RS61294B1 - Pirolobenzodiazepini i njihovi konjugati - Google Patents

Pirolobenzodiazepini i njihovi konjugati

Info

Publication number
RS61294B1
RS61294B1 RS20210002A RSP20210002A RS61294B1 RS 61294 B1 RS61294 B1 RS 61294B1 RS 20210002 A RS20210002 A RS 20210002A RS P20210002 A RSP20210002 A RS P20210002A RS 61294 B1 RS61294 B1 RS 61294B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
gene bank
antibody
genebank
accession number
seq
Prior art date
Application number
RS20210002A
Other languages
English (en)
Inventor
Philip Wilson Howard
Original Assignee
Medimmune Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Medimmune Ltd filed Critical Medimmune Ltd
Publication of RS61294B1 publication Critical patent/RS61294B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A61K47/68035—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug being a pyrrolobenzodiazepine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6851—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell
    • A61K47/6855—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell the tumour determinant being from breast cancer cell
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P39/00—General protective or antinoxious agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D519/00—Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)

Description

Opis
[0001] Ovaj pronalazak se odnosi na pirolobenzodiazepine (PBD), posebno pirolobenzodiazepine koji imaju labilnu C2 zaštitnu grupu, u obliku veznika agensa za vezivanje ćelija.
Pozadina pronalaska
Pirolobenzodiazepini
[0002] Neki pirolobenzodiazepini (PBD) imaju sposobnost da prepoznaju i da se vežu na određene sekvence DNK; poželjna sekvenca je PuGPu. Prvi PBD anti-tumorski antibiotik, antramicin, otkriven je 1965. godine (Leimgruber, i dr, J. Am Chem Soc, 87, 5793-5795 (1965); Leimgruber, i dr, J. Am Chem Soc ., 87, 5791 do 5793 (1965)). Od tada, prijavljeno je dosta PBD-a koji se javljaju u prirodi i razvijeno je više od 10 sintetičkih načina kroz različite analoge (Thurston, i dr, Chem Rev. 1994, 433-465 (1994); Antonow, D. and Thurston, DE, Chem. Rev. 2011111 (4), 2815-2864). Članovi familije uključuju abeimicin (Hochlowski, i dr., J. Antibiotics, 40, 145-148 (1987)), chicamicin (Konishi, i dr., J. Antibiotics, 37, 200-206 (1984)), DC-81 (Japanese Patent 58-180487, Thurston, i dr, Chem Brit, 26, 767-772 (1990),. Bose, i dr, Tetrahedron, 48, 751-758 (1992)), mazetramicin (Kuminoto, i dr., J. Antibiotics, 33, 665-667 (1980)), neothramicine A i B (Takeuchi i dr., J. Antibiotics, 29, 93-96 (1976)), porotramicin (Tsunakawa, i dr. J. Antibiotics, 41, 1366-1373 (1988)), protracarcin (Shimizu i dr, J. Antibiotics, 29, 2492-2503 (1982), Langley i Thurston, J. Org Chem, 52, 91- 97 (1987)), sibanomicin (DC-102) (Hara, i dr, J. Antibiotics, 41, 702-704, (1988.);. Itoh, i dr, J. Antibiotics, 41, 1281-1284 (1988) ), sibiromicin (Leber, i dr., J. Am. Chem. Soc., 110, 2992-2993 (1988)) i tomamicin (Arima, i dr., J. Antibiotics, 25, 437-444 (1972)), PBD imaju opštu strukturu:
[0003] Oni se razlikuju po broju, vrsti i položaju supstituenata, po svojim aromatskim A prstenovima A i pirolo C prstenova, kao i po stepenu zasićenosti C prstena. U B prstenu nalazi se ili imin (N = C), karbinolamin (NH-CH (OH)), ili karbinolamin metil eter (NH-CH (OMe)) na N10-C11 položaju koji je elektrofilni centar odgovoran za alkiliranje DNK. Svi od poznatih prirodnih proizvoda imaju (S)-konfiguraciju na kiralnom C11, što je pozicija koja im pruža zakrivljenje u desno kada se gleda od C prstena prema A prstenu. To im daje odgovarajući trodimenzionalni oblik za izoheličnost sa manjim žljebom od B oblika DNK, što dovodi do prikladnog prijanjanja na vezivnom mestu (Kohn, In Antibiotics III. Springer-Verlag, New York, pp. 3-11 (1975); Hurley and Needham-VanDevanter, Acc Chem Res, 19, 230-237 (1986)). Njihova sposobnost da obrazuju adukt unutar manjeg žljeba omogućuje im da se umešaju u DNK procesuiranje, odakle proizilazi njihova upotreba kao anti-tumorski agensa.
[0004] Posebno povoljno pirolobenzodiazepin jedinjenje opisali su Gregson i dr. (Chem. Commun., 1999, 797-798), kao jedinjenje 1, i Gregson i dr. (J. Med. Chem.2001., 44, 1161-1174), kao jedinjenje 4a. Ovao jedinjenje, takođe poznato kao SG2000, prikazano je u nastavku:
WO 2007/085930 opisuje pripremu dimera PBD jedinjenja koji imaju grupe veznika za povezivanje na agens za vezivanje ćelija, kao što su antitela. Veznik je prisutan u mostu i povezuje monomerne jedinice PBD dimera.
[0005] Pronalazači ovog proizvoda opisali su dimere PBD jedinjenja koji imaju grupe veznika za povezivanje na agens za vezivanje ćelija, kao što su antitela, u WO 2011/130613 i WO 2011/130616. Veznik ovih jedinjenja vezan je na jedan od dostupnih C2 položaja, i uglavnom se cepa delovanjem enzima grupu veznika.
Konjugati antitela i lekova
[0006] Terapija antitelima uspostavljena je za ciljano lečenje pacijenata sa karcinomom, imunološkim i angiogenetskim poremećajima (Carter, P. (2006) Nature Immunology Recenzije 6: 343-357). Upotreba konjugata antitela i lekova (ADC), tj. imunokonjugati za lokalnu isporuku citotoksičnih ili citostatskih agenasa, odnosno lekova koji ubijaju ili suzbijaju tumorske ćelje u lečenju karcinoma, cilja isporuku funkcionalne grupe leka na tumore i unutarćelijske akumulacije u njemu, a sistemska primena tih nekonjugovanih lek agenasa može dovesti do neprihvatljivih vrednosti toksičnosti u normalnim ćelijama (Xie i dr (2006) Expert. Opin. Biol. Ther.6(3):281-291; Kovtun i dr (2006) Cancer Res. 66(6):3214-3121; Law i dr (2006) Cancer Res. 66(4):2328-2337; Wu i dr (2005) Nature Biotech. 23(9):1137-1145; Lambert J. (2005) Current Opin. in Pharmacol. 5:543-549; Hamann P. (2005) Expert Opin. Ther. Patents 15(9):1087-1103; Payne, G. (2003) Cancer Cell 3:207-212; Trail i dr (2003) Cancer Immunol. Immunother.52:328-337; Syrigos and Epenetos (1999) Anticancer Research 19:605-614).
[0007] Time je tražena maksimalna delotvornost uz minimalnu toksičnost. Napori da se dizajnira i rafinira ADC bili su usmereni na selektivnost monoklonskih antitela (mAb), kao i mehanizame delovanja lekova, povezivanje lekova, odnos lek/antitelo (unošenje), i svojstva otpuštanja leka (Junutula, i dr., 2008b Nature Biotech., 26(8):925-932; Dornan i dr (2009) Blood 114(13):2721-2729; US 7521541; US 7723485; WO2009/052249; McDonagh (2006) Protein Eng. Design & Sel.19(7): 299-307; Doronina i dr (2006) Bioconj. Chem.17:114-124; Erickson i dr (2006) Cancer Res. 66(8):1-8; Sanderson i dr (2005) Clin. Cancer Res. 11:843-852; Jeffrey i dr (2005) J. Med. Chem.
48:1344-1358; Hamblett i dr (2004) Clin. Cancer Res. 10:7063-7070). Funkcionalne grupe leka mogu dati svoje citotoksične i citostatičke efekte koristeći mehanizme koji uključuju vezivanje tubulina, vezivanje DNA, proteazom i/ili inhibiciju topoizomeraze. Neki citotoksični lekovi imaju tendenciju da budu neaktivni ili manje aktivni kada se konjuguju na velika antitela ili proteinske receptorske ligande.
[0008] Pronalazači ovog pronalaska razvili su određene PBD dimere sa grupama veznika za formiranje PBD konjugata sa agensima za vezivanje ćelija, a posebno PBD konjugate antitela.
Sažetak pronalaska
[0009] U prvom aspektu, ovaj pronalazak daje jedinjenje A:
i njegove soli i solvate.
[0010] WO 2011/130613 obelodanjuju jedinjenje 26:
koje je matično jedinjenje od A. Jedinjenje A sadrži ovaj PBD sa veznikom da se veže za agens za vezivanje ćelija. Agens za vezivanje ćelija obezbeđuje niz etilen glikolnih delova za obezbeđivanje rastvorljivosti koja je korisna u sintezi konjugata.
[0011] Jedinjenje A ima dva sp<2>centra u svakom C-prstenu koja mogu omogućiti jače vezivanje na manji žljeb DNK nego što to čine jedinjenja sa samo jednim sp centrom u svakom C-prstenu.
[0012] Drugi aspekt ovog pronalaska daje konjugat formule ConjA:
gde CBA predstavlja agens za vezivanje ćelija. Veza do funkcionalne grupe prikazana je putem slobodnog S (aktivni tiol) na agensu za vezivanje ćelija.
Detaljan opis pronalaska
[0013] Ovaj pronalazak daje PBD dimer sa veznikom povezanim preko C2 položaja na jednoj od PBD funkcionalnih grupa prikladnih za formiranje PBD dimera konjugovanog preko linkera na agens za vezivanje ćelija.
[0014] Ovaj pronalazak je pogodan za korišćenje u dobijanju PBD jedinjenja na poželjnom mestu kod pacijenta. Konjugat omogućuje otpuštanje aktivnog jedinjenja PBD koji ne zadržava nijedan deo veznika. Ne postoji prisutan ostatak koji bi mogao uticati na reaktivnost PBD jedinjenja. Tako bi ConjA oslobodio jedinjenje ReIA:
[0015] Navedena veza između PBD dimera i agensa za vezivanje ćelija, npr. antitela, u ovom pronalasku poželjno je vanćelijski stabilna. Pre transporta i isporuke u ćeliju, konjugat antitela i leka (ADC) poželjno je stabilan i ostaje netaknut, tj. antitelo ostaje povezano sa funkcionalnom grupom leka. Veznici su stabilni izvan ciljane ćelije i mogu se otcepiti pri nekoj efikasnoj brzini unutar ćelije. Delotvorni veznik će: (i) održavati specifična svojstva vezivanja antitela; (ii) omogućiti intraćelijsku isporuku konjugata ili leka; (iii) ostati stabilan i netaknut, odnosno neće se otcepiti, dok konjugat nije isporučen ili transportovan do svog ciljanog mesta; i (iv) zadržati citotoksičnu delotvornost ubijanja ćelija ili citostatičku delotvornost funkcionalne grupe leka PBD. Stabilnost ADC može se meriti standardnim analitičkim tehnikama kao što su masena spektroskopija, HPLC i tehnika LC/MS razdvajanja/analize.
[0016] Isporuka jedinjenja formule ReIB postiže se na željenom mestu aktivacije konjugata formule ConjB delovanjem enzima, kao što je katepsin, na grupi veznika, a naročito na valin-alanin dipeptidnoj funkcionalnoj grupi.
Agens za vezivanje ćelija
[0017] Agens za vezivanje ćelija može biti bilo koje vrste, i uključuje peptide i ne-peptidie. To može uključivati antitela ili fragmente antitela koji sadrže najmanje jedno mesto vezivanja, limfokine, hormone, hormonske mimetike, vitamine, faktore rasta, molekule za prenos nutricijenata, ili bilo koje druge stanice za vezivanje molekule ili supstanci.
Peptidi
[0018] U jednom oteltotvorenju, agens za vezivanje ćelija je linearni ili ciklički peptid koji sadrži 4-30, poželjno 6-20, uzastopnih aminokiselinskih ostataka. U ovom otelotvorenju, poželjno je da se jedan agens za vezivanje ćelija veže za jedan monomer ili dimer pirolobenzodiazepin jedinjenja.
[0019] U jednom otelotvorenju agens za vezivanje ćelija sadrži peptid koji vezuje integrin αvβ6. Peptid može biti selektivan za α β preko XYS.
[0020] U jednom otelotvorenju agens za vezivanje ćelija sadrži A20FMDV-Cys polipeptid. A20FMDV-Cys ima sekvencu: NAVPNLRGDLQVLAQKVARTC. Alternativno, varijanta A20FMDV-Cys sekvence može se koristiti gde su jedan, dva, tri, četiri, pet, šest, sedam, osam, devet ili deset aminokiselinskih ostataka supstituisani sa nekim drugim aminokiselinskim ostatkom. Nadalje, polipeptid može imati sekvencu NAVXXXXXXXXXXXXXXXRTC.
Antitela
[0021] Izraz "antitelo" ovde se koristi u najširem smislu, i specifično pokriva monoklonska antitela, poliklonska antitela, dimere, multimere, multispecifična antitela (npr., bispecifična antitela) i fragmente antitela, sve dok oni pokazuju željenu biološku aktivnost (Miller i dr (2003) Jour of Immunology 170:.4854-4861). Antitela mogu biti mišja, ljudska, humanizovana, himerna ili izvedena iz drugih vrsta. Antitelo je protein stvoren od strane imunog sistema koji je sposoban da prepozna i veže se na specifični antigen. (Janeway, C., Travers, P., Walport, M. Shlomchik (2001) Immuno Biologija, 5. izd., Garland Publishing, New York). Ciljni antigen obično ima više mesta za vezivanje, koji se nazivaju epitopima, prepoznatih od strane CDR-a na više antitela. Svako antitelo koje se specifično vezuje na drugi epitop ima različitu strukturu. Tako, jedan antigen može imati više od jednog odgovarajućeg antitela. Antitelo uključuje molekule imunoglobulina pune dužine ili imunološki aktivni deo molekula imunoglobulina pune dužine, na primer, molekul koja sadrži mesto za vezivanje antigena koji imunospecifično vezuje antigen na željeni cilj ili deo takvih ciljeva, uključujući, ali ne ograničavajući se na, ćelija karcinoma ili ćelije koje proizvode autoimuna antitela povezana sa autoimunim bolestima. Imunoglobulin može biti bilo kog tipa (npr. IgG, IgE, IgM, IgD, IgA i), klase (npr. IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 i IgA2) ili potklase molekula imunoglobulina. Imunoglobulini se mogu izvesti iz bilo kog tipa, uključujući i humano, mišje ili zečje poreklo.
[0022] "Fragmenti antitela“ obuhvataju deo antitela pune dužine, uglavnom regiju koja vezuje antigen ili varijabilnu regiju istih. Primeri fragmenata antitela uključuju Fab, Fab’, F(ab’)2, i scFv fragmente; dijatela; linearna antitela; fragmente proizvedene od strane Fab eksprimujućih biblioteka, anti-idiotipska (anti-Id) antitela, CDR (komplementarna određujuća regija), kao i bilo koji od gore navedenih fragmenata za vezivanje epitopa koji se imunospecifično vezuju za ćelijske antigene karcinoma, virusne antigene ili mikrobne antigene, jednolančane molekule antitela; i multispecifična antitela formirana od fragmenata antitela.
[0023] Termin "monoklonsko antitelo", kako se ovde koristi, odnosi se na antitela dobijena iz populacije u osnovi homogenih antitela, tj. individualna antitela sadrže identičnu populaciju osim u slučaju prirodne pojave mutacija koje mogu biti prisutne u malim količinama. Monoklonska antitela su visoko specifična, usmerena protiv jednog antigenskog mesta. Nadalje, za razliku od pripreme poliklonskih antitela koja uključuju različita antitela usmerena protiv različitih determinanti (epitopa), svako monoklonsko antitelo je usmereno protiv jedne determinante na antigenu. Osim njihove specifičnosti, monoklonska antitela u prednosti su zbog toga što se mogu sintezovati nezagađena drugim antitelima. Modifikator "monoklonsko" ukazuje na karakter antitela kao što je dobijeno iz značajno homogene populacije antitela, i ne treba da se tumači da zahteva proizvodnju antitela bilo kojim posebnim postupkom. Na primer, monoklonska antitela korišćena u skladu sa ovim pronalaskom mogu se proizvesti postupkom hibridoma koju je prvi opisao Kohler i dr (1975) Nature 256: 495, ili se mogu pripremiti postupcima rekombinantne DNA (vidi, US 4816567). Monoklonska antitela mogu se izolovati iz biblioteke fag antitela pomoću tehnika opisanih u Clackson i dr (1991) Nature, 352: 624-628; Marks i dr (1991) J. Mol. Biol., 222: 581-597, ili od transgeničnih miševa koji nose potpuno human imunoglobulinski sistem (Lonberg (2008) Curr Opinion 20 (4):.
450-459).
[0024] Monoklonska antitela ovde specifično uključuju "himerna" antitela u kojima je deo teškog i/ili lakog lanca identičan ili homologan sa odgovarajućim sekvencama u antitelima dobijenim iz posebnih vrsta ili pripadajućih posebnih klasa ili potklasa antitela, dok je ostatak lanca (lanaca) identičan ili homologan sa, odgovarajućim sekvencama u antitelima dobijenim iz drugih vrsta ili pripadajućih drugih klasa ili potklasa antitela, kao i fragmenata takvih antitela, sve dok oni pokazuju željenu biološku aktivnost (US 4816567; and Morrison i dr (1984) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 81:6851-6855). Himerna antitela su "primatizovana" antitela koja sadrže varijabilne domene antigen sekvence izvedene iz ne-humanog primata (npr. majmuni starog sveta, ili čovekoliki majmun) i sekvencu humane konstantne regije.
[0025] "Netaktuto antitelo" ovde je ono koji sadrži VL i VH domene, kao i lak lanac konstantnog domena (CL) i teški lanac konstantnog domena, CH1, CH2 i CH3. Konstantni domeni mogu biti prirodna sekvenca konstantnih domena (npr. humana prirodna sekvenca konstantnih domena) ili varijanta aminokiselinske sekvence. Netaknuta antitela mogu imati jednu ili više "efektorsku funkciju" koja se odnose na one biološke aktivnosti koje se mogu pripisati u Fc regiji (prirodna sekvenca Fc regije ili aminokiselinska sekvenca varijante Fc regije) antitela. Primeri efektorskih funkcija antitela uključuju C1 q vezujuća; komplementarnu zavisnu citotoksičnost; vezivanje Fc receptora; citotoksičnost koja je posredovana ćelijama i zavisna od antitela (ADCC); fagocitoze; i donju regulaciju receptora na površini ćelije, kao što su receptori B ćelija i BCR.
[0026] Zavisno od aminokiselinske sekvenci konstantnog domena njihovih teških lanaca, netaknuta antitela mogu se dodeliti različitim "klasama". Postoji pet glavnih klasa netaknutih antitela: IgA, IgD, IgE, IgG i IgM, a neke od njih mogu se dalje podeliti u "potklase" (izotipovi), npr. IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA, i IgA2. Konstantni domeni teškog lanca koje odgovaraju različitim klasama antitela nazivaju se α, δ, ε, γ i µ, respektivno. Podjedinične strukture i trodimenzionalne konfiguracije različitih klasa imunoglobulina dobro su poznate.
Humanizovanje
[0027] Tehnike za smanjivanje in vivo imunogenosti ne-humanog antitela ili fragmenta antitela uključuju one koje nazivamo "humanizovanjem".
[0028] "Humanizovano antitelo" odnosi se na polipeptid koji se sastoji od najmanje jednog dela modifikovane varijabilne regije ljudskog antitela, gde je deo varijabilne regije, poželjno deo značajno manji od netaknutog humanog varijabilnog domena, supstituisan odgovarajućom sekvencom iz nehumanih vrsta, gde je da modifikovana varijabilna regija povezana sa bar jednim drugim delom drugog proteina, poželjno konstantnom regijom humanog antitela. Izraz "humanizovana antitela" obuhvata humana antitela kod kojih su jedna ili više regija koja određuje komplementarnost ("CDR") ostataka aminokiselina i/ili jedna ili više okvirnih regija ("FW" ili "FR") aminokiselinskih ostataka supstituisani aminokiselinski ostaci sa analognih mesta kod glodara ili drugih nehumanih antitela. Izraz "Humanizovano antitelo" takođe uključuje varijantu imunoglobulinske aminokiselinske sekvence ili njen fragment koji sadrži FR koji ima značajnu aminokiselinsku sekvencu humanog imunoglobulina, i CDR koji ima značajnu aminokiselinsku sekvencu nehumanog imunoglobulina.
[0029] "Humanizovani" oblici nehumanih (npr. mišjih) antitela su himerna antitela koja sadrže minimalnu sekvencu dobijenu iz nehumanog imunoglobulina. Ili, gledano na drugi način, humanizovano antitelo je humano antitelo koje sadrži sekvence odabrane od nehumanih (npr. mišjih) antitela umesto ljudskih sekvenci. Humanizovano antitelo može uključivati konzervativne supstitucije aminokiselina ili neprirodne ostatke od iste ili različite vrste, koje bitno ne mijenja svoje vezivanje i/ili biološku aktivnost. Takva antitela su himerna antitela koja sadrže minimalnu sekvencu dobijenu iz nehumanih imunoglobulina.
[0030] Postoji niz tehnika humanizovanja, uključujući 'CDR presađivanje', 'vođeni izbor', 'deimunizaciju', 'ponovno izlaženje na površinu' (takođe poznato kao 'furniranje'), 'kompozitna antitela', 'Human String Content Optimisation' i preslaganje okvira.
CRD presađivanje
[0031] U ovoj tehnici, humanizovana antitela su humani imunoglobulini (antitelo primalac) u kojima su ostaci od komplementarno determinišuće regije (CDR) iz antitela primaoca zamenjeni ostacima iz CDR nehumanih vrsta (antitelo donor) kao što su miš, pacov, kamila, govedo, koza, ili zec, i koje ima željena svojstva (u praksi, nehumani CDR-ovi se „presađuju“ na humane). U nekim slučajevima, okvirne regije (FR) ostataka humanog imunoglobulina zamenjene su odgovarajućim nehumanim ostacima (to se može dogoditi kada, na primer, određeni FR ostatak ima značajno dejstvo na vezivanje antigena).
[0032] Dalje, humanizovana antitela mogu sadržati ostatke koje se ne nalaze ni u antitelu primaocu, niti u uvezenim CDR ili okvirnim sekvenci. Te promene su napravljene kako bi se dodatno rafinisale i maksimizovale performanse antitela. Stoga, uglavnom, humanizovano antitelo sadržaće sve od barem jednog, a u jednom aspektu dva varijabilna domena, u kojima sve ili sve hipervarijabilne petlje odgovaraju onima nehumanog imunoglobulina i sve ili gotovo sve FR regije su one od sekvenci humanog imunoglobulina. humanizovano antitelo će po izboru sadržati barem deo imunoglobulina konstantne regije (Fc), ili ono od humanog imunoglobulina.
Vođeni izbor
[0033] Postupak sadrži kombinovanje VHi VLdomena date speficičnosti nehumanog antitela za određeni epitop sa humanim VHili VLbibliotekama i specifične humane V domene izabrane protiv željenog antigena. Ovako odabran humani VHzatim se kombinuje sa VLbibliotekom kako bi se dobila potpuno humana VhxVL kombinacija. Postupak je opisan u Nature Biotechnology (NY) 12 (1994) 899-903.
Kompozitna antitela
[0034] U ovom postupku, dva ili više segmenata aminokiselinske sekvence iz humanih antitela kombinuju se u konačne molekule antitela. Oni su konstruisani kombinovanjem više ljudskih VL segmenata sekvenci u kombinacijama koje ograničavaju ili izbegavaju humane T ćelijske epitope u finalnim V regijama kompozitnih antitela. Tamo gde je potrebno, T ćelijski epitopi su ograničeni ili izbegnuti zamenom segmenata V regija što doprinosi ili kodira T ćelijske epitope sa alternativnim segmenatima koji izbegavaju T ćelijske epitope. Ovaj postupak je opisan u US 2008/0206239 A1.
Deimunizacija
[0035] Ovaj postupak uključuje uklanjanje humanih (ili od druge vrste) T-ćelijskih epitopa iz V regija terapeutskog antitela (ili drugog molekula). Terapeutska antitela sekvence V-regije analiziraju se na prisutnost MHC vezivnih motifa klase II-, na primer, poređenje sa bazama podataka MHC-vezujućih motifa (kao što su baza podataka "motifa" hostovana na www.wehi.edu.au). Alternativno, MHC vezivni motifi klase II- mogu se identifikovati računskim postupcima nanizivanja (threading), kao što su oni napravljeni od strane Altuvia i dr. (J. Mol Biol 249 244-250 (1995).,); u tim postupcima, uzastopni preklapajući peptidi iz sekvence V-regije testiraju se na svoje vezivne energije do proteina MHC klase II. Ti podaci se zatim mogu kombinovati sa podacima o drugim osobinama sekvence koje se odnose na peptide, uspešno predstavljeni kao amfipaticitet, Rothbard motifi i mesta cepanja za katepsin B i drugih procesnih enzima.
[0036] Jednom kad se potencijalni T-ćelijski epitpoi druge vrste (npr. humani) identifikuju, oni se eliminišu izmenom jedne ili više aminokiselina. Modifikovane aminokiseline su obično unutar samog T-ćelijskog epitopa, ali mogu biti u susedstvu epitopa u smislu primarne ili sekundarne strukture proteina (i zbog toga ne mogu biti jedni pored drugih u primarnoj strukturi). Najtipičnije, promena se postiže pomoću supstitucije, ali u nekim slučajevima biće prikladnije dodavanje ili uklanjanje aminokiseline.
[0037] Sve promene mogu se postići rekombinantnom DNA tehnologijom, t"ako da se finalni molekul može pripremiti eksprimiranjem iz rekombinantnog domaćina koristeći dobro poznate postupke kao što je „Mestom usmerena mutageneza“. Međutim, upotreba hemije proteina ili bilo kojih drugim sredstava molekularne izmene takođe je moguće.
Ponovno izlaganje
[0038] Ovaj postupak uključuje:
(a) određivanje konformacijske strukture varijabilne regije nehumanog (npr. od glodara) antitela (ili njegov fragment) izgradnjom trodimenzionalnog modela nehumanog antitela varijabilne regije;
(b) generisanje poravnanja sekvenci pomoću relativne raspodele pristupačnosti sa rendgenskih kristalografskih struktura dovoljnog broja nehumanih i humanih antitela varijabilne regije teškog i lakog lanca, čime se dobija niz položaja teških i lakih lanaca gde su položaji poravnanja jednaki u 98% od dovoljnog broja nehumanih antitela teškog i lakog lanca;
(c) za definisanje nehumanog antitela koji treba se humanizuje, set površina teškog i lakog lanca izlaže aminokiselinske ostatke koristeći set okvirnih položaja generisan u koraku (b);
(d) određivanje aminokiselinskih sekvenci iz humanog antitela, set teškog i lakog lanca na površini izlaže aminokiselinske ostatke koji su najbliže identični setu površinski izloženih aminokiselinskih ostataka koji su definisani u koraku (c), pri čemu su teški i laki lanac od humanog antitelo, i jesu ili nisu prirodno upareni; (e) supstituisanje, u aminokiselinskoj sekvenci ne-humanog antitela koje treba da se humanizuje, set teškog i lakog lanca na površini izlaže aminokiselinske ostataka definisane u koraku (c) sa setom teškog i lakog lanca koji na površini izlaže aminokiselinske ostatke identifikovane u koraku (d);
(f) konstruisanje trodimenzionalnog modela varijabilne regije ne-humanog antitela dobijenog u supstituisanju navedenom u koraku (e);
(g) identifikovanje, poređenjem trodimenzionalnog modela konstruisanog u koracima (a) i (f), bilo koji aminokiselinski ostatak iz setova identifikovanih u koracima (c) ili (d), koji su unutar 5 Angstrema bilo kog atoma bilo kog ostatka u regijama koje određuju komplementarnost iz nehumanog antitela koje treba da se humanizuje; i
(h) menjanje bilo kojih ostataka utvrđenih u koraku (g) od humanog do izvornog nehumanog aminokiselinskog ostatka kako bi se time definisao set površinski izloženih aminokiselinskih ostataka za humanizovanje nehumanog antitela; uz uslov da korak (a) ne mora prvi da se izvede, ali mora da se izvede pre koraka (g). Superhumanizacija
[0039] Postupak upoređuje nehumane sekvence sa funkcionalnim humanih embrionskim repertoarom gena. Izabrani su humani geni koji kodiraju kanonske strukture identične ili blisko povezane sa nehumanim sekvencama. Kao FR donori odabrani su ti humani geni sa najvišom homologiom unutar CDR-a. Konačno, nehumane CDR se umeću u ove humane FR. Ovaj postupak opisan je u patentu WO 2005/079479 A2.
Human String Content optimizacija
[0040] Ova metoda upoređuje nehumanu (npr. mišju) sekvencu sa repertoarom humanih embrionskih gena, a razlike su označene kao Human String Content (HSC) koji kvantifikuje sekvencu na nivou potencijalnih MHC/T-ćelijskih epitopa. Ciljana sekvenca se zatim humanizuje povećavanjem svoje HSC, pre nego pomoću globalne mere identiteta, kako bi se generisalo više različitih humanih varijanti (opisano u Molecular Immunology, 44, (2007) 1986-1998).
Preslaganje okvira
[0041] CDR-ovi iz nehumanog antitela su fuzionisani u okvir as cDNA bibliotekom koja obuhvata sve poznate teške i lake lance humanih okvira embrionskih gena. Humanizovana antitela su zatim odabrana po, npr., ispiranju faga prikazane biblioteke antitela. To je opisano u Metodama 36, 43-60 (2005).
[0042] Primeri agenasa za vezivanje ćelija uključuju one agense opisane za primenu u WO 2007/085930.
[0043] Tumor-pridruženi antigeni i srodna antitela za korišćenje u otelotvorenjima ovog pronalaska navedena su ispod.
ANTIGENI POVEZANI SA TUMOROM I SRODNA ANTITELA
(1) BMPR1B (koštani morfogenetski protein receptor tipa IB)
Nukleotid
[0044] Banka gena pristupni broj NM_001203
Banka gena verzija broj NM_001203.2 GI: 169790809
Banka gena datum ažuriranja podatka: 23. septembar 2012.14:06
Polipeptid
[0045] Banka gena pristupni broj NM_001194
Banka gena verzija broj NP_001194.1 GI:4502431
Banka gena datum ažuriranja podatka: 23. septembar 2012.14:06
Upućivanje na literaturu
[0046] ten Dijke,P., i dr Science 264 (5155): 101-104 (1994), Oncogene 14 10 (11):1377-1382 (1997)); WO2004/063362 (Patentni zahtev 2); WO2003/042661 (Patentni zahtev 12); US2003/134790-A1 (Strana 38-39); WO2002/102235 (Patentni zahtev 13; Strana 296); WO2003/055443 (Strana 91-92); WO2002/99122 (Primer 2; Strana 528-530); WO2003/029421 (Patentni zahtev 6); WO2003/024392 (Patentni zahtev 2; Slika 112); WO2002/98358 (Patentni zahtev 1; Strana 183); WO2002/54940 (Strana 100-101); WO2002/59377 (Strana 349-350); WO2002/30268 (Patentni zahtev 27; Strana 376); 15 WO2001/48204 (Primer; Slika 4); NP_001194 bone morphogenetic protein receptor, type IB /pid=NP_001194.1.; MIM:603248; AY065994
(2) E16 (LAT1, SLC7A5)
Nukleotid
[0047] Banka gena pristupni broj NM_003486
Banka gena verzija broj NM_003486.5 GI:71979931
Banka gena datum ažuriranja podatka: 27. jun 2012.12:06
Polipeptid
[0048] Banka gena pristupni broj NM_003477
Banka gena verzija broj NP_003477.4 GI:71979932
Banka gena datum ažuriranja podatka: 27. hun 2012.12:06
Upućivanje na literaturu
[0049] Biochem. Biophys. Res. Commun.255 (2), 283-288 (1999), Nature 395 (6699):288-291 (1998), Gaugitsch, H.W., et 20 al (1992) J. Biol. Chem.267 (16):11267-11273); WO2004/048938 (Primer 2); WO2004/032842 (Primer IV); WO2003/042661 (Patentni zahtev 12); WO2003/016475 (Patentni zahtev 1); WO2002/78524 (Primer 2); WO2002/99074 (Patentni zahtev 19; Strana 127-129); WO2002/86443 (Patentni zahtev 27; strane 222, 393); WO2003/003906 (Patentni zahtev 10; Strana 293); WQ2002/64798 (Patentni zahtev 33; Strana 93-95); WO2000/14228 (Patentni zahtev 5; Strana 133-136); US2003/224454 (Slika 3); 25 WO2003/025138 (Patentni zahtev 12; Strana 150); NP_003477 solute carrier family 7 (cationic amino acid transporter, y+system), member 5 /pid=NP_003477.3 - Homo sapiens; MIM:600182;; NM_015923.
(3) STEAP1 (šest transmembranskih epitelnih antigena prostate)
Nukleotid
[0050] Banka gena pristupni broj NM_012449
Banka gena verzija broj NM_012449.2 GI:22027487
Banka gena datum ažuriranja podatka: 9. septembar 2012.14:57
Polipeptid
[0051] Banka gena pristupni broj NP_036581
Banka gena verzija broj NP_036581.1 GI:9558759
Banka gena datum ažuriranja podatka: 9. septembar 2012.14:57
Upućivanje na literaturu
[0052] Cancer Res. 61 (15), 5857-5860 (2001), Hubert, R.S., i dr (1999) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 96 (25):14523-14528); WO2004/065577 (Patentni zahtev 6); WO2004/027049 (Slika 11); EP1394274 (Primer 11); WO2004/016225 (Patentni zahtev 2); WO2003/042661 (Patentni zahtev 12); US2003/157089 (Primer 5); US2003/185830 (Primer 5); US2003/064397 (Slika 2); WO2002/89747 (Primer 5; Strana 618-619); WO2003/022995 (Primer 9; Slika 13A, 35 Primer 53; Strana 173, Primer 2; Slika 2A); six transmembrane epithelial antigen of the prostate; MIM:604415.
(4) 0772P (CA125, MUC16)
Nukleotid
[0053] Banka gena pristupni broj AF361486
Banka gena verzija broj AAK74120.3 GI:34501467
Banka gena datum ažuriranja podatka: 11. mart 2010.07:56
Polipeptid
[0054] Banka gena pristupni broj AAK74120
Banka gena verzija broj AAK74120.3 GI:34501467
Banka gena datum ažuriranja podatka: 11. mart 2010.07:56
Upućivanje na literaturu
[0055] J. Biol. Chem. 276 (29):27371-27375 (2001)); WO2004/045553 (Patentni zahtev 14); WO2002/92836 (Patentni zahtev 6; Slika 12); WO2002/83866 (Patentni zahtev 15; Strana 116-121); US2003/124140 (Primer 16); GI:34501467;
(5) MPF (MPF, MSLN, SMR, megakaryocyte potentiating factor, mesothelin)
Nukleotid
[0056] Banka gena pristupni broj NM_005823
Banka gena verzija broj NM_005823.5 GI:293651528
Banka gena datum ažuriranja podatka: 2. septembar 2012.13:47
Polpeptid
[0057] Banka gena pristupni broj NP_0058144
Banka gena verzija broj NP_005814.2 GI:53988378
Banka gena datum ažuriranja podatka: 2. septembar 2012.13:47
Upućivanje na literaturu
[0058] Yamaguchi, N., i dr Biol. Chem.269 (2), 805-808 (1994), Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A.96 (20):11531-11536 (1999), Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 9310 (1):136-140 (1996), J. Biol. Chem. 270 (37):21984-21990 (1995)); WO2003/101283 (Patentni zahtev 14); (WO2002/102235 (Patentni zahtev 13; Strana 287-288); WO2002/101075 (Patentni zahtev 4; Strana 308- 309); WO2002/71928 (Strana 320-321); WO94/10312 (Strana 52-57); IM:601051.
(6) Napi3b (NAPI-3B, NPTIIb, SLC34A2, familija nosača rastvorljivih supstanci 34 (natrijum fosfat), član 2, type II natrijum zavisni fosfat transporter 3b)
Nukleotid
[0059] Banka gena pristupni broj NM_006424
Banka gena verzija broj NM_006424.2 GI:110611905
Banka gena datum ažuriranja podatka: 22. jul 2012.15:39
Polpeptid
[0060] Banka gena pristupni broj NP_006415
Banka gena verzija broj NP_006415.2 GI:110611906
Banka gena datum ažuriranja podatka: 22. jul 2012.15:39
Upućivanje na literaturu
[0061] J. Biol. Chem. 277 (22):19665-19672 (2002), Genomics 62 (2):281-284 (1999), Feild, J.A., i dr (1999) Biochem. Biophys. Res. Commun. 258 (3):578-582); WO2004/022778 (Patentni zahtev 2); EP1394274 (Primer 11); WO2002/102235 (Patentni zahtev 13; Strana 20 326); EP0875569 (Patentni zahtev 1; Strana 17-19); WO2001/57188 (Patentni zahtev 20; Strana 329); WO2004/032842 (Primer IV); WO2001/75177 (Patentni zahtev 24; Strana 139-140); MIM:604217.
(7) Sema 5b (FLJ10372, KIAA1445, Mm.42015, SEMA5B, SEMAG, Semaforin 5b Hlog, sema domen, sedam trombospodinskih ponavljanja (tip 1 I slični tipu 1), transmembranski domen (TM) I kratki citoplazmatični dome, (sema forin) 5B)
Nukleotid
[0062] Banka gena pristupni broj AB040878
Banka gena verzija broj AB040878.1 GI:7959148
Banka gena datum ažuriranja podatka: 2. avgust 2006.17:40
Polpeptid
[0063] Banka gena pristupni broj BAA95969
Banka gena verzija broj BAA95969.1 GI:7959149
Banka gena datum ažuriranja podatka: 2. avgust 2006.17:40
Upućivanje na literaturu
[0064] Nagase T., i dr (2000) DNA Res. 7 (2):143-150); WO2004/000997 (Patentni zahtev 1); WO2003/003984 (Patentni zahtev 1); WO2002/06339 (Patentni zahtev 1; Strana 50); WO2001/88133 (Patentni zahtev 1; Strana 41-43, 48-58); WO2003/054152 (Patentni zahtev 20); WO2003/101400 (Patentni zahtev 11); Accession: 30 Q9P283; Genew; HGNC:10737
(8) PSCA hlg (2700050C12Rik, C530008O16Rik, RIKEN cDNA 2700050C12, RIKEN cDNA 2700050C12gene) Nukleotid
[0065] Banka gena pristupni broj AY358628
Banka gena verzija broj AY358628.1 GI:37182377
Banka gena datum ažuriranja podatka: 1. decembar 2009.04:15
Polpeptid
[0066] Banka gena pristupni broj AAQ88991
Banka gena verzija broj AAQ88991.1 GI:37182378
Banka gena datum ažuriranja podatka: 1. decembar 2009.04:15
1
Upućivanje na literaturu
[0067] Ross i dr (2002) Cancer Res.62:2546-2553; US2003/129192 (Patentni zahtev 2); US2004/044180 (Patentni zahtev 12); US2004/04417935 (Patentni zahtev 11); US2003/096961 (Patentni zahtev 11); US2003/232056 (Primer 5); WO2003/105758 16 (Patentni zahtev 12); US2003/206918 (Primer 5); EP1347046 (Patentni zahtev 1); WO2003/025148 (Patentni zahtev 20); GI:37182378.
(9) ETBR (Endotelinski receptor tipa B)
Nukleotid
[0068] Banka gena pristupni broj AY275463
Banka gena verzija broj AY275463.1 GI:305260948
Banka gena datum ažuriranja podatka: 11. mart 2010.02:26
Polpeptid
[0069] Banka gena pristupni broj AAP32295
Banka gena verzija broj AAP32295.1 GI:30526095
Banka gena datum ažuriranja podatka: 11. mart 2010.02:26
Upućivanje na literaturu
[0070]
Nakamuta M., i dr Biochem. Biophys. Res. Commun.177, 34-39, 1991; Ogawa Y., i dr Biochem. Biophys. Res. Commun. 178, 248-255, 1991; Arai H., i dr Jpn. Circ. J. 56, 1303-1307, 1992; Arai H., i dr J. Biol. Chem. 268, 3463-3470, 1993; Sakamoto A., Yanagisawa M., i dr Biochem. Biophys. Res. Commun. 178, 656-663, 1991; Elshourbagy N.A., i dr J. Biol. Chem.268, 3873-3879, 1993; Haendler B., i dr J. Cardiovasc. Pharmacol.20, s1-S4, 1992; Tsutsumi M., i dr Gene 228, 43-49, 1999; Strausberg R.L., i dr Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A.99, 16899-16903, 2002; Bourgeois C., i dr J. Clin. Endocrinol. Metab.82, 3116-3123, 1997; Okamoto Y., i dr Biol. Chem.272, 21589-21596, 1997; Verheij J.B., i dr Am. J. Med. Genet.108, 223-225, 2002; Hofstra R.M.W., i dr Eur. J. Hum. Genet.5, 180-185, 1997;
Puffenberger E.G., i dr Cell 79, 1257-1266, 1994; Attie T., i dr, Hum. Mol. Genet. 4, 2407-152409, 1995; Auricchio A., i dr Hum. Mol.
Genet.5:351-354, 1996; Amiel J., i dr Hum. Mol. Genet.5, 355-357, 1996; Hofstra R.M.W., i dr Nat. Genet.
12, 445-447, 1996; Svensson P.J., i dr Hum. Genet.103, 145-148, 1998; Fuchs S., i dr Mol. Med.7, 115-124, 2001;
Pingault V., i dr (2002) Hum. Genet.111, 198-206; WO2004/045516 (Patentni zahtev 1);
WO2004/048938 (Primer 2); WO2004/040000 (Patentni zahtev 151); WO2003/087768 (Patentni zahtev 1); 20 WO2003/016475 (Patentni zahtev 1); WO2003/016475 (Patentni zahtev 1); WO2002/61087 (Slika 1); WO2003/016494 (Slika 6); WO2003/025138 (Patentni zahtev 12; Strana 144); WO2001/98351 (Patentni zahtev 1; Strana 124-125); EP0522868 (Patentni zahtev 8; Slika 2); WO2001/77172 (Patentni zahtev 1; Strana 297-299); US2003/109676; US6518404 (Slika 3);
US5773223 (Patentni zahtev 1a; Col 31-34); WO2004/001004.
(10) MSG783 (RNF124, hipotetički protein FLJ20315)
Nukleotid
[0071] Banka gena pristupni broj NM_017763
Banka gena verzija broj NM_017763.4 GI:167830482
Banka gena datum ažuriranja podatka: 22. jul 2012.00:34
Polpeptid
[0072] Banka gena pristupni broj NP_060233
Banka gena verzija broj NP_060233.3 GI:56711322
Banka gena datum ažuriranja podatka: 22. jul 2012.00:34
Upućivanje na literaturu
[0073] WO2003/104275 (Patentni zahtev 1); WO2004/046342 (Primer 2); WO2003/042661 (Patentni zahtev 12); WO2003/083074 (Patentni zahtev 14; Strana 61); WO2003/018621 (Patentni zahtev 1); WO2003/024392 (Patentni zahtev 2; Slika 93); WO2001/66689 (Primer 6); LocusID:54894.
(11) STEAP2 (HGNC_8639, IPCA-1, PCANAP1, STAMP1, STEAP2, STMP, gen povezan sa karcinomom prostate 1, protein povezan sa karcinomom prostate 1, šest transmembranskih epitelnih antigena of prostate 2, šest transmembraneskih proteina prostate)
Nukleotid
[0074] Banka gena pristupni broj AF455138
Banka gena verzija broj AF455138.1 GI:22655487
Banka gena datum ažuriranja podatka: 11. mart 2010.13:54
Polipeptid
[0075] Banka gena pristupni broj AAN04080
Banka gena verzija broj AAN04080.1 GI:22655488
Banka gena datum ažuriranja podatka: 11. mart 2010.13:54
Upućivanje na literaturu
[0076] Lab. Invest. 82 (11):1573-1582 (2002)); WO2003/087306; US2003/064397 (Patentni zahtev 1; Slika 1); WO2002/72596 (Patentni zahtev 13; Strana 54-55); WO2001/72962 (Patentni zahtev 1; Slika 4B); 35 WO2003/104270 (Patentni zahtev 11); WO2003/104270 (Patentni zahtev 16); US2004/005598 (Patentni zahtev 22); WO2003/042661 (Patentni zahtev 12); US2003/060612 (Patentni zahtev 12; Slika 10); WO2002/26822 (Patentni zahtev 23; Slika 2); WO2002/16429 (Patentni zahtev 12; Slika 10); GI:22655488.
(12) TrpM4 (BR22450, FLJ20041, TRPM4, TRPM4B, prolazni receptorski potencijalni katjonski 5 kanal, subfamilija M, član 4)
Nukleotid
[0077] Banka gena pristupni broj NM_017636
Banka gena verzija broj NM_017636.3 GI:304766649
Banka gena datum ažuriranja podatka: 29. jun 2012.11:27
Polipeptid
[0078] Banka gena pristupni broj NP_060106
Banka gena verzija broj NP_060106.2 GI:21314671
Banka gena datum ažuriranja podatka: 29. jun 2012.11:27
Upućivanje na literaturu
[0079] Xu, X.Z., i dr Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 98 (19):10692-10697 (2001), Cell 109 (3):397-407 (2002), J. Biol. Chem.278 (33):30813-30820 (2003)); US2003/143557 (Patentni zahtev 4); WO2000/40614 (Patentni zahtev 14; Strana 100-103); WO2002/10382 (Patentni zahtev 1; Slika 9A); WO2003/042661 (Patentni zahtev 12); WO2002/30268 (Patentni zahtev 27; Strana 391); US2003/219806 (Patentni zahtev 4); WO2001/62794 (Patentni zahtev 1014; Slika 1A-D); MIM:606936.
(13) CRIPTO (CR, CR1, CRGF, CRIPTO, TDGF1, faktor rasta dobijen od teratokarcinoma)
Nukleotid
[0080] Banka gena pristupni broj NM_003212
Banka gena verzija broj NM_003212.3 GI:292494881
Banka gena datum ažuriranja podatka: 23. septembar 2012.14:27
Polipeptid
[0081] Banka gena pristupni broj NP_8003203
Banka gena verzija broj NP_8003203.1 GI:4507425
Banka gena datum ažuriranja podatka: 23. septembar 2012.14:27
Upućivanje na literaturu
[0082] Ciccodicola, A., i dr EMBO J. 8 (7):1987-1991 (1989), Am. J. Hum. Genet. 49 (3):555-565 (1991)); US2003/224411 (Patentni zahtev 1); WO2003/083041 (Primer 1); WO2003/034984 (Patentni zahtev 12); WO2002/88170 (Patentni zahtev 2; Strana 52-53); WO2003/024392 (Patentni zahtev 2; Slika 58); WO2002/16413 (Patentni zahtev 1; Strana 94-95, 105); WO2002/22808 (Patentni zahtev 2; Slika 1); US5854399 (Primer 2; Col 17-18); US5792616 (Slika 2); MIM:187395.
(14) CD21 (CR2 (Komplementarni receptor 2) or C3DR (C3d/Epstein Barr virusni receptor) ili Hs.73792) Nukleotid
[0083] Banka gena pristupni broj M26004
Banka gena verzija broj M26004.1 GI:181939
Banka gena datum ažuriranja podatka: 23. jun 2010.08:47
Polipeptid
[0084] Banka gena pristupni broj AAA35786
Banka gena verzija broj AAA35786.1 GI:181940
Banka gena datum ažuriranja podatka: 23. jun 2010.08:47
Upućivanje na literaturu
[0085] Fujisaku i dr (1989) J. Biol. Chem.264 (4):2118-2125); Weis J.J., i dr J. Exp. Med.167, 1047-1066, 1988; Moore M., i dr Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 84, 9194-9198, 1987; Barel M., i dr Mol. Immunol. 35, 1025-1031, 1998; Weis J.J., i dr Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 83, 5639-5643, 1986; Sinha S.K., i dr (1993) J. Immunol. 150, 5311-5320; WO2004/045520 (Primer 4); US2004/005538 (Primer 1); WO2003/062401 (Patentni zahtev 9); WO2004/045520 (Primer 4); WO91/02536 (Slika 9.1-9.9); WO2004/020595 (Patentni zahtev 1); Accession: P20023; Q13866; Q14212; EMBL; M26004; AAA35786.1.
(15) CD79b (CD79B, CD79β, IGb (beta povezana sa imunoglobulinom), B29)
Nukleotid
[0086] Banka gena pristupni broj NM_000626
Banka gena verzija broj NM_000626.2 GI:90193589
Banka gena datum ažuriranja podatka: 26. jun 2012.13:53
Polipeptid
[0087] Banka gena pristupni broj NM_000626
Banka gena verzija broj NM_000626.2 GI:90193589
Banka gena datum ažuriranja podatka: 26. jun 2012.13:53
Upućivanje na literaturu
[0088] Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. (2003) 100 (7):4126-4131, Blood (2002) 100 (9):3068-3076, Muller i dr (1992) Eur. J. Immunol. 22 (6):1621-1625); WO2004/016225 (patentni zahtev 2, Slika 140); WO2003/087768, US2004/101874 (patentni zahtev 1, strana 102); WO2003/062401 (patentni zahtev 9); WO2002/78524 (Primer 2); US2002/150573 (patentni zahtev 355, strana 15); US5644033; WO2003/048202 (patentni zahtev 1, strane 306 and 309); WO 99/58658, US6534482 (patentni zahtev 13, Slika 17A/B); WO2000/55351 (patentni zahtev 11, strane 1145-1146); MIM:147245
(16) FcRH2 (IFGP4, IRTA4, SPAP9A (SH2 domen koji sadrži protein za pričvršćivanje fosfataze 51a), SPAP1B, SPAP1C)
1
Nukleotid
[0089] Banka gena pristupni broj NM_030764
Banka gena verzija broj NM_030764.3 GI:227430280
Banka gena datum ažuriranja podatka: 30. jun 2012.00:30
Polipeptid
[0090] Banka gena pristupni broj NPO110391
Banka gena verzija broj NP_110391.2 GI:19923629
Banka gena datum ažuriranja podatka: 30. jun 2012.00:30
Upućivanje na literaturu
[0091] AY358130); Genome Res. 13 (10):2265-2270 (2003), Imunogenetics 54 (2):87-95 (2002), Blood 99 (8):2662-2669 (2002), Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 98 (17):9772-9777 (2001), Xu, M.J., i dr (2001) Biochem. Biophys. Res. Commun.280 (3):768-775; WO2004/016225 (Patentni zahtev 2); WO2003/077836; WO2001/38490 (Patentni zahtev 5; Slika 18D1-18D-2); WO2003/097803 (Patentni zahtev 12); 10 WO2003/089624 (Patentni zahtev 25);: MIM:606509.
(17) HER2 (ErbB2)
Nukleotid
[0092] Banka gena pristupni broj M11730
Banka gena verzija broj M11730.1 GI:183986
Banka gena datum ažuriranja podatka: 23. jun 2010.08:47
Polipeptid
[0093] Banka gena pristupni broj AAA75493
Banka gena verzija broj AAA75493.1 GI:306840
Banka gena datum ažuriranja podatka: 23. jun 2010.08:47
Upućivanje na literaturu
[0094] Coussens L., i dr Science (1985) 230(4730):1132-1139); Yamamoto T., i dr Nature 319, 230-234, 1986; Semba K., i dr Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A.82, 6497-6501, 1985; Swiercz J.M., i dr J. Cell Biol.165, 869- 15880, 2004; Kuhns J.J., i dr J. Biol. Chem.274, 36422-36427, 1999; Cho H.-S., i dr Nature 421, 756-760, 2003; Ehsani A., i dr (1993) Genomics 15, 426-429; WO2004/048938 (Primer 2); WO2004/027049 (Slika 1I); WO2004/009622; WO2003/081210;
WO2003/089904 (Patentni zahtev 9); WO2003/016475 (Patentni zahtev 1); US2003/118592; WO2003/008537 (Patentni zahtev 1); WO2003/055439 (Patentni zahtev 29; Slika 1A-B); WO2003/025228 (Patentni zahtev 37; Slika 5C); 20 WO2002/22636 (Primer 13; Strana 95-107); WO2002/12341 (Patentni zahtev 68; Slika 7); WO2002/13847 (Strana 71-74); WO2002/14503 (Strana 114-117); WO2001/53463 (Patentni zahtev 2; Strana 41-46); WO2001/41787 (Strana 15); WO2000/44899 (Patentni zahtev 52; Slika 7); WO2000/20579 (Patentni zahtev 3; Slika 2); US5869445 (Patentni zahtev 3; Col 31-38); WO9630514 (Patentni zahtev 2; Strana 56-61); EP1439393 (Patentni zahtev 7); WO2004/043361 (Patentni zahtev 7); WO2004/022709; WO2001/0024425 (Primer 3; Slika 4); Accession: P04626; EMBL; M11767; AAA35808.1. EMBL; M11761; AAA35808.1
ANTITELA
[0095]
Abbott: US20110177095
Na primer, antitelo sadrži CDR-ove koji imaju ukupno preko 80% identiteta sekvenci sa CDR-ovima koji imaju aminokiselinske sekvence SEQ ID NO:3 (CDR-H1), SEQ ID NO:4 (CDR-H2), SEQ ID NO:5 (CDR-H3), SEQ ID NO:104 and/or SEQ ID NO:6 (CDR-L1), SEQ ID NO:7 (CDR-L2), i SEQ ID NO:8 (CDR-L3), gde anti-HER2 antitelo ili anti-HER2 vezujući fragment imaju smanjenu imunogenost u poređenju sa antitelom koje ima VH od SEQ ID NO:1 i VL od SEQ ID NO:2.
Biogen: US20100119511
Na primer, ATCC pristupni brojevi: PTA-10355, PTA-10356, PTA-10357, PTA-10358
