JP2005185286A - 糸球体腎炎および他の炎症性疾患の治療のための組成物および方法 - Google Patents

糸球体腎炎および他の炎症性疾患の治療のための組成物および方法 Download PDF

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Abstract

【課題】糸球体炎症、これに付随する腎臓機能不全を軽減するための新規な手段を提供する。
【解決手段】特定の配列を有したアミノ酸１〜２４８に相当するアミノ酸配列を含むｓｃＦｖポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子、または、特定の配列を有したアミノ酸３〜アミノ酸１１０に相当する可変性軽鎖領域アミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子、または、特定の配列を有したアミノ酸１〜アミノ酸１２２に相当する可変性重鎖領域アミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子、または、（ａ）前記の特定の配列を有したアミノ酸３〜アミノ酸１１０に相当する可変牲軽鎖領域アミノ酸配列を含む第一のポリペプチド領域；および（ｂ）前記の特定の配列を有したアミノ酸１〜アミノ酸１２２に相当する可変性重鎖領域アミノ酸配列を含む第二のポリペプチド領域を含むタンパク。
【選択図】なし

Description
１．治療を必要とする患者の糸球体腎炎の治療方法であって、補体成分Ｃ５と結合する抗体を、患者の血液中に存在する補体の細胞溶解能を実質的に低下させるのに有効な量で、患者の血流中に導入することを特徴とする方法。
２．抗体が、補体成分Ｃ５のＣ５ａおよびＣ５ｂへの転換を減少させる、項目１に記載の方法。
３．抗体が、Ｃ５ｂと結合する、項目１記載の方法。
４．抗体が、補体成分Ｃ３ｂの形成を実質的に阻害しない、項目１記載の方法。
５．抗体を、０．１ｇ／ｋｇを超えない用量で患者の血流中に導入する、項目１記載の方法。
６．包装材料および該包装材料に包含される医薬剤を含む製造物であって、
（ａ）該医薬剤が、補体成分Ｃ５に対する抗体を含み、該抗体が、患者の血液中に存在する補体の細胞溶解能を実質的に低下させるのに有効であること、および
（ｂ）該包装材料が、該医薬剤が腎疾患の治療における使用のためのものであることを示すラベルを含むこと、
を特徴とする製造物。
７．ラベルが、該医薬剤が腎炎の治療における使用のためのものであることを示す、項目６記載の製造物。
８．ラベルが、該医薬剤が糸球体腎炎の治療における使用のためのものであることを示す、項目７記載の製造物。
９．医薬剤が、０．１ｇ／ｋｇを超えない投薬レベルで用いられるべきである、項目６記載の製造物。
１０．ヒト補体成分Ｃ５に対する特異的結合を示し、その特異的結合がヒト補体成分Ｃ５のα鎖を標的とするものである、少なくとも１つの抗体一抗原結合部位を含む抗体であって、ヒト体液中の補体活性化を阻害し、ヒト補体活性化生成物である遊離Ｃ５ａと特異的に結合しない抗体。
１１．ヒト体液中の補体活性化の阻害が、体液中の補体溶血活性の実質的な遮断の増加およびＣ５ａ生成の遮断の実質的な増加として測定可能であり、上記Ｃ５ａ生成の遮断の増加が上記補体溶血活性の遮断の増加と実質的に等しい、
項目１０記載の抗体。
１２．ヒトＣ５との結合に際し、抗体が、ヒト補体成分Ｃ３に結合するＣ５の能力を実質的に阻害する、項目１０記載の抗体。
１３．ヒトＣ５との結合に際し、抗体が、ヒト補体成分Ｃ４に結合するＣ５の能力を実質的に阻害する、項目１０記載の抗体。
１４．抗体が、５Ｇ４６ｋフラグメントと特異的に結合する、項目１０記載の抗体。
１５．抗体が、５Ｇ２７ｋフラグメントと特異的に結合する、項目１０記載の抗体。
１６．抗体が、５Ｇ３２５ａａペプチドと特異的に結合する、項目１０記載の抗体。
１７．抗体が、５Ｇ２００ａａペプチドと特異的に結合する、講求項１０記載の抗体。
１８．抗体が、ＫＳＳＫＣペプチドと特異的に結合する、項目１０記載の抗体。
１９．抗体を、体液中の１モルのヒトＣ５に対し１０モルの抗体の抗体一抗原結合部位と等しい、またはそれ以下の比を生じる濃度で体液に添加する場合、ヒト体液中の補体活性化の阻害が、体液中のＣ５ａ生成の実質的に完全な遮断および体液中の補体溶血活性の実質的に完全な遮断として測定可能である、項目１０記載の抗体。
２０．濃度が、体液中の１モルのヒトＣ５に対し３モルの抗体の抗体−抗原結合部位と等しい、またはそれ以下の比を生じるものである、項目１９記載の抗体。
