BG98489A - Пептиди,способни да освобождават растежен хормон - Google Patents
Пептиди,способни да освобождават растежен хормон Download PDFInfo
- Publication number
- BG98489A BG98489A BG98489A BG9848994A BG98489A BG 98489 A BG98489 A BG 98489A BG 98489 A BG98489 A BG 98489A BG 9848994 A BG9848994 A BG 9848994A BG 98489 A BG98489 A BG 98489A
- Authority
- BG
- Bulgaria
- Prior art keywords
- phe
- tyr
- gly
- daia
- ala
- Prior art date
Links
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 title claims abstract description 85
- 102000018997 Growth Hormone Human genes 0.000 title claims abstract description 83
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 title claims abstract description 83
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims description 149
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title claims description 85
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 30
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims abstract description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 67
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 53
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 47
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 46
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 26
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 23
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 20
- COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N D-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N 0.000 claims description 17
- 230000003578 releasing effect Effects 0.000 claims description 17
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 16
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 16
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 16
- 241000282412 Homo Species 0.000 claims description 15
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims description 15
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 claims description 14
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 claims description 13
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 12
- 230000037396 body weight Effects 0.000 claims description 12
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 11
- 238000009739 binding Methods 0.000 claims description 10
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 10
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 claims description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 9
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 8
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 claims description 7
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 claims description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 7
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 claims description 7
- QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N D-alpha-Ala Natural products CC([NH3+])C([O-])=O QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 claims description 6
- 150000004662 dithiols Chemical class 0.000 claims description 6
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 claims description 6
- VJLLEKDQJSMHRU-STQMWFEESA-N Phe-Gly-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O VJLLEKDQJSMHRU-STQMWFEESA-N 0.000 claims description 5
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 claims description 5
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 claims description 5
- WRHZVMBBRYBTKZ-UHFFFAOYSA-N pyrrole-2-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN1 WRHZVMBBRYBTKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims description 4
- UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N beta-alanine Chemical compound NCCC(O)=O UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 4
- 238000006482 condensation reaction Methods 0.000 claims description 4
- 239000005556 hormone Substances 0.000 claims description 4
- QIVBCDIJIAJPQS-SECBINFHSA-N D-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-SECBINFHSA-N 0.000 claims description 3
- 102000038461 Growth Hormone-Releasing Hormone Human genes 0.000 claims description 3
- 239000000095 Growth Hormone-Releasing Hormone Substances 0.000 claims description 3
- 101710142969 Somatoliberin Proteins 0.000 claims description 3
- 102000005157 Somatostatin Human genes 0.000 claims description 3
- 108010056088 Somatostatin Proteins 0.000 claims description 3
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000000556 agonist Substances 0.000 claims description 3
- 239000002876 beta blocker Substances 0.000 claims description 3
- 229940030611 beta-adrenergic blocking agent Drugs 0.000 claims description 3
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 claims description 3
- 239000000544 cholinesterase inhibitor Substances 0.000 claims description 3
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 claims description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 3
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 claims description 3
- 238000011084 recovery Methods 0.000 claims description 3
- 239000003488 releasing hormone Substances 0.000 claims description 3
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 claims description 3
- NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N somatostatin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)[C@@H](C)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N)C(O)=O)=O)[C@H](O)C)C1=CC=CC=C1 NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N 0.000 claims description 3
- 229960000553 somatostatin Drugs 0.000 claims description 3
- 125000003941 D-tryptophan group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2C(C([C@@](N([H])[H])(C(=O)[*])[H])([H])[H])=C([H])N([H])C2=C1[H] 0.000 claims description 2
- 108010010234 HDL Lipoproteins Proteins 0.000 claims description 2
- 102000015779 HDL Lipoproteins Human genes 0.000 claims description 2
- OBSIQMZKFXFYLV-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine amide Chemical compound NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 OBSIQMZKFXFYLV-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims description 2
- 108010007622 LDL Lipoproteins Proteins 0.000 claims description 2
- 102000007330 LDL Lipoproteins Human genes 0.000 claims description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 239000002160 alpha blocker Substances 0.000 claims description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 2
- 230000037406 food intake Effects 0.000 claims description 2
- 108091008039 hormone receptors Proteins 0.000 claims description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 claims description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 claims description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims 3
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical group [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 150000003862 amino acid derivatives Chemical class 0.000 claims 2
- 229940123486 Hormone receptor agonist Drugs 0.000 claims 1
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 claims 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 claims 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 claims 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims 1
- 239000000698 hormone receptor stimulating agent Substances 0.000 claims 1
- 230000002267 hypothalamic effect Effects 0.000 claims 1
- 108010022197 lipoprotein cholesterol Proteins 0.000 claims 1
- 208000003068 pituitary dwarfism Diseases 0.000 claims 1
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 claims 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 52
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 51
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 50
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 46
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 28
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 26
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 26
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 19
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 19
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 18
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 18
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 18
- -1 DAIa Chemical compound 0.000 description 16
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 15
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 15
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 14
- 239000000047 product Substances 0.000 description 12
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 11
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 11
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 10
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 10
- WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N pentobarbital Chemical compound CCCC(C)C1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 102100033367 Appetite-regulating hormone Human genes 0.000 description 9
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- HKXLAGBDJVHRQG-YFKPBYRVSA-N L-lysinamide Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(N)=O HKXLAGBDJVHRQG-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 9
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 description 9
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 9
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 9
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 9
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 8
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 8
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 8
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 8
- 101710119601 Growth hormone-releasing peptides Proteins 0.000 description 7
- VXXLYCBQADYMGY-VIFPVBQESA-N butyl N-[(2S)-2,6-diaminohexanoyl]carbamate Chemical compound N[C@@H](CCCCN)C(=O)NC(=O)OCCCC VXXLYCBQADYMGY-VIFPVBQESA-N 0.000 description 7
- PFKFTWBEEFSNDU-UHFFFAOYSA-N carbonyldiimidazole Chemical compound C1=CN=CN1C(=O)N1C=CN=C1 PFKFTWBEEFSNDU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 7
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 7
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 7
- NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N Histamine Chemical compound NCCC1=CN=CN1 NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 5
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical class [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 5
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 5
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 5
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 5
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 5
- 229960001412 pentobarbital Drugs 0.000 description 5
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 5
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 5
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 5
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 4
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- WUGMRIBZSVSJNP-UHFFFAOYSA-N N-L-alanyl-L-tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)C(N)C)C(O)=O)=CNC2=C1 WUGMRIBZSVSJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N N-Methylmorpholine Chemical compound CN1CCOCC1 SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 4
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 4
- 239000012300 argon atmosphere Substances 0.000 description 4
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 4
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 4
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 4
- 238000003828 vacuum filtration Methods 0.000 description 4
- WYTZQQPZMBNGFF-HNNXBMFYSA-N (2S)-3-phenyl-2-(phenylmethoxycarbonyloxyamino)propanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](Cc1ccccc1)NOC(=O)OCc1ccccc1 WYTZQQPZMBNGFF-HNNXBMFYSA-N 0.000 description 3
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- QMMFVYPAHWMCMS-UHFFFAOYSA-N Dimethyl sulfide Chemical compound CSC QMMFVYPAHWMCMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 3
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 3
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical class [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 3
- 229960003767 alanine Drugs 0.000 description 3
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 3
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 3
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 3
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 125000000051 benzyloxy group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])O* 0.000 description 3
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 3
- 229960001340 histamine Drugs 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 239000003701 inert diluent Substances 0.000 description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 3
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 3
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 3
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 3
- 229910052763 palladium Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 3
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 3
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 3
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 3
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 3
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 3
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 3
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 3
- BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 1,3-diisopropylcarbodiimide Chemical compound CC(C)N=C=NC(C)C BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 7H-purine Chemical compound N1=CNC2=NC=NC2=C1 KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Natural products CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WUGMRIBZSVSJNP-UFBFGSQYSA-N Ala-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@@H](N)C)C(O)=O)=CNC2=C1 WUGMRIBZSVSJNP-UFBFGSQYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000000030 D-alanine group Chemical group [H]N([H])[C@](C([H])([H])[H])(C(=O)[*])[H] 0.000 description 2
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- 102000002265 Human Growth Hormone Human genes 0.000 description 2
- 108010000521 Human Growth Hormone Proteins 0.000 description 2
- 239000000854 Human Growth Hormone Substances 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N L-Alanine Natural products C[C@@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N 0.000 description 2
- WTDRDQBEARUVNC-UHFFFAOYSA-N L-Dopa Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 WTDRDQBEARUVNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N L-Ornithine Chemical compound NCCC[C@H](N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- 125000000174 L-prolyl group Chemical group [H]N1C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[C@@]1([H])C(*)=O 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M Lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 2
- 101100270435 Mus musculus Arhgef12 gene Proteins 0.000 description 2
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- 101000633010 Rattus norvegicus Somatostatin Proteins 0.000 description 2
- 108050007673 Somatotropin Proteins 0.000 description 2
- 102100038803 Somatotropin Human genes 0.000 description 2
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000012445 acidic reagent Substances 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- QWCKQJZIFLGMSD-UHFFFAOYSA-N alpha-aminobutyric acid Chemical compound CCC(N)C(O)=O QWCKQJZIFLGMSD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 2
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 2
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 2
- 229960005261 aspartic acid Drugs 0.000 description 2
- RXQNHIDQIJXKTK-UHFFFAOYSA-N azane;pentanoic acid Chemical compound [NH4+].CCCCC([O-])=O RXQNHIDQIJXKTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 2
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 2
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 2
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 2
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 2
- 238000010908 decantation Methods 0.000 description 2
- KJOZJSGOIJQCGA-UHFFFAOYSA-N dichloromethane;2,2,2-trifluoroacetic acid Chemical compound ClCCl.OC(=O)C(F)(F)F KJOZJSGOIJQCGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N diisopropylcarbodiimide Natural products CC(C)NC(=O)NC(C)C BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MGHPNCMVUAKAIE-UHFFFAOYSA-N diphenylmethanamine Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(N)C1=CC=CC=C1 MGHPNCMVUAKAIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-M dodecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCC([O-])=O POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 2
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 229960003692 gamma aminobutyric acid Drugs 0.000 description 2
- 108010077689 gamma-aminobutyryl-2-methyltryptophyl-2-methyltryptophyl-2-methyltryptophyl-lysinamide Proteins 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 229960002989 glutamic acid Drugs 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 229960002885 histidine Drugs 0.000 description 2
- 229910000040 hydrogen fluoride Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000004029 hydroxymethyl group Chemical group [H]OC([H])([H])* 0.000 description 2
- PRJKNHOMHKJCEJ-UHFFFAOYSA-N imidazol-4-ylacetic acid Chemical compound OC(=O)CC1=CN=CN1 PRJKNHOMHKJCEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 2
- 229940070765 laurate Drugs 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 2
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 2
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 2
- 229960004452 methionine Drugs 0.000 description 2
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 2
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 2
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 229940049964 oleate Drugs 0.000 description 2
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 2
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 2
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 2
- 229940039748 oxalate Drugs 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 2
- 239000012047 saturated solution Substances 0.000 description 2
- 229960001153 serine Drugs 0.000 description 2
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- NHXLMOGPVYXJNR-UHFFFAOYSA-N srif Chemical compound N1C(=O)C(C(C)O)NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)NC(=O)C(CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)C(CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(NC(=O)CNC(=O)C(C)N)CSSCC(C(O)=O)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(O)C)NC(=O)C1CC1=CC=CC=C1 NHXLMOGPVYXJNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229940095064 tartrate Drugs 0.000 description 2
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960004799 tryptophan Drugs 0.000 description 2
- 229940070710 valerate Drugs 0.000 description 2
- NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N valeric acid Chemical compound CCCCC(O)=O NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 2
- OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N (+/-)-DABA Natural products NCCC(N)C(O)=O OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NWQWNCILOXTTHF-HLCSKTDOSA-N (2s)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2r)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-aminopropanoyl]amino]-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-3-naphthalen-2-ylpropanoyl]amino]propanoyl]amino]-3-(1h-indol-3-yl)propanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]hexanamide Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@@H](N)C)C(=O)N[C@H](CC=1C=C2C=CC=CC2=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(N)=O)C1=CNC=N1 NWQWNCILOXTTHF-HLCSKTDOSA-N 0.000 description 1
- WZHKXNSOCOQYQX-FUAFALNISA-N (2s)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2r)-2-[[(2s)-2-amino-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-3-(1h-indol-3-yl)propanoyl]amino]propanoyl]amino]-3-(1h-indol-3-yl)propanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]hexanamide Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(N)=O)C1=CN=CN1 WZHKXNSOCOQYQX-FUAFALNISA-N 0.000 description 1
- HRNLPPBUBKMZMT-SSSXJSFTSA-N (2s)-6-amino-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-aminopropanoyl]amino]-3-naphthalen-2-ylpropanoyl]amino]propanoyl]amino]-3-(1h-indol-3-yl)propanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]hexanamide Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](CC=1C=C2C=CC=CC2=CC=1)NC(=O)[C@H](N)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(N)=O)C1=CC=CC=C1 HRNLPPBUBKMZMT-SSSXJSFTSA-N 0.000 description 1
- ONOURAAVVKGJNM-SCZZXKLOSA-N (2s,3r)-2-azaniumyl-3-phenylmethoxybutanoate Chemical compound [O-]C(=O)[C@@H]([NH3+])[C@@H](C)OCC1=CC=CC=C1 ONOURAAVVKGJNM-SCZZXKLOSA-N 0.000 description 1
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- VYMPLPIFKRHAAC-UHFFFAOYSA-N 1,2-ethanedithiol Chemical compound SCCS VYMPLPIFKRHAAC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 1,3-dicyclohexylurea Chemical compound C1CCCCC1NC(=O)NC1CCCCC1 ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- XZWXFWBHYRFLEF-FSPLSTOPSA-N Ala-His Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 XZWXFWBHYRFLEF-FSPLSTOPSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonium chloride Substances [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 208000010392 Bone Fractures Diseases 0.000 description 1
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N Borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M Bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010065369 Burnout syndrome Diseases 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N D-OH-Asp Natural products OC(=O)C(N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010013883 Dwarfism Diseases 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N Elaidinsaeure-aethylester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 1
- 102100020948 Growth hormone receptor Human genes 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010062767 Hypophysitis Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N L-Aspartic acid Natural products OC(=O)[C@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- WTDRDQBEARUVNC-LURJTMIESA-N L-DOPA Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 WTDRDQBEARUVNC-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- QUOGESRFPZDMMT-UHFFFAOYSA-N L-Homoarginine Natural products OC(=O)C(N)CCCCNC(N)=N QUOGESRFPZDMMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019766 L-Lysine Nutrition 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-UHFFFAOYSA-N L-Methionine Natural products CSCCC(N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- QWCKQJZIFLGMSD-VKHMYHEASA-N L-alpha-aminobutyric acid Chemical compound CC[C@H](N)C(O)=O QWCKQJZIFLGMSD-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 150000008575 L-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000014852 L-arginine Nutrition 0.000 description 1
- 229930064664 L-arginine Natural products 0.000 description 1
- ULEBESPCVWBNIF-BYPYZUCNSA-N L-arginine amide Chemical compound NC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N ULEBESPCVWBNIF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 239000004201 L-cysteine Substances 0.000 description 1
- 235000013878 L-cysteine Nutrition 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- QUOGESRFPZDMMT-YFKPBYRVSA-N L-homoarginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCCNC(N)=N QUOGESRFPZDMMT-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- 229930182844 L-isoleucine Natural products 0.000 description 1
- 229930195722 L-methionine Natural products 0.000 description 1
- QEFRNWWLZKMPFJ-ZXPFJRLXSA-N L-methionine (R)-S-oxide Chemical compound C[S@@](=O)CC[C@H]([NH3+])C([O-])=O QEFRNWWLZKMPFJ-ZXPFJRLXSA-N 0.000 description 1
- QEFRNWWLZKMPFJ-UHFFFAOYSA-N L-methionine sulphoxide Natural products CS(=O)CCC(N)C(O)=O QEFRNWWLZKMPFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930182821 L-proline Natural products 0.000 description 1
- 125000000510 L-tryptophano group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2N([H])C([H])=C(C([H])([H])[C@@]([H])(C(O[H])=O)N([H])[*])C2=C1[H] 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N Lithium Chemical compound [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010024769 Local reaction Diseases 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000002720 Malnutrition Diseases 0.000 description 1
- 208000030880 Nose disease Diseases 0.000 description 1
- 240000007817 Olea europaea Species 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N Orn-delta-NH2 Natural products NCCCC(N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000007327 Protamines Human genes 0.000 description 1
- 108010007568 Protamines Proteins 0.000 description 1
- 101000868151 Rattus norvegicus Somatotropin Proteins 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108010068542 Somatotropin Receptors Proteins 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 241000473945 Theria <moth genus> Species 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M Trifluoroacetate Chemical compound [O-]C(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 229940022663 acetate Drugs 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 108010083553 alanyl-histidyl-(2-naphthyl)alanyl-tryptophyl-phenylalanyl-lysinamide Proteins 0.000 description 1
- 108010070944 alanylhistidine Proteins 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- 150000001342 alkaline earth metals Chemical class 0.000 description 1
- 150000003973 alkyl amines Chemical class 0.000 description 1
- 150000001370 alpha-amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000008206 alpha-amino acids Nutrition 0.000 description 1
- 229940124277 aminobutyric acid Drugs 0.000 description 1
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000001195 anabolic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008365 aqueous carrier Substances 0.000 description 1
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000009697 arginine Nutrition 0.000 description 1
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 229910052788 barium Inorganic materials 0.000 description 1
- DSAJWYNOEDNPEQ-UHFFFAOYSA-N barium atom Chemical compound [Ba] DSAJWYNOEDNPEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007630 basic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- CIHWJRSPVJBHGT-UHFFFAOYSA-N benzhydrylazanium;chloride Chemical compound Cl.C=1C=CC=CC=1C(N)C1=CC=CC=C1 CIHWJRSPVJBHGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940050390 benzoate Drugs 0.000 description 1
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 239000012455 biphasic mixture Substances 0.000 description 1
- 239000002981 blocking agent Substances 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 230000036765 blood level Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 125000004218 chloromethyl group Chemical group [H]C([H])(Cl)* 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000005352 clarification Methods 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007012 clinical effect Effects 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 235000005687 corn oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000002285 corn oil Substances 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- ORQXBVXKBGUSBA-UHFFFAOYSA-N cyclohexyl D-alanine Natural products OC(=O)C(N)CC1CCCCC1 ORQXBVXKBGUSBA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000113 cyclohexyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 238000003795 desorption Methods 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 125000005265 dialkylamine group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 description 1
- 208000010643 digestive system disease Diseases 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- MHUWZNTUIIFHAS-CLFAGFIQSA-N dioleoyl phosphatidic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(O)=O)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC MHUWZNTUIIFHAS-CLFAGFIQSA-N 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N ethyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 1
- 229940093471 ethyl oleate Drugs 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 239000012458 free base Substances 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 108010074605 gamma-Globulins Proteins 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 108010085742 growth hormone-releasing peptide-2 Proteins 0.000 description 1
- 125000002795 guanidino group Chemical group C(N)(=N)N* 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 239000001307 helium Substances 0.000 description 1
- 229910052734 helium Inorganic materials 0.000 description 1
- SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N helium atom Chemical compound [He] SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012456 homogeneous solution Substances 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-M hydrogensulfate Chemical compound OS([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 1
- DWKPPFQULDPWHX-VKHMYHEASA-N l-alanyl ester Chemical compound COC(=O)[C@H](C)N DWKPPFQULDPWHX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- BRHPBVXVOVMTIQ-ZLELNMGESA-N l-leucine l-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O.CC(C)C[C@H](N)C(O)=O BRHPBVXVOVMTIQ-ZLELNMGESA-N 0.000 description 1
- 229940001447 lactate Drugs 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 229960004502 levodopa Drugs 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 235000018977 lysine Nutrition 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 230000001071 malnutrition Effects 0.000 description 1
- 235000000824 malnutrition Nutrition 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000010297 mechanical methods and process Methods 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GSYSFVSGPABNNL-UHFFFAOYSA-N methyl 2-dimethoxyphosphoryl-2-(phenylmethoxycarbonylamino)acetate Chemical group COC(=O)C(P(=O)(OC)OC)NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 GSYSFVSGPABNNL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 125000005487 naphthalate group Chemical group 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012457 nonaqueous media Substances 0.000 description 1
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000012038 nucleophile Substances 0.000 description 1
- 208000015380 nutritional deficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 150000002895 organic esters Chemical class 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- KJOMYNHMBRNCNY-UHFFFAOYSA-N pentane-1,1-diamine Chemical compound CCCCC(N)N KJOMYNHMBRNCNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002304 perfume Substances 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 229960005190 phenylalanine Drugs 0.000 description 1
- 230000001817 pituitary effect Effects 0.000 description 1
- 210000003635 pituitary gland Anatomy 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 229960000208 pralmorelin Drugs 0.000 description 1
- 238000004094 preconcentration Methods 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 150000003141 primary amines Chemical class 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 229960002429 proline Drugs 0.000 description 1
- ZNZJJSYHZBXQSM-UHFFFAOYSA-N propane-2,2-diamine Chemical compound CC(C)(N)N ZNZJJSYHZBXQSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940048914 protamine Drugs 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 230000022558 protein metabolic process Effects 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 150000003335 secondary amines Chemical class 0.000 description 1
- UQDJGEHQDNVPGU-UHFFFAOYSA-N serine phosphoethanolamine Chemical compound [NH3+]CCOP([O-])(=O)OCC([NH3+])C([O-])=O UQDJGEHQDNVPGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- JXKPEJDQGNYQSM-UHFFFAOYSA-M sodium propionate Chemical compound [Na+].CCC([O-])=O JXKPEJDQGNYQSM-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000004324 sodium propionate Substances 0.000 description 1
- 229960003212 sodium propionate Drugs 0.000 description 1
- 235000010334 sodium propionate Nutrition 0.000 description 1
- 238000013223 sprague-dawley female rat Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 239000003206 sterilizing agent Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 230000005737 synergistic response Effects 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 229960002898 threonine Drugs 0.000 description 1
- 125000005147 toluenesulfonyl group Chemical group C=1(C(=CC=CC1)S(=O)(=O)*)C 0.000 description 1
- 238000005809 transesterification reaction Methods 0.000 description 1
- 125000000026 trimethylsilyl group Chemical group [H]C([H])([H])[Si]([*])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 229960004441 tyrosine Drugs 0.000 description 1
- 229960004295 valine Drugs 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 238000010792 warming Methods 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 238000009736 wetting Methods 0.000 description 1
- 210000002268 wool Anatomy 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- ORQXBVXKBGUSBA-QMMMGPOBSA-N β-cyclohexyl-alanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1CCCCC1 ORQXBVXKBGUSBA-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/60—Growth hormone-releasing factor [GH-RF], i.e. somatoliberin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/06—Antihyperlipidemics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/02—Drugs for disorders of the endocrine system of the hypothalamic hormones, e.g. TRH, GnRH, CRH, GRH, somatostatin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/06—Drugs for disorders of the endocrine system of the anterior pituitary hormones, e.g. TSH, ACTH, FSH, LH, PRL, GH
- A61P5/08—Drugs for disorders of the endocrine system of the anterior pituitary hormones, e.g. TSH, ACTH, FSH, LH, PRL, GH for decreasing, blocking or antagonising the activity of the anterior pituitary hormones
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Public Health (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Hematology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
Пептидите с формула а1-а2-с1-с2-с3-а5 стимулират освобождаването на растежен хормон, когато се приемат от животни. Те имат и терапевтично приложение
Description
ПЕПТИДИ СПОСОБНИ ДА ОСВОБОЖДАВАТ РАСТЕЖЕН ХОРМОН
1. ОБЛАСТ НА ТЕХНИКАТА
Изобретението са отнася до полипептидни съединения, стимулиращи освобождаването на растежен хормон, когато са приети от бозайници, за предпочитане · човешки същества. В друг аспект, изобретението се отнася до методи, стимулиращи освобождаването на растежен хормон и повишаващи нивото му в животни, чрез приемане на специфични полипептидни съединения, освобождаващи растежен хормон.
