMS-354825(표적 SRC), SKI-606(표적 SRC), CP-690(표적 JAK), AG-490(표적 JAK), WHI-P154(표적 JAK), WHI-P131(표적 JAK), 소라페닙/넥사바르(표적 RAF 키나제, VEGFR-1, VEGFR-2, VEGFR-3, PDGFR-β, KIT, FLT-3 및 RET), 다사티닙/스프라이셀(BCR/ABL 및 Src), AC-220(표적 Flt3), AC-480(표적 모든 HER 단백질들, "panHER"), 모테사닙 다이포스페이트(표적 VEGF1-3, PDGFR 및 c-kit), 데노수맙(표적 RANKL, SRC를 억제함), AMG888(표적 HER3) 및 AP24534(Flt3을 포함하는 다수의 표적)를 포함하나 이들로 한정되지 않는다.
예시적 세린/쓰레오닌 키나제 억제제는 라파뮨(Rapamune)(표적 mTOR/FRAP1), 데포롤리무스(Deforolimus)(표적 mTOR), 서티칸(Certican)/에버롤리무스(표적 mTOR/FRAP1), AP23573(표적 mTOR/FRAP1), 에릴(Eril)/파수딜(Fasudil) 하이드로클로라이드(표적 RHO), 플라보피리돌(표적 CDK), 셀리시클립/CYC202/로스코비트린(표적 CDK), SNS-032/BMS-387032(표적 CDK), 루복시스타우린(표적 PKC), Pkc412(표적 PKC), 브리오스타틴(표적 PKC), KAI-9803(표적 PKC), SF1126(표적 PI3K), VX-680(표적 오로라(Aurora) 키나제), Azd1152(표적 오로라 키나제), Arry-142886/AZD-6244(표적 MAP/MEK), SCIO-469(표적 MAP/MEK), GW681323(표적 MAP/MEK), CC-401(표적 JNK), CEP-1347(표적 JNK) 및 PD 332991(표적 CDK)을 포함하나 이들로 한정되지 않는다.
EZH2 매개 단백질 메틸화가 일정한 역할을 수행하는 질환은 신경 질환일 수 있다. 따라서, 본 발명의 화합물은 신경 질환, 예컨대, 간질, 정신분열증, 양극성 장애 또는 다른 심리학적 및/또는 정신적 장애, 신경병증, 골근육 위축증 및 신경퇴행성 질환들, 예를 들면, 신경퇴행성 질환의 치료 또는 연구를 위해 사용될 수도 있다. 예시적 신경퇴행성 질환은 알쯔하이머병, 근위축성 측삭 경화증(ALS) 및 파킨슨병을 포함한다. 신경퇴행성 질환의 또 다른 클래스는 적어도 부분적으로 폴리글루타민의 응집에 의해 야기된 질환을 포함한다. 이 클래스의 질환은 헌팅톤병, 척수연수 근위축증(SBMA 또는 케네디병), 치아적핵담창구루이체 위축증(DRPLA), 척수소뇌 실조증 1(SCA1), 척수소뇌 실조증 2(SCA2), 마카도-조셉병(MJD; SCA3), 척수소뇌 실조증 6(SCA6), 척수소뇌 실조증 7(SCA7) 및 척수소뇌 실조증 12(SCA12)를 포함한다.
EZH2에 의해 매개되는 후성적 메틸화가 일정한 역할을 수행하는 임의의 다른 질환을 본원에 기재된 화합물 및 방법을 이용하여 치료할 수 있거나 예방할 수 있거나, 또는 이러한 질환 및 이의 잠재적 치료를 본원에 기재된 화합물로 연구할 수 있다.
4. 약학 조성물
본 발명은 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 부형제 또는 담체와 함께 본원에 개시된 임의의 화학식의 화합물을 포함하는 약학 조성물도 제공한다.
"약학 조성물"은 대상체에게 투여되기에 적합한 형태로 본 발명의 화합물을 함유하는 제제이다. 한 실시양태에서, 상기 약학 조성물은 벌크(bulk) 또는 유닛 제형으로 존재한다. 상기 유닛 제형은 예를 들면, 캡슐, IV 백, 정제, 에어로졸 흡입기 상의 단일 펌프 또는 바이알을 포함하는 다양한 제형들 중 임의의 제형이다. 유닛 용량의 조성물 중의 활성 성분(예를 들면, 개시된 화합물, 또는 이의 염, 수화물, 용매화물 또는 이성질체의 제제)의 양은 유효량이고 관련된 특정 치료에 따라 달라진다. 당업자는 종종 환자의 연령 및 상태에 따라 용량에 대한 관용적인 변경을 수행할 필요가 있다는 것을 인식할 것이다. 상기 용량은 투여 경로에도 의존할 것이다. 경구, 폐, 직장, 비경구, 경피, 피하, 정맥내, 근육내, 복강내, 흡입, 협측, 설하, 흉막내, 수막공간내, 비내 등을 포함하는 다양한 경로가 고려된다. 본 발명의 화합물의 국소 또는 경피 투여를 위한 제형은 산제, 분무제, 연고, 페이스트, 크림, 로션, 겔, 용액, 패치 및 흡입제를 포함한다. 한 실시양태에서, 활성 화합물은 멸균 조건 하에 약학적으로 허용가능한 담체, 및 요구되는 임의의 방부제, 완충제 또는 추진제와 혼합된다.
본원에서 사용된 바와 같이, 어구 "약학적으로 허용가능한"은 타당한 의학적 판단의 범위 내에서 합리적인 이익/위험 비와 균형을 이루면서 과도한 독성, 자극, 알레르기 반응, 또는 다른 문제점 또는 합병증을 야기하지 않으면서 인간 및 동물의 조직과 접촉되어 사용되기에 적합한 화합물, 음이온, 양이온, 물질, 조성물, 담체 및/또는 제형을 의미한다.
"약학적으로 허용가능한 부형제"는 일반적으로 안전하고 독성을 나타내지 않고 생물학적으로 또는 다른 방식으로 바람직하지 않은 효과를 나타내지 않는, 약학 조성물의 제조에 유용한 부형제를 의미하고, 인간 약학 용도뿐만 아니라 수의학 용도를 위해서도 허용가능한 부형제를 포함한다. 본 명세서 및 특허청구범위에서 사용된 바와 같이, "약학적으로 허용가능한 부형제"는 1종의 이러한 부형제 및 1종 초과의 이러한 부형제 둘다를 포함한다.
본 발명의 약학 조성물은 이의 의도된 투여 경로에 적합하도록 제제화된다. 투여 경로의 예에는 비경구, 예를 들면, 정맥내, 피내, 피하, 경구(예를 들면, 흡입), 경피(국소) 및 경점막 투여가 포함된다. 비경구, 피내 또는 피하 적용을 위해 사용되는 용액 또는 현탁액은 하기 성분들을 포함할 수 있다: 멸균 희석제, 예컨대, 주사용수, 식염수 용액, 고정유, 폴리에틸렌 글리콜, 글리세린, 프로필렌 글리콜 또는 다른 합성 용매; 항균제, 예컨대, 벤질 알코올 또는 메틸 파라벤; 항산화제, 예컨대, 아스코르브산 또는 중아황산나트륨; 킬레이팅제, 예컨대, 에틸렌다이아민테트라아세트산; 완충제, 예컨대, 아세테이트, 시트레이트 또는 포스페이트; 및 긴장성 조절제, 예컨대, 염화나트륨 또는 덱스트로스. pH는 산 또는 염기, 예컨대, 염산 또는 수산화나트륨에 의해 조절될 수 있다. 비경구 제제는 앰플, 일회용 주사기, 또는 유리 또는 플라스틱으로 만들어진 다회 용량 바이알 내에 봉입될 수 있다.
본 발명의 화합물 또는 약학 조성물은 화학치료제 치료를 위해 현재 이용되는 잘 공지된 방법들 중 대다수의 방법들에 의해 대상체에게 투여될 수 있다. 예를 들면, 암의 치료를 위해, 본 발명의 화합물은 종양 내로 직접적으로 주사될 수 있거나, 혈류 또는 체강 내로 주사될 수 있거나, 경구 섭취될 수 있거나 패치에 의해 피부를 통해 적용될 수 있다. 선택된 용량은 효과적인 치료를 구성하기에 충분해야 하지만 허용불가능한 부작용을 야기할 정도로 높지 않아야 한다. 질환 병태(예를 들면, 암, 전암 등)의 상태 및 환자의 건강은 바람직하게는 치료 후 적당한 기간 동안 면밀히 모니터링되어야 한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "치료 유효량"은 확인된 질환 또는 병태를 치료하거나, 완화시키거나 예방하기 위한, 또는 검출가능한 치료 또는 억제 효과를 나타내기 위한 약제의 양을 의미한다. 상기 효과는 당분야에서 공지되어 있는 임의의 어세이 방법에 의해 검출될 수 있다. 대상체를 위한 정확한 유효량은 대상체의 체중, 신장 및 건강; 병태의 성질 및 정도; 및 투여를 위해 선택된 치료제 또는 치료제의 조합에 의존할 것이다. 주어진 상황에 대한 치료 유효량은 임상의의 기술 및 판단 내에 있는 관용적인 실험에 의해 결정될 수 있다. 바람직한 양태에서, 치료될 질환 또는 병태는 암이다. 또 다른 양태에서, 치료될 질환 또는 병태는 세포 증식 질환이다.
임의의 화합물에 대한 치료 유효량을 예를 들면, 신생물 세포의 세포 배양 어세이, 또는 동물 모델, 통상적으로 래트, 마우스, 토끼, 개 또는 돼지에서 먼저 추정할 수 있다. 동물 모델을 이용하여 적절한 농도 범위 및 투여 경로도 결정할 수 있다. 그 다음, 이러한 정보를 이용하여 인간에게의 투여에 유용한 용량 및 경로를 결정할 수 있다. 치료/예방 효능 및 독성, 예를 들면, ED50(집단의 50%에서 치료적으로 효과적인 용량) 및 LD50(집단의 50%에 치명적인 용량)을 세포 배양물 또는 실험 동물에서 표준 약학 절차로 측정할 수 있다. 독성 효과와 치료 효과 사이의 용량 비는 치료 지수이고, 비 LD50/ED50으로서 표현될 수 있다. 큰 치료 지수를 나타내는 약학 조성물이 바람직하다. 용량은 사용되는 제형, 환자의 민감성 및 투여 경로에 따라 이 범위 내에서 달라질 수 있다.
용량 및 투여는 충분한 수준의 활성 물질(들)을 제공하거나 원하는 효과를 유지하도록 조절된다. 고려될 수 있는 인자는 질환 상태의 중증도, 대상체의 일반적인 건강, 대상체의 연령, 체중 및 성별, 식습관, 투여 시간 및 빈도, 약물 조합(들), 반응 민감성 및 치료에 대한 내성/반응을 포함한다. 장기간 작용하는 약학 조성물은 구체적인 제제의 반감기 및 제거율에 따라 3일 내지 4일마다, 1주마다, 또는 2주마다 1회 투여될 수 있다.
본 발명의 활성 화합물을 함유하는 약학 조성물은 일반적으로 공지되어 있는 방식으로, 예를 들면, 통상적인 혼합, 용해, 과립화, 당의정 제조, 분말화, 유화, 캡슐화, 포획 또는 동결건조 공정에 의해 제조될 수 있다. 약학 조성물은 약학적으로 사용될 수 있는 제제로의 활성 화합물의 가공을 용이하게 하는 부형제 및/또는 보조제를 포함하는 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 담체를 사용하는 통상적인 방식으로 제제화될 수 있다. 물론, 적절한 제제는 선택된 투여 경로에 의존한다.
주사 사용에 적합한 약학 조성물은 멸균 수용액(수용성을 나타내는 경우) 또는 분산액, 및 멸균 주사 용액 또는 분산액의 즉석 제조를 위한 멸균 분말을 포함한다. 정맥내 투여의 경우, 적합한 담체는 생리식염수, 정균수, 크레모포르(Cremophor) EL™(바스프(BASF), 미국 뉴저지주 파시파니 소재) 또는 포스페이트 완충 식염수(PBS)를 포함한다. 모든 경우, 조성물은 멸균되어야 하고 용이한 주사능이 존재하는 정도의 유체이어야 한다. 상기 조성물은 제조 및 저장 조건 하에 안정해야 하고 미생물, 예컨대, 세균 및 진균의 오염 작용으로부터 보존되어야 한다. 담체는 예를 들면, 물, 에탄올, 폴리올(예를 들면, 글리세롤, 프로필렌 글리콜 및 액체 폴리에틸렌 글리콜 등), 및 이들의 적절한 혼합물을 함유하는 용매 또는 분산 매질일 수 있다. 적절한 유동성은 예를 들면, 코팅제, 예컨대, 레시틴의 사용, 분산액의 경우 요구되는 입자 크기의 유지, 및 계면활성제의 사용에 의해 유지될 수 있다. 미생물의 작용 방지는 다양한 항균제 및 항진균제, 예를 들면, 파라벤, 클로로부탄올, 페놀, 아스코르브산, 티메로살 등에 의해 달성될 수 있다. 많은 경우, 등장화제, 예를 들면, 당, 폴리알코올, 예컨대, 만니톨 및 소르비톨, 및 염화나트륨을 조성물에 포함시키는 것이 바람직할 것이다. 주사 조성물의 연장된 흡수는 흡수를 지연시키는 물질, 예를 들면, 알루미늄 모노스테아레이트 및 젤라틴을 조성물에 포함시킴으로써 달성될 수 있다.
멸균 주사 용액은 요구되는 양의 활성 화합물을 (요구되는 경우) 상기 나열된 성분들 중 하나 또는 이들 성분들의 조합물과 함께 적절한 용매 내에 도입시킨 후 여과 멸균함으로써 제조될 수 있다. 일반적으로, 분산액은 기본 분산 매질 및 상기 나열된 다른 성분들 중 요구되는 다른 성분을 함유하는 멸균 비히클 내로 활성 화합물을 도입함으로써 제조된다. 멸균 주사 용액의 제조를 위한 멸균 분말의 경우, 제조 방법은 활성 성분 및 임의의 추가 원하는 성분으로 구성된 분말을 이의 미리 멸균 여과된 용액으로부터 생성하는 진공건조 및 동결건조이다.
경구 조성물은 일반적으로 불활성 희석제 또는 식용가능한 약학적으로 허용가능한 담체를 포함한다. 경구 조성물은 젤라틴 캡슐 내로 봉입될 수 있거나 정제로 압축될 수 있다. 경구 치료제 투여를 위해, 활성 화합물은 부형제와 함께 도입될 수 있고 정제, 트로치 또는 캡슐의 형태로 사용될 수 있다. 경구 조성물은 구강세척제로서 사용될 유체 담체를 사용함으로써 제조될 수도 있고, 이때 상기 유체 담체 중의 화합물은 경구 적용되고 헹궈진 후 뱉어지거나 삼켜진다. 약학적으로 상용가능한 결합제 및/또는 보조제 물질이 조성물의 일부로서 포함될 수 있다. 정제, 환제, 캡슐, 트로치 등은 하기 성분들 중 임의의 성분 또는 유사한 성질의 화합물을 함유할 수 있다: 결합제, 예컨대, 미세결정질 셀룰로스, 고무 트라가칸쓰 또는 젤라틴; 부형제, 예컨대, 전분 또는 락토스; 붕해제, 예컨대, 알긴산, 프리모겔 또는 옥수수 전분; 윤활제, 예컨대, 마그네슘 스테아레이트 또는 스테로트; 활택제, 예컨대, 콜로이드성 이산화규소; 감미제, 예컨대, 수크로스 또는 사카린; 또는 방향제, 예컨대, 페퍼민트, 메틸 살리실레이트 또는 오랜지 방향제.
흡입에 의한 투여의 경우, 화합물은 적절한 추진제, 예를 들면, 기체, 예컨대, 이산화탄소를 함유하는 가압된 용기 또는 분배기, 또는 분사기로부터 에어로졸 분무의 형태로 전달된다.
전신 투여도 경점막 또는 경피 수단에 의해 달성될 수 있다. 경점막 또는 경피 투여의 경우, 투과될 차단벽에 적합한 침투제가 제제에서 사용된다. 이러한 침투제는 당분야에서 일반적으로 공지되어 있고, 예를 들면, 경점막 투여의 경우 세제, 담즙산염 및 푸시드산 유도체를 포함한다. 경점막 투여는 비강 분무 또는 좌약제의 사용을 통해 달성될 수 있다. 경피 투여의 경우, 활성 화합물은 당분야에서 일반적으로 공지되어 있는 바와 같이 연고, 고약, 겔 또는 크림으로 제제화된다.
활성 화합물은 신체로부터의 신속한 제거로부터 화합물을 보호할 약학적으로 허용가능한 담체를 사용함으로써, 예컨대, 이식물 및 미세캡슐화된 전달 시스템을 포함하는 조절 방출 제제로서 제조될 수 있다. 생체분해가능한 생체적합성 중합체, 예컨대, 에틸렌 비닐 아세테이트, 폴리무수물, 폴리글리콜산, 콜라겐, 폴리오르토에스테르 및 폴리락트산이 사용될 수 있다. 이러한 제제들의 제조 방법은 당업자에게 자명할 것이다. 상기 물질들은 알자 코포레이션(Alza Corporation) 및 노바 파마슈티칼스 인코포레이티드(Nova Pharmaceuticals, Inc.)로부터 상업적으로 입수될 수도 있다. (바이러스 항원에 대한 단일클론 항체에 의해 감염된 세포로 표적화된 리포좀을 포함하는) 리포좀 현탁액도 약학적으로 허용가능한 담체로서 사용될 수 있다. 이들은 당업자에게 공지되어 있는 방법, 예를 들면, 미국 특허 제4,522,811호에 기재된 방법에 따라 제조될 수 있다.
투여 용이성 및 용량의 균일성을 위해 경구 또는 비경구 조성물을 유닛 제형으로 제제화하는 것이 특히 유리하다. 본원에서 사용된 바와 같이, 유닛 제형은 치료될 대상체에 대한 단위 용량으로서 맞추어진 물리적으로 분리된 유닛을 의미하는데, 이때 각각의 유닛은 요구되는 약학 담체와 함께 원하는 치료 효과를 생성하도록 계산된 예정된 양의 활성 화합물을 함유한다. 본 발명의 유닛 제형에 대한 요건은 활성 화합물의 독특한 특성 및 달성될 구체적인 치료 효과에 의해 좌우되거나 이들 특성 및 치료 효과에 직접적으로 의존한다.
치료 적용에 있어서, 본 발명에 따라 사용되는 약학 조성물의 용량은 선택된 용량에 영향을 미치는 다른 인자들 중에서 약제, 수용 환자의 연령, 체중 및 임상적 상태, 및 치료제를 투여하는 임상의 또는 의사의 경험 및 판단에 따라 달라진다. 일반적으로, 용량은 종양의 성장을 늦추고 바람직하게는 퇴행시키고 또한 바람직하게는 암의 완전한 퇴행을 야기하기에 충분해야 한다. 용량은 1일 당 약 0.01 mg/kg 내지 1일 당 약 5000 mg/kg일 수 있다. 바람직한 양태에서, 용량은 1일 당 약 1 mg/kg 내지 1일 당 약 1000 mg/kg일 수 있다. 한 양태에서, 용량은 단일, 분할 또는 연속 용량으로 약 0.1 mg/일 내지 약 50 g/일; 약 0.1 mg/일 내지 약 25 g/일; 약 0.1 mg/일 내지 약 10 g/일; 약 0.1 mg/일 내지 약 3 g/일; 또는 약 0.1 mg/일 내지 약 1 g/일의 범위 내에 있을 것이다(상기 용량은 환자의 체중(kg), 신체 표면적(m2) 및 연령(세)에 대해 조절될 수 있다). 약제의 유효량은 임상의 또는 다른 자격을 갖춘 관찰자에 의해 인지된 객관적으로 확인가능한 개선을 제공하는 양이다. 예를 들면, 환자 내의 종양의 퇴행은 종양의 직경 면에서 측정될 수 있다. 종양 직경의 감소는 퇴행을 표시한다. 또한, 퇴행은 치료가 중단된 후 종양 재발의 실패에 의해 표시된다. 본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "용량 유효 방식"은 대상체 또는 세포에서 원하는 생물학적 효과를 생성하는 활성 화합물의 양을 의미한다.
약학 조성물은 투여 설명서와 함께 용기, 팩 또는 분배기 내에 포함될 수 있다.
본 발명의 화합물은 염을 추가로 형성할 수 있다. 모든 이들 형태들도 특허청구된 본 발명의 범위 내에서 고려된다.
본원에서 사용된 바와 같이, "약학적으로 허용가능한 염"은 모 화합물이 이의 산 또는 염기 염의 제조에 의해 변경되어 있는 본 발명의 화합물의 유도체를 의미한다. 약학적으로 허용가능한 염의 예에는 염기성 잔기, 예컨대, 아민의 무기산 또는 유기산 염, 산성 잔기, 예컨대, 카복실산의 알칼리 또는 유기 염 등이 포함되나 이들로 한정되지 않는다. 약학적으로 허용가능한 염은 예를 들면, 무독성 무기산 또는 유기산으로부터 형성된 모 화합물의 통상적인 무독성 염 또는 4차 암모늄 염을 포함한다. 예를 들면, 이러한 통상적인 무독성 염은 2-아세톡시벤조산, 2-하이드록시에탄설폰산, 아세트산, 아스코르브산, 벤젠설폰산, 벤조산, 중탄산, 탄산, 시트르산, 에데트산, 에탄다이설폰산, 1,2-에탄설폰산, 푸마르산, 글루코헵톤산, 글루콘산, 글루탐산, 글리콜산, 글리콜리아르사닐산, 헥실레소르신산, 하이드라밤산, 브롬화수소산, 염산, 요오드화수소산, 하이드록시말레산, 하이드록시나프토산, 이세티온산, 젖산, 락토비온산, 라우릴 설폰산, 말레산, 말산, 만델산, 메탄설폰산, 냅실산, 질산, 옥살산, 파모산, 판토텐산, 페닐아세트산, 인산, 폴리갈락투론산, 프로피온산, 살리사이클산, 스테아르산, 수바세트산, 석신산, 설팜산, 설파닐산, 황산, 탄닌산, 주석산, 톨루엔설폰산, 및 통상적으로 발생하는 아미노산, 예를 들면, 글리신, 알라닌, 페닐알라닌, 아르기닌 등으로부터 선택된 무기산 및 유기산으로부터 유도된 염들을 포함하나 이들로 한정되지 않는다.
약학적으로 허용가능한 염의 다른 예에는 헥산산, 사이클로펜탄 프로피온산, 피루브산, 말론산, 3-(4-하이드록시벤조일)벤조산, 신남산, 4-클로로벤젠설폰산, 2-나프탈렌설폰산, 4-톨루엔설폰산, 캄포르설폰산, 4-메틸비사이클로-[2.2.2]-옥트-2-엔-1-카복실산, 3-페닐프로피온산, 트라이메틸아세트산, 3차 부틸아세트산, 뮤콘산 등이 포함된다. 본 발명은 모 화합물에 존재하는 산성 양성자가 금속 이온, 예를 들면, 알칼리 금속 이온, 알칼리 토류 이온 또는 알루미늄 이온으로 치환될 때 형성된 염; 또는 유기 염기, 예컨대, 에탄올아민, 다이에탄올아민, 트라이에탄올아민, 트로메타민, N-메틸글루카민 등과의 배위체도 포함한다. 염 형태에서, 염의 화합물 대 양이온 또는 음이온의 비는 1:1, 또는 1:1 이외의 임의의 비, 예를 들면, 3:1, 2:1, 1:2 또는 1:3일 수 있다는 것이 이해된다.
약학적으로 허용가능한 염에 대한 모든 언급은 상기 염의 본원에 정의된 용매 부가 형태(용매화물) 또는 결정 형태(다형체)를 포함한다는 것이 이해되어야 한다.
본 발명의 화합물은 에스테르, 예를 들면, 약학적으로 허용가능한 에스테르로서 제조될 수도 있다. 예를 들면, 화합물의 카복실산 작용기는 그의 상응하는 에스테르, 예를 들면, 메틸, 에틸 또는 다른 에스테르로 전환될 수 있다. 또한, 화합물의 알코올 기는 그의 상응하는 에스테르, 예를 들면, 아세테이트, 프로피오네이트 또는 다른 에스테르로 전환될 수 있다.
본 발명의 화합물은 전구약물, 예를 들면, 약학적으로 허용가능한 전구약물로서 제조될 수도 있다. 용어 "전구-약물" 및 "전구약물"은 본원에서 상호교환적으로 사용되고 생체내에서 활성 모 약물을 방출하는 임의의 화합물을 의미한다. 전구약물이 약제의 많은 바람직한 성질(예를 들면, 가용성, 생체이용성, 제조 등)을 향상시키는 것으로 공지되어 있기 때문에, 본 발명의 화합물은 전구약물 형태로 전달될 수 있다. 따라서, 본 발명은 본원에서 특허청구된 화합물의 전구약물, 이를 전달하는 방법 및 이를 함유하는 조성물을 포함한다. "전구약물"은 이러한 전구약물이 대상체에게 투여될 때 생체내에서 본 발명의 활성 모 약물을 방출하는 임의의 공유결합된 담체를 포함한다. 본 발명에서 전구약물은 변경이 상용적인 조작에 의해 또는 생체내에서 절단되어 모 화합물을 생성하는 방식으로 화합물에 존재하는 작용기를 변경시킴으로써 제조된다. 전구약물은 하이드록시, 아미노, 설프하이드릴, 카복시 또는 카보닐 기가 각각 자유 하이드록실, 자유 아미노, 자유 설프하이드릴, 자유 카복시 또는 자유 카보닐 기를 형성하도록 생체내에서 절단될 수 있는 임의의 기에 결합되어 있는 본 발명의 화합물을 포함한다.
전구약물의 예에는 본 발명의 화합물의 하이드록시 작용기의 에스테르(예를 들면, 아세테이트, 다이알킬아미노아세테이트, 포르메이트, 포스페이트, 설페이트 및 벤조에이트 유도체) 및 카바메이트(예를 들면, N,N-다이메틸아미노카보닐), 카복실 작용기의 에스테르(예를 들면, 에틸 에스테르, 모르폴리노에탄올 에스테르), 아미노 작용기의 N-아실 유도체(예를 들면, N-아세틸), N-만니히(Mannich) 염기, 쉬프(Schiff) 염기 및 엔아미논, 및 케톤 및 알데하이드 작용기의 옥심, 아세탈, 케탈 및 에놀 에스테르 등이 포함되나 이들로 한정되지 않는다(문헌(Bundegaard, H., Design of Prodrugs, p1-92, Elesevier, New York-Oxford (1985)) 참조).
상기 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르 또는 전구약물은 경구, 비내, 경피, 폐, 흡입, 협측, 설하, 복강내, 피하, 근육내, 정맥내, 직장, 흉막내, 수막공간내 및 비경구로 투여된다. 한 실시양태에서, 상기 화합물은 경구로 투여된다. 당업자는 일부 투여 경로들의 장점을 인식할 것이다.
화합물을 사용하는 투약법은 환자의 유형, 종, 연령, 체중, 성별 및 의학적 상태; 치료될 병태의 중증도; 투여 경로; 환자의 신장 및 간 기능; 및 사용되는 구체적인 화합물 또는 이의 염을 포함하는 다양한 인자에 따라 선택된다. 통상의 기술을 가진 의사 또는 수의사는 병태를 예방하거나, 병태에 대항하거나 병태의 진행을 정지시키는 데에 요구되는 약물의 유효량을 용이하게 결정하여 처방할 수 있다.
본 발명의 개시된 화합물의 제제화 및 투여 기법은 문헌(Remington: the Science and Practice of Pharmacy, 19th edition, Mack Publishing Co., Easton, PA (1995))에서 발견될 수 있다. 한 실시양태에서, 본원에 기재된 화합물 및 이의 약학적으로 허용가능한 염은 약학적으로 허용가능한 담체 또는 희석제와 함께 약학 제제에서 사용된다. 적합한 약학적으로 허용가능한 담체는 불활성 고체 충전제 또는 희석제 및 멸균 수성 또는 유기 용액을 포함한다. 상기 화합물은 본원에 기재된 범위 내의 원하는 용량을 제공하기에 충분한 양으로 이러한 약학 조성물에 존재할 것이다.
달리 표시되어 있지 않은 한, 본원에서 사용된 모든 백분율 및 비는 중량을 기준으로 한 것이다. 본 발명의 다른 특징 및 장점은 다양한 실시예로부터 자명하다. 제공된 실시예는 본 발명의 실시에 유용한 다양한 성분 및 방법을 예시한다. 실시예는 특허청구된 본 발명을 한정하지 않는다. 당업자는 본 개시내용에 기초하여 본 발명의 실시에 유용한 다른 성분 및 방법을 확인하고 사용할 수 있다.
본원에 기재된 합성 반응식에서, 간결함을 위해 화합물을 하나의 특정 배위로 그릴 수 있다. 이러한 특정 배위는 본 발명을 하나의 또는 또 다른 이성질체, 호변이성질체, 위치이성질체 또는 입체이성질체로 한정하는 것으로서 해석되어서는 안 되고, 이성질체, 호변이성질체, 위치이성질체 또는 입체이성질체의 혼합물을 배제하지 않으나, 소정의 이성질체, 호변이성질체, 위치이성질체 또는 입체이성질체가 또 다른 이성질체, 호변이성질체, 위치이성질체 또는 입체이성질체보다 더 높은 수준의 활성을 가질 수 있다는 것이 이해될 것이다.
전술된 방법에 의해 디자인되고/되거나, 선택되고/되거나 최적화된 화합물이 일단 생성되면, 당업자에게 공지되어 있는 다양한 어세이들을 이용하여 상기 화합물을 특징규명하여 이 화합물이 생물학적 활성을 갖는지를 확인할 수 있다. 예를 들면, 후술된 어세이들을 포함하나 이들로 한정되지 않는 통상적인 어세이들로 분자를 특징규명하여 이 분자가 예측된 활성, 결합 활성 및/또는 결합 특이성을 갖는지를 확인할 수 있다.
나아가, 고효율 스크리닝을 이용하여 이러한 어세이들을 이용한 분석을 가속화할 수 있다. 그 결과, 당분야에서 공지되어 있는 기법을 이용하여 본원에 기재된 분자를 활성에 대해 신속히 스크리닝하는 것이 가능할 수 있다. 고효율 스크리닝을 수행하는 일반적인 방법은 예를 들면, 문헌(Devlin (1998) High Throughput Screening, Marcel Dekker) 및 미국 특허 제5,763,263호에 기재되어 있다. 고효율 어세이는 후술되어 있는 기법들을 포함하나 이들로 한정되지 않는 하나 이상의 상이한 어세이 기법들을 이용할 수 있다.
본원에서 인용된 모든 공개문헌들 및 특허문헌들은 각각의 이러한 공개문헌 또는 특허문헌이 본원에 참고로 도입되는 것으로 구체적으로 및 개별적으로 표시되어 있는 것처럼 본원에 참고로 도입된다. 공개문헌 및 특허문헌의 인용은 임의의 문헌이 관련 종래기술이라는 것을 인정하기 위한 것이 아니고 상기 문헌의 내용 또는 날짜에 대한 임의의 인정을 구성하지도 않는다. 본 발명은 작성된 설명에 의해 기재되어 있지만, 당업자는 본 발명이 다양한 실시양태들로 실시될 수 있고 상기 설명 및 하기 실시예가 하기 특허청구범위를 예시하기 위한 것이지 한정하기 위한 것이 아니라는 것을 인식할 것이다.
5. 실시예
일반적인 실험
NMR
달리 명시되어 있지 않은 한, CDCl3을 사용하여 1H-NMR 스펙트럼을 수득하였고 바리안(Varian) 또는 옥스포드(Oxford) 기기 자석(500 MHz) 기기를 이용하여 400 또는 500 MHz에서 상기 1H-NMR 스펙트럼을 기록하였다. 표시된 다중도는 다음과 같다: s = 단일선, d = 이중선, t = 삼중선, q = 사중선, quint = 오중선, sxt = 육중선, m = 다중선, dd =이중선의 이중선, dt = 삼중선의 이중선; br은 넓은 신호를 표시한다.
LCMS 및 HPLC
시마주(Shimadzu) LC-Q, 시마주 LCMS-2010EV 또는 워터스 액퀴티(Waters Acquity) 초고성능 LC. HPLC: 150 x 4.5 mm YMC ODS-M80 컬럼 또는 150 x 4.6 mm YMC-팩 프로(Pack Pro) C18 컬럼을 갖는 시마주 SPD-20A를 이용하여 생성물을 1.0 ㎖/분의 속도로 분석하였다.
이동상은 (0.3% SDS 및 0.05% H3PO4을 함유하는) MeCN:H2O=3:2이었다.
물 중의 0.05% TFA, 아세토니트릴 중의 0.05% TFA(구배 초기 20%, 그 다음 0.05% TFA/MeCN을 3분 이내에 95%까지 농축, 3.51분 내지 4.50분에서 0.5분 동안 보유, 그 다음 0.05% TFA/MeCN 농도 20%).
대안적으로, 2종의 상이한 LCMS 방법들을 이용하였는데, 본 발명자들이 가장 많이 이용한 한 방법은 높은 pH(METCR1600)이고, 다른 한 방법은 보다 표준 화합물을 위한 방법(METCR1416)이다.
물 중의 0.1% 포름산 - 이동상 "A", 아세토니트릴 중의 0.1% 포름산 - 워터스 아틀란티스(Waters Atlantis) dC18을 이용하는 이동상 "B", 2.1 mm x 100 mm, 3 ㎛ 컬럼, 이때 유속 = 0.6 ㎖/분, 컬럼 온도 = 40℃; 시간(분) %B 0.00분, 5% B 5.0분, 100% B 5.4분, 100% B 및 0.42분 5% B.
3.5분 방법은 아틀란티스 dC18, 2.1 mm x 50 mm, 3 ㎛ 컬럼, 40℃에서 1 ㎖/분의 유속을 의미한다. 이동상 A 포름산(수성) 0.1%, 이동상 B 포름산(MeCN) 0.1%, 주입 3 ㎕, 구배 0분(5% 유기), 2.5분(100% 유기), 2.7분(100% 유기), 2.71분(5% 유기), 3.5분(5% 유기).
7.0분 방법은 아틀란티스 dC18, 2.1 mm x 100 mm, 3 ㎛ 컬럼, 40℃에서 0.6 ㎖/분의 유속을 의미한다. 이동상 A 포름산(수성) 0.1%, 이동상 B 포름산(MeCN) 0.1%, 주입 3 ㎕, 구배 0분(5% 유기), 5분(100% 유기), 5.4분(100% 유기), 5.42분(5% 유기), 7분(5% 유기).
3.5분 방법 및 7분 방법 둘다를 LC-20AB 펌프 및 SPD-M20A PDA 검출기를 이용하여 MS18 시마주 LCMS-2010EV 또는 MS19 시마주 LCMS-2010EV 시스템 상에서 수행하였다.
3100 질량 검출기를 갖춘 워터스 자동정제 시스템을 이용하여 생성물을 HPLC/MS로 정제하였다.
HPLC 분석을 주위 온도에서 YMC ODS-A, C18, (150x4.6x5 ㎛) 컬럼을 이용하여 1.4 ㎖/분의 유속으로 시마주 LC-2010 CHT 상에서 수행할 수도 있다. 10 ㎕의 주입 부피가 이용되고, 검출은 UV/PDA를 통해 일어난다. 이동상 A는 물 중의 0.05% TFA이고, 이동상 B는 8분 동안 초기 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 보유 및 9.51분 내지 12분에서의 B 농도 0.5%로 구성된 구배 프로그램을 이용하는 아세토니트릴 중의 0.05% TFA이다. 희석제는 이동상이다.
기타
자동화된 플래쉬 컬럼 크로마토그래피를 바이오타지 이솔레라(Biotage Isolera) 버전 4(12 ㎖/분에서 작동하는 10 g SNAP 카트리지 또는 25 ㎖/분에서 작동하는 25 g SNAP 카트리지, 및 254 nm 및 280 nm에서의 검출) 상에서 수행하였다.
실험 절차에 기재된 조건에 따라 탈레스나노 H-큐브(ThalesNano H-Cube)® 상에서 선택 니트릴 환원을 수행할 수 있다.
실시예 1: 화합물 1의 합성: 5-(사이클로펜틸(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로푸리딘-3-일)메틸)-4'-((다이메틸아미노)메틸)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드
Figure pat00082
단계 1: 5-브로모-2-메틸-3-니트로벤조산
Figure pat00083
1,3-다이브로모-5,5-다이메틸-2,4-이미다졸리딘다이온(43.4 g, 151.8 mmol)을 실온에서 농축 H2SO4(200 ㎖) 중의 2-메틸-3-니트로벤조산(50 g, 276.2 mmol)의 교반된 용액에 나누어 첨가하고 반응물을 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 완결 시, 반응물을 빙냉수에 붓고, 침전된 고체를 여과하고, 발생된 잔사를 물로 세척하고 진공 하에 건조하여 원하는 화합물을 수득하였다(71.7 g, 100%).
단계 2: 메틸 5-브로모-2-메틸-3-니트로벤조에이트의 합성
Figure pat00084
탄산나트륨(468 g, 4415 mmol) 및 메틸 요오다이드(626.63 g, 4415 mmol)를 DMF(150 ㎖) 중의 5-브로모-2-메틸-3-니트로벤조산(287 g, 1103 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 발생된 반응물을 60℃에서 8시간 동안 가열하였다. 완결 시, 침전된 고체를 여과하고, 잔사를 다이에틸 에테르(5회)로 세척하였다. 모은 유기층을 건조하고 감압 하에 농축하여 원하는 미정제 화합물을 수득하였다(302 g, 99%).
단계 3: 메틸 3-아미노-5-브로모-2-메틸벤조에이트
Figure pat00085
물(750 ㎖)에 용해된 염화암모늄(150 g, 2777 mmol) 및 철 분말(93.3 g, 1636 mmol)을 교반 하에 에탄올(750 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-2-메틸-3-니트로벤조에이트(150 g, 544 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 발생된 반응물을 80℃에서 7시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응물을 셀라이트를 통해 여과하고 물 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 여과액을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 모은 유기층을 건조하고 감압 하에 농축하여 원하는 화합물을 수득하였다.
단계 4: 메틸 5-브로모-3-(사이클로펜틸아미노)-2-메틸벤조에이트
Figure pat00086
아세트산(0.159 g, 2.6 mmol)을 메탄올(3 ㎖) 중의 메틸 3-아미노-5-브로모-2-메틸벤조에이트(0.3 g, 1.33 mmol) 및 사이클로펜타논(0.56 g, 6.6 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고, 반응물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 시아노보로하이드라이드(0.208 g, 3.3 mmol)를 첨가하고 반응물을 밤새 교반하였다. 완결 시, 용매를 감압 하에 제거하여 원하는 화합물을 수득하였다.
단계 5: 메틸 5-브로모-3-(사이클로펜틸(메틸)아미노)-2-메틸벤조에이트
Figure pat00087
탄산세슘(1.47 g, 4.50 mmol) 및 메틸 요오다이드(1.6 g, 11.26 mmol)를 아세토니트릴(15 ㎖) 중의 미정제 메틸 5-브로모-3-(사이클로펜틸아미노)-2-메틸벤조에이트(0.7 g, 2.25 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고, 발생된 반응물을 80℃에서 7시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응물을 실온까지 냉각시키고 여과하고, 잔사를 에틸 아세테이트로 세척하고 여과액을 농축한 후 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 원하는 화합물을 수득하였다(0.6 g, 82%).
단계 6: 5-브로모-3-(사이클로펜틸(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드
Figure pat00088
수성 NaOH(0.11 g, 2.75 mmol)를 MeOH(1.5 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-3-(사이클로펜틸(메틸)아미노)-2-메틸벤조에이트(0.6 g, 1.8 mmol) 용액에 첨가하고 60℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응의 완결 후, 에탄올을 감압 하에 제거하고 묽은 HCl을 사용하여 pH 6까지 산성화하고 시트르산을 사용하여 pH 4로 조절하였다. 에틸 아세테이트를 사용하여 추출을 수행하였다. 모은 유기층을 건조하고 농축하여 각각의 산을 수득하였다(0.5 g, 87%).
그 다음, 상기 산(0.5 g, 1.60 mmol)을 DMSO(3 ㎖)에 용해시키고 3-(아미노메틸)-4,6-다이메틸피리딘-2(1H)-온(0.49 g, 3.22 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반한 후, PyBOP(1.25 g, 2.41 mmol)를 첨가하고 교반을 밤새 계속 수행하였다. 반응의 완결 후, 반응물을 얼음에 부어 고체를 수득하였고, 이것을 여과하고 아세토니트릴에 이어서 에테르로 세척하여 원하는 화합물을 수득하였다(0.315 g, 44%).
단계 7: 5-(사이클로펜틸(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4'-포르밀-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00089
1,4-다이옥산(4 ㎖) 중의 5-브로모-3-(사이클로펜틸(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드(1 당량), (4-포르밀페닐)보론산(1.2 당량) 및 Pd(PPh3)4(0.1 당량)의 용액을 아르곤으로 10분 동안 퍼징하였다. 그 다음, 2 M Na2CO3 용액(3.6 당량)을 첨가하고 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응의 완결 후, 물을 첨가하고 DCM을 사용하여 추출을 수행하였다. 모은 유기층을 물로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조하고 여과하고 감압 하에 농축하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 실리카 겔(60 내지 120 메쉬 크기) 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 원하는 화합물을 수득하였다(0.1 g, 44%).
단계 8: 5-(사이클로펜틸(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로푸리딘-3-일)메틸)-4'-((다이메틸아미노)메틸)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00090
아세트산(0.1 g, 0.21 mmol)을 메탄올(3 ㎖) 중의 5-(사이클로펜틸(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4'-포르밀-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드(0.1 g, 0.212 mmol) 및 N,N-다이메틸아민(0.047 g, 1.06 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 반응물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 시아노보로하이드라이드(0.033 g, 0.53 mmol)를 첨가하고, 반응물을 밤새 교반하였다. 완결 시, 용매를 감압 하에 제거하고 잔사를 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 원하는 화합물을 수득하였다(0.04 g, 37%). LCMS: 501.39 (M+1)+; HPLC: 90.78% (@ 254 nm) (Rt; 4.171; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (s, 1H), 8.17 (t, 1H), 7.57 (d, 2H, J=8 Hz), 7.33-7.37 (m, 3H), 7.17 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.27 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.52 (t, 1H, J=7.2 Hz), 3.04 (s, 2H), 2.54 (s, 3H), 2.23 (s, 3H), 2.19 (s, 3H), 2.15 (s, 6H), 2.09 (s, 3H), 1.70-1.72 (m, 2H), 1.61 (m, 2H), 1.43-1.50 (m, 4H).
실시예 2: 화합물 2의 합성: 5-(사이클로펜틸(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드
Figure pat00091
1,4-다이옥산(4 ㎖) 중의 5-브로모-3-(사이클로펜틸(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드(1 당량), (4-(모르폴리노메틸)페닐)보론산(1.2 당량) 및 Pd(PPh3)4(0.1 당량)의 용액을 아르곤으로 10분 동안 퍼징하였다. 그 다음, 2 M Na2CO3 용액(3.6 당량)을 첨가하고 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응의 완결 후, 물을 첨가하고 DCM을 사용하여 추출을 수행하였다. 모은 유기층을 물로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조하고 여과하고 감압 하에 농축하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 실리카 겔(60 내지 120 메쉬 크기) 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 원하는 화합물을 수득하였다(0.02 g, 16%). LCMS: 543.22 (M+1)+; HPLC: 99.53% (@ 254 nm) (Rt; 4.181; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (s, 1H), 8.17 (t, 1H, J=4.4 Hz), 7.98 (s, 1H), 7.73 (d, 1H, J=7.6 Hz), 7.57 (d, 2H, J=7.6 Hz), 7.37 (s, 2H), 7.17 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.27 (d, 2H, J=4.8 Hz), 3.44-3.57 (m, 7H), 2.54 (s, 3H), 2.32-2.36 (m, 4H), 2.23 (s, 3H), 2.19 (s, 3H), 2.09 (s, 3H), 1.69-1.72 (m, 2H), 1.61 (m, 2H), 1.43-1.50 (m, 4H).
실시예 3: 5-(사이클로펜틸아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4'-((다이메틸아미노)메틸)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00092
단계 1: 5-브로모-3-(사이클로펜틸아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드의 합성
수성 NaOH(0.1 g, 2.5 mmol)를 MeOH(5 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-3-(사이클로펜틸아미노)-2-메틸벤조에이트(0.39 g, 1.25 mmol) 용액에 첨가하고 60℃에서 1시간 동안 교반하였다. 에탄올을 감압 하에 제거하고 묽은 HCl을 사용하여 용액을 pH 6까지 산성화하고 시트르산을 사용하여 pH 4까지 산성화하였다. 생성물을 에틸 아세테이트로 추출하고 모은 유기층을 농축하여 원하는 산을 수득하였다(0.26 g, 0.82 mmol). 상기 산을 DMSO(3 ㎖)에 용해시키고 3-(아미노메틸)-4,6-다이메틸피리딘-2(1H)-온(0.25 g, 1.68 mmol)을 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반한 후, PyBOP(0.65 g, 1.26 mmol)를 첨가하고 교반을 밤새 계속 수행하였다. 반응 혼합물을 얼음에 부어 고체를 수득하였고, 이 고체를 여과로 수집하고 아세토니트릴에 이어서 에테르로 세척하여 5-브로모-3-(사이클로펜틸아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드를 수득하였다(0.178 g, 50%).
단계 2: 5-(사이클로펜틸아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4'-포르밀-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
1,4-다이옥산(4 ㎖) 중의 5-브로모-3-(사이클로펜틸아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드(1 당량), (4-포르밀페닐)보론산(1.2 당량) 및 Pd(PPh3)4(0.1 당량)의 용액을 아르곤으로 10분 동안 퍼징하였다. 그 다음, 2 M Na2CO3 용액(3.6 당량)을 첨가하고 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 실온까지 냉각시킨 후, 물을 혼합물에 첨가한 다음, 생성물을 DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 물로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조하고 여과하고 감압 하에 농축하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 실리카 겔(60 내지 120 메쉬 크기) 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 5-(사이클로펜틸아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4'-포르밀-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드를 수득하였다.
단계 3: 5-(사이클로펜틸아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4'-((다이메틸아미노)메틸)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드
아세트산(0.014 g, 0.24 mmol)을 메탄올(3 ㎖) 중의 5-(사이클로펜틸아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4'-포르밀-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드(0.11 g, 0.24 mmol) 및 N,N-다이메틸아민(0.044 g, 1.2 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 용액을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 시아노보로하이드라이드(0.030 g, 0.48 mmol)를 첨가하고, 용액을 밤새 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고 잔사를 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 원하는 5-(사이클로펜틸아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4'-((다이메틸아미노)메틸)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드를 수득하였다.
LCMS: 486.21 (M+1)+; HPLC: 99.84% (@ 254 nm) (Rt; 4.799; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.44 (s, 1H), 8.02-8.03 (m, 1H), 7.62 (d, 2H, J=7.6 Hz), 7.44 (s, 2H), 6.80 (s, 1H), 6.73 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.65 (d, 1H, J=6.4 Hz), 4.27 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.89 (d, 2H, J=5.2 Hz), 2.49 (용매 피크에서 합쳐진 7H), 1.98-2.19 (m, 11H), 1.55-1.70 (m, 6H).
실시예 4: 5-(사이클로펜틸아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00093
1,4-다이옥산(4 ㎖) 중의 5-브로모-3-(사이클로펜틸아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드(1 당량), (4-(모르폴리노메틸)페닐)보론산(1.2 당량) 및 Pd(PPh3)4(0.1 당량)의 용액을 아르곤으로 10분 동안 퍼징하였다. 그 다음, 2 M Na2CO3 용액(3.6 당량)을 첨가하고 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응의 완결 후, 물을 첨가하고 DCM을 사용하여 추출을 수행하였다. 모은 유기층을 물로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조하고 여과하고 감압 하에 농축하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 실리카 겔(60 내지 120 메쉬 크기) 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 5-(사이클로펜틸아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드를 수득한 후, 이것을 분취용 HPLC로 더 정제하여 TFA 염을 수득하였다.
LCMS: 529.30 (M+1)+; HPLC: 99.46% (@ 254 nm) (Rt; 4.782; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (s, 1H), 9.90 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.72 (d, 2H, J=8 Hz), 7.55 (d, 2H, J=8 Hz), 6.83 (s, 1H), 6.76 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.37 (s, 2H), 4.27 (d, 2H, J=4 Hz), 3.89-3.98 (m, 3H), 3.28-3.31 (m, 2H), 3.14 (s, 2H), 2.19 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 1.98-1.99 (m, 2H), 1.70 (s, 2H), 1.55 (s, 4H).
실시예 5: 2-(사이클로헥스-1-엔-1-일)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-6-(4-((다이메틸아미노)메틸)페닐)이소니코틴아미드의 합성
Figure pat00094
단계 1: 메틸 2-클로로-6-(4-(하이드록시메틸)페닐)이소니코티네이트의 합성
THF(20 ㎖) 중의 메틸 2,6-다이클로로이소니코티네이트(1 g, 4.85 mmol), 보론산(0.73 g, 4.8 mmol) 및 PdCl2(PPh3)2(0.15 g, 0.218 mmol)의 용액을 15분 동안 탈기하였다. 그 다음, Cs2CO3을 첨가하고, 반응물을 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응물을 70℃에서 2시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응물을 농축하고 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 메틸 2-클로로-6-(4-(하이드록시메틸)페닐)이소니코티네이트를 수득하였다(0.45 g, 33%).
단계 2: 메틸 2-(4-(브로모메틸)페닐)-6-클로로이소니코티네이트의 합성
트라이페닐포스핀(1 g, 3.86 mmol) 및 사브롬화탄소(1.63 g, 3.87 mmol)를 0℃에서 DCM(10 ㎖) 중의 메틸 2-클로로-6-(4-(하이드록시메틸)페닐)이소니코티네이트(0.67 g, 2.418 mmol) 용액에 첨가하고, 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 완결 시, 반응물을 농축하고 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 메틸 2-(4-(브로모메틸)페닐)-6-클로로이소니코티네이트를 수득하였다(0.53 g, 64%).
단계 3: 메틸 2-클로로-6-(4-((다이메틸아미노)메틸)페닐)이소니코티네이트의 합성
다이메틸아민(7.8 ㎖, THF 중의 2 M 용액)을 THF 중의 메틸 2-(4-(브로모메틸)페닐)-6-클로로이소니코티네이트(0.533 g, 1.56 mmol) 용액에 첨가하고 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 완결 시, 반응물을 농축하고 수득된 미정제 물질을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 순수한 메틸 2-클로로-6-(4-((다이메틸아미노)메틸)페닐)이소니코티네이트를 수득하였다(0.48 g, 99%).
단계 4: 2-클로로-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-6-(4-((다이메틸아미노)메틸)페닐)이소니코틴아미드의 합성
물(1 ㎖)에 용해된 NaOH(0.094 g, 2.368 mmol)를 에탄올(5 ㎖) 중의 메틸 2-클로로-6-(4-((다이메틸아미노)메틸)페닐)이소니코티네이트(0.48 g, 1.578 mmol) 용액에 첨가하고 반응물을 60℃에서 1시간 동안 가열하였다. 완결 시, 용매를 감압 하에 증발시켰다. 잔사를 에테르로 세척하고 1 N HCl로 pH 8까지 산성화한 후, 시트르산으로 pH 5 내지 6까지 산성화하였다. 수성층을 20% MeOH/DCM으로 추출하고, 모은 유기층을 감압 하에 농축하여 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용되는 산을 수득하였다(0.47 g, 미정제). PyBOP(1.26 g, 2.43 mmol)를 DMSO(4 ㎖) 중의 상기 산(0.47 g, 1.64 mmol) 용액에 첨가하고, 반응물을 실온에서 15분 동안 교반하였다. 그 다음, 3-(아미노메틸)-4,6-다이메틸피리딘-2(1H)-온(0.49 g, 3.28 mmol)을 첨가하고 반응물을 밤새 교반하였다. 완결 시, 물을 첨가하고 수성층을 20% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 농축하고 잔사를 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 2-클로로-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-6-(4-((다이메틸아미노)메틸)페닐)이소니코틴아미드를 수득하였다(0.3 g, 43.6%).
단계 5: 2-(사이클로헥스-1-엔-1-일)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-6-(4-((다이메틸아미노)메틸)페닐)이소니코틴아미드의 합성
Na2CO3(0.098 g, 3.6 mmol)을 다이옥산/물 혼합물(3 ㎖+1.5 ㎖) 중의 2-클로로-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-6-(4-((다이메틸아미노)메틸)페닐)이소니코틴아미드(0.11 g, 0.25 mmol) 및 보론산(0.059 g, 0.27 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 반응물을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.028 g, 0.025 mmol)을 첨가하고 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응물을 100℃에서 3시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응물을 셀라이트를 통해 여과하고, 셀라이트 층을 에틸 아세테이트로 세척하였다. 모은 여과액을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 실리카 겔 상의 컬럼으로 정제하여 2-(사이클로헥스-1-엔-1-일)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-6-(4-((다이메틸아미노)메틸)페닐)이소니코틴아미드를 수득하였다.
분석 데이터: LCMS: 471.30 (M+1)+; HPLC: 95.64% (@ 254 nm) (Rt; 5.661; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.52 (s, 1H), 8.79 (t, 1H), 8.13 (s, 1H), 8.10 (d, 2H, J=7.60 Hz), 7.81 (s, 1H), 7.41 (d, 2H, J=7.60 Hz), 6.90 (bs, 1H), 5.88 (s, 1H), 4.34 (d, 2H, J=4.8 Hz), 3.44 (s, 2H), 2.56 (bs, 2H), 2.26 (bs, 2H), 2.18 (s, 3H), 2.17 (s, 6H), 2.12 (s, 3H), 1.80-1.72 (m, 2H), 1.68-1.60 (m, 2H).
실시예 6: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-(4-((다이메틸아미노)메틸)페닐)-6-(피페리딘-1-일)이소니코틴아미드의 합성
Figure pat00095
단계 1: 메틸 2-클로로-6-(피페리딘-1-일)이소니코티네이트의 합성
아세토니트릴(20 ㎖) 중의 메틸 2,6-다이클로로이소니코티네이트(1 g, 4.85 mmol), 피페리딘(0.61 g, 7.28 mmol) 및 K2CO3(1.38 g, 9.7 mmol)의 용액을 90℃에서 20시간 동안 가열하였다. 반응의 완결 후, 반응물을 여과하고 여과액을 농축하고 컬럼으로 정제하여 순수한 메틸 2-클로로-6-(피페리딘-1-일)이소니코티네이트를 수득하였다(1.23 g, 90%).
단계 2: 2-클로로-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-6-(피페리딘-1-일)이소니코틴아미드의 합성
물(2 ㎖)에 용해된 NaOH(0.207 g, 5.196 mmol)를 에탄올(10 ㎖) 중의 메틸 2-클로로-6-(피페리딘-1-일)이소니코티네이트(1.1 g, 4.33 mmol) 용액에 첨가하고 반응물을 60℃에서 1시간 동안 가열하였다. 완결 시, 용매를 감압 하에 증발시켰다. 잔사를 에테르로 세척하고 1 N HCl로 pH 8까지 산성화한 후, 시트르산으로 pH 5 내지 6까지 산성화하였다. 수득된 고체를 여과하고 물로 세척하고 최종적으로 감압 하에 건조하여 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용되는 산을 수득하였다(0.92 g, 89%). PyBOP(3.9 g, 7.5 mmol)를 DMSO(10 ㎖) 중의 상기 산(0.9 g, 3.75 mmol) 용액에 첨가하고, 반응물을 실온에서 15분 동안 교반하였다. 그 다음, 3-(아미노메틸)-4,6-다이메틸피리딘-2(1H)-온(1.5 g, 10 mmol)을 첨가하고 반응물을 밤새 교반하였다. 완결 시, 물을 첨가하고 침전된 고체를 여과하고 물로 세척하고 건조하여 2-클로로-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-6-(피페리딘-1-일)이소니코틴아미드를 수득하였다(1 g, 74%).
단계 3: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-(4-포르밀페닐)-6-(피페리딘-1-일)이소니코틴아미드의 합성
Na2CO3(0.61 g, 5.76 mmol)을 다이옥산/물 혼합물(15 ㎖+5 ㎖) 중의 2-클로로-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-6-(피페리딘-1-일)이소니코틴아미드(0.6 g, 1.6 mmol) 및 보론산(0.263 g, 1.76 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 반응물을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.184 g, 0.16 mmol)을 첨가하고 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응물을 100℃에서 3시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응물을 셀라이트를 통해 여과하고, 셀라이트 층을 에틸 아세테이트로 세척하였다. 모은 여과액을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 실리카 겔 상의 컬럼으로 정제하여 N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-(4-포르밀페닐)-6-(피페리딘-1-일)이소니코틴아미드를 수득하였다(0.5 g, 71%).
단계 4: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-(4-((다이메틸아미노)메틸)페닐)-6-(피페리딘-1-일)이소니코틴아미드의 합성
다이메틸아민(2.6 ㎖, 4.5 mmol, THF 중의 2 M 용액) 및 아세트산(0.02 g, 0.45 mmol)을 메탄올(12 ㎖) 중의 N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-(4-포르밀페닐)-6-(피페리딘-1-일)이소니코틴아미드(0.2 g, 0.45 mmol) 용액에 첨가하고 반응물을 실온에서 90분 동안 교반하였다. 그 다음, 반응물을 0℃까지 냉각시키고 나트륨 시아노보로하이드라이드(0.056 g, 0.9 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 0℃에서 2시간 동안 교반한 후 실온에서 밤새 교반하였다. 완결 시, 용매를 감압 하에 제거하고 잔사를 물로 처리하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 모은 에틸 아세테이트 층을 황산나트륨 상에서 건조하고 감압 하에 농축하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 밝은 녹색 고체로서 N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-(4-((다이메틸아미노)메틸)페닐)-6-(피페리딘-1-일)이소니코틴아미드를 수득하였다(0.173 g, 79%).
분석 데이터: LCMS: 474.30 (M+1)+; HPLC: 99.15% (@ 254 nm) (Rt; 5.257; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.50 (s, 1H), 8.61 (t, 1H, J=4.4 Hz), 8.03 (d, 2H, J=7.6 Hz), 7.52 (s, 1H), 7.40 (d, 2H, J=8.4 Hz), 7.13 (s, 1H), 5.87 (s, 1H), 4.32 (d, 2H, J=4 Hz), 3.63 (bs, 6H), 2.26 (bs, 6H), 2.18 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.59 (bs, 6H).
실시예 7: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-(4-((다이메틸아미노)메틸)페닐)-6-(이소프로필아미노)이소니코틴아미드의 합성
Figure pat00096
단계 1: 메틸 2-클로로-6-(이소프로필아미노)이소니코티네이트의 합성
톨루엔(30 ㎖) 중의 메틸 2,6-다이클로로이소니코티네이트(1 g, 4.85 mmol), 이소프로필 아민(0.286 g, 4.85 mmol) 및 Cs2CO3(2.06 g, 6.3 mmol)의 용액을 아르곤으로 10분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(OAc)2(0.108 g, 0.485 mmol) 및 BINAP(0.3 g, 0.485 mmol)를 첨가하고 아르곤으로 15분 동안 다시 퍼징하였다. 반응물을 80℃에서 6시간 동안 교반하였다. 완결 시, 반응물을 여과하고 잔사를 에틸 아세테이트로 철저히 세척하였다. 모은 여과액을 농축하고 실리카 겔 상의 컬럼으로 정제하여 순수한 메틸 2-클로로-6-(이소프로필아미노)이소니코티네이트를 수득하였다(0.3 g, 27.27%).
단계 2: 2-클로로-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-6-(이소프로필아미노)이소니코틴아미드의 합성
NaOH(0.082 g, 2.06 mmol) 및 물(0.8 ㎖)을 에탄올(4 ㎖) 중의 메틸 2-클로로-6-(이소프로필아미노)이소니코티네이트(0.393 g, 1.7 mmol) 용액에 첨가하고 반응물을 60℃에서 1시간 동안 가열하였다. 완결 시, 용매를 감압 하에 증발시켰다. 잔사를 에테르로 세척하고 1 N HCl로 pH 8까지 산성화한 후, 시트르산으로 pH 5 내지 6까지 산성화하였다. 수득된 고체를 여과하고 물로 세척하고 최종적으로 감압 하에 건조하여 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용되는 산을 수득하였다(0.36 g, 97%). PyBOP(1.3 g, 2.5 mmol)를 DMSO(1.5 ㎖) 중의 상기 산(0.36 g, 1.68 mmol) 용액에 첨가하고, 반응물을 실온에서 15분 동안 교반하였다. 그 다음, 3-(아미노메틸)-4,6-다이메틸피리딘-2(1H)-온(0.383 g, 2.5 mmol)을 첨가하고 반응물을 밤새 교반하였다. 완결 시, 물을 첨가하고 수성층을 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 물로 세척하고 황산나트륨 상에서 건조하고 농축하여 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용되는 미정제 2-클로로-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-6-(이소프로필아미노)이소니코틴아미드를 수득하였다(0.58 g, 100%).
단계 3: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-(4-포르밀페닐)-6-(이소프로필아미노)이소니코틴아미드의 합성
Na2CO3(0.64 g, 6.037 mmol)을 다이옥산/물 혼합물(7 ㎖+3 ㎖) 중의 2-클로로-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-6-(이소프로필아미노)이소니코틴아미드(0.58 g, 1.67 mmol) 및 보론산(0.277 g, 1.84 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 반응물을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.194 g, 0.168 mmol)을 첨가하고 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응물을 100℃에서 3시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응물을 셀라이트를 통해 여과하고, 셀라이트 층을 에틸 아세테이트로 세척하였다. 모은 여과액을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 실리카 겔 상의 컬럼으로 정제하여 N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-(4-포르밀페닐)-6-(이소프로필아미노)이소니코틴아미드를 수득하였다(0.6 g, 85.7%).
단계 4: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-(4-((다이메틸아미노)메틸)페닐)-6-(이소프로필아미노)이소니코틴아미드의 합성
다이메틸아민(7.1 ㎖, 14.33 mmol, THF 중의 2 M 용액) 및 아세트산(0.086 g, 1.44 mmol)을 메탄올(6 ㎖) 중의 N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-(4-포르밀페닐)-6-(이소프로필아미노)이소니코틴아미드(0.6 g, 1.44 mmol) 용액에 첨가하고 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 시아노보로하이드라이드(0.18 g, 2.8 mmol)를 첨가하고, 반응물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 완결 시, 용매를 감압 하에 제거하고 잔사를 물로 처리하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 모은 에틸 아세테이트 층을 황산나트륨 상에서 건조하고 감압 하에 농축하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 분취용 HPLC로 정제하여 밝은 황색 고체로서 표적 분자 N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-(4-((다이메틸아미노)메틸)페닐)-6-(이소프로필아미노)이소니코틴아미드를 수득하였다.
분석 데이터: LCMS: 448.25 (M+1)+; HPLC: 96.22% (@ 254 nm) (Rt; 4.170, 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (CD3OD, 400 MHz) δ 8.01 (d, 2H, J=8 Hz), 7.67 (d, 2H, J=8 Hz), 7.39 (s, 1H), 7.19 (s, 1H), 6.14 (s, 1H), 4.50 (s, 2H), 4.40 (s, 2H), 4.17-4.11 (m, 1H), 2.89 (s, 6H), 2.38 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 1.33 (d, 6H, J=6H).
실시예 8: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-3-(메틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-5-(1-(2-모르폴리노에틸)-1H-피라졸-4-일)벤즈아미드의 합성
Figure pat00097
단계 1: 메틸 5-브로모-2-메틸-3-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)벤조에이트의 합성
아세트산(0.61 g, 10.2 mmol)을 메탄올(20 ㎖) 중의 메틸 3-아미노-5-브로모-2-메틸벤조에이트(2.5 g, 10.2 mmol) 및 다이하이드로-2H-피란-4(3H)-온(1.3 g, 13.3 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 용액을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 시아노보로하이드라이드(1.2 g, 20.48 mmol)를 0℃에서 첨가하고, 교반을 실온에서 밤새 계속 수행하였다. 그 다음, 용매를 감압 하에 제거하고 미정제 물질을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 메틸 5-브로모-2-메틸-3-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)벤조에이트를 수득하였다(2.2 g, 66%).
단계 2: 메틸 5-브로모-2-메틸-3-(메틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)벤조에이트의 합성
탄산세슘(1.97 g, 6.10 mmol) 및 메틸 요오다이드(2.15 g, 15.27 mmol)를 아세토니트릴(15 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-2-메틸-3-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)벤조에이트(1.0 g, 3.15 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고, 발생된 용액을 80℃에서 20시간 동안 가열하였다. 용액을 실온까지 냉각시키고 여과하고 잔사를 에틸 아세테이트로 세척하였다. 여과액을 농축하고 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 메틸 5-브로모-2-메틸-3-(메틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)벤조에이트를 수득하였다(0.82 g, 80%).
단계 3: 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-3-(메틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)벤즈아미드의 합성
수성 NaOH(0.19 g, 4.89 mmol)를 MeOH(20 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-2-메틸-3-(메틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)벤조에이트(0.82 g, 2.4 mmol) 용액에 첨가하고 60℃에서 1시간 동안 교반하였다. 에탄올을 감압 하에 제거하고 묽은 HCl을 사용하여 용액을 pH 6까지 산성화하고 시트르산을 사용하여 pH 4까지 산성화하였다. 생성물을 에틸 아세테이트로 추출하고, 모은 유기층을 건조하고 농축하여 각각의 산을 수득하였다(0.70 g). 그 다음, 상기 산을 DMSO(3 ㎖)에 용해시키고 3-(아미노메틸)-4,6-다이메틸피리딘-2(1H)-온(0.74 g, 4.89 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반한 후, PyBOP(1.9 g, 3.6 mmol)를 첨가하고 교반을 밤새 계속 수행하였다. 용액을 얼음에 부어 고체를 수득하였고, 이것을 여과하고 아세토니트릴로 세척한 후 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-3-(메틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)벤즈아미드를 수득하였다(0.6 g, 54%).
단계 4: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-3-(메틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-5-(1-(2-모르폴리노에틸)-1H-피라졸-4-일)벤즈아미드의 합성
Na2CO3(3.6 당량)을 다이옥산/물 혼합물(5 ㎖+1 ㎖) 중의 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-3-(메틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)벤즈아미드(1 당량) 및 4-(2-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸-1-일)에틸)모르폴린(1.2 당량)의 교반된 용액에 첨가하고 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.1 당량)을 첨가하고 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 용액을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 원하는 N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-3-(메틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-5-(1-(2-모르폴리노에틸)-1H-피라졸-4-일)벤즈아미드를 수득하였다(0.045 g, 36.9%).
LCMS: 563.00 (M+1)+; HPLC 99.26% (@ 254 nm) (Rt; 3.774; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 8.06 (t, 1H, J=4.8 Hz), 7.82 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 5.87 (s, 1H), 4.27 (d, 2H, J=4.8 Hz), 4.21 (t, 2H, J=6.4 Hz), 3.85 (d, 2H, J=11.2 Hz), 3.54 (t, 4H), 3.23-3.26 (m, 2H), 2.99 (m, 1H), 2.72 (t, 2H, J=6.4 Hz), 2.60 (s, 3H), 2.40 (bs, 4H), 2.20 (s, 3H), 2.16 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.58-1.59 (m, 4H).
