JP2019052105A

JP2019052105A - オレアノール酸誘導体

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Publication number: JP2019052105A
Application number: JP2017176793A
Authority: JP
Inventors: 哲夫鳴海; Tetsuo Narumi; 香澄荻原; Kasumi Ogiwara; 吉村　和久; Kazuhisa Yoshimura; 和久吉村; 恵嘉原田; Shigeyoshi Harada
Original assignee: Shizuoka University NUC; National Institute of Infectious Diseases
Current assignee: Shizuoka University NUC; National Institute of Infectious Diseases
Priority date: 2017-09-14
Filing date: 2017-09-14
Publication date: 2019-04-04
Also published as: WO2019054379A1

Abstract

【課題】抗ＨＩＶ活性を有する新規な化合物の提供。【解決手段】下式Ｂで例示される化合物又はその塩。【選択図】なし

Description

本発明は、オレアノール酸誘導体に関する。

ＨＩＶ（ヒト免疫不全ウイルス）感染症は現在、根治可能な治療法が存在しないものの、複数の薬剤を併用する多剤併用療法（ｃＡＲＴ）の確立により、その治療法は大きく改善されてきた。現在使われている抗ＨＩＶ薬としては、ＨＩＶＲＮＡの逆転写を阻害する核酸系逆転写酵素阻害薬（ＮＲＴＩ）、非核酸系逆転写酵素阻害薬（ＮＮＲＴＩ）、プロテアーゼの活性を阻害するプロテアーゼ阻害剤（ＰＩ）、インテグラーゼの活性を阻害するインテグラーゼ阻害剤（ＩＮＳＴＩ）、及び、標的細胞に対するＨＩＶの侵入を阻害する薬剤（ＨＩＶ侵入阻害剤）の５種類がｃＡＲＴに用いられている。一方、ｃＡＲＴによるＨＩＶ感染症の治療は、ＨＩＶ易変異性に起因する薬剤耐性ウイルスの出現が最大の問題の一つとなっており、既存の抗ＨＩＶ薬剤とは異なる作用機序及び結合様式を有する薬剤の開発が必須となっている。そのため、ＨＩＶ侵入阻害剤においては、既存の認可薬である、ＨＩＶウイルス粒子のエンベロープタンパク質（Ｅｎｖ）ｇｐ４１に結合するペプチド融合阻害剤（Ｔ-２０）および宿主細胞上にある受容体タンパク質ＣＣＲ５に結合するＣＣＲ５阻害剤（マラビロク）とは異なる新たなＨＩＶ侵入阻害剤の開発が進んでいる。

このようなＨＩＶ侵入阻害剤としては、例えば、ベツリン酸、アミドオクチルリンカー及びスタチンの３ユニットからなるベツリン酸誘導体（ＩＣ９５６４）が報告されている（例えば、非特許文献１）。

Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，１９９６年，３９巻（５号），ｐｐ．１０６９−１０８３

本発明の目的は、抗ＨＩＶ活性を有する新規な化合物を提供することにある。

本発明者らが鋭意検討を行ったところ、オレアノール酸の構造を基にした化合物（オレアノール酸誘導体）が抗ＨＩＶ活性を有することを見出し、本発明を完成するに至った。

すなわち、本発明は、下記式（Ｉ）で表される化合物又はその塩を提供する。

［式（Ｉ）中、
Ｃ環は、炭化水素環又は複素環であり、炭化水素環及び複素環は、ヒドロキシ基、オキソ基、ヒドロキシイミノ基及びＣ_１−６アルコキシ基からなる群より選択される置換基を有し、
Ｒ^１は、ヒドロキシ基、ハロゲン原子、Ｃ_１−６アルコキシ基、ハロゲン原子で置換されたＣ_１−６アルコキシ基又はＣ_１−６アルキルエステル基であり、
Ｒ^２は、−ＯＨ又は下記式（ＩＩ）で表される基であり、

（式（ＩＩ）中、＊は結合手を示し、Ｘは、ヒドロキシ基及びＣ_１−６アルキル基からなる群より選択される置換基を有していてもよいＣ_１−６アルキレン基である。）
Ｚ^１は、Ｃ_１−１０アルキレン基、又は１〜３個のヘテロ原子を含むヘテロＣ_２−７アルキレン基である。]

上記化合物又はその塩において、Ｃ環は、シクロヘキサン環又はシクロヘキセン環であってよく、シクロヘキサン環及びシクロヘキセン環は、ヒドロキシ基又はオキソ基を有していてよい。

本発明は、また、下記式（Ｉａ）、（Ｉｂ）、（Ｉｃ）、又は（Ｉｄ）で表される化合物又はその塩を提供する。

本発明は、また、上記化合物又はその塩を含有する、医薬組成物を提供する。上記化合物又はその塩は、上記化合物又はその塩と、抗ＨＩＶ抗体と、組み合わせてなる、医薬組成物であってよい。これらの医薬組成物は、抗ＨＩＶ薬として用いることができる。

本発明によれば、抗ＨＩＶ活性を有する新規な化合物を提供することができる。

以下、本発明の内容について詳細に説明する。本明細書において、構造式中の立体構造が明確に規定されている部分については、明示されているとおりの構造を示し、それ以外の立体構造が明確に規定されていない部分については、立体異性体を含んでもよく、その一方の異性体でも混合物でもよい。

以下に、本明細書において記載する用語、記号等の意義を説明し、本発明を詳細に説明する。

本明細書において、「Ｃ_１−６アルキル基」とは、炭素数が１〜６個の直鎖又は分枝状のアルキル基を意味し、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、ｎ−ヘキシル基などが挙げられる。

本明細書において、「ハロゲン原子」とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子またはヨウ素原子を意味する。

本明細書において、「Ｃ_１−６アルコキシ基」とは、Ｃ_１−６アルキル基が結合したオキシ基であることを意味し、例えば、メトキシ基、エトキシ基、１−プロピルオキシ基、２−プロピルオキシ基、１−ブチルオキシ基、２−メチルプロピルオキシ基、１−メチルプロピルオキシ基、１，１−ジメチルエトキシ基などが挙げられる。

本明細書において、「ハロゲン原子で置換されたＣ_１−６アルコキシ基」とは、Ｃ_１−６アルコキシ基における１個又は複数個の水素原子がハロゲン原子で置換された基を意味し、例えば、フルオロメトキシ、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシ、トリクロロメトキシ、１−フルオロエトキシ、２−フルオロエトキシ、２−クロロエトキシ、１，２−ジフルオロエトキシ、２，２−ジフルオロエトキシ、２，２，２−トリフルオロエトキシ、１−フルオロプロポキシ、２−フルオロプロポキシ、３−フルオロプロポキシ、３−クロロプロポキシなどが挙げられる。

本明細書において、「アルキレン基」とは、アルキル基から任意の水素原子をさらに１個除いて誘導される二価の基を意味し、「Ｃ_１−１０アルキレン基」とは、炭素数が１〜１０個のアルキレン基を意味する。Ｃ_１−１０アルキレン基としては、例えば、メチレン基、エチレン基、１，２−プロピレン基、ｎ−プロピレン基、１，２−ブチレン基、１，３−ブチレン基、ｎ−ブチレン基、２，３−ブチレン基、ｎ−ペンチレン基、ｎ−ヘキシレン基、ｎ−ヘプチレン基、ｎ−オクチレン基、ｎ−ノニレン基、ｎ−デシレン基、ｎ−ドデシレン基等が挙げられる。

