JP2007537727A - 受精で用いられる精子分散液 - Google Patents
受精で用いられる精子分散液 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2007537727A JP2007537727A JP2007506489A JP2007506489A JP2007537727A JP 2007537727 A JP2007537727 A JP 2007537727A JP 2007506489 A JP2007506489 A JP 2007506489A JP 2007506489 A JP2007506489 A JP 2007506489A JP 2007537727 A JP2007537727 A JP 2007537727A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- sperm
- dispersion
- combination
- cells
- chromosome
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Withdrawn
Links
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 title claims abstract description 276
- 230000004720 fertilization Effects 0.000 title claims abstract description 49
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 133
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 65
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims abstract description 55
- 230000004899 motility Effects 0.000 claims abstract description 22
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 182
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 36
- 239000011591 potassium Substances 0.000 claims description 36
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 claims description 34
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 claims description 31
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 claims description 31
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 31
- 210000001766 X chromosome Anatomy 0.000 claims description 26
- 210000002593 Y chromosome Anatomy 0.000 claims description 26
- 241000894007 species Species 0.000 claims description 21
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 claims description 17
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 claims description 17
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- 210000002969 egg yolk Anatomy 0.000 claims description 16
- 235000013345 egg yolk Nutrition 0.000 claims description 16
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 230000009027 insemination Effects 0.000 claims description 12
- 239000010902 straw Substances 0.000 claims description 11
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 claims description 10
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 9
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 8
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 7
- 238000005138 cryopreservation Methods 0.000 claims description 6
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 claims description 5
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 claims description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 5
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 claims description 3
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 claims description 3
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 claims description 3
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 claims description 3
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 claims description 2
- 201000010063 epididymitis Diseases 0.000 claims description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 claims 14
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims 8
- 230000002338 cryopreservative effect Effects 0.000 claims 3
- 241000283086 Equidae Species 0.000 claims 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 claims 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N carbonic acid Chemical compound OC(O)=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 abstract description 5
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 48
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 45
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N carbon dioxide Natural products O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 35
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 32
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 29
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 25
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 23
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 23
- 210000000582 semen Anatomy 0.000 description 19
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 18
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 18
- 239000004606 Fillers/Extenders Substances 0.000 description 16
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 13
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 13
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 11
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 10
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 10
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 9
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 9
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 9
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 8
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 8
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 8
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical group OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 7
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 7
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 7
- 230000008569 process Effects 0.000 description 7
- 238000006722 reduction reaction Methods 0.000 description 7
- 108010073771 Soybean Proteins Proteins 0.000 description 6
- FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N hexanoic acid Chemical compound CCCCCC(O)=O FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 6
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 6
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 6
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 6
- 229940001941 soy protein Drugs 0.000 description 6
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 5
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 5
- 239000003570 air Substances 0.000 description 5
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 5
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 5
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 5
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 5
- 229910001414 potassium ion Inorganic materials 0.000 description 5
- PRDFBSVERLRRMY-UHFFFAOYSA-N 2'-(4-ethoxyphenyl)-5-(4-methylpiperazin-1-yl)-2,5'-bibenzimidazole Chemical compound C1=CC(OCC)=CC=C1C1=NC2=CC=C(C=3NC4=CC(=CC=C4N=3)N3CCN(C)CC3)C=C2N1 PRDFBSVERLRRMY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 description 4
- LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M Pyruvate Chemical compound CC(=O)C([O-])=O LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-N Pyruvic acid Chemical compound CC(=O)C(O)=O LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 4
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 4
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 4
- -1 carbon dioxide ions Chemical class 0.000 description 4
- 239000002577 cryoprotective agent Substances 0.000 description 4
- 230000035558 fertility Effects 0.000 description 4
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 4
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 description 4
- 229940076788 pyruvate Drugs 0.000 description 4
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 3
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 3
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108090000723 Insulin-Like Growth Factor I Proteins 0.000 description 3
- OJMMVQQUTAEWLP-UHFFFAOYSA-N Lincomycin Natural products CN1CC(CCC)CC1C(=O)NC(C(C)O)C1C(O)C(O)C(O)C(SC)O1 OJMMVQQUTAEWLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229930182558 Sterol Natural products 0.000 description 3
- 102000019197 Superoxide Dismutase Human genes 0.000 description 3
- 108010012715 Superoxide dismutase Proteins 0.000 description 3
- 102000009618 Transforming Growth Factors Human genes 0.000 description 3
- 108010009583 Transforming Growth Factors Proteins 0.000 description 3
- 239000012080 ambient air Substances 0.000 description 3
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 3
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 3
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 3
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 229960005287 lincomycin Drugs 0.000 description 3
- OJMMVQQUTAEWLP-KIDUDLJLSA-N lincomycin Chemical compound CN1C[C@H](CCC)C[C@H]1C(=O)N[C@H]([C@@H](C)O)[C@@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](SC)O1 OJMMVQQUTAEWLP-KIDUDLJLSA-N 0.000 description 3
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 3
- 229910001415 sodium ion Inorganic materials 0.000 description 3
- 229960000268 spectinomycin Drugs 0.000 description 3
- 150000003432 sterols Chemical class 0.000 description 3
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 description 3
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 3
- AZQWKYJCGOJGHM-UHFFFAOYSA-N 1,4-benzoquinone Chemical compound O=C1C=CC(=O)C=C1 AZQWKYJCGOJGHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 2
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 2
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 2
- 102000004218 Insulin-Like Growth Factor I Human genes 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 2
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 2
- 229930003448 Vitamin K Natural products 0.000 description 2
- 239000012888 bovine serum Substances 0.000 description 2
- 230000009087 cell motility Effects 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 2
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 2
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 2
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 2
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 2
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 2
- AGBQKNBQESQNJD-UHFFFAOYSA-M lipoate Chemical compound [O-]C(=O)CCCCC1CCSS1 AGBQKNBQESQNJD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 235000019136 lipoic acid Nutrition 0.000 description 2
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000002159 nanocrystal Substances 0.000 description 2
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 2
- SHUZOJHMOBOZST-UHFFFAOYSA-N phylloquinone Natural products CC(C)CCCCC(C)CCC(C)CCCC(=CCC1=C(C)C(=O)c2ccccc2C1=O)C SHUZOJHMOBOZST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- INAAIJLSXJJHOZ-UHFFFAOYSA-N pibenzimol Chemical compound C1CN(C)CCN1C1=CC=C(N=C(N2)C=3C=C4NC(=NC4=CC=3)C=3C=CC(O)=CC=3)C2=C1 INAAIJLSXJJHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 2
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 2
- 229940107700 pyruvic acid Drugs 0.000 description 2
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 239000012090 serum-supplement Substances 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- UNFWWIHTNXNPBV-WXKVUWSESA-N spectinomycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](NC)[C@@H](O)[C@H]([C@@H]([C@H]1O1)O)NC)[C@]2(O)[C@H]1O[C@H](C)CC2=O UNFWWIHTNXNPBV-WXKVUWSESA-N 0.000 description 2
- 230000019100 sperm motility Effects 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 229960002663 thioctic acid Drugs 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000019168 vitamin K Nutrition 0.000 description 2
- 239000011712 vitamin K Substances 0.000 description 2
- 150000003721 vitamin K derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 229940046010 vitamin k Drugs 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710126783 Acetyl-hydrolase Proteins 0.000 description 1
- LPMXVESGRSUGHW-UHFFFAOYSA-N Acolongiflorosid K Natural products OC1C(O)C(O)C(C)OC1OC1CC2(O)CCC3C4(O)CCC(C=5COC(=O)C=5)C4(C)CC(O)C3C2(CO)C(O)C1 LPMXVESGRSUGHW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283073 Equus caballus Species 0.000 description 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- LPMXVESGRSUGHW-GHYGWZAOSA-N Ouabain Natural products O([C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O1)[C@H]1C[C@@H](O)[C@@]2(CO)[C@@](O)(C1)CC[C@H]1[C@]3(O)[C@@](C)([C@H](C4=CC(=O)OC4)CC3)C[C@@H](O)[C@H]21 LPMXVESGRSUGHW-GHYGWZAOSA-N 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 108010093965 Polymyxin B Proteins 0.000 description 1
- AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N Riboflavin Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000013275 Somatomedins Human genes 0.000 description 1
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 1
- 244000166550 Strophanthus gratus Species 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ONXOKWFYBIQOFQ-VSXSCALHSA-N ac1l4s0d Chemical compound OS(O)(=O)=O.O([C@@H]1[C@@H](NC)[C@@H](O)[C@H]([C@@H]([C@H]1O1)O)NC)[C@]2(O)[C@H]1O[C@H](C)CC2=O.O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](SC)O[C@@H]1[C@@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H]1N(C)C[C@H](C(C)C)C1 ONXOKWFYBIQOFQ-VSXSCALHSA-N 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000362 adenosine triphosphatase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000006536 aerobic glycolysis Effects 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 235000021258 carbohydrate absorption Nutrition 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 150000004649 carbonic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 1
- 230000000687 effect on sperms Effects 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 1
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 1
- 235000003969 glutathione Nutrition 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 230000003100 immobilizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000011261 inert gas Substances 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 125000000325 methylidene group Chemical group [H]C([H])=* 0.000 description 1
- 238000000520 microinjection Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 239000003068 molecular probe Substances 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- LPMXVESGRSUGHW-HBYQJFLCSA-N ouabain Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1C[C@@]2(O)CC[C@H]3[C@@]4(O)CC[C@H](C=5COC(=O)C=5)[C@@]4(C)C[C@@H](O)[C@@H]3[C@@]2(CO)[C@H](O)C1 LPMXVESGRSUGHW-HBYQJFLCSA-N 0.000 description 1
- 229960003343 ouabain Drugs 0.000 description 1
- 210000004681 ovum Anatomy 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000000149 penetrating effect Effects 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 238000005502 peroxidation Methods 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 229920000024 polymyxin B Polymers 0.000 description 1
- 229960005266 polymyxin b Drugs 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 125000001325 propanoyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 239000002096 quantum dot Substances 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000000284 resting effect Effects 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 229960004659 ticarcillin Drugs 0.000 description 1
- OHKOGUYZJXTSFX-KZFFXBSXSA-N ticarcillin Chemical compound C=1([C@@H](C(O)=O)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)C=CSC=1 OHKOGUYZJXTSFX-KZFFXBSXSA-N 0.000 description 1
- 229960004441 tyrosine Drugs 0.000 description 1
- 210000001215 vagina Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/48—Reproductive organs
- A61K35/52—Sperm; Prostate; Seminal fluid; Leydig cells of testes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N1/00—Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
- A01N1/02—Preservation of living parts
- A01N1/0205—Chemical aspects
- A01N1/021—Preservation or perfusion media, liquids, solids or gases used in the preservation of cells, tissue, organs or bodily fluids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N1/00—Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
- A01N1/02—Preservation of living parts
- A01N1/0205—Chemical aspects
- A01N1/021—Preservation or perfusion media, liquids, solids or gases used in the preservation of cells, tissue, organs or bodily fluids
- A01N1/0226—Physiologically active agents, i.e. substances affecting physiological processes of cells and tissue to be preserved, e.g. anti-oxidants or nutrients
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0608—Germ cells
- C12N5/061—Sperm cells, spermatogonia
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0608—Germ cells
- C12N5/0611—Primordial germ cells, e.g. embryonic germ cells [EG]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
- C12N2500/05—Inorganic components
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
- G01N1/30—Staining; Impregnating ; Fixation; Dehydration; Multistep processes for preparing samples of tissue, cell or nucleic acid material and the like for analysis
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Dentistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Physiology (AREA)
- Virology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
内因的に射精された精子に対して減少した運動性を有する精子分散液の形態で仕分けられたおよび仕分けられていない精子を保存する方法が開示される。該分散液の該不動性精子は、保存、輸送、および受精手順と関連した困難を耐えるより大きい能力を有する傾向がある。また、そのような精子分散液を提供するための方法、そのような精子分散液によって雌の哺乳類を受精するための方法、ならびに該精子分散液を含む組成物および組合せも開示される。
Description
本発明は、一般的には、精子細胞を保存する方法に関する。より具体的には、本発明は、内在性の射精された精子に関して減少した運動性を有する仕分けられたおよび仕分けられていない精子を保存する方法、雌の哺乳類を受精させるためにそのような精子分散液を提供するための方法、そのような精子分散液を用いて雌の哺乳類を受精するための方法に関する。
インビトロ受精に続く人工授精(AI)および胚移植による動物の受精は、確立された手順である。この手順において使用される精子の生存性および運動性は、該手順の結果（つまり、該受精および受精手順が上手く子孫を生じるか）に影響を及ぼすため、該精子細胞が、例えば、細胞の収集、保存、および輸送を含む該受精手順と関連することの多い困難を生存することが可能であることが重要である。
一例として、畜産業において、特定の性別の子孫のような１以上の好ましい特徴を有する子孫に向けた繁殖結果に影響を及ぼす能力が、しばしば望まれる。そのような結果を達成するために、雄の哺乳類からの精液試料を収集し、色素で染色し、引き続いてXおよびY染色体担持細胞に仕分け、所望により、冷凍または冷却状態で、一定期間保存し、次いで、雌の哺乳類が最終的に受精される育種の位置に移送する。これらのプロセスの工程の各々は、精子細胞生存率または運動率、特に前進運動率を減少する精子細胞に重点を置く。
Salisbury et al.は、射精されたウシ血清を直接的に、細胞運動性を阻害し周辺の精漿から炭水化物の吸収を防ぐ希釈剤へ収集するための技術を記載する。該射精液が希釈剤に収集され、液体の上の空気相を100% CO2でガスを抜くことによって置き換えると、該射精液中の細胞は動かなくなった。該細胞が該希釈剤中に留まり、空気が排除される限り、該細胞は、室温にて数時間および5℃にて少なくとも8日間、動かないままだった。
本発明の種々の態様のなかに、保存、移送、または受精の困難から精子を保護するために、それらに対して該精子を不動にするための方法がある。従って、本発明の１つの具体例において、精子および該精子によって炭水化物の取り込みを下方制御する組成物を含む、精子懸濁液と呼ばれることもある精子分散液が形成される。
従って、簡潔には、本発明は、仕分けられていない精子を仕分けるための方法に指向され、該方法は、精子、精子不動性を誘導する組成物、および抗生物質を含む精子分散液を形成し、該精子分散液を仕分けることを特徴とする。
本発明は、さらに、仕分けられた精子を保存するための方法に指向され、ここに、該方法は、精子および精子不動性を誘導する組成物を含む精子分散液を形成し、集団のうちの１つの該精子が少なくとも約65% X染色体担持精子細胞または少なくとも約65% Y染色体担持精子細胞を含む該別々の集団に該精子分散液を仕分け、次いで、該１つの集団を約-4℃ないし約30℃の温度にて保存することを特徴とする。
本発明は、さらに、雌の哺乳類を受精させるための方法に指向され、ここに該方法は精子および精子不動性を誘導する組成物を含む精子分散液によって、雌の哺乳類を受精させることを特徴とする。
本発明は、さらに、雌の哺乳類を受精させるために新たな精子分散液を提供するための方法に指向され、ここに該方法は、精子および精子不動性を誘導する組成物を含む精子分散液を形成し、離れた場所への輸送のために容器内に該精子分散液を入れ、次いで、該精子分散液を形成後約24時間以内に離れた場所に該容器中の該精子分散液を輸送することを特徴とする。
本発明は、さらに、雌の哺乳類の受精において使用するための細長い容器、および不動性精子および精子不動性を誘導する組成物を含む精子分散液を含む組合せに指向される。該精子分散液は該細長い容器中に含有される。
本発明は、さらに、不動性精子、精子不動性を誘導する組成物、および低温保存剤を含む精子分散液に指向される。また、該精子分散液は、例えば、抗生物質、成長因子、カプロン酸、カタラーゼ、または細胞内でおよび／または細胞外で酸化／還元反応を制御する組成物のような精子生存性を高める添加剤を含有してもよい。
本発明の他の態様および特徴は、部分的に明白であり、部分的に以後示されるであろう。
驚くべきことに、（同一種の）内因的に射精された精子に対して減少した運動性、およびより具体的には一時的に誘導された不動性を有する精子が、該精子を冷凍するために必要性なしに、保存および輸送の期間を耐えるのにより大きい能力を有する傾向があると決定されている。該精子は、該不動性精子による雌の哺乳類の受精まで該源哺乳類から収集される時点から、減少された運動性の状態で維持され得る。従って、好ましい具体例において、特定の濃度の、仕分けられたまたは仕分けられていない新鮮な、冷凍されていない精子、または増加した数の生存可能な細胞または増加した数の運動精子対冷凍され引き続いて解凍されている同一の特定の濃度の精子を有する受精を、保存、輸送のために調製してもよい。
（例えば、人工授精ストロー中に含有された細胞のパーセンテージのような）該分散液のアリコート中に含有されたより大きいパーセンテージの細胞が、生存可能、前進運動性であり、従って、卵を受精させることが潜在的に可能であるように、精子分散液中の増加した生存性の精子の結果として、より少ない密度の精子を含有する精子分散液のアリコートを、受精または受精手順に使用してもよい。同様に、分散液のアリコート内のより小さい密度の精子細胞が、受精または受精手順に必要であるため、精子分散液の形態の単一射精液は、受精または受精手順での使用のためにより大きい数のアリコートに分割されてもよい。