２１．ＡＴＣＣ識別番号ＨＢ−１１６２５を有するハイブリドーマ５Ｇ１．１。
２２．項目２１記載のハイブリドーマにより産生される抗体。
２３．ヒトＣ５のα鎖に対する結合に関して項目２２記載の抗体と競合しうる抗体。
２４．配列番号７のアミノ酸１〜アミノ酸２４８に相当するアミノ酸配列を含むｓｃＦｖポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子。
２５．配列番号９のアミノ酸３〜アミノ酸１１０に相当する可変性軽鎖領域アミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子。
２６．配列番号１０のアミノ酸１〜アミノ酸１２２に相当する可変性重鎖領域アミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子。
２７．（ａ）配列番号９のアミノ酸３〜アミノ酸１１０に相当する可変牲軽鎖領域アミノ酸配列を含む第一のポリペプチド領域；および
（ｂ）配列番号１０のアミノ酸１〜アミノ酸１２２に相当する可変性重鎖領域アミノ酸配列を含む第二のポリペプチド領域
を含むことを特徴とする単離されたタンパク。
２８．ポリペプチドが抗体である、項目２４、項目２５または項目２６記載の核酸分子によりコードされるアミノ酸配列を含む、単離されたポリペプチド。
２９．そのベクターを含む宿主が第一の核酸分子によりコードされるポリペプチドを発現するように、第二の核酸分子に共有結合により作動可能に連結されている第一の核酸分子を含む核酸ベクターであって、第一の核酸分子が、項目２４、項目２５または項目２６記載の核酸分子であるベクター。
３０．項目２９記載の核酸ベクターを含む組換え宿主細胞。
３１．ベクターの第一の核酸分子によりコードされるポリペプチドが宿主細胞により発現されるように項目３０記載の組換え宿主細胞を生育させる工程、および発現されたポリペプチドを単離する工程を特徴とする、単離された抗Ｃ５抗体ポリペプチドを生産する方法であって、発現されるポリペプチドが抗Ｃ５抗体である方法。
３２．項目３１に記載の単離された抗Ｃ５抗体。
３３．配列番号８のアミノ酸１〜アミノ酸２４８に相当するアミノ酸配列を含むｓｃＦｖをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子。
３４．配列番号１７のアミノ酸１〜アミノ酸２４８に相当するアミノ酸配列を含むｓｃＦｖをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子。
３５．配列番号１５のアミノ酸１〜アミノ酸１０８に相当する可変性軽鎖領域アミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子。
３６．配列番号１４のアミノ酸３〜アミノ酸１１０に相当する可変性軽鎖領域アミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子。
３７．配列番号１６のアミノ酸１〜アミノ酸１２２に相当する可変性重鎖領域アミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子。
３８．配列番号１２のアミノ酸１〜アミノ酸１２２に相当する可変性重鎖領域アミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子。
３９．配列番号１１のアミノ酸１〜アミノ酸１２２に相当する可変性重鎖領域アミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子。
４０．（ａ）配列番号１５のアミノ酸１〜アミノ酸１０８に相当する可変性軽鎖領域アミノ酸配列を含む第一のポリペプチド領域；および
（ｂ）配列番号１６のアミノ酸１〜アミノ酸１２２に相当する可変性重鎖領域アミノ酸配列を含む第二のポリペプチド領域を含むことを特徴とする単離されたタンパク。
４１．（ａ）配列番号１５のアミノ酸１〜アミノ酸１０８に相当する可変性軽鎖領域アミノ酸配列を含む第一のポリペプチド領域１および
（ｂ）配列番号１２のアミノ酸１〜アミノ酸１２２に相当する可変性重鎖領域アミノ酸配列を含む第二のポリペプチド領域
を含むことを特徴とする単離されたタンパク。
４２．（ａ）配列番号１５のアミノ酸１〜アミノ酸１０８に相当する可変性軽鎖領域アミノ酸配列を含む第一のポリペプチド領域；および