Na primer, pročišćen molekul antitela koji se vezuje za HER2 sadrži svih šest CDR-a od antitela izabarnog iz grupe koja se sastoji od BIIB71F10 (SEQ ID NOs:11, 13), BIIB69A09 (SEQ ID NOs:15, 17); BIIB67F10 (SEQ ID NOs:19, 21); BIIB67F11 (SEQ ID NOs:23, 25), BIIB66A12 (SEQ ID NOs:27, 29), BIIB66C01 (SEQ ID NOs:31, 33), BIIB65C10 (SEQ ID NOs:35, 37), BIIB65H09 (SEQ ID NOs:39, 41) i BIIB65B03 (SEQ ID NOs:43, 45), ili CDR-e koji su identični ili imaju ne više od dve izmene od navedenih CDR-a. Herceptin (Genentech) - US6,054,297; ATCC pristupni broj CRL-10463 (Genentech)
Pertuzumab (Genentech)
US20110117097
na primer, pogledati SEQ IDs No.15&16, SEQ IDs No.17&18, SEQ IDs No.23&24 & ATCC pristupne brojeve HB-12215, HB-12216, CRL 10463, HB-12697.
US20090285837
US20090202546
na primer, ATCC pristupni brojevi: HB-12215, HB-12216, CRL 10463, HB-12698.
US20060088523
- na primer, ATCC pristupni brojevi: HB-12215, HB-12216
- na primer, antitelo koje sadrži varijabilne lake i varijabilne teške aminokiselinske sekvence u SEQ ID Nos.3 i 4, respektivno.
- na primer, antitelo koje sadrži aminokiselinske sekvence lakog lanca odabrane od SEQ ID No.
15 i 23, I aminokiselinske sekvence teškog lanca odabrane od SEQ ID No.16 i 24 US20060018899
- na primer, ATCC pristupni brojevi: (7C2) HB-12215, (7F3) HB-12216, (4D5) CRL-10463, (2C4) HB-12697.
- na primer, antitelo koje sadrži aminokiselinsku sekvencu u SEQ ID No.23, ili njenu deamidovanu ili oksidovanu varijantu.
US2011/0159014
- na primer, antitelo koje ima varijabilni domen lakog lanca koji sadrži hipervarijabilne regije od SEQ ID NO: 1".
- na primer, antitelo koje ima varijabilni domen teškog lanca koji sadrži hipervarijabilne regije od SEQ ID NO: 2.
US20090187007
Glycotope: TrasGEX antibody http://www.glycotope.com/pipeline
Na primer, pogledati International Joint Cancer Institute and Changhai Hospital Cancer Cent: HMTI-Fc Ab - Gao J., i dr BMB Rep.2009 Oct 31;42(10):636-41.
Symphogen: US20110217305
Union Stem Cell &Gene Engineering, China - Liu HQ., i dr Xi Bao Yu Fen Zi Mian Yi Xue Za Zhi. 2010 May;26(5):456-8.
(18) NCA (CEACAM6)
Nukleotid
[0096] Banka gena pristupni broj M18728
Banka gena verzija broj M18728.1 GI:189084
Banka gena datum ažuriranja podatka: 23. jun 2010.08:48
1
Polipeptid
[0097] Banka gena pristupni broj AAA59907
Banka gena verzija broj AAA59907.1 GI:189085
Banka gena datum ažuriranja podatka: 23. jun 2010.08:48
Upućivanje na literaturu
[0098] Barnett T., i dr Genomics 3, 59-66, 1988; Tawaragi Y., i dr Biochem. Biophys. Res. Commun.150, 89-96, 1988; Strausberg R.L., i dr Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 99:16899-16903, 2002; WO2004/063709; EP1439393 (Patentni zahtev 7); WO2004/044178 (Primer 4); WO2004/031238; WO2003/042661 (Patentni zahtev 12); WO2002/78524 (Primer 2); WO2002/86443 (Patentni zahtev 27; Strana 427); WO2002/60317 (Patentni zahtev 2); Accession: P40199; Q14920; EMBL; M29541; AAA59915.1.
EMBL; M18728.
(19) MDP (DPEP1)
Nukleotid
[0099] Banka gena pristupni broj BC017023
Banka gena verzija broj BC017023.1 GI:16877538
Banka gena datum ažuriranja podatka: 6. mart 2012.13:00
Polipeptid
[0100] Banka gena pristupni broj AAH17023
Banka gena verzija broj AAH17023.1 GI:16877539
Banka gena datum ažuriranja podatka: 6. mart 2012.13:00
Upućivanje na literaturu
[0101] Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 99 (26):16899-16903 (2002)); WO2003/016475 (Patentni zahtev 1); WO2002/64798 (Patentni zahtev 33; Strana 85- 87); JP05003790 (Slika 6-8); WO99/46284 (Slika 9); MIM:179780.
(20) IL20R-alfa (IL20Ra, ZCYTOR7)
Nukleotid
[0102] Banka gena pristupni broj AF184971
Banka gena verzija broj AF184971.1 GI:6013324
Banka gena datum ažuriranja podatka: 10. mart 2010.22:00
Polipeptid
[0103] Banka gena pristupni broj AAF01320
Banka gena verzija broj AAF01320.1 GI:6013325
Banka gena datum ažuriranja podatka: 10. mart 2010.22:00
Upućivanje na literaturu
[0104] Clark H.F., i dr Genome Res.13, 2265-2270, 2003; Mungall A.J., i dr Nature 425, 805-811, 2003; Blumberg H., i dr Cell 104, 9-19, 2001; Dumoutier L., i dr J. Immunol.167, 3545-3549, 2001; Parrish-Novak J., i dr J. Biol. Chem.277, 47517-47523, 2002; Pletnev S., i dr (2003) 10 Biochemistry 42:12617-12624; Sheikh F., i dr (2004) J. Immunol.172, 2006-2010; EP1394274 (Primer 11); US2004/005320 (Primer 5); WO2003/029262 (Strana 74-75); WO2003/002717 (Patentni zahtev 2; Strana 63); WO2002/22153 (Strana 45-47); US2002/042366 (Strana 20-21); WO2001/46261 (Strana 57-59); WO2001/46232 (Strana 63-65); WO98/37193 (Patentni zahtev 1; Strana 55-59); Accession: Q9UHF4; Q6UWA9; Q96SH8; EMBL; AF184971; AAF01320.1.
(21) Brevican (BCAN, BEHAB)
Nukleotid
[0105] Banka gena pristupni broj AF229053
1
Banka gena verzija broj AF229053.1 GI:10798902
Banka gena datum ažuriranja podatka: 11. mart 2010.00:58
Polipeptid
[0106] Banka gena pristupni broj AAG23135
Banka gena verzija broj AAG23135.1 GI:10798903
Banka gena datum ažuriranja podatka: 11. mart 2010.00:58
Upućivanje na literaturu
[0107] Gary S.C., i dr Gene 256, 139-147, 2000; Clark H.F., i dr Genome Res. 13, 2265-2270, 2003; Strausberg R.L., i dr Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 99, 16899-16903, 2002; US2003/186372 (Patentni zahtev 11); US2003/186373 (Patentni zahtev 11); US2003/119131 (Patentni zahtev 1; Slika 52); US2003/119122 (Patentni zahtev 1; 20 Slika 52); US2003/119126 (Patentni zahtev 1); US2003/119121 (Patentni zahtev 1; Slika 52); US2003/119129 (Patentni zahtev 1); US2003/119130 (Patentni zahtev 1); US2003/119128 (Patentni zahtev 1; Slika 52); US2003/119125 (Patentni zahtev 1); WO2003/016475 (Patentni zahtev 1); WO2002/02634 (Patentni zahtev 1) (22) EphB2R (DRT, ERK, Hek5, EPHT3, Tyro5)
Nukleotid
[0108] Banka gena pristupni broj NM_004442
Banka gena verzija broj NM_004442.6 GI:111118979
Banka gena datum ažuriranja podatka: 8. septembar 2012.16:43
Polipeptid
[0109] Banka gena pristupni broj NP_004433
Banka gena verzija broj NP_004433.2 GI:21396504
Banka gena datum ažuriranja podatka: 8. septembar 2012.16:43
Upućivanje na literaturu
[0110] Chan,J. and Watt, V.M., Oncogene 6 (6), 1057-1061 (1991) Oncogene 10 (5):897-905 (1995), Annu. Rev. Neurosci. 21:309-345 (1998), Int. Rev. Cytol. 196:177-244 (2000)); WO2003042661 (Patentni zahtev 12); WO200053216 (Patentni zahtev 1; Strana 41); WO2004065576 (Patentni zahtev 1); WO2004020583 (Patentni zahtev 9); WO2003004529 (Strana 128-132); WO200053216 (Patentni zahtev 1; Strana 42); MIM:600997.
(23) ASLG659 (B7h)
Nukleotid
[0111] Banka gena pristupni broj AX092328
Banka gena verzija broj AX092328.1 GI:13444478
Banka gena datum ažuriranja podatka: 26. januar 2011.07:37
Upućivanje na literaturu
[0112] US2004/0101899 (Patentni zahtev 2); WO2003104399 (Patentni zahtev 11); WO2004000221 (Slika 3); US2003/165504 (Patentni zahtev 1); US2003/124140 (Primer 2); US2003/065143 (Slika 60); WO2002/102235 (Patentni zahtev 13; Strana 299); US2003/091580 (Primer 2); WO2002/10187 (Patentni zahtev 6; Slika 10); WO2001/94641 (Patentni zahtev 12; Slika 7b); WO2002/02624 (Patentni zahtev 13; Slika 1A-1B); US2002/034749 (Patentni zahtev 54; Strana 45-46); WO2002/06317 (Primer 2; Strana 320-321, Patentni zahtev 34; Strana 321-322); WO2002/71928 (Strana 468-469); WO2002/02587 (Primer 1; Slika 1); WO2001/40269 (Primer 3; strane 190-192); WO2000/36107 (Primer 2; Strana 205-207); WO2004/053079 (Patentni zahtev 12); WO2003/004989 (Patentni zahtev 1); WO2002/71928 (Strana 233-234, 452-453); WO 01/16318.
(24) PSCA (Antigen prethodnik matičnij ćelija prostate)
Nukleotid
[0113] Banka gena pristupni broj AJ297436
1
Banka gena verzija broj AJ297436.1 GI:9367211
Banka gena datum ažuriranja podatka: 1. februar 2011.11:25
Polipeptid
[0114] Banka gena pristupni broj CAB97347
Banka gena verzija broj CAB97347.1 GI:9367212
Banka gena datum ažuriranja podatka: 1. februar 2011.11:25
Upućivanje na literaturu
[0115] Reiter R.E., i dr Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 95, 1735-1740, 1998; u Z., i dr Oncogene 19, 1288-1296, 2000; Biochem. Biophys. Res. Commun. (2000) 275(3):783-788; WO2004/022709; EP1394274 (Primer 11); US2004/018553 (Patentni zahtev 17); WO2003/008537 (Patentni zahtev 1); WO2002/81646 (Patentni zahtev 1; Strana 164); WO2003/003906 (Patentni zahtev 10; Strana 288); WO2001/40309 (Primer 1; Slika 17); US2001/055751 (Primer 1; Slika 1b); WO2000/32752 (Patentni zahtev 18; Slika 1); WO98/51805 (Patentni zahtev 17; Strana 97); WO98/51824 (Patentni zahtev 10; Strana 94); WO98/40403 (Patentni zahtev 2; Slika 1 B); Accession: 043653; EMBL; AF043498; AAC39607.1
(25) GEDA
Nukleotid
[0116] Banka gena pristupni broj AY260763
Banka gena verzija broj AY260763.1 GI:30102448
Banka gena datum ažuriranja podatka: 11. mart 2010.02:24
Polipeptid
[0117] Banka gena pristupni broj AAP14954
Banka gena verzija broj AAP14954.1 GI:30102449
Banka gena datum ažuriranja podatka: 11. mart 2010.02:24
Upućivanje na literaturu
[0118] AP14954 lipoma HMGIC fusion-partnerlike protein /pid=AAP14954.1 - Homo sapiens (human); WO2003/054152 (Patentni zahtev 20); WO2003/000842 (Patentni zahtev 1); WO2003/023013 (Primer 3, Patentni zahtev 20); US2003/194704 (Patentni zahtev 45); GI:30102449;
(26) BAFF-R (faktor receptor za aktiviranje B ćelija, BLyS receptor 3, BR3)
Nukleotid
[0119] Banka gena pristupni broj AF116456
Banka gena verzija broj AF116456.1 GI:4585274
Banka gena datum ažuriranja podatka: 10. mart 2010.21:44
Polipeptid
[0120] Banka gena pristupni broj AAD25356
Banka gena verzija broj AAD25356.1 GI:4585275
Banka gena datum ažuriranja podatka: 10. mart 2010.21:44
Upućivanje na literaturu
[0121] BAFF receptor /pid=NP_443177.1 - Homo sapiens: Thompson, J.S., i dr Science 293 (5537), 2108-2111 (2001); WO2004/058309; WO2004/011611; WO2003/045422 (Primer; Strana 32-33); WO2003/014294 (Patentni zahtev 35; Slika 6B); WO2003/035846 (Patentni zahtev 70; Strana 615-616); WO2002/94852 (Col 136-137); WO2002/38766 25 (Patentni zahtev 3; Strana 133); WO2002/24909 (Primer 3; Slika 3); MIM:606269; NP_443177.1; NM_052945_1; AF132600
(27) CD22 (B-ćelijski receptor CD22-B izoform, BL-CAM, Lyb-8, Lyb8, SIGLEC-2, FLJ22814)
1
Nukleotid
[0122] Banka gena pristupni broj AK026467
Banka gena verzija broj AK026467.1 GI:10439337
Banka gena datum ažuriranja podatka: 11. septembar 2006.23:24
Polipeptid
[0123] Banka gena pristupni broj BAB15489
Banka gena verzija broj BAB15489.1 GI:10439338
Banka gena datum ažuriranja podatka: 11. septembar 2006.23:24
Upućivanje na literaturu
[0124] Wilson i dr (1991) J. Exp. Med.173:137-146; 30 WO2003/072036 (Patentni zahtev 1; Slika 1); IM:107266; NP_001762.1; NM_001771_1.
(27a) CD22 (CD22 molekul)
Nukleotid
[0125] Banka gena pristupni broj X52785
Banka gena verzija broj X52785.1 GI:29778
Banka gena datum ažuriranja podatka: 2. februar 2011.10:09
Polipeptid
[0126] Banka gena pristupni broj CAA36988
Banka gena verzija broj CAA36988.1 GI:29779
Banka gena datum ažuriranja podatka: 2. februar 2011.10:09
Upućivanje na literaturu
[0127] Stamenković I. i dr., Nature 345 (6270), 74-77 (1990)??
Ostali podaci
[0128] Zvanični simbol: CD22
Ostali alijasi: SIGLEC-2, SIGLEC2
Ostale oznake: B-ćelijski receptor CD22; molekul B-limfocit ćelijske adhezije; BL-CAM; CD22 antigen; T-ćelijski površinski antigen Leu-14; lectin 2 nalik Ig za vezivanje sialinske kiseline; sialinska kiselina-vezujući lectin 2 nalik Ig
ANTITELA
[0129] G5/44 (Inotuzumab): DiJoseph JF.,i dr Cancer Immunol Immunother.2005 Jan;54(1):11-24.
[0130] Epratuzumab- Goldenberg DM., i dr Expert Rev Anticancer Ther.6(10): 1341-53, 2006.
(28) CD79a (CD79A, CD79alfa), alfa povezana sa imunoglobulinom, protein specifičan za B ćelije koji kovalentno interakuje sa Ig beta (CD79B) i obrazuje kompleks na površini sa Ig M
[0131] 35 molekula, prenose signal koji je uključen u diferencijaciju B-ćelija), pl: 4.84, MW: 25028 TM: 2
[P] Gene Chromosome: 19q13.2).
Nukleotid
[0132] Banka gena pristupni broj NM_001783
Banka gena verzija broj NM_001783.3 GI:90193587
Banka gena datum ažuriranja podatka: 26. jun 2012.13:48
Polipeptid
1
[0133] Banka gena pristupni broj NP_001774
Banka gena verzija broj NP_001774.1 GI:4502685
Banka gena datum ažuriranja podatka: 26. jun 2012.13:48
Upućivanje na literaturu
[0134] WO2003/088808, US2003/0228319; WO2003/062401 (patentni zahtev 9); US2002/150573 (patentni zahtev 4, strane 13-14); WO99/58658 (patentni zahtev 13, Slika 16); WO92/07574 (Slika 1); US5644033; Ha i dr (1992) J. Immunol. 148(5):1526-1531; Müller i dr (1992) Eur. J. Immunol.. 22:1621-1625; Hashimoto i dr (1994) Imunogenetics 40(4):287-295; Preud’homme i dr (1992) Clin. Exp. 5 Immunol. 90(1):141-146; Yu i dr (1992) J. Immunol.148(2) 633-637; Sakaguchi i dr (1988)EMBO J.7(11):3457-3464
(29) CXCR5 (Receptor 1 Burkittovog limfoma, G protein-upareni receptor koji se aktivira od strane CXCL 13 hemokine, funkcioniše u migraciji limfocita i humoralnoj odbrani, ima ulogu u HIV-2 infekciji i možda u razvijanju SIDE, limfoma, mijeloma, i leukemije); 372 aa, pl: 8.54 MW: 41959 TM: 7 [P] Gene Chromosome: 11q23.3, Nukleotid
[0135] Banka gena pristupni broj NM_001716
Banka gena verzija broj NM_001716.4 GI:342307092
Banka gena datum ažuriranja podatka: 30. septembar 2012.13:49
Polipeptid
[0136] Banka gena pristupni broj NP_001707
Banka gena verzija broj NP_001707.1 GI:4502415
Banka gena datum ažuriranja podatka: 30. septembar 2012.13:49
Upućivanje na literaturu
[0137] WO2004/040000; WO2004/015426; US2003/105292 (Primer 2); US6555339 (Primer 2); WO2002/61087 (Slika 1); WO2001/57188 (Patentni zahtev 20, strana 269); WO2001/72830 (strane 12-13); WO2000/22129 (Primer 1, strane 152-153, 15 Primer 2, strane 254-256); WO99/28468 (patentni zahtev 1, strana 38); US5440021 (Primer 2, col 49-52); WO94/28931 (strane 56-58); WO92/17497 (patentni zahtev 7, Slika 5); Dobner i dr (1992) Eur. J. Immunol. 22:2795-2799; Barella i dr (1995) Biochem. J. 309:773-779 (30) HLA-DOB (Beta podjedinica MHC klasa II molekula (Ia antigen) koji vezuje peptide i daje 20 njih dp CD4+ T limfocita); 273 aa, pl: 6.56, MW: 30820.TM: 1 [P] Gene Chromosome: 6p21.3)
Nukleotid
[0138] Banka gena pristupni broj NM_002120
Banka gena verzija broj NM_002120.3 GI:118402587
Banka gena datum ažuriranja podatka: 8. septembar 2012.16:46
Polipeptid
[0139] Banka gena pristupni broj NP_002111
Banka gena verzija broj NP_002111.1 GI:4504403
Banka gena datum ažuriranja podatka: 8. septembar 2012.16:46
Upućivanje na literaturu
[0140] Tonnelle i dr (1985) EMBO J.4(11):2839-2847; Jonsson i dr (1989) Imunogenetics 29(6):411-413; Beck i dr (1992) J. Mol. Biol.228:433-441; Strausberg i dr (2002) Proc. Natl. Acad. Sci USA 99:16899-16903; Servenius i dr (1987) J. Biol. Chem. 262:8759-8766; Beck i dr (1996) J. Mol. Biol. 25255:1-13; Naruse i dr (2002) Tissue Antigens 59:512-519; WO99/58658 (patentni zahtev 13, Slika 15); US6153408 (Col 35-38); US5976551 (col 168-170); US6011146 (col 145-146); Kasahara i dr (1989) Imunogenetics 30(1):66-68; Larhammar i dr (1985) J. Biol. Chem.260(26):14111-14119
(31) P2X5 (Purinergički receptor P2X usmereno vezan za jonski kanal 5, jonski kanal usmere od strane ekstracelularng ATP, možda uključen u sinaptičku tranmisiju I neurogenezi, poremećaj koji možda doprinosi
2
idiopatskoj nestabilnosti detrusora); 422 aa), pl: 7.63, MW: 47206 TM: 1 [P] Gene Chromosome: 17p13.3). Nukleotid
[0141] Banka gena pristupni broj NM_002561
Banka gena verzija broj NM_002561.3 GI:325197202
Banka gena datum ažuriranja podatka: 27. jun 2012.00:41
Polipeptid
[0142] Banka gena pristupni broj NP_002552
Banka gena verzija broj NP_002552.2 GI:28416933
Banka gena datum ažuriranja podatka: 27. jun 2012.00:41
Upućivanje na literaturu
[0143] Le i dr (1997) FEBS Lett. 418(1-2):195-199; WO2004/047749; WO2003/072035 (patentni zahtev 10); Touchman i dr (2000) Genome Res.10:165-173; WO2002/22660 (patentni zahtev 20); WO2003/093444 (patentni zahtev 1); WO2003/087768 (patentni zahtev 1); WO2003/029277 (strana 82)
(32) CD72 (Antigen CD72 diferencijacije B-ćelija, Lyb-2); 359 aa, pl: 8.66, MW: 40225, TM: 1 5 [P] Gene Chromosome: 9p13.3).
Nukleotid
[0144] Banka gena pristupni broj NM_001782
Banka gena verzija broj NM_001782.2 GI:194018444
Banka gena datum ažuriranja podatka: 26. jun 2012.13:43
Polipeptid
[0145] Banka gena pristupni broj NP_001773
Banka gena verzija broj NP_001773.1 GI:4502683
Banka gena datum ažuriranja podatka: 26. jun 2012.13:43
Upućivanje na literaturu
[0146] WO2004042346 (patentni zahtev 65); WO2003/026493 (strane 51-52, 57-58); WO2000/75655 (strane 105-106); Von Hoegen i dr (1990) J. Immunol. 144(12):4870-4877; Strausberg i dr (2002) Proc. Natl. Acad. Sci USA 99:16899-16903.
(33) L Y64 (Limfocit antigen 64 (RP105), tip I membranski protein familije bogate ponavljanjem leucina (LRR), reguliše aktivaciju i apoptozu B-ćelija, gubitak funkcionalnosti dovodi se u vezu sa povećanom aktivnosti bolesti kod pacijenata sa sistemskom lupus eritematozom); 661 aa, pI: 6.20, MW: 74147 TM: 1 [P] Gene Chromosome: 5q12).
Nukleotid
[0147] Banka gena pristupni broj NM_005582
Banka gena verzija broj NM_005582.2 GI:167555126
Banka gena datum ažuriranja podatka: 2. septembar 2012.13:50
Polipeptid
[0148] Banka gena pristupni broj NP_005573
Banka gena verzija broj NP_005573.2 GI:167555127
Banka gena datum ažuriranja podatka: 2. septembar 2012.13:50
Upućivanje na literaturu
[0149] US2002/193567; WO97/07198 (patentni zahtev 11, strane 39-42); Miura i dr (1996) 15 Genomics 38(3):299-304; Miura i dr (1998) Blood 92:2815-2822; WO2003/083047; WO97/44452 (patentni zahtev 8, strane 57-61); WO2000/12130 (strane 24-26).
(34) FcRH1 (Protein 1 nalik Fc receptoru, pretpostavljeni receptor za imunoglobulin Fc domena koji sadrži C2 tipe nalik Ig i ITAM domene, možda ima ulogu u B-limfocit 20 diferencijaciji); 429 aa, pI: 5.28, MW: 469 TM: 1 [P] Gene Chromosome: 1q21-1q22)
Nukleotid
[0150] Banka gena pristupni broj NM_052938
Banka gena verzija broj NM_052938.4 GI:226958543
Banka gena datum ažuriranja podatka: 2. septembar 2012.13:43
Polipeptid
[0151] Banka gena pristupni broj NP_443170
Banka gena verzija broj NP_443170.1 GI:16418419
Banka gena datum ažuriranja podatka: 2. septembar 2012.13:43
Upućivanje na literaturu
[0152] WO2003/077836; WO2001/38490 (patentni zahtev 6, Slika 18E-1-18-E-2); Davis i dr (2001) Proc. Natl. Acad. Sci USA 98(17):9772-9777; WO2003/089624 (patentni zahtev 8); EP1347046 (patentni zahtev 1); WO2003/089624 (patentni zahtev 7).
(35) IRTA2 (receptor Imunoglobulinske superfamilije u vezi sa translokacijom 2, pretpostavljeni imunoreceptor sa mogućom ulogom u B-ćelijskom razvoju I limfomagnezi; deregulacija gena translokacijom dešava se u nekim B-ćelijskim malignitetima); 977 aa, pI: 6.88, MW: 106468, TM: 1 [P] Gene Chromosome: 1q21)
Nukleotid
[0153] Banka gena pristupni broj AF343662
Banka gena verzija broj AF343662.1 GI:13591709
Banka gena datum ažuriranja podatka: 11. mart 2010.01:16
Polipeptid
[0154] Banka gena pristupni broj AAK31325
Banka gena verzija broj AAK31325.1 GI:13591710
Banka gena datum ažuriranja podatka: 11. mart 2010.01:16
Upućivanje na literaturu
[0155] AF343663, AF343664, AF343665, AF369794, AF397453, AK090423, AK090475, AL834187, AY358085; Mouse:AK089756, AY158090, AY506558; NP_112571.1; WO2003/024392 (patentni zahtev 2, Slika 97); Nakayama i dr (2000) Biochem. Biophys. Res. Commun. 277(1):124-127; WO2003/077836; WO2001/38490 (patentni zahtev 3, Slika 18B-1-18B-2).
(36) TENB2 (TMEFF2, tomoregulin, TPEF, HPP1, TR, pretpostavljeni transmembranski proteoglikan, povezan sa EGF/heregulin familijom faktora rasta i follistatinom); 374 aa)
Nukleotid
[0156] Banka gena pristupni broj AF179274
Banka gena verzija broj AF179274.2 GI:12280939
Banka gena datum ažuriranja podatka: 11. mart 2010.01:05
Polipeptid
[0157] Banka gena pristupni broj AAD55776
Banka gena verzija broj AAD55776.2 GI:12280940
Banka gena datum ažuriranja podatka: 11. mart 2010.01:05
Upućivanje na literaturu
[0158] NCBI Accession: AAD55776, AAF91397, AAG49451, NCBI RefSeq: NP_057276; NCBI Gene: 23671; OMIM: 605734; SwissProt Q9UIK5; AY358907, CAF85723, CQ782436; WO2004/074320; JP2004113151; WO2003/042661; WO2003/009814; EP1295944 (strane 69-70); WO2002/30268 (strana 329); WO2001/90304; US2004/249130; US2004/022727; WO2004/063355; US2004/197325; US2003/232350; 5 US2004/005563; US2003/124579; Horie i dr (2000) Genomics 67:146-152; Uchida i dr (1999) Biochem. Biophys. Res. Commun.
266:593-602; Liang i dr (2000) Cancer Res.60:4907-12; Glynne-Jones i dr (2001) Int J Cancer. Oct 15; 94(2):178-84.
(37) PSMA - FOLH1 (Hidrolaza folata (membranski antigen specifičan za prostatu) 1)
Nukleotid
[0159] Banka gena pristupni broj M99487
Banka gena verzija broj M99487.1 GI:190663
Banka gena datum ažuriranja podatka: 23. jun 2010.08:48
Polipeptid
[0160] Banka gena pristupni broj AAA60209
Banka gena verzija broj AAA60209.1 GI:190664
Banka gena datum ažuriranja podatka: 23. jun 2010.08:48
Upućivanje na literaturu
[0161] Israeli R.S., i dr Cancer Res.53 (2), 227-230 (1993)
Ostali podaci
[0162] Zvaničan simbol: FOLH1
Ostali alijasi: GIG27, FGCP, FOLH, GCP2, GCPII, NAALAD1, NAALAdase, PSM, PSMA, mGCP
Ostale oznake: N-acetilovana afla-povezana kisela dipeptidaza 1; N-acetilovana-alfa-povezana kisela dipeptidaza I; NAALADase I; gen za pospešivanje ćelijskog rasta 27 protein; folilpoli-gama-glutamat carboksipeptidaza; glutamat carboksilaza II; glutamat carboksipeptidaza 2; glutamat carboksipeptidaza II; membranska glutamat carboksipeptidaza; membranska antigen varijanta F specifična za prostatu; pteroilpoli-gamma-glutamat carboksipeptidaza.
ANTITELA
[0163] US 7,666,425:
Antitela proizvedena od strane hibridoma imaju sledeće ATCC reference: ATCC pristupni broj HB-12101, ATCC pristupni broj HB-12109, ATCC pristupni broj HB-12127 i ATCC pristupni broj HB-12126.
Proscan: monoklonsko antitelo odabrano iz grupe koja se sastoji od 8H12, 3E11, 17G1, 29B4, 30C1 i 20F2 (US 7811564; Moffett S., i dr Hybridoma (Larchmt) decembar 2007; 26 (6): 363-72).
Cytogen: monoklonska antitela 7E11-C5 (ATCC pristupni broj HB 10494 i 9H10-A4 (ATCC pristupni broj HB 11430) - US 5,763,202
GlycoMimetics: NUH2 - ATTC pristupni bojr HB 9762 (US 7,135,301)
Human Genome Science: HPRAJ70 - ATTC pristupni broj 97131 (US 6,824,993); Aminokiselinska sekvenca kodirana od strane cDNA klona (HPRAJ70) deponirane kao American Type Culture Collection ("ATCC") Depozitni broj 97131
Medarex: Anti-PSMA antitela kojima nedostaju fukozilni ostaci - US 7,875,278
Mišja anti-PSMA antitela uključuju 3F5.4G6, 3D7.1.1, 4E10-1.14, 3E11, 4D8, 3E6, 3C9, 2C7, 1 G3, 3C4, 3C6, 4D4, 1 G9, 5C8B9, 3G6, 4C8B9, i monoklonska antitela. Hibridomi koji luče 3F5.4G6, 3D7.1.1, 4E10-1.14, 3E11, 4D8, 3E6, 3C9, 2C7, 1G3, 3C4, 3C6, 4D4, 1G9, 5C8B9, 3G6 or 4C8B9 javno su deponovani i opisani u US Pat. No.6,159,508. Relevantni hibridomi javno su deponovani i opisani u US Pat. No.6,107,090. Nadalje, humanizovana anti-PSMA antitela, uključujući humanizovanu verziju J591, opisana su detaljno u PCT publikaciji WO 02/098897.
2
[0164] Druga mišja anti-humana PSMA antitela opisani su u struci, kao što su mAb 107-1A4 (Wang, S. i dr (2001) Int J Cancer 92:., 871-876) i mAb 2C9 (Kato, K. i dr. (2003) Int. J. Urol.10:439-444).
[0165] Primeri humanih anti-PSMA monoklonskih antitela uključuju 4A3, 7F12, 8C12, 8A11, 16F9, 2A10, 2C6, 2F5 i 1 C3 antitela izolovana i strukturno okarakterisana kao što je prvobitno opisano u PCT publikacijama WO 01/09192 i WO 03/064606 I u U.S. Provisional Application Ser. No.60/654,125, pod nazivom "Human Monoclonal Antibodies to Prostate Specific Membrane Antigen (PSMA)", koja je podneta 18. februara 2005. V.sub.H aminokiselinske sekvence 4A3, 7F12, 8C12, 8A11, 16F9, 2A10, 2C6, 2F5 i 1 C3 prikazane su u SEQ ID NO: 1-9, respektivno. V.sub.L aminokiselinske sekvence 4A3, 7F12, 8C12, 8A11, 16F9, 2A10, 2C6, 2F5 i 1C3 prikazane su u SEQ ID NO: 10-18, respektivno.
[0166] Druga humana anti-PSMA antitela uključuju antitela obelodanjena u PCT publikaciji WO 03/034903 i US Application No.2004/0033229.
[0167] NW Biotherapeutics: Hibridomska ćelijska linija se bira iz grupe koju čine 3F5.4G6 koji ima ATCC pristupni broj HB12060, 3D7-1.I. koji ima ATCC pristupni broj HB12309, 4E10-1.14 koji ima ATCC pristupni broj HB12310, 3E11 (ATCC HB12488), 4D8 (ATCC HB12487), 3E6 (ATCC HB12486), 3C9 (ATCC HB12484), 2C7 (ATCC HB12490), 1G3 (ATCC HB12489), 3C4 (ATCC HB12494), 3C6 (ATCC HB12491), 4D4 (ATCC HB12493), 1G9 (ATCC HB12495), 5C8B9 (ATCC HB12492) i 3G6 (ATCC HB12485) - pogledati US 6,150,508 PSMA Development Company/Progenics/Cytogen - Seattle Genetics: mAb 3.9, proizveden od strane hibridoma deponovan pod ATCC pristupnim brojem PTA-3258 ili mAb 10,3, proizveden od strane hibridoma deponovan pod ATCC pristupnim brojem PTA-3347 – US 7,850,971
PSMA Development Company - Sastavi PSMA antitela (US 20080286284, Tabela 1)
Ova prijava izdvojena je od u US patentne prijave No. 10/395.894, podnesene 21. marta 2003 (SAD 7,850,971) Univerzitetska bolnica u Freiburgu, Nemačka - mAbs 3/A12, 3/E7, i 3/F11 (Wolf P., i dr Prostate. 2010 Apr 1;70(5):562-9).
(38) SST (Somatostatinski receptor; obratiti pažnju da postoji pet podtipova)
(38.1) SSTR2 (Somatostatinski receptor 2)
Nukleotid
[0168] Banka gena pristupni broj NM_001050
Banka gena verzija broj NMR_001050.2 GI:44890054
Banka gena datum ažuriranja podatka: 19. avgust 2012.13:37
Polipeptid
[0169] Banka gena pristupni broj NP_001041
Banka gena verzija broj NP_001041.1 GI:4557859
Banka gena datum ažuriranja podatka: 19. avgust 2012.13:37
Upućivanje na literaturu
[0170] Yamada Y., i dr Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 89 (1), 251-255 (1992); Susini C., i dr Ann Oncol. 2006 Dec;17(12):1733-42
Ostali podaci
[0171] Zvanični smbol: SSTR2
Ostale oznake: SRIF-1; SS2R; somatostatinski receptor tipa 2
(38.2) SSTR5 (Somatostatinski receptor 5)
Nukleotid
[0172] Banka gena pristupni broj D16827
Banka gena verzija broj D16827.1 GI:487683
Banka gena datum ažuriranja podatka: 1. avgust 2006.12:45
Polipeptid
[0173] Banka gena pristupni broj BAA04107
Banka gena verzija broj BAA04107.1 GI:487684
Banka gena datum ažuriranja podatka: 1. avgust 2006.12:45
Upućivanje na literaturu
[0174] Yamada,Y., i dr Biochem. Biophys. Res. Commun.195 (2), 844-852 (1993)
Ostali podaci
[0175] Zvanični simbol: SSTR5
Ostali alijasi: SS-5-R
Ostale oznake: Somatostatinski receptor podtipa 5; somatostatinski receptor tipa 5
(38.3) SSTR1
(38.4)SSTR3
(38.5) SSTR4
AvB6 – obe podjedinice (39+40)
(39) ITGAV (Integrin, alfa V;
Nukleotid
[0176] Banka gena pristupni broj M14648 J02826 M18365
Banka gena verzija broj M14648.1 GI:340306
Banka gena datum ažuriranja podatka: 23. jun 2010.08:56
Polipeptid
[0177] Banka gena pristupni broj AAA36808
Banka gena verzija broj AAA36808.1 GI:340307
Banka gena datum ažuriranja podatka: 23. jun 2010.08:56
Upućivanje na literaturu
[0178] Suzuki S., i dr Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A.83 (22), 8614-8618 (1986)
Ostali podaci
[0179] Zvanični simbol: ITGAV
Ostali alijasi CD51, MSK8, VNRA, VTNR
Ostale oznake: antigen identifikovan od strane monoclonskog antitela L230; integrin alfa-V; integrin alfaVbeta3; integrin, alfa V (vitronectinski receptor, alfa polipeptid, antigen CD51); vitronectinski receptor podjedinice alfa (40) ITGB6 (Integrin, beta 6)
Nukleotid
[0180] Banka gena pristupni broj NM_000888
Banka gena verzija broj NM_000888.3 GI:9966771
Banka gena datum ažuriranja podatka: 27. jun 2012.00:46
Polipeptid
[0181] Banka gena pristupni broj NP_000879
Banka gena verzija broj NP_000879.2 GI:9625002
Banka gena datum ažuriranja podatka: 27. jun 2012.00:46
Upućivanje na literaturu
2
[0182] Sheppard D.J., i dr Biol. Chem.265 (20), 11502-11507 (1990)
Ostale informacije
[0183] Zvanični simbol: ITGB6
Ostale oznake: integrin beta-6
ANTITELA
[0184] Biogen: US 7,943,742 – hibridoma klonovi 6.3G9 i 6.8G6 deponovani su kod ATCC, pristupni brojevi ATCC PTA-3649 i -3645, respektivno
Biogen: US7,465,449 – u nekim otelotvorenjima, antitelo sadrži iste polipeptidne sekvence teškog i lakog lanca kao antitelo proizvedeno od strane hibridoma 6.1A8, 6.3G9, 6.8G6, 6.2B1, 6.2B10, 6.2A1, 6.2E5, 7.1G10, 7.7G5, or 7.1C5.
Centocor (J&J): US7,550,142; US7,163,681
Na primer u US 7,550,142 – antitelo ima varijabilne regije humanog teškog lanca i humanog lakog lanca koje sadrže aminokiselinske sekvence prokazane u SEQ ID NO: 7 and SEQ ID NO: 8.
Seattle Genetics: 15H3 (Ryan MC., i dr Cancer Res April 15, 2012; 72(8 Supplement): 4630)
(41) CEACAMS (Karcinoembrionski antigen-povezan molekul ćelijske adhezije 5)
Nukleotid
[0185] Banka gena pristupni broj M17303
Banka gena verzija broj M17303.1 GI:178676
Banka gena datum ažuriranja podatka: 23. jun 2010, 08:47
Polipeptid
[0186] Banka gena pristupni broj AAB59513
Banka gena verzija broj AAB59513.1 GI:178677
Banka gena datum ažuriranja podatka: 23. jun 2010, 08:47
Upućivanje na literaturu
[0187] Beauchemin N., i dr Mol. Cell. Biol.7 (9), 3221-3230 (1987)
Ostali podaci
[0188] Zvanični simbol: CEACAM5
Ostali alijasi: CD66e, CEA
Ostale oznake: meconium antigen 100
Antitela
[0189] AstraZeneca-Medlmmune:US 20100330103; US20080057063;
US20020142359
- na primer, antitelo koje ima komplementarno determinišuće regije (CDR) sa narednim sekvencama:
teški lanac; CDR1 - DNYMH, CDR2 - WIDPENGDTE YAPKFRG, CDR3 - LIYAGYLAMD Y; and light chain CDR1 SASSSVTYMH, CDR2 - STSNLAS, CDR3 - QQRSTYPLT.
- Hibridoma 806.077 deponovan kao European Collection of Cell Cultures (ECACC) depozitni broj 96022936.
Research Corporation Technologies, Inc.:US5,047,507
Bayer Corporation: US6,013,772
BioAlliance: US7,982,017; US7,674,605
● US 7,674,605
2
- antitelo koje obuhvata sekvencu varijabilne regije teškog lanca od aminokiselinske sekvence od SEQ ID NO: 1, i sekvencu varijabilne regije teškog lanca od aminokiselinske sekvence od SEQ ID NO: 2.
- antitelo koje obuhvata sekvencu varijabilne regije teškog lanca od aminokiselinske sekvence od SEQ ID NO: 5, i sekvencu varijabilne regije teškog lanca od aminokiselinske sekvence od SEQ ID NO: 6.
Celltech Therapeutics Limited: US5,877,293
The Dow Chemical Company: US5,472,693; US6,417,337; US6,333,405
US5,472,693 - Na primer, ATCC No. CRL-11215
US6,417,337 - Na primer, ATCC CRL-12208
US6,333,405 - Na primer, ATCC CRL-12208
Imunolekovi, Inc: US7,534,431; US7,230,084; US7,300,644; US6,730,300;
US20110189085
- antitelo koje ima CDR-ove varijabilne regije lakog lanca sadrži:
CDR1 sadrži KASQDVGTSVA (SEQ ID NO: 20); CDR2 sadrži WTSTRHT (SEQ ID NO: 21); i CDR3 sadrži QQYSLYRS (SEQ ID NO: 22); i CDR-i varijabilne regije teškog lanca navedenog anti-CEA antitela sadrže: CDR1 sadrži TYWMS (SEQ ID NO: 23); CDR2 sadrži EIHPDSSTINYAPSLKD (SEQ ID NO: 24); i CDR3 sadrži LYFGFPWFAY (SEQ ID NO: 25). US20100221175; US20090092598; US20070202044; US20110064653;
US20090185974; US20080069775.
(42) MET (met proto-onkogen; hepatocit receptor faktora rasta)
Nukleotid
[0190] Banka gena pristupni broj M35073
Banka gena verzija broj M35073.1 GI:187553
Banka gena datum ažuriranja podatka: 6. mart 2012.11:12
Polipeptid
[0191] Banka gena pristupni broj AAA59589
Banka gena verzija broj AAA59589.1 GI:553531
Banka gena datum ažuriranja podatka: 6. mart 2012.11:12
Upućivanje na literaturu
[0192] Dean M., i dr Nature 318 (6044), 385-388 (1985)
Ostali podaci
[0193] Zvanični simbol: MET
Ostali alijasi: AUTS9, HGFR, RCCP2, c-Met
Ostale oznake: HGF receptor; HGF/SF receptor; SF receptor; hepatocit receptor faktora rasta; met protoonkogen tirozin kinaz; proto-onkogen c-Met; raštrkani faktor receptor; tirozin-protein kinaz Met
ANTITELA
[0194] Abgenix/Pfizer: US20100040629
na primer, antitelo proizvedeno od strane hibridoma 13.3.2 ima American Type Culture Collection (ATCC) pristupni broj PTA-5026; antitelo proizvedeno od strane hibridoma 9.1.2 ima ATCC pristupni broj PTA-5027; antitelo proizvedeno od strane hibridoma 8.70.2 ima ATCC pristupni broj PTA-5028; ili antitelo proizvedeno od strane hibridoma 6.90.3 ima ATCC pristupni broj PTA-5029.
[0195] Amgen/Pfizer: US20050054019
2
na primer, antitelo koje sadrži težak lanac ima aminokiselinske sekvence navedene u SEQ ID NO: 2 gde je X2 glutamat, a X4 je serin, i lak lanac ima aminokiselinske sekvence navedene u SEQ ID NO: 4 gde je X8 alanin, bez signalnih sekvenci; antitelo koje sadrži lanac ima aminokiselinske sekvence navedene u SEQ ID NO: 6 i lak lanac ima aminokiselinske sekvence navedene u SEQ ID NO: 8, bez signalnih sekvenci; antitelo koje sadrži težak lanac ima aminokiselinske sekvence navedene u SEQ ID NO: 10 i lak lanac ima aminokiselinske sekvence navedene u SEQ ID NO: 12, bez signalnih sekvenci; ili antitelo koje sadrži težak lanac ima aminokiselinske sekvence navedene u SEQ ID NO: 14 i lak lanac ima aminokiselinske sekvence navedene u SEQ ID NO: 16, bez signalnih sekvenci.
[0196] Agouron Pharmaceuticals (Now Pfizer): US20060035907
[0197] Eli Lilly: US20100129369
[0198] Genentech: US5,686,292; US20100028337; US20100016241; US20070129301; US20070098707; US20070092520, US20060270594; US20060134104; US20060035278; US20050233960; US20050037431
US 5,686,292 -na primer ATCC HB-11894 i ATCC HB-11895
US 20100016241 -na primer, ATCC HB-11894 (hibridom 1A3.3.13) or HB-11895 (hibridom 5D5.11.6)
[0199] National Defense Medical Center, Taiwan: Lu RM., i dr Biomaterials.2011 Apr;32(12):3265-74.
[0200] Novartis: US20090175860
- na primer, antitelo koje sadrži sekvence od CDR1, CDR2 and CDR3 teškog lanca 4687, gde su sekvence od CDR1, CDR2, i CDR3 teškog lanca 4687 ostaci 26-35, 50-65, i 98-102, respektivno, od SEQ ID NO:
58; i sekvence od CDR1, CDR2, i CDR3 lakog lanca 5097, gde su sekvence CDR1, CDR2, i CDR3 lakog lanca 5097 ostaci 24-39,55-61, i 94-100 of SEQ ID NO: 37.
[0201] Pharmacia Corporation: US20040166544
[0202] Pierre Fabre: US20110239316, US20110097262, US20100115639
[0203] Sumsung: US 20110129481 – na primer monoklonsko antitelo proizvedeno od hibridoma ćelije koje ima pristupni broj KCLRF-BP-00219 or pristupni broj of KCLRF-BP-00223.
[0204] Samsung: US 20110104176 – na primer antitelo proizvedeno od hibridoma ćelije koje ima pristupni broj: KCLRF-BP-00220.
[0205] University of Turin Medical School: DN-30 Pacchiana G., i dr J Biol Chem. 2010 Nov 12;285(46):36149-57
[0206] Van Andel Research Institute: Jiao Y., i dr Mol Biotechnol.2005 Sep;31(1):41-54.
(43) MUC1 (Mucin 1, povezan sa ćelijskom površinom) težak lanac aminokiselinske sekvence naveden u Nukleotid
[0207] Banka gena pristupni broj J05581
Banka gena verzija broj J05581.1 GI:188869
Banka gena datum ažuriranja podatka: 23. jun 2010.08:48
Polipeptid
[0208] Banka gena pristupni broj AAA59876
Banka gena verzija broj AAA59876.1 GI:188870
Banka gena datum ažuriranja podatka: 23. jun 2010.08:48
Upućivanje na literaturu
[0209] Gendler S.J., i dr J. Biol. Chem.265 (25), 15286-15293 (1990)
Ostali podaci
[0210] Zvanični simbol: MUC1
Ostali alijasi: RP11-263K19.2, CD227, EMA, H23AG, KL-6, MAM6, MUC-1, MUC-1/SEC, MUC-1/X, MUC1/ZD, PEM, PEMT, PUM
2
Ostale oznake: DF3 antigen; H23 antigen; antigen DF3 u vezi karcinoma dojke; mucin u vezi sa karcinomom; episialin; krebs von den Lungen-6; mucin 1, transmembranski; mucin-1; reaktivan na kikiriki urinarni mucin; pollimorfni epitelni mucin; epitelni mucin povezan sa tumorom; epitelni membranski antigen povezan sa tumorom; mucin povezan sa tumorom
ANTITELA
[0211] AltaRex- Quest Pharma Tech: US 6,716,966 – na primer Alt-1 antitelo proizvedeno od hibridoma ATCC No PTA-975.
[0212] AltaRex- Quest Pharma Tech: US7,147,850
[0213] CRT: 5E5 - Sorensen AL., i dr Glycobiologyvol.16 no.2 pp.96-107, 2006; HMFG2 - Burchell J., i dr Cancer Res., 47, 5476-5482 (1987)
[0214] Glycotope GT-MAB: GT-MAB 2.5-GEX (vebsajt: http://www.glycotope.com/pipeline/pankomab-gex)
[0215] Imunogen: US7,202,346
- na primer, antitelo MJ-170: hybridoma ćelijske linije MJ-170 ATCC pristupni broj PTA-5286; monoklonsko antitelo MJ-171: hibridoma ćelijska linija MJ-171 ATCC pristupni broj PTA-5287; monoklonsko antitelo MJ-172: hibridoma ćelijska linija MJ-172 ATCC pristupni broj PTA-5288; or monoklonsko antitelo MJ-173: hibridoma ćelijska linija MJ-173 ATCC pristupni broj PTA-5302
[0216] Imunolekovi: US 6,653,104
[0217] Ramot Tel Aviv Uni: US7,897,351
[0218] Regents Uni. CA: US 7,183,388; US20040005647; US20030077676.
[0219] Roche GlycArt: US8,021,856
[0220] Russian National Cancer Research Center: Imuteran- Ivanov PK., i dr Biotechnol J.2007 Jul;2(7):863-70
[0221] Technische Univ Braunschweig: (IIB6, HT186-B7, HT186-D11, HT186-G2, HT200-3A-C1, HT220-M-D1, HT220-M-G8) - Thie H., i dr PLoS One.2011 Jan 14;6(1):e15921
(44) CA9 (Ugljena anhidraza IX)
Nukleotid
[0222] Banka gena pristupni broj . X66839
Banka gena verzija broj X66839.1 GI:1000701
Banka gena datum ažuriranja podatka: 2. februar 2011.10:15
Polipeptid
[0223] Banka gena pristupni broj CAA47315
Banka gena verzija broj CAA47315.1 GI:1000702
Banka gena datum ažuriranja podatka: 2. februar 2011.10:15
Upućivanje na literaturu
[0224] Pastorek J., i dr Oncogene 9 (10), 2877-2888 (1994)
Ostali podaci
[0225] Zvanični simbol: CA9
Ostali alijasi: CAIX, MN
Ostale oznake: CA-IX; P54/58N; antigen G250 povezan sa RCC; protein G250 povezan sa RCC; ugljena dehidrataza IX; ugnjena dehidrataza 9; ugljena dehidrataza; membranski antigen MN; pMW1; antigen G250 povezan sa karcinomom bubrežnih ćelija
ANTITELA
[0226] Abgenix/Amgen: US20040018198
[0227] Affibody: Anti-CAIX Affibody molekuli
2
(http://www.affibody.com/en/Product-Portfolio/Pipeline/)
[0228] Bayer: US7,462,696
[0229] Bayer/Morphosys: 3ee9 mAb - Petrul HM., i dr Mol Cancer Ther.2012 Feb;11 (2):340-9
[0230] Harvard Medical School: Antitela G10, G36, G37, G39, G45, G57, G106, G119, G6, G27, G40 i G125. Xu C., i dr PLoS One.2010 Mar 10;5(3):e9625
[0231] Institute of Virology, Slovak Academy of Sciences (Bayer) - US5,955,075
- na primer, M75- ATCC pristupni broj HB 11128 or MN12 - ATCC pristupni broj HB 11647
[0232] Institute of Virology, Slovak Academy of Sciences: US7,816,493
- na primer M75 monoklonsko antitelo koje je izlučeno iz hibridoma VU-M75, koje je deponovano pri American Type Culture Collection pod ATCC brojem HB 11128; ili V/10 monoklonsko antitelo koje je izlučeno iz hibridoma V/10-VU, koje je deponovano pri International Depository Authority of the Belgian Coordinated Collection of Microorganisms (BCCM) at the Laboratorium voor Moleculaire Bioloqie-Plasmidencollectie (LMBP) at the Universeit Gent in Gent, Belgium, pod pristupnim brojem LMBP 6009CB.
[0233] Institute of Virology, Slovak Academy of Sciences US20080177046; US20080176310; US20080176258; US20050031623
[0234] Novartis: US20090252738
[0235] Wilex: US7,691,375 – na primer antitelo proizvedeno od strane hibridoma ćelijske linije DSM ASC 2526.
[0236] Wilex: US20110123537; Rencarex: Kennett RH., i dr Curr Opin Mol Ther.2003 Feb;5(1):70-5
[0237] Xencor: US20090162382
(45) EGFRvIII (Epidarmalni receptor faktora rasta (EGFR), transkriptna varijanta 3,
Nukleotid
[0238] Banka gena pristupni broj NM_201283
Banka gena verzija broj NM_201283.1 GI:41327733
Banka gena datum ažuriranja podatka: 30. septembar 2012.13:47
Polipeptid
[0239] Banka gena pristupni broj NP_958440
Banka gena verzija broj NP_958440.1 GI:41327734
Banka gena datum ažuriranja podatka: 30. septembar 2012.13:47
Upućivanje na literaturu
[0240] Batra SK., i dr Cell Growth Differ 1995;6:1251-1259.
ANTITELA:
[0241] US7,628,986 and US7,736,644 (Amgen)
Na primer, varijabilna regija teškog lanca aminokiselinske sekvence odabrane iz grupe koja sadrži SEQ ID NO: 142 i varijante i varijabilna regija lakog lanca aminokiselinske sekvence odabrane iz grupe koja sadrži: SEQ ID NO: 144 i varijante.
[0242] US20100111979 (Amgen)
Na primer, antitelo koje sadrži težak lanac aminokiselinske sekvence koja sadrži:
CDR1 koji sadrži sekvencu odabranu iz grupe koja sadrži aminokiselinske sekvence za CDR1 regiju of antitela 13.1.2 (SEQ ID NO: 138), 131 (SEQ ID NO: 2), 170 (SEQ ID NO: 4), 150 (SEQ ID NO: 5), 095 (SEQ ID NO: 7), 250 (SEQ ID NO: 9), 139 (SEQ ID NO: 10), 211 (SEQ ID NO: 12), 124 (SEQ ID NO: 13), 318 (SEQ ID NO: 15), 342 (SEQ ID NO: 16), and i (SEQ ID NO: 17);
CDR2 koji sadrži sekvencu odabranu iz grupe koja sadrži aminokiselinske sekvence za CDR2 regiju of antitela 13.1.2 (SEQ ID NO: 138), 131 (SEQ ID NO: 2), 170 (SEQ ID NO: 4), 150 (SEQ ID NO: 5), 095 (SEQ ID NO: 7), 250 (SEQ ID NO: 9), 139 (SEQ ID NO: 10), 211 (SEQ ID NO: 12), 124 (SEQ ID NO: 13), 318 (SEQ ID NO: 15), 342 (SEQ ID NO: 16), and 333 (SEQ ID NO: 17); i CDR3 koji sadrži sekvencu odabranu iz grupe koja sadrži aminokiselinske sekvence za CDR3 regiju of antitela 13.1.2 (SEQ ID NO: 138), 131 (SEQ ID NO: 2), 170 (SEQ ID NO: 4), 150 (SEQ ID NO: 5), 095 (SEQ ID NO: 7), 250 (SEQ ID NO: 9), 139 (SEQ ID NO: 10), 211 (SEQ ID NO: 12), 124 (SEQ ID NO: 13), 318 (SEQ ID NO: 15), 342 (SEQ ID NO: 16), and 333 (SEQ ID NO: 17).
[0243] US20090240038 (Amgen)
Na primer, antitelo koje ima bar jedan težak ili lak lanac oplipeptida koji sadrži aminokiselinsku sekvencu koja je bar 90% identična aminokiselinskoj sekvenci odabranoj iz grupe koja sadrži: SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 142, SEQ ID NO: 144, ili bilo koju njihovu kombinaciju.
[0244] US20090175887 (Amgen)
Na primer, antitelo koje ima težak lanac aminokiselinske sekvence odabrane iz grupe koja sadrži težak lanac aminokiselinske sekvence antitela 13.1.2 (SEQ ID NO: 138), 131 (SEQ ID NO: 2), 170 (SEQ ID NO: 4), 150 (SEQ ID NO: 5), 095 (SEQ ID NO: 7), 250 (SEQ ID NO: 9), 139 (SEQ ID NO: 10), 211 (SEQ ID NO: 12), 124 (SEQ ID NO: 13), 318 (SEQ ID NO: 15), 342 (SEQ ID NO: 16), i 333 (SEQ ID NO: 17).
[0245] US20090156790 (Amgen)
Na primer, antitelo koje ima težak lanac polipeptida i lak lanac polipeptida, gde bar ledan od teškog ili lakog lanca polipeptida sadrži aminokiselinsku sekvencu koja je barem 90% identična aminokiselinskoj sekvenci odabranoj iz grupe koja sadrži: SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 142, SEQ ID NO: 144, ili bilo koju njihovu kombinaciju.
[0246] US20090155282, US20050059087 and US20050053608 (Amgen)
Na primer, antitelo koje ima težak lanac aminokiselinske sekvence odabrane iz grupe koja sadrži težak lanac aminokiselinske sekvence antitela 13.1.2 (SEQ ID NO: 138), 131 (SEQ ID NO: 2), 170 (SEQ ID NO: 4), 150 (SEQ ID NO: 5), 095 (SEQ ID NO: 7), 250 (SEQ ID NO: 9), 139 (SEQ ID NO: 10), 211 (SEQ ID NO: 12), 124 (SEQ ID NO: 13), 318 (SEQ ID NO: 15), 342 (SEQ ID NO: 16), i 333 (SEQ ID NO: 17).
[0247] MR1-1 (US7,129,332; Duke)
Na primer, varijanta antitela koje ima sekvencu SEQ ID NO.18 sa supstitucijama S98P-T99Y u CDR3 VH, i F92W u CDR3 VL.
[0248] L8A4, H10, Y10 (Wikstrand CJ., i dr Cancer Res.1995 Jul 15;55(14):3140-8; Duke)
[0249] US20090311803 (Harvard University)
Na primer, SEQ ID NO:9 za težak lanac varijabilne regije antitela, i SEQ ID NO: 3 za težak lanac varijabilne regije antitela.
[0250] US20070274991 (EMD72000, takođe poznat kao matuzumab; Harvard University)
Na primer, SEQ ID NOs: 3 i 9 za lak i težak lanac respektivno
[0251] US6,129,915 (Schering)
Na primer, SEQ. ID NOs: 1, 2, 3, 4, 5 and 6.
[0252] mAb CH12 - Wang H., i dr FASEB J.2012 Jan;26(1):73-80 (Shanghai Cancer Institute).
[0253] RAbDMvlll - Gupta P., i dr BMC Biotechnol.2010 Oct 7;10:72 (Stanford University Medical Center).
[0254] mAb Ua30 - Ohman L., i dr Tumour Biol.2002 Mar-Apr;23(2):61-9 (Uppsala University).
[0255] Han DG., i dr Nan Fang Yi Ke Da Xue Xue Bao.2010 Jan;30(1):25-9 (Xi’an Jiaotong University).
(46) CD33 (CD33 molekul)
Nukleotid
[0256] Banka gena pristupni broj M_23197
Banka gena verzija broj NM_23197.1 GI:180097
Banka gena datum ažuriranja podatka: 23. jun 2010.08:47
1
Polipeptid
[0257] Banka gena pristupni broj AAA51948
Banka gena verzija broj AAA51948.1 GI:188098
Banka gena datum ažuriranja podatka: 23. jun 2010.08:47
Upućivanje na literaturu
[0258] Simmons D., i dr J. Immunol.141 (8), 2797-2800 (1988)
Ostali podaci
[0259] Zvanični simbol: CD33
Ostali alijasi: SIGLEC-3, SIGLEC3, p67
Ostale oznake: CD33 antigen (gp67); gp67; mijeloid antigen ćelijske površine CD33; sijalna kiselina koja vezuje lectin 3 poput Ig-a; sijalna kiselina koja vezuje lectin poput Ig-a
ANTITELA
[0260] H195 (Lintuzumab)- Raza A., i dr Leuk Lymphoma. 2009 Aug;50(8):1336-44; US6,759,045 (Seattle Genetics/Imunolekovi)
mAb OKT9: Sutherland, D.R. i dr. Proc Natl Acad Sci USA 78(7): 4515-45191981, Schneider,C., i dr J Biol Chem 257, 8516-8522 (1982)
[0261] mAb E6: Hoogenboom, H.R., i dr J Immunol 144, 3211-3217 (1990)
[0262] US6,590,088 (Human Genome Sciences)
Na primer, SEQ ID NOs: 1 i 2 i ATCC pristupni broj 97521
[0263] US7,557,189 (imunogen)
Na primer, antitelo ili njegov fragment koji sadrži varijabilnu regiju teškog lanca koja sadrži tri CDR-a koji imaju aminokiselinske sekvence SEQ ID Nos:1-3 i varijabilnu regiju lakog lanca koja sadrži tri CDR-a koji imaju aminokiselinske sekvence SEQ ID NOs:4-6.
(47) CD19 (CD19 molekul)
Nukleotid
[0264] Banka gena pristupni broj NM_001178098
Banka gena verzija broj NM_001178098.1 GI:296010920
Banka gena datum ažuriranja podatka: 10. septembar 2012.00:43
Polipeptid
