JP2005229812A - 安定化されたｓａｍを含有する乾燥微生物又は微生物抽出物、及びその製造方法 - Google Patents

Abstract

【課題】簡便な操作で容易に調整でき、食品素材で構成された、食品あるいは健康食品として幅広く利用可能な、安定なＳ−アデノシル−Ｌ−メチオニンを含有する乾燥微生物あるいは微生物抽出物を提供する。
【解決手段】Ｓ−アデノシル−Ｌ−メチオニンを含有する微生物又は微生物抽出液に、有機カルボン酸、好ましくはクエン酸、コハク酸、及び／又はキレート形成能を有する化合物、好ましくはＥＤＴＡ、コウジ酸、から選ばれた１種以上の化合物を添加し、濃縮及び／または乾燥する。
【選択図】なし

Description

本発明は、安定化されたＳ−アデノシル−Ｌ−メチオニン（以下ＳＡＭと略する）を含有する乾燥微生物あるいは微生物抽出物、及びその製造方法に関する。

ＳＡＭは、人体の殆ど全ての細胞に見られ、様々な生化学反応における共同因子として働き、軟骨の維持や脳内の化合物精製に欠かす事の出来ない物質である。一般的に人体は、正常な機能維持のためにＳＡＭを必要としているが、通常体内で必要量が生成されている。しかしながら、例えば、関節炎や鬱病など特別な健康状態にある場合、ＳＡＭの体内レベルは低位となることが知られている。また、近年、ＳＡＭには肝血症、過度脂血症、動脈硬化症、不眠症などに対する治療効果のある事が見いだされており、臨床試験等において、副作用が報告されていないのも特徴的な化合物である。
このようにＳＡＭは重要な生理活性物質であり、欧米諸国において鬱病や関節炎の治療薬として広く知られていることから、ＳＡＭを安価に供給し、簡便に使用できることが望まれているが、メチル基供与体として各種の生体反応に利用されるという特性のため、保存安定性に劣り、単体での構造維持が極めて困難であった。

従来、ＳＡＭ単体の製造に関しては、工業的製造方法としてサッカロマイセス属酵母等を培養、抽出、精製する方法が知られている。また、ＳＡＭ単体の安定性を高めるために種々の方法、例えば硫酸等の無機酸、 ｐ−トルエンスルホン酸等のスルホン酸誘導体を添加する方法、が提案されている（特許文献１、非特許文献１）。
しかしながら、これら従来の方法は、医薬原末としてのＳＡＭを得るために、複雑かつ高度な技術及び設備を必要とし、また、その得られたＳＡＭの安定化のためのは、食品としては認められていない高い酸化能力を有する物質を等分子量以上添加するという、特別な利用用途に限られるという欠点があった。
特公昭４６−１３６８０号公報、同４９−２１０７９号公報、同５３−２０９９８号公報、同５４−１４６７５号公報、同５６−１９９９８号公報、特公平１−５３０７号公報、同１−５３０３８号公報、同２−４６５９９号公報、同３−７８１１７号公報、同４−１９８３８号公報、同４−２１４７８号公報、同４−３３４３９号公報、同６−３０６０７号公報、特開昭４８−１３３３１０号公報、同５１−１２５７１７号公報、同５４−５５５９８号公報、同５６−１４５２９９号公報、同５８−１３８３９３号公報、同５８−２８２９６号公報、同５８−４００９５号公報、同５８−４３９９６号公報 Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．１９５７ ２２９ １０３７、Ｊ．Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ．１９７５ １２１ ２６７、Ａｇｒｉｃ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．１９８４ ４８ ２２９３

