JP2016510215A - 改善された微細藻類粉 - Google Patents
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Abstract
Description
本出願は、35U.S.C.§119(e)の下、2013年1月28日に出願された米国仮特許出願第61/757,534号(その内容全体は参照によって本明細書に援用される)に対する優先権を主張する。
培地に関連して、「DO」と略される「溶存酸素」は、大気と酸素平衡状態にある培地の酸素化と比較した、培地の相対的な酸素化を意味する。
本発明は、特定の微細藻類株が、特定の条件下で培養および加工される場合に、フレーバー、臭気および色の点で食欲をそそるバイオマスを産生できるという発見に根付いている。改善されたフレーバーは、単にオフフレーバーがないことに起因するだけでなく、培養および/または加工の間に産生される望ましいフレーバー化合物の存在にも起因すると考えられる。以下の実施例において、微細藻類は暗所で従属栄養的に培養されたクロレラ・プロトテコイデス(Chlorella protothecoides)の株であるが、以下で提供される方法の使用などによる従属栄養培養および慎重な加工によって非緑色を生成できることを条件として、クロレラ属(Chlorella)の別の種または緑藻植物門の他の種の可能性もある。これらの技術の使用により、製品は、本明細書で開示される新たに同定された合格判定基準の範囲内に入り得る。
微細藻類は培養される(ステップ105)。例えば、微細藻類粉が脱イオン水中に10%(w/v)で分散され、人の官能パネルによって評価される場合に、暗所における微細藻類の培養により、キノコおよびキャベツまたは魚フレーバーなどのオフフレーバーがより低レベルである微細藻類バイオマスが作られることが分かった。従って、好ましい実施形態では、微細藻類は、固定(すなわち、非CO2)炭素源において、暗所で従属栄養的に培養される。以下の実施例ではグルコースを使用したが、フルクトース、スクロース/フルクトース混合物、または酢酸/酢酸塩などの他の固定炭素源も同等の結果を生じ得る。糖の濃度は、連続供給によって管理することができる。3〜10g/lのグルコース濃度により有利な結果が達成された。微細藻類の適切な属には、クロレラ属(Chlorella)およびプロテテカ属(Protetheca)が含まれる。例えば、クロレラ・プロトテコイデス(Chlorella protothecoides)、プロトテカ・モリフォルミス(Prototheca moriformis)またはプロトテカ・ゾフィ(Prototheca zopfii)が使用され得る。人間の栄養のために使用されるクロレラ属(Chlorella)のその他の種、例えばクロレラ・プロトテコイデス(Chlorella protothecoides)なども本明細書で開示されるように成長および加工することができる。微細藻類の種または株の組み合わせも使用され得る。任意選択的に微細藻類細胞は変異され、バイオマスを取り込んだ食品の色を変化させ得る色素が実質的に低減された株が選択される。以下の実施例では、クロレラ・プロトテコイデス(Chlorella protothecoides)の細胞から適切なフレーバーおよび観察不能な緑色が得られることが分かった。例えば、粉は、200ppm未満、20ppm未満、または2ppm未満のクロロフィルを含み得る。以下の実施例では、色は黄色/金色であることが分かったが、使用される株および培養/codimnditionsに応じて、例えば、淡黄色、オフホワイト、または白色でもあり得る。
− 500mlの脱イオン水を20℃で600mlのスクワット型ビーカー(Fisherbrand FB33114)に導入し、
− 混合せずに、25gの微細藻類粉末を水の表面に均一に入れ、
− 接触の3時間後に粉末の挙動を観察し、
− 水の表面を貫通してビーカーの底に沈下した製品の高さを測定する。
− 充填された容器の質量と空の容器の質量との差を、容積(ml)で除することにより、ゆるみかさ密度の値が得られる。
