CN116814443B - 一株翘鳞伞及其应用 - Google Patents
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Abstract
一株翘鳞伞及其应用,它涉及啤酒花发酵领域,本发明的目的是为了解决啤酒花综合利用率低和产品单一的问题。本发明以翘鳞伞为发酵菌种,经固体和液体培养基扩增,啤酒花浸提液重悬得到菌悬液后,接种于啤酒花浸提液中发酵。本发明充分利用翘鳞伞独特的胞外分泌酶系,发酵啤酒花浸提液后,有效获得具有甜菜根香气和滋味的新型天然风味原液,产香稳定,且香气浓郁宜人,操作简便,降本增效。本发明对实现啤酒花香气和滋味的多样化以及有效扩大啤酒花资源应用有重要意义。
Description
技术领域
本发明涉及啤酒花发酵领域,具体涉及一株翘鳞伞及其应用。
背景技术
啤酒花又称蛇麻(Humulus lupulus L.),是啤酒酿造的重要原料之一,因其赋予啤酒特征的风味,被誉为“啤酒之魂”。翘鳞伞(Pholiota squarrosa)隶属担子菌门(Basidiomycota)伞菌纲(Agaricomycetes)伞菌目(Agaricales)球盖菇科(Strophariaceae)环绣伞属(Pholiota),为我国民间常用的食(药)用真菌,具有抗肿瘤、抗氧化等功效。目前,啤酒花存在综合利用率低、产品单一的问题,绝大部分啤酒花被用作啤酒的生产,而精酿啤酒的流行促使了风味多元化的发展。为了满足消费者对啤酒花香气和滋味的多样化和个性化需求,担子菌发酵啤酒花产新型天然风味概念被提出。目前已有担子菌发酵饮品(例如豆浆、茶等)来调节改善产品风味的报道和专利,均达到了较好的风味调控效果,尚无利用担子菌液态发酵啤酒花来产生天然的新型风味的文献报道。担子菌在发酵产香领域具有很大的应用潜能,可满足不同消费群体和场景的风味需求。
发明内容
本部分的目的在于概述本发明的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和发明名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和发明名称的目的模糊,而这种简化或省略不能用于限制本发明的范围。
鉴于上述和/或现有啤酒花产品中存在的问题以及翘鳞伞菌种发酵产香的巨大潜力,提出了本发明。
因此,本发明的目的是提供一株翘鳞伞菌种并将其应用于发酵啤酒花浸提液,生产具有天然新型风味的发酵原液,以克服现有啤酒花综合利用率低、产品单一的不足,满足不同消费群体的风味个性化需求。
为解决上述技术问题,本发明提供了如下技术方案:一株翘鳞伞及其应用,其包括如下步骤:
本发明的一株翘鳞伞,所述的翘鳞伞Pholiota squarrosaPSQ323,保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏地址是武汉市武昌区八一路299号,保藏日期为2023年5月9日,保藏编号为CCTCC NO: M 2023708。
取啤酒花与70℃恒温水按一定料液比配置,经浸提、过滤、灭菌,得啤酒花浸提液;
翘鳞伞菌种先接种至固体培养基培养,再移植至液体培养基培养,然后离心取下层菌丝体,用无菌水洗涤,加入啤酒花浸提液中,分散均匀,制得菌悬液;
按一定接种量将菌悬液加入啤酒花浸提液培养,再离心取上清液,并过滤去除菌丝体,得到天然风味原液。
一株翘鳞伞及其应用,包括以下具体步骤:
(1)灭菌啤酒花浸提液制备:啤酒花为干燥球果,控制水分在9%~10%。按照10g/L的比例将啤酒花置于70℃恒温水中浸提1h,再用筛网滤除啤酒花并对过滤浸提液高压灭菌(121℃,15min),冷却备用。