2. ПРЕДШЕСТВУВАЩО СЪСТОЯНИЕ НА ТЕХНИКАТА
Повишаване нивото на растежния хормон (РХ) в животни, напр.
бозайници, включително хора, при приемане на съединения, освобождаващи растежен хормон, може да доведе до увеличаване на теглото и до повишено производство на мляко, ако при приемането му се достигнат достатъчно високи нива на растежния хормон. Освен това, известно е, че повишаването на
-2нивото на растежния хормон при бозайниците и хората може да бъде постигнато и чрез прилагането на известни освобождаващи хормона агенти, като естествено срещащите се хормони, освобождаващи растежен хормон.
Повишаването на нивото на растежния хормон в бозайниците може да се постигне също така чрез прилагането на пептиди, освобождаващи растежен хормон, някои от които са описани по-рано, например в Патентни на САЩ По. 4,223,01; 4,223,020; 4,223,021; 4,224,316; 4,226,857; 4,228,155; 4,228,156; 4,228,157; 4,228,158; 4,410,512 и 4,410,513.
Антитела на ендогенния инхибитор за освобождаване на растежен хормон, сомастатин (SRIF), също така са били използувани, за да предизвикат повишени РХ-нива. В последния пример, нивата на растежния хормон са повишени чрез отстраняване на ендогенния инхибитор за освобождаване на растежен хормон (SRIF) преди той да достигне хипофизата, където инхибира освобождаването на растежния хормон.
»
Всеки един от тези методи, стимулиращи повишаването на нивата на растежния хормон включва материали, които са скъпи за синтезиране и/или изолиране с достатъчно висока чистота за приемането им от набелязаното животно. Желателни са относително прости полипептиди с къса верига и ниско молекулно тегло, които са относително евтини за получаване и притежават способността да стимулират отделянето на растежен хормон, защото те трябва да се получават лесно и евтино, да се променят лесно химично и/или физично, както и лесно де се пречистват и формулират; и трябва да притежават отлични транспортни свойства.
Въпреки че са известни някои полипептиди с къси вериги, които могат да стимулират освобождаването и повишаването на нивата на растежния хормон в кръвта, важно е полипептидите да могат да се скроят към различни изисквания, като доставяне, биоабсорбция, повишено време на задържане и др. Обаче, промените на аминокиселината на някои позиции могат да проявят драстичен ефект върху способността на пептидите с къси вериги за стимулиране отделянето на растежен хормон.
-3Би било желателно да се разполага с различни полипептиди с къса верига, които могат да стимулират освобождаването и повишаването на нивата на растежния хормон в кръвта на животните и по-специално при хората. Би било също така полезно тези пептиди да могат да се използуват за стимулиране освобождаването и/или повишаването на нивата на растежния хормон в кръвта на животни и хора.
Също така е желателно да се дадат методи за стимулиране освобождаването и/или повишаването нивата на растежния хормон в кръвта на животните, като се използуват такива полипептиди с къси вериги.
3. ТЕХНИЧЕСКА СЪЩНОСТ НА ИЗОБРЕТЕНИЕТО
Полипептидите са дефинирани със следната формула:
Αί - А2 - С-| - С2 - С3 - А5, в която
А-| е Gly, DAIa, β-Ala, His, Ser, Met, Pro, Sar, Ava, Aib, N-нисш алкиламинокарбонова киселина, Ν,Ν-бис-нисш алкил-аминокарбонова киселина, азол-карбонова киселина или нисш алкил-аминокарбонова киселина, при което нисшата алкилна група включва 2 до около 10 въглеродни атома с неразклонена верига. За предпочитане е А-| да бъде DAIa.
А2 е DTrp, DpNal, D-4-Y-Phe или 5-Y-D-Trp, където Y е OH, Cl, Br, F или Н. За предпочитане е А2 да бъде DpNal.
А5 е А3-А4-А5', А3-А51, А4-А5' или А51. За предпочитане е А5 да бъде А51.
A3 е Ala, Gly, DAIa, Pro или desAla.
Ад e Ala, Gly, DAIa, Pro, линеен нисш алкил-аминокарбонова киселина или desAla. А5' е Lys^-Rj, R2)-Z, Orn(5-Ri, R2)-Z, NH(CH2)xN(R3, R4). Ag1 може да бъде също така Lys-Z, Orn-Z или Arg-Z, когато А-| не е His.
Rl е линейна нисша алкилна група или Н-атом. Когато Rf е Н, R2 не е Н; по същия начин - когато R2 е Н, R-| не е Н.
R3 е линейна нисша алкилна група или Н-атом.
R4 е линейна нисша алкилна група или Н-атом. Нисшата алкилна група включва 2 до около 10 въглеродни атома с неразклонена верига. Z е NH (линейна нисша алкилна група), N (линейна нисша алкилна група)2, 0
-4(линейна нисша алкидна група), NHg или ОН, при което линейната нисша алкилна група е както дефинираната по-горе.
х е от 2 до 15.
Cf е Ala.
С2 е Trp, Phe или ChxAla. За предпочитане е Сг да бъде Тгр или Phe. Още по-препоръчително е С2 да бъде Trp. С3 е DPhe, DPal или DChxAla. Предпочита се С3 да бъде DPhe.
И присъединителните (адитивни) соли на органични и неорганични киселини на всеки от споменатите полипептиди. Предпочетен полипептид е AjA2-Ala-C2-DPhe-A5, а още по-предпочетен е полипептида AvA2-Ala-Trp-DPheА5.
Кратко описание на фигурите
На фиг.1 са представени серия от графики, показващи нивата на човешки растежен хормон в серум, в зависимост от времето.
Ние открихме няколко нови полипептиди с къси вериги, които стимулират освобождаването и повишаването нивата на растежния хормон в кръвта на животните. Полипептидите са дефинирани от следната формула:
Af-A2-Ala-Trp-DPhe-A5, където:
Af е Gly, DAIa, β-Ala, His, Ser, Met, Pro, Sar, Ava, Aib, имидазол оцетна киселина, N-нисш алкил-аминокарбонова киселина, Ν,Ν-бис-нисш алкиламинокарбонова киселина, азол-карбонова киселина или нисш алкиламинокарбонова киселина, в която нисшата алкилна група включва от 2 до около 6 въглеродни атома в неразклонена верига. Нисшата алкилна група може да бъде заместена или незаместена. Предпочетените заместители са 0, N или Si. За предпочитане е нисшата алкилна група да бъде незаместена. Предпочетената азол-карбонова киселина е Να 4-имидазолоцетна киселина (ΙΜΑ). За предпочитане е А-j да бъде Gly, DAIa или His. Още по-препоръчително е А-| да бъде His или DAIa. най-добре е Af да бъде DAIa.
ί
Аг e DTrp, DpNal, D-4-Y-Phe или 5-Y-D-Trp, където Y e OH, Cl, Br, F или H. За предпочитане е A2 да бъде DpNal, D-4-Y-Phe или 5-Y-D-Trp. Най-добре е A2 да бъде DpNal. Y е препоръчително да бъде ОН или Н.
А5 е А3-А4-А51, А3-А5', А4-А5' или А5'. За предпочитане е А5 да бъде А5'. A3 е Ala, Gly, DAIa, Pro или desAla. A4 e Ala, Gly, DAIa, Pro, линеен нисш алкиламинокарбонова киселина или desAla. А51 е Lys(£-Ri,R2)-Z, Orn(5-R-|,R2)-Z, LArg (g-Rs-Rg), NH(CH2)xN(R3,R4). A5· може също така да бъде Lys-Z, Orn-Z или Arg-Z, когато Af не е His. Rj е линейна нисша алкилнаа група или водороден атом. R2 е линейна нисша алкилна група или водороден атом. Когато Rj е Н, R2 не е Н; по подобен начин - когато R2 е Н, R-| не е Н. R3 е линейна нисша алкилна група или Н-атом. R4 е линейна нисша алкилна група или Н-атом. R5 и Rg са линейни нисши алкилни групи. Нисшата алкилна група включва от 2 до около 10 въглеродни атома в неразклонена верига. За предпочитане е нисшата алкилна група да бъде от 2 до 6 въглеродни атома в неразклонена верига.
I
Нисшата алкилна група може да бъде заместена или незаместена. Предпочетени заместители могат да бъдат Ο, N или Si. За предпочитане е нисшата алкилна група да бъде незаместена. g означава гванидино. Z е МН(линейна нисша алкилна група), Щлинейна нисша алкилна група)2, 0(линейна нисша, алкилна група)р NH2 или ОН, където линейната нисша алкилна група е както дефинираната по-горе, х е за предпочитане от 2 до 6. А5 е за предпочитане Lys-NH2И присъединителни соли с органични или неорганични киселини на споменатите полипептиди.
Използуваните съкращения за аминокиселинни остатъци са съгласно стандартната пептидна номенклатура:
Gly | Глицин |
Туг | L-тирозин |
Не | L-изолевцин |
Glu | L-глутаминова киселина |
Thr | L-треонин | |
Phe | - | L-фенилаланин |
Ala | L-аланин | |
Lys | L-лизин | |
Asp | L-аспартова киселина | |
Cys | L-цистеин | |
Arg | L-аргинин | |
Ava | Аминовалерианова киселина | |
Aib | Аминоизомаслена киселина | |
Gin | L-глутамин | |
Pro | L-пролин | |
Leu | L-левцин | |
Met | L-метионин | |
Ser | L-серин | |
Asn | L-аспарагин | |
His | L-хистидин | |
Trp | L-триптофан | |
Vai | L-валин | |
DOPA | 3,4-дихидроксифенилаланин | |
Met(O) | Метионин сулфоксид | |
Abu | α-аминомаслена киселина | |
iLys | Νξ-Η3θπροππΛ-1-ΛΗ3ΗΗ | |
4-Abu | 4-аминомаслена киселина | |
Orn | L-орнитин | |
DaNal | а-нафтил-О-аланин | |
DpNal | р-нафтил-О-аланин | |
Sar | Саркозин | |
LArg | хомоаргинин | |
Chx | циклохексил | |
ChxAla | L-циклохексилаланин |
-7DChxAla - D-циклохексилаланин
IMA - Να-имидазол оцетна киселина
Tcc - 1,2,3,4-тетрахидро-7-каролин-3-карбонова киселина
Tic - 1,2,3,4-тетрахидроизохинолин-З-карбонова к-на
Tip - 4,5,6,7-тетрахидро-1Н-имидазол-6-карбонова киселина α,γΑΒυ - алфа, гама аминомаслена киселина
DPal - D-3-пиридил аланин (X Всички тези трибуквени съкращения на аминокиселините, предшествувани от буквата D, означават D-конфигурация на аминокиселинния остатък, а глицинът се смята като включен в термина природно срещащи се L-аминокиселини.
I
В тези полипептиди с къси вериги, някои позиции са по-склонни за промени отколкото други без да повлияват неблагоприятно на пептидната способност, стимулираща освобождаване и/или повишаване на нивата на растежния хормон в кръвта на животните. Например, А5 позицията (мястото). Други позиции са по-малко толерантни към такива промени. Например, средните аминокиселинни остатъци Ala, Trp, DPhe, означени съответно с С-|, С2 и С3. Например, по-рано се е вярвало, че А-| и Аз е трябвало да бъдат в L и D форма, създаващи последователност LD LD. Обаче, ние установихме, че последователността LD LD може да бъде DD LD такава. По такъв начин, открихме изненадващо, че полипептид с формула А1-А2-С1-С2-С3-А5, в която Αι, А2, А5 са както описаните по-горе и С-| е Ala, С2 е Trp, Phe и ChxAla и С3 е DPhe, DPal или DChxAla, ще способствува за отделянето на и/или повишаване на нивата на растежния хормон при животните.
За предпочитане е С2 да бъде Тгр или Phe, по-препоръчително е С2 да бъде Т гр.
За предпочитане е С3 да бъде DPhe. За предпочитане е, когато Ορ е
ChxAla, С3 да бъде DPhe. Когато С3 е DPal, за предпочитане е Z да бъде ОН.
Повишената гъвкавост, свързана с избора на основни, неутрални или кисели аминокиселинни остатъци и L и D форми, които могат да бъдат избирани за аминокиселините Α·|, А2, A3, А4, А5, С2 и С3, осигуряват голяма степен на контрол върху физио-химичните свойства на желаните пептиди.
Въпреки че DAIa-D3Nal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 и DALa-DpNal-Ala-PheDPhe-Lys-NH2 притежават подобна активност по отношение освобождаването на растежен хормон, заместването на Trp с Phe може да повиши химичната стабилност на DAIa-DpNal-Ala-Phe-DPhe-Lys-NH2, тъй като Тгр е по-чувствителен към окисление от Phe. Също така, заместването на Trp с Phe «to»·’ придава по-голяма хидрофобност на пептида и това физико-химично свойство, така както е описано по-долу, може да се окаже благоприятно по отношение повишената орална, трансдермална и/или назална абсорбция, както и за приготвяне рецептурите на полипептида. Освен това, ED50 (50%-ната ефективна доза) при хистаминов тест с клетки от плъх на DAIa-D8Nal-Ala-TrpDPhe-Lys-NH2 и DAIa-DpNal-Ala-Phe-DPhe-Lys-NH2 са почти еднакви, т.е. 30,5 +/- 0,5 и 30,8 +/- 0,3 мкг/мл и двата са по-добри по отношение на хистаминната активност в сравнение с Ala-His-D3Nal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2> която тук е 11,0 +/-1,0 мкг/мл. Пептидите с по-слаба активност за освобождаване на хистамин
2... (по-високи стойности на ED5Q) клинически могат да бъдат по-ефективни, тъй като биха предизвикали по-малко странични местни реакции в мястото на инжектиране на пептида и/или биха били по-слаби в предизвикването на странични системични антигенни клинични ефекти.
Тази гъвкавост осигурява също така важни предимства при приготвяне на рецептурите и подаване на желания пептид до всеки даден вид. Тези промени могат също така да подобрят оралното приемане, както и метаболизма и отделянето на пептидите. Например, Ala-His-DpNal-Ala-TrpDPhe-Lys-NH2 (Пептид освобождаващ растежен хормон 1 = ПОРХ-1) е много по-ефективен от Ala-His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 по отношение способ-9ността за освобождаване на растежен хормон при хората. Обаче, DAIa-DpNalAla-Trp-DPhe-Lys-NH2 (ПОРХ-2) е много по-ефективен от ПОРХ-1, когато се приема орално. Вижте фигура 1, която показва нивата на растежен хормон в серум при нормални млади хора в зависимост от времето след приемането на 300 мкг/кг ПОРХ-1 от 40 субекта в графата вляво (о), 600 мкг/кг ПОРХ-1 от 39 субекта в графата в средата (Δ) и 100 мкг/кг ПОРХ-2 от 11 субекта в графата вдясно ( ). При тези изследвания ПОРХ е даден първо в 20 мл вода, последвано веднага от 100 мл вода на нормални младежи със средна възраст около 25 години. Кръвта е взета, както е записано на картата. Растежния хормон е измерен радиоимунологично.
Г* Освен това се очаква, поради това, че в тези пептиди ароматните w
странични вериги могат да бъдат елиминирани на определени позиции, където предварително са били смятани за необходими, и поради факта, че Dаминокиселинните остатъци би трябвало да бъдат биологично по-защитени от L-формата, че може да се използува по-добра защита и по-малко тегло при някои от пептидите, които по-нататък да бъдат използувани за скрояване на полипептида, за да се променят някои от свойствата им, като тяхното назално, орално и трансдермално приемане, стабилността им in vivo и др.
Частите R-j, Rg, R3, R4 и Z могат също така да бъдат променяни, при което се създава допълнителен контрол върху физиолого-химичните свойства
Г' ·** на желаното съединение. В резултат на това може да се получи засилено подаване на пептид до специфичен рецептор и при специфични видове.
Предпочетените съединения освобождаващи растежен хормон, използувани в практиката на представеното изобретение са:
А-| -A2-Ala-T rp-DPhe-As, или органични или неорганични адитивни соли на някои полипептиди; където Α·|, А2 и А5 са както дефинираните по-горе.
В предпочетеното изпълнение, пептидът, освобождаващ растежен хормон, използуван в практиката на представеното изобретение, притежава формула:
I
-10DAIa-A2-Ala-T rp-DPhe-As, и органичните му и неорганични адитивни соли. Предпочетени представители на тази група съединения притежават формули:
DAIa-DpNal-Ala-Trp-DPhe-LysNH2
DAIa-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys^-iPr)NH2
DAIa-DT rp-Ala-T rp-DPhe-LysNH2
DAIa-DpNal-Ala-Trp-DPhe-NH(CH2)5NH2 NH2(CH2)5CO-DpNal-Ala-Trp-DPhe-NH(CH2)5NH2 както и органичните им и неорганични адитивни соли.
Понастоящем тези съединения са най-предпочетени, защото тези полипептиди с по-къси вериги са по-евтини за синтез и тези специфични съединения са показали, че са с по-висока степен при спомагането за повишаване на растежния хормон в серума.
Други предпочетени пептиди, освобождаващи растежен хормон, са с формулата A-|-A2-Ala-Phe-DPhe-A5. Предпочетени представители на тази група съединения са тези, в които Αί е Να-IMA, α,γΑΒΙΙ, DAIa, His или α,γΑΒυ, Аг е DpNal или DPhe, a А5 е LysNH2, Arg-NH2, NH-Che-NH2(1,4 Che-диамин) или Lys ЕА. Например:
Na-IMA-DP|Mal-Ala-Phe-DPhe-LysNH2, a,YABU-DpNal-Ala-Phe-DPhe-LysNH2, DAIa-DPhe-Ala-Phe-DPhe-LysNH2, Ala-His-DpNal-Ala-Phe-DPhe-LysNH2, NalMA-DpNal-Ala-Phe-DPhe-LysNH2, a,yABU-DpNal-Ala-Phe-DPhe-NH-Chx-NH21
DAIa-DpNal-Ala-Phe-DPhe-Lys EA, a,YABU-DpNal-Ala-Phe-DPhe-LysNH2l
DAIa-DpNal-Ala-Phe-DPhe-DArgNH2, както и органичните им и неорганични адитивни соли.
-11 Друго изпълнение на изобретението включва полипептиди с формула: А1-А2-С1-С2-С3-А5, в която С( е Ala, С2 е Тгр, Phe или CHxAla, С3 е DPhe или DChxAla, А-| е за предпочитане DAIa. А2 е за предпочитане DpNal. Например DAIa-DpNal-Ala-ChxAla-DPhe-LysNH2, DAIa-DpNal-Ala-Phe-DChxAla-LysNH2,
DAIa-DpNal-Ala-ChxAla-DChxAla-LysNH2, както и органичните им и неорганични адитивни соли.
