JP2005533493A5

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Publication number: JP2005533493A5
Application number: JP2004513434A
Authority: JP
Filing date: 2003-06-12
Publication date: 2009-07-16
Anticipated expiration: 2023-06-12

Claims

インスリン様増殖因子-I受容体（IGF-IR）と特異的に結合する抗体または抗体フラグメントであって、上記受容体の拮抗薬でありかつ上記受容体に対する作動薬活性を実質的に欠くことを特徴とする上記抗体またはエピトープ結合抗体フラグメント。
再表面形成されている、請求項１に記載の抗体または抗体フラグメント。
ヒトのものであるかまたはヒト化されている、請求項１に記載の抗体または抗体フラグメント。
インスリン様増殖因子-I受容体と特異的に結合する抗体またはエピトープ結合抗体フラグメントであって、血清、インスリン様増殖因子-Iおよびインスリン様増殖因子-IIからなる群から選択される増殖刺激因子の存在のもとで癌細胞の増殖を約80％より大きく阻害することができる上記抗体または抗体フラグメント。
上記癌細胞がヒト癌細胞である、請求項４に記載の抗体または抗体フラグメント。
少なくとも１つの相補性決定領域を含み、上記相補性決定領域が配列番号１〜６：
SYWMH (配列番号１)、
EINPSNGRTNYNEKFKR (配列番号２)、
GRPDYYGSSKWYFDV (配列番号３)、
RSSQSIVHSNVNTYLE (配列番号４)、
KVSNRFS (配列番号５)、
FQGSHVPPT (配列番号６)
からなる群から選択される１つのアミノ酸配列を有する抗体またはエピトープ結合抗体フラグメントであって、配列番号５が選択されるとき該抗体または抗体フラグメントがIGF-IRに特異的に結合するものである、上記抗体またはエピトープ結合抗体フラグメント。
少なくとも１つの重鎖可変域および少なくとも１つの軽鎖可変域を含み、上記重鎖可変域が配列番号１〜３：
SYWMH (配列番号１)、
EINPSNGRTNYNEKFKR (配列番号２)、
GRPDYYGSSKWYFDV (配列番号３)
によりそれぞれ表される３つの連続的な相補性決定領域を含み、かつ
上記軽鎖可変域が配列番号４〜６：
RSSQSIVHSNVNTYLE (配列番号４)、
KVSNRFS (配列番号５)、
FQGSHVPPT (配列番号６)
によりそれぞれ表される３つの連続的な相補性決定領域を含むことを特徴とする抗体またはエピトープ結合抗体フラグメント。
上記重鎖可変域が配列番号７：
QVQLQQSGAELVKPGASVKLSCKASGYTFTSYWMHWVKQRPGQGLEWIGEINPSNGRTNYNEKFKRKATLTVDKSSSTAYMQLSSLTSEDSAVYYFARGRPDYYGSSKWYFDVWGAGTTVTVSS（配列番号７）
により表されるアミノ酸配列と少なくとも90％配列同一性を有する、請求項７に記載の抗体または抗体フラグメント。
上記重鎖可変域が配列番号７により表される上記アミノ酸配列と少なくとも95％配列同一性を有する、請求項８に記載の抗体または抗体フラグメント。
上記重鎖可変域が配列番号７により表されるアミノ酸配列を有する、請求項８に記載の抗体または抗体フラグメント。
上記軽鎖可変域が配列番号８：
DVLMTQTPLSLPVSLGDQASISCRSSQSIVHSNVNTYLEWYLQKPGQSPKLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLRISRVEAEDLGIYYCFQGSHVPPTFGGGTKLEIKR（配列番号８）
により表されるアミノ酸配列と少なくとも90％配列同一性を有する、請求項７に記載の抗体または抗体フラグメント。
上記軽鎖可変域が配列番号８により表される上記アミノ酸配列と少なくとも95％配列同一性を有する、請求項１１に記載の抗体または抗体フラグメント。
上記軽鎖可変域が配列番号８により表されるアミノ酸配列を有する、請求項１１に記載の抗体または抗体フラグメント。
少なくとも１つの相補性決定領域を含み、上記相補性決定領域が配列番号１〜６：
SYWMH (配列番号１)、
EINPSNGRTNYNEKFKR (配列番号２)、
GRPDYYGSSKWYFDV (配列番号３)、
RSSQSIVHSNVNTYLE (配列番号４)、
KVSNRFS (配列番号５)、
FQGSHVPPT (配列番号６)
からなる群から選択される１つのアミノ酸配列を有する、請求項１に記載の抗体または抗体フラグメント。
少なくとも１つの重鎖可変域および少なくとも１つの軽鎖可変域を含み、上記重鎖可変域が配列番号１〜３：
