JP2017526364A - 菌糸体の液体組織培養物の製造及び使用のための方法 - Google Patents
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[0005]米国特許第3086320号は、Morchella esculenta、Helvella gigas、Coprinus comatus、及びAgaricus campestrisの液内菌糸体の風味を、“エネルギーの供給源としての炭水化物、窒素の供給源及び適したミネラルを水中に含有しなければならず”、並びにミルクを含んでなる処方を含む培地中で、株を増殖することによって改善するための方法を開示し、これは、適当に使用された場合、菌糸体の収率及び風味を改善することが主張されている。
[0017]各種の改変及び付加を、本発明の範囲から逸脱することなく、考察された態様に対して行うことができる。例えば、先に記載した態様は、特定の特徴に対して言及しているが、本発明の範囲は、更に、異なった特徴の組合せを有する態様、及び先に記載した特徴の全てを含まない態様を含む。
[0038]一つの態様において、最小培地液体組織培養物は、短い対数時間及び二次代謝の利益を得るように、大体積の最大培地で補充される。
[0055]本発明は、−20℃で維持することができる50%(容量/容量)グリセロールに調節された液体組織原液の形態で、製造場所に播種源を提示する手段によって、ヒトの食品として世界中で液内菌糸体を培養する有効な手段を提案する。少なくとも試験された両方の株(G.lucidum及びC.sinensis)に対するこの培養物は、より長く−20℃の貯蔵庫に保存されるほど、再生時に活発に増加する現象を示し、そして増殖の前に温める必要はない。
[0058]ROで濾過された水性抽出物を、1ポンドの有機の/新鮮なジャガイモ及びニンジン、並びに1Lの有機果実ジュースから製造して、1Lの培養物を6つの4Lエルレンマイヤーフラスコ中に作製した。これらの培養物を、0〜100%の範囲のステビア/茶水性抽出物から製造した。フラスコをオートクレーブにかけ、そして冷却した。冷却した時点で、C.sinensis WC859の対数期のペトリ皿培養物を、フラスコに増殖させ、そしてその後撹拌した(1/2インチ旋回半径で60RPM)。十分に発育した液体組織培養物(対数期で増殖)が、約3〜4日で観察された。20gのステビア葉を食品グレードの容器に入れ、そして約100mLの先に記載したような対数期の液体培養物を、この容器に加えた。容器に蓋をし、約75°Fで約6時間インキュベートした。インキュベーション後、ステビア葉を軽く低温殺菌し、そして乾燥させた。5gの処理されたステビア葉をコップ1杯の水に浸し、濾過し、そしてランダム化二重盲検で、未処理のステビア葉と共に5人のテスターによって味見した。テスターは、処理されたステビアが、未処理の対照ステビアと比較して増加した甘味を有し、そして軽減された苦味/甘草の後味を有することを見出した。
[0059]ROで濾過された水性抽出物を、1ポンドの有機の/新鮮なジャガイモ及びニンジン、並びに1Lの有機果実ジュースから製造して、4Lエルレンマイヤーフラスコ中の6つの1Lの培養物を作製した。これらの培養物を0〜100%の茶の水性抽出物から製造した。フラスコをオートクレーブにかけ、そして冷却した。冷却した時点で、C.sinensis WC859株の対数期のペトリ皿培養物を、フラスコに増殖させ、そしてその後撹拌した(1/2インチ旋回半径で60RPM)。十分にコロニー化した対数期の液体組織培養物が約3〜4日で観察された。およそ20gの緑茶葉を、食品グレードの容器に入れ、そして約100mLの先に記載したような対数期培養物を、この容器に加えた。容器に蓋をし、約75°Fで約6時間インキュベートした。インキュベーションが終了した後、味試験により、緑茶葉を軽く濯ぎ、穏やかに低温殺菌し、そして乾燥させた。5gの処理された緑茶葉を乾燥させ、そしてコップ1杯の水で煎じ、濾過し、そしてランダム化二重盲検で、未処理の対照の緑茶葉と共に5人のテスターによって味見した。テスターは、処理された緑茶葉が、対照の緑茶葉と比較して減少した苦味を有することを見出した。