(2)翘鳞伞菌悬液的制备:翘鳞伞菌种接种至30mL固体培养基于24℃避光培养,直至白色菌丝覆盖培养基面积的80%,取1cm2菌丝块转移至100mL液体培养基。用高剪切分散机以10000rpm转速搅碎菌丝块并混匀10s,随即置于摇床中避光20~30℃培养5~9d,摇床转速100~200rpm。取10mL培养液离心(2150×g,10min),弃上清液取菌丝体,加入无菌水洗涤再离心(2150×g,10min),重复3次。洗涤后的菌丝体加入100mL步骤(1)制备的灭菌啤酒花浸提液制得菌悬液。
(3)天然风味原液的制备:按照体积比10%的接种量,将步骤(2)制备的菌悬液加入步骤(1)制备的灭菌啤酒花浸提液中,在20~30℃下以100~200rpm转速于摇床避光培养,培养16~24h,过滤滤去菌丝体后,得到天然风味原液。
(4)上述步骤(2)所述翘鳞伞菌种固体培养基的配方为:1.5%琼脂加2%麦芽提取物。
(5)上述步骤(2)所述翘鳞伞菌种液体培养基的配方为:2%麦芽提取物。
有益效果
本发明为一株翘鳞伞及其应用,充分利用翘鳞伞独特的胞外分泌酶系,有效获得具有浓郁且宜人的甜菜根香气及滋味的发酵原液,可作为潜在的增香原料满足不同食品和饮料的风味需求。本方法采用菌悬液移植的方式,接种量准确且不会引入其它培养基杂质,有效保证产品的风味稳定性。本方法操作简便,啤酒花浸提液无需添加其它配料即可高效发酵。发酵时间短,在啤酒花浸提液中的发酵时间不超过24h,节约成本。风味发酵原液还可进一步加工,例如浓缩、喷雾干燥等,可获得风味浓缩液或粉末,扩大啤酒花资源应用面。
具体实施方式
为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂,下面结合说明书实施例对本发明的具体实施方式做详细的说明。
在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明,但是本发明还可以采用其他不同于在此描述的其它方式来实施,本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似推广,因此本发明不受下面公开的具体实施例的限制。
其次,此处所称的“一个实施例”或“实施例”是指可包含于本发明至少一个实现方式中的特定特征、结构或特性。在本说明书中不同地方出现的“在一个实施例中”并非均指同一个实施例,也不是单独的或选择性的与其他实施例互相排斥的实施例。
本发明中实施例部分选用的原料试剂来源如下:
琼脂和麦芽提取物购于Carl Roth公司。
本发明中实施例部分采用的仪器设备型号如下:
安捷伦7890 B/5977 B气相色谱质谱联用仪、哲斯泰ODP3嗅闻仪。
实施例1
(1)灭菌啤酒花浸提液制备:啤酒花(Humulus lupulus var. Callista)为干燥球果,水分为9.0%。按照10g/L的比例将啤酒花置于70℃恒温水中浸提1h,再用筛网滤除啤酒花并对过滤浸提液高压灭菌(121℃,15min),冷却备用。
(2)翘鳞伞分离鉴定
标本采集:在黑龙江省凤凰山国家级自然保护区以随机踩踏的方式进行标本采集,采集时标本完整,适当附带着生处的基质,回到室内挑选子实体进行菌种分离并制作活体组织,将剩余的子实体通过烘干、晾干、风干等方式去除大部分水分,装入密封袋,带回实验室,备用。回到实验室用传统分类标本鉴定方法,宏观形态以记录的数据和生态学照片进行确定,微观形态用5%KOH或蒸馏水为浮载剂在光学显微镜下观察。将获得的翘鳞伞菌株Pholiota squarrosaPSQ323鉴定后提交到中国典型培养物保藏中心,保藏号为CCTCC NO:M 2023708。
