JP2003508483A - 膜ミメティクスを用いた蛋白質性薬物の送達システム - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【解決手段】 多重ラメラ小胞を有する混合リポソーム薬学的調製物であって、該調製物は、口又は鼻の膜を通じて、肺へ到達するように投与される。調製物は、蛋白質性薬剤、水、濃度が調製物全体の１−１０wt./wt.％であるアルカリ金属Ｃ８−Ｃ２２アルキルサルフェート、少なくとも一種の膜ミメティック両親媒性物質、及び少なくとも一種のリン脂質を含んでいる。膜ミメティック両親媒性物質及びリン脂質は、各々の量は、調製物全体の１−１０wt./wt.％であり、膜ミメティック両親媒性物質とリン脂質の合計濃度は、調製物の５０wt./wt.％より少ない。調製物を調製するプロセス、調製物を収容する容器、調製物を投与する方法も開示されている。投与方法は、調製物と噴射剤と混合し、得られた混合物を計量付きディスペンサーを用いて経口投与することを含んでいる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【技術分野】

本発明は、ペプチド薬物、ワクチン及びホルモンなどの大分子量(高分子)の薬
剤を投与するための送達システム(delivery system)の改良に関する。特に、本
発明は、口又は鼻の膜を経て、又は肺を通じて投与される薬剤に関する。投与の
一方法として、経口又は肺用として口の中へ投与するエアロゾルによるものがあ
る。

【０００２】

【背景技術】

巨大分子(蛋白質及びペプチド)を送達する新規な方法が、依然として求められ
ている。研究された方法の１つに、膜ミメティック両親媒性物質(membrane-mime
tic amphiphiles)の使用に関するものがある。膜ミメティック両親媒性物質の研
究は、２０世紀の最初の１０年代に遡る。物理的及び化学的な方法を用いた実験
では、この様な分子は水の存在下で望ましい配列をとることが示されている。こ
れら配列の形成物は、ミセル、単一層及び二分子層を含み、その駆動には、水と
結合させるために、イオノゲン性又はイオノゲン性でない極性の頭部(head grou
ps)を必要とし、また、水から排除されるべき極性の疎水性尾部(tails)を必要と
する［Small, D; Handbook of Lipid Research, vol. 4, 1986; Tanford, J: Th
e Hydrophobic Effect, John Wiley & Sons, 1980; Fendler, J. Membrane Chem
istry, 1982］。どの構造型がとられるかは、正確には、両親媒性物質の性質、
その濃度、他の両親媒性物質の存在、温度、及び水相中の塩及びその他溶質の存
在に依存する。

【０００３】 膜ミメティック両親媒性物質は、水中で不溶解性であるが水を吸収できる分子
と、限界条件下の水中でかなりの溶解性を有する分子とを含んでいる。前者の両
親媒性物質は、分子が分散された水溶液を生成するものではないが、水と共にか
なり膨張し、ラメラ相(lamellar phases)を生成する。後者の両親媒性物質は、
所定温度で、モノマーの分散水溶液を生成し、水中濃度が増すにつれて、モノマ
ー溶液からミセル溶液に変化する。非リン脂質両親媒性物質にリポソーム構造を
生成させるための非リン脂質リポソームの製造は、適当な時間シーケンスでの環
境変数(例えば、温度、水和性及び組成)の操作に依存する。

【０００４】 ゲビッキら(Gebicki et al.)は、オレイン酸によって囲まれた水含有小胞の生
成を開示した［Nature, 243, 232, 1973: Chem. Phys. Lipids, 16, 142, 1976;
Biochem. Biophys. Res. Commun. 80, 704, 1978; Biochemistry, 17, 3759, 1
978］。このほかに、例えば、米国特許第４７７２４７１号及び第４８３０８５
７号、及び J. Microencapsul. 4, 321, 1987 においても、ポリグリセロールの
単一尾部(single tailed)のエーテル又はエステル誘導体から脂質小胞が生成さ
れることが開示されている。 これらリポソームは、化粧品に適することがわかった。ムラカミら(Murakami
et al.)は、単一区画の小胞に、アミノ酸残基を含むカチオン両親媒性物質から
構成される１又は２以上の二重層の壁を形成した［J. Am. Chem.Soc, 101, 1030
, 1979; J. Am Oil Chem Soc. 66, 599, 1989］。ケイラーら(Kaler et al.)は
、単一尾部のカチオン及びアニオン界面活性剤の適当な水性混合物は、おそらく
塩の生成を通じて、単一壁の小胞を自発的に生成することを明らかにした［Scie
nce, 245, 1371, 1989］。これらのほかにも、ポウシラメラ(paucilamellar)で
非リン脂質のリポソームの製造方法が開発されており、該リポソームは、リン脂
質と同じ様に、様々な両親媒性物質から生成される。リポソームは、無定形のコ
アを取り囲む２以上の膜を有しており、各膜は、二重層配列(bilayer array)の
両親媒性物質から構成されている。コアは、小胞の大部分を占め、物質を被包し
ている。

【０００５】 前記の非リン脂質系リポソームは、主として、モイスチャライザーの送達用、
及びクリーム又はモイスチャライザーとして局所的又は外部で使用される化粧品
成分の送達用として使用される。そのようなリポソームは、数種類の薬品を送達
するために、軟膏として使用されることもある。前記薬品に利用される多くの成
分は、体内では許容されないことがわかっている。これらは、経口投与用や、救
命治療剤として巨大分子(蛋白質及びペプチド)を送達するための賦形剤としては
、世界的に規制され、認可されていない。 例えば、水性油ペイント、表面クレンザー、重工業用クレンザー、皮膚洗浄剤
などのような非薬学的用途においても、その他の非リン脂質系リポソームが開発
されてきた。

【０００６】 本発明の目的は、安定性に優れ、消化(gastrointestinal; ＧＩ)管のポア(por
es)より小さい多重ラメラリポソームを生成するために、非リン脂質系両親媒性
物質(人間の薬剤用経口調製物として適当であり、所定機関により認可されたも
の)と特定のリン脂質との混合物からなる経口組成物を開発することである。

【０００７】 ペプチドや蛋白質について、安全で効果的な経口調製物を得るという目標に関
しては、ほとんど発展がないといってよい。蛋白質やペプチドの経口調製物を開
発する上で大きな障害となっているものに、固有吸収性(intrinsic permeabilit
y)の不足、内腔及び細胞の酵素分解、クリアランスが速いこと、及び消化管の化
学的安定性などがある。これらの障壁に取り組むための薬学的アプローチは、従
来の小さな有機薬物分子に対しては成功しているが、ペプチドや蛋白質調製物に
対しては容易に適用できなかった。課題は有意味であるが、特にインスリンを用
いる糖尿病治療の分野において、治療の潜在的利益は依然として大きいものがあ
る。

【０００８】 研究者らは、蛋白質及びペプチドに関して、注射以外の様々な投与ルートを研
究してきた。大分子を効果的に送達するための投与ルートとして、口、鼻、直腸
、膣腔などがある。これまでは、これら４つのルートの中でも、口腔と鼻腔につ
いて関心がもたれていた。口膜と鼻膜は両方とも、その他のルートと比べて利点
があるからである。例えば、これらの膜を通じて投与された薬物は、作用の発現
が速く、治療的血漿レベルをもたらし、肝代謝の初回通過効果を回避し、敵対的
ＧＩ環境に対する薬物の曝露を回避する。さらなる利点として、膜部位へのアク
セスが容易であるので、薬物の服用、局所適用、取出しを容易に行なえることが
あげられる。さらに、これらの膜を経由すると、大分子の送達時間が長くなる利
点もある。

【０００９】 経口ルートは、その他のルートよりも注目されてきた。舌下粘膜は、舌下面の
膜と口腔底部を含んでおり、頬粘膜は頬のライニングを構成している。舌下粘膜
は、かなりの浸透性を有しているので、多くの薬物に関して吸収が速く、生物学
的利用能(bioavailability)についても許容される。さらに、薬物を舌下粘膜の
所へもっていくことが容易であるので、都合が良い。この経口ルートは、大量の
薬剤を送達するために、臨床的に研究されてきた。

【００１０】 促進剤(enhancers)を用いて大分子を吸収させるための様々なメカニズムが提
案されている。少なくとも蛋白質及びペプチド薬剤に対する作用メカニズムとし
て、(１)粘膜層の粘性及び／又は弾性を低下させること、(２)膜の脂質二重層の
流動性を増すことにより、経細胞輸送を容易にすること、(３)上皮細胞層の密着
結合(tight junction)を変えることにより、細胞間隙輸送を容易にすること、(
４)酵素バリヤーをなくすこと、(５)薬物の熱力学的活性を高めること、などが
挙げられる［Critical Rev. 117-125, 1992］。

【００１１】 これまでにも、多くの吸収促進剤(penetration enhancers)が試験されてきた
。その中には、大分子の薬物の粘膜投与を容易にする上で効果的なものもあった
。しかしながら、吸収促進剤として市場要求レベルに達したものは殆どなかった
。この理由として、刺激(irritation)に関する十分な安全プロフィルの欠如、バ
リヤー機能の低下、粘膜毛様体クリアランス(mucocilliary clearance)の保護メ
カニズムの悪化などが挙げられる。一般的な吸収促進剤の中でも特に胆汁酸塩に
関するものや蛋白質溶解剤は、極端に苦く、不快な味をもたらすことが知られて
いる。このため、人間が毎日それらを摂取することは殆ど不可能である。 胆汁酸塩の送達システムの味を改良する幾つかの提案がなされているが、人間
が毎日摂取する上で商業的に満足し得るものはなかった。これまで提案されたも
のとして、頬粘膜用パッチ、二層層タブレット、放出制御されたタブレット、リ
ポソーム調製物、プロテアーゼ阻害剤の使用、頬投与されたフィルムパッチデバ
イス、種々のポリマーマトリクスなどがある。また、パッチは、局部的副作用に
より、口の中でひどい組織損傷を惹起する問題がある。