[0060]清潔な1.5Lの柄付きガラス瓶を、17g/Lの寒天、8g/Lの有機ジャガイモデンプン、0.8g/Lの有機ニンジン粉、及び20mL/Lの有機マンゴピューレからなる1Lの培地で満たした。柄付きガラス瓶の蓋をゆるくねじって留め、そしてスズホイルで覆った。本発明者等は、注ぎを容易にするその柄のために、これらの柄付きガラス瓶の使用を推奨する。ビンをオートクレーブに入れ、そして2.33時間の液体サイクルで滅菌した。サイクルが完了した時点で、ビンを層流の滅菌フードに急いで入れて、これに触ることができるまで冷却し、これは約1.3時間を要した。この時点で、ビンの内容物を120個のペトリ皿に注意深く注いだ。プレートをフード中で一晩冷却した。
[0064]1.5Lの、RO水中の8g/Lの有機ジャガイモデンプン及び0.8g/Lの有機ニンジン粉で満たされた4Lのフラスコを滅菌し、そして2週間経ったP1 C.sinensis培養物で播種した。7日間室温の60RPM(1インチ旋回半径)で培養した後、培養物を三枚重ねたコーヒーフィルターを通して濾過し、165°Fで40分間低温殺菌し、そして140°Fの小バッチデシケーターに一晩置いた。翌日、乾燥した物質を、4.5g/Lの収率で全体で6.75gを収集してブレンドした。5gの回収した物質を、1LのRO水に注ぎ、そして15分間間欠的に振盪した。この培養原液から、53.34mLの溶液を、1.6LのRO水中に溶解した1kgの97%レバウジオシドAを含有するもう一つの溶液に加えた。この溶液を徹底的に混合し、そして小バッチデシケーターで一晩乾燥し、そして得られた物質をブレンドして清潔なジップロックバッグ中に包装し、2,667ppmの収集された濾液の固体の濃度を有していた。150mgのこの混合物を500mLのRO水に加えて、0.8ppmのC.sinensisの上清固体に対して300ppmの97%レバウジオシドAの溶液を作製した。対照に対して味の試験をした場合、C.sinensis上清固体を含有するステビオールグリコシド混合物の後味が、対照の300ppmの97%レバウジオシドA溶液と比較して検出不可能であることが全ての3人の発明者にとって明白であった。
[0065]1.5Lの、RO水中の8g/Lの有機ジャガイモデンプン及び0.8g/Lの有機ニンジン粉で満たされた4Lのフラスコを滅菌し、そして2週間経ったP1 C.sinensis培養物で播種した。15日間室温の60RPM(1インチ旋回半径)で培養した後、培養物を三枚重ねたコーヒーフィルターを通して濾過し、165°Fで40分間低温殺菌し、そして140°Fの小バッチデシケーターに一晩置いた。翌日、乾燥した物質を、4.1g/Lの収率で全体で6.15g収集し、そしてブレンドした。5gの回収した物質を、1LのRO水に注ぎ、そして15分間間欠的に振盪した。この培養原液から、53.34mLの溶液を、1.6LのRO水中に溶解した1kgの97%レバウジオシドAを含有するもう一つの溶液に加えた。この溶液を徹底的に混合し、そして小バッチデシケーターで一晩乾燥し、そして得られた物質をブレンドして清潔なジップロックバッグ中に包装し、2,667ppmの収集された濾液の固体の濃度を有していた。150mgのこの混合物を500mLのRO水に加えて、0.8ppmのC.sinensis上清固体に対して300ppmの97%レバウジオシドAの溶液を作製した。対照に対して味の試験をした場合、C.sinensis上清固体を含有するステビオールグリコシド混合物の後味が、対照の300ppmの97%レバウジオシドA溶液と比較して検出不可能であることが全ての3人の発明者にとって明白であった。
[0066]1.5Lの、RO水中の8g/Lの有機ジャガイモデンプン及び0.8g/Lの有機ニンジン粉で満たされた4Lのフラスコを滅菌し、そして2週間経ったP1 C.sinensis培養物で播種した。35日間室温の60RPM(1インチ旋回半径)で培養した後、培養物を三枚重ねたコーヒーフィルターを通して濾過し、165°Fで50分間低温殺菌し、そして140°Fの小バッチデシケーターに一晩置いた。翌日、乾燥した物質を、5.5g/Lの収率で全体で8.25gを収集してブレンドした。5gの回収した物質を、1LのRO水に注ぎ、そして15分間間欠的に振盪し、そして中火に調節したホットプレート上で15分間加熱した。この培養原液から、53.34mLの溶液を、1.6LのRO水中に溶解した1kgの97%レバウジオシドAを含有するもう一つの溶液に加えた。この溶液を徹底的に混合し、そして小バッチデシケーターで一晩乾燥し、そして得られた物質をブレンドして清潔なジップロックバッグ中に包装し、2,667ppmの収集された濾液の固体の濃度を有していた。150mgのこの混合物を500mLのRO水に加えて、0.8ppmのC.sinensis上清固体に対して300ppmの97%レバウジオシドAの溶液を作製した。対照に対して味の試験をした場合、C.sinensis上清固体を含有するステビオールグリコシド混合物の後味が、対照の300ppmの97%レバウジオシドA溶液と比較して検出不可能であることが全ての3人の発明者にとって明白であった。