(3)翘鳞伞菌悬液的制备:翘鳞伞菌种接种至30mL固体培养基于24℃避光培养,直至白色菌丝覆盖培养基面积的80%,取1cm2菌丝块转移至100mL液体培养基。用高剪切分散机以10000rpm转速搅碎菌丝块并混匀10s,随即置于摇床中避光24℃培养7d,摇床转速150rpm。取10mL培养液离心(2150×g,10min),弃上清液取菌丝体,加入无菌水洗涤再离心(2150×g,10min),重复3次。洗涤后的菌丝体加入100mL步骤(1)制备的灭菌啤酒花浸提液制得菌悬液。
(4)天然风味原液的制备:取10mL步骤(3)制备的菌悬液加入步骤(1)制备的100mL灭菌啤酒花浸提液中,在24℃以150rpm转速于摇床避光培养20h,培养结束后,使用滤纸过滤,得到天然风味原液。
(5)上述步骤(3)所述翘鳞伞菌种固体培养基的配方为:1.5%琼脂加2%麦芽提取物。
(6)上述步骤(3)所述翘鳞伞菌种液体培养基的配方为:2%麦芽提取物。
实施例2
(1) 灭菌啤酒花浸提液制备:啤酒花(Humulus lupulus var. Callista)为干燥球果,水分为9.2%。按照10g/L的比例将啤酒花置于70℃恒温水中浸提1h,再用筛网滤除啤酒花并对过滤浸提液高压灭菌(121℃,15min),冷却备用。
(2) 翘鳞伞分离鉴定同实施例1(2)。
(3)翘鳞伞菌悬液的制备:翘鳞伞菌种接种至30mL固体培养基于24℃避光培养,直至白色菌丝覆盖培养基面积的80%,取1cm2菌丝块转移至100mL液体培养基。用高剪切分散机以10000rpm转速搅碎菌丝块并混匀10s,随即置于摇床中避光20℃培养5d,摇床转速100rpm。取10mL培养液离心(2150×g,10min),弃上清液取菌丝体,加入无菌水洗涤再离心(2150×g,10min),重复3次。洗涤后的菌丝体加入100mL步骤(1)制备的灭菌啤酒花浸提液制得菌悬液。
(4)天然风味原液的制备:取10mL步骤(3)制备的菌悬液加入步骤(1)制备的100mL灭菌啤酒花浸提液中,在20℃以100rpm转速于摇床避光培养16h,培养结束后,使用滤纸过滤,得到天然风味原液。
(5)上述步骤(3)所述翘鳞伞菌种固体培养基的配方为:1.5%琼脂加2%麦芽提取物。
(6)上述步骤(3)所述翘鳞伞菌种液体培养基的配方为:2%麦芽提取物。
实施例3
(1) 灭菌啤酒花浸提液制备:啤酒花(Humulus lupulus var.Callista)为干燥球果,水分为9.4%。按照10g/L的比例将啤酒花置于70℃恒温水中浸提1h,再用筛网滤除啤酒花并对过滤浸提液高压灭菌(121℃,15min),冷却备用。
(2) 翘鳞伞分离鉴定同实施例1(2)。
(3)翘鳞伞菌悬液的制备:翘鳞伞菌种接种至30mL固体培养基于24℃避光培养,直至白色菌丝覆盖培养基面积的80%,取1cm2菌丝块转移至100mL液体培养基。用高剪切分散机以10000rpm转速搅碎菌丝块并混匀10s,随即置于摇床中避光22℃培养6d,摇床转速130rpm。取10mL培养液离心(2150×g,10min),弃上清液取菌丝体,加入无菌水洗涤再离心(2150×g,10min),重复3次。洗涤后的菌丝体加入100mL步骤(1)制备的灭菌啤酒花浸提液制得菌悬液。
(4)天然风味原液的制备:取15mL步骤(3)制备的菌悬液加入步骤(1)制备的150mL灭菌啤酒花浸提液中,在22℃以130rpm转速于摇床避光培养18h,培养结束后,使用滤纸过滤,得到天然风味原液。
(5)上述步骤(3)所述翘鳞伞菌种固体培养基的配方为:1.5%琼脂加2%麦芽提取物。
(6)上述步骤(3)所述翘鳞伞菌种液体培养基的配方为:2%麦芽提取物。
实施例4
(1) 灭菌啤酒花浸提液制备:啤酒花(Humulus lupulus var. Callista)为干燥球果,水分为9.7%。按照10g/L的比例将啤酒花置于70℃恒温水中浸提1h,再用筛网滤除啤酒花并对过滤浸提液高压灭菌(121℃,15min),冷却备用。
(2) 翘鳞伞分离鉴定同实施例1(2)。