本発明の方法に従って、精子および該精子の運動性を阻害する１以上の組成物を含有する分散液が形成され；ここに阻害された運動性のそのような状態は、不動性または精子静止状態と呼ばれることもある。一般的には、該分散液は、少なくとも約1X103精子/mlの密度で、およびより好ましくは分散液の少なくとも約0.1x106精子/mlおよび一般的には約5X1010精子/mlを超えない、より好ましくは一般的には分散液の約5x108精子/mlを超えない密度で、精子を含有するであろう。例えば、１つの具体例において、該懸濁液は、「比較的低い」密度で、つまり、懸濁液の約1X107精子/ml未満、好ましくは約1X106精子/ml未満、より好ましくは約1X103ないし約5X106精子/ml、さらにより好ましくは約1X103ないし約1X106精子/ml、さらにより好ましくは約1X104ないし約1X105精子/ml、および最も好ましくは約1X105精子/mlの密度で精子を含有してもよい。代替の具体例において、該懸濁液は、「中程度」の密度で、つまり、懸濁液の約1X107ないし約1X108精子/mlの密度で精子を含有し得る。さらにもう１つの代替の具体例において、該懸濁液は、「比較的高い」密度で、つまり、懸濁液の少なくとも約1x108精子/ml、好ましくは約1X108ないし約5X1010精子/ml、より好ましくは約1.5X108ないし約2X1010精子/ml、さらにより好ましくは約1.5X108ないし約2X108精子/ml、およびさらにより好ましくは約1.5X108精子/mlで、精子を含有してもよい。従って、例えば、１つの具体例において、該分散液は、分散液の少なくとも約0.04x106、少なくとも約1x106、少なくとも約1.5x106、少なくとも約2x106、少なくとも約3x106、少なくとも約0.5x107、少なくとも約1x107、少なくとも約2x107、少なくとも約3x107、少なくとも約4x107、少なくとも約5x107、少なくとも約6x107、少なくとも約7x107、少なくとも約8x107、少なくとも約9x107、またはさらに少なくとも約12x107精子/mlを含有し得る。代替の具体例において、該懸濁液は、懸濁液の約9X105未満、約7X105未満、約5X105未満、約2X105未満、約1X105未満、約1X104未満、またはさらに約1X103精子/mlを含有し得る。
精子の密度は、例えば、該精子が得られる哺乳類の種類を含む多くの要因によって変動し得る。例えば、ウシ精子は、より高密度での分散液中に、典型的には、例えば約0.5 mlないし約25mlの容量中に0.5x 106精子/mlないし約8x107精子/mlのような、より小容量中に存在し得る。しかしながら、ブタ精子は、より低密度の分散液中に、典型的には、例えば約50mlないし約250mlの容量中の0.04x 106精子/mlないし約1x107精子/mlのようなより大きい容量中に存在し得る。
精子分散液中の精子の密度は、個々の哺乳類または種特異的要因によって変動し得る。そのような要因の例は、例えば、異なる種の哺乳類間の偏差、単一種の哺乳類間の偏差、およびさらに単一哺乳類の異なる射精液間の偏差を含む。
また、該精子分散液中の該精子の密度は、人工的に操作されて、特異的な精子密度の分散液を達成し得る。例えば、受精ストロー中に含有された精子分散液中の精子の密度への操作は、該分散液が保存される温度、該保存期間の長さ、該精子分散液中の該精子が仕分けられるか仕分けられないか、該精子が収集される雄の哺乳類の種、該精子が収集される哺乳類の受胎能力、および受精される該雌の哺乳類の種のような要因に基づきなされてもよい。
また、精子分散液中の精子の密度は、該精子細胞が引き続いて豊富化されるまたは仕分けられ得る方法によって影響を受け得る。例えば、該精子細胞は、下記により詳細に記載されるように、フローサイトメトリーを用いて仕分けられてもよい。そのような例において、該緩衝された精子懸濁液は、典型的には、「中程度」または「比較的高い」密度の精子のものであってよい。他の仕分けまたは豊富化技術は、例えば、本明細書中に記載の色素および標識のようなマーカーによって標識された「比較的低い」密度の精子のようなより低密度の精子から利益を得てもよい。
また、精子分散液中の該精子の密度は、例えば、遠心分離によってのように、該精子を単に濃縮することによって影響され得る。そのような例において、該分散液は、一般的にペレット (最小量の流体を含有する細胞のマス)および上澄み (溶解性液体画分)と呼ばれるものに、実質的に分離するであろう。次いで、該上澄みは、該ペレットの分裂なしにデカントされ、それにより、最小量の該阻害緩衝液を含有する精子細胞の比較的密なペレットを生じ、ここに、該効果は、該分散液の成分を変化せずに、該分散液の容量を減少させることである。結果として、該ペレットの該精子細胞は、不動状態のままである。
好ましい具体例において、本発明の分散液中の精子は、特定の態様において、精巣上体精子の特徴的な様式で動き；例えば、該精子は、不動であり得、より少ない割合の固有呼吸を有し得、あるいは新たに射精された精子と比較して、より大きい割合の好気的解糖を有し得る。有利には、該阻害された精子は、（複数の）阻害剤からの分離の際、運動性に関して、１つの具体例において、運動性および呼吸に関して、射精された精子に特徴的である（精巣上体精子の特徴でない）様式で動く能力を有する。
１つの具体例において、例えば、該運動阻害剤は、HTM-IVOS精子分析 (Hamilton-Thorne HTM-IVOSコンピューター補助精子分析システム Hamilton-Thorne Research, Beverly MA)によって測定されるように、該同一種の新たな射精液中の精子細胞の経路速度、前進速度、または両方に対して、該分散液中の精子細胞の少なくとも約50%の経路速度、前進速度、または両方を減少する。好ましくは、該運動阻害剤は、HTM-IVOS精子分析によって測定されるように、同一種の新たな射精液中の経路速度、前進速度、または両方に対して、該分散液中の精子細胞の経路速度、前進速度、または両方を減少する。より好ましくは、該運動阻害剤は、HTM-IVOS精子分析によって測定されるように、該同一種の新たな射精液中の精子細胞の経路速度、前進速度、または両方に対して、該分散液中の精子細胞の少なくとも約70%の経路速度、前進速度、または両方を減少する。さらにより好ましくは、HTM-IVOS精子分析によって測定されるように、該同一種の新たな射精液中の精子細胞の経路速度、前進速度、または両方に対して、該分散液中の該精子細胞の少なくとも約80%の経路速度、前進速度、または両方を減少する。さらにより好ましくは、該運動阻害剤は、HTM-IVOS精子分析によって測定されるように、該同一種の新たな射精液中の精子細胞の経路速度、前進速度、または両方に対して、該分散液中の該精子細胞の少なくとも約90%の経路速度、前進速度、または両方を減少する。さらにより好ましくは、該運動阻害剤は、HTM-IVOS精子分析によって測定されるように、該同一種の新たな射精液中の精子細胞の経路速度、前進速度、または両方に愛して、該分散液中の該精子細胞の少なくとも約95%の経路速度、前進速度、または両方を減少する。最も好ましくは、該運動阻害剤は、HTM-IVOS精子分析によって測定されるように、該同一種の新たな射精液中の精子細胞の経路速度、前進速度、または両方に対して、該分散液中の該精子細胞の少なくとも約99%の経路速度、前進速度、または両方を減少する。
阻害緩衝液に加えてまたはその代わりに、精子細胞または精子細胞を取り囲む直接的な環境(つまり、精子分散液)の温度は、単に減少させて、該細胞の該運動性に影響を及ぼしてもよい。そのような温度の減少は、一般的には、不動性を増加させるであろう。さらに、例えば、該精子細胞または該精子分散液の温度の減少は、不動性を誘発するのに使用される阻害剤の濃度の減少を許容し得る。従って、該精子分散液は、5℃を超えない；好ましくは約0℃および約5℃の間; より好ましくは約3℃および約5℃の間; および最も好ましくは約5℃の温度であってよい。別法として、該精子分散液は、約4℃ないし約50℃; 好ましくは約7℃ないし約43℃; より好ましくは約10℃ないし約39℃; さらにより好ましくは約15℃ないし約30℃; さらにより好ましくは約17℃ないし約25℃の範囲内;および最も好ましくは約18℃の温度であってよい。しかしながら、好ましくは、該精子細胞は、該細胞の生存性に実質的に悪影響を及ぼす温度に暴露されない。
該阻害剤は、精子運動性に対して抑圧効果を有する範囲の組成物のいずれかであってよい。そのような組成物は、例えば、ウアバインのようなナトリウム/カリウム ATPase阻害剤;カリウムイオンを含む組成物;およびカリウムおよびナトリウムイオンを含む組成物を含む。例えば、該分散液中の比較的高濃度のカリウムイオンは、精子運動性を抑制する傾向がある。従って、一般的には、該分散液がカリウムイオンの源を含有し、該分散液中の該カリウム濃度が少なくとも約0.05モル/Lであることが好ましい。より好ましくは、該カリウム濃度は、少なくとも約0.05モル/Lないし約0.5モル/Lである。さらにより好ましくは、該カリウム濃度は、少なくとも約0.1モル/Lないし約0.3モル/Lである。最も好ましくは、該カリウム濃度は、約0.173モル/Lである。また、そのような分散液は、典型的には、その必要はないが、ナトリウムイオンの源を含有するであろう。ナトリウムが存在する時、カリウム対ナトリウムのモル比は、一般的には、同等、またはそれぞれ、1:1より大きいが、一般的には、8:1のモル比を超えないであろう。好ましくは、カリウム対ナトリウムのモル比は、少なくとも約1.25:1である。さらにより好ましくは、カリウム対ナトリウムのモル比は、少なくとも約1.5:1である。さらにより好ましくは、カリウム対ナトリウムのモル比は、少なくとも約1.75:1である。さらにより好ましくは、カリウム対ナトリウムのモル比は、少なくとも約1.78:1である。１つの特定の具体例において、カリウム対ナトリウムのモル比は、少なくとも約2:1である。さらにもう１つの具体例において、カリウム対ナトリウムのモル比は、少なくとも約3:1である。さらにもう１つの具体例において、カリウム対ナトリウムのモル比は、少なくとも約4:1である。さらにもう１つの具体例において、カリウム対ナトリウムのモル比は、少なくとも約5:1である。さらにもう１つの具体例において、カリウム対ナトリウムのモル比は、少なくとも約6:1である。さらにもう１つの具体例において、カリウム対ナトリウムのモル比は、少なくとも約7:1である。さらにもう１つの具体例において、カリウム対ナトリウムのモル比は、少なくとも約8:1である。
該精子分散液は、加えて、精子運動性の阻害を増加するまたはそれを助けることが可能な二酸化炭素のイオンまたは源を含み得る。この二酸化炭素の源は、例えば、１以上の炭酸塩のような分散液の成分の形態であってよく、あるいは雰囲気空気中の二酸化炭素の自然な分圧を超える二酸化炭素の正の分圧を有する分散液上のガスの雰囲気の形態であってよい。別法として、二酸化炭素の源は、分散液の成分、および雰囲気空気中の二酸化炭素の自然の分圧を超える二酸化炭素の正の分圧を有する分散液上のガスの雰囲気の双方の組合せであり得る。
１つの現在好ましい具体例において、該精子分散液はNaHCO3およびKHCO3を含み、それにより、カリウムおよびナトリウムイオンの源ならびに二酸化炭素の分圧を提供する。例えば、１つの現在好ましい具体例において、該分散液は、水溶液中にNaHCO3およびKHCO3を含み、好ましくは水中にNaHCO3、KHCO3、およびC6H8O7・H2Oを含む。一般的には、該分散液中の該KHCO3濃度は、少なくとも約0.05モル/Lであってよい。より好ましくは、該KHCO3濃度は少なくとも約0.05モル/Lないし約0.5モル/Lである。さらにより好ましくは、該KHCO3濃度は少なくとも約0.1モル/Lないし約0.3モル/Lである。最も好ましくは、該KHCO3濃度は約0.173モル/Lである。NaHCO3が存在する時、KHCO3対NaHCO3の該モル比は、カリウム対ナトリウムの該モル比に関して上記のとおりであってよい。
C6H8O7・H2Oが該分散液中に存在する時、KHCO3対NaHCO3の該モル比は上記のとおりであってよい。KHCO3対C6H8O7・H2Oの該モル比は、一般的には、それぞれ、1:1と同等またはそれより大きくてもよいが、一般的に、8:1のモル比は超えないであろう。好ましくは、KHCO3対C6H8O7・H2Oの該モル比は、少なくとも約1.25:1からである。さらにより好ましくは、KHCO3対C6H8O7・H2Oの該モル比は、少なくとも約1.5:1である。さらにより好ましくは、KHCO3対C6H8O7・H2Oの該モル比は、少なくとも約1.75:1である。１つの特定の具体例において、KHCO3対C6H8O7・H2Oの該モル比は、少なくとも約1.78:1である。もう１つの特定の具体例において、KHCO3対C6H8O7・H2Oの該モル比は、少なくとも約2:1である。さらにもう１つの具体例において、KHCO3対C6H8O7・H2Oの該モル比は、少なくとも約3:1である。さらにもう１つの具体例において、KHCO3対C6H8O7・H2Oの該モル比は、少なくとも約4:1である。さらにもう１つの具体例において、KHCO3対C6H8O7・H2Oの該モル比は、少なくとも約5:1である。さらにもう１つの具体例において、KHCO3対C6H8O7・H2Oの該モル比は、少なくとも約6:1である。さらにもう１つの具体例において、KHCO3対C6H8O7・H2Oの該モル比は、少なくとも約7:1である。さらにもう１つの具体例において、KHCO3対C6H8O7・H2Oの該モル比は、少なくとも約8:1である。１つの特定の好ましい具体例において、該分散液は、Salisbury & Graves, J. Reprod. Fertil., 6:351-359 (1963)において開示されるように、水中に0.097モル/LのNaHCO3、0.173モル/LのKHCO3、0.090モル/L C6H8O7・H2Oを含む阻害緩衝液を用いて形成される。該精子細胞は、一般的には、それらが（複数の）運動阻害剤に暴露される限り、静止状態のままであろう。
現在までの実験証拠は、さらに、精子細胞の全体的な健康および他の生存特徴が、もし該細胞分散液が、該分散液への酸素の核酸を減少または防ぐ雰囲気下で維持されるなら、改善され得ることを示唆する。これは、例えば、外気に対する二酸化炭素、窒素、または他の不活性ガスの促進された分圧を有する雰囲気と、該精子分散液の上のガスの雰囲気を置き換えることによって達成できる。好ましい具体例において、該分散液上の該雰囲気は、少なくとも約0.0001atmの二酸化炭素の分圧を有するが、一般的には、大気圧にて約5atm未満である。１つの具体例において、二酸化炭素の該分圧は、大気圧にて約0.5atmないし約2atmであり；もう１つの具体例において、二酸化炭素の該分圧は、大気圧にて約0.9atmないし約2atmであり；もう１つの具体例において、二酸化炭素の該分圧は、大気圧にて約0.95atmないし約2atmである。
静止または不動細胞は、該運動阻害剤から該細胞を分離するまたはそれらを空気に暴露することによって、活性状態に戻してもよい。加えて、活性状態の開始は、さらに、生理食塩水(Salisbury et al., 1963)またはTCA緩衝液またはPBSのような緩衝液中の該細胞の希釈によって誘導され得る。典型的には、活性状態に戻った細胞（つまり、再活性化細胞）の少なくとも約20%、好ましくは少なくとも約50%、より好ましくは少なくとも約60%、さらにより好ましくは少なくとも約70%、さらにより好ましくは少なくとも約80%、さらにより好ましくは少なくとも約90%、さらにより好ましくは少なくとも約95%、および最も好ましくは少なくとも約99%は、HTM-IVOS精子分析によって測定されるように、該運動阻害剤と組み合わされる前の該精子細胞(つまり、新たな射精液の精子細胞)の経路速度、前進速度、または両方の少なくとも約50%、好ましくは少なくとも約60%、より好ましくは少なくとも約70%、さらにより好ましくは少なくとも約80%、さらにより好ましくは少なくとも約90%、さらにより好ましくは少なくとも約95%、および最も好ましくは少なくとも約99%である経路速度、前進速度、または両方を有するであろう。
本発明の方法を使用して、保存、輸送、および仕分けられたおよび仕分けられていない精子で受精してもよい。もし仕分けられていない精子が本発明の方法によって保存されるならば、該精子は、運動阻害剤を含有する容器に直接収集されて、該精子分散液を形成してもよい。また、該精子分散液は、少なくとも１つの抗生物質を含有し得る。該精子分散液は、引きつづいて、所望の期間保存され得る。
もし仕分けられた精子が本発明の方法によって保存されるならば、該精子は、運動阻害剤を含有する容器に直接収集されて、該精子分散液を形成してもよい。一旦収集されると、該分散液中の該精子細胞は、複数の工程方法によって仕分けられる。一般的には、該細胞仕分け方法は、一連の別々の工程、つまり、該収集された細胞の染色、該細胞の仕分け、該仕分けられた細胞の収集、および所望により、該仕分けられた細胞の低温伸長（cryoextension）を含む。次いで、該仕分けられた細胞を所望の期間保存してもよい。有利には、該運動阻害剤は、該細胞仕分け方法のこれらの工程の１以上において形成または使用される精子分散液中に含まれてもよい。
Ｉ．該細胞試料の収集
本発明の方法を使用して、仕分けられたまたは仕分けられていない精子を保存するかに拘わらず、無傷で生存可能なウシ、ブタ、ウマ、イノシシ、または他の哺乳類精子細胞を収集し、該運動阻害剤と接触させてもよい。生存可能な精子の収集の種々の方法が知られており、例えば、手袋を使った方法、人工膣の使用、および電気射精を含む。一例として、典型的に約0.5ないし約100億精子細胞／ミリリットルを含有するウシ精液試料を、源哺乳類から、または同一種の１以上の源哺乳類から、運動阻害剤を含有する容器へと収集して、精子分散液を形成してもよい。別法として、該精液試料を空の容器へと収集し、次いで、引きつづいて、収集後数分ないし数時間内に該運動阻害剤と接触させて、該精子分散液を形成してもよい。
本発明の方法を使用して、仕分けられたまたは仕分けられていない精子を保存するかに拘わらず、無傷で生存可能なウシ、ブタ、ウマ、イノシシ、または他の哺乳類精子細胞を収集し、該運動阻害剤と接触させてもよい。生存可能な精子の収集の種々の方法が知られており、例えば、手袋を使った方法、人工膣の使用、および電気射精を含む。一例として、典型的に約0.5ないし約100億精子細胞／ミリリットルを含有するウシ精液試料を、源哺乳類から、または同一種の１以上の源哺乳類から、運動阻害剤を含有する容器へと収集して、精子分散液を形成してもよい。別法として、該精液試料を空の容器へと収集し、次いで、引きつづいて、収集後数分ないし数時間内に該運動阻害剤と接触させて、該精子分散液を形成してもよい。
また、緩衝液に加えて、該精子分散液は、ある範囲の添加剤を含有して、精子生存性を高めてもよい。例示的添加剤は、ステロール、脂質、および脂肪酸、蛋白源、抗生物質、成長因子、カプロン酸、カタラーゼ、Caprogen、(カプロン酸、カタラーゼ、および5% 卵黄)、および細胞内および／または細胞外で酸化／還元反応を制御する組成物を含む。
例示的蛋白源は、卵黄、卵黄抽出物、（熱で均質化されたおよびスキムを含む）乳、乳抽出物、大豆蛋白質、大豆蛋白質抽出物、血清アルブミン、ウシ血清アルブミン、ヒト代替血清補充物、例えば、全精漿または精漿抽出物(例えば、その内容が本明細書中に引用によって援用されるParks et al., Sperm Membrane Phospholipid Peroxidation and Fragmentation: Effects on Sperm Function and Role of Seminal Plasma PAF-Acetylhydrolase, Proceedings of the 16th Technical Conference on Artificial Insemination & reproduction, 1996参照)のような精子蛋白、およびその組合せを含む。アルブミン、およびより具体的にはウシ血清アルブミン (BSA)は、好ましい蛋白源である。例えば、もし含まれるなら、BSAは、約5.0%(w/v)未満、好ましくは約2%(w/v)未満、より好ましくは約1%(w/v)未満の量で、および最も好ましくは約0.1%(w/v)の量で、該精子分散液中に存在し得る。
また、BSAのような蛋白源の使用は、単独では、該分散液中の該精子細胞のパーセンテージで受精能獲得のプロセスを開始し得る。このプロセスは、雌の生殖器官で起こるのが好ましい。従って、希釈の間、ならびにその後の染色および仕分けの間、受精能獲得の開始を阻害するために、代替の蛋白源または蛋白質代替物が該精子分散液中に含まれてもよい。代替の蛋白源または蛋白質代替物は、より大きいパーセンテージの該精子分散液中の細胞で、受精能獲得の開始を阻害する能力に加えて、BSAのような典型的な蛋白源の有益な効果を有する。代替の蛋白源の例は、ヒト代替血清補充物(SSS) (Irvine Scientific, Santa Ana, CA)およびコレステロール促進BSAを含むが、蛋白質代替物の例は、例えば、一般的に約30,000ないし約60,000の分子量を有する低ないし中程度の粘度のポリビニルアルコールのようなポリビニルアルコールを含む。一般的には、含まれるなら、これらの組成物は、BSAに関して上記で開示したのと同量で存在し、ここに該緩衝液または緩衝溶液の総アルブミン含有量は、一般的に、約5.0%(w/v)を超えない。
細胞内および／または細胞外で酸化／還元反応を制御する例示的組成物は、例えば、ピルビン酸塩、ビタミンK、リポ酸、グルタチオン、フラビン、キノン、スーパーオキシドジスムターゼ (SOD)、およびSOD模倣体を含む。もし該精子分散液中に含まれるなら、そのような組成物は、精子健康に悪影響を及ぼさずに、保護効果を達成するのに十分な濃度で存在し得る。例示的な濃度範囲は、使用される特定の組成物または該分散液中の精子の濃度のような因子によって、約10μMないし約20mMを含む。例えば、ピルビン酸塩は、約1mMないし約20mM、好ましくは約5mMないし約15mM、およびより好ましくは約10mMの濃度で、該精子分散液中に存在し得る、ビタミンKは、約1μMないし約100μM、好ましくは約10μMないし約100μM、およびより好ましくは約100μMの濃度で、該精子分散液中に存在し得る。リポ酸は、約0.1mMないし約1mM、好ましくは約0.5mMないし約1mM、およびより好ましくは約1mMの濃度で、該精子分散液中に存在し得る。
細菌成長を阻害するために、抗生物質が該精子分散液中に含まれてもよい。例示的抗生物質は、例えば、チロシン、ゲンタマイシン、リンコマイシン、スペクチノマイシン、Linco-Spectin（登録商標） (塩酸リンコマイシン-スペクチノマイシン)、ペニシリン、ストレプトマイシン、チカルシリン、ポリミキシンB、またはそのいずれかの組合せを含む。もし含まれるなら、該抗生物質は、該精液が純物、緩衝された、あるいは例えば本明細書中に言及されるいずれかの添加剤のようなさらなる物質を含有するかに拘わらず、約50μgないし約800μg／精液のmlの濃度で存在し得る。The Certified Semen Services (CSS)およびNational Association of Animal Breeders (NAAB)は、精子収集および使用に関して、抗生物質の使用に関するガイドラインを推奨している。
該精子細胞の生存性を維持するのを助けるために、成長因子を、該精子分散液に添加してもよい。例示的成長因子は、例えば、TGFβ-1およびTGFβ-2のような形質転換成長因子（「TGF」）、および例えば、IGF-1のようなインスリン様成長因子（「IGF」）を含む。一般的には、TGFは、該精子分散液中に、約0.1ng/Lないし約10μg/Lの濃度でTGFβ-1の形態でまたは約0.1ng/Lないし約200ng/Lの濃度でTGFβ-2として存在し得、IGFは、約0.1ng/Lないし約50μg/Lの濃度でIGF-1の形態で、該精子分散液中に存在し得る。そのような成長因子の使用は当該分野でよく知られており、例えば、その内容が本明細書中に引用によって援用される米国特許出願2003/0157473に開示される。
一旦収集されると、該細胞は、所望の期間、静止状態で保存されてもよく、あるいは別法として、数時間内に使用されてもよい。いずれの場合においても、該細胞は、例えば、染色プロセス、仕分けプロセス、または受精プロセスにおいて使用され得る。
Ａ．収集された細胞の仕分け
（ｉ）該細胞の染色
運動阻害剤を使用して、該細胞の染色の間、細胞を不動にしてもよい。典型的には、精子細胞を染色する方法は、標識と呼ばれることもある無傷の生存可能な精子細胞、運動阻害剤、および色素を含有する、標識混合物と呼ばれることもある染色混合物の形成を特徴とする。本発明のこの態様において、該運動阻害剤を、該精子細胞と接触させて、精子分散液を形成し、次いで、該分散液をDNA選択色素と接触させてもよい。この具体例において、該精子源は、純物精液、または別法として、遠心分離または精液を画分へと分離する他の手段の使用によって得られた精子含有精液誘導体であってもよい。
（ｉ）該細胞の染色
運動阻害剤を使用して、該細胞の染色の間、細胞を不動にしてもよい。典型的には、精子細胞を染色する方法は、標識と呼ばれることもある無傷の生存可能な精子細胞、運動阻害剤、および色素を含有する、標識混合物と呼ばれることもある染色混合物の形成を特徴とする。本発明のこの態様において、該運動阻害剤を、該精子細胞と接触させて、精子分散液を形成し、次いで、該分散液をDNA選択色素と接触させてもよい。この具体例において、該精子源は、純物精液、または別法として、遠心分離または精液を画分へと分離する他の手段の使用によって得られた精子含有精液誘導体であってもよい。
代替の具体例において、該色素は、運動阻害剤と組み合わされ、それにより色素溶液を形成してもよい。従って、例えば、自由流動粉末を含めた純物固体、または液体組成物の形態の染料を阻害剤と組み合わせて染料溶液を形成し、次いで、これを純物精液、精液分散液、または精子含有精液誘導体と組み合わせることができる。
いずれの場合においても、該阻害剤中で維持される限り、該精子細胞は、一般的には、静止状態のままであろう。(Salisbury et al., 1963)しかしながら、好ましくは、該染色混合物は、雰囲気空気に対して二酸化炭素の豊富化分圧を有する雰囲気下に維持され；例えば、99%+CO2である染料混合物上の雰囲気を供するのが一般に好ましい。
該染色混合物のpHは、ある範囲のpHのいずれかで維持されてもよく；典型的にはこれは約5.0ないし約9.0の範囲であろう。例えば、該染色混合物は、「僅かに酸性の」pH、つまり約5.0ないし約7.0で維持されてもよい。この具体例において、該pHは、好ましくは約6.0ないし約7.0であり、より好ましくは約6.0ないし約6.5であり、最も好ましくは約6.2である。別法として、該染色混合物は、「僅かに塩基性の」pH、つまり、約7.0ないし約9.0で維持されてもよい。この具体例において、該pHは、好ましくは約7.0ないし約8.0であり、より好ましくは約7.0ないし約7.5であり、最も好ましくは約7.35である。
該染色混合物は、米国特許5,135,759およびWO02/41906に前述のように、１以上のUVまたは励起可能な可視光、DNA選択色素を用いることによって形成されてもよく、その各々の内容は、本明細書中に引用によって援用される。例示的なUV光励起可能、選択色素は、Hoechst 33342およびHoechst 33258を含み、その各々は、Sigma-Aldrich (St. Louis, MO)から商業的に入手可能である。例示的な可視光励起可能色素は、Molecular Probes, Inc. (Eugene, OR)から入手可能なSYBR-14およびWO02/41906に記載のビスベンズイミド-BODIPY（登録商標）コンジュゲート6-{[3-((2Z)-2-{[1-(ジフルオロボリル)-3,5-ジメチル-1H-ピロル-2-イル]メチレン}-2H-ピロル-5-イル)プロパノイル]アミノ}-N-[3-(メチル{3-[({4-[6-(4-メチルピペラジン-1-イル)-1H,3'H-2,5'-ビベンズイミダゾール-2'-イル]フェノキシ}アセチル)アミノ]プロピル}アミノ)プロピル]ヘキサンアミド (「BBC」)を含む。
これらの色素の各々は、単独でまたは組合せで使用されてもよく；別法として、他の細胞透過UVおよび可視光励起可能色素を単独でまたは前述の色素と組み合わせて使用してもよく、但し、該色素は、他所で記載のように、仕分けまたは豊富化を可能にする濃度で使用される時、許容できない程度まで該精子細胞の生存性を悪影響を及ぼさない。
別法として、該染色混合物は、蛍光性ポリアミド、より具体的には蛍光標識またはそれにコンジュゲートしたレポーターを有するポリアミドを用いて形成してもよい。そのような標識は、核酸に結合した時、発光するであろう。蛍光標識またはそれに結合したレポーターを有するポリアミドの例は、例えば、Best et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 100(21): 12063-12068 (2003); Gygi, et al., Nucleic Acids Res., 30(13): 2790-2799 (2002); 米国特許 5,998,140; 米国特許 6,143,901;および米国特許 6,090,947に記載のものを含み、それらの各々は、本明細書中に引用によって援用される。
また、蛍光ヌクレオチド配列を使用して、該精子細胞を標識してもよい。標的または相補的配列を含有する核酸にハイブリダイズする時、そのようなヌクレオチド配列は発光するが、さもなければ、ハイブリダイズされていない状態の時、発光しない。そのようなオリゴヌクレオチドは、例えば、（本明細書中に引用によって援用される）米国特許出願公報2003/0113765に開示される。
また、性別特異的抗体を使用して、染色混合物中の該精子細胞を標識してもよい。この具体例において、例えば、性別特異的抗体は、蛍光部位（または同等のレポーター分子）とコンジュゲートしてもよい。該抗体は、X染色体を持った、または別法として、Y染色体担持細胞上に存在する抗原に結合するため、そのような細胞は、（標識されていない細胞の非蛍光に対して）それらの蛍光に基づき選択的に同定することができる。さらに、各抗体がそれに結合した異なる蛍光部位を有する１以上の性別特異的抗体を同時に使用してもよい。これによって、各々の異なる蛍光に基づき、X染色体を持ったおよびY染色体担持細胞の識別が可能になる。
発光性、色選択性ナノ結晶を使用して、染色混合物中の精子細胞を標識してもよい。また、量子ドットと呼ばれるこれらの粒子は、それらの各々が本明細書中に引用によって援用される米国特許6,322,901および米国特許6,576,291によって示されるように、当該分野でよく知られる。これらのナノ結晶は、例えば、ペプチド、抗体、核酸、ストレプトアビジン、および多糖(例えば、それらの各々が本明細書中に引用によって援用される米国特許6,207,392; 6,423,551; 5,990,479、および6,326,144参照)を含む多くの生物学的物質にコンジュゲートされており、生物学的標的を検出するのに使用されている（例えば、それらの各々が本明細書中に引用によって援用される米国特許6,207,392および6,247,323参照）。
該染色混合物の該DNA選択性または他のタイプの色素のいずれかの好ましい濃度は、該選択された色素への細胞の透過性、該染色混合物の温度、染色が起こるのに許容される時間の量、精子の濃度、引き続いての仕分けまたは豊富化工程で望ましい豊富化の程度を含むある範囲の変数の関数である。一般的には、該色素濃度は、好ましくは、実質的に精子生存性に悪影響を及ぼさずに、適度に短い時間で望ましい程度の染色を達成するのに十分である。例えば、該染色混合物中のHoechst 33342、Hoechst 33258、SYBR-14、またはBBCの濃度は、一般的には、約0.1μMおよび約1.0Mの間、好ましくは約0.1μMないし約1000μM、より好ましくは約100μMないし約500μM、さらにより好ましくは約200μMないし約500μM、およびさらにより好ましくは約300μMないし約450μMであろう。従って、一組の染色条件下で、Hoechst 33342の濃度は、好ましくは約350μMである。もう一組の染色条件下で、Hoechst 33342の濃度は約400μMである。さらにもう一組の染色条件下で、該濃度は好ましくは約450μMである。
もう１つの例として、例えば、米国出願公報2001/0002314に記載のもののような蛍光ポリアミドの濃度は、一般的には、約0.1μMおよび約1mMの間、好ましくは約1μMないし約1mM、より好ましくは約5μMないし約100μM、さらにより好ましくは約10μMであろう。
また、所望により、該染色混合物は、添加剤を含有して、精子生存性を高めてもよい。例示的な添加剤は、細胞試料収集に関して上記で論議されるように、抗生物質、成長因子または細胞内でおよび／または細胞外で酸化／還元反応を制御する組成物を含む。これらの添加剤を、それに従って、該収集流体に添加してもよい。
一旦形成されると、該染色混合物は、ある範囲の温度のいずれかで維持されてよく；典型的には、これは、約4℃ないし約50℃の範囲内であろう。例えば、該染色混合物は、「比較的低い」温度、つまり、約4℃ないし約30℃の温度で維持されてよく；この具体例において、該温度は、好ましくは約20℃ないし約30℃, より好ましくは約25℃ないし約30℃、および最も好ましくは約28℃である。別法として、該染色混合物は、「中程度の」温度範囲、つまり、約30℃ないし約39℃の温度内で維持されてよく;この具体例において、該温度は、好ましくは約34℃ないし約39℃、より好ましくは約37℃である。加えて、該染色混合物は、「比較的高い」温度範囲内、つまり、約40℃ないし約50℃の温度で維持されてよく;この具体例において、該温度は好ましくは約41℃ないし約49℃であり、より好ましくは約41℃ないし約45℃、さらにより好ましくは約41℃ないし約43℃、最も好ましくは約41℃である。好ましい温度の選択は、一般的には、例えば、使用される（複数の）色素への細胞の透過性、該染色混合物中の（複数の）色素の濃度、該細胞が該染色混合物中に維持されるであろう時間の量、および該仕分けまたは豊富化工程で望ましい豊富化の程度を含むある範囲の変数に基づく。
該染色混合物中の該精子細胞による色素の取り込みは、望ましい程度のDNA染色を得るのに十分な時間、継続される。該期間は、典型的には、XおよびY染色体担持精子細胞が該２つの間の異なるおよび測定可能な蛍光強度に基づき保存または豊富化され得るように、該精子細胞の該DNAに該色素が結合するのに十分な期間である。一般的には、これは24時間以下; 好ましくは約10時間以下、より好ましくは、約2時間以下、さらにより好ましくは約90分以下、さらにより好ましくは約60分以下、最も好ましくは約5分ないし約60分であろう。特定の具体例において、該期間は約30分である。
該染色期間の長さおよび染色の期間が長いほど、染色温度の温度はより低くなるように、染色が起こる染色期間の長さおよび温度は関連する。例えば、１つの具体例において、該染色は、「比較的低い」温度にて、約3時間ないし約24時間の期間生じ得る。別法として、該染色は、「中程度の」温度にて、約1.5時間ないし約3時間の期間、生じ得る。加えて、染色は、「比較的高い」温度にて、約10分ないし約90分の期間生じ得る。特定の具体例において、染色は、約4℃の温度にて、約24時間の期間、生じ得る。もう１つの具体例において、染色は、約18℃の温度にて約4時間の期間生じ得る。さらにもう１つの具体例において、染色は、約41℃の温度にて約30分の期間、生じ得る。
従って、１つの具体例において、精子細胞、運動阻害剤、および約100μMないし約450μMの濃度で色素を含む染色混合物が形成され、該染色混合物は、一定の期間、約41℃の温度にて維持される。もう１つの具体例において、該一定の期間は約30分である。もう１つの具体例において、該運動阻害剤は、0.204g NaHCO3、0.433g KHCO3、および0.473g C6H8O7・H2O／25mLの精製水 (水中に0.097モル/LのNaHCO3、0.173モル/LのKHCO3、0.090モル/L C6H8O7・H2O)を含む。
さらにもう１つの具体例において、精子細胞、運動阻害剤、および約100μMないし約450μMの濃度の色素を含む染色混合物が形成され、該染色混合物はある一定の時間、約28℃の温度にて維持される。もう１つの具体例において、該一定の時間は約3時間である。もう１つの具体例において、該運動阻害剤は、0.204g NaHCO3、0.433g KHCO3、および0.473g C6H8O7・H2O／25mLの精製水 (水中に0.097モル/LのNaHCO3、0.173モル/LのKHCO3、0.090モル/L C6H8O7・H2O)を含む。
（ｉｉ）該染色された細胞の仕分けまたは豊富化
運動阻害剤を使用して、該精子細胞の仕分けの間、該精子細胞を不動にしてもよい。一般的には、一旦該精子が本発明によって染色されると、それらは、蛍光に基づく分離を可能にするいずれかの既知の手段によって仕分けられてもよい。一般的に使用されよく知られた方法は、それらの各々の内容が本明細書中に引用によって援用される米国特許5,135,759、5,985,216、6,071,689、6,149,867、および6,263,745、国際特許公報WO99/33956およびWO01/37655、および米国特許出願10/812,351 (国際特許公報WO2004/088283に対応)によって例示され記載されるように、フローサイトメトリーシステムを含む。そのような方法によって仕分ける時、該精子は、試料流体において、フローサイトメーターのノズルに導入される。従って、１つの具体例において、該試料流体は、該染色された精子細胞および運動阻害剤を含み得る。
運動阻害剤を使用して、該精子細胞の仕分けの間、該精子細胞を不動にしてもよい。一般的には、一旦該精子が本発明によって染色されると、それらは、蛍光に基づく分離を可能にするいずれかの既知の手段によって仕分けられてもよい。一般的に使用されよく知られた方法は、それらの各々の内容が本明細書中に引用によって援用される米国特許5,135,759、5,985,216、6,071,689、6,149,867、および6,263,745、国際特許公報WO99/33956およびWO01/37655、および米国特許出願10/812,351 (国際特許公報WO2004/088283に対応)によって例示され記載されるように、フローサイトメトリーシステムを含む。そのような方法によって仕分ける時、該精子は、試料流体において、フローサイトメーターのノズルに導入される。従って、１つの具体例において、該試料流体は、該染色された精子細胞および運動阻害剤を含み得る。
また、同様に、それが該サイトメーターを通過する時に試料流体の流れを取り囲むのに使用される該シース液は、運動阻害剤を含み得る。一般的には、該シース液は、加圧ガスを用いてまたはシリンジポンプによって、サイトメーターのノズルに導入され得る。好ましくは、該加圧ガスは二酸化炭素または窒素、より好ましくは二酸化炭素である。別法として、該加圧ガスは窒素であってよい。
所望により、該試料流体またはシース液は、抗生物質、細胞内または細胞外で酸化／還元反応を制御する組成物、または細胞試料収集に関して上記で論議されたような成長因子のような添加剤を含有し得る。これらの添加剤の各々を、それに従って、いずれかの流体に添加してもよい。
別法として、精子分散液の該細胞を、レーザー操縦を用いて、仕分けまたは豊富化してもよい。これは、しばしば、光トラッピングまたはホログラフィック光トラッピングと呼ばれる。一般的には、例えば、顕微鏡レンズによってフォーカスされた光のようなきつくフォーカスされたレーザー光は、急な強度勾配を有するであろう。光トラップは、光線の勾配力を用いて、該光線の誘電率に基づき、粒子をトラップする。そのエネルギーを最小化するために、周辺の媒体より大きい誘電率を有する粒子は、該磁場が最高である光トラップの領域に動くであろう。そのようなデバイスおよび方法は、例えば、それらの各々の内容が本明細書中に引用によって援用されるWO2004/012133、米国特許6,416,190および関連出願および特許に記載される。これらの方法によって仕分けまたは豊富化される精子細胞の不動性は、該流れ中の細胞およびこれらの細胞のレーザー操縦の並びを容易にし、それにより、該所望の細胞を、より効率的かつ正確に仕分けまたは豊富化することが可能となる。
従って、該精子分散液の細胞は、別々の集団に仕分けられてもよく、ここに、該集団の該精子は、特定のパーセントのX染色体を持ったまたはY染色体担持精子細胞を含む。例えば、該集団のうちの１つの該精子は、少なくとも約65% X染色体を持ったまたはY染色体担持精子細胞、少なくとも約70% X染色体を持ったまたはY染色体担持精子細胞、少なくとも約75% X染色体を持ったまたはY染色体担持精子細胞、少なくとも約80% X染色体を持ったまたはY染色体担持精子細胞、少なくとも約85% X染色体を持ったまたはY染色体担持精子細胞、少なくとも約90% X染色体を持ったまたはY染色体担持精子細胞、またはさらに少なくとも約95% X染色体を持ったまたはY染色体担持精子細胞を含み得る。
（ｉｉｉ）該仕分けられた細胞の集団
一旦仕分けられると、該仕分けられた集団は、収集流体を含有する容器中に収集される。一般的には、該収集流体の目的は、該細胞に流体支持体を提供することを含む。
一旦仕分けられると、該仕分けられた集団は、収集流体を含有する容器中に収集される。一般的には、該収集流体の目的は、該細胞に流体支持体を提供することを含む。
１つの具体例において、該収集流体は運動阻害剤を含む。所望により、該収集流体は、ステロール、脂質、脂肪酸、または蛋白源を含んでもよい。もし該収集流体中に含まれるなら、該ステロール、脂質、および脂肪酸は、例えば、コレステロールであってもよい。
もし該収集流体中に含まれるなら、該蛋白源は、該精子細胞の生存性と干渉せず、該運動阻害剤と適合性のあるいずれかの蛋白源であってもよい。一般的な蛋白源の例は、（熱で均質化されたおよびスキムを含む）乳、乳抽出物、卵黄、卵黄抽出物、大豆蛋白質および大豆蛋白質抽出物を含む。そのような蛋白質は、約1%(v/v)ないし約30%(v/v)、好ましくは約10%(v/v)ないし約20%(v/v)、およびより好ましくは約10%(v/v)の濃度で使用され得る。
所望により、該収集流体は、細胞試料収集に関して上記で論議したように、抗生物質、成長因子または細胞内または細胞外で酸化／還元反応を制御する組成物のような添加剤を含有し得る。これらの添加剤の各々を、それに従って、該収集流体に添加してもよい。
従って、特定の具体例において、該収集流体は、約6.2、より好ましくは約7.0、およびさらにより好ましくは約6.5のpHにて、水中に0.097モル/LのNaHCO3、0.173モル/LのKHCO3、0.090モル/L C6H8O7・H2Oおよび10%(v/v) 卵黄を含む。好ましくは、該収集流体は、空気に対して二酸化炭素の豊富化された分圧を有する雰囲気下に維持され；例えば、該雰囲気は0.9、より好ましくは 0.95、さらにより好ましくは 0.99過剰の二酸化炭素の分圧を有することができる。