本発明は、微生物にて生産されるＳＡＭを、天然状態で簡便に提供するための、安定化されたＳＡＭを含有する乾燥微生物あるいは微生物抽出物を提供することを課題とする。

本発明者らは、かかる課題を解決すべく鋭意検討の結果、微生物あるいは微生物抽出液を、特定の化合物と共に濃縮あるいは乾燥することにより、課題を解決できることを見いだし、本発明に至った。
すなわち本発明は、
（１）ＳＡＭ含有する微生物又は微生物抽出物と、有機カルボン酸及び／又はキレート形成能を有する化合物から選ばれた１種以上の化合物からなる、安定化されたＳＡＭを含有する乾燥微生物又は微生物抽出物、
（２）微生物が食用酵母である、上記（１）記載の安定化されたＳＡＭを含有する乾燥微生物又は微生物抽出物、
（３）有機カルボン酸がクエン酸又はコハク酸である、上記（１）乃至（２）記載の、安定化されたＳＡＭを含有する乾燥微生物又は微生物抽出物、
（４）キレート形成能を有する化合物が、ＥＤＴＡ又はコウジ酸である、上記（１）乃至（２）記載の、安定化されたＳＡＭを含有する乾燥微生物又は微生物抽出物、
（５）ＳＡＭを含有する微生物又は微生物抽出液に、有機カルボン酸及び／又はキレート形成能を有する化合物から選ばれた１種以上の化合物を添加し、濃縮及び／または乾燥することを特徴とする、安定化されたＳＡＭを含有する乾燥微生物又は微生物抽出物の製造方法、
（６）微生物が食用酵母である、上記（５）記載の、安定化されたＳＡＭを含有する乾燥微生物又は微生物抽出物の製造方法、
（７）有機カルボン酸がクエン酸又はコハク酸である、上記（５）乃至（６）記載の、安定化されたＳＡＭを含有する乾燥微生物又は微生物抽出物の製造方法、
（８）キレート形成能を有する化合物が、ＥＤＴＡ又はコウジ酸である、上記（５）乃至（６）記載の、安定化されたＳＡＭを含有する乾燥微生物又は微生物抽出物の製造方法、
を提供するものである。

本発明の乾燥微生物あるいは微生物抽出物は、簡便な操作で容易に調整ができ、かつ、ＳＡＭを有意に安定化することができる。また、食用素材で構成されるため、ＳＡＭを食品あるいは健康食品として幅広く利用することが可能となる。

以下、本発明を詳細に説明する。
本発明で用いられる微生物は、ＳＡＭを生産するものであれば何れでも良いが、一般的にはサッカロマイセス属を代表とする酵母微生物が挙げられる。これら微生物のうち、食経験のあるものが望ましく、例えばパン酵母、ビール酵母、ワイン酵母、清酒酵母、トルラ酵母等の食用酵母が好ましい。

これら微生物の培養は、それ自体公知の方法で十分である。例えば、廃糖蜜やコーンスティープリカー等の天然素材を用いた培地、あるいはグルコース、シュークロースを主成分のする培地や、ＳＡＭを高濃度で蓄積させるために改良された培地を例示することがでいる。
微生物菌体は、培養後、培地成分と遠心分離等の方法で分離、洗浄される。

本発明で用いられる微生物抽出液は、上述した分離・洗浄された微生物菌体を、タンパク質分解酵素、細胞壁溶解酵素などを添加して抽出する方法、微生物中の酵素を利用して自己消化により抽出する方法、高圧分散処理等の高圧粉砕により抽出する方法、等で得られた、ＳＡＭを含有する抽出液である。

本発明のＳＡＭを安定化するために添加される化合物は、有機カルボン酸あるいはキレート形成能を有する化合物である。有機カルボン酸としては、例えば、酢酸、クエン酸、コハク酸、リンゴ酸等があげられるが、中でもクエン酸、コハク酸が好ましい。キレート形成能を有する化合物としては、例えば、ＥＤＴＡ、コウジ酸、ジエチルグリオキシム等が例示され、好ましくはＥＤＴＡ、コウジ酸が望ましい。
これら化合物は、乾燥微生物あるいは微生物抽出液(固形分乾燥重量）に対して０．１〜５０重量％、好ましくは１〜４０重量％、更に好ましくは１０〜３０重量％添加される。これより量が少ないとＳＡＭの安定化効果が得られず、一方、添加量が多すぎると吸湿性が増しＳＡＭの安定化効果が低下するため、別途、乾燥剤の使用が必要となり、好ましくない。

