CZ293281B6 - Peptidy účinné při uvolňování růstového hormonu, způsob jejich přípravy, farmaceutické prostředky obsahující tyto látky a použití - Google Patents
Peptidy účinné při uvolňování růstového hormonu, způsob jejich přípravy, farmaceutické prostředky obsahující tyto látky a použití Download PDFInfo
- Publication number
- CZ293281B6 CZ293281B6 CZ1994400A CZ40094A CZ293281B6 CZ 293281 B6 CZ293281 B6 CZ 293281B6 CZ 1994400 A CZ1994400 A CZ 1994400A CZ 40094 A CZ40094 A CZ 40094A CZ 293281 B6 CZ293281 B6 CZ 293281B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- ala
- dphe
- trp
- dala
- peptide
- Prior art date
Links
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 title claims abstract description 147
- 102000018997 Growth Hormone Human genes 0.000 title claims abstract description 145
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 title claims abstract description 145
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 144
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title claims abstract description 78
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 10
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 36
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 13
- 230000008569 process Effects 0.000 title claims description 12
- 230000003578 releasing effect Effects 0.000 title description 15
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 117
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 44
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 26
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 25
- -1 alkyl aminocarboxylic acid Chemical compound 0.000 claims abstract description 22
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims abstract description 22
- 125000000030 D-alanine group Chemical group [H]N([H])[C@](C([H])([H])[H])(C(=O)[*])[H] 0.000 claims abstract description 16
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 16
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 claims abstract description 16
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 14
- COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N D-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N 0.000 claims abstract description 13
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims abstract description 11
- 125000000174 L-prolyl group Chemical group [H]N1C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[C@@]1([H])C(*)=O 0.000 claims abstract description 9
- WRHZVMBBRYBTKZ-UHFFFAOYSA-N pyrrole-2-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN1 WRHZVMBBRYBTKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- QIVBCDIJIAJPQS-SECBINFHSA-N D-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-SECBINFHSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 claims abstract description 4
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 claims abstract description 4
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 claims abstract description 4
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 47
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 20
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 19
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 18
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 claims description 15
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 15
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 claims description 7
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 claims description 7
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 claims description 7
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 6
- 238000006482 condensation reaction Methods 0.000 claims description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 6
- QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N D-alpha-Ala Natural products CC([NH3+])C([O-])=O QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 claims description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 4
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 4
- 102000005157 Somatostatin Human genes 0.000 claims description 3
- 108010056088 Somatostatin Proteins 0.000 claims description 3
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 claims description 3
- UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N beta-alanine Chemical compound NCCC(O)=O UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 claims description 3
- NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N somatostatin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)[C@@H](C)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N)C(O)=O)=O)[C@H](O)C)C1=CC=CC=C1 NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N 0.000 claims description 3
- 229960000553 somatostatin Drugs 0.000 claims description 3
- 206010006895 Cachexia Diseases 0.000 claims description 2
- 108010010234 HDL Lipoproteins Proteins 0.000 claims description 2
- 102000015779 HDL Lipoproteins Human genes 0.000 claims description 2
- 108010007622 LDL Lipoproteins Proteins 0.000 claims description 2
- 102000007330 LDL Lipoproteins Human genes 0.000 claims description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 claims description 2
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 claims description 2
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000000556 agonist Substances 0.000 claims description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 claims description 2
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 2
- 208000014674 injury Diseases 0.000 claims description 2
- 150000002632 lipids Chemical group 0.000 claims description 2
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 claims description 2
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 claims description 2
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 claims description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 claims description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims 2
- KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-N Carbamic acid Chemical compound NC(O)=O KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 206010013883 Dwarfism Diseases 0.000 claims 1
- 150000003862 amino acid derivatives Chemical class 0.000 claims 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 claims 1
- 108091008039 hormone receptors Proteins 0.000 claims 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims 1
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 abstract description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 5
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 abstract description 5
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 abstract description 2
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical compound FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 abstract 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 63
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 55
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 51
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 32
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 31
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 28
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 28
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 102100033367 Appetite-regulating hormone Human genes 0.000 description 25
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 20
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 20
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 18
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 18
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 18
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 18
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 17
- 108010077689 gamma-aminobutyryl-2-methyltryptophyl-2-methyltryptophyl-2-methyltryptophyl-lysinamide Proteins 0.000 description 17
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 17
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 17
- 239000000047 product Substances 0.000 description 16
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 15
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 14
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 125000002707 L-tryptophyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2C(C([C@](N([H])[H])(C(=O)[*])[H])([H])[H])=C([H])N([H])C2=C1[H] 0.000 description 14
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 14
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 11
- HRNLPPBUBKMZMT-SSSXJSFTSA-N (2s)-6-amino-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-aminopropanoyl]amino]-3-naphthalen-2-ylpropanoyl]amino]propanoyl]amino]-3-(1h-indol-3-yl)propanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]hexanamide Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](CC=1C=C2C=CC=CC2=CC=1)NC(=O)[C@H](N)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(N)=O)C1=CC=CC=C1 HRNLPPBUBKMZMT-SSSXJSFTSA-N 0.000 description 10
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 10
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 10
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 10
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 10
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 10
- 229960000208 pralmorelin Drugs 0.000 description 10
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 9
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 9
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 9
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 9
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 9
- NWQWNCILOXTTHF-HLCSKTDOSA-N (2s)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2r)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-aminopropanoyl]amino]-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-3-naphthalen-2-ylpropanoyl]amino]propanoyl]amino]-3-(1h-indol-3-yl)propanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]hexanamide Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@@H](N)C)C(=O)N[C@H](CC=1C=C2C=CC=CC2=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(N)=O)C1=CNC=N1 NWQWNCILOXTTHF-HLCSKTDOSA-N 0.000 description 8
- 101710119601 Growth hormone-releasing peptides Proteins 0.000 description 8
- 108010083553 alanyl-histidyl-(2-naphthyl)alanyl-tryptophyl-phenylalanyl-lysinamide Proteins 0.000 description 8
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 7
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 7
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 7
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 7
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 7
- COTNUBDHGSIOTA-UHFFFAOYSA-N meoh methanol Chemical compound OC.OC COTNUBDHGSIOTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 7
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N Histamine Chemical compound NCCC1=CN=CN1 NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 6
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 6
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 6
- 108010085742 growth hormone-releasing peptide-2 Proteins 0.000 description 6
- WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N pentobarbital Chemical compound CCCC(C)C1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 6
- 239000003488 releasing hormone Substances 0.000 description 6
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- 238000003828 vacuum filtration Methods 0.000 description 6
- FUOOLUPWFVMBKG-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoisobutyric acid Chemical compound CC(C)(N)C(O)=O FUOOLUPWFVMBKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 5
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 5
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 5
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 5
- ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 1,3-dicyclohexylurea Chemical compound C1CCCCC1NC(=O)NC1CCCCC1 ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102100039256 Growth hormone secretagogue receptor type 1 Human genes 0.000 description 4
- 101710202385 Growth hormone secretagogue receptor type 1 Proteins 0.000 description 4
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 4
- HKXLAGBDJVHRQG-YFKPBYRVSA-N L-lysinamide Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(N)=O HKXLAGBDJVHRQG-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 239000002876 beta blocker Substances 0.000 description 4
- PFKFTWBEEFSNDU-UHFFFAOYSA-N carbonyldiimidazole Chemical compound C1=CN=CN1C(=O)N1C=CN=C1 PFKFTWBEEFSNDU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- MGHPNCMVUAKAIE-UHFFFAOYSA-N diphenylmethanamine Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(N)C1=CC=CC=C1 MGHPNCMVUAKAIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 4
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical group NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 4
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 description 4
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 4
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 4
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 4
- XFNJVJPLKCPIBV-UHFFFAOYSA-N trimethylenediamine Chemical compound NCCCN XFNJVJPLKCPIBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 1,3-diisopropylcarbodiimide Chemical compound CC(C)N=C=NC(C)C BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 3
- QMMFVYPAHWMCMS-UHFFFAOYSA-N Dimethyl sulfide Chemical compound CSC QMMFVYPAHWMCMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 description 3
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 3
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 3
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 3
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-diisopropylethylamine Substances CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 230000009102 absorption Effects 0.000 description 3
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 3
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 3
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 3
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- RXQNHIDQIJXKTK-UHFFFAOYSA-N azane;pentanoic acid Chemical compound [NH4+].CCCCC([O-])=O RXQNHIDQIJXKTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000000051 benzyloxy group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])O* 0.000 description 3
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 3
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 3
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 3
- BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N diisopropylcarbodiimide Natural products CC(C)NC(=O)NC(C)C BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 3
- 229960001340 histamine Drugs 0.000 description 3
- 125000004029 hydroxymethyl group Chemical group [H]OC([H])([H])* 0.000 description 3
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 3
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 3
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 3
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 3
- 229960001412 pentobarbital Drugs 0.000 description 3
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 3
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 3
- 239000012047 saturated solution Substances 0.000 description 3
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 3
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 3
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Chemical group OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000010792 warming Methods 0.000 description 3
- GHYOCDFICYLMRF-UTIIJYGPSA-N (2S,3R)-N-[(2S)-3-(cyclopenten-1-yl)-1-[(2R)-2-methyloxiran-2-yl]-1-oxopropan-2-yl]-3-hydroxy-3-(4-methoxyphenyl)-2-[[(2S)-2-[(2-morpholin-4-ylacetyl)amino]propanoyl]amino]propanamide Chemical compound C1(=CCCC1)C[C@@H](C(=O)[C@@]1(OC1)C)NC([C@H]([C@@H](C1=CC=C(C=C1)OC)O)NC([C@H](C)NC(CN1CCOCC1)=O)=O)=O GHYOCDFICYLMRF-UTIIJYGPSA-N 0.000 description 2
- WWTBZEKOSBFBEM-SPWPXUSOSA-N (2s)-2-[[2-benzyl-3-[hydroxy-[(1r)-2-phenyl-1-(phenylmethoxycarbonylamino)ethyl]phosphoryl]propanoyl]amino]-3-(1h-indol-3-yl)propanoic acid Chemical compound N([C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)O)C(=O)C(CP(O)(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)OCC=1C=CC=CC=1)CC1=CC=CC=C1 WWTBZEKOSBFBEM-SPWPXUSOSA-N 0.000 description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Natural products CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical group [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000238424 Crustacea Species 0.000 description 2
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000033962 Fontaine progeroid syndrome Diseases 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N L-Alanine Natural products C[C@@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N 0.000 description 2
- WTDRDQBEARUVNC-UHFFFAOYSA-N L-Dopa Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 WTDRDQBEARUVNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- QWCKQJZIFLGMSD-VKHMYHEASA-N L-alpha-aminobutyric acid Chemical group CC[C@H](N)C(O)=O QWCKQJZIFLGMSD-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- VJLLEKDQJSMHRU-STQMWFEESA-N Phe-Gly-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O VJLLEKDQJSMHRU-STQMWFEESA-N 0.000 description 2
- 108010007568 Protamines Chemical class 0.000 description 2
- 102000007327 Protamines Human genes 0.000 description 2
- 101000633010 Rattus norvegicus Somatostatin Proteins 0.000 description 2
- XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N Silicon Chemical compound [Si] XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100022831 Somatoliberin Human genes 0.000 description 2
- 101710142969 Somatoliberin Proteins 0.000 description 2
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 2
- 241000473945 Theria <moth genus> Species 0.000 description 2
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 2
- 239000012445 acidic reagent Substances 0.000 description 2
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 2
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 2
- QWCKQJZIFLGMSD-UHFFFAOYSA-N alpha-aminobutyric acid Chemical compound CCC(N)C(O)=O QWCKQJZIFLGMSD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 2
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 2
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- 239000012300 argon atmosphere Substances 0.000 description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 2
- 229960005261 aspartic acid Drugs 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 125000004218 chloromethyl group Chemical group [H]C([H])(Cl)* 0.000 description 2
- 239000000544 cholinesterase inhibitor Substances 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 229940125797 compound 12 Drugs 0.000 description 2
- 229940126208 compound 22 Drugs 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 2
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 2
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 2
- KJOZJSGOIJQCGA-UHFFFAOYSA-N dichloromethane;2,2,2-trifluoroacetic acid Chemical compound ClCCl.OC(=O)C(F)(F)F KJOZJSGOIJQCGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000004662 dithiols Chemical class 0.000 description 2
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 2
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 238000010265 fast atom bombardment Methods 0.000 description 2
- 239000012458 free base Substances 0.000 description 2
- 229960003692 gamma aminobutyric acid Drugs 0.000 description 2
- 238000002290 gas chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 229960002989 glutamic acid Drugs 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 229960002885 histidine Drugs 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical group OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 2
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 2
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 2
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 2
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 description 2
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 2
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 2
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 229940049964 oleate Drugs 0.000 description 2
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical group CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 2
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 2
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 229910052763 palladium Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 230000001817 pituitary effect Effects 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 229940048914 protamine Drugs 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 2
- FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N sarcosine Chemical group C[NH2+]CC([O-])=O FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- 229960001153 serine Drugs 0.000 description 2
- 239000010703 silicon Substances 0.000 description 2
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000007909 solid dosage form Substances 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- NHXLMOGPVYXJNR-UHFFFAOYSA-N srif Chemical compound N1C(=O)C(C(C)O)NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)NC(=O)C(CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)C(CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(NC(=O)CNC(=O)C(C)N)CSSCC(C(O)=O)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(O)C)NC(=O)C1CC1=CC=CC=C1 NHXLMOGPVYXJNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 2
- WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N tfa trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.OC(=O)C(F)(F)F WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960004799 tryptophan Drugs 0.000 description 2
- 229960004441 tyrosine Drugs 0.000 description 2
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 2
- OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N (+/-)-DABA Natural products NCCC(N)C(O)=O OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TYRGLVWXHJRKMT-MRVPVSSYSA-N (2r)-2-(phenylmethoxycarbonylamino)propanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](C)NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 TYRGLVWXHJRKMT-MRVPVSSYSA-N 0.000 description 1
- DFZVZEMNPGABKO-SSDOTTSWSA-N (2r)-2-amino-3-pyridin-3-ylpropanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC1=CC=CN=C1 DFZVZEMNPGABKO-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 1
- OFYAYGJCPXRNBL-GFCCVEGCSA-N (2r)-2-azaniumyl-3-naphthalen-1-ylpropanoate Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@@H]([NH3+])C([O-])=O)=CC=CC2=C1 OFYAYGJCPXRNBL-GFCCVEGCSA-N 0.000 description 1
- OCLLVJCYGMCLJG-ZDUSSCGKSA-N (2s)-2-azaniumyl-2-naphthalen-1-ylpropanoate Chemical compound C1=CC=C2C([C@](N)(C(O)=O)C)=CC=CC2=C1 OCLLVJCYGMCLJG-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- WZHKXNSOCOQYQX-FUAFALNISA-N (2s)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2r)-2-[[(2s)-2-amino-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-3-(1h-indol-3-yl)propanoyl]amino]propanoyl]amino]-3-(1h-indol-3-yl)propanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]hexanamide Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(N)=O)C1=CN=CN1 WZHKXNSOCOQYQX-FUAFALNISA-N 0.000 description 1
- ONOURAAVVKGJNM-SCZZXKLOSA-N (2s,3r)-2-azaniumyl-3-phenylmethoxybutanoate Chemical compound [O-]C(=O)[C@@H]([NH3+])[C@@H](C)OCC1=CC=CC=C1 ONOURAAVVKGJNM-SCZZXKLOSA-N 0.000 description 1
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- BWKMGYQJPOAASG-UHFFFAOYSA-N 1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline-3-carboxylic acid Chemical compound C1=CC=C2CNC(C(=O)O)CC2=C1 BWKMGYQJPOAASG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VYMPLPIFKRHAAC-UHFFFAOYSA-N 1,2-ethanedithiol Chemical compound SCCS VYMPLPIFKRHAAC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RHCSKNNOAZULRK-APZFVMQVSA-N 2,2-dideuterio-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)ethanamine Chemical compound NCC([2H])([2H])C1=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C1 RHCSKNNOAZULRK-APZFVMQVSA-N 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical group CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- 208000009304 Acute Kidney Injury Diseases 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical class [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonium chloride Substances [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 208000010392 Bone Fractures Diseases 0.000 description 1
- ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N Boron Chemical compound [B] ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M Bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical group [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N D-OH-Asp Natural products OC(=O)C(N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000008574 D-amino acids Chemical group 0.000 description 1
- FHZPGIUBXYVUOY-VWGYHWLBSA-N Dermorphin Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CO)C(N)=O)C1=CC=C(O)C=C1 FHZPGIUBXYVUOY-VWGYHWLBSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical group OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical group OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 1
- 101710198286 Growth hormone-releasing hormone receptor Proteins 0.000 description 1
- 102100033365 Growth hormone-releasing hormone receptor Human genes 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical class Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 208000015580 Increased body weight Diseases 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N L-Aspartic acid Natural products OC(=O)[C@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- WTDRDQBEARUVNC-LURJTMIESA-N L-DOPA Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 WTDRDQBEARUVNC-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- QUOGESRFPZDMMT-UHFFFAOYSA-N L-Homoarginine Natural products OC(=O)C(N)CCCCNC(N)=N QUOGESRFPZDMMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019766 L-Lysine Nutrition 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-UHFFFAOYSA-N L-Methionine Natural products CSCCC(N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 150000008575 L-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000014852 L-arginine Nutrition 0.000 description 1
- 229930064664 L-arginine Natural products 0.000 description 1
- 239000004201 L-cysteine Substances 0.000 description 1
- 235000013878 L-cysteine Nutrition 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- QUOGESRFPZDMMT-YFKPBYRVSA-N L-homoarginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCCNC(N)=N QUOGESRFPZDMMT-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 229930182844 L-isoleucine Natural products 0.000 description 1
- 239000004395 L-leucine Substances 0.000 description 1
- 235000019454 L-leucine Nutrition 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 229930195722 L-methionine Natural products 0.000 description 1
- QEFRNWWLZKMPFJ-ZXPFJRLXSA-N L-methionine (R)-S-oxide Chemical compound C[S@@](=O)CC[C@H]([NH3+])C([O-])=O QEFRNWWLZKMPFJ-ZXPFJRLXSA-N 0.000 description 1
- QEFRNWWLZKMPFJ-MFXDVPHUSA-N L-methionine (S)-S-oxide Chemical compound C[S@](=O)CC[C@H]([NH3+])C([O-])=O QEFRNWWLZKMPFJ-MFXDVPHUSA-N 0.000 description 1
- QEFRNWWLZKMPFJ-UHFFFAOYSA-N L-methionine sulphoxide Natural products CS(=O)CCC(N)C(O)=O QEFRNWWLZKMPFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930182821 L-proline Natural products 0.000 description 1
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M Lactate Chemical group CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 206010024769 Local reaction Diseases 0.000 description 1
- 229920001367 Merrifield resin Polymers 0.000 description 1
- 101100270435 Mus musculus Arhgef12 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical group OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 208000033626 Renal failure acute Diseases 0.000 description 1
- 108010077895 Sarcosine Proteins 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical class OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M Trifluoroacetate Chemical group [O-]C(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Chemical compound CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001242 acetic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 201000011040 acute kidney failure Diseases 0.000 description 1
- 208000012998 acute renal failure Diseases 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 229960003767 alanine Drugs 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- 150000001342 alkaline earth metals Chemical class 0.000 description 1
- 150000003973 alkyl amines Chemical class 0.000 description 1
- 150000001370 alpha-amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000008206 alpha-amino acids Nutrition 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 1
- 230000001195 anabolic effect Effects 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 1
- 239000008135 aqueous vehicle Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000009697 arginine Nutrition 0.000 description 1
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 1
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- XRWSZZJLZRKHHD-WVWIJVSJSA-N asunaprevir Chemical compound O=C([C@@H]1C[C@H](CN1C(=O)[C@@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C(C)(C)C)OC1=NC=C(C2=CC=C(Cl)C=C21)OC)N[C@]1(C(=O)NS(=O)(=O)C2CC2)C[C@H]1C=C XRWSZZJLZRKHHD-WVWIJVSJSA-N 0.000 description 1
- 159000000009 barium salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 229940050390 benzoate Drugs 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical group OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001558 benzoic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036765 blood level Effects 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 229910052796 boron Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001642 boronic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 239000012159 carrier gas Substances 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 150000001860 citric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000007012 clinical effect Effects 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 229940125961 compound 24 Drugs 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 239000002285 corn oil Substances 0.000 description 1
- 235000005687 corn oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- ORQXBVXKBGUSBA-UHFFFAOYSA-N cyclohexyl D-alanine Natural products OC(=O)C(N)CC1CCCCC1 ORQXBVXKBGUSBA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000113 cyclohexyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003795 desorption Methods 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 125000005265 dialkylamine group Chemical group 0.000 description 1
- 150000004985 diamines Chemical class 0.000 description 1
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 description 1
- 208000010643 digestive system disease Diseases 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- UXGNZZKBCMGWAZ-UHFFFAOYSA-N dimethylformamide dmf Chemical compound CN(C)C=O.CN(C)C=O UXGNZZKBCMGWAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MHUWZNTUIIFHAS-CLFAGFIQSA-N dioleoyl phosphatidic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(O)=O)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC MHUWZNTUIIFHAS-CLFAGFIQSA-N 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-M dodecanoate Chemical group CCCCCCCCCCCC([O-])=O POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N dodecanoic acid Chemical class CCCCCCCCCCCC(O)=O POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 239000012156 elution solvent Substances 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-L fumarate(2-) Chemical class [O-]C(=O)\C=C\C([O-])=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-L 0.000 description 1
- 108010074605 gamma-Globulins Proteins 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 1
- ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N guanidine group Chemical group NC(=N)N ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hcl hcl Chemical compound Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 239000001307 helium Substances 0.000 description 1
- 229910052734 helium Inorganic materials 0.000 description 1
- SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N helium atom Chemical compound [He] SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012456 homogeneous solution Substances 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 150000003840 hydrochlorides Chemical class 0.000 description 1
- 229910000040 hydrogen fluoride Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QAFBDRSXXHEXGB-UHFFFAOYSA-N imidazol-1-ylacetic acid Chemical compound OC(=O)CN1C=CN=C1 QAFBDRSXXHEXGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PRJKNHOMHKJCEJ-UHFFFAOYSA-N imidazol-4-ylacetic acid Chemical compound OC(=O)CC1=CN=CN1 PRJKNHOMHKJCEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 239000003701 inert diluent Substances 0.000 description 1
- 150000002484 inorganic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229910010272 inorganic material Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- 210000004731 jugular vein Anatomy 0.000 description 1
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 1
- DWKPPFQULDPWHX-VKHMYHEASA-N l-alanyl ester Chemical compound COC(=O)[C@H](C)N DWKPPFQULDPWHX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229940001447 lactate Drugs 0.000 description 1
- 150000003903 lactic acid esters Chemical class 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 229940070765 laurate Drugs 0.000 description 1
- 229960003136 leucine Drugs 0.000 description 1
- 229960004502 levodopa Drugs 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000008297 liquid dosage form Substances 0.000 description 1
- 229910003002 lithium salt Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000002 lithium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 235000018977 lysine Nutrition 0.000 description 1
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 238000010297 mechanical methods and process Methods 0.000 description 1
- 229960004452 methionine Drugs 0.000 description 1
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 1
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MWZPENIJLUWBSY-VIFPVBQESA-N methyl L-tyrosinate Chemical compound COC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 MWZPENIJLUWBSY-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 230000021332 multicellular organism growth Effects 0.000 description 1
- 125000005487 naphthalate group Chemical group 0.000 description 1
- 125000005609 naphthenate group Chemical group 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012457 nonaqueous media Substances 0.000 description 1
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000000269 nucleophilic effect Effects 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 150000002895 organic esters Chemical class 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 229940039748 oxalate Drugs 0.000 description 1
- 150000003901 oxalic acid esters Chemical class 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 229960005190 phenylalanine Drugs 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 159000000001 potassium salts Chemical class 0.000 description 1
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000004094 preconcentration Methods 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 150000003141 primary amines Chemical class 0.000 description 1
- 229960002429 proline Drugs 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 229940043230 sarcosine Drugs 0.000 description 1
- 238000003345 scintillation counting Methods 0.000 description 1
- 150000003335 secondary amines Chemical class 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000011877 solvent mixture Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000013223 sprague-dawley female rat Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 239000003206 sterilizing agent Substances 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical group [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 150000003900 succinic acid esters Chemical class 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 150000003467 sulfuric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 150000003899 tartaric acid esters Chemical class 0.000 description 1
- 229940095064 tartrate Drugs 0.000 description 1
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 229960002898 threonine Drugs 0.000 description 1
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical group CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000005490 tosylate group Chemical group 0.000 description 1
- 238000005809 transesterification reaction Methods 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-M valerate Chemical class CCCCC([O-])=O NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229940070710 valerate Drugs 0.000 description 1
- NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N valeric acid Chemical group CCCCC(O)=O NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004295 valine Drugs 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 1
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 1
- 238000009736 wetting Methods 0.000 description 1
- 210000002268 wool Anatomy 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- ORQXBVXKBGUSBA-QMMMGPOBSA-N β-cyclohexyl-alanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1CCCCC1 ORQXBVXKBGUSBA-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/60—Growth hormone-releasing factor [GH-RF], i.e. somatoliberin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/06—Antihyperlipidemics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/02—Drugs for disorders of the endocrine system of the hypothalamic hormones, e.g. TRH, GnRH, CRH, GRH, somatostatin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/06—Drugs for disorders of the endocrine system of the anterior pituitary hormones, e.g. TSH, ACTH, FSH, LH, PRL, GH
- A61P5/08—Drugs for disorders of the endocrine system of the anterior pituitary hormones, e.g. TSH, ACTH, FSH, LH, PRL, GH for decreasing, blocking or antagonising the activity of the anterior pituitary hormones
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Obesity (AREA)
- Hematology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
Peptidy obecného vzorce I, ve kterém: A.sub.1.n. znamená Gly, DAla, .beta.-Ala, His, Ser, Met, Pro, Sar, Ava, Aib, N-alkyl-aminokarboxylovou kyselinu, N,N-bis-alkyl-aminokarboxylovou kyselinu, azolkarboxylovou kyselinu nebo alkyl-aminokarboxylovou kyselinu; A.sub.2.n. představuje DTrp, D.sup..beta..n.Nal, D-4-Y-Phe- nebo 5-Y-D-Trp, kde Y představuje OH, Cl, Br, F nebo H; A.sub.5.n. znamená A.sub.3.n.-A.sub.4.n.-A.sub.5'.n., A.sub.3.n.-A.sub.5'.n., A.sub.4.n.-A.sub.5'.n., nebo A.sub.5'.n.; přičemž (a) A.sub.3.n. představuje Ala, Gly, DAla, Pro, nebo desAla; (b) A.sub.4.n. představuje Ala, Gly, DAla, Pro, lineární alkylaminokarboxylovou kyselinu nebo desAla; a (c) A.sub.5'.n. představuje Lys (.ksi.-R.sub.1.n., R.sub.2.n.)-Z, Orn (.delta.-R.sub.1,.n. R.sub.2.n.)-Z, NH(CH.sub.2.n.).sub.x.n.N(R.sub.3.n., R.sub.4.n.); přičemž A.sub.5'.n. může rovněž znamenat Lys-Z, Orn-Z nebo Arg-Z v případě, že A.sub.1.n. není His; R.sub.1.n. a R.sub.2.n. představují alkyl nebo H; R.sub.3.n. a R.sub.4.n. představují alkyl nebo H; Z znamená NH(alkyl), N(alkyl).sub.2.n., O-(alkyl), NH.sub.2.n. nebo OH; kde alkyl obsahuje 2 až 10 uhlíkových atomů v přímém řetězci; x je 2 až 15; C.sub.1.n. představuje Ala; C.sub.2.n. představuje Trp, Phe nebo ChxAla; a C.sub.3.n. představuje DPhe, DPal nebo DChxAla. Tyto sloučeniny promotují uvolňování růstového hormonu při podání zvířatům a je možno je tudíž použít k terapeutickým účelům. Do rozsahu řešení rovněž náleží způsob přípravy těchto sloučenin a farmaceutické prostředky obsahující tyto látky a stejně tak i použití těchto látek.ŕ
Description
Peptidy účinné při uvolňování růstového hormonu, způsob jejich přípravy, farmaceutické prostředky obsahující tyto látky a použití
Oblast techniky
Vynález se týká nových polypeptidových sloučenin, které jestliže jsou podány zvířatům, a zejména lidem promotují uvolňování růstového hormonu. Do rozsahu vynálezu rovněž náleží způsob promotování uvolňování a zvyšování hladiny růstového hormonu u zvířat, který spočívá v podání specifické polypeptidové sloučeniny uvolňující tento růstový hormon. Rovněž do rozsahu uvedeného vynálezu náleží farmaceutické prostředky obsahující tyto účinné látky a použití těchto nových polypeptidových sloučenin pro promotování uvolňování a pro zvyšování hladiny růstového hormonu a pro léčení různých stavů. Předmětem uvedeného vynálezu je rovněž postup přípravy uvedených peptidových sloučenin.