【００１２】

【発明の開示】

本発明は、多重ラメラ小胞を有する混合リポソーム薬学的調製物を提供するも
ので、蛋白質性薬剤、水、濃度が調製物全体の１−１０wt./wt.％であるアルカ
リ金属Ｃ８−Ｃ２２アルキルサルフェート、少なくとも１種の膜ミメティック両
親媒性物質、及び少なくとも１種のリン脂質を含んでいる。

【００１３】 膜ミメティック両親媒性物質は、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸の薬学的に許容
される塩、ラウラアミドプロピルベタイン、ラウラミドモノイソパノールアミド
、ココアンホプロピオン酸ナトリウム、ビスヒドロキシプロピルジヒドロキシプ
ロピルステアロアンモニウムクロリド、ポリオキシエチレンジヒドロキシプロピ
ルステアロアンモニウムクロリド、ジオクタデシルジメチルアンモニウムクロリ
ド、スルホサクシネート、ステアロアミドＤＥＡ、ガンマリノール酸、ルリヂサ
油、マツヨイグサ油、モノオレイン、タウロジヒドロフシジン酸ナトリウム、フ
シジン酸、アルカリ金属イソステアリールラクチレート、アルカリ土類金属イソ
ステアリールラクチレート、トリ酢酸パンテニル、コカミドプロピルホスファチ
ジルＰＧ−ジアンモニウムクロリド、ステアロアミドプロピルホスファチジルＰ
Ｇ−ジアンモニウムクロリド、ボレージアミドプロピルホスファチジルＰＧ−ジ
アンモニウムクロリド、ボレージアミドプロピルホスファチジルコリン、ポリシ
ロキシピロリドンリノレイルホスホリピド、トリヒドロキシ−オキソ−コラニル
グリシン、トリヒドロキシ−オキソ−コラニルグリシンのアルカリ金属塩、オク
チルフェノキシポリトキシエタノール、ポリデカノールＸ−ラウリルエーテル(
但し、Ｘは９−２０)、ポリデカノールＸ−オレイルエーテル(但し、Ｘは９−２
０)、及びそれらの組合せからなる群から選択される。

【００１４】 また、リン脂質は、ホスホリピドＧＬＡ(glicolic, lactic acid)、ホスファ
チジルセリン、ホスファチジルエタノールアミン、イノシトールホスファチド、
ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン、スフィンゴミエリン、セラミド
、セファリン、トリオレイン、不飽和レシチン、飽和レシチン及びライソレシチ
ン、及びそれらの組合せからなる群から選択される。 各々の膜ミメティック両親媒性物質とリン脂質は、調製物全体の１−１０wt./
wt.％の濃度で存在し、膜ミメティック両親媒性物質及びリン脂質の合計濃度は
、調製物の５０wt./wt.％より少ない。

【００１５】 混合リポソーム薬学的調整物のｐＨは、６.０−７.０が望ましい。 膜ミメティック両親媒性物質の数は、２−５が望ましい。 リン脂質の数は、１−４が望ましい。 一実施例において、アルカリ金属Ｃ８−Ｃ２２アルキルサルフェートは、ラウ
リル硫酸ナトリウムである。

【００１６】 望ましい実施例では、蛋白質分解酵素の作用による薬剤の分解を阻害するため
に、少なくとも１種のプロテアーゼ阻害剤が調製物に加えられる。既知のプロテ
アーゼ阻害剤の大部分は、濃度が調製物の１−３wt./wt.％のときに効果がある
。

【００１７】 有効なプロテアーゼ阻害剤として、バシトラシン、大豆トリプシン、アプロチ
ニン、及び、例えばバシトラシンメチレンジサリシレートのようなバシトラシン
誘導体があるが、これらに限定されるものではない。これらの中で、バシトラシ
ンは、１.５−２wt./wt.％の濃度で使用される場合に最も効果的である。大豆ト
リプシンとアプロチニンは、調製物の約１−２wt./wt.％の濃度で使用すること
ができる。

【００１８】 一実施例において、膜ミメティック両親媒性物質は、ヒアルロン酸、ヒアルロ
ン酸の薬学的に許容される塩及びその混合物からなる群から選択され、このよう
な吸収促進化合物の濃度は約１−約５wt./wt.％である。

【００１９】 他の実施例において、口の粘膜を通じて送達するのに適した調製物として、ラ
ウリル硫酸ナトリウム(sodium lauryl sulphate)と、次の(i)乃至(vii)からなる
群から選択されるものを含んでいる。 (i) トリヒドロキシ−オキソ−コラニルグリシンのナトリウム塩、スフィン
ゴミエリン及びステアロアミドＤＥＡ； (ii) トリヒドロキシ−オキソ−コラニルグリシンのナトリウム塩及びホスホ
リピドＧＬＡ (iii) セラミド及びステアロアミドプロピルホスファチジルＰＧ−ジアンモ
ニウムクロリド； (iv) ボレージアミドプロピルホスファチジルＰＧ−ジアンモニウムクロリド
及びレシチン； (v) オクチルフェノキシポリエトキシエタノール及び飽和レシチン； (vi) ヒアルロン酸ナトリウム、ポリデカノール９−ラウリルエーテル、レシ
チン及びマツヨイグサ油； 及び (vii) モノオレイン、飽和レシチン、ヒアルロン酸ナトリウム及びマツヨイ
グサ油。 他のさらなる実施例において、局部的経皮送達に適した調製物として、ラウリ
ル硫酸ナトリウムと、次の(i)乃至(ii)からなる群から選択されるものを含んで
いる。 (i) レシチン、ヒアルロン酸ナトリウム、グリコール酸及びプロピレングリ
コール； 及び (ii) ヒアルロン酸ナトリウム、スフィンゴミエリン、グリコール酸、及びプ
ロピレングリコール。 レシチンは、飽和レシチンが望ましい。

【００２０】 当該分野の専門家であれば、多くの薬学的調製物について、薬学的活性成分の
分解と酸化を防止するために、通常は、少なくとも一種の抗酸化剤を加えること
は理解されるであろう。当該分野の専門家であれば、着色剤、着香剤、及び治療
的有効量ではないその他化合物が、調製物の中に含まれてもよいことは理解され
るであろう。

【００２１】 一実施例において、抗酸化剤は、トコフェロール、メシル酸デテロキシム(det
eroxime mesylate)、メチルパラベン、エチルパラベン、アスコルビン酸及びそ
れらの混合物からなる群から選択される。望ましい抗防止剤は、トコフェロール
である。 口粘膜を通じて送達するのに適当な調製物として、噛むことのできる形態(che
wable form)であってよい。その場合、そのような形態に適した成分を添加する
ことが必要であろう。そのような成分として、グアーガム、粉末アカシア、カラ
ゲーニン、密ろう、ザンサンガムを挙げることができる。

【００２２】 本発明の他の目的は、加圧下で液体の噴射剤(propellant)と中間調製物を含む
圧力容器を提供するもので、前記中間調製物は、 i) 蛋白質性薬剤、 ii) 水、 iii) 濃度が調製物全体の１−１０wt./wt.％であるアルカリ金属Ｃ８−Ｃ２２
アルキルサルフェート、 iv) ヒアルロン酸、ヒアルロン酸の薬学的に許容される塩、ラウラアミドプロ
ピルベタイン、ラウラミドモノイソパノールアミド、ココアンホプロピオン酸ナ
トリウム、ビスヒドロキシプロピルジヒドロキシプロピルステアロアンモニウム
クロリド、ポリオキシエチレンジヒドロキシプロピルステアロアンモニウムクロ
リド、ジオクタデシルジメチルアンモニウムクロリド、スルホサクシネート、ス
テアロアミドＤＥＡ、ガンマリノール酸、ルリヂサ油、マツヨイグサ油、モノオ
レイン、タウロジヒドロフシジン酸ナトリウム、フシジン酸、アルカリ金属イソ
ステアリールラクチレート、アルカリ土類金属イソステアリールラクチレート、
トリ酢酸パンテニル、コカミドプロピルホスファチジルＰＧ−ジアンモニウムク
ロリド、ステアロアミドプロピルホスファチジルＰＧ−ジアンモニウムクロリド
、ボレージアミドプロピルホスファチジルＰＧ−ジアンモニウムクロリド、ボレ
ージアミドプロピルホスファチジルコリン、ポリシロキシピロリドンリノレイル
ホスホリピド、トリヒドロキシ−オキソ−コラニルグリシン、トリヒドロキシ−
オキソ−コラニルグリシンのアルカリ金属塩、オクチルフェノキシポリトキシエ
タノール、ポリデカノールＸ−ラウリルエーテル(但し、Ｘは９−２０)、ポリデ
カノールＸ−オレイルエーテル(但し、Ｘは９−２０)、及びそれらの組合せから
なる群から選択される少なくとも１種の膜ミメティック両親媒性物質と、ホスホ
リピドＧＬＡ、ホスファチジルセリン、ホスファチジルエタノールアミン、イノ
シトールホスファチド、ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン、スフィ
ンゴミエリン、セラミド、セファリン、トリオレイン、不飽和レシチン、飽和レ
シチン及びライソレシチン、及びそれらの組合せからなる群から選択される少な
くとも１種のリン脂質と(但し、各々の膜ミメティック両親媒性物質とリン脂質
は、調製物全体の１−１０wt./wt.％の濃度で存在し、膜ミメティック両親媒性
物質及びリン脂質の合計濃度は、調製物の５０wt./wt.％より少ない) v) フェノール及びメチルフェノールからなる群から選択され、濃度が調製物全
体の１−１０wt./wt.％であるフェノール化合物と、 を含んでいる。

