JP2018509138A - Leptinotarsa防除用組成物及びその方法 - Google Patents
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Abstract
Description
ポリヌクレオチドとの接触によるLEPTINOTARSAの侵入の防除
食餌性ポリヌクレオチドを提供することによるLEPTINOTARSAの侵入の防除
食餌性RNAを提供することによるLEPTINOTARSAの侵入の防除
改善されたLEPTINOTARSA種の侵入への耐性を有する植物を提供する方法及びこのように提供される植物、植物部分及び種子
LEPTINOTARSA種を防除するための殺虫性組成物
改善されたLEPTINOTARSA種の侵入への耐性を有する植物を提供する方法及びこのように提供される植物、植物部分及び種子
Leptinotarsa種の防除のための組換え型DNA構造体
トランスジェニックナス科植物細胞
Leptinotarsa種の防除用殺虫性組成物
改善されたLeptinotarsa種の侵入への耐性を有する植物を提供する方法及びこのように提供される植物、植物部分及び種子
植物のLeptinotarsa種の侵入の防除方法
標的遺伝子の選択方法
「タイリング」による有効ポリヌクレオチドの選択
有効なポリヌクレオチドの選択における熱力学的考察
許容されるミスマッチ
中立配列でのサイレンシング要素の組込み
殺虫性二本鎖RNA分子
関連技術
プロモーター
リコンビナーゼ部位
アプタマー
導入遺伝子転写ユニット
イントロン
リボザイム
遺伝子抑圧要素
(a)抑制される遺伝子の少なくとも1つのセグメントに対してアンチセンスである少なくとも1つのアンチセンスDNAセグメントを含むDNA、
(b)抑制される遺伝子の少なくとも1つのセグメントに対してアンチセンスである少なくとも1つのアンチセンスDNAセグメントの複数のコピーを含むDNA、
(c)抑制される遺伝子の少なくとも1つのセグメントである少なくとも1つのセンスDNAセグメントを含むDNA、
(d)抑制される遺伝子の少なくとも1つのセグメントである少なくとも1つのセンスDNAセグメントの複数のコピーを含むDNA、
(e)二本鎖RNAを形成することによって抑制される遺伝子の抑制のためにRNAに転写するDNAであって、少なくとも1つのアンチセンスDNAセグメントを含み、抑制される遺伝子の少なくとも1つのセグメント及び抑制される遺伝子の少なくとも1つである少なくとも1つのセンスDNAセグメントに対してアンチセンスであるDNA、
(f)1本の二本鎖RNAを形成することによって、抑制される遺伝子の抑制のためにRNAに転写するDNAであって、抑制される遺伝子の少なくとも1つのセグメントに対してアンチセンスである複数の連続アンチセンスDNAセグメント及び抑制される遺伝子の少なくとも1つのセグメントである複数の連続センスDNAセグメントを含むDNA、
(g)複数の二本鎖RNAを形成することによって抑制される遺伝子の抑制のためにRNAに転写するDNAであって、抑制される遺伝子の少なくとも1つのセグメントに対してアンチセンスである複数のアンチセンスDNAセグメント及び抑制される遺伝子の少なくとも1つのセグメントである複数のセンスDNAセグメントを含むDNAであって、複数のアンチセンスDNAセグメント及び複数のセンスDNAセグメントが一連の逆方向反復で配置されるDNA、
(h)植物miRNA由来のヌクレオチドを含むDNA、
(i)siRNAのヌクレオチドを含むDNA、
(j)リガンドと結合可能なRNAアプタマーに転写するDNA、及び
(k)リガンドと結合可能なRNAアプタマーに転写するDNA、及び抑制される遺伝子の発現を調節可能な調節RNAに転写するDNAであって、この調節は、調節RNAのコンフォメーションに依存し、調節RNAのコンフォメーションがRNAアプタマーの結合状態によって、アロステリック性の影響を受けるDNA。
転写調節要素
トランスジェニック植物細胞及びトランスジェニック植物の作製及び使用
(a)第1の親植物(例えば、非トランスジェニックまたはトランスジェニック)及びトランスジェニックである第2の親植物の種子を本発明により植えること、
(b)第1の親植物及び第2の親植物の種子を、花を支持する植物に成長させること、
(c)第2の親由来の花粉を第1の親由来の花に授粉すること、及び
(d)受精した花を支持する親植物に産生された種子を収穫すること。
(a)改善された非生物性ストレス耐性、
(b)改善された生物性ストレス耐性、
(c)変性一次代謝組成物、
(d)変性二次代謝組成物、
(e)変性微量栄養元素、カロチノイドまたはビタミン組成物、
(f)改善された収率、
(g)窒素、リン酸塩または他の栄養素を使用するにあたって改善された能力、
(h)変性農学的特性、
(i)改良された成長特性または生殖特性、及び
(j)改善された収穫品質、貯蔵品質または加工品質。
実施例
