JPH04187658A - 水溶性五環性トリテルペン包接化合物及びその製造方法並びにそれを利用した食品、飲料、口腔用組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） この発明は、五環性トリテルペン化合物（以下、トリテ
ルペンと記す）の薬理機能を保持して水溶化する水溶性
五環性トリテルペ２組成物とその製造方法並びにそれを
利用した食品、飲料、口腔用組成物に関する。

（従来の技術） トリテルペンはアミリン族、ルベオール族、ノステリン
族、スクアレン族等に分類されている。

これらはいずれも水に不溶で、油及び有機溶媒等には溶
解する化合物である。

１−リテルベン類は植物界に広く遊離基として、また糖
と結合してサポニン、酸と結合してエステルとして分布
している。

トリテルペン類のうち、３位にＯＨ基、１７位にＣ０Ｏ
Ｈ基を有するアミリン族は、下記式［Ｉ］で表される化
合物であり、具体的には第１表に掲げるような化合物で
あるが、その代表的なものとしてオレアノール酸、ウル
ソール酸、ヘデラゲニン等が挙げられる。

このうちオレアノール酸はてん葉中にサポニンとして、
またオリーブ、青シソ、ナツタ、カキドーシの葉、リン
ゴの皮、チョウジの芽等に広く見出されている。ウルソ
ール酸は、リンゴ、サフランボー等の果実、それ等の葉
のろう状被膜物質中から、またカキドウシ、ナツタ等の
葉からも見出されている。更に、ヘデラゲニンはセイヨ
ウキッダ、ムクロジの実等から確認されている。

はＣＨ，、Ｒ，はＨまたは（：Ｈ３，ＲｓはＨまたはＯ
Ｈを示す。

第１表 一方、近年大学の研究所、公私立の研究機関、民間の研
究所等で薬草を含め各種植物中の薬理機能物質の検索が
盛んに進められており、植物中に含まれるトリテルペン
邪のうち、３位にＯＨ基、１７位にＣ０ＯＨ基を有する
アミリン族に抗腫瘍性、抗肝炎性、抗炎症性、抗う触性
等の薬理活性が確認され、学会・文献での報告、新聞・
雑誌等での紹介及び特許による提案等がなされている。

本発明者らもてん菜から得られるオレアノール酸につい
て薬理機能の試験を行ない抗腫瘍性、抗肝炎性、抗う触
性（不渚性グルカン合成阻害）等の効果を確認している
。

また、オレアノール酸の利用法としてこれら薬理機能に
基づいた口腔用組成物（特公昭６３−２６０８３号公報
）も提案されている。

（発明が解決しようとする問題点） しかし、これらトリテルペン類は水に溶解しないため、
上記薬理試験は粗製物、精製物いずれの場合でも有機溶
媒であるジメチルスルホキシドＣ以下、ＤＭＳＯと記す
）エタノール、プロピレングリコール、ブタンジオール
等に溶解し、これを試料としてｉｎ　ｖｉｔｒｏ、ｉｎ
　ｖｉν０の試験を行なっており、特に有機溶媒のなか
でも沸点が高く、溶解性が良いＤＭＳＯを使用する例が
極めて多いが、ＤＭ　Ｓ○は、食品、飲料、口腔用組成
物等には添加物として認められておらず、他の有機溶媒
についても食品添加物として使用する場合には問題があ
る。

一方、先の特公昭６３−２６０８３号公報の口腔用組成
物についてもオレアノール酸が水溶性の状態で含有され
ていないため、抗う触性の効果が、製品となった時点で
殆ど発揮されていないことから商品化に至っていない。

また、本発明者の一人は、ビートバルブからオレアノー
ル酸をｉ！ｌ造する方法を提案する（特開昭６０−２６
８１８９号、同６０−２６８１９０号）とともに、得ら
れた高純度のオレアノール酸に関し、食品、飲料及び口
腔用組成物等に添加するために、薬理機能を失うことな
く水に対する溶解性を付与する試みを行なったが、これ
については目的通り才レアノ−ル酸の薬理機能を損なわ
ずに水に対する溶解・ｉの高い化合物を開発するには至
っていない。

