TW201708210A - Ｚｅｓｔｅ同源物２增強子之抑制劑 - Google Patents

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坎尼斯 紐蘭德
詹姆斯 布萊克利
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肯尼士 麥克鈕提
新榮 田
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Abstract

本發明關於根據式(I)之新穎化合物，其為Zeste同源物2(EZH2)增強子之抑制劑，關於含有該等化合物之醫藥組成物、彼等之製備方法、及彼等在治療癌症之治療法中的用途。 □

Description

ZESTE同源物2增強子之抑制劑
本發明關於抑制Zeste同源物2(EZH2)增強子且因此有用於抑制癌細胞增生及/或誘發癌細胞凋亡之化合物。
表觀遺傳修飾在調節許多細胞過程中扮演重要的角色，包括在細胞增生、分化及細胞存活中。總體表觀遺傳修飾常見於癌症中，且包括DNA及/或組織蛋白甲基化的總體改變、非編碼RNA的調節異常及核小體重建，導致致癌基因、腫瘤抑制及傳訊路徑的異常激活或失活。然而，不同於出現在癌症中的基因突變，該等表觀遺傳改變可經由選擇性抑制涉及之酵素而逆轉。已知許多涉及組織蛋白或DNA甲基化之甲基化酶在癌症中的調節異常。因此，特別的甲基化酶之選擇性抑制劑有用於治療增生性疾病，諸如癌症。
EZH2(人類EZH2基因：Cardoso,C等人之European J of Human Genetics,Vol.8,No.3 Pages 174-180,2000)為多梳抑制因子複合體2(PRC2)之催化亞單元，其係藉由組織蛋白H3之三甲基化離胺酸27(H3K27me3)使標的基因沉默而起作用。組織蛋白H3為涉及真核細胞中的染色質絲結構中之五個主要的組織蛋白中之一者。以主要的球狀功能域及長的N-末端尾部為特徵之組織蛋白涉及核小體的結構，「在細線結構上的珠粒」。組織蛋白經高度轉譯後修飾，然而組織蛋白H3為五個組織蛋白中經最廣泛修飾者。術語「組織蛋白H3」單獨故意含糊不清，因為在序列變體或修飾狀態之間沒有區別。 組織蛋白H3為新興的表觀遺傳學領域中重要的蛋白質，其序列變體及可變修飾狀態被認為在基因的動態學及長期調節中扮演一角色。
在許多實體腫瘤中觀察到增加之EZH2表現，包括那些在前列腺、乳房、皮膚、膀胱、肝、胰腺、頭頸部中的腫瘤，且該表現與癌症侵犯、轉移及預後不良互相關聯(Varambally等人之Nature 419：624-629,2002；Kleer等人之Proc Natl Acad Sci USA 100：11606-11611,2003；Breuer等人之Neoplasia 6：736-743,2004；Bachmann等人之Prostate 65：252-259,2005；Weikert等人之Int.J.Mol.Med.16：349-353,2005；Sudo等人之British Joumal of Cancer 92：1754-1758,2005；Bachmann等人之Journal of Clinical Oncology 24：268-273,2006)。例如，在表現高水平EZH2之腫瘤中的前列腺切除術之後有更大的復發風險、增加轉移、更短的無疾病存活期及增加在具有高EZH2水平之乳癌病患中的死亡(Varambally等人之Nature 419：624-629,2002；Kleer等人之Proc Natl Acad Sci USA 100：11606-11611,2003)。最近，H3K27去甲基化酶(與EZH2相反的功能)在UTX(無處不轉錄之三十四肽重複序列(ubiquitously transcribed tetratricopeptide repeat)X)中的突變失活已於多發性實體及血液學腫瘤類型中證實(包括腎癌、膠質母細胞瘤、食道癌、乳癌、結腸癌、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、膀胱癌、多發性骨髓瘤和慢性骨髓性白血病)，且低的UTX水平與乳癌中差的存活期互相關聯，示意UTX功能的喪失導致H3K27me3的增加及標的基因的抑制(Wang等人之Genes & Development 24：327-332,2010)。該等數據一起示意增加的H3K27me3水平促成許多腫瘤類型中的癌症侵犯，且抑制EZH2活性可提供治療效益。
許多研究報導經由siRNA或shRNA直接剔除EZH2或經由以SAH水解酶抑制劑3-去氮奈普蘭諾辛(deazaneplanocin)A(DZNep)治療而直接喪失EZH2會降低在試管中癌細胞株增生與入侵及在活體內的細胞生長(Gonzalez等人之2008,GBM 2009)。雖然尚未知以異常的EZH2活性導致癌症進展的精確機制，但是許多EZH2標的基因為腫瘤抑制劑，其示意腫瘤抑制劑功能的喪失為關鍵的機制。另外，在無限增殖化或原發上皮細胞中的 EZH2過度表現促使非錨定依賴性生長及入侵且需要EZH2催化活性(Kleer等人之Proc Natl Acad Sci USA 100：11606-11611,2003；Cao等人之Oncogene 27：7274-7284,2008)。
因此，有強力的證據示意EZH2活性抑制作用降低細胞增生及入侵。據此，抑制EZH2活性之化合物能有用於治療癌症。
潛伏的人類免疫缺乏病毒(HIV)前病毒係由於位在病毒長末端重複序列(LTR)上的組織蛋白之去乙醯化及甲基化而沉默。使用潛伏感染之Jurkat T-細胞株的染色質絲免疫沉澱實驗證明EZH2係以高水平存在於沉默之HIV前病毒上且在前病毒再激活之後被快速替代。EZH2剔除誘發至多40%之潛在的HIV前病毒。EZH2剔除亦使潛在的前病毒對外來刺激(諸如T-細胞受體刺激)敏感，且降低再激活之前病毒逆轉成潛伏。同樣地，對外來刺激反應差的細胞群攜帶富集H3K27me3及相對缺乏H3K9me3之HIV前病毒。該等發現示意經PRC2-媒介之沉默為HIV潛伏的重要特徵且組織蛋白甲基化抑制劑可在經設計之誘發策略中扮演有用的角色，以根絕潛在的HIV庫(Friedman等人之J.Virol.85：9078-9089,2011)。額外的研究顯示在前病毒啟動子上的H3K27去甲基化使休眠的CD4+ T細胞之活體外培養物中潛伏的HIV對伏立諾他(vorinostat)效應敏感(Tripathy等人之J.Virol.89：8392-8405,2015)。
本發明關於根據式(I)之化合物或其醫藥上可接受之鹽： (I)
其中：代表單鍵或雙鍵；R1為-NH2、(C1-C4)烷基或羥基(C1-C4)烷基；R2為(C1-C4)烷基；R3和R4各自為氫；或R3與R4一起代表-CH2CH2-或-CH2CH2CH2-；R5為氫、鹵素或(C1-C3)烷基；R6為氫或(C1-C3)烷基；及R7為視需要地含有一、二或三個獨立地選自氧、氮和硫的雜原子之6-員飽和或不飽和環，其中該環視需要地經一、二或三個獨立地選自下列的群組取代：鹵素、(C1-C4)烷基、鹵(C1-C4)烷基、羥基(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基(C1-C4)烷基、(C3-C6)環烷基、氰基、-CO2H、-CO2(C1-C4)烷基、-CONH2、-CONH(C1-C4)烷基、-CON(C1-C4)烷基(C1-C4)烷基、-NH2、-NH(C1-C4)烷基、-N(C1-C4)烷基(C1-C4)烷基、酮基、羥基、(C1-C4)烷氧基、羥基(C2-C4)烷氧基-和(C1-C4)烷氧基(C2-C4)烷氧基-。
本發明的另一態樣關於誘發實體腫瘤中的癌細胞凋亡；治療實體腫瘤癌症之方法。
本發明的另一態樣關於包含式(I)化合物及醫藥上可接受之賦形劑的醫藥組成物。
在另一態樣中，其係提供式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽或溶劑合物的用途，其係製造用於治療以EZH2媒介之病症的藥劑，諸如藉由誘發癌細胞凋亡。
在另一態樣中，本發明提供式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽用於治療以EZH2媒介之疾病的用途。本發明進一步提供式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽作為治療以EZH2媒介之疾病的活性治療物質之用途。
在另一態樣中，本發明提供用於治療法的式(I)化合物或其醫藥上可接 受之鹽。
在另一態樣中，其係提供用於治療以EZH2媒介之病症的式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽。
在另一態樣中，其係提供用於治療細胞增生疾病的式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽。
在另一態樣中，其係提供用於治療癌症的式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽，包括治療例如下列的實體腫瘤：腦癌(神經膠質瘤)、膠質母細胞瘤、白血病、淋巴瘤、潘納揚-佐納納(Bannayan-Zonana)症候群、考登(Cowden)病、萊爾米特-達克洛思(Lhermitte-Duclos)病、乳癌、發炎性乳癌、威爾姆(Wilm)氏腫瘤、尤文(Ewing)氏肉瘤、橫紋肌肉瘤、室管膜瘤、髓母細胞瘤、結腸癌、胃癌、膀胱癌、頭頸部癌、腎(kidney)癌、肺癌、肝癌、黑色素瘤、腎(renal)癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、肉瘤、骨肉瘤、骨巨細胞瘤和甲狀腺癌。
在另一態樣中，其係提供共同投予本發明的式(I)化合物與其他的活性成分之方法。
在另一態樣中，其係提供式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽與至少一種用於治療以EZH2媒介之病症的抗贅瘤劑之組合。
在另一態樣中，其係提供式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽與至少一種用於治療細胞增生疾病的抗贅瘤劑之組合。
在另一態樣中，其係提供式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽與至少一種用於治療癌症的抗贅瘤劑之組合，包括治療例如下列的實體腫瘤：腦癌(神經膠質瘤)、膠質母細胞瘤、白血病、淋巴瘤、潘納揚-佐納納症候群、考登病、萊爾米特-達克洛思病、乳癌、發炎性乳癌、威爾姆氏腫瘤、尤文氏肉瘤、橫紋肌肉瘤、室管膜瘤、髓母細胞瘤、結腸癌、胃癌、膀胱癌、頭頸部癌、腎癌、肺癌、肝癌、黑色素瘤、腎癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、肉瘤、骨肉瘤、骨巨細胞瘤和甲狀腺癌。
發明詳細說明
本發明關於如上文定義之式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽。
在另一實施態樣中，本發明亦提供式(II)化合物或其醫藥上可接受之鹽：
其中：代表單鍵或雙鍵；X1、X2、X3、X4和X5各自獨立為N、CH或CR8，其條件為X1、X2、X3、X4和X5中之至少二者為CH；R1為-NH2、(C1-C4)烷基或羥基(C1-C4)烷基；R2為(C1-C4)烷基；R3和R4各自為氫；或R3與R4一起代表-CH2CH2-或-CH2CH2CH2-；R5為氫、鹵素或(C1-C3)烷基；R6為氫或(C1-C3)烷基；及各R8獨立地選自鹵素、(C1-C4)烷基、鹵(C1-C4)烷基、羥基(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基(C1-C4)烷基、(C3-C6)環烷基、氰基、-CO2H、-CO2(C1-C4)烷基、-CONH2、-CONH(C1-C4)烷基、-CON(C1-C4)烷基(C1-C4)烷基、-NH2、-NH(C1-C4)烷基、-N(C1-C4)烷基(C1-C4)烷基、羥基、(C1-C4)烷氧基、羥基(C2-C4)烷氧基-和(C1-C4)烷氧基(C2-C4)烷氧基-。
在另一實施態樣中，本發明亦提供式(III)化合物或其醫藥上可接受之 鹽：
其中：代表單鍵或雙鍵；X1、X2、X3、X4和X5各自獨立為N、CH或CR8，其條件為X1、X2、X3、X4和X5中之至少二者為CH；n為1或2；R1為-NH2、(C1-C4)烷基或羥基(C1-C4)烷基；R2為(C1-C4)烷基；R5為氫、鹵素或(C1-C3)烷基；R6為氫或(C1-C3)烷基；及各R8獨立地選自鹵素、(C1-C4)烷基、鹵(C1-C4)烷基、羥基(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基(C1-C4)烷基、(C3-C6)環烷基、氰基、-CO2H、-CO2(C1-C4)烷基、-CONH2、-CONH(C1-C4)烷基、-CON(C1-C4)烷基(C1-C4)烷基、-NH2、-NH(C1-C4)烷基、-N(C1-C4)烷基(C1-C4)烷基、羥基、(C1-C4)烷氧基、羥基(C2-C4)烷氧基-和(C1-C4)烷氧基(C2-C4)烷氧基-。
在另一實施態樣中，本發明亦提供式(IV)化合物或其醫藥上可接受之鹽：
其中：X1、X2、X3、X4和X5各自獨立為N、CH或CR8，其條件為X1、X2、X3、X4和X5中之至少二者為CH；n為1或2；R1為-NH2、(C1-C4)烷基或羥基(C1-C4)烷基；R2為(C1-C4)烷基；R5為氫、鹵素或(C1-C3)烷基；R6為氫或(C1-C3)烷基；及各R8獨立地選自鹵素、(C1-C4)烷基、鹵(C1-C4)烷基、羥基(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基(C1-C4)烷基、(C3-C6)環烷基、氰基、-CO2H、-CO2(C1-C4)烷基、-CONH2、-CONH(C1-C4)烷基、-CON(C1-C4)烷基(C1-C4)烷基、-NH2、-NH(C1-C4)烷基、-N(C1-C4)烷基(C1-C4)烷基、羥基、(C1-C4)烷氧基、羥基(C2-C4)烷氧基-和(C1-C4)烷氧基(C2-C4)烷氧基-。
在另一實施態樣中，本發明亦提供式(IV)(a)化合物或其醫藥上可接受之鹽：
其中：X1、X2、X3、X4和X5各自獨立為N、CH或CR8，其條件為X1、X2、X3、X4和X5中之至少二者為CH；n為1或2；R1為-NH2、(C1-C4)烷基或羥基(C1-C4)烷基；R2為(C1-C4)烷基；R5為氫、鹵素或(C1-C3)烷基；R6為氫或(C1-C3)烷基；及各R8獨立地選自鹵素、(C1-C4)烷基、鹵(C1-C4)烷基、羥基(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基(C1-C4)烷基、(C3-C6)環烷基、氰基、-CO2H、-CO2(C1-C4)烷基、-CONH2、-CONH(C1-C4)烷基、-CON(C1-C4)烷基(C1-C4)烷基、-NH2、-NH(C1-C4)烷基、-N(C1-C4)烷基(C1-C4)烷基、羥基、(C1-C4)烷氧基、羥基(C2-C4)烷氧基-和(C1-C4)烷氧基(C2-C4)烷氧基-。
在另一實施態樣中，本發明亦提供式(V)化合物或其醫藥上可接受之鹽：
其中：X1、X2、X3、X4和X5各自獨立為N、CH或CR8，其條件為X1、X2、X3、X4和X5中之至少二者為CH；n為1或2；R1為-NH2、(C1-C4)烷基或羥基(C1-C4)烷基；R2為(C1-C4)烷基；R5為氫、鹵素或(C1-C3)烷基；R6為氫或(C1-C3)烷基；及各R8獨立地選自鹵素、(C1-C4)烷基、鹵(C1-C4)烷基、羥基(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基(C1-C4)烷基、(C3-C6)環烷基、氰基、-CO2H、-CO2(C1-C4)烷基、-CONH2、-CONH(C1-C4)烷基、-CON(C1-C4)烷基(C1-C4)烷基、-NH2、-NH(C1-C4)烷基、-N(C1-C4)烷基(C1-C4)烷基、羥基、(C1-C4)烷氧基、羥基(C2-C4)烷氧基-和(C1-C4)烷氧基(C2-C4)烷氧基-。
在一個實施態樣中，本發明關於式(I)、(II)或(III)化合物，其中代表單鍵。在另一實施態樣中，本發明關於式(I)、(II)或(III)化合物，其中代表雙鍵。
在另一實施態樣中，本發明關於式(I)、(II)或(III)化合物，其中代表雙鍵。在另一實施態樣中，本發明關於式(I)、(II)、(III)、(IV)、(IV)(a)或(V)化合物，其中R1為(C1-C4)烷基。在特定的實施態樣中，本發明關於式(I)、 (II)、(III)、(IV)、(IV)(a)或(V)化合物，其中R1為-NH2。在另一實施態樣中，本發明關於式(I)、(II)、(III)、(IV)、(IV)(a)或(V)化合物，其中R1和R2各自獨立為甲基、乙基、正丙基或正丁基。在特定的實施態樣中，本發明關於式(I)化合物，其中R1和R2各自為甲基。
在另一特定的實施態樣中，本發明關於式(I)或(II)化合物，其中R3與R4各自為氫。在另一實施態樣中，本發明關於式(I)或(II)化合物，其中R3與R4一起代表-CH2CH2-或-CH2CH2CH2-。在特定的實施態樣中，本發明關於式(I)或(II)化合物，其中R3與R4一起代表-CH2CH2-。在另一特定的實施態樣中，本發明關於式(I)或(II)化合物，其中R3與R4一起代表-CH2CH2CH2-。
在另一實施態樣中，本發明關於式(I)、(II)、(III)、(IV)、(IV)(a)或(V)化合物，其中R5為氫、氟、氯、甲基、乙基、正丙基或異丙基。在另一實施態樣中，本發明關於式(I)、(II)、(III)、(IV)、(IV)(a)或(V)化合物，其中R5為甲基、乙基、正丙基或異丙基。在另一實施態樣中，本發明關於式(I)、(II)、(III)、(IV)、(IV)(a)或(V)化合物，其中R5為甲基或氯。在特定的實施態樣中，本發明關於式(I)、(II)、(III)、(IV)、(IV)(a)或(V)化合物，其中R5為甲基。在另一特定的實施態樣中，本發明關於式(I)、(II)、(III)、(IV)、(IV)(a)或(V)化合物，其中R5為氯。
在另一實施態樣中，本發明關於式(I)、(II)、(III)、(IV)、(IV)(a)或(V)化合物，其中R6為氫、甲基、乙基、正丙基或異丙基。在另一實施態樣中，本發明關於式(I)、(II)、(III)、(IV)、(IV)(a)或(V)化合物，其中R6為氫、甲基或乙基。在特定的實施態樣中，本發明關於式(I)、(II)、(III)、(IV)、(IV)(a)或(V)化合物，其中R6為乙基。
在另一實施態樣中，本發明關於式(I)化合物，其中R7係選自由下列所組成之群組：環己基、哌啶基、四氫哌喃基、四氫硫代哌喃基、哌基、嗎啉基、硫代嗎啉基、1,4-二烷基、1,4-二噻烷基、苯基、吡啶基、嗒基、嘧啶基、吡基和三基，每一該等基團視需要地經一、二或三個獨立地選自下列的群組取代：鹵素、(C1-C4)烷基、鹵(C1-C4)烷基、羥基(C1-C4) 烷基、(C1-C4)烷氧基(C1-C4)烷基、(C3-C6)環烷基、氰基、-CO2H、-CO2(C1-C4)烷基、-CONH2、-CONH(C1-C4)烷基、-CON(C1-C4)烷基(C1-C4)烷基、-NH2、-NH(C1-C4)烷基、-N(C1-C4)烷基(C1-C4)烷基、酮基、羥基、(C1-C4)烷氧基、羥基(C2-C4)烷氧基-和(C1-C4)烷氧基(C2-C4)烷氧基-。在另一實施態樣中，本發明關於式(I)化合物，其中R7係選自由下列所組成之群組：苯基、吡啶基、嗒基、嘧啶基、吡基和三基，每一該等基團視需要地經一、二或三個獨立地選自下列的群組取代：鹵素、(C1-C4)烷基、鹵(C1-C4)烷基、羥基(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基(C1-C4)烷基、(C3-C6)環烷基、氰基、-CO2H、-CO2(C1-C4)烷基、-CONH2、-CONH(C1-C4)烷基、-CON(C1-C4)烷基(C1-C4)烷基、-NH2、-NH(C1-C4)烷基、-N(C1-C4)烷基(C1-C4)烷基、酮基、羥基、(C1-C4)烷氧基、羥基(C2-C4)烷氧基-和(C1-C4)烷氧基(C2-C4)烷氧基-。
在另一實施態樣中，本發明關於式(I)化合物，其中R7為視需要地經一、二或三個獨立地選自下列的群組取代之苯基：鹵素、(C1-C4)烷基、鹵(C1-C4)烷基、羥基(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基(C1-C4)烷基、(C3-C6)環烷基、氰基、-CO2H、-CO2(C1-C4)烷基、-CONH2、-CONH(C1-C4)烷基、-CON(C1-C4)烷基(C1-C4)烷基、-NH2、-NH(C1-C4)烷基、-N(C1-C4)烷基(C1-C4)烷基、酮基、羥基、(C1-C4)烷氧基、羥基(C2-C4)烷氧基-和(C1-C4)烷氧基(C2-C4)烷氧基-。在另一實施態樣中，本發明關於式(I)化合物，其中R7為視需要地經一或二獨立地選自下列的群組取代之苯基：鹵素、(C1-C4)烷基、鹵(C1-C4)烷基、羥基和(C1-C4)烷氧基。
在另一實施態樣中，本發明關於式(I)化合物，其中R7為視需要地經一、二或三個獨立地選自下列的群組取代之吡啶基：鹵素、(C1-C4)烷基、鹵(C1-C4)烷基、羥基(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基(C1-C4)烷基、(C3-C6)環烷基、氰基、-CO2H、-CO2(C1-C4)烷基、-CONH2、-CONH(C1-C4)烷基、-CON(C1-C4)烷基(C1-C4)烷基、-NH2、-NH(C1-C4)烷基、-N(C1-C4)烷基(C1-C4)烷基、酮基、羥基、(C1-C4)烷氧基、羥基(C2-C4)烷氧基-和(C1-C4)烷氧基(C2-C4)烷氧基-。在另一實施態樣中，本發明關於式(I)化合物，其中R7為視需要地經一或二 獨立地選自下列的群組取代之吡啶基：鹵素、(C1-C4)烷基、鹵(C1-C4)烷基、羥基和(C1-C4)烷氧基。
在另一實施態樣中，本發明關於式(I)化合物，其中R7為各自視需要地經一或二獨立地選自下列的群組取代之嗒基、嘧啶基或吡基：鹵素、(C1-C4)烷基、鹵(C1-C4)烷基、羥基和(C1-C4)烷氧基。
在另一實施態樣中，本發明關於式(I)化合物，其中R7係選自由下列所組成之群組：環己基、哌啶基、四氫哌喃基、四氫硫代哌喃基、哌基、嗎啉基、硫代嗎啉基、1,4-二烷基和1,4-二噻烷基，每一該等基團視需要地經一、二或三個獨立地選自下列的群組取代：鹵素、(C1-C4)烷基、鹵(C1-C4)烷基、羥基(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基(C1-C4)烷基、(C3-C6)環烷基、氰基、-CO2H、-CO2(C1-C4)烷基、-CONH2、-CONH(C1-C4)烷基、-CON(C1-C4)烷基(C1-C4)烷基、-NH2、-NH(C1-C4)烷基、-N(C1-C4)烷基(C1-C4)烷基、酮基、羥基、(C1-C4)烷氧基、羥基(C2-C4)烷氧基-和(C1-C4)烷氧基(C2-C4)烷氧基-。在另一實施態樣中，本發明關於式(I)化合物，其中R7係選自由下列所組成之群組：環己基、哌啶基、四氫哌喃基、四氫硫代哌喃基、哌基、嗎啉基和硫代嗎啉基，各者視需要地經一或二獨立地選自下列的群組取代之：鹵素、(C1-C4)烷基、鹵(C1-C4)烷基、羥基和(C1-C4)烷氧基。在另一實施態樣中，本發明關於式(I)化合物，其中R7為環己基，其視需要地經一或二獨立地選自下列的群組取代之：鹵素、(C1-C4)烷基、鹵(C1-C4)烷基、羥基和(C1-C4)烷氧基。在另一實施態樣中，本發明關於式(I)化合物，其中R7係選自由下列所組成之群組：哌啶基、四氫哌喃基、哌基和嗎啉基，各者視需要地經一或二獨立地選自下列的群組取代之：鹵素、(C1-C4)烷基、鹵(C1-C4)烷基、羥基和(C1-C4)烷氧基。
在另一實施態樣中，本發明關於式(II)、(III)、(IV)、(IV)(a)或(V)化合物，其中X1、X2、X3、X4和X5各自獨立為N、CH或CR8，其條件為X1、X2、X3、X4和X5中之至少三者為CH。在另一實施態樣中，本發明關於式(II)、(III)、(IV)、(IV)(a)或(V)化合物，其中X1、X2、X3、X4和X5各自獨立為N、 CH或CR8，其條件為X1、X2、X3、X4和X5中不超過一個為N，且X1、X2、X3、X4和X5中之至少三者為CH。在另一實施態樣中，本發明關於式(II)、(III)、(IV)、(IV)(a)或(V)化合物，其中X1、X2、X3、X4和X5各自獨立為N或CH，其條件為X1、X2、X3、X4和X5中之至少三者為CH。在另一實施態樣中，本發明關於式(II)、(III)、(IV)、(IV)(a)或(V)化合物，其中X1、X2、X3、X4和X5各自獨立為CH或CR8，其條件為X1、X2、X3、X4和X5中之至少三者為CH。
在另一實施態樣中，本發明關於式(II)、(III)、(IV)、(IV)(a)或(V)化合物，其中各R8獨立地選自鹵素、(C1-C4)烷基、鹵(C1-C4)烷基、羥基和(C1-C4)烷氧基。在另一實施態樣中，本發明關於式(II)、(III)、(IV)、(IV)(a)或(V)化合物，其中各R8獨立地選自氟、氯、甲基、三氟甲基和甲氧基。
在特定的實施態樣中，本發明關於式(III)、(IV)、(IV)(a)或(V)化合物，其中n為1。在另一特定的實施態樣中，本發明關於式(III)、(IV)、(IV)(a)或(V)化合物，其中n為2。
