JP2014515600A5 - - Google Patents

Description

実際、本発明の抗体および抗原結合性フラグメントは、例えば、ＰＣＴ／ＣＡ２００９／００１５８６に開示されている３Ｄ３抗体および３Ｇ１０抗体と比べると、ＫＡＡＧ１発現腫瘍細胞に結合する能力に優れると思われる。これらの抗体および抗原結合性フラグメントはまた内在化されるため、治療剤を腫瘍細胞に送達するうえで有用であり得る。本発明者らの結果に基づき、例えば結合および内在化に優れるなどの所望の特徴を有する抗体および抗原結合性フラグメントは通常、アミノ酸６１〜８４で区切られたＫＡＡＧ１のＣ末端領域と結合することがわかった。ただし、３Ａ４抗体および３Ｇ１０抗体は両方とも同じ領域に結合するにしても、腫瘍細胞の表面への結合は３Ｇ１０抗体よりも３Ａ４抗体の方が効率的であるように思われる。特に、フローサイトメトリー（細胞表面に対する抗体の直接的な結合を測定するアプローチ）での実験において、ＫＡＡＧ１抗原を発現する癌細胞は、３Ａ４の所要量が３Ｇ１０との比較で約１／１０である。加えて、表面プラスモン共鳴を使用した結合実験において、ＫＡＡＧ１に対する３Ａ４の親和性定数（Ｋ _Ｄ ）が１０ピコモル未満であるのに対し、抗体３Ｄ３および３Ｇ１０が呈する親和性定数（Ｋ _Ｄ ）は２００ピコモル超（１／２０未満の親和性）であることが発見された。よって、３Ａ４のこうした結合能の増加は、治療活性の向上に転換されると予想される。

Claims (44)

