TW202310868A - 用於治療眼睛疾病的生長因子組合物 - Google Patents

用於治療眼睛疾病的生長因子組合物 Download PDF

Info

Publication number
TW202310868A
TW202310868A TW111118098A TW111118098A TW202310868A TW 202310868 A TW202310868 A TW 202310868A TW 111118098 A TW111118098 A TW 111118098A TW 111118098 A TW111118098 A TW 111118098A TW 202310868 A TW202310868 A TW 202310868A
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
amino acid
seq
gly
acid sequence
leu
Prior art date
Application number
TW111118098A
Other languages
English (en)
Inventor
皮奧塔 布萊拉
蘇珊 Ｃ 奧爾
Ａ 克拉克 艾特沃
Original Assignee
美商克拉里斯生物醫療股份有限公司
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 美商克拉里斯生物醫療股份有限公司 filed Critical 美商克拉里斯生物醫療股份有限公司
Publication of TW202310868A publication Critical patent/TW202310868A/zh

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
    • A61K38/1825—Fibroblast growth factor [FGF]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
    • A61K38/1833—Hepatocyte growth factor; Scatter factor; Tumor cytotoxic factor II
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/12—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
    • A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
    • A61K47/183—Amino acids, e.g. glycine, EDTA or aspartame
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0048—Eye, e.g. artificial tears
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/08—Solutions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/475—Growth factors; Growth regulators
    • C07K14/4753—Hepatocyte growth factor; Scatter factor; Tumor cytotoxic factor II

