JP2016537986A - 微細藻類バイオマスのカロテノイドおよびタンパク質を富化するためのプロセス - Google Patents
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Abstract
Description
細菌や酵母に使用されるものと同じ発酵槽が使用可能であるため、全ての培養パラメータを制御することができることに加えて、
光を基礎とする培養により得られるバイオマス生産量を大幅に上回る生産量が得られるためである。
色素(クロロフィルa、bおよびc、β−カロテン、アスタキサンチン、ルテイン、フィコシアニン、キサントフィル、フィコエリトリン等):これらは顕著な抗酸化性を示すだけでなく、食品用の天然の着色料としても使用できることから、需要が高まりつつある。
タンパク質:栄養価を最適化するために使用される。または、
脂質:特に次の用途に使用するために、脂肪酸含有量が最適化される(固形分の60重量%以下または80重量%とする場合さえある):
・バイオ燃料用途、加えて、
・食品または動物飼料用途(選択された微細藻類が「必須」(すなわち、ヒトまたは動物体内で天然に合成されないため、食事によって供給される)多価不飽和脂肪酸すなわちPUFAを産生する場合)。
制御することを選択する。
例えば、微細藻類のいくつかの種における多価不飽和脂肪酸の合成(例えば、クロレラ・ミニツシマ(Chlorella minutissima)によるEPAの合成等)は、上記微細藻類の増殖に必要とされる至適温度よりも低い温度で促進されることが報告されている。
他方、クロレラ・プロトセコイデス(Chlorella protothecoides)の従属栄養培養においては、生産温度を24℃から35℃に上げるとルテインの収率が増加する。
発酵培地においてタンパク質に変換される炭素源の添加量を一定に維持しながら多量の窒素源を供給し、かつ
微細藻類の増殖を刺激する
ように発酵条件を修正するに至った。
カロテノイド「富化」とは、最少培地のみで培養したバイオマス中のカロテノイド含有量と比較して、バイオマス中のカロテノイド含有量をバイオマスの総重量の少なくとも0.05%、好ましくは少なくとも0.1%増加させることを意味することを意図している。好ましくは、本発明による方法により得られるバイオマス中のカロテノイド含有量は、バイオマス総重量の少なくとも0.35%であり、より詳細には、好ましくは、バイオマスの総重量の少なくとも0.4%である。
炭素源およびエネルギー源:一般にグルコース
カリウム源およびリン源:例えばK2HPO4
窒素源および硫黄源:例えば(NH4)2SO4
マグネシウム源:例えばMgSO4・7H2O
カルシウム源:例えばCaCl2・2H2O
鉄源:例えばFeSO4・7H2O
微量元素源:Cu、Zn、Co、B、Mn、Moの各塩
ビタミン源(チアミン、ビオチン、ビタミンB12等)
を含む。
の窒素源の供給量は、発酵培地に含まれる全窒素(無機源および有機源併せて)の10%以下である。
微細藻類を最少培地で培養する第1ステップと、
酵母エキス、コーンスティープリカーおよびこれらの組合せからなる群から選択される有機形態の窒素源を上記最少培地に添加する第2培養ステップと
を含む方法にも関する。
養するための方法であって:
微細藻類を最少培地で増殖させる第1ステップと、
この最少培地に酵母エキスを添加する第2ステップと
を含む、方法に関する。
最少培地のみで培養されたバイオマス中のカロテノイド含有量と比較して、バイオマス中のカロテノイド含有量をバイオマスの総重量の少なくとも0.05%、好ましくは少なくとも0.1%増加させ、および/または
最少培地のみで培養されたバイオマス中のタンパク質含有量と比較して、バイオマス中のタンパク質含有量をバイオマスの総重量の少なくとも5%、好ましくは少なくとも10%増加させることができる。
カロテノイド含有量は、バイオマスの総重量の少なくとも0.35%、好ましくは、バイオマスの総重量の少なくとも0.4%であり、および/または
タンパク質含有量は、バイオマス総重量の少なくとも45%、好ましくは、バイオマス総重量の少なくとも50%である。
