HU223664B1 - Növekedési hormon felszabadulást elősegítő peptidek és eljárás előállításukra, valamint a peptideket tartalmazó gyógyszerkészítmények - Google Patents
Növekedési hormon felszabadulást elősegítő peptidek és eljárás előállításukra, valamint a peptideket tartalmazó gyógyszerkészítmények Download PDFInfo
- Publication number
- HU223664B1 HU223664B1 HU9400495A HU9400495A HU223664B1 HU 223664 B1 HU223664 B1 HU 223664B1 HU 9400495 A HU9400495 A HU 9400495A HU 9400495 A HU9400495 A HU 9400495A HU 223664 B1 HU223664 B1 HU 223664B1
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- phe
- tyr
- gly
- dala
- ala
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 117
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 title claims abstract description 111
- 102000018997 Growth Hormone Human genes 0.000 title claims abstract description 108
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 title claims abstract description 108
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title claims abstract description 59
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 22
- 230000003578 releasing effect Effects 0.000 title claims description 21
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims description 9
- 230000008569 process Effects 0.000 title claims description 7
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 27
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 56
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 37
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 24
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 21
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 20
- -1 His Chemical compound 0.000 claims description 18
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 17
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 17
- COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N D-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N 0.000 claims description 11
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 claims description 11
- 125000000030 D-alanine group Chemical group [H]N([H])[C@](C([H])([H])[H])(C(=O)[*])[H] 0.000 claims description 10
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims description 10
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 101710142969 Somatoliberin Proteins 0.000 claims description 9
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 claims description 8
- 239000000095 Growth Hormone-Releasing Hormone Substances 0.000 claims description 7
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 7
- KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-N Carbamic acid Chemical compound NC(O)=O KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- VJLLEKDQJSMHRU-STQMWFEESA-N Phe-Gly-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O VJLLEKDQJSMHRU-STQMWFEESA-N 0.000 claims description 6
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 claims description 6
- 150000004662 dithiols Chemical class 0.000 claims description 6
- QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N D-alpha-Ala Natural products CC([NH3+])C([O-])=O QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 230000036765 blood level Effects 0.000 claims description 5
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 claims description 5
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 claims description 5
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 claims description 5
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 claims description 5
- QIVBCDIJIAJPQS-SECBINFHSA-N D-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-SECBINFHSA-N 0.000 claims description 4
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 claims description 4
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 claims description 4
- 238000006482 condensation reaction Methods 0.000 claims description 4
- FHZPGIUBXYVUOY-VWGYHWLBSA-N Dermorphin Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CO)C(N)=O)C1=CC=C(O)C=C1 FHZPGIUBXYVUOY-VWGYHWLBSA-N 0.000 claims description 3
- 102000005157 Somatostatin Human genes 0.000 claims description 3
- 108010056088 Somatostatin Proteins 0.000 claims description 3
- 239000000556 agonist Substances 0.000 claims description 3
- UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N beta-alanine Chemical compound NCCC(O)=O UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N somatostatin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)[C@@H](C)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N)C(O)=O)=O)[C@H](O)C)C1=CC=CC=C1 NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N 0.000 claims description 3
- 229960000553 somatostatin Drugs 0.000 claims description 3
- 239000000674 adrenergic antagonist Substances 0.000 claims description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 2
- 239000002329 esterase inhibitor Substances 0.000 claims description 2
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 claims description 2
- 102000038461 Growth Hormone-Releasing Hormone Human genes 0.000 claims 4
- 150000003862 amino acid derivatives Chemical class 0.000 claims 2
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 claims 2
- 229940122601 Esterase inhibitor Drugs 0.000 claims 1
- 125000001559 cyclopropyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C1([H])* 0.000 claims 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 claims 1
- 238000010530 solution phase reaction Methods 0.000 claims 1
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 50
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 48
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 44
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 41
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 39
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 31
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 24
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 22
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 22
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 22
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 21
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 20
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 19
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 18
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 16
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 16
- WZHKXNSOCOQYQX-FUAFALNISA-N (2s)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2r)-2-[[(2s)-2-amino-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-3-(1h-indol-3-yl)propanoyl]amino]propanoyl]amino]-3-(1h-indol-3-yl)propanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]hexanamide Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(N)=O)C1=CN=CN1 WZHKXNSOCOQYQX-FUAFALNISA-N 0.000 description 13
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical group [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 12
- 125000002707 L-tryptophyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2C(C([C@](N([H])[H])(C(=O)[*])[H])([H])[H])=C([H])N([H])C2=C1[H] 0.000 description 12
- 101500023492 Lithobates catesbeianus Growth hormone-releasing peptide Proteins 0.000 description 12
- WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N pentobarbital Chemical compound CCCC(C)C1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 11
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 11
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 11
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 11
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 11
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 10
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 10
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000000047 product Substances 0.000 description 10
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- PFKFTWBEEFSNDU-UHFFFAOYSA-N carbonyldiimidazole Chemical compound C1=CN=CN1C(=O)N1C=CN=C1 PFKFTWBEEFSNDU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 9
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 9
- NWQWNCILOXTTHF-HLCSKTDOSA-N (2s)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2r)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-aminopropanoyl]amino]-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-3-naphthalen-2-ylpropanoyl]amino]propanoyl]amino]-3-(1h-indol-3-yl)propanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]hexanamide Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@@H](N)C)C(=O)N[C@H](CC=1C=C2C=CC=CC2=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(N)=O)C1=CNC=N1 NWQWNCILOXTTHF-HLCSKTDOSA-N 0.000 description 8
- 108010083553 alanyl-histidyl-(2-naphthyl)alanyl-tryptophyl-phenylalanyl-lysinamide Proteins 0.000 description 8
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 8
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 8
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 8
- 102100033367 Appetite-regulating hormone Human genes 0.000 description 7
- 101710119601 Growth hormone-releasing peptides Proteins 0.000 description 7
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 7
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 7
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 7
- NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N Histamine Chemical compound NCCC1=CN=CN1 NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 6
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 6
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 6
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 6
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 6
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 6
- 229960001412 pentobarbital Drugs 0.000 description 6
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 6
- SNOOUWRIMMFWNE-UHFFFAOYSA-M sodium;6-[(3,4,5-trimethoxybenzoyl)amino]hexanoate Chemical compound [Na+].COC1=CC(C(=O)NCCCCCC([O-])=O)=CC(OC)=C1OC SNOOUWRIMMFWNE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 6
- HRNLPPBUBKMZMT-SSSXJSFTSA-N (2s)-6-amino-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-aminopropanoyl]amino]-3-naphthalen-2-ylpropanoyl]amino]propanoyl]amino]-3-(1h-indol-3-yl)propanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]hexanamide Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](CC=1C=C2C=CC=CC2=CC=1)NC(=O)[C@H](N)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(N)=O)C1=CC=CC=C1 HRNLPPBUBKMZMT-SSSXJSFTSA-N 0.000 description 5
- 102100022831 Somatoliberin Human genes 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 5
- MGHPNCMVUAKAIE-UHFFFAOYSA-N diphenylmethanamine Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(N)C1=CC=CC=C1 MGHPNCMVUAKAIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 108010085742 growth hormone-releasing peptide-2 Proteins 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N palladium Substances [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229960000208 pralmorelin Drugs 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 5
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 4
- ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 1,3-dicyclohexylurea Chemical compound C1CCCCC1NC(=O)NC1CCCCC1 ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FUOOLUPWFVMBKG-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoisobutyric acid Chemical compound CC(C)(N)C(O)=O FUOOLUPWFVMBKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- HKXLAGBDJVHRQG-YFKPBYRVSA-N L-lysinamide Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(N)=O HKXLAGBDJVHRQG-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 4
- 125000000393 L-methionino group Chemical group [H]OC(=O)[C@@]([H])(N([H])[*])C([H])([H])C(SC([H])([H])[H])([H])[H] 0.000 description 4
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 4
- SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N N-Methylmorpholine Chemical compound CN1CCOCC1 SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 4
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 4
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 4
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical group NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 4
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 4
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 3
- QMMFVYPAHWMCMS-UHFFFAOYSA-N Dimethyl sulfide Chemical compound CSC QMMFVYPAHWMCMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 3
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 3
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 3
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-diisopropylethylamine Substances CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 3
- PMIXKZYRCOUPII-INIZCTEOSA-N N[C@@H](Cc1cn(C(=O)OCc2ccccc2)c2ccccc12)C(O)=O Chemical compound N[C@@H](Cc1cn(C(=O)OCc2ccccc2)c2ccccc12)C(O)=O PMIXKZYRCOUPII-INIZCTEOSA-N 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 3
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 3
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 3
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 3
- 239000012300 argon atmosphere Substances 0.000 description 3
- 125000000051 benzyloxy group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])O* 0.000 description 3
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 3
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 3
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 3
- 238000010265 fast atom bombardment Methods 0.000 description 3
- 239000012458 free base Substances 0.000 description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 3
- 229960001340 histamine Drugs 0.000 description 3
- 229910000040 hydrogen fluoride Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 3
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 3
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 3
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 3
- 229910052763 palladium Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 3
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- 238000003828 vacuum filtration Methods 0.000 description 3
- QUOGESRFPZDMMT-UHFFFAOYSA-N 2-amino-6-(diaminomethylideneamino)hexanoic acid Chemical compound OC(=O)C(N)CCCCNC(N)=N QUOGESRFPZDMMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical class [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 2
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000238424 Crustacea Species 0.000 description 2
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000033962 Fontaine progeroid syndrome Diseases 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- 101710198286 Growth hormone-releasing hormone receptor Proteins 0.000 description 2
- 102100033365 Growth hormone-releasing hormone receptor Human genes 0.000 description 2
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N L-Alanine Natural products C[C@@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N 0.000 description 2
- WTDRDQBEARUVNC-UHFFFAOYSA-N L-Dopa Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 WTDRDQBEARUVNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 2
- ATUOYWHBWRKTHZ-UHFFFAOYSA-N Propane Chemical compound CCC ATUOYWHBWRKTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010007568 Protamines Chemical class 0.000 description 2
- 102000007327 Protamines Human genes 0.000 description 2
- 101000633010 Rattus norvegicus Somatostatin Proteins 0.000 description 2
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000473945 Theria <moth genus> Species 0.000 description 2
- 150000001242 acetic acid derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 2
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 2
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 2
- 229960005261 aspartic acid Drugs 0.000 description 2
- 150000001558 benzoic acid derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 239000002876 beta blocker Substances 0.000 description 2
- 229940030611 beta-adrenergic blocking agent Drugs 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 150000001860 citric acid derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 238000010908 decantation Methods 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N dodecanoic acid Chemical class CCCCCCCCCCCC(O)=O POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-L fumarate(2-) Chemical class [O-]C(=O)\C=C\C([O-])=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-L 0.000 description 2
- 229960003692 gamma aminobutyric acid Drugs 0.000 description 2
- 238000002290 gas chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 229960002885 histidine Drugs 0.000 description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 2
- 239000003701 inert diluent Substances 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 150000003893 lactate salts Chemical class 0.000 description 2
- 235000018977 lysine Nutrition 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 2
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 2
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 2
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 2
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 2
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- 150000003891 oxalate salts Chemical class 0.000 description 2
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 2
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 229940048914 protamine Drugs 0.000 description 2
- 230000022558 protein metabolic process Effects 0.000 description 2
- 239000003488 releasing hormone Substances 0.000 description 2
- FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N sarcosine Chemical compound C[NH2+]CC([O-])=O FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960001153 serine Drugs 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000007909 solid dosage form Substances 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 2
- NHXLMOGPVYXJNR-UHFFFAOYSA-N srif Chemical compound N1C(=O)C(C(C)O)NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)NC(=O)C(CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)C(CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(NC(=O)CNC(=O)C(C)N)CSSCC(C(O)=O)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(O)C)NC(=O)C1CC1=CC=CC=C1 NHXLMOGPVYXJNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- GVPUILPMTWUFRQ-QMMMGPOBSA-N tert-butyl N-[(2S)-2,6-diaminohexanoyl]carbamate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN GVPUILPMTWUFRQ-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- 125000005490 tosylate group Chemical group 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960004799 tryptophan Drugs 0.000 description 2
- 229960004441 tyrosine Drugs 0.000 description 2
- NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-M valerate Chemical class CCCCC([O-])=O NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000010792 warming Methods 0.000 description 2
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 2
- OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N (+/-)-DABA Natural products NCCC(N)C(O)=O OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TYRGLVWXHJRKMT-MRVPVSSYSA-N (2r)-2-(phenylmethoxycarbonylamino)propanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](C)NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 TYRGLVWXHJRKMT-MRVPVSSYSA-N 0.000 description 1
- DFZVZEMNPGABKO-SSDOTTSWSA-N (2r)-2-amino-3-pyridin-3-ylpropanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC1=CC=CN=C1 DFZVZEMNPGABKO-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 1
- OFYAYGJCPXRNBL-GFCCVEGCSA-N (2r)-2-azaniumyl-3-naphthalen-1-ylpropanoate Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@@H]([NH3+])C([O-])=O)=CC=CC2=C1 OFYAYGJCPXRNBL-GFCCVEGCSA-N 0.000 description 1
- ONOURAAVVKGJNM-SCZZXKLOSA-N (2s,3r)-2-azaniumyl-3-phenylmethoxybutanoate Chemical compound [O-]C(=O)[C@@H]([NH3+])[C@@H](C)OCC1=CC=CC=C1 ONOURAAVVKGJNM-SCZZXKLOSA-N 0.000 description 1
- YCFJXOFFQLPCHD-UHFFFAOYSA-N (S)-Spinacine Chemical compound C1NC(C(=O)O)CC2=C1NC=N2 YCFJXOFFQLPCHD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- BWKMGYQJPOAASG-UHFFFAOYSA-N 1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline-3-carboxylic acid Chemical compound C1=CC=C2CNC(C(=O)O)CC2=C1 BWKMGYQJPOAASG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VYMPLPIFKRHAAC-UHFFFAOYSA-N 1,2-ethanedithiol Chemical compound SCCS VYMPLPIFKRHAAC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonium chloride Substances [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UYPAYOHGHFVLPU-OAQYLSRUSA-N C1(=CC=CC=C1)[C@H](C(=O)O)N(CC1=CC=CC=C1)C(=O)OCC1=CC=CC=C1 Chemical compound C1(=CC=CC=C1)[C@H](C(=O)O)N(CC1=CC=CC=C1)C(=O)OCC1=CC=CC=C1 UYPAYOHGHFVLPU-OAQYLSRUSA-N 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- SNDPXSYFESPGGJ-SCSAIBSYSA-N D-2-aminopentanoic acid Chemical compound CCC[C@@H](N)C(O)=O SNDPXSYFESPGGJ-SCSAIBSYSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N D-OH-Asp Natural products OC(=O)C(N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001711 D-phenylalanine group Chemical group [H]N([H])[C@@]([H])(C(=O)[*])C([H])([H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010013883 Dwarfism Diseases 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N Elaidinsaeure-aethylester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000295146 Gallionellaceae Species 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010010234 HDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000015779 HDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 102000002265 Human Growth Hormone Human genes 0.000 description 1
- 108010000521 Human Growth Hormone Proteins 0.000 description 1
- 239000000854 Human Growth Hormone Substances 0.000 description 1
- 206010062767 Hypophysitis Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 208000015580 Increased body weight Diseases 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N L-Aspartic acid Natural products OC(=O)[C@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- WTDRDQBEARUVNC-LURJTMIESA-N L-DOPA Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 WTDRDQBEARUVNC-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- 235000019766 L-Lysine Nutrition 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-UHFFFAOYSA-N L-Methionine Natural products CSCCC(N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 150000008575 L-amino acids Chemical group 0.000 description 1
- 235000014852 L-arginine Nutrition 0.000 description 1
- 229930064664 L-arginine Natural products 0.000 description 1
- 239000004201 L-cysteine Substances 0.000 description 1
- 235000013878 L-cysteine Nutrition 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- 229930182844 L-isoleucine Natural products 0.000 description 1
- 239000004395 L-leucine Substances 0.000 description 1
- 235000019454 L-leucine Nutrition 0.000 description 1
- 125000003440 L-leucyl group Chemical group O=C([*])[C@](N([H])[H])([H])C([H])([H])C(C([H])([H])[H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 229930195722 L-methionine Natural products 0.000 description 1
- QEFRNWWLZKMPFJ-ZXPFJRLXSA-N L-methionine (R)-S-oxide Chemical compound C[S@@](=O)CC[C@H]([NH3+])C([O-])=O QEFRNWWLZKMPFJ-ZXPFJRLXSA-N 0.000 description 1
- QEFRNWWLZKMPFJ-UHFFFAOYSA-N L-methionine sulphoxide Natural products CS(=O)CCC(N)C(O)=O QEFRNWWLZKMPFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930182821 L-proline Natural products 0.000 description 1
- 125000002842 L-seryl group Chemical group O=C([*])[C@](N([H])[H])([H])C([H])([H])O[H] 0.000 description 1
- 108010007622 LDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000007330 LDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N Lithium Chemical compound [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010024769 Local reaction Diseases 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001367 Merrifield resin Polymers 0.000 description 1
- 101100270435 Mus musculus Arhgef12 gene Proteins 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 240000007817 Olea europaea Species 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101001075370 Rattus norvegicus Gamma-glutamyl hydrolase Proteins 0.000 description 1
- 208000001647 Renal Insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 108010077895 Sarcosine Proteins 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M Trifluoroacetate Chemical compound [O-]C(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012445 acidic reagent Substances 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 102000011759 adducin Human genes 0.000 description 1
- 108010076723 adducin Proteins 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 229960003767 alanine Drugs 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- 150000001342 alkaline earth metals Chemical class 0.000 description 1
- 150000003973 alkyl amines Chemical class 0.000 description 1
- 239000002160 alpha blocker Substances 0.000 description 1
- 150000001370 alpha-amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000008206 alpha-amino acids Nutrition 0.000 description 1
- SDBCCDNTZKHGBJ-UHFFFAOYSA-N amino butanoate Chemical compound CCCC(=O)ON SDBCCDNTZKHGBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000009697 arginine Nutrition 0.000 description 1
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 229910052788 barium Inorganic materials 0.000 description 1
- DSAJWYNOEDNPEQ-UHFFFAOYSA-N barium atom Chemical compound [Ba] DSAJWYNOEDNPEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012455 biphasic mixture Substances 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 150000001642 boronic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 239000012159 carrier gas Substances 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005352 clarification Methods 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 239000002285 corn oil Substances 0.000 description 1
- 235000005687 corn oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 125000000113 cyclohexyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002716 delivery method Methods 0.000 description 1
- 238000003795 desorption Methods 0.000 description 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 125000005265 dialkylamine group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 description 1
- 208000010643 digestive system disease Diseases 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- MHUWZNTUIIFHAS-CLFAGFIQSA-N dioleoyl phosphatidic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(O)=O)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC MHUWZNTUIIFHAS-CLFAGFIQSA-N 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 description 1
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N ethyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 1
- 229940093471 ethyl oleate Drugs 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 108010074605 gamma-Globulins Proteins 0.000 description 1
- 229960002989 glutamic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 239000001307 helium Substances 0.000 description 1
- 229910052734 helium Inorganic materials 0.000 description 1
- SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N helium atom Chemical compound [He] SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003840 hydrochlorides Chemical class 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002267 hypothalamic effect Effects 0.000 description 1
- JBFYUZGYRGXSFL-UHFFFAOYSA-N imidazolide Chemical compound C1=C[N-]C=N1 JBFYUZGYRGXSFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- 210000004731 jugular vein Anatomy 0.000 description 1
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 1
- 201000006370 kidney failure Diseases 0.000 description 1
- DWKPPFQULDPWHX-VKHMYHEASA-N l-alanyl ester Chemical compound COC(=O)[C@H](C)N DWKPPFQULDPWHX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 229960003136 leucine Drugs 0.000 description 1
- 229960004502 levodopa Drugs 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 108010022197 lipoprotein cholesterol Proteins 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000008297 liquid dosage form Substances 0.000 description 1
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 229960004452 methionine Drugs 0.000 description 1
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 1
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000012046 mixed solvent Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- UCVVDURPZNVMNR-SECBINFHSA-N naphthalen-1-yl (2R)-2-aminopropanoate Chemical compound C1=CC=C2C(OC(=O)[C@H](N)C)=CC=CC2=C1 UCVVDURPZNVMNR-SECBINFHSA-N 0.000 description 1
- 125000001624 naphthyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 1
- 239000012457 nonaqueous media Substances 0.000 description 1
- 239000012038 nucleophile Substances 0.000 description 1
- 230000009965 odorless effect Effects 0.000 description 1
- 229940049964 oleate Drugs 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000000962 organic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- KJOMYNHMBRNCNY-UHFFFAOYSA-N pentane-1,1-diamine Chemical group CCCCC(N)N KJOMYNHMBRNCNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002304 perfume Substances 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 229960005190 phenylalanine Drugs 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000036417 physical growth Effects 0.000 description 1
- 208000003068 pituitary dwarfism Diseases 0.000 description 1
- 230000001817 pituitary effect Effects 0.000 description 1
- 210000003635 pituitary gland Anatomy 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 230000002980 postoperative effect Effects 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 150000003141 primary amines Chemical class 0.000 description 1
- 229960002429 proline Drugs 0.000 description 1
- 239000001294 propane Substances 0.000 description 1
- 238000000734 protein sequencing Methods 0.000 description 1
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 229940043230 sarcosine Drugs 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 150000003335 secondary amines Chemical class 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- JXKPEJDQGNYQSM-UHFFFAOYSA-M sodium propionate Chemical compound [Na+].CCC([O-])=O JXKPEJDQGNYQSM-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000004324 sodium propionate Substances 0.000 description 1
- 229960003212 sodium propionate Drugs 0.000 description 1
- 235000010334 sodium propionate Nutrition 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 239000003206 sterilizing agent Substances 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 150000003467 sulfuric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 150000003892 tartrate salts Chemical class 0.000 description 1
- WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N tfa trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.OC(=O)C(F)(F)F WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002898 threonine Drugs 0.000 description 1
- 125000002088 tosyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1C([H])([H])[H])S(*)(=O)=O 0.000 description 1
- 238000005809 transesterification reaction Methods 0.000 description 1
- 125000000026 trimethylsilyl group Chemical group [H]C([H])([H])[Si]([*])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007738 vacuum evaporation Methods 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 1
- 238000009736 wetting Methods 0.000 description 1
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/60—Growth hormone-releasing factor [GH-RF], i.e. somatoliberin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/06—Antihyperlipidemics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/02—Drugs for disorders of the endocrine system of the hypothalamic hormones, e.g. TRH, GnRH, CRH, GRH, somatostatin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/06—Drugs for disorders of the endocrine system of the anterior pituitary hormones, e.g. TSH, ACTH, FSH, LH, PRL, GH
- A61P5/08—Drugs for disorders of the endocrine system of the anterior pituitary hormones, e.g. TSH, ACTH, FSH, LH, PRL, GH for decreasing, blocking or antagonising the activity of the anterior pituitary hormones
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Obesity (AREA)
- Hematology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
A találmány tárgya új, A1-A2-Ala-C2-C3-A5 (I) általános képletű peptid– ahol A1 jelentése Gly, Ala, DAla, ?-Ala, His, Ser, Met, Pro, Sar,Ava, Aib, N,N-bisz(kis szénatomszámú alkil)-amino-kar- bonsav, vagy(kis szénatomszámú alkil)-amino-karbonsav, ahol a kis szénatomszámúalkilcsoport 2 és 6 közötti szénatomot tartalmazó, egyenes láncúalkilcsoportot jelent; A2 jelentése DTrp, D?Nal vagy DPhe, A5jelentése A3-A5', vagy A5' általános képletű csoport, ahol A3jelentése Ala vagy DAla, A5' jelentése Lys(?-R1R2)-Z vagy Orn(?-R1R2)-Z, melynél R1 és R2 jelentése hidrogénatom vagy 1–6 szénatomszámú al-kilcsoport, azzal a megkötéssel, hogy ha R1 jelentése hidrogénatom,akkor R2 jelentése alkilcsoport, és ha R2 jelentése hidrogénatom,akkor R1 jelentése alkilcsoport, Z jelentése –NH2 vagy –OH csoport,vagy A5' jelentése – ha A1 jelentése His-től eltérő – lehet még Lys-Z,Orn-Z vagy Arg-Z, ahol Z jelentése –NH2 vagy –OH, vagy A5' jelentése–NH(CH2)xNH2 csoport, ahol x értéke 2 és 9 közötti egész szám, C2jelentése Trp vagy Phe, C3 jelentése DPhe vagy DPal, – valamintszerves és szervetlen addíciós sói. A találmány szerinti vegyületeknövekedési hormonok felszabadulását elősegítő gyógyszerkészítményekbenhasználhatók. ŕ
Description
A találmány tárgya új, (I) általános képletű polipeptidek - amelyek állatoknál és különösen embereknél elősegítik a növekedési hormonok felszabadulását - és eljárás a vegyületek előállítására. A találmány további tárgya növekedési hormon felszabadulásának elősegítésére és a növekedési hormonok szintjének emelésére alkalmas gyógyszerkészítmény, mely hatóanyagként az (I) általános képletű polipeptideket tartalmazza.