실시예 9: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-3-(메틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)벤즈아미드의 합성
Figure pat00098
Na2CO3(3.6 당량)을 다이옥산/물 혼합물(5 ㎖+1 ㎖) 중의 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-3-(메틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)벤즈아미드(1 당량) 및 1-메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸(1.2 당량)의 교반된 용액에 첨가하고 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.1 당량)을 첨가하고 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 용액을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 원하는 N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-3-(메틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)벤즈아미드를 수득하였다(0.02 g, 20%).
LCMS: 464.30 (M+1)+; HPLC 97.80% (@ 254 nm) (Rt; 4.286; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 8.06 (t, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.10 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.27 (d, 2H, J=4.8 Hz), 3.83-3.86 (m, 5H), 3.23-3.29 (m, 2H), 2.99 (m, 1H), 2.59 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.16 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.58 (m, 4H).
실시예 10: 3-(사이클로헥실(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)벤즈아미드의 합성
Figure pat00099
단계 1: 메틸 5-브로모-3-(사이클로헥실아미노)-2-메틸벤조에이트의 합성
아세트산(0.247 g, 20.6 mmol)을 메탄올(50 ㎖) 중의 메틸 3-아미노-5-브로모-2-메틸벤조에이트(5.0 g, 20.6 mmol) 및 사이클로헥사논(4.03 g, 41.2 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고, 반응물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 시아노보로하이드라이드(1.55 g, 24.6 mmol)를 첨가하고 반응물을 밤새 교반하였다. 완결 시, 용매를 감압 하에 제거하고 미정제 물질을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 메틸 5-브로모-3-(사이클로헥실아미노)-2-메틸벤조에이트를 수득하였다(2.75 g, 41%).
단계 2: 메틸 5-브로모-3-(사이클로헥실(메틸)아미노)-2-메틸벤조에이트의 합성
탄산세슘(5.45 g, 16.9 mmol) 및 메틸 요오다이드(6 g, 42.3 mmol)를 아세토니트릴(25 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-3-(사이클로헥실아미노)-2-메틸벤조에이트(2.75 g, 8.45 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고, 발생된 용액을 80℃에서 20시간 동안 가열하였다. 완결 시, 용액을 실온까지 냉각시키고 여과하고 잔사를 에틸 아세테이트로 세척하였다. 여과액을 농축한 후 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 메틸 5-브로모-3-(사이클로헥실(메틸)아미노)-2-메틸벤조에이트를 수득하였다(2.5 g, 87%).
단계 3: 5-브로모-3-(사이클로헥실(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드의 합성
수성 NaOH(0.55 g, 14.7 mmol)를 MeOH(15 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-3-(사이클로헥실(메틸)아미노)-2-메틸벤조에이트(2.5 g, 7.35 mmol) 용액에 첨가하고 60℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응의 완결 후, 에탄올을 감압 하에 제거하고 묽은 HCl을 사용하여 pH 6까지 산성화하고 시트르산을 사용하여 pH 4까지 산성화하였다. 생성물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 모은 유기층을 건조하고 농축하여 각각의 산을 수득하였다(2.5 g, 87%). 그 다음, 상기 산을 DMSO(20 ㎖)에 용해시키고 3-(아미노메틸)-4,6-다이메틸피리딘-2(1H)-온(2.34 g, 15.1 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반한 후, PyBOP(5.85 g, 11.05 mmol)를 첨가하고 교반을 밤새 계속 수행하였다. 그 다음, 반응물을 얼음에 부어 고체를 수득하였고, 이 고체를 여과로 수집하고 아세토니트릴로 세척하였다. 실리카 상의 컬럼으로 정제하여 5-브로모-3-(사이클로헥실(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드를 수득하였다(1.5 g, 44.19%).
단계 4: 3-(사이클로헥실(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)벤즈아미드의 합성
Na2CO3(3.6 당량)을 다이옥산/물 혼합물(5 ㎖+1 ㎖) 중의 5-브로모-3-(사이클로헥실(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드(1 당량) 및 1-메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸(1.2 당량)의 교반된 용액에 첨가하고 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.1 당량)을 첨가하고 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 냉각시킨 후, 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 생성물을 수득하였다. 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.02 g, 20%).
LCMS: 462.40 (M+1)+; HPLC 88.48% (@ 254 nm) (Rt; 4.683; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 8.06 (t, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.06 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.26 (d, 2H, J=4 Hz), 3.83 (s, 3H), 2.71 (t, 1H), 2.60 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.14 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.69 (m, 4H), 1.53-1.55 (m, 1H), 1.39-1.41 (m, 2H), 1.06-1.19 (m, 3H).
실시예 11: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-5-(메틸(피페리딘-4-일)아미노)-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00100
단계 1: tert-부틸 4-((5-브로모-3-(메톡시카보닐)아미노)피페리딘-1-카복실레이트의 합성
아세트산(1.2 g, 20.6 mmol)을 메탄올(50 ㎖) 중의 메틸 3-아미노-5-브로모-2-메틸벤조에이트(5.0 g, 20.6 mmol) 및 tert-부틸 4-옥소피페리딘-1-카복실레이트(8.2 g, 41.1 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고, 반응물을 실온에서 8시간 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 시아노보로하이드라이드(1.55 g, 24.6 mmol)를 0℃에서 첨가하고 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고 생성물을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 4-((5-브로모-3-(메톡시카보닐)아미노)피페리딘-1-카복실레이트를 수득하였다(5.0 g, 57%).
단계 2: tert-부틸 4-((5-브로모-3-(메톡시카보닐)-2-메틸페닐(메틸)아미노)피페리딘-1-카복실레이트의 합성
탄산세슘(4.57 g, 14.1 mmol) 및 메틸 요오다이드(5.0 g, 35.2 mmol)를 아세토니트릴(25 ㎖) 중의 tert-부틸 4-((5-브로모-3-(메톡시카보닐)아미노)피페리딘-1-카복실레이트(3.0 g, 7.06 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 반응물을 80℃에서 20시간 동안 가열하였다. 그 다음, 반응물을 실온까지 냉각시키고 여과하고 에틸 아세테이트로 세척하였다. 여과액을 농축하고 생성물을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 4-((5-브로모-3-(메톡시카보닐)-2-메틸페닐(메틸)아미노)피페리딘-1-카복실레이트를 수득하였다(2.5 g, 81%).
단계 3: tert-부틸 4-((5-브로모-3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸페닐)(메틸)아미노)피페리딘-1-카복실레이트의 합성
수성 NaOH(0.37 g, 9.38 mmol)를 MeOH(20 ㎖) 중의 tert-부틸 4-((5-브로모-3-(메톡시카보닐)-2-메틸페닐(메틸)아미노)피페리딘-1-카복실레이트(2.0 g, 4.69 mmol) 용액에 첨가하고 60℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응의 완결 후, 에탄올을 감압 하에 제거하고 묽은 HCl을 사용하여 용액을 pH 6까지 산성화하고 시트르산을 사용하여 pH 4까지 산성화하였다. 생성물을 에틸 아세테이트를 사용하여 추출하였다. 모은 유기층을 건조하고 농축하여 각각의 산을 수득하였다(1.7 g, 90%). 그 다음, 상기 산을 DMSO(10 ㎖)에 용해시키고 3-(아미노메틸)-4,6-다이메틸피리딘-2(1H)-온(1.42 g, 9.38 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반한 후, PyBOP(3.66 g, 7.04 mmol)를 첨가하고 교반을 밤새 계속 수행하였다. 완결 후, 반응물을 얼음에 부어 고체를 수득하였고, 이것을 여과하고 아세토니트릴로 세척한 후 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 4-((5-브로모-3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸페닐)(메틸)아미노)피페리딘-1-카복실레이트를 수득하였다(1.3 g, 50%).
단계 4: tert-부틸 4-((5-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-일)(메틸)아미노)피페리딘-1-카복실레이트의 합성
Na2CO3(3.6 당량)을 다이옥산/물 혼합물(5 ㎖+1 ㎖) 중의 tert-부틸 4-((5-브로모-3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸페닐)(메틸)아미노)피페리딘-1-카복실레이트(1 당량) 및 4-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질)모르폴린(1.2 당량)의 교반된 용액에 첨가하고 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.1 당량)을 첨가하고 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응물을 100℃에서 5시간 동안 가열하였다. 냉각시킨 후, 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 생성물을 수득한 후, 이 생성물을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 4-((5-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-일)(메틸)아미노)피페리딘-1-카복실레이트를 수득하였다.
단계 5: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-5-(메틸(피페리딘-4-일)아미노)-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
DCM(5 ㎖) 중의 tert-부틸 4-((5-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-일)(메틸)아미노)피페리딘-1-카복실레이트(1 mmol)의 교반된 용액을 0℃까지 냉각시키고 TFA(2 ㎖)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 완결 시, 용액을 건조될 때까지 농축하였다. 잔사를 용매 세척으로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.07 g, 86%).
LCMS: 558.45 (M+1)+; HPLC 98.81% (@ 254 nm) (Rt; 4.009; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 10.1 (bs, 1H), 8.51 (d, 1H), 8.16 (t, 2H), 7.77 (d, 2H, J=8 Hz), 7.57 (d, 2H, J=8 Hz), 7.42 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.33 (bs, 2H), 4.29 (d, 2H, J=19.2 HZ), 3.96 (m, 2H), 3.25 (m, 4H), 3.15 (m, 4H), 2.89-2.91 (m, 2H), 2.64 (s, 3H), 2.26 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.81 (m, 4H).
실시예 12: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-5-(메틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00101
Na2CO3(3.6 당량)을 다이옥산/물 혼합물(5 ㎖+1 ㎖) 중의 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-3-(메틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)벤즈아미드(1 당량) 및 4-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질)모르폴린(1.2 당량)의 교반된 용액에 첨가하고 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.1 당량)을 첨가하고 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 용액을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.065 g, 55%). LCMS: 559.35 (M+1)+; HPLC 99.26% (@ 254 nm) (Rt; 3.983; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.15 (t, 1H), 7.58 (d, 2H, J=8 Hz), 7.36 (d, 3H, J=8.4 Hz), 7.18 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4.8 Hz), 3.84 (d, 2H, J=11.2 Hz), 3.57 (m, 3H), 3.48 (m, 3H), 3.24 (m, 2H), 3.40 (m, 1H), 2.63 (s, 3H), 2.36 (m, 4H), 2.23 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.60 (m, 4H).
실시예 13: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4'-((다이메틸아미노)메틸)-4-메틸-5-(메틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00102
Na2CO3(3.6 당량)을 다이옥산/물 혼합물(5 ㎖+1 ㎖) 중의 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-3-(메틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)벤즈아미드(1 당량) 및 N,N-다이메틸-1-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)페닐)메탄아민(1.2 당량)의 교반된 용액에 첨가하고 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.1 당량)을 첨가하고 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 용액을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.01 g, 9%). LCMS: 517.30 (M+1)+; HPLC 98.12% (@ 254 nm) (Rt; 3.972; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.16 (t, 1H), 7.58 (d, 2H, J=8 Hz), 7.34-7.36 (m, 2H), 7.18 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4 Hz), 3.84 (d, 2H, J=10.8 Hz), 3.42 (s, 2H), 3.02 (m, 2H), 2.66 (m, 1H), 2.63 (s, 3H), 2.50 (용매 피크에서 합쳐진 3H), 2.23 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.16 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.60 (m, 4H).
실시예 14: 5-(사이클로헥실(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00103
Na2CO3(3.6 당량)을 다이옥산/물 혼합물(5 ㎖+1 ㎖) 중의 5-브로모-3-(사이클로헥실(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드(1 당량) 및 (4-(모르폴리노메틸)페닐)보론산(1.2 당량)의 교반된 용액에 첨가하고 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.1 당량)을 첨가하고 용액을 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 완결 시, 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.070 g, 29% 수율). LCMS: 557.40 (M+1)+; HPLC 98.83% (@ 254 nm) (Rt; 4.303; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.15 (t, 1H, J=4 Hz), 7.56 (d, 2H, J=7.6 Hz), 7.36 (d, 2H, J=8 Hz), 7.28 (s, 1H), 7.13 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.57 (m, 4H), 3.48 (s, 2H), 2.74 (t, 1H), 2.64 (s, 3H), 2.36 (m, 4H), 2.20 (s, 6H), 2.10 (s, 3H), 1.69-1.71 (m, 3H), 1.53-1.56 (m, 2H), 1.41-1.44 (m, 2H), 1.10-1.23 (m, 3H).
실시예 15: 3-(사이클로헥실(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(1-(2-모르폴리노에틸)-1H-피라졸-4-일)벤즈아미드의 합성
Figure pat00104
Na2CO3(3.6 당량)을 다이옥산/물 혼합물(5 ㎖+1 ㎖) 중의 5-브로모-3-(사이클로헥실(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드(1 당량) 및 (1-(2-모르폴리노에틸)-1H-피라졸-4-일)보론산(1.2 당량)의 교반된 용액에 첨가하고 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.1 당량)을 첨가하고 용액을 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 완결 시, 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.06 g, 25% 수율). LCMS: 561.35 (M+1)+; HPLC 96.87% (@ 254 nm) (Rt; 4.209; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.44 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 8.06 (t, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.06 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4.8 Hz), 4.21 (t, 2H, J=6 Hz), 3.54 (m, 4H), 2.72 (t, 2H, J=6.8 Hz), 2.61 (s, 3H), 2.40 (m, 4H), 2.20 (s, 3H), 2.14 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.70 (m, 4H), 1.53-1.56 (m, 3H), 1.10-1.23 (m, 4H).
실시예 16: 5-(사이클로헥실(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4'-((다이메틸아미노)메틸)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00105
Na2CO3(3.6 당량)을 다이옥산/물 혼합물(5 ㎖+1 ㎖) 중의 5-브로모-3-(사이클로헥실(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드(1 당량) 및 (4-((다이메틸아미노)메틸)페닐)보론산(1.2 당량)의 교반된 용액에 첨가하고 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.1 당량)을 첨가하고 용액을 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 완결 시, 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.065 g, 29% 수율). LCMS: 515.40 (M+1)+; HPLC 96.73% (@ 254 nm) (Rt; 4.362; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.16 (t, 1H), 7.64 (d, 2H, J=6.8 Hz), 7.45 (d, 2H), 7.30 (s, 1H), 7.16 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4.4 Hz), 2.75 (t, 1H), 2.65 (s, 3H), 2.32-2.42 (m, 6H), 2.20 (s, 6H), 2.10 (s, 3H), 1.69 (m, 4H), 1.53-1.56 (m, 1H), 1.42-1.45 (m, 2H), 1.10-1.23 (m, 4H). [용매 피크에서 합쳐진 1H].
실시예 17: 3-(사이클로펜틸(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(6-(모르폴리노메틸)피리딘-3-일)벤즈아미드의 합성
Figure pat00106
단계 1: 3-(사이클로펜틸(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(6-포르밀피리딘-3-일)-2-메틸벤즈아미드의 합성
Na2CO3(0.42 g, 4.09 mmol)을 다이옥산/물 혼합물(15 ㎖+3 ㎖) 중의 5-브로모-3-(사이클로펜틸(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드(0.5 g, 1.12 mmol) 및 (6-포르밀피리딘-3-일)보론산(0.39 g, 1.68 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.130 g, 0.112 mmol)을 첨가하고 혼합물을 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.35 g, 66% 수율).
단계 2: 3-(사이클로펜틸(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(6-(모르폴리노메틸)피리딘-3-일)벤즈아미드의 합성
아세트산(2 당량)을 메탄올(10 ㎖) 중의 화합물 3-(사이클로펜틸(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(6-포르밀피리딘-3-일)-2-메틸벤즈아미드(1 당량) 및 모르폴린(5 당량)의 교반된 용액에 첨가하고, 반응물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 시아노보로하이드라이드(2.5 당량)를 0℃에서 첨가하고 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 완결 시, 용매를 감압 하에 제거하고 미정제 물질을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 화합물 및 미정제 물질을 수득하였고, 이 미정제 물질을 분취용 HPLC로 정제하여 TFA 염으로서 표제 화합물을 수득하였다(0.022 g, 22%). LCMS: 544.35 (M+1)+; HPLC 98.42% (@ 254 nm) (Rt; 4.143; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.17 (t, 1H), 8.01 (d, 1H, J=7.6) 7.50 (d, 1H, J=7.6 Hz), 7.42 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.06 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.28 (d, 2H), 3.59-3.61 (m, 8H), 3.35-3.37 (m, 2H), 2.66 (s, 1H), 2.55 (s, 3H), 2.24 (s, 3H), 2.19 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.72 (m, 2H), 1.61 (m, 2H), 1.48 (m, 4H).
실시예 18: 3-(사이클로펜틸(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(1-(2-모르폴리노에틸)-1H-피라졸-4-일)벤즈아미드의 합성
Figure pat00107
1,4-다이옥산(4 ㎖) 중의 5-브로모-3-(사이클로펜틸(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드(1 당량), (1-(2-모르폴리노에틸)-1H-피라졸-4-일)보론산(1.2 당량) 및 Pd(PPh3)4(0.1 당량)의 용액을 아르곤으로 10분 동안 퍼징하였다. 그 다음, 2 M Na2CO3 용액(3.6 당량)을 첨가하고 혼합물을 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 완결 후, 물을 첨가하고 DCM을 사용하여 추출을 수행하였다. 모은 유기층을 물로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조하고 여과하고 감압 하에 농축하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 실리카 겔(60 내지 120 메쉬 크기) 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.08 g, 66%). LCMS: 547.35 (M+1)+; HPLC 97.60% (@ 254 nm) (Rt; 4.071; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.44 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 8.05 (t, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.10 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.26 (d, 2H, J=4 Hz), 4.20 (d, 2H, J=6.4 Hz), 3.49-3.53 (m, 6H), 2.72 (t, 2H), 2.40 (bs, 6H), 2.20 (s, 3H), 2.17 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.61-1.70 (m, 4H), 1.42-1.50 (m, 4H).
실시예 19: 3-(사이클로펜틸(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)벤즈아미드의 합성
Figure pat00108
1,4-다이옥산(4 ㎖) 중의 5-브로모-3-(사이클로펜틸(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드(1 당량), (1-메틸-1H-피라졸-4-일)보론산(1.2 당량) 및 Pd(PPh3)4(0.1 당량)의 용액을 아르곤으로 10분 동안 퍼징하였다. 그 다음, 2 M Na2CO3 용액(3.6 당량)을 첨가하고 혼합물을 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 완결 후, 물을 첨가하고 DCM을 사용하여 추출을 수행하였다. 모은 유기층을 물로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조하고 여과하고 감압 하에 농축하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 실리카 겔(60 내지 120 메쉬 크기) 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.07 g, 70%) LCMS: 448.25 (M+1)+; HPLC 98.34% (@ 254 nm) (Rt; 4.578; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.44 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 8.05 (t, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.26 (d, 2H, J=3.2 Hz), 3.83 (s, 3H), 3.49 (m, 1H), 2.20 (s, 3H), 2.16 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.69 (m, 2H), 1.60 (m, 2H), 1.42-1.49 (m, 4H). [용매 피크에서 합쳐진 3H].
실시예 20: 5-(((1s,4s)-4-아세트아미도사이클로헥실)(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00109
단계 1: 5-브로모-2-메틸-3-니트로벤조산의 합성
1,3-다이브로모-5,5-다이메틸-2,4-이미다졸리딘다이온(43.4 g, 151.8 mmol)을 실온에서 농축 H2SO4(200 ㎖) 중의 2-메틸-3-니트로벤조산(50 g, 276.2 mmol)의 교반된 용액에 나누어 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 빙냉수에 붓고, 발생된 침전물을 여과하고, 잔사를 물로 세척하고 진공 하에 건조하여 다음 단계에서 직접적으로 사용되는 5-브로모-2-메틸-3-니트로벤조산을 수득하였다(71.7 g, 99.9%).
단계 2: 메틸 5-브로모-2-메틸-3-니트로벤조에이트의 합성
탄산나트륨(468 g, 4415 mmol) 및 메틸 요오다이드(626.63 g, 4415 mmol)를 DMF(150 ㎖) 중의 5-브로모-2-메틸-3-니트로벤조산(287 g, 1103 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 발생된 반응 혼합물을 60℃에서 8시간 동안 가열하였다. 완결 시, 침전된 고체를 여과로 수집하고, 잔사를 다이에틸 에테르(5회)로 세척하였다. 모은 유기층을 건조하고 감압 하에 농축하여 다음 단계에서 직접적으로 사용되는 메틸 5-브로모-2-메틸-3-니트로벤조에이트를 수득하였다(302 g, 99%).
단계 3: 메틸 3-아미노-5-브로모-2-메틸벤조에이트의 합성
물(750 ㎖)에 용해된 염화암모늄(150 g, 2777 mmol) 및 철 분말(93.3 g, 1636 mmol)을 교반하면서 에탄올(750 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-2-메틸-3-니트로벤조에이트(150 g, 544 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 발생된 반응 혼합물을 80℃에서 7시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 잔사를 물 및 에틸 아세테이트로 세척하고, 여과액을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 모은 유기층을 건조하고 감압 하에 농축하여 다음 단계에서 직접적으로 사용되는 메틸 3-아미노-5-브로모-2-메틸벤조에이트를 수득하였다.
단계 4: 메틸 5-브로모-3-((4-((tert-부톡시카보닐)-아미노)-사이클로헥실)-아미노)-2-메틸벤조에이트의 합성
아세트산(1.2 g, 20.57 mmol)을 메탄올(50 ㎖) 중의 메틸 3-아미노-5-브로모-2-메틸벤조에이트(5 g, 20.57 mmol) 및 tert-부틸 (4-옥소사이클로헥실)카바메이트(5.6 g, 26.7 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 8시간 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 시아노보로하이드라이드(1.6 g, 26.74 mmol)를 0℃에서 첨가하고 반응물을 밤새 교반하였다. 완결 시, 용매를 감압 하에 제거하고, 미정제 물질을 에틸 아세테이트:헥산으로 2회 용출하는 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 메틸 5-브로모-3-((4-((tert-부톡시카보닐)-아미노)-사이클로헥실)-아미노)-2-메틸벤조에이트(4 g(44%)의 비극성 이성질체(출발 물질로 오염된 시스 이성질체) 및 3 g(33%)의 순수한 극성 이성질체(트랜스 이성질체))를 수득하였다.
단계 5: 메틸 5-브로모-3-((1s,4s)-(4-((tert-부톡시카보닐)-아미노)-사이클로헥실)-(메틸)-아미노)-2-메틸벤조에이트의 합성
탄산세슘(5.9 g, 18.18 mmol) 및 메틸 요오다이드(6.45 g, 45.45 mmol)를 아세토니트릴(50 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-3-((4-((tert-부톡시카보닐)아미노)사이클로헥실)아미노)-2-메틸벤조에이트(4 g, 9.09 mmol)의 시스 이성질체의 교반된 용액에 첨가하였다. 발생된 반응 혼합물을 80℃에서 7시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고 여과하고, 잔사를 에틸 아세테이트로 세척하고, 여과액을 농축한 후 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 4.0 g(44%)의 보다 낮은 극성의 시스 이성질체인 메틸 5-브로모-3-(((1s,4s)-4-((tert-부톡시카보닐)-아미노)-사이클로헥실)-아미노)-2-메틸벤조에이트) 및 3.0 g(33%)의 보다 높은 극성의 트랜스 이성질체인 메틸 5-브로모-3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)-아미노)-사이클로헥실)-아미노)-2-메틸벤조에이트를 수득하였다.
단계 6: tert-부틸 (1s,4s)-(4-((5-브로모-3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-카바모일)-2-메틸페닐)-(메틸)-아미노)-사이클로헥실)카바메이트의 합성
수성 NaOH(0.23 g, 5.72 mmol)를 MeOH(20 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-3-(((1s,4s)-4-((tert-부톡시카보닐)-아미노)-사이클로헥실)-(메틸)-아미노)-2-메틸벤조에이트(1.3 g, 2.86 mmol) 용액에 첨가하고 60℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응의 완결 후, 에탄올을 감압 하에 제거하고 묽은 HCl을 사용하여 pH 6까지 산성화하고 시트르산을 사용하여 pH 4로 조절하였다. 에틸 아세테이트를 사용하여 추출을 수행하였다. 모은 유기층을 건조하고 농축하여 미정제 산을 수득하였다(1.13 g, 90.1%).
그 다음, 상기 산(1.13 g, 2.57 mmol)을 DMSO(10 ㎖)에 용해시키고 3-(아미노메틸)-4,6-다이메틸피리딘-2(1H)-온(0.87 g, 5.72 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반한 후, PyBOP(2.23 g, 4.28 mmol)를 첨가하고 교반을 밤새 계속 수행하였다. 반응의 완결 후, 반응 혼합물을 얼음에 부어 고체를 수득하였고, 이것을 여과하고 아세토니트릴로 세척한 후 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 (1s,4s)-(4-((5-브로모-3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-카바모일)-2-메틸페닐)-(메틸)-아미노)-사이클로헥실)카바메이트를 수득하였다(0.8 g, 48.7%).
단계 7: 3-(((1s,4s)-4-아미노사이클로헥실)-(메틸)-아미노)-5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)-메틸)-2-메틸벤즈아미드의 합성
TFA(5 ㎖)를 0℃에서 DCM(25 ㎖) 중의 tert-부틸 (4-((5-브로모-3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-카바모일)-2-메틸페닐)-(메틸)-아미노)-사이클로헥실)-카바메이트(0.8 g, 1.39 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 건조될 때까지 농축하였다. 잔사를 수성 중탄산나트륨으로 pH 8까지 염기성화하고 수성층을 20% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 황산나트륨 상에서 건조하고 농축하여 3-(((1s,4s)-4-아미노사이클로헥실)-(메틸)-아미노)-5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)-메틸)-2-메틸벤즈아미드를 수득하였다(600 mg, 90.9%).
단계 8: 3-((1s,4s)-(4-아세트아미도사이클로헥실)-(메틸)-아미노)-5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)-메틸)-2-메틸벤즈아미드의 합성
EDCI.HCl(0.168 g, 0.870 mmol), HOBt(0.078 g, 0.58 mmol) 및 아세트산(0.07 g, 1.16 mmol)을 DMF(5 ㎖) 중의 3-((4-아미노사이클로헥실)-(메틸)-아미노)-5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)-메틸)-2-메틸벤즈아미드(0.275, 0.580 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 완결 시, 물을 첨가하고 유기물을 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 건조하고 농축하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 3-(((1s,4s)-4-아세트아미도사이클로헥실)-(메틸)-아미노)-5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)-메틸)-2-메틸벤즈아미드를 수득하였다(0.25 g, 83.6%).
단계 9: 5-(((1s,4s)-4-아세트아미도사이클로헥실)(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Na2CO3(3.6 당량)을 다이옥산/물 혼합물(5 ㎖+1 ㎖) 중의 3-((4-아세트아미도사이클로헥실)-(메틸)-아미노)-5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)-메틸)-2-메틸벤즈아미드(1 당량) 및 4-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질)모르폴린(1.2 당량)의 교반된 용액에 첨가하고 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.1 당량)을 첨가하고 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.06 g, 50.8%). LCMS: 614.40 (M+1)+; HPLC 99.44% (@ 254 nm) (Rt; 3.948; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.17 (t, 1H), 7.76 (d, 1H, J=7.2 Hz), 7.55 (d, 2H, J=7.6 Hz), 7.36 (d, 3H, J=8 Hz), 7.16 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.71 (bs, 1H), 3.57 (m, 4H), 3.47 (s, 2H), 2.98 (m, 1H), 2.59 (s, 3H), 2.36 (m, 4H), 2.26 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.74-1.81 (m, 5H), 1.49-1.56 (m, 3H), 1.40-1.48 (m, 3H).
실시예 21: 5-(((1r,4r)-4-아세트아미도사이클로헥실)(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드를 실시예 20에 기재된 트랜스 이성질체인 메틸 5-브로모-3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)-아미노)-사이클로헥실)-아미노)-2-메틸벤조에이트 중간체로부터 실시예 20과 유사한 방식으로 제조하였다.
Figure pat00110
1258-트랜스의 분석 데이터: LCMS: 614.40 (M+1)+; HPLC 99.64% (@ 254 nm) (Rt; 3.917; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.16 (t, 1H), 7.76 (d, 1H, J=7.6 Hz), 7.57 (d, 2H, J=7.2 Hz), 7.36 (d, 2H, J=7.6 Hz), 7.29 (s, 1H), 7.14 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.28 (d, 2H), 3.57 (bs, 5H), 3.48 (m, 2H), 2.71 (m, 1H), 2.64 (s, 3H), 2.36 (m, 4H), 2.20 (s, 6H), 2.10 (s, 3H), 1.68-1.81 (m, 7H), 1.51-1.53 (m, 2H), 1.10-1.13 (m, 2H).
실시예 22: 3-(((1s,4s)-4-아세트아미도사이클로헥실)(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)벤즈아미드의 합성
Figure pat00111
Na2CO3(3.6 당량)을 다이옥산/물 혼합물(5 ㎖+1 ㎖) 중의 3-(((1s,4s)-4-아세트아미도사이클로헥실)-(메틸)-아미노)-5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)-메틸)-2-메틸벤즈아미드(1 당량) 및 1-메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸(1.2 당량)의 교반된 용액에 첨가하고 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.1 당량)을 첨가하고 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.02 g, 20%). LCMS: 519.40 (M+1)+; HPLC 96.24% (@ 254 nm) (Rt; 4.247; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.44 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 8.07 (t, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.75 (d, 1H, J=7.2 Hz), 7.27 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.27 (d, 2H, J=4.8 Hz), 3.83 (s, 3H), 3.69 (bs, 1H), 2.96 (m, 1H), 2.56 (s, 3H), 2.20 (s, 6H), 2.10 (s, 3H), 1.81 (s, 3H), 1.74-1.76 (m, 2H), 1.54 (m, 2H), 1.36-1.46 (m, 4H).
실시예 23: 3-(((1r,4r)-4-아세트아미도사이클로헥실)(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)벤즈아미드의 합성
Figure pat00112
표제 화합물을 실시예 22와 유사한 방식으로 제조하였다(0.06 g, 40%). LCMS: 519.30 (M+1)+; HPLC 98.21% (@ 254 nm) (Rt; 4.155; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 8.07 (t, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.66 (d, 1H, J=7.2 Hz), 7.23 (s, 1H), 7.07 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.26 (d, 2H, J=2.8 Hz), 3.83 (s, 3H), 3.44 (m, 1H), 2.66-2.69 (m, 1H), 2.61 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.13 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.78-1.80 (m, 2H), 1.74 (s, 3H), 1.67-1.70 (m, 2H), 1.48-1.51 (m, 2H), 1.10-1.13 (m, 2H).
실시예 24: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-3-(메틸(피페리딘-4-일)아미노)-5-(6-(모르폴리노메틸)피리딘-3-일)벤즈아미드의 합성
Figure pat00113
단계 1: tert-부틸 4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-5-(6-포르밀피리딘-3-일)-2-메틸페닐)(메틸)아미노)피페리딘-1-카복실레이트의 합성
1,4-다이옥산(10 ㎖) 중의 tert-부틸 4-((5-브로모-3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸페닐)(메틸)아미노)피페리딘-1-카복실레이트(0.5 g, 0.892 mmol), (6-포르밀피리딘-3-일)보론산(0.31 g, 1.33 mmol) 및 Pd(PPh3)4(0.103 g, 0.082 mmol)을 아르곤으로 10분 동안 퍼징하였다. 그 다음, 2 M Na2CO3 용액(0.34 g, 3.21 mmol)을 첨가하고 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응의 완결 후, 물을 첨가하고 DCM 중의 5% MeOH를 사용하여 추출을 수행하였다. 모은 유기층을 물로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조하고 여과하고 감압 하에 농축하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 실리카 겔(60 내지 120 메쉬 크기) 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-5-(6-포르밀피리딘-3-일)-2-메틸페닐)(메틸)아미노)피페리딘-1-카복실레이트를 수득하였다(0.40 g, 87.9%).
단계 2: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-3-(메틸(피페리딘-4-일)아미노)-5-(6-(모르폴리노메틸)피리딘-3-일)벤즈아미드의 합성
아세트산(1 당량)을 메탄올(0.3 mmol의 경우 5 ㎖) 중의 tert-부틸 4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-5-(6-포르밀피리딘-3-일)-2-메틸페닐)(메틸)아미노)피페리딘-1-카복실레이트(1 당량) 및 모르폴린(5 당량)의 교반된 용액에 첨가하고 반응물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 그 다음, 환원제 NaBH3CN(1 당량)을 첨가하고 반응물을 밤새 교반하였다. 완결 시, 용매를 감압 하에 제거하고 잔사를 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 원하는 tert-부틸 4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸-5-(6-(모르폴리노메틸)피리딘-3-일)페닐)(메틸)아미노)피페리딘-1-카복실레이트를 수득하였다. 그 다음, 이 화합물을 DCM(5 ㎖)에 용해시키고 0℃까지 냉각시켰다. TFA(2 ㎖)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 완결 시, 반응물을 건조될 때까지 농축하였다. 잔사를 용매 세척으로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.1 g, 65.78%). LCMS: 559.35 (M+1)+; HPLC: 95.60% (@ 254 nm) (Rt; 3.906; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.96 (s, 1H), 8.67 (m, 1H), 8.22 (d, 2H, J=8 Hz), 8.17 (t, 1H), 7.61 (d, 1H, J=8 Hz), 7.48 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 5.87 (s, 1H), 4.52 (s, 2H), 4.29 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.84 (bs, 4H), 3.26 (bs, 6H), 3.16 (t, 1H), 2.89-2.91 (m, 2H), 2.64 (s, 3H), 2.26 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.81 (bs, 4H).
실시예 25: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-3-(메틸(피페리딘-4-일)아미노)-5-(1-(2-모르폴리노에틸)-1H-피라졸-4-일)벤즈아미드의 합성
Figure pat00114
Na2CO3(3.6 당량)을 다이옥산/물 혼합물(5 ㎖+1 ㎖) 중의 tert-부틸 4-((5-브로모-3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸페닐)(메틸)아미노)피페리딘-1-카복실레이트(1 당량) 및 4-(2-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸-1-일)에틸)모르폴린(1.2 당량)의 교반된 용액에 첨가하고 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.1 당량)을 첨가하고 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응물을 100℃에서 5시간 동안 가열하였다. 냉각시킨 후, 반응 혼합물을 물로 희석하고 생성물을 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 생성물을 수득한 후, 이 생성물을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸-5-(1-(2-모르폴리노에틸)-1H-피라졸-4-일)페닐)(메틸)아미노)피페리딘-1-카복실레이트를 수득하였다. DCM(5 ㎖) 중의 이 화합물(1 mmol)의 교반된 용액을 0℃까지 냉각시키고 TFA(2 ㎖)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 완결 시, 용액을 건조될 때까지 농축하였다. 잔사를 용매 세척으로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.06 g, 89%). LCMS: 562.40 (M+1)+; HPLC: 99.01% (@ 254 nm) (Rt; 3.838; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 8.23 (m, 1H), 8.05 (t, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 7.16 (s, 1H), 5.87 (s, 1H), 4.53 (t, 2H), 4.27 (d, 2H, J=3.6 Hz), 3.25 (m, 4H), 3.10-3.16 (m, 4H), 2.87 (m, 2H), 2.60 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.18 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.79 (bs, 4H). [용매 피크에서 합쳐진 5H]
실시예 26: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-3-(메틸(피페리딘-4-일)아미노)-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)벤즈아미드의 합성
Figure pat00115
Na2CO3(3.6 당량)을 다이옥산/물 혼합물(5 ㎖+1 ㎖) 중의 tert-부틸 4-((5-브로모-3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸페닐)(메틸)아미노)피페리딘-1-카복실레이트(1 당량) 및 1-메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸(1.2 당량)의 교반된 용액에 첨가하고 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.1 당량)을 첨가하고 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응물을 100℃에서 5시간 동안 가열하였다. 냉각시킨 후, 반응 혼합물을 물로 희석하고 생성물을 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 생성물을 수득한 후, 이 생성물을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)페닐)(메틸)아미노)피페리딘-1-카복실레이트를 수득하였다. DCM(5 ㎖) 중의 이 화합물(1 mmol)의 교반된 용액을 0℃까지 냉각시키고 TFA(2 ㎖)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 완결 시, 용액을 건조될 때까지 농축하였다. 잔사를 용매 세척으로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.07 g, 87%). LCMS: 463.30 (M+1)+; HPLC: 98.02% (@ 254 nm) (Rt; 4.145; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (s, 1H), 8.47 (bs, 1H), 8.12 (s, 2H), 8.05 (s, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.14 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.28 (m, 2H), 3.84 (s, 3H), 3.24-3.27 (m, 2H), 3.11 (bs, 1H), 2.87-2.89 (m, 2H), 2.59 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.18 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.77-1.80 (m, 4H).
실시예 27: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4'-((다이메틸아미노)메틸)-4-메틸-5-(메틸(피페리딘-4-일)아미노)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00116
Na2CO3(3.6 당량)을 다이옥산/물 혼합물(5 ㎖+1 ㎖) 중의 tert-부틸 4-((5-브로모-3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸페닐)(메틸)아미노)피페리딘-1-카복실레이트(1 당량) 및 N,N-다이메틸-1-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)페닐)메탄아민(1.2 당량)의 교반된 용액에 첨가하고 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.1 당량)을 첨가하고 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응물을 100℃에서 5시간 동안 가열하였다. 냉각시킨 후, 반응 혼합물을 물로 희석하고 생성물을 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 생성물을 수득한 후, 이 생성물을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 4-((5-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-4'-((다이메틸아미노)메틸)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-일)(메틸)아미노)피페리딘-1-카복실레이트를 수득하였다. DCM(5 ㎖) 중의 이 화합물(1 mmol)의 교반된 용액을 0℃까지 냉각시키고 TFA(2 ㎖)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 완결 시, 용액을 건조될 때까지 농축하였다. 잔사를 용매 세척으로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.06 g, 90%). LCMS: 516.35 (M+1)+; HPLC: 98.28% (@ 254 nm) (Rt; 3.930; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (s, 1H), 9.82 (bs, 1H), 8.51 (bs, 1H), 8.17 (s, 2H), 7.77 (d, 2H, J=7.2 Hz), 7.55 (d, 2H, J=7.6 Hz), 7.43 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.30 (m, 4H), 3.25 (용매 피크에서 합쳐진 4H), 2.88-2.91 (m, 1H), 2.75 (s, 6H), 2.64 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.81 (m, 4H).
실시예 28: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-3-(메틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-5-(6-(모르폴리노메틸)피리딘-3-일)벤즈아미드의 합성
Figure pat00117
단계 1: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(6-포르밀피리딘-3-일)-2-메틸-3-(메틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)벤즈아미드
Na2CO3(0.32 g, 3.09 mmol)을 다이옥산/물 혼합물(10 ㎖+2 ㎖) 중의 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-3-(메틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)벤즈아미드(0.4 g, 0.86 mmol) 및 (6-포르밀피리딘-3-일)보론산(0.3 g, 1.29 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.092 g,0.086 mmol)을 첨가하고 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 6시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(6-포르밀피리딘-3-일)-2-메틸-3-(메틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)벤즈아미드를 수득하였다(0.28 g, 66%).
단계 2: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-3-(메틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-5-(6-(모르폴리노메틸)피리딘-3-일)벤즈아미드
아세트산(2 당량)을 메탄올(10 ㎖) 중의 N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(6-포르밀피리딘-3-일)-2-메틸-3-(메틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)벤즈아미드(1 당량) 및 모르폴린(5 당량)의 교반된 용액에 첨가하고, 반응물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 시아노보로하이드라이드(2.5 당량)를 0℃에서 첨가하고 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 완결 시, 용매를 감압 하에 제거하고 미정제 물질을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.08 g, 70%). LCMS: 560.30 (M+1)+; HPLC: 99.22% (@ 254 nm) (Rt; 3.944; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.17 (t, 1H), 8.02 (d, 1H, J=7.6 Hz), 7.50 (d, 1H, J=8 Hz), 7.41 (s, 1H), 7.23 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4.8 Hz), 3.85 (d, 2H, J=11.2 Hz), 3.61 (s, 3H), 3.59-3.60 (m, 3H), 3.24-3.29 (m, 2H), 3.02-3.05 (m, 1H), 2.64 (s, 3H), 2.42 (bs, 4H), 2.24 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.61 (bs, 4H).
실시예 29: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(6-(하이드록시메틸)피리딘-3-일)-2-메틸-3-(메틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)벤즈아미드의 합성
Figure pat00118
아세트산(2 당량)을 메탄올(10 ㎖) 중의 N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(6-포르밀피리딘-3-일)-2-메틸-3-(메틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)벤즈아미드(1 당량) 및 다이메틸아민(5 당량)의 교반된 용액에 첨가하고, 반응물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 시아노보로하이드라이드(2.5 당량)를 0℃에서 첨가하고 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 완결 시, 용매를 감압 하에 제거하고 미정제 물질을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다. LCMS: 491.25 (M+1)+; HPLC: 99.58% (@ 254 nm) (Rt; 3.984; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.47 (s, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.19 (t, 1H), 8.05 (d, 1H, J=8.4 Hz), 7.52 (d, 1H, J=8.4 Hz), 7.41 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 5.44 (t, 1H, J=5.6 Hz), 4.59 (d, 2H, J=5.6 Hz), 4.28 (d, 2H, J=4 Hz), 3.85 (d, 2H, J=10.4 Hz), 3.32 (용매 피크에서 합쳐진 2H), 3.03 (m, 1H), 2.64 (s, 3H), 2.24 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.61 (bs, 4H).
실시예 30: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(6-((다이메틸아미노)메틸)피리딘-3-일)-2-메틸-3-(메틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)벤즈아미드의 합성
Figure pat00119
아세트산(2 당량)을 메탄올(10 ㎖) 중의 N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(6-포르밀피리딘-3-일)-2-메틸-3-(메틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)벤즈아미드(1 당량) 및 다이메틸아민(5 당량)의 교반된 용액에 첨가하고, 반응물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 시아노보로하이드라이드(2.5 당량)를 0℃에서 첨가하고 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 완결 시, 용매를 감압 하에 제거하고 미정제 물질을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.03 g, 26%). LCMS: 518.25 (M+1)+; HPLC: 89.16% (@ 254 nm) (Rt; 3.982; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (s, 1H), 8.81 (s, 1H), 8.18 (t, 1H), 8.08 (d, 1H, J=8 Hz), 7.52 (d, 1H, J=8 Hz), 7.43 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4.8 Hz), 3.83-3.86 (m, 4H), 3.32 (용매 피크에서 합쳐진 2H), 3.03 (m, 1H), 2.64 (s, 3H), 2.50 (용매 피크에서 합쳐진 3H), 2.40 (bs, 3H), 2.24 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.60 (bs, 4H).
실시예 31: 3-(사이클로헥실(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(6-(모르폴리노메틸)피리딘-3-일)벤즈아미드의 합성
Figure pat00120
단계 1: 3-(사이클로헥실(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(6-포르밀피리딘-3-일)-2-메틸벤즈아미드의 합성
Na2CO3(0.498 g, 4.5 mmol)을 다이옥산/물 혼합물(8 ㎖+2 ㎖) 중의 브로모 화합물 5-브로모-3-(사이클로헥실(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드(0.6 g, 1.30 mmol) 및 (6-포르밀피리딘-3-일)보론산(0.450 g, 1.95 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.15 g, 0.129 mmol)을 첨가하고 혼합물을 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 3-(사이클로헥실(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(6-포르밀피리딘-3-일)-2-메틸벤즈아미드를 수득하였다(0.525 g, 83%).
단계 2: 3-(사이클로헥실(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(6-(모르폴리노메틸)피리딘-3-일)벤즈아미드의 합성
아세트산(2 당량)을 메탄올(10 ㎖) 중의 화합물 3-(사이클로헥실(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(6-포르밀피리딘-3-일)-2-메틸벤즈아미드(1 당량) 및 모르폴린(5 당량)의 교반된 용액에 첨가하고, 반응물을 실온에서 8시간 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 시아노보로하이드라이드(2.5 당량)를 0℃에서 첨가하고 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 완결 시, 용매를 감압 하에 제거하고 미정제 물질을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 3-(사이클로헥실(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(6-(모르폴리노메틸)피리딘-3-일)벤즈아미드를 수득하였다(0.089 g, 53% 수율). LCMS: 558.35 (M+1)+; HPLC: 96.52% (@ 254 nm) (Rt; 4.375; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (s, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.18 (t, 1H), 8.01 (d, 1H, J=6.8 Hz), 7.49 (d, 1H, J=8 Hz), 7.33 (s, 1H), 7.18 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=3.6 Hz), 3.59-3.61 (m, 6H), 2.75 (m, 1H), 2.65 (s, 3H), 2.43 (bs, 4H), 2.21 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.70 (bs, 4H), 1.53-1.56 (m, 1H), 1.42-1.44 (m, 1H), 1.09-1.23 (m, 4H).
실시예 32: 3-(사이클로헥실(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(6-((다이메틸아미노)메틸)피리딘-3-일)-2-메틸벤즈아미드의 합성
Figure pat00121
아세트산(2 당량)을 메탄올(10 ㎖) 중의 화합물 3-(사이클로헥실(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(6-포르밀피리딘-3-일)-2-메틸벤즈아미드(1 당량) 및 다이메틸아민(5 당량)의 교반된 용액에 첨가하고, 반응물을 실온에서 8시간 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 시아노보로하이드라이드(2.5 당량)를 0℃에서 첨가하고 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 완결 시, 용매를 감압 하에 제거하고 미정제 물질을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.017 g, 11% 수율). LCMS: 516.35 (M+1)+; HPLC: 90.32% (@ 254 nm) (Rt; 4.203; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.78 (s, 1H), 8.18 (t, 1H), 8.05 (d, 1H, J=6 Hz), 7.50 (d, 1H, J=8.4 Hz), 7.34 (s, 1H), 7.20 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4.8 Hz), 3.75 (bs, 2H), 2.75 (m, 1H), 2.65 (s, 3H), 2.34 (bs, 6H), 2.22 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.69-1.71 (m, 4H), 1.54-1.56 (m, 2H), 1.42-1.45 (m, 2H), 1.08-1.23 (m, 2H).
실시예 35: 3-(사이클로펜틸(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(6-((다이메틸아미노)메틸)피리딘-3-일)-2-메틸벤즈아미드의 합성
Figure pat00122
아세트산(2 당량)을 메탄올(10 ㎖) 중의 화합물 3-(사이클로펜틸(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(6-포르밀피리딘-3-일)-2-메틸벤즈아미드(1 당량) 및 다이메틸아민(5 당량)의 교반된 용액에 첨가하고, 반응물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 시아노보로하이드라이드(2.5 당량)를 0℃에서 첨가하고 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 완결 시, 용매를 감압 하에 제거하고 미정제 물질을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 화합물 및 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 분취용 HPLC로 정제하여 TFA 염으로서 표제 화합물을 수득하였다(0.12 g, 57%). LCMS: 502.30 (M+1)+; HPLC: 99.07% (@ 254 nm) (Rt; 4.059; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.50 (s, 1H), 10.04 (bs, 1H), 8.96 (s, 1H), 8.22 (m, 2H), 7.57-7.61 (m, 1H), 7.35 (s, 1H), 5.87 (s, 1H), 4.49 (s, 2H), 4.28 (d, 2H, J=2 Hz), 3.65 (bs, 1H), 2.83 (s, 6H), 2.65 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.73 (bs, 2H), 1.63 (bs, 2H), 1.50 (m, 4H).
실시예 36: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4'-((다이메틸아미노)메틸)-4-메틸-5-(메틸(피페리딘-4-일)아미노)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00123
단계 1: 메틸 5-브로모-3-(사이클로펜틸아미노)-2-메틸벤조에이트의 합성
아세트산(2.46 g, 41.1 mmol)을 메탄올(30 ㎖) 중의 메틸 3-아미노-5-브로모-2-메틸벤조에이트(5 g, 20.57 mmol) 및 사이클로펜타논(8.64 g, 102.8 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고, 반응물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 시아노보로하이드라이드(3.23 g, 51.4 mmol)를 첨가하고 반응물을 밤새 교반하였다. 완결 시, 용매를 감압 하에 제거하고 미정제 물질을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 메틸 5-브로모-3-(사이클로펜틸아미노)-2-메틸벤조에이트를 수득하였다(4 g, 78.2%).
단계 2: 메틸 5-브로모-3-(사이클로펜틸(에틸)아미노)-2-메틸벤조에이트의 합성
탄산세슘(4.18 g, 12.8 mmol) 및 에틸 요오다이드(5.01 g, 32.15 mmol)를 DMF(15 ㎖) 중의 5-브로모-3-(사이클로펜틸아미노)-2-메틸벤조에이트(2 g, 6.43 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고, 발생된 반응 혼합물을 80℃에서 18시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고 여과하고 잔사를 에틸 아세테이트로 세척하고, 여과액을 농축하여 원하는 미정제 화합물을 수득하였고, 이 화합물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 메틸 5-브로모-3-(사이클로펜틸(에틸)아미노)-2-메틸벤조에이트를 수득하였다(0.7 g, 32.1%).
단계 3: 5-브로모-3-(사이클로펜틸(에틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드의 합성
수성 NaOH(0.126 g, 3.09 mmol)를 에탄올(5 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-3-(사이클로펜틸(에틸)아미노)-2-메틸벤조에이트(0.7 g, 2.06 mmol) 용액에 첨가하고 60℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응의 완결 후, 에탄올을 감압 하에 제거하고 묽은 HCl을 사용하여 수성층을 pH 6까지 산성화하고 시트르산을 사용하여 pH 4까지 산성화하였다. 생성물을 에틸 아세테이트를 사용하여 추출하였다. 모은 유기층을 건조하고 농축하여 미정제 산을 수득하였다(0.5 g, 75%). 그 다음, 상기 산(0.5 g, 1.53 mmol)을 DMSO(5 ㎖)에 용해시키고 3-(아미노메틸)-4,6-다이메틸피리딘-2(1H)-온(0.467 g, 3.07 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반한 후, PyBOP(1.19 g, 2.30 mmol)를 첨가하고 교반을 밤새 계속 수행하였다. 반응의 완결 후, 반응 혼합물을 얼음에 붓고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 건조하고 농축한 후, 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 5-브로모-3-(사이클로펜틸(에틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드를 수득하였다(0.3 g, 42%).
단계 4: 5-(사이클로펜틸(에틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Na2CO3(0.249 g, 2.35 mmol)을 다이옥산/물 혼합물(5 ㎖+1 ㎖) 중의 5-브로모-3-(사이클로펜틸(에틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드(0.3 g, 0.653 mmol) 및 (4-(모르폴리노메틸)페닐)보론산(0.216 g, 0.98 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.075 g, 0.065 mmol)을 첨가하고 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 3시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.15 g, 41%). LCMS: 557.35 (M+1)+; HPLC: 99.13% (@ 254 nm) (Rt; 4.128; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.44 (s, 1H), 8.17 (t, 1H), 7.57 (d, 2H, J=8 Hz), 7.41 (s, 1H), 7.37 (d, 2H, J=8 Hz), 7.20 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4.8 Hz), 3.56-3.57 (m, 4H), 3.48 (s, 3H), 3.00-3.02 (m, 2H), 2.36 (m, 4H), 2.24 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.69-1.70 (m, 2H), 1.60 (m, 2H), 1.47-1.48 (m, 4H), 0.81 (t, 3H, J=6.4 Hz).
실시예 37: 3-(((1r,4r)-4-아세트아미도사이클로헥실)(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(1-(2-모르폴리노에틸)-1H-피라졸-4-일)벤즈아미드의 합성
Figure pat00124
Na2CO3(3.6 당량)을 다이옥산/물 혼합물(5 ㎖+1 ㎖) 중의 3-(((1r,4r)-4-아세트아미도사이클로헥실)-(메틸)-아미노)-5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)-메틸)-2-메틸벤즈아미드(1 당량) 및 4-(2-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸-1-일)에틸)모르폴린(1.2 당량)의 교반된 용액에 첨가하고 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.1 당량)을 첨가하고 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.050 g, 28%). LCMS: 618.35 (M+1)+; HPLC: 95.34% (@ 254 nm) (Rt; 3.760; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.47 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 8.09 (t, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.67 (d, 1H, J=7.2 Hz), 7.23 (s, 1H), 7.08 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.26 (d, 2H, J=3.2 Hz), 4.21 (t, 2H, J=6 Hz), 3.44-3.53 (m, 5H), 2.72 (t, 3H, J=5.6 Hz), 2.61 (s, 3H), 2.40 (m, 4H), 2.20 (s, 3H), 2.13 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.67-1.88 (m, 7H), 1.46-1.55 (m, 2H), 1.07-1.15 (m, 2H).
실시예 38: 3-(((1s,4s)-4-아세트아미도사이클로헥실)(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(1-(2-모르폴리노에틸)-1H-피라졸-4-일)벤즈아미드의 합성
Figure pat00125
표제 화합물을 화합물 37과 유사한 방식으로 제조하였다(0.020 g, 11%). LCMS: 618.35 (M+1)+; HPLC: 99.00% (@ 254 nm) (Rt; 3.732; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 8.09 (t, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.77 (d, 1H, J=7.2 Hz), 7.28 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.45 (bs, 1H), 4.27 (d, 2H, J=4 Hz), 4.22 (s, 2H), 3.70 (bs, 1H), 3.54 (m, 4H), 2.97 (m, 1H), 2.67-2.72 (m, 2H), 2.56 (s, 3H), 2.42 (m, 3H), 2.20 (s, 6H), 2.10 (s, 3H), 1.74-1.81 (m, 5H), 1.55 (m, 2H), 1.39-1.41 (m, 4H).
실시예 39: 5-(((1r,4r)-4-아세트아미도사이클로헥실)(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4'-((다이메틸아미노)메틸)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00126
Na2CO3(3.6 당량)을 다이옥산/물 혼합물(5 ㎖+1 ㎖) 중의 3-(((1r,4r)-4-아세트아미도사이클로헥실)-(메틸)-아미노)-5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)-메틸)-2-메틸벤즈아미드(1 당량) 및 N,N-다이메틸-1-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)페닐)메탄아민(1.2 당량)의 교반된 용액에 첨가하고 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.1 당량)을 첨가하고 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.05 g, 30%). LCMS: 572.35 (M+1)+; HPLC: 96.88% (@ 254 nm) (Rt; 3.900; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (s, 1H), 8.18 (t, 1H), 7.67 (d, 1H, J=6.8 Hz), 7.57 (d, 2H, J=7.6 Hz), 7.34 (d, 2H, J=7.6 Hz), 7.30 (s, 1H), 7.14 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.27 (d, 2H, J=3.6 Hz), 3.39 (m, 3H), 2.72 (m, 1H), 2.64 (s, 3H), 2.20 (s, 6H), 2.15 (s, 6H), 2.10 (s, 3H), 1.78-1.81 (m, 2H), 1.74 (s, 3H), 1.68 (m, 2H), 1.51-1.56 (m, 2H), 1.08-1.23 (m, 2H).
실시예 40: 5-(((1s,4s)-4-아세트아미도사이클로헥실)(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4'-((다이메틸아미노)메틸)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00127
표제 화합물을 실시예 39와 유사한 방식으로 제조하였다(0.06 g, 36%). LCMS: 572.35 (M+1)+; HPLC: 94.79% (@ 254 nm) (Rt; 3.936; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.47 (s, 1H), 8.19 (t, 1H), 7.78 (d, 1H, J=7.2 Hz), 7.56 (d, 2H, J=8 Hz), 7.33-7.35 (m, 3H), 7.17 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=3.6 Hz), 3.70 (bs, 1H), 3.37-3.40 (m, 2H), 2.98 (m, 1H), 2.59 (s, 3H), 2.26 (s, 3H), 2.20 (m, 3H), 2.15 (s, 6H), 2.10 (s, 3H), 1.81 (s, 3H), 1.74 (m, 2H), 1.55 (m, 2H), 1.40-1.48 (m, 4H).
실시예 41: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(6-((다이메틸아미노)메틸)피리딘-3-일)-2-메틸-3-(메틸(피페리딘-4-일)아미노)벤즈아미드의 합성
Figure pat00128
아세트산(1 당량)을 메탄올(0.3 mmol의 경우 5 ㎖) 중의 tert-부틸 4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-5-(6-포르밀피리딘-3-일)-2-메틸페닐)(메틸)아미노)피페리딘-1-카복실레이트(1 당량) 및 모르폴린(5 당량)의 교반된 용액에 첨가하고 반응물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 그 다음, 환원제 NaBH3CN(1 당량)을 첨가하고 반응물을 밤새 교반하였다. 완결 시, 용매를 감압 하에 제거하고 잔사를 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 원하는 tert-부틸 4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-5-(6-((다이메틸아미노)메틸)피리딘-3-일)-2-메틸페닐)(메틸)아미노)피페리딘-1-카복실레이트를 수득하였다. 그 다음, 이 화합물을 DCM(5 ㎖)에 용해시키고 0℃까지 냉각시켰다. TFA(2 ㎖)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 완결 시, 반응물을 건조될 때까지 농축하였다. 잔사를 용매 세척으로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.06 g, 40%). LCMS: 517.25 (M+1)+; HPLC: 99.07% (@ 254 nm) (Rt; 3.913; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.48 (s, 1H), 10.08 (bs, 1H), 8.97 (s, 1H), 8.57 (bs, 1H), 8.23 (d, 2H, J=7.6 Hz), 8.18 (s, 1H), 7.60 (d, 1H, J=8 Hz), 7.50 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 5.87 (s, 1H), 4.49 (d, 2H), 4.30 (s, 2H), 3.25 (d, 2H), 3.16 (s, 1H), 2.89 (m, 2H), 2.83 (s, 6H), 2.64 (s, 3H), 2.26 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.81 (bs, 4H).
실시예 42: 5-(((1s,4s)-4-아미노사이클로헥실)(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00129
단계 1: 메틸 5-브로모-3-(((1s,4s)-4-((tert-부톡시카보닐)아미노)사이클로헥실)(메틸)-아미노)-2-메틸벤조에이트의 합성
탄산세슘(5.9 g, 18.18 mmol) 및 메틸 요오다이드(6.45 g, 45.45 mmol)를 아세토니트릴(50 ㎖) 중의 보다 낮은 극성의 시스 이성질체 메틸 5-브로모-3-(((1s,4s)-4-((tert-부톡시카보닐)아미노)사이클로헥실)아미노)-2-메틸벤조에이트(4 g, 9.09 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 발생된 반응 혼합물을 80℃에서 7시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고 여과하고, 수집된 고체를 에틸 아세테이트로 세척하였다. 여과액을 농축하여 원하는 생성물을 수득한 후, 이 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 메틸 5-브로모-3-(((1s,4s)-4-((tert-부톡시카보닐)아미노)사이클로헥실)(메틸)-아미노)-2-메틸벤조에이트를 수득하였다(1.4 g, 34.14%).
단계 2: tert-부틸 ((1s,4s)-4-((5-브로모-3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸페닐)(메틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트의 합성
수성 NaOH(0.23 g, 5.72 mmol)를 MeOH(20 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-3-(((1s,4s)-4-((tert-부톡시카보닐)아미노)사이클로헥실)(메틸)-아미노)-2-메틸벤조에이트(1.3 g, 2.86 mmol) 용액에 첨가하고 60℃에서 1시간 동안 교반하였다. 에탄올을 감압 하에 제거하고 묽은 HCl을 사용하여 혼합물을 산성화하고 시트르산을 사용하여 pH 4까지 산성화하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 모은 유기 추출물을 건조하고 농축하여 각각의 산을 수득하였다(1.13 g, 90.1%).
그 다음, 상기 산(1.13 g, 2.57 mmol)을 DMSO(10 ㎖)에 용해시키고 3-(아미노메틸)-4,6-다이메틸피리딘-2(1H)-온(0.87 g, 5.72 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반한 후, PyBOP(2.23 g, 4.28 mmol)를 첨가하였다. 그 다음, 교반을 밤새 계속 수행하였다. 반응 혼합물을 빙수에 부었다. 발생된 침전물을 여과하고 아세토니트릴로 세척하고 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 ((1s,4s)-4-((5-브로모-3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸페닐)(메틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트를 수득하였다(0.8 g, 48.7%).
단계 3: tert-부틸 ((1s,4s)-4-((5-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-카바모일)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-일)(메틸)아미노)-사이클로헥실)카바메이트의 합성
Na2CO3(3.6 당량)을 다이옥산/물 혼합물(5 ㎖+1 ㎖) 중의 tert-부틸 ((1s,4s)-4-((5-브로모-3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸페닐)(메틸)아미노)사이클로헥실)-카바메이트(1 당량) 및 4-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질)모르폴린(1.2 당량)의 교반된 용액에 첨가하였다. 그 다음, 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. Pd(PPh3)4(0.1 당량)을 첨가하고 반응 혼합물을 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 추출물을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 생성물을 수득한 후, 이 생성물을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 ((1s,4s)-4-((5-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-카바모일)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-일)(메틸)아미노)-사이클로헥실)카바메이트를 수득하였다(0.08 g, 45.71%).
단계 4: 5-(((1s,4s)-4-아미노사이클로헥실)(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
DCM(5 ㎖) 중의 tert-부틸 ((1s,4s)-4-((5-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-카바모일)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-일)(메틸)아미노)-사이클로헥실)카바메이트(0.08 g)의 교반된 용액을 0℃까지 냉각시키고 TFA(2 ㎖)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 건조될 때까지 농축하여 TFA 염으로서 표제 화합물을 수득하였다(0.06 g, 88.2%). LCMS: 572.40 (M+1)+; HPLC: 95.39% (@ 254 nm) (Rt; 3.719; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 10.05 (bs, 1H), 8.19 (t, 1H), 7.74-7.78 (m, 4H), 7.56 (d, 2H, J=6.8 Hz), 7.46 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 5.87 (s, 1H), 4.38 (bs, 2H), 4.29 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.95 (m, 2H), 3.60-3.63 (m, 2H), 3.27-3.30 (m, 2H), 3.13-3.19 (m, 4H), 2.54 (s, 3H), 2.30 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.86 (m, 2H), 1.59-1.64 (m, 4H), 1.49-1.51 (m, 2H).
실시예 43: 5-(((1r,4r)-4-아세트아미도사이클로헥실)(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00130
단계 1: 5-브로모-2-메틸-3-니트로벤조산의 합성
1,3-다이브로모-5,5-다이메틸-2,4-이미다졸리딘다이온(43.4 g, 151.8 mmol)을 실온에서 농축 H2SO4(200 ㎖) 중의 2-메틸-3-니트로벤조산(50 g, 276.2 mmol)의 교반된 용액에 나누어 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 빙냉수에 붓고, 침전된 고체를 여과하고 물로 세척하고 진공 하에 건조하여 추가 반응에서 그 자체로 사용되는 원하는 화합물인 5-브로모-2-메틸-3-니트로벤조산을 수득하였다(71.7 g, 99.9%).
단계 2: 메틸 5-브로모-2-메틸-3-니트로벤조에이트의 합성
탄산나트륨(468 g, 4415 mmol) 및 메틸 요오다이드(626.63 g, 4415 mmol)를 DMF(150 ㎖) 중의 5-브로모-2-메틸-3-니트로벤조산(287 g, 1103 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 그 다음, 반응 혼합물을 60℃에서 8시간 동안 가열하였다. 침전된 고체를 여과하고 다이에틸 에테르(5회)로 세척하였다. 모은 유기 여과액을 건조하고 감압 하에 농축하여 추가 반응에서 그 자체로 사용되는 원하는 화합물인 메틸 5-브로모-2-메틸-3-니트로벤조에이트를 수득하였다(302 g, 99%).
단계 3: 메틸 3-아미노-5-브로모-2-메틸벤조에이트의 합성
물(750 ㎖)에 용해된 염화암모늄(150 g, 2777 mmol) 및 철 분말(93.3 g, 1636 mmol)을 교반 하에 에탄올(750 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-2-메틸-3-니트로벤조에이트(150 g, 544 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 발생된 반응 혼합물을 80℃에서 7시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고 수집된 고체를 물 및 에틸 아세테이트로 세척하였다. 여과액을 에틸 아세테이트로 추출하고, 추출물을 건조하고 감압 하에 농축하여 추가 반응에서 그 자체로 사용되는 원하는 화합물인 메틸 3-아미노-5-브로모-2-메틸벤조에이트를 수득하였다.
단계 4: 메틸 5-브로모-3-((4-((tert-부톡시카보닐)아미노)사이클로헥실)아미노)-2-메틸-벤조에이트의 합성
아세트산(1.2 g, 20.57 mmol)을 메탄올(50 ㎖) 중의 메틸 3-아미노-5-브로모-2-메틸벤조에이트(5.0 g, 20.6 mmol) 및 tert-부틸 (4-옥소사이클로헥실)카바메이트(5.6 g, 26.7 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 8시간 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 시아노보로하이드라이드(1.6 g, 26.74 mmol)를 0℃에서 첨가하고 반응물을 밤새 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고 미정제 물질을 에틸 아세테이트/헥산으로 (2회) 용출하는 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 4 g(44%)의 보다 낮은 극성의 시스 이성질체 메틸 5-브로모-3-(((1s,4s)-4-((tert-부톡시카보닐)아미노)사이클로헥실)아미노)-2-메틸벤조에이트(약간의 출발 물질로 오염됨) 및 3 g(33%)의 보다 높은 극성의 순수한 트랜스 이성질체 메틸 5-브로모-3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)아미노)사이클로헥실)아미노)-2-메틸벤조에이트를 수득하였다.
단계 5: 메틸 5-브로모-3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)아미노)사이클로헥실)(메틸)-아미노)-2-메틸벤조에이트의 합성
탄산세슘(4.4 g, 13.62 mmol) 및 메틸 요오다이드(4.83 g, 34.05 mmol)를 아세토니트릴(40 ㎖) 중의 보다 높은 극성의 트랜스 이성질체 메틸 5-브로모-3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)아미노)사이클로헥실)아미노)-2-메틸벤조에이트(3 g, 6.81 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 발생된 반응 혼합물을 80℃에서 7시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고 여과하고 고체를 에틸 아세테이트로 세척하였다. 여과액을 농축하여 원하는 미정제 화합물을 수득한 후, 이 화합물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 메틸 5-브로모-3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)아미노)사이클로헥실)(메틸)아미노)-2-메틸벤조에이트를 수득하였다(1.3 g, 43.33%).
단계 6: tert-부틸 ((1r,4r)-4-((5-브로모-3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸페닐)(메틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트의 합성
수성 NaOH(0.23 g, 5.72 mmol)를 MeOH(20 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)아미노)사이클로헥실)(메틸)아미노)-2-메틸벤조에이트(1.3 g, 2.86 mmol) 용액에 첨가하고 60℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응의 완결 후, 메탄올을 감압 하에 제거하고 묽은 HCl을 사용하여 잔사를 pH 6까지 산성화하고 시트르산을 사용하여 pH 4까지 산성화하였다. 산성화된 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 모은 유기 추출물을 건조하고 농축하여 각각의 산을 수득하였다(1 g, 83%).
상기 산(1 g, 2.27 mmol)을 DMSO(5 ㎖)에 용해시키고 3-(아미노메틸)-4,6-다이메틸피리딘-2(1H)-온(0.65 g, 4.54 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반한 후, PyBOP(1.7 g, 3.4 mmol)를 첨가하였다. 교반을 밤새 계속 수행하였다. 반응 혼합물을 빙수에 부었다. 발생된 침전물을 여과하고 아세토니트릴로 세척하고 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 화합물 tert-부틸 ((1r,4r)-4-((5-브로모-3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸페닐)(메틸)아미노)-사이클로헥실)카바메이트를 수득하였다(0.7 g, 53.8%).