(3)翘鳞伞菌悬液的制备:翘鳞伞菌种接种至30mL固体培养基于24℃避光培养,直至白色菌丝覆盖培养基面积的80%,取1cm2菌丝块转移至100mL液体培养基。用高剪切分散机以10000rpm转速搅碎菌丝块并混匀10s,随即置于摇床中避光28℃培养8d,摇床转速180rpm。取10mL培养液离心(2150×g,10min),弃上清液取菌丝体,加入无菌水洗涤再离心(2150×g,10min),重复3次。洗涤后的菌丝体加入100mL步骤(1)制备的灭菌啤酒花浸提液制得菌悬液。
(4)天然风味原液的制备:取15mL步骤(3)制备的菌悬液加入步骤(1)制备的150mL灭菌啤酒花浸提液中,在28℃以180rpm转速于摇床避光培养22h,培养结束后,使用滤纸过滤,得到天然风味原液。
(5)上述步骤(3)所述翘鳞伞菌种固体培养基的配方为:1.5%琼脂加2%麦芽提取物。
(6)上述步骤(3)所述翘鳞伞菌种液体培养基的配方为:2%麦芽提取物。
实施例5
(1) 灭菌啤酒花浸提液制备:啤酒花(Humulus lupulus var. Callista)为干燥球果,水分为10%。按照10g/L的比例将啤酒花置于70℃恒温水中浸提1h,再用筛网滤除啤酒花并对过滤浸提液高压灭菌(121℃,15min),冷却备用。
(2) 翘鳞伞分离鉴定同实施例1(2)。
(3)翘鳞伞菌悬液的制备:翘鳞伞菌种接种至30mL固体培养基于24℃避光培养,直至白色菌丝覆盖培养基面积的80%,取1cm2菌丝块转移至100mL液体培养基。用高剪切分散机以10000rpm转速搅碎菌丝块并混匀10s,随即置于摇床中避光30℃培养9d,摇床转速200rpm。取10mL培养液离心(2150×g,10min),弃上清液取菌丝体,加入无菌水洗涤再离心(2150×g,10min),重复3次。洗涤后的菌丝体加入100mL步骤(1)制备的灭菌啤酒花浸提液制得菌悬液。
(4)天然风味原液的制备:取20mL步骤(3)制备的菌悬液加入步骤(1)制备的200mL灭菌啤酒花浸提液中,在30℃以200rpm转速于摇床避光培养24h,培养结束后,使用滤纸过滤,得到天然风味原液。
(5)上述步骤(3)所述翘鳞伞菌种固体培养基的配方为:1.5%琼脂加2%麦芽提取物。
(6)上述步骤(3)所述翘鳞伞菌种液体培养基的配方为:2%麦芽提取物。
翘鳞伞发酵啤酒花产新型天然风味物分析结果:
实施例1发酵感官评价结果见表1。
表 1 发酵啤酒花感官评价结果
菌种 | 发酵时间(h) | 香气描述及整体强度Ia | 滋味描述 |
空白组0 | 0 | 啤酒花香、柑橘香、甘草香(I = 4) | 强烈的苦味、啤酒花味 |
空白组1 | 20 | 啤酒花香、柑橘香、甘草香(I = 4) | 强烈的苦味、啤酒花味 |
翘鳞伞 | 20 | 甜菜根香、土香(I = 5) | 苦涩的、啤酒花味、甜菜根味 |
注:a香气强度I,0 无臭,1 非常微弱,2 微弱,3 中等,4 强烈,5 非常强烈。
注:空白组0 为未发酵的啤酒花浸提液;空白组1为未发酵的啤酒花浸提液,处理条件与翘鳞伞发酵组相同,即24℃以150rpm转速于摇床避光培养20h。
表1结果显示,翘鳞伞发酵得到的天然风味原液与未发酵的啤酒花浸提液(空白组0和空白组1)相比,整体香气发生了的明显的变化,效果突出。未发酵的啤酒花浸提液(空白组0和空白组1)呈现出了特征的柑橘香和甘草香,经翘鳞伞发酵的啤酒花浸提液呈现出了非常强烈的甜菜根香,这种新型天然愉悦香气在未发酵的啤酒花浸提液(空白组0和空白组1)中并未发现。发酵前后的滋味评价结果显示,翘鳞伞发酵可以产生甜菜根的愉悦滋味。
采用直接浸没搅拌棒吸附萃取结合气相色谱-质谱-嗅觉测定仪,对实施例1中的天然风味原液进行香气物质分析鉴定,结果见表2。
表 2 空白组和天然风味原液的香气物质