【００２３】 望ましい実施例において、噴射剤は、Ｃ１−Ｃ２ジアルキルエーテル、ブタン
、フルオロカーボン噴射剤、水素含有フルオロカーボン噴射剤、クロロフルオロ
カーボン噴射剤、水素含有クロロフルオロカーボン噴射剤及びその混合物からな
る群から選択される。

【００２４】 他の実施例において、中間調製物は、グリセリン、ポリグリセリン及びその混
合物からなる群から選択され、中間調製物全体の１−４０wt./wt.％の量の化合
物を含んでいる。 さらなる実施例において、中間調製物と噴射剤の重量比は、５：９５乃至２５
：７５である。

【００２５】 一実施例において、アルカリ金属Ｃ８−Ｃ２２アルキルサルフェートは、濃度
が、中間調製物の２−８wt./wt.％である。 さらなる実施例において、メチルフェノールはｍ−クレゾールである。 他の実施例において、アルカリ金属Ｃ８−Ｃ２２アルキルサルフェートは、ラ
ウリル硫酸ナトリウムである。 さらに他の実施例において、膜ミメティック両親媒性物質の合計濃度は、約１
−２５wt./wt.％である。

【００２６】 さらに他の実施例において、噴射剤は、テトラフルオロエタン、テトラフルオ
ロプロパン、ジメチルフルオロプロパン、ヘプタフルオロプロパン、ジメチルエ
ーテル、ｎ−ブタン及びイソブタンからなる群から選択される。 さらなる実施例において、中間調製物と噴射剤の重量比は、５：９５乃至２５
：７５である。

【００２７】 本発明はまた、噴射剤と中間調製物が装填された計量付きエアロゾルディスペ
ンサーを提供するものである。 本発明はまた、計量付きスプレー装置を用いて、予め定められた量の組成物を
口の中へスプレーすることにより、本発明のエアロゾル薬学的組成物を投与する
方法を提供するものである。

【００２８】 本発明は、計量付きスプレーディスペンサーから、噴射剤と中間調製物の所定
量の混合物をヒトの口腔内へスプレーすることにより、吸入することなく、ヒト
の口腔内へ蛋白質性薬剤を投与する方法を提供するものである。 一実施例において、蛋白質性薬剤を投与する直前に、計量付きスプレーディス
ペンサーを激しく揺するようにしている。

【００２９】 蛋白質性薬剤は、処置される疾患に応じて、広範囲に亘る高分子量剤から選択
される。選択される分子量は、一般的には、約１０００より大きく、特に約１０
００−２００００００である。本発明に有用な薬剤として、インスリン、ヘパリ
ン、低分子量ヘパリン、ヒルゲン(hirugen)、ヒルロス(hirulos)、ヒルジン(hir
udine)、インターフェロン、インターロイキン、サイトカイン、モノクローナル
抗体、ポリクローナル抗体、化学治療剤、ワクチン、糖蛋白、細菌性トキソイド
、成長ホルモン、副甲状腺ホルモン(ＰＴＨ)、カルシトニン、インスリン様成長
因子(ＩＧＦ)、グルガゴン様ペプチド(ＧＬＰ−１及びＧＬＰ−２)、ステロイド
、レチノイド、注入可能な大分子抗生物質、蛋白質基の血栓溶解化合物、血小板
阻害剤、ＤＮＡ、遺伝子治療剤、ＲＮＡ、及びアンチセンスオリゴヌクレオチド
が挙げられる。

【００３０】

【発明の実施の形態】

新しい薬学的調製物を開発する際、蛋白質及びペプチド薬剤を、口、鼻、肺、
及び経皮粘膜のルートを通じて人間及び動物へ投与するのに適当な投薬形態を提
供し、投与部位へ容易に接近できることが望ましい。巨大分子の薬物の局所吸収
は、薬物の吸収を最大のものとするために、長い時間かけて行われることが望ま
しい。 さらにまた、組織の損傷をできるだけ少なくし、組織に適合できる投薬形態を
提供することが望ましい。患者がどの治療についても適合し受け入れることがで
きるように、痛みが無く、大きなフレキシビリティを以て投与されることが容易
なシステムを提供することが望ましい。

【００３１】 巨大分子量の薬物は、混合されたリポソーム調製物にて投与され、その場合、
粒子サイズ(１−４ｎｍ)は、粘膜表面のどのポアよりも小さくなるようにしてい
る。

【００３２】 本発明は、巨大分子(高分子量)の薬剤の送達を、特に鼻、口、肺、膣又は直腸
の皮膚又は膜を通じて行なう方法の改良を提供することである。送達は、口腔及
び鼻腔を通じて行うことが望ましい。口腔への送達は、計量付きディスペンサー
を用いて行なうことがより望ましい。薬剤は、広範囲に亘り、例えば、蛋白質、
ペプチド、ホルモン、ワクチンなどの薬物が挙げられる。巨大分子の薬剤の分子
量は、１０００以上、特に１０００−２００００００の範囲にあることが望まし
い。

【００３３】 本発明で投与されるホルモンの例として、ヒト成長ホルモン、副甲状腺ホルモ
ン、卵胞刺激ホルモン、卵黄ホルモン、アンドロゲン、エストロゲン、プロスト
グランジン(prostoglandins)、ソマトロピン、ゴナドトロピン、エリスロポエチ
ン、インターフェロン、インターロイキン、ステロイド、及びサイトカインが挙
げられる。

【００３４】 本発明で投与されるワクチンとして、細菌性ワクチン及びウイルス性ワクチン
があり、これらワクチンの例として、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、インフル
エンザ、結核、カナリア痘、水疱瘡、麻疹、流行性耳下腺炎、風疹、肺炎、ＢＣ
Ｇ、ＨＩＶ、ヘリコバクターピロリ及びＡＩＤＳが挙げられる。

【００３５】 本発明を用いて投与することのできる細菌性トキソイドには、ジフテリア、破
傷風、シュードモナス及び結核菌が含まれる。 特異的な心臓血管又は血栓溶解の薬剤の例として、ヘパリン、低分子量ヘパリ
ン、ヒルゲン、ヒルロス及びヒルジンが挙げられる。

【００３６】 薬剤の濃度は、疾病の治療又は予防に効果があること、また、動物又はヒトの
生理学的状態を調節するのに十分な量であることは、理解されるであろう。投与
される薬剤の濃度又は量は、薬剤によって決められるパラメータと、投与の方法
、例えば、口、鼻、皮膚、肺のどこに投与するかによって異なる。例えば、鼻か
ら投与される調製物の場合、鼻孔の刺激又は炎症を回避するため、成分によって
はかなり低い濃度を要求される傾向がある。鼻から投与される好適な調製物を供
給するために、経口用調製物を１０〜１００倍に希釈することが望まれる場合も
ある。

【００３７】 非リン脂質の膜ミメティック両親媒性物質とリン脂質の混合物を生成するため
の望ましい方法は、脂質の両親媒性物質及びリン脂質の相の挙動に依存する。こ
の方法は、タービンを用いた高速乱流混合法又は高速ノズルを用いた高速剪断混
合法を使用する。膜ミメティック両親媒性物質は、例えば、ノズルを通じて、リ
ン脂質の水相へ高速で注入される。或いはまた、膜ミメティック両親媒性物質と
リン脂質は、混合チャンバー内で混合される。該混合チャンバーへは、１又は２
本以上のノズルを通じてリン脂質が高速で注入され、膜ミメティック両親媒性物
質もまた１又は２本以上のノズルを通じて高速で注入される。その他に、例えば
、ナトリウムＣ８−Ｃ２２アルキルサルフェート、プロテアーゼ阻害剤などの成
分を、膜ミメティック両親媒性物質又はリン脂質のどちらかと予め混合してもよ
い。２種類の液体の混合速度は、部分的には、物質の粘性及びノズルの直径に依
存する。例えば直径０.５−１.０ｍｍのノズル孔を通るとき、１０−１５ｍ/ｓ
である。一般的に、膜ミメティック両親媒性物質の水溶液対リン脂質溶液の比は
、約５対１−約２０対１であり、混合温度は、一般的に約１０℃−２０℃である
。

【００３８】 均質な水溶液を得るには、リン脂質と混合する前に、膜ミメティック両親媒性
物質とその他成分を加熱することが必要になることもある。蛋白質性薬剤の性質
によっては、混合が行われる温度範囲に影響を与える場合がある。混合温度は、
一般的には、室温以下であるが、調製物によっては室温より高い場合もある。得
られた調製物は、多重ラメラのリポソーム小胞を含んでいる。調製物が混合中に
加熱される場合、多重ラメラ小胞の生成を助けるために、混合中、混合物を冷却
することが望ましい場合もある。