단계 7: tert-부틸 ((1r,4r)-4-((5-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-카바모일)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-일)(메틸)아미노)-사이클로헥실)카바메이트의 합성
Na2CO3(3.6 당량)을 다이옥산/물 혼합물(5 ㎖+1 ㎖) 중의 tert-부틸 ((1r,4r)-4-((5-브로모-3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸페닐)(메틸)아미노)-사이클로헥실)카바메이트(1 당량) 및 4-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질)모르폴린(1.2 당량)의 교반된 용액에 첨가하고 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.1 당량)을 첨가하고 반응 플라스크를 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기 추출물을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 생성물을 수득한 후, 이 생성물을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 ((1r,4r)-4-((5-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-일)(메틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트를 수득하였다(0.07 g, 40%)
단계 8: 5-(((1r,4r)-4-아미노사이클로헥실)(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
DCM(5 ㎖) 중의 tert-부틸 ((1r,4r)-4-((5-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-일)(메틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트(0.07 g)의 교반된 용액을 0℃까지 냉각시키고 TFA(2 ㎖)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 건조될 때까지 농축하여 TFA 염으로서 표제 화합물을 수득하였다(0.05 g, 84.74%). LCMS: 572.60 (M+1)+; HPLC: 88.92% (@ 254 nm) (Rt; 3.546; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 10.05 (bs, 1H), 8.16 (t, 1H), 7.74-7.76 (m, 4H), 7.56 (d, 2H, J=7.6 Hz), 7.34 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.38 (bs, 2H), 4.28 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.95 (m, 2H), 3.63 (m, 2H), 3.27 (m, 1H), 3.12 (m, 2H), 2.97 (m, 2H), 2.74 (t, 1H), 2.66 (s, 3H), 2.20 (s, 6H), 2.10 (s, 3H), 1.93-1.95 (m, 2H), 1.74-1.77 (m, 2H), 1.54-1.57 (m, 2H), 1.28-1.31 (m, 2H).
실시예 44: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00131
단계 1: 5-브로모-2-메틸-3-니트로벤조산의 합성
Figure pat00132
1,3-다이브로모-5,5-다이메틸-2,4-이미다졸리딘다이온(88 g, 308 mmol)을 실온에서 농축 H2SO4(400 ㎖) 중의 2-메틸-3-니트로벤조산(100 g, 552 mmol)의 교반된 용액에 나누어 첨가한 후, 반응 혼합물을 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 빙냉수에 붓고, 침전된 고체를 여과하고 물로 세척하고 진공 하에 건조하여 고체로서 원하는 화합물을 수득하였다(140 g, 98%). 단리된 화합물을 다음 단계에서 직접적으로 사용하였다. 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 8.31 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 2.43 (s, 3H).
단계 2: 메틸 5-브로모-2-메틸-3-니트로벤조에이트의 합성
Figure pat00133
탄산나트륨(468 g, 4415 mmol)을 실온에서 DMF(2.8 ℓ) 중의 5-브로모-2-메틸-3-니트로벤조산(285 g, 1105 mmol)의 교반된 용액에 첨가한 후 메틸 요오다이드(626.6 g, 4415 mmol)를 첨가하였다. 발생된 반응 혼합물을 60℃에서 8시간 동안 가열하였다. (TLC에 의해 모니터링된) 완결 후, (탄산나트륨을 제거하기 위해) 반응 혼합물을 여과하고 에틸 아세테이트(1 ℓ x 3)로 세척하였다. 모은 여과액을 물(3 ℓ x 5)로 세척하고, 수성층을 에틸 아세테이트(1 ℓ x 3)로 다시 추출하였다. 모은 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 여과하고 감압 하에 농축하여 고체로서 표제 화합물을 수득하였다(290 g, 97% 수율). 단리된 화합물을 다음 단계에서 직접적으로 사용하였다. 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 8.17 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 3.96 (s, 3H), 2.59 (s, 3H).
단계 3: 메틸 3-아미노-5-브로모-2-메틸벤조에이트의 합성
Figure pat00134
염화암모늄(1.5 ℓ 물에 용해된 283 g, 5290 mmol)을 에탄올(1.5 ℓ) 중의 메틸 5-브로모-2-메틸-3-니트로벤조에이트(290 g, 1058 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 발생된 혼합물을 80℃에서 교반하고, 철 분말(472 g, 8451 mmol)을 나누어 첨가하였다. 발생된 반응 혼합물을 80℃에서 12시간 동안 가열하였다. TLC에 의해 확인된 완결 시, 반응 혼합물을 셀라이트® 상에서 고온 여과하고, 셀라이트 층을 메탄올(5 ℓ)로 세척한 후 DCM 중의 30% MeOH(5 ℓ)로 세척하였다. 모은 여과액을 진공 중에서 농축하고, 수득된 잔사를 중탄산나트륨 수용액(2 ℓ)으로 희석하고 에틸 아세테이트(5 ℓ x 3)로 추출하였다. 모은 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 여과하고 감압 하에 농축하여 고체로서 표제 화합물을 수득하였다(220 g, 85%). 상기 화합물을 다음 단계에서 직접적으로 사용하였다. 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 7.37 (s, 1H), 6.92 (s, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.80 (bs, 2H), 2.31 (s, 3H).
단계 4: 메틸 5-브로모-2-메틸-3-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)벤조에이트의 합성
Figure pat00135
아세트산(22 g, 369 mmol)을 다이클로로에탄(300 ㎖) 중의 메틸 3-아미노-5-브로모-2-메틸벤조에이트(15 g, 61.5 mmol) 및 다이하이드로-2H-피란-4(3)-온(9.2 g, 92 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 반응 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 0℃까지 냉각시키고 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(39 g, 184 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. TLC에 의해 확인된 반응의 완결 시, pH 7 내지 8이 수득될 때까지 중탄산나트륨 수용액을 반응 혼합물에 첨가하였다. 유기층을 분리하고 수성층을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 모은 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 여과하고 감압 하에 농축하였다. 미정제 화합물을 에틸 아세테이트:헥산으로 용출하는 컬럼 크로마토그래피(100 내지 200 메쉬 실리카 겔)로 정제하여 고체로서 원하는 화합물을 수득하였다(14 g, 69%). 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 7.01 (s, 1H), 6.98 (s, 1H), 5.00 (d, 1H, J=7.6 Hz), 3.84-3.87 (m, 2H), 3.79 (s, 3H), 3.54-3.56 (m, 1H), 3.43 (t, 2H, J=12 Hz), 2.14 (s, 3H), 1.81-1.84 (m, 2H), 1.47-1.55 (m, 2H).
단계 5: 메틸 5-브로모-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤조에이트의 합성
Figure pat00136
아세트알데하이드(3.75 g, 85.2 mmol) 및 아세트산(15.3 g, 256 mmol)을 다이클로로에탄(150 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-2-메틸-3-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)벤조에이트(14 g, 42.7 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 발생된 반응 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반하였다. 혼합물을 0℃까지 냉각시키고 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(27 g, 128 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. TLC에 의해 확인된 반응의 완결 시, pH 7 내지 8이 수득될 때까지 중탄산나트륨 수용액을 반응 혼합물에 첨가하고, 유기층을 분리하고 수성층을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 모은 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 여과하고 감압 하에 농축하였다. 미정제 화합물을 에틸 아세테이트:헥산으로 용출하는 컬럼 크로마토그래피(100 내지 200 메쉬 실리카 겔)로 정제하여 점성 액체로서 원하는 화합물을 수득하였다(14 g, 93%). 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 7.62 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 3.80 (bs, 5H), 3.31 (t, 2H), 2.97-3.05 (m, 2H), 2.87-2.96 (m, 1H), 2.38 (s, 3H), 1.52-1.61 (m, 2H), 1.37-1.50 (m, 2H), 0.87 (t, 3H, J=6.8 Hz).
단계 6: 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드의 합성
Figure pat00137
수성 NaOH(2.36 g, 25 ㎖ 물 중의 59.2 mmol)를 에탄올(100 ㎖) 중의 5-브로모-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤조에이트(14 g, 39.4 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 발생된 혼합물을 60℃에서 1시간 동안 교반하였다. TLC에 의해 확인된 반응의 완결 시, 용매를 감압 하에 제거하고 수득된 잔사를 pH 7이 수득될 때까지 1 N HCl로 산성화한 후, pH 5 내지 6이 수득될 때까지 시트르산 수용액을 첨가하였다. 수성층을 DCM 중의 10% MeOH(200 ㎖ x 3)로 추출하고, 모은 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 여과하고 감압 하에 농축하여 각각의 산을 수득하였다(14 g, 100%).
그 다음, 상기 산(14 g, 40.9 mmol)을 DMSO(70 ㎖)에 용해시키고 3-(아미노메틸)-4,6-다이메틸피리딘-2(1H)-온(12.4 g, 81.9 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반한 후, PyBOP(31.9 g, 61.4 mmol)를 첨가하고 교반을 실온에서 밤새 계속 수행하였다. TLC에 의해 확인된 반응의 완결 시, 반응 혼합물을 빙냉수(700 ㎖)에 붓고 30분 동안 교반하고 침전된 고체를 여과로 수집하고 물(500 ㎖)로 세척하고 공기 건조하였다. 수득된 고체를 아세토니트릴(75 ㎖ x 2)과 함께 교반하고 여과하고 공기 건조하였다. 수득된 고체를 DCM(100 ㎖) 중의 5% MeOH(100 ㎖)와 함께 다시 교반하고 여과하고 진공 하에 완전히 건조하여 고체로서 표제 화합물을 수득하였다(14 g, 74%). 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.47 (s, 1H), 8.23 (t, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.08 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.23 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.81 (d, 2H, J=10.4 Hz), 3.20-3.26 (m, 2H), 3.00-3.07 (m, 1H), 2.91-2.96 (m, 2H), 2.18 (s, 3H), 2.14 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.58-1.60 (m, 2H), 1.45-1.50 (m, 2H), 0.78 (t, 3H, J=6.8 Hz).
단계 7: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00138
4-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질)모르폴린(13.4 g, 44.2 mmol)을 다이옥산/물 혼합물(70 ㎖/14 ㎖) 중의 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드(14 g, 29.5 mmol)의 교반된 용액에 첨가한 후 Na2CO3(11.2 g, 106.1 mmol)을 첨가하였다. 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징한 후, Pd(PPh3)4(3.40 g, 2.94 mmol)을 첨가하고 용액을 아르곤으로 추가 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. (TLC에 의해 모니터링된) 완결 후, 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 여과하고 감압 하에 농축하였다. 미정제 화합물을 메탄올:DCM으로 용출하는 컬럼 크로마토그래피(100 내지 200 메쉬 실리카 겔)로 정제하여 고체로서 표제 화합물을 수득하였다(12 g, 71%). 분석 데이터: LCMS: 573.35 (M+1)+; HPLC: 99.5% (@ 254 nm) (Rt; 3.999; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (s, 1H), 8.19 (t, 1H), 7.57 (d, 2H, J=7.2 Hz), 7.36-7.39 (m, 3H), 7.21 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=2.8 Hz), 3.82 (d, 2H, J=9.6 Hz), 3.57 (bs, 4H), 3.48 (s, 2H), 3.24 (t, 2H, J=10.8 Hz), 3.07-3.09 (m, 2H), 3.01 (m, 1H), 2.36 (m, 4H), 2.24 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.64-1.67 (m, 2H), 1.51-1.53 (m, 2H), 0.83 (t, 3H, J=6.4 Hz).
단계 8: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드 트라이하이드로클로라이드의 합성
Figure pat00139
N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드(12 g, 21.0 mmol)를 메탄올성 HCl(200 ㎖)에 용해시키고 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 3시간의 교반 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축하였다. 수득된 고체를 에테르(100 ㎖ x 2)와 함께 교반하여 고체로서 원하는 염을 수득하였다(11 g, 77%). 트라이-HCl 염의 분석 데이터: LCMS: 573.40 (M+1)+; HPLC: 99.1% (@ 254 nm) (Rt; 3.961; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (D2O 400 MHz) δ 7.92 (bs, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.77 (d, 2H, J=8 Hz), 7.63 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 6.30 (s, 1H), 4.48 (s, 2H), 4.42 (s, 2H), 4.09-4.11 (m, 4H), 3.95-3.97 (m, 2H), 3.77 (t, 3H, J=10.4 Hz), 3.44-3.47 (m, 3H), 3.24-3.32 (m, 3H), 2.42 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 2.26 (s, 3H), 2.01 (m, 2H), 1.76 (m, 2H), 1.04 (t, 3H, J=6.8 Hz).
실시예 45: 3-(((1r,4r)-4-아미노사이클로헥실)(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)벤즈아미드의 합성
Figure pat00140
단계 1: tert-부틸 ((1r,4r)-4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)페닐)(메틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트의 합성
Na2CO3(3.6 당량)을 다이옥산/물 혼합물(5 ㎖+1 ㎖) 중의 tert-부틸 ((1r,4r)-4-((5-브로모-3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸페닐)(메틸)아미노)-사이클로헥실)카바메이트(1 당량) 및 1-메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸(1.2 당량)의 교반된 용액에 첨가하고 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.1 당량)을 첨가하고 반응 플라스크를 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기 추출물을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 생성물을 수득한 후, 이 생성물을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 ((1r,4r)-4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)페닐)(메틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트를 수득하였다(0.07 g, 46.6%).
단계 2: 3-(((1r,4r)-4-아미노사이클로헥실)(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)벤즈아미드의 합성
DCM(5 ㎖) 중의 tert-부틸 ((1r,4r)-4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)페닐)(메틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트(0.07 g)의 교반된 용액을 0℃까지 냉각시키고 TFA(2 ㎖)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 건조될 때까지 농축하여 TFA 염으로서 표제 화합물을 수득하였다(0.07 g, 98.59%). LCMS: 477.35 (M+1)+; HPLC: 99.16% (@ 254 nm) (Rt; 3.796; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 8.08 (t, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.74 (m, 3H), 7.28 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.26 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.84 (s, 3H), 2.96 (bs, 1H), 2.73 (bs, 1H), 2.63 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.14 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.92-1.95 (m, 2H), 1.74-1.77 (m, 2H), 1.48-1.57 (m, 2H), 1.23-1.32 (m, 2H).
실시예 46: 3-(((1s,4s)-4-아미노사이클로헥실)(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)벤즈아미드의 합성
Figure pat00141
단계 1: tert-부틸 ((1s,4s)-4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)페닐)(메틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트의 합성
Na2CO3(3.6 당량)을 다이옥산/물 혼합물(5 ㎖+1 ㎖) 중의 tert-부틸 ((1s,4s)-4-((5-브로모-3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸페닐)(메틸)아미노)사이클로헥실)-카바메이트(1 당량) 및 1-메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸(1.2 당량)의 교반된 용액에 첨가하였다. 그 다음, 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. Pd(PPh3)4(0.1 당량)을 첨가하고 반응 혼합물을 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 추출물을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 생성물을 수득한 후, 이 생성물을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 ((1s,4s)-4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)페닐)(메틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트를 수득하였다(0.05 g, 33.3%).
단계 2: 3-(((1s,4s)-4-아미노사이클로헥실)(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)벤즈아미드의 합성
DCM(5 ㎖) 중의 tert-부틸 ((1s,4s)-4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)페닐)(메틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트(0.05 g)의 교반된 용액을 0℃까지 냉각시키고 TFA(2 ㎖)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 건조될 때까지 농축하여 TFA 염으로서 표제 화합물을 수득하였다(0.03 g, 73.1%). LCMS: 477.30 (M+1)+; HPLC: 98.76% (@ 254 nm) (Rt; 3.862; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (s, 1H), 8.08-8.12 (m, 2H), 7.76-7.81 (m, 4H), 7.33 (s, 1H), 7.12 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.27 (d, 2H, J=4 Hz), 3.83 (s, 3H), 3.16 (m, 2H), 2.50 (용매 피크에서 합쳐진 3H), 2.22 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.84 (m, 2H), 1.57-1.63 (m, 4H), 1.47-1.50 (m, 2H).
실시예 47: 5-(((1s,4s)-4-아미노사이클로헥실)(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4'-((다이메틸아미노)메틸)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00142
단계 1: tert-부틸 ((1s,4s)-4-((5-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-4'-((다이메틸아미노)메틸)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-일)(메틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트의 합성
Na2CO3(3.6 당량)을 다이옥산/물 혼합물(5 ㎖+1 ㎖) 중의 tert-부틸 ((1s,4s)-4-((5-브로모-3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸페닐)(메틸)아미노)사이클로헥실)-카바메이트(1 당량) 및 N,N-다이메틸-1-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)페닐)메탄아민(1.2 당량)의 교반된 용액에 첨가하였다. 그 다음, 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. Pd(PPh3)4(0.1 당량)을 첨가하고 반응 혼합물을 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 추출물을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 생성물을 수득한 후, 이 생성물을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 ((1s,4s)-4-((5-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-4'-((다이메틸아미노)메틸)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-일)(메틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트를 수득하였다(0.100 g, 61%).
단계 2: 5-(((1s,4s)-4-아미노사이클로헥실)(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4'-((다이메틸아미노)메틸)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
DCM(5 ㎖) 중의 tert-부틸 ((1s,4s)-4-((5-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-4'-((다이메틸아미노)메틸)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-일)(메틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트(0.10 g)의 교반된 용액을 0℃까지 냉각시키고 TFA(2 ㎖)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 건조될 때까지 농축하여 TFA 염으로서 표제 화합물을 수득하였다(0.05 g, 59.5%). LCMS: 530.35 (M+1)+; HPLC: 97.13% (@ 254 nm) (Rt; 3.672; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.44 (s, 1H), 9.47 (bs, 1H), 8.17 (t, 1H), 7.74-7.76 (m, 4H), 7.55 (d, 2H, J=7.6 Hz), 7.44 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.30 (m, 4H), 3.12 (m, 2H), 2.74 (s, 6H), 2.54 (s, 3H), 2.30 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.84 (bs, 2H), 1.59-1.63 (m, 4H), 1.48 (m, 2H).
실시예 48: 3-(((1s,4s)-4-아미노사이클로헥실)(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(1-(2-모르폴리노에틸)-1H-피라졸-4-일)벤즈아미드의 합성
Figure pat00143
단계 1: tert-부틸 ((1s,4s)-4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸-5-(1-(2-모르폴리노에틸)-1H-피라졸-4-일)페닐)(메틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트의 합성
Na2CO3(3.6 당량)을 다이옥산/물 혼합물(5 ㎖+1 ㎖) 중의 tert-부틸 ((1s,4s)-4-((5-브로모-3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸페닐)(메틸)아미노)사이클로헥실)-카바메이트(1 당량) 및 4-(2-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸-1-일)에틸)모르폴린(1.2 당량)의 교반된 용액에 첨가하였다. 그 다음, 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. Pd(PPh3)4(0.1 당량)을 첨가하고 반응 혼합물을 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 추출물을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 생성물을 수득한 후, 이 생성물을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 ((1r,4r)-4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸-5-(1-(2-모르폴리노에틸)-1H-피라졸-4-일)페닐)(메틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트를 수득하였다(0.120 g, 75.4%).
단계 2: 3-(((1s,4s)-4-아미노사이클로헥실)(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(1-(2-모르폴리노에틸)-1H-피라졸-4-일)벤즈아미드의 합성
DCM(5 ㎖) 중의 tert-부틸 ((1s,4s)-4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸-5-(1-(2-모르폴리노에틸)-1H-피라졸-4-일)페닐)(메틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트(0.10 g)의 교반된 용액을 0℃까지 냉각시키고 TFA(2 ㎖)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 건조될 때까지 농축하여 TFA 염으로서 표제 화합물을 수득하였다(0.06 g, 58.82%). LCMS: 576.40 (M+1)+; HPLC: 96.89% (@ 254 nm) (Rt; 3.481; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.08 (t, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.74-7.79 (m, 3H), 7.34 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.51 (bs, 2H), 4.27 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.16 (m, 6H), 2.50 (용매 피크에서 합쳐진 3H), 2.23 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.84 (bs, 2H), 1.57-1.63 (m, 4H), 1.47-1.49 (m, 2H). (용매 피크에서 합쳐진 3H).
실시예 49: 3-(((1s,4s)-4-아미노사이클로헥실)(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(6-(모르폴리노메틸)피리딘-3-일)벤즈아미드의 합성
Figure pat00144
단계 1: tert-부틸 ((1s,4s)-4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-5-(6-포르밀피리딘-3-일)-2-메틸페닐)(메틸)-아미노)사이클로헥실)카바메이트의 합성
Na2CO3(0.333 g, 2.8 mmol)을 다이옥산/물 혼합물(10 ㎖+2 ㎖) 중의 tert-부틸 ((1s,4s)-4-((5-브로모-3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸페닐)(메틸)아미노)-사이클로헥실)카바메이트(0.5 g, 8.71 mmol) 및 (6-포르밀피리딘-3-일)보론산(0.264 g, 1.13 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 그 다음, 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. Pd(PPh3)4(0.1 g, 0.086 mmol)을 첨가하고 용액을 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 추출물을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 생성물을 수득한 후, 이 생성물을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 ((1s,4s)-4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-5-(6-포르밀피리딘-3-일)-2-메틸페닐)(메틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트를 수득하였다(0.3 g, 57.3%).
단계 2: tert-부틸 ((1s,4s)-4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸-5-(6-(모르폴리노메틸)피리딘-3-일)페닐)(메틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트의 합성
아세트산(2 당량)을 메탄올(10 ㎖) 중의 tert-부틸 ((1s,4s)-4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-5-(6-포르밀피리딘-3-일)-2-메틸페닐)(메틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트(1 당량) 및 모르폴린(5 당량)의 교반된 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 시아노보로하이드라이드(2.5 당량)를 0℃에서 첨가하고 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고 미정제 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 ((1s,4s)-4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸-5-(6-(모르폴리노메틸)피리딘-3-일)페닐)(메틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트를 수득하였다.
단계 3: 3-(((1s,4s)-4-아미노사이클로헥실)(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(6-(모르폴리노메틸)피리딘-3-일)벤즈아미드의 합성
DCM(5 ㎖) 중의 tert-부틸 ((1s,4s)-4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸-5-(6-(모르폴리노메틸)피리딘-3-일)페닐)(메틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트의 교반된 용액을 0℃까지 냉각시키고 TFA(2 ㎖)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 건조될 때까지 농축하고 생성물을 용매 세척으로 정제하여 TFA 염으로서 표제 화합물을 수득하였다(0.1 g, 94.33%). LCMS: 573.45 (M+1)+; HPLC: 98.94% (@ 254 nm) (Rt; 3.618; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.47 (s, 1H), 8.94 (s, 1H), 8.19-8.21 (m, 2H), 7.80 (s, 3H), 7.60 (d, 1H, J=8 Hz), 7.49 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.52 (bs, 2H), 4.29 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.83 (bs, 4H), 3.27 (m, 4H), 3.14-3.21 (m, 2H), 2.55 (s, 3H), 2.30 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.87 (bs, 2H), 1.59-1.64 (m, 4H), 1.49-1.51 (m, 2H).
실시예 50: 3-(((1r,4r)-4-아미노사이클로헥실)(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(6-(모르폴리노메틸)피리딘-3-일)벤즈아미드의 합성
Figure pat00145
단계 1: tert-부틸 ((1r,4r)-4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-5-(6-포르밀피리딘-3-일)-2-메틸페닐)(메틸)아미노)-사이클로헥실)카바메이트의 합성
Na2CO3(0.332 g, 3.13 mmol)을 다이옥산/물 혼합물(8 ㎖+2 ㎖) 중의 tert-부틸 ((1r,4r)-4-((5-브로모-3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸페닐)(메틸)아미노)사이클로헥실)-카바메이트(0.4 g, 0.696 mmol) 및 (6-포르밀피리딘-3-일)보론산(0.21 g, 0.906 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 그 다음, 반응 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. Pd(PPh3)4(0.080 g, 0.069 mmol)을 첨가하고 아르곤 퍼징을 10분 동안 다시 수행하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 생성물을 수득한 후, 이 생성물을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 ((1r,4r)-4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-5-(6-포르밀피리딘-3-일)-2-메틸페닐)(메틸)아미노)-사이클로헥실)카바메이트를 수득하였다(0.28 g, 66.98%).
단계 2: tert-부틸 ((1r,4r)-4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸-5-(6-(모르폴리노메틸)피리딘-3-일)페닐)(메틸)-아미노)사이클로헥실)카바메이트의 합성
아세트산(2 당량)을 메탄올(10 ㎖) 중의 tert-부틸 ((1r,4r)-4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-5-(6-포르밀피리딘-3-일)-2-메틸페닐)(메틸)아미노)-사이클로헥실)카바메이트(1 당량) 및 모르폴린(5 당량)의 교반된 용액에 첨가하였다. 반응물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 시아노보로하이드라이드(2.5 당량)를 0℃에서 첨가하고 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고 미정제 물질을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 ((1r,4r)-4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-카바모일)-2-메틸-5-(6-(모르폴리노메틸)피리딘-3-일)페닐)(메틸)-아미노)사이클로헥실)카바메이트를 수득하였다.
단계 3: 3-(((1r,4r)-4-아미노사이클로헥실)(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(6-(모르폴리노메틸)피리딘-3-일)벤즈아미드의 합성
DCM(5 ㎖) 중의 tert-부틸 ((1r,4r)-4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-카바모일)-2-메틸-5-(6-(모르폴리노메틸)피리딘-3-일)페닐)(메틸)-아미노)사이클로헥실)카바메이트의 교반된 용액을 0℃까지 냉각시키고 TFA(2 ㎖)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 건조될 때까지 농축하고 고체 생성물을 용매 세척으로 정제하여 TFA 염으로서 표제 화합물을 수득하였다(0.07 g, 82.3%). LCMS: 573.40 (M+1)+; HPLC: 91.56% (@ 254 nm) (Rt; 3.591; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (s, 1H), 8.95 (s, 1H), 8.19-8.22 (m, 2H), 7.78 (bs, 3H), 7.61 (d, 1H, J=8 Hz), 7.40 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.52 (bs, 2H), 4.28 (d, 2H, J=3.2 Hz), 3.84 (bs, 4H), 3.27 (bs, 4H), 2.97 (bs, 1H), 2.75 (m, 1H), 2.66 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.93 (m, 2H), 1.74-1.76 (m, 2H), 1.54-1.57 (m, 2H), 1.28-1.31 (m, 2H).
실시예 51: 3-(((1r,4r)-4-아미노사이클로헥실)(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(1-(2-모르폴리노에틸)-1H-피라졸-4-일)벤즈아미드의 합성
Figure pat00146
단계 1: tert-부틸 ((1r,4r)-4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸-5-(1-(2-모르폴리노에틸)-1H-피라졸-4-일)페닐)(메틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트의 합성
Na2CO3(3.6 당량)을 다이옥산/물 혼합물(5 ㎖+1 ㎖) 중의 tert-부틸 ((1r,4r)-4-((5-브로모-3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸페닐)(메틸)아미노)-사이클로헥실)카바메이트(1 당량) 및 4-(2-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸-1-일)에틸)모르폴린(1.2 당량)의 교반된 용액에 첨가하고 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.1 당량)을 첨가하고 반응 플라스크를 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기 추출물을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 생성물을 수득한 후, 이 생성물을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 ((1r,4r)-4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸-5-(1-(2-모르폴리노에틸)-1H-피라졸-4-일)페닐)(메틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트를 수득하였다(0.08 g, 45.45%).
단계 2: 3-(((1r,4r)-4-아미노사이클로헥실)(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(1-(2-모르폴리노에틸)-1H-피라졸-4-일)벤즈아미드의 합성
DCM(5 ㎖) 중의 tert-부틸 ((1r,4r)-4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸-5-(1-(2-모르폴리노에틸)-1H-피라졸-4-일)페닐)(메틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트(0.08 g)의 교반된 용액을 0℃까지 냉각시키고 TFA(2 ㎖)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 건조될 때까지 농축하여 TFA 염으로서 표제 화합물을 수득하였다(0.07 g, 86.41%). LCMS: 576.45 (M+1)+; HPLC: 98.26% (@ 254 nm) (Rt; 3.413; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 8.08 (t, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.75 (m, 3H), 7.28 (s, 1H), 7.13 (s, 1H), 5.87 (s, 1H), 4.53 (t, 2H), 4.27 (d, 2H, J=3.6 Hz), 2.97-3.16 (m, 4H), 2.67-2.71 (m, 1H), 2.62 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.14 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.92-1.94 (m, 2H), 1.72 (m, 2H), 1.52-1.55 (m, 2H), 1.23-1.29 (m, 2H).
실시예 52: 3-(((1s,4s)-4-아미노사이클로헥실)(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(6-((다이메틸아미노)메틸)피리딘-3-일)-2-메틸벤즈아미드의 합성
Figure pat00147
단계 1: tert-부틸 ((1s,4s)-4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-카바모일)-5-(6-((다이메틸아미노)메틸)피리딘-3-일)-2-메틸페닐)(메틸)아미노)-사이클로헥실)카바메이트의 합성
아세트산(2 당량)을 메탄올(10 ㎖) 중의 tert-부틸 ((1s,4s)-4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-5-(6-포르밀피리딘-3-일)-2-메틸페닐)-(메틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트(1 당량) 및 다이메틸아민(5 당량)의 교반된 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 시아노보로하이드라이드(2.5 당량)를 0℃에서 첨가하고 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고 미정제 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 ((1s,4s)-4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-5-(6-((다이메틸아미노)메틸)피리딘-3-일)-2-메틸페닐)(메틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트를 수득하였다.
단계 2: 3-(((1s,4s)-4-아미노사이클로헥실)(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(6-((다이메틸아미노)메틸)피리딘-3-일)-2-메틸벤즈아미드의 합성
DCM(5 ㎖) 중의 tert-부틸 ((1s,4s)-4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-5-(6-((다이메틸아미노)메틸)피리딘-3-일)-2-메틸페닐)(메틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트의 교반된 용액을 0℃까지 냉각시키고 TFA(2 ㎖)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 건조될 때까지 농축하고 생성물을 용매 세척으로 정제하여 TFA 염으로서 표제 화합물을 수득하였다(0.07 g, 93.3%). LCMS: 531.25 (M+1)+; HPLC: 97.59% (@ 254 nm) (Rt; 3.680; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (s, 1H), 10.01 (s, 1H), 8.95 (s, 1H), 8.20 (d, 2H, J=5.2 Hz), 7.80 (bs, 3H), 7.59 (d, 1H, J=8 Hz), 7.51 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 5.87 (s, 1H), 4.48 (bs, 2H), 4.29 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.21 (m, 1H), 3.14-3.16 (m, 1H), 2.83 (s, 6H), 2.55 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.86 (bs, 2H), 1.59-1.64 (m, 4H), 1.49-1.51 (m, 2H).
실시예 53: 3-(((1r,4r)-4-아미노사이클로헥실)(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(6-((다이메틸아미노)메틸)피리딘-3-일)-2-메틸벤즈아미드의 합성
Figure pat00148
단계 1: tert-부틸 ((1r,4r)-4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-5-(6-((다이메틸아미노)메틸)피리딘-3-일)-2-메틸페닐)(메틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트의 합성
아세트산(2 당량)을 메탄올(10 ㎖) 중의 tert-부틸 ((1r,4r)-4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-5-(6-포르밀피리딘-3-일)-2-메틸페닐)(메틸)아미노)-사이클로헥실)카바메이트(1 당량) 및 다이메틸아민(5 당량)의 교반된 용액에 첨가하였다. 반응물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 시아노보로하이드라이드(2.5 당량)를 0℃에서 첨가하고 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고 미정제 물질을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 ((1r,4r)-4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-5-(6-((다이메틸아미노)메틸)피리딘-3-일)-2-메틸페닐)(메틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트를 수득하였다.
단계 2: 3-(((1r,4r)-4-아미노사이클로헥실)(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(6-((다이메틸아미노)메틸)피리딘-3-일)-2-메틸벤즈아미드의 합성
DCM(5 ㎖) 중의 tert-부틸 ((1r,4r)-4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-5-(6-((다이메틸아미노)메틸)피리딘-3-일)-2-메틸페닐)(메틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트의 교반된 용액을 0℃까지 냉각시키고 TFA(2 ㎖)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 건조될 때까지 농축하고 고체 생성물을 용매 세척으로 정제하여 TFA 염으로서 표제 화합물을 수득하였다(0.05 g, 66.6%). LCMS: 531.30 (M+1)+; HPLC: 97.59% (@ 254 nm) (Rt; 3.564; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (s, 1H), 10.01 (s, 1H), 8.95 (s, 1H), 8.20 (bs, 2H), 7.78 (bs, 2H), 7.59 (d, 1H, J=6 Hz), 7.41 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.48 (bs, 2H), 4.29 (m, 2H), 2.97 (bs, 2H), 2.83 (s, 6H), 2.66 (s, 3H), 2.21 (s, 6H), 2.10 (s, 3H), 1.93 (m, 2H), 1.74 (m, 2H), 1.55-1.57 (m, 2H), 1.28-1.31 (m, 2H).
실시예 54: 3-(((1r,4r)-4-아세트아미도사이클로헥실)(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(6-(모르폴리노메틸)피리딘-3-일)벤즈아미드의 합성
Figure pat00149
화합물 54를 실시예 57에 기재된 방법과 유사한 방법으로 제조하였다.
분석 데이터: LCMS: 615.55 (M+1)+; HPLC: 98.75% (@ 254 nm) (Rt; 3.854; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (s, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.18 (t, 1H), 8.02 (d, 1H, J=8 Hz), 7.67 (d, 1H, J=7.2 Hz), 7.49 (d, 1H, J=8 Hz), 7.35 (s, 1H), 7.19 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.59-3.61 (m, 4H), 3.47-3.55 (m, 2H), 2.76 (t, 2H, J=4 Hz), 2.65 (s, 3H), 2.42 (bs, 4H), 2.21 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.78-1.90 (m, 2H), 1.68-1.74 (m, 5H), 1.48-1.57 (m, 2H), 1.03-1.23 (m, 2H).
실시예 55: 3-(((1s,4s)-4-아세트아미도사이클로헥실)(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(6-((다이메틸아미노)메틸)피리딘-3-일)-2-메틸벤즈아미드의 합성
Figure pat00150
단계 1: 3-(((1s,4s)-4-아세트아미도사이클로헥실)(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(6-포르밀피리딘-3-일)-2-메틸벤즈아미드의 합성
Na2CO3(0.48 g, 4.53 mmol)을 다이옥산/물 혼합물(10 ㎖+2 ㎖) 중의 3-(((1s,4s)-4-아세트아미도사이클로헥실)(메틸)아미노)-5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드(0.65 g, 1.25 mmol) 및 (6-포르밀피리딘-3-일)보론산(0.38 g, 1.63 mmol)에 첨가하고 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.14 g, 0.12 mmol)을 첨가하고 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 시스 이성질체 3-((4-아세트아미도사이클로헥실)-(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(6-포르밀피리딘-3-일)-2-메틸벤즈아미드를 수득하였다(0.35 g, 51.16%).
단계 2: 3-(((1s,4s)-4-아세트아미도사이클로헥실)(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(6-((다이메틸아미노)메틸)피리딘-3-일)-2-메틸벤즈아미드의 합성
아세트산(2 당량)을 메탄올(0.3 mmol의 경우 5 ㎖) 중의 3-(((1s,4s)-4-아세트아미도사이클로헥실)(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(6-포르밀피리딘-3-일)-2-메틸벤즈아미드(1 당량) 및 다이메틸아민(5 당량)의 교반된 용액에 첨가하고, 반응물을 실온에서 교반하였다. 그 다음, NaBH3CN(1.5 당량)을 첨가하고 반응물을 밤새 교반하였다. 완결 시, 용매를 감압 하에 제거하고 잔사를 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하거나 특정된 바와 같이 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.006 g, 3.2%). LCMS: 573.40 (M+1)+; HPLC: 95.52% (@ 254 nm) (Rt; 3.899; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.47 (s, 1H), 8.88 (s, 1H), 8.20 (t, 1H), 8.14 (d, 1H, J=7.6 Hz), 7.78 (d, 1H, J=7.2 Hz), 7.55 (d, 1H, J=8 Hz), 7.44 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=3.2 Hz), 4.26 (bs, 1H), 3.71 (bs, 1H), 3.01 (bs, 1H), 2.61-2.66 (m, 8H), 2.28 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.81 (m, 5H), 1.56 (m, 2H), 1.40-1.46 (m, 2H), 1.23 (m, 2H). [용매 피크에서 합쳐진 2H].
실시예 56: 3-(((1s,4s)-4-아세트아미도사이클로헥실)(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(6-(하이드록시메틸)피리딘-3-일)-2-메틸벤즈아미드의 합성
Figure pat00151
화합물 56을 화합물 55와 동일한 반응으로 제조하였다. LCMS: 546.40 (M+1)+; HPLC: 99.40% (@ 254 nm) (Rt; 3.845; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.47 (s, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.20 (t, 1H), 8.04 (d, 1H, J=8 Hz), 7.77 (d, 1H, J=7.2 Hz), 7.52 (d, 1H, J=7.6 Hz), 7.40 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 5.45 (t, 1H, J=5.2 Hz), 4.59 (d, 2H, J=5.6 Hz), 4.27 (d, 2H, J=4 Hz), 3.71 (bs, 1H), 3.00 (bs, 1H), 2.60 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.81 (m, 5H), 1.56 (m, 2H), 1.40-1.48 (m, 4H).
실시예 57: 3-(((1s,4s)-4-아세트아미도사이클로헥실)(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(6-(모르폴리노메틸)피리딘-3-일)벤즈아미드의 합성
Figure pat00152
아세트산(2 당량)을 메탄올(0.3 mmol의 경우 5 ㎖) 중의 3-(((1s,4s)-4-아세트아미도사이클로헥실)(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(6-포르밀피리딘-3-일)-2-메틸벤즈아미드(1 당량) 및 모르폴린(5 당량)의 교반된 용액에 첨가하고, 반응물을 실온에서 교반하였다. 그 다음, NaBH3CN(1.5 당량)을 첨가하고 반응물을 밤새 교반하였다. 완결 시, 용매를 감압 하에 제거하고 잔사를 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하거나 특정된 바와 같이 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.08 g, 43%). LCMS: 615.40 (M+1)+; HPLC: 99.64% (@ 254 nm) (Rt; 3.900; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (s, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.19 (t, 1H), 8.01 (d, 1H, J=7.6 Hz), 7.77 (d, 1H, J=7.2 Hz), 7.50 (d, 1H, J=8 Hz), 7.40 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.71 (bs, 1H), 3.59-3.61 (m, 4H), 3.50 (t, 1H, J=4.4 Hz), 3.00 (bs, 1H), 2.68 (t, 1H, J=4.4 Hz), 2.60 (s, 3H), 2.42 (bs, 4H), 2.27 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.81 (m, 5H), 1.56 (m, 2H), 1.40-1.45 (m, 2H), 1.16-1.29 (m, 2H).
실시예 59: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-5-(프로필(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00153
단계 1: 메틸 5-브로모-2-메틸-3-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)벤조에이트의 합성
아세트산(22 g, 369 mmol)을 다이클로로에탄(300 ㎖) 중의 메틸 3-아미노-5-브로모-2-메틸벤조에이트(15 g, 61.5 mmol) 및 다이하이드로-2H-피란-4(3)-온(9.2 g, 92 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 반응 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 0℃까지 냉각시키고 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(39 g, 183.96 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 그 다음, 수성 중탄산나트륨을 반응 혼합물에 첨가하여 pH를 7 내지 8로 조절하였다. 유기층을 분리하고 수성층을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 모은 추출물을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 여과하고 감압 하에 농축하였다. 미정제 생성물을 에틸 아세테이트:헥산으로 용출하는 컬럼 크로마토그래피(100 내지 200 메쉬 실리카 겔)로 정제하여 회백색 고체로서 메틸 5-브로모-2-메틸-3-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)벤조에이트를 수득하였다(14 g, 69%).
단계 2: 메틸 5-브로모-2-메틸-3-(프로필(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)벤조에이트의 합성
아세트산(1.12 g, 18.2 mmol)을 다이클로로에탄(10 ㎖) 중의 5-브로모-2-메틸-3-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)벤조에이트(1 g, 3.04 mmol) 및 프로피온알데하이드(0.354 g, 6.09 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(1.94 g, 9.14 mmol)를 0℃에서 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 그 다음, 용매를 감압 하에 제거하고 물을 잔사에 첨가하였다. 혼합물을 DCM으로 추출하였다. 모은 추출물을 황산나트륨 상에서 건조하고 여과하고 감압 하에 농축하여 미정제 생성물을 수득한 후, 이 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 메틸 5-브로모-2-메틸-3-(프로필(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)벤조에이트를 수득하였다(0.96 g, 85.7%).
단계 3: 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-3-(프로필(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)벤즈아미드의 합성
수성 NaOH(0.156 g, 3.8 mmol)를 에탄올(5 ㎖) 중의 5-브로모-2-메틸-3-(프로필(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)벤조에이트(0.96 g, 2.59 mmol) 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 60℃에서 1시간 동안 교반하였다. 그 다음, 에탄올을 감압 하에 제거하고 묽은 HCl을 사용하여 잔사를 pH 6까지 산성화하고 시트르산을 사용하여 pH 4까지 산성화하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 모은 추출물을 건조하고 여과하고 농축하여 각각의 산을 수득하였다(0.8 g, 86.67%).
상기 산(0.8 g, 2.24 mmol)을 DMSO(5 ㎖)에 용해시키고 3-(아미노메틸)-4,6-다이메틸피리딘-2(1H)-온(0.683 g, 4.49 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반한 후, PyBOP(1.75 g, 3.36 mmol)를 첨가하고 교반을 밤새 계속 수행하였다. 반응 혼합물을 빙수에 붓고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 추출물을 건조하고 여과하고 농축하여 미정제 생성물을 수득한 후, 이 생성물을 용매 세척으로 정제하여 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-3-(프로필(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)벤즈아미드를 수득하였다(0.9 g, 81.8%).
단계 4: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-5-(프로필(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Na2CO3(0.108 g, 1.01 mmol)을 다이옥산/물 혼합물(5 ㎖+1 ㎖) 중의 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-3-(프로필(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)벤즈아미드(0.2 g, 0.412 mmol) 및 4-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질)모르폴린(0.148 g, 0.488 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 반응 혼합물을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.048 g, 0.042 mmol)을 첨가하고 반응 혼합물을 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 추출물을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 생성물을 수득한 후, 이 생성물을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.20 g, 83.68%). LCMS: 587.40 (M+1)+; HPLC: 98.68% (@ 254 nm) (Rt; 4.257; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (s, 1H), 8.19 (t, 1H, J=4.8 Hz), 7.56 (d, 2H, J=8 Hz), 7.38 (t, 3H, J=8 Hz), 7.19 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.82-3.85 (m, 2H), 3.57 (m, 4H), 3.48 (s, 2H), 3.23 (t, 2H, J=10.8 Hz), 2.94-3.02 (m, 3H), 2.36 (bs, 4H), 2.24 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.56-1.65 (m, 4H), 1.20-1.25 (m, 2H), 0.76 (t, 3H, J=6.8 Hz).
실시예 60: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(이소부틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00154
단계 1: 메틸 5-브로모-3-(이소부틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤조에이트의 합성
아세트산(0.456 g, 7.6 mmol)을 메탄올(15 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-2-메틸-3-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)벤조에이트(1 g, 3.04 mmol) 및 이소부티르알데하이드(1.09 g, 15.24 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 8시간 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 시아노보로하이드라이드(0.522 g, 7.56 mmol)를 0℃에서 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 그 다음, 용매를 감압 하에 제거하고 미정제 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 메틸 5-브로모-3-(이소부틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤조에이트를 수득하였다(0.52 g, 54.33%).
단계 2: 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(이소부틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드의 합성
수성 NaOH(0.104 g, 2.61 mmol)를 에탄올(15 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-3-(이소부틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤조에이트(0.5 g, 1.30 mmol) 용액에 첨가하고 60℃에서 1시간 동안 교반하였다. 그 다음, 에탄올을 감압 하에 제거하고 묽은 HCl로 pH 6까지 산성화하고 시트르산으로 pH 4까지 산성화하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 모은 추출물을 건조하고 농축하여 각각의 산을 수득하였다(0.375 g, 76.9%).
그 다음, 상기 산(0.350 g, 9.45 mmol)을 DMSO(5 ㎖)에 용해시키고 3-(아미노메틸)-4,6-다이메틸피리딘-2(1H)-온(0.283 g, 18.9 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반한 후, PyBOP(0.737 g, 14.17 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 빙수에 붓고 발생된 침전물을 수집하고 용매 세척으로 정제하여 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(이소부틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드를 수득하였다(0.2 g, 42.01%).
단계 3: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(이소부틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Na2CO3(0.108 g, 1.01 mmol)을 다이옥산/물 혼합물(5 ㎖+1 ㎖) 중의 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(이소부틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드(0.14 g, 0.277 mmol) 및 4-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질)모르폴린(0.100 g, 0.333 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.032 g, 0.027 mmol)을 첨가하고 반응 혼합물을 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 그 다음, 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 추출물을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 생성물을 수득한 후, 이 생성물을 분취용 HPLC로 정제하여 TFA 염으로서 표제 화합물을 수득하였다(0.039 g, 23.49%). LCMS: 601.30 (M+1)+; HPLC: 99.88% (@ 254 nm) (Rt; 5.225; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (s, 1H), 9.83 (bs, 1H), 8.20 (t, 1H), 7.73 (d, 2H, J=8 Hz), 7.56 (d, 2H, J=8 Hz), 7.43 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.39 (bs, 2H), 4.28 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.95-3.98 (m, 2H), 3.85-3.87 (m, 2H), 3.62 (t, 2H, J=11.2 Hz), 3.15-3.31 (m, 9H), 2.84 (m, 1H), 2.26 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.62 (bs, 2H), 1.37-1.40 (m, 2H), 0.80 (d, 6H, J=6 Hz).
실시예 61: 5-((사이클로프로필메틸)(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00155
단계 1: 메틸 5-브로모-3-((사이클로프로필메틸)(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤조에이트의 합성
아세트산(0.456 g, 7.6 mmol)을 메탄올(15 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-2-메틸-3-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)벤조에이트(1 g, 3.04 mmol) 및 사이클로프로판카브알데하이드(1.06 g, 15.24 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 8시간 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 시아노보로하이드라이드(0.488 g, 7.62 mmol)를 0℃에서 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 그 다음, 용매를 감압 하에 제거하고 미정제 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 메틸 5-브로모-3-((사이클로프로필메틸)(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤조에이트를 수득하였다(0.275 g, 23.70%).
단계 2: 5-브로모-3-((사이클로프로필메틸)(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드의 합성
수성 NaOH(0.056 g, 1.45 mmol)를 에탄올(5 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-3-((사이클로프로필메틸)(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤조에이트(0.275 g, 0.943 mmol) 용액에 첨가하고 60℃에서 1시간 동안 교반하였다. 그 다음, 에탄올을 감압 하에 제거하고 묽은 HCl로 pH 6까지 산성화하고 시트르산으로 pH 4까지 산성화하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 모은 추출물을 건조하고 농축하여 각각의 산을 수득하였다(0.25 g, 93.28%).
상기 산(0.250 g, 0.68 mmol)을 DMSO(3 ㎖)에 용해시키고 3-(아미노메틸)-4,6-다이메틸피리딘-2(1H)-온(0.155 g, 1.02 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반한 후, PyBOP(0.708 g, 1.36 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 빙수에 붓고 발생된 침전물을 수집하고 용매 세척으로 정제하여 5-브로모-3-((사이클로프로필메틸)(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드를 수득하였다(0.25 g, 73.31%).
단계 3: 5-((사이클로프로필메틸)(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Na2CO3(0.19 g, 1.79 mmol)을 다이옥산/물 혼합물(5 ㎖+1 ㎖) 중의 5-브로모-3-((사이클로프로필메틸)(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드(0.25 g, 0.499 mmol) 및 4-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질)모르폴린(0.181 g, 0.598 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.057 g, 0.049 mmol)을 첨가하고 반응 혼합물을 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 추출물을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 생성물을 수득한 후, 이 생성물을 분취용 HPLC로 정제하여 TFA 염으로서 표제 화합물을 수득하였다(0.085 g, 28.52%). LCMS: 599.35 (M+1)+; HPLC: 99.21% (@ 254 nm) (Rt; 4.191; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.51 (s, 1H), 9.83 (bs, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.77 (d, 2H, J=6.4 Hz), 7.53-7.58 (m, 3H), 7.28 (s, 1H), 5.87 (s, 1H), 4.39 (bs, 2H), 4.29 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.95-3.98 (m, 2H), 3.59-3.65 (m, 2H), 3.31-3.21 (m, 5H), 3.05-3.16 (m, 3H), 2.93 (m, 2H), 2.32 (m, 4H), 2.21 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.65 (bs, 2H), 1.50 (m, 2H), 0.66 (bs, 1H), 0.28 (d, 2H, J=7.2 Hz).
실시예 62: 5-(부틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00156
화합물 62를 실시예 61에 기재된 방법과 유사한 방법으로 제조하였다.
TFA 염의 분석 데이터: LCMS: 601.35 (M+1)+; HPLC: 99.41% (@ 254 nm) (Rt; 4.482; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.47 (s, 1H), 9.89 (bs, 1H), 8.22 (t, 1H), 7.75 (d, 2H, J=8 Hz), 7.57 (d, 2H, J=8 Hz), 7.44 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.39 (bs, 2H), 4.28 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.95-3.98 (m, 3H), 3.83-3.86 (m, 4H), 3.21-3.30 (m, 4H), 3.08-3.11 (m, 4H), 2.24 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.62 (m, 4H), 1.20 (m, 4H), 0.79 (t, 3H, J=6.4 Hz).
실시예 63: 5-((사이클로부틸메틸)(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00157
화합물 63을 실시예 61에 기재된 방법과 유사한 방법으로 제조하였다.
분석 데이터: LCMS: 613.35 (M+1)+; HPLC: 99.25% (@ 254 nm) (Rt; 4.586; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.18 (t, 1H), 7.56 (d, 2H, J=7.6 Hz), 7.41 (s, 1H), 7.37 (d, 2H, J=8 Hz), 7.20 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.45 (m, 2H), 4.28 (d, 2H, J=4 Hz), 3.83-3.85 (m, 2H), 3.57 (m, 3H), 3.48 (s, 2H), 3.19-3.22 (m, 2H), 3.08 (bs, 2H), 2.86 (m, 1H), 2.36 (m, 4H), 2.20 (s, 6H), 2.10 (s, 3H), 1.70-1.78 (m, 4H), 1.56-1.63 (m, 6H).
실시예 64: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸-5-(6-(모르폴리노메틸)피리딘-3-일)벤즈아미드의 합성
Figure pat00158
단계 1: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-5-(6-포르밀피리딘-3-일)-2-메틸벤즈아미드의 합성
Na2CO3(0.82 g, 7.74 mmol)을 다이옥산/물 혼합물(15 ㎖+3 ㎖) 중의 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드(1 g, 2.15 mmol) 및 (6-포르밀피리딘-3-일)보론산(0.539 g, 2.31 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.288 g, 0.25 mmol)을 첨가하고 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응물을 80℃에서 2시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 원하는 화합물을 수득하였다(0.60 g, 57%).
단계 2: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸-5-(6-(모르폴리노메틸)피리딘-3-일)벤즈아미드의 합성
5 ㎖ MeOH 중의 모르폴린(5 당량) 및 아세트산(2 당량)을 다이클로로에탄(3 ㎖) 중의 N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-5-(6-포르밀피리딘-3-일)-2-메틸벤즈아미드(0.2 g, mmol)의 교반된 용액에 첨가하고, 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반하였다. 그 다음, NaBH3CN(1.5 당량)을 첨가하고 반응물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. (TLC에 의해 모니터링된) 완결 후, 수성 중탄산나트륨을 pH 7 내지 8까지 반응 혼합물에 첨가하고, 유기층을 분리하고 수성층을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 모은 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 여과하고 감압 하에 농축하였다. 미정제 화합물을 에틸 아세테이트:헥산으로 용출하는 컬럼 크로마토그래피 (100 내지 200 메쉬 실리카 겔)로 정제하여 회백색 고체로서 표제 화합물을 수득하였다. LCMS: 574.25 (M+1)+; HPLC: 97.17% (@ 254 nm) (Rt; 3.906; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (s, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.20 (t, 1H), 8.01 (d, 1H, J=7.2 Hz), 7.50 (d, 1H, J=7.6 Hz), 7.46 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=3.6 Hz), 3.81-3.83 (m, 2H), 3.59-3.61 (m, 6H), 3.22-3.30 (m, 2H), 3.08-3.10 (m, 2H), 3.03 (m, 1H), 2.43 (s, 4H), 2.25 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.65-1.67 (m, 2H), 1.51-1.53 (m, 2H), 0.83 (t, 3H, J=6.4 Hz).
실시예 65: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4'-((다이메틸아미노)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00159
단계 1: 메틸 5-브로모-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤조에이트의 합성
아세트산(15.36 g, 256.08 mmol)을 다이클로로에탄(150 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-2-메틸-3-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)벤조에이트(14 g, 42.68 mmol) 및 아세트알데하이드(3.75 g, 85.36 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 반응물을 실온에서 20분 동안 교반하였다 그 다음, 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(27.01 g, 128.04 mmol)를 0℃에서 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 그 다음, 용매를 감압 하에 제거하고 물을 잔사에 첨가하였다. 혼합물을 DCM으로 추출하였다. 모은 추출물을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 감압 하에 농축하여 미정제 생성물을 수득한 후, 이 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 메틸 5-브로모-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤조에이트를 수득하였다(14 g, 93.33%).
단계 2: 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드의 합성
수성 NaOH(2.36 g, 59.15 mmol)를 에탄올(100 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤조에이트(14 g, 39.43 mmol) 용액에 첨가하고 60℃에서 1시간 동안 교반하였다. 그 다음, 에탄올을 감압 하에 제거하고 묽은 HCl로 pH 6까지 산성화하고 시트르산으로 pH 4까지 산성화하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 모은 추출물을 건조하고 농축하여 각각의 산을 수득하였다(13.9 g, 100%).
상기 산(10 g, 29.23 mmol)을 DMSO(25 ㎖)에 용해시키고 3-(아미노메틸)-4,6-다이메틸피리딘-2(1H)-온(8.8 g, 58 mmol) 및 트라이에틸아민(5.6 g, 58.4 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반한 후, PyBOP(22 g, 43.8 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 빙수에 붓고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 추출물을 건조하고 농축하여 미정제 생성물을 수득한 후, 이 생성물을 용매 세척으로 정제하여 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드를 수득하였다(14 g, 73.68%).
단계 3: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4'-((다이메틸아미노)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Na2CO3(0.16 g, 1.51 mmol)을 다이옥산/물 혼합물(5 ㎖+1 ㎖) 중의 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드(0.2 g, 0.42 mmol) 및 (4-((다이메틸아미노)메틸)페닐)보론산(0.15 g, 0.505 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. Pd(PPh3)4(0.048 g, 0.042 mmol)을 첨가하고 반응 혼합물을 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 추출물을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 생성물을 수득한 후, 이 생성물을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.120 g, 53.8%). LCMS: 531.30 (M+1)+; HPLC: 94.88% (@ 254 nm) (Rt; 3.949; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.19 (t, 1H, J=4.4 Hz), 7.61 (d, 2H, J=8 Hz), 7.39-7.41 (m, 3H), 7.23 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4.8 Hz), 3.62-3.84 (m, 4H), 3.22-3.38 (m, 2H), 3.02-3.06 (m, 3H), 2.30 (bs, 6H), 2.24 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.64-1.67 (m, 2H), 1.51-1.53 (m, 2H), 0.83 (t, 3H, J=6.8 Hz).
실시예 66: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-4'-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00160
Na2CO3(0.16 g, 1.51 mmol)을 다이옥산/물 혼합물(5 ㎖+1 ㎖) 중의 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드(0.2 g, 0.42 mmol) 및 (4-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)페닐)보론산(0.159 g, 0.505 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.048 g, 0.042 mmol)을 첨가하고 반응 혼합물을 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 추출물을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 생성물을 수득한 후, 이 생성물을 분취용 HPLC로 정제하여 TFA 염으로서 표제 화합물을 수득하였다(0.110 g, 44.7%). LCMS: 586.40 (M+1)+; HPLC: 96.03% (@ 254 nm) (Rt; 3.803; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.23 (t, 1H), 7.69 (d, 2H, J=7.6 Hz), 7.47 (t, 3H, J=8 Hz), 7.29 (s, 1H), 5.87 (s, 1H), 4.28 (d, 4H, J=4 Hz), 3.93 (s, 3H), 3.83-3.86 (m, 2H), 3.43 (m, 2H), 3.16-3.27 (m, 8H), 2.81 (s, 3H), 2.26 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.66 (m, 2H), 1.57 (m, 2H), 0.84 (t, 3H, J=6 Hz).
실시예 67: 4'-((1R,4R)-2-옥사-5-아자비사이클로[2.2.1]헵탄-5-일메틸)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드(0.1 g, 28%)의 합성
Figure pat00161
단계 1: 메틸 5-브로모-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤조에이트의 합성
아세트산(15.36 g, 256 mmol)을 다이클로로에탄(150 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-2-메틸-3-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)벤조에이트(14 g, 43 mmol) 및 아세트알데하이드(3.75 g, 85.4 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 실온에서 20분 동안 교반한 후, 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(27.0 g, 128 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고 수성 중탄산나트륨으로 급랭시켰다. 유기층을 분리하고 수성층을 다이클로로메탄으로 추출하였다. 모은 유기층을 황산나트륨 상에서 건조하고 감압 하에 농축하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 메틸 5-브로모-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤조에이트를 수득하였다(14 g, 93%).
단계 2: 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드의 합성
수성 NaOH(2.36 g, 59.1 mmol)를 에탄올(100 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤조에이트(14 g, 39 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 60℃에서 1시간 동안 교반한 후, 에탄올을 감압 하에 제거하고 묽은 HCl에 이어서 시트르산 완충제 용액을 사용하여 pH 4까지 산성화하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하고, 모은 유기층을 건조하고 농축하여 상응하는 산을 수득하였다(13.9 g).
PyBOP(22 g, 44 mmol)를 0℃에서 DMSO(25 ㎖) 중의 상기 산(10 g, 29 mmol), 3-(아미노메틸)-4,6-다이메틸피리딘-2(1H)-온(8.8 g, 58 mmol) 및 트라이에틸아민(5.6 g, 58 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 실온에서 밤새 교반한 후, 혼합물을 얼음에 붓고 10% MeOH/CH2Cl2으로 추출하였다. 모은 유기층을 건조하고 감압 하에 농축하여 미정제 물질을 수득하였다. 미정제 물질을 용매로 분쇄하여 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드를 수득하였다(14 g, 73%).
단계 3: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4'-포르밀-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Na2CO3(4.01 g, 37.9 mmol)을 다이옥산/물(30 ㎖/10 ㎖) 중의 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드(5.0 g, 10 mmol) 및 (4-포르밀페닐)보론산(2.35 g, 15.8 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. Pd(PPh3)4(1.21 g, 1.05 mmol)을 첨가하고 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온까지 냉각시키고 물로 희석하고 10% MeOH/CH2Cl2으로 추출하였다. 모은 유기층을 황산나트륨 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하였다. 발생된 미정제 물질을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4'-포르밀-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드를 수득하였다(3.5 g, 66%).
하기 환원성 아민화 절차를 이용하여 화합물 67 내지 105를 합성하였다 .
아세트산(6.0 mmol)을 다이클로로에탄(10 ㎖) 중의 N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4'-포르밀-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드(1.0 mmol) 및 필요한 아민(3.0 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 실온에서 20분 동안 교반한 후, 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(0.63 g, 3.0 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고 수성 중탄산나트륨으로 급랭시켰다. 유기층을 분리하고 수성층을 다이클로로메탄으로 추출하였다. 모은 유기층을 황산나트륨 상에서 건조하고 감압 하에 농축하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피 또는 RP-HPLC로 정제하여 자유 염기 또는 트라이플루오로아세테이트 염 형태로 생성물을 수득하였다.
4'-((1R,4R)-2-옥사-5-아자비사이클로[2.2.1]헵탄-5-일메틸)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 분석 데이터: LCMS: 585.25 (M+1)+; HPLC: 99.65% (@ 254 nm) (Rt; 4.019; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.19 (t, 1H), 7.55 (d, 2H, J=7.6 Hz), 7.39-7.41 (m, 3H), 7.21 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.35 (s, 2H), 4.28 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.93 (d, 2H, J=7.2 Hz), 3.82 (d, 2H, J=9.6 Hz), 3.72 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.44-3.53 (m, 3H), 3.22-3.27 (m, 1H), 3.01-3.09 (m, 2H), 2.73 (d, 1H, J=9.2 Hz), 2.23 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.79-1.82 (m, 1H), 1.51-1.67 (m, 5H), 0.82 (t, 3H, J=6.8 Hz).
실시예 68: 4'-((1S,4S)-2-옥사-5-아자비사이클로[2.2.1]헵탄-5-일메틸)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드(0.15 g, 43%)
Figure pat00162
분석 데이터: LCMS: 585.35 (M+1)+; HPLC: 98.99% (@ 254 nm) (Rt; 3.95; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (bs, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.56-7.54 (m, 2H), 7.41-7.39 (m, 3H), 7.21 (s, 1H), 5.87 (s, 1H), 4.34 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.93 (d, 1H, J=7.6 Hz), 3.83-3.81 (m, 2H), 3.74-3.72 (m, 2H), 3.52 (d, 1H, J=6.8 Hz), 3.44 (s, 1H), 3.28-3.22 (m, 2H), 3.09-3.08 (m, 3H), 2.73 (d, 1H, J=10 Hz), 2.41 (d, 1H, J=10 Hz), 2.24 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.79 (m, 1H), 1.67-1.51 (m, 5H), 0.83 (t, 3H, J=6.8 Hz).
실시예 69: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-4'-(피롤로딘-1-일메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드(0.19 g)
Figure pat00163
분석 데이터: LCMS: 557.25 (M+1)+; HPLC: 97.70% (@ 254 nm) (Rt; 4.075; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.19 (t, 1H, J=4.4 Hz), 7.55 (d, 2H, J=8 Hz), 7.38 (d, 2H, J=6.4 Hz), 7.35 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.81-3.84 (m, 2H), 3.58 (s, 2H), 3.22-3.27 (m, 2H), 3.06-3.09 (m, 2H), 2.99-3.04 (m, 1H), 2.43 (bs, 4H), 2.24 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.64-1.69 (m, 6H), 1.51-1.56 (m, 2H), 0.83 (t, 3H, J=6.8 Hz).
실시예 70: (S)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4'-(3-하이드록시피롤로딘-1-일메틸)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드 TFA 염(0.15 g, 44%)
Figure pat00164
분석 데이터: LCMS: 573.40 (M+1)+; HPLC: 97.97% (@ 254 nm) (Rt; 3.965; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.47 (s, 1H), 10.03-10.30 (m, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.75 (d, 2H, J=7.2 Hz), 7.60 (d, 2H, J=8 Hz), 7.52 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 5.87 (s, 1H), 4.45-4.46 (m, 2H), 4.39-4.40 (m, 2H), 4.29 (d, 2H, J=5.2 Hz), 3.83-3.86 (m, 2H), 3.43-3.55 (m, 2H), 3.01-3.36 (m, 6H), 2.32-2.37 (m, 2H), 2.27 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.67 (m, 2H), 1.58 (m, 2H), 0.84 (t, 3H, J=6.4 Hz).
실시예 71: (R)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4'-(3-하이드록시피롤로딘-1-일메틸)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드(0.125 g, 55%)
Figure pat00165
분석 데이터: LCMS: 573.40 (M+1)+; HPLC: 96.12% (@ 254 nm) (Rt; 3.921; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.18 (t, 1H), 7.56 (d, 2H, J=7.6 Hz), 7.39 (s, 1H), 7.36 (d, 2H, J=8 Hz), 7.21 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.68 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4 Hz), 4.19 (bs, 1H), 3.81-3.84 (m, 2H), 3.56-3.59 (m, 2H), 3.22-3.25 (m, 2H), 3.08-3.09 (m, 2H), 3.01 (m, 1H), 2.57-2.67 (m, 2H), 2.32 (m, 2H), 2.24 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.97-2.00 (m, 1H), 1.64-1.67 (m, 2H), 1.51-1.53 (m, 3H), 0.83 (t, 3H, J=6.4 Hz).
실시예 72: (S)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4'-(3-플루오로피롤로딘-1-일메틸)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드(0.05 g)
Figure pat00166
분석 데이터: LCMS: 575.35 (M+1)+; HPLC: 98.44% (@ 254 nm) (Rt; 4.081; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.18 (t, 1H), 7.56 (d, 2H, J=7.6 Hz), 7.39 (s, 1H), 7.34 (d, 2H, J=8 Hz), 7.21 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 5.09-5.25 (m, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4 Hz), 3.81-3.86 (m, 2H), 3.65 (s, 2H), 3.53-3.55 (m, 2H), 3.17-3.25 (m, 2H), 3.07-3.16 (m, 7H), 2.24 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.64-1.67 (m, 2H), 1.51-1.53 (m, 2H), 0.83 (t, 3H, J=6.8 Hz).
실시예 73: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-4'-(피페라진-1-일메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드 TFA 염(0.18 g, 50%)
Figure pat00167
분석 데이터: LCMS: 572.10 (M+1)+; HPLC: 96.61% (@ 254 nm) (Rt; 3.736; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (s, 1H), 8.81 (bs, 2H), 8.20 (s, 1H), 7.66 (d, 2H, J=7.2 Hz), 7.47 (d, 2H, J=7.6 Hz), 7.42 (m, 1H), 7.25 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4 Hz), 3.82-3.85 (m, 4H), 3.11-3.27 (m, 9H), 2.88 (m, 4H), 2.25 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.65 (m, 2H), 1.53-1.55 (m, 2H), 0.83 (t, 3H, J=6 Hz).
실시예 74: (R)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4'-(3-플루오로피롤리딘-1-일메틸)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드(0.07 g, 31%)
Figure pat00168
분석 데이터: LCMS: 575.35 (M+1)+; HPLC: 97.53% (@ 254 nm) (Rt; 4.079; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.18 (t, 1H), 7.57 (d, 2H, J=7.6 Hz), 7.38 (d, 2H, J=4.4 Hz), 7.36 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 5.12-5.26 (m, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4 Hz), 3.81-3.84 (m, 2H), 3.63 (s, 2H), 3.22-3.25 (m, 2H), 3.08-3.09 (m, 2H), 3.02 (m, 1H), 2.73-2.83 (m, 2H), 2.32 (m, 1H), 2.24 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.89 (m, 1H), 1.64-1.67 (m, 2H), 1.51-1.53 (m, 2H), 0.83 (t, 3H, J=7.2 Hz).
실시예 75: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-4'-(피페리딘-1-일메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드(0.1 g, 88%)
Figure pat00169
분석 데이터: LCMS: 571.25 (M+1)+; HPLC: 98.25% (@ 254 nm) (Rt; 4.147; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (s, 1H), 8.19 (t, 1H, J=5.2 Hz), 7.55 (d, 2H, J=8 Hz), 7.39 (s, 1H), 7.34 (d, 2H, J=8 Hz), 7.21 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.82-3.83 (m, 2H), 3.43 (s, 2H), 3.24 (t, 2H, J=11.2 Hz), 3.06-3.09 (m, 2H), 2.99-3.01 (m, 1H), 2.32 (bs, 4H), 2.24 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.64-1.67 (m, 2H), 1.47-1.56 (m, 6H), 1.38-1.39 (m, 2H), 0.83 (t, 3H, J=7.2 Hz).