本発明の安定化されたＳＡＭを含有する乾燥微生物あるいは微生物抽出物は、培養酵母菌体あるいは微生物抽出液に、上述した化合物を添加し、濃縮あるいは乾燥することにより、容易に製造される。
濃縮方法は任意であるが、単蒸留を基本とした減圧濃縮に対して特に有効であり、例えば、ロータリーエバポレータを用いた減圧下での湯浴温度４０℃における薄膜濃縮法を用いる方法、等を挙げることができる。
乾燥方法は、例えば、噴霧乾燥、減圧乾燥、凍結乾燥を例示する事が出来るが、特に噴霧乾燥や凍結乾燥に対して有効である。

本発明において、本発明の効果を損なわない範囲で、デキストリン等の賦形剤、ビタミンＣ、トレハロース等の添加剤等を添加することができる。

本発明の乾燥微生物あるいは微生物抽出物は、ＳＡＭが安定化されたものであるが、ＳＡＭは３０℃程度から分解がはじまり、温度が上昇すると共に分解速度が高まることが知られており、保管は、２０℃以下で行うことが望ましい。

以下に本発明の実施例を示すが、本発明はこの実施例に限定されるものではない。
製造例１
サッカロマイセス・セルビシエＫ−６株（清酒酵母協会６号）を、シュークロース１００ｇ／Ｌ、尿素１８ｇ／Ｌ、Ｌ−メチオニン１０ｇ／Ｌ、酵母エキス１０ｇ／Ｌ、硫酸亜鉛１０ｍｇ／Ｌ、硫酸マンガン１０ｍｇ／Ｌ、硫酸鉄１０ｍｇ／Ｌからなる培養基質液を用い、３０Ｌ容量の発酵槽にて、温度２８℃、圧力２０ｋＰａ、通気１ＶＶＭ、攪拌４００ｒｐｍの条件下で４日間培養を行った。
得られた培養液を遠心分離器にて菌体と培養上清に分離後、更に菌体に分離した培養上清と同じ量の生理食塩水を加え、攪拌混合による菌体洗浄を行い、再度遠心分離器で菌体を分離し、ＳＡＭ含有菌体を得た。
得られたＳＡＭ含有菌体のＳＡＭ含有量は、対乾燥酵母菌体当たり１０重量％であった。

実施例１
製造例１で得られた菌体に、クエン酸を対乾燥菌体当たり０．１、１、１０、３０、４０、５０重量％、デキストリンを対乾燥菌体当たり３０重量％添加混合し、入口温度１６０℃、出口温度７５℃にて噴霧乾燥、又は−８０℃凍結後凍結乾燥を行い、本発明の乾燥微生物を得た。
本乾燥微生物について３ヶ月間のＳＡＭ残存率を測定し、安定性を観察した。なお、ＳＡＭ残存率は、液体クロマトグラフィーを用いた比較定量法にて実施した。

実施例２
製造例１で得られた菌体に、コハク酸を対乾燥菌体当たり０．１、１、１０、３０、４０、５０重量％、デキストリンを対乾燥菌体当たり３０重量％添加混合し、入口温度１６０℃、出口温度７５℃にて噴霧乾燥、又は−８０℃凍結後凍結乾燥を行い、本発明の乾燥微生物を得た。
本乾燥微生物について３ヶ月間のＳＡＭ残存率を測定し、安定性を観察した。なお、ＳＡＭ残存率は、液体クロマトグラフィーを用いた比較定量法にて実施した。

