JP2002525284A

JP2002525284A - 化合物

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Publication number: JP2002525284A
Application number: JP2000571053A
Authority: JP
Inventors: サーストン，デイビツド・エドウイン; ハワード，フイリツプ・ウイルソン
Original assignee: スパイロジエン・リミテツド
Priority date: 1998-08-27
Filing date: 1999-08-27
Publication date: 2002-08-13
Anticipated expiration: 2019-08-27
Also published as: GB9818731D0; US20030195196A1; WO2000012507A2; ES2205872T3; JP4669611B2; US6562806B1; ATE246687T1; DK1109811T3; CA2341968C; WO2000012507A3; CA2341968A1; EP1109811B1; EP1109811A2; NZ510492A; DE69910227T2; PT1109811E; WO2000012507A8; DE69910227D1

Abstract

(57)【要約】【化１】式（Ｉ）の化合物が提供される。式中、Ｒ_１０は治療的に脱離可能な窒素保護基であり；Ｒ_２およびＲ_３は独立に、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、ＯＲ、＝Ｏ、＝ＣＨ−Ｒ、＝ＣＨ_２、ＣＨ_２−ＣＯ_２Ｒ、ＣＨ_２−ＣＯ_２Ｈ、ＣＨ_２−ＳＯ_２Ｒ、Ｏ−ＳＯ _２Ｒ、ＣＯ_２Ｒ、ＣＯＲおよびＣＮから選択され；Ｒ_６、Ｒ_７およびＲ_９は独立に、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、ＯＲ、ハロゲン、アミノ、ニトロ、Ｍｅ_３Ｓｎから選択され；ＸはＳ、ＯまたはＮＨであり；Ｒ_１１はＨまたはＲであり；Ｃ１とＣ２の間またはＣ２とＣ３の間に二重結合があっても良く；Ｒ_８はＨ、Ｒ、ＯＨ、ＯＲ、ハロゲン、アミノ、ニトロ、Ｍｅ_３Ｓｎから選択されるか、あるいはＲ_７とＲ_８が一体となって−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｏ−基を形成しており；ｐは１または２である。そのような化合物は、ＡＤＥＰＴ、ＧＤＥＰＴ、ＮＰＥＰＴまたはＰＤＴの方法で用いることができる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】（技術分野）本発明は、ピロロベンゾジアゼピン類（ＰＢＤｓ）に関するものであり、詳細
には抗体指向酵素プロドラッグ療法（ＡＤＥＰＴ）、遺伝子指向酵素プロドラッ
グ療法（ＧＤＥＰＴ）、光感作療法（ＰＤＴ）および天然酵素プロドラッグ療法
（ＮＰＥＰＴ）用のプロドラッグとしての該化合物の使用に関するものである。

【０００２】（背景技術）ピロロベンゾジアゼピン類（ＰＢＤｓ）は、ＤＮＡの特定配列を識別し、それ
に結合する能力を有する。最も好ましい配列はＰｕＧＰｕ（プリン−グアニン−
プリン）である。最初のＰＢＤ抗腫瘍抗生物質であるアントラマイシンが１９６
５年に発見されている（Leimgruber et al., 1965, J. Am. Chem. Soc., 87, 57
93-5795; Leimgruber et al., 1965 J. Am. Chem. Soc.., 87, 5791-5793）。そ
れ以降、多くの天然ＰＢＤが報告されており、各種類縁体に対して１０を超える
合成経路が開発されている（Thurston et al., 1994 Chem. Rev. 1994, 433-465
）。類縁物にはアベイマイシン（abbeymycin; Hochlowski et al., 1987 J. Ant
ibiotics, 40, 145-148）、チカマイシン（Konishi et al., 1984, J. Antibiot
ics, 37, 200-206）、ＤＣ−８１（日本特許５８−１８０４８７；Thurston et
al., 1990, Chem. Brit., 26, 767-772; Bose et al., 1992 Tetrahedron, 48,
751-758）、マゼスラマイシン（mazethramycin、Kuminoto et al., 1980, J. An
tibiotics, 33, 665-667）、ネオトラマイシンＡおよびＢ（Takeuchi et al., 1
976 J, Antibiotics, 29, 93-96）、ポロトラマイシン（porothramycin、Tsunak
awa et al., 1988 J, Antibiotics, 41, 1366-1373）、ポロトラカルシン（poro
thracarcin、Shimizu et al., J, Antibiotics, 29, 2492-2503; Langley and T
hurston, 1987 J. Org. Chem., 52, 91-97）、シバノマイシン（sibanomycin）
（ＤＣ−１０２）（Hara et al., 1988 J. Antibiotics, 41, 701-704; Itoh et
al., 1988 J. Antibiotics, 41, 1281-1284）、シビロマイシン（Leber et al.
, 1988 J. Am. Chem. Soc., 110, 2992-2993）およびトママイシン（tomamycin
、Arima et al., 1972 J. Antibiotics, 25, 437-444）などがある。ＰＢＤは以
下のような一般構造を有する。

【０００３】

【化２１】

【０００４】これらは、芳香Ａ環およびピロロＣ環の両方における置換基の数、種類および
位置とＣ環の飽和度において異なっている。Ｂ環には、ＤＮＡをアルキル化する
上での親電子性中心であるＮ１０−Ｃ１１位にイミン（Ｎ＝Ｃ）、カルビノール
アミン（ＮＨ−ＣＨ（ＯＨ））またはカルビノールアミンメチルエーテル（ＮＨ
−ＣＨ（ＯＭｅ））のいずれかがある。公知の天然産物はいずれもキラルＣ１１
ａ位に（Ｓ）−配置を有し、それによってＣ環からＡ環の方を見ると右手旋回性
となっている。それによってそれら産物は、Ｂ型ＤＮＡの微小溝と同一螺旋性と
なる上で適切な三次元形状となっており、従って結合部位ですべりばめされる（
Kohn, 1975 In Antibiotics III. Springer-Verlag, New York, pp. 3-11; Hurl
ey and Needahm-VanDevanter, 1986 Acc. Chem. Res., 19, 230-237）。微小溝
で付加物を形成する能力によりそれらは、ＤＮＡプロセシングを妨害することが
でき、従って抗腫瘍薬として使用される。

【０００５】プロドラッグの使用は、癌治療における非常に貴重な臨床的概念を代表するも
のである。例えば、モノクローナル抗体に連結した酵素の影響下でプロドラッグ
を抗腫瘍剤に変換して、それを腫瘍関連抗原に結合させることができる。そのよ
うなプロドラッグとそのような酵素モノクローナル抗体結合体との組合せは、非
常に強力な治療戦略を代表するものである。この癌治療へのアプローチは「抗体
指向酵素／プロドラッグ療法」（ＡＤＥＰＴ）と称される場合が多く、ＷＯ８８
／０７３７８に開示されている。

【０００６】「ウィルス指向酵素プロドラッグ療法」（ＶＤＥＰＴ）と称されるさらに別の
治療アプローチが、プロドラッグを用いて患者における腫瘍細胞を治療する方法
として提案されている。プロドラッグを活性化することができる酵素をコードす
る遺伝子を有するウィルスベクターで腫瘍細胞を標的とする。その遺伝子は組織
特異的プロモーター配列またはプロモーター配列によって転写的に調節すること
ができる。ウィルスベクターは腫瘍細胞に入り、酵素を発現することで、プロド
ラッグを腫瘍細胞中で活性薬剤に変換する（Huber et al., Proc. Natl. Acad.
Sci. USA (1991) 88, 8039）。別法として、遺伝子搬送のための非ウィルス的方
法が用いられている。そのような方法には、リン酸カルシウム同時沈殿、微量注
入、リポソーム、直接ＤＮＡ取り込み、受容体介在ＤＮＡ転移などがある。それ
らについてはモルガンらの報告（Morgan & French, Annu. Rev. Biochem., 1993
, 62: 191）に総説がある。「ＧＤＥＰＴ」（遺伝子指向酵素プロドラッグ療法
）という用語は、ウィルス搬送系および非ウィルス搬送系の療法を含めるのに使
用される。

【０００７】光感作療法（ＰＤＴ）は、ヒト身体における特定部位に所望の薬剤を搬送する
ためにプロドラッグを使用する別の方法を提供する。身体の内部領域への光導入
分野における進歩により、広範囲の手術を行う必要なく臓器その他の領域に送り
込むことができる。レーザー光の方向はかなりの精度で制御することができ、光
直径は単一の細胞の径よりかなり小さくして、薬剤の望ましくない活性化による
他の隣接組織への損傷が抑制されることから、この活性化プロセスは極めて部位
特異的とすることができる。大半の有機分子の結合エネルギースペクトラムが２
５０〜４２０ｋＪ／ｍｏｌにあることから、紫外線の高エネルギー（例：３４０
ｋＪ／ｍｏｌに相当する３５０ｎｍ）は広範囲の化学結合を切断するには十分で
ある。例えば、３５０ｎｍより長い波長で、ｏ−ニトロベンジルカーバメート、
ＣＢＺおよび４，５−ジメトキシ−２−ニトロベンジルカーバメート型からアミ
ノ酸、ペプチドおよび多糖類の光化学的脱保護が広く利用されている。

【０００８】さらに別の種類のプロドラッグは、所望の作用部位で天然に存在する酵素によ
って保護基が脱離されるものである。これらの酵素には、ドパ脱炭酸酵素、Ｌ−
γ−グルタミルトランスペプチダーゼならびに混合機能オキシダーゼおよびレダ
クターゼ（例：ＤＴ−ジアフラーゼ（diaphrase））などがある。これは、本願
で「天然存在酵素−プロドラッグ療法（ＮＰＥＰＴ）」と称する方法である。特
に興味深い一つの酵素は、毒性親電子剤の捕集剤としてのトリペプチド、グルタ
チオンの使用に基づいて主要な細胞防御機序の一部を構成するグルタチオントラ
ンスフェラーゼ（ＧＳＴ）である。ＧＳＴはグルタチオンとそれの標的親電子剤
との間の反応で触媒として作用する。この防御機序の結果は、親電子剤治療薬の
失活である。多くのヒト腫瘍細胞が、正常細胞と比較して高いＧＳＴレベルを示
し、ＤＮＡアルキル化剤への抵抗性を有するＧＳＴの関連が文献によって示され
ている（Lewis et al., Carcinogenesis 1988, 9, 1283-1287; Kuzmich et al.,
Journal of Biochemistry 1992, 281, 219-224; and Tew et al., Glutathione
-S-transferase and anti-cancer drug resistance, in Mechanism of Drug Res
istance in Neoplastic Cells; Wooley, P. V., Tew , K. D., Eds.; Academic
Press: Orlando, FL, 1987; pp.141-159）。癌細胞のこの固有の性質を利用する
化学療法剤は、難治性癌の治療において非常に有用であることがわかると考えら
れる。

【０００９】この高ＧＳＴレベルを利用するプロドラッグが製造されている（Satyam et al
., Med. Chem., 1996, 39, 1736-1747）。それらは、２−スルホニルエチルオキ
シカルボニル連結基を介してホスホロジアミデートマスタードに連結されたグル
タチオン分子を有する。別の種類のプロドラッグは、非常に関連性の高い２−フ
ェニルスルホニルエチルオキシカルボニル（Ｐｓｅｃ）基を利用していた（Nico
laou et al., Science, 1992, 256, 1172-1178）。そのようなプロドラッグは、
健常ヒト骨髄細胞と前分裂細胞およびＴ細胞白血病腫瘍系との間で選択性を示し
ている。

【００１０】（発明の開示）本発明の第１の態様は下記構造Ｉを有する化合物を提供する。

【００１１】

【化２２】式中、Ｒ_１０は治療的に脱離可能な窒素保護基であり；Ｒ_２およびＲ_３は独立に、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、ＯＲ、＝Ｏ、＝ＣＨ−Ｒ、＝ＣＨ_２、ＣＨ_２−ＣＯ_２Ｒ、ＣＨ_２−ＣＯ_２Ｈ、ＣＨ_２−ＳＯ_２Ｒ、Ｏ−ＳＯ_２Ｒ、Ｃ
Ｏ_２Ｒ、ＣＯＲおよびＣＮから選択され；Ｒ_６、Ｒ_７およびＲ_９は独立に、Ｈ、
Ｒ、ＯＨ、ＯＲ、ハロゲン、アミノ、ニトロ、Ｍｅ_３Ｓｎから選択され；あるい
はＲ_７とＲ_８が一体となって−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｏ−を形成しており、ｐは１
または２であり；ＸはＳ、ＯまたはＮＨであり；Ｒ_１１はＨまたはＲであり；Ｒは炭素原子数１〜１０の低級アルキル基であるか、好ましくは炭素原子数１
２以下のアラルキル基（すなわち、１以上のアリール置換基を有するアルキル基
）（その場合のアルキル基は１以上の炭素−炭素二重もしくは三重結合を有して
いても良く、その結合は共役系の一部を形成していても良い）、あるいは好まし
くは炭素原子数１２以下のアリール基であって、１以上のハロゲン、水酸基、ア
ミノまたはニトロ基で置換されていても良く、官能基の一部を形成していたり官
能基であることができる１以上のヘテロ原子を有していても良く；Ｃ１とＣ２の
間またはＣ２とＣ３の間に二重結合があっても良く；Ｒ_８はＨ、Ｒ、ＯＨ、ＯＲ、ハロゲン、アミノ、ニトロ、Ｍｅ_３Ｓｎから選択
され、Ｒは上記で定義した通りであるか、あるいは該化合物は二量体であって、
各モノマーは同一でも異なっていても良く式Ｉのものであり、それらモノマーの
Ｒ_８基が一体となってそれらモノマーを連結する式−Ｔ−Ｒ’−Ｔ−を有する架
橋を形成しており、Ｒ’は炭素原子数３〜１２を有するアルキレン鎖であり、そ
の鎖は１以上のヘテロ原子および／または芳香環（例：ベンゼンまたはピリジン
）によって中断されていても良く、１以上の炭素−炭素二重結合または三重結合
を有していても良く、各Ｔは独立にＯ、ＳまたはＮから選択される。

【００１２】Ｒがアリール基であってヘテロ原子を含む場合、Ｒは複素環基である。Ｒがア
ルキル鎖であってヘテロ原子を含む場合、そのヘテロ原子は、例えば−Ｏ−Ｃ_２Ｈ_５、−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_３のようにアルキル鎖のいずれの箇所にあっても良い
か、あるいはカルボニル、水酸基のような官能基の一部を形成したり官能基であ
ることができる。

【００１３】Ｒは好ましくは独立に、１以上のハロゲン、水酸基、アミノまたはニトロ基に
よって置換されていても良い炭素原子数１〜１０の低級アルキル基または好まし
くは炭素原子数１２以下のアラルキル基または好ましくは炭素原子数１２以下の
アリール基から選択される。さらに好ましくは、Ｒ基は独立に、１以上のハロゲ
ン、水酸基、アミノまたはニトロ基によって置換されていても良い炭素原子数１
〜１０の低級アルキル基から選択される。特に好ましくはＲ基は、炭素原子数１
〜１０、好ましくは１〜６、より好ましくは１〜４である未置換の直鎖または分
岐アルキル基、例えばメチル、エチル、プロピル、ブチルである。

【００１４】別形態としてＲ_６、Ｒ_７、Ｒ_８およびＲ_９は好ましくは独立に、（ｉ）置換されていても良いフェニル基；（ｉｉ）置換されていても良いエテニル基；（ｉｉｉ）電子シンクに結合したエテニル基という構造的特徴を有するＲ基から選択することができる。

【００１５】「電子シンク」という用語は、化合物の他方の部分における電子密度を低下さ
せることができる化合物に共有結合的に結合した部分を意味する。電子シンクの
例としては、シアノ、カルボニルおよびエステル基などがある。

【００１６】「治療的に脱離可能な窒素保護基」という用語は、１０−窒素を保護すること
ができるが、in vivoでの治療条件下で脱離可能である、すなわちin vivoで起こ
るまたは起こるようにされ得る条件下で脱離可能であって、ＤＮＡと相互作用す
ることができるＮ１０−Ｃ１１イミン基またはそれに相当するものを生じるよう
な脱離によって医薬的に許容される基を意味する。保護基の脱離は、ＰＢＤ構造
の残りの部分には影響を及ぼさないものでなければならない。

【００１７】好適な脱離法には、例えば波長２５０〜４００または５５０ｎｍの光照射、環
境ｐＨの変化または酵素作用による開裂などがあある。特に好適な酵素はニトロ
レダクターゼである。ただし他の好適な酵素には、ペニシリンＶ／Ｇアミダーゼ
、β−ラクタマーゼ、ホスファターゼ、Ｌ−γ−グルタミルトランスペプチダー
ゼおよびα−ガラクトシダーゼなどがある。それらの酵素の一部の作用は文献に
記載されている（Jungheim, L. N. and Shepherd, T. A., Design of Antitumor
Prodrugs: Substrates for Antibody Targeted Enzymes, Am. Chem. Soc. Chem
. Rev., 1994, 94: 6, 1553-1566）。別の特に好適な酵素は以下の説明するグル
タチオナーレ（glutathionare）トランスフェラーゼである。

【００１８】一つの可能な基は式ＩＩのＲ_１０である。

【００１９】

【化２３】

【００２０】式中、ｎは０〜３であり；Ｒ^（Ｉ）はＨまたはＲであり；Ｒ^（ＩＩ）は、ＮＯ _２、ＯＲまたはＲから独立に選択される１以上の存在していても良い置換基であ
り；Ｒは上記のいずれかの定義で定義された通りであり；２個の置換基Ｒ^（ＩＩ ^）が隣接する原子上にある場合、それらは一体となって−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｍ−Ｏ
−を形成することができ、ｍは１または２である。Ｒ^（ＩＩ）は好ましくはＮＯ _２である。

【００２１】治療的に脱離可能な基Ｒ_１０がニトロレダクターゼに対して感受性であるもの
である場合、それは下記式ＩＩＩのものであることができる。

【００２２】

【化２４】

【００２３】式中、ｎは０〜３であり、Ｒ^（Ｉ）はＨまたはＲであり、Ｒ^{（ＩＩＩ）}はＮＯ _２、ＯＲまたはＲから独立に選択される１以上の存在していても良い置換基であ
り；Ｒは上記の定義のいずれかで定義された通りであり；２個の置換基Ｒ^（ＩＩ ^Ｉ）が隣接する原子上にある場合、それらは一体となって−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｍ−
Ｏ−を形成することができ、ｍは１または２である。

【００２４】さらに別の可能な治療的に脱離可能な窒素保護基Ｒ_１０は下記式ＸＩのもので
ある。

【００２５】

【化２５】

【００２６】式中、Ｒは上記の定義のいずれかで定義した通りであり、ｎは０〜３、好まし
くは０である。この式において、Ｒは最も好ましくは置換もしくは未置換のフェ
ニル基である。この保護基は、多くのヒト腫瘍細胞中に高レベルで存在するグル
タチオントランスフェラーゼ（ＧＳＴ）（上記参照）の作用によって脱離させる
ことができる。

【００２７】式Ｉの化合物において好ましくは、ＸがＯであり、独立にＲ_１１がＨである。

【００２８】Ｃ環に二重結合がある場合、それはＣ２とＣ３の間である。

【００２９】さらに、Ｒ_６とＲ_９がＨであることが好ましく、さらに好ましくはＲ_７および
Ｒ_８がＨ、ＯＨおよびＯＲから独立に選択される。さらに好ましくはＲ_２および
Ｒ_３はＨである。

【００３０】式Ｉの化合物が二量体である場合、その二量体架橋は式−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｐ−
Ｏ−であることができ、ｐは１〜１２、好ましくは３〜９である。さらにＲ_６と
Ｒ_９は好ましくはＨであり、Ｒ_７は好ましくは独立にＨ、ＯＨおよびＯＲから選
択される。

【００３１】本発明の第２の態様は、ＸＲ_１１＝ＯＨである式Ｉの化合物である相当する化
合物Ｉａから、ＸＲ_１１≠ＯＨである本発明の第１の態様に記載の式Ｉの化合物
を製造する方法を提供する。ＸＲ_１１がＯＲである生成物は、化合物Ｉａの直接
エステル化によって製造することができる。ＸがＳである生成物は、化合物Ｉａ
をＲ_１１ＳＨおよび触媒（一般的にはＡｌ_２Ｏ_３などのルイス酸）で処理するこ
とで製造することができる。ＸがＮＨである生成物は、化合物ＩａをアミンＲ_１ _１ＮＨおよび触媒（一般的にはＡｌ_２Ｏ_３などのルイス酸）で処理することで製
造することができる。

【００３２】本発明の第３の態様は、下記式ＩＶａの化合物の酸化によって本発明の第２の
態様に記載の式Ｉａの化合物を製造する方法を提供する。

【００３３】

【化２６】

【００３４】式中、式ＩＶａの化合物の置換基は製造される式Ｉａの化合物と同様である（
二量体化合物の製造の場合、−Ｔ−Ｒ’−Ｔ−によってＣ８を介して連結された
モノマーは式ＩＶａの両方である。同様のコメントは二量体合成の他の中間体に
も当てはまる。）。好ましい酸化方法はスウェルン（Swern）酸化である。

【００３５】本発明の第４の態様は、下記式Ｖａの化合物

【００３６】

【化２７】を下記式ＶＩの化合物

【００３７】

【化２８】と反応させることで、本発明の第３の態様に記載の式ＩＶａの化合物を製造する
方法を提供する。これらの式中、式ＶａおよびＶＩの化合物の置換基は製造され
る式ＩＶaの化合物の場合と同様であり、Ｙはハロゲン原子である。

【００３８】治療的に脱離可能な窒素保護基を式ＩＩのものとする場合、式ＶＩの化合物は
下記式ＶＩａのハロホルメートであることが好ましい。

【００３９】

【化２９】式中、置換基は式ＩＩの基について定義した通りであり、Ｙはハロゲン原子で
ある。

【００４０】治療的に脱離可能な窒素基を式ＸＩのものとする場合、式ＶＩの化合物は下記
式ＶＩｂのハロホルメートであることが好ましい。

【００４１】

【化３０】Ｙはハロゲン原子であり、Ｒおよびｎは式ＸＩについて定義した通りである。

【００４２】本発明の第５の態様は、下記式ＶＩＩの化合物

【００４３】

【化３１】と下記式ＶＩの化合物

【００４４】

【化３２】を反応させて下記式ＶＩＩＩの化合物

【００４５】

【化３３】を形成し、次に式ＶＩＩＩの化合物と下記式ＩＸａの化合物

【００４６】

【化３４】とを反応させることによる（例：（ＣＯＣｌ）_２によって）、本発明の第３の態
様に記載の式ＩＶａの化合物の別途合成を提供する。これらの式中、式ＶＩ、Ｖ
ＩＩ、ＶＩＩＩおよびＩＸａにおける置換基は製造する式ＩＶａの化合物の場合
と同様であり、Ｙはハロゲン原子である。

【００４７】本発明の第６の態様は、下記式ＩＶｂの化合物の脱保護による本発明の第２の
態様に記載の式Ｉａの化合物の製造方法を提供する。

【００４８】

【化３５】

【００４９】式中、式ＩＶｂの化合物の置換基は製造される式Ｉａの化合物と同様であり；
ＱはＳまたはＯであり；Ｒ^（ＩＶ）は独立にＭｅまたはＥｔから選択されるか、
あるいは一体となって−（ＣＨ_２）_ｑ−を形成しており、ｑは２または３である
（二量体化合物の製造については、−Ｔ−Ｒ’−Ｔ−によってＣ８を介して連結
されたモノマーは式ＩＶｂの両方である。同様のコメントは二量体合成の他の中
間体にも当てはまる。）。Ｑ＝Ｓの場合の好ましい脱保護法は水銀介在脱保護で
ある。Ｑ＝Ｏの場合の脱保護は好ましくは、酸条件、例えばＴＦＡ、メタノール
および水またはパラジウム触媒作用を用いることで行う。

【００５０】本発明の第７の態様は、下記式Ｖｂの化合物

【００５１】

【化３６】と下記式ＶＩの化合物

【００５２】

【化３７】とを反応させることで、本発明の第６の態様に記載の式ＩＶｂの化合物を製造す
る方法を提供する。これらの式中、式ＶｂおよびＶＩの化合物の置換基は製造さ
れる式ＩＶｂの化合物の場合と同様であり、Ｙはハロゲン原子である。

【００５３】治療的に脱離される窒素保護基を式ＩＩのものとする場合、式ＶＩの化合物は
、下記式ＶＩａのハロホルメートであることが好ましい。

【００５４】

【化３８】式中、置換基は式ＩＩの基について定義された通りであり、Ｙはハロゲン原子
である。

【００５５】本発明の第８の態様は、下記式ＶＩＩの化合物

【００５６】

【化３９】と下記式ＶＩの化合物

【００５７】

【化４０】を反応させて下記式ＶＩＩＩの化合物

【００５８】

【化４１】を形成し、次に式ＶＩＩＩの化合物と下記式ＩＸｂの化合物

【００５９】

【化４２】を反応させる（例：（ＣＯＣｌ）_２によって）ことによる、本発明の第２の態様
に記載の式ＩＶｂの化合物の別途合成を提供する。式中、式ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩ
ＩＩおよびＩＸｂの化合物における置換基は製造されるＩＶｂの化合物の場合と
同様であり、Ｙはハロゲン原子である。

【００６０】本発明の第９の態様は、本発明の第１の態様に記載の式Ｉの化合物の治療的に
脱離可能な保護基Ｒ_１０の開裂による下記式Ｘの化合物の製造方法を提供する。

【００６１】

【化４３】式中、式Ｘの化合物の置換基は使用される式Ｉの化合物の置換基と同様である
。

【００６２】本発明の第１０の態様は、ＡＤＥＰＴまたはＧＤＥＰＴ療法の方法で適切な酵
素と併用して、治療的に脱離可能な窒素保護基（Ｒ_１０）が酵素感受性である式
Ｉの化合物の使用を提供する。酵素感受性基がニトロレダクターゼ感受性である
場合、ＡＤＥＰＴおよびＧＤＥＰＴ療法の方法で、式Ｉの化合物をニトロレダク
ターゼ酵素（例：大腸菌から単離されるもの）と併用することができる。