Dosavadní stav techniky
Zvýšení hladiny růstového hormonu (v tomto textu bude někdy používána pro označení růstového hormonu zkratka GH) u savců po podání sloučeniny uvolňování růstový hormon vede ke zvýšení tělesní hmotnosti a ke zvýšení produkce mléka, jestliže se po podání dosáhne dostatečného zvýšení hladiny růstového hormonu. Kromě toho je třeba poznamenat, že zvýšení hladiny růstového hormonu u savců a lidí může být dosaženo pomocí běžně známých činidel uvolňujících růstový hormon, jako jsou například v přírodě se vyskytující hormony uvolňující růstový hormon.
Toto zvýšení hladiny růstového hormonu u savců je možno rovněž dosáhnout aplikací peptidů uvolňujících růstový hormon, které jsou známy z dosavadního stavu techniky, například z patentů Spojených států amerických č. 4 223 019, 4 223 020, 4 223 021, 4 224 316, 4 226 857, 4 228 155,4228 156,4228 157,4228 158, 4 410 512 a 4 410 513.
Podle dosavadního stavu techniky byly ke zvýšení hladiny růstového hormonu rovněž použity protilátky endogenního inhibitoru uvolňování růstového hormonu, somatostatinu (SRIF). Podle této metody se hladina růstového hormonu zvyšuje odstraňováním endogenního inhibitoru uvolňováním růstového hormonu (SRIF) ještě předtím, než se dostane do hypofýzy, kde inhibuje uvolňování růstového hormonu.
Každá z těchto metod, při které se promotuje zvyšování hladiny růstového hormonu, vyžaduje použití látek, jejichž syntéza a/nebo izolování ve stavu dostatečně čistém ktomu, aby tyto látky mohly být podávány určeným zvířatům, je nákladné. V této oblasti tedy vyvstává potřeba vyvinout relativně jednoduché polypeptidové sloučeniny s krátkým řetězcem a o nízké molekulové hmotnosti, které by měly schopnost promotovat uvolňování růstového hormonu, a jejichž příprava by byla relativně laciná, neboť takovéto sloučeniny by bylo možno snadno připravit bez vynaložení velkých nákladů, dále by takové sloučeniny byly snadno modifikovatelné chemicky a/nebo fyzikálně, a rovněž tak by bylo možno je snadno vyčistit a formulovat. Dalším požadavkem je, aby tyto sloučeniny měly výborné vlastností z hlediska jejich transportovatelnosti.
Přestože některé polypeptidy s krátkým řetězcem, které jsou schopné promotovat uvolňování a zvyšování hladiny růstového hormonu v krvi, jsou známé, jako například His-DTrp-Ala-TrpDPhe-Lys-NH2, viz. patent Spojených států amerických č. 4 410 512, je i nadále důležité mít možnost modifikovat tyto polypeptidové sloučeniny pro nejrůznější účely, jako je přijímání, bioabsorbance, prodloužení intervalu retence, atd. Ovšem výměna aminokyselinových zbytků na určitých polohách mohou mít značný vliv na schopnost těchto peptidů s krátkým řetězcem uvolňovat růstový hormon.
-1 CZ 293281 B6
Vzhledem k dosavadnímu stavu techniky v této oblasti je zřejmé, že je potřeba mít k dispozici k promotování uvolňování a zvyšování hladiny růstového hormonu v krvi zvířat, a zejména lidí, různé polypeptidové sloučeniny s krátkým řetězcem. Z jiného hlediska by bylo rovněž vhodné vyvinout takové polypeptidové sloučeniny, kterých by bylo možno použít k promotování uvolňování a/nebo zvyšování hladiny růstového hormonu v krvi zvířat a lidí.
Rovněž by bylo vhodné vyvinout metodu promotování uvolňování a/nebo zvyšování hladiny růstového hormonu v krvi zvířat za použití těchto polypeptidových sloučenin s krátkým řetězcem.
Podstata vynálezu
Podstata uvedeného vynálezu tvoří polypeptidové sloučeniny, které je možno definovat následujícím obecným vzorcem:
Aj—A2—Cj—C2—C3—A5 ve kterém znamená:
A| Gly, DAla, β-Ala, His, Ser, Met, Pro, Sar, Ava, Aib, N-nižší alkyl-aminokarboxylovou kyselinu, Ν,Ν-bis-nižší alkyl-aminokarboxylovou kyselinu, azolkarboxylovou kyselinu nebo nižší alkyl-aminokarboxylovou kyselinu, kde nižší alkylová skupina obsahuje 2 až 10 uhlíkových atomů v přímém řetězci, přičemž
A] je ve výhodném provedení DAla;
A2 představuje DTrp, DpNal, D-4-Y-Phe- nebo 5-Y-D-Trp, kde
Y představuje OH, Cl, Br, F nebo H; ve výhodném provedení představuje A2 DpNal;
A5 znamená Α3-Α4-Α5-, A3-A5', A4-A5, nebo As,. Ve výhodném provedení A5 představuje A5-;
A3 představuje Ala, Gly, DAla, pro nebo desAla;
A4 představuje Ala, Gly, DAla, Pro, lineární nižší alkylaminokarboxylovou kyselinu nebo desAla;
A5- představuje Lys(e-Ri,R2)-Z, Om(5-Ri,R2)-Z, NH(CH2)XN(R3,R4); A5- může rovněž znamenat Lys-Z, Om-Z nebo Arg-Z v případě, že A| není His;
Ri představuje nižší alkylovou skupinu s lineárním řetězcem nebo atom vodíku;
R2 znamená nižší alkylovou skupinu s lineárním řetězcem nebo atom vodíku;
v případě, že Ri představuje atom vodíku, R2 není atom vodíku; a podobně v případě, že R2 je atom vodíku, potom Ri není atom vodíku;
R3 přestavuje nižší alkylovou skupinu s lineárním řetězcem nebo atom vodíku;
R4 představuje nižší alkylovou skupinu s lineárním řetězcem nebo atom vodíku; uvedená nižší alkylová skupina 2 až 10 atomů uhlíku v přímém řetězci;
-2CZ 293281 B6
Z znamená NH (nižší alkylová skupina s lineárním řetězcem), N(nižší alkylová skupina s lineárním řetězcem)2. O-(nižší alkylová skupina s lineárním řetězcem), NH2 nebo OH, přičemž uvedená nižší alkylová skupina s lineárním řetězcem byla již definována výše;
x je 2 až 15;
C] představuje Ala;
C2 představuje Trp, Phe nebo ChxAla;
ve výhodném provedení C2 představuje Trp nebo Phe; ještě výhodněji představuje C2 Trp;
C3 představuje DPhe, DPal nebo DChxAla; ve výhodném provedení C3 představuje DPhe.
Do roztoku uvedeného vynálezu rovněž náleží organické nebo anorganické adiční soli odvozené od libovolných z uvedených z polypeptidových sloučenin. Uvedenými polypeptidovými sloučeninami podle uvedeného vynálezu jsou výhodně látky obecného vzorce:
A i-A2-Ala-C2-DPhe-A5 přičemž ještě výhodnějšími polypeptidovými sloučeninami jsou látky obecného vzorce:
A]-A2-Ala-Trp-DPhe-A5.
Podle uvedeného vynálezu byla zjištěna skupina několika nových polypeptidových sloučenin s krátkým řetězcem, které jsou schopné promotovat uvolňování a zvýšení hladiny růstového hormonu v krvi zvířat. Tyto polypeptidové sloučeniny je možno definovat následujícím obecným vzorcem:
A i-A2-A la-T rp-DPhe-A5
A] Gly, DAla, β-Ala, His, Ser, Met, Pro, Ser, Ava, Aib, imidazoloctovou kyselinu, N-nižší alkyl-aminokarboxylovou kyselinu, Ν,Ν-bis-nižší alkyl-aminokarboxylovou skupinu, azolkarboxylovou kyselinu nebo nižší alkyl-aminokarboxylovou kyselinu, kde nižší alkylová skupina obsahuje 2 až asi 10 uhlíkových atomů v přímém řetězci. Ve výhodném provedení uvedená nižší alkylová skupina obsahuje 2 až 6 atomů uhlíku v přímém řetězci. Tato nižší alkylová skupina může být substituovaná nebo nesubstituovaná. Ve výhodném provedení jsou uvedenými substituenty kyslík, dusík nebo křemík. Výhodně je tato nižší alkylová skupina nesubstituovaná. Uvedenou azolkarboxylovou kyselinou je ve výhodném provedení N“ 4-imidazoloctová kyselina (IMA). Výhodně je Ai Gly, DAla nebo His. Ještě výhodněji Ai znamená His nebo DAla. Nejvýhodněji je Aj DAla.
A2 představuje DTrpDpNal, D-4-Y-Phe- nebo 5-Y-D-Trp, kde Y představuje Oh, Cl, Br, F nebo H. Ve výhodném provedení představuje A2 DpNal, D-4-Y-Phe nebo 5-Y-D-Trp. Ještě výhodněji A2 znamená DpNal. Y znamená výhodně OH nebo H.
A5 znamená Α3-Α4-Α5-, Α3-Α5·, A4-A5·, nebo A5-. Ve výhodném provedení A5 přestavuje As·;
A3 přestavuje Ala, Gly, DAla, Pro nebo desAla;
Ai představuje Ala, Gly, DAla, Pro, lineární nižší alkylaminokarboxylovou kyselinu nebo desAla;
-3CZ 293281 B6
Aj· představuje Lys(e-R],R2)-Z, Om(ó-R15R2)-Z, LArt(g-R5-Ré), NH(CH2)XN(R3,R4). A5, může rovněž znamenat Lys-Z, Om-Z nebo Arg-Z v případě, že A| není His;
Ri představuje nižší alkylovou skupinu s lineárním řetězcem nebo atom vodíku;
R2 znamená nižší alkylovou skupinu s lineárním řetězcem nebo atom vodíku;
v případě, že Ri představuje atom vodíku, R2 není atom vodíku; a podobně v případě, že R2 je atom vodíku, potom R( není atom vodíku;
R3 představuje nižší alkylovou skupinu s lineárním řetězcem nebo atom vodíku;
Ri představuje nižší alkylovou skupinu s lineárním řetězcem nebo atom vodíku;
R5 a Ré představují nižší alkylovou skupinu s lineárním řetězcem. Tato nižší alkylová skupina obsahuje 2 až asi 10 atomů uhlíku v přímém řetězci. Výhodně obsahuje tato nižší alkylová skupina 2 až 6 atomů uhlíku v přímém řetězci. Tato nižší alkylová skupina může být v přímém řetězci. Tato nižší alkylová skupina může být substituovaná nebo nesubstituovaná. Výhodnými substituenty jsou kyslík, dusík nebo křemík. Výhodně je tato nižší alkylová skupina nesubstituovaná.
g znamená guanidinový zbytek;
Z je NH (lineární nižší alkylová skupina), N(lineámí nižší alkylová skupina)?, O-(lineámí nižší alkylová skupina), NH2 nebo OH, přičemž uvedená lineární nižší alkylová skupina byla definována výše;
x je 2 až 15, přičemž toto x je výhodně 2 až 6; a
A5 _je ve výhodném provedení Lys-NH2.
Do této skupiny rovněž náleží organické nebo anorganické adiční soli odvozené od libovolných výše uvedených polypeptidových sloučenin.
Použité zkratky pro zbytky aminokyselin odpovídají standardnímu označení podle peptidové nomenklatury:
| Gly | = glycin |
| Tyr | = L-tyrosin |
| Ile | = L-izoleucin |
| Glu | = L-glutamová kyselina |
| Thr | = L-threonin |
| Phe | = L-fenylalanin |
| Ala | = L-alanin |
| Lys | = L-lysin |
| Asp | = L-aspartová kyselina |
| Cys | = L-cystein |
| Arg | = L-arginin |
| Ava | = aminovalerová kyselina |
| Aib | = aminoizomáselná kyselina |
| Gin | = L-glutamin |
| Pro | = L-prolin |
| Leu | = L-leucin |
| Met | = L-methionin |
| Ser | = L-serin |
-4CZ 293281 B6
Asn = L-histidin
Trp = L-tryptofan
Val = L-valin
DOPA = 3,4-dihydroxyfenylalanin
Met(O) = methioninsulfoxid
Abu = α-aminomáselná kyselina iLys - NE-izopropyl-L-lysin
4-Abu = 4-aminomáselná kyselina
Om = L-omithin
DaNal = a-naftyl-D-alanin
DpNal = β-naftyl-D-alanin
Sar = sarkosin
LArg = homoArginin
Chx = cyklohexyl
ChxAla = L-cyklohexylalanin dCHxAla= D-cyklohexylalanin
IMA = N“-imidazoloctová kyselina,
Tcc = 1,2,3,4-tetrahydro-7-karolin-3-karboxylová kyselina
Tic = 1,2,3,4-tetrahydroizochinolin-3-karboxylová kyselina
Tip = 4,5,6,7-tetrahydro-lH-imidazo[e]-6-karboxylová kyselina α,γ ABU = alfa, gama-aminomáselná kyselina
DPal = D-3-pyridylalanin.
Uvedená tri písmena, označující zkratku aminokyseliny, před kterými je uvedeno písmeno „D“, znamenají že se jedná o D-konfiguraci zbytku aminokyseliny, přičemž glycin je zahrnut pod označením „v přírodě se vyskytující L-aminokyseliny“.
V uvedených polypeptidových sloučeninách s krátkým řetězcem jsou určité pozice více schopné snášet změny v řetězci než jiné, aniž by touto změnou docházelo k nepříznivému ovlivnění schopnosti této peptidové sloučeniny ovlivňovat uvolňování a/nebo zvýšení hladiny růstového hormonu v krvi zvířat. Například je možno uvést v tomto směru jako tolerantní A5 polohu. Jiné polohy jsou méně tolerantní na tyto změny. Například to platí v prostředních aminokyselinových zbytcích Ala, trp, DPhe, které jsou označovány jako C], C2 a C3. Například je možné uvést, že se dříve předpokládalo, že A] a A2 by měly být v L a D formě, takže Trp a DPhe by měly být rovněž v L a D formě, čímž vzniká LD LD sekvence. Ovšem podle uvedeného vynálezu bylo zjištěno, že tato LD LD sekvence může být LD LD sekvence. Tímto způsobem bylo podle uvedeného vynálezu zcela neočekávatelně zjištěno, že polypeptidové sloučeniny obecného vzorce:
A]—A2—C]—C2—C3—A5 ve kterém:
A], A2 a A5 mají stejný význam jako bylo uvedeno shora,
Cj je Ala,
C2 je Trp, Phe a ChAla, a
C3 je DPhe, DPal nebo DChxAla, promotují uvolňování a/nebo zvyšování hladiny růstového hormonu u zvířat.
Ve výhodném provedení podle vynálezu C2 znamená Trp nebo Phe, ještě výhodněji C2 znamená Trp.
-5CZ 293281 B6
C3 je výhodně DPhe. Jestliže C2 je ChcAla, potom je výhodně C3 DPhe. V případě, že C3 je
DPal., potom Z je výhodně OH.
Zvýšená flexibilita u těchto sloučenin spojená s možností výběru bazického, neutrálního nebo kyselého aminokyselinového zbytku a dále možnost použití L a D forem v případě aminokyselinových zbytku Ah A2, A3, A4, A5, C2 a C3 umožňuje značný rozsah variability fyziologicko-chemických vlastností požadovaných konečných peptidů.
I přesto, že polypeptidy:
DAla-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 a
DAla-DpNal-Ala-Phe-DPhe-Lys-NH2 mají podobnou schopnost uvolňovat růstový hormon (GH), substituce Phe za Trp může znamenat zvýšení chemické stability
DAla-DpNal-Ala-Phe-DPhe-Lys-NH2 neboť zbytek Trp je více citlivý na oxidaci než Phe. Rovněž je třeba uvést, že substituce Phe za Trp umožňuje zlepšení hydrofobnosti konečného peptidu, přičemž tímto způsobem je možno dosáhnout lepších fyzikálně-chemických vlastností peptidu, které jsou uvedeny níže, a které se týkají zlepšení perorální, transkutánní a/nebo nasální absorpce a rovněž tak vlastností důležitých pro formulování peptidu do formy aplikačního prostředku. Kromě toho je nutné uvést, že hodnoty ED50 (50%-ní účinná dávka) při histaminovém testu na krysích buňkách peptidů:
DAIa-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 a
DAla-DpNal-Ala-Phe-DPhe-Lys-NH2 jsou podobné, to znamená 30,5 ± 0,5 a 30,8 ± 0,3 μΙ/ml, přičemž obě tyto peptidové sloučeniny projevují lepší histaminovou účinnost, než
Ala-His-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 u kterého je tato hodnota 11,0 ± 1,0 μΙ/ml. Peptidy s menší histaminovou uvolňovací účinností (to znamená vyšší hodnotou ED5o) mohou být klinicky účinnější, neboť tyto sloučeniny vykazují méně nepříznivé lokální reakce na místě injekce peptidu a/nebo je u nich menší pravděpodobnost nepříznivých antigenních systemických klinických účinků.
Flexibilita těchto sloučenin rovněž představuje významnou výhodu při přípravě prostředků obsahujících uvedené peptidové sloučeniny a přijímání těchto látek různými subjekty. Modifikace těchto sloučenin mohou rovněž zlepšovat perorální absorpci a rovněž tak i metabolismus a vyměšování těchto peptidů. Například je možno v této souvislosti uvést, že peptidová sloučenina:
Ala-His-Df3Nal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 (GHRP-1) je mnohem více účinnější než:
-6CZ 293281 B6
Ala-His-DT rp-Ala-T rp-DPhe-Lys-NH2 pokud se týče schopnosti uvolňovat růstový hormon u lidí.
Ovšem
DAla-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 (GHRP-2) je účinnější než GHRP-1 v případě, že se podává perorálně. V tomto směruje možno poukázat na obr. 1, na kterém je znázorněna graficky hladina růstového hormonu v séru u normálního mladého člověka v závislosti na čase po podání 300 pg/kg CHRP-1 v případě 40 subjektů (viz. grafické znázornění 1; o), 600 pg/kg CHRP-1 v případě 39 subjektů (viz. grafické znázornění 2: Δ) a lOOpg/kg CHRP-2 v případě 11 subjektů (viz. grafické znázornění 3; Ξ). Při provádění těchto testů byl normálním mladým lidem o průměrném věku asi 25 let podáván GHRP nejdříve ve 20 mililitrech vody, přičemž potom následovalo okamžitě podání 100 mililitrů vody. Potom byla odebrána krev a údaje zaznamenány graficky. Množství růstového hormonu (GH), bylo zjišťováno radioimunoanalýzou.
