KR20090112654A

KR20090112654A - 보존 안정성이 뛰어난 ｓ-아데노실-ｌ-메티오닌 함유 건조 효모의 제조 방법, 그 제조물 및 그 성형된 조성물

Info

Publication number: KR20090112654A
Application number: KR1020097014889A
Authority: KR
Inventors: 겐타로우 다카노; 신요 가야마
Original assignee: 미츠비시 가스 가가쿠 가부시키가이샤
Priority date: 2007-01-25
Filing date: 2008-01-23
Publication date: 2009-10-28
Also published as: EP2116593A1; JP4479932B2; WO2008090905A1; KR101525263B1; EP2116593A4; CN101589136A; US9200250B2; JPWO2008090905A1; CN101589136B; PT2116593T; AU2008208325A1; AU2008208325B2; TWI403585B; EP2116593B1; US20100075403A1; TW200900505A; CA2675970C; TR201802640T4; CA2675970A1

Abstract

본 발명은 S-아데노실-L-메티오닌 생산능을 갖는 효모를 이용하여 S-아데노실-L-메티오닌을 함유하는 건조 효모를 제조하는 방법에 있어서, 효모의 균체 배양액으로부터 얻어지는 효모 균체 농축물에 시클로덱스트린류를 첨가한 후에 건조하는 것을 특징으로 하는 S-아데노실-L-메티오닌 함유 건조 효모의 제조 방법, 상기 제조 방법으로 얻어진 SAMe 함유 건조 효모, 및 상기 건조 효모를 이용하여 성형된 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 의해 수용성 생리 활성 물질로서 유용한 S-아데노실-L-메티오닌을 고농도로 포함하는 보존 안정성이 뛰어난 건조 효모 및 상기 건조 효모를 이용하여 성형된 조성물을 간편하고 경제적으로 제조하여 시장에 제공하는 것이 가능해 진다.

Description

보존 안정성이 뛰어난 Ｓ-아데노실-Ｌ-메티오닌 함유 건조 효모의 제조 방법, 그 제조물 및 그 성형된 조성물{METHOD FOR PRODUCTION OF DRY YEAST CONTAINING S-ADENOSYL-L-METHIONINE AND HAVING EXCELLENT STORAGE STABILITY, PRODUCT PRODUCED BY THE METHOD, AND MOLDED COMPOSITION OF THE DRY YEAST}

본 발명은 S-아데노실-L-메티오닌(이하, 'SAMe'라 기재함) 생산능을 갖는 효모를 이용한 보존 안정성이 뛰어난 SAMe 함유 건조 효모의 제조 방법 및 그 제조 방법을 이용한 제조물에 관한 것이다. 보다 상세하게는, SAMe 생산능을 갖는 효모를 이용하여 상기 화합물을 함유하는 건조 효모를 제조하는 방법에 있어서, 효모의 균체 배양액으로부터 얻어지는 효모 균체 농축물에 시클로덱스트린류를 첨가한 후에 건조하는 것을 특징으로 하는 보존 안정성이 뛰어난 S-아데노실-L-메티오닌 함유 건조 효모의 제조 방법, 상기 제조 방법에 의해 얻어진 SAMe 함유 건조 효모, 및 상기 SAMe 함유 건조 효모를 이용하여 성형된 조성물에 관한 것이다.

SAMe는 생체내에서의 여러 가지 트랜스메틸라제에 의한 메틸화 반응의 메틸기 공여체로서 중요한 역할을 하고 있는 수용성 생리 활성 물질로서, 인체의 거의 모든 세포에서 발견되고, 여러 가지 생화학 반응에서의 공동 인자로 작용하며, 예를 들면, 연골의 유지나 뇌 내 물질의 생합성에 빠뜨릴 수 없는 물질이다. 근래의 SAMe의 기능 연구에서 지방간, 고지혈증, 동맥경화증, 불면증 등에 대한 치료 효과에 대해서도 보고되고 있다. 이와 같이 SAMe는 중요한 생리 활성 물질이며, 구미 제국에 있어서 울병, 간장 질환 및 관절염 등의 치료약, 혹은 건강식품으로 널리 이용되고 있다.