【００３９】 本発明の方法によって生成された混合多重ラメラ小胞は、サイズが非常に小さ
い(例えば１０ｎｍよりも小さい)ので、殆どの保存条件下で安定である。

【００４０】 膜ミメティック両親媒性物質溶液は、小さな円筒型混合チャンバー内の接線方
向に配置されたノズルを通じて、リン脂質溶液に注入されることが望ましい。膜
ミメティック両親媒性物質溶液について、１又は２本以上のノズルを使用し、リ
ン脂質溶液について、互い違いに１又は２本以上のノズルを使用することが望ま
しい。２種類の液体のノズルへの送達は、流れ制御された容積ポンプ(positive
displacement pump)によることが望ましい。

【００４１】 本発明は、広範な用途に適用可能であるが、以下では、特に糖尿病治療に使用
されるインスリン及びそのアナローグに関して説明する。

【００４２】 鼻腔又は口腔を通じて投与されるインスリンの場合、水緩衝溶液の調製は、ま
ず最初に、水性のアルカリ金属Ｃ８−Ｃ２２アルキルサルフェート(例えばラウ
リル硫酸ナトリウム)を粉末インスリンに加え、次に、粉末が溶解して、澄んだ
溶液が得られるまで攪拌することによって行なわれる。緩衝溶液は、サリチル酸
ナトリウムを含有してもよい。サリチル酸ナトリウム及びラウリル硫酸ナトリウ
ム水溶液の典型的な濃度は、溶液中の各化合物の約３−２０wt./wt.％である。
一般的には、溶液中に存在するインスリンは、濃度が最終調製物の約２−４wt./
wt.％である。

【００４３】 緩衝溶液は、次に、膜ミメティック両親媒性物質又はリン脂質を含む液体に、
激しく混合しながら加えられ、これによって、多重ラメラのリポソーム小胞が生
成する。

【００４４】 膜ミメティック両親媒性物質は、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸の薬学的に許容
される塩、ラウラアミドプロピルベタイン、ラウラミドモノイソパノールアミド
、ココアンホプロピオン酸ナトリウム、ビスヒドロキシプロピルジヒドロキシプ
ロピルステアロアンモニウムクロリド、ポリオキシエチレンジヒドロキシプロピ
ルステアロアンモニウムクロリド、ジオクタデシルジメチルアンモニウムクロリ
ド、スルホサクシネート、ステアロアミドＤＥＡ、ガンマリノール酸、ルリヂサ
油、マツヨイグサ油、モノオレイン、タウロジヒドロフシジン酸ナトリウム、フ
シジン酸、アルカリ金属イソステアリールラクチレート、アルカリ土類金属イソ
ステアリールラクチレート、トリ酢酸パンテニル、コカミドプロピルホスファチ
ジルＰＧ−ジアンモニウムクロリド、ステアロアミドプロピルホスファチジルＰ
Ｇ−ジアンモニウムクロリド、ボレージアミドプロピルホスファチジルＰＧ−ジ
アンモニウムクロリド、ボレージアミドプロピルホスファチジルコリン、ポリシ
ロキシピロリドンリノレイルホスホリピド、トリヒドロキシ−オキソ−コラニル
グリシン、トリヒドロキシ−オキソ−コラニルグリシンのアルカリ金属塩、オク
チルフェノキシポリトキシエタノール、ポリデカノールＸ−ラウリルエーテル(
但し、Ｘは９−２０)、ポリデカノールＸ−オレイルエーテル(但し、Ｘは９−２
０)、それらの組合せからなる群から選択される。Ｘは、９、１０又は２０が望
ましい。

【００４５】 リン脂質は、ホスホリピドＧＬＡ、ホスファチジルセリン、ホスファチジルエ
タノールアミン、イノシトールホスファチド、ジオレオイルホスファチジルエタ
ノールアミン、スフィンゴミエリン、セラミド、セファリン、トリオレイン、不
飽和レシチン、飽和レシチン及びライソレシチンからなる群から選択される。 各々の膜ミメティック両親媒性物質及びリン脂質は、調製物全体の１−１０wt
./wt.％の濃度で存在する。

【００４６】 ヒアルロン酸の望ましい塩は、アルカリ金属のヒアルロン酸塩、アルカリ土類
ヒアルロン酸塩及びアルミニウムのヒアルロン酸塩である。望ましい塩は、ヒア
ルロン酸ナトリウムである。ヒアルロン酸又はヒアルロン酸の薬学的に許容され
る塩の望ましい濃度は、調製物全体の１−５wt./wt.％である。なお、より望ま
しい濃度は、調製物全体の１.５−３.５wt./wt.％である。

【００４７】 当該分野の専門家であれば、多くの薬学的組成物について、薬学的活性成分の
分解と酸化を防止するために、少なくとも一種の酸化防止剤を加えてもよいこと
は理解されるであろう。当該分野の専門家であれば、着色剤、着香剤、及びその
他の化合物でも治療的作用をもたらさない量であれば、調製物の中に含まれても
よいことは理解されるであろう。代表的な着香剤として、メントール、ソルビト
ール、果実香料を挙げることができる。

【００４８】 酸化防止剤は、トコフェロール、デターオキシムメシレート(deteroxime mesy
late)、メチルパラベン、エチルパラベン、アスコルビン酸及びその混合物から
なる群から選択することができる。望ましい酸化防止剤はトコフェロールである
。 望ましい実施例において、蛋白質分解酵素の作用による薬剤の分解を抑えるた
め、少なくとも一種のプロテアーゼ阻害剤が調製物に加えられる。公知のプロテ
アーゼ抑制剤の場合、調製物の１−３wt./wr.％の濃度が最も効果的である。

【００４９】 有効なプロテアーゼ阻害剤の例として、バシトラシン、大豆トリプシン、アプ
ロチニン、及び例えばバシトラシンメチレンジサリシレートなどのバシトラシン
誘導体を挙げることができるが、これらに限定されるものではない。これらの中
でバシトラシンが、濃度１.５−２wt./wt.％で用いられるときに、最も有効であ
る。大豆トリプシンとアプロチニンは、調製物の約１−２wt./wt.％濃度で使用
される。

【００５０】 インスリンを含有するその他組成物については、組成物は、胃腸管のチャネル
を開く作用を有する少なくとも一種の無機塩を含んでもよく、インスリンを放出
するために追加の刺激を与えることもできる。無機塩の例として、ナトリウム塩
、カリウム塩、カルシウム塩及び亜鉛塩などを挙げることができ、特に、塩化ナ
トリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、塩化亜鉛及び炭酸水素ナトリウムな
どを挙げることができるが、これらに限定されるものではない。

【００５１】 一般的に、多重ラメラのリポソーム小胞の粒子サイズは、約１−１０ｎｍであ
り、１−５ｎｍが望ましい。このようなサイズ分布により、調製物つまり薬剤は
、例えば口腔又は鼻腔内の膜を通じて、効果的な吸収が確実に行われる。

【００５２】 必須成分の具体的な濃度は、比較的簡単な実験によって決定できる。鼻腔又は
口腔を通じて吸収させる場合、消化管を通じて投与するのに通常必要とされる服
用量の例えば２倍又は３倍に増やすのが望ましいことがある。

【００５３】 調製物の各成分の量は、薬剤の種類及び適用部位に応じて異なることは理解さ
れるであろう。 経口投与の場合、ナトリウムＣ８−Ｃ２２アルキルサルフェート及びエデト酸
ナトリウムは、それだけでは不十分であるので、巨大分子の経口吸収を促進して
治療効果を得るために、少なくとも１種の膜ミメティック両親媒性物質と少なく
とも１種のリン脂質と組み合わせる必要がある。

【００５４】 経口調製物は、適当な噴射剤と混合され、適当なアプリケータで送達される。 口又は鼻に適用される調製物として、ラウリル硫酸ナトリウムに加えて、次の
(i)乃至(ix)のいづれかの組合せを含むものが望ましい： (i) トリヒドロキシ−オキソ−コラニルグリシンのナトリウム塩、スフィン
ゴミエリン及びステアロアミドＤＥＡ； (ii) トリヒドロキシ−オキソ−コラニルグリシンのナトリウム塩及びホスホ
リピドＧＬＡ； (iii) ホスホリピドＧＬＡ、ポリデカノール９−ラウリルエーテル及びオク
チルフェノキシエトキシエタノール； (iv) セラミド及びステアロアミドプロピルホスファチジルＰＧ−ジアンモニ
ウムクロリド； (v) ボレージアミドプロピルホスファチジルＰＧ−ジアンモニウムクロリド
及びレシチン； (vi) オクチルフェノキシポリエトキシエタノール及び飽和レシチン； (vii) レシチン、マツヨイグサ油及びトリヒドロキシ−オキソ−コラニルグ
リシン； (viii) ヒアルロン酸ナトリウム、トリヒドロキシ−オキソ−コラニルグリシ
ン、レシチン及びマツヨイグサ油； 及び (ix) 飽和レシチン、ヒアルロン酸ナトリウム及びマツヨイグサ油。