Ha állatoknak, például emlősöknek - beleértve az embert is - növekedési hormonokat (GH) felszabadító vegyületeket adunk be, és ezáltal ezek a hormonszintek kellőképpen magasra emelkednek, ez a testtömeg és a tejtermelés növekedését eredményezheti. Ismert továbbá, hogy állatokban és emberekben a növekedési hormonok szintjének emelése megoldható ismert, növekedési hormonokat felszabadító vegyületek, például a természetben előforduló, növekedési hormonokat felszabadító hormonok alkalmazásával.
Az emlősök növekedésihormon-szintjének emelése megoldható továbbá növekedési hormonokat felszabadító peptidek alkalmazásával, melyek közül egyeseket leírtak például a 4,223,019, a 4,223,020, a 4,223,021, a 4,224,316, a 4,226,857, a 4,228,155, a 4,228,156, a 4,228,157, a 4,228,158, a 4,410,512 és a 4,410,513 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalom leírásában.
Ugyancsak használták a GH-szintek emelésére a növekedési hormonok felszabadításának endogén inhibitorával szembeni antitestet, a somatostsatint (SRIF). Ez utóbbi esetben a növekedési hormon szintjét oly módon növelik, hogy a növekedési hormonok felszabadításának endogén inhibitorát (SRIF) eltávolítják, mielőtt elérné a hipofízist, ahol a GH felszabadítását gátolja.
Mindezen - a növekedési hormonok felszabadítását elősegítő módszerekhez olyan anyagok szükségesek, melyeknek szintézise vagy izolálása olyan tisztasági fokban, hogy a kezelendő állatoknak beadhatók legyenek, igen költséges. Olyan rövid láncú, kis molekulatömegű, viszonylag egyszerű polipeptidek lennének megfelelők, amelyek viszonylag olcsón előállíthatok, és képesek a növekedési hormonok felszabadításának elősegítésére, mert ezek könnyen és olcsón előállíthatok, kémiai és/vagy fizikai úton könnyen módosíthatók, továbbá könnyen tisztíthatok és formulálhatók, ezenkívül kitűnő szállítási tulajdonságokat is kell mutatniuk.
Bár ismerünk néhány olyan rövid szénláncú polipeptidet, melyek képesek a növekedési hormon felszabadulásának elősegítésére és vérszintjének emelésére, fontos, hogy a polipeptideket különféle célok szerint szállítás, biológiai abszorbancia, megnövelt retenciós idő stb. - alakítani tudjuk. Viszont ha az aminosavakat bizonyos helyeken megváltoztatjuk, az rendkívüli mértékben csökkentheti a rövid szénláncú polipeptideknek a növekedési hormon felszabadulását elősegítő képességét.
Kívánatos lenne olyan rövid szénláncú polipeptidek előállítása, amelyek képesek a növekedési hormon felszabadulásának elősegítésére és szintjének emelésére állatok, és különösen az ember vérében.
Vizsgálataink során azt tapasztaltuk, hogy az (I) általános képletű polipeptidek a fenti célra jól alkalmazhatók.
A találmány tárgya tehát polipeptidek, melyek az (I) általános képlettel írhatók le
A,-A2-Ala-C2-C3-A5 (I) ahol az általános képletben
A, jelentése Gly, Alá, DAla, β-Ala, His, Ser, Met, Pro,
Sár, Ava, Aib, N,N-bisz(kis szénatomszámú alkil)amino-karbonsav, vagy (kis szénatomszámú alkil)amino-karbonsav, ahol a kis szénatomszámú alkilcsoport 2 és 6 közötti szénatomot tartalmazó, egyenes láncú alkilcsoportot jelent;
A2 jelentése DTrp, DPNal vagy DPhe,
A5 jelentése A3-A5·, vagy A5· általános képletű csoport, ahol
A3 jelentése Alá vagy DAla,
A5-jelentése Lys(e-R|R2)-Z vagy Om(8-RtR2)-Z, melynél Rt és R2 jelentése hidrogénatom vagy 1-6 szénatomszámú alkilcsoport, azzal a megkötéssel, hogy ha R, jelentése hidrogénatom, akkor R2 jelentése alkilcsoport, és ha R2 jelentése hidrogénatom, akkor R, jelentése alkilcsoport, Z jelentése -NH2 vagy -OH csoport, vagy
A5· jelentése - ha A, jelentése His-től eltérő - lehet még Lys-Z, Om-Z vagy Arg-Z, ahol Z jelentése -NH2 vagy -OH, vagy
A5-jelentése —NH(CH2)XNH2 csoport, ahol x értéke 2 és 9 közötti egész szám,
C2 jelentése Trp vagy Phe,
C3 jelentése DPhe vagy DPal.
A találmány oltalmi körébe tartoznak továbbá a fenti polipetidek szerves és szervetlen addíciós sói, melyet a későbbiekben részletesen ismertetünk. A polipeptidek közül előnyösen alkalmazhatók az ArA2Ala-C2-DPhe-A5, még előnyösebben az ArA2-AlaTrp-DPhe-A5 általános képletnek.
A találmányt a továbbiakban a mellékelt rajzok felhasználásával ismertetjük, ahol az 1. ábra diagramsorozata a szérum növekedési hormon szintjét mutatja az idő függvényében.
Az aminosavmaradékokat a leírásban a szabványos peptidnómenklatura szerint a következőképpen jelöltük:
Gly | = glicin |
Tyr | - L-tirozin |
Ile | = L-izoleucin |
Glu | = L-glutaminsav |
Thr | = L-treonin |
Phe | = L-fenil-alanin |
Alá | = L-alanin |
Lys | = L-lizin |
Asp | = L-aszparaginsav |
Cys | = L-cisztein |
Arg | = L-arginin |
Ava | = a-amino-valeriánsav |
Aib | = a-amino-izovajsav |
Gin | = L-glutamin |
Pro | = L-prolin |
HU 223 664 Β1
Leu = L-leucin
Met = L-metionin
Ser = L-szerin
Asn = L-aszparagin
His = L-hisztidin
Trp = L-triptofán
Val = L-valin
DOPA = 3,4-dihidroxi-fenil-alanin
Met(O) = metionin-szulfoxid
Abu = O-amino-vajsav iLys = N'-izopropil-L-lizin
4-Abu = 4-amino-vajsav
Om = L-omitin
D^al = Ó-naftil-D-alanin
DPNal = β-naftil-D-alanin
Sár = szarkozin
LArg = homoarginin
Chx = ciklohexil
IMA = Νθ-imidazol-ecetsav
Tcc = l,2,3,4-tetrahidro-7-karbolin-3-karbonsav
Tic = l,2,3,4-tetrahidroizokinolin-3-karbonsav
Tip = 4,5,6,7-tetrahidro-lH-imidazo[4,5c]piridin-6-karbonsav a,yABU = α,γ-amino-vajsav
DPal = D-3-piridil-alanin
Az aminosavak nevének hárombetűs rövidítése előtt a „D” minden esetben azt jelenti, hogy az aminosavmaradék D-konfigurációjú, a glicin pedig „a természetben előforduló L-aminosavak” közé tartozik.
Ezekben a rövid szénláncú polipeptidekben bizonyos pozíciók toleránsabbak a változásokkal szemben, mint más részek, ami azt jelenti, hogy a változások nem hatnak károsan a pepiidnek azon képességére, hogy a növekedési hormon felszabadulását elősegíti, és a hormonszintet emeli az állatok vérében. Ilyen például az A5 pozíció. Más pozíciók kevésbé toleránsak a változtatásokkal szemben. Ilyenek például a közbenső aminosavak, mint Ala, Trp, Dphe a C,, C2, illetve C3 helyen. Korábban például azt hitték, hogy az A,-nek és az A2-nek L, illetve D formában kell jelen lennie, és a Trp-nek és a DPhe-nek ugyancsak L, illetve D formában kell jelen lennie, hogy ily módon egy LD LD szekvenciát képezzenek. Mi azonban azt tapasztaltuk, hogy az LD LD szekvencia helyett állhat DD LD szekvencia. Tehát arra a meglepő felismerésre jutottunk, hogy egy A,A2AlaC2C3A5 általános képletű polipeptid, amelyben At, A2 és A5 jelentése a fenti, C2 jelentése Trp vagy Phe, és C3 jelentése DPhe vagy DPal, elősegíti a növekedési hormon felszabadulását, és emeli a hormonszintet az állatok vérében.
C2 jelentése előnyösen Trp.
C3 jelentése előnyösen DPhe. Ha C3 jelentése DPal, akkor Z jelentése előnyösen hidroxilcsoport.
Az a megnövelt flexibilitás, ami abból következik, hogy az A,, A2, A3, A4, As, C2 és C3 aminosavak lehetnek bázisosak, semlegesek vagy savasak, és lehetnek L vagy D alakúak, a kívánt peptid fiziokémiai tulajdonságait nagymértékben szabályozhatóvá teszi.
Bár a DAla-DpNal-Ala-Trp-Dphe-Lys-NH2-nek és a DAla-DpNal-Ala-Phe-Dphe-Lys-NH2-nek hasonló a GH-felszabadító hatása, a Phe helyettesítése Trp-vel megnövelheti ennek a szekvenciának a kémiai stabilitását, mert a Trp érzékenyebb az oxidációra, mint a Phe. Továbbá ez a helyettesítés fokozhatja a peptid hidrofób jellegét, és ez a fizikai-kémai tulajdonság mint később látható lesz - előnyös lehet az orális, transzdermális és/vagy nazális felszívódás növelése, valamint a peptid formulálása szempontjából. Továbbá a DAla-DpNal-Ala-Trp-Dphe-Lys-NH2 és a DAla-DpNal-Ala-Phe-Dphe-Lys-NH2 azonos ED50értéket (30,5 ±0,5, illetve 30,8±0,3 pg/ml) adott egy patkánysejtes hisztaminvizsgálatban, és mindkettő javulásnak tekinthető az Ala-His-DpNal-Ala-TrpDphe-Lys-NH2 hisztaminaktivitásához képest, amely 11,0 ±1,0 pg/ml-nek bizonyult. Azok a peptidek, melyeknek kisebb a hisztaminfelszabadító hatása (nagyobb az ED50-értéke), klinikailag hatásosabbak lehetnek, mert a peptid beinjektálásának helyén várhatóan kisebb mértékű lokális reakciót váltanak ki, és/vagy kisebb valószínűséggel váltanak ki szervezeti antigén klinikai ellenhatásokat.
A flexibilitás nagyon előnyös a kívánt peptid képzése és szállítása szempontjából is egy adott faj esetén. Ezek a változtatások javíthatják továbbá az orális felszívódást, valamint a peptidek metabolizmusát és kiválasztását. Például az Ala-His-DpNal-Ala-Trp-DpheLys-NH2 (GHRP-1) emberekben hatásosabban szabadítja fel a növekedési hormont, mint az Ala-His-DTrpAla-Trp-Dphe-Lys-NH2. Viszont orálisan beadva a DAla-DpNal-Ala-Trp-Dphe-Lys-NH2 (GHRP-2) hatásosabb a GHRP-l-nél. Az 1. ábrán fiatal férfiak szérumhormonszintje látható az idő függvényében 300 pg/kg GHRP-1 beadása után (40 személy, 1-1. ábra), 600 pg/kg GHRP-1 beadása után (39 személy, 1-2. ábra), illetve 100 pg/kg GHRP-2 beadása után (11 személy, 1-3. ábra). Ezen vizsgálatokban a GRPH-t 20 ml vízben adtuk be, majd 100 ml vizet adtunk be a fiatal, 25 év körüli férfiaknak. A vért a diagramon látható időpontokban vettük le. A GH-t radioimmunvizsgálattal mértük.
Az is várható, hogy miután aromás oldalláncok távolíthatók el ezen a peptidek bizonyos helyeiről, ahol eddig szükségesnek tartották a jelenlétükét, és minthogy a D-konfigurációjú aminosavmaradék biológiailag bizonyára jobban védett, mint az L-konfigurációjú, bizonyos peptideknél a nagyobb védelem és a kisebb tömeg felhasználható a polipeptid további alakítására olyan tulajdonságok támogatása érdekében, mint például a nazális, orális, transzdermális felszívódás, vagy az in vivő stabilitás.
Ugyancsak változtatható az R,, R2, R3, R4 és Z szubsztituens, és ezáltal a kívánt vegyület fiziokémiai tulajdonságai tovább szabályozhatók. Tehát egy bizonyos fajon belül megnövelhetjük egy pepiidnek egy adott receptorhoz történő szállítását.
A találmány szerinti, növekedési hormont felszabadító vegyületek közül előnyösen alkalmazhatók az
ArA2-Ala-Trp-DPhe-A5
HU 223 664 Β1 általános képletűek, valamint szerves és szervetlen addíciós sóik.
Ezen csoporton belül előnyösen alkalmazhatók az alábbi vegyületek:
DAla-DpNal-Ala-Trp-Dphe-Lys-NH2,
DAla-DpNal-Ala-Trp-Dphe-Lys-(e-iPr)-NH2,
DAla-DTrp-Ala-Trp-Dphe-Lys-NH2,
DAla-DpNal-Ala-Trp-Dphe-NH-(CH2)5-NH2,
NH2-(CH2)5-CO-DpNal-Ala-Trp-Dphe-NH-(CH2)5NH2 valamint szerves és szervetlen addíciós sóik.
Jelenleg ezek a vegyületek a legelőnyösebbek, mert a rövidebb szénláncú polipeptidek szintézise olcsóbb, és a fenti vegyületekről bebizonyosodott, hogy nagyon hatásosan elősegítik a vér növekedési hormonszintjeinek emelését.
A növekedési hormon felszabadítására előnyösen alkalmazhatók továbbá az ArA2-Ala-Phe-DPhe-A5 általános képletű polipeptidek. Ezen csoporton belül előnyösen alkalmazhatók azok a vegyületek, melyekben A, jelentése N“IMA, a,rABU, DAla, His, Alá vagy His, A2 jelentése DpNal vagy Dphe, és A5 jelentése Lys-NH2, Arg-NH2, NH-Chx-NH2 (1,4-Chx-diamin) vagy Lys-EA. Ilyenek például az
N“IMA-DpNal-Ala-Phe-Dphe-Lys-NH2, a,rABU-DpNal-Ala-Phe-Dphe-Lys-NH2,
D Ala-Dphe-Ala-Phe-Dphe-Ly s-NH2,
Ala-His-DpNal-Ala-Phe-Dphe-Lys-NH2,
N“IMA-DpNal-Ala-Phe-Dphe-NH-Chx-NH2, ajABU-DpNal-Ala-Phe-Dphe-NH-Chx-NH2, DAla-DpNal-Ala-Phe-Dphe-Lys-EA, DAla-DpNal-Ala-Phe-Dphe-DArg-NH2, valamint szerves és szervetlen addíciós sóik.
A találmány egy további megvalósítását képezik az olyan A1A2AlaC2C3A5 általános képletű polipeptidek, amelyekben C2 jelentése Trp, Phe vagy ChxAla és C3 jelentése Dphe vagy DChxAla. A, jelentése előnyösen DAla, A2 jelentése előnyösen DpNal. Ilyen vegyület például a
DAla-DpNal-Ala-ChxAla-Dphe-Lys-NH2, a DAla-DpNal-Ala-Phe-DChxAla-Lys-NH2 és a DAla-DpNal-Ala-DChxAla-DChxAla-Lys-NH2, valamint szerves és szervetlen addíciós sóik.
Ezek a vegyületek könnyen szintetizálhatok, hatásosan elősegítik a vér növekedési hormonszintjének emelését, ipari méretű gyártásra és felhasználásra is megfelelőek. További előnyük, hogy a polipeptidek számos pozíciójában végrehajtható helyettesítésekből adódó flexibilitásnak köszönhetően olyan fiziokémiai tulajdonságokat mutatnak, melyeknek révén egy sor állatfajnak átadhatók. A poláris, neutrális vagy nempoláris C-terminális és közbenső pozíciók megválasztása révén érjük el, hogy a vegyület kompatibilis legyen a kívánt orális, nazális vagy folyamatos beadási móddal, melyekhez speciális kémiai/mechanikai átadási módszereket alkalmazunk.
Ezek a peptidek terápiásán felhasználhatók bármely olyan területen, ahol növekedési hormonok alkalmazhatók, így például a hipotalamikus hipofizeális törpenövés, csontritkulás, égések kezelésére, a veseelégtelenség akut kezelésére, csonttörés kezelésére az összeforrás hiánya esetén, továbbá sebek gyógyulásának elősegítésére. Továbbá felhasználhatók a műtét utáni, valamint az akut vagy krónikus legyengülést okozó belgyógyászati betegségekből történő gyógyulás elősegítésére. Ugyancsak használhatók ezek a peptidek rákbetegek kezelésére, például a betegek leromlásának megelőzésére és/vagy csökkentésére. Ezen terápiás felhasználások során a peptidből terápiásán hatásos mennyiséget alkalmazunk. Ez - mint mondottuk - az a mennyiség, amely szükséges ahhoz, hogy a szérumban a növekedési hormonok szintjét megemelje.