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

本發明係關於包含生長因子之醫藥組合物及使用該生長因子及其組合物治療或預防眼睛疾病的方法。

Description

用於治療眼睛疾病的生長因子組合物
本發明係關於包含生長因子之醫藥組合物及使用該生長因子及其組合物治療或預防眼睛疾病的方法。
已研究肝細胞生長因子(HGF)用於治療結疤之角膜霧霾。參見美國專利第10,449,234號。已鑑別可受益於新治療之其他眼睛損傷及疾病。舉例而言，神經營養性角膜炎(亦稱為神經營養性角膜病變(NK)或神經麻痹性角膜炎)為由對三叉神經或其通向角膜之路徑的損傷或受損的眼表面引起之角膜疾病，從而導致角膜感覺隨之減少或喪失。NK由Magendie在1824年首次確認為角膜病症(Okada等人., 2010, Histol Histopathol, 25:771-780)及其分子基礎隨後由Sigelman及Friedenwald於1954年在動物模型中建立(Sigelman and Friedenwald, 1954, Arch Ophthalmol, 53:46-57)。角膜為眼睛之透明的「窗」，且與鞏膜一起形成眼球之外殼層。由於角膜缺乏血管供應，營養物及氧氣主要經由前部的淚液流體及角膜緣血管及後部的眼房液供應至此組織。角膜組織分級成五個層：上皮細胞、鮑曼氏膜(Bowman's membrane)、基質、德塞梅氏膜(Descemet's membrane)及內皮，其中上皮細胞充當保護下方角膜基質的主要障壁。角膜為體內最敏感組織，受跨越各種層及密集神經末梢之廣泛神經纖維網神經支配。角膜之感覺神經分佈起源於三叉神經之眼部分支，該眼部分支分泌對上皮細胞之存活至關重要的生長因子。三叉神經維持淚膜之穩定性且與上皮細胞所分泌之各種生理學活性物質(例如，細胞介素、蛋白酶及神經肽)一起進一步確保角膜上皮細胞及基質之活力。對三叉神經或上皮細胞之損傷最常由感染(例如，單純疱疹或帶狀疱疹感染)、眼睛手術(例如，白內障手術、角膜移植、屈光手術)、其他全身性疾病(諸如糖尿病、麻風、眼窩腫瘤及炎症)或物理創傷(包括化學物質及熱灼傷)及隱形眼鏡之使用引起。
因此，持續需要用於諸如NK之眼睛疾病的新穎治療以及可投與至眼睛的新穎醫藥調配物。為此目的，已研發出本文所描述之方法。
本發明提供治療或預防有需要之個體之神經營養性角膜炎的方法，該方法包含向該個體投與諸如肝細胞生長因子(HGF)或纖維母細胞生長因子(FGF)之生長因子。
本發明進一步提供用於治療眼睛疾病之包含HGF或FGF的醫藥組合物。
本文提供治療或預防有需要之個體之神經營養性角膜炎的方法，該方法包含向個體投與治療有效量之例如如本文所描述之肝細胞生長因子(HGF)或纖維母細胞生長因子(FGF)。
在一些實施例中，HGF或FGF經純化。
在一些實施例中，HGF或FGF與角膜基質滲透賦形劑組合投與。
在一些實施例中，HGF或FGF係調配於液體醫藥組合物中。
在一些實施例中，向眼睛投與HGF或FGF。在一些實施例中，該HGF或FGF局部投與至該眼睛。在一些實施例中，該HGF或FGF藉由注射投與至該眼睛。在一些實施例中，該HGF或FGF係結膜下投與。在一些實施例中，HGF或FGF係前房內投與。
在一些實施例中，該液體醫藥組合物包含濃度為約0.01% (w/v)至約1.0% (w/v)之HGF或FGF。在一些實施例中，該液體醫藥組合物包含濃度為約0.08% (w/v)至約0.25% (w/v)之HGF或FGF。在一些實施例中，該液體醫藥組合物包含濃度為約0.1% (w/v)之HGF或FGF。在一些實施例中，該液體醫藥組合物包含濃度為約0.2% (w/v)之HGF或FGF。
在一些實施例中，該HGF或FGF係與另一治療劑組合投與。在一些實施例中，該另一治療劑為另一生長因子。
在一些實施例中，HGF包含具有SEQ ID NO: 1-27中之任一者的多肽序列。在一些實施例中，HGF包含與SEQ ID NO: 1具有95%序列一致性的多肽序列。在一些實施例中，HGF包含具有SEQ ID NO: 1之多肽序列。
本文亦提供醫藥組合物，其包含：約0.01%至約1.0% (w/v) HGF；可使該組合物之pH維持在約5.8至約6.2之緩衝劑；約100至約300 mM之選自海藻糖、脯胺酸、山梨糖醇及其混合物之穩定劑；視情況選用之張力調節劑，其可提供約250 mOsm/kg H 2O至約500 mOsm/kg H 2O之組合物的滲透壓；及視情況選用之界面活性劑。
在一些實施例中，該醫藥組合物包含約0.05%至約0.5 % (w/v) HGF。在一些實施例中，該醫藥組合物包含約0.08%至約0.25% (w/v) HGF。在一些實施例中，該醫藥組合物包含約0.1% (w/v) HGF。在一些實施例中，該醫藥組合物包含約0.2% (w/v) HGF。
在一些實施例中，組合物之pH為約6.0。
在一些實施例中，該醫藥組合物包含約150至約250 mM穩定劑。在一些實施例中，該醫藥組合物包含約200 mM穩定劑。在一些實施例中，該穩定劑為海藻糖或脯胺酸。在一些實施例中，該穩定劑為海藻糖。在一些實施例中，該穩定劑為脯胺酸。在一些實施例中，該穩定劑為山梨糖醇。
在一些實施例中，該緩衝劑為檸檬酸鹽緩衝劑。在一些實施例中，該緩衝劑為檸檬酸鈉。在一些實施例中，該醫藥組合物包含約10至約50 mM緩衝劑。
在一些實施例中，該組合物之滲透壓為約450 mOsm/kg H 2O。
在一些實施例中，醫藥組合物不包括張力調節劑。在一些實施例中，醫藥組合物包含作為鹼金屬鹽之張力調節劑。在一些實施例中，醫藥組合物包含作為氯化鈉之張力調節劑。
在一些實施例中，醫藥組合物包含界面活性劑。在一些實施例中，該界面活性劑選自聚山梨醇酯80 (PS80)、Polaxomer 188及Polaxomer 407。在一些實施例中，界面活性劑為聚山梨醇酯80 (PS80)。在一些實施例中，界面活性劑以約0.01%至約0.1% (w/v)之量存在。在一些實施例中，界面活性劑以約0.02%至約0.8% (w/v)之量存在。在一些實施例中，界面活性劑以約0.05% (w/v)之量存在。
本文亦提供包含以下之水性醫藥組合物：約0.1% (w/v) HGF；約20 mM檸檬酸鈉；約200 mM海藻糖、脯胺酸或山梨糖醇；約0.05% (w/v)界面活性劑；其中該組合物之pH為約6.0，且該組合物之滲透壓為約350 mOsm/kg H 2O。
在一些實施例中，該水性醫藥組合物包含：約0.1% (w/v) HGF；約20 mM檸檬酸鈉；約200 mM海藻糖；約0.05% (w/v)聚山梨醇酯80 (PS80)；其中該組合物之pH為約6.0，且該組合物之滲透壓為約350 mOsm/kg H 2O。
在一些實施例中，該水性醫藥組合物包含：約0.1% (w/v) HGF；約20 mM檸檬酸鈉；約200 mM脯胺酸；約0.05% (w/v)聚山梨醇酯80 (PS80)；其中該組合物之pH為約6.0，且該組合物之滲透壓為約350 mOsm/kg H 2O。
在一些實施例中，該水性醫藥組合物包含：約0.1% (w/v) HGF；約20 mM檸檬酸鈉；約200 mM山梨糖醇；約0.05% (w/v)聚山梨醇酯80 (PS80)；其中該組合物之pH為約6.0，且該組合物之滲透壓為約350 mOsm/kg H 2O。
在一些實施例中，該水性醫藥組合物包含：約0.2% (w/v) HGF；約20 mM檸檬酸鈉；約200 mM海藻糖、脯胺酸或山梨糖醇；
約0.05% (w/v)界面活性劑；其中該組合物之pH為約6.0，且該組合物之滲透壓為約450 mOsm/kg H 2O。
在一些實施例中，該水性醫藥組合物包含：約0.2% (w/v) HGF；約20 mM檸檬酸鈉；約200 mM海藻糖；約0.05% (w/v)聚山梨醇酯80 (PS80)；其中該組合物之pH為約6.0，且該組合物之滲透壓為約450 mOsm/kg H 2O。
在一些實施例中，該水性醫藥組合物包含：約0.2% (w/v) HGF；約20 mM檸檬酸鈉；約200 mM脯胺酸；約0.05% (w/v)聚山梨醇酯80 (PS80)；其中該組合物之pH為約6.0，且該組合物之滲透壓為約450 mOsm/kg H 2O。
在一些實施例中，該水性醫藥組合物包含：約0.2% (w/v) HGF；約20 mM檸檬酸鈉；約200 mM山梨糖醇；約0.05% (w/v)聚山梨醇酯80 (PS80)；其中該組合物之pH為約6.0，且該組合物之滲透壓為約450 mOsm/kg H 2O。
在一些實施例中，HGF包含具有SEQ ID NO: 1-27中之任一者的多肽序列。在一些實施例中，HGF包含與SEQ ID NO: 1具有95%序列一致性的多肽序列。在一些實施例中，HGF包含具有SEQ ID NO: 1之多肽序列。
本文亦提供治療或預防有需要之個體之眼睛疾病的方法，該方法包含向個體投與治療有效量之本文所描述之醫藥組合物。
在一些實施例中，該眼睛疾病為選自以下之角膜疾病：神經營養性角膜炎、持續性角膜缺損、角膜潰瘍、乾眼病、微生物角膜炎、細菌性角膜炎、病毒角膜炎、真菌角膜炎、化學燒傷、熱燒傷、機械性外傷、角膜刮傷、受損內皮、大泡性角膜病變、福斯氏角膜失養症(Fuch's corneal dystrophy)、角膜結疤、休格倫氏症候群或手術後併發症。在一些實施例中，該眼睛疾病為角膜霧霾或結疤。在一些實施例中，該眼睛疾病為神經營養性角膜炎。在一些實施例中，組合物與角膜基質滲透賦形劑組合投與。
在一些實施例中，向眼睛投與該組合物。在一些實施例中，組合物局部投與至眼部。在一些實施例中，該組合物藉由注射投與至該眼睛。在一些實施例中，該組合物係結膜下投與。在一些實施例中，該組合物係前房內投與。
在本文所描述之方法或組合物的一些實施例中，HGF為經活化HGF。在一些實施例中，經活化HGF為經活化dHGF。
在本文所描述之方法或組合物的一些實施例中，HGF包含： (a)包含與SEQ ID NO: 2之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 2之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 2之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (b)包含與SEQ ID NO: 7之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 7之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 7之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (c)包含與SEQ ID NO: 8之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 8之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 8之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (d)包含與SEQ ID NO: 9之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 9之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 9之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (e)包含與SEQ ID NO: 10之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 10之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 10之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (g)包含與SEQ ID NO: 11之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 11之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 11之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (h)包含與SEQ ID NO: 12之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 12之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 12之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (i)包含與SEQ ID NO: 13之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 13之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 13之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (j)包含與SEQ ID NO: 14之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 14之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 14之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (k)包含與SEQ ID NO: 15之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 15之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 15之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (l)包含與SEQ ID NO: 16之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 16之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 16之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (m)包含與SEQ ID NO: 17之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 17之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 17之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (n)包含與SEQ ID NO: 18之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 18之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 18之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (o)包含與SEQ ID NO: 19之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 19之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 19之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (p)包含與SEQ ID NO: 20之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 20之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 20之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (q)包含與SEQ ID NO: 21之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 21之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 21之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (r)包含與SEQ ID NO: 22之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 22之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 22之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (s)包含與SEQ ID NO: 23之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 23之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 23之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (t)包含與SEQ ID NO: 24之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 24之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 24之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (u) )包含與SEQ ID NO: 25之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 25之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 25之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (v)包含與SEQ ID NO: 26之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 26之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 26之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (w)包含與SEQ ID NO: 27之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 27之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 27之胺基酸161-165之胺基酸的缺失。
在本文所描述之方法或組合物的一些實施例中，HGF包含： (a)包含對應於SEQ ID NO: 2之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 2之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 2之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (b)包含對應於SEQ ID NO: 7之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 7之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 7之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (c)包含對應於SEQ ID NO: 8之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 8之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 8之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (d)包含對應於SEQ ID NO: 9之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 9之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 9之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (e)包含對應於SEQ ID NO: 10之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 10之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 10之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (g)包含對應於SEQ ID NO: 11之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 11之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 11之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (h)包含對應於SEQ ID NO: 12之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 12之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 12之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (i)包含對應於SEQ ID NO: 13之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 13之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 13之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (j)包含對應於SEQ ID NO: 14之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 14之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 14之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (k)包含對應於SEQ ID NO: 15之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 15之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 15之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (l)包含對應於SEQ ID NO: 16之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 16之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 16之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (m)包含對應於SEQ ID NO: 17之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 17之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 17之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (n)包含對應於SEQ ID NO: 18之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 18之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 18之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (o)包含對應於SEQ ID NO: 19之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 19之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 19之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (p)包含對應於SEQ ID NO: 20之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 20之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 20之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (q)包含對應於SEQ ID NO: 21之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 21之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 21之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (r)包含對應於SEQ ID NO: 22之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 22之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 22之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (s)包含對應於SEQ ID NO: 23之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 23之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 23之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (t)包含對應於SEQ ID NO: 24之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 24之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 24之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (u)包含對應於SEQ ID NO: 25之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 25之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 25之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (v)包含對應於SEQ ID NO: 26之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 26之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 26之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (w)包含對應於SEQ ID NO: 27之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 27之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 27之胺基酸161-165之胺基酸的缺失。
在本文所描述之方法或組合物的一些實施例中，該第一多肽包含SEQ ID NO: 36之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成，且該第二多肽包含SEQ ID NO: 37之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成。
在本文所描述之方法或組合物的一些實施例中，該第一多肽之該N端胺基酸為吡咯啶酮羧酸。
在本文所描述之方法或組合物的一些實施例中，該第一多肽與該第二多肽係藉由一或多個二硫鍵連接。
在本文所描述之方法或組合物的一些實施例中，該HGF能夠結合至c-MET及/或活化上皮細胞中之MAPK路徑。
優先權主張本申請案主張2021年5月14日申請之美國臨時專利申請案第63/188,816號之權益。以上申請案之全部內容以引用之方式併入本文中。
序列表本申請案含有已以電子方式作為名為「Sequence_Listing.txt.」之ASCII正文檔案提交的序列表。在2022年5月10日創建之ASCII正文檔案的大小為171千位元組。ASCII正文檔案中之材料以全文引用的方式併入本文中。
在一些實施例中，本發明提供治療或預防有需要之個體之神經營養性角膜炎(NK)的方法，該方法包含向該個體投與肝細胞生長因子(HGF)或纖維母細胞生長因子(FGF)。
神經營養性角膜炎(或替代地，神經營養性角膜病變(NK))為由對三叉神經或其分支之損傷或受損的眼表面引起之角膜的退化性病狀，其導致角膜敏感性隨之減少或角膜感覺完全喪失。如本文中所用，術語「疾病」、「病狀」或「病症」可互換地使用係指受影響組織或器官之許多病理學病狀中之任一者。對三叉神經或其分支之損傷最常由感染(例如病毒感染，包括單純疱疹或帶狀疱疹感染、細菌性潰爛、後期棘狀阿米巴角膜潰瘍)、眼睛手術(例如白內障手術、角膜移植、屈光手術及視黃醛手術)、其他全身性疾病(諸如糖尿病、麻風、眼窩腫瘤及炎症)、由後窩中之三叉神經病變、動脈瘤、聽神經瘤、脊膜瘤或因化學物質及熱灼傷對角膜層造成的物理損傷引起的第五神經麻痹。NK之其他原因包括遺傳病(例如常見的角膜感覺遲鈍、Goldenhar-Gorlin症候群、遺傳感覺及自主神經性病變III、IV或V型、角膜營養不良及多發性內分泌瘤IIb)、使用某些藥物(例如局部β-阻斷劑、局部非類固醇抗發炎(NSAID)、局部麻醉劑)及使用隱形眼鏡(關於審查參見Okada等人., 見上文)。
NK可根據本文所描述之方法藉由投與肝細胞生長因子(HGF)及/或纖維母細胞生長因子(FGF)來治療或預防。
HGF (例如，UniProt ID第P14210號))為尤其經由酪胺酸激酶傳訊路徑刺激各種器官中之上皮細胞增殖、活動性、形態發生及血管生成，且在胚胎器官發育及成人器官再生及創傷癒合中起主要作用的cMet激酶促效劑。HGF為包含以下兩個由單一雙硫鍵連接之次單元的約84 kDa蛋白質：表觀分子量為69 kDa之 a-次單元及表觀分子量為34 kDa之β -次單元。
HGF藉由間葉基質細胞(例如，纖維母細胞及巨噬細胞)作為728個胺基酸之前HGF分子產生，其中前1-31個胺基酸殘基對應於分泌傳訊序列(Matsumoto and Nakamura， in Encyclopedia of Endocrine Diseases, Elsevier, 2004, 436-442)。前HGF之一級胺基酸序列組織成四個三環(K)域之域結構(Sigurdardottir等人., 2015, Chem. Sci., 6:6147-6157)。如本文中所用，「三環」域係指摺疊成三環、二硫鍵交聯域的多肽線性序列(Simonneau等人., 2015, Chem. Sci., 6:2110- 2121)。三環域存在於多種多肽中，包括脂蛋白元A、血液凝血因子XII、纖維蛋白溶酶原及HGF。名稱「三環」衍生自與此等結構類似的斯堪的納維亞糕點。咸信，三環域介導蛋白質、膜及磷脂之間的結合相互作用。在一些實施例中，本發明之多肽含有至少一個三環域。
在分泌傳訊序列裂解之後，在前HGF之第四三環與C端絲胺酸-蛋白酶同源性(SPH)域之間的胰蛋白酶樣位點(R494-V495)處之蛋白水解分裂得到成熟經活化HGF。胰蛋白酶樣裂解位點為帶正電之胺基酸(例如，離胺酸或精胺酸)之後的肽鍵。在活化時，HGF結合至且活化其受體，cMet (亦稱為MET酪胺酸激酶)，其引起酪胺酸磷酸化，進一步實現多種下游接附分子之募集及各種胞內路徑及生物活性之調節，共同稱為侵襲性生長程序(Nakamura, T., 1991, Prog. Growth Factor Res., 3:67-85; Bottaro等人., 1991, Science251:802-804)。HGF及其受體cMet均表現於角膜上皮細胞、基質細胞、內皮及淚腺中，儘管在極低含量下，但人類淚液中HGF之量經估計為約500 pg/mL(Wilson等人., 1993, Invest. Ophthalmol. Vis. Sci.,34:2544-2561; Li等人., 1996, Invest. Ophthalmol. Vis. Sci., 37:727-739)。
由HGF mRNA基因轉錄本之替代性拼接引起的HGF的六種天然存在之同功型係文獻中已知的，其中主要同功型為同功型1 (例如SEQ ID NO: 2)及2 (例如SEQ ID NO: 3) (Bottaro等人., 1991, Science,251:802-804; Chan等人., 1991, Science, 254:1382-1385; Lokker and Godowski, 1992, EMBO J., 11:2503-2510; Cioce等人., 1996, J. Biol. Chem., 271:13110-13115)。如本文所使用，術語「同功型」係指由編碼HGF之mRNA前軀體的替代性拼接產生的蛋白質。同功型1 mRNA轉錄物編碼最長HGF基因序列，其包含728個胺基酸殘基。第二主要HGF同功型由同功型2之mRNA轉錄物編碼，該mRNA轉錄物相對於同功型1轉錄物缺乏多個3' 外顯子但包括3'外顯子。由同功型2 mRNA轉錄物編碼之HGF蛋白質包含290個胺基酸殘基，且相較於同功型1 HGF蛋白質在第二三環域之後截斷(Miyazawa等人., 1991, Eur. J. Biochem., 197:15-22)。同功型3 mRNA轉錄物缺乏存在於同功型1中之框內編碼片段且編碼包含缺乏在同功型1之第一三環域內位置161-165處的序列「SFLPS」之723個胺基酸殘基(例如，SEQ ID NO: 1)的HGF蛋白質(Rubin等人., 1991, Proc. Natl. Acad. Sci., 88:415-419)。同功型4 HGF蛋白質(例如，SEQ ID NO: 4)為包含殘基1-296之較小分子，其中胺基酸序列僅延伸穿過第二三環域(Chan等人., 1991, Science, 254:1382-1385)。同功型5 HGF蛋白質(例如，SEQ ID NO: 5)與具有如在同功型3 HGF中之殘基161-165 (SFLPS)之額外缺失的同功型2 HGF蛋白質類似(Rubin等人., 1991, Proc. Natl. Acad. Sci., 88: 415-419)。同功型6 HGF蛋白質(亦稱為NK1)(例如，SEQ ID NO: 6)為所有HGF同功型中最小的，僅包含210個胺基酸(Cioce等人., 1996, J. Bio. Chem., 271:13110-13115)。
HGF之全長及截斷同功型均已顯示結合至cMet，儘管具有不同效能及與胞外基質之硫酸肝素蛋白聚糖的相互作用，其幫助延長活體內HGF之循環半衰期(Masumoto and Yamamoto, 1991, Biochem. Biophys. Res. Commun., 174:90-95; Montesano等人., 1998, Cell Growth Differ., 9:355-365; Sakata等人., 1997, J. Biol. Chem., 272:9457-9463; Stahl等人., 1997, Biochem. J., 326:763-772)。雖然同功型1及3需要在R494- V495處發生蛋白水解分裂以變得具有生物學活性，但截短同功型2、4、5及6不具有R494-V495裂解位點，且因此，此活化步驟不為其生物活性所需。然而，已知截短同功型2、4、5及6一般不如全長同功型1及3對應物有效(Stahl等人., 1997; Montesano等人., 1998; 見上文)。
纖維母細胞生長因子(FGF)為涉及廣泛範圍之生物過程(包括發育)的細胞傳訊蛋白質家族。人類FGF家族包括22個成員：FGF1、FGF2、FGF3 (INT2)、FGF4、FGF5、FGF6、FGF7 (KGF)、FGF8 (AIGF)、FGF9、FGF10、FGF11、FGF12、FGF13、FGF14、FGF16、FGF17、FGF18、FGF19、FGF20、FGF21、FGF22及FGF23。
FGF經由結合及活化纖維母細胞生長因子受體(FGFR)發揮其生物學作用。經活化FGFR藉由募集在受體之細胞溶質部分處結合至磷酸化酪胺酸之特異性分子來介導傳訊，觸發許多傳訊路徑，從而引起特異性細胞反應。人類FGFR家族包括4個成員：FGFR1、FGFR2、FGFR3及FGFR4。
在一些實施例中，HGF為包含SEQ ID NO: 1-27中之任一者之胺基酸序列，具有或不具有訊號序列(亦即，對應於SEQ ID NO: 1之胺基酸1-31之胺基酸)的多肽。在一些實施例中，HGF為包含SEQ ID NO: 1或SEQ ID NO: 2之胺基酸序列，具有或不具有訊號序列(亦即，對應於SEQ ID NO: 1或SEQ ID NO: 2之胺基酸1-31之胺基酸)的多肽。在一些實施例中，HGF為包含SEQ ID NO: 1之胺基酸序列，具有或不具有訊號序列(亦即，對應於SEQ ID NO: 1之胺基酸1-31之胺基酸)的多肽。在一些實施例中，HGF為包含SEQ ID NO: 2之胺基酸序列，具有或不具有訊號序列(亦即，對應於SEQ ID NO: 2之胺基酸1-31之胺基酸)的多肽。在一些實施例中，HGF為包含SEQ ID NO. 1或SEQ ID NO. 2之經活化形式胺基酸序列的多肽。術語「經活化形式」係指尤其HGF多肽訊號序列(例如，SEQ ID NO: 1或SEQ ID NO: 2之胺基酸1-31)已自其中裂解且在SEQ ID NO:1之R489與V490之間或在SEQ ID NO:2之R494與V495之間裂解以形成HGF之二硫鍵連接的α鏈及β鏈。在一些實施例中，N端胺基酸(例如，SEQ ID NO: 1或SEQ ID NO: 2之胺基酸32)為吡咯啶酮羧酸，例如由訊號序列之裂解引起。在一些實施例中，本發明之多肽以HGF前驅體(pro- HGF)形式存在，其中SEQ ID NO: 1之R489與V490之間或SEQ ID NO: 2之R494及V495之間的肽鍵為完整的。在一些實施例中，本發明之多肽可藉由在SEQ ID NO: 1之R489及V490胺基酸殘基之間或在SEQ ID NO: 2 pro-HGF蛋白質活體內之R494及V495胺基酸殘基之間的胰蛋白酶樣裂解位點的蛋白水解分裂轉化成活性形式。在一些實施例中，本發明之多肽可藉由在SEQ ID NO: 1之R489及V490胺基酸殘基之間或在SEQ ID NO: 2 pro-HGF蛋白質活體外之R494及V495胺基酸殘基之間的胰蛋白酶樣裂解位點的蛋白水解分裂轉化成活性形式。在一些實施例中，HGF為包含SEQ ID NO:1 pro-HGF蛋白質之胺基酸32-723之胺基酸序列的多肽。在一些實施例中，HGF為包含SEQ ID NO: 1經活化蛋白質之胺基酸32-723之胺基酸序列的多肽。在一些實施例中，HGF為包含SEQ ID NO:2 pro-HGF蛋白質之胺基酸32-728之胺基酸序列的多肽。在一些實施例中，HGF為包含SEQ ID NO: 2經活化蛋白質之胺基酸32-728之胺基酸序列的多肽。
在一些實施例中，HGF為包含SEQ ID NO: 3、4、5或6之胺基酸序列，具有或不具有訊號序列(例如，對應於SEQ ID NO: 3、4、5或6之胺基酸1-31之胺基酸)的多肽。
在一些實施例中，HGF為包含SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5或SEQ ID NO: 6之多肽變異體，具有或不具有訊號序列(亦即，對應於SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5或SEQ ID NO: 6之胺基酸1-31之胺基酸)的多肽。如本文所使用，術語「變異體」意指一種多肽與另一種多肽的不同之處在於由編碼該多肽之核酸中之突變引起的一或多個胺基酸取代、缺失或插入。在一些實施例中，HGF為包含與SEQ ID NO:1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO:6具有至少90%序列一致性之胺基酸序列，具有或不具有訊號序列(亦即，對應於SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 6之胺基酸1-31之胺基酸)的多肽。在一些實施例中，HGF為包含與SEQ ID NO:1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO:6具有至少95%序列一致性之胺基酸序列，具有或不具有訊號序列(亦即，對應於SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 6之胺基酸1-31之胺基酸)的多肽。在一些實施例中，HGF為包含與SEQ ID NO:1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO:6具有至少98%序列一致性之胺基酸序列，具有或不具有訊號序列(亦即，對應於SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 6之胺基酸1-31之胺基酸)的多肽。在一些實施例中，HGF為包含與SEQ ID NO:1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO:6具有至少99%序列一致性之胺基酸序列，具有或不具有訊號序列(亦即，對應於SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 6之胺基酸1-31之胺基酸)的多肽。在一些實施例中，該HGF變異體可(1)結合至c-MET及/或(2)活化上皮細胞(例如，人類角膜上皮細胞)中之MAPK路徑。
在一些實施例中，該HGF為包含在野生型HGF同功型1之胺基酸序列(例如，SEQ ID NO: 2)中之突變，在位置62、64、77、95、125、127、130、132、137、142、148、154、170、173及193中之一或多者處具有或不具有訊號序列(例如，對應於SEQ ID NO: 2之胺基酸1-31之胺基酸)的多肽。在一些實施例中，野生型HGF同功型3 (例如，SEQ ID NO: 1)中之類似位置發生突變。在一些實施例中，HGF為包含如下表1及表2中所示之胺基酸序列中之突變的多肽。表1及表2中所示之突變的任何組合可包括於本文所揭示之HGF多肽中。
表 1. HGF 變異體中之序列突變 .SEQ ID NO: 2為野生型。僅來自野生型序列之差異展示於SEQ ID NO: 7-16中，空格表示保留野生型HGF殘基。
SEQ ID NO 同功型 bp AA 28 30 33 37 38 42 44 48 58 62 64 65 75 77 82 95
2 1       Y E R N T F K T K K V N T N F Q
7 1 15 12                         R E A       S    R
8 1 21 15                            E A    I       R
9 1 16 14                            E A       S    R
10 1 18 15    K G                   E A D    S      
11 1 19 15                      A R E A       S    R
12 1 20 15                            E A       S    R
13 1 16 13                            E A    I         
14 1 28 20          D A C R       E A          S R
15 1 14 12       G                   E          S    R
16 1 17 15 H                         E A       S    R
SEQ ID NO 96 98 101 123 125 127 130 132 135 137 142 148 154 168 170 173 181 190 193
2 C W F D I N I K S K I K S R K Q R F N
7                D          R       A    E R    Y D
8       V    T    V N    R T    A    E R    Y D
9                D V N    R    E A    E R    Y D
10                D V N    R V          E R    Y D
11                D V N    R    E       E    W Y D
12             T    V N    R    E A Q E R    Y D
13          A    D    R N R    E       E R    Y D
14 R R       T    V N    R T    A    E R W    D
15                D    R    R       A    E R    Y D
16             T    V N    R T    A    E R    Y D
bp：鹼基對突變之數目 AA：胺基酸突變數目
表 2. HGF 變異體中之序列突變 .SEQ ID NO: 2為野生型。僅來自野生型序列之差異展示於SEQ ID NO: 17-27中，空格表示保留野生型HGF殘基。
SEQ ID NO 同功型 bp AA 30 33 46 58 62 64 65 75 77 78 79 95 101
2 1       E R A K K V N T N K G Q F
17 1 17 13             E A       S R         
18 1 16 11             E A                R   
19 1 20 17       V    E A       S       R V
20 1 18 13             E A       S       R   
21 1 17 13          R E A       S R    R   
22 1 21 16             E A       S R R R   
23 1 16 14             E A       S       R   
24 1 14 9                   D             R   
25 1 24 16    G    R E A       S       R   
26 1 21 15 K       R E       I          R   
27 1 14 12    G       E          S       R   
SEQ ID NO 112 123 127 130 132 135 137 142 148 154 166 170 173 181 190 193
2 F D N I K S K I K S S K Q R F N
17       D    N    R V    A    E R    Y D
18       D V N    R             E R    Y D
19 S    D V N    R T    A    E R    Y D
20       D V N    R             E R W Y D
21       D    N    R             E R    Y D
22       D          R V E A N E R    Y D
23       D V N    R    E A    E R    Y D
24       D    N    R             E R    Y D
25    A D    R N R       A    E R    Y D
26    A D    R N R       A    E R    Y D
27       D    N    R       A    E R    Y D
bp：鹼基對突變之數目 AA：胺基酸突變數目
在一些實施例中，HGF為包含選自由SEQ ID NO: 7-27組成之群之胺基酸序列，具有或不具有訊號序列(例如，對應於SEQ ID NO: 7-27之胺基酸1-31之胺基酸)的多肽。在一些實施例中，HGF為由選自由SEQ ID NO: 7-27組成之群之胺基酸序列，具有或不具有訊號序列(例如，對應於SEQ ID NO: 7-27之胺基酸1-31之胺基酸)組成的多肽。
在一些實施例中，FGF為包含SEQ ID NO: 28之胺基酸序列的多肽。在一些實施例中，FGF為SEQ ID NO: 28之多肽變異體。在一些實施例中，FGF為包含與SEQ ID NO: 28具有至少90%、至少95%、至少98%或至少99%序列一致性之胺基酸序列的多肽。在一些實施例中，相較於野生型FGF1，FGF變異體展現出增加之蛋白水解穩定性。
在一些實施例中，FGF為在位置28、40、47、93或131中之一或多者處包含野生型FGF同功型1 (例如SEQ ID NO: 28)之胺基酸序列突變的多肽。位置28、40、47、93及131處之突變的任何組合可包括於本文所揭示之FGF多肽中。
在一些實施例中，FGF1變異體包含至少一個選自由以下組成之群的胺基酸取代：D28N、Q40P、S47I、H93G、L131R及L131K。在一些實施例中，FGF1變異體包含胺基酸取代L131R。在一些實施例中，FGF1變異體包含胺基酸取代L131K。在一些實施例中，變異體包含胺基酸取代D28N及L131R (例如，SEQ ID NO: 29)。在一些實施例中，變異體包含胺基酸取代D28N及L131K。在一些實施例中，變異體包含胺基酸取代Q40P、S47I及H93G (例如，SEQ ID NO: 30)。在一些實施例中，變異體包含胺基酸取代Q40P、S47I、H93G及L131R。在一些實施例中，變異體包含胺基酸取代Q40P、S47I、H93G及L131K。在一些實施例中，變異體包含胺基酸取代D28N、Q40P、S47I、H93G及L131R (例如，SEQ ID NO: 31)。在一些實施例中，變異體包含胺基酸取代D28N、Q40P、S47I、H93G及L131K。在一些實施例中，FGF1變異體不包含胺基酸取代L131A。
在一些實施例中，FGF為包含選自由SEQ ID NO: 29-33組成之群之胺基酸序列的多肽。在一些實施例中，FGF為具有選自由SEQ ID NO: 29-33組成之群之胺基酸序列的多肽。
本文所揭示之多肽(例如，HGF多肽、FGF多肽)可為單體或二聚體。在一些實施例中，該HGF為SEQ ID NO: 1-27中之任一者之多肽或其多肽變異體的共價二聚體(具有或不具有訊號序列(例如，對應於SEQ ID NO: 1-27之胺基酸1-31之胺基酸))。在一些實施例中，FGF為SEQ ID NO: 29-33中之任一者之多肽或其多肽變異體的共價二聚體。HGF或FGF多肽之共價二聚體可藉由在適合之表現系統(例如，酵母菌或大腸桿菌)中表現SEQ ID NO: 1-27之HGF多肽序列或其變異體中之任一者獲得，而單一胺基酸殘基(特定言之，N端胺基酸殘基)經半胱胺酸殘基置換。所表現及例如訊號序列裂解之HGF多肽單體或經表現FGF多肽單體可經由在經引入半胱胺酸殘基之間形成二硫鍵而誘導二聚(參見例如Liu等人., 2014, FEBS Letters, 588:4831-4837; Jones II等人., 2011, Proc. Natl. Acad. Sci., 108:13035-13040；及USSN 15/365,514)。
在一些情況下，本文所描述之HGF多肽包含一或多個轉譯後修飾，包括(例如)以下中之一或多者：
關鍵特徵 位置 描述
經修飾殘基 32 吡咯啶酮羧酸
二硫鍵 70↔96   
二硫鍵 74↔84   
二硫鍵 128↔206   
二硫鍵 149↔189   
二硫鍵 177↔201   
二硫鍵 211↔288   
二硫鍵 232↔271   
二硫鍵 260↔283   
醣基化 294 N連接(GlcNAc...) (複合物)天冬醯胺
二硫鍵 305↔383   
二硫鍵 326↔365   
二硫鍵 354↔377   
二硫鍵 391↔469   
醣基化 402 N連接(GlcNAc...) (複合物)天冬醯胺
二硫鍵 412↔452   
二硫鍵 440↔464   
醣基化 476 O連接(GalNAc...)蘇胺酸
二硫鍵 487↔604 鏈間(在α鏈及β鏈之間)
二硫鍵 519↔535   
醣基化 566 N連接(GlcNAc...) (複合物)天冬醯胺
二硫鍵 612↔679   
二硫鍵 642↔658   
醣基化 653 N連接(GlcNAc...) (複合物)天冬醯胺
二硫鍵 669↔697   
本文所揭示之多肽(例如，HGF多肽、FGF多肽)可包括經天然存在之胺基酸或非天然存在之胺基酸，包括(但不限於)羥脯胺酸(Hyp)、β-丙胺酸、瓜胺酸(Cit)、鳥胺酸(Orn)、正白胺酸(Nle)、3-硝基酪胺酸、硝基精胺酸及焦麩胺酸(Pyr)的取代。在一些情況下，HGF多肽經轉譯後修飾，例如如上表中所示。
如本文所使用，術語「序列一致性」係指兩個多肽或核酸序列之間一致殘基的百分比。熟習此項技術者可容易地確定與HGF或FGF胺基酸之序列一致性，例如藉由使用藉由輸入HGF或FGF之胺基酸(或核酸)序列及所討論之多肽(或核酸)可在https://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi上獲得之鹼基局部比對檢索工具(BLAST)。程式BLAST可例如用於比對兩個序列(具有預設參數)，如以下中所描述：Tatiana A. Tatusova and Thomas L. Madden (1999), 「Blast 2 sequences - a new tool for comparing protein and nucleotide sequences」, FEMS Microbiol Lett. 174:247-250。此項技術中熟知可用於獲得胺基酸或核苷酸序列之比對的各種演算法及軟體。此等演算法及軟體包括但不限於BLAST、ALIGN、Megalign、BestFit、GCG Wisconsin Package及其變化形式。在一些實施例中，如例如藉由使用程式BLAST來比對兩個序列(預設參數)所確定，本發明之多肽與HGF具有至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、至少約85%、至少約90%、至少約95%、至少約97%、至少約98%或至少約99%同源性。在一些情況下，該等序列在所比較之序列的全長上實質上一致，例如(i)核苷酸序列之編碼區，或(ii)胺基酸序列。
在一些實施例中，HGF及/或FGF自生物來源中分離，該生物來源諸如羊膜或流體、產生HGF及/或FGF (例如，間葉細胞基質細胞或肝細胞)之細胞或組織，或淚液。在一些實施例中，HGF為表現於適合之宿主蛋白質表現系統，諸如大腸桿菌、釀酒酵母、中國倉鼠卵巢(CHO)細胞、人類胚胎腎(HEK293)細胞或昆蟲細胞株(例如Sf9、Sf21或S2)中之重組蛋白質。在一些實施例中，HGF經純化。如本文中所用，「純化」HGF係指已經處理以移除其他非所需組分或污染物的多肽。在一些實施例中，FGF為表現於適合之宿主蛋白質表現系統，諸如大腸桿菌、釀酒酵母、中國倉鼠卵巢(CHO)細胞、人類胚胎腎(HEK293)細胞或昆蟲細胞株(例如Sf9、Sf21或S2)中之重組蛋白質。在一些實施例中，FGF經純化。如本文所用，「經純化」FGF係指已經處理以移除其他非所需組分或污染物的多肽。
在純化過程期間移除之非所需組分或污染物的實例包括與HGF及/或FGF無關之細胞、組織、核酸、多肽(例如，來自所用表現系統之宿主細胞蛋白質，或來自例如白蛋白及免疫球蛋白分離之自其中分離之生物來源的豐富蛋白質)、具有低於50%序列同源性之HGF及/或FGF之小片段、金屬及其他無機鹽。熟習此項技術者使用之純化方法的實例包括：沈澱、絮凝、切向流過濾(TFF)、超過濾(UF)、透濾作用(DF)、透析、凝膠過濾層析(GFC)、液相層析(LC)、離子交換層析法(IEX)、疏水性相互作用層析(HIC)及電泳。在一些實施例中，經純化HGF之純度為至少約50%。在一些實施例中，經純化HGF之純度為至少約60%。在一些實施例中，經純化HGF之純度為約75%。在一些實施例中，經純化HGF之純度為約80%。在一些實施例中，經純化HGF之純度為約85%。在一些實施例中，經純化HGF之純度為約90%。在一些實施例中，經純化HGF之純度為約95%。在一個較佳實施例中，經純化HGF之純度為約97%。在一些實施例中，經純化FGF之純度為至少約50%。在一些實施例中，經純化FGF之純度為至少約60%。在一些實施例中，經純化FGF之純度為約75%。在一些實施例中，經純化FGF之純度為約80%。在一些實施例中，經純化FGF之純度為約85%。在一些實施例中，經純化FGF之純度為約90%。在一些實施例中，經純化FGF之純度為約95%。在一個較佳實施例中，經純化FGF之純度為約97%。
HGF及/或FGF之純度及含量之確定可由熟習此項技術者使用習知分析及方法容易地實現，例如藉由逆相高效液相層析(RP-HPLC)、尺寸排阻層析(SEC)、離子交換層析(IEX)、聚丙烯醯胺凝膠電泳(PAGE)、毛細管凝膠電泳(CGE)及西方墨點法。
如本文中所用，「多肽」或「蛋白質」為具有例如2至約1000個或更多個胺基酸殘基之胺基酸的聚合物。在一些實施例中，「多肽」具有10至約130個胺基酸、10至約220個胺基酸、10至約500個胺基酸或10至約730個胺基酸。任何天然存在或合成之胺基酸均可形成多肽。多肽亦可包括修飾，諸如糖基化及其他部分。在一些實施例中，本發明之多肽能夠基於例如目標之胺基酸序列，諸如N端或C端之胺基酸序列而選擇性地結合至目標多肽。
如本文中所使用，術語「約」意謂大致、大約、粗略地或約。當術語「約」與數值範圍結合使用時，其藉由向上或向下擴展所闡述數值之邊界來調整其範圍。一般而言，術語「約」在本文中用以修改數值到所陳述值上方及下方10%之偏差。
治療及預防方法本發明提供治療或預防個體之眼睛疾病或病症的方法。在一些實施例中，眼睛疾病或病症為角膜疾病。角膜疾病之非限制性實例包括：神經營養性角膜炎、持續性角膜缺損、角膜潰瘍、乾眼病、微生物角膜炎、細菌性角膜炎、病毒角膜炎、真菌角膜炎、化學燒傷、熱燒傷、機械性外傷、角膜刮傷、受損內皮、大泡性角膜病變、福斯氏角膜失養症(Fuch's corneal dystrophy)、角膜結疤、休格倫氏症候群或手術後併發症。在一些實施例中，疾病或病症為角膜損傷，包括角膜霧霾或結疤。在一些實施例中，疾病為神經病變性角膜炎。該方法涉及向該個體投與治療有效量的如本文所描述之HGF及/或FGF多肽。如本文中所用，「個體」或「患者」可互換地使用，包括哺乳動物，諸如人類、牛、馬、犬、貓、豬及綿羊科動物。個體較佳地為人類。
在一些實施例中，該個體具有NK，其中存在對三叉神經或其分支之損傷。在某些情況下，對三叉神經或其分支之損傷係由感染(例如，細菌或病毒感染，諸如單純疱疹或帶狀疱疹感染)引起。在某些情況下，對三叉神經或其分支之損傷係由眼睛手術(例如，白內障手術、角膜移植、屈光手術)引起。在某些情況下，對三叉神經或其分支之損傷係由全身性疾病引起，諸如糖尿病、麻風、眼窩腫瘤及炎症。在一些情況下，對三叉神經或其分支之損傷由物理創傷引起，包括化學物質及熱灼傷。在其他情況下，對三叉神經或其分支之損傷由使用隱形眼鏡引起。在一些實施例中，個體具有NK，其中對上皮之損傷不與對三叉神經路徑之任何擾動相關。
在一些實施例中，向個體眼睛投與HGF及/或FGF。HGF及/或FGF投與途徑可根據已知方法進行，例如局部經由滴眼劑或軟性隱形眼鏡、局部眼部注射(例如，結膜下、玻璃體內、眼球後及前房內)或藉由如下文所指出之持續釋放系統。在一些實施例中，該HGF及/或FGF局部投與至該眼睛。術語「局部」指將HGF及/或FGF直接施用於眼睛之表面(亦即，角膜)上。在一些實施例中，該HGF及/或FGF藉由注射投與至該眼睛。在一些實施例中，該HGF及/或FGF係結膜下投與。術語「結膜下」係指在眼球結膜下(眼球上(epibulbar))或眼瞼之結膜內襯下(眼瞼下)給予之注射(Stanley, R., 2008 「Ocular Clinical Pharmacology」 in Small Animal Clinical Pharmacology (2nd Ed.))。在一些實施例中，該HGF及/或FGF係玻璃體內投與。術語「玻璃體內」係指直接給予至眼睛之玻璃體腔中之注射。在一些實施例中，HGF及/或FGF係前房內投與。術語「前房內」係指直接給予至眼睛之前房中之注射。意欲用於注射之治療性多肽組合物一般置於具有適合之進入孔的無菌容器中，例如具有可藉由皮下注射針刺穿之塞子的小瓶。對於局部投與，包含HGF及/或FGF之醫藥組合物可置於可擠壓滴眼劑容器中。在一些實施例中，包含HGF及/或FGF之醫藥組合物係使用經眼擠壓分配器(諸如來自Aptar Pharma之分配器)局部投與。