（ｂ）配列番号１１のアミノ酸１〜アミノ酸１２２に相当する可変性重鎖領域アミノ酸配列を含む第二のポリペプチド領域
を含むことを特徴とする単離されたタンパク。
４３．（ａ）配列番号１４のアミノ酸３〜アミノ酸１１０に相当する可変性軽鎖領域アミノ酸配列を含む第一のポリペプチド領域；および
（ｂ）配列番号１６のアミノ酸１〜アミノ酸１２２に相当する可変性重鎖領域アミノ酸配列を含む第二のポリペプチド領域を含むことを特徴とする単離されたタンパク。
４４．（ａ）配列番号１４のアミノ酸３〜アミノ酸１１０に相当する可変性軽鎖領域アミノ酸配列を含む第一のポリペプチド領域；および
（ｂ）配列番号１２のアミノ酸１〜アミノ酸１２２に相当する可変性重鎖領域アミノ酸配列を含む第二のポリペプチド領域
を含むことを特徴とする単離されたタンパク。
４５．（ａ）配列番号１４のアミノ酸３〜アミノ酸１１０に相当する可変性軽鎖領域
アミノ酸配列を含む第一のポリペプチド領域；および
（ｂ）配列番号１１のアミノ酸１〜アミノ酸１２２に相当する可変性重鎖領域アミノ酸配列を含む第二のポリペプチド領域
を含むことを特徴とする単離されたタンパク。
４６．単離されたタンパクが抗Ｃ５抗体である、項目３３、項目３４、項目３５、項目３６、項目３７、項目３８または項目３９記載の核酸分子
によりコードされるアミノ酸配列を含む単離されたタンパク。
４７．そのベクターを含む宿主が第一の核酸分子によりコードされるポリペプチドを発現するように、第二の核酸分子に共有結合により作動可能に連結されている第一の核酸分子を含む核酸ベクターであって、第一の核酸分子が、項目３３、項目３４、項目３５、項目３６、項目３７、項目３８または項目３９記載の核酸分子であるベクター。
４８．項目４７記載の核酸ベクターを含む組換え宿主細胞。
４９．核酸分子によりコードされるタンパクが宿主細胞により発現されるように項目４８記載の組換え宿主細胞を生育させる工程、および発現されたタンパクを単離する工程を特徴とする、単離されたＣ５抗体タンパクを生産する方法であって、発現されるタンパクが抗Ｃ５抗体である方法。
５０．項目４７記載の単離された抗Ｃ５抗体。
５１．（ａ）配列番号７のアミノ酸９３〜アミノ酸９８に相当するアミノ酸配列を含む可変牲軽鎖領域ＣＤＲ３をコードするヌクレオチド配列；
（ｂ）（ａ）に相補的な配列；または
（ｃ）（ａ）および（ｂ）の両方
を含むことを特徴とする単離された核酸分子。
５２．（ａ）配列番号８のアミノ酸９１〜アミノ酸９９に相当するアミノ酸配列を含む可変性軽鎖領域ＣＤＲ３をコードするヌクレオチド配列；
（ｂ）（ａ）に相補的な配列；または
（ｃ）（ａ）および（ｂ）の両方
を含むことを特徴とする単離された核酸分子。
５３．（ａ）配列番号７のアミノ酸１５６〜アミノ酸１５９に相当するアミノ酸配列を含む可変性重鎖領域ＣＤＲ１をコードするヌクレオチド配列；
（ｂ）（ａ）に相補的な配列；または
（ｃ）（ａ）および（ｂ〉の両方
を含むことを特徴とする単離された核酸分子。
５４．（ａ）配列番号８のアミノ酸１５２〜アミノ酸１６１に相当するアミノ酸配列を含む可変性重鎖領域ＣＤＲ１をコードするヌクレオチド配列；
（ｂ）（ａ）に相補的な配列；または
（ｃ）（ａ）および（ｂ）の両方
を含むことを特徴とする単離された核酸分子。
５５．（ａ）配列番号７のアミノ酸１７９〜アミノ酸１８２に相当するアミノ酸配列を含む可変性重鎖領域ＣＤＲ２をコードするヌクレオチド配列；
（ｂ）（ａ）に相補的な配列；または
（ｃ）（ａ）および（ｂ）の両方
を含むことを特徴とする単離された核酸分子。
５６．（ａ）配列番号８のアミノ酸１７６〜アミノ酸１８６に相当するアミノ酸配列
を含む可変性重鎖領域ＣＤＲ２をコードするヌクレオチド配列；
（ｂ）（ａ）に相補的な配列；または
（ｃ）（ａ）および（ｂ）の両方
を含むことを特徴とする単離された核酸分子。
５７．（ａ）配列番号７のアミノ酸２２６〜アミノ酸２３６に相当するアミノ酸配列を含む可変性重鎖領域ＣＤＲ３をコードするヌクレオチド配列；
（ｂ）（ａ）に相補的な配列；または
（ｃ）（ａ）および（ｂ）の両方
を含むことを特徴とする単離された核酸分子。
５８．（ａ）配列番号８のアミノ酸２２５〜アミノ酸２３７に相当するアミノ酸配列を含む可変性重鎖領域ＣＤＲ３をコードするヌクレオチド配列；
（ｂ〉（ａ）に相補的な配列；または
（ｃ）（ａ）および（ｂ）の両方
を含むことを特徴とする単離された核酸分子。
５９．（ａ）配列番号８のアミノ酸９１〜アミノ酸９９に相当するアミノ酸配列を含む可変性軽鎖領域ＣＤＲ３をコードするヌクレオチド配列；
（ｂ）配列番号８のアミノ酸１５２〜アミノ酸１６１に相当するアミノ酸配列を