実施例1:Leptinotarsa cDNAライブラリの生成
実施例2:低コピー標的遺伝子の選択
実施例3:Leptinotarsa標的遺伝子の選択
実施例4:「タイリング」によるポリヌクレオチドトリガーの選択
実施例5
**(+)水処理対照と比較して有意な阻害または死滅率、(−)水処理対照と比較して有意でない阻害または死滅率、NT=(1)トリガーについては試験を行っていない、または(2)以下のいずれも発生:当該試験において、サンプルでは、有意な阻害/死滅がもたらされなかった。及び陽性対照では、有意な阻害/死滅がもたらされなかった。本アッセイで使用した陽性対照は、以前、米国特許明細書第7,943,819号で配列番号:880として開示されているとおり、βコアトマーを標的にし、配列番号:1086のセンス鎖配列を有するdsRNAトリガーであった。
**(+)水処理対照と比較して有意な阻害または死滅率、(−)水処理対照と比較して有意でない阻害または死滅率、NT=(1)トリガーについては試験を行っていない、または(2)以下のいずれも発生:当該試験において、サンプルでは、有意な阻害/死滅がもたらされなかった。及び陽性対照では、有意な阻害/死滅がもたらされなかった。本アッセイで使用した陽性対照は、以前、米国特許明細書第7,943,819号で配列番号:880として開示されているとおり、βコアトマーを標的にし、配列番号:1086のセンス鎖配列を有するdsRNAトリガーであった。
実施例6
「配合物−1」及び「配合物−2」は、ヌル対照群(0.1%Silwet/水)の複製物である。「GFP−1」及び「GFP−2」は、緑色蛍光タンパク質(GFP)を標的にし、配列番号:1115のセンス鎖配列を有する377bpのdsRNAトリガーを用いる陰性対照の複製物である。「n/a」=該当なし。
「配合物−1」及び「配合物−2」は、ヌル対照群(0.1%Silwet/水)の複製物である。「GFP−1」及び「GFP−2」は、緑色蛍光タンパク質(GFP)を標的にし、配列番号:1115のセンス鎖配列を有する377bpのdsRNAトリガーを用いる陰性対照の複製物である。「n/a」=該当なし。
実施例7
**dsRNAトリガーのアンチセンス鎖配列
米国特許明細書第7,943,819号に配列番号:880としてこれまでに開示されているように、配列番号:1086は、βコアトマーを標的にしている平滑末端化dsRNAのセンス鎖配列に対応している。
実施例8:Leptinotarsa decemlineataのRNAi−媒介防除の現場有効性
n.a.、該当なし
ns、有意差なし
*1600ミリリットルの水当たり3ミリリットルの市販の噴霧アジュバントTACTIC(商標)(Loveland Products,Loveland,CO 80538)を含有する配合物に入ったdsRNAトリガー
**液量オンス/エーカ
実施例9
実施例10
Claims (20)
- 植物のLeptinotarsa種の侵入を防除する方法であって、
(a)配列番号:730、配列番号:807、配列番号:1〜725、配列番号:726〜729、配列番号:731〜806、配列番号:808〜830、及び配列番号:1087〜1094、または標的遺伝子から転写されるRNAからなる群から選択されるヌクレオチド配列を有する、前記標的遺伝子の少なくとも21の近接ヌクレオチに相補的なヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドと前記Leptinotarsa種とを接触させること:または、
(b)配列番号:730、配列番号:807、配列番号:1〜725、配列番号:726〜729、配列番号:731〜806、配列番号:808〜830、及び配列番号:1087〜1094、または標的遺伝子から転写されるRNAからなる群から選択されるヌクレオチド配列を有する、前記標的遺伝子の少なくとも21の近接ヌクレオチドに相補的なヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドを前記Leptinotarsa種の食餌に提供すること:または、
(c)配列番号:730、配列番号:807、配列番号:1〜725、配列番号:726〜729、配列番号:731〜806、配列番号:808〜830、及び配列番号:1087〜1094、または標的遺伝子から転写されるRNAからなる群から選択されるヌクレオチド配列を有する前記標的遺伝子に相補的な21の近接ヌクレオチドを含む少なくとも1つのサイレンシング要素を含む少なくとも1つのポリヌクレオチドを幼虫の食餌に提供することによって前記Leptinotarsa種の前記幼虫の死滅または阻害を招くこと:または、
(d)配列番号:730、配列番号:807、配列番号:1〜725、配列番号:726〜729、配列番号:731〜806、配列番号:808〜830、及び配列番号:1087〜1094、または標的遺伝子から転写されるRNAからなる群から選択されるヌクレオチド配列を有する前記標的遺伝子の少なくとも21の近接ヌクレオチドに相補的であるヌクレオチド配列を含む少なくとも1つのポリヌクレオチドを含む組成物を前記植物に局所投与すること:または