− この試験のために、100mlの容器、充填に使用されるスクープ、および使用されるスクレーパーは、Hosokawa社によって商標Powder Tester型PTEで販売される装置と共に供給される。
− 測定を実施するために、製品は、2000μmの開口を有するふるい(SAULASにより販売)によって選別される。密度は、そのふるい上に保持されなかった製品において測定される。
クロレラ・プロトテコイデス(Chlorella protothecoides)の多数の発酵を7L〜1000Lの範囲のスケールで実施した。クロレラ・プロトテコイデス(Chlorella protothecoides)の2つの株、株Aと、低色素突然変異体である株Bとを使用した。発酵は、約5〜6のpHにおいて、固定炭素源としてのグルコースに対して暗所で実施した。発酵の後、微細藻類を含有する発酵ブロスを加熱処理して微細藻類を不活性化し、過剰の水で直ちに希釈し、遠心分離して、微細藻類を洗浄および濃縮した。粉砕により細胞を溶解させてから、噴霧乾燥して微細藻類粉を製造した。株Aから作られた微細藻類粉は淡黄色であり、株Bから作られた微細藻類粉は黄褐色であった。株Bの発酵は、ほぼ中性のpHでも実施した。
株Bを高レベル(約60%〜70%)および低レベル(約30〜40%)の溶存酸素において培養し、実施例1と同様に処理して、微細藻類粉を形成した。高酸素実験の場合、より少ない酸素で製造された微細藻類と比較して、ブロス、遠心分離したバイオマスおよび最終の粉において、黄色の低下が注目された。
クロレラ・プロトテコイデス(Chlorella protothecoides)の種培養物を限定培地ブロスに添加し、9,000Lの培養物を得た。炭素源として加熱滅菌グルコース(55%w/w)を使用した。発酵槽内で通気、背圧および攪拌を調節することにより、溶存酸素を最低30%に保持した。培養温度は28℃であった。ブロスのpHは培養の開始時は6.8であり、培養の過程で約6まで降下した。グルコースを3〜10g/L濃度の濃度まで供給した。OD750により測定されるように中間対数期になるまで成長を4〜5日間にわたって継続させた。得られた生成物は、18.5%w/vの乾燥細胞重量(DCW)を有した。成長培地中の窒素レベルは限定的であり、長時間の糖供給の結果として、微細藻類に約50%の脂質を強制的に蓄積させた。
サンプル(500mg)および3mLの蒸留水および1gmのNaClおよびエタノール中0.022ug/uLの2−ウンデカノン内部標準5uLを50℃で10分間インキュベートし、次に、Gerstel MPS2のオービタルシェーカーで攪拌しながら、SPMEにより50℃で20分間抽出した。使用したSPME繊維は、DVB/CAR/PDMS(ジビニルベンゼン/カルボキセン/ポリジメチルシロキサン)、df50/30μmであった。Agilentスプリット/スプリットレスインジェクタにおいて繊維を260℃で3分間脱着させた。揮発性物質をLeco Pegasus GC−TOFMS内に脱着させ、1.0mL/分のヘリウムキャリアガス流を用いてDB5−MSカラム(30m、0.25mm、0.25um)で分離した。初期カラム温度は40℃(3分間)であり、次に15℃/分で270℃まで上昇させ、270℃で5分間保持した。質量検出を電子衝撃モード(EI)で実施した。注入は全てスプリットレスであった。ピーク同定は、サンプルのEI質量スペクトルとNISTライブラリのEI質量スペクトルとの比較に基づく。データは、内部標準と比較した相対濃度(ppbで表される)として報告される。
