RU2126014C1 - Пептид или его органические или неорганические соли, способ получения, фармацевтическая композиция, способы стимулирования высвобождения гормона роста и увеличения его содержания в крови - Google Patents
Пептид или его органические или неорганические соли, способ получения, фармацевтическая композиция, способы стимулирования высвобождения гормона роста и увеличения его содержания в крови Download PDFInfo
- Publication number
- RU2126014C1 RU2126014C1 RU94016393A RU94016393A RU2126014C1 RU 2126014 C1 RU2126014 C1 RU 2126014C1 RU 94016393 A RU94016393 A RU 94016393A RU 94016393 A RU94016393 A RU 94016393A RU 2126014 C1 RU2126014 C1 RU 2126014C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- ala
- dphe
- nal
- dala
- phe
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 152
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 title claims abstract description 75
- 102000018997 Growth Hormone Human genes 0.000 title claims abstract description 72
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 title claims abstract description 72
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 37
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 title claims abstract description 27
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 title claims abstract description 24
- 239000008280 blood Substances 0.000 title claims abstract description 24
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 title abstract description 15
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 title abstract description 10
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 title 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims abstract description 98
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 64
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 46
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 30
- KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-N Carbamic acid Chemical class NC(O)=O KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 9
- 125000000030 D-alanine group Chemical group [H]N([H])[C@](C([H])([H])[H])(C(=O)[*])[H] 0.000 claims description 28
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 16
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 14
- COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N D-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N 0.000 claims description 13
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 claims description 13
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 230000037396 body weight Effects 0.000 claims description 10
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 10
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 claims description 9
- 125000000174 L-prolyl group Chemical group [H]N1C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[C@@]1([H])C(*)=O 0.000 claims description 8
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims description 8
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 claims description 8
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 6
- QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N D-alpha-Ala Natural products CC([NH3+])C([O-])=O QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- QIVBCDIJIAJPQS-SECBINFHSA-N D-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-SECBINFHSA-N 0.000 claims description 4
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 claims description 4
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 claims description 4
- WRHZVMBBRYBTKZ-UHFFFAOYSA-N pyrrole-2-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN1 WRHZVMBBRYBTKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N beta-alanine Chemical compound NCCC(O)=O UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 claims description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 2
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 claims description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 claims 3
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims 2
- 125000006273 (C1-C3) alkyl group Chemical group 0.000 claims 1
- 230000003578 releasing effect Effects 0.000 abstract description 11
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 abstract description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 5
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 abstract description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 3
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 abstract description 3
- 239000008267 milk Substances 0.000 abstract description 3
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 abstract description 3
- 230000017363 positive regulation of growth Effects 0.000 abstract 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 57
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 51
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 51
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 45
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 32
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 29
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 25
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 22
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 18
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 17
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 15
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 15
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 14
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 13
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 11
- 239000000047 product Substances 0.000 description 11
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 11
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 10
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 10
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 9
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 9
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 9
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 9
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N Histamine Chemical compound NCCC1=CN=CN1 NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 8
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 8
- -1 His Chemical compound 0.000 description 7
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 7
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 7
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 7
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 7
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 7
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 6
- HKXLAGBDJVHRQG-YFKPBYRVSA-N L-lysinamide Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(N)=O HKXLAGBDJVHRQG-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 6
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 6
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 6
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 6
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 6
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 6
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 6
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 6
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 6
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 6
- 238000003828 vacuum filtration Methods 0.000 description 6
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 5
- 238000009739 binding Methods 0.000 description 5
- MGHPNCMVUAKAIE-UHFFFAOYSA-N diphenylmethanamine Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(N)C1=CC=CC=C1 MGHPNCMVUAKAIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 5
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 5
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 5
- ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 1,3-dicyclohexylurea Chemical compound C1CCCCC1NC(=O)NC1CCCCC1 ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical class [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 4
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 4
- PFKFTWBEEFSNDU-UHFFFAOYSA-N carbonyldiimidazole Chemical compound C1=CN=CN1C(=O)N1C=CN=C1 PFKFTWBEEFSNDU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000006482 condensation reaction Methods 0.000 description 4
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 4
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 4
- 229960001340 histamine Drugs 0.000 description 4
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 4
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 description 4
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 4
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000010792 warming Methods 0.000 description 4
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 1,3-diisopropylcarbodiimide Chemical compound CC(C)N=C=NC(C)C BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- GYXJISVTQSWMRK-HYBUGGRVSA-N C[C@@](C(N[C@H](CC1=CC=CC2=CC=CC=C12)C(O)=O)=O)(C(OCC1=CC=CC=C1)=O)N Chemical compound C[C@@](C(N[C@H](CC1=CC=CC2=CC=CC=C12)C(O)=O)=O)(C(OCC1=CC=CC=C1)=O)N GYXJISVTQSWMRK-HYBUGGRVSA-N 0.000 description 3
- QMMFVYPAHWMCMS-UHFFFAOYSA-N Dimethyl sulfide Chemical compound CSC QMMFVYPAHWMCMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 description 3
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 3
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N N-Methylmorpholine Chemical compound CN1CCOCC1 SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 102100022831 Somatoliberin Human genes 0.000 description 3
- 101710142969 Somatoliberin Proteins 0.000 description 3
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 239000002876 beta blocker Substances 0.000 description 3
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 3
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 3
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 3
- BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N diisopropylcarbodiimide Natural products CC(C)NC(=O)NC(C)C BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 3
- 239000008298 dragée Substances 0.000 description 3
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutanoic acid Natural products NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- 125000004029 hydroxymethyl group Chemical group [H]OC([H])([H])* 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 3
- 229910052763 palladium Inorganic materials 0.000 description 3
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 3
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 3
- WWTBZEKOSBFBEM-SPWPXUSOSA-N (2s)-2-[[2-benzyl-3-[hydroxy-[(1r)-2-phenyl-1-(phenylmethoxycarbonylamino)ethyl]phosphoryl]propanoyl]amino]-3-(1h-indol-3-yl)propanoic acid Chemical compound N([C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)O)C(=O)C(CP(O)(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)OCC=1C=CC=CC=1)CC1=CC=CC=C1 WWTBZEKOSBFBEM-SPWPXUSOSA-N 0.000 description 2
- NWQWNCILOXTTHF-HLCSKTDOSA-N (2s)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2r)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-aminopropanoyl]amino]-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-3-naphthalen-2-ylpropanoyl]amino]propanoyl]amino]-3-(1h-indol-3-yl)propanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]hexanamide Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@@H](N)C)C(=O)N[C@H](CC=1C=C2C=CC=CC2=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(N)=O)C1=CNC=N1 NWQWNCILOXTTHF-HLCSKTDOSA-N 0.000 description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 2
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 241000238424 Crustacea Species 0.000 description 2
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 2
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- 229920002153 Hydroxypropyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical class [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WTDRDQBEARUVNC-UHFFFAOYSA-N L-Dopa Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 WTDRDQBEARUVNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M Lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 101500023492 Lithobates catesbeianus Growth hormone-releasing peptide Proteins 0.000 description 2
- 101100270435 Mus musculus Arhgef12 gene Proteins 0.000 description 2
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- 102000007327 Protamines Human genes 0.000 description 2
- 108010007568 Protamines Proteins 0.000 description 2
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241000473945 Theria <moth genus> Species 0.000 description 2
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 2
- 230000009102 absorption Effects 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 239000012445 acidic reagent Substances 0.000 description 2
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 2
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 2
- 108010083553 alanyl-histidyl-(2-naphthyl)alanyl-tryptophyl-phenylalanyl-lysinamide Proteins 0.000 description 2
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 2
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000001342 alkaline earth metals Chemical class 0.000 description 2
- QWCKQJZIFLGMSD-UHFFFAOYSA-N alpha-aminobutyric acid Chemical compound CCC(N)C(O)=O QWCKQJZIFLGMSD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002942 anti-growth Effects 0.000 description 2
- 239000012300 argon atmosphere Substances 0.000 description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 2
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 2
- 229940030611 beta-adrenergic blocking agent Drugs 0.000 description 2
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 125000004218 chloromethyl group Chemical group [H]C([H])(Cl)* 0.000 description 2
- 239000000544 cholinesterase inhibitor Substances 0.000 description 2
- 229940126208 compound 22 Drugs 0.000 description 2
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 238000010908 decantation Methods 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 150000004662 dithiols Chemical class 0.000 description 2
- POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-M dodecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCC([O-])=O POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 239000012458 free base Substances 0.000 description 2
- 229960003692 gamma aminobutyric acid Drugs 0.000 description 2
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 2
- 229910000040 hydrogen fluoride Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 239000001863 hydroxypropyl cellulose Substances 0.000 description 2
- 235000010977 hydroxypropyl cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 239000003701 inert diluent Substances 0.000 description 2
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 229940070765 laurate Drugs 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 2
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 2
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 2
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 description 2
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 2
- 125000005487 naphthalate group Chemical group 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 229940049964 oleate Drugs 0.000 description 2
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 2
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 2
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 2
- 229940039748 oxalate Drugs 0.000 description 2
- WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N pentobarbital Chemical compound CCCC(C)C1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 2
- 230000001817 pituitary effect Effects 0.000 description 2
- 229920000307 polymer substrate Polymers 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 229940048914 protamine Drugs 0.000 description 2
- 230000022558 protein metabolic process Effects 0.000 description 2
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 2
- 239000007909 solid dosage form Substances 0.000 description 2
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 description 2
- 229940095064 tartrate Drugs 0.000 description 2
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N tfa trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.OC(=O)C(F)(F)F WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940070710 valerate Drugs 0.000 description 2
- NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N valeric acid Chemical compound CCCCC(O)=O NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 2
- OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N (+/-)-DABA Natural products NCCC(N)C(O)=O OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GHYOCDFICYLMRF-UTIIJYGPSA-N (2S,3R)-N-[(2S)-3-(cyclopenten-1-yl)-1-[(2R)-2-methyloxiran-2-yl]-1-oxopropan-2-yl]-3-hydroxy-3-(4-methoxyphenyl)-2-[[(2S)-2-[(2-morpholin-4-ylacetyl)amino]propanoyl]amino]propanamide Chemical compound C1(=CCCC1)C[C@@H](C(=O)[C@@]1(OC1)C)NC([C@H]([C@@H](C1=CC=C(C=C1)OC)O)NC([C@H](C)NC(CN1CCOCC1)=O)=O)=O GHYOCDFICYLMRF-UTIIJYGPSA-N 0.000 description 1
- UCGNOCFVXJBIPU-QGZVFWFLSA-N (2r)-2-amino-2-benzyl-3-oxo-3-phenylmethoxypropanoic acid Chemical compound C([C@@](N)(C(O)=O)C(=O)OCC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 UCGNOCFVXJBIPU-QGZVFWFLSA-N 0.000 description 1
- KGSUHESKNXLPEW-LLVKDONJSA-N (2r)-2-amino-2-methyl-3-oxo-3-phenylmethoxypropanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@](N)(C)C(=O)OCC1=CC=CC=C1 KGSUHESKNXLPEW-LLVKDONJSA-N 0.000 description 1
- AHYFYYVVAXRMKB-KRWDZBQOSA-N (2s)-3-(1h-indol-3-yl)-2-(phenylmethoxycarbonylamino)propanoic acid Chemical compound N([C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)O)C(=O)OCC1=CC=CC=C1 AHYFYYVVAXRMKB-KRWDZBQOSA-N 0.000 description 1
- WZHKXNSOCOQYQX-FUAFALNISA-N (2s)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2r)-2-[[(2s)-2-amino-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-3-(1h-indol-3-yl)propanoyl]amino]propanoyl]amino]-3-(1h-indol-3-yl)propanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]hexanamide Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(N)=O)C1=CN=CN1 WZHKXNSOCOQYQX-FUAFALNISA-N 0.000 description 1
- HRNLPPBUBKMZMT-SSSXJSFTSA-N (2s)-6-amino-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-aminopropanoyl]amino]-3-naphthalen-2-ylpropanoyl]amino]propanoyl]amino]-3-(1h-indol-3-yl)propanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]hexanamide Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](CC=1C=C2C=CC=CC2=CC=1)NC(=O)[C@H](N)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(N)=O)C1=CC=CC=C1 HRNLPPBUBKMZMT-SSSXJSFTSA-N 0.000 description 1
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- VYMPLPIFKRHAAC-UHFFFAOYSA-N 1,2-ethanedithiol Chemical compound SCCS VYMPLPIFKRHAAC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 1H-imidazole Chemical compound C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- 208000030090 Acute Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000009304 Acute Kidney Injury Diseases 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonium chloride Substances [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000010392 Bone Fractures Diseases 0.000 description 1