本明細書において、「ヘテロ原子」とは、酸素原子、窒素原子、又は硫黄原子を意味する。

本明細書において、「ヘテロアルキレン基」とは、アルキレン基の炭素原子の少なくとも１個がヘテロ原子に置換されている基を意味する。また、本明細書において、「ヘテロＣ_２−７アルキレン基」は、炭素数２〜７個のヘテロアルキレン基を意味する。

本発明の一つの実施形態は、一般式（Ｉ）で表される化合物（以下、「化合物（Ｉ）」とも称す）又はその塩である。

式（Ｉ）中、Ｃ環は、炭化水素環又は複素環であり、炭化水素環及び複素環は、ヒドロキシ基、オキソ基、ヒドロキシイミノ基及びＣ_１−６アルコキシ基からなる群より選択される置換基を有し、Ｒ^１は、ヒドロキシ基、ハロゲン原子、Ｃ_１−６アルコキシ基、ハロゲン原子で置換されたＣ_１−６アルコキシ基又はＣ_１−６アルキルエステル基であり、Ｒ^２は、−ＯＨ又は下記式（ＩＩ）で表される基であり、Ｚ^１は、Ｃ_１−１０アルキレン基、又は１〜３個のヘテロ原子を含むヘテロＣ_２−７アルキレン基である。

式（ＩＩ）中、＊は結合手を示し、Ｘは、ヒドロキシ基及びＣ_１−６アルキル基からなる群より選択される置換基を有していてもよいＣ_１−６アルキレン基である。

化合物（Ｉ）において、Ｃ環は、炭化水素環又は複素環である。炭化水素環及び複素環は、飽和環であってもよく、不飽和環であってもよい。また、炭化水素環及び複素環は、５〜８員環、又は６〜７員環であってよい。Ｃ環における炭化水素環及び複素環は、ヒドロキシ基、オキソ基、ヒドロキシイミノ基、及びＣ_１−６アルコキシ基からなる群より選択される置換基を有する。Ｃ環における炭化水素環及び複素環は、ヒドロキシ基又はオキソ基を有していてよい。Ｃ環としては、例えば、上記置換基を有するシクロヘキサン環若しくはシクロヘキセン環、又はε−カプロラクトン環若しくはε−カプロラクタム環が挙げられる。Ｃ環は、上記置換基を有するシクロヘキサン環又はシクロヘキセン環であってよく、ヒドロキシ基又はオキソ基を有するシクロヘキサン環又はシクロヘキセン環であってよく、ヒドロキシ基又はオキソ基を有するシクロヘキサン環であってよく、ヒドロキシ基を有するシクロヘキサン環であってよい。

化合物（Ｉ）において、Ｒ^１は、ヒドロキシ基、ハロゲン原子、Ｃ_１−６アルコキシ基、ハロゲン原子で置換されたＣ_１−６アルコキシ基又はＣ_１−６アルキルエステル基であってよい。

化合物（Ｉ）において、Ｒ^２は、上記一般式（ＩＩ）で表される基であってよい。上記一般式（ＩＩ）において、Ｘは、ヒドロキシ基を有するＣ_１−６アルキル基、又はヒドロキシ基及びＣ_１−６アルキル基を有するＣ_１−６アルキル基であってよい。

Ｒ^２は、下記式（ＩＩａ）で表される基であってよい。

また、Ｒ^２は、下記式（ＩＩｂ）で表される基であってよい。

化合物（Ｉ）において、Ｚ^１は、Ｃ_１−１０アルキレン基、又は１〜３個のヘテロ原子を含むヘテロＣ_２−７アルキレン基である。１〜３個のヘテロ原子を含むヘテロＣ_２−７アルキレン基におけるヘテロ原子は、一般式（Ｉ）の−ＣＯ−ＮＨ−の窒素原子と直接結合しない。

Ｚ^１がＣ_１−１０アルキレン基である場合、Ｚ^１は、ｎ−ペンチレン基、ｎ−ヘキシレン基、ｎ−ヘプチレン基、ｎ−オクチレン基又はｎ−ノニレン基であってよく、ｎ−ヘプチレン基、ｎ−オクチレン基又はｎ−ノニレン基であってよく、ｎ−ヘプチレン基であってよい。

Ｚ^１が１〜３個のヘテロ原子を含むヘテロＣ_２−７アルキレン基である場合、Ｚ^１は、例えば、下記式（ＩＩＩ）で表される基であってよい。Ｚ^１が２個以上のヘテロ原子を含むヘテロＣ_２−７アルキレン基である場合、ヘテロＣ_２−７アルキレン基は、同種のヘテロ原子のみを含むものであってもよく、窒素、酸素及び硫黄からなる群より選択される２種以上のヘテロ原子を含むものであってもよい。

式（ＩＩＩ）中、Ｙは、ヘテロ原子であり、ｎ及びｍはそれぞれ独立に１〜３の整数である。

Ｚ^１は、例えば、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｏ−ＣＨ_２−、又は−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＮＲ^Ｚ１−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＮＲ^Ｚ１−ＣＨ_２−であってよい。Ｒ^Ｚ１は、水素原子又はＣ_１−Ｃ_６アルキル基を示す。Ｒ^Ｚ１は、同一であっても、異なっていてもよい。

化合物（Ｉ）の一態様において、Ｃ環は、シクロヘキサン環又はシクロヘキセン環であり、シクロヘキサン環及びシクロヘキセン環は、オキソ基又はヒドロキシ基を有し、Ｒ^１はヒドロキシ基であり、Ｒ^２は、上記式（ＩＩｂ）で表される基であり、Ｚ^１は、ｎ−ヘプチレン基である。すなわち、化合物（Ｉ）は、下記式（Ｉａ）、（Ｉｂ）、（Ｉｃ）又は（Ｉｄ）で表される化合物であってよい。

化合物（Ｉ）の塩は、薬剤学的に許容される塩であればよく、化合物（Ｉ）の塩としては、例えば、塩酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸等の無機酸との塩；ギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、フタル酸、フマル酸、シュウ酸、酒石酸、マレイン酸、クエン酸、コハク酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸等の有機酸との塩；ナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属との塩；カルシウム、マグネシウム等のアルカリ土類金属との塩；アルミニウム塩；アンモニウム塩；トリメチルアミン、トリエチルアミン、ピリジン、ピコリン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、トロメタミン［トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミン］、ｔｅｒｔ−ブチルアミン、シクロヘキシルアミン、ベンジルアミン、ジシクロヘキシルアミン、Ｎ，Ｎ−ジベンジルエチレンジアミン等の有機塩基との塩；アスパラギン酸、グルタミン酸等の酸性アミノ酸との塩；アルギニン、リジン、オルニチン等の塩基性アミノ酸との塩等が挙げられる。

化合物（Ｉ）が、互変異性体、光学異性体、立体異性体、位置異性体、回転異性体などの異性体を有する場合には、いずれか一方の異性体も混合物も本発明の化合物に包含される。さらに、化合物（Ｉ）に光学異性体が存在する場合には、ラセミ体から分割された光学異性体も化合物（Ｉ）に包含される。