より慣用的な収集流体を使用する代わりに、該仕分けられた細胞を、低温エキステンダーを含有するまたはそれで覆われた容器中に収集してもよい。従って、１つの特定の具体例において、該仕分けられた細胞を、運動阻害剤を含む低温エキステンダーに収集する。もう１つの具体例において、該仕分けられた細胞は、運動阻害剤、水、Triladyl（登録商標） (Minitube, Verona, WI, 60ml グリセロール、24.2g トリス、13.8g クエン酸、10.0g フルクトース／リットル、5mg/100ml チロシン、25mg/100ml ゲンタマイシン、30mg/100ml スペクチノマイシン、および15mg/100ml リンコマイシンを含む)、卵黄、および所望によりピルビン酸を含む低温エキステンダーに収集される。さらにもう１つの具体例において、該収集流体は、水中に0.097モル/LのNaHCO3、0.173モル/LのKHCO3、0.090モル/L C6H8O7・H2O、および25g Triladyl（登録商標）、25g 卵黄、および10mM ピルビン酸／75mLの水を含む低温エキステンダーである。さらにもう１つの具体例において、該収集流体は、水中に0.097モル/LのNaHCO3、0.173モル/LのKHCO3、0.090モル/L C6H8O7・H2O、および25g Triladyl（登録商標）、25g 卵黄／75mLの水を含む該低温エキステンダーである。
（ｉｖ）該仕分けられた細胞の低温伸長
一旦該精子が収集容器へと仕分けられ収集されると、それらを雌の哺乳類を受精するのに使用してもよい。これは、ほとんど直ぐに行うことができ、該精子のさらなる処理をほとんど必要としない。そのような例において、該精子は、例えば、該受精が起こる場所に該精子を輸送するのに必要な時間、現在の状態で保存してもよい。従って、該精子は、例えば、該収集流体中に保存され輸送されてよい。同様に、該精子は、運動阻害剤において、該特定の哺乳類種に適切な密度、例えば、約50x106精子/mlないし約120x106精子/mlの密度に濃縮し、引き続いて保存および輸送してよい。該選択された密度は、該細胞が入手される哺乳類の該種を含む、受精に関して下記で論議されたもののような要因に基づく。該精子が入手された哺乳類の種に基づくそのような範囲の密度は、当業者によく知られる。いずれかの事象において、該精子は、より詳細に下記されるように、保存または輸送期間の間、不動のままであってよい。
一旦該精子が収集容器へと仕分けられ収集されると、それらを雌の哺乳類を受精するのに使用してもよい。これは、ほとんど直ぐに行うことができ、該精子のさらなる処理をほとんど必要としない。そのような例において、該精子は、例えば、該受精が起こる場所に該精子を輸送するのに必要な時間、現在の状態で保存してもよい。従って、該精子は、例えば、該収集流体中に保存され輸送されてよい。同様に、該精子は、運動阻害剤において、該特定の哺乳類種に適切な密度、例えば、約50x106精子/mlないし約120x106精子/mlの密度に濃縮し、引き続いて保存および輸送してよい。該選択された密度は、該細胞が入手される哺乳類の該種を含む、受精に関して下記で論議されたもののような要因に基づく。該精子が入手された哺乳類の種に基づくそのような範囲の密度は、当業者によく知られる。いずれかの事象において、該精子は、より詳細に下記されるように、保存または輸送期間の間、不動のままであってよい。
同様に、該精子は、後日での使用のために冷却または冷凍してよい。そのような例において、該精子は、低温エキステンダーの添加から利益を得て、冷却または冷凍の結果として、生存性または解凍後運動性に対する衝撃を最小化し得る。
運動阻害剤を使用して、該低温エキステンダー中の細胞を不動にしてもよい。一般的には、低温エキステンダーは、運動阻害剤、蛋白源、および抗凍結剤を含み得る。もし含まれるなら、蛋白源を添加して、該細胞に支持体を提供してもよい。該蛋白源は、該精子細胞の生存性と干渉せず、該運動阻害剤と適合性のあるいずれの蛋白源であってもよい。一般的な蛋白源の例は、（熱で均質化されたおよびスキムを含む）乳、乳抽出物、卵黄、卵黄抽出物、大豆蛋白質および大豆蛋白質抽出物を含む。そのような蛋白質は、約10%(v/v)ないし約30%(v/v)、好ましくは約10%(v/v)ないし約20%(v/v)、およびより好ましくは約20%(v/v)の濃度で見つけ得る。
抗凍結剤は、好ましくは、該低温エキステンダー中に含まれて、冷ショックを緩和または防ぐあるいは該精子の受精率を維持する。数多くの抗凍結剤が当該分野で知られる。所与のエクステンダーとの使用に適当な抗凍結剤の選択は変動し得、冷凍される種が得られる種によって決まる。適当な抗凍結剤の例は、例えば、グリセロール、ジメチルスルホキシド、エチレングリコール、プロピレングリコール、トレハロース、Triladyl（登録商標）、およびその組合せを含む。もし含まれるなら、一般的には、これらの抗凍結剤は、該低温エキステンダー中に約1%(v/v)ないし約15%(v/v)の量で、好ましくは約5%(v/v)ないし約10%(v/v)の量で、より好ましくは約7%(v/v)の量で、最も好ましくは約6%(v/v)の量で存在する。
１つの特定の具体例において、該低温エキステンダーは、運動阻害剤、水、Triladyl（登録商標）、卵黄、および、所望によりピルビン酸を含む。さらにもう１つの具体例において、該低温エキステンダーは、水中に0.097モル/LのNaHCO3、0.173モル/LのKHCO3、0.090モル/L C6H8O7・H2O、および25g Triladyl（登録商標）、25g 卵黄、および10mMピルビン酸／75mLの水を含む。
もう１つの特定の具体例において、該低温エキステンダーは、運動阻害剤、水、Triladyl（登録商標）、および卵黄を含む。さらにもう１つの具体例において、該低温エキステンダーは、水中に0.097モル/LのNaHCO3、0.173モル/LのKHCO3、0.090モル/L C6H8O7・H2O、および25g Triladyl（登録商標）、および25g 卵黄／75mLの水を含む。
また、所望により、該低温エキステンダーは、細胞試料収集に関して上記で論議したように、抗生物質、成長因子、または細胞内でおよび／または細胞外で酸化／還元反応を制御する組成物を含み得る。これらの添加剤の各々を、それに従って該低温エキステンダーに添加してもよい。
II.該収集された細胞の保存
A.保存期間
一旦該細胞が該源哺乳類から収集されると、それらはその後所望により仕分けられるかに拘わらず、該細胞は、一定の時間、保存されてよい。保存の期間は、例えば、該細胞が保存される温度、該保存容器内の細胞の数、該細胞が仕分けられるまたは仕分けられないか、該細胞が使用される受精の方法、および受精される該雌の哺乳類を含むいくつかの要因によって決まる。一般的には、例えば、該細胞は、例えば、2、4、8、12、または24時間のような数時間;例えば1、2、3、4、5、6、または7日間のような数日間;例えば、1、2、3、または4週間のような数週間;あるいは例えば、1、2、または3ヶ月間のような数ヶ月間、保存されてよい。典型的には、細胞は、約5℃ないし約30℃の温度にて、数時間ないし数日間; 約-4℃ないし約5℃の温度にて数日間ないし数週間;および（液体窒素蒸気において）約-196℃ないし約-4℃の温度にて、数週間ないし数ヶ月間、保存され得る。
A.保存期間
一旦該細胞が該源哺乳類から収集されると、それらはその後所望により仕分けられるかに拘わらず、該細胞は、一定の時間、保存されてよい。保存の期間は、例えば、該細胞が保存される温度、該保存容器内の細胞の数、該細胞が仕分けられるまたは仕分けられないか、該細胞が使用される受精の方法、および受精される該雌の哺乳類を含むいくつかの要因によって決まる。一般的には、例えば、該細胞は、例えば、2、4、8、12、または24時間のような数時間;例えば1、2、3、4、5、6、または7日間のような数日間;例えば、1、2、3、または4週間のような数週間;あるいは例えば、1、2、または3ヶ月間のような数ヶ月間、保存されてよい。典型的には、細胞は、約5℃ないし約30℃の温度にて、数時間ないし数日間; 約-4℃ないし約5℃の温度にて数日間ないし数週間;および（液体窒素蒸気において）約-196℃ないし約-4℃の温度にて、数週間ないし数ヶ月間、保存され得る。
Ｂ．保存温度
該細胞はある範囲の異なる温度にて保存され得る。保存温度の選択は、例えば、該細胞が保存される時間の長さ、該保存容器内の細胞の濃度、該細胞が仕分けられるか仕分けられないか、該細胞が使用される受精の方法、および受精される雌の哺乳類のようないくつかの要因によって決まる。これらの要因の全ては、該保存期間の間生存可能のままであろう細胞の数に影響を与える。一例として、一般的には、該細胞が保存され得る時間が長ければ長いほど、該細胞が保存され得る温度は低い。温度の減少は、一般的には、より大きいパーセンテージの保存された細胞が、より長い時間、生存可能のままでいることを可能にする。
該細胞はある範囲の異なる温度にて保存され得る。保存温度の選択は、例えば、該細胞が保存される時間の長さ、該保存容器内の細胞の濃度、該細胞が仕分けられるか仕分けられないか、該細胞が使用される受精の方法、および受精される雌の哺乳類のようないくつかの要因によって決まる。これらの要因の全ては、該保存期間の間生存可能のままであろう細胞の数に影響を与える。一例として、一般的には、該細胞が保存され得る時間が長ければ長いほど、該細胞が保存され得る温度は低い。温度の減少は、一般的には、より大きいパーセンテージの保存された細胞が、より長い時間、生存可能のままでいることを可能にする。
従って、細胞は、約-196℃ないし約30℃の温度にて保存され得る。例えば、細胞は、「比較的低い保存温度」、つまり、約-196℃ないし約-4℃の温度範囲にて保存されてよく;この具体例において、該温度は好ましくは約-12℃ないし約-4℃、より好ましくは約-10℃ないし約-4℃、最も好ましくは約-4℃である。別法として、該細胞は、「中程度の保存温度」つまり、約-4℃ないし約5℃の温度範囲で保存されてよく；この具体例において、該温度は好ましくは約-3℃ないし約5℃、より好ましくは 約0℃ないし約5℃、最も好ましくは約5℃である。加えて、該細胞は、「中程度に高い保存温度」、つまり、約5℃ないし約30℃の温度範囲にて保存されてよく; この具体例において、該温度は、好ましくは約10℃ないし約25℃、より好ましくは約12℃ないし約23℃、さらにより好ましくは約15℃ないし約20℃、最も好ましくは約18℃である。有利には、より高い温度または冷凍温度（つまり、0℃以下の温度）のいずれかでの保存の困難が精子生存性に対して有害であり得るように、該阻害剤緩衝液中の18℃での該細胞の保存が、増加した数の生存可能かつ運動性精子細胞のさらなる利益を提供することが決定されている。
Ｃ．保存容器
該精子分散液を、ある範囲の異なる容器中に保存してもよい。該容器は大きさが変動し得るが、一般的には適当な容器は該精子分散液を含有することが可能であろう；つまり、該容器は、そのような接触が該容器の内側または外側で起こるかに拘わらず、一般的には流体、および特異的には精子分散液との接触の結果として、漏出または劣化に感受性でない物質で構築されるであろう。適当な容器の例は、例えば、フラスコ、ビーカー、試験管、アンプル、およびガラス、プラスチック、または他の同様の物質で構築された他のそのような容器を含む。特定の具体例において、該容器は、例えば、細長い容器のような雌の哺乳類の受精において使用されるタイプの構築のものである。そのような細長い容器は、一般的には、約1000:1ないし約100:1の長さと直径の比、好ましくは約900:1ないし約200:1の長さと直径の比、より好ましくは約800:1ないし約300:1の長さと直径の比、さらにより好ましくは約700:1ないし約400:1の長さと直径の比、さらにより好ましくは約600:1ないし約400:1の長さと直径の比、さらにより好ましくは約500:1ないし約400:1の長さと直径の比、および１つの特定の具体例において、約450:1の長さと直径の比を有し得る。そのような細長い容器は、一般的には、約0.1ccないし約100ccの容量を有し得、ここに使用に選択された該容器の容量は、該精液が収集される哺乳類の種に基づく。例えば、そのような細長い容器の容量は、約0.1ccないし約0.7cc、好ましくは約0.2ccないし約0.6ccの容量、より好ましくは約0.23ccないし約0.5ccの容量、最も好ましくは約0.3ccないし約0.4ccの容量であり得る。特定の具体例において、該細長い容器は、約0.23ccの容量および約133:1の長さと直径の比を有する、該人工授精産業において、ストローとして一般的に呼ばれるものである。もう１つの特定の具体例において、該細長い容器は、約0.5ccの容量および約67:1の長さと直径の比を有する該人工授精産業においてストローと一般的に呼ばれるものである。典型的には、これらの容量の容器は、ウシ精子細胞の保存に使用される。
該精子分散液を、ある範囲の異なる容器中に保存してもよい。該容器は大きさが変動し得るが、一般的には適当な容器は該精子分散液を含有することが可能であろう；つまり、該容器は、そのような接触が該容器の内側または外側で起こるかに拘わらず、一般的には流体、および特異的には精子分散液との接触の結果として、漏出または劣化に感受性でない物質で構築されるであろう。適当な容器の例は、例えば、フラスコ、ビーカー、試験管、アンプル、およびガラス、プラスチック、または他の同様の物質で構築された他のそのような容器を含む。特定の具体例において、該容器は、例えば、細長い容器のような雌の哺乳類の受精において使用されるタイプの構築のものである。そのような細長い容器は、一般的には、約1000:1ないし約100:1の長さと直径の比、好ましくは約900:1ないし約200:1の長さと直径の比、より好ましくは約800:1ないし約300:1の長さと直径の比、さらにより好ましくは約700:1ないし約400:1の長さと直径の比、さらにより好ましくは約600:1ないし約400:1の長さと直径の比、さらにより好ましくは約500:1ないし約400:1の長さと直径の比、および１つの特定の具体例において、約450:1の長さと直径の比を有し得る。そのような細長い容器は、一般的には、約0.1ccないし約100ccの容量を有し得、ここに使用に選択された該容器の容量は、該精液が収集される哺乳類の種に基づく。例えば、そのような細長い容器の容量は、約0.1ccないし約0.7cc、好ましくは約0.2ccないし約0.6ccの容量、より好ましくは約0.23ccないし約0.5ccの容量、最も好ましくは約0.3ccないし約0.4ccの容量であり得る。特定の具体例において、該細長い容器は、約0.23ccの容量および約133:1の長さと直径の比を有する、該人工授精産業において、ストローとして一般的に呼ばれるものである。もう１つの特定の具体例において、該細長い容器は、約0.5ccの容量および約67:1の長さと直径の比を有する該人工授精産業においてストローと一般的に呼ばれるものである。典型的には、これらの容量の容器は、ウシ精子細胞の保存に使用される。
別法として、該細長い容器の容量は、約1ccないし約100ccの容量、好ましくは約10ccないし約75ccの容量、より好ましくは約15ccないし約50ccの容量、さらにより好ましくは約20cc,ないし約40ccの容量、さらにより好ましくは約25ccないし約30ccの容量であってよい。特定の具体例において、該細長い容器は、約25ccの容量および約445:1の長さと直径の比を有する、該人工授精産業において、ストローとして一般的に呼ばれるものである。典型的には、これらの容量の容器は、ブタ精子細胞の保存に使用される。
ストロー中に該精子分散液を保存する利益は、該分散液が、それが雌の哺乳類の受精に使用されるまで、その中に保存されたままであってよいということであり、この時、該ストローの該内容物は、雌の哺乳類の子宮に移されてよい。従って、そのような例において、該細胞は、雌が該分散液によって受精されるまで、運動阻害剤において、該ストローにおいて、従って、不動の状態で、維持され得、この時、該子宮内流体は該運動阻害剤を希釈して、該不動細胞を動かすであろう。
III.受精（Fertilization）または受精（Insemination）
本発明のもう１つの態様は、一般的に上記のような精子を保存するための該新規方法を使用する、卵子の該受精または雌の哺乳類の受精である。
本発明のもう１つの態様は、一般的に上記のような精子を保存するための該新規方法を使用する、卵子の該受精または雌の哺乳類の受精である。
一旦精子分散液が、精子細胞試料の収集に関して上記でより詳細に論議されるように形成されると、該精子分散液を使用して、雌の哺乳類を受精してもよい。受精を、当業者によく知られた多くの方法のいずれかによって実施してもよい。これらの方法は、例えば、標準の人工授精および深子宮受精（deep uterine insemination）を含む人工授精、および当業者によく知られた他の方法を含む。例えば、不動性精子および精子不動性を誘導する組成物を含む精子分散液を使用して、例えば、人工授精によってのような雌の哺乳類を受精してもよい。特定の具体例において、該精子分散液は、雌の哺乳類の受精における使用のための細長い容器にあってよく、該精子分散液中の該精子は、該雌の哺乳類の該分散液による受精まで、不動のままであってよい。もう１つの具体例において、該精子懸濁液中の該精子を、例えば、上記の方法によって、動くまたは活性な状態に戻し、引き続いて、雌の哺乳類を受精するのに使用する。
別法として、該精子分散液を使用して、例えば、卵細胞質内精子注入法(ICSI)、および当業者によく知られた他の方法を含むマイクロインジェクションのような、卵子、より具体的には卵子をインビトロで受精してもよい。その後、該受精された卵子を、例えば、胚移植のような当業者によく知られた多くの手段のいずれかによって、雌の哺乳類の子宮に導入してもよい。
精子分散液を用いる雌の哺乳類の受精または卵子のインビトロでの受精（その後、雌の子宮に該受精された卵子を導入）は、例えば、該精子分散液の形成後、約120時間内、好ましくは約96時間内、より好ましくは約72時間内、さらにより好ましくは約48時間内、特定の具体例において約24時間内で、該精子分散液の形成後直ぐに起こり得る。そのような例において、一般的には該分散液は、雌の哺乳類の受精または卵子のインビトロでの受精前に冷凍保存されず(つまり、該分散液は新鮮であるかあるいは新鮮な精子細胞を含む);代わりに、それは、運動阻害剤中で維持されてよくおよび／または約4℃ないし約25℃、より好ましくは約10℃ないし約25℃、さらにより好ましくは約15℃ないし約20℃、および最も好ましくは約18℃の温度で冷凍されてよい。別法として、該分散液は冷凍保存され、次いで、雌の哺乳類の受精または卵子のインビトロ受精前に解凍されてもよい（つまり、該分散液は冷凍され／解凍されるかあるいは冷凍された／解凍された精子細胞を含む）。典型的には、そのような例において、該冷凍保存された分散液は、例えば、雌の哺乳類の受精または卵子のインビトロ受精前約15分以内に、直ぐに解凍されるであろう。別法として、該冷凍保存された分散液は、一定の時間にわたり解凍されるかあるいは例えば、約5日間未満、より好ましくは約2日間未満、さらにより好ましくは約1日未満、および最も好ましくは、約12時間未満のような一定の時間解凍され、引き続いて保存されてもよい。
IV.新鮮な精子分散液を提供するための方法
本発明のもう１つの態様は、一般的に上記の該精子分散液を使用して雌の哺乳類を受精するための新鮮な精子分散液を提供することである。有利には、該運動阻害剤は、源哺乳類からそれへの精子の収集、および該分散液を冷凍する必要なしに、該精子分散液の育種位置（つまり、該雌の哺乳類が受精される場所）への輸送を可能にする。従って、これは、該分散液中のより大きいパーセンテージの精子が、冷凍／解凍分散液に対して生存可能のままであることを可能にし、ここに、該分散液中の細胞を冷凍し引き続いて解凍することの困難性は、該細胞の生存性に悪影響を与えるリスクを増加する。該精子分散液中の運動阻害剤の使用、および所望により、約4℃ないし約25℃、好ましくは約10℃ないし約20℃、より好ましくは約15℃ないし約20℃、および最も好ましくは約18℃の温度での該分散液の保存および／または輸送は、該精子分散液によって受精された雌の哺乳類においてより高い受精率を可能にする。また、該精子分散液中の運動阻害剤の使用、および所望により低温保存および輸送は、該分散液中のより多くの細胞が生存性を維持するように、雌の哺乳類を受精するためのより低い精子濃度の使用を可能にする。
本発明のもう１つの態様は、一般的に上記の該精子分散液を使用して雌の哺乳類を受精するための新鮮な精子分散液を提供することである。有利には、該運動阻害剤は、源哺乳類からそれへの精子の収集、および該分散液を冷凍する必要なしに、該精子分散液の育種位置（つまり、該雌の哺乳類が受精される場所）への輸送を可能にする。従って、これは、該分散液中のより大きいパーセンテージの精子が、冷凍／解凍分散液に対して生存可能のままであることを可能にし、ここに、該分散液中の細胞を冷凍し引き続いて解凍することの困難性は、該細胞の生存性に悪影響を与えるリスクを増加する。該精子分散液中の運動阻害剤の使用、および所望により、約4℃ないし約25℃、好ましくは約10℃ないし約20℃、より好ましくは約15℃ないし約20℃、および最も好ましくは約18℃の温度での該分散液の保存および／または輸送は、該精子分散液によって受精された雌の哺乳類においてより高い受精率を可能にする。また、該精子分散液中の運動阻害剤の使用、および所望により低温保存および輸送は、該分散液中のより多くの細胞が生存性を維持するように、雌の哺乳類を受精するためのより低い精子濃度の使用を可能にする。
一旦該精子分散液が、試料収集に関して上記でより主催に記載されたように形成されると、該分散液は、該精子が得られたまたは該精子分散液が形成された場所から１マイル以上（1.69キロ以上）離れていることもある農場または他の育種場所のような離れた場所への輸送のための容器に入れられてもよい。該分散液は、輸送の困難の結果としての損傷から、該分散液を保護するであろういずれかの容器に入れてよい。該容器は、例えば、約4℃ないし約25℃の間、より好ましくは約10℃ないし約25℃、さらにより好ましくは約15℃ないし約20℃、および最も好ましくは約18℃のような適当な温度にて該分散液を維持するために、断熱されてもよい。さらに、該分散液は、雌の哺乳類の受精における使用のための容器、次いで、該離れた場所への輸送のための容器に入れられた１以上の該受精容器に入れられてよい。一例として、該精子分散液は、１以上のストローに入れられ、該ストローは、該育種場所への輸送のためのクーラーに入れてもよい。
該容器は、例えば、U.S.メールによって、多くの翌日配達サービスのいずれかによって、または国際宅配便によってのようなアイテムを輸送する多くのよく知られた手段のいずれかによって輸送され得る。
本発明を詳細に記載してきて、修飾および変動は、添付の請求の範囲において定義される本発明の範囲を逸脱せずに可能であることが明白であろう。
Claims (76)
- 仕分けられていない精子を保存するための方法であって、
a.精子分散液を形成し、ここに該精子分散液は精子、精子不動性を誘導する組成物、および抗生物質を含み、次いで
b.該精子分散液を保存することを特徴とする該方法。 - 仕分けられた精子を保存するための方法であって、
a.精子分散液を形成し、ここに該精子分散液は精子および精子不動性を誘導する組成物を含み、
b.該精子分散液を別々の集団に仕分け、ここに該集団のうちの１つの該精子が、少なくとも約65% X染色体担持精子細胞または少なくとも約65% Y染色体担持精子細胞を含み、次いで
c.約-4℃ないし約30℃の温度にて、該１つの集団を保存することを特徴とする該方法。 - 雌の哺乳類を受精させるための方法であって、雌の哺乳類を精子分散液で受精させることを特徴とし、ここに該精子分散液が不動性精子および精子不動性を誘導する組成物を含む該方法。
- 雌の哺乳類を受精させるための新たな精子分散液を提供するための方法であって：
a.精子分散液を形成し、ここに該精子分散液は精子および精子不動性を誘導する組成物を含み、
b.離れた場所への発送用の容器に該精子分散液を入れ、次いで
c.該精子分散液を形成後約24時間以内に、離れた場所に、該容器中の該精子分散液を発送することを特徴とする該方法。 - a.雌の哺乳類の該受精における使用のための細長い容器、および
b.精子分散液を含み、ここに該精子分散液は、不動性精子および精子不動性を誘導する組成物を含み、ここに該精子分散液は該細長い容器中に含有される組合せ。 - 不動性精子、精子不動性を誘導する組成物、および低温保存剤を含む精子分散液。
- 該精子分散液が約-4℃ないし約30℃で保存される前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該精子分散液が約-4℃ないし約5℃で保存される前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該精子分散液が約-4℃ないし約0℃で保存される前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該精子分散液が約0℃ないし約5℃で保存される前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該精子分散液が約5℃ないし約30℃で保存される前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該精子分散液が少なくとも約24時間保存される前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該精子分散液が少なくとも約48時間保存される前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該精子分散液が少なくとも約72時間保存される前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該精子分散液が少なくとも約96時間保存される前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該精子分散液が少なくとも約1週間保存される前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該精子分散液が少なくとも約2週間保存される前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該精子分散液中の精子の濃度が少なくとも約0.04x106精子/mlである前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該精子分散液中の精子の濃度が少なくとも約1.5x106精子/mlである前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該精子分散液中の精子の濃度が少なくとも約2x106精子/mlである前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該精子分散液中の精子の濃度が少なくとも約3x106精子/mlである前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該精子分散液中の精子の濃度が少なくとも約0.5X107精子/mlである前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該精子分散液中の精子の濃度が少なくとも約1x107精子/mlである前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該精子分散液中の精子の濃度が少なくとも約2x107精子/mlである前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該精子分散液中の精子の濃度が少なくとも約3x107精子/mlである前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該精子分散液中の精子の濃度が少なくとも約4x107精子/mlである前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該精子分散液中の精子の濃度が少なくとも約5x107精子/mlである前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該精子分散液中の精子の濃度が少なくとも約6x107精子/mlである前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該精子分散液中の精子の濃度が少なくとも約7x107精子/mlである前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該精子分散液中の精子の濃度が少なくとも約8x107精子/mlである前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該精子分散液中の精子の濃度が少なくとも約12x107精子/mlである前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 精子不動性を誘導する該組成物が、カリウムおよび所望によりナトリウムを含み、ここにカリウム対ナトリウムのモル比が、それぞれ、1:1より大きい前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 精子不動性を誘導する該組成物が、カリウムおよび所望によりナトリウムを含み、ここにカリウム対ナトリウムのモル比が1.25:1より大きい前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 精子不動性を誘導する該組成物が、カリウムおよび所望によりナトリウムを含み、ここにカリウム対ナトリウムのモル比が1.5:1より大きい前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 精子不動性を誘導する該組成物が、カリウムおよび所望によりナトリウムを含み、ここにカリウム対ナトリウムのモル比が1.75:1より大きい前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 精子不動性を誘導する該組成物が、カリウムおよび所望によりナトリウムを含み、ここにカリウム対ナトリウムのモル比が2:1より大きい前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 精子不動性を誘導する該組成物が、カリウムおよび所望によりナトリウムを含み、ここにカリウム対ナトリウムのモル比が3:1より大きい前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 精子不動性を誘導する該組成物が、カリウムおよび所望によりナトリウムを含み、ここにカリウム対ナトリウムのモル比が4:1より大きい前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 精子不動性を誘導する該組成物が、カリウムおよび所望によりナトリウムを含み、ここにカリウム対ナトリウムのモル比が5:1より大きい前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該精子分散液中の該精子が、同一種の内在性の射精された精子よりも精巣上体精子に特徴的である運動性を有する前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該精子分散液が炭酸の源を含む前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該分散液がNaHCO3、KHCO3、およびC6H8O7・H2Oを含む前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該分散液が、水中に0.097モル/LのNaHCO3、0.173モル/LのKHCO3、0.090モル/L C6H8O7・H2Oを含む緩衝液を含む前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該精子分散液が、さらに、低温保存剤を含む前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該低温保存剤がグリセロールを含む請求項４４記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該低温保存剤が卵黄を含む請求項４４または４５記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該低温保存剤が、グリセロール、TRIS、クエン酸、およびフラクトースを含む請求項４４、４５、または４６のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該低温保存剤が、低温保存剤の１リットル当たり、60ml グリセロール、24.2g TRIS、13.8g クエン酸、10.0gフラクトースを含む請求項４４、４５、４６、または４７のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該精子分散液中の該精子が、同一種の１以上の哺乳類からである前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該精子分散液中の該精子が、ウシ、ブタ、ウマ、またはイノシイよりなる群から選択される哺乳類からである前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該集団のうちの１つの該精子が、少なくとも約70% X染色体を持ったまたは少なくとも約70% Y染色体担持精子細胞を含む請求項２または請求項２に従属するいずれかの請求項記載の方法。
- 該集団のうちの１つの該精子が、少なくとも約75% X染色体を持ったまたは少なくとも約75% Y染色体担持精子細胞を含む請求項２または請求項２に従属するいずれかの請求項記載の方法。
- 該集団のうちの１つの該精子が、少なくとも約80% X染色体を持ったまたは少なくとも約80% Y染色体担持精子細胞を含む請求項２または請求項２に従属するいずれかの請求項記載の方法。
- 該集団のうちの１つの該精子が、少なくとも約85% X染色体を持ったまたは少なくとも約85% Y染色体担持精子細胞を含む請求項２または請求項２に従属するいずれかの請求項記載の方法。
- 該集団のうちの１つの該精子が、少なくとも約90% X染色体を持ったまたは少なくとも約90% Y染色体担持精子細胞を含む請求項２または請求項２に従属するいずれかの請求項記載の方法。
- 該集団のうちの１つの該精子が、少なくとも約95% X染色体を持ったまたは少なくとも約95% Y染色体担持精子細胞を含む請求項２または請求項２に従属するいずれかの請求項記載の方法。
- 該精子分散液が、別々の集団に仕分けられた精子を含み、ここに、該集団のうちの１つの該精子が、少なくとも約65% X染色体担持精子細胞または少なくとも約65% Y染色体担持精子細胞を含む請求項３または４、または請求項５、または請求項３、４、または５に従属するいずれかの請求項の組合せ記載の方法。
- 該精子分散液が別々の集団に仕分けられた精子を含み、ここに、該集団のうちの１つの該精子が少なくとも約70% X染色体担持精子細胞または少なくとも約70% Y染色体担持精子細胞を含む請求項３または４、または請求項５の組合せ、または請求項３、４、または５に従属するいずれかの請求項記載の方法。
- 該精子分散液が別々の集団に仕分けられた精子を含み、ここに、該集団のうちの１つの該精子が少なくとも約75% X染色体担持精子細胞または少なくとも約75% Y染色体担持精子細胞を含む請求項３または４、または請求項５の組合せ、または請求項３、４、または５に従属するいずれかの請求項記載の方法。
- 該精子分散液が別々の集団に仕分けられた精子を含み、ここに、該集団のうちの１つの該精子が少なくとも約80% X染色体担持精子細胞または少なくとも約80% Y染色体担持精子細胞を含む請求項３または４、または請求項５の組合せ、または請求項３、４、または５に従属するいずれかの請求項記載の方法。
- 該精子分散液が別々の集団に仕分けられた精子を含み、ここに、該集団のうちの１つの該精子が少なくとも約85% X染色体担持精子細胞または少なくとも約85% Y染色体担持精子細胞を含む請求項３または４、または請求項５の組合せ、または請求項３、４、または５に従属するいずれかの請求項記載の方法。
- 該精子分散液が別々の集団に仕分けられた精子を含み、ここに、該集団のうちの１つの該精子が少なくとも約90% X染色体担持精子細胞または少なくとも約90% Y染色体担持精子細胞を含む請求項３または４、または請求項５の組合せ、または請求項３、４、または５に従属するいずれかの請求項記載の方法。
- 該精子分散液が別々の集団に仕分けられた精子を含み、ここに、該集団のうちの１つの該精子が少なくとも約95% X染色体担持精子細胞または少なくとも約95% Y染色体担持精子細胞を含む請求項３または４、または請求項５の組合せ、または請求項３、４、または５に従属するいずれかの請求項記載の方法。
- 該精子分散液が冷凍される前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該精子分散液が冷凍されない請求項１ないし６３のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該精子分散液が、該精子分散液による雌の哺乳類の受精前少なくとも約24時間、保存される前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該精子分散液が、該精子分散液による雌の哺乳類の受精前少なくとも約48時間、保存される前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該精子分散液が、該精子分散液による雌の哺乳類の受精前少なくとも約72時間、保存される前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該精子分散液が、該精子分散液による雌の哺乳類の受精前少なくとも約96時間、保存される前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該精子分散液が、該精子分散液による雌の哺乳類の受精前少なくとも約120時間、保存される前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該精子分散液が、該精子分散液の形成後約24時間以内に発送される前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該精子分散液が、該精子分散液の形成後約48時間以内に発送される前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該精子分散液が、該精子分散液の形成後約72時間以内に発送される前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該精子分散液が、該精子分散液の形成後約96時間以内に発送される前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該精子分散液が、該精子分散液の形成後約120時間以内に発送される前記請求項のいずれか１記載の方法、組合せ、または分散液。
- 該容器が人工授精ストローである請求項５または請求項５に従属するいずれかの請求項記載の組合せ。
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US55740704P | 2004-03-29 | 2004-03-29 | |
| US61417804P | 2004-09-29 | 2004-09-29 | |
| US61844004P | 2004-10-13 | 2004-10-13 | |
| PCT/US2005/010599 WO2005094852A2 (en) | 2004-03-29 | 2005-03-29 | Sperm suspensions for use in insemination |
Related Child Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2008314417A Division JP2009100752A (ja) | 2004-03-29 | 2008-12-10 | 受精で用いられる精子分散液 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2007537727A true JP2007537727A (ja) | 2007-12-27 |
Family
ID=34964337
Family Applications (4)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2007506489A Withdrawn JP2007537727A (ja) | 2004-03-29 | 2005-03-29 | 受精で用いられる精子分散液 |
| JP2007506461A Withdrawn JP2007531523A (ja) | 2004-03-29 | 2005-03-29 | Ｘまたはｙ染色体担持豊富化集団に仕分けるための精子懸濁液 |
| JP2008314414A Withdrawn JP2009082143A (ja) | 2004-03-29 | 2008-12-10 | Ｘまたはｙ染色体担持豊富化集団に仕分けるための精子懸濁液 |
| JP2008314417A Pending JP2009100752A (ja) | 2004-03-29 | 2008-12-10 | 受精で用いられる精子分散液 |
Family Applications After (3)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2007506461A Withdrawn JP2007531523A (ja) | 2004-03-29 | 2005-03-29 | Ｘまたはｙ染色体担持豊富化集団に仕分けるための精子懸濁液 |
| JP2008314414A Withdrawn JP2009082143A (ja) | 2004-03-29 | 2008-12-10 | Ｘまたはｙ染色体担持豊富化集団に仕分けるための精子懸濁液 |
| JP2008314417A Pending JP2009100752A (ja) | 2004-03-29 | 2008-12-10 | 受精で用いられる精子分散液 |
Country Status (16)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US7838210B2 (ja) |
| EP (5) | EP2260854A1 (ja) |
| JP (4) | JP2007537727A (ja) |
| CN (2) | CN104974983A (ja) |
| AR (2) | AR048515A1 (ja) |
| AU (2) | AU2005228893B2 (ja) |
| BR (2) | BRPI0509488A (ja) |
| CA (3) | CA2561519C (ja) |
| DK (2) | DK2801363T3 (ja) |
| ES (1) | ES2397678T3 (ja) |
| HK (2) | HK1173745A1 (ja) |