Rovněž se předpokládá, že vzhledem ktomu, že u těchto peptidů mohou být aromatické postranní řetězce eliminovány z různých poloh, kde se předtím předpokládala jejich přítomnost jako nezbytná, a dále vzhledem k tomu, že D-aminokyselinové zbytky je možno lépe biologicky chránit než L-formu, je možno při dalších modifikacích těchto polypeptidových sloučenin dosáhnout lepší ochrany a menší hmotnosti určitých typů peptidů, čímž se zlepší vlastnosti těchto látek pro nasální, perorální a transkutánní absorpci, dále in vivo stabilita, atd.
Zbytky Rb R2, R3, R4 a Z je možno rovněž modifikovat čímž se dosáhne další možnosti úpravy fyziologickochemických vlastností požadované sloučeniny. Z výše uvedeného vyplývá, že je možno rovněž dosáhnout lepšího přijímání peptidů v případě daného konkrétního příjemce a konkrétního druhu subjektu.
Ve výhodném provedení jsou uvedenými sloučeninami pro uvolňování růstového hormonu používanými podle vynálezu sloučeniny obecného vzorce:
Ai-A2-Ala-Trp-DPhe-A5 a organické nebo anorganické adiční soli odvozené do těchto libovolných polypeptidů, přičemž A+, A2 a A5 mají stejný význam jako bylo uvedeno shora.
Výhodnými peptidovými sloučeninami používanými pro uvolňování růstového hormonu při praktické aplikaci uvedeného vynálezu jsou sloučeniny obecného vzorce:
DAla-A2-Ala-Trp-DPhe-A5 a organické a anorganické adiční soli odvozené od těchto sloučenin. Výhodnými sloučeninami z této skupiny jsou sloučeniny obecného vzorce:
DAla-DpNal-Ala-Trp-DPhe-LysNH2 DAla-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys(e-iPr)NH2 D Ala-DT rp-Ala-T rp-DPhe-Lys(s-iPr)NH2 DAla-DTrp-ala-Trp-Dphe-LysNH2
DAla-DpNal-Ala-Trp-Dph^-NH(CH2)3NH2a NH2(CH2)5CO-DfiNal-Ala-Trp-DPhe-NH(CH2)5NH2 a organické a anorganické adiční soli odvozené od těchto sloučenin.
Tyto sloučeniny jsou v současné době nejvýhodnějšími sloučeninami, neboť syntetizování jejich krátkého polypeptidového řetězce je méně nákladné, přičemž současně bylo prokázáno, že tyto 5 specifické sloučeniny vykazují vysokou úroveň účinnosti při promotování zvýšení hladiny růstového hormonu v séru.
Dalšími výhodnými peptidovými sloučeninami pro uvolňování růstového hormonu jsou sloučeniny obecného vzorce:
Ai-A2-Ala-Phe-DPhe-A5
Výhodnými členy této skupiny sloučenin jsou látky, ve kterých Ai znamená ΝαΙΜΑ, ayABU, DAla, His, Ala, His nebo ayABU, A2 představuje DpNal nebo DPhe a A5 znamená Lys NH2, Lys 15 NH> ArgNH?, NH-Chx-NH2 (1,4 Chx diamin) nebo Lys EA. Jako konkrétní příklad těchto sloučenin je možno uvést látky obecného vzorce:
NaIMA-DpNal-Ala-Phe-DPhe-LysNH2 a,yABU-D|3Nal-Ala-Phe-DBhe-LysNH2
DAla-DPhe-Ala-Phe-DPhe-LysNH2 pAIa-His-DpNal-Ala-Phe-DPhe-LysNH2 NaIMA-DpNal-Ala-Phe-DPhe-NH-Chx-NH2 a.yABU-DpNal-Ala-Phe-DBhe-NH-Chx-NH2 DAla-D^al-Ala-Phe-DPhe-Lys EA a
DAla-DpNal-Ala-Phe-DPhe-DArgNH2 a rovněž tak i organické a anorganické adiční soli odvozené od těchto sloučenin.
Podle dalšího provedení náleží do rozsahu uvedeného vynálezu polypeptidové sloučeniny obec30 ného vzorce:
Ai-A2-C i~C2-C3-A5 ve kterém:
Ci znamená Ala,
C2 znamená Trp, Phe nebo ChxAla,
C2 je DPhe nebo DCHxAla, přičemž
A] je výhodně DAla a
A2 je výhodně DpNal, jako jsou například sloučeniny:
DAla-DpNal-Ala-ChxAla-DPhe-LysNH2
DAla-DpNal-Ala-Phe-DChXAla-LysNH2 a DAla-DpNal-Ala-ChxAla-DChxAla-LysNH2 a rovněž tak i organicko a anorganické adiční soli odvozené od těchto sloučenin.
Tyto výše uvedené látky patří mezi typické sloučeniny, které možno synteticky snadno připravit, projevují výbornou účinnost pokud se týče promotování zvýšení hladiny růstového hormonu v séru a představují takto látky, které jsou vhodné pro výrobu a použití v průmyslovém měřítku. Kromě toho je nutno uvést, že tyto sloučeniny jsou výhodné z hlediska svých vhodných fyziologicky-chemických vlastností, které se uplatňují při aplikování těchto polypeptidových sloučenin
-8CZ 293281 B6 zvířatům různých druhů, neboť flexibilita těchto sloučenin umožňuje provedení různých substitucí na mnoha místech této polypeptidové sloučeniny a kromě toho je možno provést výběr části na koncovém uhlíku a v centrální části těchto polypeptidových sloučenin, která může být populární povahy, neutrální nebo nepolární povahy, takže se získá látka vyhovující uvažované metodě podávání, ať již se jedná o perorální podávání, nasální podávání nebo kontinuální podávání za použití speciálních chemicko/mechanických metod.
Tyto výše uvedené peptidové sloučeniny je možno použít k libovolným terapeutickým účelům, ke kterým se používají růstové hormony, jako například pro léčení nanismu hypotalamicko-hypofyzárního původu, osteoporózy, popálenin a dále je možno je použít při akutním selhání činnosti ledvin, pro léčení nesrůstu zlomené kosti a k urychlení hojení různých poranění. Kromě toho je možno tyto látky použít k urychlení regenerace organismu při chirurgických zákrocích a při akutních/chronických zeslabujících chorobách. Přínosné jsou rovněž anabolické účinky na kůži, svalstvu a kostech při procesu stárnutí se současným snižováním tělesného tuku. Rovněž je možno použít tyto peptidické sloučeniny při léčení pacientů trpících nádory, například k prevenci a/nebo zmenšení kachexie u těchto pacientů. Při terapeutickém použití se používá terapeuticky účinného množství těchto peptidických sloučenin. Uvedené terapeuticky účinné množství je takové množství, které je potřebné k promotování uvolňování růstového hormonu v séru jak již bylo uvedeno výše.
Sloučeniny podle uvedeného vynálezu je možno použít ke zvýšení hladiny růstového hormonu v krvi u zvířat, ke zvýšení produkce mléka u krav, zvýšení tělesné hmotnosti u zvířat, jako například u savců (to znamená u lidí, ovcí, hovězího dobytka a vepřů) a rovně tak i u ryb, drůbeže a dalších obratlovců a korýšů, a dále ke zvýšení produkce vlny a/nebo srsti u dalších zvířat. Rozsah přírůstku tělesné hmotnosti závisí na pohlaví a stáří daného druhu zvířete, na množství a charakteru podávané sloučeniny, uvolňující růstový hormon, na způsobu podávání a podobně. Rovněž je možno sloučenin podle uvedeného vynálezu použít ke zvýšení růstového hormonu v séru u lidí, ke zlepšení růstu postavy u dětí s malým tělesným vzrůstem, ke snížení obsahu tuku v těles a ke zlepšení metabolismu u vybraných dětí, dále ke zlepšení metabolismu kůže, svalstva a kostí, přičemž je možno současně dosáhnout snížení obsahu tělesného tuku u starších lidí, zejména v případech, kdy se vyskytuje snížená hladina růstového hormonu.
Tyto peptidové sloučeniny podle uvedeného vynálezu jsou rovněž vhodné ke zlepšení lipidové struktury v séru u lidí, čehož se dosáhne snížením množství cholesterolu v séru a lipoproteinů o nízké hustotě v séru a zvýšením množství lipoproteinů o vysoké hustotě v séru.
Tyto nové polypeptidové sloučeniny podle uvedeného vynálezu je možno synteticky připravit obvyklými metodami znamená z dosavadního stavu techniky, které se používají pro přípravu peptidů v roztoku nebo v pevné fázi, nebo jinými klasickými metodami podle dosavadního stavu techniky.
V případě peptidových amidů se syntéza v pevné fázi ve výhodném provedení provádí do C-koncové části tohoto peptidů. Vhodné výchozí látky je možno například připravit připojením požadované alfa-aminokyseliny na chlormethylovanou pryskyřici, hydroxymethylovou pryskyřici, benzhydrylaminovou (BHA) pryskyřici nebo na para-methyl-benzydrylaminovo (p-Me-BHA) pryskyřici. Jedna z těchto chlormethylových pryskyřic se prodává pod ochrannou známkou Biobeads SX-1, což je produkt firmy Bio Rad Laboratories, Richmond, Kalifornie. Postup přípravy hydroxymethylové pryskyřice je popsán v Chem. Ind. (Londýn) 38, 1597 (1966), autor Bodansky a kol., přičemž postup zde uvedený je možno pro průmyslovou aplikaci získat od firmy Peninsula Laboratories, lne., Belmont, Kalifornie.
Po počátečním připojení je možno chránící skupinu alfa-aminoskupiny odstranit použitím vhodného acidického reakčního činidla, jako je například roztok kyseliny trifluoroctové (TFA) nebo kyseliny chlorovodíkové (HC1) v organickém rozpouštědle, přičemž zpracovávání se provádí při teplotě místnosti. Po odstranění chránící skupiny alfa-aminoskupiny se postupně
-9CZ 293281 B6 napojí zbývající chráněné aminokyseliny v požadovaném pořadí. Každá chráněná aminokyselina se obvykle uvádí do reakce v asi trojnásobném přebytku, přičemž se používá vhodného aktivátoru karboxylové skupiny, jako je například dicyklohexylkarbodiimid (DCC) nebo diizopropylkarbodiimid (DIC), což se provádí v roztoku, jako například v roztoku methylenchloridu (CH2C12) nebo dimethylformamidu (DMF) nebo ve směsích těchto látek.
Po dokončení požadované sekvence aminokyselin je možno požadovaný peptid odštěpit od benzhydrylaminového pryskyřicového nosiče zpracováním s takovým reakčním činidlem, jako je například fluorovodík (HF), čímž se dosáhne nejenom odštěpení peptidu od pryskyřice, ale rovněž i odbourání obvykle používaných chránících skupin bočního řetězce. V případě použití chlormethylové pryskyřice nebo hydroxymethylové pryskyřice se po fluorovodíkovém zpracování získá volná peptidová kyselina. Ovšem peptidové alkylamidy a estery je možno snadno připravit z těchto peptidových prysky řic štěpením prováděným za použití vhodného alkylaminu, dialkylaminu nebo diaminoalkanu, nebo transesterifikací s alkoholem při vysoké hodnotě pH.
Postup prováděný v pevné fázi, který byl popsán ve shora uvedeném textu, je velice dobře znám z dosavadního stavu techniky, viz. Stewart a Young, Solid Phase Peptide Synthesis : Second En. (Pierce Chemical Co., Rockford, II1984).
Některé zběžně známých metod probíhajících v roztoku, kterých je možno použít k syntetické přípravě peptidových látek podle uvedeného vynálezu, jsou uvedeny v publikaci Peptide Synthesis, Td Edition, John Wiley &Sons, New York, N.Y. 1976, autoři Bodansky a kol.
Předpokládá se, že je výhodnější provádět syntetický postup přípravy uvedených peptidů metodou v rozpouštědlové fázi, při které probíhá kondenzační reakce přinejmenším dvou peptidových fragmentů.
Tato výše uvedená metoda zahrnuje kondenzaci peptidového fragmentu
X-Aj-Y s peptidovým fragmentem
U-V-W kde všechny boční řetězce aminokyselin s výjimkou Ai jsou neutrální nebo chráněné, a
X je Prot, přičemž Prot je N-koncová chránící skupina,
Y je A2-Q, Ala-A2-Q, A2-Ala-Q, Ala-A2-Ala-Q, A2-Ala-Trp-Q, Ala-A2-A!a-Trp-Q, Ala-Q nebo -Q, přičemž jestliže Y je Q, potom U znamená J-A2-Ala-Trp nebo J-Ala-A2-Ala-Trp;
jestliže Y je Ala-Q, potom U znamená J-Ar-Ala-Trp;
jestliže Y znamená Ar-Q nebo Ala-A2~Q, potom U znamená J-Ala-Trp;
jestliže Y znamená A2-Ala-Q nebo Ala-A2-A3-Q, potom U znamená J-Trp;
jestliže Y znamená A2-Ala-Trp-Q nebo Ala-A2-Ala-Trp-Q, potom U znamená J;
V je A5 nebo Z; přičemž jestliže V je A5, potom W je Z;
-10CZ 293281 B6 jestliže V je Z, potom W není přítomno; a
Ai, A2, A5 a Z mají stejný význam jako bylo uvedeno shora;
Q je koncová karboxyskupina peptidového fragmentu, přičemž představuje -OR3 nebo -M, kde M je zbytek, který je schopen nahrazení nukleofilní částí obsahující dusík, a R3 je vodík, alkylová skupina obsahující jeden až asi 10 atomů uhlíku, arylová skupina obsahující 6 až asi 12 atomů uhlíku nebo aralkylová skupina obsahující 7 až asi 12 atomů uhlíku,
J znamená aminové zakončení uvažovaného fragmentu, přičemž představuje vodík nebo chránící skupinu, která nebrání kondenzační reakci, jako je například benzylová skupina.
V dalším postupu je odstraní chránící skupiny. V alternativním provedení je možno pro další kondenzační reakci za účelem přípravy většího peptidů použít chráněný peptid získaný shora uvedeným postupem.
Tato výhodná metoda je podrobněji popsána v patentové přihlášce Spojených států amerických č. 558 121, podané 24. července 1990, autoři John C. Hubbs a S.V. Parker, o názvu „Process for Synthesizing peptides“, uvedené zde jako odkazový materiál, přičemž tato peptidová přihláška byla publikována jako mezinárodní patentová přihláška WO 9201709.
Do rozsahu uvedeného vynálezu rovněž spadá farmaceutický prostředek k promotování uvolňování a/nebo zvýšení hladiny růstového hormonu v krvi zvířat. Tento farmaceutický prostředek je charakteristický tím, že obsahuje účinné množství alespoň jedné výše popsané peptidové sloučeniny. Podle jedné z variant tohoto postupu se tento farmaceutický prostředek podává živočichovi, kterým není člověk.
Sloučeniny podle uvedeného vynálezu je možno podávat perorálně, parenterálně (intramuskulárně, i.m.), intraperitoneálně (i.p.), intravenózně (i.v.) nebo subkutánně (s.c.) pomocí injekcí, dále nazálně, vaginálně, rektálně nebo sublinguálně a rovněž tak intrapulmonámí inhalací, přičemž tyto sloučeniny je možno formulovat do dávkových forem, které jsou vhodné pro každou jednotlivou metodu podávání. Ve výhodném provedení podle uvedeného vynálezu se používá parenterálního podávání.
Mezi pevné dávkové formy pro orální podávání náleží kapsle, tablety, pilulky, prášky a granule. Při přípravě těchto pevných dávkových forem se účinná látka smíchává s přinejmenším jedním inertním nosičovým materiálem, jako je například sacharóza, laktóza nebo škrob. Tyto dávkové formy mohou rovněž obsahovat, jak je to běžné v obdobných jiných případech v tomto oboru, další látky kromě uvedených inertních nosičových látek, jako jsou například maziva, například stearát hořečnatý. V případě kapslí, tablet a pilulek může dávková forma rovněž obsahovat tlumicí činidla. Tablety a pilulky může dávková forma rovněž obsahovat tlumicí činidla. Tablety a pilulky je možno formulovat společně s enterosolventními prostředky (což jsou látky napomáhající uvolňování účinné látky ve střevech).
Mezi kapalné dávkové formy pro orální podávání je možno zařadit emulze, roztoky, suspenze, sirupy, elixíry obsahující inertní ředidla všeobecně známá a používaná v tomto oboru, jako je například voda. Kromě výše uvedených ředicích látek mohou tyto prostředky obsahovat rovněž pomocné látky, jako jsou například smáčecí činidla, emulgační a suspendační činidla a sladidla, esence a vonné přísady.
Prostředky podle uvedeného vynálezu pro parenterální podávání zahrnují sterilní vodné nebo nevodné roztoky, suspenze nebo emulze. Jak příklad nevodných rozpouštědel nebo vehikul je možno uvést propylenglykol, polyethylenglykol, rostlinné oleje, jako je například olivový olej a kukuřičný olej, dále želatina a organické estery používané pro injekce, jako je například
-11 CZ 293281 B6 ethylester kyseliny olejové. Tyto dávkové formy mohou rovněž obsahovat přídavné látky, jako jsou například konzervační přísady, smáčecí, emulgační a dispergační činidla. Tyto prostředky je možno sterilizovat, například filtrací přes filtr zachycující bakterie, vpravením sterilizačních činidel do těchto prostředků, ozařováním těchto prostředků nebo zahříváním těchto prostředků. Rovněž je možno tyto prostředky bezprostředně před použitím připravovat v prostředí sterilní vody nebo v jiném sterilním médiu vhodném pro injekce.
Tyto nové sloučeniny podle uvedeného vynálezu jsou rovněž vhodné k podávání v kombinaci s hormony uvolňujícími růstový hormon (jako jsou například v přírodě se vyskytující hormony uvolňující růstový hormon, analogy a funkční deriváty těchto látek) a rovněž v kombinaci sjinými sloučeninami, které promotují uvolňování růstového hormonu, jako jsou například peptidy uvolňující růstový hormon (viz například patent Spojených států amerických č. 4 880 778, který je zde uveden jako odkazový materiál); přičemž v tomto směru je možno například uvést acetylcholinesterázové inhibitory, β-adrenergní blokátory, cr-adrenemí blokátory, atd. Tyto kombinace představují zejména výhodné formy, pomocí kterých se podávají peptidy k uvolňování růstového hormonu podle uvedeného vynálezu, neboť tyto kombinace promotují uvolňování mnohem většího množství růstového hormonu než by odpovídalo součtu jednotlivých účinků pro každou jednotlivou složku přítomnou v uvedené kombinaci, to znamená, že tato kombinace poskytuje synergický účinek vzhledem k jednotlivým složkám. Další detaily týkající se podávání kombinací obsahujících peptidy uvolňující růstový hormon jsou popsány ve výše uvedeném patentu. Těmito synergicky působícími sloučeninami jsou ve výhodném provedení sloučeniny, které účinkují jako agonisty receptorů hormonu uvolňujícího růstový hormon, nebo inhibují účinek somatostatinu. Tento synergismus může být binární, to znamená může k němu docházet mezi sloučeninou podle uvedeného vynálezu a jednou synergicky účinnou látkou, nebo může být přítomna více nezjedná synergicky účinná sloučenina.
Kombinace látek, které jsou účinné při podporování uvolňování a zvy šování hladiny růstového hormonu v krvi zvířat, jako například lidí, obsahují účinné množství polypeptidové sloučeniny vybrané ze skupiny výše definovaných polypeptidových látek a přinejmenším jedné látky vybrané z následujících skupin : polypeptidy skupiny 1 nebo sloučeniny, které promotují uvolňování růstových hormonů, například polypeptidy skupiny 2, přičemž polypeptidy skupiny 1 jsou vybrány ze souboru zahrnujícího veškeré v přírodě se vyskytující hormony uvolňující růstový hormon a funkční ekvivalenty těchto látek, přičemž tyto uvedené polypeptidy účinkují jako receptory hormonů uvolňujících růstový hormon u savců a jiných obratlovců a korýšů.
Polypeptidy skupiny 2 představují libovolné látky vybrané ze souboru polypeptidových sloučenin, které mají následující strukturu:
Tyr-DArg-Phe-NH2 Tyr-DAla-Phe-NH2 Tyr-DArg(NO2)-Phe-NH2 Tyr-DMe(O)-Phe-NH2 Tyr-DAla-Phe-Gly-NH2 Tyr-DArg-Phe-Gly-NH2
Tyr-DThr-Phe-Gly-NH2 Phe-DArg-Phe-Gly-NH2 T yr-D Arg-Phe-Sar-NH2 Tyr-DArg-Gly—Phe-NH2 Tyr-DArg-Gly-Trp-NH2 Tyr-DArg(NO2)-Phe-Gly-NH2 Tyr-DMet(O)-Phe-Gly-NH2 (NMe)T yr-DArg-Phe-Sar-NH2 Tyr-DArg-Phe-Gly-ol
Tyr-DArg-Gly-(NMe)Phe-NH2
Tyr-DArg-Phe-Sar-ol
- 12CZ 293281 B6
Tyr-DArg-Phe-Sar-ol
Tyr-DArg-Phe-Gly-Tyr-NH2
Tyr-DArg-(NMe)Phe-Gly-Met(O)-ol Tyr-DArg-(NMe)Phe-Gly-Met(O)-ol
Gly-Tyr-DArg-Phe-Gly-NH2
Tyr-DThr-Gly-Phe-Thz-NH2
G ly-T y r-D Ala-Phe-G ly-NH2
Tyr-DAla-Phe-Gly-ol
Tyr-DAla-Gly-(NMe)Phe-Gly-ol
Tyr-DAla-Phe-Sar-NH2
Tyr-DAla-Phe-Sar-NH2 Tyr-DAla-Gly-(NMe)Phe-NH2
Sar-Tyr-dArg-Phe-Sar-NH2
Tyr-DCys-Phe-Gly-DCys-NH2 (cyklický disulfid)
Tyr-DCys-Phe-Gly-DCys-NH2 (volný dithiol)
Tyr-DCys-Gly-Phe-DCys-NH2 (cyklický disulfid) Tyr-DCys-Gly-Phe-DCys-NH2 (volný dithiol)
Tyr-DAIa-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2 Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH2
Tyr-DAla-Phe-Sar-Phe-Pro-Ser-NH2 Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2
Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH2 Tyr-DAla-Phe-Sar-Phe-Hyp-Ser-NH2
Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2 Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH2
Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH2 Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2 a organické nebo anorganické adiční soli odvozené od těchto uvedených polypeptidů ze skupiny 2, přičemž tato kombinace se podává v takovém poměru složek, aby byla účinná k napomáhání synergického uvolňování a zvyšování hladiny růstového hormonu v krvi zvířat, u kterých se provádí tato aplikace.
Podle uvedeného vynálezu je možno použít i jiných dalších sloučenin, které promotují uvolňování růstových hormonů a které jsou odborníkům pracujícím v daném oboru z dosavadního stavu techniky známy, přičemž do skupin) těchto sloučenin je možno zahrnout inhibitory acetylcholinesterázy, β-adrenergní blokátory a a2-adrenergní antagonisty.
Podle jednoho z výhodných provedení se podle uvedeného vynálezu používají v kombinaci s peptidy podle uvedeného vynálezu v přírodě se vyskytující hormony uvolňující růstový hormon a funkční ekvivalenty těchto látek společně se sloučeninami, které promotují uvolňování růstových hormonů. Jako příklad těchto kombinací je možno uvést kombinaci sloučenin ze skupiny 1 a ze skupiny 2 společně s peptidy podle uvedeného vynálezu, přičemž jako další příklad je možno uvést kombinaci sloučenin ze skupiny 1 a β-adrenergních blokátorů společně s peptidovými sloučeninami podle uvedeného vynálezu.