含む可変性重鎖領域ＣＤＲ１をコードするヌクレオチド配列；
（ｃ）配列番号８のアミノ酸１７６〜アミノ酸１８６に相当するアミノ酸配列を
含む可変性重鎖領域ＣＤＲ２をコードするヌクレオチド配列；および
（ｄ）配列番号８のアミノ酸２２５〜アミノ酸２３７に相当するアミノ酸配列を含む可変性重鎖領域ＣＤＲ３をコードするヌクレオチド配列を含むことを特徴とする単離された核酸分子。
６０．（ａ）配列番号８のアミノ酸９１〜アミノ酸９９に相当するアミノ酸配列を含む可変性軽鎖領域ＣＤＲ３をコードするヌクレオチド配列；
（ｂ）配列番号８のアミノ酸１５２〜アミノ酸１６１に相当するアミノ酸配列を含む可変性重鎖領域ＣＤＲ１をコードするヌクレオチド配列；
（ｃ）配列番号８のアミノ酸１７６〜アミノ酸１９２に相当するアミノ酸配列を含む薄変性重鎖領域ＣＤＲ２をコードするヌクレオチド配列；および
（ｄ）配列番号８のアミノ酸２２５〜アミノ酸２３７に相当するアミノ酸配列を
含む可変性重鎖領域ＣＤＲ３をコードするヌクレオチド配列
を含むことを特徴とする単離された核酸分子。
６１，（ａ）配列番号８のアミノ酸９１〜アミノ酸９９に相当するアミノ酸配列を含む可変性軽鎖領域ＣＤＲ３をコードするヌクレオチド配列；
（ｂ）配列番号８のアミノ酸１５２〜アミノ酸１６１に相当するアミノ酸配列を
含む可変性重鎖領域ＣＤＲ１をコードするヌクレオチド配列；
（ｃ）配列番号７のアミノ酸１７９〜アミノ酸１８２に相当するアミノ酸配列を
含む可変性重鎖領域ＣＤＲ２をコードするヌクレオチド配列；および
（ｄ）配列番号８のアミノ酸２２５〜アミノ酸２３７に相当するアミノ酸配列を
含む可変性重鎖領域ＣＤＲ３をコードするヌクレオチド配列
を含むことを特徴とする単離された核酸分子。
６２．項目５１、項目５２、項目５３、項目５４、項目５５、項目５６、項目５７、項目５８、項目５９、項目６０または項目８７記載の核酸分子によりコードされるアミノ酸配列を含む単離されたタンパク。
６３．タンパクが抗Ｃ５抗体である、項目６２記載の単離されたタンパク。
６４．第一の核酸分子を含む核酸ベクターであって、該第一の核酸分子が、項目５１、項目５２、項目５３、項目５４、項目５５、項目５６、項目５７、項目５８または項目８７記載の核酸分子に相当し、そのベクターを含む宿主が第一の核酸分子によりコードされるポリペプチドを発現するように第二の核酸分子に共有結合により作動可能に連結されているベクター。
６５．項目６４記載の核酸ベクターを含む組換え宿主細胞。
６６．核酸分子によりコードされるタンパクが宿主細胞により発現されるように項目６５記載の組換え宿主細胞を生育させる工程、および発現されたポリペプチドを単離する工程を特徴とする、抗Ｃ５抗体を生産する方法であって、発現されたタンパクが抗Ｃ５抗体である方法。
６７．項目６６記載の抗Ｃ５抗体。
６８．単離されたヒト補体成分Ｃ５の５Ｇ４６ｋフラグメント。
６９．単離されたヒト補体成分Ｃ５の５Ｇ２７ｋフラグメント。
７０．単離された５Ｇ３２５ａａペプチド。
７１．単離された５Ｇ２００ａａペプチド。
７２．配列番号１のアミノ酸８〜アミノ酸１２に相当するアミノ酸配列を含む単離されたオリゴペプチド。
７３．単離されたヒトＣ５のα鎖で動物を繰り返し免疫することを特徴とする、抗
Ｃ５抗体を産生するよう動物を誘導する方法。
７４．項目６８記載の単離された５Ｇ４６ｋフラグメントで動物を免疫することを特徴とする、抗Ｃ５抗体を産生するよう動物を誘導する方法。
７５．項目６９記載の単離された５Ｇ２７ｋフラグメントで動物を免疫することを特徴とする抗Ｃ５抗体を産生するよう動物を誘導する方法。
７６．項目７０記載の単離された５Ｇ３２５ａａペプチドで動物を免疫すること
を特徴とする、抗Ｃ５抗体を産生するよう動物を誘導する方法。
７７．項目７１記載の単離された５Ｇ２００ａａペプチドで動物を免疫することを特徴とする、抗Ｃ５抗体を産生するよう動物を誘導する方法。
７８．項目７２記載の単離されたオリゴペプチドで動物を免疫することを特徴とする、抗Ｃ５抗体を産生するよう動物を誘導する方法。
７９．単離されたヒトＣ５のα鎖で候補抗体をスクリーニングすることを特徴とする、抗Ｃ５抗体の同定方法。
８０．項目６８記載の単離された５Ｇ４６ｋフラグメントで候補抗体をスクリーニングすることを特徴とする、抗Ｃ５抗体の同定方法。
８１．項目６９記載の単離された５Ｇ２７ｋで候補抗体をスクリーニングすることを特徴とする、抗Ｃ５抗体の同定方法。
８２．項目７０記載の単離された５Ｇ３２５ａａペプチドで候補抗体をスクリーニングすることを特徴とする、抗Ｃ５抗体の同定方法。