(e)有効量の前記ポリヌクレオチドを前記植物上で摂餌しているLeptinotarsa種に摂餌させるような方法で、前記植物に少なくとも1つのポリヌクレオチドを含む組成物を局所投与することであって、配列番号:730、配列番号:807、配列番号:1〜725、配列番号:726〜729、配列番号:731〜806、配列番号:808〜830、及び配列番号:1087〜1094、または標的遺伝子から転写されるRNAからなる群から選択されるヌクレオチド配列を有する前記標的遺伝子に相補的である少なくとも21の近接ヌクレオチドを含む前記ポリヌクレオチドを含む前記組成物を局所投与すること:または
(f)配列番号:730、配列番号:807、配列番号:1〜725、配列番号:726〜729、配列番号:731〜806、配列番号:808〜830、及び配列番号:1087〜1094からなる群から選択される配列を有するDNAの少なくとも21の近接ヌクレオチドに同一であるか、または相補的である少なくとも1つのセグメントを含む少なくとも1つのポリヌクレオチドを前記植物中に発現させること:または、
(g)標的遺伝子は、前記標的遺伝子配列群または前記標的遺伝子から転写されたRNAにおいて同定される前記遺伝子からなる群から選択される、前記標的遺伝子または前記標的遺伝子から転写されたRNAの少なくとも21の近接ヌクレオチドに同一であるか、または相補的である少なくとも1つのセグメントを含む少なくとも1つのポリヌクレオチドを前記植物に提供すること:または、
(h)前記Leptinotarsa種を有効量の二本鎖RNAと接触させることであって、そのうちの1本の鎖は、リボソームタンパク質をコードする遺伝子の少なくとも21の近接ヌクレオチドに相補的であり、RNA干渉が誘導され、死滅が発生する、有効量の二本鎖RNAと接触させること:または
(i)前記標的遺伝子配列群または前記標的遺伝子から転写されたRNAにおいて同定される前記遺伝子からなる群から選択される標的遺伝子の少なくとも21の近接ヌクレオチドに同一であるか、または相補的である少なくとも1つのセグメントを含むポリヌクレオチドと前記Leptinotarsa種とを接触させること:を含む方法。 - 前記ポリヌクレオチドは、二本鎖RNAである、請求項1に記載の方法。
- 前記二本鎖RNAは、化学合成されるか、または微生物中での発現若しくは植物細胞中での発現によって産生される、請求項2に記載の方法。
- 前記二本鎖RNAは、配列番号:989、1049、831、842、849、898、910、925、928、931、932、937、938、940、941、942、943、944、945、947、948、949、950、951、952、955、956、957、958、960、961、964、966、967、968、969、970、971、973、976、978、979、982、983、985、987、988、991、992、994、995、996、997、999、1006、1007、1008、1009、1010、1013、1018、1019、1020、1022、1025、1029、1030、1033、1035、1036、1037、1038、1039、1040、1041、1042、1043、1045、1046、1047、1050、1053、1054、1058、1060、1061、1064、1065、1066、1067、1068、1070、1073、1074、1075、1077、1078、1080、1081、1082、1084、1085、1095、1096、1097、1098、1099、1100、1101、1102、1103、1104、1105、1110、1111、1112、1113、1114、1115、1116、1117、1118、1119、1120、1121、1122、1123、1124、1125、及び1126からなる群から選択される配列を含む鎖を含む、請求項2に記載の方法。
- 前記方法は、標的遺伝子または前記標的遺伝子から転写されるRNAの少なくとも21の近接ヌクレオチドに相補的であるヌクレオチド配列を含む少なくとも1つのポリヌクレオチドを含む組成物を前記植物に局所投与することを含み:前記標的遺伝子は、配列番号:730、配列番号:807、配列番号:1〜725、配列番号:726〜729、配列番号:731〜806、配列番号:808〜830、及び配列番号:1087〜1094からなる群から選択されるヌクレオチド配列を有し;前記組成物は、キャリア剤、界面活性剤、陽イオン性脂質、オルガノシリコーン、オルガノシリコーン界面活性剤、ポリヌクレオチド除草剤分子、非ポリヌクレオチド除草剤分子、非ポリヌクレオチド殺虫剤、毒性緩和剤及び昆虫成長調整剤からなる群から選択される1つ以上の成分を更に含む、請求項1に記載の方法。