[0067]1.5Lの、RO水中の8g/Lの有機ジャガイモデンプン及び0.8g/Lの有機ニンジン粉で満たされた4Lのフラスコを滅菌し、そして2週間経ったP1 C.sinensis培養物で播種した。7日間室温の60RPM(1インチ旋回半径)で培養した後、培養物をチーズクロスを通して濾過し、160°Fで50分間低温殺菌し、そして130°Fの小バッチデシケーターに一晩置いた。翌日、乾燥した物質を、4.4g/Lの収率で全体で6.6gを収集してブレンドした。5gの回収した物質を、1LのRO水に注ぎ、そして15分間間欠的に振盪した。この培養原液から、53.34mLの溶液を、1.6LのRO水中に溶解した1kgの97%レバウジオシドAを含有するもう一つの溶液に加えた。この溶液を徹底的に混合し、そして小バッチデシケーターで一晩乾燥し、そして得られた物質をブレンドして清潔なジップロックバッグ中に包装し、2,667ppmの収集された濾液の固体の濃度を有していた。150mgのこの混合物を500mLのRO水中に加えて、0.8ppmのC.sinensis上清固体に対して300ppmの97%レバウジオシドAの溶液を作製した。対照に対して味の試験をした場合、C.sinensis上清固体を含有するステビオールグリコシド混合物の後味が、対照の300ppmの97%レバウジオシドA溶液と比較して検出不可能であることが全ての3人の発明者にとって明白であった。
[0068]1.5Lの、RO水中の8g/Lの有機ジャガイモデンプン及び0.8g/Lの有機ニンジン粉で満たされた4Lのフラスコを滅菌し、そして2週間経ったP1 C.sinensis培養物で播種した。10日間室温の60RPM(1インチ旋回半径)で培養した後、培養物を三枚重ねたコーヒーフィルターを通して濾過し、170°Fで40分間低温殺菌し、そして140°Fの小バッチデシケーターに一晩置いた。翌日、乾燥した物質を、4.6g/Lの収率で全体で6.9gを収集してブレンドした。5gの回収した物質を、1LのRO水に注ぎ、そして15分間間欠的に振盪した。この培養原液から、40.00mLの溶液を、1kgの97%レバウジオシドAを含有する蒸留水のもう一つの1.6Lの溶液に加えた。この溶液を徹底的に混合し、そして小バッチデシケーターで一晩乾燥し、そして得られた物質をブレンドして清潔なジップロックバッグ中に包装し、2,000ppmの収集された濾液の固体の濃度を有していた。150mgのこの混合物を500mLのRO水に加えて、0.6ppmのC.sinensis上清固体に対して300ppmの97%レバウジオシドAの溶液を作製した。対照に対して味の試験をした場合、C.sinensis上清固体を含有するステビオールグリコシド混合物の後味が、対照の300ppmの97%レバウジオシドA溶液と比較して検出不可能であることが全ての3人の発明者にとって明白であった。このステビオールグリコシドの混合物は、0.8ppmの上清固体を含有する混合物と非常に類似する味がした。
[0069]1.5Lの、RO水中の8g/Lの有機ジャガイモデンプン及び0.8g/Lの有機ニンジン粉で満たされた4Lのフラスコを滅菌し、そして10日経ったP1 C.sinensis培養物で播種した。4日間室温の60RPM(1インチ旋回半径)で培養した後、培養物をチーズクロスを通して濾過し、そして140°Fの小バッチデシケーターに一晩置いた。翌日、乾燥した物質を、4.5g/Lの収率で全体で6.75gを収集してブレンドした。5gの回収した物質を、1LのRO水に注ぎ、そして15分間間欠的に振盪した。この培養原液から、53.34mLの溶液を、1.6LのRO水中に溶解した1kgの97%レバウジオシドAを含有する蒸留水のもう一つの溶液に加えた。この溶液を徹底的に混合し、そして小バッチデシケーターで一晩乾燥し、そして得られた物質をブレンドして清潔なジップロックバッグ中に包装し、2,667ppmの収集された濾液の固体の濃度を有していた。150mgのこの混合物を500mLのRO水中に加えて、0.8ppmのC.sinensis上清固体に対して300ppmの97%レバウジオシドAの溶液を作製した。対照に対して味の試験をした場合、C.sinensis上清固体を含有するステビオールグリコシド混合物の後味が、対照の300ppmの97%レバウジオシドA溶液と比較して検出不可能であることが全ての3人の発明者にとって明白であった。