실시예 76: (S)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4'-((3-하이드록시피페리딘-1-일)메틸)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드(0.25 g, 71.4%)
Figure pat00170
분석 데이터: LCMS: 587.40 (M+1)+; HPLC: 97.63% (@ 254 nm) (Rt; 3.997; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.18 (t, 1H, J=4.8 Hz), 7.56 (d, 2H, J=8 Hz), 7.39 (s, 1H), 7.34 (d, 2H, J=8 Hz), 7.21 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.55 (d, 1H, J=4.8 Hz), 4.28 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.81-3.84 (m, 2H), 3.51-3.54 (m, 2H), 3.43-3.45 (m, 1H), 3.06-3.09 (m, 3H), 2.99-3.01 (m, 2H), 2.79 (d, 1H, J=6.8 Hz), 2.65 (d, 1H, J=10.8 Hz), 2.24 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.78-1.88 (m, 2H), 1.58-1.71 (m, 2H), 1.39-1.51 (m, 4H), 1.04-1.10 (m, 1H), 0.83 (t, 3H, J=6.8 Hz).
실시예 77: (R)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4'-((3-하이드록시피페리딘-1-일)메틸)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드(0.11 g, 48.6%)
Figure pat00171
분석 데이터: LCMS: 587.45 (M+1)+; HPLC: 98.65% (@ 254 nm) (Rt; 3.976; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.44 (s, 1H), 8.18 (t, 1H), 7.56 (d, 2H, J=7.6 Hz), 7.39 (s, 1H), 7.35 (d, 2H, J=8 Hz), 7.21 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.81-3.84 (m, 2H), 3.40-3.54 (m, 3H), 3.22-3.25 (m, 2H), 3.08-3.09 (m, 2H), 3.02 (m, 1H), 2.78-2.80 (m, 2H), 2.66 (m, 2H), 2.24 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.80-1.86 (m, 3H), 1.53-1.67 (m, 3H), 1.40-1.51 (m, 3H), 1.04-1.06 (m, 1H), 0.83 (t, 3H, J=6.8 Hz).
실시예 78: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4'-((4-하이드록시피페리딘-1-일)메틸)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드(0.2 g, 57%)
Figure pat00172
분석 데이터: LCMS: 587.20 (M+1)+; HPLC: 99.89% (@ 254 nm) (Rt; 1.456; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (s, 1H), 8.19 (t, 1H, J=4.4 Hz), 7.56 (d, 2H, J=8 Hz), 7.39 (s, 1H), 7.34 (d, 2H, J=8 Hz), 7.21 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.53 (d, 1H, J=3.6 Hz), 4.28 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.81-3.84 (m, 2H), 3.44 (s, 3H), 3.22-3.27 (m, 2H), 3.07-3.09 (m, 2H), 3.01-3.06 (m, 1H), 2.66 (m, 2H), 2.24 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 2.00-2.04 (m, 2H), 1.64-1.67 (m, 4H), 1.51-1.53 (m, 2H), 1.36-1.39 (m, 2H), 0.83 (t, 3H, J=7.2 Hz).
실시예 79: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4'-((3-플루오로피페리딘-1-일)메틸)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드(0.2 g, 56%)
Figure pat00173
분석 데이터: LCMS: 589.35 (M+1)+; HPLC: 96.06% (@ 254 nm) (Rt; 4.092; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.18 (t, 1H), 7.57 (d, 2H, J=7.2 Hz), 7.40 (s, 1H), 7.35 (d, 2H, J=7.2 Hz), 7.22 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.56-4.68 (m, 1H), 4.28 (d, 2H), 3.81-3.84 (m, 2H), 3.52 (s, 2H), 3.22-3.28 (m, 3H), 3.08-3.09 (m, 2H), 3.02 (m, 1H), 2.65-2.72 (m, 1H), 2.39 (m, 2H), 2.24 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.78-1.81 (m, 2H), 1.64-1.68 (m, 2H), 1.50-1.53 (m, 4H), 0.83 (t, 3H).
실시예 80: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4'-((4-플루오로피페리딘-1-일)메틸)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드(0.09 g, 25%)
Figure pat00174
분석 데이터: LCMS: 589.30 (M+1)+; HPLC: 95.46% (@ 254 nm) (Rt; 4.156; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.18 (t, 1H), 7.56 (d, 2H), 7.39 (s, 1H), 7.37 (d, 2H), 7.21 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.62-4.74 (m, 1H), 4.28 (d, 2H, J=3.2 Hz), 3.81-3.84 (m, 2H), 3.49 (s, 2H), 3.22-3.25 (m, 3H), 3.08-3.09 (m, 3H), 3.02 (m, 1H), 2.32 (m, 2H), 2.24 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.82-1.85 (m, 2H), 1.64-1.67 (m, 4H), 1.51-1.53 (m, 2H), 0.83 (t, 3H, J=6.4 Hz).
실시예 81: 4'-((4,4-다이플루오로피페리딘-1-일)메틸)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드(0.1 g, 27%)
Figure pat00175
분석 데이터: LCMS: 607.35 (M+1)+; HPLC: 95.48% (@ 254 nm) (Rt; 4.237; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (s, 1H), 8.19 (t, 1H), 7.58 (d, 2H, J=8 Hz), 7.38 (d, 2H, J=3.6 Hz), 7.36 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.81-3.84 (m, 2H), 3.56 (s, 2H), 3.22-3.27 (m, 2H), 3.08-3.09 (m, 2H), 2.99-3.01 (m, 1H), 2.24 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.90-1.99 (m, 4H), 1.64-1.67 (m, 2H), 1.48-1.56 (m, 2H), 0.83 (t, 3H, J=6.4 Hz). [용매 피크에서 합쳐진 4H].
실시예 82: 4'-(아제티딘-1-일메틸)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드
Figure pat00176
분석 데이터: LCMS: 543.40 (M+1)+; HPLC: 96.50% (@ 254 nm) (Rt; 4.010; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.19 (t, 1H, J=4.4 Hz), 7.54 (d, 2H, J=8 Hz), 7.38 (s, 1H), 7.32 (d, 2H, J=8 Hz), 7.20 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.81-3.84 (m, 2H), 3.52 (s, 2H), 3.22-3.27 (m, 2H), 2.98-3.11 (m, 7H), 2.23 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.94-2.01 (m, 2H), 1.64-1.67 (m, 2H), 1.51-1.56 (m, 2H), 0.82 (t, 3H, J=7.2 Hz).
실시예 83: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4'-((3-하이드록시아제티딘-1-일)메틸)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드
Figure pat00177
분석 데이터: LCMS: 559.80 (M+1)+; HPLC: 96.10% (@ 254 nm) (Rt; 3.917; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.18 (t, 1H), 7.54 (d, 2H, J=8 Hz), 7.38 (s, 1H), 7.31 (d, 2H, J=4.4 Hz), 7.20 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 5.28 (d, 1H, J=6.4 Hz), 4.28 (d, 2H, J=4.4 Hz), 4.17-4.19 (m, 1H), 3.81-3.84 (m, 2H), 3.56 (s, 2H), 3.48 (t, 2H, J=6.4 Hz), 3.22-3.27 (m, 2H), 3.06-3.09 (m, 2H), 3.01 (m, 1H), 2.75 (t, 2H, J=6.8 Hz), 2.24 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.64-1.67 (m, 2H), 1.51-1.53 (m, 2H), 0.82 (t, 3H, J=7.2 Hz).
실시예 84: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4'-((3-플루오로아제티딘-1-일)메틸)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드
Figure pat00178
분석 데이터: LCMS: 561.25 (M+1)+; HPLC: 97.99% (@ 254 nm) (Rt; 4.021; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.18 (t, 1H), 7.57 (d, 2H, J=7.2 Hz), 7.37-7.40 (m, 3H), 7.22 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 5.27 (m, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.81-3.84 (m, 2H), 3.63 (s, 2H), 3.22-3.27 (m, 2H), 3.08-3.09 (m, 2H), 3.01 (m, 1H), 2.77 (m, 2H), 2.24 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.15 (s, 3H), 1.65-1.67 (m, 2H), 1.51-1.53 (m, 2H), 1.04-1.06 (m, 1H), 0.83 (t, 3H, J=7.2 Hz) [용매 피크에서 합쳐진 2H].
실시예 86: 4'-((1,4-다이아제판-1-일)메틸)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드
Figure pat00179
분석 데이터: LCMS: 585.37 (M+1)+; HPLC: 87.74% (@ 254 nm) (Rt; 3.715; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.47 (s, 1H), 8.18 (t, 1H), 7.57 (d, 2H, J=6.8 Hz), 7.39 (m, 3H), 7.21 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.29 (d, 2H), 3.81-3.84 (m, 2H), 3.66 (s, 2H), 3.08-3.09 (m, 3H), 3.02 (bs, 4H), 2.96 (m, 3H), 2.64-2.66 (m, 4H), 2.24 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.78 (m, 2H), 1.64-1.67 (m, 2H), 1.51-1.53 (m, 2H), 0.83 (t, 3H).
실시예 87: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-4'-((4-메틸-1,4-다이아제판-1-일)메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드
Figure pat00180
분석 데이터: LCMS: 600.30 (M+1)+; HPLC: 99.46% (@ 254 nm) (Rt; 3.713; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.44 (s, 1H), 8.17 (t, 1H), 7.56 (d, 2H, J=8 Hz), 7.38 (d, 2H, J=5.6 Hz), 7.36 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=5.2 Hz), 3.81-3.84 (m, 2H), 3.61 (s, 2H), 3.09-3.28 (m, 3H), 3.06-3.09 (m, 2H), 3.02 (m, 1H), 2.59-2.65 (m, 5H), 2.56 (t, 2H, J=6 Hz), 2.24 (s, 6H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.64-1.72 (m, 4H), 1.51-1.53 (m, 2H), 0.83 (t, 3H, J=6.4 Hz).
실시예 88: 4'-((1,4-옥사제판-4-일)메틸)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드
Figure pat00181
분석 데이터: LCMS: 587.40 (M+1)+; HPLC: 96.85% (@ 254 nm) (Rt; 4.055; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.18 (t, 1H, J=4.8 Hz), 7.56 (d, 2H, J=8 Hz), 7.37-7.39 (m, 3H), 7.21 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.81-3.84 (m, 2H), 3.69 (t, 3H, J=6 Hz), 3.64 (s, 1H), 3.59-3.61 (m, 2H), 3.22-3.27 (m, 2H), 2.99-3.09 (m, 3H), 2.59-2.64 (m, 4H), 2.24 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.77-1.83 (m, 2H), 1.64-1.67 (m, 2H), 1.48-1.56 (m, 2H), 0.83 (t, 3H, J=7.2 Hz).
실시예 89: 4'-(아미노메틸)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드
Figure pat00182
분석 데이터: LCMS: 503.40 (M+1)+; HPLC: 79.83% (@ 254 nm) (Rt; 3.846; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.19 (t, 1H), 7.63 (d, 2H, J=8.4 Hz), 7.47 (d, 2H, J=8 Hz), 7.39 (s, 1H), 7.23 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.92 (s, 2H), 3.81-3.84 (m, 2H), 3.22-3.32 (m, 2H), 3.08-3.10 (m, 2H), 3.01 (m, 1H), 2.24 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.65-1.67 (m, 2H), 1.51-1.56 (m, 2H), 0.83 (t, 3H, J=6.8 Hz).
실시예 90: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-4'-((메틸아미노)메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드
Figure pat00183
분석 데이터: LCMS: 517.30 (M+1)+; HPLC: 98.05% (@ 254 nm) (Rt; 3.886; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.51 (s, 1H), 8.19 (t, 1H, J=4.4 Hz), 7.55 (d, 2H, J=8 Hz), 7.38 (d, 2H), 7.36 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.81-3.84 (m, 2H), 3.66 (s, 2H), 3.11-3.25 (m, 3H), 3.04-3.09 (m, 2H), 2.99-3.01 (m, 1H), 2.26 (s, 3H), 2.24 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.65-1.67 (m, 2H), 1.48-1.56 (m, 2H), 0.83 (t, 3H, J=6.8 Hz).
실시예 91: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-4'-((에틸아미노)메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드
Figure pat00184
분석 데이터: LCMS: 531.35 (M+1)+; HPLC: 98.28% (@ 254 nm) (Rt; 3.977; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.18 (t, 1H, J=4.8 Hz), 7.55 (d, 2H, J=8 Hz), 7.39 (s, 1H), 7.37 (d, 2H, J=2 Hz), 7.21 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=6 Hz), 3.81-3.84 (m, 2H), 3.71 (s, 2H), 3.22-3.28 (m, 2H), 3.01-3.11 (m, 3H), 2.52-2.55 (m, 2H), 2.24 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.65-1.67 (m, 2H), 1.50-1.53 (m, 2H), 1.03 (t, 3H, J=7.2 Hz), 0.83 (t, 3H, J=6.8 Hz).
실시예 92: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-4'-((이소프로필아미노)메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드 TFA 염
Figure pat00185
TFA 염의 분석 데이터: LCMS: 545.40 (M+1)+; HPLC: 94.74% (@ 254 nm) (Rt; 4.081; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.47 (s, 1H), 8.66 (bs, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.74 (d, 2H, J=7.6 Hz), 7.57 (d, 2H, J=7.6 Hz), 7.43 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4.4 Hz), 4.19 (t, 2H), 3.82-3.85 (m, 2H), 3.25 (t, 2H, J=10.8 Hz), 3.09-3.22 (m, 3H), 2.25 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.65 (m, 2H), 1.53-1.55 (m, 3H), 1.28 (d, 6H, J=6.4 Hz), 0.83 (t, 3H, J=6.8 Hz).
실시예 93: 4'-((사이클로프로필메틸)아미노)메틸)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드
Figure pat00186
분석 데이터: LCMS: 557.35 (M+1)+; HPLC: 96.44% (@ 254 nm) (Rt; 4.182; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.19 (t, 1H), 7.55 (d, 2H, J=7.2 Hz), 7.37-7.39 (m, 3H), 7.21 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.81-3.84 (m, 2H), 3.73 (s, 2H), 3.22-3.24 (m, 3H), 3.06-3.09 (m, 2H), 3.01 (m, 1H), 2.36 (d, 2H, J=6.8 Hz), 2.23 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.64-1.67 (m, 2H), 1.51-1.56 (m, 2H), 0.81-0.84 (m, 4H), 0.38-0.39 (m, 2H), 0.07-0.08 (m, 2H).
실시예 94: 4'-((다이에틸)아미노)메틸)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드
Figure pat00187
분석 데이터: LCMS: 559.20 (M+1)+; HPLC: 98.33% (@ 254 nm) (Rt; 4.126; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.47 (s, 1H), 8.19 (t, 1H, J=5.2 Hz), 7.55 (d, 2H, J=8 Hz), 7.38 (d, 2H, J=5.2 Hz), 7.36 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.81-3.83 (m, 2H), 3.54 (s, 2H), 3.22-3.37 (m, 2H), 3.06-3.11 (m, 2H), 2.99-3.01 (m, 1H), 2.43-2.47 (m, 4H), 2.24 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.64-1.67 (m, 2H), 1.48-1.56 (m, 2H), 0.98 (t, 6H, J=7.2 Hz), 0.83 (t, 3H, J=6.8 Hz).
실시예 95: (R)-4'-(((2,3-다이하이드록시프로필)아미노)메틸)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드
Figure pat00188
분석 데이터: LCMS: 599.35 (M+1)+; HPLC: 93.58% (@ 254 nm) (Rt; 3.808; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.18 (t, 1H, J=4.8 Hz), 7.56 (d, 2H, J=8 Hz), 7.37-7.39 (m, 3H), 7.16 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.51-4.56 (m, 2H), 4.28 (d, 2H, J=4.8 Hz), 3.81-3.84 (m, 2H), 3.73 (s, 2H), 3.55 (m, 1H), 3.11-3.25 (m, 3H), 3.01-3.09 (m, 3H), 2.56-2.61 (m, 1H), 2.41-2.46 (m, 2H), 2.24 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.15 (s, 3H), 1.65-1.67 (m, 2H), 1.48-1.56 (m, 2H), 0.83 (t, 3H, J=6.8 Hz).
실시예 96: (S)-4'-(((2,3-다이하이드록시프로필)아미노)메틸)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드
Figure pat00189
분석 데이터: LCMS: 577.25 (M+1)+; HPLC: 96.96% (@ 254 nm) (Rt; 3.812; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.19 (t, 1H, J=4.8 Hz), 7.55 (d, 2H, J=8 Hz), 7.37-7.39 (m, 3H), 7.21 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.55 (m, 3H), 4.28 (d, 2H, J=4.8 Hz), 3.81-3.83 (m, 2H), 3.72 (s, 2H), 3.55 (bs, 1H), 3.22-3.28 (m, 3H), 3.01-3.11 (m, 3H), 2.57-2.60 (m, 1H), 2.41-2.45 (m, 2H), 2.24 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.64-1.67 (m, 2H), 1.51-1.56 (m, 2H), 0.83 (t, 3H, J=7.2 Hz).
실시예 97: 4'-(((사이클로프로필메틸)(메틸)아미노)메틸)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드
Figure pat00190
분석 데이터: LCMS: 571.40 (M+1)+; HPLC: 99.80% (@ 254 nm) (Rt; 4.243; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.18 (t, 1H, J=4.8 Hz), 7.57 (d, 2H, J=8 Hz), 7.40 (s, 1H), 7.37 (d, 2H, J=8 Hz), 7.22 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.81-3.83 (m, 2H), 3.53 (s, 2H), 3.11-3.25 (m, 2H), 2.99-3.09 (m, 3H), 2.25-2.32 (m, 2H), 2.24 (s, 3H), 2.20 (s, 6H), 2.10 (s, 3H), 1.65-1.67 (m, 2H), 1.48-1.56 (m, 2H), 0.88 (m, 1H), 0.83 (t, 3H, J=7.2 Hz), 0.46-0.47 (m, 2H), 0.081 (m, 2H).
실시예 98: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-4'-(((2-하이드록시에틸)아미노)메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드
Figure pat00191
분석 데이터: LCMS: 547.35 (M+1)+; HPLC: 96.46% (@ 254 nm) (Rt; 3.862; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.44 (s, 1H), 8.19 (t, 1H, J=4.4 Hz), 7.55 (d, 2H, J=8 Hz), 7.38 (d, 2H, J=4.4 Hz), 7.37 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.47 (bs, 2H), 4.28 (d, 2H, J=3.6 Hz), 3.81-3.83 (m, 2H), 3.72 (s, 2H), 3.46 (m, 2H), 3.22-3.27 (m, 2H), 3.07-3.09 (m, 2H), 3.01-3.06 (m, 1H), 2.55-2.57 (m, 2H), 2.23 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.64-1.67 (m, 2H), 1.51-1.53 (m, 2H), 0.83 (t, 3H, J=6.8 Hz).
실시예 99: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-4'-(((3-하이드록시프로필)아미노)메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드
Figure pat00192
분석 데이터: LCMS: 561.30 (M+1)+; HPLC: 96.82% (@ 254 nm) (Rt; 3.911; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.47 (s, 1H), 8.19 (t, 1H), 7.55 (d, 2H, J=7.6 Hz), 7.39 (d, 2H), 7.37 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.46 (bs, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.81-3.83 (m, 2H), 3.69 (s, 2H), 3.45 (t, 2H, J=6.4 Hz), 3.22-3.27 (m, 2H), 3.07-3.09 (m, 2H), 3.01-3.06 (m, 1H), 2.23 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.14 (s, 3H), 1.64-1.67 (m, 2H), 1.51-1.61 (m, 4H), 0.83 (t, 3H, J=6.8 Hz) [용매 피크에서 합쳐진 1H].
실시예 100: 4'-((비스(2-하이드록시에틸)아미노)메틸)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드 TFA 염
Figure pat00193
TFA 염의 분석 데이터: LCMS: 591.25 (M+1)+; HPLC: 99.00% (@ 254 nm) (Rt; 3.860; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.47 (s, 1H), 9.38 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.77 (d, 2H, J=3.2 Hz), 7.65 (s, 2H), 7.63 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 5.87 (s, 1H), 4.46 (s, 2H), 4.29 (d, 2H, J=4.8 Hz), 3.78-3.90 (m, 6H), 3.18-3.28 (m, 9H), 2.27 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.58-1.67 (m, 4H), 0.85 (t, 3H, J=6.8 Hz).
실시예 101: 4'-(((2-아미노에틸)아미노)메틸)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드
Figure pat00194
분석 데이터: LCMS: 546.35 (M+1)+; HPLC: 93.12% (@ 254 nm) (Rt; 3.721; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.47 (s, 1H), 9.19 (bs, 1H), 8.20 (t, 1H), 7.99 (bs, 2H), 7.74 (d, 2H, J=8 Hz), 7.57 (d, 2H, J=8 Hz), 7.42 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.26-4.29 (m, 3H), 3.82-3.84 (m, 2H), 3.11-3.27 (m, 8H), 3.03 (s, 2H), 2.24 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.64-1.67 (m, 2H), 1.55 (m, 2H), 0.83 (t, 3H, J=6 Hz).
실시예 102: 4'-(((3-아미노프로필)아미노)메틸)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드 TFA 염
Figure pat00195
TFA 염의 분석 데이터: LCMS: 560.20 (M+1)+; HPLC: 98.90% (@ 254 nm) (Rt; 3.611; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.48 (s, 1H), 8.93 (bs, 2H), 8.20 (t, 1H), 7.79 (bs, 2H), 7.73 (d, 2H, J=8 Hz), 7.55 (d, 2H, J=8 Hz), 7.43 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 5.87 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4.4 Hz), 4.19 (m, 2H), 3.81-3.85 (m, 2H), 3.25 (t, 2H, J=11.2 Hz), 3.11-3.16 (m, 3H), 3.01 (m, 3H), 2.87-2.88 (m, 1H), 2.24 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.89-1.92 (m, 2H), 1.65-1.68 (m, 2H), 1.53-1.55 (m, 2H), 0.83 (t, 3H, J=6.8 Hz).
실시예 103: 4'-(((2,2-다이플루오로에틸)아미노)메틸)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드
Figure pat00196
분석 데이터: LCMS: 567.30 (M+1)+; HPLC: 92.86% (@ 254 nm) (Rt; 3.984; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (s, 1H), 8.19 (t, 1H), 7.57 (d, 2H, J=7.2 Hz), 7.38-7.40 (m, 3H), 7.21 (s, 1H), 6.01 (t, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.81-3.84 (m, 2H), 3.77 (s, 2H), 3.22-3.28 (m, 2H), 3.06-3.09 (m, 2H), 3.01 (m, 1H), 2.84 (t, 2H), 2.24 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.65-1.67 (m, 2H), 1.51-1.53 (m, 2H), 0.83 (t, 3H, J=6.8 Hz).
실시예 104: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-4'-(((2,2,2-트라이플루오로에틸)아미노)메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드
Figure pat00197
분석 데이터: LCMS: 585.25 (M+1)+; HPLC: 99.52% (@ 254 nm) (Rt; 4.175; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (s, 1H), 8.19 (t, 1H), 7.58 (d, 2H, J=8 Hz), 7.39-7.40 (m, 3H), 7.21 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.80-3.83 (m, 4H), 2.93-3.27 (m, 8H), 2.24 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.64-1.67 (m, 2H), 1.51-1.53 (m, 2H), 0.83 (t, 3H, J=6.8 Hz).
실시예 105: 4'-(2-옥사-6-아자스피로[3.3]헵탄-6-일메틸)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드
Figure pat00198
분석 데이터: LCMS: 585.40 (M+1)+; HPLC: 99.67% (@ 254 nm) (Rt; 3.99; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (bs, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.55-7.54 (m, 2H), 7.38 (s, 1H), 7.31-7.29 (m, 2H), 7.20 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.60 (s, 3H), 4.28 (d, 2H, J=4.8 Hz), 3.83-3.81 (m, 2H), 3.53 (s, 2H), 3.83-3.81 (m, 2H), 3.32 (용매 피크에서 합쳐진 2개의 양성자), 3.24-3.22 (m, 4H), 3.09-3.01 (m, 3H), 2.24 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.67-1.64 (m, 2H), 1.53-1.51 (m, 2H), 0.83 (t, 3H, J=6.4 Hz).
실시예 108: 5-(((1r,4r)-4-아미노사이클로헥실)(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4'-((다이메틸아미노)메틸)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00199
단계 1: tert-부틸 ((1r,4r)-4-((5-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-4'-((다이메틸아미노)메틸)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-일)(메틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트의 합성
Na2CO3(3.6 당량)을 다이옥산/물 혼합물(5 ㎖+1 ㎖) 중의 tert-부틸 ((1r,4r)-4-((5-브로모-3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸페닐)(메틸)아미노)-사이클로헥실)카바메이트(1 당량) 및 N,N-다이메틸-1-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)페닐)메탄아민(1.2 당량)의 교반된 용액에 첨가하고 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.1 당량)을 첨가하고 반응 플라스크를 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기 추출물을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 생성물을 수득한 후, 이 생성물을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 ((1r,4r)-4-((5-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-4'-((다이메틸아미노)메틸)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-일)(메틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트를 수득하였다(0.08 g, 48.78%).
단계 2: 5-(((1r,4r)-4-아미노사이클로헥실)(메틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4'-((다이메틸아미노)메틸)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
DCM(5 ㎖) 중의 tert-부틸 ((1r,4r)-4-((5-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-4'-((다이메틸아미노)메틸)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-일)(메틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트(0.08 g)의 교반된 용액을 0℃까지 냉각시키고 TFA(2 ㎖)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 건조될 때까지 농축하여 TFA 염으로서 표제 화합물을 수득하였다(0.06 g, 89.55%). LCMS: 530.35 (M+1)+; HPLC: 89.74% (@ 254 nm) (Rt; 3.557; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (s, 1H), 9.74 (bs, 1H), 8.17 (t, 1H), 7.74-7.76 (m, 4H), 7.55 (d, 2H, J=7.6 Hz), 7.36 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.28-4.31 (m, 4H), 2.97 (bs, 1H), 2.74 (d, 6H, J=4.4 Hz), 2.66 (s, 3H), 2.20 (d, 6H, J=2 Hz), 2.10 (s, 3H), 1.92-1.95 (m, 2H), 1.74-1.77 (m, 2H), 1.52-1.57 (m, 2H), 1.28-1.30 (m, 2H) [용매 피크에서 합쳐진 1H].
실시예 109: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)벤즈아미드의 합성
Figure pat00200
Na2CO3(0.16 g, 1.51 mmol)을 다이옥산/물 혼합물(5 ㎖+1 ㎖) 중의 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드(0.2 g, 0.42 mmol) 및 (1-메틸-1H-피라졸-4-일)보론산(0.105 g, 0.505 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.048 g, 0.042 mmol)을 첨가하고 반응 혼합물을 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 그 다음, 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 추출물을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 생성물을 수득한 후, 이 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.100 g, 50%). LCMS: 478.20 (M+1)+; HPLC: 95.82% (@ 254 nm) (Rt; 4.322; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 8.10 (t, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.13 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.27 (d, 2H, J=4.8 Hz), 3.81-3.83 (m, 5H), 3.21-3.26 (m, 2H), 2.98-3.08 (m, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.17 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.63-1.66 (m, 2H), 1.48-1.52 (m, 2H), 0.86 (t, 3H, J=7.2 Hz).
실시예 110: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(6-((다이메틸아미노)메틸)피리딘-3-일)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드의 합성
Figure pat00201
단계 1: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-5-(6-포르밀피리딘-3-일)-2-메틸벤즈아미드의 합성
Na2CO3(0.82 g, 7.74 mmol)을 다이옥산/물 혼합물(15 ㎖+3 ㎖) 중의 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드(1 g, 2.15 mmol) 및 (6-포르밀피리딘-3-일)보론산(0.539 g, 2.31 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.288 g, 0.25 mmol)을 첨가하고 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응물을 80℃에서 2시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 원하는 화합물을 수득하였다(0.60 g, 57%).
단계 2: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(6-((다이메틸아미노)메틸)피리딘-3-일)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드의 합성
아세트산(0.073 g, 1.021 mmol)을 다이클로로에탄(3 ㎖) 중의 N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-5-(6-포르밀피리딘-3-일)-2-메틸벤즈아미드(0.102 g, 0.203 mmol) 및 다이메틸아민(0.044 g, 2 M 0.507 ㎖, 1.01 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 반응물을 실온에서 20분 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(0.129 g, 0.609 mmol)를 0℃에서 첨가하고 반응물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 완결 시, 용매를 감압 하에 제거하고 물을 첨가하고 10% MeOH/DCM을 사용하여 추출을 수행하였다. 모은 유기층을 황산나트륨 상에서 건조하고 감압 하에 농축하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.08 g, 75%). LCMS: 532.30 (M+1)+; HPLC: 97.53% (@ 254 nm) (Rt; 3.878; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (s, 1H), 8.75 (d, 1H, J=1.2 Hz), 8.20 (t, 1H, J=4.8 Hz), 8.02 (d, 1H, J=6.4 Hz), 7.49 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 5.87 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4.8 Hz), 3.81-3.84 (m, 2H), 3.56 (s, 2H), 3.22-3.24 (m, 2H), 3.02-3.12 (m, 3H), 2.25 (s, 3H), 2.21 (s, 6H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.65-1.67 (m, 2H), 1.50-1.56 (m, 2H), 0.82 (t, 3H, J=6.8 Hz).
실시예 111: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸-5-(6-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)피리딘-3-일)벤즈아미드의 합성
Figure pat00202
단계 1a: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-5-(6-포르밀피리딘-3-일)-2-메틸벤즈아미드의 합성
Figure pat00203
Na2CO3(0.82 g, 7.74 mmol)을 다이옥산/물 혼합물(15 ㎖+3 ㎖) 중의 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드(1 g, 2.15 mmol) 및 (6-포르밀피리딘-3-일)보론산(0.539 g, 2.31 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.288 g, 0.25 mmol)을 첨가하고 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응물을 80℃에서 2시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 원하는 화합물을 수득하였다(0.60 g, 57%).
단계 1b: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-5-(6-(하이드록시메틸)피리딘-3-일)-2-메틸벤즈아미드의 합성
Figure pat00204
상기 반응을 1.5 g 규모로 반복하였을 때, N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-5-(6-(하이드록시메틸)피리딘-3-일)-2-메틸벤즈아미드가 단리되었다(0.350 g, 22%).
단계 2: 5-(6-(브로모메틸)피리딘-3-일)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드의 합성
Figure pat00205
트라이페닐포스핀(0.361 g, 1.38 mmol)을 DCM(5 ㎖) 중의 N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-5-(6-(하이드록시메틸)피리딘-3-일)-2-메틸벤즈아미드(0.35 g, 0.694 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 실온에서 10분 동안 교반하였다. 최종적으로 CBr4(0.318 g, 1.38 mmol)를 나누어 첨가하고, 발생된 용액을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 완결 시, 물을 반응물에 첨가하고 DCM을 사용하여 추출을 수행하였다. 모은 유기층을 황산나트륨 상에서 건조하고 감압 하에 농축하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 컬럼 정제하여 원하는 화합물을 수득하였다(0.35 g, 89%).
단계 3: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸-5-(6-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)피리딘-3-일)벤즈아미드의 합성
1-메틸-피페라진(0.309 g, 1.54 mmol)을 실온에서 THF(2 ㎖)에 용해된 5-(6-(브로모메틸)피리딘-3-일)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드(0.175 g, 0.309 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 동일한 온도에서 18시간 동안 교반하였다. 완결 시, 물을 반응물에 첨가하고 DCM을 사용하여 추출을 수행하였다. 모은 유기층을 황산나트륨 상에서 건조하고 감압 하에 농축하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 분취용 HPLC로 정제하여 TFA 염으로서 표제 화합물을 수득하였다(0.028 g, 15%). LCMS: 587.40 (M+1)+; HPLC: 98.05% (@ 254 nm) (Rt; 3.831; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (s, 1H), 8.89 (s, 1H), 8.21 (d, 2H, J=7.6 Hz), 7.59 (d, 2H, J=7.6 Hz), 7.35 (s, 1H), 5.87 (s, 1H), 4.29 (d, 2H, J=4 Hz), 3.96-4.04 (m, 2H), 3.83-3.86 (m, 2H), 3.16-3.43 (m, 13H), 2.81 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.67 (m, 2H), 1.56 (m, 2H), 0.84 (t, 3H, J=6.4 Hz).
실시예 112: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4,4'-다이메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00206
2 M Na2CO3 수용액(0.75 ㎖, 1.51 mmol)을 다이옥산(3 ㎖) 중의 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드(200 mg, 0.42 mmol) 및 p-톨릴 보론산(86 mg, 0.63 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고, 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(48 mg, 0.04 mmol)을 첨가하고 아르곤으로 15분 동안 다시 퍼징하였다. 반응물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM(3회)으로 추출하였다. 모은 유기층을 황산나트륨 상에서 건조하였다. 용매를 감압 하에 제거한 후 컬럼 크로마토그래피 정제를 수행하여 표제 화합물을 수득하였다(150 mg, 73%). LCMS: 488.20 (M+1)+; HPLC: 99.33% (@ 254 nm) (Rt; 5.393; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (s, 1H), 8.19 (t, 1H), 7.51 (d, 2H, J=8 Hz), 7.37 (s, 1H), 7.25 (d, 2H, J=8 Hz), 7.19 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.81-3.83 (m, 2H), 3.22-3.27 (m, 2H), 3.07-3.09 (m, 2H), 3.01 (m, 1H), 2.33 (s, 3H), 2.23 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.64-1.67 (m, 2H), 1.51-1.55 (m, 2H), 0.82 (t, 3H, J=6.8 Hz).
실시예 113: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4'-(하이드록시메틸)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00207
2 M Na2CO3 수용액(0.75 ㎖, 1.51 mmol)을 다이옥산(2.5 ㎖) 중의 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드(200 mg, 0.42 mmol) 및 4-(하이드록시메틸)페닐보론산(96 mg, 0.63 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고, 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(48 mg, 0.04 mmol)을 첨가하고 아르곤으로 15분 동안 다시 퍼징하였다. 반응물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM(3회)으로 추출하였다. 모은 유기층을 황산나트륨 상에서 건조하였다. 용매를 감압 하에 제거한 후 컬럼 크로마토그래피 정제를 수행하여 표제 화합물을 수득하였다(130 mg, 62%). LCMS: 504.15 (M+1)+; HPLC: 98.86% (@ 254 nm) (Rt; 4.240; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.19 (t, 1H), 7.57 (d, 2H, J=7.2 Hz), 7.39 (s, 1H), 7.37 (d, 2H), 7.21 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 5.20 (t, 1H, J=5.2 Hz), 4.52 (d, 2H, J=5.6 Hz), 4.28 (d, 2H, J=3.6 Hz), 3.81-3.84 (m, 2H), 3.22-3.32 (m, 2H), 3.08-3.09 (m, 2H), 3.01 (m, 1H), 2.24 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.65-1.67 (m, 2H), 1.51-1.53 (m, 2H), 0.83 (t, 3H, J=6.4 Hz).
실시예 114: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-3'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00208
단계 1: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-3'-포르밀-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
2 M Na2CO3 수용액(1.5 ㎖, 3.03 mmol)을 다이옥산(2 ㎖) 중의 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드(400 mg, 0.84 mmol) 및 (3-포르밀페닐)보론산(189 mg, 1.26 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고, 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(97 mg, 0.08 mmol)을 첨가하고 아르곤으로 15분 동안 다시 퍼징하였다. 반응물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM(3회)으로 추출하였다. 모은 유기층을 황산나트륨 상에서 건조하였다. 용매를 감압 하에 제거한 후 컬럼 크로마토그래피 정제를 수행하여 표제 화합물을 수득하였다(270 mg, 64%).
단계 2: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-3'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
아세트산(194 mg, 3.23 mmol)을 다이클로로에탄(5 ㎖) 중의 N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-3'-포르밀-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드(270 mg, 0.53 mmol) 및 모르폴린(94 mg, 1.07 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 반응물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(343 mg, 1.61 mmol)를 0℃에서 반응 혼합물에 첨가하고 실온에 도달하게 하고 교반을 밤새 계속 수행하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 다이클로로메탄으로 희석하고 물 및 포화된 중탄산나트륨 수용액으로 세척하고 황산나트륨 상에서 건조하였다. 용매를 감압 하에 제거한 후 컬럼 크로마토그래피 정제를 수행하여 표제 화합물을 수득하였다(200 mg, 65%). LCMS: 573.25 (M+1)+; HPLC: 90.21% (@ 254 nm) (Rt; 4.048; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.20 (t, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.49 (d, 2H, J=7.6 Hz), 7.39 (d, 1H, J=5.6 Hz), 7.29 (d, 1H, J=7.2 Hz), 7.20 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.82-3.84 (m, 2H), 3.56 (m, 4H), 3.52 (s, 2H), 3.22-3.30 (m, 2H), 3.08-3.10 (m, 2H), 3.01 (m, 1H), 2.37 (s, 4H), 2.24 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.65-1.67 (m, 2H), 1.51-1.54 (m, 2H), 0.83 (t, 3H, J=6.4 Hz).
실시예 115: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-4'-((3-(모르폴리노메틸)아제티딘-1-일)메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드
Figure pat00209
화합물 115를 실시예 67에 기재된 방법과 유사한 방법으로 제조하였다. 분석 데이터: LCMS: 642.45 (M+1)+; HPLC: 93.13% (@ 254 nm) (Rt; 3.803; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.18 (t, 1H), 7.54 (d, 2H, J=7.6 Hz), 7.38 (s, 1H), 7.31 (d, 2H, J=7.6 Hz), 7.20 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4 Hz), 3.81-3.83 (m, 2H), 3.52-3.53 (m, 6H), 3.22-3.24 (m, 2H), 3.07-3.09 (m, 2H), 3.01 (m, 1H), 2.79 (s, 2H), 2.56-2.58 (m, 2H), 2.29 (m, 2H), 2.28 (s, 3H), 2.23 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.64-1.67 (m, 2H), 1.51-1.53 (m, 2H), 0.82 (t, 3H, J=6.8 Hz).
실시예 116: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-5-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00210
단계 1: 메틸 4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-5-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-[1,1'-비페닐]-3-카복실레이트의 합성
2 M Na2CO3 수용액(3.30 ㎖, 6.60 mmol)을 다이옥산(9 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-2-메틸-3-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)벤조에이트(600 mg, 1.83 mmol) 및 4-[4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질]모르폴린(833 mg, 2.75 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고, 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(211 mg, 0.18 mmol)을 첨가하고 아르곤으로 15분 동안 다시 퍼징하였다. 반응물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM(3회)으로 추출하였다. 모은 유기층을 황산나트륨 상에서 건조하였다. 용매를 감압 하에 제거한 후 컬럼 크로마토그래피 정제를 수행하여 표제 화합물을 수득하였다(500 mg, 77%).
단계 2: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-5-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
수성 NaOH(73 mg, 1.76 mmol)를 에탄올(10 ㎖) 중의 메틸 4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-5-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-[1,1'-비페닐]-3-카복실레이트(500 mg, 1.17 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 교반을 60℃에서 1시간 동안 계속 수행하였다. 완결 후, 에탄올을 감압 하에 제거하고 묽은 HCl을 사용하여 pH 6까지 산성화하였다. 수성층을 에틸 아세테이트(5회)로 추출하고 모은 유기층을 황산나트륨 상에서 건조하였다. 용매를 감압 하에 제거하여 각각의 산을 수득하였다(350 mg, 72.4%).
EDCI(139 mg, 0.73 mmol) 및 트라이에틸아민(0.17 ㎖, 1.21 mmol)을 DMF(10 ㎖) 중의 상기 산(200 mg, 0.48 mmol)의 교반된 빙냉 용액에 첨가하였다. 그 다음, 0℃에서 15분의 교반 시간 후, HOBT(78 mg, 0.58 mmol)에 이어서 3-(아미노메틸)-4,6-다이메틸피리딘-2(1H)-온(148 mg, 0.97 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에 도달하고 하고 교반을 밤새 계속 수행하였다. 완결 시, 반응물을 얼음에 붓고 10% MeOH/DCM(5회)으로 추출하였다. 모은 유기층을 물로 세척하고 황산나트륨 상에서 건조하였다. 용매를 감압 하에 제거한 후 용매 세척을 수행하여 표제 화합물을 수득하였다(50 mg, 19%). LCMS: 545.15 (M+1)+; HPLC: 95.86% (@ 254 nm) (Rt; 4.382; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.03 (m, 1H), 7.71 (bs, 1H), 7.54 (d, 1H, J=7.6 Hz), 7.34 (d, 2H, J=7.6 Hz), 6.85 (s, 1H), 6.70 (s, 1H), 5.83 (d, 2H, J=7.6 Hz), 4.58 (d, 1H, J=7.6 Hz), 4.26 (d, 2H, J=4 Hz), 4.04 (d, 2 H, J=4.8 Hz), 3.85-3.88 (m, 2H), 3.62 (m, 1H), 3.57 (t, 2H), 3.41-3.47 (m, 3H), 2.32-2.36 (m, 4H), 2.19 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 1.88-1.91 (m, 2H), 1.50-1.52 (m, 2H).
실시예 117: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸아미노)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00211
단계 1: 메틸 5-브로모-3-(에틸아미노)-2-메틸벤조에이트의 합성
아세트산(1.47 g, 24.58 mmol)을 다이클로로에탄(10 ㎖) 중의 메틸 3-아미노-5-브로모-2-메틸벤조에이트(1.0 g, 4.09 mmol) 및 아세트알데하이드(180 mg, 4.09 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 반응물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(2.6 g, 12.29 mmol)를 0℃에서 첨가하고 실온에 도달하게 하고 교반을 2시간 동안 계속 수행하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 다이클로로메탄으로 희석하고 물 및 포화된 중탄산나트륨 수용액으로 세척하고 황산나트륨 상에서 건조하였다. 용매를 감압 하에 제거한 후 컬럼 크로마토그래피 정제를 수행하여 원하는 화합물을 수득하였다(600 mg, 55%).
단계 2: 메틸 5-(에틸아미노)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복실레이트의 합성
2 M Na2CO3 수용액(3.96 ㎖, 7.93 mmol)을 다이옥산(5 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-3-(에틸아미노)-2-메틸벤조에이트(600 mg, 2.2 mmol) 및 4-[4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질]모르폴린(1.0 g, 3.3 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고, 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(255 mg, 0.22 mmol)을 첨가하고 아르곤으로 15분 동안 다시 퍼징하였다. 반응물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM(3회)으로 추출하였다. 모은 유기층을 황산나트륨 상에서 건조하였다. 용매를 감압 하에 제거한 후 컬럼 크로마토그래피 정제를 수행하여 원하는 화합물을 수득하였다(800 mg, 98%).
단계 3: 5-(에틸아미노)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복실산의 합성
수성 NaOH(130 mg, 3.25 mmol)를 에탄올(10 ㎖) 중의 화합물 6(800 mg, 2.17 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 교반을 60℃에서 1시간 동안 계속 수행하였다. 완결 후, 에탄올을 감압 하에 제거하고 묽은 HCl을 사용하여 pH 약 6까지 산성화하였다. 수성층을 에틸 아세테이트(5회)로 추출하고, 모은 유기층을 황산나트륨 상에서 건조하였다. 용매를 감압 하에 제거하여 원하는 화합물을 수득하였다(700 mg, 91%). LCMS: 355.05 (M+1)+; HPLC: 89.74% (@ 254 nm) (Rt; 3.854; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (CD3OD, 400 MHz) δ 8.24 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.84 (d, 2H, J=8 Hz), 7.71 (d, 2H, J=8.4 Hz), 4.45 (s, 2H), 4.06 (d, 2H, J=11.2 Hz), 3.79 (t, 2H, J=12 Hz), 3.53 (q, 2H, J=7.2 Hz), 3.40-3.43 (m, 2H), 3.22-3.31 (m, 2H), 2.66 (s, 3H), 1.45 (t, 3H, J=7.2 Hz).
단계 4: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸아미노)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
5-(에틸아미노)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복실산(300 mg, 0.84 mmol)을 DMSO(2 ㎖)에 용해시키고 3-(아미노메틸)-4,6-다이메틸피리딘-2(1H)-온(257 mg, 1.69 mmol)을 첨가하였다. 실온에서 15분 동안 교반한 후, PyBOP(660 mg, 1.26 mmol)를 반응 혼합물에 첨가하고 교반을 밤새 계속 수행하였다. 완결 후, 반응물을 얼음에 붓고 10% MeOH/DCM(5회)으로 추출하였다. 모은 유기층을 물로 세척하고 황산나트륨 상에서 건조하였다. 용매를 감압 하에 제거한 후 용매 세척을 수행하여 표제 화합물을 수득하였다(100 mg, 24%). LCMS: 489.20 (M+1)+; HPLC: 96.41% (@ 254 nm) (Rt; 4.060; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (s, 1H), 9.90 (s, 1H), 8.06 (t, 1H), 7.73 (d, 2H, J=7.6 Hz), 7.55 (d, 2H, J=7.2 Hz), 6.80 (d, 2H, J=7.6 Hz), 5.86 (s, 1H), 4.38 (s, 2H), 4.27 (d, 2H, J=4 Hz), 3.95 (m, 2H), 3.62-3.65 (m, 2H), 3.28-3.31 (m, 2H), 3.20-3.24 (m, 2H), 3.14-3.19 (m, 2H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 2.06 (s, 3H), 1.21 (t, 3H, J=6.8 Hz).
실시예 118: 5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-N-((4-(하이드록시메틸)-6-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00212
단계 1: tert-부틸다이메틸(프로프-2-인-1-일옥시)실란의 합성
TBDMSCl(40.24 g, 267.5 mmol)을 다이클로로에탄(500 ㎖) 중의 프로프-2-인-1-올(10.0 g, 178.3 mmol) 및 이미다졸(18.2 mg, 267.5 mmol)의 빙냉 교반된 용액에 첨가하고 교반을 0℃에서 1.5시간 동안 계속 수행하였다. 완결 시, 포화된 염화암모늄 수용액을 반응 혼합물에 첨가하고 에틸 아세테이트(3회)로 추출하였다. 모은 유기층을 황산나트륨 상에서 건조하였다. 용매를 감압 하에 제거한 후 용매 세척을 수행하여 원하는 화합물을 수득하였다(20 g, 67%).
단계 2: 5-((tert-부틸다이메틸실릴)옥시)펜트-3-인-2-온의 합성
n-BuLi(90 ㎖, 140.0 mmol)을 -78℃에서 THF(400 ㎖) 중의 tert-부틸다이메틸(프로프-2-인-1-일옥시)실란(20.0 g, 116.9 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고, 반응 혼합물을 2시간 이내에 실온에 도달하게 하였다. 그 다음, 반응 혼합물을 -78℃까지 냉각시키고 보론트라이플루오라이드 에테레이트(18 ㎖, 140.0 mmol)를 첨가하였다. 10분 동안 교반한 후, 아세트산 무수물(15 ㎖, 153.0 mmol)을 첨가하고 반응 혼합물을 2.5시간 이내에 실온에 도달하게 하였다. 반응물을 1 N NaOH 수용액으로 급랭시키고 에틸 아세테이트(3회)로 추출하였다. 모은 유기층을 황산나트륨 상에서 건조하였다. 용매를 감압 하에 제거한 후 용매 세척을 수행하여 원하는 화합물을 수득하였다(13 g, 52%).
단계 3: 4-(((tert-부틸다이메틸실릴)옥시)메틸)-6-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-카보니트릴의 합성
피페리딘아세테이트(촉매량)를 실온에서 에탄올과 물의 혼합물(9:1)(270 ㎖) 중의 화합물 5-((tert-부틸다이메틸실릴)옥시)펜트-3-인-2-온(13.0 g, 61.0 mmol) 및 시아노아세트아미드(6.2 g, 73.2 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 반응 혼합물을 환류 온도에서 5시간 동안 가열하였다. 용매의 제거 후, 물을 첨가하고 고체 생성물을 여과하였다. 상기 고체 생성물을 물에 이어서 에테르 및 헥산으로 세척하여 원하는 화합물을 수득하였다(5.5 g, 32%).
단계 4: 3-(아미노메틸)-4-(((tert-부틸다이메틸실릴)옥시)메틸)-6-메틸피리딘-2(1H)-온의 합성
레이니 니켈(정량)을 메탄올(100 ㎖) 및 암모니아(30 ㎖) 중의 4-(((tert-부틸다이메틸실릴)옥시)메틸)-6-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-카보니트릴(5.5 g, 19.7 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 반응 혼합물을 기구 압력 하에 수소의 존재 하에서 14시간 동안 교반하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고 메탄올로 세척하였다. 용매를 감압 하에 제거하여 원하는 화합물을 수득하였다(3.5 g, 63%).
단계 5: 5-브로모-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-N-((4-(하이드록시메틸)-6-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드의 합성
수성 NaOH(70 mg, 1.7 mmol)를 에탄올(60 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤조에이트(400 mg, 1.1 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 교반을 60℃에서 1시간 동안 계속 수행하였다. 완결 후, 에탄올을 감압 하에 제거하고 묽은 HCl을 사용하여 pH 약 6까지 산성화하였다. 수성층을 에틸 아세테이트(5회)로 추출하고 모은 유기층을 황산나트륨 상에서 건조하였다. 용매를 감압 하에 제거하여 각각의 산을 수득하였다(320 mg, 83.55%).
그 다음, 상기 산(400 mg, 1.1 mmol)을 DMSO(4 ㎖)에 용해시키고 3-(아미노메틸)-4-(((tert-부틸다이메틸실릴)옥시)메틸)-6-메틸피리딘-2(1H)-온(525 mg, 1.7 mmol)을 첨가하였다. 실온에서 15분 동안 교반한 후, PyBOP(900 mg, 1.6 mmol)를 반응 혼합물에 첨가하고 교반을 밤새 계속 수행하였다. 완결 후, 반응물을 얼음에 붓고 10% MeOH/DCM(5회)으로 추출하였다. 모은 유기층을 물로 세척하고 황산나트륨 상에서 건조하였다. 용매를 감압 하에 제거한 후 용매 세척을 수행하여 원하는 화합물을 수득하였다(230 mg, 40%).
단계 6: 5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-N-((4-(하이드록시메틸)-6-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
2 M Na2CO3 수용액(0.9 ㎖, 1.8 mmol)을 다이옥산(5 ㎖) 중의 5-브로모-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-N-((4-(하이드록시메틸)-6-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드(250 mg, 0.5 mmol) 및 4-[4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질]모르폴린(230 mg, 7.6 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고, 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(57 mg, 0.05 mmol)을 첨가하고 아르곤으로 15분 동안 다시 퍼징하였다. 반응물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM(3회)으로 추출하였다. 모은 유기층을 황산나트륨 상에서 건조하였다. 용매를 감압 하에 제거한 후 컬럼 크로마토그래피 정제를 수행하여 표제 화합물을 수득하였다(60 mg, 25%). LCMS: 589.35 (M+1)+; HPLC: 95.58% (@ 254 nm) (Rt; 3.524; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.54 (s, 1H), 8.22 (t, 1H), 7.57 (d, 2H, J=7.6 Hz), 7.38 (d, 2H, J=5.6 Hz), 7.36 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 6.16 (s, 1H), 5.28 (m, 1H), 4.52 (d, 2H, J=4.8 Hz), 4.25 (d, 2H, J=3.6 Hz), 3.81-3.83 (m, 2H), 3.57 (m, 4H), 3.48 (s, 2H), 3.01-3.09 (m, 3H), 2.36 (m, 4H), 2.23 (s, 3H), 2.15 (s, 3H), 1.64-1.67 (m, 2H), 1.51-1.53 (m, 2H), 1.23 (m, 2H), 0.82 (t, 3H, J=6.4 Hz).
실시예 119: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-5-(N-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아세트아미도)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00213
단계 1: 메틸 5-브로모-2-메틸-3-(N-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아세트아미도)벤조에이트의 합성
아세트산 무수물(3 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-2-메틸-3-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)벤조에이트(520 mg, 1.58 mmol) 용액을 70℃에서 6시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고 포화된 NaHCO3으로 급랭시키고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 농축하고 실리카 겔(100 내지 200) 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 목적 화합물을 수득하였다(400 mg, 68%).
단계 2: 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-3-(N-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아세트아미도)벤즈아미드의 합성
에탄올:물(2:1)(5 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-2-메틸-3-(N-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아세트아미도)벤조에이트(400 mg, 1.08 mmol) 및 NaOH(47 mg, 1.13 mmol)의 혼합물을 70℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 건조될 때까지 농축하고 미정제 물질을 물에 용해시키고 HCl을 느리게 첨가하여 pH를 5 내지 6으로 조절하고 DCM 중의 10% MeOH로 추출하였다. 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 감압 하에 농축하여 400 mg의 산을 수득하였다.
상기 미정제 산(400 mg, 1.23 mmol), 3-(아미노메틸)-4,6-다이메틸피리딘-2(1H)-온(370 mg, 2.46 mmol), PyBOP(960 mg, 1.85 mmol) 및 트라이에틸아민(0.17 ㎖, 1.23) 혼합물을 실온에서 DMSO(2 ㎖) 중에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고 화합물을 DCM 중의 10% MeOH로 추출하고 Na2SO4 상에서 건조하고 농축하고, 미정제 물질을 실리카 겔(100 내지 200) 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-3-(N-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아세트아미도)벤즈아미드를 수득하였다(95 mg, 17.3%).
단계 3: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-5-(N-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아세트아미도)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
다이옥산(3 ㎖) 중의 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-3-(N-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아세트아미도)벤즈아미드(50 mg, 0.10 mmol), (4-(모르폴리노메틸)페닐)보론산(41 mg, 0.13 mmol) 및 탄산나트륨(27 mg, 0.25 mmol)의 용액을 아르곤으로 20분 동안 탈기하였다. Pd(PPh3)4(12 mg, 0.0012 mmol)을 혼합물에 첨가하고 100℃에서 밤새 가열하였다. 반응물을 실온까지 냉각시키고 물로 희석한 후 DCM 중의 10% MeOH로 추출하고, 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 농축하고, 발생된 미정제 생성물을 실리카 겔(100 내지 200) 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(26 mg, 23%).
LCMS: 609.35 (M+23)+; HPLC: 97.81% (@ 254 nm) (Rt; 4.407; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.48 (bs, 1H), 8.41 (t, 1H), 7.67-7.69 (m, 2H), 7.39-7.56 (m, 4H), 5.87 (s, 1H), 4.54-4.57 (m, 1H), 4.30-4.31 (d, 2H, J=4 Hz), 3.77-3.85 (m, 2H), 3.50-3.58 (m, 6H), 2.37 (m, 4H), 2.22 (s, 3H), 2.16 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.88-1.91 (m, 1H), 1.51-1.65 (m, 6H), 용매 피크에서 합쳐진 2개의 양성자.
실시예 120: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-3'-플루오로-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00214
단계 1: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-3'-플루오로-4'-포르밀-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
2 M Na2CO3 수용액(1.15 ㎖, 2.3 mmol)을 다이옥산(6 ㎖) 중의 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드(300 mg, 0.63 mmol) 및 (3-플루오로-4-포르밀페닐)보론산(160 mg, 0.94 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고, 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(72 mg, 0.06 mmol)을 첨가하고 아르곤으로 15분 동안 다시 퍼징하였다. 반응물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM(3회)으로 추출하였다. 모은 유기층을 황산나트륨 상에서 건조하였다. 용매를 감압 하에 제거한 후 컬럼 크로마토그래피 정제를 수행하여 표제 화합물을 수득하였다(288 mg, 88%).
단계 2: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-3'-플루오로-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
아세트산(0.2 ㎖, 3.29 mmol)을 다이클로로에탄(5 ㎖) 중의 N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-3'-플루오로-4'-포르밀-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드(285 mg, 0.55 mmol) 및 모르폴린(149 mg, 1.64 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 반응물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(349 mg, 1.64 mmol)를 0℃에서 반응 혼합물에 첨가하고 실온에 도달하게 하고 교반을 밤새 계속 수행하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 다이클로로메탄으로 희석하고 물 및 포화된 중탄산나트륨 수용액으로 세척하고 황산나트륨 상에서 건조하였다. 용매를 감압 하에 제거한 후 컬럼 크로마토그래피 및 분취용 HPLC 정제를 수행하여 표제 화합물을 수득하였다(70 mg, 20%). LCMS: 591.45 (M+1)+; HPLC: 98.96% (@ 254 nm) (Rt; 4.034; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.5 (bs, 1H), 10.1 (bs, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.66-7.73 (m, 3H), 7.54 (s, 1H), 7.36 (s, 1H), 5.88 (s, 1H), 4.44 (s, 2H), 4.30 (m, 5H), 3.96 (m, 2H), 3.66-3.86 (m, 6H), 3.17-3.34 (m, 4H), 2.27 (s, 3H), 2.22 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.57-1.67 (m, 4H), 0.84 (t, 3H, J=6 Hz).
실시예 121: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2'-플루오로-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00215
단계 1: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2'-플루오로-4'-포르밀-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
2 M Na2CO3 수용액(1.13 ㎖, 2.26 mmol)을 다이옥산(3 ㎖) 중의 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드(300 mg, 0.62 mmol) 및 (2-플루오로-4-포르밀페닐)보론산(158 mg, 0.94 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고, 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(72 mg, 0.06 mmol)을 첨가하고 아르곤으로 15분 동안 다시 퍼징하였다. 반응물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM(3회)으로 추출하였다. 모은 유기층을 황산나트륨 상에서 건조하였다. 용매를 감압 하에 제거한 후 컬럼 크로마토그래피 정제를 수행하여 원하는 화합물을 수득하였다(300 mg, 91%).
단계 2: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2'-플루오로-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
아세트산(207 mg, 3.46 mmol)을 다이클로로에탄(4 ㎖) 중의 N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2'-플루오로-4'-포르밀-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드(300 mg, 0.57 mmol) 및 모르폴린(100 mg, 1.15 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 반응물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(367 mg, 1.73 mmol)를 0℃에서 반응 혼합물에 첨가하고 실온에 도달하게 하고 교반을 밤새 계속 수행하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 다이클로로메탄으로 희석하고 물 및 포화된 중탄산나트륨 수용액으로 세척하고 황산나트륨 상에서 건조하였다. 용매를 감압 하에 제거한 후 컬럼 크로마토그래피 정제를 수행하여 표제 화합물을 수득하였다(300 mg, 87.97%).
LCMS: 591.30 (M+1)+; HPLC: 96.03% (@ 254 nm) (Rt; 4.077; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (bs, 1H), 8.17 (t, 1H), 7.47 (t, 1H, J=8 Hz), 7.30 (s, 1H), 7.21-7.23 (m, 2H), 7.10 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.81-3.84 (m, 2H), 3.50-3.59 (m, 6H), 3.22-3.25 (m, 2H), 3.00-3.06 (m, 3H), 2.38 (m, 4H), 2.25(s, 3H), 2.19 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.51-1.66 (m, 4H), 0.83 (t, 3H, J=6.8 Hz).
실시예 122: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2',4-다이메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00216
단계 1: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4'-포르밀-2',4-다이메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
2 M Na2CO3 수용액(1.5 ㎖, 3.03 mmol)을 다이옥산(2 ㎖) 중의 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드(400 mg, 0.84 mmol) 및 3-메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤즈알데하이드(310 mg, 1.26 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고, 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(97 mg, 0.08 mmol)을 첨가하고 아르곤으로 15분 동안 다시 퍼징하였다. 반응물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM(3회)으로 추출하였다. 모은 유기층을 황산나트륨 상에서 건조하였다. 용매를 감압 하에 제거한 후 컬럼 크로마토그래피 정제를 수행하여 원하는 화합물을 수득하였다(300 mg, 69.28%).
단계 2: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2',4-다이메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
아세트산(280 mg, 4.77 mmol)을 다이클로로에탄(10 ㎖) 중의 N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4'-포르밀-2',4-다이메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드(410 mg, 0.79 mmol) 및 모르폴린(210 mg, 2.38 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 반응물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(580 mg, 2.71 mmol)를 0℃에서 반응 혼합물에 첨가하고 실온에 도달하게 하고 교반을 밤새 계속 수행하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 다이클로로메탄으로 희석하고 물 및 포화된 중탄산나트륨 수용액으로 세척하고 황산나트륨 상에서 건조하였다. 용매를 감압 하에 제거한 후 컬럼 크로마토그래피 정제를 수행하여 표제 화합물을 수득하였다(125 mg, 26.76%).
LCMS: 587.55 (M+1)+; HPLC: 97.23% (@ 254 nm) (Rt; 4.065; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (bs, 1H), 9.91 (bs, 1H), 8.17 (bs, 1H), 7.32-7.42 (m, 3H), 7.15 (bs, 1H), 6.92 (bs, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.27-4.35 (m, 4H), 3.86 (m, 2H), 3.64-3.67 (m, 3H), 3.12-3.32 (m, 10H), 2.33 (bs, 6H), 2.19 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.55-1.64 (m, 4H), 0.84 (t, 3H, J=6 Hz), 용매 피크에서 합쳐진 2개의 양성자.
실시예 123: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-4'-(모르폴린-4-카보닐)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00217
2 M Na2CO3 수용액(1.13 ㎖, 2.27 mmol)을 다이옥산(10 ㎖) 중의 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드(300 mg, 0.63 mmol) 및 모르폴리노(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)페닐)메타논(260 mg, 0.82 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고, 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(72 mg, 0.06 mmol)을 첨가하고 아르곤으로 15분 동안 다시 퍼징하였다. 반응물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM(3회)으로 추출하였다. 모은 유기층을 황산나트륨 상에서 건조하였다. 용매를 감압 하에 제거한 후 컬럼 크로마토그래피 정제를 수행하여 표제 화합물을 수득하였다(250 mg, 68%). LCMS: 587.35 (M+1)+; HPLC: 93.85% (@ 254 nm) (Rt; 4.535; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (bs, 1H), 8.21 (t, 1H), 7.69-7.71 (m, 2H), 7.45-7.49 (m, 3H), 7.26 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.29 (d, 2H, J=4 Hz), 3.82-3.84 (m, 2H), 3.48-3.60 (m, 8H), 3.23-3.25 (m, 2H), 3.09-3.11 (m, 3H), 2.26 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.52-1.68 (m, 4H), 0.83 (t, 3H, J=6.8 Hz).
실시예 124: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(1-(메틸설포닐)피페리딘-4-일)아미노)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00218
트라이에틸아민(0.106 g, 1.04 mmol) 및 메실 클로라이드(0.08 g, 0.69 mmol)를 0℃에서 DCM(8 ㎖) 중의 N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(피페리딘-4-일)아미노)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드(0.2 g, 0.35 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 발생된 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 완결 후, 물을 반응 혼합물에 첨가하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 황산나트륨 상에서 건조하고 감압 하에 농축하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 메탄올(10 ㎖)에 용해시키고 NaOH(0.021 g, 0.52 mmol)를 첨가하였다. 이 혼합물을 실온에서 15시간 동안 교반하였다. 완결 후, 20% MeOH/DCM을 사용하여 추출을 수행하였다. 모은 유기층을 황산나트륨 상에서 건조하고 농축하고 미정제 물질을 용매 세척으로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.1 g, 45.45%).
LCMS: 650.85 (M+1)+; HPLC: 95.37% (@ 254 nm) (Rt; 4.258; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (bs, 1H), 8.18 (t, 1H), 7.57-7.59 (m, 3H), 7.37-7.39 (m, 2H), 7.22 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.29 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.58 (m, 4H), 3.48-3.52 (m, 4H), 3.09-3.11 (m, 2H), 2.94 (m, 1H), 2.82 (s, 3H), 2.67-2.72 (m, 2H), 2.36 (m, 4H), 2.24 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.81-1.83 (m, 2H), 1.59-1.61 (m, 2H), 0.84 (t, 3H, J=6 Hz).
실시예 125: 5-((1-아세틸피페리딘-4-일)(에틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00219
EDCI(0.123 g, 0.64 mmol) 및 HOBt(0.087 g, 0.64 mmol)를 DMF(3 ㎖) 중의 N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(피페리딘-4-일)아미노)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드(0.25 g, 0.44 mmol) 및 아세트산(0.052 g, 0.86 mmol)의 교반된 용액에 첨가한 후 트라이에틸아민(0.108 g, 1.06 mmol)을 첨가하고, 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응의 완결 후, 물을 첨가하고 10% MeOH/DCM을 사용하여 추출을 수행하였다. 모은 유기층을 물로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조하고 여과하고 감압 하에 농축하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 컬럼 크로마토그래로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.1 g, 37.31%).
LCMS: 614.75 (M+1)+; HPLC: 97.57% (@ 254 nm) (Rt; 4.140; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (bs, 1H), 8.19 (t, 1H), 7.57 (d, 2H, J=7.2 Hz), 7.37-7.39 (m, 3H), 7.22 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.29 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.78 (m, 1H), 3.49-3.58 (m, 6H), 2.99-3.08 (m, 4H), 2.36 (m, 4H), 2.24 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.97 (s, 3H), 1.74 (m, 2H), 1.31-1.52 (m, 2H), 0.83 (t, 3H, J=6.8 Hz), 용매 피크에서 합쳐진 2개의 양성자.
실시예 126: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(피페리딘-4-일)아미노)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00220
단계 1: tert-부틸 4-((5-브로모-3-(메톡시카보닐)-2-메틸페닐)아미노)피페리딘-1-카복실레이트의 합성
아세트산(6.64 g, 110.6 mmol)을 다이클로로에탄(50 ㎖) 중의 메틸 3-아미노-5-브로모-2-메틸벤조에이트(4.5 g, 18.44 mmol) 및 tert-부틸 4-옥소피페리딘-1-카복실레이트(11.01 g, 55.33 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 반응물을 실온에서 10분 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(11.72 g, 55.28 mmol)를 0℃에서 첨가하고 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 완결 시, 용매를 감압 하에 제거하고 미정제 물질을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 원하는 화합물을 수득하였다(5.2 g, 66.24%).
단계 2: tert-부틸 4-((5-브로모-3-(메톡시카보닐)-2-메틸페닐)(에틸)-아미노)-피페리딘-1-카복실레이트의 합성
아세트산(4.24 g, 70.66 mmol)을 다이클로로에탄(60 ㎖) 중의 tert-부틸 4-((5-브로모-3-(메톡시카보닐)-2-메틸페닐)아미노)피페리딘-1-카복실레이트(5 g, 11.70 mmol) 및 아세트알데하이드(1.58 g, 35.12 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 반응물을 실온에서 10분 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(7.44 g, 35.09 mmol)를 0℃에서 첨가하고 반응물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 완결 시, 반응물을 수성 중탄산나트륨으로 급랭시키고, 유기층을 분리하고 수성층을 다이클로로메탄으로 추출하였다. 모은 유기층을 황산나트륨 상에서 건조하고 감압 하에 농축하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 원하는 생성물을 수득하였다(5 g, 93.45%).
단계 3: tert-부틸 4-((5-브로모-3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸-페닐)(에틸)아미노)피페리딘-1-카복실레이트의 합성
수성 NaOH(0.7 g, 17.50 mmol)를 에탄올(50 ㎖) 중의 tert-부틸 4-((5-브로모-3-(메톡시카보닐)-2-메틸페닐)아미노)피페리딘-1-카복실레이트(5 g, 10.94 mmol) 용액에 첨가하고 60℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응의 완결 후, 에탄올을 감압 하에 제거하고 묽은 HCl을 사용하여 pH 6까지 산성화하고 시트르산을 사용하여 pH 4로 조절하였다. 에틸 아세테이트를 사용하여 추출을 수행하였다. 모은 유기층을 건조하고 농축하여 각각의 산을 수득하였다(4.8 g, 99.17%).