Ezenkívül a találmány szerinti vegyületek felhasználhatók állatokban a vér GH-szlntjeinek növelésére, tehenek tejtermelésének növelésére, állatok, például emlősök (mint ember, juh, szarvasmarha, sertés), valamint halak, szárnyasok, egyéb gerincesek és rákfélék testgyarapodásának növelésére, továbbá emlősök gyapjú- és/vagy szőrmetermelésének fokozására. A testgyarapodás mértéke függ többek között az állat nemétől és korától, a beadott - növekedésihormonfelszabadító - vegyület fajtájától és mennyiségétől, a beadás módjától. A találmány szerinti vegyületek az emberben is növelik a szérum GH-szintjét, kis termetű gyermekeknél elősegítik a testi növekedést, egyes gyermekeknél csökkentik a kövérséget és javítják a protein-anyagcserét, javítják a bőr, az izmok és a csontok protein-anyagcseréjét, miközben csökkentik az idősebbek elhízását, különösen akkor, ha a GH nem kielégítő.
Ezek a peptidek felhasználhatók továbbá az emberi szérum lipidmegoszlásának javítására azáltal, hogy a szérumban csökkentik a koleszterin és a kis sűrűségű lipoprotein mennyiségét, és növelik a nagy sűrűségű lipoprotein mennyiségét.
A találmány szerinti új polipeptidek az oldat- és szilárd fázisú peptidkémiában használatos, vagy a szakmában ismert hagyományos módszerekkel szintetizálhatok. A peptid-amidok esetén a szilárd fázisú szintézist előnyösen a peptid C-terminális végénél kezdjük. Az alkalmas kiindulási anyagot például úgy állíthatjuk elő, hogy a kívánt védett α-aminosavat egy klór-metilezett, hidroxi-metilezett, benzhidril-amin (BHA)vagy para-metil-benzil-hidril-amin (p-Me-BHA)gyantán megkötjük. Ilyen klór-metilezett gyanta BIOBEADS SX-1 kereskedelmi néven szerezhető be a Bio Rád Laboratoritories-tól (Richmond, Califomia). A hidroxi-metilezett gyanta előállítását Bodansky és munkatársai ismertetik [Chem. Ind. (London) 38, 1597 (1966)]. A BHA gyantát Pietta és Marshall írja le [Chem Comm. 650 (1970)], beszerezhető a Peninsula Laboratories Inc.-tói (Belmont, Califomia).
A kezdeti kapcsolás után az a-amino-védőcsoportot szerves oldószerben oldott savas reagenssel, például trifluor-ecetsavval (TFA) vagy sósavval (HCI) szobahőmérsékleten eltávolíthatjuk. Az a-amino-védőcsoport eltávolítása után a visszamaradt védett aminosavakat lépésről lépésre, a kívánt sorrendben kapcsolhatjuk. Általában mindegyik védett aminosavat a megfelelő reagensnek körülbelül háromszoros feleslegével reagáltatjuk egy alkalmas karboxilcsoport-aktivátor - például
HU 223 664 Bl metilén-kloridos (CH2C12) vagy dimetil-formamidos (DMF) vagy ezen oldószerek elegyével készített diciklohexil-karbodiimid (DCC)- vagy diizpropil-karbodiimid (DlC)-oldat - jelenlétében.
A kívánt aminosavszekvencia kialakítása után a kívánt peptidet a benzhidril-amin alapgyantáról például hidrogén-fluoridos (HF) kezeléssel hasíthatjuk le, amely nemcsak a peptidet hasítja le a gyantáról, hanem a legelterjedtebben használt oldalláncvédó csoportokat is. Ha klór-metilezett vagy hidroxi-metilezett gyantát használunk, a hidrogén-fluoridos kezeléssel szabad aminosavat kapunk. De ezekből a peptidgyantákból könnyen előállíthatunk peptid-alkil-amidokat és -észtereket is oly módon, hogy a lehasítást egy alkalmas alkil-aminnal, dialkil-aminnal vagy diamino-alkánnal végezzük, vagy egy alkohollal magas pH-jú közegben átészterezést hajtunk végre.
A fenti szilárd fázisú eljárás a szakmában jól ismert, leírása megtalálható Stewart és Young Solid Phase Peptide Synthesis című művében (Second Edn., Pierce Chemical Co., Rockford, IL 1984).
Bodansky és munkatársai (Peptide Synthesis, 2nd Edition, John Wiley & Sons, New York, N. Y. 1976) leírnak néhány jól ismert oldószeres módszert, melyek alkalmasak a találmány szerinti peptidrészek szintetizálására.
Előnyösebbnek tartják az olyan oldószeres peptidszintézist, amelyben legalább két peptidfragmentum között kondenzációs reakció játszódik le.
Ebben az eljárásban egy Χ-Α,-Υ peptidfragmentum egy U-V-W peptidfragmentummal kondenzál, ahol az A, kivételével minden oldallánc semleges vagy védett, és X jelentése Prot, ahol Prot egy N-terminális védőcsoportot jelent; Y jelentése A2-Q, Ala-A2-Q, A2Ala-Q, Ala-A2-Ala-Q, A2-Ala-Trp-Q, Ala-A2-AlaTrp-Q, Ala-Q vagy -Q; ha Y jelentése Q, akkor U jelentése J-A2-Ala-Trp vagy J-Ala-A2-Ala-Trp; ha Y jelentése Ala-Q, akkor U jelentése J-A2-Ala-Trp; ha Y jelentése A2-Q, vagy Ala-A2-Q, akkor U jelentése JAla-Trp; ha Y jelentése A2-Ala-Q vagy Ala-A2-A3-Q, akkor U jelentése J-Trp; ha Y jelentése A2-Ala-Trp-Q vagy Ala-A2-Ala-Trp-Q, akkor U jelentése J; V jelentése A5 vagy Z; ha V jelentése A5, akkor W jelentése Z; ha V jelentése Z, akkor W nincs jelen; A,, A2, A5 és Z jelentése a fenti.
Q a peptidfragmentum karboxiterminálisa, jelentése -R3 vagy -M általános képletű csoport, ahol M egy nitrogéntartalmú nukleofillel helyettesíthető molekularész, R3 jelentése pedig hidrogénatom, 1 és körülbelül 10 közötti szénatomot tartalmazó alkilcsoport, 6 és körülbelül 12 közötti szénatomot tartalmazó arilcsoport, vagy 7 és körülbelül 12 közötti szénatomot tartalmazó aril-alkilcsoport; J a peptidfragmentum aminoterminálisa, jelentése hidrogénatom vagy egy, a kapcsolási reakciót nem zavaró védőcsoport, például benzilcsoport.
Ezután eltávolítjuk a védőcsoportokat, vagy pedig az így kapott védett peptidet további kondenzációs reakciókban felhasználjuk egy nagyobb peptid előállítására.
Ennek az előnyös módszernek a leírása megtalálható az 551,121 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi bejelentésben (közzétételi száma: W09201709)
A találmány vonatkozik még gyógyszerkészítményre, melyek alkalmasak növekedési hormonok felszabadulásának elősegítésére és/vagy a növekedési hormonok szintjének emelésére állatok vérében.
A növekedési hormonok felszabadulásának elősegítésére és/vagy szintjeik emelésére szolgáló eljárás a fent felsorolt betegségek kezelésére is felhasználható. Az eljárás abból áll, hogy az állatnak vagy embernek a fenti peptideknek legalább egyikéből hatásos mennyiséget adunk be. Az eljárás egyik megvalósítása állatok kezelésére szolgál.
A találmány szerinti vegyületek beadhatók orálisan, parenterálisan (intramuszkuláris (im.), intraperitoneális (ip.), intravénás (iv.) vagy szubkután (se.) injekció alakjában), nazálisán, vaginálisan, rektálisan vagy szublinguálisan, intrapulmonáris belélegeztetéssel, és mindegyik beadási módhoz kialakítható a megfelelő dózisforma. Előnyösen alkalmazható a parenterális beadási mód.
Orális beadásra alkalmas szilárd dózisformák például a kapszulák, tabletták, pirulák, porok és granulátumok. Ezekben a szilárd dózis formákban a hatóanyag legalább egy inért hordozóanyaggal - mint szacharóz, laktóz vagy keményítő - van elkeverve. Az ilyen dózisformák általában tartalmaznak inért hordozóanyagokon kívül további anyagokat is, például lubrikánsokat (csúsztatószerek), mint magnézium-sztearát. Kapszulák, tabletták és pirulák esetén a dózisformák tartalmazhatnak pufferanyagokat is. A tabletták és pirulák készülhetnek enterális bevonattal.
Orális beadásra alkalmas folyékony dózisformák például az emulziók, oldatok, szuszpenziók, szirupok, elixírek, amelyek a szakmában ismert inért hígítóanyagokat, például vizet tartalmaznak. Az inért hígítóanyagokon kívül a készítmények tartalmazhatnak adalék anyagokat, például nedvesítő-, emulgeáló- és szuszpendálószereket, továbbá édesítő-, ízesítő- és illatosítóanyagokat.
A találmány szerinti, parenterális beadásra alkalmas készítmények közé tartoznak a steril vizes vagy nemvizes oldatok, szuszpenziók és emulziók. Nemvizes oldószerként vagy közegként használható például a propilénglikol, polietilénglikol, növényolajok, például olívavagy kukoricaolaj, zselatin és az injektálható szerves éterek, mint például az etil-oleát. Ezek a dózisformák tartalmazhatnak továbbá adalék anyagokat, például tartósító-, nedvesítő-, emulgeáló- és diszpergálószereket. A készítményeket sterilizálhatjuk például baktériumszűrőn történő átszűréssel, sterilizálószerek bevitelével, besugárzással vagy hőkezeléssel. Úgy is eljárhatunk, hogy a készítményt steril vízzel vagy más steril, injektálható közeggel közvetlenül a felhasználás előtt állítjuk össze.
A találmány szerinti vegyületeket beadhatjuk növekedési hormont felszabadító hormonnal (például a természetben előforduló, növekedési hormont felszabadító hormonnal, annak analógjaival vagy funkcionális megfelelőivel) együtt, valamint egyéb, a növekedési
HU 223 664 BI hormon felszabadulását elősegítő vegyületekkel, például növekedési hormont felszabadító peptidekkel együtt (lásd például a 4,880,778 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalom leírásában), mint amilyenek például az acetokolin-észteráz-inhibitorok, a βadrenergiás blokkolószerek és az a-adrenergiás blokkolószerek. Ezek a kombinációk a találmány szerinti, növekedési hormont felszabadító peptidek beadásának egy különösen előnyös módját képezik, mert a kombináció sokkal nagyobb mértékben elősegíti a növekedési hormon felszabadulását, mint az az egyes komponensek egyedi hatásainak összegezése alapján várható lenne, vagyis a kombinációban szinergetikus hatás lép fel az egyedi komponensek hatásához képest. A fent idézett szabadalmi leírásban további részletek találhatók a növekedési hormont felszabadító peptidek beadásával kapcsolatban. Ezek a szinergetikus vegyületek előnyösen olyan vegyületek, amelyek a növekedési hormont felszabadító hormon receptoraival szemben agonistaként működnek vagy a szomatostatin hatását inhibiálják. A szinergizmus lehet bináris, tehát a találmány szerinti vegyület és egy szinergetikus vegyület közötti, de egynél több szinrgetikus vegyület is részt vehet benne.
A növekedési hormon felszabadulását és élőlények, például az ember vérében mért szintjének emelését eredményező kombinációk hatásos mennyiséget tartalmaznak a találmány szerinti polipeptidekből, és legalább egyet az alábbi csoportokból: az 1. csoportba tartozó polipeptidek vagy egy, a növekedési hormonok felszabadulását elősegítő vegyület, például egy, a 2. csoportba tartozó polipeptid. Az 1. csoportba tartozik bármely, a természetben előforduló, növekedési hormont felszabadító hormon és annak funkcionális megfelelői. A fenti polipeptidek az emlősök, szárnyasok, és rákfélék növekedési hormont felszabadító hormonreceptoraira agonistaként hatnak.
A 2. csoportba tartoznak az alábbi peptidek:
Tyr-DArg-Phe-NH2,
Tyr-DAla-Phe-NH2,
Tyr-DArg(NO2)-Phe-NH2,
Tyr-DMet(O)-Phe-NH2,
Tyr-DAla-Phe-Gly-NH2,
Tyr-DArg-Phe-Gly-NH2,
Tyr-DThr-Phe-Gly-NH2,
Phe-DArg-Phe-Gly-NH2,
Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2,
Tyr-DAla-Gly-Phe-NH2,
Tyr-DArg-Gly-Trp-NH2,
Tyr-DArg(NO2)-Phe-Gly-NH2,
Tyr-DMet(O)-Phe-Gly-NH2, (NMe)Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2,
Tyr-DArg-Phe-Gly-ol,
Tyr-DArg-Gly-(NMe)-Phe-NH2,
Tyr-DArg-Phe-Sar-ol,
Tyr-DAla-Phe-Sar-ol,
Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-NH2,
Tyr-DAla-(NMe)Phe-Gly-Met(O)-ol,
Tyr-DArg-(NMe)Phe-Gly-Met(O)-ol,
Gly-Tyr-DArg-Phe-Gly-NH2,
Tyr-DThr-Gly-Phe-Thz-NH2,
Gly-Tyr-DAla-Phe-Gly-NH2,
Tyr-DAla-Phe-Gly-ol,
Tyr-DAla-Gly-(NMe)Phe-Gly-ol,
Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2,
Tyr-DAla-Phe-Sar-NH2,
Tyr-DAla-Gly-(NMe)Phe-NH2,
Sar-Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2,
Tyr-DCys-Phe-Gly-DCys-NH2 (ciklikus diszulfid),
Tyr-DCys-Phe-Gly-DCys-NH2 (szabad ditiol),
Tyr-DCys-Gly-Phe-DCys-NH2 (ciklikus diszulfid),
Tyr-DCys-Gly-Phe-DCys-NH2 (szabad ditiol),
Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2,
Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH2,
Tyr-DAla-Phe-Sar-Phe-Pro-Ser-NH2,
Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2,
Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH2,
Tyr-DAla-Phe-Sar-Phe-Hyp-Ser-NH2,
Tyr-DArg-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2,
Tyr-DArg-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH2,
Tyr-DArg-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH2,
Tyr-DArg-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2 és szerves vagy szervetlen addíciós sóik. Ezen kombinációkat a növekedési hormon felszabadulását és az állati vérben mért szintjének emelését okozó szinergetikus hatás előidézéséhez szükséges mennyiségben adjuk be.
A szakmában jártasak más olyan vegyületeket is ismernek, amelyek a növekedési hormon felszabadulását idézik elő, ilyenek például az acetokolin-észterázinhibitorok, valamint a β-adrenergiás és az a2adrenergiás blokkolószerek.
A találmány egy előnyös megvalósításában a természetben előforduló, növekedési hormont felszabadító hormonokat és azok funkcionális megfelelőit használjuk a növekedési hormonok felszabadulását elősegítő vegyületekkel és a találmány szerinti peptidekkel együtt, például az 1. és a 2. csoportba tartozó vegyületeket a találmány szerinti peptidekkel, vagy egy másik példaként az 1. csoportba tartozó vegyületeket vagy βadrenergiás blokkolószereket a találmány szerinti peptidekkel együtt.
A találmány szerinti polipeptidből vagy polipeptidek kombinációjából beadandó mennyiség sokféle tényezőtől függ, így például a kezelendő állattól, annak életkorától és nemétől, az elérni kívánt terápiás hatástól, a beadási módtól, valamint attól hogy milyen polipeptidet vagy polipeptidkombinációt alkalmazunk, de minden esetben a növekedési hormon felszabadítása és a kezelt állat vérében mért szintjének emelése szempontjából hatásos dózist (terápiásán hatásos mennyiséget) alkalmazunk. Ez a dózisszint általában testtömegkilogrammonként körülbelül 0,1 pg-10 mg összes polipeptidet jelent. Az előnyös mennyiséget a szakmában jártasak a leírás alapján könnyen meghatározzák.
így például embereknél intravénás beadás esetén a dózisszint testtömeg-kilogrammonként előnyösen körülbelül 0,1 pg-10 pg, még előnyösebben körülbelül 0,5 pg-5 pg, a legelőnyösebben körülbelül 0,7 pg-körülbelül 3,0 pg összes polipeptid. A növekedési hormont felszabadító peptidek kombinációját is alkalmazhatjuk,
HU 223 664 Β1 mely esetben a találmány szerinti peptidekből értelemszerűen kisebb mennyiségek használhatók. Ha például a találmány szerinti pepiidet egy, a 4,880,778 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalom leírásában szereplő és az 1. csoportba tartozó szinergetikus vegyülettel, például GHRH-val kombináljuk, akkor a találmány szerinti vegyület dózisszintje testtömeg-kilogrammonként előnyösen körülbelül 0,1 pg-körülbelül 5 pg, a másik vegyületé (például GHRH) körülbelül 0,5 pg-körülbelül 15,0 pg, még előnyösebben a találmány szerinti vegyület dózisszintje testtömeg-kilogrammonként körülbelül 0,1 pg-3 pg, a másik vegyületé pedig körülbelül 1,0 pg és körülbelül 3,0 pg közötti.
Orális beadási mód esetén általában nagyobb mennyiségek szükségesek. így például embereknél orális beadás esetén a dózisszint testtömeg-kilogrammonként előnyösen körülbelül 30 pg-körülbelül 1200 pg, még előnyösebben körülbelül 70 pg-körülbelül 600 pg, a legelőnyösebben körülbelül 200 pg-körülbelül 600 pg összes polipeptid. A szarvasmarhák és sertések általában az emberrel azonos, míg a patkányok általában magasabb dózisszintet igényelnek. A pontos dózisszint a leírás alapján kísérleti úton könnyen meghatározható.
A találmány tárgyát képezik olyan gyógyszerkészítmények, melyek hatóanyagként a fenti polipeptidek vagy kombinációik szerves vagy szervetlen addíciós sóit tartalmazzák, adott esetben egy hordozó-, hígító-, felszabadulást késleltető ágyazó- vagy bevonóanyaggal együtt.
A növekedési hormonokat felszabadító peptideknek és kombinációiknak a találmány oltalmi körébe tartozó szerves addíciós sói lehetnek például acetátok, mint trifluor-acetát, továbbá lehetnek oxalátok, valerátok, oleátok, laurátok, benzoátok, laktátok, tozilátok, citrátok, maleátok, fumarátok, szukcinátok, tartarátok, naftalátok; a szervetlen addíciós sók pedig tartalmazhatnak az I. oszlopba tartozó elemeket (ezek az alkálifémsók), a II. oszlopba tartozó elemeket (ezek az alkáliföldfémsók), lehetnek ammónium- és protaminsók, tartalmazhatnak továbbá cinket, vasat, ellenionként klorid-, bromid-, szulfát- és foszfátionokat, valamint a fenti szerves csoportokat.
Embereknek előnyösen adhatók be gyógyászatilag elfogadható sók. Ilyenek például a gyógyszeriparban általánosan használt nem toxikus alkálifém- és alkáliföldfém- és ammóniumsók, mint nátrium-, kálium-, lítium-, kalcium-, magnézium-, bárium-, ammónium- és protaminsók, amelyeket a szakmában ismert módszerekkel állítunk elő. Idetartoznak továbbá a nem toxikus savaddíciós sók, melyeket szintén ismert módon, általában úgy állítunk elő, hogy a találmány szerinti vegyületeket egy alkalmas szerves vagy szervetlen savval reagáltatjuk. Ilyen sók például a hidrokloridok, hidrobromidok, szulfátok, hidrogén-szulfátok, acetátok, oxalátok, valerátok, oleátok, laurátok, borátok, benzoátok, laktátok, foszfátok, tozilátok, citrátok, maleátok, fumarátok, szukcinátok, tartarátok, naftilátok.
Az alábbi példák a találmány további illusztrálására szolgálnak, annak oltalmi körét nem befolyásolják.
1. példa
A növekedési hormont felszabadító peptidek előállítása
Egy kereskedelmi forgalomban kapható automatikus peptidszintetizáló készülék reakcióedényébe parametil-benzhidril-amin-hidrokloridot (pMeBHA -HC1) töltünk. A gyantát körülbelül 5 mol/g töltésig szabad aminnal szubsztituáljuk. A vegyületeket az egyes aminosavak kapcsolásával állítjuk elő a peptidszekvencia karboxiterminálisából kiindulva, megfelelő aktiválószer, például N,N’-diciklohexil-karbodiimid (DCC) alkalmazásával. Az egyes aminosavak aaminocsoportját például t-butoxi-karbonil-csoporttal, az oldalláncok reakcióképes funkciós csoportjait pedig az alábbi 1. táblázatban megadott módon védjük.