Množství podávaného polypeptidů nebo kombinace polypeptidů podle uvedeného vynálezu se pohybuje v širokých mezích v závislosti na různých faktorech, jako například na konkrétním zvířeti, které je ošetřováno pomocí těchto peptidů, na stáří a pohlaví, a požadovaném terapeutickém účinku, na způsobu podávání a na tom, jaký konkrétní polypeptid nebo kombinace polypeptidů se používá. Ve všech těchto případech se ovšem používá takové dávky, která je účinná (terapeuticky účinné množství) k promotování uvolňování nebo zvýšení hladiny růstového hormonu v krvi zvířete, kterému je podávána tato látka. Obvykle se tato dávka celkově podávaného peptidu pohybuje v rozmezí od 0,1 pg do 10 mg na kilogram tělesné hmotnosti.
-13CZ 293281 B6
Výhodné používané množství je možno snadným způsobem určit empiricky, což může provést každý odborník pracující v daném oboru na základě informací uvedených v tomto popisu.
Například je možno uvést, že v případě podávání uvedených látek, jestliže se použije intravenózního podávání, se výhodné množství pohybuje v rozmezí od asi 0,1 pg do 10 pg celkového množství polypeptidu na kilogram tělesné hmotnosti, podle ještě výhodnějšího provedení je toto množství v rozmezí od asi 0,5 pg do asi 5 pg celkového množství polypeptidu na kilogram tělesné hmotnosti a ještě výhodnější je toto množství v rozmezí od asi 0,7 pg do asi 3,0 pg celkového množství polypeptidu na kilogram tělesné hmotnosti. V případě, že se používá kombinací obsahujících peptidy uvolňující růstový hormon, potom je možno použít nižších množství tohoto peptidu. Například je možno uvést, že v případě kombinování peptidu podle uvedeného vynálezu například se synergicky působící sloučeninou ze skupiny I podle patentu Spojených států amerických č. 4 880 778, jako například GHRH, potom se výhodné množství peptidu podle uvedeného vynálezu v rozmezí od asi 0,1 pg do asi 5 pg na kilogram tělesné hmotnosti, přičemž množství synergicky působící sloučeniny (jako například GHRH) se pohybuje v rozmezí od asi 0,5 pg do asi 15,0 pg na kilogram tělesné hmotnosti, podle ještě výhodnějšího provedení je toto množství peptidu podle uvedeného vynálezu v rozmezí od asi 0,1 pg do asi 3 pg a množství synergicky působící sloučeniny je v rozmezí do asi 1,0 pg do asi 3,0 pg na kilogram tělesné hmotnosti.
V případě použití perorálního způsobu podávání je zapotřebí obvykle použít většího množství polypeptidu. Například v případě perorálního způsobu podávání u lidí se dávkové množství obvykle pohybuje v rozmezí od asi 30 pg do asi 1200 pg polypeptidu na kilogram tělesné hmotnosti, podle ještě výhodnějšího provedení je toto množství v rozmezí od asi 70 pg do asi 600 pg celkového podílu polypeptidu na kilogram tělesné hmotnosti, podle ještě výhodnějšího provedení je toto množství v rozmezí od asi 200 pg do asi 600 pg celkového podílu polypeptidu na kilogram tělesné hmotnosti. U krav a prasat je třeba použít přibližně stejného dávkovaného množství polypeptidu jako u lidí, zatímco u krys jsou zapotřebí dávky vyšší. Přesné dávkované množství je možno snadno určit empirickým způsobem na základě informací uvedených v tomto popisu.
Obecně je možno uvést, jak již rovněž bylo uvedeno výše, že při podávání kombinace obsahující peptidy uvolňující růstový hormon je možno použít nižších dávek jednotlivých sloučenin uvolňujících růstový hormon v porovnání s dávkami nutnými v případě jednotlivě použitých sloučenin uvolňujících růstový hormon za účelem dosažení stejného účinku vzhledem k synergickému působení dosahovaného v případě použití uvedené kombinace.
Do rozsahu uvedeného vynálezu rovněž náleží prostředky obsahující jako účinnou látku organickou nebo anorganickou adiční sůl odvozenou od výše uvedených polypeptidů a kombinace těchto látek, popřípadě společně s nosičovým materiálem, ředidlem, matricí s pomalým uvolňováním nebo povlakem.
Do skupiny organických nebo anorganických adičních solí odvozených od sloučenin uvolňujících růstový hormon podle uvedeného vynálezu, které náleží do rozsahu tohoto vynálezu, je možno zařadit soli organických částí jako je například acetát, trifluoracetát, oxalát, valerát, oleát, laurát, benzoát, laktát, tosylát, citrát, maleinan, fumarát, sukcinát, vínan, naftenát a podobné další zbytky, a dále anorganických částí, jako jsou prvky ze skupiny I (to znamená soli alkalických kovů), skupiny II (to znamená soli kovů alkalických zemin), amonné a protaminové soli, zinek, železo a podobné další prvky, s opačnými ionty, jako je například chlorid, bromid, síran, fosforečnan a podobné další ionty, a rovněž tak i s organickými částmi uvedenými výše.
Farmaceuticky přijatelné soli představují výhodné sloučeniny v případech, kdy se tyto látky podle uvedeného vynálezu podávají lidem. Mezi tyto soli je možno zařadit netoxické soli alkalických kovů, kovů alkalických zemin a amonné soli, které jsou běžně používány a připravovány ve farmacii, přičemž těmito solemi jsou například sodné soli, draselné soli, lithné soli,
-14CZ 293281 B6 vápenaté soli, hořečnaté soli, bamaté soli, amonné soli a protaminové soli, připravované metodami běžně známými z dosavadního stavu techniky. V rozsahu tohoto termínu jsou rovněž zahrnuty netoxické adiční soli s kyselinami, které se obvykle připraví reakcí sloučenin podle uvedeného vynálezu se vhodnou organickou nebo anorganickou sloučeninou. Jako reprezentativní příklad těchto solí je možno uvést hydrochloridy, hydrobromidy, sulfáty, hydrogensulfáty, acetáty, oxaláty, valeráty, oleáty, lauráty, boráty, benzoáty, laktáty, fosfáty, tosyláty, citráty, maleinany, fumaráty, sukcináty, vínany, naftyláty a podobné další látky.
Příklady provedení vynálezu
Polypeptidové sloučeniny podle uvedeného vynálezu, postup jejich přípravy a jejich použití budou v dalším ilustrovány s pomocí konkrétních příkladů, které ovšem nijak neomezují rozsah tohoto vynálezu.
Na přiloženém obrázku 1 je znázorněna sada tří grafů znázorňujících hladinu růstového hormonu v séru v závislosti na čase.
Na všech těchto grafech je na ose x čas a na ose y množství růstového hormonu po perorálním podání GHRP-1 nebo GHRP-2 u normálních mladých lidí v závislosti na čase, přičemž v jednotlivých případech bylo podáno 300 pg/kg GHRP-1 v případě 40 subjektů (viz. grafické znázornění 1; o), 600 pg/kg GHRP-1 v případě 39 subjektů (viz grafické znázornění 2; Δ) a 100 pg/kg GHRP-2 v případě 11 subjektů (viz. grafické znázornění 3; □). Při provádění těchto testů byl normálním mladým lidem o průměrném věku asi 25 let podáván GHRP nejdříve ve 20 mililitrech vody, přičemž potom následovalo okamžitě podání 100 mililitrů vody. Potom byla odebrána krev a údaje zaznamenány graficky. Množství růstového hormonu (GH) bylo zjišťováno radioimunoanalýzou.
Podrobnější údaje o těchto prováděných testech, vztahujících se k těmto grafům, budou uvedeny v následujících příkladech.
Příklad 1
Postup syntézy peptidů uvolňujících růstový hormon.
Podle tohoto provedení se postupovalo tak, že se hydrochlorid parametnylbezhydrylaminové (pMe-BHA.HCl) pryskyřice umístil do reakční nádoby běžně obchodně dostupného automaticky pracujícího zařízení na syntetickou přípravu peptidů. Tato pryskyřice byla substituována volnými aminovými skupinami v rozsahu až asi 5 mmolů na gram. Sloučeniny byly připraveny nakondenzováním jednotlivých aminokyselin, přičemž se vycházelo do konce peptidové sekvence s karboxyskupinou, za použití vhodného aktivačního činidla, jako je například N,N'-dicyklohexylkarbodiimid (DCC). Alfa-aminoskupina jednotlivých aminokyselin byla chráněna například t-butoxykarbonylovým zbytkem (t-Boc), přičemž reakční funkční skupiny bočního řetězce byly chráněny způsobem uvedeným v následující tabulce č. 1.
-15CZ 293281 B6
Tabulka 1
Chránící skupiny bočního řetězce vhodné pro syntézu peptidů v pevné fázi
| arginin | N8-tosyl |
| kyselina aspartová | O-benzyl |
| cystein | S-para-methylbenzyl |
| glutamová kyselina | O-benzyl |
| histidin | N,m-tosyl |
| lysin | NE-2,4-dichlorbenzyloxykarbonyl |
| methionin | S-sulfoxid |
| serin | O-benzyl |
| threonin | O-benzyl |
| tryptofan | N,m-forrnyl |
| tyrosin | 0-2,6-dichlorbenzyl |
Ještě před přidáním počáteční aminokyseliny byla pryskyřice promíchána ve třech cyklech (v každém cyklu po dobu asi jedné minuty) s dichlormethanem (CH2C12; asi lOml/gram pryskyřice), potom byla neutralizována Ν,Ν-diizopropylethylaminem (DIEA) promícháním ve třech cyklech (v každém cyklu po dobu asi dvou minut) v dichlormethanu (v poměru 10 : 90; asi 10 ml/gram pryskyřice) a potom byl tento podíl promíchán ve třech cyklech (pokaždé asi jednu minutu) s dichlormethanem (v množství asi 10 ml/gram pryskyřice). Počáteční aminokyselina a každá další aminokyselina byla nakondenzována na pryskyřici za použití předem připraveného symetrického anhydridu, za použití asi šestinásobku vhodně chráněné aminokyseliny vzhledem k celkové reakční kapacitě pryskyřice a asi dvojnásobku DCC vzhledem k celkové vazebné kapacitě pryskyřice ve vhodném množství dichlormethanu. V případě aminokyselin s malou rozpustností v dichlormethanu byl přidán Ν,Ν-dimethylformamid (DMF) za účelem dosažení homogenního roztoku. Obecně je možno uvést, že symetrický anhydrid byl připraven až 30 minut před zavedením do reakční nádoby při teplotě místnosti nebo při teplotě nižší. Dicyklohexylmočovina, která se tvořila během přípravy symetrického anhydridu, byla odstraněna odfiltrováním roztoku při gravitačním spádu do reakční nádoby. Průběh kondenzace aminokyseliny na pryskyřici byl monitorován obvyklým způsobem za použití běžně používaného barevného testu a reakčních činidel, jako je například ninhydrin (který reaguje s primárními a sekundárními aminy). Po dokončení kondenzace chráněné aminokyseliny na pryskyřici (>99 %) byla chráněna zpracováním s acidickým reakčním činidlem (nebo činidly). Všeobecně používané reakční činidlo sestávalo z roztoku trifluoroctové kyseliny (TFA) v dichlormethanu (v poměru 33 : 66).
Po dokončení požadované aminokyselinové sekvence je možno připravovaný peptid odštěpit z tohoto pryskyřicového nosiče zpracováním se vhodným reakčním činidlem, jako je například fluorovodík (HF), čímž se dosáhne nejenom odštěpení peptidů z pryskyřice, ale rovněž i odštěpení nejčastěji používaných chránících skupin bočního řetězce. V případě, že se použije BHA pryskyřice nebo p-Me-BHA pryskyřice, potom se po zpracování fluorovodíkem získají přímo volné peptidové aminy. V případě použití kombinace aminokyselina-Merrifieldova pryskyřice se volné peptidové alkylamidy získají odštěpením zpracováním se vhodným aminem (v tomto případě při použití BOC-NE-FMOC-Lys umožňuje současné odstranění FMOC skupiny).
Úplný postup připojování každého jednotlivého zbytku aminokyseliny na pryskyřici je uveden v následující tabulce č. 2.
-16CZ 293281 B6
Tabulka 2
Postup připojování jednotlivých aminokyselin na pryskyřici
| Reakční činidlo | Míchací cykly | Doba míchání v jednom cyklu |
| 1. Dichlromethan | 3 | 1 minuta |
| 2. TFA-dichlormethan (33 : 66) | 1 | 2 minuty |
| 3. TFA-dichlormetna (33 : 66) | 1 | 20 minut |
| 4. Dichlormethan | 3 | 1 minuta |
| 5.DIEA, DMF (10: 90) | 2 | 2 minuty |
| 6. Dichlormethan | 3 | 1 minuta |
| 7. BOC-aminokyselina/DIC | 1 | 15-120 minut* |
| 8. Dichlormethan | 3 | 1 minuta |
| 9. Monitorování průběhu kondenzační reakce** | ||
| 10. Opakování stupňů 1-12 pro každou jednotlivou amino | ||
| kyselinu |
* Doba kondenzace závisí na jednotlivé aminokyselině ** Míru kondenzace je možno obecně monitorovat barevným testem. V případě, že je kondenzace neúplná, může být tato stejná aminokyselina opětně kondenzována různým způsobem, například se použije HOBt aktivní ester. V případě, že je kondenzace úplná, je možno kondenzovat další aminokyselinu.
Za použití tohoto postupu byly připraveny sloučeniny uvedené v tabulce 3, 4, 5 a 6.
Příklad 2
Uvolňování růstového hormonu in vivo u krys.
K tomuto testu byly použity nedospělé samičky krys Sprague-Dawley, které byly získány od firmy Charles River Laboratories (Wilmington, MA). Po získání byly tyto krysy umístěny do klecí o teplotě 25 °C, ve kterých poměr cyklů světlo : tma byl 14 : 10 hodin. Těmto krysám byla k dispozici voda a potrava Purina podle libosti. Mláďata byla umístěna společné s jejich matkami po dobu 21 dní.
Potom byly krysy o stáří 26 dnů, ve skupinách po šesti, anestetizovány intraperitoneámě podáním 50 mg/kg petrobarbitalu, což bylo provedeno 20 minut před intravenózním podáním peptidu. Pro tyto intravenózní injekce (i.v.) obsahující peptidy bylo použito jako vehikula normálního slaného roztoku obsahujícího 0,1 % želatiny. Těmto anestetizovaným krysám o hmotnosti v rozmezí od 55 do 65 gramů byly potom pomocí i.v. injekcí podány sloučeniny uvolňující růstový hormon v množství uvedeném v následující tabulce č. 3. Injekce byly provedeny do jugulámí žíly, přičemž množství injekčního roztoku odpovídalo 0,1 mililitru.
Všechna zvířata byla potom usmrcena na tonzilótomu 10 minut po podání poslední injekce (viz tabulka č. 3). Po dekapitací byla odebrána krev z trupu pro stanovení hladiny růstového hormonu v krvi. Potom byla ponechána krev zkoagulovat, dále byla odtředěna a sérum bylo odděleno od sraženiny. Toto sérum bylo potom uchováváno ve zmraženém stavu až do provedení radioimunologického stanovení (RIA) hladiny růstového hormonu, což bylo provedeno podle dále popsané metody, která byla vyvinuta National Instritute of Arthritis, Diabetes and Digestive and Kidney Diseases (NIADDK).
Reakční činidla byla obvyklým způsobem přidána do trubic pro RIA stanovení nejednou o teplotě, při které byly uchovávány v mrazničce (asi 4°C), přičemž postup provádění byl následující:
-17CZ 293281 B6 (a) pufr (b) „studený“ (to znamená neradioaktivní) standard nebo neznámá vzorek séra, který má být analyzován, (c) radioznačený jódový antigen růstového hormonu, a (d) antisérum růstového hormonu.
Přidání reakčních činidel se obvykle provede tak, aby bylo dosaženo zředění asi 1 : 30 000 (tzn. poměr antiséra k celkovému objemu kapaliny, v jednotkách objem/objem).
Tato smíchaná reakční činidla byla potom obvyklým způsobem inkubována při teplotě místnosti (asi 25 °C) po dobu asi 24 hodin, přičemž potom byla přidána druhá protilátka (t. zn. kozí nebo králičí anti-opičí gama globulinové sérum), která se váže na antisérum růstového hormonu a způsobuje vysrážení takto vzniklého komplexu. Vysrážený podíl v trubicích pro RIA-stanovení byl potom analyzován na počet pulzů ve specifických časových periodách, což bylo provedeno v gama-scintilačním čítači. Potom byla vytvořena standardní křivka vynesením počtu radioaktivních pulzů proti úrovni růstového hormonu (GH). Hladina růstového hormonu v neznámých vzorků byla potom stanovena podle této standardní křivky.
Hladina růstového hormonu v séru byla zjišťována metodou RIA za pomoci reakčních činidel dodaných National Hormone and Pituitary Program.
Hladiny séra v tabulce 3 jsou uváděny v ng/ml při GH-standardu 0,61 mezinárodních jednotek/mg (t. zn. IU/mg). Hodnoty jsou uváděny se střední +/- standardní odchylkou od průměrné hodnoty (SEM). Statistická analýza byla provedena pomocí Studentova t-testu. Označení NS znamená to, že odchylka nebyla statisticky významná. Výsledky uvedené v tabulce 3 představují průměr testů se šesti krysami.
Tabulka 3
Uvolňování růstového hormonu in vivo promotované sloučeninami uvolňujícími růstový hormon u krys anesterizovaných pentobarbitalem.
(zvířata usmrcená 10 minut po aplikaci poslední injekce)
| Sloupec A: Peptid uvolňující růstový hormon | Celková dávka (pg/i.v.) | GH v kontrolním séru (ng/ml) 1SEM (N=6) | Uvolněný GH, GH v séru (ng/ml) ±SEM (N=6) |
| Ala-his-DpNal- | 0,1 | 337151 | 610+90 |
| Ala-Trp-DPhe- | 0,3 | 337±51 | 11401187 |
| lys-NH2 b | 1,0 | 337+51 | 29091257 |
| 3,0 | 337+51 | 3686+436 | |
| His-DTrp-Ala- | 0,1 | 131+43 | 540+148 |
| DPhe-Lys-NH2 b | 0,3 | 131143 | 751+88 |
| 1,0 | 131+43 | 17901252 | |
| 3,0 | 131+43 | 24811209 | |
| Ala-DpNal-Ala- | 0,3 | 167+46 | 363+73 |
| Trp-DPhe-Lys-NH2 | 1,0 | 167+46 | 14501294 |
| 3,0 | 167+46 | 20721208 | |
| 10,0 | 167146 | 26981369 |
-18CZ 293281 B6
Tabulka 3 - pokračování
| Sloupec A: Peptid uvolňující růstový hormon | Celková dávka (pg/i.v.) | GH v kontrolním séru (ng/ml) +SEM (N=6) | Uvolněný GH, GH v séru (na/ml) ±SEM (N=6) |
| DAla-LpNal-Ala- | 0,1 | 263+45 | |
| Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,3 | 160+151 | 315+85 |
| 1,0 | 160+151 | 426+41 | |
| DAla-DTrp-Ala- | 0,1 | 111±24 | 526+86 |
| Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,3 | 111±24 | 1608+204 |
| 1,0 | 111±24 | 2820+346 | |
| 3,0 | 111+24 | 2437+214 | |
| Ala-DpNal-Ala- | 0,1 | 167+46 | 144+20 |
| NMeT rp-DPhe-Ly s-NH2 | 0,3 | 167+46 | 258+28 |
| 1,0 | 167+46 | 261+24 | |
| 3,0 | 167+46 | 277+85 | |
| D-Leu-DpNal- | 0,1 | 160+51 | 256+94 |
| Ala-T rp-DPhe-Lys-NH2 | 0,3 | 160+51 | 452+49 |
| 1,0 | 160+51 | 355+94 | |
| D-Trp-DpNal-Ala- | 0,1 | 160+51 | 226+61 |
| Trp-DPhe-Lys-NH2 b | 0,3 | 160+51 | 245+27 |
| 1,0 | 160+51 | 437+62 | |
| Ala-His-DpNal-Ala- | 0,3 | 160+51 | 1418+302 |
| Trp-DPhe-Lys-NH2 b | 1,0 | 160+51 | 2201+269 |
| His-DTrp-Ala- | 0,1 | 140+10 | 200+40 |
| Trp-DPhe-Lys-NH2 b | 0,3 | 140+10 | 505+50 |
| 1,0 | 140+10 | 1640+215 | |
| DAsn-DpNal-Ala- | 0,1 | 228+23 | 122+38 |
| Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,3 | 228+23 | 195+21 |
| 1,0 | 228+23 | 197+47 | |
| DHis-DpNal-Ala- | 0,1 | 228+23 | 386+81 |
| Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,3 | 228+23 | 605+82 |
| 1,0 | 228+23 | 930+96 | |
| DLys-DpNal-Ala- | 0,1 | 228+23 | 262+31 |
| Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,3 | 228+23 | 340+86 |
| 1,0 | 228+23 | 335+56 | |
| DSer-DpNal-Ala- | 0,1 | 228+23 | 226+11 |
| Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,3 | 228+23 | 171+48 |
| 1,0 | 228+23 | 212+43 |
- 19CZ 293281 B6
Tabulka 3 - pokračování
| Sloupec A: Peptid uvolňující růstový hormon | Celková dávka (pg/i.v.) | GH v kontrolním séru (ng/ml) ±SEM (N=6) | Uvolněný GH. GH v séru (ng/ml) ±SEM (N=6) |
| Ala-His-DpNal-Ala- | 0,3 | 228±23 | 1746±318 |
| Trp-DPhe-Lys-NH2 b | 1,0 | 228+23 | 2610±176 |
| Gly-DpNal-Ala- | 0,3 | 160±36 | 1237±249 |
| T rp-Dphe-Lys-NH2 | 1,0 | 160±36 | 2325±46 |
| 3,0 | 160±36 | 2694±370 | |
| 10,0 | 160±36 | 3454±159 | |
| Ser-DpNal-Ala- | 0,3 | 160±36 | 227±39 |
| Trp-DPhe-Lys-NH2 | 1,0 | 160+36 | 595±112 |
| 3,0 | 160+36 | 1303±281 | |
| 10,0 | 160±36 | 2919±320 | |
| Met-DpNal-Ala- | 0,3 | 160±36 | 181±48 |
| Trp-DPhe-Lys-NH2 | 1,0 | 160±36 | 226±58 |
| 3,0 | 160±36 | 316±66 | |
| 10,0 | 160±36 | 1010±236 | |
| Ala-His-DpNal-Ala- | 0,1 | 160±36 | 822±243 |
| Trp-DPhe-Lys-NH2 b | 0,3 | 160±36 | 1594±292 |
| 1,0 | 160±36 | 2180±284 | |
| Gln-DpNal-Ala- | 0,3 | 131±43 | 124±15 |
| Trp-DPhe-Lys-NH2 | 1,0 | 131+43 | 340±66 |
| 1,0 | 131±43 | 476+109 | |
| 10,0 | 131±43 | 673±228 | |
| Pro-DpNal-Ala- | 0,3 | 135±32 | 264±31 |
| T rp-DPhe-Lys-NH2 | 1,0 | 135±32 | 513±123 |
| 3,0 | 135±32 | 1690±103 | |
| Gly-DpNal-Ala- | 0,3 | 215±33 | 1301±260 |
| T rp-DPhe-Lys-NH2 | 1,0 | 215±33 | 2211±146 |
| 3,0 | 215±33 | 2364±365 | |
| Naacetyl-Gly- | 0,3 | 262±53* | 268±21* |
| DaNal-Ala-Trp- | 1,0 | 262±53* | 599±219* |
| DPhe-Lys-NH2 | 3,0 | 262±53* | 626±210* |
| Sar-DpNal-Ala- | 0,3 | 262±53* | 908+264* |
| T rp-Dphe-Ly s-NH2 | 1,0 | 262±53* | 168H262* |
| 3,0 | 262±53* | 2600±316* | |
| DpNal-Ala-Trp- | 0,3 | 215+33 | 436+98 |
| DPhe-Lys-NH2 | 1,0 | 215±33 | 660±151 |
| 3,0 | 215±33 | 776+274 |
-20CZ 293281 B6
Tabulka 3 - pokračování
| Sloupec A: Peptid uvolňující růstový hormon | Celková dávka (pg/i.v.) | GH v kontrolním séru (ng/ml) ±SEM (N=6) | Uvolněný GH, GH v séru (ng/ml) +SEM (N=6) |
| NaAcetyl-DpNal- | 0,3 | 262+53* | 339+17* |
| Ala-Trp-Dphe- | 1,0 | 262+53* | 430+136* |
| Lys-NH2 | 3,0 | 262+53* | 634+118* |
| Naisopropyl-DpNal- | 0,3 | 262+53* | 541+179* |
| Ala-T rp-DPhe-Lys-NH2 | 1,0 | 262+53* | 972+247* |
| 3,0 | 262+53* | 1636+371* | |
| Nadiethyl-DpNal- | 0,3 | 127+32* | 462+132* |
| Ala-T rp-DPhe-Lys-NH2 | 1,0 | 127+32* | 899+160* |
| 3,0 | 127+32* | 1786+373* | |
| Naethyl-DpNal- | 0,3 | 135+32 | 531+80 |
| Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 | 1,0 | 135+32 | 1156+250 |
| 3,0 | 135+32 | 2664+225 | |
| Gly-DpNal-Ala- | 0,3 | 135+32 | 1387+352 |
| T rp-DPhe-Ly s-NH2 | 1,0 | 135+32 | 158+353 |
| 3,0 | 135+32 | 2605+97 | |
| pAla-DpNal-Ala- | 0,3 | 135+32 | 1937+343 |
| Trp-DPhe-Lys-NH2 | 1,0 | 135+32 | 3603+645 |
| 3,0 | 135+32 | 4000+500 | |
| Ava* *-DpN al-Ala- | 0,3 | 135+32 | 2469+185 |
| T rp-DPhe-Ly s-NH2 | 1,0 | 135+32 | 4034+680 |
| 3,0 | 135±32 | 3142+392 | |
| Ala-DpNal-Ala- | 0,3 | 208+148* | 211+27* |
| Trp-Dphe- | 1,0 | 208+148* | 468+127* |
| NHCH2CH2NH2 | 3,0 | 208+148* | 877+325* |
| 30,0 | 208+148* | 2325+477* | |
| Ala-DpNal-Ala | 0,3 | 208+148* | 284+132* |
| Trp-Dphe- | 1,0 | 208+148* | 527+166* |
| NHCH2CH2CH2CH2CH2NH2 | 3,0 | 208+148* | 816+289* |
| 30,0 | 208+148* | 3650+772* | |
| D-Ala-DpNal-Ala- | 0,3 | 111+24 | 180+37 |
| Trp-DPhe- | 1,0 | 111+24 | 686+135 |
| NHCH2CH2CH2CH2CH2NH2 | 3,0 | 111+24 | 1490+179 |
| 30,0 | 111+24 | 2248+70 | |
| Ala-DpNal-Ala- | 0,3 | 208+148* | 211+48* |
| Trp-DPhe-OMe | 1,0 | 208+148* | 157+35* |
| 3,0 | 208+148* | 492+147* | |
| 30,0 | 208+148* | 554+127* |
-21 CZ 293281 B6
Tabulka 3 - pokračování
| Sloupec A: Peptid uvolňující růstový hormon | Celková dávka (pg/i.v.) | GH v kontrolním séru (ng/ml) +SEM (N=6) | Uvolněný GH, GH v séru (ng/ml) ±SEM (N=6) |
| D-Ala-DTrp-Ala- | 0,1 | 111±24 | 526+86 |
| T rp-Dphe-Lys-NH2 | 0,3 | 111±24 | 1608+204 |
| 1,0 | 111±24 | 2820+346 | |
| 3,0 | 111±24 | 2437+214 | |
| Aib-DpNal-Ala | 0,1 | 208=148* | 260+58* |
| Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,3 | 208=148* | 331+108* |
| 1,0 | 208=148* | 368+133* | |
| 3,0 | 208=148* | 1090+176* | |
| D-Ala-DpNal- | 0,1 | 215+49 | 608+115 |
| Ala-Trp-DPhe | 0,3 | 215+49 | 1753+419 |
| Lys(iPr)-NH2 | 1,0 | 215+49 | 1817+297 |
| 3,0 | 215+49 | 2336+196 |
* Rozpuštěn v DMSO ** Rozpuštěn v kyselině aminovalerové (AVA) a Dávky takto označené byly podány samičkám krys o stáří 29 dnů b Kontrolní GHRP.