[0265] Banka gena pristupni broj NP_001171569
Banka gena verzija broj NP_001171569.1 GI:296010921
Banka gena datum ažuriranja podatka: 10. septembar 2012.00:43
Upućivanje na literaturu
[0266] Tedder TF., i dr J. Immunol.143 (2): 712-7 (1989)
Ostali podaci
[0267] Zvanični simbol: CD19
Ostali alijasi: B4, CVID3
Ostale oznake: B-limfocit antigen CD19; B-limfocit površinski antigen B4; T-ćelijski površinski antigen Leu-12; antigen diferencijacije CD19
ANTITELA
[0268] Imunogen: HuB4 - Al-Katib AM., i dr Clin Cancer Res.2009 Jun 15;15(12):4038-45.
2
4G7: Kügler M., i dr Protein Eng Des Sel.2009 Mar;22(3):135-47
Na primer, sekvence u Fig.3 of of Knappik, A. i dr. J Mol Biol 2000 Feb;296(1):57-86
[0269] AstraZeneca /Medlmmune: MEDI-551 - Herbst R., i dr J Pharmacol Exp Ther.2010 Oct;335(1):213-22
[0270] Glenmark Pharmaceuticals: GBR-401 - Hou S., i dr Mol Cancer Ther November 201110 (Meeting Abstract Supplement) C164
[0271] US7,109,304 (imunolekovi)
Na primer, antitelo koje sadrži sekvencu hA19Vk (SEQ ID NO:7) i sekvence hA19VH (SEQ ID NO:10)
[0272] US7,902,338 (imunolekovi)
Na primer, antitelo ili njegov fragment za vezivanje antigena koji sadrže lak lanac komplementarno određujuće regije CDR sekvenci CDR1 od SEQ ID NO: 16 (KASQSVDYDGDSYLN); CDR2 of SEQ ID NO: 17 (DASNLVS); i CDR3 od SEQ ID NO: 18 (QQSTEDPWT) i težak lanac CDR sekvenci CDR1 od SEQ ID NO: 19 (SYWMN); CDR2 of SEQ ID NO: 20 (QIWPGDGDTNYNGKFKG) i CDR2 od SEQ ID NO: 21 (RETTTVGRYYYAMDY) i takođe sadrži humani okvir (RT) antitela i sekvence konstantne regije sa jednim ili više aminokiselinskih ostataka okvire regije supstituisani od odgovarajućih sekvenci okvirne regije roditeljskog mišjeg antitela, i gde navedeni supstituisani FR ostaci sadrže supstituciju serina za fenilalanin kod Kabat ostatka 91 varijabilne regije teškog lanca.
[0273] Medarex: MDX-1342 - Cardarelli PM., i dr Cancer Immunol Immunofher.2010 Feb;59(2):257-65.
[0274] MorphoSys /Xencor: MOR-208/XmAb-5574 - Zalevsky J., i dr Blood.2009 Apr 16;113(16):3735-43
[0275] US7,968,687 (Seattle Genetics)
Antitelo ili fragment za vezivanje antigena koji sadrži varijabilni domen teškog lanca koji sadrži aminokiselinsku sekvencu SEQ ID NO:9 i varijabilni domen lakog lanca koji sadrži aminokiselinsku sekvencu SEQ ID NO: 24.
[0276] 4G7 chim - Lang P., i dr Blood.2004 May 15;103(10):3982-5 (University of Tubingen) Na primer, Slika 6 i SEQ ID No: 80 of US20120082664
[0277] Zhejiang University School of Medicine: 2E8 - Zhang J., i dr J Drug Target.2010 Nov;18(9):675-8 (48) IL2RA (Interleukin 2 receptor, alfa); NCBI Reference Sequence: NM_000417.2);
Nukleotid
[0278] Banka gena pristupni broj NM_000417
Banka gena verzija broj NM_000417.2 GI:269973860
Banka gena datum ažuriranja podatka: 9. septembar 2012.16:59
Polipeptid
[0279] Banka gena pristupni broj NP_000408
Banka gena verzija broj NP_000408.1 GI:4557667
Banka gena datum ažuriranja podatka: 9. septembar 2012.16:59
Upućivanje na literaturu
[0280] Kuziel W.A., i dr J. Invest. Dermatol.94 (6 SUPPL), 27S-32S (1990)
Ostali podaci
[0281] Zvanični simbol: IL2RA
Ostali alijasi: RP11-536K7.1, CD25, IDDM10, IL2R, TCGFR
Ostale oznake: FIL-2 receptor podjedinica alfa; IL-2-RA; IL-2R podjedinica alfa; IL2-RA; TAC antigen; interleukin2 receptor podjedinica alfa; p55
ANTITELA
[0282] US6,383,487 (Novartis/UCL: Baxilisimab [Simulect])
[0283] US6,521,230 (Novartis/UCL: Baxilisimab [Simulect])
Na primer, antitela koja imaju mesto za vezivanje antitela koja sadrže bar jedan domen koji sadrži CDR1 koji ima aminokiselinske sekvence u SEQ. ID. NO: 7, CDR2 koji ima aminokiselinske sekvence u SEQ. ID. NO: 8, i CDR3 koji ima aminokiselinske sekvence u SEQ. ID. NO: 9; ili navedene CDR1, CDR2 i CDR3 uzete u sekvenci kao celini koja sadrži aminokiselinsku sekvencu koja je barem 90% identična sa SEQ. ID. NOs: 7, 8 i 9 uzetim u sekvenci kao celini.
[0284] Daclizumab - Rech AJ., i dr Ann N YAcad Sci.2009 Sep;1174:99-106 (Roche)
(49) AXL (AXL receptor tirozin kinaze)
Nukleotid
[0285] Banka gena pristupni broj M76125
Banka gena verzija broj M76125.1 GI:292869
Banka gena datum ažuriranja podatka: 23. jun 2010.08:53 AM
Polipeptid
[0286] Banka gena pristupni broj AAA61243
Banka gena verzija broj AAA61243.1 GI:29870
Banka gena datum ažuriranja podatka: 23. jun 2010.08:53 AM
Upućivanje na literaturu
[0287] O’Bryan J.P., i dr Mol. Cell. Biol.11 (10), 5016-5031 (1991); Bergsagel P.L., i dr J. Immunol.148 (2), 590-596 (1992)
Ostali podaci
[0288] Zvanični simbol: AXL
Ostali alijasi: JTK11, UFO
Ostale oznake: AXL onkogen; AXL koji transformiše sekvence/gene; onkogen AXL; tirozin-protein kinaze receptor UFO ANTITELA
[0289] YW327.6S2 - Ye X., i dr Oncogene.2010 Sep 23;29(38):5254-64. (Genentech)
[0290] BergenBio: BGB324 (http://www.bergenbio.com/BGB324)
(50) CD - TNFRSF8 (Član 8 superfamilije receptora faktora nekroze tumora)
Nukleotid
[0291] Banka gena pristupni broj M83554
Banka gena verzija broj M83554.1 GI:180095
Banka gena datum ažuriranja podatka: 23. jun 2010.08:53
Polipeptid
[0292] Banka gena pristupni broj AAA51947
Banka gena verzija broj AAA51947.1 GI:180096
Banka gena datum ažuriranja podatka: 23. jun 2010.08:53
Upućivanje na literaturu
[0293] Durkop H., i dr Cell 68 (3), 421-427 (1992)
Ostali podaci
[0294] Zvanični simbol: TNFRSF8
Ostali alijasi: CD30, D1S166E, Ki-1
Ostale oznake: CD30L receptor; Ki-1 antigen; receptor citokina CD30; antigen CD30 za aktivaciju limfocita; član
4
8 superfamilije receptora faktora nekroze tumora
(51) BCMA (B-cell maturation antigen) - TNFRSF17 (Član 17 superfamilije receptora faktora nekroze tumora) Nukleotid
[0295] Banka gena pristupni broj Z29574
Banka gena verzija broj Z29574.1 GI:471244
Banka gena datum ažuriranja podatka: 2. februar 2011.10:40
Polipeptid
[0296] Banka gena pristupni broj CAA82690
Banka gena verzija broj CAA82690.1 GI:471245
Banka gena datum ažuriranja podatka: 2. februar 2011.10:40
Upućivanje na literaturu
[0297] Laabi Y., i dr Nucleic Acids Res.22 (7), 1147-1154 (1994)
Ostali podaci
[0298] Zvanični simbol: TNFRSF17
Ostali alijasi: BCM, BCMA, CD269
Ostale oznake: B ćelijski antigen sazrevanja; B-ćelijski faktor sazrevanja; B-ćelijski protein sazrevanja; član 17 superfamilije receptora faktora nekroze tumora
(52) CT Ags - CTA (Antigeni karcinoma testisa)
Upućivanje na literaturu
[0299] Fratta E., i dr. Mol Oncol.2011 Apr;5(2):164-82; Lim SH., at al Am J Blood Res.2012;2(1):29-35.
(53) CD 174 (Lewis Y) - FUT3 (fucosyltransferase 3 (galactoside 3(4)-L-fucosyltransferase, Lewis blood group) Nukleotid
[0300] Banka gena pristupni broj NM000149
Banka gena verzija broj NM000149.3 GI:148277008
Banka gena datum ažuriranja podatka: 26. jun 201216:49
Polipeptid
[0301] Banka gena pristupni broj NP_000140
Banka gena verzija broj NP_000140.1 GI:4503809
Banka gena datum ažuriranja podatka: 26. jun 201216:49
Upućivanje na literaturu
[0302] Kukowska-Latallo,J.F., i dr Genes Dev.4 (8), 1288-1303 (1990)
Ostali podaci
[0303] Zvanični simbol: FUT3
Ostali alijasi: CD174, FT3B, FucT-III, LE, Les
Ostale oznake: Lewis FT; alfa-(1,3/1,4)-fukoziltransferaza; krvna grupa Lewis alfa-4-fukoziltransferaza; fukoziltransferaza III; galaktosid 3(4)-L- fukoziltransferaza
(54) CLEC14A (Član A, familija 14 licetinski domen tipa C; Banka gena pristupni broj NM175060) Nukleotid
[0304] Banka gena pristupni broj NM175060
Banka gena verzija broj NM175060.2 GI:371123930
Banka gena datum ažuriranja podatka: 1 april 2012.15:34
Polipeptid
[0305] Banka gena pristupni broj NP_778230
Banka gena verzija broj NP_778230.1 GI:28269707
Banka gena datum ažuriranja podatka: 1 april 2012.15:34
Ostali podaci
[0306] Zvanični simbol: CLEC14A
Ostali alijasi: UNQ236/PR0269, C14orf27, CEG1, EGFR-5
Ostale oznake: član A, familija 14 licetinski domen tipa C; domen nalik CIECT i EGF koji sadrži protein; receptor 5 epidermalnog faktora rasta
(55) GRP78 - HSPA5 (protein 5 toplotnog udara 70kDa (protein regulisan od strane glukoze, 78kDa) Nukleotid
[0307] Banka gena pristupni broj NM005347
Banka gena verzija broj NM005347.4 GI:305855105
Banka gena datum ažuriranja podatka: 30. septembar 2012.13:42
Polipeptid
[0308] Banka gena pristupni broj NP_005338
Banka gena verzija broj NP_005338.1 GI:16507237
Banka gena datum ažuriranja podatka: 30. septembar 2012.13:42
Upućivanje na literaturu
[0309] Ting J., i dr DNA 7 (4), 275-286 (1988)
Ostali podaci
[0310] Zvanični simbol: HSPA5
Ostali alijasi: BIP, GRP78, MIF2
Ostale oznake: 78 kDa protein regulisan od strane glukoze; lumenal endoplazmatičnog retikuluma Ca(2+)-vezujući protein grp78; protein za vezivanje teškog lanca imunoglobulina
(56) CD70 (CD70 molekul) L08096
Nukleotid
[0311] Banka gena pristupni broj L08096
Banka gena verzija broj L08096.1 GI:307127
Banka gena datum ažuriranja podatka: 23. jun 2012.08:54
Polipeptid
[0312] Banka gena pristupni broj AAA36175
Banka gena verzija broj AAA36175.1 GI:307128
Banka gena datum ažuriranja podatka: 23. jun 201208:54
Upućivanje na literaturu
[0313] Goodwin R.G., i dr Cell 73 (3), 447-456 (1993)
Ostali podaci
[0314] Zvanični simbol: CD70
Ostali alijasi: CD27L, CD27LG, TNFSF7
Ostale oznake: CD27 ligand; CD27-L; CD70 antigen; Ki-24 antigen; površinski antigen CD70; superfamilija faktor nekroze tumora (ligand), član 7; superfamilija faktor nekroze tumora (ligand), član 7
ANTITELA
[0315] MDX-1411 protiv CD70 (Medarex)
[0316] h1F6 (Oflazoglu, E., i dr, Clin Cancer Res.2008 Oct 1;14(19):6171-80; Seattle Genetics)
Na primer, pogledati US20060083736 SEQ ID NOs: 1, 2, 11 i 12 i Slika 1.
(57) Antigeni specifični za matične ćelije. Na primer:
[0317]
• 5T4 (videti unos (63) ispod)
• CD25 (videti unos (48) iznad)
• CD32
o Polipeptid
▪ Banka gena pristupni broj ABK42161
▪ Banka gena verzija broj ABK42161.1 GI:117616286
▪ Banka gena datum ažuriranja podatka: 25. jul 2007.15:00
• LGR5/GPR49
o Nukleotid
▪ Banka gena pristupni broj NM_003667
▪ Banka gena verzija broj NM_003667.2 GI:24475886
▪ Banka gena datum ažuriranja podatka: 22. jul 2012.15:38
o Polipeptid
▪ Banka gena pristupni broj NP_003658
▪ Banka gena verzija broj NP_003658.1 GI:4504379
▪ Banka gena datum ažuriranja podatka: 22. jul 2012.15:38
• Prominin/CD133
o Nukleotid
▪ Banka gena pristupni broj NM_006017
▪ Banka gena verzija broj NM_006017.2 GI:224994187
▪ Banka gena datum ažuriranja podatka: 30. septembar 2012.13:47
o Polipeptid
▪ Banka gena pristupni broj NP_006008
▪ Banka gena verzija broj NP_006008.1 GI:5174387
▪ Banka gena datum ažuriranja podatka: 30. septembar 2012.13:47
(58) ASG-5
Upućivanje na literaturu
[0318] (Smith L.M., et.al AACR 20 Annual Meeting (abstract #2590); Gudas J.M., et.al. AACR 20 Annual Meeting (abstract #4393)
ANTITELA
[0319] Anti- AGS-5 Antibody: M6.131 (Smith, L.M., et.al AACR 20 Annual Meeting (abstract #2590)
(59) ENPP3 (Ektonukleotid pirofosfataza/fosfodiesteraza 3)
Nukleotid
[0320] Banka gena pristupni broj AF005632
Banka gena verzija broj AF005632.2 GI:4432589
Banka gena datum ažuriranja podatka: 10. mart 2010.21:41
Polipeptid
[0321] Banka gena pristupni broj AAC51813
Banka gena verzija broj AAC51813.1 GI:2465540
Banka gena datum ažuriranja podatka: 10. mart 2010.21:41
Upućivanje na literaturu
[0322] Jin-Hua P., i dr Genomics 45 (2), 412-415 (1997)
Ostali podaci
[0323] Zvanični simbol: ENPP3
Ostali alijasi: RP5-988G15.3, B10, CD203c, NPP3, PD-IBETA, PDNP3
Ostale oznake: E-NPP 3; dJ1005H11.3 (fosfodiesteraza I/nukleotid pirofosfataza 3); dJ914N13.3 (fosfodiesteraza I/nukleotid pirofosfataza 3); familija ektonukleotid pirofosfataza/fosfodiesteraza član 3 3; gp130RB13-6; fosfodiesteraza I beta; fosfodiesteraza I/ nukleotid pirofosfataza 3; fosfodiesteraza-I beta
(60) PRR4 (Bogati prolin 4 (lakrimal))
Nukleotid
[0324] Banka gena pristupni broj NM_007244
Banka gena verzija broj NM_007244.2 GI:154448885
Banka gena datum ažuriranja podatka: 28. jun 201212:39
Polipeptid
[0325] Banka gena pristupni broj NP_009175
Banka gena verzija broj NP_009175.2 GI:154448886
Banka gena datum ažuriranja podatka: 28. jun 201212:39
Upućivanje na literaturu
[0326] Dickinson D.P., i dr Invest. Ophthalmol. Vis. Sci.36 (10), 2020-2031 (1995)
Ostali podaci
[0327] Zvanični simbol: PRR4
Ostali alijasi: LPRP, PROL4
Ostale oznake: lakrimal prolin-bogat protein; nasofaringeal povezan sa karcinomom prolin-bogat 4; prolin-bogat polipeptid 4; prolin-bogat protein 4
(61) GCC - GUCY2C (guanilat ciklaza 2C (toplotno stabilan enterotoksin receptor)
Nukleotid
[0328] Banka gena pristupni broj NM_004963
Banka gena verzija broj NM_004963.3 GI:222080082
Banka gena datum ažuriranja podatka: 02. septembar 2012.13:50
Polipeptid
[0329] Banka gena pristupni broj NP_004954
Banka gena verzija broj NP_004954.2 GI:222080083
Banka gena datum ažuriranja podatka: 02. septembar 2012.13:50
Upućivanje na literaturu
[0330] De Sauvage F.J., i dr J. Biol. Chem.266 (27), 17912-17918 (1991); Singh S., i dr Biochem. Biophys. Res. Commun.179 (3), 1455-1463 (1991)
Ostali podaci
[0331] Zvanični simbol: GUCY2C
Ostali alijasi: DIAR6, GUC2C, MUCIL, STAR
Ostale oznake: GC-C; STA receptor; guanilil ciklaza C; hSTAR; toplotno stabilan enterotoksin receptor; crevna guanilat ciklaza
(62) Liv-1- SLC39A6 (familija 39 nosača rastvarača (transporter cinka), član 6)
Nukleotid
[0332] Banka gena pristupni broj U41060
Banka gena verzija broj U41060.2 GI:12711792
Banka gena datum ažuriranja podatka: 30. novembar 2009.16:35
Polipeptid
[0333] Banka gena pristupni broj AAA96258
Banka gena verzija broj AAA96258.2 GI:12711793
Banka gena datum ažuriranja podatka: 30. novembar 2009.16:35
Upućivanje na literaturu
[0334] Taylor KM., i dr Biochim Biophys Acta.2003 Apr 1;1611(1-2):16-30
Ostali podaci
[0335] Zvanični simbol: SLC39A6
Ostali alijasi: LIV-1
Ostale oznake: LIV-1 protein, estrogenom regulisan; ZIP-6; estrogenom regulisan protein LIV-1; familija 39 nosača rastvarača (transporter metalnih jona), član 6; familija 39 nosača rastvarača član 6; transporter cinka ZIP6; zrt- i protein 6 nalin Irt
(63) 5T4, Trofoblast glikoprotein, TPBG - TPBG (trofoblast glikoprotein)
Nukleotid
[0336] Banka gena pristupni broj AJ012159
Banka gena verzija broj AJ012159.1 GI:3805946
Banka gena datum ažuriranja podatka: 01. februar 2011.10:27
Polipeptid
[0337] Banka gena pristupni broj CAA09930
Banka gena verzija broj CAA09930.1 GI:3805947
Banka gena datum ažuriranja podatka: 01. februar 2011.10:27
Upućivanje na literaturu
[0338] King K.W.,i dr Biochim. Biophys. Acta 1445 (3), 257-270 (1999)
Ostali podaci
[0339]
• Zvanični simbol: TPBG
• Ostali alijasi: 5T4, 5T4AG, M6P1
• Ostale oznake: 5T4 onkofetalni antigen; 5T4 onkofetalni trofoblast glikoprotein; 5T4 onko trofoblast glikoprotein
(64) CD56 - NCMA1 (molekul 1 adhezije nervnih ćelija)
Nukleotid
[0340] Banka gena pristupni broj NM_000615
Banka gena verzija broj NM_000615.6 GI:336285433
Banka gena datum ažuriranja podatka: 23. septembar 201214:32
Polipeptid
[0341] Banka gena pristupni broj NP_000606
Banka gena verzija broj NP_000606.3 GI:94420689
Banka gena datum ažuriranja podatka: 23. septembar 201214:32
Upućivanje na literaturu
[0342] Dickson, G., i dr, Cell 50 (7), 1119-1130 (1987)
Ostali podaci
[0343] Zvanični simbol: NCAM1
Ostali alijasi: CD56, MSK39, NCAM
Ostale oznake: antigen prepoznat od strane monoklonskog antitela 5.1H11; molekul adhezije nervnih ćelija, NCAM ANTITELA
[0344] Imunogen: HuN901 (Smith SV., i dr Curr Opin Mol Ther.2005 Aug;7(4):394-401)
Na primer, videti humanizovano iz mišjeg N901 antitela. Videti slike 1b i 1e of Roguska, M.A., i dr. Proc Natl Acad Sci USA Feb 1994;91:969-973.
(65) CanAg (Antigen povezan sa tumorom CA242)
Upućivanje na literaturu
[0345] Haglund C., i dr Br J Cancer 60:845-851, 1989; Baeckstrom D., i dr J Biol Chem 266:21537-21547, 1991 ANTIETLA
[0346] huC242 (Tolcher AW i dr., J Clin Oncol. 2003 Jan 15;21(2):211-22;Imunogen) Na primer, videti US20080138898A1 SEQ ID NO: 1 i 2
(66) FOLR1 (Receptor folata 1)
Nukleotid
[0347] Banka gena pristupni broj J05013
Banka gena verzija broj J05013.1 GI:182417
Banka gena datum ažuriranja podatka: 23 jun 2010.08:47
Polipeptid
[0348] Banka gena pristupni broj AAA35823
Banka gena verzija broj AAA35823.1 GI:182418
Banka gena datum ažuriranja podatka: 23 jun 2010.08:47
Upućivanje na literaturu
[0349] Elwood P.C., i dr J. Biol. Chem.264 (25), 14893-14901 (1989)
Ostali podaci
4
[0350] Zvanični simbol: FOLR1
Ostali alijasi: FBP, FOLR
Ostale oznake: FR-alfa; KB ćelije FBP; zreli folat-vezujući protein; folat vezujući protein; alfa receptor folata; receptor folata, zreli; antigen MOv18 u vezi sa tumorom jajnika
ANTITELA
[0351] M9346A - Whiteman KR., i dr Cancer Res April 15, 2012; 72(8 Supplement): 4628 (imunogen)
(67) GPNMB (Glikoprotein (transmembranski) nmb)
Nukleotid
[0352] Banka gena pristupni broj X76534
Banka gena verzija broj X76534.1 GI:666042
Banka gena datum ažuriranja podatka: 02. februar 2011.10:10
Polipeptid
[0353] Banka gena pristupni broj CAA54044
Banka gena verzija broj CAA54044.1 GI:666043
Banka gena datum ažuriranja podatka: 02. februar 2011.10:10
Upućivanje na literaturu
[0354] Weterman M.A., i dr Int. J. Cancer 60 (1), 73-81 (1995)
Ostali podaci
[0355] Zvanični simbol: GPNMB
Ostali alijasi: UNQ1725/PRO9925, HGFIN, NMB
Ostale oznake: glikoprotein NMB; glikoprotein nalik nmb protein; osteoaktivin; transmembranski gloloprotein HGFIN; transmembranski glikoprotein NMB
ANTITELA
[0356] Celldex Therapeutics: CR011 (Tse KF., i dr Clin Cancer Res.2006 Feb 15;12(4):1373-82)
Na primer, pogledati EP1827492B1 SEQ ID NO: 22, 24, 26, 31, 33 and 35
(68) TIM-1 - HAVCR1 (Ćelijski receptor 1 hepatitis A virusa)
Nukleotid
[0357] Banka gena pristupni broj AF043724
Banka gena verzija broj AF043724.1 GI:2827453
Banka gena datum ažuriranja podatka: 10. mart 2010.18:24
Polipeptid
[0358] Banka gena pristupni broj AAC39862
Banka gena verzija broj AAC39862.1 GI:2827454
Banka gena datum ažuriranja podatka: 10. mart 2010.18:24
Upućivanje na literaturu
[0359] Feigelstock D., i dr J. Virol.72 (8), 6621-6628 (1998)
Ostali podaci
[0360] Zvanični simbol: HAVCR1
Ostali alijasi: HAVCR, HAVCR-1, KIM-1, KIM1, TIM, TIM-1, TIM1, TIMD-1, TIMD1
Ostale oznake: T ćelijski protein 1 imunoglobinskog domena i mucinskog domena; T-ćelijsi membranski protein 1; molecule 1 povrede bubrega
(69) RG-1/Mindin – Mindin/RG-1 cilj tumora prostate
Upućivanje na literaturu
[0361] Parry R., i dr Cancer Res.2005 Sep 15;65(18):8397-405
(70) B7-H4 - VTCN1 (V-set domen koji sadrži inhibitor 1 aktivacije T-ćelija)
Nukleotid
[0362] Banka gena pristupni broj BX648021
Banka gena verzija broj BX648021.1 GI:34367180
Banka gena datum ažuriranja podatka: 02. feburar 2011.08:40
Upućivanje na literaturu
[0363] Sica GL., i dr Immunity.2003 Jun;18(6):849-61
Ostali podaci
[0364] Zvanični simbol: VTCN1
Ostali alijasi: RP11-229A19.4, B7-H4, B7H4, B7S1, B7X, B7h.5, PRO1291, VCTN1
Ostale oznake: član familije B7, H4; član 1 superfamilije B7; T ćelijskil kostimulatorni molekul B7x; ćelijski kostimulatorni molekul B7x; V-set domen koji sadrži inhibitor 1 aktivacije T-ćelija; imunološki kostimulatorni protein B7-H4
(71) PTK7 (PTK7 protein tirozin kinaza 7)
Nukleotid
[0365] Banka gena pristupni broj AF447176
Banka gena verzija broj AF447176.1 GI:17432420
Banka gena datum ažuriranja podatka: 28. novembar 2008.13:51
Polipeptid
[0366] Banka gena pristupni broj AAL39062
Banka gena verzija broj AAL39062.1 GI:17432421
Banka gena datum ažuriranja podatka: 28. novembar 2008.13:51
Upućivanje na literaturu
[0367] Park S.K.,i dr J. Biochem.119 (2), 235-239 (1996)
Ostali podaci
[0368] Zvanični simbol: PTK7
Ostali alijasi: CCK-4, CCK4
Ostale oznake: kolon karcinomska kinaza 4; neaktivna tirozin-protein kinaza 7; pseudo recetpor 7 tirozin kinaze; tirozine-protein kinaza nalik 7
(72) CD37 (CD37 molekul)
Nukleotid
[0369] Banka gena pristupni broj NM_001040031
Banka gena verzija broj NM_001040031.1 GI:91807109
Banka gena datum ažuriranja podatka: 29. jul 2012.14:08
Polipeptid
[0370] Banka gena pristupni broj NP_001035120
Banka gena verzija broj NP_001035120.1 GI:91807110
Banka gena datum ažuriranja podatka: 29. jul 2012.14:08
Upućivanje na literaturu
[0371] Schwartz-Albiez R., i dr J. Immunol.140 (3), 905-914 (1988)
Ostali podaci
[0372] Zvanični simbol: CD37
Ostali alijasi: GP52-40, TSPAN26
Ostale oznake: CD37 antigen; antigen 37 diferencijacije ćelija; leukocit antigen CD37; leukocit površinski antigen CD37; tetraspanin-26; tspan-26
ANTITELA
[0373] Boehringer Ingelheim: mAb 37.1 (Heider KH., i dr Blood.2011 Oct 13;118(15):4159-68)
[0374] Trubion: CD37-SMIP (G28-1 scFv-Ig) ((Zhao X., i dr Blood.2007;110: 2569-2577)
Na primer, videti US20110171208A1 SEQ ID NO: 253
[0375] Imunogen: K7153A (Deckert J., i dr Cancer Res April 15, 2012; 72(8 Supplement): 4625)
(73) CD138 - SDC1 (sindecan 1)
Nukleotid
[0376] Banka gena pristupni broj AJ551176
Banka gena verzija broj AJ551176.1 GI:29243141
Banka gena datum ažuriranja podatka: 01. februar 2011.12:09
Polipeptid
[0377] Banka gena pristupni broj CAD80245
Banka gena verzija broj CAD80245.1 GI:29243142
Banka gena datum ažuriranja podatka: 01. februar 2011.12:09
Upućivanje na literaturu
[0378] O’Connell FP., i dr Am J Clin Pathol.2004 Feb;121 (2):254-63
Ostali podaci
[0379] Zvanični simbol: SDC1
Ostali alijasi: CD138, SDC, SYND1, sindecan
Ostale oznake: CD138 antigen; heparan sulfat proteoglikan fibroblast receptor faktora rasta; syndecan pro-teoglikan 1; sindecan-1
ANTITELA
[0380] Biotest: chimerized MAb (nBT062) - (Jagannath S., i dr Poster ASH #3060, 2010; WIPO
[0381] Patent Application WO/2010/128087)
Na primer, videti US20090232810 SEQ ID NO: 1 i 2
[0382] Imunogen: B-B4 (Tassone P., i dr Blood 104_3688-3696)
Na primer, videti US20090175863A1 SEQ ID NO: 1 i 2
(74) CD74 (CD74 molekul, glavni kompleks histokompatibilnosti, invarijantni lanac klase II)
Nukleotid
[0383] Banka gena pristupni broj NM_004355
Banka gena verzija broj NM_004355.1 GI:343403784
4
Banka gena datum ažuriranja podatka: 23. septembar 2012.14:30
Polipeptid
[0384] Banka gena pristupni broj NP_004346
Banka gena verzija broj NP_004346.1 GI:10835071
Banka gena datum ažuriranja podatka: 23. septembar 2012.14:30
Upućivanje na literaturu
[0385] Kudo, J., i dr Nucleic Acids Res.13 (24), 8827-8841 (1985)
Ostali podaci
[0386] Zvanični simbol: CD74
Ostali alijasi: DHLAG, HLADG, II, la-GAMMA
Ostale oznake: CD74 antigen (invarijantni polipeptid glavnog kompleksa histokompatibilnosti, povezan sa antigenom klase II); HLA klase II gaman lanac antigen histokompatibilnosti; HLA-DR invarijantni lanac povezan sa antigenom; HLADR-gama; invarijantni lanac povezan sa la; MHC HLA-DR gama lanac; antigeni gama lanca klase II; p33
ANTITELA
[0387] Imunolekovi: hLL1 (Milatuzumab,) - Berkova Z., i dr Expert Opin Investig Drugs.2010 Jan;19(1):141-9)
Na primer, videti US20040115193 SEQ ID NOs: 19, 20, 21, 22, 23 i 24
[0388] Genmab: HuMax-CD74 (pogledati vebsajt)
(75) Klaudini - CLs (Klaudini)
Upućivanje na literaturu
[0389] Offner S., i dr Cancer Immunol Immunother.2005 May; 54(5):431-45, Suzuki H., i dr Ann N Y Acad Sci.
2012 Jul;1258:65-70)
[0390] Kod ljudi, 25 člana familije su opisana, pogledati reference iz literature.
(76) EGFR (Receptor emiderpamlnog faktora rasta)
Nukleotid
[0391] Banka gena pristupni broj NM_005228
Banka gena verzija broj NM_005228.3 GI:41927737
Banka gena datum ažuriranja podatka: 30. septembar 2012.13:47
Polipeptid
[0392] Banka gena pristupni broj NP_005219
Banka gena verzija broj NP_005219.2 GI:29725609
Banka gena datum ažuriranja podatka: 30. septembar 2012.13:47
Upućivanje na literaturu
[0393] Dhomen NS., i dr Crit Rev Oncog.2012;17(1):31-50
Ostali podaci
[0394] Zvanični simbol: EGFR
Ostali alijasi: ERBB, ERBB1, HER1, PIG61, mENA
Ostale oznake: ptičji eritroblastični leukemijski virusni (v-erb-b) onkogeni homolog; inhibitorski protein 40 ćelijskog rasta; protein 61 za indukciju ćelijske proliferacije; proto-onkogene c-ErbB-1; receptor tirozine-protein kinaze erbB-1
ANTITELA
[0395] BMS: Cetuximab (Erbitux) - Broadbridge VT., i dr Expert Rev Anticancer Ther.2012 May;12(5):555-65. Na primer, videti US6217866 - ATTC pristupni broj 9764.
[0396] Amgen: Panitumumab (Vectibix) - Argiles G., i dr Future Oncol.2012 Apr;8(4):373-89
Na primer, videti US6235883 SEQ ID NOs: 23-38.
[0397] Genmab: Zalutumumab - Rivera F., i dr Expert Opin Biol Ther.2009 May;9(5):667-74.
[0398] YM Biosciences: Nimotuzumab - Ramakrishnan MS., i dr MAbs.2009 Jan-Feb;1(1):41-8.
Na primer, videti US5891996 SEQ ID NOs: 27-34.
(77) Her3 (ErbB3) - ERBB3 (v-erb-b2 eritroblastični leukemjski virusni onkogene homolog 3 (ptičji)) Nukleotid
[0399] Banka gena pristupni broj M34309
Banka gena verzija broj M34309.1 GI:183990
Banka gena datum ažuriranja podatka: 23. jun 2010.20:47
Polipeptid
[0400] Banka gena pristupni broj AAA35979
Banka gena verzija broj AAA35979.1 GI:306841
Banka gena datum ažuriranja podatka: 23. jun 2010.20:47
Upućivanje na literaturu
[0401] Plowman,G.D., i dr., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A.87 (13), 4905-4909 (1990)
Ostali podaci
[0402] Zvanični simbol: ERBB3
Ostali alijasi: ErbB-3, HER3, LCCS2, MDA-BF-1, c-erbB-3, c-erbB3, erbB3-S, p180-ErbB3, p45-sErbB3, p85sErbB3
Ostale oznake: protein c-ErbB-3 nalik proto-onkogenu; receptor tirozin-protein kinaze erbB-3; tirozine kinaza tip površinskog ćelijskog receptora HER3
ANTITELA
[0403] Merimack Pharma : MM-121 (Schoeberl B., i dr Cancer Res.2010 Mar 15;70(6):2485-2494) [0438] Na primer, videti US2011028129 SEQ ID NOs: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 i 8.
(78) RON - MST1R (makrofag stimulišući 1 receptor (c-met-povezana tirozin kinaza))
Nukleotid
[0404] Banka gena pristupni broj X70040
Banka gena verzija broj X70040.1 GI:36109
Banka gena datum ažuriranja podatka: 2. februar 2011.22:17
Polipeptid
[0405] Banka gena pristupni broj CCA49634
Banka gena verzija broj CCA49634.1 GI:36110
Banka gena datum ažuriranja podatka: 2. februar 2011.22:17
Upućivanje na literaturu
[0406] Ronsin C., i dr Oncogene 8 (5), 1195-1202 (1993)
Ostali podaci
4
[0407] Zvanični simbol: MST1 R
Ostali alijasi: CD136, CDw136, PTK8, RON
Ostale oznake: MSP receptor; MST1 R varijanta RON30; MST1 R varijanta RON62; PTK8 protein tirozin kinaza 8; RON varijanta E2E3; c-met-povezana tirozin kinaza; makrofag-stimulišući protein receptor; p185-Ron; rastvorljiva RON varijanta 1; rastvorljiva RON varijanta 2; rastvorljiva RON varijanta 3; rastvorljiva RON varijanta 4
(79) EPHA2 (EPH receptor A2)
Nukleotid
[0408] Banka gena pristupni broj BC037166
Banka gena verzija broj BC037166.2 GI:33879863
Banka gena datum ažuriranja podatka: 6. mart 2012.13:59
Polipeptid
[0409] Banka gena pristupni broj AAH37166
Banka gena verzija broj AAH37166.1 GI:22713539
Banka gena datum ažuriranja podatka: 6. mart 2012.13:59
Upućivanje na literaturu
[0410] Strausberg R.L., i dr Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A.99 (26), 16899-16903 (2002)
Ostali podaci
[0411] Zvanični simbol: EPHA2
Ostali alijasi: ARCC2, CTPA, CTPP1, ECK
Ostale oznake: efrin receptor 2 tipa A; epitelni ćelijski receptor protein tirozin kinaza; rastvorljivi EPHA2 varjianta 1; tirozin-protein kinaza receptor ECK
ANTITELA
[0412] Medimmune: 1C1 (Lee JW., i dr Clin Cancer Res.2010 May 1;16(9):2562-2570)
Na primer, videti US20090304721A1 Fig.7 i 8.
(80) CD20 - MS4A 1 (član 1 superfamilije A 4-domena membranskog raspona)
Nukleotid
[0413] Banka gena pristupni broj M27394
Banka gena verzija broj M27394.1 GI:179307
Banka gena datum ažuriranja podatka: 30. novembar 2009.11:16
Polipeptid
[0414] Banka gena pristupni broj AAA35581
Banka gena verzija broj AAA35581.1 GI:179308
Banka gena datum ažuriranja podatka: 30. novembar 2009.11:16
Upućivanje na literaturu
[0415] Tedder T.F., i dr Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A.85 (1), 208-212 (1988)
Ostali podaci
[0416] Zvanični simbol: MS4A1
Ostali alijasi: B1, Bp35, CD20, CVID5, LEU-16, MS4A2, S7
Ostale oznake: B-limfocit antigen CD20; B-limofict površinski ćelijski antigen B1; CD20 antigen; CD20 receptor; leukocit površinski antigen Leu-16
4
ANTITELA
[0417] Genentech/Roche: Rituximab - Abdulla NE., i dr BioDrugs.2012 Apr 1;26(2):71-82.
Na primer, videti US5736137, ATCC depozit Br. HB-69119.
[0418] GSK/Genmab: Ofatumumab - Nightingale G., i dr Ann Pharmacother.2011 Oct;45(10):1248-55.
Na primer, videti US20090169550A1 SEQ ID NOs: 2, 4 i 5.
[0419] Imunolekovi: Veltuzumab - Goldenberg DM., i dr Leuk Lymphoma.2010 May;51(5):747-55.
Na primer, videti US7919273B2 SEQ ID NOs: 1, 2, 3, 4, 5 i 6.
(81) Tenascin C - TNC (Tenascin C)
Nukleotid
[0420] Banka gena pristupni broj NM_002160
Banka gena verzija broj NM_002160.3 GI:340745336
Banka gena datum ažuriranja podatka: 23. septembar 2012.14:33
Polipeptid
[0421] Banka gena pristupni broj NP_002151
Banka gena verzija broj NP_002151.2 GI:153946395
Banka gena datum ažuriranja podatka: 23. septembar 2012.14:33
Upućivanje na literaturu
[0422] Nies D.E., i dr J. Biol. Chem. 266 (5), 2818-2823 (1991); Siri A., i dr Nucleic Acids Res.19 (3), 525-531 (1991)
Ostali podaci
[0423] Zvanični simbol: TNC
Ostali alijasi: 150-225, GMEM, GP, HXB, JI, TN, TN-C
Ostale oznake: GP 150-225; citotaktin; vanćelijski matrčni antigen povezan sa gilomom; heksxabrachion (tenascin); miotendinski antigen; neuronektin; tenascin; tenascin-C izoform 14/AD1/16
ANTITELA
[0424] Philogen : G11 (von Lukowicz T., i dr J Nucl Med.2007 Apr;48(4):582-7) and F16 (Pedretti M., i dr Lung Cancer.2009 Apr;64(1):28-33)
Na primer, videti US7968685 SEQ ID NOs: 29, 35, 45 and 47.
(82) FAP (Aktivacioni protein fibroblasta, alfa)
Nukleotid
[0425] Banka gena pristupni broj U09278
Banka gena verzija broj U09278.1 GI:1888315
Banka gena datum ažuriranja podatka: 23. jun 2010.09:22
Polipeptid
[0426] Banka gena pristupni broj AAB49652
Banka gena verzija broj AAB49652.1 GI:1888316
Banka gena datum ažuriranja podatka: 23. jun 2010.09:22
Upućivanje na literaturu
[0427] Scanlan,M.J.,i dr Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A.91 (12), 5657-5661 (1994)
Ostali podaci
4
[0428] Zvanični simbol: FAP
Ostali alijasi: DPPIV, FAPA
Ostale oznake: 170 kDa melanomska želatinaza vezana za membranu; serinska proteaza sa integralnom membranom; sepraza
(83) DKK-1 (Dickkopf 1 homolog (Xenopus laevis)
Nukleotid
[0429] Banka gena pristupni broj NM_012242
Banka gena verzija broj NM_012242.2 GI:61676924
Banka gena datum ažuriranja podatka: 30. septembar 2012.13:48
Polipeptid
[0430] Banka gena pristupni broj NP_036374
Banka gena verzija broj NP_036374.1 GI:7110719
Banka gena datum ažuriranja podatka: 30. septembar 2012.13:48
Upućivanje na literaturu
[0431] Fedi P. i dr J. Biol. Chem.274 (27), 19465-19472 (1999)
Ostali podaci
[0432] Zvanični simbol: DKK1
Ostali alijasi: UNQ492/PRO1008, DKK-1, SK
Ostale oznake: dikopf povezan protein-1; nalik dikopf-1; protein 1 nalik dikopf; dikopf-povezan protein 1; hDkk-1 ANTITELA
[0433] Novartis: BHQ880 (Fulciniti M., i dr Blood.2009 Jul 9;114(2):371-379)
Na primer, videti US20120052070A1 SEQ ID NOs: 100 i 108.
(84) CD52 (CD52 molekul)
Nukleotid
[0434] Banka gena pristupni broj NM_001803
Banka gena verzija broj NM_001803.2 GI:68342029
Banka gena datum ažuriranja podatka: 30. septembar 2012.13:48
Polipeptid
[0435] Banka gena pristupni broj NP_001794
Banka gena verzija broj NP_001794.2 GI:68342030
Banka gena datum ažuriranja podatka: 30. septembar 2012.13:48
Upućivanje na literaturu
[0436] Xia M.Q., i dr Eur. J. Immunol.21 (7), 1677-1684 (1991)
Ostali podaci
[0437] Zvanični simbol: CD52
Ostali alijasi: CDW52
Ostale oznake: CAMPATH-1 antigen; CD52 antigen (CAMPATH-1 antigen); CDW52 antigen (CAMPATH-1 antigen); kembridžka patologija 1 antigen; epididimalni sekretni protein E5; he5; humani epididimis-specifični protein 5
ANTITELA
4
[0438] Alemtuzumab (Campath) - Skoetz N., i dr Cochrane Database Syst Rev.2012 Feb 15;2:CD008078.
Na primer, videti Drugbank Acc. No. DB00087 (BIOD00109, BTD00109)
(85) CS1 - SLAMF7 (član 7 SLAM familije)
Nukleotid
[0439] Banka gena pristupni broj NM_021181
Banka gena verzija broj NM_021181.3 GI:1993571
Banka gena datum ažuriranja podatka: 29. jun 2012.11:24
Polipeptid
[0440] Banka gena pristupni broj NP_067004
Banka gena verzija broj NP_067004.3 GI:19923572
Banka gena datum ažuriranja podatka: 29. jun 2012.11:24
Upućivanje na literaturu
[0441] Boles K.S., i dr Imunogenetics 52 (3-4), 302-307 (2001)
Ostali podaci
[0442] Zvanični simbol: SLAMF7
Ostali alijasi: UNQ576/PRO1138, 19A, CD319, CRACC, CS1
Ostale oznake: 19A24 protein; CD2 podset 1; citotoksične ćelije za aktivaciju receptora nalik CD2; citotoksične receptoraktivirajuće ćelije nalik CD2; membranski protein FOAP-12; novel LY9 (limfocitni antigen 9) nalik proteinu; protein 19A
ANTITELA
[0443] BMS: elotuzumab/HuLuc63 (Benson DM., i dr J Clin Oncol.2012 Jun 1;30(16):2013-2015)
Na primer, videti US20110206701 SEQ ID NOs: 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 i 16.
(86) Endoglin - ENG (Endoglin)
Nukleotid
[0444] Banka gena pristupni broj AF035753
Banka gena verzija broj AF035753.1 GI:3452260
Banka gena datum ažuriranja podatka: 10. mart 201018:36
Polipeptid
[0445] Banka gena pristupni broj AAC32802
Banka gena verzija broj AAC32802.1 GI:3452261
Banka gena datum ažuriranja podatka: 10. mart 201018:36
Upućivanje na literaturu
[0446] Rius C., i dr Blood 92 (12), 4677-4690 (1998)
Zvanični simbol: ENG
Ostali podaci
[0447] Ostali alijasi: RP11-228B15.2, CD105, END, HHT1, ORW, ORW1
Ostale oznake: CD105 antigen
(87) Aneksin A1 - ANXA1 (Aneksin A1)
Nukleotid
[0448] Banka gena pristupni broj X05908
4
Banka gena verzija broj X05908.1 GI:34387
Banka gena datum ažuriranja podatka: 2. februar 2011.10:02
Polipeptid
[0449] Banka gena pristupni broj CCA29338
Banka gena verzija broj CCA29338.1 GI:34388
Banka gena datum ažuriranja podatka: 2. februar 2011.10:02
Upućivanje na literaturu
[0450] Wallner B.P.,i dr Nature 320 (6057), 77-81 (1986)
Ostali podaci
[0451] Zvanični simbol: ANXA1
Ostali alijasi: RP11-71A24.1, ANX1, LPC1
Ostale oznake: aneksin I (lipokortin I); aneksin-1; kalpaktin II; kalpaktin-2; hromobindin-9; lipokortin I; p35; fosfolipaza A2 inhibitorni protein
(88) V-CAM (CD106) - VCAM1 (Molekul 1 adhezije vaskularnih ćelija)
Nukleotid
[0452] Banka gena pristupni broj M60335
Banka gena verzija broj M60335.1 GI:340193
Banka gena datum ažuriranja podatka: 23. jun 2010.08:56
Polipeptid
[0453] Banka gena pristupni broj AAA61269
Banka gena verzija broj AAA61269.1 GI:340194
Banka gena datum ažuriranja podatka: 23. jun 2010.08:56
Upućivanje na literaturu
[0454] Hession C., i dr J. Biol. Chem.266 (11), 6682-6685 (1991)
Ostali podaci
[0455] Zvanični simbol VCAM1
Ostali alijasi: CD106, INCAM-100
Ostale oznake: CD106 antigen; protein 1 adhezije vaskularnih ćelija
Sekvence antitela
RHF
CD19 B4 ponovo izašao na površinu VK
Anti-Her2
[0459]
Herceptin VH lanac
1
Herceptin VL lanac
Anti-CD25
[0460]
Simulect VK (takođe poznat kao Basiliksimab)
Simulect VH
Anti-PSMA
[0461]
Deimunizovan VH ’1
Deimunizovan VH1 ’5
Deimunizovan VH3 ’5
Deimunizovan VK1 ’5
Deimunizovan VK2 ’5
2
Deimunizovan VK3 ’5
Deimunizovan VK4 ’5
Deimunizovan VH DI ’5
Humanizovan RHB ’5
Humanizovan RHD ’5
Humanizovan RHF ’5
Humanizovan RKA ’5
Humanizovan RKB ’5
Humanizovan RKD ’5
Humanizovan RKE ’5
Humanizovan RKG ’5
[0462] Roditeljsko antitelo takođe može biti fuzioni protein koji sadrži albumin-vezujući peptid (ABP) sekvencu (Dennis i dr (2002) "Albumin Binding As A General Strategy For Improving The Pharmacokinetics Of Proteins" J Biol Chem. 277:35035-35043; WO 01/45746). Antitela iz ovog pronalaska sadržave fuzijone proteine sa ABP sekvenci kako su opisali: (i) Dennis i dr (2002) J Biol Chem.277:35035-35043 na Tables III i IV, strana 35038; (ii) US 2004/0001827 na [0076]; i (iii) WO 01/45746 na stranama 12-13.
[0463] U jednom otelotvorenju, antitelo je napravljno za ciljanje specifičnih antigena αvβ6povezanih sa tumorom.
[0464] Agens za vezivanje ćelija može biti označen, na primer, da olakša detekciju ili pročišćavanje agensa ili pre dodavanja u obliku konjugata, ili kao deo konjugata. Oznaka može biti biotinska oznaka. U drugom otelotvorenju, agens za vezivanje ćelija može se označiti radioaktivnim izotopom.
[0465] Otelotvorenja ovog pronalaska uključuju ConjB, pri čemu se agens za vezivanje ćelija bira iz antitela za bilo koji od gore razmatranih antigena.
[0466] Otelotvorenja ovog pronalaska uključuju ConjB, pri čemu se agens za vezivanje ćelija bira iz bilo kog od gore razmatranih antitela.
[0466] Predmetni pronalazak se takođe može odnositi na konjugate gde je agens za vezivanje ćelija odabran od antitela na bilo koji od gore pomenutih antigena i bilo koje gore pomenuto antitelo povezano sa različitim lekovima.
[0467] Predmetni pronalazak se takođe može odnositi na konjugate gde je agens za vezivanje ćelija odabran od bilo kojih antitela pomenutih gore i bilo kojih gore pomenutih antitela povezanih sa različitim lekovima.
Unos leka
[0468] Unos leka je prosečan broj PBD lekova po agensu za vezivanje ćelija, npr. antitela. Tamo gde su jedinjenja iz ovog pronalaska vezana na cisteine, unos leka može varirati od 1 do 8 lekova (D) po agensu za vezivanje ćelija, odnosno gde su 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 i grupe lekova su kovalentno vezane na agens za vezivanje ćelija. Sastavi konjugata uključuju zbirke agensa za vezivanje ćelija, npr. antitela, konjugovanih sa rasponom lekova, od 1 do 8. Kada su jedinjenja ovog pronalaska vezana na lizine, unos leka može varirati od 1 do 80 lekova (D) po agensu za vezivanje ćelija, iako gornja granica od 40, 20, 10 ili 8 može biti poželjna. Sastavi konjugata uključuju zbirke agensa za vezivanje ćelija, npr. antitela, konjugovanih sa rasponom lekova, od 1 do 80, 1 do 40, 1 do 20, 1 do 10 ili od 1 do 8.
[0469] Prosečan broj lekova po antitelu u pripremi ADC iz reakcije konjugacije može se okarakterisati uobičajenim načinima, kao što su UV, HPLC obrnute faze, HIC, masovna spektroskopija, ELISA test i elektroforeza.
4
Kvantitativna raspodela ADC po p takođe može biti određena. Koristeći ELISA, srednja vrednost p može se odrediti u određenoj pripremi ADC (Hamblett i dr (2004) Clin. Cancer Res. 10:7063-7070; Sanderson i dr (2005) Clin. Cancer Res. 11:843-852). Međutim, raspodela p (lek) vrednosti se ne primećuje po antitelo-antigen vezivanju i ograničenjima detekcije ELISA. Takođe, ELISA test za detektovanje konjugat antitela i leka ne određuje gde su grupe lekova vezane na antitela, kao što su fragmenti teškog ili lakog lanca, ili određenih aminokiselinski ostaci. U nekim slučajevima, odvajanje, pročišćavanje i karakterisanje homogenog ADC, gde je p određena vrednost od ADC sa drugim unošenjima leka može se postići sredstvima, kao što su obrnuta faza HPLC ili elektroforeza. Takve tehnike mogu se primeniti i na druge tipove konjugata.
[0470] Za neke konjugate antitela i leka, p može biti ograničen brojem mesta za spajanje na antitelu. Na primer, antitelo može imati samo jednu ili nekoliko cistein tiolnih grupa, ili može imati samo jednu ili nekoliko dovoljno reaktivnih tiolnih grupa kroz koje veznik može biti povezan. Veće unošenje leka i, na primer p> 5, može izazvati agregaciju, nerastvorljivost, toksičnost, ili gubitak ćelijske propustljivosti određenih konjugata antitelo-lek.
[0471] Tipično, manje od teoretskog maksimuma, delovi lekova konjugovaće se sa antitelima za vreme reakcije konjugacije. Antitelo može sadržati, na primer, mnogo lizinskih ostataka koji ne reaguju sa posrednikom veznika leka (DL) ili veznik reagensa. Samo najviše reaktivne lizinske grupe mogu reagovati sa amin-reaktivnim veznik reagensima. Takođe, samo vrlo reaktivne cisteinske tiolne grupe mogu reagovati sa tiol-reaktivnim veznik reagensima. Generalno, antitela ne sadrže mnogo, ako uopšte, slobodnih i reaktivnih cisteinskih tiolnih grupa koja mogu biti povezane sa delom leka. Većina cistein tiol ostataka u jedinjenjima antitela postoje kao disulfidni mostovi i moraju se redukovati koristeći redukcioni agens kao što je ditiotreitol
[0472] (DTT) i TCEP, delimično ili potpuno pod redukcijskim uslovima. Punjenje (lek/antitelo odnos) ADC-a može se kontrolisati na nekoliko različitih načina, uključujući: (i) ograničavanjem molarnog viška posrednika veznika leka (DL) ili vezivnog reagensa u odnosu na antitela, (ii) ograničavajući vreme ili temperaturu konjugacione reakcije, i (iii) delimično ili potpuno ograničavanje reduktivnih uslova za modifikaciju cisteinskoh tiola.
[0473] Pojedina antitela moraju redukovati međulančane disulfide, odnosno cisteinske mostove. Antitela mogu da se naprave reaktivna za konjugaciju sa vezivnim reagensima obradom redukcionim sredstvom kao što je ditiotreitol (DTT). Svaki cisteinski most će na taj način formirati, teoretski, dva reaktivna tiolna nukleofila. Dodatne nukleofilne grupe mogu se uvesti u reakciju antitela preko lizina as 2-iminotiolanom (Trautov reagens), što dovodi do pretvaranja amina u tiol. Reaktivne tiolne grupe mogu biti uvedene u antitela (ili njegove fragmente) inženjeringom jednim, dva, tri, četiri ili više cisteinskih ostataka (na primer, pripremanjem mutantnih antitela koja sadrže jedan ili više neprirodni cisteinski ostatak aminokiselina). US 7521541 podučava inžinjering antitela uvođenjem reaktivnih cisteinskih aminokiselina.
[0474] Cisteinske aminokiseline mogu se sintezovati na reaktivnim mestima u antitelima, i koji ne obrazuju intra ili intermolekularne disulfidne veze (Junutula, i dr, 2008b Nature Biotech, 26 (8):., 925-932; Dornan i dr (2009) Blood 114 (13): 2721-2729, SAD 7521541, US 7723485; WO2009/052.249). Modifikovani cistein tiol može reagovati sa vezivnim reagensom ili lek-vezujućim reagensom iz ovog pronalaska, koje imaju tiol-reaktivne elektrofilne grupe kao što su maleimidi ili alfa-halo amidi da obrazuju ADC sa cisteinskim sintetičkim antitelom i PBD delom leka. Punjenje leka u konjugatu može se unapred odrediti, kontrolisati, i znati. Doziranje leka se može kontrolisati, jer modifikovane cisteinske tiolne grupe reaguju sa tiol-reaktivnim vezivnih reagensom ili lek-vezujućim reagensom sa visokim prinosom. Inženjering IgG antitela, kako bi se uvela cisteinska aminokiselina supstitucijom na jednom mestu teškog ili lakog lanca, daje dva nova cisteina na simetričnom antitelu. Punjenje leka u blizini 2 može se postići sa skoro potpunom homogenošću konjugacija ADC proizvoda.
[0475] Kada više nukleofilnih ili elektrofilnih grupa antitela reaguje sa lek-veznik posrednikom, ili vezivnim reagensom praćenim reagensom dela leka, tada je dobijeni proizvod smesa ADC jedinjenja sa raspodelom delova leka pripojenih na antitelo, npr.1, 2, 3, itd. Postupci tečne hromatografije, kao što su polimerne reverzne faze (PLRP) i hidrofobna interakcija (HIC), mogu razdvojiti jedinjenja u mešavini pomoću vrednosti unošenja leka. Pripreme ADC sa jednim doziranjem leka (p) mogu se izolovati, međutim, te pojedinačne vrednosti unošenja ADC još uvek mogu biti heterogene smese zato to delovi leka mogu biti pripojeni, pomoću veznika, za različita mesta na antitelu.
[0476] Stoga sastavi konjugata antitela i leka pronalaska obuhvataju mešavine konjugovanih konjugat antitela i leka jedinjenja gde antitelo ima jedan ili više PBD delova leka, gde delo leka mogu biti pripojeni za antitelo na različitim ostacima aminokiselina.
[0477] U jednom otelotvorenju, prosečni broj dimer pirolobenzodiazepin grupa po agensu za vezivanje ćelija je u rasponu od 1 do 20. U nekim otelotvorenjima raspon se bira od 1 do 8, 2 do 8, 2 do 6, od 2 do 4, i 4 do 8.
[0478] U nekim otelotvorenjima, postoji jedna dimer pirolobenzodiazepin grupa po agensu za vezivanje ćelija.
Obuhvatanje drugih oblika
[0479] Osim ako nije drugačije navedeno, gore obuhvaćeni su dobro poznati jonski, slani, solvatni i zaštićeni oblici tih supstituenata. Na primer, navođenje karboksilne kiseline (-COOH), takođe uključuje anjonski (karboksilni) oblik (-COO-), so ili solvat, kao i konvencionalne zaštićene oblike. Slično tome, pozivanje na amino grupu obuhvata protonirani oblik (N HR<1>R<2>), so ili solvat amino grupe, na primer, hidrohloridnu so, kao i konvencionalne zaštićene oblike amino grupa. Slično tome, pozivanje na hidroksilnu grupu uključuje anjonski oblik (-O-), so ili solvat, kao i konvencionalne zaštićene oblike.
Soli
[0480] Može biti pogodno ili poželjno pripremanje, pročišćavanje, i/ili obrada odgovarajuće soli aktivnog jedinjenja, na primer, farmaceutski prihvatljive soli. Primeri farmaceutski prihvatljivih soli opisane su u Berge, i dr., J. Pharm. Sci., 66, 1-19 (1977).
[0481] Na primer, ako je jedinjenje anjonsko, ili ima funkcionalnu grupu koja može biti anjonska (na primer COOH može biti -COO-), onda so može biti formirana sa odgovarajućim katjonom. Primeri prikladnih neorganskih katjona uključuju, ali nisu ograničeni na alkalne metalne jone kao što su Na<+>i K<+>, alkalne zemne katjone kao što su Ca<2+>i Mg<2+>, i druge katjone kao što je Al<3+>. Primeri odgovarajućih organskih katjona uključuju, ali nisu ograničeni na, amonijum jon (tj. NH<4+>) i supstituisane amonijum jone (npr. NH3R<+>, NH2R2<+>, NHR3<+>, NR4<+>). Primeri nekih pogodnih supstituisanih amonijum jona su oni dobijeni iz: etilamina, dietilamina, dicikloheksilamina, trietilamina, butilamina, etilendiamina, etanolamina, dietanolamina, piperazina, benzilamina, fenilbenzilamina, holina, meglumina, i trometamina, kao i aminokiselina, kao što su lizin i arginin. Primer zajedničkog kvaternarnog amonijum jona je N(CH3)4.