Тези съединения, описани по-горе, са лесни за синтез, ефикасни при повишаване нивата на растежния хормон в серум и са желани за производство и приложение. В допълнение, за тези съединения могат да се посочат и тези предимства, че притежават физиолого-химични свойства, които са желателни за ефективно приемане на такива полипептидни съединения при голямо разнообразие от животински видове, поради гъвкавостта им, получена от различните заместители на различните позиции на полипептидните съединения; чрез подбиране на полярна, неутрална или неполярна природа на С-края и централните части на тези полипептиди, така че да бъдат съвместими с желания метод за приемане при орално, назално и непрекъснато приемане, като се използуват специални химични/механични способи на приемане.
Тези пептиди могат да бъдат използувани в терапията при всякакво ** приложение, при което може да се приложи растежен хормон като лечение на хипоталамусно-хипофизно недоразвитие (джуджета), остеопороза, изгаряния, при акутни носни заболявания, при счупване на костите и стимулиране заздравяването на рани. В допълнение, те могат да бъдат използувани за стимулиране на възстановяване след операции и след акутни или хронични изтощаващи заболявания. Наблюдават се благоприятни анаболни ефекти върху кожата, мускулите и костите във връзка с процесите на стареене със значително понижаване на затлъстяването. С тези пептиди също така е възможно и обработката на пациенти болни от рак, например за предпазване и/или намаляване на хроничното умствено изтощение при такива пациенти.
ί
-12Тези терапевтични приложения са свързани с използуването на терапевтично ефективно количество от пептида. Това е количеството, необходимо за да се стимулира in vivo повишаване нивото на растежния хормон.
Съединенията от това изобретение могат да се използуват за повишаване на нивото на растежния хормон в кръвта на животни; повишаване млеконадоя при крави; повишаване на теглото при бозайници (например хора, овце, едър рогат добитък и свине), както и при риби, птици, други гръбначни и безгръбначни, както и за повишаване добива на вълна и/или кожи при бозайниците. Степента на растеж на тялото зависи от пола и възраста на животинските видове, количеството и вида на осбождаващото растежния хормон съединение, което се поема, както и начина приемане и др. Също така, съединенията от представеното изобретение повишават нивото на растежния хормон в серума при хората; увеличават нарастването на теглото при зле развити деца; понижават затлъстяването и подобряват метаболизма на протеините при подбрани деца, подобряват метаболизма на протеините на кожата, мускулите, костите, като същевременно понижават затлъстяването при по-възрасните, особено, когато е налице недостатък на растежен хормон.
Тези пептиди са също така полезни за подобряване картината на серумните липиди при хората, чрез понижаване количеството на серумния холестерол и на липопротеина с ниска плътност и повишаване количеството на липопротеина с висока плътност в серума.
Новите полипептидни съединения от това изобретение могат да бъдат синтезирани съгласно познати методи в пептидната химия в разтвор и твърда фаза или по класическите методи, известни в химията.
За пептидните амиди, твърдофазният синтез е за предпочитане, като се започне от С-края на пептида. Например, подходящ изходен материал може да се получи чрез свързване на желаната, защитена алфа-аминокиселина към хлорметилирана смола, бензхидриламинна смола или пара-метилбензхидриламинна смола. Един вид такава смола се продава под търговската марка BIOBEADS SX-1, произведена от Био Рад Лабораторийз, в Ричмонд,
-13щата Калифорния. Получаването на хидроксиметилова смола е описано от Bodansky et al., Chem.Ind.(London) 38, 1597 (1966). Бензхидриламинната смола е описана от Pietta and Marshall, Chem. Comm., 650 (1970) и е достъпна в търговията от фирмата Пенинсула Лабораторийз Инк. Белмонт, Калифорния.
След първоначалното свързване, алфа-амино защитната група може да се отстрани чрез богат избор от киселинни реагенти, включващи разтвори на трифлуороцетна киселина или солна киселина в органични разтворители при стайна температура. След отстраняване на алфа-амино защитната група, останалите защитени аминокиселини могат да се свържат постепенно в желан порядък. Всяка защитена аминокиселина може да реагира в приблизително трикратен излишък, като се използува съответния активатор на карбоксилна група, като дициклохексил-карбодиимид или диизопропил карбодиимид в разтвор, например на метилен хлорид (CH2CI2) или диметилформамид (ДМф) или в смес от тях.
След като е завършена желаната последователност от аминокиселини, желаният пептид може да бъде отцепен от бензилхидрил-аминната смола чрез обработка с реагент като например флуороводород (HF), който не само отцепва пептида от смолата, но също така отцепва най-широко използуваните защитни групи на страничната верига. Когато се използува хлорометилова или хидроксиметилова смола, обработката с флуороводород води до образуването на свободна пептидна киселина. Обаче, пептидните алкиламиди и естери могат да бъдат получени лесно от тези пептидни смоли, чрез отцепване с подходящ алкиламин, диалкиламин или диаминоалкан или чрез трансестерификация с алкохол при високи стойности на pH на средата.
Процедурата твърдофазен синтез, разгледана по-горе е добре известна в практиката и е описана от Steward and Young, Solid Phase Peptide Synthesis: Second Edition (Pierce Chemical Co., Rockford, IL 1984).
Някои от добре известните методи в разтвор, които могат да бъдат използувани за синтез на пептидните части от това изобретение, са дадени от
-14Bodansky et al., Peptide Synthesis 2nd Edition, John Wiley and Sons, New York, N.Y. 1976.
Смята се, че ще бъде по-препоръчително, ако пептидите се синтезират по метода в разтвор, който включва кондензационна реакция на най-малко два пептидни фрагмента.
Този метод включва кондензиране на пептидния фрагмент X-Aj-Y с пептидния фрагмент U-V-W, при което всички аминокисели странични вериги, с изключение на А-| са неутрални или защитени и където X е Prot., при което Prot. означава защитна група на N-края; Y е A2-Q, Ala-A2-Q, Ala-A2-Ala-Q, А2Ala-Trp-Q, Ala-A2-Ala-Trp-Q, Ala-Q или -Q, където Y e Q, U e J-A2-Ala-Trp или JAla-A2-Ala-Trp. Когато Y e Ala-Q, U e J-A2-Ala-Trp. Когато Y e A2-Q или Ala-A2Q, U е J-Ala-Trp. Когато Y е A2-Ala-Q или А1а-А2-Аз-0, U е J-Trp. Когато Y е АгAla-Trp-Q или Ala-A2-Ala-Trp-Q, U е J. V е А5 или Z. Когато V е А5, W е Z. Когато V е Z, W липсва. Af, Аг, А5 и Z са както дефинираните по-горе.
Q е карбокси-края на пептиден фрагмент и е -OR3 или -М, където М е частта, способна да бъде изместена от азот-съдържащ нуклеофил и R3 е Н, акилова група, съдържаща един до около 10 въглеродни атома, арилова група, притежаваща от 6 до около 12 въглеродни атома или арилалкилова група, притежаваща от, 7 до около 12 въглеродни атома; J означава аминокрая на даден фрагмент и е Н или защитна група, която не пречи на свързващата ч», реакция, например, бензил.
След което, защитните групи се отстраняват.
Съответно, така полученият защитен пептид може да се използува за по-нататъшни кондензации, за да се получи по-голям пептид.
Този предпочетен метод е описан по-подробно в U.S. Patent Application Serial Number 558,121, изпълнен на 24.07.1990 от John С. Hubbs и S.W.Parker, озаглавен Process for Synthesizing Peptides (Метод за синтез на пептиди), който е вкючен тук и е публикуван като W09201709.
Съгласно друго изпълнение на представеното изобретение, даден е метод за стимулиране освобождаването и/или повишаване на нивото на
-15растежния хормон в кръвта на животно. Този метод за стимулиране освобождаването и/или повишаването нивото на растежния хормон може да бъде използуван също така в терапията на гореспоменатите заболявания. Споменатите методи включват приемането от животните на ефективна доза от поне един от споменатите по-горе полипептиди. В едно от изпълненията този метод е използуван при животни, а не при хора.
Съединенията от представеното изобретение могат да бъдат приемани орално, парентерално (като мускулна (i.m.), интрапериториална (i.p.), венозна (i.v.) или подкожна (s.c.) инжекция); назално, вагинално, ректално или подезично, както и чрез белодробни инхалации и могат да бъдат приготвени в такива дози и форми, които да отговарят на предпочетения начин на приемане.
Твърдите форми за орално приемане включват капсули, таблети, хапчета, прахове и гранули. В тези твърди форми активната съставка се смесва с най-малко един инертен носител, като захароза, лактоза или скорбяла. Тези форми често включват, както е прието в нормалната практика, допълнителни субстанции, освен инертните разредители, т.е. смазващи агенти, като магнезиев стеарат. В случай на капсули, таблети и хапчета, могат да се включат също така и буферни агенти. Таблетите и хапчетата могат да бъдат допълнително покрити за по-лесно приемане.
Течните форми за орално приемане включват емулсии, разтвори, суспенсии, сиропи, еликсири, съдържащи широко използувани инертни разредители, например, вода. Освен тези инертни разредители, съставите могат да включват също така и други добавки, като омокрящи агенти, емулгатори и суспендиращи агенти и подсладители, ароматизиращи и парфюмиращи агенти.
Препаратите, съгласно представеното изобретение, предназначени за парентерално приемане, включват стерилни водни или неводни разтвори, суспенсии или емулсии. Примери за неводни разтворители или носители са пропилен гликол, полиетилен гликол, растителни масла, като маслиново или
-16царевично масло, желатин и инжектируеми органични естери като етилолеат. Тези състави могат също така да съдържат и други добавки, като консерванти, омокрящи, емулгиращи и диспергиращи агенти. Те могат да бъдат стерилизирани чрез филтруване през филтър, задържащ бактериите, чрез включване на стерилизиращи агенти в съставите или чрез нагряването им. Те могат да бъдат приготвяни непосредствено преди приложението им със стерилна вода или с някои други стерилни среди.
Новите съединения на представеното изобретение са също така полезни при комбинираното им приемане с хормон, освобождаващ растежен хормон (т.е. естествен хормон, освобождаващ растежен хормон, както и неговите аналози и функционални еквиваленти), както и в комбинация с други съединения, които спомагат за освобождаването на растежен хормон, напр. пептиди, освобождаващи растежен хормон (вижте Патент на САЩ ао. 4,880,778), например инхибитори на ацетилхолинестераза, бета-адренергични блокиращи агенти, алфа-адренергични блокиращи агенти и др. Тези комбинации представляват специално предпочетени средства за поемане на пептидите, съгласно представеното изобретение, освобождаващи растежен хормон, защото комбинацията спомага освобождаването на много повече растежен хормон, отколкото е предсказано от сумирането на индивидуалните отговори за всеки компонент от комбинацията, т.е. комбинацията осигурява синергичен отговор спрямо отделните компоненти. Повече подробности за приемането на комбинации от пептиди, освобождаващи растежен хормон, са описани в горепосочения патент. Такива синергисти са за предпочитане съединенията, които действуват като агонисти върху рецептора на хормона, освобождаващ растежен хормон или инхибират ефекта на соматостатина. Синергизмът може да бъде двоен, т.е. съединението на изобретението и едно от синергично действуващите съединения или да включва повече от едно синергично действуващо съединение.
Комбинациите, които могат да предизвикат освобождаването и повишаването нивото на растежния хормон в кръвта на животински видове,
-17каквито се хората, включват ефективно количество полипептиди, подбрани от заявените в представеното изобретение полипептиди и най-малко един от следните групи: полипептиди Група 1 или съединение, което спомага за освобождаване на растежен хормон, т.е. Група 2 полипептиди, като полипептидите от Група 1 са подбрани от някои срещащите се в природата хормони, освобождаващи растежен хормон и функционалните му еквиваленти, при което споменатите полипептиди действуват върху рецептора на хормона, освобождаващ растежен хормон при бозайниците и другите гръбначни и безгръбначни;
Полипептидите от Група 2 са притежаващи структурата:
Tyr-DArg-Phe-NH2; Tyr-DAIa-Phe-NH#
Tyr-DArg (NO2)-Phe-NH2; Tyr-DMet (OJ-Phe-NHg; Tyr-DAIa-Phe-Gly-NHg; Tyr-DArg-Phe-Gly-NH2;
Tyr-DThr-Phe-Gly-NH2;
P he-DA rg - P he-G ly-N H2;
Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2; Tyr-DAIa-Gly-Phe-NH2;
T y r-DArg-Gly-T rp-N Η2;
Tyr-DArg(NO2)-Phe-Gly-NH2; Tyr-DMet (O)-Phe-Gly-NH2; (NMe)Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2; Tyr-DArg-Phe-Gly-ол;
Tyr-DArg-Gly-(NMe)Phe-NH2;
Tyr-DArg-Phe-Sar-ол;
Tyr-DAIa-Phe-Sar-ол;
Tyr-DAIa-Phe-Gly-Tyr-NH2;
подбрани от някои от полипептидите,
-18Tyr-DAIa-(NMe)Phe-Gly-Met(O)-OA;
T y r-DArg- (N Me) Phe-Gly- M et (О)-ол;
Gly-Tyr-Darg-Phe-Gly-NH2;
Tyr-DThr-Gly-Phe-Thz-NH2;
Gly-Tyr-DAIa-Phe-Gly-NH2J Tyr-DAIa-Phe-Gly-ол;
Tyr-DAIa-Gly-(NMe) Phe-Gly-ол;
Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2!
Tyr-DAIa-Phe-Sar-NH2;
Tyr-DAIa-Gly-(NMe)Phe-NH2; Sar-Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2!
W
Tyr-DCys-Phe-Gly-DCys-NH2 (цикличен дисулфид); Tyr-DCys-Phe-Gly-DCys-NH2 (свободен дитиол); Tyr-DCys-Gly-Phe-DCys-NH2 (цикличен дисулфид); Tyr-DCys-Gly-Phe-DCys-NH2 (свободен дитиол); Tyr-DAIa-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2!
Tyr-DAIa-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH2;
Tyr-DAIa-Phe-Sar-Phe-Pro-Ser-NH2; Tyr-DAIa-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2;
T y r-DAIa-Phe-Sar-T y r-Hy p-Ser-N H 2 J Tyr-DAIa-Phe-Sar-Phe-Hyp-Ser-NH2;
Tyr-DArg-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2', Tyr-DArg-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH2;
Tyr-DArg-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH2; Tyr-DArg-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2;
както и адитивните им соли с органични или неорганични киселини на споменатите полипептиди от Група 2; при което споменатата комбинация се приема в такова съотношение, че да бъде ефективно за получаването на синергичното освобождаване на растежен хормон, както и за повишаване нивото му в кръвта на съответния животински вид.
-19На работещите в тази област са известни и други съединения, които спомагат за освобождаването на растежни хормони и те включват инхибитори на ацетилхолинестераза, β-адренегични блокиращи агенти и а2-адренергични блокиращи агонисти.
В едно от предпочетените изпълнения са използувани естествени хормони, освобождаващи растежния хормон и техните функционални еквиваленти заедно със съединения, които спомагат за освобождаване на растежни хормони и с представените пептиди. Например, съединенията от Група 1 и Група 2, заедно с представените пептиди. Друг пример е съединенията от Група 1 или бета-адренергични блокиращи агенти, заедно с представените пептиди.
Количеството на приетия полипептид или на комбинацията от полипептиди на представеното изобретение ще зависи от голям брой фактори, напр. желаният терапевтичен ефект, пътя на приемане и какъв полипептид или
I комбинация от полипептиди ще се използува. Във всички случаи, обаче, трябва да се поеме ефективна доза (терапевтично ефективно количество), предизвикващо освобождаването на растежен хормон или повишаването му в кръвта на приемащото животно. Обикновено, тази доза се намира в диапазона между около 0,1 мкг (микрограм) до 10 мг (милиграма) общо количество полипептид на килограм телесно тегло. Предпочетеното количество може да се определи лесно емпирично от специалистите в тази област на базата на представеното описание.
Например, при хора и венозно приемане, препоръчителната доза е в интервала от около 0,1 мкг до 10 мкг полипептид за кг телесно тегло, попрепоръчително - около 0,5 мкг до 5 мкг общо количество полипептид на кг телесно тегло и още по-препоръчително - около 0,7 мкг до около 3,0 мкг за кг телесно тегло. Когато се използува комбинация от пептиди, освобождаващи растежен хормон, могат да се използуват по-малки количества от дадените в представеното описание пептиди. Например, комбинирайки описаните тук пептиди с например, синергично съединение от Група 1 на Патент на САЩ No.
-204,880,778, като например ПОРХ, препоръчителният диапазон е около 0,1 мкг до около 5 мкг от описаното тук съединение за кг телесно тегло и около 0,5 мкг до около 15 мкг синергично съединение (напр. ПОРХ) и по-препоръчително - около 0,1 мкг до около 3 мкг от представеното съединение с около 1,0 мкг до около 3,0 мкг от синергичното съединение за килограм телесно тегло.
Когато пътят на приемане е орален, обикновено са необходими поголеми дози. Например, при хора за орално приемане, нивото на дозировката е типично около 30 мкг до около 1200 мкг полипептид за кг телесно тегло, попрепоръчително - около 70 мкг до около 600 мкг полипептид за кг телесно тегло и още по-препоръчително - около 200 мкг до около 600 мкг общо количество полипептид за кг телесно тегло. Кравите и прасетата изискват приблизително същите дози, както и хората, докато плъховете изискват повисоки дозировки. Точното количество може да се определи лесно емпирично на базата на представеното описание.
В общи линии, както беше казано по-горе, приемането на комбинация от пептиди, освобождаващи растежни хормони, позволява понижаване на дозировката на отделните съединения, които ще се използуват, поради синергичния ефект на комбинацията.
Включени в представеното изобретение са също така и състави, включващи, като активна съставка, органични и неорганични адитивни соли на гореописаните полипептиди и техните комбинации, обикновено, свързани с носител, разредител, свързващо вещество за бавно отделяне или покритие.
Органичните или неорганични адитивни соли на съединенията, освобождаващи растежен хормон или на комбинацията им, замислени като част от представеното изобретение, включват органични соли като ацетат, трифлуорацетат, оксалат, валерат, олеат, лаурат, бензоат, лактат, тозилат, цитрат, малеат, фумарат, сукцинат, тартарат, нафталат и др. под. и такива неорганични соли като солите на алкални и алкалозевни метали, амониеви и протаминови соли, цинк, желязо и други с противойоните им като хлорид, бромид, сулфат, фосфат и др., както и органичните части, споменати по-горе.
-21 Когато съставите са предназначени за приемане от хора, за предпочитане са фармацевтично приемливи соли. Тези соли включват нетоксичен алкален метал, алкалоземен метал и амониеви соли, използувани нашироко във фармацевтичната практика, например, натрий, калий, литий, калций, магнезий, барий, амониев хидроокис и др., които се получават по известни методи. Терминът включва също така нетоксични киселинни адитивни соли, които, обикновено се получават при взаимодействието на съединенията от представеното изобретение с подходяща органична или неорганична киселина. Представители на тези соли включват хидрохлорид, хидробромид, сулфат, бисулфат, ацетат, оксалат, валерат, олеат, лаурат, борат, бензоат, лактат, фосфат, тозилат, цитрат, малеат, фумарат, сукцинат, тартарат, нафтилат и др.
Изобретението ще бъде илюстрирано по-нататък със следните неограничаващи примери.
ПРИМЕРИ ЗА ИЗПЪЛНЕНИЕ НА ИЗОБРЕТЕНИЕТО
ПРИМЕР 1
Синтез на пептиди, освобождаващи растежен хормон
В реакционния съд на търговски достъпен пептиден синтезатор се поставя параметил-бензхидриламин-хидрохлоридна смола (pMe-BHA.HCI). Смолата се замества със свободен амин до натоварване от около 5 ммола за грам. Съединенията се получават чрез свързване на отделните аминокиселини, като се започне от С-края на пептидната последователност, като се използува подходящ активиращ агент, като например Ν,Ν’дициклохексилкарбодиимид (DCC). Алфа-аминът на отделните аминокиселини се защитават, например като t-бутилоксикарбонилно производно (t-Boc), а реактивните функционални групи на страничната верига се защитават, както е показано на Таблица 1.
-22ТАБЛИЦА1
Защитни групи на страничната верига, подходящи за твърдофазен синтез на пептиди
Аргинин: | NS-тозил (толулолсулфонил) |
Аспартова киселина: | О-бензил |
Цистеин: | S-пара-метилбензил |
Глутаминова киселина: | О-бензил |
Хистидин: | №т-тозил |
Лизин: | м£-2,4-дихлоробензилоксикарбонил |
Метионин: | S-сулфоксид |
Серин: | О-бензил |
Треонин: | О-бензил |
Триптофан: | №п-формил |
Т ирозин: | 0-2,6-дихлоробензил |
Преди включването на началната аминокиселина, смолата се разбърква трикратно (около 1 минута всяко разбъркване) с дихлорметан (CH2CI2; около 10 мл/г смола), неутрализира се с три разбърквания (около 2 минути всяко) с Ν,Ν'-диизопропилетиламин (DIEA) в дихлорметан (10:90; около 10 мл/г смола) и се разбърква трикратно (около 1 минута всяко) с дихлорметан (около 10 мл/г смола). Началната и всяка следваща аминокиселина се свързва със смолата, като се използува предварително формиран симетричен анхидрид на подходящо защитена киселина, при използуване около 6,0 пъти общото количество от реакционния капацитет на смолата и около 2,0 пъти тоталния свързващ капацитет на смолата на диизопропилкарбодиимид в подходящо количество дихлорметан. За аминокиселини с ниска разтворимост в дихлорметан, се прибавя N,Ν'-диметилформамид за постигане на хомогенен разтвор. Общо взето, симетричният анхидрид се приготвя до 30 минути преди въвеждането му в реакционния съд при стайна или под стайна температура.