【００５５】 経皮用として望ましい組成物は、ラウリル硫酸ナトリウム及びエデト酸ナトリ
ウムに加えて、次の(i)又は(ii)の吸収増進化合物の組合せを含むこともできる
： (i) ヒアルロン酸ナトリウム、飽和レシチン、グリコール酸及びプロピレン
グリコール； (ii) ヒアルロン酸ナトリウム、スフィンゴミエリン、グリコール酸及びプロ
ピレングリコール。

【００５６】 局所的適用の場合、皮膚の吸収効果は、グリコール酸・乳酸プロピレングリコ
ールとリポソームとの組合せによって促進することができる。 本発明の治療用組成物は、室温又は低温で保存することができる。蛋白質性薬
物の保存は、薬物の劣化を防止し、貯蔵寿命を延ばすために、例えば４℃の低温
で保存することが望ましい。

【００５７】 前述したように、一般的に、口、肺、皮膚及び鼻は、投与に最適な部位である
が、組成物は、直腸又は膣の粘膜に施すこともできる。薬理学的に活性なペプチ
ド又は蛋白質が使用される場合、投与形態や投与部位に応じて、具体的な投与方
法を選択することができる。

【００５８】 この発明の組成物は、一般的には、その調製方法と、膜ミメティック両親媒性
物質及びリン脂質の特性に適した組合せとにより、超微細な多重ラメラのリポソ
ーム小胞粒子(１−１０ｎｍ以下)として調製される。

【００５９】 調製物の投与は、当該分野で一般的に知られた方法によって行われる。口や鼻
に適用する場合、スプレーが望ましい。その他の方法として、ドロップ、チュー
イングタブレット、チューイングガム、座剤、ローションや軟膏の使用が挙げら
れる。鼻腔又は口腔から効果的に吸入するために、粒子サイズをさらに小さくす
るために、アトマイザー又はエアゾールスプレー装置(計量付きインヘラー又は
ネブライザー)を用いることができる。これにより、薬物は、特定の部位に、特
に肺までうまく到達して、吸収される。

【００６０】 また、薬物送達システムを利用し、ゼラチンカプセルにエンテリックコーティ
ングを施すことにより、ミセルが十二指腸又は大腸の近傍でのみ放出され、胃の
中で放出されないようにすることもできる。

【００６１】 前述したように、経口投与又は肺投与が望ましい。薬剤は計量付きディスペン
サーを用いて投与されることが望ましく、薬剤調製物は噴射剤と共に送達される
。

【００６２】 フェノール及び／又はメチルクレゾール(例えばｍ−クレゾール)は、調製物を
安定化させ、バクテリアの増殖から保護するために加えられる。グリセリンのよ
うな等張剤を加えてもよい。調製物は、次に、エアロゾルディスペンサーに入れ
られ、ディスペンサーには噴射剤が充填される。噴射剤は、圧力下にあり、ディ
スペンサー内で液体状である。本発明では、本発明の組成物がディスペンサーの
中にあるとき、水性相は、噴射剤の相と分離していてもよい。しかしながら、成
分の割合は、水成相と噴射剤の相が一つの相になるように、簡単な実験によって
調節されるのが望ましい。２相である場合、内容物の一部を例えば定量弁を介し
て分配する前に、ディスペンサーを振る必要がある。所定量に分配された薬剤は
、定量弁から微細なスプレー状態で噴射される。

【００６３】 望ましい噴射剤は、水素含有クロロフルオロカーボン、水素含有フルオロカー
ボン、ジメチルエーテル及びジエチルエーテルである。さらに望ましい噴射剤は
、ヒドロフルオロアルカン(ＨＦＡ)１３４ａ(１,１,１,２テトラフルオロエタン
)である。

【００６４】 計量付きディスペンサーを用いることによる具体的な利点は、調製物をかなり
正確な投与量で供給できることであり、例えば、１ユニットのインスリン投与範
囲内で、注入物の滴定が可能である。調製物の液滴サイズについては、液滴が頬
粘膜に浸透できるように、また深肺部の表面にまで到達できるようにするために
、１〜５μｍであることが望ましい。したがって、本発明は、糖尿病治療用のイ
ンスリンのような蛋白質性薬剤の送達に適している。

【００６５】 加圧式ディスペンサーは、投与される範囲が広く、所定の投薬効率をもたらす
。この送達方式では、投与量の９５％以上が目的領域に達する。加圧式インヘラ
ーを用いると小さな粒子サイズ(１〜５μｍ)が得られるので、肺腔内部に行き渡
る範囲が広く、投薬効果は高められる。このように、インスリンのような薬剤が
行き渡る範囲が広いと、薬剤はより多く吸収されることができる。さらに、これ
らの器具自体は自己収納式であるので、潜在汚染は回避される。

【００６６】 必須成分の具体的な濃度は、比較的簡単な実験によって決めることができる。
スプレーされる時、組成物が微細な霧状ではなく泡状とならないようにするため
に、特定の成分の量を限定する必要があることは理解されるであろう。口腔を通
じて吸収させる場合、注射による投与又は消化管経由の投与に通常必要とされる
投与量の２倍又は３倍に増やすのが望ましいことがある。

【００６７】 調製物の各成分の量は、薬剤の種類及び適用部位に応じて異なることは理解さ
れるであろう。 調製物の口腔への投与は、調製物を口の中にスプレーすることにより、吸入な
しで行われるので、液滴は、肺の中へ引き込まれることなく、口の中に残る。 次に実施例を挙げて、本発明を説明する。

【００６８】実験１ ０.３Ｍ塩酸１５０ｍＬの中に２６０００ユニット(１０００ｍｇ)のインスリ
ン結晶を懸濁し、結晶が完全に溶解するまで溶液を攪拌した。ｐＨは、０.３Ｍ
水酸化ナトリウムで中和することにより７.０に調整した。最終的な量は、２６
０ｍＬに調整し、１００ユニット／ｍＬのインスリンを得た。 インスリン溶液１０ｍＬに、ラウリル硫酸ナトリウム５０ｍｇを添加し、これ
を完全に溶かした。水５０ｍＬの中に、トリヒドロキシ−オキソ−コラニルグリ
シン５０ｍｇ及びポリデカノール２０−オレイルエーテル５０ｍｇを添加して溶
解し、次にインスリン溶液と混合した。この混合物を加圧下でホスホリピドＧＬ
Ａの１重量％溶液にスプレー投与し、混合ミセルを生成した。この工程により、
５０ユニット／ｍＬの混合された両親媒性インスリン溶液を得た。

【００６９】 混合両親媒性インスリンの構造を光学顕微鏡で検査し、粒子サイズをレーザー
光散乱によって分析した。平均粒子サイズは、約２−１０ｎｍと推定された。

【００７０】 試験は、インスリンの注射を１日３回行なっている糖尿病患者１０人の被験者
について行なわれた。被験者には、インスリンを経口投与した。被験者は、試験
前の夜１２時から絶食し、４時間の検査の間、食事を摂らなかった。

【００７１】 各被験者には、１０ユニットのインスリンを投与した。第１の試験では、計量
付きスプレーを用いてインスリンを経口投与した。第２の試験では、インスリン
を注射により投与した。Ｂａｙｅｒ社のグルコメータエリート(Glucometer Elit
e)を用いて、１５−３０分毎に、血糖値(ｍｍｏｌ／Ｌ)をモニターした。 試験結果について、１０人の被験者の平均値を表１に示す。

【００７２】

【表１】

【００７３】 この結果より、本発明の範囲内にあるインスリン調製物を経口投与した効果は
、同じ投与量では、注射によるインスリンと同等であることがわかる。

【００７４】実験２ 実験１で調製したインスリン溶液１０ｍＬに、ラウリル硫酸ナトリウム５０ｍ
ｇを添加し、これを完全に溶解した。水５０ｍＬの中に、ラウラミドプロピルベ
タイン５０ｍｇとポリデカノール９−ラウリルエーテル５０ｍｇを添加し、溶解
した後、次にインスリン溶液と混合した。この混合物を、加圧下で、ホスホリポ
ン−Ｈ(登録商標)飽和レシチンの１重量％溶液の中へスプレー投与し、混合ミセ
ルを生成した。この工程により、５０ユニット／ｍＬの多重ラメラの混合両親媒
性インスリン溶液を得た。

【００７５】 多重ラメラの混合両親媒性インスリンの構造を光学顕微鏡で検査し、粒子サイ
ズはレーザー光散乱によって分析した。平均粒子サイズは、約２−１０ｎｍと推
定された。

【００７６】 試験は、健康な被験者１０人について行なわれた。被験者へのインスリンの投
与は、経口と注射により行なった。被験者は、試験前の夜１２時から絶食し、４
時間の検査の間、食事を摂らなかった。

【００７７】 各被験者には、１０ユニットのインスリンを投与した。第１の試験では、計量
付きスプレーを用いてインスリンを経口投与した。第２の試験では、インスリン
を注射により投与した。Ｂａｙｅｒ社のグルコメータエリートを用いて、３０分
毎に、血糖値(ｍｍｏｌ／Ｌ)をモニターした。 試験結果について、１０人の被験者の平均値を表２に示す。

【００７８】

【表２】

【００７９】 この結果より、本発明の範囲内にあるインスリン調製物を経口投与した効果は
、同じ投与量では、注射によるインスリンと同等であることがわかる。

【００８０】実験３ 実験１で調製したインスリン溶液１０ｍＬに、ラウリル硫酸ナトリウム５０ｍ
ｇを添加し、これを完全に溶解した。この混合物を、加圧下で、ホスホリポン−
Ｈ(登録商標)飽和レシチンの１重量％溶液の中へスプレー投与し、混合ミセルを
生成した。この工程により、５０ユニット／ｍＬの多重ラメラの混合両親媒性イ
ンスリン溶液を得た。