持續釋放型製劑之適合實例包括半滲透聚合物基質的成形物件形式，例如薄膜、植入物或微膠囊。持續釋放基質包括聚酯、水凝膠、聚乳酸交酯(美國專利第3,773,919號及EP 58,481)、L-麩胺酸及γ乙基-L-麩胺酸之共聚物(Sidman等人, 1983, Biopolymers, 22:547-556)、聚(2-羥乙基-甲基丙烯酸酯) (Langer等人, 1981, J. Biomed. Mater. Res., 15:267-277及Langer, 1982, Chem. Tech., 12:98-105)、乙烯乙酸乙烯酯(Langer等人, 同上)或聚-D(-)-3-羥基丁酸(EP 133,988)。持續釋放組合物亦包括經脂質體包覆之HGF、FGF或HGF與FGF兩者。含有HGF、FGF或HGF及FGF兩者之脂質體可藉由本身已知的方法製備：DE 3,218,121；Eppstein等人, 1985, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 82:3688-3692；Hwang等人, 1980, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 77:4030-4034；EP 52,322；EP 36,676；EP 88,046；EP 143,949；EP 142,641；美國專利第4,485,045及4,544,545號；及EP 102,324。通常，脂質體屬於小(約200-800埃)單層型，其中脂質含量大於約30莫耳%膽固醇，所選擇之比例經調節以用於最有效療法。
待治療採用之含HGF或含HGF組合物及/或含FGF或含FGF組合物之有效量將視例如治療目標、投與途徑及個體之病狀而定。因此，可能需要治療師來滴定劑量及視需要調節投與途徑以獲得最佳治療效果。典型地，臨床醫師將投與HGF及/或FGF，直至達到達成所需作用之劑量。此療法之進程易於藉由習知分析及方法來監測。
在治療及預防眼睛疾病及病症(諸如角膜霧霾或結疤)以及NK中，包含HGF及/或FGF之醫藥組合物可以與良好醫學實踐一致的方式調配、給藥及投與。在此上下文中考慮之因素包括所治療之特定哺乳動物、個別個體之臨床病狀、病症之病因、投與方法、投與時程及醫學從業者已知之其他因素。待投與之HGF及/或FGF的「治療有效量」可藉由此類考慮因素調節且為預防、改進或治療眼睛疾病之症狀所必需的最小量。此量較佳低於對宿主具有毒性或對宿主具有顯著不良作用的量。
作為一般處方，以重量比體積(w/v)計，局部投與至個體眼睛之醫藥組合物包含初始濃度在約0.01%至約1.0%、約0.05%至約0.5%、約0.05%至約0.4%、約0.05%至約0.3%或約0.08%至約0.25%範圍內之HGF及/或FGF。在一些實施例中，局部投與至個體眼睛之醫藥組合物包含濃度為約0.1% (w/v)之HGF。在一些實施例中，局部投與至個體眼睛之醫藥組合物包含濃度為約0.2% (w/v)之HGF。在一些實施例中，局部投與至個體眼睛之醫藥組合物包含濃度為約0.1% (w/v)之FGF。在一些實施例中，局部投與至個體眼睛之醫藥組合物包含濃度為約0.2% (w/v)之FGF。在一些實施例中，局部投與至個體眼睛之醫藥組合物包含各自濃度為約0.1% (w/v)之HGF與FGF。在一些實施例中，局部投與至個體眼睛之醫藥組合物包含各自濃度為約0.2% (w/v)之HGF與FGF。在一些實施例中，醫藥組合物包含HGF且實質上不含FGF。在一些實施例中，醫藥組合物包含FGF且實質上不含HGF。
本發明亦提供組合療法。舉例而言，向個體(例如，人類)投與本文所描述之HGF與第二治療劑之組合。在一些實施例中，向個體伴隨第二治療劑投與HGF多肽。如本文所用，術語「伴隨」意謂「在相同時間段期間」發生。在一些實施例中，將HGF多肽及第二治療劑調配於同一調配物中。在一些實施例中，將HGF多肽及第二治療劑調配於各別調配物中。在一些實施例中，同時投與HGF多肽及第二治療劑。在一些實施例中，依序投與HGF多肽及第二治療劑。在一些實施例中，在投與第二治療劑之前投與HGF多肽。在一些實施例中，在投與第二治療劑之後投與HGF多肽。在一些實施例中，將HGF多肽及第二治療劑相隔1至60分鐘、相隔5至30分鐘或相隔10至20分鐘投與。在一些實施例中，相隔5分鐘投與HGF多肽及第二治療劑。在一些實施例中，相隔10分鐘投與HGF多肽及第二治療劑。在一些實施例中，相隔15分鐘投與HGF多肽及第二治療劑。在一些實施例中，相隔30分鐘投與HGF多肽及第二治療劑。在一些實施例中，相隔1小時投與HGF多肽及第二治療劑。在一些實施例中，FGF多肽為第二治療劑。
在一些實施例中，第二治療劑可引起與HGF相同的生物學及生理作用，例如活化類似細胞內路徑。在一些實施例中，第二治療劑可引起與HGF不同的生物學及生理作用。在一些實施例中，第二治療劑增強由HGF引起之生物學及生理作用。在一些實施例中，第二治療劑具有與HGF相同之分子類別(亦即，兩者均為多肽)。在一些實施例中，第二治療劑具有不同類別之分子(例如，小分子或核酸)。第二治療劑之非限制性實例包括小分子、肽、蛋白質、抗體及抗原結合片段、核酸、細胞及組織提取物及羊膜及其他體液。第二治療劑可經由自天然來源分離、以合成方式產生或藉由細胞培養獲得。如本文所使用，術語「小分子」係指低於900道爾頓之低分子量有機化合物。如本文所用，術語「肽」係指2至約50個次單位胺基酸、胺基酸類似物或肽模擬物之化合物。次單位可藉由肽鍵連接。如本文所用，術語「胺基酸」係指天然及/或非天然或合成胺基酸，包括甘胺酸及D或L光學異構體，及胺基酸類似物及肽模擬物。如本文所用，術語「抗體」包括多株抗體及單株抗體以及其片段。抗體包括(但不限於)小鼠、大鼠、兔、人類或嵌合抗體及其類似物。術語抗體亦包括所有同型之抗體。如本文所用，「核酸」或「聚核苷酸」係指任何長度之核苷酸或其類似物的聚合形式。聚核苷酸可含有去氧核糖核苷酸、核糖核苷酸及/或其類似物。核苷酸可具有任何三維結構，且可執行任何已知或未知的功能。核酸分子進一步包括寡核苷酸，諸如反義分子、探針、引子及其類似物。寡核苷酸通常具有約2至約100、8至約30或10至約28個核苷酸或其類似物。
在一些實施例中，第二治療劑為抗生素。抗生素之非限制性實例包括甲氧苄啶(trimethoprim)、多黏菌素B (polymyxin B)、阿奇黴素(azithromycin)、慶大黴素(gentamicin)、貝西沙星(besifloxacin)、加替沙星(gatifloxacin)、莫西沙星(moxifloxacin)、左氧氟沙星(levofloxacin)、環丙沙星(ciprofloxacin)、氧氟沙星(ofloxacin)及托普黴素(tobramycin)。在一些實施例中，第二治療劑為非類固醇消炎藥(NSAID)。NSAID之非限制性實例包括阿司匹林(aspirin)、雙水楊酸酯(salsalate)、塞內昔布(celecoxib)、雙氯芬酸(diclofenac)、依託度酸(etodolac)、布洛芬(ibuprofen)、吲哚美辛(indomethacin)、酮基布洛芬(ketoprofen)、酮咯酸(ketorolac)、萘丁美酮(nabumetone)、萘普生(naproxen)、奧沙普嗪(oxaprozin)、吡羅昔康(piroxicam)、舒林酸(sulindac)及托美丁(tolmetin)。在一些實施例中，第二治療劑為經眼類固醇。經眼類固醇之非限制性實例包括地塞米松眼用(Maxidex®)、二氟潑尼酯眼用(Durezol®)、氟米龍眼用(Flarex®、FML®、FML Liquifilm®、FML Forte®)、氯替潑諾眼用(Alrex®、Lotemax®)、普賴蘇穠乙酸鹽眼用(Omnipred®、Pred Forte®、Pred Mild®)、普賴蘇穠磷酸鈉眼用及利美索龍眼用(Vexol®)。在一些實施例中，第二治療劑為局部麻醉劑。局部麻醉劑之非限制性實例包括丙胺卡因(prilocaine)、腎上腺素(epinephrine)、利多卡因(lidocaine)、布比卡因(bupivacaine)、龍托卡因(lontocaine)、奴佛卡因(novocain)、羅比卡因(ropivacaine)、普魯卡因(procaine)、阿美索卡因(amethocaine)、辛可卡因(cinchocaine)、甲哌卡因(mepivacaine)及依替卡因(etidocaine)。在一些實施例中，第二治療劑為另一生長因子。生長因子之非限制性實例包括上皮生長因子(EGF)、纖維母細胞生長因子(FGF)、類胰島素生長因子(IGF-1)、血小板衍生生長因子(PDGF)、角質細胞生長因子(KGF)、轉型生長因子(TGF)、血管內皮生長因子及粒細胞－巨噬細胞群落刺激因子(GM-CSF)、神經營養素及神經生長因子(NGF)、腫瘤壞死因子-α (TNF- a)及介白素。
醫藥組合物及調配物維持多肽對熱應力之穩定性及最小化可見微粒及可溶性聚集體之形成在包含多肽之醫藥組合物，尤其主要包含需要長期儲存之水溶液的醫藥組合物之研發中至關重要。參見以下參考文獻，其中HGF及相關蛋白質與各種穩定劑一起調配：WO 90/10651WO00/72873 (歐洲專利第1180368號)、JP-A 9-25241 (美國專利第7,173,008號)、WO 2008/102849 (美國專利第8461112號)及US 10213485。儘管蛋白質聚集及熱穩定性問題可能在一定程度上使用如先前技術中所描述之此類凍乾HGF調配物規避，但此使在產生包含HGF之醫藥組合物時冷凍乾燥單元操作成為必要，其在該方法中產生額外製造成本及複雜性。此外，凍乾HGF調配物在給藥及投與之前需要復原。因此，穩定溶液為有利的。
在本發明之一些實施例中，HGF(及/或FGF)調配於液體醫藥組合物中。在一些實施例中，醫藥組合物為水性醫藥組合物。如本文中所用，「水性醫藥調配物」係指基於水之液體。在一些實施例中，水性醫藥組合物包含蒸餾水。在一些實施例中，該水性醫藥組合物包含去離子水。在一些實施例中，該水性醫藥組合物包含無菌水。在一些實施例中，水性醫藥組合物包含注射用水(WFI)。在一些實施例中，液體醫藥組合物調配為滴眼劑。在一些實施例中，液體醫藥組合物調配為溶液。在一些實施例中，液體醫藥組合物調配為懸浮液。在一些實施例中，HGF與另一治療劑一起調配於液體醫藥組合物中。在一些實施例中，將HGF與另一治療劑一起調配為滴眼劑。在一些實施例中，將HGF與另一治療劑一起調配為溶液。
本發明之多肽或其衍生物的醫藥調配物可藉由將具有所需純度之多肽或其衍生物與呈凍乾濾餅或水溶液形式之視情況醫藥學上可接受之載劑、賦形劑、張力調節劑或穩定劑混合來製備用於儲存(參見例如 Remington's Pharmaceutical Sciences, 第43章, 第14版., Mack Publishing Co, Easton Pa. 18042, USA)。可接受之載劑、賦形劑、張力調節劑或穩定劑在所利用之劑量及濃度下對於接收者來說無毒性且包括諸如磷酸鹽、檸檬酸鹽、丁二酸鹽及其他有機酸之緩衝劑，其中該術語「緩衝劑」係指弱酸與其共軛鹼之混合物，或反之亦然，亦即用於使溶液之pH維持在幾乎恆定值下；抗氧化劑，包括抗壞血酸；低分子量(低於約10個殘基)多肽；蛋白質，諸如血清白蛋白、明膠或免疫球蛋白；親水性聚合物，諸如聚乙烯吡咯啶酮(PVP)及聚乙二醇(PEG)；胺基酸，諸如甘胺酸、麩醯胺、天冬醯胺、精胺酸、組胺酸、脯胺酸或離胺酸；單醣、雙醣及其他碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖、蔗糖、海藻糖或糊精；螯合劑，諸如EDTA；糖醇，諸如甘露糖醇或山梨糖醇；成鹽抗衡離子，諸如鈉或鉀；及/或非離子界面活性劑或共溶劑，諸如聚山梨醇酯及泊洛沙姆；張力調節劑，諸如氯化鈉、氯化鉀、甘露糖醇、右旋糖、丙三醇及氯化鎂。
在一些實施例中，本發明之調配物基本上不含張力調節劑。在一些實施例中，本發明之調配物基本上不含氯化物鹽，諸如氯化鈉、氯化鉀及氯化鎂。
在一些實施例中，包含HGF (及/或FGF)之醫藥調配物的pH為約5.5至約7.5。在一些實施例中，醫藥調配物之pH為約5.5至約6.0。在一些實施例中，醫藥調配物之pH為約5.8至約6.2。在一些實施例中，醫藥調配物之pH為約6.0至約6.5。在一些實施例中，醫藥調配物之pH為約6.5至約7.0。在一些實施例中，醫藥調配物之pH為約7.0至約7.5。在一些實施例中，醫藥調配物之pH為約6.0。在一些實施例中，醫藥調配物之pH為約6.5。在一些實施例中，醫藥調配物之pH為約7.0。
在一些實施例中，本發明之醫藥調配物進一步包含緩衝劑。在一些實施例中，緩衝劑係選自乙酸鹽、檸檬酸鹽、麩胺酸鹽、組胺酸、丁二酸鹽、酒石酸鹽及Tris (羥基甲基)胺基甲烷(Tris)。在一些實施例中，緩衝劑為檸檬酸鹽緩衝劑，諸如檸檬酸鈉(例如，二水合檸檬酸鈉)。在一些實施例中，緩衝劑為乙酸鹽緩衝劑。在一些實施例中，緩衝劑為丁二酸鹽緩衝劑。在一些實施例中，緩衝劑為酒石酸鹽緩衝劑。在一些實施例中，緩衝劑為麩胺酸緩衝劑。在一些實施例中，緩衝劑為Tris。在一些實施例中，緩衝劑以約10 mM至約100 mM存在。在一些實施例中，緩衝劑以約20 mM至約50 mM存在。在一些實施例中，緩衝劑以約20 mM存在。
在一些實施例中，本發明之醫藥調配物進一步視情況包含張力調節劑。在一些實施例中，醫藥調配物實質上不含張力調節劑。在一些實施例中，張力調節劑為鹼金屬鹽，諸如氯化鈉(NaCl)或氯化鉀(KCl)。在一些實施例中，張力調節劑為氯化鈣(CaCl 2)。在一些實施例中，張力調節劑為甘露糖醇。在一些實施例中，張力調節劑為海藻糖(例如，二水合海藻糖)。在一些實施例中，張力調節劑以約0.1至約1.0 M、約0.2至約0.8 M、約0.3 M、約0.4 M、約0.5 M、約0.6 M、約0.7 M或約0.75 M存在。在一些實施例中，調配物之滲透壓為約200至約500 mOsm/kg H 2O、約200至約300 mOsm/kg H 2O、約250至約350 mOsm/kg H 2O、約350至約400 mOsm/kg H 2O、約400至約450 mOsm/kg H 2O或約450 mOsm/kg H 2O至約500 mOsm/kg H 2O。在一些實施例中，調配物之滲透壓為約300 mOsm/kg H 2O。在一些實施例中，調配物之滲透壓為約350 mOsm/kg H 2O。在一些實施例中，調配物之滲透壓為約400 mOsm/kg H 2O。在一些實施例中，調配物之滲透壓為約425 mOsm/kg H 2O。在一些實施例中，調配物之滲透壓為約450 mOsm/kg H 2O。在一些實施例中，調配物之滲透壓為約475 mOsm/kg H 2O。在一些實施例中，調配物之滲透壓為約500 mOsm/kg H 2O。
在一些實施例中，本發明之醫藥調配物進一步包含一或多種穩定劑。在一些實施例中，一或多種穩定劑係選自山梨糖醇、海藻糖、蔗糖、丙胺酸、甘胺酸、脯胺酸、麩胺酸及精胺酸。在一些實施例中，一或多種穩定劑選自山梨糖醇、脯胺酸及海藻糖。在一些實施例中，一或多種穩定劑係選自脯胺酸、精胺酸及海藻糖。在一些實施例中，一或多種穩定劑選自麩胺酸、脯胺酸及海藻糖。在一些實施例中，一或多種穩定劑係選自精胺酸、麩胺酸及海藻糖。在一些實施例中，一或多種穩定劑係選自精胺酸、脯胺酸及山梨糖醇。在一些實施例中，一或多種穩定劑係選自麩胺酸、脯胺酸及山梨糖醇。在一些實施例中，一或多種穩定劑選自精胺酸、麩胺酸及山梨糖醇。在一些實施例中，一或多種穩定劑為精胺酸及海藻糖。在一些實施例中，一或多種穩定劑為山梨糖醇及海藻糖。在一些實施例中，一或多種穩定劑為脯胺酸及海藻糖。在一些實施例中，一或多種穩定劑為精胺酸及山梨糖醇。在一些實施例中，一或多種穩定劑為麩胺酸及山梨糖醇。在一些實施例中，一或多種穩定劑為脯胺酸及山梨糖醇。在一些實施例中，該穩定劑為海藻糖。在一些實施例中，該穩定劑為脯胺酸。在一些實施例中，穩定劑為精胺酸。在一些實施例中，該穩定劑為山梨糖醇。
在一些實施例中，本發明之醫藥調配物實質上不含蔗糖、丙胺酸及甘胺酸。在一些實施例中，醫藥調配物實質上不含蔗糖。在一些實施例中，醫藥調配物實質上不含丙胺酸。在一些實施例中，醫藥調配物實質上不含甘胺酸。
在一些實施例中，穩定劑以約100 mM至約500 mM之濃度存在於調配物中。在一些實施例中，穩定劑以約150 mM至約250 mM之濃度存在。在一些實施例中，穩定劑以約200 mM之濃度存在。
在一些實施例中，本發明之醫藥調配物進一步視情況包含界面活性劑。在一些實施例中，界面活性劑選自聚山梨醇酯80 (PS80)、聚山梨醇酯20 (PS20)、泊洛沙姆188 (P188)及泊洛沙姆407 (P407)。在一些實施例中，界面活性劑為聚山梨醇酯80。在一些實施例中，界面活性劑以約0.02%至約0.07% (w/v)存在。在一些實施例中，界面活性劑以約0.04%至約0.06% (w/v)存在。在一些實施例中，界面活性劑以約0.05% (w/v)存在。
在一些實施例中，本發明之醫藥組合物包含： (i) 約0.1% (w/v)至約1.0% (w/v) HGF； (ii) 可使該組合物之pH維持在約5.8至約6.2之緩衝劑； (iii) 約100至約300 mM海藻糖、脯胺酸、山梨糖醇或其混合物； (iv) 視情況選用之張力調節劑，其可提供約250 mOsm/kg H 2O至約500 mOsm/kg H 2O之組合物的滲透壓；及 (v) 視情況選用之界面活性劑。
在一些實施例中，本發明之醫藥組合物包含： (i) 約0.1%至約0.5% (w/v) HGF； (ii) 可使該組合物之pH維持在約5.8至約6.2之緩衝劑； (iii) 約100至約300 mM海藻糖、脯胺酸、山梨糖醇或其混合物； (iv) 視情況選用之張力調節劑，其可提供約250 mOsm/kg H 2O至約500 mOsm/kg H 2O之組合物的滲透壓；及 (v) 視情況選用之界面活性劑。
在一些實施例中，本發明之醫藥組合物包含： (i) 約0.1% (w/v) HGF； (ii) 可使該組合物之pH維持在約5.8至約6.2之緩衝劑； (iii) 約100至約300 mM海藻糖、脯胺酸、山梨糖醇或其混合物； (iv) 視情況選用之張力調節劑，其可提供約250 mOsm/kg H 2O至約500 mOsm/kg H 2O之組合物的滲透壓；及 (v) 視情況選用之界面活性劑。
在一些實施例中，本發明之醫藥組合物包含： (i) 約0.2% (w/v) HGF； (ii) 可使該組合物之pH維持在約5.8至約6.2之緩衝劑； (iii) 約100至約300 mM海藻糖、脯胺酸、山梨糖醇或其混合物； (iv) 視情況選用之張力調節劑，其可提供約250 mOsm/kg H 2O至約500 mOsm/kg H 2O之組合物的滲透壓；及 (v) 視情況選用之界面活性劑。
在一些實施例中，本發明之醫藥組合物包含： 約0.1% (w/v) HGF； 約20 mM檸檬酸鈉； 約200 mM海藻糖、脯胺酸或山梨糖醇； 約0.05% (w/v)界面活性劑； 其中該組合物之pH為約6.0。
在一些實施例中，本發明之醫藥組合物包含： 約0.1% (w/v) HGF； 約20 mM檸檬酸鈉； 約200 mM海藻糖； 約0.05% (w/v)聚山梨醇酯80 (PS80)； 其中該組合物之pH為約6.0。
在一些實施例中，本發明之醫藥組合物包含： 約0.1% (w/v) HGF； 約20 mM檸檬酸鈉； 約200 mM脯胺酸； 約0.05% (w/v)聚山梨醇酯80 (PS80)； 其中該組合物之pH為約6.0。
在一些實施例中，本發明之醫藥組合物包含： 約0.1% (w/v) HGF； 約20 mM檸檬酸鈉； 約200 mM山梨糖醇； 約0.05% (w/v)聚山梨醇酯80 (PS80)； 其中該組合物之pH為約6.0。
在一些實施例中，本發明之醫藥組合物包含： 約0.2% (w/v) HGF； 約20 mM檸檬酸鈉； 約200 mM海藻糖、脯胺酸或山梨糖醇； 約0.05% (w/v)界面活性劑； 其中該組合物之pH為約6.0。
在一些實施例中，本發明之醫藥組合物包含： 約0.2% (w/v) HGF； 約20 mM檸檬酸鈉； 約200 mM海藻糖； 約0.05% (w/v)聚山梨醇酯80 (PS80)； 其中該組合物之pH為約6.0。
在一些實施例中，本發明之醫藥組合物包含： 約0.2% (w/v) HGF； 約20 mM檸檬酸鈉； 約200 mM脯胺酸； 約0.05% (w/v)聚山梨醇酯80 (PS80)； 其中該組合物之pH為約6.0。
在一些實施例中，本發明之醫藥組合物包含： 約0.2% (w/v) HGF； 約20 mM檸檬酸鈉； 約200 mM山梨糖醇； 約0.05% (w/v)聚山梨醇酯80 (PS80)； 其中該組合物之pH為約6.0。
在一些實施例中，本發明之醫藥組合物包含： 約0.1% (w/v) HGF； 約20 mM檸檬酸鈉； 約200 mM海藻糖、脯胺酸或山梨糖醇； 約0.05% (w/v)界面活性劑； 其中該組合物之pH為約6.0，且該組合物之滲透壓為約350 mOsm/kg H 2O。
在一些實施例中，本發明之醫藥組合物包含： 約0.1% (w/v) HGF； 約20 mM檸檬酸鈉； 約200 mM海藻糖； 約0.05% (w/v)聚山梨醇酯80 (PS80)； 其中該組合物之pH為約6.0，且該組合物之滲透壓為約350 mOsm/kg H 2O。
在一些實施例中，本發明之醫藥組合物包含： 約0.1% (w/v) HGF； 約20 mM檸檬酸鈉； 約200 mM脯胺酸； 約0.05% (w/v)聚山梨醇酯80 (PS80)； 其中該組合物之pH為約6.0，且該組合物之滲透壓為約350 mOsm/kg H 2O。
在一些實施例中，本發明之醫藥組合物包含： 約0.1% (w/v) HGF； 約20 mM檸檬酸鈉； 約200 mM山梨糖醇； 約0.05% (w/v)聚山梨醇酯80 (PS80)； 其中該組合物之pH為約6.0，且該組合物之滲透壓為約350 mOsm/kg H 2O。
在一些實施例中，本發明之醫藥組合物包含： 約0.2% (w/v) HGF； 約20 mM檸檬酸鈉； 約200 mM海藻糖、脯胺酸或山梨糖醇； 約0.05% (w/v)界面活性劑； 其中該組合物之pH為約6.0，且該組合物之滲透壓為約450 mOsm/kg H 2O。
在一些實施例中，本發明之醫藥組合物包含： 約0.2% (w/v) HGF； 約20 mM檸檬酸鈉； 約200 mM海藻糖； 約0.05% (w/v)聚山梨醇酯80 (PS80)； 其中該組合物之pH為約6.0，且該組合物之滲透壓為約450 mOsm/kg H 2O。
在一些實施例中，本發明之醫藥組合物包含： 約0.2% (w/v) HGF； 約20 mM檸檬酸鈉； 約200 mM脯胺酸； 約0.05% (w/v)聚山梨醇酯80 (PS80)； 其中該組合物之pH為約6.0，且該組合物之滲透壓為約450 mOsm/kg H 2O。
在一些實施例中，本發明之醫藥組合物包含： 約0.2% (w/v) HGF； 約20 mM檸檬酸鈉； 約200 mM山梨糖醇； 約0.05% (w/v)聚山梨醇酯80 (PS80)； 其中該組合物之pH為約6.0，且該組合物之滲透壓為約450 mOsm/kg H 2O。
在一些實施例中，HGF與角膜基質滲透賦形劑組合投與。基質滲透賦形劑為可增強治療劑遞送穿過角膜層(主要為上皮)的化合物(Moiseev等人., 2019, Pharmaceutics, 11:321-354)。此等化合物當包括於醫藥組合物中且局部投與至眼睛時能夠修改淚膜、黏液層或眼部膜，由此增加治療劑之角膜滲透性。基質滲透賦形劑之非限制性實例包括環糊精(CD)，包括α-、β-及γ-CD；螯合劑，諸如乙二胺-N,N,N',N'-四乙酸(EDTA)、乙二醇-雙(β-胺基乙基)-N,N,N',N'-四乙酸(EGTA)、1,2-雙(o- 胺基苯氧基)乙烷-N,N,N',N'-四乙酸(BAPTA)及乙二胺-N,N,N',N'- 二丁二酸(EDDS)；冠醚、界面活性劑、膽酸及膽汁鹽及細胞穿透肽。用於活體內投與之HGF較佳為無菌的。此可容易地藉由經由無菌過濾膜過濾HGF水溶液來實現。HGF或其變異體通常以凍乾形式或以溶液形式儲存。
應瞭解，為清楚起見而在單獨實施例之上下文中所描述的本發明之某些特徵亦可以組合形式提供於單一實施例中。相反，為了簡便起見而描述於單個實施例之上下文中之本發明的各種特徵亦可分開或以任何適合的子組合形式提供。
實例 實例 1 ： UniProtKB 上可用之人類 HGF 同功型的胺基酸序列 (uniprot.org/uniprot/P14210) SEQ ID NO:1. 智人 HGF 同功型 3 之 胺基酸序列 ； ( 標識符 ： P14210- 3 ， 寄存編號 NP_001010932.1) (dHGF)
Figure 02_image001
SEQ ID NO:2. 智人 HGF 同功型 1 之 胺基酸序列 ； ( 標識符 ： P14210- 1 ， 寄存編號 ： NP_000592.3 )
Figure 02_image003
Figure 02_image005
SEQ ID NO:3. 智人 HGF 同功型 2 之胺基酸序列 ( 標識符 ： P14210-2 ， 寄存編號 ： NP_001010931.1)：
Figure 02_image007
SEQ ID NO:4. 智人 HGF 同功型 4 之胺基酸序列 ( 標識符 ： P14210- 4)：
Figure 02_image009
SEQ ID NO:5. 智人 HGF 同功型 5 之胺基酸序列 ( 標識符 ： P14210-5 ， NP_001010933.1)：
Figure 02_image011
SEQ ID NO:6. 智人 HGF 同功型 6 之胺基酸序列 ( 標識符 ： P14210-6 ， NP_001010934.1):
Figure 02_image013
SEQ ID NO: 7. HGF 變異體：
Figure 02_image015
SEQ ID NO: 8. HGF 變異體：
Figure 02_image017
SEQ ID NO: 9. HGF 變異體：
Figure 02_image019
Figure 02_image021
SEQ ID NO: 10. HGF 變異體：
Figure 02_image023
SEQ ID NO: 11. HGF 變異體：
Figure 02_image025
Figure 02_image027
SEQ ID NO: 12. HGF 變異體：
Figure 02_image029
SEQ ID NO: 13. HGF 變異體：
Figure 02_image031
Figure 02_image033
SEQ ID NO: 14. HGF 變異體：
Figure 02_image035
SEQ ID NO: 15. HGF 變異體：
Figure 02_image037
Figure 02_image039
SEQ ID NO: 16. HGF 變異體：
Figure 02_image041
SEQ ID NO: 17. HGF 變異體：
Figure 02_image043
Figure 02_image045
SEQ ID NO: 18. HGF 變異體：
Figure 02_image047
SEQ ID NO: 19. HGF 變異體：
Figure 02_image049
Figure 02_image051
SEQ ID NO: 20. HGF 變異體：
Figure 02_image053
SEQ ID NO: 21. HGF 變異體：
Figure 02_image055
SEQ ID NO: 22. HGF 變異體：
Figure 02_image057
SEQ ID NO: 23. HGF 變異體：
Figure 02_image059
SEQ ID NO: 24. HGF 變異體：
Figure 02_image061
Figure 02_image063
SEQ ID NO: 25. HGF 變異體：
Figure 02_image065
SEQ ID NO: 26. HGF 變異體：
Figure 02_image067
Figure 02_image069
SEQ ID NO: 27. HGF 變異體：
Figure 02_image071
SEQ ID NO: 28. FGF1 野生型：
Figure 02_image073
SEQ ID NO: 29. FGF1 變異體：
Figure 02_image075
Figure 02_image077
SEQ ID NO: 30. FGF1 變異體：
Figure 02_image079
SEQ ID NO: 31. FGF1 變異體：
Figure 02_image081
SEQ ID NO: 32. FGF1 變異體：
Figure 02_image083
SEQ ID NO: 33. FGF1 變異體：
Figure 02_image085
SEQ ID NO:34  SEQ ID NO: 1 之 訊號肽
Figure 02_image087
SEQ ID NO:35  SEQ ID NO: 1 之未裂解 α 及 β 鏈肽
Figure 02_image089
Figure 02_image091
SEQ ID NO:36 SEQ ID NO: 1 之 α 鏈肽
Figure 02_image093
SEQ ID NO:37  SEQ ID NO: 1 之 β 鏈肽
Figure 02_image095
實例 2 ： 調配物進行實驗設計(DoE)研究以鑑別最佳pH、緩衝劑及穩定劑，其可防止聚集且維持HGF在溶液調配物中之最佳物理化學穩定性。HGF蛋白質(來自SEQ. ID NO. 1之經活化dHGF)在10 mM citrate、1M NaCl、0.075% PS80 (pH 6.0)中以34.67 mg/mL調配且使用Amicon-15濃縮器單元(10 kDa MWCO)緩衝交換至表3中所列出之調配物中至1 mg/mL之濃度。將340 µL體積之34.67 mg/mL溶液添加至預沖洗濃縮器(具有適當緩衝劑)中，且在適當調配緩衝溶液(不具有界面活性劑)中稀釋至15 mL。樣品以3200 rcf離心直至實現約5 mL之體積，隨後用適當調配緩衝液再次稀釋至約15 mL總體積。此緩衝交換過程重複五次循環，總稀釋度為約3610倍。在最終離心循環中，使樣品體積減小至約7 mL。假定最差回收率為約60%，各樣品之最終蛋白質濃度為約1 mg/mL，其中PS80之估計殘餘濃度為約0.004%。
使用消光係數為1.890 mL mg -1cm -1藉由UV-可見光譜法分析緩衝液交換樣品之蛋白質含量。視需要使用適當調配緩衝液使樣品標準化至目標1 mg/mL且外加10% PS80 (w/v，由USP級PS80製備，目錄號4117-04 J.T.Baker或等效物)至目標濃度為0.05% PS80於HGF調配物中。在緩衝液交換過程結束時不考慮理論殘餘PS80含量(約0.004%)，因為PS80之殘餘含量相對於外加PS80之量為最小的。
在蛋白質含量及界面活性劑濃度標準化之後，使用0.22 µm無菌濃縮器(Millipore Ultrafree-CL GV，P/N UFC40GV0S)對該調配物進行無菌過濾。使各調配物以1.0 mL/小瓶無菌過濾至六個滅菌1型硼矽酸鹽玻璃小瓶(2 mL，13 mm，目錄號RTF8418，Afton)中。使剩餘樣品體積轉移至1 mL LDPE管(目錄號03-439-61W Fisher)且用作初始時間點對照(T0)以便分析型測試。對於中心點調配物，將來自T0測試小瓶之200 µL轉移至1 mL LDPE管(目錄號03-439-61W Fisher)且用於如下文所描述之吸收研究。樣品轉移及無菌過濾程序在滅菌生物安全櫃中使用無菌技術進行。用滅菌Fluorotec塞來塞住小瓶，且用具有按鈕之13FO鋁蓋進行封蓋。在以下儲存條件下儲存各調配物類型之兩種小瓶：2至8℃，持續4週，及40℃，持續4週。藉由目視檢查，針對顏色、透明度及微粒評估樣品外觀。藉由DSF/SLS評估蛋白質之熱穩定性。另外，使用UV可見光譜法藉由量測340 nm波長下之吸收進行濁度量測。蛋白質之構形穩定性及聚集穩定性分別藉由DLS及SEC-HPLC確定。使用還原及非還原毛細管凝膠電泳(CE-SDS)及等電聚焦(icIEF)凝膠電泳進一步分析樣品。使用HIAC粒子計數器(其中報導樣品中＞ 2 µm、≥5 µm、≥10 µm及≥25 µm的平均粒子計數)評估粒子物質之存在。所有DoE分析以隨機順序進行。使用Design Expert Stat Ease®評估所有DoE調配物之T0及穩定性時間點的資料以推導出統計顯著趨勢。
評估非特異性 HGF 蛋白質吸附至 LDPE 容器表面之吸附研究將LDPE試管中之樣品儲存於2-8℃下至少五天。在儲存五天之後量測此等樣品如由在280 nm (A280)下之UV吸光度所確定的蛋白質含量，且將該等值與T0時之相應結果相比，以確定是否存在蛋白質至LDPE容器材料之任何吸附。當儲存於LDPE容器中時觀測到最小蛋白質吸附，其中除調配物包括蔗糖及丙胺酸之外，在5天後量測之HGF濃度的差異%低於所測試之大部分調配物的4%，其中觀測到HGF蛋白質濃度降低8% (表3)。來自此研究之結果支持使用LDPE管作為HGF調配物之可行容器。
表 3. LDPE 吸附研究
調配物 pH 濃度 (mg/mL)T=初始 濃度 (mg/mL)T=5天 差異 %
20 mM檸檬酸鹽，200 mM山梨糖醇，0.05% PS80 6.0 1.0 1.0 1
6.0 1.0 1.0 2
20 mM檸檬酸鹽，200 mM脯胺酸，0.05% PS80 6.0 1.0 1.0 3
6.0 1.0 1.0 2
20 mM檸檬酸鹽，200 mM海藻糖，0.05% PS80 6.0 1.0 1.0 3
6.0 1.0 1.0 1
30 mM乙酸鹽，200 mM山梨糖醇，0.05% PS80 5.0 1.0 1.0 4
5.0 1.0 1.0 3
30 mM乙酸鹽，200 mM脯胺酸，0.05% PS80 5.0 1.0 1.0 1
5.0 1.0 1.0 1
30 mM乙酸鹽，200 mM海藻糖，0.05% PS80** 5.0 1.0 1.0 2
5.0 1.0 1.0 1
10 mM檸檬酸鹽，0.3M NaCl，1%蔗糖，0.5%丙胺酸，0.05% PS80** 6.0 1.1 1.0 8
10 mM檸檬酸鹽，0.75M NaCl，0.08%甘胺酸，0.01% PS80** 6.0 1.0 1.0 2
結果一般而言，在於40℃或5℃下儲存1個月時，在6.0至6.5之較高pH範圍下在調配物中觀測到較低濁度(表4)。包含200 mM海藻糖之調配物在5.0至6.5之pH範圍內展現出低濁度(低於0.01)，其中包含200 mM海藻糖之調配物(pH 6.0)在40℃下儲存1個月時展現出最低濁度。
表 4. 在 40 ℃ 或 5 ℃ 下儲存 1 個月之各種 HGF 溶液調配物之濁度 .
調配物 pH 在 40 ℃下 之 A340* 1M 在 5 ℃ 下之 A340* 1M
20 mM檸檬酸鹽，200 mM山梨糖醇，0.05% PS80 5.5 0.011 0.005
6.0 0.016 0.008
6.5 0.024 0.013
20 mM檸檬酸鹽，200 mM脯胺酸，0.05% PS80 5.5 0.028 0.023
6.0 0.009 0.006
6.5 0.030 0.014
20 mM檸檬酸鹽，200 mM海藻糖，0.05% PS80 5.5 0.009 0.007
6.0 0.007 0.005
6.5 0.014 0.009
30 mM乙酸鹽，200 mM山梨糖醇，0.05% PS80 4.5 0.027 0.009
5.0 0.015 0.013
5.5 0.019 0.021
30 mM乙酸鹽，200 mM脯胺酸，0.05% PS80 4.5 0.023 0.021
5.0 0.019 0.008
5.5 0.011 0.018
30 mM乙酸鹽，200 mM海藻糖，0.05% PS80 4.5 0.032 0.014
5.0 0.022 0.010
5.5 0.010 0.009
10 mM檸檬酸鹽，0.3M NaCl，1%蔗糖，0.5%丙胺酸，0.05% PS80** 6.0 0.017 0.014
10 mM檸檬酸鹽，0.75M NaCl，0.08%甘胺酸，0.01% PS80** 6.0 0.006 0.000
* 所有A340值均報導為兩種獨立製備之量測結果的平均值，除了用**指示之調配物，該調配物指示單一製備。
在5℃或40℃下儲存1個月後，在若干調配物之情況下觀測到粒子物質之存在(表5)，如使用HIAC所偵測。包含200 mM山梨糖醇、200 mM脯胺酸或200 mM海藻糖(在pH 5.0下)或200 mM海藻糖或0.08%甘胺酸(在pH 6.0下)之調配物展現出最低粒子計數。然而，其他分析資料，包括表4中所示之濁度資料，指向在pH 6.0下HGF蛋白質之總體穩定性更佳，其中僅200 mM海藻糖及0.08%甘胺酸調配物在儲存時展現出低粒子計數。
表 5. 在 40 ℃ 或 5 ℃ 下儲存 1 個月的 HGF 調配物如 HIAC 所量測之粒子計數 .
      在 40 ℃ 下之 HIAC 粒子計數 * T1M 在 5 ℃下之 HIAC 粒子計數 * T1M
調配物 pH ≥ 2 µm ≥ 5 µm ≥ 10 µm ≥ 25 µm ≥ 2 µm ≥ 5 µm ≥ 10 µm ≥ 25 µm
20 mM檸檬酸鹽，200 mM山梨糖醇，0.05% PS80 6.0 326 121 46 4 386 146 48 3
20 mM檸檬酸鹽，200 mM脯胺酸，0.05% PS80 6.0 753 238 94 4 417 125 20 0
20 mM檸檬酸鹽，200 mM海藻糖，0.05% PS80 6.0 142 47 16 2 200 73 19 0
20 mM檸檬酸鹽，200 mM山梨糖醇，0.05% PS80 5.0 125 34 3 0 327 81 13 0
20 mM檸檬酸鹽，200 mM脯胺酸，0.05% PS80 5.0 74 24 7 2 433 140 26 1
20 mM檸檬酸鹽，200 mM海藻糖，0.05% PS80 5.0 132 33 6 2 314 113 50 8
10 mM檸檬酸鹽，0.3M NaCl，1%蔗糖，0.5%丙胺酸，0.05% PS80** 6.0 955 100 43 2 172 57 23 3
10 mM檸檬酸鹽，0.75M NaCl，0.08%甘胺酸，0.01% PS80** 6.0 57 5 0 0 47 13 8 0
* 所有HIAC值均報導為兩種獨立製備之量測結果的平均值，除了用**指示之調配物，該調配物指示單一製備。
使用降低毛細管凝膠電泳(R-CE-SDS)以進一步評估不同調配物中之HGF蛋白質的化學穩定性。HGF為雜二聚體，其包含經由二硫鍵連接之 a及β鏈。在還原條件下，兩個峰值存在於電泳圖中(表6中之%主峰1及%主峰2)；經「其他%」標記之欄表示HGF蛋白質之潛在降解產物。如表6中所示，在40℃及5℃下，pH 6.0下之HGF調配物在長期儲存期間通常展現出較佳化學穩定性，其中在pH 6.0下，在包含200 mM海藻糖或200 mM脯胺酸之調配物下觀測到最高%總主峰。包含0.08%甘胺酸之HGF調配物，其展現出在粒子計數及濁度方面之良好穩定性，證實具有如R-CE-SDS所揭露之不良化學穩定性。
表 6. 在 40 ℃ 或 5 ℃ 下儲存 1 個月之 HGF 調配物的降低毛細管凝膠電泳 (R-CE-SDS).
      在 40 ℃ 下之 T1M 在 5 ℃ 下之 T1M
調配物 pH % 主峰 1 % 主峰 2 % 其他 % 總主 * % 主峰 1 % 主峰 2 % 其他 % 總主 *
20 mM檸檬酸鹽，200 mM 山梨糖醇，0.05% PS80 6.0 31.5 45.9 22.5 77.5 31.4 46.5 22.1 77.9
20 mM檸檬酸鹽，200 mM脯胺酸，0.05% PS80 6.0 31.9 47.1 21.0 79.0 31.8 46.9 21.3 78.7
20 mM檸檬酸鹽，200 mM海藻糖，0.05% PS80 6.0 32.0 47.0 20.9 79.1 31.3 46.8 21.9 78.1
20 mM檸檬酸鹽，200 mM山梨糖醇，0.05% PS80 5.0 34.2 41.0 24.8 75.2 32.0 47.5 20.5 79.5
20 mM檸檬酸鹽，200 mM脯胺酸，0.05% PS80 5.0 34.3 41.2 24.6 75.4 31.4 47.7 20.9 79.1
20 mM檸檬酸鹽，200 mM海藻糖，0.05% PS80 5.0 34.6 41.9 23.5 76.5 31.9 47.7 20.3 79.7
10 mM檸檬酸鹽，0.3M NaCl，1%蔗糖，0.5%丙胺酸，0.05% PS80** 6.0 30.8 44.5 24.6 75.4 30.1 43.0 27.0 73.0
10 mM檸檬酸鹽，0.75M NaCl，0.08%甘胺酸，0.01% PS80** 6.0 29.8 37.9 32.3 67.7 26.9 39.1 34.0 66.0
* 所有%峰值均報導為兩種獨立製備之量測結果的平均值，除了用**指示之調配物，該調配物指示單一製備。
實例 3 ： 用以確定相對效能之生物分析展現出如實例2下所描述之調配物發展實驗中所鑑別之最佳整體屬性的調配物在轉型生長因子β (TGF-β)存在下使用具有Mv.1.Lu細胞(美國貂肺細胞株)之細胞增殖促進活性效能分析進一步評估相對效能。TGF-β抑制Mv.1.Lu細胞中之細胞生長，且本文所描述之HGF調配物可逆轉此生長抑制。使Mv.1.Lu細胞解凍，且藉由錐蟲藍染色評定細胞儲備液之活力。確定活細胞密度之後，將適當數目之細胞轉移至用於初始培養之燒瓶中。在接種以用於樣品分析之前，將細胞在組織培養燒瓶中連續生長及擴增。
各參考標準物及各測試樣品用分析培養基稀釋以產生八點稀釋曲線。藉由將由測試樣品產生之稀釋曲線與參考標準物進行比較來確定各測試樣品之效能。使來自組織培養瓶之經培養細胞胰蛋白酶化且再懸浮於分析培養基(含有250 pg/mL TGF-ß)中至約0.1 x 106 個細胞/mL。將五十微升細胞懸浮液接種於96孔盤之各孔中。含有經培養細胞之96孔盤在37℃/5% CO 2下培育1至4小時，之後添加參考標準物及測試樣品。將測試樣品及參考標準物重複三次添加至單獨的孔，且培育細胞72小時。
在培育之後，將MTS增殖試劑(Promega，普洛麥格G3582)或其等效物添加至各孔，且將96孔盤在37℃/5% CO 2下培育4小時。在此培育之後，將盤置於UV-Vis盤讀取器中，且在490 nm下量測吸光度。重複三次地分析各參考標準物及測試樣品且藉由平行線評估確定效能。藉由四參數約束擬合將各樣品與參考標準進行比較以確定相對效力。
測試樣品(TS)接受準則： 1. 當繪製平均反應相對於對數蛋白質濃度時，TS獨立四個參數曲線擬合必須展現出劑量依賴性關係。 2. 非TS依賴型4參數擬合之R 2值必須≥ 0.97。 3. TS之所有%CV值必須≤20%。 4. 系統適合樣品之效能將使用整體擬合模型確定且各TS之F機率必須≥0.01。 5. 將在相同條件下重新測試未通過所有以上準則之測試樣品。 6. 未通過以上標準中之任一者的分析盤必須在相同條件下再測試一次。 7. 標準樣品(SS)之RP%必須在50%至200%內。
來自選擇調配物之活體外相對效能生物分析的結果概述於表7中。證實包含200 mM海藻糖(在pH 6.0下)之HGF溶液調配物對於HGF蛋白質亦維持極佳效能(99%)。
表 7. 不同調配物中 HGF 之相對效能
調配物 結果 ( 相對效能 %) **
20 mM檸檬酸鹽，200 mM脯胺酸，pH 6.0 106%
20 mM檸檬酸鹽，200 mM海藻糖，pH 6.0 99%
20 mM檸檬酸鹽，200 mM山梨糖醇，pH 6.0 93%
30 mM乙酸鹽，200 mM脯胺酸，pH 4.5 34%
30 mM乙酸鹽，200 mM海藻糖，pH 4.5 35%
30 mM乙酸鹽，200 mM山梨糖醇，pH 4.5 29%
30 mM乙酸鹽，200 mM脯胺酸，pH 5.5 68%
30 mM乙酸鹽，200 mM海藻糖，pH 5.5 63%
30 mM乙酸鹽，200 mM山梨糖醇，pH 5.5 70%
10 mM檸檬酸鹽，0.75M NaCl，0.08%甘胺酸，0.01% PS80，pH 6.0 91%
10 mM檸檬酸鹽，0.3M NaCl，1%蔗糖，0.5%丙胺酸，0.05% PS80，pH 6.0 98%
** 相較於參考標準之相對效能。
實例 4 ： 小鼠角膜機械損傷模型中局部調配物之功效在小鼠角膜損傷模型中測試用於治療NK之HGF之局部調配物的有效性。在兩個階段中使用雄性C57BL/6小鼠進行功效測試。在第I階段中，75隻動物中之每一者一隻眼睛每天給藥4次(QID)，其中在第0天(損傷)各劑量之間為2小時且研究之剩餘部分(第8天)各劑量之間為3小時，使用3.5 µL體積之測試物品經由移液管。研究中不包括未對損傷(亦即，在第3天無角膜霧霾/不透明度)反應之動物(約10-20%)。1期研究實驗設計概述於下表8中。
表 8 ： 在小鼠角膜機械損傷模型中治療 NK 中 HGF 之 1 期功效測試的實驗設計
群組編號 動物數目 * 治療 ( 在 第 0 天之 QID) 終點 / 程序 安樂死
1 12 +3 PBS • 基線眼部檢查(裂隙燈) • 手術後 亮場數位照相術且隨後每日至多7天。 • 手術後 螢光素染色及成像且隨後每日至多7天。 • OCT(損傷前及損傷後基線，第3及7天) • N=3/組在3天治療之後處死用於病理組織學(整個眼球橫斷面之H&E染色) 第8天(來自PBS組之動物用於如下 表 9中所描述之試驗操作)
2 12 +3 0.1% (w/v) dHGF (T1)**
3 12 +3 0.2% (w/v) dHGF (T2)**
4 12 +3 0.1% (w/v) mNGF (N)
5 12 +3 0.1% (w/v) mHGF (HGF)
縮寫： mNGF：鼠類神經生長因子 mHGF：鼠類肝細胞生長因子
*在第3天排除以下動物： 1. 在第3天，發起人排除對損傷未反應(亦即，在第3天無角膜霧霾/不透明度)之動物(n=1-2/組)，且發起人被隱藏。 2. 收集各組作為代表之動物(n=3/組)以用於組織學(H&E染色)。 **  T1：含0.1% (w/v)人類dHGF (SEQ ID NO: 1)之PBS。 T2：含0.2% (w/v)人類dHGF (SEQ ID NO: 1)之PBS。
表 9 ： 用以確定上皮刮除之頻率 ( 來自 1 期 PBS 組之動物 (n=9-10) 用於此試驗 ) 的試驗操作及 基於 1 期 結果選擇 0.1% 相對於 0.2% dHGF 劑量 .
群組編號 動物數目 * 在第 10 天開始之治療 (QID) 終點 / 程序 安樂死
1 3 HGF (0.1 %) (+ 一次上皮刮除) • 在治療開始之前 第 10 天一次，在不透明區域(1 mm骨髓環鑽)上使用Algerbrush刮擦角膜上皮細胞。 • 在基線時(第10天、第14天、第17天、第20天)之亮場圖及OCT 第20天
2 4 HGF (0.1 %) (+ 三次上皮刮除) • 在治療之前 第 10 天、第 14 天及第 17 天時每日一次，在不透明區域(1 mm骨髓環鑽)上使用Algerbrush刮擦上皮細胞。 • 在基線時(第10天、第14天、第17天、第20天)之亮場圖及OCT 第20天
在2期功效研究中，85隻動物對受傷之角膜每天給藥4次(QID)，其中在第11天(損傷)各劑量之間為2小時且研究之剩餘部分(第20天)各劑量之間為3小時，在3.5 µL體積之測試物品中。在首次治療施用時(第11天)，藉由在角膜之不透明區域(藉由1mm骨髓環鑽標記)上平緩地施加Algerbrush之尖端來移除角膜上皮細胞。在第16天第二次移除角膜上皮細胞。2期之研究設計概述於下表10中。
表 10 ： 在小鼠角膜機械損傷模型中治療 NK 中 HGF 之 2 期 功效測試的實驗設計
群組編號 動物數目 * 在第 10 天開始之治療 (QID) 終點 / 程序 安樂死
1 17 媒劑** • 基線眼部檢查(裂隙燈) • 在基線(第8天)、第16天及第21天時之亮場 數位照相術。 第21天
2 17 0.1% (w/v) dHGF
3 17 0.2% (w/v) dHGF
4 17 0.1% (w/v) mNGF • 在基線(第8天)、第21天時之 螢光素染色及成像。 • OCT基線(第8天)、第16天及第21天。   
5 17 0.1% (w/v) mHGF
*將具有正確表型之動物登記用於治療。
縮寫： mNGF：鼠類神經生長因子 mHGF：鼠類肝細胞生長因子 dHGF：人類肝細胞生長因子(SEQ. ID NO. 1) **媒劑= PBS；mNGF、mHGF及dHGF以指示濃度調配於媒劑中。
角膜損傷 (1 期 及 2 期 ) ：在模型誘導之前，測試個體皮下給予0.01-0.05 mg/kg之丁基原啡因。亦向動物局部給予托品醯胺(1.0%)與苯腎上腺素(2.5%)混合液以擴張且突出眼睛。隨後用氯胺酮/甲苯噻嗪混合物及一滴0.5%丙美卡因HCl將動物轉移以用於手術程序。將鑷(例如Dumont #4)用於突出動物之眼睛，且施用輕微壓力，將2 mm骨髓環鑽置於中心角膜上。將骨髓環鑽在平緩壓力下旋轉3小時以界定缺陷區域。將具有0.5mm毛邊之Algerbrush II (Alger Company Inc., Lago Vista, TX)用於移除角膜上皮細胞及環鑽區域內之前基質。受傷基質藉由基質碎片之外觀標記。藉由用平衡鹽生理鹽水(BSS)洗滌移除基質碎屑。藉由光同調斷層掃描(OCT)掃描動物且經螢光素染色，隨後將第一劑量之治療應用於受傷眼睛。在15分鐘之後施加局部抗生素(氧氟沙星(Ofloxacin))且使動物自手術正常恢復。動物在手術後約6-8小時皮下接受0.01-0.05 mg/kg之丁基原啡因之第二次給藥且在手術後兩天每6至8小時每天兩次接受。
角膜損傷 ( 上皮移除 ， 僅 2 期 ) ：在開始2期之前，執行試驗研究以確定如上文針對1期所描述之初始損傷後之上皮細胞刮擦的最佳數目。兩個刮擦對於所需模型誘導為足夠的。在開始2期之後，動物皮下給予0.01-0.05 mg/kg之丁基原啡因。亦向動物局部給予托品醯胺(1.0%)與苯腎上腺素(2.5%)混合液以擴張且突出眼睛。隨後用氯胺酮/甲苯噻嗪混合物將動物轉移以用於手術程序，且施用一滴0.5%丙美卡因HCl。在第0天，動物經歷如上文針對1期所描述之手術程序。在初始損傷及疤痕形成之後第11天及第16天，將鑷(例如Dumont #4)用於突出動物之眼睛，且施用輕微壓力，將1 mm骨髓環鑽置於角膜上之疤痕區域。將骨髓環鑽在平緩壓力下旋轉3小時以界定缺陷區域。將具有0.5mm毛邊之Algerbrush II (Alger Company Inc., Lago Vista, TX)用於移除環鑽區域內之角膜上皮細胞。隨後用BSS洗滌眼表面。藉由光同調斷層掃描(OCT)掃描動物，經螢光素染色，隨後將第一劑量之治療應用於受傷眼睛。在15分鐘之後施加局部抗生素(氧氟沙星(Ofloxacin))且使動物自手術正常恢復。動物在手術後約6-8小時以0.01-0.05 mg/kg皮下接受第二劑量之丁基原啡因且每日兩次(BID)每6-8小時持續手術後兩天。
監測之參數 ： (i) 檢查及體重 ：每日兩次觀測死亡率及發病以及籠側觀測結果，特別注意兩隻眼睛。由於在給藥及成像之此研究的1期期間大量處置，n=18隻動物死亡(第1組：4隻小鼠；第2組：3隻小鼠；第3組：3隻小鼠；第4組：3隻小鼠；第5組：5隻小鼠)或在研究結束之前安樂死。在2期之試驗期間，無死亡。在2期中，減少成像會話之數目且僅n=3隻小鼠死亡(第1組：1隻小鼠；第2組：1隻小鼠；第4組：1隻小鼠)。在模型誘導之前及在屍檢時獲取體重。
(ii) 眼部檢查及亮場影像 ：基線眼表面形態在登記之前由獸醫學眼科醫師在裂隙燈生物顯微鏡下評估。使用成像J軟體在基線及如研究設計中所指示之天數捕獲亮場影像以分析角膜不透明度。
(iii) 螢光素染色 ：在如實驗設計表中所指示之時間點處，動物經歷螢光素眼表面染色。將約1.5 µl之2.5%螢光素鈉施加至角膜表面持續30秒，接著用1X PBS使用1 ml注射器清洗。在鈷藍光下使用安裝於三角架上之Nikon數位SLR攝影機對角膜染色拍照。將相機透鏡處於手動模式，其中透鏡設定為1呎遠。動物眼睛聚焦於檢視窗之中心且收集影像以維持相機透鏡與動物眼睛之間的一致距離。使用影像J軟體(NIH)確定各時間點處之各眼的螢光素染色之面積(以像素為單位)。
(iv) 光同調斷層掃描 (OCT) ：在如藉由實驗設計表指示之天數時，所有動物均經歷眼睛前部切片之OCT成像程序。麻醉動物且用PBS洗滌角膜，隨後進行OCT檢查。
(v) 組織學 ( 僅 1 期 ) ：在第3天，在最終生命量測後，藉由二氧化碳窒息，接著開胸術以人道方式處死動物之子集。將動物之手術眼睛收集至10%中性緩衝福馬林中。第二天，將眼睛放入70%乙醇中，嵌入石蠟中且矢狀地切割。將含有包括視神經之連續切片的三個載玻片經蘇木精及伊紅(H&E)染色用於形態學。另外，將在H&E之後剩餘的區塊進一步切片，且進行用於TUJ-1染色(亦稱為β III微管蛋白)之免疫組織化學以評估角膜神經分佈。使用DAPI (藍)作為複染劑以突顯所有核。載玻片由獸醫眼科醫師分析。
(vii) 結果： 1) 加速癒合(螢光素染色) 與接收PBS媒劑之動物相比，在來自經0.1% dHGF處理動物之手術後3天的組織樣品中觀測到更多TUJ01染色(圖1)，指示經0.1% dHGF處理之動物中角膜神經分佈。當與PBS對照及0.1% mNGF相比時，上皮癒合時間在0.1% dHGF (p=0.041)及0.2% dHGF下更快(圖2)。針對50%研究完全癒合之時間在0.1% dHGF組中為三天，其為PBS組所花費之時間的一半(六天；p=0.41)。0.2% dHGF及0.1% mHGF組之癒合速率為PBS組之癒合速率的三分之二(四天相對於六天)。另外，0.1% mHGF顯著快於mNGF (p=0.053)及PBS (p=0.0018)。接收0.1% dHGF之動物較早開始閉合且截至處理後第4天，＞75%已閉合；0.1% mHGF有相同作用(圖2)。相比之下，僅50%經PBS治療之動物達到完全傷口閉合且直至第6天。
2) 疤痕預防(亮場影像分析) 在手術及每日用PBS (對照)、0.1%或0.2% dHGF、0.1% mNGF或0.1% mHGF處理之後，除PBS對照之外的所有測試物品截至第7天有效減小平均疤痕尺寸(圖3)。對疤痕形成之測試物品效應的定量揭露，0.1% mHGF具有最大效應，接著為0.1% dHGF。在dHGF組中，疤痕顯著小於PBS對照(對於0.1%及0.2%組分別為p=0.0439及p=0.0126)，但彼此未顯著不同(p=0.7406)。0.1% mHGF組中之疤痕的平均面積在第7天顯著小於對照組(p=0.0001)及0.1% mNGF (p=0.0029)。對照組及0.1% mNGF組之平均尺寸彼此無顯著差異(p=0.2481)。
由HGF驅動之作用大小在閉合分析之時間時成鏡像(參見章節vii.1)。0.1% mHGF疤痕形成大致比對照組中觀測到的減少9倍，而0.1%及0.2% dHGF減少百分比比對照組大5倍。0.1% mNGF減少百分比大致為dHGF組之減少百分比一半，其中疤痕尺寸在數值上但非統計學上顯著比PBS對照組大。
3) 疤痕逆轉(亮場影像分析) 在移除角膜上皮細胞及前基質之手術及兩次重複刮擦以僅僅移除上皮細胞之後，經PBS處理之動物的疤痕大小具有極小改變，而動物接受0.1% dHGF、0.2% dHGF或0.1% mHGF具有減小之角膜疤痕大小。在PBS對照組中，平均瘢痕大小自基線(第8天)至第21天持續增加超過20%。相比之下，三個HGF組中之疤痕的尺寸自基線至第21天減小超過35%，其中平均尺寸與PBS組相比之總體差異為55%。在0.1% dHGF與0.2% dHGF之間的差異與PBS對照相比為統計學上顯著的(分別為p=0.0054及p=0.0015)，如圖4中所繪示。0.1% mNGF組中之平均疤痕大小自第8天至第21天減小，但與PBS對照無顯著不同(p=0.0859)。來自使用0.1%或0.2% dHGF之處理的結果無顯著差異(p=0.7558)。
基於此研究之結果，在單一上皮及前基質移除(1期)多個上皮刮擦(2期)之後0.1% dHGF處理在首次手術程序當天(1期)或第11天(2期)開始每天給藥四次時引起更快創傷閉合(1期)及疤痕尺寸更大減小(2期)。
在1期中，所有動物經歷單一手術程序以在2 mm區域內移除角膜上皮細胞及前基質。所有動物在程序之後每天接受給藥四次。雖然約50%之PBS處理之動物(媒劑對照)截至手術後第7天癒合，接受0.1% dHGF或0.1% mHGF之＞75%動物截至手術後第7天癒合(圖2及圖3)。另外，當與PBS處理相比時，此等動物之較大百分比的角膜在手術後第3天完全癒合(分別＞60%相對於30%)。在第3天免疫螢光分析角膜神經分佈顯示在0.1% dHGF處理之動物中TUJ-1染色增加(圖1)。
在2期中，動物經歷與1期中相同的手術程序，但隨後接受兩種額外程序僅移除上皮。在此實驗中，動物在第一次上皮刮擦之後開始接受處理。在此等條件下，接受HGF之動物(0.1% dHGF、0.2% dHGF或0.1% mHGF)顯示相比於經PBS處理之眼睛，疤痕大小對於所有經HGF處理之眼睛減小＞35%(圖4)。
此研究結果指示，在角膜上皮細胞損傷後局部投與HGF引起單一或多個損傷模型中之更快的癒合速率及瘢痕大小減小。
實例 5 ： 局部調配物在小鼠角膜細菌 LPS 誘導之 角膜炎模型中之功效在小鼠角膜細菌LPS誘導之角膜炎模型中測試用於治療NK之HGF之局部調配物的有效性。在雄性C57BL/6小鼠中進行功效測試。40隻動物中之每一者一隻眼睛每天給藥4次(QID)，其中在損傷後第4-9天各劑量之間為3小時，使用3.5 µL體積之測試物品經由移液管。受傷眼睛接受如實驗設計(表11)中所指示之測試物品或對照。來自大腸桿菌O111:B4 (Invivogen)之脂多醣(LPS)的儲備溶液用1 mL無菌水稀釋，等分且根據製造商的方案儲存。在給藥當天，用PBS將經稀釋LPS溶液進一步1:1 (v/v)稀釋以在2.0 µL注射液中遞送約5 µg LPS材料。
表 11 ： 在小鼠角膜細菌 LPS 誘導之 角膜炎損傷模型中治療 NK 中 HGF 之功效測試的實驗設計
群組編號 動物數目 * 在第 10 天開始之治療 (QID) 終點 / 程序 安樂死
1 10 PBS • 基線眼部檢查 ( 裂隙燈 )* • 亮場數位照相術(第0天，在注射之前n-5隻眼睛)，第5天至第9天 • 當天至第7天之 螢光素染色。 • OCT (第0天，在注射之前n=5隻眼睛)及第8天。 第10天
2 10 0.1% (w/v) dHGF**
3 10 0.2% (w/v) dHGF**
4 10 0.1% (w/v) mNGF**
* 對n=5隻小鼠進行基線眼部檢查；所有登記動物均在後續天數進行評估。 縮寫： mNGF：鼠類神經生長因子 dHGF：人類肝細胞生長因子(SEQ. ID NO. 1) ** 以指定濃度調配於PBS中。
使用來自 大腸桿菌 O111:B4 之 LPS 的 角膜損傷在模型誘導之前，測試個體皮下給予0.01-0.05 mg/kg之丁基原啡因。亦向動物局部給予托品醯胺(1.0%)與苯腎上腺素(2.5%)混合液以擴張且突出眼睛。隨後用氯胺酮/甲苯噻嗪混合物及一滴0.5%丙美卡因HCl將動物轉移以用於手術程序。將鑷(例如Dumont #4)用於突出動物之眼睛，且使用連接至2.5 µL注射器之34G針，將約5 µg之LPS (大腸桿菌O111:B4)注射至2.0 µL體積中。在第0天及第4天進行LPS注射。第一劑量之治療在第4天注射LPS之後應用於受傷眼睛。在15分鐘之後施加局部抗生素(氧氟沙星(Ofloxacin))且使動物自手術正常恢復。動物在手術後約6-8小時皮下接受0.01-0.05 mg/kg之丁基原啡因之第二次給藥且在手術後兩天每6至8小時每天兩次接受。
所監測之參數 (i) 檢查及體重 ：每日兩次觀測死亡率及發病以及籠側觀測結果。在模型誘導之前及在屍檢時獲取體重。
(ii) 眼部檢查及亮場影像 ：眼表面形態在登記之前由獸醫學眼科醫師在裂隙燈生物顯微鏡下評估。使用成像J軟體在基線及如研究設計中所指示之天數捕獲亮場影像以分析角膜不透明度。
(iii) 螢光素染色 ：在如實驗設計表中所指示之時間點處，動物經歷螢光素眼表面染色。將約1.5 µl之2.5%螢光素鈉施加至角膜表面持續30秒，接著用1X PBS使用1 ml注射器清洗。在鈷藍光下使用安裝於三角架上之Nikon數位SLR攝影機對角膜染色拍照。將相機透鏡處於手動模式，其中透鏡設定為1呎遠。動物眼睛聚焦於檢視窗之中心且收集影像以維持相機透鏡與動物之眼睛之間的一致距離。使用影像J軟體(NIH)確定各時間點處之各眼的螢光素染色之面積(以像素為單位)。
(iv) 光同調斷層掃描 (OCT) ：在如藉由實驗設計表指示之天數時，所有動物均經歷眼睛前部切片之OCT成像程序。麻醉動物且用PBS洗滌角膜，隨後進行OCT檢查。
(v) 結果 ：在誘導該模型及每日用PBS (對照)、0.1%或0.2% dHGF或0.1% mNGF處理每天四次之後，第2組及第3組(分別為0.1%及0.2% dHGF)截至第9天展現出疤痕尺寸最大減小。當標準化至第1組時，第2組及第3組減小疤痕尺寸幾乎60%，而第4組中之測試物品減小疤痕尺寸約25% (圖5)。與PBS對照相比，平均疤痕面積顯著較小，其中0.1% dHGF (p=0.0110)及0.2% dHGF (p=0.0028)。在PBS對照下疤痕尺寸比0.1%及0.2% HGF組大約5倍，且在PBS下比0.1% mNGF組大約2.5倍(p=0.0417)。兩個dHGF組中所得平均疤痕大小彼此無顯著差異(p=0.6176)(圖5)。
總之，此研究之結果表明，藉由大腸桿菌LPS之基質投與誘導之角膜上皮損傷後用HGF治療受傷眼睛改進癒合速率。
除本文所描述之彼等修改以外，根據前述描述，本發明之各種修改對熟習此項技術者而言將為顯而易見的。此類修改亦意欲屬於隨附申請專利範圍之範疇內。本申請案中所引用之各參考文獻(包括所有專利、專利申請案及公開案)係以全文引用的方式併入本文中。
圖 1. 含有小鼠視神經之連續切片之載玻片的螢光顯微鏡影像以評估手術後第3天之角膜神經分佈。組織樣品針對TUJ-1 (亦稱為β III微管蛋白，圓圈區域)染色以評估角膜神經分佈。經對照(PBS)處理之動物在第3天與接受0.1% dHGF (SEQ ID. NO. 1)之眼睛相比展現出潛在地更低TUJ-1染色(圓圈區域)；DAPI用作複染劑以突出所有細胞核。
圖 2. 在小鼠角膜機械損傷模式下之1期研究中之手術及每日用PBS (媒劑對照)、0.1%或0.2% dHGF、0.1% mNGF或0.1% mHGF處理之後經螢光素染色之動物角膜表面上閉合時間分析。
圖 3A. 在小鼠角膜機械損傷模型中在手術後第7天時經PBS (對照)、0.1% dHGF或0.2% dHGF處理之動物角膜表面中量測之平均疤痕面積(以像素為單位)的亮場影像分析。
圖 3B. 在小鼠角膜機械損傷模型中在手術後第7天時經PBS (對照)、0.1% mNGF或0.1% mHGF處理之動物角膜表面中量測之平均疤痕面積(以像素為單位)的亮場影像分析。
圖 4.在小鼠角膜機械損傷模型中經PBS (對照)、dHGF (0.1%及0.2%)、mHGF及mNGF處理之動物的第8天至第21天之平均百分比、量測標準誤差(SEM)及疤痕減少之統計比較。
圖 5.在小鼠角膜大腸桿菌LPS誘導之角膜炎模型中經PBS (對照)、dHGF (0.1%及0.2%)或mNGF處理之動物在第9天的疤痕大小變化百分比。 