序号 | 物质 | 保留指数 | 香气描述 | 空白组0 | 翘鳞伞 |
1 | 未定性 | 966 | 甜香 | x | |
2 | 4-甲基-2-戊酮 | 1004 | 洗涤剂香, 辛辣香 | x | |
3 | 2-甲基丁酸乙酯 | 1053 | 甜香, 青香 | x | |
4 | 正己醛 | 1079 | 青香 | x | |
5 | 2,7-二甲基-2,7-二辛烯 | 1091 | 啤酒花香, 汗香, 焦香 | x | x |
6 | 未定性 | 1125 | 辛辣香 | x | |
7 | 3-己烯醛 | 1140 | 青香, 草香, 果香 | x | x |
8 | 己酸甲酯 | 1183 | 汗香 | x | |
9 | 未定性 | 1238 | 青香, 果香 | x | x |
10 | 未定性 | 1261 | 清新香 | x | |
11 | 正辛醛 | 1286 | 果香, 柑橘香, 清新香 | x | x |
12 | 6-甲基-2-庚烯-4-酮 | 1294 | 甜香, 蘑菇香, 花香 | x | |
13 | 羟基丙酮 | 1304 | 甜香, 果香, 土香 | x | |
14 | 未定性 | 1325 | 甜香, 果香 | x | |
15 | 6-甲基-5-庚烯-2-酮 | 1336 | 青香, 果香, 植物香 | x | x |
16 | 未定性 | 1368 | 花香, 植物香, 土香, 啤酒花香 | x | |
17 | 未定性 | 1378 | 啤酒花香 | x | |
18 | 壬醛 | 1390 | 花香, 清新香, 脂香, 溶剂香 | x | x |
19 | 未定性 | 1428 | 汗香, 植物香 | x | |
20 | 反-2-辛烯醛 | 1433 | 蘑菇香, 土香, 松树香 | x | |
21 | 1-辛烯-3-醇 | 1453 | 蘑菇香, 土香 | x | |
22 | 糠醛 | 1464 | 焙烤香, 甜香, 果香 | x | |
23 | 未定性 | 1473 | 肉汤香, 鲜香 | x | |
24 | 未定性 | 1483 | 土香, 马铃薯香, 植物香 | x | |
25 | 2-乙基己醇 | 1492 | 果香, 溶剂香 | x | |
26 | 反-2-十二碳烯醇 | 1502 | 果香 | x | |
27 | 未定性 | 1522 | 肉汤香, 坚果香 | x | x |
28 | 未定性 | 1526 | 植物香, 花香 | x | |
29 | 2-壬烯醛 | 1534 | 花香, 溶剂香, 果香 | x | x |
30 | 丁香醛B | 1544 | 茶香, 花香 | x | |
31 | 芳樟醇 | 1549 | 花香, 果香, 柑橘香 | x | x |
32 | 反式2,6-壬二醛 | 1586 | 果香, 灯笼椒香 | x | |
33 | 未定性 | 1624 | 青香 | x | |
34 | 未定性 | 1631 | 花香 | x | |
35 | β-甲基戊酸 | 1666 | 汗香 | x | x |
36 | α-松油醇 | 1697 | 果香, 面包香, 醛香 | x | |
37 | 未定性 | 1707 | 花香, 柑橘香 | x | |
38 | 十二醛 | 1711 | 清新香, 花香, 植物香 | x | |
39 | 未定性 | 1712 | 薄荷香, 清新香 | x | |
40 | 顺-2-壬烯-1-醇 | 1716 | 清新香, 果香, 热带水果香 | x | |
41 | 反-乙酸香芹酯 | 1736 | 金属香, 醛香 | x | |
42 | (5E)-2,6-二甲基-1,5,7-辛三烯-3-醇 | 1747 | 啤酒花香 | x | |