【００６３】本発明の第１１の態様は、ＰＤＴの方法で波長２５０〜４００または５５０ｎ
ｍの光との併用での、治療的に脱離可能な窒素保護基（Ｒ_１０）が光感受性であ
る式Ｉの化合物の使用を提供する。

【００６４】本発明の第１２の態様は、治療を受ける患者における特異的局在部位で自然に
生じる条件によって治療的に脱離可能な窒素保護基（Ｒ_１０）が感受性である式
Ｉの化合物の使用を提供する。式Ｉの好適な化合物は、低酸素腫瘍細胞を治療す
るのに使用する場合にニトロレダクターゼ酵素に対して感受性であるもの、ある
いはグルタチオントランスフェラーゼなどの特異的局在部位で自然に生じる酵素
に対して感受性のものであることができる。

【００６５】本発明の第１０または第１１または第１２の態様で治療的に脱離可能な窒素保
護基の開裂によって生じる薬剤は、毒性の局所的上昇が患者にとって有益である
癌その他の部位特異的疾患の治療に用いることができる。治療可能な癌は、卵巣
癌、結腸癌、直腸癌、乳癌および腸ＣＮＳ、メラノーマなどの固形癌ならびに白
血病である。そのような薬剤は、宿主にとって自然ではない感染の部位で産生さ
れる独特の酵素を利用することで、あるいは宿主において自然に生じる酵素の量
増加を利用することで、細菌感染、ウィルス感染または寄生虫感染の治療に好適
なものともなり得る。

【００６６】本発明の第１３の態様は、本発明の第１の態様に記載の式Ｉの化合物を含む医
薬組成物である。本発明によるおよび本発明による使用での医薬組成物は、有効
成分すなわち式Ｉの化合物に加えて、医薬的に許容される賦形剤、担体、緩衝剤
、安定剤その他の当業者には公知の材料を含むことができる。担体その他の材料
の詳細な性質は投与経路によって決まり、その投与経路には経口あるいは皮膚、
皮下もしくは静注などの注射などがあり得る。

【００６７】経口投与用の医薬組成物は、錠剤、カプセル、粉剤または液剤の形態であるこ
とができる。錠剤は固体担体または補助剤を含むことができる。液体医薬組成物
は、水、石油、動物性もしくは植物性油、鉱油もしくは合成油を含む。生理食塩
水、デキストロースその他の多糖類溶液あるいはエチレングリコール、プロピレ
ングリコールまたはポリエチレングリコールなどのグリコール類を含むことがで
きる。カプセルにはゼラチンなどの固体担体を含ませることができる。

【００６８】静脈注射、皮膚注射または皮下注射あるいは患部での注射の場合、有効成分は
、発熱物質を含まず好適なｐＨ、等張性および安定性を有する非経口的に許容さ
れる水溶液の形とする。当業者であれば、例えば塩化ナトリウム注射液、リンゲ
ル液または乳酸リンゲル注射液などの等張性媒体を用いて好適な溶液を調製する
ことができる。保存剤、安定剤、緩衝剤、酸化防止剤および／またはその他の添
加剤も必要に応じて含有させることができる。

【００６９】本発明の第１４の態様は、本発明の第１の態様に記載の式Ｉの化合物を用いた
、毒性の局所的上昇が患者にとって有益である腫瘍疾患その他の部位特異的疾患
の治療用の医薬品製造を提供する。式Ｉの化合物は、医薬的に許容される担体ま
たは希釈剤とともに提供することができる。医薬品の調製は、本発明の第１３の
態様に関して記載されている。

【００７０】（発明を実施するための最良の形態）以下、本発明の態様について添付の図面を参照しながらさらに詳細に説明する
。

【００７１】図１は本発明による合成図式である。

【００７２】図２ａおよび２ｂは本発明による二量体の合成図式である。

【００７３】図３は、本発明で使用される別途環化を示す合成図式である。

【００７４】図４は、ＳＷ１１１６細胞およびＬＳ１７４Ｔ細胞におけるニトロレダクター
ゼ／ＮＡＤＨによる活性化前後での、プロドラッグ化合物７（実施例１参照）に
おける細胞毒性結果を示すグラフである。

【００７５】図５は、３時間の期間にわたるＵＶＡ（３６５ｎｍ）露光によって開裂した化
合物１１（実施例３参照）のパーセントを示すグラフである。

【００７６】図６は、照射時間を変動させた場合における、当初薬剤濃度１ｍＭでの、ＤＭ
Ｆ中のヒト慢性骨髄性白血病Ｋ５６２細胞に対するベンジルＤＣ−８１および化
合物１１のin vitro細胞毒性（ＩＣ_５０；μＭ）を示すグラフである。

【００７７】図７は、照射時間を変動させた場合における、当初薬剤濃度１０ｍＭでの、Ｄ
ＭＦ中のヒト慢性骨髄性白血病Ｋ５６２細胞に対するベンジルＤＣ−８１および
化合物１１のin vitro細胞毒性（ＩＣ_５０；μＭ）を示すグラフである。

【００７８】図８は、照射時間を変動させた場合における、当初薬剤濃度１ｍＭでの、メタ
ノール中のヒト慢性骨髄性白血病Ｋ５６２細胞に対するベンジルＤＣ−８１およ
び化合物１１のin vitro細胞毒性（ＩＣ_５０；μＭ）を示すグラフである。

【００７９】図９は、照射時間を変動させた場合における、当初薬剤濃度１ｍＭでの、メタ
ノール中のヒト慢性骨髄性白血病Ｋ５６２細胞に対するＤＳＢ−１２０および化
合物３２のin vitro細胞毒性（ＩＣ_５０；μＭ）を示すグラフである。

【００８０】好ましい合成戦略式Ｉの化合物に対する好ましい経路における主要な段階は、１１位でのアルデ
ヒド形成と１０位窒素によるそれへの攻撃が関与する、環化によるＢ環の形成で
ある。

【００８１】

【化４４】

【００８２】「保護アルデヒド」−ＣＰＱは、アセタールまたはチオアセタール（例：Ｐ＝
Ｑ＝ＳＥｔまたはＯＭｅ）であることができ、それらは環状であって良く、その
場合環化には脱保護が関与する。別法として、保護アルデヒドはアルコール、−
ＣＨＯＨなどのアルデヒド前駆体であることができ、その場合反応には、例えば
ＴＰＡＰまたはＤＭＳＯによる酸化（スウェルン酸化）が関与する。

【００８３】保護アルデヒド化合物は、相当する２−置換ピロリジンと２−ニトロ安息香酸
とを縮合させることで得ることができる。

【００８４】

【化４５】

【００８５】次に、ニトロ基を還元して−ＮＨ_２とし、クロロホルメートなどの好適な試薬
と反応させて保護することで、式Ｉの化合物において治療的に脱離可能な窒素保
護基Ｒ_１０を得ることができる。

【００８６】上記酸化−環化法が関与するプロセスを図１に示してある（別形態の環化につ
いては、図３を参照して後述する）。Ｒ_１１が水素以外である場合、式Ｉの化合
物はアルコールＩａの直接エーテル化によって製造することができる。Ｘ＝Ｓで
あってＯではない場合、アルコールＩａまたはＯＲ誘導体をＨ_２ＳおよびＡｌ_２Ｏ_３などの触媒で処理するか、あるいはＥｔＳＨなどのチオールを加えることで
処理することができる。ＸがＮＨの場合、アルコールＩａの適切なアミンによる
処理によって、所望の式Ｉの化合物が得られる。

【００８７】アルコール（ＩＶａ）（プロ−１０−窒素がアミドカーバメートとして保護さ
れている）のＡ４シーブス上での過ルテニウム酸テトラプロピルアンモニウム（
ＴＰＡＰ）／Ｎ−メチルモルホリンＮ−オキサイド（ＮＭＯ）への曝露によって
、自然Ｂ環閉環を伴う酸化が生じて所望の生成物が得られる。このＴＰＡＰ／Ｎ
ＭＯ酸化法は、少量反応において特に簡便であることが認められており、ＤＭＳ
Ｏに基づく酸化法、特にスウェルン酸化の使用は比較的大量の作業に優れている
ことがわかっている（例：＞１ｇ）。

【００８８】未環化アルコール（ＩＶａ）は、中等度の温度（例：０℃）でピリジン（好ま
しくは２当量）などの塩基存在下に、溶液中での好ましくはクロロホルメートま
たは酸塩化物である式ＶＩの窒素保護試薬のアミノアルコール（Ｖａ）への添加
によって製造することができる。この条件下では、Ｏ−アシル化はほとんど認め
られないのが普通である。

【００８９】重要なアミノアルコール（Ｖａ）は、分子の残りの部分に影響しない方法を選
択することで、相当するニトロ化合物（ＸＩａ）の還元によって製造することが
できる。例えば還流メタノールなどの好適な溶媒中ＸＩａを塩化スズ（ＩＩ）で
処理することで、スズ塩除去後に所望の生成物が高収率で得られる。

【００９０】ＸＩａのヒドラジン／ラネーニッケルへの曝露（または触媒を用いた水素化）
によってスズ塩の生成が回避され、Ｖａをさらに高収率で得ることができる。た
だし、この方法は考えられるＣ環およびＡ環置換基の範囲との適合性が相対的に
低い。例えば、Ｃ環に不飽和がある場合（環自体またはＲ_２もしくはＲ_３で）、
この方法は適さない場合がある。

【００９１】式ＸＩａのニトロ化合物は、例えばＮ_２雰囲気下−２５℃でＫ_２ＣＯ_３存在下
に、適切なｏ−ニトロベンゾイルクロライドを式ＩＸａの化合物とカップリング
させることで製造することができる。ｏ−ニトロベンゾイルクロライドは、式Ｘ
ＩＩのｏ−ニトロ安息香酸（その多くが市販されている）から合成され、いくつ
かの例の合成が報告されている（Althuis, T. H. and Hess, H-J, 1977, Synthe
sis and Identification of the Major Metabolites of Prazosin Formed in Do
g and Rat, Journal of Medicinal Chemistry 20, 1: 146-266）。式ＩＸａの化
合物は、例えばＬ−トランス−ヒドロキシプロリンから誘導されるケトンのオレ
フィン化によって容易に製造することができる。ケトン中間体は、ヘック反応、
シュティル（Stille）反応およびスズキ反応などのパラジウム介在カップリング
反応で使用されるエノールトリフレートへの変換によって利用することもできる
。

【００９２】二量体合成（図２）ＰＢＤ二量体は、保護ＰＢＤモノマーの合成について開発された戦略を用いて
合成することができる（図２ａ）。図２にはさらに、二量体連結が式−Ｏ−（Ｃ
Ｈ_２）_ｎ−Ｏ−である合成経路も示してある。二量体形成の段階は通常、ビス（
ニトロ酸）ＸＩＩ’を形成するように実施される（図２ｂ）。

【００９３】ビス（ニトロ酸）ＸＩＩ’は、ビス（カルボン酸）をニトロ化（例：７０％硝
酸を使用）することで得ることができる。これは、関係する安息香酸２当量を塩
基性条件下で適切なジヨードアルカンでアルキル化することで合成することがで
きる（経路２ａ）。多くの安息香酸が市販されており、他のものは従来法によっ
て合成することができる。

【００９４】ビス（ニトロ酸）の別途合成には、例えば過マンガン酸カリウムを用いるビス
（ニトロアルデヒド）の酸化が関与する。その化合物は、例えば７０％ＨＮＯ_３を用いたビス（アルデヒド）の直接ニトロ化によって得ることができる。最終的
に、２当量のベンゾイックアルデヒドの適切なアルカンジオールによるミツノブ
エーテル化によってビス（アルデヒド）を得ることができる（経路２ｂ）。

【００９５】別途環化（図３）図１および２では、最終段階または最終前段階が酸化的環化である。チオアセ
タールカップリング脱保護を用いる別途法を図３に示してある（図では、それを
式−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｎ−Ｏ−の二量体連結を有する二量体に適用することが示し
てある）。水銀介在脱保護によって、所望の化合物（Ｉａ’）への環化が生じる
。

【００９６】このチオアセタール化合物は、図３に示した方法に従って製造することができ
る。チオアセタール保護Ｃ環［文献法によって製造；Langley, D. R. & Thursto
n, D. E., J. Organic Chemistry, 52, 91-97 (1987)］を、文献法を用いてビス
（ニトロカルボン酸）核にカップリングさせる。得られるニトロ化合物は、チオ
アセタール基が存在するために水素化によって還元されないことから、塩化スズ
（ＩＩ）法を用いてビス（アミン）を得る。次にそれを、例えばｐ−ニトロベン
ジルクロロホルメートなどのクロロホルメートもしくは酸塩化物との反応によっ
てＮ−保護する。

【００９７】チオアセタールカップリングに対する別途法は、アセタールカップリングの使
用である。この方法は、チオアセタール基をアセタール基（例：−ＣＨ（ＯＭｅ
）_２）に置き換える以外、図３に示したものと同様である。酸またはパラジウム
介在脱保護が、式ＩａまたはＩ’ａの所望の化合物への環化を生じる好ましい脱
保護法である。

【００９８】ＧＤＥＰＴベクター系一般に、ＧＤＥＰＴ療法で使用されるベクターは好適なＤＮＡまたはＲＮＡベ
クターとすることができる。

【００９９】好適な非ウィルスベクターには、カチオン性リポソームおよびポリマーなどが
ある。好適なウィルスベクターには、レトロウィルスに基づいたものなどがある
。そのようなベクターは当業界で広く入手可能である。フーバーらは（Huber et
al., ibid）、肝癌細胞、乳房細胞、結腸細胞または皮膚細胞のトランスフォー
メーションへの両栄養性レトロウィルスの使用を報告している。カルバーらも（
Culver et al., Science (1992) 256; 1550-1552）、ＧＤＥＰＴでのレトロウィ
ルスベクターの使用について記載している。そのようなベクターまたはそれに由
来するベクターも使用可能である。他のレトロウィルスも、本発明での使用に好
適なベクター製造に用いることができる。そのようなレトロウィルスにはラウス
肉腫ウィルス（ＲＳＶ）などがある。

【０１００】エングルハルトら（Englehardt et al., Nature Genetics (1993) 4; 27-34）
は、細胞中への嚢胞性線維症膜横断伝導物（ＣＦＴＲ）の搬送におけるアデノウ
ィルスに基づくベクターの使用について記載しており、そのようなアデノウィル
スに基づくベクターも使用可能である。アデノウィルスプロモーターおよび他の
制御配列を利用するベクターは、肺において細胞に本発明による系を搬送するの
に使用することができ、従って肺腫瘍の治療に有用であると考えられる。

【０１０１】モロニー（Molony）マウス白血病ウィルスに基づくベクターを含む他のベクタ
ー系が知られている（Ram, Z et al., Cancer Research (1993) 53,; 83-88; Da
lton & Treisman, Cell (1992) 68; 597-612）。これらのベクターは、β−グロ
ビン最小プロモーターの上流でクローニングされたマウス白血病ウィルス（ＭＬ
Ｖ）エンハンサーを含む。開始コドンＡＴＧまでのβ−グロビン５’未翻訳領域
を、酵素の直接有効な翻訳に供給する。

【０１０２】上記ベクターで用いることができる好適なプロモーターには、ＭＬＶ、ＣＭＶ
、ＲＳＶおよびアデノウィルスプロモーター類などがある。好ましいアデノウィ
ルスプロモーターは、アデノウィルス初期遺伝子プロモーターである。強力な哺
乳動物プロモーターも好適である場合がある。そのようなプロモーターの例とし
ては、ミズシマらの報告（Mizushima and Nagata (1990), Nucl. Acids Res. 18
; 5322）を参照することで得ることができるＥＦ−１αプロモーターがある。実
質的に同様の転写活性を保持するそのようなプロモーターの変種も使用可能であ
る。

【０１０３】他の好適なプロモーターには、組織特異的プロモーター類ならびに小分子、低
酸素またはＸ線によって活性化したプロモーターなどがある。

【０１０４】ニトロレダクターゼが式Ｉの化合物の活性化用の選択酵素である場合、好まし
くはその酵素は、細菌ニトロレダクターゼなどの非哺乳動物ニトロレダクターゼ
である。ＷＯ９３／０８２８８に開示の大腸菌ニトロレダクターゼが特に好まし
い。その酵素は、例えば酵素をクローニングし、その遺伝子配列を決定し、例え
ば部位指向性突然変異誘発による配列の切断、置換、欠失もしくは挿入などの方
法によって遺伝子配列を変えるなどの標準的な組換えＤＮＡ法によって変えるこ
とができる。標準的な組換えＤＮＡ法の説明については、サムブロックらの著作
を参照することができる（Sambrook et al., "Molecular Cloning" (1989), Col
d Spring Harbor）。行う変更は、やはり式Ｉの好適な化合物におけるニトロ基
を還元する能力を有する酵素を与えるが、例えば反応速度もしくは選択性という
酵素の他の特性を変えるものであることができる。

【０１０５】さらに、Ｎ末端および／またはＣ末端配列における小さい切断が、その酵素を
コードする核酸配列が各種の他ベクター配列に連結しているベクターを生成する
上で必要な操作の結果として生じる場合がある。

【０１０６】ＧＤＥＰＴにおけるペニシリンＶ／Ｇアミダーゼおよびβ−ラクタマーゼ使用
に関するデータについては、ユングハイムらの報告を参照する（Jungheim, L. N
. and Shepherd, T. A., Design of Antitumore Prodrugs: Substrates for Ant
ibody Targeted Enzymes, Am. Chem. Soc. Chem. Rev., 1994, Vol94, No.6, 15
53-1566）。

【０１０７】ＡＤＥＰＴＡＤＥＰＴ系での適用では、腫瘍特異的マーカー指向性の抗体を、前記の方法
に従って変えることができる関連する酵素に連結する。その抗体はモノクローナ
ルまたはポリクローナルであることができる。本発明に関しては、別の意味で指
定されていない限り、「抗体」という用語は腫瘍標的抗原に対する結合活性を保
持する全抗体の断片を含むものである。そのような断片にはＦｖ、Ｆ（ａｂ’）
およびＦ（ａｂ’）_２断片、ならびに一本鎖抗体などがある。さらに、抗体およ
びそれの断片は、例えばＥＰ−Ａ−２３９４００に記載のようなヒト化抗体であ
ることができる。

【０１０８】抗体は、従来のハイブリドーマ法によって生成することができるか、あるいは
変性抗体もしくは断片の場合には、例えば操作可能な形でプロモーターに連結し
た変性抗体もしくは断片をコードするＤＮＡ構築物の好適な宿主ベクターでの発
現等の組換えＤＮＡ法によって生産することができる。好適な宿主細胞には細菌
（例：大腸菌）、酵母、昆虫および哺乳動物細胞などがある。抗体をそのような
組換え法によって生産する場合、酵素をコードする核酸配列（上記の方法に従っ
て変性されていても良い）を抗体もしくはそれの断片をコードする構築物の配列
の３’もしくは５’末端に連結することで、酵素を生産することができる。

【０１０９】ＰＤＴＰＤＴにおける活性化プロセスは、非常に部位特異的とすることができる。レ
ーザー光の方向は高精度で制御することができ、光径は単一細胞の径よりはるか
に小さい幅まで小さくすることができる。従って、それを非常に限定された領域
に作用させて、隣接組織への損傷を低減することができる。

【０１１０】大半の有機分子において結合開裂のためのエネルギースペクトラムが２５０〜
４２０ｋＪ／ｍｏｌにあり、例えば３５０ｎｍは３４０ｋＪ／ｍｏｌに相当する
ことから、紫外線は広範囲の化学結合を切断するのに十分である。例えば、３５
０ｎｍより長い波長でのＣＢＺならびにｏ−ニトロベンジルおよび４，５−ジメ
トキシ−２−ニトロベンジルカーバメート型からのアミノ酸、ペプチドおよび多
糖類の光化学的脱保護などの広範囲の光介在脱保護反応が示されている（Pillar
i, R. V. N., Photoremovable protecting groups in organic chemistry, Synt
hesis (1980), 1-26）、（Bayley, H., Gasparro, F. and Edelson, R., Photoa
ctivatible drugs, TIPS (1987) 8, 138-143, (Star, W. M. , Light delivery
and light dosimetry for photodynamic therapy, Laser in Medical Science (
1990) 5, 107-113）。他方、非常に反応性が高く、従って細胞毒性の化学種も比
較的低いエネルギー活性化で得られる。例えば分子状酸素の反応性励起状態であ
る一重項状態は、それの基底三重項状態からわずか９０ｋＪ／ｍｏｌしか違わな
い。しかしながらそれによって、十分な濃度の毒性化学種が６００ｎｍより長い
波長で吸収する増感剤によって形成される（Carruth, J. A. S., Clinical appl
ications for photodynamic therapy, J Photochem Photobiol (1991) 9, 396-3
97）。

【０１１１】このアプローチの主要な制限は、光自体の物理およびそれのヒト組織との相互
作用によって生じる。光の組織貫通能は波長依存性であることが認められている
。波長が長くなると貫通能力は高くなるが、光の散乱および反射によって制限さ
れる。生物組織では、例えば赤色光の散乱係数は吸収係数よりかなり大きい（Ca
rruth, J. A. S., Clinical applications for photodynamic therapy, J Photo
chem Photobiol (1991) 9, 396-397）（Kennedy, J. C. and Pottier, R. H., E
ndogenous protoporphyrin IX, a clinical useful photosensitiser for photo
dynamic therapy, J. Photochem Photobiol (1992) 14, 275-292）。その結果、
組織に進入する光子は吸収もしくは拡散する前に数回散乱される。これによって
一定の領域に搬送させるエネルギー増加が期待されると考えられるが、内部反射
によって組織−空気界面からの距離増加に伴うエネルギー流束の級数的低下が生
じる。これらの制限は、比較的嵩高い腫瘍の治療では、あるいは複数の組織間光
ファイバーの使用によってさらに深く貫通させる必要がある場合には部分的に克
服されている。

【０１１２】いくつかの種類の腫瘍がＰＤＴの可能な標的であることが確認されている。そ
れには、頭部および頸部の腫瘍、気管支の癌、悪性脳腫瘍、膀胱の表在性腫瘍お
よび血管疾患などがあり、これらはいずれも診療所において有望な応答を示して
いる（Regula, J., Mac Roberts, A. J., Gorchein, A., Buonaccorsi, Thorpe,
S. M., Spencer, G. M., Hartfield, A. R. W. and Bown, S. G., Photosensit
isation and photodynamic therapy of oesophageal, duodenal and colorectal
tumors using 5-aminoleavulic acid induced protoporphyrin IX-a pilot stu
dy, Gut (1995) 36, 67-75）。

【０１１３】上記のＰＤＴ法は、治療的に脱離可能な窒素保護基が光感受性である場合には
、適切な式Ｉの化合物と組み合わせて使用することができる。使用する好ましい
ＵＶ光波長は２５０〜４００または５５０ｎｍである。

【０１１４】本発明の利用分野本発明の化合物は、広範囲の利用分野についてin vitroまたはin vivoで使用
することができる。例えば、細胞でのニトロレダクターゼ発現のための多くのベ
クター系が開発されている。そのような系をさらに開発するには（例：特定の細
胞種に好適なプロモーターの開発）、ニトロレダクターゼによって活性化した場
合に細胞を殺すことができる好適なプロドラッグ候補剤が必要である。ニトロレ
ダクターゼ感受性である式Ｉのプロドラッグ化合物は、そのようなモデル系で使
用可能である。

【０１１５】そのモデル系は、in vitroモデル系あるいは例えばヌードマウスに移植された
ヒト腫瘍細胞を有するin vivoの異種移植片モデル系であることができる。各種
酵素に対して感受性である式Ｉの化合物を、適切に変化させた同様の系で使用す
ることができる。

【０１１６】酵素によって活性化することができない式Ｉの化合物は、各種腫瘍細胞試験群
に対する他の好適な形の活性化を行ってin vitroで試験して、そのような腫瘍細
胞に対する効力を求めることができる。広範囲の腫瘍細胞型に対する本発明の化
合物の効力は、さらなる抗腫瘍化合物の開発における基準点として用いることが
できる。式Ｉの化合物はまた、別の抗癌化合物と組み合わせて試験して、例えば
相乗的な組合せなどの可能な薬剤併用系を確認することもできる。

【０１１７】式Ｉの化合物は、ヒトもしくは動物の身体の治療方法で用いることもできる。
そのような治療には、腫瘍疾患患者における新生物細胞成長の治療方法であって
、治療を必要とする患者に対して、ＡＤＥＰＴ、ＧＤＥＰＴもしくはＰＤＴ系の
一部として式Ｉの化合物を投与する方法、あるいは式Ｉの化合物単独での治療な
どがあり、その場合の腫瘍疾患には、白血病ならびに卵巣、結腸、肺、腎臓、乳
房、腸、ＣＮＳなどの固形腫瘍およびメラノーマなどがある。その治療はまた、
毒性の局所的上昇が患者にとって有益である他の部位特異的疾患の治療であるこ
ともできる。

【０１１８】腫瘍治療が関係する場合に治療には、患者に対する腫瘍の影響を軽減すべく医
師が取る手段が含まれることは明らかであろう。そこで、腫瘍の完全寛解が望ま
れる目標であるが、有効な治療には腫瘍の部分的寛解の達成やそれの転移などの
腫瘍成長速度の低下を行うことができる手段も含まれる。そのような手段は、寿
命の延長および／または生活の質の向上ならびに疾患症状の軽減において有効で
あることができる。

【０１１９】療法ＡＤＥＰＴおよびＧＤＥＰＴの方法についてニトロレダクターゼに言及しなが
ら説明する。ただし、前述の方法に対して適切な修正を加えて、前述のような他
の酵素に切り換えることが可能である。

【０１２０】ＰＤＴの基礎については前述してあるが、以下の物の投与に関するデータはこ
の種の療法にも当てはまる。そのデータはさらに、身体内で自然に生じる条件（
例：低酸素、ＧＳＴレベル上昇−上記のＮＰＥＰＴの議論参照）によってプロド
ラッグが活性化される療法に関連するものでもある。