V uvedené tabulce č. 3 je provedeno porovnání sloučenin podle uvedeného vynálezu se sloučeninami, které jsou mimo rozsah sloučenin uvedeného obecného vzorce podle vynálezu, přičemž zvýše uvedených výsledků je patrné, že sloučeniny podle vynálezu promotují uvolňování a zvyšování hladiny růstového hormonu v krvi krys, kterým byly tyto sloučeniny podány, vynikajícím způsobem. Tato zcela neočekávatelná účinnost výhodných sloučenin podle vynálezu pokud se týče uvolňování růstového hormonu je zejména cenná z toho důvodu, že se jedná o polypeptidové sloučeniny s krátkým řetězcem, které mají nízkou molekulovou hmotnost, a dále jsou relativně stabilní a obsahují nenákladný aminokyselinový zbytek D-alanin na koncové aminové skupině a pentadiaminový zbytek na místo Lys na koncovém uhlíku, přičemž za těchto podmínek prokazatelně poskytují lacinější prostředky ke zvýšení hladiny růstového hormonu u zvířat a u lidí.
Příklad 3
Zvyšování hladiny růstového hormonu in vivo u krys po perorálním podání.
Podle tohoto příkladu byl opakován postup podle příkladu 2 s tím rozdílem, že těmto krysám byla podávána dávka sloučenin nitrožaludečními trubicemi. Podávané sloučeniny, použité dávky těchto sloučenin a získané výsledky jsou uvedeny v následující tabulce č. 4.
-22CZ 293281 B6
Tabulka 4
Uvolňování růstového hormonu in vivo promotované sloučeninami uvolňujícími růstový hormon 5 u krys anestetizovaných pentobarbitalem.
(zvířata usmrcená po různých časových intervalech po nitrožaludeční aplikaci peptidů).
| Sloupec A: Peptid uvolňující růstový hormon | Celková dávka (mg/kg) | GH v séru (ng/ml) i SEM (N=6) | GH v séru (ng/ml) i SEM(N=6)po 15 minutách (20 min.) (30 min.) |
| Ala-His-DpNal- | 10 | 247+32 | 7861244 |
| Ala-Trp-DPhe- | 30 | 247+32 | 1914+294 |
| Lys-NH2 a | |||
| DALA-DpNal-Ala- | 10* | 247+32 | 1161298 |
| T rp-Dphe-Lys-NH2 | 30** | 247+32 | 20381244 |
| Ava-DpNal-Ala- | 30 | 322+145* | 2135+586* |
| T rp-Dphe-Lys-NH2 | |||
| Gly-DpNal-Ala- | 30 | 247132 | 1072+137 |
| Trp-DPhe-Lys-NH2 | |||
| His-Dtrp-Ala- | 30 | 247132 | 1810+437 |
| T rp-DPhe-Lys-NH | |||
| Ala-His-DpNal- | 10 | 196+49(15) | 14211363 |
| Ala-Trp-DPhe- | 147+30 (20) | 1605+621(20) | |
| Lys-NH2 a | 133±18 (30) | 752+81 (30) | |
| DAla-DpNal- | 10 | 196±49 (15) | 706+133 (15) |
| Ala-Trp-DPhe- | 147+30 (20) | 10621254 (20) | |
| Lys-NH2 | |||
| Gly-DpNal-Ala- | 10 | 196+49 (15) | 9571188(15) |
| Trp-DPhe-Lys | 147130(20) | 1685+524 (20) | |
| His-DTrp-Ala- | 10 | 196±49 (15) | 11311189 (15) |
| Trp-DPhe-Lysa | 147+30 (20) | 686+149 (20) | |
| pAla-DpNal- | 10 | 196149(15) | 12021429(15) |
| Ala-Trp-DPhe- | 147+30 (20) | 12171239 (20) | |
| Lys-NH2 | |||
| Ava-DpNal-Ala- | 10 | 196±49 (15) | 14071204(15) |
| T rp-Dphe-Lys-NH2 | 147+30 (20) | 1251+351 (20) | |
| * Suspenze (zředěná*, koncentrovaná**) - | přidaná kyselina octová |
a Kontrolní peptidy
-23CZ 293281 B6
Z uvedených výsledků je patrné, že si sloučeniny podle uvedeného vynálezu po perorálním podání krysám zachovávají účinnou schopnost uvolňovat růstový hormon. Tato skutečnost je zejména vhodná z toho hlediska, že při této metodě podávání je terapeutická využitelnost těchto peptidových sloučenin vyšší.
Příklad 4
Uvolňování růstového hormonu in vivo u krys.
Podle tohoto příkladu se opakoval postup podle příkladu 2. Podávané sloučeniny, použité dávky těchto sloučenin a získané výsledky jsou uvedeny v následujících tabulkách č. 5 a 6.
Tabulka 5
Uvolňování růstového hormonu in vivo promotované syntetickými peptidy uvolňujícími růstový hormon u krys anestetizovaných pentobarbitalem.
(zvířata usmrcená 10 minut po aplikaci poslední injekce)
| Sloupec A: Peptid uvolňující růstový hormon | Celková dávka (pg/i.v.) | GH v kontrolním séru (ng/ml) ± SEM (N=6) | Uvolněný GH, GH v séru (ng/ml) ±SEM (N=6) |
| DAla-DpNal- | 0,30 | 216+27 | 340+38 |
| Ala-Trp-Dphe-NH2 | 1,0 | 216+27 | 1205+335 |
| 3,00 | 216+27 | 1703+182 | |
| 10,0 | 216+27 | 2741+484 | |
| DAla-DpNal- | 0,30 | 216+27 | 611+68 |
| Ala-Trp-DPhe- | 1,00 | 216+27 | 929+209 |
| Ala-NH2 | 3,00 | 216+27 | 1765+320 |
| 10,00 | 216+27 | 2644+358 | |
| Lys-DAla-DpNal- | 0,10 | 216+27 | 219+40 |
| Ala-Trp-DPhe- | 0,30 | 216+27 | 269+31 |
| Lys-NH2 | 1,0 | 216+27 | 432+143 |
| 3,0 | 216+27 | 711+134 | |
| DAla-DpNal-Ala | 0,03 | 216+27 | 517+135 |
| Trp-DPhe-NH- | 0,10 | 216+21 | 1078+174 |
| Chx-NH2 | 0,30 | 216+27 | 1831+436 |
| 1,00 | 216+27 | 3120+761 | |
| DAla-DpNal-Ala- | 0,10 | 187+36 | 220+34 |
| Trp-DAla-Lys-NH2 | 0,30 | 187+36 | 167+48 |
| 1,00 | 187+36 | 339+61 | |
| 3,00 | 187+36 | 778+174 | |
| 10,00 | 187±36 | 1676+470 | |
| 30,00 | 187+36 | 1791+384 |
-24CZ 293281 B6
Tabulka 5 - pokračování
| Sloupec A: Peptid uvolňující růstový hormon | Celková dávka (pg/i.v.) | GH v kontrolním séru (ng/ml) ± SEM (N=6) | Uvolněný GH, GH v séru (ng/ml) ±SEM (N=6) |
| DAIa-DpNal- | 0,03 | 153+27 | 409+97 |
| Ala-Trp-DPhe- | 0,10 | 153+27 | 1469+152 |
| Lys-NH2 | 0,30 | 153+27 | 2322+265 |
| 1,00 | 153+27 | 2765+352 | |
| DAla-DpNal-Ala- | 0,03 | 177+45 | 542+98 |
| Trp-DPhe-Ala- | 0,10 | 177+45 | 932+84 |
| NH(CH2)5NH2 | 0,30 | 177+45 | 1121+212 |
| 1,00 | 177+45 | 2599+144 | |
| NalMA-DpNal- | 0,03 | 192+41 | 696+108 |
| Ala-Trp-DPhe- | 0,10 | 192+41 | 1049+198 |
| Lys-NH2 | 0,30 | 192+41 | 2567+419 |
| 1,0 | 192+41 | 2001+341 | |
| DAla-DPNal-Ala- | 0,10 | 192+41 | 846+105 |
| Trp-DPhe-NH- | 0,30 | 192+41 | 1886+493 |
| Chx-NH2 | 1,00 | 192+41 | 2209+187 |
| 3,00 | 192+41 | 3359+433 | |
| DAla-Tcc-Ala- | 0,30 | 93+22 | 149+20 |
| T rp-DPhe-Lys-NH2 | 3,00 | 93+22 | 142+35 |
| DAla-Gly-Gly- | 0,30 | 93+22 | 107+14 |
| Trp-DPhe-Lys-NH2 | 3,00 | 93+22 | 89+15 |
| DAla-DpNal-Ala- | 0,03 | 93+22 | 230+23 |
| Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,10 | 93+22 | 1006+204 |
| 0,30 | 93+22 | 2110+260 | |
| 1,00 | 93+22 | 1825+328 | |
| DAla-DpNal-Ala- | 0,03 | 93+22 | 141+26 |
| Trp-DT ic-Ly s-N H2 | 0,10 | 93+22 | 156+62 |
| 0,30 | 93+22 | 124+31 | |
| 1,00 | 93+22 | 151+24 | |
| DAla-DPNal-Ala- | 0,10 | 93+22 | 558+162 |
| Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,30 | 93+22 | 1730+306 |
| DAla-DpNal-Ala- | 3,00 | 145+17 | 537+43 |
| Tcc-DPhe-Lys-NH2 | 10,00 | 145+17 | 746+92 |
| DpNal-Gly-Gly- | 3,00 | 145+17 | 417+37 |
| T rp-DPhe-Lys-NH2 | 10,00 | 145+17 | 397+114 |
-25CZ 293281 B6
Tabulka 5 - pokračování
| Sloupec A: Peptid uvolňující růstový hormon | Celková dávka (pg/i.v.) | GH v kontrolním séru (ng/ml) i SEM (N=6) | Uvolněný GH, GH v séru (ng/ml) ±SEM (N=6) |
| DAla-DpNal-Ala- | 0,10 | 145117 | 365+42 |
| Trp-DPal-Lys-NH2 | 0,30 | 145+17 | 5841148 |
| DAla-DpNal-Ala- | 0,10 | 145117 | 9281184 |
| Trp-DPal-Lys-OH | 0,30 | 145±17 | 1782+241 |
| 3Me-His-DpNal- | 0,03 | 87±11 | 122111 |
| Ala-Trp-DPhe- | 0,10 | 87±11 | 185127 |
| Lys-NH2 | 0,30 | 87±11 | 101+12 |
| 0,10 | 87±11 | 112+13 | |
| 3Me-His-DpNal- | 0,03 | 87±11 | 134+28 |
| Ala-Trp-DPhe- | 0,10 | 87±11 | 159+30 |
| Lys-NH, | 0,30 | 87±11 | 78+19 |
| 1,00 | 87111 | 134+27 | |
| Tip-Ala-DpNal- | 0,10 | 87±11 | 168+27 |
| Ala-Trp-DPhe- | 0,30 | 87±11 | 167128 |
| Lys-NH2 | 1,00 | 87±11 | 152174 |
| 3,00 | 87±11 | 272+63 | |
| DAla-DBNal-Ala- | 0,03 | 247153 | 870+136 |
| Trp-DPhe-Lys-NH2 | 010 | 247+53 | 1440+267 |
| 0,30 | 247+53 | 2420+456 | |
| 1,00 | 247+53 | 2855+347 | |
| 3,00 | 247+53 | 34211377 | |
| DAla-DTcc-Ala- | 0,10 | 247153 | 165126 |
| Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,30 | 247153 | 18319 |
| 1,00 | 247153 | 207+38 | |
| 3,00 | 247+53 | 153122 | |
| 10,00 | 247+53 | 269147 | |
| Ava-Trp-DTrp- | 0,10 | 247+53 | 153+30 |
| Lys-NH2 | 0,30 | 247+53 | 144+14 |
| 1,00 | 247+53 | 117+9 | |
| 3,00 | 247153 | 205+59 | |
| 10,00 | 247+53 | 214+48 | |
| DAla-DpNal-Ala- | 0,03 | 228+48 | 203120 |
| Trp-DPal-Lys-NH2 | 0,10 | 228+48 | 772+142 |
| 0,30 | 228+48 | 979+182 | |
| 1,00 | 228+48 | 1691+139 | |
| 3,00 | 228+48 | 3249+526 |
-26CZ 293281 B6
Tabulka 5 - pokračování
| Sloupec A: Peptid uvolňující růstový hormon | Celková dávka (pg/i.v.) | GH v kontrolním séru (ng/ml) ± SEM (N=6) | Uvolněný GH, GH v séru (ng/ml) ±SEM (N=6) |
| Tyr-DAla-D3Nal- | 0,03 | 228+48 | 164+52 |
| Ala-Trp-DPhe- | 0,10 | 228+48 | 247+51 |
| Lys-NH2 | 0,30 | 228+48 | 196+39 |
| 1,00 | 228+48 | 329+57 | |
| 3,00 | 228+48 | 878+170 | |
| Ala-His-DpNal- | 0,03 | 228+48 | 894+112 |
| Ala-Trp-DPhe- | 0,10 | 228+48 | 1128+274 |
| Lys-NH, | 1,00 | 228+48 | 1362+198 |
| DAla-DpNal-Ala- | 0,03 | 228+48 | 300+82 |
| Trp-DPhe-Lys- | 0,10 | 228+48 | 585+141 |
| OH | 0,30 | 228+48 | 1202+236 |
| 1,00 | 228+48 | 2610+355 | |
| DAla-DpNal-Ala- | 0,03 | 167+29 | 123+17 |
| Trp-NMe-DPhe- | 0,10 | 167+29 | 132+30 |
| Lys-NH2 | 0,30 | 167+29 | 232+49 |
| 1,00 | 167+29 | 233+41 | |
| His-Trp-Ala- | 1,00 | 167+29 | 125+24 |
| Trp-Phe-Lys-NH2 | 3,00 | 167+29 | 201+19 |
| 10,00 | 167+29 | 130+25 | |
| 30,00 | 167+29 | 182+36 | |
| Ava-DAla-DpNal- | 0,03 | 167+29 | 209+33 |
| Ala-Trp-DPhe- | 0,10 | 167+:29 | 144+42 |
| Lys-NH2 | 0,30 | 167+29 | 185+47 |
| 1,00 | 167+29 | 499+110 | |
| pAla-DpNal- | 0,03 | 167+29 | 489+71 |
| Ala-T rp-DPhe- | 0,10 | 167+29 | 1112+194 |
| Lys-NH2 | 0,30 | 167+29 | 1993+259 |
| 1,00 | 167+29 | 3061+238 | |
| DAla-DpNal-Gly- | 0,10 | 121+14 | 226+26 |
| T rp-DPhe-Lys-NH2 | 0,30 | 121+14 | 170+31 |
| 1,00 | 121+14 | 414+101 | |
| 3,00 | 121+14 | 713+126 | |
| DAIa-DpNal-Gly- | 0,10 | 121+14 | 95+15 |
| Gly-Trp-DPhe- | 0,30 | 121+14 | 82+16 |
| Lys-NH2 | 1,00 | 121+14 | 177+43 |
| 3,00 | 121+14 | 223+58 | |
| Asp-DAla-DpNal- | 0,03 | 121+14 | 210+53 |
| Ala-Trp-DPhe- | 0,10 | 121+14 | 322+48 |
-27CZ 293281 B6
Tabulka 5 - pokračování
| Sloupec A: Peptid uvolňující růstový hormon | Celková dávka (pg/i.v.) | GH v kontrolním séru (ng/ml) ± SEM (N=6) | Uvolněný GH, GH v séru (ng/ml) +SEM (N=6) |
| Lys-NH2 | 0,30 | 121+14 | 557+184 |
| 1,00 | 121+14 | 821+173 | |
| DAla-DpNal-Ala- | 0,03 | 121+14 | 335+106 |
| Trp-DPhe-NH- | 0,10 | 121+14 | 652+129 |
| CHx-NH2 | 0,30 | 121+14 | 1528+252 |
| 1,00 | 121+14 | 2410+370 | |
| DAla-DpNal-DAla- | 0,10 | 200+45 | 166+36 |
| Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,30 | 200+45 | 197+33 |
| 1,00 | 200+45 | 343+73 | |
| 3,00 | 200+45 | 531+121 | |
| DAla-DpNal-Ala- | 0,10 | 200+45 | 147+21 |
| Ala-Trp-DPhe- | 0,30 | 200+45 | 184+45 |
| Lys-NH2 | 1,00 | 200+45 | 206+66 |
| 3,00 | 200+45 | 143+9 | |
| DAla-DpNal-Ala- | 0,10 | 200+45 | 1246x189 |
| Trp-DPhe-NH- | 0,30 | 200+45 | 1616+250 |
| Chx-NH2 | 1,00 | 200+45 | 2574+467 |
| 3,00 | 200+45 | 2789+130 | |
| DAla-DpNal-Ala- | 0,10 | 200+45 | 608+140 |
| T rp-DPhe-Lys-NH2 | 0,30 | 200+45 | 920+225 |
| 1,00 | 200+45 | 1735+291 | |
| 3,00 | 200+45 | 2527+196 | |
| DAla-DpNal-Ala- | 0,03 | 157+40 | 113+14 |
| T rp-Pro-Ly s-N H2 | 1,00 | 157+40 | 136+40 |
| 3,00 | 157+40 | 195+35 | |
| 10,00 | 157+40 | 226+42 | |
| DAla-DpNal-Ala- | 0,03 | 157+40 | 234+36 |
| T rp-DPro-Lys-NH2 | 1,00 | 157+40 | 358+48 |
| 3,00 | 157+40 | 576+77 | |
| 10,00 | 157+40 | 1624+241 | |
| DAla-DpNal-Ala- | 0,03 | 157+40 | 202+27 |
| T rp-DLeu-Ly s-NH2 | 1,00 | 157+40 | 165+12 |
| 3,00 | 157+40 | 307+51 | |
| 10,00 | 157+40 | 1591+568 | |
| Ava-DpNal-Ala- | 0,03 | 157+40 | 768+191 |
| Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0,10 | 157+40 | 1277+61 |
| 0,30 | 157+40 | 1733+254 | |
| 1,00 | 157+40 | 2418+162 |
-28CZ 293281 B6
Tabulka 6
Uvolňování růstového hormonu in vivo promotované syntetickými peptidy uvolňujícími růstový 5 hormon u krys anesterizovaných pentaborbitalem.