８３．項目７１記載の単離された５Ｇ２００ａａペプチドで候補抗体をスクリーニングすることを特徴とする、抗Ｃ５抗体の同定方法。
８４．項目７２記載の単離されたオリゴペプチドで候補抗体をスクリー二ングすることを特徴とする、抗Ｃ５抗体の同定方法。
８５．補体阻害を必要とする患者の治療方法であって、項目１０、項目２２、
項目２３、項目２８、項目３２、項目４６、項目５０、項目６３または項目６７記載の抗体を、患者の体液中の溶血活性を実質的に低下させるのに有効な量で、患者に投与することを特徴とする方法。
８６．ヒト定常ドメインを含む組換え抗体である、項目１０記載の抗体。
８７．（ａ）配列番号８のアミノ酸１７６〜アミノ酸１９２に相当するアミノ酸配列
を含む可変性重鎖領域ＣＤＲ２をコードするヌクレオチド配列；
（ｂ）（ａ）に相補的な配列；または
（ｃ）（ａ）および（ｂ）の両方
を含むことを特徴とする単離された核酸分子。
図１Ａ、１Ｂおよび１Ｃ−−マウス腎臓のＰＡＳ染色切片の写真である。図１Ａ−−非誘導・非処理マウス。図１Ｂ−−ＧＮ誘導、ＰＢＳ（対照）処理マウス。図１Ｃ−−ＧＮ誘導、抗Ｃ５処理マウス。各々の拡大率は同じであり、およそ４００倍である。 図２Ａ、２Ｂおよび２Ｃ−−マウス賢臓の免疫蛍光染色切片の写真である。図２Ａ−−非誘遵、非処理マウス。図２Ｂ−−ＧＮ誘導、ＰＢＳ（対照）処理マウス。図２Ｃ−−ＧＮ誘導、抗Ｃ５処理マウス。各々の拡大率は同じであり、およそ２００倍である。 図３−−ＰＢＳ中の抗Ｃ５抗体（「抗Ｃ５」）またはＰＢＳ単独（「ＰＢＳ対照」）のいずれかで処理したＧＮ誘導動物からの血清の溶血（細胞溶解）検定の結果である。正常血清を用いて行った検定の結果も示す。 図４−−可溶性Ｃ５ｂ〜９（「ｓＣ５ｂ〜９」）検定の結果である。「ＮＤ」は測定しなかったことを示す。 図５Ａ、５Ｂおよび５Ｃ−−マウスＣ３について染色した腎臓切片の免疫蛍光写真である。図５Ａ−−ＧＮ誘導、非処理マウス。図５Ｂ−−ＧＮ誘導、ＰＢＳ（対照）処理マウス。図５Ｃ−−ＧＮ誘導、抗Ｃ５処理マウス。各々の拡大率は同じであり、およそ４００倍である。 図５Ａ、５Ｂおよび５Ｃ−−マウスＣ３について染色した腎臓切片の免疫蛍光写真である。図５Ａ−−ＧＮ誘導、非処理マウス。図５Ｂ−−ＧＮ誘導、ＰＢＳ（対照）処理マウス。図５Ｃ−−ＧＮ誘導、抗Ｃ５処理マウス。各々の拡大率は同じであり、およそ４００倍である。 図５Ａ、５Ｂおよび５Ｃ−−マウスＣ３について染色した腎臓切片の免疫蛍光写真である。図５Ａ−−ＧＮ誘導、非処理マウス。図５Ｂ−−ＧＮ誘導、ＰＢＳ（対照）処理マウス。図５Ｃ−−ＧＮ誘導、抗Ｃ５処理マウス。各々の拡大率は同じであり、およそ４００倍である。 図６−−循環ヒト血液の試料のＣ３ａ検定の結果である。「ＮＤ」は測定しなかったことを示す。 図７Ａおよび７Ｂ−−抗Ｃ５抗体での処理後のマウス（図７Ａ）またはヒト（図７Ｂ）髄液の細胞溶解能の減少のファーマコキネティック分析である。図２および図５の免疫蛍光染色は、糸球体毛細管ネットワーク（タフト）に閉じこめられており、したがって、図１Ｂに見られる糸球体の肥大は図２Ｂおよび５Ｂにおいては見えない。 図８−−Ｃ５に対するネイテでブ５Ｇ１．１結合のスキャッチャード解析である。 図９−−Ｃ５に対するネイティブＮ１９／８結合のスキャッチャード解析である。 図１０−−ネイティブ５Ｇ１．１の存在下での循環ヒト血液試料中におけるＣ３ａの生成を示す。 図１１−−ネイティブ５Ｇ１．１の存在下での循環ヒト血液試料中におけるｓＣ５ｂ〜９の生成を示す。 図１２−−ネイティブ５Ｇ１．１の存在下における循環ヒト血液試料の血清溶血活性を示す。 図１３−−ｍ５Ｇ１．１ｓｃＦｖの存在下における血液溶血活性を示す。 図１４−−ｍ５Ｇ１．１ｓｃＦｖの存在下におけるＣ５ａの生成を示す。 図１５−−ｍ５Ｇ１．１ｓｃＦｖの存在下における循環ヒト血液試料中のＣ３ａの生成を示す。 図１６−−５Ｇ１．１ｓｃＦｖの存在下における循環ヒト血液試料の血清溶血活性を示す。 図１７−−ｎ５Ｇ１．１ｓｃＦｖの存在下における循環ヒト血液試料のｓＣ５ｂ〜９の生成を示す。 図１８−−抗体５Ｇ１．１の軽鎖可変領域を示す。可変領域のＰＣＲ増幅に用いた５’オリゴヌクレオチドプライマーからの配列は小文字で示す。アミノ酸はＫａｂａｔら（前出）に従って番号付けされている。四角で囲ったアミノ酸は、成熟５Ｇ１．１軽鎖または５Ｇ１１．１のエンドプロテイナーゼＬｙｓ Ｃペプチドから得たペプチド配列に相当する。