          <![CDATA[<110>  美商克拉里斯生物醫療股份有限公司(Claris Biotherapeutics, Inc.)]]>
          <![CDATA[<120>  用於治療眼睛疾病的生長因子組合物]]>
          <![CDATA[<130>  49082-0004WO1]]>
          <![CDATA[<150>  US 63/188,816]]>
          <![CDATA[<151>  2021-05-14]]>
          <![CDATA[<160>  37    ]]>
          <![CDATA[<170>  PatentIn version 3.5]]>
          <![CDATA[<210>  1]]>
          <![CDATA[<211>]]>  723
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  智人]]>
          <![CDATA[<400>  1]]>
          Met Trp Val Thr Lys Leu Leu Pro Ala Leu Leu Leu Gln His Val Leu 
          1               5                   10                  15      
          Leu His Leu Leu Leu Leu Pro Ile Ala Ile Pro Tyr Ala Glu Gly Gln 
                      20                  25                  30          
          Arg Lys Arg Arg Asn Thr Ile His Glu Phe Lys Lys Ser Ala Lys Thr 
                  35                  40                  45              
          Thr Leu Ile Lys Ile Asp Pro Ala Leu Lys Ile Lys Thr Lys Lys Val 
              50                  55                  60                  
          Asn Thr Ala Asp Gln Cys Ala Asn Arg Cys Thr Arg Asn Lys Gly Leu 
          65                  70                  75                  80  
          Pro Phe Thr Cys Lys Ala Phe Val Phe Asp Lys Ala Arg Lys Gln Cys 
                          85                  90                  95      
          Leu Trp Phe Pro Phe Asn Ser Met Ser Ser Gly Val Lys Lys Glu Phe 
                      100                 105                 110         
          Gly His Glu Phe Asp Leu Tyr Glu Asn Lys Asp Tyr Ile Arg Asn Cys 
                  115                 120                 125             
          Ile Ile Gly Lys Gly Arg Ser Tyr Lys Gly Thr Val Ser Ile Thr Lys 
              130                 135                 140                 
          Ser Gly Ile Lys Cys Gln Pro Trp Ser Ser Met Ile Pro His Glu His 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Tyr Arg Gly Lys Asp Leu Gln Glu Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Arg 
                          165                 170                 175     
          Gly Glu Glu Gly Gly Pro Trp Cys Phe Thr Ser Asn Pro Glu Val Arg 
                      180                 185                 190         
          Tyr Glu Val Cys Asp Ile Pro Gln Cys Ser Glu Val Glu Cys Met Thr 
                  195                 200                 205             
          Cys Asn Gly Glu Ser Tyr Arg Gly Leu Met Asp His Thr Glu Ser Gly 
              210                 215                 220                 
          Lys Ile Cys Gln Arg Trp Asp His Gln Thr Pro His Arg His Lys Phe 
          225                 230                 235                 240 
          Leu Pro Glu Arg Tyr Pro Asp Lys Gly Phe Asp Asp Asn Tyr Cys Arg 
                          245                 250                 255     
          Asn Pro Asp Gly Gln Pro Arg Pro Trp Cys Tyr Thr Leu Asp Pro His 
                      260                 265                 270         
          Thr Arg Trp Glu Tyr Cys Ala Ile Lys Thr Cys Ala Asp Asn Thr Met 
                  275                 280                 285             
          Asn Asp Thr Asp Val Pro Leu Glu Thr Thr Glu Cys Ile Gln Gly Gln 
              290                 295                 300                 
          Gly Glu Gly Tyr Arg Gly Thr Val Asn Thr Ile Trp Asn Gly Ile Pro 
          305                 310                 315                 320 
          Cys Gln Arg Trp Asp Ser Gln Tyr Pro His Glu His Asp Met Thr Pro 
                          325                 330                 335     
          Glu Asn Phe Lys Cys Lys Asp Leu Arg Glu Asn Tyr Cys Arg Asn Pro 
                      340                 345                 350         
          Asp Gly Ser Glu Ser Pro Trp Cys Phe Thr Thr Asp Pro Asn Ile Arg 
                  355                 360                 365             
          Val Gly Tyr Cys Ser Gln Ile Pro Asn Cys Asp Met Ser His Gly Gln 
              370                 375                 380                 
          Asp Cys Tyr Arg Gly Asn Gly Lys Asn Tyr Met Gly Asn Leu Ser Gln 
          385                 390                 395                 400 
          Thr Arg Ser Gly Leu Thr Cys Ser Met Trp Asp Lys Asn Met Glu Asp 
                          405                 410                 415     
          Leu His Arg His Ile Phe Trp Glu Pro Asp Ala Ser Lys Leu Asn Glu 
                      420                 425                 430         
          Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Asp Asp Ala His Gly Pro Trp Cys Tyr 
                  435                 440                 445             
          Thr Gly Asn Pro Leu Ile Pro Trp Asp Tyr Cys Pro Ile Ser Arg Cys 
              450                 455                 460                 
          Glu Gly Asp Thr Thr Pro Thr Ile Val Asn Leu Asp His Pro Val Ile 
          465                 470                 475                 480 
          Ser Cys Ala Lys Thr Lys Gln Leu Arg Val Val Asn Gly Ile Pro Thr 
                          485                 490                 495     
          Arg Thr Asn Ile Gly Trp Met Val Ser Leu Arg Tyr Arg Asn Lys His 
                      500                 505                 510         
          Ile Cys Gly Gly Ser Leu Ile Lys Glu Ser Trp Val Leu Thr Ala Arg 
                  515                 520                 525             
          Gln Cys Phe Pro Ser Arg Asp Leu Lys Asp Tyr Glu Ala Trp Leu Gly 
              530                 535                 540                 
          Ile His Asp Val His Gly Arg Gly Asp Glu Lys Cys Lys Gln Val Leu 
          545                 550                 555                 560 
          Asn Val Ser Gln Leu Val Tyr Gly Pro Glu Gly Ser Asp Leu Val Leu 
                          565                 570                 575     
          Met Lys Leu Ala Arg Pro Ala Val Leu Asp Asp Phe Val Ser Thr Ile 
                      580                 585                 590         
          Asp Leu Pro Asn Tyr Gly Cys Thr Ile Pro Glu Lys Thr Ser Cys Ser 
                  595                 600                 605             
          Val Tyr Gly Trp Gly Tyr Thr Gly Leu Ile Asn Tyr Asp Gly Leu Leu 
              610                 615                 620                 
          Arg Val Ala His Leu Tyr Ile Met Gly Asn Glu Lys Cys Ser Gln His 
          625                 630                 635                 640 
          His Arg Gly Lys Val Thr Leu Asn Glu Ser Glu Ile Cys Ala Gly Ala 
                          645                 650                 655     
          Glu Lys Ile Gly Ser Gly Pro Cys Glu Gly Asp Tyr Gly Gly Pro Leu 
                      660                 665                 670         
          Val Cys Glu Gln His Lys Met Arg Met Val Leu Gly Val Ile Val Pro 
                  675                 680                 685             
          Gly Arg Gly Cys Ala Ile Pro Asn Arg Pro Gly Ile Phe Val Arg Val 
              690                 695                 700                 
          Ala Tyr Tyr Ala Lys Trp Ile His Lys Ile Ile Leu Thr Tyr Lys Val 
          705                 710                 715                 720 
          Pro Gln Ser 
          <![CDATA[<210>  2]]>
          <![CDATA[<211>  728]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  智人]]>
          <![CDATA[<400> ]]> 2
          Met Trp Val Thr Lys Leu Leu Pro Ala Leu Leu Leu Gln His Val Leu 
          1               5                   10                  15      
          Leu His Leu Leu Leu Leu Pro Ile Ala Ile Pro Tyr Ala Glu Gly Gln 
                      20                  25                  30          
          Arg Lys Arg Arg Asn Thr Ile His Glu Phe Lys Lys Ser Ala Lys Thr 
                  35                  40                  45              
          Thr Leu Ile Lys Ile Asp Pro Ala Leu Lys Ile Lys Thr Lys Lys Val 
              50                  55                  60                  
          Asn Thr Ala Asp Gln Cys Ala Asn Arg Cys Thr Arg Asn Lys Gly Leu 
          65                  70                  75                  80  
          Pro Phe Thr Cys Lys Ala Phe Val Phe Asp Lys Ala Arg Lys Gln Cys 
                          85                  90                  95      
          Leu Trp Phe Pro Phe Asn Ser Met Ser Ser Gly Val Lys Lys Glu Phe 
                      100                 105                 110         
          Gly His Glu Phe Asp Leu Tyr Glu Asn Lys Asp Tyr Ile Arg Asn Cys 
                  115                 120                 125             
          Ile Ile Gly Lys Gly Arg Ser Tyr Lys Gly Thr Val Ser Ile Thr Lys 
              130                 135                 140                 
          Ser Gly Ile Lys Cys Gln Pro Trp Ser Ser Met Ile Pro His Glu His 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Phe Leu Pro Ser Ser Tyr Arg Gly Lys Asp Leu Gln Glu Asn Tyr 
                          165                 170                 175     
          Cys Arg Asn Pro Arg Gly Glu Glu Gly Gly Pro Trp Cys Phe Thr Ser 
                      180                 185                 190         
          Asn Pro Glu Val Arg Tyr Glu Val Cys Asp Ile Pro Gln Cys Ser Glu 
                  195                 200                 205             
          Val Glu Cys Met Thr Cys Asn Gly Glu Ser Tyr Arg Gly Leu Met Asp 
              210                 215                 220                 
          His Thr Glu Ser Gly Lys Ile Cys Gln Arg Trp Asp His Gln Thr Pro 
          225                 230                 235                 240 
          His Arg His Lys Phe Leu Pro Glu Arg Tyr Pro Asp Lys Gly Phe Asp 
                          245                 250                 255     
          Asp Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Gln Pro Arg Pro Trp Cys Tyr 
                      260                 265                 270         
          Thr Leu Asp Pro His Thr Arg Trp Glu Tyr Cys Ala Ile Lys Thr Cys 
                  275                 280                 285             
          Ala Asp Asn Thr Met Asn Asp Thr Asp Val Pro Leu Glu Thr Thr Glu 
              290                 295                 300                 
          Cys Ile Gln Gly Gln Gly Glu Gly Tyr Arg Gly Thr Val Asn Thr Ile 
          305                 310                 315                 320 
          Trp Asn Gly Ile Pro Cys Gln Arg Trp Asp Ser Gln Tyr Pro His Glu 
                          325                 330                 335     
          His Asp Met Thr Pro Glu Asn Phe Lys Cys Lys Asp Leu Arg Glu Asn 
                      340                 345                 350         
          Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Ser Glu Ser Pro Trp Cys Phe Thr Thr 
                  355                 360                 365             
          Asp Pro Asn Ile Arg Val Gly Tyr Cys Ser Gln Ile Pro Asn Cys Asp 
              370                 375                 380                 
          Met Ser His Gly Gln Asp Cys Tyr Arg Gly Asn Gly Lys Asn Tyr Met 
          385                 390                 395                 400 
          Gly Asn Leu Ser Gln Thr Arg Ser Gly Leu Thr Cys Ser Met Trp Asp 
                          405                 410                 415     
          Lys Asn Met Glu Asp Leu His Arg His Ile Phe Trp Glu Pro Asp Ala 
                      420                 425                 430         
          Ser Lys Leu Asn Glu Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Asp Asp Ala His 
                  435                 440                 445             
          Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Gly Asn Pro Leu Ile Pro Trp Asp Tyr Cys 
              450                 455                 460                 
          Pro Ile Ser Arg Cys Glu Gly Asp Thr Thr Pro Thr Ile Val Asn Leu 
          465                 470                 475                 480 
          Asp His Pro Val Ile Ser Cys Ala Lys Thr Lys Gln Leu Arg Val Val 
                          485                 490                 495     
          Asn Gly Ile Pro Thr Arg Thr Asn Ile Gly Trp Met Val Ser Leu Arg 
                      500                 505                 510         
          Tyr Arg Asn Lys His Ile Cys Gly Gly Ser Leu Ile Lys Glu Ser Trp 
                  515                 520                 525             
          Val Leu Thr Ala Arg Gln Cys Phe Pro Ser Arg Asp Leu Lys Asp Tyr 
              530                 535                 540                 
          Glu Ala Trp Leu Gly Ile His Asp Val His Gly Arg Gly Asp Glu Lys 
          545                 550                 555                 560 
          Cys Lys Gln Val Leu Asn Val Ser Gln Leu Val Tyr Gly Pro Glu Gly 
                          565                 570                 575     
          Ser Asp Leu Val Leu Met Lys Leu Ala Arg Pro Ala Val Leu Asp Asp 
                      580                 585                 590         
          Phe Val Ser Thr Ile Asp Leu Pro Asn Tyr Gly Cys Thr Ile Pro Glu 
                  595                 600                 605             
          Lys Thr Ser Cys Ser Val Tyr Gly Trp Gly Tyr Thr Gly Leu Ile Asn 
              610                 615                 620                 
          Tyr Asp Gly Leu Leu Arg Val Ala His Leu Tyr Ile Met Gly Asn Glu 
          625                 630                 635                 640 
          Lys Cys Ser Gln His His Arg Gly Lys Val Thr Leu Asn Glu Ser Glu 
                          645                 650                 655     
          Ile Cys Ala Gly Ala Glu Lys Ile Gly Ser Gly Pro Cys Glu Gly Asp 
                      660                 665                 670         
          Tyr Gly Gly Pro Leu Val Cys Glu Gln His Lys Met Arg Met Val Leu 
                  675                 680                 685             
          Gly Val Ile Val Pro Gly Arg Gly Cys Ala Ile Pro Asn Arg Pro Gly 
              690                 695                 700                 
          Ile Phe Val Arg Val Ala Tyr Tyr Ala Lys Trp Ile His Lys Ile Ile 
          705                 710                 715                 720 
          Leu Thr Tyr Lys Val Pro Gln Ser 
                          725             
          <![CDATA[<210>  3]]>
          <![CDATA[<211>  290]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  智人]]>
          <![CDATA[<400>  3]]>
          Met Trp Val Thr Lys Leu Leu Pro Ala Leu Leu Leu Gln His Val Leu 
          1               5                   10                  15      
          Leu His Leu Leu Leu Leu Pro Ile Ala Ile Pro Tyr Ala Glu Gly Gln 
                      20                  25                  30          
          Arg Lys Arg Arg Asn Thr Ile His Glu Phe Lys Lys Ser Ala Lys Thr 
                  35                  40                  45              
          Thr Leu Ile Lys Ile Asp Pro Ala Leu Lys Ile Lys Thr Lys Lys Val 
              50                  55                  60                  
          Asn Thr Ala Asp Gln Cys Ala Asn Arg Cys Thr Arg Asn Lys Gly Leu 
          65                  70                  75                  80  
          Pro Phe Thr Cys Lys Ala Phe Val Phe Asp Lys Ala Arg Lys Gln Cys 
                          85                  90                  95      
          Leu Trp Phe Pro Phe Asn Ser Met Ser Ser Gly Val Lys Lys Glu Phe 
                      100                 105                 110         
          Gly His Glu Phe Asp Leu Tyr Glu Asn Lys Asp Tyr Ile Arg Asn Cys 
                  115                 120                 125             
          Ile Ile Gly Lys Gly Arg Ser Tyr Lys Gly Thr Val Ser Ile Thr Lys 
              130                 135                 140                 
          Ser Gly Ile Lys Cys Gln Pro Trp Ser Ser Met Ile Pro His Glu His 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Phe Leu Pro Ser Ser Tyr Arg Gly Lys Asp Leu Gln Glu Asn Tyr 
                          165                 170                 175     
          Cys Arg Asn Pro Arg Gly Glu Glu Gly Gly Pro Trp Cys Phe Thr Ser 
                      180                 185                 190         
          Asn Pro Glu Val Arg Tyr Glu Val Cys Asp Ile Pro Gln Cys Ser Glu 
                  195                 200                 205             
          Val Glu Cys Met Thr Cys Asn Gly Glu Ser Tyr Arg Gly Leu Met Asp 
              210                 215                 220                 
          His Thr Glu Ser Gly Lys Ile Cys Gln Arg Trp Asp His Gln Thr Pro 
          225                 230                 235                 240 
          His Arg His Lys Phe Leu Pro Glu Arg Tyr Pro Asp Lys Gly Phe Asp 
                          245                 250                 255     
          Asp Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Gln Pro Arg Pro Trp Cys Tyr 
                      260                 265                 270         
          Thr Leu Asp Pro His Thr Arg Trp Glu Tyr Cys Ala Ile Lys Thr Cys 
                  275                 280                 285             
          Glu Thr 
              290 
          <![CDATA[<210>  4]]>
          <![CDATA[<211> ]]> 296
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  智人]]>
          <![CDATA[<400>  4]]>
          Met Trp Val Thr Lys Leu Leu Pro Ala Leu Leu Leu Gln His Val Leu 
          1               5                   10                  15      
          Leu His Leu Leu Leu Leu Pro Ile Ala Ile Pro Tyr Ala Glu Gly Gln 
                      20                  25                  30          
          Arg Lys Arg Arg Asn Thr Ile His Glu Phe Lys Lys Ser Ala Lys Thr 
                  35                  40                  45              
          Thr Leu Ile Lys Ile Asp Pro Ala Leu Lys Ile Lys Thr Lys Lys Val 
              50                  55                  60                  
          Asn Thr Ala Asp Gln Cys Ala Asn Arg Cys Thr Arg Asn Lys Gly Leu 
          65                  70                  75                  80  
          Pro Phe Thr Cys Lys Ala Phe Val Phe Asp Lys Ala Arg Lys Gln Cys 
                          85                  90                  95      
          Leu Trp Phe Pro Phe Asn Ser Met Ser Ser Gly Val Lys Lys Glu Phe 
                      100                 105                 110         
          Gly His Glu Phe Asp Leu Tyr Glu Asn Lys Asp Tyr Ile Arg Asn Cys 
                  115                 120                 125             
          Ile Ile Gly Lys Gly Arg Ser Tyr Lys Gly Thr Val Ser Ile Thr Lys 
              130                 135                 140                 
          Ser Gly Ile Lys Cys Gln Pro Trp Ser Ser Met Ile Pro His Glu His 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Phe Leu Pro Ser Ser Tyr Arg Gly Lys Asp Leu Gln Glu Asn Tyr 
                          165                 170                 175     
          Cys Arg Asn Pro Arg Gly Glu Glu Gly Gly Pro Trp Cys Phe Thr Ser 
                      180                 185                 190         
          Asn Pro Glu Val Arg Tyr Glu Val Cys Asp Ile Pro Gln Cys Ser Glu 
                  195                 200                 205             
          Val Glu Cys Met Thr Cys Asn Gly Glu Ser Tyr Arg Gly Leu Met Asp 
              210                 215                 220                 
          His Thr Glu Ser Gly Lys Ile Cys Gln Arg Trp Asp His Gln Thr Pro 
          225                 230                 235                 240 
          His Arg His Lys Phe Leu Pro Glu Arg Tyr Pro Asp Lys Gly Phe Asp 
                          245                 250                 255     
          Asp Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Gln Pro Arg Pro Trp Cys Tyr 
                      260                 265                 270         
          Thr Leu Asp Pro His Thr Arg Trp Glu Tyr Cys Ala Ile Lys Asn Met 
                  275                 280                 285             
          Arg Asp Ile Thr Trp Ala Leu Asn 
              290                 295     
          <![CDATA[<210>  5]]>
          <![CDATA[<211>  285]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  智人]]>
          <![CDATA[<400>  5]]>
          Met Trp Val Thr Lys Leu Leu Pro Ala Leu Leu Leu Gln His Val Leu 
          1               5                   10                  15      
          Leu His Leu Leu Leu Leu Pro Ile Ala Ile Pro Tyr Ala Glu Gly Gln 
                      20                  25                  30          
          Arg Lys Arg Arg Asn Thr Ile His Glu Phe Lys Lys Ser Ala Lys Thr 
                  35                  40                  45              
          Thr Leu Ile Lys Ile Asp Pro Ala Leu Lys Ile Lys Thr Lys Lys Val 
              50                  55                  60                  
          Asn Thr Ala Asp Gln Cys Ala Asn Arg Cys Thr Arg Asn Lys Gly Leu 
          65                  70                  75                  80  
          Pro Phe Thr Cys Lys Ala Phe Val Phe Asp Lys Ala Arg Lys Gln Cys 
                          85                  90                  95      
          Leu Trp Phe Pro Phe Asn Ser Met Ser Ser Gly Val Lys Lys Glu Phe 
                      100                 105                 110         
          Gly His Glu Phe Asp Leu Tyr Glu Asn Lys Asp Tyr Ile Arg Asn Cys 
                  115                 120                 125             
          Ile Ile Gly Lys Gly Arg Ser Tyr Lys Gly Thr Val Ser Ile Thr Lys 
              130                 135                 140                 
          Ser Gly Ile Lys Cys Gln Pro Trp Ser Ser Met Ile Pro His Glu His 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Tyr Arg Gly Lys Asp Leu Gln Glu Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Arg 
                          165                 170                 175     
          Gly Glu Glu Gly Gly Pro Trp Cys Phe Thr Ser Asn Pro Glu Val Arg 
                      180                 185                 190         
          Tyr Glu Val Cys Asp Ile Pro Gln Cys Ser Glu Val Glu Cys Met Thr 
                  195                 200                 205             
          Cys Asn Gly Glu Ser Tyr Arg Gly Leu Met Asp His Thr Glu Ser Gly 
              210                 215                 220                 
          Lys Ile Cys Gln Arg Trp Asp His Gln Thr Pro His Arg His Lys Phe 
          225                 230                 235                 240 
          Leu Pro Glu Arg Tyr Pro Asp Lys Gly Phe Asp Asp Asn Tyr Cys Arg 
                          245                 250                 255     
          Asn Pro Asp Gly Gln Pro Arg Pro Trp Cys Tyr Thr Leu Asp Pro His 
                      260                 265                 270         
          Thr Arg Trp Glu Tyr Cys Ala Ile Lys Thr Cys Glu Thr 
                  275                 280                 285 
          <![CDATA[<210>  6]]>
          <![CDATA[<211>  210]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  智人]]>
          <![CDATA[<400>  6]]>
          Met Trp Val Thr Lys Leu Leu Pro Ala Leu Leu Leu Gln His Val Leu 
          1               5                   10                  15      
          Leu His Leu Leu Leu Leu Pro Ile Ala Ile Pro Tyr Ala Glu Gly Gln 
                      20                  25                  30          
          Arg Lys Arg Arg Asn Thr Ile His Glu Phe Lys Lys Ser Ala Lys Thr 
                  35                  40                  45              
          Thr Leu Ile Lys Ile Asp Pro Ala Leu Lys Ile Lys Thr Lys Lys Val 
              50                  55                  60                  
          Asn Thr Ala Asp Gln Cys Ala Asn Arg Cys Thr Arg Asn Lys Gly Leu 
          65                  70                  75                  80  
          Pro Phe Thr Cys Lys Ala Phe Val Phe Asp Lys Ala Arg Lys Gln Cys 
                          85                  90                  95      
          Leu Trp Phe Pro Phe Asn Ser Met Ser Ser Gly Val Lys Lys Glu Phe 
                      100                 105                 110         
          Gly His Glu Phe Asp Leu Tyr Glu Asn Lys Asp Tyr Ile Arg Asn Cys 
                  115                 120                 125             
          Ile Ile Gly Lys Gly Arg Ser Tyr Lys Gly Thr Val Ser Ile Thr Lys 
              130                 135                 140                 
          Ser Gly Ile Lys Cys Gln Pro Trp Ser Ser Met Ile Pro His Glu His 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Phe Leu Pro Ser Ser Tyr Arg Gly Lys Asp Leu Gln Glu Asn Tyr 
                          165                 170                 175     
          Cys Arg Asn Pro Arg Gly Glu Glu Gly Gly Pro Trp Cys Phe Thr Ser 
                      180                 185                 190         
          Asn Pro Glu Val Arg Tyr Glu Val Cys Asp Ile Pro Gln Cys Ser Glu 
                  195                 200                 205             
          Gly Lys 
              210 
          <![CDATA[<210>  7]]>
          <![CDATA[<211>  728]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  HGF變異體]]>
          <![CDATA[<400>  7]]>
          Met Trp Val Thr Lys Leu Leu Pro Ala Leu Leu Leu Gln His Val Leu 
          1               5                   10                  15      
          Leu His Leu Leu Leu Leu Pro Ile Ala Ile Pro Tyr Ala Glu Gly Gln 
                      20                  25                  30          
          Arg Lys Arg Arg Asn Thr Ile His Glu Phe Lys Lys Ser Ala Lys Thr 
                  35                  40                  45              
          Thr Leu Ile Lys Ile Asp Pro Ala Leu Glu Ile Lys Thr Lys Lys Ala 
              50                  55                  60                  
          Asn Thr Ala Asp Gln Cys Ala Asn Arg Cys Thr Arg Ser Lys Gly Leu 
          65                  70                  75                  80  
          Pro Phe Thr Cys Lys Ala Phe Val Phe Asp Lys Ala Arg Lys Arg Cys 
                          85                  90                  95      
          Leu Trp Phe Pro Phe Asn Ser Met Ser Ser Gly Val Lys Lys Glu Phe 
                      100                 105                 110         
          Gly His Glu Phe Asp Leu Tyr Glu Asn Lys Asp Tyr Ile Arg Asp Cys 
                  115                 120                 125             
          Ile Ile Gly Lys Gly Arg Ser Tyr Arg Gly Thr Val Ser Ile Thr Lys 
              130                 135                 140                 
          Ser Gly Ile Lys Cys Gln Pro Trp Ser Ala Met Ile Pro His Glu His 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Phe Leu Pro Ser Ser Tyr Arg Gly Glu Asp Leu Arg Glu Asn Tyr 
                          165                 170                 175     
          Cys Arg Asn Pro Arg Gly Glu Glu Gly Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Ser 
                      180                 185                 190         
          Asp Pro Glu Val Arg Tyr Glu Val Cys Asp Ile Pro Gln Cys Ser Glu 
                  195                 200                 205             
          Val Glu Cys Met Thr Cys Asn Gly Glu Ser Tyr Arg Gly Leu Met Asp 
              210                 215                 220                 
          His Thr Glu Ser Gly Lys Ile Cys Gln Arg Trp Asp His Gln Thr Pro 
          225                 230                 235                 240 
          His Arg His Lys Phe Leu Pro Glu Arg Tyr Pro Asp Lys Gly Phe Asp 
                          245                 250                 255     
          Asp Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Gln Pro Arg Pro Trp Cys Tyr 
                      260                 265                 270         
          Thr Leu Asp Pro His Thr Arg Trp Glu Tyr Cys Ala Ile Lys Thr Cys 
                  275                 280                 285             
          Ala Asp Asn Thr Met Asn Asp Thr Asp Val Pro Leu Glu Thr Thr Glu 
              290                 295                 300                 
          Cys Ile Gln Gly Gln Gly Glu Gly Tyr Arg Gly Thr Val Asn Thr Ile 
          305                 310                 315                 320 
          Trp Asn Gly Ile Pro Cys Gln Arg Trp Asp Ser Gln Tyr Pro His Glu 
                          325                 330                 335     
          His Asp Met Thr Pro Glu Asn Phe Lys Cys Lys Asp Leu Arg Glu Asn 
                      340                 345                 350         
          Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Ser Glu Ser Pro Trp Cys Phe Thr Thr 
                  355                 360                 365             
          Asp Pro Asn Ile Arg Val Gly Tyr Cys Ser Gln Ile Pro Asn Cys Asp 
              370                 375                 380                 
          Met Ser His Gly Gln Asp Cys Tyr Arg Gly Asn Gly Lys Asn Tyr Met 
          385                 390                 395                 400 
          Gly Asn Leu Ser Gln Thr Arg Ser Gly Leu Thr Cys Ser Met Trp Asp 
                          405                 410                 415     
          Lys Asn Met Glu Asp Leu His Arg His Ile Phe Trp Glu Pro Asp Ala 
                      420                 425                 430         
          Ser Lys Leu Asn Glu Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Asp Asp Ala His 
                  435                 440                 445             
          Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Gly Asn Pro Leu Ile Pro Trp Asp Tyr Cys 
              450                 455                 460                 
          Pro Ile Ser Arg Cys Glu Gly Asp Thr Thr Pro Thr Ile Val Asn Leu 
          465                 470                 475                 480 
          Asp His Pro Val Ile Ser Cys Ala Lys Thr Lys Gln Leu Arg Val Val 
                          485                 490                 495     
          Asn Gly Ile Pro Thr Arg Thr Asn Ile Gly Trp Met Val Ser Leu Arg 
                      500                 505                 510         
          Tyr Arg Asn Lys His Ile Cys Gly Gly Ser Leu Ile Lys Glu Ser Trp 
                  515                 520                 525             
          Val Leu Thr Ala Arg Gln Cys Phe Pro Ser Arg Asp Leu Lys Asp Tyr 
              530                 535                 540                 
          Glu Ala Trp Leu Gly Ile His Asp Val His Gly Arg Gly Asp Glu Lys 
          545                 550                 555                 560 
          Cys Lys Gln Val Leu Asn Val Ser Gln Leu Val Tyr Gly Pro Glu Gly 
                          565                 570                 575     
          Ser Asp Leu Val Leu Met Lys Leu Ala Arg Pro Ala Val Leu Asp Asp 
                      580                 585                 590         
          Phe Val Ser Thr Ile Asp Leu Pro Asn Tyr Gly Cys Thr Ile Pro Glu 
                  595                 600                 605             
          Lys Thr Ser Cys Ser Val Tyr Gly Trp Gly Tyr Thr Gly Leu Ile Asn 
              610                 615                 620                 
          Tyr Asp Gly Leu Leu Arg Val Ala His Leu Tyr Ile Met Gly Asn Glu 
          625                 630                 635                 640 
          Lys Cys Ser Gln His His Arg Gly Lys Val Thr Leu Asn Glu Ser Glu 
                          645                 650                 655     
          Ile Cys Ala Gly Ala Glu Lys Ile Gly Ser Gly Pro Cys Glu Gly Asp 
                      660                 665                 670         
          Tyr Gly Gly Pro Leu Val Cys Glu Gln His Lys Met Arg Met Val Leu 
                  675                 680                 685             
          Gly Val Ile Val Pro Gly Arg Gly Cys Ala Ile Pro Asn Arg Pro Gly 
              690                 695                 700                 
          Ile Phe Val Arg Val Ala Tyr Tyr Ala Lys Trp Ile His Lys Ile Ile 
          705                 710                 715                 720 
          Leu Thr Tyr Lys Val Pro Gln Ser 
                          725             
          <![CDATA[<210>  8]]>
          <![CDATA[<211>  728]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  HGF變異體]]>
          <![CDATA[<400>  8]]>
          Met Trp Val Thr Lys Leu Leu Pro Ala Leu Leu Leu Gln His Val Leu 
          1               5                   10                  15      
          Leu His Leu Leu Leu Leu Pro Ile Ala Ile Pro Tyr Ala Glu Gly Gln 
                      20                  25                  30          
          Arg Lys Arg Arg Asn Thr Ile His Glu Phe Lys Lys Ser Ala Lys Thr 
                  35                  40                  45              
          Thr Leu Ile Lys Ile Asp Pro Ala Leu Lys Ile Lys Thr Glu Lys Ala 
              50                  55                  60                  
          Asn Thr Ala Asp Gln Cys Ala Asn Arg Cys Ile Arg Asn Lys Gly Leu 
          65                  70                  75                  80  
          Pro Phe Thr Cys Lys Ala Phe Val Phe Asp Lys Ala Arg Lys Arg Cys 
                          85                  90                  95      
          Leu Trp Phe Pro Val Asn Ser Met Ser Ser Gly Val Lys Lys Glu Phe 
                      100                 105                 110         
          Gly His Glu Phe Asp Leu Tyr Glu Asn Lys Asp Tyr Thr Arg Asn Cys 
                  115                 120                 125             
          Ile Val Gly Asn Gly Arg Ser Tyr Arg Gly Thr Val Ser Thr Thr Lys 
              130                 135                 140                 
          Ser Gly Ile Lys Cys Gln Pro Trp Ser Ala Met Ile Pro His Glu His 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Phe Leu Pro Ser Ser Tyr Arg Gly Glu Asp Leu Arg Glu Asn Tyr 
                          165                 170                 175     
          Cys Arg Asn Pro Arg Gly Glu Glu Gly Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Ser 
                      180                 185                 190         
          Asp Pro Glu Val Arg Tyr Glu Val Cys Asp Ile Pro Gln Cys Ser Glu 
                  195                 200                 205             
          Val Glu Cys Met Thr Cys Asn Gly Glu Ser Tyr Arg Gly Leu Met Asp 
              210                 215                 220                 
          His Thr Glu Ser Gly Lys Ile Cys Gln Arg Trp Asp His Gln Thr Pro 
          225                 230                 235                 240 
          His Arg His Lys Phe Leu Pro Glu Arg Tyr Pro Asp Lys Gly Phe Asp 
                          245                 250                 255     
          Asp Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Gln Pro Arg Pro Trp Cys Tyr 
                      260                 265                 270         
          Thr Leu Asp Pro His Thr Arg Trp Glu Tyr Cys Ala Ile Lys Thr Cys 
                  275                 280                 285             
          Ala Asp Asn Thr Met Asn Asp Thr Asp Val Pro Leu Glu Thr Thr Glu 
              290                 295                 300                 
          Cys Ile Gln Gly Gln Gly Glu Gly Tyr Arg Gly Thr Val Asn Thr Ile 
          305                 310                 315                 320 
          Trp Asn Gly Ile Pro Cys Gln Arg Trp Asp Ser Gln Tyr Pro His Glu 
                          325                 330                 335     
          His Asp Met Thr Pro Glu Asn Phe Lys Cys Lys Asp Leu Arg Glu Asn 
                      340                 345                 350         
          Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Ser Glu Ser Pro Trp Cys Phe Thr Thr 
                  355                 360                 365             
          Asp Pro Asn Ile Arg Val Gly Tyr Cys Ser Gln Ile Pro Asn Cys Asp 
              370                 375                 380                 
          Met Ser His Gly Gln Asp Cys Tyr Arg Gly Asn Gly Lys Asn Tyr Met 
          385                 390                 395                 400 
          Gly Asn Leu Ser Gln Thr Arg Ser Gly Leu Thr Cys Ser Met Trp Asp 
                          405                 410                 415     
          Lys Asn Met Glu Asp Leu His Arg His Ile Phe Trp Glu Pro Asp Ala 
                      420                 425                 430         
          Ser Lys Leu Asn Glu Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Asp Asp Ala His 
                  435                 440                 445             
          Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Gly Asn Pro Leu Ile Pro Trp Asp Tyr Cys 
              450                 455                 460                 
          Pro Ile Ser Arg Cys Glu Gly Asp Thr Thr Pro Thr Ile Val Asn Leu 
          465                 470                 475                 480 
          Asp His Pro Val Ile Ser Cys Ala Lys Thr Lys Gln Leu Arg Val Val 
                          485                 490                 495     
          Asn Gly Ile Pro Thr Arg Thr Asn Ile Gly Trp Met Val Ser Leu Arg 
                      500                 505                 510         
          Tyr Arg Asn Lys His Ile Cys Gly Gly Ser Leu Ile Lys Glu Ser Trp 
                  515                 520                 525             
          Val Leu Thr Ala Arg Gln Cys Phe Pro Ser Arg Asp Leu Lys Asp Tyr 
              530                 535                 540                 
          Glu Ala Trp Leu Gly Ile His Asp Val His Gly Arg Gly Asp Glu Lys 
          545                 550                 555                 560 
          Cys Lys Gln Val Leu Asn Val Ser Gln Leu Val Tyr Gly Pro Glu Gly 
                          565                 570                 575     
          Ser Asp Leu Val Leu Met Lys Leu Ala Arg Pro Ala Val Leu Asp Asp 
                      580                 585                 590         
          Phe Val Ser Thr Ile Asp Leu Pro Asn Tyr Gly Cys Thr Ile Pro Glu 
                  595                 600                 605             
          Lys Thr Ser Cys Ser Val Tyr Gly Trp Gly Tyr Thr Gly Leu Ile Asn 
              610                 615                 620                 
          Tyr Asp Gly Leu Leu Arg Val Ala His Leu Tyr Ile Met Gly Asn Glu 
          625                 630                 635                 640 
          Lys Cys Ser Gln His His Arg Gly Lys Val Thr Leu Asn Glu Ser Glu 
                          645                 650                 655     
          Ile Cys Ala Gly Ala Glu Lys Ile Gly Ser Gly Pro Cys Glu Gly Asp 
                      660                 665                 670         
          Tyr Gly Gly Pro Leu Val Cys Glu Gln His Lys Met Arg Met Val Leu 
                  675                 680                 685             
          Gly Val Ile Val Pro Gly Arg Gly Cys Ala Ile Pro Asn Arg Pro Gly 
              690                 695                 700                 
          Ile Phe Val Arg Val Ala Tyr Tyr Ala Lys Trp Ile His Lys Ile Ile 
          705                 710                 715                 720 
          Leu Thr Tyr Lys Val Pro Gln Ser 
                          725             
          <![CDATA[<210>  9]]>
          <![CDATA[<211>  728]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  HGF變異體]]>
          <![CDATA[<400>  9]]>
          Met Trp Val Thr Lys Leu Leu Pro Ala Leu Leu Leu Gln His Val Leu 
          1               5                   10                  15      
          Leu His Leu Leu Leu Leu Pro Ile Ala Ile Pro Tyr Ala Glu Gly Gln 
                      20                  25                  30          
          Arg Lys Arg Arg Asn Thr Ile His Glu Phe Lys Lys Ser Ala Lys Thr 
                  35                  40                  45              
          Thr Leu Ile Lys Ile Asp Pro Ala Leu Lys Ile Lys Thr Glu Lys Ala 
              50                  55                  60                  
          Asn Thr Ala Asp Gln Cys Ala Asn Arg Cys Thr Arg Ser Lys Gly Leu 
          65                  70                  75                  80  
          Pro Phe Thr Cys Lys Ala Phe Val Phe Asp Lys Ala Arg Lys Arg Cys 
                          85                  90                  95      
          Leu Trp Phe Pro Phe Asn Ser Met Ser Ser Gly Val Lys Lys Glu Phe 
                      100                 105                 110         
          Gly His Glu Phe Asp Leu Tyr Glu Asn Lys Asp Tyr Ile Arg Asp Cys 
                  115                 120                 125             
          Ile Val Gly Asn Gly Arg Ser Tyr Arg Gly Thr Val Ser Ile Thr Lys 
              130                 135                 140                 
          Ser Gly Ile Glu Cys Gln Pro Trp Ser Ala Met Ile Pro His Glu His 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Phe Leu Pro Ser Ser Tyr Arg Gly Glu Asp Leu Arg Glu Asn Tyr 
                          165                 170                 175     
          Cys Arg Asn Pro Arg Gly Glu Glu Gly Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Ser 
                      180                 185                 190         
          Asp Pro Glu Val Arg Tyr Glu Val Cys Asp Ile Pro Gln Cys Ser Glu 
                  195                 200                 205             
          Val Glu Cys Met Thr Cys Asn Gly Glu Ser Tyr Arg Gly Leu Met Asp 
              210                 215                 220                 
          His Thr Glu Ser Gly Lys Ile Cys Gln Arg Trp Asp His Gln Thr Pro 
          225                 230                 235                 240 
          His Arg His Lys Phe Leu Pro Glu Arg Tyr Pro Asp Lys Gly Phe Asp 
                          245                 250                 255     
          Asp Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Gln Pro Arg Pro Trp Cys Tyr 
                      260                 265                 270         
          Thr Leu Asp Pro His Thr Arg Trp Glu Tyr Cys Ala Ile Lys Thr Cys 
                  275                 280                 285             
          Ala Asp Asn Thr Met Asn Asp Thr Asp Val Pro Leu Glu Thr Thr Glu 
              290                 295                 300                 
          Cys Ile Gln Gly Gln Gly Glu Gly Tyr Arg Gly Thr Val Asn Thr Ile 
          305                 310                 315                 320 
          Trp Asn Gly Ile Pro Cys Gln Arg Trp Asp Ser Gln Tyr Pro His Glu 
                          325                 330                 335     
          His Asp Met Thr Pro Glu Asn Phe Lys Cys Lys Asp Leu Arg Glu Asn 
                      340                 345                 350         
          Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Ser Glu Ser Pro Trp Cys Phe Thr Thr 
                  355                 360                 365             
          Asp Pro Asn Ile Arg Val Gly Tyr Cys Ser Gln Ile Pro Asn Cys Asp 
              370                 375                 380                 
          Met Ser His Gly Gln Asp Cys Tyr Arg Gly Asn Gly Lys Asn Tyr Met 
          385                 390                 395                 400 
          Gly Asn Leu Ser Gln Thr Arg Ser Gly Leu Thr Cys Ser Met Trp Asp 
                          405                 410                 415     
          Lys Asn Met Glu Asp Leu His Arg His Ile Phe Trp Glu Pro Asp Ala 
                      420                 425                 430         
          Ser Lys Leu Asn Glu Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Asp Asp Ala His 
                  435                 440                 445             
          Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Gly Asn Pro Leu Ile Pro Trp Asp Tyr Cys 
              450                 455                 460                 
          Pro Ile Ser Arg Cys Glu Gly Asp Thr Thr Pro Thr Ile Val Asn Leu 
          465                 470                 475                 480 
          Asp His Pro Val Ile Ser Cys Ala Lys Thr Lys Gln Leu Arg Val Val 
                          485                 490                 495     
          Asn Gly Ile Pro Thr Arg Thr Asn Ile Gly Trp Met Val Ser Leu Arg 
                      500                 505                 510         
          Tyr Arg Asn Lys His Ile Cys Gly Gly Ser Leu Ile Lys Glu Ser Trp 
                  515                 520                 525             
          Val Leu Thr Ala Arg Gln Cys Phe Pro Ser Arg Asp Leu Lys Asp Tyr 
              530                 535                 540                 
          Glu Ala Trp Leu Gly Ile His Asp Val His Gly Arg Gly Asp Glu Lys 
          545                 550                 555                 560 
          Cys Lys Gln Val Leu Asn Val Ser Gln Leu Val Tyr Gly Pro Glu Gly 
                          565                 570                 575     
          Ser Asp Leu Val Leu Met Lys Leu Ala Arg Pro Ala Val Leu Asp Asp 
                      580                 585                 590         
          Phe Val Ser Thr Ile Asp Leu Pro Asn Tyr Gly Cys Thr Ile Pro Glu 
                  595                 600                 605             
          Lys Thr Ser Cys Ser Val Tyr Gly Trp Gly Tyr Thr Gly Leu Ile Asn 
              610                 615                 620                 
          Tyr Asp Gly Leu Leu Arg Val Ala His Leu Tyr Ile Met Gly Asn Glu 
          625                 630                 635                 640 
          Lys Cys Ser Gln His His Arg Gly Lys Val Thr Leu Asn Glu Ser Glu 
                          645                 650                 655     
          Ile Cys Ala Gly Ala Glu Lys Ile Gly Ser Gly Pro Cys Glu Gly Asp 
                      660                 665                 670         
          Tyr Gly Gly Pro Leu Val Cys Glu Gln His Lys Met Arg Met Val Leu 
                  675                 680                 685             
          Gly Val Ile Val Pro Gly Arg Gly Cys Ala Ile Pro Asn Arg Pro Gly 
              690                 695                 700                 
          Ile Phe Val Arg Val Ala Tyr Tyr Ala Lys Trp Ile His Lys Ile Ile 
          705                 710                 715                 720 
          Leu Thr Tyr Lys Val Pro Gln Ser 
                          725             
          <![CDATA[<210>  10]]>
          <![CDATA[<211>  728]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  HGF變異體]]>
          <![CDATA[<400>  10]]>
          Met Trp Val Thr Lys Leu Leu Pro Ala Leu Leu Leu Gln His Val Leu 
          1               5                   10                  15      
          Leu His Leu Leu Leu Leu Pro Ile Ala Ile Pro Tyr Ala Lys Gly Gln 
                      20                  25                  30          
          Gly Lys Arg Arg Asn Thr Ile His Glu Phe Lys Lys Ser Ala Lys Thr 
                  35                  40                  45              
          Thr Leu Ile Lys Ile Asp Pro Ala Leu Lys Ile Lys Thr Glu Lys Ala 
              50                  55                  60                  
          Asp Thr Ala Asp Gln Cys Ala Asn Arg Cys Thr Arg Ser Lys Gly Leu 
          65                  70                  75                  80  
          Pro Phe Thr Cys Lys Ala Phe Val Phe Asp Lys Ala Arg Lys Gln Cys 
                          85                  90                  95      
          Leu Trp Phe Pro Phe Asn Ser Met Ser Ser Gly Val Lys Lys Glu Phe 
                      100                 105                 110         
          Gly His Glu Phe Asp Leu Tyr Glu Asn Lys Asp Tyr Ile Arg Asp Cys 
                  115                 120                 125             
          Ile Val Gly Asn Gly Arg Ser Tyr Arg Gly Thr Val Ser Val Thr Lys 
              130                 135                 140                 
          Ser Gly Ile Lys Cys Gln Pro Trp Ser Ser Met Ile Pro His Glu His 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Phe Leu Pro Ser Ser Tyr Arg Gly Glu Asp Leu Arg Glu Asn Tyr 
                          165                 170                 175     
          Cys Arg Asn Pro Arg Gly Glu Glu Gly Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Ser 
                      180                 185                 190         
          Asp Pro Glu Val Arg Tyr Glu Val Cys Asp Ile Pro Gln Cys Ser Glu 
                  195                 200                 205             
          Val Glu Cys Met Thr Cys Asn Gly Glu Ser Tyr Arg Gly Leu Met Asp 
              210                 215                 220                 
          His Thr Glu Ser Gly Lys Ile Cys Gln Arg Trp Asp His Gln Thr Pro 
          225                 230                 235                 240 
          His Arg His Lys Phe Leu Pro Glu Arg Tyr Pro Asp Lys Gly Phe Asp 
                          245                 250                 255     
          Asp Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Gln Pro Arg Pro Trp Cys Tyr 
                      260                 265                 270         
          Thr Leu Asp Pro His Thr Arg Trp Glu Tyr Cys Ala Ile Lys Thr Cys 
                  275                 280                 285             
          Ala Asp Asn Thr Met Asn Asp Thr Asp Val Pro Leu Glu Thr Thr Glu 
              290                 295                 300                 
          Cys Ile Gln Gly Gln Gly Glu Gly Tyr Arg Gly Thr Val Asn Thr Ile 
          305                 310                 315                 320 
          Trp Asn Gly Ile Pro Cys Gln Arg Trp Asp Ser Gln Tyr Pro His Glu 
                          325                 330                 335     
          His Asp Met Thr Pro Glu Asn Phe Lys Cys Lys Asp Leu Arg Glu Asn 
                      340                 345                 350         
          Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Ser Glu Ser Pro Trp Cys Phe Thr Thr 
                  355                 360                 365             
          Asp Pro Asn Ile Arg Val Gly Tyr Cys Ser Gln Ile Pro Asn Cys Asp 
              370                 375                 380                 
          Met Ser His Gly Gln Asp Cys Tyr Arg Gly Asn Gly Lys Asn Tyr Met 
          385                 390                 395                 400 
          Gly Asn Leu Ser Gln Thr Arg Ser Gly Leu Thr Cys Ser Met Trp Asp 
                          405                 410                 415     
          Lys Asn Met Glu Asp Leu His Arg His Ile Phe Trp Glu Pro Asp Ala 
                      420                 425                 430         
          Ser Lys Leu Asn Glu Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Asp Asp Ala His 
                  435                 440                 445             
          Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Gly Asn Pro Leu Ile Pro Trp Asp Tyr Cys 
              450                 455                 460                 
          Pro Ile Ser Arg Cys Glu Gly Asp Thr Thr Pro Thr Ile Val Asn Leu 
          465                 470                 475                 480 
          Asp His Pro Val Ile Ser Cys Ala Lys Thr Lys Gln Leu Arg Val Val 
                          485                 490                 495     
          Asn Gly Ile Pro Thr Arg Thr Asn Ile Gly Trp Met Val Ser Leu Arg 
                      500                 505                 510         
          Tyr Arg Asn Lys His Ile Cys Gly Gly Ser Leu Ile Lys Glu Ser Trp 
                  515                 520                 525             
          Val Leu Thr Ala Arg Gln Cys Phe Pro Ser Arg Asp Leu Lys Asp Tyr 
              530                 535                 540                 
          Glu Ala Trp Leu Gly Ile His Asp Val His Gly Arg Gly Asp Glu Lys 
          545                 550                 555                 560 
          Cys Lys Gln Val Leu Asn Val Ser Gln Leu Val Tyr Gly Pro Glu Gly 
                          565                 570                 575     
          Ser Asp Leu Val Leu Met Lys Leu Ala Arg Pro Ala Val Leu Asp Asp 
                      580                 585                 590         
          Phe Val Ser Thr Ile Asp Leu Pro Asn Tyr Gly Cys Thr Ile Pro Glu 
                  595                 600                 605             
          Lys Thr Ser Cys Ser Val Tyr Gly Trp Gly Tyr Thr Gly Leu Ile Asn 
              610                 615                 620                 
          Tyr Asp Gly Leu Leu Arg Val Ala His Leu Tyr Ile Met Gly Asn Glu 
          625                 630                 635                 640 
          Lys Cys Ser Gln His His Arg Gly Lys Val Thr Leu Asn Glu Ser Glu 
                          645                 650                 655     
          Ile Cys Ala Gly Ala Glu Lys Ile Gly Ser Gly Pro Cys Glu Gly Asp 
                      660                 665                 670         
          Tyr Gly Gly Pro Leu Val Cys Glu Gln His Lys Met Arg Met Val Leu 
                  675                 680                 685             
          Gly Val Ile Val Pro Gly Arg Gly Cys Ala Ile Pro Asn Arg Pro Gly 
              690                 695                 700                 
          Ile Phe Val Arg Val Ala Tyr Tyr Ala Lys Trp Ile His Lys Ile Ile 
          705                 710                 715                 720 
          Leu Thr Tyr Lys Val Pro Gln Ser 
                          725             
          <![CDATA[<210>  11]]>
          <![CDATA[<211>  728]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  HGF變異體]]>
          <![CDATA[<400>  11]]>
          Met Trp Val Thr Lys Leu Leu Pro Ala Leu Leu Leu Gln His Val Leu 
          1               5                   10                  15      
          Leu His Leu Leu Leu Leu Pro Ile Ala Ile Pro Tyr Ala Glu Gly Gln 
                      20                  25                  30          
          Arg Lys Arg Arg Asn Ala Ile His Glu Phe Lys Lys Ser Ala Lys Ala 
                  35                  40                  45              
          Thr Leu Ile Lys Ile Asp Pro Ala Leu Lys Ile Lys Thr Glu Lys Ala 
              50                  55                  60                  
          Asn Thr Ala Asp Gln Cys Ala Asn Arg Cys Thr Arg Ser Lys Gly Leu 
          65                  70                  75                  80  
          Pro Phe Thr Cys Lys Ala Phe Val Phe Asp Lys Ala Arg Lys Arg Cys 
                          85                  90                  95      
          Leu Trp Phe Pro Phe Asn Ser Met Ser Ser Gly Val Lys Lys Glu Phe 
                      100                 105                 110         
          Gly His Glu Phe Asp Leu Tyr Glu Asn Lys Asp Tyr Ile Arg Asp Cys 
                  115                 120                 125             
          Ile Val Gly Asn Gly Arg Ser Tyr Arg Gly Thr Val Ser Ile Thr Lys 
              130                 135                 140                 
          Ser Gly Ile Glu Cys Gln Pro Trp Ser Ser Met Ile Pro His Glu His 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Phe Leu Pro Ser Ser Tyr Arg Gly Glu Asp Leu Gln Glu Asn Tyr 
                          165                 170                 175     
          Cys Arg Asn Pro Trp Gly Glu Glu Gly Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Ser 
                      180                 185                 190         
          Asp Pro Glu Val Arg Tyr Glu Val Cys Asp Ile Pro Gln Cys Ser Glu 
                  195                 200                 205             
          Val Glu Cys Met Thr Cys Asn Gly Glu Ser Tyr Arg Gly Leu Met Asp 
              210                 215                 220                 
          His Thr Glu Ser Gly Lys Ile Cys Gln Arg Trp Asp His Gln Thr Pro 
          225                 230                 235                 240 
          His Arg His Lys Phe Leu Pro Glu Arg Tyr Pro Asp Lys Gly Phe Asp 
                          245                 250                 255     
          Asp Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Gln Pro Arg Pro Trp Cys Tyr 
                      260                 265                 270         
          Thr Leu Asp Pro His Thr Arg Trp Glu Tyr Cys Ala Ile Lys Thr Cys 
                  275                 280                 285             
          Ala Asp Asn Thr Met Asn Asp Thr Asp Val Pro Leu Glu Thr Thr Glu 
              290                 295                 300                 
          Cys Ile Gln Gly Gln Gly Glu Gly Tyr Arg Gly Thr Val Asn Thr Ile 
          305                 310                 315                 320 
          Trp Asn Gly Ile Pro Cys Gln Arg Trp Asp Ser Gln Tyr Pro His Glu 
                          325                 330                 335     
          His Asp Met Thr Pro Glu Asn Phe Lys Cys Lys Asp Leu Arg Glu Asn 
                      340                 345                 350         
          Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Ser Glu Ser Pro Trp Cys Phe Thr Thr 
                  355                 360                 365             
          Asp Pro Asn Ile Arg Val Gly Tyr Cys Ser Gln Ile Pro Asn Cys Asp 
              370                 375                 380                 
          Met Ser His Gly Gln Asp Cys Tyr Arg Gly Asn Gly Lys Asn Tyr Met 
          385                 390                 395                 400 
          Gly Asn Leu Ser Gln Thr Arg Ser Gly Leu Thr Cys Ser Met Trp Asp 
                          405                 410                 415     
          Lys Asn Met Glu Asp Leu His Arg His Ile Phe Trp Glu Pro Asp Ala 
                      420                 425                 430         
          Ser Lys Leu Asn Glu Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Asp Asp Ala His 
                  435                 440                 445             
          Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Gly Asn Pro Leu Ile Pro Trp Asp Tyr Cys 
              450                 455                 460                 
          Pro Ile Ser Arg Cys Glu Gly Asp Thr Thr Pro Thr Ile Val Asn Leu 
          465                 470                 475                 480 
          Asp His Pro Val Ile Ser Cys Ala Lys Thr Lys Gln Leu Arg Val Val 
                          485                 490                 495     
          Asn Gly Ile Pro Thr Arg Thr Asn Ile Gly Trp Met Val Ser Leu Arg 
                      500                 505                 510         
          Tyr Arg Asn Lys His Ile Cys Gly Gly Ser Leu Ile Lys Glu Ser Trp 
                  515                 520                 525             
          Val Leu Thr Ala Arg Gln Cys Phe Pro Ser Arg Asp Leu Lys Asp Tyr 
              530                 535                 540                 
          Glu Ala Trp Leu Gly Ile His Asp Val His Gly Arg Gly Asp Glu Lys 
          545                 550                 555                 560 
          Cys Lys Gln Val Leu Asn Val Ser Gln Leu Val Tyr Gly Pro Glu Gly 
                          565                 570                 575     
          Ser Asp Leu Val Leu Met Lys Leu Ala Arg Pro Ala Val Leu Asp Asp 
                      580                 585                 590         
          Phe Val Ser Thr Ile Asp Leu Pro Asn Tyr Gly Cys Thr Ile Pro Glu 
                  595                 600                 605             
          Lys Thr Ser Cys Ser Val Tyr Gly Trp Gly Tyr Thr Gly Leu Ile Asn 
              610                 615                 620                 
          Tyr Asp Gly Leu Leu Arg Val Ala His Leu Tyr Ile Met Gly Asn Glu 
          625                 630                 635                 640 
          Lys Cys Ser Gln His His Arg Gly Lys Val Thr Leu Asn Glu Ser Glu 
                          645                 650                 655     
          Ile Cys Ala Gly Ala Glu Lys Ile Gly Ser Gly Pro Cys Glu Gly Asp 
                      660                 665                 670         
          Tyr Gly Gly Pro Leu Val Cys Glu Gln His Lys Met Arg Met Val Leu 
                  675                 680                 685             
          Gly Val Ile Val Pro Gly Arg Gly Cys Ala Ile Pro Asn Arg Pro Gly 
              690                 695                 700                 
          Ile Phe Val Arg Val Ala Tyr Tyr Ala Lys Trp Ile His Lys Ile Ile 
          705                 710                 715                 720 
          Leu Thr Tyr Lys Val Pro Gln Ser 
                          725             
          <![CDATA[<210>  12]]>
          <![CDATA[<211>  728]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  HGF變異體]]>
          <![CDATA[<400>  12]]>
          Met Trp Val Thr Lys Leu Leu Pro Ala Leu Leu Leu Gln His Val Leu 
          1               5                   10                  15      
          Leu His Leu Leu Leu Leu Pro Ile Ala Ile Pro Tyr Ala Glu Gly Gln 
                      20                  25                  30          
          Arg Lys Arg Arg Asn Thr Ile His Glu Phe Lys Lys Ser Ala Lys Thr 
                  35                  40                  45              
          Thr Leu Ile Lys Ile Asp Pro Ala Leu Lys Ile Lys Thr Glu Lys Ala 
              50                  55                  60                  
          Asn Thr Ala Asp Gln Cys Ala Asn Arg Cys Thr Arg Ser Lys Gly Leu 
          65                  70                  75                  80  
          Pro Phe Thr Cys Lys Ala Phe Val Phe Asp Lys Ala Arg Lys Arg Cys 
                          85                  90                  95      
          Leu Trp Phe Pro Phe Asn Ser Met Ser Ser Gly Val Lys Lys Glu Phe 
                      100                 105                 110         
          Gly His Glu Phe Asp Leu Tyr Glu Asn Lys Asp Tyr Thr Arg Asn Cys 
                  115                 120                 125             
          Ile Val Gly Asn Gly Arg Ser Tyr Arg Gly Thr Val Ser Ile Thr Lys 
              130                 135                 140                 
          Ser Gly Ile Glu Cys Gln Pro Trp Ser Ala Met Ile Pro His Glu His 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Phe Leu Pro Ser Ser Tyr Gln Gly Glu Asp Leu Arg Glu Asn Tyr 
                          165                 170                 175     
          Cys Arg Asn Pro Arg Gly Glu Glu Gly Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Ser 
                      180                 185                 190         
          Asp Pro Glu Val Arg Tyr Glu Val Cys Asp Ile Pro Gln Cys Ser Glu 
                  195                 200                 205             
          Val Glu Cys Met Thr Cys Asn Gly Glu Ser Tyr Arg Gly Leu Met Asp 
              210                 215                 220                 
          His Thr Glu Ser Gly Lys Ile Cys Gln Arg Trp Asp His Gln Thr Pro 
          225                 230                 235                 240 
          His Arg His Lys Phe Leu Pro Glu Arg Tyr Pro Asp Lys Gly Phe Asp 
                          245                 250                 255     
          Asp Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Gln Pro Arg Pro Trp Cys Tyr 
                      260                 265                 270         
          Thr Leu Asp Pro His Thr Arg Trp Glu Tyr Cys Ala Ile Lys Thr Cys 
                  275                 280                 285             
          Ala Asp Asn Thr Met Asn Asp Thr Asp Val Pro Leu Glu Thr Thr Glu 
              290                 295                 300                 
          Cys Ile Gln Gly Gln Gly Glu Gly Tyr Arg Gly Thr Val Asn Thr Ile 
          305                 310                 315                 320 
          Trp Asn Gly Ile Pro Cys Gln Arg Trp Asp Ser Gln Tyr Pro His Glu 
                          325                 330                 335     
          His Asp Met Thr Pro Glu Asn Phe Lys Cys Lys Asp Leu Arg Glu Asn 
                      340                 345                 350         
          Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Ser Glu Ser Pro Trp Cys Phe Thr Thr 
                  355                 360                 365             
          Asp Pro Asn Ile Arg Val Gly Tyr Cys Ser Gln Ile Pro Asn Cys Asp 
              370                 375                 380                 
          Met Ser His Gly Gln Asp Cys Tyr Arg Gly Asn Gly Lys Asn Tyr Met 
          385                 390                 395                 400 
          Gly Asn Leu Ser Gln Thr Arg Ser Gly Leu Thr Cys Ser Met Trp Asp 
                          405                 410                 415     
          Lys Asn Met Glu Asp Leu His Arg His Ile Phe Trp Glu Pro Asp Ala 
                      420                 425                 430         
          Ser Lys Leu Asn Glu Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Asp Asp Ala His 
                  435                 440                 445             
          Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Gly Asn Pro Leu Ile Pro Trp Asp Tyr Cys 
              450                 455                 460                 
          Pro Ile Ser Arg Cys Glu Gly Asp Thr Thr Pro Thr Ile Val Asn Leu 
          465                 470                 475                 480 
          Asp His Pro Val Ile Ser Cys Ala Lys Thr Lys Gln Leu Arg Val Val 
                          485                 490                 495     
          Asn Gly Ile Pro Thr Arg Thr Asn Ile Gly Trp Met Val Ser Leu Arg 
                      500                 505                 510         
          Tyr Arg Asn Lys His Ile Cys Gly Gly Ser Leu Ile Lys Glu Ser Trp 
                  515                 520                 525             
          Val Leu Thr Ala Arg Gln Cys Phe Pro Ser Arg Asp Leu Lys Asp Tyr 
              530                 535                 540                 
          Glu Ala Trp Leu Gly Ile His Asp Val His Gly Arg Gly Asp Glu Lys 
          545                 550                 555                 560 
          Cys Lys Gln Val Leu Asn Val Ser Gln Leu Val Tyr Gly Pro Glu Gly 
                          565                 570                 575     
          Ser Asp Leu Val Leu Met Lys Leu Ala Arg Pro Ala Val Leu Asp Asp 
                      580                 585                 590         
          Phe Val Ser Thr Ile Asp Leu Pro Asn Tyr Gly Cys Thr Ile Pro Glu 
                  595                 600                 605             