更に、本発明者らはオレアノール酸が少量ではあるが医
薬用溶媒であるエタノール等の有機溶媒に溶解すること
から、エタノール、グリセリン、プロピレングリコール
、メントール等に完全に溶解せしめた後に他の配合成分
と混合して口腔用組成物とする方法を提案したが（特開
平１−２９０６１９号）、この場合においても効果にバ
ラツキがあり、時間の経過とともに添加したオレアノー
ル酸が水に不溶となり、効果が発現しない場合もあり満
足する方法とはならなかった。

また、本発明者らはオレアノール酸を脂肪酸エステル（
非イオン系）、両性活性剤（天然物由来）等かなり広い
範囲の界面活性剤を使用して水溶化、又は乳化させて薬
理試験を行なったが、１ｎｖｉｔｒｏにおける試験では
抗う蝕効果はほとんどなく、一部効果が認められた界面
活性剤の場合でも抗う蝕効果にバラツキが激しく、再現
性も見られなかった。

ところが、不発明者らは、この問題についで史に鋭Ｖ研
究を重ねた結果、オレアノール酸を含むトリテルペンを
シクロデキストリン（以下、ＣＤと記す）て包接化させ
ることにより、トリテルペン類の抗う蝕効果を活性状態
に保ちながら水に忍解する組成物が得られることを見出
すに至った。

なお、前述のように界面活性剤を使用してトリテルペン
類を水溶化、乳化させることは一般に行なわれているが
、トリテルペン類の各機能を活性状態のまま水浴化させ
る目的でＣＤに包接化することは未だ報告されていない
。

（問題点、を解決するための手段） そこで、この発明では上記知見に基づいてトリテルペン
をＣＤて包接化した不溶性五環性トリテルペン組成物と
その製造方法並びにそれを初用した食品、飲料、口腔用
組成物を提案するものである。

なお、ＣＤはその機能性から用途面が広いが、水に対す
る溶解度の低いα−ＣＤ、Ｂ−ＣＤ、γ−ＣＤなどの非
分岐ＣＤが従来よりあり、これに対して水に対する溶解
度が大幅に改良された製品としてアルキル化したアルキ
ル化ＣＤ、ヒドロキシアルキル化したヒドロキシアルキ
ル化ＣＤ、グルコース、マルトース等の糖を付加させた
分岐ＣＤが開発され、この開発によりＣＤの持つ機能性
即ち、揮発性物質の安定化、粉末安定化、親油性物質の
可溶化等から食品への用途も広く、需要も年々伸びてき
ているが、これら非分岐、分岐何れのＣＤも空洞を形成
し、包接力を有しており、したがって包接化量の差はあ
るが、何れもトリテルペンの包接化に使用することがで
きる。中でも空洞の大きいγ−ＣＤ、及び分岐γ−ＣＤ
は包接化量が多くなると考えられ、好ましいが、これに
限定されることなく目的に応じてＣＤの種類を選択する
ことができる。

また、この発明では五環性トリテルペンの内、アミリン
族について行なったが、何れもＣＤで包接化され水溶性
トリテルペン組成物とすることができると同時に、抗う
触性等、薬理機能の活性を保持することができる。

トリテルペンのＣＤによる包接化は水の存在下で行なわ
れる。具体的にはＣＤを水に溶解乃至懸濁させるととも
に、これにトリテルペンを加えて撹拌することにより包
接化させるものである。

トリテルペンをＣＤにより包接化する際、条件的には中
性の水を使用しても可能であるが、好ましくは炭酸水素
ナトリウム、炭酸ソーダ、苛性ソーダ、苛性カリ等で若
干アルカリ性とした方が、包接化量が増大する。

トリテルペンは有機溶媒に溶解することから、包接化す
る時に、例えば６５％メタノール洛液トロ的のトリテル
ペンを溶解しておき、ＣＤを加えて撹拌しながら加熱溶
解後、更にホモジナイズすることにより、包接化が非常
に速やかとなる。