配列可変性定義および構造可変性定義による相補性決定領域（ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｒｉｔｙ ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ ｒｅｇｉｏｎ；ＣＤＲ）残基は、各々下線または上線で示す。 図１９−−抗体５Ｇ１，１の重鎖可変領域を示す。可変領域のＲＣＲ増幅に用いた５７オリゴヌクレオチドプライマーから由来する配列を小文字で示す。アミノ酸は前出のＫａｂａｔらのスキームを用いて番号を付けてあり、＋１はプロセシングされた成熟可変領域の最初のアミノ酸を表す。四角で囲んだアミノ酸は、ピログルタメートアミノペプチダーゼ処理語に、５Ｇ１．１重鎖から得られたペプチド配列に相当する。配列可変性定義または構造可変性定義による相補性決定領域（ＣＤＲ）残基は、各々下線または上線で示す。
（配列表）

Claims (45)

  1. 配列番号７のアミノ酸１〜アミノ酸２４８に相当するアミノ酸配列を含むｓｃＦｖポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子。
  2. 配列番号９のアミノ酸３〜アミノ酸１１０に相当する可変性軽鎖領域アミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子。
  3. 配列番号１０のアミノ酸１〜アミノ酸１２２に相当する可変性重鎖領域アミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子。
  4. （ａ）配列番号９のアミノ酸３〜アミノ酸１１０に相当する可変牲軽鎖領域アミノ酸配列を含む第一のポリペプチド領域；および
    （ｂ）配列番号１０のアミノ酸１〜アミノ酸１２２に相当する可変性重鎖領域アミノ酸配列を含む第二のポリペプチド領域
    を含むことを特徴とする単離されたタンパク。
  5. ポリペプチドが抗体である、請求項１、請求項２または請求項３記載の核酸分子によりコードされるアミノ酸配列を含む、単離されたポリペプチド。
  6. そのベクターを含む宿主が第一の核酸分子によりコードされるポリペプチドを発現するように、第二の核酸分子に共有結合により作動可能に連結されている第一の核酸分子を含む核酸ベクターであって、第一の核酸分子が、請求項１、請求項２または請求項３記載の核酸分子であるベクター。
  7. 請求項６記載の核酸ベクターを含む組換え宿主細胞。
  8. ベクターの第一の核酸分子によりコードされるポリペプチドが宿主細胞により発現されるように請求項７記載の組換え宿主細胞を生育させる工程、および発現されたポリペプチドを単離する工程を特徴とする、単離されたＣ５抗体ポリペプチドを生産する方法であって、発現されるポリペプチドが抗Ｃ５抗体である方法。
  9. 請求項８に記載の方法によって生産される、単離された抗Ｃ５抗体。
  10. 配列番号８のアミノ酸１〜アミノ酸２４８に相当するアミノ酸配列を含むｓｃＦｖをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子。
  11. 配列番号１７のアミノ酸１〜アミノ酸２４８に相当するアミノ酸配列を含むｓｃＦｖをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子。
  12. 配列番号１５のアミノ酸１〜アミノ酸１０８に相当する可変性軽鎖領域アミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子。
  13. 配列番号１４のアミノ酸３〜アミノ酸１１０に相当する可変性軽鎖領域アミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子。
  14. 配列番号１６のアミノ酸１〜アミノ酸１２２に相当する可変性重鎖領域アミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子。
  15. 配列番号１２のアミノ酸１〜アミノ酸１２２に相当する可変性重鎖領域アミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子。
  16. 配列番号１１のアミノ酸１〜アミノ酸１２２に相当する可変性重鎖領域アミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子。
  17. （ａ）配列番号１５のアミノ酸１〜アミノ酸１０８に相当する可変性軽鎖領域アミノ酸配列を含む第一のポリペプチド領域；および