(zvířata usmrcená 10 minut po aplikaci poslední injekce)
| Sloupec A: Peptid uvolňující růstový' hormon | Celková dávka (pg/i.v.) | GH v kontrolním séru (ng/ml) 1 SEM (N=6) | Uvolněný GH, GH v séru (ng/ml) ±SEM (N=6) |
| DAla-DpNal-Ala- | 0,03 | 186134 | 412+84 |
| 2rp-DPhe-iLys-NH2 | 0,10 | 186134 | 630+124 |
| 0,30 | 186134 | 1877+195 | |
| 1,00 | 186134 | 30081417 | |
| DAla-DpNal-Ala- | 0,03 | 93113 | 214+71 |
| homo-Phe-DPhe- | 0,10 | 93+13 | 214+58 |
| Lys-NH2 | 0,30 | 93113 | 406+121 |
| 1,00 | 93113 | 1189±120 | |
| DAla-D3Nal-Ala- | 0,03 | 93113 | 444+60 |
| Trp-Dphe-Ala- | 0,10 | 93113 | 517+109 |
| 1,3-diaminopropan | 0,30 | 93±13 | 2341±479 |
| 1,00 | 93+13 | 24681276 | |
| DAla-DpNal-Ala- | 0,03 | 93113 | 362164 |
| Trp-DPhe-Ly s-NH2 | 0,10 | 93113 | 800+192 |
| 0,30 | 93113 | 26741486 | |
| 1,00 | 93113 | 36581610 | |
| DAla-DpNal-Ala- | 0,03 | 85116 | 395191 |
| Trp-DPhe-Ala- | 0,10 | 85116 | 9051113 |
| 1,6-hexyldiamin | 0,10 | 85116 | 7351166 |
| 1,00 | 85116 | 27081310 | |
| IMA-DpNal-Ala- | 0,03 | 85116 | 5661157 |
| Trp-DPhe-Ala- | 0,10 | 85±16 | 6451167 |
| 1,3-diaminopropan | 0,10 | 85116 | 14281271 |
| 1,00 | 85116 | 29721365 | |
| DAla-DpNal-Ala- | 0,03 | 125112 | 252129 |
| T rp-DPhe-Arg-NH2 | 0,10 | 125112 | 645190 |
| 0,30 | 125112 | 11801318 | |
| 1,00 | 125+12 | 21971285 | |
| Arg-DAla-DpNal- | 0,10 | 125+12 | 155143 |
| Ala-Trp-DPhe- | 0,30 | 125+12 | 247170 |
| Arg-NH2 | 1,00 | 125+12 | 276116 |
| IMA-DpNal-Ala- | 0,03 | 125112 | 332159 |
| Trp-DPhe-Ala- | 0,10 | 125+12 | 6091165 |
-29CZ 293281 B6
Tabulka 6 - pokračování
| Sloupec A: Peptid uvolňující růstový hormon | Celková dávka (pg/i.v.) | GH v kontrolním séru (ng/ml) ± SEM (N=6) | Uvolněný GH, GH v séru (ng/ml) ±SEM (N=6) |
| 1,6-hexyldiamin | 0,30 | 125+12 | 1139±232 |
| 1,00 | 125+12 | 1996+372 | |
| DAla-DpNal-Ala- | 0,30 | 160+33 | 187+44 |
| Trp-Lys-NH2 | 1,00 | 160+33 | 257+18 |
| 3,00 | 160+33 | 198+31 | |
| 10,00 | 160+33 | 193+33 | |
| 30,00 | 160±33 | 236+23 | |
| DAla-DpNal-Ala- | 0,30 | 160+33 | 115+22 |
| Trp-NH? | 1,00 | 160±33 | 107+23 |
| 3,00 | 160+33 | 101+13 | |
| 10,00 | 160+33 | 199+40 | |
| 30,00 | 160+33 | 232+69 | |
| DAla-DpNal-Ala- | 0,03 | 160+33 | 517+89 |
| Trp-DPhe-Ala- | 0,10 | 160+33 | 1164+255 |
| NH(CH2)5-NH2 | 0,30 | 160+33 | 2023+242 |
| 1,00 | 160+33 | 3441+435 | |
| DAla-DpNal-Ala- | 0,30 | 157+40 | 113+14 |
| Trp-Pro-Lys-NH2 | 1,00 | 157+40 | 136+40 |
| 3,00 | 157+40 | 195+35 | |
| 10,00 | 157+40 | 226+42 | |
| DAla-DpNal-Ala- | 0,30 | 157+40 | 234+36 |
| T rp-DPro-Lys-NH2 | 1,00 | 157+40 | 353+48 |
| 3,00 | 157+40 | 576+77 | |
| 10,00 | 157+40 | 1624+241 | |
| DAla-DpNal-Ala- | 0,30 | 157+40 | 202+27 |
| T rp-DLeu-Lys-NH2 | 1,00 | 157+40 | 165+12 |
| 3,00 | 157+40 | 307+51 | |
| 10,00 | 157+40 | 1591+568 | |
| Ava-DpNal-Ala- | 0,03 | 157+40 | 768+191 |
| T rp-DPhe-Lys-NH2 | 0,10 | 157+40 | 1277+61 |
| 0,30 | 157+40 | 1733+252 | |
| 1,00 | 157+40 | 2418+162 | |
| α, γ ABU-DpNsal- | 0,03 | 108±20 | 621+85 |
| Ala-Trp-DPhe- | 0,10 | 108+20 | 1230+317 |
| Lys-NH2 | 0,30 | 108+20 | 2385+182 |
| 1,00 | 108+20 | 3011+380 | |
| DAla-DpNal-Ala- | 0,03 | 108+20 | 246+22 |
| Trp-DPhe-His-NH2 | 0,10 | 108+20 | 199+34 |
-30CZ 293281 B6
Tabulka 6 - pokračování
| Sloupec A: Peptid uvolňující růstový hormon | Celková dávka (pg/i.v.) | GH v kontrolním séru (ng/ml) ± SEM (N=6) | Uvolněný GH, GH v séru (ng/ml) ±SEM (N=6) |
| 0,30 | 108+20 | 370+67 | |
| 1,00 | 108+20 | 1419+230 | |
| DAla-DpNal-Ala- | 0,03 | 108+20 | 366+81 |
| Phe-DPhe-Lys-NH2 | 0,10 | 108+20 | 1011+175 |
| 0,30 | 108+20 | 2361+233 | |
| 1,00 | 108+20 | 3057+472 | |
| DAla-DpNal-Ala- | 0,10 | 108+20 | 151+35 |
| Trp-NH-Chx-NH2 | 0,30 | 108+20 | 251+43 |
| 1,00 | 108+20 | 227+55 | |
| 3,00 | 108+20 | 349+72 | |
| DAla-D3Nal-Ala- | 0,03 | 200+33 | 515+92 |
| Trp-DPhe-Om-NH2 | 0,10 | 200+33 | 787+71 |
| 0,30 | 200+33 | 1288+365 | |
| 1,00 | 200+33 | 1888+615 | |
| DAla-DpNal-Ala- | 0,03 | 200+33 | 287+48 |
| Trp-DHis-Lys-NH2 | 0,10 | 200+33 | 131+37 |
| 0,30 | 200+33 | 337+78 | |
| 1,00 | 200+33 | 457+124 |
Z výsledků uvedených v tabulkách 5 a 6 je zřejmé, že sloučeniny záležící do rozsahu uvedeného vynálezu promotují uvolňování a zvýšení hladiny růstového hormonu v krvi ve větší míře než sloučeniny, které nespadají do rozsahu sloučenin výše uvedeného obecného vzorce.
ío Příklad 5
Uvolňování růstového hormonu in vivo u lidí.
Podle tohoto provedení byli testováni normální jedinci lidí, mužského původu a o průměrném 15 věku asi 25 let, přičemž jim byl podáván perorálně peptid:
Ala-His-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 (GHRP-1) nebo peptid:
DAla-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 (GHRP-2).
K testování bylo použito 40 subjektů, kterým bylo podáno 300 pg/l kg GHRP-1 ve 20 mililitrech vody, přičemž potom následovalo podání pouze vody (100 mililitrů), 39 subjektů, kterým 25 bylo podáno 600 pg/l kg GHRP-1 ve 20 mililitrech vody, přičemž potom následovalo podání
100 mililitrů vody, a 11 subjektů, kterým bylo podáno 100 pg/kg GHRP-2 ve 20 mililitrů vody. Krev byly odebírána periodicky v intervalech, které jsou uvedeny na bor. 1 a tyto vzorky byly analyzovány metodou radioimunologické analýzy na obsah růstového hormonu, přičemž bylo
-31 CZ 293281 B6 použito postupu uvedeného v příkladu 2. Získané výsledky jsou graficky znázorněny na obr. 1. Při perorálním podání 100 pg/kg GHRP-2 bylo dosaženo vyšších hladin růstového hormonu v krevním séru než při perorálním podání 300 pg/kg GHRP-1.
Příklad 6
Uvolňování růstového hormonu in vivo u krys.
io Při provádění tohoto testu bylo obecně postupováno stejným způsobem jako je uvedeno v příkladu 2 s tím rozdílem, že peptidy byly podány injekčně subkutánně místo intravenózního podání, jak je uvedeno v tomto příkladu 2, a krysy byly usmrceny po +15 minutách místo po +10 minutách. Použité podávané sloučeniny, aplikované dávky a získané výsledky jsou uvedeny v následující tabulce č. 7.
Tabulka 7
| Sloupec A: Peptid uvolňující růstový hormon | Celková dávka (pg/i.v.) | GH v kontrolním séru (ng/ml) ± SEM (N=6) | Uvolněný GH, GH v séru (ng/ml) +SEM (N=6) |
| IMA-DpNal-Ala- | 0,03 | 147+21 | 181+36 |
| Phe-DPhe-Lys-NH2 | 0,10 | 147+21 | 399+40 |
| 0,30 | 147+21 | 808+187 | |
| 1,00 | 147+21 | 2394+475 | |
| α γ ABu-DPNal- | 0,03 | 147+21 | 192+29 |
| Ala-Phe-DPhe- | 0,10 | 147+21 | 288+62 |
| Lys-NH2 | 0,30 | 147+21 | 461+90 |
| 1,00 | 147+21 | 1441+203 | |
| IMA-DpNal-Ala- | 0,03 | 147+21 | 475+96 |
| Trp-DPhe-AIa- | 0,10 | 147+21 | 916+169 |
| 1,5-pentadiamin | 0,30 | 147+21 | 1118+243 |
| 1,00 | 147+21 | 2660+599 | |
| His-DpNal-Ala- | 0,03 | 217+33 | 317+55 |
| Phe-DPhe-Lys-NH2 | 0,10 | 217+33 | 348+65 |
| 0,30 | 217+33 | 1283+258 | |
| 1,00 | 217+33 | 1374+107 | |
| Ala-His-DpNal- | 0,03 | 217+33 | 341+35 |
| Ala-Phe-DPhe- | 0,10 | 217+33 | 516+118 |
| Lys-NH2 | 0,30 | 217+33 | 1060+151 |
| 1,00 | 217+33 | 1467+208 | |
| α γ ABU-DpNal- | 0,03 | 217+33 | 197+31 |
| Ala-Phe-DPhe- | 0,10 | 217+33 | 182+20 |
| Lys-NH2 | 0,30 | 217+33 | 524+116 |
| 1,00 | 217+33 | 1127+110 | |
| DAla-DpNal-Ala- | 0,03 | 217+33 | 287+62 |
| Phe-DPhe- | 0,10 | 217+33 | 184+162 |
-32CZ 293281 B6
Tabulka 7 - pokračování
| Sloupec A: Peptid uvolňující růstový hormon | Celková dávka (pg/i.v.) | GH v kontrolním séru (ng/ml) 1 SEM (N=6) | Uvolněný GH, GH v séru (ng/ml) ±SEM (N=6) |
| Lys-NH? | 0,30 | 217+33 | 1982±345 |
| 1,00 | 217+33 | 2887+275 | |
| DAla-DPhe-Ala- | 0,03 | 132±18 | 167+29 |
| Phe-DPhe-Lys-NH? | 0,10 | 132118 | 499+62 |
| 0,30 | 132±18 | 1132±145 | |
| 1,00 | 132118 | 21471268 | |
| DAla-DpNal-Ala- | 0,04 | 132+18 | 356+77 |
| Phe-DPhe-Lys- NH? | 0,10 | 132+18 | 795+132 |
| 0,30 | 132+18 | 15641224 | |
| 1,00 | 132±18 | 22721406 |
Příklad 7
Kondenzační reakce peptidových fragmentů pro přípravu peptidu.
Obecný postup:
Teplotu tání je možno stanovit na přístroji Thomas Hoover pro stanovení teploty tání kapilární metodou. Infračervená spektra (IR) je možno zaznamenat na spektrofotometru Perkin-Elmer Model 137 nebo Nicolet Model 5DX, přičemž hodnoty se uvádí v počtu vln (cm'1). Hmotové spektrum (MS) se stanoví na přístroji VG Analytical Ltd. Model ZAB-1F Mass Spektrometer metodu El (elektronového nárazu), FD (desorpce pole) nebo FAB (bombardování rychlými atomy). GCMS je možno změřit na přístroji Finnigan 4024 GCMS vybaveném 30-ti metrovou DB5 kapilární kolonou (J & W Scientific) za použití helia jako nosného plynu. Optickou rotaci je možno změřit na polarimeru Autopol III, vyráběném firmou Rudolph Research.
’H NMR spektra je možno naměřit na přístroji JEOL GH-^400NMR pracujícím při 400 NHz nebo na přístroji JEOL GX-270 NMR pracujícím při 270 MHz. Tyto přístroje jsou schopny pracovat s běžným digitálním rozlišením menším než 0,7 Hz. Chemický posun je vyjádřen v dílech na milion dílů vzhledem ke vnitřnímu standardu,kterým je 3-(trinethylsilyl)tetradeuteropropionát sodný (TSP).
Vysokoúčinná kapalinová chromatografie (HPLC) byla provedena za použití systému Hitachi, sestávajícího z gradientového regulátoru L-500 a čerpadla 655A, připojeného na semipreparativní kolonu 218TP1010. Jako elučního rozpouštědla je možno použít kombinaci vody obsahující 0,2 % kyseliny trifluoroctové a methanolu.
V obvyklém provedení jsou požadované sloučeniny eluovány průtokovou rychlostí šest mililitrů za minutu se stoupajícím gradientem organické složky rychlostí přibližně 1-2% za minutu. Sloučeniny se potom stanoví při vhodných vlnových délkách za použití UV detektoru LKB 2140 s diodovým uspořádáním. Integraci je potom možno provést pomocí programu Nelson Analytical Software (verze 3.6).
Reakce byly provedeny pod inertní atmosférou dusíku nebo argonu, pokud nebude uvedeno jinak. Bezvodý tetrahydrofuran (THF, jakost U.V.) a dimethylformamid (DMF) byly podány firmou Burdick and Jackson, přičemž tyto látky byly přímo odebírány z nádoby.
-33CZ 293281 B6
A. Postup přípravy tripeptidového fragmentu
- 2HN-Trp-DPhe-Lys(Boc)-NH2
N“-benzyloxykarbonyl-(NÝ-butoxykarbonyl)lysin-amid, 4.
Podle tohoto provedení byl k roztoku obsahujícímu karbonyldiimidazol (CDI, 2, 88, 24 gramů, 0,544 mol) a suchý tatrahydrofuran (THF, 1500 mililitrů) o teplotě 10°C pomalu přidáván N“-benzyloxykarbonyl-( N^-t-butoxykarbonyl)lysin (1, v množství 180 gramů, 0,474 mol). Během tohoto přídavku bylo pozorováno uvolňování plynu. Zatímco se tvoři meziprodukt 3, kterým je bL-benzyloxykarbonyl-(N;-t-butoxykarbonyl)lysinimidazol, byl připraven nasycený roztok amoniaku a THF (2000 mililitrů), což bylo prováděno tak, že plynný amoniak byl veden tetrahydrofuranem při teplotě v rozmezí od 5 do 10 °C. Poté, co bylo odhadnuto, že vznik meziproduktu 3 proběhl úplně (to znamená, že vývoj plynu ustal, což trvalo přibližně 2 hodiny), byla jedna polovina THF-roztoku obsahující meziprodukt 3 přidána k roztoku amoniaku. Zbytek roztoku obsahující meziprodukt 3 byl přidán po 30 minutách. Během tohoto přídavku byl udržován kontinuální proud plynného amoniaku, přičemž tento proud byl udržován po dobu dalších 45 minut po tomto přídavku. Během přidávání těchto dvou podílů roztoku obsahujícího meziprodukt 3 se vytvořila bílá sraženina. Takto získaná reakční směs byla potom ponechána ohřát na teplotu místnosti a potom byla promíchávána po dobu 15 hodin. Použité rozpouštědlo bylo odstraněno od suspenze aplikací vakua. Získaný zbytek byl suspendován ve vodě, přičemž výsledná pevná látka byla oddělena vakuovou filtrací.
NM-Butoxykarbonyl-lysin-amid, 5.
Podle tohoto provedení byl roztok obsahující lysinamid 4 (v množství 181,48 gramu, což je 0,479 mol) v methanolu (MeOH, v množství 1000 mililitrů) přidáván ke katalytické suspenzi obsahující 5% Pd/C (v množství 5 gramů) v methanolu (250 mililitrů) pod atmosférou argonu. Touto reakční směsí byl potom probubláván vodík (po dobu asi 15 minut), přičemž tato reakční směs byla potom promíchávána pod atmosférou vodíku tak dlouho, dokud nebylo HPLC-metodou zjištěno, že reakce proběhla úplně (36 hodin). Vodíková atmosféra byla potom vyměněna argonem. Reakční roztok byl potom přečištěn průchodem přes vrstvu Celitu a rozpouštědlo bylo odstraněno za použití vakua, čímž byla získána pevná látka.
N“-Benzyloxykarbonyl-D-fenylalanyl-(NM-butoxykarbonyl)lysin-amid, 8.
Podle tohoto provedení byl N“-benzyloxykarbonyl-D-fenylalanin (6, v množství 236,39 gramu, což odpovídá 0,423 mol) pomalu přidáván k roztoku CDI (2, v množství 66,03 gramu, což je 0,409 mol) v THF (500 mililitrů) o teplotě 10 °C. Během tohoto přidávání byl pozorován vývoj plynu. Poté co vývoj plynu ustal, byl přidán lysinamid 5 (v množství 110,75 gramu, což odpovídá 0,452 mol) ve formě roztoku v THF (500 mililitrů). Po asi 48 hodinách byla takto získaná směs zfiltrována za účelem odstranění pevných látek. Oddělený filtrát byl zkoncentrován za použití vakua.
Takto získaný zbytek byl potom vložen do ethyletheru kyseliny octové (EtOAc, v množství 500 mililitrů) a tento podíl byl potom promyt v děličce následujícím způsobem:
1. vodný roztok kyseliny chlorovodíkové (IN, 3 x 500 mililitrů), pH promytého podílu 1 bylo asi 8, přičemž následující promývací podíly měly pH 1;
2. voda (500 mililitrů);
3. vodný roztok uhličitanu sodného Na2CO3 (polovičně nasycený roztok, 2 podíly 2 po 500 mililitrech) byl zfiltrován za účelem oddělení vzniklého krystalického pevného podílu (8);
4. voda (3 x 500 mililitrů).
-34CZ 293281 B6
Organická vrstva byla potom usušena za pomoci síranu hořečnatého MgSO4. Po vyčištění bylo rozpouštědlo odstraněno za použití vakua. Získaný zbytek byl potom rekrystalován z horkého
EtOAc, čímž byl získán druhý podíl vzorku 8.
D-Fenylalanyl-(b^-t-butoxykarbonyl)-lysin-amid, 9.
Podole tohoto provedení byl methanolický roztok (v množství 1500 mililitrů) amidu 8 (v množství 120,53 gramu, což je 0,229 mol) přidán ke katalytické suspenzi obsahující 5% Pd/C (50 gramů) v methanolu MeOH (200 mililitrů). Argonová atmosféra byla potom nahrazena vodíkem. Poté, co bylo HPLC analýzou zjištěno, že reakce proběhla úplně (reakce probíhala po dobu asi 4 hodin)n, byla vodíková atmosféře vyměněna argonem. Získaný reakční roztok byl potom vyčištěn průchodem přes vrstvu Celitu, přičemž filtrát byl potom zkoncentrován za použití vakua, čímž byl získán zbytek. Tento dipeptidový produkt byl potom použit přímo pro přípravu tripeptidu 12.
Na-Benzyloxykarbonyl-triptofyl-D-fenylalanyl-(NM-butoxykarbonyl)lysin-amid, 12.
Podle tohoto provedení byl roztok obsahující N“-benzyloxykarbonyl-triptofan (10, v množství 67,60 tramu, což je 0,200 mol), THF (v množství 500 mililitrů) a CDI (2, v množství 33,05 gramu, což je 0,104 mol) o teplotě 10 °C promícháván tak dlouho, dokud neustal vývoj plynu. Ktéto reakční směsi byl potom přidán roztok obsahující sloučeninu 9 (v množství 40,8 gramu, což je 0,103 mol) v THF (asi 200 mililitrů). Takto vzniklý roztok byl potom ponechán regulovat po dobu 15 hodin, přičemž se tento roztok ohřál na teplotu místnosti. Tímto způsobem se vytvořila pevná látka, která byla oddělena vakuovou filtrací. Získaný filtrát byl potom zkoncentrován za použití vakua, čímž byl získán zbytek. Takto získaný zbytek a pevný podíl byly potom opět spojeny a vloženy do ethylesteru kyseliny octové EtOAc (v množství 4000 mililitrů) za mírného ohřívání. Po ochlazení tohoto roztoku na teplotu místnosti vznikl pevný podíl. Tento pevný podíl byl potom oddělen vakuovou filtrací. Získaná pevná látka byla potom rekrystalována z horkého methanolu MeOH, čímž byl získán čistý tripeptidový produkt 12.
Ethylacetátový filtrát (z první krystalizace) byl potom promyt v děličce následujícím způsobem:
1. vodný roztok kyseliny chlorovodíkové (IN, 2 x 500 mililitrů),
2. voda (1 x 500 mililitrů),
3. vodný roztok uhličitanu sodného Na2CO3 (polovičně nasycený roztok, 2 x 500 mililitrů),
4. vodný roztok chloridu sodného (1 x 500 mililitrů).
Organická vrstva byla potom usušena pomocí síranu hořečnatého MgSO4 a potom byl tento podíl přečištěn vakuovou filtrací. Rozpouštědlo z tohoto filtrátu bylo potom odstraněno za použití vakua. Takto získaný výsledný zbytek byl potom opět přidán do ethylesteru kyseliny octové, čímž vznikl suchý pevný podíl. Tento pevný materiál byl potom podroben rekrystalování z horkého methanolu MeOH, čímž byl získán druhý výtěžek sloučeniny 12 ve formě bílé pevné látky.
Tryptofyl-D-fenylalanyl-(NM-butoxykarbonyl)lysin-amidin, 13.
Podle tohoto provedení byl methanolický roztok (v množství 1500 mililitrů) tripeptidové sloučeniny 12 (v množství 64,59 gramu, což je 0,091 mol) přidán ke katalytické suspenzi obsahující 50 Pd/C (5 gramů) a methanol MeOH (250 mililitrů) pod atmosférou argonu. Potom byl přidán další podíl methanolu MeOH (2250 mililitrů). Argonová atmosféra byla potom nahražena vodíkem a reakční směs byla ponechána zreagovat (reakce probíhala po dobu asi 24 hodin). Po dokončení reakce byla vodíková atmosféra nahražena argonem. Takto získaný roztok byl potom vyčištěn přes vrstvu Celitu a získaný filtrát byl zkoncentrován za použití vakua, čímž byl získán tripeptid 13 ve formě bílé pevné látky.
-35CZ 293281 B6
B. Příprava tripeptidového fragmentu -K-Ala-D^Nal-Ala-OMe.
Methylester N“-benzyloxykarbonyl-D-alanyl-D-beta-naftylaninu, 25.