【００８１】 この組成物は本発明の範囲外である。この組成物を、実験２と同じように、健
康な被験者１０人について試験を行ない、注射によるインスリン投与の場合と比
較した。 試験結果について、１０人の被験者の平均値を表３に示す。

【００８２】

【表３】

【００８３】 この結果より、本発明の範囲外であるインスリン調製物を経口投与したものは
、同じ投与量では、殆ど効果がないことがわかる。これは、おそらく、インスリ
ンが吸収されずに急速に分解したためと思われる。

【００８４】実験４ 実験１で調製したインスリン溶液１０ｍＬに、ラウリル硫酸ナトリウム１００
ｍｇを添加し、これを完全に溶解した。 この組成物は本発明の範囲外である。この組成物を、実験２と同じように、健
康な被験者１０人について試験を行ない、注射によるインスリン投与の場合と比
較した。 試験結果について、１０人の被験者の平均値を表４に示す。

【００８５】

【表４】

【００８６】 この結果より、本発明の範囲外であるインスリン調製物を経口投与したものは
、同じ投与量では、殆ど効果がないことがわかる。

【００８７】実験５ 実験１で調製したインスリン溶液１０ｍＬを、ホスホリポン−Ｈ飽和レシチン
の１重量％溶液に添加した。 この組成物は本発明の範囲外である。この組成物を、実験２と同じように、健
康な被験者１０人について試験を行ない、注射によるインスリン投与の場合と比
較した。 試験結果について、１０人の被験者の平均値を表５に示す。

【００８８】

【表５】

【００８９】 この結果より、本発明の範囲外であるインスリン調製物を経口投与したものは
、同じ投与量では、殆ど効果がないことがわかる。

【００９０】実験６ 実験１で調製したインスリン溶液１０ｍＬに、ラウリル硫酸ナトリウム５０ｍ
ｇを添加し、これを完全に溶解した。水５０ｍＬの中に、トリヒドロキシ−オキ
ソ−コラニルグリシン５０ｍｇとステアロアミドＤＥＡ５０ｍｇを添加し、溶解
した後、次にインスリン溶液と混合した。この混合物を、加圧下で、スフィンゴ
ミエリンの１重量％溶液の中にスプレー投与し、混合ミセルを生成した。この工
程により、５０ユニット／ｍＬの混合両親媒性インスリン溶液を得た。

【００９１】 混合両親媒性インスリンの構造を光学顕微鏡で検査し、粒子サイズはレーザー
光散乱によって分析した。 この組成物は、本発明の範囲内である。この組成物を、実験１と同じように、
糖尿病患者１０人の被験者について試験を行ない、注射によるインスリン投与の
場合と比較した。 試験結果について、１０人の被験者の平均値を表６に示す。

【００９２】

【表６】 この試験によれば、本発明の範囲内のインスリン調製物を経口投与したもの
は、同じ投与量のとき、注射によるインスリンと同等であることがわかる。

【００９３】実験７ 実験１で調製したインスリン溶液１０ｍＬに、ラウリル硫酸ナトリウム１００
ｍｇを添加し、これを完全に溶解した。水５０ｍＬの中に、１００ｍｇのヒアル
ロン酸ナトリウム、０.５ｍＬのグリコール酸及び０.５ｍＬのプロピレングリコ
ールを添加し、溶解した後、次にインスリン溶液と混合した。この混合物を、加
圧下で、ホスホリポン−Ｈ(登録商標)飽和レシチンの１重量％溶液の中にスプレ
ー投与し、混合ミセルを生成した。

【００９４】 試験は、健康な被験者１０人について行なわれた。被験者へのインスリンの投
与は、局所的投与と注射により行なった。被験者は、試験前の夜１２時から絶食
し、４時間の検査の間、食事を摂らなかった。

【００９５】 各被験者には、１０ユニットのインスリンを投与した。第１の試験では、イン
スリンを手の甲の２ｃｍ²の局所的領域に適用した。第２の試験は、インスリン
を注射により投与した。Ｂａｙｅｒ社のグルコメータエリートを用いて、３０分
毎に、血糖値(ｍｍｏｌ／Ｌ)をモニターした。 試験結果について、１０人の被験者の平均値を表７に示す。

【００９６】

【表７】

【００９７】 この試験によれば、本発明の範囲内のインスリン調製物を局所的適用したもの
は、同じ投与量のとき、注射によるインスリンと同等であることがわかる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｋ 47/20 Ａ６１Ｋ 47/20 47/24 47/24 47/36 47/36 47/44 47/44 (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ，ＺＷ )，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ， ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＧ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ， ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，Ｃ Ｎ，ＣＲ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ，ＤＺ，ＥＥ ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ， ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，Ｋ Ｐ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ ，ＬＶ，ＭＡ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ， ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，Ｓ Ｇ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ

Claims (34)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 多重ラメラ小胞を有する混合リポソーム薬剤調製物であって
   、該調製物は、蛋白質性薬剤、水、濃度が調製物全体の１−１０wt./wt.％であ
   るアルカリ金属Ｃ８−Ｃ２２アルキルサルフェート、少なくとも一種の膜ミメテ
   ィック両親媒性物質及び、及び少なくとも一種のリン脂質を含んでおり、 膜ミメティック両親媒性物質は、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸の薬学的に許容
   される塩、ラウラアミドプロピルベタイン、ラウラミドモノイソパノールアミド
   、ココアンホプロピオン酸ナトリウム、ビスヒドロキシプロピルジヒドロキシプ
   ロピルステアロアンモニウムクロリド、ポリオキシエチレンジヒドロキシプロピ
   ルステアロアンモニウムクロリド、ジオクタデシルジメチルアンモニウムクロリ
   ド、スルホサクシネート、ステアロアミドＤＥＡ、ガンマリノール酸、ルリヂサ
   油、マツヨイグサ油、モノオレイン、タウロジヒドロフシジン酸ナトリウム、フ
   シジン酸、アルカリ金属イソステアリールラクチレート、アルカリ土類金属イソ
   ステアリールラクチレート、トリ酢酸パンテニル、コカミドプロピルホスファチ
   ジルＰＧ−ジアンモニウムクロリド、ステアロアミドプロピルホスファチジルＰ
   Ｇ−ジアンモニウムクロリド、ボレージアミドプロピルホスファチジルＰＧ−ジ
   アンモニウムクロリド、ボレージアミドプロピルホスファチジルコリン、ポリシ
   ロキシピロリドンリノレイルホスホリピド、トリヒドロキシ−オキソ−コラニル
   グリシン、トリヒドロキシ−オキソ−コラニルグリシンのアルカリ金属塩、オク
   チルフェノキシポリトキシエタノール、ポリデカノールＸ−ラウリルエーテル(
   但し、Ｘは９−２０)、ポリデカノールＸ−オレイルエーテル(但し、Ｘは９−２
   ０)、及びそれらの組合せからなる群から選択され、 リン脂質は、ホスホリピドＧＬＡ、ホスファチジルセリン、ホスファチジルエ
   タノールアミン、イノシトールホスファチド、ジオレオイルホスファチジルエタ
   ノールアミン、スフィンゴミエリン、セラミド、セファリン、トリオレイン、レ
   シチン、飽和レシチン及びライソレシチン、及びそれらの組合せからなる群から
   選択され、 各々の膜ミメティック両親媒性物質及びリン脂質は、調製物全体の１−１０wt
   ./wt.％の濃度で存在し、膜ミメティック両親媒性物質及びリン脂質の合計濃度
   は、調製物の５０wt./wt.％より少ない、混合リポソーム薬剤調製物。
2. 【請求項２】 アルカリ金属Ｃ８−Ｃ２２アルキルサルフェートはラウリル
   硫酸ナトリウムである請求項１に記載の調製物。
3. 【請求項３】 膜ミメティック両親媒性物質は二種以上存在する請求項１に
   記載の調製物。
4. 【請求項４】 膜ミメティック両親媒性物質は、ヒアルロン酸、ヒアルロン
   酸の薬学的に許容される塩及びその混合物からなる群から選択され、吸収促進化
   合物の濃度は約１−約５wt./wt.％である請求項１に記載の調製物。
5. 【請求項５】 ラウリル硫酸ナトリウムと、次の(i)乃至(xi)からなる群か
   ら選択される組合せを含んでいる請求項１に記載の調整物。 (i) トリヒドロキシ−オキソ−コラニルグリシンのナトリウム塩、スフィン
   ゴミエリン及びステアロアミドＤＥＡ； (ii) トリヒドロキシ−オキソ−コラニルグリシンのナトリウム塩及びホスホ
   リピドＧＬＡ； (iii) ホスホリピドＧＬＡ、ポリデカノール９−ラウリルエーテル及びオク
   チルフェノキシエトキシエタノール； (iv) セラミド及びステアロアミドプロピルホスファチジルＰＧ−ジアンモニ
   ウムクロリド； (v) ボレージアミドプロピルホスファチジルＰＧ−ジアンモニウムクロリド
   及びレシチン； (vi) オクチルフェノキシポリエトキシエタノール及び飽和レシチン； (vii) レシチン、マツヨイグサ油及びトリヒドロキシ−オキソ−コラニルグ
   リシン； (viii) ヒアルロン酸ナトリウム、トリヒドロキシ−オキソ−コラニルグリシ
   ン、レシチン及びマツヨイグサ油； (ix) ヒアルロン酸ナトリウム、飽和レシチン及びマツヨイグサ油； (x) ヒアルロン酸ナトリウム及び飽和レシチン；及び (xi) ヒアルロン酸ナトリウム及びスフィンゴミエリン。
6. 【請求項６】 薬剤は、インスリン、ヘパリン、低分子量ヘパリン、低分子
   量ヘパリン、ヒルゲン、ヒルロス、ヒルジン、インターフェロン、インターロイ
   キン、サイトカイン、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、化学療法剤、
   ワクチン、糖蛋白、ホルモン、細菌性トキソイド、成長ホルモン、カルシトニン
   、インスリン様成長因子(ＩＧＦ)、グルカゴン様ペプチド(ＧＬＰ−１又はＧＬ
   Ｐ−２)、ステロイド、レチノイド、注入可能な大分子抗生物質、蛋白質基の血
   栓溶解化合物、血小板阻害剤、ＤＮＡ、遺伝子治療剤、ＲＮＡ及びアンチセンス
   オリゴヌクレオチドからなる群から選択される請求項１に記載の調製物。
7. 【請求項７】 薬剤組成物を作る方法であって、高速剪断ミキサーの中で、
   蛋白質性薬剤、水、濃度が調製物全体の１−１０wt./wt.％であるアルカリ金属
   Ｃ８−Ｃ２２アルキルサルフェート、少なくとも一種の膜ミメティック両親媒性
   物質及び少なくとも一種のリン脂質を混合することを含んでおり、 膜ミメティック両親媒性物質は、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸の薬学的に許容
   される塩、ラウラアミドプロピルベタイン、ラウラミドモノイソパノールアミド
   、ココアンホプロピオン酸ナトリウム、ビスヒドロキシプロピルジヒドロキシプ
   ロピルステアロアンモニウムクロリド、ポリオキシエチレンジヒドロキシプロピ
   ルステアロアンモニウムクロリド、ジオクタデシルジメチルアンモニウムクロリ
   ド、スルホサクシネート、ステアロアミドＤＥＡ、ガンマリノール酸、ルリヂサ
   油、マツヨイグサ油、モノオレイン、タウロジヒドロフシジン酸ナトリウム、フ
   シジン酸、アルカリ金属イソステアリールラクチレート、アルカリ土類金属イソ
   ステアリールラクチレート、トリ酢酸パンテニル、コカミドプロピルホスファチ
   ジルＰＧ−ジアンモニウムクロリド、ステアロアミドプロピルホスファチジルＰ
   Ｇ−ジアンモニウムクロリド、ボレージアミドプロピルホスファチジルＰＧ−ジ
   アンモニウムクロリド、ボレージアミドプロピルホスファチジルコリン、ポリシ
   ロキシピロリドンリノレイルホスホリピド、トリヒドロキシ−オキソ−コラニル
   グリシン、トリヒドロキシ−オキソ−コラニルグリシンのアルカリ金属塩、オク
   チルフェノキシポリトキシエタノール、ポリデカノールＸ−ラウリルエーテル(
   但し、Ｘは９−２０)、及びポリデカノールＸ−オレイルエーテル(但し、Ｘは９
   −２０)からなる群から選択され、 リン脂質は、ホスホリピドＧＬＡ、ホスファチジルセリン、ホスファチジルエ
   タノールアミン、イノシトールホスファチド、ジオレオイルホスファチジルエタ
   ノールアミン、スフィンゴミエリン、セラミド、セファリン、トリオレイン、レ
   シチン、飽和レシチン及びライソレシチンからなる群から選択され、 各々の膜ミメティック両親媒性物質及びリン脂質は、調製物全体の１−１０wt
   ./wt.％の濃度で存在し、膜ミメティック両親媒性物質及びリン脂質の合計濃度
   は、調製物の５０wt./wt.％よりも少なく、 混合は、組成物が多重ラメラ小胞の形態になるまで続けられる薬剤組成物の調
   製方法。
8. 【請求項８】 膜ミメティック両親媒性物質は、ヒアルロン酸、ヒアルロン
   酸の薬学的に許容される塩及びその混合物からなる群から選択され、吸収促進化
   合物の濃度は約１−約５wt./wt.％である請求項７に記載の方法。
9. 【請求項９】 アルカリ金属Ｃ８−Ｃ２２アルキルサルフェートは、ラウリ
   ル硫酸ナトリウムである請求項７に記載の方法。
10. 【請求項１０】 リン脂質と両親媒性物質は、 (i) トリヒドロキシ−オキソ−コラニルグリシンのナトリウム塩、スフィン
    ゴミエリン及びステアロアミドＤＥＡ； (ii) トリヒドロキシ−オキソ−コラニルグリシンのナトリウム塩及びホスホ
    リピドＧＬＡ； (iii) ホスホリピドＧＬＡ、ポリデカノール９−ラウリルエーテル及びオク
    チルフェノキシエトキシエタノール； (iv) セラミド及びステアロアミドプロピルホスファチジルＰＧ−ジアンモニ
    ウムクロリド； (v) ボレージアミドプロピルホスファチジルＰＧ−ジアンモニウムクロリド
    及びレシチン； (vi) オクチルフェノキシポリトキシエタノール及び飽和レシチン； (vii) レシチン、マツヨイグサ油及びトリヒドロキシ−オキソ−コラニルグ
    リシン； (viii) ヒアルロン酸ナトリウム、トリヒドロキシ−オキソ−コラニルグリシ
    ン、レシチン及びマツヨイグサ油； (ix) 飽和レシチン、ヒアルロン酸ナトリウム及びマツヨイグサ油； (x) 飽和レシチン及びヒアルロン酸ナトリウム； 及び (xi) ヒアルロン酸ナトリウム及びスフィンゴミエリン からなる群から選択される組合せを含んでいる請求項７に記載の方法。
11. 【請求項１１】 蛋白質性薬剤は、インスリン、ヘパリン、いわゆる低分子
    量ヘパリン、低分子量ヘパリン、ヒルゲン、ヒルロス、ヒルジン、インターフェ
    ロン、インターロイキン、サイトカイン、モノクローナル抗体、ポリクローナル
    抗体、化学療法剤、ワクチン、糖蛋白、細菌性トキソイド、ホルモン、カルシト
    ニン、インスリン様成長因子(ＩＧＦ)、グルカゴン様ペプチド(ＧＬＰ−１又は
    ＧＬＰ−２)、大分子抗生物質、蛋白質基の血栓溶解化合物、血小板阻害剤、Ｄ
    ＮＡ、ＲＮＡ、遺伝子治療剤及びアンチセンスオリゴヌクレオチドからなる群か
    ら選択される請求項７に記載の方法。
12. 【請求項１２】 混合方法は、高速乱流混合方法又は高速剪断混合方法であ
    る請求項７に記載の方法。
13. 【請求項１３】 (i)液状のリン脂質を、膜ミメティック両親媒性物質の水
    相の中へ、少なくとも１つのノズルを通じて高速で注入すること、(ii)液状の膜