サンプル(500mg)および10mLの蒸留水およびエタノール中0.022ug/uLの2−ウンデカノン内部標準5uLを、2cmのGerstel PDMS Twisterを使用して1000rpmで攪拌しながら1時間抽出した。次に、1グラムのNaClをサンプルに添加し、抽出をさらに1時間継続した。この技術は、逐次SBSEとして知られている。次に、ツイスターをサンプルから取り出し、蒸留水で洗い流し、リントレスな布で押さえて乾かし、スプリットレスモードで使用されるGerstel TDUにおいて熱的に脱着させた。TDUでは、脱着された揮発性物質を始めに−100℃で捕捉し、次に、ツイスターに補足された揮発性物質を280℃で3分間脱着させた。揮発性物質をAgilent GC−MSD内に脱着させ、1.0mL/分のヘリウムキャリアガス流を用いてDB5−MSカラム(30m、0.25mm、0.25um)で分離した。初期カラム温度は40℃(3分間)であり、次に10℃/分で270℃まで上昇させ、270℃で5分間保持した。質量検出を電子衝撃モード(EI)で実施した。注入は全てスプリットレスであった。ピーク同定は、サンプルのEI質量スペクトルとNISTライブラリのEI質量スペクトルとの比較に基づく。データは、内部標準と比較した相対濃度(ppbで表される)として報告される。
実施例3で製造したサンプルを官能パネルにより試験し、実施例4および5のようなSPMEおよびSBSEで分析した。結果は、2−ウンデカノン内部標準に対して決定される10億分の1の単位で以下の表に報告される。以下の表において、aはアルファ、dはデルタ、gはガンマを表すために使用される。化合物のCAS番号は実施例7において記載される。
上記の方法に従って、クロレラ・プロトテコイデス(Chlorella protothecoides)微細藻類粉の多数の製造ロットを製造した。さらに、クロレラ属(Chlorella)粉末の市販のサンプルを、nuts.comから入手した。製品情報は出願日時点のものである。http://www.nuts.com/では、粉は、従属栄養製造された韓国起源であるとされている。実施例4および5のようなSBSEおよびSPMEによって測定された全部で12のサンプルを2通り使用した。さらに、ボランティアのパネルを用いて官能試験を行った。スケーリングされた主成分分析(相関行列を用いる)を、prcomp機能を用いてRソフトウェアバージョン2.15.1(統計的計算のためのRプロジェクト、www.r−project.org)により実施した。フレーバー/臭気化合物の変動を十分に特徴付ける3つの主成分が見出された。3つの主成分を定義するベクトルは、各化合物を決定するために使用される方法と共に、PC1、PC2、およびPC3として以下の表に記載される。容認できる官能特性を有するサンプルと相関するサンプルのクラスタがこの低次元空間において見出される。
実施例7のPCA分析に基づき、FactomineRパッケージv.1.2.1(Hussonら)を用いて、容認できる官能試験と相関するサンプルのクラスタを統計的に定義した。FactomineR分析の結果は、PC1、PC2およびPC3の3つの次元の3つの楕円体であった。楕円体は、正の人の官能分析(実施例7のグラフからの黒丸)に関連するクラスタの中心点からの1、2、および3つの標準偏差を特徴付ける。各3次元楕円体は、A、B、C、D、E、およびF値に対する以下の表のデータを用いて、式Ax2+Bxy+Cy2+Dx+Ey+F=0で定義される3つの直交する2次元楕円によって定義される。従って、最小の楕円体の範囲内に入るサンプルは、約99.7%の確率で人のパネルにより正の官能分析を有することが予想され、中間サイズの楕円体の範囲にのみ入るサンプルは、約95%の確率で人のパネルにより正の官能分析を有することが予想され、最大の楕円体の範囲内にしか入らないサンプルは、約68%の確率で人のパネルにより正の官能分析を有することが予想されるであろう。
実施例8の楕円体を使用して、サンプルが正のフレーバーに関連するクラスタの範囲内に入るかどうかを決定することができる。例えば、上記の方法に従って製造された微細藻類粉のバッチにおいて品質管理実験を実施することができる。粉は、実施例4および5のようなSPMEおよびSBSEによって分析され、次に、データが実施例8の楕円体の1つまたは複数の範囲内に入るかどうかが決定される。
以下の段落において、本発明の特定の実施形態は便宜上番号が付けられている。各実施形態に関連する番号は任意であり、種々の実施形態の相対的な重要性を示すことは意図されない。
ジメチル.スルフィド
2.3.ブタンジオン
ブタナール
プロパナール..2.メチル.