[0482] Ako je jedinjenje katjonsko, ili ima funkcionalnu grupu koja može biti katjonska (na primer - NH2može -NH3<+>), onda so može biti formirana sa odgovarajućim anjonom. Primeri prikladnih neorganskih anjona uključuju, ali nisu ograničeni na one koji su izvedeni iz sledećih neorganskih kiselina: hlorovodična, bromovodična, jodovodična, sumporna, sumporasta, azotna, azotasta, fosforna i fosforasta.
[0483] Primeri prikladnih organskih anjona uključuju, ali nisu ograničeni na, one dobijene iz sledećih organskih kiselina: 2-acetioksibenzoična, octena, askorbinska, asparaginska, benzojeva, kamforsumporna, cinamična, limunska, edetična, etandisulfonska, etansulfonska, gluceptonska, glukonska, glutaminska, glikolna, hidroksimaleinska, hidroksinaftalen karboksilna, izetionska, mlečna, laktobionska, laurinska, maleinska, jabučna, metansulfonska, mucinska, oleinska, oksalna, palmitinska, pamoična, pantotenska, feniloctena, fenilsulfonska, propionska, piruvinska, salicilna, stearinska, jantarna, sulfanilna, vinska, toluensulfonska, trifluoroctena kiselina i valerijanska. Primeri pogodnih polimernih organskih anjona uključuju, one dobijene iz sledećih polimernih kiselina: taninske kiseline, karboksimetil celuloze.
Solvati
[0484] To može biti zgodno ili poželjno dobijanje, pročišćavanje, i/ili obrada odgovarajućeg solvat aktivnog jedinjenja. Termin "solvat" ovde se koristi u konvencionalnom smislu i odnosi se na kompleks rastvora (npr. aktivno jedinjenje, so aktivnog jedinjenja) i rastvarača. Ako je rastvarač voda, solvat se može pogodno nazvati kao hidrat, na primer, mono-hidrat, di-hidrat, tri-hidrat, itd.
[0485] Ovaj pronalazak uključuje jedinjenja gde se rastvarač dodaje preko iminske veze PBD grupe, koja je prikazana u nastavku, gde je rastvarač voda ili alkohol (R<A>OH, gde R<A>predstavlja C1-4alkil):
[0486] Ovi oblici mogu se nazvati karbinolamini i karbinolamini eterski oblici PBD (kao što je opisano u delu koji se odnosi na R<10>gore). Balans tih ravnoteža zavisi od uslovima u kojima se nalaze jedinjenja, kao i prirodi samog dela.
[0487] Ova određena jedinjenja mogu se izolovati u čvrstom obliku, na primer, liofilizacijom.
Izomeri
[0488] Određena jedinjenja pronalaska mogu postojati u jednom ili više geometrijskih, optičkih, enantiomernih, diasteriomernih, epimernih, atropični, stereoizomernih, tautomernih, konformacijskih ili anomernih oblika, uključujući, ali ne ograničavajući na, cis- i trans-oblike; E- i Z-oblike; c-, t-, i R-oblike; endo- i egzo-oblike; R-, S-, i mezo-oblike; D- i L-oblike; d- i I-oblike; (+) I (-) oblike; keto-, enol-, i enolat-oblike; sinhrone i anti-oblike; sinlinalne- i antiklinalne oblike; α i β-oblike; aksijalne i ekvatorijalne oblkei; boat-, chair-, twist-, envelope-, i halfchair-oblike; i njihove kombinacije, u daljem tekstu kolektivno se nazivaju "izomeri" (ili "izomerni oblici").
[0489] Termin "kiralan" odnosi se na molekule koji imaju svojstvo da se ne mogu preklopiti sa svojom odrazom, dok se termin "akiralan" odnosi na molekule koji se mogu preklopiti sa svojom odrazom.
[0490] Termin "stereoizomer" odnosi se na jedinjenja koja imaju istu hemijsku strukturu ali se razlikuju po rasporedu atoma ili grupa u prostoru.
[0491] "Dijastereomer" se odnosi na stereoizomer sa dva ili više kiralna centra, i čiji molekuli nisu odrazi jedan prema drugom. Dijastereomeri imaju različita fizikalna svojstva, npr. tačku topljenja, tačku ključanja, spektralna svojstva i reaktivnost. Smese dijastereomera mogu se razdvojiti analitičkim postupcima kao što je elektroforeza i hromatografija.
[0492] "Enantiomeri" se odnose na dva stereoizomera spoja koji su odrazu jedan prema drugom.
[0493] Stereokemijske definicije i konvencije korišćene ovde u principu slede S. P. Parker, Ed., McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms (1984) McGraw-Hill Book Company, New York; and Eliel, E. and Wilen, S., "Stereochemistry of Organic Compounds", John Wiley & Sons, Inc., New York, 1994. Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu sadržati asimetrične ili kiralne centre, te stoga postoje u različitim stereoizomernim oblicima. Namera je da svi stereoizomerni oblici jedinjenja ovog pronalaska, uključujući, ali ne ograničavajući se na, dijastereomere, enantiomere i atropizomere, kao i njihove smese, kao što su racemične smese, čine deo ovog pronalaska. Mnoga organska jedinjenja postoje u optički aktivnim oblicima, tj., oni imaju sposobnost da rotiraju ravan polarizovane svetlosti. U opisu optički aktivnog jedinjenja, prefiksi D i L, ili R i S koriste se da označe apsolutnu konfiguraciju molekula prema njihovom kiralnom centru(ima). Prefiksi d i I ili (+) i (-) koriste se da označe rotaciju ravni polariziranog svetla uzrokovanu jedinjenjem, gde (-) ili I znače da jedinjenje zakreće ravan ulevo. Jedinjenje sa prefiksom (+) ili d zakreće udesno. Za datu hemijsku strukturu, ti stereoizomeri su identični osim što su odrazi jedan prema drugom. Specifični stereoizomer može se takođe navesti i kao enantiomer, a smesa takvih izomera često se zove enantiomerna smesa. 50:50 smesa enetiomera naziva se racemična smesa ili racemat, do kog može doći kad nije bilo stereoselektivnosti ili sterospecifičnosti u hemijskoj reakciji ili procesu. Pojmovi "racemična smesa" i "racemat" odnosi se na ekvimolarnu smesu dve vrsta, lišene optičke aktivnosti.
[0494] Treba voditi računa da, osim kako je opisano u nastavku za tautomerne oblike, posebno izuzeti iz termina "izomer", kako se ovde koristi, su strukturalni (ili sastavni) izomeri (tj. izomeri koji se razlikuju po vezama između atoma više nego po samoj poziciji atoma u prostoru). Na primer, navođenje metoksi grupe, -OCH3, ne treba tumačiti kao referencu za svoj strukturni izomeri, hidroksimetil grupu, -CH2OH . Isto tako, upućivanje na ortohlorofenil ne treba tumačiti kao referencu za svoj strukturni izomera, meta-hlorofeml. Međutim, navođenje klasa struktura može uključivati i strukturno izomerne oblike koji potpadaju pod tu klasu (na primer C1-7alkil uključuje n-propil i izopropil, butil uključuje n-, izo-, sek- i terc-butil; metoksifenil uključuje orto-, meta-, i para-metoksifenil).
[0495] Gore navedena isključenja ne odnose se na tautomerne oblike, na primer, keto-, enol-, i enolat-oblike, kao kod, na primer, slijedećih tautomernih parova: keto/enol (prikazani u nastavku), imin/enamin, amid/imino alkohol, .
[0496] Izraz "tautomer" ili "tautomerni oblik" odnosi se na strukturne izomere različitih energija koji se mogu međusobno konvertovati pomoću niske energetske barijere. Na primer, protonski tautomeri (takođe poznati i kao prototropni tautomeri) uključuju međusobne konverzije putem migracije protona, kao što su keto-enol i iminenamin izomerizacije. Valentni tautomeri uključuju međusobno konvertovanje pomoću reorganizacije nekih od elektrona veze.
[0497] Treba voditi računa da su posebno obuhvaćeni u pojmom "izomer" jedinjenja sa jednim ili više izotopskom zamenom. Na primer, H može biti u bilo kojem izotopskom obliku, uključujući H, H (D), i H (T); C može biti u bilo kojem izotopskom obliku, uključujući i C, C, i C; O može biti u bilo kojem izotopskom obliku, uključujući i O i O; i slično.
[0498] Primeri izotopa koji se mogu ugraditi u jedinjenja pronalaska uključuju izotope vodonika, ugljenika azota, kiseonika, fosfora, flora i hlora, kao što su, ali ne ograničavajući se na H (deuterijum, D), H (tricijum),<1>C,<13>C,<14>C,<15>N,<18>F,<31>P,<32>P,<35>S,<36>Cl, i<125>I. Različita izotopno obeležena jedinjenja prema ovom pronalasku su, na primer, ona u koja su ugrađeni radioaktivni izotopi kao što su 3H, 13C i 14C. Takva izotopno obeležena jedinjenja mogu biti korisna u studijama metabolizma, studijama kinetike reakcija, za tehnike detekcije ili slikanja, kao što je pozitron emisijska tomografija (PET) i kompjuterizovana tomografija emisijom jednog fotona (SPECT), uključujući lekove ili distribucije supstrata u tkivu, ili pri radioaktivnom lečenju pacijenata. Deuterijumom obiežena ili supstituisana terapeutska jedinjenja iz pronalaska mogu imati poboljšana DMPK (metabolizam i farmakokinetika leka) svojstva, koja se odnose na distribuciju, metabolizam, i lučenje (ADME). Supstitucija s težim izotopima kao što je deuterijum može omogućiti određene terapijske prednosti koje proizlaze iz veće metaboličke stabilnosti, na primer povećanje in vivo poluživota ili smanjenje potrebne doze. 18F obeleženo jedinjenje može biti korisno za PET i SPECT ispitivanja. Izotopno obeležena jedinjenja ovog pronalaska i njihovi predlekovi mogu se uglavnom pripremiti sprovođenjem postupaka opisanih u šemama i u primerima i dobijanjima u nastavku, zamenom lako dostupnih izotopno obeleženih reagensa sa ne-izotopno obeleženim reagensom. Nadalje, supstitucija težim izotopima, posebno deuterijumom (tj. 2H ili D), može obezbediti određene terapeutske prednosti koje proizlaze iz veće metaboličke stabilnosti, na primer povećanje in vivo poluživota ili smanjenje potrebne doze ili poboljšanje terapeutskog indeksa. Podrazumeva se da se deuterijum u ovom kontekstu smatra kao supstituent. Koncentracija ovakvog težeg izotopom, posebno deuterijuma, može se definisati pomoću faktora obogaćenja izotopa. U jedinjenjima iz ovog pronalaska, bilo koji atom, koji nije označen kao posebno određeni izotop, podrazumeva se da predstavlja bilo koji stabilan izotop tog atoma.
[0499] Osim ako nije drugačije navedeno, referenca na određeno jedinjenje obuhvata sve takve izomerne oblike, uključujući (u celosti ili delomično) racemike i druge njihove smese. Postupci za dobijanje (na primer asimetrična sinteza) i odvajanje (na primer, frakcijskom kristalizacijom i hromatografskim postupcima) takvih izomernih oblika su ili poznati u struci ili se lako dobijaju prilagođavanjem na način prikazan ovde, ili poznatim postupcima, na poznat način.
Biološka aktivnost
In vitro testiranje ćelijske proliferacije
[0500] Generalno, citotoksična ili citostatična aktivnost konjugata antitela i leka (ADC) merena je pomoću: izlaganja onih ćelija sisara koje imaju proteinske receptore, npr. HER2, na antitela za ADC u medijumu ćelijske kulture; uzgajanjem ćelija u trajanju od oko 6 sati do oko 5 dana; i merenju održivosti ćelija. In vitro testovi bazirani na ćelijama koriste se za merenje održivosti (proliferacije), citotoksičnosti i indukovanja apoptoze (aktivacije kaspaze) ADC-a pronalaska.
[0501] Aktivnost in vitro konjugata antitela i leka može se meriti u testu proliferacije ćelija. Glo® Luminescent Cell Viability Assay tržišno je dostupan (Promega Corp., Madison, WI), homogen postupak testiranja koji se bazira na rekombinantnoj ekspresiji coleoptera luciferaze (US Patent Br 5583024, 5674713 i 5700670). Ova proliferacija ćelija određuje broj živih ćelija u kulturi na temelju kvantifikacije prisutnog ATP, pokazatelj je metabolički aktivnih ćelija (pogledati i dr (1993) J. Immunol 160 Meth., 81-88; US 6602677). CellTiterGlo® Ispitivanje je sprovedeno u formatu sa 96 rupica, što je prikladno za automatsku trijažu sa visokim protokom (HTS) (Cree i dr (1995) AntiCancer Drugs 6:398-404). Homogen postupak ispitivanja uključuje dodavanje jednog reagensa (CellTited-Glo® reagen) direktno u ćelije uzgajene u serumom obogaćenom medijumu. Ćelijsko pranje, uklanjanje srednjeg i vištestrukih pipetnih koraka nisu potrebni. Sistem prepoznaje najmanje 15 ćelija/rupica, u formatu sa 384 rupice unutar 10 minuta nakon dodavanja reagensa i mešanja. Ćelije mogu biti neprekidno tretirane sa ADC, ili mogu biti tretirane i odvojeno od ADC. Uglavnom, ćelije tretirane kratko, tj.3 sata, pokazale su istu potentnost učinaka kao kontinuirano tretirane ćelije.
[0502] Homogen "dodatak-mešavina-mera" format dovodi do razgradnje ćelija i stvaranja luminescentnog signala proporcionalnog količini prisutnog ATP. Količina ATP direktno je proporcionalna broju ćelija u kulturi. CellTitler-Glo Assay stvara „sjajni“ luminescentni signal proizveden luciferaznom reakcijom, koji ima vreme poluraspada po pravilu veće od pet sati, zavisno od tipa ćelije i medijuma koji se koristi. Održive ćelije se izražavaju u relativnim jedinicama luminiscencije (RLU). Supstrat, Beetle Luciferin, oksidativno je dekarboksiliran pomoću rekombinantne luciferaze svitca sa pratećom konverzijom ATP-a u AMP i generisanje fotona.
[0503] Aktivnost in vitro antitelo-leka konjugata može se takođe meriti testom citotoksičnosti. Uzgajane adherentne ćelije isprane PBS-om, odvojene tripsinom, razređene u kompletnom mediju, koji sadrži 10% FCS, centrifugirane, ponovno suspendovane u svežoj podlozi i prebrojane hemocitometrom. Suspendovane kulture broje se direktno. Monodisperzne ćelijske suspenzije prikladne za brojanje mogu zahtevati agitaciju suspenzije ponovljenom aspiracijom kako bi se razbili ćelijski grumeni.
[0504] Suspenzija ćelija razređuje se na željenu gustinu sejanja i deli (100 ml po rupici) u crne ploče sa 96 rupica. Ploče sa adherentnim ćelijskim linijama inkubiraju se preko noći kako bi se omogućilo prianjanje. Suspenzije ćelijskih kultura mogu se koristiti na dan sejanja.
[0505] Uobičajen rastvor (1 ml) ADC (20 mg/ml), napravljen je u odgovarajućem medijumu za ćelijsku kulturu. Serijska 10-ostruka razređivanja uobičajenog ADC prave se u 15 ml epruvetama za centrifugu pomoću serijskog transfera 100 ml do 900 ml medijuma ćelijske kulture.
[0506] Četiri ponovljene rupice svakog razređenja ADC (100 ml) dele se na 96 izvornih crnih ploča, prethodno postavljenih sa ćelijskom suspenzijom (100 ml), što rezultuje u konačnom volumenu od 200 ml. Kontrolne rupice dobijaju medijum ćelijske kulture (100 ml).
[0507] Ako je vreme udvostručavanja ćelijske linije veće od 30 sati, ADC inkubacija je u trajanju od 5 dana, inače se sprovodi inkubacija od četiri dana.
[0508] Na kraju perioda inkubacije, ćelijska održivost procenjuje se Alamar Blue analizom. AlamarBlue (Invitrogen) se stavlja preko cele ploče (20 ml po rupici) i inkubira tokom 4 sata. Alamar blue fluorescentnost meri se po uzdignutosti 570nm, emisiji 585nm na Varioskan Flash čitaču ploča. Procenat preživljavanja ćelija računa se iz srednje vrednosti fluorescentnosti kod ADC teretiranih rupica u odnosu na srednje vrednosti fluorescentnosti kod kontrolnih rupica.
In vivo delotvornost
[0509] In vivo delotvornost konjugata antitela i leka (ADC) prema pronalasku može se meriti tumorskim ksenograftskim ispitivanjima na miševima. Na primer, in vivo delotvornost anti-HER2 ADC izuma može se meriti pomoću visoko eksprimiranog HER2 transgenskog eksplanta mišjeg modela. Alograft se propagira iz Fo5 mmtv transgenskih miševa koji ne reaguju, ili loše reaguju, na HERCEPTIN® terapiju. Pacijenti su tretirani jednom sa ADC na određenim nivoima doza (mg/kg) i PBD izloženosti leka (mg/m2); i placebom pufer kontrolom (nosač), i prate se tokom dve nedelje ili više kako bi se merilo vreme dupliranja tumora, beležilo ubijanje ćelija, i smanjenje tumora.
Primena
[0510] Konjugati pronalaska mogu se koristiti da se dobije jedinjenje PBD na ciljanom mestu.
[0511] Ciljano mesto je poželjno populacija proliferativnih ćelija. Antitelo je antitelo za antigen prisutan na populaciji proliferativnih ćelija.
[0512] U jednom otelotvorenju antigen je odsutan ili prisutan pri smanjenom nivou populacije ne-proliferativnih ćelija u odnosu na količinu antigena prisutnog u populaciji proliferativnih ćelija, na primer populaciji ćelija tumora.
[0513] Na ciljanom mestu veznik se može otcepiti tako da se oslobodi jedinjenje ReIA. Prema tome, konjugat se može koristiti kako bi se selektivno dobilo jedinjenje ReIA na ciljanm mestu.
[0514] Veznik može biti rascepljen enzimom prisutnim na ciljnom mestu.
[0515] Ciljana lokacija može biti in vitro, in vivo ili ex vivo.
[0516] Jedinjenja konjugata antitela i leka (ADC) iz pronalaska uključuju ona koja se mogu koristiti za antikancerogenu aktivnost. Konkretno, jedinjenja uključuju konjugovana antitela, tj. kovalentno pripojena veznikom na PBD deo leka, odnosno toksina. Kada lek nije konjugovan na antitelo, PBD lek ima citotoksično dejstvo. Biološka aktivnost dela PBD leka PBD se tako modulira za konjugaciju antitela. Konjugat antitela i leka (ADC) prema ovom pronalasku selektivno isporučuju delotvorne doze citotoksičnog agensa do tumorskog tkiva, pri čemu se može postići veća selektivnost, odnosno manje delotvorna doza.
[0517] Prema tome, u jednom aspektu, ovaj pronalazak daje jedinjenje konjugata kako je ovde opisano za primenu u terapiji.
[0518] U jednom aspektu takođe se dobija jedinjenje konjugata kao što je opisano u ovom tekstu za upotrebu u lečenju proliferativnih bolesti.
[0519] Osoba uobičajene veštine u ovoj oblasti može lako odrediti da li ili ne kandidat za konjugat tretira proliferativno stanje za bilo koju pojedinu vrstu ćelija. Na primer, testovi koji se mogu prikladno upotrebiti za ocenu aktivnosti ponuđenu od strane određenog jedinjenja opisani su u primerima niže.
[0520] Izraz "proliferativne bolesti" odnosi se na neželjene ili nekontrolisane ćelijske proliferacije viška ili abnormalnih ćelija, što je nepoželjno, kao što su, neoplastični ili hiperplastični rast, bilo in vitro ili in vivo.
[0521] Primeri proliferacionih stanja uključuju, ali nisu ograničeni na benigne, predmaligne i maligne ćelijske proliferacije, uključuju, ali nisu ograničeni na neoplazme i tumore (npr. histokitoma, gliom, astrokioma, osteom), kancere (npr. karcinom pluća, karcinom malih ćelija pluća, gastrointestinalni karcinom, karcinom creva, karcinom debelog creva, karcinom dojke, karcinom jajnika, karcinom prostate, karcinom testisa, karcinom jetre, karcinom bubrega, karcinom mokraćnog mehura, karcinom gušterače, karcinom mozga, sarkoma, osteosarkoma, Kaposijev sarkom, melanom), limfome, leukemije, psorijaze, bolesti kostiju, fibroproliferativne bolesti (npr. vezivnog tkiva) i ateroskleroze. Karcinomi od posebnog interesa uključuju, ali nisu ograničeni na leukemije i karcinome jajnika.
[0522] Bilo koji tip ćelije može se tretirati, što uključuje, ali nije ograničeno na, pluća, gastrointestinalne organe (uključujući, npr. creva, debelo crevo), dojke (mlečne), jajnike, prostatu, jetru, bubrege, mokraćni mehur, pankreas, mozak, kožu.
[0523] U jednom otelotvorenju, u pitanju je tretman karcinoma gušterače.
U jednom otelotvorenju, u pitanju je tretman tumora koji ima αvβ6integrin na površini ćelije.
[0524] Smatra se da konjugati antitela i leka (ADC) iz ovog pronalaska mogu da se koristite pri lečenju raznih bolesti ili poremećaja, npr. okarakterisanih prekomernom ekspresijom tumorskog antigena. Primeri stanja ili hiperproliferacijskih poremećaja uključuju benigne ili maligne tumore; leukemije, hematološke i limfne malignosti. Drugi uključuju neuralne, glijalne, astrocitne, hipotalamusni, glandularne, makrofagne, stromalne blastocelne, upalne, angiogene i imunoloških, uključujući i autoimune, bolesti.
[0525] Uglavnom, bolesti ili poremećaji koji se leče su hiperproliferativne bolesti kao što je karcinom. Primeri karcinoma koji se tretiraju ovde uključuju, ali nisu ograničeni na karcinom, limfom, blastom, sarkom i leukemiju ili limfoidne maligne bolesti. Više određenih primeri takvih karcinoma su karcinom pločastih ćelija (npr. karcinom epitelnih skvamoznih ćelija), karcinom pluća uključujući karcinom malih ćelija pluća, karcinom nemalih ćelija pluća, adenokarcinom pluća i karcinom pločast ćelijaih pluća, karcinom peritoneuma, hepatocelulami karcinom, karcinom želudca ili stomaka uključujući gastrointestinalni karcinom, karcinom gušterače, glioblastoma, karcinoma grlića materice, karcinom jajnika, karcinom jetre, karcinom mokraćnog mehura, hepatom, karcinom dojke, karcinom debelog creva, karcinom rektuma, karcinom debelog creva, karcinom endometrija ili karcinom materice, karcinom žlezda bubrega i karcinom bubrega, karcinom prostate, karcinom vulve, karcinom štitnjače, karcinom jetre, analni karcinom, karcinom penisa, i karcinom glave i vrata.
[0526] Autoimune bolesti za čije lečenje mogu da se koriste ADC jedinjenja uključuju reumatološke poremećaje (kao što je, na primer, reumatoidni artritis, Sjogren-ov sindrom, skleroderm, lupus poput SLE i lupus nefritis, polimiozitis/dermatomiozitis, krioglobulinemija, sindrom anti-fosfolipida antitela, kao i psorijatični artritis), osteoartritis, autoimune gastrointestinalne i jetrene bolesti (kao što su, na primer, upalne bolesti creva (na primer ulcerozni kolitis i Crohnova bolest), autoimuni gastritis i perniciozna anemija, autoimuni hepatitis, primarna bilijarna ciroza, primarni sklerozirajući kolangitis i celijakija), vaskulitis (kao što su, na primer, ANCA-povezan vaskulitis, uključujući Churg-Strauss vaskulitis, Wegenerova granulomatoza, i polyarteriitis), autoimune neurološke poremećaje (kao što su, na primer, multipla skleroza, opsoclonus mioklonus sindrom, myasthenia gravis, optički neuromijelitis, Parkinsonova bolest, Alzhajmerova bolesti i autoimune polineuropatije), bubrežne bolesti (kao što su, na primer, glomerulonefritis, Goodpastureov sindrom i Vergerova bolest), autoimuni dermatološki poremećaji (kao što su, na primer, psorijaza, urtikarija, koprivnjača, pemphigus vulgaris, bulozni pemfigoid, i kožni eritemski lupus), hematološke poremećaje (kao što su, na primer, trombocitopenijski purpur, tromboza trombocitopenijskog purpura, poslijetransfuzijski purpur, i autoimuna hemolitička anemija), ateroskleroza, uveitis, autoimune bolesti sluha (kao što su, na primer, bolest unutašnjeh uha i gubitak sluha), Behcetova bolest, Raynaudov sindrom, transplantacije organa i autoimuni endokrinih poremećaji (kao što su, na primer, sa dijabetesom povezane autoimune bolesti kao što su inzulin-zavisni dijabetes melitus (IDDM), Addisonova bolest, i autoimune bolesti štitne žlezde (npr. Gravesova bolest i tiroiditis)). Još poželjnije takve bolesti uključuju, na primer, reumatoidni artritis, ulcerativni kolitis, vaskulitis u vezi sa ANCA, lupus, multiple skleroze, Sjogrenov sindrom, Gravesovu bolest, IDDM, pernicioznu anemiju, tiroiditis i glomeruloni phritis.
Postupci lečenja
[0527] Konjugati ovog pronalaska mogu se upotrebiti u postupku terapije. Pojam "terapeutski delotvorna količina" je količina dovoljna da pokaže poboljšanje kod pacijenta. Takvo poboljšanje može biti bar ublažavanje najmanje jednog simptoma. Stvarni iznos primanja, i brzina i vremenski tok primene, zavisiće od prirode i težine obolenja koje se tretira. Prepisivanje tretmana, npr. odluke o dozi, u nadležnosti su lekara opšte prakse i ostalih doktora medicine.
[0528] Jedinjenje pronalaska može se primeniti samo ili u kombinaciji sa drugim terapijama, bilo istovremeno ili uzastopno, zavisno od stanja koje se leči. Primeri tretmana i terapija uključuju, ali nisu ograničeni na hemoterapiju (davanje aktivnih agenasa, uključujući, npr. lekove kao što su hemoterapijski); hirurgija; i terapija zračenjem.
[0529] "Hemoterapijski agens" je hemijsko jedinjenje korisno u tretmanu karcinoma, bez obzira na mehanizam delovanja. Klase hemoterapijskih agensa uključuju alkilacijske agense, antimetabolite, biljne alkaloide otrova vretena, citotoksične/protu-tumorske antibiotike, inhibitore topoizomeraze, antitela, fotosenzibilizatore i inhibitore kinaze. Hemoterapijski agensi uključuju jedinjenja koja se koriste u "ciljanoj terapili" i uobičajenoj hemoterapiji.
[0530] Primeri hemoterapijskih agenasa uključuju: (erlotinib. TARCEVA®, Genentech/OSI Pharm), docetaksel (Taxotere®, Sanofi-Aventis), 5-FU (fluorouracil, 5-fluorouracil, CAS No. 51-21-8), gemcitabin (GEMZAR®, Lilly), PD-0325901 (CAS No. 391210-10-9, Pfizer), cisplatin (cis-diamin, dihlorplatina (II), CAS No. 15663-27-1), karboplatin (CAS br . 41575-94-4), paklitaksel (Taxol®, Bristol-Myers Squibb Oncology, Princeton, NJ), trastuzumab (HERCEPTIN®, Genentech), temozolomid (4-metil-5-okso-2,3,4,6, 8-pentazabicyclo [4.3.0] nona-2,7,9-triene- 9-karboksamid, CAS No. 85622-93-1, TEMODAR®, TEMODAL®, Schering Plough), tamoksifen ((Z) -2- [4- (1,2-1enyl) fenoksi] -N, N-dimetiletanamin, NOLVADEX®, ISTUBAL®, VALODEX®) i doksorubicin (ADRIAmicin®), Akti-1/2, HPPD i rapamicin.
Više primeri hemoterapijskih agensa su: oksaliplatin (ELOXATIN®, Sanofi), bortezomib (VELCADE®, Millennium Pharm.), sutent (SUNITINIB®, SU11248, Pfizer), letrozol (FEMARA®, Novartis), imatinibmezilat (GLEEVEC®, Novartis ), XL-518 (inhibitor MEK, Exelixis, WO 2007/044515), ARRY-886 (inhibitor MEK, AZD6244, Array BioPharma, Astra Zeneca), SF-1126 (inhibitor PI3K, Semafore Pharmaceuticals), BEZ-235 (inhibitor PI3K, Novartis), XL-147 (inhibitor PI3K, Exelixis), PTK787/ZK 222584 (Novartis), fulvestrant (FASLODEX®, AstraZeneca), leukovorin (folna kiselina), rapamicin (sirolimus, RAPAMUNE®, Wyeth), lapatinib (TYKERB®, GSK572016, Glaxo Smith Kline), lonafarnib (SARASAR ™, SCH 66336, Schering Plough), sorafenib (Nexavar®, BAY43-9006, Bayer Labs), gefitinib (IRESSA®, AstraZeneca), irinotecan (Camptosar®, CPT-11, Pfizer), tipifarnib (ZARNESTRA™, Johnson & Johnson), ABRAXANE ™ (Crcmophor bez), albuminprojektovane nanočestične formulacije paklitakseloma (American Pharmaceutical Partners, Schaumberg, II), vandetaniba (Rinn, ZD6474, ZACTIMA®, AstraZeneca), hloranmbucil, AG1478, AG1571 (SU 5271; Sugen), temsirolimus (TORISEL®, Wyeth), pazopaniba (GlaxoSmithKline), canfosfamide (TELCYTA®, Telik), tiotepa i ciklosfosfamid (CYTOXAN®, NEOSAR®); alkil sulfonati kao busulfan, improsulfan i piposulfan; aziridini kao benzodop, karbokvon, meturedop i uredopa; etilenimini i metilamelamini uključujući altretamin trietilenmelamin, trietilenfosforamid, trietilentiofosforamid i trimetilomelamin; acetogenini (pogotovo bullatacin i bullatacinone); kamptotecin (uključujući sintetičke analoge topotekana); briostatin; calistatin; CC-1065 (uključujući i njegov adozelesin, carzelesin i bizelesin sintetičke analoge); kriptoficine (posebno kriptoficin 1 i kriptoficin 8); dolastatin; duocarmicin (uključujući sintetičke analoge, KW-2189 i CB1-TM1); eleuterobina; pancratistatin; sarcodictiin; spongistatin; azotne iperite kao hlorambucil, hlornafazin, hlorofosfamid, estramustin, ifosfamid, mehloretamin, mehloretamin oksid hidrohlorid, melfalan, novembichin, fenesterin, prednimustin, trofosfamid, uracil mustard; nitrozouree kao što su karmustin, hlorozotocin, fotemustin, lomustin, nimustin i ranimnustine; antibiotici kao što su antibiotici (npr. enedin kalikeamicin, kalikeamicin gamma1I, kalikeamicina omegal1 (Angew Chem Intl Ed Engl (1994) 33. 183-186), dinemicin, dinemicin A; bisfosfonatime, kao na primer esperamicin klodronata, kao i neokarzinostatin hromofor i srodni hromoprotein enedin antibiotski hromoforim), aklacinomisine, aktinomicin, autramicin, azaserin, bleomicini, kactinomicin, karabicin, karminomicin, karzinofilin, hromomicini, daktinomicin, daunorubicin, detorubicin, 6-diazo-5-okso-L-norleucin, morfolino-doksorubicin, doksorubicin-cijanomorfolino, 2-pirolin-doksorubicin i deoksidoksorubicin), epirubicin, esorubicin, idarubicin, nemorubicin, marcelomicin, mitomicine kao mitomicin C, mikofenolna kiselina, nogalamicin, olivomicine, peplomicin, porfiromicin, puromicin, quelamicin, rodorubicin, streptonigrin, streptozocin, tubericidin, ubenimeks, zinostatin, zorubicin; antimetabolite kao što su metotreksat i 5-fluorouracil (5FU); analoge folne kiseline kao što su denopterin, metotreksat, pteropterin, trimetreksat; analoge purina kao što su fludarabin, 6-merkaptopurin, tiogvanin, thiamiprin; analoge pirimidina kao što su, ancitabine azacitidine, 6-azauridin, karmofur, citarabin, dideoksiuridin, doksifluridin, enocitabin, floksuridin; androgene kao što calusteron, dromostanolon propionat, epitiostanol, mepitiostane, testolakton; anti-nadbubrežne žlijezde, kao što su aminoglutetimid, mitotan, trilostan; folna kiselina, krema poput frolinic kiselina; aceglaton; aldogosphamid glikozida; aminolevulinska kiselina; eniluracil; amsakrin; bestrabucil; bizantren; edatraksate; defofamine; demecolcine; diaziquone; elfornithine; elliptinium acetata; epotilon; etoglucid; galij nitrat; hidroksiurea; lentinan; lonidainine; majtanzinoidi poput majtanzina i ansamitocina; mitoguazon; mitoksantron; mopidanmol; nitraerine; pentostatin; fenamet; pirarubicin; lozoksantron; podofylna kiselina; 2-etylhidrazid; prokarbazin; PSK® polisaharid kompleks (JHS Prirodni proizvodi, Eugene, OR); razoksan; rizoksin; sizofiran; spirogermanium; tenuazonic kiselina; triaziquone; 2,2 ', 2 ", -trihlorotrietilamin trihotecen (pogotovo T-2 toksina, verracurin A, A i roridin anguidine), uretan, vindesin, dakarbazin, manomustine, mitobronitol, mitolactol, pipobroman, gacitozin, arabinozid (« Ara-C «), ciklofosfamid, tiotep, 6-tiogvanin, merkaptopurin, metotreksat, platinski analoge, kao što su cisplatin i karboplatin; vinblastina; etopozid (VP-16), ifosfamid, mitoksantron, vinkristin, vinorelbin (NAVELBINE®) novantron, tenipozid, Edatreksat, daunomicin, aminopterin, kapecitabin
1
(XELODA®, Roche), ibandronat, CPT-11, inhibitor topoizomeraze RFS 2000; difluorometilornitin (DMFO); fraHj retinoične kiseline, i farmaceutski prihvatljive soli, kiseline i derivati bilo čega od gore navedenog.
[0531] Takođe uključeni u definiciju "hemoterapijskih agenasa" su: (i) anti-hormonski agensi koja regulišu ili inhibiraju hormonsko delovanje na tumore kao što su anti-estrogeni i selektivne modulatori receptora estrogena (SERM), uključujući, na primer, tamoksifen (uključujući NOLVADEX®, tamoksifen citrat), raloksifen, droloksifen, 4-hidroksitamoksifen, trioksifen, keoksifen, LY117018, onapriston i FARESTON® (toremifine citrat); (ii) inhibitori aromataze koje inhibiraju enzim aromatazu, koja reguliše proizvodnju estrogena u nadbubrežne žlezde, kao što su, na primer, 4 (5) -imidazoles, aminoglutetimid, MEGASE® (megestrol acetat), AROMASIN® (eksemestan, Pfizer), formestanie, fadrozol, RIVISOR® (vorozol), FEMARA® (letrozol, Novartis), i ARIMIDEX® (anastrozola, AstraZeneca); (iii) anti-androgeni kao što su flutamid, nilutamid, bikalutamid, leuprolid, i goserelin; kao troksacitabin (1,3-dioksolan nukleozid analog citozina); (iv) inhibitore protein kinaze, kao što su inhibitori MEK (WO 2007/044515); (v) inhibitori lipid kinaze; (vi) oligonukleotidi, posebno onih koji inhibiraju eksprimovanje gena u signalnim putevima imliciranim u aberantnim proliferacijama ćelija, na primer, PKC-alfa, Raf i H-Ras, kao što je oblimersen (GENASENSE®, Genta Inc.); (vii) ribozimi poput inhibitora VEGF eksprimovanja (npr. ANGIOZYME®) i HER2 inhibitori eksprimovanja; (viii), vakcine kao što su vakcine genske terapij, na primer, ALLOVECTIN®, LEUVECTIN® i VAXID®; PROLEUKIN® rIL-2; inhibitori topoizomeraze 1, kao što su LURTOTECAN®; ABARELIX® RMRH; (ix) anti-angiogeni agensi kao što su bevacizumab (AVASTIN®, Genentech); i farmaceutski prihvatljive soli, kiseline i derivati bilo čega od gore navedenog.
Takođe uključeni u definiciju "hemoterapijskog agensa" su terapeutska antitela kao alemtuzumab (Campath), bevacizumab (AVASTIN®, Genentech); cetuksimab (ERBITUX®, Imclone); panitumumab (VECTIBIX®, Amgen), rituksimab (RITUXAN®, Genentech/Biogen Idec), ofatumumab (ARZERRA®, GSK), pertuzumab (PERJETA, OMNITARG™, 2C4, Genentech), trastuzumab (HERCEPTIN®, Genentech), tositumomab (Bexxar ™, Corixia), i antitelo-leka konjugat, getuzumab ozogamicin (MYLOTARG®, Wyeth).
[0532] Humanizovana monoklonska antitela sa terapeutskim potencijalom kao hemoterapijski agensi u kombinaciji sa konjugata iz pronalaska uključuju: alemtuzumab apolizumab, aselizumab, infliksimab, bapineuzumab, bevacizumab, bivatuzumab mertanzine, kantuzumab mertanzine, cedelizumab, certolizumab pegol, cidfusituzumab, cidtuzumab, daklizumab, eculizumab, efalizumab, epratuzumab, erlizumab, felvizumab, fontolizumab, getuzumab ozogamicin, inotuzumab ozogamicin, ipilimumab, labetuzumab, lintuzumab Pantimumaba, Matuzimaba, mepolizumab, motavizumab, motovizumab, natalizumab, Nimotuzimaba, nolovizumab, numavizumab, ocrelizumab, omalizumab, palivizumab, paskolizumaba, pec- fusituzumab, pectuzumab, pertuzumab, pekselizumab, ralivizumab, ranibizumab, reslivizumab, reslizumab, resyvizumab, rovelizumab, ruplizumab, sibrotuzumab, siplizumab, sontuzumab, tacatuzumab tetraksetan, tadocizumab, talizumab, tefibazumab, tocilizumab, toralizumab, trastuzumab, tucotuzumab celmoleukin, tucusituzumab, umavizumab, urtoksazumab i visilizumab.
[0533] Farmaceutski sastavi prema ovom pronalasku, i za upotrebu u skladu s ovim pronalaskom, mogu sadržati, pored aktivnog sastojka, npr. konjugat jedinjenja, i farmaceutski prihvatljiv pomoćni agens, nosač, pufer, stabilizator ili druge materijale dobro poznate stručnjacima u ovoj oblasti. Takvi materijali treba da budu netoksični i ne smeju uticati na delotvornost aktivnog sastojka. Egzaktna priroda nosača ili drugog materijala zavisiće od načinu primene, koji može biti oralni, ili sa injekcijom, npr. kožno, potkožno, ili intravenski.
[0534] Farmaceutski sastavi za oralnu primenu mogu biti u obliku tableta, kapsula, praha ili u obliku tečnosti. Tableta može sadržati čvrsti nosač ili pomoćni agens. Tečni farmaceutski sastavi uglavnom sadrže tečni nosač kao što su voda, petrolej, životinjska ili biljna ulja, mineralno ulje ili sintetička ulja. Mogu se uključiti fiziološki slani rastvor, dekstroza ili drugi rastvor saharida, ili glikoli kao što je etilen glikol, propilen glikol ili polietilen glikol. Kapsula može sadržati čvrsti nosač kao želatin.
[0535] Za intravensku, kožnu ili potkožnu injekciju, ili injekciju na mestu tumora, aktivni sastojak će biti u obliku parenteralno prihvatljivog vodenog rastvora, koji je bez pirogena i ima odgovarajući pH, izotoničnost i stabilnost. Oni sa relevantnom veštinom u oblasti mogu dobro pripremiti prikladne rastvore, na primer, izotonične agense kao što su natrijum hlorid injekcija, Ringerova injekcija, mlečna Ringerova injekcija. Konzervansi, stabilizatori, puferi, antioksidanti i/ili drugi dodaci mogu biti uključeni, po potrebi.
Formulacije
[0536] Iako je moguće da se konjugat jedinjenja koristiti (npr. daje) sam, često je poželjno da se predstavi u obliku sastava ili formulacije.
[0537] U jednom otelotvorenju, sastav je farmaceutski sastav (npr., formulacije, preparat, lek) koji sadrži jedinjenje konjugata, kao što je ovde opisano, i farmaceutski prihvatljivu podlogu, rastvarač ili ekscipijent.
2
[0538] U jednom otelotvorenju, sastav je farmaceutski sastav koji sadrži najmanje jedno jedinjenje konjugata, kao što je opisano ovde, zajedno sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih sastojaka koji su dobro poznati stručnjacima u ovoj oblasti, uključujući, ali ne ograničavajući se na, farmaceutski prihvatljive nosače, rastvarače, ekscipijente, pomoćne agense, punila, pufere, konzervanse, antioksidante, agense za podmazivanje, stabilizatori, agense za otapanje, surfakante (npr., agense za kvašenje), agense za prikrivanje, bojila, agense za poboljšanje ukusa i zaslađivače.
[0539] U jednom otelotvorenju, sastav nadalje sadrži i druge aktivne agense, na primer, druga terapijska ili profilaktička sredstva.
[0540] Prikladni nosači, razrjeđivači, ekscipijenti itd. mogu se naći u standardnim farmaceutskim tekstovima. Pogledati, na primer, Handbook of Pharmaceutical Additives, 2nd Edition (eds. M. Ash and I. Ash), 2001 (Synapse Information Resources, Inc., Endicott, New York, USA), Remington’s Pharmaceutical Sciences, 20th edition, pub. Lippincott, Williams & Wilkins, 2000; and Handbook of Pharmaceutical Excipients, 2nd edition, 1994.
[0541] Izraz "farmaceutski prihvatljiv" kako se ovde koristi, odnosi se na jedinjenja, materijale, sastojke, kompozicije, oblike doziranja i slično, koji su, unutar opsega medicinske procene, prikladni za upotrebu u dodiru s tkivima pacijenta u pitanju (npr., čoveka) bez preterane toksičnosti, iritacije, alergijskog odgovora, ili drugih problema ili komplikacija, srazmerno sa razumnim odnosom koristi/rizika. Svaki nosač, razređivač, ekscipijent itd mora biti "prihvatljiv" u smislu da je kompatibilan sa ostalim sastojcima formulacije.
[0542] Formulacije se mogu pripremiti bilo kojim postupkom dobro poznatim u farmaceutskoj struci. Takvi postupci uključuju korak dovođenja u vezu aktivnog jedinjenja sa nosačem koji sadrži jedan ili više pomoćnih sastojaka. Uglavnom, sastavi se pripremaju uniformnim dovođenjem u kontakt aktivnih jedinjenja sa nosačima (npr., tečni nosači, fino usitnjenim čvrstim nosačima, itd), a zatim oblikovanjem proizvoda, ako je potrebno.
[0543] Formulacija se može pripremiti da obezbedi brzo i sporo otpuštanje; neposredna, odložena, vremenska, ili produžena otpuštanja; ili njihove kombinacije.
[0544] Formulacije prikladne za parenteralno davanje (npr. injekcijom), uključuju vodene i nevodene, izotonične, apirogene, sterilne tečnosti (npr., rastvore, suspenzije), u kojima je aktivni sastojak rastvoren, suspendovan ili obezbeđen na drugi način (npr., u liposomima ili drugim mikročesticama). Takve tečnosti mogu dodatno sadržati druge farmaceutski prihvatljive dodatke, kao što su antioksidansi, puferi, konzervansi, stabilizatori, bakteriostati, suspenzije, agensi za zgušnjavanje, i rastvori koji čine formulaciju izotoničnom sa krvlju (ili drugim telesne tečnostima) relevantnog predviđenog primaoca. Primeri pomoćnih agensa uključuju, na primer, vodu, alkohole, poliole, glicerole, biljna ulja i slično. Primeri prikladnih izotoničnih nosača za upotrebu u takvim formulacijama obuhvataju natrijum hlorid za injekcije, Ringerov rasvor, ili mlečnu Ringerovu injekciju. Tipično, koncentracija aktivnog sastojka u tečnosti je od oko 1 ng/mL do oko 10 mg/ml, na primer od oko 10 ng/ml do 1 mg/ml. Formulacije mogu biti u jedinici doze ili više doza, na primer, ampule i bočice, i mogu biti čuvane u hladno-suvim (liofilizirani) uslovima koji zahtevaju samo dodatak sterilnog tečnog nosača, na primer vode za injekcije, neposredno pre upotrebe. Improvizovani injekcijski rastvori i suspenzije mogu se pripremiti od sterilnih prašaka, granula i tableta.
Doziranje
[0545] Biće uvaženo od stručnjaka u ovoj oblasti da odgovarajuće doze konjugata jedinjenja, i smese koje sadrže konjugat jedinjenja, mogu varirati od pacijenta do pacijenta. Određivanje optimalne doze će uglavnom uključivati balansiranje nivoa koristi terapijskog davanja prema bilo kojem riziku ili štetnoj nuspojavi. Veličina odabrane doze zavisiće od različitih faktora, uključuje ali se ne ograničava na aktivnost određenog jedinjenja, način davanja, vreme davanja, brzinu lučenja jedinjenja, trajanje lečenja, ostale lekove, jedinjenja i/ili materijale koji se koriste u kombinaciji, ozbiljnost stanja, kao i od vrste, starosti, pola, težine, stanja, opšteg zdravlja, i prethodne medicinske istorije pacijenta. Količina jedinjenja i način primene će naposletku biti prepuštene nahođenju lekara, veterinara ili medicinskog osoblja, iako će generalno doziranje biti odabrano da bi se dobile lokalne koncentracije na mestu delovanja koje postižu željeni učinak bez uzrokovanja značajne štetne ili pogubne nuspojave.
[0546] Davanje se može sprovesti u jednoj dozi, kontinuirano ili sa prekidima (npr., u podeljenim dozama u odgovarajućim intervalima) tokom trajanja lečenja. Postupci za određivanje najučinkovitijih načina i doza primene dobro su poznati stručnjacima u ovoj oblasti i variraće sa formulacijom korišćenom pri terapiji, svrsi terapije, ciljanim ćelijama koje se tretiraju, i pacijentom koji se leči. Same pojedinačne ili višestruke primene mogu se sprovesti sa nivoom doziranja i obrasca odabranog od lekara, veterinara ili medicinskog osoblja.
[0547] Uglavnom, odgovarajuća doza aktivnog jedinjenja je u rasponu od oko 100 ng do oko 25 mg (tipičnije, od oko 1 mg do oko 10 mg) po kilogramu telesne težine pacijenta dnevno. Kada je aktivno jedinjenje so, ester, amid, prolek, ili slično, količina koja se daje računa se na temelju matičnog jedinjenja i tako stvarna masa koja se koristi proporcionalno raste.
[0548] U jednom otelotvorenju, aktivno jedinjenje se primenjuje na humanom pacijentu prema sledećem režimu doziranja: oko 100 mg, 3 puta dnevno.
[0549] U jednom otelotvorenju, aktivno jedinjenje se primenjuje na humanom pacijentu prema sledećem režimu doziranja: oko 150 mg, 2 puta dnevno.
[0550] U jednom otelotvorenju, aktivno jedinjenje se primenjuje na humanom pacijentu prema sledećem režimu doziranja: oko 200 mg, 2 puta dnevno.
[0551] Međutim, u jednom otelotvorenju, jedinjenje konjugata se primenjuje na humanom pacijentu prema sledećem režimu doziranja: 50, ili oko 75 mg, 3 ili 4 puta dnevno.
[0552] U u jednom otelotvorenju, jedinjenje konjugata se primenjuje na humanom pacijentu prema sledećem režimu doziranja:: oko 100 ili oko 125 mg, 2 puta dnevno.
[0553] Količine doziranja opisane gore mogu se primeniti na konjugat (uključujući i PBD grupe veznika za antitelo) ili na delotvornu količinu datog PBD jedinjenja, na primer, količinu jedinjenja koja se može osloboditi nakon cepanja veznika.
[0554] Za prevenciju ili tretman oboljenja, prikladna doza od ADC pronalaska zavisiće od vrste bolesti koja se leči, kao što je gore definisano, ozbiljnost i toka bolesti, da li se molekul primenjuje za sprečavanje ili terapijske svrhe, prethodna terapija, pacijentova kliničke prošlost i odgovor na antitela, kao i odluke lekara. Molekul se prikladno daje pacijentu odjednom ili kroz seriju tretmana. Zavisno od vrste i težine bolesti, oko 1 mg/kg do 15 mg/kg (na primer 0,1-20 mg/kg) molekula je početna doza kandidat za davanje pacijentu, bilo da, na primer, ima jedan oili više zasebnih davanja, ili kontinuirana infuzija. Tipična dnevna doza može varirati od oko 1 mg/kg do 100 mg/kg ili više, zavisno od gore navedenih faktora. Na primer doza ADC se daju pacijentu, u rasponu od oko 0.1 do oko 10 mg/kg telesne težine pacijenta. Za ponovnu primena tokom nekoliko dana ili duže, zavisno od stanja, terapija se održava dok se ne postigne željeno suzbijanje simptoma bolesti. Uzoran režim doziranja sastoji se od toka davanja početne doze od oko 4 mg/kg, a zatim dodatnih doza svake nedelje, dve nedelje, ili tri nedelje od ADC. Drugi režimi doziranja mogu biti korisni. Napredak terapije se lako prati uobičajenim postupcima i ispitivanjima.
Tretman
[0555] Termin "tretman", kako se ovde koristi u kontekstu tretiranja stanja, odnosi se generalno na tretman i terapiju, bilo čoveka ili životinje (na primer, u veterini) kod kojih se postiže neki željeni terapeutski efekat, na primer, sprečavanje napredovanja stanja, i uključuje smanjenje brzine napretka, zaustavljanje brzine napretka, regresije bolesti, poboljšanje bolesti, i lečenje bolesti. Tretman kao profilaktička mera (tj., profilaksa, prevencija) također je uključena.
[0556] Termin "terapeutski delotvorna količina", kako se ovde koristi, odnosi se na količinu aktivnog jedinjenja, ili materijala, sastava ili doze koja sadrži aktivno jedinjenje, koji je delotvorno za dobijanje nekog željenog terapeutskog efekta, proporcionalno razumnom odnosu koristi/rizika kada se daje u skladu sa željenim režimom lečenja.
[0557] Isto tako, termin "profilaktički delotvorna količina", kako se ovde koristi, odnosi se na količinu aktivnog jedinjenja, ili materijala, sastava ili doze koja sadrži aktivno jedinjenje, koji je delotvorno za dobijanje nekog željenog profilaktičkiog efekta, proporcionalno razumnom odnosu koristi/rizika kada se daje u skladu sa željenim režimom lečenja.
Priprema konjugata leka
[0558] Antitelo lek konjugati, kao i konjugati sa drugim agensima za vezivanje ćelija, mogu se dobiti na nekoliko načina, koristeći organske hemijske reakcije, uslove i reagense koji su poznati stručnjacima u ovoj oblasti, uključujući reakcije nukleofilne grupe antitela ili agensa za vezivanje čelija sa reagensom za veznikom za lek. Ova metoda može se koristiti sa različitim antitelima i agensima za vezivanje ćelija, kako bi se pripremili antitelo lek kojugati pronalaska.
[0559] Nukleofilne grupe na antitelima uključuju ali se ne ograničavaju na tiolne grupe bočnog lanca, npr. cistein. Tiolne grupe su nukleofilne i sposobne da reaguju u obliku kovalentne veze sa elektrofilnim grupama na vezivnim delovima kao što su oni iz ovoga pronalaska. Neki antitela imaju reduktivne međulančane disulfide, odnosno cisteinske mostove. Antitela se mogu napraviti da budu reaktivna za konjugaciju sa vezivnim reagensima obradom sa reduktivnim agensom kao što je DTT (Clelandov reagens, ditiotreitol) ili TCEP (tris(2-karboksietil)fosfin hidrohlorid; Getz i dr (1999) Anal Biochem, Vol 273,. 73-80; Soltec Ventures, Beverly, MA). Svaki cisteinski
4
disulfid most će tako obrazovani, teoretski, dva reaktivna tiolne nukleofila. Dodatne nukleofilne grupe mogu se uvesti u reakciju antitela preko lizina sa 2-iminotiolanom (Trautov reagens), što dovodi do pretvaranja amina u tiol.
