JPS5989633A

JPS5989633A - 水性相中リポゾ−ムの製造方法

Info

Publication number: JPS5989633A
Application number: JP13790883A
Authority: JP
Inventors: ヘルムト・ハウザ−
Original assignee: Ciba Geigy AG
Current assignee: Novartis AG
Priority date: 1982-07-29
Filing date: 1983-07-29
Publication date: 1984-05-23
Also published as: EP0102324A3; ES8602434A1; DK346183A; DK346183D0; AU1740283A; ES524504A0; EP0102324A2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】本発明は水性相の鵠葉リボシーメンの製法に係わる。

リボゾームはすでに多くの刊行物に記載され、その構造
や用途について多くの研究がなされている。脂質から成
る二重層を有する単葉リボゾームは玉ねぎ状に重なる多
重層脂質を有する多葉リボシーメンと区別される。

単葉リボシーメンは約２００〜５０．０００人、好まし
くは約２００〜５０，０００人の直径を有し、その球形
の殻は脂質成分、例えば二重層脂質、例えば７オスフオ
リピド、例えばフォスファチジン酸、レシチンまたはケ
ファリン、場合によってはコレステリンのような中性脂
質の二重層から成シ、この二重層が水性相を内蔵する内
部空間を囲ん７でいる。

種々の作用物質のキャリアとしてリボゾームを治療目的
に利用することに多大の関心が寄せられている。即ち、
例えば抗体、酵素のような蛋白質、ホルモン、ビタミン
または遺伝子のキャリアとしてのりボゾームや、分析用
として標識化合物のキャリアとしてのりボゾームが提案
されている。例えば米国特許第５．９９３．７５４号は
りボゾームをキャリアとして使用する細胞性腫瘍の化学
的治療法は係わる。

作用物質はりボゾーム形成時に、または形成後に拡散に
よって内包させる。リボゾームの調製及び作用物質の内
包は種々の態様で達成でき、“キャンサーΦトリートメ
ント・レビエウズ（１９８１）旦、２７−５０に掲載さ
れた８ｔ、　Ｂ、ケイの論文に報告されている。作用物
質内包用のりボゾームの他の製法は６バイオケミストリ
一″第１６巻、第１２号、２８０６−２８１０　　にお
けるパレンホルッ等の論文、ドイツ公開公報第２８１９
８５５号、第２９０２６７２号、第２５３２３１９号及
び第２８４２６０８号、米国特許第４．０５５．５８５
号及びヨーロッパ特許出願第３６６７６号にも開示され
ている。

公知の製法では例えばフォスフォリピド、７オスフアチ
ジン酸、レシチンまたはケファリン、及び場合によって
は中性脂質、例えばコレステリンのような脂質成分をク
ロロホルムやペンゾールのような有機溶媒に溶かす。蒸
発後関連脂質成分の均質層、例えばフィルム層が残留す
る。次いでこの脂質成分を、関連の作用物質を含む水性
相中に例えば攪拌することによって分散させる。続く超
音波処理で、作用物質を内包する単葉リボシーメンが形
成される。

本発明の方法では直径が約２００〜６００人の小さい単
集りボゾーム（ＫＵＬ）及び直径が約６００〜３０００
人の大きい単葉リボゾーム（ＧＵＬ）を含む水性相を低
い装置コストで簡単に調製することができる。適当な分
離方法、例えばゲルろ過または限外ろ過セルによって小
さいリボゾームを大きいりボゾームから分離することが
できる。

本発明はイオン性界面活性剤と脂質の均質混合物を水性
相における界面活性剤の臨界ミセル形成濃度（ｃｍｃ−
臨界ミセル濃度）よシ低い濃度で水性相中に分散させ、
必要ならば得られた水性相を中和し、また必要ならば得
られた単葉リボシーメンを濃縮及び／または分離するこ
とを特徴とする単集りホゾ−メンの製法を提案するもの
である。

この明細書において以下に使用する一般的概念は特に下
記の意味を有するものとする。

有機基、例えば低級アルキル、低級アルキレン、低級ア
ルコキシ、低級アルカノイルなどに関連して使用する６
低級”という表現はとのような有機基が特にことわらな
い限−リ、７個または７個以下、好ましくは４個または
４個以下の炭素原子を含むことを意味する。

イオン性界面活性剤及び脂質の均質混合物の調製は公知
態様で行なわれ、６脂質酸分の均質層形成”の部分に記
載されている。

イオン性界面活性剤は陽イオン性または陰イオン性界面
活性剤である。

陽イオン性界面活性剤は例えば下記式で表わされる化合
物である。

ただし式中、Ｒａは置換されていない又は置換されてい
る炭化水素基であり：Ｒｂは低級アルキル、フェニル低
級アルキル又はヒドロキシでアシ；Ｒｃ及びＲ，ｄは低
級アルキルであシ；あるいはＲｂ及びＲｃけ、これらが
結合している窒素原子と共に一緒になって炭素原子にお
いて置換されている脂肪族複素環系を構成１７；そり、
てＲｄけ低級アルキル基であり；あるいは又Ｒｂ　、　
Ｒｃ　　及びＲｄはそれらが結合している窒素原子と共
に一緒に々って、芳香族複素環系を構成し；そして世は
陰イオンである。

式（ＩＡ）の陽イオン性界面活性剤において、場合によ
って置換される脂肪族炭化水素残基ＦＬａは例えばアリ
ールオキシ低級アルコキシによって１１換された低級ア
ルキル、７−２２個、特に１２−２０個の炭素原子を有
する直鎖または分枝アルキホまたは８−２０個、特に１
２−２０個の炭素原子及び１−４個の二重結合を有する
アルケニルである。

アリールオキシ低級アルコキシ中の了り−ルは例えば１
−４個の炭素原子を有する直鎖低級アルキル、例えばメ
チル、エチルまたはｎ−プロピルにより、またけ３−１
０個の炭素原子を有する分枝アルキル、例えばイソブチ
ル、第６ブチル、アミル、ネオペンチル、２−４＊は３
−メチルペンチル、２．２−または２，３−ジメチルブ
チル、２−−４ｆｔは５−メチルヘキシル、３−エチル
ペンチル、２．２−１２，３−１２，４−または３，３
−ジメチルペンチル、４−メチルヘプチル、２．２．２
−１２．２．４−１２．３６−または２．３．４−トリ
メチルペンチル、１゜１、５．３−テトラメチルブチル
または２．２．３．３−テトラメチルブチルによりモノ
−またけジー置換されたフェニルである。

アリールオキシ低級アルコキシ中の低級アルコキシは例
えばメトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシまたはｎ−ブ
トキシである。

アリールオキシ低級アルコキシで置換された低級アルキ
ルＲａは例えばアリールオキシ低級アルコキシ−メチル
または２−アリールオキシ低級アルコキシエチル、例え
ばアリールオキシメトキシメチル、２−アリールオキシ
メチルオキシエチル、２−アリールオキシエトキシメチ
ルまたは２−（２−アリールオキシエトキシ）−エチル
、例えばフェノキシメトキシメチル、２−７エノキシメ
トキシエチル、２−フェノキシエトキシメチル、２−（
２−フェノキシエトキシ）−エチル、２−、３−ｔたは
４−メチルフェノキシメトキシメチル、２−（２−メチ
ルフェノキシメトキシ）−エチル、２−（６−メチルフ
ェノキシメトキシ）−エテル、２−（４−メチルフェノ
キシメトキシ）−エチル、２−（２−メチルフェノキシ
）−エトキシメチル、２−（３−メチルフェノキシ）−
エトキシメチル、２−（４−メチルフェノキシ）−エト
キシ−メチル、２−（２−（２−メチルフェノキシ）−
エトキシ〕−エチル、２−（２−（３−メチルフェノキ
シ）−エトキシ〕−エチル、２−〔２−（４−メチルフ
ェノキシ）−エトキシ〕−エチル、４−（１，１，３，
３−テトラメチルブチル）−フェノキシメトキシメチル
、２−　［４−（１，１，３，３−テトラメチルブチル
）−フェノキシメトキシ］−エチル、２−　（４−（１
，１，３，３−テトラメチルブチル）−フェノキシ〕−
エトキシメチル、２−［２−（４−（１，１，３，３−
テトラメチルブチル）−フェノキシ〕−エトキシメチル
、２−（２−（４−（−１，１゜３．３−テトラメチル
ブチル）−フェノキシ）−エトキシツーエチル、２−メ
チル−４−（１，１，３，３−テトラメチルブチル）−
フェノキシメトキシエチル、２−〔２−メチル−４−（
１，１，５，３−テトラメチルブチル）−フェノキシメ
トキシ〕−エチル、２−〔６−メチル−４−（１，１，
３，３−テトラメチルブチル）−フェノキシメトキシ〕
−エチル、２−（２−（２−メチル−４−（１，１，５
，３−テトラメチルブチル）−フェノキシ）〕−エトキ
シメチル、２−（２−（３−メチル−４−（１，１，３
，３−テトラメテルブテル）−フェノキシ）〕−エトキ
シメチル、２−（２−（２−メチル−４−（１゜１、３
．３−テトラメチルブチル）−７エノキシ）−エトキシ
〕−エチルまたは２−（２−（３−メチル−４−（１，
１，３，３−テトラメチルブチル）−フェノキシ）−エ
トキシツーエチルである。

アリールオキシ低級アルコキシで置換された低級アルキ
ルＲａは特に２−（２−（２−メチル−４−（１，１，
５，ｓ−テトラメチルブチル）−フェノキシ）−エトキ
シツーエチル及び２−（２−（３−メチル−４−（ｔ、
ｔ、６．ｓ・−テトラメチルブチル）−フェノキシ）−
エトキシツーエチルである。

１７−２２個、特に１２−２０個の炭素原子を有する直
鎖または分枝アルキルＲａは例えばｎ−へブチル、２−
メチルヘキシル、３−メチルヘキシル、６−エチルベン
チル、２．２−　、２．３−　、２．４−または３，６
−ジメチルペンチル、■−オクチル、４−メチルヘプチ
ル、２．２．６−１２．２．４−１２，３゜６−１また
は２，３．４−）ジメチルペンチル、ｎ−ノニル、ｎ−
デシル、ｎ−ウンデシル、ｎ−）”デシル（ラウリル）
、ｎ−）リゾシル、ｎ−テトラデシル（ミリスチル）、
ｎ−ペンタデシル、ｎ−ヘキサデシル（セチル）、ｎ−
ヘプタデシル、ｎ−オクタデシル（ステアリル）、ｎ−
ノナデシルまたはｎ−エイコシル（アラキニル）である
。

１２−２０個の偶数個炭素原子を有する直鎖アルキルが
好ましく例えばれ−ドデシル（ラウリル）、ｎ−テトラ
デシル（ミリメチルＬｎ−ヘキサデシル（セチル）、ｎ
−オクタデシル（ステアリル）ｔ　ｆｃ、　ハｘｌ−エ
イコシル（アラキニル）である。

８−２０個、特に１２−２０個の炭素原子及び１−４個
の二重結合を有するアルケニルＲａは例えば１−オクテ
ニル、１−ノネニル、１−デセニル、１−ウンデセニル
、１−ドデセニル、９−シス−ドデセニル（ラウロレイ
ル）、１−）リゾセニル、１−テトラデセニル、９−シ
ス−テトラデセニル（ミリストレイル）、１−ペンタデ
セニル、１−へキサデセニル、？−シスーヘキサデセニ
ル（ハルミドレイニル）、１−へブタデセニル、１−オ
クタデセニル、６−シス−オクタデセニル（ベトロセリ
ニル）、６−）ランス−オクタデセニル（ベトロセライ
ジニル）、９−シス−オクタデセニル（オレイル）、９
−）ランス−オクタデセニル（エライジニル）、９−シ
ス−１２−トランス−オクタデカジェニル（リルイル）
、？−シスー１１−）ランス−１３−）ランスーオクタ
デカトリエニル（α−エレオステアリニル）、９−トラ
ンス−１１−トランス−１３−トランスーオクタデカト
リエニル（β−エレオステアリニル）、９−シス−１２
−シス−１５−シスーオクタデヵトリエニル（リルニル
）、９−．１１−．１！ｌ−。