フラン..3.メチル.
エチル.アセタート
2.ブテナール...E..
ブタナール..3.メチル.
1.ブタノール
ブタナール..2.メチル.
チオフェン
1.ペンテン.3.オール
1.ペンテン.3.オン
2.ペンタノン
2.3.ペンタンジオン
ペンタナール
フラン..2.エチル.
チアゾール
3.ペンテン.2.オン
ジスルフィド..ジメチル
2.ペンテナール...E..
ピロール
オキサゾール..4.5.ジメチル.
2.ペンテン.1.オール...Z..
チオフェン..3.メチル.
ヘキサナール
4.メチルチアゾール
ピラジン..メチル.
フルフラール
オキサゾール..トリメチル.
ブタン酸..3.メチル.
ブタン酸..2.メチル.
2.ヘキセナール
1.ヘキサノール
4.ヘプタノン
ピリジン..2.6.ジメチル.
チアゾール..2.4.ジメチル.
3.ヘプタノン
2.ヘプタノン
3.ヘプタノール
ヘプタナール
メチオナール
ピラジン..2.5.ジメチル.
ピラジン..2.6.ジメチル.
ピラジン..エチル.
ピラジン..2.3.ジメチル.
ピラジン..エテニル.
チアゾール..4.5.ジメチル.
2.ヘプタノン..6.メチル.
ヘキサナール..2.エチル.
2.ヘプテナール...Z..
5.ノネン.2.オン
2.フランカルボキシアルデヒド..5.メチル..
ベンズアルデヒド
ヘキサン酸
1.オクテン.3.オール
ジメチル.トリスルフィド
2.5.オクタンジオン
5.ヘプテン.2.オン..6.メチル.
フラン..2.ペンチル.
2.4.ヘプタジエナール...E.E..
ピラジン..2.エチル.6.メチル.
オクタナール
ピラジン..トリメチル.
ピラジン..2.エチル.3.メチル.
2.4.ヘプタジエナール...E.E...1
ピラジン..2.エテニル.6.メチル.
1.ヘキサノール..2.エチル.
3.オクテン.2.オン...E..
2H.ピラン.2.オン..5.6.ジヒドロ.
ベンゼンアセトアルデヒド
3.5.オクタジエン.2.オン...E.E..
アセトフェノン
1.デセン.3.オン
ピラジン..3.エチル.2.5.ジメチル.
ピラジン..テトラメチル.
5.メチル.2.チオフェンカルボキシアルデヒド
g.ヘプタラクトン
リナロール
ノナナール
チモール
フェニルエチル.アルコール
2.3.5.トリメチル.6.エチルピラジン.
酢酸..フェニルメチル.エステル
サフラナール
2.デセナール...E..
g.オクタラコン
o.アミノ.アセトフェノン
2.4.デカジエナール
g.ノンラクトン
イオノン
ゲラニル.アセトン
イオネン
g.ノンラクトン.1
2.4.ノナジエナール...E.E..
2.4.デカジエナール.1
g.ヘプタラクトン.1
イオノン.1
ゲラニル.アセトン.1
a.イオノン
ピーチ.ラクトン.g.ウンデカラクトン
d.デカラクトン
cis.ゲラニルアセトン
d.ドデカラクトン..δ.ノニル.δ.バレララクトン.
d.ウンデカラクトンの濃度を内部標準に対して決定することによって得られる。楕円体は、式Ax2+Bxy+Cy2+Dx+Ey+f=0によって定義され、そして以下の表:
に従ってパラメータ化される。楕円体の範囲内に入ることは、
各化合物について、相対濃度を決定し、
各化合物について、以下の表に従ってセンター因子を差し引き、
各化合物について、以下の表に従ってスケール因子で除し、
スケール化および中心化されたデータのドット積をとって、PC1、PC2およびPC3の値を生じさせ、そして
PC1、PC2およびPC3によって定義されるフレーバー記述子が楕円体の範囲内に入るかどうかを決定する
という手順によって決定される。
によってパラメータ化されるより狭い楕円の範囲内に入る。
によってパラメータ化されるさらにより狭い楕円の範囲内に入る。
Claims (36)
- 緑藻植物門の微細藻類細胞を含み、食物での使用に適した微細藻類粉であって、PC1、PC2およびPC3の次元を有するフレーバー記述空間の楕円体の範囲内に入るフレーバー記述子を特徴とし、前記フレーバー記述子が、SPMEおよび/またはSBSE分析を用いて、以下の化合物:
ジメチル.スルフィド
2.3.ブタンジオン
ブタナール
プロパナール..2.メチル.