-23Дициклохексилкарбамидът, който се получава по време на образуването на синтетичния анхидрид се отстранява чрез декантиране и филтруване на разтвора в реакционния съд. Степента на свързване на аминокиселината със смолата обикновено се следи чрез цветна реакция, като се използува някакъв реагент, като например нинхидрин (който реагира с първичните и вторични амини). При завършване на свързването на защитената аминокиселина със смолата (> 99%), алфа-амино защитната група се отстранява чрез обработка с киселинен реагент(и). Широкоизползуваният реагент се състои от разтвор на трифлуороцетна киселина в дихлорметан (33:66).
След като е завършена желаната последователност от аминокиселини, желаният пептид може да бъде отцепен от смолата-носител чрез обработка с някакъв реагент, например флуороводород (HF), който не само отцепва пептида от смолата, но също отцепва и най-често използуваните защитни групи на страничната верига. Когато е използувана ВНА или р-Ме-ВНА смола, обработката с HF води директно до получаването на свободни пептидни амиди. Когато се работи по метода на Merrifield, свободните пептидни алкиламиди се отцепват чрез обработка със съответен амин (в този случай, използуването на Boc-Ne-FMOC-Lys ще позволи едновременното отстраняване на групата FMOC).
Пълната процедура на включване на всеки отделен аминокиселинен w остатък в смолата е показана на Таблица 2.
ТАБЛИЦА 2
Процедура на включване на отделните аминокиселини в смолата Реагент Разбърквания
Време/Разбъркване
1. Дихлорметан 3 1 мин
2. TFA - Дихлорметан 1 2 мин (33:66)
3. TFA - Дихлорметан мин (33:66)
4. Дихлорметан
5. DIEA, DMF
6. Дихлорметан
7. Вос аминок-на/DIC
3 | 1 мин | |
2 | 2 мин | |
3 | 1 мин | |
1 | 15-120 мин* |
мин
8. Дихлорметан
10. Следене хода на реакцията**
11. Повторете етапи 1-12 за всяка отделна аминокиселина * Времето на свързване варира в зависимост от отделната аминокиселина ** В общи линии степента на свързване може да се проследява с цветна реакция. Ако свързването не е завършило, същата киселина може да бъде свързана с друг реагент, напр. HOBt активен естер. Ако свързването е завършило, след това може да свърже следващата аминокиселина.
Като се използува тази процедура, бяха получени съединенията, описани в Таблици 3, 4,5 и 6.
ПРИМЕР 2
Освобождаване In Vivo на растежен хормон при плъхове
Недоразвити женски плъхове Sprague-Dawley са получени от Чарлз Ривър Лабораторийз (Уйлмингтън, Масачузетс). След пристигането те бяха хоспитализирани при 25°С с цикъл светло:тъмно 14:10 часа. Вода и храна за плъхове Пурина получават в изобилие. Малките са държани при майките им до 21 ден.
26-дневни плъхове, по 6 за всяка група са анестезирани интерперитониално с 50 мг/кг пентобарбитал 20 минути преди венозната обработка с пептид. Нормален солен разтвор с 0,1% желатин е носителят за венозните инжекции на пептидите. Анестезираните плъхове, тежащи 55 - 65 грама, се
-25инжектират венозно с количество от съединенията, освобождаващо растежен хормон, както е дадено в Таблица 3. Инжектира се 0,1 мл разтвор в югуларната (шийна) вена.
Всички животни се умъртвяват чрез обезглавяване 10 минути след последната инжекция (вижте Таблица 3). След обезглавяването се събира артериалната кръв за определяне на нивото на растежния хормон. След като се остави кръвта да се съсири, тя се центрофугира и серумът се отделя от съсирената част. Серумът се запазва замразен до деня на вземане на проба за радиоимунологичен анализ (РИА) на нивото на растежния хормон, съгласно дадената по-долу процедура, разработена от Националният институт по артрит, диабет и заболявания на храносмилателната система и бъбреците (NIADDK).
Реагентите обикновено се поставят в епруветките за РИА анализ при температура около 4°С в следната последователност:
(а) буфер, (б) студен (т.е. нерадиоактивен) стандарт или неизвестен серум, който ще се анализира, (в) радио-йодиран антиген на растежен хормон и (г) антисерум на растежен хормон.
Прибавянето на реагентите се извършва така, ча да се получи крайно разреждане в РИА епруветката около 1:30 000 (антисерум към общия обем течност: обем:обем). След това смесените реагенти се инкубират при стайна температура (около 25°С) в продължение на 24 часа преди прибавянето на второ антитяло (напр. анти-маймунен гама глобулинов серум), което се свързва и предизвиква утаяване на комплексирания антисерум на растежния хормон. Утаените съдържания на епруветките от РИА след това се анализират за броя на импулсите за определен период от време в гама-сцинтилационен брояч. Приготвя се стандартна крива, чрез нанасяне на броя на радиоактивните импулси спрямо нивото на растежния хормон. След това
-26нивата на растежния хормон в неизвестните проби се определят чрез сравняване със стандартната крива.
Серумният растежен хормон се измерва с РИА с реагенти, доставени от Националната програма по хормони и хипофиза.
Серумните нива в Таблица 3 са дадени в нг(нанограм)/мл, преизчислени за стандарт растежен хормон при плъх 0,61 международни единици/мг (IU/mg). Данните са дадени като средни +/- средна стандартна грешка. Статистическият анализ е направен със студентски t-тест. В Таблица 3 са дадени средните изследвания от шест плъха.
В Таблица 3, съединенията от изобретението са сравнени със съединения, които са извън представената обща формула и е показано, че стимулират освобождаването на растежен хормон и повишават съдържанието му в кръвта на плъхове, на които тези съединения са дадени по гореописания начин. Изненадващата активност за отделяне на растежен хормон от >
предпочетените съединения е с твърде висока стойност, тъй като полипептиди с по-къса верига и с по-ниско молекулно тегло, със сравнително устойчивата и евтина аминокиселина D-аланин в аминокрая и пентандиамин вместо Lys в Скрая доказват, че са по-евтини средства за повишаване нивото на растежния хормон при животните и човека.
ПРИМЕР 3
Освобождаване In Vivo на растежен хормон при плъхове, след орално приемане
Повторена е процедурата от Пример 2, с изключение на това, че на плъховете са дадени посочените дози от съединенията, чрез стомашни сонди. Приетите съединения, използуваните дози и резултатите са дадени в Таблица 4.
Съединенията от представеното изобретение запазват полезно ниво на активността за освобождаване на растежен хормон, както е показано при •27Таблица 3
Освобождаване на РХ In Vivo, стимулирано от съединения, освобождаващи растежен хормон в плъхове, анестезирани с пентобарбитал (животните са умъртвени 10 мин след последната инжекция, брой на опитите » 6)
Пептид, осв. РХ Ala-His-D0Nal· Ala -Trp-DPhe- Lys-NH2 b | обща доза® мкг/вен. .1 .3 1.0 3.0 | Контрол серум РХ нг/мл | РХ освободен серумен РХ нг/мл 610 + 90 1140 + 187 2909 + 257 3686 + 436 | ||
337 337 337 337 | + + + + | 51 51 51 51 | |||
His-DTrp-Ala-Trp· | .1 | 131 | + | 43 | 540 + 148 |
DPhe-Lys-NH2 b | .3 | 131 | + | 43 | 751 + 88 |
1.0 | 131 | + | 43 | 1790 ± 252 | |
3.0 | 131 | + | 43 | 2481 + 209 |
DAla-D/3Nal-Ala- | .1 | 337 | + | 51 ' | 1381 | + | 222 |
Trp-DPhe-Lys-NH2 | .3 | 337 | 51 | 2831 | + | 304 | |
1.0 | 337 | + | 51 | 2886 | + | 179 | |
3.0 | 337 | + | 51 | 3678 | + | 287 |
Ala-D^Nal-Ala· | |||||||
Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0.3 | 167 | + | 46 | 363 | + | 73 |
1.0 | 167 | + | 46 | 1450 | + | 294 | |
3.0 | 167 | + | 46 | 2072 | + | 208 | |
10.0 | 167 | 46 | 2698 | + | 369 |
DAla· U?Nal-Ala· | |||||||
Trp-DPhe-Lys-NH2 | .1 | 263 | + | 45 | |||
.3 | 160 | + | 151 | 315 | ± | 85 | |
1.0 | 160 | + | 151 | 426 | + | 41 |
I.
•28-
DAla-DTrp-Ala-Trp- | |||
DPhe-Lys-Nl·^ | . 1 | 111 + 24 | 526 + 86 |
. 3 | 111 + 24 | 1608 + 204 | |
1.0 | 111 ± 24 | 2820 + 346 | |
3.0 | 111 + 24 | 2437 + 214 | |
Ala-D0Nal-Ala- | |||
NMeTrp-DPhe-Lys-NHj | . 1 | 167 + 46 | 144 + 20 |
0.3 | 167 + 46 | 258 + 28 | |
1.0 | 167 + 46 | 261 ± 24 | |
3.0 | 167 + 46 | 277 + 85 | |
D-Leu-D0Nal· | |||
Ala-Trp-DPheLys-NH2 | .1 | 160 + 51 | 256 + 94 |
. 3 | 160 ± 51 | 452 + 49 | |
1.0 | 160 ± 51 | 355 + 94 | |
D-Trp-D/3Nal-Ala- | 1 | ||
Trp-DPhe-Lys-NH2 | .1 | 160 + 51 | 226 + 61 |
.3 | 160 + 51 | 245 + 27 | |
1.0 | 160 ± 51 | 437 + 62 | |
Ala-His -D/9Nal -Ala- | |||
Trp-DPhe-Lys-NH2 b | .3 | 160 + 51 | 1418 + 302 |
• | 1.0 | 160 + 51 ' | 2201 ± 269 |
His-DTrp-Ala-Trp | |||
DPhe-Lys-NH2 | .1 | 140 + 10 | 200 + 40 |
.3 | 140 + 10 | 505 ± 50 | |
1.0 | 140 + 10 | 1640 + 215 | |
DAsn-D^Nal-Ala- | |||
Trp·DPhe·Lys-NH2 | .1 | 228 + 23 | 122 + 38 |
.3 | 228 + 23 | 195 ± 21 | |
1.0 | 228 + 23 | 197 + 47 | |
DHis-D^Nal-Ala- | |||
Trp-DPhe-Lys-NHj | .1 | 228 + 23 | 386 ± 81 |
.3 | 228 + 23 | 605 + 82 | |
1.0 | 228 + 23 | 930 + 96 |
ί
DLys-D0Nal-Ala - | |||||||
Trp-DPhe·Lys·ΝΗ2 | . 1 | 228 | + | 23 | 262 | + | 31 |
.3 | 228 | + | 23 | 340 | + | 86 | |
1.0 | 228 | + | 23 | 335 | + | 56 |
DSer-D/JNal-Ala- | |||
Trp-DPhe-Lys-NHj | . 1 | 228 ± 23 | 226 + 11 |
.3 | 228 + 23 | 171 + 48 | |
1.0 | 228 ± 23 | 212 ± 43 | |
Ala-His-D0Nal-Ala- | |||
Trp-DPhe-Lys -NH2 | ..3 | 228 + 23 | 1746 + 318 |
1.0 | 228 + 23 | 2610 ± 176 | |
Gly-D0Nal-Ala-Trp- | |||
DPhe-Lys-NH2 | .3 | 160 ± 36 | 1237 + 249 |
1.0 | 160 ± 36 | 2325 + 46 | |
3.0 | 160 + 36 | 2694 ± 370 | |
10.0 | ‘160 ± 36 | 3454 + 159 | |
Ser-D0Nal-Ala- | |||
Trp-DPhe-Lys-NH2 | .3 | 160 + 36 | 227 + 39 |
1.0 | 160 ± 36 | . 595 + 112 | |
3.0 | 160 + 36 | 1303 + 281 | |
10.0 | 160 + 36 | 2919 + 320 | |
Mec-D^Nal-Ala- | |||
Trp-DPhe-Lys-NH2 | .3 | 160 ± 36 | 181 + 48 |
1.0 | 160 + 36 | 226 ± 58 | |
3.0 | 160 + 36 | 316 + 66 | |
10.0 | 160 ± 36 | 1010 i 236 | |
Ala-His-D^Nal-Ala- | |||
Trp-DPhe-Lys-NHjb | 0.1 | 160 + 36 | 822 + 243 |
0.3 | 160 + 36 | 1594 ± 292 | |
1.0 | 160 ± 36 | 2180 + 284 | |
Gln-D/9Nal -Ala-Trp- | |||
DPhe-Lys-NHn | 0.3 | 131 + 43 | 124 + 15 |
1.0 | 131 + 43 | 340 ± 66 | |
3.0 | 131 + 43 | 476 + 109 | |
10.0 | 131 + 43 | 673 + 228 |
Pro-D/9Nal-Ala-Trp·
DPhe-Lys-NHo 0.3
1.0
3.0
135 + 32
135 ± 32
135 + 32
264 + 31
513 + 123
1690 + 103
Gly-D0Nal-Ala-Trp·
DPhe-Lys-NH, 0.3
1.0
3.0
215 + 33
215 + 33
215 + 33
1301 + 260
2211 ± 146
2364 + 365
NaAcecyl -Gly D^Nal-Ala-Trp-DPheLys-NH2
Sar-D^Nal-Ala-TrpDPhe-Lys-NH2
Dj3Nal-Ala-Trp-DPhe·
Lys-NH2
NaAcetyl-D0Nal-AlaTrp-DPhe-Lys-NH2
0.3 | 262 | + | 53* | 268 | + | 21 |
1.0 | 262 | + | 53* | 599 | + | 219 |
3.0 | 262 | + | 53* | 626 | + | 210 |
0.3 | 262 | + | 53* | 908 + | 264 |
1.0 | 262 | + | 53* | 1681 + | 262 |
3.0 | 262 | + | 53* | 2600 + | 316 |
0.3 215 ±33
1.0 215 +33
3.0 215 +33
436 + 98
660 + 151
776 + 274
0.3 | 262 | + | 53* | 339 + | 17 | |
1.0 | 262 | + | 53* | 430 | + | 136 |
3.0 | 262 | + | 53* | 634 | + | 118 |
NaIsopropyl-D0Nal-AlaTrp-DPhe-Lys-NH? 0.3
1.0
3.0
Nadiechyl-D^Nal-Ala·
Trp-DPhe-Lys-NH2
262 + 53* 541 +179*
262 + 53* 972 +247*
262 ± 53* 1636 +371*
0.3 | 127 | + | - _ w 32 | 462 | + | 132 |
1.0 | 127 | + | 32* | 899 | + | 160 |
3.0 | 127 | + | 32* | 1786 | + | 373 |
I
Naethyl-D0Nal-Ala-
Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0.3 | 135 ± 32 | 531 + 80 |
1.0 | 135 + 32 | 1156 + 250 | |
3.0 | 135 + 32 | 2664 + 225 | |
Gly-D0Nal-Ala-Trp- | |||
DPhe-Lys-NH2 | 0.3 | 135 + 32 | 1387 + 352 |
1.0 | 135 + 32 | 1958 ± 353 | |
3.0 | 135 + 32 | 2605 ± 97 | |
/3Ala-D/3Nal - Ala-Trp- | |||
DPhe-Lys-NH2 | 0.3 | 135 + 32 | 1937 + 343 |
1.0 | 135 + 32 | 3603 + 645 | |
3.0 | 135 + 32 | 4000 ± 500 | |
Avax’' -D/JNal -Ala· | |||
Trp-DPhe-Lvs-NH2 | 0.3 | 135 + 32 | 2469 + 185 |
1.0 | 135 + 32 | 4034 ± 680 | |
3.0 | Ί35 + 32 | 3142 + 392 | |
Ala-D0Nal-Ala-Trp- | |||
DPhe-NHCH2CH2NH2 | 0.3 | 208 + 148 | 211 + 27* |
1.0 | 208 + 148 | 468 + 127 | |
3.0 | 208 + 148* | 877 + 325* | |
30.0 | 208 + 148* | 2325 + 477* |
Ala-D^Nal·Ala-Trp-DPhenhch2ch2ch2ch2ch2nh2
0.3 | 208 | + | 148 | 284 | + | 132' |
1.0 | 208 | 148* | 527 | 166' | ||
3.0 | 208 | + | 148* | 816 | + | 289 |
30 ;O | 208 | + | 148 | 3650 | ± | 772 |
* *
* *
D-Ala-D^Nal-Ala-Trp-DPhenhch2ch2ch2ch2ch2nh2
0.3
1.0
3.0
10.0
111 ± | 24 | 180 | + | 37 |
111 + | 24 | 686 | + | 135 |
111 + | 24 | 1490 | + | 179 |
111 + | 24 | 2248 | + | 70 |
I.
ί
Ala-D^Nal·Ala-TrpDPhe-OMe0.3
1.0
3.0 30.0
208 + 148* 211 +48*
208 + 148* 157 +35*
208 ± 148* 492 +147*
208 + 148* 554 +127*
D-Ala-DTrp-AlaTrp-DPhe·Lys-NH2
0.1 | ш | + | 24 | 526 | + | 86 |
0.3 | ш | + | 24 | 1608 | + | 204 |
1.0 | 111 | * | 24 | 2820 | + | 346 |
3.0 | ш | + | 24 | 2437 | + | 214 |
Aib-D£Nal-Ala-TrpDPhe-Lys-NH2
0.1 | 208 | + | 148* | 26° | + | 58 |
0.3 | 208 | + | 148* | 331 | + | 108 |
1.0 | 208 | + | 148* | 368 | + | 133 |
3.0 | 208 | + | 148* | 1090 | + | 176 |
D-Ala-D3Nal-Ala-Trp-DPheLys(iPr)-NH2 0.1
0.3
1.0
3.0
215 + 215 + 215 + | 49 49 49 | 608 + 1753 ± | 115 419 297 | |
1817 | + | |||
215 + | 49 | 2336 | + | 196 |
* Разтворен в диметилсулфоксид, ** Разтворен в аминовалерианова киселина (Ava) а Така посочените дози са приети от 29-дневни женски плъхове о Контролни ОРХП ί
ί · — — — —
Таблица 4
Освобождаване на РХ In Vivo, стимулирано от съединения, освобождаващи растежен хормон в плъхове, анестезирани с , пентобарбитал , (Плъховете са умъртвени в различни времена след последното
I поглъщане на пептида)
Пептид, ос в, РХ
Серумен РХ нг/мл | ||
обща | Серумен | 6 жив. на 15' 20' |
доза | РХ нг/мл | 30 |
(мг/кг) |
Ala-His-D/JNal-Ala- Trp-DPhe-Lys -Nl^4 | 10 30 |
DAIa-D0Nal-Ala Trp-DPhe-Lys | 10 зо11 |
Ava-D/3Nal-Ala- Trp-DPhe-Lys-NP^ | 30 |
Gly-D^Nal-Ala - Trp-DPhe-Lys-NH2 | 30 |
His-DTrp-Ala- Trp-DPhe-Lys-NHj* | 30 |
Ala-His-D^Nal-Ala- Trp-DPhe-Lys-NH2a | 10 |
DAla-D^Nal-Ala- Trp’DPhe-Lys-N^ | 10 |
247 ± 32
247 + 32
247 + 32
247 ± 32
322 ±145*
247 ± 32
247 ± 32
196 + 49(15')
147 + 30(20)
133 ± 18(30')
196 ± 49(15’)
147 + 30(20')
786 ± 244
1914 + 294
116 ± 298
2038 ± 444
2135 ± 586*
1072 ± 137
1810 ± 437
1421 ± 363
1605 ± 621 (20')
752 + 81 (30')
706 ± 133 (15')
1062 ± 254 (20')
Gly-D0Nal-Ala· Trp·DPhe·Lys·NH£ | 10 | |
His-DTrp-Ala- Trp-DPhe-Lysa | 10 | |
0Ala*D0Nal-Ala Trp·DPhe·Lys-NH2 | 10 | |
Ava-D0Nal-Ala - Trp-DPhe-Lys-NH2 | 10 |
196 | + | 49(15’) | 957 + 188 | (15') |
147 | + | 30(20') | 1685 + 524 | (20·) |
196 | + | 49(15') | 1131 + 189 | (15') |
147 | + | 30(20') | 686 + 149 | (20') |
196 | + | 49(15') | 1202 + 429 | (15') |
147 | 30(20’) | 1217 + 239 | (20') | |
196 | + | 49(15') | 1407 + 204 | (15') |
147 | + | 30(20') | 1251 + 351 | (20-) |
* Прибавена суспензия (лека* или тежка*,*)-оцетна киселина а Контролни пептиди
Таблица 5
Освобождавана на РХ In Vivo на РХ, стимулирано от синтетични паптиди, освобождаващи растежен хормон в плъхове, анестезирани с пентобарбитал (Животните са умъртвени 10 минути след последната инжекция)
Пептид, осв, РХ обща Контрол серум доза® РХ нг/мл мкг/вен.
РХ освободен серумен РХ нг/мл
DAla-D^Nal·
Ala-Trp-DPhe-NHj
0.30 216 +27
1.00 216 +27
3.00 216 +27
10.00 216 +27
340 + 38 1205 ± 335 1703 + 182 2741 + 484
1.