本發明的特定化合物包括：(R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-2-(1-(1-(吡啶-2-基甲基)哌啶-4-基)丙基)-6,7-二氫噻吩并[3,2-c]吡啶-4(5H)-酮；(R)-2-(1-(1-苯甲基哌啶-4-基)丙基)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-6,7-二氫噻吩并[3,2-c]吡啶-4(5H)-酮；(R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-2-(1-(1-(吡啶-4-基甲基)哌啶-4-基)丙基)-6,7-二氫噻吩并[3,2-c]吡啶-4(5H)-酮；(R)-2-(1-(1-((5-氯吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-基)丙基)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-6,7-二氫噻吩并[3,2-c]吡啶-4(5H)-酮；N-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-5-(1-(1-((2-甲氧基吡啶-4-基)甲基)亞哌啶-4-基)丙基)-4-甲基噻吩-3-甲醯胺；(R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-2-(1-(1-(吡啶-2-基甲基)哌啶-4-基)乙基)-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-4-酮； (R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-2-(1-(1-((2-甲氧基吡啶-4-基)甲基)哌啶-4-基)乙基)-3-甲基-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-4-酮；(R)-2-(1-(1-((5-氯吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-基)乙基)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-4-酮；(R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-2-(1-(1-((6-甲基吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-基)乙基)-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-4-酮；(R)-2-(1-(1-苯甲基哌啶-4-基)乙基)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-4-酮；(R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-2-(1-(1-((2-甲氧基吡啶-4-基)甲基)哌啶-4-基)乙基)-3-甲基-6,7-二氫噻吩并[3,2-c]吡啶-4(5H)-酮；(R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-2-(1-(1-((6-甲氧基吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-基)乙基)-3-甲基-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-4-酮；(R)-2-(1-(1-(環己基甲基)哌啶-4-基)乙基)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-4-酮；及(R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-2-(1-(1-((1-甲基環己基)甲基)哌啶-4-基)乙基)-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-4-酮；或其醫藥上可接受之鹽。
通常但非絕對，本發明的鹽為醫藥上可接受之鹽。含有鹼性胺或其他鹼性官能基的所揭示之化合物的鹽可以本技術中已知任何適合的方法製備，包括將游離鹼以無機酸處理，諸如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸及類似者，或以有機酸處理，諸如乙酸、三氟乙酸、馬來酸、琥珀酸、扁桃酸、富馬酸、丙二酸、丙酮酸、草酸、乙醇酸、水楊酸、哌喃糖苷酸(諸 如葡糖醛酸或半乳糖醛酸)、α-羥基酸(諸如檸檬酸或酒石酸)、胺基酸(諸如天冬胺酸或麩胺酸)、芳族酸(諸如苯甲酸或肉桂酸)、磺酸(諸如對-甲苯磺酸、甲烷磺酸、乙烷磺酸)或類似者。醫藥上可接受之鹽的實例包括硫酸鹽、焦硫酸鹽、硫酸氫鹽、亞硫酸鹽、亞硫酸氫鹽、磷酸鹽、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸鹽、丙酸鹽、癸酸鹽、辛酸鹽、丙烯酸鹽、甲酸鹽、異丁酸鹽、己酸鹽、庚酸鹽、丙炔酸酯、草酸鹽、丙二酸鹽、琥珀酸鹽、辛二酸鹽、癸二酸鹽、富馬酸鹽、馬來酸鹽、丁炔-1,4-二酸鹽、己炔-1,6-二酸鹽、苯甲酸鹽、氯苯甲酸鹽、甲基苯甲酸鹽、二硝基苯甲酸鹽、羥基苯甲酸鹽、甲氧基苯甲酸鹽、苯二甲酸鹽、苯基乙酸鹽、苯基丙酸鹽、苯基丁酸鹽、檸檬酸鹽、乳酸鹽、γ-羥基丁酸酯、甘醇酸酯、酒石酸鹽、扁桃酸鹽和磺酸鹽(諸如二甲苯磺酸鹽、甲烷磺酸鹽、丙烷磺酸鹽、萘-1-磺酸鹽和萘-2-磺酸鹽)。
含有羧酸或其他酸性官能基的所揭示之化合物的鹽可藉由與適合的鹼反應而製得。此等醫藥上可接受之鹽可以供給醫藥上可接受之陽離子的鹼製成，該鹽包括鹼金屬鹽(尤其為鈉和鉀)、鹼土金屬鹽(尤其為鈣和鎂)、鋁鹽和銨鹽，以及自生理學上可接受之有機鹼製成，諸如三甲胺、三乙胺、嗎啉、吡啶、哌啶、甲基吡啶、二環丙胺、N,N’-二苯甲基乙二胺、2-羥基乙胺、雙-(2-羥乙基)胺、三-(2-羥乙基)胺、普魯卡因、二苯甲基哌啶、脫氫松香胺、N,N’-雙脫氫松香胺、葡糖胺、N-甲基葡糖胺、柯林鹼、奎寧、喹啉和鹼性胺基酸(諸如離胺酸和精胺酸)。
不是醫藥上可接受之其他鹽可用於製備本發明化合物，且應將該等鹽視為構成本發明的其他態樣。雖然該等鹽(諸如草酸鹽或三氟乙酸鹽)本身不是醫藥上可接受之鹽，但是該等鹽可用於製備用作為獲得本發明化合物及其醫藥上可接受之鹽的中間物之鹽。
式(I)化合物或其鹽可以立體異構物形式存在(例如其含有一個或多個不對稱碳原子)。個別的立體異構物(鏡像異構物和非鏡像異構物)及彼等的混合物皆包括在本發明的範圍內。同樣地，應瞭解式(I)化合物或其鹽可以除 了該式所示以外的互變異構物形式存在，且該等亦包括在本發明的範圍內。亦應瞭解本發明包括上文所定義之特定基團的所有組合及子集。本發明的範圍包括立體異構體以及純化之鏡像異構物的混合物或鏡像異構物/非鏡像異構物富集的混合物。應瞭解本發明包括上文所定義之特定基團的所有組合和子集。
本發明亦包括經同位素標記之化合物，其與那些式(I)及下列中所引述者相同，但事實上有一個或多個原子經具有與自然界中最常發現的原子質量或質量數不同的原子質量或質量數之原子置換。可併入本發明化合物及其醫藥上可接受之鹽的同位素之實例包括氫、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯和碘的同位素，諸如2H、3H、11C、13C、14C、15N、17O、18O、31P、32P、35S、18F、36Cl、123I和125I。
含有前述同位素及/或其他原子的其他同位素之本發明化合物及該化合物在醫藥上可接受之鹽係在本發明的範圍內。經同位素標記之本發明化合物(例如那些其中併入放射性同位素(諸如3H、14C)之化合物)有用於藥物和/或受質組織分佈檢定中。氚化(亦即3H)及碳-14(亦即14C)同位素係以彼等容易製備及可檢測性而特別佳。11C和18F同位素特別有用於PET(正電子發射斷層掃描)及125I同位素特別有用於SPECT(單光子發射電腦化機斷層掃描)，全部皆用於腦成像。另外，以較重的同位素(諸如氘，亦即2H)取代可起因於更大的代謝穩定性而供給某些治療優勢，例如增加活體內半衰期或減少劑量需求，且因此在一些情況下可能較佳。本發明的經同位素標記之式(I)化合物及下列者通常可藉由進行流程中及/或實施例中所揭示之程序，藉由可輕易取得的經同位素標記之試劑取代未經同位素標記之試劑來製備。
本發明進一步提供包含式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽及一或多種賦形劑(在醫藥技術中亦稱為載劑及/或稀釋劑)的醫藥組成物(亦稱為醫藥調配物)。賦形劑在與調配物的其他成分可相容且對其接受者(亦即病患)無害的意義上為可接受的。
適合的醫藥上可接受之賦形劑將取決於所選擇的特定劑型而改變。另 外，適合的醫藥上可接受之賦形劑可就彼等可用於組成物中的特定功能而予以選擇。例如，某些醫藥上可接受之賦形劑可就彼等有助於製造均勻的劑型之能力而予以選擇。某些醫藥上可接受之賦形劑可就彼等有助於製造穩定的劑型之能力而予以選擇。某些醫藥上可接受之賦形劑可就彼等有助於本發明化合物或化合物類一旦投予病患時自身體的一個器官或部位承載或輸送至身體的另一個器官或部位之能力而予以選擇。某些醫藥上可接受之賦形劑可就彼等提高病患順應性之能力而予以選擇。
適合的醫藥上可接受之賦形劑包括下列類型的賦形劑：稀釋劑、填充劑、黏合劑、崩解劑、潤滑劑、助滑劑、造粒劑、包膜劑、潤濕劑、溶劑、共溶劑、懸浮劑、乳化劑、甜味劑、調味劑、味道掩蔽劑、著色劑、防結塊劑、保濕劑、螯合劑、增塑劑、增黏劑、抗氧化劑、防腐劑、穩定劑、界面活性劑和緩衝劑。熟習本技術領域者將理解某些醫藥上可接受之賦形劑可供應一種以上的功能且可取決於多少賦形劑存在於調配物中及哪些其他的成分存在於調配物中而供應替代的功能。
熟習本技術領域者具有本技術的知識和技能，能使他們選擇具有適合於本發明使用的量之適合的醫藥上可接受之賦形劑。另外，有許多使熟習本技術領域者有效說明醫藥上可接受之賦形劑且可用於選擇適合的醫藥上可接受之賦形劑的資源。實例包括Remington's Pharmaceutical Sciences(Mack Publishing Company)、The Handbook of Pharmaceutical Additives(Gower Publishing Limited)及The Handbook of Pharmaceutical Excipients(the American Pharmaceutical Association and the Pharmaceutical Press)。
本發明的醫藥組成物係使用那些熟習本技術領域者已知的技術及方法製備。在本技術中常使用的一些方法說明於Remington's Pharmaceutical Sciences(Mack Publishing Company)中。
醫藥組成物可呈每單位劑量含有預定量的活性成分之單位劑型。此等單位可含有治療有效劑量的式(I)化合物或其鹽，或以多個單位劑型可在給定的時間投予以達到所欲治療有效劑量的一部分的治療有效劑量。較佳的 單位劑量調配物為那些含有如上文所引述之日劑量或亞劑量的活性成分，或其適當部分的調配物。此外，此等醫藥組成物可以藥學技術中熟知的任何方法來製備。
醫藥組成物可適合以任何適當的路徑投予，例如經口(包括口腔或舌下)、直腸、鼻、局部(包括口腔、舌下或經皮)、陰道或非經腸(包括皮下，肌肉內，靜脈內或穿透內膚)路徑。此等組成物可以藥學技術中已知的任何方法來製備，例如藉由使活性成分與賦形劑達成締合。
當適用於經口投予時，醫藥組成物可呈分立單元，如錠劑或膠囊；粉劑或顆粒；在水性或非水性液體中的溶液或懸浮液；可食用發泡體或氣泡體；水包油型液體乳液或油包水型液體乳劑。亦可將本發明化合物或其鹽或本發明的醫藥組成物併入糖果、糯米紙及/或舌用膠帶調配物中作用「快速溶解」藥劑投予。
例如，以錠劑或膠囊形式經口投予，可將活性藥物組分與經口的無毒性醫藥上可接受之惰性載劑(諸如乙醇、甘油、水及類似者)組合。粉劑或顆粒係藉由將化合物粉碎至適合的細微尺寸且與同樣粉碎之醫藥載劑(諸如可食用的碳水化合物，例如澱粉或甘露醇)混合而製得。調味劑、防腐劑、分散劑及著色劑亦可以存在。
膠囊係藉由製備如上文所述之粉末混合物且填充至成形的明膠或非膠狀鞘中而製成。可將助滑劑及潤滑劑(諸如膠體二氧化矽、滑石、硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、固體聚乙二醇)在填充操作之前添加至粉末混合物中。在以膠囊服用時，亦可添加崩解劑或增溶劑(諸如瓊脂-瓊脂、碳酸鈣或碳酸鈉)以改進藥劑的利用率。
而且，當有要求或必要時，亦可將適合的黏合劑、潤滑劑、崩解劑及著色劑併入混合物中。適合的黏合劑包括澱粉、明膠、天然糖(諸如葡萄糖或β-乳糖)、玉米甜味劑、天然和合成膠(諸如阿拉伯膠、黃蓍膠、藻酸鈉)、羧甲基纖維素、聚乙二醇、蠟及類似物。在該等劑型中所使用的潤滑劑包括油酸鈉、硬脂酸鈉、硬脂酸鎂、苯甲酸鈉、乙酸鈉、氯化鈉及類似物。 崩解劑包括而不限於澱粉、甲基纖維素、瓊脂、膨潤土、黃原膠及類似物。
錠劑係例如藉由製備粉末混合物、造粒或結塊、添加潤滑劑和崩解劑及壓製成錠劑來調配。粉末混合物係藉由將適當粉碎之化合物與如上述之稀釋劑或鹼及視需要地與黏合劑(諸如羧甲基纖維素、藻酸酯、明膠或聚乙烯基吡咯啶酮)、溶液阻滯劑(諸如石蠟)、再吸收促進劑(諸如四級鹽)及/或吸收劑(諸如膨潤土、高嶺土或磷酸二鈣)混合而製得。粉末混合物可藉由潤濕黏合劑(諸如糖漿、澱粉糊、阿拉伯膠黏液或纖維素溶液或聚合物材料溶液)且強迫通過篩網來造粒。可將粉末混合物通過製錠機及結果是破裂成顆粒的不完整成形的小粒，作為造粒的替代法。為了防止黏到錠劑成形模具，可藉助於硬脂酸、硬脂酸鹽、滑石或礦物油的添加而使顆粒潤滑。接著將潤滑之混合物壓製成錠劑。亦可將本發明化合物或鹽與自由流動的惰性載劑組合且無需通過造粒或結塊步驟而直接壓製成錠劑。可提供由蟲膠、糖包膜或聚合物材料所組成之透明或不透明的保護包膜及蠟的拋光包膜。可將染料添加至該等包膜中以區分不同的劑量。
可將經口流體(諸如溶液、糖漿和酏劑)製備成劑量單位形式，使得給定之量含有預定量的活性成分。糖漿可藉由將本發明化合物或其鹽溶解在適當調味的水溶液中而製得，而酏劑係通過使用無毒性醇媒劑而製得。懸浮液可藉由將本發明化合物或其鹽分散在無毒性媒劑中而製得。亦可添加增溶劑及乳化劑(諸如乙氧基化異硬脂醇和聚氧乙烯山梨醇醚)、防腐劑、調味添加劑(諸如薄荷油、天然甜味劑、糖精或其他人造甜味劑)及類似者。
在適當時，可將經口投予之單位劑量調配微膠囊化。亦可將調配物製備成延長或持續釋放，例如藉由將微粒材料包膜或包埋在聚合物、蠟或類似者中。
在本發明中，以錠劑和膠囊遞送醫藥組成物較佳。
依照本發明的另一態樣，其係提供製備醫藥組成物之方法，其包含將式(I)化合物或其鹽與至少一種賦形劑混合(或摻合)。
本發明亦提供在哺乳動物(尤其為人類)中的治療方法。本發明化合物及 組成物係用於治療細胞增生疾病。可以本文所提供的方法及組成物治療之疾病狀態包括但不限於癌症(於下文進一步討論)、自身免疫性疾病、真菌病症、關節炎、移植排斥、發炎性腸疾病、醫療程序(包括但不限於手術、血管成形術及類似者)之後誘發的增生。在一些例子中，應理解細胞可能不在過度或低增生狀態(不正常狀態)且仍需要治療。例如，在傷口痊癒期間，細胞可能「正常」增生，但是可能希望加強增生。因此，在一個實施態樣中，本發明在此包括應用至患有或即將患有該等病症或狀態中之任一者的細胞或個體。
本文所提供的組成物及方法特別視為用於治療癌症，包括諸如前列腺癌、乳癌、腦癌、皮膚癌、子宮頸癌、睾丸癌等等的腫瘤。該等特別有用於治療轉移性或惡性腫瘤。可以本發明的組成物及方法治療之癌症更特別地包括但不限於星形細胞癌、乳癌、子宮頸癌、結腸直腸癌、子宮內膜癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、肝細胞癌、喉癌、肺癌、口腔、卵巢癌、前列腺癌和甲狀腺癌和肉瘤的腫瘤類型。更特定言之，該等化合物可用於治療：心臟：肉瘤(血管肉瘤、纖維肉瘤、橫紋肌肉瘤、脂肪肉瘤)、黏液瘤、橫紋肌瘤、纖維瘤、脂肪瘤和畸胎瘤；肺：支氣管癌(鱗狀細胞、未分化小細胞、未分化大細胞、腺癌)、肺泡(細支氣管)癌、支氣管腺瘤、肉瘤、淋巴瘤、軟骨瘤性錯構瘤、間皮瘤；胃腸道：食管(鱗狀細胞癌、腺癌、平滑肌肉瘤、淋巴瘤)、胃(癌、淋巴瘤、平滑肌肉瘤)、胰腺(導管腺癌、胰島瘤、胰高血糖素瘤、胃泌素瘤、類癌、血管活性腸肽瘤)、小腸(腺癌、淋巴瘤、類癌、卡波西(Karposi)氏肉瘤、平滑肌瘤、血管瘤、脂肪瘤、神經纖維瘤、纖維瘤)、大腸(腺癌、管狀腺瘤、絨毛狀腺瘤、錯構瘤、平滑肌瘤)；生殖泌尿道：腎(腺癌、威爾姆氏腫瘤(腎母細胞瘤)、淋巴瘤、白血病)、膀胱和尿道(鱗狀細胞癌、移行細胞癌、腺癌)、前列腺(腺癌、肉瘤)、睾丸(精原細胞瘤、畸胎瘤、胚胎癌、畸胎癌、絨毛膜癌、肉瘤、間質細胞癌、纖維瘤、纖維腺瘤、腺瘤樣瘤、脂肪瘤)；肝：肝癌(肝細胞癌)、膽管癌、肝母細胞瘤、血管肉瘤、肝細胞腺瘤、血管瘤；膽道：膽囊癌、壺腹癌、膽管癌；骨頭：骨肉 瘤(骨肉瘤)、纖維肉瘤、惡性纖維組織細胞瘤、軟骨肉瘤、尤文氏肉瘤、惡性淋巴瘤(網狀細胞肉瘤)、多發性骨髓瘤、惡性巨細胞瘤脊索瘤、骨軟骨瘤骨軟骨外生骨疣)、良性軟骨瘤、軟骨母細胞瘤、軟骨黏液纖維瘤、骨樣骨瘤和巨細胞腫瘤；神經系統：顱骨(骨瘤、血管瘤、肉芽腫、黃瘤、畸形性骨炎)、腦膜(腦膜瘤、血管肉瘤、神經膠質瘤)、腦(星形細胞瘤、髓母細胞瘤、神經膠質瘤、室管膜瘤、生殖細胞瘤(松果體瘤)、多形膠質母細胞瘤、少突膠質細胞、神經鞘瘤、視網膜母細胞瘤、先天性腫瘤)、脊髓神經纖維瘤、腦膜瘤、神經膠質瘤、肉瘤)；婦科：子宮(子宮內膜癌)、子宮頸(子宮頸癌、腫瘤前子宮頸上皮分化不良)、卵巢(卵巢癌(漿液性囊腺癌、黏液性囊腺癌、未分類癌)、顆粒-卵泡膜細胞瘤、史脫力-雷迪格(Sertoli-Leydig)細胞瘤、無性細胞瘤、惡性畸胎瘤)、外陰(鱗狀細胞癌、上皮內癌、腺癌、肉瘤、黑色素瘤)、陰道(透明細胞癌、鱗狀細胞癌、肉瘤葡萄狀(胚胎性橫紋肌肉瘤)、輸卵管(癌)；血液學：血液(骨髓性白血病(急性和慢性)、急性成淋巴細胞性白血病、慢性淋巴細胞性白血病、骨髓增生性疾病、多發性骨髓瘤、骨髓增生異常症候群)、霍奇金(Hodgkin)氏病、非霍奇金氏淋巴瘤(惡性淋巴瘤)；皮膚：惡性黑色素瘤、基底細胞癌、鱗狀細胞癌、卡波西氏肉瘤、痣發育異常痣、脂肪瘤、血管瘤、皮膚纖維瘤、瘢痕瘤、牛皮癬；及腎上腺：神經母細胞瘤。因此，如本文所提供的術語「癌性細胞」包括受到上文鑑定之病況中之任一者或相關者所苦的細胞。
本發明化合物及組成物亦可用於治療或治癒人類免疫缺乏病毒(HIV)感染。在一個實施態樣中，其係提供治療HIV感染之方法，其包含以治療有效量的式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽投予患有HIV之病患。在另一實施態樣中，其係提供治癒HIV感染之方法，其包含以治療有效量的式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽投予患有HIV之病患。在另一實施態樣中，其係提供式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽或溶劑合物的用途，其係製造用於治療HIV感染之藥劑。在另一實施態樣中，其係提供式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽或溶劑合物的用途，其係製造用於治癒HIV感染之藥劑。在另一實 施態樣中，其係提供用於治療HIV感染之式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽。在另一實施態樣中，其係提供用於治癒HIV感染之式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽。
本發明化合物可與其他的治療劑組合或共同投予，特別為可增強化合物的活性或處置時間之劑。根據本發明的組合療法包含投予至少一種本發明化合物及使用至少一種其他的治療方法。在一個實施態樣中，根據本發明的組合療法包含投予至少一種本發明化合物及手術療法。在一個實施態樣中，根據本發明的組合療法包含投予至少一種本發明化合物及放射療法。在一個實施方案中，根據本發明的組合療法包含投予至少一種本發明化合物及至少一種支持性護理劑(例如至少一種止吐劑)。在一個實施態樣中，根據本發明組合療法包含投予至少一種本發明化合物及至少一種其他的化療劑。在一個特定的實施態樣中，本發明包含投予至少一種本發明化合物及及至少一種抗贅瘤劑。在又另一實施態樣中，本發明包含治療方案，其中本發明的EZH2抑制劑本身不呈或不具有活性或顯著的活性，但是與作為單獨療法可能有或可能沒有活性之另一種療法組合時，組合提供有用的治療結果。
如本文所使用的術語「共同投予」及其衍生詞係指同時投予或以任何方式單獨依序投予如本文所述之EZH2抑制化合物及已知有用於治療癌症之另外的活性成分或成分類(包括化療法及放射治療)。如本文所使用的術語另外的活性成分或成分類包括已知或證明在投予需要癌症治療之病患時具有利的性質之任何化合物或治療劑。若不是同時投予，較佳地使化合物彼此以緊接的相鄰時間投予。此外，即使化合物不以相同的劑型投予也不要緊，例如一種化合物可經局部投予及另一種化合物可經口投予。
對欲治療之易感腫瘤具有活性的任何抗贅瘤劑通常可共同投予以治療本發明中指出之癌症。此等劑的實例可於Lippincott Williams & Wilkins出版社的Cancer Principles and Practice of Oncology by V.T.Devita and S.Hellman(editors)，第6版(2001年2月15日)中發現。一般熟習本技術領域者常常能夠 以藥物的特定性質和及所涉及的癌症為基準而辨別哪些藥劑組合可能有用。在本發明中有用的典型抗贅瘤劑包括但不限於抗微小管劑，諸如二萜和長春花生物鹼；鉑配位錯合物；烷基化劑，諸如氮芥、氧氮磷雜環己烯(oxazaphosphorine)、烷基磺酸酯、亞硝基尿素和三氮烯(triazene)；抗生素，諸如蒽環黴素(anthracyclin)、放線菌素(actinomycin)和博來黴素(bleomycin)；拓樸異構酶II抑制劑，諸如表鬼臼毒素(epipodophyllotoxin)；抗代謝物，諸如嘌呤和嘧啶類似物及抗葉酸化合物；拓樸異構酶I抑制劑，諸如喜樹鹼(camptothecin)；激素和激素類似物；DNA甲基轉移酶抑制劑，諸如氮胞啶(azacitidine)和地西他濱(decitabine)；信號轉導路徑抑制劑；非受體酪胺酸激酶血管新生抑制劑；免疫治療劑；促細胞凋亡劑；及細胞週期信號傳導抑制劑。
具有對抗欲治療之易感贅瘤的活性之任何化療劑通常可與本發明化合物組合使用，其條件為該特定的劑與使用本發明化合物的治療在臨床上可相容。在本發明中有用的典型抗贅瘤劑包括但不限於：烷基化劑、抗代謝物、抗腫瘤抗生素、抗有絲分裂劑、核苷酸類似物、拓撲異構酶I和II抑制劑、激素和激素類似物、類視色素、組織蛋白去乙醯酶抑制劑、信號轉導路徑抑制劑(包括細胞生長抑制劑和生長因子功能抑制劑)、血管新生抑制劑、絲胺酸/蘇胺酸或其他激酶抑制劑、週期素依賴性激酶抑制劑、反義治療和免疫治療劑，包括單株抗體、疫苗或其他生物劑。
可與式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽組合使用的選擇抗腫瘤劑包括但不限於：5-氟尿嘧啶、阿巴瑞克(abarelix)、阿比特龍(abiraterone)、阿多-曲妥珠單抗艾坦辛(ado-trastuzumab emtansine)、阿法替尼(afatinib)、阿柏西普(aflibercept)、艾樂替尼(alectinib)、阿那曲唑(anastrozole)、阿特唑單抗(atezolizumab)、阿西替尼(axitinib)、貝林諾他(belinostat)、苯達莫司汀(bendamustine)、貝伐單抗(bevacizumab)，比利木單抗(blinatumomab)、硼替佐米(bortezomib)、伯舒替尼(bosutinib)、貝倫妥單抗維多汀(brentuximab vedotin)，卡巴利他索(cabazitaxel)，卡博替尼(cabozantinib)、卡非唑米 (carfilzomib)，色瑞替尼(ceritinib)、西妥昔單抗(cetuximab)、氯法拉濱(clofarabine)、考比替尼(cobimetinib)、克卓替尼(crizotinib)、達拉菲尼(dabrafenib)、達土木單抗(daratumumab)、達沙替尼(dasatinib)、地加瑞克(degarelix)、德諾單抗(denosumab)、狄紐單抗(dinutuximab)、多西他賽(docetaxel)、小紅莓(doxorubicin)、小紅莓(doxorubicin)、依羅珠單抗(elotuzumab)、恩雜魯胺(enzalutamide)、表柔比星(epirubicin)、艾日布林(eribulin)、埃羅替尼(erlotinib)、依維莫司(everolimus)、非格司亭(filgrastim)、氟他胺(flutamide)、氟維司群(fulvestrant)、吉非替尼(gefitinib)、吉西他濱(gemcitabine)、吉妥單抗奥佐米星(gemtuzumab ozogamicin)、戈舍瑞林(goserelin)、布突默單抗(ibritumomab)、依魯替尼(ibrutinib)、依狄拉利辛(idelalisib)、伊馬替尼(imatinib)、伊派利單抗(ipilimumab)、伊立替康(irinotecan)、伊沙匹隆(ixabepilone)、依薩佐米(ixazomib)、拉帕替尼(lapatinib)、來那度胺(lenalidomide)、樂伐替尼(lenvatinib)、來曲唑(letrozole)、甲醯四氫葉酸(leucovorin)、亮丙瑞林(leuprolide)、甲氮芥(mechlorethamine)、奈昔木單抗(necitumumab)、奈拉濱(nelarabine)、奈妥吡坦(netupitant)、尼羅替尼(nilotinib)、尼沃單抗(nivolumab)、歐比托珠單抗(obinutuzumab)、奧伐木單抗(ofatumumab)、奧伐木單抗(ofatumumab)、奧拉帕尼(olaparib)、奧馬他星(omacetaxine)、奧西莫替尼(osimertinib)、奧沙利鉑(oxaliplatin)、太平洋紫杉醇(paclitaxel)、帕博西里(palbociclib)、帕洛諾司瓊(palonosetron)、帕尼單抗(panitumumab)、帕比司他(panobinostat)、帕唑帕尼(pazopanib)、派立珠單抗(pembrolizumab)、培美曲塞(pemetrexed)、賀疾妥(pertuzumab)、普樂沙福(plerixafor)、泊利度胺(pomalidomide)、普納替尼(ponatinib)、普拉曲沙(pralatrexate)、雷莫蘆單抗(ramucirumab)、瑞戈非尼(regorafenib)、利妥昔單抗(rituximab)、羅拉皮特(rolapitant)、羅米地辛(romidepsin)、西普亮塞-T(sipuleucel-T)、索尼蒂吉(sonidegib)、索拉非尼(sorafenib)、舒尼替尼(sunitinib)、坦羅莫司(temsirolimus)、替吡嘧啶(tipiracil)、拓朴替康(topotecan)、曲貝替定(trabectedin)、曲美替尼(trametinib)、曲妥珠單抗 (trastuzumab)、曲氟尿苷(trifluridine)、曲普瑞林(triptorelin)、尿苷、凡德他尼(vandetanib)、維羅非尼(vemurafenib)、維托克拉(venetoclax)、長春新鹼(vincristine)、維莫德吉(vismodegib)和伏立諾他。
核苷酸類似物為那些轉變成脫氧核苷三磷酸且併入複製DNA中取代胞嘧啶之化合物。DNA甲基移轉酶與經修飾之鹼共價鍵結，產生失活酵素且降低DNA甲基化。核苷酸類似物的實例包括氮胞啶和地西他濱，其係用於治療骨髓增生性病症。組織蛋白去乙醯酶(HDAC)抑制劑包括伏立諾他，其用於治療急性T-細胞淋巴瘤。HDAC係經由組織蛋白的去乙醯化來修飾染色質絲。另外，核苷酸類似物具有各種受質，包括許多轉錄因子和傳訊分子。其他的HDAC抑制劑正在開發中。