Pacijent
[0560] Pacijent može biti životinja, sisar, placentni sisar, torbar (npr. kengur, vombat), kljunar, glodar (na primer, zamorče, hrčak, rat, miš), miš, dvojezubac (npr., zec), ptica, pas, mačka, konj, svinja, ovca, goveđo (npr. krava), primat, majmun (npr., marmozet ili babun), čovekoliki majmun (npr., gorila, šimpanza, orangutan), ili čovek.
[0561] Nadalje, pacijent može biti bilo kog stupnja razvoja, na primer, na fetus. U jednom poželjnom otelotvorenju pacijent je čovek.
[0562] U jednom otelotvorenju pacijent je populacija u kojoj svaki pacijent ima tumor koji ima αvβ6integrin na ćelijskoj površini.
Primeri
Opšti eksperimentalni pristupi za primer 1
[0563] Optičke rotacije merene su na ADP 220 polarimetru (Bellingham Stanley Ltd.) dok su koncentracije (c) date u g/100 ml. Tačke topljenja su merene pomoću digitalnog uređaja za tačku topljenja (Electrothermal). IR spektri snimljeni su na Perkin-Elmer Spectrum 1000 FT IR spektrometru. H i C NMR spektri su dobijeni na 300 x koristeći Bruker Avance NMR spektrometra na 400 i 100 MHz, respektivno. Hemijske promene su prijavljene u odnosu na TMS (8 = 0,0 ppm), a signali su označeni kao s (jednostruki), d (duplet), t (triplet), dt (dupli triplet), dd (duplet dupleta), ddd (dupli duplet dupleta), ili m (multiplet), sa uparenim konstantama datim u hercima (Hz). Podaci masene spektroskopije (MS) prikupljeni su na instrumentu Waters Micromass ZQ uparenim sa Waters 2695 HPLC s Waters 2996 PDA. Waters Micromass ZQ parametri bili su: kapilarno (kV), 3,38; konusno (V), 35; ekstraktor (V), 3,0; izvorna temperatura (° C), 100; temperatura desolvacije (° C), 200; konusni protok (L/h), 50; protok desolvatacije (L/h), 250. Podaci u visokoj rezoluciji masene spektroskopije (HRMS) snimljeni su na Waters Micromass QTOF Global pri pozitivnom W-modu koristeći borosilikatne vrhove stakla obloženog metalom kako bi se uzorci uveli u instrument. Tankoslojna hromatografija (TLC) je obavljena na silika gel aluminijskim pločama (Merck 60, F254), dok je brza hromatografija koristila silika gel (Merck 60, 230-400 mesh ASTM). Osim za HOBt (Novabiochem) i čvrstih reagenasa (Argonaut), sve druge hemikalije rastvori kupljeni su od Sigma-Aldrich, i korišćeni su kao što su nabavljeni, bez daljeg pročišćavanja. Ne-vodeni rastvori dobijeni su destilacijom pod suvom atmosferom azota u prisustvu odgovarajućeg agensa za sušenje, i pohranjeni su iznad molekulskih sita 4A i natrijumske žice. Petroletar se odnosi na ključanje delova na 40-60°C.
Optši LC/MS uslovi
Metod 1 (podrazumevana korišćena metoda, osim ako nije drugačije navedeno)
[0564]: HPLC (Waters Alliance 2695) se izvode pomoću mobilne faze vode (A) (0,1% mravlja kiselina) i acetonitrila (B) (0,1% mravlja kiselina). Gradijent: inicijalni sastav 5% B u trajanju od 1,0 minuta, zatim se poveća od 5% B do 95% B duže od 3 min. Sastav je održan 0,1 min na 95% B, a zatim se vratio do 5% B u 0,03 minuta i održava tu 0,87 minuta. Ukupno vreme gradijenta iznosi 5 min.
Metod 2
[0565]: HPLC (Waters Alliance 2695) se izvode pomoću mobilne faze vode (A) (0,1% mravlja kiselina) i acetonitrila (B) (0,1% mravlja kiselina). Gradijent: inicijalni sastav 5% B u trajanju od 1,0 minuta, zatim se poveća od 5% B do 95% B duže od 2,5 min. Sastav je održan 0,5 min na 95% B, a zatim se vratio do 5% B u 0,1 minuta i održava tu 0,9 minuta. Ukupno vreme gradijenta iznosi 5 min.
Za oba metoda
[0566] Brzina protoka 3,0 ml/min, 400 µl je podeljeno preko t komada nulte zapremine koji prolazi u maseni spektrometar. Opseg detekcije talasnih dužina: 220 do 400 nm. Tip funkcije: poredak dioda (535 skenova). Kolona: Phenomenex® Onyx Monolitni C1850 x 4,60 mm
[0567] Uslovi prečišćavanja blica reverzne faze bili su sledeći: Sistem za brzo prečišćavanje (Varian 971-Fp) je radio sa mobilnom fazom vode (A) i acetonitrilom (B). Gradijent: početni sastav 5% B preko 20 C.V. (zapremina kolone), zatim 5% B do 70% B u okviru 60 C.V. Sastav je držan za 15 C.V. na 95% B, a zatim se vratio na 5% B u 5 C.V. i drži se na 5% B za 10 C.V. Ukupno vreme gradijenta je 120 C.V. Protok 6,0 mL/min. Opseg detekcije talasnih dužina: 254 nm. Kolona: Agilent AKS1372-1 SF10-5.5gC8.
[0568] Priprema HPLC: Tehnološka hromatografija ultra-visoke performanse (UPLC) ultra-visokih performansi izvedena je na Phenomenek Gemini NKS 5µ C-18 kolonama dimenzija: 150 x 4,6 mm za analizu i 150 x 21,20 mm za pripremni rad. Svi UPLC eksperimenti su izvedeni sa uslovima gradijenta. Korišćeni eluenti su bili rastvarač A (H2O sa 0.1% mravljom kiselinom) i rastvarač B (CH3CN sa 0.1% mravljom kiselinom). Korišćeni protok iznosili su 1,0 ml / min za analitičke i 20,0 ml / min za pripremne HPLC. Detekcija je bila 254 i 280 nm.
Sinteza intermedijera 12
[0569]
(a) 1',3'-Bis[2-metoksi-4-(metoksikarbonil)fenoks]propan (3)
[0570] Dijazopropil azodikarboksilat (71,3 mL, 73,2 g, 362 mmol) se dodaje kapanjem tokom 60 minuta rastvoru metil vanilata 2 (60.0 g, 329 mmol) i Ph3P (129.4 g, 494 mmol) u anhidrovanom THF (800 mL) na 0-5 ° C (led/aceton) u atmosferi azota. Reakciona smeša je ostavljena da se meša na 0-5°C u toku dodatnih sat vremena, nakon čega je dodan rastvor 1,3-propandiola (11.4 ml, 12.0 g, 158 mmol) u THF (12 mL) tokom perioda od 20 min. Reakciona smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i meša 5 dana. Dobijeni beli talog 3 je sakupljen vakuum filtracijom, ispran sa THF i osušen u vakuumskom sušilicom do konstantne težine. Prinos = 54.7 g (84% na bazi 1,3- propandiola). Zadovoljavajuća čistoća prema LC/MS (3.20 min (ES+) m/z (relativni intenzitet) 427 ([M Na]<+>, 10);<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,64 (dd, 2H, J = 1,8, 8,3 Hz), 7,54 (d, 2H, J = 1,8 Hz), 6,93 (d, 2H, J = 8,5 Hz), 4,30 (t, 4H, J = 6,1 Hz), 3,90 (s, 6H), 3,89 (s, 6H), 2,40 (p, 2H, J = 6,0 Hz).
(b) 1',3'-Bis[2- metoksi -4-( metoksikarbonil)-5-nitrofenoks]propan (4)
[0571] Čvrsti Cu(NO3)2,3H2O (81,5 g, 337,5 mmol se polako dodaje u mešanu suspenziju bis-estra 3 (54,7 g, 135 mmol) u anhidrid sirćetne kiseline (650 ml) na 0-5°C (led/aceton). Reakciona smeša je ostavljena da se meša 1 čas na 0-5°C i zatim ostavi da se zagreje do sobne temperature. U ovoj fazi je primećena blaga egzoterma (oko 40-50°C), praćena zgušnjavanjem smeše i evolucijom NO2. Dodat je dodatni sirćetni anhidrid (300 mL) i reakciona smeša je ostavljena da se meša 16 sati na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je sipana na led (~ 1,5 L), mešana i dopuštena da se vrati na sobnu temperaturu. Dobijeni žuti talog je sakupljen vakuum filtracijom i osušen u eksikatoru da bi se dobilo željeno bis-nitro jedinjenje 4 kao žuta čvrsta supstanca. Prinos = 66,7 g (100%). Zadovoljavajuća čistoća prema LC/MS (3,25 min (ES+) m/z (relativni intenzitet) 517 ([M Na]<+>, 40);<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,49 (s, 2H), 7,06 (s, 2H), 4,32 (t, 4H, J = 6,0 Hz), 3,95 (s, 6H), 3,90 (s, 6H), 2,45-2,40 (m, 2H).
(c) 1 ', 3'-Bis(4-karboksi-2-metoksi-5-nitrofenoksi) propan (5)
[0572] Suspenzija metil estra 4 (66,7 g, 135 mmol) u THF (700 mL) tretirana je sa 1N NaOH (700 mL) i reakciona smeša je ostavljena da se snažno meša na sobnoj temperaturi. Posle 4 dana mešanja, suspenzija postaje tamno obojeni rastvor koji je podvrgnut rotacionom isparavanju pod sniženim pritiskom da bi se uklonio THF. Dobijeni vodeni ostatak je zakiseljen do pH 1 sa koncentrovanim HCI i bezbojni precipitat 5 je sakupljen i temeljno osušen u vakuumskoj pećnici (50°C). Prinos = 54,5 g (87%). Zadovoljavajuća čistoća prema LC/MS (2,65 min (ES+) m/z (relativni intenzitet) 489 ([M Na]<+>, 30));<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,62 (s, 2H), 7,30 (s, 2H), 4,29 (t, 4H, J = 6,0 Hz), 3,85 (s, 6H), 2,30-2,26 (m, 2H).
(d) 1,1 '- [[(propan-1,3-diil)dioksi]bis[(5-metoksi-2-nitro-1,4-fenilen)karbonil]]bis[(2S,4R)hidroksipirolidin-2-karboksilat] (6)
[0573] U mešanu suspenziju nitrobenzojeve kiseline 5 (43 g, 92,3 mmol) i DMF (6 mL) u anhidrovanom DCM (600 mL) dodat je oksalilhlorid (24,5 mL, 35,6 g, 281 mmol). Nakon inicijalnog penušanja, suspenzija za reakciju postaje rastvor i smeša je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi 16 sati. Pretaranje u kiselinski hlorid potvrđeno je tretiranjem uzorka reakcione smeše sa MeOH, a dobijeni bis-metil estar je primećen pomoću LC/MS. Većina rastvarača je uklonjena isparavanjem pod sniženim pritiskom; dobijeni koncentrovani rastvor je ponovo rastvoren u minimalnoj količini suvog DCM i triturisan sa dietil etrom. Dobijeni žuti talog je sakupljen filtriranjem, ispran hladnim dietil etrom i osušen 1 sat u vakuumskoj pećnici na 40°C. Čvrsti kiseli horid se doda u obrocima tijekom 25 minuta u mješanu suspenziju (2S, 4R)-metil-4-hidroksipirolidin-2-karboksilat hidrohlorida (38,1 g, 210 mmol) i TEA (64,5 mL, g, 463 mmol) u DCM (400mL) na -40°C (suvi led/CH3CN). Neposredno, reakcija je završena, kao što je ocenjeno prema LC/MS (2,47 min (ES ) m/z (relativni intenzitet) 721 ([M H]<+>, 100). Smeša se razblaži sa DCM (200 mL) i opere sa 1N HCl (300 mL), zasićenim NaHCO3(300 mL), rastvorom soli (400 mL), osuši (MgS04), filtrira i rastvarač ispari u vakumu da se dobije čist proizvod 6 kao čvrsta narandžasta supstanca (66,7 g, 100%). [α]<22>D= -46,1° (c = 0,47, CHCl3);<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) (rotameri) δ 7,63 (s, 2H), 6,82 (s, 2H), 4,79-4,72 (m, 2H), 4,49-4,28 (m, 6H), 3,96 (s, 6H), 3,79 (s, 6H), 3,46-3,38 (m, 2H), 3,02 (d, 2H, J = 11,1 Hz), 2,48-2,30 (m, 4H), 2,29-2,04 (m, 4H);<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) (rotameri) δ 172,4, 166,7, 154,6, 148,4, 137,2, 127,0, 109,7, 108,2, 69,7, 65,1, 57,4, 57,0, 56,7, 52,4, 37,8, 29,0; IR (ATR, CHCl3) 3410 (br), 3010, 2953, 1741, 1622, 1577, 1519, 1455, 1429, 1334, 1274, 1211, 1177, 1072, 1050, 1008, 871 cm<-1>; MS (ES<+>) m/z (relativni intenzitet) 721 ([M H]<+>, 47), 388 (80); HRMS [M H]<+>teoretski C31H36N4O16m/z 721,2199, found (ES<+>) m/z 721,2227.
(e) 1,1 '- [[(propan-1,3-diil)dioksi]bis(11aS,2R)-2-(hidroksi)-7-metoksi-1,2,3,10,11,11a-heksahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]-benzodiazepin-5,11-dion] (7)
[0574]
Metod A: Rastvoru nitroestra 6 (44 g, 61,1 mmol) u MeOH (2,8 L) dodat je sveže nabavljen Ranei® nikl (~ 50 g ~ 50% gnojiva u H2O) i anti-bumping granule u 5L 3-vrata menzuri sa okruglim dnom. Smeša je zagrevana pod refluksom, a zatim je kapanjem rastvoren rastvor hidrazin hidrata (21,6 mL, 22,2 g, 693 mmol) u MeOH (200 mL), pri čemu je primećena snažno penušanje. Kada je dodavanje završeno (~ 45 minuta) pažljivo je dodan dodatni Ranei® nikl dok ne prestane penušanje, a početna žuta boja reakcione mešavine je ispuštena. Smeša je zagrevana na refluksu još 5 min, pri čemu je reakcija bila potpuna TLC (90:10 v/v CHCl3/MeOH) i LC/MS (2,12 min (ES ) m/z (relativni intenzitet ) 597 ([M H] , 100)). Reakciona smeša se odmah prebaci kroz sinter levak koji sadrži celit sa usisavanjem u vakuumu. Zapremina filtrata je smanjena isparavanjem u vakuumu, pri čemu se formirao bezbojni talog koji je sakupljen filtracijom i osušen u vakuumskom sušiliku da bi se dobilo 7 (31 g, 85%). [α]<27>D= 404° (c = 0,10, DMF);<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10,2 (s, 2H, NH), 7,26 (s, 2H), 6,73 (s, 2H), 5,11 (d, 2H, J = 3,98 Hz, OH), 4,32-4,27 (m, 2H), 4,19-4,07 (m, 6H), 3,78 (s, 6H), 3,62 (dd, 2H, J = 12,1, 3,60 Hz), 3,43 (dd, 2H, J = 12,0, 4,72 Hz), 2,67-2,57 (m, 2H), 2,26 (p, 2H, J = 5,90 Hz), 1,99-1,89 (m, 2H);<13>C NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ 169,1, 164,0, 149,9, 144,5, 129,8, 117,1, 111,3, 104,5, 54,8, 54,4, 53,1, 33,5, 27,5; IR (ATR, čist) 3438, 1680, 1654, 1610, 1605, 1516, 1490, 1434, 1379, 1263, 1234, 1216, 1177, 1156, 1115, 1089, 1038, 1018, 952, 870 cm<-1>; MS (ES<+>) m/z (relativni intenzitet) 619 ([M Na]<+>, 10), 597 ([M H]<+>, 52), 445 (12), 326 (11); HRMS [M H]<+>teoretski C29H32N4O10m/z 597,2191, pronađeno (ES<+>) m/z 597,2205.
Metod B: Suspenziji 10% Pd / C (7,5 g, 10% w / w) u DMF (40 mL) je dodat rastvor nitroestera 6 (75 g, 104 mmol) u DMF (360 mL). Suspenzija se hidrogenira u Parrovoj aparaturi za hidriranje tokom 8 sati. Napredak reakcije je nadgledan prema LC/MS nakon što je zaustavljanje vodonika prestalo. Čvrsti Pd/C je uklonjen filtracijom i filtrat je koncentrisan rotacionim uparavanjem pod vakuumom (ispod 10 mbara) na 40°C kako bi se dobilo tamno ulje sa tragovima DMF i rezidualnog uglja. Ostatak je rastvoren u EtOH (500 mL) na 40°C na vodenom kupatilu (rotaciono kupatilo za isparavanje), a dobijena suspenzija se filtrira kroz celit i ispere etanolom (500 mL) da bi se dobio čist filtrat. U rastvor je dodat hidrazin hidrat (10 mL, 321 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na refluksu. Posle 20 minuta je zabeleženo nastanak belog taloga i dozvoljeno je da se refluks nastavi još 30 minuta. Smeša je ostavljena da se ohladi na sobnu temperaturu, a talog je dobijen filtriranjem, ispran dietil etrom (2:1 zapremina taloga) i osušen u vakuumskom eksikatoru da bi se dobio 7 (50 g, 81%). Analitički podaci za metod B: Identični onima dobijenim za metod A (optička rotacija,<1>H NMR, LC/MS and TLC).
(f) 1,1'-[[(propan-1,3-diil)dioksi]bis(11aS, 2R)-2-(terc-butildimetilsililoksi)-7-metoksi-1,2,3,10,11,11a-heksahidro5H-pirolo[2,1-c][1,4]-benzodiazepin-5,11-dion] (8)
[0575] TBSCI (27,6 g, 182,9 mmol) i imidazol (29,9 g, 438,8 mmol) su dodati u zamućeni rastvor tetralaktama 7 (21,8 g, 36,6 mmol) u anhidrovanom DMF 400 mL) na 0°C (led/aceton). Smeša je ostavljena da se meša pod atmosferom azota u trajanju od 3 sata, nakon čega je reakcija ocenjena kao kompletna prema LC / MS (3,90 min (ES ) m / z (relativni intenzitet) 825 ([M H]<+>, 100). Reakciona smeša je sipana na led (~ 1,75 L) i ostavljena da se zagreje na sobnoj temperaturi uz mešanje. Dobijeni beli tlog je sakupljen vakuumskom filtriranjem, ispran sa H2O, dietil etrom i osušen u vakuumskom sušiliku da bi se dobilo čisto 8 (30,1 g, 99%). [α]<23>D= 234° (c = 0,41, CHCl3);<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8,65 (s, 2H, NH), 7,44 (s, 2H), 6,54 (s, 2H), 4,50 (p, 2H, J = 5,38 Hz), 4,21-4,10 (m, 6H), 3,87 (s, 6H), 3,73-3,63 (m, 4H), 2,85-2,79 (m, 2H), 2,36-2,29 (m, 2H), 2,07-1,99 (m, 2H), 0,86 (s, 18H), 0,08 (s, 12H);<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 170,4, 165,7, 151,4, 146,6, 129,7, 118,9, 112,8, 105,3, 69,2, 65,4, 56,3, 55,7, 54,2, 35,2, 28,7, 25,7, 18,0, -4,82 and -4,86; IR (ATR, CHCl3) 3235, 2955, 2926, 2855, 1698, 1695, 1603, 1518, 1491, 1446, 1380, 1356, 1251, 1220, 1120, 1099, 1033 cm<-1>; MS (ES<+>) m/z (relativni intenzitet) 825 ([M H]<+>, 62), 721 (14), 440 (38); HRMS [M H]<+>teoretski C41H60N4O10Si2m/z 825,3921, pronađeno (ES<+>) m/z 825,3948.
(g) 1,1'-[[(propan-1,3-diil)dioksi]bis(11aS,2R)-2-(terc-butildimetilsililoksi)-7-metoksi-10-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1,2,3,10,11,11a-heksahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4 -benzodiazepin-5,11-dion] (9)
[0576] Rastvor n-BuLi (68,3 mL 1,6 M rastvora u heksanu, 109 mmol) dodat je kapanjem uz mešanje suspenziji tetralaktama 8 (30,08 g, 36,4 mmol) u anhidrovanom THF 600 mL) na -30°C (suvi led/etilen glikol) u atmosferi azota. Reakciona smeša je ostavljena da se meša na ovoj temperaturi 1 sat (sada crvenkasto narandžaste boje), u kojoj je dodat kap po kap rastvor SEMCI (19,3 ml, 18,2 g, 109 mmol) u anhidrovanom THF (120 ml). Reakciona smeša je ostavljena da se lagano zagreje do sobne temperature i mešana 16 sati u atmosferi azota. Reakcija je ocenjena kao što je procenjeno prema TLC (EtOAc) i LC/MS (4,77 min (ES+) m/z (relativni intenzitet) 1085 ([M H]<+>, 100). THF je uklonjen isparavanjem u vakuumu i dobijeni ostatak je rastvoren u EtOAc (750 mL), ispran H2O (250 mL), slanim rastvorom (250 mL), osušen (MgSO4) filtriran i uparen u vakuumu da bi se dobilo sirovo tetralaktam 9 koji je zaštićen od N10-SEM kao ulje (max<m>39,5 g, 100%). Proizvod se prenosi na sledeći korak bez prečišćavanja. [α]<23>D= 163° (c = 0,41, CHCl3);<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,33 (s, 2H), 7,22 (s, 2H), 5,47 (d, 2H, J= 9,98 Hz), 4,68 (d, 2H, J = 9,99 Hz), 4,57 (p, 2H, J = 5,77 Hz), 4,29-4,19 (m, 6H), 3,89 (s, 6H), 3,79-3,51 (m, 8H), 2,87-2,81 (m, 2H), 2,41 (p, 2H, J = 5,81 Hz), 2,03-1,90 (m, 2H), 1,02-0,81 (m, 22H), 0,09 (s, 12H), 0,01 (s, 18H);<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 170,0, 165,7, 151,2, 147,5, 133,8, 121,8, 111,6, 106,9, 78,1, 69,6, 67,1, 65,5, 56,6, 56,3, 53,7, 35,6, 30,0, 25,8, 18,4, 18,1, -1,24, -4,73; IR (ATR, CHCl3) 2951, 1685, 1640, 1606, 1517, 1462, 1433, 1360, 1247, 1127, 1065 cm<-1>; MS (ES<+>) m/z (relativni intenzitet) 1113 ([M Na]<+>, 48), 1085 ([M H]<+>, 100), 1009 (5), 813 (6); HRMS [M H]<+>teoretski C53H88N4O12Si4m/z 1085,5548, pronađeno (ES<+>) m/z 1085,5542.
(h) 1,1-[[(Propan-1,3-diil)dioksi]bis(11aS, 2R)-2-hidroksi-7-metoksi-10-((2-(trimetilsilil) etoksi)metil),2,3,10,11,11a-heksahidro-5H-pirolo[2,1-c] [1,4]-benzodiazepin-5,11-dion] (10)
[0577] Rastvor TBAF (150 mL 1,0 M rastvora u THF, 150 mmol) dodat je u mešani rastvor sirove bis-silil etra 9
[84,0 g (max<m>56,8 g), 52,4 mmol] u THF (800 mL) na sobnoj temperaturi. Nakon mešanja u trajanju od 1 sata, analiza reakcione smeše TLC (95: 5 v/v CHCl3/MeOH) pokazala je završetak reakcije. THF je uklonjen isparavanjem pod sniženim pritiskom na sobnoj temperaturi, a nastali ostatak je rastvoren u EtOAc (500 mL) i ispran sa NH4Cl (300 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (60 mL), osušeni (MgSO4), filtrirani i ispareni pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirovi proizvod. Prečišćavanje fleš hromatografijom (gradijentna elucija: 100% CHCl3do 96: 4 v/v CHCl3/MeOH) dala je čist tetralaktam 10 kao bela pena (36,0 g, 79%). LC / MS 3,33 min (ES ) m/z (relativni intenzitet) 879 ([M Na]<+>, 100), 857 ([M H]<+>, 40); [α]<23>D= 202° (c = 0,34, CHCl3);<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,28 (s, 2H), 7,20 (s, 2H), 5,44 (d, 2H, J = 10,0 Hz), 4,72 (d, 2H, J = 10,0 Hz), 4,61-4,58 (m, 2H), 4,25 (t, 4H, J = 5,83 Hz), 4,20-4,16 (m, 2H), 3,91-3,85 (m, 8H), 3,77-3,54 (m, 6H), 3,01 (br s, 2H, OH), 2,96-2,90 (m, 2H), 2,38 (p, 2H, J = 5,77 Hz), 2,11-2,05 (m, 2H), 1,00-0,91 (m, 4H), 0,00 (s, 18H);<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 169,5, 165,9, 151,3, 147,4, 133,7, 121,5, 111,6, 106,9, 79,4, 69,3, 67,2, 65,2, 56,5, 56,2, 54,1, 35,2, 29,1, 18,4, -1,23; IR (ATR, CHCl3) 2956, 1684, 1625, 1604, 1518, 1464, 1434, 1361, 1238, 1058, 1021 cm<-1>; MS (ES<+>) m/z (relativni intenzitet) 885 ([M 29]<+>, 70), 857 ([M H]<+>, 100), 711 (8), 448 (17); HRMS [M H]<+>teoretski C41H60N4O12Si2m/z 857,3819, pronađeno (ES<+>) m/z 857,3826.
(i) 1,1'-[[(propan-1,3-diil)dioksi]bis(11aS)-7-metoksi-2-okso-10-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)2,3,10,11,11aheksahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]-benzodiazepin-5,11-dion] (11)
[0578] Diol 10 (25,6 g, 30 mmol, 1 ekv.), NaOAc (6,9 g, 84 mmol, 2,8 ekv.) i TEMPO (188 mg, 1,2 mmol, 0,04 ekv.) su bili rastvoren u DCM (326 mL) pod Ar. Ovo se ohladi na -8°C (unutrašnja temperatura) a TCCA (9,7 g, 42 mmol, 1,4 ekv.) je u posudama dodat u toku 15 minuta. TLC (EtOAc) i LC / MS [3,60 min. (ES ) m/z (relativni intenzitet) 854,21 ([M H]<+>, 40), (ES-) m/z (relativni intenzitet) 887,07 ([M-H 10)] nakon 30 minuta je pokazala da je reakcija završena. Dodato je hladno DCM (200 mL) i smeša je filtrirana kroz sloj Celita pre ispiranja sa rastvorom zasićenog natrijum hidrogen karbonata/natrijum tiosulfata (1:1 v/v, 200 mL x 2). Organski sloj je osušen sa MgSO4, filtriran i rastvarač je uklonjen u vakuumu da bi se dobila žuto/narandžasta sunđerasta masa (25,4 g, 99%). LC / MS [3,60 min. (ES ) m/z (relativni intenzitet) 854,21 ([M H]<+>, 40); [α]<20>D= 291° (c = 0,26, CHCl3);<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,32 (s, 2H), 7,25 (s, 2H), 5,50 (d, 2H, J = 10,1 Hz), 4,75 (d, 2H, J = 10,1 Hz), 4,60 (dd, 2H, J = 9,85, 3,07 Hz), 4,31-4,18 (m, 6H), 3,89-3,84 (m, 8H), 3,78-3,62 (m, 4H), 3,55 (dd, 2H, J = 19,2, 2,85 Hz), 2,76 (dd, 2H, J = 19,2, 9,90 Hz), 2,42 (p, 2H, J = 5,77 Hz), 0,98-0,91 (m, 4H), 0,00 (s, 18H);<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 206,8, 168,8, 165,9, 151,8, 148,0, 133,9, 120,9, 111,6, 107,2, 78,2, 67,3, 65,6, 56,3, 54,9, 52,4, 37,4, 29,0, 18,4, -1,24; IR (ATR, CHCl3) 2957, 1763, 1685, 1644, 1606, 1516, 1457, 1434, 1360, 1247, 1209, 1098, 1066, 1023 cm<-1>; MS (ES<+>) m/z (relativni intenzitet) 881 ([M 29]<+>, 38), 853 ([M H]<+>, 100), 707 (8), 542 (12); HRMS [M H]<+>teoretski C41H56N4O12Si2m/z 853,3506, pronađeno (ES<+>) m/z 853,3502.
(j) 1,1'-[[(propan-1,3-diil)dioksi]bis(11aS)-7-metoksi-2-[[(trifluorometil)sulfonil]oksi]-10-((2-(trimetilsilil )etoksi) metil) -1,10,11,11a-tetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]-benzodiazepin-5,11-dion] (12)
[0579] Anhidrovan 2,6-lutidin (5,15 mL, 4,74 g, 44,2 mmol) je ubrizgan jednim delom u rastvor bis-ketona 11 (6,08 g, 7,1 mmol) u suvom mešaju u suvom DCM (180 mL) na -45°C (suvi led/acetonitril) u atmosferi azota. Anhidrovan triflicni anhidrid, uzet iz sveže otvorene ampule (7,2 mL, 12,08 g, 42,8 mmol), ubrizgava se brzo u kapima, uz održavanje temperature na -40°C ili niže. Reakciona smeša je ostavljena da se meša na -45°C tokom 1 sata, pri čemu je TLC (50/50 v/v n-heksan / EtOAc) otkrio kompletnu potrošnju polaznog materijala. Smeša hladne reakcije odmah je razblažen DCM (200 mL) i, uz snažno tresanje, oprana vodom (1 x 100 mL), 5% rastvorom limunske kiseline (1 x 200 mL) zasićenim NaHCO3(200 mL), slanim rastvorom (100 mL) i osušena (MgSO4). Filtriranje i isparavanje rastvarača pod sniženim pritiskom dalo je sirovi proizvod koji je prečišćen fleš hromatografijom na koloni (gradijentno eluiranje: 90:10 v/v n-heksan/EtOAc do 70:30 v/v n-heksan/EtOAc) bis-enol triflata 12 kao žuta pena (5,5 g, 70%). LC/MS 4,32 min (ES+) m/z (relativni intenzitet) 1139 ([M Na]<+>, 20); [α]<24>D= 271° (c = 0,18, CHCl3);<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,33 (s, 2H), 7,26 (s, 2H), 7,14 (t, 2H, J = 1,97 Hz), 5,51 (d, 2H, J = 10,1 Hz), 4,76 (d, 2H, J = 10,1 Hz), 4,62 (dd, 2H, J = 11,0, 3,69 Hz), 4,32-4,23 (m, 4H), 3,94-3,90 (m, 8H), 3,81-3,64 (m, 4H), 3,16 (ddd, 2H, J = 16,3, 11,0, 2,36 Hz), 2,43 (p, 2H, J= 5,85 Hz), 1,23-0,92 (m, 4H), 0,02 (s, 18H);<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 167,1, 162,7, 151,9, 148,0, 138,4, 133,6, 120,2, 118,8, 111,9, 107,4, 78,6, 67,5, 65,6, 56,7, 56,3, 30,8, 29,0, 18,4, -1,25; IR (ATR, CHCl3) 2958, 1690, 1646, 1605, 1517, 1456, 1428, 1360, 1327, 1207, 1136, 1096, 1060, 1022, 938, 913 cm<-1>; MS (ES<+>) m/z (relativni intenzitet) 1144 ([M 28]<+>, 100), 1117 ([M H]<+>, 48), 1041 (40), 578 (8); HRMS [M H]<+>teoretski C43H54N4O16Si2S2F6m/z 1117,2491, pronađeno (ES<+>) m/z 1117,2465.
Primer 1
[0580]
(a) (S)-8-(3-(((S)-2-(4-aminofenil)-7-metoksi-5, 11-diokso-10-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-5,10,11,11a-tetrahidro-1H-benzo[e]pirolo[1,2-a][1,4]diazepin-8-il)oksi)propoksi)-7-metoksi-5,11-diokso-10-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-5,10,11,11a-tetrahidro-1H-benzo[e]pirolo[1,2-a][1,4]diazepin-2-il trifluorometansulfonat (13)
[0581] Pd(PPh3)4(116,9 mg, 0,101 mmol) je dodat mešanoj smeši bis-enol triflata 12 (5,65 g, 5,06 mmol), estra pinakola 4-aminofenilboronske kiseline (1 g, 4,56 mmol), Na2CO3(2,46 g, 23,2 mmol), MeOH (37 mL), toluen (74 mL) i voda (37 mL). Reakciona smeša je ostavljena da se meša na 30°C u atmosferi azota tokom 24 sata, nakon čega je potrošen sav boronski estar. Reakciona smeša je zatim isparen dok nije bila suva pre nego što je ostatak prenet u EtOAc (150 ml) i isprana sa H2O (2 x 100 mL), slanim rastvorom (150 mL), osušena (MgSO4), filtrirana i isparena pod redukovanim pritiskom da se dobije sirovi proizvod. Prečišćavanje fleš hromatografijom (gradijentna elucija: 80:20 v/v Heksan/EtOAc to 60:40 v/v Heksan/EtOAc) daje proizvod 13 u obliku žućkaste pene (2,4 g, 45%). LC/MS 4,02 min (ES+) m/z (relativni intenzitet) 1060,21 ([M H]<+>, 100);<1>H-NMR: (CDCl3, 400 MHz) δ 7,40 (s, 1H), 7,33 (s, 1H), 7,27 (bs, 3H), 7,24 (d, 2H, J = 8,5 Hz), 7,15 (t, 1H, J = 2,0 Hz), 6,66 (d, 2H, J = 8,5 Hz), 5,52 (d, 2H, J = 10,0 Hz), 4,77 (d, 1H, J = 10,0 Hz), 4,76 (d, 1H, J = 10,0 Hz), 4,62 (dd, 1H, J = 3,7, 11,0 Hz), 4,58 (dd, 1H, J = 3,4, 10,6 Hz), 4,29 (t, 4H, J = 5,6 Hz), 4,00-3,85 (m, 8H), 3,80 - 3,60 (m, 4H), 3,16 (ddd, 1H, J = 2,4, 11,0, 16,3 Hz), 3,11 (ddd, 1H, J = 2,2, 10,5, 16,1 Hz), 2,43 (p, 2H, J = 5,9 Hz), 1,1-0,9 (m, 4H), 0,2 (s, 18H).<13>C-NMR: (CDCl3, 100 MHz) δ 169,8, 168,3, 164,0, 162,7, 153,3, 152,6, 149,28, 149,0, 147,6, 139,6, 134,8, 134,5, 127,9, 127,5, 125,1, 123,21, 121,5, 120,5, 120,1, 116,4, 113,2, 108,7, 79,8, 79,6, 68,7, 68,5, 67,0, 66,8, 58,8, 58,0, 57,6, 32,8, 32,0, 30,3, 19,7, 0,25.
(b) (S)-2-(4-Aminofenil)-8-(3-(((S)-2-ciklopropil-7-metoksi-5,11-diokso-10-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-5,10,11,11a-tetrahidro-1H-benzo[e]pirolo[1,2-a][1,4]diazepin-8-il)oksi)propoksi)-7-metoksi-10-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-benzo[e]pirolo[1,2-a][1,4]diazepin-5,11(10H,11aH)-dion (14)
[0582] Trifenilarzin (0,24 g, 0,8 mmol), srebro (I) oksid (1,02 g, 4,4 mmol), ciklopropilboronska kiselina (0,47 g, 5,5 mmol) i početni materijal 13 (1,15 g, 1,1 mmol) rastvoreni su u dioksanu (30 mL) pod atmosferom argona. Triosnovni kalijum-fosfat (2,8 g, 13,2 mmol) melje se tučkom i malterom i brzo dodaje u reakcionu smešu. Reakciona smeša je evakuisana i isprana argonom 3 puta i zagrevana do 71 °C. Dodat je paladijum (II) bis (benzonitril hlorid) (84 mg, 0,22 mmol) i reakciona posuda je evakuisana i isprana argonom 3 puta. Posle 10 minuta uzet je mali uzorak za analizu pomoću TLC (80:20 v/v etil acetat/heksan) i LC/MS. Posle 30 minuta reakcija je završena (LC/MS analiza je pokazala potpunu potrošnju početnog materijala) i reakcija je filtrirana kroz celit, a filter podloga je isparana etil acetatom (400 mL). Filtrat je ispran vodom (2 x 200 mL) i slanim rastvorom (2 x 200 mL). Organski sloj je osušen sa MgSO4,filtriran i rastvarač je uklonjen u vakuumu. Prečišćavanjem hromatografijom na koloni silika gela (30:70 v/v heksan/etil acetat) dobijen je proizvod 14 u obliku narandžasto-žute čvrste supstance (0,66 g, 63%). Postupak 1, LC/MS 3,85 min (ES+) m/z (relativni intenzitet) 952,17 ([M H]<+>, 100);<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,36 (d, 2H, J = 8,4 Hz), 7,30 (s, 1H), 7,25 - 7,19 (m, 4H), 6,68 (s, 1H), 6,62 (d, 2H, J = 8,4 Hz), 5,49 (dd, 2H, J = 5,6, 10,0 Hz), 4,73 (pribl. t, 2H, J = 10,8 Hz), 4,54 (dd, 1H, J = 3,2, 10,4 Hz), 4,40 (dd, 1H, J = 3,2, 10,4 Hz), 4,29 - 4,23 (m, 4H), 3,91 - 3,85 (m, 7H), 3,80 - 3,71 (m, 2H), 3,70 - 3,61 (m, 2H), 3,38 - 3,32 (m, 1H), 3,12 - 3,01 (m, 1H), 2,50 - 2,69 (m, 1H), 2,40 (q, 2H, J = 5,6 Hz), 1,50 - 1,43 (m, 1H), 0,99 - 0,71 (m, 6H), 0,54 - 0,59 (m, 2H), 0,00 (s, 18H) ppm.
(c) (S)-2-(4-Aminofenil)-8-(3-(((S)-2-ciklopropil-7-metoksi-5-okso-5,11a-dihidro-1H-benzo[e]pirolo[1,2-a][1,4]diazepin-8-il)oksi)propoksi)-7-metoksi-1H-benzo[e]pirolo[1,2-a][1,4]diazepin-5(11aH)-on (15)
[0583] SEM dilaktam 14 (0,66 g, 0,69 mmol) je rastvoren u THF (23 mL) i ohlađen na -78 °C u atmosferi argona. Rastvor Super-Hydride® (1,7 ml, 1 M u THF) dodat je u vidu kapi tokom 5 minuta dok se nadgleda temperatura. Posle 20 minuta uzet je mali uzorak i ispran vodom za LC/MS analizu. Dodata je voda (50 mL) i uklonjena je ledena kupka. Organski sloj je ekstrahovan i ispran fiziološkim rastvorom (60 mL). Kombinovani vodeni slojevi su isprani sa CH2Cl2/MeOH (90/10 v/v) (2 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni sa MgSO4,filtrirani i rastvarač je uklonjen u vakuumu. Sirovi proizvod je rastvoren u MeOH (48 mL), CH2Cl2(18 mL) i vodi (6 mL) i dodato je dovoljno silika gela da se dobije gusta suspenzija. Nakon 5 dana mešanja, suspenzija je filtrirana kroz sinterovani levak i isprana sa CH2Cl2/MeOH (9:1) (∼ 200 mL) sve dok se proizvod nije prestao eluirati. Organski sloj je ispran sa slanim rastvorom (2 x 70 mL), osušen sa MgSO4, filtriran i rastvarač je uklonjen u vakuumu. Prečišćavanje hromatografijom na koloni silika gela (100% CHCl3do 96/4 v/v CHCl3/MeOH) dao je proizvod 15 kao žutu čvrstu supstancu (302 mg, 66%). Postupak 1, LC/MS 2,42 min (ES+) m/z (relativni intenzitet) 660,74 ([M H]<+>, 30);<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,86 (d, 1H, J = 3,6 Hz), 7,78 (d, 1H, J = 3,6 Hz), 7,58 - 7,44 (m, 3H), 7,34 - 7,20 (m, 3H), 6,88 - 6,66 (m, 4H), 4,35 - 4,15 (m, 6H), 3,95 - 3,75 (m, 7H), 3,39 - 3,22 (m, 1H), 3,14 - 3,04 (m, 1H), 2,93 -2,85 (m, 1H), 2,46 - 2,36 (m, 2H), 1,49 - 1,41 (m, 1H), 0,80 - 0,72 (m, 2H), 0,58 - 0,51 (pribl. s, 2H) ppm.
(d) Alil ((2S)-1-(((2S)-1-((4-(8-(3-((2-ciklopropil-7-metoksi-5-okso-5,11a-dihidro-1H-benzo[e]pirolo[1,2-a][1,4]diazepin-8-il)oksi)propoksi)-7-metoksi-5-okso-5,11a-dihidro-1H-benzo[e]pirolo[1,2-a][1,4]diazepin-2-il)fenil)amino)-1-oksopropan-2-il)amino)-3-metil-1-oksobutan-2-il)karbamat (16)
[0584] U degasiranoj flašici sa okruglim dnom napunjenoj argonom, HO-Ala-Val-alok (149,6 mg, 0,549 mmol) i EEDK (135,8 mg, 0,549 mmol) rastvoreni su u smeši suvog CH2Cl2/MeOH (5 mL). Posuda je umotana u aluminijumsku foliju i reakciona smeša je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi 1 sat pre dodavanja početnog materijala 15 (302 mg, 0,457 mmol). Reakciona smeša je ostavljena da se meša još 40 sati na sobnoj temperaturi pre nego što su isparljive materije uklonjene rotacionim isparavanjem pod redukovanim pritiskom (reakcija je praćena LC/MS, RT početni materijal 2,32 min, (ES<+>660,29 ([M+H]<+>, 100)). Sirovi proizvod je direktno prečišćen hromatografskom kolonom na silika gelu (100% CHCl3to 90/10 v/v CHCl3/MeOH) da bi se dobio čisti proizvod (16) sa 42% prinosa (174 mg). Postupak 2 LC/MS (2,70 min (ES+) m/z (relativni intenzitet) 914,73 ([M+H]<+>, 60), 660,43 (60), 184,31 (100)).
(e) (2S)-2-amino-N-((2S)-1-((4-(8-(3-((2-ciklopropil-7-metoksi-5-okso-5,11a-dihidro-1H-benzo[e]pirolo[1,2-a][1,4]diazepin-8-il)oksi)propoksi)-7-metoksi-5-okso-5,11a-dihidro-1H-benzo[e]pirolo[1,2-a][1,4]diazepin-2-il)fenil)amino)-1-oksopropan-2-il)-3-metilbutanamid (17)
[0585] Polazni materijal 16 (170 mg, 0,185 mmol) rastvoren je u suvom CH2Cl2(5 mL) u flašici sa okruglim dnom napunjenom argonom, pre nego što je dodat pirolidin (41 µL, 0,21 mmol). Flašica je pročišćena/napunjena tri puta argonom pre dodavanja Pd(PPh3)4(14 mg, 0,084 mmol) i ponovljena operacija ispiranja. Posle jednog sata, primećena je potpuna potrošnja početnog materijala (reakcija je praćena pomoću LC/MS) i u reakcionu smešu je dodat Et2O (50 mL) koja je ostavljena da se meša dok se sav proizvod ne raspadne iz rastvora. Čvrsta supstanca je filtrirana kroz sinterovani levak i isprana dva puta sa Et2O (2 x 25 mL). Posuda za sakupljanje je zamenjena i izolovana čvrsta supstanca je rastvorena u CHCl3(100 mL ili dok sav proizvod ne prođe kroz sinterovani levak). Isparljive materije su zatim uklonjene rotacionim isparavanjem pod redukovanim pritiskom da bi se dobio sirovi proizvod 17 koji je korišćen direktno u sledećem koraku (168 mg). LC/MS postupak 2 (2,70 min (ES+) m/z (relativni intenzitet) 830,27 ([M+H]<+>, 50), 660,13 (80), 171,15 (100)).
(f) N-((R)-1-(((S)-1-((4-((S)-8-(3-(((S)-2-ciklopropil-7-metoksi-5-okso-5,11a-dihidro-1H-benzo[e]pirolo[1,2-a][1,4]diazepin-8-il)oksi)propoksi)-7-metoksi-5-okso-5,11a-dihidro-1H-benzo[e]pirolo[1,2-a][1,4]diazepin-2-il)fenil)amino)-1-oksopropan-2-il)amino)-3-metil-1-oksobutan-2-il)-1-(3-(2,5-diokso-2,5-dihidro-1-il)propanamido)-3,6,9,12,15,18,21,24-oktaoksaheptakozan-27-amid (18)
[0586] Početni materijal 17 (154 mg, 0,185 mmol) i EDCI. HCl (110 mg, 0,185 mmol) rastvoreni su u suvom CH2Cl2(5 mL) u flašici sa okruglim dnom, pročišćenoj i napunjenoj argonom. Smeša je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi 1 sat pre dodavanja PEG8-maleimida (35,6 mg, 0,185 mmol) i reakciona smeša je mešana narednih 16 sati (ili dok reakcija nije završena, praćena pomoću LC/MS). Reakcioni rastvor je razblažen sa CH2Cl2(50 mL) i organske materije su isprane sa H2O (50 mL) i slanim rastvorom (50 mL) pre sušenja sa MgSO4, filtrirane i rastvarač je uklonjen rotacionim isparavanjem pod redukovanim pritiskom da bi se dobio sirovi proizvod. Prečišćavanjem na hromatografiji na koloni silika gela (100% CHCl3to 85/15 v/v CHCl3/MeOH) dobijen je željeni proizvod (135 mg), međutim uočeni su preostali tragovi PEG8-maleimida koji nije reagovao (LC/MS, 2,21 min, postupak 2). Automatizovana hromatografija na silika gelu reverzne faze (H2O/CH3CN) (videti opšte informacije za uslove) uspešno je uklonila nečistoću dajući čisti konačni proizvod (18, 37 mg čistog proizvoda počevši od 110 mg, 33%). Ukupni prinos = 17%. Postupak 2 LC/MS (2,58 min (ES+) m/z (relativni intenzitet) 1404,03 ([M+H]<+>, 20), 702,63 (100)).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,91 (t, J = 3,5 Hz, 1H), 7,80 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,54 - 7,50 (m, 2H), 7,45 (s, 1H), 7,39 - 7,31 (m, 2H), 6,87 (d, J = 10,5 Hz, 2H), 6,76 (s, 1H), 6,72 - 6,68 (m, 2H), 4,74 - 4,62 (m, 1H), 4,45 - 4,17 (m, 7H), 3,95 (s, 3H), 3,94 (s, 3H), 3,67 - 3,58 (m, 34H), 3,54 (m, 2H), 3,42 (dd, J = 10,2, 5,2 Hz, 2H), 3,16 - 3,07 (m, 1H), 2,92 (dd, J = 16,1, 4,1 Hz, 1H), 2,62 - 2,49 (m, 4H), 2,48 - 2,39 (m, 2H), 2,37 - 2,25 (m, 1H), 1,92 (s, 1H), 1,52 - 1,44 (m, 3H), 1,10 -0,93 (m, 6H), 0,79 (dd, J = 9,2, 5,3 Hz, 2H), 0,57 (dd, J = 9,2, 5,3 Hz, 2H), NH nisu posmatrani.
Primer 2
[0587]
1
(a) (R) -2-((R) -2-((((9H-fluoren-9-il)metoksi)karbonil)amino)-3-metilbutanamido)propanojske kiseline (20b)
[0588] HO-Ala-Val-H 20a (350 mg, 1,86 mmol) i Na2CO3(493 mg, 4,65 mmol) su rastvoreni u destilovanom H2O (15 mL) i smeša je ohlađena na 0°C pre dioksana (15 mL) dodat je delimični talog nastao od aminokiselinske soli. Rastvor Fmoc-Cl (504 mg, 1,95 mmol) u dioksanu (15 mL) je dodat ukapavanjem uz snažno mešanje tokom 10 minuta. Dobijena smeša je mešana na 0°C 2 sata pre uklanjanja iz ledene kupke i mešanje je održavano 16 sati. Rastvarač je uklonjen rotacionim uparavanjem pod sniženim pritiskom i ostatak je rastvoren u vodi (150 mL). PH je podešen od 9 do 2 sa 1N HCl i vodeni sloj je naknadno ekstrahovan sa EtOAc (3k100 mL). Kombinovane organske materije su isprane slanim rastvorom soli (100 mL), osušene sa MgSO4, filtrirane i hlapljine uklonjene rotacionim uparavanjem pod sniženim pritiskom kako bi se dobilo čisto HO-Ala-Val-Fmoc 20b (746 mg, 97% prinos). LC/MS 2,85 min (ES+) m/z (relativni intenzitet) 410,60 ;<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,79 (d, J=7,77 Hz, 2H), 7,60(d, J=7,77 Hz, 2H), 7,43(d, J=7,5 Hz, 2H), 7,34 (d, J=7,5 Hz, 2H), 6,30 (bs, 1H), 5,30 (bs, 1H), 4,71-7,56 (m, 1H), 4,54-4,36 (m, 2H), 4,08-3,91 (m, 1H), 2,21-2,07 (m, 1H), 1,50 (d, J=7,1 Hz, 3H), 1,06-0,90 (m, 6H).
(b) (9H-fluoren-9-il)metil((S)-3-metil-1-okso-1-(((S)-1-okso-1-((4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)amino)propan-2-il)amino)butan-2-il)karbamata (20)
[0589] Rastvoru HO-Ala-Val-Fmoc 20b (330 mg, 0,8 mmol), DCC (166 mg, 0,8) je dodat pinakol estar 4-aminofenilboronske kiseline (146,9 mg, 0,67 mmol) mmol) i DMAP (5 mg, kat.) u suvom DCM (8 mL) prethodno mešan tokom 30 minuta na sobnoj temperaturi u boci isparenom argonom. Reakciona smeša je zatim ostavljena da
2
se meša na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcijom su sledili LCMS i TLC. Reakciona smeša je razblažena sa CH2Cl2i organske materije isprane sa H2O i slanim rastvorom pre sušenja sa MgS04, filtrirane i rastvarač uklonjen rotacionim uparavanjem pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je osušen na silikagelskoj hromatografskoj koloni (Hekane / EtOAc, 6:4) i čist proizvod 20 je izolovan kao bela čvrsta supstanca sa 88% prinosom (360 mg).
(c) 8-(3-((2-(4-((S)-2-((S)-2-((((9H-fluoren-9-il)metoksi)karbonil)amino)-3-metilbutanamido)propanamido)fenil)-7-metoksi-5,11-diokso-10-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-5,10,11,11a-tetrahidro-1 H-benzo[e]pirolo[1,2-a][1,4]diazepin-8-il)oksi)propoksi)-7-metoksi-5,11-diokso-10-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-5,10,11,11a-tetrahidro-1H-benzo[e]pirolo[1,2-a][1,4]diazepin-2-il trifluorometansulfonat (21)
[0590] Bis-triflat 12 (2,03 g, 1,81 mmol), estar bornog pinakola (1 g, 1,63 mmol) i Na2CO3(881 mg, 8,31 mmol) rastvoreni su u smeši toluena/MeOH/H2O, 2:1:1 (40 mL). Reakciona flašica je pročišćena i napunjena argonom tri puta pre nego što je dodat tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (41 mg, 0,035 mmol) i reakciona smeša je zagrevana preko noći na 30 °C. Rastvarači su uklonjeni pod redukovanim pritiskom, a ostatak je rastvoren u H2O (100 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (3 x 100 mL). Kombinovane organske materije su isprane slanim rastvorom (100 mL), osušene sa MgSO4, filtrirane i isparljive materije uklonjene rotacionim isparavanjem pod redukovanim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografskom kolonom na silika gelu (heksan/EtOAc, 8:2 do 25:75) da bi se dobilo čisto 21 u prinosu od 33% (885 mg). LC/MS 3,85 min (ES+) m/z (relativni intenzitet) 1452,90 ;<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,78 - 7,16 (m, 17H), 7,13 (s, 1H), 6,51 - 6,24 (m, 1H), 5,51 (dd, J = 10,0, 5,1 Hz, 2H), 5,36 - 5,11 (m, 1H), 4,74 (dd, J = 10,1, 4,4 Hz, 2H), 4,70-4,53 (m, 2H), 4,47 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 4,37 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 4,27 (m, 4H), 4,20 - 4,14 (m, 1H), 3,90 (s, 3H), 3,89 (s, 3H), 3,77 (ddd, J = 16,7, 9,0, 6,4 Hz, 3H), 3,71 - 3,61 (m, 2H), 3,24 - 2,91 (m, 3H), 2,55 - 2,33 (m, 2H), 2,22 - 2,07 (m, 1H), 1,52 - 1,37 (m, 3H), 1,04 - 0,86 (m, 10H), 0,00 (s, 18H).
(d) (9H-fluoren-9-il)metil((2S)-1-(((2S)-1-((4-(8-(3-((2-ciklopropil-7-metoksi-5,11-diokso-10-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-5,10,11,11a-tetrahidro-1H-benzo[e]pirolo[1,2-a][1,4]diazepin-8-il)oksi)propoksi)-7-metoksi-5,11-diokso-10-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-5,10,11,11a-tetrahidro-1H-benzo[e]pirolo[1,2-a][1,4]diazepin-2-il)fenil)amino)-1-oksopropan-2-il)amino)-3-metil-1-oksobutan-2-il)karbamat (22)
[0591] Trifenilarzin (42 mg, 0,137 mmol) je dodat mešavini PBD-triflata 21 (250 mg, 0,172 mmol), ciklopropilboronske kiseline (73,9 mg, 0,86 mmol), srebrnog oksida (159 mg, 0,688 mmol) i trobaznog kalijum-fosfata (438 mg, 2,06 mmol) u suvom dioksanu (10 mL) u atmosferi argona. Reakcija je isprana sa argonom 3 puta i dodat je bis(benzonitril)paladijum(II) hlorid (13,2 mg, 0,034 mmol). Reakcija je isprana sa argonom još 3 puta pre nego što je zagrejana na 75°C i mešana 10 minuta. Reakciona smeša je filtrirana kroz celitni sloj koji je potom ispran etil acetatom. Rastvarač je uklonjen rotacionim isparavanjem pod redukovanim pritiskom. Dobijeni ostatak je podvrgnut fleš hromatografiji na koloni (silika gel; 1% metanola/hloroforma). Čiste frakcije su sakupljene i kombinovane, a višak eluenta je uklonjen rotacionim isparavanjem pod redukovanim pritiskom da bi se dobio željeni proizvod 22 (132 mg, 50% prinos). LC/MS 3,83 min (ES+) m/z (relativni intenzitet) 1345,91 ;<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,88 - 7,14 (m, 17H), 6,69 (s, 1H), 6,45 - 6,25 (m, 1H), 5,57 - 5,41 (m, 2H), 5,34 - 5,14 (m, 1H), 4,78 - 4,67 (m, 2H), 4,62 - 4,55 (m, 1H), 4,50 - 4,45 (m, 2H), 4,51 - 4,44 (m, 1H), 4,31 - 4,21 (m, 4H), 4,16 (m, 1H), 3,92 (s, 3H), 3,86 (s, 3H), 3,82 - 3,71 (m, 2H), 3,66 (m, 3H), 3,40 - 3,28 (m, 1H), 3,07 (m, 1H), 2,70 - 2,57 (m, 1H), 2,47-2,36 (m, 2H), 2,15 (m, 1H), 1,51 - 1,40 (m, 3H), 1,03 - 0,87 (m, 11H), 0,77 - 0,71 (m, 2H), 0,60 - 0,54 (m, 2H), 0,00 (t, J = 3,0 Hz, 18H).
(e) (9H-fluoren-9-il)metil((2S)-1-((4-(8-(3-((2-ciklopropil-7-metoksi-5-okso-5,11a-dihidro-1H-benzo[e]pirolo[1,2-a][1,4]diazepin-8-il)oksi)propoksi)-7-metoksi-5-okso-5,11a-dihidro-1H-benzo[e]pirolo[1,2-a][1,4]diazepin-2-il)fenil)amino)-1-oksopropan-2-il)amino)-3-metil-1-oksobutan-2-il)karbamat (23)
[0592] Rastvoru Super-Hidride® (0,5 mL, 1M u THF) dodat je kapanjem rastvor SEM-dilaktam 22 (265 mg, 0,9 mmol) u THF (10 mL) na -78°C u atmosferi argona. Dodavanje je završeno tokom 5 minuta kako bi se održala unutrašnja temperatura reakcione mešavine konstantno. Nakon 20 minuta, alikvot je ugašen vodom za LC/MS analizu, koja je otkrila da je reakcija završena. U reakcionu smešu je dodata voda (20 mL) i uklonjeno hladno kupatilo. Organski sloj je ekstrahovan sa EtOAc (3 x 30 mL) i kombinovani organski slojevi su isprani sa slanim rastvorom (50 mL), osušeni sa MgSO4, filtrirani i rastvarač uklonjen rotacionim uparavanjem pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je rastvoren u MeOH (12 mL), CH2Cl2(6 mL), vodi (1 mL) i dovoljnom silika gelu da bi se formirala gusta mešalna suspenzija. Posle 5 dana, suspenzija je filtrirana kroz sinterovani levak i oprana sa CH2Cl2/MeOH (9: 1) (200 mL) sve dok elucija proizvoda nije završena. Organski sloj je ispran rastvorom soli (2 x 70 mL), osušen sa MgSO4, filtriran i rastvarač uklonjen rotacionim uparavanjem pod sniženim pritiskom. Prečišćavanje hromatografijom na koloni silika gela (100% CHCl3do 96% CHCl3/ 4% MeOH) dalo je proizvod 23 u vidu žute čvrste supstance (162 mg, 78%). LC / MS 3,02 min (ES+) m/z (relativni intenzitet) 152,37.
(f) (2S)-2-amino-N-((2S)-1-((4-(8-(3-((2-ciklopropil-7-metoksi-5-okso-5,11a-dihidro-1H-benzo[e]pirolo[1,2-a][1,4]diazepin-8-il)oksi)propoksi)-7-metoksi-5-okso-5,11a-dihidro-1H-benzo[e]pirolo[1,2-a][1,4]diazepin-2-il)fenil)amino)-1-oksopropan-2-il)-3-metilbutanamid (17)
[0593] Dodat je višak piperidina (0,2 mL, 2 mmol) u rastvor PBD 23 (76 mg, 0,073 mmol) u DMF (1 mL). Smeša je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi 20 minuta, pri čemu se reakcija završila (kao što je utvrđeno putem LC/MS). Reakciona smeša je razblažena sa CH2Cl2(75 mL) i organska faza je isprana sa H2O (3 x 75 mL) sve do potpunog uklanjanja piperidina. Organska faza je osušena preko MgSO4, filtrirana i višak rastvarača uklonjen rotacionim uparavanjem pod sniženim pritiskom, kako bi se dobio sirovi proizvod 17 koji je u sledećem koraku korišćen kao takav. LC/MS 2,32 min (ES+) m/z (relativni intenzitet) 830,00.
(g) N-((2S)-1-(((2S)-1-((4-(8-(3-((2-ciklopropil-7-metoksi-5-okso-5,11a-dihidro-1H-benzo[e]pirolo[1,2-a][1,4]diazepin-8-il)oksi)propoksi)-7-metoksi-5-okso-5,11a-dihidro-1H-benzo[e]pirolo[1,2-a][1,4]diazepin-2-il)fenil)amino)-1-oksopropan-2-il)amino)-3-metil-1-oksobutan-2-il)-1-(3-(2,5-diokso-2,5-dihidro-1-il)propanamido)-3,6,9,12,15,18,21,24-oktaoksaheptakozan-27-amid (18)
[0594] EDCI hidrohlorid (14 mg, 0,0732 mmol) je dodat suspenziji Maleimid-PEG8-kiseline (43,4 mg, 0,0732 mmol) u suvom CH2Cl2(5 mL) u atmosferi argona. Smeša je mešana 1 sat na sobnoj temperaturi pre nego što je dodat PBD 17 (60,7 mg, 0,0732 mmol). Mešanje se održavalo dok se reakcija nije završila (obično 5 sati). Reakcija je razblažena sa CH2Cl2, a organska faza je isprana sa H2O i slanim rastvorom pre sušenja preko MgSO4, filtriranja i uklanjanja viška rastvarača rotacionim isparavanjem pod redukovanim pritiskom rotacionim isparavanjem pod redukovanim pritiskom. Proizvod je prečišćen pažljivom hromatografijom na silika gelu (sporo eluiranje počevši sa 100% CHCl3do 9:1 CHCl3/MeOH) praćeno hromatografijom reverzne faze da bi se uklonio nereagovani maleimid-PEG8-kiselina. Proizvod 18 je izolovan u 17,6% (21,8 mg). LC/MS 2,57 min (ES+) m/z (relativni intenzitet) 1405,30 ;<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,91 (t, J = 3,5 Hz, 1H), 7,80 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,54 - 7,50 (m, 2H), 7,45 (s, 1H), 7,39 - 7,31 (m, 2H), 6,87 (d, J = 10,5 Hz, 2H), 6,76 (s, 1H), 6,72 - 6,68 (m, 2H), 4,74 - 4,62 (m, 1H), 4,45 - 4,17 (m, 7H), 3,95 (s, 3H), 3,94 (s, 3H), 3,67 - 3,58 (m, 34H), 3,54 (m, 2H), 3,42 (dd, J = 10,2, 5,2 Hz, 2H), 3,16-3,07 (m, 1H), 2,92 (dd, J = 16,1, 4,1 Hz, 1H), 2,62 - 2,49 (m, 4H), 2,48 - 2,39 (m, 2H), 2,37 - 2,25 (m, 1H), 1,92 (s, 1H), 1,52 - 1,44 (m, 3H), 1,10 - 0,93 (m, 6H), 0,79 (dd, J = 9,2, 5,3 Hz, 2H), 0,57 (dd, J = 9,2, 5,3 Hz, 2H), NH nisu posmatrani.
Opšti eksperimentalni postupci za primer 3
[0595] Napredak reakcije praćen je tankoslojnom hromatografijom (TLC), koristeći Merck Kieselgel 60 F254 silika gel, sa fluorescentnim indikatorom na aluminijumskim pločama. Vizualizacija TLC je postignuta UV svetlošću ili parom joda, ukoliko nije drugačije navedeno. Fleš hromatografija je izvedena upotrebom Merck Kieselgel 60 F254 silika gela. Ekstrakcioni i hromatografski rastvarači su kupljeni i korišćeni bez daljeg prečišćavanja od kompanije Fisher Scientific, U.K. Sve hemikalije su kupljene od Aldricha, Lancastera ili BDH.