그 때문에, SAMe를 염가로, 간편하게 제조 공급하는 것이 강하게 요망되지만, 종래 SAMe의 제조 방법으로는 전구물질인 L-메티오닌을 함유시킨 배지를 이용하여 발효 생산하는 방법(예를 들면, 특허문헌 1∼3, 비특허문헌 1∼7 참조), 효모 등의 미생물로부터 단리 정제한 SAMe 합성 효소(메티오닌 아데노실 트랜스퍼라제)를 이용하여 아데노신 5'-3인산(ATP)과 L-메티오닌을 기질로 하여 SAMe를 효소적으로 합성하는 방법(예를 들면, 특허문헌 4∼5, 비특허문헌 7∼11 참조) 및 합성법에 의한 방법(예를 들면, 특허문헌 6, 비특허문헌 12 참조) 등이 알려져 있다.

효소적 합성법에 대해서는 효모 등의 미생물로부터 단리 정제한 SAMe 합성 효소(메티오닌 아데노실 트랜스퍼라제)를 이용하여 아데노신 5'-3인산(ATP)과 L-메티오닌을 기질로 하여 SAMe를 효소적으로 합성하는 방법이지만, 이 방법은 발효법과 비교해서 SAMe의 축적량이 많아 균체로부터의 SAMe 추출 조작이 필요없는 등의 이점은 있지만, 효소의 조제가 번잡한 것, 얻어지는 효소의 활성이 미약한 것, ATP 분해 효소 등의 방해 물질을 제거할 필요가 있는 것, 나아가서는 기질인 ATP가 매우 고가인 것 등 여러 가지 문제를 가져, 반드시 실용적인 방법으로는 될 수 없었 다. 또, 근래의 유전자 공학의 발전에 의해 클론화한 SAMe 합성 효소 유전자를 이용함으로써 상기 효소의 조제가 보다 간편해져(예를 들면, 비특허문헌 6∼9 참조) 효소 조제의 문제는 계속적으로 해결되고 있지만, 여전히 고가의 ATP를 기질로 사용할 필요가 있는 등 다른 실용상의 문제는 해결되고 있지 않다.

또, SAMe는 열적으로 불안정하고 용이하게 분해되는 성질을 갖기 때문에, 그 대책으로서 보존 안정성의 향상을 목적으로 한 많은 시도가 있어 왔다. 예를 들면, 전술한 제조 방법에서 얻어진 SAMe의 조성물을 크로마토그래피 등에 의해 정제한 후, 황산이나 p-톨루엔 술폰산과의 염, 또는 부탄 디술폰산과의 염 등으로 함으로써 SAMe의 안정화를 도모하는 방법(예를 들면, 특허문헌 1∼3, 7∼11 참조), 또는 정제한 SAMe에 첨가물을 첨가함으로써 안정화를 도모하는 방법(예를 들면, 특허문헌 1∼3, 7∼13 참조)도 제안되고 있지만, 어느 쪽의 방법도 많은 노력과 비용을 필요로 하며, 아울러 반드시 충분한 보존 안정성을 얻고 있는 것이 아니기 때문에, 치료약이나 건강식품으로서 중요한 SAMe를 경제적인 가격으로 제공하는 것은 곤란하였다.

한편, 경제적인 가격으로 SAMe를 제조하여 제공하는 방법으로서, 발효법에 의해 SAMe를 포함하는 건조 효모를 제조하여 제공하는 방법도 보고되어 있지만, 제조된 건조 효모 중의 SAMe에 대해 충분한 보존 안정성은 얻고 있지 못하다(예를 들면, 특허문헌 14 참조).

특허문헌 1: 일본 특공평4-21478호 공보

특허문헌 2: 일본 특공평6-30607호 공보

특허문헌 3: 유럽특허 제1091001호 명세서

특허문헌 4: 일본 특개소61-227792호 공보

특허문헌 5: 일본 특개2001-169797호 공보

특허문헌 6: 미국특허 제6881837호 명세서

특허문헌 7: 일본 특개소59-51213호 공보

특허문헌 8: 일본 특개소52-48691호 공보

특허문헌 9: 일본 특공평1-49274호 공보

특허문헌 10: 일본 특공평1-49275호 공보

특허문헌 11: 일본 특표평3-501970호 공보

특허문헌 12: 일본 특개소60-181095호 공보

특허문헌 13: 일본 특개소61-91125호 공보

특허문헌 14: 일본 특개2005-229812호 공보

비특허문헌 1: Schlenk F., DePalma R.E., J. Biol. Chem., 229, 1037-1050 (1957)