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N Borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M Bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010006895 Cachexia Diseases 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N D-OH-Asp Natural products OC(=O)C(N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N D-alanine Chemical compound C[C@@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- 229930182832 D-phenylalanine Natural products 0.000 description 1
- FHZPGIUBXYVUOY-VWGYHWLBSA-N Dermorphin Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CO)C(N)=O)C1=CC=C(O)C=C1 FHZPGIUBXYVUOY-VWGYHWLBSA-N 0.000 description 1
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N Elaidinsaeure-aethylester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000012895 Gastric disease Diseases 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000190687 Gobius Species 0.000 description 1
- 239000000095 Growth Hormone-Releasing Hormone Substances 0.000 description 1
- 102100039256 Growth hormone secretagogue receptor type 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710202385 Growth hormone secretagogue receptor type 1 Proteins 0.000 description 1
- 102000002265 Human Growth Hormone Human genes 0.000 description 1
- 108010000521 Human Growth Hormone Proteins 0.000 description 1
- 239000000854 Human Growth Hormone Substances 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010062767 Hypophysitis Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N L-Aspartic acid Natural products OC(=O)[C@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- QUOGESRFPZDMMT-UHFFFAOYSA-N L-Homoarginine Natural products OC(=O)C(N)CCCCNC(N)=N QUOGESRFPZDMMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000008575 L-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- QEFRNWWLZKMPFJ-UHFFFAOYSA-N L-methionine sulphoxide Natural products CS(=O)CCC(N)C(O)=O QEFRNWWLZKMPFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 1
- 125000000510 L-tryptophano group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2N([H])C([H])=C(C([H])([H])[C@@]([H])(C(O[H])=O)N([H])[*])C2=C1[H] 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 108010007622 LDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000007330 LDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- VJLLEKDQJSMHRU-STQMWFEESA-N Phe-Gly-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O VJLLEKDQJSMHRU-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101001023863 Rattus norvegicus Glucocorticoid receptor Proteins 0.000 description 1
- 101000906082 Rattus norvegicus Glutathione reductase Proteins 0.000 description 1
- 208000033626 Renal failure acute Diseases 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 102000005157 Somatostatin Human genes 0.000 description 1
- 108010056088 Somatostatin Proteins 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M Trifluoroacetate Chemical compound [O-]C(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical class [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 1
- 229940022663 acetate Drugs 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 201000011040 acute kidney failure Diseases 0.000 description 1
- 208000012998 acute renal failure Diseases 0.000 description 1
- 238000007259 addition reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000048 adrenergic agonist Substances 0.000 description 1
- 239000000670 adrenergic alpha-2 receptor antagonist Substances 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 150000003973 alkyl amines Chemical class 0.000 description 1
- 150000001370 alpha-amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000008206 alpha-amino acids Nutrition 0.000 description 1
- 229940124277 aminobutyric acid Drugs 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 1
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 1
- 230000001195 anabolic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229960005261 aspartic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 229910052788 barium Inorganic materials 0.000 description 1
- DSAJWYNOEDNPEQ-UHFFFAOYSA-N barium atom Chemical compound [Ba] DSAJWYNOEDNPEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007630 basic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 229940050390 benzoate Drugs 0.000 description 1
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 239000012455 biphasic mixture Substances 0.000 description 1
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- USOPFYZPGZGBEB-UHFFFAOYSA-N calcium lithium Chemical compound [Li].[Ca] USOPFYZPGZGBEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000012159 carrier gas Substances 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000005352 clarification Methods 0.000 description 1
- 239000013065 commercial product Substances 0.000 description 1
- 229940125797 compound 12 Drugs 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 239000002285 corn oil Substances 0.000 description 1
- 235000005687 corn oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- ORQXBVXKBGUSBA-UHFFFAOYSA-N cyclohexyl D-alanine Natural products OC(=O)C(N)CC1CCCCC1 ORQXBVXKBGUSBA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 238000003795 desorption Methods 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 125000005265 dialkylamine group Chemical group 0.000 description 1
- 150000004985 diamines Chemical group 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- MHUWZNTUIIFHAS-CLFAGFIQSA-N dioleoyl phosphatidic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(O)=O)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC MHUWZNTUIIFHAS-CLFAGFIQSA-N 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 description 1
- 239000002702 enteric coating Substances 0.000 description 1
- 238000009505 enteric coating Methods 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N ethyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 1
- 229940093471 ethyl oleate Drugs 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 238000010265 fast atom bombardment Methods 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 108010074605 gamma-Globulins Proteins 0.000 description 1
- 229960002989 glutamic acid Drugs 0.000 description 1
- 125000002795 guanidino group Chemical group C(N)(=N)N* 0.000 description 1
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hcl hcl Chemical compound Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 239000001307 helium Substances 0.000 description 1
- 229910052734 helium Inorganic materials 0.000 description 1
- SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N helium atom Chemical compound [He] SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012456 homogeneous solution Substances 0.000 description 1
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-M hydrogensulfate Chemical compound OS([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- PRJKNHOMHKJCEJ-UHFFFAOYSA-N imidazol-4-ylacetic acid Chemical compound OC(=O)CC1=CN=CN1 PRJKNHOMHKJCEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001678 irradiating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 230000009916 joint effect Effects 0.000 description 1
- 210000004731 jugular vein Anatomy 0.000 description 1
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 1
- 238000004898 kneading Methods 0.000 description 1
- DWKPPFQULDPWHX-VKHMYHEASA-N l-alanyl ester Chemical compound COC(=O)[C@H](C)N DWKPPFQULDPWHX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- BRHPBVXVOVMTIQ-ZLELNMGESA-N l-leucine l-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O.CC(C)C[C@H](N)C(O)=O BRHPBVXVOVMTIQ-ZLELNMGESA-N 0.000 description 1
- 229940001447 lactate Drugs 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 229960004502 levodopa Drugs 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical group 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000008297 liquid dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 238000010297 mechanical methods and process Methods 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 1
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZZDPGZAZMFNUBC-BTQNPOSSSA-N methyl (2r)-2-amino-3-naphthalen-1-ylpropanoate;hydrochloride Chemical compound Cl.C1=CC=C2C(C[C@@H](N)C(=O)OC)=CC=CC2=C1 ZZDPGZAZMFNUBC-BTQNPOSSSA-N 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 229940037525 nasal preparations Drugs 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 1
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012038 nucleophile Substances 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 150000002895 organic esters Chemical class 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012856 packing Methods 0.000 description 1
- KJOMYNHMBRNCNY-UHFFFAOYSA-N pentane-1,1-diamine Chemical compound CCCCC(N)N KJOMYNHMBRNCNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001412 pentobarbital Drugs 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 229960005190 phenylalanine Drugs 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 210000003635 pituitary gland Anatomy 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 230000010287 polarization Effects 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 1
- 229960000208 pralmorelin Drugs 0.000 description 1
- 238000004094 preconcentration Methods 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 150000003141 primary amines Chemical class 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 239000003488 releasing hormone Substances 0.000 description 1
- 239000013557 residual solvent Substances 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 239000012047 saturated solution Substances 0.000 description 1
- 150000003335 secondary amines Chemical class 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000004513 sizing Methods 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000012265 solid product Substances 0.000 description 1
- NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N somatostatin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)[C@@H](C)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N)C(O)=O)=O)[C@H](O)C)C1=CC=CC=C1 NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N 0.000 description 1
- 229960000553 somatostatin Drugs 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000013223 sprague-dawley female rat Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 239000003206 sterilizing agent Substances 0.000 description 1
- 239000000021 stimulant Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 230000005737 synergistic response Effects 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- JXIXSGAFSRSQAZ-QMMMGPOBSA-N tert-butyl n-[(2s)-1,6-diamino-1-oxohexan-2-yl]carbamate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@H](C(N)=O)CCCCN JXIXSGAFSRSQAZ-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000005809 transesterification reaction Methods 0.000 description 1
- 125000000026 trimethylsilyl group Chemical group [H]C([H])([H])[Si]([*])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 1
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 1
- 210000002268 wool Anatomy 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/60—Growth hormone-releasing factor [GH-RF], i.e. somatoliberin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/06—Antihyperlipidemics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/02—Drugs for disorders of the endocrine system of the hypothalamic hormones, e.g. TRH, GnRH, CRH, GRH, somatostatin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/06—Drugs for disorders of the endocrine system of the anterior pituitary hormones, e.g. TSH, ACTH, FSH, LH, PRL, GH
- A61P5/08—Drugs for disorders of the endocrine system of the anterior pituitary hormones, e.g. TSH, ACTH, FSH, LH, PRL, GH for decreasing, blocking or antagonising the activity of the anterior pituitary hormones
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Obesity (AREA)
- Hematology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
Изобретние относится к новым пептидам формулы 1, где А1, А2, А5, С1, С2, C3 представляют собой различные аминокислотные остатки или (низший алкил) замещенные остатки аминокарбоновых кислот, определенные в п.1 формулы изобретения. Раскрыты также их соли, способ получения, фармацевтическая композиция на основе пептидов, а также способ стимулирования высвобождения гормона роста и увеличения его содержания в крови. Соединения фopмулы 1 могут быть использованы в терапевтических целях для лечения заболеваний, где необходимо повышение уровней гормона роста, а также для увеличения надоев молока и повышения массы тела у животных. 5 с. и 14 з.п. ф-лы, 7 табл., 3 ил.
А1 - А2 - С1 - С2 - C3 - А5 (1)
Description
Настоящее изобретение относится к новым полипептидным соединениям, которые при введение их животным, а предпочтительно человеку, стимулируют высвобождение гормона роста. В другом своем варианте, настоящее изобретение относится к способам стимулирования высвобождения гормона роста и повышения его уровней у животных путем введения этим животным указанных полипептидных соединений, высвобождающих гормон роста.
Повышение уровней гормона роста (ГР) у животных, например у млекопитающих (включая человека), после введения этим животным соединений, высвобождающих гормон роста, может привести к увеличению массы тела и к повышению молочной продуктивности в случае, если введение указанных соединений способствует достаточному увеличению ГР - уровней. Кроме того, известно, что повышение уровней гормона роста у млекопитающих и человека может быть продуцировано путем введения известных агентов, высвобождающих гормон роста, например, таких как натуральные рилизинг-факторы ростового гормона.
Повышение уровней гормона роста у млекопитающих может быть также вызвано путем введения этим млекопитающим пептидов, высвобождающих ГР, некоторые из которых были ранее описаны в литературе, например в патентах США N 4 223 019, 4 223 020, 4 223 021, 4 224 316, 4 226 857, 4 228 155, 4 228 156, 4 228 157, 4 228 158, 4 410 512, 4 410 513.
Для повышения ГР - уровней были также использованы антитела против эндогенного ингибитора высвобождения гормона роста, соматостатина (SR1 - фактор, или SR 1F). В этом случае, ГР - уровни повышают путем удаления эндогенного ингибитора ГР - высвобождения (SR1F) до того, как этот ингибитор достигнет гипофиза, где он подавляет выделение ГР.
В каждом из этих методов, направленных на увеличение уровней гормона роста, используются материалы, синтез и/или выделение которых со степенью чистоты, достаточной для последующего введения целевому животному, являются слишком дорогостоящими процедурами. Поэтому было бы желательно получить короткоцепочечные, низкомолекулярные и относительно простые полипептиды, которые обладали бы способностью стимулировать высвобождение гормона роста, и которые были бы относительно недорогостоящими, то есть они должны быть легко и без особых затрат синтезируемыми, легко химически и/или физически модифицируемыми, легко поддаваться очистке и введению в фармацевтические композиции, а также они должны обладать прекрасными транспортными свойствами.
Хотя специалистам известны некоторые короткоцепочечные полипептиды, которые способны стимулировать высвобождение гормона роста и повышение его уровней в крови (например, такие как полипептид His-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2, описанный в патенте США 4 410 512), но по разным причинам, например, для улучшения доставки к тканям, улучшения биологической усвояемости, для повышение времени удержания и т.п. Очень важно, чтобы данные полипептиды обладали бы способностью к конструированию. Однако замена аминокислот в некоторых положениях может весьма неблагоприятно отразиться на способность такого короткоцепочечного пептида к стимулированию высвобождения гормона роста.
Поэтому, было бы желательно получить другие короткоцепочечные полипептиды, которые были бы способны стимулировать высвобождение гормонов роста и повышение их уровня в крови животного, а в частности, человека. Было бы также желательно использовать такие полипептиды в целях стимулирования высвобождения и/или повышения уровней гормона роста в крови человека и животных.
Кроме того, было бы желательно разработать методы стимуляции высвобождения гормона роста и/или повышения его уровня в крови животных, используя при этом указанные полипептиды с короткой цепью.
Полипептиды настоящего изобретения могут быть определены следующей формулой:
A1-A2-C1-C2-C3-A5,
где: A1 представляет собой Cly, DAla, β-Ala, His, Ser, Met, Pro, Sar, Ava, Aib, N-(низший алкил) - аминокарбоновую кислоту, N,N-бис(низший алкил)аминокарбоновую кислоту, азолкарбоновую кислоту, или (низший алкил)аминокарбоновую кислоту, где низшая алкильная группа имеет прямую цепь, содержащую 2-10 атомов углерода. При этом предпочтительно если A1 является DAla.
A1-A2-C1-C2-C3-A5,
где: A1 представляет собой Cly, DAla, β-Ala, His, Ser, Met, Pro, Sar, Ava, Aib, N-(низший алкил) - аминокарбоновую кислоту, N,N-бис(низший алкил)аминокарбоновую кислоту, азолкарбоновую кислоту, или (низший алкил)аминокарбоновую кислоту, где низшая алкильная группа имеет прямую цепь, содержащую 2-10 атомов углерода. При этом предпочтительно если A1 является DAla.
A2 представляет собой DTrp, DβNal, D-4-Y-Phe или 5-Y-D-Trp, где Y является OH, Cl, Br, F или H. Предпочтительно если A2 является DβNal.
A5 представляет собой A3-A4-A5', A3-A5' или A5'.
A5 представляет собой A3-A4-A5', A3-A5' или A5'.
Предпочтительно если A5 является A5'. A3 представляет собой Ala, Gly, DAla, Pro или des Ala. A4 представляет собой Ala, Gly, DAla, Pro, (линейный низший алкил)аминокарбоновую кислоту, или des Ala. A5 представляет собой Lys(ξ-R1,R2)-Z, Orn (δ-R1,R2)-Z, NH(CH2)xN(R3, R4). A5' может быть также Lys-Z, Orn-Z или Arg-Z, если A1 не является His. R1 представляет собой линейную низшую группу или атом водорода. R2 представляет собой линейную алкильную группу водорода. Если R1 является атомом водорода, то R2 не является атомом водорода; и аналогично, если R2 является атомом водорода, то R1 не является атомом водорода. R3 представляет собой линейную низшую алкильную группу или атом водорода. Указанная низшая алкильная группа содержит прямую цепь с 2-10 атомами углерода. Z представляет собой NH (линейную низшую алкильную группу), N (линейную низшую алкильную группу)2, O - (линейную низшую алкильную группу), NH2 или OH, где линейная низшая алкильная группа является такой, как она была определена выше. "x" представляет собой число от 2 до 15. C1 является Ala. C2 является Trp, Phe, или Ch xAla. Предпочтительно, если C2 является Trp или Phe, а более предпочтительно Trp. C3 является DPhe, DPal или DCh x Ala. Предпочтительно если C3 является DPhe.