[0596]<1>H i<13>C NMR spektri su dobijeni na Bruker Avance 400 spektrometru. Konstante sprege navedene su u hercima (Hz). Hemijske promene su zabeležene u delovima na milion (ppm) ispod polja od tetrametilsilana. Više rotacija je opisano kao s (singlet), bs (široki singlet), d (dublet), t (triplet), k (kvartet), p (pentuplet) i m (multiplet). IR spektri su zabeleženi na spektrofotometru Perkin-Elmer FT/IR paragon 1000 primenom uzorka u rastvoru hloroforma primenom ATR sistema "zlatna kapija". Optičke rotacije su merene na temperaturi okoline pomoću polarimetra Bellingham i Stanley ADP 220, Masena spektrometrija je izvedena na ThermoQuest Navigator-u kompanije Thermo Electron, a spektri elektrosprej (ES) dobijeni su na 20 do 30 V. Tačna merenja mase izvršena su pomoću globalnog tandema Micromass Q-TOF. Svi uzorci su pokrenuti u režimu jonizacije elektrosprejom koristeći 50% acetonitrila u vodi i 0,1% mravlje kiseline kao rastvarača. Uzorci su pokrenuti u V režimu koji daje tipičnu rezoluciju od 19000 na FWHH. Instrument je kalibrisan sa [Glu]-fibrinopeptidom B neposredno pre merenja.
LCMS
[0597] LC/MS (Shimazu LCMS-2020) korišćenjem mobilne faze vode (A) (mravlja kiselina 0,1%) i acetonitrila (B) (mravlja kiselina 0,1%).
Gradijent: početni sastav 5% B se držao tokom 0,25 minuta, a zatim povećao sa 5% B na 100% B tokom perioda od 2 min. Sastav se držao 0,50 minuta na 100% B, a zatim se vratio na 5% B za 0,05 minuta i držao tamo 0,05 minuta. Ukupno vreme izvođenja gradijenta je 3 minuta. Brzina protoka 0,8 ml/min. Opseg detekcije talasne dužine: 190 do 800 nm. Temperatura rerne: 50°C. Kolona: Waters Acquity UPLC BEH Shield RP181,7µm 2,1x50mm.
4
Preparativna HPLC
[0598] Uslovi za preparativnu HPLC bili su sledeći: HPLC (Shimadzu UFLC) je pokrenut koristeći mobilnu fazu vode (0,1% mravlja kiselina) A i acetonitrila (0,1% mravlja kiselina) B. Opseg detekcije talasnih dužina: 254 nm.
[0599] Kolona: Phenomenex Gemini 5µ C18150x21-20mm.
[0600] Gradijent:
B
t=0 13%
t=15,00 95%
t=17,00 95%
t=17,10 13%
t=20,00 13%
[0601] Ukupno vreme izvođenja gradijenta je 20 min; Brzina protoka 20,00 mL/min.
Primer 3
(a) (S)-5-(((terc-butildimetilsilil)oksi)metil)-1-(5-metoksi-2-nitro-4-((triizopropzlsilzl)oksi)benzoil)-4,5-dihidro-1H-pirol-3-il trifluorometansulfonat (37)
[0602]
[0603] Bezvodni 2,6-lutidin (16,06 ml, 0,137 mol) ubrizgan je u jednom delu snažno mešanom rastvoru ketona 36 (20 g, 0,034 mol) u suvom CH2Cl2(350 mL) na -45°C (suvi led/acetonitril) ) u atmosferi argona. Bezvodni triflični anhidrid, uzet iz sveže otvorene bočice (17,37 mL, 0,1 mol), brzo je ubrizgan, održavajući temperaturu na -40 °C ili nižu. Reakciona smeša je ostavljena da se meša na -45 °C tokom 1 sata, a tada je TLC (heksan/EtOAc; 95/5) otkrila potpunu potrošnju početnog materijala. Hladna reakciona smeša je odmah razblažena sa CH2Cl2(400 mL) i uz snažno mućkanje isprana ledeno hladnom vodom (1 x 200 mL), ledeno hladnim 5% rastvorom limunske kiseline (1 x 300 mL), zasićenim NaHCO3(300 mL), slani rastvor (200 mL). Organski slojevi su osušeni preko MgSO4, filtrirani i rastvarač je isparen pod redukovanim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu (heksan/EtOAc; 100% do 90:10) da bi se dobio enol-triflat 37 u obliku žute pene (22,06 g, 89%).<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,72 (s, 1H), 7,26 (s, 1H), 6,75 (s, 1H), 60,6 (bm, 1H), 5,75 (d, J = 5,7 Hz, 0,5H), 4,78 (m, 1H), 4,59 (d, J = 8,2 Hz, 0,5H), 3,92 (s, 3H), 3,18 (dd, J = 15,2, 3,2 Hz, 4H), 2,99 (dd, J = 15,7, 3,2 Hz, 4H), 1,36 -1,22 (m, 3H), 1,11 (d, J = 7,3 Hz, 18H), 0,92 (s, 9H), 0,12 (s, 6H) ; ES<+>= 2,39 min, m/z 1447,05 [2M Na]<+>. (b) terc-butil(11S)-8-(3-bromopropoksi)-11-((terc-butildimetilsilil)oksi)-2-ciklopropil-7-metoksi-5-okso-11,11adihidro-1H-benzo[e]pirolo[1,2-a][1,4]diazepin-10(5H)-karboksilat (45)
[0604]
(i) (S)-(2-(((terc-butildimetilsilil)oksi)metil)-4-ciklopropil-2,3-dihidro-1H-pirol-1-il)(5-metoksi-2-nitro-4-((triizopropilsilil)oksi)fenil)metanon (38)
[0605] Trifenilarzin (0,343 g, 1,12 mmol), srebro (I) oksid (1,3 g, 5,6 mmol), ciklopropilboronska kiselina (0,6 g, 7,01 mmol) i triflat 37 (1 g, 1,4 mmol) rastvoreni su u dioksanu (20 mL) pod atmosferom argona. Tri-osnovni kalijum-fosfat (3,6 g, 16,8 mmol) melje se tučkom i malterom i brzo dodaje u reakcionu smešu. Reakciona smeša je evakuisana i isprana argonom tri puta i zagrevana do 71°C. Dodat je bis(benzonitril)paladijum(II) hlorid (107 mg, 0,28 mmol) i reakciona posuda je evakuisana i isprana argonom tri puta. Posle 10 minuta, uzet je mali uzorak za analizu pomoću TLC (heksan/EtOAc; 80:20) otkrivajući da je reakcija završena. Reakciona smeša je filtrirana kroz celit i filter podloga je isprana EtOAc (200 mL). Filtrat je ispran vodom (200 mL) i slanim rastvorom (200 mL). Organski sloj je osušen sa MgSO4,filtriran i rastvarač je uklonjen u vakuumu. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu (heksan/EtOAc; 100% do 80:20) da bi se dobio enol-triflat 38 kao žuta čvrsta supstanca (0,663 g, 78%).<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,70 (s, 1H), 7,33 (s, 1H), 6,77 (s, 1H), 4,64 (m, 1H), 3,90 (s, 3H), 3,70 (s, 2H), 2,64 (dd, J = 16,2, 2,42 Hz, 1H), 2,42 (dd, J = 16,2, 2,4 Hz, 1H), 1,35 - 1,22 (m, 3H), 1,19 (m, 1H), 1,10 (d, J = 7,3 Hz, 18H), 0,91 (s, 9H), 0,61 (m, 2H), 0,40 (dd, J = 7,2, 3,4 Hz, 2H), 0,10 (d, J = 1,9 Hz, 6H).) ; ES<+>= 2,39 min, m/z 605,30 [M H]<+>.
(ii) (S)-(2-amino-5-metoksi-4-((triizopropilsilil)oksi)fenil)(2-(((tercbutildimetilsilil)oksi)metil)-4-ciklopropil-2,3-dihidro-1H-pirol-1-il)metanon (39)
[0606] U suvoj flašici sa okruglim dnom sa dva vrata, prethodno ispranoj argonom i opremljenoj termometrom, nitrofenil 38 (3,03 g 5 mmol) rastvoren je u rastvoru 5% mravlje kiseline u metanolu (25 mL). U rastvor se brzo sipa cink (1,64 g, 25 mmol). Temperatura je trenutno porasla na 45°C i polako se hladila do sobne temperature i tada je reakcija završena (≈15 minuta, reakcija praćena pomoću LCMS). Reakciona smeša je zatim filtrirana kroz celit i podloga dalje isprana EtOAc (2 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su potom isprani zasićenim NaHCO3(vod )(100 mL), H2O (100 mL) i slanim rastvorom (100 mL), pre nego što su osušeni preko MgSO4, filtrirani i isparljive materije uklonjene u vakuumu. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu (heksan/E-tOAc; 100% do 80:20) i čist proizvod 39 je izolovan kao bledo bezbojno ulje (1,35 g, prinos 47%).<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,26 (s, 2H), 6,71 (s, 1H), 4,61 (bs, 1H), 4,22 (s, 2H), 3,88 (s, 1H), 3,77 (s, 1H), 3,71 (s, 3H), 2,60 (dd, J = 16,5, 3,7 Hz, 1H), 2,43 (dd, J = 16,5, 3,7 Hz, 1H), 1,35 (m, 1H), 1,22 (m, 3H), 1,09 (d, J = 7,2 Hz, 18H), 0,89 (s, 9H), 0,68 - 0,58 (m, 2H), 0,48 - 0,36 (m, 2H), 0,05 (d, J = 5,8 Hz, 6H). ES<+>= 2,40 min, m/z 575,30 [M H]<+>
(iii) terc-butil (S)-(2-(2-(((terc-butildimetilsilil)oksi)metil)-4-ciklopropil-2,3-dihidro-1H-pirol-1-karbonil)-4-metoksi-5-((triizopropilsilil)oksi)fenil)karbamat (40)
[0607] Amin 39 (770 mg, 1,34 mmol) i Boc2O (350 mg, 1,6 mmol) su zagrevani zajedno na 70°C u flašici sa okruglim dnom. Da bi se pomogla rastvorljivost, dodat je CHCl3(3 mL) i smeša je ostavljena da se meša dok se reakcija ne završi (praćeno LCMS). Gusti sirovi rastvor je ostavljen da se ohladi do sobne temperature pre nego što je direktno nanet na hromatografsku kolonu silika gela (heksan/EtOAc; 100% do 95:5). Proizvod 40 je izolovan kao bezbojna pena (741 mg, prinos 82%).<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,73 (s, 1H), 7,26 (s, 2H), 6,73 (s, 1H), 4,64 (s, 1H), 3,91 (s, 1H), 3,78 (s, 1H), 3,74 (s, 3H), 2,61 (dd, J = 16,2, 3,0 Hz, 1H), 2,45 (dd, J = 16,2, 3,0 Hz, 1H), 1,47 (s, 9H), 1,36 (m, 1H), 1,33 - 1,23 (m, 3H), 1,11 (d, J = 7,3 Hz, 18H), 0,89 (s, 9H), 0,64 (m, 2H), 0,43 (m, 2H), 0,05 (d, J = 7,2 Hz, 6H) ; ES<+>= 2,56 min, m/z 675,30 [M+H]<+>.
(iv) terc-butil (S)-(2-(4-ciklopropil-2-(hidroksimetil)-2,3-dihidro-1H-pirol-1-karbonil)-4-metoksi-5-((triizopropilsilil)oksi)fenil)karbamat (41)
[0608] Silil etar 40 (741 mg, 1,1 mmol) je rastvoren u smeši 7:2:1:1 AcOH/H2O/MeOH/THF (11 mL) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi dok reakcija nije završena (≈ 3 sati). Isparljive materije su uklonjene u vakuumu, a ostatak je rastvoren u EtOAc (50 mL). Organska faza je isprana zasićenim NaHCO3(vod )(50 mL), H2O (50 mL) i slanim rastvorom (50 mL), pre nego što je osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana u vakuumu. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu (Heks/EtOAc; 100% do 60:40) i čist proizvod 41 je izolovan kao bezbojna pena (521 mg, prinos 84%).<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,94 (s, 1H), 7,65 (s, 1H), 6,75 (s, 1H), 6,17 (s, 1H), 4,71 (s, 1H), 4,60 (s, 1H), 3,82 (t, J = 8,7 Hz, 1H), 3,76 (s, 3H), 3,72 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 2,76 (ddd, J = 16,4, 10,2, 1,6 Hz, 1H), 2,08 (dd, J = 16,3, 4,4 Hz, 1H), 1,48 (s, 9H), 1,42 - 1,33 (m, 1H), 1,33 - 1,23 (m, 3H), 1,11 (d, J = 7,3 Hz, 18H), 0,67 (dd, J = 5,0, 3,1 Hz, 2H), 0,46 - 0,39 (m, 2H) ; ES<+>= 2,25 min, m/z 561,45 [M+H]<+>.
(v) terc-butil (11S)-2-ciklopropil-11-hidroksi-7-metoksi-5-okso-8-((triizopropilsilil)oksi)-11,11a-dihidro-1H-benzo[e]pirolo[1,2-a][1,4]diazepin-10(5H)-karboksilat (42)
[0609] DMSO (163 µL, 2,29 mmol) je dodat u ohlađeni rastvor oksalil hlorida (93 µL, 1,1 mmol) u CH2Cl2(2 mL) na -78°C. Posle 15 minuta, rastvor alkohola 41 (515 mg, 0,91 mmol) u CH2Cl2(5 mL) dodat je u vidu kapi u oksidacionu smešu. Reakcija je ostavljena da se meša na -78°C 1 sat pre dodavanja NEt3(640 µL, 4,59 mmol) i smeša je ostavljena da se zagreje na sobnu temperaturu. Po završetku, reakciona smeša je razblažena sa CH2Cl2(40 mL) i rastvor je ispran sa 0,1M HCl(vod )(50 mL), H2O (50 mL), zasićenim NaHCO3(vod )(50 mL) i slanim rastvorom (50 mL). Organski slojevi su osušeni sa MgSO4, filtrirani i isparljive materije uklonjene u vakuumu. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu (heksan/EtOAc; 100% do 60:40) da bi se dobio čisti 42 u obliku bele pene (350 mg, 68%).<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,17 (s, 1H), 6,74 (s, 1H), 6,67 (s, 1H), 5,65 (dd, J = 8,6, 2,3 Hz, 1H), 3,85 (s, 3H), 3,77 (dt, J = 13,2, 6,7 Hz, 1H), 3,38 (s, 1H), 2,88 (dd, J = 17,7, 9,2 Hz, 1H), 2,52 (d, J = 14,5 Hz, 1H), 1,46 (m, 1H), 1,39 (s, 9H), 1,31 - 1,19 (m, 3H), 1,10 (dd, J = 7,4, 2,1 Hz, 18H), 0,77 - 0,70 (m, 2H), 0,56 - 0,48 (m, 2H) ; ES<+>= 1,89 min, m/z 559,45 [M+H]<+>.
(vi) terc-butil (11S)-11-((terc-butildimetilsilil)oksi)-2-ciklopropil-7-metoksi-5-okso-8-((triizopropilsilil)oksi)-11,11a-dihidro-1H-benzo[e]pirolo[1,2-a][1,4]diazepin-10(5H)-karboksilat (43)
[0610] Alkohol 42 (350 mg, 0,62 mmol) rastvoren je u suvom CH2Cl2(5 mL) u zatvorenoj boci sa okruglim dnom, prethodno ispranoj tri puta sa argonom. Rastvor je ohlađen na 0°C pre nego što su naknadno dodati lutidin (0,3 ml, 2,5 mmol) i TBS-OTf (0,43 ml, 1,8 mmol). Reakciona smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je do kraja (praćeno LCMS). Po završetku, rastvor je razblažen sa CH2Cl2(50 mL), ispran zasićenim NH4Cl(vod )(50 mL), H2O (50 mL), zasićenim NaHCO3(vod )(50 mL) i slanim rastvorom (50 mL). Organski slojevi su osušeni sa MgSO4, filtrirani i isparljive materije uklonjene u vakuumu. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu (heksan/EtOAc; 100% do 80:20) da bi se dobio čisti 43 kao bezbojno ulje (397,3 mg, 94%).<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,16 (s, 1H), 6,69 (s, 1H), 6,63 (s, 1H), 5,78 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 3,84 (s, 3H), 3,65 (td, J = 10,1, 3,7 Hz, 1H), 2,82 (ddd, J = 16,8, 10,3, 2,6 Hz, 1H), 2,30 (dd, J = 16,8, 2,6 Hz, 1H), 1,45 - 1,37 (m, 1H), 1,32 (s, 9H), 1,25 (dd, J = 14,1, 8,0 Hz, 3H), 1,09 (dd, J = 7,4, 4,1 Hz, 18H), 0,85 (s, 9H), 0,74 - 0,67 (m, 2H), 0,55 - 0,49 (m, 1H), 0,47 - 0,40 (m, 1H), 0,25 (s, 3H), 0,20 (s, 3H) ; ES<+>= 2,39 min, m/z 695,55 [M+Na]<+>.
(vii) terc-butil (11S)-11-((terc-butildimetilsilil)oksi)-2-ciklopropil-8-hidroksi-7-metoksi-5-okso-11,11a-dihidro-1H-benzo[e]pirolo[1,2-a][1,4]diazepin-10(5H)-karboksilat (44)
[0611] Monomer 43 (518,8 mg, 0,77 mmol) je rastvoren u vlažnom DMF (5 ml 0,1 ml H2O) pre dodavanja LiOAc (78,5 mg, 0,77 mmol) i smeša je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi do završetka (praćeno LCMS). Smeša je zatim razblažena sa EtOAc (50 mL), ugašena limunskom kiselinom (vod.) (pH = 3, 40 ml), zatim se ispere sa H2O (50 mL) i slanim rastvorom (50 mL). Organski sloj je osušen preko MgSO4,filtriran i isparenja su uklonjena u vakuumu. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu (heksan/EtOAc; 100% do 60:40) i čist proizvod 44 je izolovan kao bela čvrsta supstanca (351 mg, prinos 88%).<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,20 (s, 1H), 6,68 (s, 1H), 6,68 (s, 1H'), 5,79 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 3,94 (s, 3H), 3,70 (td, J = 10,1, 3,7 Hz, 1H), 2,82 (ddd, J = 16,9, 10,3, 2,0 Hz, 1H), 2,31 (dd, J = 16,9, 2,0 Hz, 1H), 1,44 - 1,37 (m, 1H), 1,32 (s, 9H), 0,86 (s, 9H), 0,75 - 0,68 (m, 1H), 0,57 - 0,49 (m, 1H), 0,46 (m, 1H), 0,23 (d, J = 6,9 Hz, 6H) ; ES<+>= 1,82 min, m/z 517,35 [M+Na]<+>.
(viii) terc-butil(11S)-8-(3-bromopropoksi)-11-((terc-butildimetilsilil)oksi)-2-ciklopropil-7-metoksi-5-okso-11,11adihidro-1H-benzo[e]pirolo[1,2-a][1,4]diazepin-10(5H)-karboksilat (45)
[0612] U suvoj flašici sa okruglim dnom, prethodno ispranoj tri puta sa argonom, alkohol 44 (300 mg, 0,58 mmol) je rastvoren u suvom DMF (5 mL). Naknadno su dodati K2CO3(123 mg, 0,58 mmol) i 1,3-dibromopropan (0,3 ml, 2,9 mmol). Reakciona smeša je zagrevana na 70°C i ostavljena da se meša do završetka (≈1 sat, praćeno LCMS). Reakcija je razblažena sa EtOAc (50 mL), isprana sa H2O (75 mL) i slanim rastvorom (50 mL) pre sušenja preko MgSO4, filtrirana i isparljive materije su uklonjene u vakuumu. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu (Heksan/EtOAc; 100% do 70:30) i čist proizvod 45 je izolovan kao bezbojna pena (311 mg, prinos 84%).
<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,21 (s, 1H), 6,69 (s, 1H), 6,63 (s, 1H), 5,82 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 4,14 (t, J = 5,9 Hz, 2H), 3,90 (s, 3H), 3,69 (ddd, J = 10,2, 9,0, 3,7 Hz, 1H), 3,63 (t, J = 6,3 Hz, 2H), 2,84 (ddd, J = 16,7, 10,4, 1,9 Hz, 1H), 2,38 (p, J = 6,1 Hz, 2H), 2,31 (dd, J = 16,5, 2,1 Hz, 1H), 1,45 - 1,37 (m, 1H), 1,33 (s, 9H), 0,87 (s, 9H), 0,77 -0,69 (m, 2H), 0,57 - 0,49 (m, 1H), 0,49 - 0,42 (m, 1H), 0,24 (d, J = 5,4 Hz, 6H) ; ES<+>= 2,16 min, m/z 638,95 [M+Na]<+>.
(c) terc-butil(11S)-2-(4-((S)-2-((S)-2-((((9H-fluoren-9-il)metoksi)karbonil)amino)-3-metilbutanamido)propanamido)fenil)-11-((terc-butildimetilsilil)oksi)-8-hidroksi-7-metoksi-5-oksi-11,11a-dihidro-1H-benzo[e]pirolo[1,2-a][1,4]diazepin-10(5H)-karboksilat (53)
[0613]
(i) (S)-(4-(4-aminofenil)-2-(((terc-butildimetilsilil)oksi)metil)-2,3-dihidro-1H-pirol-1-il)(5-metoksi-2-nitro-4-((triizopropilsilil)oksi)fenil)metanon (46)
[0614] Pd(PPh3)4(609 mg, 0,52 mmol) je dodat mešanoj smeši triflata 37 (18,8 g, 26,3 mmol), estra pinakola 4-aminofenilboronske kiseline (8,64 g, 39,4 mmol), Na2CO3(12,78 g, 120 mmol), MeOH (80 mL), toluen (160 mL) i voda (80 mL). Reakciona smeša je ostavljena da se meša na 30°C u atmosferi azota tokom 24 sata, nakon čega je potrošen sav boronski estar. Reakciona smeša je zatim isparen dok nije bila suva pre nego što je ostatak prenet u EtOAc (150 ml) i isprana sa H2O (100 mL), slanim rastvorom (100 mL), osušena (MgSO4), filtrirana i isparena pod redukovanim pritiskom da se dobije sirovi proizvod. Prečišćavanjem hromatografijom na silika gelu (heksan/E-tOAc; 100% do 70:30) dobija se proizvod 46 u obliku žućkaste pene (11,06 g, 64%).<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,74 (s, 1H), 7,00 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 6,81 (s, 1H), 6,58 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 6,06 (s, 1H), 4,77 (bm, 1H), 3,91 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 3,68 (bs, 2H), 3,13 (bm, 1H), 2,97 (d, J = 14,5 Hz, 1H), 1,36 - 1,21 (m, 3H), 1,12 (d, J = 7,3 Hz, 18H), 0,89 (s, 10H), 0,10 (s, 6H).) ; ES<+>= 2,27 min, m/z 698 [M CH3CN]<+>.
(ii) (9H-fluoren-9-il)metil ((S)-1-(((S)-1-((4-((S)-5-(((terc-butildimetilsilil)oksi)metil)-1-(5-metoksi-2-nitro-4-((triizopropilsilil)oksi)benzoil)-4,5-dihidro-1H-pirol-3-il)fenil)amino)-1-oksopropan-2-il)amino)-3-metil-1-oksobutan-2-il)karbamat (47)
[0615] U suvu flašicu sa okruglim dnom prethodno ispranu argonom dodati su anilin 46 (10,05 g, 15,3 mmol), dipeptid (6,3 g, 15,3 mmol) i suv CH2Cl2(500 mL). Zatim je flašica pročišćena tri puta sa argonom pre dodavanja EEDQ (3,79 g, 15,3 mmol) i smeša je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi. Reakciju je pratio LCMS i nakon 3,5 sata reakcija je završena. Reakcija je ugašena sa H2O (200 mL) i ekstrahovana dva puta sa CH2Cl2(250 mL). Kombinovane organske materije su isprane slanim rastvorom (150 mL), osušene preko MgSO4, filtrirane i rastvarač je uklonjen u vakuumu. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu (heksan/EtOAc; 100% do 55:45) da bi se dobio čisti proizvod 47 (13,821 g, 86%).<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8,26 (s, 1H), 7,64 (s d, J = 4,9 Hz, 3H), 7,43 (t, J = 7,3 Hz, 1H), 7,36 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,28 (t, J = 7,3 Hz, 1H), 7,19 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 6,99 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,71 (s, 1H), 6,27 (d, J = 6,3 Hz, 1H), 6,08 (s, 1H), 5,11 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 4,69 (bs, 1H), 4,52 (bm, 1H), 4,36 (d, J = 6,5 Hz, 2H), 4,08 (t, J = 5,9 Hz, 1H), 3,89 (m, 1H), 3,80 (s, 3H), 3,11 - 2,97 (bm, 1H), 2,88 (bd, J = 15,2 Hz, 1H), 2,03 (bs, 1H), 1,33 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,24 - 1,11 (m, 3H), 1,01 (d, J = 7,4 Hz, 18H), 0,86 - 0,79 (m, 6H), 0,77 (s, 9H), 0,00 (s, 6H) ; ES<+>= 2,37 min, bez mase.
(iii) (9H-fluoren-9-il)metil ((S)-1-(((S)-1-((4-((S)-1-(2-amino-5-metoksi-4-((triizopropilsilil)oksi)benzoil)-5-(((tercbutildimetilsilil)oksi)metil)-4,5-dihidro-1H-pirol-3-il)fenil)amino)-1-oksopropan-2-il)amino)-3-metil-1-oksobutan-2-il)karbamat (48)
[0616] U suvoj flašici sa okruglim dnom sa dva vrata, prethodno ispranoj argonom i opremljenoj termometrom, nitrofenil 47 (2,97g 2,8 mmol) rastvoren je u rastvoru 5% mravlje kiseline u metanolu (50 mL). U rastvor se brzo sipa cink (1,85g, 28 mmol). Temperatura je trenutno porasla na 40°C i polako se hladila do sobne temperature i tada je reakcija završena (≈15 minuta, reakcija praćena pomoću LCMS). Reakciona smeša je zatim filtrirana kroz celit i podloga dalje isprana EtOAc (2 x 150 mL). Kombinovani organski slojevi su potom isprani zasićenim NaHCO3(vod )(100 mL), H2O (100 mL) i slanim rastvorom (100 mL), pre nego što su osušeni preko MgSO4, filtrirani i isparljive materije uklonjene u vakuumu. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu (heksan/EtOAc; 75:25 do 50:50) i čist proizvod 48 je izolovan kao bledo žuto ulje (2,291 g, prinos 79%).<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8,37 (s, 1H), 7,74 (s+d, J= 4,9 Hz, 3H), 7,53 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 7,46 (d, J = 11,3 Hz, 2H), 7,39 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 7,28 (t, J = 11,3 Hz, 2H), 7,09 (d, J = 7,9 Hz, 2H), 6,38 (d, J = 6,3 Hz, 1H), 6,18 (s, 1H), 5,21 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 4,81 (bs, 1H), 4,72 - 4,57 (m, 1H), 4,47 (d, J = 6,5 Hz, 2H), 4,19 (t, J = 5,0 Hz, 1H), 4,00 - 3,94 (m, 1H), 3,91 (s, 3H), 3,23 - 3,07 (m, 1H), 2,98 (d, J = 16,8 Hz, 1H), 2,15 (s, 1H), 1,43 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,36 - 1,18 (m, 3H), 1,12 (d, J = 7,4 Hz, 18H), 0,97 - 0,89 (m, 6H), 0,88 (s, 9H), 0,10 (s, 6H). ES<+>= 2,37 min, m/z bez mase.
(iv) (9H-fluoren-9-il)metil ((S)-1-(((S)-1-((4-((S)-1-(2-((terc-butoksikarbonil)amino-5-metoksi-4-((triizopropilsilil)oksi)benzoil)-5-(((terc-butildimetilsilil)oksi)metil)-4,5-dihidro-1H-pirol-3-il)fenil)amino)-1-oksopropan-2-il)amino)-3-metil-1-oksobutan-2-il)karbamat (49)
[0617] Amin 48 (14,913 g, 14,6 mmol) i Boc2O (3,83 g, 17,5 mmol) su zagrevani zajedno na 70°C u flašici sa okruglim dnom. Da bi se pomogla rastvorljivost, dodat je CHCl3(25 mL) i smeša je ostavljena da se meša dok se reakcija ne završi (praćeno LCMS). Gusti sirovi rastvor je ostavljen da se ohladi do sobne temperature pre nego što je direktno nanet na hromatografsku kolonu silika gela (heksan/EtOAc; 100% do 65:35). Proizvod 49 je izolovan kao kremasta pena (13,2 g, prinos 80%).
<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8,40 (s, 1H), 8,21 (s, 1H), 7,74 (d, J = 7,8 Hz, 3H), 7,54 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 7,48 (d, J = 7,7 Hz, 2H), 7,38 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 7,31 - 7,25 (m, 3H), 7,14 (d, J = 6,7 Hz, 2H), 6,84 (bs, 1H), 6,80 (s, 1H), 6,50 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 5,28 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 4,77 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 4,70 - 4,58 (m, 1H), 4,47 (t, J = 5,7 Hz, 2H), 4,19 (t, J = 6,1 Hz, 1H), 4,00 (m, 2H), 3,88 (bs, 1H), 3,73 (s, 3H), 3,05 (m, 1H), 2,98 (dd, J = 15,4, 3,3 Hz, 1H), 2,15 (bm, 1H), 1,46 (s, 9H), 1,43 (d, J=11,7 Hz, 3H), 1,36 - 1,22 (m, 3H), 1,12 (d, J = 7,4 Hz, 18H), 1,00 - 0,89 (m, 6H), 0,84 (s, 9H), 0,05 (d, J = 6,0 Hz, 6H)) ; ES<+>= 2,53 min, bez mase.
(v) (9H-fluoren-9-il)metil ((S)-1-(((S)-1-((4-((S)-1-(2-((terc-butoksikarbonil)amino-5-metoksi-4-((triizopropilsilil)oksi)benzoil)-5-(hidroksimetil)-4,5-dihidro-1H-pirol-3-il)fenil)amino)-1-oksopropan-2-il)amino)-3-metil-1-oksobutan-2-il)karbamat (50)
[0618] Silil etar 49 (13,2 g, 11,8 mmol) je rastvoren u smeši 7:2:1:1 AcOH/H2O:MeOH/THF (220 mL) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi dok reakcija nije završena (preko noći). Isparljive materije su uklonjene u vakuumu, a ostatak je rastvoren u EtOAc (400 mL). Organska faza je isprana zasićenim NaHCO3(vod )(200 mL), H2O (200 mL) i slanim rastvorom (10 mL), pre nego što je osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana u vakuumu. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu (Heks/EtOAc ; 50:50 do 0:100) i čist proizvod 50 je izolovan kao svetlo žuta pena (11,168 g, prinos 94%).<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8,45 (s, 1H), 7,93 (s, 1H), 7,74 (d, J = 7,4 Hz, 2H), 7,64 (s, 1H), 7,52 (dd, J = 17,9, 8,9 Hz, 4H), 7,39 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 7,33 - 7,26 (m, 3H), 7,13 (d, J = 7,4 Hz, 2H), 6,81 (s, 1H), 6,45 (s, 1H), 5,26 (s, 1H), 4,84 (s, 1H), 4,69 - 4,58 (m, 1H), 4,47 (d, J = 6,2 Hz, 2H), 4,43 (s, 1H), 4,17 (d, J = 14,2 Hz, 1H), 3,99 (s, 1H), 3,89 (s, 2H), 3,74 (s, 3H), 3,30 - 3,17 (m, 1H), 2,64 (d, J= 16,9 Hz, 1H), 2,23 - 2,09 (m, 1H), 1,44 (s, 9H), 1,44 (d, J = 10,9 Hz, 2H), 1,29 (ddd, J = 14,3, 13,0, 7,4 Hz, 3H), 1,12 (d, J = 7,4 Hz, 18H), 0,92 (m, 6H) ; ES<+>= 2,23 min, bez mase.
(vi) terc-butil (11S)-2-(4-((S)-2-((S)-2-((((9H-fluoren-9-il)metoksi)karbonil)amino)-3-metilbutanamido)propanamido)fenil)-11-hidroksi-7-metoksi-5-okso-8-((triizopropilsilil)oksi)-11,11a-dihidro-1H-benzo[e]pirolo[1,2-a][1,4]diazepin-10(5H)-karboksilat (51)
[0619] DMSO (1,55 L, 21,9 mmol) je dodat u ohlađeni rastvor oksalil hlorida (0,89 mL, 10,5 mmol) u CH2Cl2(50 mL) na -78°C. Posle 15 minuta, rastvor alkohola 50 (8,8 mg, 8,76 mmol) u CH2Cl2(100 mL) dodat je u vidu kapi u oksidacionu smešu. Reakcija je ostavljena da se meša na -78°C 1 sat pre dodavanja NEt3(6,11 mL, 43,8 mmol) i smeša je ostavljena da se zagreje na sobnu temperaturu. Po završetku, reakciona smeša je razblažena sa CH2Cl2(100 mL) i rastvor je ispran sa 0,1M HCl(vod )(250 mL), H2O (250 mL), zasićenim NaHCO3(vod )(250 mL) i slanim rastvorom (200 mL). Organski slojevi su osušeni sa MgSO4, filtrirani i isparljive materije uklonjene u vakuumu. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu (CH2Cl2/EtOAc ; 100% do 50:50) da bi se dobio čisti 51 kao žuto ulje (8,8 mg, 100%).<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8,71 (s, 1H), 7,74 (t, J = 8,4 Hz, 3H), 7,52 (d, J = 7,4 Hz, 5H), 7,43 - 7,33 (m, 4H), 7,23 - 7,17 (m, 2H), 6,69 (s, 1H), 6,42 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 5,78 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 5,62 (s, 1H), 5,23 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 4,84 - 4,69 (m, 1H), 4,65 (d, J = 22,5 Hz, 1H), 4,45 - 4,29 (m, 2H), 3,91 (dd, J = 11,3, 8,1 Hz, 1H), 3,86 (s, 3H), 3,28 (q, J = 11,9 Hz, 1H), 2,98 (t, J = 12,6 Hz, 1H), 2,14 (dd, J = 12,9, 10,0 Hz, 1H), 1,52 - 1,42 (m, 3H), 1,38 (s, 9H), 1,26 (m, 3H), 1,16 - 1,05 (m, 18H), 0,93 (d, J = 6,0 Hz, 6H) ; ES<+>= 2,19 min, bez mase.
(vii) terc-butil (11S)-2-(4-((S)-2-((S)-2-((((9H-fluoren-9-il)metoksi)karbonil)amino)-3-metilbutanamido)propanamido)fenil)-11-((terc-butildimetilsilil)oksi)-7-metoksi-5-okso-8-((triizopropilsilil)oksi)-11,11a-dihidro-1H-benzo[e]pirolo[1,2-a][1,4]diazepin-10(5H)-karboksilat (52)
[0620] Alkohol 51 (8,8 g, 8,78 mmol) rastvoren je u suvom CH2Cl2(150 mL) u zatvorenoj boci sa okruglim dnom, prethodno ispranoj tri puta sa argonom. Rastvor je ohlađen na 0°C pre nego što su naknadno dodati lutidin (4 mL, 35,1 mmol) i TBS-OTf (6 mL, 26,3 mmol). Reakciona smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je do kraja (praćeno LCMS). Po završetku, rastvor je razblažen sa CH2Cl2(100 mL), ispran zasićenim NH4Cl(vod )(150 mL), H2O (100 mL), zasićenim NaHCO3(vod )(100 mL) i slanim rastvorom (100 mL). Organski slojevi su osušeni sa MgSO4, filtrirani i isparljive materije uklonjene u vakuumu. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu (heksan/EtOAc: 100% do 80:20) da se dobije čisti 52 kao bezbojno ulje (6,18 mg, 70%).
<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8,40 (s, 1H), 7,76 (d, J = 7,5 Hz, 2H), 7,55 (dd, J = 13,0, 6,7 Hz, 4H), 7,40 (t, J = 7,3 Hz, 4H), 7,33 - 7,27 (m, 3H), 7,21 (s, 1H), 6,67 (s, 1H), 6,49 (s, 1H), 5,87 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 5,30 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 4,71 - 4,59 (m, 1H), 4,48 (d, J = 6,8 Hz, 2H), 4,20 (t, J = 6,7 Hz, 1H), 4,04 - 3,96 (m, 1H), 3,86 (s, 3H), 3,84 -3,77 (m, 1H), 3,25 (m, 1H), 2,79 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 2,26-2,11 (m, 1H), 1,46 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,33 (s, 9H), 1,27 (dd, J = 17,1, 9,7 Hz, 3H), 1,11 (dd, J = 7,4, 4,0 Hz, 18H), 0,93 (s, 6H), 0,89 (s, 9H), 0,27 (s, 3H), 0,22 (s, 3H); ES<+>= 2,55 min, m/z 116,30 [M+H]<+>.
(viii) terc-butil(11S)-2-(4-((S)-2-((S)-2-((((9H-fluoren-9-il)metoksi)karbonil)amino)-3-metilbutanamido)propanamido)fenil)-11-((terc-butildimetilsilil)oksi)-8-hidroksi-7-metoksi-5-oksi-11,11a-dihidro-1H-benzo[e]pirolo[1,2-a][1,4]diazepin-10(5H)-karboksilat (53)
[0621] Monomer 52 (1 g, 0,89 mmol) je rastvoren u vlažnom DMF (5 mL 0,5 ml H2O) pre dodavanja LiOAc (91 mg, 0,89 mmol) i smeša je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi do završetka (≈3h, praćeno LCMS). Smeša je zatim razblažena sa EtOAc (50 mL), ugašena limunskom kiselinom (vod.) (pH = 3, 40 ml), zatim se ispere sa H2O (50 mL) i slanim rastvorom (50 mL). Organski sloj je osušen preko MgSO4,filtriran i isparenja su uklonjena u vakuumu. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu (heksan/EtOAc/MeOH; 60:40:0 do 60:30:10) i čist proizvod 53 je izolovan u obliku čvrste kreme (675 mg, prinos 78%).<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8,36 (s, 1H), 7,76 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 7,55 (dd, J = 16,0, 7,5 Hz, 4H), 7,40 (t, J = 7,4 Hz, 4H), 7,30 (ddd, J = 14,7, 7,4, 1,1 Hz, 3H), 7,24 (s, 1H), 6,72 (s, 1H), 6,38 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 5,87 (s, 1H), 5,23 (d, J = 6,2 Hz, 1H), 4,69 - 4,57 (m, 1H), 4,49 (d, J = 6,6 Hz, 2H), 4,20 (t, J = 5,3 Hz, 1H), 4,04 - 3,96 (m, 1H), 3,96 (s, 3H), 3,87 (dd, J = 10,1, 3,5 Hz, 1H), 3,29 (dd, J = 18,0, 8,5 Hz, 1H), 2,80 (d, J = 19,4 Hz, 1H), 2,24 - 2,08 (m, 1H), 1,46 (d, J = 10,5 Hz, 3H), 1,33 (s, 9H), 1,00 - 0,91 (m, 6H), 0,90 (s, 9H), 0,25 (d, J = 8,6 Hz, 6H). ; ES<+>= 2,08 min, m/z 960,35 [M+H]<+>.
(d) N-((2S)-1-(((2S)-1-((4-(8-(3-((2-ciklopropil-7-metoksi-5-okso-5,11a-dihidro-1H-benzo[e]pirolo[1,2-a][1,4]diazepin-8-il)oksi)propoksi)-7-metoksi-5-okso-5,11a-dihidro-1H-benzo[e]pirolo[1,2-a][1,4]diazepin-2-il)fenil)amino)-1-oksopropan-2-il)amino)-3-metil-1-oksobutan-2-il)-1-(3-(2,5-diokso-2,5-dihidro-1H-pirol-1-il)propanamido)-3,6,9,12,15,18,21,24-oktaoksaheptakozan-27-amid (18)
[0622]
1
(i) terc-butil (11S)-2-(4-((S)-2-((S)-2-amino-3-metilbutanamido)propanamido)fenil)-8-(3-(((11S)-10-(terc-butoksikarbonil)-11-((terc-butildimetilsilil)oksi)-2-ciklopropil-7-metoksi-5-okso-5,10,11,11a-tetrahidro-1H-benzo[e]pirolo[1,2-a][1,4]diazepin-8-il)oksi)propoksi)-11-((tert-butildimetilsilil)oksi)-7-metoksi-5-okso-11,11a-dihidro-1H-benzo[e]pirolo[1,2-a][1,4]diazepin-10(5H)-karboksilat (54)
[0623] U suvoj flašici sa okruglim dnom, prethodno ispranoj tri puta sa argonom, monomer 45 (310 mg, 0,48 mmol), monomer 53 (513 mg, 0,53 mmol), K2CO3(103 mg, 0,48 mmol) i TBAI (18 mg, 0,048 mmol) su rastvoreni u suvom DMF (5 mL) i smeša je zagrevana na 60°C. Reakcija je ostavljena da se meša do kraja (nakon čega sledi LCMS), pre nego što se razblaži sa EtOAc (50 mL), ispere sa H2O (75 mL) i slanim rastvorom (50 mL). Organski slojevi su osušeni preko MgSO4, filtrirani i isparljive materije su uklonjene u vakuumu. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu (CHCl3/MeOH ; 100% do 98:2) i čist proizvod 54 je izolovan kao bela čvrsta supstanca (280,3 mg, 46% prinos).<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8,93 (s, 1H), 7,85 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,52 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,40 (s, 1H), 7,28 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,19 (s, 2H), 6,69 (s, 1H), 6,63 (s, 1H), 6,61 (s, 1H), 5,90 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 5,81 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 4,60 (p, J = 7,1 Hz, 1H), 4,20 (dd, J = 15,9, 11,1 Hz, 4H), 3,88 (s, 3H), 3,87 (s, 3H), 3,84 (dd, J = 6,3, 4,5 Hz, 1H), 3,68 (td, J = 10,2, 3,7 Hz, 1H), 3,38 - 3,22 (m, 2H), 2,89 - 2,73 (m, 2H), 2,48 - 2,26 (m, 4H), 1,47 (d, J = 7,0 Hz, 3H), 1,42 (m, 1H), 1,30 (s, 18H), 1,02 (d, J = 7,0 Hz, 3H), 0,89 (s, 9H), 0,86 (s, 10H),
2
0,84 (s, 6H), 0,72 (dd, J = 8,1, 3,3 Hz, 2H), 0,57 - 0,50 (m, 1H), 0,45 (m, 1H), 0,28 - 0,20 (m, 12H) ; ES<+>= 2,16 min, m/z 1297,55 [M+Na]<+>.
(ii) terc-butil (11S)-8-(3-(((11S)-10-(terc-butoksikarbonil)-11-((terc-butildimetilsilil)oksi)-2-(4-((2S,5S)-37-(2,5-diokso-2,5-dihidro-1H-pirol-1-il)-5-izopropil-2-metil-4,7,35-triokso-10,13,16,19,22,25,28,31-oktaoksa-3,6,34-triazaheptatriacontanamido)fenil)-7-metoksi-5-okso-5,10,11,11a-tetrahidro-1H-benzo[ejpirolo[1,2-a][1,4]diazepin-8-il)oksi)propoksi)-11-((terc-butildimetilsilil)oksi)-2-ciklopropil-7-metoksi-5-okso-11,11a-dihidro-1H-benzolo[1,2-a][1,4]diazepin-10(5H)-karboksilat (55)
[0624] U suvoj flašici sa okruglim dnom, prethodno ispranoj tri puta sa argonom, dimer 54 (270 mg, 0,021 mmol) je rastvoren u suvom CH2Cl2(6 mL). EDCI hidrohlorid (40 mg, 0,021 mmol) i maleimid-PEG8-OH (123 mg, 0,021 mmol) su naknadno dodati rastvoru koji je ostavljen da se meša na sobnoj temperaturi do završetka (≈1 sat, praćen LCMS). Po završetku, reakcija se razblaži sa CH2Cl2(50 mL) i organska faza se ispira sa H2O (50 mL) i slanim rastvorom (50 mL) pre nego što se osuši preko MgSO4, filtrira i isparljive materije se uklone rotacionim isparavanjem pod redukovanim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu (CHCl3/MeOH 100% do 97:3) i čist proizvod 55 je izolovan kao svetlo žuta pena (318,8 mg, 82% prinos).<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3) 8,64 (s, 1H), 7,69 (d, J = 15,0 Hz, 2H), 7,39 (s, 1H), 7,28 (d, J = 15,0 Hz, 2H), 7,26, (s, 1H), 7,22 (s, 1H), 7,20 (s, 1H),7,03 (d, J = 4,5 Hz, 1H), 6,92 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 6,69 (s, 2H), 6,65 (s, 1H), 6,63 (s, 1H), 6,37 (t, J = 4,7 Hz, 1H), 5,89 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 5,81 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 4,67 (p, J = 7,2 Hz, 1H), 4,27 - 4,12 (m, 5H), 3,88 (s, 3H), 3,87 (s, 3H), 3,84 (t, J = 5,6 Hz, 1H), 3,73 - 3,56 (m, 46H), 3,53 (t, J = 5,0 Hz, 1H), 3,41 (dd, J = 10,3, 5,2 Hz, 1H), 3,35 - 3,22 (m, 1H), 2,90 - 2,74 (m, 1H), 2,67 (ddd, J = 13,6, 9,2, 4,1 Hz, 1H), 2,52 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 2,48 - 2,45 (m, 1H), 2,45 - 2,37 (m, 1H), 2,37 - 2,22 (m, 1H), 2,02 (t, J = 9,0 Hz, 1H), 1,45 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,42 - 1,37 (m, 1H), 1,30 (s, 9H), 0,99 (s, 6H), 0,89 (s, 9H), 0,86 (s, 9H), 0,78 - 0,67 (m, 2H), 0,58 - 0,49 (m, 1H), 0,48 - 0,42 (m, 1H), 0,28 - 0,20 (m, 12H) ; ES<+>= 2,15 min, m/z 1891,60 [M+Na]<+>
(iii) N-((2S)-1-(((2S)-1-((4-(8-(3-((2-ciklopropil-7-metoksi-5-okso-5,11a-dihidro-1H-benzo[e]pirolo[1,2-a][1,4]diazepin-8-il)oksi)propoksi)-7-metoksi-5-okso-5,11a-dihidro-1H-benzo[e]pirolo[1,2-a][1,4]diazepin-2-il)fenil)amino)-1-oksopropan-2-il)amino)-3-metil-1-oksobutan-2-il)-1-(3-(2,5-diokso-2,5-dihidro-1-il)propanamido)-3,6,9,12,15,18,21,24-oktaoksaheptakozan-27-amid (18)
[0625] Dimer 55 (318 mg, 0,017 mmol) je rastvoren u suvom H2O (160 µL) i suspenzija je ohlađena na 0°C pre nego što je dodat TFA (4 mL) i smeša je ostavljena da se meša do završetka (≈20 minuta, praćeno LCMS). Po završetku, reakcija je razblažena sa CH2Cl2(50 mL) i organska faza je isprana ledeno hladnim NaHCO3(2 x 50 mL), H2O (50 mL)) i slanim rastvorom (50 mL) pre nego što je osušena preko MgSO4, filtrirana i isparljive materije su uklonjene u vakuumu. Sirovi materijal je direktno prečišćen preparativnom HPLC reverzne faze (H2O/CH3CN, videti uslove ispod) i čist proizvod 18 je izolovan kao žuta čvrsta supstanca (61 mg, prinos 26%).<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8,76 (s, 1H), 7,88 (d, J = 3,9 Hz, 1H), 7,78 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,51 - 7,48 (m, 2H), 7,43 (s, 1H), 7,33 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,20 (s, 1H), 7,15 (s, 1H), 6,86 (s, 1H), 6,84 (s, 1H), 6,74 (s, 1H), 6,68 (s, 2H), 6,62 (s, 1H), 4,69 (p, J = 7,1 Hz, 1H), 4,41 - 4,24 (m, 5H), 4,24 - 4,16 (m, 2H), 3,93 (s, 3H), 3,92 (s, 3H), 3,83 (t, J = 7,2 Hz, 4H), 3,67 - 3,56 (m, 33H), 3,55 - 3,49 (m, 1H), 3,39 (dt, J = 14,0, 7,0 Hz, 1H), 3,10 (dd, J = 15,0, 11,6 Hz, 1H), 2,89 (dd, J = 16,9, 3,6 Hz, 1H), 2,75 - 2,64 (m, 1H), 2,51 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 2,48 - 2,44 (m, 1H), 2,44 - 2,38 (m, 1H), 2,28 (dt, J = 13,3, 6,8 Hz, 1H), 1,47 (s, 1H), 1,46 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,02 (dd, J = 10,7, 6,9 Hz, 6H), 0,82 - 0,72 (m, 2H), 0,55 (q, J = 5,2 Hz, 2H). ES<+>= 1,39 min, m/z 1404,45 [M+H]<+>
Primer 4: aktivnost oslobođenih jedinjenja
K562 test
[0626] K562 humane hronične mijeloidne leukemije održavani su u RPM11640 medijumu uz 10% fetalnog telećeg seruma i 2 mM glutamina na 37°C u vlažnoj atmosferi sa 5% CO2, i inkubirani su određenom dozom leka tokom 1 sata ili 96 sati na 37°C u mraku. Inkubacija je prekinuta centrifugiranjem (5 min, 300 g), i ćelije su jednom isprane medijumom bez leka. Sledeći odgovarajući tretman leka, ćelije su prenesene u mikrotitarske ploče sa 96 rupica (10 ćelija po rupici, 8 rupica po uzorku). Ploče su zatim čuvane u mraku na 37°C u vlažnoj atmosferi sa 5% CO2. Ispitivanje se temelji na sposobnosti vitalnih ćelija da smanje žutu rastvorivu tetrazolijevu so, 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difenil-2H-tetrazolij-bromid (MTT, Aldrich-Sigma) u netopiv ljubičast talog formazana. Nakon inkubacije ploča tokom 4 dana (kako bi kontrolne ćelje povećale broj otprilike 10 puta), 20 ml MTT rastvora (5 mg/ml u fosfatnom puferu) dodato je u svaku rupicu i ploče su dalje inkubirane 5 sati. Ploče su zatim podvrgnute centrifugi 5 minuta pri 300 g i većins medijuma je pipetirana od ćelijskog taloga, ostavljajući 10-20 ml po rupica. DMSO (200 mL) je dodat u svaki rupica, a uzorci mešani kako bi se osiguralo potpuno mešanje. Optička gustina je zatim očitana na talasnoj dužini od 550 nm na Titertek Multiscan ELISA čitaču, i kriva doza-odgovor je konstruisana. Za svaku krivu, IC50 vrednost je uzeta kao doza neophodna da se smanji konačna optičke gustina na 50% kontrolne vrednosti.
Primer 5: formiranje konjugata
Opšta procedura konjugovanja antitela
[0627] Antitela su razređena do 1-5 mg/ml u puferu za smanjenje (primeri: fosfatom puferovan fiziološki rastvor PBS, histidin pufer, natrijum boratni pufer, TRIS pufera). Sveže pripremljen rastvor TCEP (tris(2-karboksietil)fosfin hidrohlorid) dodat je kako bi se selektivno redukovali cistein disulfidni mostovi. Količina TCEP je proporcionalna ciljanom nivou smanjenja, sa 1 do 4 molarnih ekvivalenata po antitelu, što stvara 2 do 8 reaktivnih tiola. Nakon redukcije tokom nekoliko sati na 37°C, smesa je ohlađena na sobnu temperaturu i višak veznika za lek (B) dodat je kao razređen DMSO rastvor (konačni sadržaj DMSO do 10% volumena/volumen reakcione smese). smesa je blago trešena na ili 4°C ili sobne temperature, u prikladnom trajanju, obično 1-3 sata. Višak reaktivnih tiola može reagovati sa "reagensom za ograničavanje tiola" kao što je N-etil maleimid (NEM) na kraju konjugacije. Konjugati antitela leka su koncentrisani pomoću centrifugalnih spin-filtera sa odsečkom molekulske mase od 10 kDa ili više, a zatim pročišćeni filtracijom tangencijalnog protoka (TFF) ili brzom proteinskom tečnom hromatografijom (FPLC). Odgovarajući konjugati antitela lekova mogu se odrediti analizom Tečnom hromatografijom velikog učinka (HPLC) ili Tečnom hromatografijom ultra-velikog učinka (UHPLC) kako bi se procenio odnos lek-po-antitelu (DAR) pomoću reverzno-fazne hromatografije (RP) ili hidrofobno-interakcijske hromatografije (HIC), u kombinaciji sa UV-vidljivom, fluorescentnom ili masa-spektrometar detekcijom; agregatn nivo i monomerska čistoća mogu se analizirati pomoću HPLC ili UHPLC koristeći hromatografiju koja isključuje po veličini sa UV-vidljivom, fluorescentnom ili masa-spektrometar detekcijom. Konačnu koncentraciju konjugata određuje kombinacija spektroskopske (apsorbcija na 280, 214 i 330 nm) i biohemijske analize (bicinhoninska kiseline BCA; Smith, PK, i dr, (1985) Anal Biochem 150 (1) 76- 85, korišćenjem poznatih koncentracija-IgG antitela kao referenca). Konjugati antitela i leka su uglavnom sterilno filtrirani koristeći filtre od 0,2 mm u aseptičkim uslovima, i čuvani na 4°C, -20°C ili -80°C.
[0628] Primeri pojedinih konjugacija opisani su u nastavku.
ADC1A
[0629] Antitielo 1 (15 mg, 100 nanomola) razređeno je u 13,5 ml redukcionog pufera koji sadrži 10 mM natrijum borata pH 8.4, 2.5 mM EDTA i konačnoj koncentraciji antitela od 1.25 mg/ml. Dodato je 20 mM TCEP rastvora (2 molarni ekvivalent/antitela, 200 nanomola, 10 µl) i redukciona smesa je zagrejana na 37°C tokom dva sata u orbitalnom inkubatoru. Nakon hlađenja na sobnoj temperaturi, jedinjenje A je dodato kao DSMO rastvor (5 molarni ekvivalent/antitelo, 510 nanomola, u 1,2 mL DMSO). Rastvor se meša 3 sata na sobnoj temperaturi, a zatim se gasi dodavanjem N-etilmaleimida (NEM, 10 molarni ekvivalent, 1000 nanomola, 100 µL na 10 mM), a zatim se prenese u 15mL Amicon Ultracell 50KDa MVCO centrifugalni filter, koncentriran na oko 2,0 mL i injektira se u AKTA™ FPLC koristeći kolonu GE Healthcare KSK16/70 koja se pakuje sa Superdek 200 PG, eluirajući sa 1,5 mL/min sterilnog filtriranog fiziološkog rastvora fosfata (PBS). Frakcije koje odgovaraju ADC1B monomernom vrhu se sabiraju, analiziraju i filtriraju sterilno. BCA test daje koncentraciju finalnog ADC1B na 1,23 mg/mL u 10,0 mL, dobijena masa je 12,5 mg (83% prinos). UHPLC analiza na sistemu Shimadzu Prominence pomoću kolone Agilent PLRP-S 1000 A 8um 150 k 2,1 mm uz eluiranje sa gradijentom vode i acetonitrila na smanjenom uzorku ADC1B na 280 nm i 330 nm (specifični za lijek-linker) mešavina lakih i teških lanaca prikačenih na nekoliko molekula B, u skladu sa odnosom drogom na antitelo (DAR) od 2,5 molekula A po antitelu. SEC analiza na AKTA ™ FPLC koristeći kolonu GE Healthcare KSK16 / 70, pakiranu Superdek 200 PG, eluira sa sterilnim filtriranim fiziološkim fiziološkim fiziološkim rastvorom (PBS) na uzorku ADC1B pri 280 nm, pokazuje čistoću monomera od 99,4% sa 0,6% agregata.
ADC2A
[0630] Antitelo2 (15 mg, 100 nanomola) se razblaži u 13,5 mL redukcionog pufera koji sadrži 10 mM natrijumborata pH 8,4, 2,5 mM EDTA i konačnu koncentraciju antitela od 1,1 mg/mL. Dodaje se 40 mM rastvor TCEP (3 molarni ekvivalent/antitelo, 300 nanomola, 7,5 µL) i redukciona smeša se zagreva na 37°C jedan sat u orbitalnom inkubatoru. Nakon hlađenja do sobne temperature, dodaje se A kao rastvor DMSO (7 molarni ekvivalent/antitelo, 700 nanomola, u 1,0 mL DMSO). Rastvor se meša 2,5 sata na sobnoj temperaturi, a zatim gasi dodavanjem N-etilmaleimida (NEM, 30 molarnih ekvivalenta, 3000 nanomola, 100 µL na 30 mM), a zatim se prebacuje u rotacioni filter od 15 mL Amicon Ultracell 50KDa MWCO, koncentrovan na oko 2,0 mL i ubrizgano u AKTA ™FPLC pomoću kolone GE Healthcare XK16/70 upakovane u Superdex 200 PG, eluirajući sa 1,5 mL/min sterilnog filtriranog fiziološkog rastvora puferisanog fosfatom (PBS). Frakcije koje odgovaraju vrhuncu ADC2A monomera se objedinjuju, koncentrišu se pomoću 15 mL Amicon Ultracell 50KDa MWCO rotacionog filtera, analiziraju i
4
sterilno filtriraju. BCA test daje koncentraciju konačnog ADC2A na 3,94 mg/mL u 2,7 mL, dobijena masa je 10,6 mg (prinos 71%). UHPLC analiza na Shimadzu Prominence sistemu upotrebom Agilent PLRP-S 1000 A 8um 150 x 2,1 mm kolone eluiranjem gradijentom vode i acetonitrila na smanjenom uzorku ADC2A na 280 nm i 330 nm (specifično za vezujući lek) pokazuje smešu lakih i teških lanaca vezanih za nekoliko molekula A, u skladu sa odnosom leka po antitelu (DAR) od 2,4 molekula A po antitelu. UHPLC analiza na Shimadzu Prominence sistemu pomoću Waters Acquity UPLC BEH200 SEC 1,7 um 4,6 x 150 mm kolone eluiranjem sterilnim filtriranim fiziološkim rastvorom puferskim fosfatom (PBS) na uzorku ADC2A na 280 nm pokazuje monomernu čistoću 97,5% sa 1,9 % agregata.
[0631] Kao što se ovde koristi, "Antitelo 1" je anti-Her2 antitelo koje sadrži VH domen koji ima sekvencu prema SEQ ID NO.1 i VL domenu koji ima sekvencu prema SEQ ID NO.2.
[0632] Kako se ovde koristi, "Antitelo 2" je anti-CD25 antitelo ("Simulect") koje sadrži VH domen koji ima sekvencu prema SEQ ID NO.3 i VL domen koji ima sekvencu prema SEQ ID NO.4,
Primer 6: In vitro ADC ispitivanja efikasnosti
[0633] Citotoksičnost ADC2A procenjena je u testu citotoksičnosti kako je iznad opisano, a rezultati su prikazani na Slici 1, ○ predstavlja ćelijsku liniju koja eksprimira antigen (ćelije SU-DHL-1 iz Leibniz Instituta DSMZ-Nemačka kolekcija mikroorganizama i ćelijskih kultura.), i ▲ predstavlja ćelijsku liniju koja ne eksprimira antigen (Daudi ćelije iz američke zbirke tipičnih kultura) i trake grešaka označavaju ± standardnu devijaciju
Primer 7: In vivo ispitivanja delotvornosti ADC
[0634] CB.17 SCID miševa, starih 8 do 12 nedelja, ubrizgan je sa 1 mm tumorskim fragmenatima dobijenim iz BT-474 ćelijske linije potkožno na slabinama. Kada tumori dostignu prosečnu veličinu od 100 - 150 mm<3>, počinje tretman. Miševi se mere dva puta nedeljno. Veličina tumora meri se dva puta nedeljno. Životinje se prate zasebno. Kraj eksperimenta je zapremina tumora od 1000 mm<3>ili 60 dana, šta pre nastupi. Odgovori se mogu pratiti duže.
[0635] Grupama od 10 ksenograftnih miševa se intravenski ubrizgava 0.2 mL konjugata leka i antitela (ADC), ili golog antitela, u fosfatno puferisanom fiziološkom rastvoru (nosač) i 0.2 mL samog nosača. Koncentracija ADC je prilagođena da se dobije, na primer, 0,3 ili 1,0 mg ADC/kg telesne težine, u jednoj dozi. Tri identične doze mogu se dati svakom mišu u razmacima od, na primer, 1 nedelje.
[0636] Slika 1 prikazuje učinak na srednju zapreminu tumora u grupama od 10 miševa doziranih sa ADC1B na 0,3 (svetlo plavo) ili 1,0 mg/kg (zeleno) u odnosu na nosače (crno) ili gole Ig (tamno plavo) kontrole.
Skraćenice
[0637]
Ac acetil
Acm acetamidometil
Alloc aliloksikarbonil
Boc di-tert-butil dikarbonat
t-Bu tert-butil
Bzl benzil, gde je Bzl-Ome methoksibenzil, a Bzl-Me je metilbenzene
Cbz ili Z benziloksi-karbonil, gde su Z-Cl i Z-Br hloro- i bromobenziloksi karbonil, respektivno DMF N,N-dimetilformamid
Dnp dinitrogenil
DTT dithiotreitol
Fmoc 9H-fluoren-9-ilmethoksikarbonil
imp N-10 imine zaštitna grupa: 3-(2-metoksiethoksi)propanoat-Val-Ala-PAB
MC-Osu maleimidocaproil-O-N-sucinimid
Moc methoksikarbonil
MP maleimidopropanamid
Mtr 4-metoksi-2,3,6-trimethtilbenzenesulfonil PAB para-aminobenziloksikarbonil
PEG etileneoksi
PNZ p-nitrobenzil karbamat
Psec 2-(phenilsulfonil)ethoksikarbonil TBDMS tert-butildimetilsilil
TBDPS tert-butildiphenilsilil
Teoc 2-(trimetilsilil)ethoksikarbonil
Tos tosil
Troc 2,2,2-trihlorethoksikarbonil hloride Trt tritil
Xan ksantil
SEKVENCE
[0638]