43 | 未定性 | 1754 | 玫瑰花香, 花香 | x | |
44 | 未定性 | 1758 | 清新香, 溶剂香 | x | |
45 | 未定性 | 1762 | 青香, 硫香 | x | |
46 | 未定性 | 1806 | 土香, 果香 | x | |
47 | 未定性 | 1810 | 果香, 豆香, 甜香 | x | x |
48 | 癸酸二甲酯 | 1819 | 烟草香, 药香 | x | |
49 | 未定性 | 1825 | 甜香, 糖浆香 | x | |
50 | 未定性 | 1835 | 藻香, 霉香, 青香 | x | |
51 | 己酸 | 1840 | 青香, 汗香 | x | |
52 | 未定性 | 1853 | 茶香 | x | |
53 | 氢化苯并呋喃 | 1858 | 松树香, 树香 | x | x |
54 | 2-羟基十四烷酸 | 1869 | 脂香, 果香 | x | |
55 | 苯乙醇 | 1913 | 玫瑰花香, 花香 | x | |
56 | 未定性 | 1919 | 溶剂香, 药香 | x | |
57 | 未定性 | 1938 | 不愉悦香, 霉香 | x | |
58 | 未定性 | 1942 | 果香, 热带水果香 | x | |
59 | 十一烷酸 | 1953 | 肥皂香, 青香,土香 | x | |
60 | 未定性 | 1959 | 大豆香, 豆香 | x | |
61 | 未定性 | 1995 | 焙烤香, 爆米花香 | x | |
62 | 未定性 | 2006 | 果香 | x | |
63 | 石竹素 | 2009 | 花香, 啤酒花香 | x | x |
64 | 未定性 | 2015 | 清新香, 柑橘香 | x | |
65 | 葎草烯环氧化物 I | 2023 | 果香, 豆香 | x | |
66 | 4-甲氧基苯甲醛 | 2026 | 椰香, 坚果香 | x | |
67 | 未定性 | 2031 | 奶油香, 豆香 | x | |
68 | 葎草烯环氧化物II | 2046 | 花香, 咸香 | x | |
69 | 3-苯基丙醇 | 2048 | 溶剂香 | x | |
70 | 未定性 | 2116 | 甜香, 辛辣香 | x | |
71 | 丁香酚 | 2134 | 辛辣香, 丁香香 | x | |
72 | 四氢-2H-吡喃 | 2144 | 果香, 甜香 | x | x |
73 | 未定性 | 2154 | 果香, 青香 | x | |
74 | 壬酸 | 2160 | 溶剂香, 汗香 | x | x |
75 | 未定性 | 2176 | 溶剂香 | x | |
76 | 5,5,8a-三甲基萘烷-1-酮 | 2179 | 溶剂香, 清新香 | x | |
77 | 未定性 | 2194 | 未定义 | x | |
78 | δ-十三内酯 | 2198 | 青香, 花香, 果香 | x | |
79 | 未定性 | 2206 | 橡胶香, 溶剂香 | x | |
80 | 未定性 | 2216 | 樱桃香, 甜香 | x | |
81 | 8-甲基壬酸 | 2217 | 溶剂香, 脂香 | x | |
82 | 未定性 | 2227 | 果香, 热带水果香 | x | |
83 | 未定性 | 2242 | 青香, 罗勒香 | x | |
84 | 十氢二甲基甲乙烯基萘酚 | 2258 | 果香, 不愉悦香 | x | |
85 | 未定性 | 2263 | 溶剂香 | x | |
86 | 2,6-二甲氧基酚 | 2264 | 烟香 | x | |
87 | 正癸酸 | 2272 | 花香, 汗香 | x | |
88 | 未定性 | 2295 | 果香 | x | |