フラン..3.メチル.
エチル.アセタート
2.ブテナール...E..
ブタナール..3.メチル.
1.ブタノール
ブタナール..2.メチル.
チオフェン
1.ペンテン.3.オール
1.ペンテン.3.オン
2.ペンタノン
2.3.ペンタンジオン
ペンタナール
フラン..2.エチル.
チアゾール
3.ペンテン.2.オン
ジスルフィド..ジメチル
2.ペンテナール...E..
ピロール
オキサゾール..4.5.ジメチル.
2.ペンテン.1.オール...Z..
チオフェン..3.メチル.
ヘキサナール
4.メチルチアゾール
ピラジン..メチル.
フルフラール
オキサゾール..トリメチル.
ブタン酸..3.メチル.
ブタン酸..2.メチル.
2.ヘキセナール
1.ヘキサノール
4.ヘプタノン
ピリジン..2.6.ジメチル.
チアゾール..2.4.ジメチル.
3.ヘプタノン
2.ヘプタノン
3.ヘプタノール
ヘプタナール
メチオナール
ピラジン..2.5.ジメチル.
ピラジン..2.6.ジメチル.
ピラジン..エチル.
ピラジン..2.3.ジメチル.
ピラジン..エテニル.
チアゾール..4.5.ジメチル.
2.ヘプタノン..6.メチル.
ヘキサナール..2.エチル.
2.ヘプテナール...Z..
5.ノネン.2.オン
2.フランカルボキシアルデヒド..5.メチル
ベンズアルデヒド
ヘキサン酸
1.オクテン.3.オール
ジメチル.トリスルフィド
2.5.オクタンジオン
5.ヘプテン.2.オン..6.メチル.
フラン..2.ペンチル.
2.4.ヘプタジエナール...E.E..
ピラジン..2.エチル.6.メチル.
オクタナール
ピラジン..トリメチル.
ピラジン..2.エチル.3.メチル.
2.4.ヘプタジエナール...E.E...1
ピラジン..2.エテニル.6.メチル.
1.ヘキサノール..2.エチル.
3.オクテン.2.オン...E..
2H.ピラン.2.オン..5.6.ジヒドロ.
ベンゼンアセトアルデヒド
3.5.オクタジエン.2.オン...E.E..
アセトフェノン
1.デセン.3.オン
ピラジン..3.エチル.2.5.ジメチル.
ピラジン..テトラメチル.
5.メチル.2.チオフェンカルボキシアルデヒド
g.ヘプタラクトン
リナロール
ノナナール
チモール
フェニルエチル.アルコール
2.3.5.トリメチル.6.エチルピラジン.
酢酸..フェニルメチル.エステル
サフラナール
2.デセナール...E..
g.オクタラコン
o.アミノ.アセトフェノン
2.4.デカジエナール
g.ノンラクトン
イオノン
ゲラニル.アセトン
イオネン
g.ノンラクトン.1
2.4.ノナジエナール...E.E..