Claims (14)

  1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje koje je A:
    i njegove soli i solvati.
  2. 2. Konjugat formule ConjA:
    gde CBA predstavlja agens za vezivanje ćelija. 3. Konjugat prema patentnom zahtevu 2, gde je agens za vezivanje ćelija antitelo ili njegov fragment za antigen povezan sa tumorom. 4. Konjugat prema patentnom zahtevu 3, gde su antitelo ili fragment antitela antitelo koje se vezuje na jedan ili više tumor-pridruženih antigena ili površinskih ćelijskih receptora, izabranih od (1)-(88): (1) BMPR1B; (2) E16; (3) STEAP1; (4) 0772P; (5) MPF; (6) Napi3b; (7) Sema 5b; (8) PSCA hlg; (9) ETBR; (10) MSG783; (11) STEAP2; (12) TrpM4; (13) CRIPTO; (14) CD21; (15) CD79b; (16) FcRH2; (17) HER2; (18) NCA; (19) MDP; (20) IL20R-alfa; (21) Brevican; (22) EphB2R; (23) ASLG659; (24) PSCA; (25) GEDA; (26) BAFF-R; (27) CD22; (28) CD79a; (29) CXCR5; (30) HLA-DOB; (31) P2X5; (32) CD72; (33) LY64; (34) FcRH1; (35) IRTA2; (36) TENB2; (37) PSMA - FOLH1; (38) SST; (38.1) SSTR2; (38.2) SSTR5; (38.
  3. 3) SSTR1; (38.
  4. 4)SSTR3; (38.
  5. 5) SSTR4; (39) ITGAV; (40) ITGB6; (41) CEACAM5; (42) MET; (43) MUC1; (44) CA9; (45) EGFRvIII; (46) CD33; (47) CD 19; (48) IL2RA; (49) AXL; (50) CD30 - TNFRSF8; (51) BCMA - TNFRSF17; (52) CT Ags - CTA; (53) CD174 (Lewis Y) - FUT3; (54) CLEC14A; (55) GRP78 - HSPA5; (56) CD70; (57) Antigeni specifični za matične ćelije;
    (72) CD37; (73) CD138 - SDC1; (74) CD74; (75) Claudini - CLs; (76) EGFR; (77) Her3; (78) RON - MST1 R; (79) EPHA2; (80) CD20 - MS4A1; (81) Tenascin C - TNC; (82) FAP; (83) DKK-1; (84) CD52; (85) CS1 - SLAMF7; (86) Endoglin - ENG; (87) Aneksin A1 - ANXA1; (88) V-CAM (CD106) – VCAM1. 5. Konjugat prema bilo kom od patentnih zahteva 2 do 4, gde su antitelo ili fragment antitela cisteinsko genetski modifikovano antitelo.
  6. 6. Konjugat prema bilo kom od patentnih zahteva 2 do 5, gde je unos leka (p) od lekova (D) na antitela (Ab) ceo broj od 1 do oko 8.
  7. 7. Konjugat prema patentom zahtevu 6, gde p je 1, 2, 3 ili 4.
  8. 8. Kompozicija koji sadrži smesu konjugovanih jedinjenja leka prema bilo kom od patentnih zahteva 2 do 7, gde je prosečan unos leka po antitelu u smesi konjugata antitela i leka od otprilike 1 do otprilike 8.
  9. 9. Konjugat prema bilo kom od patentnih zahteva 2 do 7 ili kompozicija prema patentnom zahtevu 8, za upotrebu u terapiji.
  10. 10. Konjugat prema bilo kom od patentnih zahteva 2 do 7 ili kompozicija prema patentnom zahtevu 8, za upotrebu u lečenju proliferativnih bolesti kod pacijenta.
  11. 11. Konjugat ili kompozicija za upotrebu prema patentnom zahtevu 10, gde bolest je karcinom.
  12. 12. Farmaceutska kompozicija koja sadrži konjugat prema bilo kom od patentnih zahteva 2 do 7 ili kompozicija prema patentnom zahtevu 8 i farmaceutski prihvatljiv razređivač, nosač ili ekscipijent.
  13. 13. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 12 koja dalje sadrži terapeutski delotvornu količinu hemoterapeutskog agensa.
  14. 14. Postupak dobijanja konjugata prema bilo kom od patentnih zahteva 2 do 7, koji postupak uključuje korak reakcije agensa za vezivanje ćelija sa jedinjenjem A, kako je definisano u patentnom zahtevu 1.
RS20210002A 2012-10-12 2013-10-11 Pirolobenzodiazepini i njihovi konjugati RS61294B1 (sr)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261712924P 2012-10-12 2012-10-12
EP18187765.5A EP3470086B1 (en) 2012-10-12 2013-10-11 Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS61294B1 true RS61294B1 (sr) 2021-02-26