          Lys Thr Ser Cys Ser Val Tyr Gly Trp Gly Tyr Thr Gly Leu Ile Asn 
              610                 615                 620                 
          Tyr Asp Gly Leu Leu Arg Val Ala His Leu Tyr Ile Met Gly Asn Glu 
          625                 630                 635                 640 
          Lys Cys Ser Gln His His Arg Gly Lys Val Thr Leu Asn Glu Ser Glu 
                          645                 650                 655     
          Ile Cys Ala Gly Ala Glu Lys Ile Gly Ser Gly Pro Cys Glu Gly Asp 
                      660                 665                 670         
          Tyr Gly Gly Pro Leu Val Cys Glu Gln His Lys Met Arg Met Val Leu 
                  675                 680                 685             
          Gly Val Ile Val Pro Gly Arg Gly Cys Ala Ile Pro Asn Arg Pro Gly 
              690                 695                 700                 
          Ile Phe Val Arg Val Ala Tyr Tyr Ala Lys Trp Ile His Lys Ile Ile 
          705                 710                 715                 720 
          Leu Thr Tyr Lys Val Pro Gln Ser 
                          725             
          <![CDATA[<210>  13]]>
          <![CDATA[<211>  728]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  HGF變異體]]>
          <![CDATA[<400>  13]]>
          Met Trp Val Thr Lys Leu Leu Pro Ala Leu Leu Leu Gln His Val Leu 
          1               5                   10                  15      
          Leu His Leu Leu Leu Leu Pro Ile Ala Ile Pro Tyr Ala Glu Gly Gln 
                      20                  25                  30          
          Arg Lys Arg Arg Asn Thr Ile His Glu Phe Lys Lys Ser Ala Lys Thr 
                  35                  40                  45              
          Thr Leu Ile Lys Ile Asp Pro Ala Leu Lys Ile Lys Thr Lys Lys Val 
              50                  55                  60                  
          Asn Thr Ala Asp Gln Cys Ala Asn Arg Cys Thr Arg Asn Lys Gly Leu 
          65                  70                  75                  80  
          Pro Phe Thr Cys Lys Ala Phe Val Phe Asp Lys Ala Arg Lys Gln Cys 
                          85                  90                  95      
          Leu Trp Phe Pro Phe Asn Ser Met Ser Ser Gly Val Lys Lys Glu Phe 
                      100                 105                 110         
          Gly His Glu Phe Asp Leu Tyr Glu Asn Lys Asp Tyr Ile Arg Asn Cys 
                  115                 120                 125             
          Ile Ile Gly Lys Gly Arg Ser Tyr Lys Gly Thr Val Ser Ile Thr Lys 
              130                 135                 140                 
          Ser Gly Ile Lys Cys Gln Pro Trp Ser Ser Met Ile Pro His Glu His 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Phe Leu Pro Ser Ser Tyr Arg Gly Lys Asp Leu Gln Glu Asn Tyr 
                          165                 170                 175     
          Cys Arg Asn Pro Arg Gly Glu Glu Gly Gly Pro Trp Cys Phe Thr Ser 
                      180                 185                 190         
          Asn Pro Glu Val Arg Tyr Glu Val Cys Asp Ile Pro Gln Cys Ser Glu 
                  195                 200                 205             
          Val Glu Cys Met Thr Cys Asn Gly Glu Ser Tyr Arg Gly Leu Met Asp 
              210                 215                 220                 
          His Thr Glu Ser Gly Lys Ile Cys Gln Arg Trp Asp His Gln Thr Pro 
          225                 230                 235                 240 
          His Arg His Lys Phe Leu Pro Glu Arg Tyr Pro Asp Lys Gly Phe Asp 
                          245                 250                 255     
          Asp Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Gln Pro Arg Pro Trp Cys Tyr 
                      260                 265                 270         
          Thr Leu Asp Pro His Thr Arg Trp Glu Tyr Cys Ala Ile Lys Thr Cys 
                  275                 280                 285             
          Ala Asp Asn Thr Met Asn Asp Thr Asp Val Pro Leu Glu Thr Thr Glu 
              290                 295                 300                 
          Cys Ile Gln Gly Gln Gly Glu Gly Tyr Arg Gly Thr Val Asn Thr Ile 
          305                 310                 315                 320 
          Trp Asn Gly Ile Pro Cys Gln Arg Trp Asp Ser Gln Tyr Pro His Glu 
                          325                 330                 335     
          His Asp Met Thr Pro Glu Asn Phe Lys Cys Lys Asp Leu Arg Glu Asn 
                      340                 345                 350         
          Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Ser Glu Ser Pro Trp Cys Phe Thr Thr 
                  355                 360                 365             
          Asp Pro Asn Ile Arg Val Gly Tyr Cys Ser Gln Ile Pro Asn Cys Asp 
              370                 375                 380                 
          Met Ser His Gly Gln Asp Cys Tyr Arg Gly Asn Gly Lys Asn Tyr Met 
          385                 390                 395                 400 
          Gly Asn Leu Ser Gln Thr Arg Ser Gly Leu Thr Cys Ser Met Trp Asp 
                          405                 410                 415     
          Lys Asn Met Glu Asp Leu His Arg His Ile Phe Trp Glu Pro Asp Ala 
                      420                 425                 430         
          Ser Lys Leu Asn Glu Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Asp Asp Ala His 
                  435                 440                 445             
          Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Gly Asn Pro Leu Ile Pro Trp Asp Tyr Cys 
              450                 455                 460                 
          Pro Ile Ser Arg Cys Glu Gly Asp Thr Thr Pro Thr Ile Val Asn Leu 
          465                 470                 475                 480 
          Asp His Pro Val Ile Ser Cys Ala Lys Thr Lys Gln Leu Arg Val Val 
                          485                 490                 495     
          Asn Gly Ile Pro Thr Arg Thr Asn Ile Gly Trp Met Val Ser Leu Arg 
                      500                 505                 510         
          Tyr Arg Asn Lys His Ile Cys Gly Gly Ser Leu Ile Lys Glu Ser Trp 
                  515                 520                 525             
          Val Leu Thr Ala Arg Gln Cys Phe Pro Ser Arg Asp Leu Lys Asp Tyr 
              530                 535                 540                 
          Glu Ala Trp Leu Gly Ile His Asp Val His Gly Arg Gly Asp Glu Lys 
          545                 550                 555                 560 
          Cys Lys Gln Val Leu Asn Val Ser Gln Leu Val Tyr Gly Pro Glu Gly 
                          565                 570                 575     
          Ser Asp Leu Val Leu Met Lys Leu Ala Arg Pro Ala Val Leu Asp Asp 
                      580                 585                 590         
          Phe Val Ser Thr Ile Asp Leu Pro Asn Tyr Gly Cys Thr Ile Pro Glu 
                  595                 600                 605             
          Lys Thr Ser Cys Ser Val Tyr Gly Trp Gly Tyr Thr Gly Leu Ile Asn 
              610                 615                 620                 
          Tyr Asp Gly Leu Leu Arg Val Ala His Leu Tyr Ile Met Gly Asn Glu 
          625                 630                 635                 640 
          Lys Cys Ser Gln His His Arg Gly Lys Val Thr Leu Asn Glu Ser Glu 
                          645                 650                 655     
          Ile Cys Ala Gly Ala Glu Lys Ile Gly Ser Gly Pro Cys Glu Gly Asp 
                      660                 665                 670         
          Tyr Gly Gly Pro Leu Val Cys Glu Gln His Lys Met Arg Met Val Leu 
                  675                 680                 685             
          Gly Val Ile Val Pro Gly Arg Gly Cys Ala Ile Pro Asn Arg Pro Gly 
              690                 695                 700                 
          Ile Phe Val Arg Val Ala Tyr Tyr Ala Lys Trp Ile His Lys Ile Ile 
          705                 710                 715                 720 
          Leu Thr Tyr Lys Val Pro Gln Ser 
                          725             
          <![CDATA[<210>  14]]>
          <![CDATA[<211>  728]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  HGF變異體]]>
          <![CDATA[<400>  14]]>
          Met Trp Val Thr Lys Leu Leu Pro Ala Leu Leu Leu Gln His Val Leu 
          1               5                   10                  15      
          Leu His Leu Leu Leu Leu Pro Ile Ala Ile Pro Tyr Ala Glu Gly Gln 
                      20                  25                  30          
          Arg Lys Arg Arg Asp Ala Ile His Glu Cys Lys Arg Ser Ala Lys Thr 
                  35                  40                  45              
          Thr Leu Ile Lys Ile Asp Pro Ala Leu Lys Ile Lys Thr Glu Lys Ala 
              50                  55                  60                  
          Asn Thr Ala Asp Gln Cys Ala Asn Arg Cys Thr Arg Asn Lys Gly Leu 
          65                  70                  75                  80  
          Pro Ser Thr Cys Lys Ala Phe Val Phe Asp Lys Ala Arg Lys Arg Arg 
                          85                  90                  95      
          Leu Arg Phe Pro Phe Asn Ser Met Ser Ser Gly Val Lys Lys Glu Phe 
                      100                 105                 110         
          Gly His Glu Phe Asp Leu Tyr Glu Asn Lys Asp Tyr Thr Arg Asn Cys 
                  115                 120                 125             
          Ile Val Gly Lys Gly Arg Ser Tyr Arg Gly Thr Val Ser Thr Thr Lys 
              130                 135                 140                 
          Ser Gly Ile Lys Cys Gln Pro Trp Ser Ala Met Ile Pro His Glu His 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Phe Leu Pro Ser Ser Tyr Arg Gly Glu Asp Leu Arg Glu Asn Tyr 
                          165                 170                 175     
          Cys Arg Asn Pro Arg Gly Glu Glu Gly Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Ser 
                      180                 185                 190         
          Asp Pro Glu Val Arg Tyr Glu Val Cys Asp Ile Pro Gln Cys Ser Glu 
                  195                 200                 205             
          Val Glu Cys Met Thr Cys Asn Gly Glu Ser Tyr Arg Gly Leu Met Asp 
              210                 215                 220                 
          His Thr Glu Ser Gly Lys Ile Cys Gln Arg Trp Asp His Gln Thr Pro 
          225                 230                 235                 240 
          His Arg His Lys Phe Leu Pro Glu Arg Tyr Pro Asp Lys Gly Phe Asp 
                          245                 250                 255     
          Asp Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Gln Pro Arg Pro Trp Cys Tyr 
                      260                 265                 270         
          Thr Leu Asp Pro His Thr Arg Trp Glu Tyr Cys Ala Ile Lys Thr Cys 
                  275                 280                 285             
          Ala Asp Asn Thr Met Asn Asp Thr Asp Val Pro Leu Glu Thr Thr Glu 
              290                 295                 300                 
          Cys Ile Gln Gly Gln Gly Glu Gly Tyr Arg Gly Thr Val Asn Thr Ile 
          305                 310                 315                 320 
          Trp Asn Gly Ile Pro Cys Gln Arg Trp Asp Ser Gln Tyr Pro His Glu 
                          325                 330                 335     
          His Asp Met Thr Pro Glu Asn Phe Lys Cys Lys Asp Leu Arg Glu Asn 
                      340                 345                 350         
          Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Ser Glu Ser Pro Trp Cys Phe Thr Thr 
                  355                 360                 365             
          Asp Pro Asn Ile Arg Val Gly Tyr Cys Ser Gln Ile Pro Asn Cys Asp 
              370                 375                 380                 
          Met Ser His Gly Gln Asp Cys Tyr Arg Gly Asn Gly Lys Asn Tyr Met 
          385                 390                 395                 400 
          Gly Asn Leu Ser Gln Thr Arg Ser Gly Leu Thr Cys Ser Met Trp Asp 
                          405                 410                 415     
          Lys Asn Met Glu Asp Leu His Arg His Ile Phe Trp Glu Pro Asp Ala 
                      420                 425                 430         
          Ser Lys Leu Asn Glu Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Asp Asp Ala His 
                  435                 440                 445             
          Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Gly Asn Pro Leu Ile Pro Trp Asp Tyr Cys 
              450                 455                 460                 
          Pro Ile Ser Arg Cys Glu Gly Asp Thr Thr Pro Thr Ile Val Asn Leu 
          465                 470                 475                 480 
          Asp His Pro Val Ile Ser Cys Ala Lys Thr Lys Gln Leu Arg Val Val 
                          485                 490                 495     
          Asn Gly Ile Pro Thr Arg Thr Asn Ile Gly Trp Met Val Ser Leu Arg 
                      500                 505                 510         
          Tyr Arg Asn Lys His Ile Cys Gly Gly Ser Leu Ile Lys Glu Ser Trp 
                  515                 520                 525             
          Val Leu Thr Ala Arg Gln Cys Phe Pro Ser Arg Asp Leu Lys Asp Tyr 
              530                 535                 540                 
          Glu Ala Trp Leu Gly Ile His Asp Val His Gly Arg Gly Asp Glu Lys 
          545                 550                 555                 560 
          Cys Lys Gln Val Leu Asn Val Ser Gln Leu Val Tyr Gly Pro Glu Gly 
                          565                 570                 575     
          Ser Asp Leu Val Leu Met Lys Leu Ala Arg Pro Ala Val Leu Asp Asp 
                      580                 585                 590         
          Phe Val Ser Thr Ile Asp Leu Pro Asn Tyr Gly Cys Thr Ile Pro Glu 
                  595                 600                 605             
          Lys Thr Ser Cys Ser Val Tyr Gly Trp Gly Tyr Thr Gly Leu Ile Asn 
              610                 615                 620                 
          Tyr Asp Gly Leu Leu Arg Val Ala His Leu Tyr Ile Met Gly Asn Glu 
          625                 630                 635                 640 
          Lys Cys Ser Gln His His Arg Gly Lys Val Thr Leu Asn Glu Ser Glu 
                          645                 650                 655     
          Ile Cys Ala Gly Ala Glu Lys Ile Gly Ser Gly Pro Cys Glu Gly Asp 
                      660                 665                 670         
          Tyr Gly Gly Pro Leu Val Cys Glu Gln His Lys Met Arg Met Val Leu 
                  675                 680                 685             
          Gly Val Ile Val Pro Gly Arg Gly Cys Ala Ile Pro Asn Arg Pro Gly 
              690                 695                 700                 
          Ile Phe Val Arg Val Ala Tyr Tyr Ala Lys Trp Ile His Lys Ile Ile 
          705                 710                 715                 720 
          Leu Thr Tyr Lys Val Pro Gln Ser 
                          725             
          <![CDATA[<210>  15]]>
          <![CDATA[<211>  728]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  HGF變異體]]>
          <![CDATA[<400>  15]]>
          Met Trp Val Thr Lys Leu Leu Pro Ala Leu Leu Leu Gln His Val Leu 
          1               5                   10                  15      
          Leu His Leu Leu Leu Leu Pro Ile Ala Ile Pro Tyr Ala Glu Gly Gln 
                      20                  25                  30          
          Gly Lys Arg Arg Asn Thr Ile His Glu Phe Lys Lys Ser Ala Lys Thr 
                  35                  40                  45              
          Thr Leu Ile Lys Ile Asp Pro Ala Leu Lys Ile Lys Thr Glu Lys Val 
              50                  55                  60                  
          Asn Thr Ala Asp Gln Cys Ala Asn Arg Cys Thr Arg Ser Lys Gly Leu 
          65                  70                  75                  80  
          Pro Phe Thr Cys Lys Ala Phe Val Phe Asp Lys Ala Arg Lys Arg Cys 
                          85                  90                  95      
          Leu Trp Phe Pro Phe Asn Ser Met Ser Ser Gly Val Lys Lys Glu Phe 
                      100                 105                 110         
          Gly His Glu Phe Asp Leu Tyr Glu Asn Lys Asp Tyr Ile Arg Asp Cys 
                  115                 120                 125             
          Ile Ile Gly Arg Gly Arg Ser Tyr Arg Gly Thr Val Ser Ile Thr Lys 
              130                 135                 140                 
          Ser Gly Ile Lys Cys Gln Pro Trp Ser Ala Met Ile Pro His Glu His 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Phe Leu Pro Ser Ser Tyr Arg Gly Glu Asp Leu Arg Glu Asn Tyr 
                          165                 170                 175     
          Cys Arg Asn Pro Arg Gly Glu Glu Gly Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Ser 
                      180                 185                 190         
          Asp Pro Glu Val Arg Tyr Glu Val Cys Asp Ile Pro Gln Cys Ser Glu 
                  195                 200                 205             
          Val Glu Cys Met Thr Cys Asn Gly Glu Ser Tyr Arg Gly Leu Met Asp 
              210                 215                 220                 
          His Thr Glu Ser Gly Lys Ile Cys Gln Arg Trp Asp His Gln Thr Pro 
          225                 230                 235                 240 
          His Arg His Lys Phe Leu Pro Glu Arg Tyr Pro Asp Lys Gly Phe Asp 
                          245                 250                 255     
          Asp Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Gln Pro Arg Pro Trp Cys Tyr 
                      260                 265                 270         
          Thr Leu Asp Pro His Thr Arg Trp Glu Tyr Cys Ala Ile Lys Thr Cys 
                  275                 280                 285             
          Ala Asp Asn Thr Met Asn Asp Thr Asp Val Pro Leu Glu Thr Thr Glu 
              290                 295                 300                 
          Cys Ile Gln Gly Gln Gly Glu Gly Tyr Arg Gly Thr Val Asn Thr Ile 
          305                 310                 315                 320 
          Trp Asn Gly Ile Pro Cys Gln Arg Trp Asp Ser Gln Tyr Pro His Glu 
                          325                 330                 335     
          His Asp Met Thr Pro Glu Asn Phe Lys Cys Lys Asp Leu Arg Glu Asn 
                      340                 345                 350         
          Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Ser Glu Ser Pro Trp Cys Phe Thr Thr 
                  355                 360                 365             
          Asp Pro Asn Ile Arg Val Gly Tyr Cys Ser Gln Ile Pro Asn Cys Asp 
              370                 375                 380                 
          Met Ser His Gly Gln Asp Cys Tyr Arg Gly Asn Gly Lys Asn Tyr Met 
          385                 390                 395                 400 
          Gly Asn Leu Ser Gln Thr Arg Ser Gly Leu Thr Cys Ser Met Trp Asp 
                          405                 410                 415     
          Lys Asn Met Glu Asp Leu His Arg His Ile Phe Trp Glu Pro Asp Ala 
                      420                 425                 430         
          Ser Lys Leu Asn Glu Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Asp Asp Ala His 
                  435                 440                 445             
          Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Gly Asn Pro Leu Ile Pro Trp Asp Tyr Cys 
              450                 455                 460                 
          Pro Ile Ser Arg Cys Glu Gly Asp Thr Thr Pro Thr Ile Val Asn Leu 
          465                 470                 475                 480 
          Asp His Pro Val Ile Ser Cys Ala Lys Thr Lys Gln Leu Arg Val Val 
                          485                 490                 495     
          Asn Gly Ile Pro Thr Arg Thr Asn Ile Gly Trp Met Val Ser Leu Arg 
                      500                 505                 510         
          Tyr Arg Asn Lys His Ile Cys Gly Gly Ser Leu Ile Lys Glu Ser Trp 
                  515                 520                 525             
          Val Leu Thr Ala Arg Gln Cys Phe Pro Ser Arg Asp Leu Lys Asp Tyr 
              530                 535                 540                 
          Glu Ala Trp Leu Gly Ile His Asp Val His Gly Arg Gly Asp Glu Lys 
          545                 550                 555                 560 
          Cys Lys Gln Val Leu Asn Val Ser Gln Leu Val Tyr Gly Pro Glu Gly 
                          565                 570                 575     
          Ser Asp Leu Val Leu Met Lys Leu Ala Arg Pro Ala Val Leu Asp Asp 
                      580                 585                 590         
          Phe Val Ser Thr Ile Asp Leu Pro Asn Tyr Gly Cys Thr Ile Pro Glu 
                  595                 600                 605             
          Lys Thr Ser Cys Ser Val Tyr Gly Trp Gly Tyr Thr Gly Leu Ile Asn 
              610                 615                 620                 
          Tyr Asp Gly Leu Leu Arg Val Ala His Leu Tyr Ile Met Gly Asn Glu 
          625                 630                 635                 640 
          Lys Cys Ser Gln His His Arg Gly Lys Val Thr Leu Asn Glu Ser Glu 
                          645                 650                 655     
          Ile Cys Ala Gly Ala Glu Lys Ile Gly Ser Gly Pro Cys Glu Gly Asp 
                      660                 665                 670         
          Tyr Gly Gly Pro Leu Val Cys Glu Gln His Lys Met Arg Met Val Leu 
                  675                 680                 685             
          Gly Val Ile Val Pro Gly Arg Gly Cys Ala Ile Pro Asn Arg Pro Gly 
              690                 695                 700                 
          Ile Phe Val Arg Val Ala Tyr Tyr Ala Lys Trp Ile His Lys Ile Ile 
          705                 710                 715                 720 
          Leu Thr Tyr Lys Val Pro Gln Ser 
                          725             
          <![CDATA[<210>  16]]>
          <![CDATA[<211>  728]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  HGF變異體]]>
          <![CDATA[<400>  16]]>
          Met Trp Val Thr Lys Leu Leu Pro Ala Leu Leu Leu Gln His Val Leu 
          1               5                   10                  15      
          Leu His Leu Leu Leu Leu Pro Ile Ala Ile Pro His Ala Glu Gly Gln 
                      20                  25                  30          
          Arg Lys Arg Arg Asn Thr Ile His Glu Phe Lys Lys Ser Ala Lys Thr 
                  35                  40                  45              
          Thr Leu Ile Lys Ile Asp Pro Ala Leu Lys Ile Lys Thr Glu Lys Ala 
              50                  55                  60                  
          Asn Thr Ala Asp Gln Cys Ala Asn Arg Cys Thr Arg Ser Lys Gly Leu 
          65                  70                  75                  80  
          Pro Phe Thr Cys Lys Ala Phe Val Phe Asp Lys Ala Arg Lys Arg Cys 
                          85                  90                  95      
          Leu Trp Phe Pro Phe Asn Ser Met Ser Ser Gly Val Lys Lys Glu Phe 
                      100                 105                 110         
          Gly His Glu Phe Asp Leu Tyr Glu Asn Lys Asp Tyr Thr Arg Asn Cys 
                  115                 120                 125             
          Ile Val Gly Asn Gly Arg Ser Tyr Arg Gly Thr Val Ser Thr Thr Lys 
              130                 135                 140                 
          Ser Gly Ile Lys Cys Gln Pro Trp Ser Ala Met Ile Pro His Glu His 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Phe Leu Pro Ser Ser Tyr Arg Gly Glu Asp Leu Arg Glu Asn Tyr 
                          165                 170                 175     
          Cys Arg Asn Pro Arg Gly Glu Glu Gly Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Ser 
                      180                 185                 190         
          Asp Pro Glu Val Arg Tyr Glu Val Cys Asp Ile Pro Gln Cys Ser Glu 
                  195                 200                 205             
          Val Glu Cys Met Thr Cys Asn Gly Glu Ser Tyr Arg Gly Leu Met Asp 
              210                 215                 220                 
          His Thr Glu Ser Gly Lys Ile Cys Gln Arg Trp Asp His Gln Thr Pro 
          225                 230                 235                 240 
          His Arg His Lys Phe Leu Pro Glu Arg Tyr Pro Asp Lys Gly Phe Asp 
                          245                 250                 255     
          Asp Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Gln Pro Arg Pro Trp Cys Tyr 
                      260                 265                 270         
          Thr Leu Asp Pro His Thr Arg Trp Glu Tyr Cys Ala Ile Lys Thr Cys 
                  275                 280                 285             
          Ala Asp Asn Thr Met Asn Asp Thr Asp Val Pro Leu Glu Thr Thr Glu 
              290                 295                 300                 
          Cys Ile Gln Gly Gln Gly Glu Gly Tyr Arg Gly Thr Val Asn Thr Ile 
          305                 310                 315                 320 
          Trp Asn Gly Ile Pro Cys Gln Arg Trp Asp Ser Gln Tyr Pro His Glu 
                          325                 330                 335     
          His Asp Met Thr Pro Glu Asn Phe Lys Cys Lys Asp Leu Arg Glu Asn 
                      340                 345                 350         
          Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Ser Glu Ser Pro Trp Cys Phe Thr Thr 
                  355                 360                 365             
          Asp Pro Asn Ile Arg Val Gly Tyr Cys Ser Gln Ile Pro Asn Cys Asp 
              370                 375                 380                 
          Met Ser His Gly Gln Asp Cys Tyr Arg Gly Asn Gly Lys Asn Tyr Met 
          385                 390                 395                 400 
          Gly Asn Leu Ser Gln Thr Arg Ser Gly Leu Thr Cys Ser Met Trp Asp 
                          405                 410                 415     
          Lys Asn Met Glu Asp Leu His Arg His Ile Phe Trp Glu Pro Asp Ala 
                      420                 425                 430         
          Ser Lys Leu Asn Glu Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Asp Asp Ala His 
                  435                 440                 445             
          Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Gly Asn Pro Leu Ile Pro Trp Asp Tyr Cys 
              450                 455                 460                 
          Pro Ile Ser Arg Cys Glu Gly Asp Thr Thr Pro Thr Ile Val Asn Leu 
          465                 470                 475                 480 
          Asp His Pro Val Ile Ser Cys Ala Lys Thr Lys Gln Leu Arg Val Val 
                          485                 490                 495     
          Asn Gly Ile Pro Thr Arg Thr Asn Ile Gly Trp Met Val Ser Leu Arg 
                      500                 505                 510         
          Tyr Arg Asn Lys His Ile Cys Gly Gly Ser Leu Ile Lys Glu Ser Trp 
                  515                 520                 525             
          Val Leu Thr Ala Arg Gln Cys Phe Pro Ser Arg Asp Leu Lys Asp Tyr 
              530                 535                 540                 
          Glu Ala Trp Leu Gly Ile His Asp Val His Gly Arg Gly Asp Glu Lys 
          545                 550                 555                 560 
          Cys Lys Gln Val Leu Asn Val Ser Gln Leu Val Tyr Gly Pro Glu Gly 
                          565                 570                 575     
          Ser Asp Leu Val Leu Met Lys Leu Ala Arg Pro Ala Val Leu Asp Asp 
                      580                 585                 590         
          Phe Val Ser Thr Ile Asp Leu Pro Asn Tyr Gly Cys Thr Ile Pro Glu 
                  595                 600                 605             
          Lys Thr Ser Cys Ser Val Tyr Gly Trp Gly Tyr Thr Gly Leu Ile Asn 
              610                 615                 620                 
          Tyr Asp Gly Leu Leu Arg Val Ala His Leu Tyr Ile Met Gly Asn Glu 
          625                 630                 635                 640 
          Lys Cys Ser Gln His His Arg Gly Lys Val Thr Leu Asn Glu Ser Glu 
                          645                 650                 655     
          Ile Cys Ala Gly Ala Glu Lys Ile Gly Ser Gly Pro Cys Glu Gly Asp 
                      660                 665                 670         
          Tyr Gly Gly Pro Leu Val Cys Glu Gln His Lys Met Arg Met Val Leu 
                  675                 680                 685             
          Gly Val Ile Val Pro Gly Arg Gly Cys Ala Ile Pro Asn Arg Pro Gly 
              690                 695                 700                 
          Ile Phe Val Arg Val Ala Tyr Tyr Ala Lys Trp Ile His Lys Ile Ile 
          705                 710                 715                 720 
          Leu Thr Tyr Lys Val Pro Gln Ser 
                          725             
          <![CDATA[<210>  17]]>
          <![CDATA[<211>  728]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  HGF變異體]]>
          <![CDATA[<400>  17]]>
          Met Trp Val Thr Lys Leu Leu Pro Ala Leu Leu Leu Gln His Val Leu 
          1               5                   10                  15      
          Leu His Leu Leu Leu Leu Pro Ile Ala Ile Pro Tyr Ala Glu Gly Gln 
                      20                  25                  30          
          Arg Lys Arg Arg Asn Thr Ile His Glu Phe Lys Lys Ser Ala Lys Thr 
                  35                  40                  45              
          Thr Leu Ile Lys Ile Asp Pro Ala Leu Lys Ile Lys Thr Glu Lys Ala 
              50                  55                  60                  
          Asn Thr Ala Asp Gln Cys Ala Asn Arg Cys Thr Arg Ser Arg Gly Leu 
          65                  70                  75                  80  
          Pro Phe Thr Cys Lys Ala Phe Val Phe Asp Lys Ala Arg Lys Gln Cys 
                          85                  90                  95      
          Leu Trp Phe Pro Phe Asn Ser Met Ser Ser Gly Val Lys Lys Glu Phe 
                      100                 105                 110         
          Gly His Glu Phe Asp Leu Tyr Glu Asn Lys Asp Tyr Ile Arg Asp Cys 
                  115                 120                 125             
          Ile Ile Gly Asn Gly Arg Ser Tyr Arg Gly Thr Val Ser Val Thr Lys 
              130                 135                 140                 
          Ser Gly Ile Lys Cys Gln Pro Trp Ser Ala Met Ile Pro His Glu His 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Phe Leu Pro Ser Ser Tyr Arg Gly Glu Asp Leu Arg Glu Asn Tyr 
                          165                 170                 175     
          Cys Arg Asn Pro Arg Gly Glu Glu Gly Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Ser 
                      180                 185                 190         
          Asp Pro Glu Val Arg Tyr Glu Val Cys Asp Ile Pro Gln Cys Ser Glu 
                  195                 200                 205             
          Val Glu Cys Met Thr Cys Asn Gly Glu Ser Tyr Arg Gly Leu Met Asp 
              210                 215                 220                 
          His Thr Glu Ser Gly Lys Ile Cys Gln Arg Trp Asp His Gln Thr Pro 
          225                 230                 235                 240 
          His Arg His Lys Phe Leu Pro Glu Arg Tyr Pro Asp Lys Gly Phe Asp 
                          245                 250                 255     
          Asp Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Gln Pro Arg Pro Trp Cys Tyr 
                      260                 265                 270         
          Thr Leu Asp Pro His Thr Arg Trp Glu Tyr Cys Ala Ile Lys Thr Cys 
                  275                 280                 285             
          Ala Asp Asn Thr Met Asn Asp Thr Asp Val Pro Leu Glu Thr Thr Glu 
              290                 295                 300                 
          Cys Ile Gln Gly Gln Gly Glu Gly Tyr Arg Gly Thr Val Asn Thr Ile 
          305                 310                 315                 320 
          Trp Asn Gly Ile Pro Cys Gln Arg Trp Asp Ser Gln Tyr Pro His Glu 
                          325                 330                 335     
          His Asp Met Thr Pro Glu Asn Phe Lys Cys Lys Asp Leu Arg Glu Asn 
                      340                 345                 350         
          Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Ser Glu Ser Pro Trp Cys Phe Thr Thr 
                  355                 360                 365             
          Asp Pro Asn Ile Arg Val Gly Tyr Cys Ser Gln Ile Pro Asn Cys Asp 
              370                 375                 380                 
          Met Ser His Gly Gln Asp Cys Tyr Arg Gly Asn Gly Lys Asn Tyr Met 
          385                 390                 395                 400 
          Gly Asn Leu Ser Gln Thr Arg Ser Gly Leu Thr Cys Ser Met Trp Asp 
                          405                 410                 415     
          Lys Asn Met Glu Asp Leu His Arg His Ile Phe Trp Glu Pro Asp Ala 
                      420                 425                 430         
          Ser Lys Leu Asn Glu Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Asp Asp Ala His 
                  435                 440                 445             
          Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Gly Asn Pro Leu Ile Pro Trp Asp Tyr Cys 
              450                 455                 460                 
          Pro Ile Ser Arg Cys Glu Gly Asp Thr Thr Pro Thr Ile Val Asn Leu 
          465                 470                 475                 480 
          Asp His Pro Val Ile Ser Cys Ala Lys Thr Lys Gln Leu Arg Val Val 
                          485                 490                 495     
          Asn Gly Ile Pro Thr Arg Thr Asn Ile Gly Trp Met Val Ser Leu Arg 
                      500                 505                 510         
          Tyr Arg Asn Lys His Ile Cys Gly Gly Ser Leu Ile Lys Glu Ser Trp 
                  515                 520                 525             
          Val Leu Thr Ala Arg Gln Cys Phe Pro Ser Arg Asp Leu Lys Asp Tyr 
              530                 535                 540                 
          Glu Ala Trp Leu Gly Ile His Asp Val His Gly Arg Gly Asp Glu Lys 
          545                 550                 555                 560 
          Cys Lys Gln Val Leu Asn Val Ser Gln Leu Val Tyr Gly Pro Glu Gly 
                          565                 570                 575     
          Ser Asp Leu Val Leu Met Lys Leu Ala Arg Pro Ala Val Leu Asp Asp 
                      580                 585                 590         
          Phe Val Ser Thr Ile Asp Leu Pro Asn Tyr Gly Cys Thr Ile Pro Glu 
                  595                 600                 605             
          Lys Thr Ser Cys Ser Val Tyr Gly Trp Gly Tyr Thr Gly Leu Ile Asn 
              610                 615                 620                 
          Tyr Asp Gly Leu Leu Arg Val Ala His Leu Tyr Ile Met Gly Asn Glu 
          625                 630                 635                 640 
          Lys Cys Ser Gln His His Arg Gly Lys Val Thr Leu Asn Glu Ser Glu 
                          645                 650                 655     
          Ile Cys Ala Gly Ala Glu Lys Ile Gly Ser Gly Pro Cys Glu Gly Asp 
                      660                 665                 670         
          Tyr Gly Gly Pro Leu Val Cys Glu Gln His Lys Met Arg Met Val Leu 
                  675                 680                 685             
          Gly Val Ile Val Pro Gly Arg Gly Cys Ala Ile Pro Asn Arg Pro Gly 
              690                 695                 700                 
          Ile Phe Val Arg Val Ala Tyr Tyr Ala Lys Trp Ile His Lys Ile Ile 
          705                 710                 715                 720 
          Leu Thr Tyr Lys Val Pro Gln Ser 
                          725             
          <![CDATA[<210>  18]]>
          <![CDATA[<211>  728]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  HGF變異體]]>
          <![CDATA[<400>  18]]>
          Met Trp Val Thr Lys Leu Leu Pro Ala Leu Leu Leu Gln His Val Leu 
          1               5                   10                  15      
          Leu His Leu Leu Leu Leu Pro Ile Ala Ile Pro Tyr Ala Glu Gly Gln 
                      20                  25                  30          
          Arg Lys Arg Arg Asn Thr Ile His Glu Phe Lys Lys Ser Ala Lys Thr 
                  35                  40                  45              
          Thr Leu Ile Lys Ile Asp Pro Ala Leu Lys Ile Lys Thr Glu Lys Ala 
              50                  55                  60                  
          Asn Thr Ala Asp Gln Cys Ala Asn Arg Cys Thr Arg Asn Lys Gly Leu 
          65                  70                  75                  80  
          Pro Phe Thr Cys Lys Ala Phe Val Phe Asp Lys Ala Arg Lys Arg Cys 
                          85                  90                  95      
          Leu Trp Phe Pro Phe Asn Ser Met Ser Ser Gly Val Lys Lys Glu Phe 
                      100                 105                 110         
          Gly His Glu Phe Asp Leu Tyr Glu Asn Lys Asp Tyr Ile Arg Asp Cys 
                  115                 120                 125             
          Ile Val Gly Asn Gly Arg Ser Tyr Arg Gly Thr Val Ser Ile Thr Lys 
              130                 135                 140                 
          Ser Gly Ile Lys Cys Gln Pro Trp Ser Ser Met Ile Pro His Glu His 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Phe Leu Pro Ser Ser Tyr Arg Gly Glu Asp Leu Arg Glu Asn Tyr 
                          165                 170                 175     
          Cys Arg Asn Pro Arg Gly Glu Glu Gly Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Ser 
                      180                 185                 190         
          Asp Pro Glu Val Arg Tyr Glu Val Cys Asp Ile Pro Gln Cys Ser Glu 
                  195                 200                 205             
          Val Glu Cys Met Thr Cys Asn Gly Glu Ser Tyr Arg Gly Leu Met Asp 
              210                 215                 220                 
          His Thr Glu Ser Gly Lys Ile Cys Gln Arg Trp Asp His Gln Thr Pro 
          225                 230                 235                 240 
          His Arg His Lys Phe Leu Pro Glu Arg Tyr Pro Asp Lys Gly Phe Asp 
                          245                 250                 255     
          Asp Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Gln Pro Arg Pro Trp Cys Tyr 
                      260                 265                 270         
          Thr Leu Asp Pro His Thr Arg Trp Glu Tyr Cys Ala Ile Lys Thr Cys 
                  275                 280                 285             
          Ala Asp Asn Thr Met Asn Asp Thr Asp Val Pro Leu Glu Thr Thr Glu 
              290                 295                 300                 
          Cys Ile Gln Gly Gln Gly Glu Gly Tyr Arg Gly Thr Val Asn Thr Ile 
          305                 310                 315                 320 
          Trp Asn Gly Ile Pro Cys Gln Arg Trp Asp Ser Gln Tyr Pro His Glu 
                          325                 330                 335     
          His Asp Met Thr Pro Glu Asn Phe Lys Cys Lys Asp Leu Arg Glu Asn 
                      340                 345                 350         
          Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Ser Glu Ser Pro Trp Cys Phe Thr Thr 
                  355                 360                 365             
          Asp Pro Asn Ile Arg Val Gly Tyr Cys Ser Gln Ile Pro Asn Cys Asp 
              370                 375                 380                 
          Met Ser His Gly Gln Asp Cys Tyr Arg Gly Asn Gly Lys Asn Tyr Met 
          385                 390                 395                 400 
          Gly Asn Leu Ser Gln Thr Arg Ser Gly Leu Thr Cys Ser Met Trp Asp 
                          405                 410                 415     
          Lys Asn Met Glu Asp Leu His Arg His Ile Phe Trp Glu Pro Asp Ala 
                      420                 425                 430         
          Ser Lys Leu Asn Glu Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Asp Asp Ala His 
                  435                 440                 445             
          Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Gly Asn Pro Leu Ile Pro Trp Asp Tyr Cys 
              450                 455                 460                 
          Pro Ile Ser Arg Cys Glu Gly Asp Thr Thr Pro Thr Ile Val Asn Leu 
          465                 470                 475                 480 
          Asp His Pro Val Ile Ser Cys Ala Lys Thr Lys Gln Leu Arg Val Val 
                          485                 490                 495     
          Asn Gly Ile Pro Thr Arg Thr Asn Ile Gly Trp Met Val Ser Leu Arg 
                      500                 505                 510         
          Tyr Arg Asn Lys His Ile Cys Gly Gly Ser Leu Ile Lys Glu Ser Trp 
                  515                 520                 525             
          Val Leu Thr Ala Arg Gln Cys Phe Pro Ser Arg Asp Leu Lys Asp Tyr 
              530                 535                 540                 
          Glu Ala Trp Leu Gly Ile His Asp Val His Gly Arg Gly Asp Glu Lys 
          545                 550                 555                 560 
          Cys Lys Gln Val Leu Asn Val Ser Gln Leu Val Tyr Gly Pro Glu Gly 
                          565                 570                 575     
          Ser Asp Leu Val Leu Met Lys Leu Ala Arg Pro Ala Val Leu Asp Asp 
                      580                 585                 590         
          Phe Val Ser Thr Ile Asp Leu Pro Asn Tyr Gly Cys Thr Ile Pro Glu 
                  595                 600                 605             
          Lys Thr Ser Cys Ser Val Tyr Gly Trp Gly Tyr Thr Gly Leu Ile Asn 
              610                 615                 620                 
          Tyr Asp Gly Leu Leu Arg Val Ala His Leu Tyr Ile Met Gly Asn Glu 
          625                 630                 635                 640 
          Lys Cys Ser Gln His His Arg Gly Lys Val Thr Leu Asn Glu Ser Glu 
                          645                 650                 655     
          Ile Cys Ala Gly Ala Glu Lys Ile Gly Ser Gly Pro Cys Glu Gly Asp 
                      660                 665                 670         
          Tyr Gly Gly Pro Leu Val Cys Glu Gln His Lys Met Arg Met Val Leu 
                  675                 680                 685             
          Gly Val Ile Val Pro Gly Arg Gly Cys Ala Ile Pro Asn Arg Pro Gly 
              690                 695                 700                 
          Ile Phe Val Arg Val Ala Tyr Tyr Ala Lys Trp Ile His Lys Ile Ile 
          705                 710                 715                 720 
          Leu Thr Tyr Lys Val Pro Gln Ser 
                          725             
          <![CDATA[<210>  19]]>
          <![CDATA[<211>  728]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  HGF變異體]]>
          <![CDATA[<400>  19]]>
          Met Trp Val Thr Lys Leu Leu Pro Ala Leu Leu Leu Gln His Val Leu 
          1               5                   10                  15      
          Leu His Leu Leu Leu Leu Pro Ile Ala Ile Pro Tyr Ala Glu Gly Gln 
                      20                  25                  30          
          Arg Lys Arg Arg Asn Thr Ile His Glu Phe Lys Lys Ser Val Lys Thr 
                  35                  40                  45              
          Thr Leu Ile Lys Ile Asp Pro Ala Leu Lys Ile Lys Thr Glu Lys Ala 
              50                  55                  60                  
          Asn Thr Ala Asp Gln Cys Ala Asn Arg Cys Thr Arg Ser Lys Gly Leu 
          65                  70                  75                  80  
          Pro Phe Thr Cys Lys Ala Phe Val Phe Asp Lys Ala Arg Lys Arg Cys 
                          85                  90                  95      
          Leu Trp Phe Pro Val Asn Ser Met Ser Ser Gly Val Lys Lys Glu Ser 
                      100                 105                 110         
          Gly His Glu Phe Asp Leu Tyr Glu Asn Lys Asp Tyr Ile Arg Asp Cys 
                  115                 120                 125             
          Ile Val Gly Asn Gly Arg Ser Tyr Arg Gly Thr Val Ser Thr Thr Lys 
              130                 135                 140                 
          Ser Gly Ile Lys Cys Gln Pro Trp Ser Ala Met Ile Pro His Glu His 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Phe Leu Pro Ser Ser Tyr Arg Gly Glu Asp Leu Arg Glu Asn Tyr 
                          165                 170                 175     
          Cys Arg Asn Pro Arg Gly Glu Glu Gly Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Ser 
                      180                 185                 190         
          Asp Pro Glu Val Arg Tyr Glu Val Cys Asp Ile Pro Gln Cys Ser Glu 
                  195                 200                 205             
          Val Glu Cys Met Thr Cys Asn Gly Glu Ser Tyr Arg Gly Leu Met Asp 
              210                 215                 220                 
          His Thr Glu Ser Gly Lys Ile Cys Gln Arg Trp Asp His Gln Thr Pro 
          225                 230                 235                 240 
          His Arg His Lys Phe Leu Pro Glu Arg Tyr Pro Asp Lys Gly Phe Asp 
                          245                 250                 255     
          Asp Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Gln Pro Arg Pro Trp Cys Tyr 
                      260                 265                 270         
          Thr Leu Asp Pro His Thr Arg Trp Glu Tyr Cys Ala Ile Lys Thr Cys 
                  275                 280                 285             
          Ala Asp Asn Thr Met Asn Asp Thr Asp Val Pro Leu Glu Thr Thr Glu 
              290                 295                 300                 
          Cys Ile Gln Gly Gln Gly Glu Gly Tyr Arg Gly Thr Val Asn Thr Ile 
          305                 310                 315                 320 
          Trp Asn Gly Ile Pro Cys Gln Arg Trp Asp Ser Gln Tyr Pro His Glu 
                          325                 330                 335     
          His Asp Met Thr Pro Glu Asn Phe Lys Cys Lys Asp Leu Arg Glu Asn 
                      340                 345                 350         
          Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Ser Glu Ser Pro Trp Cys Phe Thr Thr 
                  355                 360                 365             
          Asp Pro Asn Ile Arg Val Gly Tyr Cys Ser Gln Ile Pro Asn Cys Asp 
              370                 375                 380                 
          Met Ser His Gly Gln Asp Cys Tyr Arg Gly Asn Gly Lys Asn Tyr Met 
          385                 390                 395                 400 
          Gly Asn Leu Ser Gln Thr Arg Ser Gly Leu Thr Cys Ser Met Trp Asp 
                          405                 410                 415     
          Lys Asn Met Glu Asp Leu His Arg His Ile Phe Trp Glu Pro Asp Ala 
                      420                 425                 430         
          Ser Lys Leu Asn Glu Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Asp Asp Ala His 
                  435                 440                 445             
          Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Gly Asn Pro Leu Ile Pro Trp Asp Tyr Cys 
              450                 455                 460                 
          Pro Ile Ser Arg Cys Glu Gly Asp Thr Thr Pro Thr Ile Val Asn Leu 
          465                 470                 475                 480 
          Asp His Pro Val Ile Ser Cys Ala Lys Thr Lys Gln Leu Arg Val Val 
                          485                 490                 495     
          Asn Gly Ile Pro Thr Arg Thr Asn Ile Gly Trp Met Val Ser Leu Arg 
                      500                 505                 510         
          Tyr Arg Asn Lys His Ile Cys Gly Gly Ser Leu Ile Lys Glu Ser Trp 
                  515                 520                 525             
          Val Leu Thr Ala Arg Gln Cys Phe Pro Ser Arg Asp Leu Lys Asp Tyr 
              530                 535                 540                 
          Glu Ala Trp Leu Gly Ile His Asp Val His Gly Arg Gly Asp Glu Lys 
          545                 550                 555                 560 
          Cys Lys Gln Val Leu Asn Val Ser Gln Leu Val Tyr Gly Pro Glu Gly 
                          565                 570                 575     
          Ser Asp Leu Val Leu Met Lys Leu Ala Arg Pro Ala Val Leu Asp Asp 
                      580                 585                 590         
          Phe Val Ser Thr Ile Asp Leu Pro Asn Tyr Gly Cys Thr Ile Pro Glu 
                  595                 600                 605             
          Lys Thr Ser Cys Ser Val Tyr Gly Trp Gly Tyr Thr Gly Leu Ile Asn 
              610                 615                 620                 
          Tyr Asp Gly Leu Leu Arg Val Ala His Leu Tyr Ile Met Gly Asn Glu 
          625                 630                 635                 640 
          Lys Cys Ser Gln His His Arg Gly Lys Val Thr Leu Asn Glu Ser Glu 
                          645                 650                 655     
          Ile Cys Ala Gly Ala Glu Lys Ile Gly Ser Gly Pro Cys Glu Gly Asp 
                      660                 665                 670         
          Tyr Gly Gly Pro Leu Val Cys Glu Gln His Lys Met Arg Met Val Leu 
                  675                 680                 685             
          Gly Val Ile Val Pro Gly Arg Gly Cys Ala Ile Pro Asn Arg Pro Gly 
              690                 695                 700                 
          Ile Phe Val Arg Val Ala Tyr Tyr Ala Lys Trp Ile His Lys Ile Ile 
          705                 710                 715                 720 
          Leu Thr Tyr Lys Val Pro Gln Ser 
                          725             
          <![CDATA[<210>  20]]>
          <![CDATA[<211>  728]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  HGF變異體]]>
          <![CDATA[<400>  20]]>
          Met Trp Val Thr Lys Leu Leu Pro Ala Leu Leu Leu Gln His Val Leu 
          1               5                   10                  15      
          Leu His Leu Leu Leu Leu Pro Ile Ala Ile Pro Tyr Ala Glu Gly Gln 
                      20                  25                  30          
          Arg Lys Arg Arg Asn Thr Ile His Glu Phe Lys Lys Ser Ala Lys Thr 
                  35                  40                  45              
          Thr Leu Ile Lys Ile Asp Pro Ala Leu Lys Ile Lys Thr Glu Lys Ala 
              50                  55                  60                  
          Asn Thr Ala Asp Gln Cys Ala Asn Arg Cys Thr Arg Ser Lys Gly Leu 
          65                  70                  75                  80  
          Pro Phe Thr Cys Lys Ala Phe Val Phe Asp Lys Ala Arg Lys Arg Cys 
                          85                  90                  95      
          Leu Trp Phe Pro Phe Asn Ser Met Ser Ser Gly Val Lys Lys Glu Phe 
                      100                 105                 110         
          Gly His Glu Phe Asp Leu Tyr Glu Asn Lys Asp Tyr Ile Arg Asp Cys 
                  115                 120                 125             
          Ile Val Gly Asn Gly Arg Ser Tyr Arg Gly Thr Val Ser Ile Thr Lys 
              130                 135                 140                 
          Ser Gly Ile Lys Cys Gln Pro Trp Ser Ser Met Ile Pro His Glu His 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Phe Leu Pro Ser Ser Tyr Arg Gly Glu Asp Leu Arg Glu Asn Tyr 
                          165                 170                 175     
          Cys Arg Asn Pro Trp Gly Glu Glu Gly Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Ser 
                      180                 185                 190         
          Asp Pro Glu Val Arg Tyr Glu Val Cys Asp Ile Pro Gln Cys Ser Glu 
                  195                 200                 205             
          Val Glu Cys Met Thr Cys Asn Gly Glu Ser Tyr Arg Gly Leu Met Asp 
              210                 215                 220                 
          His Thr Glu Ser Gly Lys Ile Cys Gln Arg Trp Asp His Gln Thr Pro 
          225                 230                 235                 240 
          His Arg His Lys Phe Leu Pro Glu Arg Tyr Pro Asp Lys Gly Phe Asp 
                          245                 250                 255     
          Asp Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Gln Pro Arg Pro Trp Cys Tyr 
                      260                 265                 270         
          Thr Leu Asp Pro His Thr Arg Trp Glu Tyr Cys Ala Ile Lys Thr Cys 
                  275                 280                 285             
          Ala Asp Asn Thr Met Asn Asp Thr Asp Val Pro Leu Glu Thr Thr Glu 
              290                 295                 300                 
          Cys Ile Gln Gly Gln Gly Glu Gly Tyr Arg Gly Thr Val Asn Thr Ile 
          305                 310                 315                 320 
          Trp Asn Gly Ile Pro Cys Gln Arg Trp Asp Ser Gln Tyr Pro His Glu 
                          325                 330                 335     
          His Asp Met Thr Pro Glu Asn Phe Lys Cys Lys Asp Leu Arg Glu Asn 
                      340                 345                 350         
          Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Ser Glu Ser Pro Trp Cys Phe Thr Thr 
                  355                 360                 365             
          Asp Pro Asn Ile Arg Val Gly Tyr Cys Ser Gln Ile Pro Asn Cys Asp 
              370                 375                 380                 
          Met Ser His Gly Gln Asp Cys Tyr Arg Gly Asn Gly Lys Asn Tyr Met 
          385                 390                 395                 400 
          Gly Asn Leu Ser Gln Thr Arg Ser Gly Leu Thr Cys Ser Met Trp Asp 
                          405                 410                 415     
          Lys Asn Met Glu Asp Leu His Arg His Ile Phe Trp Glu Pro Asp Ala 
                      420                 425                 430         
          Ser Lys Leu Asn Glu Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Asp Asp Ala His 
                  435                 440                 445             
          Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Gly Asn Pro Leu Ile Pro Trp Asp Tyr Cys 
              450                 455                 460                 
          Pro Ile Ser Arg Cys Glu Gly Asp Thr Thr Pro Thr Ile Val Asn Leu 
          465                 470                 475                 480 
          Asp His Pro Val Ile Ser Cys Ala Lys Thr Lys Gln Leu Arg Val Val 
                          485                 490                 495     
          Asn Gly Ile Pro Thr Arg Thr Asn Ile Gly Trp Met Val Ser Leu Arg 
                      500                 505                 510         
          Tyr Arg Asn Lys His Ile Cys Gly Gly Ser Leu Ile Lys Glu Ser Trp 
                  515                 520                 525             
          Val Leu Thr Ala Arg Gln Cys Phe Pro Ser Arg Asp Leu Lys Asp Tyr 
              530                 535                 540                 
          Glu Ala Trp Leu Gly Ile His Asp Val His Gly Arg Gly Asp Glu Lys 
          545                 550                 555                 560 
          Cys Lys Gln Val Leu Asn Val Ser Gln Leu Val Tyr Gly Pro Glu Gly 
                          565                 570                 575     
          Ser Asp Leu Val Leu Met Lys Leu Ala Arg Pro Ala Val Leu Asp Asp 
                      580                 585                 590         
          Phe Val Ser Thr Ile Asp Leu Pro Asn Tyr Gly Cys Thr Ile Pro Glu 
                  595                 600                 605             
          Lys Thr Ser Cys Ser Val Tyr Gly Trp Gly Tyr Thr Gly Leu Ile Asn 
              610                 615                 620                 
          Tyr Asp Gly Leu Leu Arg Val Ala His Leu Tyr Ile Met Gly Asn Glu 
          625                 630                 635                 640 
          Lys Cys Ser Gln His His Arg Gly Lys Val Thr Leu Asn Glu Ser Glu 
                          645                 650                 655     
          Ile Cys Ala Gly Ala Glu Lys Ile Gly Ser Gly Pro Cys Glu Gly Asp 
                      660                 665                 670         
          Tyr Gly Gly Pro Leu Val Cys Glu Gln His Lys Met Arg Met Val Leu 
                  675                 680                 685             
          Gly Val Ile Val Pro Gly Arg Gly Cys Ala Ile Pro Asn Arg Pro Gly 
              690                 695                 700                 
          Ile Phe Val Arg Val Ala Tyr Tyr Ala Lys Trp Ile His Lys Ile Ile 
          705                 710                 715                 720 
          Leu Thr Tyr Lys Val Pro Gln Ser 
                          725             
          <![CDATA[<210>  21]]>
          <![CDATA[<211>  728]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  HGF變異體]]>
          <![CDATA[<400>  21]]>
          Met Trp Val Thr Lys Leu Leu Pro Ala Leu Leu Leu Gln His Val Leu 
          1               5                   10                  15      
          Leu His Leu Leu Leu Leu Pro Ile Ala Ile Pro Tyr Ala Glu Gly Gln 
                      20                  25                  30          
          Arg Lys Arg Arg Asn Thr Ile His Glu Phe Lys Lys Ser Ala Lys Thr 
                  35                  40                  45              
          Thr Leu Ile Lys Ile Asp Pro Ala Leu Arg Ile Lys Thr Glu Lys Ala 
              50                  55                  60                  
          Asn Thr Ala Asp Gln Cys Ala Asn Arg Cys Thr Arg Ser Arg Gly Leu 
          65                  70                  75                  80  
          Pro Phe Thr Cys Lys Ala Phe Val Phe Asp Lys Ala Arg Lys Arg Cys 
                          85                  90                  95      
          Leu Trp Phe Pro Phe Asn Ser Met Ser Ser Gly Val Lys Lys Glu Phe 
                      100                 105                 110         
          Gly His Glu Phe Asp Leu Tyr Glu Asn Lys Asp Tyr Ile Arg Asp Cys 
                  115                 120                 125             
          Ile Ile Gly Asn Gly Arg Ser Tyr Arg Gly Thr Val Ser Ile Thr Lys 
              130                 135                 140                 
          Ser Gly Ile Lys Cys Gln Pro Trp Ser Ser Met Ile Pro His Glu His 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Phe Leu Pro Ser Ser Tyr Arg Gly Glu Asp Leu Arg Glu Asn Tyr 
                          165                 170                 175     
          Cys Arg Asn Pro Arg Gly Glu Glu Gly Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Ser 
                      180                 185                 190         
          Asp Pro Glu Val Arg Tyr Glu Val Cys Asp Ile Pro Gln Cys Ser Glu 
                  195                 200                 205             
          Val Glu Cys Met Thr Cys Asn Gly Glu Ser Tyr Arg Gly Leu Met Asp 
              210                 215                 220                 
          His Thr Glu Ser Gly Lys Ile Cys Gln Arg Trp Asp His Gln Thr Pro 
          225                 230                 235                 240 
          His Arg His Lys Phe Leu Pro Glu Arg Tyr Pro Asp Lys Gly Phe Asp 
                          245                 250                 255     
          Asp Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Gln Pro Arg Pro Trp Cys Tyr 
                      260                 265                 270         
          Thr Leu Asp Pro His Thr Arg Trp Glu Tyr Cys Ala Ile Lys Thr Cys 
                  275                 280                 285             
          Ala Asp Asn Thr Met Asn Asp Thr Asp Val Pro Leu Glu Thr Thr Glu 
              290                 295                 300                 
          Cys Ile Gln Gly Gln Gly Glu Gly Tyr Arg Gly Thr Val Asn Thr Ile 
          305                 310                 315                 320 
          Trp Asn Gly Ile Pro Cys Gln Arg Trp Asp Ser Gln Tyr Pro His Glu 
                          325                 330                 335     
          His Asp Met Thr Pro Glu Asn Phe Lys Cys Lys Asp Leu Arg Glu Asn 
                      340                 345                 350         
          Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Ser Glu Ser Pro Trp Cys Phe Thr Thr 
                  355                 360                 365             
          Asp Pro Asn Ile Arg Val Gly Tyr Cys Ser Gln Ile Pro Asn Cys Asp 
              370                 375                 380                 
          Met Ser His Gly Gln Asp Cys Tyr Arg Gly Asn Gly Lys Asn Tyr Met 
          385                 390                 395                 400 
          Gly Asn Leu Ser Gln Thr Arg Ser Gly Leu Thr Cys Ser Met Trp Asp 
                          405                 410                 415     
          Lys Asn Met Glu Asp Leu His Arg His Ile Phe Trp Glu Pro Asp Ala 
                      420                 425                 430         
          Ser Lys Leu Asn Glu Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Asp Asp Ala His 
                  435                 440                 445             
          Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Gly Asn Pro Leu Ile Pro Trp Asp Tyr Cys 
              450                 455                 460                 
          Pro Ile Ser Arg Cys Glu Gly Asp Thr Thr Pro Thr Ile Val Asn Leu 
          465                 470                 475                 480 
          Asp His Pro Val Ile Ser Cys Ala Lys Thr Lys Gln Leu Arg Val Val 
                          485                 490                 495     
          Asn Gly Ile Pro Thr Arg Thr Asn Ile Gly Trp Met Val Ser Leu Arg 
                      500                 505                 510         
          Tyr Arg Asn Lys His Ile Cys Gly Gly Ser Leu Ile Lys Glu Ser Trp 
                  515                 520                 525             
          Val Leu Thr Ala Arg Gln Cys Phe Pro Ser Arg Asp Leu Lys Asp Tyr 
              530                 535                 540                 
          Glu Ala Trp Leu Gly Ile His Asp Val His Gly Arg Gly Asp Glu Lys 
          545                 550                 555                 560 
          Cys Lys Gln Val Leu Asn Val Ser Gln Leu Val Tyr Gly Pro Glu Gly 
                          565                 570                 575     
          Ser Asp Leu Val Leu Met Lys Leu Ala Arg Pro Ala Val Leu Asp Asp 
                      580                 585                 590         
          Phe Val Ser Thr Ile Asp Leu Pro Asn Tyr Gly Cys Thr Ile Pro Glu 
                  595                 600                 605             
          Lys Thr Ser Cys Ser Val Tyr Gly Trp Gly Tyr Thr Gly Leu Ile Asn 
              610                 615                 620                 
          Tyr Asp Gly Leu Leu Arg Val Ala His Leu Tyr Ile Met Gly Asn Glu 
          625                 630                 635                 640 
          Lys Cys Ser Gln His His Arg Gly Lys Val Thr Leu Asn Glu Ser Glu 
                          645                 650                 655     
          Ile Cys Ala Gly Ala Glu Lys Ile Gly Ser Gly Pro Cys Glu Gly Asp 
                      660                 665                 670         
          Tyr Gly Gly Pro Leu Val Cys Glu Gln His Lys Met Arg Met Val Leu 
                  675                 680                 685             
          Gly Val Ile Val Pro Gly Arg Gly Cys Ala Ile Pro Asn Arg Pro Gly 
              690                 695                 700                 
          Ile Phe Val Arg Val Ala Tyr Tyr Ala Lys Trp Ile His Lys Ile Ile 
          705                 710                 715                 720 
          Leu Thr Tyr Lys Val Pro Gln Ser 
                          725             
          <![CDATA[<210>  22]]>
          <![CDATA[<211>  728]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  HGF變異體]]>
          <![CDATA[<400>  22]]>
          Met Trp Val Thr Lys Leu Leu Pro Ala Leu Leu Leu Gln His Val Leu 
          1               5                   10                  15      
          Leu His Leu Leu Leu Leu Pro Ile Ala Ile Pro Tyr Ala Glu Gly Gln 
                      20                  25                  30          
          Arg Lys Arg Arg Asn Thr Ile His Glu Phe Lys Lys Ser Ala Lys Thr 
                  35                  40                  45              
          Thr Leu Ile Lys Ile Asp Pro Ala Leu Lys Ile Lys Thr Glu Lys Ala 
              50                  55                  60                  
          Asn Thr Ala Asp Gln Cys Ala Asn Arg Cys Thr Arg Ser Arg Arg Leu 
          65                  70                  75                  80  
          Pro Phe Thr Cys Lys Ala Phe Val Phe Asp Lys Ala Arg Lys Arg Cys 
                          85                  90                  95      
          Leu Trp Phe Pro Phe Asn Ser Met Ser Ser Gly Val Lys Lys Glu Phe 
                      100                 105                 110         
          Gly His Glu Phe Asp Leu Tyr Glu Asn Lys Asp Tyr Ile Arg Asp Cys 
                  115                 120                 125             
          Ile Ile Gly Lys Gly Arg Ser Tyr Arg Gly Thr Val Ser Val Thr Lys 
              130                 135                 140                 
          Ser Gly Ile Glu Cys Gln Pro Trp Ser Ala Met Ile Pro His Glu His 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Phe Leu Pro Ser Asn Tyr Arg Gly Glu Asp Leu Arg Glu Asn Tyr 