SYWMH (配列番号１)、
EINPSNGRTNYNEKFKR (配列番号２)、
GRPDYYGSSKWYFDV (配列番号３)
によりそれぞれ表される３つの連続的な相補性決定領域を含み、かつ
上記軽鎖可変域が配列番号４〜６：
RSSQSIVHSNVNTYLE (配列番号４)、
KVSNRFS (配列番号５)、
FQGSHVPPT (配列番号６)
によりそれぞれ表される３つの連続的な相補性決定領域を含むことを特徴とする、請求項１に記載の抗体または抗体フラグメント。
上記抗体または抗体フラグメントが配列番号７：
QVQLQQSGAELVKPGASVKLSCKASGYTFTSYWMHWVKQRPGQGLEWIGEINPSNGRTNYNEKFKRKATLTVDKSSSTAYMQLSSLTSEDSAVYYFARGRPDYYGSSKWYFDVWGAGTTVTVSS（配列番号７）
により表されるアミノ酸配列と少なくとも90％配列同一性を有する重鎖可変域を含む、請求項１に記載の抗体または抗体フラグメント。
上記重鎖可変域が配列番号７により表される上記アミノ酸配列と少なくとも95％配列同一性を有する、請求項１６に記載の抗体または抗体フラグメント。
上記重鎖可変域が配列番号７により表されるアミノ酸配列を有する、請求項１６に記載の抗体または抗体フラグメント。
上記抗体または抗体フラグメントが配列番号８：
DVLMTQTPLSLPVSLGDQASISCRSSQSIVHSNVNTYLEWYLQKPGQSPKLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLRISRVEAEDLGIYYCFQGSHVPPTFGGGTKLEIKR（配列番号８）
により表されるアミノ酸配列と少なくとも90％配列同一性を有する軽鎖可変域を含む、請求項１に記載の抗体または抗体フラグメント。
上記軽鎖可変域が配列番号８により表される上記アミノ酸配列と少なくとも95％配列同一性を有する、請求項１９に記載の抗体または抗体フラグメント。
上記軽鎖可変域が配列番号８により表されるアミノ酸配列を有する、請求項１９に記載の抗体または抗体フラグメント。
DVVMTQTPLSLPVSLGDPASISCRSSQSIVHSNVNTYLEWYLQKPGQSPRLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGAGTDFTLRISRVEAEDLGIYYCFQGSHVPPTFGGGTKLEIKR（配列番号９）；
DVLMTQTPLSLPVSLGDPASISCRSSQSIVHSNVNTYLEWYLQKPGQSPKLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGAGTDFTLRISRVEAEDLGIYYCFQGSHVPPTFGGGTKLEIKR（配列番号１０）；
DVLMTQTPLSLPVSLGDPASISCRSSQSIVHSNVNTYLEWYLQKPGQSPRLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGAGTDFTLRISRVEAEDLGIYYCFQGSHVPPTFGGGTKLEIKR（配列番号１１）；および
DVVMTQTPLSLPVSLGDPASISCRSSQSIVHSNVNTYLEWYLQKPGQSPKLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGAGTDFTLRISRVEAEDLGIYYCFQGSHVPPTFGGGTKLEIKR（配列番号１２）
からなる群から選択される配列を有する軽鎖可変域を含む、請求項１に記載の抗体または抗体フラグメント。
配列番号１３：
QVQLVQSGAEVVKPGASVKLSCKASGYTFTSYWMHWVKQRPGQGLEWIGEINPSNGRTNYNQKFQGKATLTVDKSSSTAYMQLSSLTSEDSAVYYFARGRPDYYGSSKWYFDVWGQGTTVTVSS（配列番号１３）
により表される配列を有する重鎖可変域を含む、請求項１に記載の抗体または抗体フラグメント。
請求項１〜２３のいずれか１項に記載の抗体または抗体フラグメントおよび製薬上許容される担体を含む医薬組成物。
細胞傷害薬に連結された、請求項１〜２３のいずれか１項に記載の抗体または抗体フラグメントを含むコンジュゲート。
上記細胞傷害薬がメイタンシノイド、低分子薬剤、プロドラッグ、タキソイド、CC-1065およびCC-1065類似体からなる群から選択される、請求項２５に記載のコンジュゲート。
請求項２６に記載のコンジュゲートおよび製薬上許容される担体を含む医薬組成物。
上記抗体または抗体フラグメントが標識されている、請求項２４または請求項２７に記載の組成物を含む診断試薬。
上記標識が放射標識、蛍光体、発色体、イメージング剤および金属イオンからなる群から選択される、請求項２８に記載の診断試薬。