信號傳導路徑抑制劑為那些阻斷或抑制引起胞內變化的化學過程之抑制劑。如本文所使用的此變化為細胞增生或分化或存活。有用於本發明的信號傳導路徑抑制劑包括但不限於受體酪胺酸激酶、非受體酪胺酸激酶、SH2/SH3功能域阻斷劑、絲胺酸/蘇胺酸激酶、磷脂醯肌醇-3-OH激酶、肌醇傳訊和Ras致癌基因之抑制劑。信號傳導路徑抑制劑可與本發明化合物組合用於上述組成物及方法中。
受體激酶血管新生抑制劑亦可用於本發明中。與VEGFR和TIE-2有關的血管新生抑制劑係就有關信號傳導抑制劑於上文討論(二者皆為受體酪胺酸激酶)。其他的抑制劑可與本發明化合物組合使用。例如，抗-VEGF抗體，其無法辨識VEGFR(受體酪胺酸激酶)，但是與配體結合；抑制血管新生的整合素(αv β3)之小分子抑制劑；恩度(endostatin)和血管生長抑素(angiostatin)(非-RTK)亦證實有用於與本發明化合物組合。VEGFR抗體的一個實例為貝伐單抗(AVASTIN®)。
許多生長因子受體抑制劑正在開發中且包括配體拮抗劑、抗體、酪胺酸激酶抑制劑、反義寡核苷和適體。該等生長因子受體抑制劑中之任一者可與本發明化合物組合用於本文所述之任何組成物及方法/用途中。曲妥珠單抗(Herceptin®)為生長因子功能之抗-erbB2抗體抑制劑的實例。生長因子功 能之抗-erbB2抗體抑制劑的一個實例為西妥昔單抗(ErbituxTM，C225)。貝伐單抗(Avastin®)為針對VEGFR之單株抗體的實例。表皮生長因子受體之小分子抑制劑的實例包括但不限於拉帕替尼(Tykerb®)和埃羅替尼(TARCEVA®)。伊馬替尼甲磺酸鹽(GLEEVEC®)為PDGFR抑制劑的一個實例。VEGFR抑制劑的實例包括帕唑帕尼(Votrient®)、ZD6474、AZD2171、PTK787、舒尼替尼和索拉非尼。
抗微小管劑或抗有絲分裂劑為在細胞週期之M或有絲分裂期的期間內有效對抗腫瘤細胞微小管之階段特異性試劑(phase specific agent)。抗微小管劑的實例包括但不限於二萜和長春花生物鹼。
衍生自天然來源的二萜為在細胞週期的G 2/M期運作的階段特異性抗癌劑。咸信二萜係藉由與β-微管蛋白結合而使微小管的β-微管蛋白亞單元穩定。接著出現抑制蛋白質與受阻之有絲分裂分開及接著細胞死亡。二萜的實例包括但不限於太平洋紫杉醇(太平洋紫杉醇)及其類似的多西紫杉醇(docetaxel)。
太平洋紫杉醇，5β,20-環氧-1,2α,4,7β,10β,13α-六-羥基紫杉-11-烯-9-酮4,10-二乙酸2-苯甲酸13-酯帶有(2R,3S)-N-苯甲醯基-3-苯基異絲胺酸為自太平洋紫杉樹(短葉紅豆杉；Taxus brevifolia)分離的天然二萜產物，且在市場上以注射溶液TAXOL®取得。其為萜烯(terpene)之紫杉烷(taxane)家族的成員。其首先於1971年由Wani等人所分離(J.Am.Chem,Soc.,93：2325(1971))，其係以化學及X-射線晶體學方法定出其結構特性。一個其活性機制係關於太平洋紫杉醇結合微小管的能力，藉此抑制癌細胞生長。Schiff等人之Proc.Natl,Acad,Sci.USA,77：1561-1565(1980)；Schiff等人之Nature,277：665-667(1979)；Kumar,J.Biol,Chem,256：10435-10441(1981)。就一些太平洋紫杉醇衍生物的合成及抗癌活性之審視參見：D.G.I.Kingston等人之Studies in Organic Chemistry vol.26，標題為“New trends in Natural Products Chemistry 1986”,Attaur-Rahman,P.W.Le Quesne,Eds.(Elsevier,Amsterdam,1986)pp 219-235。
太平洋紫杉醇在美國已核准於臨床上用於治療頑固性卵巢癌(Markman等人之Yale Journal of Biology and Medicine,64：583,1991；McGuire等人之Ann.Int.Med.,111：273,1989)及治療乳癌(Holmes等人之J.Nat.Cancer Inst.,83：1797,1991)。其為治療皮膚贅瘤(Einzig等人之Proc.Am.Soc.Clin.Oncol.,20：46)及頭頸部癌(Forastire等人之Sem.Oncol.,20：56,1990)之可能候選藥。化合物亦顯示用於治療多囊性腎疾病(Woo等人之Nature,368：750.1994)、肺癌和瘧疾的潛力。以太平洋紫杉醇治療的病患導致與大於閥值濃度(50nM)之給藥期間(Kearns,C.M.等人之Seminars in Oncology,3(6)p.16-23,1995)有關的骨髓抑制(多重細胞譜系，Ignoff,R.J.等人之癌症Chemotherapy Pocket Guide,1998)。
多西紫杉醇，(2R,3S)-N-羧基-3-苯基異絲胺酸N-第三丁酯，13-酯帶有Sβ-20-環氧-1,2α,4,7β,10β,13α-六羥基紫杉-11-烯-9-酮4-乙酸2-苯甲酸酯三水合物；在市場上以成為注射溶液的TAXOTERE®取得。多西紫杉醇適用於治療乳癌。多西紫杉醇為太平洋紫杉醇q.v.之半合成衍生物，其係使用自歐洲紫杉樹的針葉萃取之天然前驅物10-去乙醯基-巴卡丁(baccatin)III而製得。多西紫杉醇之劑量限制毒性為嗜中性白細胞減少症。
長春花生物鹼為衍生自長春花(periwinkle)植株之階段特異性抗贅瘤劑。長春花生物鹼係藉由與微小管特異性結合而在細胞週期的M期(有絲分裂)起作用。因此，結合之小管分子不能聚合成微小管。咸信有絲分裂係於中期受阻，接著細胞死亡。長春花生物鹼的實例包括但不限於長春花鹼(vinblastine)、長春新鹼和長春瑞濱(vinorelbine)。
長春花鹼，長春鹼硫酸鹽(vincaleukoblastine sulfate)在市場上以成為注射溶液的VELBAN®取得。雖然其具有作為各種實體腫瘤之第二線治療的可能適用性，但其主要適用於治療睪丸癌及各種淋巴瘤(包括霍奇金氏病)；及淋巴性和組織細胞林巴瘤。骨髓抑制為長春花鹼之劑量限制副作用。
長春新鹼，長春鹼，22-酮基-，硫酸鹽在市場上以成為注射溶液的ONCOVIN®取得。長春新鹼適用於治療急性白血且亦發現其在霍奇金氏和 非霍奇金氏惡性淋巴瘤之治療方案中的用途。掉髮及神經學效應為最常見的長春新鹼副作用且發生較低程度的骨髓抑制和胃腸黏膜炎效應。
長春瑞濱，3’,4’-二去氫-4’-去氧-C’-去甲長春鹼(norvincaleukoblastine)[R-(R*,R*)-2,3-二羥基丁二酸(1：2)(鹽)]在市場上以長春瑞濱酒石酸鹽注射溶液(NAVELBINE®)取得，其為半合成的長春花生物鹼。長春瑞濱係以單一劑或與其他的化療劑(諸如順鉑(cisplatin))組合而適用於治療各種實體腫瘤，特別為小細胞肺癌、晚期乳癌和激素頑固性前列腺癌。骨髓抑制為長春瑞濱最常見的劑量限制副作用。
鉑配位錯合物為與DNA相互作用之非階段特異性抗癌劑。鉑錯合物進入腫瘤細胞，經歷水和作用且與DNA形成股內和股間交鏈，造成對腫瘤有害的生物效應。鉑配位錯合物的實例包括但不限於順鉑和卡鉑(carboplatin)。
順鉑，順-二胺二氯鉑在市場上以成為注射溶液的PLATINOL®取得。順鉑主要適用於治療轉移的睪丸癌和卵巢癌及晚期膀胱癌。順鉑的主要劑量限制副作用為腎中毒(其可藉由水合和利尿來控制)及耳毒性。
卡鉑，二胺[1,1-環丁烷-二羧酸酯(2-)-O,O’]在市場上以成為注射溶液的PARAPLATIN®取得。卡鉑主要適用於晚期卵巢癌之第一和第二線治療。骨髓抑制為卡鉑之劑量限制毒性。
烷基化劑為非階段抗癌特異性藥劑及強親電子劑。烷基化劑通常係藉由烷基化作用通過DNA分子的親電子基團(諸如磷酸鹽、胺基、巰基、羥基、羧基和咪唑基)與DNA形成共價鍵聯。此烷基化作用破壞核酸功能，造成細胞死亡。烷基化劑的實例包括但不限於氮芥，諸如環磷醯胺、美法侖(melphalan)和苯丁酸氮芥(chlorambucil)；烷基磺酸酯，例如白消安(busulfan)；亞硝基尿素，諸如卡莫司汀(carmustine)；及三氮烯，諸如達卡巴仁(dacarbazine)。
環磷醯胺，2-[雙(2-氯乙基)氨基]四氫-2H-1,3,2-氧氮磷雜環己烯2-氧化物單水合物在市場上以成為注射溶液或錠劑的CYTOXAN®取得。環磷醯胺係以單一劑或與其他的化療劑組合而適用於治療惡性淋巴瘤、多發性骨髓 瘤和白血病。掉髮、噁心、嘔吐和白細胞減少症為環磷醯胺最常見的劑量限制副作用。
美法侖，4-[雙(2-氯乙基)胺基]-L-苯基丙胺酸在市場上以成為注射溶液或錠劑的ALKERAN®取得。美法侖適用於多發性骨髓瘤及不可切除的卵巢上皮癌的舒緩治療。骨髓抑制為美法侖最常見的劑量限制副作用。
苯丁酸氮芥，4-[雙(2-氯乙基)胺基]苯丁酸在市場上以LEUKERAN®錠劑取得。苯丁酸氮芥適用於慢性淋巴細胞性白血病及惡性淋巴瘤(諸如淋巴肉瘤、巨濾泡性淋巴瘤和霍奇金氏病的舒緩治療。骨髓抑制為苯丁酸氮芥最常見的劑量限制副作用。
白消安，1,4-丁二醇二甲磺酸酯在市場上以MYLERAN®錠劑取得。白消安適用於慢性骨髓性白血病的舒緩治療。骨髓抑制為白消安最常見的劑量限制副作用。
卡莫司汀，1,3-[雙(2-氯乙基)-1-亞硝基尿素在市場上以成為單一安瓶的凍乾物之BiCNU®取得。卡莫司汀係以單一劑或與其他劑組合而適用於腦瘤、多發性骨髓瘤、霍奇金氏病和非霍奇金氏金淋巴瘤的舒緩治療。延遲的骨髓抑制為卡莫司汀最常見的劑量限制副作用。
達卡巴仁，5-(3,3-二甲基-1-三氮烯基)-咪唑-4-甲醯胺在市場上以成為單一安瓶的物料之DTIC-Dome®取得。達卡巴仁適用於治療轉移性惡性黑素瘤，且與其他劑組合而用於作為霍奇金氏病之第二線治療。噁心、嘔吐和厭食為達卡巴仁最常見的劑量限制副作用。
抗生素抗贅瘤劑為非階段特異性藥劑，其係結合或插入DNA中。此作用通常產生穩定的DNA複合物或股斷裂，其破壞核酸的正常功能，導致細胞死亡。抗生素抗贅瘤劑的實例包括但不限於放線菌素，諸如更生黴素(dactinomycin)；蒽環黴素，諸如柔紅黴素(daunorubicin)和多柔比星(doxorubicin)；及博來黴素。
更生黴素(亦稱為放線菌素D)在市場上以注射形式的COSMEGEN®取得。更生黴素適用於治療威爾姆氏腫瘤和橫紋肌肉瘤。噁心、嘔吐和厭食 為更生黴素最常見的劑量限制副作用。
柔紅黴素，(8S-順-)-8-乙醯基-10-[(3-胺基-2,3,6-三去氧-α-L-來蘇(lyxo)-己哌喃糖基(hexopyranosyl))氧基]-7,8,9,10-四氫-6,8,11-三羥基-1-甲氧基-5,12-稠四苯二酮鹽酸鹽在市場上以微脂體注射形式的DAUNOXOME®或以注射液的CERUBIDINE®取得。柔紅黴素適用於急性非淋巴細胞性白血病和晚期HIV相關的卡波西氏肉瘤治療中的誘發緩解。骨髓抑制為柔紅黴素最常見的劑量限制副作用。
多柔比星，(8S,10S)-10-[(3-胺基-2,3,6-二去氧-α-L-來蘇-己哌喃糖基)氧基]-8-乙醇醯基-7,8,9,10-四氫-6,8,11-三羥基-1-甲氧基-5,12-稠四苯二酮鹽酸鹽在市場上以注射形式的RUBEX®或ADRIAMYCIN RDF®取得。多柔比星主要適用於治療急性淋巴母細胞性白血病和急性成骨髓母細胞性白血病，但亦為治療一些實體瘤和淋巴瘤的有用組份。骨髓抑制為多柔比星最常見的劑量限制副作用。
博來黴素(自輪絲鏈黴菌(Streptomyces verticillus)菌株分離之細胞毒素糖胜肽抗生素的混合物)在市場上以BLENOXANE®取得。博來黴素係以單一劑或與其他劑的組合而適用於鱗狀細胞癌、淋巴瘤和睪丸癌的舒緩治療。肺部和皮膚毒性為博來黴素最常見的劑量限制副作用。
拓撲異構酶II抑制劑包括但不限於表鬼臼毒素。
表鬼臼毒素為自曼德拉草(mandrake)植株所衍生的階段特異性抗贅瘤劑。表鬼臼毒素通常係藉由與拓撲異構酶II及DNA形成三元複合物，造成DNA股斷裂來影響細胞週期的S和G2期之細胞。股斷裂積聚及接著細胞死亡。表鬼臼毒素的實例包括但不限於依託泊苷(etoposide)和替尼泊苷(teniposide)。
依託泊苷，4'-去甲基-表鬼臼毒素9[4,6-0-(R)-亞乙基-β-D-哌喃葡萄糖苷]在市場上以成為注射溶液或膠囊的VePESID®取得且一般稱為VP-16。依託泊苷係以單一劑或與其他化療劑的組合而適用於治療睪丸癌和非小細胞肺癌。骨髓抑制為依託泊苷最常見的副作用。白細胞減少症的發生率傾向比 血小板減少症更嚴重。
替尼泊苷，4'-去甲基-表鬼臼毒素9[4,6-0-(R)-亞噻吩基-β-D-哌喃葡萄糖苷]在市場上以成為注射溶液的VUMON®取得且一般稱為VM-26。替尼泊苷係以單一劑或與其他化療劑的組合而適用於治療兒童急性白血病。骨髓抑制為替尼泊苷最常見的劑量限制副作用。替尼泊苷可能誘發白細胞減少症和血小板減少症。
抗代謝抗贅瘤劑為階段特異性抗贅瘤劑，其係藉由抑制DNA合成或藉由抑制嘌呤或嘧啶鹼合成且藉此限制DNA合成而在細胞週期的S期(DNA合成)起作用。因此，S期無法繼續及接著細胞死亡。抗代謝抗贅瘤劑的實例包括但不限於氟尿嘧啶、胺甲喋呤(胺甲喋呤)、阿糖胞苷(cytarabine)、巰嘌呤(mecaptopurin)、硫鳥嘌呤(thioguanine)和吉西他濱。
5-氟尿嘧啶，5-氟-2,4-(1H,3H)嘧啶二酮在市場上以氟尿嘧啶取得。投予5-氟尿嘧啶導致胸苷酸合成抑制且亦併入RNA和DNA中。結果通常是細胞死亡。5-氟尿嘧啶係以單一劑或與其他化療劑的組合兒適用於治療乳癌、結腸癌、直腸癌、胃癌和胰臟癌。骨髓抑制和黏膜炎為5-氟尿嘧啶的劑量限制副作用。其他的氟嘧啶類似物包括5-氟去氧尿苷(氟尿苷(floxuridine))和5-氟去氧尿苷單磷酸鹽。
阿糖胞苷，4-胺基-1-β-D-呋喃阿拉伯糖基-2(1H)-嘧啶酮在市場上以CYTOSAR-U®取得且一般稱為Ara-C。咸信阿糖胞苷係藉由將阿糖胞苷末端併入成長的DNA鏈中以抑制DNA鏈加長而在S-期展現階段特異性。阿糖胞苷係以單一劑或與其他化療劑的組合而適用於治療急性白血病。其他的胞苷類似物包括5-氮雜胞苷和2',2'-二氟去氧胞苷(吉西他濱)。阿糖胞苷誘發白細胞減少症、血小板減少症和黏膜炎。
巰嘌呤，1,7-二氫-6H-嘌呤-6-硫酮單水合物在市場上以PURINETHOL®取得。巰嘌呤係藉由至今尚未明的機制來抑制DNA合成而在S-期展現階段特異性。巰嘌呤係以單一劑或與其他化療劑的組合而適用於治療急性白血病。骨髓抑制和胃腸黏膜炎為高劑量巰嘌呤之預期副作用。有用的巰嘌呤 類似物為硫唑嘌呤(azathioprine)。
硫鳥嘌呤，2-胺基-1,7-二氫-6H-嘌呤-6-硫酮在市場上以TABLOID®取得。硫鳥嘌呤係藉由至今尚未明的機制來抑制DNA合成而在S-期展現階段特異性。硫鳥嘌呤係以單一劑或與其他化療劑的組合而適用於治療急性白血病。骨髓抑制(包括白細胞減少症、血小板減少症和貧血)為投予硫鳥嘌呤最常見的劑量限制副作用。然而，亦發生胃腸副作用且可能為劑量限制副作用。其他的嘌呤類似物包括噴司他汀(pentostatin)、赤羥基壬基腺嘌呤(erythrohydroxynonyl adenine)、氟達拉濱磷酸鹽(fludarabine phosphate)和克拉屈濱(cladribine)。
吉西他濱，2'-去氧-2',2'-二氟胞苷單鹽酸鹽(β-異構物)在市場上以GEMZAR®取得。吉西他濱係在S-期及藉由通過G1/S邊界來阻斷細胞進程而展現細胞階段特異性。吉西他濱係與順鉑組合而適用於治療局部的晚期非小細胞肺癌，及單獨用於治療局部的晚期胰臟癌。骨髓抑制(包括白細胞減少症、血小板減少症和貧血)為投予吉西他濱最常見的劑量限制副作用。
胺甲喋呤，N-[4[[(2,4-二胺基-6-喋啶基)甲基]甲基胺基]苯甲醯基]-L-麩胺酸在市場上以胺甲喋呤鈉取得。胺甲喋呤係藉由通過抑制合成嘌呤核苷酸及胸苷酸所需之二氫葉酸(dyhydrofolic acid)還原酶來由抑制DNA合成、修復和/或複製而在S-期展現細胞階段效應特異性。胺甲喋呤係以單一劑或與其他化療劑的組合而適用於治療絨毛膜癌，腦膜白血病，非霍奇金氏淋巴瘤，以及乳癌、頭癌、頸癌、卵巢癌和膀胱癌。骨髓抑制(白細胞減少症、血小板減少症和貧血)及黏膜炎為投予胺甲喋呤之預期副作用。
喜樹鹼(包括喜樹鹼和喜樹鹼衍生物)係以拓撲異構酶I抑制劑取得或在開發中。咸信喜樹鹼細胞毒性活性係與其拓撲異構酶I抑制活性有關。喜樹鹼的實例包括但不限於伊立替康、托泊替康和下文所述之7-(4-甲基哌基-亞甲基)-10,11-伸乙二氧基-20-喜樹鹼的各種光學形式。
伊立替康HCl，(4S)-4,11-二乙基-4-羥基-9-[(4-哌啶并哌啶基)羰氧基]-1H-哌喃并[3',4',6,7]吲并[1,2-b]喹啉-3,14(4H,12H)-二酮鹽酸鹽在市場 上以成為注射溶液的CAMPTOSAR®取得。
伊立替康為喜樹鹼的衍生物，其係與其活性代謝物SN-38一起結合至拓撲異構酶1-DNA複合物相。咸信細胞毒性係由於拓撲異構酶1：DNA：伊立替康或SN-38三元複合物與複製酶的交互作用而引起的不可修復之雙股斷裂而發生。伊立替康係適用於治療結腸或直腸的轉移癌。伊立替康HCl的劑量限制性副作用為骨髓抑制，包括嗜中性白細胞減少症和GI效應，包括腹瀉。
拓朴替康HCl，(S)-10-[(二甲基胺基)甲基]-4-乙基-4,9-二羥基-1H-哌喃并[C,4',6,7]吲并[1,2-b]喹啉-3,14-(4H,12H)-二酮單鹽酸鹽在市場上以成為注射溶液的HYCAMTIN®取得。拓朴替康為喜樹鹼的衍生物，其結合至拓撲異構酶1-DNA複合物且防止由拓撲異構酶I回應DNA分子的扭曲張力所造成的單股斷裂之再連接。拓朴替康係適用作轉移性卵巢癌和小細胞肺癌之第二線治療。拓朴替康HCl的劑量限制副作用為骨髓抑制，主要為嗜中性白細胞減少症。
另外，式(I)化合物可與一或多種可用於治療或治癒HIV的其他劑組合使用。
此等劑的實例包括但不限於：核苷酸反轉錄酶抑制劑，諸如齊多夫定(zidovudine)、去羥肌苷(didanosine)、拉米夫定(lamivudine)、紮西他濱(zalcitabine)、阿巴卡韋(abacavir)、司他維丁(stavidine)、阿德福韋(adefovir)、阿德福韋酯(adefovir dipivoxil)、福齊夫定(fozivudine)、托德西(todoxil)、恩曲他濱(emtricitabine)、阿洛夫定(alovudine)、安多賀韋(amdoxovir)、艾維他濱(elvucitabine)及類似的劑；非核苷酸反轉錄酶抑制劑(包括具有抗氧化活性之藥劑，諸如怡妙康(immunocal)、奧替普拉(oltipraz)等等)，諸如奈韋拉平(nevirapine)、地拉韋啶(delavirdine)、依發韋侖(efavirenz)、洛韋胺(loviride)、怡妙康、奧替普拉、卡普拉維林(capravirine)、樂斯維林(lersivirine)、GSK2248761、TMC-278、 TMC-125、異他維林(etravirine)及類似的劑；蛋白酶抑制劑，諸如沙奎那韋(saquinavir)、利托那韋(ritonavir)、茚地那韋(indinavir)、奈非那韋(nelfinavir)、安普那韋(amprenavir)、佛沙普那韋(fosamprenavir)、貝肯那韋(brecanavir)、地瑞那韋(darunavir)、阿紮那韋(atazanavir)、替拉那韋(tipranavir)、帕利那韋(palinavir)、拉辛那韋(lasinavir)及類似的劑；進入、附著及融合抑制劑，諸如恩福韋地(enfuvirtide)(T-20)、T-1249、PRO-542、PRO-140、TNX-355、BMS-806、BMS-663068和BMS-626529、5-Helix及類似的劑；整合酶抑制劑，諸如雷特格維(raltegravir)、艾維雷韋(elvitegravir)、杜魯特韋(dolutegravir)、卡博特韋(cabotegravir)及類似的劑；成熟抑制劑，諸如PA-344和PA-457及類似的劑；及CXCR4及/或CCR5抑制劑，諸如維克雷羅(vicriviroc)(Sch-C)、Sch-D、TAK779、馬拉維羅(maraviroc)(UK 427,857)、TAK449，以及那些在WO 02/74769、PCT/US03/39644、PCT/US03/39975、PCT/US03/39619、PCT/US03/39618、PCT/US03/39740和PCT/US03/39732中所揭示者，及類似的劑。
其中本發明化合物可與一或多種有用於預防或治療HIV之劑組合使用的更多實例可見於表1中。
本發明化合物與HIV劑的組合範圍不限於那些上文所提及者，但是原則上包括與有用於治癒或治療HIV之任何醫藥組合物的任何組合。如上文所述，在此等組合中，本發明化合物及其他的HIV劑可分開或聯合投予。另外，一種劑可在投予其他劑之前、同時或之後投予。
本發明化合物可與一或多種用作為藥理增強劑之劑以及與或不與用於預防或治療HIV之額外的化合物組合使用。該等藥理增強劑(或藥物動力學輔助劑)的實例包括但不限於利托那韋、GS-9350和SPI-452。利托那韋為10-羥基-2-甲基-5-(1-甲基乙基)-1-1[2-(1-甲基乙基)-4-噻唑基]-3,6-二酮基-8,11-雙(苯基甲基)-2,4,7,12-四氮雜十三烷-13-酸，5-噻唑基甲酯，[5S-(5S*,8R*,10R*,11R*)]且可自Abbott park(Illinois)之Abbott Laboratories以Norvir取得。利托那韋為與其他的抗反轉錄病毒劑一起適用於治療HIV感染之HIV蛋白酶抑制劑。利托那韋亦抑制P450媒介之藥物代謝以及P-醣蛋白(Pgp)細胞轉運系統，由此導致生物體內的活性化合物濃度增加。GS-9350為由Gilead Sciences of Foster City California所開發作為藥理增強劑之化合物。SPI-452為由Sequoia Pharmaceuticals of Gaithersburg,Maryland所開發作為藥理增強劑之化合物。
本發明提供治療或預防可藉由抑制EZH1及/或EZH2來改進自體免疫及發炎病況及疾病且由此例如調節甲基化激活及甲基化抑制之標的基因的表現水平或調節傳訊蛋白質的活性之方法。該方法可包含將治療有效量的本文所述之劑投予人類，例如需要其之人類。
發炎表示對創傷的血管、細胞和神經反應群組。發炎可以發炎的細胞(諸如單核細胞，嗜中性球和粒細胞)移動至組織中為特徵。這通常與降低的內皮屏障功能及組織中的水腫相關聯。可將發炎分類成急性或慢性。急性發炎為身體對有害刺激的最初反應且藉由增加血漿及白細胞自血液移動至受傷組織而達成。生化事件的級聯使發炎反應蔓延且成熟，涉及局部血管系統、免疫系統及受傷組織內部的各種細胞。延長發炎(稱為慢性發炎)導致在發炎部位存在的細胞類型中漸進式移動且以組織因發炎過程而同時破壞及 痊癒為特徵。
當發炎成為對感染之免疫反應的一部分或對創傷之急性反應而發生時，則發炎可為有利的且正常為自限性。然而，發炎可在各種狀況下是有害的。這包括對感染劑產生過度反應，這可導致顯著的器官損害及死亡(例如膿毒症的背景)。而且，慢性發炎通常是有害的且在許多慢性疾病的根源引起嚴重及不可逆轉的組織損害。在此等背景下，免疫反應時常針對自體組織(自體免疫)，雖然對外來實體的慢性反應亦可導致對自體組織的旁觀者(bystander)損害。
抗發炎療法的目標因此為降低此發炎、抑制在出現時的自體免疫且容許進行生理過程或痊癒及組織修復。
本劑可用於治療任何身體組織及器官的發炎，包括肌肉骨骼的發炎、血管發炎、神經發炎、消化系統發炎、眼部發炎、生殖系統發炎及其他的發炎，如下文舉例說明。
肌肉骨骼發炎係指肌肉骨骼系統之發炎病況，特別為那些影響骨骼關節(包括手、腕、肘、肩、顎、脊柱、頸、髖、膝、踝和腳)之病況及影響連接肌肉至骨(諸如筋)的組織之病況。可以本發明化合物治療之肌肉骨骼發炎的實例包括關節炎(包括例如骨關節炎、類風濕性關節炎、牛皮癬關節炎、強直性脊柱炎、急性和慢性感染性關節炎、與痛風與假痛風相關聯的關節炎和幼年特發性關節炎)、肌腱炎、滑膜炎、腱鞘炎、滑囊炎、纖維組織炎(纖維肌痛)、上髁炎、肌炎和骨炎(包括例如佩吉特(Paget)氏病、骨炎恥骨和纖維性骨炎囊性)。
眼部發炎係指眼睛的任何結構(包括眼瞼)發炎。可以本發明化合物治療之眼部發炎的實例包括瞼緣炎、眼瞼鬆弛、結膜炎、淚腺炎、角膜炎、乾燥性角膜結膜炎(乾眼)、鞏膜炎、倒睫和葡萄膜炎。
可以本發明治療之神經系統發炎的實例包括腦炎、格林-巴利(Guillain-Barre)症候群、腦膜炎、神經性肌強直、發作性睡病、多發性硬化症、脊髓炎和精神分裂症。
可以本發明治療之脈管或淋巴系統發炎的實例包括關節硬化症、關節炎、靜脈炎、血管炎和淋巴管炎。
可以本發明治療之消化系統發炎病況的實例包括膽管炎、膽囊炎、腸炎、小腸結腸炎、胃炎、腸胃炎、發炎性腸病、迴腸炎和直腸炎。
可以本發明治療之生殖系統發發炎性病況的實例包括子宮頸炎、絨毛膜羊膜炎、子宮內膜炎、附睾炎、臍炎、卵巢炎、睾丸炎、輸卵管炎、輸卵管卵巢膿腫、尿道炎、陰道炎、外陰炎和外陰痛。
本劑可用於治療具有發炎成分的自體免疫性病況。此等病況包括急性播散性全身禿髮症、白塞(Behcet)氏病、查加斯(Chagas)氏病、慢性疲勞症候群、自主神經功能異常、腦脊髓炎、強直性脊柱炎、再生障礙性貧血、化膿性汗腺炎、自體免疫性肝炎、自體免疫性卵巢炎、乳糜瀉、克隆(Crohn)氏病、1型糖尿病、巨細胞性動脈炎、古德帕斯徹(goodpasture)氏症候群、葛瑞夫茲(Grave)氏病、格林-巴利症候群、橋本(Hashimoto)氏病、過敏性紫癜(Henoch-Schönlein purpura)、川崎(Kawasaki)氏病、紅斑狼瘡、微小性結腸炎、微小性多動脈炎、混合性結締組織病、多發性硬化、重症肌無力、眼陣攣肌陣攣症候群、視神經神經炎、奧德(ord)氏甲狀腺炎、天皰瘡、結節性多動脈炎、多肌痛、萊特爾(Reiter)氏症候群、修格連(Sjogren)氏症候群、顯動脈炎、韋格納(Wegener)氏肉芽腫病、溫暖的自體免疫性溶血性貧血、間質性膀胱炎、萊姆病、硬斑病、結節病、硬皮病、潰瘍性結腸炎和白斑症。
本劑可用於治療具有發炎成分的T-細胞媒介之過敏性疾病。此等病況包括接觸性過敏反應、接觸性皮膚炎(包括由於毒藤)、蕁痲疹、皮膚過敏、呼吸道過敏(枯草熱、過敏性鼻炎)和麩質敏感性腸疾(乳糜瀉)。
可以本發明治療之其他的發炎病況包括例如闌尾炎、皮膚炎、皮肌炎、心內膜炎、纖維組織炎、齒齦炎、舌炎、肝炎、化膿性汗腺炎、虹膜炎、喉炎、乳腺炎、心肌炎、腎炎、耳炎、胰腺炎、腮腺炎、心囊炎、腹膜炎、咽炎、胸膜炎、肺炎、前列腺炎、腎盂腎炎和口腔炎、移植排斥(包含器官、 諸如腎、肝、心臟、肺、胰腺(例如胰島細胞)、骨髓、角膜、小腸、皮膚同種異體移植、皮膚同種移植和心臟瓣膜異種移植、血清病及移植物抗宿主病)、急性胰腺炎、慢性胰腺炎、急性呼吸窘迫症候群、塞扎萊(Sexary)氏症候群、先天性腎上腺增生、非化膿性甲狀腺炎、與癌症相關的高鈣血症、天皰瘡、大皰性皰疹樣皮炎、重度多形紅斑、剝脫性皮膚炎、脂漏性皮膚炎、季節性或常年性過敏性鼻炎、支氣管哮喘、接觸性皮膚炎、異位性皮膚炎、藥物過敏反應、過敏性結膜炎、角膜炎、眼帶狀皰疹、虹膜炎和oiridocyclitis、脈胳膜視網膜炎、視神經炎、症狀性類肉瘤病、暴發性或播散性肺結核化療、成人特發性血小板減少性紫癜、成人繼發性血小板減少症、後天性(自體免疫性)溶血性貧血、成人白血病和淋巴瘤、兒童急性白血病、局限性腸炎、自體免疫性血管炎、多發性硬化症、慢性阻塞性肺疾病、實體器官移植排斥反應、敗血症。