１５−オクタデカテトラエニル（バリンアリル）、１−
ノナテセニル、１−エイコセニル、９−シスーエイコセ
ニル（ガドレイニル）、５−．１１−。

１４−エイコサテトエニル捷たは５−．８−。

１１−．１４−エイコサテトラエニル（アラキトニル）
である。

１２−２０個の炭素原子及び１個の二重結合を有するア
ルケニルは例えば９−シス−トチセニル（ラウロレイル
）、９−シス−テトラデセニル（ミリストレイル）、？
−シスーヘキサデセニル（ハルミドレイニル）、６−シ
ス−オクタデセニル（ペトロセリニル）、６−）ランス
−オクタ−デセニル（ペトロセライジニル）、９−シス
−オクタデセニル（オレイル）、９−）ランス−オクタ
デセニル（エライジニル）マたは９−シスーエイコセニ
ル（ガドレイニル）であることが好ましい。

低級アルキルＲｈ　、Ｒｃ　またはＲｄｌ啼Ｕえばメチ
ルまたはエチルである。

フェニル低級アルキルＲ，ｂは例えばベンジルま１１２
−フェニルエチルでアル。

窒素原子と共にＲｈ及びＲｅによって形成される脂肪族
複素環は例えば単環の５または６原子アザ−、オキサア
ザ−またはチアザ−シクリル基、例えばピペリジノ、モ
ルフォリノまたはチアモルフォリノである。

仁の複素環の置換基は窒素原子におけるＲａ及びＲｄ、
　　並びに炭素原子における低級アルキル、例えばメチ
ル、エチル、ｎ−プロピルまたはｎ−ブチルである。

窒素原子と共にＲｂ及びＲｃによって形成され、炭素原
子において低級アルキルによって置換された複素環は例
えば２−１３−オたは４−メチルビヘリシン、２−．３
−−ｉたは４−エチルピペリジン、または２−または３
−メチルモルフすリンである。

窒素原子と共にＲｂ％Ｒｃ及びＲｄによって形成される
芳香族複素環は例えば単項の５−またけ６−原子アザ−
、ジアザ−、オキサアザ−またはチ（ロ）　　　− アザ−シクリル基、例えばピリジノ、インキノリノ、オ
キサゾリノまたはチアゾリノまたは例えハベンゼン項に
縮合しているモノアザビシクリル基、例えばキノリノま
たはインキノリノである。

この複素環の置換基は窒素原子における基Ｒａ。

及び炭素原子における低級アルキル、例えばメチルまた
はエチル、ヒドロキシ低級アルキル、例えばヒドロキシ
メチルまたは２−ヒドロキシエチル、オキソ、ヒドロキ
シまたはハロゲン、例えば塩素または臭素である。

Ｒｂ　、　Ｒｃ及びＲｄによって構成され、炭素原子に
おいて上記残基によって置換された複素環は例えば２−
または４−低級アルキルピリジノ、例えば２−もしくは
４−メチル−ピリジノまたは２−もしくは４−エチルピ
リジノ、ジ低級アルキルピリジノ、例えば２．６−シメ
チルー、２−メチル−３−エチル−１２−メチル−４−
エチル−１２−メチル−５−エチル−１または２−メチ
ル−６−ニチルーピリジノ、２−１５−または４−ハロ
ゲンピリジノ、例えば２−１５−または４−クロロに）ピリジノまたは２−１３−または４−ブロモピリジノ、
２−低級アルキルーイミドアゾリン、−オキサゾリンま
たは−チアゾリノ、同えば２−メチル−または２−エチ
ルーイミダゾリン、−オキサゾリノまたは−チアゾリノ
、または２−低級アルキルー８−ハロゲンピノリニノ、
例えば２−メチル−８−クロロキノリニノである。

陰イオンＹＣ）は例えばハロゲンイオン、例えば弗素イ
オン、塩素イオンまたは臭素イオン、低級アルカノエー
ト、例えばホルメイオン、アセテートイオン、硫酸水素
イオン、低級アルキルサルフェートイオン、例えばメチ
ル−もしくはエチルサルフェートイオン、低級ア、ルキ
ルスルホネートイオン、例えばメチルスルホネートイオ
ン、又はアリールスルホネートイオン、例、Ｌｉｔ：フ
ェニルスルホネートイオン又はトルエンスルホネートイ
オンである。

陰イオンＹＯは特にハロゲンイオン、例えば、塩素イオ
ン又は臭素イオンである。

式（ＩＡ）の陽イオン性界面活性剤は特にＮ−−ベンジ
ルーＮ、Ｎ−ジメチル−Ｎ−２−（２−（４−６，１，
３，３−テトラメチルブチル）−フェノキシ）−エトキ
シ〕−エチアンモニウムクロリド、Ｎ−ベンジルＮ、Ｎ
−ジメチル−Ｎ−２−（２−（３−メチル−４−（１，
１，５，３−テトラメチルブチル）−７エノキシ）−エ
トキシ〕エチルアンモニウムクロリド（メテルベンゼソ
ニウムクロリド）、ｎ−ドデシルトリメチルアンモニウ
ムクロリドもしくはプロミド、トリメチルｎ−テトラデ
シルアンモニウムクロリドもしくはプロミド、ｎ−ヘキ
サデシルトリメチルアンモニウムクロリドもしくはプロ
ミド（セチルトリメチルアンモニウムクロリド本しくけ
プロミド）、トリメチルｎ−オクタデシルアンモニウム
クロリドもしくけプロミド、エチルｎ−ドデシルジメチ
ルアンモニウムクロリドもしくはプロミド、エチルジメ
チルｎ−オクタデシルアンモニウムクロリドもしくけプ
ロミド、エチルｎ−ヘキサデシルジメチルアンモニウム
クロリドもしくはプロミド、エチルジメチルｎ−テトラ
デシルアンモニウムクロリドもしくけプロミド、エチル
ｎ−ヘキサデシルジメチルアンモニウムクロリドもしく
はプロミド、エチルジメチ／Ｉ／ｎ−オ、フタデシルア
ンモニウムクロリドもしくはプロミド、ｎ−アルキルベ
ンジルジメチルアンモニウムクロリドもしくはプロミド
（ベンザルコニウムクロリドも［７くはプロミド）、例
えば、ベンジルｎ−ドデシルジメチルアンモニウムクロ
リドもしくけプロミド、ベンジルジメチルｎ−テトラデ
シルアンモニウムクロリドもしくはプロミド、ベンジル
ｎ−ヘキサデシルジメチルアンモニウムクロリドもしく
はプロミド、又はベンジルジメチル−ｎ−オクタデシル
アンモニウムタロリドもしくはプロミド、Ｎ−（ｎ−、
デシル）ピリジニウムクロリドもしり（ｒよプロミド、
Ｎ−（ｎ−ドデシル）ピリジニウムクロリドもしくはプ
ロミド、Ｎ−（ｎ−テトラディル）ピリジニウムクロリ
ドもしくはプロミド、Ｎ−（ｎ−ヘキサデシル）ピリジ
ニウムクロリドもしくはプロミド、（セチルピリジニウ
ムクロリドもしくはプロミド）、マたはＮ−（ｎ−オク
タデシル）ピリジニウムクロリドもしくはプロミド、又
はこれらの界面活性剤の混合物である。

陰イオン性界面活性剤は例えばａ）　　’Ｅｔａが場合によって置換される炭化水素基
、Ａが低級アルキレン、ｍが０（直接結合）または１、
Ｂがスルホン酸基捷たは硫酸基、Ｚ■が一価陽イオンを
表わすとして式（ＩＢ）（Ｒａ　−（０−Ａ）ｍ−Ｂ　
）ｅＺ■　　（ＩＢ）で表わされる化合物、またはｂ）　　ｍが０または１、基Ｒ４及びＲ２の一方が水素
、ヒドロキシ、炭素原子が１−４個の低級アルキル、他
方の基がそれぞれが１０−２１１個の炭素原子を有する
アルキル、アルケニル、アルコキシ、アルケニルオキシ
またはアシルオキシ、几、が水素または１−４１１ｉ１
の炭素原子を有する低級アルキル、Ｒ４が場合によって
置換される１−７個の炭素原子を何する低級アルキル、
５−１２個の炭素原子を有する炭水化物基または、両残
基Ｒ及びＲ２が水素またはヒドロキシを意味するならス
テロイド残基、Ｚ■が一価陽イオンを表わすとして式（
ＩＣ）で表わされる化合物、凍たけｃ）　　Ｒ，Ｒ２１”ｓ　及ヒｚ■が式（ＩＣ）におけ
る意味と同じ意味を有するとして、式（ＩＤ）で表わさ
れる化合物である。

式（ＩＢ）の陰イオン界面活性剤において場合によって
置換される炭化水素残基Ｒａけ式（ＩＡ）に関連して述
べたのと同じ意味を有し、好ましくは炭素原子が７−２
２個、特に１２−２０個の直鎖またｄ分枝アルキル及び
炭素原子が６−２０個、特に１２−２０個、二重結合が
１−４個のアルケニルである。

式（ＩＢ）の陰イオン界面活性剤において、Ｒａは特に
１２−２０個の偶数炭素原子を有する直鎖アルキル、例
えばｎ−ドデシル（ラウリル）％ｎ−テトラデシルＣミ
リスチル）、ｎ−ヘキサデシル（セチル）、ｎ−オクタ
デシル（ステアリル）またけｎ−エイコシル（アラキニ
ル）、′または１２−２０個の炭素原子及び１個の二重
結合を有するアルケニル、例えば゛ノーシスードデセニ
ル（ラリロレイル）、９−シス−テトラデセニル（ミリ
ストレイル）、９−シス−ヘキサデセニル（パルミトレ
イニル）、６−シス−オクタデセニル（ペトロセリニル
）、６−）ランス−オクタデセニル（ベトロセライジニ
ル）、９−シス−オクタデセニル（オレイル）、９−１
ランス−オクタデセニル（エライジニル）゛または９−
シスーエイコセニル（ガドレイニル）でアル。

低級アル井しンを六わすＡは例えばメチレン、エチレン
、ｎ−プロピレンまたはｎ−ブチレンである。

陽イオンＺ■はアルカリ金属陽イオン、例えばリチワム
ー、ナトリウム−またはカリウム−イオン、ま／ζ；は
テトラ低級アルキルアンモニウムイオン、例えばテトラ
メチルアンモニウムである。

式（ＩＢ）の陰イオン界面活性剤は好ましくはアルカリ
金属硫酸アルキル（ｍ＝０）、例えばナトリウム−′ま
たはカリウム−ｎ−ドデシル（ラウリル）−サルフェー
ト、−ｎ−テトラデシル（ミリスチル）−サルフェート
、−ｎ−ヘキサデシル（セチル）−サルフェート廿たけ
一〇−オクタデシル（ステアリル）−サルフェート、ア
ルカリ金属硫酸アルキルエーテル（ｍ＝１）、例えばナ
トリウム−咋／とはカリウム−ｎ−ドデシルオキシエチ
ルサルフェート、−ｎニデトラデシルオキシエチルブル
フェート、−ｎ−ヘキサデシルオキシエチルサルフェー
トまたは−ｎ−オクタデシルオキシエチルサルフェート
ｉたは、アルカリ金属スルボネートアルカン、例えばナ
トリウム−ま１ζはカリウム−ｎ−ドデカンスルホ不−
）、ｎ−テトラデカンスルフォネート、ｎ−ヘキサデカ
ンスル７ォネートまたは−ｎ−オクタデカンスルフォネ
ートである。