- 前記方法は、前記Leptinotarsa種を有効量の二本鎖RNA含有溶液と接触させることを含み、前記二本鎖RNAの少なくとも一本鎖は、リボソームタンパク質または前記遺伝子から転写されるRNAをコードする遺伝子の少なくとも21の近接ヌクレオチドに相補的であり、前記Leptinotarsa種は、Leptinotarsa decemlineataであり、RNA干渉が誘導され、Leptinotarsa decemlineataの死滅が発生し、前記リボソームタンパク質は、リボソームL7タンパク質または配列番号:730によってコードされるタンパク質であるか、または前記二本鎖RNAは、配列番号:989、988、1104または1105からなる群から選択される配列を含む、請求項1に記載の方法。
- 前記溶液は、オルガノシリコーン界面活性剤または陽イオン性脂質からなる群から選択される1つ以上の成分を更に含む、請求項6に記載の方法。
- 前記方法は、有効量の前記ポリヌクレオチドを前記植物上で摂餌しているLeptinotarsa種に摂餌させる方法で、前記植物に少なくとも1つのポリヌクレオチドを含む組成物を局所投与することを含み、前記ポリヌクレオチドは、配列番号:730、配列番号:807、配列番号:1〜725、配列番号:726〜729、配列番号:731〜806、配列番号:808〜830、及び配列番号:1087〜1094、または前記標的遺伝子から転写されるRNAからなる群から選択されるヌクレオチド配列を有する標的遺伝子の少なくとも21の近接ヌクレオチドに相補的であるヌクレオチド配列を含み、前記Leptinotarsa種は、Leptinotarsa decemlineataであり、前記標的遺伝子は配列番号:730の配列を有するか、または、前記ポリヌクレオチドは、配列番号:989、988、1104または1105からなる群から選択される配列を有する鎖を有する二本鎖RNAである、請求項1に記載の方法。
- 前記Leptinotarsa種は、Leptinotarsa behrensi、Leptinotarsa collinsi、Leptinotarsa decemlineata(Colorado potato beetle)、Leptinotarsa defecta、Leptinotarsa haldemani(Haldeman’s green potato beetle)、Leptinotarsa heydeni、Leptinotarsa juncta(false potato beetle)、Leptinotarsa lineolata(burrobrush leaf beetle)、Leptinotarsa peninsularis、Leptinotarsa rubiginosa、Leptinotarsa texana、Leptinotarsa tlascalana、Leptinotarsa tumamoca、及びLeptinotarsa typographicaからなる群から選択される、請求項1に記載の方法。
- 請求項1に記載の方法によって提供される、Leptinotarsa種の侵入に対する改善された耐性を有する植物、または果実、種子、若しくは前記植物の伝播可能部分。
- 前記植物は、ジャガイモ、トマト及びナスからなる群から選択される、請求項10に記載の植物。
- Leptinotarsa種を防除するための殺虫性組成物であって、前記殺虫性組成物が、
(a)配列番号:730、配列番号:807、配列番号:1〜725、配列番号:726〜729、配列番号:731〜806、配列番号:808〜830、及び配列番号:1087〜1094、または前記標的遺伝子から転写されるRNAからなる群から選択されるヌクレオチド配列を有する標的遺伝子に相補的である少なくとも21の近接ヌクレオチドを含む殺虫性有効量のポリヌクレオチド、または、
(b)標的遺伝子または前記標的遺伝子から転写されるRNAの少なくとも21の近接ヌクレオチドに相補的である少なくとも1つの要素を含み、前記標的遺伝子は、配列番号:730、配列番号:807、配列番号:1〜725、配列番号:726〜729、配列番号:731〜806、配列番号:808〜830、及び配列番号:1087〜1094からなる群から選択されるヌクレオチド配列を有する殺虫性有効量の少なくとも1つのポリヌクレオチド、または、
(c)配列番号:730、配列番号:807、配列番号:1〜725、配列番号:726~729、配列番号:731〜806、配列番号:808〜830、及び配列番号:1087〜1094、または前記標的遺伝子から転写されるRNA、からなる群から選択されるヌクレオチド配列を有する標的遺伝子の少なくとも21の近接ヌクレオチドと同一であるか、または相補的である少なくとも1つのセグメントを含む、殺虫性有効量の少なくとも1つのRNA、または