実施例３
製造例１で得られた菌体に、ＥＤＴＡを対乾燥菌体当たり０．１、１、１０、３０、４０、５０重量％、デキストリンを対乾燥菌体当たり３０重量％添加混合し、入口温度１６０℃、出口温度７５℃にて噴霧乾燥、又は−８０℃凍結後凍結乾燥を行い、本発明の乾燥微生物を得た。
本乾燥微生物について３ヶ月間のＳＡＭ残存率を測定し、安定性を観察した。なお、ＳＡＭ残存率は、液体クロマトグラフィーを用いた比較定量法にて実施した。

実施例４
製造例１で得られた菌体に、コウジ酸を対乾燥菌体当たり０．１、１、１０、３０、４０、５０重量％、デキストリンを対乾燥菌体当たり３０重量％添加混合し、入口温度１６０℃、出口温度７５℃にて噴霧乾燥、又は−８０℃凍結後凍結乾燥を行い、本発明の乾燥微生物を得た。
本乾燥微生物について３ヶ月間のＳＡＭ残存率を測定し、安定性を観察した。なお、ＳＡＭ残存率は、液体クロマトグラフィーを用いた比較定量法にて実施した。

比較例１
製造例１で得られた菌体に、デキストリンを対乾燥菌体当たり３０重量％添加混合し、入口温度１６０℃、出口温度７５℃にて噴霧乾燥、又は−８０℃凍結後凍結乾燥を行い、乾燥微生物を得た。
本乾燥微生物について３ヶ月間のＳＡＭ残存率を測定し、安定性を観察した。なお、ＳＡＭ残存率は、液体クロマトグラフィーを用いた比較定量法にて実施した。

比較例２
製造例１で得られた菌体に、ｐ−トルエンスルホン酸を対乾燥菌体当たり１０重量％、硫酸を耐乾燥菌体当たり８重量部及びデキストリンを対乾燥菌体当たり３０重量％添加混合し、入口温度１６０℃、出口温度７５℃にて噴霧乾燥、又は−８０℃凍結後凍結乾燥を行い、乾燥微生物を得た。
本乾燥微生物について３ヶ月間のＳＡＭ残存率を測定し、安定性を観察した。なお、ＳＡＭ残存率は、液体クロマトグラフィーを用いた比較定量法にて実施した。

実施例１〜４及び比較例１〜２の、噴霧乾燥で得た乾燥微生物の、常温保管での経時変化を、表１に示す。

実施例１〜４及び比較例１〜２の、凍結乾燥で得た乾燥微生物の、常温保管での経時変化を、表２に示す。

製造例２
製造例１で得られた菌体を蒸留水にて５倍希釈した菌体懸濁物を、高圧ホモジナイザーにて６００〜８００ＭＰａの圧力をかけ、細胞壁を破砕させ細胞内容物を抽出した。
得られた細胞壁類と抽出物の混合懸濁液を遠心分離器にて抽出物を分離し、ＳＡＭ含有抽出液を得た。
得られたＳＡＭ含有抽出液のＳＡＭ含有量は、対固形分当たり２０重量％であった。

実施例５
製造例２で得られた抽出液に、クエン酸を対固形分当たり０．１、１、１０、３０、４０、５０重量％添加し、湯浴温度４０℃で減圧濃縮を行い、本発明の微生物抽出物を得た。
抽出液の濃縮中のＳＡＭ残存率を測定し、安定性を観察した。なお、ＳＡＭ残存率は、液体クロマトグラフィーを用いた比較定量法にて実施した。

実施例６
製造例２で得られた抽出液に、コハク酸を対固形分当たり０．１、１、１０、３０、４０、５０重量％添加し、湯浴温度４０℃で減圧濃縮を行い、本発明の微生物抽出物を得た。
抽出液の濃縮中のＳＡＭ残存率を測定し、安定性を観察した。なお、ＳＡＭ残存率は、液体クロマトグラフィーを用いた比較定量法にて実施した。

実施例７
製造例２で得られた抽出液に、ＥＤＴＡを対固形分当たり０．１、１、１０、３０、４０、５０重量％添加し、湯浴温度４０℃で減圧濃縮を行い、本発明の微生物抽出物を得た。
抽出液の濃縮中のＳＡＭ残存率を測定し、安定性を観察した。なお、ＳＡＭ残存率は、液体クロマトグラフィーを用いた比較定量法にて実施した。