この場合の有機温媒としては、メタノール以外に、例え
ばエタノール、グリセリン、プロピレングリコール、メ
ントール等を使用することができる。

包接化後、濾過又は遠心分離により本部成分を除去した
清澄液を公知の方法にてａ縮、乾燥することにより、製
品とする。

（発明の効果） このようにして得られた水溶性五環性トリテルペン組成
物は抗う触性等の薬理機能を保持したまま、水に完全に
溶解する。したがって、活性状態のまま均一に練り歯磨
き、うがい剤、洗口液、チューインガムなどの口腔用組
成物に添加することが可能となる。

また１口腔用組成物のみならず食品であるジャム、ママ
レード、餡頚、菓子、パン、キャンデー並びに飲料、そ
のほか医薬品等に均一に活性状態で添加することが可能
となる。

なお、これらトリテルペンの包接化物を添加した製品は
、経時変化が見られず薬理活性が十分に保持されている
。このため、口腔用組成物は食事後に用いることにより
、虫歯になることを防ぎ、また甘味料添加食品、飲料は
虫歯になりにくい製品となる。

トリテルペンの上述の薬理効果は、ｒｏｏ　ｕｇ／ｍ１
前後と非常にうすい濃度でも発揮されることが特徴であ
る。

（実施例） 以下、実施例によりこの発明を具体的に説明する。

実施例１ β−ＣＤ（塩水港精糖社製）　Ｉｇを３％炭酸水素ナト
リウム水溶液１０ｍ１に！！！！濁後、オレアノール酸
０、２ｇを添加してから１２．００Ｏｒ、ｐ、ｍｌ、２
０分間ホモジナイズする。その液を０．４５μｍのメン
ブランフィルタ−にて示温性分を濾別し、その濾液を凍
結乾燥しオレアノール酸包接化粉末＋ＡＩ　を得た。こ
の包接化物についてオレアノール酸を下記のガスクロマ
トグラフ法により定量した結果、オレアノール酸含量は
１０９ｍｇ／ｇであった。またこのオレアノール酸包接
化物を水に溶解したところ、その水溶液は透明であった
。

オレアノール酸試料を一定量精秤し、　２０ｍ１の水を
加え溶解し、稀塩酸で弱酸性とする。次に塩化メチレン
を用いて抽出した後、塩化メチレン相を水洗してから減
圧下にて留去する。この残量に２１Ｔ１１のメタノール
を加えて瀉解し、更にベンゼン３ｍｌとトリメチルシリ
ルジアゾメタン−ヘキサン滴液０４ｍ１を加えてから、
還流冷却器をつけ６５°Ｃて２時間撹拌後、−夜室温下
で放置し、翌日メタノールで１０ｍ１に定容し、ガスク
ロマトグラフにて検量線法により定量する。

操作条件　カラム　　　一５Ｅ−３０ 検出器　　　ＦＩＤ キャリアガスＮｚ　６０ｍ１／ｍ１ｎ一定量力ラム温度
　　２９０℃ 実施例２ α−ＣＤ（塩水港精糖社製）、γ−ＣＤ（半井化学社製
）　、　Ｋ−１００ｆα−ＣＤ：６０％、β−ＣＤ：３
０％、塩水港精糖社製）、Ｇ１−α−ＣＤ、Ｇ、−α−
ＣＤ、　Ｇ２−γ−ＣＤ、Ｇ２−Ｂ　　−ＭｉｘＣＤ［
Ｇ２−β−ＣＤ：６２％、（Ｇ２１２−β　−ＣＤ：３
１％、フルドース＝７％）、イソエリート（分岐ＣＤ　
：　５０％、全ＣＤ：８０％）　〔以上日研化学社！！
８１）、ジメチルｆＤＭ＋−β−ＣＤ（和光紬薬社製）
、ヒドロキシプロピルｆＨＰｌ−〇−ＣＤ　　（ロゲッ
ト社製）等１０種類について各１ｇを実施例１と同様に
処理し１０種類の包接化粉末を得たにのうち、Ｇ１−β
−ＣＤの包接化物を（８１とする。これら包接化物につ
いてオレアノール酸を上記ガスクロマトグラフ法により
定量した。その結果を第２表に示す。