(d)前記Leptinotarsa種によって摂餌または接触されると、Leptinotarsa種において死滅または成長の阻害を引き起こすRNA分子であって、配列番号:730、配列番号:807、配列番号:1〜725、配列番号:726〜729、配列番号:731〜806、配列番号:808〜830、及び配列番号:1087〜1094、または前記標的遺伝子から転写されるRNAからなる群から選択されるヌクレオチド配列を有する標的遺伝子に相補的である少なくとも21の近接ヌクレオチドを含む前記RNA分子、または
(e)前記Leptinotarsa種によって摂餌または接触されると、Leptinotarsa種において死滅または成長の阻害を引き起こす殺虫性二本鎖RNA分子であって、前記殺虫性二本鎖RNA分子の少なくとも1本の鎖は、標的遺伝子または前記標的遺伝子から転写されたRNAに相補的である21の近接ヌクレオチドを含み、前記標的遺伝子は、配列番号:730、配列番号:807、配列番号:1〜725、配列番号:726〜729、配列番号:731〜806、配列番号:808〜830、及び配列番号:1087〜1094からなる群から選択される配列を有する殺虫性二本鎖RNA分子、または
(f)配列番号:989、1049、831、842、849、898、910、925、928、931、932、937、938、940、941、942、943、944、945、947、948、949、950、951、952、955、956、957、958、960、961、964、966、967、968、969、970、971、973、976、978、979、982、983、985、987、988、991、992、994、995、996、997、999、1006、1007、1008、1009、1010、1013、1018、1019、1020、1022、1025、1029、1030、1033、1035、1036、1037、1038、1039、1040、1041、1042、1043、1045、1046、1047、1050、1053、1054、1058、1060、1061、1064、1065、1066、1067、1068、1070、1073、1074、1075、1077、1078、1080、1081、1082、1084、1085、1095、1096、1097、1098、1099、1100、1101、1102、1103、1104、1105、1110、1111、1112、1113、1114、1115、1116、1117、1118、1119、1120、1121、1122、1123、1124、1125、及び1126からなる群から選択される配列を含む殺虫性有効量の少なくとも1つの二本鎖RNAを含む、前記殺虫性組成物。 - 前記殺虫性組成物は、固体、液体、粉体、懸濁液、乳化剤、噴霧剤、封入形態、マイクロビーズ、キャリア微粒子、フィルム、基質、または種子処理剤、土壌潅水、植付可能配合物、及びインファロー配合物からなる群から選択される少なくとも1つの形態である、請求項12に記載の殺虫性組成物。
- ポリヌクレオチド含有組成物は、キャリア剤、界面活性剤、陽イオン性脂質、オルガノシリコーン、オルガノシリコーン界面活性剤、ポリヌクレオチド除草剤分子、非ポリヌクレオチド除草剤分子、非ポリヌクレオチド殺虫剤、毒性緩和剤及び昆虫成長調整剤からなる群から選択される少なくとも1つの成分を更に含む、請求項12に記載の殺虫性組成物。
- 前記殺虫性組成物は、前記Leptinotarsa種によって摂取されるか、またはLeptinotarsa種が接触するときにLeptinotarsa種の死滅または成長の阻害を招く殺虫性二本鎖RNA分子を含み、前記殺虫性二本鎖RNA分子は、配列番号:730、配列番号:807、配列番号:1〜725、配列番号:726〜729、配列番号:731〜806、配列番号:808〜830、及び配列番号:1087〜1094、または前記DNAから転写されるRNAからなる群から選択される配列を有するDNAの21の近接ヌクレオチドと相補的である少なくとも1つのセグメントを含み、前記二本鎖RNA分子は、長さが少なくとも50塩基対であるか、または長さ約100〜約500塩基対である、請求項12に記載の殺虫性組成。
- 異種プロモーターを含む組換え型DNA構造体であって、前記異種プロモーターは、
(a)配列番号:730、配列番号:807、配列番号:1〜725、配列番号:726〜729、配列番号:731〜806、配列番号:808〜830、及び配列番号:1087〜1094、または前記標的遺伝子から転写されるRNAからなる群から選択される配列を有する標的遺伝子の少なくとも21の近接ヌクレオチドに相補的であるヌクレオチド配列を含むDNA、または、
(b)または配列番号:730、配列番号:807、配列番号:1〜725、配列番号:726〜729、配列番号:731〜806、配列番号:808〜830、及び配列番号:1087〜1094、またはこれらのDNA補体からなる群から選択される配列を有するDNAの同等の長さのフラグメントに対して100%同一性を有する21以上の近接ヌクレオチドを含むDNA、または、