式ＩＣの１食イオン界面活性剤において、１−４個の炭
素原子か有１″′る低級アルキルＩｔ、Ｒ２ままたはｌ（６はメチル、エテル、ｎ−プロピル−二Ｆ罠は
１１−メチルであることが好ま］７い。

アルキルＲ珪／こはＲ２４’Ｊ：　ｎ−デシル、−ｎ−
ウンデシル、ｎ−ドデシル（ラウリル）、ｎ−）リゾシ
ル、ｎ−テトラデシル（ミリスチル）、ｎ−ペンタデシ
ル、ｎ−へキサデシル（セチル）、ｎ−オクタデシル（
ステアリル）及びｎ−エイコシル（アラキニル）でめろ
ことンうＳ好着しい。

アルケニルｔｔ　　ｔたはＲ２は？−シスードデセニル
（ラウロレイル）、？−シスーテトラデセニルＣミリス
トレイル〕、９−シスー−一＼キサデセニル（パルミト
レイニル）、６−シス−オクタデセニル（ベトロセリニ
ル）、６−）ランス−オクタデセニル（ベトロセライジ
ニル）、９−シス−オクタデセニル（オレイル）、９−
）ランス−オクタデセニル（エライジニル）及び９−シ
スーエイコセニル（ガドレイニル）であることが好まし
い。

アルコキシＲまたは′ＰＬ２はｎ−デシルオキシ、ｎ−
ドデシルオキシ（ラウリルオキシ）、ｎ−テトラデシル
オキシ（ミリスチルオキシ）、ｎ−へキサデシルオキシ
（セチルオキシ）、ｎ−オクタデシルオキシ（ステアリ
ルオキシ）及びｎ−エイコシルオキシ（アラキニルオキ
シ）であることが好ましい。

アルケニルオキシＲまたｕＲ２ｔＪ：９−シス−ドデセ
ニルオキシ（ラウロレイルオキシ）、？−シスーテトラ
デセニルオキシ（ミリストレイルオキシ）、９−シス−
ヘキサデセニルオキシ（パルミトレイニルオキシ）、６
−シスオクタゾセニルオキシ（ベトロセリニルオギシ）
、６−）ランス−オクタデセニルオキシ（ベトロセライ
ジニルオキシ）、９−シス−オクタデセニルオキシ（オ
レイルオキシ）、９−）ランス−オクタデセニルオキシ
（エイコシルオキシ）又は９−シスーアイコセニル（ガ
ドレイニルオキシ）であることが好ましい。

アシルオキシＲ１またはＲ２は例えばアルカノイルオキ
シまたはアルケノイルオキシである。

アルカノイルオキシＲ１またはＲ２はｎ−デカノイルオ
キシ、ｎ−ドデカノイルオキシ（ラウロイルオキシ）、
ｎ−テトラゾカッイルオキシ（ミリストイルオキシ）、
ｎ−ヘキサデカノイルオキシ（バルミトイルキシ）、ｎ
−オクタデカノイルオキシ（ステアロイルオキシ）及び
ｎ−エイコツイルオキシ（アラキノイルオキシ）である
ことが好ましい。

以下余白アルケノイルオキシＲまたはＲ２は９−シス１一ドデセニルオキシ（ラウロレオイルオキシ）、９−シ
スーテトラデセノイルオキシｃミリストレオイルオキシ
）、９−シスーヘキザデセノイルオキシ（ハルミドレイ
ノイルオキシ）、６−７スーオクタデセノイルオキシ（
ベトロセリノイルオキシ）、６−）ランス−オクタデセ
ノイルオキシ（ヘトロセライジノイルオキシ）、９−シ
ス−オクタデセノイルオキシ（オレオイルオキシ）、９
−トランス−オクタデセノイルオキシ（エライジノイル
オキシ）及び９−シスーエイコセノイル（ガドレイノイ
ルオキシ）であることが好ましい。

１−７個の炭素原子を有する低級アルキルＲ４ｔｉｌｌ
えばメチル、エチル、イソプロピル、ｎ−プロピル、イ
ソブチルまたはｎ−ブチルであ如、これらは酸性基、例
えばカルボキシまたはスルホにより、または酸性基及び
塩基性基例えばカルボキシ及びアミノ（この場合アミン
基はカルボキシ基に対してα位にある）により、または
遊離のもしく口）くはエーテル化ヒドロキシル基（ここで２個のエテル化
ヒドロキシは二価の炭化水素基例えばメチレン、エチレ
ン、エチリデン、１．２−プロピレンまたは２．２−プ
ロピレンを介して互いに結合していてもよい）により、
またはノ１０ゲン、例えば塩素または臭素、低級アルコ
キシカルボニル、例えばメトキシ−またはエトキシカル
ボニルにより、または低級アルカンスルホニル、例えば
メタンスルホニルにより置換されていてもよい。

１−７個の炭素原子を有する置換低級アルキルＲ４はカ
ルボキシ低級アルキル、例えばカルボキシメチル、２−
カルボキシエチルまたけ３−カルボキシ−ｎ−プロピル
、ω−アミノ−ω−カルボキシ低級アルキル、例えば２
−アミノ−２−カルボキシエチルまたは６−アミノ−６
−カルボキシ−〇−プロピル、ヒドロキシ低級アルキル
、例えば２−ヒドロキシエチルｔ　＞’ｔ−は２．６−
シヒドロキシグロビル、低級アルコキシ低級アルキル、
例えばメトキシ−またはエトキシメチル、２−メトキシ
エチルまたは３−メトキシ−ｎ−プロピル、低帥級アルキレンジオキシ低級アルキル、例えば２．３−エ
チレンジオキシブロピルオたは２．３−（２，２−プロ
ピレン）−ジオキシプロピル、またはハロゲン低級アル
キル、例えばクロロ−またはプロモーメチル、２−クロ
ロ−または２−ブロモエテル、２−または６−クロロ−
または２−または３−プロモーｎ−プロピルであること
が好ましい。

５−１２個の炭素原子を有する炭水化物基Ｒ４は例えば
アルドース゛またはケトースの形で存在するペントース
またはヘキソースから得られる天然単糖類である。

アルドースの形で存在するペントースは例えばＤ−リボ
ース、Ｄ−アラビノース、Ｄ−キシロースまたはＤ−リ
キソースである。

ケトースの形で存在するペントースは例えばＤ−リブロ
ースまたはＤ−キシルロースである。

アルドースの形で存在するヘキソースは例えばＤ−アロ
ース、Ｄ−アルドロース、Ｄ−グルコース、Ｄ−マンノ
ース、Ｄ−ガラクトースｔタハＤ−タロースである。

ケトースの形で存在するヘキソースは例えばＤ−プシコ
ース、Ｄ−フラクト、−ス、Ｄ−ソルボースまたはＤ−
タガトースである。

ヘキソースは例えばピラノース（アルドース）、例えば
α−またはβ−Ｄ−グルコビラノースとして、またはフ
ラノース、例えばα−またはβ−り一７ラクトースとし
て環式の形状で存在する。ピラノシル残は１−又は６位
のヒドロキシル基を介してホスファチジル基によシ、そ
してフラノシル基は１−又は５位（ｍ＝１）のヒドロキ
シル基を介してホスファチジル基によりエステル化され
ていることが好ましい。

５−１２個の炭素原子を有する炭水化物基Ｒ４はまた天
然二糖類残基、例えば２個のヘキソースによって形成さ
れる三糖類残基でもあシ、この三糖類残基は例えば２鋼
のアルドース、例えばＤ−グルコースまたはＤ−ガラク
トースの縮合、または１個のアルドース、例えばＤ−グ
ルコースと１個のケトース、例えばフラクトーンとの縮
合によって得られる。２閲のアルドースから形成された
三糖類、例えばラクトースまたはマルトースは該当のピ
ラノシル残基の６−位置にあるヒドロキシ基を介してフ
ォスファテジル基でエステル化されているのが好ましい
。アルドースとケトースで形成された三糖類、例えばサ
ッカロースはピラノシル残基の６−位置またはフラノシ
ル残基の１−位置にあるヒドロキシ基を介してフォスフ
ァチジル基（ｍ＝１）でエステル化されていることが好
ましい。

５−１２個の炭素原子を有する炭水化物残基′ｆＬ４は
例えばアルデヒド基及び／または１個または２個の末端
ヒドロキシ基が酸化されてカルボキシ基となっている誘
導車または三糖類残基、例えば好ましくは環式ラクトン
残基として存在するＤ−クルコン−、Ｄ−グルカル−ま
たはＤ−グルコロン酸残基であってもよい。

また、誘導車または三糖類残基において、アルデヒドま
たはケト基がヒドロキシル基に還元されて例えばイノシ
トール、ソルビトール又けＤ−マンニトールとなってい
てもよく、又はヒドロキシ基が水素により置換されて、
例えば、２−デツキシーＤ−リボース、Ｌ−ラムノース
又はＬ−フコースになっていてもよく、またはアミン基
により例えばＤ−グルコサミンやＤ−ガラクトサミンの
ようなアミン糖に転換したものであってもよい。

以下余白炭水化物Ｒ４は例えば過ヨウ素酸のような強い酸化剤に
よる上記単糖類またけ三糖類の転換で生成した分裂生成
物であってもよい。

ステロイド基Ｒ４は例えばステロイド構造の３−位置に
あるヒドロキシ基がフォスファテジル基（ｍ＝１）でエ
ステルイヒされたステリン残基である。

ステロール基ハ例、ｔ　ハラノステロール、シトステロ
ール、コブロスメノール、コレスタノール。

クリココール酸、エルゴステロール１１；ｊＸステマス
チロール、好ｔｌ、＜はコレステロールである。

Ｒ４がステロイド基なら、　　Ｒ１及びＲ２はヒドロキ
シ、Ｒ３は水素であることが好ましい。

Ｚ′Ｆ）は式（ＩＢ）に関連して述べた倉味を有し。

ナトリウムまたはカリウムであることが好ましい。

式（ＩＣ）の陰イオン界面活性剤において、好ましくは
ｍは１、Ｒ１はアルキル、例えばｎ−ドデシル（ラウリ
ル）、ｎ−）リゾシル、Ｎ−テトラテシル（ミリスチル
）、ローペンタデシル、ｎ−ヘキサデシル（セチル）、
ｎ−ヘキサデシルまたはｎ−オクタデシル（ステアリル
）、アルコキシ、例えばｎ−ドデシルオキシ（ラウリル
オキシ〕。

ｎ−テトラデシルオキシ（ミリスチルオキシ）。

ｎ−ヘキサデシルオキシ（セチルオキシ）、またはｎ−
オクタデシルオキシ（ステアリルオキシ）。

アシルオキシ、例えばラウロリルオキシ、ミリストイル
オキシ、バルミトイルオキシまたはステアロイルオキシ
、Ｒ２は水素またはヒドロキシ、Ｒ３け水素または低級
アルキル、例えばメチル、　Ｒ４は低級アルキル、例え
ばメチルまたけエチル、酸性基または塩基性基１例えば
カルボキシ及びアミンによって置換された低級アルキル
、例えばω−アミノ−ω−カルボキシ−低級アルキル、
例えば２−アミノ−２−カルボ牛ジエチル着たけ３−ア
ミノ−３−カルボキシ−ｎ−プロピル、ヒドロキシ低級
アルキル、例えば２−ヒドロキシエチルまたは２．３−
ヒドロキシ−プロピル、低級アルキレンジオキシ低級ア
ルキル、例えば２．３−エチレンジオキプロビルまたは
２．３−（２，２−プロピレン）−ジオキシプロピル、
ハロゲン低級アルキル、例えば２−クロロ−または２−
ブロモエテル、５−１２個の炭素原子を有する炭水化物
基１例えばイノシトール、またはステロイド基１例えば
ステロール、例工ばコレステロール、Ｚ■けナトリウム
またはカリウムである。