비특허문헌 2: Shiozaki S., et all, Agric. Biol. Chem., 48, 2293-2300 (1984)

비특허문헌 3: Shiozaki S., et all, Agric. Biol. Chem., 53, 3269-3274 (1989)

비특허문헌 4: Kusakabe, H., Kuninaka, A., Yoshino, H., Agric. Biol. Chem., 38, 1669-1672 (1974)

비특허문헌 5: Mudd SH., Cantoni GL., et all, J. Biol. Chem., 231, 481-492 (1958)

비특허문헌 6: Shiozaki S., et all, J. Biotechnology., 4, 345-354 (1986)

비특허문헌 7: Thomas D., Surdin-Kerjan Y., J. Biol. Chem., 262, 16704-16709 (1987)

비특허문헌 8: Markham G.D., et all, J. Biol. Chem., 255, 9082-9092 (1980)

비특허문헌 9: Markham DJ., DeParisis J., J. Biol. Chem., 259, 14505-14507 (1984)

비특허문헌 10: Thomas D., Cherest H., et all, Mol. Cell. Biol, 8, 5132-5139 (1988)

비특허문헌 11: Jeongho Park, Junzhe Tai, Charles A., Roessner and A. Ian Scott., Bioorganic & Medical Chemistry, Vol.4, No.12, 2179-2185 (1996)

비특허문헌 12: Jose R. Mator, Frank M. Raushel, Chi-Huey Wong., Biotechnology and Applied Biochemistry., 9, 39-52 (1987)

발명의 개시

본 발명의 목적은 SAMe를 고농도로 포함하는 보존 안정성이 뛰어난 건조 효모의 간편하고 경제적인 제조 방법을 확립하는 동시에, 상기 제조 방법에서 얻어진 SAMe 함유 건조 효모, 및 상기 건조 효모를 이용하여 성형된 보존 안정성이 매우 뛰어난 조성물을 제공하는 것에 있다.

본 발명자들은 상기 과제를 해결할 수 있도록 SAMe를 고농도로 함유하고, 또한 안정적인 상태에서 장기간 보존할 수 있는 성능적으로 뛰어난 조성물을 경제적으로 생산할 수 있는 방법에 대해 예의 검토한 결과, SAMe 생산능을 갖고 또한 경구 섭취가 가능한 효모를 이용하여 균체 내에 SAMe를 고농도로 생산 축적시킨 후, 배양액으로부터 원심분리 등의 분리 수단으로 효모 균체를 분리하고, 얻어진 효모 균체 농축물에 시클로덱스트린류를 첨가한 후 건조시킴으로써, 목적으로 하는 SAMe를 고농도로 함유하고, 또한 보존 안정성이 뛰어난 조성물인 건조 효모를 간편하게 좋은 수율로 제조할 수 있음을 발견하고 본 발명을 완성하기에 이르렀다.

즉, 본 발명은 이하의 (1)∼(8)로 표시되는 보존 안정성이 뛰어난 SAMe를 고농도로 포함하는 건조 효모 및 상기 건조 효모를 이용한 성형체를 효율적으로 제조하여 제공하기 위한 것이다.

(1) S-아데노실-L-메티오닌 생산능을 갖는 효모를 이용하여 S-아데노실-L-메티오닌을 함유하는 건조 효모를 제조하는 방법에 있어서, 효모의 균체 배양액으로부터 얻어지는 효모 균체 농축물에 시클로덱스트린류를 첨가한 후에 건조하는 것을 특징으로 하는 S-아데노실-L-메티오닌 함유 건조 효모의 제조 방법.

(2) S-아데노실-L-메티오닌 생산능을 갖는 효모가 사카로마이세스 속에 속하는 효모인 상기 (1)의 S-아데노실-L-메티오닌 함유 건조 효모의 제조 방법.

(3) 사카로마이세스 속에 속하는 효모가 사카로마이세스·세레비지애(Saccharomyces cerebisiae)인 상기 (2)의 S-아데노실-L-메티오닌 함유 건조 효모의 제조 방법.