化合物（Ｉ）は、結晶であってもよく、結晶形が単一であっても結晶形混合物であっても化合物（Ｉ）に包含される。

化合物（Ｉ）は、溶媒和物（例えば、水和物など）であっても、無溶媒和物（例えば、非水和物など）であってもよく、いずれも化合物（Ｉ）に包含される。

本実施形態の化合物（Ｉ）の製造法について以下に説明する。Ｒ^１がヒドロキシ基である場合、化合物（Ｉ）は、例えば、以下の方法により製造することができる。

式中、Ｃ環、Ｚ^１及びＸは、上記と同意義を示す。Ｒ^ａ、Ｒ^ｂ及びＲ^ｃは保護基を示す。Ｒ^ａは、例えば、アセチル基であり、Ｒ^ｂはトリメチルシリル（ＴＭＳ）基であり、Ｒ^ｃは、ｔｅｒｔ−ブチル基である。Ｌは、例えば、ハロゲン原子である。

（工程１）
工程１は、化合物（１−１）と化合物（１−２）とを反応させることにより、化合物（２−１）を製造する工程である。
化合物（１−１）は、市販品として入手できるオレアノール酸を出発原料として、製造することができる。例えば、Ｃ環がオキソ基を有するシクロヘキサン環である化合物（１−１）を合成する場合、オレアノール酸のカルボキシル基をエステル基へ変換した後、３−クロロ過安息香酸（ｍＣＰＢＡ）等の酸化剤を用いて、Ｃ環にオキソ基を有するシクロヘキサン環が形成された化合物（１−１）又は化合物（１−１）の前駆体を合成することができる。また、Ｃ環がオキソ基を有するシクロヘキサン環である化合物を原料として、ＬｉＡｌＨ_４等の還元剤によるカルボニル基の還元反応、ベックマン転位型反応、又はバイヤー・ビリガー酸化型反応に付すことにより、Ｃ環が、それぞれヒドロキシ基を有するシクロヘキサン環、ε−カプロラクタム環、ε−カプロラクトン環である化合物（１−１）又はその前駆体を合成することができる。化合物（１−２）は、市販の化合物又は市販の化合物を原料にして合成して得られたものであってもよい。工程１の具体的な反応条件としては、例えば、後述する製造例に示した反応条件が挙げられる。

（工程２）
工程２は、化合物（２−１）と化合物（２−２）とを反応させることにより、化合物（３−１）を製造する工程である。化合物（２−２）は、市販の化合物又は市販の化合物を原料にして合成して得られたものであってよい。Ｒ^２が上記式（ＩＩｂ）で表される基である化合物（Ｉ）を製造する場合、例えば、The Journal of Organic chemistry, 2008, 73, 9228-9234に記載の方法に準じて製造することができる。工程２の具体的な反応条件は、例えば後述する製造例に示した反応条件が挙げられる。

（工程３）
工程３は、化合物（３−１）の保護基を脱保護することにより、化合物（４−１）を製造する工程（脱保護工程）である。
脱保護の条件は、保護基の種類に応じて、適宜選択するものであってよい。例えば、Ｒ^ｃがｔｅｒｔ−ブチル基（ｔ−ブチル基）であり、Ｒ^ａがアセチル基である場合、化合物（３−１）をメタノール及び炭酸カリウム存在下で攪拌し、その後、水酸化ナトリウム水溶液存在下で攪拌することにより、アセチル及びｔ−ブチル基を脱保護して、化合物（４−１）を製造することができる。
工程３の具体的な反応条件としては、例えば、後述する製造例に示した反応条件が挙げられる。

Ｒ^１が、ハロゲン原子、Ｃ_１−６アルコキシ基、ハロゲン原子で置換されたＣ_１−６アルコキシ基又はＣ_１−６アルキルエステル基である化合物（Ｉ）を製造する場合、上記工程１の化合物（１−１）におけるＯＲ^ａ基の代わりに、ハロゲン原子、Ｃ_１−６アルコキシ基、ハロゲン原子で置換されたＣ_１−６アルコキシ基又はＣ_１−６アルキルエステル基を有する化合物を工程１の原料として用いることにより製造することができる。この場合、脱保護工程（工程３）は、行わなくてもよい。

化合物（Ｉ）又はその塩は、必要に応じて、薬剤学的に許容できる添加物を添加して、医薬組成物とすることができる。化合物（Ｉ）は、抗ＨＩＶ活性を有しつつ、細胞毒性が抑制されていることから、化合物（Ｉ）又はその塩を含む医薬組成物は、抗ＨＩＶ薬として用いることができる。また、化合物（Ｉ）は、ＨＩＶの細胞侵入を阻害することから、ＨＩＶ侵入阻害剤として用いることができる。

本実施形態の医薬組成物は、医薬製剤の製造法として自体公知の方法（例、日本薬局方記載の方法等）に従って、化合物（Ｉ）又はその塩と薬学的に許容される担体とを混合した医薬組成物として使用することができる。本実施形態の医薬組成物は、例えば錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、トローチ剤、シロップ剤、液剤、乳剤、懸濁剤、放出制御製剤、エアゾール剤、フィルム剤、注射剤、点滴剤、経皮吸収型製剤、軟膏剤、ローション剤、貼付剤、坐剤、ペレット、経鼻剤、経肺剤、点眼剤として、経口的又は非経口的に投与することができる。本実施形態に係る医薬組成物における化合物（Ｉ）又はその塩の含有量は、投与対象、投与ルート、疾患等により適宜選択することができる。

本実施形態の医薬組成物の投与量は、症状の程度、年齢、性別、体重、投与形態・塩の種類、疾患の具体的な種類等に応じて異なり、許容できない副作用を引き起こすことなく投与できる薬物の最大の用量を超えなければ限定されない。例えば、投与量は、化合物（Ｉ）又はその塩の量で、成人（体重６０ｋｇ）に対して経口投与する場合、例えば、３０μｇ〜１０ｇ、１００μｇ〜５ｇ、又は１００μｇ〜１ｇであってよく、成人に対して注射投与する場合、３０μｇ〜１ｇ、１００μｇ〜５００ｍｇ、又は１００μｇ〜３００ｍｇであってよい。投与間隔としては、例えば、１日１回又は数回（例えば、２〜６回）投与してもよく、２日に１回投与してもよく、１週間に１回投与してもよく、１月に１回投与してもよい。

本実施形態の医薬組成物の製造に用いられてもよい薬学的に許容される担体としては、医薬素材として慣用の各種有機又は無機担体物質が挙げられ、例えば、固形製剤における賦形剤、滑沢剤、結合剤及び崩壊剤、又は液状製剤における溶剤、溶解補助剤、懸濁化剤、等張化剤、緩衝剤及び無痛化剤等が挙げられる。更に必要に応じ、通常の防腐剤、抗酸化剤等の添加物を適宜、適量用いることもできる。