式（ＩＣ）の陰イオン界面活性剤は特にリゾフォスフア
ナジルセリンのナトリウムまたはカリウム塩１例えば牛
の脳から得られるリゾフォスフアナジルセリンのナトリ
ウムまたはカリウム塩または合成リゾフォスフアナジル
セリンのナトリウムまたはカリウム塩、例えばナトリウ
ム−ま九はカリウム−１−ミリストイル−または−１−
パルミトイルリゾフォスフアナジルセリン、マ九はりゾ
フォスファテジルグリセリンのナトリウムまたはカリウ
ム塩である。

式（ＩＤ）の陰イオン界面活性剤において。

ＦＬＩｓ　　”２ｅ　　Ｒ５及びＺ■の意味内容は式（
ＩＣ）に関連して述べたのと同じである。陽イオンＺ■
はナトリウムまたはカリウムであることが好ましい。燐
酸基の水素原子は第２の陽イオン２■またけマグネシウ
ムイオンによって置換されていてもよい。

式（ＩＤ）の陰イオン界面活性剤において好ましくＦＬ
ｌけアルキル、例えばｎ−ドデシル（ラウリル）、”−
トリデシル、ｎ−テトラデシル（ミリスチル）、ｎ−ペ
ンタデシル、ｎ−ヘキサデシル（セチル）、ｎ−ヘキサ
デシルまたけｎ−オクタデシル（ステアリル）％又はア
ルコキシ、例えばｎ−ドデシルオキシ（ラウリルオキシ
）、ｎ−テトラデシルオキシ（ミリスチルオキシ）ｓ’
−ヘキサデシルオキシ（セチルオキシ）、またはｎ−オ
クタデシルオキシ（ステアリルオキシ）Ｓアシルオキシ
、例えばラウロイルオキシ、ミリストイルオキシ、パル
ミトイルオキクまたはステアリルオキシ、Ｒ２は水素ま
たはヒドロキシｈ　　Ｒ５は水素または低級アルキル、
例えばメチル、Ｚ■はナトリウムまたはカリウムである
。

式（ＩＤ）の陰イオン界面活性剤は特に卵−フォスファ
テジン酸のような天然フォスファテジン酸のナトリウム
−またはカリウム塩１例えば卵−リゾフォスファテジン
酸のような天然リゾフオスファチジ／酸のナトリウムま
たはカリウム塩、マたは例えば１−ラウロイル−，１−
ミリストイル−または１−バルミトイルーリゾフォスフ
ァテジン酸のような合成リゾフォスファテジン酸のナト
リウム−またはカリウム塩である。

水性相中に分散している脂質は例えば下記式で表わされ
る仕合物である。

ただしｍ、Ｒ１−ＦＬ２ｓ　　”Ｓ及びＲ４の意味内容
は式（ＩＣ）に関連して述べたのと同じであり、Ｒ４は
さらに第３低級アルキルアミノ、例えばトリメチルアミ
ノ又はアミノで置換された低級アルキル、例えば２−ト
リメチルアンモニアエチル（コリニル）をも含む。

脂質は、ｍが１％　Ｒ１及びＲ２がアシルオ午シ。

Ｒ，が水素、そしてＦＬ４が２−トリメチルアンモニオ
エテルまたけ２−アミノエチルである場合の式（Ｉ　Ｃ
’）の脂質であることが好ましい。

このような脂質は例えば卵−レシチンまたは大豆−レシ
チン（１’Ｌ４が２−トリメチルアンモニオエテル）の
ような天然レシチン、及び卵−ケファリンまたは大豆−
ケファリン（Ｒ４が２−アミノエチル）のような天然ケ
ファリンである。

ほかに式（ＩＣ’）の合成レシチン（Ｒ４が２−トリメ
チルアンモニオエチル）及び合成ケファリン（Ｒ，が２
−アミノエテル）も好ましい脂質である。ただし、Ｒ４
及びＲ・２は同一のアシルオキシ残基、例えばラウロイ
ルオキシ、オレオイルオキシ、リンイルオキシ、リルオ
イルオキシまたはアラキノイルオキシであって、例えば
ジラウロイル−、シミリストイル−、ジパルミトイル−
。

ジステアロイル−、ジラウロイルー、ジオレオイル−、
シリノイル−、シリルオイル−１またはジアラキノイル
ーレシテンまたは一ケファリンを表わすか、またはＲ＋
１′Ｂ！びＲ２が異なるアシルオキシ残基であり１例え
ばＲ１がパルミトイルオキシそしてＲ２がオレオイルオ
キシであって１例ｔば１−バルミトイル−２−オレオイ
ル−レシチンまたは一ケファリンを表わすか、またけＲ
１及びＲ２が同一のアルコキシ弗基１例えばテトラデシ
ルオキシまたはヘキサデシルオキシであって、例えばジ
テトラデシルーまたはジヘキサデシルーレシチンまたは
一ケフプリンを表わすか、またはＲ１がアルケニルそし
てＲＩ２がアシルオキシであって、例えばプラズマロー
ゲン（Ｒ，がトリメチルアンモニオエチル）を表わすか
、またはＲ１がアシルオキシ、例えばミリストイルオキ
シまたはパルミトイルオキシ、Ｒ２がヒドロキシであっ
て。

例えば天然または合成リゾレシチンまたけりゾケファリ
ン、例えば１−ミリストイル−または１−バルミトイル
−リゾレシチンまたけ−リゾケファリンを表わし、Ｒ５
は水素を表わす。

ｍが１．Ｒ１がアルケニル基、Ｒ２がア／ルアミド基、
Ｒ３が水素、Ｒ４が２−トリメチルアンモニオエチル（
コリン基）をそれぞれ表わすとして式（１勺の脂質もま
た好適である。このような脂質はスフィンゴミエリンと
呼ばれる。

ほかに好適な脂質としてはリゾレシチン類似体、例工ば
１−ラウロイル−１，３−プロパンジオール−３−７オ
スフオリルコリン、モノグリセライド。

例えばモノオレインまたはモノミリスチン、セレブロン
ド、ガングリオシドまたは３−位置に遊離マタハエステ
ル什フォスフォリルーまタハフォスフォニル基を持たな
いグリセリドがある。このようなグリセリドは例えば上
記アシル鬼人びアルケニル基をそれぞれ含み３−ヒドロ
キシ基が上記炭水化物基の１つ１例えばガラクトシル基
でエーテルイヒされたジアシルグリセリドまたは１−ア
ルケニル−１−オキシ−２−アシルグリセリド、例えば
モノガラクトシルグリセロールである。

細胞膜中に含まれ、クロロホルムのような非極性溶媒だ
けに溶ける天然脂質も好適な脂質である。

天然脂質としては例えばステロイド、例えばエストラジ
オールまたはステロール、例えばコレステロール、β−
シトステロール、テスモステロール。

７−ケドーコレステロールまたはβ−コレスタノール、
脂溶性ビタミン、例えばビタミンＡ、例えばビタミンＡ
１またはＡ２、ビタ９ｙＥ、　　ビタミンに、例えばビ
タミンに１またはに２またはビタミンＤ２またはＤ３が
ある。

均質混合物は好ましくけ式（Ｉ　Ａ）の界面活性剤、特
にＮ−ベンジルＮ、Ｎ−ジメチル−Ｎ−２−［２−（４
−（１，１，３，３−テトラメチルブチル）−７エノキ
シ）−エトキシ］−エテルアンモニウムクロリド、Ｎ−
ベンジルＮ、Ｎ−ジメチル−Ｎ−２−［２−（３−メチ
ル−４−（１，１，３，３−テトラメチルブチル］フェ
ノキシ）−エトキシエテルアンモニウムクロリド（メテ
ルベンゼソニウムクロリドＬ　”−ドデシルトリメチル
アンモニウムクロリドもしくはプロミド、トリメチルｎ
−テトラデシルアンモニウムクロリドもしくはプロミド
、ｎ−ヘキサデシルトリメチルアンモニウムクロリドも
しくはプロミド（セチルトリメチルアンモニウムクロリ
ドもしくけプロミド）、トリメチル−ｎ−オクチルデシ
ルアンモニウムクロリドもしくはプロミド、エテルｎ−
ドデシルジメチルアンモニウムクロリドもしくはプロミ
ド、エテルジメチル−ｎ−テトラデシルアンモニウムク
ロリトモシくはプロミド、エテル−ｎ−ヘキサデシルジ
メチルアンモニウムクロリドもしくはプロミド、エテル
ジメチル−ｎ−オクタデシルアンモニウムクロリドもし
くはプロミド、ｎ−アルキル−ベンジルジメチルアンモ
ニウムクロリドもしくはプロミド（壌什もしくは臭什ベ
ンザルコニウム）、例えばベンジルｎ−ドデシルジメチ
ルアンモニウムクロリドもしくはプロミド、ベンジルジ
メチルｎ−テトラデシルアンモニウムクロリドもしくケ
プロミト、ベンジルｎ−ヘキサデシルジメチルアンモニ
ウムクロリドもしくはプロミド、またはベンジルジメチ
ル−ｎ−オクタデシルアンモニウムクロリドもしくはプ
ロミド、Ｎ−（ｎ−デシル）ピリジニウムクロリドもし
くはプロミド、Ｎ−（ｎ−ドデシル）ピリジニウムクロ
リドもしくはプロミド。

Ｎ−（ｎ−ヘキサデシル）ピリジニウムクロリドもしく
はフ゛ロミド（セチルピリジニウムクロリドもしくはプ
ロミド）、またはＮ−（ｎ−オクタデシル）ピリジニウ
ムクロリドもしくはプロミド。

または式（Ｉｔ３）’７″表わされる陰イオン性界面活
性剤、特にナトリウム−またはカリウム−ｎ−ドデシル
（ラウリル）−サルフェート、−ｎ−テトラデシル（ミ
リスチル）−サルフェート、−〇−ヘキサデシル（セチ
ル）−サルフェート、ｔｉは−ｎ−オクタデシル（ステ
アリル）−ザルフェート、ナトリウム−もしくはカリウ
ム−ｎ−ドデゾルオキシエテルザルフェー）、　−〇−
テトラデシルオキンエテルサルフェート、−ｎ−ヘキザ
デシルオキシエテルサルフェート、また（ｄニーｎ−オ
クタデシルオキシエテルサルフェート、マたは式（ｆｃ
）で表わされる陰イオン性界面活性剤、特にナトリウム
−またはカリウム−２，２−ジメチル−３−パルミトイ
ルオキシプロピル水素フォスフェート、ナトリウム−ま
たはカリウム−１−パルミトイルリゾフォスフアテジル
グリセロ〜ル又は、ナトリウム−またはカリウム−１−
パルミトイルリゾフォスファテジルセリン、及び式（Ｉ
Ｃって表わされる脂質（ここで、Ｒ１及びＲ２はアシル
オキシ、例えばラウロイルオキシ、ミリストイルオキシ
、バルミトイルオキシまたけステアロイルオキシを、Ｒ
３け水素金、　　Ｒ４は２−トリメチルアンモニオエチ
ルであって１例えば天然ケファリン、例えば卵−ケファ
リン寸たは大豆−ケファリンであり、またけ２−アミノ
エテルであって、例えば天然レシチン、例えば卵しンチ
ン着たけ大豆レシチンをそれぞれ表わす）から成る。

結合手としての炭素原子を有する丸１下に述べる界面活
性剤及び脂質はラセミ混合物の形で存在することもでき
、光学対称体の形で存在することもできる。

均質混合物においてイオン性界面活性剤と脂質との大体
のモル比は約０１〜２：１．好ましくは約０８〜１．２
：１である。

例えばあらかじめ調製されたフィルムまたは泡状の均質
混合物を、内包すべき物質１例えば殺虫剤のような農薬
、香料、硬什剤１着色剤普たは薬理作用物質１例λ−ば
ペプチド、例えばムラミルペプチドを溶液コロイドまた
は懸濁液の形で含む水性相に分散させる。