그 다음, 상기 산(4.8 g, 10.90 mmol)을 DMSO(20 ㎖)에 용해시키고 3-(아미노메틸)-4,6-다이메틸피리딘-2(1H)-온(3.32 g, 21.81 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반한 후, PyBOP(8.50 g, 16.35 mmol)를 첨가하고 교반을 밤새 계속 수행하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 4-((5-브로모-3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸-페닐)(에틸)아미노)피페리딘-1-카복실레이트를 수득하였다(4.4 g, 70.96%).
단계 4: tert-부틸 4-((5-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-일)(에틸)아미노)피페리딘-1-카복실레이트의 합성
Na2CO3(1.32 g, 12.45 mmol)을 다이옥산/물 혼합물 중의 tert-부틸 4-((5-브로모-3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸-페닐)(에틸)아미노)피페리딘-1-카복실레이트(2 g, 3.47 mmol) 및 4-(모르폴리노메틸)-페닐)보론산(1.58 g, 5.21 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고, 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.4 g, 0.35 mmol)을 첨가하고 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 90℃에서 3.5시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 원하는 화합물을 수득하였다(1.6 g, 68.66%).
단계 5: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(피페리딘-4-일)아미노)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
tert-부틸 4-((5-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-일)(에틸)아미노)피페리딘-1-카복실레이트(1.3 g, 1.93 mmol)를 DCM(20 ㎖)에 용해시키고, TFA(10 ㎖)를 0℃에서 첨가하고 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응의 완결 시, 용매를 감압 하에 제거하고 반응물을 수성 중탄산나트륨으로 급랭시키고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 황산나트륨 상에서 건조하고 감압 하에 농축하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 아세토니트릴 세척으로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.9 g, 81.81%).
LCMS: 572.35 (M+1)+; HPLC: 96.59% (@ 254 nm) (Rt; 3.964; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 8.19 (t, 1H), 7.57 (d, 2H, J=8 Hz), 7.38 (m, 3H), 7.21 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.29 (d, 2H, J=4 Hz), 3.48-3.57 (m, 8H), 2.98-3.10 (m, 4H), 2.88 (m, 1H), 2.36 (m, 4H), 2.24 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.70-1.73 (m, 2H), 1.48-1.51 (m, 2H), 0.84 (t, 3H, J=6.8 Hz).
실시예 127: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(1-피발로일피페리딘-4-일)아미노)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00221
N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(피페리딘-4-일)아미노)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드(0.2 g, 0.34 mmol)를 DMSO(2 ㎖)에 용해시키고 피발산(0.107 g, 1.04 mmol) 및 트라이에틸아민(0.106 g, 1.04 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반한 후, PyBOP(0.27 g, 0.52 mmol)를 첨가하고 교반을 밤새 계속 수행하였다. 반응의 완결 후, 반응 혼합물을 얼음에 붓고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 건조하고 농축하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.14 g, 60.86%).
LCMS: 656.65 (M+1)+; HPLC: 97.51% (@ 254 nm) (Rt; 4.555; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (bs, 1H), 8.18 (t, 1H), 7.57 (d, 2H, J=7.2), 7.37-7.40 (m, 3H), 7.21 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.21-4.29 (m, 4H), 3.49-3.58 (m, 6H), 3.06-3.08 (m, 3H), 2.73-2.79 (m, 2H), 2.37 (m, 4H), 2.24 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.75-1.78 (m, 2H), 1.38-1.41 (m, 2H), 1.17 (s, 9H), 0.83 (t, 3H, J=7.2 Hz).
실시예 128: 5-(((1r,4r)-4-아미노사이클로헥실)(에틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00222
단계 1: 메틸 5-브로모-3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)아미노)사이클로헥실)아미노)-2-메틸벤조에이트의 합성
아세트산(7.4 g, 123.33 mmol)을 다이클로로에탄(50 ㎖) 중의 메틸 3-아미노-5-브로모-2-메틸벤조에이트(5 g, 20.57 mmol) 및 tert-부틸 (4-옥소사이클로헥실)카바메이트(5.6 g, 26.74 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 반응물을 실온에서 10분 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(13 g, 61.72 mmol)를 0℃에서 첨가하고 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 완결 시, 반응물을 수성 중탄산나트륨으로 급랭시키고, 유기층을 분리하고 수성층을 다이클로로메탄으로 추출하였다. 모은 유기층을 황산나트륨 상에서 건조하고 감압 하에 농축하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(3.5 g, 38.88%).
단계 2: 메틸 5-브로모-3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)-아미노)사이클로헥실)-(에틸)-아미노)-2-메틸벤조에이트의 합성
아세트산(1.14 g, 19.0 mmol)을 다이클로로에탄(20 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)아미노)사이클로헥실)아미노)-2-메틸벤조에이트(1.4 g, 3.18 mmol) 및 아세트알데하이드(0.419 g, 9.52 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 반응물을 실온에서 10분 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(2 g, 9.43 mmol)를 0℃에서 첨가하고 반응물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 완결 시, 반응물을 수성 중탄산나트륨으로 급랭시키고, 유기층을 분리하고 수성층을 다이클로로메탄으로 추출하였다. 모은 유기층을 황산나트륨 상에서 건조하고 감압 하에 농축하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(1.25 g, 84.45%).
단계 3: tert-부틸 ((1r,4r)-4-((5-브로모-3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸페닐)(에틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트의 합성
수성 NaOH(0.16 g, 4.0 mmol)를 에탄올(10 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)-아미노)사이클로헥실)-(에틸)-아미노)-2-메틸벤조에이트(1.25 g, 2.67 mmol) 용액에 첨가하고 60℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응의 완결 후, 에탄올을 감압 하에 제거하고 묽은 HCl을 사용하여 pH 6까지 산성화하고 시트르산을 사용하여 pH 4로 조절하였다. 에틸 아세테이트를 사용하여 추출을 수행하였다. 모은 유기층을 건조하고 농축하여 각각의 산을 수득하였다(1.1 g, 90%).
그 다음, 상기 산(1.1 g, 2.42 mmol)을 DMSO(10 ㎖)에 용해시키고 3-(아미노메틸)-4,6-다이메틸피리딘-2(1H)-온(0.736 g, 4.84 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반한 후, PyBOP(1.88 g, 3.61 mmol)를 첨가하고 교반을 밤새 계속 수행하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.75 g, 53.57%).
단계 4: tert-부틸 ((1r,4r)-4-((5-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)-메틸)-카바모일)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-일)-(에틸)-아미노)-사이클로헥실)-카바메이트의 합성
Na2CO3(0.454 g, 4.28 mmol)을 다이옥산/물 혼합물 중의 tert-부틸 ((1r,4r)-4-((5-브로모-3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸페닐)(에틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트(0.7 g, 1.19 mmol) 및 (4-(모르폴리노메틸)페닐)-보론산(0.489 g, 1.78 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고, 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.137 g, 0.119 mmol)을 첨가하고 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 90℃에서 3.5시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.55 g, 67.48%).
단계 5: 5-(((1r,4r)-4-아미노사이클로헥실)(에틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
tert-부틸 ((1r,4r)-4-((5-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)-메틸)-카바모일)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-일)-(에틸)-아미노)-사이클로헥실)-카바메이트(0.55 g, 0.80 mmol)를 DCM(10 ㎖)에 용해시키고, TFA(3 ㎖)를 0℃에서 첨가하고 실온에서 밤새 교반하였다. 반응의 완결 시, 용매를 감압 하에 제거하고 반응물을 수성 중탄산나트륨으로 급랭시키고 다이클로로메탄으로 추출하였다. 모은 유기층을 황산나트륨 상에서 건조하고 감압 하에 농축하여 미정제 생성물을 수득한 후, 이 생성물을 아세토니트릴 세척으로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.42 g, 89.36%).
LCMS: 586.45 (M+1)+; HPLC: 98.38% (@ 254 nm) (Rt; 3.667; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 8.18 (t, 1H), 7.56 (d, 2H, J=7.6), 7.35-7.38 (m, 3H), 7.18 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.29 (d, 2H, J=3.2 Hz), 3.58 (m, 4H), 3.49 (m, 2H), 3.09-3.10 (m, 2H), 2.63-2.66 (m, 2H), 2.37 (m, 4H), 2.21 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.75-1.78 (m, 4H), 1.40-1.43 (m, 2H), 1.05-1.08 (m, 2H), 0.83 (t, 3H, J=6.4 Hz).
실시예 129: 5-(((1r,4r)-4-아세트아미도사이클로헥실)(에틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00223
EDCI(0.123 g, 0.64 mmol) 및 HOBt(0.057 g, 0.42 mmol)를 DMF(3 ㎖) 중의 5-(((1r,4r)-4-아미노사이클로헥실)(에틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드(0.25 g, 0.42 mmol) 및 아세트산(0.151 g, 0.85 mmol)의 교반된 용액에 첨가한 후 트라이에틸아민(0.064 g, 0.63 mmol)을 첨가하고, 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응의 완결 후, 물을 첨가하고 10% MeOH/DCM을 사용하여 추출을 수행하였다. 모은 유기층을 물로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조하고 여과하고 감압 하에 농축하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.11 g, 41.04%).
LCMS: 628.35 (M+1)+; HPLC: 98.79% (@ 254 nm) (Rt; 3.902; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (bs, 1H), 8.18 (t, 1H), 7.56-7.66 (m, 3H), 7.36-7.38 (m, 3H), 7.18 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.29 (d, 2H, J=4 Hz), 3.99 (m, 1H), 3.48-3.58 (m, 6H), 3.10-3.11 (m, 2H), 2.67 (m, 1H), 2.37 (m, 4H), 2.22 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.74-1.79 (m, 6H), 1.43-1.46 (m, 2H), 1.08-1.11 (m, 2H), 0.81-0.94 (t, 4H).
실시예 130: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-플루오로-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00224
단계 1: 6-플루오로-2-메틸-3-니트로벤조산
농축 H2SO4(15.77 ㎖, 295.85 mmol) 중의 2-플루오로-6-메틸벤조산(2 g, 12.98 mmol) 용액을 공기 중에서 아세톤/빙욕조 내에서 -5℃까지 냉각시켰다. 농축 질산(1.08 ㎖, 16.87 mmol)과 농축 H2SO4(1 ㎖, 18.76 mmol)의 혼합물을 -5℃ 내지 0℃에서 반응 혼합물에 15분 동안 적가하였다. 엷은 황색 반응 혼합물을 -5℃ 내지 0℃에서 30분 동안 교반한 후 얼음(100 g)에 부었다. 발생된 침전물을 여과하고 EtOAc(50 ㎖)에 용해시키고 유기층을 탈이온수(25 ㎖)에 이어서 염수(25 ㎖)로 세척하였다. 유기층을 MgSO4 상에서 건조하고 여과하고 감압 하에 농축하여 백색 고체로서 2 g(77%)의 6-플루오로-2-메틸-3-니트로벤조산을 수득하였다. LC-MS 99%, 1.31분(3분 LC-MS 방법), m/z = 198.0, 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 8.04 (dd, J=9.1, 5.0 Hz, 1H), 7.16 (t, J=8.6 Hz, 1H), 2.63 (s, 3H).
단계 2: 3-브로모-2-플루오로-6-메틸-5-니트로벤조산의 합성
1,3-다이브로모-5,5-다이메틸이미다졸리딘-2,4-다이온(79 mg, 0.28 mmol)을 질소 하에 실온에서 농축 H2SO4(0.5 ㎖, 9.38 mmol) 중의 6-플루오로-2-메틸-3-니트로벤조산(100 mg, 0.5 mmol) 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 6시간 동안 교반하였고, 이 시간 동안 침전물이 형성되었다. 반응 혼합물을 탈이온수(3 ㎖)에 서서히 첨가하고, 발생된 침전물을 여과하였다. 고체를 탈이온수(2 ㎖)로 세척하고 2시간 동안 공기 건조하여 엷은 황색 고체로서 123 mg(88%)의 3-브로모-2-플루오로-6-메틸-5-니트로벤조산을 수득하였다. LC-MS 94%, 1.61분(3분 LC-MS 방법), m/z = 275.9/277.9 (ES-), 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 8.25 (d, J=6.2 Hz, 1H), 2.58 (s, 3H).
단계 3: 메틸 3-브로모-2-플루오로-6-메틸-5-니트로벤조에이트의 합성
K2CO3(2.4 g, 17.34 mmol)에 이어서 요오도메탄(0.7 ㎖, 11.27 mmol)을 질소 하에 실온에서 N,N-다이메틸포름아미드(25 ㎖) 중의 3-브로모-2-플루오로-6-메틸-5-니트로벤조산(2.41 g, 8.67 mmol) 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반한 후, 탈이온수(100 ㎖)로 희석하고 EtOAc(3 x 50 ㎖)로 추출하였다. 모은 유기층을 포화된 NaHCO3(수성)(50 ㎖)으로 세척한 후 MgSO4 상에서 건조하고 여과하고 감압 하에 농축하였다. 잔사를 FCC(50 g 실리카, 이솔루트 카트리지, 용출제의 구배; 98:2 헵탄:EtOAc 내지 9:1 헵탄:EtOAc)로 2회 정제하여 백색 고체로서 2.43 g(89%)의 메틸 3-브로모-2-플루오로-6-메틸-5-니트로벤조에이트를 수득하였다. LC-MS 99%, 2.18분(3분 LC-MS 방법), m/z = 이온화 없음, 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 8.22 (d, J=6.2 Hz, 1H), 4.00 (s, 3H), 2.48 (s, 3H).
단계 4: 메틸 3-아미노-5-브로모-6-플루오로-2-메틸벤조에이트의 합성
염화암모늄(4.37 g, 83.2 mmol)에 이어서 탈이온수(40 ㎖)를 실온에서 메탄올(80 ㎖) 중의 메틸 3-브로모-2-플루오로-6-메틸-5-니트로벤조에이트(2.43 g, 8.32 mmol) 용액에 첨가하였다. 혼합물을 공기 중에서 70℃까지 가열한 후 철(2.79 g, 49.92 mmol)을 첨가하였다. 반응물은 70℃에서 교반된 2.5시간 동안 갈색으로 변하였다. 이 혼합물을 실온까지 냉각시키고 키에셀겔(Kieselgel)을 통해 여과하였다. 필터 패드를 MeOH(80 ㎖)로 세척하고 여과액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 포화된 NaHCO3(수성)(50 ㎖) 및 EtOAc(150 ㎖)에 용해시켰다. 층을 분리하고 유기층을 포화된 NaHCO3(수성)(50 ㎖)으로 세척한 후 MgSO4 상에서 건조하고 여과하고 감압 하에 농축하였다. 잔사를 FCC(50 g 실리카, 이솔루트 카트리지, 용출제의 구배; 95:5 헵탄:EtOAc 내지 7:3 헵탄:EtOAc)로 정제하여 황색 오일로서 2.23 g(95%, 77% 보정된 수율)의 메틸 3-아미노-5-브로모-6-플루오로-2-메틸벤조에이트를 수득하였다. 이 물질을 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. LC-MS 81%, 1.87분(3분 LC-MS 방법), m/z = 261.9/263.9, 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 6.89 (d, J=6.0 Hz, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.60 (s, 2H), 2.08 (s, 3H).
단계 5: 메틸 3-브로모-2-플루오로-6-메틸-5-[(옥산-4-일)아미노]벤조에이트의 합성
옥산-4-온(1.49 ㎖, 16.17 mmol)에 이어서 아세트산(2.78 ㎖, 48.5 mmol)을 질소 하에 실온에서 1,2-다이클로로에탄(32 ㎖) 중의 메틸 3-아미노-5-브로모-6-플루오로-2-메틸벤조에이트(2.23 g, 8.08 mmol) 용액에 첨가하였다. 이 용액을 5분 동안 교반한 후, 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(5.14 g, 24.25 mmol)를 실온에서 첨가하였다. 5.5시간 동안 교반한 후, LCMS에 의한 확인 시 존재하는 미반응된 출발 물질은 없었다. 탈이온수(32 ㎖)를 첨가하고 혼합물을 고체 NaHCO3으로 중화하였다. 층을 분리하고 수성층을 EtOAc(2 x 32 ㎖)로 추출하였다. 모은 유기 추출물을 MgSO4 상에서 건조하고 여과하고 감압 하에 농축하였다. 잔사를 FCC(50 g 실리카, 이솔루트 카트리지, 용출제의 구배; 95:5 헵탄:EtOAc 내지 6:4 헵탄:EtOAc)로 정제하여 회백색 고체로서 2.3 g(82%)의 메틸 3-브로모-2-플루오로-6-메틸-5-[(옥산-4-일)아미노]벤조에이트를 수득하였다. LC-MS 99%, 2.13분(3분 LC-MS 방법), m/z = 245.9/247.9, 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 6.78 (d, J=5.9 Hz, 1H), 4.01 (dt, J=11.9, 3.4 Hz, 2H), 3.93 (s, 3H), 3.53 (td, J=11.7, 2.1 Hz, 2H), 3.49-3.42 (m, 1H), 3.34 (s, 1H), 2.04 (s, 5H), 1.48 (qd, J=11.0, 4.2 Hz, 2H).
단계 6: 메틸 3-브로모-5-[에틸(옥산-4-일)아미노]-2-플루오로-6-메틸벤조에이트의 합성
아세트알데하이드(0.81 ㎖, 14.44 mmol)에 이어서 아세트산(0.5 ㎖, 8.67 mmol)을 질소 하에 실온에서 1,2-다이클로로에탄(15 ㎖) 중의 메틸 3-브로모-2-플루오로-6-메틸-5-[(옥산-4-일)아미노]벤조에이트(500 mg, 1.44 mmol) 용액에 첨가하였다. 이 용액을 5분 동안 교반한 후, 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(3.06 g, 14.44 mmol)를 실온에서 첨가하였다. 2시간 동안 교반한 후, 탈이온수(20 ㎖)를 첨가하고 혼합물을 고체 NaHCO3으로 중화하였다. 층을 분리하고 수성층을 EtOAc(2 x 20 ㎖)로 추출하였다. 모은 유기 추출물을 MgSO4 상에서 건조하고 여과하고 감압 하에 농축하였다. 잔사를 FCC(10 g 실리카, 이솔루트 카트리지, 용출제의 구배; 95:5 헵탄:EtOAc 내지 85:15 헵탄:EtOAc)로 정제함으로써 정치 시 고체화되는 엷은 황색 오일로서 519 mg(96%)의 메틸 3-브로모-5-[에틸(옥산-4-일)아미노]-2-플루오로-6-메틸벤조에이트를 수득하였다. LC-MS 94%, 2.45분(3분 LC-MS 방법), m/z = 373.9/375.9, 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 7.33 (d, J=6.6 Hz, 1H), 3.95 (s, 5H), 3.32 (td, J=11.7, 2.1 Hz, 2H), 3.00 (q, J=7.1 Hz, 2H), 2.88 (tt, J=10.9, 4.0 Hz, 1H), 2.25 (s, 3H), 1.73-1.54 (m, 4H), 0.85 (t, J=7.1 Hz, 3H).
단계 7: 3-브로모-5-[에틸(옥산-4-일)아미노]-2-플루오로-6-메틸벤조산의 합성
4 M NaOH(13.87 ㎖)를 테트라하이드로푸란(13 ㎖) 및 MeOH(4 ㎖) 중의 메틸 3-브로모-5-[에틸(옥산-4-일)아미노]-2-플루오로-6-메틸벤조에이트(519 mg, 1.39 mmol) 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 공기 중에서 50℃에서 72시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 6 M HCl로 pH 2 내지 3까지 산성화하고 DCM(5 x 15 ㎖)으로 추출하였다. 모은 유기 추출물을 MgSO4 상에서 건조하고 여과하고 감압 하에 농축하여 베이지색 포말로서 526 mg(95%)의 3-브로모-5-[에틸(옥산-4-일)아미노]-2-플루오로-6-메틸벤조산을 수득하였다. LC-MS 88%, 1.77분(3분 LC-MS 방법), m/z = 359.9/361.9, 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 7.43-7.31 (m, 1H), 4.00 (d, J=11.3 Hz, 2H), 3.41-3.29 (m, 2H), 3.16-2.91 (m, 3H), 2.40 (s, 3H), 1.84-1.59 (m, 4H), 0.99-0.82 (m, 3H).
단계 8: 3-브로모-N-[(4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸]-5-[에틸(옥산-4-일)아미노]-2-플루오로-6-메틸벤즈아미드의 합성
PyBOP(346.72 mg, 0.67 mmol)에 이어서 N-에틸-N-(프로판-2-일)프로판-2-아민(145 ㎕, 0.83 mmol) 및 3-(아미노메틸)-4,6-다이메틸-1,2-다이하이드로피리딘-2-온(89%, 104 mg, 0.61 mmol)을 질소 하에 실온에서 N,N-다이메틸포름아미드(2 ㎖) 중의 3-브로모-5-[에틸(옥산-4-일)아미노]-2-플루오로-6-메틸벤조산(200 mg, 0.56 mmol) 용액에 첨가하였다. 실온에서 1시간 동안 교반한 후, 출발 물질의 부재를 LCMS로 관찰하였다. EtOAc(20 ㎖)를 반응 혼합물에 첨가한 후, 이것을 탈이온수(5 ㎖)에 이어서 포화된 NaHCO3(수성)(3 x 5 ㎖)으로 세척하였다. 유기층을 MgSO4 상에서 건조하고 여과하고 감압 하에 농축하였다. 그 다음, 잔사를 FCC(5 g 실리카, 이솔루트 카트리지, 용출제의 구배; 100% DCM 내지 97:3 DCM:MeOH)로 정제하여 엷은 황색 고체로서 112 mg(41%)의 3-브로모-N-[(4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸]-5-[에틸(옥산-4-일)아미노]-2-플루오로-6-메틸벤즈아미드를 수득하였다. LC-MS 97%, 1.85분(3분 LC-MS 방법), m/z = 494.0/496.0, 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 11.66 (s, 1H), 7.23 (d, J=6.5 Hz, 1H), 5.95 (s, 1H), 4.65-4.43 (m, 2H), 3.93 (d, J=11.0 Hz, 2H), 3.38-3.22 (m, 2H), 2.97 (q, J=7.0 Hz, 2H), 2.91-2.79 (m, 1H), 2.37 (s, 3H), 2.24-2.11 (m, 6H), 1.72-1.53 (m, 4H), 0.83 (t, J=7.0 Hz, 3H).
단계 9: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-플루오로-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
4-[4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질]모르폴린(103 mg, 0.34 mmol)에 이어서 Na2CO3(84.04 mg, 0.79 mmol)을 1,4-다이옥산(2 ㎖) 및 물(1 ㎖) 중의 3-브로모-N-[(4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸]-5-[에틸(옥산-4-일)아미노]-2-플루오로-6-메틸벤즈아미드(112 mg, 0.23 mmol) 용액에 첨가하였다. 용액을 질소로 5분 동안 퍼징한 후, 팔라듐-트라이페닐포스핀(1:4)(26 mg, 0.02 mmol)을 첨가하였다. 그 다음, 황색 혼합물을 질소로 5분 동안 퍼징한 후 100℃까지 가열하였다. 4시간 후, LCMS는 미반응된 출발 물질이 존재하지 않는다는 것을 표시하였다. 어두운 색 반응 혼합물을 탈이온수(5 ㎖)로 희석하고 DCM 중의 10% MeOH(5 x 5 ㎖)로 추출하였다. 모은 유기 추출물을 MgSO4 상에서 건조하고 여과하고 감압 하에 농축하였다. 잔사를 FCC(5 g 실리카, 이솔루트 카트리지, 용출제의 구배; 99:1 DCM:MeOH 내지 95:5 DCM:MeOH)로 정제하여 회백색 고체로서 69 mg(52%)의 표제 화합물을 수득하였다. LC-MS 97%, 2.70분(7분 LC-MS 방법), m/z = 591.2, 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 12.10 (br s, 1H), 7.53-7.30 (m, 4H), 7.13 (d, J=7.4 Hz, 1H), 7.07 (br s, 1H), 5.88 (s, 1H), 4.55 (br s, 2H), 3.93 (d, J=11.2 Hz, 2H), 3.73-3.69 (m, 4H), 3.52 (s, 2H), 3.30 (t, J=10.8 Hz, 2H), 3.02 (q, J=6.9 Hz, 2H), 2.92 (ddd, J=14.6, 10.7, 3.7 Hz, 1H), 2.46 (s, 4H), 2.35 (s, 3H), 2.26 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 1.79-1.43 (m, 4H), 0.86 (t, J=7.0 Hz, 3H).
실시예 131: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-4'-((3-옥소모르폴리노)메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00225
단계 1: 4'-(브로모메틸)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
트라이페닐포스핀(469 mg, 1.78 mmol) 및 사브롬화탄소(741 mg, 2.25 mmol)를 DCM(10 ㎖) 중의 N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4'-(하이드록시메틸)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드(450 mg, 0.89 mmol)의 빙냉 교반된 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에 도달하게 하고 교반을 16시간 동안 계속 수행하였다. 완결 시, 용매를 감압 하에 제거한 후 컬럼 크로마토그래피 정제를 수행하여 화합물 8을 수득하였다(300 mg, 59%).
단계 2: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-4'-((3-옥소모르폴리노)메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
수소화나트륨(27 mg, 0.66 mmol)을 DMF(30 ㎖) 중의 4'-(브로모메틸)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드(250 mg, 0.44 mmol) 및 모르폴린-3-온(67 mg, 0.66 mmol)의 빙냉 교반된 용액에 첨가하였다. 10분 후, 얼음을 제거하고 교반을 실온에서 16시간 동안 계속 수행하였다. 완결 시, 물을 첨가하고 DCM(3회)으로 추출하였다. 모은 유기층을 황산나트륨 상에서 건조하였다. 용매를 감압 하에 제거한 후 컬럼 크로마토그래피 및 분취용 HPLC 정제를 수행하여 표제 화합물을 수득하였다(75 mg, 29%). LCMS: 587.35 (M+1)+; HPLC: 98.69% (@ 254 nm) (Rt; 4.604; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.50 (bs, 1H), 8.25 (m, 1H), 7.65 (m,2H), 7.37-7.35 (m, 3H), 5.87 (s, 1H), 4.59 (m, 2H), 4.29 (d, 2H), 4.12 (s, 2H), 3.82 (m, 4H), 3.28 (m, 4H), 3.17-3.09 (m, 2H), 2.32-2.28 (m, 4H), 2.22 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.57 (m, 4H), 0.86 (t, 3H).
실시예 132: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-티오피란-4-일)아미노)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00226
단계 1: 메틸 5-브로모-2-메틸-3-((테트라하이드로-2H-티오피란-4-일)아미노)벤조에이트의 합성
아세트산(3.6 ㎖, 61.47 mmol)을 다이클로로에탄(50 ㎖) 중의 메틸 3-아미노-5-브로모-2-메틸벤조에이트(2.5 g, 10.24 mmol) 및 다이하이드로-2H-티오피란-4(3H)-온(1.42 g, 12.29 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 반응물을 실온에서 10분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 0℃까지 냉각시키고, 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(6.5 g, 30.73 mmol)를 첨가하고 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 포화된 NaHCO3으로 중화하고 화합물을 DCM으로 추출하고 Na2SO4 상에서 건조하고 감압 하에 농축하였다. 미정제 물질을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 메틸 5-브로모-2-메틸-3-((테트라하이드로-2H-티오피란-4-일)아미노)벤조에이트를 수득하였다(2.5 g, 71.0%).
단계 2: 메틸 5-브로모-3-(에틸(테트라하이드로-2H-티오피란-4-일)아미노)-2-메틸벤조에이트의 합성
아세트산(2.0 ㎖, 34.9 mmol)을 다이클로로에탄(50 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-2-메틸-3-((테트라하이드로-2H-티오피란-4-일)아미노)벤조에이트(2.5 g, 5.83 mmol) 및 아세트알데하이드(513 mg, 11.66 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 반응물을 실온에서 20분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 0℃까지 냉각시키고, 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(3.7 g, 17.49 mmol)를 첨가하고 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 포화된 NaHCO3으로 중화하고 화합물을 DCM으로 추출하고 Na2SO4 상에서 건조하고 감압 하에 농축하였다. 미정제 물질을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 메틸 5-브로모-3-(에틸(테트라하이드로-2H-티오피란-4-일)아미노)-2-메틸벤조에이트를 수득하였다(2.0 g, 74.0%).
단계 3: 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-티오피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드의 합성
에탄올:물(2:1)(3 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-3-(에틸(테트라하이드로-2H-티오피란-4-일)아미노)-2-메틸벤조에이트(2.0 g, 5.39 mol) 및 NaOH(0.323 g, 8.08 mol)의 혼합물을 70℃에서 2시간 동안 가열하고, 반응 혼합물을 건조될 때까지 농축하고, 미정제 물질을 물과 DCM에 분배하고, 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 감압 하에 농축하여 1.8 g의 산을 수득하였다.
상기 미정제 산(1.8 g, 5.04 mmol), 3-(아미노메틸)-4,6-다이메틸피리딘-2(1H)-온(1.53 mg, 10.08 mmol) 및 PyBOP(3.9 g, 7.56 mmol) 혼합물을 실온에서 3 ㎖의 DMSO 중에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고 화합물을 DCM으로 추출하였다. 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 감압 하에 농축하고 실리카 겔(100 내지 200 메쉬) 컬럼 크로마토그래피(DCM 중의 4% MeOH로 용출함)로 정제하여 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-티오피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드를 수득하였다(1.5 g, 60.7%).
단계 4: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-티오피란-4-일)아미노)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
다이옥산(20 ㎖) 중의 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-티오피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드(800 mg, 1.629 mmol), 4-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질)모르폴린(740 mg, 2.443 mmol) 및 탄산나트륨(621 mg, 5.86 mmol)의 용액을 아르곤으로 20분 동안 탈기하고, Pd(PPh3)4(188 mg, 0.16 mmol)을 혼합물에 첨가하고 100℃에서 밤새 가열하였다. 반응물을 실온까지 냉각시키고 물로 희석하고, 화합물을 DCM 중의 10% MeOH로 추출하고 Na2SO4 상에서 건조하고 농축하고, 미정제 물질을 실리카 겔(100 내지 200) 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(700 mg, 73.0%).
LCMS: 589.25 (M+1)+; HPLC: 96.75% (@ 254 nm) (Rt; 4.869; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (D2O, 400 MHz) δ 7.78-7.89 (m, 4H), 7.64-7.66 (m, 2H), 6.33 (s, 1H), 4.52 (s, 2H), 4.45 (s, 2H), 4.13 (d, J=13.2 Hz, 2H), 3.77-3.89 (m, 5H), 3.49 (d, J=12.0 Hz, 2H), 3.30-3.33 (m, 2H), 2.73-2.82 (m, 5H), 2.44, 2.38, 2.30 (3s, 9H), 1.89 (m, 2H), 1.06 (t, J=7.2 Hz, 3H).
실시예 133: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(1-옥시도테트라하이드로-2H-티오피란-4-일)아미노)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00227
m-CPBA(70 mg, 0.41 mmol)를 0℃에서 DCM(2 ㎖) 중의 N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-티오피란-4-일)아미노)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드(200 mg, 0.34 mmol)의 냉각된 용액에 첨가하고 실온에서 2시간 동안 교반하였다(TLC에 의해 모니터링됨). 반응물을 포화된 NaHCO3으로 급랭시키고 화합물을 DCM으로 추출하고 Na2SO4 상에서 건조하고 감압 하에 농축하고 실리카 겔(100 내지 200) 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(60 mg, 29.3%).
LCMS: 605.25 (M+1)+; HPLC: 44.06% & 54.42% (@ 254 nm) (Rt; 4.092 & 4.448; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.18 (t, 1H), 7.59-7.57 (m, 2H), 7.39-7.37 (m, 3H), 7.23-7.21 (m, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.29 (d, 2H, J=4 Hz), 3.58 (m, 3H), 3.48 (m, 3H), 3.18-2.86 (m, 5H), 2.67-2.59 (m, 4H), 2.37-2.33 (m, 4H), 2.25 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.77 (m, 2H), 0.85 (t, 3H).
실시예 134: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-3',4-다이메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드
Figure pat00228
화합물 134를 실시예 131에 기재된 방법과 유사한 방법으로 제조하였다. 분석 데이터: LCMS: 587.4 (M+1)+; HPLC: 98.76% (@ 254 nm) (Rt; 4.11; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (bs, 1H), 8.17 (bs, 1H), 7.41-7.20 (m, 5H), 5.85 (s, 1H), 4.28 (d, J=4 Hz, 2H), 3.82 (d, J=10 Hz, 2H), 3.55 (m, 4H), 3.44 (bs, 2H), 3.27-3.22 (m, 2H), 3.09-3.01 (m, 3H), 2.39 (m, 7H), 2.23 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.67-1.51 (m, 4H), 0.83 (t, J=6.8 Hz, 3H).
실시예 135: 4-((3'-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-5'-(에틸(1-옥시도테트라하이드로-2H-티오피란-4-일)아미노)-4'-메틸-[1,1'-비페닐]-4-일)메틸)모르폴린 4-옥사이드
Figure pat00229
전술된 분취용 HPLC 정제 동안 4-((3'-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-5'-(에틸(1-옥시도테트라하이드로-2H-티오피란-4-일)아미노)-4'-메틸-[1,1'-비페닐]-4-일)메틸)모르폴린 4-옥사이드도 단리하였다.
LCMS: 621.40 (M+1)+; HPLC: 98.69% (@ 254 nm) (Rt; 4.157; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 12.18 (s, 1H), 11.45 (s, 1H), 8.20 (t, 1H), 7.79 (d, 2H, J=6.8 Hz), 7.62 (d, 2H, J=6.8 Hz), 7.45 (s, 1H), 7.27 (s, 2H), 5.86 (s, 1H), 4.89 (s, 2H), 4.30 (d, 2H, J=4 Hz), 4.00-3.80 (m, 7H), 3.19 (m, 2H), 3.00-2.85 (m, 4H), 2.70-2.60 (m, 2H), 2.30 (bs, 2H), 2.26 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.75 (m, 2H), 0.87 (t, 3H, J=6 Hz).
실시예 136: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-((1,1-다이옥시도테트라하이드로-2H-티오피란-4-일)(에틸)아미노)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00230
m-CPBA(117 mg, 0.68 mmol)를 0℃에서 DCM(2 ㎖) 중의 화합물 N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-티오피란-4-일)아미노)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드(200 mg, 0.34 mmol)의 냉각된 용액에 첨가하고 실온에서 2시간 동안 교반하였다(TLC에 의해 모니터링됨). 반응물을 포화된 NaHCO3으로 급랭시키고 DCM으로 추출하고 Na2SO4 상에서 건조하고 감압 하에 농축하였다. 컬럼 크로마토그래피 후, 분취용 HPLC로 더 정제하여 TFA 염으로서 표제 화합물을 수득하였다(80 mg, 38.1%).
LCMS: 621.45 (M+1)+; HPLC: 99.93% (@ 254 nm) (Rt; 4.522; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 12.22 (s, 1H), 11.45 (s, 1H), 8.20 (t, 1H), 7.78 (d, 2H, J=8 Hz), 7.61 (d, 2H, J=8 Hz), 7.43 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.89 (s, 2H), 4.29 (d, 2H, J=4.4 Hz), 4.00-3.80 (m, 7H), 3.32 (m, 2H), 3.04 (m, 4H), 2.65-2.55 (m, 2H), 2.26 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.17 (m, 2H), 2.10 (s, 3H), 1.78 (m, 2H), 0.83 (t, 3H, J=6.4 & 7.2 Hz).
실시예 137: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4,4'-다이메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00231
m-CPBA(60 mg, 0.35 mmol)를 실온에서 다이클로로메탄 중의 N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4,4'-다이메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드(200 mg, 0.35 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 실온에서 교반을 밤새 계속 수행하였다. 완결 시, 포화된 중탄산나트륨 수용액을 첨가하여 반응물을 급랭시키고 10% MeOH/DCM(3회)으로 추출하였다. 모은 유기층을 황산나트륨 상에서 건조하였다. 용매를 감압 하에 제거한 후 용매 세척을 수행하여 표제 화합물을 수득하였다(120 mg, 58%). LCMS: 589.35 (M+1)+; HPLC: 95.56% (@ 254 nm) (Rt; 4.143; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.5 (bs, 1H), 8.22 (t, 1H), 7.66-7.60 (m, 4H), 7.42 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.34-4.28 (m, 4H), 4.12-4.07 (m, 2H), 3.83-3.81 (m, 2H), 3.62-3.60 (m, 2H), 3.42-3.39 (m, 2H), 3.33-3.22 (m, 2H), 3.16-3.08 (m, 3H), 2.65-2.62 (m, 2H), 2.25-2.10 (m, 9H), 1.67-1.51 (m, 4H), 0.83 (t, 3H, J=6.8 Hz).
실시예 138: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-5-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)(2,2,2-트라이플루오로에틸)아미노)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00232
단계 1: 5-브로모-2-메틸-3-니트로벤조산의 합성
농축 H2SO4(27 ㎖, 512 mmol) 중의 5-브로모-2-메틸벤조산(5.0 g, 23 mmol) 용액을 아세톤/빙욕조 내에서 5℃까지 냉각시켰다. 농축 질산(1.9 ㎖, 30 mmol)과 농축 H2SO4(2.8 ㎖, 52 mmol)의 혼합물을 -5℃ 내지 0℃에서 반응 혼합물에 15분 동안 적가하였다. 황색 반응 혼합물을 -5℃ 내지 0℃에서 2시간 동안 교반하였고, 이 시간 동안 황색 침전물이 형성되었다. 반응 혼합물을 얼음(150 g)에 부은 후, 침전물을 여과로 수집하였다. 침전물을 공기 건조하여 엷은 황색 고체로서 표제 화합물을 수득하였다(5.5 g, 52%). LC-MS 57%, 1.82분(3.5분 LC-MS 방법), 이온화 없음; 1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 8.29 (s, 1H), 8.13 (d, J=1.58 Hz, 1H), 2.43 (s, 3H).
단계 2: 메틸 5-브로모-2-메틸-3-니트로벤조에이트의 합성
Na2CO3(3.4 g, 32 mmol)에 이어서 요오도메탄(2.0 ㎖, 32 mmol)을 질소 하에 DMF(42 ㎖) 중의 5-브로모-2-메틸-3-니트로벤조산(5.5 g, 21 mmol) 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 탈이온수(150 ㎖)로 희석하고 EtOAc(4 x 50 ㎖)로 추출하였다. 모은 유기층을 포화된 NaHCO3(수성)(2 x 50 ㎖)으로 세척하고 MgSO4 상에서 건조하고 여과하고 진공 중에서 농축하여 황색 오일로서 표제 화합물을 수득하였다(6.3 g, 61%). LC-MS 57%, 2.20분(3.5분 LC-MS 방법), 이온화 없음; 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 7.38 (d, J=2.05 Hz, 1H), 7.23 (d, J=2.05 Hz, 1H), 3.20 (s, 3H), 1.82 (s, 3H).
단계 3: 메틸 3-아미노-5-브로모-2-메틸벤조에이트의 합성
염화암모늄(11.0 g, 209 mmol)에 이어서 탈이온수(75 ㎖)를 메탄올(150 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-2-메틸-3-니트로벤조에이트(6.3 g, 21 mmol) 용액에 첨가하였다. 혼합물을 70℃까지 가열한 후 철(7.0 g, 125 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 2시간 동안 교반한 후 실온까지 냉각시키고 키에셀겔을 통해 여과하였다. 필터 패드를 MeOH(150 ㎖)로 세척하고 여과액을 진공 중에서 농축하였다. 잔사를 포화된 NaHCO3(수성)(50 ㎖) 및 EtOAc(150 ㎖)에 용해시켰다. 층을 분리하고 유기층을 포화된 NaHCO3(수성)(3 x 50 ㎖)으로 세척하고 MgSO4 상에서 건조하고 여과하고 진공 중에서 농축하였다. 잔사를 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(50 g 실리카, 이솔루트 카트리지, 5% 내지 20% EtOAc:헵탄)로 정제하여 두꺼운 엷은 황색 오일로서 표제 화합물을 수득하였다(3.0 g, 51%). LC-MS 87%, 1.89분(3.5분 LC-MS 방법), m/z = 243.9, 244.9, 245.9, 246.9; 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 7.34 (d, J=1.89 Hz, 1H), 6.95 (d, J=1.89 Hz, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.80 (br. s., 2H), 2.29 (s, 3H).
단계 4: 메틸 5-브로모-2-메틸-3-[(옥산-4-일)아미노]벤조에이트의 합성
옥산-4-온(2.3 ㎖, 25 mmol)에 이어서 아세트산(4.2 ㎖, 74 mmol)을 질소 하에 1,2-다이클로로에탄(48 ㎖) 중의 메틸 3-아미노-5-브로모-2-메틸벤조에이트(3.0 g, 12 mmol) 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(7.8 g, 37 mmol)를 첨가하였다. 64시간 동안 교반한 후, 탈이온수(100 ㎖)를 첨가하고 혼합물을 고체 NaHCO3으로 중화하였다. 층을 분리하고 수성층을 EtOAc(4 x 50 ㎖)로 추출하였다. 모은 유기 추출물을 MgSO4 상에서 건조하고 여과하고 진공 중에서 농축하였다. 잔사를 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(50 g 실리카, 이솔루트 카트리지, 10% 내지 30% EtOAc:헵탄)로 정제하여 백색 고체로서 표제 화합물을 수득하였다(3.5 g, 85%). LC-MS 99.8%, 2.18분(3.5분 LC-MS 방법), m/z = 327.9, 328.9, 329.9, 330.9; 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 7.24 (d, J=1.73 Hz, 1H), 6.85 (d, J=1.58 Hz, 1H), 4.03 (dt, J=11.82, 3.31 Hz, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.66 (br.s., 1H), 3.56 (td, J=11.55, 1.97 Hz, 2H), 3.47-3.55 (m, 1H), 2.24 (s, 3H), 2.06 (d, J=13.56 Hz, 2H), 1.47-1.60 (m, 2H).
단계 5: 메틸 5-브로모-2-메틸-3-[(옥산-4-일)(2,2,2-트라이플루오로에틸)아미노]벤조에이트의 합성
나트륨 테트라하이드로보레이트(1.0 g, 26 mmol)를, 메틸 5-브로모-2-메틸-3-[(옥산-4-일)아미노]벤조에이트(500 mg, 1.5 mmol) 및 TFA(15 ㎖)를 함유하는 2구 100 ㎖ RBF 내에 5분 동안 나누어 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반한 후 50℃에서 3시간 동안 가열하고 추가 분취량의 NaBH4(300 mg)으로 25분 동안 처리하였다. 그 다음, 반응 혼합물을 60℃에서 2시간 동안 가열하고 실온에서 17시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 TFA(5 ㎖) 및 NaBH4(200 mg)으로 처리하고 60℃에서 3.5시간 동안 다시 가열하였다. 추가 분취량의 NaBH4(200 mg)을 TFA(5 ㎖)와 함께 15분 동안 첨가하고 가열을 추가 3시간 동안 계속 수행한 후, 실온에서 밤새 정치시켰다. 반응 혼합물을 얼음(75 ㎖)에 붓고 얼음이 용융될 때까지 교반하였다. 그 다음, 6 M NaOH(수성)(40 ㎖)를 첨가하여 반응 혼합물을 염기성화하고 1 M HCl(수성)(40 ㎖)을 사용하여 pH 7로 재조절하였다. 발생된 백색 현탁액을 여과로 수집하고 고체를 물(20 ㎖)로 세척하고 진공 중에서 40℃에서 3시간 동안 건조하여 백색 고체로서 표제 화합물을 수득하였다(577 mg, 91%). LC-MS 98.2%, 2.42분(3.5분 LC-MS 방법), m/z = 409.90, 410.9, 411.90, 412.9; 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 7.80 (d, J=1.73 Hz, 1H), 7.41 (d, J=1.73 Hz, 1H), 4.01 (dd, J=11.51, 4.10 Hz, 2H), 3.91 (s, 3H), 3.64 (d,J=5.20 Hz, 2H), 3.32 (t, J=11.82 Hz, 2H), 2.99 (tt, J=11.43, 3.63 Hz, 1H), 2.48 (s, 3H), 1.80 (dd, J=12.53, 1.50 Hz, 2H), 1.54-1.62 (m, 2H).
단계 6: 5-브로모-2-메틸-3-[(옥산-4-일)(2,2,2-트라이플루오로에틸)아미노]벤조산의 합성
4 M NaOH(수성)(13.9 ㎖)를 THF(14 ㎖)와 MeOH(2.1 ㎖)의 혼합물 중의 메틸 5-브로모-2-메틸-3-[(옥산-4-일)(2,2,2-트라이플루오로에틸)아미노]벤조에이트(572 mg, 1.4 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 50℃에서 5.5시간 동안 교반한 후 실온에서 17시간 동안 교반하였다. 진공 중에서 농축하여 THF를 제거하고 6 M HCl(수성)(9.5 ㎖)을 사용하여 수성 잔사를 pH 4까지 산성화하였다. 발생된 현탁액을 실온에서 20분 동안 정치한 후 고체를 여과로 수집하였다. 고체 케이크를 물(20 ㎖)로 세척하고 고진공 하에 2시간 동안 건조하여 백색 고체로서 표제 화합물을 수득하였다(507 mg, 90%). LC-MS 98%, 2.04분(3.5분 LC-MS 방법), m/z = 395.9, 396.9, 397.9, 398.9; 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 7.97 (d, J=1.73 Hz, 1H), 7.48 (d, J=1.73 Hz, 1H), 4.02 (dd, J=11.35, 3.94 Hz, 2H), 3.65 (br. s, 2H), 3.33 (t, J=11.59 Hz, 2H), 3.00 (tt, J=11.49, 3.80 Hz, 1H), 2.55 (s, 3H), 1.82 (d, J=11.98 Hz, 2H), 1.55-1.69 (m, 2H). OH는 가시화되지 않는다.
단계 7: 5-브로모-N-[(4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸]-2-메틸-3-[(옥산-4-일)(2,2,2-트라이플루오로에틸)아미노]벤즈아미드의 합성
무수 DMF(3.0 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-2-메틸-3-[(옥산-4-일)(2,2,2-트라이플루오로에틸)아미노]벤조에이트(250 mg, 0.63 mmol)의 교반된 용액을 질소 기구 압력 하에 0℃에서 HATU(288 mg, 0.76 mmol) 및 DIPEA(220 ㎕, 1.3 mmol)로 적가 처리하였다. 발생된 용액을 5분 동안 교반한 후 3-(아미노메틸)-4,6-다이메틸-1,2-다이하이드로피리딘-2-온(89%, 119 mg, 0.69 mmol)으로 처리하였다. 발생된 현탁액을 0℃에서 20분 동안 교반한 후 실온에서 16.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 3-(아미노메틸)-4,6-다이메틸-1,2-다이하이드로피리딘-2-온(30 mg)으로 처리하였다. 교반을 추가 23시간 동안 계속 수행한 후, 반응 혼합물을 물(30 ㎖)과 CH2Cl2(20 ㎖)에 분배하였다. 층을 분리하고 수성층을 CH2Cl2(3 x 20 ㎖)으로 처리하였다. 모은 유기물을 포화된 NaHCO3 용액(수성)(50 ㎖), 물(60 ㎖) 및 염수(2 x 40 ㎖)로 세척하고 MgSO4 상에서 건조하고 여과하고 진공 중에서 농축하였다. 미정제 잔사를 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(10 g SNAP 카트리지, 이솔레라, 0% 내지 10% MeOH/CH2Cl2)로 정제하고 초음파처리를 이용하여 에테르(10 ㎖)로부터 분쇄하였다. 발생된 침전물을 여과로 수집하고 진공 중에서 건조하여 백색 고체로서 표제 화합물을 수득하였다(249 mg, 74%). LC-MS 100%, 4.08분(7분 LC-MS 방법), m/z = 530.0, 531.0, 532.0, 533.0; 1H NMR (500 MHz, 아세톤) δ 10.67 (s, 1H), 7.55 (d, J=1.8 Hz, 2H), 7.27 (d, J=1.9 Hz, 1H), 5.90 (s, 1H), 4.40 (d, J=5.5 Hz, 2H), 3.90 (dd, J=11.2, 4.6 Hz, 4H), 3.28 (t, J=11.6 Hz, 2H), 3.07-2.97 (m, 1H), 2.32 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 2.24 (s, 3H), 1.76 (dd, J=12.3, 1.6 Hz, 2H), 1.61 (qd, J=12.0, 4.5 Hz, 2H).
단계 8: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-5-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)(2,2,2-트라이플루오로에틸)아미노)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
2구 RBF에서, 1,4-다이옥산(3.0 ㎖) 중의 5-브로모-N-[(4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸]-2-메틸-3-[(옥산-4-일)(2,2,2-트라이플루오로에틸)아미노]벤즈아미드(200 mg, 0.38 mmol) 및 4-[4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질]모르폴린(126 mg, 0.41 mmol)을 물(1.0 ㎖) 중의 Na2CO3(140 mg, 1.3 mmol) 함유 용액으로 처리하였다. 긴 바늘을 이용하여 혼합물을 통해 질소를 5분 동안 발포한 후 팔라듐-트라이페닐포스판(1:4)(44 mg, 0.04 mmol)을 첨가하였다. 황색 현탁액을 통해 질소를 추가 5분 동안 발포한 후, 반응 혼합물을 100℃에서 5.5시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물(10 ㎖) 및 CH2Cl2 중의 10% MeOH(10 ㎖)로 희석하였다. 층을 분리하고 수성층을 CH2Cl2 중의 10% MeOH(3 x 15 ㎖)로 추출하였다. 모은 유기 추출물을 염수(40 ㎖)로 세척하고 MgSO4 상에서 건조하고 여과하고 진공 중에서 농축하였다. 미정제 잔사를 컬럼 크로마토그래피(10 g SNAP 카트리지, 이솔레라, 0% 내지 4% MeOH/CH2Cl2)로 정제하여 회백색 분말로서 표제 화합물을 수득하였다(193 mg, 82%). LC-MS 100%, 3.34분(7분 LC-MS 방법), m/z = 627.5; 1H NMR (500 MHz, 아세톤) δ 10.76 (s, 1H), 7.65 (d, J=1.5 Hz, 1H), 7.60 (d, J=8.2 Hz, 2H), 7.57 (t, J=5.6 Hz, 1H), 7.43 (d, J=1.5 Hz, 1H), 7.39 (d, J=8.1 Hz, 2H), 5.91 (s, 1H), 4.44 (d, J=5.5 Hz, 2H), 3.97 (s, 2H), 3.90 (dd, J=11.4, 4.1 Hz, 2H), 3.61 (t, J=4.6 Hz, 4H), 3.50 (s, 2H), 3.29 (t, J=11.5 Hz, 2H), 3.06 (tt, J=11.4, 3.8 Hz, 1H), 2.39 (d, J=5.0 Hz, 7H), 2.34 (s, 3H), 2.22 (s, 3H), 1.82 (dd, J=12.3, 1.7 Hz, 2H), 1.70-1.56 (m, 2H).
실시예 139: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-에틸-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00233
단계 1: 메틸 5-클로로-2-[2-(트라이메틸실릴)에티닐]벤조에이트의 합성
요오드화구리(I)(338 mg, 1.78 mmol) 및 트라이페닐포스핀(778 mg, 2.97 mmol)을 질소 하에 실온에서 TEA(124 ㎖, 889.82 mmol) 중의 메틸 2-브로모-5-클로로벤조에이트(14.8 g, 59 mmol) 용액에 첨가하였다. 이 혼합물을 통해 질소를 10분 동안 발포한 후, 에티닐(트라이메틸)실란(12.45 ㎖, 89 mmol) 및 Pd(OAc)2(266 mg, 1.19 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 50℃에서 20시간 동안 교반한 후 감압 하에 농축하였다. 잔사를 탈이온수(50 ㎖) 및 EtOAc(50 ㎖)에 용해시키고 셀라이트를 통해 여과하였다. 필터 케이크를 EtOAc(50 ㎖)로 세척한 후, 층을 분리하고 수성층을 EtOAc(2 x 50 ㎖)로 추출하였다. 모은 유기 추출물을 MgSO4 상에서 건조하고 여과하고 감압 하에 농축하였다. 잔사를 FCC(10 g 실리카, 이솔루트 카트리지, 용출제의 구배; 99:1 헵탄:EtOAc 내지 85:15 헵탄:EtOAc)로 정제함으로써 정치 시 고체화되는 주황색 오일로서 16.2 g(102.4%)의 메틸 5-클로로-2-[2-(트라이메틸실릴)에티닐]벤조에이트를 수득하였다. 샘플은 헵탄을 함유하였다. LC-MS 91%, 2.57분(3분 LC-MS 방법), m/z = 267.4/268.9, 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 7.89 (d, J=2.2 Hz, 1H), 7.51 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.41 (dd, J=8.3, 2.3 Hz, 1H), 3.92 (s, 3H), 0.27 (s, 9H).
단계 2: 메틸 5-클로로-2-에티닐벤조에이트의 합성
K2CO3(10.36 g, 75 mmol)을 공기 중에서 실온에서 메탄올(150 ㎖) 중의 메틸 5-클로로-2-[2-(트라이메틸실릴)에티닐]벤조에이트(10 g, 37.5 mmol) 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 교반한 후 감압 하에 농축하였다. 잔사를 탈이온수(50 ㎖) 및 EtOAc(50 ㎖)에 용해시켰다. 층을 분리하고 수성층을 EtOAc(2 x 50 ㎖)로 추출하였다. 모은 유기 추출물을 MgSO4 상에서 건조하고 여과하고 감압 하에 농축하였다. 잔사를 FCC(50 g 실리카, 이솔루트 카트리지, 용출제의 구배; 95:5 헵탄:EtOAc 내지 9:1 헵탄:EtOAc)로 정제함으로써 정치 시 고체화되는 주황색 오일로서 5.75 g(55.2%)의 메틸 5-클로로-2-에티닐벤조에이트를 수득하였다. 이 물질은 임의의 추가 정제 없이 사용되기에 적합한 30%의 에틸 에스테르를 함유하였다. LC-MS 38%, 1.98분(3분 LC-MS 방법), m/z = 195.0/196.9, 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 7.93 (d, J=2.2 Hz, 1H), 7.55 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.45 (dd, J=8.3, 2.3 Hz, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.43 (s, 1H).
단계 3: 메틸 5-클로로-2-에틸벤조에이트의 합성
Pd/C(10%)(50% 물, 2.92 g, 1.37 mmol)을 에틸 아세테이트(135 ㎖) 중의 메틸 5-클로로-2-에티닐벤조에이트(5.34 g, 27.44 mmol) 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 수소 대기 하에 실온에서 3시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완결되었다는 것을 표시하였고, 상기 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하였다. 필터 케이크를 EtOAc(50 ㎖)로 세척하고, 여과액을 감압 하에 농축함으로써 이의 추가 정제 없이 사용되기에 적합한 갈색 오일로서 5.12 g(93.9%)의 메틸 5-클로로-2-에틸벤조에이트를 수득하였다. LC-MS 56%, 2.21분(3분 LC-MS 방법), m/z = 198.9/200.9, 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 7.84 (d, J=2.3 Hz, 1H), 7.39 (dd, J=8.3, 2.3 Hz, 1H), 7.21 (d, J=8.3 Hz, 1H), 3.90 (s, 3H), 2.94 (q, J=7.5 Hz, 2H), 1.21 (t, J=7.5 Hz, 3H).
단계 4: 메틸 5-클로로-2-에틸-3-니트로벤조에이트의 합성
농축 H2SO4(31 ㎖, 587 mmol) 중의 메틸 5-클로로-2-에틸벤조에이트(5.12 g, 25.77 mmol) 용액을 공기 중에서 아세톤/빙욕조 내에서 -5℃까지 냉각시켰다. 농축 질산(2.15 ㎖, 33.51 mmol)과 농축 H2SO4(2.0 ㎖, 37.52 mmol)의 혼합물을 -5℃ 내지 0℃에서 반응 혼합물에 15분 동안 적가하였다. 엷은 황색 반응 혼합물을 -5℃ 내지 0℃에서 1시간 동안 교반한 후 얼음(500 ㎖)에 붓고, 이것을 EtOAc(3 x 100 ㎖)로 추출하였다. 모은 유기층을 탈이온수(100 ㎖)에 이어서 염수(100 ㎖)로 세척하였다. 유기층을 MgSO4 상에서 건조하고 여과하고 감압 하에 농축하였다. LCMS 및 NMR은 에스테르의 약 30% 가수분해를 보여주었다. 미정제 물질을 메탄올(30 ㎖)에 용해시키고 질소 하에 0℃까지 냉각시켰고, 이때 SOCl2(2.25 ㎖, 30.93 mmol)를 서서히 첨가하였다. 그 다음, 반응 혼합물을 환류 온도에서 6시간 동안 가열한 후 감압 하에 농축함으로써 주황색 오일로서 6.18 g(98%)의 메틸 5-클로로-2-에틸-3-니트로벤조에이트를 수득하였다. 상기 생성물은 임의의 추가 정제 없이 사용되기에 적합한 3-니트로:6-니트로 이성질체의 1:1 혼합물을 약간의 에틸 에스테르와 함께 함유하였다.
단계 5: 메틸 3-아미노-5-클로로-2-에틸벤조에이트의 합성
염화암모늄(13.31 g, 253.65 mmol)에 이어서 탈이온수(125 ㎖)를 실온에서 메탄올(250 ㎖) 중의 메틸 5-클로로-2-에틸-3-니트로벤조에이트(6.18 g, 25.36 mmol) 용액에 첨가하였다. 혼합물을 공기 중에서 70℃까지 가열한 후, 철(8.5 g, 152.19 mmol)을 첨가하였다. 반응물은 70℃에서 교반된 2.5시간 동안 어두운 색으로 변하였다. 이 혼합물을 실온까지 냉각시키고 키에셀겔을 통해 여과하였다. 필터 패드를 MeOH(250 ㎖)로 세척하고 여과액을 감압 하에 농축하였다. 잔사를 포화된 NaHCO3(수성)(50 ㎖) 및 EtOAc(150 ㎖)에 용해시켰다. 층을 분리하고 유기층을 포화된 NaHCO3(수성)(2 x 50 ㎖)으로 세척한 후 MgSO4 상에서 건조하고 여과하고 감압 하에 농축하였다. 잔사를 FCC(50 g 실리카, 이솔루트 카트리지, 용출제의 구배; 95:5 헵탄:EtOAc 내지 75:25 헵탄:EtOAc)로 정제하여 황색 오일로서 2.42 g(22%, 7% 보정된 수율)의 메틸 3-아미노-5-클로로-2-에틸벤조에이트를 수득하였다. 상기 생성물은 약 25%의 에틸 에스테르 및 가능한 약 15%의 4-니트로 생성물을 함유한다. 상기 물질을 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. LC-MS 31%, 2.00분(3분 LC-MS 방법), m/z = 295.0, 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 7.17 (d, J=2.1 Hz, 1H), 6.79 (d, J=2.1 Hz, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.86-3.81 (m, 2H), 2.74 (q, J=7.5 Hz, 2H), 1.20 (t, J=7.5 Hz, 3H).
단계 6: 메틸 5-클로로-2-에틸-3-[(옥산-4-일)아미노]벤조에이트의 합성
옥산-4-온(1.3 ㎖, 14.04 mmol)에 이어서 아세트산(2.41 ㎖, 42.12 mmol)을 질소 하에 실온에서 1,2-다이클로로에탄(28 ㎖) 중의 메틸 3-아미노-5-클로로-2-에틸벤조에이트(1.5 g, 7.02 mmol) 용액에 첨가하였다. 이 용액을 5분 동안 교반한 후, 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(4.46 g, 21.06 mmol)를 실온에서 첨가하였다. 20시간 동안 교반한 후, 탈이온수(28 ㎖)를 첨가하고 혼합물을 고체 NaHCO3으로 중화하였다. 층을 분리하고 수성층을 EtOAc(2 x 28 ㎖)로 추출하였다. 모은 유기 추출물을 MgSO4 상에서 건조하고 여과하고 감압 하에 농축하였다. 잔사를 FCC(50 g 실리카, 이솔루트 카트리지, 용출제의 구배; 95:5 헵탄:EtOAc 내지 8:2 헵탄:EtOAc)로 정제하여 백색 고체로서 1.76 g(84%, 50% 보정된 수율)의 메틸 5-클로로-2-에틸-3-[(옥산-4-일)아미노]벤조에이트를 수득하였다. 상기 생성물은 약 25%의 에틸 에스테르를 함유한다. 상기 물질을 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. LC-MS 60%, 2.27분(3분 LC-MS 방법), m/z = 298.0/300.0, 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 7.07 (d, J=2.0 Hz, 1H), 6.71 (d, J=1.9 Hz, 1H), 4.01 (dt, J=11.8, 3.4 Hz, 2H), 3.87 (s, 3H), 3.82-3.76 (m, 1H), 3.64-3.47 (m, 3H), 2.79-2.63 (m, 2H), 2.06 (d, J=13.2 Hz, 2H), 1.55-1.46 (m, 2H), 1.18 (t, J=7.5 Hz, 3H).
단계 7: 5-클로로-2-에틸-3-[에틸(옥산-4-일)아미노]벤조산의 합성
아세트알데하이드(0.66 ㎖, 11.75 mmol)에 이어서 아세트산(0.4 ㎖, 7.05 mmol)을 질소 하에 실온에서 DCE(10 ㎖) 중의 메틸 5-클로로-2-에틸-3-[(옥산-4-일)아미노]벤조에이트(350 mg, 1.18 mmol) 용액에 첨가하였다. 이 용액을 5분 동안 교반한 후, 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(2.49 g, 11.75 mmol)를 실온에서 첨가하였다. 23시간 동안 교반한 후, 추가 아세트알데하이드(0.66 ㎖, 11.75 mmol)를 첨가한 다음, 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(2.49 g, 11.75 mmol)를 첨가하였다. 추가 3시간 동안 교반한 후, 탈이온수(15 ㎖)를 첨가하고 혼합물을 고체 NaHCO3으로 중화하였다. 층을 분리하고, 수성층을 EtOAc(2 x 15 ㎖)로 추출하였다. 모은 유기 추출물을 MgSO4 상에서 건조하고 여과하고 감압 하에 농축하였다. 잔사를 FCC(10 g 실리카, 이솔루트 카트리지, 용출제의 구배; 99:1 헵탄:EtOAc 내지 85:15 헵탄:EtOAc)로 정제함으로써 다음 단계에서 사용되는 메틸 에스테르와 에틸 에스테르의 2:1 혼합물로서 표제 화합물을 수득하였다(317 mg).
THF(10 ㎖) 및 4 M NaOH(9.7 ㎖, 38.9 mmol)를 상기 에스테르들의 혼합물에 첨가하고 반응물을 50℃에서 27시간 동안 교반한 후, MeOH(5 ㎖)를 반응 혼합물에 첨가하고, 이것을 50℃에서 추가 21시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 6 M HCl로 pH 2 내지 3까지 산성화하고 DCM(5 x 10 ㎖)으로 추출하였다. 모은 유기 추출물을 MgSO4 상에서 건조하고 여과하고 감압 하에 농축함으로써 주황색 결정으로서 표제 화합물을 수득하였다(289 mg, 2 단계에 걸쳐 79%). LC-MS 100%, 2.09분(3.5분 LC-MS 방법), m/z = 312.0/314.0, 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ 7.73 (d, J=1.7 Hz, 1H), 7.29 (d, J=1.8 Hz, 1H), 3.99 (d, J=11.0 Hz, 2H), 3.38-3.29 (m, 2H), 3.20-3.03 (m, 4H), 3.02-2.91 (m, 1H), 1.78-1.61 (m, 4H), 1.13 (t, J=7.4 Hz, 3H), 0.91 (t, J=7.0 Hz, 3H).
단계 8: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-에틸-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
HATU(280 mg, 0.74 mmol)에 이어서 DIPEA(213 ㎕, 1.26 mmol) 및 3-(아미노메틸)-4,6-다이메틸-1,2-다이하이드로피리딘-2-온(89%, 115 mg, 0.67 mmol)을 0℃에서 DMF(3 ㎖) 중의 5-클로로-2-에틸-3-[에틸(옥산-4-일)아미노]벤조산(191 mg, 0.61 mmol) 용액에 첨가하였다. 반응물을 실온에서 3시간 동안 교반한 후, 반응물을 탈이온수(50 ㎖)에 붓고 발생된 고체를 여과하고 물로 세척하였다. 수성층을 DCM(3 x 50 ㎖)으로 세척하고, 모은 유기물을 염수(30 ㎖)로 세척하고 MgSO4 상에서 건조하고 여과하고 증발시켜 오일을 수득하였다. 상기 고체 및 오일을 DCM 중의 0% 내지 3% MeOH로 용출하는 10 g 이솔루트 컬럼으로 정제하고 증발시킨 후, EtOAc 중의 0% 내지 3% MeOH로 용출하는 10 g 이솔루트를 사용하여 정제함으로써 회백색 고체로서 표제 화합물을 수득하였다(234 mg, 79%). LC-MS 92%, 1.78분(3.5분 LC-MS 방법), m/z = 446.2/448. 2'-(다이사이클로헥실포스파닐)-N,N-다이메틸비페닐-2-아민(21 mg, 0.05 mmol), 팔라듐 다이아세테이트(5.89 mg, 0.03 mmol), 불화세슘(120 mg, 0.79 mmol) 및 4-[4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질]모르폴린(119 mg, 0.39 mmol)을 다이글라임(4 ㎖)과 MeOH(2 ㎖)(질소 기체로 발포됨)의 탈기된 혼합물 중의 5-클로로-N-[(4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸]-2-에틸-3-[에틸(옥산-4-일)아미노]벤즈아미드(117 mg, 0.26 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 질소 발포를 10분 동안 계속 수행한 다음, 반응물을 70℃에서 16시간 동안 가열한 후, 추가 4-[4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질]모르폴린(119 mg, 0.39 mmol)을 첨가하고, 가열을 6시간 동안 계속 수행하였다. 그 다음, 반응물을 실온까지 냉각시키고 키에셀겔을 통해 여과하고, 케이크를 MeOH로 세척하였다. 증류수(20 ㎖)를 여과액에 첨가한 후, 여과액을 EtOAc(3 x 50 ㎖)로 추출한 다음, 모은 유기물을 염수(2 x 50 ㎖)로 세척하고 MgSO4으로 건조하고 여과하고 증발시켰다. 발생된 잔사를 DCM 중의 0% 내지 10% MeOH 구배로 용출하는 25 g 이솔루트 컬럼을 사용하여 정제함으로써 엷은 황색 고체로서 표제 화합물을 수득하였다(32 mg, 21%). LC-MS 99%, 2.72분(7분 LC-MS 방법), m/z = 294.3 (M+H/2), 1H NMR (500 MHz, 아세톤-d 6 ) δ 10.80 (s, 1H), 7.60-7.54 (m, 3H), 7.51 (s, 1H), 7.39 (d, J=7.9 Hz, 2H), 7.36 (d, J=1.4 Hz, 1H), 5.92 (s, 1H), 4.45 (d, J=5.6 Hz, 2H), 3.88 (d, J=8.0 Hz, 2H), 3.66-3.56 (m, 4H), 3.51 (s, 2H), 3.29 (t, J=11.2 Hz, 2H), 3.17 (q, J=7.0 Hz, 2H), 3.09 (t, J=11.2 Hz, 1H), 2.98 (q, J=7.4 Hz, 2H), 2.41 (s, 4H), 2.36 (s, 3H), 2.22 (s, 3H), 1.76 (d, J=11.2 Hz, 2H), 1.65-1.56 (m, 2H), 1.08 (t, J=7.4 Hz, 3H), 0.91 (t, J=7.0 Hz, 3H).