第２表　包接化粉末中のオレアノール酸含量実施例３ メタノール二本が２：１の溶液１０ｍ１に炭酸水素ナト
リウム０，３ｇを加えアルカリ性とし、オレアノール酸
０．２ｇを添加、更にａ−ＣＤ又はＧ＋−ａ−ＣＤ　Ｉ
ｇを加えてから加熱渚解した。次いで、各々について１
２．００ｏｒ、ｐ、ｍ、、１０分間ホモジナイズし、以
後は実施例１と同じに処理し、２種類の包接化粉末を得
た。これら包接化物についてオレアノール酸をガスクロ
マトグラフにより定量した。結果を第３表に示す。

第３表　包接化粉末中のオレアノール酸含量実施例４ β−ＣＤ　０．７５ｇを３％炭酸水素ナトリウム水溶液
１２ｍ１に懸濁液ウルソール酸（シグマ社製試薬）０．
１５ｇを添加する以外は実施例１と同じく処理して、ウ
ルソール酸包接化粉末ｆｃ）を得た。

実施例５ β−ＣＤ１ｇを３％炭酸水素ナトリウム水溶液１５ｍ１
に懸濁後、ヘデラゲニン（インドファインケミカル社製
試薬）　０．２ｇを添加する以外は実施例１に同じく処
理して、ヘデラゲニン包接化粉末＋Ｄｌ　を得た。前実
施例のｔｃ＋　　と共にガスクロマトグラフ法により定
量した結果を第４表に示す。

第４表　包接化粉末中のトリテルペン含量比較例１ 下記の組成に示すように界面活性剤リボゾームを使用し
、オレアノール酸を溶解（やや不透明）させ、オレアノ
ール酸溶液（Ｅ）　ｌ［ｌＯ＋ｎｌを得た。

オレアノール　−　　゛　剤９　の （％）　　　　　　　　　（％） リポソーム　　　　２０　　パラベル　　　０２乳化安
定剤　　　　ＩＯオレアノール酸０５多価アルコール　
１０．０ 上記を混合してから１０分間ホモジナイズした後、精製
水で１００ｍ１とした。

比較例２ オレアノール酸１６０ｍｇをＤ　Ｍ　Ｓ　Ｏ１００ｍ１
に渚解し５オレアノール酸溶液ｆＦｌを得た。

試験例１ 実施例１〜５及び比較例１〜２にて製造した（Ａｌ−（
Ｆｌ　の試料６点について、トリテルペン０゜８Ｂ／＋
ｍｌとなるよう各々試料原液を調整し、虫歯の原因とな
る不溶性グルカン生成酵素生産菌ストレットコツカス　
ミュータンス（Ｓ、　ｍｕｔａｎｓｌに対する下記の生
育抑制試験を行なった。その結果を第５表に示す。

Ｓ、’ｍｔ＋ｔａｎｓの　　　　！１試菌株：　Ｓ、ｍ
ｕｔａｎｓ　ＯＭＺ　１７６株（広島大学歯学部ヨリ分
譲） 培地：　Ｂｅｒｎ＋ａｎ培地 オレアノール酸が各濃度になるよう添加した培地１０ｍ
１に１０１１／ｍ１種菌を０．１ｍｌ接種３７℃、１８
時間培養する。培ＩＩ液を分光光度計により、　００６
６０ｒｖでの吸光度を測定し判定する６ 第５表　Ｓ、ｍｕｔａｎｓに対する生育抑制＋：生育、
−二生育せず 試験例２ 試験例１と同し試料６点について、トリテルペン１．６
ｍｇ／ｍｌとなるよう各々試料原液を調整し、虫歯の原
因となるＳ、ｍｕｔａｎｓの生産する不溶性グルカン合
成酵素に対する阻害作用について下記試験を行なった。