-35орално приемане от плъхове. Това е от значение, тъй като терапевтичната полза от пептидите е от значение при този начин на приемането им.
ПРИМЕР 4
Освобождаване In Vivo на растежен хормон при плъхове
Повторена е процедурата от Пример 2. Приетите съединения, използуваните дози и постигнатите резултати са дадени в Таблици 5 и 6.
Таблици 5 и 6 показват, че съединенията, отговарящи на представената формула стимулират отделянето на растежен хормон и повишаване нивото му в кръвта в по-голяма степен от съединенията, не принадлежащи на тази формула.
ПРИМЕР 5
Освобождаване In Vivo на растежен хормон при хора
Нормални човешки субекти, мъжки, със средна възраст около 25 години, приемат пептида Ala-His-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 (пептид освобождаващ растежен хормон 1 (ПОРХ - 1) или пептида DAIa-DpNal-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 (ПОРХ - 2) орално. 40 субекта получават 300 мкг/кг ПОРХ - 1 в 20 мл вода, последвано от 100 мл чиста вода, 39 субекта получават 600 мкг/кг ПОРХ -1 в 20 мл вода, последвано от 100 мл вода и 11 субекта получават 100 мкг/кг ПОРХ - 2 в 20 мл вода, последвано от 100 мл вода. На определени интервали се взема кръв, както е показано на фиг.1 и се измерва радиоимунологично за нивата на растежния хормон по процедурата, описана в Пример 2. Резултатите са дадени на фиг. 1. Оралното приемане на 100 мкг/кг ПОРХ-2 дава по-високи нива на растежния хормон от оралното приемане на 300 мкг/кг ПОРХ -1.
DAla-DiNal-Ala-Trp-
DPhe-Ala-NHj | 0.30 | 216 ± 27 | 611 + 68 |
1.00 | 216 + 27 | 929 + 209 | |
3.00 | 216 + 27 | 1765 ± 320 | |
10.00 | 216 + 27 | 2644 + 358 | |
Lys-DAla-D0Nal-Ala- | |||
Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0.10 | 216 + 27 | 216 + 40 |
0.30 | 216 + 27 | 269 + 31 | |
1.00 | 216 + 27 | 432 + 143 | |
3.00 | 216 + 27 | 771 + 134 | |
DAla-D0Nal-Ala· | |||
Trp-DPhe-NH-Chx-NH2 | 0.03 | 216 + 27 | 517 + 135 |
0.10 | 216 + 27 | 1078 + 174 | |
0.30 | 1 216 + 27 | 1831 + 436 | |
1.00 | 216 + 27 | 3120 ± 761 | |
DAla-D/9Nal-Ala- | |||
Trp-DAla-Lys-NH2 | 0.10 | 187 + 36 | 220 + 34 |
0.30 | 187 + 36 | 167 > 48 | |
1.00 | 187 + 36 | 339 ± 61 | |
3.00 | 187 + 36 | 778 + 174 | |
10.00 | 187 + 36 | 1676 + 470 | |
30.00 | 187 + 36 | 1791 + 384 | |
DAla-D^Nal-Ala- | 0.03 | 153 + 27 | 409 + 97 |
Trp-DPhe-LysNH2 | 0.10 | 153 + 27 | 1469 + 152 |
0.30 | 153 + 27 | 2322 + 265 | |
1.00 | 153 ± 27 | 2765 + 352 | |
DAla-D/9Nal-Ala- | |||
Trp-DPhe-Ala- | |||
nh(ch2)5nh2 | 0.03 | 177 + 45 | 542 + 98 |
0.10 | 177 + 45 | 932 + 84 | |
0.30 | 177 + 45 | 1121 + 212 | |
1.00 | 177 ± 45 | 2599 + 144 |
-37ΝαΙΜΑ-DflNal-Ala·
Trp-DPhe-LysNH2 | 0,03 | 192 + 41 | 696 + 108 |
0.10 | 192 + 41 | 1049 + 198 | |
0.30 | 192 + 41 | 2567 + 419 | |
1.00 | 192 ± 41 | 2001 + 341 | |
DAla-D^Nal-Ala-Trp- | |||
DPhe-NH-Chx-NH2 | 0.10 | 192 + 41 | 846 + 105 |
0.30 | 192 + 41 | 1886 + 493 | |
1.00 | 192 + 41 | 2209 + 187 | |
3.00 | 192 + 41 | 3359 + 433 | |
DAla-Tcc-Ala-Trp- | |||
DPhe-Lys-NH2 | 0.30 | 93 + 22 | 149 + 20 |
3.00 | 93 + 22 | 142 + 35 | |
DAla-Gly-Gly-Trp-DPhe- | |||
Lys-NH2 | 0.30 | 93 + 22 | 107 + 14 |
3.00 | '93+22 | 89+15 | |
DAla-D^Nal-ALa- | |||
Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0.03 | 93 + 22 | 230 + 23 |
0.10 | 93 + 22 | 1006 + 204 | |
0.30 | 93 + 22 | 2110 + 260 | |
1.00 | 93 ± 22 | 1825 + 328 | |
DAla-D^Nal-ALa-Trp· | |||
DTlc-Lys-NH2 | 0.03 | 93 + 22 | 141 + 26 |
0.10 | 93 + 22 | 156 + 62 | |
0.30 | 93 ± 22 | 124 + 31 | |
1.00 | 93 + 22 | 151 + 24 | |
DAla-D^Nal-Ala- | |||
Trp-DPhe-Lys-OH | 0.10 | 93 + 22 | 558 + 162 |
0.30 | 93 ± 22 | 1730 + 306 | |
DAla-D0Nal-Ala- | |||
Tcc-DPhe-Lys-NH2 | 3.00 | 145 + 17 | 537 ± 43 |
10.00 | 145 + 17 | 746 + 92 | |
D0Nal-Gly-Gly-Trp- | |||
DPhe-Lys-NH? | 3.00 | 145 + 17 | 417 + 37 |
10.00 | 145 + 17 | 397 + 114 |
I
-38t.
DALa-D0Nal-Ala-Trp-
DPal-Lys-NH2 | 0.10 | 145 ± 17 | 365 ± 42 |
0.30 | 145 ± 17 | 584 + 148 | |
DA la - DjSNal - Ala -Trp- | |||
DPal-Lys-OH | 0.10 | 145 + 17 | 928 + 184 |
0.30 | 145 + 17 | 1782 ± 241 | |
3Me ·His ·D/3Nal ·Ala-Trp · | |||
DPhe-Lys-NH2 | 0.03 | 87 + 11 | 122 ± 11 |
0.10 | 87 + 11 | 185 + 27 | |
0.30 | 87 + 11 | 101 ± 12 | |
0.10 | 87 + 11 | 112 + 13 | |
3Me·HisD0Nal·ALa-Trp· | |||
DPhe·Lys-NH2 | 0.03 | 87 + 11 | 134 + 28 |
0.10 | 87 + 11 | 159 + 30 | |
0.30 | 87 + 11 | 78 ± 19 | |
1.00 | '87 + 11 | 134 + . 27 | |
Tip-Al a -D/3Nal -Al a-Trp- | |||
DPhe-Lys-NH2 | 0.10 | 87 ± 11 | 168 + 27 |
0.30 | 87 + 11 | 167 + 28 | |
1.00 | 87 ± 11 | 152 + 74 | |
3.00 | 87 ± 11 | 272 + 63 | |
DAla-D0Nal-Ala-Trp- | |||
DPhe-Lys-NH2 | 0.03 | 247 + 53 | 870 + 136 |
0.10 | 247 + 53 | 1440 + 267 | |
0.30 | 247 + 53 | 2420 + 456 | |
1.00 | 247 + 53 | 2855 + 347 | |
3.00 | 247 + 53 | 3421 + 377 | |
DAla-DTcc-Ala-Trp- | |||
DPhe-Lys-NH2 | 0.10 | 247 + 53 | 165 ± 26 |
0.30 | 247 + 53 | 183 ± 9 | |
1.00 | 247 + 53 | 207 ± 38 | |
3.00 | 247 + 53 | 153 + 22 | |
10.00 | 247 + 53 | 269 + 47 | |
Ava-Trp-DTrp-Lys-NH2 | 0.10 | 247 + 53 | 153 ± 30 |
0.30 | 247 + 53 | 144 + 14 | |
1.00 | 247 + 53 | 117 + 9 | |
3.00 | 247 + 53 | 205 + 59 | |
10.00 | 247 + 53 | 214 + 48 |
DAIa·D0Nal-Ala-Trp- | |||||||
DPal·Lys-NHj | 0.03 | 228 | 68 | 203 | + | 20 | |
0.10 | 228 | + | 48 | 772 | + | 142 | |
0.30 | 228 | + | 48 | 979 | + | 182 | |
1.00 | 228 | + | 48 | 1691 | + | 139 | |
3.00 | 228 | + | 48 | 3249 | + | 526 |
Tyr-DAla-D^Nal-Ala-Trp- | |||
DPhe-Lys-NH2 | 0.03 | 228 + 48 | 164 + 52 |
0.10 | 228 + 48 | 247 + 51 | |
0.30 | 228 + 48 | 196 + 39 | |
1.00 | 228 + 48 | 329 + 57 | |
3.00 | 228 ± 48 | 878 + 170 | |
Ala-His-D0NaL-ALa-Trp· DPhe-Lys-NH2 | 0.10 | 228 + 48 | 894 + 112 |
0.30 | 228 ± 48 | 1128 + 274 | |
1.00 | 228 + 48 | 1362 + 198 | |
DAla-D0Nal-Ala-TrpDPhe-Lys-OH | 0.03 | 228 + 48 | 300 + 82 |
0.10 | 228 + 48 | 585 + 141 | |
0.30 | 228 + 48 | 1202 + 236 | |
. | 1.00 | 228 + 48 • | 2610 + 355 |
DAla-D/3Nal-Ala-Trp- NMe-DPhe-Lys-NH2 | 0.03 | 167 + 29 | 123 + 17 |
0.10 | 167 + 29 | 132 + 30 | |
0.30 | 167 + 29 | 232 + 49 | |
1.00 | 167 + 29 | 233 + 41 | |
His-Trp-Ala-Trp·Phe- | |||
Lys-NHj | 1.00 | 167 + 29 | 125 + 24 |
3.00 | 167 + 29 | 201 + 19 | |
10.00 | 167 + 29 | 130 i 25 | |
30.00 | 167 + 29 | 182 + 36 | |
Ava-DAla-Dj3Nal- | |||
Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0.03 | 167 ± 29 | 209 + 33 |
0.10 | 167 + 29 | 144 + 42 | |
0.30 | 167 + .29 | 185 + 47 | |
1.00 | 167 + 29 | 499 ± 110 |
I
0Ala-D0Nal-
Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0.03 | 167 t 29 | 489 + 71 |
0.10 | 167 + 29 | 1112 + 194 | |
0.30 | 167 + 29 | 1993 + 259 | |
1.00 | 167 + 29 | 3061 ± 238 | |
DAla-D0Nal-Gly-Trp- | |||
DPhe-Lys-NH2 | 0.10 | 121 + 14 | 226 + 26 |
0.30 | 121 + 14 | 170 + 31 | |
1.00 | 121 + 14 | 414 + 101 | |
3.00 | 121 ± 14 | 713 + 126 | |
DAla-D0Nal-Gly-Gly- | |||
Тгр-DPhe-Lys·ΝΗ2 | 0.10 | 121 + 14 | 95 + 15 |
0.30 | 121 + 14 | ' 82 + 16 | |
1.00 | 121 + 14 | 177 + 43 | |
3.00 | 121 ± 14 | 223 + 58 | |
Asp-DAla-D0Nal-Ala- | '' Ί ......... - ......- - | ||
Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0.03 | 121 + 14 | 210 + 53 |
0.10 | 121 ± 14 | 322 + 48 | |
0.30 | 121 ± 14 | 557 + 181 | |
1.00 | 121 + 14 | 821 + 173 | |
DAla-D0Nal-Ala-Trp- | |||
DPhe-NH-Chx-NH2 | 0.03 | 121 + 14 | 335 + 106 |
1 | 0.10 | 121 + 14 | 652 + 129 |
0.30 | 121 + 14 | 1528 + 252 | |
1.00 | 121 + 14 | 2410 + 370 | |
DAla-D0Nal-DAla-Trp- | |||
DPhe·Lys-NH2 | 0.10 | 200 + 45 | 166 + 36 |
0.30 | 200 + 45 | 197 ± 33 | |
1.00 | 200 + 45 | 343 + 73 | |
3.00 | 200 + 45 | 531 ± 121 | |
DAla-D0Nal-Ala-Ala· | |||
Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0.10 | 200 + 45 | 147 + 21 |
0.30 | 200 + 45 | 184 + 45 | |
1.00 | 200 + 45 | 206 + 66 | |
3.00 | 200 + .45 | 143 + 9 |
DAla-D0Nal-Ala-Trp- | |||
DPhe-NH-Chx-NH2 | 0.10 | 200 + 45 | 1246 + 189 |
0.30 | 200 + 45 | 1616 ± 250 | |
1.00 | 200 + 45 | 2574 + 467 | |
3.00 | 200.± 45 | 2789 ± 130 | |
DAla-D^Nal-Ala- | 0.03 | 200 + 45 | 608 + 140 |
Trp-DPhe-Lys-NH2 | 0.30 | 200 i 45 | 920 + 225 |
1.00 | 200 + 45 | 1755 1 291 | |
3.00 | 200 + 45 | 2527 ± 196 | |
DAla-D0Nal-Ala-Trp- | |||
Pro-Lys-NH2 | 0.03 | 157 + 40 | 113 + 14 |
1.00 | 157 + 40 | 136 ± 40 | |
3.00 | 157 + 40 | •195 + 35 | |
10.00 | 157 + 40 | 226 ± 42 | |
DAla-D0Nal-Ala-Тгр- | |||
DPro-Lys-NH2 | 0.30 | 157 + 40 | 234 ± 36 |
1.00 | 157 + 40 | 358 + 48 | |
3.00. | 157 + 40 | 576 + 77 | |
10.00 | 157 + 40 | 1624 + 241 | |
DAla-D^Nal-Ala-Trp- | |||
DLeu-Lys-NH2 | 0.30 | 157 ± 40 | 202 + 27 |
. | 1.00 | 157 + 40 ' | 165 ± 12 |
3.00 | 157 + 40 | 307 ± 51 | |
10.00 | 157 + 40 | 1591 + 568 | |
Ava-D/3Nal-Ala-Trp- | |||
DPhe·Lys-NH2 | 0.03 | 157 + 40 | 768 + 191 |
0.10 | 157 + 40 | 1277 + 61 | |
0.30 | 157 + 40 | 1733 + 254 | |
1.00 | 157 + 40 | 2418 + 162 |
•42Таблица 6
Освобождаване на РХ In Vivo на РХ, стимулирано от синтетични пептиди, освобождаващи растежен хормон в плъхове, анестезирани с пентобарбитал (Животните са умъртвени 10 минути след последната инжекция)
Пептид, осв. РХ | обща доза® мкг/вен. | Контрол серум РХ нг/мл | РХ освободен серумен РХ нг/мл |
DAla-D/9Nal-Ala· | 0.03 | 186.+ 34 | 412 + 84 |
2rp-DPhe-iLysNl·^ | 0.10 | 186 + 34 | 630 + 124 |
0.30 | 186 + 34 | 1877 + 195 | |
1.00 | 186 + 34 | 3008 + 417 |
DAla-D^Nal-Ala-homo | |||
PheDPhe-LysNHj | 0.03 | 93 + 13 | 214 + 71 |
0.10 | 93 + 13 | 214 + 58 | |
0.30 | 93 + 13 | 406 + 121 | |
1.00 | 93 + 13 | 1189 + 120 | |
DAla-DdNal-Ala-Trp- | |||
DPhe-Ala-1,3 - | |||
diaminopropane | 0.03 | 93 ± 13 | 444 + 60 |
0.10 | 93 + 13 | 517 + 109 | |
0.30 | ' 93 + 13 | 2341 + 479 | |
1.00 | 93 + 13 | 2468 + 276 | |
DAla-D^Nal-Ala-Trp· | |||
DPhe·LysNHj | 0.03 | 93 + 13 | 362 + 64 |
0.10 | 93 + 13 | 800 + 192 | |
0.30 | 93 + 13 | 2674 + 486 | |
- | 1.00 | 93 + 13 | 3658 + 610 |
DAla-DdNal-Ala-Trp- | |||
DPhe-Ala·1,6, | 0.03 | 85 + 16 | 395 + 91 |
hexyldiamine | 0.10 | 85 + 16 | 905 + 113 |
0.30 | 85 + 16 | 735 + 166 | |
1.00 | 85 + 16 | 2708 + 310 | |
IMA-D^Nal-Ala-Trp- | |||
DPhe-Ala-1,3, | 0.03 | 85 + 16 | 566 + 157 |
diaminopropane | 0.10 | 85 + 16 | 645 + 167 |
0.30 | 85 + 16 | 1428 + 271 | |
1.00 | 85 + 16 | 2972 + 365 | |
DAla-D/3Nal-Ala-Trp· | |||
DPhe-ArgNHo | 0.03 | 125 + 12 | 252 + 29 |
0.10 | 125 + 12 | 645 + 90 | |
0.30 | 125 + 12 | 1180 + 318 | |
1.00 | 125 + 12 | 2197 + 285 |
ν
Τ'
Arg-DAla-D^Nal-Ala-Trp- | |||
DPhe-ArgNH2 | 0.10 | 125 ± 12 | 155 + 43 |
0.30 | 125 + 12 | 247 ± 70 | |
1.00 | 125 ± 12 | 276 + 16 | |
IMA-D0Nal-Ala-Trp- | |||
DPhe-Ala-1,6 | 0.03 | 125 + 12 | 332 + 59 |
hexyldiamine | 0.10 | 125 ± 12 | 609 + 165 |
0.30 | 125 + 12 | 1139 + 232 | |
1.00 | 125 + 12 | 1996 + 372 | |
DAla-D0Nal-Ala-Trp- | |||
LysNH2 | 0.30 | 160 + 33 | 187 + 44 |
1.00 | 160 ± 33 | 257 + 18 | |
3.00 | 160 + 33 | .198 + 31 | |
10.00 | 160 + 33 | 193 ± 33 | |
30.00 | 160 + 33 | 236 + 23 | |
DAla-D0Nal-Ala- | 1 | ||
TrpNH2 | 0.30 | 160 + 33 | 115 ± 22 |
1.00 | 160 + 33 | 107 + 23 | |
3.00 | 160 + 33 | 101 + 13 | |
10.00 | 160 + 33 | 199 + 40 | |
• | 30.00 | 160 + 33 | 232 ± 69 |
DAla-D)9Nal -Ala-Trp· | |||
DPhe-Ala-NH(CH9)= | |||
nh2 | 0.03 | 160 + 33 | 517 + 89 |
0.10 | 160 + 33 | 1164 + 255 | |
0.30 | 160 ± 33 | 2023 + 242 | |
1.00 | 160 + 33 | 3441 + 435 | |
DAla-D/JNal - Ala-Trp | |||
Pro-LysNH·, | 0.30 | 157 + 40 | 113 + 14 |
1.00 | 157 + 40 | 136 + 40 | |
3.00 | 157 + 40 | 195 + 35 | |
10.00 | 157 ± 40 | 226 + 42 | |
DAla-D^Nal-Ala- | |||
Trp-DPro-LysNH2 | 0.30 | 157 + 40 | + 36 |
1.00 | 157 ± 40 | 353 + 48 | |
3.00 | 157 + 40 | 576 + 77 | |
10.00 | 157 + 40 | 1624 + 241 |
ι
DAla -D^Nal- Ala-Trp· DLeu-LysNHj 0.30 1.00 | 157 + 40 157 + 40 157 + 40 157+ 40 | 202 + 27 165 + 12 307 + 51 | |
3.00 10.00 | |||
1591 + 568 | |||
Ava-D/3Nal -Ala-Trp | |||
DPhe-LysNH2 | 0.03 | 157 + 40 | 768 + 191 |
0.10 | 157 + 40 | 1277 + 61 | |
0.30 | 157 + 40 | 1733 + 254 | |
1.00 | 157 + 40 | 2418 + 162 | |
a , yABU-D^Nal-Ala· | |||
Trp-DPhe·LysNH2 | 0.03 | 108 + 20 | 621 + 85 |
0.10 | 108 + 20 | 1230 + 317 | |
0.30 | 108 + 20 | 2385 + 182 | |
1.00 | 108 + 20 | 3011 + 380 | |
DAla-DdNal-Ala-Trp- | |||
DPhe-HisNH2 | 0.03 | 108 + 20 | 246 + 22 |
0.10 | 108 + 20 | 199 + 34 | |
0.30 | 108 + 20 | 370 + 67 | |
• | 1.00 | 108 + 20 | 1419 + 230 |
DAla-DdNal-Ala-Phe- | |||
DPhe·LysNHj | 0.03 | 108 + 20 | 366 + 81 |
0.10 | 108 + 20 | 1011 + 175 | |
0.30 | 108 + 20 | 2361 + 233 | |
1.00 | 108 + 20 | 3057 + 472 | |
DAla-D0Nal-Ala-Trp- | |||
NH-Chx-NH2 | 0.10 | 108 + 20 | 151 + 35 |
0.30 | 108 + 20 | 251 + 43 | |
1.00 | 108 + 20 | 227 + 55 | |
3.00 | 108 + 20 | 349 + 72 | |
DAla-D0Nal-Ala-Trp- | |||
DPhe-OrnNH2 | 0.03 | 200 + 33 | 515 + 92 |
0.10 | 200 + 33 | 787 + 71 | |
0.30 | 200 + 33 | 1288 + 365 | |
1.00 | 200 + 33 | 1888 + 615 | |
DAla·DtfNal-Ala-TrpDHlsLysNH? | 0.03 | 200 + 33 | 287 + |
J i. | 0.10 | 200 + 33 | 131 + 37 |
0.30 | 200 + 33 | 337 + 78 | |
1.00 | 200 + 33 | 457 + 124 |
ι
-45ПРИМЕР6
Освобождаване In Vivo на растежен хормон при плъхове
Приложена е общата процедура от Пример 2, с изключение на това, че пептидите са инжектирани подкожно, а не венозно и времето на умрътвяване е + 15 мин, а не + 10 мин. Приетите съединения, дозировката им и резултатите са дадени в Таблица 7.