賦形剤としては、例えば、乳糖、白糖、Ｄ−マンニトール、デンプン、コーンスターチ、結晶セルロース、軽質無水ケイ酸が挙げられる。滑沢剤としては、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、タルク、コロイドシリカが挙げられる。結合剤としては、例えば、結晶セルロース、白糖、Ｄ−マンニトール、デキストリン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、デンプン、ショ糖、ゼラチン、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウムが挙げられる。崩壊剤としては、例えば、デンプン、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、カルボキシメチルスターチナトリウム、Ｌ−ヒドロキシプロピルセルロースが挙げられる。溶剤としては、例えば、注射用水、アルコール、プロピレングリコール、マクロゴール、ゴマ油、トウモロコシ油、オリーブ油が挙げられる。溶解補助剤としては、例えば、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、Ｄ−マンニトール、安息香酸ベンジル、エタノール、トリスアミノメタン、コレステロール、トリエタノールアミン、炭酸ナトリウム、クエン酸ナトリウムが挙げられる。懸濁化剤としては、例えば、ステアリルトリエタノールアミン、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリルアミノプロピオン酸、レシチン、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、モノステアリン酸グリセリン等の界面活性剤；例えば、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース等の親水性高分子が挙げられる。等張化剤としては、例えば、ブドウ糖、Ｄ−ソルビトール、塩化ナトリウム、グリセリン、Ｄ−マンニトールが挙げられる。緩衝剤としては、例えば、リン酸塩、酢酸塩、炭酸塩、クエン酸塩等の緩衝液が挙げられる。無痛化剤としては、例えば、ベンジルアルコールが挙げられる。防腐剤としては、例えば、パラオキシ安息香酸エステル類、クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェニルエチルアルコール、デヒドロ酢酸、ソルビン酸が挙げられる。抗酸化剤としては、例えば、亜硫酸塩、アスコルビン酸、α−トコフェロールが挙げられる。

また、化合物（Ｉ）又はその塩は抗ＨＩＶ抗体と組み合わせて使用することができる。抗ＨＩＶ抗体は、ポリクローナル抗体又はモノクローナル抗体であってよい。抗ＨＩＶ抗体が由来する動物は、マウスであってよい（マウス抗体、キメラ型抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体等）。抗ＨＩＶ抗体は、ＨＩＶ中和抗体であってよい。化合物（Ｉ）は、ＨＩＶ中和抗体に対するＨＩＶの感受性を増強させることができることから、化合物（Ｉ）又はその塩とＨＩＶ中和抗体とを組み合わせてなる医薬組成物として有用である。抗ＨＩＶ抗体（ＨＩＶ中和抗体）としては、例えば、ＨＩＶウイルス粒子の最も外側に位置するエンベロープタンパク質（Ｅｎｖ）であるｇｐ１２０三量体の突端部のＶ２糖鎖領域を認識するＶ２ａｐｅｘ（ＰＧＤＭ１４００、ＰＧ９、ＰＧ１６等）、Ｖ３基部の糖鎖を認識するＶ３−ｈｉｇｈｍａｎｎｏｓｅｐａｔｃｈ（１０-１０７４、ＰＧＴ-１２８、２Ｇ１２等）、宿主細胞表面タンパク質ＣＤ４との結合領域を認識するＣＤ４ｂｓ（ＶＲＣ０１、３ＢＮＣ１１７、ｂ１２等）、ｇｐ１２０とｇｐ４１の境界面を認識するｇｐ１２０／４１ｉｎｔｅｒｆａｃｅ（３５Ｏ２２、ＰＧＴ１５１、８ＡＮＣ１９５等）、ｇｐ４１の膜貫通部位近傍を認識するＭＰＥＲ（１０Ｅ８、２Ｆ５、４Ｅ１０等）、Ｖ３先端領域を認識するｃｒｙｐｔｉｃ-Ｖ３（４４７-５２Ｄ、ＫＤ-２４７等）そして、宿主細胞表面タンパク質ＣＣＲ５またはＣＸＣＲ４との結合領域を認識するＣＤ４ｉＣｏＲｂｓ（１７ｂ等）等が挙げられる。上記の抗ＨＩＶ抗体は、ＫＤ-２４７以外はＰｏｌｙｍｕｎＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社、Ｃｒｅａｔｉｖｅｂｉｏｌａｂ社等により入手することができる。

本実施形態の、化合物（Ｉ）又はその塩と抗ＨＩＶ抗体とを組み合わせてなる医薬組成物（以下、「併用医薬組成物」ともいう）において、化合物（Ｉ）又はその塩と抗ＨＩＶ抗体の投与時期は、化合物（Ｉ）又はその塩と抗ＨＩＶ抗体とを、投与対象に対し、同時に投与してもよいし、時間差をおいて投与してもよい。

本実施形態の併用医薬組成物の投与形態は、投与時に、化合物（Ｉ）又はその塩と抗体とが組み合わされていればよい。このような投与形態としては、例えば、（１）化合物（Ｉ）又はその塩と抗体とを同時に製剤化して得られる単一の製剤の投与、（２）化合物（Ｉ）又はその塩と抗体とを別々に製剤化して得られる２種の製剤の同一投与経路での同時投与、（３）化合物（Ｉ）又はその塩と抗体とを別々に製剤化して得られる２種の製剤の同一投与経路での時間差をおいての投与、（４）化合物（Ｉ）又はその塩と抗体とを別々に製剤化して得られる２種の製剤の異なる投与経路での同時投与、（５）化合物（Ｉ）又はその塩と抗体とを別々に製剤化して得られる２種の製剤の異なる投与経路での時間差をおいての投与（例えば、本実施形態の化合物又はその塩を投与した後の併用薬物の投与、又はその逆の順序での投与）等が挙げられる。

時間差をおいて投与する場合、時間差は投与する有効成分、剤形、投与方法により異なってよい。例えば、化合物（Ｉ）又はその塩を投与した後、１月以内、１週間以内、２日以内、１分〜１日以内、１０分〜６時間以内、又は１５分〜３時間以内に抗体を投与する方法が挙げられる。

以下に、製造例、実施例及び試験例を示して、本発明をより詳細に説明するが、本発明は以下の具体例により限定されるものではない。

オレアノール酸から公知の方法（Org. Lett.， 2013, 15, 1622-1625、及びBioorg. Med. Chem.， 2008, 16, 8697-8705に記載された方法）に準じて、オレアノール酸誘導体（後述する化合物Ａ−１、Ｂ−１、Ｃ−１、Ｃ−１’及びＤ−１）を合成した。

製造例１−１：３β−アセトキシ−１２−オキソオレアノ−２８−オイル−クロリドの合成

Ａ−１（８７４ｍｇ，１．６９ｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（５．３０ｍＬ）に、オキサリルクロリド（２９２μＬ，３．４０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（１０．６ｍＬ）を０℃で滴下し、得られた混合液を室温で５時間撹拌した。その後、有機溶媒を濃縮し、標記化合物を得た。得られた化合物は、精製処理を更に行うことなく、次工程に使用した。

製造例１−２：Ｎ−［３β−アセトキシ−１２−オキソオレアノ−２８−オイル］−８−アミノオクタン酸の合成

８−アミノオクタン酸のジクロロメタン溶液に、クロロトリメチルシラン（ＴＭＳＣｌ）を添加し、得られた混合液を４時間加熱還流した。室温まで冷却した後、溶液にＡ−２（５３５ｍｇ，１．００ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液とトリエチルアミンとを添加し、室温で１２時間撹拌した。その後、得られた溶液を減圧下で濃縮し、濃縮残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝２０：１）にて精製して、標記化合物(659mg, quant.)を得た。
IR (CHCl₃) v 3349 (OH), 1692 (CO),1635 (CO), 1529 (NHCO), 1469 (NHCO); ¹H-NMR (300 MHz, CD₃OD)δ 0.87 (s, 6H), 0.90 (s, 3H), 0.95 (s, 3H), 0.97 (s,6H), 1.01-1.30 (m, 7H), 1.33 (s, 6H), 1.37-2.03 (m, 21H), 2.05 (s, 3H), 2.10-2.30(m, 2H), 2.32-2.38 (m, 2H), 2.61-2.81 (m, 2H), 3.21-3.39 (m, 2H), 4.41-4.53(m,1H), 5.76-5.89 (m, 1H); MS (ESI) m/z calcd for C46H78N2O7 [M+H]⁺771.58, found 771.60