    ミメティック両親媒性物質を、リン脂質の水相の中へ、少なくとも１つのノズル
    を通じて高速で注入すること、(iii)液状のリン脂質と液状の両親媒性物質を、
    夫々、少なくとも１つのノズルを通じて、混合チャンバーへ高速で注入すること
    、からなる群から選択され、 アルカリ金属Ｃ８−Ｃ２２アルキルサルフェートは、リン脂質又は膜ミメティ
    ック両親媒性物質のどちらか一方と共に存在する請求項１２に記載の方法。
14. 【請求項１４】 リン脂質及び両親媒性物質の液体は、直径０.５−１.０ｍ
    ｍのノズル孔を、０−１５ｍ／ｓの速度で通過する請求項１３に記載の方法。
15. 【請求項１５】 膜ミメティック両親媒性物質水溶液対リン脂質溶液の比は
    、約５対１乃至約２０対１である請求項１２に記載の方法。
16. 【請求項１６】 膜ミメティック両親媒性物質水溶液対リン脂質溶液の比は
    、約５対１乃至約２０対１である、請求項１３に記載の方法。
17. 【請求項１７】 加圧下で液体の噴射剤と中間調製物が入れられた圧力容器
    であって、中間調製物は、 i) 蛋白質性薬剤と、 ii) 水と、 iii) 濃度が調製物全体の１−１０wt./wt.％であるアルカリ金属Ｃ８−Ｃ２２
    アルキルサルフェートと、 iv) ヒアルロン酸、ヒアルロン酸の薬学的に許容される塩、ラウラアミドプロ
    ピルベタイン、ラウラミドモノイソパノールアミド、ココアンホプロピオン酸ナ
    トリウム、ビスヒドロキシプロピルジヒドロキシプロピルステアロアンモニウム
    クロリド、ポリオキシエチレンジヒドロキシプロピルステアロアンモニウムクロ
    リド、ジオクタデシルジメチルアンモニウムクロリド、スルホサクシネート、ス
    テアロアミドＤＥＡ、ガンマリノール酸、ルリヂサ油、マツヨイグサ油、モノオ
    レイン、タウロジヒドロフシジン酸ナトリウム、フシジン酸、アルカリ金属イソ
    ステアリールラクチレート、アルカリ土類金属イソステアリールラクチレート、
    トリ酢酸パンテニル、コカミドプロピルホスファチジルＰＧ−ジアンモニウムク
    ロリド、ステアロアミドプロピルホスファチジルＰＧ−ジアンモニウムクロリド
    、ボレージアミドプロピルホスファチジルＰＧ−ジアンモニウムクロリド、ボレ
    ージアミドプロピルホスファチジルコリン、ポリシロキシピロリドンリノレイル
    ホスホリピド、トリヒドロキシ−オキソ−コラニルグリシン、トリヒドロキシ−
    オキソ−コラニルグリシンのアルカリ金属塩、オクチルフェノキシポリトキシエ
    タノール、ポリデカノールＸ−ラウリルエーテル(但し、Ｘは９−２０)、ポリデ
    カノールＸ−オレイルエーテル(但し、Ｘは９−２０)、及びそれらの組合せから
    なる群から選択される少なくとも一種の膜ミメティック両親媒性物質と、 ホスホリピドＧＬＡ、ホスファチジルセリン、ホスファチジルエタノールアミ
    ン、イノシトールホスファチド、ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン
    、スフィンゴミエリン、セラミド、セファリン、トリオレイン、不飽和レシチン
    、飽和レシチン、ライソレシチン、及びそれらの組合せからなる群から選択され
    る少なくとも一種のリン脂質と(但し、各々の膜ミメティック両親媒性物質とリ
    ン脂質は、調製物全体の１−１０wt./wt.％の濃度で存在し、膜ミメティック両
    親媒性物質及びリン脂質の合計濃度は、調製物の５０wt./wt.％より少ない)、 v) フェノール及びメチルフェノールからなる群から選択され、濃度が調製物全
    体の１−１０wt./wt.％であるフェノール化合物と、 を含んでいる、圧力容器。
18. 【請求項１８】 噴射剤は、Ｃ１−Ｃ２ジアルキルエーテル、ブタン、フル
    オロカーボン噴射剤、水素含有フルオロカーボン噴射剤、クロロフルオロカーボ
    ン噴射剤、水素含有クロロフルオロカーボン噴射剤及びその混合物からなる群か
    ら選択される請求項１７の容器。
19. 【請求項１９】 中間調製物は、グリセリン、ポリグリセリン及びその混合
    物からなる群から選択され、中間調製物全体の１−４０wt./wt.％の量の化合物
    を含んでいる請求項１８の容器。
20. 【請求項２０】 中間調製物と噴射剤の重量比は、５：９５乃至２５：７５
    である請求項１８の容器。
21. 【請求項２１】 アルカリ金属Ｃ８−Ｃ２２アルキルサルフェートはラウリ
    ル硫酸ナトリウムである請求項１８の容器。
22. 【請求項２２】 噴射剤は、テトラフルオロエタン、テトラフルオロプロパ
    ン、ジメチルフルオロプロパン、ヘプタフルオロプロパン、ジメチルエーテル、
    ｎ−ブタン及びイソブタンからなる群から選択される請求項１８の容器。
23. 【請求項２３】 蛋白質性薬剤は、インスリン、ヘパリン、いわゆる低分子
    量ヘパリン、低分子量ヘパリン、ヒルゲン、ヒルロス、ヒルジン、インターフェ
    ロン、インターロイキン、サイトカイン、モノクローナル抗体、ポリクローナル
    抗体、化学治療剤、ワクチン、糖蛋白、細菌性トキソイド、ホルモン、カルシト
    ニン、インスリン様成長因子(ＩＧＦ)、グルガゴン様ペプチド(ＧＬＰ−１又は
    ＧＬＰ−２)、大分子抗生物質、蛋白質基の血栓溶解化合物、血小板阻害剤、Ｄ
    ＮＡ、ＲＮＡ、遺伝子治療剤、及びアンチセンスオリゴヌクレオチドから選択さ
    れる請求項１７の容器。
24. 【請求項２４】 蛋白質性薬剤はインスリンである請求項１７の容器。
25. 【請求項２５】 容器は計量付きエアロゾルディスペンサーである請求項１
    ７の容器。
26. 【請求項２６】 噴射剤と中間調製物の所定量の混合物をスプレーすること
    により、本発明のエアロゾル薬学的組成物を投与する方法であって、 中間調製物は、 i) 蛋白質性薬剤と、 ii) 水と、 iii) 濃度が調製物全体の１−１０wt./wt.％であるアルカリ金属Ｃ８−Ｃ２２
    アルキルサルフェートと、 iv) ヒアルロン酸、ヒアルロン酸の薬学的に許容される塩、ラウラアミドプロ
    ピルベタイン、ラウラミドモノイソパノールアミド、ココアンホプロピオン酸ナ
    トリウム、ビスヒドロキシプロピルジヒドロキシプロピルステアロアンモニウム
    クロリド、ポリオキシエチレンジヒドロキシプロピルステアロアンモニウムクロ
    リド、ジオクタデシルジメチルアンモニウムクロリド、スルホサクシネート、ス
    テアロアミドＤＥＡ、ガンマリノール酸、ルリヂサ油、マツヨイグサ油、モノオ
    レイン、タウロジヒドロフシジン酸ナトリウム、フシジン酸、アルカリ金属イソ
    ステアリールラクチレート、アルカリ土類金属イソステアリールラクチレート、
    トリ酢酸パンテニル、コカミドプロピルホスファチジルＰＧ−ジアンモニウムク
    ロリド、ステアロアミドプロピルホスファチジルＰＧ−ジアンモニウムクロリド
    、ボレージアミドプロピルホスファチジルＰＧ−ジアンモニウムクロリド、ボレ
    ージアミドプロピルホスファチジルコリン、ポリシロキシピロリドンリノレイル
    ホスホリピド、トリヒドロキシ−オキソ−コラニルグリシン、トリヒドロキシ−
    オキソ−コラニルグリシンのアルカリ金属塩、オクチルフェノキシポリトキシエ
    タノール、ポリデカノールＸ−ラウリルエーテル(但し、Ｘは９−２０)、ポリデ
    カノールＸ−オレイルエーテル(但し、Ｘは９−２０)、及びそれらの組合せから
    なる群から選択される少なくとも一種の膜ミメティック両親媒性物質と、 ホスホリピドＧＬＡ、ホスファチジルセリン、ホスファチジルエタノールアミ
    ン、イノシトールホスファチド、ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン
    、スフィンゴミエリン、セラミド、セファリン、トリオレイン、不飽和レシチン
    、飽和レシチン、ライソレシチン、及びそれらの組合せからなる群から選択され
    る少なくとも一種のリン脂質と(但し、各々の膜ミメティック両親媒性物質とリ
    ン脂質は、調製物全体の１−１０wt./wt.％の濃度で存在し、膜ミメティック両
    親媒性物質及びリン脂質の合計濃度は、調製物の５０wt./wt.％より少ない)、 v) フェノール及びメチルフェノールからなる群から選択され、濃度が調製物全
    体の１−１０wt./wt.％であるフェノール化合物と、を含んでおり、 噴射剤は、Ｃ１−Ｃ２ジアルキルエーテル、ブタン、フルオロカーボン噴射剤
    、水素含有フルオロカーボン噴射剤、クロロフルオロカーボン噴射剤、水素含有
    クロロフルオロカーボン噴射剤及びその混合物からなる群から選択される、エア
    ロゾル薬学的組成物の投与方法。
27. 【請求項２７】 混合物は計量付きエアロゾルディスペンサーから投与され
    る請求項２６の方法。
28. 【請求項２８】 噴射剤は、Ｃ１−Ｃ２ジアルキルエーテル、ブタン、フル
    オロカーボン噴射剤、水素含有フルオロカーボン噴射剤、クロロフルオロカーボ
    ン噴射剤、水素含有クロロフルオロカーボン噴射剤及びその混合物からなる群か
    ら選択される請求項２７の方法。
29. 【請求項２９】 中間調製物は、グリセリン、ポリグリセリン及びその混合
    物からなる群から選択され、中間調製物全体の１−４０wt./wt.％の量の化合物
    を含んでいる請求項２８の方法。
30. 【請求項３０】 蛋白質性薬剤は、インスリン、ヘパリン、いわゆる低分子
    量ヘパリン、低分子量ヘパリン、ヒルゲン、ヒルロス、ヒルジン、インターフェ
    ロン、インターロイキン、サイトカイン、モノクローナル抗体、ポリクローナル
    抗体、化学治療剤、ワクチン、糖蛋白、細菌性トキソイド、ホルモン、カルシト
    ニン、インスリン様成長因子(ＩＧＦ)、グルガゴン様ペプチド(ＧＬＰ−１又は
    ＧＬＰ−２)、大分子抗生物質、蛋白質基の血栓溶解化合物、血小板阻害剤、Ｄ
    ＮＡ、ＲＮＡ、遺伝子治療剤、及びアンチセンスオリゴヌクレオチドから選択さ
    れる請求項２８の方法。
31. 【請求項３１】 蛋白質性薬剤はインスリンである請求項２８の方法。
32. 【請求項３２】 混合物は、ヒトの口腔内へ、吸入なしでスプレーされる請
    求項２８の方法。
33. 【請求項３３】 混合物は、ヒトの口腔内へ、吸入なしでスプレーされる請
    求項３０の方法。
34. 【請求項３４】 混合物は、ヒトの口腔内へ、吸入なしでスプレーされる請
    求項３１の方法。