ПРИМЕР 7
Реакция на кондензация на пептидните фрагменти за получаване на пептид
Основни процедури
Точките на топене могат да се определят, като се използува апаратурата за точка на топене с капиляра на Thomas Hoover. Инфрачервените спектри могат да бъдат записани на спектрофотометър Perkin Elmer 137 или на Nikolet 5DX и представени с вълновото число (см-1). Масспектрите могат да бъдат получени като се използува масспектрометър на фирмата VG Analytical Ltd. модел YAB1F и представени като EI (електронен импулс), полева десорбция или бърза атомна бомбардировка. Газхроматограмите могат да бъдат получени, като се използува газхроматограф на фирмата Finnigan 4023, съоръжен с 30 м капиляра при носител хелий. Оптичното въртене може да се измери, като се използува поляриметър Autopol III, изработен от Rudolph Research.
1Η ЯМР спектрите могат да се получат на прибор JEOL GX-400 ЯМР, работещ при 400 MHz или на JEOL GX-270, работещ при 270 MHz. Тези прибори притежават разрешаваща способност по-малка от 0,7 Hz. Химичните измествания са изразени в ррм (части на милион) спрямо вътрешния 3(триметилсилил)-тетрадеутеро натриев пропионат.
Висококачествената течна хроматография (HPLC) може да се проведе като се използува система Хитачи, състояща се от L-5000 контролер на
Таблица 7
Пептид, осв. РХ | обща доза® мкг/вен. | Контрол серум РХ нг/мл | РХ освободен серумен РХ нг/мл |
IMA-D0Na1·Ala· | .......- -................................. | -------- .......... - ........ | |
Phe-DPhe-Lys-NH2 | .03 | 147 + 21 | 181 + 36 |
. 10 | 147 ± 21 | 399 + 40 | |
. 30 | 147 + 21 | 808 + 187 | |
1.00 | 147 ± 21 | 2394 + 475 | |
αγΑΒυ- DtfNal-Ala-Phe- DPhe-Lys-NH2 | ί .03 | 147 + 21 | 192 + 29 |
. 10 | 147 + 21 | 288 + 62 | |
.30 | 147 + 21 | 461 + 90 | |
1.00 | 147 + 21 | 1441 + 203 | |
IMA-D0Nal-Ala· Trp-DPhe-Ala-1,5- pentadiamine | .03 | 147 + 21 | 475 + 96 |
.10 | 147 + 21 | 916 + 169 | |
. 30 | 147 + 21 | 1118 + 243 | |
1.00 | 147 + 21 | 2660 + 599 | |
Hls-D/3Nal-Ala-Phe DPhe-Lys-NH2 | .03 | 217 + 33 | 317 + 55 |
. 10 | 217 ± 33 | 348 + 65 | |
. 30 | 217 + 33 | 1283 + 258 | |
1.00 | 217 ± 33 | 1374 + 107 | |
Ala-His-D^NalAla·Phe-DPhe-Lys· nh2 | .03 | 217 ± 33 | 341 + 35 |
.10 | 217 + 33 | 516 + 118 | |
.30 | 217 + 33 | 1060 ± 151 | |
1.00 | 217 + 33 | 1467 + 208 |
477ABU-D0NalAla-Phe-DPhe·Lys ·
nh2 | .03 | 217 | + | 33 | 197 | ± | 31 |
.10 | 217 | + | 33 | 182 | i | 20 | |
.30 | 217 | + | 33 | 524 | 116 | ||
1.00 | 217 | + | 33 | 1127 | ± | 110 | |
DAla-D/3Nal.-Ala- | |||||||
rhe-DPhe-Lys - | .03 | 217 | + | 33 | 287 | + | 62 |
nh2 | .10 | 217 | + | 33 | 1084 | ± | 162 |
.30 | 217 | + | 33 | 1982 | + | 345 | |
1.00 | 217 | + | 33 | 2887 | ± | 275 | |
DAla-Phe-Ala-Phe- | .03 | 132 | + | 18 | 167 | ± | 29 |
DPhe-Lys-NH2 | . 10 | 132 | + | 18 | 499 | ± | 62 |
.30 | 132 | + | 18 | . 1132 | + | 145 | |
1.00 | 132 | + | 18 | 2147 | ± | 268 | |
DAla-D0Nal-Ala- | |||||||
Phe-DPhe-Lys-NH2 | .03 | 132 | + | 18 | 356 | ± | 77 |
. 10 | 132 | + | 18 | 795 | ± | 132 | |
.30 | 132 | + | 18 | 1564 | + | 224 | |
1.00 | 132 | + | 18 | 2272 | + | 406 |
-48градиента и помпа 655А, свързана към полупрепаративна колона Vidac 201ТР1010 или 218ТР1010. Комбинации от вода, съдържаща 0,2% трифлуороцетна киселина и метанол могат да бъдат използувани като елюенти. Характерно е, че съединенията представляващи интерес, се елюират при скорост на потока 6 мл/мин с градиент, увеличаващ органичната компонента със скорост от около 1-2% за минута. След това съединенията се откриват при съответните дължини на вълните, като се използува диоден детектор LKB 2140 в диапазона на (UV) (ултравиолетовата област). Интегрирането може да се довърши със соуфтуеър на Nelson Analitical (версия 3.6).
Реакциите могат да бъдат проведени под инертна атмосфера от азот или аргон, ако не е посочено друго. Безводен тетрахидрофуран (UV-степен на чистота) и диметилформамид могат да бъда купени от фирмата Burdik and Jackson и използувани директно от бутилката.
»
А. Получаване на трипептидния фрагмент - H2N-Trp-DPhe-Lys(Boc)-NH2-Naбензилоксикарбонил-(^4-бутоксикарбонил)лизин амид (4)
Към 10°С разтвор на карбонилдиимидазол (2) (88,24 г; 0,544 мола) и сух тетрахидрофуран (ТХф) (1500 мл) се прибавя бавно Na-бензилоксикарбонил(^Ц-бутоксикарбонил)лизин (1) (180 г; 0,474 мола). По време на прибавянето се наблюдава отделяне на газове. Докато се получава междинното съединение ^-бензилоксикарбонил-(^-Ьбутоксикарбонил) лизин имидазолид (3), се приготвя наситен разтвор на амоняк в тетрахидрофуран (2000 мл) (безводен NH3 се прекарва през тетрахидрофуран при температура 5 - 10°С). След като се установи, че получаването на междинното съединение (3) е приключило (прекратяване отделянето на газ, приблизително около 2 часа), половината от разтвора на ТХф, съдържащ съединението (3) се прибавя към амонячния разтвор. Останалата част от разтвора, съдържащ (3) се прибавя 30 минути покъсно. По време на смесванията се поддържа непрекъснат поток от амоняк, който продължава още 45 минути след това. При прибавянето на двата ί
-49· разтвор, съдържащи (3) се отделя бяла утайка. Реакционната смес се оставя да се темперира до стайна температура и се разбърква в продължение на 15 минути. Разтворителят се отстранява от суспензията под вакуум. Остатъкът се суспендира във вода и полученият твърд остатък се събира с филтруване под вакуум.
^-Ьбутоксикарбонил-лизинамид (5)
Разтвор на лизинамид (4) (181,48 г; 0,479 мола) в метанол (МеОН, 1000 мл) се прибавя към суспензия, съдържаща катализатор 5% Pd/C (5г) в метанол (250мл) под аргон. През реакционната смес барботира водород (около 15 мин), след което реакционната смес се разбърква под водородна атмосфера, докато HPLC не покаже, че реакцията е приключила (36 часа). След това водородната атмосфера се заменя с аргон. Реакционният разтвор се избистря през слой от Celite и разтворителят се отстранява под вакуум за получаването на твърд остатък.
Иа-бензилоксикарбонил-О-фенилаланил-^-йбутоксикарбонил) лизинамид (8)
Иа-бензилаксикарбонил-О-фенилаланин (6) (126,39 г; 0,423 мола) се прибавя бавно към 10°С разтвор на карбонилдиимидазол (2) (66,03 г; 0,409 мола) в ТХф (500 мл). По време на прибавянето се наблюдава отделяне на газ. Когато престане отделянето на газ, към реакционната смес се прибавя лизинамид (5) (110,75 г; 0,452 мола) в разтвор на ТХф (500 мл). След около 48 часа сместа се филтрува за отстраняване на твърдите съставки, филтратът се концентрира под вакуум.
Полученият остатък се улавя в етилацетат (EtOAc, 500 мл) и след това се промива по следния начин в делителна фуния:
1. солна киселина (1N, 3 х 500 мл), pH на първото измиване около 8; последвалите pH -1;
2. вода (500 мл);
3. воден р-р на ИагСОз (полунаситен, 2 х 500 мл), филтрува се, за да се съберат образуваните твърди кристали (8);
4. вода (3 х 500 мл).
Органичният слой се суши върху магнезиев сулфат. След избистряно, разтворителят се отстранява под вакуум. Полученият остатък може да се прекристализира из EtOAc, за да се получи втора проба от (8).
0-фенилаланил-(^-1-бутоксикарбонил)лизинамид (9)
Метанолов разтвор (1500 мл) на амид (8) (120,53 г; 0,229 мола) се прибавя към катализаторна суспензия от 5% Pd/C (50 г) в МеОН (200 мл). Аргонната атмосфера се заменя с водородна. Когато HPLC-анализът покаже, че реакцията е завършила (около 4 часа), водородната атмосфера се заменя с аргон. След това реакционният разтвор се избистря през слой от Celite и филтратът се превръща в остатък под вакуум. Този дипептиден продукт може да се използува директно при получаването на трипептид (12).
На-бензилоксикарбонил-триптофил-0-фенилаланил-(М£-1-бутоксикарбонил)лизинамид (12)
10°С разтвор на Να-бензилоксикарбонил-триптофан (10) (67,60 г; 0,200 мола), ТХф (500 мл) и карбонилдиимидазол (2) (33,05 г; 0,204 мола) се разбърква, докато престане отделянето на газ. След това към реакционната смес се прибавя разтвор на (9) (40,8 г; 0,103 мола) в ТХф (ок. 200 мл). Полученият разтвор се оставя около 15 часа, за да протече напълно реакцията, като се темперира до стайна температура. Твърдото вещество, което се получава, се събира с филтруване под вакуум, филтратът се довежда до остатък чрез концентриране под вакуум. Полученият остатък и твърдото вещество се събират и улавят в EtOAc (4000 мл) с леко затопляне. След охлаждане на разтвора до стайна температура, се образува твърдо вещество. То се събира чрез вакуумно филтруване. Прекристализира се из горещ
-51 метанол, за да се пречисти трипептида (12). филтратът EtOAc (от първата кристализация) се промива в делителна фуния по следния начин:
1. солна киселина (1N, 2 х 500 мл),
2. вода (1 х 500 мл),
3. воден ИагСОз (полунаситен, 2 х 500 мл),
4. воден NaCI (1х 500 мл).
Органичният слой се суши върху МдвОд и се избистря чрез вакуумно филтруване. Разтворителят се отделя от филтрата под вакуум. Полученият остатък се улавя отново в EtOAc, за да се получи сухо твърдо вещество. То може да се подложи на втора прекристализация из горещ метанол, за да се получи втори добив от (12) под формата на бяло твърдо вещество.
Т риптофил-О-фенилаланил-(^-Ьбутилоксикарбонил)лизин-амид (13)
Метанолов разтвор (1500) на трипептид (12) (64,59 г; 0,091 мола) се
I прибавя към суспензия от катализатор 5% Pd/C (5 г) и МеОН (250 мл) под атмосферан на аргон. Прибавя се допълнително количество МеОН (2250). Аргоновата атмосфера се заменя с водород и реакционната смес се оставя да реагира (ок. 24 часа). След приключване на реакцията, водородната атмосфера се заменя с аргонова. Разтворът се избистря през слой от Celite и филтратът се концентрира под вакуум за получаването на трипептид (13) под формата на твърдо бяло вещество.
Б. Получаване на трипептидния фрагмент - К - ОрМа1-А1а-ОМе-Ма-бензилоксикарбонил-Ор-нафтил аланин метил естер (25)
Разтвор на EtOAc (400 мл) и хидрохлорид на Dp-нафтилаланин метил естер (22) (0,62 мола) се промива с разтвор на наситен натриев карбонат (400 мл) и 0,8 N воден разтвор на натриев хидроокис (ок.500 мл). Получената водна фаза се отстранява (pH 8,5) и органичната фаза се промива последователно с полунаситен разтвор на ИагСОз (150 мл) и след това с вода (50 мл).
-52Свободната базична форма на (22) се изолира при концентриране на слоя етилацетат под вакуум.
Дициклохексилкарбодиимид (около 95 г; 0,46 мола) се прибавя към охладен до -5°С (лед-етанолова баня) разтвор на Ма-бензилоксикарбонил-Оаланин (19)(143,5 г; 0,50 мола), N-хидроксисукцинимид (HONSu (23) 0,62 мола) и свежо приготвената свободна база (22) (около 0,52 мола) в диметилформамид (около 3 л). Получената реакционна смес се разбърква в продължение на 24 часа, като се темперира до стайна температура. Трябва да се използува HPLC-анализ, за да се види дали реакцията е завършила. Ако не е, реакционният разтвор се охлажда до около -5°С и се прибавя допълнително количество дициклохексилкарбодиимид (ок. 0,17 мола). След това реакционната смес се разбърква нови 24 часа, като се оставя да се темперира до стайна температура. Накрая сместа се филтрува, за да се отстрани образувалият се дициклохексилкарбамид. Към филтрата се прибавя вода (1 л) и полученият разтвор се концентрира под вакуум. Полученият остатък се улавя във воден 1N HCI (около 1 л, докато pH на водната фаза достигне 1). След това водната фаза се екстрахира с две порции етилеацетат (по 1 л всяка). Слоевете етилацетат се отделят. pH на водната фаза се настройва с прибавяне на 2N NaOH (500 мл) и гранули натриев хидроокис. По време на тази неутрализация, разтворът се поддържа охладен, чрез прибавянето на студен етилацетат (1 л). Когато pH на водната фаза достигне приблизително 7, обикновено се отделя обилна утайка от бяло твърдо вещество или масло. Тази утайка се събира чрез филтруване под вакуум или декантиране и се промива последователно с полунаситен разтвор на натриева карбонат (2 х 1500 мл), вода (6 х 1500 мл) и етилацетат (3 х 1500 мл). Полученият материал се суши под висок вакуум до постоянно тегло. Този материал може да се хидролизира директно без по-нататъшно пречистване.
ί
-53Ма-бензилоксикарбонил-0-аланил-р-нафтил-0-аланин (26)
Воден разтвор на натриев хидроокис (192 мл; 0,08 г/л; 0,38 мола) се прибавя към разтвор на дипептид (25) (около 0,38 мола), вода (360 мл) и МеОН (ок. 6 л). Разтворът се разбърква при стайна температура до завършване на хидролизата (ок. 24 часа). Изчезването на изходният пептид се следи с HPLCанализ. Разтворът се концентрира под вакуум до остатък, който се разтваря във вода (ок. 1 л). Водният слой (pH ок. 10) след това се екстрахира с EtOAc (2 х 500 мл) в делителна фуния. Етилацетатните слоеве се отстраняват. Получената водна фаза се довежда до pH прибл. 5 с конц. HCI, при който пункт обикновено се утаява бяла твърда маса или масло. Продуктът се събира и се суши под вакуум.
Иа-бензилоксикарбонил-О-аланил-О-р-нафтил аланил-аланин метилестер (20)
Дипетид
Иа-бензилоксикарбонил-О-аланил-Ор-нафтил аланин (26) (0,253 мола) се прибавя към разтвор на HONSu (23) (0,505 мола) в диметилформамид (800 мл) под аргонна атмосфера. Към този разтвор се прибавя смес от хидрохлорид на аланин метилестер (15) (0,303 мола), N-метилморфолин (16) (0,303 мола) и диметилформамид (200 мл). Полученият разтвор се охлажда до 10°С, през което време се прибавя дицикло-хексилкарбодиимид (24) (0,265 мола) в метилен хлорид (273 мл). Реакцията се следи с HPLC, като реакционната температура се поддържа 10°С, докато реакцията приключи. Ако след няколко дни (около 4) реакцията не приключва, се прибавя допълнително количество от (24) (0,080 мола) и реакционната смес се разбърква в продължение на още един ден при 10°С. Реакцията отново се следи с HPLC-анализ до пълното и завършване (около 5 дни). Твърдите вещества, които се образуват по време на реакцията, се събират чрез филтруване под вакуум. След това филтратът се концентрира под вакуум до получаване на остатък. Последният се улавя в етилацетат и се екстрахира с полунаситен воден разтвор на ИагСОз (2 х 500
-54мл). Етилацетатната фаза се суши върху МдБОд. Полученият разтвор се избистря и се концентрира под вакуум до остатък.
2N воден разтвор на натриев хидроокис (7,5 мл; 15 милимола) се прибавя към метанол (500 мл) и към воден разтвор (200 мл), съдържащ Ναбензилоксикарбонил-0А1а-0рМа!-А1а-0Ме (13,7 ммола). След като реакционната смес се разбърква в продължение на една нощ при стайна температура, HPLC-анализът показва количеството останал изходен материал. Когато реакцията приключи напълно (около 1 нощ), полученият разтвор се концентрира под вакуум до обем около 200 мл. Прибавя се вода (100 мл) и pH се настройва до около 12, чрез прбавянето на 2Ν натриев хидроокис (1 мл). Полученият разтвор се екстрахира с етилаецатат (2 х 500 мл). Етилацетатните слоеве се отстраняват. pH на водната фаза се настройва до около 5 с прибавянето на воден HCI, което обикновено води до утаяването на продукта. От значение е обема на водната фаза да се сведе до минимум, за да се стимулира утаяването. Водната фаза се отдекантира от продукта, който след това се промива с вода (2 х 50 мл). Изолираният продукт се суши под вакуум до постоянно тегло.
В. Кондензационна реакция на пептидните фрагменти за получаването на хексапептид
Двата пептида DAIa-Dp-Nal-Ala-OH (33) (2,6 ммола) nTrp-D-Phe-Lys(Boc)NH2 (13) (2,8 ммола) се разтварят в безводен диметилформамид и полученият разтвор се концентрира под вакуум. Това предварително концентриране се провежда като опит да се отстранят всякакви следи от метанол, който може да е налице. Получената в резултат смес от пептиди се разтваря отново в диметилформамид и се прибавя N-хидроксисукцинимид (5,1 ммола). Полученият разтвор след това се охлажда до температурата на разтвора -2°С и се прибавя дициклохексилкарбодиимид (3,4 ммола), разтворен в метиленхлорид (3,5 мл). Получената смес се разбърква при -2°С в продължение на 3 дни. За определяне края на реакцията се използува HPLC i
-55анализ. След този период от време, ако реакцията не е привършила, може да се прибави допълнително дициклохексилкарбодиимид и получената нова реакционна смес да се разбърква допълнително още едни ден при -2°С. Ако на следващия ден (общо 4 дни) HPLC-анализът отново покаже незавършена реакция, охлаждането на реакционната смес трябва да се преустанови. Реакционният разтвор се оставя бавно да се темперира до стайна температура (25°С) за период от около 8 часа. Така получената реакционна смес се разбърква в продължение на една нощ при стайна температура. Процедурата се повтаря докато реакцията завърши напълно. След това се прибавя вода (50 мл) и получената смес се разбърква още един ден. Реакционният разтвор се филтрува за да се отстрани дициклохексилкарабамида и полученият филтрат се концентрира под вакуум до вискозно масло. Към така полученият остатък се прибавят етилацетат и полунаситен воден разтвор на натриев карбонат (200 мл). Двуфазната смес се завихря енергично във въртящ се изпарител в продължение на около 1 час. Всички получени твърди съставки се събират за получаване на продукта върху шотов филтър (синтерована стъклена фуния). Органичната фаза се промива с вода и се суши под вакуум до постоянно тегло за получаването на продукта.