| MX (2) | MXPA06011344A (ja) |
| NZ (2) | NZ550196A (ja) |
| PL (1) | PL2151243T3 (ja) |
| PT (1) | PT2151243E (ja) |
| WO (2) | WO2005095590A2 (ja) |
Families Citing this family (47)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1998034094A1 (en) | 1997-01-31 | 1998-08-06 | The Horticulture & Food Research Institute Of New Zealand Ltd. | Optical apparatus |
| US6149867A (en) | 1997-12-31 | 2000-11-21 | Xy, Inc. | Sheath fluids and collection systems for sex-specific cytometer sorting of sperm |
| DE69942959D1 (de) | 1998-07-30 | 2010-12-30 | Xy Llc | Pferdesystem für die künstliche Befruchtung ohne chirurgischen Eingriff |
| US7208265B1 (en) * | 1999-11-24 | 2007-04-24 | Xy, Inc. | Method of cryopreserving selected sperm cells |
| CN101418280B (zh) | 2000-05-09 | 2014-10-22 | Xy有限责任公司 | 具有高纯度x-染色体和y-染色体的精子群 |
| AU2002237689B2 (en) | 2000-11-29 | 2008-01-10 | Xy, Llc. | System to separate frozen-thawed spermatozoa into X-chromosome bearing and Y-chromosome bearing populations |
| US7713687B2 (en) | 2000-11-29 | 2010-05-11 | Xy, Inc. | System to separate frozen-thawed spermatozoa into x-chromosome bearing and y-chromosome bearing populations |
| EP2275533B9 (en) | 2002-08-01 | 2016-10-19 | Xy, Llc | Method of assessing sperm cells |
| US8486618B2 (en) | 2002-08-01 | 2013-07-16 | Xy, Llc | Heterogeneous inseminate system |
| WO2004017041A2 (en) | 2002-08-15 | 2004-02-26 | Xy, Inc. | High resolution flow cytometer |
| US7169548B2 (en) | 2002-09-13 | 2007-01-30 | Xy, Inc. | Sperm cell processing and preservation systems |
| ES2561816T3 (es) | 2003-03-28 | 2016-03-01 | Inguran, Llc | Aparatos, métodos y procesos para clasificar partículas y para proporcionar esperma animal clasificado por sexo |
| CA2566749C (en) * | 2003-05-15 | 2017-02-21 | Xy, Inc. | Efficient haploid cell sorting for flow cytometer systems |
| MXPA06011344A (es) | 2004-03-29 | 2006-12-15 | Monsanto Technology Llc | Suspensiones de espermatozoides para separar en poblaciones enriquecidas con cromosomas x o y. |
| BRPI0513685A (pt) | 2004-07-22 | 2008-05-13 | Monsanto Technology Llc | processo para enriquecimento de uma população de células de esperma |
| DE102005044530B4 (de) * | 2004-09-16 | 2010-02-18 | Masterrind Gmbh | Verfahren zur geschlechtsspezifischen Selektion von Säugerspermatozoen |
| US9433484B2 (en) * | 2007-07-27 | 2016-09-06 | Brad K. Stroud | Artificial breeding techniques for bovines including semen diluents and AI apparatus |
| US8415094B2 (en) * | 2007-12-21 | 2013-04-09 | Jaffar Ali bin M. Abdullah | Protein-free gamete and embryo handling and culture media products |
| CN101554152B (zh) * | 2009-05-21 | 2012-05-09 | 西北农林科技大学 | 一种冷冻精液稀释液及其配制方法 |
| NZ600737A (en) * | 2009-11-24 | 2013-05-31 | Biassex Pty Ltd | Method for influencing sex selection in artificial insemination and apparatus for same |
| US10610343B2 (en) | 2013-07-03 | 2020-04-07 | Brad K. Stroud | Method, apparatus and kit for artificial insemination of bovine |
| USRE48283E1 (en) | 2010-08-10 | 2020-10-27 | Brad Stroud | Method and apparatus to reduce the number of sperm used in artificial insemination of cattle |
| US11622844B2 (en) | 2010-08-10 | 2023-04-11 | Maximate, Llc | Method, apparatus and kit for artificial insemination of bovine |
| US9340762B2 (en) | 2010-08-20 | 2016-05-17 | Yu Sun | Method for automated sperm manipulation and device for holding sperm and oocytes |
| US9781919B2 (en) | 2011-06-01 | 2017-10-10 | Inguran, Llc | Compositions and methods for improving the quality of processed sperm |
| US9347038B2 (en) | 2011-06-01 | 2016-05-24 | Inguran, Llc | Compositions and methods for processing sperm |
| WO2013049227A2 (en) | 2011-09-26 | 2013-04-04 | Geneart Ag | High efficiency, small volume nucleic acid synthesis |
| MX366111B (es) | 2012-03-14 | 2019-06-26 | Membrane Protective Tech Inc | Sistema y sustancias para la crioconservacion de celulas viables. |
| EP2834357B1 (en) | 2012-04-04 | 2017-12-27 | Life Technologies Corporation | Tal-effector assembly platform, customized services, kits and assays |
| US9888990B2 (en) | 2012-06-06 | 2018-02-13 | Inguran, Llc | Methods for use of sex sorted semen to improve genetic management in swine |
| US9433195B2 (en) | 2012-06-06 | 2016-09-06 | Inguran, Llc | Methods for increasing genetic progress in a line or breed of swine using sex-selected sperm cells |
| US9034161B2 (en) | 2012-08-23 | 2015-05-19 | Douglas T. Carrell | Sperm separation devices and associated methods |
| EP2903431A4 (en) | 2012-10-05 | 2016-03-23 | Inguran Llc | HIGHLY EFFICIENT SEX SEER SEXING METHODS |
| US10620213B2 (en) | 2012-10-05 | 2020-04-14 | Inguran, Llc | High pressure sperm sorting and flow cytometer methods |
| US10563240B2 (en) | 2013-03-14 | 2020-02-18 | Life Technologies Corporation | High efficiency, small volume nucleic acid synthesis |
| US20160017394A1 (en) | 2014-07-15 | 2016-01-21 | Life Technologies Corporation | Compositions and methods for nucleic acid assembly |
| US11708556B2 (en) * | 2014-10-20 | 2023-07-25 | University Of Utah Research Foundation | Tissue sample processing system and associated methods |
| CA3210347A1 (en) | 2014-11-20 | 2016-05-26 | Inguran, Llc | Low sugar sperm media and compositions |
| EP3557262B1 (en) | 2014-12-09 | 2022-08-10 | Life Technologies Corporation | High efficiency, small volume nucleic acid synthesis |
| EP3320103A1 (en) | 2015-07-07 | 2018-05-16 | Thermo Fisher Scientific Geneart GmbH | Enzymatic synthesis of nucleic acid sequences |
| EP3763818A1 (en) | 2015-10-06 | 2021-01-13 | Pierce Biotechnology, Inc. | Devices and methods for producing proteins |
| PT110231B (pt) * | 2017-08-02 | 2021-02-22 | Universidade Do Porto | Potenciadores de mtor e suas utilizações para melhorar a qualidade e função do esperma durante o armazenamento |
| WO2020001783A1 (en) | 2018-06-29 | 2020-01-02 | Thermo Fisher Scientific Geneart Gmbh | High throughput assembly of nucleic acid molecules |
| US10603075B1 (en) | 2018-11-30 | 2020-03-31 | Ohana Biosciences, Inc. | Compositions and methods for enhancing sperm function |
| GB201905303D0 (en) | 2019-04-15 | 2019-05-29 | Thermo Fisher Scient Geneart Gmbh | Multiplex assembly of nucleic acid molecules |
| WO2021178809A1 (en) | 2020-03-06 | 2021-09-10 | Life Technologies Corporation | High sequence fidelity nucleic acid synthesis and assembly |
| DE102021002257A1 (de) | 2021-04-29 | 2022-11-03 | Forschungsverbund Berlin E.V. | Mittel zur Konservierung von Säugetiersperma und Verwendung des Mittels |
Citations (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3005756A (en) * | 1958-11-14 | 1961-10-24 | Noland L Van Demark | Diluter containing carbon dioxide for preserving semen |
| US3005759A (en) * | 1959-04-24 | 1961-10-24 | American Zinc Inst | Zinc electroplating |
| JPH05285163A (ja) * | 1992-04-10 | 1993-11-02 | Okayama Pref Gov | 精子凍結方法及び精子凍結装置 |
| JP2000239101A (ja) * | 1999-02-18 | 2000-09-05 | Japan Science & Technology Corp | ラット精子の凍結保存法 |
| JP2001017026A (ja) * | 1999-07-09 | 2001-01-23 | Livestock Improvement Association Of Japan Inc | 家畜の人工授精用精子または受精卵移植用卵子の注入器及びその操作方法 |
| JP2001328901A (ja) * | 2000-05-19 | 2001-11-27 | Seatsuku Yoshitomi Kk | マウス精子凍結保存用キット |
| WO2002041906A2 (en) * | 2000-11-22 | 2002-05-30 | Pharmacia Corporation | Methods and apparatus for producing gender enriched sperm |
| JP2002521043A (ja) * | 1998-07-30 | 2002-07-16 | エックスワイ，インコーポレイテッド | 非外科的人工授精のためのウマシステム |
| US20030157473A1 (en) * | 2002-02-21 | 2003-08-21 | Minitube Of America | Compositions comprising reproductive cell media and methods for using such compositions |
Family Cites Families (626)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3299354A (en) | 1962-07-05 | 1967-01-17 | Coulter Electronics | Aperture tube structure for particle study apparatus |
| US3499435A (en) | 1967-06-02 | 1970-03-10 | Paul E Rockwell | Esophageal probe for use in monitoring |
| US3547526A (en) | 1967-10-26 | 1970-12-15 | Kollsman Instr Corp | Optical beam cross-section converter |
| US3810010A (en) | 1968-11-02 | 1974-05-07 | Telefunken Patent | Particle analysis method and apparatus wherein liquid containing particles is sucked into a constricted flow path |
| US3829216A (en) | 1968-11-26 | 1974-08-13 | M Persidsky | Optical system and method for counting sperm cells |
| DE1815352C3 (de) | 1968-12-18 | 1975-03-20 | Wolfgang Prof. Dr. Dittrich | Automatisches MeB- und Zählgerät für die Teilchen einer Dispersion |
| US3894529A (en) | 1969-04-10 | 1975-07-15 | Bio Controls Inc | Method and means for controlling the sex of mammalian offspring and product therefor |
| US4327177A (en) | 1969-04-10 | 1982-04-27 | Wallace Shrimpton | Method and means for controlling the sex of mammalian offspring and product therefor |
| US4474875A (en) * | 1969-04-10 | 1984-10-02 | Wallace Shrimpton | Method and means for controlling the sex of mammalian offspring and product therefor |
| DE1919628C3 (de) | 1969-04-18 | 1975-04-10 | Wolfgang Prof. Dr. Dittrich | Anordnung zum automatischen Zählen und/oder Klassifizieren von in einem strömungsfähigen Medium dispergierten Teilchen |
| US3687806A (en) | 1969-11-04 | 1972-08-29 | Bio Controls Inc | Method for controlling sex of mammalian offspring |
| US3788744A (en) | 1970-01-14 | 1974-01-29 | Bio Physics Systems Inc | Method and apparatus for photoanalysis |
| US3661460A (en) | 1970-08-28 | 1972-05-09 | Technicon Instr | Method and apparatus for optical analysis of the contents of a sheathed stream |
| US3816249A (en) | 1970-11-23 | 1974-06-11 | B Bhattacharya | Universal medium and method for extending the useful life of semen in vitro |
| US3644128A (en) | 1970-12-28 | 1972-02-22 | Stuart Lipner | Method of preparing comminuted meat products |
| US3756459A (en) | 1971-01-12 | 1973-09-04 | Damon Corp | Method and apparatus for metering fluid utilizing pressure differentials |
| US3791384A (en) * | 1971-07-15 | 1974-02-12 | Schaumann H | Artificial insemination of sows |
| US3833796A (en) | 1971-10-13 | 1974-09-03 | Georgia Tech Res Inst | Method and apparatus for chromosome digitizing |
| BE793185A (fr) | 1971-12-23 | 1973-04-16 | Atomic Energy Commission | Appareil pour analyser et trier rapidement des particules telles que des cellules biologiques |
| US3826364A (en) | 1972-05-22 | 1974-07-30 | Univ Leland Stanford Junior | Particle sorting method and apparatus |
| US3761941A (en) | 1972-10-13 | 1973-09-25 | Mead Corp | Phase control for a drop generating and charging system |
| CA1029833A (en) | 1973-02-23 | 1978-04-18 | Hildegarde Goehde | Apparatus for the automatic counting and measuring of suspended particles |
| US3791517A (en) | 1973-03-05 | 1974-02-12 | Bio Physics Systems Inc | Digital fluidic amplifier particle sorter |
| US4009260A (en) | 1973-04-19 | 1977-02-22 | Schering Aktiengesellschaft | Fractionation of sperm |
| USRE29141E (en) | 1973-06-14 | 1977-02-22 | Coulter Electronics, Inc. | Apparatus for orienting generally flat particles for sensing |
| US3893766A (en) | 1973-06-14 | 1975-07-08 | Coulter Electronics | Apparatus for orienting generally flat particles for slit-scan photometry |
| US3947093A (en) | 1973-06-28 | 1976-03-30 | Canon Kabushiki Kaisha | Optical device for producing a minute light beam |
| US3944917A (en) | 1973-08-13 | 1976-03-16 | Coulter Electronics, Inc. | Electrical sensing circuitry for particle analyzing device |
| US3909744A (en) | 1973-09-24 | 1975-09-30 | United Technologies Corp | Unstable resonator system producing a high irradiance beam in the far field |
| US3906929A (en) | 1973-11-23 | 1975-09-23 | Lynn Lawrence Augspurger | Processes for reproduction of cellular bodies |
| FR2254639B1 (ja) | 1973-12-18 | 1978-06-02 | Agronomique Inst Nat Rech | |
| US4070617A (en) | 1974-05-08 | 1978-01-24 | Max-Planck-Gesellschaft Zur Forderung Der Wissenschaften E.V. | Device for controlling the particle flow in an apparatus for measuring the properties of particles suspended in liquid |
| US3973196A (en) | 1974-05-24 | 1976-08-03 | Coulter Electronics, Inc. | Method and apparatus for ejecting a metered amount of particulate sample |
| US3963606A (en) | 1974-06-03 | 1976-06-15 | Coulter Electronics, Inc. | Semi-automatic adjusting delay for an electronic particle separator |
| US3877430A (en) | 1974-07-17 | 1975-04-15 | Horst K Wieder | Artificial insemination apparatus |
| US4083957A (en) | 1974-07-26 | 1978-04-11 | Lang John L | Process for the alteration of the sex-ratio of mammals |
| US4006360A (en) | 1974-08-21 | 1977-02-01 | Block Engineering, Inc. | Method of discriminating between dyed particles and background fluorescence of the dye |
| US4092229A (en) | 1975-12-17 | 1978-05-30 | Bhattacharya Bhairab C | Thermal convection counter streaming sedimentation and forced convection galvanization method for controlling the sex of mammalian offspring |
| US3976197A (en) | 1974-11-22 | 1976-08-24 | Bhattacharya Bhairab C | Thermal convection counter streaming sedimentation method and apparatus for controlling the sex of mammalian offspring |
| US4014611A (en) | 1975-04-30 | 1977-03-29 | Coulter Electronics, Inc. | Aperture module for use in particle testing apparatus |
| DE2521236C3 (de) | 1975-05-10 | 1978-12-14 | Hildegard Dr. 4400 Muenster Goehde Geb. Kuhl | Einrichtung zum Zählen und Messen von in einer Flüssigkeit suspendierten Teilchen |
| US3960449A (en) | 1975-06-05 | 1976-06-01 | The Board Of Trustees Of Leland Stanford Junior University | Measurement of angular dependence of scattered light in a flowing stream |
| US4058732A (en) | 1975-06-30 | 1977-11-15 | Analytical Radiation Corporation | Method and apparatus for improved analytical fluorescent spectroscopy |
| US4007087A (en) | 1975-10-17 | 1977-02-08 | Gametrics Limited | Sperm fractionation and storage |
| AU2154077A (en) | 1976-01-27 | 1978-07-27 | Univ Edinburgh | Control of sex ratio in mammalian offspring |
| US4162282A (en) | 1976-04-22 | 1979-07-24 | Coulter Electronics, Inc. | Method for producing uniform particles |
| US4302166A (en) | 1976-04-22 | 1981-11-24 | Coulter Electronics, Inc. | Droplet forming apparatus for use in producing uniform particles |
| JPS5319891A (en) | 1976-06-10 | 1978-02-23 | Coulter Electronics | Method and apparatus for folling drop formation and separation |
| GB1583150A (en) | 1976-08-02 | 1981-01-21 | Milk Marketing Board | Apparatus for collecting eggs |
| US4110604A (en) | 1976-11-04 | 1978-08-29 | Becton, Dickinson And Company | Particle density measuring system |
| DE2709399C3 (de) | 1977-03-04 | 1980-07-24 | Goehde, Wolfgang, Dr., 4400 Muenster | Einrichtung zum Messen von Zelleigenschaften |
| DE2716095A1 (de) | 1977-04-12 | 1978-10-19 | Zoeld Tibor Dr Phys | Gasgesteuertes verfahren zum sortieren von in einem elektrolyten suspendierten teilchen und vorrichtung zur durchfuehrung des verfahrens |
| US4191749A (en) | 1977-10-11 | 1980-03-04 | Bryant Bernard J | Method and material for increasing the percentage of mammalian offspring of either sex |
| US4448767A (en) | 1977-10-11 | 1984-05-15 | Sumar Corporation | Preparation of monospecific male-specific antibody and the use thereof for increasing the percentage of mammalian offspring of either sex |
| US4189236A (en) | 1978-03-20 | 1980-02-19 | Coulter Electronics, Inc. | Ellipsoid-conic radiation collector and method |
| US4179218A (en) | 1978-05-15 | 1979-12-18 | The Boeing Company | Particle size analyzer |
| US4251733A (en) * | 1978-06-29 | 1981-02-17 | Hirleman Jr Edwin D | Technique for simultaneous particle size and velocity measurement |
| DE2832091A1 (de) | 1978-07-21 | 1980-01-31 | Eidenschink Henning | Optisches verfahren zur bestimmung der teilchengroesse kolloidaler loesungen und messgeraet zur durchfuehrung des verfahrens |
| US4276139A (en) | 1978-08-16 | 1981-06-30 | Lawson Rommon L | Process for magnetic separation and collection of viable female and male spermatozoa |
| US4225405A (en) | 1978-08-16 | 1980-09-30 | Lawson Rommom L | Process for separation and collection of viable female and male spermatozoa |
| US4230558A (en) | 1978-10-02 | 1980-10-28 | Coulter Electronics, Inc. | Single drop separator |
| US4341471A (en) | 1979-01-02 | 1982-07-27 | Coulter Electronics, Inc. | Apparatus and method for measuring the distribution of radiant energy produced in particle investigating systems |
| US4267268A (en) | 1979-03-12 | 1981-05-12 | Nelson Jr Robert A | Spermatozoa extenders |
| US4274408A (en) | 1979-03-26 | 1981-06-23 | Beatrice Nimrod | Method for guide-wire placement and novel syringe therefor |
| US4200802A (en) | 1979-03-28 | 1980-04-29 | The United States Of America As Represented By The United States Department Of Energy | Parabolic cell analyzer |
| US4408877A (en) | 1979-04-10 | 1983-10-11 | Ernst Leitz Wetzlar Gmbh | Device for hydrodynamic focussing of a particle-suspension in a liquid flow cytophotometer |
| NO144002C (no) | 1979-04-10 | 1981-05-27 | Norsk Hydro S Inst For Kreftfo | Anordning for anvendelse ved vaeskestroemsfotometri |
| US4263508A (en) | 1979-04-20 | 1981-04-21 | Research Corporation | Pulse edge measurement for determining particle dimensional characteristics |
| US4255021A (en) | 1979-04-20 | 1981-03-10 | The United States Of America As Represented By The United States Department Of Energy | Optical device with conical input and output prism faces |
| US4318481A (en) | 1979-08-20 | 1982-03-09 | Ortho Diagnostics, Inc. | Method for automatically setting the correct phase of the charge pulses in an electrostatic flow sorter |
| US4317520A (en) | 1979-08-20 | 1982-03-02 | Ortho Diagnostics, Inc. | Servo system to control the spatial position of droplet formation of a fluid jet in a cell sorting apparatus |
| US4318482A (en) | 1979-08-20 | 1982-03-09 | Ortho Diagnostics, Inc. | Method for measuring the velocity of a perturbed jetting fluid in an electrostatic particle sorting system |
| US4318480A (en) | 1979-08-20 | 1982-03-09 | Ortho Diagnostics, Inc. | Method and apparatus for positioning the point of droplet formation in the jetting fluid of an electrostatic sorting device |
| US4325483A (en) | 1979-08-20 | 1982-04-20 | Ortho Diagnostics, Inc. | Method for detecting and controlling flow rates of the droplet forming stream of an electrostatic particle sorting apparatus |
| DE2943116C2 (de) | 1979-10-25 | 1986-06-19 | Gesellschaft für Strahlen- und Umweltforschung mbH, 8000 München | Einrichtung zur durchflußcytometrischen Reaktions- und/oder Diffusionsmessung |
| US4284355A (en) | 1979-10-29 | 1981-08-18 | Ortho Diagnostics, Inc. | Automated method for cell volume determination |
| US4400764A (en) | 1980-02-05 | 1983-08-23 | The Boeing Company | Low backscatter illumination system |
| US4367043A (en) | 1980-05-05 | 1983-01-04 | Leland Stanford Junior University | Method and means for delivering liquid samples to a sample scanning device |
| US4362246A (en) | 1980-07-14 | 1982-12-07 | Adair Edwin Lloyd | Method of treating collected mammal semen and separating sperm into X Y components |
| US4348107A (en) | 1980-07-18 | 1982-09-07 | Coulter Electronics, Inc. | Orifice inside optical element |
| EP0046345A3 (en) | 1980-08-15 | 1982-03-03 | Ortho Diagnostic Systems Inc. | Controlled hydrodynamic flow in flow cytometry systems |
| US4350410A (en) | 1980-10-08 | 1982-09-21 | The United States Of America As Represented By The Administrator Of The National Aeronautics And Space Administration | Multiprism collimator |