あらかじめｉｑ製されている均質混合物を含むこの水性
相を撮とりまたは攪拌することによって分散シせるが、
この場合単葉リボゾーム（ＫＵＬ）及び（ＧＵＬ）は自
然発生的に、即ち、外部からエネルギーを供給されるこ
となく、迅速に形成される。界面活性剤、脂質及び内包
化合物の製電は水性相中のイオン性界面活性剤が臨界ミ
セル形成濃＠（ｃｍｃ）に達するまで高めることができ
る。

臨界ミセル形成濃嵯を超えるとミセルが形成され、この
現象は多くの場合、乱光の消失１例えば水性相の透明化
によって認知することができる。

ｃｍｃはミセル形成を回避しながら一定量の水に分散さ
せることのできるイオン性界面活性剤量を示す変数であ
る。界面活性剤の疎水性基の構造がＣｍＣの数値を左右
する。即ち、鎖長が長ければ長いほどｃｍｃ値が小さく
なる。疎水性基中にスペースの大きい置換基、例えば芳
香族基がある場合もｃｍｃを低下させることになる。疎
水性基の疎水性を弱める作用基、例えば二重結合は　ｃ
ｍｃを増大させるａ　ｃｍｃは分散汲び溶解している水
性相中の成分、例えば対イオン、追加の脂質、内包すべ
き作中物質の種類などにも依存する。Ｓｃｍｃの数値は
特定の系Ｖ（ついて実験的にしか知ることができない。

即ち、適当な電極を利用して導電率測定まｆＣは対イオ
ンの電位測定のような電気什学的方法１表面張力、輸率
の測定、蒸気圧降下、氷点降下及び浸透圧のような束−
件の測定、密１゜屈折率、ＵＶ及びＩＲ光紳吸収、可溶
及び不溶色素の可溶什、光散乱、螢光偏光及び粘吋の測
定などにより間接的に知るしかない。ｃｍｃに達すると
これらの性質は明らかに肇什する。例えば表面張力はイ
オン性界面活性剤濃度に応じてｃｍｃに達するまで著し
く降下し、ｃｍｃを超えると表面張力はほぼ一定となる
。Ｈ，シータラへの°°テンシドタッシェンプッフ（界
面活性剤ハンドブック）％ハン？　＋、　　１９８１　
″の特に第２６負、パラグラフ３．１の゛ｃｍｃ測定方
法”及び第２８頁、パラグラフ３．２　”　ｃｍｃと各
種パラメータとの関係″゛を参照されたい。例えばドデ
シルビリジニウムブロマイドのｃｍｃ値は　Ｊ、Ｂ、ア
ンダーンン及びＪ、Ｈ，ティラーの１コロイド・サイエ
ンス″１９゜４９５（１９６４）に報告されているａ　
ｃｍｃｉ超えたら水性相を水で希釈して再びｃｍｃ　ｊ
−Ｊ下とすればよい。この場合逆にミセルから単葉リボ
シーメンが形成される。

ｐＨが約８より高い水性相を分散後例えば生理的、Ｈ値
１２′！！で中和する。この中和は作用物質及び／″ｌ
！、たけリボゾームが塩基性条件下に破壊されるのを防
ぐと共に、リボゾーム混合物を含む水性相を生理的に適
応させるために必須である。中和は生理的に適応可能な
ａ？またけｐＨが７〜Ｂの緩衝液で行なう。生理的に適
応可能な酸は例えば希釈された水性鉱酸、例えば希塩酸
、希硫酸または希燐酸、または希釈された有機酸１例え
ば酢酸のような低級アルカンカルボン酸である。

式（ＩＡ）の陽イオン界面活性剤を含む水性相は酸性を
呈する可能性がある。こｔｌ、に希釈された水性塩基１
例えば水酸什ナトリウムまたは水酸什カリウム溶液を添
加するか、またはｐＨ値が７〜８の緩衝液を添加して中
和する。

室温または約６０℃までの流電〒攪拌または振とりする
ことが好塘しい。内包すべき作用物質が敏感なら、冷却
下に、かつ場合によっては窒素雰囲気のような不活性ガ
ス雰門下に行なう。こうして得られたりボゾームは水性
相中で比較的長時間（数日）安定である。ヨーロツ・（
特許出願第００６５２９２号に記載の方法を採用すれば
本発明の単葉リボゾームを含む水性相を貯蔵することが
できる。

形成される単葉リボゾームのサイズは特に界面活性剤及
び脂質の構造、各成分の混合比、水性相中の成分の濃暖
、及び内包すべき作用物質の量及び構造に依存する。例
えば界面活性剤成分の濃度を高めることにより、小また
は大サイズ単葉リボシーメンが大きい部分を占める水性
相を調装することができる。Ｋ、　Ｕ　Ｌのほかに大き
い単葉１１ボゾーム（ＧＵＬ、直径５０．０００人まで
）も形成され、これはモル当たりの脂質容積が大きく、
ビールス、バクテリアまたは細胞組織などのような容積
の大きい物質を内包するのに好適である。

ＧＵＬからのＫＵＬ分離は公知の分離夕べ１例えばセフ
ァロース４Ｂまたはセファクリルを担体とするゲルフィ
ルター全利用するか１例えば１６０．０１１０Ｘｆの超
遠心機でＧＵＬを沈降させることによって達成される。

例えば数時間、具体的には約３時間の遠心分離でＧＵＬ
が沈降してもＫＵＬは分散状態のままであり、デカント
可能である。このような遠心分離ヶ反復することにより
ＧＵＬとＫ　Ｕ　Ｔ、と全完全に分離することができる
。

ゲルろ過によっても水性相中に存在する直径６００人よ
り大きいすべてのりボゾーム１例えばＧＵＬ及び多葉リ
ボゾーム、内包されない作用物質及び余剰の分散脂質′
ｔ−残らず分離し、比較的サイズの揃ったＫＵＩ、だけ
の水性相を得ることができる。

大きい単葉リボゾーム（ＧＵＬ）及び多葉リボゾームを
上記方法で分離した後、小さい単葉リボゾームの形成及
びその含量を各槙の物理的測定方法を利用して公知の態
様で確認することができる。

例えば凍結破壊サンプル及び薄層サンプルを電子顕徴錆
で検査するか、Ｘ線回折、動的光散乱１分析用超遠心機
によるＰ液の重量分析などがあるが。

特に有効なのけ核共鳴スペクトル（ＮＭＲ）　（’Ｈ。

１５Ｃ及び３１Ｐ）などによるスペクトル分析である。

例えば核共鳴スペクトルにおいて線幅の狭い鋭い信号が
約１０００人より小さい直径を有する単葉リボゾームが
形成されたことを示す。δ＝約０，８９ｍ）Ｉ）ｍ　（
−ＣＨ３）　、δ＝約１．２８　ｐｐｍ　（−ＣＨ２−
）及びδ＝約３．２３１）ｐｍ　（−Ｎ（ＣＨ３）　３
）　ノ’ｌｌイ信号はフォスファテジルコリンを成分と
する単葉リボゾームが形成されたことを意味する。核共
鳴スペクトルにおいてこのような信号は単葉リボゾーム
に対応する特有のものであり、混合されているミセル、
例えばフォスフォリピド１例えばレシチン。

及び界面活性剤、例えばセチルトリメチルアンモニウム
プロミドから成るミセルからのスペクトルとけ異なる。

これらの成分から成るミセルに特異的なメチル信号はδ
＝約１］、　８９　ｐｐｍ　　となり、この信号は三重
線に分かれており、単葉リボゾームに対応するメチル信
号〔単線〕（同じく　δ二約ｏ、　８９　ｐｐｍ）より
亀線幅が実質上狭い。

本発明のりポゾーム（ＫＵＬ及びＧＵＬ）は例えば脂溶
性色素のような親油性物質を可ｍ什した夛１例工ばプロ
スタグランジ／のような加水分解し易い物質を安定什し
たり、殺虫剤を内包したり。

ジクロロ７オスの作中を変什させたり、栄養Ｎｌｔ内包
したり、ビタミンや色素のみ成性を変えたり。

作用物質、酸素、抗体、ホルモン、遺伝子、ビールス、
ビタミン、塘たけ細胞組織を細胞内に封入するため水性
相中に使用できる好適なキャリア系でちる。

本発明で得られるリボゾームを内包されている作用物質
と共に含む水性相Ｆ′ｉ場合によって例えば超遠心機ｔ
でよりリボゾームｔ−濃縮または分離した後、治療のた
め経口（ｐ、　Ｏ，）腸管外（凰、■０１着たけｊ、ｐ
、　）またｔよ局所投与するのに好適な投与系である。

経口投与の場合、リボゾームをベースとする投与系は消
イヒ液中で不安定な例えばインシュリンを保護するかま
たはその吸収を助長する。経口投与にｌｄ　’Ｊボゾー
ム含有水性相を薬理的に安全な希釈剤またはキャリアと
、または例えば色素や調味料のような添加物と混合し、
シロップまたはカプセルの彬で投与すればよい。

腸管外投与の場合、リボゾームをベースとする投与系は
例えばデスフェロイオキサミン（Ｒ，Ａ。

ギルメット等の″ライフーサイエンス″’　２２（４）
３１３−３２０．　１９７１３を８照）またはジェンタ
マイシン（ＷｏＭ、シェルト等の６クリニ、り・リサー
チ″’　　２６．　Ｎｏ、１．　５９Ａ、　　１９７８
管参照）の臓器的滞留時間を延ばすことができるａまた
。内包されているキレート形成物質１例Ａ−ばＢＤＴ　
Ａ　（エチレンジアミンテトラ酸Ｗｉ）の臓器内滞留時
ｌ′ｌＪＩヲ延ばすことにより、キレート形成による特
に肝臓、肺臓または腎臓から重金鳩を排除することがで
きる（ラーマン等の６サイエンス”１８０巻、３００−
３０２．１９７３　′ｌＡび”　Ｊ、Ｌａｂ、　Ｃｌ１
ｎ、ムイｅｄ、’６４ＣＪ−６４７，１９７４）。リボ
ゾームをベースとする投与系を採用すれば１作用物質を
心筋に濃縮させることが〒きる（ランデスマン等の“サ
イエンス”　１９８巻、　７３７−７３８．　１９７７
）。コルナゾルのような抗炎症剤（″ネーテーア″２７
１．　Ｎｏ。

５６４３、　３７２−７３．　１９７Ｆ３）−ｉたけプ
ロテアーゼ抑制剤（”　Ａｎａｌ、　　）ｌｉｏｃｈｅ
ｍ、　”　８９．　Ｎｏ、２゜４０（１−０７，１９７
８）を関ｍｓ中に濃縮ぢせ、細胞活動停止剤を腫瘍組織
内に＃縮させることができル（パキャンサー・トリート
メント・レビューズ８、　２７−５Ｑ、　１９８１　　
に掲載されたＳｔ、Ｂ、ケイの論文など）。癌治療用の
什学療法剤はリボシーメンに内包させて投与すれば毒性
が軽減され、生理的安全性が増大する。例えばリボゾー
ム内包のアクナノマイシンＤ（ラーマン尋の６プロシー
デイングズ柳オプ・ザ・ンサイエティ・フォア・イクス
ベリメンタル・バイオロジー・アンド−メジシン”　１
４６．１１７３−１１７６、１９７４　）１　メトトレ
キサート（Ｌ、Ｄ、　　Ｌ／−ゼル−ｑ　ン尋０’：）
　　’　Ｐｒｏｃ。