較佳的治療包括移植排斥、牛皮癬關節炎、多發性硬化症、1型糖尿病、哮喘、全身性紅斑性狼瘡、慢性肺疾病和伴隨感染性病況(例如敗血症)之發炎的治療中之任一者。
醫藥組成物可以每單位劑量含有預定量的活性成分之單位劑型呈現。此等單位可可取決於治療之病況、投予路徑及病患的年齡、體重和狀況而含有例如0.5毫克至1克，較佳為1毫克至700毫訥，更佳為5毫克至100毫克式(I)化合物，或醫藥組成物可以每單位劑量含有預定量的活性成分之單位劑型呈現。較佳的單位劑量組成物為那些含有如上文所引述之日劑量或亞劑量的活性成分，或其適當部分的組成物。此外，此等醫藥組成物可以藥學技術中熟知的任何方法來製備。
醫藥組成物可適用以任何適當的路徑投予，例如經口(包括口腔或舌下)、直腸、鼻、局部(包括口腔、舌下或經皮)、陰道或非經腸(包括皮下、肌肉內、靜脈內或穿透內膚)路徑。此等組成物可以藥學技術中已知的任何方法來製備，例如藉由使式(I)化合物與載劑或賦形劑達成締合。
適用於經口投予之醫藥組成物可以分立單元呈現，如膠囊或錠劑；粉 劑或顆粒；在水性或非水性液體中的溶液或懸浮液；可食用發泡體或氣泡體；水包油型液體乳液或油包水型液體乳劑。
膠囊係藉由製備如上文所述之粉末混合物且填充至成形的明膠鞘中而製成。可將助滑劑及潤滑劑(諸如膠體二氧化矽，滑石，硬脂酸鎂，硬脂酸鈣或固體聚乙二醇)在填充操作之前添加至粉末混合物中。在以膠囊服用時，亦可添加崩解劑或增溶劑(諸如瓊脂-瓊脂，碳酸鈣或碳酸鈉)以改進藥劑的利用率。
而且，當有要求或必要時，亦可將適合的黏合劑、潤滑劑、崩解劑及著色劑併入混合物中。適合的黏合劑包括澱粉、明膠、天然糖(諸如葡萄糖或β-乳糖)、玉米甜味劑、天然和合成膠(諸如阿拉伯膠、黃蓍膠或藻酸鈉)、羧甲基纖維素、聚乙二醇、蠟及類似物。在該等劑型中所使用的潤滑劑包括油酸鈉、硬脂酸鈉、硬脂酸鎂、苯甲酸鈉、乙酸鈉、氯化鈉及類似物。崩解劑包括而不限於澱粉、甲基纖維素、瓊脂、膨潤土、黃原膠及類似物。在該等劑型中所使用的潤滑劑包括油酸鈉、硬脂酸鈉、硬脂酸鎂、苯甲酸鈉、乙酸鈉、氯化鈉及類似物。崩解劑包括而不限於澱粉、甲基纖維素、瓊脂、膨潤土、黃原膠及類似物。錠劑係例如藉由製備粉末混合物、造粒或結塊、添加潤滑劑和崩解劑及壓製成錠劑來調配。粉末混合物係藉由將適當粉碎之化合物與如上述之稀釋劑或鹼及視需要地與黏合劑(諸如羧甲基纖維素、藻酸酯、明膠或聚乙烯基吡咯啶酮)、溶液阻滯劑(諸如石蠟)、再吸收促進劑(諸如四級鹽)及/或吸收劑(諸如膨潤土、高嶺土或磷酸二鈣)混合而製得。粉末混合物可藉助於添加硬脂酸、滑石或礦物油而以錠劑成形模具造錠。接著將潤滑之混合物壓製成錠劑。亦可將本發明化合物與自由流動的惰性載劑組合且無需通過造粒或結塊步驟而直接壓製成錠劑。可提供由蟲膠，糖包膜或聚合物材料所組成之透明或不透明的保護包膜及蠟的拋光包膜。可將染料添加至該等包膜中以區分不同的單位劑量。
可將經口流體(諸如溶液，糖漿和酏劑)製備成劑量單位形式，使得給定之量含有預定量的式(I)化合物。糖漿可藉由將化合物溶解在適當調味的水 溶液中而製得，而酏劑係通過使用無毒性醇媒劑而製得。懸浮液可藉由將化合物分散在無毒性媒劑中而製得。亦可添加增溶劑及乳化劑(諸如乙氧基化異硬脂醇和聚氧乙烯山梨醇醚)、防腐劑、調味添加劑(諸如薄荷油、天然甜味劑或糖精或其他人造甜味劑)及類似者。
在適當時，可將經口投予之單位劑量醫藥組成物微膠囊化。亦可將調配物製備成延長或持續釋放，例如藉由將微粒材料包膜或包埋在聚合物、蠟或類似者中。
適用於經直腸投予之醫藥組成物可以栓劑或灌腸劑呈現。
適用於經陰道投予之醫藥組成物可以子宮托、棉塞、霜劑、凝膠、糊劑、泡沫劑或噴霧調配物呈現。
適用於非經腸投予之醫藥調配物包括水性和非水性無菌注射溶液，其可包含抗氧化劑、緩衝劑、制菌劑及使組成物物與意欲之接受者的血液具有等滲透壓之溶質，及水性和非水性無菌懸浮液，其可包括懸浮劑和增稠劑。醫藥組成物可以單位劑量或多次劑量容器呈現，例如密封式安瓶和小瓶，且可貯存在冷凍乾燥(凍乾)條件中，僅需要在使用前立即添加無菌液體載劑(例如注射用水)。即用之注射溶液和懸浮液可自無菌粉劑、顆粒和錠劑製備。
應瞭解除了特別於上文提及的成分以外，醫藥組成物可包括在關於討論中的調配物類型之本技術中習知的其他劑，例如那些適合於經口投予之醫藥組成物可包括調味劑。
本發明化合物的治療有效量將取決於許多因素而定，例如意欲之接受者的年齡和體重、需要治療的確切病況和其嚴重性、調配物的本性及投予路經，且最終由開藥劑處方之醫師判斷。然而，用於治療貧血之式(I)化合物的有效量通常係在每天0.001至100毫克/接受者之公斤計體重的範圍內，適合在0.01至100毫克/公斤計體重的範圍內。關於70公斤的成年哺乳動物，每天的實際量可適合為從7至700毫克，且該量可以每天單一劑量或以每天幾次(諸如二、三、四、五或六次)亞劑量給予，使得總日劑量相同。鹽或溶 劑合物等等的有效量可以式(I)化合物本身的有效量依比例測定。可設想類似的劑量適合於治療上文述及的其他病況。
定義
術語係以其公認的意義使用。下列的定義旨在闡明而非限制所定義之術語。
如本文所使用的術語「烷基」代表具有指定的碳原子數目的飽和、直鏈或支鏈烴部分。術語「(C1-C4)烷基」係指含有從1至4個碳原子的烷基部分。舉例的烷基包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第二丁基和第三丁基。
「烷氧基」係指含有通過氧原子連接的上文定義之烷基的基團。術語「(C1-C4)烷氧基」係指通過氧原子連接的具有至少1個及至多4個碳原子的直鏈或支鏈烴基。在本發明中有用的舉例之「(C1-C4)烷氧基」包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、第二丁氧基、異丁氧基和第三丁氧基。
當術語「烷基」與其他的取代基組合使用時，諸如「鹵(C1-C4)烷基」、「羥基(C1-C4)烷基」或「(C1-C4)烷氧基(C1-C4)烷基」，則術語「烷基」意欲包含二價直鏈或支鏈烴基，其中連接點係通過烷基部分。術語「鹵(C1-C4)烷基」意欲代表在含有從1至4個碳原子的烷基部分之一或多個碳原子上具有一或多個可相同或不同的鹵素原子之基團，其可為直鏈或支鏈碳基團。在本發明中有用的舉例之「鹵(C1-C4)烷基」包括但不限於-CF3(三氟甲基)、-CCl3(三氯甲基)、1,1-二氟乙基、2-氟-2-甲基丙基、2,2-二氟丙基、2,2,2-三氟乙基和六氟異丙基。在本發明中有用的「羥基(C1-C4)烷基」的實例包括但不限於羥基甲基、羥基乙基和羥基異丙基。在本發明中有用的「(C1-C4)烷氧基(C1-C4)烷基」的實例包括但不限於甲氧基甲基、甲氧基乙基、甲氧基異丙基、乙氧基甲基、乙氧基乙基、乙氧基異丙基、異丙氧基甲基、異丙氧基乙基、異丙氧基異丙基、第三丁氧基甲基、第三丁氧基乙基和第三 丁氧基異丙基。
當術語「烷氧基」與其他的取代基組合使用時，諸如「羥基(C2-C4)烷氧基-」或「(C1-C4)烷氧基(C2-C4)烷氧基-」，則術語「烷氧基-」意欲包含通過氧原子連接的二價直鏈或支鏈烴基，其中連接點係通過烷氧基的烷基部分。在本發明中有用的「羥基(C2-C4)烷氧基-」的實例包括但不限於羥基乙氧基、羥基丙氧基和羥基丁氧基。在本發明中有用的「(C1-C4)烷氧基(C2-C4)烷氧基-」的實例包括但不限於甲氧基乙氧基、甲氧基丙氧基、甲氧基丁氧基、乙氧基乙氧基、乙氧基丙氧基、乙氧基丁氧基、異丙氧基乙氧基、異丙氧基丙氧基、異丙氧基丁氧基、第三丁氧基乙氧基、第三丁氧基丙氧基和第三丁氧基丁氧基。
如本文所使用的術語「環烷基」係指含有指定的碳原子數目的非芳族、飽和、環狀烴環。術語「(C3-C6)環烷基」係指具有3至6個環碳原子的非芳族環狀烴環。在本發明中有用的舉例之「(C3-C6)環烷基」包括環丙基、環丁基、環戊基和環己基。
術語「鹵素」及「鹵基」代表氟、氯、溴或碘取代基。「羥基」意欲代表-OH基。「氰基」意欲代表-CN基。「酮基」代表雙鍵結之氧部分；例如若直接連接至碳原子，則形成羰基部分(C=O)。
如本文所使用的術語「視需要地」意指後續說明之事件可能或不可能發生，且同時包括發生的事件及不發生的事件。
如本文所使用的術語「治療」係指減輕指定之病況、消除或減少病況的一或多個徵候、減慢或消除病況的進展、及延遲在先前患病或診斷之病患或個體中的病況復發。
「治癒(cure)」或「治癒(curing)」病患的疾病係用於代表經限定的時期根絕、停止、終止或結束人類免疫缺乏病毒或徵候，或徵候或病毒的進展。作為一實例，在一個實施態樣中，「治癒(cure)」或「治癒(curing)」係指以單獨或與一或多種其他化合物組合的治療投予或組合投予誘發或維持在最少兩年沒有任何其他的治療干預之後仍持續的人類免疫缺乏病毒之病毒控 制(以例如聚合酶鏈反應(PCR)試驗、bDNA(支鏈DNA)試驗或NASBA(依賴核酸序列擴增法)試驗沒有可偵測的血漿病毒血症含量)。上述的PCR、bDNA及NASBA試驗係使用熟習本技術領域者已知且熟悉的技術進行。作為一實例，根絕、停止、終止或結束人類免疫缺乏病毒或徵候，或徵候或病毒的進展可維持最少兩年。
如本文所使用的術語「有效量」意指例如由研究人員或臨床醫師探索將引出組織、系統，動物或人類的生物或醫學反應的藥物或醫藥劑之量。
術語「治療有效量」意指與未接受此量之對應個體相比而導致疾病、病症或副作用的治療改進、痊癒或改善，或降低疾病或病症進展的速度之量。該術語亦包括在其範圍內有效提高正常的生理功能之量。可將用於治療之治療有效量的式(I)化合物以及其鹽以原料化學投予。另此，活性成分可以醫藥組成物呈現。
化合物製備 縮寫
通用合成程序
本發明化合物可以多種方法製成，包括熟知的標準合成方法。在下文闡述例證的通用合成方法且接著於操作實施例中製備本發明特定的化合物。熟習本技術領域者將理解若本文所述之取代基與本文所述之合成方法不相容，則可將取代基以對反應條件穩定之適合的保護基保護。保護基可在反應順序中適合的點移除，以提供所欲中間物或標的化合物。在下文所述之所有流程中，依照合成化學的通用原理，在必要時對敏感性或反應性基團使用保護基。保護基係根據標準的有機合方法操作(T.W.Green and P.G.M.Wuts,(1991)Protecting Groups in Organic Synthesis,John Wiley & Sons，併入本文以參考有關的保護基)。該等基團係在化合物合成的適宜階段使用那些熟習本技術領域者輕易明白的方法移除。方法以及反應條件的選擇及彼等執行的次序應符合本發明化合物的製備作用致。起始材料係於市場上取得或自市場上取得的起始材料使用那些熟習本技術領域者已知的方法製成。
特定的式(I)化合物可根據流程1或類似的方法製備。將經適當取代之噻吩甲醛與硝甲烷縮合以提供對應之硝基乙烯基噻吩。還原硝基乙烯基，接著捕集所生成的胺，得到對應之胺甲酸乙酯。以POCl3/POCl5處理胺甲酸乙酯以供給內醯胺。以經銥媒介之硼化作用，接著與經適當取代之三氟甲磺酸酯的Suzuki偶合反應得到對應之偶合烯烴。還原烯烴，接著以內醯胺氮與經適當取代之烷基鹵的烷基化作用供給制訂的噻吩內醯胺。以移除苯甲基及第三丁基羰基保護基提供吡啶酮。以經適當取代之醛的還原胺化作用供給式(I)化合物。
額外的式(I)化合物可根據流程2或類似的方法製備。以經適當取代之噻吩-3-羧酸的酯化作用提供對應之酯。與經適當取代之酐(或醯基氯)的經銦媒介之醯化作用供給5-醯基噻吩。與經適當取代之酮的McMurray偶合反應供給經四取代之烯烴。以酯之皂化作用，接著以所得羧酸與經適當取代之胺的偶合反應供給對應之吡啶酮。與經適當取代之醛的還原烷基化作用供給 式(I)化合物。
同樣地，式(I)化合物可根據流程3或類似的方法製備。以經適當取代之噻吩-3-羧酸的皂化作用提供對應之酯。與經適當取代之酐(或醯基氯)的經銦媒介之醯化作用供給5-醯基噻吩。與經適當取代之酮的McMurray偶合反應供給經四取代之烯烴。與經適當取代之烷基鹵的烷基化作用或與經適當取代之醛的還原胺化作用供給經取代之衍生物。以酯之皂化作用，接著以所得羧酸與經適當取代之胺的偶合反應供給式(I)化合物。
流程3：式(I)化合物之合成
額外的式(I)化合物可根據流程4或類似的方法製備。自其對應之Weinreb醯胺形成經適當取代之酮係以適當的Grignard(或烷基鋰)試劑完成。形成對應之乙烯基三氟甲磺酸酯，接著與經適當取代之溴噻吩的經鈀媒介之偶合反應供給經三取代之烯烴。還原烯烴，接著經適當取代之烷基鹵的烷基化作用或與經適當取代之醛的還原胺化作用供給經取代之衍生物。以酯之皂化作用，接著以所得羧酸與經適當取代之胺的偶合反應供給式(I)化合物。
流程4：式(I)化合物之合成
在流程1中的6-員內醯胺中間物亦可根據流程5或類似的方法製備。以經銥媒介之硼化作用，接著與經適當取代之三氟甲磺酸酯的Suzuki偶合反應得到對應之偶合烯烴。以烯烴的經銥媒介之不對稱環原作用，接著以溴化作用提供溴噻吩。以溴噻吩與異唑-硼酸酯的經鈀媒介之Suzuki偶合反應，接著以開環供給腈。以腈之還原作用及分子內醯胺形成作用供給制訂之噻吩內醯胺中間物。
流程5：內醯胺中間物之合成
額外的式(I)化合物可根據流程6或類似的方法製備。以如上述流程5所製備的溴噻吩與烯丙醇的經鈀媒介之Heck偶合反應，接著以所得醛與經適當取代之胺的還原胺化作用供給二級胺。以酯之皂化作用及分子內醯胺形成作用供給制訂之噻吩內醯胺。以移除甲基及第三丁基羰基保護基提供吡啶酮。經適當取代之醛的還原烷基化作用供給式(I)化合物。
流程6：式(I)化合物之合成
實驗
下列的指導方針應用於本文所述之所有實驗。所有的反應皆在正氮氣壓下使用烘箱乾燥之玻璃器具進行，除非另有其他指示。設計的溫度為內部(亦即浴溫)且為大約值。空氣及濕氣敏感液體係由注射器轉移。以收到的試劑原樣子使用。所使用的溶劑為那些由供應商列示為「無水」溶劑。列示之溶液中的試劑莫耳數為大約值且以未對應於標準物預先滴定而使用。所有的反應係以攪拌棒攪動，除非另有其他指示。加熱係使用含有矽油的加熱浴進行，除非另有其他指示。以微波照射(在2.45GHz下0-400W)進行的反應係使用具有Biotage®微波EXP小瓶(0.2-20毫升)及隔墊和瓶蓋的Biotage® Initiator 2.0儀器達到。以溶劑及離子電荷為基準而使用的照射水平(亦即高、中、低)係根據供應商規範。冷卻至-70℃之溫度係使用乾冰/丙酮 或乾冰/2-丙醇進行。用作為乾燥劑的硫酸鎂及硫酸鈉具有無水等級且可交換使用。如本文所述「在真空中」或「在減壓下」移除溶劑係以旋轉蒸發達到。
製備性正相矽膠層析術係使用具有with RediSep或ISCO® Gold矽膠匣(4克-330克)之Teledyne ISCO® CombiFlash Comoanion儀器或具有SF25矽膠匣(4克-330克)之Analogix® IF280儀器或具有HP®矽膠匣(10克-100克)之Biotage® SP1儀器進行。以反相HPLC純化係使用作為固相之YMC-填充管柱(ODS-A 75x30毫米)進行，除非另有其他註明。使用A(CH3CN-0.1% TFA)：B(水-0.1% TFA)之25毫升/分鐘的移動相，10-80%梯度A(10分鐘)，以214奈米之UV偵測，除非另有其他註明。
A PE Sciex® API 150單一四極桿質譜儀(PE Sciex,Thornhill,Ontario,Canada)係使用正離子偵測模式的電噴灑游離法操作。霧化氣體係自零級空氣產生器(Balston Inc.,Haverhill,MA,USA)產生且以65psi輸送，及氣簾氣體為自Dewar液態氮容器以50psi輸送的高純度氮氣。施予電噴灑針之壓力為4.8kV。孔設定在25V且質譜儀係使用0.2amu之步階質量以0.5次掃描/秒之速率掃描且收集剖面數據。
方法A，LCMS。樣品係使用配備有執行注射至Valco 10-埠注射閥的Hamilton® 10微升注射器之CTC® PAL自動取樣器(LEAP Technologies,Carrboro,NC)引入質譜儀內。HPLC泵為以0.3毫升/分鐘及線性梯度4.5% A至90% B經3.2分鐘且保持0.4分鐘操作之Shimadzu® LC-10ADvp(Shimadzu Scientific Instruments,Columbia,MD)。移動相係由容器A中的100%(H2O 0.02% TFA)及容器B中的100%(CH3CN 0.018% TFA)所組成。固定相為Aquasil®(C18)及管柱尺寸為1毫米x 40毫米。以UV在214奈米下、蒸發光-散射(ELSD)及MS偵測。
方法B，LCMS。另一選擇地使用具有LC/MS之Agilent® 1100分析級HPLC系統，且在1毫升/分鐘及線性梯度5% A至100% B經2.2分鐘且保持0.4分鐘操作。移動相係由容器A中的100%(H2O 0.02% TFA)及容器B中的 100%(CH3CN 0.018% TFA)所組成。固定相為具有3.5微米粒徑之Zobax®(C8)及管柱尺寸為2.1毫米x 50毫米。以UV在214奈米下、蒸發光-散射(ELSD)及MS偵測。
方法C，LCMS。另一選擇地使用具備有(50×4.6毫米，5微米)之毛細管柱的MDSSCIEX® API 2000。HPLC係在配備有以CH3CN：NH4OAc緩衝液溶析之管柱Zorbax® SB-C18(50×4.6毫米，1.8微米)的Agilent® 1200系列UPLC系統上進行。
1H-NMR光譜係在400MHz下使用Bruker® AVANCE 400MHz儀器記錄，以ACD Spect manager v.10用於再處理。所標明之多重性為：s=單峰，d=雙重峰，t=三重峰，q=四重峰，sxt=六重峰，m=多重峰，dd=雙重的雙重峰，dt=三重的雙重峰等等，且br標明寬峰信號。所有的NMR係於DMSO-d6中，除非另有其他註明。
分析級HPLC：將產物以Agilent® 1100分析級層析術系統分析，其具有4.5 x 75毫米Zorbax® XDB-C18管柱(3.5微米)，以2毫升/分鐘及梯度從5% CH3CN(0.1%甲酸)至H2O(0.1%甲酸)中的95% CH3CN(0.1%甲酸)經4分鐘且保持1分鐘。
中間物 中間物1 a)2-(苯甲氧基)-4,6-二甲基菸鹼腈
將甲苯(50毫升)中的2-羥基-4,6-二甲基菸鹼腈(5克，33.7毫莫耳)之溶液以BnCl(4.70毫升，40.5毫莫耳)及Ag2O(8.60克，37.1毫莫耳)處理，接著在110℃下攪拌隔夜。將反應經由Celite®過濾且將固體以DCM(2 x 100毫升)清洗。將合併的有機層以食鹽水(30毫升)清洗，經由Na2SO4過濾且在真空中 濃縮，以給出殘餘物。將殘餘物經由使用石油醚中的20-30% DCM之矽膠塞純化。將所欲流份合併且濃縮，以供給成為白色固體的2-(苯甲氧基)-4,6-二甲基菸鹼腈(9克，35.9毫莫耳，>100%產率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 7.47-7.56(m,2H),7.31-7.43(m,3H),6.72(s,1H),5.51(s,2H),2.48(d,J=3.03Hz,6H)。MS(ES)[M+H]+ 239.0。
b)2-(苯甲氧基)-4,6-二甲基菸鹼醛
將1M DIBAL-H之甲苯溶液(43.1毫升，43.1毫莫耳)經由注射器緩慢地添加至惰性氣體下在DCM(100毫升)中的2-(苯甲氧基)-4,6-二甲基菸鹼腈(9克，35.9毫莫耳)之冷卻(冰浴)溶液中。將反應在0℃下攪拌20分鐘，在此時移除冰浴且將反應在室溫下攪拌隔夜。LCMS顯示剩餘~14%之起始材料。添加額外部分的1M DIBAL-H之甲苯溶液(10.76毫升，10.76毫莫耳)且將反應在室溫下繼續攪拌。LCMS表明反應完成。將反應冷卻(冰浴)且以1N HCl(50毫升)萃滅。**小心放熱。將反應攪拌30分鐘，直到鋁鹽自由流動為止。將反應以2.5N NaOH(~15毫升，~pH7.5)中和。將雙相混合物過濾且將過濾物以DCM(100毫升，2X)清洗。將層分離且將水層以DCM(100毫升)萃取。將合併的有機層以食鹽水(30毫升)清洗，經由Na2SO4過濾且在真空中濃縮。將殘餘物以快速層析術純化(管柱：80克矽膠。溶析劑：庚烷中的0-5% EtOAc。梯度：15分鐘)。將所欲流份合併且在真空中濃縮，以給出成為白色蓬鬆固體的2-(苯甲氧基)-4,6-二甲基菸鹼醛(3.5克，14.36毫莫耳，40.0%產率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 10.58(s,1H),7.49(d,J=7.07Hz,2H),7.31-7.44(m,3H),6.67(s,1H),5.54(s,2H),2.59(s,3H),2.50(s,3H)。MS(ES)[M+H]+ 242.1,[M+Na]+ 264.0。
c)(2-(苯甲氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲醇
將MeOH(100毫升)中的2-(苯甲氧基)-4,6-二甲基菸鹼醛(3.46克，14.34毫莫耳)之懸浮液保存在惰性氛圍下且在冰浴中冷卻至0℃。將NaBH4(0.651克，17.21毫莫耳)以兩部分添加至攪拌的懸浮液中。懸浮液在添加第一部分硼氫化物之後成為溶液。將反應在0℃下攪拌10分鐘，在此時移除冰浴且將反應在室溫下攪拌隔夜。在真空中移除反應溶劑且將剩餘的白色固體殘餘物分溶在飽和NaHCO3(60毫升)與EtOAc(125毫升)之間。將水層以EtOAc(125毫升)萃取。將合併的有機層以食鹽水(20毫升)清洗，經由Na2SO4過濾且在真空中濃縮，以給出成為無色半透明油的(2-(苯甲氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲醇(3.5克，14.39毫莫耳，100%產率)，其以未進一步純化而前進至下一步驟。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 7.44-7.53(m,2H),7.30-7.43(m,3H),6.63(s,1H),5.46(s,2H),4.72(s,2H),2.43(s,3H),2.35(s,3H),2.25(br.s.,1H)。MS(ES)[M+H]+ 244.1。
d)2-(苯甲氧基)-3-(氯甲基)-4,6-二甲基吡啶
將DCM(70毫升)中的(2-(苯甲氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲醇(3.5克，14.39毫莫耳)之懸浮液保存在惰性氛圍下且在乾冰/CH3CN浴中經30分鐘冷卻至-40℃。將2M SOCl2之DCM溶液(10.79毫升，21.58毫莫耳)以一份添加至驟冷溶液中且將反應在-40℃下繼續攪拌。在1小時之後，LCMS顯示剩下5%之起始材料。添加額外的2M SOCl2之DCM溶液(1.439毫升，2.88毫莫耳)且繼續反應。在20分鐘之後，將反應倒入冰水中且將pH以飽和NaHCO3(30毫升)調整至7-8。將水層以DCM(125毫升，2X)萃取。將合併的有機層以食鹽水(50毫升)清洗，經由Na2SO4過濾且在真空中濃縮。將殘餘物以快速層析 術純化(管柱：80克矽膠。溶析劑：0-10% EtOAc/庚烷。梯度：14分鐘)，以給出成為無色油的2-(苯甲氧基)-3-(氯甲基)-4,6-二甲基吡啶(2.84克，10.74毫莫耳，74.7%產率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 7.48-7.57(m,2H),7.30-7.45(m,3H),6.64(s,1H),5.47(s,2H),4.74(s,2H),2.43(s,3H),2.38(s,3H)。MS(ES)[M+H]+ 262.1。
中間物2 (Z)-4-(1-(((三氟甲基)磺醯基)氧基)丙-1-烯-1-基)哌啶-1-羧酸第三丁酯
a)4-丙醯基哌啶-1-羧酸第三丁酯
將2N氯化乙基鎂之THF溶液(28毫升，56.0毫莫耳)逐滴添加至0℃(冰浴)及氮氣下在THF(100毫升)中的4-(甲氧基(甲基)胺甲醯基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(10.0克，36.7毫莫耳)之攪拌溶液中。將反應在0℃下攪拌4小時，接著以飽和NH4Cl萃滅，以EtOAc萃取，以水清洗，乾燥(Na2SO4)，過濾且在真空下蒸發至乾燥。將粗製產物以矽膠層析術純化(Isco® RediSep Rf Gold 220克，己烷中的0至40% EtOAc)。(UV負型，以EtOH中的H2SO4焦化而顯現)。將純的流份合併且蒸發至乾燥，以給出成為無色油的4-丙醯基哌啶-1-羧酸第三丁酯(8.10克，33.6毫莫耳，91%產率)。MS(ES)[M+H]+ -異伸丁基-18 167.9,[M+H]+ -異伸丁基186.0,M+Na+ 264.1。
b)(Z)-4-(1-(((三氟甲基)磺醯基)氧基)丙-1-烯-1-基)哌啶-1-羧酸第三丁酯
將1N NaHMDS之THF溶液(31毫升，31.0毫莫耳)逐滴添加至-78℃及氮氣下在THF(80毫升)中的4-丙醯基哌啶-1-羧酸第三丁酯(6.9克，28.6毫莫耳)之攪拌溶液中。將反應在-78℃下攪拌1小時。接著經5分鐘逐滴添加在THF(50毫升)中的1,1,1-三氟-N-(吡啶-2-基)-N-((三氟甲基)磺醯基)-甲烷磺醯胺(11.4克，31.8毫莫耳)之溶液。將反應在-78℃下攪拌1小時，接著在0℃下攪拌30分鐘。將反應以水(150毫升)萃滅，以EtOAc(2 x 150毫升)萃取，以水清洗，乾燥(Na2SO4)，過濾且在真空下濃縮。將粗製產物以矽膠層析術純化(Isco® RediSep Rf Gold 220克，庚烷中的0至20% EtOAc)。(UV負型，以EtOH中的H2SO4焦化而顯現)。將純的流份合併且蒸發至乾燥，以給出成為無色油的(Z)-4-(1-(((三氟甲基)磺醯基)氧基)丙-1-烯-1-基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(9.15克，24.51毫莫耳，86%產率)。MS(ES)[M+H]+-異伸丁基318.1。
中間物3 a)4-甲基噻吩-3-羧酸甲酯
將1.3N氯化異丙基鎂氯化鋰複合物之THF溶液(90毫升，117毫莫耳)逐滴添加至氮氣及室溫下在THF(100毫升)中的3-溴-4-甲基噻吩(20.0克，113毫莫耳)之攪拌溶液中。將反應攪拌隔夜。將反應冷卻至-78℃且以氯甲酸甲酯(12毫升，155毫莫耳)處理。容許反應溫熱至室溫且攪拌1小時。將反應以EtOAc稀釋，以飽和NaHCO3清洗，攪拌30分鐘(形成停留在水相中的白色懸浮液)，以水清洗，乾燥(Na2SO4)，過濾且在真空下濃縮。將產物在真空下及在44至55℃(油浴50至75℃)下經短徑蒸餾(4至2毫米Hg)。將主要及後來的部分合併，以給出成為澄清液體的產物4-甲基噻吩-3-羧酸甲酯(13.2克，85 毫莫耳，74.8%產率)。MS(ES)[M+H]+ 156.8。
b)4-甲基-5-丙醯基噻吩-3-羧酸甲酯