    （ｂ）配列番号１６のアミノ酸１〜アミノ酸１２２に相当する可変性重鎖領域アミノ酸配列を含む第二のポリペプチド領域を含むことを特徴とする単離されたタンパク。
  18. （ａ）配列番号１５のアミノ酸１〜アミノ酸１０８に相当する可変性軽鎖領域アミノ酸配列を含む第一のポリペプチド領域１および
    （ｂ）配列番号１２のアミノ酸１〜アミノ酸１２２に相当する可変性重鎖領域アミノ酸配列を含む第二のポリペプチド領域
    を含むことを特徴とする単離されたタンパク。
  19. （ａ）配列番号１５のアミノ酸１〜アミノ酸１０８に相当する可変性軽鎖領域アミノ酸配列を含む第一のポリペプチド領域；および
    （ｂ）配列番号１１のアミノ酸１〜アミノ酸１２２に相当する可変性重鎖領域アミノ酸配列を含む第二のポリペプチド領域
    を含むことを特徴とする単離されたタンパク。
  20. （ａ）配列番号１４のアミノ酸３〜アミノ酸１１０に相当する可変性軽鎖領域アミノ酸配列を含む第一のポリペプチド領域；および
    （ｂ）配列番号１６のアミノ酸１〜アミノ酸１２２に相当する可変性重鎖領域アミノ酸配列を含む第二のポリペプチド領域を含むことを特徴とする単離されたタンパク。
  21. （ａ）配列番号１４のアミノ酸３〜アミノ酸１１０に相当する可変性軽鎖領域アミノ酸配列を含む第一のポリペプチド領域；および
    （ｂ）配列番号１２のアミノ酸１〜アミノ酸１２２に相当する可変性重鎖領域アミノ酸配列を含む第二のポリペプチド領域
    を含むことを特徴とする単離されたタンパク。
  22. （ａ）配列番号１４のアミノ酸３〜アミノ酸１１０に相当する可変性軽鎖領域
    アミノ酸配列を含む第一のポリペプチド領域；および
    （ｂ）配列番号１１のアミノ酸１〜アミノ酸１２２に相当する可変性重鎖領域アミノ酸配列を含む第二のポリペプチド領域
    を含むことを特徴とする単離されたタンパク。
  23. 単離されたタンパクが抗Ｃ５抗体である、請求項１０〜１６のいずれか1項に記載の核酸分子
    によりコードされるアミノ酸配列を含む単離されたタンパク。
  24. そのベクターを含む宿主が第一の核酸分子によりコードされるポリペプチドを発現するように、第二の核酸分子に共有結合により作動可能に連結されている第一の核酸分子を含む核酸ベクターであって、第一の核酸分子が、請求項１０〜１６のいずれか1項に記載の核酸分子であるベクター。
  25. 請求項２４記載の核酸ベクターを含む組換え宿主細胞。
  26. 核酸分子によりコードされるタンパクが宿主細胞により発現されるように請求項２５記載の組換え宿主細胞を生育させる工程、および発現されたタンパクを単離する工程を特徴とする、単離された抗Ｃ５抗体タンパクを生産する方法であって、発現されるタンパクが抗Ｃ５抗体である方法。
  27. 請求項２４記載の単離された抗Ｃ５抗体。
  28. （ａ）配列番号７のアミノ酸９３〜アミノ酸９８に相当するアミノ酸配列を含む可変牲軽鎖領域ＣＤＲ３をコードするヌクレオチド配列；
    （ｂ）（ａ）に相補的な配列；または
    （ｃ）（ａ）および（ｂ）の両方
    を含むことを特徴とする単離された核酸分子。
  29. （ａ）配列番号８のアミノ酸９１〜アミノ酸９９に相当するアミノ酸配列を含む可変性軽鎖領域ＣＤＲ３をコードするヌクレオチド配列；
    （ｂ）（ａ）に相補的な配列；または
    （ｃ）（ａ）および（ｂ）の両方
    を含むことを特徴とする単離された核酸分子。
  30. （ａ）配列番号７のアミノ酸１５６〜アミノ酸１５９に相当するアミノ酸配列を含む可変性重鎖領域ＣＤＲ１をコードするヌクレオチド配列；
    （ｂ）（ａ）に相補的な配列；または
    （ｃ）（ａ）および（ｂ）の両方
    を含むことを特徴とする単離された核酸分子。
  31. （ａ）配列番号８のアミノ酸１５２〜アミノ酸１６１に相当するアミノ酸配列を含む可変性重鎖領域ＣＤＲ１をコードするヌクレオチド配列；
    （ｂ）（ａ）に相補的な配列；または
    （ｃ）（ａ）および（ｂ）の両方
    を含むことを特徴とする単離された核酸分子。
  32. （ａ）配列番号７のアミノ酸１７９〜アミノ酸１８２に相当するアミノ酸配列を含む可変性重鎖領域ＣＤＲ２をコードするヌクレオチド配列；
    （ｂ）（ａ）に相補的な配列；または
    （ｃ）（ａ）および（ｂ）の両方
    を含むことを特徴とする単離された核酸分子。
  33. （ａ）配列番号８のアミノ酸１７６〜アミノ酸１８６に相当するアミノ酸配列