(4) 첨가하는 시클로덱스트린류가 α-, β-, 혹은 γ-시클로덱스트린 또는 그 유도체인 상기 (1)의 S-아데노실-L-메티오닌 함유 건조 효모의 제조 방법.

(5) 시클로덱스트린류의 첨가량이 효모 균체의 분리 농축물 중에 포함되는 SAMe에 대한 몰 비로서 0.05∼6배 몰의 범위인 상기 (1)의 S-아데노실-L-메티오닌 함유 건조 효모의 제조 방법.

(6) 첨가하는 시클로덱스트린류가 γ-시클로덱스트린인 상기 (1)의 S-아데노실-L-메티오닌 함유 건조 효모의 제조 방법.

(7) 상기 (1)∼(6) 중 어느 한 방법에 의해 제조된 S-아데노실-L-메티오닌 함유 건조 효모.

(8) 상기 (7)의 S-아데노실-L-메티오닌 함유 건조 효모를 이용하여 성형된 조성물.

발명을 실시하기 위한 바람직한 형태

본 발명에 사용되는 효모의 종류는 SAMe 생산능을 갖고, 또한 경구 섭취 가능한 것이면 되고, 예를 들면, 사카로마이세스 속에 속하는 효모를 들 수 있다. 이 중, 사카로마이세스·세레비지애가 보다 바람직하다. 또한, 건조 효모에는 5'-뉴클레오티드, 유리 아미노산, 항산화 작용을 가져 간 기능 개선에 도움이 되는 글루타티온, 면역력의 증진 작용이나 정장(整腸) 작용을 갖는 β-글루칸이나 식물 섬유 등의 유용 성분이 많이 포함되어 있어 건강식품 등으로 널리 이용되고 있다.

상기 효모를 배양할 때에 사용하는 탄소원은 효모가 자화(資化)할 수 있는 것이면 특별히 제한은 없고, 예를 들면, 글루코오스, 자당, 전분, 폐당밀 등의 탄수화물, 에탄올 등의 알코올, 또는 아세트산 등의 유기산을 들 수 있다. 질소원도 사용하는 효모가 자화할 수 있는 것이면 특별히 제한은 없고, 예를 들면, 암모니아, 질산, 요소 등의 무기체 질소 화합물, 또는 효모 엑기스, 맥아 엑기스 등의 유기체 질소 화합물을 포함하는 것을 들 수 있다. 또, 무기 염류로는 인산, 칼륨, 나트륨, 마그네슘, 칼슘, 철, 아연, 망간, 코발트, 구리, 몰리브덴 등의 염이 이용된다. 나아가서는, SAMe의 골격 구성에 관여하는 메티오닌, 아데닌, 아데노실 리보뉴클레오시드를 첨가하여 배양할 수도 있다.

배양 온도 및 배양액의 pH는 사용하는 효모의 종류에 따라 다르지만, 배양 온도로는 20∼35℃의 범위를, 배양액의 pH로는 pH 4∼7의 범위를 들 수 있다.

또, 균체 내의 SAMe 함량을 높이려면 호기적으로 배양하는 것이 바람직하다. 배양조는 환기 가능하며 필요에 따라 교반할 수 있는 것이면 되고, 예를 들면, 기계적 교반 배양조, 에어 리프트식 배양조 및 기포탑형 배양조 등을 이용할 수 있다.

배지의 공급 방법은 탄소원, 질소원, 각종 무기 염류, 각종 첨가제 등을 일괄 혹은 개별적으로 연속적 또는 간헐적으로 공급한다. 예를 들면, 자당, 에탄올 등의 기질은 다른 배지 성분과의 혼합물로서 배양조에 공급해도 되고, 또 다른 배지 성분과는 별도로 독립적으로 배양조에 공급해도 된다. 배양액의 pH 제어는 산, 알칼리 용액에 의해 수행된다. 알칼리로는 질소원으로 사용되는 암모니아, 요소, 또는 비질소계 염기, 예를 들면, 수산화나트륨, 수산화칼륨 등을 이용하여 pH 제어하는 것이 바람직하다. 산으로는 무기산, 예를 들면, 인산, 황산, 질산, 또는 유기산이 이용된다. 또한, 무기 염류인 인산염, 칼륨염, 나트륨염, 질산염 등을 이용하여 pH 제어할 수도 있다.