將LiClO4(4.0克，37.6毫莫耳)、丙酸酐(5.87毫升，38.4毫莫耳)及In(OTf)3(0.9克，1.601毫莫耳)添加至CH3NO2(50毫升)中的4-甲基噻吩-3-羧酸甲酯(5.0克，32.0毫莫耳)之攪拌溶液中。將反應在50℃下攪拌2小時。LCMS顯示反應完成。將反應以水(100毫升)稀釋，以DCM(2x 50毫升)萃取，乾燥(Na2SO4)，過濾且在真空下蒸發至乾燥。將剩餘的棕色固體以矽膠層析術純化(Isco® RediSep Rf Gold 120克，己烷中的0至25% EtOAc)(裝載DCM)。將純的流份合併且蒸發至乾燥。將剩餘的淺黃色固體以己烷濕磨，過濾且在真空下乾燥，以給出成為白色固體的產物4-甲基-5-丙醯基噻吩-3-羧酸甲酯(4.60克，21.67毫莫耳，67.7%產率)。MS(ES)[M+H]+ 212.9。
中間物4 (2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲胺
將1M LiAlH4之Et2O溶液(123毫升，123毫莫耳)逐滴添加至Et2O(200毫升)中的2-甲氧基-4,6-二甲基菸鹼腈(10克，61.7毫莫耳)之冷卻(冰水浴)溶液中。移除冰浴且將反應混合物在室溫下攪拌16小時。將反應混合物在冰水浴中冷卻且以少量水萃滅(直到不再產生氫氣為止)。將反應過濾且將不可溶材料以10：1之DCM/MeOH清洗。將合併的有機過濾物濃縮。將殘餘物經由管柱層析術純化(0-30% MeOH/DCM；100克-HP-矽膠管柱)，以給出成為黃色半固體的(2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲胺(8.9克)。
實施例 實施例1 (R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-2-(1-(1-(吡啶-2-基甲基)哌啶-4-基)丙基)-6,7-二氫噻吩并[3,2-c]吡啶-4(5H)-酮
a)(Z)-4-甲基-2-(2-硝基乙烯基)噻吩
將4-甲基噻吩-2-甲醛(10.0克，79.3毫莫耳)、硝甲烷(100毫升)及NH4OAc(1.1克，14.27毫莫耳)之溶液在100℃下加熱4小時。容許反應冷卻至室溫且在真空下濃縮。將殘餘物溶解在EtOAc中，以1N HCl、水性NaHCO3、食鹽水清洗，乾燥(MgSO4)，過濾且蒸發至乾燥。將殘餘物以矽膠層析術純化(Isco® RediSep Rf Gold 120克，己烷中的0至15% EtOAc)。將純的流份合併且蒸發至在真空下乾燥，以給出成為黃色油的(Z)-4-甲基-2-(2-硝基乙烯基)噻吩(9.63克，56.91毫莫耳，71.8%產率)，其在真空下固化。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 8.10(d,J=13.4Hz,1H),7.47(d,J=13.4Hz,1H),7.27(s,1H),7.17(s,1H),2.31(d,J=0.8Hz,3H)。MS(ES)[M+H]+ 170.0。
b)(2-(4-甲基噻吩-2-基)乙基)胺甲酸乙酯
將TMSCl(60毫升，473毫莫耳)經10分鐘逐滴添加至氮氣下的2N LiBH4溶液(120毫升，240毫莫耳)中。反應變成白色懸浮液。在攪拌15分鐘之後，經約20分鐘逐滴添加在THF(50毫升)中的(Z)-4-甲基-2-(2-硝基乙烯基)噻吩(9.60克，56.74毫莫耳)之溶液。觀察到劇烈放出的氣體。反應略有溫熱的觸感且將反應在定期添加冰的水浴中冷卻。將反應在室溫下攪拌4小時，接著 溫熱至50℃且攪拌隔夜。將反應在冰浴中冷卻且以MeOH(200毫升)小心萃滅。在攪拌1小時之後，將反應在減壓下濃縮，以給出粗製2-胺基乙基-4-甲基噻吩。MS(ES)[M+H]+ 142.1。
將Na2CO3(25克，235.9毫莫耳)緩慢地添加至DCM(200毫升)及水(100毫升)中的粗製2-胺基乙基-4-甲基噻吩之冷卻(0℃)溶液中及逐滴添加氯甲酸乙酯(0.710毫升，7.39毫莫耳)。容許所得混合物溫熱至室溫且攪拌1小時。將反應經由Celite®墊過濾且將澄清的過濾物轉移至分液漏斗中。移出下層有機相，乾燥(MgSO4)，過濾且在真空下濃縮。將殘餘物以矽膠層析術純化(Isco® RediSep Rf Gold 120克，己烷中的10至30% EtOAc)。將純的流份合併且蒸發至在真空下乾燥，以給出成為無色油的(2-(4-甲基噻吩-2-基)乙基)胺甲酸乙酯(9.29克，43.55毫莫耳，76.7%產率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 6.74(s,1H),6.66(s,1H),4.80(br.s.,1H),4.14(q,J=6.9Hz,2H),3.46(q,J=6.3Hz,2H),2.98(t,J=6.6Hz,2H),2.24(d,J=0.8Hz,3H),1.26(t,J=7.1Hz,3H)。MS(ES)[M+H]+ 214.1。
c)3-甲基-6,7-二氫噻吩并[3,2-c]吡啶-4(5H)-酮
將POCl3(100毫升，107毫莫耳)及P2O5(14克，98.6毫莫耳)添加至(2-(4-甲基噻吩-2-基)乙基)胺甲酸乙酯(9.20克，43.13毫莫耳)中。將混合物在回流下加熱3小時(混合物短暫地形成黏性沉澱物，最終以加熱溶解)。容許深色反應混合物冷卻至室溫且在真空下蒸發至乾燥。將殘餘物以冰小心萃滅，以水性Na2CO3鹼化，以DCM萃取，乾燥(Na2SO4)，過濾且在真空下濃縮。將殘餘物以矽膠層析術純化(Isco® RediSep Rf Gold 80克，己烷中的30至80% EtOAc)。將純的流份合併且在真空下蒸發至乾燥，以己烷濕磨，過濾且在真空下乾燥，以給出成為灰白色固體的3-甲基-6,7-二氫噻吩并[3,2-c]吡啶-4(5H)-酮(2.22克，13.27毫莫耳，30.78%產率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 6.72(m,1H),5.75(br.s.,1H),3.62(t,J=6.2Hz,2H),3.05(t,J=6.7Hz,2H), 2.50(d,J=1.3Hz,3H)。MS(ES)[M+H]+ 168.0。
d)3-甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-6,7-二氫噻吩并[3,2-c]吡啶-4(5H)-酮
將4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷(2.8毫升，19.30毫莫耳)添加至Ar下含有[Ir(OMe)(1,5-cod)]2(106.4毫克，0.161毫莫耳)的50毫升圓底燒瓶中，接著添加在正己烷(16毫升)中的4,41-二-第三丁基-2,2'-聯吡啶(85.6毫克，0.319毫莫耳)之溶液。將反應混合物攪拌1分鐘，在此時逐滴添加在THF(8毫升)中的3-甲基-6,7-二氫噻吩并[3,2-c]吡啶-4(5H)-酮(1.785克，10.67毫莫耳)之溶液。將反應攪拌2小時。以LCMS監控反應完成(產物顯示為硼酸與頻哪醇硼酸酯的混合物)。當繼續反應時，其變成多相。需要額外等量的[Ir(OMe)(1,5-cod)]2、4,4'-二-第三丁基-2,2'-聯吡啶及4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷驅動反應完成。將混合物在真空下蒸發至乾燥。將殘餘物以少量的冷己烷濕磨，過濾，以少量的冷己烷沖洗且在真空下乾燥，以給出成為棕色固體的3-甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-6,7-二氫噻吩并[3,2-c]吡啶-4(5H)-酮(2.286克，7.80毫莫耳，73%產率)。MS(ES)[M+H]+ 212(硼酸)，294.2(硼酸酯)。
e)(E)-4-(1-(3-甲基-4-酮基-4,5,6,7-四氫噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)丙-1-烯-1-基)哌啶-1-羧酸第三丁酯
將1,4-二烷(18毫升)及水(4.50毫升)中的3-甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)-6,7-二氫噻吩并[3,2-c]吡啶-4(5H)-酮(1.883克，6.42毫莫耳)、(Z)-4-(1-(((三氟甲基)磺醯基)氧基)丙-1-烯-1-基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(2.524克，6.76毫莫耳)、NaHCO3(1.802克，21.45毫莫耳)及Pd(PPh3)4(735毫克，0.636毫莫耳)之溶液以空氣吹洗、加蓋且在70℃之油浴中加熱2小時。將反應混合物分溶在CHCl3與H2O之間且將有機層經Na2SO4乾燥，過濾、吸附在矽膠上。以管柱層析術純化(Isco® CombiFlash Rf，30-90% 80：20：2 EtOAc/己烷；40克管柱)，以給出成為淺黃色固體的(Z)-4-(1-(3-甲基-4-酮基-4,5,6,7-四氫噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)丙-1-烯-1-基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(2.07克，5.30毫莫耳，83%產率)。MS(ES)[M+H]+ 391。
f)4-(1-(3-甲基-4-酮基-4,5,6,7-四氫噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)丙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯
將Pd/C(4.25克，39.9毫莫耳)裝入200毫升圓底燒瓶中且以Ar吹洗。添加i-PrOH(14毫升)，接著添在MeOH(70毫升)中的(Z)-4-(1-(3-甲基-4-酮基-4,5,6,7-四氫噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)丙-1-烯-1-基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(2.07克，5.30毫莫耳)之溶液。將混合物脫氣且維持在H2氛圍下24小時。將反應混合物通過Celite®及接著通過0.2μM尼龍盤過濾。將溶液吸附在矽膠上且經由管柱層析術純化(Isco® CombiFlash Rf；20-75% EtOAc/己烷；40克管柱)，以給出成為白色固體的4-(1-(3-甲基-4-酮基-4,5,6,7-四氫噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)丙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(1.40克，3.57毫莫耳，67.3%產率)。
將消旋性產物以掌性HPLC解析(Chiralpak®，5微米，30毫米x 250毫米，230奈米UV，100% MeOH)。將解析之產物以TBME稀釋兩次且濃縮，接著 在真空烘箱(50℃)中乾燥，以給出：S-(+)-4-(1-(3-甲基-4-酮基-4,5,6,7-四氫噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)丙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(670毫克)：96.6% ee，[α]D=+40°(c=0.25，MeOH，24℃)。MS(ES)[M+Na]+ 415.2。
R-(-)-4-(1-(3-甲基-4-酮基-4,5,6,7-四氫噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)丙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(690毫克)：99.74% ee；[α]D=-39°(c=0.25，MeOH，21℃)。MS(ES)[M+Na]+ 415.2。
(注意：乙基的絕對立體化學係基於已知優選關於EZH2抑制的R-異構物來指定)。
g)(R)-4-(1-(5-((2-(苯甲氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-4-酮基-4,5,6,7-四氫噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)丙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯
將KOtBu(2.1毫升，2.100毫莫耳)添加至DMF(6毫升)中的(R)-4-(1-(3-甲基-4-酮基-4,5,6,7-四氫噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)丙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(690毫克，1.758毫莫耳)之冷卻(0℃)溶液中。將反應攪拌15分鐘，在此時添加在THF(2.4毫升)中的2-(苯甲氧基)-3-(氯甲基)-4,6-二甲基吡啶(556毫克，2.124毫莫耳)之溶液。容許反應溫熱至室溫40分鐘。在起始材料消耗之後，將反應以飽和NH4Cl(4毫升)萃滅且蒸發至乾燥。將殘餘物分溶在CHCl3(10毫升)與飽和水性Na2CO3之間且將有機層經Na2SO4乾燥，吸附在矽膠上且以管柱層析術純化(Isco® Companion；0-20% EtOAc/己烷；40克管柱)，以給出成為無色油的(R)-4-(1-(5-((2-(苯甲氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-4-酮基-4,5,6,7-四氫噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)丙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(934毫克，1.512毫莫耳，86%產率)。MS(ES)[M+H]+ 618。
h)(R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-2-(1-(哌啶-4- 基)丙基)-6,7-二氫噻吩并[3,2-c]吡啶-4(5H)-酮
將在TFA(15毫升，195毫莫耳)中的(R)-4-(1-(5-((2-(苯甲氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-4-酮基-4,5,6,7-四氫噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)丙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(934毫克，1.512毫莫耳)之混合物在45℃下加熱1小時。將反應混合物濃縮至乾燥，溶解在MeOH(2毫升)中，吸附在矽膠上且以管柱層析術純化(Isco® CombiFlash Rf；0-40% 80：20：2[CHCl3/MeOH/NH4OH]/CHCl3，具有0.5%異丙胺；40克管柱，以5管柱體積之80：20：2 CHCl3/MeOH/NH4OH預沖洗，以中和酸性位置，接著以3管柱體積之CHCl3，具有0.5%異丙胺沖洗)。將流份濃縮，溶解在CHCl3中且以H2O(2 x 100毫升)清洗，以移除過多的異丙胺。將有機層濃縮，以給出成為淺黃色固體的(R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-2-(1-(哌啶-4-基)丙基)-6,7-二氫噻吩并[3,2-c]吡啶-4(5H)-酮(691毫克，1.616毫莫耳，>100%產率)。MS(ES)[M+H]+ 428。
i)(R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-2-(1-(1-(吡啶-2-基甲基)哌啶-4-基)丙基)-6,7-二氫噻吩并[3,2-c]吡啶-4(5H)-酮
將AcOH(60微升，1.048毫莫耳)添加至DCM(2.5毫升)中的(R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-2-(1-(哌啶-4-基)丙基)-6,7-二氫噻吩并[3,2-c]吡啶-4(5H)-酮(100.1毫克，0.234毫莫耳)及吡啶甲醛(64.7 毫克，0.604毫莫耳)之溶液中，接著添加NaBH(OAc)3(109毫克，0.514毫莫耳)。將反應在室溫下攪拌30分鐘，在此時緩慢添加NaHCO3，直到鹼性為止。將混合物以CHCl3萃取，經Na2SO4乾燥且濃縮。將殘餘物溶解在MeOH(2毫升)中，吸附在矽膠上且以管柱層析術純化(Isco® CombiFlash Rf；0-30% 80：20：2[CHCl3/MeOH/NH4OH]；12克管柱)。將無色油溶解在己烷(15毫升)中，經聲波化且形成白色粉末。將溶劑傾析且將固體乾燥，以供給成為白色固體的(R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-2-(1-(1-(吡啶-2-基甲基)哌啶-4-基)丙基)-6,7-二氫噻吩并[3,2-c]吡啶-4(5H)-酮(66毫克，0.121毫莫耳，51.6%產率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d 6)δ ppm 11.53(br.s.,1 H)8.39-8.50(m,1 H)7.73(td,J=7.58,1.77Hz,1 H)7.38(d,J=7.83Hz,1 H)7.18-7.27(m,1 H)5.87(s,1 H)4.48(s,2 H)3.45-3.57(m,4 H)2.84(t,J=6.69Hz,3 H)2.66-2.79(m,2 H)2.30(s,3 H)2.16(s,3 H)2.12(s,3 H)1.91-2.00(m,1 H)1.77-1.91(m,3 H)1.29-1.43(m,3 H)1.11-1.26(m,2 H)0.71(t,J=7.33Hz,3 H)。MS(ES)[M+H]+ 519。
實施例2 (R)-2-(1-(1-苯甲基哌啶-4-基)丙基)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-6,7-二氫噻吩并[3,2-c]吡啶-4(5H)-酮
依照實施例1(i)的程序製備成為白色固體的(R)-2-(1-(1-苯甲基哌啶-4-基)丙基)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-6,7-二氫噻吩并[3,2-c]吡啶-4(5H)-酮(1.1克，2毫莫耳，63%產率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d 6)δ ppm 11.54(s,1 H)7.10-7.40(m,5 H)5.87(s,1 H)4.48(s,2 H)3.50(t,J=6.82Hz,2 H)3.38(d,J=2.53Hz,2 H)2.65-2.89(m,5 H)2.30(s,3 H)2.12(s,3 H)2.15(s,3 H)1.67-1.94(m,4 H)1.25-1.42(m,3 H)1.04- 1.25(m,2 H)0.70(t,J=7.20Hz,3 H)。MS(ES)[M+H]+ 518。
實施例3 (R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-2-(1-(1-(吡啶-4-基甲基)哌啶-4-基)丙基)-6,7-二氫噻吩并[3,2-c]吡啶-4(5H)-酮
依照實施例1(i)的程序製備成為白色固體的(R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-2-(1-(1-(吡啶-4-基甲基)哌啶-4-基)丙基)-6,7-二氫噻吩并[3,2-c]吡啶-4(5H)-酮(69毫克，0.13毫莫耳，51%產率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d 6)δ ppm 11.53(br.s.,1 H)8.40-8.54(m,2 H)7.27(d,J=6.06Hz,2 H)5.87(s,1 H)4.48(s,2 H)3.51(t,J=6.69Hz,2 H)3.43(s,2 H)2.63-2.91(m,5 H)2.30(s,3 H)2.16(s,3 H)2.09-2.14(s,3 H)1.74-1.97(m,4 H)1.28-1.42(m,3 H)1.10-1.28(m,2 H)0.71(t,J=7.20Hz,3 H)。MS(ES)[M+H]+ 519。
實施例4 (R)-2-(1-(1-((5-氯吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-基)丙基)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-6,7-二氫噻吩并[3,2-c]吡啶-4(5H)-酮
依照實施例1(i)的程序製備成為白色固體的(R)-2-(1-(1-((5-氯吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-基)丙基)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-6,7-二氫噻吩并[3,2-c]吡啶-4(5H)-酮(64毫克，0.11毫莫耳，46%產率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d 6)δ ppm 11.53(br.s.,1 H)8.51(d,J=2.02Hz,1 H)7.86(dd,J=8.46,2.65Hz,1 H)7.43(d,J=8.34Hz,1 H)5.87(s,1 H)4.48(s,2 H)3.44-3.57(m,4 H)2.64-2.93(m,5 H)2.30(s,3 H)2.16(s,3 H)2.12(s,3 H)1.75-2.02(m,4 H)1.25-1.47(m,3 H)1.12-1.25(m,2 H)0.71(t,J=7.20Hz,3 H)。MS(ES)[M+H]+ 553。
實施例5 N-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-5-(1-(1-((2-甲氧基吡啶-4-基)甲基)亞哌啶-4-基)丙基)-4-甲基噻吩-3-甲醯胺
a)4-甲基-5-(1-(亞哌啶-4-基)丙基)噻吩-3-羧酸甲酯，鹽酸鹽
將TiCl4(13.72毫升，124毫莫耳)經由注射器藉由燒瓶壁穩定滴流下而緩慢地添加至惰性氛圍下在THF(150毫升)中的鋅(16.76克，256毫莫耳)之冷卻(0℃)懸浮液中。自攪拌的溶液爆發黃色粉末垂球(必須小心緩慢地添加TiCl4)。將燒瓶壁以THF(60毫升)清洗。將反應在70℃下攪拌10分鐘。移除冰浴，將燒瓶裝備上冷凝器且將反應在70℃下加熱1小時。以加料漏斗替換冷凝器且經30分鐘穩定滴下在THF(51.0毫升，622毫莫耳)中的4-甲基-5-丙醯基噻吩-3-羧酸甲酯(4克，18.84毫莫耳)、4-酮基哌啶-1-羧酸第三丁酯(12.01克，60.3毫莫耳)及吡啶(16.00毫升，198毫莫耳)之溶液。將反應在70℃下攪拌4天。容許反應冷卻且倒入矽藻土、飽和NH4Cl(200毫升)與EtOAc(400毫升)之混合物中。將混合物劇烈攪拌，接著傾析且經由矽藻土床過濾。將剩 餘的泥漿以EtOAc(3 x 400毫升)萃取。將塊過濾且以EtOAc(200毫升)清洗。將層分離且將有機物以水清洗，經Na2SO4乾燥，過濾且濃縮。將殘餘物溶解在DCM(30毫升)中且將不溶的鹽濾除。在真空中濃縮DCM。將殘餘物溶解在DCM(5毫升)中，裝載在矽膠上且以使用：ISCO® Redisep 80克管柱，0-20% EtOAc/庚烷經12分鐘，60毫升/分鐘，接著20-60% EtOAc/庚烷經12分鐘之管柱層析術純化。未溶析出產物。將梯度增加至60-90%經5分鐘，接著以90%保持8分鐘。將所欲流份合併，濃縮且在真空下乾燥，以給出成為黃褐色固體的4-甲基-5-(1-(亞哌啶-4-基)丙基)噻吩-3-羧酸甲酯，鹽酸鹽(4.08克，12.79毫莫耳，67.9%產率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ ppm 8.84-9.00(m,2H),8.06(s,1H),3.87(s,3H),3.46-3.68(m,2H),2.84(br.s.,2H),2.40(t,J=6.06Hz,4H),2.24(s,3H),1.60-1.86(m,2H),0.95(t,J=7.45Hz,3H)。
b)4-(1-(4-(((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)胺甲醯基)-3-甲基噻吩-2-基)伸丙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯
將Et3N(2.295毫升，16.46毫莫耳)及Boc2O(5.00毫升，21.53毫莫耳)添加至DCM(20.37毫升，317毫莫耳)中的4-甲基-5-(1-(亞哌啶-4-基)丙基)噻吩-3-羧酸甲酯，鹽酸鹽(4克，12.66毫莫耳)之溶液。將反應維持在室溫下。在15分鐘之後，LCMS顯示反應完成。在真空中移除DCM且將剩餘的殘餘物分溶在EtOAc(80毫升)與飽和NaHCO3(35毫升)之間。自水層洗出白色固體。將固體濾除且將層分離。將有機物以水(20毫升)、1N HCl(20毫升)及食鹽水(10毫升)清洗。將EtOAc層經Na2SO4乾燥，過濾且濃縮，以給出經Boc保護之中間物(4.63克)。
將8M NaOH(4.12毫升，32.9毫莫耳)添加至MeOH(25毫升)及THF(75毫升)中的上述殘餘物之混合物中。將懸浮液在50℃下加熱隔夜。以LCMS監控反應。添加額外部分的8M NaOH(4.12毫升，32.9毫莫耳)且將反應在50℃下加熱4小時。添加額外部分的8M NaOH(0.997毫升，7.98毫莫耳)且將反應在50℃下加熱0.5小時。在真空中移除有機溶劑且將剩餘的水性殘餘物以水(30毫升)稀釋。將水性溶液冷卻(冰浴)且將pH以6N HCl(8.44毫升，50.7毫莫耳)調整至~5-6。在真空中移除水且將剩餘的殘餘物在高真空下經3天乾燥，以給出羧酸中間物。