クロレラ・ソロキニアーナUTEX 1663株を使用する。
2L容の三角フラスコに培地600mLを入れる。
培地組成を次に示す。
基本培地は、尿素をNH4Clに置き換えたことを除いて前培養と同じ培地とする。
試験2:酵母エキス1g/Lを添加する。
S=12・exp(0.07×t)
(式中、Sはグルコース供給速度(g/h)であり、tは流加方式の継続時間(h)である)。
得られたバイオマスの全窒素を測定することにより、タンパク質含有量を求める(N×6.25として計算)。
Claims (16)
- 従属栄養培養された微細藻類バイオマスをカロテノイド富化およびタンパク質富化するための方法であって、前記微細藻類を有機形態の窒素源を補充した最少培地で培養することを含む、方法。
- 前記微細藻類がクロレラ(Chlorella)属に属する微細藻類であることを特徴とする、請求項1に記載の方法。
- 前記微細藻類が、クロレラ・ソロキニアーナ(Chlorella sorokiniana)、クロレラ・ブルガリス(Chlorella vulgaris)およびコレラ・ケスレリ(Chorella kessleri)から選択されることを特徴とする、請求項1に記載の方法。
- 前記微細藻類がクロレラ・ソロキニアーナ(Chlorella sorokiniana)であることを特徴とする、請求項1または2に記載の方法。
- 前記有機形態の窒素源が、酵母エキス、コーンスティープリカーおよびこれらの組合せからなる群からから選択されることを特徴とする、請求項1乃至4のいずれか一項に記載の方法。
- 前記有機形態の窒素源が酵母エキスであることを特徴とする、請求項1乃至5のいずれか一項に記載の方法。
- 前記有機形態の窒素源がコーンスティープリカーであることを特徴とする、請求項1乃至6のいずれか一項に記載の方法。
- 有機形態の窒素源の添加量が、発酵培地に含まれる全窒素の10%以下であることを特徴とする、請求項1乃至7のいずれか一項に記載の方法。
- 前記最少培地に酵母エキスが0.5〜3g/L、好ましくは、酵母エキスが1〜2g/L補充されることを特徴とする、請求項1乃至8のいずれか一項に記載の方法。
- 最少培地のみで培養されたバイオマス中のカロテノイド含有量と比較して、前記バイオマス中のカロテノイド含有量を、前記バイオマスの総重量の少なくとも0.05%、好ましくは少なくとも0.1%に増加させることを特徴とする、請求項1乃至9のいずれか一項に記載の方法。
- 最少培地のみで培養されたバイオマス中のタンパク質含有量と比較して、前記バイオマス中のタンパク質含有量を、前記バイオマスの総重量の少なくとも5%、好ましくは少なくとも10%に増加させることを特徴とする、請求項1乃至10のいずれか一項に記載の方法。
- 取得される前記バイオマス中のカロテノイド含有量が、前記バイオマスの総重量の少なくとも0.35%、好ましくは前記バイオマスの総重量の少なくとも0.4%であることを特徴とする、請求項1乃至11のいずれか一項に記載の方法。
- 取得される前記バイオマス中のタンパク質含有量が、前記バイオマスの総重量の少なくとも45%、好ましくは、前記バイオマスの総重量の少なくとも50%であることを特徴とする、請求項1乃至12のいずれか一項に記載の方法。
- 前記微細藻類を最少培地で培養する第1ステップと、
酵母エキスまたはコーンスティープリカーを前記最少培地に添加する第2培養ステップと
を含むことを特徴とする、請求項1乃至13のいずれか一項に記載の方法。 - クロレラ・ソロキニアーナ(Chlorella sorokiniana)種の微細藻類を最少培地で増殖させる第1ステップと、
前記最少培地に酵母エキスを添加する第2培養ステップと
を含むことを特徴とする、請求項1乃至14のいずれか一項に記載の方法。 - 前記第2ステップにおいて、前記微細藻類のグルコース消費能力よりも大幅に低い速度でグルコースを連続的に供給することを特徴とする、請求項14および15のいずれかに記載の方法。
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