1. táblázat
A szilárd fázisú peptidszintézisnél alkalmazható oldalláncvédő csoportok
Arginin | Ns-tozil- |
Aszpartámsav | O-benzil- |
Cisztein | S-para-(metil-benzil)- |
Glutaminsav | O-benzil- |
Hisztidin | N'm-tozil- |
Lizin | Nc-2,4-diklór-benzil-oxi-karbonil- |
Metionin | S-szulfoxid- |
Szerin | O-benzil- |
Treonin | O-benzil- |
Triptofán | Nin-formil- |
Tirozin | 0-2,6-diklór-benzoil- |
Az első aminosav beépítése előtt a gyantát annak 1 g-jára számítva körülbelül 10 ml diklór-metánnal háromszor körülbelül 1 percig keverjük, 1 g gyantára számítva körülbelül 10 ml 10:90 arányú diklór-metános Ν,Ν-diizopropil-etil-amin (DIEA)-oldattal háromszor - egyenként két percig - keverve semlegesítjük, majd 1 g gyantára számítva körülbelül 10 ml diklórmetánnal háromszor körülbelül 1 percig keverjük. Az első és minden egyes további aminosavat egy előre elkészített szimmetrikus anhidrid alkalmazásával kapcsolunk a gyantához oly módon, hogy a megfelelően védett aminosavból a gyanta reakciókapacitásának körülbelül 6-szorosát kitevő mennyiséget és a gyanta kötési kapacitásának 2,0-szeresét kitevő DIC-t használunk megfelelő mennyiségű diklór-metánban oldva. A diklór-metánban rosszul oldódó aminosavaknál az oldatot Ν,Ν-dimetil-formamid (DMF) hozzáadásával homogenizáljuk. A szimmetrikus anhidridet általában szobahőmérsékleten vagy alacsonyabb hőmérsékleten állítjuk elő, legfeljebb 30 perccel azelőtt, hogy a reakcióedénybe betöítenénk. A szimmetrikus anhidrid előállítása során képződő diciklohexil-karbamidot úgy távolítjuk el, hogy az oldatot gravitációs szűréssel a reakcióedénybe beleszűrjük. Az aminosavaknak a gyantához történő kapcsolódását általában színteszttel követjük, egy olyan reagens - például ninhidrin - al7
HU 223 664 Bl kalmazásával, amely a primer és szekunder aminokkal reagál. Miután a védett aminosav kapcsolódása a gyantához teljes mértékben (99%-ban) végbement, az α-aminocsoport védőcsoportját egy, vagy többsavas reagenssel eltávolítjuk. Erre a célra általában trifluorecetsav 33:66 arányú diklór-metános oldatát használjuk.
Miután a kívánt aminosavszekvencia kialakítását befejeztük, a kívánt peptidet a hordozógyantáról egy reagenssel, például hidrogén-fluoriddal végzett kezeléssel hasítjuk le, amely nemcsak a peptidet hasítja le a gyantáról, hanem a legáltalánosabban használt oldalláncvédő csoportokat is. Ha BHA- vagy p-MeBHA-gyantát használunk, a hidrogén-fluoridos kezelés eredményeként szabad peptid-amidokat kapunk. Ami5 nosav-Merrifield-gyanta használata esetén a szabad peptid-alkil-amidokat egy alkalmas aminnal, végzett kezeléssel hasítjuk le (ebben az esetben a Boc-NeFMOC-Lys alkalmazása az FMOC-csoport egyidejű eltávolítását is lehetővé teszi).
A 2. táblázaton látható az egyes aminosavak gyantára történő felvitelének teljes menete.
2. táblázat
Eljárás az egyes aminosavaknak a gyantára történő felvitelére
Reagens | Keverések száma | 1-1 keverés időtartama |
1. Diklór-metán | 3 | 1 perc |
2. TFA-diklór-metán (33.66) | 1 | 2 perc |
3. Diklór-metán | 1 | 20 perc |
4. Diklór-metán | 3 | 1 perc |
5. DIEA, DMF (10:90) | 2 | 2 perc |
6. Diklór-metán | 3 | 1 perc |
7. Boc-aminosav/DIC | 1 | 15-120 perc* |
8. Diklór-metán | 3 | 1 perc |
10. A kapcsolási reakció előrehaladásának követése** | ||
11. Az 1-12. lépés megismétlése minden egyes aminosavnál |
* A kapcsolási reakcióidő a szóban forgó aminosavtól függ.
** Hogy a kapcsolás milyen mértékig ment végbe, az általában egy színteszttel követhető. Ha a kacsolás nem tökéletes, akkor ugyanazon aminosav kapcsolását más módon, például HOBt aktív észterrel megismételjük. Ha a kapcsolás tökéletesen végbement, akkor kapcsolhatjuk a következő aminosavat.
Ezzel az eljárással állítjuk elő a 3., 4., 5. és 6. táblázatban felsorolt vegyületeket.
2. példa
A GH in vivő felszabadítása patkányokban
A Charles River Laboratories-tól (Wilmington, MA) fejletlen nőstény patkányokat szereztünk be. Megérkezésük után 25 °C-on, 10:40 órás világos: sötét ciklusokban tartottuk őket. Vizet és Purina patkányeledelt szükség szerint kaptak. A kölykök 21 napos korukig maradtak anyjuk mellett.
Csoportonként 6 db 26 napos patkányt 20 perccel az intravénás peptides kezelés előtt 50 mg/kg intraperitoneálisan beadott pentobarbitallal érzéstelenítettünk. A peptidek intravénás (iv.) beadásához hordozóanyagként 0,1% zselatint tartalmazó normál nátriumklorid-oldatot használtunk. Az 55 65 g-os, érzéstelenített patkányoknak injekció alakjában beadtuk a növekedési hormont felszabadító vegyületeknek a 3. táblázatban látható mennyiségeit. A 0,1 ml-es injekciót a jugularis (nyaki) vénába adtuk be.
perccel az utolsó vizsgálati injekció (ld. 3. táblázat) beadása után minden állatot guillotinnal lefejeztünk, majd a vér GH-szintjeinek méréséhez a törzsből származó vért összegyűjtöttük. A vért hagytuk megalvadni, majd a vérrögöket a szérumtól centrifugálással elválasztottuk. A szérumot mindaddig fagyasztva tároltuk, míg a növekedési hormon-szintek meghatározására szolgáló, a National Institute of Arthritis, Diabetes and Digestive and Kidney Diseases (NIADDK) által kidolgozott és az alábbiakban leírt radioimmunvizsgálatához mintákat nem vettünk belőle.
A reagenseket általában a hűtőszekrény hőmérsékletén (körülbelül 4 °C), a következő sorrendben töltjük be a RíA-elemzés kémcsőibe:
(a) puffer (b) „hideg” (vagyis nem radioaktív) standard vagy meghatározandó ismeretlen szérumminta, (c) radiokatív jóddal megjelölt növekedésihormonantigén, és (d) növekedésihormon-antiszérum.
A reagenseket általában úgy adagoljuk, hogy a RIA kémcsőben elért végső hígítás körülbelül 1:30 000 legyen (az antiszérum és az összes folyadék térfogataránya).
Az összekevert reagenseket ezután rendszerint 24 órán át szobahőmérsékleten (körülbelül 25 °C-on) inkubáljuk, majd hozzáadunk egy második antitestet (például a majom gamma-globulinjával szembeni
HU 223 664 Bl kecske- vagy nyúlszérumot), amely a komplexbe vitt növekedésihormon-antiszérumhoz kötődik, és kicsapja azt. Ezután a RIA kémcsövekben lévő csapadékokból egy gamma-szcintillációsszámlálóval meghatározzuk az adott idő alatt jelentkező becsapódások számát. 5 A becsapódások számát a növekedési hormon (GH) szintjének függvényében ábrázolva felveszünk egy összehasonlító görbét. Az ismeretlen minták GHszintjét azután ehhez az összehasonlító görbéhez viszonyítva határozzuk meg.
A szérum GH-t RIA-módszerrel mértük, a National Hormoné and Pituitary Programtól kapott reagensek alkalmazásával.
A 3. táblázatban a szérumszinteket ng/ml-ben adjuk meg a patkány GH standard értékében (0,61 nemzetközi egység/mg, IU/mg) kifejezve. Az adatok mellett feltüntettük a középértéktől való ± eltérést (standard hiba, SEM). A statisztikai elemzést Student-t-vizsgálattal végeztük. A 3. táblázatban a 6-6 patkánnyal kapott ered10 mények átlagértékei láthatók.
3. táblázat
Növekedési hormont felszabadító vegyületekkel elért in vivő GH-felszabadulás pentobarbitallal érzéstelenített patkányokban (az utolsó injekció beadása után 10 perccel az állatokat lefejeztük)
A oszlop GH-felszabadító peptid | Összes dózis3 (pg/iv.) | Kontrollszérum GH ng/ml ±SEM (N-6) | Kezelt szérum GH ng/ml ±SEM (N-6) |
* Ala-His-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 b | 0,1 | 337±51 | 610±90 |
0,3 | 337±51 | 1140± 187 | |
1,0 | 337±51 | 2909±257 | |
3,0 | 337±51 | 3686±436 | |
* His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 b | 0,1 | 131 ±43 | 540± 148 |
0,3 | 131 ±43 | 751 ±88 | |
1,0 | 131 ±43 | 1790±252 | |
3,0 | 131 ±43 | 2481±209 | |
DAIa-DPNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH, | 0,1 | 337±51 | 1381±222 |
0,3 | 337±51 | 2831 ±304 | |
1,0 | 337±51 | 2886± 179 | |
3,0 | 337±51 | 3678±287 | |
* Ala-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,3 | 167 ±46 | 363±73 |
1,0 | 167±46 | 1450±294 | |
3,0 | 167±46 | 2072±208 | |
10,0 | 167 ±46 | 2698±369 | |
* DAIa-pNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,1 | 160±151 | 263±45 |
0,3 1,0 | 160±151 | 315±85 426±41 1 |
*-gal a találmány oltalmi körén kívüli vegyületeket jelöljük
A oszlop GH-felszabadító peptid | Összes dózis3 (pg/iv) | Kontrollszérum GH ng/ml ±SEM (N-6) | Kezelt szérum GH ng/ml ±SEM (N-6) |
DAla-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,1 | 111±24 | 526±86 |
0,3 | 111±24 | 1608 ±204 | |
1,0 | 111±24 | 2820±346 | |
3,0 | 111±24 | 2437±214 | |
* Ala-DpNal-Ala-NMeTrp-DPhe-Lys-NH2 | 0,1 | 167 ±46 | 144±20 |
0,3 | 167 ±46 | 258±28 | |
1,0 | 167±46 | 261 ±24 | |
3,0 | 167±46 | 277±85 | |
* D-Leu-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,1 | 160±51 | 256±94 |
0,3 | 160±51 | 452±49 | |
1,0 | 160±51 | 355±94 | |
* D-Trp-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,1 | 160±51 | 226±61 |
0,3 | 160±51 | 245±27 | |
1,0 | 160±51 | 437±62 |
HU 223 664 Bl
3. táblázat (folytatás)
A oszlop GH-felszabadító peptid | Összes dózis3 (pg/iv) | Kontrol lszérum GH ng/ml ±SEM (N-6) | Kezelt szérum GH ng/ml ±SEM (N-6) |
* Ala-His-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH,b | 0,3 | 160±51 | 1418±302 |
1,0 | 160±51 | 2201±269 | |
* His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 b | 0,1 | 140±10 | 200±40 |
0,3 | 140±10 | 505±50 | |
1,0 | 140±10 | 1640±215 | |
* DAsn-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,1 | 228±23 | 122±38 |
0,3 | 228±23 | 195±21 | |
1,0 | 228±23 | 197±47 | |
* DHis-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,1 | 228±23 | 386±81 |
0,3 | 228±23 | 605 ±82 | |
1,0 | 228±23 | 930±96 | |
* DLys-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,1 | 228±23 | 262±31 |
0,3 | 228±23 | 340±86 | |
1,0 | 228±23 | 335±56 | |
* DSer-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH, | 0,1 | 228±23 | 226± 11 |
0,3 | 228±23 | 171 ±48 | |
1,0 | 228±23 | 212±43 | |
* Ala-His-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 b | 0,3 | 228±23 | 1746±318 |
1,0 | 228±23 | 2610± 176 | |
Gly-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NHj | 0,3 | 160±36 | 1237±249 |
1,0 | 160±36 | 2325±46 | |
3,0 | 160±36 | 2694±370 | |
10,0 | 160±36 | 3454± 159 | |
Ser-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,3 | 160±36 | 227±39 |
1,0 | 160±36 | 595± 112 | |
3,0 | 160±36 | 1303±281 | |
10,0 | 160±36 | 2919±320 | |
Met-DpN al-Ala-T rp-DPhe-Lys-NH2 | 0,3 | 160±36 | 181±48 |
1,0 | 160±36 | 226±58 | |
3,0 | 160±36 | 316±66 | |
10,0 | 160±36 | 1010±236 | |
* Ala-His-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 b | 0,1 | 160±36 | 822±243 |
0,3 | 160±36 | 1594±292 | |
1,0 | 160±36 | 2180±284 | |
* Gln-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NI f2 | 0,3 | 131 ±43 | 124±15 |
1,0 | 131 ±43 | 340±66 | |
3,0 | 131 ±43 | 476±109 | |
10,0 | 131 ±43 | 673±228 | |
Pro-D [INal - A1 a-Trp-D Phe-Ly s-N H2 | 0,3 | 135±32 | 264±31 |
1,0 | 135±32 | 513±123 | |
3,0 | 135±32 | 1690±103 | |
Gly-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH, | 0,3 | 215±33 | 1301 ±260 |
1,0 | 215±33 | 2211±146 | |
3,0 | 215±33 | 2364±365 | |
NaAcetil-Gly-D[jNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,3 | 262±53* | 268±21* |
1,0 | 262±53* | 599±219* | |
3,0 | 262 ±53* | 626±210* | |
Sar-DfSNal-Ala-Trp-DPhc-Lys-NH2 | 0,3 | 262±53* | 908±264* |
1,0 | 262 ±53* | 1681 ±262* | |
3,0 | 262 ±53* | 2600±316* | |
* DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,3 | 215±33 | 436±98 |
1,0 | 215±33 | 660±151 | |
3,0 | 215±33 | 776±274 |
HU 223 664 Β1
3. táblázat (folytatás)
A oszlop GH-felszabadító peptid | Összes dózis11 (pg/iv) | Kontrollszérum GH ng/ml ±SEM (N-6) | Kezelt szérum GH ng/ml ±SEM (N-6) |
* NaAcetil-DflNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH, | 0,3 | 262 ±53* | 339±17* |
1,0 | 262 ±53* | 430±136* | |
3,0 | 262±53* | 634±118* | |
Ncdzopropil-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH, | 0,3 | 262±53* | 541 ±179* |
1,0 | 262 ±53* | 972±247* | |
3,0 | 262 ±53* | 1636±371* | |
NaDietil-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,3 | 127±32* | 462±132* |
1,0 | 127±32* | 899±160* | |
3,0 | 127±32* | 1786±373* | |
NaEtil-DpNaL-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,3 | 135±32 | 531±80 |
1,0 | 135±32 | 1156±250 | |
3,0 | 135±32 | 2666±225 | |
Gly-DpNal-Ala-Trp-DPhc-Lys-NH2 | 0,3 | 135±32 | 1387±352 |
1,0 | 135±32 | 1958±353 | |
3,0 | 135±32 | 2605±97 | |
PAla-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,3 | 135±32 | 1937±343 |
1,0 | 135±32 | 3603±645 | |
3,0 | 135±32 | 4000±500 | |
Ava* *-DpNal- Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,3 | 135±32 | 2469± 185 |
1,0 | 135±32 | 4034±680 | |
3,0 | 135±32 | 3142±392 | |
* Ala-DPNal-Ala-Trp-DPhe-NHCH2CH2NH2 | 0,3 | 208±148* | 211±27* |
1,0 | 208±168* | 468±127* | |
3,0 | 208±148* | 877±325* | |
30,0 | 208±148* | 2325±477* | |
* Ala-DpNal-Ala-Trp-DPhe-NHCH2CH2CH2CH2CH2NH2 | 0,3 | 208±148* | 284±132* |
1,0 | 208±148* | 527±166* | |
3,0 | 208±148* | 816±289* | |
30,0 | 208±148* | 3650±772* | |
D-Ala-DpNal-Ala-Trp-DPhe-NHCH2CH2CH2CH2CH2NH2 | 0,3 | 111±24 | 180±37 |
1,0 | 111±24 | 686±135 | |
3,0 | 111±24 | 1490±179 | |
10,0 | 111±24 | 2248±70 | |
* Ala-DpNal-Ala-Trp-DPhe-OMe | 0,3 | 208±148* | 211±48* |
1,0 | 208±148* | 157±35* | |
3,0 | 208±148* | 492 ±147* | |
30,0 | 208±148* | 554±127* | |
D-Ala-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,1 | 111±24 | 526±86 |
0,3 | 111±24 | 1608±204 | |
1,0 | 111 ±24 | 2820±346 | |
3,0 | 111 ±24 | 2437±214 | |
Aib-DpNal-ALa-Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,1 | 208±148* | 269±58* |
0,3 | 208±148* | 331 ±108* | |
1,0 | 208±148* | 368±133* | |
3,0 | 208±148* | 1090±176* | |
D-Ala-DPNal-Ala-Trp-DPhe-Lys(iPr)-NH2 | 0,1 | 215±49 | 608± 115 |
0,3 | 215±49 | 1753±419 | |
1,0 | 215±49 | 1817±297 | |
3,0 | 215±49 | 2336± 196 |
* DMSO-ban oldva ** amino-valcriánsavban (Ava) oldva a az így jelölt dózisokat 29 napos nőstény patkányoknak adtuk be b kontrollként használt GH-felszabadító peptidek
HU 223 664 Bl
3. táblázat
Növekedési hormont felszabadító vegyületekkel elért in vivő GH-felszabadulás pentobarbitallal érzéstelenített patkányokban
A 3. táblázatban a találmány szerinti vegyületeket hasonlítottuk össze az ilyen vegyületek általános képletén kívül eső vegyületekkel, és kimutattuk, hogy az előbbiek patkányoknak beadva rendkívüli mértékben elősegítik a növekedési hormon felszabadulását és szintjének emelését az állatok vérében. Különösen értékelendő az előnyös vegyületek meglepő hatása a növekedési hormon felszabadítására, mert egy rövid szénláncú, kis molekulatömegű polipeptid, melynek aminoterminális végén D-alanin, C-terminális végén pedig a Lys helyén pentán-diamin van, minden bizonnyal olcsó eszközt jelent majd az állatok és emberek növekedésihormon-szintjeinek emelésére.
3. példa
A GH in vivő felszabadítása patkányokban orális beadás után
A 2. példában leírt eljárást ismételtük, azzal az eltéréssel, hogy a vegyületek ott feltüntetett dózisait intragasztrikus (gyomorba vezetett) csövön át adtuk be a patkányoknak. A beadott vegyületek, az alkalmazott dózisok és az eredmények a 4. táblázaton láthatók.
4. táblázat
Növekedési hormont felszabadító vegyületekkel elért in vivő GH-felszabadulás pentobarbitallal érzéstelenített patkányokban (az állatokat a peptidek intragasztrikus beadását követően különböző időpontokban lefejeztük)
A oszlop GH-fclszabaditó peptid | Összes dózis3 (mg/kg) | Szérum GH ng/ml ±SEM (N-6) | Szérum GH ng/ml ± SEM (N-6) 15’, (20’), (30’) múlva |
* Ala-His-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NHq | 10 30 | 247+32 247+32 | 786+244 1914+294 |
DAla-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 | 10* 30** | 247+32 247+32 | 116+298 2038+444 |
Ava-DpNaL-Ala-Trp-DPhe-Lys-NHj | 30 | 322+145* | 2135+586* |
Gly-DpNal-Ala-Trp-DPhc-Lys-NH2 | 30 | 247+32 | 1072+137 |
* His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH/ | 30 | 247+32 | 1810+437 |
* Ala-His-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 a | 10 | 196+49(15’) 147+30(20’) 133 + 18 (30’) | 1421+363 1605+621 (20’) 752 + 81 (30’) |
DAla-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NHj | 10 | 196+49 (15’) 147+30(20’) | 706+133 (15’) 1062+254 (20’) |
Gly-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH, | 10 | 196+49(15’) 147+30(20’) | 957+188(15’) 1685+524 (20’) |
* His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lysa | 10 | 196+49(15’) 147+30(20’) | 1131 + 189(15’) 686+149 (20’) |
PAla-DpNal-Ala-Trp-DPhe-I.ys-NIL | 10 | 196+49 (15’) 147+30(20’) | 1202+429(15’) 1217+239(20’) |
Ava-DpNal-Ala-Trp-Dphe-Lys-NH2 | 10 | 196±49(15’) 147+30(20’) | 1407+204(15’) 1251+351 (20’) |
* szuszpenzió (nehéz* vagy könnyű**) ecetsav hozzáadásával a kontrollpcptidck
A találmány szerinti vegyületek patkányoknak orálisan beadva GH-felszabadító hatásukat megtartják. Ez értékes tulajdonság, mert ez a beadási mód növeli a peptidek terápiás használhatóságát.
4. példa
A GH in vivő felszabadítása patkányokban A 2. példában leírt eljárást ismételtük. A beadott vegyületek, az alkalmazott dózisok és az eredmények θθ az 5. és 6. táblázatban láthatók.