1. 配列番号５、配列番号６および配列番号７に示すアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ならびに/または配列番号８、配列番号９および配列番号１０に示すアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する腎臓関連抗原１（ＫＡＡＧ１）に特異的に結合する能力がある、抗体またはその抗原結合性フラグメント。
2. 前記重鎖可変領域が配列番号３５、配列番号３６または配列番号３７に示されている、および/または、前記軽鎖可変領域が配列番号３０、配列番号３１または配列番号３２に示されている、請求項１に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメント。
3. 前記重鎖可変領域が配列番号３８、配列番号３９、配列番号４０、配列番号４１または配列番号２に示されている、および/または、前記軽鎖可変領域が配列番号３３、配列番号３４または配列番号４に示されている、請求項１に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメント。
4. 前記抗体が、配列番号４５、配列番号４６、配列番号４７、配列番号４８または配列番号４９に示されている重鎖、および/または、前記軽鎖が配列番号４２、配列番号４３または配列番号４４に示されている軽鎖を含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメント。
5. a. 配列番号４１に示されている重鎖可変領域および配列番号３３に示されている軽鎖可変領域、
   b. 配列番号４９に示されている重鎖および配列番号４３に示されている軽鎖、
   c. 配列番号３８に示されている重鎖可変領域および配列番号３３に示されている軽鎖可変領域、
   d. 配列番号４６に示されている重鎖および配列番号４３に示されている軽鎖、
   e. 配列番号３９に示されている重鎖可変領域および配列番号３３に示されている軽鎖可変領域、
   f. 配列番号４７に示されている重鎖および配列番号４３に示されている軽鎖、
   g. 配列番号４０に示されている重鎖可変領域および配列番号３３に示されている軽鎖可変領域、
   h. 配列番号４８に示されている重鎖および配列番号４３に示されている軽鎖、
   i. 配列番号４１に示されている重鎖可変領域および配列番号３４に示されている軽鎖可変領域、
   j. 配列番号４９に示されている重鎖および配列番号４４に示されている軽鎖、
   k. 配列番号３８に示されている重鎖可変領域および配列番号３４に示されている軽鎖可変領域、
   l. 配列番号４６に示されている重鎖および配列番号４４に示されている軽鎖、
   m. 配列番号３９に示されている重鎖可変領域および配列番号３４に示されている軽鎖可変領域、
   n. 配列番号４７に示されている重鎖および配列番号４４に示されている軽鎖、
   o. 配列番号４０に示されている重鎖可変領域および配列番号３４に示されている軽鎖可変領域、
   p. 配列番号４８に示されている重鎖および配列番号４４に示されている軽鎖、
   q. 配列番号２に示されている重鎖可変領域および配列番号４に示されている軽鎖可変領域、又は
   r. 配列番号４５に示されている重鎖および配列番号４２に示されている軽鎖、
   を含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメント。
6. 腎臓関連抗原１（ＫＡＡＧ１）に特異的に結合し、親和性定数（Ｋ_Ｄ）が１０ピコモル未満である、抗体またはその抗原結合性フラグメント。
7. 請求項１〜５のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメントと競合する、請求項６に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメント。
8. 前記抗体がヒトＩｇＧ１抗体の定常領域を含む、請求項１〜３、６および７のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメント。
9. 請求項１〜５のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメントと競合し、１ｎＭ未満の親和性定数（Ｋ_Ｄ）を有し、３Ｇ１０抗体またはその抗原結合性フラグメントではない、抗体またはその抗原結合性フラグメント。
10. 配列番号４に対して少なくとも７０％同一である軽鎖可変領域、および/または、配列番号２に対して少なくとも７０％同一である重鎖可変領域を有する、請求項１に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメント。
11. 前記抗体がモノクローナル抗体、キメラ抗体、ハイブリッド抗体、ヒト化抗体、もしくはヒト抗体またはその抗原結合性フラグメントである、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメント。
12. 治療部分または検出可能部分に結合している、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメント。
13. 細胞傷害性剤に結合している、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメント。
14. 前記細胞傷害性剤がアウリスタチンを含む、請求項１３に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメント。
15. 前記アウリスタチンがモノメチルアウリスタチンＥまたはモノメチルアウリスタチンＦを含む、請求項１４に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメント。
16. 請求項１〜１１のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメントの軽鎖可変領域および／または重鎖可変領域をコードする核酸。
17. 請求項１６に記載の核酸を含むベクター。
18. 発現ベクターである、請求項１７に記載のベクター。
19. 請求項１６に記載の核酸、請求項１７に記載のベクターまたは請求項１〜１５のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメントを含む、単離された細胞。
20. 軽鎖可変領域をコードする核酸と重鎖可変領域をコードする核酸とを含む、請求項１９に記載の単離された細胞。
21. 抗体またはその抗原結合性フラグメントを発現させる、アセンブルする、および／または分泌する能力のある、請求項２０に記載の単離された細胞。
22. 請求項１〜１５のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメントと薬学的に許容可能な担体とを含む、医薬組成物。
23. 請求項１〜１５のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメントと、担体とを含む、組成物。
24. ＫＡＡＧ１もしくはＫＡＡＧ１変異体を発現する単離された細胞、またはＫＡＡＧ１もしくはＫＡＡＧ１変異体を含むか含む疑いのある試料を、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメントに接触させる工程と、結合を測定する工程と、を含む、ＫＡＡＧ１またはＫＡＡＧ１変異体を検出するための方法。
25. 前記試料が、癌または転移性癌を有するか有する疑いのある被験対象に由来する、請求項２４に記載の方法。
26. 前記試料が哺乳動物から採取された血清試料、血漿試料、血液試料または組織試料であるか、細胞培養物または上澄みである、請求項２４または２５に記載の方法。
27. 前記ＫＡＡＧ１または前記ＫＡＡＧ１変異体に結合された抗体の量を定量する工程を含む、請求項２４〜２６のいずれか一項に記載の方法。
28. 請求項１〜１５のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合性フラグメントを含むキット。
29. ＫＡＡＧ１またはＫＡＡＧ１変異体を発現する細胞を含む癌の検出、診断、または治療のための医薬の製造における、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の抗体もしくはその抗原結合性フラグメント、請求項２２に記載の医薬組成物または請求項２３に記載の組成物の使用。
30. ＫＡＡＧ１またはＫＡＡＧ１変異体を発現する細胞を含む癌の治療のための、請求項２２に記載の医薬組成物または請求項２３に記載の組成物。
31. ＫＡＡＧ１またはＫＡＡＧ１変異体を発現する細胞を含む腫瘍の検出または癌の診断に使用するための、請求項２２に記載の医薬組成物または請求項２３に記載の組成物。
32. 前記癌が卵巣癌、皮膚癌、腎臓癌、結腸直腸癌、肉腫、白血病、脳癌、甲状腺癌、乳癌、前立腺癌、食道癌、膀胱癌、肺癌および頭頸部癌からなる群から選択される、請求項３０または３１に記載の医薬組成物または組成物。
33. 前記癌が卵巣癌である、請求項３２に記載の医薬組成物または組成物。
34. 前記卵巣癌が再発性卵巣癌である、請求項３３に記載の医薬組成物または組成物。
35. 前記癌が転移性である、請求項３０〜３４のいずれか一項に記載の医薬組成物または組成物。
36. 請求項２２に記載の医薬組成物または請求項２３に記載の組成物を必要としている被検対象に投与する工程を含む、癌の治療方法において使用するための、請求項２２に記載の医薬組成物または請求項２３に記載の組成物。
37. 前記必要としている被検対象が卵巣癌、皮膚癌、腎臓癌、結腸直腸癌、肉腫、白血病、脳癌、甲状腺癌、乳癌、前立腺癌、食道癌、膀胱癌、肺癌および頭頸部癌からなる群から選択される癌を有するか有する疑いのある、請求項３６に記載の医薬組成物または組成物。
38. 前記癌が卵巣癌、皮膚癌、腎臓癌、結腸直腸癌、肉腫、白血病、脳癌、甲状腺癌、乳癌、前立腺癌、食道癌、膀胱癌、肺癌および頭頸部癌からなる群から選択される、請求項２９に記載の使用。
39. 前記癌が卵巣癌である、請求項３８に記載の使用。
40. 前記卵巣癌が再発性卵巣癌である、請求項３９に記載の使用。
41. 前記癌が転移性である、請求項２９および３８〜４０のいずれか一項に記載の使用。
42. ＫＡＡＧ１またはＫＡＡＧ１変異体を発現する細胞を含む癌の治療用の抗体薬物複合体として使用するのに適した、抗体またはその抗原結合性フラグメントを採取する方法であって、
    ａ．ＫＡＡＧ１またはＫＡＡＧ１変異体のアミノ酸６１とアミノ酸８４との間に含まれるエピトープに特異的に結合する抗体またはその抗原結合性フラグメントを提供する工程と、
    ｂ．非ヒト動物またはＫＡＡＧ１またはＫＡＡＧ１変異体を発現する単離された細胞内の前記抗体もしくはその抗原結合性フラグメントの内在化を試験する工程と、
    ｃ．内在化される抗体または抗原結合性フラグメントを単離する工程と、を含む方法。
43. 請求項１９〜２１のいずれか一項に記載の単離された細胞を培養し、抗体またはその抗原結合性フラグメントを生産する工程を含む、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の抗原またはその抗原結合性フラグメントを作成する方法。
44. 前記抗体またはその抗原結合性フラグメントを、治療部分または検出部分と結合させる工程を含む、請求項４３に記載の方法。