Указанные полипептиды могут быть также получены в виде органических или неорганических аддитивных солей. Предпочтительным полипептидом является: A1-A2 (2- апр- 1999)2-DPhe-A5, а более предпочтительными является полипептид: A1-A2-Ala-Trp-DPhe-A5.
Краткое описание рисунков
На фиг. 1 представлена серия графиков, иллюстрирующая зависимость уровней гормона роста в сыворотке человека от времени.
На фиг. 1 представлена серия графиков, иллюстрирующая зависимость уровней гормона роста в сыворотке человека от времени.
Авторами настоящей заявки были получены новые полипептиды с короткой цепью, которые стимулируют высвобождение гормона роста и повышение его уровней в крови животных. Эти полипептиды могут быть определены следующей формулой:
A1-A2-Ala-Trp-DPhe-A5,
где A1 представляет собой Gly, β-Ala, His, Ser, Met, Pro, Sar, Ava, Aib, имидазолуксусную кислоту, N-(низший алкил)аминокарбоновую кислоту, N,N-бис(низший алкил)аминокарбоновую кислоту, азолкарбоновую кислоту, или (низший алкил) карбоновую кислоту, где низшая алкильная группа имеет прямую цепь с 2-10 атомами углерода. Предпочтительно если низшая алкильная группа является прямой и имеет 2-6 атомов углерода. Указанная низшая алкильная группа может быть замещенной или незамещенной. Предпочтительными заместителями являются O, N, или Si. Предпочтительно если низшая алкильная группа является незамещенной. Предпочтительной азолкарбоновой кислотой является Nα -4-имидазолуксусная кислота (IMA). A1 предпочтительно является Gle, DAla или His, более предпочтительно His или DAla, а наиболее предпочтительно DAla.
A1-A2-Ala-Trp-DPhe-A5,
где A1 представляет собой Gly, β-Ala, His, Ser, Met, Pro, Sar, Ava, Aib, имидазолуксусную кислоту, N-(низший алкил)аминокарбоновую кислоту, N,N-бис(низший алкил)аминокарбоновую кислоту, азолкарбоновую кислоту, или (низший алкил) карбоновую кислоту, где низшая алкильная группа имеет прямую цепь с 2-10 атомами углерода. Предпочтительно если низшая алкильная группа является прямой и имеет 2-6 атомов углерода. Указанная низшая алкильная группа может быть замещенной или незамещенной. Предпочтительными заместителями являются O, N, или Si. Предпочтительно если низшая алкильная группа является незамещенной. Предпочтительной азолкарбоновой кислотой является Nα -4-имидазолуксусная кислота (IMA). A1 предпочтительно является Gle, DAla или His, более предпочтительно His или DAla, а наиболее предпочтительно DAla.
A2 представляет собой DTrp, DβNal, D-4-Y-Phe- или 5-Y-D-Trp, где Y является OH, Cl, Br, F или H. A2 предпочтительно является DβNal, D-4-Y-Phe или 5-Y-D-Trp, а более предпочтительно DβNal. Y предпочтительно является OH или H.
A5 представляет собой A3-A4-A5', A3-A5', A4-A5', или A5'. Предпочтительно если A5 является A5'. A3 представляет собой Ala, Gly, DAla, Pro или desAla. A4 представляет собой Ala, Gly, DAla, Pro, (линейный низший алкил) аминокарбоновую кислоту, или desAla; а A5 представляет собой Lys(ξ-R1,R2)-Z, Orn(δ-R1,R2)- Z, LArg (g - R5 - R6), NH(CH2)xN(R3, R4). A5' может быть также Lys-Z, Orn-Z или Arg-Z, в том случае, если A1 не является His. R1 представляет собой линейную низшую алкильную группу или атом водорода. Если R1 является H, то R2 не является H; и аналогично, если R2 является H, то R1 не является H. R3 представляет собой линейную низшую алкильную группу или атом H. R4 представляет собой линейную алкильную группу или атом водорода. R5 и R6 являются линейными низшими алкильными группами. Указанная низшая алкильная группа состоит из прямой цепи, имеющей от 2 до около 10 атомов углерода. Предпочтительно если эта алкильная группа имеет прямую цепь с 2-6 атомами углерода. Причем, указанная низшая алкильная группа может быть замещенной или незамещенной. Предпочтительными заместителями являются O, N, или Si. Предпочтительно если указанная низшая алкильная группа является незамещенной. "g" - гуанидино. Z - NH (линейная низшая алкильная группа), N (линейная низшая алкильная группа)2, O (линейная низшая алкильная группа), NH2 или OH, где линейная низшая алкильная группа является такой, как она была определена выше. "x" является числом от 2 до 15, предпочтительно 2 - 6. A5 является предпочтительно Lys - NH2. Рассматриваемые полипептиды могут быть также получены в виде органических или неорганических аддитивных солей.
В соответствии со стандартной номенклатурой пептидов, используемые в настоящем описании аббревиатуры аминокислотных остатков имеют следующие значения:
Gly - Глицин
Tyr - L - Тирозин
Ile - L - Изолейцин
Glu - L - Глутаминовая кислота
Thr - L - Треонин
Phe - L - Фенилаланин
Ala - L - Аланин
Lys - L - Лизин
Asp - L - Аспарагиновая кислота
Cys - L - Цистеин
Arg - L - Аргинин
Ava - Аминовалерьяновая кислота
Aib - Аминоизомасляная кислота
Gln - L - Глутамин
Pro - L - Пролин
Leu - L - Лейцин
Met - L - Метионин
Ser - L - Серин
Asn - L - Аспарагин
His - L - Гистидин
Trp - L - Триптофан
Val - L - Валин
DOPA - 3,4-Дигидроксифенилаланин
Met(O) - Метионинсульфоксид
Abu - α- Аминомасляная кислота
iLys - Nε- Изопропил - L - лизин
4-Abu - 4-аминомасляная кислота
Orn - L - Орнитин
DαNal - α-Нафтил-D-Аланин
DβNal - β-Нафтил-D-Аланин
Sar - Саркозин
LArg - гомоаргинин
Chx - циклогексил
ChxAla - L-циклогексилаланин
DChxAla - D-циклогексилаланин
IMA - Nα-имидазолуксусная кислота
Tcc - 1,2,3,4-тетрагидро-7-каролин-3-карбоновая кислота
Tic - 1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-карбоновая кислота
Tip - 4,5,6,7-тетрагидро-IH-имидазо[e]-6-карбоновая кислота
α,γABU - альфа, гамма-аминомасляная кислота
DPal - D-3-пиридилаланин
Во всех обозначениях аминокислот, где трехбуквенной аббревиатуре предшествует буква "D", эта буква указывает на D-конфигурацию аминокислотного остатка, а глицин относится к аминокислотам, определяемым термином "натуральные L-аминокислоты".
Gly - Глицин
Tyr - L - Тирозин
Ile - L - Изолейцин
Glu - L - Глутаминовая кислота
Thr - L - Треонин
Phe - L - Фенилаланин
Ala - L - Аланин
Lys - L - Лизин
Asp - L - Аспарагиновая кислота
Cys - L - Цистеин
Arg - L - Аргинин
Ava - Аминовалерьяновая кислота
Aib - Аминоизомасляная кислота
Gln - L - Глутамин
Pro - L - Пролин
Leu - L - Лейцин
Met - L - Метионин
Ser - L - Серин
Asn - L - Аспарагин
His - L - Гистидин
Trp - L - Триптофан
Val - L - Валин
DOPA - 3,4-Дигидроксифенилаланин
Met(O) - Метионинсульфоксид
Abu - α- Аминомасляная кислота
iLys - Nε- Изопропил - L - лизин
4-Abu - 4-аминомасляная кислота
Orn - L - Орнитин
DαNal - α-Нафтил-D-Аланин
DβNal - β-Нафтил-D-Аланин
Sar - Саркозин
LArg - гомоаргинин
Chx - циклогексил
ChxAla - L-циклогексилаланин
DChxAla - D-циклогексилаланин
IMA - Nα-имидазолуксусная кислота
Tcc - 1,2,3,4-тетрагидро-7-каролин-3-карбоновая кислота
Tic - 1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-карбоновая кислота
Tip - 4,5,6,7-тетрагидро-IH-имидазо[e]-6-карбоновая кислота
α,γABU - альфа, гамма-аминомасляная кислота
DPal - D-3-пиридилаланин
Во всех обозначениях аминокислот, где трехбуквенной аббревиатуре предшествует буква "D", эта буква указывает на D-конфигурацию аминокислотного остатка, а глицин относится к аминокислотам, определяемым термином "натуральные L-аминокислоты".
В этих короткоцепочечных полипептидах имеются некоторые положения, которые, по сравнению с другими, являются более толерантными к замене аминокислот, то есть в этих положениях замена аминокислот не оказывает неблагоприятного воздействия на способность полипептида к стимулированию высвобождения гормона роста и/или повышению его уровней в крови животных. К таким положениям относится, например, положение A5. Другие положения являются менее толерантными к таким изменениям, например, средние аминокислотные остатки Ala, Trp, DPhe, обозначенные C1, C2 и C3 соответственно. Ранее предполагалось, что A1 и A2 должны присутствовать в L- и D-форме соответственно и что Trp и DPhe должны быть в L- и D-форме, составляющей LD LD - ряды. Однако авторами настоящей заявки было обнаружено, что LD LD - последовательность может быть DD LD - последовательностью. Таким образом, было неожиданно обнаружено, что полипептид формулы A1-A2-C1-C2-C3-A5, где A1, A2, A5 являются такими, как они были определены выше; C1 является Ala; C2 является Trp, Phe, и CDxAla; а C3 является DPhe, DPal, или DChxAla, обладает способностью стимулировать высвобождение гормона роста и/или повышение его уровней в крови животного.
Предпочтительно если C2 является Trp или Phe, а более предпочтительно Trp.
C3 является предпочтительно DPhe. Если C2 является ChxAla, то C3 предпочтительно является DPhe. Если C3 является DPal, то Z предпочтительно является OH.
Повышенная гибкость в выборе основных, нейтральных или кислотных аминокислотных остатков и L - и D-форм, который может быть осуществлен для аминокислот A1, A2, A3, A4, A5,C2 и C3, дает большие возможности для регулирования физиологических свойств нужного пептида.
Хотя DAla -DβNal- Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 и DAla -DβNal- Ala-Phe-DPhe-Lys-NH2 имеют аналогичную активность в отношении ГР - высвобождения, однако замена остатка Trp остатком Phe может способствовать повышению химической стабильности DAla -DβNal- Ala-Phe-DPhe-Lys-NH2, поскольку Trp является более восприимчивым к окислению, чем Phe. Кроме того, замена Trp на Phe будет придавать пептиду большую гидрофобность, и это качество вместе с вышеуказанной химической стабильностью будет определять физико-химические свойства пептида, которые могут оказаться предпочтительными для повышения абсорбции пептида, а также для составления пероральных, трансдермальных и/или назальных препаратов, содержащих указанный пептид. Кроме того, величины ED50 (50%-ная эффективная доза) в гистаминовом анализе (с использованием крысиных клеток) DAla -DβNal- Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 и DAla -DβNal- Ala-Phe-Dphe-Lys-NH2 являются одинаковыми, т.е. 30,5±0,5 и 30,8±0,3 мкг/мл, указывают на более высокую гистаминовую активность по сравнению с гистаминовой активностью пептида Ala-His -DβNal- Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2, для которого это значение составляет 11,0±1,0 мкг/мл. Пептиды с меньшей гистамин-высвобождающей активностью (выше ED50) могут быть клинически более эффективными, поскольку они будут в меньшей степени продуцировать неблагоприятную местную реакцию при их инъецировании, и/или они будут в меньшей степени продуцировать клинически неблагоприятное системное антигенное действие.
Вышеуказанная гибкость в выборе аминокислотных остатков дает также важное преимущество в отношении составления лекарственных средств, содержащих данные пептиды, и доставки этих пептидов к любым участкам организма. Проводимые замены аминокислот могут также способствовать улучшению пероральной абсорбции, метаболизма и экскреции пептидов. Например, по своей способности к высвобождения гормона роста у человека пептид Ala-His -DβNal- Ala-Trp-Dphe-Lys-NH2(GHR P-1) является более эффективным, чем пептид Ala-His-DTrp-Ala-Trp-Dphe-Lys-NH2. Однако при пероральном введении пептид DAla -DβNal- Ala-Trp-Dphe-Lys-NH2 (GHR P-2) является более эффективным, чем GHRP-1. См. , например, чертеж, который иллюстрирует уровни гормона роста в сыворотке нормального молодого человека в зависимости от времени после введения 300 мкг/кг GHRP-1 40 индивидуумам (график 1-1 (о)), 600 мкг/кг GHR P-1 39 индивидуумам (график 1-2(Δ)), и 100 мкг/кг GHR P-2 11 индивидуумам (график 1-3 (□)).В этих исследованиях нормальным молодым людям в возрасте 25 лет вводили GHRP сначала в 20 мл H2O, затем 100 мл H2O. Пробы крови брали в соответствии со схемой, показанной на диаграмме. Уровни ГР определяли с помощью радиоиммуноанализа.
Предполагается также, что поскольку в этих пептидах ароматические боковые цепи могут быть также элиминированы в некоторых положениях, где они, как считалось ранее, были необходимы и что D - аминокислотный остаток должен быть биологически более защищен, чем остаток в L - форме, то могут быть использованы некоторые пептиды с большей защитой и меньшими массами для того, чтобы посредством последующего конструирования полипептида можно было бы придать этому полипептиду улучшенные свойства, такие как назальная, пероральная и трансдермальная абсорбция, in vivo - стабильность, и т.п.