(c)標的遺伝子または前記標的遺伝子から転写されるRNAの少なくとも21の近接ヌクレオチドに相補的である少なくとも1つのサイレンシング要素をコードしたDNAであって、前記標的遺伝子は、配列番号:730、配列番号:807、配列番号:1〜725、配列番号:726~729、配列番号:731〜806、配列番号:808〜830、及び配列番号:1087〜1094の群から選択される配列を有するDNA、または、
(d)前記標的遺伝子配列群または前記標的遺伝子から転写されたRNAにおける前記遺伝子からなる群から選択される標的遺伝子に相補的である少なくとも21の近接ヌクレオチドを含む少なくとも1つのサイレンシング要素をコードするDNA、または
(e)配列番号:989、1049、831、842、849、898、910、925、928、931、932、937、938、940、941、942、943、944、945、947、948、949、950、951、952、955、956、957、958、960、961、964、966、967、968、969、970、971、973、976、978、979、982、983、985、987、988、991、992、994、995、996、997、999、1006、1007、1008、1009、1010、1013、1018、1019、1020、1022、1025、1029、1030、1033、1035、1036、1037、1038、1039、1040、1041、1042、1043、1045、1046、1047、1050、1053、1054、1058、1060、1061、1064、1065、1066、1067、1068、1070、1073、1074、1075、1077、1078、1080、1081、1082、1084、1085、1095、1096、1097、1098、1099、1100、1101、1102、1103、1104、1105、1110、1111、1112、1113、1114、1115、1116、1117、1118、1119、1120、1121、1122、1123、1124、1125、及び1126またはこれらの補体からなる群から選択されるヌクレオチド配列、またはLeptinotarsa種若しくはTribolium種のオルソロガスヌクレオチド配列であって、配列番号:989、1049、831、842、849、898、910、925、928、931、932、937、938、940、941、942、943、944、945、947、948、949、950、951、952、955、956、957、958、960、961、964、966、967、968、969、970、971、973、976、978、979、982、983、985、987、988、991、992、994、995、996、997、999、1006、1007、1008、1009、1010、1013、1018、1019、1020、1022、1025、1029、1030、1033、1035、1036、1037、1038、1039、1040、1041、1042、1043、1045、1046、1047、1050、1053、1054、1058、1060、1061、1064、1065、1066、1067、1068、1070、1073、1074、1075、1077、1078、1080、1081、1082、1084、1085、1095、1096、1097、1098、1099、1100、1101、1102、1103、1104、1105、1110、1111、1112、1113、1114、1115、1116、1117、1118、1119、1120、1121、1122、1123、1124、1125、及び1126からなる群から選択されるヌクレオチド配列と少なくとも95%の配列同一性を有し、前記配列同一率が同一長さで算出される前記オルソロガスヌクレオチド配列に相補的である少なくとも21の近接ヌクレオチドを含むRNAをコードするDNA、または、
(f)RNAをコードするDNAであって、前記DNAは少なくとも1つの二本鎖RNA領域を含み、そのうちの少なくとも1本の鎖は、配列番号:989、1049、831、842、849、898、910、925、928、931、932、937、938、940、941、942、943、944、945、947、948、949、950、951、952、955、956、957、958、960、961、964、966、967、968、969、970、971、973、976、978、979、982、983、985、987、988、991、992、994、995、996、997、999、1006、1007、1008、1009、1010、1013、1018、1019、1020、1022、1025、1029、1030、1033、1035、1036、1037、1038、1039、1040、1041、1042、1043、1045、1046、1047、1050、1053、1054、1058、1060、1061、1064、1065、1066、1067、1068、1070、1073、1074