실시예 140: 3'-시아노-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00234
단계 1: 5-브로모-2-(모르폴리노메틸)벤조니트릴의 합성
아세트산(342 mg, 5.7 mmol)을 다이클로로에탄(10 ㎖) 중의 5-브로모-2-포르밀벤조니트릴(200 mg, 0.95 mmol) 및 모르폴린(248 mg, 2.85 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 반응물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(604 mg, 2.85 mmol)를 0℃에서 반응 혼합물에 첨가하고 실온에 도달하게 하고 교반을 밤새 계속 수행하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 다이클로로메탄으로 희석하고 물 및 포화된 중탄산나트륨 수용액으로 세척하고 황산나트륨 상에서 건조하였다. 용매를 감압 하에 제거한 후 컬럼 크로마토그래피 정제를 수행하여 원하는 화합물을 수득하였다(150 mg, 56%).
단계 2: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤즈아미드의 합성
다이옥산(10 ㎖) 중의 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드(1.0 g, 2.1 mmol), 비스피나콜레이토 다이보론(2.67 g, 10.5 mmol) 및 아세트산칼륨(610 mg, 6.31 mmol)의 교반된 혼합물을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, 1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센-팔라듐(II) 다이클로라이드 다이클로로메탄 착물(85 mg, 0.10 mmol)을 첨가하고 아르곤으로 15분 동안 다시 퍼징하였다. 반응물을 80℃에서 7시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM(3회)으로 추출하였다. 모은 유기층을 황산나트륨 상에서 건조하였다. 용매를 감압 하에 제거한 후 컬럼 크로마토그래피 정제를 수행하여 원하는 화합물을 수득하였다(250 mg, 27%).
단계 3: 3'-시아노-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
2 M Na2CO3 수용액(0.81 ㎖, 1.63 mmol)을 다이옥산(6 ㎖) 중의 5-브로모-2-(모르폴리노메틸)벤조니트릴(190 mg, 0.68 mmol) 및 N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤즈아미드(200 mg, 0.45 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고, 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(52 mg, 0.04 mmol)을 첨가하고 아르곤으로 15분 동안 다시 퍼징하였다. 반응물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM(3회)으로 추출하였다. 모은 유기층을 황산나트륨 상에서 건조하였다. 용매를 감압 하에 제거한 후 컬럼 크로마토그래피 정제를 수행하여 표제 화합물을 수득하였다(16 mg, 6%). LCMS: 598.20 (M+1)+; HPLC: 89.15% (@ 254 nm) (Rt; 4.039; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (bs, 1H), 8.20 (t, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.94 (d, 1H, J=6.8 Hz), 7.63 (d, 1H, J=8.4 Hz), 7.51 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.29 (m, 2H), 3.84-3.82 (m, 2H), 3.66-3.58 (m, 6H), 3.32 (m, 5H), 3.11-3.03 (m, 4H), 2.25 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.65-1.51 (m, 4H), 0.82 (t, 3H, J=6 Hz).
실시예 141: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드
Figure pat00235
단계 1: 5-브로모-2-메틸-3-니트로벤조산
1,3-다이브로모-5,5-다이메틸-2,4-이미다졸리딘다이온(87.98 g, 307.70 mmol)을 실온에서 농축 H2SO4(400 ㎖) 중의 2-메틸-3-니트로벤조산(100 g, 552.48 mmol)의 교반된 용액에 나누어 첨가하였다. 그 다음, 반응 혼합물을 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 빙수에 붓고, 침전된 고체를 여과로 수집하고 물로 세척하고 진공 하에 건조하여 회백색 고체로서 원하는 5-브로모-2-메틸-3-니트로벤조산을 수득하였다(140 g, 97.90% 수율). 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 8.31 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 2.43 (s, 3H).
단계 2: 메틸 5-브로모-2-메틸-3-니트로벤조에이트
탄산나트륨(468 g, 4415.09 mmol)을 DMF(2.8 ℓ) 중의 5-브로모-2-메틸-3-니트로벤조산(285 g, 1104.65 mmol)의 교반된 용액에 첨가한 후, 메틸 요오다이드(626.63 g, 4415 mmol)를 실온에서 첨가하였다. 발생된 반응 혼합물을 60℃에서 8시간 동안 교반하였다. 그 다음, 반응 혼합물을 여과하여 현탁된 고체를 제거하고, 상기 고체를 에틸 아세테이트(3 x 1 ℓ)로 충분히 세척하였다. 모은 여과액을 물(5 x 3 ℓ)로 충분히 세척하고, 수성층을 에틸 아세테이트(3 x 1 ℓ)로 다시 추출하였다. 모은 유기 추출물을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 여과하고 감압 하에 농축하여 회백색 고체로서 메틸 5-브로모-2-메틸-3-니트로벤조에이트를 수득하였다(290 g, 97% 수율). 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 8.17 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 3.96 (s, 3H), 2.59 (s, 3H).
단계 3: 메틸 3-아미노-5-브로모-2-메틸벤조에이트
수성 염화암모늄(283 g, 1.5 ℓ 물에 용해된 5290 mmol)을 에탄올(1.5 ℓ) 중의 메틸 5-브로모-2-메틸-3-니트로벤조에이트(290 g, 1058.39 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 발생된 혼합물을 교반하고 80℃에서 가열한 후 철 분말(472 g, 8451 mmol)을 80℃에서 나누어 첨가하였다. 발생된 반응 혼합물을 80℃에서 12시간 동안 가열하였다. 그 다음, 반응 혼합물을 셀라이트®를 통해 고온 여과하고 셀라이트® 층을 메탄올(5 ℓ)로 충분히 세척한 후 DCM(5 ℓ) 중의 30% MeOH로 충분히 세척하였다. 모은 여과액을 진공 중에서 농축하고 수득된 잔사를 수성 중탄산염(2 ℓ)으로 희석하고 에틸 아세테이트(3 x 5 ℓ)로 추출하였다. 모은 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 여과하고 감압 하에 농축하여 갈색 고체로서 메틸 3-아미노-5-브로모-2-메틸벤조에이트를 수득하였다(220 g, 89.41% 수율).
상기 생성물의 일부(5 g)를 고온 에탄올(20 ㎖)에 용해시키고, 불용성 잔사를 여과하여 제거하고 모액을 농축하여 밝은 갈색 고체로서 HPLC 순도 93.81%의 메틸 3-아미노-5-브로모-2-메틸벤조에이트를 수득하였다(3.5 g, 70% 수율). 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 7.37 (s, 1H), 6.92 (s, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.80 (bs, 2H), 2.31 (s, 3H).
단계 4: 메틸 5-브로모-3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)아미노)사이클로헥실)아미노)-2-메틸벤조에이트
아세트산(7.4 g, 123 mmol)을 다이클로로에탄(50 ㎖) 중의 메틸 3-아미노-5-브로모-2-메틸벤조에이트(5 g, 20.5 mmol) 및 tert-부틸 (4-옥소사이클로헥실)카바메이트(5.69 g, 26.7 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고, 반응물을 실온에서 10분 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(13.1 g, 61.7 mmol)를 0℃에서 첨가하고 반응물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응물을 수성 중탄산나트륨으로 급랭시키고 유기층을 분리하고 수성층을 다이클로로메탄으로 추출하였다. 모은 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공 중에서 농축하였다. 미정제 생성물을 헥산 중의 10% 에틸 아세테이트로 용출하는 실리카 겔(100 내지 200 메쉬 크기) 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 고체로서 3.5 g의 보다 높은 극성의 (트랜스) 이성질체 메틸 5-브로모-3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)아미노)사이클로헥실)아미노)-2-메틸벤조에이트를 수득하였다(38.46%). 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 7.21 (s, 1H), 6.80 (s, 1H), 4.41 (bs, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.60 (m, 1H), 3.45 (m, 1H), 3.20 (m, 1H), 2.22 (s, 3H), 2.15 (bs, 2H), 2.05 (bs, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.30 (m, 4H).
단계 5: 메틸 5-브로모-3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)아미노)사이클로헥실)-(에틸)아미노)-2-메틸벤조에이트
아세트산(44.64 g, 0.744 mmol)을 다이클로로에탄(550 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)아미노)-사이클로헥실)(에틸)아미노)-2-메틸벤조에이트(55 g, 0.124 mol) 및 아세트알데하이드(11 g, 0.25 mol)의 교반된 용액에 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(79 g, 0.372 mmol)를 0℃에서 첨가하고 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응물을 수성 중탄산나트륨으로 급랭시키고 유기층을 분리하고 수성층을 다이클로로메탄으로 추출하였다. 모은 추출물을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공 중에서 농축하였다. 미정제 화합물을 헥산 중의 10% 에틸 아세테이트로 용출하는 실리카 겔(100 내지 200 메쉬 크기) 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 고체로서 44 g의 메틸 5-브로모-3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)아미노)사이클로헥실)-(에틸)아미노)-2-메틸벤조에이트를 수득하였다(75.2%). 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 7.55 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 6.65 (d, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.15 (bs, 1H), 3.05 (q, 2H), 2.60 (m, 1H), 2.30 (s, 3H), 1.75 (m, 4H), 1.40 (m, 2H), 1.35 (s, 9H), 1.10 (m, 2H), 0.80 (t, 3H).
단계 6: tert-부틸 ((1r,4r)-4-((5-브로모-3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸페닐)(에틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트
수성 NaOH(3.5 g, 10 ㎖ H2O 중의 0.08 mol)를 EtOH(100 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)아미노)사이클로헥실)-(에틸)아미노)-2-메틸벤조에이트(25 g, 0.053 mol) 용액에 첨가하고 60℃에서 1시간 동안 교반하였다. 그 다음, 에탄올을 감압 하에 제거하고 묽은 HCl로 pH 8까지 산성화하고 시트르산으로 pH 6까지 산성화하였다. 혼합물을 DCM 중의 10% 메탄올(3 x 200 ㎖)로 추출하였다. 모은 유기층을 건조하고 농축하여 각각의 산을 수득하였다(24.2 g, 99.0%). 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 13.13 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 6.68 (d, 1H), 3.14 (bs, 1H), 3.03 (q, 2H), 2.56 (m, 1H), 2.33 (s, 3H), 1.80-1.65 (m, 4H), 1.40 (m, 2H), 1.35 (s, 9H), 1.10 (m, 2H), 0.77 (t, 3H).
상기 산(24 g, 0.053 mol)을 DMSO(100 ㎖)에 용해시키고 3-(아미노메틸)-4,6-다이메틸피리딘-2(1H)-온(16 g, 0.106 mol) 및 트라이에틸아민(5.3 g, 0.053 mol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반한 후, PyBOP(41 g, 0.079 mmol)를 첨가한 다음, 교반을 실온에서 밤새 계속 수행하였다. 반응 혼합물을 빙수(1 ℓ)에 부었다. 발생된 침전물을 여과로 수집하고 물(2 x 1 ℓ)로 충분히 세척하고 건조하였다. 수득된 생성물을 아세토니트릴(3 x 200 ㎖) 및 DCM(100 ㎖)으로 세척하여 정제함으로써 tert-부틸 ((1r,4r)-4-((5-브로모-3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸페닐)(에틸)아미노)사이클로헥실)-카바메이트를 수득하였다(24 g, 77%). 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.47 (s, 1H), 8.24 (t, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.04 (s, 1H), 6.67 (d, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.24 (d, 2H), 3.13 (bs, 1H), 3.01 (q, 2H), 2.53 (m, 1H), 2.18 (s, 3H), 2.10 (s, 6H), 1.80-1.65 (m, 4H), 1.40 (m, 2H), 1.35 (s, 9H), 1.10 (m, 2H), 0.77 (t, 3H).
단계 7: tert-부틸 ((1r,4r)-4-((5-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-일)(에틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트
Na2CO3(15 g, 0.15 mol)을 다이옥산/물 혼합물(160 ㎖ + 40 ㎖) 중의 tert-부틸 ((1r,4r)-4-((5-브로모-3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸페닐)(에틸)아미노)사이클로헥실)-카바메이트(24 g, 0.041 mol) 및 4-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질)모르폴린(18 g, 0.061 mol)의 교반된 용액에 첨가하고, 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(4.7 g, 0.041 mol)을 첨가하고 반응 혼합물을 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 그 다음, 반응 혼합물을 10% MeOH/DCM(500 ㎖)으로 희석하고 여과하였다. 여과액을 농축하고 물(500 ㎖)로 희석하고 DCM 중의 10% MeOH(3 x 500 ㎖)로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 미정제 생성물을 DCM 중의 7% MeOH로 용출하는 실리카 겔(100 내지 200 메쉬) 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 tert-부틸 ((1r,4r)-4-((5-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-일)(에틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트를 수득하였다(20 g, 71.43%). 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (s, 1H), 8.20 (t, 1H), 7.56 (d, 2H), 7.36 (m, 3H), 7.17 (s, 1H), 6.66 (d, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.28 (d, 2H), 3.57 (bs, 4H), 3.48 (s, 2H), 3.20-3.05 (m, 3H), 2.62 (m, 1H), 2.36 (bs, 4H), 2.20 (s, 6H), 2.10 (s, 3H), 1.75 (m, 4H), 1.42 (m, 2H), 1.35 (s, 9H), 1.10 (m, 2H), 0.82 (t, 3H).
단계 8: 5-(((1r,4r)-4-아미노사이클로헥실)(에틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드
TFA(75 ㎖)를 0℃에서 DCM(200 ㎖) 중의 tert-부틸 ((1r,4r)-4-((5-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-일)(에틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트(20 g, 0.03 mol)의 교반된 용액에 첨가하고, 반응물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 그 다음, 반응 혼합물을 건조될 때까지 농축하고 잔사를 포화된 중탄산염 수용액(300 ㎖)으로 pH 8까지 염기성화하였다. 혼합물을 DCM 중의 20% 메탄올(4 x 200 ㎖)로 추출하였다. 모은 추출물을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 다음 반응에서 그 자체로 사용되는 5-(((1r,4r)-4-아미노사이클로헥실)(에틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드를 수득하였다(15.5 g, 91%). 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 8.18 (bs, 1H), 7.57 (d, 2H), 7.38 (m, 3H), 7.20 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.29 (d, 2H), 3.57 (bs, 4H), 3.48 (s, 2H), 3.31 (bs, 2H), 3.10 (m, 2H), 2.91 (m, 1H), 2.67 (m, 1H), 2.36 (bs, 4H), 2.21 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.90 (m, 2H), 1.83 (m, 2H), 1.45 (m, 2H), 1.23 (m, 2H), 0.83 (t, 3H).
단계 9: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드
35% 포름알데하이드 수용액(2.4 g, 0.080 mol)을 0℃에서 다이클로로메탄(150 ㎖) 중의 5-(((1r,4r)-4-아미노사이클로헥실)(에틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드(14 g, 0.023 mol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 20분 동안 교반한 후, Na(OAc)3BH(12.2 g, 0.057 mol)을 첨가하고 교반을 0℃에서 2시간 동안 계속 수행하였다. 그 다음, 물(100 ㎖)을 반응 혼합물에 첨가하고 혼합물을 DCM 중의 20% 메탄올(3 x 200 ㎖)로 추출하였다. 모은 추출물을 Na2SO4 상에서 건조하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 미정제 생성물을 DCM 중의 6% 내지 7% MeOH로 용출하는 염기성 알루미나 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(10 g, 63.6%). LCMS: 614.65 (M+1)+; HPLC: 98.88% (@ 210-370 nm) (Rt; 3.724; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (s, 1H), 8.17 (t, 1H), 7.56 (d, 2H, J=8 Hz), 7.36 (m, 3H), 7.17 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.29 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.57 (bs, 4H), 3.48 (s, 2H), 3.09 (q, 2H), 2.66 (m, 1H), 2.36 (bs, 4H), 2.21 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.11 (s, 9H), 1.79 (m, 4H), 1.36 (m, 2H), 1.11 (m, 2H), 0.82 (t, 3H, J=6.4 & 6.8 Hz).
실시예 142: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-((2-메톡시에틸)(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00236
단계 1: 메틸 5-브로모-3-((2-메톡시에틸)(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤조에이트의 합성
아세트산(0.42 ㎖, 7.33 mmol)을 다이클로로에탄(7 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-2-메틸-3-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)벤조에이트(400 mg, 1.22 mmol) 및 2-메톡시아세트알데하이드(1.3 mg, 17.56 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 실온에서 20분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 0℃까지 냉각시키고, 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(777 mg, 3.66 mmol)를 첨가하고 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 그 다음, 반응 혼합물을 포화된 NaHCO3으로 중화하고 DCM으로 추출하고, 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 감압 하에 농축하여 260 mg의 미정제 생성물을 수득하였다.
단계 2: 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-((2-메톡시에틸)(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드의 합성
에탄올:물(2:1)(5 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-3-((2-메톡시에틸)(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤조에이트(260 mg, 0.67 mmol) 및 NaOH(40 mg, 1.01 mmol)의 혼합물을 70℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 건조될 때까지 농축하고 미정제 물질을 물에 용해시키고 HCl을 느리게 첨가하여 pH를 5 내지 6으로 조절하고 화합물을 DCM 중의 10% MeOH로 추출하였다. 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 감압 하에 농축하여 230 mg의 산을 수득하였다.
상기 미정제 산(230 mg, 0.62 mmol), 3-(아미노메틸)-4,6-다이메틸피리딘-2(1H)-온(188 mg, 1.24 mmol), PyBOP(483 mg, 0.93 mmol) 및 트라이에틸아민(0.17 ㎖, 1.238) 혼합물을 실온에서 DMSO(3 ㎖) 중에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고 화합물을 DCM 중의 10% MeOH로 추출하고 Na2SO4 상에서 건조하고 농축하고, 미정제 물질을 실리카 겔(100 내지 200) 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-((2-메톡시에틸)(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드를 수득하였다(110 mg, 35%).
단계 3: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-((2-메톡시에틸)(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
다이옥산(4 ㎖) 중의 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-((2-메톡시에틸)(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드(110 mg, 0.21 mmol), (4-(모르폴리노메틸)페닐)보론산(99 mg, 0.33 mmol) 및 탄산나트륨(83 mg, 0.78 mmol)의 용액을 아르곤으로 20분 동안 탈기하고, Pd(PPh3)4(25 mg, 0.02 mmol)을 혼합물에 첨가하고 100℃에서 밤새 가열하였다. 반응물을 실온까지 냉각시키고 물로 희석한 후, 화합물을 DCM 중의 10% MeOH로 추출하고 Na2SO4 상에서 건조하고 농축하고, 미정제 생성물을 실리카 겔(100 내지 200) 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(50 mg, 38%).
LCMS: 603.45 (M+1)+; HPLC: 99.60% (@ 254 nm) (Rt; 4.492; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (bs, 1H), 8.20 (t, 1H), 7.58 (d, 2H, J=7.2 Hz), 7.47 (s, 1H), 7.37 (d, 2H, J=7.2 Hz), 7.23 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.29 (d, 2H, J=3.6 Hz), 3.82-3.85 (m, 2H), 3.49-3.58 (m, 6H), 3.15-3.23 (m, 9H), 2.98 (m, 1H), 2.36 (m, 4H), 2.23 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.51-1.68 (m, 4H).
실시예 143: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸-d5(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드
Figure pat00237
단계 1: 메틸 5-브로모-3-(에틸-d5(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤조에이트의 합성
아세트산(1.65 g, 27.5 mmol)을 다이클로로에탄(15 ㎖) 중의 화합물 메틸 5-브로모-2-메틸-3-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)벤조에이트(1 g, 3.05 mmol) 및 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(0.2 g, 4.76 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 반응물을 5℃ 내지 10℃에서 2시간 동안 교반하였다. 그 다음, 아세트알데하이드-d 4 (0.264 g, 6.00 mmol)를 0℃에서 첨가하고 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 완결 시, 반응물을 수성 중탄산나트륨으로 급랭시키고, 유기층을 분리하고 수성층을 다이클로로메탄으로 추출하였다. 모은 유기층을 황산나트륨 상에서 건조하고 감압 하에 농축하고 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 원하는 생성물을 수득하였다(1 g, 91%).
단계 2 및 3: 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸-d 5 (테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드의 합성
수성 NaOH(0.166 g, 4.15 mmol)를 에탄올(10 ㎖) 중의 화합물 메틸 5-브로모-3-(에틸-d 5 (테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤조에이트(1 g, 2.77 mmol) 용액에 첨가하고 60℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응의 완결 후, 에탄올을 감압 하에 제거하고 묽은 HCl을 사용하여 pH 6까지 산성화하고 시트르산을 사용하여 pH 4로 조절하였다. 에틸 아세테이트를 사용하여 추출을 수행하였다. 모은 유기층을 건조하고 농축하여 각각의 산을 수득한 후(0.7 g, 2.01 mmol, 73%), 상기 산을 DMSO(7 ㎖)에 용해시키고 3-(아미노메틸)-4,6-다이메틸피리딘-2(1H)-온(0.611 g, 4.01 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반한 후, PyBOP(1.56 g, 3.01 mmol)를 첨가하고 교반을 밤새 계속 수행하였다. 전환의 완결 후, 반응물을 얼음에 붓고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 건조하고 농축하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 용매 세척으로 정제하여 원하는 생성물을 수득하였다(0.6 g, 62%).
단계 4: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸-d 5 (테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4'-포르밀-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Na2CO3(0.24 g, 2.26 mmol)을 다이옥산/물 혼합물 중의 화합물 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸-d 5 (테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드(0.3 g, 0.62 mmol) 및 (4-(모르폴리노메틸)페닐)보론산(0.283 g, 0.93 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고, 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.072 g, 0.062 mmol)을 첨가하고 혼합물을 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 원하는 표제 화합물을 수득하였다(0.22 g, 61%). N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸-d5(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4'-포르밀-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 분석 데이터: LCMS: 578.35 (M+1)+; HPLC: 98.50% (@ 254 nm) (Rt; 4.176; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (bs, 1H), 8.19 (t, 1H), 7.57 (d, 2H, J=7.6), 7.36-7.39 (m, 3H), 7.21 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.29 (d, 2H, J=3.2 Hz), 3.81-3.84 (m, 2H), 3.48-3.57 (m, 6H), 3.22-3.25 (m, 2H), 3.02 (m, 1H), 2.36 (m, 4H), 2.24 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.51-1.67 (m, 4H).
실시예 144: 5-((2,2-다이플루오로에틸)(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00238
단계 1: 메틸 5-브로모-3-[(2,2-다이플루오로에틸)(옥산-4-일)아미노]-2-메틸벤조에이트의 합성
2구 100 ㎖ RBF에서, 다이플루오로아세트산(15 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-2-메틸-3-[(옥산-4-일)아미노]벤조에이트(500 mg, 1.5 mmol)의 교반된 용액을 나트륨 테트라하이드로보레이트(1000 mg, 26 mmol)로 12분 동안 나누어 처리하였다(주의!). 반응 혼합물을 50℃로 가온하고 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온에 도달하게 한 후 얼음(130 ㎖)에 붓고 5분 동안 방치하였다. 6 M NaOH(수성)(35 ㎖)를 첨가하여 혼합물을 염기성화하고 1 M HCl(수성)(20 ㎖)을 사용하여 pH를 7로 조절하였다. 발생된 현탁액을 용액이 투명해질 때까지 정치시키고, 발생된 고체를 여과로 수집하고 40℃에서 진공 중에서 건조하여 백색 고체로서 표제 화합물을 수득하였다(572 mg, 96%). LC-MS 100%, 2.32분(3.5분 LC-MS 방법), m/z = 391.9, 392.9, 393.9, 394.9; 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 7.79 (d, J=1.89 Hz, 1H), 7.44 (d, J=1.89 Hz, 1H), 5.44-5.71 (m, 1H), 4.00 (dd, J=11.51, 4.10 Hz, 2H), 3.91 (s, 3H), 3.41 (td, J=13.99, 4.18 Hz, 2H), 3.32 (t, J=11.27 Hz, 2H), 2.97 (tt, J=11.37, 3.84 Hz, 1H), 2.47 (s, 3H), 1.72-1.81 (m, 2H), 1.59-1.67 (m, 2H).
단계 2: 5-브로모-3-[(2,2-다이플루오로에틸)(옥산-4-일)아미노]-2-메틸벤조산의 합성
4 M NaOH(14.6 ㎖)를 THF(14.6 ㎖)와 MeOH(2.2 ㎖)의 혼합물 중의 메틸 5-브로모-3-[(2,2-다이플루오로에틸)(옥산-4-일)아미노]-2-메틸벤조에이트(571 mg, 1.5 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 50℃에서 7시간 동안 교반하였다. 가열을 중단하고 반응 혼합물을 실온에서 16.5시간 동안 교반하였다. THF를 진공 중에서 제거하고, 빙냉하면서 6 M HCl(수성)(10 ㎖)을 첨가하여 수성 잔사를 pH 4까지 산성화하였다. 발생된 고체를 여과로 수집하고 물(20 ㎖)로 세척하고 30℃ 내지 40℃에서 진공 중에서 3시간 동안 건조하여 밝은 베이지색 고체로서 표제 화합물을 수득하였다(526 mg, 96%). LC-MS 100%, 1.98분(3.5분 LC-MS 방법), m/z = 377.9, 378.9, 379.9, 380.9; 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 7.91 (d, J=1.58 Hz, 1H), 7.49 (d, J=1.58 Hz, 1H), 5.43-5.75 (m, 1H), 4.01 (dd, J=11.43, 3.55 Hz, 2H), 3.42 (td, J=13.95, 3.78 Hz, 2H), 3.32 (t, J=11.35 Hz, 2H), 2.98 (tt, J=11.37, 3.53 Hz, 1H), 2.52 (s, 3H), 1.77 (d, J=10.88 Hz, 2H), 1.56-1.69 (m, 2H). OH는 가시화되지 않는다.
단계 3: 5-브로모-3-[(2,2-다이플루오로에틸)(옥산-4-일)아미노]-N-[(4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸]-2-메틸벤즈아미드의 합성
무수 DMF(3.0 ㎖) 중의 5-브로모-3-[(2,2-다이플루오로에틸)(옥산-4-일)아미노]-2-메틸벤조산(250 mg, 0.66 mmol)의 교반된 용액을 질소 기구 압력 하에 0℃에서 HATU(327 mg, 0.86 mmol) 및 DIPEA(230 ㎕, 1.3 mmol)로 적가 처리하였다. 발생된 용액을 5분 동안 교반한 후 3-(아미노메틸)-4,6-다이메틸-1,2-다이하이드로피리딘-2-온(89%, 136 mg, 0.79 mmol)으로 처리하였다. 발생된 현탁액을 0℃에서 20분 동안 교반한 후 실온에서 밤새 교반하였다. 18시간 후, 3-(아미노메틸)-4,6-다이메틸-1,2-다이하이드로피리딘-2-온(25 mg)을 첨가하고 교반을 추가 25시간 동안 계속 수행하였다. 반응 혼합물을 물(30 ㎖) 및 CH2Cl2(30 ㎖)으로 희석하였다. 층을 분리하고 수성층을 CH2Cl2(3 x 15 ㎖)으로 추출하였다. 모은 유기층을 포화된 NaHCO3 용액(수성)(45 ㎖), 물(2 x 50 ㎖) 및 염수(2 x 50 ㎖)로 세척하고 건조하고(MgSO4) 여과하고 진공 중에서 농축하였다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(10 g SNAP 카트리지, 이솔레라, 0% 내지 3% MeOH/CH2Cl2)로 정제한 후 에테르로 분쇄하였다. 발생된 고체를 여과로 수집하고 40℃에서 진공 중에서 건조하여 회백색 고체로서 표제 화합물을 수득하였다(259 mg, 77%). LC-MS 100%, 4.04분(7분 LC-MS 방법), m/z = 512.0, 513.0, 514.0, 515.0; 1H NMR (500 MHz, 아세톤) δ 10.71 (s, 1H), 7.57-7.49 (m, 2H), 7.25 (d, J=1.9 Hz, 1H), 5.91 (s, 1H), 5.76 (tt, J=56.2, 4.3 Hz, 1H), 4.40 (d, J=5.5 Hz, 2H), 3.88 (dd, J=11.3, 4.2 Hz, 2H), 3.52 (td, J=14.6, 4.2 Hz, 2H), 3.33-3.23 (m, 2H), 3.02 (tt, J=11.6, 3.9 Hz, 1H), 2.32 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 2.24 (s, 3H), 1.73 (dd, J=12.4, 1.9 Hz, 2H), 1.59 (qd, J=12.2, 4.5 Hz, 2H).
단계 4: 5-((2,2-다이플루오로에틸)(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
2구 RBF에서, 다이옥산(3.0 ㎖) 중의 5-브로모-3-[(2,2-다이플루오로에틸)(옥산-4-일)아미노]-N-[(4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸]-2-메틸벤즈아미드(200 mg, 0.39 mmol) 및 4-[4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤질]모르폴린(130 mg, 0.43 mmol)을 물(1.0 ㎖) 중의 Na2CO3(145 mg, 1.4 mmol) 용액으로 처리하였다. 혼합물을 짧게 초음파처리하고 긴 바늘을 이용하여 발생된 현탁액을 통해 질소를 5분 동안 발포하였다. 그 다음, 상기 현탁액을 팔라듐-트라이페닐포스판(1:4)(45 mg, 0.04 mmol)으로 처리하고 발생된 현탁액을 통해 질소를 추가 5분 동안 발포하였다. 그 다음, 반응 혼합물을 100℃에서 8시간 동안 가열하고 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물(20 ㎖) 및 10% MeOH/CH2Cl2(15 ㎖)으로 처리하였다. 층을 분리하고 수성층을 10% MeOH/CH2Cl2(3 x 15 ㎖)으로 추출하였다. 모은 유기물을 염수(55 ㎖)로 세척하고 건조하고(MgSO4) 여과하고 진공 중에서 농축하였다. 미정제 잔사를 컬럼 크로마토그래피(10 g SNAP 카트리지, 이솔레라, 0% 내지 5% MeOH/CH2Cl2)로 정제하고 에테르(10 ㎖)로 처리하고 짧게 초음파처리하고 수조에서 가온하고 얼음 상에서 냉각시켰다. 발생된 백색 고체를 여과로 수집하고 에테르(5 ㎖)로 세척하였다. 상기 고체를 40℃에서 진공 중에서 35시간 동안 건조하여 회백색 고체로서 표제 화합물을 수득하였다(159 mg, 67%). LC-MS 100%, 3.09분(7분 LC-MS 방법), m/z = 609.15; 1H NMR (500 MHz, 아세톤) δ 10.72 (s, 1H), 7.63 (d, J=1.5 Hz, 1H), 7.60 (d, J=8.1 Hz, 2H), 7.54 (t, J=5.2 Hz, 1H), 7.41 (d, J=1.6 Hz, 1H), 7.39 (d, J=8.1 Hz, 2H), 5.91 (s, 1H), 5.76 (ttt, J=56.4, 30.4, 4.4 Hz, 1H), 4.44 (d, J=5.5 Hz, 2H), 3.89 (dd, J=11.4, 3.9 Hz, 2H), 3.65-3.55 (m, 6H), 3.50 (s, 2H), 3.29 (t, J=11.3 Hz, 2H), 3.07 (tt, J=11.5, 3.6 Hz, 1H), 2.40 (s, 4H), 2.37 (s, 3H), 2.34 (s, 3H), 2.22 (s, 3H), 1.82-1.75 (m, 2H), 1.61 (qd, J=11.9, 4.1 Hz, 2H).
실시예 145: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(((1s,4s)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-2-메틸-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)벤즈아미드
Figure pat00239
단계 1: 3-(((1s,4s)-4-아미노사이클로헥실)(에틸)아미노)-5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드의 합성
2 ㎖의 TFA를 DCM(10 ㎖) 중의 화합물 tert-부틸 ((1s,4s)-4-((5-브로모-3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸페닐)(에틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트(1.0 g, 1.60 mmol)의 냉각된 용액에 적가하고 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 감압 하에 건조될 때까지 농축하고, 수득된 미정제 물질을 DCM 중의 10% MeOH에 용해시키고 포화된 NaHCO3, 물 및 염수로 세척하였다. 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 감압 하에 농축하여 원하는 미정제 화합물을 수득하였다(650 mg, 81%).
단계 2: 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(((1s,4s)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-2-메틸벤즈아미드의 합성
나트륨 시아노보로하이드라이드(82 mg, 1.32 mmol)를 0℃에서 메탄올(10 ㎖) 중의 미정제 화합물 3-(((1s,4s)-4-아미노사이클로헥실)(에틸)아미노)-5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드(650 mg, 1.32 mmol) 및 포름알데하이드(0.5 ㎖의 38% 용액, 13.26 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 물과 DCM 중의 10% MeOH에 분배하고, 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 감압 하에 농축하였다. 미정제 물질을 염기성 알루미나 컬럼 정제로 정제하여 원하는 생성물 화합물을 수득하였다(450 mg, 65%).
단계 3: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(((1s,4s)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-2-메틸-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)벤즈아미드의 합성
다이옥산(10 ㎖) 중의 화합물 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(((1s,4s)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-2-메틸벤즈아미드(150 mg, 0.29 mmol), (1-메틸-1H-피라졸-4-일)보론산(72 mg, 0.34 mmol) 및 탄산나트륨(110 mg, 1.06 mmol)의 용액을 아르곤으로 20분 동안 탈기하고, Pd(PPh3)4(33 mg, 0.03 mmol)을 혼합물에 첨가하고 100℃에서 밤새 가열하였다. 반응물을 실온까지 냉각시키고 물로 희석하고, 화합물을 DCM 중의 10% MeOH로 추출하고 Na2SO4 상에서 건조하고 농축하고, 미정제 물질을 실리카 겔(100 내지 200) 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(40 mg, 26%).
분석 데이터: LCMS: 519.40 (M+1)+; HPLC: 95.98% (@ 254 nm) (Rt; 3.987; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (bs, 1H), 8.12-8.09 (m, 2H), 7.80 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.10 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.27 (d, 2H, J=4.8 Hz), 3.84 (s, 3H), 3.07-3.05 (m, 2H), 2.67-2.63 (m, 2H), 2.21 (s, 3H), 2.15 (s, 3H), 2.12-2.11 (s, 3H+3H+3H), 1.79-1.75 (m, 4H), 1.36-1.11 (m, 4H), 0.80 (t, 3H, J=6.0 Hz).
실시예 146: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(((1s,4s)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-4-메틸-4'-((4-메틸-1,4-다이아제판-1-일)메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드
Figure pat00240
단계 1: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(((1s,4s)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-4'-포르밀-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
다이옥산(5 ㎖) 중의 화합물 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(((1s,4s)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-2-메틸벤즈아미드(380 mg, 0.73 mmol), (4-포르밀페닐)보론산(165 mg, 1.10 mmol) 및 탄산나트륨(280 mg, 2.6 mmol)의 용액을 아르곤으로 20분 동안 탈기하고, Pd(PPh3)4(84 mg, 0.07 mmol)을 혼합물에 첨가하고 100℃에서 5시간 동안 가열하였다. 반응물을 실온까지 냉각시키고 물로 희석하고, 화합물을 DCM 중의 10% MeOH로 추출하고 Na2SO4 상에서 건조하고 농축하고, 미정제 물질을 실리카 겔(100 내지 200) 크로마토그래피로 정제하여 원하는 화합물을 수득하였다(250 mg, 63%).
단계 2: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(((1s,4s)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-4-메틸-4'-((4-메틸-1,4-다이아제판-1-일)메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
아세트산(0.03 ㎖, 0.49 mmol)을 메탄올(2 ㎖) 중의 화합물 N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(((1s,4s)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-4'-포르밀-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드(90 mg, 0.16 mmol) 및 1-메틸-1,4-다이아제판(0.56 g, 0.49 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 실온에서 20분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 0℃까지 냉각시키고 나트륨 시아노보로하이드라이드(25 mg, 0.41 mmol)를 첨가하고 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화된 NaHCO3으로 중화하고 화합물을 DCM으로 추출하고 Na2SO4 상에서 건조하고 감압 하에 농축하고 분취용 HPLC로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(26 mg, 25%).
TFA 염의 분석 데이터: LCMS: 641.50 (M+1)+; HPLC: 97.72% (@ 254 nm) (Rt; 3.783; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (bs, 1H), 9.54 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.74 (d, J=7.6 Hz, 2H), 7.57 (d, J=7.6 Hz, 2H), 7.42 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 5.87 (s, 1H), 4.29 (d, J=4.0 Hz, 2H), 3.83 (m, 4H), 3.25 (m, 3H), 3.17-3.12 (m, 4H), 2.84 (s, 3H), 2.69, 2.68 (2s, 6H), 2.24 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 2.10-1.89 (m, 6H), 1.46-1.44 (m, 4H), 0.84 (t, J=7.2 Hz, 3H).
실시예 147: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드
Figure pat00241
단계 1: 메틸 5-브로모-3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)아미노)사이클로헥실)-(에틸)아미노)-2-메틸벤조에이트
아세트산(8.18 g, 136.33 mmol)을 다이클로로에탄(100 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)아미노)-사이클로헥실)아미노)-2-메틸벤조에이트(10 g, 22.72 mmol) 및 아세트알데하이드(2.99 g, 67.95 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 20분 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(14.45 g, 68.16 mmol)를 0℃에서 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 물에 용해시키고 5% MeOH/DCM을 사용하여 추출하였다. 모은 추출물을 건조하고 농축하여 추가 반응에서 그 자체로 사용되는 메틸 5-브로모-3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)아미노)사이클로헥실)-(에틸)아미노)-2-메틸벤조에이트를 수득하였다(9 g, 84.66%).
단계 2: tert-부틸 ((1r,4r)-4-((5-브로모-3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸페닐)아미노)사이클로헥실)카바메이트
수성 NaOH(1.15 g, 28.84 mmol)를 에탄올(10 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)아미노)사이클로헥실)-(에틸)아미노)-2-메틸벤조에이트(9 g, 19.23 mmol) 용액에 첨가하고 60℃에서 1시간 동안 교반하였다. 에탄올을 감압 하에 제거하고 묽은 HCl을 사용하여 pH 6까지 산성화한 후 시트르산을 사용하여 pH 4까지 산성화하였다. 혼합물을 아세테이트로 추출하였다. 모은 유기층을 건조하고 농축하여 각각의 산을 수득하였다(8.6 g, 98.50%).
상기 산(8.6 g, 18.90 mmol)을 DMSO(7 ㎖)에 용해시키고 3-(아미노메틸)-4,6-다이메틸피리딘-2(1H)-온(5.74 g, 37.80 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반한 후, PyBOP(14.70 g, 28.35 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 빙수에 붓고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 추출물을 건조하고 농축하여 미정제 생성물을 수득한 후, 이 생성물을 용매 세척으로 정제하여 tert-부틸 ((1r,4r)-4-((5-브로모-3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸페닐)아미노)사이클로헥실)카바메이트를 수득하였다(10.2 g, 91.89%).
단계 3: 3-(((1r,4r)-4-아미노사이클로헥실)(에틸)아미노)-5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드
tert-부틸 ((1r,4r)-4-((5-브로모-3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸페닐)아미노)사이클로헥실)카바메이트(3 g, 5.10 mmol)를 DCM(20 ㎖)에 용해시킨 후, TFA(5 ㎖)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고 포화된 NaHCO3 용액을 첨가하였다. 혼합물을 10% MeOH/DCM으로 추출하고 모은 추출물을 물 및 염수로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조하고 여과하고 감압 하에 농축하여 3-(((1r,4r)-4-아미노사이클로헥실)(에틸)아미노)-5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드를 수득하였다(2.2 g, 87.50%).
단계 4: 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-2-메틸벤즈아미드
3-(((1r,4r)-4-아미노사이클로헥실)(에틸)아미노)-5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드(2.2 g, 4.50 mmol)를 DCM(25 ㎖)에 용해시키고 0℃까지 냉각시킨 후, 포르말린(0.49 g, 16.26 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 동일한 온도에서 20분 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(2.39 g, 11.22 mmol)를 첨가하고 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고 물을 잔사에 첨가하였다. 10% MeOH/DCM을 사용하여 혼합물을 추출하였다. 모은 추출물을 건조하고 감압 하에 농축하여 추가 반응에서 그 자체로 사용되는 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-2-메틸벤즈아미드를 수득하였다(2.3 g, 98.71%).
단계 5: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드
Na2CO3(3.6 당량)을 다이옥산/물 혼합물 중의 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-2-메틸벤즈아미드(1 당량) 및 페닐보론산(1.5 당량)의 교반된 용액에 첨가하고, 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.1 당량)을 첨가하고 반응 혼합물을 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 추출물을 Na2SO4 상에서 건조하고, 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 생성물을 수득한 후, 이 생성물을 실리카 겔 상의 크로마토그래피로 정제하여 TFA 염으로서 표제 화합물을 수득하였다(0.07 g, 23.92%). LCMS: 515.45 (M+1)+; HPLC: 92.45% (@ 254 nm) (Rt; 4.672; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 11.48 (bs, 1H), 9.41 (bs, 1H), 8.23 (bs, 1H), 7.63 (d, 2H, J=4.8 Hz), 7.50-7.20 (m, 5H), 5.86 (s, 1H), 4.29 (d, 2H), 3.12 (m, 3H), 2.68 (s, 6H), 2.25 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.95 (m, 4H), 1.44 (m, 4H), 0.84 (t, 3H).
실시예 148: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-4,4'-다이메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드
Figure pat00242
단계 1: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-4,4'-다이메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드
Na2CO3(3.6 당량)을 다이옥산/물 혼합물 중의 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-2-메틸벤즈아미드(1 당량) 및 p-톨릴보론산(1.5 당량)의 교반된 용액에 첨가하고, 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.1 당량)을 첨가하고 반응 혼합물을 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 추출물을 Na2SO4 상에서 건조하고, 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 생성물을 수득한 후, 이 생성물을 실리카 겔 상의 크로마토그래피로 정제하여 TFA 염으로서 표제 화합물을 수득하였다(0.15 g, 51.30%). LCMS: 529.40 (M+1)+; HPLC: 93.61% (@ 254 nm) (Rt; 4.761; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.47 (bs, 1H), 9.40 (bs, 1H), 8.21 (bs, 1H), 7.53 (d, 2H, J=6.8 Hz), 7.38 (bs, 1H), 7.26 (d, 2H, J=7.6 Hz), 5.86 (s, 1H), 4.29 (d, 2H, J=4 Hz), 3.15 (m, 2H), 2.69 (s, 3H), 2.68 (s, 3H), 2.33 (s, 3H), 2.24 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.95 (m, 4H), 1.44 (m, 4H), 0.84 (t, 3H).
실시예 149: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-4-메틸-4'-(트라이플루오로메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드
Figure pat00243
단계 1: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-4-메틸-4'-(트라이플루오로메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드
Na2CO3(3.6 당량)을 다이옥산/물 혼합물 중의 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-2-메틸벤즈아미드(1 당량) 및 (4-(트라이플루오로메틸)페닐)보론산(1.5 당량)의 교반된 용액에 첨가하고, 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.1 당량)을 첨가하고 반응 혼합물을 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 추출물을 Na2SO4 상에서 건조하고, 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 생성물을 수득한 후, 이 생성물을 실리카 겔 상의 크로마토그래피로 정제하여 TFA 염으로서 표제 화합물을 수득하였다(0.08 g, 23.52%). LCMS: 583.45 (M+1)+; HPLC: 94.04% (@ 254 nm) (Rt; 5.168; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.48 (s, 1H), 9.41 (bs, 1H), 8.27 (bs, 1H), 7.88 (d, 2H, J=8 Hz), 7.81 (d, 2H, J=8 Hz), 7.51 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 5.87 (s, 1H), 4.30 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.16 (m, 3H), 2.85 (m, 1H), 2.69 (s, 3H), 2.68 (s, 3H), 2.26 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.94 (m, 4H), 1.45 (m, 4H), 0.85 (t, 3H, J=6.8 Hz).
실시예 150: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-4-메틸-4'-(메틸설포닐)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드
Figure pat00244
단계 1: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-4-메틸-4'-(메틸설포닐)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드
Na2CO3(3.6 당량)을 다이옥산/물 혼합물 중의 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-2-메틸벤즈아미드(1 당량) 및 (4-(메틸설포닐)페닐)보론산(1.5 당량)의 교반된 용액에 첨가하고, 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.1 당량)을 첨가하고 반응 혼합물을 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 추출물을 Na2SO4 상에서 건조하고, 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 생성물을 수득한 후, 이 생성물을 실리카 겔 상의 크로마토그래피로 정제하여 TFA 염으로서 표제 화합물을 수득하였다(0.12 g, 34.68%). LCMS: 593.45 (M+1)+; HPLC: 98.74% (@ 254 nm) (Rt; 4.194; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.48 (bs, 1H), 9.43 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.99 (d, 2H, J=8.4 Hz), 7.93 (d, 2H, J=8.4 Hz), 7.51 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 5.87 (s, 1H), 4.30 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.24 (s, 3H), 3.30 (m, 3H), 2.80 (m, 1H), 2.69 (s, 3H), 2.68 (s, 3H), 2.26 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.93 (m, 4H), 1.45 (m, 4H), 0.84 (t, 3H, J=6.8 Hz).
실시예 151: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-2-메틸-5-(피리미딘-5-일)벤즈아미드
Figure pat00245
단계 1: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-2-메틸-5-(피리미딘-5-일)벤즈아미드
Na2CO3(3.6 당량)을 다이옥산/물 혼합물 중의 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-2-메틸벤즈아미드(1 당량) 및 피리미딘-5-일보론산(1.5 당량)의 교반된 용액에 첨가하고, 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.1 당량)을 첨가하고 반응 혼합물을 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 추출물을 Na2SO4 상에서 건조하고, 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 생성물을 수득한 후, 이 생성물을 실리카 겔 상의 크로마토그래피로 정제하여 N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-2-메틸-5-(피리미딘-5-일)벤즈아미드 TFA 염을 수득하였다(0.12 g, 39.33%). LCMS: 517.60 (M+1)+; HPLC: 99.55% (@ 210 nm-370 nm) (Rt; 3.996; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 11.47 (bs, 1H), 9.43 (bs, 1H), 9.18 (s, 1H), 9.14 (s, 2H), 8.22 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 5.87 (s, 1H), 4.30 (d, 2H), 3.14 (m, 3H), 2.69 (s, 3H+3H), 2.27 (s, 3H), 2.22 (s, 3H), 2.11-2.07 (m, 4H), 1.95 (m, 4H), 1.44 (m, 4H), 0.84 (t, 3H).
실시예 152: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸-3-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-5-(푸란-2-일)-2-메틸벤즈아미드 TFA 염의 합성
Figure pat00246
단계 1: 메틸 5-브로모-3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)-아미노)-사이클로헥실)아미노)-2-메틸벤조에이트의 합성
Figure pat00247
아세트산(7.4 g, 12 mmol)을 다이클로로에탄(50 ㎖) 중의 메틸 3-아미노-5-브로모-2-메틸벤조에이트(5.0 g, 2.0 mmol) 및 4-N-Boc-아미노사이클로헥사논(5.69 g, 2.67 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(13.1 g, 6.17 mmol)를 0℃에서 첨가하고 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 수성 중탄산나트륨으로 급랭시키고 유기층을 분리하고 수성층을 다이클로로메탄으로 추출하였다. 모은 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공 중에서 농축하였다. 미정제 화합물을 헥산 중의 10% 에틸 아세테이트로 용출하는 실리카 겔(100 내지 200 메쉬 크기) 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 회백색 고체로서 3.5 g의 보다 높은 극성의 트랜스 이성질체 5-브로모-3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)-아미노)-사이클로헥실)아미노)-2-메틸벤조에이트를 수득하였다(38%). 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 7.21 (s, 1H), 6.89 (s, 1H), 4.41 (bs, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.41-3.64 (m, 2H), 2.11-2.21 (m, 6H), 1.42 (s, 9H), 1.22-1.36 (m, 5H).
단계 2: 메틸 5-브로모-3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)-아미노)-사이클로헥실)(에틸)-아미노)-2-메틸벤조에이트의 합성
Figure pat00248
아세트산(44.6 g, 0.74 mol)을 다이클로로에탄(550 ㎖) 중의 5-브로모-3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)-아미노)-사이클로헥실)아미노)-2-메틸벤조에이트(55 g, 0.12 mol) 및 아세트알데하이드(11 g, 0.25 mol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(79 g, 0.37 mol)를 0℃에서 첨가하고 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 수성 중탄산나트륨을 첨가하고, 유기층을 분리하고 수성층을 다이클로로메탄으로 추출하였다. 모은 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조하고 진공 중에서 농축하였다. 미정제 화합물을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 회백색 고체로서 표제 화합물을 수득하였다(35 g, 59%).
단계 3: tert-부틸 ((1r,4r)-4-((5-브로모-3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)-메틸)카바모일)-2-메틸페닐(에틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트의 합성
Figure pat00249
수성 NaOH(3.5 g, 10 ㎖ H2O 중의 0.08 mol)를 EtOH(100 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)-아미노)-사이클로헥실)(에틸)-아미노)-2-메틸벤조에이트(25 g, 0.053 mol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 60℃에서 1시간 동안 교반한 후, 혼합물을 pH 4까지 산성화하고 DCM 중의 10% 메탄올로 추출하였다. 모은 유기층을 건조하고 농축하여 24.2 g의 상응하는 산을 수득하였다. PyBOP(41 g, 0.079 mol)를 DMSO(50 ㎖) 중의 상기 산(24 g, 0.053 mol), 3-(아미노메틸)-4,6-다이메틸피리딘-2(1H)-온(16 g, 0.11 mol) 및 트라이에틸아민(5.3 g, 0.053 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 실온에서 밤새 교반한 후, 혼합물을 빙수에 붓고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 황산나트륨 상에서 건조하고 감압 하에 농축하였다. 미정제 물질을 물(1 ℓ x 2)에 이어서 아세토니트릴(150 ㎖ x 3)로 세척하여 표제 화합물을 수득하였다(24 g, 77%).
단계 4: 3-(((1r,4r)-4-아미노사이클로헥실)(에틸)아미노)-5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드의 합성
Figure pat00250
TFA(10 ㎖)를 0℃에서 DCM(30 ㎖) 중의 tert-부틸 ((1r,4r)-4-((5-브로모-3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)-메틸)카바모일)-2-메틸페닐(에틸)아미노)사이클로헥실)카바메이트(6.0 g, 10 mol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고 건조될 때까지 농축하였다. 포화된 중탄산염 용액(40 ㎖)을 첨가하여 잔사를 중화한 후 DCM 중의 20% 메탄올(100 ㎖ x 4)로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 추가 정제 없이 사용되는 5.0 g의 표제 화합물을 수득하였다.
단계 4: 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-2-메틸벤즈아미드의 합성
Figure pat00251
35% 포름알데하이드 수용액(2.9 g, 36 mmol)을 0℃에서 다이클로로메탄(50 ㎖) 중의 3-(((1r,4r)-4-아미노사이클로헥실)(에틸)아미노)-5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드(5.0 g, 10 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. Na(OAc)3BH(5.43 g, 25.6 mmol)을 첨가하고 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반하였다. 물(100 ㎖)을 첨가한 후 DCM 중의 20% 메탄올(200 ㎖ x 3)로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔사를 DCM 중의 6% 내지 7% MeOH로 용출하는 염기성 알루미나 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(4.5 g, 94%).
화합물 152 내지 156, 158 내지 162, 165 및 167의 합성에 대한 일반 스즈키 반응 절차
Na2CO3(3.6 당량)을 다이옥산/물 혼합물(4:1) 중의 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-2-메틸벤즈아미드(1 당량) 및 소정의 보론산/피나콜 에스테르(1.2 당량)의 교반된 용액에 첨가하였다. 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. Pd(PPh3)4(0.1 당량)을 첨가하였다. 교반된 반응 혼합물을 아르곤 하에 100℃에서 2시간 내지 4시간 동안 가열하였다. 실온까지 냉각시킨 후, 혼합물을 10% MeOH/DCM으로 희석하고 여과하였다. 여과액을 농축하고 물로 희석하고 DCM 중의 10% MeOH로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하였다. 미정제 생성물을 실리카 겔(100 내지 200 메쉬) 상의 컬럼 크로마토그래피 또는 분취용 HPLC로 정제하여 각각 자유 염기 또는 TFA 염으로서 생성물을 수득하였다.
N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸-3-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-5-(푸란-2-일)-2-메틸벤즈아미드 TFA 염(0.08 g, 27%)의 분석 데이터; LCMS: 505.55 (M+1)+; HPLC: 97.76% (@ 210 nm-370 nm) (Rt; 4.192; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (bs, 1H), 8.21 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 6.93 (s, 1H), 6.57 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.29 (d, 2H), 3.08-3.06 (m, 3H), 2.67 (m, 1H), 2.21 (s, 3H+3H+3H), 2.18-2.11 (s, 3H+3H), 1.80 (m, 4H), 1.37-1.19 (m, 4H), 0.81 (t, 3H).
실시예 153: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸-3-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-2-메틸-5-(퀴놀린-8-일)-벤즈아미드 TFA 염(0.09 g, 27%)
Figure pat00252
상기 TFA 염의 분석 데이터: LCMS: 566.70 (M+1)+; HPLC: 93.94% (@ 210 nm-370 nm) (Rt; 4.352; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.43 (bs, 1H), 9.34 (bs, 1H), 8.88 (s, 1H), 8.45 (d, 1H, J=7.6 Hz), 8.16 (t, 1H), 8.00 (d, 1H, J=7.2 Hz), 7.80-7.79 (m, 1H), 7.70-7.69 (m, 1H), 7.59-7.57 (m, 1H), 7.49 (m, 1H), 7.29 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=3.6 Hz), 3.16-3.11 (m, 3H), 2.70-2.69 (m, 1H+3H+3H), 2.30 (s, 3H), 2.19 (s, 3H), 2.09 (s, 3H), 1.99 (m, 4H), 1.45 (m, 4H), 0.93 (t, 3H).
실시예 154: 5-(2-아미노피리미딘-5-일)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸-3-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노-2-메틸벤즈아미드 TFA 염(0.14 g, 45%)
Figure pat00253
상기 TFA 염의 분석 데이터: LCMS: 532.65 (M+1)+; HPLC: 98.49% (@ 210 nm-370 nm) (Rt; 3.692; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.48 (bs, 1H), 9.45 (bs, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 5.87 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.12 (m, 3H), 2.69 (s, 3H+3H), 2.23 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.96 (m, 4H), 1.43 (m, 4H), 0.83 (t, 3H).
실시예 155: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸-3-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-2-메틸-5-(피리딘-4-일)-벤즈아미드 TFA 염(0.17 g, 56%)
Figure pat00254
상기 TFA 염의 분석 데이터: LCMS: 516.60 (M+1)+; HPLC: 92.58% (@ 210 nm-370 nm) (Rt; 3.775; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (bs, 1H), 9.74 (bs, 1H), 8.85 (d, 2H, J=5.2 Hz), 8.30 (t, 1H), 8.24 (d, 2H, J=4.8 Hz), 7.71 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 5.88 (s, 1H), 4.31 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.16 (m, 3H), 2.79 (m, 1H), 2.69 (s, 3H+3H), 2.28 (s, 3H), 2.22 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.98-1.90 (m, 4H), 1.47-1.45 (m, 4H), 0.84 (t, 3H).
실시예 156: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸-3-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-2-메틸-5-(티오펜-3-일)-벤즈아미드 TFA 염(0.07 g, 56%)
Figure pat00255
상기 TFA 염의 분석 데이터: LCMS: 521.55 (M+1)+; HPLC: 98.64% (@ 210 nm-370 nm) (Rt; 4.366; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.47 (bs, 1H), 9.45 (bs, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.54 (m, 2H), 7.32 (s, 1H), 5.87 (s, 1H), 4.29 (d, 2H), 3.13 (m, 3H), 2.69 (m, 6H+1H), 2.22 (s, 3H+3H), 2.11 (s, 3H), 1.96 (m, 4H) 1.44 (m, 4H), 0.84 (t, 3H).
실시예 158: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-2-메틸-5-(6-메틸피리딘-3-일)벤즈아미드
Figure pat00256
분석 데이터: LCMS: 530.55 (M+1)+; HPLC: 96.45% (@ 210 nm-370 nm) (Rt; 4.192; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (bs, 1H), 8.70 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.95-7.90 (d, 1H, J=8.0 Hz), 7.39 (s, 1H), 7.35-7.30 (d, 1H, J=7.6 Hz), 7.22 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.29 (d, 2H), 3.05-3.15 (m, 2H), 2.60-2.70 (m, 1H), 용매 피크에서 합쳐진 3개의 양성자, 2.25-2.35 (m, 6H+1H), 2.0-2.25 (3H+3H+3H), 1.70-1.90 (m, 4H), 1.30-1.20 (m, 2H), 1.0-1.20 (m, 2H), 0.75-0.85 (t, 3H)
실시예 159: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸-3-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-5-(3,5-다이메틸이속사졸-4-일)-2-메틸벤즈아미드 TFA 염(0.13 g, 50%)
Figure pat00257
상기 TFA 염의 분석 데이터: LCMS: 534.60 (M+1)+; HPLC: 96.65% (@ 210 nm-370 nm) (Rt; 4.352; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (bs, 1H), 9.42 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.13 (s, 1H), 6.92 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.25-4.30 (d, 2H), 3.0-3.20 (m, 3H), 2.65-2.75 (m, 3H+3H), 용매 피크에서 합쳐진 3개의 양성자, 2.39 (s, 3H), 2.05-2.25 (m, 3H+3H+3H+1H), 1.90-2.0 (m, 2H), 1.80-1.90 (m, 2H), 1.35-1.50 (m, 4H), 0.80-0.90 (t, 3H).
실시예 160: 5-(1,5-다이메틸-1H-피라졸-4-일)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-2-메틸벤즈아미드 TFA 염(0.06 g, 58%)
Figure pat00258
상기 TFA 염의 분석 데이터: LCMS: 533.80 (M+1)+; HPLC: 90.76% (@ 254 nm) (Rt; 5.583; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 11.45 (bs, 1H), 9.27 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 6.95 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.20-4.30 (d, 2H), 3.76 (s, 2H), 3.0-3.20 (m, 2H), 2.60-2.75 (m, 3H+3H), 2.33 (s, 3H), 2.19 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.80-2.0 (m, 4H), 1.35-1.50 (m, 4H), 0.80-0.90 (t, 3H).
실시예 161: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸-3-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-5-(1-메틸피라졸-3-일)-2-메틸벤즈아미드 TFA 염(0.1 g, 33%)
Figure pat00259
상기 TFA 염의 분석 데이터: LCMS: 519.45 (M+1)+; HPLC: 96.61% (@ 254 nm) (Rt; 6.026; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.47 (bs, 1H), 9.46 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.06 (s, 1H), 6.38 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.20-4.25 (d, 2H), 3.83 (s, 3H), 3.0-3.15 (m, 3H), 2.60-2.80 (m, 1H+3H+3H), 2.24 (s, 3H), 2.19 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.80-2.0 (m, 2H+2H), 1.40-1.50 (m, 4H), 0.80-0.90 (t, 3H).
실시예 162: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸-3-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-5-(피리딘-3-일)-2-메틸벤즈아미드 TFA 염(0.1 g, 33%)
Figure pat00260
상기 TFA 염의 분석 데이터: LCMS: 516.50 (M+1)+; HPLC: 89.96% (@ 254 nm) (Rt; 6.026; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (bs, 1H), 9.35 (s, 1H), 8.96 (s, 1H), 8.63 (s, 1H), 8.22 (m, 2H), 7.61 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.25-4.35 (d, 2H), 3.05-3.15 (m, 3H), 2.6-2.80 (m, 1H+3H+3H), 2.25 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.90-2.0 (m, 2H+2H), 1.40-1.50 (m, 4H), 0.80-0.90 (t, 3H).
실시예 163: N,N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-4-메틸-4'-(2H-테트라졸-5-일)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드
Figure pat00261
Na2CO3(3.6 당량)을 다이옥산/물 혼합물 중의 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-2-메틸벤즈아미드(1 당량) 및 5-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)페닐)-2H-테트라졸(1.5 당량)의 교반된 용액에 첨가하고 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.1 당량)을 첨가하고 반응 혼합물을 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 추출물을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 생성물을 수득한 후, 이 생성물을 실리카 겔 상의 크로마토그래피에 이어서 분취용 HPLC로 정제하여 TFA 염으로서 표제 화합물을 수득하였다(0.125 g, 35.50%). LCMS: 583.40 (M+1)+; HPLC: 90.26% (@ 210-370 nm) (Rt; 4.130; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 11.46 (bs, 1H), 9.32 (bs, 1H), 8.23-8.11 (m, 3H), 7.90 (d, 2H, J=7.2 Hz), 7.50 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 5.87 (s, 1H), 4.30 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.59 (s, 1H), 3.13 (m, 3H), 2.69-2.68 (m, 6H), 2.26-2.10 (m, 9H), 1.94 (m, 4H), 1.44 (m, 4H), 0.85 (m, 3H).
실시예 164: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-2-메틸-5-(2-메틸피리미딘-5-일)벤즈아미드
Figure pat00262
Na2CO3(3.6 당량)을 다이옥산/물 혼합물 중의 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-2-메틸벤즈아미드(1 당량) 및 2-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리미딘(1.5 당량)의 교반된 용액에 첨가하고 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.1 당량)을 첨가하고 반응 혼합물을 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 추출물을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 생성물을 수득한 후, 이 생성물을 실리카 겔 상의 크로마토그래피에 이어서 분취용 HPLC로 정제하여 TFA 염으로서 표제 화합물을 수득하였다(0.08 g, 25.97%). LCMS: 531.65 (M+1)+; HPLC: 99.61% (@ 210-370 nm) (Rt; 3.981; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.47 (bs, 1H), 9.46 (bs, 1H), 9.00 (m, 2H), 8.20 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.29 (m, 2H), 3.125-3.127 (m, 3H), 2.69-2.50 (m, 10H), 2.25-2.10 (m, 9H), 1.94 (m, 4H), 1.43 (m, 4H), 0.83 (m, 3H).
실시예 165: 5-(1,3-다이메틸-1H-피라졸-4-일)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸-3-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노-2-메틸벤즈아미드 TFA 염(0.18 g, 69%)
Figure pat00263
상기 TFA 염의 분석 데이터: LCMS: 533.80 (M+1)+; HPLC: 87.18% (@ 210-370 nm) (Rt; 3.946; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (D2O-d 6 , 400 MHz) δ 7.93 (s, 1H), 7.62-7.57 (m, 2H), 6.31 (s, 1H), 4.492-4.494 (m, 2H), 3.92-3.80 (m, 6H), 3.33 (m, 1H), 2.82 (m, 6H), 2.39-2.28 (m, 16H), 1.66 (m, 4H), 1.04 (m, 3H).
실시예 166: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-2-메틸-5-(티아졸-4-일)벤즈아미드
Figure pat00264
Na2CO3(3.6 당량)을 다이옥산/물 혼합물 중의 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-2-메틸벤즈아미드(1 당량) 및 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)티아졸(1.5 당량)의 교반된 용액에 첨가하고 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.1 당량)을 첨가하고 반응 혼합물을 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 추출물을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 생성물을 수득한 후, 이 생성물을 실리카 겔 상의 크로마토그래피에 이어서 분취용 HPLC로 정제하여 TFA 염으로서 표제 화합물을 수득하였다(0.07 g, 28.40%). LCMS: 522.50 (M+1)+; HPLC: 99.22% (@ 210-370 nm) (Rt; 4.114; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.48 (bs, 1H), 9.36 (bs, 1H), 9.18 (s, 1H), 8.19 (bs, 2H), 7.79 (s, 1H), 7.58 (s, 1H), 5.87 (s, 1H), 4.30 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.11 (m, 3H), 2.73-2.68 (m, 7H), 2.22 (s, 6H), 2.11 (s, 3H), 1.95 (m, 4H), 1.44 (m, 4H), 0.83 (t, 3H).
실시예 167: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸-3-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-2-메틸-5-(티오펜-2-일)-벤즈아미드 TFA 염(0.05 g, 50%)
Figure pat00265
분석 데이터: LCMS: 521.55 (M+1)+; HPLC: 88.13% (@ 210-370 nm) (Rt; 4.412; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.47 (bs, 1H), 9.32 (bs, 1H), 8.22 (t, 1H), 7.53-7.38 (m, 3H), 7.20-7.13 (m, 2H), 5.87 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=3.6 Hz), 3.10 (m, 3H), 2.69-2.68 (m, 7H), 2.21 (s, 6H), 2.11 (s, 3H), 1.95-1.90 (m, 4H), 1.44 (m, 4H), 0.83 (t, 3H).
실시예 168: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸-3-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-2-메틸-5-(티아졸-2-일)-벤즈아미드 TFA 염의 합성
Figure pat00266
단계 1: 메틸 3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)-아미노)-사이클로헥실)-(에틸)-아미노)-2-메틸-5-(티아졸-2-일)벤조에이트의 합성
Cs2CO3(0.94 g, 2.88 mmol)을 실온에서 다이옥산/물 혼합물 중의 메틸 3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)-아미노)-사이클로헥실)-(에틸)-아미노)-2-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤조에이트(0.5 g, 1.2 mmol) 및 2-브로모티아졸(0.22 g, 1.38 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하고 PdCl2(PPh3)2(0.08 g, 0.11 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 아르곤 하에 100℃에서 3시간 동안 가열하고 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하였다. 미정제 물질을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.36 g, 71%).
단계 2: tert-부틸 ((1r,4r)-4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸-5-(티아졸-2-일)-페닐)-(에틸)-아미노)-사이클로헥실)-카바메이트의 합성
수성 NaOH(0.064 g, 1.60 mmol)를 실온에서 에탄올(5 ㎖) 중의 메틸 3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)-아미노)-사이클로헥실)-(에틸)-아미노)-2-메틸-5-(티아졸-2-일)벤조에이트(0.36 g, 0.76 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 혼합물을 60℃에서 1시간 동안 가열하고 감압 하에 농축하였다. 농축물을 pH 4까지 산성화하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 모은 유기층을 건조하고 농축하여 0.26 g의 미정제 산을 수득하였다. PyBOP(0.44 g, 0.85 mmol)를 실온에서 DMSO(3 ㎖) 중의 상기 미정제 산(0.26 g, 약 0.56 mmol) 및 3-(아미노메틸)-4,6-다이메틸피리딘-2(1H)-온(0.17 g, 1.13 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 밤새 교반한 후, 혼합물을 얼음에 붓고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 물로 세척하고 건조하고 감압 하에 농축하여 다음 단계에서 직접적으로 사용되는 표제 화합물을 수득하였다(0.15 g).
단계 3: 3-(((1r,4r)-4-아미노사이클로헥실)(에틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(티아졸-2-일)벤즈아미드의 합성
TFA(1 ㎖)를 다이클로로메탄(3 ㎖) 중의 tert-부틸 ((1r,4r)-4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸-5-(티아졸-2-일)-페닐)-(에틸)-아미노)-사이클로헥실)-카바메이트(0.15 g, 0.25 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고 감압 하에 농축하고 NaHCO3 용액을 농축물에 첨가하였다. 10% MeOH/DCM으로 추출한 후, 모은 유기층을 물 및 염수로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조하고 감압 하에 농축하여 다음 단계에서 직접적으로 사용되는 0.11 g의 표제 화합물을 수득하였다.