이와 같은 조건으로 배양하여 목표량의 SAMe가 효모 균체 내에 축적된 단계에서 배양액을 뽑아내어 효모 균체를 분리한다. 분리 방법으로는 균체의 분리와 세정을 효율적으로 수행할 수 있는 방법이면 특별히 제한은 없지만, 향류형(向流型) 효모 세퍼레이터(yeast separator)나 분리막을 이용한 한외여과장치를 바람직한 예로 들 수 있다.

그 다음에, 분리한 효모 균체의 분리 농축물에 시클로덱스트린류를, 예를 들면, 실온에서 분말 또는 수용액의 형태로 첨가하여 일정 시간 교반 혼합한 후에 건조한다. 이것에 의해, 건조 효모 중의 SAMe의 보존 안정성이 증가하는 동시에 보존에 수반하는 유황 냄새와 같은 이취(異臭)의 발생을 억제할 수 있다. 또, 효모 건조 공정에서의 SAMe의 제품 수율도 향상되고 건조 효모 특유의 악취도 차단된다. 첨가하는 시클로덱스트린류의 양으로는 건조 효모 중의 SAMe의 보존 안정성의 관점으로부터, 효모 균체의 분리 농축물 중에 포함되는 SAMe에 대하여 첨가하는 시클로덱스트린류의 몰 비가 0.05∼6배 몰의 범위가 되도록 하는 것이 바람직하고, 0.1∼4배 몰의 범위가 되도록 하는 것이 보다 바람직하며, 0.5∼4배 몰의 범위가 되도록 하는 것이 더욱 바람직하다.

또한, 본 발명에서 사용하는 시클로덱스트린류로는 α-, β-, 혹은 γ-시클로덱스트린 또는 그 유도체를 들 수 있으며, 그 중에서도 γ-시클로덱스트린이 특히 유효하다. 또, 각각의 시클로덱스트린류를 단독으로 또는 2종 이상을 혼합하여 사용할 수도 있다. 유도체로는 글루코실 시클로덱스트린, 말토실 시클로덱스트린, 히드록시프로필 시클로덱스트린, 메틸화 시클로덱스트린 및 디메틸화 시클로덱스트린이다. 시클로덱스트린류로는 분말상, 과립상, 또는 결정상의 형태로 식품, 화장품, 의약품 용도에서 범용되고 있어 안전하게 사용할 수 있다.

이와 같이 하여 시클로덱스트린류의 첨가 처리를 수행한 후에 효모 균체의 농축물을 스프레이 드라이어에 의한 분무건조법이나 동결건조법 등의 건조 방법에 의해 수분을 증발시켜 건조 효모를 만들어낸다. 건조 조건으로는, 분무건조법에서는 입구 온도 210℃ 이하, 출구 온도 110℃ 이하에서 건조시키는 것이 바람직하다. 동결건조법에서는 최종 선반 온도 30℃ 이하에서 건조시키는 것이 바람직하다. 본 발명의 SAMe 함유 건조 효모는 보존 안정성의 관점으로부터 그 수분 함량이 5.0 중량% 이하가 되도록 하는 것이 바람직하다.

나아가서는, 이 건조 효모를 파쇄하여 분말상으로 하거나, 분말상의 건조 효모에 필요에 따라 다른 생리 활성 성분이나 부형제 등의 첨가제를 첨가한 후에 압축 타정하여 정제상의 조성물로 하고, 추가로 그 표면을 피복하거나 할 수도 있다. 또, 분체를 과립상으로 조립하는 것이나, 분체나 조립한 과립을 채워 캡슐화할 수도 있다.

이하, 본 발명을 실시예 및 비교예를 들어 더욱 상세하게 설명하겠으나, 본 발명은 이들 예에 의해 한정되는 것은 아니다.