実施例８
製造例２で得られた抽出液に、コウジ酸を対固形分当たり０．１、１、１０、３０、４０、５０重量％添加し、湯浴温度４０℃で減圧濃縮を行い、本発明の微生物抽出物を得た。
抽出液の濃縮中のＳＡＭ残存率を測定し、安定性を観察した。なお、ＳＡＭ残存率は、液体クロマトグラフィーを用いた比較定量法にて実施した。

比較例３
製造例２で得られた抽出液を、湯浴温度４０℃で減圧濃縮を行い、微生物抽出物を得た。
抽出液の濃縮中のＳＡＭ残存率を測定し、安定性を観察した。なお、ＳＡＭ残存率は、液体クロマトグラフィーを用いた比較定量法にて実施した。

比較例４
製造例２で得られた抽出液に、ｐ−トルエンスルホン酸を対ＳＡＭ当たり２．５倍重量、及び硫酸を対ＳＡＭ当たり８倍重量添加し、湯浴温度４０℃で減圧濃縮を行い、微生物抽出物を得た。
抽出液の濃縮中のＳＡＭ残存率を測定し、安定性を観察した。なお、ＳＡＭ残存率は、液体クロマトグラフィーを用いた比較定量法にて実施した。

実施例５〜８及び比較例３〜４の、湯浴４０℃での減圧濃縮中のＳＡＭの経時変化を表３に示す。

以上述べてきたように、本発明では、安定なＳ−アデノシル−Ｌ−メチオニンを含有する乾燥微生物及び微生物抽出物を、簡便かつ、食品の原料素材にて提供できるため、Ｓ−アデノシル−Ｌ−メチオニンを食品や健康食品として、幅広く利用することが可能となる。

Claims (8)

1. Ｓ−アデノシル−Ｌ−メチオニンを含有する微生物又は微生物抽出物と、有機カルボン酸及び／又はキレート形成能を有する化合物から選ばれた１種以上の化合物からなる、安定化されたＳ−アデノシル−Ｌ−メチオニンを含有する乾燥微生物又は微生物抽出物。
2. 微生物が食用酵母である、請求項１記載の安定化されたＳ−アデノシル−Ｌ−メチオニンを含有する乾燥微生物又は微生物抽出物。
3. 有機カルボン酸がクエン酸又はコハク酸である、請求項１乃至２記載の、安定化されたＳ−アデノシル−Ｌ−メチオニンを含有する乾燥微生物又は微生物抽出物。
4. キレート形成能を有する化合物が、ＥＤＴＡ又はコウジ酸である、請求項１乃至２記載の、安定化されたＳ−アデノシル−Ｌ−メチオニンを含有する乾燥微生物又は微生物抽出物。
5. Ｓ−アデノシル−Ｌ−メチオニンを含有する微生物又は微生物抽出液に、有機カルボン酸及び／又はキレート形成能を有する化合物から選ばれた１種以上の化合物を添加し、濃縮及び／または乾燥することを特徴とする、安定化されたＳ−アデノシル−Ｌ−メチオニンを含有する乾燥微生物又は微生物抽出物の製造方法。
6. 微生物が食用酵母である、請求項５記載の、安定化されたＳ−アデノシル−Ｌ−メチオニンを含有する乾燥微生物又は微生物抽出物の製造方法。
7. 有機カルボン酸がクエン酸又はコハク酸である、請求項５乃至６記載の、安定化されたＳ−アデノシル−Ｌ−メチオニンを含有する乾燥微生物又は微生物抽出物の製造方法。
8. キレート形成能を有する化合物が、ＥＤＴＡ又はコウジ酸である、請求項５乃至６記載の、安定化されたＳ−アデノシル−Ｌ−メチオニンを含有する乾燥微生物又は微生物抽出物の製造方法。