[0070]1.5Lの、RO水中の8g/Lの有機ジャガイモデンプン及び0.8g/Lの有機ニンジン粉で満たされた4Lのフラスコを滅菌し、そして2週間経ったP1 C.sinensis培養物で播種した。7日間室温の60RPM(1インチ旋回半径)で培養した後、培養物を三枚重ねたコーヒーフィルターを通して濾過し、そして140°Fの小バッチデシケーターに一晩置いた。翌日、乾燥した物質を、4.5g/Lの収率で全体で6.75gを収集してブレンドした。5gの回収した物質を、1LのRO水に注ぎ、そして15分間間欠的に振盪した。この培養原液から、53.34mLの溶液を、1.6LのRO水中に溶解された1kgの97%レバウジオシドAを含有するもう一つの溶液に加えた。この溶液を徹底的に混合し、そして小バッチデシケーターで一晩乾燥し、そして得られた物質をブレンドして清潔なジップロックバッグ中に包装し、2,667ppmの収集された濾液の固体の濃度を有していた。150mgのこの混合物を500mLのRO水に加えて、0.8ppmのC.sinensis上清固体に対して300ppmの60%レバウジオシドAの溶液を作製した。対照に対して味の試験をした場合、C.sinensis上清固体を含有するステビオールグリコシド混合物の後味が、対照の300ppmの60%レバウジオシドA溶液と比較して検出不可能であることが全ての3人の発明者にとって明白であった。
[0071]1.5Lの、RO水中の8g/Lの有機ジャガイモデンプン及び0.8g/Lの有機ニンジン粉で満たされた4Lのフラスコを滅菌し、そして20日経ったP1 C.sinensis培養物で播種した。7日間室温の60RPM(1インチ旋回半径)で培養した後、培養物を0.2μmの真空フィルターを通して濾過し、そして150°Fの小バッチデシケーターに一晩置いた。翌日、乾燥した物質を、4.3g/Lの収率で全体で6.45gを収集してブレンドした。5gの回収した物質を、1LのRO水に注ぎ、そして15分間間欠的に振盪した。この培養原液から、53.34mLの溶液を、1.6LのRO水中に溶解した1kgの60%レバウジオシドAを含有するもう一つの溶液に加えた。この溶液を徹底的に混合し、そして小バッチデシケーターで一晩乾燥し、そして得られた物質をブレンドして清潔なジップロックバッグ中に包装し、2,667ppmの収集された濾液の固体の濃度を有していた。150mgのこの混合物を500mLのRO水中に加えて、0.8ppmのC.sinensis上清固体に対して300ppmの60%レバウジオシドAの溶液を作製した。対照に対して味の試験をした場合、C.sinensis上清固体を含有するステビオールグリコシド混合物の後味が、対照の300ppmの60%レバウジオシドA溶液と比較して検出不可能であることが全ての3人の発明者にとって明白であった。
[0072]実施例4の方法を使用する60%レバウジオシドAの試料に対する苦味遮断活性に関する培地の影響を決定するための、以下に示すのように培地を変化させた場合の、16種の異なった培地処方。以下の表1は、試験された培地及び感覚の反応の要約を示す。
[0074]開示される苦味遮断物質の分子組成が、8g/Lの有機ジャガイモデンプン粉及び0.8g/Lの有機ニンジン粉のRO水培地中で増殖された200LのC.sinensis液内培養物の二つの40Lのバッチから製造された試料から決定された。培養物は、合計230gの粉末の苦味遮断物質(約2.9g/Lの収率)のために、41及び48日目に回収され、これは一緒に混合された。150gの試料を、第三者の組成分析のために使用した。技術的に二重に採取されたデータは、このバッチの苦味遮断物質が86.9%の炭水化物であることを示す。この物質は、更に濃度の下降する順序で、水、灰分、脂肪及びタンパク質で構成される。食品供給に対して異質の分子は、この研究では検出されなかった。これらのデータは、表2に要約され、一方、更に詳細な情報は、後続の表に示される。キロカロリー(食品のラベルでは通常‘カロリー’と呼ばれる)も同様に列挙されている。苦味遮断物質は、典型的には、培養の8〜12日目に加工されるが、しかしこの方法は、産物の最も濃縮された形態、即ち最も転換された培地の理解を明らかにするために採用された。