製造例１−３：（３Ｓ，４Ｓ）−Ｎ’−［Ｎ−［３β−アセトキシ−１２−オキソオレアノ−２８−オイル］−８−アミノオクタノイル］−４−アミノ−３−ヒドロキシ−６−メチルヘプタン酸ｔ−ブチルエステルの合成

Ａ−３(324 mg, 0.494 mol)のジクロロメタン溶液にＳ１、ＨＯＢｔ・Ｈ_２Ｏ、ＥＤＣＩ及びトリエチルアミンを添加し、混合液を室温で１５時間撹拌した。反応混合液に水を添加して希釈し、ジクロロメタンで抽出した。その後、有機層を飽和塩化アンモニウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させた後、硫酸マグネシウムを濾過した。濾液を減圧濃縮し、濃縮残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝２０：１）にて精製して、標記化合物（293 mg、収率：68%）を得た。なお、Ｓ１は、公知の方法（例えば、The Journal of Organic chemistry, 2008, 73, 9228-9234及びTetrahedron Letters， 2006, 47, 389-393)に記載の方法に準じてＬ−Ｂｏｃ−ロイシンから誘導したものを用いた。
IR (CHCl₃) v 3355 (OH), 1723(CO), 1634 (CO), 1530 (NHCO);¹H-NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 0.87 (s, 6H), 0.91 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), 0.95 (s, 3H), 0.98 (s,6H), 0.99-1.32 (m, 12H), 1.33 (s, 3H), 1.34-1.44 (m, 6H), 1.46 (s, 9H), 1.48-1.60(m, 7H), 1.61 (s, 3H), 1.64-2.03 (m, 8H), 2.05 (s, 3H), 2.07-2.32 (m, 5H), 2.34-2.43(m, 2H), 2.64-2.78 (m, 2H), 3.18-3.29 (m, 2H), 3.92-4.06 (m, 2H), 4.41-4.53 (m,1H), 5.58-5.68 (m, 1H), 5.72 (s, 1H); HRMS (ESI) m/z calcd for C52H89N2O8 [M+H]⁺869.6613, found 869.6612

製造例１−４：（３Ｓ，４Ｓ）−Ｎ’−［Ｎ−［３β−ヒドロキシ−１２−オキソオレアノ−２８−オイル］−８−アミノオクタノイル］−４−アミノ−３−ヒドロキシ−６−メチルヘプタン酸の合成

Ａ−４(283.7 mg, 0.326 mol)のメタノール（ＭｅＯＨ）溶液に炭酸カリウムを添加し、混合液を室温で８時間撹拌した。この溶液に、４ＮＮａＯＨ水溶液を添加し、混合液を室温で更に８時間撹拌した。得られた反応液を減圧濃縮し、残渣を水で希釈し、１ＮＨＣｌ水溶液で中和した。混合液にジクロロメタンを加えて抽出し、有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させた後、硫酸マグネシウムを濾過した。濾液を減圧濃縮し、濃縮残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝１０：１）にて精製して、標記化合物(248.2 mg, quant.)を白色個体として得た。得られた化合物Ａを実施例１の化合物ともいう。
[α]^23.1 _D= -22.4 (c 1.01, CH₃OH); IR (ATR) v 3349 (OH), 1692 (CO), 1635 (CO),1529 (NHCO); ¹H-NMR (300 MHz, CD₃OD) δ0.78 (s, 3H), 0.89 (s, 6H), 0.94-0.99 (m, 12H), 1.01 (s, 3H), 1.01-1.33(m, 9H), 1.35 (s, 3H), 1.35-2.31 (m, 31H), 2.28-2.45 (m, 2H), 2.74-2.84 (m,2H), 3.05-3.18 (m, 2H), 3.18-3.27 (m, 1H), 3.94-4.04 (m, 2H).; ¹³C-NMR(75 MHz, CD₃OD) δ15.7, 16.0, 16.9, 19.4,21.0, 22.3, 23.4, 23.6, 23.8, 26.0, 27.1, 27.7, 28.1, 28.5, 30.2, 30.3, 30.6,31.5, 32.9, 33.0, 34.0, 35.2, 35.7, 37.1, 37.6, 38.0, 39.2, 39.4, 39.9, 40.5,40.5, 40.7, 41.1, 41.1, 42.7, 43.1, 48.1, 48.4, 48.7, 49.0, 49.3, 49.6, 49.8,49.9, 51.2, 52.2, 52.9, 56.5, 71.4, 79.4, 176.4, 177.7, 180.2, 214.9; LRMS(ESI) m/z calcd for C46H78N2O7 [M+H]⁺ 771.58, found 771.60

製造例２−１：３β−アセトキシ−１２−オキソオレアノ−９（１１）エン−２８−オイルクロリドの合成

Ｂ−１(115 mg, 0.224 mol)のジクロロメタン溶液(700 μL)に、オキサリルクロリド(38.5 μL, 0.448 mmol)のジクロロメタン溶液(1.40 mL)を0oCで滴下して加えた。混合液を５時間室温で攪拌した。その後、有機溶媒を濃縮し、標記化合物を得た。得られた化合物は、精製処理を更に行うことなく、次工程に使用した。

製造例２−２：Ｎ−［３β−アセトキシ−１２−オキソオレアノ−９（１１）−エン−２８−オイル］−８−アミノオクタン酸の合成

Ｂ−２を用いて、製造例１−２と同様の方法により、標記化合物(135 mg、収率：92%)を合成した。
¹H-NMR(300 MHz, CD₃OD) δ0.90 (s, 3H), 0.92 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 1.00 (s,3H), 0.99-1.20 (m, 5H), 1.21(s, 3H), 1.25 (s, 3H), 1.32 (s, 3H), 1.32-2.05 (m, 25H), 2.06 (s, 3H), 2.29-2.38 (m, 2H), 2.77-2.86(m, 1H), 2.88-2.93 (m, 1H),3.21-3.29 (m, 2H), 4.41-4.55 (m, 1H), 5.77 (s, 1H), 6.06-6.14 (m, 1H)

製造例２−３：（３Ｓ，４Ｓ）−Ｎ’−［Ｎ−［３β−アセトキシ−１２−オキソオレアノ−９（１１）−エン−２８−オイル］−８−アミノオクタノイル］−４−アミノ−３−ヒドロキシ−６−メチルヘプタン酸ｔ−ブチルエステルの合成