、1075、1077、1078、1080、1081、1082、1084、1085、1095、1096、1097、1098、1099、1100、1101、1102、1103、1104、1105、1110、1111、1112、1113、1114、1115、1116、1117、1118、1119、1120、1121、1122、1123、1124、1125、及び1126またはこれらの補体からなる群から選択されるヌクレオチド配列、またはLeptinotarsa種若しくはTribolium種のオルソロガスヌクレオチド配列であって、配列番号:989、1049、831、842、849、898、910、925、928、931、932、937、938、940、941、942、943、944、945、947、948、949、950、951、952、955、956、957、958、960、961、964、966、967、968、969、970、971、973、976、978、979、982、983、985、987、988、991、992、994、995、996、997、999、1006、1007、1008、1009、1010、1013、1018、1019、1020、1022、1025、1029、1030、1033、1035、1036、1037、1038、1039、1040、1041、1042、1043、1045、1046、1047、1050、1053、1054、1058、1060、1061、1064、1065、1066、1067、1068、1070、1073、1074、1075、1077、1078、1080、1081、1082、1084、1085、1095、1096、1097、1098、1099、1100、1101、1102、1103、1104、1105、1110、1111、1112、1113、1114、1115、1116、1117、1118、1119、1120、1121、1122、1123、1124、1125、及び1126からなる群から選択されるヌクレオチド配列を有する少なくとも95%の配列同一性を有し、前記配列同一率が同一長さで算出される前記オルソロガスヌクレオチド配列に相補的である少なくとも21の近接ヌクレオチドを含む前記DNA、または、
(g)配列番号:989、1049、831、842、849、898、910、925、928、931、932、937、938、940、941、942、943、944、945、947、948、949、950、951、952、955、956、957、958、960、961、964、966、967、968、969、970、971、973、976、978、979、982、983、985、987、988、991、992、994、995、996、997、999、1006、1007、1008、1009、1010、1013、1018、1019、1020、1022、1025、1029、1030、1033、1035、1036、1037、1038、1039、1040、1041、1042、1043、1045、1046、1047、1050、1053、1054、1058、1060、1061、1064、1065、1066、1067、1068、1070、1073、1074、1075、1077、1078、1080、1081、1082、1084、1085、1095、1096、1097、1098、1099、1100、1101、1102、1103、1104、1105、1110、1111、1112、1113、1114、1115、1116、1117、1118、1119、1120、1121、1122、1123、1124、1125、及び1126またはこれらの補体からなる群から選択されるヌクレオチド配列を含むRNAをコードするDNA、に操作可能に連結される、組換え型DNA構造体。 - 植物染色体若しくは色素体若しくは組換え型植物ウイルスベクターまたは請求項16に記載の組換え型DNA構造体を含む組換え型バキュロウイルスベクター。
- そのゲノム内に請求項16に記載の前記組換え型DNA構造体を有するトランスジェニックナス科植物細胞。
- 前記トランスジェニックナス科植物細胞は、コードするそのゲノム内にパタチン、植物レクチン、植物エクジステロイド、植物エクジステロイド、Bacillus thuringiensis殺虫タンパク質、Xenorhabdus殺虫タンパク質、Photorhabdus殺虫タンパク質、Bacillus laterosporous殺虫タンパク質、及びBacillus sphaericus殺虫タンパク質からなる群から選択される少なくとも1つの殺虫剤をコードするDNAを更に有する、請求項18に記載のトランスジェニックナス科植物細胞。
- 請求項18に記載のトランスジェニックナス科植物細胞を含むトランスジェニックナス科植物、果実、種子または前記トランスジェニックナス科植物の伝播部分。
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