將NMM(5.57毫升，50.7毫莫耳)添加至DMF(34.3毫升，443毫莫耳)及DCM(40.7毫升，633毫莫耳)中的殘餘物之懸浮液中，接著添加HATU(4.82克，12.66毫莫耳)及3-(胺基甲基)-4,6-二甲基吡啶-2(1H)-酮，鹽酸鹽(2.509克，13.30毫莫耳)。將反應在室溫下攪拌16小時，在此時將固體過濾且分溶在EtOAc(20毫升)與水(20毫升)之間。將有機層分離且備用。將來自上述的母液濃縮，直到剩餘濃稠的油(~15-20毫升)為止。將油狀殘餘物逐滴添加至0.2N HCl(50毫升)之攪拌溶液中。收集固體且分溶在EtOAc(100毫升)與水(30毫升)之間。將有機層分離且與先前備用的EtOAc層合併。將合併的溶液以食鹽水(12毫升)清洗，經Na2SO4乾燥，過濾且濃縮，以給出成為黃褐色固體的4-(1-(4-(((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)胺甲醯基)-3-甲基噻吩-2-基)伸丙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(4.63克，9.27毫莫耳，73.2%產率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d 6 )δ ppm 11.43-11.59(m,1H),8.04(t,J=5.18Hz,1H),7.81(s,1H),5.88(s,1H),4.24(d,J=4.80Hz,2H),3.40(br.s.,2H),3.23(br.s.,2H),2.36(t,J=5.56Hz,2H),2.28(d,J=7.33Hz,2H),2.16-2.21(m,3H),2.12(s,3H),2.07(s,3H),1.90(t,J=5.43Hz,2H),1.39(s,9H),0.87(t,J=7.45Hz,3H)。MS(ES)[M+H]+ 500.2。
c)5-(1-(1-(2,2-二氟丙基)亞哌啶-4-基)丙基)-N-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-4-甲基噻吩-3-甲醯胺
將4N HCl之1,4-二烷溶液(10.01毫升，40.0毫莫耳)添加至DCM(45毫升)中的4-(1-(4-(((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)胺甲醯基)-3-甲基噻吩-2-基)伸丙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(4克，8.01毫莫耳)之溶液中。將反應在室溫下攪拌隔夜，在此時將溶液傾析。將剩餘的殘餘物溶解在MeOH(25毫升)中且將混合物濃縮。額外三次放入MeOH中及自MeOH取出，得到成為發泡體的中間產物N-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-4-甲基-5-(1-(亞哌啶-4-基)丙基)噻吩-3-甲醯胺，鹽酸鹽(3.45克，5.78毫莫耳，72.2%產率)。將發泡體研磨成粉末且以未進一步純化而前進至下一步驟。1H NMR(400MHz，DMSO-d 6 )δ ppm 11.56(br.s.,1H),8.91(br.s.,1H),8.03-8.12(m,1H),7.86(s,1H),5.89(s,1H),4.24(d,J=4.29Hz,2H),3.08-3.21(m,3H),2.96(br.s.,2H),2.60(t,J=5.94Hz,2H),2.24-2.37(m,2H),2.19(s,3H),2.10-2.15(m,5H),2.09(s,3H),0.88(t,J=7.45Hz,3H)。MS(ES)[M+H]+ 400.1。
d)N-((4,6-D甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-5-(1-(1-((2-甲氧基吡啶-4-基)甲基)亞哌啶-4-基)丙基)-4-甲基噻吩-3-甲醯胺
將DIPEA(3.16毫升，18.08毫莫耳)及MgSO4(1.814克，15.07毫莫耳)添 加至MeOH(80毫升)中的N-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-4-甲基-5-(1-(亞哌啶-4-基)丙基)噻吩-3-甲醯胺，鹽酸鹽(3.6克，6.03毫莫耳)之溶液中。將反應在室溫下攪拌5分鐘，在此時添加2-甲氧基異菸鹼醛(1.653克，12.05毫莫耳)。將反應攪拌15分鐘，在此時添加AcOH(0.690毫升，12.05毫莫耳)。將反應攪拌30分鐘，在此時添加NaBH3CN(2.273克，36.2毫莫耳)。將反應攪拌隔夜，在此時過濾且將固體以MeOH(40毫升)，接著以DCM(40毫升)清洗。將過濾物濃縮且將殘餘物分溶在DCM(100毫升)與飽和NaHCO3(15毫升)與水(15毫升)之間。將相分離且將有機物以食鹽水(6毫升)清洗，經Na2SO4乾燥且濃縮。將殘餘物裝在矽膠上且以正相快速層析術純化。將固體分溶在DCM(75毫升)與飽和NH4Cl(25毫升)之間。將有機層以飽和NH4Cl(4 x 10毫升)及食鹽水(6毫升)清洗，經Na2SO4乾燥且濃縮，以給出成為白色固體的N-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-5-(1-(1-((2-甲氧基吡啶-4-基)甲基)亞哌啶-4-基)丙基)-4-甲基噻吩-3-甲醯胺(1.2克，2.282毫莫耳，37.9%產率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d 6 )δ ppm 11.47(s,1H),8.08(d,J=5.31Hz,1H),8.00(t,J=5.05Hz,1H),7.78(s,1H),6.94(d,J=5.31Hz,1H),6.73(s,1H),5.86(s,1H),4.23(d,J=5.05Hz,2H),3.83(s,3H),3.45(s,2H),2.39-2.45(m,4H),2.23-2.34(m,J=5.05Hz,4H),2.18(s,3H),2.11(s,3H),2.07(s,3H),1.91-1.99(m,J=4.29Hz,2H),0.86(t,J=7.33Hz,3H)。MS(ES)[M+H]+ 521.3。
實施例6 (R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-2-(1-(1-(吡啶-2-基甲基)哌啶-4-基)乙基)-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-4-酮
a)4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1、3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)噻吩-3-羧酸甲酯
將4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷(7.10克，55.5毫莫耳)以攪拌添加至裝入(1,5-環辛二烯)(甲氧基)銥(l)二聚物(325毫克，0.490毫莫耳)的100毫升圓底燒瓶中，接著添加在正己烷(35毫升)中的4,4'-二-第三丁基-2,2'-二吡啶(260毫克，0.969毫莫耳)之溶液。將混合物在室溫下攪拌2分鐘且逐滴添加4-甲基噻吩-3-羧酸甲酯(5克，32毫莫耳)。將混合物在室溫下攪拌18小時。接著將反應混合物濃縮且將殘餘物使用管柱層析術純化(矽膠，0至100% DCM/己烷)，以給出成為無色油的5.8克產物。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 1.36(s,12 H),2.70(s,3 H),3.87(s,3 H),8.32(s,1 H)。MS(ES)[M+H]+ 283.1。
b)4-(1-(4-(甲氧基羰基)-3-甲基噻吩-2-基)乙烯基)哌啶-1-羧酸第三丁酯
將4-(1-(((三氟甲基)磺醯基)氧基)乙烯基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(3.38克，9.39毫莫耳)、Na2CO3(2.489克，23.48毫莫耳)及水(24毫升)添加至1,4-二烷(72毫升)中的4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)噻吩-3-羧酸甲酯(2.65克，9.39毫莫耳)之溶液。將混合物以起泡的N2經10分鐘脫氣。添加Pd(PPh3)4(0.543克，0.470毫莫耳)且將混合物在70℃下加熱1小時。容許反應混合物冷卻至室溫且以EtOAc(3x)萃取。將合併的萃取物經Na2SO4乾燥且濃縮。將殘餘物使用管柱層析術純化(矽膠，0至40% EtOAc/己烷)，以給出成為無色油的2.8克產物。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 1.27-1.55(m,11 H),1.78(m,2 H),2.26-2.46(m,4 H),2.71(t,J=11.49Hz,2 H),3.87(s,3 H),4.18(br.s.,2 H),5.13(s,1 H),5.29-5.39(m,1 H),8.02(s,1 H)。MS(ES)[M+Na]+ 388.1。
c)(R)-4-(1-(4-(甲氧基羰基)-3-甲基噻吩-2-基)乙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯
將DCM(50毫升)中的4-(1-(4-(甲氧基羰基)-3-甲基噻吩-2-基)乙烯基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(1.2克，3.28毫莫耳)及((4R,5R)-(+)-O-[1-苯甲基-1-(5-甲基-2-苯基-4,5-二氫唑-4-基)-2-苯基乙基](二環己基次膦酸酯)(1,5-COD)銥(I)肆(3,5-雙(三氟甲基)苯基硼酸酯(63毫克，0.036毫莫耳)之溶液在Parr搖動器上於50psi氫壓力下經30小時氫化。將混合物濃縮且將殘餘物使用管柱層析術純化(矽膠，0至40% EtOAc/己烷)，以給出成為無色油的1.1克產物。產物的光學純度以掌性HPLC測定為98% ee(Chiralpak AY-H，5微米，4.6毫米x 150毫米；245,250奈米UV；90：10：0.1之正庚烷：EtOH：異丙胺基，等度溶析，1.0毫升/分鐘)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 1.03-1.33(m,5 H),1.38-1.58(m,11 H),1.88(d,J=12.38Hz,1 H),2.37(s,3 H),2.48-2.77(m,2 H),2.94(quin,J=7.26Hz,1 H),3.85(s,3 H),4.05-4.15(m,1 H),7.97(s,1 H)。MS(ES)[M+H]+ 390.2。
d)(R)-4-(1-(5-溴-4-(甲氧基羰基)-3-甲基噻吩-2-基)乙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯
將NBS(1.322克，7.43毫莫耳)添加至DMF(30毫升)中的(R)-4-(1-(4-(甲氧基羰基)-3-甲基噻吩-2-基)乙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(2.1克，5.71毫莫耳)之溶液且將混合物在室溫下攪拌5小時。將混合物以水萃滅且以EtOAc(3x)萃取，將萃取物經Na2SO4乾燥且濃縮。將殘餘物使用管柱層析術純化(矽膠，0至50% EtOAc/己烷)，以給出成為淡棕色油的1.98克產物。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ 1.03-1.65(m,16 H),1.86(d,J=12.88Hz,1 H),2.21-2.30(m,3 H),2.54-2.72(m,2 H),2.85-2.98(m,1 H),3.88-3.95(m,3 H),4.08(d,J=13.64Hz,1 H),4.17(d,J=13.64Hz,1 H)。MS(ES)[M+Na]+ 468.1,470.1。
e)(R)-4-(1-(4-(甲氧基羰基)-3-甲基-5-(3-酮丙基)噻吩-2-基)乙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯
將丙-2-烯-1-醇(0.579毫升，8.51毫莫耳)、NaHCO3(468毫克，5.58毫莫耳)、Bu4NCl(591毫克，2.128毫莫耳)及Pd(OAc)2(23.89毫克，0.106毫莫耳)添加至DMF(14毫升)中的(R)-4-(1-(5-溴-4-(甲氧基羰基)-3-甲基噻吩-2-基)乙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(950毫克，2.128毫莫耳)之溶液中。將混合物以起泡的N2經10分鐘脫氣。接著將反應混合物在65℃下加熱3小時。容許反應冷卻至室溫，以水(20毫升)萃滅且過濾。將過濾物以EtOAc(3x)萃取。將合併的萃取物經Na2SO4乾燥且濃縮。將殘餘物使用管柱層析術純化(矽膠，0至40% EtOAc/己烷)，以給出成為淡棕色油的680毫克產物。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 1.04-1.69(m,16 H),1.86(d,J=12.88Hz,1 H),2.25(s,3 H),2.55-2.77(m,2 H),2.81-2.94(m,3 H),3.26-3.46(m,2 H),3.82-3.92(m,3 H),4.05(br.s.,1 H),4.15(br.s.,1 H),9.84(t,J=1.26Hz,1 H)。MS(ES)[M+H]+ 446.3。
f)(R)-4-(1-(5-(3-(((2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)胺基)丙基)-4-(甲氧基羰基)-3-甲基噻吩-2-基)乙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯
將(2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲胺(371毫克，2.231毫莫耳)添加至 MeOH(14毫升)中的(R)-4-(1-(4-(甲氧基羰基)-3-甲基-5-(3-酮丙基)噻吩-2-基)乙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(675毫克，1.594毫莫耳)之溶液中。將混合物在室溫下攪拌18小時。將反應冷卻(0℃冰浴)且添加NaBH4(109毫克，2.87毫莫耳)。將反應混合物在室溫下攪拌20分鐘。將反應以飽和水性NaHCO3萃滅且以EtOAc(3x)萃取。將合併的萃取物經Na2SO4乾燥且濃縮。將殘餘物使用管柱層析術純化(矽膠，0至100% EtOAc/己烷，接著0至15% MeOH/DCM)，以給出成為淡棕色油的550毫克產物。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 1.17-1.76(m,16 H),1.86(quin,J=7.33Hz,3 H),2.19-2.95(m,14 H),3.06(dq,J=15.51,7.46Hz,2 H),3.75(s,2 H),3.84(s,3 H),3.94(s,3 H),4.05-4.29(m,2 H)。MS(ES)[M+H]+ 574.1。
g)(R)-4-(1-(5-((2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-4-酮基-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-2-基)乙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯
將8N NaOH(1.4毫升，11.2毫莫耳)添加至MeOH(6毫升)中的(R)-4-(1-(5-(3-(((2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)胺基)丙基)-4-(甲氧基羰基)-3-甲基噻吩-2-基)乙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(530毫克，0.924毫莫耳)之溶液中。將混合物在50℃下加熱20小時。容許混合物冷卻至室溫，以水性6N HCl(1.878毫升，11.27毫莫耳)萃滅且濃縮。將殘餘物在真空下乾燥且以DMSO(6毫升)處理。將EDC(354毫克，1.847毫莫耳)、HOAt(251毫克，1.847毫莫耳)及NMM(0.609毫升，5.54毫莫耳)添加至此混合物中。將混合物在室溫下攪拌5小時。接著將反應以水(20毫升)萃滅。以過濾收集所得沉澱物且使用管柱層析術純化(矽膠，0至80% EtOAc/己烷)，以給出成為白色固體的450毫克產物。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 1.00-1.68(m,18 H),1.86(d,J=12.38Hz,1 H),2.27(s,3 H),2.35(s,3 H),2.43(s,3 H),2.53-2.79(m,4 H),2.79-2.96(m,1 H),3.29(t,J=6.32Hz,2 H),3.97(s,3 H),4.14(m,1 H),4.80(d,J=14.15Hz,1 H),4.89(d,J=14.15Hz,1 H)。MS(ES)[M+H]+ 542.1。
h)(R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-2-(1-(哌啶-4-基)乙基)-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-4-酮
將6N HCl(0.5毫升，3毫莫耳)添加至1,4-二烷(3毫升)中的(R)-4-(1-(5-((2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-4-酮基-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-2-基)乙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(350毫克，0.646毫莫耳)之溶液中。將混合物在70℃下加熱20小時。將混合物濃縮且將殘餘物在真空下乾燥，以給出成為灰白色固體的340毫克產物(雙-HCl鹽)。1H NMR(400MHz，DMSO-d 6)δ 1.10-2.02(m,10 H),2.15(s,3H),2.16(s,3H),2.14(s,3 H),2.61-2.87(m,4 H),2.93(t,J=7.33Hz,1 H),3.13-3.34(m,4 H),4.50(d,J=13.64Hz,1 H),4.62(d,J=13.64Hz,1 H),5.92(s,1 H)。MS(ES)[M+H]+ 428.5。
i)(R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-2-(1-(1-(吡啶-2-基甲基)哌啶-4-基)乙基)-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-4-酮
將DIPEA(0.080毫升，0.460毫莫耳)、吡啶甲醛(0.038毫升，0.400毫莫耳)及AcOH(0.038毫升，0.659毫莫耳)添加至MeOH(2毫升)中的(R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-2-(1-(哌啶-4-基)乙 基)-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-4-酮，雙-HCl(100毫克，0.200毫莫耳)之溶液中。將混合物在室溫下攪拌30分鐘。添加NaBH3CN(50.2毫克，0.799毫莫耳)且將混合物在室溫下攪拌18小時。將混合物使用反相HPLC純化。將含有產物的流份以1N HCl處理且濃縮，以給出成為白色固體的52毫克產物。1H NMR(400MHz，MeOH-d4)δ 1.33(d,J=7.07Hz,3 H),1.56-1.75(m,2 H),1.80(d,J=11.87Hz,2 H),2.16-2.37(m,6 H),2.52(s,3 H),2.65(s,3 H),2.93-3.00(m,2 H),3.03-3.24(m,3 H),3.35-3.45(m,2 H),3.55(d,J=11.62Hz,1 H),3.64(d,J=12.38Hz,1 H),4.59(s,2 H),4.86(s,2 H),6.98(s,1 H),7.73(dd,J=7.07,5.56Hz,1 H),7.85(d,J=7.83Hz,1 H),8.20(td,J=7.83,1.52Hz,1 H),8.73-8.86(m,1 H)。MS(ES)[M+H]+ 519.4。
實施例7 (R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-2-(1-(1-((2-甲氧基吡啶-4-基)甲基)哌啶-4-基)乙基)-3-甲基-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-4-酮
將DIPEA(0.080毫升，0.460毫莫耳)、2-甲氧基異菸鹼醛(54.8毫克，0.400毫莫耳)及AcOH(0.038毫升，0.659毫莫耳)添加至MeOH(1.5毫升)中的(R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-2-(1-(哌啶-4-基)乙基)-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-4-酮，雙-HCl(100毫克，0.200毫莫耳)之溶液中。將混合物在室溫下攪拌30分鐘。添加NaBH3CN(50.2毫克，0.799毫莫耳)且將混合物在室溫下攪拌18小時。將混合物使用反相HPLC純化。將含有產物的流份以1N HCl處理且濃縮，以給出成為白色固體的54毫克產物(HCl鹽)。1H NMR(400MHz，MeOH-d4)δ 1.32(d,J=7.10Hz,3 H),1.60-1.87(m,4 H),2.13-2.31(m,6 H),2.51(s,3 H),2.63(s,3 H),2.90-3.18 (m,5 H),3.35-3.43(m,2 H),3.45-3.54(m,1 H),3.58(d,J=11.66Hz,1 H),4.17(s,3 H),4.46(s,2 H),4.85(s,2 H),6.93(s,1 H),7.48(dd,J=5.83,1.27Hz,1 H),7.64(s,1 H),8.39(d,J=5.83Hz,1 H)。MS(ES)[M+H]+ 549.7。
另一選擇地，實施例7的化合物可根據下列程序製備：
a)4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)噻吩-3-羧酸甲酯
將(1,5-環辛二烯)(甲氧基)銥(I)二聚物(1.3克，1.961毫莫耳)添加至Ar氣下的500毫升圓底燒瓶中。經由注射器以攪拌添加4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷(32毫升，222毫莫耳)，接著添加在正己烷(75毫升)中的4,4'-二-第三丁基-2,2'-二吡啶(1.04克，3.87毫莫耳)之溶液(將反應在冰浴中保持冷卻至5-10℃)。在攪拌1分鐘之後，添加4-甲基噻吩-3-羧酸甲酯(20.0克，128毫莫耳)(看到放出的氣體)。將反應在室溫下攪拌隔夜。將反應在真空下蒸發至乾燥且以矽膠層析術純化(Isco® RediSep Rf Gold 330克，0至10%之己烷中的EtOAc)。將純的流份合併且蒸發至乾燥，以給出成為無色油的4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)噻吩-3-羧酸甲酯(33.1克，117毫莫耳，92%產率)，其在真空下固化成白色蠟狀固體。MS(ES)[M+H]+ 200.9(硼酸)，283.1(硼酸酯)。
b)4-(1-(((三氟甲基)磺醯基)氧基)乙烯基)哌啶-1-羧酸第三丁酯
將1N NaHMDS之THF溶液(130毫升，130毫莫耳)經1小時逐滴添加至-78℃及氮氣下在THF(250毫升)中的4-乙醯基哌啶-1-羧酸第三丁酯(25克，110毫莫耳)之攪拌溶液中。接著經15分鐘逐滴添加在THF(100毫升)中的 1,1,1-三氟-N-(吡啶-2-基)-N-((三氟甲基)磺醯基)甲烷磺醯胺(45克，126毫莫耳)之溶液。將反應在-78℃下攪拌1小時，接著在0℃下攪拌30分鐘。將反應以冷水(500毫升)萃滅，以EtOAc(2 x 250毫升)萃取，以水清洗，乾燥(Na2SO4)，過濾且在真空下濃縮。將粗製產物以矽膠層析術純化(Isco® RediSep Rf Gold 330克，0至20%之己烷中的EtOAc)。(UV負型，以EtOH中的H2SO4焦化而顯現)。將含有產物的流份合併且蒸發至乾燥，以給出成為無色油的4-(1-(((三氟甲基)磺醯基)氧基)乙烯基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(29.1克，81毫莫耳，73.6%產率)。(LCMS及1H NMR顯示~16%之N-Boc-4-乙炔基哌啶)。MS(ES)[M+H]+ 304.0(-異伸丁基)，283.1(-Boc)。
c)4-(1-(4-(甲氧基羰基)-3-甲基噻吩-2-基)乙烯基)哌啶-1-羧酸第三丁酯
將1,4-二烷(450毫升)及水(150毫升)中的4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)噻吩-3-羧酸甲酯(50克，177毫莫耳)、4-(1-(((三氟甲基)磺醯基)氧基)乙烯基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(76克，211毫莫耳)及Na2CO3(45克，536毫莫耳)之攪拌溶液以起泡的N2沖洗5分鐘。將Pd(PPh3)4(8克，6.92毫莫耳)裝入反應中且在70℃及N2下加熱1小時(劇烈放出氣體)。將反應以EtOAc(500毫升)稀釋，以水(500毫升)及食鹽水清洗，乾燥(Na2SO4)且在真空下濃縮。將殘餘物以矽膠層析術純化(Isco® RediSep Rf Gold 330克，0至20% EtOAc/己烷)，以給出成為淺黃色油的4-(1-(4-(甲氧基羰基)-3-甲基噻吩-2-基)乙烯基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(58.8克，161毫莫耳，91%產率)。MS(ES)[M+H]+ 266.1(-Boc),[M+H]+ 278.0(-異伸丁基，-MeOH),[M+H]+ 310.1(-異伸丁基)，[M+Na]+ 388.1。
d)(R)-4-(1-(4-(甲氧基羰基)-3-甲基噻吩-2-基)乙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯
將DCM(500毫升)中的4-(1-(4-(甲氧基羰基)-3-甲基噻吩-2-基)乙烯基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(31.0克，85毫莫耳)之溶液以N2氣流沖洗10分鐘。將(R,R)-[COD]Ir[cy2PThrePHOX](2.64克，1.527毫莫耳)添加至沖洗之溶液中。將H2(50psi)裝入混合物中且搖動(Parr反應器)22小時，在此時將其經由Celite®過濾，以DCM(50毫升)清洗且濃縮。將殘餘物純化(330克Isco®矽膠管柱；梯度B：3-30%；A=庚烷；B=EtOAc)，以給出成為濃稠油的(R)-4-(1-(4-(甲氧基羰基)-3-甲基噻吩-2-基)乙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(30.9克，80毫莫耳，94%產率)。MS(ES)[M+H]+ 390.2。產物的光學純度以掌性HPLC測定為97.6% ee(Chiralpak AY-H，5微米，4.6毫米x 150毫米；245,250奈米UV；90：10：0.1之正庚烷：EtOH：異丙胺基，等度溶析，1.0毫升/分鐘)。
e)(R)-4-(1-(5-溴-4-(甲氧基羰基)-3-甲基噻吩-2-基)乙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯
將NBS(20.9克，117毫莫耳)添加至DMF(500毫升)中的(R)-4-(1-(4-(甲氧基羰基)-3-甲基噻吩-2-基)乙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(33.2克，90毫莫耳)之溶液中。將反應維持約4小時，在此時將其以水稀釋且以Et2O(1.5公升)萃取。將有機物以水、食鹽水清洗，經MgSO4乾燥，過濾且蒸發。將殘餘物以管柱層析術純化(5至20% EtOAc/己烷)，以給出(R)-4-(1-(5-溴-4-(甲氧基羰基)-3-甲基噻吩-2-基)乙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(34克，72.4毫莫耳，80%產率)。MS(ES)[M+H]+ 468.2,470.2(M+Na)。
f)(R)-4-(1-(4-(甲氧基羰基)-3-甲基-5-(3-酮丙基)噻吩-2-基)乙基)哌啶-1-羧酸 第三丁酯
將丙-2-烯-1-醇(0.023公升，560毫莫耳)、Bu4NCl(37.4克，134毫莫耳)及NaHCO3(37.6克，448毫莫耳)添加至DMP(1公升)中的(R)-4-(1-(5-溴-4-(甲氧基羰基)-3-甲基噻吩-2-基)乙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(50克，112毫莫耳)之溶液中。將反應混合物以N2脫氣且添加Pd(OAc)2(3.77克，16.8毫莫耳)。將反應混合物在65℃下加熱2小時，在此時容許其冷卻至室溫。將混合物以水(1.3公升)稀釋且以Et2O(2x)萃取。將合併的萃取物乾燥(MgSO4)且濃縮。將殘餘物以管柱層析術純化(矽膠，10至40% EtOAc/己烷)，以給出成為淡黃色油的(R)-4-(1-(4-(甲氧基羰基)-3-甲基-5-(3-酮丙基)噻吩-2-基)乙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(42克，94毫莫耳，84%產率)。MS(ES)[M+H]+ 446.2(M+Na)464.3(M+MeCN)。
g)(R)-4-(1-(5-(3-(((2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)胺基)丙基)-4-(甲氧基羰基)-3-甲基噻吩-2-基)乙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯
將成為冷凍固體的(2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲胺(16.38克，99毫莫耳)添加至MeOH(600毫升)中的(R)-4-(1-(4-(甲氧基羰基)-3-甲基-5-(3-酮丙基)噻吩-2-基)乙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(36.3克，86毫莫耳)之溶液。將反應在室溫下維持1.5小時。接著將反應在冰浴中冷卻10分鐘，在此時添加固體的NaBH4(8.11克，214毫莫耳)(一些起泡/放出氣體)。將混合物攪拌15分鐘。移除冰浴且將反應在室溫下攪拌2小時。將反應在冰浴中再冷卻且以飽 和水性NH4Cl(200毫升)萃滅。移除冰浴且將反應在真空中濃縮至~1/4體積。將混合物以飽和水性NH4Cl稀釋且以EtOAc(2x)萃取。將合併的有機物以飽和水性NH4Cl清洗，經MgSO4乾燥(攪拌15分鐘)，經由Celite®過濾且濃縮，以給出成為油的(R)-4-(1-(5-(3-(((2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)胺基)丙基)-4-(甲氧基羰基)-3-甲基噻吩-2-基)乙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(55.5克，87毫莫耳，以HPLC的90%純度為基準，100%產率)。將材料在真空中經30分鐘乾燥。MS(ES)[M+H]+ 574.5。
h)(R)-5-(1-(1-(第三丁氧基羰基)哌啶-4-基)乙基)-2-(3-(((2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)胺基)丙基)-4-甲基噻吩-3-羧酸
將5N NaOH(192毫升，959毫莫耳)添加至MeOH(600毫升)及THF(130毫升)中的(R)-4-(1-(5-(3-(((2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)胺基)丙基)-4-(甲氧基羰基)-3-甲基噻吩-2-基)乙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(55克，96毫莫耳)之溶液中。將反應在63℃下加熱22小時，在此時將其在真空中濃縮。將殘餘物以水(400毫升)及DCM(400毫升)稀釋且在冰浴中冷卻。將6N HCl(158毫升，949毫莫耳)添加至混合物中，以調整pH至5-6(paper)。將混合物徹底攪拌且將層分離。將水層以DCM(200毫升)萃取且將合併的有機物經MgSO4乾燥(攪拌30分鐘)，經由Celite®過濾且濃縮，以給出(R)-5-(1-(1-(第三丁氧基羰基)哌啶-4-基)乙基)-2-(3-(((2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)胺基)丙基)-4-甲基噻吩-3-羧酸(52.5克，87毫莫耳，91%產率)。將殘餘物在真空中經2小時乾燥。MS(ES)[M+H]+ 560.4。
i)(R)-4-(1-(5-((2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-4-酮基-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-2-基)乙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯
將NMM(25.8毫升，234毫莫耳)添加至DMSO(400毫升)中的(R)-5-(1-(1-(第三丁氧基羰基)哌啶-4-基)乙基)-2-(3-(((2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)胺基)丙基)-4-甲基噻吩-3-羧酸(52.5克，94毫莫耳)、EDC(21.58克，113毫莫耳)及HOAt(15.32克，113毫莫耳)之溶液中。將反應維持18小時，在此時將其緩慢地倒入冰水(1500毫升)中。將混合物劇烈攪拌(高架式攪拌器)40分鐘。將混合物過濾且將固體以水清洗且經~1小時空氣乾燥。將仍濕的固體溶解在DCM中且以飽和水性NH4Cl清洗，乾燥(Mg2SO4)，經由Celite®過濾且濃縮。將殘餘物以管柱層析術純化(330克Isco®矽膠管柱；梯度B：4-40%；A=庚烷。B=3：1之EtOAc/EtOH)，以給出成為玻璃狀黃色固體的(R)-4-(1-(5-((2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-4-酮基-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-2-基)乙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(34.3克，60毫莫耳，64%產率)。MS(ES)[M+H]+ 542.4。
j)(R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-2-(1-(哌啶-4-基)乙基)-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-4-酮
將4N HCl之1,4-二烷溶液(222毫升，886毫莫耳)添加至MeOH(450毫升)中的(R)-4-(1-(5-((2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-4-酮基-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-2-基)乙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(34.3 克，63.3毫莫耳)之溶液中。將反應在室溫下維持15分鐘，接著在70℃下加熱24小時。容許反應冷卻至室溫且濃縮。將殘餘物以DCM(500毫升)及水(300毫升)稀釋且將pH以飽和NH4OH調整至約11。將混合物攪拌15分鐘，在此時將層分離。將水層以DCM萃取且將合併的有機物乾燥(Mg2SO4)，過濾且濃縮。將殘餘物在真空中經18小時乾燥，以給出(R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-2-(1-(哌啶-4-基)乙基)-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-4-酮(29.3克，65.1毫莫耳，100%產率)。MS(ES)[M+H]+ 428.3。
k)(R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-2-(1-(1-((2-甲氧基吡啶-4-基)甲基)哌啶-4-基)乙基)-3-甲基-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-4-酮
將2-甲氧基異菸鹼醛(7.38克，53.8毫莫耳)添加至DCE(400毫升)中的(R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-2-(1-(哌啶-4-基)乙基)-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-4-酮(20克，46.8毫莫耳)之溶液中。將反應攪拌5分鐘，在此時添加AcOH(5.36毫升，94毫莫耳)。在15分鐘之後，添加固體的NaBH(OAc)3(29.7克，140毫莫耳)且將反應在室溫下攪拌18小時。將反應以DCM(100毫升)及水稀釋。將pH以飽和NaHCO3與飽和Na2CO3之組合調整至10。將混合物攪拌30分鐘且將層分離。將水層以DCM萃取且將合併的有機物經Mg2SO4乾燥，過濾且濃縮。將殘餘物純化(330克Isco® GOLD矽膠管柱；梯度B：10-90%；A=庚烷；B=3：1之EtOAc/EtOH+1% NH4OH)，以給出白色固體。將固體以10% EtOH/庚烷處理且濃縮。接著將殘餘物以100%庚烷處理且濃縮。將固體在真空烘箱中以50℃經35小時 乾燥，以給出(R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-2-(1-(1-((2-甲氧基吡啶-4-基)甲基)哌啶-4-基)乙基)-3-甲基-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-4-酮(19.9克，35.6毫莫耳，76%產率)。1H NMR(DMSO-d6)：δ 11.56(s,1H),8.06(d,J=5.2Hz,1H),6.89(d,J=5.2Hz,1H),6.69(s,1H),5.90(s,1H),4.58-4.63(m,1H),4.49-4.54(m,1H),3.82(s,3H),3.39(s,2H),3.21-3.26(m,2H),2.85-2.91(m,1H),2.73-2.79(m,1H),2.67(t,J=7.3Hz,2H),2.16(s,3H),2.14(s,3H),2.122.15(m,3H),1.85-1.92(m,1H),1.75-1.81(m,1H),1.63-1.69(m,2H),1.40(br d,J=12.3Hz,1H),1.23-1.31(m,1H),1.17(d,J=6.9Hz,3H),1.14-1.27(m,2H),0.82-0.89(m,1H)。MS(ES)[M+H]+ 549.4。
實施例8 (R)-2-(1-(1-((5-氯吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-基)乙基)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-4-酮
將DIPEA(0.064毫升，0.368毫莫耳)、5-氯吡啶甲醛(45.3毫克，0.320毫莫耳)及AcOH(0.030毫升，0.527毫莫耳)添加至MeOH(1.5毫升)中的(R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-2-(1-(哌啶-4-基)乙基)-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-4-酮，雙-HCl(80毫克，0.160毫莫耳)之溶液中，且將混合物在室溫下攪拌30分鐘。添加NaBH3CN(40.2毫克，0.639毫莫耳)且將混合物在室溫下攪拌18小時。將混合物使用反相HPLC純化。將含有產物的流份以1N HCl處理且濃縮，以給出成為白色固體的45毫克產物(HCl鹽)。1H NMR(400MHz，MeOH-d4)δ 1.33(d,J=6.84Hz,3 H),1.50-1.72(m,2 H),1.72-1.89(m,2 H),2.16-2.38(m,6 H),2.53(s,3 H),2.66(s,3 H),2.91-3.19(m,5 H),3.35-3.45(m,2 H)3.48-3.60(m,1 H),3.64(d,J=12.42Hz,1 H),4.46(s,2 H),4.86(s,2 H),7.01(s,1 H),7.54(d, J=8.11Hz,1 H),7.97(dd,J=8.24,2.41Hz,1 H),8.70(d,J=1.77Hz,1 H)。MS(ES)[M+H]+ 553.6。
實施例9 (R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-2-(1-(1-((6-甲基吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-基)乙基)-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-4-酮
將DIPEA(0.066毫升，0.378毫莫耳)、6-甲基吡啶甲醛(39.8毫克，0.329毫莫耳)及AcOH(0.031毫升，0.543毫莫耳)添加至MeOH(1.5毫升)中的(R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-2-(1-(哌啶-4-基)乙基)-6,7-二氫噻吩并[3,2-c]吡啶-4(5H)-酮，雙-HCl(80毫克，0.164毫莫耳)之溶液中。將混合物在室溫下攪拌30分鐘。添加NaBH3CN(36.2毫克，0.576毫莫耳)且將混合物在室溫下攪拌18小時。將混合物使用反相HPLC純化。將含有產物的流份以1N HCl處理且濃縮，以給出成為白色固體的43毫克產物(HCl鹽)。1H NMR(400MHz，MeOH-d4)δ 1.33(d,J=7.10Hz,3 H),1.58-1.77(m,2 H),1.81(m,2 H),2.15-2.34(m,6 H),2.51(s,3 H),2.63(s,3 H),2.83(s,3 H),2.89-3.01(m,2 H),3.01-3.29(m,3 H),3.35-3.45(m,2 H),3.57(d,J=11.66Hz,1 H),3.66(d,J=12.17Hz,1 H),4.67(s,2 H),4.85(s,2 H),6.94(s,1 H),7.86(d,J=7.86Hz,1 H),7.95(d,J=7.60Hz,1 H),8.37(t,J=7.86Hz,1 H)。MS(ES)[M+H]+ 533.6。
實施例10 (R)-2-(1-(1-苯甲基哌啶-4-基)乙基)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-4-酮
將DIPEA(0.066毫升，0.378毫莫耳)、6-甲基吡啶甲醛(39.8毫克，0.329毫莫耳)及AcOH(0.031毫升，0.543毫莫耳)添加至MeOH(1.5毫升)中的(R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-2-(1-(哌啶-4-基)乙基)-6,7-二氫噻吩并[3,2-c]吡啶-4(5H)-酮，雙-HCl(80毫克，0.164毫莫耳)之溶液中。將混合物在室溫下攪拌30分鐘。添加NaBH3CN(36.2毫克，0.576毫莫耳)且將混合物在室溫下攪拌18小時。將混合物使用反相HPLC純化。將含有產物的流份以1N HCl處理且濃縮，以給出成為白色固體的46毫克產物(HCl鹽)。1H NMR(400MHz，MeOH-d4)δ 1.24-1.39(m,3 H),1.43-1.63(m,2 H),1.67-1.86(m,2 H),2.12-2.30(m,6 H),2.50(s,3 H),2.62(s,3 H),2.88-3.10(m,5 H),3.36-3.49(m,3 H),3.53(d,J=12.67Hz,1 H),4.30(s,2 H),4.81-4.88(m,2 H),6.91(s,1 H),7.44-7.60(m,5 H)。MS(ES)[M+H]+ 533.6。
實施例11 (R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-2-(1-(1-((2-甲氧基吡啶-4-基)甲基)哌啶-4-基)乙基)-3-甲基-6,7-二氫噻吩并[3,2-c]吡啶-4(5H)-酮
a)(R)-4-(1-(5-溴-4-(甲氧基羰基)-3-甲基噻吩-2-基)乙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯
將NBS(8.14克，45.7毫莫耳)添加至DMF(70毫升)中的(R)-4-(1-(4-(甲氧基羰基)-3-甲基噻吩-2-基)乙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(12克，32.7毫莫耳)之溶液中。將混合物在室溫下攪拌18小時。將混合物倒入水中且以CHCl3(3 x 100毫升)萃取。將合併的有機濃縮。將殘餘物使用管柱層析術純化(矽膠，0至50% EtOAc/己烷)，以給出成為無色油的(R)-4-(1-(5-溴-4-(甲氧基羰基)-3-甲基噻吩-2-基)乙基)哌啶-1-羧酸酯(13.62克，30.5毫莫耳，93%產率)。
b)(R)-4-(1-(5-(異唑-4-基)-4-(甲氧基羰基)-3-甲基噻吩-2-基)乙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯
將4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼雜環戊烷-2-基)異唑(6.42克，32.9毫莫耳)、Na2CO3(7.27克，68.5毫莫耳)及水(24毫升)添加至1,4-二烷(72毫升)中的(R)-4-(1-(5-溴-4-(甲氧基羰基)-3-甲基噻吩-2-基)乙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(12.24克，27.4毫莫耳)之溶液。將混合物以通過溶液的起泡氮氣經10分鐘脫氣。添加Pd(PPh3)4(1.584克，1.371毫莫耳)且將混合物在80℃下加熱5小時。接著將混合物以水(100毫升)萃滅且以EtOAc(3x)萃取。將萃取物經Na2SO4乾燥且濃縮。將殘餘物使用管柱層析術純化(矽膠，0至50% EtOAc/己烷)，以提供成為淡棕色油的(R)-4-(1-(5-(異唑-4-基)-4-(甲氧基羰基)-3-甲基噻吩-2-基)乙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(7.1克，16.34毫莫耳，59.6%產率)。1H NMR(400MHz,MeOD-d4)δ 8.94(s,1H),8.61(s,1H),4.91(s,1H),4.18-4.11(m,1H),4.04(dd,J=1.8,13.1Hz,1H),3.82(s,2H),3.33(td,J=1.5,3.2Hz,1H),3.02(dd,J=6.9,8.5Hz,1H),2.28(s,2H),1.93(br.s.,1H),1.47-1.44(m,9H),1.35-1.28(m,5H),1.21-1.08(m,2H),0.95-0.87(m,2H)。
c)(R)-4-(1-(5-(氰基甲基)-4-(甲氧基羰基)-3-甲基噻吩-2-基)乙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯
將水(20毫升)中的KF(3.01克，51.8毫莫耳)之溶液添加至MeOH(20毫升)中的(R)-4-(1-(5-(異唑-4-基)-4-(甲氧基羰基)-3-甲基噻吩-2-基)乙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(7.5克，17.26毫莫耳)之溶液中。將混合物在100℃下以攪拌加熱60小時。容許混合物冷卻至室溫且濃縮。將殘餘物以水(50毫升)處理且以EtOAc(3x)萃取。將該等合併的萃取物經Na2SO4乾燥且濃縮。接著將殘餘物在真空下進一步乾燥，以提供成為淡棕色油的(R)-4-(1-(5-(氰基甲基)-4-(甲氧基羰基)-3-甲基噻吩-2-基)乙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(6.06克，14.91毫莫耳，86%產率)。MS(ES)[M+Na]+ 429.6。
d)(R)-4-(1-(3-甲基-4-酮基-4,5,6,7-四氫噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯
將六水合氯鈷(II)(2.63克，11.07毫莫耳)添加至EtOH(200毫升)中的(R)-4-(1-(5-(氰基甲基)-4-(甲氧基羰基)-3-甲基噻吩-2-基)乙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(6.00克，14.76毫莫耳)之冷卻(0℃)溶液中。將反應攪拌15分鐘，在此時經15分鐘分批添加NaBH4(2.62克，69.4毫莫耳)(觀察到放出的氣體)。將反應攪拌1小時，在此時移除冰浴且將反應在室溫下攪拌18小時。以LCMS監控呈深色的反應。在18小時之後有大部分的產物、一些雜質及少量未環化之胺中間物。將反應額外攪拌2小時。在真空中移除溶劑。將殘餘物以飽和NH4Cl處理且將pH以1M HCl調整至pH~7。將混合物以DCM(3 x 100毫升)萃取且將合併的有機物經Mg2SO4乾燥，過濾且濃縮。將深棕色殘餘物在 真空中經1小時乾燥，溶解在DCM中且以快速管柱純化(200克Isco® GOLD矽膠管柱；梯度B：5-75%，A：庚烷，B：3比1之EtOAc比EtOH，以給出(R)-4-(1-(3-甲基-4-酮基-4,5,6,7-四氫噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(3.32克，8.33毫莫耳，56.5%產率)。MS(ES)[M+Na]+ 401.7。
e)(R)-4-(1-(5-((2-(苯甲氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-4-酮基-4,5,6,7-四氫噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯
將KOtBu(7.61毫升，7.61毫莫耳)經由注射器經1分鐘添加至DMP(50毫升)中的(R)-4-(1-(3-甲基-4-酮基-4,5,6,7-四氫噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(2.40克，6.34毫莫耳)之冷卻(冰浴)溶液中。將反應混合物攪拌10分鐘，在此時添加固體的2-(苯甲氧基)-3-(氯甲基)-4,6-二甲基吡啶(1.826克，6.97毫莫耳)。將混合物攪拌30分鐘且以LCMS監控。將反應倒入冰與飽和NH4Cl(200毫升)之混合物中且攪拌10分鐘。添加Et2O(200毫升)且將混合物攪拌15分鐘。將層分離且將水層以Et2O萃取。將合併的有機物以水清洗，經Mg2SO4乾燥，過濾且濃縮。將殘餘物在真空中經1小時進一步乾燥且以快速管柱純化(120克Isco® GOLD矽膠管柱。梯度B：5-40%。A：庚烷，B：EtOAc)，以給出成為玻璃狀固體的(R)-4-(1-(5-((2-(苯甲氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-4-酮基-4,5,6,7-四氫噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(3.30克，5.19毫莫耳，82%產率)。MS(ES)[M+Na]+ 604.9。
f)5-((4,6-二甲基-2-酮基-2,3-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-2-((R)-1-(哌啶-4-基)乙基)-6,7-二氫噻吩并[3,2-c]吡啶-4(5H)-酮