HU 223 664 Bl
5. táblázat
Növekedési hormont felszabadító szintetikus peptidekkel elért in vivő GH-felszabadulás pentobarbitallal érzéstelenített patkányokban (az utolsó injekció beadása után 10 perccel az állatokat lefejeztük)
A oszlop GH-felszabadító peptid | Összes dózis (pg/iv.) | Kontrollszérum GH ng/ml ±SEM (N-6) | Kezelt szérum GH ng/ml ±SEM (N-6) |
DAla-DpNal-Ala-Trp-DPhe-NH2 | 0,30 | 216±27 | 340±38 |
1,00 | 216±27 | 1205±335 | |
3,00 | 216±27 | 1703±182 | |
10,00 | 216±27 | 2741 ±484 | |
DAla-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Ala-NH, | 0,30 | 216±27 | 611 ±68 |
1,00 | 216±27 | 929 ±209 | |
3,00 | 216±27 | 1765±320 | |
10,00 | 216±27 | 2644±358 | |
* Lys-DAla-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NHj | 0,10 | 216±27 | 216±40 |
0,30 | 216±27 | 269±31 | |
1,00 | 216±27 | 432± 143 | |
3,00 | 216±27 | 771± 134 | |
DAla-DpNal-Ala-Trp-DPhe-NH-Chx-NHj | 0,03 | 216±27 | 517±135 |
0,10 | 216±27 | 1078± 174 | |
0,30 | 216±27 | 1831 ±436 | |
1,00 | 216±27 | 3120±761 | |
* DAla-DpNal-Ala-Trp-DAla-Lys-NH, | 0,10 | 187±36 | 220±34 |
0,30 | 187±36 | 167±48 | |
1,00 | 187±36 | 339±61 | |
3,00 | 187±36 | 778 ±174 | |
10,00 | 187±36 | 1676±470 | |
30,00 | 187±36 | 1791±384 | |
DAla-DPNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH, | 0,03 | 153±27 | 409±97 |
0,10 | 153±27 | 1469± 152 | |
0,30 | 153±27 | 2322±265 | |
1,00 | 153±27 | 2765±352 | |
DAla-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Ala-NH(CH2)5NH2 | 0,03 | 177±45 | 542±98 |
0,10 | 177±45 | 932±84 | |
0,30 | 177±45 | 1121 ±212 | |
1,00 | 177 ±45 | 2599 ±144 | |
NalMA-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NlL | 0,03 | 192±41 | 696± 108 |
0,10 | 192±41 | 1049± 198 | |
0,30 | 192±41 | 2567±419 | |
1,00 | 192±41 | 2001 ±341 | |
DAIa-DpNal-Ala-Trp-DPhc-NH-Chx-NH, | 0,10 | 192±41 | 846± 105 |
0,30 | 192±41 | 1886±493 | |
1,00 | 192±41 | 2209±187 | |
3,00 | 192±41 | 3359±433 | |
DAla-Tcc-Ala-Trp-DPhc-Lys-NHj | 0,30 | 93 ±22 | 149±20 |
3,00 | 93 ±22 | 142±35 | |
* DAla-Gly-Gly-Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,30 | 93±22 | 107±14 |
3,00 | 93±22 | 89± 15 | |
DAIa-DfíNal-AIa-Trp-DPhe-I.ys-NH, | 0,03 | 93±22 | 230±23 |
0,10 | 93±22 | 1006±204 | |
0,30 | 93 ±22 | 2110±260 | |
1,00 | 93 ±22 | 1825±328 | |
DAla-DpNal-Ala-Trp-DTic-Lys-NH2 | 0,03 | 93 ±22 | 141±26 |
0,10 | 93 ±22 | 156±62 | |
0,30 | 93 ±22 | 124±31 | |
1,00 | 93±22 | 151 ±24 |
HU 223 664 Bl
5. táblázat (folytatás)
A oszlop GH-felszabadító peptid | Összes dózis (pg/iv.) | Kontrollszérum GH ng/ml ±SEM (N-6) | Kezelt szérum GH ng/ml ±SEM(N-6) |
DAIa-DfiNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-OH | 0,10 | 93±22 | 558±162 |
0,30 | 93±22 | 1730±306 | |
DAla-DfiNal-Ala-Tcc-DPIre-Lys-NH, | 3,00 | 145±17 | 537±43 |
10,00 | 145±17 | 746±92 | |
* DpNal-Cily-Gly-Trp-DPhc-Lys-NH, | 3,00 | 145±17 | 417±37 |
10,00 | 145±17 | 397±114 | |
DAla-DpNal-Ala-Trp-DPal-Lys-NH2 | 0,10 | 145±17 | 365±42 |
0,30 | 145±17 | 584±148 | |
DAla-DfiNal-Ala-Trp-DPal-Lys-OH | 0,10 | 145±17 | 928±184 |
0,30 | 145±17 | 1782±241 | |
* 3Me-His-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,03 | 87± 11 | 122± 11 |
0,10 | 87±11 | 185±27 | |
0,30 | 87± 11 | 101 ±12 | |
0,10 | 87±11 | 112±13 | |
* 3Me-His-D3Nal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,03 | 87±11 | 134±28 |
0,10 | 87±11 | 159±30 | |
0,30 | 87± 11 | 78±19 | |
1,00 | 87±11 | 134±27 | |
* Tip-Ala-DfiNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NHj | 0,10 | 87±11 | 168±27 |
0,30 | 87±11 | 167±28 | |
1,00 | 87±11 | 152±74 | |
3,00 | 87±11 | 272±63 | |
DAla-DfiNal-Ala-Trp-DPhc-Lys-NH, | 0,03 | 247±53 | 870± 136 |
0,10 | 247 ±53 | 1440±267 | |
0,30 | 247 ±53 | 2420±456 | |
1,00 | 247±53 | 2855±347 | |
3,00 | 247 ±53 | 3421±377 | |
* DAla-DTcc-Ala-Trp-DPh-Lys-NH2 | 0,10 | 247±53 | 165±26 |
0,30 | 247±53 | 183±9 | |
1,00 | 247±53 | 207±38 | |
3,00 | 247 ±53 | 153±22 | |
10,00 | 247 ±53 | 269±47 | |
* Ava-Trp-DTrp-Lys-NH2 | 0,10 | 247±53 | 153±3O |
0,30 | 247±53 | 144± 14 | |
1,00 | 247±53 | 117±9 | |
3,00 | 247±53 | 205±59 | |
10,00 | 247±53 | 214±48 | |
DAla-DfiNal-Ala-Tip-DPal-Lys-NHj | 0,03 | 228±48 | 203±20 |
0,10 | 228±48 | 772±142 | |
0,30 | 228±48 | 979±182 | |
1,00 | 228±48 | 1691±139 | |
3,00 | 228±48 | 3249±526 | |
* Tyr-DAla-DfiNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NHj | 0,03 | 228±48 | 164±52 |
0,10 | 228±48 | 247±51 | |
0,30 | 228±48 | 196±39 | |
1,00 | 228±48 | 329±57 | |
3,00 | 228±48 | 878±170 | |
* Ala-His-DfiNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,10 | 228±48 | 894± 112 |
0,30 | 228±48 | 1128±274 | |
1,00 | 228±48 | 1362± 198 |
HU 223 664 Bl
5. táblázat (folytatás)
A oszlop GH-felszabadító peptid | Összes dózis (pg/iv.) | Kontrollszérum GH ng/ml ±SEM (N-6) | Kezelt szérum GH ng/ml ±SEM (N-6) |
DAla-DfiNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-OH | 0,03 | 228±48 | 300±82 |
0,10 | 228±48 | 585±141 | |
0,30 | 228±48 | 1202±236 | |
1,00 | 228±48 | 2610±355 | |
* DAla-DpNal-Ala-Trp-NMe-DPhe-Lys-NH2 | 0,03 | 167±29 | 123±17 |
0,10 | 167±29 | 132±30 | |
0,30 | 167±29 | 232±49 | |
1,00 | 167±29 | 233±41 | |
* His-Trp-Ala-Trp-Phe-Lys-NH2 | 1,00 | 167±29 | 125±24 |
3,00 | 167±29 | 201±19 | |
10,00 | 167±29 | 130±25 | |
30,00 | 167±29 | 182±36 | |
* Ava-DAla-DpNal-Ala-Trp-UPhe-Lys-NH, | 0,03 | 167±29 | 209±33 |
0,10 | 167±29 | 144±42 | |
0,30 | 167±29 | 185±47 | |
1,00 | 167±29 | 499±110 | |
QAla-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NHj | 0,03 | 167±29 | 489±71 |
0,10 | 167±29 | 1112±194 | |
0,30 | 167±29 | 1993±259 | |
1,00 | 167±29 | 3061±238 | |
* DAla-DpNal-Gly-Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,10 | 121 ± 14 | 226±26 |
0,30 | 121±14 | 170±31 | |
1,00 | 121± 14 | 414±101 | |
3,00 | 121± 14 | 713±126 | |
* DAla-DpNal-Gly-Gly-Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,10 | 121±14 | 95±15 |
0,30 | 121 ± 14 | 82±16 | |
1,00 | 121± 14 | 177±43 | |
3,00 | 121± 14 | 223±58 | |
* Asp-DAla-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,03 | 121 ± 14 | 210±53 |
0,10 | 121± 14 | 322±48 | |
0,30 | 121 ± 14 | 557± 181 | |
1,00 | 121 ±14 | 821± 173 | |
DAla-DpNal-Ala-Trp-DPhe-NH-Chx-NH2 | 0,03 | 121±14 | 335±106 |
0,10 | 121 ±14 | 652± 129 | |
0,30 | 121±14 | 1528±252 | |
1,00 | 121±14 | 2410±370 | |
* DAla-DpNal-DAla-Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,10 | 200±45 | 166±36 |
0,30 | 200±45 | 197±33 | |
1,00 | 200±45 | 343±73 | |
3,00 | 200±45 | 531 ±121 | |
* DAla-DpNal-Ala-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,10 | 200±45 | 147±21 |
0,30 | 200±45 | 184±45 | |
1,00 | 200±45 | 206±66 | |
3,00 | 200±45 | 143±9 | |
DAla-DpNal-Ala-Trp-DPhe-NH-Chx-NH2 | 0,10 | 200±45 | 1246±189 |
0,30 | 200±45 | 1616±250 | |
1,00 | 200±45 | 2574±467 | |
3,00 | 200±45 | 2789±130 | |
* DAla-DPNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH, | 0,03 | 200±45 | 608 ±140 |
0,30 | 200±45 | 920±225 | |
1,00 | 200±45 | 1755±291 | |
3,00 | 200±45 | 2527±196 |
HU 223 664 Bl
5. táblázat (folytatás)
A oszlop GH-fclszabaditó peptid | Összes dózis (pg/iv.) | Kontrollszérum GH ng/ml ±SEM (N-6) | Kezelt szérum GH ng/ml ±SEM (N-6) |
* DAla-DpNal-Ala-Trp-Pro-Lys-NH2 | 0,03 | 157+40 | 113+14 |
1,00 | 157+40 | 136+40 | |
3,00 | 157+40 | 195+35 | |
10,00 | 157+40 | 226+42 | |
* DAla-DpNal-Ala-Trp-DPro-Lys-NHj | 0,30 | 157+40 | 234+36 |
1,00 | 157+40 | 358+48 | |
3,00 | 157+40 | 576+77 | |
10,00 | 157+40 | 1624+241 | |
* DAla-DpNal-Ala-Trp-DLcu-Lys-NH2 | 0,30 | 157+40 | 202+27 |
1,00 | 157+40 | 165+12 | |
3,00 | 157+40 | 307+51 | |
10,00 | 157+40 | 1591+568 | |
Ava-DfNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NHj | 0,03 | 157+40 | 768+191 |
0,10 | 157+40 | 1277+61 | |
0,30 | 157+40 | 1733+254 | |
1,00 | 157+40 | 2418+162 |
6. táblázat
Növekedési hormont felszabadító szintetikus peptidekkel elért in vivő GH-felszabadulás pentobarbitallal érzéstelenített patkányokban (az utolsó injekció beadása után 10 perccel az állatokat lefejeztük)
A oszlop GH-felszabadító peptid | Összes dózis (pg/iv.) | Kontrollszérum GH ng/ml +SEM (N-6) | Kezelt szérum GH ng/ml +SEM (N-6) |
* DAla-DpNal-Ala-Trp-DPhe-iLys-NHj | 0,03 | 186+34 | 412+84 |
0,10 | 186+34 | 630+124 | |
0,30 | 186+34 | 1877+195 | |
1,00 | 186+34 | 3008+417 | |
* DAla-DpNal-Ala-homo-Phe-DPhe-Lys-NHj | 0,03 | 93+13 | 214+71 |
0,10 | 93+13 | 214+58 | |
0,30 | 93+13 | 406+121 | |
1,00 | 93+13 | 1189+120 | |
DAla-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Ala-l,3-diamino-propán | 0,03 | 93 + 13 | 444+60 |
0,10 | 93 + 13 | 517+109 | |
0,30 | 93 + 13 | 2341+479 | |
1,00 | 93 + 13 | 2468+276 | |
DAla-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,03 | 93 + 13 | 362+64 |
0,10 | 93+13 | 800+192 | |
0,30 | 93 + 13 | 2674+486 | |
1,00 | 93+13 | 3658+610 | |
DAla-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Ala-1,6-hexil-diamin | 0,03 | 85+16 | 395+91 |
0,10 | 85+16 | 905 + 113 | |
0,30 | 85+16 | 735+166 | |
1,00 | 85+16 | 2708+310 | |
IMA-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Ala-1,3-diamino-propán | 0,03 | 85+16 | 566+157 |
0,10 | 85+16 | 645 + 167 | |
0,30 | 85+16 | 1428+271 | |
1,00 | 85+16 | 2972+365 | |
DAla-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Arg-NHj | 0,03 | 125+12 | 252+29 |
0,10 | 125+12 | 645+90 | |
0,30 | 125+12 | 1180+318 | |
1,00 | 125+12 | 2197+285 |
HU 223 664 Β1
6. táblázat (folytatás)
A oszlop GH-felszabadító peptid | Összes dózis (pg/iv.) | Kontrollszérum GH ng/ml ±SEM (N-6) | Kezelt szérum GH ng/ml ±SEM(N-6) |
* Arg-DAla-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Arg-NHj | 0,10 | 125+12 | 155+43 |
0,30 | 125+12 | 247 ±70 | |
1,00 | 125+12 | 276+ 16 | |
IMA-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Ala-1,6-hexil-diamin | 0,03 | 125+12 | 332+59 |
0,10 | 125+12 | 609+165 | |
0,30 | 125+12 | 1139+232 | |
1,00 | 125+12 | 1996+372 | |
* DAla-DpNal-Ala-Trp-Lys-NH2 | 0,30 | 160+33 | 187+44 |
1,00 | 160+33 | 257+18 | |
3,00 | 160+33 | 198+31 | |
10,00 | 160+33 | 193+33 | |
30,00 | 160+33 | 236+23 1 | |
* DAla-DpNal-Ala-Trp-NH, | 0,30 | 160+33 | 115+22 |
1,00 | 160+33 | 107+23 | |
3,00 | 160+33 | 101 + 13 | |
10,00 | 160+33 | 199+40 | |
30,00 | 160+33 | 232+69 | |
DAla-D(5Nal-Ala-Trp-DPhe-Ala-NH(CH2)5NH2 | 0,03 | 160+33 | 517+89 |
0,10 | 160+33 | 1164+255 | |
0,30 | 160+33 | 2023+242 | |
1,00 | 160+33 | 3441+435 | |
* DAla-DpNal-Ala-Trp-Pro-Lys-NH2 | 0,30 | 157+40 | 113+14 |
1,00 | 157+40 | 136+40 | |
3,00 | 157+40 | 195+35 | |
10,00 | 157+40 | 226+42 | |
* DAla-DpNal-Ala-Trp-DPro-Lys-NH2 | 0,30 | 157+40 | 234+36 |
1,00 | 157+40 | 358+48 | |
3,00 | 157+40 | 576+77 | |
10,00 | 157+40 | 1624+241 | |
* DAla-DpNal-Ala-Trp-DLeu-Lys-NH2 | 0,30 | 157+40 | 202+27 |
1,00 | 157+40 | 165+12 | |
3,00 | 157+40 | 307+51 | |
10,00 | 157+40 | 1591+568 | |
Ava-DpNal-Ala-Trp-DPhc-Lys-NH2 | 0,03 | 157+40 | 768+191 |
0,10 | 157+40 | 1277+61 | |
0,30 | 157+40 | 1733+254 | |
1,00 | 157+40 | 2418+162 | |
a,yABU-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,03 | 108+20 | 621+85 |
0,10 | 108+20 | 1230+317 | |
0,30 | 108+20 | 2385+182 | |
1,00 | 108+20 | 3011+380 | |
* DAla-DpNal-Ala-Trp-DPhe-His-NH2 | 0,03 | 108+20 | 246+22 |
0,10 | 108+20 | 199+34 | |
0,30 | 108+20 | 370+67 | |
1,00 | 108+20 | 1419+230 | |
DAla-DfiNal-Ala-Phe-DPhe-Lys-NHj | 0,03 | 108+20 | 366+81 |
0,10 | 108+20 | 1011 + 175 | |
0,30 | 108+20 | 2361+233 | |
1,00 | 108+20 | 3057+472 | |
* DAla-DpNal-Ala-Trp-NH-Chx-NH2 | 0,10 | 108+20 | 151+35 |
0,30 | 108+20 | 251+43 | |
1,00 | 108+20 | 227+55 | |
3,00 | 108+20 | 349+72 |
HU 223 664 Bl
6. táblázat (folytatás)
A oszlop GH-fclszabadító peptid | Összes dózis (pg/iv.) | Kontrollszérum GH ng/ml ±SEM (N-6) | Kezelt szérum GH ng/ml ±SEM (N-6) |
DAla-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Om-NH2 | 0,03 | 200±33 | 515±92 |
0,10 | 200±33 | 787±71 | |
0,30 | 200±33 | 1288±365 | |
1,00 | 200±33 | 1888±615 | |
* DAla-DPNAl-Ala-Trp-DHis-Lys-NH2 | 0,03 | 200±33 | 287±48 |
0,10 | 200±33 | 131 ±37 | |
0,30 | 200±33 | 337±78 | |
1,00 | 200±33 | 457±124 |
Az 5. és 6. táblázat azt mutatja, hogy a találmány szerinti vegyűletek nagyobb mértékben segítik elő a növekedési hormon felszabadulását és vérszintjének emelését, mint az egyéb vegyűletek.
5. példa
A GH in vivő felszabadítása emberekben
Normális, 25 éves átlagos életkorú férfiaknak orálisan beadtuk az Ala-His-DpNal-Ala-Trp-Dphe-LysNH2 (GHRP-1) vagy a DAla-DpNal-Ala-Trp-DpheLys-NH2 (GHRP-2) peptidet. 40 személy 300 pg/kg 25 GHRP-l-et kapott 20 ml vízben, majd 100 ml vizet tisztán, 39 személy 600 pg/kg GHRP-l-et kapott 20 ml vízben, majd 100 ml vizet, 11 személy pedig 100 pg/kg GHRP-2-t kapott 20 ml vízben, majd 100 ml vizet. Rendszeres időközökben - amint az az 30
1. ábrán látható - vért vettünk, és a mintából a 2. példa szerinti módon, radioimmunvizsgálattal meghatároztuk a növekedésihormon-szinteket. Az eredmények az 1. ábrán láthatók. 100 pg/kg GHRP-2 orális beadásával magasabb növekedésihormon-szinteket értünk el, mint 300 pg/kg GHRP-1 orális beadásával.
6. példa
A GH in vivő felszabadítása patkányokban A 2. példában leírt általános eljárást ismételtük, azzal az eltéréssel, hogy a peptideket nem intravénásán, hanem szubkután injektáltuk, és a lefejezést nem 10, hanem 15 perc elteltével végeztük. A beadott vegyületek, az alkalmazott dózisok és az eredmények a 7. táblázatban láthatók.