    を含む可変性重鎖領域ＣＤＲ２をコードするヌクレオチド配列；
    （ｂ）（ａ）に相補的な配列；または
    （ｃ）（ａ）および（ｂ）の両方
    を含むことを特徴とする単離された核酸分子。
  34. （ａ）配列番号７のアミノ酸２２６〜アミノ酸２３６に相当するアミノ酸配列を含む可変性重鎖領域ＣＤＲ３をコードするヌクレオチド配列；
    （ｂ）（ａ）に相補的な配列；または
    （ｃ）（ａ）および（ｂ）の両方
    を含むことを特徴とする単離された核酸分子。
  35. （ａ）配列番号８のアミノ酸２２５〜アミノ酸２３７に相当するアミノ酸配列を含む可変性重鎖領域ＣＤＲ３をコードするヌクレオチド配列；
    （ｂ〉（ａ）に相補的な配列；または
    （ｃ）（ａ）および（ｂ）の両方
    を含むことを特徴とする単離された核酸分子。
  36. （ａ）配列番号８のアミノ酸９１〜アミノ酸９９に相当するアミノ酸配列を含む可変性軽鎖領域ＣＤＲ３をコードするヌクレオチド配列；
    （ｂ）配列番号８のアミノ酸１５２〜アミノ酸１６１に相当するアミノ酸配列を含む可変性重鎖領域ＣＤＲ１をコードするヌクレオチド配列；
    （ｃ）配列番号８のアミノ酸１７６〜アミノ酸１８６に相当するアミノ酸配列を含む可変性重鎖領域ＣＤＲ２をコードするヌクレオチド配列；および
    （ｄ）配列番号８のアミノ酸２２５〜アミノ酸２３７に相当するアミノ酸配列を含む可変性重鎖領域ＣＤＲ３をコードするヌクレオチド配列を含むことを特徴とする単離された核酸分子。
  37. （ａ）配列番号８のアミノ酸９１〜アミノ酸９９に相当するアミノ酸配列を含む可変性軽鎖領域ＣＤＲ３をコードするヌクレオチド配列；
    （ｂ）配列番号８のアミノ酸１５２〜アミノ酸１６１に相当するアミノ酸配列を含む可変性重鎖領域ＣＤＲ１をコードするヌクレオチド配列；
    （ｃ）配列番号８のアミノ酸１７６〜アミノ酸１９２に相当するアミノ酸配列を含む薄変性重鎖領域ＣＤＲ２をコードするヌクレオチド配列；および
    （ｄ）配列番号８のアミノ酸２２５〜アミノ酸２３７に相当するアミノ酸配列を
    含む可変性重鎖領域ＣＤＲ３をコードするヌクレオチド配列
    を含むことを特徴とする単離された核酸分子。
  38. （ａ）配列番号８のアミノ酸９１〜アミノ酸９９に相当するアミノ酸配列を含む可変性軽鎖領域ＣＤＲ３をコードするヌクレオチド配列；
    （ｂ）配列番号８のアミノ酸１５２〜アミノ酸１６１に相当するアミノ酸配列を含む可変性重鎖領域ＣＤＲ１をコードするヌクレオチド配列；
    （ｃ）配列番号７のアミノ酸１７９〜アミノ酸１８２に相当するアミノ酸配列を含む可変性重鎖領域ＣＤＲ２をコードするヌクレオチド配列；および
    （ｄ）配列番号８のアミノ酸２２５〜アミノ酸２３７に相当するアミノ酸配列を含む可変性重鎖領域ＣＤＲ３をコードするヌクレオチド配列
    を含むことを特徴とする単離された核酸分子。
  39. 請求項２８、請求項２９、請求項３０、請求項３１、請求項３２、請求項３３、請求項３４、請求項３５、請求項３６、請求項３７または請求項４５に記載の核酸分子によりコードされるアミノ酸配列を含む単離されたタンパク。
  40. タンパクが抗Ｃ５抗体である、請求項３９記載の単離されたタンパク。
  41. 第一の核酸分子を含む核酸ベクターであって、該第一の核酸分子が、請求項２８〜３５、または４５のいずれか１項に記載の核酸分子に相当し、そのベクターを含む宿主が第一の核酸分子によりコードされるポリペプチドを発現するように第二の核酸分子に共有結合により作動可能に連結されているベクター。
  42. 請求項４１記載の核酸ベクターを含む組換え宿主細胞。
  43. 核酸分子によりコードされるタンパクが宿主細胞により発現されるように請求項４２記載の組換え宿主細胞を生育させる工程、および発現されたポリペプチドを単離する工程を特徴とする、抗Ｃ５抗体を生産する方法であって、発現されたタンパクが抗Ｃ５抗体である方法。
  44. 請求項４３記載の方法によって生産される抗Ｃ５抗体。
  45. （ａ）配列番号８のアミノ酸１７６〜アミノ酸１９２に相当するアミノ酸配列
    を含む可変性重鎖領域ＣＤＲ２をコードするヌクレオチド配列；
    （ｂ）（ａ）に相補的な配列；または
    （ｃ）（ａ）および（ｂ）の両方
    を含むことを特徴とする単離された核酸分子。
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