[0081]C.sinensis上清粉末(苦味遮断物質)を、実施例4に概略記載した方法によって製造し、そしてppm基準で食品産物と共に使用した。
[0017]各種の改変及び付加を、本発明の範囲から逸脱することなく、考察された態様に対して行うことができる。例えば、先に記載した態様は、特定の特徴に対して言及しているが、本発明の範囲は、更に、異なった特徴の組合せを有する態様、及び先に記載した特徴の全てを含まない態様を含む。
すなわち、本出願は以下の発明の開示を包含する。
[1]液内菌糸体液体組織培養物を培地中で培養し;
前記液内菌糸体液体組織培養物の上清流体を収集し;そして
前記収集した上清流体を、食品産物の味を向上するために十分な量で食品産物に加えること;
を含んでなる、食品産物の味を向上するための方法。
[2]前記液内菌糸体液体組織培養物を培養するために使用される真菌が、次の群:Ganoderma lucidum、Ganoderma applanatum、Cordyceps sinensis、Cordyceps militaris、Hericium erinaceus、Lentinula edodes、Agaricus blazei、Grifola frondosa、Auricularia auricula、Flammulina velutipes、Trametes versicolor、Morchella spp.、Inonotus obliquus、Laricifomes officinalis、 Fomes fomentarius、Fomes officinalis、Fomes fomitopisis、Tricholoma matsutake、Boletus edulis、Clitocybe nuda、Clitocybe saeva、Plearotus spp.、Tremella fuciformis、Piptoporus betulinis、Polyporus umbellatus、Pholiota nameko、Volvariella volvacea、Hypsizygus marmoreus、Stropharia rugosoannulata、及びLaetiporus sulfureusから選択される、[1]に記載の方法。
[3]前記真菌が、Cordyceps sinensisである、[1]に記載の方法。
[4]前記味の向上が:食品産物の、苦味を減少すること、好ましくない後味を減少すること、及び渋味を減少することからなる群から選択される、[1]に記載の方法。
[5]前記培地が、ヒトの食品グレードの培地である[3]に記載の方法。
[6]前記食品産物が:食品成分、栄養補助食品、食品添加物、栄養補給食品、及び医薬からなる群から選択される、[1]に記載の方法。
[7]前記収集された上清流体が低温殺菌される、[1]に記載の方法。
[8]前記収集された上清流体が乾燥される、[1]に記載の方法。
[9]前記収集された上清流体が滅菌される、[1]に記載の方法。
[10]前記菌糸体液体組織培養物が濾過される、[1]に記載の方法。
[11]前記菌糸体液体組織培養物が遠心される、[1]に記載の方法。
[12]前記培地が動物グレードであり、そして食品産物が動物の飼料である、[1]に記載の方法。
[13]前記培養物が、浮遊培養物であり、そして上清流体を収集する前にブレンドされる、[1]に記載の方法。
[14]前記食品産物が乾燥される、[1]に記載の方法。
[15]前記培養工程が、1日〜60日間行われる、[1]に記載の方法。
[16]前記食品産物がステビアの植物体の部分、ステビア煎じ汁、又は精製されたステビア抽出物である、[1]に記載の方法。
[17]前記食品産物が、ステビアの植物体の部分、ステビオールグリコシド、アスパルテーム、アセスルファム−K、スクラロース、炭水化物、羅漢果、カカオ、カカオ濃縮液、茶、チョウセンニンジン、エンドウマメタンパク質、糖アルコール、コーヒー、クランベリー、グレープフルーツ、ザクロ、ココナツ、ワイン、ビール、リカー及びスピリッツからなる群から選択される、[1]に記載の方法。
[18]C.sinensisを含んでなる液内菌糸体液体組織培養物を、培地中で約4〜約7日間培養し;
前記液内菌糸体液体組織培養物の上清流体を濾過によって収集し;
収集した前記上清流体を乾燥し;そして