7. táblázat
A oszlop GH-felszabadító peptid | Összes dózis (pg/iv.) | Kontrollszérum GH ng/ml ±SEM(N-6) | =-Ί Kezelt szérum GH ng/ml ±SEM (N-6) |
IMA-DpNal-Ala-Phe-DPhe-Lys-NHj | 0,03 | 147±21 | 181±36 |
0,10 | 147±21 | 399±40 | |
0,30 | 147±21 | 808± 187 | |
1,00 | 147±21 | 2394±475 | |
a,yABU-DpNal-Ala-Phe-DPhe-Lys-NH2 | 0,03 | 147±21 | 192±29 |
0,10 | 147±21 | 288±62 | |
0,30 | 147±21 | 461 ±90 | |
1,00 | 147±21 | 1441 ±203 | |
IMA-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Alá-1,5-pentadiamin | 0,03 | 147±21 | 475±96 |
0,10 | 147±21 | 916±169 | |
0,30 | 147±21 | 1118±243 | |
1,00 | 147±21 | 2660±599 | |
His-DpNal-ALa-Phe-DPhe-Lys-NH, | 0,03 | 217±33 | 317±55 |
0,10 | 217±33 | 348±65 | |
0,30 | 217±33 | 1283±258 | |
1,00 | 217±33 | 1374±107 | |
Ala-His-DpNal-Ala-Phe-DPhe-Lys-NH, | 0,03 | 2I7±33 | 341 ±35 |
0,10 | 217±33 | 516±118 | |
0,30 | 217±33 | 1060± 151 | |
1,00 | 217±33 | 1467 ±208 | |
rABU-DpNal-Ala-Phe-DPhe-I.ys-NHi | 0,03 | 217±33 | 197±31 |
0,10 | 217±33 | 182±20 | |
0,30 | 217±33 | 524±116 | |
1,00 | 217±33 | 1127±110 |
HU 223 664 Β1
7. táblázat (folytatás)
A oszlop GH-felszabadító peptid | Összes dózis (pg/iv.) | Kontrollszcnim GH ng/ml ± SEM (N-6) | Kezelt szérum GH ng/ml +SEM (N-6) |
DAla-DpNal-Ala-Phe-DPhe-Lys-NH2 | 0,03 | 217+33 | 287+62 |
0,10 | 217+33 | 1084+162 | |
0,30 | 217+33 | 1982+345 | |
1,00 | 217+33 | 2887+275 | |
DAla-Phe-Ala-Phe-DPhe-Lys-NH2 | 0,03 | 132+18 | 167+29 |
0,10 | 132+18 | 499+62 | |
0,30 | 132+18 | 1132+145 | |
1,00 | 132+18 | 2147+268 | |
DAla-D(lNal-Ala-Phe-DPhe-Lys-NH2 | 0,03 | 132+18 | 356+77 |
0,10 | 132+18 | 756+132 | |
0,30 | 132+18 | 1564+224 | |
1,00 | 132+18 | 2272+406 |
7. példa
Peptidfragmentumok kondenzációs reakciója a peptid előállításához Általános eljárások
Az olvadáspontok meghatározásához egy Thomas Hoover kapilláris olvadáspontmérő berendezést használhatunk. Az infravörös spektrum (IR) felvételéhez egy Perkin-Elmer Model 137 vagy egy Nicolet Model 5DX spektrofotométert használunk, a mért értékeket hullámszámban (cm1) adjuk meg. A tömegspektrumot (MS) VG Analytical Ltd. Model ZAB-1F tömegspektrométerrel vehetjük fel El (elektronütköztetéses), FD (meződeszorpciós) vagy FAB (gyors atombombázási) módban. A GCMS-vizsgálatot végezhetjük egy 30 m DB5 kapillárisoszloppal (J & W Scientific) felszerelt Finnigan 4023 GCMS gázkromatográffal, hélium vivőgáz alkalmazásával. Az optikai forgatóképességet a Rudolph Research által gyártott Autopol III polariméterrel mérhetjük.
Az 'H-NMR-spektrumot egy 400 M Hz-en működő JEOL GX-400 NMR vagy egy 270 M Hz-en működő JEOL GX-270 NMR-készülékkel mérjük. Ezek a készülékek 0,7 Hz-nél kisebb rutinszerű digitális feloldásra képesek. A kémiai eltolódásokat ppm-ben (egymilliomod rész) fejezzük ki a nemzetközileg elfogadott 3-(trimetil-szilil)-tetradeutro-nátrium-propionáthoz (TSP) viszonyítva.
A nagy teljesítményű folyadékkromatográfiát (HPLC) egy L-5000 gradiensszabályozóból és egy Vydac 201TP1010 vagy 218TP1010 félpreparatív oszlophoz kapcsolt 655A szivattyúból álló Hitachi rendszerrel végezhetjük. Eluensként 0,2%-os trifluor-ecetsav-oldat és metanol különböző elegyeit alkalmazhatjuk. A szóban forgó vegyületeket általában 6 ml/perc sebességgel eluáljuk, miközben a szerves oldószer aránya fokozatosan, percenként 1-2%-kal növekszik. A vegyületeket azután a megfelelő hullámhosszaknál egy LKB 2140 dióda elrendezésű UV-detektorral mutatjuk ki. Az integrálást Nelson Analytical szoftverrel (3.6 verzió) végezhetjük.
A reakciókat - hacsak nincs másképp megadva inért nitrogén- vagy argonatmoszférában hajtjuk végre.
A vízmentes tetrahidroíuránt (THF, UV-minőség) és dimetil-formamidot (DMF) a Burdick és Jackson cégtől szerezhetjük be, és közvetlenül a palackból használhatjuk. Szárításra vízmentes MgSO4-ot alkalmazunk.
A) Az NH2-Trp-Dphe-Lys(Boc)-NH2 tripeptidfragmentum előállítása
Nv-Benzil-oxi-karbonil-fN^-t-butoxi-karbonilj-lizin-amid, 4
88,24 g (0,544 mól) karbonil-diimidazolt (CDI, 2) 1500 ml vízmentes tetrahidrofuránban (THF) oldunk, és 10 °C-ra hűtve lassan hozzáadunk 180 g (0,474 mól) Ne-t-butoxi-karbonil)-lizint (1). Az adagolás során gázfejlődés tapasztalható. Az N' -benzil-oxi-karbonil(Ne-t-butoxi-karbonil)-lizin-imidazolid (3 közbenső termék) képződése közben 2000 ml THF-t ammóniával telítünk (a THF-on 5-10 °C-on vízmentes ammóniagázt vezetünk át). Mikor úgy látjuk, hogy a 3 közbenső termék képződése befejeződött (vagyis a gázfejlődés már körülbelül 2 órája megszűnt), a 3 közbenső terméket tartalmazó THF-os oldat felét hozzáadjuk az ammóniaoldathoz. A 3 közbenső terméket tartalmazó oldat visszamaradt részét 30 perc múlva adjuk az oldathoz. Az adagolások ideje alatt és még további 45 percen át folyamatos ammóniagáz-áramot tartunk fenn. A 3 közbenső terméket tartalmazó oldat hozzáadása után fehér csapadék válik ki. A reakcióelegyet hagyjuk szobahőmérsékletre felmelegedni, majd 15 órán át keverjük. Ezután a szuszpenzióból az oldószert vákuumban eltávolítjuk. A maradékot vízben szuszpendáljuk, a kapott szilárd anyagot vákuumszűréssel leszűrjük.
N^-t-Butoxi-karbonil-lizin-amid, 5 g 5%-os Pd/C (szénen megkötött palládium) katalizátort 250 ml metanolban szuszpendálunk, és argonatmoszférában hozzáadunk 181,48 g (0,479 mól) 4 lizin-amidot 1000 ml metanolban oldva. Körülbelül 15 percig hidrogént buborékoltatunk át a reakcióelegyen, majd addig keverjük hidrogénatmoszférában, míg a HPLC-elemzés azt nem mutatja, hogy a reakció teljes mértékben végbement (36 óra). Ezután a hidrogénatmoszférát argonnal váltjuk fel. A reakcióoldatot Celite betéten leszűrve derítjük, majd az oldószert vákuumban eltávolítva szilárd anyagot kapunk.
HU 223 664 Β1
Na-Benzil-oxi-karbonil-D-fenil-alanil-(Ne-t-butoxi-karbonil)-lizin-amid, 8
66,03 g (0,409 mól) CDI-t (2) 500 ml THF-ban oldunk, és 10 °C-ra hűtve lassan hozzáadunk 126,39 g (0,423 mól) Na-benzil-oxi-karbonil-D-fenil-alanint (6). Az adagolás során gázfejlődés tapasztalható. Ennek megszűnte után 110,75 g (0,452 mól) 5 lizin-amidot adunk az oldathoz 500 ml THF-ban oldva. Körülbelül 48 óra múlva a keverékből a szilárd anyagokat szűréssel eltávolítjuk, majd a szűrletet vákuumban bepároljuk.
Az így kapott maradékot 500 ml etil-acetáttal (EtOAc) felvesszük, és választótölcsérben a következőképpen mossuk:
1. háromszor 500 ml 1 N vizes sósavoldattal; az első mosás utáni mosóoldat pH-ja körülbelül 8, a következőké 1,
2. 500 ml vízzel,
3. kétszer 500 ml félig telített vizes nátriumkarbonát-oldattal, azután a képződött kristályos szilárd anyagot (8) szűréssel eltávolítjuk,
4. háromszor 500 ml vízzel.
A szerves réteget magnézium-szulfáton szárítjuk. Derítés után az oldószert vákuumban eltávolítjuk. Az így kapott maradékot forró EtOAc-ból átkristályosítva egy második adagot kapunk a 8 közbenső termékből.
D-Fenil-alanil-(Nc-t-butoxi-karbonil)-lizin-amid, 9 g 5%-os Pd/C katalizátort 200 ml metanolban szuszpendálunk, és argonatmoszférában hozzáadunk 120,53 g (0,229 mól) 8 amidot 1500 ml metanolban oldva, majd az argonatmoszférát hidrogénre cseréljük. Mikor a HPLC-elemzés azt mutatja, hogy a reakció teljes mértékben végbement (körülbelül 4 óra), a hidrogénatmoszférát argonnal váltjuk fel. Ezután a reakcióoldatot Celite betéten leszűrve derítjük, majd az oldószert vákuumban bepároljuk. A maradékként kapott dipeptidet a /2 tripeptid szintéziséhez közvetlenül felhasználhatjuk.
Na-Benzil-oxi-karbon iltriptofil-D-fenil-alanil-(NQ-t-butoxi-karbonil)-lizin-amid, 12
67,60 g (0,209 mól) N“-benzil-oxi-karbonil-triptofánt (10) és 33,05 g (0,204 mól) CDI-t (2) 500 ml THF-ban oldunk, és az oldatot 10 °C-ra hűtve addig keverjük, míg a gázfejlődés megszűnik. Ezután körülbelül 200 ml THF-ban oldva 40,8 g (0,103 mól) 9 közbenső terméket adunk a reakcióelegyhez. A kapott oldatot 15 órán át állni hagyjuk, miközben melegítéssel szobahőmérsékleten tartjuk. A képződött szilárd anyagot vákuumszűréssel eltávolítjuk, majd a szűrletet vákuumban bepároljuk. Az így kapott maradékot 4000 ml EtOAc-tal enyhe melegítés közben feloldjuk. Az oldatot szobahőmérsékletre lehűtve szilárd anyag válik ki. Ezt vákuumban leszűrjük, és forró metanolból átkristályosítjuk, így megkapjuk a tisztított 12 tripeptidet. Az első kristályosításból kapott EtOAc-os szűrletet választótölcsérben a következőképpen mossuk:
1. kétszer 500 ml 1 N vizes sósavoldattal,
2. 500 ml vízzel,
3. kétszer 500 ml félig vizes telített nátriumkarbonát-oldattal,
4. egyszer 500 ml vizes nátrium-klorid-oldattal.
A szerves réteget magnézium-szulfáton szárítjuk, majd vákuumszűréssel derítjük. A szűrletből az oldószert vákuumban eltávolítjuk. Az így kapott maradékot forró EtOAc-tal ismét felvesszük. Az így kapott szilárd anyagból forró metanolból történő átkristályosítással a 12 tripeptid egy újabb adagját nyerhetjük ki fehér szilárd anyag alakjában.
Triptofil-D-fenil-alanil-(N--t-butoxi-karbonil)-lizin-amid, 13 g 5%-os Pd/C katalizátort 250 ml metanolban szuszpendálunk, és argonatmoszférában hozzáadunk 64,59 g (0,091 mól) 12 tripeptidet 1500 ml metanolban oldva, majd az oldathoz további 2250 ml metanolt adunk. Ezután az argonatmoszférát hidrogénre cseréljük, és a reakcióelegyet 24 órán át állni hagyjuk. Mikor a reakció teljes mértékben végbement, a hidrogénatmoszférát argonnal váltjuk fel. Ezután a reakcióoldatot Celite betéten leszűrve derítjük, majd az oldószert vákuumban bepároljuk, így fehér, szilárd anyag alakjában megkapjuk a 13 tripeptidet.
B) A K-DAla-DVNal-Ala-OMe tripeptidfragmentum előállítása
Na-Benzil-oxi-karbonil-D-alanil-D-$-naftil-alanin-metil-észter, 25
0,62 mól D-P-naftll-alanin-metil-észter-hidroklorid (22) 400 ml EtOAc-tal készített oldatát 400 ml telített nátrium-karbonát-oldattal és körülbelül 500 ml 0,8 N vizes nátrium-hidroxid-oldattal mossuk. A vizes fázist, melynek pH-ja 8,5, eltávolítjuk, a szerves fázist 150 ml félig telített vizes nátrium-karbonát-oldattal, majd 50 ml vízzel mossuk. A 22 szabad bázisformát az EtOAc-os réteg vákuumbepárlásával izoláljuk.
A körülbelül 0,52 mól frissen előállított 22 szabad bázisformát, továbbá 143,5 g (0,50 mól) Na-benziloxi-karbonil-D-alanint és (19), 0,62 mól N-hidroxiszukcinimidet (HONSu, 23) körülbelül 3 liter DMF-ben oldunk, és jeges etanolos fürdőben -5 °C-ra hűtve 95 g (0,46 mól) diciklohexil-karbodiimidet (DCC) adunk hozzá. A kapott reakcióelegyet 24 órán át keverjük, eközben szobahőmérsékletre melegszik. HPLC-elemzéssel állapítjuk meg, hogy a reakció teljesen végbement-e. Ha nem, akkor a reakcióelegyet -5 °C-ra hűtjük, és további körülbelül 0,17 mól diciklohexil-karbodiimidet adunk hozzá. Ezután újabb 24 órán át keverjük, miközben ismét szobahőmérsékletre melegszik. Ekkor a reakcióelegyet a diciklohexilkarbamid (DCU) eltávolítására leszűrjük, a szűrlethez 1 liter vizet adunk, és az így kapott oldatot vákuumban bepároljuk. A maradékot 1 N vizes sósavoldattal felvesszük (addig adjuk hozzá a sósavoldatot, míg a pH-ja eléri az 1-et, ez körülbelül 1 liter). A vizes fázist kétszer 1 liter etil-acetáttal extraháljuk. Az etil-acetátos rétegeket elöntjük. A vizes fázis pH-ját 500 ml hideg 2 N nátrium-hidroxid-oldat és szemcsés nátrium-hidroxid hozzáadásával állítjuk be. A semlegesítés folyamán az oldatot 1 liter hideg etil-acetát hozzáadásával tartjuk hi20
HU 223 664 BI degen. Mikor a vizes fázis pH-ja eléri a körülbelül 7-et, rendszerint bőséges fehér csapadék vagy olaj válik ki. Ezt vákuumszűréssel vagy dekantálással elválasztjuk, és rendre kétszer 1500 ml félig vizes telített nátriumkarbonát-oldattal, hatszor 1500 ml vízzel és háromszor 1500 ml etil-acetáttal mossuk. A kapott anyagot nagyvákuumban tömegállandóságig szárítjuk. Ezt az anyagot további tisztítás nélkül közvetlenül hidrolizálhatjuk.
Na-Benzil-oxi-karbonil-D-alanil-$-naftil-D-alanin,
Körülbelül 0,38 mól 25 dipeptidet 360 ml vízben és körülbelül 6 liter metanolban oldunk, és 192 ml 0,08 g/ml koncentrációjú (0,38 mól) vizes vizes nátrium-hidroxid-oldatot adunk hozzá. Az oldatot szobahőmérsékleten addig keverjük, míg teljes mértékben elhidrolizál (körülbelül 24 óra). HPLC-elemzéssel győződünk meg arról, hogy a kiindulási peptid már nincs jelen. Az oldatot vákuumban bepároljuk, a maradékot körülbelül 1 liter vízben oldjuk. A vizes réteget (pH-ja körülbelül 10), választótölcsérben kétszer 500 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az etil-acetátos rétegeket elöntjük. A vizes fázis pH-ját koncentrált sósavoldattal körülbelül 5-re állítjuk, ekkor rendszerint fehér csapadék vagy olaj válik ki. A terméket leszűrjük és vákuumban szárítjuk.
Na-Benzil-oxi-karbonil-D-alanil-D-$-naftil-alanil-alanin-metil-észter, 20 0,505 mól HONSu-t (23) 800 ml DMF-ben oldunk, és argonatmoszférában hozzáadjuk a 0,253 mól Na-benzil-oxi-karbonil-D-alanil-p-naftil-D-alanint (26). Ehhez az oldathoz hozzáadjuk 0,303 mól alaninmetil-észter-hidroklorid (15), 0,303 mól N-metil-morfolin (16) és 200 ml DMF keverékét. Az így kapott oldatot 10 °C-ra hűtjük, és 0,265 mól diciklohexil-karbodiimidet adunk hozzá 273 ml metilén-kloridban oldva. A reakció előrehaladását HPLC-vel követjük, miközben a reakcióelegy hőmérsékletét a reakció befejeződéséig 10 °C-on tartjuk. Ha néhány (körülbelül 4) nap múlva a reakció nem fejeződött be, további 0,080 mól 24 vegyületet adunk hozzá, és még egy napig 10 °C-on keverjük. A reakció előrehaladását továbbra is HPLCvel követjük, egészen a befejeződéséig (körülbelül 5 nap). A reakció során képződött szilárd anyagot vákuumban leszűrjük, a szűrletet vákuumban bepároljuk. A maradékot etil-acetáttal felvesszük, és kétszer 500 ml félig telített vizes nátrium-karbonát-oldattal extraháljuk. Az etil-acetátos fázist magnézium-szulfáton szárítjuk. A kapott oldatot derítjük, majd vákuumban szárazra pároljuk.
500 ml metanol és 200 ml víz elegyéhez, amely 13,7 mól N“-benzil-oxi-karbonil-DAla-DPNal-AlaOME-t tartalmaz, 7,5 ml (15 mmol) 2 N vizes nátrium-hidroxid-oldatot adunk. A reakcióelegyet egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük, majd HPLCvel megvizsgáljuk, hogy mennyi maradt a kiindulási anyagból. Ha a reakció lényegében befejeződött (körülbelül egy éjszaka), az oldatot vákuumban körülbelül 200 ml-re bepároljuk. Ezután 100 ml vizet adunk hozzá, és pH-ját 1 ml 2 N nátrium-hidroxid-oldat hozzáadásával körülbelül 12-re állítjuk. A kapott oldatot kétszer 500 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az etil-acetátos rétegeket elöntjük. A vizes fázis pH-ját vizes sósavoldattal körülbelül 5-re állítjuk, ekkor a termék rendszerint kicsapódik. Ennek elősegítésére fontos, hogy a vizes fázis térfogatát minimalizáljuk. A vizes fázist a termékről ledekantáljuk, a terméket kétszer 50 ml vízzel leöblítjük. Az elválasztott terméket vákuumban tömegállandóságig szárítjuk.
C) A peptidfragmentumok kondenzálása hexapeptid előállítására
2,6 mmol Dala-DPNal-Ala-OH-t (33) és 2,8 mmol Trp-D-Phe-Lys(Boc)-NH2 (13) peptidet vízmentes DMF-ben oldunk, és a kapott oldatot vákuumban bepároljuk. Ezt az előzetes bepárlást azért végezzük, hogy megkíséreljük a nyomokban esetleg jelen lévő metanol eltávolítását. A kapott peptidkeveréket ismét feloldjuk, és 5,1 mmol N-hidroxi-szukcinimidet adunk hozzá. Az így kapott oldatot -2 °C-ra hűtjük, és
3.4 mmol diciklohexil-karbodiimidet adunk hozzá
3.5 ml metilén-kloridban oldva. A reakcióelegyet -2 °C-on három napig keverjük, majd HPLC-vel megvizsgáljuk, hogy a reakció lényegében befejeződött-e. Ha nem, akkor további diciklohexil-karbodiimidet adunk hozzá, és a kapott reakcióelegyet még egy napon át -2 °C-on keverjük. Ha ekkor (összesen 4 nap múltán) a HPLC azt mutatja, hogy a reakció még mindig nem ment végbe tökéletesen, akkor a reakcióelegy hűtését megszüntetjük, és hagyjuk, hogy az oldat lassan, több (körülbelül 8) óra alatt szobahőmérsékletre melegedjék. Ezt az eljárást addig ismételjük, míg a reakció teljesen végbe nem megy. Ezután 50 ml vizet hozzáadva a reakcióelegyet még egy napig keverjük, majd a diciklohexil-karbamid eltávolítására leszűrjük, és a szűrletet vákuumban viszkózus olajjá bepároljuk. A maradékhoz etil-acetátot és 200 ml félig telített vizes nátrium-karbonát-oldatot adunk. A kétfázisú keveréket rotary bepárlóban körülbelül 1 órán át erőteljesen forgatjuk. Az esetleg kivált szilárd anyagot zsugorított üvegszűrőn leszűrjük. A szerves fázist vízzel mossuk, majd tömegállandóságig szárítjuk, így megkapjuk a kívánt terméket.
DAla-DWal-Ala-Trp-D-Phe-Lys-NH2 (35) ml trifluor-ecetsavat, 14 ml dimetil-szulfidot, 7 ml 1,2-etán-ditiolt és 2,2 ml anizolt 15 ml metilénkloridban oldunk, és hozzáadjuk az 1,02 mmol benziloxi-karbonil-Dala-DPNal-Ala-Trp-D-Phe-Lys(Boc)NH2 (34) hexapeptidet. A homogén reakcióelegyet 15 percig keverjük. Ezen idő eltelte után 450 ml vízmentes étert adunk hozzá, ennek hatására kiválik a biológiailag aktív nyers 35 peptid. Ezt a terméket zsugorított üvegszűrőn leszűrve vagy dekantálással elválasztjuk. A kapott terméket vízben oldjuk, és liofilizáljuk. A liofilizált terméket tovább tisztíthatjuk közepes nyomású kromatográfiával, amit egy Lichrorpep™ RP-18 (C-18, 25-40 nm, szabálytalan szemcsés) töltőanyagot tartalmazó 26x460 mm-es üvegcsőben hajtunk végre. A peptid vizes oldatának beinjektálása után az oszlopot 9 ml/perc áramlási sebességgel, 5-20 órán át 0—>25% metanolgradienssel, majd körülbelül
HU 223 664 Bl órán át 25—>55% metanolgradienssel eluáljuk. Ezután a gradiens metanolkoncentrációját óránként 2%-os sebességgel növeljük. Az eluens másik része 0,2% trifluorecetsavat tartalmazó vízből áll. A 35 terméket HPLC-vel vizsgáljuk, és a megfelelő eluátumfrakciók bepárlásával izoláljuk.
A kapott termék szagtalan, sárgásfehér por, melynek aminosavszekvenciáját PSQ-1 típusú proteinszekvencia-mérő eszközzel (Shimadzu) mérve a kapott eredmény megfelel a számítottnak.
A szabad bázis molekulatömege: 817,99 (FAB tömegspektrummérés JMS-SX102 típusú spektrográffal).
'HNMR-spektrumot egy JNM-EX270 típusú (Nihon
Denshi) készülékben felvéve az alábbi értékeket kapjuk (N-H protonok és HCl-protonok nem mutathatók ki).
iH-NMR 8270 M Hz, D2O-ban δ 7,95-7,43 (m, 7H, naftil), 7,52-6,99) (m, 5H, indol), 7,32-7,17 (m, 5H, fenil), 4,62 (t, J=6,9 Hz, 1H, CH Nal), 4,44 (t, J=6,9 Hz, 1H, CH, Phe), 4,26 (t, J=6,9 Hz, 1H,
CH Trp), 4,15-4,02 (m, 3H, CH Alá, CH Alá, CH Lys), 3,35-3,07 (m, 2H, CH2 Nal), 3,24-3,07 (m, 2H, CH2 Phe), 2,86 (t, J = 7,9 Hz, 2H, CH2(e)Lys), 2,68-2,47 (m, 2H, CH2, Trp), 1,70-1,57 (m, 2H, CH2(P)Lys), 1,51 (d, J=6,9 Hz,
3H, CHjAla), 1,50-1,35 (m, 2H, CH2(ő)Lys),
0,99-0,88 (m, 2H, CH2(y)Lys), 0,82 (d, J=6,9 Hz, 3H, CH3 Alá).
A találmány részletes leírása során annak előnyös megvalósításait ismertettük. A szakmában jártasak szá15 mára nyilvánvaló, hogy a leírás alapján a találmány oltalmi körébe eső, annak szelleme szerinti módosítások és változtatások végrehajthatók.
Claims (20)
- SZABADALMI IGÉNYPONTOK1. (I) általános képletű peptidA j - A2-Ala-C2-C3-A5 ahol az általános képletbenA[ jelentése Gly, Alá, DAla, β-Ala, His, Ser, Met, Pro,Sár, Ava, Aib, N,N-bisz(kis szénatomszámú alkil)amino-karbonsav, vagy (kis szénatomszámú alkil)amino-karbonsav, ahol a kis szénatomszámú alkilcsoport 2 és 6 közötti szénatomot tartalmazó, egyenes láncú alkilcsoportot jelent;A2 jelentése DTrp, DPNal vagy DPhe,A5 jelentése A3-A5·, vagy A5- általános képletű csoport, aholA3 jelentése Alá vagy DAla,Aj. jelentése Lys(c-R|R2)-Z vagy Om(ő-RjR2)-Z, melynél Rj és R2 jelentése hidrogénatom vagy 1-6 szénatomszámú alkilcsoport, azzal a megkötéssel, hogy ha R, jelentése hidrogénatom, akkor R2 jelentése alkilcsoport, és ha R2 jelentése hidrogénatom, akkor Rj jelentése alkilcsoport, Z jelentése —NH2 vagy -OH csoport, vagyAj. jelentése - ha At jelentése His-től eltérő - lehet még Lys-Z, Om-Z vagy Arg-Z, ahol Z jelentése -NH2 vagy -OH, vagyA5. jelentése -NH(CH2)XNH2 csoport, ahol x értéke 2 és 9 közötti egész szám,C2 jelentése Trp vagy Phe,C3 jelentése DPhe vagy DPal, valamint az (I) általános képletű vegyületek szerves és szervetlen addíciós sói.
- 2. Az 1. igénypont szerinti (I) általános képletű peptid, ahol Aj jelentése Gly, DAla vagy His, a többi szubsztituens jelentése az 1. igénypontban megadott.
- 3. Az 1. igénypont szerinti (I) általános képletű peptid, ahol A, jelentése DAla, a többi szubsztituens jelentése az 1. igénypontban megadott.
- 4. Az 1. igénypont szerinti (I) általános képletű peptid, ahol A2 jelentése DTrp vagy DPNal, a többi szubsztituens jelentése az 1. igénypontban megadott.
- 5. Az 1. igénypont szerinti (I) általános képletű peptid, ahol A2 jelentése DPNal, a többi szubsztituens jelentése az 1. igénypontban megadott.
- 6. Az 1. igénypont szerinti (I) általános képletű peptid, ahol A5 jelentése A3-A5. általános képletű csoport, a többi szubsztituens jelentése az 1. igénypontban megadott.
- 7. Az 1., 2., 3., 4. vagy 5. igénypont szerinti (I) általános képletű peptid, ahol A5 jelentése A5· általános képletű csoport, a többi szubsztituens jelentése az 1. igénypontban megadott.
- 8. Az 1. igénypont szerinti (I) általános képletű peptid, ahol C3 jelentése DPhe, a többi szubsztituens jelentése az 1. igénypontban megadott.
- 9. Az 1. igénypont szerinti (I) általános képletű peptid, ahol C2 jelentése Trp, a többi szubsztituens jelentése az 1. igénypontban megadott.
- 10. A 9. igénypont szerinti (I) általános képletű peptid, ahol C3 jelentése DPhe, a többi szubsztituens jelentése all. igénypontban megadott.
- 11. Az 1. igénypont szerinti, DAla-DPNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2, DAla-DPNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-(E-iPr)-NH2, DAla-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-(e-iPr)-NH2, DAla-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2, DAla-DPNal-Ala-Trp-DPhe-NH-(CH2)5-NH2, NH2-(CH2)5-CO-DPNal-Ala-Trp-DPhe-NH-(CH2)5nh2,DAla-DPhe-Ala-Phe-DPhe-Lys-NH2, βΑΐ3-Ηί8-ΟβΝ3ΐ-Αΐ3-Ρ1ΐ6-ΟΡ1ΐ6-ΕΥ5-ΝΗ2,DAla-DPNal-Ala-Phe-DPhe-Lys-NH2,DAla-DPNal-Ala-Phe-DPhe-Arg-NH2,DAla-DPNal-Ala-Trp-DPhe-DArg-NH2, képletű peptidek, valamint szerves és szervetlen addíciós sóik.
- 12. Gyógyszerkészítmény növekedési hormonok felszabadulásának elősegítésére és állatokban vagy emberben mért vérszintjének növelésére, mely valamely 1. igénypont szerinti peptidet, egy gyógyászatilag elfogadható hordozó- vagy hígítóanyagot, és kívánt eset22HU 223 664 Bl ben egy másik vegyületet, amely vegyület a növekedési hormont felszabadító hormon receptoraira agonistaként hat, vagy amely a szomatosztatin felszabadulását inhibiálja, valamint adott esetben más segédanyagot tartalmaz.
- 13. A 12. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény növekedési hormonok felszabadulásának elősegítésére és vérszintjének növelésére, mely tartalmaz valamely 1. igénypont szerinti peptidet legalább egy, a természetben előforduló, növekedési hormont felszabadító hormonnal vagy annak funkcionális megfelelőivel, vagy egy, a növekedési hormonok felszabadulását elősegítő vegyülettel együtt.
- 14. A 12. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény növekedési hormonok felszabadulásának elősegítésére és vérszintjének növelésére, mely tartalmaz valamely 1. igénypont szerinti peptidet legalább egy, az 1. csoportba tartozó polipeptiddel vagy a 2. csoportba tartozó polipeptiddel együtt, ahol az 1. csoport tartalmaz minden, a természetben előforduló, növekedési hormont felszabadító hormont és azok funkcionális megfelelőit, a 2. csoport pedig az alábbi polipeptideketTyr-DArg-Phe-NH2,Tyr-DAla-Phe-NH2,Tyr-DArg(NO2)-Phe-NH2,Tyr-DMet(O)-Phe-NH2,Tyr-DAla-Phe-Gly-NH2,Tyr-DArg-Phe-Gly-NH2,Tyr-DThr-Phe-Gly-NH2,Phe-DArg-Phe-Gly-NH2,Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2,Tyr-DAla-Gly-Phe-NH2,Tyr-DArg-Gly-Trp-NH2,Tyr-DArg(NO2)-Phe-Gly-NH2,Tyr-DMet(O)-Phe-Gly-NH2, (NMe)Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2,Tyr-DArg-Phe-Gly-ol,Tyr-DArg-Gly-(NMe)-Phe-NH2,Tyr-DArg-Phe-Sar-ol,Tyr-DAla-Phe-Sar-ol,Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-NH2,Tyr-DAla-(NMe)Phe-Gly-Met(O)-ol,Tyr-DArg-(NMe)Phe-Gly-Met(O)-ol,Gly-Tyr-DArg-Phe-Gly-NH2,Tyr-DThr-Gly-Phe-Thz-NH2,Gly-Tyr-DAla-Phe-Gly-NH2,Tyr-DAla-Phe-Gly-ol,Tyr-DAla-Gly-(NMe)Phe-Gly-ol,Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2,Tyr-DAla-Phe-Sar-NH2,Tyr-DAla-Gly-(NMe)Phe-NH2,Sar-Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2,Tyr-DCys-Phe-Gly-DCys-NH2 (ciklikus diszulfid),Tyr-DCys-Phe-Gly-DCys-NH2 (szabad ditiol),Tyr-DCys-Gly-Phe-DCys-NH2 (ciklikus diszulfid),Tyr-DCys-Gly-Phe-DCys-NH2 (szabad ditiol),Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2,Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH2,Tyr-DAla-Phe-Sar-Phe-Pro-Ser-NH2,Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2,Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH2,Tyr-DAla-Phe-Sar-Phe-Hyp-Ser-NH2,Tyr-DArg-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2,Tyr-DArg-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH2,Tyr-DArg-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH2,T yr-D Arg-Phe-Gly-T yr-Pro-Ser-NH2 valamint szerves és szervetlen addíciós sóikat tartalmazza.
- 15. A 14. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, mely tartalmaz valamely 1. csoportba tartozó és valamely 2. csoportba tartozó polipeptidet.
- 16. A 13. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, mely a növekedési hormonok felszabadulását elősegítő vegyületként β-adrenergiás vagy a2-adrenergiás blokkolószert vagy egy acetokolin-észteráz-inhibitort, és az alábbi csoportból választható peptidet:Tyr-DArg-Phe-NH2,Tyr-DAla-Phe-NH2,Tyr-DArg(NO2)-Phe-NH2,T yr-DMet(O)-Phe-NH2,Tyr-DAla-Phe-Gly-NH2,Tyr-DArg-Phe-Gly-NH2,Tyr-DThr-Phe-Gly-NH2,Phe-DArg-Phe-Gly-NH2,Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2,T yr-D Ala-Gly-Phe-NH2,Tyr-DArg-Gly-Trp-NH2,Tyr-DArg(NO2)-Phe-Gly-NH2,Tyr-DMet(O)-Phe-Gly-NH2, (NMe)Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2,Tyr-DArg-Phe-Gly-ol,Tyr-DArg-Gly-(NMe)-Phe-NH2,Tyr-DArg-Phe-Sar-ol,Tyr-DAla-Phe-Sar-ol,T yr-D Ala-Phe-Gly-T yr-NH2,Tyr-DAla-(NMe)Phe-Gly-Met(O)-ol,Tyr-DArg-(NMe)Phe-Gly-Met(O)-ol,Gly-Tyr-DArg-Phe-Gly-NH2,Tyr-DThr-Gly-Phe-Thz-NH2,Gly-Tyr-DAla-Phe-Gly-NH2,Tyr-DAla-Phe-Gly-ol,Tyr-DAla-Gly-(NMe)Phe-Gly-ol,Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2,Tyr-DAla-Phe-Sar-NH2,Tyr-DAla-Gly-(NMe)Phe-NH2,S ar-Tyr-D Arg-Phe- Sar-NH2,Tyr-DCys-Phe-Gly-DCys-NH2 (ciklikus diszulfid),Tyr-DCys-Phe-Gly-DCys-NH2 (szabad ditiol),Tyr-DCys-Gly-Phe-DCys-NH2 (ciklikus diszulfid),Tyr-DCys-Gly-Phe-DCys-NH2 (szabad ditiol),Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2,Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH2,T yr-D Ala-Phe- Sar-Phe-Pro-Ser-NH2,T yr-D Ala-Phe-Gly-Tyr-Hyp- Ser-N H2,Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH2,Tyr-DAla-Phe-Sar-Phe-Hyp-Ser-NH2,Tyr-DArg-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2,Tyr-DArg-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH2,Tyr-DArg-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH2,Tyr-DArg-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2,HU 223 664 Bl vagy ezek szerves vagy szervetlen addíciós sóját tartalmazza.
- 17. A 7. igénypont szerinti DAla-DPNal-Ala-Trp-Dphe-Lys-NHj, DAla-DPNal-Ala-Trp-Dphe-Lys(c-iPr)-NH2, DAla-DTrp-Ala-Trp-Dphe-Lys(c-iPr)-NH2, DAla-DTrp-Ala-Trp-Dphe-Lys-N H2, DAla-DPNal-Ala-Trp-Dphe-NH-(CH2)5-NH2, NH2-(CH2)5-CO-DPNal-Ala-Trp-Dphe-NH-(CH2)5-NH2 képletű peptid és ezek szerves vagy szervetlen addíciós sói.
- 18. Eljárás (I) általános képletűAi-A2-Ala-C2-C3-A5 (I) peptid - ahol a képletbenA( jelentése Gly, Alá, DAla, β-Ala, His, Ser, Met, Pro,Sár, Ava, Aib, N,N-bisz(kis szénatomszámú alkil)amino-karbonsav, vagy (kis szénatomszámú alkil)amino-karbonsav, ahol a kis szénatomszámú alkilcsoport 2 és 6 közötti szénatomot tartalmazó, egyenes láncú alkilcsoportot jelent;A2 jelentése DTrp, DPNal vagy DPhe,As jelentése A3-A5·, vagy As· általános képletű csoport, aholA3 jelentése Alá vagy DAla,A5- jelentése Lys(e-R,R2)-Z vagy Om(ő-R,R2)-Z, melynél R, és R2 jelentése hidrogénatom vagy1 -6 szénatomszámú alkilcsoport, azzal a megkötéssel, hogy ha Rt jelentése hidrogénatom, akkor R2 jelentése alkilcsoport, és ha R2 jelentése hidrogénatom, akkor Rt jelentése alkilcsoport, Z jelentése -NH2 vagy -OH csoport, vagyA5-jelentése - ha A| jelentése His-től eltérő - lehet még Lys-Z, Om-Z vagy Arg-Z, ahol Z jelentése -NH2 vagy -OH, vagyAj· jelentése -NH(CH2)XNH2 csoport, ahol x értéke 2 és 9 közötti egész szám,C2 jelentése Trp vagy Phe,C3 jelentése DPhe vagy DPal,- valamint szerves és szervetlen addíciós sóik előállítására, azzal jellemezve, hogy a fenti aminosavakat vagy aminosavszármazékokat szilárd fázisú peptidszintézis során ismert módon a kívánt sorrendben egymáshoz kapcsoljuk, vagy oldatfázisú kondenzációs reakció során ismert módon állítjuk elő a kívánt pepiidet.
- 19. A 18. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a vegyületet oldatfázisú reakció során a peptidffagmentumok kondenzálásával állítjuk elő.