癌細胞の増殖を阻害する方法であって、上記細胞を請求項１〜２３のいずれか１項に記載の抗体または抗体フラグメントと接触させることを含む上記方法。
癌患者を治療するための医薬組成物であって、請求項１〜２３のいずれか１項に記載の抗体または抗体フラグメントの有効量を含む上記医薬組成物。
さらに治療薬を含む、請求項３１に記載の医薬組成物。
上記治療薬が細胞傷害薬である、請求項３２に記載の医薬組成物。
癌患者を治療するための医薬組成物であって、請求項２５または２６に記載のコンジュゲートの有効量を含む上記医薬組成物。
上記癌が乳癌、大腸癌、卵巣癌、骨肉腫、子宮頸癌、前立腺癌、肺癌、滑膜癌および膵癌からなる群から選択される癌である、請求項３１〜３４のいずれか１項に記載の医薬組成物。
癌の疑いがある被験者を診断するための医薬組成物であって、請求項２８または２９に記載の診断試薬を含む上記医薬組成物。
上記癌が乳癌、大腸癌、卵巣癌、骨肉腫、子宮頸癌、前立腺癌、肺癌、滑膜癌および膵癌からなる群から選択される癌である、請求項３６に記載の診断の医薬組成物。
インスリン様増殖因子-I受容体と特異的に結合する改良された抗体またはエピトープ結合抗体フラグメントであって、
(a)配列番号１〜８：
SYWMH (配列番号１),
EINPSNGRTNYNEKFKR (配列番号２),
GRPDYYGSSKWYFDV (配列番号３),
RSSQSIVHSNVNTYLE (配列番号４),
KVSNRFS (配列番号５),
FQGSHVPPT (配列番号６),
QVQLQQSGAELVKPGASVKLSCKASGYTFTSYWMHWVKQRPGQGLEWIGEINPSNGRTNYNEKFKRKATLTVDKSSSTAYMQLSSLTSEDSAVYYFARGRPDYYGSSKWYFDVWGAGTTVTVSS (配列番号７),
DVLMTQTPLSLPVSLGDQASISCRSSQSIVHSNVNTYLEWYLQKPGQSPKLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLRISRVEAEDLGIYYCFQGSHVPPTFGGGTKLEIKR (配列番号８);
からなる群から選択される少なくとも１つの配列を含む抗体またはそのフラグメントをコードするDNAを提供するステップ；
(b)上記DNA中に少なくとも１つのヌクレオチド突然変異、欠失または挿入を導入して、上記DNAによりコードされる上記抗体または抗体フラグメントのアミノ酸配列を変えるステップ；
(c)上記抗体または抗体フラグメントを発現するステップ；
(d)上記発現された抗体または抗体フラグメントを上記改良についてスクリーニングしてそれにより上記改良された抗体またはその抗体フラグメントを調製するステップ、
により調製される上記改良された抗体またはその抗体フラグメント。
上記改良がIGF-I受容体との親和性の増加である、請求項３８に記載の抗体または抗体フラグメント。
上記少なくとも１つのヌクレオチド突然変異、欠失または挿入を、オリゴヌクレオチドが媒介する位置指定突然変異誘発、カセット変異誘発、誤りがちなPCR、DNAシャッフリング、または大腸菌（E. coli）の突然変異体株の使用からなる群から選択される方法により行うことを特徴とする、請求項３８に記載の抗体または抗体フラグメント。
請求項６、７、８または１１のいずれか１項に記載の抗体または抗体フラグメントをコードするポリヌクレオチド。
請求項６、７、８または１１のいずれか1項に記載の抗体または抗体フラグメントの軽鎖または重鎖可変域をコードするポリヌクレオチド。
請求項４１のポリヌクレオチドを含むベクター。
請求項４２のポリヌクレオチドを含むベクター。
上記抗体または抗体フラグメントを発現することができる発現ベクターである、請求項４３に記載のベクター。
上記抗体または抗体フラグメントを発現することができる発現ベクターである、請求項４４に記載のベクター。
ATCC（American Type Culture Collection）に受託番号PTA-4457として寄託されているハイブリドーマ細胞系統により産生されるマウス抗体EM164、またはインスリン様増殖因子-I受容体と特異的に結合するそのエピトープ結合抗体フラグメントであって、上記受容体の拮抗薬でありかつ上記受容体に対する作動薬活性を実質的に欠くことを特徴とする上記抗体またはフラグメント。
ATCC（American Type Culture Collection）に受託番号PTA-4457として寄託されているハイブリドーマ細胞系統により産生されるEM164から誘導されたヒト化または再表面形成した抗体、またはインスリン様増殖因子-I受容体と特異的に結合するそのエピトープ結合抗体フラグメントであって、上記受容体の拮抗薬でありかつ上記受容体に対する作動薬活性を実質的に欠くことを特徴とする上記抗体またはフラグメント。
上記IGF-IRがヒトIGF-IRである、請求項１に記載の抗体またはフラグメント。
ATCC（American Type Culture Collection）に受託番号PTA-4457として寄託されているハイブリドーマ細胞系統EM164。
細胞のアポトーシスを誘導する方法であって、上記細胞を請求項１〜２３のいずれか１項に記載の抗体または抗体フラグメントと接触させることを含む上記方法。
細胞のアポトーシスを誘導する方法であって、上記細胞を請求項４７に記載の抗体または抗体フラグメントと接触させることを含む上記方法。
細胞のアポトーシスを誘導する方法であって、上記細胞を請求項４８に記載の抗体または抗体フラグメントと接触させることを含む上記方法。
上記細胞が癌細胞である、請求項５１、５２または５３に記載の方法。
抗体または抗体フラグメントが、
a)IGF-IRを活性化することなくIGF-IRの細胞機能を阻害する特性；
b)血清の存在のもとで少なくとも80％だけ腫瘍細胞増殖を阻害する特性；
c)IGF-IRと0.3x10^-9M以下のK_Dで結合する特性；
d)IGF-IのIGF-IRとの結合を阻害する特性;
e)IGF-Iが媒介するIGF-IRによる細胞シグナル伝達を阻害する特性；
f)IGF-Iが誘導するIGF-IRリン酸化を阻害する特性；
g)IGF-IおよびIGF-IIが媒介する細胞増殖と生存を阻害する特性；
h)アフリカミドリザルIGF-IRと結合するが、マウス、チャイニーズハムスターまたはヤギIGF-IRと結合しない特性；および
i)IRS-1、AktおよびErk1/2の活性化を阻害する特性
からなる群から選択される少なくとも１つの特性を有することを特徴とする、請求項１に記載の抗体または抗体フラグメント。
請求項５５に記載の特性の全てを有する、請求項５５に記載の抗体または抗体フラグメント。
上記抗体または抗体フラグメントが
a)免疫グロブリン（Ig）G1-4、IgM、IgA1-2、IgDもしくはIgE分子であるかまたはそれらから誘導されるか；または
b)1本鎖抗体、1本鎖抗体フラグメント（scFv）、Fabフラグメント、F(ab’)₂フラグメント、または少なくとも３つのCDRを含有するフラグメントである、
請求項１に記載の抗体または抗体フラグメント。
請求項４３に記載のベクターを含む宿主細胞。
請求項４４に記載のベクターを含む宿主細胞。
抗IGF-IR抗体またはエピトープ結合抗体フラグメントを作る方法であって、請求項５８に記載の宿主細胞を上記抗IGF-IR抗体または抗体フラグメントを発現するのに好適な条件のもとで培養するステップ、および上記抗IGF-IR抗体または抗体フラグメントを回収するステップを含む上記方法。
抗IGF-IR抗体またはエピトープ結合抗体フラグメントを作る方法であって、請求項５９に記載の宿主細胞を上記抗IGF-IR抗体または抗体フラグメントを発現するのに好適な条件のもとで培養するステップ、および上記抗IGF-IR抗体または抗体フラグメントを回収するステップを含む上記方法。
配列番号１、54、３、４、５および６からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む抗体またはそのフラグメント。
配列番号１、54、３、４、５および６のアミノ酸配列を含む抗体またはそのフラグメント。
配列番号１、54、３、４、５および６からなる群より選択されるアミノ酸配列を有する少なくとも１つの相補性決定領域を含む抗体またはそのフラグメントの軽鎖または重鎖を含む抗体またはそのフラグメントであって、該重鎖は、配列番号１、54および３のアミノ酸配列を含む３つの相補性決定領域を含み、該軽鎖は、配列番号４、５および６のアミノ酸配列を含む３つの相補性決定領域を含む、上記抗体またはそのフラグメント。
少なくとも１つの重鎖可変域および少なくとも１つの軽鎖可変域を含む、IGF-IRに特異的に結合する抗体またはそのフラグメントであって、該重鎖可変域は、配列番号１、54および３のアミノ酸配列を含む３つの相補性決定領域を含み、該軽鎖可変域は、配列番号４、５および６のアミノ酸配列を含む３つの相補性決定領域を含む、上記抗体またはそのフラグメント。
重鎖可変域および軽鎖可変域を含む抗体またはそのフラグメントであって、該重鎖可変域は、配列番号１、54および３のアミノ酸配列を含む３つの重鎖相補性決定領域を含み、該軽鎖可変域は、配列番号８のアミノ酸配列を含む、上記抗体またはそのフラグメント。
少なくとも１つの重鎖可変域および少なくとも１つの軽鎖可変域を含む抗体またはそのフラグメントであって、該重鎖可変域は、配列番号１、54および３のアミノ酸配列を含む３つの相補性決定領域を含み、該軽鎖可変域は、配列番号４、５および６のアミノ酸配列を含む３つの相補性決定領域を含み、該重鎖可変域は配列番号７のアミノ酸配列を含む、上記抗体またはそのフラグメント。