2.4.デカジエナール.1
g.ヘプタラクトン.1
イオノン.1
ゲラニル.アセトン.1
a.イオノン
ピーチ.ラクトン.g.ウンデカラクトン
d.デカラクトン
cis.ゲラニルアセトン
d.ドデカラクトン..δ.ノニル.δ.バレララクトン.
d.ウンデカラクトン
の濃度を内部標準に対して決定することによって得られ、前記楕円体が、式Ax2+Bxy+Cy2+Dx+Ey+F=0によって定義され、そして以下の表:
に従ってパラメータ化され、前記楕円体の範囲内に入ることが、
各化合物について、相対濃度を決定し、
各化合物について、以下の表に従ってセンター因子を差し引き、
各化合物について、以下の表に従ってスケール因子で除し、
スケール化および中心化されたデータのドット積をとって、PC1、PC2およびPC3の値を生じさせ、そして
PC1、PC2およびPC3によって定義される前記フレーバー記述子が前記楕円体の範囲内に入るかどうかを決定する
という手順によって決定される、微細藻類粉。
- 前記フレーバー記述子が以下の表:
によってパラメータ化されるより狭い楕円の範囲内に入る、請求項1に記載の微細藻類粉。 - 前記フレーバー記述子が以下の表:
によってパラメータ化されるさらにより狭い楕円の範囲内に入る、請求項2に記載の微細藻類粉。 - 30%よりも高い溶存酸素レベルを維持しながら、開始pH6.8で固定炭素源としてグルコースの存在下、クロレラ・プロトテコイデス(Chlorella protothecoides)の細胞ブロスを暗所で培養し、前記ブロスを75℃で1分間の高温短時間プロセスにさらし、水中で6.4倍に希釈して遠心分離により前記細胞を採取し、酸化防止剤を添加し、粉砕により前記細胞を溶解させ、移動ベルトに対して出力する噴霧乾燥ノズルを用いて乾燥させるというプロセスによって得ることができる、請求項1〜3のいずれか一項に記載の微細藻類粉。
- SPMEまたはSBSEによって決定したときに、ウンデカラクトン(400〜1800ppb)、3−メチルブタナール(0〜11,000ppb)、ペンタナール(160〜10,700ppb)、2−メチルブタナール(0〜2500ppb)、2−ペンタノン(39〜10,600ppb)、および/または3−ペンテン−2−オン(0〜1500ppb)を含む、請求項1〜4のいずれか一項に記載の微細藻類粉。
- 前記粉が脱イオン水中に10%(w/v)で分散される場合、試験パネルによって検出するときに魚またはキャベツフレーバーが検出不能である、請求項1〜5のいずれか一項に記載の微細藻類粉。
- 2000μmにおいて15〜35重量%のオーバーサイズを特徴とする流動性を有する、請求項1〜6のいずれか一項に記載の微細藻類粉。
- 前記粉が白色、淡黄色または黄色である、請求項1〜7のいずれか一項に記載の微細藻類粉。
- 前記粉が5〜20%の脂質を含む、請求項1〜8のいずれか一項に記載の微細藻類粉。
- 前記粉が30〜70%の脂質を含む、請求項1〜8のいずれか一項に記載の微細藻類粉。
- 前記粉が40〜60%の脂質を含む、請求項の1〜8いずれか一項に記載の微細藻類粉。
- 1%(w/v)で水中に溶解したときの前記粉のpHが5.5〜8.5の間である、請求項1〜11のいずれか一項に記載の微細藻類粉。
- 1%(w/v)で水中に溶解したときの前記粉のpHが6.0〜8.0の間である、請求項1〜11のいずれか一項に記載の微細藻類粉。
- 1%(w/v)で水中に溶解したときの前記粉のpHが6.5〜7.5の間である、請求項1〜11のいずれか一項に記載の微細藻類粉。
- 2ppm未満のクロロフィルを有する、請求項1〜14のいずれか一項に記載の微細藻類粉。
- 添加された酸化防止剤をさらに含む、請求項1〜15のいずれか一項に記載の微細藻類粉。
- 前記粉中の前記細胞の大部分が溶解され、任意選択的に、前記細胞の50%〜90%が溶解される、請求項1〜16のいずれか一項に記載の微細藻類粉。