Ｎａｔｌ、　　Ａｃａｄ、　　８ｃｉ″　７７、　Ｎｏ
、７．　４０８９−９５、１９８０　）　、ビンブラス
チン、ダウノマイシンまたはシトシンーアラビノシド（
定路−レンジーペン等の１キヤンサー・リサーチ“４１
．　Ｎｏ、５゜１６０２−０７．　１９８１　　）など
がそゎである。リボシーメンは例えば酸素、ペプチドホ
ルモン、遺伝子またはビールスのような作用物質を生体
の細胞質中に封入するために利用できる。例えばアスパ
ラギナーゼ（Ｍ、フィンケルシェタイン及びＧ、ワイス
マンの＠Ｊ、　　リピドＯリサーチ１１９巻。

１９７８、　２８９−３０３に掲載の論文）、アミログ
ルコシダーゼ（Ｇ、グレゴリアゾイス及ヒＢ、Ｅ、ライ
マン″Ｅｕｒ、Ｊ、　Ｂｉｏｃｈｅｍ”　２４　（１９
７２）。

４８５−４９１　）、またはニューロミニダーゼ（グレ
ゴリアゾイス等、”　Ｂｉｏｃｈｅｍ、　ｔＴ、（１９
７４）　１４０゜２３２−３３０　）などである。リボ
ゾームはまた特定のｍＲ分子１例えばモノクロン抗体を
特定のターゲット細胞に正しく封入固定したり（レーゼ
ルマｙ等、′ネーテユア”２９３　（５８２９）、　　
２２６−２２８、　１９８１　）１例えばシーシュマニ
ア症に対する免疫接種に（Ｎｅｗ　Ｒ，Ｒ６Ｃ０等、−
ネーテユア１１２７２　（５６４Ｂ）　５５−５６．　
１９７８）またはｍ奪上昇という信号で例えば炎症のあ
る組織内に作用物質を放出させたり、あるいはｐＨｔｌ
を変化させるために利用できる。腸管外投与には濃縮ま
たは分離したりホゾ−メンを適当なキャリア液１例えば
殺菌された蒸留水または生理的食塩水中に分散シせれば
よい。

脂質成分の均質層形成は公知の態様で行なえばよい。例
えば先ず式ＣＩＡ）の界面活性剤１例えばセナルピ））
ジニウムクロリドと、脂質１例えば卵レシチンとを場合
によっては親油性作用物質。

例えばリボゾーム形成時に脂質層中に内包される蛋白質
？混入した上で有機溶媒に溶かす。真苧甲でま念は不活
性ガス、例えば９累の送入下に有機溶媒を除去すること
によりフィルム状の脂質成分均質層が得ら相る。

溶媒の選択は対応する脂質成分のこの溶媒に対する可溶
症に従って決定される。適当な溶媒は例えば非置換また
は置換された１例えばハロゲンイヒ、脂肪族。

環脂肪族、芳香族または芳香脂肪族炭化水素１例エケベ
ンゼン、トルエン、塩什メチレン、またはクロロホルム
、アルコール、例ｔげメタノールまたはエタノール、低
級アルカンカルボン酸エステル、例對−げ酢酸エチルエ
ステル、エーテル、例えばジエチルエーテル。ジオキサ
ンまたけテトラヒドロフラン、またはこれらの溶媒の混
合物である。

均質混合物はドイツ公告第２８１８６５５号に記載され
ているように有機溶液からの凍結乾燥によって調製でき
る。こうして泡状の均質層が得られる。

この明糾１書中に述べたイオン性界面活性剤、例えば陽
イオン界面活性剤（式ＩＡ）及び陰イオン界面活性剤（
式ＩＢ）は公知である。この界面活１１の製法はエリツ
ク・ジャングガーマンの６カナオニツク螢サーフアクタ
ンツ′（デシカー、ニューヨーク、１９７０）に記載さ
名ている。市販の陰イオン及び陽イオン界面活性剤及び
その商品名は年刊のハンドブックである６マツカツテ冒
ン著：イマルジファイアズ・アンドΦデタージエンツ”
（マニュファクナユアリング・コンフェクショナー・パ
ブリッシング・カンパニー）に記載されている。式（１
）及び（ＩＣ）の界面活性剤は公知であるか、あるいは
新規だとしてもＣ３０゜ナイトの著作１リポゾームズ′
°（エルゼフィール１９８１）の第３章に記載の方法で
製造できる。

その他の脂質は公知であり、大部分は市販されている。

１ソ下の例は本発明を理解を助けるためのものであり１
本発明がこの例に限定されるものではない。

流度は℃、ＮＭＲスペクトルのイ七学的変位ｔ（δ）の
単位はｐｐｍである。

以下余白例１：１０■の卵レシチン及び［１，０５ｍｇのセチル
トリメナルアンモニウムプロミド’ｉ２ｍ／のクロロホ
ルム／メタノール混合物（２：１）に溶がし、この溶液
を回転蒸発器中で真空蒸発させる。

単葉リボゾームを形成するため、室ｍにおいてフィルム
状残留物を１−の水に分散させ、５−１０分間に亘って
振とりする。その結果やや乱光を帯びる水性相が得られ
る。

小さい単葉リボゾームが形成されたことはＮＭＲスペク
トルにおいて信号δ＝　１．２８　（メチレン〕、δ＝
０．８６（メチル）及びδ＝３．２５（−Ｎ（ＣＨ３）
３）によって検知される。

形成された単葉リボゾームは電子顯微錆で観察できる。

リボゾーム分散液に先ず従来の凍結破壊検査を施す。単
葉リボゾームはその平均サイズに従って２つの“群”に
大別される。即ち。

１、　直径が約２００−６００．４の小さい単葉リボゾ
ーム及び２、　直径が約ｉ、０００−１０，０００　Ａの大きい
単葉リボゾーム。

例２：　例１と同様に実験ごとに１０〜の卵レシチン及
び漸増ｔのセチルトリメチルアンモニウムプロミド（Ｃ
ＴＡＢ、表を参照）をそれぞれの実験ごとに２　ｍｌの
クロロホルム／メタノール（２：１）混合物に溶かし、
蒸発させ、水中に分散させる。その結果、小サイズ（Ｋ
ＵＴ、）及び大サイズ（（１ｔＪＴ、）単葉リボゾーム
から成る乱光を帯びた水性相が得られる。

表１＝ｉ　　　　　　　　０．１　　　　　　　１０２　　　
　　　　０．２　　　　　　１０３　　　　　　　　Ｑ
、５　　　　　　１０４　　　　　　１．０　　　　　
１０５　　　　　　　２．０　　　　　　１２６　　　　　
　　５．０　　　　　　１４７　　　　　　　　Ｚｏ　
　　　　　　２０Ｂ　　　　　　１．０．０　　　　　
　４０９　　　　　１５．０　　　　　　７０例３：　
実験ごとに１１０１ｎの卵レシチン及び漸増量の堵什セ
ナルビリジニウム（ＣＰＣ，表２を参照）または堪什ベ
ンザルコニウム（ＢＡＣ，表３を参照）　ｋ　２　ｍｌ
のクロロホルム／メタノール（２：１）混合物に溶かし
、この溶液を真空蒸発させ、１ｍｌの水に分散させて５
−１０分間に亘って振とりする。その結果小サイズ（Ｋ
ＵＬ）及び大サイズ（ＧＵＬ）単葉リポゾームから成る
乱光を帯びる水性相が得られる。

表２＝１　　　　　１．０　　　　　　１０２　　　　　　１．５　　　　　　　１５３　　　　　
　２．０　　　　　　　２０４　　　　　　２．５　　
　　　　　２０５　　　　　　３．０　　　　　　　２
５６　　　　　　３．５　　　　　　　３０表３：Ｉ　　　　　　　　　Ｑ、　５　　　　　　　　　　２
２　　　　　　　　　１、０　　　　　　　　　　　　
５３２．０　　　　　　　　　　　　５４　　　　　　　　　　３．０　　　　　　　　　　　
１０５５．０　　　　　　　　　１５６　　　　　　　　１０．０　　　　　　　　　　６０
例４：　実験ごとに１０■の卵レシチン及び漸■ 増量のテキサポンＮ２５’−（硫酸ナトリウムラウリル
エーテル、表４を参照）、オクタデシルフォスフオーＤ
−マンニｙｈ（ＯＰＭ、表５を参照）またはドデシル硫
酸ナトリウム（８１）８．表６）ｆ　２　ｍｌのクロロ
ホルム／メタノール（２：１　）混合物に溶かし、この
溶液を蒸発させ、１−の水に分散させて５−１０分間に
亘って振とりする。その結果、小サイズ（ＫＵＬ）及び
大サイズ（ＧＵＬ）単集りボゾームから成る乱光を帯び
る水性相が得られる。

表４：１　　　　　　　１、０　　　　　　　　　　２２　　
　　　　　２．０　　　　　　　　　　５３　　　　　
　　　３、”０　　　　　　　　　　　５４　　　　　
　　４．０　　　　　　　　　１０表５＝１１・０　　　　　　　　１０２　　　　　　　２．０　　　　　　　　　１５５　　
　　　　　３．０　　　　　　　　　２゜表６：ｉ　　　　　　　　　　　１．　ｏ　　　　　　　　　
　　　　ｓ２　　　　　　　　　　　２．０　　　　　
　　　　　　　　８３　　　　　　　　　　３．０　　
　　　　　　　　　１０４　　　　　　　　　　４．０
　　　　　　　　　　　１２５　　　　　　　　　５．
０　　　　　　　　　　１５６　　　　　　　　　６．
０　　　　　　　　　　１５７　　　　　　　　　７０
　　　　　　　　　　２０８　　　　　　　　　　ａｏ
　　　　　　　　　　　５０９　　　　　　　　　９、
０　　　　　　　　　　３５例５：　　ｆｉｌ−３に示
す成分を含有するナトリウム−２，２−ジメチル−３−
バルミトイルオキシプロピル水素フォスフェート（表７
）％ナトリウムー１−パルミトイルリゾフオスフアテジ
ルグリセロール（表８）及びナトリウム−１−パリミト
イルリゾフォスファテジルセリン（表９）を総量で１０
■と、対応する責の卵レクチン（脂質）を１−のクロロ
ホルム／メタノール（２：１）混合物に溶かし、このｅ
ｇ’を回転蒸発器中で蒸発させる。

次いでフィルム状弗留物ｔ−１−の蒸留水に分散させ、
Ｑ、ＩＮＮ水酸上ヒナトリウム溶液添加して中和する。

その結果乱光を帯びる水性相が得られる。

表７：１　　　　　　０．５　　　　　　　　７２　　　　　
　１．０　　　　　　　１３５　　　　　　１．５　　
　　　　　１９４　　　　　　２．０　　　　　　　２
３５　　　　　　２．５　　　　　　　２６６　　　　
　　３、ｏ　　　　　　　　３゜７　　　　　　４、Ｑ
　　　　　　　　３７８　　　　　　５．０　　　　　
　　６０９　　　　　　６．０　　　　　　　８３１０
　　　　　　　Ｚｏ　　　　　　　　９０１１　　　　
　　８．０　　　　　　　９５１２　　　　　　　　　
　９．０　　　　　　　　　　１００１　３　　　　　
　　　　　９、５　　　　　　　　　　１　００界面活
性剤の含有量が６０腎以上の場合、　ＫＵＬ分は脂質及
び界面活性剤から成る小ミセルをも含む。

表８：１　　　　　　　１．０　　　　　　　　６２　　　　
　１．５　　　　　　１０３２．０　　　　　　１５４　　　　　　２．５　　　　　　　１７５　　　　　
　３．０　　　　　　　２０６　　　　　　３．５　　
　　　　　２５７　　　　　　４．０　　　　　　　２
７Ｂ　　　　　　　４．５　　　　　　　３０９　　　
　　　５．０　　　　　　　３５１０　　　　　　６．
０　　　　　　　４０表９：１　　　　　　　　　　　１　　　　　　　　　　　　
　５２　　　　　　　　　　　２　　　　　　　　　　
　　　８３　　　　　　　　　　　３　　　　　　　　
　　　１３４　　　　　　　　　　　４　　　　　　　
　　　　１８５　　　　　　　　　　　５　　　　　　
　　　　　２０６　　　　　　　　　　　６　　　　　
　　　　　　２５例６：　表１０に示す界面活性剤３■
及び卵レシチン（脂質）７岬を１−のクロロホルム／メ
タノール（２：１）混合物に溶かし、この溶液を蒸発さ
せる。フィルム状侵留物を１−の水に分散させる。次い
で０．１Ｎ水酸什ナトリウムｉ１ｇを添加して中和する
。こうして乱光を帯びる水性相が得られる。