                          165                 170                 175     
          Cys Arg Asn Pro Arg Gly Glu Glu Gly Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Ser 
                      180                 185                 190         
          Asp Pro Glu Val Arg Tyr Glu Val Cys Asp Ile Pro Gln Cys Ser Glu 
                  195                 200                 205             
          Val Glu Cys Met Thr Cys Asn Gly Glu Ser Tyr Arg Gly Leu Met Asp 
              210                 215                 220                 
          His Thr Glu Ser Gly Lys Ile Cys Gln Arg Trp Asp His Gln Thr Pro 
          225                 230                 235                 240 
          His Arg His Lys Phe Leu Pro Glu Arg Tyr Pro Asp Lys Gly Phe Asp 
                          245                 250                 255     
          Asp Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Gln Pro Arg Pro Trp Cys Tyr 
                      260                 265                 270         
          Thr Leu Asp Pro His Thr Arg Trp Glu Tyr Cys Ala Ile Lys Thr Cys 
                  275                 280                 285             
          Ala Asp Asn Thr Met Asn Asp Thr Asp Val Pro Leu Glu Thr Thr Glu 
              290                 295                 300                 
          Cys Ile Gln Gly Gln Gly Glu Gly Tyr Arg Gly Thr Val Asn Thr Ile 
          305                 310                 315                 320 
          Trp Asn Gly Ile Pro Cys Gln Arg Trp Asp Ser Gln Tyr Pro His Glu 
                          325                 330                 335     
          His Asp Met Thr Pro Glu Asn Phe Lys Cys Lys Asp Leu Arg Glu Asn 
                      340                 345                 350         
          Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Ser Glu Ser Pro Trp Cys Phe Thr Thr 
                  355                 360                 365             
          Asp Pro Asn Ile Arg Val Gly Tyr Cys Ser Gln Ile Pro Asn Cys Asp 
              370                 375                 380                 
          Met Ser His Gly Gln Asp Cys Tyr Arg Gly Asn Gly Lys Asn Tyr Met 
          385                 390                 395                 400 
          Gly Asn Leu Ser Gln Thr Arg Ser Gly Leu Thr Cys Ser Met Trp Asp 
                          405                 410                 415     
          Lys Asn Met Glu Asp Leu His Arg His Ile Phe Trp Glu Pro Asp Ala 
                      420                 425                 430         
          Ser Lys Leu Asn Glu Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Asp Asp Ala His 
                  435                 440                 445             
          Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Gly Asn Pro Leu Ile Pro Trp Asp Tyr Cys 
              450                 455                 460                 
          Pro Ile Ser Arg Cys Glu Gly Asp Thr Thr Pro Thr Ile Val Asn Leu 
          465                 470                 475                 480 
          Asp His Pro Val Ile Ser Cys Ala Lys Thr Lys Gln Leu Arg Val Val 
                          485                 490                 495     
          Asn Gly Ile Pro Thr Arg Thr Asn Ile Gly Trp Met Val Ser Leu Arg 
                      500                 505                 510         
          Tyr Arg Asn Lys His Ile Cys Gly Gly Ser Leu Ile Lys Glu Ser Trp 
                  515                 520                 525             
          Val Leu Thr Ala Arg Gln Cys Phe Pro Ser Arg Asp Leu Lys Asp Tyr 
              530                 535                 540                 
          Glu Ala Trp Leu Gly Ile His Asp Val His Gly Arg Gly Asp Glu Lys 
          545                 550                 555                 560 
          Cys Lys Gln Val Leu Asn Val Ser Gln Leu Val Tyr Gly Pro Glu Gly 
                          565                 570                 575     
          Ser Asp Leu Val Leu Met Lys Leu Ala Arg Pro Ala Val Leu Asp Asp 
                      580                 585                 590         
          Phe Val Ser Thr Ile Asp Leu Pro Asn Tyr Gly Cys Thr Ile Pro Glu 
                  595                 600                 605             
          Lys Thr Ser Cys Ser Val Tyr Gly Trp Gly Tyr Thr Gly Leu Ile Asn 
              610                 615                 620                 
          Tyr Asp Gly Leu Leu Arg Val Ala His Leu Tyr Ile Met Gly Asn Glu 
          625                 630                 635                 640 
          Lys Cys Ser Gln His His Arg Gly Lys Val Thr Leu Asn Glu Ser Glu 
                          645                 650                 655     
          Ile Cys Ala Gly Ala Glu Lys Ile Gly Ser Gly Pro Cys Glu Gly Asp 
                      660                 665                 670         
          Tyr Gly Gly Pro Leu Val Cys Glu Gln His Lys Met Arg Met Val Leu 
                  675                 680                 685             
          Gly Val Ile Val Pro Gly Arg Gly Cys Ala Ile Pro Asn Arg Pro Gly 
              690                 695                 700                 
          Ile Phe Val Arg Val Ala Tyr Tyr Ala Lys Trp Ile His Lys Ile Ile 
          705                 710                 715                 720 
          Leu Thr Tyr Lys Val Pro Gln Ser 
                          725             
          <![CDATA[<210>  23]]>
          <![CDATA[<211>  728]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  HGF變異體]]>
          <![CDATA[<400>  23]]>
          Met Trp Val Thr Lys Leu Leu Pro Ala Leu Leu Leu Gln His Val Leu 
          1               5                   10                  15      
          Leu His Leu Leu Leu Leu Pro Ile Ala Ile Pro Tyr Ala Glu Gly Gln 
                      20                  25                  30          
          Arg Lys Arg Arg Asn Thr Ile His Glu Phe Lys Lys Ser Ala Lys Thr 
                  35                  40                  45              
          Thr Leu Ile Lys Ile Asp Pro Ala Leu Lys Ile Lys Thr Glu Lys Ala 
              50                  55                  60                  
          Asn Thr Ala Asp Gln Cys Ala Asn Arg Cys Thr Arg Ser Lys Gly Leu 
          65                  70                  75                  80  
          Pro Phe Thr Cys Lys Ala Phe Val Phe Asp Lys Ala Arg Lys Arg Cys 
                          85                  90                  95      
          Leu Trp Phe Pro Phe Asn Ser Met Ser Ser Gly Val Lys Lys Glu Phe 
                      100                 105                 110         
          Gly His Glu Phe Asp Leu Tyr Glu Asn Lys Asp Tyr Ile Arg Asp Cys 
                  115                 120                 125             
          Ile Val Gly Asn Gly Arg Ser Tyr Arg Gly Thr Val Ser Ile Thr Lys 
              130                 135                 140                 
          Ser Gly Ile Glu Cys Gln Pro Trp Ser Ala Met Ile Pro His Glu His 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Phe Leu Pro Ser Ser Tyr Arg Gly Glu Asp Leu Arg Glu Asn Tyr 
                          165                 170                 175     
          Cys Arg Asn Pro Arg Gly Glu Glu Gly Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Ser 
                      180                 185                 190         
          Asp Pro Glu Val Arg Tyr Glu Val Cys Asp Ile Pro Gln Cys Ser Glu 
                  195                 200                 205             
          Val Glu Cys Met Thr Cys Asn Gly Glu Ser Tyr Arg Gly Leu Met Asp 
              210                 215                 220                 
          His Thr Glu Ser Gly Lys Ile Cys Gln Arg Trp Asp His Gln Thr Pro 
          225                 230                 235                 240 
          His Arg His Lys Phe Leu Pro Glu Arg Tyr Pro Asp Lys Gly Phe Asp 
                          245                 250                 255     
          Asp Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Gln Pro Arg Pro Trp Cys Tyr 
                      260                 265                 270         
          Thr Leu Asp Pro His Thr Arg Trp Glu Tyr Cys Ala Ile Lys Thr Cys 
                  275                 280                 285             
          Ala Asp Asn Thr Met Asn Asp Thr Asp Val Pro Leu Glu Thr Thr Glu 
              290                 295                 300                 
          Cys Ile Gln Gly Gln Gly Glu Gly Tyr Arg Gly Thr Val Asn Thr Ile 
          305                 310                 315                 320 
          Trp Asn Gly Ile Pro Cys Gln Arg Trp Asp Ser Gln Tyr Pro His Glu 
                          325                 330                 335     
          His Asp Met Thr Pro Glu Asn Phe Lys Cys Lys Asp Leu Arg Glu Asn 
                      340                 345                 350         
          Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Ser Glu Ser Pro Trp Cys Phe Thr Thr 
                  355                 360                 365             
          Asp Pro Asn Ile Arg Val Gly Tyr Cys Ser Gln Ile Pro Asn Cys Asp 
              370                 375                 380                 
          Met Ser His Gly Gln Asp Cys Tyr Arg Gly Asn Gly Lys Asn Tyr Met 
          385                 390                 395                 400 
          Gly Asn Leu Ser Gln Thr Arg Ser Gly Leu Thr Cys Ser Met Trp Asp 
                          405                 410                 415     
          Lys Asn Met Glu Asp Leu His Arg His Ile Phe Trp Glu Pro Asp Ala 
                      420                 425                 430         
          Ser Lys Leu Asn Glu Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Asp Asp Ala His 
                  435                 440                 445             
          Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Gly Asn Pro Leu Ile Pro Trp Asp Tyr Cys 
              450                 455                 460                 
          Pro Ile Ser Arg Cys Glu Gly Asp Thr Thr Pro Thr Ile Val Asn Leu 
          465                 470                 475                 480 
          Asp His Pro Val Ile Ser Cys Ala Lys Thr Lys Gln Leu Arg Val Val 
                          485                 490                 495     
          Asn Gly Ile Pro Thr Arg Thr Asn Ile Gly Trp Met Val Ser Leu Arg 
                      500                 505                 510         
          Tyr Arg Asn Lys His Ile Cys Gly Gly Ser Leu Ile Lys Glu Ser Trp 
                  515                 520                 525             
          Val Leu Thr Ala Arg Gln Cys Phe Pro Ser Arg Asp Leu Lys Asp Tyr 
              530                 535                 540                 
          Glu Ala Trp Leu Gly Ile His Asp Val His Gly Arg Gly Asp Glu Lys 
          545                 550                 555                 560 
          Cys Lys Gln Val Leu Asn Val Ser Gln Leu Val Tyr Gly Pro Glu Gly 
                          565                 570                 575     
          Ser Asp Leu Val Leu Met Lys Leu Ala Arg Pro Ala Val Leu Asp Asp 
                      580                 585                 590         
          Phe Val Ser Thr Ile Asp Leu Pro Asn Tyr Gly Cys Thr Ile Pro Glu 
                  595                 600                 605             
          Lys Thr Ser Cys Ser Val Tyr Gly Trp Gly Tyr Thr Gly Leu Ile Asn 
              610                 615                 620                 
          Tyr Asp Gly Leu Leu Arg Val Ala His Leu Tyr Ile Met Gly Asn Glu 
          625                 630                 635                 640 
          Lys Cys Ser Gln His His Arg Gly Lys Val Thr Leu Asn Glu Ser Glu 
                          645                 650                 655     
          Ile Cys Ala Gly Ala Glu Lys Ile Gly Ser Gly Pro Cys Glu Gly Asp 
                      660                 665                 670         
          Tyr Gly Gly Pro Leu Val Cys Glu Gln His Lys Met Arg Met Val Leu 
                  675                 680                 685             
          Gly Val Ile Val Pro Gly Arg Gly Cys Ala Ile Pro Asn Arg Pro Gly 
              690                 695                 700                 
          Ile Phe Val Arg Val Ala Tyr Tyr Ala Lys Trp Ile His Lys Ile Ile 
          705                 710                 715                 720 
          Leu Thr Tyr Lys Val Pro Gln Ser 
                          725             
          <![CDATA[<210>  24]]>
          <![CDATA[<211>  728]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  HGF變異體]]>
          <![CDATA[<400>  24]]>
          Met Trp Val Thr Lys Leu Leu Pro Ala Leu Leu Leu Gln His Val Leu 
          1               5                   10                  15      
          Leu His Leu Leu Leu Leu Pro Ile Ala Ile Pro Tyr Ala Glu Gly Gln 
                      20                  25                  30          
          Arg Lys Arg Arg Asn Thr Ile His Glu Phe Lys Lys Ser Ala Lys Thr 
                  35                  40                  45              
          Thr Leu Ile Lys Ile Asp Pro Ala Leu Lys Ile Lys Thr Lys Lys Val 
              50                  55                  60                  
          Asp Thr Ala Asp Gln Cys Ala Asn Arg Cys Thr Arg Asn Lys Gly Leu 
          65                  70                  75                  80  
          Pro Phe Thr Cys Lys Ala Phe Val Phe Asp Lys Ala Arg Lys Arg Cys 
                          85                  90                  95      
          Leu Trp Phe Pro Phe Asn Ser Met Ser Ser Gly Val Lys Lys Glu Phe 
                      100                 105                 110         
          Gly His Glu Phe Asp Leu Tyr Glu Asn Lys Asp Tyr Ile Arg Asp Cys 
                  115                 120                 125             
          Ile Ile Gly Asn Gly Arg Ser Tyr Arg Gly Thr Val Ser Ile Thr Lys 
              130                 135                 140                 
          Ser Gly Ile Lys Cys Gln Pro Trp Ser Ser Met Ile Pro His Glu His 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Phe Leu Pro Ser Ser Tyr Arg Gly Glu Asp Leu Arg Glu Asn Tyr 
                          165                 170                 175     
          Cys Arg Asn Pro Arg Gly Glu Glu Gly Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Ser 
                      180                 185                 190         
          Asp Pro Glu Val Arg Tyr Glu Val Cys Asp Ile Pro Gln Cys Ser Glu 
                  195                 200                 205             
          Val Glu Cys Met Thr Cys Asn Gly Glu Ser Tyr Arg Gly Leu Met Asp 
              210                 215                 220                 
          His Thr Glu Ser Gly Lys Ile Cys Gln Arg Trp Asp His Gln Thr Pro 
          225                 230                 235                 240 
          His Arg His Lys Phe Leu Pro Glu Arg Tyr Pro Asp Lys Gly Phe Asp 
                          245                 250                 255     
          Asp Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Gln Pro Arg Pro Trp Cys Tyr 
                      260                 265                 270         
          Thr Leu Asp Pro His Thr Arg Trp Glu Tyr Cys Ala Ile Lys Thr Cys 
                  275                 280                 285             
          Ala Asp Asn Thr Met Asn Asp Thr Asp Val Pro Leu Glu Thr Thr Glu 
              290                 295                 300                 
          Cys Ile Gln Gly Gln Gly Glu Gly Tyr Arg Gly Thr Val Asn Thr Ile 
          305                 310                 315                 320 
          Trp Asn Gly Ile Pro Cys Gln Arg Trp Asp Ser Gln Tyr Pro His Glu 
                          325                 330                 335     
          His Asp Met Thr Pro Glu Asn Phe Lys Cys Lys Asp Leu Arg Glu Asn 
                      340                 345                 350         
          Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Ser Glu Ser Pro Trp Cys Phe Thr Thr 
                  355                 360                 365             
          Asp Pro Asn Ile Arg Val Gly Tyr Cys Ser Gln Ile Pro Asn Cys Asp 
              370                 375                 380                 
          Met Ser His Gly Gln Asp Cys Tyr Arg Gly Asn Gly Lys Asn Tyr Met 
          385                 390                 395                 400 
          Gly Asn Leu Ser Gln Thr Arg Ser Gly Leu Thr Cys Ser Met Trp Asp 
                          405                 410                 415     
          Lys Asn Met Glu Asp Leu His Arg His Ile Phe Trp Glu Pro Asp Ala 
                      420                 425                 430         
          Ser Lys Leu Asn Glu Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Asp Asp Ala His 
                  435                 440                 445             
          Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Gly Asn Pro Leu Ile Pro Trp Asp Tyr Cys 
              450                 455                 460                 
          Pro Ile Ser Arg Cys Glu Gly Asp Thr Thr Pro Thr Ile Val Asn Leu 
          465                 470                 475                 480 
          Asp His Pro Val Ile Ser Cys Ala Lys Thr Lys Gln Leu Arg Val Val 
                          485                 490                 495     
          Asn Gly Ile Pro Thr Arg Thr Asn Ile Gly Trp Met Val Ser Leu Arg 
                      500                 505                 510         
          Tyr Arg Asn Lys His Ile Cys Gly Gly Ser Leu Ile Lys Glu Ser Trp 
                  515                 520                 525             
          Val Leu Thr Ala Arg Gln Cys Phe Pro Ser Arg Asp Leu Lys Asp Tyr 
              530                 535                 540                 
          Glu Ala Trp Leu Gly Ile His Asp Val His Gly Arg Gly Asp Glu Lys 
          545                 550                 555                 560 
          Cys Lys Gln Val Leu Asn Val Ser Gln Leu Val Tyr Gly Pro Glu Gly 
                          565                 570                 575     
          Ser Asp Leu Val Leu Met Lys Leu Ala Arg Pro Ala Val Leu Asp Asp 
                      580                 585                 590         
          Phe Val Ser Thr Ile Asp Leu Pro Asn Tyr Gly Cys Thr Ile Pro Glu 
                  595                 600                 605             
          Lys Thr Ser Cys Ser Val Tyr Gly Trp Gly Tyr Thr Gly Leu Ile Asn 
              610                 615                 620                 
          Tyr Asp Gly Leu Leu Arg Val Ala His Leu Tyr Ile Met Gly Asn Glu 
          625                 630                 635                 640 
          Lys Cys Ser Gln His His Arg Gly Lys Val Thr Leu Asn Glu Ser Glu 
                          645                 650                 655     
          Ile Cys Ala Gly Ala Glu Lys Ile Gly Ser Gly Pro Cys Glu Gly Asp 
                      660                 665                 670         
          Tyr Gly Gly Pro Leu Val Cys Glu Gln His Lys Met Arg Met Val Leu 
                  675                 680                 685             
          Gly Val Ile Val Pro Gly Arg Gly Cys Ala Ile Pro Asn Arg Pro Gly 
              690                 695                 700                 
          Ile Phe Val Arg Val Ala Tyr Tyr Ala Lys Trp Ile His Lys Ile Ile 
          705                 710                 715                 720 
          Leu Thr Tyr Lys Val Pro Gln Ser 
                          725             
          <![CDATA[<210> ]]> 25
          <![CDATA[<211>  728]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  HGF變異體]]>
          <![CDATA[<400>  25]]>
          Met Trp Val Thr Lys Leu Leu Pro Ala Leu Leu Leu Gln His Val Leu 
          1               5                   10                  15      
          Leu His Leu Leu Leu Leu Pro Ile Ala Ile Pro Tyr Ala Glu Gly Gln 
                      20                  25                  30          
          Gly Lys Arg Arg Asn Thr Ile His Glu Phe Lys Lys Ser Ala Lys Thr 
                  35                  40                  45              
          Thr Leu Ile Lys Ile Asp Pro Ala Leu Arg Ile Lys Thr Glu Lys Ala 
              50                  55                  60                  
          Asn Thr Ala Asp Gln Cys Ala Asn Arg Cys Thr Arg Ser Lys Gly Leu 
          65                  70                  75                  80  
          Pro Phe Thr Cys Lys Ala Phe Val Phe Asp Lys Ala Arg Lys Arg Cys 
                          85                  90                  95      
          Leu Trp Phe Pro Phe Asn Ser Met Ser Ser Gly Val Lys Lys Glu Phe 
                      100                 105                 110         
          Gly His Glu Phe Asp Leu Tyr Glu Asn Lys Ala Tyr Ile Arg Asp Cys 
                  115                 120                 125             
          Ile Ile Gly Arg Gly Arg Asn Tyr Arg Gly Thr Val Ser Ile Thr Lys 
              130                 135                 140                 
          Ser Gly Ile Lys Cys Gln Pro Trp Ser Ala Met Ile Pro His Glu His 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Phe Leu Pro Ser Ser Tyr Arg Gly Glu Asp Leu Arg Glu Asn Tyr 
                          165                 170                 175     
          Cys Arg Asn Pro Arg Gly Glu Glu Gly Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Ser 
                      180                 185                 190         
          Asp Pro Glu Val Arg Tyr Glu Val Cys Asp Ile Pro Gln Cys Ser Glu 
                  195                 200                 205             
          Val Glu Cys Met Thr Cys Asn Gly Glu Ser Tyr Arg Gly Leu Met Asp 
              210                 215                 220                 
          His Thr Glu Ser Gly Lys Ile Cys Gln Arg Trp Asp His Gln Thr Pro 
          225                 230                 235                 240 
          His Arg His Lys Phe Leu Pro Glu Arg Tyr Pro Asp Lys Gly Phe Asp 
                          245                 250                 255     
          Asp Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Gln Pro Arg Pro Trp Cys Tyr 
                      260                 265                 270         
          Thr Leu Asp Pro His Thr Arg Trp Glu Tyr Cys Ala Ile Lys Thr Cys 
                  275                 280                 285             
          Ala Asp Asn Thr Met Asn Asp Thr Asp Val Pro Leu Glu Thr Thr Glu 
              290                 295                 300                 
          Cys Ile Gln Gly Gln Gly Glu Gly Tyr Arg Gly Thr Val Asn Thr Ile 
          305                 310                 315                 320 
          Trp Asn Gly Ile Pro Cys Gln Arg Trp Asp Ser Gln Tyr Pro His Glu 
                          325                 330                 335     
          His Asp Met Thr Pro Glu Asn Phe Lys Cys Lys Asp Leu Arg Glu Asn 
                      340                 345                 350         
          Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Ser Glu Ser Pro Trp Cys Phe Thr Thr 
                  355                 360                 365             
          Asp Pro Asn Ile Arg Val Gly Tyr Cys Ser Gln Ile Pro Asn Cys Asp 
              370                 375                 380                 
          Met Ser His Gly Gln Asp Cys Tyr Arg Gly Asn Gly Lys Asn Tyr Met 
          385                 390                 395                 400 
          Gly Asn Leu Ser Gln Thr Arg Ser Gly Leu Thr Cys Ser Met Trp Asp 
                          405                 410                 415     
          Lys Asn Met Glu Asp Leu His Arg His Ile Phe Trp Glu Pro Asp Ala 
                      420                 425                 430         
          Ser Lys Leu Asn Glu Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Asp Asp Ala His 
                  435                 440                 445             
          Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Gly Asn Pro Leu Ile Pro Trp Asp Tyr Cys 
              450                 455                 460                 
          Pro Ile Ser Arg Cys Glu Gly Asp Thr Thr Pro Thr Ile Val Asn Leu 
          465                 470                 475                 480 
          Asp His Pro Val Ile Ser Cys Ala Lys Thr Lys Gln Leu Arg Val Val 
                          485                 490                 495     
          Asn Gly Ile Pro Thr Arg Thr Asn Ile Gly Trp Met Val Ser Leu Arg 
                      500                 505                 510         
          Tyr Arg Asn Lys His Ile Cys Gly Gly Ser Leu Ile Lys Glu Ser Trp 
                  515                 520                 525             
          Val Leu Thr Ala Arg Gln Cys Phe Pro Ser Arg Asp Leu Lys Asp Tyr 
              530                 535                 540                 
          Glu Ala Trp Leu Gly Ile His Asp Val His Gly Arg Gly Asp Glu Lys 
          545                 550                 555                 560 
          Cys Lys Gln Val Leu Asn Val Ser Gln Leu Val Tyr Gly Pro Glu Gly 
                          565                 570                 575     
          Ser Asp Leu Val Leu Met Lys Leu Ala Arg Pro Ala Val Leu Asp Asp 
                      580                 585                 590         
          Phe Val Ser Thr Ile Asp Leu Pro Asn Tyr Gly Cys Thr Ile Pro Glu 
                  595                 600                 605             
          Lys Thr Ser Cys Ser Val Tyr Gly Trp Gly Tyr Thr Gly Leu Ile Asn 
              610                 615                 620                 
          Tyr Asp Gly Leu Leu Arg Val Ala His Leu Tyr Ile Met Gly Asn Glu 
          625                 630                 635                 640 
          Lys Cys Ser Gln His His Arg Gly Lys Val Thr Leu Asn Glu Ser Glu 
                          645                 650                 655     
          Ile Cys Ala Gly Ala Glu Lys Ile Gly Ser Gly Pro Cys Glu Gly Asp 
                      660                 665                 670         
          Tyr Gly Gly Pro Leu Val Cys Glu Gln His Lys Met Arg Met Val Leu 
                  675                 680                 685             
          Gly Val Ile Val Pro Gly Arg Gly Cys Ala Ile Pro Asn Arg Pro Gly 
              690                 695                 700                 
          Ile Phe Val Arg Val Ala Tyr Tyr Ala Lys Trp Ile His Lys Ile Ile 
          705                 710                 715                 720 
          Leu Thr Tyr Lys Val Pro Gln Ser 
                          725             
          <![CDATA[<210>  26]]>
          <![CDATA[<211>  728]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  HGF變異體]]>
          <![CDATA[<400>  26]]>
          Met Trp Val Thr Lys Leu Leu Pro Ala Leu Leu Leu Gln His Val Leu 
          1               5                   10                  15      
          Leu His Leu Leu Leu Leu Pro Ile Ala Ile Pro Tyr Ala Lys Gly Gln 
                      20                  25                  30          
          Arg Lys Arg Arg Asn Thr Ile His Glu Phe Lys Lys Ser Ala Lys Thr 
                  35                  40                  45              
          Thr Leu Ile Lys Ile Asp Pro Ala Leu Glu Ile Lys Thr Glu Lys Val 
              50                  55                  60                  
          Asn Thr Ala Asp Gln Cys Ala Asn Arg Cys Ile Arg Asn Lys Gly Leu 
          65                  70                  75                  80  
          Pro Phe Thr Cys Lys Ala Phe Val Phe Asp Lys Ala Arg Lys Arg Cys 
                          85                  90                  95      
          Leu Trp Phe Pro Phe Asn Ser Met Ser Ser Gly Val Lys Lys Glu Phe 
                      100                 105                 110         
          Gly His Glu Phe Asp Leu Tyr Glu Asn Lys Ala Tyr Ile Arg Asp Cys 
                  115                 120                 125             
          Ile Ile Gly Arg Gly Arg Asn Tyr Arg Gly Thr Val Ser Ile Thr Lys 
              130                 135                 140                 
          Ser Gly Ile Lys Cys Gln Pro Trp Ser Ala Met Ile Pro His Glu His 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Phe Leu Pro Ser Ser Tyr Arg Gly Glu Asp Leu Arg Glu Asn Tyr 
                          165                 170                 175     
          Cys Arg Asn Pro Arg Gly Glu Glu Gly Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Ser 
                      180                 185                 190         
          Asp Pro Glu Val Arg Tyr Glu Val Cys Asp Ile Pro Gln Cys Ser Glu 
                  195                 200                 205             
          Val Glu Cys Met Thr Cys Asn Gly Glu Ser Tyr Arg Gly Leu Met Asp 
              210                 215                 220                 
          His Thr Glu Ser Gly Lys Ile Cys Gln Arg Trp Asp His Gln Thr Pro 
          225                 230                 235                 240 
          His Arg His Lys Phe Leu Pro Glu Arg Tyr Pro Asp Lys Gly Phe Asp 
                          245                 250                 255     
          Asp Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Gln Pro Arg Pro Trp Cys Tyr 
                      260                 265                 270         
          Thr Leu Asp Pro His Thr Arg Trp Glu Tyr Cys Ala Ile Lys Thr Cys 
                  275                 280                 285             
          Ala Asp Asn Thr Met Asn Asp Thr Asp Val Pro Leu Glu Thr Thr Glu 
              290                 295                 300                 
          Cys Ile Gln Gly Gln Gly Glu Gly Tyr Arg Gly Thr Val Asn Thr Ile 
          305                 310                 315                 320 
          Trp Asn Gly Ile Pro Cys Gln Arg Trp Asp Ser Gln Tyr Pro His Glu 
                          325                 330                 335     
          His Asp Met Thr Pro Glu Asn Phe Lys Cys Lys Asp Leu Arg Glu Asn 
                      340                 345                 350         
          Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Ser Glu Ser Pro Trp Cys Phe Thr Thr 
                  355                 360                 365             
          Asp Pro Asn Ile Arg Val Gly Tyr Cys Ser Gln Ile Pro Asn Cys Asp 
              370                 375                 380                 
          Met Ser His Gly Gln Asp Cys Tyr Arg Gly Asn Gly Lys Asn Tyr Met 
          385                 390                 395                 400 
          Gly Asn Leu Ser Gln Thr Arg Ser Gly Leu Thr Cys Ser Met Trp Asp 
                          405                 410                 415     
          Lys Asn Met Glu Asp Leu His Arg His Ile Phe Trp Glu Pro Asp Ala 
                      420                 425                 430         
          Ser Lys Leu Asn Glu Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Asp Asp Ala His 
                  435                 440                 445             
          Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Gly Asn Pro Leu Ile Pro Trp Asp Tyr Cys 
              450                 455                 460                 
          Pro Ile Ser Arg Cys Glu Gly Asp Thr Thr Pro Thr Ile Val Asn Leu 
          465                 470                 475                 480 
          Asp His Pro Val Ile Ser Cys Ala Lys Thr Lys Gln Leu Arg Val Val 
                          485                 490                 495     
          Asn Gly Ile Pro Thr Arg Thr Asn Ile Gly Trp Met Val Ser Leu Arg 
                      500                 505                 510         
          Tyr Arg Asn Lys His Ile Cys Gly Gly Ser Leu Ile Lys Glu Ser Trp 
                  515                 520                 525             
          Val Leu Thr Ala Arg Gln Cys Phe Pro Ser Arg Asp Leu Lys Asp Tyr 
              530                 535                 540                 
          Glu Ala Trp Leu Gly Ile His Asp Val His Gly Arg Gly Asp Glu Lys 
          545                 550                 555                 560 
          Cys Lys Gln Val Leu Asn Val Ser Gln Leu Val Tyr Gly Pro Glu Gly 
                          565                 570                 575     
          Ser Asp Leu Val Leu Met Lys Leu Ala Arg Pro Ala Val Leu Asp Asp 
                      580                 585                 590         
          Phe Val Ser Thr Ile Asp Leu Pro Asn Tyr Gly Cys Thr Ile Pro Glu 
                  595                 600                 605             
          Lys Thr Ser Cys Ser Val Tyr Gly Trp Gly Tyr Thr Gly Leu Ile Asn 
              610                 615                 620                 
          Tyr Asp Gly Leu Leu Arg Val Ala His Leu Tyr Ile Met Gly Asn Glu 
          625                 630                 635                 640 
          Lys Cys Ser Gln His His Arg Gly Lys Val Thr Leu Asn Glu Ser Glu 
                          645                 650                 655     
          Ile Cys Ala Gly Ala Glu Lys Ile Gly Ser Gly Pro Cys Glu Gly Asp 
                      660                 665                 670         
          Tyr Gly Gly Pro Leu Val Cys Glu Gln His Lys Met Arg Met Val Leu 
                  675                 680                 685             
          Gly Val Ile Val Pro Gly Arg Gly Cys Ala Ile Pro Asn Arg Pro Gly 
              690                 695                 700                 
          Ile Phe Val Arg Val Ala Tyr Tyr Ala Lys Trp Ile His Lys Ile Ile 
          705                 710                 715                 720 
          Leu Thr Tyr Lys Val Pro Gln Ser 
                          725             
          <![CDATA[<210>  27]]>
          <![CDATA[<211>  728]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  HGF變異體]]>
          <![CDATA[<400>  27]]>
          Met Trp Val Thr Lys Leu Leu Pro Ala Leu Leu Leu Gln His Val Leu 
          1               5                   10                  15      
          Leu His Leu Leu Leu Leu Pro Ile Ala Ile Pro Tyr Ala Glu Gly Gln 
                      20                  25                  30          
          Gly Lys Arg Arg Asn Thr Ile His Glu Phe Lys Lys Ser Ala Lys Thr 
                  35                  40                  45              
          Thr Leu Ile Lys Ile Asp Pro Ala Leu Lys Ile Lys Thr Glu Lys Val 
              50                  55                  60                  
          Asn Thr Ala Asp Gln Cys Ala Asn Arg Cys Thr Arg Ser Lys Gly Leu 
          65                  70                  75                  80  
          Pro Phe Thr Cys Lys Ala Phe Val Phe Asp Lys Ala Arg Lys Arg Cys 
                          85                  90                  95      
          Leu Trp Phe Pro Phe Asn Ser Met Ser Ser Gly Val Lys Lys Glu Phe 
                      100                 105                 110         
          Gly His Glu Phe Asp Leu Tyr Glu Asn Lys Asp Tyr Ile Arg Asp Cys 
                  115                 120                 125             
          Ile Ile Gly Asn Gly Arg Ser Tyr Arg Gly Thr Val Ser Ile Thr Lys 
              130                 135                 140                 
          Ser Gly Ile Lys Cys Gln Pro Trp Ser Ala Met Ile Pro His Glu His 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Phe Leu Pro Ser Ser Tyr Arg Gly Glu Asp Leu Arg Glu Asn Tyr 
                          165                 170                 175     
          Cys Arg Asn Pro Arg Gly Glu Glu Gly Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Ser 
                      180                 185                 190         
          Asp Pro Glu Val Arg Tyr Glu Val Cys Asp Ile Pro Gln Cys Ser Glu 
                  195                 200                 205             
          Val Glu Cys Met Thr Cys Asn Gly Glu Ser Tyr Arg Gly Leu Met Asp 
              210                 215                 220                 
          His Thr Glu Ser Gly Lys Ile Cys Gln Arg Trp Asp His Gln Thr Pro 
          225                 230                 235                 240 
          His Arg His Lys Phe Leu Pro Glu Arg Tyr Pro Asp Lys Gly Phe Asp 
                          245                 250                 255     
          Asp Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Gln Pro Arg Pro Trp Cys Tyr 
                      260                 265                 270         
          Thr Leu Asp Pro His Thr Arg Trp Glu Tyr Cys Ala Ile Lys Thr Cys 
                  275                 280                 285             
          Ala Asp Asn Thr Met Asn Asp Thr Asp Val Pro Leu Glu Thr Thr Glu 
              290                 295                 300                 
          Cys Ile Gln Gly Gln Gly Glu Gly Tyr Arg Gly Thr Val Asn Thr Ile 
          305                 310                 315                 320 
          Trp Asn Gly Ile Pro Cys Gln Arg Trp Asp Ser Gln Tyr Pro His Glu 
                          325                 330                 335     
          His Asp Met Thr Pro Glu Asn Phe Lys Cys Lys Asp Leu Arg Glu Asn 
                      340                 345                 350         
          Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Gly Ser Glu Ser Pro Trp Cys Phe Thr Thr 
                  355                 360                 365             
          Asp Pro Asn Ile Arg Val Gly Tyr Cys Ser Gln Ile Pro Asn Cys Asp 
              370                 375                 380                 
          Met Ser His Gly Gln Asp Cys Tyr Arg Gly Asn Gly Lys Asn Tyr Met 
          385                 390                 395                 400 
          Gly Asn Leu Ser Gln Thr Arg Ser Gly Leu Thr Cys Ser Met Trp Asp 
                          405                 410                 415     
          Lys Asn Met Glu Asp Leu His Arg His Ile Phe Trp Glu Pro Asp Ala 
                      420                 425                 430         
          Ser Lys Leu Asn Glu Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Asp Asp Ala His 
                  435                 440                 445             
          Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Gly Asn Pro Leu Ile Pro Trp Asp Tyr Cys 
              450                 455                 460                 
          Pro Ile Ser Arg Cys Glu Gly Asp Thr Thr Pro Thr Ile Val Asn Leu 
          465                 470                 475                 480 
          Asp His Pro Val Ile Ser Cys Ala Lys Thr Lys Gln Leu Arg Val Val 
                          485                 490                 495     
          Asn Gly Ile Pro Thr Arg Thr Asn Ile Gly Trp Met Val Ser Leu Arg 
                      500                 505                 510         
          Tyr Arg Asn Lys His Ile Cys Gly Gly Ser Leu Ile Lys Glu Ser Trp 
                  515                 520                 525             
          Val Leu Thr Ala Arg Gln Cys Phe Pro Ser Arg Asp Leu Lys Asp Tyr 
              530                 535                 540                 
          Glu Ala Trp Leu Gly Ile His Asp Val His Gly Arg Gly Asp Glu Lys 
          545                 550                 555                 560 
          Cys Lys Gln Val Leu Asn Val Ser Gln Leu Val Tyr Gly Pro Glu Gly 
                          565                 570                 575     
          Ser Asp Leu Val Leu Met Lys Leu Ala Arg Pro Ala Val Leu Asp Asp 
                      580                 585                 590         
          Phe Val Ser Thr Ile Asp Leu Pro Asn Tyr Gly Cys Thr Ile Pro Glu 
                  595                 600                 605             
          Lys Thr Ser Cys Ser Val Tyr Gly Trp Gly Tyr Thr Gly Leu Ile Asn 
              610                 615                 620                 
          Tyr Asp Gly Leu Leu Arg Val Ala His Leu Tyr Ile Met Gly Asn Glu 
          625                 630                 635                 640 
          Lys Cys Ser Gln His His Arg Gly Lys Val Thr Leu Asn Glu Ser Glu 
                          645                 650                 655     
          Ile Cys Ala Gly Ala Glu Lys Ile Gly Ser Gly Pro Cys Glu Gly Asp 
                      660                 665                 670         
          Tyr Gly Gly Pro Leu Val Cys Glu Gln His Lys Met Arg Met Val Leu 
                  675                 680                 685             
          Gly Val Ile Val Pro Gly Arg Gly Cys Ala Ile Pro Asn Arg Pro Gly 
              690                 695                 700                 
          Ile Phe Val Arg Val Ala Tyr Tyr Ala Lys Trp Ile His Lys Ile Ile 
          705                 710                 715                 720 
          Leu Thr Tyr Lys Val Pro Gln Ser 
                          725             
          <![CDATA[<210>  28]]>
          <![CDATA[<211>  140]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  智人]]>
          <![CDATA[<400>  28]]>
          Phe Asn Leu Pro Pro Gly Asn Tyr Lys Lys Pro Lys Leu Leu Tyr Cys 
          1               5                   10                  15      
          Ser Asn Gly Gly His Phe Leu Arg Ile Leu Pro Asp Gly Thr Val Asp 
                      20                  25                  30          
          Gly Thr Arg Asp Arg Ser Asp Gln His Ile Gln Leu Gln Leu Ser Ala 
                  35                  40                  45              
          Glu Ser Val Gly Glu Val Tyr Ile Lys Ser Thr Glu Thr Gly Gln Tyr 
              50                  55                  60                  
          Leu Ala Met Asp Thr Asp Gly Leu Leu Tyr Gly Ser Gln Thr Pro Asn 
          65                  70                  75                  80  
          Glu Glu Cys Leu Phe Leu Glu Arg Leu Glu Glu Asn His Tyr Asn Thr 
                          85                  90                  95      
          Tyr Ile Ser Lys Lys His Ala Glu Lys Asn Trp Phe Val Gly Leu Lys 
                      100                 105                 110         
          Lys Asn Gly Ser Cys Lys Arg Gly Pro Arg Thr His Tyr Gly Gln Lys 
                  115                 120                 125             
          Ala Ile Leu Phe Leu Pro Leu Pro Val Ser Ser Asp 
              130                 135                 140 
          <![CDATA[<210>  29]]>
          <![CDATA[<211>  140]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  FGF1變異體]]>
          <![CDATA[<400>  29]]>
          Phe Asn Leu Pro Pro Gly Asn Tyr Lys Lys Pro Lys Leu Leu Tyr Cys 
          1               5                   10                  15      
          Ser Asn Gly Gly His Phe Leu Arg Ile Leu Pro Asn Gly Thr Val Asp 
                      20                  25                  30          
          Gly Thr Arg Asp Arg Ser Asp Gln His Ile Gln Leu Gln Leu Ser Ala 
                  35                  40                  45              
          Glu Ser Val Gly Glu Val Tyr Ile Lys Ser Thr Glu Thr Gly Gln Tyr 
              50                  55                  60                  
          Leu Ala Met Asp Thr Asp Gly Leu Leu Tyr Gly Ser Gln Thr Pro Asn 
          65                  70                  75                  80  
          Glu Glu Cys Leu Phe Leu Glu Arg Leu Glu Glu Asn His Tyr Asn Thr 
                          85                  90                  95      
          Tyr Ile Ser Lys Lys His Ala Glu Lys Asn Trp Phe Val Gly Leu Lys 
                      100                 105                 110         
          Lys Asn Gly Ser Cys Lys Arg Gly Pro Arg Thr His Tyr Gly Gln Lys 
                  115                 120                 125             
          Ala Ile Arg Phe Leu Pro Leu Pro Val Ser Ser Asp 
              130                 135                 140 
          <![CDATA[<210>  30]]>
          <![CDATA[<211>  140]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  FGF1變異體]]>
          <![CDATA[<400>  30]]>
          Phe Asn Leu Pro Pro Gly Asn Tyr Lys Lys Pro Lys Leu Leu Tyr Cys 
          1               5                   10                  15      
          Ser Asn Gly Gly His Phe Leu Arg Ile Leu Pro Asp Gly Thr Val Asp 
                      20                  25                  30          
          Gly Thr Arg Asp Arg Ser Asp Pro His Ile Gln Leu Gln Leu Ile Ala 
                  35                  40                  45              
          Glu Ser Val Gly Glu Val Tyr Ile Lys Ser Thr Glu Thr Gly Gln Tyr 
              50                  55                  60                  
          Leu Ala Met Asp Thr Asp Gly Leu Leu Tyr Gly Ser Gln Thr Pro Asn 
          65                  70                  75                  80  
          Glu Glu Cys Leu Phe Leu Glu Arg Leu Glu Glu Asn Gly Tyr Asn Thr 
                          85                  90                  95      
          Tyr Ile Ser Lys Lys His Ala Glu Lys Asn Trp Phe Val Gly Leu Lys 
                      100                 105                 110         
          Lys Asn Gly Ser Cys Lys Arg Gly Pro Arg Thr His Tyr Gly Gln Lys 
                  115                 120                 125             
          Ala Ile Leu Phe Leu Pro Leu Pro Val Ser Ser Asp 
              130                 135                 140 
          <![CDATA[<210>  31]]>
          <![CDATA[<211>  140]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  FGF1變異體]]>
          <![CDATA[<400>  31]]>
          Phe Asn Leu Pro Pro Gly Asn Tyr Lys Lys Pro Lys Leu Leu Tyr Cys 
          1               5                   10                  15      
          Ser Asn Gly Gly His Phe Leu Arg Ile Leu Pro Asn Gly Thr Val Asp 
                      20                  25                  30          
          Gly Thr Arg Asp Arg Ser Asp Pro His Ile Gln Leu Gln Leu Ile Ala 
                  35                  40                  45              
          Glu Ser Val Gly Glu Val Tyr Ile Lys Ser Thr Glu Thr Gly Gln Tyr 
              50                  55                  60                  
          Leu Ala Met Asp Thr Asp Gly Leu Leu Tyr Gly Ser Gln Thr Pro Asn 
          65                  70                  75                  80  
          Glu Glu Cys Leu Phe Leu Glu Arg Leu Glu Glu Asn Gly Tyr Asn Thr 
                          85                  90                  95      
          Tyr Ile Ser Lys Lys His Ala Glu Lys Asn Trp Phe Val Gly Leu Lys 
                      100                 105                 110         
          Lys Asn Gly Ser Cys Lys Arg Gly Pro Arg Thr His Tyr Gly Gln Lys 
                  115                 120                 125             
          Ala Ile Arg Phe Leu Pro Leu Pro Val Ser Ser Asp 
              130                 135                 140 
          <![CDATA[<210>  32]]>
          <![CDATA[<211>  140]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  FGF1變異體]]>
          <![CDATA[<400>  32]]>
          Phe Asn Leu Pro Pro Gly Asn Tyr Lys Lys Pro Lys Leu Leu Tyr Cys 
          1               5                   10                  15      
          Ser Asn Gly Gly His Phe Leu Arg Ile Leu Pro Asp Gly Thr Val Asp 
                      20                  25                  30          
          Gly Thr Arg Asp Arg Ser Asp Gln His Ile Gln Leu Gln Leu Ser Ala 
                  35                  40                  45              
          Glu Ser Val Gly Glu Val Tyr Ile Lys Ser Thr Glu Thr Gly Gln Tyr 
              50                  55                  60                  
          Leu Ala Met Asp Thr Asp Gly Leu Leu Tyr Gly Ser Gln Thr Pro Asn 
          65                  70                  75                  80  
          Glu Glu Cys Leu Phe Leu Glu Arg Leu Glu Glu Asn His Tyr Asn Thr 
                          85                  90                  95      
          Tyr Ile Ser Lys Lys His Ala Glu Lys Asn Trp Phe Val Gly Leu Lys 
                      100                 105                 110         
          Lys Asn Gly Ser Cys Lys Arg Gly Pro Arg Thr His Tyr Gly Gln Lys 
                  115                 120                 125             
          Ala Ile Arg Phe Leu Pro Leu Pro Val Ser Ser Asp 
              130                 135                 140 
          <![CDATA[<210>  33]]>
          <![CDATA[<211>  140]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>]]>
          <![CDATA[<223>  FGF1變異體]]>
          <![CDATA[<400>  33]]>
          Phe Asn Leu Pro Pro Gly Asn Tyr Lys Lys Pro Lys Leu Leu Tyr Cys 
          1               5                   10                  15      
          Ser Asn Gly Gly His Phe Leu Arg Ile Leu Pro Asp Gly Thr Val Asp 
                      20                  25                  30          
          Gly Thr Arg Asp Arg Ser Asp Gln His Ile Gln Leu Gln Leu Ser Ala 
                  35                  40                  45              
          Glu Ser Val Gly Glu Val Tyr Ile Lys Ser Thr Glu Thr Gly Gln Tyr 
              50                  55                  60                  
          Leu Ala Met Asp Thr Asp Gly Leu Leu Tyr Gly Ser Gln Thr Pro Asn 
          65                  70                  75                  80  
          Glu Glu Cys Leu Phe Leu Glu Arg Leu Glu Glu Asn His Tyr Asn Thr 
                          85                  90                  95      
          Tyr Ile Ser Lys Lys His Ala Glu Lys Asn Trp Phe Val Gly Leu Lys 
                      100                 105                 110         
          Lys Asn Gly Ser Cys Lys Arg Gly Pro Arg Thr His Tyr Gly Gln Lys 
                  115                 120                 125             
          Ala Ile Lys Phe Leu Pro Leu Pro Val Ser Ser Asp 
              130                 135                 140 
          <![CDATA[<210>  34]]>
          <![CDATA[<211>  31]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  智人]]>
          <![CDATA[<400>  34]]>
          Met Trp Val Thr Lys Leu Leu Pro Ala Leu Leu Leu Gln His Val Leu 
          1               5                   10                  15      
          Leu His Leu Leu Leu Leu Pro Ile Ala Ile Pro Tyr Ala Glu Gly 
                      20                  25                  30      
          <![CDATA[<210>  35]]>
          <![CDATA[<211>  692]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  智人]]>
          <![CDATA[<400>  35]]>
          Gln Arg Lys Arg Arg Asn Thr Ile His Glu Phe Lys Lys Ser Ala Lys 
          1               5                   10                  15      
          Thr Thr Leu Ile Lys Ile Asp Pro Ala Leu Lys Ile Lys Thr Lys Lys 
                      20                  25                  30          
          Val Asn Thr Ala Asp Gln Cys Ala Asn Arg Cys Thr Arg Asn Lys Gly 
                  35                  40                  45              
          Leu Pro Phe Thr Cys Lys Ala Phe Val Phe Asp Lys Ala Arg Lys Gln 
              50                  55                  60                  
          Cys Leu Trp Phe Pro Phe Asn Ser Met Ser Ser Gly Val Lys Lys Glu 
          65                  70                  75                  80  
          Phe Gly His Glu Phe Asp Leu Tyr Glu Asn Lys Asp Tyr Ile Arg Asn 
                          85                  90                  95      
          Cys Ile Ile Gly Lys Gly Arg Ser Tyr Lys Gly Thr Val Ser Ile Thr 
                      100                 105                 110         
          Lys Ser Gly Ile Lys Cys Gln Pro Trp Ser Ser Met Ile Pro His Glu 
                  115                 120                 125             
          His Ser Tyr Arg Gly Lys Asp Leu Gln Glu Asn Tyr Cys Arg Asn Pro 
              130                 135                 140                 
          Arg Gly Glu Glu Gly Gly Pro Trp Cys Phe Thr Ser Asn Pro Glu Val 
          145                 150                 155                 160 
          Arg Tyr Glu Val Cys Asp Ile Pro Gln Cys Ser Glu Val Glu Cys Met 
                          165                 170                 175     
          Thr Cys Asn Gly Glu Ser Tyr Arg Gly Leu Met Asp His Thr Glu Ser 
                      180                 185                 190         
          Gly Lys Ile Cys Gln Arg Trp Asp His Gln Thr Pro His Arg His Lys 
                  195                 200                 205             
          Phe Leu Pro Glu Arg Tyr Pro Asp Lys Gly Phe Asp Asp Asn Tyr Cys 
              210                 215                 220                 
          Arg Asn Pro Asp Gly Gln Pro Arg Pro Trp Cys Tyr Thr Leu Asp Pro 
          225                 230                 235                 240 
          His Thr Arg Trp Glu Tyr Cys Ala Ile Lys Thr Cys Ala Asp Asn Thr 
                          245                 250                 255     
          Met Asn Asp Thr Asp Val Pro Leu Glu Thr Thr Glu Cys Ile Gln Gly 
                      260                 265                 270         
          Gln Gly Glu Gly Tyr Arg Gly Thr Val Asn Thr Ile Trp Asn Gly Ile 
                  275                 280                 285             
          Pro Cys Gln Arg Trp Asp Ser Gln Tyr Pro His Glu His Asp Met Thr 
              290                 295                 300                 
          Pro Glu Asn Phe Lys Cys Lys Asp Leu Arg Glu Asn Tyr Cys Arg Asn 
          305                 310                 315                 320 
          Pro Asp Gly Ser Glu Ser Pro Trp Cys Phe Thr Thr Asp Pro Asn Ile 
                          325                 330                 335     
          Arg Val Gly Tyr Cys Ser Gln Ile Pro Asn Cys Asp Met Ser His Gly 
                      340                 345                 350         
          Gln Asp Cys Tyr Arg Gly Asn Gly Lys Asn Tyr Met Gly Asn Leu Ser 
                  355                 360                 365             
          Gln Thr Arg Ser Gly Leu Thr Cys Ser Met Trp Asp Lys Asn Met Glu 
              370                 375                 380                 
          Asp Leu His Arg His Ile Phe Trp Glu Pro Asp Ala Ser Lys Leu Asn 
          385                 390                 395                 400 
          Glu Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Asp Asp Ala His Gly Pro Trp Cys 
                          405                 410                 415     
          Tyr Thr Gly Asn Pro Leu Ile Pro Trp Asp Tyr Cys Pro Ile Ser Arg 
                      420                 425                 430         
          Cys Glu Gly Asp Thr Thr Pro Thr Ile Val Asn Leu Asp His Pro Val 
                  435                 440                 445             
          Ile Ser Cys Ala Lys Thr Lys Gln Leu Arg Val Val Asn Gly Ile Pro 
              450                 455                 460                 
          Thr Arg Thr Asn Ile Gly Trp Met Val Ser Leu Arg Tyr Arg Asn Lys 
          465                 470                 475                 480 
          His Ile Cys Gly Gly Ser Leu Ile Lys Glu Ser Trp Val Leu Thr Ala 
                          485                 490                 495     
          Arg Gln Cys Phe Pro Ser Arg Asp Leu Lys Asp Tyr Glu Ala Trp Leu 
                      500                 505                 510         
          Gly Ile His Asp Val His Gly Arg Gly Asp Glu Lys Cys Lys Gln Val 
                  515                 520                 525             
          Leu Asn Val Ser Gln Leu Val Tyr Gly Pro Glu Gly Ser Asp Leu Val 
              530                 535                 540                 
          Leu Met Lys Leu Ala Arg Pro Ala Val Leu Asp Asp Phe Val Ser Thr 
          545                 550                 555                 560 
          Ile Asp Leu Pro Asn Tyr Gly Cys Thr Ile Pro Glu Lys Thr Ser Cys 
                          565                 570                 575     
          Ser Val Tyr Gly Trp Gly Tyr Thr Gly Leu Ile Asn Tyr Asp Gly Leu 
                      580                 585                 590         
          Leu Arg Val Ala His Leu Tyr Ile Met Gly Asn Glu Lys Cys Ser Gln 
                  595                 600                 605             
          His His Arg Gly Lys Val Thr Leu Asn Glu Ser Glu Ile Cys Ala Gly 
              610                 615                 620                 
          Ala Glu Lys Ile Gly Ser Gly Pro Cys Glu Gly Asp Tyr Gly Gly Pro 
          625                 630                 635                 640 
          Leu Val Cys Glu Gln His Lys Met Arg Met Val Leu Gly Val Ile Val 
                          645                 650                 655     
          Pro Gly Arg Gly Cys Ala Ile Pro Asn Arg Pro Gly Ile Phe Val Arg 
                      660                 665                 670         
          Val Ala Tyr Tyr Ala Lys Trp Ile His Lys Ile Ile Leu Thr Tyr Lys 
                  675                 680                 685             
          Val Pro Gln Ser 
              690         
          <![CDATA[<210>  36]]>
          <![CDATA[<211>  458]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  智人]]>
          <![CDATA[<400>  36]]>
          Gln Arg Lys Arg Arg Asn Thr Ile His Glu Phe Lys Lys Ser Ala Lys 
          1               5                   10                  15      
          Thr Thr Leu Ile Lys Ile Asp Pro Ala Leu Lys Ile Lys Thr Lys Lys 
                      20                  25                  30          
          Val Asn Thr Ala Asp Gln Cys Ala Asn Arg Cys Thr Arg Asn Lys Gly 
                  35                  40                  45              
          Leu Pro Phe Thr Cys Lys Ala Phe Val Phe Asp Lys Ala Arg Lys Gln 
              50                  55                  60                  
          Cys Leu Trp Phe Pro Phe Asn Ser Met Ser Ser Gly Val Lys Lys Glu 
          65                  70                  75                  80  
          Phe Gly His Glu Phe Asp Leu Tyr Glu Asn Lys Asp Tyr Ile Arg Asn 
                          85                  90                  95      
          Cys Ile Ile Gly Lys Gly Arg Ser Tyr Lys Gly Thr Val Ser Ile Thr 
                      100                 105                 110         
          Lys Ser Gly Ile Lys Cys Gln Pro Trp Ser Ser Met Ile Pro His Glu 
                  115                 120                 125             
          His Ser Tyr Arg Gly Lys Asp Leu Gln Glu Asn Tyr Cys Arg Asn Pro 
              130                 135                 140                 
          Arg Gly Glu Glu Gly Gly Pro Trp Cys Phe Thr Ser Asn Pro Glu Val 
          145                 150                 155                 160 
          Arg Tyr Glu Val Cys Asp Ile Pro Gln Cys Ser Glu Val Glu Cys Met 
                          165                 170                 175     
          Thr Cys Asn Gly Glu Ser Tyr Arg Gly Leu Met Asp His Thr Glu Ser 
                      180                 185                 190         
          Gly Lys Ile Cys Gln Arg Trp Asp His Gln Thr Pro His Arg His Lys 
                  195                 200                 205             
          Phe Leu Pro Glu Arg Tyr Pro Asp Lys Gly Phe Asp Asp Asn Tyr Cys 
              210                 215                 220                 
          Arg Asn Pro Asp Gly Gln Pro Arg Pro Trp Cys Tyr Thr Leu Asp Pro 
          225                 230                 235                 240 
          His Thr Arg Trp Glu Tyr Cys Ala Ile Lys Thr Cys Ala Asp Asn Thr 
                          245                 250                 255     
          Met Asn Asp Thr Asp Val Pro Leu Glu Thr Thr Glu Cys Ile Gln Gly 
                      260                 265                 270         
          Gln Gly Glu Gly Tyr Arg Gly Thr Val Asn Thr Ile Trp Asn Gly Ile 
                  275                 280                 285             
          Pro Cys Gln Arg Trp Asp Ser Gln Tyr Pro His Glu His Asp Met Thr 
              290                 295                 300                 
          Pro Glu Asn Phe Lys Cys Lys Asp Leu Arg Glu Asn Tyr Cys Arg Asn 
          305                 310                 315                 320 
          Pro Asp Gly Ser Glu Ser Pro Trp Cys Phe Thr Thr Asp Pro Asn Ile 
                          325                 330                 335     
          Arg Val Gly Tyr Cys Ser Gln Ile Pro Asn Cys Asp Met Ser His Gly 
                      340                 345                 350         
          Gln Asp Cys Tyr Arg Gly Asn Gly Lys Asn Tyr Met Gly Asn Leu Ser 
                  355                 360                 365             
          Gln Thr Arg Ser Gly Leu Thr Cys Ser Met Trp Asp Lys Asn Met Glu 
              370                 375                 380                 
          Asp Leu His Arg His Ile Phe Trp Glu Pro Asp Ala Ser Lys Leu Asn 
          385                 390                 395                 400 
          Glu Asn Tyr Cys Arg Asn Pro Asp Asp Asp Ala His Gly Pro Trp Cys 
                          405                 410                 415     
          Tyr Thr Gly Asn Pro Leu Ile Pro Trp Asp Tyr Cys Pro Ile Ser Arg 
                      420                 425                 430         
          Cys Glu Gly Asp Thr Thr Pro Thr Ile Val Asn Leu Asp His Pro Val 
                  435                 440                 445             
          Ile Ser Cys Ala Lys Thr Lys Gln Leu Arg 
              450                 455             
          <![CDATA[<210>  37]]>
          <![CDATA[<211>  234]]>
          <![CDATA[<212>  PRT]]>
          <![CDATA[<213>  智人]]>
          <![CDATA[<400>  37]]>
          Val Val Asn Gly Ile Pro Thr Arg Thr Asn Ile Gly Trp Met Val Ser 
          1               5                   10                  15      
          Leu Arg Tyr Arg Asn Lys His Ile Cys Gly Gly Ser Leu Ile Lys Glu 
                      20                  25                  30          
          Ser Trp Val Leu Thr Ala Arg Gln Cys Phe Pro Ser Arg Asp Leu Lys 
                  35                  40                  45              
          Asp Tyr Glu Ala Trp Leu Gly Ile His Asp Val His Gly Arg Gly Asp 
              50                  55                  60                  
          Glu Lys Cys Lys Gln Val Leu Asn Val Ser Gln Leu Val Tyr Gly Pro 
          65                  70                  75                  80  
          Glu Gly Ser Asp Leu Val Leu Met Lys Leu Ala Arg Pro Ala Val Leu 
                          85                  90                  95      
          Asp Asp Phe Val Ser Thr Ile Asp Leu Pro Asn Tyr Gly Cys Thr Ile 
                      100                 105                 110         
          Pro Glu Lys Thr Ser Cys Ser Val Tyr Gly Trp Gly Tyr Thr Gly Leu 
                  115                 120                 125             
          Ile Asn Tyr Asp Gly Leu Leu Arg Val Ala His Leu Tyr Ile Met Gly 
              130                 135                 140                 
          Asn Glu Lys Cys Ser Gln His His Arg Gly Lys Val Thr Leu Asn Glu 
          145                 150                 155                 160 
          Ser Glu Ile Cys Ala Gly Ala Glu Lys Ile Gly Ser Gly Pro Cys Glu 
                          165                 170                 175     
          Gly Asp Tyr Gly Gly Pro Leu Val Cys Glu Gln His Lys Met Arg Met 
                      180                 185                 190         
          Val Leu Gly Val Ile Val Pro Gly Arg Gly Cys Ala Ile Pro Asn Arg 
                  195                 200                 205             
          Pro Gly Ile Phe Val Arg Val Ala Tyr Tyr Ala Lys Trp Ile His Lys 
              210                 215                 220                 
          Ile Ile Leu Thr Tyr Lys Val Pro Gln Ser 
          225                 230
Figure 12_A0101_SEQ_0001
Figure 12_A0101_SEQ_0002
Figure 12_A0101_SEQ_0003
Figure 12_A0101_SEQ_0004
Figure 12_A0101_SEQ_0005
Figure 12_A0101_SEQ_0006
Figure 12_A0101_SEQ_0007
Figure 12_A0101_SEQ_0008
Figure 12_A0101_SEQ_0009
Figure 12_A0101_SEQ_0010
Figure 12_A0101_SEQ_0011
Figure 12_A0101_SEQ_0012
Figure 12_A0101_SEQ_0013
Figure 12_A0101_SEQ_0014
Figure 12_A0101_SEQ_0015
Figure 12_A0101_SEQ_0016
Figure 12_A0101_SEQ_0017
Figure 12_A0101_SEQ_0018
Figure 12_A0101_SEQ_0019
Figure 12_A0101_SEQ_0020
Figure 12_A0101_SEQ_0021
Figure 12_A0101_SEQ_0022
Figure 12_A0101_SEQ_0023
Figure 12_A0101_SEQ_0024
Figure 12_A0101_SEQ_0025
Figure 12_A0101_SEQ_0026
Figure 12_A0101_SEQ_0027
Figure 12_A0101_SEQ_0028
Figure 12_A0101_SEQ_0029
Figure 12_A0101_SEQ_0030
Figure 12_A0101_SEQ_0031
Figure 12_A0101_SEQ_0032
Figure 12_A0101_SEQ_0033
Figure 12_A0101_SEQ_0034
Figure 12_A0101_SEQ_0035
Figure 12_A0101_SEQ_0036
Figure 12_A0101_SEQ_0037
Figure 12_A0101_SEQ_0038
Figure 12_A0101_SEQ_0039
Figure 12_A0101_SEQ_0040
Figure 12_A0101_SEQ_0041
Figure 12_A0101_SEQ_0042
Figure 12_A0101_SEQ_0043
Figure 12_A0101_SEQ_0044
Figure 12_A0101_SEQ_0045
Figure 12_A0101_SEQ_0046
Figure 12_A0101_SEQ_0047
Figure 12_A0101_SEQ_0048
Figure 12_A0101_SEQ_0049
Figure 12_A0101_SEQ_0050
Figure 12_A0101_SEQ_0051
Figure 12_A0101_SEQ_0052
Figure 12_A0101_SEQ_0053
Figure 12_A0101_SEQ_0054
Figure 12_A0101_SEQ_0055
Figure 12_A0101_SEQ_0056
Figure 12_A0101_SEQ_0057
Figure 12_A0101_SEQ_0058
Figure 12_A0101_SEQ_0059
Figure 12_A0101_SEQ_0060
Figure 12_A0101_SEQ_0061
Figure 12_A0101_SEQ_0062
Figure 12_A0101_SEQ_0063
Figure 12_A0101_SEQ_0064
Figure 12_A0101_SEQ_0065
Figure 12_A0101_SEQ_0066
Figure 12_A0101_SEQ_0067
Figure 12_A0101_SEQ_0068
Figure 12_A0101_SEQ_0069
Figure 12_A0101_SEQ_0070
Figure 12_A0101_SEQ_0071
Figure 12_A0101_SEQ_0072
Figure 12_A0101_SEQ_0073
Figure 12_A0101_SEQ_0074
Figure 12_A0101_SEQ_0075
Figure 12_A0101_SEQ_0076
Figure 12_A0101_SEQ_0077
Figure 12_A0101_SEQ_0078
Figure 12_A0101_SEQ_0079
Figure 12_A0101_SEQ_0080
Figure 12_A0101_SEQ_0081
Figure 12_A0101_SEQ_0082
Figure 12_A0101_SEQ_0083
Figure 12_A0101_SEQ_0084
Figure 12_A0101_SEQ_0085
Figure 12_A0101_SEQ_0086
Figure 12_A0101_SEQ_0087
Figure 12_A0101_SEQ_0088
Figure 12_A0101_SEQ_0089
Figure 12_A0101_SEQ_0090
Figure 12_A0101_SEQ_0091
Figure 12_A0101_SEQ_0092
Figure 12_A0101_SEQ_0093
Figure 12_A0101_SEQ_0094
Figure 12_A0101_SEQ_0095
Figure 12_A0101_SEQ_0096
Figure 12_A0101_SEQ_0097
Figure 12_A0101_SEQ_0098
Figure 12_A0101_SEQ_0099
Figure 12_A0101_SEQ_0100
Figure 12_A0101_SEQ_0101
Figure 12_A0101_SEQ_0102
Figure 12_A0101_SEQ_0103
Figure 12_A0101_SEQ_0104
Figure 12_A0101_SEQ_0105
Figure 12_A0101_SEQ_0106
Figure 12_A0101_SEQ_0107
Figure 12_A0101_SEQ_0108
Figure 12_A0101_SEQ_0109