DAIa-DpNal-Ala-T rp-D-Phe-Lys-NHg (35)
Хексапептид
BeH3HAOKCHKap6oHHA-DAIa-D3Nal-Ala-Trp-D-Phe-Lys-(Boc)-NH2 (34) (1,02 ммола) се прибавят, при стайна температура, към разтвор на трифлуороцетна киселина (30 мл), диметилсулфид (14 мл), 1,2-етандитиол (7 мл) и анизол (2,2 мл) в метиленхлорид (15 мл). Хомогенната реакционна смес се разбърква в продължение на 15 мин. След този период от време се прибавя безводен етер (450 мл), за да предизвика утаяване на суровия, биологичноактивен пептиден продукт (35). Този продукт се изолира посредствомм филтруване върху шотов филтър или с декантиране. Полученият продукт се разтваря във вода и се лиофилизира. Лиофилизираният продукт може да бъде пречистен по-нататък
-56чрез хроматография при средно налягане върху стъклена колона 26 х 460 мм, съдържаща Lichroprep™ RP-18 материал за пълнеж (С-18, 25-40 нм, нехомогенен). След инжектирането на пептида, разтворен във вода, колоната се елюира при скорост на потока 9 мл/мин с плитък градиент 0 до 25% метанол в продължение на 5-20 часа и след това с градиент 25 до 55% метанол за около 48 часа. След това метаноловата концентрация на градиента се повишава с около 2% на час. По време на елюирането остатъкът от разтворителя на състава се обработва с вода, съдържаща 0,2% трифлуороцетиа киселина. Продуктът (35) се идентифицира с HPLC и се изолира чрез концентриране на съответните обеми елюент.
Изобретението е описано в подробности с оглед на предпочетените му изпълнения. Обаче, за специалистите е ясно, при разглеждане на описанието, че са възможни варианти и модификации в духа и обхвата на изобретението.
Claims (37)
- ПАТЕНТНИ ПРЕТЕНЦИИ1. Пептид с формула:А-|-А2-С-|-С2-Сз-А5, в коятоAi е Gly, DAIa, β-Ala, His, Ser, Met, Pro, Sar, Ava, Aib, N-нисш алкиламинокарбонова киселина, Ν,Ν'-бис-нисш алкил-аминокарбонова киселина, азол-карбонова киселина или нисш алкил-аминокарбонова киселина, в която нисшата алкилна група включва неразклонена въглеродна верига с 2 до 10 въглеродни атома;Аг е DTrp, DPNal, D-4-Y-Phe или 5-Y-D-Trp, където Y е OH, Cl, Br, F или Н;а5 е А3-А4-А5, А3-А5, А4-А5 или А5, където (а) A3 е Dla, Gly, DAIa, Pro или desAla;(б) A4 е Ala, Gly, DAIa, Pro, линеен нисш алкил-аминокарбонова киселина или desAla и (в) А5 е Lys^-Ri,R2)-Z, Orn(S-Ri,R2)-Z, NH(CH2)XN(R3, R4) и когато Ai не е His, А5 може да бъде също така Lys-Z, Orn-Z; при което Ri е линейна нисша алкилна група или Н-атом; R2 е линейна нисша алкилна група или Н-атом; но когато R1 е Н, R2 не е Н; а когато R2 е Н, R-| не е Н;R3 е линейна нисша алкилна група или Н-атом;R4 е линейна нисша алкилна група или Н-атом;Z е МН(линейна нисша алкилна група), N (линейна нисша алкилна група)2, О-(линейна нисша алкилна група), NH2 или ОН, където линейната нисша алкилна група е както дефинираното за нисша алкилна група;хе от 2 до 15;Ct е Ala,С2 е Trp, Phe или ChxAla,С3 е DPhe, DPal или DChxAla, както и органичните им или неорганични адитивни соли.
- 2. Пептид, съгласно претенция 1, в който А-| е Gly, DAIa или His.
- 3. Пептид, съгласно претенция 1, в който Aj е DAIa.
- 4. Пептид, съгласно претенция 1, в който А2 е DTrp или DPNal.
- 5. Пептид, съгласно претенция 1, в който Ag е DPNal.
- 6. Пептид, съгласно претенция 1, в който А5 е А3-А4-А5.
- 7. Пептид, съгласно претенция 1, в който А5 е А3-А5.
- 8. Пептид, съгласно претенция 1, в който А5 е А4-А5.
- 9. Пептид, съгласно претенции 1,2,3,4 или 5, в който А5 е А5.
- 10. Пептиди, съгласно претенции 1,2,3,4 или 5, в които Сг е Trp или Phe.
- 11. Пептиди, съгласно претенции 1, 2,3, 4,5,9 или 10, в които С3 е DPhe.
- 12. Пептиди, съгласно претенция 10, в които Сг е Тгр.
- 13. Пептиди, съгласно претенция 12, в които С3 е DPhe.
- 14. Пептид, съгласно претенция 1, притежаващ формула: DAIa-DPNal-Ala-T rp-DPhe-LysNH2, DAIa-DPNal-Ala-Trp-DPhe-Lys£-iPr)NH2, DAIa-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lysfc-iPr)NH2,DAIa-DT rp-Ala-T rp-DPhe-LysNH2.DAIa-D₽Nal-Ala-Trp-DPhe-NH(CH2)5NH2, NH2(CH2)5CO-D₽Nal-Ala-Trp-DPhe-NH(CH2)5NH2, NalMA-DPNal-Ala-Phe-LysNH2, <x,yABU-DPNal-Ala-Phe-DPhe-LysNH2, DAIa-DPhe-Ala-Phe-DPhe-LysNH2, Ala-His-DPNal-Ala-Phe-DPhe-LysNH2, NalMA-DPNal-Ala-Phe-DPhe-NH NH2, a,yABU-DPNal-Ala-Phe-DPhe-NH NH2,DAIa-DPNal-Ala-Phe-DPhe-Lys EA, a,yABU-DPNal-Ala-Phe-DPhe-LysNH2, DAIa-DPNal-Ala-Phe-DPhe-DArgNH2, DAIa-DPNal-Ala-ChxAla-DPhe-LysNH2, DAIa-DPNal-Ala-Phe-DChxAla-LysNH2HAHDAIa-DPNal-Ala-ChxAla-DChxAla-LysNHg и органичните им и неорганични адитивни соли.
- 15. Метод за стимулиране освобождаването на растежен хормон в животно, характеризиращ се с приемането от животното на ефективно количество на най-малко един от пептидите от претенции 1,9,10,11,12 или 14.
- 16. Метод съгласно претенция 15, характеризиращ се с това, че животното е бозайник.
- 17. Метод, съгласно претенция 15, характеризиращ се с това, че животното е човек.
- 18. фармацевтичен състав за стимулиране освобождаването на растежен хормон при животни, включващ ефективно количество от най-малко един от пептидите от претенции 1, 9, 10, 11, 12 или 14 и фармацевтично приемлив носител или разредител.
- 19. Метод за стимулиране освобождаването и повишаването на нивата на растежен хормон, характеризиращ се с това, че включва приемането на пептида от претенция 1 в синергично количество с второ съединение, при което второто съединение е съединение, което играе ролята на агонист спрямо хормонния рецептор за освобождаване на растежния хормон или инхибира освобождаването на соматостатин.
- 20. фармацевтичен състав, съгласно претенция 18, които включва освен това второ съединение, което служи като агонист при хормонния рецептор, освобождаващ растежния хормон или инхибира ефектите на соматостатина.
- 21. Метод за стимулиране освобождаването и повишаването на кръвните хормонни нива, характеризиращ се с това, че включва приемането на пептида от претенция 1, заедно с най-малко един естествено срещащ се хормон, освобождаващ растежен хормон и функционално еквивалентен нему или съединение, което стимулира освобождаването на растежен хормон.
- 22. Метод за стимулиране освобождаването и повишаването на нивата на кръвен растежен хормон, характеризиращ се с това, че включва пиемането на пептида от претенция 1 в синергично количество с най-малко един полипептид от Група 1 или Група 2, при което полипептида от Група 1 е подбран от някои от естествено срещащите се хормони, освобождаващи растежен хормон и функционално еквивалентни на тях, а полипептида от Група 2 е подбран от групата на полипептидите, включваща:Tyr-DArg-Phe-NH2;Tyr-DAIa-Phe-NHg; Tyr-DArg(NO2)-Phe-NH2;Tyr-DMet (Ο) -Phe-NH#Tyr-DAIa-Phe-Gly-NH2!Tyr-DArg-Phe-Gly-NH2;Tyr-DThr-Phe-Gly-NH2;Phe-DArg-Phe-Gly-NH2;Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2;Tyr-DAIa-Gly-Phe-NH2;Tyr-DArg-Gly-T rp-NH2!Tyr-DArg(NO2)-Phe-Gly-NH2;Tyr-DMet (0) -Phe-Gly-NH^ (NMe)Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2;Tyr-DArg-Phe-Gly-ол;Tyr-DArg-Gly-(NMe)Phe-NH2;Tyr-DArg-Phe-Sar-ол;Tyr-DAIa-Phe-Sar-ол;Tyr-DAIa-Phe-Gly-Tyr-NH2;Tyr-DAIa-(NMe)Phe-Gly-Met(O)-OA;Tyr-DArg-(NMe)Phe-Gly-Met(O)-OA;Gly-Tyr-DArg-Phe-Gly-NH2;Tyr-DThr-Gly-Phe-Thy-NH2;Gly-Tyr-DAIa-Phe-Gly-NH2;Tyr-DAIa-Phe-Gly-ол;T yr-DAIa-Gly-(NMe)Phe-Gly-OA;Tyr-DArg-Phe-Sar-NHg;Tyr-DAIa-Phe-Sar-NHg;Tyr-DAIa-Gly-(NMe)Phe-NH2;Sar-Tyr-DArg-Phe-Sar-NHg;Tyr-DCys-Phe-Gly-DCys-NH2 (цикличен дисулфид);Tyr-DCys-Phe-Gly-DCys-NH2 (свободен дитиол);Tyr-DCys-Gly-Phe-DCys-NH2 (цикличен дисулфид); Tyr-DCys-Gly-Phe-DCys-NH2 (свободен дитиол);Tyr-DAIa-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2;Т yr-DALa-Phe-Sar-T yr-Pro-Ser-Nh^;Tyr-DAIa-Phe-Sar-Phe-Pro-Ser-NH2;Tyr-DAIa-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2;Tyr-DAIa-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH2;Tyr-DAIa-Phe-Sar-Phe-Hyp-Ser-NH2;Tyr-DArg-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2;Tyr-DArg-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH2!Tyr-DArg-Phe Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH#T yr-Darg-Phe-Gly-T yr-Pro-Ser-NH2 и органичните им и неорганични адитивни соли.
- 23. Методът от претенция 22, характеризиращ се с това, че се използуват полипептиди от Г рупа 1 и полипептиди от Г рупа 2.
- 24. Методът от претенция 21, характеризиращ се с това, че съединението, което стимулира освобождаването на растежен хормон е подбрано от групите, състоящи се от β-адренергични блокиращи агенти, а^адренергични блокиращи агенти, инхибитори на ацетилхолинестераза и пептиди, включ ващи:Tyr-DArg-Phe-NH2;Tyr-DAIa-Phe-NH2;Tyr-DArg(NO2)-Phe-NH2;Tyr-DMet (0) -Phe-NH2; Tyr-DAIa-Phe-Gly-NH2; Tyr-DArg-Phe-Gly-NH2; Tyr-DThr-Phe-Gly-NH2; Phe-DArg-Phe-Gly-NH2; T y r-DArg-Phe-Sar-NH2; Tyr-DAIa-Gly-Phe-NH2; Tyr-DArg-Gly-Trp-NH2; Tyr-DArg(NO2)-Phe-Gly-NH2;Tyr-DMet (0) -Phe-Gly-NH2; (NMe)Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2; Tyr-DArg-Phe-Gly-ол; Tyr-DArg-Gly-(NMe)Phe-NH2; T yr-DArg-Phe-Sar-ол; Tyr-DAIa-Phe-Sar-ол; Tyr-DAIa-Phe-Gly-Tyr-NH2;Ty r-DAIa-(NMe) Phe-Gly-Met(O)-OA; Tyr-DArg-(NMe)Phe-Gly-Met(O)-OA; Gly-Tyr-DArg-Phe-Gly-NH2; Tyr-DThr-Gly-Phe-Thy-NH2; Gly-Tyr-DAIa-Phe-Gly-NH2; Tyr-DAIa-Phe-Gly-ол; Tyr-DAIa-Gly-(NMe)Phe-Gly-OA; Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2; Tyr-DAIa-Phe-Sar-NH2; Tyr-DAIa-Gly-(NMe)Phe-NH2; Sar-Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2;Tyr-DCys-Phe-Gly-DCys-NH2 (цикличен дисулфид); Tyr-DCys-Phe-Gly-DCys-NH2 (свободен дитиол); Tyr-DCys-Gly-Phe-DCys-NH2 (цикличен дисулфид);7 Tyr-DCys-Gly-Phe-DCys-NHg (свободен дитиол);Tyr-DAIa-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2:Т yr-DALa-Phe-Sar-T yr-Pro-Ser-NHg;Tyr-DAIa-Phe-Sar-Phe-Pro-Ser-NHa;Tyr-DAIa-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2;Tyr-DAIa-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH2; Tyr-DAIa-Phe-Sar-Phe-Hyp-Ser-NH2;T y r-DArg-Phe-G ly-T y r-Hy p-Ser-NH2;T yr-DArg-Phe-Sar-T yr-Pro-Ser-NH2;Tyr-DArg-Phe Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH2;Tyr-Darg-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2 и органичните им и неорганични адитивни соли.
- 25. Метод за лечение на хипоталамусни хипофизни джуджета, остеоророза или изгаряния, характеризиращ се с това, че включва приемането на терапевтично ефективно количество от пептида от претенция 1.
- 26. Метод за стимулиране зарастването на рани, стимулиращ възстановяване от хирургическа намеса или възстановяване от акутно/хронично дебилно заболяване, характеризиращ се с това, че включва приемането на терапевтично количество от фармацевтичния състав от претенция 18.
- 27. Метод за предпазване или намаляване на кахезия при болни от рак пациенти, характеризиращ се с това, че включва даването на терапевтично ефективно количество от петида от претенция 1.
- 28. Метод за стимулиране анаболизъм или за предпазване от катаболизъм при хората, характеризиращ се с това, че включва приемането на терапевтично ефективно количество от пептида от претенция 1.
- 29. Методът, съгласно претенция 28, характеризиращ се с това, че терапевтичното ефективно количество е около 30 мкг до 1200 мкг пептид за кг телесно тегло.
- 30. Метод за увеличаване мускулите на животно и/или намаляване на телесните тльстини, характеризиращ се с това, че включва приемането на ефективно количество от пептида от претенция 1.
- 31. Метод за подобряване серумния липиден профил при хора, чрез снижаване в серума на количеството серумен холестерол и липопротеин с ниска плътност и увеличаване в серума на количеството липопротеин с висока плътност, характеризиращ се с това, че включва приемането на ефективно количество от пептида от претенция 1.
- 32. Метод, съгласно претенции 30 или 31, характеризиращ се с това, че ефективните количества са в границите от около 0,1 мкг до 10 мг общ пептид за кг телесно тегло.
- 33. Методи, съгласно претенции 25, 26 или 27, характеризиращи се с това, че споменатите терапевтични ефективни количества са в границите между около 0,1 мкг до 10 мг общо количество пептид на кг телесно тегло.
- 34. Пептид, съгласно претенция 9, притежаващ формула:DAIa-DPNal-Ala-T rp-DPhe-LysNHg,DAIa-DPNal-Ala-Trp-DPhe-Lys£-iPr)NH2,DAIa-DT rp-Ala-T rp-DPhe-Lys^-iPr)NH2,DAIa-DT rp-Ala-T rp-DPhe-LysNH2,DAIa-DPNal-Ala-Trp-DPhe-NH(CH2)5NH2, NH2(CH2)5CO-DpNal-Ala-Trp-DPhe-NH(CH2)5NH2 и органичните им и неорганични адитивни соли.
- 35. Метод за получаване на съединения с формула:А1-А2-С1-С2-С3-А5, в коятоAi е Gly, DAIa, β-Ala, His, Ser, Met, Pro, Sar, Ava, Aib, N-нисш алкиламинокарбонова киселина, Ν,Ν'-бис-нисш алкил-аминокарбонова киселина, азолкарбонова киселина или нисш алкил-аминокарбонова киселина, в която нисшата алкилна група включва неразклонена въглеродна верига с 2 до 10 въглеродни атома;к2 е DTrp, DPNal, D-4-Y-Phe или 5-Y-D-Trp, където Y е OH, Cl, Br, F или H; АбеАз-Ад-Аб, A3-A5, А4-А5ИЛИА5, където (а) A3 e Dla, Gly, DAIa, Pro или desAla;(б) A4 e Ala, Gly, DAIa, Pro, линеен нисш алкил-аминокарбонова киселина или desAla и (в) А5 е Lys^-Ri,R2)-Z, Orn(6-Ri,R2)-Z, NH(CH2)xN(R3, R4) и когато Αί не е His, А5 може да бъде също така Lys-Z, Orn-Z; при което Ri е линейна нисша алкилна група или Н-атом; R2 е линейна нисша алкилна група или Н-атом; но когато R-| е Н, R2 не е Н; а когато R2 е Н, Rj не е Н;R3 е линейна нисша алкилна група или Н-атом;R4 е линейна нисша алкилна група или Н-атом;Z е NH (линейна нисша алкилна група), N (линейна нисша алкилна група)2. О-(линейна нисша алкилна група), NH2 или ОН, където линейната нисша алкилна група е както дефинираното за нисша алкилна група;хе от 2 до 15;С-| е Ala,С2 е Trp, Phe или ChxAla,С3 е DPhe, DPal или DChxAla, както и органичните им или неорганични адитивни соли, характеризиращ се с това, че включва свързване на гореописаните аминокиселини или аминокиселинни производни, за да се получат съединенията.
- 36. Метод за получаване на съединенията съгласно претенция 35, характеризиращ се с това, че включва кондензационна реакция на пептидни фрагменти за получаване на съединението.