Группы R1, R2, R3, R4 и Z могут варьироваться, и тем самым обеспечивать дополнительный контроль физико-химических свойств нужного соединения. Поэтому можно получить пептид с повышенной способностью доставки к конкретному рецептору и в конкретном хозяине.
В соответствии с настоящим изобретением предпочтительными ГР - высвобождающими соединениями являются
A1-A2-Ala-Trp-DPhe-A5',
или органические или неорганические аддитивные соли любых полипептидов, где A1, A2 и A5' являются такими, как они были определены выше.
A1-A2-Ala-Trp-DPhe-A5',
или органические или неорганические аддитивные соли любых полипептидов, где A1, A2 и A5' являются такими, как они были определены выше.
В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения используемый ГР - высвобождающий пептид имеет формулу:
DAla-A2-Ala-Trp-DPhe-A5',
или его органические или неорганические аддитивные соли. Предпочтительными пептидами являются члены следующей группы соединений:
DAla -DβNal- Ala-Trp-DPhr-Lys NH2
DAla -DβNal- Ala-Trp-DPhe -Lys(ε-iPr)NH2
DAla-DTrp-Ala-Trp-DPhe -Lys(ε-iPr) NH2
DAla-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys NH2
DAla -DβNal- Ala-Trp-DPhe-NH(CH2)5NH2
NH2(CH2)5CO -Dβ- Nal-Ala-Trp-D-Phe-NH(CH2)5NH2,
а также их органические или неорганические аддитивные соли.
DAla-A2-Ala-Trp-DPhe-A5',
или его органические или неорганические аддитивные соли. Предпочтительными пептидами являются члены следующей группы соединений:
DAla -DβNal- Ala-Trp-DPhr-Lys NH2
DAla -DβNal- Ala-Trp-DPhe -Lys(ε-iPr)NH2
DAla-DTrp-Ala-Trp-DPhe -Lys(ε-iPr) NH2
DAla-DTrp-Ala-Trp-DPhe-Lys NH2
DAla -DβNal- Ala-Trp-DPhe-NH(CH2)5NH2
NH2(CH2)5CO -Dβ- Nal-Ala-Trp-D-Phe-NH(CH2)5NH2,
а также их органические или неорганические аддитивные соли.
Эти соединения являются наиболее предпочтительными, поскольку указанные полипептиды с более короткой цепью являются экономически более выгодными для синтеза, и обладают при этом высокой степенью способности стимулировать увеличение уровней гормона роста в крови.
Другими предпочтительными пептидами являются пептиды формулы A1-A2-Ala-Phe-DPhe-A5. Предпочтительными членами этой группы соединений являются соединения, в которых A1 представляет собой NαIMA,αγABU, DAla, His, Ala, или αγABU; A2 представляет собой DβNal или DPhe, а A5 представляет собой LysNH2, LysNH2, ArgNH2, NH-Chx-NH2 (1,4 Chx - диамин) или Lys EA.
Например:
NαIMa-DβNal- Ala-Phe-DPhe-LysNH2,
α,γ ABU-DβNal- Ala-Phe-DPhe-LysNH2,
DAla-DPhe-Ala-Phe-DPhe-LysNH2,
βAla-His-DβNal- Ala-Phe-DPhe-LysNH2,
NαIMA-DβNal- Ala-Phe-DPhe-NH-Chx-NH2,
α,γABU-DβNal- ALa-Phe-DPhe-NH-Chx-NH2,
DAla -DβNal- Ala-Phe-DPhe-Lys EA,
DAla -DβNal- Ala-Phe-DPhe-Arg NH2,
а также их органические или неорганические соли.
NαIMa-DβNal- Ala-Phe-DPhe-LysNH2,
α,γ ABU-DβNal- Ala-Phe-DPhe-LysNH2,
DAla-DPhe-Ala-Phe-DPhe-LysNH2,
βAla-His-DβNal- Ala-Phe-DPhe-LysNH2,
NαIMA-DβNal- Ala-Phe-DPhe-NH-Chx-NH2,
α,γABU-DβNal- ALa-Phe-DPhe-NH-Chx-NH2,
DAla -DβNal- Ala-Phe-DPhe-Lys EA,
DAla -DβNal- Ala-Phe-DPhe-Arg NH2,
а также их органические или неорганические соли.
В другом своем варианте настоящее изобретение включает в себя полипептиды формулы: A1-A2-C1-C2-C3-A5, где C1 является Ala; C2 является Trp, Phe или ChxAla; C3 является DPhe или DChxAla, A1 является предпочтительно DAla. A2 является предпочтительно DβNal.
Например:
DAla -DβNal- Ala-ChxAla-DPhe-Lys NH2,
DAla -DβNal- Ala-Phe-DChxAla-Lys NH2,
DAla -DβNal- Ala-ChxAla-DChxAla-Lys NH2,
а также их органические или неорганические аддитивные соли.
Например:
DAla -DβNal- Ala-ChxAla-DPhe-Lys NH2,
DAla -DβNal- Ala-Phe-DChxAla-Lys NH2,
DAla -DβNal- Ala-ChxAla-DChxAla-Lys NH2,
а также их органические или неорганические аддитивные соли.
Описанные выше соединения могут быть легко синтезированы, являются высокоэффективными стимуляторами повышения уровней гормона роста в сыворотке, и обладают достаточно хорошими свойствами, облегчающими их промышленное производство и использование. Кроме того, указанные соединения могут иметь физиохимические свойства, которые являются предпочтительными для эффективной пероральной, назальной и пролонгированной доставки таких полипептидных соединений широкому ряду животных с использованием конкретных химических/механических методов; причем, указанные структурно пластичные полипептиды могут быть наделены вышеописанными физиохимическими свойствами посредством различных замещений в ряде положений полипептида и посредством выбора полярной, нейтральной или неполярной природы C-концевых и центральных положений данного полипептида.
Пептиды настоящего изобретения могут быть использованы в терапевтических целях в том случае, где необходимо повышение уровней гормона роста, например, для лечения таких заболеваний, как гипофизарный инфантилизм, остеопороз, ожоги, острая почечная недостаточность, несращиваемые переломы кости и для более быстрого заживления ран. Кроме того, эти полипептиды могут быть использованы для ускорения выздоровления после хирургической операции, а также при истощении после острого/хронического заболевания. Поскольку указанные полипептиды обладают анаболическим действием на кожу, мускулы и кости и одновременно способствуют уменьшению содержания жира в организме, то они могут быть с успехом использованы для предотвращения процессов старения организма. Эти пептиды могут быть также использованы при лечении пациентов, страдающих раковыми заболеваниями, например, для предупреждения и/или кахексии у этих пациентов. Указанные способы лечения могут быть проведены с использованием терапевтически эффективного количества пептида. Таким количеством является количество, необходимое для стимулирования высвобождения нужного уровня гормона роста, как обсуждалось выше.
Соединения настоящего изобретения могут быть также использованы для увеличения ГР - уровней в крови у животных; для увеличения надоев молока у коров; для повышения массы тела у животных, например, у млекопитающих (таких как человек, овцы, бычки и свиньи), у рыб, домашней птицы, а также у других позвоночных и ракообразных; и для усиления роста шерсти и/или меха у млекопитающих. Количество прироста массы тела зависит от пола и возраста животных, от дозы и природы вводимых ГР - высвобождающих соединений, от способа введения, и т.п. Соединения настоящего изобретения также способствуют увеличению уровней ГР в сыворотке человека; ускорению роста у детей маленького роста; снижению количества жира в организме; улучшению метаболизма белка у детей, и кроме того, улучшению белкового метаболизма кожи, мускул, кости при одновременном снижении содержания жира у пожилых людей, особенно при дефиците в организме гормона роста.
Рассматриваемые пептиды могут быть также использованы для улучшения состава липидов в организме человека путем снижения уровня холестерина и липопротеина низкой плотности в сыворотке, и увеличения количества сывороточного липопротеина высокой плотности.
Новые полипептидные соединения настоящего изобретения могут быть синтезированы стандартными методами твердофазной пептидной химии, или классическими методами, хорошо известными специалистам.
Для синтеза пептидных амидов твердофазный синтез предпочтительно начинать с C-конца пептида. Подходящий исходный материал может быть получен, например, путем связывания нужной защищенной альфа-аминокислоты с хлорометилированным полимером, гидроксиметиловым полимером, бензгидриламиновым (ВНА) полимером или пара-метил-бензгидриламиновым (p-Me-BHA) полимером. Один из таких полимеров, например хлорометиловый полимер, продается под торговой маркой BIOBEADS SX-1 (Bio Rad Laboratories, Richmond, California). Получение гидроксиметилового полимера описано Bodansky и др., Chem. Ind. (London) 38, 1597 (1966). BHA-полимер описан Pietta и Marshall, Chem. Comm. 650 (1970), и являются коммерческим продуктом, поставляемым Peninsula Laboratories, Inc., Belmont, California.
После первоначального связывания альфа-амино-защитная группа может быть удалена с помощью кислотного реагента, например раствора трифтороуксусной кислоты (TFA) или соляной кислоты (HCl), в органических растворителях при комнатной температуре. После удаления α -амино-защитной группы, оставшиеся защищенные аминокислоты могут быть поэтапно присоединены в нужном порядке. Каждая защищенная аминокислота может быть подвергнута реакции (например в 3-кратном избытке) с использованием соответствующего активатора карбоксильной группы, такого как дициклогексилкарбодиимид (DCC) или диизопропилкарбодиимид (DIC) в растворе, например, в метиленхлориде (CH2Cl2) или диметилформамиде (ДМФ), или в их смеси.
После получения нужной аминокислотной последовательности синтезированный пептид может быть отщеплен от бензгидриламиновой полимерной подложки посредством обработки соответствующим реагентом, таким как фторводород (HF), который не только отщепляет пептид от полимера, но и также отщепляет наиболее часто используемые боковые защитные группы. В случае использования хлорометилового или гидроксиметилового полимера обработка фторводородом приводит к образованию свободной кислоты пептида. Однако, из этих пептидных полимеров могут быть легко получены сложные эфиры и алкиламиды этих пептидов посредством гидролиза соответствующим алкиламином, диалкиламином или диаминоалканом, либо посредством переэтерификации с использованием спирта с высоким pH.
Процедура твердофазного синтеза хорошо известна специалистам и описана Stewart и Young, Solid Phase Peptide Syntesis: 2-ое изд. (Pierce Chemical Co., Rockford, IL 1984).
Некоторые из хорошо известных методов синтеза в растворе, которые могут быть использованы для синтеза частей пептида настоящего изобретения, описаны Bodansky et al., Peptide Synthesis, 2-ое изд., John Wiley & Sons, New York, N.Y. 1976.
Очевидно, что наиболее предпочтительным синтезом пептидов является синтез в жидкой фазе, который предусматривает реакцию конденсации по крайней мере двух пептидных фрагментов.
Этот метод включает в себя конденсацию пептидного фрагмента X-A1-Y с пептидным фрагментом U-V-W, где все аминокислотные боковые цепи, за исключением A1, являются нейтральными или защищенными, а X представляет собой Prot, где Prot является N-концевой защитной группой; Y представляет собой A2-Q, Ala-A2-Q, A2-Ala-Q, Ala-A2-Ala-Q, A2-Ala-Trp-Q, Ala-A2-Ala-Trp-Q, Ala-Q или -Q, где Y является Q; U является J-A2-Ala-Trp, или J-Ala-A2-Ala-Trp. Если Y является Ala-Q, то U является J-A2-Ala-Trp. Если Y является A2-Q или Ala-A2-Q, то U является J-Ala-Trp. Если Y является A2-Ala-Trp-Q или Ala-A2-Ala-Trp-Q, то U является J. V представляет собой A5 или Z. Если V является A5, то W является Z. Если V является Z, то W отсутствует. A1, A2, A5 и Z являются такими, как они определены выше.
Q представляет собой карбоксиконец пептидного фрагмента и является /OR3 или -M, где M представляет собой часть, которая может быть заменена азотсодержащим нуклеофилом, а R3 представляет собой алкильную группу, содержащую от 1 до около 10 атомов углерода; арильную группу, имеющую от 6 до около 12 атомов углерода; или арилалкильную группу, имеющую от 7 до около 12 атомов углерода.
J представляет собой аминоконец указанного фрагмента; а H представляет собой защитную группу, которая не затрудняет реакцию присоединения, например бензильную группу.
Затем защитные группы удаляют. Альтернативно, полученный таким образом защищенный пептид может быть использован в последующих реакциях конденсации для получения более крупного пептида.
Этот предпочтительный метод синтеза более подробно описан в заявке на патент США рег. N 559 121, поданной 24 июля 1990 г. под названием "Способ синтеза пептидов", и опубликованной как WO 9201709 ("Pro cess for Synthesizi ng Peptides", John C. Hubbs и S.W. Parker).
В соответствии с другим вариантом своего осуществления настоящее изобретение относится к способу стимулирования высвобождения гормона роста и/или повышения его уровней в крови животного. Этот способ стимуляции высвобождения ГР и/или повышения его уровней в крови может быть использован для терапевтического лечения вышеуказанных заболеваний. Этот способ заключается во введении животному эффективной дозы по крайней мере одного из описанных выше полипептидов. В одном из вариантов осуществления этого способа используются животные за исключением человека.
Соединения настоящего изобретения могут быть введены перорально, парентерально (внутримышечно (I.m.), внутрибрюшинно (i.p.), внутривенно (i.v.), или подкожно (s.c.)), через нос, вагинально, ректально, подъязычно, а также путем внутрилегочной ингаляции в виде лекарственных форм, подходящих для каждого способа введения. При этом предпочтительным путем введения являются парентеральные инъекции.
Твердые лекарственные формы для перорального введения обычно изготавливаются в виде капсул, таблеток, драже, порошков и гранул. Для приготовления таких твердых лекарственных форм активное соединение смешивают по крайней мере с одним инертным носителем, таким как сахароза, лактоза или крахмал. Помимо инертных наполнителей указанные лекарственные формы могут содержать замасливающие агенты, такие как стеарат магния. В случае использования капсул, таблеток и драже эти лекарственные препараты могут также содержать буферные агенты. Таблетки и драже могут быть изготовлены с энтеросолюбильным покрытием.