【０１２１】ＡＤＥＰＴ療法ＡＤＥＰＴにおける抗体／酵素結合体は同時に投与することができるが、臨床
的実務においては、プロドラッグ以前に（例：７２時間まであるいは１週間前で
あっても）酵素／抗体結合体を投与して、腫瘍標的の領域において局在する機会
を酵素／抗体結合体に与えることが好ましいことが認められる場合が多い。この
ように操作することで、プロドラッグを投与する際に、プロドラッグの細胞毒性
薬への変換が、酵素／薬剤結合体が局在する領域、すなわち標的腫瘍の領域に制
限される傾向がある。このようにして、本発明のプロドラッグに対するニトロレ
ダクターゼの作用によって生じる化合物の早期放出が低減される。

【０１２２】ＡＤＥＰＴでは、酵素／薬剤結合体の局在程度（局在結合体の遊離して循環し
ている活性結合体に対する比に関して）は、ＷＯ８９／１０１４０に記載のクリ
アランス系および／または失活系を用いてさらに高めることができる。それには
、通常は結合体投与後でプロドラッグ投与前に、結合体の一部に結合して血液中
の酵素を失活させたりないしは血液からの結合体のクリアランスを加速すること
ができる成分（「第２成分」）の投与が関与する。そのような成分は、酵素を失
活させることができる系の酵素成分に対する抗体が含まれ得る。

【０１２３】第２成分は、デキストラン、リポソーム、アルブミン、マクログロブリンまた
は血液型Ｏ型赤血球などの巨大分子に連結させて、第２成分が血管コンパートメ
ントから出るのを制限することができる。さらに、あるいは別形態として、第２
成分に十分な数の共有結合ガラクトース残基やラクトースもしくはマンノースな
どの他の糖の残基を含有させて、それが血漿中の結合体には結合するが、肝臓中
のガラクトースその他の糖に対する受容体によって血漿から結合体とともに除去
されるようにすることができる。第２成分は、それがいかなる感知可能な程度で
あっても、それがプロドラッグ投与以前および投与中に局在結合体を失活させる
ような腫瘍の血管外空間に進入しないように使用および投与するよう設計しなけ
ればならない。

【０１２４】ＡＤＥＰＴ系では、プロドラッグおよび結合体の用量は最終的には、患者の年
齢、体重および状態などの因子を考慮する医師の裁量に委ねられる。プロドラッ
グおよび結合体の好適な用量は、バグショウらの報告（Bagshawe et al., Antib
ody, Immunoconjugates, and Radiopharmaceuticals (1991), 4, 915-922）に記
載されている。結合体の好適な用量は５００〜２０００００酵素単位／ｍ^２（例
：２００００酵素単位／ｍ^２）であり、プロドラッグの好適な用量は患者当たり
１日に約０．１〜２００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは約１０〜約１００ｍｇ／ｋｇで
ある。

【０１２５】所望の治療部位での結合体濃度が最大となるようにするために通常は、少なく
とも４時間だけ２つの成分の投与間に間隔を設けることが望ましい。正確な投与
法は、標的となる腫瘍の性質およびプロドラッグの性質などの各種要素によって
影響されるが、通常は４８時間以内に所望の治療部位で十分な結合体濃度が得ら
れる。

【０１２６】ニトロレダクターゼとともに使用する場合のＡＤＥＰＴ系の好ましくは、酵素
にとって好適な補助因子を有する。好ましい補助因子には、ニコチン酸またはニ
コチンアミドのリボシドまたはリボチドなどがあり得る。

【０１２７】抗体／酵素結合体は、ＡＤＥＰＴ療法で通常用いられる好適な経路によって投
与することができる。それには、以下に記載のものと同様の方法および製剤での
抗体の非経口投与などがある。

【０１２８】ＧＤＥＰＴ療法療法におけるベクターの使用に関しては、ベクターは通常、例えばラムらの報
告（Ram et al.,supra）に記載のように、ウィルス粒子および腫瘍部位に搬送さ
れる粒子中に取り込まれている。ウィルス粒子には変更を加えて、抗体、それの
断片（一本鎖を含む）または腫瘍指向リガンドを含ませて、腫瘍標的性を高める
ことができる。別法として、ベクターをリポソームに取り込ませることができる
。リポソームは特定の腫瘍を標的とすることができる。それは、腫瘍指向性抗体
をリポソームに結合させることで行うことができる。ウィルス粒子もリポソーム
に取り込ませることができる。その粒子は、医師の裁量で好適な手段によって腫
瘍に搬送させることができる。好ましくはウィルス粒子は、選択的に腫瘍細胞を
感染させることができる。「選択的に感染させる」とは、ウィルス粒子が主とし
て腫瘍細胞を感染させ、感染した非腫瘍細胞の割合が、治療対象の疾患の性質を
考慮してプロドラッグの投与による非腫瘍細胞への損傷が許容できる程度となる
ようなものであるということを意味している。最終的にはそれは医師が決定する
。

【０１２９】好適な投与経路の一つは、無菌溶液中の粒子の注射によるものである。例えば
取り込み細胞系から単離されるウィルスも、局所潅流または直接腫瘍内注射また
は身体腔部への直接注射（腔内投与）、例えば腹腔内注射によって投与すること
ができる。

【０１３０】ＧＤＥＰＴにおける正確な投与法は当然のことながら個々の患者について個々
の臨床医が決定する必要があることから、プロドラッグおよびプロドラッグから
放出される細胞毒性剤の詳細な性質によって調節される。しかしながら、ある程
度の一般的指針を得ることができる。この種の化学療法には通常、変性ウィルス
の非経口投与が関与し、静脈経路による投与が最も実際的であることが認められ
る場合が非常に多い。

【０１３１】ＧＤＥＰＴ系では、搬送されるウィルスその他のベクターの量は、上記のＡＤ
ＥＰＴ系での酵素の細胞濃度と同様の濃度を与えるようなものとする。代表的に
はベクターを患者に投与し、次に例えば標的組織の生検サンプルの回収・分析に
よってトランスフェクションもしくは感染（ウィルスベクターの場合）細胞によ
るベクター取り込みをモニタリングする。それは、患者への広範囲の試験用量の
投与および標的細胞もしくは腫瘍の感染もしくはトランスフェクションの程度の
測定が関与する臨床試験によって求めることができる。必要なプロドラッグの量
は、ＡＤＥＰＴ系の場合と同様であるかそれより大きい。

【０１３２】ＧＤＥＰＴ系を用いる場合、プロドラッグは通常、酵素をコードするベクター
の投与後に投与される。プロドラッグの好適な用量は、患者当たり１日に約０．
１〜２００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは約１０〜約１００ｍｇ／ｋｇである。

【０１３３】プロドラッグの投与式Ｉａの化合物を単独で投与することが可能であるが、上記のいずれかの方法
で用いるには、それを医薬製剤として提供することが好ましい。その製剤は、１
以上の許容される担体および適宜に他の治療成分または希釈剤とともに化合物を
含む。担体は、製剤の他の成分と適合性であるという意味において「許容できる
」ものでなければならず、リポソームのように被投与者に対して有害であっては
ならない。好適なリポソームには例えば、正電荷を有する脂質（Ｎ［１−（２，
３−ジオレイルオキシ）プロピル］−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリエチルアンモニウム（Ｄ
ＯＴＭＡ））を含むもの、ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＯ
ＰＥ）を含むもの、３β［Ｎ−（ｎ’Ｎ’−ジメチルアミノエタン）−カルバモ
イル］コレステロール（ＤＣ−Ｃｈｏｌ）を含むものなどがある。

【０１３４】非経口投与または筋肉投与に適した製剤には、それは酸化防止剤、緩衝剤、静
菌剤、殺菌性抗生物質および所期の被投与者の血液と等張性の製剤を与える溶質
を含んでいても良い水系および非水系無菌注射液；ならびに懸濁剤および増粘剤
ならびに血液成分または１以上の臓器に化合物を指向させるよう設計されたリポ
ソームその他の微粒子系を含むことができる水系および非水系の無菌懸濁液など
がある。製剤は、単位用量もしくは多用量容器、例えば封止アンプルおよびバイ
アルに入れて提供することができ、使用直前に注射用水などの無菌液体担体を加
える必要があるだけの冷凍乾燥（凍結乾燥）条件で保存することができる。注射
液および注射懸濁液は、前述した種類の無菌粉剤、粒剤および錠剤から準備なし
で調製することができる。

【０１３５】理解しておくべき点として、上記で特に言及した成分以外に製剤には、問題と
なる製剤の種類に関係する業界で従来からかる他の薬剤を含有させることができ
る。可能な製剤の中では、無菌の発熱物質を含まない水系および非水系溶液が好
ましい。

【０１３６】薬剤投与は、例えば１時間ごと、１日ごと、１週間ごとまたは１ヶ月ごとのよ
うに順番に、あるいは患者の特定のニーズに応じて行うことができる。好ましい
投与経路は、経口投与および注射であり、代表的には非経口もしくは筋肉注射ま
たは腫瘍内注射である。ＰＤＴ法の場合、皮膚投与または局所投与が好ましい場
合があり、例えば皮下注射またはクリームおよび軟膏などがある、そのような投
与方法も公知である。

【０１３７】正確な投与法は当然のことながら、個々の患者について個々の臨床医が決定す
る必要があることから、式Ｉの化合物の詳細な性質によって調節されが、ある程
度の一般的指針を得ることができる。代表的な用量範囲は、単回投与または複数
回投与で投与することができる前述のものである。医師の裁量で、患者の状態お
よび他の要素に従って他の用量を用いることが可能である。

【０１３８】実施例以下、実施例によって本発明の実施態様を詳細に説明する。

【０１３９】一般的実験法融点（ｍｐ）は、ガレンカンプ（Gallenkamp）Ｐ１３８４デジタル融点計を用
いて測定し、未補正である。赤外（ＩＲ）スペクトラムは、パーキンエルマー（
Perkin-Elmer）２９７分光光度計を用いて記録した。^１Ｈ−および^１３Ｃ−ＮＭ
Ｒスペクトラムは、２０℃±１℃で動作するジェオール（Jeol）ＧＳＸ２７０Ｍ
ＨｚＦＴ−ＮＭＲスペクトル計で記録した。化学シフトは、テトラメチルシラン
（ＴＭＳ）から低磁場側へのｐｐｍ（δ）で報告してある。スピン多重度は、ｓ
（１重線）、ｂｓ（広い１重線）、ｄ（二重線）、ｄｄ（二重線の二重線）、ｔ
（三重線）、ｑ（四重線）、ｐ（五重線）またはｍ（多重線）として記載してあ
る。質量分析スペクトラム（ＭＳ）は、ジェオールＪＭＳ−Ｄ３０３ＧＣ質量分
析装置（ＥＩモード；７０ｅＶ、ソース１１７〜１４７℃）を用いて記録した。
精密分子量（ＨＲＭＳ）は、内部質量マーカーとパーフルオロケロセン（ＰＥＫ
）を用いるピーク合わせによって求め、ソース温度１８０℃でＦＡＢ質量スペク
トラムはグリセリン／チオグリセリン／トリフルオロ酢酸（１：１：０．１）基
質から得た。Ｎａ−Ｄ線での旋光度は、パーキンエルマー１４１旋光計を用いて
室温で得た。フラッシュクロマトグラフィーは、アルドリッチ（Aldrich）フラ
ッシュクロマトグラフィー「シリカゲル−６０」（E. Merck, ２３０〜４００メ
ッシュ）を用いて行った。薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）は、ガラス板上の
ＧＦ_２５４シリカゲル（蛍光指示薬を含む）を用いて行った。溶媒および試薬は
別段の断りがない限り、アルドリッチケミカル社（Aldrich Chemical Company L
td.）が供給したものであり、さらなる精製を行わずに供給された状態で使用し
た。脱水溶媒は、適切な乾燥剤存在下に乾燥窒素雰囲気下での蒸留によって得て
、４Åモレキュラーシーブスまたはナトリウムワイヤを入れて保存した。石油エ
ーテルとは、沸点６０〜８０℃の留分を指す。

【０１４０】実施例１：ＡＤＥＰＴ用のニトロレダクターゼ活性化ベンジルＤＣ−８１プロ
ドラッグ（７）の合成

【０１４１】

【化４６】４−ベンジルオキシ−３−メトキシ安息香酸（２）の合成。

【０１４２】塩化ベンジル（２４．６ｍＬ、２０９ｍｍｏｌ、１．１当量）のＴＨＦ（１０
０ｍＬ）溶液を、機械撹拌した４−ヒドロキシ−３−メトキシ安息香酸（バニリ
ン酸、１）（３０ｇ、１７９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（９０ｍＬ）および２．０Ｍ
ＮａＯＨ水溶液（２２５ｍＬ）溶液に０℃で１５分間かけて滴下した。混合物を
昇温させて室温とし、還流下に４８時間加熱した。冷却後、混合物をヘキサンで
洗浄し（１００ｍＬで２回）、ＴＨＦを減圧下に除去した。残った水相を濃ＨＣ
ｌでｐＨ１の酸性とした。得られた沈殿を濾取し、水で洗浄し、乾燥して、４−
ベンジルオキシ−３−メトキシ安息香酸（２）を淡色非晶質固体として得た。

【０１４３】収量（ＥｔＯＡｃからの再結晶後）３１ｇ（６７％）；融点１７１〜１７２℃；ＩＲ（ｃｍ^−１）３７００〜３２００、２８２０〜３０００、２２１０、２１
４０、１６７０、１６００、１５８０、１５１０、１４５０、１４３０、１４１
０、１３８０、１３４０、１３００、１２６５、１２２０、１１８０、１１３０
〜１１１０、１０３０、１０１０； ^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３＋ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ７．６０（ｄ、Ｊ＝２Ｈｚ、
１Ｈ）、７．５５（ｄ、Ｊ＝２Ｈｚ、１Ｈ）、７．３０〜７．４４（ｍ、５Ｈ）
、６．９０（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、５．１９（ｓ、２Ｈ）、３．９１（
ｓ、３Ｈ）； ^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３＋ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ１６８．３、１５１．７、
１４８．８、１３６．３、１２８．５、１２８．０、１２７．２、１２３．７、
１２３、５、１１２．５、１１２．２．７０．６、５５．９；ＭＳ（ＥＩ）（ｍ／ｚ、相対強度）２５８．０９４９（Ｃ_１５Ｈ_１４Ｏ_４の計
算値：ｍ／ｚ２５８．０８９２）。

【０１４４】４−ベンジルオキシ−５−メトキシ−２−ニトロ安息香酸（３）の合成。

【０１４５】方法Ａ：調製したばかりのＳｎＣｌ４（５ｇ、１９．５ｍｍｏｌ）および発煙硝酸（１
．６７ｇ、２６．５ｍｍｏｌ）の混合物を、−２５℃（ドライアイス／四塩化炭
素）で機械撹拌している２（４．３５ｇ、１７ｍｍｏｌ）のＤＣＭ溶液に５分間
かけて滴下した。混合物を同温度でさらに１５分間維持し、水（１５０ｍＬ）で
反応停止し、昇温させて室温とした。有機層を分液した後、水層をＥｔＯＡｃで
抽出した（７５ｍＬで２回）。合わせた有機相を脱水し（ＭｇＳＯ_４）、減圧下
に溶媒留去して、明褐色ガムを得た。それを再結晶して、３を淡黄色針状物とし
て得た。収量＝４．１６ｇ（８２％）。

【０１４６】方法Ｂ：４−ベンジルオキシ−３−メトキシ安息香酸（８．５ｇ、３２．９ｍｍｏｌ）
を、７０％硝酸（１００ｍＬ）の撹拌溶液に３０分間かけて少量ずつ加えた。添
加完了後、反応混合物を昇温させて１５℃とし、その温度にさらに３０分間維持
した。反応混合物を氷に投入し、得られた沈殿物を濾取し、氷冷水で洗浄し、乾
燥して、ニトロ化生成物３を黄色粉末として得た。

【０１４７】収量（ＥｔＯＡｃ／ヘキサンからの再結晶後）７．８ｇ（７８％）；融点１８
２〜１８５℃；ＩＲ（ｃｍ^−１）３４００〜３２００、２８２０〜２９３０、１６７０、１６
００、１５８０、１５５０、１５１０、１４５０、１４１０、１４００、１３７
０、１３５０、１３３０、１２６５、１２１０、１１８０、１１６０、１０５５
、１００５； ^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３＋ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ７．３６〜７．４５（ｍ、６
Ｈ）、７．１６（ｓ、１Ｈ）、５．１９（ｓ、２Ｈ）、３．９５（ｓ、３Ｈ）； ^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３＋ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ１６７．３、１５２．７、
１４９．０、１４０．９、１３５、２、１２８．４、１２７．６、１２７．３、
１１１．１、７１．２、５６．５；ＭＳ（ＥＩ）（ｍ／ｚ、相対強度）３０３（Ｍ^＋、６４）、２８６（３６）、
２７３（５）、２５９（５）、１８１（７）、１２３（８）、１０５（１３）、
９１（１００）、７７（８）、６５（６３）、５１（２３）；ＥＩ−ＨＲＭＳｍ／ｚ３０３．０８２４（Ｃ_１５Ｈ_１３ＮＯ_６の計算値：
ｍ／ｚ３０３．０７４３）。

【０１４８】（２Ｓ）−Ｎ−（４−ベンジルオキシ−５−メトキシ−２−ニトロベンゾイル
）ピロリジン−メタノール（４）の合成。

【０１４９】４−ベンジルオキシ−５−メトキシ−２−ニトロ安息香酸（３）（３．５ｇ、
１１．５５ｍｍｏｌ）およびオキサリルクロライド（１．７５ｇ、１３．５６ｍ
ｍｏｌ、１．２当量）の脱水アセトニトリル（３０ｍＬ）溶液に触媒量のＤＭＦ
（３滴）を加えた。溶液を窒素下に終夜撹拌した。得られた酸塩化物溶液を窒素
雰囲気下に−２５℃で、ピロリジンメタノール（１．１６８ｇ、１１．５６ｍｍ
ｏｌ、１当量）およびＫ_２ＣＯ_３（３．６７５ｇ、２６．６３ｍｍｏｌ、２．３
当量）のアセトニトリル（８０ｍＬ）懸濁液を撹拌したものに３０分間かけて滴
下した。反応混合物をその温度でさらに１時間撹拌し、室温まで戻し、水（２０
０ｍＬ）で反応停止した。次に、溶液をクロロホルムで抽出し（１００ｍＬで４
回）、合わせた有機相を１ＭＨＣｌ（５０ｍＬで２回）、水（７５ｍＬで２回
）、ブライン（５０ｍＬで２回）、水（１００ｍＬ）で洗浄し、脱水し（ＭｇＳ
Ｏ_４）、溶媒を減圧下に留去して明黄色油状物を得た。生成物をさらにフラッシ
ュクロマトグラフィー（５％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３）によって精製して淡黄色油
状物として（４）を得たが、それは静置していると徐々に結晶化した。

【０１５０】収量３．９２ｇ（８８％）；［α］^２０ _Ｄ：−６２．３（ｃ０．４５、ＣＨＣｌ_３）；ＩＲ（ｃｍ^−１）３５００〜３２５０、２８６０、２９１０、１６００、１５
８０、１５２０、１４５５、１４３０、１３７０、１３３０、１２７５、１２２
０、１２１０．１１８５、１１５０、１１１０、１０６０、１０２５、１０００
； ^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ７．７６（ｓ、１Ｈ）、７．３４〜７．４７（
ｍ、５Ｈ）、６．８３（ｓ、１Ｈ）、５．２１（ｓ、２Ｈ）、４．３８〜４．４
０（ｂｓ、１Ｈ）、３．９８（ｓ、３Ｈ）、３．８０〜３．９５（ｍ、２Ｈ）、
３．１５〜３．２０（ｍ、２Ｈ）、２．１７〜２．２１（ｍ、２Ｈ）、１．６９
〜１．８９（ｍ、２Ｈ）； ^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ１５５．０、１４８．１、１３６．９、１３
５．２、１２８、８、１２８．５、１２７．９、１２７．６、１０９．２、１０
９．１、７１．３、６６．１、６１．５、５６．８、４９．５、２８．４、２４
．４；ＭＳ（ＥＩ）（ｍ／ｚ、相対強度）３８６（Ｍ^＋、４）、３６８（６）、３５
５（３９）、２８６（９０）、１２１（４）、９１（１００）、６５（４）；ＥＩ−ＨＲＭＳｍ／ｚ３８６．１５３１（Ｃ_２０Ｈ_２２Ｎ_２Ｏ_６の計算値
：ｍ／ｚ３８６．１４７８）。

【０１５１】（２Ｓ）−Ｎ−（２−アミノ−４−ベンジルオキシ−５−メトキシベンゾイル
）ピロリジン−メタノール（５）の合成。

【０１５２】方法Ａ：ニトロ化合物（４）（１．４ｇ、３．６２ｍｍｏｌ）およびＳｎＣｌ_２・２Ｈ _２Ｏ（４．５８ｇ、２０．０８ｇ、５．５当量）のメタノール（７０ｍＬ）溶液
を４５分間加熱還流した。溶媒を減圧留去によって除去し、得られた褐色油状物
をＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３（１５０ｍＬ）で処理
し、Ｎ_２下に終夜撹拌した。得られた懸濁液をセライト濾過し、有機相を分液し
、ブラインで洗浄し（１００ｍＬで２回）、脱水し（ＭｇＳＯ_４）、過剰の溶媒
を最終的に減圧下に留去した。残留明褐色油状物をさらにカラムクロマトグラフ
ィー（５％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３）によって精製して、アミン（５）を明黄色油
状物として得た。収量＝０．８２ｇ（６２％）。

【０１５３】方法Ｂ：ニトロ化合物４（７．０ｇ、１８．１３ｍｍｏｌ）の脱水メタノール（２０ｍ
Ｌ）溶液にヒドラジン水和物（４．５３ｇ、９０．６７ｍＬ、５当量）を滴下し
、緩やかな還流を維持しながら突沸防止顆粒で触媒量のラネーＮｉ（０．５４４
ｇ）を加えた。混合物をさらに１５分間加熱還流したところ、ＴＬＣ（５％Ｍｅ
ＯＨ／ＣＨＣｌ_３）によって反応が完結していることが示された。Ｎｉ触媒をセ
ライト濾過で除去し、溶媒を減圧下に留去した。生成物をフラッシュクロマトグ
ラフィー（５％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３）によってさらに精製して、アミン５を明
黄色の不安定な油状物として得た。それは低温で保存する必要があった。

【０１５４】収量５．２ｇ（８１％）；［α］^２０ _Ｄ：−１５．４（ｃ０．１３、ＣＨＣｌ_３）； ^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ７．２８〜７．４２（ｍ．５Ｈ）、６．７６
（ｓ１Ｈ）、６．２６（ｓ、１Ｈ）、５．０９（ｓ、２Ｈ）、４．３７〜４．４
２（ｂｓ、１Ｈ）、３．７８（５、３Ｈ）．３．５８〜３．７７（ｍ、４Ｈ）、
２．０４〜２．１０（ｍ、２Ｈ）、１．６９〜１．９２（ｍ、２Ｈ）； ^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ１７１．８、１５１．０．１４１．２、１３
６．５、１２８．６、１２７．６、１２７．１、１１２．９、１０２．９、７０
．６、６６．８、６０．９、５７．１、５１．０、２８．５、２４．９；ＩＲ（ｃｍ^−１）３５００〜３１００、２９５０、１６８０、１６２０、１５
９０、１５１０、１４５０、１４２５、１４００、１３３０、１２６０、１２３
０、１１７０、１１６５、１１３０、１１００、１０８０、１０５５、１０３０
；ＭＳ（ＥＩ）（ｍ／ｚ、相対強度）３５６（Ｍ^＋、１００）、２５６（６８）
、２３７（１４）、２２６（４）、１６４（６）、１３８（１５）、１００（８
）、９１（９６）、８４（２２）、６５（８）；ＥＩ−ＨＲＭＳｍ／ｚ３５６．１７８５（Ｃ_２０Ｈ_２４Ｎ_２Ｏ_４の計算値
：ｍ／ｚ３５６．１７３６）。

【０１５５】（２Ｓ）−Ｎ−［２−（ｐ−ニトロベンジルオキシ）カルボキサミド−４−ベ
ンジルオキシ−５−メトキシベンゾイル］ピロリジンメタノール（６）の合成。

【０１５６】アミン（５）（１ｇ、２．８ｍｍｏｌ）およびピリジン（０．４４ｇ、５．６
ｍｍｏｌ、２当量）の脱水ＤＣＭ（２０ｍＬ）溶液にＮ_２下０℃で、クロロギ酸
４−ニトロベンジル（０．６ｇ、２．８ｍｍｏｌ、１当量）の脱水ＤＣＭ（１５
ｍＬ）溶液を２０分間かけて滴下した。添加完了後、溶液をさらに１．５時間撹
拌した。反応混合物を飽和ＣｕＳＯ_４水溶液（１００ｍＬ）で２回）、水（１５
０ｍＬ）、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、脱水し（ＭｇＳＯ_４）、過剰の溶
媒を減圧下に除去した。得られた油状物についてフラッシュクロマトグラフィー
（３％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３）を行って、保護アミン（６）を淡黄色油状物とし
て得た。

【０１５７】収量１．１６ｇ（７７％）；ＩＲ（ｃｍ^−１）３５００〜３１００、２９５０、１６８０、１６２０、１５
９０、１５１０、１４５０、１４２５、１４００、１３３０、１２６０、１２３
０、１１７０、１１６５、１１３０、１１００、１０８０、１０５５、１０３０
； ^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、回転異性体）δ９．０４（ｓ、１Ｈ）、８．２０
（ｄ、Ｊ＝２２Ｈｚ、２Ｈ）、７．８１（ｓ、１Ｈ）、７．２８〜７．５５（ｍ
、５Ｈ）、６．８６（５、１Ｈ）、５．１４〜５．２４（ｂｓ、４Ｈ）、４．３
９（ｂｓ、１Ｈ）、３．８２（ｓ、３Ｈ）、３．５５〜３．８９（ｍ、４Ｈ）、
２．０４〜２．１４（ｍ、２Ｈ）、１．７０〜１．８７（ｍ、２Ｈ）； ^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ１７０．７、１５３．２、１５０．３、１４
７．５、１４３．６、１３６．１、１２８．７〜１２７．７、１２３．７、１１
１．５、１０６．０、７０．６、６５．２、６０．９、５６．５、５１．７、１
２８．２、２５．１；ＭＳ（ＦＡＢ）（ｍ／ｚ、相対強度）５３５（ＭＨ^＋、４）、４３５（２）、
３５６（３）、２５６（９）、１９２（２）、１８５（４）、１６６（３）．１
３６（１３）、１２０（５）、１０２（２６）、９１（１００）、８４（５）。

【０１５８】（１１ａＳ）−８−ベンジルオキシ−７−メトキシ−１，２，３，１０，１１
，１１ａ−ヘキサヒドロ−１１−ヒドロキシ−１０−（ｐ−ニトロベンジルオキ
シ）カルボキシ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］−ベンゾジアゼピン−
５−オン（７）の合成４Åモレキュラーシーブス（０．３７５ｇ）を加えたカーバメート６（０．４
ｇ、０．７５ｍｍｏｌ）、ＮＭＯ（０．１３１ｇ、１．１２ｍｍｏｌ、１．５当
量）の脱水ＤＣＭ：ＣＨ_３ＣＮ（９：３ｍＬ）混合溶媒溶液を、窒素下に１５分
間室温で撹拌した。ＴＰＡＰ（１３ｍｇ）の一部を加え、溶液をさらに２時間撹
拌した。ＴＬＣ（２％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３）で、反応が未完了でああることが
示されたので、追加量のＮＭＯ（６５ｍｇ、０．８４５ｍｍｏｌ、０．７５当量
）およびＴＰＡＰ（６．５ｍｇ）を加えた。１５分後にＴＬＣで、原料が完全に
なくなっていることが示された。モレキュラーシーブスをセライト濾過で除去し
、溶媒を減圧下に除去した。黒色残留物をカラムクロマトグラフィー（１％Ｍｅ
ＯＨ／ＣＨＣｌ_３からＥｔＯＡｃ：石油エーテル９５：５）によって精製して、
環化最終生成物７を得た。

【０１５９】収量０．１２４（３１％）；ＩＲ（ｃｍ^−１）３６００〜３２００、２８２０〜３０００、１７１０、１６
００、１５１０、１４５０、１４３０、１４００、１３７０、１３５０、１３０
５、１２７０、１２２０．１１２０〜１１００、１０５０、１０３０、１０１０
； ^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、回転異性体）δ８．１０（ｄ、Ｊ＝８．４３Ｈｚ
、２Ｈ）．７．２７〜７．５３（ｍ、６Ｈ）、７．２０（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、
２Ｈ）、６．７０（ｓ、１Ｈ）、５．６２（ｄ、Ｊ＝１０．２Ｈｚ、１Ｈ）、５
．０７（ｄ、Ｊ＝１０．７Ｈｚ、４Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３、５２〜３
．７２（ｍ、３Ｈ）、２．０４〜２．１０（ｍ、４Ｈ）； ^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ１６６．８３、１４９．２６、１４２．８５
、１３６．０３、１２８．７９〜１２７．１７．１２６．３８、１１４．５８、
１１２．５３、１１１．００、１０５．９２、８６．２３、７１．１２、６６．
２１、５９．９０、５６．２１、４７．３２、４６．４２、２８．６８、２３．
０５；ＭＳ（ＦＡＢ）（ｍ／ｚ、相対強度）５３５（Ｍ^＋＋２、２）、３５３（６）
、３３７（１０）、２８６（５）、２５６（３）、２４１（２）、２２８（２）
、１９２（３）、１３６（７）、９１（１００）；ＥＩ−ＨＲＭＳｍ／ｚ５３３．１８１３（Ｃ_２８Ｈ_２７Ｎ_３Ｏ_８の計算値
：ｍ／ｚ５３３．１７９８）。

【０１６０】実施例２：ＰＧＡＡＤＥＰＴ用のベンジルＤＣ−８１プロドラッグ（９）の
合成

【０１６１】

【化４７】（２Ｓ）−Ｎ−［２−フェニルアセトアミド−４−ベンジルオキシ−５−メト
キシベンゾイル］ピロリジンメタノール（８）の合成。

【０１６２】フェニル酢酸（０．４２ｇ、３．３ｍｍｏｌ、１．２当量）およびオキサリル
クロライド（０．５１ｇ、３．９６ｍｍｏｌ、１．４当量）の脱水アセトニトリ
ル（１０ｍＬ）溶液に触媒量のＤＭＦ（４滴）を加え、反応混合物を窒素下に終
夜撹拌した。得られた酸塩化物溶液を窒素雰囲気下に−２５℃で、アミン（５）
（１ｇ、２．８ｍｍｏｌ）およびＫ_２ＣＯ_３（０．９７ｇ、７．０２ｍｍｏｌ、
２．５当量）の脱水アセトニトリル（６０ｍＬ）中混合物に２０分間かけて滴下
した。反応混合物を−２５℃でさらに２時間撹拌し、室温まで戻した。反応混合
物を水（２００ｍＬ）で希釈し、それをＣＨＣｌ_３で抽出した（１００ｍＬで４
回）、合わせた有機相を１ＭＨＣｌ（５０ｍＬで２回）、水（７５ｍＬで２回
）およびブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水した。溶媒を減圧
下に留去し、残留油状物をさらにフラッシュクロマトグラフィー（５％ＭｅＯＨ
／ＣＨＣｌ_３）によって精製して淡黄色油状物としてフェニルアセトアミド（８
）を得た。

【０１６３】収量０．９１ｇ（６８％）；ＩＲ（ｃｍ^−１）３４００、２０９３、１６６０、１６１３、１５１９、１４
９５、１４５４、１４３５、１４０１、１３４５、１２６２、１２１８、１１７
５、１１０１、１０２８、１００３、９６９； ^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、回転異性体）δ９．２７（ｓ、１Ｈ）、７．９０
（ｓ、１Ｈ）、７．２６〜７．４８（ｍ、１０Ｈ）、６．７７（ｓ、１Ｈ）、５
．１１（ｓ、２Ｈ）、４．１９〜４．２９（ｂｓ、１Ｈ）、３．７８（ｓ、３Ｈ
）、３．６５（ｓ、２Ｈ）、３．３５〜３．６０（ｍ、４Ｈ）、１．８１〜２．
０８（ｍ、２Ｈ）、１．６２〜１．８１（ｍ、２Ｈ）； ^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ１６９．８、１４９．９、１４５．０、１３
６．２、１３４．５、１２９．３〜１２７．３、１１０．９、１０７．８、７０
．６、６６．２、６１．２、５６．５、５１．２、４４．８、２８．３、２４．
９；ＭＳ（ＥＩ）（ｍ／ｚ、相対強度）４７４（Ｍ^＋、７）、３７４（４４）、２
８４（７）、２５６（９）、２２８（３）、１６６（９）、１０５（１４）、１
０２（２５）、９１（１００）、８４（５）；ＥＩ−ＨＲＭＳｍ／ｚ４７４．２１４２（Ｃ_２８Ｈ_３０Ｎ_２Ｏ_３の計算値
：ｍ／ｚ４７４．２１５５）。

【０１６４】（１１ａＳ）−８−ベンジルオキシ−７−メトキシ−１，２，３，１１，１１
ａ−ペンタヒドロ−１１−ヒドロキシ−１０−フェニルアセチル−５Ｈ−ピロロ
［２，１−ｃ］［１，４］−ベンゾジアゼピン−５−オン（９）の合成モレキュラーシーブス（０．５２５ｇ）を加えたフェニルアセトアミド（８）
（０．５ｇ、１．０５ｍｍｏｌ）およびＮＭＯ（０．１８４ｇ、１．５７ｍｍｏ
ｌ、１．５当量）の脱水ＤＣＭおよびＣＨ_３ＣＮ（９：３ｍＬ）からなる溶媒系
の溶液を、窒素下に１５分間室温で撹拌した。ＴＰＡＰ（１９ｍｇ、５モル％）
を加え、混合物を１時間撹拌したところ、ＴＬＣ（５％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３）
で原料が完全に消費されたことが示された。反応混合物を濾過し、減圧下に溶媒
留去した。生成物をフラッシュクロマトグラフィー（２％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３）によってさらに精製して、保護ＰＢＤ９を不透明油状物として得た。

【０１６５】収量０．１５ｇ（３０％）；［α］^２０ _Ｄ：＋１３２５°（ｃ０．０４、ＣＨＣｌ_３）；ＩＲ（ｃｍ^−１）３４００、２９５６、２９２７、２０９４、１６３１、１５
５３、１５１４、１４５４、１４３３、１４０７、１３７９、１３５２、１２７
８、１２１９、１２０２、１１８１、１１３６、１０６７、１００９、７５２； ^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、回転異性体）δ７．１９〜７．３８（ｍ、１１Ｈ
）、６．４７（ｓ、１Ｈ）、５．７６（ｄ、Ｊ＝１０．１Ｈｚ、１Ｈ）、４．８
７（ｄ、Ｊ＝１２．１Ｈｚ、２Ｈ）、３．９５（ｓ、３Ｈ）、３．４２〜３．６
７（ｍ、３Ｈ）、２．６２（ｓ、２Ｈ）、１．９８〜２．１１（ｍ、４Ｈ）； ^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ１７３．５６、１６６．５４、１４９．７４
、１３５．８１、１３４．８４、１３０．９４〜１２６．５６、１１４．７７、
１１１．４５、８４．３８、７０．６０、５９．８７、５６．２８、４６．４１
、２８．５４、２２．６７；ＭＳ（ＥＩ）（ｍ／ｚ、相対強度）４７２（Ｍ^＋、４０）、３７４（２５）、
３５２（１５）、３２６（６）、２８４（７）、１３６（５）、９１（１００）
、７０（１７）；ＥＩ−ＨＲＭＳｍ／ｚ４７２．１９４４（Ｃ_２８Ｈ_２０Ｎ_２Ｏ_５の計算値
：ｍ／ｚ４７２．１９９８）。

【０１６６】実施例３：光感受性ベンジルＤＣ−８１プロドラッグ（１１）の合成

【０１６７】

【化４８】（２Ｓ）−Ｎ−［２−（２’−ニトロ−４’，５’−ジメトキシベンジルオキ
シ）カルボキサミド−４−ベンジルオキシ−５−メトキシベンゾイル］ピロリジ
ンメタノール（１０）の合成クロロギ酸４，５−ジメトキシ−２−ニトロベンジル（ＮＶＯＣ−Ｃｌ）（０
．７７ｇ、２．８ｍｍｏｌ、１当量）の脱水ＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液を１５分間
かけて、アミン（５）（１ｇ、２．８ｍｍｏｌ）およびピリジン（０．４４ｇ、
５．６ｍｍｏｌ、２当量）の脱水ＤＣＭ溶液にＮ_２下０℃で滴下した。次に反応
混合物を０℃でさらに２．５時間撹拌したところ、ＴＬＣ（３％ＭｅＯＨ／ＣＨ
Ｃｌ_３）で反応完結が示された。溶液を飽和ＣｕＳＯ_４水溶液（２×７５ｍＬ）
、水（１００ｍＬで２回）、ブライン（１５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱
水した。過剰の溶媒を減圧下に除去して粗生成物を得た。カラムクロマトグラフ
ィー（５％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３）によってさらに精製することで、１０を黄色
油状物として得た。

【０１６８】収量１．４５ｇ（８７％）；［α］^２０ _Ｄ：−１７５．５°（ｃ０．２２５、ＣＨＣｌ_３）；ＩＲ（ｃｍ^−１）４３３０、４２５３、３４２８、２９２４、２８５４、１７
１１、１６２６、１５１３、１４６３、１３７７、１２６６、１２１６、１１７
３、７６１、７２２； ^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、回転異性体）δ８．９０（ｓ、１Ｈ）、７．８２
（ｓ、１Ｈ）、７．７３（ｓ、１Ｈ）、７．２６〜７．４７（ｍ、６Ｈ）、６．
８５（ｓ、１Ｈ）、５．５８（ｄ、Ｊ＝１５Ｈｚ、２Ｈ）、５．１６（ｓ、２Ｈ
）、４．２９〜４．３９（ｂｓ、１Ｈ）、３．９５〜３．９９（ｓ、６Ｈ）、３
．８４（ｓ、３Ｈ）、３．４９〜３、７２（ｍ、４Ｈ）、１．８６〜２．１７（
ｍ、２Ｈ）、１．７２〜１．８６（ｍ、２Ｈ）； ^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ１５３．７、１５３．２、１５０．４、１４
８．１、１４４．５、１３９．６、１３６．１、１２８．５、１２８．１、１２
７．８、１２７．６、１１１．５、１１０．８、１０９．９、１０８．１、７０
．７、６６．４、６３．７、６２．７、６１．０、５６．７〜５６．４、５１．
６、２８．３；ＭＳ（ＦＡＢ）（ｍ／ｚ、相対強度）５９６（Ｍ^＋＋１、１６）、３５６（６
）、２５６（１９）、１９６（９５）、１８１（２１）、１６６（２０）、１４
９（１４）、１０２（３２）、９１（１００）、８７（１０）、７３（４４）、
６１（２２）、５７（３１）。

【０１６９】（１１ａＳ）−８−ベンジルオキシ−７−メトキシ−１，２，３，１０，１１
，１１ａ−ヘキサヒドロ−１１−ヒドロキシ−１０−（２’−ニトロ−４’，５
’−ジメトキシベンジルオキシ）カルボキシ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１
，４］−ベンゾジアゼピン−５−オン（１１）の合成モレキュラーシーブス（０．３３５ｇ）を加えたＮＶＯＣ保護アミン１０（０
．４ｇ、０．６７ｍｍｏｌ）およびＮＭＯ（０．２３６ｇ、２０．１７ｍｍｏｌ
、３当量）の脱水ＤＣＭ：ＣＨ_３ＣＮ（９：３ｍＬ）混合物溶液を、Ｎ_２下に１
５分間室温で撹拌した。ＴＰＡＰ（２３ｍｇ、１０モル％）を反応混合物に加え
、それをさらに２時間撹拌したところ、ＴＬＣ（２％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３）で
反応が完結していることが示された。モレキュラーシーブスをセライトで濾去し
、得られた溶液を減圧下に溶媒留去した。残留暗色油状物についてフラッシュク
ロマトグラフィー（１％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３）を行って、光感受性保護ＰＢＤ
（１１）を得た。

【０１７０】収量０．２１ｇ（４９％）；［α］^２０ _Ｄ：２１２．５°（ｃ０．０８、ＣＨＣｌ_３）；ＩＲ（ｃｍ^−１）４３２９、４２５８、３４０５、２９２５、２３６１、１７
１３、１６２０、１６０２、１５７９、１５１４、１４６３、１３７７、１３４
２、１２７７、１２１９、１１０３、１０６５、１０１２、９６８、８７０、７
９１、７２２； ^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、回転異性体）δ７．６６〜７．７１（ｓ、１Ｈ）
、７．１１〜７．３９（ｍ、６Ｈ）、６．８０〜６．９２（ｓ、１Ｈ）、６．３
２（ｓ、１Ｈ）、５．１４〜５．６７（ｍ、５Ｈ）、３．８５〜４．１５（ｍ、
９Ｈ）、３．４９〜３〜６７（ｍ、３Ｈ）、２．０１〜２．１５（ｍ、４Ｈ）； ^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ１７０．４１、１６６．７３、１９４．９７
、１４９、０３、１３５．９２、１２８．６７、１２６．３０、１２４．５２、
１１４．６４、１１２．２４、１１０．８７、１０９．８２、１０８．９２、１
０７．９７、８６．０２、７１．５１、６６．３８、６５．０３、６０．４０、
５６．４８〜５６．１９．４６．６７、２８．７０、２６．４１、２３．６５、
２１．０５；ＩＲ（ｃｍ^−１）３６００〜３１００、３０２０、２４００、２１０５、１７
６５、１６４０、１５２５、１４３０、１３８５、１３５０、１３１０、１２８
０、１２１５、１１７０、１１１０、１０４５；ＭＳ（ＦＡＢ）（ｍ／ｚ、相対強度）５９４（ＭＨ^＋、９）、３５３（５）、
３３７（４）、２８２（６）、２５６（４）、２４１（８）、１９６（１００）
、１８０（１５）、１６６（１６）、１５１（１３）、１３６（６）、１２３（
５）、１０５（１７）、９１（９８）；ＥＩ−ＨＲＭＳｍ／ｚ５９３．２０１０（Ｃ_３０Ｈ_３１Ｎ_３Ｏ_１０の計算
値：ｍ／ｚ５９３．２０４２）。

【０１７１】実施例４：ニトロレダクターゼＡＤＥＰＴ用のベンジルトマイマイシンプロド
ラッグ（１４７）の合成

【０１７２】

【化４９】（２Ｓ，４Ｓ）−Ｎ−（アリルオキシカルボニル）−４−ヒドロキシピロリジ
ン−２−カルボン酸（１３）の合成クロロギ酸アリル（３３．１７ｇ、２７５ｍｍｏｌ、１．２当量）のＴＨＦ（
３０ｍＬ）溶液を、トランス−４−ヒドロキシプロリン（３０ｇ、２２９ｍｍｏ
ｌ）のＴＨＦ（１５０ｍＬ）および水（１５０ｍＬ）懸濁液でｐＨ９（４ＭＮ
ａＯＨで調節）および０℃としたものに３０分間かけて滴下した。反応混合物を
さらに１時間０℃およびｐＨ９で撹拌した。水層を分液し、ＮａＣｌで飽和させ
、ＥｔＯＡｃで洗浄し（１００ｍＬで４回）、水相のｐＨを濃ＨＣｌで２に調節
した。得られた油状物をＥｔＯＡｃで抽出した（１００ｍＬで３回）。合わせた
有機相を脱水し（ＭｇＳＯ_４）、減圧下に溶媒留去して、Ａｌｌｏｃ保護ヒドロ
キシプロリン（１４）を粘稠透明油状物として得た。それをそれ以上精製せずに
次の段階で用いた。

【０１７３】収量４１ｇ（８４％）；［α］^２０ _Ｄ：−２３６°（ｃ０．２５、ＣＨＣｌ_３）；ＩＲ（ｃｍ^−１）３４２９、２５２２、２３４０、２２５８、２１３０、１６
８８、１４３７、１４１５、１３４５、１２７７、１２２２、１１７７、１１３
３、１０８５、１０４７、１０２５、９９４、８２７、７６８； ^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、回転異性体）δ５．８０〜５．９９（ｍ、１Ｈ）
、５．１３〜５．３４（ｍ、２Ｈ）、４．５２〜４．６３（ｍ、２Ｈ）、４．３
７〜４．４４（ｍ、２Ｈ）、３．５３〜３．６０（ｍ、２Ｈ）、２．００〜２．
３６（ｍ、２Ｈ）； ^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ１７４．７、１７４．５、１５４．８、１５
４．５、１３２．８、１３２．７、１１７．１、１１６．７、６９．２、６８．
５、６５．７、６５．６、５７．９、５７．６、５４．９、５４．４、３８．９
、３８．２；ＭＳ（ＥＩ）（ｍ／ｚ、相対強度）２１５（Ｍ^＋、１４）、１７０（１００）
、１３０（９５）、１２６（３４）、１０８（３５）、６８（５１）、５６（２
１）；ＥＩ−ＨＲＭＳｍ／ｚ２１５．０７５９（Ｃ_９Ｈ_１３ＮＯ_５の計算値：ｍ
／ｚ２１５．０７４３）。

【０１７４】（２Ｓ）−Ｎ−（アリルオキシカルボニル）−４−オキソピロリジン−２−カ
ルボン酸（１４）の合成ａｌｌｏｃ保護ヒドロキシプロリン（１３）（１８ｇ、８３．７２ｍｍｏｌ）
をアセトン（１２６０ｍＬ）に溶かした。ジョーンズ試薬［ＣｒＯ_３：２６．６
ｇ／Ｈ_２ＳＯ_４：２１．３ｍＬで、水で１００ｍＬとして溶液を調製した］（８
７ｍＬ）を１０分間かけて加えた。得られた混合物をさらに４５分間撹拌し、そ
の時点で過剰の酸化剤をメタノール（１５ｍＬ）で分解した。緑色クロム塩をセ
ライト濾過で除去し、濾液をＣＨＣｌ_３（１０００ｍＬ）で希釈した。合わせた
有機相をブラインで数回洗浄し（５００ｍＬで５回）、溶媒を減圧下に留去して
ケトン１４を得た。それを精製せずに用いた。

【０１７５】収量１４．６８（６２％）；ＩＲ（ｃｍ^−１）３４７１、３０２０、２９３２、２６１０、２０４１、１７
６１、１６９１、１６４９、１５４７、１４１１、１３４３、１２６６．１１９
５、１１６４、１１２８、９７２、９３９、８７７、７５９； ^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、回転異性体）δ９．２０（ｂｓ、１Ｈ）．５．８
６〜６、００（ｍ、３Ｈ）、５、２１〜５．３５（ｍ、２Ｈ）、４．８７〜４．
９１（ｍ、２Ｈ）、４．８７〜４．９１（ｍ、１Ｈ）、３．８７〜３．９９（ｓ
、２Ｈ）、２．６８〜２．９５（ｍ、２Ｈ）； ^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ２０７．６、２０７．１、１７５．８、１７５
．３、１５５．３、１５４．２、１３１．９、１１８．４、１１８．２、６７．
０、６６．８、５５．８、５２．５、５２．３、４１．０、４０．３；ＭＳ（ＥＩ）（ｍ／ｚ、相対強度）＝２１３（Ｍ^＋、１９）、１６８（８１）
、１５２（８）、１２８（１００）、１１２（１５）、１００（３７）、９６（
３６）、６８（１４）、５８（１３）、５６（３７）；ＥＩ−ＨＲＭＳｍ／ｚ２１３．０６４１（Ｃ_９Ｈ_１１ＮＯ_５の計算値：ｍ
／ｚ２１３．０６３７）。

【０１７６】（２Ｓ）−（Ｅ，Ｚ）−Ｎ−（アリルオキシカルボニル）−４−エチリデンピ
ロリジン−２−カルボン酸（１５）の合成ＮａＨ（６０％懸濁品）（４ｇ、１００ｍｍｏｌ、４当量）およびエチルトリ
フェニルホスホニウムブロマイド（３７ｇ、１００ｍｍｏｌ、４当量）の蒸留し
たばかりのＴＨＦ（２５０ｍＬ）中混合物を窒素下に４時間還流した。ケトン１
４（５．３２５ｇ、２５ｍｍｏｌ）の蒸留したばかりのＴＨＦ（５０ｍＬ）溶液
を４０分間かけて滴下し、反応混合物を窒素下に終夜還流した。それを冷却し、
５重量／体積％ＮａＨＣＯ_３水溶液（５００ｍＬ）に投入し、１０分間撹拌した
。混合物をＥｔＯＡｃで洗浄した（２５０ｍＬで２回）。水層を希ＨＣｌでｐＨ
３の酸性とした（激しい発泡が認められた）。乳濁液をＥｔＯＡｃで抽出し（２
００ｍＬで４回）、合わせた有機相をブラインで洗浄し（２５０ｍＬ）、脱水し
た（ＭｇＳＯ_４）。次に、溶媒を減圧下に留去して橙赤色油状物を得て、それを
それ以上精製せずに次の段階で用いた。粗収量３．８１ｇ（６８％）。

【０１７７】（２Ｓ）−（Ｅ，Ｚ）−Ｎ−（アリルオキシカルボニル）−４−エチリデンピ
ロリジン−２−カルボン酸メチル（１６）の合成ウィティッヒ生成物１５（３．５ｇ、１６ｍｍｏｌ）の脱水トルエン（１５ｍ
Ｌ）溶液にオキサリルクロライドおよびＤＭＦ（４滴）を加え、それを室温下お
よびＮ_２下に終夜撹拌した。蒸留したばかりのメタノール（２０ｍＬ）を加え、
混合物をさらに４時間撹拌したところ、ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：石油エーテル、１
：１）で原料が完全に消失していることが認められた。次に溶媒を減圧下に留去
させた。得られた油状物をＥｔＯＡｃ（６０ｍＬ）に溶かし、溶液を飽和ＮａＨ
ＣＯ_３水溶液（４×２５ｍＬ）、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、脱水し（Ｍｇ
ＳＯ_４）、溶媒を減圧下に除去してエステル化ウィティッヒ生成物（１６）を得
た。

【０１７８】収量３．４８ｇ（９４％）；［α］^２０ _Ｄ：−３７７．７°（ｃ０．０４５、ＣＨＣｌ_３）；ＩＲ（ｃｍ^−１）４２１４、３４５２、３０１９、２９５５、２８６２、２４
００、１７４６、１７０４、１６４９、１４３７、１４１０、１３４３、１３１
０、１２７４、１２１５、１１７９、１１２０、１０７２、１０２９、９９１、
９３２、７５５； ^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、回転異性体）δ５．８３〜６．００（ｍ、１Ｈ）
、５．１６〜５．４８（ｍ、３Ｈ）、４．５６〜４．６８（ｍ、３Ｈ）、４．０
５〜４．１４（５、２Ｈ）、３．８７〜３．９９（ｍ、３Ｈ）、２．５３〜２．
９７（ｍ、２Ｈ）、１．６０〜１．６３（ｍ、３Ｈ）； ^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）（Ｅ／Ｚ異性体）δ１７２．９、１５４．８、
１３４．１、１３４．０、１３３．１、１３３．０．１３２．８、１３２．７、
１１８．２、１１８．１、１１７．８、１１７、７、１１７．５、１１７．４、
１１７．１、６６．１、６６．０、６５．９、５８．８、５８．６、５８．４、
５２．３、５１．１、５０．６、４８．３、４７．７、３６．６、３５．７、３
２．６、３１．７、１４．７、１４．６、１４．４；ＭＳ（ＥＩ）（ｍ／ｚ、相対強度）２３９（Ｍ^＋、４）、１８０（７０）、１
５４（１００）、１３６（５５）、９４（３３）、８０（１０）、６７（１９）
、５９（８）；ＥＩ−ＨＲＭＳｍ／ｚ２３９．１０３０（Ｃ_１２Ｈ_１７ＮＯ_４の計算値：
ｍ／ｚ２３９．１１５８）。

【０１７９】（２Ｓ）−（Ｅ，Ｚ）−Ｎ−（アリルオキシカルボニル）−４−エチリデンピ
ロリジンメタノール（１７）の合成Ａｌｌｏｃ保護Ｃ環エステル（１６）（２．５ｇ、１０．４６ｍｍｏｌ）の溶
液を蒸留したばかりのＴＨＦ（５０ｍＬ）に溶かし、窒素下に０℃で撹拌した。
水素化ホウ素リチウム（０．４ｇ、１７．９５ｍｍｏｌ、１．７当量）をゆっく
り、少量ずつでその溶液に加えた（発泡が認められた）。混合物を昇温させて室
温とし、さらに４時間撹拌したところ、ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：石油エーテル、１
：１）によって反応が完結していることが示された。次にそれを再度０℃まで冷
却し、１５分間かけて水（４０ｍＬ）を滴下することで反応を停止した。混合物
を２ＭＨＣｌ（４０ｍＬ）で中和した。そのＨＣｌ液は非常にゆっくり加えた
が、激しい発泡が生じた。それをＥｔＯＡｃで抽出し（１００ｍＬで３回）、合
わせた有機相を水（１５０ｍＬ）およびブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、脱水
し（ＭｇＳＯ_４）、溶媒を減圧下に除去して油状物を得た。それをフラッシュク
ロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：石油エーテル、６０：４０）によってさらに精
製して純粋な生成物１７を得た。

【０１８０】収量１．５７ｇ（７１％）；ＩＲ（ｃｍ^−１）３４２５、２９４７、２８６４、２０８５、１６７８、１５
４７、１５３６、１４１１、１３４９、１３０８、１２３６、１２０３、１１１
４、１０４７、９７５、９３１、８８３、８５１、７６９； ^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、回転異性体）δ５．８７〜６．０１（ｍ、１Ｈ）
、５．１９〜５．４０（ｍ、３Ｈ）、４．５９〜４．６１（ｓ、２Ｈ）、３．６
４〜４．１５（ｍ、５Ｈ）、２．３７〜２．８０（ｍ、２Ｈ）、１．６２〜１．
６４（ｍ、３Ｈ）； ^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）（Ｅ／Ｚ異性体）δ１５６．３、１５４．５、
１３３．１、１３２．８、１３１．８、１３１．７、１３０．９、１３０．７、
１２８．７、１２８．６、１２５．５、１１７．５〜１１５．９、６６．１、６
５．９、６５．７、６４．６、６０．４、５９．９、５７．９、５７．３、５１
．６．５１．３、４８．３、４８．１、３４．７、３４．４、３４．２、３４．
１、３０．６、３０．３、２９．９．２９．５、２５．６、１４．５、１４．４
、１４．２。

【０１８１】（２Ｓ）−（Ｅ，Ｚ）−Ｎ−（アリルオキシカルボニル）−４−エチリデン−
Ｏ−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）−ピロリジンメタノール（１８）の合
成ヒドロキシ化合物１７（１．３ｇ、６．３６ｍｍｏｌ）およびイミダゾール（
１．０５ｇ、１５．４１ｍｍｏｌ、２．５当量）の脱水ＤＭＦ（３ｍＬ）溶液に
ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルクロライド（１．１１ｇ、７．３７ｍｍｏｌ、
１．２当量）を加え、反応混合物をＮ_２下に終夜撹拌した。反応混合物を水（２
００ｍＬ）で飽和させ、ＥｔＯＡｃで抽出した（１００ｍＬで３回）。有機層を
水（１００ｍＬ）、ブライン（１５０ｍＬ）で洗浄し、脱水し（ＭｇＳＯ_４）、
過剰の溶媒を減圧下に留去して明褐色油状物を得た。それについてフラッシュク
ロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：石油エーテル、５０：５０）を行って、純粋な
シリルエーテル（１８）を得た。

【０１８２】収量１．５４ｇ（７５％）；ＩＲ（ｃｍ^−１）３４１６、２０９３、１６４２、１４０６、１２５３、１１
８９、１１０４、７７５； ^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、回転異性体）δ５．８９〜５．９５（ｍ、１Ｈ）
、５．１８〜５．３４（ｍ、３Ｈ）、４．６２（ｓ、２Ｈ）、３．５３〜４．０
８（ｍ、５Ｈ）、２．４９〜２．７０（ｍ、２Ｈ）、１．４３〜１．５９（ｍ、
３Ｈ）、０．９１（ｂｓ、９Ｈ）、０．０２〜．００３（ｂｓ、６Ｈ）； ^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）（Ｅ／Ｚ異性体）δ１６２．５、１５４．４、
１３６．２、１３５．１、１３３．１、１３０．９、１２８．８、１１７．４、
１１７．１、１１６．７、１１６．１、６５．９、６５．７、６５．５、６３．
９、６３．６、６３．１、５８．６、５８．２、５８．１、５１．２、４８．３
、４８．１、３６．５、３４．６、３３．９、３１．８、３１．４、３０．４、
３０．３、２９．７、２９．２、２９．１、２２．７、１８．１、１８．０、１
４．５、１４．４、１４．１、−３．６、−５．４；ＭＳ（ＥＩ）（ｍ／ｚ、相対強度）３２５（Ｍ^＋、６）、３１０（３）、２６
８（１００）、２５６（６）、２４０（１８）、２２４（７）、１８２（２２）
、１８０（３８）、１６８（１０）、１５４（５）、１３６（２４）、１１５（
８）、９４（６）、７５（１３）、７３（２１）、５７（１７）；ＥＩ−ＨＲＭＳｍ／ｚ３２５．２０７３［（Ｍ−イソブチル）ｍ／ｚ２
６８．１２３３］（Ｃ_１７Ｈ_３１ＮＯ_３の計算値：ｍ／ｚ３２５．２０７３）
［（Ｍ−イソブチル）ｍ／ｚ２６８．１３６９）。

【０１８３】（２Ｓ）−（Ｅ，Ｚ）−４−エチリデン−Ｏ−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシ
リル）−ピロリジンメタノール（１９）の合成１８（１．５ｇ、４．６２ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（３０ｍＬ）溶液に、水（０．
４８ｇ、２７．１１ｍｍｏｌ、６当量）および触媒量のＰｄ（ＰＰｈ_３）_２Ｃｌ _２（０．１３２ｇ、０．１８９ｍｍｏｌ、４モル％）存在下に水素化トリブチル
スズ（１．４９ｇ、５．１ｍｍｏｌ、１．１当量）を加え、反応混合物を室温で
５分間撹拌した。反応混合物をＤＣＭ（４０ｍＬ）で希釈し、脱水し（ＭｇＳＯ _４）、過剰の溶媒を減圧下に除去した。純粋なアミン１９をフラッシュクロマト
グラフィー（ＥｔＯＡｃ：石油エーテル、５０：５０）によって単離して、明褐
色油状物を得た。

【０１８４】収量０．６７ｇ（６０％）；ＩＲ（ｃｍ^−１）４３２９、４２５７、３４２６、２９２３、２７２８、２６
７２、２３６０、２３４１、２０３５、１７７７、１７１３、１６４１、１５１
２、１４６３、１３７７、１３０２、１２４２、１１６９、１０１９、８９０、
７６０、７２１； ^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ５．３３〜５．３７（ｍ、１Ｈ）、４．０６（
ｓ、１Ｈ）、３．２８〜３．７５（ｍ、４Ｈ）、２．１７〜２．４７（ｍ、２Ｈ
）、１．５４〜１．６３（ｍ、３Ｈ）、０．８９（ｂｓ、９Ｈ）、０．０６〜．
００７（ｂｓ、６Ｈ）。

【０１８５】（２Ｓ）−（Ｅ，Ｚ）−Ｎ−（４−ベンジルオキシ−５−メトキシ−２−ニト
ロベンゾイル）−２−エチリデン−Ｏ−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）−
ピロリジンメタノール（２０）の合成４−ベンジルオキシ−５−メトキシ−２−ニトロ安息香酸（３）（２．５ｇ、
８．２５ｍｍｏｌ）およびオキサリルクロライド（１．２５ｇ、９．８４ｍｍｏ
ｌ、１．２当量）の脱水ＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液に触媒量のＤＭＦ（４滴）を加
え、室温で終夜撹拌した。得られたクロライドを脱保護Ｃ環１９（１．９８ｇ、
８．２５ｍｍｏｌ、１当量）、ＴＥＡ（１．７５ｇ、１７．３５ｍｍｏｌ、２．
１当量）および水（０．６ｍＬ）に窒素下で０℃にて２０分間かけて滴下した。
反応混合物をさらに２．５時間撹拌し、その時点でのＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：石油
エーテル、４０：６０）で反応が完結していることがわかった。有機溶媒を減圧
下に除去し、残留物をＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）と水（１５０ｍＬ）との間で分
配し、分液を行った。水層をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で洗浄し、合わせた有機
相を飽和ＮＨ_４Ｃｌ（１００ｍＬ）、ブライン（１５０ｍＬ）で洗浄し、脱水し
（ＭｇＳＯ_４）、減圧下に溶媒留去して、フラッシュクロマトグラフィー（Ｅｔ
ＯＡｃ：石油エーテル、７０：３０）後にカップリング生成物２０を得た。

【０１８６】収量２．８５ｇ（６６％）；［α］^２０ _Ｄ：−１１．７°（ｃ０．３０５、ＣＨＣｌ_３）；ＩＲ（ｃｍ^−１）４３２８、３４２４、２９６０、２８５５、２３５９、２３
３２、２０８４、１７０９、１６４１、１５４８、１５２６、１４６２、１３７
７、１２７８、１２１５、１１０７、１０５８、８３６、７６１、７２２； ^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ７．３７〜７．４７（ｍ、６Ｈ）、６．７７（
ｓ、１Ｈ）、５．３３〜５．３７（ｍ、１Ｈ）、５．２２（ｓ、２Ｈ）、４．４
３〜４．５９（ｂｓ、１Ｈ）、３．９５（ｓ、３Ｈ）、３．５９〜３．８６（ｍ
、４Ｈ）、２．４７〜２．７５（ｍ、２Ｈ）、１．６０〜１．６７（ｍ、３Ｈ）
、０．８９（ｂｓ、９Ｈ）、０．０８７〜０．０９（ｂｓ、６Ｈ）； ^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）（Ｅ／Ｚ異性体）δ１５４．８、１３５．３、
１２８．９、１２７．６、１０９．２、７１．３、５８．０、５７．６、５６．
６、３０．３、２９．７、２５．７、１４．６、１４．４、−５．４、−５．６
；ＭＳ（ＣＩ）（ｍ／ｚ、相対強度）５２７（ＭＨ^＋、２５）、４１８（８２）
、３８８（６）、３５９（９）、３２８（７）、３０４（２５）、２７９（４５
）、２５８（１３）、２４０（３５）、２１９（１１）、１８４（１０）、１６
１（５１）、１４７（２１）、１３３（４１）、１１３（２１）、１０７（１０
０）、９１（２５）、８１（８）、７３（４０）；ＥＩ−ＨＲＭＳｍ／ｚ５２６．２６４２（Ｃ_２０Ｈ_３８Ｎ_２Ｏ_６Ｓｉの計
算値：ｍ／ｚ５２６．２４９９）。

【０１８７】（２Ｓ）−（Ｅ，Ｚ）−Ｎ−（４−ベンジルオキシ−５−メトキシ−２−ニト
ロベンゾイル）−２−エチリデンピロリジンメタノール（２１）の合成ＴＢＡＦ（１ＭＴＨＦ溶液、１．７５ｍＬ、１．７５ｍｍｏｌ、１．２当量
）をＮ_２下に０℃で１５分間にわたって、ＴＢＤＭＳ保護中間体２０（０．７５
ｇ、１．４２ｍｍｏｌ）の脱水ＴＨＦ（３０ｍＬ）溶液に滴下した。反応混合物
を昇温させて室温とし、さらに３０分間撹拌したところ、ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ）
で原料が完全に消費されていることが示された。反応混合物を飽和ＮＨ_４Ｃｌ水
溶液（１５０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した（１００ｍＬで３回）。有
機相をブラインで洗浄し（１５０ｍＬ）、脱水し（ＭｇＳＯ_４）、減圧下に溶媒
留去して脱保護生成物２１を得た。それをそれ以上精製せずに次の段階で用いた
。

【０１８８】収量０．６４ｇ（１０９％、生成物とともに少量のＴＢＤＭＳＦ；最大収量０
．５７ｇ）；ＩＲ（ｃｍ^−１）４２１４、３４０６、３０２０、２９５８、２９２５、２８
５４、２４００、２０８５、１６３１、１５８１、１５２３、１４６３、１４５
３、１４３３、１３７８、１３３５、１２７８、１２１５、１０５３、８７０、
７５４； ^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ７．３７〜７．４７（ｍ、６Ｈ）、６．７７（
ｓ、１Ｈ）、５．３３〜５．３７（ｍ、１Ｈ）、５．２２（ｓ、２Ｈ）、４．４
３〜４．５９（ｂｓ、１Ｈ）、３．９５（ｓ、３Ｈ）、３．５９〜３．８６（ｍ
、４Ｈ）、２．４７〜２．７５（ｍ、２Ｈ）、１．６０〜１．６７（ｍ、３Ｈ）
、０．８９（ｂｓ、９Ｈ）、０．０８７〜．００９（ｂｓ、６Ｈ）。

【０１８９】（２Ｓ）−（Ｅ，Ｚ）−Ｎ−（２−アミノ−４−ベンジルオキシ−５−メトキ
シベンゾイル）−２−エチリデンピロリジンメタノール（２２）の合成ニトロ化合物２１（０．６４ｇ、１．３８ｍｍｏｌ、前段階で定量的収率であ
ったと仮定）のＭｅＯＨ（３０ｍＬ）およびＳｎＣｌ_２・２Ｈ_２Ｏ（１．５８ｇ
、７ｍｍｏｌ、５当量）溶液を４０分間加熱還流したところ、ＴＬＣ（５％Ｍｅ
ＯＨ／ＣＨＣｌ_３）で反応が完結したことが示された。過剰の溶媒を減圧下に留
去し、残留油状物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）と飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（１０
０ｍＬ）との間で分配し、Ｎ_２下に終夜撹拌した。有機層を分液し、ブライン（
１５０ｍＬ）で洗浄し、脱水し（ＭｇＳＯ_４）、減圧下に溶媒留去した。残留物
をフラッシュクロマトグラフィー（５％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３）によって精製し
て、純粋なアミン中間体２２を明黄色油状物として得た。

【０１９０】収量０．３２ｇ（６１％）；ＩＲ（ｃｍ^−１）４３２９、４２５７、３４２７、２９２３、２７２７、２３
６０、２３４１、２０３６、１７１２、１６２４、１５１３、１４６３、１３７
７、１２６４、１２１５、１１７２、１１２０、１００２、８７２、７６１、７
２２； ^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ７．３５〜７．５１（ｍ、５Ｈ）、６．８７（
ｓ、１Ｈ）．６．２７（ｓ、１Ｈ）、５．２８〜５．４２（ｍ、１Ｈ）、５．１
７（ｓ、２Ｈ）、４．４３〜４．５９（ｂｓ、１Ｈ）、３．８４（ｓ、３Ｈ）、
３．５９〜３．７８（ｍ、４Ｈ）、２．２５〜２．７５（ｍ、２Ｈ）、１．６０
（ｄ、Ｊ＝６．８Ｈｚ、３Ｈ）； ^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）（Ｅ／Ｚ異性体）δ１５０．９、１４１．５、
１３６．６、１３４．５、１２８．８、１２７．９、１２７．１、１１７．７、
１１７．３、１１２．６、１０３．０、７０．６、６６．１、６０．４、５９．
８、５７．２、３４．３、３０．０、２９．４、２１．０、１４．６、１４．３
、１３．６。

【０１９１】（２Ｓ）−（Ｅ，Ｚ）−Ｎ−［２−（ｐ−ニトロベンジルオキシ）カルボキサ
ミド−４−ベンジルオキシ−５−メトキシベンゾイル］−２−エチリデンピロリ
ジンメタノール（２３）の合成得られたばかりのアミン２２（０．５ｇ、１．３１ｍｍｏｌ）および脱水ピリ
ジン（０．２０７ｇ、２．６２ｍｍｏｌ、２当量）を脱水ＤＣＭ（３０ｍＬ）に
Ｎ_２下で０℃にて溶かした。クロロギ酸４−ニトロベンジル（０．２８２ｇ、１
．３１ｍｍｏｌ、１当量）の溶液を２０分間かけて前記アミン溶液に滴下した。
反応混合物を同じ条件下で２時間撹拌したところ、ＴＬＣ（５％ＭｅＯＨ／ＣＨ
Ｃｌ_３）で原料が完全に消費されたことが明らかになった。混合物をＤＣＭ（１
００ｍＬ）で希釈し、飽和ＣｕＳＯ_４水溶液（７５ｍＬで２回）、水（１００ｍ
Ｌで２回）、ブライン（１５０ｍＬ）で洗浄し、脱水した（ＭｇＳＯ_４）。有機
溶媒を減圧下に留去し、フラッシュクロマトグラフィー（３％ＭｅＯＨ／ＣＨＣ
ｌ_３）精製後にｐ−ニトロベンジルカーバメートを単離した。

【０１９２】収量０．５６ｇ（７６．３％）；［α］^２０ _Ｄ：＋２０４．６°（ｃ０．２２、ＣＨＣｌ_３）；ＩＲ（ｃｍ^−１）４３２９、４２５７、３４２６、２９２４、２８５３、２０
９３、１７１０、１６２８、１５２４、１４６２、１４０６、１３７７、１３４
６０、１２６９、１２１９、１１７５、１１１８、７２２； ^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、回転異性体）δ８．８１（ｂｓ、１Ｈ）、８．１
９（ｄ、Ｊ＝８．６Ｈｚ、２Ｈ）、７．８０（ｓ、１Ｈ）、７．３１〜７．６１
（ｍ、７Ｈ）、６．８５（ｓ、１Ｈ）、５．２９〜５．３５（ｍ、１Ｈ）、５．
２４（ｓ、２Ｈ）、５．１５（ｓ、２Ｈ）、４．０８〜４．１３（ｂｓ、１Ｈ）
、３．８３（ｓ、３Ｈ）、３．６６〜３．８６（ｍ、４Ｈ）、２．３９〜２．７
５（ｍ、２Ｈ）、１．５１（ｄ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、３Ｈ）； ^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）（Ｅ／Ｚ異性体）δ１５３．２、１５０．３、
１４７．６、１４３．６、１３６．１、１３４．１、１２８．７、１２８．４、
１２８．１、１２７．７、１２６．９、１２３．７、１１７．８、１１１．２、
７０．７、６５．２、６３．８、５６．６、２９．７、１４．６、１４．４；ＭＳ（ＦＡＢ）（ｍ／ｚ、相対強度）５６２（ＭＨ^＋、１５）、２７９（７７
）、２５６（１５）、２４０（３５）、２３１（３７）、１３６（１３）、１２
８（２５）、１０６（１４）、９１（１００）、７３（１１）、５７（１１）；ＥＩ−ＨＲＭＳｍ／ｚ５６１．２１５０（Ｃ_３０Ｈ_３１Ｎ_３Ｏ_８の計算値
：ｍ／ｚ５６１．２１１１）。

【０１９３】（１１ａＳ）−８−ベンジルオキシ−７−メトキシ−１，３，１０，１１，１
１ａ−テトラヒドロ−２−エチリデン−１１−ヒドロキシ−１０−（ｐ−ニトロ
ベンジルオキシ）カルボキシ−５Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］−ベンゾ
ジアゼピン−５−オン（２４）の合成未環かカーバメート２３（０．３ｇ、０．５３５ｍｍｏｌ）、ＮＭＯ（９４ｍ
ｇ、０．８０３ｍｍｏｌ、１．５当量）およびモレキュラーシーブス（０．２６
７ｇ）の脱水（ＤＣＭ：ＣＨ_３ＣＮ、９：３ｍＬ）混合液溶液をＮ_２下に室温で
１５分間撹拌した。ＴＲＡＰ（９．４ｍｇ、０．０２６ｍｍｏｌ、５モル％）を
加え、混合物を同じ条件下でさらに２．５時間撹拌した。反応混合物をセライト
濾過し、濾液を減圧下に溶媒留去した。残留物についてフラッシュクロマトグラ
フィー（１％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３）を行って、標的化合物（２４）を得た。

【０１９４】実施例５：ＰＢＤ二量体プロドラッグの合成実施例５（ａ）−１，１’−［［（プロパン−１，３−ジイル）ジオキシ］ビ
ス［［２−（４−ニトロベンジルオキシカルボキサミド）］ビス［（１１ａＳ）
−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−１１−ヒドロキシ−５Ｈ
−ピロロ［１，２−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン（３０）の合成

【０１９５】

【化５０】１’，３’−ビス（４−カルボキシ−２−メトキシフェノキシ）プロパン（２
５）の合成バニリン酸（１）（４−ヒドロキシ−３−メトキシ安息香酸）（５ｇ、２９．
８ｍｍｏｌ、２．１当量）および０．５ＭＮａＯＨ水溶液（７０ｍＬ）のＴＨ
Ｆ（５０ｍＬ）溶液を高撹拌しながら、それにジヨードプロパン（４．２ｇ、１
４．２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３０ｍＬ）溶液を滴下した。反応混合物を４８時間
還流させ、有機溶媒を減圧下に除去した。残った水相を石油エーテル４０〜６０
で洗浄し（１００ｍＬで３回）、それを次に新たな沈殿が認められなくなるまで
濃ＨＣｌでｐＨ２の酸性とした。沈殿を濾取し、水で洗浄し、脱水して、二量体
酸（２５）を白色結晶として得た。

【０１９６】収量７．６３ｇ（６８％）； ^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３＋ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ７．６４（ｄｄ、Ｊ_１＝８．
３Ｈｚ、Ｊ_２＝８．３Ｈｚ、２Ｈ）、７．５４（ｓ、２Ｈ）、６．９６（ｄ、Ｊ
＝８．４Ｈｚ、２Ｈ）、４．２９（ｔ、Ｊ＝６．１Ｈｚ、４Ｈ）、３．８８（ｓ
、６Ｈ）、２．３８（ｔ、Ｊ＝６．２Ｈｚ、２Ｈ）； ^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３＋ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ１７３．１、１６８．１、
１５１．９、１４８．９、１２３．５、１１２．４、１１１．４５、６５．２１
、５５．８、２８．８；ＩＲ（ｃｍ^−１）＝３６００〜３１００、２９２５、２８５５、１７１３、１
６８０、１５９７、１５１６、１４５９、１３７７、１３４４、１３０９、１２
７５、１２２３、１１７８、１１３３、１０４５、１０２１；ＭＳ（ＥＩ）（ｍ／ｚ、相対強度）３７６（Ｍ^＋、３４）、２０８（３１）、
１６８（４３）、１５２（１５）、１０１（１００）、６９（８７）；ＥＩ−ＨＲＭＳｍ／ｚ３７６．１１３６（Ｃ_１９Ｈ_２０Ｏ_８の計算値：ｍ
／ｚ３７６．１１５８）。

【０１９７】１’，３’−ビス（４−カルボキシ−２−メトキシ−５−ニトロフェノキシ）
プロパン（２６）の合成前記二量体酸２５（５ｇ、１３．３ｍｍｏｌ）を少量ずつ、７０％ＨＮＯ_３の
撹拌溶液（５０ｍＬ）に０℃で３０分間かけてゆっくり加えた。添加完了後、反
応混合物を昇温させて１５℃とし、撹拌をさらに２時間続けた。反応混合物を氷
に投入して生成物を沈殿させた。黄色沈殿物を濾取し、冷水で洗浄し、脱水して
、ニトロ化二量体酸核（２６）を淡黄色固体として得た。

【０１９８】収量４．５２ｇ（７３％）；融点２４１〜２４６℃；ＩＲ（ｃｍ^−１）３５００〜３２００、２９２４、１７１３、１６０４、１５
８２、１５２３、１４５９、１３７７、１２８２、１２１８、１１８９、１０５
３； ^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３＋ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ７．４４（ｓ、２Ｈ）、７．
１６（ｓ、２Ｈ）、４．３２（ｔ、Ｊ＝６．５Ｈｚ、４Ｈ）、３．９４（ｓ、６
Ｈ）、２．４４（ｔ、Ｊ＝６．４Ｈｚ、２Ｈ）； ^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３＋ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ１７２．３、１６７、１１
、１５２．５、１４９．２、１４１．１、１３２．１、１２８．６、１２２．７
、１１１．２、１０８．３、６５．２、５６．４、３３．９；ＭＳ（ＥＩ）（ｍ／ｚ、相対強度）４６７（ＭＨ^＋、１）、４３６（５）、４
２３（１０）、３７６（２）、２５６（６）、２１０（４）、１８３（１０）、
１６４（１０）、１５３（３）、９１（９）、７７（４）、５１（１３）、４４
（１００）；ＥＩ−ＨＲＭＳｍ／ｚ４６６．０８７６（Ｃ_１９Ｈ_１８Ｎ_２Ｏ_１２の計算
値：ｍ／ｚ４６６．０８５８）。

【０１９９】１，１’−［［（プロパン−１，３−ジイル）ジオキシ］ビス［２−ニトロ−
５−メトキシ−１，４−フェニレン）カルボニル］ビス［ピロリジンメタノール
］（２７）の合成前記ニトロ化二量体核２６（１ｇ、２．１４ｍｍｏｌ）の脱水ＣＨ_３ＣＮ／Ｔ
ＨＦ（３０：５ｍＬ）混合液溶液をオキサリルクロライド（０．６４ｇ、５．１
４ｍｍｏｌ、２．４当量）およびＤＭＦ（５滴）で終夜処理した。得られた酸塩
化物を、ピロリジンメタノール（０．４３２ｇ、４．２８ｍｍｏｌ、２当量）お
よびＫ_２ＣＯ_３（１．２ｇ、８．５６ｍｍｏｌ、４当量）の脱水アセトニトリル
（８０ｍＬ）懸濁液に−２５℃で窒素下に３０分間かけて滴下した。得られた混
合物を−２５℃でさらに１．５時間撹拌し、そこで反応混合物を水（１００ｍＬ
）で希釈した。溶液をクロロホルムで抽出した（１００ｍＬで４回）。合わせた
有機相を１ＭＨＣｌ水溶液（７５ｍＬで２回）、水（７５ｍＬで２回）、ブラ
イン（１００ｍＬ）で洗浄し、脱水し（ＭｇＳＯ_４）、減圧下に溶媒留去した。
得られた橙赤色油状物をカラムクロマトグラフィー（１０％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ _３）によって精製して、純粋な生成物２７を黄色粘稠油状物として得た。

【０２００】収量０．８８ｇ（６５％）；［α］^２０ _Ｄ：＋２４６．１°（ｃ０．０６７、ＣＨＣｌ_３）；ＩＲ（ｃｍ^−１）４３２９、４２５７、３３７０、２９１６、２７２８、１７
８７、１７１３、１６１４、１５７４、１５１３、１４６２、１３７７、１３３
７、１２７４、１２１５、１０５８、８６８、８２３、７４９、７２３； ^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ７．７３（ｓ、２Ｈ）、６．８０（ｓ、２Ｈ）
、４．３１〜４．３６（ｍ、６Ｈ）、３．９４（ｓ、６Ｈ）、３．７４〜３．８
７（ｍ、４Ｈ）、３．１７（ｔ、Ｊ＝６Ｈｚ、４Ｈ）、２．４４（ｔ、Ｊ＝５．
９Ｈｚ）、２．１２〜２．２２（ｍ、４Ｈ）、１．７０〜１．９２（ｍ、４Ｈ）
； ^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ１５４．８、１４８．３、１３７．０、１２
８．０、１０９．１、１０８．４、６６．０、６５．６、６１．４、５６．７、
４９．５、２８．６、２４．４；ＭＳ（ＦＡＢ）（ｍ／ｚ、相対強度）６３３（Ｍ^＋＋１、５２）、４４９（１
２）、２３６（１１）、２１９（１７）、２０６（１２）、１９６（１５）、１
９１（２２）、１７８（２０）、１６６（２０）、１５１（３４）、１３５（２
３）、１２８（１１）、１２２（３３）、１１５（１１）、１０２（４７）、９
１（１００）、８４（４５）。

【０２０１】１，１’−［［（プロパン−１，３−ジイル）ジオキシ］ビス［２−アミノ−
５−メトキシ−１，４−フェニレン）カルボニル］ビス［ピロリジンメタノール
］（２８）の合成ラネーニッケル（０．２５ｇ）を加えたニトロ中間体（２７）（１ｇ、１．５
８ｍｍｏｌ）のメタノール（２０ｍＬ）をゆるやかに還流させたものに、ヒドラ
ジン水和物（０．８７ｇ、１．７４ｍｍｏｌ、１０当量）を滴下した（沸騰が均
等に起こるよう突沸防止用顆粒を使用した）。反応混合物をさらに１５分間加熱
還流したところ、ＴＬＣ（１０％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３）で反応が完了している
ことが示された。触媒を濾去し（注意！自燃性のＮｉ）、濾液を減圧下に溶媒留
去して暗褐色油状物を得た。それをフラッシュクロマトグラフィー（７．５％Ｍ
ｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３）によって精製して、カップリングした二量体アミン（２８
）を明黄色油状物として得た。

【０２０２】収量＝０．６３２ｇ（７０％）；ＩＲ（ｃｍ^−１）３１００〜３６００、２９２５、１６１１、１４６０、１３
７７、１２７５、１２１６、１１７５； ^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ６．７４（ｓ、２Ｈ）、６．３３（ｓ、２Ｈ）
、４．３１〜４．４２（ｍ、２Ｈ）、４．１９〜４．２３（ｍ、４Ｈ）、３．７
６（ｓ、６Ｈ）、３．５０〜３．６６（ｍ、８Ｈ）、２．２７〜２．４０（ｍ、
２Ｈ）、２．０２〜２．１５（ｍ、４Ｈ）、１．７１〜１．８７（ｍ、４Ｈ）； ^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ１５１．１、１４１．０、１１２．８、１０
２．３、６５．１、６０．８、５７．１、５０．９、２８．７、２８．４；ＭＳ（ＦＡＢ）（ｍ／ｚ、相対強度）５７４（Ｍ^＋＋２、４４）、５０３（３
）、４７３（３０）、３８９（１１）、３７１（３１）、２１９（１４）、２０
６（５０）、１９８（１３）、１９２（２７）、１８０（３０）、１６６（１８
）、１４９（２８）、１３７（２３）、１２８（１７）、１０２（４３）、９３
（６８）、８４（５７）、７０（３３）、５７（３５）。

【０２０３】１，１’−［［（プロパン−１，３−ジイル）ジオキシ］ビス［［２−（４−
ニトロベンジルオキシカルボキサミド）−５−メトキシ−１，４−フェニレン］
カルボニル］ビスピロリジンメタノール（２９）の合成調製したばからの二量体アミン２８（０．４ｇ、０．７ｍｍｏｌ）の脱水ＤＣ
Ｍ（１５ｍＬ）およびピリジン（０．１９３ｇ、２．４５ｍｍｏｌ、３．５当量
）溶液に０℃で、クロロギ酸４−ニトロベンジル（０．３４７ｇ、１．６１ｍｍ
ｏｌ、２．３当量）の脱水ＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液を２０分間かけて滴下した。
得られた反応混合物を０℃でさらに１．５時間撹拌したところ、ＴＬＣ（１０％
ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３）で原料が完全に消費されたことが示された。反応混合物
をクロロホルム（５０ｍＬ）で希釈し、飽和ＣｕＳＯ_４水溶液（５０ｍＬで２回
）、水（５０ｍＬで２回）、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、脱水した（Ｍｇ
ＳＯ_４）。有機溶媒を減圧下に除去し、純粋な二量体カーバメート２９をフラッ
シュクロマトグラフィー（７％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３）後に明黄色泡状物として
得た。

【０２０４】収量０．５３ｇ（８１％）；ＩＲ（ｃｍ^−１）３４２４、２０８８、１６４１、１５０２、１２４７； ^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ９．０２（ｂｓ、２Ｈ）、８．２１（ｄ、Ｊ＝
８．８Ｈｚ、４Ｈ）、７．７２（ｓ、２Ｈ）、７．５６（ｄ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、
４Ｈ）、６．８２（５、２Ｈ）、５．２６（ｓ、４Ｈ）、４．２８〜４．３８（
ｍ、２Ｈ）、４．２６（ｔ、Ｊ＝６Ｈｚ、４Ｈ）、３．７９（ｓ、６Ｈ）、３．
４２〜３．７９（ｍ、８Ｈ）、２．２７〜２．４２（ｍ、２Ｈ）、２．１１〜２
．１８（ｍ、４Ｈ）、１．７１〜１．８８（ｍ、４Ｈ）； ^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ１７０．７、１５３．２、１５０．６、１４
７．６、１４３．６、１２８．５、１２６．９、１２３．９、１１１．５、１０
５．９、６５．３、６３．８、６１．０、５６．６、５１．６、３０．３、２８
．４；ＭＳ（ＦＡＢ）（ｍ／ｚ、相対強度）９３２（Ｍ^＋＋２、３）、７５３（５）
、５５１（５）、２４９（７）、２３２（１３）、２２２（８）、２０６（２３
）、１９２（３２）、１７９（２７）、１６６（４６）、１４９（２８）、１３
６（６６）、１２０（２２）、１０６（４５）、１０２（１００）、９１（８０
）、８４（４８）、７３（７１）、５７（４７）。

【０２０５】１，１’−［［（プロパン−１，３−ジイル）ジオキシ］ビス［［２−（４−
ニトロベンジルオキシカルボキサミド）］ビス［（１１ａＳ）−７−メトキシ−
１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−１１−ヒドロキシ−５Ｈ−ピロロ［１，２
−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン（３０）の合成ビスカーバメート２９（０．３５ｇ、０．３７ｍｍｏｌ）およびＮＭＯ（０．
１３４ｇ、１．１４ｍｍｏｌ、３．１当量）のモレキュラーシーブス（０．３５
０ｇ）を加えてＮ_２下に室温で１５分間撹拌しておいた脱水ＤＣＭ／ＣＨ_３ＣＮ
（９：３ｍＬ）溶液に、ＴＰＡＰ（１３．４ｍｇ、０．１１４ｍｍｏｌ、０．３
当量）を１回で加えた。反応の進行をＴＬＣ（７％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３）で追
跡した。２時間後反応はまだ十分に進行しておらず、追加のＮＭＯ（６７ｍｇ、
０．５５ｍｍｏｌ、１．５当量）およびＴＰＡＰ（６．７ｍｇ、０．０５ｍｍｏ
ｌ、０．１５当量）が必要であった。さらに３０分間撹拌した後、ＴＬＣで原料
が完全に消費されたことがわかった。反応混合物をセライト濾過し、濾液を減圧
下に溶媒留去した。得られた黒色残留物についてカラムクロマトグラフィー（１
．５％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３）を行って、生成物を不透明淡黄色油状物として得
た。

【０２０６】収量０．１４３（４２％）；ＩＲ（ｃｍ^−１）３５００〜３０００、２９３３、２２５３、１７２８、１５
９９、１５２３、１４６５、１４３１、１４０９、１３４８、１２７０、１２０
６、１１７４、１１１１、１０６０； ^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、回転異性体）δ８．１８（ｄ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、
４Ｈ）、７．７４（ｓ、２Ｈ）、７．４８（ｄ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、４Ｈ）、６．
７１（ｓ、２Ｈ）、５．６５（ｄ、Ｊ＝１０Ｈｚ、２Ｈ）、５．２６（ｓ、４Ｈ
）、４．２９（ｔ、Ｊ＝６Ｈｚ、４Ｈ）、４．０７〜４．１６（ｍ、２Ｈ）、３
．８３（ｓ、６Ｈ）、３．４２〜３．７５（ｍ、８Ｈ）、２．２５〜２．３２（
ｍ、２Ｈ）、２．１０〜２．２２（ｍ、４Ｈ）、１．６８〜１．７５（ｍ、４Ｈ
）； ^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ１６６．９、１５３．２、１４７．６、１４
３．８、１４２．８、１２８．２、１２３．９、１１３．９、１１０．９、１０
８．３、８６．２、６９．１、６６．３、６５．６、６０．０、５６．４、４６
．４、２９．７、２８．７、２３．１、１４．８ＭＳ（ＦＡＢ）（ｍ／ｚ、相対強度）９２５（Ｍ^＋−１、１）、８８９（５）
、７１１（６）、５０１（３）、２８６（１０）、２５２（７）、２１３（１５
）、１９２（３２）、１９７（１１）、１８５（２２）、１８１（４２）、１６
５（１５）、１４９（４７）、１３１（１８）、１１９（１６）、１０５（２９
）、９１（９６）、７３（１００）、５７（５４）。

【０２０７】実施例５（ｂ）−１，１’−［［（プロパン−１，３−ジイル）ジオキシ］ビ
ス［［２−（２，３−ジメトキシ−５−ニトロベンジルオキシカルボキサミド）
］ビス［（１１ａＳ）−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−１
１−ヒドロキシ−５Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５
−オン（３２）の合成

【０２０８】

【化５１】１，１’−［［（プロパン−１，３−ジイル）ジオキシ］ビス［［２−（２，
３−ジメトキシ−５−ニトロベンジルオキシカルボキサミド）］−５−メトキシ
−１，４−フェニレン］カルボニル］ビス−ピロリジンメタノール（３１）の合
成アミノアルコール２８（０．４ｇ、０．７ｍｍｏｌ）およびピリジン（０．１
９３ｇ、２．５４ｍｍｏｌ）の脱水ＤＣＭ（１５ｍＬ）溶液をＮ_２下に０℃で撹
拌しながら、それにクロロギ酸２−ニトロ−４，５−ジメトキシベンジル（０．
４４３ｇ、１．６１ｍｍｏｌ、２．３当量）の脱水ＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液を２
０分間かけて滴下した。反応混合物をクロロホルム（５０ｍＬ）で希釈し、飽和
ＣｕＳＯ_４水溶液（５０ｍＬで２回）、水（５０ｍＬで２回）、ブライン（１０
０ｍＬ）で洗浄し、脱水した（ＭｇＳＯ_４）。減圧下で溶媒を除去することで暗
黄色油状物を得て、それをフラッシュクロマトグラフィー（７％ＭｅＯＨ／ＣＨ
Ｃｌ_３）によってさらに精製して、純粋な生成物を黄色泡状物として得た。

【０２０９】収量０．５６４（７７％）；［α］^２０ _Ｄ：−４３．３°（ｃ０．４８５、ＣＨＣｌ_３）；ＩＲ（ｃｍ^−１）：４２１４、３４１６、３０２０、２９７３、２９４０、２
６１３、２４００、２２５４、２０７５、１７２７、１６１８、１５８５、１５
２２、１４６５、１４３８、１４０８、１３３１、１２７８、１２１６、１１７
４、１１１８、１０７１、１０３０、９８７、９０９、８７４、８５０、７５４
； ^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、回転異性体）δ８．９３（ｂｓ、２Ｈ）、７．７
１（ｓ、２Ｈ）、７．６９（ｓ、２Ｈ）、７．１０（ｓ、２Ｈ）、６．８２（ｓ
、２Ｈ）、５．６０（ｍ、４Ｈ）、４．３４（ｍ、２Ｈ）、４．２６（ｔ、Ｊ＝
６Ｈｚ、４Ｈ）、３．９９（ｓ、１２Ｈ）、３．９４（ｓ、６Ｈ）、３．５１〜
３．７９（ｍ、８Ｈ）、２．２６〜２．３６（ｍ、２Ｈ）、２．０５〜２．１７
（ｍ、４Ｈ）、１．８０〜１．８８（ｍ、４Ｈ）； ^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ１７０．６、１５３．７．１５０．４５、１
４８．１、１３９．５、１３２．９、１２７．８、１１１．２、１１０．４、１
０９．９、１０８．１、６５．４、６３．８、６２．４、６０．８、５６、４、
５３．５、５１．４、５０．６、２８．２、２５．０、２１．０、１４．２；ＭＳ（ＦＡＢ）（ｍ／ｚ、相対強度）１０５３（Ｍ^＋＋２、７）、８１４（６
）、４１６（３）、３０６（１３）、２９２（５）、２８０（２７）、２４６（
４６）、１９７（８１）、１８６（３８）、１８０（２５）、１６６（３７）、
１５１（１９）、１０２（２３）、９３（１００）、８４（１０）、７５（３７
）、５７（４２）。

【０２１０】１，１’−［［（プロパン−１，３−ジイル）ジオキシ］ビス［［２−（２，
３−ジメトキシ−５−ニトロベンジルオキシカルボキサミド）］ビス［（１１ａ
Ｓ）−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−１１−ヒドロキシ−
５Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン（３２）の
合成ＮＶＯＣ二量体カーバメート３１（０．４ｇ、０．３８ｍｍｏｌ）の脱水ＤＣ
Ｍおよびアセトニトリル（９：３ｍＬ）溶液を窒素下に撹拌しながら、それにＮ
ＭＯ（０．１３８ｇ、１．１６ｍｍｏｌ、３．１当量）およびモレキュラーシー
ブス（３５０ｍｇ）を加えた。この混合物を１５分間撹拌してから、ＴＰＡＰ（
１３．８ｍｇ、０．１１６ｍｍｏｌ、０．３当量）を加えた。反応混合物を室温
でさらに２時間撹拌し、次に追加のＴＰＡＰ（６．９ｍｇ、０．０５８ｍｍｏｌ
、０．１５当量）およびＮＭＯ（６９ｍｇ、１．５８ｍｍｏｌ、１．５当量）を
加えて、さらに４５分間高撹拌した後に反応を完結させた［ＴＬＣ（５％ＭｅＯ
Ｈ／ＣＨＣｌ_３）］。有機溶媒を減圧下に留去して黒色残留物を得て、それをカ
ラムクロマトグラフィー（１％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３）によってさらに精製する
ことで、純粋な最終生成物を暗黄色油状物として得た。

【０２１１】収量０．１６２（３９％）；［α］^２０ _Ｄ：−１２１．５°（ｃ１．０７、ＣＨＣｌ_３）；ＩＲ（ｃｍ^−１）４３２９、４２５８、３４２６、２９２６、２８５４、２７
２８、２３６０、２３４１、２０４６、１７１２、１６２０、１５８３、１５２
３、１４６４、１４０８、１３３０、１２７８、１２１９、１１７２、１１４９
、１０７１、１０３０、９８７、８７１、７９６、７５９； ^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、回転異性体）δ７．７１（ｓ、２Ｈ）、７．６２
（ｓ、２Ｈ）、７．１０（ｓ、２Ｈ）、６．４３（ｓ、２Ｈ）、５．４８〜５．
５９（ｍ、６Ｈ）、４．２９〜４．３６（ｍ、２Ｈ）、４．２４〜４．２８（ｔ
、Ｊ＝６Ｈｚ、４Ｈ）、３．９５（ｓ、１２Ｈ）、３．８８（ｓ、６Ｈ）、３．
４７〜３．５３（ｍ、８Ｈ）、２．３２〜２．４３（ｍ、２Ｈ）、２．０７〜２
．１７（ｍ、４Ｈ）、１．６７〜１．９２（ｍ、４Ｈ）； ^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ１７０．４、１５３．８、１５０．２、１４
８．９、１３９．６、１３０．９、１２８．８、１２７．６、１１１．５、１１
０．６、１０８．１、８６．０、６５．４、６５．０、６３．８、６０．９、５
６．４、４６．４、３１．９、２８．２、２５．９．２２．７、１４．１。

【０２１２】実施例５（ｃ）−１，１’−［［（プロパン−１，３−ジイル）ジオキシ］ビ
ス［［２−（フェニルアセトアミド）］ビス［（１１ａＳ）−７−メトキシ−１
，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−１１−ヒドロキシ−５Ｈ−ピロロ［１，２−
ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン（３４）の合成

【０２１３】

【化５２】１，１’−［［（プロパン−１，３−ジイル）ジオキシ］ビス［［２−（フェ
ニルアセトアミド）−５−メトキシ−１，４−フェニレン］カルボニル］ビス−
ピロリジンメタノール（３３）の合成フェニル酢酸（０．２ｇ、１．４７ｍｍｏｌ、２．１当量）およびオキサリル
クロライド（０．２２４ｇ、１．７６ｍｍｏｌ、２．５当量）の脱水アセトニト
リル（１０ｍＬ）溶液に撹拌下で触媒量のＤＭＦ（４滴）を加え、反応混合物を
Ｎ_２下に室温で終夜撹拌した。得られた酸塩化物溶液をＮ_２雰囲気下に−２５℃
で、Ｋ_２ＣＯ_３（０．４０６ｇ、２．９４ｍｍｏｌ、４．２当量）を加えたアミ
ン２８（０．４ｇ、０．７ｍｍｏｌ）の脱水アセトニトリル（４０ｍＬ）溶液に
撹拌下に３０分間かけて滴下し、反応混合物をさらに１．５時間撹拌した。反応
混合物をクロロホルム（５０ｍＬ）で希釈し、１ＭＨＣｌ（５０ｍＬで２回）
、水（７５ｍＬで２回）およびブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、脱水した（Ｍ
ｇＳＯ_４）。過剰の溶媒を減圧下に留去して、暗黄色油状物を得た。フラッシュ
クロマトグラフィー（１０％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３）後に、純粋なフェニルアセ
トアミド保護二量体アミノアルコールを淡黄色油状物として得た。

【０２１４】収量０．３４４（６４％）； ^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、回転異性体）δ９．３１（ｂｓ、２Ｈ）、７．５
９（ｓ、２Ｈ）、７．３５（ｓ、１０Ｈ）、６．６８（ｓ、２Ｈ）、４．２０〜
４．２８（ｍ、６Ｈ）、４．１４〜４．１６（ｍ、４Ｈ）、３．７１（ｓ、６Ｈ
）、３．２４〜３．５６（ｍ、８Ｈ）、２．２７〜２．３９（ｍ、２Ｈ）、２．
０２〜２．１７（ｍ、４Ｈ）、１．６４〜１．８１（ｍ、４Ｈ）； ^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ１６９．７、１５０．１、１３４．７、１３
０．２、１２９．４、１２８．９、１２７．３、１１０．５、１０８．２、６５
．３、６１．１、５６．３、５０．８、４４．７、２９．７、２８．３、２４．
７。

【０２１５】１，１’−［［（プロパン−１，３−ジイル）ジオキシ］ビス［［２−（フェ
ニルアセトアミド）］ビス［（１１ａＳ）−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ
−テトラヒドロ−１１−ヒドロキシ−５Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］［１，４］ベ
ンゾジアゼピン−５−オン（３４）の合成ＮＭＯ（０．１４１ｇ、１．２ｍｍｏｌ、３．１当量）およびモレキュラーシ
ーブス（３５０ｍｇ）を、撹拌したフェニルアセトアミド保護二量体カーバメー
ト３３（０．３ｇ、０．３８ｍｍｏｌ）の脱水ＤＣＭおよびアセトニトリル（９
：３ｍＬ）溶液に窒素下で加えた。この混合物を２０分間撹拌してから、ＴＰＡ
Ｐ（１４．１ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ、０．３１当量）を加えた。室温で反応混
合物をさらに１．５時間撹拌し、次に追加のＴＰＡＰ（７ｍｇ、０．０６ｍｍｏ
ｌ、０．１５当量）およびＮＭＯ（７０ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ、１．５当量）を
加えて、さらに４５分間にわたって高撹拌することで反応を完結させた［ＴＬＣ
（１％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３）］。有機溶媒を減圧下に留去して黒色残留物を得
て、それをさらにカラムクロマトグラフィー（１％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３）によ
って精製して、純粋な最終生成物を暗黄色油状物として得た。

【０２１６】収量０．１３８ｇ（４７．５％）；［α］^２０ _Ｄ：＋１３２°（ｃ０．２６８、ＣＨＣｌ_３）；ＩＲ（ｃｍ^−１）３４１２、２９５９、２９２４、２８５４、２０９４、１６
４２、１４６２、１３７７； ^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、回転異性体）δ７．２８〜７．３９（ｍ、１０Ｈ
）、７．１５（ｓ、２Ｈ）、６．４６（ｓ、２Ｈ）、５．７５〜５．７８（ｄ、
Ｊ＝１０Ｈｚ、２Ｈ）、４．１０〜４．３５（ｍ、１０Ｈ）、３．８９（ｓ、６
Ｈ）、３．３５〜３．７３（ｍ、８Ｈ）、２．２７〜２．３２（ｍ、２Ｈ）、１
．６８〜２．０５（ｍ、８Ｈ）； ^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ１６９．９、１５３．２、１４７．６、１４
３．８、１４２．８、１２８．２、１２３．９、１１３．９、１１０．９、１０
８．３、８６．５、６９．１、６６．３、６５．６、６０．０、５６．４、４６
．４、２９．７、２８．７、２３．１、１４．８。

【０２１７】実施例５（ｄ）−１，１’−［［（プロパン−１，３−ジイル）ジオキシ］ビ
ス［［２−（４−ニトロベンジルオキシカルボキサミド）］ビス［（１１ａＳ）
−７−メトキシ−１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−１１−ヒドロキシ−５Ｈ
−ピロロ［１，２−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン（３０）の別途
合成

【０２１８】

【化５３】１，１’−［［（プロパン−１，３−ジイル）ジオキシ］ビス［［２−ニトロ
−５−メトキシ１，４−フェニレン）カルボニル］］ビス［ピロリジン−２−カ
ルボキシアルデヒドジエチルジチオアセタール］（３５）の合成二量体ニトロ酸２６（０．２５ｇ、１．０１ｍｍｏｌ）およびオキサリルクロ
ライド（０．３ｇ、２．３３ｍｍｏｌ、２．３当量）の脱水ＴＨＦ懸濁液を撹拌
しながら、それにＤＭＦ３〜４滴を加え、反応混合物を窒素下に終夜撹拌した。
得られた酸塩化物を、（２Ｓ）−ピロリジン−２−カルボアルデヒド・ジエチル
チオアセタール（０．４１６ｇ、２．０２ｍｍｏｌ、２当量）およびトリエチル
アミン（０．４１ｇ、４．０４ｍｍｏｌ、４当量）の撹拌溶液にＮ_２下０℃で２
０分間かけて滴下した。反応混合物を昇温させて室温とし、撹拌をさらに１．５
時間続けた。過剰のＴＨＦを除去し、残留物を水（５ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡ
ｃ（１５ｍＬ）で抽出した。水相のｐＨを濃ＨＣｌ２滴でｐＨ３に調節してから
、ＥｔＯＡｃで抽出した（１０ｍＬで３回）。合わせた有機相を水（１０ｍＬで
２回）、ブライン（１５ｍＬ）で洗浄し、脱水し（ＭｇＳＯ_４）、有機溶媒を減
圧下に留去して暗赤色油状物を得た。フラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡ
ｃ：石油エーテル４０〜６０、１：１）による精製で、純粋な生成物３５を得た
。

【０２１９】収量０．５５８ｇ（６６％）； ^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ７．７２（ｓ、２Ｈ）、６．８３（ｓ、２Ｈ）
、４．８９（ｄ、Ｊ＝４．０Ｈｚ、２Ｈ）、４．６４〜４．７０（ｍ、２Ｈ）、
４．３０〜４．４０（ｍ、４Ｈ）、３．９１（ｓ、６Ｈ）、３．１５〜３．３０
（ｍ、４Ｈ）、２．５９〜２．７６（ｍ、８Ｈ）、１．７０〜２．３８（ｍ、８
Ｈ）、１．３０〜１．３８（ｍ、１２Ｈ）。

【０２２０】１，１’−［［（プロパン−１，３−ジイル）ジオキシ］ビス［［２−アミノ
−５−メトキシ１，４−フェニレン）カルボニル］］ビス［ピロリジン−２−カ
ルボキシアルデヒドジエチルジチオアセタール］（３６）の合成ニトロチオアセタール３５（０．４ｇ、０．４７ｍｍｏｌ）およびＳｎＣｌ_２・２Ｈ_２Ｏ（１．４ｇ、６．２２ｍｍｏｌ、１３．２当量）のメタノール（７ｍ
Ｌ）溶液を４０分間加熱還流したところ、ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ：石油エーテル４
０〜６０、１：１）で反応が完結していることが示された。反応混合物を室温に
戻した後、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液を加えることでｐＨをｐＨ８に調節した。得
られた懸濁液をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈し、それを窒素下に終夜撹拌し
た。有機相を分液し、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、脱水し（ＭｇＳＯ_４）、
溶媒を減圧下に除去して暗黄色ガム状物を得た。それをフラッシュクロマトグラ
フィー（ＥｔＯＡｃ：石油エーテル４０〜６０、３：７）によってさらに精製し
て、純粋な二量体アミノチオアセタールを明黄色油状物として得た。

【０２２１】収量０．２８１（５６％）； ^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ６．８２（ｓ、２Ｈ）、６．２９（ｓ、２Ｈ）
、５．３０（ｄ、Ｊ＝４．０Ｈｚ、２Ｈ）、４．６９〜４．８７（ｍ、２Ｈ）．
４．０８〜４．２１（ｍ、４Ｈ）、３．７６（ｓ、６Ｈ）、３．６０〜３．６６
（ｍ、４Ｈ）、２．６５〜２．７３（ｍ、８Ｈ）、１．８０〜２．３５（ｍ、８
Ｈ）、１．２２〜１．３１（ｍ、１２Ｈ）。

【０２２２】１，１’−［［（プロパン−１，３−ジイル）ジオキシ］ビス［［２−（４−
ニトロベンジルオキシカルボニルアミノ−５−メトキシ１，４−フェニレン）カ
ルボニル］］ビス［ピロリジン−２−カルボキシアルデヒドジエチルジチオアセ
タール］（３７）の合成ビスアミン３６（０．１８ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）およびピリジン（０．１０
１ｇ、１．２８ｍｍｏｌ、５．５当量）の脱水ＤＣＭ（１５ｍＬ）溶液をＮ_２下
に０℃で撹拌しながら、それにクロロギ酸４−ニトロベンジル（０．１００ｇ、
０．４６ｍｍｏｌ、２当量）の脱水ＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液を２０分間かけて滴
下した。反応混合物を０℃でさらに１．５時間撹拌し、その後昇温させて室温と
し、クロロホルム（５０ｍＬ）で希釈した。有機相を飽和ＣｕＳＯ_４水溶液（５
０ｍＬで２回）、水（７５ｍＬ）、ブライン（７５ｍＬ）で洗浄し、脱水し（Ｍ
ｇＳＯ_４）、過剰の溶媒を減圧下で除去することで暗黄色油状物を得た。フラッ
シュクロマトグラフィー（７％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３）によってさらに精製する
ことで、純粋な生成物を暗黄色泡状物として得た。

【０２２３】収量０．１７９（６８％）；［α］^２０ _Ｄ：＋１００°（ｃ０．２３２、ＣＨＣｌ_３）；ＩＲ（ｃｍ^−１）４２１４、３４２６、３０２０、２４００、２０８５、１６
５８、１６０９、１５２５、１４６６、１４５２、１４０８、１３４８、１２６
８、１２１６、１１７４、１１１２、１０５２、１０１５、９０８、７５３； ^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、回転異性体）δ９．１８（ｂｓ、２Ｈ）、８．１
９〜８．２４（ｄ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、４Ｈ）、６．８２（ｓ、２Ｈ）、６．２９
（ｓ、２Ｈ）、５．３０（ｄ、Ｊ＝４．０Ｈｚ、２Ｈ）、４、６９〜４．８７（
ｍ、２Ｈ）、４．０８〜４．２１（ｍ、４Ｈ）、３．７６（ｓ、６Ｈ）、３．６
０〜３．６６（ｍ、４Ｈ）、２．６５〜２．７３（ｍ、８Ｈ）、１．８０〜２、
３５（ｍ、８Ｈ）、１．２２〜１．３１（ｍ、１２Ｈ）。

【０２２４】１，１’−［［（プロパン−１，３−ジイル）ジオキシ］ビス［［２−（４−
ニトロベンジルオキシカルボキサミド）］ビス［（１１ａＳ）−７−メトキシ−
１，２，３，１１ａ−テトラヒドロ−１１−ヒドロキシ−５Ｈ−ピロロ［１，２
−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−５−オン（３０）の合成Ｎ−保護アミノチオアセタール３７（０．１５ｇ、０．１３ｍｍｏｌ）および
ＣａＣＯ３（６５ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ、５当量）のアセトニトリル／水（４
：１、５ｍＬ）溶液をゆっくり撹拌しながら、それに塩化水銀（１．６ｇ、５．
８８ｍｍｏｌ、４．５当量）を加え、室温で撹拌を２４時間続けた。反応混合物
をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）で希釈し、セライト濾過した。濾液を飽和ＮａＨＣＯ _３水溶液（１５ｍＬで２回）、ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、脱水し（ＭｇＳ
Ｏ_４）、減圧下に溶媒留去して黄色油状物を得た。それをカラムクロマトグラフ
ィー（０から２％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３）によってさらに精製することで、二量
体プロドラッグ化合物３０を得た（収量＝６７．３ｍｇ（５６％））。

【０２２５】実施例５（ｅ）−実施例５（ａ）〜５（ｄ）における中間体（２６）の別途合
成

【０２２６】

【化５４】１’，３’−ビス（４−カルボニル−２−メトキシフェノキシ）プロパン（３
９）の合成バニリン（３８）（１０．４ｇ、６８．３ｍｍｏｌ、２．６当量）、１，３−
プロパンジオール（２ｇ、２６．３ｍｍｏｌ、１当量）およびトリフェニルホス
フィン（６．８７ｇ、２６．３ｍｍｏｌ、１当量）の脱水ＴＨＦ（５０ｍＬ）溶
液に、窒素下でジエチルアゾジカルボキシレート（４．５７ｇ、２６．３ｍｍｏ
ｌ、１当量）の脱水ＴＨＦ（１５ｍｌ）溶液を１５分間かけて滴下した。反応混
合物を終夜撹拌し、クロロホルムで希釈し（７０ｍＬ）、１ＭＮａＯＨで洗浄
した（７５ｍＬで２回）。有機溶媒をロータリーエバポレーターで留去し、残留
物をトルエン（１５０ｍＬ）で２４時間にわたって磨砕した。トリフェニルホス
フィンオキサイドを濾去し、濾液をＮａＯＨ（１００ｍＬ）で洗浄し、脱水し（
ＭｇＳＯ_４）、減圧下に溶媒留去し、残留不透明油状物をフラッシュクロマトグ
ラフィー（１００％ＣＨＣｌ_３）によって精製して白色固体を得た。

【０２２７】収量＝６．２７（７０％）； ^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３＋ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ９．８４（ｓ、２Ｈ）、７．
６２〜７．６６（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、２Ｈ）、７．３８（ｓ、２Ｈ）、７．０
２〜７．０５（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、２Ｈ）、４．２４〜４．２８（ｔ、Ｊ＝６
．１Ｈｚ、４Ｈ）、３．９１（ｓ、６Ｈ）、２．０５〜２．１２（ｔ、Ｊ＝６．
２Ｈｚ、２Ｈ）； ^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３＋ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ１９０．８、１５４．０、
１４９．６、１３１．９、１２９．７、１２８．５、１２６．７、１１．５、１
０９．１、６６．６、６１．４、５８．８、５５．９、３１．８、１４．５；ＭＳ（ＦＡＢ）（ｍ／ｚ、相対強度）３４４（Ｍ^＋、２）、２１０（５４）、
１５２（１００）、１２３（９）、１０９（１４）．８１（１１）、６５（１０
）、５１（１１）。

【０２２８】１’，３’−ビス（４−カルボニル−２−メトキシ−５−ニトロフェノキシ）
プロパン（４０）の合成二量体アルデヒド（３９）（５ｇ、１４．５ｍｍｏｌ）を少量ずつ、ＨＮＯ_３（１００ｍＬ、７０％）に０℃で３０分間かけて少量ずつ加えた。得られた懸濁
液を１５℃でさらに３０分間撹拌してから、氷水に投入し、明黄色沈殿を濾取し
、冷水で洗浄し、乾燥して、ニトロ化中間体を得た。

【０２２９】収量４．６３ｇ（７４％）； ^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３＋ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ１０．４１（ｓ、２Ｈ）、７
．６７（ｓ、２Ｈ）、７．３７（ｓ、２Ｈ）、４．４１〜４．４５（ｔ、Ｊ＝６
．１Ｈｚ、４Ｈ）、３．９９（ｓ、６Ｈ）、２．８７〜２．９２（ｔ、Ｊ＝６．
２Ｈｚ、２Ｈ）； ^１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３＋ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ１８７．７、１７２．２、
１５３．４、１５１．５、１４３．６、１３２．０．１２８．６、１２５．６、
１１０．３、１０９．９、１０８．４、６５．８、５６．６、３３．８；ＭＳ（ＥＩ）（ｍ／ｚ、相対強度）４３４（Ｍ^＋、１）、２７７（３３）、２
６９（３７）、２１４（１３）、１９７（２１）、１６７（１００）、１５２（
２１）、１２２（２０）、１１１（１５）、９６（１０）、７９（１３）、７２
（３２）。

【０２３０】１’，３’−ビス（４−カルボキシ−２−メトキシ−５−ニトロフェノキシ）
プロパン（２６）の合成アルデヒド（４０）（４ｇ、９．２１ｍｍｏｌ）のアセトン（３００ｍＬ）溶
液に１５分間かけて熱ＫＭｎＯ_４水溶液（１０ｗ／ｖ％、２００ｍＬ）を滴下し
た。得られた混合物を４０分間撹拌し、不溶物をセライトで濾去した。セライト
層を熱水で洗浄し、合わせた濾液を減圧下に濃縮した。残った水相を濃ＨＣｌで
酸性とすることで淡黄色沈殿を得た。それを濾取し、水で洗浄し、乾燥して、二
量体酸（２６）を得た（収量３．０８ｇ（７１．８％））。

【０２３１】実施例６：Ｐｓｅｃ−保護ＰＢＤ（５２）および関連Ｐｔｅｃ−保護ＰＢＤ（
５５ａ／ｂ）（比較用）の合成

【０２３２】

【化５５】２級アミン４５の合成Ｎ−カルボベンジルオキシ−Ｌ−プロリンメチルエステル４１（２１ｇ、０．
０８ｍｏｌ）のＴＨＦ（５００ｍＬ）溶液に０℃でテトラヒドロホウ酸リチウム
（２．６ｇ、０．１２ｍｏｌ）を少量ずつ加えた。反応混合物を室温で４８時間
撹拌した。溶液を冷却して０℃とし、氷水（１５０ｍＬ）を加えて過剰のテトラ
ヒドロホウ酸リチウムを分解した。得られた懸濁液をＨＣｌ水溶液（１．０Ｎ）
でｐＨ４．０に調節し、Ｅｔ_２Ｏ（２５０ｍＬ）で抽出した。有機相を分液し、
Ｈ_２Ｏ（１００ｍＬで３回）、ブライン（１００ｍＬで２回）で洗浄し、脱水し
（ＭｇＳＯ_４）、濃縮して、アルコール４２を淡黄色油状物として得た（１８．
６ｇ、９９％）。

【０２３３】 ^１ＨＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）ｄ２．１〜１．７７（ｍ、４Ｈ）
、３．７６〜３．３５（ｍ、４Ｈ）、４．１〜３．７７（ｍ、１Ｈ）、５．１４
（２×ｓ、２Ｈ）、７．３８〜７．２８（ｍ、５Ｈ）；ＣＩＭＳ２３６（Ｍ^＋）。

【０２３４】アルコール４２（１８ｇ、０．０７７ｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（２５０ｍＬ）
溶液に窒素雰囲気下で−１０℃にて、トリエチルアミン（３２ｍＬ、０．２３ｍ
ｏｌ）およびＳＯ３・ピリジン錯体（３７ｇ、０．２３ｍｏｌ）のＤＭＳＯ（２
１０ｍＬ）溶液を加えた。反応混合物を昇温させて室温とし、３０分間撹拌し、
氷水（２００ｍＬ）に投入し、Ｅｔ_２Ｏで抽出した。有機相をＨＣｌ水溶液（１
．０Ｎ、１５０ｍＬで３回）、Ｈ_２Ｏ（１５０ｍＬで３回）、ブライン（１５０
ｍＬで２回）で洗浄し、脱水し（ＭｇＳＯ_４）、濃縮して黄色油状物を得た。粗
取得物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、ＥｔＯＡｃ）によって精
製して、アルデヒド４３を無色油状物として得た（１２．６ｇ、７１％）。

【０２３５】 ^１ＨＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）ｄ２．１６〜１．８（ｍ、４Ｈ）
、３．６６〜３．５（ｍ、２Ｈ）、４．３３〜４、１７（ｍ、１Ｈ）、５．２２
〜５、１３（ｍ、２Ｈ）、７．３７〜７．３（ｍ、５Ｈ）、９．５９（２×ｓ、
１Ｈ）；ＣＩＭＳ２３４（Ｍ^＋＋１）。

【０２３６】アルデヒド４３（１１ｇ、０．０４７ｍｏｌ）およびオルトギ酸トリメチル（
３６ｍＬ、０．３３ｍｏｌ）のＭｅＯＨ（５５ｍＬ）溶液に０℃で塩化チオニル
（５．５ｍＬ）を加えた。反応混合物を６０℃で２時間加熱した。溶液を冷却し
て室温とし、過剰の固体Ｎａ_２ＣＯ_３で処理し、Ｅｔ_２Ｏ（６０ｍＬ）で希釈し
た。懸濁液を濾過して不溶無機物を除去し、得られた濾液を減圧下に濃縮し、Ｅ
ｔＯＡｃに再度溶かした。有機溶液を飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（５０ｍＬで３回
）、ブライン（５０ｍＬで２回）で洗浄し、脱水し（ＭｇＳＯ_４）、濃縮して、
アセタール４４を黄色液体として得た（１２．５ｇ、９５％）。

【０２３７】 ^１ＨＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）ｄ２．１６〜１．７（ｍ、４Ｈ）
、３．６４〜３．３３（ｍ、８Ｈ）、４．０２〜３．９１（ｂｒｍ、１Ｈ）、４
．４および４．６（２×ｂｒｓ、１Ｈ）、５．１７〜５．１（ｍ、２Ｈ）、７．
４７〜７．２８（ｍ、５Ｈ）。

【０２３８】アセタール４４（５．８ｇ、０．０２ｍｏｌ）のＥｔＯＨ（５０ｍＬ）溶液を
、ラネーニッケル（０．２ｇ）とともに室温で１６時間撹拌して、水素化に先だ
って痕跡量の硫黄不純物を除去した。ニッケルをセライト濾過によって除去した
。

【０２３９】１０％パラジウム炭素（５８０ｍｇ）をアルコール溶液に加え、それを加圧下
に（約０．３４５ＭＰａ（約５０ｐｓｉ））水素化した。１６時間後、反応混合
物をセライト濾過し、セライト層をＥｔＯＡｃで洗浄し、合わせた有機溶液を濃
縮して２級アミン４５を淡緑色液体として得た（２．９ｇ、１００％）。

【０２４０】 ^１ＨＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ１．９３〜１．５９（ｍ、４Ｈ
）、３．１〜２．９２（ｍ、２Ｈ）、３．４〜３．３（ｄ、Ｊ＝６．９Ｈｚ、１
Ｈ）、３．４１（２×ｓ、６Ｈ）、３．５３（ｂｒｓ、１Ｈ）、４．２（ｄ、Ｊ
＝６．８Ｈｔ、１Ｈ）。

【０２４１】アミン４８の合成アセタール４５（１ｇ、６．９ｍｍｏｌ）、４，５−ジメトキシ−２−ニトロ
安息香酸４６（１．６ｇ、６．９ｍｍｏｌ）、ＴＢＴＵ（２．２ｇ、６．９ｍｍ
ｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１．２ｍＬ、６．９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３０ｍＬ）
溶液を室温で１６時間撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮し、粗取得物をＥｔ
ＯＡｃで抽出し、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（３０ｍＬで３回）、ＨＣｌ（１．０
Ｎ、３０ｍＬで３回）、Ｈ_２Ｏ（３０ｍＬで３回）、ブライン（３０ｍＬで３回
）で洗浄し、脱水し（ＭｇＳＯ_４）、濃縮して、黄色半固体を得た。粗取得物を
フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、２：１ＥｔＯＡｃ：石油エ
ーテル４０〜６０）によって精製して、ニトロ化合物４７を淡クリーム色固体と
して得た（１．２８ｇ、５１％）。

【０２４２】 ^１ＨＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ２．２６〜１．６７（ｍ、４Ｈ
）、３．１９〜３．０６（ｍ、２Ｈ）、３．５９および３．５７（２×ｓ、６Ｈ
）、３．９８（ｓ、６Ｈ）、４．４５〜４．４（ｍ、１Ｈ）、４．９５〜４．９
４（ｄ、Ｊ＝２．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．７６（ｓ、１Ｈ）、７．７１（ｓ、１Ｈ
）；ＣＩＭＳ３５５（Ｍ^＋＋１）。

【０２４３】１０％パラジウム炭素（１３０ｍｇ）を、ニトロ化合物４７（１．２８ｇ、３
．６ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（５０ｍＬ）溶液に加え、それを加圧下に（約０．３
４５ＭＰａ（約５０ｐｓｉ））水素化した。２０時間後、反応混合物をセライト
濾過し、セライト層をＥｔＯＡｃで洗浄し、合わせた有機溶液を濃縮して２級ア
ミン４８を淡色油状物として得た（１．２６ｇ、９８％）。

【０２４４】 ^１ＨＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ２．１８〜１．６５（ｍ、４Ｈ
）、３．５７〜３．４７（ｍ、８Ｈ）、３．８５および３．８（２×ｓ、６Ｈ）
、４．４２〜４．３８（ｍ、１Ｈ）、４．７４〜４．７（ｍ、１Ｈ）、６．３（
ｓ、１Ｈ）、６．７７（ｓ、１Ｈ）； ^１３ＣＮＭＲ（６８．７ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ２４．０３、２５．０７、
５０．５６、５５．８、５６．２４、５６．８６、５７．６５、５８．８２、１
０１．０７、１０５．０１、１１１．７５、１１２．５２、１４１．０７、１５
１．８１、１６９．７６；ＥＩＭＳ３２４（Ｍ^＋）。

【０２４５】Ｐｓｅｃ−保護ＰＢＤ５２の合成２−（フェニルスルホニル）エタノール４９（３７５ｍｇ、２．０１ｍｍｏｌ
）およびトリホスゲン（２００ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（１０
ｍＬ）溶液に０℃でピリジン（５５μＬ、０．６７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混
合物を室温で１６時間撹拌した。ピリジン（１５０μＬ、１．８５ｍｍｏｌ）お
よび粗クロロホルメート５０を、アミン４８（０．５ｇ、１．５ｍｍｏｌ）のＣ
Ｈ_２Ｃｌ_２（２０ｍＬ）溶液に０℃で加えた。反応混合物を室温で３時間撹拌し
た。溶液を減圧下に濃縮し、ＣＨ_２Ｃｌ_２で抽出した。有機相を１０％クエン酸
（２０ｍＬで２回）、Ｈ_２Ｏ（２０ｍＬ）、ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、脱
水し（ＭｇＳＯ_４）、濃縮して黄色油状物を得た。粗取得物をフラッシュカラム
クロマトグラフィー（シリカゲル、ＥｔＯＡｃ）によって精製して、カーバメー
ト５１を無色油状物として得た（７７０ｍｇ、９３％）。

【０２４６】 ^１ＨＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ２．１７〜１．７２（ｍ、６Ｈ
）、３．５５〜３．３４（ｍ、１０Ｈ）、３．９２および３．８４（２×ｓ、６
Ｈ）、４．５〜４．４（ｍ、２Ｈ）、４．７５（ｂｒｓ、１Ｈ）、６．８２（ｓ
、１Ｈ）、７．９７〜７．５６（ｍ、６Ｈ）、８．８９（ｂｒｓ、１Ｈ）； ^１３ＣＮＭＲ（６８．７ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ１４．１９、２１．０４、
２３．８８、５５．３１、５６．１２、５６．３１、５６．３９、５７．５２、
５８．２５、５８．９４、６０．３８、１０３．９１、１０４．７４、１１１．
１５、１２７．９７、１２８．０９、１２９．４３、１３３．９８、１３４．０
５、１３９．２９、１４３．７５、１５１．０９、１５２．７２、１６８．８３
；ＦＡＲＭＳ５３６（Ｍ^＋）。

【０２４７】カーバメート５１の脱水アセトン（１４ｍＬ）溶液にトランス−ビス（アセト
ニトリル）パラジウム（ＩＩ）クロライド（１０７ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）を
加えた、反応混合物を室温で１６時間撹拌した。溶液を減圧下に濃縮して褐色泡
状物を得た。粗取得物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、Ｅ
ｔＯＡｃ）によって精製して、メチルエーテル５２を橙赤色油状物として得た（
６９０ｍｇ、８５％）。

【０２４８】 ^１ＨＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ２．１２〜１．７８（ｍ、６Ｈ
）、３．２２〜３．１７（ｍ、１Ｈ）、３．７〜３．４（ｍ、７Ｈ）、３．９８
および３．９４（２×ｓ、６Ｈ）、４．６９〜４、６５（ｍ、１Ｈ）、５．４６
〜５．４３（ｄ、Ｊ＝９．３Ｈｚ、１Ｈ）、７．０３（ｓ、１Ｈ）、７．２２（
ｓ、１Ｈ）、７．８７〜７．５３（ｍ、５Ｈ）； ^１３ＣＮＭＲ（６８．７ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ１４．１９、２１．０６、
２３．２１、２８．９８、４６．３３、５４．７４、５６．１５、５６．３９、
５６．４５、５８．５８、６０．０９、６０．３９、９３．３３、１１０．１８
、１１３．３２、１２６．２４、１２８．０７、１２８．２７、１２９．４９、
１３４．１３、１３８．５９、１４８．７７、１５１．１５、１５５．６５、１
６７．３６；ＥＩＭＳ５０４（Ｍ^＋）。

【０２４９】Ｐｔｅｃ−ＰＢＤ５５ａ／ｂの合成

【０２５０】

【化５６】２−（フェニルチオ）エタノール５３（３５５ｍｇ、２．３ｍｍｏｌ）および
トリホスゲン（２３０ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（１０ｍＬ）溶
液に０℃でピリジン（６５μＬ、０．７７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室
温で１６時間撹拌した。ピリジン（１５０μＬ、１．８５ｍｍｏｌ）および粗ク
ロロホルメート５４を、アミン４７（０．５ｇ、１．５ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ _２（２０ｍＬ）溶液に０℃で加えた。反応混合物を室温で３時間撹拌した。溶液
を減圧下に濃縮し、ＣＨ_２Ｃｌ_２で抽出した。有機相をＨＣｌ（１．０Ｎ、２０
ｍＬで２回）、Ｈ_２Ｏ（２０ｍＬ）、ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、脱水し（
ＭｇＳＯ_４）、濃縮して褐色油状物を得た。粗取得物をフラッシュカラムクロマ
トグラフィー（シリカゲル、２：１ＥｔＯＡｃ：石油エーテル４０〜６０）によ
って精製して、カルビノールアミン５５ａとメチルエーテル５５ｂの混合物を黄
色ガム状物物として得た（５１０ｍｇ、６６％）。

【０２５１】 ^１ＨＮＭＲ（２７０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ２．１〜１．９９（ｍ、４Ｈ）
、３．１５〜２．９８（ｍ、２Ｈ）、３．７１〜３．４４（ｍ、４Ｈ）、３．９
３および３．８９（２×ｓ、６Ｈ）、４．３８〜４．０７（ｍ、１Ｈ）、５．４
５〜５．４１（ｄ、Ｊ＝９．３Ｈｚ、１Ｈ）、５．６５〜５、６１（ｄ、Ｊ＝９
．５Ｈｚ、１Ｈ）、６．７６（ｓ、１Ｈ）、７．２９〜７．１９（ｍ、６Ｈ）； ^１３ＣＮＭＲ（６８．７ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ２３．０５、２３．２１、
２８．７、２８．９８、２９．３６、２９．６８、３２．７２、３２．９９、４
６．３６、５６．１３、５６．１９、５６．５９、５９．９、６０．１３、６３
．９１、６４．１９、８６．０７、９３．３７、１１０．３６、１１２．５５、
１１２．８５、１２５．６７、１２６．６９、１２８．３、１２９．１５、１２
９．７２、１２９．９７、１３４．８５、１４８．３６、１５０．８３、１５６
．０２、１６７．０５；ＥＩＭＳ４５８（Ｍ^＋、５５ａ）、４７２（Ｍ^＋、５５ｂ）。

【０２５２】実施例７：ベンジルＤＣ−８１プロドラッグ（化合物７）のニトロレダクター
ゼ活性化実施例１に従って合成した化合物７を、２種類の異なる細胞系、すなわちＳＷ
１１１６とＬＳ１７４Ｔで評価した。ＳＷ１１１６とＬＳ１７４Ｔのいずれもヒ
ト腺癌結腸細胞系であり、病院（Charing Cross Hospital）で成長させたもので
ある。濃度２５００個／ｍＬで細胞を９６ウェルの微量定量プレートに入れ、大
腸菌ニトロレダクターゼ−モノクローナル抗体結合体の存在下または非存在下で
の各種濃度のプロドラッグのリン酸緩衝生理食塩水（Sigmaから入手可能）溶液
およびＮＡＤＨ（酵素機能に必要な補助因子）のＤＭＳＯ溶液とともに３７℃で
１時間インキュベートした。細胞を洗浄し、３７℃でさらに３日間インキュベー
トした。その後、細胞を固定し（ＴＣＡ）、染色した。プレートに付着している
残留生存細胞の濃度を、スルホローダミンＢ（ＳＲＢ）染料によって定量した。
プロドラッグのみで処理した対照細胞群を用いて、酵素活性化前の化合物の細胞
毒性を評価した。

【０２５３】結果を図４に示してある。プロドラッグ単独は、５００μＭまでの濃度であっ
てもＳＷ１１１６細胞で実質的に無毒性であることが認められた。ＬＳ１７４Ｔ
細胞系では、１００μＭを超える濃度で若干の毒性が認められた。この酵素およ
び補助因子存在下では、化合物７のＩＣ_５０はいずれの細胞系でも１〜５μＭで
あることが確認された。

【０２５４】同一条件下に同一細胞系で親薬剤であるベンジルＤＣ−８１（Thurston et al
., 1990, Chem. Brit., 26, 767-772）も評価して、プロドラッグ／酵素系によ
って得られる活性化の程度を確認した。親薬剤のＩＣ_５０値（ＩＣ_５０＝０．０
０８μＭ）とニトロレダクターゼ活性化プロドラッグのＩＣ_５０値（ＩＣ_５０＝
１〜５μＭ）との差は、２０〜１００倍であることが認められた。

【０２５５】実施例８：ＤＳＢ−１２０プロドラッグ（化合物３０）のニトロレダクターゼ
活性化化合物３０（実施例５（ａ）および５（ｅ）参照）を、実施例６で用いたもの
と同じ条件下でＬＳ１７４Ｔ細胞系で評価した。ＩＣ_５０値は２１５．３μＭ（
２つの測定値の平均）であることが認められ、それは酵素および補助因子を加え
た後で１３．７μＭまで低下し、１５〜１６倍の活性化係数を表していた。親薬
剤ＤＳＢ−１２０のこの細胞系での細胞毒性（ＩＣ_５０）は０．０００５μＭで
あって、化合物７と比較して二量体プロドラッグの活性化があまり有効でないこ
とを示している。

【０２５６】実施例９：ベンジルトマイマイシンプロドラッグ（化合物２４）のニトロレダ
クターゼ活性化化合物２４（実施例４参照）について、実施例６と同じ細胞系および同じ条件
下で調べた。それは、８６．２μＭ（２回の実験の平均）というＩＣ_５０値を示
し、それは酵素結合体およびＮＡＤＨを加えた後に６．４μＭまで低下し、活性
化係数が約１３．５であることを示していた。この場合、親のベンジルトマイマ
イシンは、対照として評価用には入手することができなかった。しかしながら、
トマイマイシンのＡ環のＣ８位へのベンジル基付加は化合物の細胞毒性をあまり
変化させない（ＤＣ−８１／Ｃ８−ベンジルＤＣ−８１の場合のように）と仮定
すると、Ｃ８−ベンジルトマイマイシンの細胞毒性は０．０１〜０．００１μＭ
のレベルであるはずである。

【０２５７】実施例１０：ベンジルＤＣ−８１プロドラッグ（化合物１１）の光活性化この実験では、紫外線架橋装置（Stratagene UVA Crosslinker）（３６５ｎｍ
）を用い、濃度１ｍＭの化合物１１（実施例３参照）のＤＭＦ溶液について光照
射を行った。少量ずつ（１００μＬ）を３０分後、１時間後、２時間後および３
時間後に取り、ウォーターズ（Waters）Ｃ４、３００Å逆相カラムおよび移動相
としての５０％メタノール／５０％水を用いるＨＰＬＣによって光感受性ＮＶＯ
Ｃ基の開裂をモニタリングした。化合物１１は保持時間が１１．２５分であり、
光照射すると保持時間８．５８分に新たなピークを生じた。標品のベンジルＤＣ
−８１は８．５８分という同じ保持時間を有している。脱保護プロセスの時間経
過を図５に示してある。完全な変換は、用いた条件下で３６５ｎｍでの照射を２
時間行うことで得られた。

【０２５８】ＭＴＴアッセイを用いて、ある時間経過ごとに取った活性化類縁体の少量サン
プルが培養液中での慢性ヒト組織球白血病Ｋ５６２細胞の成長を阻害する能力を
評価した。広範囲の濃度の薬剤で細胞を処理した後、細胞を９６ウェル微量定量
プレートに１０^４個／ウェル、８ウェル／サンプルで移した。プレートを５％Ｃ
Ｏ_２を含む加湿雰囲気下に３７℃でインキュベートした。このアッセイは、生存
細胞が不溶性の紫色ホルマザン沈殿に対して黄色の可溶性である３−（４，５−
ジメチルチアゾリル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロマイド（ＭＴＴ
）・テトラゾリウム塩を低減させる能力に基づいたものである。プレートを４日
間インキュベートした後（対照細胞数を１０倍に増やすため）、５ｍｇ／ｍＬ
ＭＴＴのリン酸緩衝生理食塩水溶液２０μＬを各ウェルに加え、プレートをさら
に５時間インキュベートした。プレートを３００ｇで５分間遠心し、多量の媒体
を細胞ペレットから除去した。各ウェルにＤＭＳＯ（２００μＬ）を加え、サン
プルを撹拌して完全に混合するようにした。ＥＬＩＳＡプレート読取装置（Tite
rtek Multiscan）で波長５５０ｎｍにて光学密度を測定し、対照光学密度のパー
セントとして表した。各曲線について、最終光学密度を対照値の５０％まで低下
させるのに必要な用量としてＩＣ_５０値を読み取った。

【０２５９】調べたＰＢＤプロドラッグ化合物１１自体は、無視できる程度の細胞毒性を有
することが明らかになった（ＩＣ_５０＝４７．５μＭ；図６）。照射後には細胞
毒性にかなりの上昇が認められ（図６）、照射１時間後にはＩＣ_５０値は０．６
μＭとなった。同様の条件下での標品ベンジルＤＣ−８１のＩＣ_５０値は０．５
μＭであった。

【０２６０】

【表１】

【０２６１】ＤＭＦ中のプロドラッグ濃度が１０ｍＭと比較的高いと光誘発開裂の効率が低
くなり、２時間の照射でＩＣ_５０値は１．７５μＭであった（図７参照）。

【０２６２】

【表２】

【０２６３】プロドラッグ濃度が高いとＵＶ光の効果的な吸収が防止される可能性があると
考えられる。さらに、溶媒をＤＭＦからメタノールに変更すると変換効率が低く
なった（図８）。

【０２６４】

【表３】

【０２６５】実施例１１：二量体ＤＳＢ−１２０プロドラッグ（化合物３２）の光活性化
二量体誘導体３２（実施例５（ｂ）参照）は、ＵＶ照射前にはやや細胞毒性で
あって、ＩＣ_５０値が４．５μＭであることが認められた。２時間の照射後の細
胞で化合物３２の溶液をインキュベーションすると、ＩＣ_５０値は１．２５μＭ
まで低下した（図９）。これはさらに、５時間の照射後では０．８５μＭまで低
下した。親ＰＢＤ二量体ＤＳＢ−１２０は、同じ細胞系で０．５５μＭというＩ
Ｃ_５０値を与えた（図９参照）。

【０２６６】

【表４】

【０２６７】これらの実験ではＨＰＬＣデータ（不図示）から、プロドラッグ３２（保持時
＝５．１８分）の保持時間＝３．６４分の生成物へのほぼ完全な変換が２時間の
照射によって生じ、５時間で完全に変換されたことが示唆された。標品のＤＳＢ
−１２０は保持時間３．６４分で溶出した。

【０２６８】実施例１２：ＰｓｅｃおよびＰｔｅｃ保護ＰＢＤ（化合物５２および化合物５
５）の生理活性の比較化合物５２（ＵＰ２０７３）および比較化合物５５ｂ（ＵＰ２０９０）につい
て、英国癌研究所（The Institute of Cancer Research, Sutton）のケランド博
士（Dr Lloyd R. Kelland）のグループが卵巣細胞系での細胞毒性活性を評価し
た。調べた５種類の細胞系はＳＫＯＶ−３、Ａ２７８０／Ａ２７８０ｃｉｓＲお
よびＣＨ１／ＣＨ１ｃｉｓＲ（ｃｉｓＲは、細胞系がシスプラチンに対して抵抗
性であることを示している）であった。

【０２６９】単一の生存細胞を９６ウェル微量定量プレートにおいて成長培地（１６０μＬ
）に接種し、終夜で付着させた。被験化合物をＤＭＳＯに溶かし（２０ｍＭ薬剤
濃度を得る）、直ちに四連ウェルで細胞を加えた。ウェルにおける最終薬剤濃度
は１００μＭから２．５ｎＭの範囲であり、実際には１００、２５、１０、２．
５、１μＭ、２５０、１００、２５、１０、２．５ｎＭであった（薬剤を成長培
地で希釈し、既存のウェル容量１６０μＬに４０μＬを加えて上記の最終濃度を
得た）。９６時間後、培地を除去し、残った細胞を氷上で１０％トリクロロ酢酸
に３０分間曝露することで固定した。次にウェルを水道水で３〜４回洗浄し、終
夜風乾し、１％酢酸に溶かしたスルホローダミンＢ（０．４％）１００μＬで処
理した。染色を１０〜１５分間継続してから、ウェルを１％酢酸で３〜４回洗浄
し、風乾してからＴｒｉｓ塩基（１０ｍＭのもの１００μＬ）に加えた。プレー
トを振盪し、５４０ｎＭでの吸光度読取値をプレート読取装置を用いて求めた。
濃度の吸光度％に対するプロットからＩＣ_５０値を計算した（８個の未処理ウェ
ルと比較）。

【０２７０】化合物５６（ＵＰ２０２５）を用いてもアッセイを行った。

【０２７１】

【化５７】これは化合物５２の未保護型のものである。

【０２７２】結果を以下に示す。

【０２７３】

【表５】

【０２７４】ＲＦは抵抗性係数であり、シスプラチン抵抗性細胞における化合物の細胞毒性
を正常な細胞系での毒性で割った値である。

【０２７５】Ｐｔｅｃ保護ＰＢＤ（５５ｂ）であるＵＰ２０９０は、Ｐｔｅｃ保護基がＧＳ
Ｔへの曝露時に保護基の断片化を誘発する上で必要と考えられる酸性プロトンを
持たないことから予想されるように、卵巣細胞系に対して実質的に不活性である
。しかしながら、Ｐｓｅｃ−保護プロドラッグ（５２）であるＵＰ２０７３は、
Ｐｔｅｃ対照より５０倍以上の毒性を有することを示した。この化合物は特にＳ
ＫＯＶ３細胞系に対して活性であり、それはこの細胞系が高レベルのグルタチオ
ン／グルタチオントランスフェラーゼが存在するために親電子細胞毒性剤に対し
て本来抵抗性であることから注目すべきことである。興味深いことに、Ｐｓｅｃ
プロドラッグＵＰ２０７３は実際には、それの基礎となっているＰＢＤであるＵ
Ｐ２０２５よりこの細胞系では活性が高かった。理論に拘束されるものではない
が、このプロドラッグは、作用部位近くで脱保護されるまでグルタチオンおよび
他の生体内求核剤から保護される可能性がある。

【０２７６】ＵＰ２０７３についてはまた、国立癌研究所（The National Cancer Institut
e (NCI), Bethesda, Marykand USA）がスクリーニングを行った。ＮＣＩは、そ
れぞれ１０倍で異なる最低５種類の濃度で化合物の試験を行う約６０種類のヒト
腫瘍細胞系からなるin vitro細胞毒性スクリーニング材料を使用することができ
る。細胞の生存性または成長がＳＲＢ蛋白アッセイで推定される場合には、４８
時間連続曝露プロトコールを用いる。

【０２７７】方法約６０種類のヒト腫瘍細胞系に対して被験化合物を評価した。ＮＣＩスクリー
ニング手順については、モンクスらの報告に詳細に記載されている（Monks, A e
t al., Journal of the National Cancer Institute, 1991, 83, 757）。すなわ
ち、細胞懸濁液を特定の細胞型および予想される標的細胞密度（細胞成長特性に
基づいて５０００〜４００００個／ウェル）に従って希釈し、ピペット（１００
μＬ）によって９６ウェル微量定量プレートに加えた。細胞を３７℃で２４時間
にわたって前インキュベーションして安定化させた。所期の試験濃度の２倍の希
釈液を時間ゼロで１００μＬずつウェルに加えた。被験化合物は、５種類の１０
倍希釈液（１０^−４、１０^−５、１０^−６、１０^−７および１０^−８μＭ）で評
価した。被験化合物を５％ＣＯ_２雰囲気および１００％湿度で４８時間インキュ
ベートした。次に、スルホローダミンＢアッセイを用いて細胞のアッセイを行っ
た。プレート読取装置を用いて光学密度を読み取り、マイクロコンピューターで
読取値を処理して、半数の細胞を殺すのに必要な用量であるＬＣ_５０値とした。
細胞の半分の成長を阻害するのに必要な用量も測定した。

【０２７８】ＵＰ２０７３はスクリーニングで良好な成績を示し、肺、結腸、ＣＮＳ、メラ
ノーマ、腎臓および乳房の腫瘍細胞系パネルで細胞系に対する活性を示した。興
味深いことに、５３にわたる細胞系のＬＣ_５０データを解析したところ、グルタ
チオントランスフェラーゼ活性に対する若干の相関性が示唆された。選択した結
果を以下に示す。

【０２７９】

【表６】

【図面の簡単な説明】

【図１】図１は本発明による合成図式である。

【図２ａ】図２ａは本発明による二量体の合成図式である。

【図２ｂ】図２ｂは本発明による二量体の合成図式である。

【図３】図３は、本発明で使用される別途環化を示す合成図式である。

【図４】図４は、ＳＷ１１１６細胞およびＬＳ１７４Ｔ細胞におけるニトロレダクター
ゼ／ＮＡＤＨによる活性化前後での、プロドラッグ化合物７（実施例１参照）に
おける細胞毒性結果を示すグラフである。

【図５】図５は、３時間の期間にわたるＵＶＡ（３６５ｎｍ）露光によって開裂した化
合物１１（実施例３参照）のパーセントを示すグラフである。

【図６】図６は、照射時間を変動させた場合における、当初薬剤濃度１ｍＭでの、ＤＭ
Ｆ中のヒト慢性骨髄性白血病Ｋ５６２細胞に対するベンジルＤＣ−８１および化
合物１１のin vitro細胞毒性（ＩＣ_５０；μＭ）を示すグラフである。

【図７】図７は、照射時間を変動させた場合における、当初薬剤濃度１０ｍＭでの、Ｄ
ＭＦ中のヒト慢性骨髄性白血病Ｋ５６２細胞に対するベンジルＤＣ−８１および
化合物１１のin vitro細胞毒性（ＩＣ_５０；μＭ）を示すグラフである。

【図８】図８は、照射時間を変動させた場合における、当初薬剤濃度１ｍＭでの、メタ
ノール中のヒト慢性骨髄性白血病Ｋ５６２細胞に対するベンジルＤＣ−８１およ
び化合物１１のin vitro細胞毒性（ＩＣ_５０；μＭ）を示すグラフである。

【図９】図９は、照射時間を変動させた場合における、当初薬剤濃度１ｍＭでの、メタ
ノール中のヒト慢性骨髄性白血病Ｋ５６２細胞に対するＤＳＢ−１２０および化
合物３２のin vitro細胞毒性（ＩＣ_５０；μＭ）を示すグラフである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｐ 35/00 Ａ６１Ｐ 35/00 43/00 １２３ 43/00 １２３Ｃ０７Ｄ 207/08 Ｃ０７Ｄ 207/08 (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＲ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ (72)発明者ハワード，フイリツプ・ウイルソンイギリス国、ノツテインガムシヤー・エヌ・ジー・７・２・アール・デイー、ノツテインガム、ユニバーシテイ・パーク、ユニバーシテイ・オブ・ノツテインガム、エクスぺリメンタル・キヤンサー・ケモセラピー・ラボラトリーズ、キヤンサー・リサーチ・キヤンペーン（番地なし) Ｆターム(参考） 4C050 AA01 AA07 BB04 CC11 DD10 EE02 FF01 GG03 HH01 4C069 AA05 BB02 BB15 BB16 4C086 AA01 AA02 AA03 AA04 BC07 CB11 MA01 MA04 NA14 NA15 ZB26 ZB33 ZB35 ZB37

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】下記構造Ｉを有する化合物。【化１】［式中、Ｒ_１０は治療的に脱離可能な窒素保護基であり；Ｒ_２およびＲ_３は独立に、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、ＯＲ、＝Ｏ、＝ＣＨ−Ｒ、＝ＣＨ_２、ＣＨ_２−ＣＯ_２Ｒ、ＣＨ_２−ＣＯ_２Ｈ、ＣＨ_２−ＳＯ_２Ｒ、Ｏ−ＳＯ_２Ｒ、Ｃ
Ｏ_２Ｒ、ＣＯＲおよびＣＮから選択され；Ｒ_６、Ｒ_７およびＲ_９は独立に、Ｈ、
Ｒ、ＯＨ、ＯＲ、ハロゲン、アミノ、ニトロ、Ｍｅ_３Ｓｎから選択され；あるい
はＲ_７とＲ_８が一体となって−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｏ−を形成しており、ｐは１
または２であり；ＸはＳ、ＯまたはＮＨであり；Ｒ_１１はＨまたはＲであり；Ｒは炭素原子数１〜１０の低級アルキル基であるか、炭素原子数１２以下のア
ラルキル基（その場合のアルキル基は１以上の炭素−炭素二重もしくは三重結合
を有していても良く、その結合は共役系の一部を形成していても良い）、あるい
は炭素原子数１２以下のアリール基であって、１以上のハロゲン、水酸基、アミ
ノまたはニトロ基で置換されていても良く、官能基の一部を形成していたり官能
基であることができる１以上のヘテロ原子を有していても良く；Ｃ１とＣ２の間
またはＣ２とＣ３の間に二重結合があっても良く；Ｒ_８はＨ、Ｒ、ＯＨ、ＯＲ、ハロゲン、アミノ、ニトロ、Ｍｅ_３Ｓｎから選択
され、Ｒは上記で定義した通りであるか、あるいは該化合物は二量体であって、
各モノマーは同一でも異なっていても良く式Ｉのものであり、それらモノマーの
Ｒ_８基が一体となってそれらモノマーを連結する式−Ｔ−Ｒ’−Ｔ−を有する架
橋を形成しており、Ｒ’は炭素原子数３〜１２を有するアルキレン鎖であり、そ
の鎖は１以上のヘテロ原子および／または芳香環によって中断されていても良く
、１以上の炭素−炭素二重結合または三重結合を有していても良く、各Ｔは独立
にＯ、ＳまたはＮから選択される。］
【請求項２】Ｒ_１０が下記式ＩＩのものである請求項１に記載の化合物。【化２】［式中、ｎは０〜３であり；Ｒ^（Ｉ）はＨまたはＲであり；Ｒ^（ＩＩ）は、Ｎ
Ｏ_２、ＯＲまたはＲから独立に選択される１以上の存在していても良い置換基で
あり；Ｒは請求項１に定義の通りであり；２個の置換基Ｒ^（ＩＩ）が隣接する原
子上にある場合、それらは一体となって−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｍ−Ｏ−を形成するこ
とができ、ｍは１または２である。］
【請求項３】Ｒ_１０が光感受性保護基である請求項１または２に記載の化
合物。
【請求項４】Ｒ_１０が波長２５０〜５５０ｎｍの光によって開裂可能であ
る請求項３に記載の化合物。
【請求項５】Ｒ_１０が酵素感受性基である請求項１または２に記載の化合
物。
【請求項６】Ｒ_１０がニトロレダクターゼ感受性基である請求項５に記載
の化合物。
【請求項７】Ｒ_１０がペニシリンＶ／Ｇアミダーゼ感受性基である請求項
５に記載の化合物。
【請求項８】Ｒ_１０がＬ−γ−グルタミルトランスペプチダーゼ感受性基
である請求項５に記載の化合物。
【請求項９】Ｒ_１０がグルタチオントランスフェラーゼ感受性基である請
求項５に記載の化合物。
【請求項１０】Ｒ_１０が下記式ＩＩＩの構造のものである請求項６に記載
の化合物。【化３】［式中、ｎは０〜３であり、Ｒ^（Ｉ）はＨまたはＲであり、Ｒ^{（ＩＩＩ）}はＮ
Ｏ_２、ＯＲまたはＲから独立に選択される１以上の存在していても良い置換基で
あり；Ｒは請求項１で定義された通りであり；２個の置換基Ｒ^{（ＩＩＩ）}が隣接
する原子上にある場合、それらは一体となって−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｍ−Ｏ−を形成
することができ、ｍは１または２である。］
【請求項１１】Ｒ_１０が下記式ＩＶの構造のものである請求項９に記載の
化合物。【化４】［式中、Ｒは請求項１で定義された通りであり、ｎは０〜３である。］
【請求項１２】式ＸＩの基におけるＲが置換もしくは未置換フェニル基で
ある請求項１１に記載の化合物。
【請求項１３】ＸがＯである請求項１ないし１２のいずれかに記載の化合
物。
【請求項１４】Ｒ_１１がＨである請求項１ないし１３のいずれかに記載の
化合物。
【請求項１５】Ｒ_６およびＲ_９がＨである請求項１ないし１４のいずれか
に記載の化合物。
【請求項１６】Ｒ_７およびＲ_８が独立に、Ｈ、ＯＨおよびＯＲから選択さ
れ、Ｒが請求項１で定義された通りである請求項１６に記載の化合物。
【請求項１７】前記化合物がＣ８二量体であり、Ｒ_６およびＲ_９がＨであ
り、Ｒ_７が独立に、Ｈ、ＯＨおよびＯＲから選択され、Ｒが請求項１で定義され
た通りである請求項１ないし１６のいずれかに記載の化合物。
【請求項１８】前記化合物がＣ８二量体であり、Ｒ’が−Ｏ−（ＣＨ_２） _ｐ −Ｏ−であり、ｐが１〜１２である請求項１ないし１７のいずれかに記載の化
合物。
【請求項１９】下記式Ｉａの化合物から、ＸＲ_１１≠ＯＨである請求項１
ないし１８のいずれかに定義の式Ｉの化合物を製造する方法。【化５】［式Ｉａの化合物の置換基は製造される式Ｉの化合物と同様である。］
【請求項２０】下記式ＩＶａの化合物の酸化による請求項１９に定義の式
Ｉａの化合物の製造方法。【化６】［式ＩＶａの化合物の置換基は製造される式Ｉａの化合物と同様である。］
【請求項２１】前記酸化がスウェルン酸化である請求項２０に記載の方法
。
【請求項２２】下記式Ｖａの化合物【化７】と下記式ＶＩの化合物【化８】とを反応させる請求項２０に定義の式ＩＶａの化合物の製造方法［式Ｖａおよび
ＶＩの化合物の置換基は製造される式ＩＶａの化合物の場合と同様であり、Ｙは
ハロゲン原子である。］。
【請求項２３】前記式ＶＩの化合物が式Ｙ−Ａのハロホルメートであり、
Ａが請求項２で定義の式ＩＩの基である請求項２０に記載の式ＩＶａの化合物の
製造方法。
【請求項２４】下記式ＶＩＩの化合物【化９】と下記式ＶＩの化合物【化１０】とを反応させて下記式ＶＩＩＩの化合物【化１１】を形成し、該式ＶＩＩＩの化合物を酸塩化物の形成を介して下記式ＩＸａの化合
物【化１２】と反応させることによる、請求項２０に定義の式ＩＶａの化合物の製造方法［式
ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩおよびＩＸａの化合物の置換基は製造される式Ｖａの化
合物の場合と同様であり、Ｙはハロゲン原子である。］。
【請求項２５】下記式ＩＶｂの化合物の脱保護による請求項１９に定義の
式Ｉａの化合物の製造方法。【化１３】［式中、式ＩＶｂの化合物の置換基は製造される式Ｉａの化合物の場合と同様
であり；ＱはＯまたはＳであり；Ｒ^（ＩＶ）はＭｅまたはＥｔであるか、あるい
は一体となって−（ＣＨ_２）_ｑ−を形成しており；ｑは２または３である。］
【請求項２６】ＱがＳであり、Ｒ^（ＩＶ）がＥｔであり、脱保護が水銀介
在の脱保護である請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】ＱがＯであり、Ｒ^（ＩＶ）がＥｔであり、脱保護がパラジ
ウム介在の脱保護である請求項２５に記載の方法。
【請求項２８】下記式Ｖｂの化合物【化１４】と下記式ＶＩの化合物【化１５】とを反応させる請求項２５に定義の式ＩＶｂの化合物の製造方法［式Ｖｂおよび
ＶＩの化合物の置換基は製造される式ＩＶｂの化合物の場合と同様であり、Ｙは
ハロゲン原子である。］。
【請求項２９】前記式ＶＩの化合物が式Ｙ−Ａのハロホルメートであり、
Ａが請求項２で定義の式ＩＩの基である請求項２８に記載の式ＩＶｂの化合物の
製造方法。
【請求項３０】下記式ＶＩＩの化合物【化１６】と下記式ＶＩの化合物【化１７】とを反応させて下記式ＶＩＩＩの化合物【化１８】を形成し、該式ＶＩＩＩの化合物を酸塩化物の形成を介して下記式ＩＸｂの化合
物【化１９】と反応させることによる、請求項２５に定義の式ＩＶｂの化合物の製造方法［式
ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩおよびＩＸｂの化合物の置換基は製造される式Ｖｂの化
合物の場合と同様であり、Ｙはハロゲン原子である。］。
【請求項３１】請求項１ないし１８のいずれかに定義の式Ｉの化合物の治
療的に脱離可能な保護基Ｒ_１０の開裂による下記式Ｘの化合物の製造方法。【化２０】［式Ｘの化合物の置換基は使用される化合物Ｉの置換基と同様である。］
【請求項３２】ＡＤＥＰＴまたはＧＤＥＰＴ療法の方法における適切な酵
素と組み合わせた請求項５ないし８のいずれかまたは請求項１０に定義の式Ｉの
化合物の使用。
【請求項３３】ＰＤＴの方法における波長２５０〜５５０ｎｍの光と組み
合わせた請求項２ないし４のいずれかに定義の式Ｉの化合物の使用。
【請求項３４】ＮＰＥＰＴの方法における請求項９または１１に定義の式
Ｉの化合物の使用。
【請求項３５】請求項１ないし１８のいずれかに定義の式Ｉの化合物およ
び医薬的に許容される担体もしくは希釈剤を含む医薬組成物。
【請求項３６】腫瘍疾患治療用医薬品を製造するための請求項１ないし１
８のいずれかに定義の式Ｉの化合物の使用。
【請求項３７】細菌感染、ウィルス感染もしくは寄生虫感染の治療用の医
薬品を製造するための請求項１ないし１８のいずれかに定義の式Ｉの化合物の使
用。