| US4691829A (en) | 1980-11-03 | 1987-09-08 | Coulter Corporation | Method of and apparatus for detecting change in the breakoff point in a droplet generation system |
| US4487320A (en) | 1980-11-03 | 1984-12-11 | Coulter Corporation | Method of and apparatus for detecting change in the breakoff point in a droplet generation system |
| US4395676A (en) | 1980-11-24 | 1983-07-26 | Coulter Electronics, Inc. | Focused aperture module |
| US4361400A (en) | 1980-11-26 | 1982-11-30 | The United States Of America As Represented By The United States Department Of Energy | Fluidic assembly for an ultra-high-speed chromosome flow sorter |
| US4680258A (en) | 1981-03-24 | 1987-07-14 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | Process for sex determination in man by use of monoclonal antibodies to the H-Y antigen |
| US4673288A (en) | 1981-05-15 | 1987-06-16 | Ratcom, Inc. | Flow cytometry |
| US4818103A (en) | 1981-05-15 | 1989-04-04 | Ratcom | Flow cytometry |
| EP0068404B1 (en) | 1981-06-24 | 1985-10-02 | Becton Dickinson and Company | Analyzer for simultaneously determining volume and light emission characteristics of particles |
| US4339434A (en) | 1981-08-17 | 1982-07-13 | Gametrics Limited | Method of increasing the incidence of female offspring |
| US4395397A (en) | 1981-09-17 | 1983-07-26 | Sidney Farber Cancer Institute, Inc. | Apparatus and method for killing unwanted cells |
| US4422761A (en) | 1981-09-28 | 1983-12-27 | Frommer Joseph C | Photo-electric particle sensing system |
| US4515274A (en) | 1981-12-02 | 1985-05-07 | Coulter Corporation | Particle analyzing and sorting apparatus |
| JPS59500340A (ja) | 1982-03-08 | 1984-03-01 | モトロ−ラ・インコ−ポレ−テツド | 集積回路のリ−ドフレ−ム |
| US4511661A (en) | 1982-03-19 | 1985-04-16 | University Patents, Inc. | ATCC HB8116 And its monoclonal anti-H-Y antibody, Hyclonalan |
| US4498766A (en) | 1982-03-25 | 1985-02-12 | Becton, Dickinson And Company | Light beam focal spot elongation in flow cytometry devices |
| DE3315195A1 (de) | 1982-04-29 | 1983-11-03 | International Remote Imaging Systems Inc., 91311 Chatsworth, Calif. | Verfahren zum ausrichten von teilchen in einer fluidprobe |
| DE3315194A1 (de) | 1982-04-29 | 1983-11-03 | International Remote Imaging Systems Inc., 91311 Chatsworth, Calif. | Verfahren zum trennen von in einer fluidprobe stroemenden teilchen |
| US4629687A (en) | 1982-07-29 | 1986-12-16 | Board Of Trustees Of Michigan State University | Positive selection sorting of cells |
| GB2125181B (en) | 1982-08-11 | 1986-01-29 | Coulter Electronics | Flow cells for particle study |
| US4559309A (en) | 1982-09-01 | 1985-12-17 | Memorial Sloan Kettering Cancer Center | Flow cytometry-fluorescence measurements for characterizing sperm |
| WO1984001265A1 (en) | 1982-10-05 | 1984-04-12 | Genetic Engineering Inc | Method of treating collected mammal semen and separating sperm into x and y components |
| US4501366A (en) | 1982-12-14 | 1985-02-26 | Adolph Coors Company | Photomultiplier tube assembly |
| EP0112188B1 (en) | 1982-12-21 | 1987-06-16 | Crosfield Electronics Limited | Light beam-splitter |
| US4492436A (en) | 1983-01-03 | 1985-01-08 | At&T Bell Laboratories | Polarization independent beam splitter |
| JPS59143146A (ja) | 1983-02-07 | 1984-08-16 | Nippon Kogaku Kk <Nikon> | ミラ−集光型照明光学系 |
| CA1206559A (en) | 1983-03-04 | 1986-06-24 | Robert E. Auer | Method of and apparatus for detecting change in the breakoff point of a droplet generation system |
| IT1197570B (it) | 1983-02-11 | 1988-12-06 | Serono Ist Farm | Miscele di fsh e lh da ipofisi porcine in rapporto definito |
| CH651930A5 (en) | 1983-03-24 | 1985-10-15 | Coulter Corp | Apparatus for analysis and sorting of particles |
| JPS59174742A (ja) | 1983-03-25 | 1984-10-03 | Agency Of Ind Science & Technol | 微小粒子を区分又は選別する方法及びその装置 |
| GB2145112B (en) | 1983-04-27 | 1987-02-18 | Milk Marketing Board | Sorting living spermatozoa |
| US4523809A (en) | 1983-08-04 | 1985-06-18 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Air Force | Method and apparatus for generating a structured light beam array |
| NZ207393A (en) | 1983-08-05 | 1987-03-31 | Neal Lloyd First | Staining dna in living cells |
| US4538733A (en) | 1983-10-14 | 1985-09-03 | Becton, Dickinson And Company | Particle sorter with neutralized collection wells and method of using same |
| US4780406A (en) | 1983-10-18 | 1988-10-25 | The Regents Of The University Of California | Flow cytometric measurement of total DNA and incorporated halodeoxyuridine |
| US4585736A (en) | 1983-10-18 | 1986-04-29 | The United States Of America As Represented By The United States Department Of Energy | Flow cytometric measurement of total DNA and incorporated halodeoxyuridine |
| US4735504A (en) | 1983-10-31 | 1988-04-05 | Technicon Instruments Corporation | Method and apparatus for determining the volume & index of refraction of particles |
| DE3483519D1 (de) | 1983-12-24 | 1990-12-06 | Inotech Ag Wohlen | Vorrichtung zum fuehren und sammeln von licht in der fotometrie od. dgl. |
| US4573796A (en) | 1984-01-06 | 1986-03-04 | The United States Of America As Represented By The United States Department Of Energy | Apparatus for eliminating background interference in fluorescence measurements |
| US4631483A (en) | 1984-02-01 | 1986-12-23 | Coulter Electronics, Inc. | Particle analyzing apparatus and method of moving particles in suspension through such apparatus |
| US4714680B1 (en) | 1984-02-06 | 1995-06-27 | Univ Johns Hopkins | Human stem cells |
| US4965204A (en) | 1984-02-06 | 1990-10-23 | The Johns Hopkins University | Human stem cells and monoclonal antibodies |
| EP0172242A1 (en) | 1984-02-29 | 1986-02-26 | Research Corporation | Flow cytometers |
| US4545677A (en) | 1984-03-05 | 1985-10-08 | Becton, Dickinson And Company | Prismatic beam expander for light beam shaping in a flow cytometry apparatus |
| US4600302A (en) | 1984-03-26 | 1986-07-15 | Becton, Dickinson And Company | Flow cytometry apparatus with uniform incoherent light excitation |
| DE3412620A1 (de) | 1984-04-04 | 1985-10-17 | Basf Ag, 6700 Ludwigshafen | Laseroptische anordnung zur messung des dispergiergrades in stroemenden systemen |
| US4609286A (en) | 1984-04-16 | 1986-09-02 | Becton, Dickinson And Company | Dispersion prism for separation of wavelengths of spectrally rich light in a flow cytometry apparatus |
| US4605558A (en) | 1984-04-20 | 1986-08-12 | Wallace Shrimpton | Process for cell separation |
| US4660971A (en) | 1984-05-03 | 1987-04-28 | Becton, Dickinson And Company | Optical features of flow cytometry apparatus |
| FR2563726B1 (fr) | 1984-05-04 | 1986-10-10 | Robert Cassou | Appareil d'insemination artificielle, notamment des carnivores |
| FR2566543B1 (fr) | 1984-06-20 | 1988-02-26 | Commissariat Energie Atomique | Dispositif optique a rendement de collection eleve et cytofluorimetre en faisant application |
| EP0171676B1 (en) | 1984-07-31 | 1990-11-07 | Hitachi, Ltd. | Free-flow electrophoretic separation method and apparatus therefor |
| ATE48477T1 (de) | 1984-09-11 | 1989-12-15 | Partec Ag | Verfahren und vorrichtung zur sortierung von mikroskopischen partikeln. |
| US4661913A (en) | 1984-09-11 | 1987-04-28 | Becton, Dickinson And Company | Apparatus and method for the detection and classification of articles using flow cytometry techniques |
| US4598408A (en) | 1984-10-22 | 1986-07-01 | Trw Inc. | High extraction efficiency cylindrical ring resonator |
| JPS61139747A (ja) | 1984-12-12 | 1986-06-27 | Canon Inc | 粒子解析装置 |
| JPS61159135A (ja) | 1984-12-31 | 1986-07-18 | Canon Inc | 粒子解析装置 |
| US4702598A (en) | 1985-02-25 | 1987-10-27 | Research Corporation | Flow cytometer |
| US4683202A (en) | 1985-03-28 | 1987-07-28 | Cetus Corporation | Process for amplifying nucleic acid sequences |
| US4683195A (en) | 1986-01-30 | 1987-07-28 | Cetus Corporation | Process for amplifying, detecting, and/or-cloning nucleic acid sequences |
| CA1250808A (en) | 1985-04-29 | 1989-03-07 | David W. Dresser | Semen sexing |
| US4662742A (en) | 1985-05-10 | 1987-05-05 | Becton, Dickinson And Company | Scatter/fluorescene beam splitter in a flow cytometry apparatus |
| US4877965A (en) | 1985-07-01 | 1989-10-31 | Diatron Corporation | Fluorometer |
| USRE34782E (en) | 1985-07-01 | 1994-11-08 | Diatron Corporation | Fluorometer |
| US4744090A (en) | 1985-07-08 | 1988-05-10 | Trw Inc. | High-extraction efficiency annular resonator |
| NO156916C (no) | 1985-07-10 | 1987-12-16 | Harald B Steen | Stroemningskammer for vaeskestroemsfotometer. |
| NO156917C (no) | 1985-07-16 | 1987-12-16 | Harald B Steen | Anordning for maaling av biologiske cellers lysspredning i vaeskestroemsfotometere. |
| US4989977A (en) | 1985-07-29 | 1991-02-05 | Becton, Dickinson And Company | Flow cytometry apparatus with improved light beam adjustment |
| US4794086A (en) | 1985-11-25 | 1988-12-27 | Liquid Air Corporation | Method for measurement of impurities in liquids |
| US4770992A (en) | 1985-11-27 | 1988-09-13 | Den Engh Gerrit J Van | Detection of specific DNA sequences by flow cytometry |
| US4999283A (en) | 1986-01-10 | 1991-03-12 | University Of Kentucky Research Foundation | Method for x and y spermatozoa separation |
| US5447841A (en) | 1986-01-16 | 1995-09-05 | The Regents Of The Univ. Of California | Methods for chromosome-specific staining |
| US5756696A (en) | 1986-01-16 | 1998-05-26 | Regents Of The University Of California | Compositions for chromosome-specific staining |
| US4710635A (en) | 1986-04-14 | 1987-12-01 | Becton, Dickinson And Company | Dual laser excitation from single laser source |
| NL8601000A (nl) | 1986-04-21 | 1987-11-16 | Jan Greve T H Twente Afdeling | Het gebruik van gepolariseerd licht in stromingscytometrie. |
| JPS62274238A (ja) | 1986-05-22 | 1987-11-28 | ベクトン・デイツキンソン・アンド・カンパニ− | フロ−サイトメトリ−装置に用いる光学的結合用ゲル |
| US4790653A (en) | 1986-05-22 | 1988-12-13 | Becton Dickinson And Company | Housing for a flow cytometry apparatus with particle unclogging feature |
| US4786165A (en) | 1986-07-10 | 1988-11-22 | Toa Medical Electronics Co., Ltd. | Flow cytometry and apparatus therefor |
| US4867908A (en) | 1986-08-29 | 1989-09-19 | Becton, Dickinson And Company | Method and materials for calibrating flow cytometers and other analysis instruments |
| US4704891A (en) | 1986-08-29 | 1987-11-10 | Becton, Dickinson And Company | Method and materials for calibrating flow cytometers and other analysis instruments |
| FR2609885B1 (fr) | 1987-01-22 | 1989-04-14 | Cassou Robert | Instrument pour l'insemination artificielle, le transfert d'embryons ou le prelevement de liquides folliculaires chez les mammiferes |
| US5162306A (en) | 1987-01-23 | 1992-11-10 | Donaldson Lloyd E | Composition and method for producing superovulation in mammals |
| US4780451B1 (en) | 1987-01-23 | 1995-04-04 | Asua International Inc | Composition and method for producing superovulation in cattle |
| ATE91789T1 (de) | 1987-02-17 | 1993-08-15 | Ratcom Inc | Durchflusszytometrie. |
| US4764013A (en) | 1987-03-23 | 1988-08-16 | The United States Of America As Represented By The United States Department Of Energy | Interferometric apparatus and method for detection and characterization of particles using light scattered therefrom |
| US4765737A (en) | 1987-03-30 | 1988-08-23 | Cornell Research Foundation | Cell size measurements using light in flow cytometry and cell sorting |
| US5346990A (en) | 1987-04-08 | 1994-09-13 | Cytogam, Inc. | Sex-associated membrane proteins and methods for increasing the probability that offspring will be of a desired sex |
| US5021244A (en) | 1988-12-06 | 1991-06-04 | Cytogam, Inc. | Sex-associated membrane antibodies and their use for increasing the probability that offspring will be of a desired sex |
| EP0286088B1 (en) | 1987-04-08 | 1994-09-14 | Hitachi, Ltd. | A sheath flow type flow-cell device |
| JPS63262565A (ja) | 1987-04-20 | 1988-10-28 | Hitachi Ltd | フロ−セル |
| EP0289677A3 (en) | 1987-04-27 | 1989-05-10 | Fritz K. Preikschat | Apparatus and method for particle analysis |
| DE3851176T3 (de) | 1987-04-27 | 1999-02-11 | Laser Sensor Technology Inc | Vorrichtung und Verfahren zur Untersuchung von Teilchen. |
| FR2614626B1 (fr) | 1987-04-30 | 1989-07-21 | Ranoux Claude | Conteneur pour fecondation des ovocytes et replacement des embryons chez l'homme et l'animal |
| JP2642632B2 (ja) | 1987-07-03 | 1997-08-20 | 株式会社日立製作所 | 微粒子計測装置および微粒子計測方法 |
| GB8716285D0 (en) | 1987-07-10 | 1987-08-19 | Medical Res Council | Light collecting device |
| US4979093A (en) | 1987-07-16 | 1990-12-18 | Cavro Scientific Instruments | XYZ positioner |
| US4987539A (en) | 1987-08-05 | 1991-01-22 | Stanford University | Apparatus and method for multidimensional characterization of objects in real time |
| US4796788A (en) | 1987-08-26 | 1989-01-10 | Liqui-Box Corporation | Bag-in-box packaging and dispensing of substances which will not readily flow by gravity |
| US4758729A (en) | 1987-08-28 | 1988-07-19 | Spectra-Physics, Inc. | Apparatus and method for measuring the included angle of a reflective cone |
| DE3832901A1 (de) | 1987-10-02 | 1989-04-20 | Hitachi Ltd | Teilchenmessvorrichtung |
| US4793705A (en) | 1987-10-07 | 1988-12-27 | The United States Of America As Represented By The United States Department Of Energy | Single molecule tracking |
| US4831385A (en) | 1987-10-14 | 1989-05-16 | Burlington Industries, Inc. | Vacuum tray fluid-jet start-up system |
| US4980277A (en) | 1987-10-16 | 1990-12-25 | Cultor Ltd. | Cryoprotectant solution and method |
| US5712807A (en) | 1987-10-21 | 1998-01-27 | Bangham; James Andrew | Pulse analyzing method and apparatus |
| US5789155A (en) * | 1987-10-30 | 1998-08-04 | California Institute Of Technology | Process for identifying nucleic acids and triple helices formed thereby |
| GB8726305D0 (en) | 1987-11-10 | 1987-12-16 | Secr Defence | Portable particle analysers |
| AU2620488A (en) | 1987-11-10 | 1989-06-01 | Secretary Of State For Defence In Her Britannic Majesty's Government Of The United Kingdom Of Great Britain And Northern Ireland, The | Particle monitoring system |
| US4845025A (en) | 1987-11-10 | 1989-07-04 | Coulter Corporation | Biological sample mixing apparatus and method |
| GB8726304D0 (en) | 1987-11-10 | 1987-12-16 | Secr Defence | Particle asymmetry analyser |
| US5040890A (en) | 1987-11-25 | 1991-08-20 | Becton, Dickinson And Company | Sheathed particle flow controlled by differential pressure |
| US4887721A (en) | 1987-11-30 | 1989-12-19 | The United States Of America As Represented By The United States Department Of Energy | Laser particle sorter |
| US4988619A (en) | 1987-11-30 | 1991-01-29 | United States Department Of Energy | Flow cytometry apparatus |
| US4936465A (en) | 1987-12-07 | 1990-06-26 | Zoeld Tibor | Method and apparatus for fast, reliable, and environmentally safe dispensing of fluids, gases and individual particles of a suspension through pressure control at well defined parts of a closed flow-through system |
| US5219729A (en) | 1988-02-25 | 1993-06-15 | Serono Laboratories, Inc. | Fertility assay |
| US5622820A (en) | 1988-03-10 | 1997-04-22 | City Of Hope | Method for amplification and detection of RNA and DNA sequences |
| US4836038A (en) | 1988-03-18 | 1989-06-06 | Aim Instruments Ltd. | Automated sampler-injector apparatus and method for sampling a quantity of sample and testing portions of said quantity |
| US5057413A (en) | 1988-06-13 | 1991-10-15 | Becton, Dickinson And Company | Method for discriminating between intact and damaged cells in a sample |
| US5070080A (en) | 1988-08-10 | 1991-12-03 | Fahim Mostafa S | Method of inhibiting generation, maturation, motility and viability of sperm with minerals in bioavailable form |
| JPH0718785B2 (ja) | 1988-09-19 | 1995-03-06 | 株式会社日立製作所 | フローセル装置 |
| JP2635125B2 (ja) | 1988-09-30 | 1997-07-30 | 東亜医用電子株式会社 | 核の分葉指数を求めるための粒子分析装置及び方法 |
| JP2635126B2 (ja) | 1988-09-30 | 1997-07-30 | 東亜医用電子株式会社 | 核の分葉指数を求めるための粒子分析装置及び方法 |
| JPH02168160A (ja) | 1988-12-22 | 1990-06-28 | Omron Tateisi Electron Co | 細胞選別装置 |
| US5726009A (en) | 1989-03-20 | 1998-03-10 | Anticancer, Inc. | Native-state method and system for determining viability and proliferative capacity of tissues in vitro |
| JPH02289808A (ja) | 1989-04-28 | 1990-11-29 | Olympus Optical Co Ltd | 照明光学系 |
| US4981580A (en) | 1989-05-01 | 1991-01-01 | Coulter Corporation | Coincidence arbitration in a flow cytomery sorting system |
| DE69028526T2 (de) | 1989-05-10 | 1997-02-06 | Us Agriculture | Verfahren zur vorwahl des geschlechts der nachkommenschaft |
| US4942305A (en) | 1989-05-12 | 1990-07-17 | Pacific Scientific Company | Integrating sphere aerosol particle detector |
| DE68924275T2 (de) | 1989-05-12 | 1996-05-02 | Cytogam Inc | Mit dem geschlecht assoziierte membranproteine und methoden zur erhöhung der wahrscheinlichkeit, dass die nachkommenschaft das gewünschte geschlecht besitzt. |
| US5055393A (en) | 1989-06-13 | 1991-10-08 | Salk Institute Biotechnology/Industrial Associates, Inc. | Prenatal sex determination of bovine cells using male-specific oligonucleotides |
| US4954715A (en) | 1989-06-26 | 1990-09-04 | Zoeld Tibor | Method and apparatus for an optimized multiparameter flow-through particle and cell analyzer |
| JPH0353164A (ja) | 1989-07-20 | 1991-03-07 | Canon Inc | サンプル供給装置及びこれを用いたサンプル測定装置 |
| US5098657A (en) | 1989-08-07 | 1992-03-24 | Tsi Incorporated | Apparatus for measuring impurity concentrations in a liquid |
| US5030002A (en) | 1989-08-11 | 1991-07-09 | Becton, Dickinson And Company | Method and apparatus for sorting particles with a moving catcher tube |
| US5005981A (en) | 1989-09-08 | 1991-04-09 | Becton, Dickinson And Company | Apparatus for method for causing vortices in a test tube |
| US5215376A (en) | 1989-09-08 | 1993-06-01 | Becton, Dickinson And Company | Method for causing vortices in a test tube |
| DE69014507T2 (de) | 1989-09-13 | 1995-04-13 | Tiyoda Seisakusho Koushoku Kk | Gerät zur Zellenvorbehandlung für Durchfluss-Zytometrie. |
| JP2808321B2 (ja) | 1989-09-19 | 1998-10-08 | 東亜医用電子株式会社 | 細胞分析方法及び装置 |
| US5072382A (en) | 1989-10-02 | 1991-12-10 | Kamentsky Louis A | Methods and apparatus for measuring multiple optical properties of biological specimens |
| US5275787A (en) | 1989-10-04 | 1994-01-04 | Canon Kabushiki Kaisha | Apparatus for separating or measuring particles to be examined in a sample fluid |
| EP0422616B1 (en) | 1989-10-11 | 1996-02-07 | Canon Kabushiki Kaisha | Apparatus for and method of fractionating particle in particle-suspended liquid in conformity with the properties thereof |
| JPH03140840A (ja) | 1989-10-26 | 1991-06-14 | Hitachi Ltd | 流動細胞分析装置 |
| FR2653885B1 (fr) | 1989-10-27 | 1994-01-14 | Abx | Appareil pour le comptage et la determination d'au moins une sous-population leucocytaire. |
| US5034613A (en) | 1989-11-14 | 1991-07-23 | Cornell Research Foundation, Inc. | Two-photon laser microscopy |
| US5101978A (en) | 1989-11-27 | 1992-04-07 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army | Fluidic sorting device for two or more materials suspended in a fluid |
| AU647741B2 (en) | 1989-12-01 | 1994-03-31 | Regents Of The University Of California, The | Methods and compositions for chromosome-specific staining |
| US5274240A (en) | 1990-01-12 | 1993-12-28 | The Regents Of The University Of California | Capillary array confocal fluorescence scanner and method |