Жидкие лекарственные формы для перорального введения обычно изготавливаются в виде эмульсий, растворов, суспензий, сиропов и элексиров, содержащих инертные разбавители, которые обычно используются в этих целях, например, такие как вода. Помимо указанных инертных разбавителей, такие композиции могут также содержать адъюванты, например, смачивающие агенты, эмульгирующие и суспендирующие агенты, а также подслащивающие, вкусовые и ароматизирующие вещества.
Препараты настоящего изобретения, предназначенные для парентерального введения, могут быть изготовлены в виде стерильных водных или безводных растворов, суспензий или эмульсий. Примерами безводных растворителей или разбавителей являются пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, растительные масла, такие как оливковое масло и кукурузное масло, желатин и инъецируемые органические сложные эфиры, такие как этилолеат. Указанные лекарственные формы могут также содержать адъюванты, такие как консерванты, смачивающие агенты, эмульгаторы и диспергирующие агенты. Они могут быть стерилизованы, например, путем фильтрации через бактериальные фильтры путем введения в композиции стерилизующих агентов, путем облучения этих композиций или путем их нагревания. Указанные препараты могут быть также приготовлены в водной среде или в другой стерильной инъецируемой среде непосредственно перед их использованием.
Новые соединения настоящего изобретения могут быть также введены в комбинации с фактором высвобождения гормона роста (т.е. природным рилизинг-фактором ростового гормона, его аналогом и функциональным эквивалентом), а также в комбинации с другими соединениями, способствующими высвобождению гормона роста, такими как ГР - высвобождающие пептиды (см., патент США N 880 778, который вводится в описание посредством ссылки), например, ингибиторы ацетилхолинэстеразы, β- адренергические блокирующие агенты, α2- адренергические блокирующие агенты и т.п. Такие комбинации с ГР - высвобождающими пептидами настоящего изобретения являются особенно предпочтительными, поскольку они стимулируют гораздо большее высвобождение гормона, чем это ожидается при суммировании отдельных ответов для каждого компонента комбинации, то есть, другими словами, эта комбинация продуцирует синергический ответ. Более подробное описание введения комбинации ГР - высвобождающих пептидов приводится в вышеуказанном патенте. Такими синергическими соединениями являются предпочтительно соединения, которые действуют как агонисты фактора ГР - высвобождения в реакции связывания с рецептором, или ингибиторы действия сомастатина. Этот синергизм может быть бинарным, то есть синергическими соединениями являются пептиды настоящего изобретения и одно из указанных других соединений, либо более чем одно из указанных соединений.
Комбинации, способствующие эффективному высвобождению гормона роста и повышение его уровней в крови животного, включая человека, содержат эффективное количество полипептидов, выбранных из полипептидов настоящего изобретения, и по крайней мере одного полипептида, принадлежащего к полипептидам Группы 1 или к полипептидам Группы 2 (т.е. соединениям, стимулирующим высвобождение гормона роста); причем полипептиды Группы 1 выбирают из природных факторов высвобождения ГР и их функциональных эквивалентов, где указанные полипептиды действуют как агонисты фактора ГР - высвобождения в реакции связывания с рецептором млекопитающих и других позвоночных и ракообразных; а полипептиды группы 2 выбирают из любых полипептидов, имеющих следующую структуру:
Tyr-DArg-Phe-NH2;
Tyr-DAla-Phe-NH2;
Tyr-DArg (NO2)-Phe-NH2;
Tyr-DMet (O)-Phe-NH2;
Tyr-DAla-Phe-Gly-NH2;
Tyr-DArg-Phe-Gly-NH2;
Tyr-DThr-Phe-Gly-NH2;
Phe-DArg-Phe-Gly-NH2;
Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2;
Tyr-DAla-Gly-Phe-NH2;
Tyr-DArg-Gly-Trp-NH2;
Tyr-DArg(NO2)-Phe-Gly-NH2;
Tyr-DMet (O)-Phe-Gly-NH2
(NMe)Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2;
Tyr-DArg-Phe-Gly-ol;
Tyr-DArg-Gly-(NMe)Phe-NH2;
Tyr-DArg-Phe-Sar-оI
Tyr-DAla-Phe-Sar-ol
Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-NH2;
Tyr-DAla-(NMe)Phe-Gly-Met(O)-ol;
Tyr-DArg-(NMe)Phe-Gly-Net(O)-ol;
Gly-Tyr-DArg-Phe-Gly-NH2;
Tyr-DThr-Gly-Phe-Thz-NH2;
Gly-Tyr-DAla-Phe-Gly-NH2;
Туr-DAla-Phe-Gly-ol;
Туr-DAla-Gly-(NMe)Phe-Gly-ol;
Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2;
Tyr-DAla-Phe-Sar-NH2;
Tyr-DAla-Gly-(NMe)Phe-NH2;
Sar-Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2;
Tyr-DCys-Phe-Gly-DCys-NH2 (циклический дисульфид);
Tyr-DCys-Phe-Gly-DCys-NH2 (свободный дитиол);
Tyr-DCys-Gly-Phe-DCys-NH2 (циклический дисульфид);
Tyr-DCys-Gly-Phe-DCys-NH2 (свободный дитиол);
Tyr-DAla-Phe-Gly-Туr-Pro-Ser-NH2;
Tуr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH2;
Tyr-DAla-Phe-Sar-Phe-Pro-Ser-NH2;
Туr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2;
Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH2;
Tyr-DAla-Phe-Sar-Phe-Hyp-Ser-NH2;
Туr-DArg-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2;
Туr-DArg-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH2;
Tyr-DArg-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH2;
Туr-DArg-Phe-Gly-Туr-Pro-Ser-NH2;
и органические или неорганические аддитивные соли указанных полипептидов Группы 2; при этом вышеуказанную комбинацию вводят в таком отношении ингредиентов, что их совместное действие вызывает синергическое высвобождение гормона роста и увеличение его уровней в крови животного.
Tyr-DArg-Phe-NH2;
Tyr-DAla-Phe-NH2;
Tyr-DArg (NO2)-Phe-NH2;
Tyr-DMet (O)-Phe-NH2;
Tyr-DAla-Phe-Gly-NH2;
Tyr-DArg-Phe-Gly-NH2;
Tyr-DThr-Phe-Gly-NH2;
Phe-DArg-Phe-Gly-NH2;
Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2;
Tyr-DAla-Gly-Phe-NH2;
Tyr-DArg-Gly-Trp-NH2;
Tyr-DArg(NO2)-Phe-Gly-NH2;
Tyr-DMet (O)-Phe-Gly-NH2
(NMe)Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2;
Tyr-DArg-Phe-Gly-ol;
Tyr-DArg-Gly-(NMe)Phe-NH2;
Tyr-DArg-Phe-Sar-оI
Tyr-DAla-Phe-Sar-ol
Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-NH2;
Tyr-DAla-(NMe)Phe-Gly-Met(O)-ol;
Tyr-DArg-(NMe)Phe-Gly-Net(O)-ol;
Gly-Tyr-DArg-Phe-Gly-NH2;
Tyr-DThr-Gly-Phe-Thz-NH2;
Gly-Tyr-DAla-Phe-Gly-NH2;
Туr-DAla-Phe-Gly-ol;
Туr-DAla-Gly-(NMe)Phe-Gly-ol;
Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2;
Tyr-DAla-Phe-Sar-NH2;
Tyr-DAla-Gly-(NMe)Phe-NH2;
Sar-Tyr-DArg-Phe-Sar-NH2;
Tyr-DCys-Phe-Gly-DCys-NH2 (циклический дисульфид);
Tyr-DCys-Phe-Gly-DCys-NH2 (свободный дитиол);
Tyr-DCys-Gly-Phe-DCys-NH2 (циклический дисульфид);
Tyr-DCys-Gly-Phe-DCys-NH2 (свободный дитиол);
Tyr-DAla-Phe-Gly-Туr-Pro-Ser-NH2;
Tуr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH2;
Tyr-DAla-Phe-Sar-Phe-Pro-Ser-NH2;
Туr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2;
Tyr-DAla-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH2;
Tyr-DAla-Phe-Sar-Phe-Hyp-Ser-NH2;
Туr-DArg-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2;
Туr-DArg-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH2;
Tyr-DArg-Phe-Sar-Tyr-Hyp-Ser-NH2;
Туr-DArg-Phe-Gly-Туr-Pro-Ser-NH2;
и органические или неорганические аддитивные соли указанных полипептидов Группы 2; при этом вышеуказанную комбинацию вводят в таком отношении ингредиентов, что их совместное действие вызывает синергическое высвобождение гормона роста и увеличение его уровней в крови животного.
Примерами других хорошо известных соединений, способствующих высвобождению гормонов роста, являются ингибиторы ацетилхолинэстеразы, β- адренегенные блокаторы и α2- адренергические агонисты.
В одном из предпочтительных вариантов осуществления настоящего изобретения пептиды настоящего изобретения используют вместе с природными факторами высвобождения гормона роста или их функциональными эквивалентами и вместе с соединениями, стимулирующими высвобождение гормона роста. Например, вместе с пептидами настоящего изобретения могут быть использованы соединения Группы 1 и Группы 2; либо в другом примере с пептидами настоящего изобретения могут быть использованы соединения Группы 1 или β- адренергические блокирующие агенты.
Количество вводимого полипептида или комбинации полипептидов настоящего изобретения может широко варьироваться в зависимости от многих факторов, например, от конкретного животного, которому вводят данный полипептид или композицию; от возраста и пола этого животного; от нужного терапевтического эффекта; от способа введения; и от конкретно используемого полипептида или композиции полипептидов. Однако во всех случаях используемая доза должна быть эффективной (терапевтически эффективное количество) для стимулирования высвобождения гормона роста и повышения его уровней в крови животного-реципиента. В основном такая доза колеблется в пределах от около 0,1 мкг до 10 мг всего полипептида на один килограмм массы тела. Предпочтительное количество может быть легко определено самим специалистом исходя из настоящего описания.
Например, предпочтительная доза для внутривенного введения человеку составляет в пределах от около 0,1 мкг до 10 мг всего полипептида на кг веса тела, более предпочтительно от около 0,5 мкг до 5 мкг, и наиболее предпочтительно от около 0,7 мкг до около 3,0 мкг на кг веса тела. В случае использования комбинаций пептидов высвобождения гормона роста описанные пептиды настоящего изобретения могут присутствовать в меньшем количестве. Например, при использовании пептида настоящего изобретения в сочетании с синергическим соединением Группы 1 (Патент США N 4 880 778), таким как GHRH, количество пептида настоящего изобретения предпочтительно составляет от около 0,1 мкг до около 5 мкг на кг массы тела, а количество синергического соединения (напр. , GHRH) составляет от около 0,5 мкг до около 15,0 мкг; а более предпочтительно если количество соединения настоящего изобретения составляет от около 0,1 мкг до около 3 мкг, а количество синергического соединения составляет от около 1,0 мкг до около 3,0 мкг на кг массы тела.
При пероральном введении обычно требуются большие количества. Например, доза для перорального введения человеку обычно составляет от около 30 до около 1200 мкг полипептида на кг массы тела, более предпочтительно от около 70 мкг до около 600 мкг, а наиболее предпочтительно от около 200 мкг до около 600 мкг всего полипептида на кг массы тела. Коровам и свиньям требуется примерно такая же доза, как и человеку, однако крысам необходимы более высокие дозы. Точная доза может быть определена любым специалистом исходя из описания настоящего изобретения.
В основном, как указывалось выше, при введении комбинаций пептидов высвобождения ГР предусматривается использование более низких доз каждого из указанных соединений по сравнению с дозами отдельных соединений, необходимыми для получения адекватного ответа, поскольку вышеуказанная композиция этих соединений обладает синергическим действием.
В объем настоящего изобретения также входят композиции, содержащие в качестве активного ингредиента органические или неорганические аддитивные соли вышеописанных полипептидов и их комбинаций, в сочетании, но необязательно, с носителем, разбавителем, матрицей замедленного высвобождения или с покрытием.
Примерами органических или неорганических аддитивных солей соединений, стимулирующих высвобождение ГР, или их комбинаций, которые входят в объем настоящего изобретения, могут служить органические соли, такие как ацетат, трифторацетат, оксалат, валерат, олеат, лаурат, бензоат, лактат, тозилат, цитрат, малеат, фумарат, сукцинат, тартрат, нафталат и т.п., и неорганические соли, такие как соли металлов Группы I (т.е. щелочных металлов), соли Группы II (т. е. щелочно-земельных металлов), соли аммония, протамина, а также соли цинка, железа и т.п., соли с противоионами, например хлорид, бромид, сульфат, фосфат и т.п., т.е. аналогичные тем, которые были указаны выше для органических соединений.
Для введения человеку фармацевтически приемлемые соли являются предпочтительными. Такие соли, как нетоксичные соли щелочных металлов, щелочно-земельных металлов и соли аммония (например, соли натрия, калия, лития кальция, магния, бария, аммония и протамина), которые обычно используются в фармацевтической промышленности, могут быть получены хорошо известными способами. Термин "фармацевтически приемлемые соли" также включает в себя нетоксичные кислые аддитивные соли, которые могут быть получены при помощи реакции соединений настоящего изобретения с соответствующей органической или неорганической кислотой. Типичными примерами таких солей являются гидрохлорид, гидробромид, сульфат, бисульфат, ацетат, оксалат, валерат, олеат, лаурат, борат, бензоат, лактат, фосфат, тозилат, цитрат, малеат, фумарат, сукцинат, тартрат, нафтилат и т.п.
Настоящее изобретение также иллюстрируется нижеприведенными примерами, не ограничивающими, однако, его объема.
Пример 1.