단계 4: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸-3-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-2-메틸-5-(티아졸-2-일)-벤즈아미드 TFA 염의 합성
포르말린(0.06 g, 2.0 mmol)을 0℃에서 메탄올(3 ㎖) 중의 3-(((1r,4r)-4-아미노사이클로헥실)(에틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(티아졸-2-일)벤즈아미드(0.1 g, 0.20 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 나트륨 시아노보로하이드라이드(0.025 g, 0.59 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물로 급랭시키고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 건조하고 감압 하에 농축하여 고체를 수득한 후, 이 고체를 분취용 HPLC로 정제하여 TFA 염으로서 표제 화합물을 수득하였다(0.06 g, 56%). 상기 TFA 염의 분석 데이터: LCMS: 522.60 (M+1)+; HPLC: 92.00% (@ 210-370 nm) (Rt; 4.255; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (bs, 1H), 9.39 (bs, 1H), 8.30 (t, 1H), 7.90 (d, 1H, J=3.2 Hz), 7.78 (d, 1H, J=2.4 Hz), 7.71 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 5.88 (s, 1H), 4.30 (d, 2H, J=4 Hz), 3.11 (m, 3H), 2.77-2.68 (m, 7H), 2.24 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.96-1.89 (m, 4H), 1.45 (m, 4H), 0.84 (t, 3H, J=6.4 Hz).
실시예 169: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸-3-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-2-메틸-5-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)-벤즈아미드의 합성
Figure pat00267
단계 1: 메틸 3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)-아미노)-사이클로헥실)-(에틸)아미노)-2-메틸-5-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)벤조에이트의 합성
Cs2CO3(0.94 g, 2.88 mmol)을 아르곤 하에 다이옥산/물 혼합물 중의 메틸 3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)-아미노)-사이클로헥실)-(에틸)-아미노)-2-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤조에이트(0.5 g, 1.15 mmol) 및 2-브로모-1-메틸-1H-이미다졸(0.22 g, 1.38 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. PdCl2(PPh3)2(0.08 g, 0.11 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 아르곤 하에 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 물을 첨가하고 혼합물을 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 메틸 3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)-아미노)-사이클로헥실)-(에틸)아미노)-2-메틸-5-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)벤조에이트를 수득하였다(0.22 g, 40%).
단계 2: tert-부틸 ((1r,4r)-4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸-5-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)-페닐)-(에틸)-아미노)사이클로헥실)카바메이트의 합성
수성 NaOH(0.028 g, 0.70 mmol)를 에탄올(3 ㎖) 중의 메틸 3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)-아미노)-사이클로헥실)-(에틸)아미노)-2-메틸-5-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)벤조에이트(0.22 g, 0.47 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 60℃에서 1시간 동안 교반한 후, 혼합물을 감압 하에 농축하고, pH 4까지 산성화하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 모은 유기층을 건조하고 농축하여 0.16 g의 미정제 산을 수득하였다. PyBOP(0.27 g, 0.53 mmol)를 DMSO(3 ㎖) 중의 상기 미정제 산(0.16 g, 0.35 mmol) 및 3-(아미노메틸)-4,6-다이메틸피리딘-2(1H)-온(0.11 g, 0.70 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 밤새 교반한 후, 혼합물을 빙수에 붓고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 물로 세척하고 건조하고 감압 하에 농축하여 추가 정제 없이 직접적으로 사용되는 0.12 g의 tert-부틸 ((1r,4r)-4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸-5-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)-페닐)-(에틸)-아미노)사이클로헥실)카바메이트를 수득하였다.
단계 3: 3-(((1r,4r)-4-아미노사이클로헥실)(에틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)벤즈아미드의 합성
TFA(1 ㎖)를 DCM(3 ㎖) 중의 tert-부틸 ((1r,4r)-4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸-5-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)-페닐)-(에틸)-아미노)사이클로헥실)카바메이트(0.12 g, 0.20 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 실온에서 1시간 동안 교반한 후, 혼합물을 감압 하에 농축하였다. 포화된 NaHCO3 용액을 잔사에 첨가한 후 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 물 및 염수로 세척하고 건조하고 감압 하에 농축하여 추가 정제 없이 직접적으로 사용되는 0.1 g의 3-(((1r,4r)-4-아미노사이클로헥실)(에틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)벤즈아미드를 수득하였다.
단계 4: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-2-메틸-5-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)벤즈아미드 TFA 염의 합성
포르말린(0.06 g, 2.0 mmol)을 0℃에서 메탄올(3 ㎖) 중의 3-(((1r,4r)-4-아미노사이클로헥실)(에틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(1-메틸-1H-이미다졸-2-일)벤즈아미드(0.1 g, 0.20 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 물을 첨가한 후 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 건조하고 감압 하에 농축하여 고체를 수득한 후, 이 고체를 분취용 HPLC로 정제하여 TFA 염으로서 표제 화합물을 수득하였다(0.03 g, 28%). 상기 TFA 염의 분석 데이터: LCMS: 519.65 (M+1)+; HPLC: 96.10% (@ 254 nm) (Rt; 3.976; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.47 (bs, 1H), 9.60 (bs, 1H), 8.24 (bs, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 5.87 (s, 1H), 4.30 (bs, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.10 (m, 3H), 2.69 (bs, 7H), 2.28 (s, 3H), 2.22 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.96-1.88 (m, 4H), 1.46 (m, 4H), 0.84 (bs, 3H).
실시예 170: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-2-메틸-5-(6-(4-메틸피페라진-1-일)피리딘-3-일)벤즈아미드
Figure pat00268
화합물 170을 하기 실시예 183에 기재된 방법과 유사한 방법으로 제조하였다.
분석 데이터: LCMS: 614.75 (M+1)+; HPLC: 98.17% (@ 210-370 nm) (Rt; 3.598; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 11.46 (bs, 1H), 10.10 (bs, 1H), 9.68 (bs, 1H), 8.21 (m, 2H), 7.47 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.16 (s, 1H), 7.05 (d, 1H, J=4.8 Hz), 5.87 (s, 1H), 4.54-4.51 (m, 2H), 4.30 (d, 2H, J=4 Hz), 3.53 (m, 2H), 3.13 (m, 7H), 2.86 (s, 3H), 2.76-2.68 (m, 7H), 2.24 (s, 3H), 2.22 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.97-1.90 (m, 4H), 1.43 (m, 4H), 0.83 (t, 3H, J=6.4 Hz).
실시예 171: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸-5-(6-(4-메틸피페라진-1-일)피리딘-3-일)벤즈아미드
Figure pat00269
화합물 171을 하기 실시예 183에 기재된 방법과 유사한 방법으로 제조하였다.
분석 데이터: LCMS: 573.75 (M+1)+; HPLC: 95.92% (@ 210-370 nm) (Rt; 3.891; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 11.46 (bs, 1H), 8.19 (t, 1H), 8.14 (d, 1H, J=4.8 Hz), 7.44 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.97 (s, 1H), 6.88 (d, 1H, J=4.8 Hz), 5.86 (s, 1H), 4.29 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.84-3.81 (m, 2H), 3.54 (m, 4H), 3.28-3.22 (m, 2H), 3.10-3.02 (m, 3H), 2.42 (m, 4H), 2.24 (s, 3H), 2.23 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.66-1.50 (m, 4H), 0.82 (t, 3H, J=6.4 Hz).
실시예 172: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-2-메틸-5-(6-(피페라진-1-일)피리딘-3-일)벤즈아미드
Figure pat00270
화합물 172를 하기 실시예 183에 기재된 방법과 유사한 방법으로 제조하였다.
분석 데이터: LCMS: 600.75 (M+1)+; HPLC: 99.58% (@ 210-370 nm) (Rt; 3.460; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (bs, 1H), 9.59 (bs, 1H), 8.92 (bs, 2H), 8.47 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.92 (d, 1H, J=7.6 Hz), 7.39 (bs, 1H), 7.21 (bs, 1H), 7.01 (d, 1H, J=8.8 Hz), 5.87 (s, 1H), 4.29 (d, 2H, J=5.2 Hz), 3.75 (q, 4H, J=5.2 Hz), 3.22 (m, 4H), 3.12 (m, 3H), 2.75 (m, 1H), 2.69 (s, 3H), 2.68 (s, 3H), 2.23 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.97 (m, 4H), 1.44 (m, 4H), 0.83 (t, 3H, J=6.8 Hz).
실시예 173: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸-5-(6-(피페라진-1-일)피리딘-3-일)벤즈아미드
Figure pat00271
화합물 173을 하기 실시예 183에 기재된 방법과 유사한 방법으로 제조하였다.
분석 데이터: LCMS: 559.55 (M+1)+; HPLC: 98.43% (@ 210-370 nm) (Rt; 3.731; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (bs, 1H), 8.86 (s, 2H), 8.48 (bs, 1H), 8.21 (bs, 1H), 7.94 (bs, 1H), 7.45 (bs, 1H), 7.25 (bs, 1H), 7.02 (d, 1H, J=8.4 Hz), 5.87 (s, 1H), 4.29 (d, 2H, J=3.6 Hz), 3.83 (m, 3H), 3.76 (bs, 4H), 3.30-3.15 (m, 7H), 3.10 (m, 1H), 2.25 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.75-1.50 (m, 4H), 0.84 (t, 3H).
실시예 174: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸-3-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-2-메틸-5-(피라진-2-일)-벤즈아미드의 합성
Figure pat00272
단계 1: 메틸 5-브로모-3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)-아미노)-사이클로헥실)(에틸)-아미노)-2-메틸벤조에이트의 합성
아세트산(8.18 g, 136 mmol)을 다이클로로에탄(100 ㎖) 중의 5-브로모-3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)-아미노)-사이클로헥실)아미노)-2-메틸벤조에이트(10 g, 23 mmol) 및 아세트알데하이드(2.99 g, 68 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 반응물을 실온에서 20분 동안 교반하였다. 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(14.45 g, 68 mmol)를 0℃에서 첨가하고 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고 물을 첨가한 후 5% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 건조하고 농축하여 추가 정제 없이 사용되는 9 g의 표제 화합물을 수득하였다.
단계 2: 메틸 3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)-아미노)-사이클로헥실)-(에틸)-아미노)-2-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤조에이트의 합성
아세트산칼륨(1.25 g, 12.82 mmol)을 아르곤 하에 다이옥산 중의 메틸 5-브로모-3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)-아미노)-사이클로헥실)(에틸)-아미노)-2-메틸벤조에이트(2.0 g, 4.3 mmol) 및 비스피나콜레이토다이보론(5.42 g, 21 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. PdCl2(dppf)DCM(0.35 g, 0.42 mmol)을 첨가하고 혼합물을 아르곤 하에 80℃에서 3시간 동안 가열하였다. 물을 첨가한 후 에틸 아세테이트로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하였다. 미정제 생성물을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(1.3 g, 70%).
단계 3: 메틸 3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)-아미노)-사이클로헥실)-(에틸)-아미노)-2-메틸-5-(피라진-2-일)벤조에이트의 합성
Cs2CO3(0.94 g, 2.89 mmol)을 아르곤 하에 다이옥산/물 혼합물 중의 메틸 3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)-아미노)-사이클로헥실)-(에틸)-아미노)-2-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤조에이트(0.50 g, 1.15 mmol) 및 2-브로모피라진(0.24 g, 1.49 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. PdCl2(PPh3)2(0.08 g, 0.11 mmol)을 첨가하고 혼합물을 아르곤 하에 100℃에서 3시간 동안 가열하였다. 물을 첨가한 후 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하였다. 미정제 생성물을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.29 g, 53%).
단계 4: tert-부틸 ((1r,4r)-4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)-메틸)카바모일)-2-메틸-5-(피라진-2-일)-페닐)-(에틸)-아미노)-사이클로헥실)-카바메이트의 합성
수성 NaOH(0.037 g, 0.93 mmol)를 실온에서 에탄올(3 ㎖) 중의 메틸 3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)-아미노)-사이클로헥실)-(에틸)-아미노)-2-메틸-5-(피라진-2-일)벤조에이트(0.29 g, 0.62 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 60℃에서 1시간 동안 교반한 후, 혼합물을 감압 하에 농축하고, pH 4까지 산성화하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 모은 유기층을 건조하고 농축하여 0.24 g의 미정제 산을 수득하였다. PyBOP(0.41 g, 0.79 mmol)를 DMSO(3 ㎖) 중의 상기 미정제 산(0.24 g, 0.52 mmol) 및 3-(아미노메틸)-4,6-다이메틸피리딘-2(1H)-온(0.16 g, 1.05 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 밤새 교반한 후, 혼합물을 빙수에 붓고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 물로 세척하고 건조하고 감압 하에 농축하여 추가 정제 없이 직접적으로 사용되는 0.3 g의 표제 화합물을 수득하였다.
단계 5: 3-(((1r,4r)-4-아미노사이클로헥실)(에틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(피라진-2-일)벤즈아미드의 합성
TFA(1 ㎖)를 DCM(3 ㎖) 중의 tert-부틸 ((1r,4r)-4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)-메틸)카바모일)-2-메틸-5-(피라진-2-일)-페닐)-(에틸)-아미노)-사이클로헥실)-카바메이트(0.3 g, 0.51 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 실온에서 1시간 동안 교반한 후, 혼합물을 감압 하에 농축하였다. 포화된 NaHCO3 용액을 첨가한 후 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 물 및 염수로 세척하고 건조하고 감압 하에 농축하여 추가 정제 없이 직접적으로 사용되는 0.24 g의 표제 화합물을 수득하였다.
단계 6: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-2-메틸-5-(피라진-2-일)벤즈아미드 TFA 염의 합성
포르말린(0.15 g, 5.1 mmol)을 0℃에서 메탄올(3 ㎖) 중의 3-(((1r,4r)-4-아미노사이클로헥실)(에틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(피라진-2-일)벤즈아미드(0.24 g, 0.51 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 나트륨 시아노보로하이드라이드(0.06 g, 1.0 mmol)를 첨가하고 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 물을 첨가한 후 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 건조하고 감압 하에 농축하였다. 수득된 고체를 분취용 HPLC로 정제하여 TFA 염으로서 표제 화합물을 수득하였다(0.12 g, 47%). 상기 TFA 염의 분석 데이터: LCMS: 517.50 (M+1)+; HPLC: 99.49% (@ 210-370 nm) (Rt; 4.072; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.47 (bs, 1H), 9.45 (bs, 1H), 9.26 (s, 1H), 8.71 (s, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.23 (t, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 5.88 (s, 1H), 4.31 (d, 2H, J=4 Hz), 3.13 (m, 3H), 2.78 (m, 1H), 2.69 (d, 6H, J=4.8 Hz), 2.28 (s, 3H), 2.22 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 1.96-1.92 (m, 4H), 1.45 (m, 3H), 0.84 (t, 3H, J=6.4 Hz).
실시예 175: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸-3-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-2-메틸-5-(5-메틸피라진-2-일)-벤즈아미드의 합성
Figure pat00273
단계 1: 메틸 3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)-아미노)-사이클로헥실)-(에틸)-아미노)-2-메틸-5-(5-메틸피라진-2-일)벤조에이트의 합성
Cs2CO3(0.75 g, 2.30 mmol)을 아르곤 하에 다이옥산/물 혼합물 중의 메틸 3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)-아미노)-사이클로헥실)-(에틸)-아미노)-2-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)벤조에이트(0.40 g, 0.92 mmol) 및 2-브로모-5-메틸피라진(0.21 g, 1.19 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. PdCl2(PPh3)2(0.064 g, 0.092 mmol)을 첨가하고 혼합물을 아르곤 하에 100℃에서 3시간 동안 가열하였다. 물을 첨가한 후 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.3 g, 56%).
단계 2: tert-부틸 ((1r,4r)-4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸-5-(5-메틸피라진-2-일)-페닐)-(에틸)-아미노)-사이클로헥실)카바메이트의 합성
수성 NaOH(0.029 g, 0.75 mmol)를 실온에서 에탄올(3 ㎖) 중의 메틸 3-(((1r,4r)-4-((tert-부톡시카보닐)-아미노)-사이클로헥실)-(에틸)-아미노)-2-메틸-5-(5-메틸피라진-2-일)벤조에이트(0.29 g, 0.49 mmol) 용액에 첨가하였다. 60℃에서 1시간 동안 교반한 후, 혼합물을 감압 하에 농축하고, pH 4까지 산성화하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 모은 유기층을 건조하고 농축하여 0.25 g의 미정제 산을 수득하였다. PyBOP(0.34 g, 0.66 mmol)를 실온에서 DMSO(3 ㎖) 중의 상기 미정제 산(0.25 g, 0.44 mmol) 및 3-(아미노메틸)-4,6-다이메틸피리딘-2(1H)-온(0.13 g, 0.88 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 교반을 밤새 계속 수행한 후, 혼합물을 빙수에 붓고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 물로 세척하고 건조하고 감압 하에 농축하여 추가 정제 없이 직접적으로 사용되는 0.2 g의 표제 화합물을 수득하였다.
단계 3: 3-(((1r,4r)-4-아미노사이클로헥실)(에틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(5-메틸피라진-2-일)벤즈아미드의 합성
TFA(1 ㎖)를 DCM(3 ㎖) 중의 tert-부틸 ((1r,4r)-4-((3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-2-메틸-5-(5-메틸피라진-2-일)-페닐)-(에틸)-아미노)-사이클로헥실)카바메이트(0.2 g, 0.33 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 실온에서 1시간 동안 교반한 후, 혼합물을 감압 하에 농축하였다. 포화된 NaHCO3 용액을 첨가한 후 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 물 및 염수로 세척하고 건조하고 감압 하에 농축하여 추가 정제 없이 직접적으로 사용되는 0.15 g의 표제 화합물을 수득하였다.
단계 4: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸-3-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-2-메틸-5-(5-메틸피라진-2-일)-벤즈아미드 TFA 염의 합성
포르말린(0.089 g, 2.98 mmol)을 0℃에서 메탄올(3 ㎖) 중의 3-(((1r,4r)-4-아미노사이클로헥실)(에틸)아미노)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(5-메틸피라진-2-일)벤즈아미드(0.15 g, 0.29 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 나트륨 시아노보로하이드라이드(0.037 g, 0.59 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 물을 첨가한 후 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 건조하고 감압 하에 농축하였다. 수득된 고체를 분취용 HPLC로 더 정제하여 TFA 염으로서 표제 화합물을 수득하였다(0.12 g, 75%). 상기 TFA 염의 분석 데이터: LCMS: 531.50 (M+1)+; HPLC: 88.93% (@ 210-370 nm) (Rt; 4.130; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 0.05% TFA in 물/B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.49 (bs, 1H), 9.54 (bs, 1H), 9.10 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.23 (t, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.69 (s, 1H), 5.87 (s, 1H), 4.30 (bs, 2H), 3.12 (m, 3H), 2.77-2.69 (m, 7H), 2.53 (s, 3H), 2.26 (s, 3H), 2.22 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.95-1.91 (m, 4H), 1.44 (m, 4H), 0.83 (t, 3H).
실시예 176: 5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-N-((6-메틸-2-옥소-4-프로필-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00274
단계 1: 6-메틸-2-옥소-4-프로필-1,2-다이하이드로피리딘-3-카보니트릴의 합성
화합물 시아노아세트아미드(0.824 g, 9.8 mmol) 및 (E)-헵트-3-엔-2-온(1 g, 8.91 mmol)을 실온에서 DMSO(15 ㎖) 중의 t-BuOK(1 g, 8.9 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 추가 t-BuOK(3 g, 26.7 mmol)를 첨가하고 반응물을 공기의 존재 하에 실온에서 교반하였다. 완결 시, 반응물을 H2O로 희석하고 4 N HCl로 서서히 희석하였다. 침전된 고체를 여과하고 물로 세척하고 건조하였다. 미정제 생성물을 에테르로 분쇄하여 표제 화합물을 수득하였다(0.5 g, 33%).
단계 2: 3-(아미노메틸)-6-메틸-4-프로필피리딘-2(1H)-온의 합성
촉매량의 레이니 니켈을 메탄올 및 암모니아 수용액(50 ㎖, 9:1) 중의 6-메틸-2-옥소-4-프로필-1,2-다이하이드로피리딘-3-카보니트릴(1.3 g, 7.38 mmol) 용액에 첨가하였다. 반응물을 수소 압력(기구 압력) 하에 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 반응의 완결 시, 반응물을 셀라이트 층을 통해 여과하고 여과액을 감압 하에 농축하여 표제 화합물을 수득하였다(1.2 g, 92%).
단계 3: 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드의 합성
수성 NaOH(2.36 g, 59.15 mmol)를 에탄올(100 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤조에이트(14 g, 39.43 mmol) 용액에 첨가하고 60℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응의 완결 후, 에탄올을 감압 하에 제거하고 묽은 HCl을 사용하여 pH 6까지 산성화하고 시트르산을 사용하여 pH 4로 조절하였다. 에틸 아세테이트를 사용하여 추출을 수행하였다. 모은 유기층을 건조하고 농축하여 각각의 산을 수득하였다(13.9 g, 99%).
그 다음, 상기 산(0.6 g, 1.75 mmol)을 DMSO(5 ㎖)에 용해시키고 3-(아미노메틸)-6-메틸-4-프로필피리딘-2(1H)-온(0.64 g, 3 mmol) 및 트라이에틸아민(0.49 g, 5.26 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반한 후, PyBOP(1.36 g, 2.63 mmol)를 첨가하고 교반을 밤새 계속 수행하였다. 반응의 완결 후, 반응 혼합물을 얼음에 붓고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 건조하고 농축하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 용매 세척으로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.75 g, 84.7%).
단계 4: 5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-N-((6-메틸-2-옥소-4-프로필-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Na2CO3(0.23 g, 2.14 mmol)을 다이옥산/물 혼합물(5 ㎖+1 ㎖) 중의 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드(0.3 g, 0.59 mmol) 및 4-((모르폴리노)메틸)페닐보론산 피나콜 에스테르(0.22 g, 0.71 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고, 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.068 g, 0.059 mmol)을 첨가하고 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.25 g, 70%). LCMS: 601.55 (M+1)+; HPLC: 97.21% (@ 210-370 nm) (Rt; 4.380; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (bs, 1H), 8.16 (bs, 1H), 7.57 (d, 2H, J=7.6 Hz), 7.38 (t, 3H, J=6.8 Hz), 7.21 (s, 1H), 5.89 (s, 1H), 4.30 (m, 2H), 3.84-3.82 (m, 2H), 3.57 (bs, 3H), 3.48 (s, 3H), 3.28-3.22 (m, 2H), 3.09-3.02 (m, 3H), 2.36 (bs, 4H), 2.25 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.67-1.54 (m, 6H), 0.93 (t, 3H, J=7 Hz), 0.84 (t, 3H). 용매 피크에서 합쳐진 2H.
실시예 177: N-((5-브로모-4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00275
단계 1: 메틸 5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복실레이트의 합성
Na2CO3(1.08 g, 10.14 mmol)을 다이옥산/물 혼합물(10 ㎖+2 ㎖) 중의 메틸 5-브로모-3-(에틸-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤조에이트(1 g, 2.82 mmol) 및 4-((모르폴리노)메틸)페닐보론산 피나콜 에스테르(1.03 g, 3.38 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고, 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, Pd(PPh3)4(0.325 g, 0.28 mmol)을 첨가하고 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 용매를 감압 하에 제거하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.75 g, 59%).
단계 2: 5-브로모-4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-카보니트릴의 합성
브롬(2.5 ㎖)을 실온에서 AcOH(25 ㎖) 중의 4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-카보니트릴(5 g, 33.78 mmol)의 교반된 현탁액에 적가하였다. 발생된 용액을 1시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 수득된 고체를 고온 EtOH 및 H2O에서 재결정화하여 백색 고체로서 표제 화합물을 수득하였다(5.5 g, 72%).
단계 3: 3-(아미노메틸)-5-브로모-4,6-다이메틸피리딘-2(1H)-온의 합성
NaBH4(0.68 g, 17.78 mmol)을 0℃에서 메탄올 중의 5-브로모-4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-카보니트릴(1 g, 4.44 mmol) 및 NiCl2.6H2O(0.21 g, 0.89 mmol)의 교반된 용액에 나누어 첨가하였다. 그 다음, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 완결 시, 3 N HCl을 사용하여 반응 혼합물을 산성화하고 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔사를 다이에틸 에테르로 세척하고 수성 NH4OH으로 염기성화하였다. 화합물을 DCM 중의 10% MeOH로 추출하고 무수 Na2SO4 상에서 건조하여 커플링 반응에 그 자체로 사용되는 표제 화합물을 수득하였다(0.96 g, 94%).
단계 4: N-((5-브로모-4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
수성 NaOH(0.06 g, 1.66 mmol)를 EtOH:H2O(4:1)(10 ㎖) 중의 화합물 7(0.5 g, 1.11 mmol) 용액에 첨가하고 60℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응의 완결 후, 에탄올을 감압 하에 제거하고 묽은 HCl을 사용하여 반응물을 pH 6까지 산성화하고 시트르산을 사용하여 pH 4로 조절하였다. DCM 중의 10% MeOH를 사용하여 추출을 수행하였다. 모은 유기층을 건조하고 농축하여 각각의 산을 수득하였다(0.35 g, 72%).
그 다음, 상기 산(0.266 g, 0.61 mmol)을 DMSO(2.5 ㎖)에 용해시키고 3-(아미노메틸)-5-브로모-4,6-다이메틸피리딘-2(1H)-온(0.42 g, 1.83 mmol) 및 트라이에틸아민(0.095 g, 0.91 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반한 후, PyBOP(0.63 g, 1.22 mmol)를 첨가하고 교반을 밤새 계속 수행하였다. 반응의 완결 후, 반응물을 얼음에 붓고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 건조하고 농축하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 용매 세척으로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.035 g, 7.6%).
LCMS: 653.65 (M+1)+, HPLC: 89.23% (@ 210-370 nm) (Rt; 4.421; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 9.88 (bs, 1H), 8.30 (bs, 1H), 7.76 (m, 2H), 7.57 (d, 2H, J=7.6 Hz), 7.44 (bs, 1H), 7.27 (bs, 1H), 4.39 (m, 4H), 3.99-3.96 (m, 5H), 3.84 (d, 2H, J=8.4 Hz), 3.65-3.62 (m, 2H), 3.28-3.23 (m, 4H), 3.12 (m, 4H), 2.35 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 2.26 (s, 3H), 1.65-1.55 (m, 4H), 0.84 (t, 3H).
실시예 178: 4-클로로-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드
Figure pat00276
화합물 178을 실시예 177에 기재된 방법과 유사한 방법으로 제조하였다.
분석 데이터: LCMS: 593.60 (M+1)+; HPLC: 95.50% (@ 210-370 nm) (Rt; 4.566; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (s, 1H), 8.34 (m, 1H), 7.61-7.24 (m, 6H), 5.86 (s, 1H), 4.29 (m, 2H), 3.86-3.84 (m, 2H), 3.57-3.49 (m, 6H), 3.25-3.16 (m, 5H), 2.36 (m, 4H), 2.21 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.68-1.58 (m, 4H), 0.86 (t, 3H).
실시예 179: 5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-N-((5-플루오로-4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
Figure pat00277
단계 1: 5-플루오로-4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-카보니트릴의 합성
3-플루오로펜탄-2,4-다이온(880 mg, 7.5 mmol)에 이어서 피페리딘(96 ㎕, 0.97 mmol)을 75℃에서 무수 EtOH(7.0 ㎖) 중의 2-시아노아세트아미드(689 mg, 8.2 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 이 온도에서 3시간 동안 교반하고 반응 혼합물을 실온에 도달하게 한 후, 냉장고에서 4일 동안 저장하였다. 베이지색 고체를 여과로 수집하고 여과액이 투명해질 때까지 냉각된 EtOH(4 x 0.4 ㎖)로 세척하였다. 발생된 베이지색 고체를 40℃에서 진공 중에서 5시간 동안 건조하여 베이지색 고체로서 표제 화합물을 수득하였다(733 mg, 58%). LC-MS 97%, 1.18분(3.5분 LC-MS 방법); m/z = 166.9, 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 13.67 (br. s., 1H), 2.46 (d, J=2.05 Hz, 3H), 2.45 (d, J=2.84 Hz, 3H).
단계 2: 3-(아미노메틸)-5-플루오로-4,6-다이메틸-1,2-다이하이드로피리딘-2-온의 합성
1.75 M NH3/MeOH(87 ㎖) 중의 0.05 M 5-플루오로-4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-카보니트릴(731 mg, 4.4 mmol) 용액을 80℃ 및 50 bar에서 1 ㎖/분의 유속으로 H-큐브에 통과시켰다. 발생된 용액을 진공 중에서 농축하였다. 발생된 고체를 2개의 회분으로 분할하고, 350 mg의 미정제 생성물을 컬럼 크로마토그래피(25 g SNAP 카트리지, 이솔레라, (10% NH4OH을 함유하는) 0% 내지 25% MeOH:CH2Cl2)로 정제하여 생성물:출발 물질의 1:1 혼합물인 회백색 고체로서 표제 화합물을 수득하였다(307 mg, 20%). LC-MS (ELS) 100%, 0.23분(3.5분 LC-MS 방법), m/z = 170.9, 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 3.79 (s, 2H), 2.31 (d, J=2.84 Hz, 3H), 2.25 (d, J=2.05 Hz, 3H).
단계 3: 5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-N-((5-플루오로-4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드의 합성
무수 DMF(4.0 ㎖) 중의 3-[에틸(옥산-4-일)아미노]-2-메틸-5-[4-(모르폴린-4-일메틸)페닐]벤조산(100 mg, 0.22 mmol)의 교반된 용액을 질소 기구 압력 하에 0℃에서 HATU(99 mg, 0.26 mmol) 및 DIPEA(75 ㎕, 0.43 mmol)로 적가 처리하였다. 발생된 용액을 10분 동안 교반한 후 3-(아미노메틸)-5-플루오로-4,6-다이메틸-1,2-다이하이드로피리딘-2-온(50%, 81 mg, 0.24 mmol)으로 처리하였다. 발생된 현탁액을 0℃에서 30분 동안 교반한 후 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물(20 ㎖)과 CH2Cl2(15 ㎖)에 분배하였다. 층을 분리하고 수성층을 CH2Cl2(3 x 15 ㎖)으로 추출하였다. 모은 유기물을 포화된 NaHCO3(수성) 용액(40 ㎖), 물(2 x 25 ㎖) 및 염수(20 ㎖)로 세척하고 건조하고(MgSO4) 여과하고 진공 중에서 농축하였다. 미정제 잔사를 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(10 g SNAP 카트리지, 이솔레라, 0% 내지 6% MeOH/CH2Cl2)로 정제한 후 EtOAc(40 ㎖)와 CH2Cl2(10 ㎖)의 혼합물에 용해시키고 물(6 x 30 ㎖) 및 염수(2 x 30 ㎖)로 세척하고 건조하고(MgSO4) 여과하고 진공 중에서 농축하였다. 고체를 40℃에서 진공 중에서 40시간 동안 철저히 건조하여 분말 백색 고체로서 5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-N-((5-플루오로-4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-4-메틸-4'-(모르폴리노메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드를 수득하였다(93 mg, 73%). LC-MS 100%, 2.76분(7분 LC-MS 방법), m/z = 591.2; 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ 11.79 (s, 1H), 7.44 (d, J=8.1 Hz, 2H), 7.34 (d, J=8.4 Hz, 3H), 7.08 (t, J=6.0 Hz, 1H), 4.56 (d, J=6.0 Hz, 2H), 3.95 (d, J=11.2 Hz, 2H), 3.76-3.66 (m, 4H), 3.51 (s, 2H), 3.31 (td, J=11.3, 2.7 Hz, 2H), 3.10 (q, J=7.0 Hz, 2H), 3.00 (tt, J=9.6, 4.6 Hz, 1H), 2.45 (s, 4H), 2.43 (d, J=1.8 Hz, 3H), 2.34 (s, 3H), 2.13 (d, J=2.7 Hz, 3H), 1.74-1.62 (m, 4H), 0.89 (t, J=7.0 Hz, 3H). 1개의 양성자가 용매 피크와 일치하는 것으로 추정되었다.
실시예 180: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-2-메틸-5-(1-메틸-1H-이미다졸-4-일)벤즈아미드
Figure pat00278
화합물 180을 실시예 169에 기재된 방법과 유사한 방법으로 제조하였다.
분석 데이터: LCMS: 519.55 (M+1)+; HPLC: 89.93% (@ 210-370 nm) (Rt; 3.676; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.50 (bs, 1H), 9.77 (bs, 1H), 9.11 (s, 1H), 8.20-8.17 (m, 2H), 7.60 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 5.87 (s, 1H), 4.30 (d, 2H, J=5.2 Hz), 3.87 (s, 3H), 3.11 (m, 3H), 2.68-2.67 (m, 6H), 2.72-2.64 (m, 1H), 2.22 (s, 6H), 2.11 (s, 3H), 1.99-1.87 (m, 4H), 1.48-1.40 (m, 4H), 0.81 (t, 3H, J=6.8 Hz).
실시예 181: 4'-(아제티딘-1-카보닐)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3-카복스아미드
Figure pat00279
분석 데이터: LCMS: 598.60 (M+1)+; HPLC: 94.88% (@ 210-370 nm) (Rt; 3.823; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz) δ 11.44 (bs, 1H), 9.56 (bs, 1H), 8.21 (m, 1H), 8.05-7.96 (m, 4H), 7.54 (bs, 1H), 7.38 (bs, 1H), 5.87 (s, 1H), 4.82-4.81 (m, 2H), 4.31 (d, 2H, J=4.8 Hz), 3.69 (t, 2H, J=5.6 Hz), 3.17-3.14 (m, 3H), 2.77 (bs, 1H), 2.69-2.68 (m, 6H), 2.26 (s, 3H), 2.22 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.97-1.91 (m, 4H), 1.46-1.44 (m, 4H), 0.85 (t, 3H, J=6.8 Hz). 용매 피크에서 합쳐진 2H.
실시예 182: N3-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(((1r,4r)-4-(다이메틸아미노)사이클로헥실)(에틸)아미노)-N4'-(3-하이드록시프로필)-4-메틸-[1,1'-비페닐]-3,4'-다이카복스아미드
Figure pat00280
분석 데이터: LCMS: 617.70 (M+1)+; HPLC: 93.27% (@ 210-370 nm) (Rt; 4.009; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (bs, 1H), 9.47 (bs, 1H), 8.48 (m, 1H), 8.23 (bs, 1H), 7.93-7.73 (m, 4H), 7.47 (bs, 1H), 7.31 (bs, 1H), 5.87 (s, 1H), 4.31-4.30 (m, 2H), 3.47 (t, 2H, J=6 Hz), 3.34-3.33 (m, 2H), 3.13 (bs, 3H), 2.69-2.68 (m, 6H), 2.26 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.96 (m, 4H), 1.69 (t, 2H, J=6.6 Hz), 1.45 (m, 4H), 0.85 (t, 3H). 용매 피크에서 합쳐진 1H.
실시예 183: 3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸-N-((6-메틸-2-옥소-4-프로필-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(6-(4-메틸피페라진-1-일)피리딘-3-일)벤즈아미드
Figure pat00281
분석 데이터: LCMS: 601.65 (M+1)+; HPLC: 99.85% (@ 210 nm-370 nm) (Rt; 4.256; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.48 (bs, 1H), 9.84 (bs, 1H), 8.47 (bs, 1H), 8.17 (bs, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.41 (m, 2H), 7.04 (d, 1H, J=8 Hz), 5.89 (s, 1H), 4.44 (d, 2H, J=12 Hz), 4.30 (s, 2H), 3.84 (bs, 2H), 3.52 (d, 2H, J=9 Hz), 3.12-3.24 (m, 8 Hz), 2.85 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.54-1.65 (m, 6H), 0.84-0.94 (m, 6H). 용매 피크에서 합쳐진 3개의 양성자.
실시예 184: 3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸-N-((6-메틸-2-옥소-4-프로필-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(6-(피페라진-1-일)피리딘-3-일)벤즈아미드의 합성
Figure pat00282
다이옥산(10 ㎖) 중의 5-브로모-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸-N-((6-메틸-2-옥소-4-프로필-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)벤즈아미드(0.7 g, 1.38 mmol), 각각의 보로네이트 에스테르(0.601 g, 2.08 mmol) 및 테트라키스(0.160 g, 0.138 mmol)의 용액을 아르곤으로 10분 동안 퍼징하였다. 이 용액에 수성 Na2CO3(0.529 g, 4.99 mmol, 2 ㎖)을 첨가하고 10분 동안 다시 탈기하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 16시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 농축하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 컬럼 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.50 g, 61.5%). 분석 데이터: LCMS: 587.55 (M+1)+; HPLC: 97.87% (@ 210-370 nm) (Rt; 4.217; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (bs, 1H), 8.38 (d, 1H, J=2.4 Hz), 8.14 (t, 1H, J=4.4 Hz), 7.78 (dd, 1H, J=2.4, 9.2 Hz), 7.35 (d, 1H, J=1.2 Hz), 7.15 (d, 1H, J=1.2 Hz), 6.85 (d, 1H, J=8.4 Hz), 5.88 (s, 1H), 4.29 (d, 2H, J=4.8 Hz), 3.82 (d, 2H, J=10 Hz), 3.43 (t, 4H, J=5.2 Hz), 3.24 (t, 2H, J=11.2 Hz), 3.10-2.98 (m, 3H), 2.78 (t, 4H, J=4.8 Hz), 2.22 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.67-1.47 (m, 6H), 0.93 (t, 3H, J=7.2 Hz), 0.81 (t, 3H, J=6.8 Hz).
실시예 185: 3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-N-((4-이소프로필-6-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(6-(피페라진-1-일)피리딘-3-일)벤즈아미드의 합성
Figure pat00283
다이옥산(7 ㎖) 중의 5-브로모-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-N-((4-이소프로필-6-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드(0.5 g, 0.99 mmol), 1-(5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2-일)피페라진(0.43 g, 1.48 mmol) 및 테트라키스(0.114 g, 0.09 mmol)의 용액을 아르곤으로 10분 동안 퍼징하였다. 이 용액에 수성 Na2CO3(0.377 g, 3.5 mmol, 2 ㎖)을 첨가하고 10분 동안 다시 탈기하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 16시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 농축하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 컬럼 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.35 g, 60.13%).
분석 데이터: LCMS: 586.36 (M+1)+; HPLC: 97.03% (@ 210-370 nm) (Rt; 4.10; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (bs, 1H), 8.37 (bs, 1H), 8.17 (bs, 1H), 7.78 (d, 1H, J=7.6 Hz), 7.35 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 6.85 (d, 1H, J=8.8 Hz), 5.99 (s, 1H), 4.34 (d, 2H, J=4 Hz), 3.83-3.81 (m, 2H), 3.42 (bs, 4H), 3.27-3.21 (m, 3H), 3.02-3.01 (m, 3H), 2.77 (bs, 4H), 2.22 (s, 3H), 2.13 (s, 3H), 1.67-1.49 (m, 4H), 1.13 (s, 3H), 1.12 (s, 3H), 0.81 (t, 3H, J=6.4 Hz).
실시예 186: 3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-N-((4-이소프로필-6-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(6-(4-메틸피페라진-1-일)피리딘-3-일)벤즈아미드의 합성
Figure pat00284
단계 1: 4-이소프로필-6-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-카보니트릴의 합성
5-메틸헥스-3-엔-2-온(5 g, 44.6 mmol)을 0℃에서 DMSO 중의 2-시아노아세트아미드(4.1 g, 49 mmol) 및 t-BuOK(4.9 g, 44.6 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 30분 동안 교반하였다. 추가 t-BuOK(15 g, 133.9 mmol)를 반응 혼합물에 첨가하고 실온에서 추가 1시간 동안 교반하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 물(50 ㎖)로 희석하고 4 N HCl로 서서히 산성화하였다. 침전물을 여과하고 물로 세척하고 건조하여 화합물 B를 수득하였다(2.2 g, 28.2%).
단계 2: 3-(아미노메틸)-4-이소프로필-6-메틸피리딘-2(1H)-온의 합성
촉매량의 레이니 니켈을 메탄올 및 암모니아 수용액(10 ㎖, 4:1) 중의 시아노 화합물 B(2.2 g, 12.5 mmol) 용액에 첨가하였다. 반응물을 수소 압력(기구 압력) 하에 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응의 완결 시, 반응물을 셀라이트 층을 통해 여과하고 여과액을 감압 하에 농축하여 표제 화합물을 수득하였다(2 g, 91%).
단계 3: 5-브로모-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-N-((4-이소프로필-6-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드의 합성
5-브로모-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤조산(2.0 g, 0.0058 mol)을 DMSO(20 ㎖)에 용해시키고 3-(아미노메틸)-4-이소프로필-6-메틸피리딘-2(1H)-온(2.1 g, 11.7 mmol) 및 트라이에틸아민(0.585 g, 5.8 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반한 후, PyBOP(4.5 g, 8.7 mmol)를 첨가하고 교반을 밤새 계속 수행하였다. 반응의 완결 후, 반응 혼합물을 얼음에 붓고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 건조하고 농축하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 용매 세척으로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(2.0 g, 68.9%).
단계 4: 3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-N-((4-이소프로필-6-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(6-(4-메틸피페라진-1-일)피리딘-3-일)벤즈아미드의 합성
다이옥산(10 ㎖) 중의 5-브로모-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-N-((4-이소프로필-6-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드(0.3 g, 0.99 mmol), 각각의 보론산 피나콜 에스테르(0.216 g, 0.715 mmol) 및 테트라키스(0.068 g, 0.0596 mmol)의 용액을 아르곤으로 10분 동안 퍼징하였다. 이 용액에 수성 Na2CO3(0.227 g, 2.14 mmol, 2 ㎖)을 첨가하고 10분 동안 다시 탈기하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 16시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 농축하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 분취용 HPLC로 정제하여 TFA 염으로서 표제 화합물을 수득하였다(0.12 g, 33.6%).
상기 TFA 염의 분석 데이터: MS: 601.55 (M+1)+. HPLC: 96.78% (@ 210-370 nm) (Rt; 4.197; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.49 (bs, 1H), 9.94 (bs, 1H), 8.493 (d, 1H, 6 Hz), 7.957 (bs, 1H), 7.65-7.258 (m, 3H), 7.056 (d, 1H, 8.4 Hz), 6.014 (s, 1H), 4.46 (d, 2H, 12.8 Hz), 4.349 (d, 2H, 4.8 Hz), 3.849 (d, 2H, 7.2 Hz), 3.530 (d, 2H, 10.8 Hz), 3.28-3.075 (m, 10H), 2.85 (s, 3H), 2.26 (bs, 3H), 2.14 (s, 3H), 1.64 (bs, 2H), 1.56 (bs, 2H), 1.14 (s, 3H), 1.12 (s, 3H), 0.845 (t, 3H, 7.6 Hz).
실시예 187: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸-5-(6-(4-(1-메틸피페리딘-4-일)피페라진-1-일)피리딘-3-일)벤즈아미드의 합성
Figure pat00285
아세트산(0.07 ㎖, 1.07 mmol)을 다이클로로에탄(2 ㎖) 중의 N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸-5-(6-(피페라진-1-일)피리딘-3-일)벤즈아미드(0.1 g, 0.179 mmol) 및 1-메틸피페리딘-4-온(0.04 g, 0.358 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 반응물을 실온에서 15분 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(0.113 g, 0.53 mmol)를 0℃에서 첨가하고 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 완결 시, 반응물을 수성 중탄산나트륨으로 급랭시키고, 유기층을 분리하고 수성층을 다이클로로메탄으로 추출하였다. 모은 유기층을 황산나트륨 상에서 건조하고 감압 하에 농축하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 분취용 HPLC로 정제하여 TFA 염으로서 표제 화합물을 수득하였다(0.08 g, 22.72%).
상기 TFA 염의 분석 데이터: ESMS: 656.41 (M+1)+; HPLC: 97.76% (@ 210 nm-370 nm) (Rt; 3.667; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.49 (bs, 1H), 10.33 (bs, 1H), 9.86 (bs, 1H), 8.49 (bs, 1H), 8.20 (bs, 1H), 7.96 (bs, 1H), 7.24-7.39 (m, 2H), 7.07 (d, 1H, J=9 Hz), 5.87 (s, 1H), 4.47 (bs, 2H), 4.28 (d, 2H, J=4 Hz), 3.84 (s, 2H), 3.60 (d, 5H, J=11 Hz), 3.16-3.28 (m, 7H), 2.99 (bs, 2H), 2.79 (s, 3H), 2.11-2.25 (m, 11H), 1.87-1.90 (m, 2H), 1.56-1.64 (m, 3H), 0.85 (s, 3H).
실시예 188: 3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-N-((4-이소프로필-6-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(6-(4-(1-메틸피페리딘-4-일)피페라진-1-일)피리딘-3-일)벤즈아미드의 합성
Figure pat00286
아세트산(0.18 g, 3.06 mmol)을 다이클로로에탄(5 ㎖) 중의 3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-N-((4-이소프로필-6-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(6-(피페라진-1-일)피리딘-3-일)벤즈아미드(0.3 g, 0.51 mmol) 및 1-메틸피페리딘-4-온(0.086 g, 0.76 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 반응물을 실온에서 20분 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(0.33 g, 1.55 mmol)를 0℃에서 첨가하고 반응물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 완결 시, 반응물을 수성 중탄산나트륨으로 급랭시키고, 유기층을 분리하고 수성층을 다이클로로메탄으로 추출하였다. 모은 유기층을 황산나트륨 상에서 건조하고 감압 하에 농축하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 분취용 HPLC로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.12 g, 34.38%).
분석 데이터: LCMS: 683.45 (M+1)+; HPLC: 98.65% (@ 210-370 nm) (Rt; 4.04; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.47 (bs, 1H), 10.24 (bs, 1H), 9.79 (bs, 1H), 8.46 (bs, 1H), 8.19 (bs, 1H), 7.92 (bs, 1H), 7.38 (bs, 1H), 7.19 (bs, 1H), 7.06 (d, 1H, J=9.2 Hz), 6.0 (s, 1H), 4.47 (bs, 2H), 4.34 (d, 2H, J=7.6 Hz), 3.83 (d, 2H, J=8.8 Hz), 3.6 (d, 4H, J=12 Hz), 3.43 (m, 1H), 3.27-3.16 (m, 8H), 2.99-2.97 (m, 3H), 2.79 (s, 3H), 2.37-2.33 (m, 3H), 2.24 (bs, 3H), 2.13 (s, 3H), 1.90-1.82 (m, 2H), 1.64-1.53 (m, 4H), 1.13 (s, 3H), 1.12 (s, 3H), 0.83 (t, 3H, J=6.8 Hz).
실시예 189: 3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸-N-((6-메틸-2-옥소-4-프로필-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(6-(4-(1-메틸피페리딘-4-일)피페라진-1-일)피리딘-3-일)벤즈아미드의 합성
Figure pat00287
아세트산(0.276 g, 4.6 mmol)을 다이클로로에탄(10 ㎖) 중의 3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸-N-((6-메틸-2-옥소-4-프로필-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(6-(피페라진-1-일)피리딘-3-일)벤즈아미드(0.45 g, 0.76 mmol) 및 1-메틸피페리딘-4-온(0.173 g, 1.53 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 반응물을 실온에서 20분 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(0.488 g, 2.3 mmol)를 0℃에서 첨가하고 반응물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 완결 시, 반응물을 수성 중탄산나트륨으로 급랭시키고, 유기층을 분리하고 수성층을 다이클로로메탄으로 추출하였다. 모은 유기층을 황산나트륨 상에서 건조하고 감압 하에 농축하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.215 g, 41%).
분석 데이터: LCMS: 684.45 (M+1)+; HPLC: 93.41% (@ 210 nm-370 nm) (Rt; 4.140; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (bs, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.13 (bs, 1H), 7.78 (d, 1H, J=9 Hz), 7.35 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 6.8 (d, 1H, J=9 Hz), 5.88 (s, 1H), 4.28 (d, 2H, J=4 Hz), 3.82 (d, 2H, J=10 Hz), 3.49 (s, 4H), 3.24 (t, 2H, J=11 Hz), 3.0-3.08 (m, 3H), 2.78 (d, 2H, J=10 Hz), 2.56 (s, 4H), 2.22 (s, 3H), 2.13 (s, 1H), 2.11 (s, 1H), 1.57-1.86 (m, 6H), 1.46-1.55 (m, 6H), 0.91 (t, 3H, J=8 Hz), 0.81 (t, 3H, J=6 Hz).
실시예 190: 3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-N-((4-이소프로필-6-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(6-(모르폴리노메틸)피리딘-3-일)벤즈아미드의 합성
Figure pat00288
단계 1: 3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-5-(6-포르밀피리딘-3-일)-N-((4-이소프로필-6-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드의 합성
다이옥산(5 ㎖) 중의 5-브로모-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-N-((4-이소프로필-6-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드(0.4 g, 0.793 mmol), 5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피콜린알데하이드(0.28 g, 1.19 mmol) 및 테트라키스(0.091 g, 0.079 mmol)의 용액을 아르곤으로 10분 동안 퍼징하였다. 이 용액에 수성 Na2CO3(0.301 g, 2.83 mmol)을 첨가하고 10분 동안 다시 탈기하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 16시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 농축하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 컬럼 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.28 g, 66.50%).
단계 2: 3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-N-((4-이소프로필-6-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(6-(모르폴리노메틸)피리딘-3-일)벤즈아미드의 합성
아세트산(0.19 g, 3.16 mmol)을 다이클로로에탄(3 ㎖) 중의 3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-5-(6-포르밀피리딘-3-일)-N-((4-이소프로필-6-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드(0.28 g, 0.528 mmol) 및 모르폴린(0.07 g, 0.79 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 반응물을 실온에서 20분 동안 교반하였다. 그 다음, 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(0.33 g, 1.55 mmol)를 0℃에서 첨가하고 반응물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 완결 시, 반응물을 수성 중탄산나트륨으로 급랭시키고, 유기층을 분리하고 수성층을 다이클로로메탄으로 추출하였다. 모은 유기층을 황산나트륨 상에서 건조하고 감압 하에 농축하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 분취용 HPLC로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.12 g, 38.70%).
상기 TFA 염의 분석 데이터: LCMS: 601.36 (M+1)+; HPLC: 95.48% (@ 210-370 nm) (Rt; 4.28; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.45 (bs, 1H), 10.45 (bs, 1H), 8.95 (s, 1H), 8.23-8.21 (m, 2H), 7.62-7.52 (m, 2H), 7.34 (bs, 1H), 6.01 (s, 1H), 4.55 (s, 2H), 4.35 (d, 2H, J=5.2 Hz), 3.84 (bs, 6H), 3.29-3.13 (m, 8H), 2.27 (s, 3H), 2.13 (s, 3H), 1.66-1.56 (m, 4H), 1.13 (s, 3H), 1.12 (s, 3H), 0.83 (t, 3H, J=6.8 Hz). 용매 피크에서 합쳐진 2개의 양성자.
실시예 191: 3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸-N-((6-메틸-2-옥소-4-프로필-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(6-(모르폴리노메틸)피리딘-3-일)벤즈아미드의 합성
Figure pat00289
단계 1: 3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-5-(6-포르밀피리딘-3-일)-2-메틸-N-((6-메틸-2-옥소-4-프로필-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)벤즈아미드의 합성
다이옥산(10 ㎖) 중의 5-브로모-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸-N-((6-메틸-2-옥소-4-프로필-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)벤즈아미드(0.5 g, 0.99 mmol), 5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피콜린알데하이드(0.346 g, 1.48 mmol) 및 테트라키스(0.114 g, 0.99 mmol)의 용액을 아르곤으로 10분 동안 퍼징하였다. 이 용액에 수성 Na2CO3(0.378 g, 3.56 mmol, 1.8 ㎖)을 첨가하고 10분 동안 다시 탈기하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 16시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 농축하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 컬럼 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.40 g, 76.0%).
단계 2: 3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸-N-((6-메틸-2-옥소-4-프로필-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(6-(모르폴리노메틸)피리딘-3-일)벤즈아미드의 합성
모르폴린(0.1 g, 1.18 mmol)을 0℃에서 EDC(8 ㎖) 중의 3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-5-(6-포르밀피리딘-3-일)-2-메틸-N-((6-메틸-2-옥소-4-프로필-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)벤즈아미드(0.315 g, 0.59 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 실온에서 10분 동안 교반하였다. 그 다음, NaBH(OAc)3(0.377 g, 1.78 mmol)을 첨가하고 16시간 동안 교반하였다. 완결 시, 반응물을 물로 급랭시켰다. MeOH(8 ㎖)를 첨가하고 층을 분리하고 DCM 중의 10% MeOH로 추출하고 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.2 g, 56%).
분석 데이터: LCMS: 602.60 (M+1)+; HPLC: 98.12% (@ 210 nm-370 nm) (Rt; 4.374; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.48 (s, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.19 (t, 1H, J=4 Hz), 7.99-8.02 (m, 1H), 7.49 (t, 2H, J=8 Hz), 7.26 (s, 1H), 5.88 (s, 1H), 4.29 (d, 2H, J=4 Hz), 3.82 (d, 2H, J=10 Hz), 3.59-3.61 (m, 6H), 3.24 (t, 2H, J=12 Hz), 2.99-3.10 (m, 3H), 2.42 (s, 4H), 2.25 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.48-1.67 (m, 6H), 0.926 (t, 3H, J=8 Hz), 0.824 (t, 3H, J=7 Hz).
실시예 192: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(6-(4-(다이메틸아미노)피페리딘-1-일)피리딘-3-일)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드
Figure pat00290
단계 1: tert-부틸 (1-(5-(3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸페닐)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)카바메이트(9)의 합성
Na2CO3(0.28 g, 2.65 mmol)을 다이옥산(5 ㎖) 중의 5-브로모-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드(0.35 g, 0.736 mmol) 및 각각의 보론산 피나콜 에스테르(0.35 g, 0.88 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고, 용액을 아르곤으로 15분 동안 퍼징하였다. 그 다음, 테트라키스(0.085 g, 0.073 mmol)를 첨가하고 아르곤으로 10분 동안 다시 퍼징하였다. 반응물을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 물로 희석하고 10% MeOH/DCM으로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고, 용매를 감압 하에 제거하고 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.39 g, 79%)
단계 2: 5-(6-(4-아미노피페리딘-1-일)피리딘-3-일)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드(10)의 합성
TFA(2 ㎖)를 0℃에서 DCM(4 ㎖) 중의 tert-부틸 (1-(5-(3-(((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-5-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸페닐)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)카바메이트(0.39 g, 0.058 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고, 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 완결 후, 반응물을 건조될 때까지 농축하였다. 그 다음, 잔사를 포화된 중탄산염 수용액(30 ㎖)으로 pH 8까지 염기성화하고, 수성층을 DCM 중의 20% 메탄올(50 ㎖ x 4)로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 다음 반응에서 그 자체로 사용되는 표제 화합물을 수득하였다(0.3 g, 90.63%).
단계 3: N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-5-(6-(4-(다이메틸아미노)피페리딘-1-일)피리딘-3-일)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드의 합성
37% 내지 41%의 포르말린 수용액(0.277 g, 1.31 mmol)을 0℃에서 DCM(3 ㎖) 중의 5-(6-(4-아미노피페리딘-1-일)피리딘-3-일)-N-((4,6-다이메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤즈아미드(0.3 g, 0.524 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 실온에서 10분 동안 교반하였다. 그 다음, NaBH(OAc)3(0.277 g, 1.31 mmol)을 첨가하고 2시간 동안 교반하였다. 완결 시, 반응물을 물로 급랭시켰다. MeOH(10 ㎖)를 첨가하고 층을 분리하고 DCM 중의 10% MeOH로 추출하고 컬럼 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.12 g, 38%).
분석 데이터: LCMS: 602.00 (M+1)+; HPLC: 97.22% (@ 210-370 nm) (Rt; 3.757; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (bs, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.15 (t, 1H), 7.78 (d, 1H, J=8.4 Hz), 7.35 (s, 1H), 7.16 (s, 1H), 6.90 (d, 1H, J=8.8 Hz), 5.85 (s, 1H), 4.35 (d, 2H, J=13.2 Hz), 4.28 (d, 2H, J=4 Hz), 3.82 (d, 2H, J=10 Hz), 3.30-3.20 (m, 2H), 3.10-3.00 (m, 3H), 2.90-2.80 (m, 2H), 2.28 (s, 6H), 2.22 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.90-1.80 (m, 3H), 1.70-1.60 (m, 2H), 1.60-1.50 (m, 2H), 1.40-1.30 (m, 2H), 0.82 (t, 3H, J=6.4 Hz).
실시예 193: 5-(6-(4-(다이메틸아미노)피페리딘-1-일)피리딘-3-일)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-N-((4-이소프로필-6-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드의 합성
Figure pat00291
tert-부틸 (1-(5-(3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-5-(((4-이소프로필-6-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-4-메틸페닐)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)카바메이트의 합성
다이옥산(5 ㎖) 중의 5-브로모-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-N-((4-이소프로필-6-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드(0.35 g, 0.69 mmol), tert-부틸 (1-(5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)카바메이트(0.33 g, 0.83 mmol) 및 테트라키스(0.079 g, 0.069 mmol)의 용액을 아르곤으로 10분 동안 퍼징하였다. 이 용액에 수성 Na2CO3(0.263 g, 2.48 mmol, 2 ㎖)을 첨가하고 10분 동안 다시 탈기하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 16시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 농축하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 컬럼 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.31 g, 63%).
5-(6-(4-아미노피페리딘-1-일)피리딘-3-일)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-N-((4-이소프로필-6-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드의 합성
tert-부틸 (1-(5-(3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-5-(((4-이소프로필-6-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-4-메틸페닐)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)카바메이트(0.31 g, 0.44 mmol)를 DCM(5 ㎖)에 용해시키고 TFA(1 ㎖)를 첨가하고 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응의 완결 후, 용매를 감압 하에 제거하고 포화된 NaHCO3 용액을 첨가하였다. 10% MeOH/DCM을 사용하여 추출을 수행하고, 모은 유기층을 물 및 염수로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조하고 여과하고 감압 하에 농축하여 표제 화합물을 수득하였다(0.26 g, 98.11%)
5-(6-(4-(다이메틸아미노)피페리딘-1-일)피리딘-3-일)-3-(에틸-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)-아미노)-N-((4-이소프로필-6-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)-메틸)-2-메틸벤즈아미드의 합성
포르말린(0.045 g, 1.51 mmol)을 DCM(4 ㎖) 중의 5-(6-(4-아미노피페리딘-1-일)피리딘-3-일)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-N-((4-이소프로필-6-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸벤즈아미드(0.26 g, 0.43 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고, 반응물을 0℃에서 10분 동안 교반하였다. 나트륨 트라이아세톡시보로하이드라이드(0.23 g, 1.08 mmol)를 0℃에서 첨가하고 반응물을 1시간 동안 교반하였다. 완결 시, 물을 반응물에 첨가하고 DCM을 사용하여 추출을 수행하였다. 모은 유기층을 중탄산염 용액으로 세척하고 황산나트륨 상에서 건조하고 감압 하에 농축하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 용매 세척으로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.17 g, 62%).
분석 데이터: LCMS: 629.70 (M+1)+; HPLC: 97.74% (@ 210-370 nm) (Rt; 4.176; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (s, 1H), 10.33 (bs, 1H), 8.39 (d, 1H), 8.16 (t, 1H), 7.81 (d, 1H, J=6.8 Hz), 7.35 (s, 1H), 7.16 (s, 1H), 6.97 (d, 1H, J=9.2 Hz), 5.99 (s, 1H), 4.50 (d, 2H, J=12.8 Hz), 4.34 (d, 2H, J=4.4 Hz), 3.82 (d, 2H, J=9.6 Hz), 3.39 (m, 1H), 3.24 (m, 3H), 3.10-3.00 (m, 3H), 2.90-2.80 (m, 2H), 2.69 (s, 6H), 2.22 (s, 3H), 2.13 (s, 3H), 2.10-2.05 (m, 2H), 1.70-1.60 (m, 2H), 1.60-1.45 (m, 4H), 1.13 (d, 6H, J=6.4 Hz), 0.82 (t, 3H, J=6.8 Hz).
실시예 194: 5-(6-(4-(다이메틸아미노)피페리딘-1-일)피리딘-3-일)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸-N-((6-메틸-2-옥소-4-프로필-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)벤즈아미드의 합성
Figure pat00292
tert-부틸 (1-(5-(3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-5-(((6-메틸-2-옥소-4-프로필-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)페닐)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)카바메이트의 합성
다이옥산(7 ㎖) 중의 5-브로모-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸-N-((6-메틸-2-옥소-4-프로필-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)벤즈아미드(0.5 g, 0.99 mmol), 각각의 보론산 피나콜 에스테르(0.6 g, 1.48 mmol) 및 테트라키스(0.114 g, 0.99 mmol)의 용액을 아르곤으로 10분 동안 퍼징하였다. 이 용액에 수성 Na2CO3(0.377 g, 3.5 mmol, 2 ㎖)을 첨가하고 10분 동안 다시 탈기하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 16시간 동안 가열하였다. 완결 시, 반응 혼합물을 농축하여 미정제 물질을 수득한 후, 이 물질을 컬럼 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.40 g, 57.47%).
5-(6-(4-아미노피페리딘-1-일)피리딘-3-일)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸-N-((6-메틸-2-옥소-4-프로필-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)벤즈아미드의 합성
TFA(10 ㎖)를 0℃에서 DCM(10 ㎖) 중의 tert-부틸 (1-(5-(3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-4-메틸-5-(((6-메틸-2-옥소-4-프로필-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)페닐)피리딘-2-일)피페리딘-4-일)카바메이트(0.4 g, 0.00051 mol)의 교반된 용액에 첨가하고 반응물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 완결 후, 반응물을 건조될 때까지 농축하였다. 그 다음, 잔사를 포화된 중탄산염 수용액(80 ㎖)으로 pH 8까지 염기성화하고 수성층을 DCM 중의 20% 메탄올(60 ㎖ x 4)로 추출하였다. 모은 유기층을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하여 다음 반응에서 그 자체로 사용되는 표제 화합물을 수득하였다(0.315 g, 92.1%).
5-(6-(4-(다이메틸아미노)피페리딘-1-일)피리딘-3-일)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸-N-((6-메틸-2-옥소-4-프로필-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)벤즈아미드의 합성
37% 내지 41%의 포르말린 수용액(0.078 g, 2.6 mmol)을 0℃에서 DCM(8 ㎖) 중의 5-(6-(4-아미노피페리딘-1-일)피리딘-3-일)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸-N-((6-메틸-2-옥소-4-프로필-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)벤즈아미드(0.315 g, 0.52 mmol)의 교반된 용액에 첨가하고 실온에서 10분 동안 교반하였다. 그 다음, NaBH(OAc)3(0.275 g, 1.3 mmol)을 첨가하고 2시간 동안 교반하였다. 완결 시, 반응물을 물로 급랭시켰다. MeOH(8 ㎖)를 첨가하고 층을 분리하고 DCM 중의 10% MeOH로 추출하고 에테르, 아세토니트릴 및 펜탄으로부터 재결정화하여 표제 화합물을 수득하였다(0.27 g, 82%).
분석 데이터: LCMS: 630.00 (M+1)+; HPLC: 98.21% (@ 210-370 nm) (Rt; 4.155; 방법: 컬럼: YMC ODS-A 150 mm x 4.6 mm x 5 μ; 이동상: A; 물 중의 0.05% TFA, B; 아세토니트릴 중의 0.05% TFA; 주입 부피: 10 ㎕, 컬럼 온도: 30℃; 유속: 1.4 ㎖/분; 구배: 8분 동안 5% B 내지 95% B, 1.5분 동안 유지, 9.51분 내지 12분 5% B); 1H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz) δ 11.46 (s, 1H), 8.37 (d, 1H, J=1.6 Hz), 8.13 (t, 1H, J=4.4 Hz), 7.76 (dd, 1H, J=2.4 & 9.2 Hz), 7.35 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 6.89 (d, 1H, J=8.8 Hz), 5.88 (s, 1H), 4.25-4.35 (m, 4H), 3.82 (d, 2H, J=10 Hz), 3.24 (m, 2H), 3.10-3.00 (m, 3H), 2.90-2.80 (m, 2H), 2.35 (m, 1H), 2.22 (s, 3H), 2.18 (s, 6H), 2.11 (s, 3H), 1.80 (m, 2H), 1.70-1.60 (m, 2H), 1.60-1.45 (m, 4H), 1.40-1.30 (m, 2H), 0.93 (t, 3H, J=7.2 Hz), 0.81 (t, 3H, J=6.8 Hz).
실시예 195: 3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-N-((5-플루오로-4-이소프로필-6-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(6-(피페라진-1-일)피리딘-3-일)벤즈아미드의 합성
Figure pat00293
단계 1: 5-플루오로-4-이소프로필-6-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-카보니트릴의 합성
셀렉트플루오르(Selectfluor)(620 mg, 1.75 mmol)를 MeCN(6 ㎖) 중의 6-메틸-2-옥소-4-(프로판-2-일)-1,2-다이하이드로피리딘-3-카보니트릴(225 mg, 1.277 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 50℃에서 3시간 동안 교반하였다. 23℃까지 냉각시킨 후, 반응 혼합물을 진공 중에서 농축하였다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(50% 내지 100% EtOAc-헵탄)로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(90 mg, 36%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 3.39 (m, 1H), 2.44 (d, J=3.1 Hz, 3H), 1.41 (dd, J=7.0, 3.1 Hz, 6H); LCMS E-S (M+H) = 195.2.
단계 2: 3-(아미노메틸)-5-플루오로-4-이소프로필-6-메틸피리딘-2(1H)-온의 합성
100 ㎖ 플라스크 내의 5-플루오로-4-이소프로필-6-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-카보니트릴(100 mg, 0.515 mmol)을 MeOH(6 ㎖)와 NH3(수성)(2 ㎖, 25%)의 혼합물에 용해시켰다. 촉매로서 레이니 니켈을 갖는 H-큐브를 이용하여 실온에서 환원을 3시간 내지 4시간 동안 수행하였다. (TLC에 의해 모니터링된) 반응의 완결 시, 반응물을 감압 하에 농축하여 회색 고체로서 표제 화합물을 수득하였다(90 mg, 90%). 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 4.04 (s, 2H), 3.22 (m, 1H), 2.24 (d, J=3.4 Hz, 3H), 1.32 (dd, J=7.0, 1.8 Hz, 6H); LCMS E-S (M+H) = 199.2.
단계 3: tert-부틸 4-(5-(3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-5-(메톡시카보닐)-4-메틸페닐)피리딘-2-일)피페라진-1-카복실레이트의 합성
스즈키 커플링 반응의 일반 절차에 따라 제조하였다.
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8.42 (dd, J=2.4 Hz, 1H), 7.70-7.74 (m, 2H), 7.41 (d, J=2.1 Hz, 1H), 6.72 (d, J=8.8 Hz, 1H), 3.97 (m, 2H), 3.93 (s, 3H), 3.58 (s, 8H), 3.34 (m, 2H), 3.11 (q, J=7.0 Hz, 2H), 3.02 (m, 1H), 2.53 (s, 3H), 1.64-1.76 (m, 4H), 1.50 (s, 9H), 0.91 (t, J=7.0 Hz, 3H). MS (ES) (M+H) = 539.5.
