JP2004500842A5 - - Google Patents
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Description
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一組のプラスミドを含む、クローン化ウイルスｃＤＮＡから感染性インフルエンザウイルスを発生させる組成物であって、
各プラスミドが１つのウイルスゲノムセグメントを含み、ウイルスゲノムセグメントに対応するウイルスｃＤＮＡが、ＲＮＡポリメラーゼＩ（ＰｏｌＩ）プロモーターと正確な３’末端を有するｖＲＮＡまたはｃＲＮＡの合成のための調節要素との間に挿入されていて、それによりｖＲＮＡまたはｃＲＮＡの発現がもたらされ、次に、その全体が、ＲＮＡポリメラーゼＩＩ（ＰｏｌＩＩ）プロモーターとポリアデニル化シグナルとの間に挿入されていて、それによりウイルスｍＲＮＡおよび対応するウイルスタンパク質の発現がもたらされ、ｖＲＮＡまたはｃＲＮＡおよびウイルスタンパク質の完全なセットの発現によって感染性インフルエンザウイルスのアセンブリがもたらされる組成物。
【請求項２】
正確な３’末端を有するｖＲＮＡまたはｃＲＮＡの合成のための調節要素が、ＲＮＡポリメラーゼＩ（ｐｏｌＩ）ターミネーター配列である請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
正確な３’末端を有するｖＲＮＡまたはｃＲＮＡの合成のための調節要素が、リボザイム配列である請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
ｐｏｌＩプロモーターがポリアデニル化シグナルに隣接していて、ｐｏｌＩターミネーター配列がｐｏｌＩＩプロモーターに隣接している請求項２に記載の組成物。
【請求項５】
ｐｏｌＩプロモーターがｐｏｌＩＩプロモーターに隣接していて、ｐｏｌＩターミネーター配列がポリアデニル化シグナルに隣接している請求項２に記載の組成物。
【請求項６】
インフルエンザウイルスがインフルエンザＡ型ウイルスである請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
インフルエンザウイルスがインフルエンザＢ型ウイルスである請求項１に記載の組成物。
【請求項８】
ウイルスゲノムセグメントが、
（ｉ）ウイルスポリメラーゼ複合タンパク質、Ｍタンパク質およびＮＳタンパク質からなる群から選択したタンパク質をコードしていて；
（ｉｉ）細胞培養中での成長によく適応した株から、または弱毒化した株から、もしくは両方から得られる
請求項６に記載の組成物。
【請求項９】
ウイルスゲノムセグメントが赤血球凝集素（ＨＡ）遺伝子もしくはノイラミニダーゼ（ＮＡ）遺伝子、または両方を含み、前記遺伝子が病原性インフルエンザウイルスから得られる請求項６に記載の組成物。
【請求項１０】
前記組成物がｐＨＷ２４１−ＰＢ２、ｐＨＷ２４２−ＰＢ１、ｐＨＷ２４３−ＰＡ、ｐＨＷ２４４−ＨＡ、ｐＨＷ２４５−ＮＰ、ｐＨＷ２４６−ＮＡ、ｐＨＷ２４７−ＭおよびｐＨＷ２４８−ＮＳからなる群から選択したマップを有する１つまたは複数のプラスミドを含む請求項６に記載の組成物。
【請求項１１】
前記組成物がｐＨＷ１８１−ＰＢ２、ｐＨＷ１８２−ＰＢ１、ｐＨＷ１８３−ＰＡ、ｐＨＷ１８４−ＨＡ、ｐＨＷ１８５−ＮＰ、ｐＨＷ１８６−ＮＡ、ｐＨＷ１８７−ＭおよびｐＨＷ１８８−ＮＳからなる群から選択したマップを有する１つまたは複数のプラスミドを含む請求項６に記載の組成物。
【請求項１２】
請求項１に記載の組成物を含む宿主細胞。
【請求項１３】
請求項７に記載の組成物を含む宿主細胞。
【請求項１４】
請求項６に記載の組成物を含む宿主細胞。
【請求項１５】
請求項９に記載の組成物を含む宿主細胞。
【請求項１６】
感染性インフルエンザウイルスビリオンを生成する方法であって、ウイルスタンパク質およびｖＲＮＡまたはｃＲＮＡの産生を可能にする条件下で請求項１２に記載の宿主細胞を培養し、それにより感染性インフルエンザウイルスを生成することを含む方法。
【請求項１７】
病原性インフルエンザビリオンを生成する方法であって、ウイルスタンパク質およびｖＲＮＡまたはｃＲＮＡの産生を可能にする条件下で請求項１５に記載の宿主細胞を培養し、それにより病原性感染性インフルエンザウイルスを生成することを含む方法。
【請求項１８】
弱毒化インフルエンザウイルスを発生させる方法であって、
（ａ）請求項１に記載の組成物中の１つまたは複数のウイルス遺伝子を突然変異させることと、および