Синтез пептидов, способствующих высвобождению гормона роста
Параметилбензгидриламино-гидрохлоридный (pMe-BHA • HCl) полимер помещали в реакционный сосуд в стандартный автоматический синтезатор пептидов. Полимер был замещен свободным амином вплоть загрузки от около 5 мМ/грамм. Соединения получают путем присоединения отдельных аминокислот, начиная с карбоксиконца пептидной последовательности и используя соответствующий активирующий реагент, такой как N,N-дициклогексилкарбодиимид (DCC). Альфа-амин отдельных аминокислот является защищенным, например, в виде т-бутилоксикарбонильного производного (t-Boc), а реактивные функциональные группы боковой цепи являются защищенными, как показано в таблице 1.
Параметилбензгидриламино-гидрохлоридный (pMe-BHA • HCl) полимер помещали в реакционный сосуд в стандартный автоматический синтезатор пептидов. Полимер был замещен свободным амином вплоть загрузки от около 5 мМ/грамм. Соединения получают путем присоединения отдельных аминокислот, начиная с карбоксиконца пептидной последовательности и используя соответствующий активирующий реагент, такой как N,N-дициклогексилкарбодиимид (DCC). Альфа-амин отдельных аминокислот является защищенным, например, в виде т-бутилоксикарбонильного производного (t-Boc), а реактивные функциональные группы боковой цепи являются защищенными, как показано в таблице 1.
До введения начальной аминокислоты полимер три раза (около 1 минуты каждый раз) размешивали с дихлорметаном (CH2Cl2; около 10 мг/г полимера); нейтрализовали путем трехкратного (около 2 минут каждый раз) размешивания с N, N-диизопропилэтиламином (DIEA) в дихлорметане (10:90; около 10 мг/г полимера); три раза (около 1 минуты каждый раз) с дихлорметаном (около 10 мл/г полимера). Начальную и каждую последующую аминокислоту присоединяли к полимеру с помощью предварительно образованного симметричного ангидрида с использованием примерно 6-кратного избытка (по отношению к полной реакционной емкости полимера) соответствующим образом защищенной аминокислоты и примерно 2-кратного избытка (по отношению к полной связывающей емкости полимера) DIC в соответствующем количестве дихлорметана. Для аминокислот с низкой растворимостью в дихлорметане добавляли N,N-диметилформамид (ДМФ) в целях получения гомогенного раствора. Обычно симметричный ангидрид получали за 30 минут до введения в реакционный сосуд при комнатной температуре или ниже. Дициклогексилмочевину, которая образуется при получении симметричного ангидрида, удаляли путем гравитационного фильтрования раствора в реакционный сосуд. Течение реакции присоединения аминокислот к полимеру прослеживали с помощью цветной реакции, используя соответствующий реагент, такой как нингидрин (который реагирует с первичными и вторичными аминами). После завершения присоединения аминокислоты к полимеру (> 99%), αаминозащитную группу удаляли путем обработки кислотным реагентом (или реагентами). Обычно использовался реагент, состоящий из раствора трифторуксусной кислоты (TFA) в дихлорметане (33:66).
После получения желаемой аминокислотной последовательности, нужный пептид может быть отщеплен от полимерной подложки путем обработки соответствующим реагентом таким как фтороводород (HF), который не только отщепляет пептид от полимера, но и также отщепляет наиболее часто используемые защитные группы боковых цепей. Если используется BHA- или p-Me-BHA-полимер, то HF - обработка приводит непосредственно к образованию свободных амидов пептида. В случае, если синтез проводят по методу Меррифилда, то свободные алкиламиды пептида отщепляют путем обработки соответствующим амином (в том случае, использование Boc -Nε- FMOC-Lys позволяет одновременно удалить FMOC-группу).
Полный процесс присоединения каждого отдельного аминокислотного остатка к полимеру показан в таблице 2.
С использованием описанной выше процедуры были получены соединения, представленные в таблицах 3, 4, 5 и 6.
Пример 2
In vivo - высвобождение гормона роста у крыс
Незрелые самки крыс Sprague-Dawley были получены из Charles River Laboratories (Wilmington, MA). После получения этих крыс содержали в условиях суточного цикла "день : ночь = 14 : 15" и при температуре 25oC. Воду и еду для крыс Purina животные получали ad libitum. Детенышей держали вместе с матерью до тех пор, пока они не достигнут 21-дневного возраста.
In vivo - высвобождение гормона роста у крыс
Незрелые самки крыс Sprague-Dawley были получены из Charles River Laboratories (Wilmington, MA). После получения этих крыс содержали в условиях суточного цикла "день : ночь = 14 : 15" и при температуре 25oC. Воду и еду для крыс Purina животные получали ad libitum. Детенышей держали вместе с матерью до тех пор, пока они не достигнут 21-дневного возраста.
Крыс в возрасте 26 дней (6 крыс на обрабатываемую группу) за двадцать минут до внутривенной инъекции пептида анастезировали путем введения (внутрибрюшинно) 50 мг/кг пентобарбитала. Внутривенные инъекции пептида (i. v.) вводили в нормальном физиологическом растворе, содержащем 0,1% желатина. Анастезированным крысам весом 55-65 грамм внутривенно инъецировали соединения, способствующие высвобождению гормона роста, в количестве, указанном в таблице 3. Инъекцию в виде 0,1 мл раствора делали в яремную вену.
Через 10 минут после инъекции всех животных умерщвляли путем декапитации (см. таблицу 3). Кровь собирали для определения ГР-уровней. После свертывания крови ее центрифугировали и отделяли сыворотку. Эту сыворотку замораживали и содержали в этом состоянии вплоть до проведения радиоиммуноанализа (РИА), осуществляемого для определения уровней гормона роста (ГР) в соответствии с процедурой, разработанной Национальным институтом артрита, диабета, желудочных и почечных заболеваний (NIADDK).
В пробирки для РИА-анализа при температуре рефрижератора (около 4oC) добавляли реагенты (за одну стадию) в следующем порядке:
(a) буфер,
(b) "холодный" (т.е., нерадиоактивный) стандарт или неизвестный образец сыворотки для анализа,
(c) меченный радиоактивным йодом антиген гормона роста, и
(d) антисыворотку против гормона роста.
(a) буфер,
(b) "холодный" (т.е., нерадиоактивный) стандарт или неизвестный образец сыворотки для анализа,
(c) меченный радиоактивным йодом антиген гормона роста, и
(d) антисыворотку против гормона роста.
Добавление реагентов, в основном, осуществляли так, чтобы конечное разведение в РИА-пробирке составляло примерно 1:30000 (антисыворотка : полный объем жидкости = объем : объем).
Затем смешанные реагенты инкубировали при комнатной температуре (около 25oC) в течение 24 часов, после чего добавляли второе антитело (например, козью или кроличью антиобезьянью гаммаглобулиновую сыворотку), которое связывается с конъюгированной антисывороткой против гормона роста и вызывает осаждение этого коньюгата. Затем осажденное содержимое РИА-пробирок анализировали, и с помощью гамма-сцинтилляционного счетчика определяли число отсчетов в определенный период времени. После этого строили стандартную кривую зависимости числа радиоактивных отсчетов от уровня гормона роста (ГР). С помощью этой эталонной кривой определяли затем ГР-уровни анализируемых образцов.
Сывороточные ГР-уровни измеряли при помощи РИА с использованием реагентов, предусматриваемых Национальной программой по гормональным и гипофизарным исследованиям.
В таблице 3 представлены сывороточные уровни (нг/мл), исходя из стандартных ГР-уровней крысы, составляющих 0,61 Международных единиц/мг (ME/мг). Приведенные данные представляют собой средние величины ± ср.кв.ош. (SEM). Статистический анализ проводили в соответствии с т-критерием Стьюдента. Результаты, приведенные в таблице 3, представляют собой средние величины, полученные в эксперименте с 6 крысами.
В таблице 3 соединения настоящего изобретения сравниваются с соединениями, структура которых выходит за пределы общей формулы заявленных соединений, и на основании этого сравнения показывается, что соединения настоящего изобретения обладают способностью стимулировать высвобождение гормона роста и увеличения его уровней в крови крыс, которым были введены эти соединения предпочтительным способом. Эта неожиданная активность к ГР-высвобождению, обнаруживаемая предпочтительными соединениями настоящего изобретения, является очень важным фактом, который подтверждает, что для повышения уровней гормона роста в крови животных и человека может быть использован менее дорогостоящий метод, чем методы, применяемые до настоящего времени, то есть может быть использован низкомолекулярный полипептид с более короткой цепью, имеющей относительно стабильный и экономически выгодный D-аланин у своего аминоконца, и пентандиамин (вместо Lys) у C-конца.
Пример 3
In vivo - высвобождение гормона роста (ГР) у крыс после перорального введения
Повторяли процедуру примера 2, за исключением того, что крысам вводили указанные дозы соединений с помощью желудочного зонда. В таблице 4 указаны вводимые соединения, использованные дозы и данные, полученные в результате эксперимента.
In vivo - высвобождение гормона роста (ГР) у крыс после перорального введения
Повторяли процедуру примера 2, за исключением того, что крысам вводили указанные дозы соединений с помощью желудочного зонда. В таблице 4 указаны вводимые соединения, использованные дозы и данные, полученные в результате эксперимента.
После перорального введения крысам соединения настоящего изобретения сохраняли свою высокую активность в высвобождении ГР. Этот факт является очень важным результатом и свидетельствует о возможности перорального введения пептидов настоящего изобретения в терапевтических целях.
Пример 4
In vivo - высвобождение гормона роста (ГР) у крыс
Повторяли процедуру примера 2. Вводимые соединения, используемые дозы и результаты представлены в таблицах 5 и 6.
In vivo - высвобождение гормона роста (ГР) у крыс
Повторяли процедуру примера 2. Вводимые соединения, используемые дозы и результаты представлены в таблицах 5 и 6.
Как видно из таблиц 5 и 6, соединения настоящего изобретения стимулируют высвобождение гормона роста и повышение его уровней в крови в гораздо большей степени, чем соединения, имеющие более длинную цепь.
Пример 5
In vivo - высвобождение гормона роста у человека
Нормальным мужчинам, имеющим средний возраст примерно 25 лет, перорально вводили пептид Ala-His -DβNal- Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 (GHR P-1) или пептид Ala -DβNal- Ala-trp-DPhe-Lys-NH2 (GHR P-2). 40 человек получили 300 мкг/кг GHR P-1 в 20 мл воды, а затем лишь 100 мл воды; 39 человек получили 600 мкг/кг GHR P-1 в 20 мл воды, а затем 100 мл воды; и 11 человек получили 100 мкг/кг GHR P-2 в 20 мл воды, а затем 100 мл воды. У этих людей брали пробы крови через определенные промежутки времени (как показано на фиг. 1), и эти пробы подвергали радиоиммуноанализу для определения уровней гормона роста в соответствии с процедурой, описанной в примере 2. Результаты показаны на фиг. 1. Пероральное введение 100 мкг/кг GHR P-2 давало более высокие уровни гормона роста, чем пероральное введение 300 мкг/кг GHR P-1.
In vivo - высвобождение гормона роста у человека
Нормальным мужчинам, имеющим средний возраст примерно 25 лет, перорально вводили пептид Ala-His -DβNal- Ala-Trp-DPhe-Lys-NH2 (GHR P-1) или пептид Ala -DβNal- Ala-trp-DPhe-Lys-NH2 (GHR P-2). 40 человек получили 300 мкг/кг GHR P-1 в 20 мл воды, а затем лишь 100 мл воды; 39 человек получили 600 мкг/кг GHR P-1 в 20 мл воды, а затем 100 мл воды; и 11 человек получили 100 мкг/кг GHR P-2 в 20 мл воды, а затем 100 мл воды. У этих людей брали пробы крови через определенные промежутки времени (как показано на фиг. 1), и эти пробы подвергали радиоиммуноанализу для определения уровней гормона роста в соответствии с процедурой, описанной в примере 2. Результаты показаны на фиг. 1. Пероральное введение 100 мкг/кг GHR P-2 давало более высокие уровни гормона роста, чем пероральное введение 300 мкг/кг GHR P-1.
Пример 6
In vivo - высвобождение гормона роста у крыс
В основном, повторяли процедуру, описанную в примере 2, за исключением того, что указанные пептиды инъецировали подкожно, а не внутривенно, а животных умерщвляли не через 10 минут, а через 15 минут. Вводимые соединения, используемые дозы и полученные результаты представлены в таблице 7.
In vivo - высвобождение гормона роста у крыс
В основном, повторяли процедуру, описанную в примере 2, за исключением того, что указанные пептиды инъецировали подкожно, а не внутривенно, а животных умерщвляли не через 10 минут, а через 15 минут. Вводимые соединения, используемые дозы и полученные результаты представлены в таблице 7.
Пример 7
Реакция конденсации пептидных фрагментов с образованием пептида
Основная процедура
Точки плавления могут быть определены с помощью аппарата Томаса Гувера для капиллярного определения температур плавления. ИК-спектры могут быть сняты на спектрофотометре Perkin - Elmer Model 137 или Nicolet Model 5DX и зарегистрированы в волновых числах (см-1). Масс-спектры (МС) могут быть получены с использованием спектрофотометра VG Analytical Ltd. Model ZAB-IF-Mass Spectrometer, где ионизацию осуществляют методами электронного удара (EI), полевой десорбции (FD), или бомбардировкой быстрыми атомами (FAB). Газовая хроматография с масс-спектроскопией (GCMS) может быть проведена на хромато-масс-спектрометре Finnigan 4023, снабженном капиллярной колонкой 30 м DB5 (J & W Scientific), где в качестве газа-носителя используют гелий. Вращение плоскости поляризации света может быть измерено с помощью поляриметра Autopol III, изготавливаемого Rudolph Research.