収集し、乾燥した上清流体を食品産物の苦味を減少するために十分な量で食品産物に添加すること;
を含んでなる、食品産物の苦味を減少するための方法。
[19]前記食品産物が、ステビアの植物体の部分又はステビオールグリコシドである、[18]に記載の方法。
Claims (19)
- 液内菌糸体液体組織培養物を培地中で培養し;
前記液内菌糸体液体組織培養物の上清流体を収集し;そして
前記収集した上清流体を、食品産物の味を向上するために十分な量で食品産物に加えること;
を含んでなる、食品産物の味を向上するための方法。 - 前記液内菌糸体液体組織培養物を培養するために使用される真菌が、次の群:Ganoderma lucidum、Ganoderma applanatum、Cordyceps sinensis、Cordyceps militaris、Hericium erinaceus、Lentinula edodes、Agaricus blazei、Grifola frondosa、Auricularia auricula、Flammulina velutipes、Trametes versicolor、Morchella spp.、Inonotus obliquus、Laricifomes officinalis、 Fomes fomentarius、Fomes officinalis、Fomes fomitopisis、Tricholoma matsutake、Boletus edulis、Clitocybe nuda、Clitocybe saeva、Plearotus spp.、Tremella fuciformis、Piptoporus betulinis、Polyporus umbellatus、Pholiota nameko、Volvariella volvacea、Hypsizygus marmoreus、Stropharia rugosoannulata、及びLaetiporus sulfureusから選択される、請求項1に記載の方法。
- 前記真菌が、Cordyceps sinensisである、請求項1に記載の方法。
- 前記味の向上が:食品産物の、苦味を減少すること、好ましくない後味を減少すること、及び渋味を減少することからなる群から選択される、請求項1に記載の方法。
- 前記培地が、ヒトの食品グレードの培地である請求項3に記載の方法。
- 前記食品産物が:食品成分、栄養補助食品、食品添加物、栄養補給食品、及び医薬からなる群から選択される、請求項1に記載の方法。
- 前記収集された上清流体が低温殺菌される、請求項1に記載の方法。
- 前記収集された上清流体が乾燥される、請求項1に記載の方法。
- 前記収集された上清流体が滅菌される、請求項1に記載の方法。
- 前記菌糸体液体組織培養物が濾過される、請求項1に記載の方法。
- 前記菌糸体液体組織培養物が遠心される、請求項1に記載の方法。
- 前記培地が動物グレードであり、そして食品産物が動物の飼料である、請求項1に記載の方法。
- 前記培養物が、浮遊培養物であり、そして上清流体を収集する前にブレンドされる、請求項1に記載の方法。
- 前記食品産物が乾燥される、請求項1に記載の方法。
- 前記培養工程が、1日〜60日間行われる、請求項1に記載の方法。
- 前記食品産物がステビアの植物体の部分、ステビア煎じ汁、又は精製されたステビア抽出物である、請求項1に記載の方法。
- 前記食品産物が、ステビアの植物体の部分、ステビオールグリコシド、アスパルテーム、アセスルファム−K、スクラロース、炭水化物、羅漢果、カカオ、カカオ濃縮液、茶、チョウセンニンジン、エンドウマメタンパク質、糖アルコール、コーヒー、クランベリー、グレープフルーツ、ザクロ、ココナツ、ワイン、ビール、リカー及びスピリッツからなる群から選択される、請求項1に記載の方法。
- C.sinensisを含んでなる液内菌糸体液体組織培養物を、培地中で約4〜約7日間培養し;
前記液内菌糸体液体組織培養物の上清流体を濾過によって収集し;
収集した前記上清流体を乾燥し;そして
収集し、乾燥した上清流体を食品産物の苦味を減少するために十分な量で食品産物に添加すること;
を含んでなる、食品産物の苦味を減少するための方法。 - 前記食品産物が、ステビアの植物体の部分又はステビオールグリコシドである、請求項18に記載の方法。
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