실시예 1∼ 실시예 6

(a) 효모 균체의 배양

전술한 공지의 배양법(Schlenk F., DePalma R.E., J. Biol. Chem., 229, 1037-1050 (1957)(비특허문헌 1), Shiozaki S., et all, Agric. Biol. Chem., 53, 3269-3274 (1989)(비특허문헌 3))에 따라 L-메티오닌 함유 배지(Shiozaki S., et all, J. Biotechnology, 4, 345-354 (1986)(비특허문헌 6))에 사카로마이세스 속에 속하는 효모 사카로마이세스·세레비지애 IFO 2346을 접종하여 배양 온도 27∼29℃에서 호기적으로 통기교반 통기반하면서 6일간 배양하였다. 그 결과, 균체 농도 3.5 중량%, SAMe 함량 205 ㎎/g인 건조 효모의 효모 균체 배양액 18ℓ를 얻었다.

(b) 효모 균체의 집균

상기의 효모 균체 배양액 18ℓ를 연속 로터리형 원심분리기(히타치 HIMAC CENTRIFUGE CR10B2)로 처리하여 균 농도가 건조물 환산으로 18 중량%에 상당하는 액상의 효모 균체 농축물 3.4 ㎏을 얻었다.

(c) 효모 균체 농축물에 대한 시클로덱스트린류의 첨가

상기의 효모 균체 농축물 3.4 ㎏에 γ-시클로덱스트린을 상기 효모 농축물 중의 SAMe에 대해 0.1, 0.5, 1.0, 2.0, 3.0, 4.0배 몰 첨가하고, 실온에서 30분간 교반 혼합하여 γ-시클로덱스트린을 첨가한 효모 균체 농축물을 얻었다.

(d) 건조 효모의 제조

상기의 γ-시클로덱스트린을 첨가한 효모 균체 농축물을 동결건조기(일본진공기술 주식회사제)의 동결건조용 스테인리스 트레이에 흘려 넣어 -50℃로 동결한 후, 최종 선반단 온도 25℃의 조건으로 36시간 동결건조하였다. 얻어진 동결건조 효모를 추가로 분쇄함으로써 분말 건조 효모를 얻었다. 이와 같이 하여 얻어진 분말 건조 효모를 밀폐 유리 용기 중에 채워 40℃, RH 75%의 가속 조건하에서 보존 안정성 시험을 수행하였다. 표 1에 그 결과를 나타낸다. 또한, SAMe 잔존율은 SAMe 함유 건조 효모로부터 과염소산을 이용한 공지의 방법(예를 들면, 비특허문헌 2)으로 SAMe를 추출하고, 액체 크로마토그래피를 이용한 비교 정량법으로 실시하였다. 보존 후의 악취의 유무에 대해서는 5명의 패널리스트에 의한 관능검사로 구하였다. 본 발명에서의 SAMe 측정법은 이하 조건의 액체 크로마토그래피를 사용하였다.

이용된 분석 조건:

칼럼: 나칼라이(nacalai tesque) COSMOSIL 4.6φ× 100 ㎜

용리액: 0.2 M KH₂PO₄ 수용액/메탄올=95/5

유속: 0.7 ㎖/분, 검출기: UV(260 ㎚), SAMe 유지 시간: 약 150초

실시예 7∼ 실시예 12

효모 균체 농축물에 β-시클로덱스트린을 이용하여 실시예 1과 동일하게 처 리하여 분말 건조 효모를 얻었다. 얻어진 분말 건조 효모 중의 SAMe 함량, β-시클로덱스트린의 첨가량, 및 얻어진 SAMe 함유 건조 효모의 밀폐 유리 용기 중, 40℃, RH 75%의 가속 조건 하에서의 보존 안정성 시험 결과, 관능 검사 결과를 표 1에 나타낸다.

실시예 13∼ 실시예 17

효모 균체 농축물에 α-시클로덱스트린을 상기 효모 농축물 중의 SAMe에 대해 0.5, 1.0, 2.0, 3.0, 4.0배 몰 첨가한 것 이외에는 실시예 1과 동일하게 처리하여 분말 건조 효모를 얻었다. 얻어진 분말 건조 효모 중의 SAMe 함량, α-시클로덱스트린의 첨가량, 및 얻어진 SAMe 함유 건조 효모의 밀폐 유리 용기 중, 40℃, RH 75%의 가속 조건 하에서의 보존 안정성 시험 결과, 관능 검사 결과를 표 1에 나타낸다.