Реакция конденсации пептидных фрагментов с образованием пептида
Основная процедура
Точки плавления могут быть определены с помощью аппарата Томаса Гувера для капиллярного определения температур плавления. ИК-спектры могут быть сняты на спектрофотометре Perkin - Elmer Model 137 или Nicolet Model 5DX и зарегистрированы в волновых числах (см-1). Масс-спектры (МС) могут быть получены с использованием спектрофотометра VG Analytical Ltd. Model ZAB-IF-Mass Spectrometer, где ионизацию осуществляют методами электронного удара (EI), полевой десорбции (FD), или бомбардировкой быстрыми атомами (FAB). Газовая хроматография с масс-спектроскопией (GCMS) может быть проведена на хромато-масс-спектрометре Finnigan 4023, снабженном капиллярной колонкой 30 м DB5 (J & W Scientific), где в качестве газа-носителя используют гелий. Вращение плоскости поляризации света может быть измерено с помощью поляриметра Autopol III, изготавливаемого Rudolph Research.
IH-ЯМР - спектры могут быть получены на приборе JEOL GX - 400, работающем при 400 МГц, или на приборе JEOL GX-270, работающем при 270 МГц. Размечающая способность этих приборов составляет менее чем 0,7 Гц. Химические сдвиги выражали в миллионных долях (м.д.) и измеряли по отношению к внутреннему стандарту (3-(триметилсилил) - тетрадейтерированному пропионату натрия (TSP)).
Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) может быть осуществлена на системе Hitachi, содержащей регулятор градиентных объемов (l - 5000) и насос 655А, подсоединенный к полупрепаративной колонке (Видак 20ITP1010 или 218TP1010). В качестве элюирующего растворителя могут быть использованы смеси воды, содержащей 0,2% трифторуксусной кислоты и метанола. Обычно нужные соединения элюировали со скоростью потока 6 мл/мин в режиме возрастания градиента органического компонента приблизительно со скоростью 1-2% в минуту. Детекцию соединений осуществляли при соответствующей длине волны на диодном УФ-детекторе L KB 2140. Последующее интегрирование может быть осуществлено с использованием аналитического программного обеспечения (Версия 3.6)
Реакции осуществляли в инертной атмосфере азота или органа, за исключением тех случаев, когда это указано особо. Безводный тетрагидрофуран (ТГФ, сорт. U. V. ) и диметилформамид могут быть закуплены у Burdick и Jackson, и использованы непосредственно из бутыли.
Реакции осуществляли в инертной атмосфере азота или органа, за исключением тех случаев, когда это указано особо. Безводный тетрагидрофуран (ТГФ, сорт. U. V. ) и диметилформамид могут быть закуплены у Burdick и Jackson, и использованы непосредственно из бутыли.
А. Получение трипептидного фрагмента-2HN-Trp-DPhe-Lys (Boc)-NH2
Nα Бензилоксикарбонил _(Nε-т- бутоксикарбонил)лизина амида 4.
Nα Бензилоксикарбонил _(Nε-т- бутоксикарбонил)лизина амида 4.
К раствору (10oC) карбонилдиимидазола (CDI, 2, 88,24 г, 0,544М) и сухого тетрагидрофурана (ТГФ, 1500 мл) медленно добавляли Nα бензилоксикарбонил -(Nε-т- бутоксикарбонил)лизин (1, 180 г, 0,474 М). Во время этого добавления наблюдалось выделение газа. При образовании промежуточного соединения имидазолида Nε- бензилоксикарбонил -(Nε-т- бутоксикарбонил)лизина, 3, получили насыщенный раствор аммиака и ТГФ (2000 мл) (безводный газ NH3 пропускали через ТГФ при 5-10oC). После завершения образования промежуточного соединения 3 (примерно через 2 часа, когда прекратится выделение газа), половину ТГФ - раствора, содержащего 3, добавляли к раствору аммиака. Затем через 30 минут добавляли оставшийся раствор, содержащий 3. Во время добавления и еще 45 минут после добавления поддерживали непрерывный поток аммиачного газа. После добавления двух растворов, содержащих 3, образовался осадок. Затем реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и размешивали еще 15 часов. Растворитель удаляли из суспензии в вакууме. Остаток суспендировали в воде, а твердые вещества собирали путем вакуумной фильтрации.
Nε- т-бутоксикарбонил-лизин-амид. 5.
Раствор амида лизина 4 (181,48 г, 0,479 М) в метаноле (MeOH, 1000 мл) добавляли к суспензии катализатора (5% Pd/c, 5г) в метаноле (250 мл) в атмосфере азота. Через реакционную смесь барботировали водород (примерно 15 минут), после чего эту смесь размешивали в атмосфере водорода до тех пор, пока ВЭЖХ-анализ не покажет, что реакция завершена (36 часов). Затем атмосферу водорода заменяли аргоном. Реакционный раствор осветляли, пропуская через прокладку из Целита®, а растворитель удаляли в вакууме, в результате чего получали твердое вещество.
Nα- Бензилоксикарбонил-D-фенилаланил _(Nε-т- бутоксикарбонил)-лизин-амид. 8.
Nα- Бензилоксикарбонил-D-фенилаланин (6, 126%, 9 г, 0,423 М) медленно добавляли к раствору (10oC) CDI (2, 66,03 г, 0,409 М) в ТГФ (500 мл). Во время добавления наблюдалось выделение газа. После прекращения выделения газа добавляли амид лизина 5 (110,75 г, 0,452 М) в виде раствора в ТГФ (500 мл). Приблизительно через 48 часов смесь фильтровали в целях удаления твердых веществ. Фильтрат концентрировали в вакууме.
Полученный остаток растворяли в этилацетате (Et OAc, 500 мл), а затем промывали в разделительной воронке следующим образом:
1. Вод. HCl (1 н., 3 x 500 мл), pH промывки 1, ок. 8; затем промывка pH 1.
1. Вод. HCl (1 н., 3 x 500 мл), pH промывки 1, ок. 8; затем промывка pH 1.
2. Вода (500 мл)
3. Вод. Na2CO3 (1/2 насыщенный, 2 x 500 мл), фильтровали для сбора образовавшегося твердого вещества (8).
3. Вод. Na2CO3 (1/2 насыщенный, 2 x 500 мл), фильтровали для сбора образовавшегося твердого вещества (8).
4. Вода (3 x 500 мл).
Органический слой осушали сульфатом натрия. После осветления растворитель удаляли в вакууме. Полученный остаток перекристаллизовывали из горячего Et OAc и получали второй образец 8.
D-Фенилаланин _(Nε-т- бутоксикарбонил)лизин-амид. 9.
Метаноловый раствор (1500 мл) амида 8 (120,53 г, 0,229 М) добавляли к суспензии катализатора (5% Pd/C, 50 г) в MeOH (200 мл). Затем атмосферу аргона заменяли водородом. После завершения реакции, на что указывала ВЭЖХ (примерно через 4 часа), атмосферу водорода заменяли аргоном. Реакционный раствор осветляли путем пропускания через прокладку из целита, а фильтрат концентрировали в вакууме. Полученный дипептид может быть использован непосредственно для получения трипептида 12.
Nα Бензилоксикарбонил-триптонил-D-фенилаланил _(Nε-т- бутоксикарбонил)лизин-амид. 12.
Раствор (10oC) Nα бензилоксикарбонил-триптофана (10, 67,60 г, 0,200 М), ТГФ (500 мл) и CDI (2, 33,05 г, 0,204 М) размешивали до тех пор, пока не прекратится выделение газа. Затем к реакционной смеси добавляли раствор соединения 9 (40,8 г, 0,103 М) в ТГФ (около 200 мл). Полученный раствор оставляли для реакции на 15 часов, нагревая при этом до комнатной температуры. Образовавшееся в результате твердое вещество собирали путем вакуумной фильтрации. Фильтрат концентрировали в вакууме. Полученный остаток и твердое вещество снова объединяли и растворяли в Et OAc (4000 мл), слегка нагревая. После охлаждения раствора до комнатной температуры образовалось твердое вещество. Это твердое вещество собирали путем вакуумной фильтрации. Затем его перекристаллизовывали из горячего MeOH и получали в результате очищенный трипептид 12. Et OAC-фильтрат (от первой кристаллизации) промывали в разделительной колонке следующим образом:
1. Вод. HCl (1 н., 2 х 500 мл),
2. Вода (1 х 500 мл),
3. Вод. Na2CO3 (1/2 насыщенный, 2 х 500 мл),
4. Вод. NaCl (1 х 500 мл).
1. Вод. HCl (1 н., 2 х 500 мл),
2. Вода (1 х 500 мл),
3. Вод. Na2CO3 (1/2 насыщенный, 2 х 500 мл),
4. Вод. NaCl (1 х 500 мл).
Органический слой осушали сульфатом магния, а затем осветляли путем вакуумной фильтрации. Растворитель фильтрата удаляли в вакууме. Полученный остаток снова растворяли в этилацетате и получали сухой твердый продукт. Для получения второго сбора соединения 12 в виде белого твердого вещества этот твердый продукт может быть перекристаллизован из горячего MeOH.
Триптофил-D-фенилаланил _(Nε-т- бутилоксикарбонил)лизин-амид, 13.
Метаноловый раствор (1500 мл) трипептида 12 ( 64,59 г, 0,091 М) добавляли к суспензии катализатора (5% Pd/C, 5 г) в MeOH (250 мл) в атмосфере аргона. Затем добавляли еще 2250 мл метанола. Атмосферу аргона заменяли водородом и смесь оставляли примерно на 24 часа для реакции. После завершения реакции атмосферу водорода заменяли аргоном. Раствор осветляли путем пропускания через прокладку из Целита®, а фильтрат концентрировали в вакууме, в результате чего получали трипептид 13 в виде белого твердого вещества.
B. Получение метилового сложного эфира фрагмента трипептида: K-DAla -DβNal-Ala-Oме-Nα- бензилоксикарбонил-D-аланил-D-бетанафтил-аланина
Раствор этилацетата (400 мл) и гидрохлорида метилового сложного эфира D-бета-нафтилаланина (22, 0,62 М) промывали насыщенным карбонатом натрия (400 мл) и 0,8 н. водным гидроксидом натрия (ок. 500 мл). Образовавшуюся водную фазу удаляли (pH 8,5), а органическую фазу последовательно промывали полунасыщенным водным Na2CO3 (150 мл) и водой (50 мл). После концентрирования этилацетатного слоя в вакууме выделяли образовавшееся свободное основание соединения 22.
Раствор этилацетата (400 мл) и гидрохлорида метилового сложного эфира D-бета-нафтилаланина (22, 0,62 М) промывали насыщенным карбонатом натрия (400 мл) и 0,8 н. водным гидроксидом натрия (ок. 500 мл). Образовавшуюся водную фазу удаляли (pH 8,5), а органическую фазу последовательно промывали полунасыщенным водным Na2CO3 (150 мл) и водой (50 мл). После концентрирования этилацетатного слоя в вакууме выделяли образовавшееся свободное основание соединения 22.
К раствору (-5oC, в этанол-ледяной бане) Nα- бензилоксикарбонил-D-аланина (19, 14%, 5 г, 0,50 М), N-гидроксисукцинимида (HONSu, 23, 0,62 М) и свежеприготовленного свободного основания соединения 22 (ок. 0,52 М) в ДМФ (ок. 3 л) добавляли дициклогексилкарбодиимид (DCC, около 95 г, 0,46 М). Полученный реакционный раствор оставляли в течение 24 часов, нагревая при этом до комнатной температуры. За ходом реакции и ее завершением следили с помощью ВЭЖХ-анализа. Если реакция не была завершена, то реакционный раствор охлаждали примерно до -5oC и к этому раствору добавляли еще одну порцию дициклокарбодиимида (около 0,17 М). Затем реакционную смесь оставляли размешиваться еще на 24 часа, нагревая при этом до комнатной температуры. Затем смесь отфильтровывали для удаления дициклогексилмочевины (DCU). К фильтрату добавляли 1 л воды и полученный раствор концентрировали в вакууме. Остаток растворяли в водном растворе 1 н. HCl (ок. 1 л., до тех пор, пока pH водной фазы не достигает pH 1). Затем водную фазу экстрагировали двумя порциями этилацетата (1 л каждая). Этилацетатные слои отбрасывали. pH водной фазы корректировали путем добавления холодного 2 н. гидроксида натрия (500 мл) и гранул гидроксида натрия. В процессе этой нейтрализации раствор поддерживали при низкой температуре путем добавления холодного этилацетата (1 л). После того как pH водной фазы достигала приблизительно 7, образовалось большое количество белого твердого или маслянистого осадка. Этот осадок собирали с помощью вакуумной фильтрации или декантации и последовательно промывали полунасыщенным карбонатом натрия (2 x 1500 мл), водной (6 x 1500 мл) и этилацетатом (3 x 1500 мл). Полученный продукт осушали в высоком вакууме до получения постоянного веса. Этот продукт может сразу гидролизован без дополнительной очистки.
Nα- Бензилоксикарбонил -D-аланил-β- нафтил-D-аланин. 26.
Водный гидроксид натрия (192 мл, 0,08 г/мл раствора 0,38 М) добавляли к раствору дипептида 25 (около 0,38 М), воды (360 мл) и MeOH (около 6 л). Раствор размешивали при комнатной температуре до тех пор, пока не завершится гидролиз (около 24 часов). Исчезновение исходного пептида устанавливали с помощью ВЭЖХ-анализа. Раствор концентрировали в вакууме, в результате чего получали остаток, который растворяли в воде (около 1 л). Водный слой (pH ок. 10) затем экстрагировали этилацетатом (2 x 500 мл) в разделительной воронке. Этилацетатные слои отбрасывали. pH полученной водной фазы доводили примерно до 5 путем добавления концентрированной HCl; при этом, в момент добавления образовывался белый твердый или маслянистый осадок. Этот осадок собирали и осушали в вакууме.
Метиловый эфир Nα- Бензилоксикарбонил-D-аланил-D-бета- нафтил-аланил-аланин. 20.