Claims (72)

  1. 一種治療或預防有需要之個體之神經營養性角膜炎的方法，該方法包含向該個體投與治療有效量之肝細胞生長因子(HGF)或纖維母細胞生長因子(FGF)。
  2. 如請求項1之方法，其中該HGF或FGF經純化。
  3. 如請求項1或2之方法，其中該HGF或FGF係與角膜基質滲透賦形劑組合投與。
  4. 如請求項1至3中任一項之方法，其中該HGF或FGF調配於液體醫藥組合物中。
  5. 如請求項1至4中任一項之方法，其中向眼睛投與該HGF或FGF。
  6. 如請求項5之方法，其中該HGF或FGF局部投與至該眼睛。
  7. 如請求項5之方法，其中該HGF或FGF藉由注射投與至該眼睛。
  8. 如請求項7之方法，其中該HGF或FGF係結膜下投與。
  9. 如請求項7之方法，其中該HGF或FGF係前房內投與。
  10. 如請求項1至9中任一項之方法，其中該液體醫藥組合物包含濃度為約0.01% (w/v)至約1.0% (w/v)之HGF或FGF。
  11. 如請求項10之方法，其中該液體醫藥組合物包含濃度為約0.08% (w/v)至約0.25% (w/v)之HGF或FGF。
  12. 如請求項10之方法，其中該液體醫藥組合物包含濃度為約0.1% (w/v)之HGF或FGF。
  13. 如請求項10之方法，其中該液體醫藥組合物包含濃度為約0.2% (w/v)之HGF或FGF。
  14. 如請求項1至13中任一項之方法，其中該HGF或FGF係與另一治療劑組合投與。
  15. 如請求項14之方法，其中該另一治療劑為另一生長因子。
  16. 如請求項1至15中任一項之方法，其中該HGF包含具有SEQ ID NO: 1-27中之任一者的多肽序列。
  17. 如請求項1至15中任一項之方法，其中該HGF包含與SEQ ID NO: 1具有95%序列一致性的多肽序列。
  18. 如請求項1至15中任一項之方法，其中該HGF包含具有SEQ ID NO: 1之多肽序列。
  19. 一種醫藥組合物，其包含： 約0.01%至約1.0% (w/v) HGF； 可使該組合物之pH維持在約5.8至約6.2之緩衝劑； 約100至約300 mM之選自海藻糖、脯胺酸、山梨糖醇及其混合物之穩定劑； 視情況選用之張力調節劑，其可提供約250 mOsm/kg H 2O至約500 mOsm/kg H 2O之組合物的滲透壓；及 視情況選用之界面活性劑。
  20. 如請求項19之組合物，其包含約0.05%至約0.5% (w/v) HGF。
  21. 如請求項19之組合物，其包含約0.08%至約0.25% (w/v) HGF。
  22. 如請求項19之組合物，其包含約0.1% (w/v) HGF。
  23. 如請求項19之組合物，其包含約0.2% (w/v) HGF。
  24. 如請求項19至23中任一項之組合物，其中該組合物之pH為約6.0。
  25. 如請求項19至24中任一項之組合物，其包含約150至約250 mM穩定劑。
  26. 如請求項25之組合物，其包含約200 mM穩定劑。
  27. 如請求項19至26中任一項之組合物，其中該穩定劑為海藻糖或脯胺酸。
  28. 如請求項19至26中任一項之組合物，其中該穩定劑為海藻糖。
  29. 如請求項19至26中任一項之組合物，其中該穩定劑為脯胺酸。
  30. 如請求項19至26中任一項之組合物，其中該穩定劑為山梨糖醇。
  31. 如請求項19至30中任一項之組合物，其中該緩衝劑為檸檬酸鹽緩衝劑。
  32. 如請求項19至30中任一項之組合物，其中該緩衝劑為檸檬酸鈉。
  33. 如請求項19至30中任一項之組合物，包含約10至約50 mM緩衝劑。
  34. 如請求項19至33中任一項之組合物，其中該組合物之滲透壓為約450 mOsm/kg H 2O。
  35. 如請求項19至33中任一項之組合物，其不包括張力調節劑。
  36. 如請求項19至33中任一項之組合物，其包含張力調節劑鹼金屬鹽。
  37. 如請求項19至33中任一項之組合物，其包含張力調節劑氯化鈉。
  38. 如請求項19至37中任一項之組合物，其包含界面活性劑。
  39. 如請求項38之組合物，其中該界面活性劑選自聚山梨醇酯80 (PS80)、Polaxomer 188及Polaxomer 407。
  40. 如請求項38之組合物，其中該界面活性劑為聚山梨醇酯80 (PS80)。
  41. 如請求項19至40中任一項之組合物，其中該界面活性劑係以約0.01%至約0.1% (w/v)之量存在。
  42. 如請求項19至40中任一項之組合物，其中該界面活性劑係以約0.02%至約0.8% (w/v)之量存在。
  43. 如請求項19至40中任一項之組合物，其中該界面活性劑係以約0.05% (w/v)之量存在。
  44. 一種水性醫藥組合物，其包含： 約0.1% (w/v) HGF； 約20 mM檸檬酸鈉； 約200 mM海藻糖、脯胺酸或山梨糖醇； 約0.05% (w/v)界面活性劑； 其中該組合物之pH為約6.0，且該組合物之滲透壓為約350 mOsm/kg H 2O。
  45. 如請求項44之水性醫藥組合物，其包含： 約0.1% (w/v) HGF； 約20 mM檸檬酸鈉； 約200 mM海藻糖； 約0.05% (w/v)聚山梨醇酯80 (PS80)； 其中該組合物之pH為約6.0，且該組合物之滲透壓為約350 mOsm/kg H 2O。
  46. 如請求項44之水性醫藥組合物，其包含： 約0.1% (w/v) HGF； 約20 mM檸檬酸鈉； 約200 mM脯胺酸； 約0.05% (w/v)聚山梨醇酯80 (PS80)； 其中該組合物之pH為約6.0，且該組合物之滲透壓為約350 mOsm/kg H 2O。
  47. 如請求項44之水性醫藥組合物，其包含： 約0.1% (w/v) HGF； 約20 mM檸檬酸鈉； 約200 mM山梨糖醇； 約0.05% (w/v)聚山梨醇酯80 (PS80)； 其中該組合物之pH為約6.0，且該組合物之滲透壓為約350 mOsm/kg H 2O。
  48. 一種水性醫藥組合物，其包含： 約0.2% (w/v) HGF； 約20 mM檸檬酸鈉； 約200 mM海藻糖、脯胺酸或山梨糖醇； 約0.05% (w/v)界面活性劑； 其中該組合物之pH為約6.0，且該組合物之滲透壓為約450 mOsm/kg H 2O。
  49. 如請求項48之水性醫藥組合物，其包含： 約0.2% (w/v) HGF； 約20 mM檸檬酸鈉； 約200 mM海藻糖； 約0.05% (w/v)聚山梨醇酯80 (PS80)； 其中該組合物之pH為約6.0，且該組合物之滲透壓為約450 mOsm/kg H 2O。
  50. 如請求項48之水性醫藥組合物，其包含： 約0.2% (w/v) HGF； 約20 mM檸檬酸鈉； 約200 mM脯胺酸； 約0.05% (w/v)聚山梨醇酯80 (PS80)； 其中該組合物之pH為約6.0，且該組合物之滲透壓為約450 mOsm/kg H 2O。
  51. 如請求項49之水性醫藥組合物，其包含： 約0.2% (w/v) HGF； 約20 mM檸檬酸鈉； 約200 mM山梨糖醇； 約0.05% (w/v)聚山梨醇酯80 (PS80)； 其中該組合物之pH為約6.0，且該組合物之滲透壓為約450 mOsm/kg H 2O。
  52. 如請求項19至51中任一項之醫藥組合物，其中該HGF包含SEQ ID NO: 1-27中之任一者的多肽序列。
  53. 如請求項19至51中任一項之醫藥組合物，其中該HGF包含與SEQ ID NO: 1具有95%序列一致性的多肽序列。
  54. 如請求項19至51中任一項之醫藥組合物，其中該HGF包含具有SEQ ID NO: 1之多肽序列。
  55. 一種治療或預防有需要之個體之眼睛疾病的方法，該方法包含向該個體投與治療有效量之如請求項19至55中任一項之醫藥組合物。
  56. 如請求項55之方法，其中該眼睛疾病為選自以下之角膜疾病：神經營養性角膜炎、持續性角膜缺損、角膜潰瘍、乾眼病、微生物角膜炎、細菌性角膜炎、病毒角膜炎、真菌角膜炎、化學燒傷、熱燒傷、機械性外傷、角膜刮傷、受損內皮、大泡性角膜病變、福斯氏角膜失養症(Fuch's corneal dystrophy)、角膜結疤、休格倫氏症候群或手術後併發症。
  57. 如請求項55之方法，其中該眼睛疾病為角膜霧霾或結疤。
  58. 如請求項55之方法，其中該眼睛疾病為神經營養性角膜炎。
  59. 如請求項55至58中任一項之方法，其中該組合物係與角膜基質滲透賦形劑組合投與。
  60. 如請求項55至58中任一項之方法，其中該組合物投與至眼睛。
  61. 如請求項60之方法，其中該組合物局部投與至該眼睛。
  62. 如請求項60之方法，其中該組合物藉由注射投與至該眼睛。
  63. 如請求項62之方法，其中該組合物係結膜下投與。
  64. 如請求項62之方法，其中該組合物係前房內投與。
  65. 如前述請求項中任一項之組合物或方法，其中該HGF為經活化HGF。
  66. 如請求項65之組合物或方法，其中該經活化HGF為經活化dHGF。
  67. 如前述請求項中任一項之組合物或方法，其中該HGF包含： (a)包含與SEQ ID NO: 2之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 2之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 2之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (b) 包含與SEQ ID NO: 7之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 7之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 7之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (c) 包含與SEQ ID NO: 8之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 8之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 8之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (d) 包含與SEQ ID NO: 9之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 9之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 9之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (e) 包含與SEQ ID NO: 10之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 10之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 10之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (g) 包含與SEQ ID NO: 11之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 11之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 11之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (h) 包含與SEQ ID NO: 12之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 12之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 12之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (i) 包含與SEQ ID NO: 13之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 13之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 13之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (j)包含與SEQ ID NO: 14之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 14之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 14之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (k)包含與SEQ ID NO: 15之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 15之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 15之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (l)包含與SEQ ID NO: 16之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 16之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 16之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (m)包含與SEQ ID NO: 17之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 17之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 17之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (n)包含與SEQ ID NO: 18之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 18之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 18之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (o)包含與SEQ ID NO: 19之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 19之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 19之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (p)包含與SEQ ID NO: 20之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 20之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 20之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (q)包含與SEQ ID NO: 21之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 21之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 21之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (r)包含與SEQ ID NO: 22之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 22之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 22之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (s)包含與SEQ ID NO: 23之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 23之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 23之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (t)包含與SEQ ID NO: 24之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 24之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 24之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (u) )包含與SEQ ID NO: 25之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 25之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 25之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (v)包含與SEQ ID NO: 26之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 26之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 26之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (w)包含與SEQ ID NO: 27之胺基酸32-494具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第一多肽；及包含與SEQ ID NO: 27之胺基酸495-728具有至少80%，較佳90%一致性之胺基酸序列的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 27之胺基酸161-165之胺基酸的缺失。
  68. 如前述請求項中任一項之組合物或方法，其中該HGF包含： (a) 包含對應於SEQ ID NO: 2之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 2之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 2之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (b)包含對應於SEQ ID NO: 7之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 7之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 7之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (c)包含對應於SEQ ID NO: 8之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 8之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 8之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (d)包含對應於SEQ ID NO: 9之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 9之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 9之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (e)包含對應於SEQ ID NO: 10之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 10之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 10之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (g)包含對應於SEQ ID NO: 11之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 11之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 11之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (h)包含對應於SEQ ID NO: 12之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 12之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 12之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (i)包含對應於SEQ ID NO: 13之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 13之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 13之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (j)包含對應於SEQ ID NO: 14之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 14之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 14之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (k)包含對應於SEQ ID NO: 15之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 15之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 15之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (l)包含對應於SEQ ID NO: 16之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 16之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 16之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (m)包含對應於SEQ ID NO: 17之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 17之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 17之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (n)包含對應於SEQ ID NO: 18之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 18之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 18之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (o)包含對應於SEQ ID NO: 19之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 19之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 19之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (p)包含對應於SEQ ID NO: 20之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 20之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 20之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (q)包含對應於SEQ ID NO: 21之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 21之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 21之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (r)包含對應於SEQ ID NO: 22之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 22之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 22之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (s)包含對應於SEQ ID NO: 23之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 23之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 23之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (t)包含對應於SEQ ID NO: 24之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 24之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 24之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (u) )包含對應於SEQ ID NO: 25之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 25之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 25之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (v)包含對應於SEQ ID NO: 26之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 26之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 26之胺基酸161-165之胺基酸的缺失；或 (w)包含對應於SEQ ID NO: 27之胺基酸32-494之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第一多肽；及包含對應於SEQ ID NO: 27之胺基酸495-728之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成的第二多肽，視情況其中該第一多肽包含對應於SEQ ID NO: 27之胺基酸161-165之胺基酸的缺失。
  69. 如請求項66之組合物或方法，其中該第一多肽包含SEQ ID NO: 36之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成，且該第二多肽包含SEQ ID NO: 37之胺基酸序列或由該胺基酸序列組成。
  70. 如請求項66或請求項67之組合物或方法，其中該第一多肽之該N端胺基酸為吡咯啶酮羧酸。
  71. 如請求項65至68中任一項之組合物或方法，其中該第一多肽與該第二多肽係藉由一或多個二硫鍵連接。
  72. 如請求項65至69中任一項之組合物或方法，其中該HGF能夠結合至c-MET及/或活化上皮細胞中之MAPK路徑。
TW111118098A 2021-05-14 2022-05-13 用於治療眼睛疾病的生長因子組合物 TW202310868A (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US202163188816P 2021-05-14 2021-05-14
US63/188,816 2021-05-14