- 20. A 18. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az aminosavak vagy aminosavszármazékok összekapcsolását szilárd fázisú szintézissel állítjuk elő.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US07/748,350 US5663146A (en) | 1991-08-22 | 1991-08-22 | Polypeptide analogues having growth hormone releasing activity |
PCT/US1992/007026 WO1993004081A1 (en) | 1991-08-22 | 1992-08-20 | Peptides having growth hormone releasing activity |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
HU9400495D0 HU9400495D0 (en) | 1994-05-30 |
HUT69178A HUT69178A (en) | 1995-08-28 |
HU223664B1 true HU223664B1 (hu) | 2004-11-29 |
Family
ID=25009088
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
HU9400495A HU223664B1 (hu) | 1991-08-22 | 1992-08-20 | Növekedési hormon felszabadulást elősegítő peptidek és eljárás előállításukra, valamint a peptideket tartalmazó gyógyszerkészítmények |
Country Status (26)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US5663146A (hu) |
EP (1) | EP0605484B1 (hu) |
JP (1) | JP3179489B2 (hu) |
KR (1) | KR100247212B1 (hu) |
CN (1) | CN1035256C (hu) |
AT (1) | ATE172742T1 (hu) |
AU (1) | AU666673B2 (hu) |
BG (1) | BG62655B1 (hu) |
BR (2) | BR9206398A (hu) |
CA (1) | CA2116120C (hu) |
CZ (1) | CZ293281B6 (hu) |
DE (1) | DE69227462T2 (hu) |
DK (1) | DK0605484T3 (hu) |
ES (1) | ES2124263T3 (hu) |
FI (2) | FI120095B (hu) |
HU (1) | HU223664B1 (hu) |
IL (1) | IL102848A (hu) |
MX (1) | MX9204861A (hu) |
NO (1) | NO314695B1 (hu) |
NZ (1) | NZ244034A (hu) |
PL (1) | PL169562B1 (hu) |
RO (1) | RO112507B1 (hu) |
RU (1) | RU2126014C1 (hu) |
SK (1) | SK282895B6 (hu) |
WO (1) | WO1993004081A1 (hu) |
ZA (1) | ZA926337B (hu) |
Families Citing this family (105)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5843941A (en) | 1993-05-14 | 1998-12-01 | Genentech, Inc. | Ras farnesyl transferase inhibitors |
SG55069A1 (en) * | 1993-12-23 | 1998-12-21 | Novo Nordisk As | Compounds with growth hormone releasing properties |
AU683121B2 (en) * | 1993-12-23 | 1997-10-30 | Novo Nordisk A/S | Compounds with growth hormone releasing properties |
US5798337A (en) * | 1994-11-16 | 1998-08-25 | Genentech, Inc. | Low molecular weight peptidomimetic growth hormone secretagogues |
US20020111461A1 (en) * | 1999-05-21 | 2002-08-15 | Todd C. Somers | Low molecular weight peptidomimetic growth hormone secretagogues |
PL186520B1 (pl) * | 1995-06-22 | 2004-01-30 | Novo Nordisk As | Związk o właściwościach uwalniania hormonu wzrostu, kompozycja farmaceutyczna zawierająca ten związek i jego zastosowanie |
PL329413A1 (en) * | 1996-04-24 | 1999-03-29 | Novo Nordisk As | Chemical compounds exhibiting properties capable to cause growth hormone release |
US6127341A (en) * | 1997-06-20 | 2000-10-03 | Novo Nordisk A/S | Compounds with growth hormone releasing properties |
EP1005484A1 (en) | 1997-06-20 | 2000-06-07 | Novo Nordisk A/S | Compounds with growth hormone releasing properties |
ZA987383B (en) * | 1997-08-19 | 2000-02-17 | Lilly Co Eli | Treatment of congestive heart failure with growth hormone secretagogues. |
US6329342B1 (en) | 1997-08-19 | 2001-12-11 | Eli Lilly And Company | Treatment of congestive heart failure with growth hormone secretagogues |
DE69921611T2 (de) | 1998-01-16 | 2005-11-03 | Novo Nordisk A/S | Verbindungen mit wachstumshormon-freisetzenden eigenschaften |
WO1999039730A1 (fr) * | 1998-02-09 | 1999-08-12 | Kaken Pharmaceutical Co., Ltd. | Preparation a administration orale contenant des peptides favorisant la secretion d'hormone de croissance |
US6919315B1 (en) | 1998-06-30 | 2005-07-19 | Novo Nordisk A/S | Compounds with growth hormone releasing properties |
US6682908B1 (en) | 1998-07-10 | 2004-01-27 | Merck & Co., Inc. | Mouse growth hormone secretagogue receptor |
WO2000002919A1 (en) | 1998-07-13 | 2000-01-20 | Merck & Co., Inc. | Growth hormone secretagogue related receptors and nucleic acids |
CA2340095A1 (en) | 1998-08-10 | 2000-02-24 | Merck & Co., Inc. | Canine growth hormone secretagogue receptor |
EP1159292A2 (en) | 1998-08-14 | 2001-12-05 | Administrators of The Tulane Educational Fund | Compounds having growth hormone releasing activity |
US6639076B1 (en) | 1998-08-18 | 2003-10-28 | Eli Lilly And Company | Growth hormone secretagogues |
US6696063B1 (en) * | 1998-12-30 | 2004-02-24 | Applied Research Systems Ars Holding N.V. | Treatment of HIV-associated dysmorphia/dysmetabolic syndrome (HADDS) with or without lipodystrophy |
CA2362290A1 (en) * | 1999-02-18 | 2000-08-24 | Kaken Pharmaceutical Co., Ltd. | Novel amide derivatives as growth hormone secretagogues |
US7022677B1 (en) | 1999-02-18 | 2006-04-04 | Kaken Pharmaceutical Co., Ltd. | Amide derivatives as growth hormone secretagogues |
US6828331B1 (en) * | 1999-02-19 | 2004-12-07 | Eli Lilly And Company | Growth hormone secretagogues |
KR20020047096A (ko) | 1999-07-26 | 2002-06-21 | 크로커 사무엘 에스 | 초활성 돼지 성장 호르몬 분비 호르몬 유사체 |
US20040192593A1 (en) | 1999-07-26 | 2004-09-30 | Baylor College Of Medicine | Protease resistant ti-growth hormone releasing hormone |
CA2387212A1 (en) * | 1999-10-12 | 2001-04-19 | Kaken Pharmaceutical Co., Ltd. | Dry powder inhalation and a method for the preparation thereof |
UA73530C2 (uk) | 1999-11-10 | 2005-08-15 | Ново Нордіск А/С | Сполука з властивостями вивільнювати гормон росту |
JP3498041B2 (ja) * | 2000-05-29 | 2004-02-16 | 科研製薬株式会社 | プラルモレリン含有点鼻用製剤 |
ES2333097T3 (es) | 2000-05-31 | 2010-02-17 | Raqualia Pharma Inc | Uso de secretagogos de la hormona de crecimiento para estimular la motilidad gastrointestinal. |
US7622503B2 (en) | 2000-08-24 | 2009-11-24 | University Of Tennessee Research Foundation | Selective androgen receptor modulators and methods of use thereof |
US7919647B2 (en) | 2000-08-24 | 2011-04-05 | University Of Tennessee Research Foundation | Selective androgen receptor modulators and methods of use thereof |
US7855229B2 (en) | 2000-08-24 | 2010-12-21 | University Of Tennessee Research Foundation | Treating wasting disorders with selective androgen receptor modulators |
US7645898B2 (en) | 2000-08-24 | 2010-01-12 | University Of Tennessee Research Foundation | Selective androgen receptor modulators and method of use thereof |
EP1355941A2 (en) | 2001-02-02 | 2003-10-29 | ConjuChem, Inc. | Long lasting growth hormone releasing factor derivatives |
US7125840B2 (en) * | 2001-10-09 | 2006-10-24 | Eli Lilly And Company | Substituted dipeptides as growth hormone secretagogues |
ATE536100T1 (de) * | 2001-10-26 | 2011-12-15 | Baylor College Medicine | Zusammensetzung für die änderung der knocheneigenschaften bei einem probanden |
US8853266B2 (en) | 2001-12-06 | 2014-10-07 | University Of Tennessee Research Foundation | Selective androgen receptor modulators for treating diabetes |
US6831102B2 (en) | 2001-12-07 | 2004-12-14 | Bristol-Myers Squibb Company | Phenyl naphthol ligands for thyroid hormone receptor |
CA2469310C (en) * | 2001-12-11 | 2013-01-29 | Advisys, Inc. | Plasmid mediated supplementation for treating chronically ill subjects |
US7015219B2 (en) | 2001-12-19 | 2006-03-21 | Bristol-Myers Squibb Company | 3-aryl-hydroxybenzoxazines and 3, 4-dihydro-3-aryl-hydroxybenzoxazines as selective estrogen receptor beta modulators |
US7250405B2 (en) * | 2002-02-07 | 2007-07-31 | Baylor College Of Medicine | Modified pituitary gland development in offspring from expectant mother animals treated with growth hormone releasing hormone therapy |
US7772433B2 (en) | 2002-02-28 | 2010-08-10 | University Of Tennessee Research Foundation | SARMS and method of use thereof |
US7381730B2 (en) | 2002-03-15 | 2008-06-03 | Bristol-Myers Squibb Company | 3-arylquinazoline derivatives as selective estrogen receptor beta modulators |
DE60306636T2 (de) * | 2002-04-09 | 2007-07-05 | Eli Lilly And Co., Indianapolis | Wachstumhormonsekretionsförderer |
US20060167268A1 (en) * | 2002-04-09 | 2006-07-27 | Eli Lilly And Company, Patent Division, | Growth hormone secretagogues |
AU2003225305A1 (en) | 2002-05-08 | 2003-11-11 | Bristol-Myers Squibb Company | Pyridine-based thyroid receptor ligands |
US7405234B2 (en) | 2002-05-17 | 2008-07-29 | Bristol-Myers Squibb Company | Bicyclic modulators of androgen receptor function |
US7785567B2 (en) | 2002-08-23 | 2010-08-31 | Valorisation-Recherche, Société en Commandite | Growth hormone-releasing peptides in the treatment or prevention of atherosclerosis and hypercholesterolemia |
WO2004045518A2 (en) | 2002-11-15 | 2004-06-03 | Bristol-Myers Squibb Company | Open chain prolyl urea-related modulators of androgen receptor function |
US8309603B2 (en) | 2004-06-07 | 2012-11-13 | University Of Tennessee Research Foundation | SARMs and method of use thereof |
TW200504021A (en) | 2003-01-24 | 2005-02-01 | Bristol Myers Squibb Co | Substituted anilide ligands for the thyroid receptor |
CA2513743C (en) * | 2003-01-28 | 2013-06-25 | Advisys, Inc. | Reducing culling in herd animals growth hormone releasing hormone (ghrh) |
WO2004069793A2 (en) | 2003-01-28 | 2004-08-19 | Bristol-Myers Squibb Company | Novel 2-substituted cyclic amines as calcium sensing receptor modulators |
US7205322B2 (en) | 2003-02-12 | 2007-04-17 | Bristol-Myers Squibb Company | Thiazolidine compounds as calcium sensing receptor modulators |
US7557143B2 (en) | 2003-04-18 | 2009-07-07 | Bristol-Myers Squibb Company | Thyroid receptor ligands |
TW200424214A (en) * | 2003-04-21 | 2004-11-16 | Advisys Inc | Plasmid mediated GHRH supplementation for renal failures |
US7459460B2 (en) | 2003-05-28 | 2008-12-02 | Bristol-Myers Squibb Company | Trisubstituted heteroaromatic compounds as calcium sensing receptor modulators |
US7265145B2 (en) | 2003-05-28 | 2007-09-04 | Bristol-Myers Squibb Company | Substituted piperidines and pyrrolidines as calcium sensing receptor modulators and method |
US7476653B2 (en) | 2003-06-18 | 2009-01-13 | Tranzyme Pharma, Inc. | Macrocyclic modulators of the ghrelin receptor |
WO2005016964A2 (en) * | 2003-08-04 | 2005-02-24 | Advisys, Inc. | Canine specific growth hormone releasing hormone |
US7399826B1 (en) | 2003-10-02 | 2008-07-15 | Ali Sadat M | Peptide for promoting healing of fractures |
DE602004027165D1 (de) | 2003-12-31 | 2010-06-24 | VGX Pharmaceuticals LLC | Reduzierung von arthritis und lahmheit bei personen unter supllement von wachstumshormon freisetzendem hormon (ghrh) |
ATE507239T1 (de) * | 2004-01-20 | 2011-05-15 | VGX Pharmaceuticals LLC | Erhöhte sekretion/retention von wachstumshormonfreisetzendem hormon (ghrh) aus muskelzellen durch speziesspezifisches signalpeptid |
US20050164952A1 (en) * | 2004-01-23 | 2005-07-28 | Vital Pharmaceuticals, Inc. | Delivery system for growth hormone releasing peptides |
US7820702B2 (en) | 2004-02-04 | 2010-10-26 | Bristol-Myers Squibb Company | Sulfonylpyrrolidine modulators of androgen receptor function and method |
US7378426B2 (en) | 2004-03-01 | 2008-05-27 | Bristol-Myers Squibb Company | Fused heterotricyclic compounds as inhibitors of 17β-hydroxysteroid dehydrogenase 3 |
US7625923B2 (en) | 2004-03-04 | 2009-12-01 | Bristol-Myers Squibb Company | Bicyclic modulators of androgen receptor function |
US7696241B2 (en) | 2004-03-04 | 2010-04-13 | Bristol-Myers Squibb Company | Bicyclic compounds as modulators of androgen receptor function and method |
US9884038B2 (en) | 2004-06-07 | 2018-02-06 | University Of Tennessee Research Foundation | Selective androgen receptor modulator and methods of use thereof |
US9889110B2 (en) | 2004-06-07 | 2018-02-13 | University Of Tennessee Research Foundation | Selective androgen receptor modulator for treating hormone-related conditions |
ATE413890T1 (de) * | 2004-07-23 | 2008-11-15 | Advisys Inc | Wachstumshormon-freisetzendes hormon verstärkt die vakzin-induzierte immunantwort |
AU2005277389A1 (en) | 2004-08-18 | 2006-03-02 | Elixir Pharmaceuticals, Inc. | Growth-hormone secretagogues |
US7456188B1 (en) | 2005-04-28 | 2008-11-25 | Bristol-Myers Squibb Company | C-5 substituted quinazolinone derivatives as selective estrogen receptor beta modulators |
EP2425715B1 (en) | 2005-08-31 | 2014-03-05 | University of Tennessee Research Foundation | Treating symptoms of renal disease with selective androgen receptor modulators (SARM) |
CU23558A1 (es) | 2006-02-28 | 2010-07-20 | Ct Ingenieria Genetica Biotech | Compuestos análogos a los secretagogos peptidicos de la hormona de crecimiento |
US8058253B2 (en) * | 2006-07-06 | 2011-11-15 | Vgx Pharmaceuticals, Inc. | Growth hormone releasing hormone treatment to decrease cholesterol levels |
MX2009000385A (es) | 2006-07-12 | 2009-04-06 | Univ Tennessee Res Foundation | Acil-anilidas sustituidas y metodos de uso de las mismas. |
CA2659336C (en) | 2006-08-02 | 2015-03-24 | Cytokinetics, Incorporated | Certain 1h-imidazo[4,5-b]pyrazin-2(3h)-ones and 1h-imidazo[4,5-b]pyrazin-2-ols, compositions thereof and their use |
US8299248B2 (en) | 2006-08-02 | 2012-10-30 | Cytokinetics, Incorporated | Certain 1H-imidazo[4,5-b]pyrazin-2(3H)-ones and 1H-imidazo[4,5-b]pyrazin-2-ols and methods for their use |
US10010521B2 (en) | 2006-08-24 | 2018-07-03 | University Of Tennessee Research Foundation | SARMs and method of use thereof |
US9730908B2 (en) | 2006-08-24 | 2017-08-15 | University Of Tennessee Research Foundation | SARMs and method of use thereof |
ES2581765T3 (es) | 2006-08-24 | 2016-09-07 | University Of Tennessee Research Foundation | Acilanilidas sustituidas y métodos de uso de las mismas |
US9844528B2 (en) | 2006-08-24 | 2017-12-19 | University Of Tennessee Research Foundation | SARMs and method of use thereof |
EP2644618B1 (en) | 2007-02-09 | 2016-08-17 | Ocera Therapeutics, Inc. | tether intermediates for the synthesis of macrocyclic ghrelin receptor modulators |
WO2008134828A2 (en) | 2007-05-04 | 2008-11-13 | Katholieke Universiteit Leuven | Tissue degeneration protection |
US7968603B2 (en) | 2007-09-11 | 2011-06-28 | University Of Tennessee Research Foundation | Solid forms of selective androgen receptor modulators |
US8003689B2 (en) | 2008-06-20 | 2011-08-23 | Gtx, Inc. | Metabolites of selective androgen receptor modulators and methods of use thereof |
AR081331A1 (es) | 2010-04-23 | 2012-08-08 | Cytokinetics Inc | Amino- pirimidinas composiciones de las mismas y metodos para el uso de los mismos |
AR081626A1 (es) | 2010-04-23 | 2012-10-10 | Cytokinetics Inc | Compuestos amino-piridazinicos, composiciones farmaceuticas que los contienen y uso de los mismos para tratar trastornos musculares cardiacos y esqueleticos |
EP2560488B1 (en) | 2010-04-23 | 2015-10-28 | Cytokinetics, Inc. | Certain amino-pyridines and amino-triazines, compositions thereof, and methods for their use |
WO2013190520A2 (en) | 2012-06-22 | 2013-12-27 | The General Hospital Corporation | Gh-releasing agents in the treatment of vascular stenosis and associated conditions |
US10314807B2 (en) | 2012-07-13 | 2019-06-11 | Gtx, Inc. | Method of treating HER2-positive breast cancers with selective androgen receptor modulators (SARMS) |
PT2872482T (pt) | 2012-07-13 | 2020-09-22 | Oncternal Therapeutics Inc | Método de tratamento de cancro de mama com modulador seletivo do recetor de andrógeno (sarm) |
US9969683B2 (en) | 2012-07-13 | 2018-05-15 | Gtx, Inc. | Method of treating estrogen receptor (ER)-positive breast cancers with selective androgen receptor modulator (SARMS) |
US10987334B2 (en) | 2012-07-13 | 2021-04-27 | University Of Tennessee Research Foundation | Method of treating ER mutant expressing breast cancers with selective androgen receptor modulators (SARMs) |
US9622992B2 (en) | 2012-07-13 | 2017-04-18 | Gtx, Inc. | Method of treating androgen receptor (AR)-positive breast cancers with selective androgen receptor modulator (SARMs) |
US9744149B2 (en) | 2012-07-13 | 2017-08-29 | Gtx, Inc. | Method of treating androgen receptor (AR)-positive breast cancers with selective androgen receptor modulator (SARMs) |
US10258596B2 (en) | 2012-07-13 | 2019-04-16 | Gtx, Inc. | Method of treating HER2-positive breast cancers with selective androgen receptor modulators (SARMS) |
JP6262661B2 (ja) | 2012-10-24 | 2018-01-17 | 第一三共株式会社 | 筋萎縮性側索硬化症治療剤 |
JP2016518357A (ja) | 2013-04-08 | 2016-06-23 | プレジデント アンド フェローズ オブ ハーバード カレッジ | 骨格筋幹細胞を若返らせる方法および組成物 |
US9119832B2 (en) | 2014-02-05 | 2015-09-01 | The Regents Of The University Of California | Methods of treating mild brain injury |
BR112016027778A2 (pt) | 2014-05-30 | 2017-08-15 | Pfizer | Usos de derivados de carbonitrila, sua combinação e sua composição farmacêutica |
WO2017075535A1 (en) | 2015-10-28 | 2017-05-04 | Oxeia Biopharmaceuticals, Inc. | Methods of treating neurodegenerative conditions |
JP2022538119A (ja) | 2019-06-27 | 2022-08-31 | サイトキネティックス, インコーポレイテッド | 1-(2-((((trans)-3-フルオロ-1-(3-フルオロピリジン-2-イル)シクロブチル)メチル)アミノ)ピリミジン-5-イル)-1H-ピロール-3-カルボキサミドの多形 |
WO2023275715A1 (en) | 2021-06-30 | 2023-01-05 | Pfizer Inc. | Metabolites of selective androgen receptor modulators |
Family Cites Families (22)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4228158A (en) * | 1979-03-30 | 1980-10-14 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
US4228156A (en) * | 1979-03-30 | 1980-10-14 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
US4223021A (en) * | 1979-03-30 | 1980-09-16 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
US4224316A (en) * | 1979-03-30 | 1980-09-23 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
CA1175810A (en) * | 1979-03-30 | 1984-10-09 | Frank A. Momany | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
US4228157A (en) * | 1979-03-30 | 1980-10-14 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
US4228155A (en) * | 1979-03-30 | 1980-10-14 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
US4223019A (en) * | 1979-03-30 | 1980-09-16 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
US4226857A (en) * | 1979-03-30 | 1980-10-07 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
US4223020A (en) * | 1979-03-30 | 1980-09-16 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
US4410513A (en) * | 1981-12-28 | 1983-10-18 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
US4410512A (en) * | 1981-12-28 | 1983-10-18 | Beckman Instruments, Inc. | Combinations having synergistic pituitary growth hormone releasing activity |
WO1983002272A1 (en) * | 1981-12-28 | 1983-07-07 | Beckman Instruments Inc | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
US4880778A (en) * | 1986-05-12 | 1989-11-14 | Eastman Kodak Company | Combinations having synergistic growth hormone releasing activity and methods for use thereof |
US4839344A (en) * | 1987-06-12 | 1989-06-13 | Eastman Kodak Company | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity |
US4880777A (en) * | 1987-09-01 | 1989-11-14 | Eastman Kodak Company | Synthetic peptides having growth hormone releasing activity |
EP0398961B1 (en) * | 1988-01-28 | 1994-11-02 | Polygen Holding Corporation | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity |
EP0400051B1 (en) * | 1988-01-28 | 1995-05-10 | Polygen Holding Corporation | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity |
DE68912775T2 (de) * | 1988-05-11 | 1994-06-30 | Polygen Holding Corp | Polypeptid-verbindungen mit hormonwachstumsbefreiender wirkung. |
US5486505A (en) * | 1990-07-24 | 1996-01-23 | Polygen Holding Corporation | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity |
JPH05508859A (ja) | 1990-07-24 | 1993-12-09 | イーストマン コダック カンパニー | ペプチド合成方法 |
IL98910A0 (en) * | 1990-07-24 | 1992-07-15 | Polygen Holding Corp | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity and pharmaceutical compositions containing them |
-
1991
- 1991-08-22 US US07/748,350 patent/US5663146A/en not_active Expired - Lifetime
-
1992
- 1992-08-18 IL IL102848A patent/IL102848A/en not_active IP Right Cessation
- 1992-08-20 RU RU94016393A patent/RU2126014C1/ru not_active IP Right Cessation
- 1992-08-20 SK SK204-94A patent/SK282895B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1992-08-20 HU HU9400495A patent/HU223664B1/hu not_active IP Right Cessation
- 1992-08-20 RO RO94-00256A patent/RO112507B1/ro unknown
- 1992-08-20 KR KR1019940700542A patent/KR100247212B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1992-08-20 NZ NZ244034A patent/NZ244034A/en not_active IP Right Cessation
- 1992-08-20 DK DK92919262T patent/DK0605484T3/da active
- 1992-08-20 BR BR9206398A patent/BR9206398A/pt not_active Application Discontinuation
- 1992-08-20 CA CA002116120A patent/CA2116120C/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-08-20 EP EP92919262A patent/EP0605484B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-08-20 ES ES92919262T patent/ES2124263T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1992-08-20 CZ CZ1994400A patent/CZ293281B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1992-08-20 AU AU25416/92A patent/AU666673B2/en not_active Ceased
- 1992-08-20 PL PL92302434A patent/PL169562B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1992-08-20 JP JP50458593A patent/JP3179489B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1992-08-20 US US07/932,494 patent/US5776901A/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-08-20 DE DE69227462T patent/DE69227462T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1992-08-20 WO PCT/US1992/007026 patent/WO1993004081A1/en active Application Filing
- 1992-08-20 AT AT92919262T patent/ATE172742T1/de active
- 1992-08-21 MX MX9204861A patent/MX9204861A/es unknown
- 1992-08-21 ZA ZA926337A patent/ZA926337B/xx unknown
- 1992-08-22 CN CN92110868A patent/CN1035256C/zh not_active Expired - Fee Related
-
1994
- 1994-02-18 BG BG98489A patent/BG62655B1/bg unknown
- 1994-02-21 NO NO19940592A patent/NO314695B1/no not_active IP Right Cessation
- 1994-02-21 FI FI940807A patent/FI120095B/fi not_active IP Right Cessation
-
1997
- 1997-04-22 BR BR1100309-0A patent/BR1100309A/pt active IP Right Grant
-
2005
- 2005-05-02 FI FI20050467A patent/FI120691B/fi not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
HU223664B1 (hu) | Növekedési hormon felszabadulást elősegítő peptidek és eljárás előállításukra, valamint a peptideket tartalmazó gyógyszerkészítmények | |
US5486505A (en) | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity | |
JPH03502329A (ja) | 成長ホルモン放出活性を有するポリペプチド化合物類 | |
JPH03502326A (ja) | 成長ホルモン放出活性を有するポリペプチド化合物類 | |
EP0417165B1 (en) | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity | |
CZ401392A3 (en) | Polypeptide compounds exhibiting capability of releasing growth hormone | |
US7250399B2 (en) | Compounds having growth hormone releasing activity | |
HU211694A9 (en) | Hexapeptides with sulphate ester groups |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
HFG4 | Patent granted, date of granting |
Effective date: 20041005 |
|
MM4A | Lapse of definitive patent protection due to non-payment of fees |