Family

ID=49474386

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20190024A RS58203B1 (sr) 2012-10-12 2013-10-11 Pirolobenzodiazepini i njihovi konjugati
RS20210002A RS61294B1 (sr) 2012-10-12 2013-10-11 Pirolobenzodiazepini i njihovi konjugati

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20190024A RS58203B1 (sr) 2012-10-12 2013-10-11 Pirolobenzodiazepini i njihovi konjugati

Country Status (24)

Country Link
US (1) US9415117B2 (sr)
EP (2) EP2906248B1 (sr)
JP (2) JP6367811B2 (sr)
KR (3) KR20150083994A (sr)
CN (2) CN110256469B (sr)
AU (1) AU2013328674B2 (sr)
BR (1) BR112015008251B1 (sr)
CA (2) CA2885315C (sr)
CY (2) CY1121390T1 (sr)
DK (2) DK3470086T3 (sr)
ES (2) ES2713164T3 (sr)
HR (2) HRP20190366T1 (sr)
HU (2) HUE043738T4 (sr)
LT (2) LT2906248T (sr)
MX (2) MX362004B (sr)
NZ (2) NZ705910A (sr)
PL (2) PL2906248T3 (sr)
PT (2) PT3470086T (sr)
RS (2) RS58203B1 (sr)
SI (2) SI3470086T1 (sr)
SM (2) SMT202100265T1 (sr)
TR (1) TR201902494T4 (sr)
WO (1) WO2014057073A1 (sr)
ZA (1) ZA201501781B (sr)

Families Citing this family (81)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB0819095D0 (en) 2008-10-17 2008-11-26 Spirogen Ltd Pyrrolobenzodiazepines
KR101772354B1 (ko) 2010-04-15 2017-08-28 시애틀 지네틱스, 인크. 표적화된 피롤로벤조디아제핀 접합체
ES2623057T3 (es) 2010-04-15 2017-07-10 Medimmune Limited Pirrolobenzodiazepinas usadas para tratar enfermedades proliferativas
WO2013041606A1 (en) 2011-09-20 2013-03-28 Spirogen Sàrl Pyrrolobenzodiazepines as unsymmetrical dimeric pbd compounds for inclusion in targeted conjugates
MX358757B (es) 2011-10-14 2018-09-03 Seattle Genetics Inc Pirrolobenzodiazepinas y conjugados dirigidos.
BR112014008888A2 (pt) 2011-10-14 2017-04-18 Seattle Genetics Inc pirrolobenzodiazepinas
US9388187B2 (en) 2011-10-14 2016-07-12 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepines
US9526798B2 (en) 2011-10-14 2016-12-27 Seattle Genetics, Inc. Pyrrolobenzodiazepines and targeted conjugates
BR112015002193A2 (pt) * 2012-08-02 2017-07-04 Genentech Inc anticorpos anti-etbr e imunoconjugados
KR101645905B1 (ko) 2012-10-12 2016-08-04 스피로즌 살 피롤로벤조디아제핀 및 그의 컨주게이트
ES2680153T3 (es) 2012-10-12 2018-09-04 Adc Therapeutics Sa Conjugados de anticuerpos anti-PSMA-pirrolobenzodiazepinas
HRP20181646T2 (hr) 2012-10-12 2019-08-09 Adc Therapeutics Sa Konjugati pirolobenzodiazepin - anti-psma protutijela
WO2014057120A1 (en) 2012-10-12 2014-04-17 Adc Therapeutics Sàrl Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
HRP20190366T1 (hr) 2012-10-12 2019-04-19 Medimmune Limited Pirolobenzodiazepini i njihovi konjugati
PL2906251T3 (pl) 2012-10-12 2018-02-28 Adc Therapeutics Sa Koniugaty pirolobenzodiazepina-przeciwciało anty-CD22
AU2013328673B2 (en) 2012-10-12 2017-07-13 Medimmune Limited Synthesis and intermediates of pyrrolobenzodiazepine derivatives for conjugation
WO2014057117A1 (en) * 2012-10-12 2014-04-17 Adc Therapeutics Sàrl Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
MX364328B (es) 2012-10-12 2019-04-23 Medimmune Ltd Conjugados del anticuerpo pirrolobenzodiazepina.
CN105246894A (zh) 2012-12-21 2016-01-13 斯皮罗根有限公司 用于治疗增殖性和自身免疫疾病的非对称吡咯并苯并二氮杂卓二聚物
AU2013366493B2 (en) 2012-12-21 2017-08-24 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
JP6445519B2 (ja) 2013-03-13 2018-12-26 メドイミューン・リミテッドＭｅｄＩｍｍｕｎｅ Ｌｉｍｉｔｅｄ ピロロベンゾジアゼピン及びそのコンジュゲート
WO2014140862A2 (en) 2013-03-13 2014-09-18 Spirogen Sarl Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
CN105517577A (zh) * 2013-06-21 2016-04-20 先天制药公司 多肽的酶促偶联
GB201317981D0 (en) 2013-10-11 2013-11-27 Spirogen Sarl Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
US9950078B2 (en) 2013-10-11 2018-04-24 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
US10010624B2 (en) 2013-10-11 2018-07-03 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
GB201317982D0 (en) 2013-10-11 2013-11-27 Spirogen Sarl Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
EP3054986B1 (en) 2013-10-11 2019-03-20 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
TW201617368A (zh) 2014-09-05 2016-05-16 史坦森特瑞斯公司 新穎抗ｍｆｉ２抗體及使用方法
WO2016037644A1 (en) 2014-09-10 2016-03-17 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
GB201416112D0 (en) 2014-09-12 2014-10-29 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
AU2015314954B2 (en) 2014-09-12 2021-05-13 Genentech, Inc. Anti-HER2 antibodies and immunoconjugates
US10780096B2 (en) 2014-11-25 2020-09-22 Adc Therapeutics Sa Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
ES2747386T3 (es) 2015-01-14 2020-03-10 Bristol Myers Squibb Co Dímeros de benzodiacepina unidos por heteroarileno, conjugados de los mismos y métodos de preparación y uso
WO2016115191A1 (en) 2015-01-14 2016-07-21 Bristol-Myers Squibb Company Benzodiazepine dimers, conjugates thereof, and methods of making and using
GB201506389D0 (en) 2015-04-15 2015-05-27 Berkel Patricius H C Van And Howard Philip W Site-specific antibody-drug conjugates
GB201506394D0 (en) * 2015-04-15 2015-05-27 Berkel Patricius H C Van And Howard Philip W Site-specific antibody-drug conjugates
GB201506402D0 (en) * 2015-04-15 2015-05-27 Berkel Patricius H C Van And Howard Philip W Site-specific antibody-drug conjugates
GB201506405D0 (en) * 2015-04-15 2015-05-27 Berkel Patricius H C Van And Howard Philip W Site-specific antibody-drug conjugates
GB201506411D0 (en) 2015-04-15 2015-05-27 Bergenbio As Humanized anti-axl antibodies
EA201792516A1 (ru) 2015-06-23 2018-05-31 Бристол-Маерс Сквибб Компани Макроциклические димеры бензодиазепина, их конъюгаты, получение и применение
NZ741261A (en) 2015-10-02 2019-11-29 Genentech Inc Pyrrolobenzodiazepine antibody drug conjugates and methods of use
TWI726942B (zh) 2015-11-30 2021-05-11 美商輝瑞股份有限公司 位點專一性ｈｅｒ２抗體藥物共軛體
GB201601431D0 (en) 2016-01-26 2016-03-09 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepines
GB201602359D0 (en) 2016-02-10 2016-03-23 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepine Conjugates
GB201602356D0 (en) 2016-02-10 2016-03-23 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepine Conjugates
WO2017184942A1 (en) 2016-04-21 2017-10-26 Abbvie Stemcentrx Llc Novel anti-bmpr1b antibodies and methods of use
GB201607478D0 (en) 2016-04-29 2016-06-15 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepine Conjugates
US10143695B2 (en) 2016-05-18 2018-12-04 Mersana Therapeutics, Inc. Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
JP7049276B2 (ja) 2016-06-24 2022-04-06 メルサナ セラピューティクス インコーポレイテッド ピロロベンゾジアゼピンおよびその結合体
GB201617466D0 (en) 2016-10-14 2016-11-30 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepine conjugates
GB201619490D0 (en) * 2016-11-17 2017-01-04 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepine conjugates
EP3348560A1 (en) 2017-01-16 2018-07-18 Spago Nanomedical AB Chemical compounds for coating of nanostructures
UA125198C2 (uk) 2017-02-08 2022-01-26 Ейдісі Терапьютікс Са Кон'югати піролобензодіазепін-антитіло
GB201702031D0 (en) 2017-02-08 2017-03-22 Medlmmune Ltd Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
SI3612537T1 (sl) 2017-04-18 2022-10-28 Medimmune Limited Konjugati pirolobenzodiazepina
WO2018193102A1 (en) 2017-04-20 2018-10-25 Adc Therapeutics Sa Combination therapy with an anti-axl antibody-drug conjugate
JP7145891B2 (ja) 2017-06-14 2022-10-03 アーデーセー セラピューティクス ソシエテ アノニム 抗ｃｄ１９ ａｄｃを投与するための投与レジメ
BR112020003003A2 (pt) 2017-08-18 2020-08-11 Medimmune Limited conjugados de pirrolobenzodiazepina
CN117003875A (zh) 2017-09-29 2023-11-07 第一三共株式会社 抗体或其功能性片段、多核苷酸、表达载体、宿主细胞、糖链重构抗体、药物组合物、应用
CN111417409B (zh) 2017-11-14 2022-07-08 麦迪穆有限责任公司 吡咯并苯并二氮杂䓬缀合物
US11638760B2 (en) 2017-11-27 2023-05-02 Mersana Therapeutics, Inc. Pyrrolobenzodiazepine antibody conjugates
CU24558B1 (es) * 2017-11-28 2021-12-08 Ct Inmunologia Molecular Anticuerpos monoclonales que reconocen al receptor del factor de crecimiento epidérmico y sus fragmentos derivados
JP2021506883A (ja) 2017-12-21 2021-02-22 メルサナ セラピューティクス インコーポレイテッド ピロロベンゾジアゼピン抗体結合体
GB201803342D0 (en) 2018-03-01 2018-04-18 Medimmune Ltd Methods
MX2020010110A (es) 2018-03-28 2020-11-06 Mitsubishi Tanabe Pharma Corp Conjugados de farmacos de agentes de union monoclonales de cmet, y usos de los mismos.
GB201806022D0 (en) 2018-04-12 2018-05-30 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
GB201811364D0 (en) * 2018-07-11 2018-08-29 Adc Therapeutics Sa Combination therapy
GB201902495D0 (en) 2019-02-25 2019-04-10 Medimmune Ltd Methods of synthesis and intermediates
MX2021010477A (es) 2019-03-15 2021-10-01 Medimmune Ltd Dimeros de azetidobenzodiazepina y conjugados que los comprenden para uso en el tratamiento de cancer.
CA3133333A1 (en) 2019-04-30 2020-04-30 Brian Scott GARRISON Chimeric receptors and methods of use thereof
CN114302745A (zh) * 2019-06-10 2022-04-08 Adc治疗有限公司 包含抗cd19抗体药物缀合物以及pi3k抑制剂或第二剂的组合疗法
EP4013494A1 (en) 2019-08-12 2022-06-22 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Macrophage stimulating 1 receptor (mst1r) variants and uses thereof
US20240123081A1 (en) 2019-10-25 2024-04-18 Medimmune, Llc Branched moiety for use in conjugates
US11124568B1 (en) * 2020-08-19 2021-09-21 Vitruviae LLC CD3/CD25 antibodies for neuro-immune diseases
TW202302638A (zh) * 2021-02-19 2023-01-16 美商健生生物科技公司 用於靶向調節性ｔ細胞以增強免疫監視之材料及方法
KR102285542B1 (ko) 2021-03-09 2021-08-04 주식회사 레젠 투광등용 리플렉터 및 이를 가진 투광등
KR20240146036A (ko) * 2022-03-11 2024-10-07 시그마-알드리치 컴퍼니., 엘엘씨 피롤로벤조디아제핀 중간체 및 이의 용도
US20250367307A1 (en) 2022-06-30 2025-12-04 Toray Industries, Inc. Pharmaceutical composition for cancer treatment and/or prevention
CN117624167B (zh) * 2022-08-18 2026-02-17 四川大学 吡咯并苯并二氮杂卓-蒽酰亚胺杂交分子及其制备方法和用途
WO2025096716A1 (en) 2023-11-01 2025-05-08 Incyte Corporation Anti-mutant calreticulin (calr) antibody-drug conjugates and uses thereof

Family Cites Families (130)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3361742A (en) 1964-12-07 1968-01-02 Hoffmann La Roche 5-oxo-1h-pyrrolo-[2, 1-c][1, 4]-benzodiazepin-2-crylamides
US3523941A (en) 1967-03-06 1970-08-11 Hoffmann La Roche Benzodiazepine compounds and process for their preparation
US3524849A (en) 1967-10-27 1970-08-18 Hoffmann La Roche Process for the preparation of pyrrolo-benzodiazepine acrylamides and intermediates useful therein
IL33558A (en) 1968-12-30 1973-10-25 Fujisawa Pharmaceutical Co Antibiotic pyrrolo-benzodiazepine compound,its derivatives and processes for their production
DE1965304A1 (de) 1968-12-30 1970-07-23 Fujisawa Pharmaceutical Co Benzdiazepinon-Verbindungen und Verfahren zu ihrer Herstellung
JPS4843755B1 (sr) 1969-06-26 1973-12-20
JPS5382792U (sr) 1976-12-10 1978-07-08
JPS585916B2 (ja) 1977-12-27 1983-02-02 株式会社ミドリ十字 新規ベンゾジアゼピン系化合物
JPS5615289A (en) 1979-07-17 1981-02-14 Green Cross Corp:The Novel benzodiazepinnbased compound 3
JPH0353356Y2 (sr) 1981-02-06 1991-11-21
CA1185602A (en) 1981-02-27 1985-04-16 Emilio Kyburz Imidazodiazepines
CA1184175A (en) 1981-02-27 1985-03-19 Walter Hunkeler Imidazodiazepines
CA1173441A (en) 1981-02-27 1984-08-28 Hoffmann-La Roche Limited Imidazodiazepines
JPS58180487A (ja) 1982-04-16 1983-10-21 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd 抗生物質ｄｃ−８１およびその製造法
JPS58180487U (ja) 1982-05-28 1983-12-02 松下電工株式会社 光線式報知器の組立体
US4427588A (en) 1982-11-08 1984-01-24 Bristol-Myers Company Process for conversion of oxotomaymycin to tomaymycin
US4427587A (en) 1982-11-10 1984-01-24 Bristol-Myers Company Total synthesis of antitumor antibiotics BBM-2040A and BBM-2040B
JPS59152329A (ja) 1983-02-17 1984-08-31 Green Cross Corp:The 局所障害抑制剤
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
FR2586683B1 (fr) 1985-08-29 1988-07-01 Centre Nat Rech Scient Nouveaux derives de neothramycine, leur procede de preparation et leur application en tant que medicaments
US5583024A (en) 1985-12-02 1996-12-10 The Regents Of The University Of California Recombinant expression of Coleoptera luciferase
JP2660201B2 (ja) 1988-08-05 1997-10-08 塩野義製薬株式会社 新規ピロロ［１，４］ベンゾジアゼピン誘導体および老人性痴呆薬
FR2676230B1 (fr) 1991-05-07 1993-08-27 Centre Nat Rech Scient Nouveaux derives de pyrrolo [1,4]-benzodiazepines, leur procede de preparation et medicaments les contenant.
GB9205051D0 (en) 1992-03-09 1992-04-22 Cancer Res Campaign Tech Pyrrolobenzodiazepine derivatives,their preparation,and compositions containing them
FR2696176B1 (fr) 1992-09-28 1994-11-10 Synthelabo Dérivés de pipéridine, leur préparation et leur application en thérapeutique.
US6214345B1 (en) 1993-05-14 2001-04-10 Bristol-Myers Squibb Co. Lysosomal enzyme-cleavable antitumor drug conjugates
GB9316162D0 (en) 1993-08-04 1993-09-22 Zeneca Ltd Fungicides
JPH08336393A (ja) 1995-04-13 1996-12-24 Mitsubishi Chem Corp 光学活性なγ−置換−β−ヒドロキシ酪酸エステルの製造法
US6602677B1 (en) 1997-09-19 2003-08-05 Promega Corporation Thermostable luciferases and methods of production
EP1754995B1 (en) 1998-07-08 2012-04-04 E Ink Corporation Methods for achieving improved color in microencapsulted electrophoretic devices
GB9818730D0 (en) 1998-08-27 1998-10-21 Univ Portsmouth Collections of compounds
CA2341471C (en) 1998-08-27 2009-04-07 Spirogen Limited Pyrrolbenzodiazepines
GB9818731D0 (en) 1998-08-27 1998-10-21 Univ Portsmouth Compounds
GB9818732D0 (en) 1998-08-27 1998-10-21 Univ Portsmouth Collection of compounds
US6909006B1 (en) 1999-08-27 2005-06-21 Spirogen Limited Cyclopropylindole derivatives
ES2270893T3 (es) 1999-12-24 2007-04-16 Genentech, Inc. Procedimiento y composiciones para prolongar la vida media de compuestos bioactivos.
US20040001827A1 (en) 2002-06-28 2004-01-01 Dennis Mark S. Serum albumin binding peptides for tumor targeting
CN1315805C (zh) 2000-09-19 2007-05-16 斯皮罗根公司 Cc－1065和多卡米新的非手性类似物的组合物及其使用方法
US6362331B1 (en) 2001-03-30 2002-03-26 Council Of Scientific And Industrial Research Process for the preparation of antitumor agents
US6660856B2 (en) 2002-03-08 2003-12-09 Kaohsiung Medical University Synthesis of pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepine analogues
DK1545613T3 (da) 2002-07-31 2011-11-14 Seattle Genetics Inc Auristatinkonjugater og deres anvendelse til behandling af cancer, en autoimmun sygdom eller en infektiøs sygdom
US20040138269A1 (en) 2002-10-11 2004-07-15 Sugen, Inc. Substituted pyrroles as kinase inhibitors
GB0226593D0 (en) 2002-11-14 2002-12-24 Consultants Ltd Compounds
ATE421967T1 (de) 2003-03-31 2009-02-15 Council Scient Ind Res Nichtvernetzende pyrroloä2,1-cüä1, 4übenzodiazepine als potentielle antitumor- agentien und ihre herstellung
GB0321295D0 (en) 2003-09-11 2003-10-15 Spirogen Ltd Synthesis of protected pyrrolobenzodiazepines
GB0416511D0 (en) 2003-10-22 2004-08-25 Spirogen Ltd Pyrrolobenzodiazepines
WO2005040170A2 (en) 2003-10-22 2005-05-06 Government Of The United States Of America, Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Pyrrolobenzodiazepine derivatives, compositions comprising the same and methods related thereto
CN107213469A (zh) 2003-11-06 2017-09-29 西雅图基因公司 能够与配体偶联的单甲基缬氨酸化合物
WO2005079479A2 (en) 2004-02-17 2005-09-01 Absalus, Inc. Super-humanized antibodies against respiratory syncytial virus
EP1718667B1 (en) 2004-02-23 2013-01-09 Genentech, Inc. Heterocyclic self-immolative linkers and conjugates
GB0404577D0 (en) 2004-03-01 2004-04-07 Spirogen Ltd Pyrrolobenzodiazepines
GB0404574D0 (en) 2004-03-01 2004-04-07 Spirogen Ltd Amino acids
GB0404578D0 (en) 2004-03-01 2004-04-07 Spirogen Ltd Pyrrolobenzodiazepines
CA2558195C (en) * 2004-03-01 2012-11-06 Spirogen Limited 11-hydroxy-5h-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-one derivatives as key intermediates for the preparation of c2 substituted pyrrolobenzodiazepines
DE102004010943A1 (de) 2004-03-03 2005-09-29 Degussa Ag Verfahren zur Herstellung von N-geschützten 4-Ketprolinderivaten
US7528126B2 (en) 2004-03-09 2009-05-05 Spirogen Limited Pyrrolobenzodiazepines
FR2869231B1 (fr) 2004-04-27 2008-03-14 Sod Conseils Rech Applic Composition therapeutique contenant au moins un derive de la pyrrolobenzodiazepine et la fludarabine
GB0410725D0 (en) 2004-05-13 2004-06-16 Spirogen Ltd Pyrrolobenzodiazepine therapeutic agents
KR101270829B1 (ko) 2004-09-23 2013-06-07 제넨테크, 인크. 시스테인 유전자조작 항체 및 접합체
EP1831418A2 (en) 2004-12-24 2007-09-12 Showa Denko Kabushiki Kaisha Production method of thermoelectric semiconductor alloy, thermoelectric conversion module and thermoelectric power generating device
JP2008528668A (ja) 2005-02-03 2008-07-31 アンチトープ リミテッド ヒト抗体及びタンパク質
CN101203241B (zh) 2005-04-19 2012-02-22 西雅图基因公司 人源化抗-cd70结合物和其应用
NZ563136A (en) 2005-04-21 2009-11-27 Spirogen Ltd Pyrrolobenzodiazepines
US20070154906A1 (en) 2005-10-05 2007-07-05 Spirogen Ltd. Methods to identify therapeutic candidates
US8637664B2 (en) 2005-10-05 2014-01-28 Spirogen Sarl Alkyl 4- [4- (5-oxo-2,3,5, 11a-tetrahydo-5H-pyrrolo [2, 1-c] [1,4] benzodiazepine-8-yloxy)-butyrylamino]-1H-pyrrole-2-carboxylate derivatives and related compounds for the treatment of a proliferative disease
DE602006021205D1 (de) 2005-10-07 2011-05-19 Exelixis Inc Azetidine als mek-inhibitoren bei der behandlung proliferativer erkrankungen
SI1813614T1 (sl) 2006-01-25 2012-01-31 Sanofi 174 Citotoksična sredstva, ki obsegajo nove tomajmicinske derivate
NZ574215A (en) 2006-07-18 2012-07-27 Sanofi Aventis Antagonist antibody against epha2 for the treatment of cancer
EP1914242A1 (en) 2006-10-19 2008-04-23 Sanofi-Aventis Novel anti-CD38 antibodies for the treatment of cancer
WO2008050140A2 (en) 2006-10-27 2008-05-02 Spirogen Limited Compounds for treatment of parasitic infection
DK2099823T4 (da) 2006-12-01 2022-05-09 Seagen Inc Målbindingsmiddelvarianter og anvendelser deraf
AR066476A1 (es) 2007-05-08 2009-08-19 Genentech Inc Anticuerpos anti-muc16 disenados con cisteina y conjugaods de anticuerpos y farmacos
SI2019104T1 (sl) 2007-07-19 2013-12-31 Sanofi Citotoksična sredstva, ki obsegajo nove tomaimicinske derivate, in njihova terapevtska uporaba
CA2698541C (en) 2007-10-19 2018-01-09 Genentech, Inc. Cysteine engineered anti-tenb2 antibodies and antibody drug conjugates
GB0722088D0 (en) 2007-11-09 2007-12-19 Spirogen Ltd Pyrrolobenzodiazepines
GB0722087D0 (en) 2007-11-09 2007-12-19 Spirogen Ltd Polyamides
BRPI0907046A2 (pt) * 2008-01-18 2015-07-28 Medimmune Llc Anticorpo de cisteína engenheirada, ácido nucleico isolado, vetor, célula hospedeira, conjugado de anticorpo, composição farmacêutica, métodos de detecção de câncer, doenças ou distúrbios autoimunes, inflamatórios ou infecciosos em um indivíduo e de inibição de proliferação de uma célula alvo
DK2265283T3 (da) 2008-03-18 2014-10-20 Seattle Genetics Inc Auristatin-lægemiddel-linker-konjugater
GB0813432D0 (en) 2008-07-22 2008-08-27 Spirogen Ltd Pyrrolobenzodiazepines
ES2524076T3 (es) 2008-10-15 2014-12-04 Zimmer Gmbh Clavo intramedular
GB0819097D0 (en) 2008-10-17 2008-11-26 Spirogen Ltd Pyrrolobenzodiazepines
GB0819095D0 (en) 2008-10-17 2008-11-26 Spirogen Ltd Pyrrolobenzodiazepines
SG173152A1 (en) 2009-02-05 2011-08-29 Immunogen Inc Novel benzodiazepine derivatives
FR2949469A1 (fr) 2009-08-25 2011-03-04 Sanofi Aventis Derives anticancereux, leur preparation et leur application en therapeutique
EP2480230A4 (en) 2009-09-24 2015-06-10 Seattle Genetics Inc DR5 Ligand-HEILMITTELKONJUGATE
US9040526B2 (en) 2010-02-09 2015-05-26 Bristol-Myers Squibb Company Benzylpyrrolidinone derivatives as modulators of chemokine receptor activity
ES2623057T3 (es) 2010-04-15 2017-07-10 Medimmune Limited Pirrolobenzodiazepinas usadas para tratar enfermedades proliferativas
KR101772354B1 (ko) 2010-04-15 2017-08-28 시애틀 지네틱스, 인크. 표적화된 피롤로벤조디아제핀 접합체
GB201006340D0 (en) 2010-04-15 2010-06-02 Spirogen Ltd Synthesis method and intermediates
WO2011130598A1 (en) 2010-04-15 2011-10-20 Spirogen Limited Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
WO2011130615A2 (en) 2010-04-15 2011-10-20 Dr. Reddy's Laboratories Ltd. Preparation of lacosamide
KR20190089048A (ko) 2011-02-15 2019-07-29 이뮤노젠 아이엔씨 컨쥬게이트의 제조방법
WO2013041606A1 (en) * 2011-09-20 2013-03-28 Spirogen Sàrl Pyrrolobenzodiazepines as unsymmetrical dimeric pbd compounds for inclusion in targeted conjugates
US9388187B2 (en) 2011-10-14 2016-07-12 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepines
BR112014008888A2 (pt) 2011-10-14 2017-04-18 Seattle Genetics Inc pirrolobenzodiazepinas
US9526798B2 (en) 2011-10-14 2016-12-27 Seattle Genetics, Inc. Pyrrolobenzodiazepines and targeted conjugates
EP2751076B1 (en) 2011-10-14 2018-04-25 MedImmune Limited Synthesis method and intermediates useful in the preparation of pyrrolobenzodiazepines
WO2013055987A1 (en) 2011-10-14 2013-04-18 Spirogen Sàrl Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
MX358757B (es) 2011-10-14 2018-09-03 Seattle Genetics Inc Pirrolobenzodiazepinas y conjugados dirigidos.
NZ701290A (en) 2012-04-30 2016-08-26 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepines
KR101960130B1 (ko) 2012-04-30 2019-03-19 메디뮨 리미티드 피롤로벤조디아제핀
TW201406785A (zh) 2012-07-09 2014-02-16 Genentech Inc 抗ｃｄ２２抗體及免疫結合物
IN2014DN10652A (sr) 2012-07-09 2015-09-11 Genentech Inc
BR112015002193A2 (pt) 2012-08-02 2017-07-04 Genentech Inc anticorpos anti-etbr e imunoconjugados
WO2014057118A1 (en) 2012-10-12 2014-04-17 Adc Therapeutics Sarl Pyrrolobenzodiazepine-anti-cd22 antibody conjugates
PL2906251T3 (pl) 2012-10-12 2018-02-28 Adc Therapeutics Sa Koniugaty pirolobenzodiazepina-przeciwciało anty-CD22
AU2013328673B2 (en) 2012-10-12 2017-07-13 Medimmune Limited Synthesis and intermediates of pyrrolobenzodiazepine derivatives for conjugation
MX364328B (es) 2012-10-12 2019-04-23 Medimmune Ltd Conjugados del anticuerpo pirrolobenzodiazepina.
HRP20181646T2 (hr) 2012-10-12 2019-08-09 Adc Therapeutics Sa Konjugati pirolobenzodiazepin - anti-psma protutijela
HRP20171264T1 (hr) 2012-10-12 2017-10-20 Adc Therapeutics Sa Konjugati protutijela anti-her2-pirolobenzodiazepina
WO2014057117A1 (en) 2012-10-12 2014-04-17 Adc Therapeutics Sàrl Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
WO2014057120A1 (en) 2012-10-12 2014-04-17 Adc Therapeutics Sàrl Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
HRP20190366T1 (hr) 2012-10-12 2019-04-19 Medimmune Limited Pirolobenzodiazepini i njihovi konjugati
KR101645905B1 (ko) 2012-10-12 2016-08-04 스피로즌 살 피롤로벤조디아제핀 및 그의 컨주게이트
ES2680153T3 (es) 2012-10-12 2018-09-04 Adc Therapeutics Sa Conjugados de anticuerpos anti-PSMA-pirrolobenzodiazepinas
CN105246894A (zh) 2012-12-21 2016-01-13 斯皮罗根有限公司 用于治疗增殖性和自身免疫疾病的非对称吡咯并苯并二氮杂卓二聚物
AU2013366493B2 (en) 2012-12-21 2017-08-24 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
RU2019109456A (ru) 2013-02-22 2019-04-10 ЭББВИ СТЕМСЕНТРКС ЭлЭлСи Новые конъюгаты антител и их применения
JP6445519B2 (ja) 2013-03-13 2018-12-26 メドイミューン・リミテッドＭｅｄＩｍｍｕｎｅ Ｌｉｍｉｔｅｄ ピロロベンゾジアゼピン及びそのコンジュゲート
EP2968585B1 (en) 2013-03-13 2018-07-18 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
WO2014140862A2 (en) 2013-03-13 2014-09-18 Spirogen Sarl Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
WO2014174111A1 (en) 2013-04-26 2014-10-30 Pierre Fabre Medicament Axl antibody-drug conjugate and its use for the treatment of cancer
US9950078B2 (en) 2013-10-11 2018-04-24 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
US10010624B2 (en) 2013-10-11 2018-07-03 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
GB201317981D0 (en) 2013-10-11 2013-11-27 Spirogen Sarl Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
EP3054986B1 (en) 2013-10-11 2019-03-20 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
GB201317982D0 (en) 2013-10-11 2013-11-27 Spirogen Sarl Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
EP3054984A1 (en) 2013-10-11 2016-08-17 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
MX381017B (es) 2013-12-16 2025-03-12 Genentech Inc Compuestos peptidomiméticos y conjugados anticuerpo-fármaco de estos.
GB201406767D0 (en) 2014-04-15 2014-05-28 Cancer Rec Tech Ltd Humanized anti-Tn-MUC1 antibodies anf their conjugates

Also Published As

Publication number Publication date
CY1123778T1 (el) 2022-05-27
HUE043738T2 (hu) 2019-09-30
HK1213183A1 (en) 2016-06-30
LT2906248T (lt) 2019-02-11
ZA201501781B (en) 2016-06-29
CA2885315C (en) 2020-06-23
HRP20210126T1 (hr) 2021-03-19
RS58203B1 (sr) 2019-03-29
TR201902494T4 (tr) 2019-03-21
CA2885315A1 (en) 2014-04-17
NZ745069A (en) 2019-05-31
KR20200003278A (ko) 2020-01-08
BR112015008251A2 (pt) 2017-07-04
SI3470086T1 (sl) 2021-03-31
EP2906248A1 (en) 2015-08-19
PT3470086T (pt) 2021-02-01
HRP20190366T1 (hr) 2019-04-19
CN110256469B (zh) 2022-05-17
US9415117B2 (en) 2016-08-16
MX362004B (es) 2019-01-03
SMT202100265T1 (it) 2021-07-12
KR20150083994A (ko) 2015-07-21
MX2015004560A (es) 2015-07-21
DK3470086T3 (da) 2020-12-21
NZ705910A (en) 2018-09-28
WO2014057073A1 (en) 2014-04-17
KR20190126197A (ko) 2019-11-08
PL3470086T3 (pl) 2021-05-31
ES2847050T3 (es) 2021-07-30
AU2013328674A1 (en) 2015-04-02
DK2906248T3 (en) 2019-03-04
JP2018168182A (ja) 2018-11-01
EP3470086B1 (en) 2020-11-25
CY1121390T1 (el) 2020-05-29
AU2013328674B2 (en) 2017-06-22
CA3060520C (en) 2022-05-17
EP3470086A1 (en) 2019-04-17
LT3470086T (lt) 2021-02-25
HUE052835T2 (hu) 2021-05-28
EP2906248B1 (en) 2018-12-05
SMT201900144T1 (it) 2019-05-10
HUE043738T4 (hu) 2020-05-28
CN104703630A (zh) 2015-06-10
PT2906248T (pt) 2019-03-04
JP2015533141A (ja) 2015-11-19
ES2713164T3 (es) 2019-05-20
PL2906248T3 (pl) 2019-05-31
BR112015008251B1 (pt) 2023-09-26
JP6367811B2 (ja) 2018-08-01
JP6516909B2 (ja) 2019-05-22
CA3060520A1 (en) 2014-04-17
CN110256469A (zh) 2019-09-20
MX366303B (es) 2019-07-04
KR102138220B1 (ko) 2020-07-27
SI2906248T1 (sl) 2019-02-28
US20140120118A1 (en) 2014-05-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US12121590B2 (en) Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
US9415117B2 (en) Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
JP6448632B2 (ja) ピロロベンゾジアゼピン類およびその複合体
US9956298B2 (en) Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
HK40006354B (en) Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
HK40006354A (en) Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
HK1213183B (en) Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof