JP6044540B2 - 保存安定性に優れたｓ−アデノシル−ｌ−メチオニン含有組成物 - Google Patents

保存安定性に優れたｓ−アデノシル−ｌ−メチオニン含有組成物 Download PDF

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Description

本発明は、水溶性の生理活性物質として有用なＳ−アデノシル−Ｌ−メチオニンを高濃度に含む保存安定性に優れた組成物、該組成物を用いた成型体及び該組成物の製造方法に関する。
Ｓ−アデノシル−Ｌ−メチオニン（以下、ＳＡＭｅと記す）は、生体内に広く存在する。ＳＡＭｅは、核酸、神経伝達物質、リン脂質、ホルモン、タンパク質などの合成・代謝にて種々のトランスメチラーゼによるメチル化反応のメチル基供与体として重要な役割を演じている水溶性の生理活性物質である。ＳＡＭｅは、人体の殆ど全ての細胞に見られ、様々な生化学反応における共同因子として働き、メチル基転移、硫黄基転移、及びアミノプロピル基転移の３つの代謝経路により代謝される。例えば、軟骨の維持や脳内物質の生合成に欠かすことの出来ない物質である。近年のＳＡＭｅの機能研究より脂肪肝、高脂血症、動脈硬化症、不眠症、アルコール性肝炎、老人性痴呆症などに対する治療効果についても報告されている。このようにＳＡＭｅは、重要な生理活性物質であり、欧米諸国において鬱病、肝臓疾患及び関節炎等の治療薬、或いは健康食品として広く利用されている。
そのため、ＳＡＭｅを安価で、簡便に製造供給することが強く望まれる。従来、ＳＡＭｅの製造方法としては、前駆物質であるＬ−メチオニンを含有させた培地を用いて醗酵生産する方法、微生物より単離精製したＳＡＭｅ合成酵素（メチオニンアデノシルトランスフェラーゼ）を用い、アデノシン５’−三リン酸（ＡＴＰ）とＬ−メチオニンを基質としてＳＡＭｅを酵素的に合成する方法及び合成法による方法などが知られている。
酵素的合成法については、微生物より単離精製したＳＡＭｅ合成酵素（メチオニンアデノシルトランスフェラーゼ）を用い、アデノシン５’−三リン酸（ＡＴＰ）とＬ−メチオニンを基質としてＳＡＭｅを酵素的に合成する方法である。この方法は、醗酵法と比べ、ＳＡＭｅの生成量が多く、菌体からのＳＡＭｅ抽出操作が必要ないなどの利点がある。しかしながら、酵素の調製が煩雑であること、得られる酵素の活性が微弱であること、ＡＴＰ分解酵素等の妨害物質を除去する必要があること、さらには、基質であるＡＴＰが極めて高価であるなど様々な問題を有し、必ずしも実用的な方法とは成り得なかった。
また、近年の遺伝子工学の発展により、クローン化したＳＡＭｅ合成酵素遺伝子を用いることによって該酵素の調製がより簡便になり、酵素調製の問題は解決されつつある。しかしながら、依然として高価なＡＴＰを基質として使用する必要があるなど、他の実用上の問題は解決されていない。
また、ＳＡＭｅは熱的に不安定で常温においても容易に分解する性質を有することから、医薬品、健康食品として使用する際の大きな障害となっている。その対策として、保存安定性の向上を目的とした多くの試みがなされてきた。例えば、前述した製造方法で得られたＳＡＭｅの組成物をクロマトグラフィー等により精製した後、硫酸やｐ−トルエンスルフォン酸との塩、又はブタンジスルフォン酸との塩等にすることによりＳＡＭｅの安定化をはかる方法、または、精製したＳＡＭｅに添加物処理を行い、ＳＡＭｅ組成物として安定化をはかる方法が一般的である。しかしながら、多くの手間と費用を要するため、治療薬や健康食品として重要なＳＡＭｅを安価に製造し提供することは極めて困難なことであった。
そして近年、ＳＡＭｅをより安価で、精製工程が少なく、簡便に製造できるＳＡＭｅ生産能を有し且つ経口摂取が可能な微生物を用いたＳＡＭｅ含有微生物（例えば、非特許文献１参照）、ＳＡＭｅ含有微生物エキスについて研究が行われている（例えば、特許文献１〜４、非特許文献２参照）。しかし、現状でＳＡＭｅ含有微生物エキスは、精製したＳＡＭｅ、ＳＡＭｅ組成物に比べ保存安定性が低いことが問題となっている。
特開２００５−２２９８１２号公報 特開２００８−０１２４６４号公報 国際公開第２００９／０８１８３３号 特許第４４７９９３２号公報 国際公開第２０１１／１２６０３０３号
Schlenk F.,DePalma R.E., J.Biol.Chem. 1037-1050(1957) Biochemica et Biophysica Acta, 1573,105-108(2002)
本発明の目的は、ＳＡＭｅを高濃度に含む保存安定性に優れた組成物及び該組成物を低コストで簡便に製造できるプロセス該組成物を用いた成型体を提供することにある。
本発明の発明者等は、上記課題を解決するべく、ＳＡＭｅを高濃度に含有し、かつ安定な状態で長期間保存できる組成物について鋭意検討した結果、ＳＡＭｅ含有酵母菌体と、特定の増粘剤を含有するＳＡＭｅ含有乾燥酵母組成物が保存安定性に優れることを見出し、特許出願している（特許文献５参照）。しかしながら、ＳＡＭｅ含有酵母菌体から抽出されたＳＡＭｅ含有抽出物を含有する組成物については、検討されていなかった。
そこで、本発明者等は、ＳＡＭｅ含有抽出物を利用し、ＳＡＭｅを高濃度に含有し、かつ安定な状態で長期間保存できる性能的に優れた組成物、及び該組成物を経済的に生産できる方法について鋭意検討した結果、以下に示す項目によって、解決できることを見出し、本発明を完成するに至った。
〔１〕Ｓ−アデノシル−Ｌ−メチオニンと、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、大豆多糖類、カゼインナトリム及びツェインから選ばれる少なくとも１種の添加物とを含有する組成物であり、Ｓ−アデノシル−Ｌ−メチオニンが、Ｓ−アデノシル−Ｌ−メチオニン生産能を有する微生物を培養して得られたＳ−アデノシル−Ｌ−メチオニン含有菌体から抽出されたものであり、該組成物中の該添加物の含有量が、該組成物中のＳ−アデノシル−Ｌ−メチオニンに対する質量比として０．０５〜１５倍量の範囲である、組成物。
〔２〕前記微生物が、サッカロマイセス属に属する微生物である、前記〔１〕に記載の組成物。
〔３〕前記サッカロマイセス属に属する微生物がサッカロマイセス・セレビジエである、前記〔２〕に記載の組成物。
〔４〕前記組成物が固体である、前記〔１〕〜〔３〕のいずれかに記載の組成物。
〔５〕前記〔４〕に記載の組成物を用いて成型された成型体。
〔６〕Ｓ−アデノシル−Ｌ−メチオニンと、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、大豆多糖類、カゼインナトリム及びツェインから選ばれる少なくとも１種の添加物とを含有する組成物の製造方法であって、Ｓ−アデノシル−Ｌ−メチオニン生産能を有する微生物を培養して得られたＳ−アデノシル−Ｌ−メチオニン含有菌体から抽出されたＳ−アデノシル−Ｌ−メチオニン含有抽出液に、該添加物を、該Ｓ−アデノシル−Ｌ−メチオニン含有抽出液中のＳ−アデノシル−Ｌ−メチオニンに対する質量比として０．０５〜１５倍量の範囲で混合し、得られた混合物を乾燥させる、組成物の製造方法。
本発明により、高濃度にＳＡＭｅを含み保存安定性に優れる組成物、該組成物を経済的に生産できる方法、及び該ＳＡＭｅ含有組成物を用いた成型体を提供することが可能となる。
また、本発明により得られる該ＳＡＭｅ含有組成物は、生体吸収性にも優れる。
本発明の組成物は、ＳＡＭｅと、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、大豆多糖類、カゼインナトリム及びツェインから選ばれる少なくとも１種の添加物とを含有する組成物であり、ＳＡＭｅが、ＳＡＭｅ生産能を有する微生物を培養して得られたＳＡＭｅ含有菌体から抽出されたものであり、該組成物中の該添加物の含有量が、該組成物中のＳＡＭｅに対する質量比として０．０５〜１５倍量の範囲であることを特徴とする。
以下、本発明について詳細に説明する。
本発明の保存安定性に優れ高濃度にＳＡＭｅを含む組成物は、微生物を培養して得られたＳＡＭｅ含有微生物菌体から抽出して得られたＳＡＭｅと特定の添加物とを含有する。
なお、ＳＡＭｅを含む組成物には、５'−ヌクレオチド、遊離アミノ酸、抗酸化作用を有し肝機能改善に役立つグルタチオン、免疫力の増進作用や整腸作用を有するβ−グルカンや食物繊維などの有用成分が多く含まれており、健康食品等として広く利用されている。
本発明に使用される微生物の種類は、ＳＡＭｅ生産能を有し且つ経口摂取可能なものであればよく、例えばサッカロマイセス（Saccharomyces）属、キャンディダ（Candida）属、ピキア（Pichia）属、ムコアー（Mucor)属、リゾパス（Rhizopus）属、ブレビバクテリウム（Brevibacterium）属、コリネバクテリウム（Corynebacterium）属、エシェリヒア（Esherichia）属ストレプトマイセス（Streptomyces）属などに属する微生物が挙げられる。このうち、サッカロマイセス属に属する微生物が好ましく、特に、サッカロマイセス・セレビジエがより好適である。
微生物を培養する際に使用する炭素源は、微生物が資化し得るものであれば特に制限はなく、例えば、グルコース、蔗糖、澱粉、廃糖蜜等の炭水化物、エタノール等のアルコール、又は酢酸等の有機酸が挙げられる。窒素源も、使用する微生物が資化し得るものであれば特に制限はなく、例えば、アンモニア、硝酸、尿素等の無機体窒素化合物、又は微生物エキス、麦芽エキス等の有機体窒素化合物を含むものが挙げられる。また、無機塩類としては、リン酸、カリウム、ナトリウム、マグネシウム、カルシウム、鉄、亜鉛、マンガン、コバルト、銅、モリブデン等の塩が用いられる。さらには、ＳＡＭｅの骨格構成にあずかるメチオニン、アデニン、アデノシルリボヌクレオシドを添加し培養することもできる。
培養温度及び培養液のｐＨは使用する微生物の種類よって異なるが、培養温度としては２０〜３５℃の範囲を、培養液のｐＨとしてはｐＨ４〜７の範囲を挙げることができる。
また、菌体内のＳＡＭｅ含量を高めるには、好気的に培養することが好ましい。培養槽は、通気可能で必要に応じ攪拌できるものであればよく、例えば、機械的攪拌培養槽、エアーリフト式培養槽及び気泡塔型培養槽等を利用することができる。
培地の供給方法は、炭素源、窒素源、各種無機塩類、各種添加剤等を、一括若しくは個別に連続的又は間欠的に供給する。例えば、蔗糖、エタノール等の基質は他の培地成分との混合物として培養槽に供給してもよく、また他の培地成分とは別に独立して培養槽に供給してもよい。
培養液のｐＨ制御は、酸、アルカリ溶液によって行われる。アルカリとしては窒素源として使用されるアンモニア、尿素、又は非窒素系塩基、例えば、苛性ソーダ、苛性カリ等を用いてｐＨ制御するのが望ましい。酸としては無機酸、例えば、リン酸、硫酸、硝酸、又は有機酸が用いられる。なお、無機塩類であるリン酸塩、カリウム塩、ナトリウム塩、硝酸塩等を用いてｐＨ制御することもできる。
このような条件で培養し、目標量のＳＡＭｅが微生物菌体中に蓄積された段階で培養液を抜き出し微生物菌体を分離する。分離方法としては、菌体の分離と洗浄が効率的に行える方法であれば特に制限はないが、向流型のイーストセパレーターや分離膜を用いた限外濾過装置が好適な例として挙げられる。
ついで、分離した微生物菌体からＳＡＭｅを抽出し、ＳＡＭｅを含有する抽出液を得た後、当該抽出液に添加物を添加混合処理して液状の組成物とする。
ＳＡＭｅを含有する抽出液を得る方法としては、分離した微生物菌体の分離濃縮物に対して、タンパク質分解酵素、細胞壁溶解酵素などを添加して抽出する方法、微生物中の酵素を利用して自己消化により抽出する方法、高圧分散処理等の高圧粉砕により抽出する方法、鉱酸、有機酸を添加する混合する方法、加熱処理する方法等が挙げられる。
ＳＡＭｅを含有する抽出液は、ＳＡＭｅを含有する微生物菌体と比べて、固形分が少なく、水に分散、溶解させ易く、食品、調味料などへ容易に添加することができる。また、ＳＡＭｅ成分の濃縮が可能である。
本発明で使用する添加物としては、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、大豆多糖類、カゼインナトリム及びツェインから選ばれる少なくとも１種である。これらの添加物は単独で又は２種以上を組み合わせて用いることができる。このうちカルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、大豆多糖類がより好ましい。
大豆多糖類は、ヘミセルロースを主成分とする水溶性多糖類であり、ガラクトース、アラビノース、ガラクツロン酸、キシロース、フコース、ラムノース等の糖から構成された多糖類あり、具体的にはフロイント産業株式会社製の市販品（商品名「ヘミロース」）を好適に用いることができる。ツェインとは、トウモロコシ由来のタンパク質であり、該タンパク質加水分解物又はナトリウム塩やカリウム塩等の塩を使用してもよい。本発明において、特定の添加物を用いることで、組成物中のＳＡＭｅの保存安定性が向上し、さらにはＳＡＭｅの生体吸収性が向上する。本発明で使用する添加物は、食品、化粧品、医薬品用途で汎用されており、安全に使用することができる。これらの添加物は、適宜合成したものを使用してもよいし、市販品を使用してもよい。
添加物の添加量としては、乾燥前ＳＡＭｅ含有抽出液中ＳＡＭｅに対しての質量比として０．０５〜１５倍量の範囲であるようにすることが必要であり、０．１〜１３．５倍量の範囲であるようにすることが好ましく、０．１５〜１３．５倍量の範囲であるようにすることがより好ましい。添加物の前記添加量が０．０５倍量を下回ると組成物中のＳＡＭｅの保存安定性が不充分となり、１５倍量を超えると無駄であるばかりか該組成物中のＳＡＭｅの保存安定性が用量依存的に低下する傾向を示す。
ＳＡＭｅ含有抽出液と添加物との混合時間は、１分〜２４時間の範囲であることが好ましい。１分を下回ると組成物中のＳＡＭｅの保存安定性が不充分となり、２４時間を超えると無駄であるばかりか、該組成物中のＳＡＭｅ成分の減少が起こる可能性ある。混合中に該組成物中のＳＡＭｅの保存安定性、さらには生体吸収性が増し、また後述する該組成物の乾燥工程での歩留まりも向上、またＳＡＭｅを含有する組成物独特の臭気もマスキングされる。
添加物の添加混合処理を行った後に、液状の組成物を乾燥させることにより水分を蒸発させて、固体の乾燥組成物となす。乾燥方法としては、スプレードライヤによる噴霧乾燥法、凍結乾燥法等の方法が挙げられる。
乾燥条件としては、噴霧乾燥法では、入口温度２１０℃以下、出口温度１１０℃以下にて乾燥させることが望ましい。凍結乾燥法では、最終棚温度３０℃以下にて乾燥させることが望ましい。本発明の乾燥組成物は、保存安定性の観点から、その水分含量が５．０質量％以下、好ましくは３．０質量％以下、より好ましくは１．０質量％以下になるようにすることが望ましい。
組成物中の添加物の含有量としては、組成物中のＳＡＭｅに対しての質量比として０．０５〜１５倍量の範囲であり、０．１〜１３．５倍量の範囲であることが好ましく、０．１５〜１３．５倍量の範囲であることがより好ましい。添加物の前記含有量が０．０５倍量を下回ると組成物中のＳＡＭｅの保存安定性が不充分となり、１５倍量を超えると該組成物中のＳＡＭｅの保存安定性が用量依存的に低下する傾向を示す。
組成物中のＳＡＭｅの含有量としては、組成物の乾燥質量に対して１質量％以上であることが好ましく、３質量％以上であることがより好ましく、８質量％以上であることが更に好ましい。
得られた乾燥組成物は固体であり、容易に成型加工することができる。この乾燥ＳＡＭｅ含有組成物を用いて成型された成型体は種々の用途に使用される。例えば、乾燥ＳＡＭｅ含有組成物を破砕して粉末状にしたり、粉末状のＳＡＭｅ含有組成物に必要に応じて他の生理活性成分や賦形剤等の添加剤を加えた後に圧縮打錠し錠剤状の組成物となし、さらに、その表面を被覆したりすることもできる。また、粉体を顆粒状に造粒することや、粉体や造粒した顆粒を詰めてカプセル化することもできる。
以下、本発明を実施例及び比較例を以てさらに詳細に説明するが、本発明はこれらの例に依って限定されるものではない。
実施例１−１〜１−３
（ａ）微生物菌体の培養
前述した公知の培養法に従って、Ｌ−メチオニン含有培地（Shiozaki S.,et all, J. Biotechnology, 4, 345-354 (1986))にサッカロマイセス属に属する微生物サッカロマイセス・セレビジエＩＦＯ２３４６を接種し、培養温度２７〜２９℃で好気的に通気攪拌通気拌しながら６日間培養した。その結果、菌体濃度３．５質量％，ＳＡＭｅ含量２０５ｍｇ／ｇの微生物菌体培養液１８Ｌを得た。
（ｂ）微生物菌体の集菌
上記の微生物菌体培養液１８Ｌを連続ロータリー型遠心分離器（日立ＨＩＭＡＣ ＣＥＮＴＲＩＦＵＧＥ ＣＲ１０Ｂ２）で処理し、菌体濃度が乾物換算で１８質量％に相当する液状の微生物菌体濃縮物３．４ｋｇを得た。
（ｃ）微生物菌体濃縮物からＳＡＭｅを含有する抽出液の抽出
上記の微生物菌体濃縮物３．４ｋｇに５０質量％硫酸を添加してｐＨを３．５に調整した。該微生物菌体濃縮物を５０℃に３０分間加熱撹拌後、直ちに遠心管に移し替え、遠心分離器（日立ＨＩＭＡＣ ＣＥＮＴＲＩＦＵＧＥ ＣＲ１０Ｂ２）にて冷却遠心分離処理後、上清液をＳＡＭｅ含有抽出液として回収した。
（ｄ）ＳＡＭｅ含有抽出液へ添加物の添加
上記のＳＡＭｅ含有抽出液にヒドロキシプロピルセルロース（和光純薬工業株式会社製）（以下、ＨＰＣと略す）を、表１に示すように乾燥前ＳＡＭｅ含有抽出液中ＳＡＭｅに対しての質量比として０．１９、１．９２、１３．４６倍量加えて、室温にて３０分間攪拌混合し、ＨＰＣを添加した液状のＳＡＭｅ含有組成物を得た。
（ｅ）ＳＡＭｅ及び添加物を含有する乾燥組成物の製造
上記のＨＰＣを添加した液状のＳＡＭｅ含有組成物を凍結乾燥器（日本真空技術株式会社製）の凍結乾燥用ステンレストレーに流し込み−５０℃で凍結した後、最終棚段温度２５℃の条件で３６時間凍結乾燥した。得られた乾燥組成物（固体）をさらに粉砕することによって、ＳＡＭｅ及びＨＰＣを含有する粉末状の乾燥組成物を得た。
得られた乾燥組成物を密閉ガラス容器中に詰め、４０℃、ＲＨ７５％での加速試験条件下で保存安定性試験を行った。表１に４０℃、ＲＨ７５％での加速保存安定性試験結果を示した。なお、ＳＡＭｅ残存率は、乾燥組成物より過塩素酸を用いた公知の方法でＳＡＭｅを抽出し、液体クロマトグラフィーを用いた比較定量法にて実施した。保存後の臭気の有無については５名のパネラーによる官能検査にて求めた。
本発明のＳＡＭｅ測定では、以下の条件の液体クロマトグラフィーを使用した。
用いられた分析条件：
カラム：ナカライテスク（nacalai tesque）株式会社製、商品名ＣＯＳＭＯＳＩＬ、４．６φ×１００ｍｍ
溶離液：０．２Ｍ ＫＨ2ＰＯ4水溶液／メタノール＝９５／５（質量比）
流速：０．７ｍＬ/分、検出器：ＵＶ（２６０ｎｍ）、ＳＡＭｅ保持時間：約１５０秒
比較例１
ＳＡＭｅ含有抽出液へ添加するＨＰＣを、乾燥前ＳＡＭｅ含有抽出液中ＳＡＭｅに対しての質量比として０．０２倍量加えた以外は、実施例１−１〜１−３と同様に処理して、凍結乾燥を経て、ＳＡＭｅ及びＨＰＣを含有する粉末状の乾燥組成物を得た。該組成物中のＳＡＭｅ含量、及び該組成物の密閉ガラス容器中、４０℃、ＲＨ７５％の加速条件下での保存安定性試験の結果、官能検査の結果を表１に示す。
実施例１−４
実施例１−１〜１−３の（ａ）から（ｃ）と同様にして得られたＳＡＭｅ含有抽出液について、（ｄ）の操作にてＨＰＣを該抽出液中ＳＡＭｅに対する質量比として０．１９倍量加える操作を行い、室温にて３０分間攪拌混合し、ＨＰＣを添加した液状のＳＡＭｅ含有組成物を得た。
得られたＨＰＣを添加した液状のＳＡＭｅ含有組成物を微粒子化装置として二流体ノズルを有するミニスプレードライヤＢー２９０（メトローム社製）を用いて、乾燥室の入口温度１３５℃、出口温度８０℃、通液速度１．２ｇ／分の条件にて噴霧乾燥し、ＳＡＭｅ及びＨＰＣを含有する粉末状の乾燥組成物を得た。該組成物中のＳＡＭｅ含量、密閉ガラス容器中、４０℃、ＲＨ７５％の加速条件下での保存安定性試験の結果、官能検査の結果を表２に示す。
実施例２
ＳＡＭｅ含有抽出液へ添加する添加物としてカルボキシメチルセルロースを乾燥前ＳＡＭｅ含有抽出液中ＳＡＭｅに対しての添加物の質量比として０．１９倍量加えた以外は、実施例１−１〜１−３と同様に処理して、凍結乾燥を経て、ＳＡＭｅ及びカルボキシメチルセルロースを含有する粉末状の乾燥組成物を得た。該組成物中のＳＡＭｅ含量、及び該組成物の密閉ガラス容器中、４０℃、ＲＨ７５％の加速条件下での保存安定性試験の結果、官能検査の結果を表１に示す。
実施例３−１〜３−３
ＳＡＭｅ含有抽出液へ添加する添加物を大豆多糖類（フロイント産業社製、製品名「ヘミロース」）に変更した以外は、実施例１−１〜１−３と同様に処理して、凍結乾燥を経て、ＳＡＭｅ及び大豆多糖類を含有する粉末状の乾燥組成物を得た。該組成物中のＳＡＭｅ含量、及び該組成物の密閉ガラス容器中、４０℃、ＲＨ７５％の加速条件下での保存安定性試験の結果、官能検査の結果を表１、及び表２に示す。
比較例２
ＳＡＭｅ含有抽出液へ添加する大豆多糖類（フロイント産業社製、製品名「ヘミロース」）を乾燥前ＳＡＭｅ含有抽出液中ＳＡＭｅに対しての添加物の質量比として０．０２倍量加えた以外は、実施例１−１〜１−３と同様に処理して、凍結乾燥を経て、ＳＡＭｅ及び大豆多糖類を含有する粉末状の乾燥組成物を得た。該組成物中のＳＡＭｅ含量、及び該組成物の密閉ガラス容器中、４０℃、ＲＨ７５％の加速条件下での保存安定性試験の結果、官能検査の結果を表１に示す。
実施例３−４
ＳＡＭｅ含有抽出液へ添加する添加物を大豆多糖類（フロイント産業社製、製品名「ヘミロース」）に変更した以外は、実施例１−４と同様に処理して、噴霧乾燥を経て、ＳＡＭｅ及び大豆多糖類を含有する粉末状の乾燥組成物を得た。該組成物中のＳＡＭｅ含量、及び該組成物の密閉ガラス容器中、４０℃、ＲＨ７５％の加速条件下での保存安定性試験の結果、官能検査の結果を表２に示す。
比較例３−１
ＳＡＭｅ含有抽出液へ添加物を添加しなかったこと以外は、実施例１−１〜１−３と同様に処理して、凍結乾燥を経てＳＡＭｅを含有する粉末状の乾燥組成物を得た。該組成物中のＳＡＭｅ含量、及び得られた該組成物の密閉ガラス容器中、４０℃、ＲＨ７５％の加速条件下での保存安定性試験の結果、官能検査の結果を表１に示す。
比較例３−２
ＳＡＭｅ含有抽出液へ添加物を添加しなかったこと以外は、実施例１−４と同様に処理して、噴霧乾燥を経て、ＳＡＭｅを含有する粉末状の乾燥組成物を得た。該組成物中のＳＡＭｅ含量、及び該組成物の密閉ガラス容器中、４０℃、ＲＨ７５％の加速条件下での保存安定性試験の結果、官能検査の結果を表２示す。
比較例４〜９
ＳＡＭｅ含有抽出液へ添加する添加物を、それぞれ表１に示すトレハロース、クエン酸、ＥＤＴＡ、ＤＬ−リンゴ酸、ガラクトース又はγ-シクロデキストリンに変更し、該添加物を乾燥前ＳＡＭｅ含有抽出液中ＳＡＭｅに対しての添加物の質量比として２．３１倍量加えた以外は、実施例１−１〜１−３と同様に処理して、凍結乾燥を経て、ＳＡＭｅ及び添加物を含有する粉末状の乾燥組成物を得た。該組成物中のＳＡＭｅ含量、及び密閉ガラス容器中、４０℃、ＲＨ７５％の加速条件下での保存安定性試験の結果、官能検査の結果を表１に示す。
比較例１０〜１３
ＳＡＭｅ含有抽出液へ添加する添加物をそれぞれ表１に示すセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、タマリンドガム、又はシェラックに変更し、該添加物を乾燥前ＳＡＭｅ含有抽出液中ＳＡＭｅに対しての添加物の質量比として０．１９倍量加えた以外は、実施例１−１〜１−３と同様に処理して、凍結乾燥を経て、ＳＡＭｅ及び添加物を含有する粉末状の乾燥組成物を得た。該組成物中のＳＡＭｅ含量、及び密閉ガラス容器中、４０℃、ＲＨ７５％の加速条件下での該組成物の保存安定性試験の結果、官能検査の結果を表１に示す。
Figure 0006044540
Figure 0006044540
実施例４−１〜４−３
ＳＡＭｅ含有抽出液へ添加する添加物をカゼインナトリウムに変更した以外は、実施例１−１〜１−３と同様に処理して、凍結乾燥を経て、ＳＡＭｅ及びカゼインナトリウムを含有する粉末状の乾燥組成物を得た。該組成物中のＳＡＭｅ含量、及び得られた該組成物の密閉ガラス容器中、４０℃、ＲＨ７５％の加速条件下での保存安定性試験の結果、官能検査の結果を表３、４に示す。
比較例１４
ＳＡＭｅ含有抽出液へ添加するカゼインナトリウムを乾燥前ＳＡＭｅ含有抽出液中ＳＡＭｅに対しての添加物の質量比として０．０２倍量加えた以外は、実施例１−１〜１−３と同様に処理して、凍結乾燥を経て、ＳＡＭｅ及びカゼインナトリウムを含有する粉末状の乾燥組成物を得た。該組成物中のＳＡＭｅ含量、及び該組成物の密閉ガラス容器中、４０℃、ＲＨ７５％の加速条件下での保存安定性試験の結果、官能検査の結果を表３に示す。
実施例４−４
ＳＡＭｅ含有抽出液へ添加する添加物をカゼインナトリウムに変更した以外は、実施例１−４と同様に処理して、噴霧乾燥を経て、ＳＡＭｅ及びカゼインナトリウムを含有する粉末状の乾燥組成物を得た。該組成物中のＳＡＭｅ含量、及び該組成物の密閉ガラス容器中、４０℃、ＲＨ７５％の加速条件下での保存安定性試験の結果、官能検査の結果を表４に示す。
実施例５−１〜５−３
ＳＡＭｅ含有抽出液へ添加する添加物を微結晶性ツェイン（小林香料株式会社製、商品名：小林ツェインＤＰ）に変更した以外は、実施例１−１〜１−３と同様に処理して、凍結乾燥を経て、ＳＡＭｅ及びツェインを含有する粉末状の乾燥組成物を得た。該組成物中のＳＡＭｅ含量、及び得られた該組成物の密閉ガラス容器中、４０℃、ＲＨ７５％の加速条件下での保存安定性試験の結果、官能検査の結果を表３、４に示す。
比較例１５
ＳＡＭｅ含有抽出液へ添加する微結晶性ツェイン（小林香料株式会社製、商品名：小林ツェインＤＰ）を乾燥前ＳＡＭｅ含有抽出液中ＳＡＭｅに対しての添加物の質量比として０．０２倍量加えた以外は、実施例１−１〜１−３と同様に処理して、凍結乾燥を経て、ＳＡＭｅ及びツェインを含有する粉末状の乾燥組成物を得た。該組成物中のＳＡＭｅ含量、及び該組成物の密閉ガラス容器中、４０℃、ＲＨ７５％の加速条件下での保存安定性試験の結果、官能検査の結果を表３に示す。
実施例５−４
ＳＡＭｅ含有抽出液へ添加する添加物を微結晶性ツェイン（小林香料株式会社製、商品名：小林ツェインＤＰ）に変更した以外は、実施例１−４と同様に処理して、噴霧乾燥を経て、ＳＡＭｅ及びツェインを含有する粉末状の乾燥組成物を得た。該組成物中のＳＡＭｅ含量、及び該組成物の密閉ガラス容器中、４０℃、ＲＨ７５％の加速条件下での保存安定性試験の結果、官能検査の結果を表４に示す。
比較例１６〜１９
ＳＡＭｅ含有抽出液へ添加するタ添加物を、それぞれ表３に示す、カゼイン、ゼラチン、ダイズタンパク又はエンドウタンパクに変更し、該添加物を該抽出液中ＳＡＭｅに対する質量比として２．３１倍量加えた以外は、実施例１−１〜１−３と同様に処理して、凍結乾燥を経て、ＳＡＭｅ及び添加物を含有する粉末状の乾燥組成物を得た。該組成物中のＳＡＭｅ含量、及び該組成物の密閉ガラス容器中、４０℃、ＲＨ７５％の加速条件下での保存安定性試験の結果、官能検査の結果を表３に示す。
Figure 0006044540
Figure 0006044540
＜生体吸収性試験＞
実施例１−１、実施例２、実施例３−１、実施例４−１、実施例５−１、及び比較例１３で得られた、ＳＡＭｅ及び添加物を含有する粉末状の乾燥組成物、並びに比較例３−１で得られた、ＳＡＭｅを含有する粉末状の乾燥組成物について、文献（J of Chromatography B,863,94-100(2008)）記載の方法と同様にＳＤ系ラット（雄、８週齢、動物数：各群ｎ＝３）を用いて、生体吸収性試験を実施した。
ラットへの粉末状の乾燥組成物の投与量は、ＳＡＭｅとして３００ｍｇ／ｋｇ−ラットの投与量になる様に粉末状の乾燥組成物を蒸留水へ分散した状態でラットに経口投与し、経口投与後０．５、１、２、３及び５時間後のラットの血液を採取した。採取した血液は速やかに遠心分離し、血漿成分の分離、過塩素酸を用いたＳＡＭｅ成分の抽出、ＬＣ−ＭＳ−ＭＳ法（Liquid chromatography coupled with mass spectrometry）により分析した。
生体吸収性試験の結果、経口投与２時間後の血漿中ＳＡＭｅ濃度が最も高かった。各粉末状の乾燥組成物の経口投与１時間後及び２時間後の生体吸収性試験の結果を表５に示す。
Figure 0006044540
表５より、本発明に属する添加物を添加したＳＡＭｅ含有組成物は、添加処理を行っていないＳＡＭｅ含有組成物よりも生体吸収性が向上し、さらにシェラックを添加したＳＡＭｅ含有組成物は、添加処理を行っていないＳＡＭｅ含有組成物よりも生体吸収性が低いことが確認された。
なお、生体吸収性試験に用いられた分析機器、条件は以下の通りである。
（ＬＣ-ＭＳ-ＭＳ法）
ＬＣ-ＭＳ-ＭＳ装置：Thermo社製 Accela、LTQ orbitrap Discovery
（ＨＰＬＣ条件）
カラム：ジーエルサイエンス社製 Intersil ODS-3(４．６ｍｍ×１５０ｍｍ)
流速：０．５ｍＬ/ｍｉｎ、カラムオーブン：４０℃、検出器：ＵＶ（２６０ｎｍ）、ＳＡＭｅ保持時間：約１４５秒、注入量：１０μL
溶離液： ２ｍｍｏｌ／Ｌヘプタフルオロ酪酸水溶液：アセトニトリル＝３０：７０
（ＭＳ条件）
Ion Source:ＥＳＩ
Ion Polarity Mode: Ｐｏｓｉｔｉｖｅ
Scan Mode Type:ＦＴフルマス
Resolution：３００００
Mass Range：ｍ／z ３６０−４１０
本発明の組成物を用いることによって、医薬・農薬や健康食品用の生理活性物質として有用なＳＡＭｅを保存安定性に優れ、さらには生体吸収性にも優れた組成物として市場に供給することが可能である。本発明の製造方法は、Ｓ−アデノシル−Ｌ−メチオニンを高濃度に含み、保存安定性に優れ、さらには生体吸収性にも優れる組成物を、低コストで簡便に製造する方法として利用できる。

Claims (6)

  1. Ｓ−アデノシル−Ｌ−メチオニンと、ヒドロキシプロピルセルロース、大豆多糖類、カゼインナトリム及びツェインから選ばれる少なくとも１種の添加物とを含有する組成物であり、Ｓ−アデノシル−Ｌ−メチオニンが、Ｓ−アデノシル−Ｌ−メチオニン生産能を有する微生物を培養して得られたＳ−アデノシル−Ｌ−メチオニン含有菌体から抽出されたものであり、該組成物中の該添加物の含有量が、該組成物中のＳ−アデノシル−Ｌ−メチオニンに対する質量比として０．０５〜１５倍量の範囲である、組成物。
  2. 前記微生物が、サッカロマイセス属に属する微生物である、請求項１に記載の組成物。
  3. 前記サッカロマイセス属に属する微生物がサッカロマイセス・セレビジエである、請求項２に記載の組成物。
  4. 前記組成物が固体である、請求項１〜３のいずれかに記載の組成物。
  5. 請求項４に記載の組成物を用いて成型された成型体。
  6. Ｓ−アデノシル−Ｌ−メチオニンと、ヒドロキシプロピルセルロース、大豆多糖類、カゼインナトリム及びツェインから選ばれる少なくとも１種の添加物とを含有する組成物の製造方法であって、Ｓ−アデノシル−Ｌ−メチオニン生産能を有する微生物を培養して得られたＳ−アデノシル−Ｌ−メチオニン含有菌体から抽出されたＳ−アデノシル−Ｌ−メチオニン含有抽出液に、該添加物を、該Ｓ−アデノシル−Ｌ−メチオニン含有抽出液中のＳ−アデノシル−Ｌ−メチオニンに対する質量比として０．０５〜１５倍量の範囲で混合し、得られた混合物を乾燥させる、組成物の製造方法。
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Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ITMI20130426A1 (it) * 2013-03-20 2014-09-21 Gnosis Spa S-adenosilmetionina sterile ad alto contenuto di isomero attivo per soluzioni iniettabili e procedimento per ottenerla
US9884437B2 (en) 2014-06-20 2018-02-06 Palo Alto Research Center Incorporated Integral vasculature
IT201700074957A1 (it) 2017-07-04 2019-01-04 Gnosis Spa Sale di (ss)-adenosil metionina con inositolo esafosfato e procedimento per ottenerlo
CN117099949B (zh) * 2023-08-01 2025-07-15 百色学院 米根霉发酵制备富含s-腺苷甲硫氨酸食品的方法与应用
IT202300027237A1 (it) 2023-12-19 2025-06-19 Lesaffre & Cie Formulazioni orosolubili stabili a base di s-adenosil metionina

Family Cites Families (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4025659A (en) * 1975-06-06 1977-05-24 Ralston Purina Company Soy protein/casein coffee whitener composition
IT1200589B (it) * 1985-02-14 1989-01-27 Gibipharma Spa Derivati naturali attivita farmagologica
WO1994005299A1 (fr) 1992-09-04 1994-03-17 Fuji Kagaku Kogyo Kabushiki Kaisha Compositions medicinales
EP0970948B1 (en) * 1997-06-25 2005-03-09 Teijin Limited Vitamin d 3? derivatives and remedies for inflammatory respiratory diseases prepared from the same
JP4242475B2 (ja) * 1998-05-13 2009-03-25 丸善製薬株式会社 ビタミンｋ１組成物およびその製造法
US20030069202A1 (en) * 2000-06-02 2003-04-10 Kern Kenneth Norman Compositions, kits, and methods for promoting defined health benefits
JP3549197B2 (ja) * 2001-08-10 2004-08-04 日清ファルマ株式会社 ユビキノン含有製剤
JP4592260B2 (ja) 2003-05-29 2010-12-01 雪印乳業株式会社 ラクトフェリン組成物
NZ526350A (en) * 2003-06-09 2004-10-29 A Anti-aging compositions comprising an amino acid, vitamin B complex, metal salt and an amino alcohol
CN1217002C (zh) 2003-06-12 2005-08-31 北京凯因生物技术有限公司 酶催化生产腺苷甲硫氨酸的方法
JP2005229812A (ja) 2004-02-17 2005-09-02 Kohjin Co Ltd 安定化されたｓａｍを含有する乾燥微生物又は微生物抽出物、及びその製造方法
US20050272687A1 (en) * 2004-06-08 2005-12-08 Hebert Rolland F Stable S-adenosyl-l-methionine
JP2008012464A (ja) 2006-07-07 2008-01-24 Fujifilm Corp Ｓ−アデノシルメチオニンの抽出方法
JPWO2008072532A1 (ja) * 2006-12-07 2010-03-25 第一三共株式会社 貯蔵安定性が改善された医薬組成物
US9200250B2 (en) 2007-01-25 2015-12-01 Mitsubishi Gas Chemical Company, Inc. Method for production of dry yeast containing S-adenosyl-L-methionine and having excellent storage stability, product produced by the method, and molded composition of the dry yeast
US20090088404A1 (en) * 2007-01-31 2009-04-02 Methylation Sciences International Srl Extended Release Pharmaceutical Formulations of S-Adenosylmethionine
WO2009081833A1 (ja) 2007-12-20 2009-07-02 Kaneka Corporation 安定化された(ｓｓ)－ｓ－アデノシル－ｌ－メチオニンを含有する微生物乾燥菌体又は微生物エキス、及びその製造方法
IT1393331B1 (it) 2009-02-09 2012-04-20 Graal S R L Composizioni orosolubili e/o effervescenti contenenti almeno un sale di s-adenosilmetionina (same)
JP2013503352A (ja) 2009-08-31 2013-01-31 エムバイオ ダイアグノスティクス，インコーポレイティド 統合されたサンプル調製及び検体検出
EP2557151B1 (en) 2010-04-07 2017-10-04 Mitsubishi Gas Chemical Company, Inc. S-adenosyl-l-methionine-containing dry yeast composition with excellent storage stability and process for producing same

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