89 | 未定性 | 2334 | 青香, 辛辣香 | x | |
90 | 棕榈油酸 | 2341 | 脂香, 汗香 | x | |
91 | 未定性 | 2351 | 脂香, 溶剂香 | x | |
92 | 未定性 | 2377 | 啤酒花香 | x | x |
93 | 未定性 | 2434 | 浓香, 醛香 | x | |
94 | 香兰素 | 2449 | 坚果香, 焙烤香, 甜香, 辛辣香 | x | |
95 | 未定性 | 2475 | 花香 | x | |
96 | 月桂酸 | 2480 | 脂香 | x |
注:空白组0 为未发酵的啤酒花浸提液
表2结果显示,翘鳞伞发酵得到的天然风味原液与未发酵的啤酒花浸提液(空白组0)相比,香气物质的组成发生了的明显的变化,说明本发明涉及的一株翘鳞伞,利用它发酵啤酒花浸提液可以有效达到改善香气的目的。
综上所述,本发明充分利用翘鳞伞独特的胞外分泌酶系,有效获得浓郁的甜菜根天然风味原液,具有浓郁宜人香气;利用翘鳞伞应用于发酵啤酒花,可以产生新的甜菜根的愉悦滋味,且产香稳定,操作简便,降本增效。本发明对实现啤酒花香气和滋味的多样化以及有效扩大啤酒花资源应用有重要意义。
Claims (7)
1.一株翘鳞伞(Pholiota squarrosa)PSQ323菌株,其特征在于:所述菌株保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏地址是武汉市武昌区八一路299号,保藏日期为2023年5月9日,保藏编号为CCTCC NO:M 2023708。
2.根据权利要求1所述的一株翘鳞伞PSQ323菌株的应用,其特征在于:利用翘鳞伞发酵啤酒花,啤酒花为唯一发酵底物,经液态发酵,得到具有浓郁的甜菜根宜人香气和滋味的新型天然风味原液,通过以下步骤实现的:
取啤酒花与70℃恒温水按一定料液比配置,经浸提、过滤、灭菌,得啤酒花浸提液;
翘鳞伞菌种先接种至固体培养基培养,再移植至液体培养基培养,然后离心取下层菌丝体,用无菌水洗涤,加入啤酒花浸提液中,分散均匀,制得菌悬液;
按一定接种量将菌悬液加入啤酒花浸提液培养,再离心取上清液,并抽滤去除菌丝体,得到天然风味原液。
3.根据权利要求2中所述的应用,其特征在于:翘鳞伞菌种固体培养基的配方为1.5%琼脂加2%麦芽提取物。
4.根据权利要求2所述的应用,其特征在于:翘鳞伞菌种液体培养基的配方为2%麦芽提取物。
5.根据权利要求2所述的应用,其特征在于:啤酒花为干燥球果,控制水分在9%~10%,按照10g/L的比例将啤酒花置于70℃恒温水中浸提1h,再用筛网滤除啤酒花并对过滤浸提液高压灭菌,高压灭菌温度121℃,高压灭菌时间15min,冷却备用。
6.根据权利要求2所述的应用,其特征在于:翘鳞伞菌种接种至30mL固体培养基于24℃避光培养,直至白色菌丝覆盖培养基面积的80%,取1cm2菌丝块转移至100mL液体培养基,用高剪切分散机以10000rpm转速搅碎菌丝块并混匀10s,随即置于摇床中避光20~30℃培养5~9d,摇床转速100~200rpm,取10mL培养液离心,离心重力2150×g,离心时间10min,弃上清液取菌丝体,加入无菌水洗涤再离心,离心重力2150×g,离心时间10min,重复3次,洗涤后的菌丝体加入100mL制备的灭菌啤酒花浸提液制得菌悬液。
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于:按照体积比10%的接种量,将制备的菌悬液加入灭菌啤酒花浸提液中,在20~30℃下以100~200rpm转速于摇床避光培养,培养16~24h,过滤去除菌丝体后,得到天然风味原液。
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