| EP0448931B1 (en) | 1990-01-26 | 1996-04-03 | Canon Kabushiki Kaisha | Method for measuring a specimen by the use of fluorescence light |
| JP3049254B2 (ja) | 1990-02-08 | 2000-06-05 | シスメックス株式会社 | ２種類の光源を備えた光学式粒子分析装置 |
| IL93634A0 (en) | 1990-03-05 | 1990-12-23 | Galai Lab Ltd | Particle size analyzer |
| US5153117A (en) | 1990-03-27 | 1992-10-06 | Genetype A.G. | Fetal cell recovery method |
| US5492534A (en) | 1990-04-02 | 1996-02-20 | Pharmetrix Corporation | Controlled release portable pump |
| US5150313A (en) | 1990-04-12 | 1992-09-22 | Regents Of The University Of California | Parallel pulse processing and data acquisition for high speed, low error flow cytometry |
| US5087295A (en) | 1990-06-13 | 1992-02-11 | Becton Dickinson And Company | Cleaning cycle for flow cytometers |
| US5076472A (en) | 1990-06-13 | 1991-12-31 | Becton, Dickinson And Company | Cleaning cycle for flow cytometers |
| JPH0710226B2 (ja) | 1990-06-20 | 1995-02-08 | 株式会社ピーシーシーテクノロジー | プロトプラスト攪拌装置並びにそれを含む細胞融合装置及びフローサイトメーター装置 |
| JPH0716392B2 (ja) | 1990-06-20 | 1995-03-01 | 株式会社ピーシーシーテクノロジー | 細胞融合及び融合細胞選別システム |
| US5160974A (en) | 1990-06-25 | 1992-11-03 | Flow Science, Inc. | Closed sample cell for use in flow cytometry |
| JPH04126065A (ja) | 1990-06-25 | 1992-04-27 | Saburo Okonogi | 食品素材の棒状体成型装置 |
| US5559032A (en) | 1990-06-29 | 1996-09-24 | Pomeroy; Patrick C. | Method and apparatus for post-transfer assaying of material on solid support |
| CA2086330A1 (en) | 1990-07-09 | 1992-01-10 | Richard C. Fry | Enhanced implantation, development and maintenance of embryos using leukaemia inhibitory factor |
| JP2939647B2 (ja) | 1990-07-24 | 1999-08-25 | シスメックス株式会社 | フローイメージングサイトメータにおける自動焦点調整方法 |
| IE76732B1 (en) | 1990-08-07 | 1997-11-05 | Becton Dickinson Co | One step test for absolute counts |
| US5259593A (en) | 1990-08-30 | 1993-11-09 | University Of Southern California | Apparatus for droplet stream manufacturing |
| JPH04115136A (ja) | 1990-09-05 | 1992-04-16 | Hitachi Ltd | 粒子計測装置 |
| JPH04126080A (ja) | 1990-09-14 | 1992-04-27 | Juzo Udaka | 耐熱性キシロースイソメラーゼの製造方法 |
| JPH04126064A (ja) | 1990-09-14 | 1992-04-27 | Nitto Shokai:Kk | 二重包餡食品の製造法 |
| JP2957246B2 (ja) | 1990-09-14 | 1999-10-04 | 大和化成株式会社 | 微生物起源カルボキシペプチダーゼｂ様酵素 |
| US5132548A (en) | 1990-09-14 | 1992-07-21 | High Yield Technology | High sensitivity, large detection area particle sensor for vacuum applications |
| US5204884A (en) | 1991-03-18 | 1993-04-20 | University Of Rochester | System for high-speed measurement and sorting of particles |
| US5273527A (en) | 1992-05-12 | 1993-12-28 | Ovamed Corporation | Delivery catheter |
| US5663048A (en) | 1990-10-04 | 1997-09-02 | University Of Calgary | Y-chromosome specific polynucleotide probes for prenatal sexing |
| US5840482A (en) | 1990-10-10 | 1998-11-24 | The Regents Of The University Of California | Y chromosome specific nucleic acid probe and method for determining the Y chromosome in situ |
| WO1992008120A1 (en) | 1990-10-29 | 1992-05-14 | Macquarie University | Pulsed laser flow cytometry |
| WO1992008122A1 (en) | 1990-10-31 | 1992-05-14 | Biophos Medical Ab | Fertility analyzer |
| US5116125A (en) | 1990-10-31 | 1992-05-26 | Biophos Medical Ab | Fertility analyzer |
| JP2874746B2 (ja) | 1990-11-22 | 1999-03-24 | シスメックス株式会社 | フローイメージングサイトメータにおけるフローセル機構 |
| US5991028A (en) | 1991-02-22 | 1999-11-23 | Applied Spectral Imaging Ltd. | Spectral bio-imaging methods for cell classification |
| JP3121849B2 (ja) | 1991-02-27 | 2001-01-09 | シスメックス株式会社 | フローイメージサイトメータ |
| JPH0734012B2 (ja) | 1991-02-27 | 1995-04-12 | 東亜医用電子株式会社 | フローイメージサイトメータ |
| US5144224A (en) | 1991-04-01 | 1992-09-01 | Larsen Lawrence E | Millimeter wave flow cytometer |
| US5199576A (en) | 1991-04-05 | 1993-04-06 | University Of Rochester | System for flexibly sorting particles |
| EP0515211A3 (en) | 1991-05-23 | 1993-04-07 | Becton Dickinson And Company | Apparatus and method for phase resolved fluorescence lifetimes of independent and varying amplitude pulses |
| DE9107792U1 (de) | 1991-06-25 | 1991-09-12 | Labotect-Labor-Technik, Göttingen, GmbH, 3406 Bovenden | Instrumentensatz zum uterinen Embryonentransfer |
| FR2678506B1 (fr) | 1991-07-01 | 2000-03-10 | Claude Ranoux | Procede de fecondation en cycle spontane. |
| US5548661A (en) | 1991-07-12 | 1996-08-20 | Price; Jeffrey H. | Operator independent image cytometer |
| US5412466A (en) | 1991-07-26 | 1995-05-02 | Toa Medical Electronics Co., Ltd. | Apparatus for forming flattened sample flow for analyzing particles |
| EP0529666B1 (en) | 1991-08-30 | 2000-04-12 | Omron Corporation | Cell analyzing apparatus |
| US5488469A (en) | 1991-08-30 | 1996-01-30 | Omron Corporation | Cell analyzing apparatus |
| US5548395A (en) | 1991-09-20 | 1996-08-20 | Toa Medical Electronics Co., Ltd. | Particle analyzer |
| US5578449A (en) | 1991-10-03 | 1996-11-26 | Hilding Ohlsson, S.A. | Procedure for the sex determination of embryos in mammals especially applied to bovine embryos |
| IT1253226B (it) | 1991-10-24 | 1995-07-11 | Piero Serra | Catetere per l'introduzione o l'aspirazione di liquidi di diversa natura in animali particolarmente per trattamenti ginecologici in bovini, equini e simili |
| US5919621A (en) | 1991-10-24 | 1999-07-06 | Brown; David B. | Methods for diagnosing human male infertility |
| JP3212647B2 (ja) | 1991-10-24 | 2001-09-25 | シスメックス株式会社 | イメージングフローサイトメータ |
| US5866344A (en) | 1991-11-15 | 1999-02-02 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Antibody selection methods using cell surface expressed libraries |
| US5370842A (en) | 1991-11-29 | 1994-12-06 | Canon Kabushiki Kaisha | Sample measuring device and sample measuring system |
| JP2593021B2 (ja) | 1991-12-13 | 1997-03-19 | 伊藤ハム株式会社 | ウシ胚の性の識別方法 |
| JP3130628B2 (ja) | 1992-01-30 | 2001-01-31 | シスメックス株式会社 | 粒子判定装置 |
| US5400179A (en) | 1992-02-18 | 1995-03-21 | Asahi Kogaku Kogyo Kabushiki Kaisha | Optical multilayer thin film and beam splitter |
| DE69321748T2 (de) | 1992-02-20 | 1999-06-17 | Canon Kk | Verfahren und Messapparatur zur Handhabung von Teilchen |
| WO1993017322A1 (en) | 1992-02-21 | 1993-09-02 | Secretary Of State For Defence In Her | Analysis of particle characteristics |
| US5558998A (en) | 1992-02-25 | 1996-09-24 | The Regents Of The Univ. Of California | DNA fragment sizing and sorting by laser-induced fluorescence |
| US6120735A (en) | 1992-02-26 | 2000-09-19 | The Ohio States University | Fractional cell sorter |
| US5298967A (en) | 1992-06-02 | 1994-03-29 | Pacific Scientific Company | Measurement of concentrations of dissolved solvent |
| JP3145486B2 (ja) | 1992-06-12 | 2001-03-12 | シスメックス株式会社 | イメージングフローサイトメータ |
| CN1084426A (zh) | 1992-07-13 | 1994-03-30 | 帕尔公司 | 处理生物液体的自动化系统和方法 |
| JP3215175B2 (ja) | 1992-08-10 | 2001-10-02 | シスメックス株式会社 | 粒子分析装置 |
| US5315122A (en) | 1992-08-25 | 1994-05-24 | Becton, Dickinson And Company | Apparatus and method for fluorescent lifetime measurement |
| US5466572A (en) | 1992-09-03 | 1995-11-14 | Systemix, Inc. | High speed flow cytometric separation of viable cells |
| WO1994005775A1 (en) | 1992-09-03 | 1994-03-17 | Systemix, Inc. | High speed flow cytometric separation of viable mammalian cells |
| US5736410A (en) | 1992-09-14 | 1998-04-07 | Sri International | Up-converting reporters for biological and other assays using laser excitation techniques |
| US5275933A (en) | 1992-09-25 | 1994-01-04 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Triple gradient process for recovering nucleated fetal cells from maternal blood |
| US5371585A (en) | 1992-11-10 | 1994-12-06 | Pacific Scientific Company | Particle detecting instrument with sapphire detecting cell defining a rectangular flow path |
| US5359907A (en) | 1992-11-12 | 1994-11-01 | Horiba Instruments, Inc. | Method and apparatus for dry particle analysis |
| US5395588A (en) | 1992-12-14 | 1995-03-07 | Becton Dickinson And Company | Control of flow cytometer having vacuum fluidics |
| WO1994016499A2 (en) | 1993-01-16 | 1994-07-21 | Bangham James A | Signal processing system |
| JP2525713B2 (ja) | 1993-01-19 | 1996-08-21 | 農林水産省畜産試験場長 | 低分子チオ―ル化合物を用いた牛胚の培養法および輸送法 |
| US5467189A (en) | 1993-01-22 | 1995-11-14 | Venturedyne, Ltd. | Improved particle sensor and method for assaying a particle |
| JP3052665B2 (ja) | 1993-01-26 | 2000-06-19 | 株式会社日立製作所 | フローセル装置 |
| CA2113957A1 (en) | 1993-01-29 | 1994-07-30 | University Of Guelph | Nucleotide sequences for bovine sex determination |
| US5453575A (en) | 1993-02-01 | 1995-09-26 | Endosonics Corporation | Apparatus and method for detecting blood flow in intravascular ultrasonic imaging |
| CA2155186A1 (en) | 1993-02-01 | 1994-08-18 | Kevin M. Ulmer | Methods and apparatus for dna sequencing |
| US5367474A (en) | 1993-02-08 | 1994-11-22 | Coulter Corporation | Flow cytometer |
| US5556764A (en) | 1993-02-17 | 1996-09-17 | Biometric Imaging, Inc. | Method and apparatus for cell counting and cell classification |
| US5547849A (en) | 1993-02-17 | 1996-08-20 | Biometric Imaging, Inc. | Apparatus and method for volumetric capillary cytometry |
| US5563059A (en) | 1993-02-23 | 1996-10-08 | Genentech, Inc. | Use of human inhibin and human activin to increase the number of mature primate oocytes |
| DE69418131D1 (de) | 1993-03-01 | 1999-06-02 | Gen Signal Corp | Vorrichtung zur erzeugung einer einstellbaren ringförmigen beleuchtung für einen photolithograpischen projektionsapparat |
| NO930980L (no) | 1993-03-18 | 1994-09-19 | Flowtech As | Optisk konfigurasjon for væskeströmcytofotometer |
| US5658751A (en) | 1993-04-13 | 1997-08-19 | Molecular Probes, Inc. | Substituted unsymmetrical cyanine dyes with selected permeability |
| US5494795A (en) | 1993-05-05 | 1996-02-27 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy | Specific oligonucleotide primers for detection of pathogenic campylobacter bacteria by polymerase chain reaction |
| US5439578A (en) | 1993-06-03 | 1995-08-08 | The Governors Of The University Of Alberta | Multiple capillary biochemical analyzer |
| DE69418248T2 (de) | 1993-06-03 | 1999-10-14 | Hamamatsu Photonics Kk | Optisches Laser-Abtastsystem mit Axikon |
| AU6857094A (en) | 1993-06-04 | 1995-01-03 | Kwahak International Co., Ltd. | Artificial insemination and embryo transfer device |
| NO932088L (no) | 1993-06-08 | 1995-01-05 | Oddbjoern Gjelsnes | Anordning for anvendelse ved væskeströmscytometri |
| US5464581A (en) | 1993-08-02 | 1995-11-07 | The Regents Of The University Of California | Flow cytometer |
| US5483469A (en) | 1993-08-02 | 1996-01-09 | The Regents Of The University Of California | Multiple sort flow cytometer |
| US6328071B1 (en) | 1993-08-06 | 2001-12-11 | Cary Austin | Well pressure tank |
| EP0649014B1 (en) | 1993-09-16 | 2005-11-23 | Sysmex Corporation | Particle analyzing apparatus |
| US5503994A (en) | 1993-10-08 | 1996-04-02 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | System for sample detection with compensation for difference in sensitivity to detection of components moving at different velocities |
| US5480774A (en) | 1993-10-14 | 1996-01-02 | A/F Protein, Inc. | Determination of genomic sex in salmonids |
| JP3290786B2 (ja) | 1993-11-26 | 2002-06-10 | シスメックス株式会社 | 粒子分析装置 |
| GB9324938D0 (en) | 1993-12-04 | 1994-01-26 | Atomic Energy Authority Uk | Aerosol generator |
| FI96452C (fi) | 1994-01-26 | 1996-06-25 | Pekka Haenninen | Menetelmä väriaineiden virittämiseksi |
| DE69430587T2 (de) | 1994-02-28 | 2003-01-09 | Sunkyong Ind Ltd | Pyrimidin-acyclonukleosid-derivate |
| DE69534484T2 (de) | 1994-03-25 | 2006-07-06 | Marukin Chuyu Co. Ltd. | Epimerase |
| US5475487A (en) | 1994-04-20 | 1995-12-12 | The Regents Of The University Of California | Aqueous carrier waveguide in a flow cytometer |
| DE4414940C2 (de) | 1994-04-28 | 1998-07-02 | Pekka Haenninen | Lumineszenz-Rastermikroskop mit zwei Photonen Anregung |
| US5595866A (en) | 1994-05-27 | 1997-01-21 | Methodist Hospital Of Indiana, Inc. | Step-wise method to remove cryoprotectant from sperm |
| DE4419894A1 (de) | 1994-06-07 | 1995-12-14 | Gip Medizin Technik Gmbh | Endoskopische Punktionsnadelvorrichtung |
| EP0687956B2 (de) | 1994-06-17 | 2005-11-23 | Carl Zeiss SMT AG | Beleuchtungseinrichtung |
| US5601234A (en) | 1994-08-01 | 1997-02-11 | Abbott Laboratories | Fluid nozzle and method of introducing a fluid |
| US5891734A (en) | 1994-08-01 | 1999-04-06 | Abbott Laboratories | Method for performing automated analysis |
| JP3375203B2 (ja) | 1994-08-08 | 2003-02-10 | シスメックス株式会社 | 細胞分析装置 |
| FR2723735B1 (fr) | 1994-08-18 | 1996-10-31 | Abx Sa | Boitier a branchement automatique pour distribution de reactifs dans un appareil notamment un analyseur hematologique. |
| US5790692A (en) | 1994-09-07 | 1998-08-04 | Jeffrey H. Price | Method and means of least squares designed filters for image segmentation in scanning cytometry |
| US20020186874A1 (en) | 1994-09-07 | 2002-12-12 | Jeffrey H. Price | Method and means for image segmentation in fluorescence scanning cytometry |
| US5700692A (en) | 1994-09-27 | 1997-12-23 | Becton Dickinson And Company | Flow sorter with video-regulated droplet spacing |
| US5934885A (en) | 1994-10-07 | 1999-08-10 | Bayer Corporation | Reagent pump assembly |
| IL115327A (en) | 1994-10-07 | 2000-08-13 | Bayer Ag | Diaphragm pump |
| US5643796A (en) | 1994-10-14 | 1997-07-01 | University Of Washington | System for sensing droplet formation time delay in a flow cytometer |
| US5602039A (en) | 1994-10-14 | 1997-02-11 | The University Of Washington | Flow cytometer jet monitor system |
| US6861265B1 (en) | 1994-10-14 | 2005-03-01 | University Of Washington | Flow cytometer droplet formation system |
| US5602349A (en) | 1994-10-14 | 1997-02-11 | The University Of Washington | Sample introduction system for a flow cytometer |
| EP0786078B1 (en) | 1994-10-14 | 2004-01-07 | University of Washington | System and method for high speed flow cytometer droplet formation |
| US5495719A (en) | 1994-11-14 | 1996-03-05 | Gray, Jr.; Carl O. | Method of preserving spermatozoa |
| JP3347495B2 (ja) | 1994-11-14 | 2002-11-20 | シスメックス株式会社 | 粒子分析装置 |
| US5514537A (en) | 1994-11-28 | 1996-05-07 | Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College | Process and apparatus for sorting spermatozoa |
| JP3794703B2 (ja) | 1994-12-08 | 2006-07-12 | アマシャム・バイオサイエンス・（エスブイ）・コーポレイション | マクロ走査対物レンズを用いた蛍光撮像システム |
| US5632754A (en) | 1994-12-23 | 1997-05-27 | Devices For Vascular Intervention | Universal catheter with interchangeable work element |
| EP0720012B1 (en) | 1994-12-26 | 2004-09-08 | Sysmex Corporation | Flow cytometer |
| US5835262A (en) | 1994-12-28 | 1998-11-10 | Research Development Corporation Of Japan | Multi-wavelength optical microscope |
| FI98765C (fi) | 1995-01-16 | 1997-08-11 | Erkki Soini | Virtaussytometrinen menetelmä ja laite |
| US5793485A (en) | 1995-03-20 | 1998-08-11 | Sandia Corporation | Resonant-cavity apparatus for cytometry or particle analysis |
| US5608519A (en) | 1995-03-20 | 1997-03-04 | Gourley; Paul L. | Laser apparatus and method for microscopic and spectroscopic analysis and processing of biological cells |
| US5620842A (en) | 1995-03-29 | 1997-04-15 | Becton Dickinson And Company | Determination of the number of fluorescent molecules on calibration beads for flow cytometry |
| US5786560A (en) | 1995-03-31 | 1998-07-28 | Panasonic Technologies, Inc. | 3-dimensional micromachining with femtosecond laser pulses |
| US5699152A (en) * | 1995-04-03 | 1997-12-16 | Alltrista Corporation | Electro-optical inspection system and method |
| US5528045A (en) | 1995-04-06 | 1996-06-18 | Becton Dickinson And Company | Particle analyzer with spatially split wavelength filter |
| US5682038A (en) | 1995-04-06 | 1997-10-28 | Becton Dickinson And Company | Fluorescent-particle analyzer with timing alignment for analog pulse subtraction of fluorescent pulses arising from different excitation locations |
| US5641457A (en) | 1995-04-25 | 1997-06-24 | Systemix | Sterile flow cytometer and sorter with mechanical isolation between flow chamber and sterile enclosure |
| US5687727A (en) | 1995-05-01 | 1997-11-18 | Danforth Biomedical Incorporated | Catheter adaptor with slitting blade and improved manual control and method of use |
| CA2220550C (en) | 1995-05-09 | 2001-04-17 | Curators Of The University Of Missouri | A system for introducing a fluid into the uterus of an animal |
| FR2734637B1 (fr) | 1995-05-24 | 1997-08-14 | Abx Sa | Dispositif d'inspection optique d'un fluide, notamment pour analyses hematologiques |
| US5798276A (en) | 1995-06-07 | 1998-08-25 | Molecular Probes, Inc. | Reactive derivatives of sulforhodamine 101 with enhanced hydrolytic stability |
| US5650847A (en) | 1995-06-14 | 1997-07-22 | Erkki Soini | Method and device for determination of parameters of individual microparticles |
| US6454945B1 (en) | 1995-06-16 | 2002-09-24 | University Of Washington | Microfabricated devices and methods |
| US5716852A (en) | 1996-03-29 | 1998-02-10 | University Of Washington | Microfabricated diffusion-based chemical sensor |
| US5589457A (en) | 1995-07-03 | 1996-12-31 | Ausa International, Inc. | Process for the synchronization of ovulation |
| US6411835B1 (en) | 1997-01-13 | 2002-06-25 | Medispectra, Inc. | Spectral volume microprobe arrays |
| WO1997007399A1 (en) | 1995-08-11 | 1997-02-27 | University Of Guelph | Method for identifying sex specific and species specific molecules, molecules identified using the method, and uses of the molecules |
| EP0862432A4 (en) | 1995-09-06 | 2003-03-19 | Univ New York State Res Found | TWO-PHOTON CONVERTERING DYES AND THEIR APPLICATIONS |
| DE19533092A1 (de) | 1995-09-07 | 1997-03-13 | Basf Ag | Vorrichtung zur parallelisierten Zweiphotonen-Fluoreszenz-Korrelations-Spektroskopie (TPA-FCS) und deren Verwendung zum Wirkstoff-Screening |
| US6329158B1 (en) | 1995-09-15 | 2001-12-11 | Becton Dickinson And Company | Use of dimly fluorescing nucleic acid dyes in the identification of nucleated cells |
| US6040139A (en) * | 1995-09-19 | 2000-03-21 | Bova; G. Steven | Laser cell purification system |
| US5726751A (en) | 1995-09-27 | 1998-03-10 | University Of Washington | Silicon microchannel optical flow cytometer |
| US5780230A (en) | 1995-10-06 | 1998-07-14 | Coriell Institute For Medical Research | Compositions and methods for human sperm activation and quantitative assessment of human sperm genome replication |
| US5736330A (en) | 1995-10-11 | 1998-04-07 | Luminex Corporation | Method and compositions for flow cytometric determination of DNA sequences |
| US6117068A (en) | 1995-10-19 | 2000-09-12 | Elite Genetics, Inc | Artificial insemination system |
| JP4421681B2 (ja) | 1995-10-19 | 2010-02-24 | バイオ‐オリジン エルエルシー | 生殖細胞および胚の生存および機能を改善する方法および組成物 |
| DE69529538T2 (de) | 1995-11-09 | 2003-11-06 | Medical Res Council London | Verwendung von cyb-medium zum transport und lagern von sperma |
| DE19549015C1 (de) | 1995-12-28 | 1997-04-03 | Siemens Ag | Verfahren und Anordnung zur Überwachung eines abreißenden Flüssigkeitstrahls |
| JP3584108B2 (ja) | 1996-01-08 | 2004-11-04 | キヤノン株式会社 | レンズ鏡筒 |
| US6641708B1 (en) | 1996-01-31 | 2003-11-04 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Method and apparatus for fractionation using conventional dielectrophoresis and field flow fractionation |