실시예 18, 19

실시예 1과 동일하게 하여 (a)부터 (b)까지의 조작을 수행하고, 얻어진 액상의 효모 균체 농축물에 첨가물로서 γ-시클로덱스트린, 또는 β-시클로덱스트린을 SAMe에 대해 2.0배 몰 첨가하고, 실온에서 30분간 교반, 용해하여 γ-시클로덱스트린을 첨가한 효모 균체 농축물 및 β-시클로덱스트린을 첨가한 효모 균체 농축물을 얻었다. 이 효모 균체를 미립자화 장치로서 이류체(二流體) 노즐을 갖는 스프레이 드라이어를 이용하여, 건조실의 입구 온도 145℃, 출구 온도 85℃, 통액 속도 1.5 g/분의 조건에서 분무건조하여 분말 건조 효모를 얻었다. 얻어진 분말 건조 효모 중의 SAMe 함량, 첨가물 양, 얻어진 SAMe 함유 건조 효모의 밀폐 유리 용기 중, 40 ℃, RH 75%의 가속 조건 하에서의 보존 안정성 시험 결과, 관능 검사 결과를 표 1에 나타낸다.

비교예 1

효모 균체 농축물에 시클로덱스트린류를 첨가하지 않은 것 이외에는 실시예 1과 동일하게 처리하여 분말 건조 효모를 얻었다. 얻어진 분말 건조 효모 중의 SAMe 함량, 얻어진 SAMe 함유 건조 효모의 밀폐 유리 용기 중, 40℃, RH 75%의 가속 조건 하에서의 보존 안정성 시험 결과, 관능 검사 결과를 표 1에 나타낸다.

비교예 2

효모 균체 농축물에 전분을 상기 효모 농축물에 대해 5.0 중량%가 되도록 첨가한 것 이외에는 실시예 1과 동일하게 처리하여 분말 건조 효모를 얻었다. 얻어진 분말 건조 효모 중의 SAMe 함량, 전분의 첨가량, 얻어진 SAMe 함유 건조 효모의 밀폐 유리 용기 중, 40℃, RH 75%의 가속 조건 하에서의 보존 안정성 시험 결과, 관능 검사 결과를 표 2에 나타낸다.

비교예 3

효모 균체 농축물에 덱스트린 수화물을 상기 효모 농축물에 대해 10 중량%가 되도록 첨가한 것 이외에는 실시예 1과 동일하게 처리하여 분말 건조 효모를 얻었다. 얻어진 분말 건조 효모 중의 SAMe 함량, 덱스트린 수화물의 첨가량, 얻어진 SAMe 함유 건조 효모의 밀폐 유리 용기 중, 40℃, RH 75%의 가속 조건 하에서의 보존 안정성 시험 결과, 관능 검사 결과를 표 2에 나타낸다.

비교예 4

효모 균체 농축물에 수크로오스를 상기 효모 농축물 중의 SAMe 몰 비에 대해 1.0 당량을 첨가한 것 이외에는 실시예 1과 동일하게 처리하여 분말 건조 효모를 얻었다. 얻어진 분말 건조 효모 중의 SAMe 함량, 수크로오스의 첨가량, 얻어진 SAMe 함유 건조 효모의 밀폐 유리 용기 중, 40℃, RH 75%의 가속 조건 하에서의 보존 안정성 시험 결과, 관능 검사 결과를 표 2에 나타낸다.

비교예 5

효모 균체 농축물에 말토오스를 상기 효모 농축물 중의 SAMe 몰 비에 대해 1.0 당량을 첨가한 것 이외에는 실시예 1과 동일하게 처리하여 분말 건조 효모를 얻었다. 얻어진 분말 건조 효모 중의 SAMe 함량, 말토오스의 첨가량, 얻어진 SAMe 함유 건조 효모의 밀폐 유리 용기 중, 40℃, RH 75%의 가속 조건하에서의 보존 안정성 시험 결과, 관능 검사 결과를 표 2에 나타낸다.

비교예 6

효모 균체 농축물에 글루코오스를 상기 효모 농축물 중의 SAMe 몰 비에 대해 1.0 당량을 첨가한 것 이외에는 실시예 1과 동일하게 처리하여 분말 건조 효모를 얻었다. 얻어진 분말 건조 효모 중의 SAMe 함량, 글루코오스의 첨가량, 얻어진 SAMe 함유 건조 효모의 밀폐 유리 용기 중, 40℃, RH 75%의 가속 조건하에서의 보존 안정성 시험 결과, 관능 검사 결과를 표 2에 나타낸다.