將TFA(21.05毫升，273毫莫耳)經由注射器經1分鐘添加至CHCl3(40毫升)中的(R)-4-(1-(5-((2-(苯甲氧基)-4,6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-4-酮基-4,5,6,7-四氫噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)乙基)哌啶-1-羧酸第三丁酯(3.3克，5.47毫莫耳)之溶液中。將反應維持10分鐘，接著在35℃下加熱2小時。容許反應冷卻至室溫且在真空中移除揮發物。將反應以甲苯稀釋且濃縮(2x)。將殘餘物以水稀釋且以NH4OH緩慢地鹼化至pH~11。將白色懸浮液以DCM(100毫升)處理且攪拌15分鐘。將層分離且將水層以DCM萃取。將合併的有機物經MgSO4乾燥，過濾且濃縮。將殘餘物以TBME處理且在真空中濃縮，以給出成為白色固體的5-((4,6-二甲基-2-酮基-2,3-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-2-((R)-1-(哌啶-4-基)乙基)-6,7-二氫噻吩并[3,2-c]吡啶-4(5H)-酮(2.60克，5.66毫莫耳，104%產率)。MS(ES)[M+Na]+ 414.3。
g)(R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-2-(1-(1-((2-甲氧基吡啶-4-基)甲基)哌啶-4-基)乙基)-3-甲基-6,7-二氫噻吩并[3,2-c]吡啶-4(5H)-酮
將2-甲氧基異菸鹼醛(0.474克，3.46毫莫耳)添加至DCE(40毫升)中的(R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-2-(1-(哌啶-4-基)乙基)-6,7-二氫噻吩并[3,2-c]吡啶-4(5H)-酮(1.3克，3.14毫莫耳)之溶液中。在5分鐘之後，添加AcOH(0.540毫升，9.43毫莫耳)且將反應攪拌15分鐘。將NaBH(OAc)3(2.66克，12.57毫莫耳)以固體添加至混合物中。將反應在室溫 下攪拌2小時。將反應以DCM(125毫升)及水稀釋。將反應以飽和NaHCO3與飽和Na2CO3之混合物鹼化至pH~10。將混合物攪拌15分鐘，將層分離且將水層以DCM萃取。將合併的有機物經MgSO4乾燥，過濾且濃縮。將殘餘物以快速管柱純化(80克Isco® GOLD矽膠管柱。梯度B：8-75%。A：DCM，B：90：10：1之DCM/MeOH/NH4OH)。將殘餘物以TBME處理，濃縮且在40℃之真空烘箱中經18小時乾燥，以給出成為白色固體的(R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-2-(1-(1-((2-甲氧基吡啶-4-基)甲基)哌啶-4-基)乙基)-3-甲基-6,7-二氫噻吩并[3,2-c]吡啶-4(5H)-酮(1.19克，2.159毫莫耳，68.7%產率)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 1.12-1.32(m,6 H)1.38(d,J=12.17Hz,1 H)1.74-1.93(m,3 H)2.13(d,J=8.62Hz,6 H)2.26-2.36(m,3 H)2.71(d,J=11.15Hz,1 H)2.76-2.96(m,4 H)3.39(s,2 H)3.43-3.55(m,2 H)3.82(s,3 H)4.48(s,2 H)5.87(s,1 H)6.65-6.71(m,1 H),6.89(dd,J=5.32,1.27Hz,1 H)8.06(d,J=5.58Hz,1 H)11.55(s,1 H)。MS(ES)[M+Na]+ 535.4。
實施例12 (R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-2-(1-(1-((6-甲氧基吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-基)乙基)-3-甲基-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-4-酮
將6-甲氧基吡啶甲醛(3.31克，24.13毫莫耳)添加至DCE(200毫升)中的(R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-2-(1-(哌啶-4-基)乙基)-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-4-酮(8.6克，20.1毫莫耳)之溶液中。將反應攪拌5分鐘，在此時添加AcOH(2.3毫升，40毫莫耳)。在15分鐘之後，添加固體的NaBH(OAc)3(12.8克，60毫莫耳)且將反應在室溫下攪拌 18小時。將反應以DCM(200毫升)及水稀釋。將pH以飽和NaHCO3與飽和Na2CO3之組合調整至10。將混合物攪拌30分鐘且將層分離。將水層以DCM萃取且將合併的有機物經Mg2SO4乾燥，過濾且濃縮。將殘餘物純化(200克Isco® GOLD矽膠管柱；梯度B：10-90%；A=庚烷；B=3：1之EtOAc/EtOH+1% NH4OH)，以給出白色固體。
將Silicycle硫醇樹脂(6克)添加至EtOH(220毫升)中的固體之溶液中。將混合物在50℃下加熱48小時，在此時將其經由Celite®墊過濾且以EtOH(2 x 15毫升)清洗。將過濾物濃縮且將殘餘物以10% EtOH/庚烷(100毫升)處理且濃縮，以5% EtOH/庚烷(100毫升)處理且濃縮，並以100%庚烷(100毫升)處理且濃縮。將產物在45℃之真空烘箱中經60小時乾燥，以給出成為白色固體的(R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-2-(1-(1-((2-甲氧基吡啶-4-基)甲基)哌啶-4-基)乙基)-3-甲基-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-4-酮(9.3克，16.5毫莫耳，82%產率)。1H NMR(DMSO-d6)δ 11.59(s,1H),8.06(d,J=5.1Hz,1H),6.89(dd,J=5.3,1.3Hz,1H),6.69(s,1H),5.90(s,1H),4.60(d,J=13.7Hz,1H),4.50(d,J=13.4Hz,1H),3.82(s,3H),3,39(s,2H),3.15-3.32(m,2H),2.62-2.92(m,5H),2.05-2.26(m,9H),1.74-1.93(m,3H),1.65(quin,J=6.6Hz,2H),1.40(d,J=11.9Hz,1H),1.09-1.31(m,6H)。MS(ES)[M+H]+ 549.4。
實施例13 (R)-2-(1-(1-(環己基甲基)哌啶-4-基)乙基)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-4-酮
將環己烷甲醛(0.057毫升，0.468毫莫耳)及AcOH(0.020毫升，0.351毫莫耳)添加至MeOH(1.5毫升)中的(R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3- 基)甲基)-3-甲基-2-(1-(哌啶-4-基)乙基)-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-4-酮(100毫克，0.234毫莫耳)之溶液中。將反應在室溫下攪拌2.5小時，在此時添加NaBH3CN(58.8毫克，0.935毫莫耳)且將混合物在室溫下攪拌18小時。將混合物使用反相HPLC純化(Phenomenex Gemini C18(2)100A,AXIA，5微米，30毫米x 100毫米；254奈米UV；38% CH3CN/H2O，0.1%甲酸至80% CH3CN/H2O，0.1%甲酸，30.0毫升/分鐘)，以給出成為白色固體的(R)-2-(1-(1-(環己基甲基)哌啶-4-基)乙基)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-4-酮，甲酸鹽(47毫克，0.079毫莫耳，34%產率)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ 0.98-1.14(m,2 H),1.20-1.44(m,6 H),1.46-1.67(m,2 H),1.67-1.90(m,11 H),2.12-2.25(m,4 H),2.28(s,3 H),2.32(s,3 H),2.71-2.90(m,3 H),2.90-3.09(m,4 H),3.35-3.46(m,3 H),3.46-3.67(m,2 H),4.73(d,J=13.94Hz,1 H),4.82(d,J=13.94Hz,1 H),6.15(s,1 H)。MS(ES)[M+H]+ 524.4。
實施例14 (R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-2-(1-(1-((1-甲基環己基)甲基)哌啶-4-基)乙基)-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-4-酮
依照實施例13的通用程序製備(R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-2-(1-(1-((1-甲基環己基)甲基)哌啶-4-基)乙基)-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-4-酮。1H NMR(DMSO-d6)δ 11.58(br.s.,1 H)5.91(s,1 H)4.46-4.67(m,2 H)3.20-3.27(m,2 H)2.62-2.90(m,6 H)2.12-2.19(m,9 H)1.98-2.08(m,3 H)1.61-1.77(m,3 H)1.30-1.48(m,6 H)1.11-1.27(m,11 H)0.81(s,3 H)。MS(ES)[M+H]+ 538.4。
檢定方案
本文所包含的化合物係以彼等抑制PRC2複合體內的EZH2之甲基轉移活性的能力來評估。入類PRC2複合體係藉由將每一5個成員蛋白質(FLAG-EZH2、EED、SUZ12、RbAp48、AEBP2)在Sf9細胞中共同表現，接著共同純化來準備。酵素活性係在閃爍親近檢定法(SPA)中測量，其中氚化甲基係自3H-SAM轉移至自組織蛋白H3所衍生的生物化素之未甲基化肽受質上的離胺酸殘基。在經鏈親和素塗佈之SPA珠粒上捕獲肽且所得信號係在ViewLux盤讀數機上讀取。
A部分. 化合物的準備
1. 自固體於100% DMSO中準備化合物的10mM儲液。
2. 在384槽孔中設置各試驗化合物於100% DMSO中的11點連續稀釋(1：4稀釋，最高濃度10mM)，留下第6及18排用於DMSO對照組。
3. 自稀釋盤配置10毫微升化合物至反應盤(Coming，384-槽孔聚苯乙烯NBS，Cat# 3673)。
B部分. 試劑的準備 準備下列溶液：
1. 1x鹼緩衝液、50mM Tris-HCl，pH 8、2mM MgCl2：每1公升鹼緩衝液組合1M Tris-HCl,pH 8(50毫升)，1M MgCl2(2毫升)及蒸餾水(948毫升)。
2. 1x檢定緩衝液：每10毫升1x檢定緩衝液組合1x鹼緩衝液(9.96毫升)、1M DTT(40微升)及10% Tween-20(1uL)，以提供最終濃度50mM Tris-HCl，pH 8、2mM MgCl2、4mM DTT、0.001% Tween-20。
3. 2x酵素溶液：每10毫升2x酵素溶液組合1x檢定緩衝液(9.99毫升)及3.24微米EZH2 5成分複合(6.17微升)，以提供最終酵素濃度1nM。
4. SPA珠粒溶液：每1毫升SPA珠粒溶液組合經鏈親和素塗佈之SPA珠粒(PerkinElmer,Cat# RPNQ0261，40毫克)及1x檢定緩衝液(1毫升)，以提供操作濃度40毫克/毫升。
5. 2x受質溶液：每10毫升2x受質溶液組合40毫克/毫升之SPA珠粒溶液(375微升)、1mM生物素化組織蛋白H3K27肽(200uL)、12.5微米3H-SAM(240微升；1mCi/mL)、1mM冷SAM(57微升)及1x檢定緩衝液(9.13毫升)，以提供最終濃度0.75毫克/毫升之SPA珠粒溶液、10微米組織蛋白H3K27肽、0.15微米3H-SAM(~12uCi/mL 3H-SAM)及2.85μM冷SAM。
6. 2.67x萃滅溶液：每10毫升2.67x萃滅溶液組合1x檢定緩衝液(9.73毫升)及10mM冷SAM(267微升)，以提供最終濃度100μM冷SAM。
C部分. 在384-槽孔Grenier Bio-One盤中的檢定反應 化合物的添加
1. 分注10毫微升/槽孔之1000x化合物至試驗槽孔(如上文所述)。
2. 分注10毫微升/槽孔之100% DMSO至第6 & 18排(分別為高及低對照組)。
檢定
1. 配置5微升/槽孔之1x檢定緩衝液至第18排(低對照組反應)。
2. 配置5微升/槽孔之2x受質溶液至第1-24排(註明：受質溶液應在配置至基質貯槽之前混合，以確保均勻的珠粒懸浮液)。
3. 配置5微升/槽孔之2x酵素溶液至第1-17、19-24排。
4. 將反應在室溫下培育60分鐘。
萃滅
1. 配置6微升/槽孔之2.67x萃滅溶液至1-24排。
2. 將檢定盤密封且在500rpm下旋轉~1分鐘。
3. 將盤在ViewLux儀器經15-60分鐘暗適應。
讀取盤
1. 在Viewlux讀盤機上讀取檢定盤，其係利用613奈米發射濾光片或純淨濾光片(300s曝光)。添加試劑可以手動或自動化液體處理機進行。
結果
抑制百分比係各化合物濃度相對於DMSO對照組計算而來且所得值係使用ABASE數據擬合套裝軟體內的標準IC50擬合參數擬合。
舉例的化合物通常係根據上述或類似的檢定法測試且發現為EZH2抑制劑。將根據此等檢定法所測試的特異性生物活性列示於下列表中。10nM之IC50值表示化合物活性接近於偵測限度。重複檢定操作可導致稍微不同的IC50值。

Claims (20)

  1. 一種式(I)之化合物或其醫藥上可接受之鹽： 其中：代表單鍵或雙鍵；R1為-NH2、(C1-C4)烷基或羥基(C1-C4)烷基；R2為(C1-C4)烷基；R3和R4各自為氫；或R3與R4一起代表-CH2CH2-或-CH2CH2CH2-；R5為氫、鹵素或(C1-C3)烷基；R6為氫或(C1-C3)烷基；及R7視需要含有一、二或三個獨立地選自氧、氮和硫的雜原子之6-員飽和或不飽和環，其中該環視需要地經一、二或三個獨立地選自下列的群組取代：鹵素、(C1-C4)烷基、鹵(C1-C4)烷基、羥基(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基(C1-C4)烷基、(C3-C6)環烷基、氰基、-CO2H、-CO2(C1-C4)烷基、-CONH2、-CONH(C1-C4)烷基、-CON(C1-C4)烷基(C1-C4)烷基、-NH2、-NH(C1-C4)烷基、-N(C1-C4)烷基(C1-C4)烷基、酮基、羥基、(C1-C4)烷氧基、羥基(C2-C4)烷氧基-和(C1-C4)烷氧基(C2-C4)烷氧基-。
  2. 根據請求項1之化合物或其醫藥上可接受之鹽，其係以式(II)代表： 其中：代表單鍵或雙鍵；X1、X2、X3、X4和X5各自獨立為N、CH或CR8，其條件為X1、X2、X3、X4和X5中之至少二者為CH；R1為-NH2、(C1-C4)烷基或羥基(C1-C4)烷基；R2為(C1-C4)烷基；R3和R4各自為氫；或R3與R4一起代表-CH2CH2-或-CH2CH2CH2-；R5為氫、鹵素或(C1-C3)烷基；R6為氫或(C1-C3)烷基；及各R8獨立地選自鹵素、(C1-C4)烷基、鹵(C1-C4)烷基、羥基(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基(C1-C4)烷基、(C3-C6)環烷基、氰基、-CO2H、-CO2(C1-C4)烷基、-CONH2、-CONH(C1-C4)烷基、-CON(C1-C4)烷基(C1-C4)烷基、-NH2、-NH(C1-C4)烷基、-N(C1-C4)烷基(C1-C4)烷基、羥基、(C1-C4)烷氧基、羥基(C2-C4)烷氧基-和(C1-C4)烷氧基(C2-C4)烷氧基-。
  3. 根據請求項1之化合物或其醫藥上可接受之鹽，其係以式(III)代表： 其中：代表單鍵或雙鍵；X1、X2、X3、X4和X5各自獨立為N、CH或CR8，其條件為X1、X2、X3、X4和X5中之至少二者為CH；n為1或2；R1為-NH2、(C1-C4)烷基或羥基(C1-C4)烷基；R2為(C1-C4)烷基；R5為氫、鹵素或(C1-C3)烷基；R6為氫或(C1-C3)烷基；及各R8獨立地選自鹵素、(C1-C4)烷基、鹵(C1-C4)烷基、羥基(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基(C1-C4)烷基、(C3-C6)環烷基、氰基、-CO2H、-CO2(C1-C4)烷基、-CONH2、-CONH(C1-C4)烷基、-CON(C1-C4)烷基(C1-C4)烷基、-NH2、-NH(C1-C4)烷基、-N(C1-C4)烷基(C1-C4)烷基、羥基、(C1-C4)烷氧基、羥基(C2-C4)烷氧基-和(C1-C4)烷氧基(C2-C4)烷氧基-。
  4. 根據請求項1之化合物或其醫藥上可接受之鹽，其係以式(IV)代表： 其中：X1、X2、X3、X4和X5各自獨立為N、CH或CR8，其條件為X1、X2、X3、X4和X5中之至少二者為CH；n為1或2；R1為-NH2、(C1-C4)烷基或羥基(C1-C4)烷基；R2為(C1-C4)烷基；R5為氫、鹵素或(C1-C3)烷基；R6為氫或(C1-C3)烷基；及各R8獨立地選自鹵素、(C1-C4)烷基、鹵(C1-C4)烷基、羥基(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基(C1-C4)烷基、(C3-C6)環烷基、氰基、-CO2H、-CO2(C1-C4)烷基、-CONH2、-CONH(C1-C4)烷基、-CON(C1-C4)烷基(C1-C4)烷基、-NH2、-NH(C1-C4)烷基、-N(C1-C4)烷基(C1-C4)烷基、羥基、(C1-C4)烷氧基、羥基(C2-C4)烷氧基-和(C1-C4)烷氧基(C2-C4)烷氧基-。
  5. 根據請求項1之化合物或其醫藥上可接受之鹽，其係以式(V)代表： 其中：X1、X2、X3、X4和X5各自獨立為N、CH或CR8，其條件為X1、X2、X3、X4和X5中之至少二者為CH；n為1或2；R1為-NH2、(C1-C4)烷基或羥基(C1-C4)烷基；R2為(C1-C4)烷基；R5為氫、鹵素或(C1-C3)烷基；R6為氫或(C1-C3)烷基；及各R8獨立地選自鹵素、(C1-C4)烷基、鹵(C1-C4)烷基、羥基(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基(C1-C4)烷基、(C3-C6)環烷基、氰基、-CO2H、-CO2(C1-C4)烷基、-CONH2、-CONH(C1-C4)烷基、-CON(C1-C4)烷基(C1-C4)烷基、-NH2、-NH(C1-C4)烷基、-N(C1-C4)烷基(C1-C4)烷基、羥基、(C1-C4)烷氧基、羥基(C2-C4)烷氧基-和(C1-C4)烷氧基(C2-C4)烷氧基-。
  6. 根據請求項1之化合物或其醫藥上可接受之鹽，其中R7係選自由下列所組成之群組：苯基、吡啶基、嗒基、嘧啶基、吡基和三基，每一該等基團視需要地經一、二或三個獨立地選自下列的群組取代：鹵素、(C1-C4)烷基、鹵(C1-C4)烷基、羥基(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基(C1-C4)烷基、(C3-C6)環烷基、氰基、-CO2H、-CO2(C1-C4)烷基、-CONH2、-CONH(C1-C4)烷基、-CON(C1-C4)烷基(C1-C4)烷 基、-NH2、-NH(C1-C4)烷基、-N(C1-C4)烷基(C1-C4)烷基、酮基、羥基、(C1-C4)烷氧基、羥基(C2-C4)烷氧基-和(C1-C4)烷氧基(C2-C4)烷氧基-。
  7. 根據請求項1之化合物或其醫藥上可接受之鹽，其中R7為視需要地經一或二獨立地選自下列的群組取代之：鹵素、(C1-C4)烷基、鹵(C1-C4)烷基、羥基和(C1-C4)烷氧基。
  8. 根據請求項1之化合物或其醫藥上可接受之鹽，其中R7為視需要地經一或二獨立地選自下列的群組取代之吡啶基：鹵素、(C1-C4)烷基、鹵(C1-C4)烷基、羥基和(C1-C4)烷氧基。
  9. 根據請求項1、2、6、7或8中任一項之化合物或其醫藥上可接受之鹽，其中R3和R4各自為氫。
  10. 根據請求項3-5中任一項之化合物或其醫藥上可接受之鹽，其中n為1。
  11. 根據請求項2-5或10中任一項之化合物或其醫藥上可接受之鹽，其中X1、X2、X3、X4和X5各自獨立為N、CH或CR8，其條件為X1、X2、X3、X4和X5中不超過一者為N及X1、X2、X3、X4和X5中之至少三者為CH。
  12. 根據請求項2-5、10或11中任一項之化合物或其醫藥上可接受之鹽，其中各R8獨立地選自鹵素、(C1-C4)烷基、鹵(C1-C4)烷基、羥基和(C1-C4)烷氧基。
  13. 根據請求項1-12中任一項之化合物或其醫藥上可接受之鹽，其中R1和R2各自獨立為甲基、乙基、正丙基或正丁基。
  14. 根據請求項1-13中任一項之化合物或其醫藥上可接受之鹽，其中R5為甲基或氯。
  15. 根據請求項1-14中任一項之化合物或其醫藥上可接受之鹽，其中R6為氫、甲基或乙基。
  16. 根據請求項1之化合物，其為：(R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-2-(1-(1-(吡啶-2-基甲基)哌啶-4-基)丙基)-6,7-二氫噻吩并[3,2-c]吡啶-4(5H)-酮； (R)-2-(1-(1-苯甲基哌啶-4-基)丙基)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-6,7-二氫噻吩并[3,2-c]吡啶-4(5H)-酮；(R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-2-(1-(1-(吡啶-4-基甲基)哌啶-4-基)丙基)-6,7-二氫噻吩并[3,2-c]吡啶-4(5H)-酮；(R)-2-(1-(1-((5-氯吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-基)丙基)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-6,7-二氫噻吩并[3,2-c]吡啶-4(5H)-酮；N-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-5-(1-(1-((2-甲氧基吡啶-4-基)甲基)亞哌啶-4-基)丙基)-4-甲基噻吩-3-甲醯胺；(R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-2-(1-(1-(吡啶-2-基甲基)哌啶-4-基)乙基)-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-4-酮；(R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-2-(1-(1-((2-甲氧基吡啶-4-基)甲基)哌啶-4-基)乙基)-3-甲基-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-4-酮；(R)-2-(1-(1-((5-氯吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-基)乙基)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-4-酮；(R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-2-(1-(1-((6-甲基吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-基)乙基)-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-4-酮；(R)-2-(1-(1-苯甲基哌啶-4-基)乙基)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-4-酮；(R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-2-(1-(1-((2-甲氧基吡啶-4-基)甲基)哌啶-4-基)乙基)-3-甲基-6,7-二氫噻吩并[3,2-c]吡啶-4(5H)-酮；(R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-2-(1-(1-((6-甲氧基吡啶-2-基)甲基)哌啶-4-基)乙基)-3-甲基-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-4-酮； (R)-2-(1-(1-(環己基甲基)哌啶-4-基)乙基)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-4-酮；or(R)-5-((4,6-二甲基-2-酮基-1,2-二氫吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-2-(1-(1-((1-甲基環己基)甲基)哌啶-4-基)乙基)-5,6,7,8-四氫-4H-噻吩并[3,2-c]氮呯-4-酮；或其醫藥上可接受之鹽。
  17. 一種醫藥組成物，其包含根據請求項1-16中任一項之化合物或其醫藥上可接受之鹽及醫藥上可接受之賦形劑。
  18. 一種根據請求項1-16中任一項之化合物或其醫藥上可接受之鹽的用途，其係製造用於治療癌症之藥劑。
  19. 一種根據請求項17之醫藥組成物的用途，其係製造用於治療癌症之藥劑。
  20. 根據請求項18或19之用途，其中該癌症係選自由下列所組成之群組：腦癌(神經膠質瘤)、膠質母細胞瘤、白血病、淋巴瘤、潘納揚-佐納納(Bannayan-Zonana)症候群、考登(Cowden)病、萊爾米特-達克洛思(Lhermitte-Duclos)病、乳癌、發炎性乳癌、威爾姆(Wilm)氏腫瘤、尤文(Ewing)氏肉瘤、橫紋肌肉瘤、室管膜瘤、髓母細胞瘤、結腸癌、胃癌、膀胱癌、頭頸部癌、腎(kidney)癌、肺癌、肝癌、黑色素瘤、腎(renal)癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、肉瘤、骨肉瘤、骨巨細胞瘤和甲狀腺癌。
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