JP2006101795A - 高クロロフィル及び高カロテノイド含有性のクロレラ及びその製造方法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】 (1)有機炭素源を含有する培地で、クロレラを従属栄養的に培養する工程、及び(2)該従属栄養的に培養したクロレラを、有機炭素源を含有しない培地で培養する工程、を含む同調培養方法による、高クロロフィル及び高カロテノイド含有性のクロレラの製造方法。
【選択図】 なし
Description
また、尿素を添加する場合には、その添加量が5gL-1以下であることが好ましい。尿素の添加量が、5gL-1以上となるとクロレラの成長阻害が生じる。そのため、高濃度の培養を行う場合には、尿素を少しずつ分割して添加することが好ましい。
淡水より単離されたクロレラ・レギュラリスS−50を、メチル−N′−ニトロ−N−ニトロソ・グアニジンを用いて常法により変異処理し、クロレラ・レギュラリスS−50−17株を得た。この株を通常の方法で培養した場合に得られるクロレラの組成は、表1に示すとおりであり、カロテノイド含量が480mg/乾燥藻体100g、クロロフィル含量2500mg/乾燥藻体100gであった。また、このようにして得られるクロレラの細胞は、容積の大きな細胞が不均一に混在し、同調化はされていなかった。
グルコース;7g、KH2PO4;1.0g、MgSO4・7H2O;1.0g、クエン酸;0.06g、FeSO4・7H2O;0.009g、Arons'sA5;1.0mL、CaCl・2H2O;0.016g及び尿素;2.5gを、700mLの水に溶解させることにより基本培地を調製した。また、工程1の培養中に添加する添加培地は、グルコース;171g、KH2PO4;5.9g、MgSO4・7H2O;3.5g、クエン酸;1.4g、FeSO4・7H2O;0.22g、Arons'sA5;3.0mL、CaCl・2H2O;0.38g及び尿素;12.7gを、300mLの水に溶解させることにより調製した。なお、これらの培地は、115℃で20分間滅菌処理した尿素溶液を、別途121℃、30分間の条件で殺菌処理した尿素を含まない培地に無菌的に添加して調製した。
一方、クロレラ・レギュラリスS−50−17株は、本発明の工程1と工程2により反復培養して同調化した細胞をシードとして用いた。
得られた細胞は、遠心分離により洗浄・濃縮し、さらに細胞質の酵素を不活性化するために加熱処理し、スプレードライヤーで乾燥することにより、乾燥粉末を得た。なお、乾燥粉末は、使用した全グルコース1400kgに対し、630kg(乾燥質量)得られ、対糖収率は0.45であった。
また、クロロフィルやカロテノイドの含有量は、通常の培養により得られるクロレラ(表1参照)よりも明らかに高い数値を示した。
本発明の方法による細胞の生産性は、67.2g/L・dayであり、カロテノイド、ルテイン、トコフェノール、及びクロロフィルの生産性は、それぞれ484mg/L・day、235mg/L・day、15mg/L・day及び2.4mg/L・dayであった。
この結果、工程1では、細胞が大きくなり(細胞容積の増大)、工程2で細胞の分裂(娘細胞の生成)が同調しておきていることが分かる。
その結果、工程1では3.0〜4.5mmol O2/gh、工程2では2.0〜2.5mmol O2/ghであった。
Claims (5)
- (1)有機炭素源を含有する培地で、クロレラを従属栄養的に培養する工程、及び(2)該従属栄養的に培養したクロレラを、有機炭素源を含まない培地で培養する工程、を含む同調培養方法による、高クロロフィル及び高カロテノイド含有性のクロレラの製造方法。
- クロレラがクロレラ・レギュラリス(Chlorella regularis)又はクロレラ・ソロキニアナ(Chlorella sorokiniana)である請求項1記載の製造方法。
- (1)有機炭素源を含有する培地で、クロレラを従属栄養的に培養する工程の培地中の酸素濃度が、3.0mmol O2g-1h-1以上であり、(2)該従属栄養的に培養したクロレラを、有機炭素源を含まない培地で培養する工程の培地中の酸素濃度が、2.0mmol O2g-1h-1以上である、請求項1又は2記載の製造方法。
- (1)有機炭素源を含有する培地で、クロレラを従属栄養的に培養する工程、及び(2)該従属栄養的に培養したクロレラを、有機炭素源を含有しない培地で培養する工程、を含む同調培養方法により得られる、乾燥藻体当りクロロフィル含量が20mg/g以上かつ総カロテノイド含量が3mg/g以上である高クロロフィル及び高カロテノイド含有性のクロレラ。
- クロレラがクロレラ・レギュラリス(Chlorella regularis)又はクロレラ・ソロキニアナ(chlorella sorokiniana)である請求項4記載の高クロロフィル及び高カロテノイド含有性のクロレラ。
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