- 緑藻植物門の微細藻類細胞を含み、食物での使用に適した微細藻類粉であって、内部標準に対して実施例6の化合物の濃度を決定するための実施例4のSPMEおよび/または実施例5のSBSEによる分析と、その後の実施例9の手順に従う分析とによって、図2のグラフの黒丸に相当する正のフレーバー群に対して3つの標準偏差を定義する実施例8の楕円体の範囲内に入るフレーバー記述子が得られる、微細藻類粉。
- 前記フレーバー記述子が、実施例7(図2)のグラフの黒丸に相当する正のフレーバー群に対して2つの標準偏差を定義する実施例8の楕円体の範囲内に入る、請求項18に記載の微細藻類粉。
- 前記フレーバー記述子が、実施例7(図2)のグラフの黒丸に相当する正のフレーバー群に対して1つの標準偏差を定義する実施例8の楕円体の範囲内に入る、請求項18に記載の微細藻類粉。
- 30%よりも高い溶存酸素レベルを維持しながら、開始pH6.8で固定炭素源としてグルコースの存在下、クロレラ・プロトテコイデス(Chlorella protothecoides)の細胞ブロスを暗所で培養し、前記ブロスを75℃で1分間の高温短時間プロセスにさらし、水中で6.4倍に希釈して遠心分離により前記細胞を採取し、酸化防止剤を添加し、粉砕により前記細胞を溶解させ、移動ベルトに対して出力する噴霧乾燥ノズルを用いて乾燥させるというプロセスによって得ることができる、請求項18に記載の微細藻類粉。
- SPMEまたはSBSEによって決定したときに、ウンデカラクトン(400〜1800ppb)、3−メチルブタナール(0〜11,000ppb)、ペンタナール(160〜10,700ppb)、2−メチルブタナール(0〜2500ppb)、2−ペンタノン(39〜10,600ppb)、および/または3−ペンテン−2−オン(0〜1500ppb)を含む、請求項18に記載の微細藻類粉。
- 前記粉が脱イオン水中に10%(w/v)で分散される場合、試験パネルによって検出するときに魚またはキャベツフレーバーが検出不能である、請求項18に記載の微細藻類粉。
- 2000μmにおいて15〜35重量%のオーバーサイズを特徴とする流動性を有する、請求項18に記載の微細藻類粉。
- 前記粉が白色、淡黄色または黄色である、請求項18に記載の微細藻類粉。
- 明白な緑色を含まない、請求項18に記載の微細藻類粉。
- 前記粉が5〜20%の脂質を含む、請求項18に記載の微細藻類粉。
- 前記粉が30〜70%の脂質を含む、請求項18に記載の微細藻類粉。
- 前記粉が40〜60%の脂質を含む、請求項1に記載の微細藻類粉。
- 1%(w/v)で水中に溶解したときの前記粉のpHが5.5〜8.5の間である、請求項18に記載の微細藻類粉。
- 1%(w/v)で水中に溶解したときの前記粉のpHが6.0〜8.0の間である、請求項18に記載の微細藻類粉。
- 1%(w/v)で水中に溶解したときの前記粉のpHが6.5〜7.5の間である、請求項18に記載の微細藻類粉。
- 2ppm未満のクロロフィルを有する、請求項18に記載の微細藻類粉。
- 添加された酸化防止剤をさらに含む、請求項18に記載の微細藻類粉。
- 前記粉中の細胞の大部分が溶解され、任意選択的に、前記細胞の50%〜90%が溶解される、請求項18に記載の微細藻類粉。
- 30%よりも高い溶存酸素レベルを維持しながら、開始pH6.8で固定炭素源としてグルコースの存在下、クロレラ・プロトテコイデス(Chlorella protothecoides)の細胞ブロスを暗所で培養し、前記ブロスを75℃で1分間の高温短時間プロセスにさらし、水中で6.4倍に希釈して遠心分離により前記細胞を採取し、粉砕により前記細胞を溶解させ、酸化防止剤を添加し、移動ベルトに対して出力する噴霧乾燥ノズルを用いて乾燥させるというプロセスによって得ることができる微細藻類粉。
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