（ｂ）適切な宿主細胞に導入した組成物によって生成された感染性インフルエンザウイルスが弱毒化されるかどうかを判定することを含む方法。
【請求項１】
一組のプラスミドを含む、クローン化ウイルスｃＤＮＡから感染性インフルエンザウイルスを発生させる組成物であって、
各プラスミドが１つのウイルスゲノムセグメントを含み、ウイルスゲノムセグメントに対応するウイルスｃＤＮＡが、ＲＮＡポリメラーゼＩ（ＰｏｌＩ）プロモーターと正確な３’末端を有するｖＲＮＡまたはｃＲＮＡの合成のための調節要素との間に挿入されていて、それによりｖＲＮＡまたはｃＲＮＡの発現がもたらされ、次に、その全体が、ＲＮＡポリメラーゼＩＩ（ＰｏｌＩＩ）プロモーターとポリアデニル化シグナルとの間に挿入されていて、それによりウイルスｍＲＮＡおよび対応するウイルスタンパク質の発現がもたらされ、ｖＲＮＡまたはｃＲＮＡおよびウイルスタンパク質の完全なセットの発現によって感染性インフルエンザウイルスのアセンブリがもたらされる組成物。
【請求項２】
正確な３’末端を有するｖＲＮＡまたはｃＲＮＡの合成のための調節要素が、ＲＮＡポリメラーゼＩ（ｐｏｌＩ）ターミネーター配列である請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
正確な３’末端を有するｖＲＮＡまたはｃＲＮＡの合成のための調節要素が、リボザイム配列である請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
ｐｏｌＩプロモーターがポリアデニル化シグナルに隣接していて、ｐｏｌＩターミネーター配列がｐｏｌＩＩプロモーターに隣接している請求項２に記載の組成物。
【請求項５】
ｐｏｌＩプロモーターがｐｏｌＩＩプロモーターに隣接していて、ｐｏｌＩターミネーター配列がポリアデニル化シグナルに隣接している請求項２に記載の組成物。
【請求項６】
インフルエンザウイルスがインフルエンザＡ型ウイルスである請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
インフルエンザウイルスがインフルエンザＢ型ウイルスである請求項１に記載の組成物。
【請求項８】
ウイルスゲノムセグメントが、
（ｉ）ウイルスポリメラーゼ複合タンパク質、Ｍタンパク質およびＮＳタンパク質からなる群から選択したタンパク質をコードしていて；
（ｉｉ）細胞培養中での成長によく適応した株から、または弱毒化した株から、もしくは両方から得られる
請求項６に記載の組成物。
【請求項９】
ウイルスゲノムセグメントが赤血球凝集素（ＨＡ）遺伝子もしくはノイラミニダーゼ（ＮＡ）遺伝子、または両方を含み、前記遺伝子が病原性インフルエンザウイルスから得られる請求項６に記載の組成物。
【請求項１０】
前記組成物がｐＨＷ２４１−ＰＢ２、ｐＨＷ２４２−ＰＢ１、ｐＨＷ２４３−ＰＡ、ｐＨＷ２４４−ＨＡ、ｐＨＷ２４５−ＮＰ、ｐＨＷ２４６−ＮＡ、ｐＨＷ２４７−ＭおよびｐＨＷ２４８−ＮＳからなる群から選択したマップを有する１つまたは複数のプラスミドを含む請求項６に記載の組成物。
【請求項１１】
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【請求項１３】
請求項７に記載の組成物を含む宿主細胞。
【請求項１４】
請求項６に記載の組成物を含む宿主細胞。
【請求項１５】
請求項９に記載の組成物を含む宿主細胞。
【請求項１６】
感染性インフルエンザウイルスビリオンを生成する方法であって、ウイルスタンパク質およびｖＲＮＡまたはｃＲＮＡの産生を可能にする条件下で請求項１２に記載の宿主細胞を培養し、それにより感染性インフルエンザウイルスを生成することを含む方法。
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病原性インフルエンザビリオンを生成する方法であって、ウイルスタンパク質およびｖＲＮＡまたはｃＲＮＡの産生を可能にする条件下で請求項１５に記載の宿主細胞を培養し、それにより病原性感染性インフルエンザウイルスを生成することを含む方法。
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弱毒化インフルエンザウイルスを発生させる方法であって、
（ａ）請求項１に記載の組成物中の１つまたは複数のウイルス遺伝子を突然変異させることと、および
（ｂ）適切な宿主細胞に導入した組成物によって生成された感染性インフルエンザウイルスが弱毒化されるかどうかを判定することを含む方法。
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