Ｂ−３(65.0 mg, 99.0μmol)を用いて、製造例１−３と同様の方法により、標記化合物(85.7 mg、収率：99%)を合成した。
¹H-NMR(300 MHz, CDCl₃) δ0.91 (s, 6H), 0.99 (s, 6H), 1.00-1.20 (m, 5H), 1.21 (s, 3H), 1.24 (s, 3H),1.26-1.34 (m, 8H), 1.36 (s,3H), 1.45 (s, 9H), 1.47-2.04(m, 26H), 2.06 (s, 3H), 2.22 (s, 1H), 2.28-2.44 (m, 2H), 2.74-2.87(m, 1H), 2.91 (s, 1H), 3.25 (s, 2H), 3.29-3.46 (m, 1H), 3.92-4.06(m, 1H), 4.43-4.54 (m, 1H),5.73-5.78 (m, 1H), 5.84-5.94 (m, 1H)

製造例２−４：（３Ｓ，４Ｓ）−Ｎ’−［Ｎ−［３β−ヒドロキシ−１２−オキソオレアノ−９（１１）−エン−２８−オイル］−８−アミノオクタノイル］−４−アミノ−３−ヒドロキシ−６−メチルヘプタン酸の合成

Ｂ−４(85.7 mg, 99.0 μmol)を用いて、製造例１−４と同様の方法により、標記化合物（化合物Ｂ）(75.2 mg、収率：98%)を合成した。得られた化合物Ｂを実施例２の化合物ともいう。
¹H-NMR(300 MHz, CD₃OD) δ 0.83 (s, 3H), 0.89 (s,3H), 0.92 (s, 3H), 0.94 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 1.02 (s, 6H), 1.22 (s, 3H), 1.27(s, 3H), 1.33-1.75 (m, 37H),2.15-2.25 (m, 4H), 2.96-3.04 (m, 1H), 3.06-3.08 (m, 1H), 3.11-3.17(m, 2H), 3.19-3.23 (m, 1H),3.88-4.00 (m, 2H), 5.74 (s,1H); HRMS (ESI) m/z calcd for C46H76N2O7 [M+Na]⁺ 791.5545, found791.5546

製造例３−１：３β，１２β−ジアセトキシオレアナン−２８−酸の合成

Ｃ−１(24.3 mg, 51.0 μmol)の無水酢酸溶液（102 μL)を１２０℃で２時間撹拌した。その後、水で希釈した。反応混合液を酢酸エチルで抽出し、有機層をブラインで洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥させた。そして、硫酸ナトリウムを濾過して得た濾液を濃縮し、標記化合物を得た。得られた化合物は、精製処理を更に行うことなく、次工程に使用した。

製造例３−２：３β，１２β−ジアセトキシオレアナン−２８−オイルクロリドの合成

Ｃ−２を用いて、製造例１−１と同様の方法により、標記化合物を合成した。得られた化合物は、精製処理を更に行うことなく、次工程に使用した。

製造例３−３：Ｎ−［３β，１２β−ジアセトキシオレアナン−２８−オイル］−８−アミノオクタン酸の合成

Ｃ−３を用いて、製造例１−２と同様の方法により、標記化合物(26.9 mg、収率：85%)を合成した。
¹H-NMR(300 MHz, CHCl₃) δ 0.84 (s, 6H), 0.89 (s,6H), 1.21-1.71 (m, 43H), 2.05 (s, 6H), 2.33-2.39 (m, 2H), 2.49 (s, 1H), 3.14-3.39(m, 2H), 4.41-4.54 (m, 1H), 5.08 (s, 1H), 5.63-5.75 (m, 1H); LRMS (ESI) m/z calcdfor C46H78N2O7 [M+H]⁺ 700, found 700

製造例３−４：（３Ｓ，４Ｓ）−Ｎ’−［Ｎ−［３β，１２β−ジアセトキシオレアナン−２８−オイル］−８−アミノオクタノイル］−４−アミノ−３−ヒドロキシ−６−メチルヘプタン酸ｔ−ブチルエステルの合成

Ｃ−４(20.9 mg, 29.8μmol)を用いて、製造例１−３と同様の方法により、標記化合物(17.9 mg、収率：66%)を合成した。
¹H-NMR(300 MHz, CDCl₃) δ 0.83 (s, 3H), 0.84 (s,3H), 0.86 (s, 3H), 0.88 (s, 3H), 0.89 (s, 3H), 0.91 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), 0.96-1.28(m, 11H), 1.30 (s, 3H), 1.33 (s, 3H), 1.46 (s, 12H), 1.48-1.81 (m, 26H), 2.05(s, 6H), 2.16-2.22 (m, 2H), 2.37-2.42 (m, 2H), 2.45-2.56 (m, 1H), 3.14-3.37 (m,2H), 3.47-3.59 (m, 2H), 3.96-4.04 (m, 2H), 4.48 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 5.07 (bs,1H), 5.65 (dd, J = 11.2, 7.0 Hz, 2H); LRMS (ESI) m/z calcd for C52H88N2O7 [M+H]⁺913, found 913

製造例３−５：（３Ｓ，４Ｓ）−Ｎ’−［Ｎ−［３β，１２β−ジヒドロキシオレアナン−２８−オイル］−８−アミノオクタノイル］−４−アミノ−３−ヒドロキシ−６−メチルヘプタン酸の合成

Ｃ−５(17.9 mg, 19.6 μmol)を用いて、製造例１−４と同様の方法により、標記化合物（化合物Ｃ）(7.50 mg、収率：49%)を合成した。得られた化合物Ｃを実施例３の化合物ともいう。
[α]²² _D = -22.4 (c1.01, CH₃OH); IR (ATR) v 3349 (OH), 1692 (CO), 1635 (CO), 1529(NHCO), 1469 (NHCO); 1H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ 0.75 (s, 3H), 0.85 (s, 3H), 0.89(s, 6H), 0.91 (s, 6H), 0.92 (s, 6H), 0.95 (s, 3H), 0.95-2.20 (m, 40H), 2.17-2.28(m, 2H), 2.26-2.42 (m, 2H),2.57-2.69 (m, 1H), 3.04-3.22 (m, 2H), 3.35 (s, 1H), 3.59-3.76 (m, 1H), 3.84-3.92 (m, 1H), 3.96-4.09(m, 1H); LRMS (ESI) m/z calcd for C46H78N2O7 [M+H]⁺ 773, found 773

製造例４：（３Ｓ，４Ｓ）−Ｎ’−［Ｎ−［３β，１２α−ジヒドロキシオレアナン−２８−オイル］−８−アミノオクタノイル］−４−アミノ−３−ヒドロキシ−６−メチルヘプタン酸の合成

Ｃ−１におけるヒドロキシ基の立体配置が異なるジアステレオマー（化合物Ｃ−１’）を用いたこと以外は、製造例３−１〜３−５と同様にして、標記化合物（化合物Ｃ’）を合成した。得られた化合物Ｃ’を実施例４の化合物ともいう。