Podle tohoto provedení byl roztok obsahující ethylester kyseliny octové EtOAc (v množství 400 mililitrů) v hydrochlorid methylesteru D-beta-naftalalaninu (22, v množství 0,62 mol) promyt nasyceným roztokem uhličitanu sodného (400 mililitrů) a 0,8 N vodným roztokem hydroxidu sodného (asi 500 mililitrů). Získaná vodná fáze byla odstraněna (pH 8,5) a organická ío fáze byla postupně promyta polovičně nasyceným vodným roztokem uhličitanu sodného Na2CO3 (150 mililitrů) a potom vodou (50 mililitrů). Volná bazická forma sloučeniny 22 byla potom oddělena při zkoncentrovávání ethylacetátové vrstvy ve vakuu.
Dicyklohexylkarbodiimid (DCC, v množství asi 95 gramů, což je 0,46 mol) byl přidán k roztoku 15 obsahujícímu N“benzyloxykarbonyl-D-alanin (19, v množství 143,5 gramu, což je 0,50 mol),
N-hydroxysukcinimid (HONSu, 23, v množství 0,62 mol) a čerstvě připravenou volnou bazickou formu sloučeniny 22 (v množství asi 0.52 mol) v DMF (asi 3 litry) o teplotě -5 °C (roztok chlazen na lázni ledu a ethanolu). Takto získaný výsledný reakční roztok byl potom ponechán promíchávat po dobu 24 hodin, přičemž se tento roztok ohřál na teplotu místnosti. Ke zjištění, 20 zda reakce proběhla úplně, je možno použít HPLC-analýzu (vysokoúčinná kapalinová chromatografíe) reakčního produktu. V případě, že reakce neproběhla úplně, je možno reakční roztok ochladit na asi -5 °C a k reakční směsi se přidá další podíl dicyklohexylkarbodiimidu (asi 0,17 mol). Tato reakční směs byla potom opět ponechána promíchávat po dobu dalších 24 hodin při současném ohřátí na teplotu místnosti. Takto získaná směs byla potom zfiltrována 25 za účelem odstranění dicyklohexylmočoviny (DCU). K takto získanému filtrátu byla potom přidán voda (1 litr) a tento roztok byl potom zkoncentrován ve vakuu. Zbytek byl potom zpracováván vodným roztokem IN kyseliny chlorvodíkové (asi 1 litr, dokud hodnota pH vodné fáze nedosáhla 1). Vodná fáze byla potom extrahována dvěma podíly ethylesteru kyseliny octové (každý podíl o objemu 1 litr). Takto získané ethylacetátové vrstvy byly potom odděleny. Hodnota 30 pH vodná fáze byla potom upravena přídavkem chladného 2N roztoku hydroxidu sodného (500 mililitrů) a peletami hydroxidu sodného. Během provádění neutralizace byl roztok udržován v chladném stavu přídavkem ethylesteru kyseliny octové (1 litr). Po úpravě hodnoty pH této vodné fáze se přibližně 7 nastane obvykle velice intenzivní vysrážení bílé pevné látky nebo oleje. Získaná sraženina byla oddělena vakuovou filtrací nebo dekantováním a potom 35 promyta polovičně nasyceným roztokem uhličitanu sodného (2 x 1500 mililitrů), vodou (6 x 1500 mililitrů) a ethylesterem kyseliny octové (3 x 1500 mililitrů). Získaný podíl byl potom usušen za vysokého vakua a konstantní hmotnost. Tento produkt byl potom hydrolyzován přímo bez dalšího přečišťování.
N“benzyloxykarbonyl-D-alanyl-|3-naftyl-D-alanin, 26.
Podle tohoto provedení byl vodný roztok hydroxidu sodného (v množství 192 mililitrů, 0,08 g/ml roztoku, 0,38 mol), přidán k roztoku obsahujícímu dipeptid 25 (asi 0,38 mol), vodu (360 mililitrů) a methanolů MeOH (asi 6 litrů). Takto získaný roztok byl potom promícháván při 45 teplotě místnosti tak dlouho, dokud hydrolýza neproběhla úplně (asi 24 hodin). Spotřebování výchozího peptidu bylo potvrzeno HPLC analýzou. Potom byl tento roztok zkoncentrován za použití vakua, čímž vznikl zbytek, který byl rozpuštěn ve vodě (asi 1 litr). Vodná vrstva byla potom extrahována ethylesterem kyseliny octové EtOAc (2 x 500 mililitrů) v děličce. Ethylacetátová vrstva byla potom oddělena. Získaná vodná fáze byla potom upravena na pH přibližně 50 5 přídavkem koncentrované kyseliny chlorovodíkové, přičemž v tomto okamžiku nastalo vysrážení bílé pevné látky nebo oleje. Produkt byl oddělen a usušen za použití vakua.
Methylester N“-benzyloxykarbonyl-D-alanyl-D-beta-naftylalanylalan inu, 20.
-36CZ 293281 B6
Podle tohoto provedení byl shora uvedený dipeptid N“-benzyloxykarbonyl-D-alanyl-D-betanaftylalanin (26, v množství 0,253 mol) přidán k roztoku HONSu (23, v množství 0,505 mol) v DMF (800 mililitrů) pod atmosférou argonu. K tomuto roztoku byla potom přidána směs obsahující hydrochlorid methylester alaninu (15, v množství 0,303 mol) a dimethylformamid DMF (200 mililitrů). Takto získaný konečný roztok byl potom ochlazen na teplotu 10 °C, přičemž současně byl přidán dicyklohexylkarbodiimid (24, v množství 0,265 mol) v methylenchloridu (273 mililitrů). Reakční průběh byl monitorován metodou HPLC, přičemž reakční teplota byla udržována na 10 °C až do dokončení reakce. Jestliže po několika dnech (asi 4 dny) neproběhne reakce úplně, přidá se k reakční směsi další podíl sloučeniny 24 (v množství 0,080 mol) a tato reakční směs se potom ponechá promíchávat po dobu dalšího dne, což se provede při teplotě 10 °C. Reakce se znovu monitoruje metodou HPLC dokud není zaznamenán úplný průběh reakce (obvykle asi 5 dní). Pevný podíl, který během této reakce vznikl, byl oddělen vakuovou filtrací, získaný filtrát byl potom zkoncentrován za použití vakua, čímž vznikl zbytek. Tento zbytek byl potom přidán do ethylesteru kyseliny octové a extrahován polovičně nasyceným roztokem uhličitanu sodného Na2CO3 (2 x 500 mililitrů). Potom byla ethylacetátová fáze usušena síranem hořečnatým MgSO4. Získaný roztok byl přečištěn a zkoncentrován za použití vakua za vzniku zbytku.
Podle tohoto provedení byl vodný roztok 2N hydroxidu sodného (v množství 7,5 mililitru, což je 15 milimol) přidán k roztoku methanolu (v množství 500 mililitrů) a vody (200 mililitrů) obsahujícímu N“-benzyloxykarbonyl-DAla-D1JNal-Ala-OMe (v množství 13,7 mmol). Po proběhnutí reakce byla získaná reakční směs ponechána promíchávat po dobu přes noc při teplotě místnosti, přičemž potom bylo HPLC-analýzou (vysokoúčinná kapalinová chromatografie) zjištěna, že v této reakční směsi zbývá ještě určitý podíl výchozí látky. Po téměř úplném dokončení reakce (což trvalo asi po dub přes noc) byl získaný výsledný roztok zkoncentrován ve vakuu na objem přibližně 200 mililitrů. K tomuto roztoku byla přidána voda (100 mililitrů) a hodnota pH byla upravena na přibližně 12 přídavkem 2N hydroxidu sodného (1 mililitr). Tento výsledný roztok byl extrahován ethylesterem kyseliny octové (2 x 500 mililitrů). Vzniklá ethylacetátová vrstva byla potom odstraněna. Hodnota pH vodné fáze byla potom upravena na přibližně 5 přídavkem vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové, což obvykle způsobí vysrážení produktu. V této fázi je důležité minimalizovat objem vodné fáze za účelem urychlení vysrážení produktu. Vodná fáze byla potom dekantováním oddělena od získaného produktu a tento produkt byl opláchnut vodou (2 x 50 mililitrů). Oddělený produkt byl potom usušen na konstantní hmotnost ve vakuu.
C. Kondenzační reakce peptidových fragmentů za účelem přípravy hexapeptidu.
Podle tohoto provedení byla dva peptidy DAla-DpNal-Ala-OH (33, v množství 2,6 mmol) a Trp-D-Phe-Lys(BOC)-NH2 (13, v množství 2,8 mol) rozpuštěny v bezvodém DMF, přičemž získaný výsledný roztok byl zkoncentrován za použití vakua. Toto předběžné zkoncentrování bylo provedeno z toho důvodu, aby bylo odstraněno jakékoliv stopové množství methanolu, které by mohlo být přítomno. Takto získaná peptidová směs byla potom opět rozpuštěna v DMF a dále byl přidán N-hydroxysukcinimid (v množství 5,1 mmol). Takto získaný výsledný roztok byl potom ochlazen na teplotu -2 °C a potom byl přidán dicyklohexylkarbodiimid (v množství 3,4 mmol) ve formě roztoku v methylenchloridu (3,5 mililitru). Takto získaná reakční směs byla potom ponechána promíchávat při teplotě roztoku -2 °C po dobu tří dní. K analyzování roztoku, zda proběhla reakce úplně, bylo použito metody HPLC (vysoko)činná kapalinová chromatografie). Po tomto uvedeném časovém intervalu a v případě, že bylo zaznamenáno, že reakce neproběhla úplně, byl přidán další podíl dicyklohexylkarbodiimidu a takto získaná reakční směs byla ponechána promíchávat po dobu dalšího jednoho dne při teplotě -2 °C. V případě, že v následujícím dni (to znamená celkově po čtyřech dnech) bylo metodou HPLC-analýzy (vysokoúčinná kapalinová chromatografie) znovu zjištěno, že reakce neproběhla úplně, bylo ochlazením reakční směsi dosaženo ukončení reakce. Teplota reakčního roztoku byla potom ponechána mírně vzrůst na teplotu místnosti (25 °C), což bylo prováděno po dobu několika hodin (asi 8 hodin). Takto získaná reakční směs byla potom ponechána promíchávat po dobu přes noc při teplotě místnosti. Tento postup byl potom opakován dokud reakce neproběhla úplně.
-37CZ 293281 B6
K výsledné reakční směsi byla potom přidána voda (50 mililitrů) a výsledná reakční směs byla potom ponechána promíchávat po dobu dalšího jednoho dne. Potom byl reakční roztok zfiltrován za účelem odstranění dicyklohexylmočoviny a získaný filtrát byl zkoncentrován ve vakuu na viskózní olej. K takto získanému výslednému zbytku byl potom přidán ethylester kyselin) octové a polovičně nasycený vodný roztok uhličitanu sodného (200 mililitrů). Tímto způsobem vznikla dvoufázová reakční směs, která byla intenzivně promíchávána na rotačním odpařováku po dobu přibližně jedné hodiny. Veškerý podíl pevných látek byl potom oddělen filtrací na fritě za účelem získání produktu. Organická fáze byla promyta vodou a potom byla sušena na konstantní hmotnost za použití vakua, čímž byl získán další podíl produktu.
Příprava DAla-DpNal-Ala-Trp-D-Phe-Lys-NH2, 35.
Podle tohoto provedení byl hexapeptid benzyloxykarbonyl-DAla-DpNal-Ala-Trp-D-Phe-Lys(BOC)-NH2 (34, v množství 1,02 mmol) přidán při teplotě místnosti k roztoku obsahujícímu trifluoroctovou kyselinu (v množství 30 mililitrů), dimethylsulfíd (v množství 14 mililitrů), l,2ethandithiol (7 mililitrů) a anisol (2,2 mililitru) a methylenchloridu (15 mililitrů). Takto získaná homogenní reakční směs byla potom ponechána promíchávat pod obu 15 minut. Po tomto časovém intervalu byl přidán bezvodý éter (v množství 450 mililitrů) za účelem dosažení vysrážení surového biologicky aktivního peptidového produktu 35. Tento produkt byl potom izolován filtrací na fritě nebo dekantován. Takto získaný výsledný produkt byl potom rozpuštěn ve vodě a potom byl lyofílizován. Takto získaný lyofílizovaný produkt byl potom dále přečištěn chromatografickou metodou za středního tlaku ve skleněné koloně 26 x 460 mililitrů, naplněné materiálem Lichroprep RP-18 (C-18, 25-40 nm, nepravidelná hodnota mesh, neboli rozdělení velikosti ztn). Po přivedení peptidu ve formě roztoku ve vodě byla tato kolona eluována průtokovou rychlostí 9 mililitrů za minutu při malém gradientu v rozmezí 0 až 25 % methanolu po dobu 5 až 20 hodin a potom při gradientu 25 až 55 % methanolu po dobu 448 hodin. Koncentrace methanolu při použití tohoto gradientu vzrůstala rychlostí 2 % za hodinu. Během provádění tohoto eluování byl zbytek rozpouštědlové směsi upraven vodou obsahující 0,2 % kyseliny trifiuoroctové. Produkt získaný tímto postupem (35) byl potom analyzován metodou HPLC (vysokoúčinná kapalinová chromatografíe), přičemž byl oddělen zkoncentrováním vhodných podílů získaných eluováním.
Uvedený vynález byl detailně popsán pomocí výhodných provedení náležících do roztoku obecného řešení podle vynálezu. Je ovšem třeba poznamenat, že odborníkům pracujícím v daném oboru budou na základě výše uvedeného popisu zřejmá i další provedení, alternativy a modifikace tohoto postupu, které všechny náleží do roztoku uvedeného vynálezu.
Claims (27)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Peptid obecného vzorce:A,—A2—C]—C2—C3—A5 ve kterém:A] znamená Gly, DAla, β-Ala, His, Ser, Met, Pro, Sar, Ava, Aib, N-nižší alkyl-aminokarboxylovou kyselinu, Ν,Ν-bis-nižší alkyl-aminokarboxylovou kyselinu, azolkarboxylovou kyselinu nebo nižší alkyl-aminokarboxylovou kyselinu, kde nižší alkylová skupina obsahuje 2 až 10 uhlíkových atomů v přímém řetězci;A2 představuje DTrp, DpNal, D-4-Y-Phe- nebo 5-Y-D-Trp, kde-38CZ 293281 B6Y představuje OH, Cl, Br, F nebo H;A5 znamená A3-A4-A5-, A3-A5·, A4-A5, nebo A5,;přičemž (a) A3 představuje Ala, Gly, DAla, Pro nebo desAla;(b) A4 představuje Ala, Gly DAla. Pro, lineární nižší alkylaminokarboxylovou skupinu nebo dasAla; a (c) As· přestavuje Lys (e-Ri,R2)-Z, Omíb-R^R^Z, NH(CH2)XN(R3,R4); přičemž A5- může rovněž znamenat Lys-Z, Orn-Z nebo Arg-Z v případě, že Ai není His;Ri představuje nižší alkylovou skupinu s lineárním řetězcem nebo atom vodíku;R2 znamená nižší alkylovou skupinu s lineárním řetězcem nebo atom vodíku; přičemž v případě, že Ri představuje atom vodíku, R2 není atom vodíku; a podobně v případě, že R2 je atom vodíku, potom Ri není atom vodíku;R3 přestavuje nižší alkylovou skupinu s lineárním řetězcem nebo atom vodíku;R» představuje nižší alkylovou skupinu s lineárním řetězcem nebo atom vodíku;Z znamená NH (nižší alky lová skupina s lineárním řetězcem), N(nižší alkylová skupina s lineárním řetězcem)2, O-(nižší alkylová skupina s lineárním řetězcem), NH2 nebo OH, přičemž uvedená nižší alkylová skupina s lineárním řetězcem je stejně definována jako nižší alkylová skupina;x je 2 až 15;Ci představuje Ala;C2 představuje Trp, Phe nebo ChxAla;C3 představuje DPhe, DPal nebo DChxAla, a organické nebo anorganické adiční soli odvozené od těchto sloučenin.
- 2. Peptid podle nároku 1, ve kterém A] znamená Gly, DAla nebo His.
- 3. Peptid podle nároku 1, ve kterém A] znamená DAla.
- 4. Peptid podle nároku 1, ve kterém A2 znamená DTrp nebo DpNal.
- 5. Peptid podle nároku 1, ve kterém A2 znamená DPnal.
- 6. Peptid podle nároku 1, ve kterém A5 znamená A3-A4-A5'.
- 7. Peptid podle nároku 1, ve kterém A5 znamená A3-A5'.
- 8. Peptid podle nároku 1, ve kterém A5 znamená A4-A5·.
- 9. Peptid podle nároků 1,2, 3,4 nebo 5, ve kterém A5 znamená A5-.-39CZ 293281 B6
- 10. Peptid podle nároků 1, 2, 3, 4 nebo 5, ve kterém C2 znamená Trp nebo Phe.
- 11. Peptid podle nároků 1, 2, 3, 4, 5, 9 nebo 10, ve kterém C3 znamená DPhe.
- 12. Peptid podle nároku 10, ve kterém C2 znamená Trp.
- 13. Peptid podle nároku 12, ve kterém C3 je DPhe.
- 14. Peptid podle nároku 1, který má vzorec:DAla-DpNal-Ala-Trp-DPhe-LysNH2DAla-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys(s-iPr)NH2 DAla-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys(s-iPr)NH2D Ala-DT rp-Ala-T rp-DPhe-LysNH2DAla-DPNal-Ala-Trp-DPhe-NHÍCHzjjNHz NH2(CH2)5CO-DpNal-Ala-Trp-DPhe-NH(CH2)5NH2NaIMA-DpNal-Ala-Phe-DPhe-LysNH2 a,yABU-DpNal-Ala-Phe-DPhe-LysNH2DAla-DPhe-Ala-Phe-DPhe-LysNH2 pAla-His-DpNal-Ala-Ph^DPhe-LysNH2 NaIMA-DpNal-Ala-Phe-DPhe-NH-Chx-NH2 a,yABU-DpNal-Ala-Phe-DPhe-NH-CHx-NH2DAla-D^al-Ala-Phe-DPhe-LysNH, DAla-D^al-Ala-Trp-DPhe-Arg-NFLDAla-DpNal-Ala-Phe-Phe-Arg-NH2DAla-DpNal-Ala-ChxAla-DPhe-Lys-NH2DAla-DpNal-Ala-Phe-DChxAla-Lys-NH2 nebo DAIa-DpNal-Ala-ChxAla-DChxAla-LysNH2 a organické nebo organické adiční soli odvozené od těchto sloučenin.
- 15. Peptid podle nároků 1,9, 10, 11, 12 nebo 14 k promotování uvolňování a zvyšování hladiny růstového hormonu u savců, včetně lidí.
- 16. Farmaceutický prostředek k promotování uvolňování a zvyšování hladiny růstového hormonu u zvířat, vyznačující se tím, že obsahuje účinné množství přinejmenším jedné peptidové sloučeniny podle nároků 1, 9, 10, 11, 12 nebo 14 a farmaceuticky přijatelnou nosičovou látku nebo ředidlo.
- 17. Farmaceutický prostředek podle nároku 16, vyznačující se tím, že dále obsahuje druhou sloučeninu, která působí jako agonista receptorů hormonu pro uvolňování růstového hormonu nebo inhibuje účinek somatostatinu.
- 18. Peptid podle nároku 1 pro léčení nanismu hypotalamicko-hypofyzámího původu, osteoporózy nebo spálenin.
- 19. Farmaceutický prostředek k promotování léčení zranění, promotování generace po chirurgickém zákroku nebo regenerace po akutní/chronické zeslabující chorobě, vyznačující se tím, že obsahuje terapeuticky účinné množství peptidů podle nároků 1,9, 10, 11, 12 nebo 14 a farmaceuticky přijatelnou nosičovou látku nebo ředidlo.
- 20. Peptid podle nároku 1 k prevenci nebo snížení kachexie u pacientů trpících rakovinou.-40CZ 293281 B6
- 21. Peptid podle nároku 1 k promotování anabolismu a/nebo prevence katabolismu u lidí.
- 22. Peptid podle nároku 1 ke zlepšování svaloviny u zvířat a/nebo snižování množství tělesného tuku.
- 23. Peptid podle nároku 1 ke zlepšování struktury lipidů v séru u lidí snižováním množství cholesterolu v séru a lipoproteinů o nízké hustotě a zvyšování množství lipoproteinů o vysoké hustotě v séru.
- 24. Peptid podle nároku 9. kterým je:DAla-DpNal-Ala-T rp-DPhe-LysNH2DAla-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys(8-iPr)NH2DAla-DT rp-Ala-T rp-DPhe-Lys(s-iPr)NH2DAla-DTrp-ala-Trp-DPhe-LysNH2DAla-DpNal-Ala-Trp-DPhe-NH(CH2)5NH2 NH2(CH2)5CO-DpNal-Ala-Trp-DPhe-NH(CH2)5NH2 a organické nebo anorganické adiční soli odvozené od těchto sloučenin.
- 25. Způsob přípravy sloučenin podle nároku 1, vyznačující se tím, že se spojí odpovídající výše uvedené aminokyseliny nebo deriváty aminokyselin za vzniku požadované sloučeniny.
- 26. Způsob přípravy sloučenin podle nároku 25, vy z n ač u j í c í se t í m , že se provádí kondenzační reakcí odpovídajících peptidových fragmentů za vzniku požadované sloučeniny.