비교예 7

효모 균체 농축물에 자일리톨을 상기 효모 농축물 중의 SAMe 몰 비에 대해 1.0 당량을 첨가한 것 이외에는 실시예 1과 동일하게 처리하여 분말 건조 효모를 얻었다. 얻어진 분말 건조 효모 중의 SAMe 함량, 자일리톨의 첨가량, 얻어진 SAMe 함유 건조 효모의 밀폐 유리 용기 중, 40℃, RH 75%의 가속 조건 하에서의 보존 안정성 시험 결과, 관능 검사 결과를 표 2에 나타낸다.

[표 1]

SAMe 함유 건조 효모의 밀폐 유리 용기 중, 40℃, RH 75%의 가속 조건하에서의 보존 안정성 시험 결과

※1 실시예 1∼6은 γ-시클로덱스트린(γ-CD)을 첨가(건조법은 동결건조)

※1 실시예 7∼12는 β-시클로덱스트린(β-CD)을 첨가(건조법은 동결건조)

※1 실시예 13∼17은 α-시클로덱스트린(α-CD)을 첨가(건조법은 동결건조)

※1 실시예 18은 γ-시클로덱스트린(γ-CD)을 첨가(건조법은 분무건조)

※1 실시예 19는 β-시클로덱스트린을 첨가(건조법은 분무건조)

※2 관능 검사: A: 이취 없음, B: 이취가 약간 있음, C: 이취 있음

[표 2]

SAMe 함유 건조 효모의 밀폐 유리 용기 중, 40℃, RH 75%의 가속 조건 하에서의 보존 안정성 시험 결과

※관능 검사: A: 이취 없음, B: 이취가 약간 있음, C: 이취 있음

본 발명의 제조 방법을 이용함으로써, 간략한 프로세스로 SAMe를 고농도로 포함하며, 또한 안정적으로 보존할 수 있는 건조 효모 및 그것을 이용하여 성형된 조성물을 제조할 수 있다. 또, 이에 의해 의약이나 건강식품용 생리 활성 물질로 유용한 SAMe를 경제적인 가격으로 시장에 제공하는 것이 가능해진다.

Claims

S-아데노실-L-메티오닌 생산능을 갖는 효모를 이용하여 S-아데노실-L-메티오닌을 함유하는 건조 효모를 제조하는 방법에 있어서, 효모의 균체 배양액으로부터 얻어지는 효모 균체 농축물에 시클로덱스트린류를 첨가한 후에 건조하는 것을 특징으로 하는 S-아데노실-L-메티오닌 함유 건조 효모의 제조 방법.
청구항 1에 있어서,

S-아데노실-L-메티오닌 생산능을 갖는 효모가 사카로마이세스 속에 속하는 효모인 S-아데노실-L-메티오닌 함유 건조 효모의 제조 방법.
청구항 2에 있어서,

사카로마이세스 속에 속하는 효모가 사카로마이세스·세레비지애인 S-아데노실-L-메티오닌 함유 건조 효모의 제조 방법.
청구항 1에 있어서,

첨가하는 시클로덱스트린류가 α-, β-, 혹은 γ-시클로덱스트린 또는 그 유도체인 S-아데노실-L-메티오닌 함유 건조 효모의 제조 방법.
청구항 1에 있어서,

시클로덱스트린류의 첨가량이 효모 균체의 분리 농축물 중에 포함되는 SAMe에 대해 몰 비로서 0.05∼6배 몰의 범위인 S-아데노실-L-메티오닌 함유 건조 효모의 제조 방법.
청구항 1에 있어서,

첨가하는 시클로덱스트린류가 γ-시클로덱스트린인 S-아데노실-L-메티오닌 함유 건조 효모의 제조 방법.
청구항 1 내지 청구항 6 중 어느 한 항에 기재한 방법에 의해 제조된 S-아데노실-L-메티오닌 함유 건조 효모.
청구항 7에 기재된 S-아데노실-L-메티오닌 함유 건조 효모를 이용하여 성형된 조성물.