| WO1997029354A1 (de) | 1996-02-05 | 1997-08-14 | Bayer Aktiengesellschaft | Verfahren und vorrichtung zum sortieren und zur gewinnung von planar ausgebrachten biologischen objekten wie biologische zellen bzw. zellorganellen, histologischen schnitten, chromosomenteilchen etc. mit laserstrahlen |
| BR9600722A (pt) | 1996-02-14 | 1997-12-30 | Jorge Antonio Rodrigues Claro | Bomba de infusão para contidos em bolsas plásticas flexíveis |
| WO1997030338A1 (en) | 1996-02-16 | 1997-08-21 | Inphocyte, Inc. | System and method for rapid analysis of cells using spectral cytometry |
| JP3127111B2 (ja) | 1996-02-22 | 2001-01-22 | 株式会社日立製作所 | フロー式粒子画像解析方法および装置 |
| US6090947A (en) * | 1996-02-26 | 2000-07-18 | California Institute Of Technology | Method for the synthesis of pyrrole and imidazole carboxamides on a solid support |
| US6143901A (en) | 1996-07-31 | 2000-11-07 | Genesoft, Inc. | Complex formation between dsDNA and pyrrole imidazole polyamides |
| US5701012A (en) | 1996-03-19 | 1997-12-23 | Her Majesty The Queen In Right Of Canada, As Represented By The Minister Of National Defence | Fluorescent biological particle detection system |
| US5895922A (en) | 1996-03-19 | 1999-04-20 | Her Majesty The Queen In Right Of Canada, As Represented By The Minister Of National Defence | Fluorescent biological particle detection system |
| US5747349A (en) | 1996-03-20 | 1998-05-05 | University Of Washington | Fluorescent reporter beads for fluid analysis |
| JP3590470B2 (ja) | 1996-03-27 | 2004-11-17 | アルプス電気株式会社 | 洗浄水生成方法および洗浄方法ならびに洗浄水生成装置および洗浄装置 |
| JP3640461B2 (ja) | 1996-04-03 | 2005-04-20 | シスメックス株式会社 | 粒子分析装置 |
| US5707808A (en) | 1996-04-15 | 1998-01-13 | The Regents Of The University Of California | Optical selection and collection of DNA fragments |
| CN1262667C (zh) | 1996-04-25 | 2006-07-05 | 詹尼康科学公司 | 利用颗粒标记物检测分析物 |
| WO1997043620A1 (en) | 1996-05-15 | 1997-11-20 | International Remote Imaging Systems, Inc. | Selectively emphasizing particles of interest from a fluid sample for analysis |
| JP2963393B2 (ja) | 1996-06-14 | 1999-10-18 | 浜松ホトニクス株式会社 | 光電子増倍管用電圧分割回路 |
| US5846737A (en) | 1996-07-26 | 1998-12-08 | Molecular Probes, Inc. | Conjugates of sulforhodamine fluorophores with enhanced fluorescence |
| US5909278A (en) | 1996-07-29 | 1999-06-01 | The Regents Of The University Of California | Time-resolved fluorescence decay measurements for flowing particles |
| EP0822401A3 (en) | 1996-07-30 | 1999-05-06 | Bayer Corporation | Hydraulic system for a hematology analytical instrument |
| US6042249A (en) | 1996-07-30 | 2000-03-28 | Bayer Corporation | Illuminator optical assembly for an analytical instrument and methods of alignment and manufacture |
| US6074827A (en) | 1996-07-30 | 2000-06-13 | Aclara Biosciences, Inc. | Microfluidic method for nucleic acid purification and processing |
| US5745308A (en) | 1996-07-30 | 1998-04-28 | Bayer Corporation | Methods and apparatus for an optical illuminator assembly and its alignment |
| US5883378A (en) | 1996-07-30 | 1999-03-16 | Bayer Corporation | Apparatus and methods for transmitting electrical signals indicative of optical interactions between a light beam and a flowing suspension of particles |
| EP0822404B1 (en) | 1996-07-30 | 2009-06-17 | Siemens Healthcare Diagnostics Inc. | Optical system for a hematology analytical instrument |
| US5844685A (en) | 1996-07-30 | 1998-12-01 | Bayer Corporation | Reference laser beam sampling apparatus |
| US5719667A (en) | 1996-07-30 | 1998-02-17 | Bayer Corporation | Apparatus for filtering a laser beam in an analytical instrument |
| US5872627A (en) | 1996-07-30 | 1999-02-16 | Bayer Corporation | Method and apparatus for detecting scattered light in an analytical instrument |
| US5998140A (en) | 1996-07-31 | 1999-12-07 | The Scripps Research Institute | Complex formation between dsDNA and oligomer of cyclic heterocycles |
| US5804436A (en) | 1996-08-02 | 1998-09-08 | Axiom Biotechnologies, Inc. | Apparatus and method for real-time measurement of cellular response |
| WO1998005853A1 (en) | 1996-08-07 | 1998-02-12 | Cuno, Inc. | Additive dispensing apparatus |
| AU4113297A (en) | 1996-09-04 | 1998-03-26 | Technical University Of Denmark | A micro flow system for particle separation and analysis |
| US5873254A (en) | 1996-09-06 | 1999-02-23 | Interface Multigrad Technology | Device and methods for multigradient directional cooling and warming of biological samples |
| EP0929300B1 (en) | 1996-09-06 | 2004-05-26 | Medarex, Inc. | Cyanidin compositions and therapeutic and diagnostic uses therefor |
| US6221654B1 (en) | 1996-09-25 | 2001-04-24 | California Institute Of Technology | Method and apparatus for analysis and sorting of polynucleotides based on size |
| US5759767A (en) | 1996-10-11 | 1998-06-02 | Joseph R. Lakowicz | Two-photon and multi-photon measurement of analytes in animal and human tissues and fluids |
| US6002471A (en) | 1996-11-04 | 1999-12-14 | California Institute Of Technology | High resolution scanning raman microscope |
| US5799830A (en) | 1996-11-08 | 1998-09-01 | Carroll; David C. | Pressure vessel access port |
| US5696157A (en) | 1996-11-15 | 1997-12-09 | Molecular Probes, Inc. | Sulfonated derivatives of 7-aminocoumarin |
| WO1998034094A1 (en) | 1997-01-31 | 1998-08-06 | The Horticulture & Food Research Institute Of New Zealand Ltd. | Optical apparatus |
| US6753161B2 (en) | 1997-03-27 | 2004-06-22 | Oncosis Llc | Optoinjection methods |
| US5874266A (en) | 1997-03-27 | 1999-02-23 | Palsson; Bernhard O. | Targeted system for removing tumor cells from cell populations |
| US6534308B1 (en) | 1997-03-27 | 2003-03-18 | Oncosis, Llc | Method and apparatus for selectively targeting specific cells within a mixed cell population |
| GB9707096D0 (en) | 1997-04-08 | 1997-05-28 | Smithkline Beecham Plc | Novel device |
| JP2968231B2 (ja) | 1997-04-11 | 1999-10-25 | 株式会社荏原製作所 | 空調システム |
| US6133995A (en) | 1997-05-09 | 2000-10-17 | Sysmex Corporation | Particle measuring apparatus |
| US6050935A (en) | 1997-05-09 | 2000-04-18 | Biofertec | Container assembly for intravaginal fertilization and culture and embryo transfer and method of intravaginal fertilization and culture employing such a container |
| WO1998057152A1 (en) | 1997-06-09 | 1998-12-17 | Guava Technologies, Inc. | Method and apparatus for detecting microparticles in fluid samples |
| US6139800A (en) | 1997-06-23 | 2000-10-31 | Luminex Corporation | Interlaced lasers for multiple fluorescence measurement |
| ATE326228T1 (de) | 1997-07-01 | 2006-06-15 | Vicam Lp | Verfahren zur geschlechtsbestimmung von säuger- nachkommenschaft |
| US6111398A (en) | 1997-07-03 | 2000-08-29 | Coulter International Corp. | Method and apparatus for sensing and characterizing particles |
| BR9704313A (pt) | 1997-07-08 | 1999-04-06 | Alves Elias Walter | Utilização de ig-y de ovo de galinha associado a anticorpos monoclonais contra antigenos sexo especifico na imunosexagem de espermatozóides de bovinos |
| US5899848A (en) | 1997-07-14 | 1999-05-04 | Haubrich; Mark A. | Device and process for artificial insemination of animals |
| US5876942A (en) | 1997-07-24 | 1999-03-02 | National Science Council Of Republic Of China | Process for sexing cow embryos |
| US5985216A (en) | 1997-07-24 | 1999-11-16 | The United States Of America, As Represented By The Secretary Of Agriculture | Flow cytometry nozzle for high efficiency cell sorting |
| US5985538A (en) | 1997-08-01 | 1999-11-16 | Saint Barnabas Medical Center | Cryopreservation and cell culture medium comprising less than 50 mM sodium ions and greater than 100 mM choline salt |
| US5819948A (en) | 1997-08-21 | 1998-10-13 | Van Den Engh; Gerrit J. | Particle separating apparatus and method |
| US6003678A (en) | 1997-08-21 | 1999-12-21 | University Of Washington | Particle separating apparatus and method |
| US5880474A (en) | 1997-08-29 | 1999-03-09 | Becton Dickinson And Company | Multi-illumination-source flow particle analyzer with inter-location emissions crosstalk cancelation |
| WO1999015010A1 (en) | 1997-09-22 | 1999-04-01 | University Of Guelph | Reduction of sperm sensitivity to chilling |
| US6540895B1 (en) | 1997-09-23 | 2003-04-01 | California Institute Of Technology | Microfabricated cell sorter for chemical and biological materials |
| US6322901B1 (en) * | 1997-11-13 | 2001-11-27 | Massachusetts Institute Of Technology | Highly luminescent color-selective nano-crystalline materials |
| US6201628B1 (en) | 1997-11-19 | 2001-03-13 | University Of Washington | High throughput optical scanner |
| US6086574A (en) | 1997-11-21 | 2000-07-11 | Hyclone Laboratories, Inc. | Fluid delivery systems with diptube connector |
| US5895764A (en) | 1997-11-24 | 1999-04-20 | University Of New Mexico | Controlled sheath flow injection cytometry |
| US6207392B1 (en) * | 1997-11-25 | 2001-03-27 | The Regents Of The University Of California | Semiconductor nanocrystal probes for biological applications and process for making and using such probes |
| US5990479A (en) * | 1997-11-25 | 1999-11-23 | Regents Of The University Of California | Organo Luminescent semiconductor nanocrystal probes for biological applications and process for making and using such probes |
| EP1040340A4 (en) | 1997-12-12 | 2008-01-09 | Chemunex S A | CYTOMETER IN DIGITAL STREAM |
| US6149867A (en) * | 1997-12-31 | 2000-11-21 | Xy, Inc. | Sheath fluids and collection systems for sex-specific cytometer sorting of sperm |
| US6071689A (en) | 1997-12-31 | 2000-06-06 | Xy, Inc. | System for improving yield of sexed embryos in mammals |
| EP1058688A4 (en) | 1998-02-03 | 2004-10-06 | Xy Inc | USE OF SPECIFIC OLIGONUCLEOTIDE PRIMERS TO DETECT THE PRESENCE OF MALE BOVINE CHROMOSOME BY CHAIN AMPLIFICATION BY POLYMERASE |
| US6746873B1 (en) | 1998-02-20 | 2004-06-08 | Xy, Inc. | Vibratory system for a sorting flow cytometer |
| NZ506454A (en) | 1998-02-20 | 2003-10-31 | Colorado State University Thro | A vibratory system for a sorting flow cytometer |
| US6154276A (en) | 1998-02-23 | 2000-11-28 | The Regents Of The University Of California | Waveguide detection of right-angle-scattered light in flow cytometry |
| US6211477B1 (en) | 1998-02-26 | 2001-04-03 | Becton Dickinson And Company | Electrostatic deceleration system for flow cytometer |
| US6248590B1 (en) | 1998-02-27 | 2001-06-19 | Cytomation, Inc. | Method and apparatus for flow cytometry |
| US6042025A (en) * | 1998-03-13 | 2000-03-28 | Smith Et Al. | Two hole dispenser with baffles |
| ATE254762T1 (de) | 1998-03-16 | 2003-12-15 | Partec Partikelzaehlgeraete Gm | Elektronisches gerät zur präzisen abgabe kleiner flüssigkeitsmengen |
| JP3594794B2 (ja) | 1998-03-24 | 2004-12-02 | 独立行政法人 科学技術振興機構 | ナノ秒時間ゲート分光診断装置 |
| US6642018B1 (en) | 1998-03-27 | 2003-11-04 | Oncosis Llc | Method for inducing a response in one or more targeted cells |
| JP2002510045A (ja) | 1998-03-30 | 2002-04-02 | バイオシャフ リミテッド | 細胞および体液における一般的診断要因を分析するためのフロー式細胞数計算器 |
| US6175409B1 (en) | 1999-04-02 | 2001-01-16 | Symyx Technologies, Inc. | Flow-injection analysis and variable-flow light-scattering methods and apparatus for characterizing polymers |
| JP3350442B2 (ja) | 1998-04-09 | 2002-11-25 | 科学技術振興事業団 | 顕微鏡システム |
| US6411904B1 (en) | 1998-05-14 | 2002-06-25 | Luminex Corporation | Zero dead time architecture for flow cytometer |
| EP1046032A4 (en) | 1998-05-18 | 2002-05-29 | Univ Washington | LIQUID ANALYSIS CARTRIDGE |
| WO1999061888A2 (en) | 1998-05-22 | 1999-12-02 | California Institute Of Technology | Microfabricated cell sorter |
| US6079836A (en) | 1998-07-20 | 2000-06-27 | Coulter International Corp. | Flow cytometer droplet break-off location adjustment mechanism |
| US6729369B2 (en) | 1998-07-31 | 2004-05-04 | Chata Biosystems, Inc. | Vessel for containing/transporting a fluent substance |
| US20040107150A1 (en) | 1998-07-31 | 2004-06-03 | Chata Biosystems, Inc. Of Colorado | Apparatus and method with vessel for containing/transporting a fluent substance |
| DE29813921U1 (de) | 1998-08-04 | 1998-10-08 | Kisfeld, Alfons, 48691 Vreden | Vorrichtung zur Besamung von Tieren, insbesondere Sauen |
| US6309815B1 (en) | 1998-08-07 | 2001-10-30 | University Of Kansas Medical Center | Composition and method for preparation, storage and activation of large populations of immotile sperm |
| WO2000009113A1 (en) | 1998-08-17 | 2000-02-24 | Trout William E | Use of zeranol to modulate reproductive cycles |
| CA2341231C (en) | 1998-08-21 | 2003-10-21 | Union Biometrica, Inc. | Instrument for selecting and depositing multicellular organisms and other large objects |
| US6326144B1 (en) | 1998-09-18 | 2001-12-04 | Massachusetts Institute Of Technology | Biological applications of quantum dots |
| US6495333B1 (en) | 1998-09-22 | 2002-12-17 | Becton Dickinson And Company | Flow cytometric, whole blood dendritic cell immune function assay |
| US6208411B1 (en) | 1998-09-28 | 2001-03-27 | Kla-Tencor Corporation | Massively parallel inspection and imaging system |
| US6707555B1 (en) | 1998-10-15 | 2004-03-16 | Sysmex Corporation | Optical information measuring apparatus |
| US6423505B1 (en) | 1998-12-03 | 2002-07-23 | Becton Dickinson And Company | Methods and reagents for quantitation of HLA-DR and CD11b expression on peripheral blood cells |
| US7116407B2 (en) | 1998-12-15 | 2006-10-03 | Union Biometrica, Inc. | System for axial pattern analysis of multicellular organisms |
| US6128133A (en) | 1998-12-22 | 2000-10-03 | Lucent Technologies Inc. | Optical beamsplitter |
| EP1018644A2 (en) | 1999-01-06 | 2000-07-12 | Bayer Corporation | Variable rate particle counter and method of use |
| US6256096B1 (en) | 1999-01-11 | 2001-07-03 | Softray | Flow cytometry apparatus and method |
| US20010006416A1 (en) | 1999-01-11 | 2001-07-05 | Johnson Paul E. | Ribbon flow cytometry apparatus and methods |
| US6150119A (en) | 1999-01-19 | 2000-11-21 | Caliper Technologies Corp. | Optimized high-throughput analytical system |
| US6473176B2 (en) | 1999-01-25 | 2002-10-29 | Amnis Corporation | Imaging and analyzing parameters of small moving objects such as cells |
| US6580504B1 (en) | 1999-01-25 | 2003-06-17 | Amnis Corporation | Multipass cavity for illumination and excitation of moving objects |
| US6671044B2 (en) | 1999-01-25 | 2003-12-30 | Amnis Corporation | Imaging and analyzing parameters of small moving objects such as cells in broad flat flow |
| US6119465A (en) | 1999-02-10 | 2000-09-19 | Mullens; Patrick L. | Shipping container for storing materials at cryogenic temperatures |
| FR2789778B1 (fr) | 1999-02-12 | 2001-09-14 | France Telecom | Procede pour associer des references d'acheminement a des paquets de donnees au moyen d'une memoire trie, et routeur de paquets appliquant ce procede |
| US6323632B1 (en) | 1999-08-13 | 2001-11-27 | Coulter International Corp. | Solid state RF oscillator-detector for flow cytometer |
| CH690557A5 (de) | 1999-03-01 | 2000-10-13 | Arson Ag | Beleuchtungseinrichtung. |
| US6097485A (en) | 1999-03-08 | 2000-08-01 | Integrated Waveguides, Inc. | Microchip optical transport technology for use in a personal flow cytometer |
| FR2791645B1 (fr) | 1999-04-02 | 2001-06-15 | Valois Sa | Echantillon de produit fluide destine a la presse |
| US6193647B1 (en) | 1999-04-08 | 2001-02-27 | The Board Of Trustees Of The University Of Illinois | Microfluidic embryo and/or oocyte handling device and method |
| US6793387B1 (en) | 1999-05-08 | 2004-09-21 | Chata Biosystems, Inc. | Apparatus for automatic preparation of a mixture and method |
| FR2793495B1 (fr) | 1999-05-14 | 2001-08-10 | Imv Technologies | Dilueur pour la cryoconservation de spermatozoides de bovins |
| FR2793708B1 (fr) | 1999-05-21 | 2001-08-03 | Valois Sa | Dispositif de distribution de produit fluide |
| US6372506B1 (en) | 1999-07-02 | 2002-04-16 | Becton, Dickinson And Company | Apparatus and method for verifying drop delay in a flow cytometer |
| IT1307787B1 (it) | 1999-07-26 | 2001-11-19 | Univ Firenze | Processo per incrementare la motilita' degli spermatozoi e spermatozoia motilita' superiore cosi' ottenuti. |
| DE19935766A1 (de) | 1999-07-29 | 2001-02-01 | Friedrich Schiller Uni Jena Bu | Verfahren zur optischen Anregung von Fluorophor-markierter DNA und RNA |
| US6664550B2 (en) | 1999-08-30 | 2003-12-16 | Sandia National Laboratories | Apparatus to collect, classify, concentrate, and characterize gas-borne particles |
| US6495366B1 (en) | 1999-09-03 | 2002-12-17 | Therakos, Inc. | Uninterrupted flow pump apparatus and method |
| US6813017B1 (en) | 1999-10-20 | 2004-11-02 | Becton, Dickinson And Company | Apparatus and method employing incoherent light emitting semiconductor devices as particle detection light sources in a flow cytometer |
| JP2003512605A (ja) | 1999-10-21 | 2003-04-02 | サイトメーション， インコーポレイテッド | 一時的動的フローサイトメータ分析システム |
| US6472153B1 (en) * | 1999-10-26 | 2002-10-29 | Epoch Biosciences, Inc. | Hybridization-triggered fluorescent detection of nucleic acids |
| US7208265B1 (en) | 1999-11-24 | 2007-04-24 | Xy, Inc. | Method of cryopreserving selected sperm cells |
| WO2001040454A1 (en) | 1999-11-30 | 2001-06-07 | Oncosis | Method and apparatus for selectively targeting specific cells within a cell population |
| US6263745B1 (en) | 1999-12-03 | 2001-07-24 | Xy, Inc. | Flow cytometer nozzle and flow cytometer sample handling methods |
| US6558911B1 (en) | 1999-12-10 | 2003-05-06 | Oregon Health Sciences University | Sperm quality assay |
| EP1250897B1 (en) | 2000-01-03 | 2004-09-29 | Iberica de Reproduccion Asistida, S.L. | Artificial insemination device for pigs |
| IT1317724B1 (it) * | 2000-01-14 | 2003-07-15 | Istituto Sperimentale Italiano | Procedimento per la produzione di embrioni non umani di sessopredeterminato ad alto valore genetico. |
| ES2174778T3 (es) | 2000-01-14 | 2002-11-16 | Exelixis Deutschland Gmbh | Procedimiento de crioconservacion de esperma de pez cebra. |
| US6465169B2 (en) | 2000-01-14 | 2002-10-15 | Artemis Pharmaceuticals Gmbh | Method for cryoconservation of Zebrafish sperm |
| AU2001234608A1 (en) | 2000-01-28 | 2001-08-07 | Genetrace Systems, Inc. | Methods for analysis of gene expression |
| US6587203B2 (en) | 2000-02-17 | 2003-07-01 | Cornell Research Foundation, Inc. | Sort stream stabilizer for flow cytometer |
| US6618143B2 (en) | 2000-02-18 | 2003-09-09 | Idexx Laboratories, Inc. | High numerical aperture flow cytometer and method of using same |
| US6646742B1 (en) | 2000-02-19 | 2003-11-11 | Mwi, Inc. | Optical device and method for multi-angle laser light scatter |
| GB2360360B (en) | 2000-03-14 | 2002-03-20 | Univ Bristol | A method of sorting cells |
| JP3587755B2 (ja) | 2000-03-14 | 2004-11-10 | シスメックス株式会社 | 粒子測定装置およびその方法 |
| US6482652B2 (en) | 2000-03-23 | 2002-11-19 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Biological particle sorter |
| BR0109655A (pt) | 2000-03-30 | 2004-01-13 | Univ Iowa State Res Found Inc | Marcadores genéticos para caracterìsticas melhoradas de carne em animais |
| US6970246B2 (en) | 2000-04-11 | 2005-11-29 | Chemometec A/S | Method and apparatus for detecting fluorescence of a sample |
| EP1147774A1 (en) | 2000-04-20 | 2001-10-24 | Stichting Dienst Landbouwkundig Onderzoek | Method for improving the quality of sperm for artificial insemination of animals |
| CN101418280B (zh) | 2000-05-09 | 2014-10-22 | Xy有限责任公司 | 具有高纯度x-染色体和y-染色体的精子群 |
| EP1287111A4 (en) | 2000-05-19 | 2005-12-28 | Dakocytomation Colorado Inc | QUICK ENTRY SYSTEM OF MULTIMATIC SAMPLE |