단계 4 tert-부틸 4-(5-(3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-5-(((5-플루오로-4-이소프로필-6-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-4-메틸페닐)피리딘-2-일)피페라진-1-카복실레이트의 합성
전술된 실시예들에 대한 방법과 유사한 방법에 따라 tert-부틸 4-(5-(3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-5-(메톡시카보닐)-4-메틸페닐)피리딘-2-일)피페라진-1-카복실레이트를 가수분해하여 상응하는 미정제 카복실산인 5-(6-(4-(tert-부톡시카보닐)피페라진-1-일)피리딘-3-일)-3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸벤조산을 발생시켰다. 그 다음, 이 산을 전술된 방법과 유사한 방법에 따라 3-(아미노메틸)-5-플루오로-4-이소프로필-6-메틸피리딘-2(1H)-온과 커플링시켰다. 역상 HPLC(0.1% 포름산을 함유하는 ACN-H2O)로 정제한 후 표제 화합물을 수득하였다. 1H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8.33 (d, J=2.6 Hz, 1H), 7.81 (dd, J=2.6, 8.8 Hz, 1H), 7.41 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.26 (d, J=2.0 Hz, 1H), 6.91 (d, J=8.8 Hz, 1H), 4.54 (s, 2H), 3.92 (m, 2H), 3.46-3.56 (m, 9H), 3.34 (m, 2H), 3.07-3.18 (m, 3H), 2.33 (s, 3H), 2.24 (d, J=3.2 Hz, 3H), 1.74-1.77 (m, 2H), 1.62-1.69 (m, 2H), 1.49 (s, 9H), 1.37 (dd, J=1.6, 6.8 Hz, 6H), 0.90 (t, J=6.8 Hz, 3H); MS (ES) (M+H) 705.7.
단계 5: 3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-N-((5-플루오로-4-이소프로필-6-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(6-(피페라진-1-일)피리딘-3-일)벤즈아미드 포르메이트의 합성
다이옥산(2 ㎖, 8.00 mmol) 중의 4 M HCl을 실온에서 에탄올(4.3 ㎖) 중의 tert-부틸 4-(5-(3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-5-(((5-플루오로-4-이소프로필-6-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)카바모일)-4-메틸페닐)피리딘-2-일)피페라진-1-카복실레이트(450 mg, 0.639 mmol) 용액에 첨가하였다. 2시간 후 LC/MS는 생성물 및 잔류 출발 물질 둘다를 보여주었다. 1,4-다이옥산(1.5 ㎖, 6.00 mmol) 중의 추가 4 M HCl을 첨가하고, 총 4시간 후 LC/MS는 반응이 완결되었다는 것을 보여주었다. 반응 혼합물을 건조될 때까지 농축하고 톨루엔-메탄올로 공비하여 미정제 하이드로클로라이드 염을 수득하였다(454 mg, 111%). 상기 미정제 하이드로클로라이드 염의 125 mg 샘플을 역상 HPLC/MS(ACN-H2O, 0.1% 포름산)로 정제하여 무색 유리질 필름으로서 3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-N-((5-플루오로-4-이소프로필-6-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(6-(피페라진-1-일)피리딘-3-일)벤즈아미드 포르메이트(65 mg)를 수득하였다. 1H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8.35-8.40 (m, 2H), 7.86 (dd, J=2.4, 8.8 Hz, 1H), 7.42 (d, J=1.6 Hz, 1H), 7.27 (d, J=1.6 Hz, 1H), 6.99 (d, J=8.8 Hz, 1H), 4.54 (s, 2H), 3.92 (m, 2H), 3.84 (m, 4H), 3.54 (m, 1H), 3.30-3.38 (m, 6H), 3.07-3.18 (m, 3H), 2.33 (s, 3H), 2.24 (d, J=2.8 Hz, 3H), 1.73-1.76 (m, 2H), 1.62-1.68 (m, 2H), 1.37 (d, J=6.8 Hz, 6H), 0.89 (t, J=6.8 Hz, 3H); MS (ES) (M+H) 605.6.
실시예 196: 3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-N-((5-플루오로-4-이소프로필-6-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(6-(4-메틸피페라진-1-일)피리딘-3-일)벤즈아미드의 합성
Figure pat00294
물 중의 35% 포름알데하이드 용액(0.196 ㎖, 2.495 mmol)을 0℃에서 메탄올(2 ㎖) 중의 3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-N-((5-플루오로-4-이소프로필-6-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(6-(피페라진-1-일)피리딘-3-일)벤즈아미드 하이드로클로라이드(160 mg, 0.25 mmol) 용액에 첨가하였다. 20분 동안 교반한 후, 나트륨 시아노보로하이드라이드(31.4 mg, 0.499 mmol)를 첨가하였다. 0℃에서 1.5시간 후, 반응물을 물(3 ㎖)로 급랭시키고 냉각조를 제거하고 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 그 다음, DCM(10 ㎖) 및 포화된 수성 NaHCO3(1 ㎖)을 첨가하였다. 유기층을 분리하고 수성층을 DCM(2 x 15 ㎖)으로 추출하고 모은 유기 추출물을 황산나트륨 상에서 건조하고 여과하고 농축하였다. 생성물을 역상 HPLC/MS(ACN-H2O, 0.5% 포름산)로 정제하여 무색 유리질 필름으로서 3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-N-((5-플루오로-4-이소프로필-6-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(6-(4-메틸피페라진-1-일)피리딘-3-일)벤즈아미드 포르메이트를 수득하였다(31 mg, 0.047 mmol, 19% 수율).
1H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8.42 (br. s, 1H), 8.38 (d, J=2.4 Hz, 1H), 7.85 (dd, J=2.8, 8.8 Hz, 1H), 7.42 (d, J=1.6 Hz, 1H), 7.27 (d, J=1.6 Hz, 1H), 6.98 (d, J=8.8 Hz, 1H), 4.54 (s, 2H), 3.91 (m, 2H), 3.82 (br. s, 4H), 3.54 (m, 1H), 3.31-3.38 (m, 2H), 3.05-3.21 (m, 7H), 2.81 (s, 3H), 2.33 (s, 3H), 2.24 (d, J=2.8 Hz, 3H), 1.73-1.76 (m, 2H), 1.58-1.68 (m, 2H), 1.37 (dd, J=1.6, 6.8 Hz, 6H), 0.89 (t, J=6.8 Hz, 3H); MS (ES) (M+H) 619.7.
실시예 197: 3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-N-((5-플루오로-4-이소프로필-6-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(6-(모르폴리노메틸)피리딘-3-일)벤즈아미드의 합성
Figure pat00295
단계 1: 메틸 3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸-5-(6-(모르폴리노메틸)피리딘-3-일)벤조에이트
화합물 197을 스즈키 커플링 반응의 일반 절차에 따라 제조하였다. 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8.77 (dd, J=0.9, 2.4 Hz, 1H), 7.84 (dd, J=2.4, 7.9 Hz, 1H), 7.78 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.49 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.45 (d, J=2.1 Hz, 1H), 3.98 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.75-3.78 (m, 4H), 3.72 (s, 2H), 3.34 (m, 2H), 3.13 (q, J=7.1 Hz, 2H), 3.03 (m, 1H), 2.56 (m, 7H), 1.64-1.76 (m, 4H), 0.92 (t, J=7.1 Hz, 3H). MS (ES) (M+H) = 454.5.
단계 2: 3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-N-((5-플루오로-4-이소프로필-6-메틸-2-옥소-1,2-다이하이드로피리딘-3-일)메틸)-2-메틸-5-(6-(모르폴리노메틸)피리딘-3-일)벤즈아미드 포르메이트
전술된 방법과 유사한 방법에 따라 메틸 3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-2-메틸-5-(6-(모르폴리노메틸)피리딘-3-일)벤조에이트를 가수분해하여 상응하는 카복실산인 3-(에틸(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노)-5-(6-(모르폴리노메틸)피리딘-3-일)벤조산을 발생시켰다. 그 다음, 이 산을 전술된 방법과 유사한 방법에 따라 3-(아미노메틸)-5-플루오로-4-이소프로필-6-메틸피리딘-2(1H)-온과 커플링시켰다. 역상 HPLC(0.1% 포름산을 함유하는 ACN-H2O)로 정제한 후 표제 화합물을 수득하였다. 1H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8.77 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.25 (br. s, 1H), 8.07 (dd, J=2.3, 8.2 Hz, 1H), 7.61 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.52 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.37 (d, J=1.8 Hz, 1H), 4.54, (s, 2H), 3.97 (s, 2H), 3.91 (m, 2H), 3.78 (m, 4H), 3.55 (m, 1H), 3.35 (m, 2H), 3.08-3.20 (m, 3H), 2.81 (m, 4H), 2.36 (s, 3H), 2.24 (d, J=2.9 Hz, 3H), 1.60-1.77 (m, 4H), 1.37 (dd, J=1.5, 7.0 Hz, 6H), 0.90 (t, J=6.9 Hz, 3H). MS (ES) (M+H) 620.6.
실시예 198: 바이오어세이 프로토콜 및 일반 방법
야생형 및 돌연변이체 PRC2 효소 어세이에 대한 프로토콜
일반 재료. S-아데노실메티오닌(SAM), S-아데노실호모시스테인(SAH), 비신(bicine), KCl, 트윈 20, 다이메틸설폭사이드(DMSO) 및 소 피부 젤라틴(BSG)을 가능한 가장 높은 순도로 시그마-알드리치(Sigma-Aldrich)로부터 구입하였다. 다이티오트레이톨(DTT)을 EMD로부터 구입하였다. 비활성이 80 Ci/mmol인 3H-SAM을 어메리칸 레디오레이블드 케미칼스(American Radiolabeled Chemicals)로부터 구입하였다. 384-웰 스트렙타비딘 플래쉬플레이트(Flashplate)를 퍼킨엘머(PerkinElmer)로부터 구입하였다.
기질. 21세기 바이오케미칼스(21st Century Biochemicals)는 C 말단 G(K-바이오틴) 연결기-친화성 태그 모티프 및 C 말단 아미드 캡을 사용하여 비변경된 라이신 27(H3K27me0) 또는 다이메틸화된 라이신 27(H3K27me2)을 함유하는 인간 히스톤 H3 잔기 21 내지 44를 대표하는 펩티드들을 합성하였다. 상기 펩티드들을 95% 초과의 순도까지 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)로 정제하고 액체 크로마토그래피 질량 분광측정(LC-MS)으로 확인하였다. 서열은 하기 나열되어 있다:
H3K27me0: ATKAARKSAPATGGVKKPHRYRPGGK(바이오틴)-아미드(서열번호 1); 및
H3K27me2: ATKAARK(me2)SAPATGGVKKPHRYRPGGK(바이오틴)-아미드(서열번호 2).
확립된 절차에 따라 닭 적혈구 올리고뉴클레오좀을 닭 혈액으로부터 정제하였다.
재조합 PRC2 복합체. 바큘로바이러스 발현 시스템을 사용하여 스포도프테라 프루기페르다(Spodoptera frugiperda)(sf9) 세포에서 함께 발현된 4-성분 효소 복합체로서 인간 PRC2 복합체를 정제하였다. 발현된 서브유닛은 야생형 EZH2(NM_004456) 또는 야생형 EZH2 구축물로부터 발생된 EZH2 Y641F, N, H, S 또는 C 돌연변이체, EED(NM_003797), Suz12(NM_015355) 및 RbAp48(NM_005610)이었다. EED 서브유닛은 sf9 세포 용해물로부터 전체 4-성분 복합체를 정제하는 데에 사용되는 N 말단 FLAG 태그를 함유하였다. 상기 복합체의 순도는 SDS-PAGE 및 아질런트 바이오분석기(Agilent Bioanalyzer) 분석에 의해 측정되었을 때 95 이상이었다. 소 혈청 알부민(BSA) 표준물에 대한 브래드포드(Bradford) 어세이를 이용하여 효소 저장액(stock) 농축물의 농도(일반적으로 0.3 내지 1.0 mg/㎖)를 측정하였다.
펩티드 기질에 대한 PRC2 효소 어세이에 대한 일반 절차. 사용 당일에 제조된, 20 mM 비신(pH = 7.6), 0.5 mM DTT, 0.005% BSG 및 0.002% 트윈 20으로 구성된 완충제에서 모든 어세이들을 수행하였다. 384-채널 피펫 헤드를 갖춘 플레이트메이트(Platemate) 2 X 3(써모((Thermo))을 이용하여 100% DMSO 중의 화합물(1 ㎕)을 폴리프로필렌 384-웰 V-바닥 플레이트(그레이너(Greiner)) 내로 스폿팅하였다. DMSO(1 ㎕)를 최대 신호 대조군용으로 컬럼 11, 12, 23 및 24의 A 내지 H열에 첨가하였고, PRC2의 공지된 생성물이면서 억제제인 SAH(1 ㎕)를 최소 신호 대조군용으로 컬럼 11, 12, 23 및 24의 I 내지 P열에 첨가하였다. 야생형 PRC2 효소 및 H3K27me0 펩티드, 또는 Y641 둘연변이체 효소들 중 임의의 효소 및 H3K27me2 펩티드를 함유하는 칵테일(40 ㎕)을 멀티드롭 콤비(Multidrop Combi)(써모)로 첨가하였다. 화합물을 25℃에서 PRC2와 함께 30분 동안 항온처리한 후, 비방사성 SAM과 3H-SAM의 혼합물을 함유하는 칵테일(10 ㎕)을 첨가하여 반응을 개시하였다(최종 부피 = 51 ㎕). 모든 경우, 최종 농도는 다음과 같았다: 야생형 또는 돌연변이체 PRC2 효소는 4 nM이었고, 최소 신호 대조군 웰에서의 SAH는 1 mM이었고, DMSO 농도는 1%이었다. 나머지 성분들의 최종 농도는 하기 표 2에 표시되어 있다. 비방사성 SAM(10 ㎕)을 600 μM의 최종 농도로 첨가하여 3H-SAM을 펩티드 기질 내로의 그의 도입이 더 이상 검출될 수 없는 수준까지 희석함으로써 어세이를 중단하였다. 그 다음, 384-웰 폴리프로필렌 플레이트 내의 50 ㎕ 반응물을 384-웰 플래쉬플레이트로 옮기고 바이오티닐화된 펩티드를 1시간 이상 동안 스트렙타비딘 표면에 결합시킨 후, 바이오텍(Biotek) ELx405 플레이트 세척제 중의 0.1% 트윈 20으로 3회 세척하였다. 그 다음, 상기 플레이트를 퍼킨엘머 탑카운트(TopCount) 플레이트 판독기 내에서 판독함으로써 분 당 붕해(dpm)(대안적으로 분 당 카운트(cpm)로서도 지칭됨)로서 측정된, 플래쉬플레이트 표면에 결합된 3H-표지된 펩티드의 양을 측정하였다.
Figure pat00296
올리고뉴클레오좀 기질에 대한 야생형 PRC2 효소 어세이에 대한 일반 절차. 사용 당일에 제조된, 20 mM 비신(pH = 7.6), 0.5 mM DTT, 0.005% BSG, 100 mM KCl 및 0.002% 트윈 20으로 구성된 완충제에서 모든 어세이들을 수행하였다. 384-채널 피펫 헤드를 갖춘 플레이트메이트 2 X 3(써모)을 이용하여 100% DMSO 중의 화합물(1 ㎕)을 폴리프로필렌 384-웰 V-바닥 플레이트(그레이너) 내로 스폿팅하였다. DMSO(1 ㎕)를 최대 신호 대조군용으로 컬럼 11, 12, 23 및 24의 A 내지 H열에 첨가하였고, PRC2의 공지된 생성물이면서 억제제인 SAH(1 ㎕)를 최소 신호 대조군용으로 컬럼 11, 12, 23 및 24의 I 내지 P열에 첨가하였다. 야생형 PRC2 효소 및 닭 적혈구 올리고뉴클레오좀을 함유하는 칵테일(40 ㎕)을 멀티드롭 콤비(써모)로 첨가하였다. 화합물을 25℃에서 PRC2와 함께 30분 동안 항온처리한 후, 비방사성 SAM과 3H-SAM의 혼합물을 함유하는 칵테일(10 ㎕)을 첨가하여 반응을 개시하였다(최종 부피 = 51 ㎕). 최종 농도는 다음과 같았다: 야생형 PRC2 효소는 4 nM이었고, 비방사성 SAM은 430 nM이었고, 3H-SAM은 120 nM이었고, 닭 적혈구 올리고뉴클레오좀은 120 nM이었고, 최소 신호 대조군 웰에서의 SAH는 1 mM이었고, DMSO 농도는 1%이었다. 비방사성 SAM(10 ㎕)을 600 μM의 최종 농도로 첨가하여 3H-SAM을 닭 적혈구 올리고뉴클레오좀 기질 내로의 그의 도입이 더 이상 검출될 수 없는 수준까지 희석함으로써 어세이를 중단하였다. 그 다음, 384-웰 폴리프로필렌 플레이트 내의 50 ㎕ 반응물을 384-웰 플래쉬플레이트로 옮기고 닭 적혈구 올리고뉴클레오좀을 상기 플레이트의 표면에 고정시킨 후, 상기 플레이트를 바이오텍 ELx405 플레이트 세척제 중의 0.1% 트윈 20으로 3회 세척하였다. 그 다음, 상기 플레이트를 퍼킨엘머 탑카운트 플레이트 판독기 내에서 판독함으로써 분 당 붕해(dpm)(대안적으로 분 당 카운트(cpm)로서도 지칭됨)로서 측정된, 플래쉬플레이트 표면에 결합된 3H-표지된 닭 적혈구 올리고뉴클레오좀의 양을 측정하였다.
% 억제 계산
Figure pat00297
상기 식에서, dpm은 분 당 붕해이고, cmpd는 어세이 웰에서의 신호이고, min 및 max는 각각의 최소 신호 대조군 및 최대 신호 대조군이다.
4-파라미터 IC 50 피트
Figure pat00298
상기 식에서, 상부 및 하부는 정상적으로 변동되지만, 3-파라미터 피트에서 각각 100 또는 0으로 고정될 수 있다. 힐 계수는 정상적으로 변동되지만, 3-파라미터 피트에서 1로 고정될 수도 있다. Y는% 억제이고, X는 화합물 농도이다.
펩티드 기질(예를 들면, EZH2 야생형 및 Y641F)에 대한 PRC2 효소 어세이에 대한 IC50 값은 하기 표 3에 제시되어 있다.
WSU-DLCL2 메틸화 어세이
WSU-DLCL2 현탁 세포를 DSMZ(독일 미생물 및 세포 배양물 수집 기관(German Collection of Microorganisms and Cell Cultures), 독일 브라운슈베이그 소재)로부터 구입하였다. RPMI/글루타맥스 배지, 페니실린-스트렙토마이신, 열 불활성화된 태아 소 혈청 및 D-PBS를 라이프 테크놀로지스(Life Technologies)(미국 뉴욕주 그랜드 아일랜드 소재)로부터 구입하였다. 추출 완충제 및 중화 완충제(5X)를 액티브 모티프(Active Motif)(미국 캘리포니아주 칼스바드 소재)로부터 구입하였다. 토끼 항-히스톤 H3 항체를 애브캄(Abcam)(미국 매사추세츠주 캠브리지 소재)으로부터 구입하였다. 토끼 항-H3K27me3 및 HRP-접합된 항-토끼-IgG를 셀 시그날링 테크놀로지(Cell Signaling Technology)(미국 매사추세츠주 댄버스 소재)로부터 구입하였다. TMB "초민감성" 기질을 바이오에프엑스 레이보레이토리스(BioFX Laboratories)(미국 매릴랜드주 오윙스 밀스 소재)로부터 공급받았다. IgG 무함유 소 혈청 알부민을 잭슨 이뮤노리서치(Jackson ImmunoResearch)(미국 펜실베니아주 웨스트 그로브 소재)로부터 구입하였다. 트윈을 갖는 PBS(10X PBST)를 케이피엘(KPL)(미국 매릴랜드주 게이더스버그 소재)로부터 구입하였다. 황산을 리카 케미칼(Ricca Chemical)(미국 텍사스주 알링톤 소재)로부터 구입하였다. 이뮬론(Immulon) ELISA 플레이트를 써모(미국 뉴욕주 로체스터 소재)로부터 구입하였다. V-바닥 세포 배양 플레이트를 코닝 인코포레이티드(Corning Inc.)(미국 뉴욕주 코닝 소재)로부터 구입하였다. V-바닥 폴리프로필렌 플레이트를 그레이너 바이오-원(Greiner Bio-One)(미국 노쓰캐롤라이나주 몬로 소재)으로부터 구입하였다.
WSU-DLCL2 현탁 세포를 생장 배지(10% 부피/부피 열 불활성화된 태아 소 혈청 및 100 유닛/㎖ 페니실린-스트렙토마이신으로 보충된 RPMI 1640)에서 유지하고 5% CO2 하에 37℃에서 배양하였다. 어세이 조건 하에, 세포를 5% CO2 하에 37℃에서 플레이트 진탕기 상의 어세이 배지(20% 부피/부피 열 불활성화된 태아 소 혈청 및 100 유닛/㎖ 페니실린-스트렙토마이신으로 보충된 RPMI 1640)에서 항온처리하였다.
어세이 배지 중의 WSU-DLCL2 세포를 웰 당 200 ㎕씩 96-웰 V-바닥 세포 배양 플레이트에 ㎖ 당 50,000개 세포의 농도로 시딩하였다. 96-웰 공급원 플레이트로부터의 화합물(1 ㎕)을 V-바닥 세포 플레이트에 직접적으로 첨가하였다. 플레이트를 5% CO2 하에 37℃에서 타이터-플레이트 진탕기 상에서 96시간 동안 항온처리하였다. 4일 동안의 항온처리 후, 플레이트를 241 x g에서 5분 동안 회전시키고 세포 펠렛을 교란시키지 않으면서 세포 플레이트의 각각의 웰로부터 배지를 조심스럽게 흡입하였다. 펠렛을 200 ㎕의 DPBS에 재현탁하고 플레이트를 241 x g에서 5분 동안 다시 회전시켰다. 상청액을 흡입하고 냉각시켰다(4℃). 추출 완충제(100 ㎕)를 웰마다 첨가하였다. 플레이트를 4℃에서 오비탈 진탕기 상에서 2시간 동안 항온처리하였다. 플레이트를 3427 x g에서 10분 동안 회전시켰다. 상청액(웰 당 80 ㎕)을 96-웰 V-바닥 폴리프로필렌 플레이트의 각각의 웰로 옮겼다. 중화 완충제(5X)(웰 당 20 ㎕)를, 상청액을 함유하는 V-바닥 폴리프로필렌 플레이트에 첨가하였다. 미정제 히스톤 제제(CHP)를 함유하는 V-바닥 폴리프로필렌 플레이트를 오비탈 진탕기 상에서 5분 동안 항온처리하였다. 미정제 히스톤 제제를, 100 ㎕의 코팅 완충제(1X PBS + BSA 0.05%(중량/부피))를 함유하는 이중 96-웰 ELISA 플레이트 내의 각각의 웰에 첨가하였다(웰 당 2 ㎕). 플레이트를 밀봉하고 4℃에서 밤새 항온처리하였다. 다음 날, 플레이트를 웰 당 300 ㎕의 1X PBST로 3회 세척하였다. 웰을 웰 당 300 ㎕의 ELISA 희석제(PBS(1X) BSA(2%(중량/부피)) 및 트윈 20(0.05%(부피/부피)))로 차단하였다. 플레이트를 1X PBST로 3회 세척하였다. 히스톤 H3 검출 플레이트의 경우, ELISA 희석제 중에 1:10,000으로 희석된 항-히스톤-H3 항체(애브캄, ab1791)를 웰 당 100 ㎕씩 첨가하였다. H3K27 트라이메틸화 검출 플레이트의 경우, ELISA 희석제 중에 1:2,000으로 희석된 항-H3K27me3을 웰 당 100 ㎕씩 첨가하였다. 플레이트를 실온에서 90분 동안 항온처리하였다. 플레이트를 웰 당 300 ㎕ 1X PBST로 3회 세척하였다. 히스톤 H3 검출의 경우, ELISA 희석제 중에 1:6,000으로 희석된 HRP-접합된 항-토끼 IgG 항체를 웰 당 100 ㎕씩 첨가하였다. H3K27me3 검출의 경우, ELISA 희석제 중에 1:4,000으로 희석된 HRP-접합된 항-토끼 IgG 항체를 웰 당 100 ㎕씩 첨가하였다. 플레이트를 실온에서 90분 동안 항온처리하였다. 플레이트를 웰 당 300 ㎕의 1X PBST로 4회 세척하였다. TMB 기질을 웰 당 100 ㎕씩 첨가하였다. 히스톤 H3 플레이트를 실온에서 5분 동안 항온처리하였다. H3K27me3 플레이트를 실온에서 10분 동안 항온처리하였다. 반응을 1 N 황산(웰 당 100 ㎕)으로 중단하였다. 각각의 플레이트에 대한 흡광도를 450 nm에서 판독하였다.
먼저, 각각의 웰에 대한 비를
Figure pat00299
로 측정하였다.
각각의 플레이트는 DMSO만으로 처리된 8개의 대조군 웰(최소 억제)뿐만 아니라 최대 억제에 대한 8개의 대조군 웰(배경 웰)도 포함하였다.
각각의 대조군 유형에 대한 비 값의 평균을 계산하고 이를 사용하여 플레이트에서 각각의 시험 웰에 대한% 억제를 측정하였다. 25 μM부터 시작하여 총 10개 시험 농도를 위해 시험 화합물을 DMSO로 연속 3배 희석하였다.% 억제를 측정하고, 화합물의 농도 당 이중 웰을 사용하여 IC50 곡선을 발생시켰다. 이 어세이에 대한 IC50 값은 하기 표 3에 제시되어 있다.
Figure pat00300
세포 증식 분석
WSU-DLCL2 현탁 세포를 DSMZ(독일 미생물 및 세포 배양물 수집 기관, 독일 브라운슈베이그 소재)로부터 구입하였다. RPMI/글루타맥스 배지, 페니실린-스트렙토마이신 및 열 불활성화된 태아 소 혈청을 라이프 테크놀로지스(미국 뉴욕주 그랜드 아일랜드 소재)로부터 구입하였다. V-바닥 폴리프로필렌 384-웰 플레이트를 그레이너 바이오-원(미국 노쓰캐롤라이나주 몬로 소재)으로부터 구입하였다. 세포 배양 384-웰 백색 불투명 플레이트를 퍼킨엘머(미국 매사추세츠주 왈쌈 소재)로부터 구입하였다. 세포-타이터 글로(Cell-Titer Glo)®를 프로메가 코포레이션(Promega Corporation)(미국 위스콘신주 매디슨 소재)으로부터 구입하였다. 스펙트라맥스(SpectraMax) M5 플레이트 판독기를 몰레큘라 디바이시스 엘엘씨(Molecular Devices LLC)(미국 캘리포니아주 서니베일 소재)로부터 구입하였다.
WSU-DLCL2 현탁 세포를 생장 배지(10%(부피/부피) 열 불활성화된 태아 소 혈청으로 보충된 RPMI 1640)에서 유지하고 5% CO2 하에 37℃에서 배양하였다. 어세이 조건 하에, 세포를 5% CO2 하에 37℃에서 어세이 배지(20%(부피/부피) 열 불활성화된 태아 소 혈청 및 100 유닛/㎖ 페니실린-스트렙토마이신으로 보충된 RPMI 1640)에서 항온처리하였다.
WSU-DLCL2 세포주의 증식에 대한 화합물의 효과를 평가하기 위해 기하급수적으로 생장하는 세포를 최종 부피 50 ㎕의 어세이 배지 중의 1250개 세포/㎖의 밀도로 384-웰 백색 불투명 플레이트에 플레이팅하였다. 10 mM에서 시작하여 DMSO로 삼중 9-점 3배 연속 희석을 수행함으로써 화합물 공급원 플레이트를 제조하였다(어세이에서 화합물의 최종 최고 농도는 20 μM이었고 DMSO는 0.2%이었다). 화합물 저장액 플레이트로부터의 100 nl 분취액을 세포 플레이트의 각각의 웰에 첨가하였다. 100% 억제 대조군은 200 nM 최종 농도의 스타우로스포린(staurosporine)으로 처리된 세포로 구성되었고, 0% 억제 대조군은 DMSO로 처리된 세포로 구성되었다. 화합물의 첨가 후, 어세이 플레이트를 37℃, 5% CO2 및 90% 초과의 상대습도에서 6일 동안 항온처리하였다. 세포 배양물에 존재하는 ATP를 정량하고 35 ㎕의 세포-타이터 글로® 시약을 세포 플레이트에 첨가함으로써 세포 생존능을 측정하였다. 발광도를 스펙트라맥스 M5에서 판독하였다. 표준화된 용량 반응 곡선의 4-파라미터 피트를 이용하여 세포 생존능을 50%까지 억제하는 농도를 측정하였다. 이 어세이에 대한 IC50 값도 하기 표 3에 제시되어 있다.
[표 3]
Figure pat00301
Figure pat00302
Figure pat00303
Figure pat00304
Figure pat00305
실시예 199: 최저 세포독성 농도(LCC)의 유도
세포 증식이 분열 전의 세포 수에 비해 상대적으로 분열 후 세포 수의 2배 증가를 야기하는 세포 분열을 통해 진행된다는 것은 잘 확립되어 있다. 충분한 영양분 및 다른 필요한 인자들이 사용될 수 있는 한, 고정된 세트의 환경 조건(예를 들면, pH, 이온 강도, 온도, 세포 밀도, 단백질 및 성장인자의 배지 함량 등) 하에 세포는 하기 수학식 A.1에 따른 연속 2배 증가(즉, 분열)에 의해 증식할 것이다.
[수학식 A.1]
Figure pat00306
상기 식에서,
Nt는 관찰 기간의 개시 후 일정 시점(t)에서의 세포 수이고, N0은 관찰 기간의 개시 시점에서의 세포 수이고, t는 관찰 기간의 개시 후 시간이고, tD는 2배 증가 시간으로서도 지칭되는, 세포 2배 증가에 필요한 시간 간격이다. 수학식 A.1은 기수 e에서 등식 0.693 = ln(2)을 이용하여 보다 편리한 형태의 지수 방정식으로 전환될 수 있다:
[수학식 A.2]
Figure pat00307
세포 증식(kp)에 대한 속도 상수는 다음과 같이 2배 증가 시간과 역비례한다:
[수학식 A.3]
Figure pat00308
수학식 A.2와 수학식 A.3의 조합은 하기 수학식 A.4를 발생시킨다:
[수학식 A.4]
Figure pat00309
따라서, 수학식 A.4에 따라, 세포 수는 대수기 생장으로서 지칭되는 세포 생장의 초기 동안 시간에 따라 기하급수적으로 증가할 것으로 예측된다. 지수 방정식, 예컨대, 수학식 A.4는 각각의 변의 자연 대수를 이용함으로써 일차 방정식으로 전환될 수 있다.
[수학식 A.5]
Figure pat00310
따라서, 시간의 함수로서 작도된 ln(Nt)의 도표는 도 1b에 나타낸 바와 같이 kp와 동등한 기울기 및 ln(N0)와 동등한 y-절편을 갖는 상승하는 직선을 발생시킬 것으로 예측된다.
환경 조건의 변화는 증식 속도 상수 kp에서의 변화로서 정량될 수 있는 세포 증식 속도에서의 변화를 야기할 수 있다. 증식 속도에서의 변화를 야기할 수 있는 조건들 중에는 관찰 기간의 개시 시점(즉, t = 0)에서 항증식 화합물의 시스템에의 도입이다. 항증식 화합물이 세포 증식에 즉각적인 영향을 미치는 경우, 시간의 함수로서 작도된 ln(Nt)의 도표는 화합물의 증가하는 농도에서 감소하는 kp 값을 가지면서 모든 화합물 농도에서 계속 선형일 것으로 예측된다.
항증식 작용의 기전에 따라, 몇몇 화합물들은 세포 증식에서의 변화에 즉각적으로 영향을 미칠 수 없다. 대신에, 화합물의 영향이 실현되기 전에 잠복기가 존재할 수 있다. 이러한 경우, 시간의 함수로서 작도된 ln(Nt)의 도표는 이상(biphasic) 도표로 보일 것이고, 화합물의 영향이 시작되는 시점은 상 사이의 분열점으로서 확인될 수 있다(도 2). 증식에 대한 화합물의 영향이 즉각적인지 아니면 잠복기 후에 시작되는지와 관계없이, 각각의 화합물 농도에서 증식에 대한 속도 상수는 화합물 영향이 시작되는 시점부터 실험 관찰 기간의 종결 시점까지 ln(Nt) 대 시간 곡선의 기울기에 의해 가장 잘 정의된다.
생장하는 세포에 적용된 화합물은 2종의 일반적인 방식 중 하나, 즉 추가 세포 분열의 억제(세포증식억제) 또는 세포 사멸(세포독성)로 관찰된 증식에 영항을 미칠 수 있다. 화합물이 세포증식억제성을 나타내는 경우, 증가하는 농도의 화합물은 추가 세포 분열이 없을 때까지 kp의 값을 감소시킬 것이다. 이 시점에서, 세포 생장의 속도 및 이로 인한 kp의 값은 0일 것이다. 다른 한편으로, 화합물이 세포독성을 나타내는 경우, kp의 값은 하기 2종의 속도 상수로 구성될 것이다: 화합물의 존재 하에 계속된 세포 생장에 대한 속도 상수(kg) 및 화합물에 의한 세포 사멸에 대한 속도 상수(kd). 따라서, 화합물의 고정된 농도에서 증식에 대한 전체 속도 상수는 이들 대립하는 속도 상수들의 절대 값 사이의 차이일 것이다.
[수학식 A.6]
Figure pat00311
세포 생장 속도가 세포 사멸 속도를 초과하는 화합물 농도에서, kp의 값은 양의 값을 가질 것이다(즉, kp>0). 세포 생장의 속도가 세포 사멸의 속도보다 더 낮은 화합물 농도에서, kp의 값은 음의 값을 가질 것이고(즉, kp<0), 세포 수는 시간에 따라 감소될 것인데, 이것은 강력한 세포독성을 표시한다. kg가 kd와 정확히 일치하는 경우, 전체 증식 속도 상수 kp는 0의 값을 가질 것이다. 따라서, 본 발명자들은 최저 세포독성 농도(LCC)를 0과 동등한 kp 값을 야기하는 화합물의 농도로서 정의할 수 있는데, 이는 이 농도를 초과하는 임의의 농도가 명확히 관찰될 수 있는 세포독성을 야기할 것이기 때문이다. 주의: LCC 미만의 농도에서 잔류 세포 증식의 속도보다 더 낮은 속도로 일어나는 세포 사멸이 존재할 가능성이 있다. 여기서 치료는 화합물 작용의 생물학적 세부사항을 정의하기 위한 것이 아니다. 오히려, 여기서 목적은 세포 사멸 속도가 새로운 세포 생장을 초과하는 화합물의 농도를 객관적으로 정량하기 위해 실용적인 파라미터를 정의하기 위한 것일 뿐이다. 실제로, LCC는 세포독성 농도 그 자체보다는 오히려 중단점 또는 임계 농도(이 농도 초과의 농도에서 실제 세포독성이 관찰됨)를 나타낸다. 이러한 면에서, LCC는 다른 물리적 중단점 지표(metrics), 예컨대, 지질, 세제 또는 다른 계면활성제 종의 농도를 정의하는 데에 사용되는 임계 마이셀 농도(CMC)(이 농도 초과의 농도에서 모든 분자들이 마이셀 구조 내로 도입됨)와 유사한 것으로 간주될 수 있다.
전통적으로, 세포 생장에 대한 항증식 화합물의 영향은 가장 통상적으로 세포 증식 속도를 화합물의 부재(즉, 비히클 또는 용매 대조군 샘플의 경우; 도 2) 하에서 관찰된 세포 증식 속도의 절반까지 감소시키는 화합물 농도로서 정의되는 IC50 값에 의해 정량된다. 그러나, IC50은 연구자가 세포증식억제성 화합물과 세포독성 화합물을 구별하는 것을 가능하게 하지 않는다. 대조적으로, LCC는 연구자가 용이하게 이러한 구별을 수행하고 강력한 세포독성 거동으로의 전이가 일어나는 농도를 추가로 정량할 수 있게 한다.
관찰 시간의 시간대(window)를 영향의 개시 시점(상기 및 도 2에 정의된 바와 같음)과 실험의 종결 시점 사이로 한정하는 경우, 데이터는 시간의 함수로서 ln(Nt)로서 작도될 때 일반적으로 일차 방정식에 잘 피팅될 것이다(상기 참조). 이 유형의 피팅으로부터, kp 값을 시험된 화합물의 각각의 농도에서 측정할 수 있다. 화합물 농도([I])의 함수로서 재작도된 kp 값의 도표는 [I] = 0에서 kmax의 최대 값(비히클 또는 용매 대조군 샘플에 의해 정의됨) 및 무한 화합물 농도에서 kmin의 최소 값을 갖는 하강하는 등온선의 형태를 가질 것이다(도 3).
[수학식 A.7]
Figure pat00312
상기 식에서,
Imid는 kmax 값과 kmin 값 사이의 중간에 있는 kp 값을 발생시키는 화합물의 농도이다(완전히 순수하게 세포증식억제성을 나타내는 화합물의 경우를 제외하고 Imid 값은 IC50과 동일하지 않다는 것을 인식한다). 따라서, 재작도 데이터를 수학식 A.7에 피팅하여 kmax, kmin 및 Imid의 추정치를 제공한다. 화합물이 (본원에서 정의된 바와 같이) 세포증식억제성을 나타내는 경우, kmin 값은 0보다 더 낮을 수 없다. 세포독성 화합물의 경우, kmin은 0보다 더 낮을 것이고 kmin의 절대 값은 세포 사멸에서의 화합물의 효능에 비례할 것이다.
또한, 수학식 A.7로부터 유도된 피팅된 값을 사용하여 LCC의 값을 측정할 수 있다. 정의하자면, [I] = LCC일 때, kp = 0이다. 따라서, 이들 조건 하에 수학식 A.7은 수학식 A.8이 된다:
[수학식 A.8]
Figure pat00313
수학식 A.8의 대수적 재배열은 LCC에 대한 수학식을 발생시킨다:
[수학식 A.9]
Figure pat00314
이 분석은 비선형 곡선 피팅 소프트웨어를 이용하여 실시할 정도로 단순하고 약물 전달 및 개발 과정 전체에서 화합물 활성의 세포 어세이 동안 적용될 수 있다. 이 방식에서, LCC는 화합물 SAR(구조-활성 관계)의 평가를 위한 귀중한 지표를 제공할 수 있다.
하기 표 4는 WSU-DLCL2 세포에 대한 본 발명의 일부 화합물들에 대한 LCC 및 IC50 데이터를 제공한다:
Figure pat00315
실시예 200: 생체내 어세이
마우스
암컷 폭스 체이스(Fox Chase) SCID® 마우스(CB17/Icr-Prkdcscid/IcrIcoCrl, 찰스 리버 레이보레이토리스(Charles River Laboratories)) 또는 무흉선 누드 마우스(Crl:NU(Ncr)-Foxn1nu, 찰스 리버 레이보레이토리스)는 8주령이었고 연구 D1일에 16.0 내지 21.1 g 범위 내의 체중(BW)을 가졌다. 상기 동물들에게 물(역삼투 1 ppm Cl) 및 (18.0% 미정제 단백질, 5.0% 미정제 지방 및 5.0% 미정제 섬유로 구성된) NIH 31 변경 및 방사선조사 실험식(Modified and Irradiated Lab Diet)®을 무제한적으로 공급하였다. 20℃ 내지 22℃(68℉ 내지 72℉) 및 40% 내지 60% 습도에서 12시간 명주기를 이용하여 정적 미세절연체 내의 방사선조사 엔리흐-오콥스(Enrich-o'cobs)™ 깔개(bedding) 상에서 마우스를 사육하였다. 모든 절차는 구속, 축산, 수술 절차, 사료 및 유체 조절, 및 수의학적 보호에 대한 실험 동물의 보호 및 사용에 대한 지침서의 권장을 따랐다.
종양 세포 배양
인간 림프종 세포주를 상이한 공급원(ATCC, DSMZ)으로부터 입수하였고, 예를 들면, WSU-DLCL2를 DSMZ로부터 입수하였다. 상기 세포주를 100 유닛/㎖ 페니실린 G 나트륨 염, 100 g/㎖ 스트렙토마이신 및 25 g/㎖ 젠타미신을 함유하는 RPMI-1640 배지에서 현탁 배양액으로서 피드먼트(Piedmont)에서 유지하였다. 상기 배지를 10% 태아 소 혈청 및 2 mM 글루타민으로 보충하였다. 세포를 5% CO2 및 95% 공기의 대기 하에 37℃에서 가습 항온처리기 내의 조직 배양 플라스크에서 배양하였다.
생체내 종양 이식
중간 대수기 생장 동안 인간 림프종 세포주, 예를 들면, WSU-DLCL2 세포를 수거하고 50% 매트리겔(Matrigel)™(비디 바이오사이언시스(BD Biosciences))을 갖는 PBS에 재현탁하였다. 각각의 마우스는 우측 옆구리에서 1 x 107개 세포(0.2 ㎖ 세포 현탁액)를 피하로 제공받았다. 종양을 2 차원에서 칼리퍼스로 측정하여 원하는 80 내지 120 ㎣ 범위에 도달된 평균 부피로서 성장을 모니터링하였다. 종양 크기(㎣)를 하기 수학식으로부터 계산하였다:
Figure pat00316
상기 식에서, w는 종양의 폭(㎜)이고 l은 종양의 길이(㎜)이다. 1 mg이 1 ㎣의 종양 부피와 동등하다고 가정하여 종양 중량을 추정할 수 있다. 10일 내지 30일 후, 108 내지 126 ㎣의 종양을 갖는 마우스를 117 내지 119 ㎣의 평균 종양 부피를 갖는 치료군으로 분류하였다.
시험 제품
시험 화합물을 실온에서 저장하고 광으로부터 보호하였다. 각각의 치료일에, 분말을 탈이온수 중의 0.5% 나트륨 카복시메틸셀룰로스(NaCMC) 및 0.1% 트윈® 80에 현탁함으로써 새로운 화합물 제제(예를 들면, 화합물 44 트라이-HCl 염 또는 화합물 87 트라이-HCl 염의 제제)를 제조하였다. 화합물 141(자유 염기)을 멸균 식염수에 용해시키고 pH를 HCl로 매일 새롭게 4.5로 조절하였다. 탈이온수 또는 멸균 식염수(pH 4.5) 중의 비히클, 0.5% NaCMC 및 0.1% 트윈® 80을 사용하여 동일한 스케쥴로 대조군을 치료하였다. 투여 전, 제제를 4℃에서 광으로부터 떨어진 장소에 저장하였다. 달리 특정되어 있지 않은 한, 본 실험에서 언급되고 시험된 화합물들은 본 단락에서 언급된 그들의 특정 염 형태로 존재하였다.
치료 계획
경구 위관영양(화합물 44 또는 87)을 이용하거나 복강내 경로(화합물 141)를 통한 주사를 이용하여 마우스를 다양한 기간 동안 TID(8시간마다 1일 3회), BID(12시간마다 1일 2회) 또는 QD(1일 1회) 스케쥴로 12.5 내지 600 mg/kg의 화합물 용량으로 치료하였다. 각각의 용량은 0.2 ㎖/20 g 마우스(10 ㎖/kg)의 부피로 전달되었고 개별 동물의 마지막 기록된 체중에 대해 조절되었다. 최대 치료 기간은 28일이었다.
중간 종양 부피(MTV) 및 종양 성장 억제(TGI) 분석
마지막 치료일에 치료 효능을 측정하였다. 마지막 날에 평가될 수 있는 MTV(n), 즉 동물의 수(n)에 대한 중간 종양 부피를 각각의 군에 대해 측정하였다.% 종양 성장 억제(%TGI)는 여러 방식으로 정의될 수 있다. 먼저, 지정된 대조군의 MTV(n)와 약물 치료군의 MTV(n) 사이의 차이는 대조군의 MTV(n)의 백분율로서 표현된다:
Figure pat00317
%TGI를 계산하는 또 다른 방식은 n이 마지막 치료일일 때 1일부터 n일까지 종양 크기의 변화를 고려하는 것이다.
Figure pat00318
Figure pat00319
독성
1일째 날부터 5일째 날까지 동물들의 체중을 매일 측정한 후, 연구 완결 시까지 주 당 2회 측정하였다. 문서화될 수 있는 임의의 불리한 치료 관련 부작용의 명시적 징후에 대해 마우스를 빈번하게 검사하였다. 최대 허용 용량(MTD)에 대한 허용가능한 독성은 시험 동안 20% 미만의 군 평균 BW 손실 및 TR 사망으로 인한 10% 이하의 사망률로서 정의되었다. 사망이 임상 징후 및/또는 부검에 의해 입증된 치료 부작용에 기인할 수 있거나 투약 기간 동안 비공지된 원인으로 인한 것인 경우 상기 사망은 TR로서 분류되었다. 사망이 치료 부작용과 관련되지 않는다는 증거가 존재하는 경우 상기 사망은 NTR로서 분류되었다. 투약 기간 동안의 NTR 사망은 전형적으로 (우연한 또는 인간 오류로 인한) NTRa 또는 (부검에 의해 확인된 침습 및/또는 전이에 의한 종양 퍼짐으로 인한) NTRm으로서 분류될 것이다. 투약 기간 동안 비공지된 원인으로 인해 사망하는 경구 치료된 동물들은 군 성능이 TR 분류 및 부검을 뒷받침하지 않는 경우 투약 오류(실현가능하지 않음)를 배제하기 위해 NTRu로서 분류될 수 있다.
샘플링
연구 동안 7일째 날 또는 28일째 날에, 마우스를 미리 특정된 방식으로 샘플링하여 종양에서의 표적 억제를 평가하였다. RNAse 부재 조건 하에 특정된 마우스로부터 종양을 수거하고 이등분하였다. 각각의 동물로부터의 동결된 종양 조직을 액체 N2에서 급속 동결시키고 막자사발과 막자로 분쇄하였다.
통계 및 그래픽 분석
윈도우용 프리즘 3.03(그래프패드)을 사용하여 모든 통계 및 그래픽 분석을 수행하였다. 전체 치료 기간 과정에 걸쳐 대조군과 치료군 사이의 통계적 유의성을 검정하기 위해, 반복 측정 ANOVA 검정에 이어서 던넷 다중 비교 사후 검정 또는 2원 ANOVA 검정을 이용하였다. 프리즘은 결과를 P > 0.05에서 비유의한(ns) 결과, 0.01 < P < 0.05에서 유의한 결과(부호 "*"로 표시됨), 0.001 < P < 0.01에서 매우 유의한 결과("**") 및 P < 0.001에서 극도로 유의한 결과 ("***")로서 보고한다.
히스톤 추출
히스톤 단리를 위해, 60 내지 90 mg의 종양 조직을 1.5 ㎖의 핵 추출 완충제(10 mM 트라이스-HCl, 10 mM MgCl2, 25 mM KCl, 1% 트라이톤 X-100, 8.6% 수크로스 및 로슈 프로테아제 억제제 정제 1836145)에서 균질화하고 얼음 상에서 5분 동안 항온처리하였다. 4℃에서 600 g로 5분 동안 원심분리하여 핵을 수집하고 PBS로 1회 세척하였다. 상청액을 제거하고 15분마다 볼텍싱하면서 0.4 N의 냉각된 황산을 사용하여 히스톤을 1시간 동안 추출하였다. 4℃에서 10000 g로 10분 동안 원심분리하여 추출물을 정화하고 10배 부피의 빙냉 아세톤을 함유하는 새로운 미세원심분리기 튜브로 옮겼다. 히스톤을 -20℃에서 2시간 동안 내지 밤새 침전시키고 10000 g로 10분 동안 원심분리하여 펠렛화하고 물에 재현탁하였다.
ELISA
히스톤을 코팅 완충제(PBS + 0.05% BSA)에서 동등한 농도로 제조하여 0.5 ng/㎕의 샘플을 발생시키고, 100 ㎕의 샘플 또는 표준물을 2개의 96-웰 ELISA 플레이트(써모 랩시스템스(Thermo Labsystems), 이뮬론 4HBX #3885)에 이중으로 첨가하였다. 플레이트를 밀봉하고 4℃에서 밤새 항온처리하였다. 다음 날, 플레이트를 바이오텍 플레이트 세척제 상에서 300 ㎕/웰 PBST(PBS + 0.05% 트윈 20; 10X PBST, KPL #51-14-02)로 3회 세척하였다. 플레이트를 300 ㎕/웰의 희석제(PBS + 2% BSA + 0.05% 트윈 20)로 차단하고 실온에서 2시간 동안 항온처리하고 PBST로 3회 세척하였다. 모든 항체들을 희석제로 희석하였다. 100 ㎕/웰의 항-H3K27me3(CST #9733, 50% 글리세롤 저장액 1:1,000) 또는 항-총 H3(애브캄 ab1791, 50% 글리세롤 1:10,000)을 각각의 플레이트에 첨가하였다. 플레이트를 실온에서 90분 동안 항온처리하고 PBST로 3회 세척하였다. 100 ㎕/웰의 항-Rb-IgG-HRP(셀 시그날링 테크놀로지(Cell Signaling Technology), 7074)를 H3K27Me3 플레이트에 1:2,000으로 첨가하고 H3 플레이트에 1:6,000으로 첨가하고 실온에서 90분 동안 항온처리하였다. 플레이트를 PBST로 4회 세척하였다. 검출을 위해, 100 ㎕/웰의 TMB 기질(바이오에프엑스 레이보레이토리스(BioFx Laboratories), #TMBS)을 첨가하고 플레이트를 실온에서 암실 내에서 5분 동안 항온처리하였다. 반응을 100 ㎕/웰의 1 N H2SO4으로 중단시켰다. 450 nm에서의 흡광도를 스펙타맥스 M5 마이크로플레이트 판독기 상에서 판독하였다.
결과:
화합물 87을 사용한 7일 PD 연구
화합물 87이 생체내 종양에서 H3K27me3 히스톤 표시를 조절할 수 있는지를 시험하기 위해, WSU-DLCL2 이종이식편 보유 마우스를 7일 동안 200 mg/kg BID 또는 400 mg/kg QD의 화합물 87 또는 비히클(BID 스케쥴)로 치료하였다. 군 당 4마리의 동물들이 있었다. 마지막 투약으로부터 3시간 후 동물들을 안락사시키고, 종양을 전술된 바와 같이 동결된 상태로 보존하였다. 히스톤 추출 후, 트라이메틸화된 상태의 히스톤 H3K27(H3K27me3) 또는 총 히스톤 H3에 대해 유도된 항체를 사용하여 샘플을 ELISA 어세이에 적용하였다. 이들 데이터에 기초하여, 전체적으로 메틸화된 H3K27 대 총 H3K27의 비를 계산하였다. 도 4는 ELISA에 의한 측정 시 모든 군들에 대한 평균 전체 메틸화 비를 보여주고 비히클에 비해 대략 62.5%(400 mg/kg QD x 7) 및 37.5%(200 mg/kg BID x 7)의 표적 억제를 표시한다.
WSU-DLCL2 이종이식편 모델에서 화합물 141을 사용한 28일 효능 연구
화합물 141이 생체내에서 종양 성장 억제를 유도할 수 있는지를 시험하기 위해, WSU-DLCL2 이종이식편 종양 보유 마우스를 복강내 주사를 통해 28일 동안 12.5, 25 또는 50 mg/kg QD의 화합물 141로 치료하였다. 종양 부피 및 체중을 주 당 2회 측정하였다. 화합물 141은 최소한의 체중 손실을 야기하면서 모든 용량에서 잘 허용되었다. 병행 마우스 군(군 당 n=4)을 7일 동안 동일한 용량으로 치료하고 종양 샘플링 및 표적 억제의 평가를 위해 7일째 날 마지막 투약으로부터 3시간 후 마우스를 안락사시켰다. 도 5는 총 H3으로 표준화된 H3K27me3의 전체 메틸화를 측정하는 ELISA의 결과를 보여준다. 비히클에 비해 39% 내지 67%의 용량 의존적 표적 억제를 관찰할 수 있다.
도 6은 비히클 또는 화합물 141로 치료받은 군들에 대한 28일의 치료 과정에 걸친 종양 성장을 보여준다.
비히클 치료군 대 비치료군에서 종양 성장이 더 느렸을 때 복강내 경로를 통해 제공된 비히클의 투여 효과를 관찰할 수 있었다. 화합물 141(50 mg/kg QD x 28)의 가장 높은 용량 군만이 비히클 치료군에 비해 종양 성장 억제를 보여주었다(1일째 날로부터 계산된 33%, 7일째 날로부터 계산된 43%). 반복 측정 ANOVA에 이어서 던넷 사후 검정을 이용하였을 때 종양 성장은 비히클에 비해 통계적으로 유의하지 않았지만, 말기 종양 크기는 비히클에 비해 50 mg/kg DQ 군에서 유의하게 더 작았다(2원 ANOVA, 본페로니(Bonferroni) 사후 검정, p < 0.0001).
WSU-DLCL2 이종이식편 모델에서 증가하는 용량의 화합물 44를 사용한 효능 연구
화합물 44가 생체내에서 항종양 효과를 유도할 수 있는지를 시험하기 위해, WSU-DLCL2 이종이식편 종양 보유 마우스를 28일 동안 37.5, 75 또는 150 mg/kg TID의 화합물 44로 치료하였다. 실험의 효능 아암(arm)에 대한 군 당 12마리의 마우스가 존재하였다. 7일 후 표적 억제를 평가하기 위해 병행 군(군 당 n=6)을 동일한 용량 및 스케쥴로 7일 동안 투약하였다. 도 7은 비히클 치료군 및 화합물 44 치료군에 대한 28일의 치료 과정에 걸친 종양 성장을 보여준다. 명확한 용량 의존적 종양 성장 억제를 관찰할 수 있었다. 반복 측정 ANOVA 및 던넷 사후 검정에 의한 확인 시, 가장 높은 용량 군만이 비히클과 통계적으로 유의하게 상이하였다. 가장 높은 용량 군에 대한 종양 성장 억제는 비히클에 비해 58%(1일째 날) 또는 73%(7일째 날)이었다.
7일의 투약 후(병행 PD 군) 및 효능 군의 경우 28일째 날 연구의 말기(상기 두 군에 대해 마지막 투약으로부터 3시간 후)에 수집된 종양으로부터 히스톤을 추출하였다. 도 8은 H3K27me3 메틸 표시가 용량 의존적 방식으로 치료에 의해 조절되고 가장 높은 용량 군(150 mg/kg TID)의 경우 7일째 날에 비해 28일째 날에 통계적으로 유의한 보다 우수한 표적 억제가 존재한다는 것을 보여준다.
상이한 투약 스케쥴로 화합물 44를 사용한 효능 연구
화합물 44가 TID를 제외한 다른 투약 스케쥴에서 종양 성장 억제를 유발하는지를 평가하기 위해, TID, BID 및 QD 스케쥴이 나란히 비교되는 WSU-DLCL2 이종이식편 효능 연구를 수행하였다. 군 당 12마리의 동물들이 존재하였고, 마우스를 28일 동안 치료하였다. 도 9는 비히클 치료군 및 화합물 44 치료군에 대한 28일의 치료 과정에 걸친 종양 성장을 보여준다. 모든 용량 및 스케쥴에서 종양 성장 억제를 달성할 수 있었다(하기 표 5 참조: WSU-DLXC2 이종이식편에서 화합물 44의 상이한 투약 스케쥴에 의해 유도된 종양 성장 억제의 요약). 150 mg/kg TID 및 225 mg/kg BID만이 반복 측정 ANOVA 및 던넷 사후 검정에 의한 확인 시 비히클과 통계적으로 유의하게 상이하였지만, 화합물 44 치료군에서 모든 말기 종양 크기는 2원 ANOVA 및 본페로니 사후 검정에 의한 확인 시 비히클과 통계적으로 유의하게 상이하였다(p < 0.0001).
Figure pat00320
28일째 날, 마우스를 안락사시키고 표적 억제를 평가하기 위해 마지막 투약으로부터 3시간 후 종양을 수집하였다. 도 10은 화합물 44를 사용한 치료가 모든 용량 및 스케쥴에서 유사한 정도의 표적 억제를 유도하였다는 것을 보여준다.
실시예 201: KARPAS-422 인간 미만성 거대 B 세포 림프종 마우스 이종이식편 모델에 대한 화합물 44의 항암 효과
인간 미만성 거대 B 세포 림프종 이종이식편 모델인 KARPAS-422 마우스 이종이식편 모델에서 화합물 44(HCl 염 형태)의 항암 활성을 시험하였다. 달리 특정되어 있지 않은 한, 본 실험에서 언급되고 시험된 화합물 44는 그의 트라이-HCl 염 형태이었다. 평균 종양 부피(TV)가 대략 150 mm3에 도달한 KARPAS-422 종양을 갖는 45마리의 암컷 CAnN.Cg-Foxn1nu/CrlCrlj 마우스(찰스 리버 레이보레이토리스(Charles River Laboratories), 일본 소재)들을 그들의 TV에 기초하여 선별하고 5개의 군으로 무작위적으로 나누었다. 화합물 44(80.5, 161, 322 및 644 mg/kg) 또는 비히클의 경구 투여를 1일째 날에 시작하였다. 화합물 44를 1일째 날 및 29일째 날에 1일 당 1회 제공하고 2일째 날부터 28일째 날까지 매일 1일 당 2회 제공하였다. 투여 부피(0.1 ㎖/10 g 체중)를 투여 전에 체중으로부터 계산하였다. TV 및 체중을 주 당 2회 측정하였다. 본 실험에 대한 디자인은 표 6에 나타나 있다.
Figure pat00321
장형 타원체의 부피에 대한 식 (LxW2)/2(이때, L 및 W는 각각 직교 길이 및 폭 측정치(mm)임)으로 칼리퍼 측정치로부터 TV를 계산한다.
데이터는 평균±표준편차(SD)로서 표현된다. 비히클 치료군과 화합물 44 치료군 사이의 TV의 차이를 반복 측정 변량 분석(ANOVA)에 이어서 던넷형 다중 비교 검정으로 분석하였다. P < 0.05(양측)의 값은 통계적으로 유의한 것으로 간주되었다. 프리즘 5 소프트웨어 팩키지 버전 5.04(그래프패드 소프트웨어 인코포레이티드(GraphPad Software, Inc.), 미국 캘리포니아주 소재)를 이용하여 통계적 분석을 수행하였다.
치료 기간 동안, 644 mg/kg의 용량이 9마리의 마우스들 중 2마리의 마우스의 사망을 야기하였다. 본 연구에서 최대 허용 용량은 사망률 또는 체중 손실이 기록되지 않은 용량인 322 mg/kg으로서 측정되었다(도 11 및 표 7 참조).
화합물 44는 29일째 날에 모든 용량에서 투여량 의존적 방식으로 인간 미만성 거대 B 세포 림프종 KARPAS-422 이종이식편에 대한 항종양 효과를 보였다(도 12). 종양 성장 억제 효과를 80.5 mg/kg에서 관찰하였다. 종양 퇴행을 161 및 322 mg/kg에서 관찰하였다.
Figure pat00322
참고도입
본원에서 언급된 특허 문헌 및 과학 논문 각각의 전체 개시내용은 모든 목적을 위해 참고로 도입된다.
균등물
본 발명은 이의 사상 또는 본질적인 특성을 벗어나지 않으면서 다른 특정 형태로 구현될 수 있다. 따라서, 상기 실시양태들은 본원에 기재된 본 발명을 한정하기 위한 것이기보다는 오히려 모든 면에서 예시하기 위한 것으로 간주되어야 한다. 따라서, 본 발명의 범위는 상기 설명에 의해 표시되기보다는 오히려 첨부된 특허청구범위에 의해 표시되고, 특허청구범위의 균등 의미 및 범위 내에 있는 모든 변화들이 특허청구범위에 포함되어야 한다.
SEQUENCE LISTING <110> EPIZYME, INC. <120> ARYL- OR HETEROARYL-SUBSTITUTED BENZENE COMPOUNDS <130> 41478-507001WO <150> 61/474,821 <151> 2011-04-13 <150> 61/499,595 <151> 2011-06-21 <160> 2 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 26 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Chemically synthesized polypeptide <220> <221> MISC_FEATURE <222> (26)..(26) <223> wherein a biotin and an amide are conjugated <400> 1 Ala Thr Lys Ala Ala Arg Lys Ser Ala Pro Ala Thr Gly Gly Val Lys 1 5 10 15 Lys Pro His Arg Tyr Arg Pro Gly Gly Lys 20 25 <210> 2 <211> 26 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Chemically synthesized polypeptide <220> <221> MISC_FEATURE <222> (7)..(7) <223> wherein the lysine is dimethylated <220> <221> MISC_FEATURE <222> (26)..(26) <223> wherein a biotin and an amide are conjugated <400> 2 Ala Thr Lys Ala Ala Arg Lys Ser Ala Pro Ala Thr Gly Gly Val Lys 1 5 10 15 Lys Pro His Arg Tyr Arg Pro Gly Gly Lys 20 25

Claims (1)

  1. 하기 화학식 I의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염:
    [화학식 I]
    Figure pat00323

    상기 식에서,
    X1은 N 또는 CR11이고;
    X2는 N 또는 CR13이고;
    Z는 NR7R8, OR7, S(O)nR7 또는 CR7R8R14이고, 이때 n은 0, 1 또는 2이고;
    R1, R5, R9 및 R10은 각각 독립적으로 H이거나, 할로, 하이드록실, COOH, C(O)O-C1-C6 알킬, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬 및 5원 또는 6원 헤테로아릴로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬이고;
    R2, R3 및 R4는 각각 독립적으로 -Q1-T1이고, 이때 Q1은 결합이거나 할로, 시아노, 하이드록실 또는 C1-C6 알콕시로 임의적으로 치환된 C1-C3 알킬 연결기이고, T1은 H, 할로, 하이드록실, COOH, 시아노 또는 RS1이고, 이때 RS1은 C1-C3 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C1-C6 알콕실, C(O)O-C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬, 또는 5원 또는 6원 헤테로아릴이고, RS1은 할로, 하이드록실, 옥소, COOH, C(O)O-C1-C6 알킬, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬 및 5원 또는 6원 헤테로아릴로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환되고;
    R6은 C6-C10 아릴, 또는 5원 또는 6원 헤테로아릴이고, 이들 각각은 하나 이상의 -Q2-T2로 임의적으로 치환되고, 이때 Q2는 결합이거나 할로, 시아노, 하이드록실 또는 C1-C6 알콕시로 임의적으로 치환된 C1-C3 알킬 연결기이고, T2는 H, 할로, 시아노, -ORa, -NRaRb, -(NRaRbRc)+A-, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -C(O)NRaRb, -NRbC(O)Ra, -NRbC(O)ORa, -S(O)2Ra, -S(O)2NRaRb 또는 RS2이고, 이때 Ra, Rb 및 Rc는 각각 독립적으로 H 또는 RS3이고, A-는 약학적으로 허용가능한 음이온이고, RS2 및 RS3은 각각 독립적으로 C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬, 또는 5원 또는 6원 헤테로아릴이거나, Ra 및 Rb는 이들이 부착된 N 원자와 함께 0개 또는 1개의 추가 헤테로원자를 갖는 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬 고리를 형성하고, RS2, RS3, 및 Ra와 Rb에 의해 형성된 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬 고리 각각은 하나 이상의 -Q3-T3으로 임의적으로 치환되고, 이때 Q3은 결합이거나 할로, 시아노, 하이드록실 또는 C1-C6 알콕시로 각각 임의적으로 치환된 C1-C3 알킬 연결기이고, T3은 할로, 시아노, C1-C6 알킬, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬, 5원 또는 6원 헤테로아릴, ORd, COORd, -S(O)2Rd, -NRdRe 및 -C(O)NRdRe로 구성된 군으로부터 선택되고, 이때 Rd 및 Re는 각각 독립적으로 H 또는 C1-C6 알킬이거나; -Q3-T3은 옥소이거나; 임의의 2개 인접하는 -Q2-T2는 이들이 부착된 원자와 함께 N, O 및 S로부터 선택된 1개 내지 4개의 헤테로원자를 임의적으로 함유하고 할로, 하이드록실, COOH, C(O)O-C1-C6 알킬, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬 및 5원 또는 6원 헤테로아릴로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환된 5원 또는 6원 고리를 형성하고;
    R7은 -Q4-T4이고, 이때 Q4는 결합, C1-C4 알킬 연결기 또는 C2-C4 알케닐 연결기이고, 이때 연결기 각각은 할로, 시아노, 하이드록실 또는 C1-C6 알콕시로 임의적으로 치환되고, T4는 H, 할로, 시아노, NRfRg, -ORf, -C(O)Rf, -C(O)ORf, -C(O)NRfRg, -C(O)NRfORg, -NRfC(O)Rg, -S(O)2Rf 또는 RS4이고, 이때 Rf 및 Rg는 각각 독립적으로 H 또는 RS5이고, RS4 및 RS5는 각각 독립적으로 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬, 또는 5원 또는 6원 헤테로아릴이고, RS4 및 RS5 각각은 하나 이상의 -Q5-T5로 임의적으로 치환되고, 이때 Q5는 결합, C(O), C(O)NRk, NRkC(O), S(O)2 또는 C1-C3 알킬 연결기이고, 이때 Rk는 H 또는 C1-C6 알킬이고, T5는 H, 할로, C1-C6 알킬, 하이드록실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬, 5원 또는 6원 헤테로아릴 또는 S(O)qRq이고, 이때 q는 0, 1 또는 2이고, Rq는 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬, 또는 5원 또는 6원 헤테로아릴이고, T5가 H, 할로, 하이드록실 또는 시아노인 경우를 제외하고 T5는 할로, C1-C6 알킬, 하이드록실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬 및 5원 또는 6원 헤테로아릴로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환되거나; -Q5-T5는 옥소이고;
    R8, R11, R12 및 R13은 각각 독립적으로 H, 할로, 하이드록실, COOH, 시아노, RS6, ORS6 또는 COORS6이고, 이때 RS6은 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 사이클로알킬, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노 또는 다이-C1-C6 알킬아미노이고, RS6은 할로, 하이드록실, COOH, C(O)O-C1-C6 알킬, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노 및 다이-C1-C6 알킬아미노로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환되거나; R7 및 R8은 이들이 부착된 N 원자와 함께 0개 내지 2개의 추가 헤테로원자를 갖는 4원 내지 11원 헤테로사이클로알킬 고리를 형성하거나; R7 및 R8은 이들이 부착된 C 원자와 함께 C3-C8 사이클로알킬 또는 1개 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 4원 내지 11원 헤테로사이클로알킬 고리를 형성하고, R7과 R8에 의해 형성된 4원 내지 11원 헤테로사이클로알킬 고리 또는 C3-C8 사이클로알킬 각각은 하나 이상의 -Q6-T6으로 임의적으로 치환되고, 이때 Q6은 결합, C(O), C(O)NRm, NRmC(O), S(O)2 또는 C1-C3 알킬 연결기이고, 이때 Rm은 H 또는 C1-C6 알킬이고, T6은 H, 할로, C1-C6 알킬, 하이드록실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬, 5원 또는 6원 헤테로아릴 또는 S(O)pRp이고, 이때 p는 0, 1 또는 2이고, Rp는 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬, 또는 5원 또는 6원 헤테로아릴이고, T6이 H, 할로, 하이드록실 또는 시아노인 경우를 제외하고 T6은 할로, C1-C6 알킬, 하이드록실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬 및 5원 또는 6원 헤테로아릴로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환되거나; -Q6-T6은 옥소이고;
    R14는 부재하거나, H이거나, 할로, 하이드록실, COOH, C(O)O-C1-C6 알킬, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 다이-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 사이클로알킬, C6-C10 아릴, 4원 내지 12원 헤테로사이클로알킬 및 5원 또는 6원 헤테로아릴로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬이다.
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