Publications (1)

Publication Number Publication Date
TW202310868A true TW202310868A (zh) 2023-03-16

Family

ID=81756753

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW111118098A TW202310868A (zh) 2021-05-14 2022-05-13 用於治療眼睛疾病的生長因子組合物

Country Status (12)

Country Link
US (1) US20230022990A1 (zh)
EP (1) EP4337243A1 (zh)
JP (1) JP2024518178A (zh)
KR (1) KR20240035394A (zh)
CN (1) CN117677394A (zh)
AU (1) AU2022272740A1 (zh)
BR (1) BR112023022474A2 (zh)
CA (1) CA3218000A1 (zh)
IL (1) IL308496A (zh)
MX (1) MX2023012782A (zh)
TW (1) TW202310868A (zh)
WO (1) WO2022241465A1 (zh)

Family Cites Families (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3773919A (en) 1969-10-23 1973-11-20 Du Pont Polylactide-drug mixtures
US4263428A (en) 1978-03-24 1981-04-21 The Regents Of The University Of California Bis-anthracycline nucleic acid function inhibitors and improved method for administering the same
EP0052322B1 (de) 1980-11-10 1985-03-27 Gersonde, Klaus, Prof. Dr. Verfahren zur Herstellung von Lipid-Vesikeln durch Ultraschallbehandlung, Anwendung des Verfahrens und Vorrichtung zur Durchführung des Verfahrens
IE52535B1 (en) 1981-02-16 1987-12-09 Ici Plc Continuous release pharmaceutical compositions
US4485045A (en) 1981-07-06 1984-11-27 Research Corporation Synthetic phosphatidyl cholines useful in forming liposomes
EP0088046B1 (de) 1982-02-17 1987-12-09 Ciba-Geigy Ag Lipide in wässriger Phase
DE3218121A1 (de) 1982-05-14 1983-11-17 Leskovar, Peter, Dr.-Ing., 8000 München Arzneimittel zur tumorbehandlung
EP0102324A3 (de) 1982-07-29 1984-11-07 Ciba-Geigy Ag Lipide und Tenside in wässriger Phase
US4544545A (en) 1983-06-20 1985-10-01 Trustees University Of Massachusetts Liposomes containing modified cholesterol for organ targeting
HUT35524A (en) 1983-08-02 1985-07-29 Hoechst Ag Process for preparing pharmaceutical compositions containing regulatory /regulative/ peptides providing for the retarded release of the active substance
ATE59966T1 (de) 1983-09-26 1991-02-15 Ehrenfeld Udo Mittel und erzeugnis fuer die diagnose und therapie von tumoren sowie zur behandlung von schwaechen der zelligen und humoralen immunabwehr.
US4615885A (en) 1983-11-01 1986-10-07 Terumo Kabushiki Kaisha Pharmaceutical composition containing urokinase
US5510329A (en) * 1988-04-26 1996-04-23 Ramot University For Applied Research And Industrial Development Ltd. Preparations for the treatment of eyes
NZ232813A (en) 1989-03-10 1992-08-26 Snow Brand Milk Products Co Ltd Human fibroblast glycoprotein, cell differentiation, blood vessel endothelial cell growth factor, cellular immunology inforcing factor of 78 or 74 thousand daltons plus or minus two thousand daltons
JP3927248B2 (ja) 1995-07-11 2007-06-06 第一製薬株式会社 Ｈｇｆ凍結乾燥製剤
JP2000344680A (ja) * 1999-05-31 2000-12-12 Mitsubishi Chemicals Corp Ｈｇｆ含有医薬組成物
CN100448482C (zh) 1999-05-31 2009-01-07 三菱化学株式会社 Hgf冻干制剂
AU2003272536A1 (en) * 2002-09-18 2004-04-08 Emiliano Ghinelli Use of a human amniotic membrane composition for prophylaxis and treatment of diseases and conditions of the eye and skin
WO2008102452A1 (ja) 2007-02-22 2008-08-28 Kringle Pharma Inc. Ｈｇｆ製剤
WO2011010399A1 (ja) * 2009-07-24 2011-01-27 千寿製薬株式会社 角膜内皮細胞増殖促進剤
LT3138575T (lt) * 2014-04-28 2021-08-25 Eisai R&D Management Co., Ltd. Liofilizuoto hgf paruošimas
JP6281992B2 (ja) * 2014-09-10 2018-02-21 クリングルファーマ株式会社 神経疾患の治療に適したｈｇｆ製剤
US10449234B2 (en) * 2015-09-11 2019-10-22 The Schepens Eye Research Institute, Inc. Compositions and methods for prevention and treatment of corneal haze and scarring
WO2018204847A2 (en) * 2017-05-05 2018-11-08 Trefoil Therapeutics, Inc. Recombinant modified fibroblast growth factors and therapeutic uses thereof
KR20230066318A (ko) * 2020-06-26 2023-05-15 트레포일 테라퓨틱스, 인크. 재조합 변형된 섬유모세포 성장 인자 및 이의 치료적 용도

Also Published As

Publication number Publication date
EP4337243A1 (en) 2024-03-20
IL308496A (en) 2024-01-01
CN117677394A (zh) 2024-03-08
AU2022272740A9 (en) 2023-11-09
US20230022990A1 (en) 2023-01-26
CA3218000A1 (en) 2022-11-17
WO2022241465A1 (en) 2022-11-17
JP2024518178A (ja) 2024-04-25
AU2022272740A1 (en) 2023-11-02
MX2023012782A (es) 2024-03-25
KR20240035394A (ko) 2024-03-15
BR112023022474A2 (pt) 2024-01-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US6238888B1 (en) Keratinocyte growth factor-2 formulations
AU2011217181A1 (en) Use of transforming growth factor - beta 1 (TGF-beta1) inhibitor peptides for the treatment of corneal fibrosis and/or haze
JPH10158188A (ja) 角膜治療用組成物
JP2003512433A (ja) 角膜欠陥を処置するためのｇｄｎｆの使用
CA2375829A1 (en) Keratinocyte growth factor-2 formulations
CN111148755A (zh) 重组经修饰成纤维细胞生长因子及其治疗用途
Jiang et al. Pharmacology study of a chimeric decoy receptor trap fusion protein on retina neovascularization by dual blockage of VEGF and FGF-2
WO2014084027A1 (ja) 細胞膜透過性の線維芽細胞増殖因子の医療用途
EP4031117B1 (en) Ngf mutant for use in treatment or prevention of ophthalmic disorders
US20230022990A1 (en) Compositions of growth factor for the treatment of eye disease
US20230364185A1 (en) VEGFR Fusion Protein Pharmaceutical Composition
EP4438629A1 (en) Multispecific ligand binding molecule and application thereof
CA3083101A1 (en) Composition for promoting goblet cell proliferation or mucin secretion comprising thymosin beta 4 or derivative thereof as active ingredient
US20080132451A1 (en) Modulation of polysialylated neural adhesion molecules (psa-ncam) as a regulator of ocular disease
KR20220047979A (ko) 안구 건조증에 대한 tsg6 폴리펩티드 단편
US20220168434A1 (en) Application of transthyretin in entering eye and preparing drop
US8207119B2 (en) Ophthalmological composition
US20240000891A1 (en) Growth and differentiation factor 15 for treatment of proliferative vitreoretinopathy therapy
JP2024533245A (ja) Ｖｅｇｆ受容体融合タンパク質の製剤
CA3171266A1 (en) Norrin regulation of plasmalemma vesicle-associated protein and use to treat macular degeneration