| US6590911B1 (en) | 2000-06-02 | 2003-07-08 | Coherent, Inc. | Passively modelocked harmonic-generating laser |
| US6700130B2 (en) | 2001-06-29 | 2004-03-02 | Honeywell International Inc. | Optical detection system for flow cytometry |
| US6784981B1 (en) * | 2000-06-02 | 2004-08-31 | Idexx Laboratories, Inc. | Flow cytometry-based hematology system |
| US7351376B1 (en) | 2000-06-05 | 2008-04-01 | California Institute Of Technology | Integrated active flux microfluidic devices and methods |
| US6503698B1 (en) | 2000-06-16 | 2003-01-07 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture | Cryopreservation of swine embryos |
| WO2001095815A1 (en) | 2000-06-12 | 2001-12-20 | Xy, Inc. | Integrated herd management system utilizing isolated populations of x-chromosome bearing and y-chromosome bearing spermatozoa |
| DE10031028B4 (de) | 2000-06-26 | 2008-09-04 | Gnothis Holding Sa | Verfahren zur Selektion von Partikeln |
| GB0016920D0 (en) | 2000-07-10 | 2000-08-30 | Univ Cambridge Tech | Decondensation of DNA |
| EP1315418A4 (en) | 2000-08-10 | 2004-01-14 | Gtc Biotherapeutics Inc | SPERM CRYOPRESERVATION |
| US20040005582A1 (en) | 2000-08-10 | 2004-01-08 | Nanobiodynamics, Incorporated | Biospecific desorption microflow systems and methods for studying biospecific interactions and their modulators |
| FR2813283B1 (fr) | 2000-08-25 | 2003-02-14 | Valois Sa | Distributeur a pompe integree |
| EP1190684A1 (en) | 2000-09-05 | 2002-03-27 | Universiteit Gent | Device and method for artificial insemination of bovines and other animals |
| US20020028434A1 (en) | 2000-09-06 | 2002-03-07 | Guava Technologies, Inc. | Particle or cell analyzer and method |
| JP2004522418A (ja) | 2000-09-08 | 2004-07-29 | アイオワ ステート ユニバーシティ リサーチ ファウンデーション，インコーポレーティッド | 新規なｐｒｋａｇ３対立遺伝子並びに生殖性及び肉質の形質の遺伝標識としてのその使用 |
| EP1334347A1 (en) | 2000-09-15 | 2003-08-13 | California Institute Of Technology | Microfabricated crossflow devices and methods |
| GB0023041D0 (en) | 2000-09-20 | 2000-11-01 | Univ Manchester | Identification apparatus |
| WO2002026114A2 (en) | 2000-09-27 | 2002-04-04 | Bitensky Mark W | Cellular diagnostic arrays, methods of using and processes for producing same |
| CN1325909C (zh) | 2000-09-27 | 2007-07-11 | 清华大学 | 用于微粒操纵与微粒导向的装置及其使用方法 |
| BR0005045A (pt) | 2000-09-28 | 2002-05-14 | Marcos Fernando De Resende Mat | Método para sexagem de espermatozóides usando a via clássica do sistema complemento, com eliminação da via alternativa pela inativação da proteina "b" |
| WO2002029106A2 (en) | 2000-10-03 | 2002-04-11 | California Institute Of Technology | Microfluidic devices and methods of use |
| US20040031071A1 (en) | 2000-10-05 | 2004-02-12 | Xy, Inc. | System of hysteroscopic insemination of mares |
| CA2424115A1 (en) | 2000-10-05 | 2002-04-11 | Xy, Inc. | System of hysteroscopic insemination of animals |
| WO2002031467A1 (en) | 2000-10-12 | 2002-04-18 | Amnis Corporation | Multipass cavity for illumination and excitation of moving objects |
| JP2004537712A (ja) | 2000-10-18 | 2004-12-16 | バーチャル・アレイズ・インコーポレーテッド | 多重細胞分析システム |
| KR100865599B1 (ko) | 2000-10-23 | 2008-10-27 | 피 페턴트, 인크. | 유체 분배기 및 유체 분배기 충진 방법 |
| US20040034879A1 (en) | 2000-11-09 | 2004-02-19 | Steve Rothstein | Mammalian sex selection using genetic modification |
| SE0004777D0 (sv) | 2000-12-22 | 2000-12-22 | Amersham Pharm Biotech Ab | Separation of X-and Y-sperm cells |
| US6849423B2 (en) | 2000-11-29 | 2005-02-01 | Picoliter Inc | Focused acoustics for detection and sorting of fluid volumes |
| US20020064808A1 (en) | 2000-11-29 | 2002-05-30 | Mutz Mitchell W. | Focused acoustic energy for ejecting cells from a fluid |
| US20020064809A1 (en) | 2000-11-29 | 2002-05-30 | Mutz Mitchell W. | Focused acoustic ejection cell sorting system and method |
| AU2002237689B2 (en) | 2000-11-29 | 2008-01-10 | Xy, Llc. | System to separate frozen-thawed spermatozoa into X-chromosome bearing and Y-chromosome bearing populations |
| US7713687B2 (en) | 2000-11-29 | 2010-05-11 | Xy, Inc. | System to separate frozen-thawed spermatozoa into x-chromosome bearing and y-chromosome bearing populations |
| US6596499B2 (en) | 2000-11-30 | 2003-07-22 | The Netherlands Cancer Institute | Membrane molecule indicator compositions and methods |
| US6576291B2 (en) * | 2000-12-08 | 2003-06-10 | Massachusetts Institute Of Technology | Preparation of nanocrystallites |
| EP1352237A4 (en) | 2000-12-15 | 2009-03-04 | Beckman Coulter Inc | ELECTROCONDUCTIVE CONTAINMENT SYSTEM |
| US6577387B2 (en) | 2000-12-29 | 2003-06-10 | Johnson & Johnson Vision Care, Inc. | Inspection of ophthalmic lenses using absorption |
| WO2002060880A1 (fr) | 2001-01-29 | 2002-08-08 | Universite De Geneve | Derives d'acyclonucleosides pyrimidiniques, leur procede de preparation et leur utilisation |
| US6673095B2 (en) | 2001-02-12 | 2004-01-06 | Wound Healing Of Oklahoma, Inc. | Apparatus and method for delivery of laser light |
| US7029916B2 (en) | 2001-02-21 | 2006-04-18 | Maxcyte, Inc. | Apparatus and method for flow electroporation of biological samples |
| AU2002254173A1 (en) * | 2001-03-12 | 2002-10-08 | The State Of Oregon Acting By And Through The State Board Of Higher Education On Behalf Of The Unive | Oxidation-reduction sensitive green fluorescent protein variants |
| US6706163B2 (en) | 2001-03-21 | 2004-03-16 | Michael Seul | On-chip analysis of particles and fractionation of particle mixtures using light-controlled electrokinetic assembly of particles near surfaces |
| CA2442019A1 (en) | 2001-03-22 | 2002-10-03 | Infigen, Inc. | Sex-specific selection of sperm from transgenic animals |
| EP1245944B1 (en) | 2001-03-29 | 2007-02-14 | Sysmex Corporation | Flow cytometer |
| CA2442282A1 (en) | 2001-03-29 | 2002-10-10 | Cellect Technologies Corp. | Methods devices and systems for sorting and separating particles |
| US6569464B1 (en) * | 2001-03-30 | 2003-05-27 | Council Of Scientific & Industrial Research | Coelomic fluid extract from Pheretima posthuma for providing sperm immotility |
| US20020160518A1 (en) | 2001-04-03 | 2002-10-31 | Hayenga Jon W. | Microfluidic sedimentation |
| JP2002311027A (ja) | 2001-04-09 | 2002-10-23 | Hitachi Software Eng Co Ltd | ビーズ、ビーズ製造方法、フローサイトメータ及びプログラム |
| US6416190B1 (en) * | 2001-04-27 | 2002-07-09 | University Of Chicago | Apparatus for using optical tweezers to manipulate materials |
| US20020186375A1 (en) | 2001-05-01 | 2002-12-12 | Asbury Charles L. | Device and methods for detecting samples in a flow cytometer independent of variations in fluorescence polarization |
| WO2002092161A1 (en) | 2001-05-10 | 2002-11-21 | Biophan, Llc | Miniaturized particle analyzer |
| US7012689B2 (en) | 2001-05-17 | 2006-03-14 | Dako Colorado, Inc. | Flow cytometer with active automated optical alignment system |
| US7345758B2 (en) | 2001-05-17 | 2008-03-18 | Cytopeia | Apparatus for analyzing and sorting biological particles |
| US20020182590A1 (en) | 2001-05-25 | 2002-12-05 | Vanderbilt University | Determining protein function in cell culture using RNA interference |
| US20030048433A1 (en) | 2001-06-01 | 2003-03-13 | Jean-Marie Desjonqueres | Cytometer signal processing system and method |
| FR2825987B1 (fr) | 2001-06-19 | 2003-12-12 | Valois Sa | Distributeur de produit fluide |
| US7105355B2 (en) | 2001-07-18 | 2006-09-12 | The Regents Of The University Of Michigan | Flow cytometers and detection system of lesser size |
| WO2003008102A1 (en) | 2001-07-18 | 2003-01-30 | The Regents Of The University Of Michigan | Microfluidic gravity pump with constant flow rate |
| FR2828281B1 (fr) | 2001-08-02 | 2004-12-31 | Biocytex | Dispositif pour l'analyse d'un echantillon notamment par cytometrie de flux |
| WO2003020877A2 (en) | 2001-09-01 | 2003-03-13 | Pharmacia Corporation | Staining and sorting genomes and chromosomes using sequence-specific polyamides |
| DE10151216A1 (de) | 2001-10-16 | 2003-04-24 | Zeiss Carl Jena Gmbh | Verfahren zur optischen Erfassung von charakteristischen Größen einer beleuchteten Probe |
| US20030078703A1 (en) | 2001-10-19 | 2003-04-24 | Surromed, Inc. | Cytometry analysis system and method using database-driven network of cytometers |
| US6838289B2 (en) | 2001-11-14 | 2005-01-04 | Beckman Coulter, Inc. | Analyte detection system |
| US6831279B2 (en) | 2001-11-27 | 2004-12-14 | Her Majesty The Queen In Right Of Canada, As Represented By The Minister Of National Defence | Laser diode-excited biological particle detection system |
| WO2003053055A1 (en) | 2001-12-18 | 2003-06-26 | Thomson Licensing S.A. | Internally generated close captioning/tele-texting for set-up menus of network-capable signal processing apparatus |
| WO2003056330A2 (de) | 2001-12-31 | 2003-07-10 | Institut für Physikalische Hochtechnologie e.V. | Zellsortiersystem zur grössenabhängigen sortierung oder separation von in einer strömenden flüssigkeit suspendierten zellen |
| AU2002361220A1 (en) | 2001-12-31 | 2003-07-15 | Institut Fur Physikalische Hochtechnologie E.V. | Micro-recess array for size-dependent sorting or separation of cells suspended in a flowing medium and method for analysing the functional activity of individual cells |
| US6780377B2 (en) | 2002-01-22 | 2004-08-24 | Dakocytomation Denmark A/S | Environmental containment system for a flow cytometer |
| US6698627B2 (en) | 2002-02-19 | 2004-03-02 | Valois S.A.S. | Fluid dispenser |
| AU2003219836A1 (en) | 2002-02-27 | 2003-09-09 | The Regents Of The University Of Michigan | Process for sorting motile particles from lesser-motile particles and apparatus suitable therefor |
| US20030175980A1 (en) | 2002-03-14 | 2003-09-18 | Hayenga Jon W. | Ribbon flow cytometry and cell sorting |
| US7223371B2 (en) | 2002-03-14 | 2007-05-29 | Micronics, Inc. | Microfluidic channel network device |
| JP2004000144A (ja) | 2002-03-29 | 2004-01-08 | Aisin Seiki Co Ltd | 細胞分離選別装置、細胞整列用基板 |
| US7312085B2 (en) * | 2002-04-01 | 2007-12-25 | Fluidigm Corporation | Microfluidic particle-analysis systems |
| MXPA04012850A (es) | 2002-06-28 | 2005-02-24 | Monsanto Technology Llc | Sistema de negocios para genetica porcina. |
| CA2489779A1 (en) | 2002-07-10 | 2004-01-22 | Applied Research Systems Ars Holding N.V. | Use of compounds for increasing spermatozoa motility |
| EP1542529A4 (en) | 2002-07-22 | 2006-08-09 | Xy Inc | SYSTEM FOR TREATING SPERMATIC CELL |
| ES2430963T3 (es) | 2002-07-31 | 2013-11-22 | Premium Genetics (Uk) Limited | Sistema y procedimiento de clasificación de materiales usando dirección de láser holográfica |
| EP2275533B9 (en) | 2002-08-01 | 2016-10-19 | Xy, Llc | Method of assessing sperm cells |
| WO2004017041A2 (en) | 2002-08-15 | 2004-02-26 | Xy, Inc. | High resolution flow cytometer |
| US7169548B2 (en) | 2002-09-13 | 2007-01-30 | Xy, Inc. | Sperm cell processing and preservation systems |
| JP3983151B2 (ja) | 2002-09-25 | 2007-09-26 | ダイワ精工株式会社 | 魚釣用スピニングリール |
| US20040061853A1 (en) | 2002-09-27 | 2004-04-01 | Blasenheim Barry J. | Prism-based flow cytometry excitation optics |
| US7201875B2 (en) | 2002-09-27 | 2007-04-10 | Becton Dickinson And Company | Fixed mounted sorting cuvette with user replaceable nozzle |
| US6941005B2 (en) | 2002-11-01 | 2005-09-06 | Coulter International Corp. | Monitoring and control of droplet sorting |
| WO2004046712A2 (en) | 2002-11-20 | 2004-06-03 | University Of Virginia Patent Foundation | Isolation of sperm cells from other biological materials using microfabricated devices and related methods thereof |
| AU2003297304A1 (en) | 2002-12-19 | 2004-07-22 | Monsanto Technology Llc | Method and means for early detection of pregnancy in animals by combination testing |
| ES2561816T3 (es) | 2003-03-28 | 2016-03-01 | Inguran, Llc | Aparatos, métodos y procesos para clasificar partículas y para proporcionar esperma animal clasificado por sexo |
| US7335507B2 (en) | 2003-03-28 | 2008-02-26 | Monsanto Technology Llc | Process for the staining of sperm |
| CA2566749C (en) | 2003-05-15 | 2017-02-21 | Xy, Inc. | Efficient haploid cell sorting for flow cytometer systems |
| US20050011582A1 (en) | 2003-06-06 | 2005-01-20 | Haug Jeffrey S. | Fluid delivery system for a flow cytometer |
| US7460223B2 (en) * | 2003-09-19 | 2008-12-02 | Applied Biosystems Inc. | Inverted orientation for a microplate |
| JP5198849B2 (ja) | 2004-03-29 | 2013-05-15 | イングラン・リミテッド・ライアビリティ・カンパニー | 染色または仕分け方法において細胞内でおよび／または細胞外で酸化／還元反応を制御する組成物の使用 |
| MXPA06011344A (es) | 2004-03-29 | 2006-12-15 | Monsanto Technology Llc | Suspensiones de espermatozoides para separar en poblaciones enriquecidas con cromosomas x o y. |
| BRPI0513685A (pt) | 2004-07-22 | 2008-05-13 | Monsanto Technology Llc | processo para enriquecimento de uma população de células de esperma |
| PT2884258T (pt) | 2004-07-27 | 2016-12-13 | Beckman Coulter Inc | Discriminação da citometria de fluxo melhorada com transformação geométrica implementada por computador |
| US20060118167A1 (en) | 2004-12-03 | 2006-06-08 | Xy, Inc. | Pressure regulated continuously variable volume container for fluid delivery |
| US20060147894A1 (en) | 2004-12-30 | 2006-07-06 | Vicam, L.P. | Jacketed vessel for holding semen for sex biasing mammals through artificial insemination and systems and methods for enhancing the probability of sex biasing using the same |
| US7591064B2 (en) | 2005-07-20 | 2009-09-22 | Hitachi Global Storage Technologies Netherlands B.V. | Method of fabrication for tape medium read head with unitary formation of multiple elements |
| US7618770B2 (en) | 2005-07-29 | 2009-11-17 | Xy, Inc. | Methods and apparatus for reducing protein content in sperm cell extenders |
| AU2006304620A1 (en) * | 2005-10-19 | 2007-04-26 | Scott Josephson | Improved reproductive management |
-
2005
- 2005-03-29 MX MXPA06011344A patent/MXPA06011344A/es active IP Right Grant
- 2005-03-29 EP EP20100178442 patent/EP2260854A1/en not_active Ceased
- 2005-03-29 CA CA2561519A patent/CA2561519C/en active Active
- 2005-03-29 WO PCT/US2005/010481 patent/WO2005095590A2/en active Application Filing
- 2005-03-29 EP EP05731409A patent/EP1730266A2/en not_active Ceased
- 2005-03-29 BR BRPI0509488-7A patent/BRPI0509488A/pt not_active Application Discontinuation
- 2005-03-29 AU AU2005228893A patent/AU2005228893B2/en not_active Ceased
- 2005-03-29 US US11/092,313 patent/US7838210B2/en active Active
- 2005-03-29 ES ES09014128T patent/ES2397678T3/es active Active
- 2005-03-29 WO PCT/US2005/010599 patent/WO2005094852A2/en active Application Filing
- 2005-03-29 CA CA2561661A patent/CA2561661C/en active Active
- 2005-03-29 NZ NZ550196A patent/NZ550196A/en unknown
- 2005-03-29 DK DK14002489.4T patent/DK2801363T3/en active
- 2005-03-29 EP EP09014128A patent/EP2151243B1/en active Active
- 2005-03-29 MX MXPA06011345A patent/MXPA06011345A/es active IP Right Grant
- 2005-03-29 CA CA2972254A patent/CA2972254A1/en active Pending
- 2005-03-29 DK DK09014128.4T patent/DK2151243T3/da active
- 2005-03-29 US US11/092,338 patent/US7892725B2/en active Active
- 2005-03-29 JP JP2007506489A patent/JP2007537727A/ja not_active Withdrawn
- 2005-03-29 EP EP05731144A patent/EP1729789A2/en not_active Withdrawn
- 2005-03-29 JP JP2007506461A patent/JP2007531523A/ja not_active Withdrawn
- 2005-03-29 BR BRPI0509485-2A patent/BRPI0509485A/pt not_active Application Discontinuation
- 2005-03-29 CN CN201510400906.7A patent/CN104974983A/zh active Pending
- 2005-03-29 PL PL09014128T patent/PL2151243T3/pl unknown
- 2005-03-29 AU AU2005229073A patent/AU2005229073B2/en not_active Ceased
- 2005-03-29 CN CN201210040778.6A patent/CN102586179B/zh active Active
- 2005-03-29 NZ NZ550198A patent/NZ550198A/en unknown
- 2005-03-29 EP EP14002489.4A patent/EP2801363B1/en active Active
- 2005-03-29 PT PT90141284T patent/PT2151243E/pt unknown
- 2005-03-30 AR ARP050101215A patent/AR048515A1/es not_active Application Discontinuation
- 2005-03-30 AR ARP050101214A patent/AR049259A1/es unknown
-
2008
- 2008-12-10 JP JP2008314414A patent/JP2009082143A/ja not_active Withdrawn
- 2008-12-10 JP JP2008314417A patent/JP2009100752A/ja active Pending
-
2013
- 2013-01-18 HK HK13100826.5A patent/HK1173745A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2015
- 2015-05-11 HK HK15104438.5A patent/HK1203831A1/xx unknown
Patent Citations (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3005756A (en) * | 1958-11-14 | 1961-10-24 | Noland L Van Demark | Diluter containing carbon dioxide for preserving semen |
| US3005759A (en) * | 1959-04-24 | 1961-10-24 | American Zinc Inst | Zinc electroplating |
| JPH05285163A (ja) * | 1992-04-10 | 1993-11-02 | Okayama Pref Gov | 精子凍結方法及び精子凍結装置 |
| JP2002521043A (ja) * | 1998-07-30 | 2002-07-16 | エックスワイ，インコーポレイテッド | 非外科的人工授精のためのウマシステム |
| JP2000239101A (ja) * | 1999-02-18 | 2000-09-05 | Japan Science & Technology Corp | ラット精子の凍結保存法 |
| JP2001017026A (ja) * | 1999-07-09 | 2001-01-23 | Livestock Improvement Association Of Japan Inc | 家畜の人工授精用精子または受精卵移植用卵子の注入器及びその操作方法 |
| JP2001328901A (ja) * | 2000-05-19 | 2001-11-27 | Seatsuku Yoshitomi Kk | マウス精子凍結保存用キット |
| WO2002041906A2 (en) * | 2000-11-22 | 2002-05-30 | Pharmacia Corporation | Methods and apparatus for producing gender enriched sperm |
| US20030157473A1 (en) * | 2002-02-21 | 2003-08-21 | Minitube Of America | Compositions comprising reproductive cell media and methods for using such compositions |
Non-Patent Citations (10)
| Title |
|---|
| JPN6010057524; Ｔｈｅｒｉｏｇｅｎｏｌｏｇｙ Ｖｏｌ．５２, 1999, ｐ．１３７５-１３９１ * |
| JPN6011017152; Ｚｏｏｌ．Ｓｃｉ． Ｖｏｌ．１０, 1993, ｐ．２８１-２８５ * |
| JPN6011017153; Ｊ．Ａｎｉｍ．Ｓｃｉ． Ｖｏｌ．８０, 2002, ｐ．１２-１８ * |
| JPN6011017154; Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ． Ｖｏｌ．１２８， Ｎｏ．１, 1985, ｐ．２１１-２１９ * |
| JPN6011017155; Ｂｉｏｓｃｉ．Ｒｅｐｏｒｔｓ Ｖｏｌ．１６， Ｎｏ．１, 1996, ｐ．３５-４０ * |
| JPN6011017156; Ｉｎｔ．Ｊ．Ａｎｄｒｏｌ． Ｖｏｌ．２５, 2002, ｐ．１８０-１８５ * |
| JPN6011017158; Ｔｅｒｉｏｇｅｎｏｌｏｇｙ Ｖｏｌ．５４, 2000, ｐ．１４５３-１４６７ * |
| JPN6011017159; Ｆｉｓｈ Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ． Ｖｏｌ．２３, 2000, ｐ．２７５-２８１ * |
| JPN6011017160; Ｍｏｌ．Ｒｅｐｒｏｄ．Ｄｅｖｅｌｏｐ． Ｖｏｌ．６２, 2002, ｐ．３４８-３５６ * |
| JPN6012055200; Ｊ．Ｒｅｐｒｏｄ．Ｆｅｒｔｉｌ． Ｖｏｌ．６, 1963, ｐ．３５１-３５９ |
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US7892725B2 (en) | Process for storing a sperm dispersion | |
| JP5198849B2 (ja) | 染色または仕分け方法において細胞内でおよび／または細胞外で酸化／還元反応を制御する組成物の使用 | |
| US7833147B2 (en) | Process for enriching a population of sperm cells | |
| US20230097054A1 (en) | Low sugar sperm media and compositions | |
| CN101014350A (zh) | 用于授精的精子悬浮液 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20080331 |
|
| A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A711 Effective date: 20081127 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20101005 |
|
| A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20110105 |
|
| A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20110113 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20110204 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20110405 |
|
| RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 Effective date: 20110927 |
|
| A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20120313 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20120713 |
|
| A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20120904 |
|
| A912 | Re-examination (zenchi) completed and case transferred to appeal board |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A912 Effective date: 20121026 |
|
| A761 | Written withdrawal of application |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A761 Effective date: 20140131 |