- 27. Způsob přípravy sloučenin podle nároků 25, vyznačující se tím, že zahrnuje syntézu uvedených aminokyselin nebo derivátů těchto aminokyselin v pevné fázi.3 výkresy
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US07/748,350 US5663146A (en) | 1991-08-22 | 1991-08-22 | Polypeptide analogues having growth hormone releasing activity |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ40094A3 CZ40094A3 (en) | 1994-11-16 |
| CZ293281B6 true CZ293281B6 (cs) | 2004-03-17 |
Family
ID=25009088
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ1994400A CZ293281B6 (cs) | 1991-08-22 | 1992-08-20 | Peptidy účinné při uvolňování růstového hormonu, způsob jejich přípravy, farmaceutické prostředky obsahující tyto látky a použití |
Country Status (26)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US5663146A (cs) |
| EP (1) | EP0605484B1 (cs) |
| JP (1) | JP3179489B2 (cs) |
| KR (1) | KR100247212B1 (cs) |
| CN (1) | CN1035256C (cs) |
| AT (1) | ATE172742T1 (cs) |
| AU (1) | AU666673B2 (cs) |
| BG (1) | BG62655B1 (cs) |
| BR (2) | BR9206398A (cs) |
| CA (1) | CA2116120C (cs) |
| CZ (1) | CZ293281B6 (cs) |
| DE (1) | DE69227462T2 (cs) |
| DK (1) | DK0605484T3 (cs) |
| ES (1) | ES2124263T3 (cs) |
| FI (2) | FI120095B (cs) |
| HU (1) | HU223664B1 (cs) |
| IL (1) | IL102848A (cs) |
| MX (1) | MX9204861A (cs) |
| NO (1) | NO314695B1 (cs) |
| NZ (1) | NZ244034A (cs) |
| PL (1) | PL169562B1 (cs) |
| RO (1) | RO112507B1 (cs) |
| RU (1) | RU2126014C1 (cs) |
| SK (1) | SK282895B6 (cs) |
| WO (1) | WO1993004081A1 (cs) |
| ZA (1) | ZA926337B (cs) |
Families Citing this family (105)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2160786A1 (en) | 1993-05-14 | 1994-11-24 | James C. Marsters, Jr. | Ras farnesyl transferase inhibitors |
| HU221092B1 (en) * | 1993-12-23 | 2002-08-28 | Novo Nordisk As | Compounds with growth hormone releasing properties |
| HU224345B1 (hu) * | 1993-12-23 | 2005-08-29 | Novo Nordisk A/S. | Növekedési hormont felszabadító tulajdonságú peptidek, ezeket hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények és alkalmazásuk |
| US5798337A (en) * | 1994-11-16 | 1998-08-25 | Genentech, Inc. | Low molecular weight peptidomimetic growth hormone secretagogues |
| US20020111461A1 (en) * | 1999-05-21 | 2002-08-15 | Todd C. Somers | Low molecular weight peptidomimetic growth hormone secretagogues |
| BR9608909A (pt) * | 1995-06-22 | 1999-03-02 | Novo Nordisk As | Composto composição farmacêutica processos para estimular a liberação do hormônio do crescimento da patuitária e aumentar a velocidade e extensão do crescimento dos animais para aumentar a produção de leite ou lã de animais ou para para doenças e uso do composto |
| ATE231131T1 (de) * | 1996-04-24 | 2003-02-15 | Novo Nordisk As | Verbindungen mit wachtumshormon freisetzenden eigenschaften |
| EP1005484A1 (en) | 1997-06-20 | 2000-06-07 | Novo Nordisk A/S | Compounds with growth hormone releasing properties |
| US6127341A (en) * | 1997-06-20 | 2000-10-03 | Novo Nordisk A/S | Compounds with growth hormone releasing properties |
| ZA987383B (en) * | 1997-08-19 | 2000-02-17 | Lilly Co Eli | Treatment of congestive heart failure with growth hormone secretagogues. |
| US6329342B1 (en) | 1997-08-19 | 2001-12-11 | Eli Lilly And Company | Treatment of congestive heart failure with growth hormone secretagogues |
| AU766305B2 (en) | 1998-01-16 | 2003-10-16 | Novo Nordisk A/S | Compounds with growth hormone releasing properties |
| WO1999039730A1 (fr) * | 1998-02-09 | 1999-08-12 | Kaken Pharmaceutical Co., Ltd. | Preparation a administration orale contenant des peptides favorisant la secretion d'hormone de croissance |
| US6919315B1 (en) | 1998-06-30 | 2005-07-19 | Novo Nordisk A/S | Compounds with growth hormone releasing properties |
| US6682908B1 (en) | 1998-07-10 | 2004-01-27 | Merck & Co., Inc. | Mouse growth hormone secretagogue receptor |
| JP2002520011A (ja) | 1998-07-13 | 2002-07-09 | メルク・アンド・カンパニー・インコーポレーテッド | 成長ホルモン分泌促進物質関連受容体および核酸 |
| JP2002522058A (ja) | 1998-08-10 | 2002-07-23 | メルク・アンド・カンパニー・インコーポレーテッド | イヌ成長ホルモン分泌促進物質受容体 |
| US6468974B1 (en) | 1998-08-14 | 2002-10-22 | The Administrators Of The Tulane Educational Fund | Compounds having growth hormone releasing activity |
| US6639076B1 (en) | 1998-08-18 | 2003-10-28 | Eli Lilly And Company | Growth hormone secretagogues |
| US6696063B1 (en) | 1998-12-30 | 2004-02-24 | Applied Research Systems Ars Holding N.V. | Treatment of HIV-associated dysmorphia/dysmetabolic syndrome (HADDS) with or without lipodystrophy |
| US7022677B1 (en) | 1999-02-18 | 2006-04-04 | Kaken Pharmaceutical Co., Ltd. | Amide derivatives as growth hormone secretagogues |
| AU759022B2 (en) * | 1999-02-18 | 2003-04-03 | Kaken Pharmaceutical Co., Ltd. | Novel amide derivatives as growth hormone secretagogues |
| US6828331B1 (en) * | 1999-02-19 | 2004-12-07 | Eli Lilly And Company | Growth hormone secretagogues |
| US20040192593A1 (en) * | 1999-07-26 | 2004-09-30 | Baylor College Of Medicine | Protease resistant ti-growth hormone releasing hormone |
| KR20020047096A (ko) * | 1999-07-26 | 2002-06-21 | 크로커 사무엘 에스 | 초활성 돼지 성장 호르몬 분비 호르몬 유사체 |
| JP4691298B2 (ja) * | 1999-10-12 | 2011-06-01 | 科研製薬株式会社 | 粉末吸入用製剤及びその製造方法 |
| UA73530C2 (uk) | 1999-11-10 | 2005-08-15 | Ново Нордіск А/С | Сполука з властивостями вивільнювати гормон росту |
| JP3498041B2 (ja) * | 2000-05-29 | 2004-02-16 | 科研製薬株式会社 | プラルモレリン含有点鼻用製剤 |
| ATE446758T1 (de) | 2000-05-31 | 2009-11-15 | Pfizer Prod Inc | Verwendung von wachstumshormonsekretagoga zur förderung der beweglichkeit des verdauungstrakts |
| US7622503B2 (en) | 2000-08-24 | 2009-11-24 | University Of Tennessee Research Foundation | Selective androgen receptor modulators and methods of use thereof |
| US7855229B2 (en) | 2000-08-24 | 2010-12-21 | University Of Tennessee Research Foundation | Treating wasting disorders with selective androgen receptor modulators |
| US7645898B2 (en) | 2000-08-24 | 2010-01-12 | University Of Tennessee Research Foundation | Selective androgen receptor modulators and method of use thereof |
| US7919647B2 (en) | 2000-08-24 | 2011-04-05 | University Of Tennessee Research Foundation | Selective androgen receptor modulators and methods of use thereof |
| EA006484B1 (ru) | 2001-02-02 | 2005-12-29 | Конджачем, Инк. | Долгоживущие производные рилизинг-фактора гормона роста |
| US7125840B2 (en) * | 2001-10-09 | 2006-10-24 | Eli Lilly And Company | Substituted dipeptides as growth hormone secretagogues |
| EP1450605B1 (en) * | 2001-10-26 | 2011-12-07 | Baylor College Of Medicine | Composition to alter bone properties in a subject |
| US8853266B2 (en) | 2001-12-06 | 2014-10-07 | University Of Tennessee Research Foundation | Selective androgen receptor modulators for treating diabetes |
| US6831102B2 (en) | 2001-12-07 | 2004-12-14 | Bristol-Myers Squibb Company | Phenyl naphthol ligands for thyroid hormone receptor |
| MY142457A (en) * | 2001-12-11 | 2010-11-30 | Advisys Inc | Plasmid mediated supplementation for treating chronically ill subjects |
| US7015219B2 (en) | 2001-12-19 | 2006-03-21 | Bristol-Myers Squibb Company | 3-aryl-hydroxybenzoxazines and 3, 4-dihydro-3-aryl-hydroxybenzoxazines as selective estrogen receptor beta modulators |
| TW200307749A (en) * | 2002-02-07 | 2003-12-16 | Baylor College Medicine | Modified pituitary gland development in offspring from expectant mother animals treated with growth hormone releasing hormone therapy |
| US7772433B2 (en) | 2002-02-28 | 2010-08-10 | University Of Tennessee Research Foundation | SARMS and method of use thereof |
| US7381730B2 (en) | 2002-03-15 | 2008-06-03 | Bristol-Myers Squibb Company | 3-arylquinazoline derivatives as selective estrogen receptor beta modulators |
| US20060167268A1 (en) * | 2002-04-09 | 2006-07-27 | Eli Lilly And Company, Patent Division, | Growth hormone secretagogues |
| ES2271557T3 (es) * | 2002-04-09 | 2007-04-16 | Eli Lilly And Company | Secretagogos dipeptidicos de la hormona del crecimiento. |
| AU2003225305A1 (en) | 2002-05-08 | 2003-11-11 | Bristol-Myers Squibb Company | Pyridine-based thyroid receptor ligands |
| US7405234B2 (en) | 2002-05-17 | 2008-07-29 | Bristol-Myers Squibb Company | Bicyclic modulators of androgen receptor function |
| AU2003259340A1 (en) | 2002-08-23 | 2004-03-11 | Gestion Univalor Societe En Commandite | Growth hormone-releasing peptides in the treatment of prevention of atherosclerosis and hypercholesterolemia |
| WO2004045518A2 (en) | 2002-11-15 | 2004-06-03 | Bristol-Myers Squibb Company | Open chain prolyl urea-related modulators of androgen receptor function |
| US8309603B2 (en) | 2004-06-07 | 2012-11-13 | University Of Tennessee Research Foundation | SARMs and method of use thereof |
| TW200504021A (en) | 2003-01-24 | 2005-02-01 | Bristol Myers Squibb Co | Substituted anilide ligands for the thyroid receptor |
| US7105537B2 (en) | 2003-01-28 | 2006-09-12 | Bristol-Myers Squibb Company | 2-substituted cyclic amines as calcium sensing receptor modulators |
| WO2004067719A2 (en) * | 2003-01-28 | 2004-08-12 | Advisys, Inc. | Growth hormone releasing hormone (ghrh) for use in reducing culling in herd animals |
| US7205322B2 (en) | 2003-02-12 | 2007-04-17 | Bristol-Myers Squibb Company | Thiazolidine compounds as calcium sensing receptor modulators |
| US7557143B2 (en) | 2003-04-18 | 2009-07-07 | Bristol-Myers Squibb Company | Thyroid receptor ligands |
| TW200424214A (en) * | 2003-04-21 | 2004-11-16 | Advisys Inc | Plasmid mediated GHRH supplementation for renal failures |
| US7459460B2 (en) | 2003-05-28 | 2008-12-02 | Bristol-Myers Squibb Company | Trisubstituted heteroaromatic compounds as calcium sensing receptor modulators |
| US7265145B2 (en) | 2003-05-28 | 2007-09-04 | Bristol-Myers Squibb Company | Substituted piperidines and pyrrolidines as calcium sensing receptor modulators and method |
| US7476653B2 (en) | 2003-06-18 | 2009-01-13 | Tranzyme Pharma, Inc. | Macrocyclic modulators of the ghrelin receptor |
| WO2005016964A2 (en) * | 2003-08-04 | 2005-02-24 | Advisys, Inc. | Canine specific growth hormone releasing hormone |
| WO2005041998A1 (en) | 2003-10-02 | 2005-05-12 | Ali Sadat M | Peptide for promoting healing of fractures |
| ATE467417T1 (de) * | 2003-12-31 | 2010-05-15 | VGX Pharmaceuticals LLC | Reduzierung von arthritis und lahmheit bei personen unter supllement von wachstumshormon freisetzendem hormon (ghrh) |
| EP1713828B1 (en) * | 2004-01-20 | 2011-04-27 | VGX Pharmaceuticals, LLC | Enhanced secretion/retention of growth hormone releasing hormone (ghrh) from muscle cells by species-specific signal peptide |
| US20050164952A1 (en) * | 2004-01-23 | 2005-07-28 | Vital Pharmaceuticals, Inc. | Delivery system for growth hormone releasing peptides |
| US7820702B2 (en) | 2004-02-04 | 2010-10-26 | Bristol-Myers Squibb Company | Sulfonylpyrrolidine modulators of androgen receptor function and method |
| US7378426B2 (en) | 2004-03-01 | 2008-05-27 | Bristol-Myers Squibb Company | Fused heterotricyclic compounds as inhibitors of 17β-hydroxysteroid dehydrogenase 3 |
| US7696241B2 (en) | 2004-03-04 | 2010-04-13 | Bristol-Myers Squibb Company | Bicyclic compounds as modulators of androgen receptor function and method |
| US7625923B2 (en) | 2004-03-04 | 2009-12-01 | Bristol-Myers Squibb Company | Bicyclic modulators of androgen receptor function |
| US9884038B2 (en) | 2004-06-07 | 2018-02-06 | University Of Tennessee Research Foundation | Selective androgen receptor modulator and methods of use thereof |
| US9889110B2 (en) | 2004-06-07 | 2018-02-13 | University Of Tennessee Research Foundation | Selective androgen receptor modulator for treating hormone-related conditions |
| ATE413890T1 (de) * | 2004-07-23 | 2008-11-15 | Advisys Inc | Wachstumshormon-freisetzendes hormon verstärkt die vakzin-induzierte immunantwort |
| CA2576915A1 (en) | 2004-08-18 | 2006-03-02 | Elixir Pharmaceuticals, Inc. | Growth-hormone secretagogues |
| WO2006116401A1 (en) | 2005-04-28 | 2006-11-02 | Bristol-Myers Squibb Company | C-5 substituted quinazolinone derivatives as selective estrogen receptor beta modulators |
| KR101388087B1 (ko) | 2005-08-31 | 2014-04-25 | 유니버시티 오브 테네시 리서치 파운데이션 | 선택적 안드로겐 수용체 조절제를 이용한 신장 질환, 화상,부상 및 척수 손상의 치료 방법 |
| CU23558A1 (es) | 2006-02-28 | 2010-07-20 | Ct Ingenieria Genetica Biotech | Compuestos análogos a los secretagogos peptidicos de la hormona de crecimiento |
| WO2008006019A2 (en) * | 2006-07-06 | 2008-01-10 | Advisys Inc. | Growth hormone releasing hormone treatment to decrease cholesterol levels |
| WO2008008433A2 (en) | 2006-07-12 | 2008-01-17 | University Of Tennessee Research Foundation | Substituted acylanilides and methods of use thereof |
| KR101410453B1 (ko) | 2006-08-02 | 2014-06-27 | 싸이토키네틱스, 인코포레이티드 | 소정의 화학 물질, 조성물 및 방법 |
| US8299248B2 (en) | 2006-08-02 | 2012-10-30 | Cytokinetics, Incorporated | Certain 1H-imidazo[4,5-b]pyrazin-2(3H)-ones and 1H-imidazo[4,5-b]pyrazin-2-ols and methods for their use |
| US9730908B2 (en) | 2006-08-24 | 2017-08-15 | University Of Tennessee Research Foundation | SARMs and method of use thereof |
| US10010521B2 (en) | 2006-08-24 | 2018-07-03 | University Of Tennessee Research Foundation | SARMs and method of use thereof |
| US9844528B2 (en) | 2006-08-24 | 2017-12-19 | University Of Tennessee Research Foundation | SARMs and method of use thereof |
| CN107007581A (zh) | 2006-08-24 | 2017-08-04 | 田纳西大学研究基金会 | 取代的n‑酰基苯胺及其使用方法 |
| ES2604943T3 (es) | 2007-02-09 | 2017-03-10 | Ocera Therapeutics, Inc. | Moduladores macrocíclicos del receptor de la grelina y procedimientos de uso de los mismos |
| EP2155769B1 (en) | 2007-05-04 | 2012-06-27 | Katholieke Universiteit Leuven KU Leuven Research & Development | Tissue degeneration protection |
| US7968603B2 (en) | 2007-09-11 | 2011-06-28 | University Of Tennessee Research Foundation | Solid forms of selective androgen receptor modulators |
| US8003689B2 (en) | 2008-06-20 | 2011-08-23 | Gtx, Inc. | Metabolites of selective androgen receptor modulators and methods of use thereof |
| WO2011133920A1 (en) | 2010-04-23 | 2011-10-27 | Cytokinetics, Inc. | Certain amino-pyridines and amino-triazines, compositions thereof, and methods for their use |
| AR081626A1 (es) | 2010-04-23 | 2012-10-10 | Cytokinetics Inc | Compuestos amino-piridazinicos, composiciones farmaceuticas que los contienen y uso de los mismos para tratar trastornos musculares cardiacos y esqueleticos |
| AR081331A1 (es) | 2010-04-23 | 2012-08-08 | Cytokinetics Inc | Amino- pirimidinas composiciones de las mismas y metodos para el uso de los mismos |
| WO2013190520A2 (en) | 2012-06-22 | 2013-12-27 | The General Hospital Corporation | Gh-releasing agents in the treatment of vascular stenosis and associated conditions |
| US9622992B2 (en) | 2012-07-13 | 2017-04-18 | Gtx, Inc. | Method of treating androgen receptor (AR)-positive breast cancers with selective androgen receptor modulator (SARMs) |
| US10314807B2 (en) | 2012-07-13 | 2019-06-11 | Gtx, Inc. | Method of treating HER2-positive breast cancers with selective androgen receptor modulators (SARMS) |
| US9744149B2 (en) | 2012-07-13 | 2017-08-29 | Gtx, Inc. | Method of treating androgen receptor (AR)-positive breast cancers with selective androgen receptor modulator (SARMs) |
| US10987334B2 (en) | 2012-07-13 | 2021-04-27 | University Of Tennessee Research Foundation | Method of treating ER mutant expressing breast cancers with selective androgen receptor modulators (SARMs) |
| AU2013203600C1 (en) | 2012-07-13 | 2016-11-24 | University Of Tennessee Research Foundation | A method of treating androgen receptor (AR)-positive breast cancers with selective androgen receptor modulator (SARMS) |
| US10258596B2 (en) | 2012-07-13 | 2019-04-16 | Gtx, Inc. | Method of treating HER2-positive breast cancers with selective androgen receptor modulators (SARMS) |
| US9969683B2 (en) | 2012-07-13 | 2018-05-15 | Gtx, Inc. | Method of treating estrogen receptor (ER)-positive breast cancers with selective androgen receptor modulator (SARMS) |
| CA2889499C (en) | 2012-10-24 | 2019-09-10 | Daiichi Sankyo Company, Limited | Growth hormone secretagogue receptor agonists for treating amyotrophic lateral sclerosis |
| WO2014168973A2 (en) | 2013-04-08 | 2014-10-16 | President And Fellows Of Harvard College | Methods and compositions for rejuvenating skeletal muscle stem cells |
| US9119832B2 (en) | 2014-02-05 | 2015-09-01 | The Regents Of The University Of California | Methods of treating mild brain injury |
| EP3148587B1 (en) | 2014-05-30 | 2021-02-24 | Pfizer Inc | Carbonitrile derivatives as selective androgen receptor modulators |
| US20170121385A1 (en) | 2015-10-28 | 2017-05-04 | Oxeia Biopharmaceuticals, Inc. | Methods of treating neurodegenerative conditions |
| EP3990447A1 (en) | 2019-06-27 | 2022-05-04 | Cytokinetics, Inc. | Polymorphs of 1-(2-((((trans)-3-fluoro-1-(3-fluoropyridin-2-yl)cyclobutyl)methyl)amino)pyrimidin-5-yl)-1h-pyrrole-3-carboxamide |
| WO2023275715A1 (en) | 2021-06-30 | 2023-01-05 | Pfizer Inc. | Metabolites of selective androgen receptor modulators |
Family Cites Families (22)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4223020A (en) * | 1979-03-30 | 1980-09-16 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
| US4228155A (en) * | 1979-03-30 | 1980-10-14 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
| US4228157A (en) * | 1979-03-30 | 1980-10-14 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
| US4228158A (en) * | 1979-03-30 | 1980-10-14 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
| US4226857A (en) * | 1979-03-30 | 1980-10-07 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
| US4228156A (en) * | 1979-03-30 | 1980-10-14 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
| CA1175810A (en) * | 1979-03-30 | 1984-10-09 | Frank A. Momany | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
| US4224316A (en) * | 1979-03-30 | 1980-09-23 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
| US4223021A (en) * | 1979-03-30 | 1980-09-16 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
| US4223019A (en) * | 1979-03-30 | 1980-09-16 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
| WO1983002272A1 (en) * | 1981-12-28 | 1983-07-07 | Beckman Instruments Inc | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
| US4410512A (en) * | 1981-12-28 | 1983-10-18 | Beckman Instruments, Inc. | Combinations having synergistic pituitary growth hormone releasing activity |
| US4410513A (en) * | 1981-12-28 | 1983-10-18 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
| US4880778A (en) * | 1986-05-12 | 1989-11-14 | Eastman Kodak Company | Combinations having synergistic growth hormone releasing activity and methods for use thereof |
| US4839344A (en) * | 1987-06-12 | 1989-06-13 | Eastman Kodak Company | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity |
| US4880777A (en) * | 1987-09-01 | 1989-11-14 | Eastman Kodak Company | Synthetic peptides having growth hormone releasing activity |
| ATE113607T1 (de) * | 1988-01-28 | 1994-11-15 | Polygen Holding Corp | Polypeptidverbindungen mit wachstumshormonfreisetzender aktivität. |
| JPH03502329A (ja) * | 1988-01-28 | 1991-05-30 | ポリゲン ホールディング コーポレイション | 成長ホルモン放出活性を有するポリペプチド化合物類 |
| WO1989010933A1 (en) * | 1988-05-11 | 1989-11-16 | Eastman Kodak Company | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity |
| IL98910A0 (en) * | 1990-07-24 | 1992-07-15 | Polygen Holding Corp | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity and pharmaceutical compositions containing them |
| US5486505A (en) * | 1990-07-24 | 1996-01-23 | Polygen Holding Corporation | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity |
| WO1992001709A1 (en) | 1990-07-24 | 1992-02-06 | Eastman Kodak Company | Process for synthesizing peptides |
-
1991
- 1991-08-22 US US07/748,350 patent/US5663146A/en not_active Expired - Lifetime
-
1992
- 1992-08-18 IL IL102848A patent/IL102848A/en not_active IP Right Cessation
- 1992-08-20 RU RU94016393A patent/RU2126014C1/ru not_active IP Right Cessation
- 1992-08-20 SK SK204-94A patent/SK282895B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1992-08-20 HU HU9400495A patent/HU223664B1/hu not_active IP Right Cessation
- 1992-08-20 WO PCT/US1992/007026 patent/WO1993004081A1/en active Application Filing
- 1992-08-20 CZ CZ1994400A patent/CZ293281B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1992-08-20 BR BR9206398A patent/BR9206398A/pt not_active Application Discontinuation
- 1992-08-20 NZ NZ244034A patent/NZ244034A/en not_active IP Right Cessation
- 1992-08-20 JP JP50458593A patent/JP3179489B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1992-08-20 DK DK92919262T patent/DK0605484T3/da active
- 1992-08-20 RO RO94-00256A patent/RO112507B1/ro unknown
- 1992-08-20 EP EP92919262A patent/EP0605484B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-08-20 CA CA002116120A patent/CA2116120C/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-08-20 KR KR1019940700542A patent/KR100247212B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1992-08-20 ES ES92919262T patent/ES2124263T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1992-08-20 PL PL92302434A patent/PL169562B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1992-08-20 AT AT92919262T patent/ATE172742T1/de active
- 1992-08-20 DE DE69227462T patent/DE69227462T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1992-08-20 US US07/932,494 patent/US5776901A/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-08-20 AU AU25416/92A patent/AU666673B2/en not_active Ceased
- 1992-08-21 MX MX9204861A patent/MX9204861A/es unknown
- 1992-08-21 ZA ZA926337A patent/ZA926337B/xx unknown
- 1992-08-22 CN CN92110868A patent/CN1035256C/zh not_active Expired - Fee Related
-
1994
- 1994-02-18 BG BG98489A patent/BG62655B1/bg unknown
- 1994-02-21 NO NO19940592A patent/NO314695B1/no not_active IP Right Cessation
- 1994-02-21 FI FI940807A patent/FI120095B/fi not_active IP Right Cessation
-
1997
- 1997-04-22 BR BR1100309-0A patent/BR1100309A/pt active IP Right Grant
-
2005
- 2005-05-02 FI FI20050467A patent/FI120691B/fi not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CZ293281B6 (cs) | Peptidy účinné při uvolňování růstového hormonu, způsob jejich přípravy, farmaceutické prostředky obsahující tyto látky a použití | |
| US5534494A (en) | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity | |
| EP0398961B1 (en) | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity | |
| US5486505A (en) | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity | |
| EP0417165B1 (en) | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity | |
| CZ401392A3 (en) | Polypeptide compounds exhibiting capability of releasing growth hormone | |
| US7250399B2 (en) | Compounds having growth hormone releasing activity | |
| US4880777A (en) | Synthetic peptides having growth hormone releasing activity |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD00 | Pending as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20110820 |