以下余白表１０：２−ヒドロキシエチル−３−バルミトイルオキシプロピ
ルフォスフェート２０２．２−ジメチル−３−バルミトイルオキシプロピル水
素フォスフェート５０３−セチルオキシプロピル−２−ヒドロキシエチルフォ
スフェート２９２−ブロモエテル−セチルフォスフェート３０ｎ−エイコシル−２，３−（２，２−プロピレン〕−ジ
オキシプロピルフォスフェート１８３−ステアリルオキ７プロピル水累フオスフエート　　
　　　　　　　　　　　　　　８２．３−ジヒドロキシ
プロピル−ミリステルフォスフェート３４３−セチルオキシプロピル水素７オスフエート　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　１９９２．３−ジヒドロキシプロピル−ｎ−エイコシルフォス
フェート　　　　　　　　　　　８セチル−２，３−ジ
ヒドロキシプロピルフォスフェート２５メチル−３−ステアロイルオキシプロピルフォスフェー
ト４５例７：　　２０ｍ９（０，０２６ｍＭｏｌ）の大豆Ｌ／
シテン、１■（Ｑ、７６μＭ０１）のＮ−アセチルムラ
ミル−Ｌ−アラニル−２−（１’、２’−ジパルミトイ
ル−５ｎ−ｙクセロー３′−７オスフオリル）−エテル
アミド及び５ｍｑのｎ−ヘキサデシルピリジニウムクロ
リドを２　ｍｌのクロロホルム／メタノール（２：１）
混合物に溶かし、このｇａｔ−回転蒸発器中で蒸発させ
る。フィルム状残留物ｔ−３ｍ１の蒸留水に分散させ５
分間娠とうする。こうして乱光を帯びる水性相が得られ
る。次いで燐酸塩で緩衝した’／１ｏｍｅの等侵食塩水
（注射用ＰＢＸ）０．２　ｄ　を添加して７．４のｐＨ
値に緩衝イヒする。

以下余白例８　：　　３０ｗｔ（ｏ、ｏ　４　ｍＭｏ１）の大豆
Ｖ’／テン。

２４（０，００４、、ｌＭｏ１　）のフルメタゾｙ−２
１−ピバラート及び８　”４　（０，００２ｍ　Ｍｏ　
Ｉ　）　（Ｄ　ｎ　−ヘキサデシルピリジニウムクロリ
ドを３−のクロロホルム／メタノール（２：１　）混合
物に醇かし、この溶液を回転蒸発器中で蒸発させる。フ
ィルム状残留物を３−の蒸留水に分散させ５分間に亘っ
て７エーキングする。こうして乱光を帯びる水性相が得
られる。次いで例７と同様に７．４ＯｐＨ値まで緩衝す
る。

例１０：　　２０ｗｇ（０，０２６ｍＭｏｌ）の大豆Ｌ
／ジチア、１ｍｆＩ（０，７６Ｍｏｌ）のＮ−アセチル
ムラミル−■」−アラニル−２−（１’、２’−ジパル
ミトイル−９ｎ−グリセロ−３′−フォスフォリル）−
エテルアミド及び１０ＩＩｖ（［ＬＯ２８ｍＭｏｌ）の
ラネ。

トＥ■ヶ６．．．。第３プ、７−ヤ／、２７−ヤ、４：
１〕混合物に７０’で溶かし、この溶液を回転蒸発器中
で蒸発させる。フィルム状残留物を２−の蒸留水と共に
５分間に亘って振とりする。乱光を帯びる水性相が得ら
ｈる。

これを攪拌されている限外フィルター−セル（アミ＝ン
■）に注入する。このフィルター・セルは限外フィルタ
ーの代りに孔径０．１μｍのポリカーボネート（ヌーク
レクオポール■）から成る直孔フィルターを装備し１粒
子が残らないように洗Ｍしたものである。このフィルタ
ー・セルにおいて、僅かな超過圧の下に、セル内の容積
が３０−以下に減らないように絶えず殺菌ろ過デールベ
ッコ緩衝液（Ｃａ及びＭｔ　ｔ−含まず、ｐＨ７，４）
を供給しながらろ過する。、ａ、Ｓｔのる液を通した後
Ｋ　Ｕ　Ｌを残らず分離し％侵留するＧＵＬ分散液をア
ンプル充填し、臨床実験に使用することができる。

例１１：　　５０ｑ（０，Ｏ４ｍＭｏ１）の大豆ＶＶ？
７、　４１ｎｇ（ｏ、ｏ　８１　ｇＭｏｌ）のフルメタ
シン−２１−プリバラート及び１０”Ｐ（０，０２８ｍ
Ｍｏｌ）のラネットＥ■を６−の第３ブタノール／メタ
ノール（４：１）混合物中に７０°で溶かし、この溶液
を回転蒸発器中で蒸発させる。フィルム状残留物を３ｗ
ｔの蒸留水と共に７エーキングする。乳光を帯びる水性
相が得られる。例１０の攪拌フィルター・セル（相客＠
　１００　ｍｌ　）に充填した後、殺菌された粒子のな
いろ過水を、５００−のる液が得られるまで添加しなが
らろ過する。このろ液を限外フィルター、例えばアミコ
ンＵ■）を装備した攪拌フィルター・セルに連続供給し
、５０ｍ１の容積に濃縮する。このｊ縮分散腋は小さい
琳葉リボゾームを含有し、デールペッコ燐酸塩緩衝液（
Ｃａ及びｈｈ　を含まず、ｐＨ７，４）の濃縮物を添加
した後アンプル充填し、臨床実験に使用できる。

特許出願人テバーガイギー　アクテエンゲゼルシャフト特許出願代
理人弁理士　　青　　木　　　　　朗弁理士　　西　　舘　　和　　之弁理士　　福　　本　　　　　積弁理士　　山　　口　　昭　　之・弁理士　　西　　山　　雅　　也手続補正書Ｃ方式）％式％１、事件の表示昭和５８年　特許願　　第１３７９０８号２、発明の名
称水性相中リボゾームの製造方法３、補正をする者事件との関係　　特許出願人名　称　テバーガイギー　アクチェンゲゼルシャフト４
、代理人（外４　名）５、補正命令の日付昭和５８年１１月２９日′Ｃ発送日）６、補正の対象明細書７、補正の内容明細書の浄書（内容に変更なし）８、添附書類の目録浄書明細書　　　　　　１通