その結果を第６表に示す。

不溶性グルカンＡ成阻宝試 酵素グルカノトランスフェラーゼ、０．２Ｍリン酸緩衝
液（ｐＨ６，［］）　、　０．５Ｍシュークロース溶液
、及びオレアノール酸（反応時オレアノール酸濃度１０
０〜４００　ｕ　ｇ／ｍｌ）を各０．１ｍｌずつ加えた
反応液を３７℃で２時間反応させた後、　０．２５Ｎ−
塩酸０．２ｎ＋１を加えて反応を停止させる。次に可溶
性物を除去するため、蒸留水１ｍｌを加え、２．（１０
０ｇで遠心洗浄し、得られた沈殿物即ち不溶性グルカン
を凍結乾燥させる。乾燥後、不溶性グルカンを０．５Ｎ
−水酸化ナトリウム２ｍｌに溶解し、フェノール硫酸法
により比色定置する。阻害率は、コントロールの不溶性
グルカン合成量に対して算出する。

第６表　不出性グルカン合成阻害 実施例６ ユ区旦旦旦滅〕 小豆　　　４００ｇ　　　食塩　　　　　　　　少量砂
＠４００ｇ　　オレアノール酸包接化物ｆＡｌ　１２．
０ｇオレアノール酸包接化物を添加する以外は、−Ｒ９
的な方法により上記に示す組成物のつぶし餡（Ｇｌ　６
００ｇを作製したｃオレアノール酸含有量２ｍｇ／ｇｌ
。

実施例７ 区ぞ 紅茶（缶・午後の紅茶１　　　　　　　２００ｍ１オレ
アノール酸包接化物ｆＡ）　　　　　　０．８ｇ市版の
缶紅茶にオレアノール酸包接化物を添加し、上記組成の
オレアノール酸入り紅茶（Ｈｌ　２００ｍ１を作製した
（オレアノール酸含有量０．４ｍｇ／巾Ｉ）。

実施例８ 九旦貞 エタノール　　　　　　　　　　　　　　６じ炭酸水素
ナトリウム　　　　　　　　　０．５ｇグリセリン　　
　　　　　　　　　　１５ｇラウリル硫酸ナトリウム　
　　　　　　０．３ｇオレアノール酸包接化物（Ａ）　
　　　　　０．４ｇ上記に示す組成を精製水で溶解し、
洗口Ｉｆｉ［１１００ｍｌを作製した（オレアノール酸
含量０．４ｍｇ／ｍｌ）。

比較例３ 実施例６．７、及び８の各組成からオレアノール酸包接
化物ｉＡ］無添加の、つぶし餡（Ｊ）、紅茶（Ｋ）及び
洗口液（Ｌｌを作製した。

試験例３ 実施例６．７．８及び比較例２にて作製したつぶし餡、
紅茶、洗口液（Ｇｌ〜（Ｌｌの試料６点について試験例
２に同じく、不溶性グルカン合成酵素に対する阻害作用
試験を行なった。その結果を第７表に示す。

試料の調整：Ｇ、Ｊは精製水にて５倍とし、十分に撹拌
しでから２００メツシユ濾布で濾過し、その濾液を試料
とした。

その他については、製品をそのまま試料とした。

Claims (7)

【特許請求の範囲】
1. （１）五環性トリテルペン化合物をシクロデキストリン
   類にて包接化してなる水溶性五環性トリテルペン組成物
   。
2. （２）五環性トリテルペン化合物が、アミリン族の化合
   物である特許請求の範囲第１項記載の水溶性五環性トリ
   テルペン組成物。
3. （３）五環性トリテルペン化合物が、アミリン族のオレ
   アノール酸又はウルソール酸又はヘデラゲニンである特
   許請求の範囲第１項記載の水溶性五環性トリテルペン組
   成物。
4. （４）五環性トリテルペン化合物とシクロデキストリン
   類を水の存在下で接触させ、五環性トリテルペン化合物
   をシクロデキストリン類で包接化した後、乾燥粉末とす
   ることを特徴とする水溶性五環性トリテルペン組成物の
   製造方法。
5. （５）特許請求の範囲第１項記載の水溶性五環性トリテ
   ルペン組成物を添加してなる食品。
6. （６）特許請求の範囲第１項記載の水溶性五環性トリテ
   ルペン組成物を添加してなる飲料。
7. （７）特許請求の範囲第１項記載の水溶性五環性トリテ
   ルペン組成物を添加してなる口腔用組成物。