製造例５−１：Ｎ−［３β−アセトキシオレアノ−１２−エン−２８−オイル］−８−アミノオクタン酸の合成

８−アミノオクタン酸(276 mg, 1.74 mol)のジクロロメタン(18.8 mL)溶液に、ＴＭＳＣｌ(357 μL)を添加し、得られた混合液を４時間加熱還流した。室温まで冷却した後、溶液にＤ−２(701 mg, 1.32 mmol)のジクロロメタン(7.60 mL)溶液とトリエチルアミン(709 μL)とを添加し、室温で１２時間撹拌した。その後、得られた溶液を減圧下で濃縮し、濃縮残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝２０：１）にて精製して、標記化合物(739 mg、収率：87%)を淡黄色固体として得た。Ｄ−１は、市販品として入手可能であるオレアノール酸から製造例１−１の条件に準じた条件で合成した。
IR (CHCl₃) v 3381 (OH), 1726(CO), 1611 (CO), 1525 (NHCO); ¹H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 0.8 (s, 3H),0.9 (s, 3H), 0.9 (s, 3H), 0.9 (s, 6H), 0.9 (s, 3H), 1.2 (s, 3H),1.3-1.4 (m,12H), 1.4-1.7 (m, 18H), 1.9-2.0 (m, 3H), 2.1 (s, 3H), 2.3-2.4 (m, 2H), 2.4-2.5(m, 1H),2.9-3.0 (m, 1H), 3.3-3.4 (m, 1H), 4.5-4.5 (m, 1H), 5.4-5.4 (m, 1H), 5.9-6.0(m, 1H); HRMS (ESI),m/z calcd for C40H65NO5 [M+H]⁺ 640.4936, found640.4934

製造例５−２：(３Ｓ，４Ｓ)−Ｎ’−［Ｎ−［３β−アセトキシオレアノ−１２−エン−２８−オイル］−８−アミノオクタノイル］−４−アミノ−３−ヒドロキシ−６−メチルへプタン酸ｔｅｒｔブチルエステルの合成

Ｄ−２(101 mg, 0.158 mol)を用いて、製造例１−３と同様の方法により、標記化合物(130 mg、収率：97%)を合成した。
IR (CHCl₃) v 3327 (OH), 1726(CO), 1651 (CO), 1525 (NHCO); ¹H-NMR (300MHz, CDCl3) δ 0.76 (s, 3H),0.86 (s, 3H), 0.87 (s, 3H), 0.91 (s, 6H), 0.93 (s, 3H), 0.94 (s, 3H),0.95-1.13(m, 3H), 1.16 (s, 3H), 1.17-1.29(m, 5H), 1.32 (s, 3H), 1.45 (s, 15H), 1.48-1.81 (m, 25H),1.88-1.98 (m, 3H), 2.05 (s, 3H), 2.16-2.22 (m, 2H),2.36-2.41 (m, 2H), 2.45-2.54 (m, 1H), 2.92-3.04 (m, 1H), 3.28-3.41 (m, 1H),3.93-4.02 (m, 2H), 4.45-4.53 (m, 1H), 5.36-5.39 (m, 1H), 5.61-5.68 (m, 1H),5.88-5.95 (m, 1H); HRMS (ESI) m/z calcd for C52H88N2O7 [M+H]⁺853.6664, found853.6667

製造例５−３：(３Ｓ，４Ｓ)−Ｎ’−［Ｎ−［３β−ヒドロキシオレアノ−１２−エン−２８−オイル］−８−アミノオクタノイル］−４−アミノ−３−ヒドロキシ−６−メチルへプタン酸の合成

Ｄ−３(139 mg, 0.163 mmol)を用いて、製造例１−４と同様の方法により、標記化合物（化合物Ｄ）(35.2 mg、収率：26%)を合成した。得られた化合物Ｄを参考例１の化合物ともいう。
[α]^23.1 _D = -10.5 (c0.98, CHCl₃); IR (CHCl₃) v 3349 (OH), 1692 (CO), 1635(CO), 1529 (NHCO); ¹H-NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 0.75 (s,3H), 0.79 (s, 3H), 0.91 (s, 6H), 0.81-0.92 (m, 11H), 0.93 (s, 3H), 0.97 (s,3H), 0.99-1.13 (m, 4H), 1.16 (s, 3H), 1.26 (s, 3H),1.32 (s, 3H), 1.33-2.07 (m,24H), 2.17-2.28 (m, 1H), 2.44-2.53 (m, 2H), 2.91-3.02 (m, 1H), 3.19-3.25 (m,1H), 3.29-3.38 (m, 1H), 3.94-4.10 (m, 2H), 5.31-5.50 (m, 1H), 6.03-6.09 (m,1H), 6.05-6.15 (m, 2H); ¹³C-NMR (75 MHz, CD₃OD) δ 15.5,15.8, 16.3, 17.0, 18.3, 22.0, 23.6, 23.7, 24.9,25.8, 27.2, 27.2, 27.3, 28.2,28.2, 29.2, 29.3, 29.5, 29.5, 30.8, 32.6, 33.0, 33.1, 34.2, 37.0, 38.8,39.2,39.4, 39.6, 42.1, 42.2, 42.3, 42.9, 43.8, 45.2, 45.8, 46.0, 46.3, 47.6,55.2, 78.9, 79.0, 123.0, 145.2,174.5, 178.5; HRMS (ESI) m/z calcd forC46H78N2O7 [M+H]⁺ 755.5933, found 755.5928

製造例６：ＩＣ９５６４の合成

公知のＨＩＶ活性を有する化合物であるＩＣ９５６４についてJ. Med. Chem.1996, 39, 1069-1083に記載の方法に準じて合成した。得られた化合物を参考例２の化合物ともいう。

試験例１：抗ＨＩＶ活性の評価試験
合成した実施例１〜４の化合物（化合物Ａ、Ｂ、Ｃ及びＣ’）及び参考例１〜２の化合物（化合物Ｄ及びＩＣ９５６４）について、抗ＨＩＶ活性および細胞毒性を以下の方法により評価した。結果を表１に示す。表１中、「Ｎ．Ｄ．」とは、検出不可を意味する。

抗ＨＩＶ活性についてはＴＺＭ−ｂｌ細胞を用いたＴＺＭ−ｂｌアッセイによる評価を行った。ＴＺＭ−ｂｌ細胞（米国ＮＩＨＡＩＤＳＲｅｓｅａｒｃｈａｎｄＲｅｆｅｒｅｎｃｅＲｅａｇｅｎｔＰｒｏｇｒａｍより入手）は、親株ＪＣ−５３細胞のＨＩＶ−１ＬＴＲ（ｌｏｎｇｔｅｒｍｉｎａｌｒｅｐｅａｔ）配列に、β−ガラクトシダーゼ及びルシフェラーゼ遺伝子が組み込まれた細胞株であり、ＨＩＶ−１の感染をβ−ガラクトシダーゼの発現量に比例した発光シグナルにて検出することができる。β−ガラクトシダーゼの定量は、Ｂｅｔａ−ＧｌｏＴＭアッセイ系（Ｐｒｏｍｅｇａ社製）を用いて行った。ウイルス株は、先進国で流行しているサブタイプＢ型ウイルスのうち、ＣＣＲ５（Ｒ５）指向性ウイルスＹＵ２株（米国ＮＩＨＡＩＤＳＲｅｓｅａｒｃｈａｎｄＲｅｆｅｒｅｎｃｅＲｅａｇｅｎｔＰｒｏｇｒａｍより入手）、ＣＸＣＲ４（Ｘ４）指向性ウイルスのＮＬ４−３株（米国ＮＩＨＡＩＤＳＲｅｓｅａｒｃｈａｎｄＲｅｆｅｒｅｎｃｅＲｅａｇｅｎｔＰｒｏｇｒａｍより入手）、両指向性ウイルスの８９．６株（米国ＮＩＨＡＩＤＳＲｅｓｅａｒｃｈａｎｄＲｅｆｅｒｅｎｃｅＲｅａｇｅｎｔＰｒｏｇｒａｍより入手）の３株を用いた。具体的には、１００ＴＣＩＤ_５０のウイルス株および希釈系列薬剤と共に、ＴＺＭ-ｂｌ細胞（１ｘ１０^４細胞）を培養した。培養４８時間後、Ｂｅｔａ−ＧｌｏＴＭアッセイの添付説明書に従いβ−ガラクトシダーゼ活性を、ルミノメーターで測定し、薬剤の感受性を比較した。ＩＣ_５０値は、ＨＩＶのＴＺＭ−ｂｌ細胞への感染を５０％阻害した時の濃度である。なお、ＬＴＲは転写調節領域であるため、このアッセイ系ではＨＩＶライフサイクルのうちウイルスＤＮＡの転写過程までのウイルス感染を検出することができる。