- 37. Метод за получаване на съединението съгласно претенция 35, характеризиращ се с това, че включва твърдофазен синтез на споменатите аминокиселини или аминокиселинни производни.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US07/748,350 US5663146A (en) | 1991-08-22 | 1991-08-22 | Polypeptide analogues having growth hormone releasing activity |
PCT/US1992/007026 WO1993004081A1 (en) | 1991-08-22 | 1992-08-20 | Peptides having growth hormone releasing activity |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
BG98489A true BG98489A (bg) | 1995-02-28 |
BG62655B1 BG62655B1 (bg) | 2000-04-28 |
Family
ID=25009088
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
BG98489A BG62655B1 (bg) | 1991-08-22 | 1994-02-18 | Пептиди, способни да освобождават растежен хормон |
Country Status (26)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US5663146A (bg) |
EP (1) | EP0605484B1 (bg) |
JP (1) | JP3179489B2 (bg) |
KR (1) | KR100247212B1 (bg) |
CN (1) | CN1035256C (bg) |
AT (1) | ATE172742T1 (bg) |
AU (1) | AU666673B2 (bg) |
BG (1) | BG62655B1 (bg) |
BR (2) | BR9206398A (bg) |
CA (1) | CA2116120C (bg) |
CZ (1) | CZ293281B6 (bg) |
DE (1) | DE69227462T2 (bg) |
DK (1) | DK0605484T3 (bg) |
ES (1) | ES2124263T3 (bg) |
FI (2) | FI120095B (bg) |
HU (1) | HU223664B1 (bg) |
IL (1) | IL102848A (bg) |
MX (1) | MX9204861A (bg) |
NO (1) | NO314695B1 (bg) |
NZ (1) | NZ244034A (bg) |
PL (1) | PL169562B1 (bg) |
RO (1) | RO112507B1 (bg) |
RU (1) | RU2126014C1 (bg) |
SK (1) | SK282895B6 (bg) |
WO (1) | WO1993004081A1 (bg) |
ZA (1) | ZA926337B (bg) |
Families Citing this family (105)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5843941A (en) | 1993-05-14 | 1998-12-01 | Genentech, Inc. | Ras farnesyl transferase inhibitors |
SK281963B6 (sk) * | 1993-12-23 | 2001-09-11 | Novo Nordisk A/S | Zlúčeniny ovplyvňujúce uvoľňovanie rastového hormónu, farmaceutické prostriedky s ich obsahom a ich použitie |
PL181286B1 (pl) * | 1993-12-23 | 2001-07-31 | Novo Nordisk As | Zwiazki o wlasciwosciach uwalniania hormonu wzrostu i zawierajace je kompozycje farmaceutyczne PL PL PL PL PL PL PL PL |
US5798337A (en) * | 1994-11-16 | 1998-08-25 | Genentech, Inc. | Low molecular weight peptidomimetic growth hormone secretagogues |
US20020111461A1 (en) * | 1999-05-21 | 2002-08-15 | Todd C. Somers | Low molecular weight peptidomimetic growth hormone secretagogues |
WO1997000894A1 (en) * | 1995-06-22 | 1997-01-09 | Novo Nordisk A/S | Compounds with growth hormone releasing properties |
CA2252761A1 (en) * | 1996-04-24 | 1997-10-30 | Novo Nordisk A/S | Compounds with growth hormone releasing properties |
JP4116097B2 (ja) | 1997-06-20 | 2008-07-09 | ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ | 成長ホルモン放出特性をもつ化合物 |
US6127341A (en) * | 1997-06-20 | 2000-10-03 | Novo Nordisk A/S | Compounds with growth hormone releasing properties |
ZA987383B (en) * | 1997-08-19 | 2000-02-17 | Lilly Co Eli | Treatment of congestive heart failure with growth hormone secretagogues. |
US6329342B1 (en) | 1997-08-19 | 2001-12-11 | Eli Lilly And Company | Treatment of congestive heart failure with growth hormone secretagogues |
WO1999036431A1 (en) | 1998-01-16 | 1999-07-22 | Novo Nordisk A/S | Compounds with growth hormone releasing properties |
WO1999039730A1 (fr) * | 1998-02-09 | 1999-08-12 | Kaken Pharmaceutical Co., Ltd. | Preparation a administration orale contenant des peptides favorisant la secretion d'hormone de croissance |
US6919315B1 (en) | 1998-06-30 | 2005-07-19 | Novo Nordisk A/S | Compounds with growth hormone releasing properties |
US6682908B1 (en) | 1998-07-10 | 2004-01-27 | Merck & Co., Inc. | Mouse growth hormone secretagogue receptor |
CA2333857A1 (en) | 1998-07-13 | 2000-01-20 | Merck & Co., Inc. | Growth hormone secretagogue related receptors and nucleic acids |
EP1112282A4 (en) | 1998-08-10 | 2002-10-31 | Merck & Co Inc | RECEPTOR OF THE GROWTH HORMONE SECRETION PROMOTER FROM THE DOG |
WO2000009537A2 (en) * | 1998-08-14 | 2000-02-24 | Administrators Of The Tulane Educational Fund | Compounds having growth hormone releasing activity |
US6639076B1 (en) | 1998-08-18 | 2003-10-28 | Eli Lilly And Company | Growth hormone secretagogues |
US6696063B1 (en) * | 1998-12-30 | 2004-02-24 | Applied Research Systems Ars Holding N.V. | Treatment of HIV-associated dysmorphia/dysmetabolic syndrome (HADDS) with or without lipodystrophy |
US7022677B1 (en) | 1999-02-18 | 2006-04-04 | Kaken Pharmaceutical Co., Ltd. | Amide derivatives as growth hormone secretagogues |
CA2362290A1 (en) * | 1999-02-18 | 2000-08-24 | Kaken Pharmaceutical Co., Ltd. | Novel amide derivatives as growth hormone secretagogues |
US6828331B1 (en) * | 1999-02-19 | 2004-12-07 | Eli Lilly And Company | Growth hormone secretagogues |
MXPA02000938A (es) * | 1999-07-26 | 2004-03-19 | Baylor College Medicine | Analogo super-activo de la hormona que libera la hormona de crecimiento porcina. |
US20040192593A1 (en) * | 1999-07-26 | 2004-09-30 | Baylor College Of Medicine | Protease resistant ti-growth hormone releasing hormone |
US7022311B1 (en) * | 1999-10-12 | 2006-04-04 | Kaken Pharmaceutical Co., Ltd. | Powdery inhalational preparations and process for producing the same |
UA73530C2 (uk) | 1999-11-10 | 2005-08-15 | Ново Нордіск А/С | Сполука з властивостями вивільнювати гормон росту |
JP3498041B2 (ja) * | 2000-05-29 | 2004-02-16 | 科研製薬株式会社 | プラルモレリン含有点鼻用製剤 |
ES2333097T3 (es) | 2000-05-31 | 2010-02-17 | Raqualia Pharma Inc | Uso de secretagogos de la hormona de crecimiento para estimular la motilidad gastrointestinal. |
US7919647B2 (en) | 2000-08-24 | 2011-04-05 | University Of Tennessee Research Foundation | Selective androgen receptor modulators and methods of use thereof |
US7645898B2 (en) | 2000-08-24 | 2010-01-12 | University Of Tennessee Research Foundation | Selective androgen receptor modulators and method of use thereof |
US7622503B2 (en) | 2000-08-24 | 2009-11-24 | University Of Tennessee Research Foundation | Selective androgen receptor modulators and methods of use thereof |
US7855229B2 (en) | 2000-08-24 | 2010-12-21 | University Of Tennessee Research Foundation | Treating wasting disorders with selective androgen receptor modulators |
EP1355941A2 (en) | 2001-02-02 | 2003-10-29 | ConjuChem, Inc. | Long lasting growth hormone releasing factor derivatives |
US7125840B2 (en) * | 2001-10-09 | 2006-10-24 | Eli Lilly And Company | Substituted dipeptides as growth hormone secretagogues |
CN100417419C (zh) | 2001-10-26 | 2008-09-10 | 贝勒医学院 | 改变个体的瘦体重和骨特性的组合物和方法 |
US8853266B2 (en) | 2001-12-06 | 2014-10-07 | University Of Tennessee Research Foundation | Selective androgen receptor modulators for treating diabetes |
US6831102B2 (en) | 2001-12-07 | 2004-12-14 | Bristol-Myers Squibb Company | Phenyl naphthol ligands for thyroid hormone receptor |
BR0214869A (pt) | 2001-12-11 | 2005-03-08 | Advisys Inc | Suplementação mediada por plasmìdeo para tratamento de indivìduos cronicamente doentes |
US7015219B2 (en) | 2001-12-19 | 2006-03-21 | Bristol-Myers Squibb Company | 3-aryl-hydroxybenzoxazines and 3, 4-dihydro-3-aryl-hydroxybenzoxazines as selective estrogen receptor beta modulators |
ATE510919T1 (de) * | 2002-02-07 | 2011-06-15 | Baylor College Medicine | Veränderte hirnanhangsdrüsenentwicklung in nachkommen von mit einer therapie mit wachstumshormon freisetzendem hormon behandelten trächtigen muttertieren |
US7772433B2 (en) | 2002-02-28 | 2010-08-10 | University Of Tennessee Research Foundation | SARMS and method of use thereof |
US7381730B2 (en) | 2002-03-15 | 2008-06-03 | Bristol-Myers Squibb Company | 3-arylquinazoline derivatives as selective estrogen receptor beta modulators |
AU2003218337A1 (en) * | 2002-04-09 | 2003-10-27 | Eli Lilly And Company | Growth hormone secretagogues |
US20060167268A1 (en) * | 2002-04-09 | 2006-07-27 | Eli Lilly And Company, Patent Division, | Growth hormone secretagogues |
WO2003094845A2 (en) | 2002-05-08 | 2003-11-20 | Bristol-Myers Squibb Company | Pyridine-based thyroid receptor ligands |
US7405234B2 (en) | 2002-05-17 | 2008-07-29 | Bristol-Myers Squibb Company | Bicyclic modulators of androgen receptor function |
EP1536817A1 (en) | 2002-08-23 | 2005-06-08 | Gestion Univalor Société en Commandite | Growth hormone-releasing peptides in the treatment of prevention of atherosclerosis and hypercholesterolemia |
WO2004045518A2 (en) | 2002-11-15 | 2004-06-03 | Bristol-Myers Squibb Company | Open chain prolyl urea-related modulators of androgen receptor function |
US8309603B2 (en) | 2004-06-07 | 2012-11-13 | University Of Tennessee Research Foundation | SARMs and method of use thereof |
TW200504021A (en) | 2003-01-24 | 2005-02-01 | Bristol Myers Squibb Co | Substituted anilide ligands for the thyroid receptor |
WO2004067719A2 (en) * | 2003-01-28 | 2004-08-12 | Advisys, Inc. | Growth hormone releasing hormone (ghrh) for use in reducing culling in herd animals |
WO2004069793A2 (en) | 2003-01-28 | 2004-08-19 | Bristol-Myers Squibb Company | Novel 2-substituted cyclic amines as calcium sensing receptor modulators |
US7205322B2 (en) | 2003-02-12 | 2007-04-17 | Bristol-Myers Squibb Company | Thiazolidine compounds as calcium sensing receptor modulators |
US7557143B2 (en) | 2003-04-18 | 2009-07-07 | Bristol-Myers Squibb Company | Thyroid receptor ligands |
TW200424214A (en) * | 2003-04-21 | 2004-11-16 | Advisys Inc | Plasmid mediated GHRH supplementation for renal failures |
US7459460B2 (en) | 2003-05-28 | 2008-12-02 | Bristol-Myers Squibb Company | Trisubstituted heteroaromatic compounds as calcium sensing receptor modulators |
US7265145B2 (en) | 2003-05-28 | 2007-09-04 | Bristol-Myers Squibb Company | Substituted piperidines and pyrrolidines as calcium sensing receptor modulators and method |
US7476653B2 (en) | 2003-06-18 | 2009-01-13 | Tranzyme Pharma, Inc. | Macrocyclic modulators of the ghrelin receptor |
US7361642B2 (en) * | 2003-08-04 | 2008-04-22 | Vgx Pharmaceuticals, Inc. | Canine specific growth hormone releasing hormone |
AU2003272814A1 (en) | 2003-10-02 | 2005-05-19 | Ibrahim Al-Habdan | Peptide for promoting healing of fractures |
DE602004027165D1 (de) * | 2003-12-31 | 2010-06-24 | VGX Pharmaceuticals LLC | Reduzierung von arthritis und lahmheit bei personen unter supllement von wachstumshormon freisetzendem hormon (ghrh) |
US7517863B2 (en) * | 2004-01-20 | 2009-04-14 | Vgx Pharmaceuticals, Inc. | Enhanced secretion/retention of growth hormone releasing hormone (GHRH) from muscle cells by species-specific signal peptide |
US20050164952A1 (en) * | 2004-01-23 | 2005-07-28 | Vital Pharmaceuticals, Inc. | Delivery system for growth hormone releasing peptides |
US7820702B2 (en) | 2004-02-04 | 2010-10-26 | Bristol-Myers Squibb Company | Sulfonylpyrrolidine modulators of androgen receptor function and method |
US7378426B2 (en) | 2004-03-01 | 2008-05-27 | Bristol-Myers Squibb Company | Fused heterotricyclic compounds as inhibitors of 17β-hydroxysteroid dehydrogenase 3 |
US7696241B2 (en) | 2004-03-04 | 2010-04-13 | Bristol-Myers Squibb Company | Bicyclic compounds as modulators of androgen receptor function and method |
US7625923B2 (en) | 2004-03-04 | 2009-12-01 | Bristol-Myers Squibb Company | Bicyclic modulators of androgen receptor function |
US9889110B2 (en) | 2004-06-07 | 2018-02-13 | University Of Tennessee Research Foundation | Selective androgen receptor modulator for treating hormone-related conditions |
US9884038B2 (en) | 2004-06-07 | 2018-02-06 | University Of Tennessee Research Foundation | Selective androgen receptor modulator and methods of use thereof |
MX2007000893A (es) * | 2004-07-23 | 2007-04-18 | Advisys Inc | La hormona liberadora de hormona de crecimiento mejora la respuesta inmune inducida por la vacunacion. |
WO2006023608A2 (en) | 2004-08-18 | 2006-03-02 | Elixir Pharmaceuticals, Inc. | Growth-hormone secretagogues |
US7456188B1 (en) | 2005-04-28 | 2008-11-25 | Bristol-Myers Squibb Company | C-5 substituted quinazolinone derivatives as selective estrogen receptor beta modulators |
ES2453981T3 (es) | 2005-08-31 | 2014-04-09 | University Of Tennessee Research Foundation | Tratamiento de síntomas de enfermedad renal con moduladores selectivos de receptor de andrógenos (SARM) |
CU23558A1 (es) | 2006-02-28 | 2010-07-20 | Ct Ingenieria Genetica Biotech | Compuestos análogos a los secretagogos peptidicos de la hormona de crecimiento |
WO2008006019A2 (en) * | 2006-07-06 | 2008-01-10 | Advisys Inc. | Growth hormone releasing hormone treatment to decrease cholesterol levels |
EP2038252B1 (en) | 2006-07-12 | 2016-11-02 | University of Tennessee Research Foundation | Substituted acylanilides and methods of use thereof |
EP2995619B1 (en) | 2006-08-02 | 2019-09-25 | Cytokinetics, Inc. | Certain chemical entities comprising imidazopyrimidines, compositions and methods |
US8299248B2 (en) | 2006-08-02 | 2012-10-30 | Cytokinetics, Incorporated | Certain 1H-imidazo[4,5-b]pyrazin-2(3H)-ones and 1H-imidazo[4,5-b]pyrazin-2-ols and methods for their use |
US10010521B2 (en) | 2006-08-24 | 2018-07-03 | University Of Tennessee Research Foundation | SARMs and method of use thereof |
CN103251579B (zh) | 2006-08-24 | 2016-12-28 | 田纳西大学研究基金会 | 取代的n-酰基苯胺及其使用方法 |
US9730908B2 (en) | 2006-08-24 | 2017-08-15 | University Of Tennessee Research Foundation | SARMs and method of use thereof |
US9844528B2 (en) | 2006-08-24 | 2017-12-19 | University Of Tennessee Research Foundation | SARMs and method of use thereof |
AU2008241532A1 (en) | 2007-02-09 | 2008-10-30 | Tranzyme Pharma, Inc. | Macrocyclic ghrelin receptor modulators and methods of using the same |
US20100099640A1 (en) | 2007-05-04 | 2010-04-22 | Joannes Geuns | Tissue degeneration protection |
US7968603B2 (en) | 2007-09-11 | 2011-06-28 | University Of Tennessee Research Foundation | Solid forms of selective androgen receptor modulators |
US8003689B2 (en) | 2008-06-20 | 2011-08-23 | Gtx, Inc. | Metabolites of selective androgen receptor modulators and methods of use thereof |
AR081331A1 (es) | 2010-04-23 | 2012-08-08 | Cytokinetics Inc | Amino- pirimidinas composiciones de las mismas y metodos para el uso de los mismos |
US9133123B2 (en) | 2010-04-23 | 2015-09-15 | Cytokinetics, Inc. | Certain amino-pyridines and amino-triazines, compositions thereof, and methods for their use |
AR081626A1 (es) | 2010-04-23 | 2012-10-10 | Cytokinetics Inc | Compuestos amino-piridazinicos, composiciones farmaceuticas que los contienen y uso de los mismos para tratar trastornos musculares cardiacos y esqueleticos |
WO2013190520A2 (en) | 2012-06-22 | 2013-12-27 | The General Hospital Corporation | Gh-releasing agents in the treatment of vascular stenosis and associated conditions |
US10314807B2 (en) | 2012-07-13 | 2019-06-11 | Gtx, Inc. | Method of treating HER2-positive breast cancers with selective androgen receptor modulators (SARMS) |
PT2872482T (pt) | 2012-07-13 | 2020-09-22 | Oncternal Therapeutics Inc | Método de tratamento de cancro de mama com modulador seletivo do recetor de andrógeno (sarm) |
US10987334B2 (en) | 2012-07-13 | 2021-04-27 | University Of Tennessee Research Foundation | Method of treating ER mutant expressing breast cancers with selective androgen receptor modulators (SARMs) |
US10258596B2 (en) | 2012-07-13 | 2019-04-16 | Gtx, Inc. | Method of treating HER2-positive breast cancers with selective androgen receptor modulators (SARMS) |
US9744149B2 (en) | 2012-07-13 | 2017-08-29 | Gtx, Inc. | Method of treating androgen receptor (AR)-positive breast cancers with selective androgen receptor modulator (SARMs) |
US9969683B2 (en) | 2012-07-13 | 2018-05-15 | Gtx, Inc. | Method of treating estrogen receptor (ER)-positive breast cancers with selective androgen receptor modulator (SARMS) |
US9622992B2 (en) | 2012-07-13 | 2017-04-18 | Gtx, Inc. | Method of treating androgen receptor (AR)-positive breast cancers with selective androgen receptor modulator (SARMs) |
IN2015DN04172A (bg) | 2012-10-24 | 2015-10-16 | Daiichi Sankyo Companyltd | |
US10092627B2 (en) | 2013-04-08 | 2018-10-09 | President And Fellows Of Harvard College | Methods and compositions for rejuvenating skeletal muscle stem cells |
US9119832B2 (en) | 2014-02-05 | 2015-09-01 | The Regents Of The University Of California | Methods of treating mild brain injury |
SG11201609050UA (en) | 2014-05-30 | 2016-12-29 | Pfizer | Carbonitrile derivatives as selective androgen receptor modulators |
US20170121385A1 (en) | 2015-10-28 | 2017-05-04 | Oxeia Biopharmaceuticals, Inc. | Methods of treating neurodegenerative conditions |
CA3142514A1 (en) | 2019-06-27 | 2020-12-30 | Cytokinetics, Inc. | Polymorphs of 1-(2-((((trans)-3-fluoro-1-(3-fluoropyridin-2-yl)cyclobutyl)methyl)amino)pyrimidin-5-yl)-1h-pyrrole-3-carboxamide |
WO2023275715A1 (en) | 2021-06-30 | 2023-01-05 | Pfizer Inc. | Metabolites of selective androgen receptor modulators |
Family Cites Families (22)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4228157A (en) * | 1979-03-30 | 1980-10-14 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
CA1175810A (en) * | 1979-03-30 | 1984-10-09 | Frank A. Momany | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
US4223021A (en) * | 1979-03-30 | 1980-09-16 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
US4223019A (en) * | 1979-03-30 | 1980-09-16 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
US4228156A (en) * | 1979-03-30 | 1980-10-14 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
US4228155A (en) * | 1979-03-30 | 1980-10-14 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
US4224316A (en) * | 1979-03-30 | 1980-09-23 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
US4228158A (en) * | 1979-03-30 | 1980-10-14 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
US4223020A (en) * | 1979-03-30 | 1980-09-16 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
US4226857A (en) * | 1979-03-30 | 1980-10-07 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
US4410513A (en) * | 1981-12-28 | 1983-10-18 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
US4410512A (en) * | 1981-12-28 | 1983-10-18 | Beckman Instruments, Inc. | Combinations having synergistic pituitary growth hormone releasing activity |
WO1983002272A1 (en) * | 1981-12-28 | 1983-07-07 | Beckman Instruments Inc | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
US4880778A (en) * | 1986-05-12 | 1989-11-14 | Eastman Kodak Company | Combinations having synergistic growth hormone releasing activity and methods for use thereof |
US4839344A (en) * | 1987-06-12 | 1989-06-13 | Eastman Kodak Company | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity |
US4880777A (en) * | 1987-09-01 | 1989-11-14 | Eastman Kodak Company | Synthetic peptides having growth hormone releasing activity |
DE68919213T2 (de) * | 1988-01-28 | 1995-05-11 | Polygen Holding Corp | Polypeptidverbindungen mit wachstumshormonfreisetzender aktivität. |
EP0400051B1 (en) * | 1988-01-28 | 1995-05-10 | Polygen Holding Corporation | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity |
AU633003B2 (en) * | 1988-05-11 | 1993-01-21 | Polygen Holding Corporation | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity |
IL98910A0 (en) * | 1990-07-24 | 1992-07-15 | Polygen Holding Corp | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity and pharmaceutical compositions containing them |
JPH05508859A (ja) | 1990-07-24 | 1993-12-09 | イーストマン コダック カンパニー | ペプチド合成方法 |
US5486505A (en) * | 1990-07-24 | 1996-01-23 | Polygen Holding Corporation | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity |
-
1991
- 1991-08-22 US US07/748,350 patent/US5663146A/en not_active Expired - Lifetime
-
1992
- 1992-08-18 IL IL102848A patent/IL102848A/en not_active IP Right Cessation
- 1992-08-20 DE DE69227462T patent/DE69227462T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1992-08-20 RO RO94-00256A patent/RO112507B1/ro unknown
- 1992-08-20 WO PCT/US1992/007026 patent/WO1993004081A1/en active Application Filing
- 1992-08-20 EP EP92919262A patent/EP0605484B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-08-20 BR BR9206398A patent/BR9206398A/pt not_active Application Discontinuation
- 1992-08-20 CZ CZ1994400A patent/CZ293281B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1992-08-20 KR KR1019940700542A patent/KR100247212B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1992-08-20 AU AU25416/92A patent/AU666673B2/en not_active Ceased
- 1992-08-20 CA CA002116120A patent/CA2116120C/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-08-20 NZ NZ244034A patent/NZ244034A/en not_active IP Right Cessation
- 1992-08-20 JP JP50458593A patent/JP3179489B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1992-08-20 DK DK92919262T patent/DK0605484T3/da active
- 1992-08-20 US US07/932,494 patent/US5776901A/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-08-20 RU RU94016393A patent/RU2126014C1/ru not_active IP Right Cessation
- 1992-08-20 SK SK204-94A patent/SK282895B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1992-08-20 PL PL92302434A patent/PL169562B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1992-08-20 AT AT92919262T patent/ATE172742T1/de active
- 1992-08-20 ES ES92919262T patent/ES2124263T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1992-08-20 HU HU9400495A patent/HU223664B1/hu not_active IP Right Cessation
- 1992-08-21 MX MX9204861A patent/MX9204861A/es unknown
- 1992-08-21 ZA ZA926337A patent/ZA926337B/xx unknown
- 1992-08-22 CN CN92110868A patent/CN1035256C/zh not_active Expired - Fee Related
-
1994
- 1994-02-18 BG BG98489A patent/BG62655B1/bg unknown
- 1994-02-21 NO NO19940592A patent/NO314695B1/no not_active IP Right Cessation
- 1994-02-21 FI FI940807A patent/FI120095B/fi not_active IP Right Cessation
-
1997
- 1997-04-22 BR BR1100309-0A patent/BR1100309A/pt active IP Right Grant
-
2005
- 2005-05-02 FI FI20050467A patent/FI120691B/fi not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
BG98489A (bg) | Пептиди,способни да освобождават растежен хормон | |
EP0400051A1 (en) | POLYPEPTIDES WITH A HORMONE GROWTH RELEASING EFFECT. | |
US5486505A (en) | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity | |
EP0417165B1 (en) | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity | |
US7250399B2 (en) | Compounds having growth hormone releasing activity | |
EP0540676B1 (en) | Peptide compounds having growth hormone releasing activity | |
JPH051798B2 (bg) |