Claims

【特許請求の範囲】１、　イオン性界面活性剤と脂質の均質混合物を水性相
における界面活性剤の臨界ミセル形成濃度（ｃｍｃ−臨
界ミセル濃度）よシ低い濃度で水性相中に分散させ、必
要ならば得られた水性相を中和し、また必要ならば得ら
れた単葉リボゾームを濃縮及び／または分離することを
特徴とする水性相中の単葉リボゾームの製造方法。 λ　陰イオンまたは陽イオン性界面活性剤の均質混合物
を分散させることを特徴とする特許請求の範囲第１項に
記載の方法。五　式（ＩＡ）。ＲａＲｃ（式中、Ｒａは置換されていない又は置換されている炭
化水素基であｊｊ）　；　Ｒｂは低級アルキル、フェニ
ル低級アルキル又はヒドロキシで６Ｄ：ＲＣ及びＲｄは
低級アルキルであシ；あるいはＲ，ｂ及びＲＣは、これ
らが結合している窒素原子と共に一緒になって炭素原子
ｐｆおいて置換されている脂肪族複素環系を構成し；そ
してＲｄけ低級アルキル基であり；あるいは又Ｒｂ　、
　Ｒｃ　及びＲ，ｄけそれらが結合１−ている窒素原子
と共に一緒になって、芳香族複素環系を構成し；そして
鋺は陰イオンである）で表わされる陽イオン界面活性剤及び脂質の均質混合物
を分散せしめることを特徴とする特許請求の範囲第２項
記載の方法。４、　　Ｎ−ベンジル−Ｎ、Ｎ−ジメチル−Ｎ−２−（
２−（４−（１，１，３，３−テトラメチルブチル）−
フェノキシ）−エトキシ〕−エチアンモニウムクロリド
、Ｎ−ベンジルＮ、Ｎ　−ジメチル−Ｎ−２−（２−（
３−メチル−４−（１，１，３゜３−テトラメチルブチ
ル）−７エノキシ）−エトキシ〕エチルアンモニウムク
ロリド（メチルベンゼソニウムクロリド）、ｎ−ドデシ
ルトリメチルアンモニウムクロリドもしくけプロミド、
トリメチルｎ−テトラデシルアンモニウムクロリドもし
くはプロミド、ｎ−ヘキサデシルトリメチルアンモニウ
ムクロリドもしくはプロミド（セチルトリメチルアンモ
ニウムクロリドもしくはプロミド）、トリメチルｎ−オ
クタデシルアンモニウムクロリドもしくはプロミド、エ
チルｎ−ドデシルジメチルアンモニウムクロリドもしく
はプロミド、エチルジメチルｎ−オクタデシルアンモニ
ウムクロリドもしくはプロミドエチルｎ−ヘキサデシル
ジメチルアンモニウムクロリドもしくけプロミド、エチ
ルジメチルｎ−テトラデシルアンモニウムクロリドもし
くはプロミド、エチルｎ−ヘキサデシルジメチルアンモ
ニウムクロリドもしくはプロミド、エチルジメチルｎ−
オクタデシルアンモニウムクロリドもしくけプロミド、
ｎ−アルキルベンジルジメチルアンモニウムクロリドも
しくはプロミド（ベンザルコニウムクロリドもしくはプ
ロミド）、例えば、ベンジルｎ−ドデシルジメチルアン
モニウムクロリドもしくはプロミド、ベンジルジメチル
ｎ−テトラデシルアンモニラクロリドもしくけプロミド
、ベンジルｎ−ヘキサデシルジメチルアンモニウムクロ
リドもしくけプロミド、又はベンジルジメチル−ｎ−オ
クタデシルアンモニウムクロリドもしくはプロミド、Ｎ
−（ｎ−デシル）−ビリジニウムクロリルもしくはプロ
ミド、Ｎ−（ｎ−ドデシル）ピリジニウムクロリドもし
くはフロミド、Ｎ−（ｎ−テトラディル）ピリジニウム
クロリドもしくはプロミド、ＪＬ＝（ｎ−ヘキサデシル
）ピリジニウムクロリドもしくはプロミド、（セチルピ
リジニウムクロリドもしくけプロミド）、またはＮ−（
ｎ−オクタデシル）ピリジニウムクロリドもしくはプロ
ミド、又はこれらの界面活性剤の混合物と脂質との均質
混合物を分散せしめることを特徴とする特許請求の範囲
第３項に記載の′方法。５、下記式で表わされる陰イオン性界面活性剤、即ち、ａ）ｎａが場合によって置換される炭化水素基、Ａが低
級アルキレン、ｍが０（直接結合）または１、Ｂがスル
ホン酸基または硫酸基、Ｚ■が一価陽イオンを表わすと
して式（ＩＢ）（Ｒａ　−（０−Ａ）　　−Ｂ　）ＯＺ
■　　　（ＩＢ）で表わされる化合物、またはｂ）　　ｍが０または１、基Ｒ１及びＲ２の一方が水素
、ヒドロキシ、炭素原子が１−４個の低級アルキル、他
方の基がそれぞれがｉ　０−２０個の炭素原子を有する
アルキル、アルケニル、アルコキシ、アルケニルオキシ
またはアシルオキシ、Ｒ５が水素ま／＋１−１：１−４
個の炭素原子を有する低級アルキル、Ｒ４が場合によっ
て置換される１−７個の炭素原子を有する低級アルキル
、５−１２個の炭素原子を有する炭水化物基または、両
残基Ｒ１゜及びＲ２が水素またはヒドロキシを意味する
ならステロイド残基、２■が一例陽イオンを表わすとし
て式（ＩＣ）以下余白で表わされる化合物、またはＣ）　　Ｒ４，Ｒ２，Ｒ３及びＺ■が式（ＩＣ）におけ
る意味と同じ意味を有するとして、式（Ｉ　Ｉ））で表
わされる化合物と脂質との均質な混合物を分散させるこ
とを特徴とする特許請求の範囲第２項に記載の方法。６、アルカリ金属硫酸アルキル（ｍ＝　Ｑ　）　、　例
えばナトリウムまたはカリウム−ｎ−ドデシル（ラウリ
ル）−サルフェート、−ｎ−テトラデシル（ミリスチル
）−サルフェート、−ｎ−ヘキサデシル（セチル）−サ
ルフェートまたは一〇−オクタデシル（ステアリル）−
サルフェート、アルカリ金属硫酸アルキルエーテル（ｍ
＝１）、例えばナトリウム−またはカリウム−〇−ドデ
シルオキシエチルサルフェート、−ｎ−テトラデシルオ
キシエチルサル７エート、−ｎ−ヘキサデシルオキシエ
チルサルフェートまたは−ｎ−オクタデシルオキシエチ
ルサルフェートまたけ、アルカリ金属スルホネトアルカ
ン、例えばナトリウム−またはカリウム−〇−ドデカン
スルホネート、ｎ−テトラデカンスルフォネート、ｎ−
ヘキサデカンスルフォネートまたは−ｎ−オクタデカン
スルフォネート、リゾフォスファチジルセリンのナトリ
ウムまたはカリウム塩、例えば牛の脳から得られるリゾ
フすスファチジルセリンのナトリウムまたけカリウム塩
、捷たは合成リゾフォスファテジルセリンのナトリウム
′またはカリウム塩、例えばナトリウム−またはカリウ
ム−１−ミリストイル−または−１−パルミトイルーリ
ゾフォスファチジルセリン、またはりゾフォスファチジ
ルセリンのナトリウムまたはカリウム塩、又はリゾファ
スファチジルグリセロールのナトリウム塩もしくはカリ
ウム塩、または天然７オスフアチジン酸例えば卵フォス
ファチジン酸のナトリウムまたはカリウム塩、天然リゾ
フォスファチジン酸例えば卵リゾ７オスフアチジン酸の
ナトリウム塘たけカリウム塩、合成リゾフォスファチジ
ン酸例えば１−ラウロイル−１１−ミリストイル−また
は１−バルミトイルーリゾフォスファチジン酸のナトリ
ウム又はカリウム塩又はこれらの界面活性剤の混合物と
脂質との均質混合物を分散させることを特徴とする特許
請求の範囲第５項に記載の方法。Ｚ　ｍ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ，及びＲ４が式（ＩＣ）の場合
と同じ意味を有し、Ｒ４が第６低級アルキルアンモニ第
１たはアミノで置換される低級アルキルを表わすとして
、式（ＩＣ）で表わされる化合物を脂質として分散させることを特徴
とする特許請求の範囲第１項から第６項までのいずれか
に記載の方法。ａ　脂質として天然レシチン、例えば卵−レシチンまた
は大豆から得られるレシチン（Ｒ４＝２−トリメチルア
ンモニオエチル）、天然ケファリン、例えば卵−ケファ
リンまたは大豆から得られるケファリン（Ｒ４＝２−ア
ミノエチル）、マたは式（１（’ｌ’）で表わされる合
成レシチン（Ｒ４＝２−トリメチルアンモニオエチル）
又は合成ケファリン（Ｒ４＝２−アミノエチル）（ここ
でＲ１及びＲ２が同一のアシルオキシ基、例えばラウロ
イルオキシ、オレオイルオキシ、リノイルオキシ、１）
／Ｌ／Ｆイルオキシまたはアラキノイルオキシ、例えば
ジラウロイル−、シミリストイル−、ジパルミトイル−
、ジステアラロイルー、ジラウロイルー、ジオレオイル
−、シリノイル−、シリルオイル−１またはジアラキノ
イルーレシチンまたはケファリンを表わし、Ｒ１及びＲ
２が異なるアシルオキシ残基を、例えばＲ１がパルミト
イルオキシ、でありＲ２がオレオイルオキシ、例えば１
−バルミトイル−２−オレオイル−レシチンまたは一ケ
ファリンを表わし、Ｒ４及びＲ２が同一のアルコキシ基
、例えばテトラデシルオキシまたはヘキサデシルオキル
、例えばジテトラデシルーまたはジヘキサデシルーレシ
チンまたは一ケファリン、Ｒ４がアルケニルでありＲ２
がアシルオキシ、例えばプラズマローゲン（Ｒ４＝トリ
メチルアンモニオエチル）、またけＲ１がアシルオキシ
、例えばミリストイルオキシまたはパルミトイルオキシ
、そして几、がヒドロキシ（例えば天然または合成リゾ
レシチンまたはりゾケ７アリン、例えば１−ミリストイ
ル−または１−バルミトイル−リゾレシチンまたは−リ
ゾケファリン、そして几。が水素をそれぞれ表わす）を使用することを特徴とする
特許請求の範囲第７項記載の方法。９　式（ＩＡ）で表わされる界面活性剤、特ＫＮ−ベン
ジルＮ、Ｎ−ジメチル−Ｎ−２−（２−（４−（１，１
，３，３−テトラメチルブチル）−フェノキシ）−エト
キシ〕−エチルアンモニウムクロリド、Ｎ−ベンジルＮ
、Ｎ−ジメチル−Ｎ−２−（２−、（３−メチル−４−
（１，１，３，３−テトラメチルブチル）フェノキシ）
−エトキシエチルアンモニウムクロリト（メチルベンゼ
ンニウムクロリド）％１１−ドデシルトリメチルアンモ
ニウムクｐリドもしくはプロミド、トリメチルｎ−テト
ラデシルアンモニウムクロリドもしくはプロミド、ヰ←
≠す宍ｎ−−＼キサデシルトリメチルアンモニウムクロ
リドもしくはプロミド（セチルトリメチルアンモニウム
クロリドもしくはプロミド）、トリメチル−ｎ−オクチ
ルデシルアンモニウムクロリドもしくｄプロミド、エチ
ルｎ−ドデシルジメチルアンモニウムクロリドもしくは
プロミド、エチルジメチル−〇−テトラデシルアンモニ
ウムクロリドもしくはプロミド、エチル−ｎ−ヘキサデ
シルジメチルアンモニウムクロリドもしくす、プロミド
、エチルジメチル−〇−オクタデシルアンモニウムクロ
リドもしくはプロミド、ｎ−アルキル−ベンジルジメチ
ルアンモニウムクロリドもしくは７’Ｄミド（塩化もｊ
〜〈は臭化ベンザルコニウム）、例エバベンジルーｎ−
ドデシルジメチルアンモニウムクロリドもしくはプロミ
ド、ベンジルジメチル−ｎ−テトラデシルアンモニウム
クロリドもしくはプロミド、ベンジル−ｎ−ヘキサデシ
ルジメチルアンモニウムクロリドもしくはプロミド、ま
たはベンジルジメチル−ｎ−オクタデシルアンモニウム
クロリドもしくけプロばド、Ｎ−（ｎ−デシル）ピリジ
ニウムクロリドもしくはプロミド、Ｎ　−（１１−ドデ
シル）ピリジニウムクロリドもしくはプロミド、Ｎ−（
ｎ−ヘキサデシル）ピリジニウムクロリドもしくけプロ
ミド　（セチルピリジニウムクロリドもしくけプロミド
）、またはＮ−（ｎ−オクタデシル）ピリジニウムクロ
リドもしくはプロミド、または式（ＩＢ）で表わされる
陰イオン性界面活性剤、特にナトリウム−またはカリウ
ム−ｎ−ドデシル（ラウリル）−サルフヱー）、−〇−
テトラデシル（ミリスチル）−サル７エー）、−ｎ−ヘ
キサデシル（セチル）−サルフェート、−＝；：’ｃは
−ｎ−オクタデシル（ステアリル）−サルフェート、ナ
トリウムもしくはカリウム−ｎ−ドデシルオキシエチル
サルフェート、−ｎ−テトラデシルオキシエチルサルフ
ェート、−ｎ−ヘキサデシルオ千ジエチルサルフェート
、または−〇−オクタデシルオキシエチルサル７エート
、または式（ＩＣ）で表わされる陰イオン性界面活性剤
、特にナトリウム−またはカリウム−２，２−ジメチル
−３−パルントイルオキシブロビル水素７＃、スフエー
ト、ナトリウム−またはカリウム−１−バルミトイルリ
ゾ７オスフアチジルセリセロール又は、ナトリウム−ま
たはカリウム−１−バルミトイルリゾ７オスフアチジル
セリン、及び式（ＩＣ’）で表わされる脂質（ここで、
Ｒ４及びＲ２けアシルオキシ、例えばラウロイルオキシ
、定リストイルオキシ、パルミトイルオキシまたはステ
アロイルオキシを、Ｒ３け水素を、Ｒ４け２−トリメチ
ルアンモニオエチルであって、例えば天然ケファリン、
例えば卵ケファリンまたは大豆ケファリンであり、また
は２−アミノエテルであって、例えば天然レシチン、例
えば卵レシチンまたは大豆レシチンをそれぞれ表わす）
の均質混合物を分散せしめることを特徴とする特許請求
の範囲第１項〜第８項のいずれか１項に記載の方法。１０、特許請求の範囲第９項に記載の界面活性剤（１３
−− 及び脂質と薬理作用物質の均質混合物を分散させること
を特徴とする特許請求の範囲第１項から第９項までのｈ
ずれかに記載の方法。１１、式（ＩＢ）の陰イオン界面活性剤、卵レシチン及
びムラ建ルペチドの均質混合物を分散させることを特徴
とする特許請求の範囲第１項から第１０項までのいずれ
かに記載の方法。１２、式（ＩＡ）の陽イ゛オン界面活性剤、大豆レシチ
ン及びムラミルベチドの均質混合物を分散させることを
特徴とする特許請求の範囲第１項から第１０項までのい
ずれかに記載の方法。１３、ｎ−ヘキサデシルピリジニウムクロリド、大豆レ
シチン及びＮ−アセチルムラミル−Ｌ−アラニル−２−
（１１′２；−ジパルミトイル−８ｎ−ゝグリセロー３
−フォスフォリル）−エチルアミドの均質混合物を分散
させることを特徴とする特許請求の範囲第１２項に記載
の製法。１４、　　内包するＮ−アセチルムラミル−Ｌ−７ラニ
ルーＤ−４ソグルタミルーＬ−７ラニルー２−（１：２
’−ジパルミトイル−５ｎ−グリセロ−３′−α→ フすスフォロ）−エチルアミドのための、特許請求の範
囲第１項に記載の製法でｉｌ製されるリボシーメンをベ
ースとする投与系。１５、薬学的に適合殴を有する添加物質と混合された特
許請求の範囲第１４項に記載の内包する作用物質のため
のリボシーメンをベースとする投与系を含む薬剤組成。１６、人畜治療用の特許請求の範囲第１４項に記載の投
与系。１７　　人畜治療用の特許請求の範囲第１４項に記載の
薬剤組成。１ａ　　％許饋求の範囲第１５項Ｖｃ二記載の投与系に
よる人畜疾病の治療方法。