細胞毒性については、ＴＺＭ−ｂｌ細胞（米国ＮＩＨＡＩＤＳＲｅｓｅａｒｃｈａｎｄＲｅｆｅｒｅｎｃｅＲｅａｇｅｎｔＰｒｏｇｒａｍより入手）を用いて、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−ＧｌｏＬｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔＣｅｌｌＶｉａｂｉｌｉｔｙアッセイ系（Ｐｒｏｍｅｇａ社製）により、代謝活性のある細胞由来のＡＴＰを定量することで、生存細胞数を測定した。具体的には、希釈系列薬剤と共にＴＺＭ-ｂｌ細胞（１ｘ１０^４細胞）を培養した。培養４８時間後、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−ＧｌｏＬｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔＣｅｌｌＶｉａｂｉｌｉｔｙアッセイの添付説明書に従いＡＴＰ産生量を、ルミノメーターで測定し、細胞の増殖率や生存率を定量化した。ＣＣ_５０値は、ＴＺＭ−ｂｌ細胞をｍｏｃｋ感染させ、生存率が５０％になったときの濃度である。

上述の化合物（Ｉ）におけるＣ環にカルボニル基を有するケトン体（化合物Ａ）はＮＬ４−３株および８９．６株においてｎＭオーダーの抗ＨＩＶ活性を示し（ＩＣ_５０＝０．４９〜５．６μＭ）、Ｃ環に置換基を有しない化合物Ｄ（ＩＣ_５０＝１．６〜２６μＭ）と比較して約３〜４倍高活性となった。加えて、化合物Ａは、化合物Ｄに比べて細胞毒性においても約２倍低毒性であることが明らかとなった（化合物ＡのＣＣ_５０＝１４０μＭ）。また、上述の化合物（Ｉ）におけるＣ環にヒドロキシ基を有する化合物Ｃは８９．６株においてケトン体（化合物Ａ）と同様にｎＭオーダーの抗ＨＩＶ活性を示し（ＩＣ_５０＝０．１７〜４．６μＭ）、かつケトン体（化合物Ａ）に比べて細胞毒性が減弱した（ＣＣ_５０＝１６４μＭ）。α，β−不飽和ケトン体（化合物Ｂ）においても抗ＨＩＶ活性が認められた（ＩＣ_５０＝１９〜４３μＭ）。また、化合物Ｃのジアステレオマーである化合物Ｃ’も抗ＨＩＶ活性を示し、かつ、ＩＣ９５６４と比べて、細胞毒性が低いことが示された。

試験例２：ＨＩＶ−１中和抗体との併用効果
両指向性ウイルス８９．６株及びＴＺＭ−ｂｌ細胞を用いて、化合物Ａ又は化合物Ｄと、ＨＩＶ−１中和抗体との併用効果について評価した。併用効果は、Eur. J. Biochem., 1981, 115, 207-216、J. Biol. Chem., 2012, 287, 15076-15086等に記載の方法に準じて評価した。ＩＣ_５０は、試験例１と同様の方法により測定した。結果を表２に示す。なお、ＨＩＶ−１中和抗体(以下、「ＮＡｂ」ともいう。)としては、ｂ１２、２Ｇ１２、２Ｆ５、４Ｅ１０、４４７-５２Ｄ、及びＫＤ２４７を用いた。以下、化合物及びＮＡｂを「阻害剤」ともいう。化合物とＮＡｂとの比（化合物：ＮＡｂ）は、各阻害剤単独でのＩＣ_５０値の比に近似している。

ＤＲＩ（Dose reduction index）は、第２の阻害剤の存在下のＩＣ_５０に対する、第２の阻害剤の非存在下におけるＩＣ_５０の比であり、下記式により算出した。
ＤＲＩ_Ｘ＝（ＩＣ_５０）_Ｘ／（ＩＣ_５０）_Ｘ，Ｙ
ＤＲＩ_ｙ＝（ＩＣ_５０）_ｙ／（ＩＣ_５０）_Ｘ，Ｙ
ここで、（ＩＣ_５０）_Ｘは、化合物Ａ又はＤ単独のＩＣ_５０であり、（ＩＣ_５０）_ｙは、ＮＡｂ単独のＩＣ_５０であり、（ＩＣ_５０）_Ｘ，Ｙは、化合物Ａ又はＤとＮＡｂとを併用した場合のＩＣ_５０である。

ＣＩ（Combination index）は、下記式により算出した。
ＣＩ＝（ＤＲＩ_ｘ）^−１＋（ＤＲＩ_ｙ）^−１＋（ＤＲＩ_ｘＤＲＩ_ｙ）^−１

ＣＩが１未満である場合、相乗効果ありと判断し、ＣＩが１である場合、相加効果であると判断し、ＣＩが１超えである場合、きっ抗効果であると判断した。

表２に示すとおり、化合物Ａおよび化合物Ｄが、試験に用いたいずれの中和抗体においても相乗効果を有することが示された。

Claims

下記式（Ｉ）で表される化合物又はその塩。

［式（Ｉ）中、
Ｃ環は、炭化水素環又は複素環であり、前記炭化水素環及び前記複素環は、ヒドロキシ基、オキソ基、ヒドロキシイミノ基及びＣ_１−６アルコキシ基からなる群より選択される置換基を有し、
Ｒ^１は、ヒドロキシ基、ハロゲン原子、Ｃ_１−６アルコキシ基、ハロゲン原子で置換されたＣ_１−６アルコキシ基又はＣ_１−６アルキルエステル基であり、
Ｒ^２は、−ＯＨ又は下記式（ＩＩ）で表される基であり、

（式（ＩＩ）中、＊は結合手を示し、Ｘは、ヒドロキシ基及びＣ_１−６アルキル基からなる群より選択される置換基を有していてもよいＣ_１−６アルキレン基である。）
Ｚ^１は、Ｃ_１−１０アルキレン基、又は１〜３個のヘテロ原子を含むヘテロＣ_２−７アルキレン基である。]
Ｃ環は、シクロヘキサン環又はシクロヘキセン環であり、前記シクロヘキサン環及びシクロヘキセン環は、ヒドロキシ基又はオキソ基を有する、請求項１に記載の化合物又はその塩。
下記式（Ｉａ）、（Ｉｂ）、（Ｉｃ）又は（Ｉｄ）で表される化合物又はその塩。
請求項１〜３のいずれか１項に記載の化合物又はその塩を含有する、医薬組成物。
請求項１〜３のいずれか１項に記載の化合物又はその塩と、抗ＨＩＶ抗体と、組み合わせてなる、医薬組成物。
抗ＨＩＶ薬である、請求項４又は５に記載の医薬組成物。