Дипептид Nα- бензилоксикарбонил-D-аланил-D-бета-нафтил-аланин (26, 0,253 М) добавляли к раствору HONSu (23, 0,505 М) в ДМФ (800 мл) в атмосфере аргона. К полученному раствору добавляли смесь гидрохлорида метилового сложного эфира аланина (15, 0,303 М) N-метилморфолина (16, 0,303 М) и ДМФ (200 мл). Полученный раствор охлаждали до 10oC и во время охлаждения добавляли дициклогексилкарбодиимид (24, 0,265 М) в метиленхлориде (27% мл). За ходом реакции следили с помощью ВЭЖХ, причем температуру реакции поддерживали при 10oC до тех пор, пока реакция не завершится. Если через несколько дней (ок. 4) реакция не завершилась, то добавляли еще некоторое количество 24 (0,080 М), и реакционную смесь оставляли еще на день при 10oC и при размешивании. При этом реакцию снова контролировали с помощью ВЭЖХ-анализа до тех пор, пока она не завершится (обычно, около 5 дней). Твердые вещества, образованные в процессе реакции, собирали путем вакуумной фильтрации. Затем фильтрат концентрировали в вакууме. Полученный остаток растворяли в этилацетате и экстрагировали полунасыщенным водным Na2CO3 (2 x 500 мл). Этилацетатную фазу осушали сульфатом магния. Полученный раствор осветляли и концентрировали в вакууме.
2 н. водный раствор гидроксида натрия (7,5 мл, 15 мМ) добавляли к метанолу (500 мл) и водному раствору (200 мл), содержащему Nα- Бензилоксикарбонил-DAla -DβNal-Ala-OMe (13,7 мМ). Реакцию размешивали в течение ночи при комнатной температуре, после чего проводили ВЭЖХ-анализ, который позволял определить количество оставшегося исходного материала. Если реакция была, в основном, завершена (напр., в течение ночи), то полученный раствор концентрировали в вакууме примерно до объема в 200 мл. Затем добавляли воду (100 мл), и посредством добавления 2 н. гидроксида натрия (1 мл) доводили pH приблизительно до 12. Полученный раствор экстрагировали этилацетатом (2 x 500 мл). Этилацетатные слои отбрасывали. После этого pH водной фазы доводили примерно до 5 путем добавления водного раствора HCl, в процессе которого образовывался осадок продукта. Для стимулирования этого осаждения очень важно минимизировать объем водной фазы. Водную фазу декантировали, а продукт промывали водой (2 x 50 мл). Выделенный продукт осушали в вакууме до получения постоянного веса.
C. Реакция конденсации пептидных фрагментов с образованием гексапептида
Два пептида DAla-DβNal-Ala-OH (33, 2,6 мМ) и Trp-D-Phe-Lys (Boc) - NH2 (13, 2,8 мМ) растворяли в безводном ДМФ, и полученный раствор концентрировали в вакууме. Это предварительное концентрирование осуществляли в целях удаления любых присутствующих следовых количеств метанола. Полученную пептидную смесь снова растворяли в ДМФ, а затем добавляли N-гидроксисукцинимид (5,1 мМ). После этого полученный раствор охлаждали до температуры -2oC и добавляли раствор дициклогексилкарбодиимида (3,4 М) в метиленхлориде (3,5 мл). Реакционную смесь оставляли размешиваться при -2oC в течение трех дней. Для определения факта завершения реакции использовали ВЭЖХ-анализ. Если по истечении указанного времени реакция не была завершена, то добавляли дополнительное количество дициклогексилкарбодиимида, а реакционную смесь оставляли при размешивании еще на один день (при -2oC). Если и на следующий день (всего четыре дня) реакция не была завершена (на что указывал ВЭЖХ-анализ), то реакцию завершали путем охлаждения реакционной смеси. Температуру реакционного раствора медленно повышали до комнатной температуры (25oC) в течение нескольких часов (около 8 часов). Полученную реакционную смесь оставляли на ночь при комнатной температуре для размешивания. Эту процедуру повторяли до тех пор, пока реакция не завершится. Затем добавляли воду (50 мл) и полученную смесь оставляли для размешивания еще на один день. Затем реакционный раствор фильтровали для удаления дициклогексилмочевины и полученный фильтрат концентрировали в вакууме, в результате чего получали вязкий маслообразный остаток. К тому остатку добавляли этилацетат и полунасыщенный водный раствор карбоната натрия (200 мл). Двухфазную смесь энергично размешивали на роторном испарителе в течение примерно одного часа. Образовавшиеся твердые вещества собирали путем фильтрации на воронке из спеченного стекла. Органическую фазу промывали водой, а затем осушали в вакууме до получения продукта с постоянным весом.
Два пептида DAla-DβNal-Ala-OH (33, 2,6 мМ) и Trp-D-Phe-Lys (Boc) - NH2 (13, 2,8 мМ) растворяли в безводном ДМФ, и полученный раствор концентрировали в вакууме. Это предварительное концентрирование осуществляли в целях удаления любых присутствующих следовых количеств метанола. Полученную пептидную смесь снова растворяли в ДМФ, а затем добавляли N-гидроксисукцинимид (5,1 мМ). После этого полученный раствор охлаждали до температуры -2oC и добавляли раствор дициклогексилкарбодиимида (3,4 М) в метиленхлориде (3,5 мл). Реакционную смесь оставляли размешиваться при -2oC в течение трех дней. Для определения факта завершения реакции использовали ВЭЖХ-анализ. Если по истечении указанного времени реакция не была завершена, то добавляли дополнительное количество дициклогексилкарбодиимида, а реакционную смесь оставляли при размешивании еще на один день (при -2oC). Если и на следующий день (всего четыре дня) реакция не была завершена (на что указывал ВЭЖХ-анализ), то реакцию завершали путем охлаждения реакционной смеси. Температуру реакционного раствора медленно повышали до комнатной температуры (25oC) в течение нескольких часов (около 8 часов). Полученную реакционную смесь оставляли на ночь при комнатной температуре для размешивания. Эту процедуру повторяли до тех пор, пока реакция не завершится. Затем добавляли воду (50 мл) и полученную смесь оставляли для размешивания еще на один день. Затем реакционный раствор фильтровали для удаления дициклогексилмочевины и полученный фильтрат концентрировали в вакууме, в результате чего получали вязкий маслообразный остаток. К тому остатку добавляли этилацетат и полунасыщенный водный раствор карбоната натрия (200 мл). Двухфазную смесь энергично размешивали на роторном испарителе в течение примерно одного часа. Образовавшиеся твердые вещества собирали путем фильтрации на воронке из спеченного стекла. Органическую фазу промывали водой, а затем осушали в вакууме до получения продукта с постоянным весом.
DAla-_D-βNal- Ala-Trp-D-Phe-Lys-NH2, 35
Гексапептид бензилоксикарбонил-DAla _D-βNal- Ala-Trp-D-Phe-Lys (Boc) - NH2 (34, 1,02 мМ) добавляли при комнатной температуре к раствору трифтороуксусной кислоты (30 мл), диметилсульфида (14 мл) 1,2-этандитиола (7 мл) и анизола (2,2 мл) в метиленхлориде (15 мл). Гомогенную реакционную смесь оставляли для размешивания на 15 минут. По истечении этого времени к образовавшемуся осадку биологически активного пептидного продукта 35 добавляли безводный простой эфир (450 мл) Этот продукт выделяли путем фильтрации на воронке из спеченного стекла или путем декантации. Полученный продукт растворяли в воде и лиофилизовали. Лиофилизованный продукт может быть затем очищен с помощью хроматографии среднего давления на стеклянной колонке (26 x 460 мм), содержащей (материал для упаковки колонок, С-18, 25-40 нм, иррегулярное сито). После введения пептида в виде водного раствора колонку элюировали (со скоростью потока 9 мл/мин) пологим градиентом (0-25%) метанола в течение 5-20 часов, а затем градиентом метанола 25-55% в течение около 48 часов. Затем концентрацию метанола в градиенте повышали со скоростью 2% в час. В процессе элюирования остаточный растворитель состоял из воды, содержащей 0,2% трифторуксусной кислоты. Полученный продукт (35) идентифицировали с помощью ВЭЖХ и выделяли путем концентрирования соответствующих элюирующих объемов.
Гексапептид бензилоксикарбонил-DAla _D-βNal- Ala-Trp-D-Phe-Lys (Boc) - NH2 (34, 1,02 мМ) добавляли при комнатной температуре к раствору трифтороуксусной кислоты (30 мл), диметилсульфида (14 мл) 1,2-этандитиола (7 мл) и анизола (2,2 мл) в метиленхлориде (15 мл). Гомогенную реакционную смесь оставляли для размешивания на 15 минут. По истечении этого времени к образовавшемуся осадку биологически активного пептидного продукта 35 добавляли безводный простой эфир (450 мл) Этот продукт выделяли путем фильтрации на воронке из спеченного стекла или путем декантации. Полученный продукт растворяли в воде и лиофилизовали. Лиофилизованный продукт может быть затем очищен с помощью хроматографии среднего давления на стеклянной колонке (26 x 460 мм), содержащей (материал для упаковки колонок, С-18, 25-40 нм, иррегулярное сито). После введения пептида в виде водного раствора колонку элюировали (со скоростью потока 9 мл/мин) пологим градиентом (0-25%) метанола в течение 5-20 часов, а затем градиентом метанола 25-55% в течение около 48 часов. Затем концентрацию метанола в градиенте повышали со скоростью 2% в час. В процессе элюирования остаточный растворитель состоял из воды, содержащей 0,2% трифторуксусной кислоты. Полученный продукт (35) идентифицировали с помощью ВЭЖХ и выделяли путем концентрирования соответствующих элюирующих объемов.
Проиллюстрированные выше варианты осуществления настоящего изобретения следует рассматривать как предпочтительные. Однако необходимо иметь в виду, что в настоящее изобретение могут быть внесены различные изменения и модификации, не выходящие за рамки нижеприведенной формулы изобретения.
Пример рецептуры 1 (Лиофилизированная форма) (на ампулу)
Компоненты - Количество
Активный полипептид - 25 - 1000 мкг
D-Маннит - 25 мг
Лиофилизацию проводили после растворения компонентов, указанных выше, в воде для инъекции, замораживанием в течение одного часа и последующей сушкой в сублимационном осушителе в течение от 1-3 суток.
Компоненты - Количество
Активный полипептид - 25 - 1000 мкг
D-Маннит - 25 мг
Лиофилизацию проводили после растворения компонентов, указанных выше, в воде для инъекции, замораживанием в течение одного часа и последующей сушкой в сублимационном осушителе в течение от 1-3 суток.
Пример рецептуры 2 (Порошок).
(на 1 г порошка)
Компоненты - Количества
Активный полипептид - 2,5 - 40 мг
D-Маннит - Соответствующее количество
Гидроксипропилцеллюлоза - 6 мг
Всего - 1000 мг
Взвешивают активный полипептид и D-Маннит и смешивают. К порошковой смеси добавляют раствор, состоящий из гидроксипропилцеллюлозы и изопропанола, помещают в месильную машину, а затем сушат в лотковой сушилке. Высушенный порошок просеивают и получают готовый порошкообразный полипептид.
Компоненты - Количества
Активный полипептид - 2,5 - 40 мг
D-Маннит - Соответствующее количество
Гидроксипропилцеллюлоза - 6 мг
Всего - 1000 мг
Взвешивают активный полипептид и D-Маннит и смешивают. К порошковой смеси добавляют раствор, состоящий из гидроксипропилцеллюлозы и изопропанола, помещают в месильную машину, а затем сушат в лотковой сушилке. Высушенный порошок просеивают и получают готовый порошкообразный полипептид.
Claims (17)
1. Пептид формулы I
A1-A2-C1-C2-C3-A5, I
где A1 - представляет собой Gly, β-Ala, DАla, His, Ser, Met, Pro, Sar, Ava, Aib, N-(низший алкил)-аминокарбоновую кислоту, N,N-бис-(низший алкил)-аминокарбоновую кислоту, азолкарбоновую кислоту, или (низший алкил)аминокарбоновую кислоту, где низшая алкильная группа является прямой цепью, имеющей от 2 до около 10 атомов углерода;
A2 представляет собой DTrp, DβNal;
А5 представляет собой A3-A4-A5', A3-A5', A4-A5', или A5', где
(а) А3 является Ala, Gly, DAla, Pro или des Ala;
(b) А4 является Ala, Gly, DAla, Pro, (линейный низший алкил) аминокарбоновой кислотой, или des Ala;
(с) А5 представляет собой Lys (ε-R1, R2)-Z, Orn(δ-R1→ R2)-L, NH(CH2)XN(R3, R4), и, если А1 не является His, то А5 может быть также Lys-Z, Orn-Z, или Arg-Z, где R1 представляет собой линейную низшую алкильную группу или атом Н, R2 представляет собой низшую алкильную группу или атом Н, но, если R1 является Н, то R2 не является Н, а, если R2 является Н, то R1 не является Н, R3 представляет собой линейную низшую алкильную группу или атом Н; R4 представляет собой линейную низшую алкильную группу или атом Н; Z представляет собой N4 (линейную низшую алкильную группу), N (линейную низшую алкильную группу)2, О-(линейную С1-С3алкильную группу), NH2 или ОН, где линейная низшая алкильная группа является такой, как она определена выше, Х представляет собой число от 2 до 15,
C1 представляет собой Ala,
С2 представляет собой Trp, Phe или ChxAla,
С3 представляет собой DРhe, DРal или DchxAla,
или органические или неорганические аддитивные соли указанного пептида.
A1-A2-C1-C2-C3-A5, I
где A1 - представляет собой Gly, β-Ala, DАla, His, Ser, Met, Pro, Sar, Ava, Aib, N-(низший алкил)-аминокарбоновую кислоту, N,N-бис-(низший алкил)-аминокарбоновую кислоту, азолкарбоновую кислоту, или (низший алкил)аминокарбоновую кислоту, где низшая алкильная группа является прямой цепью, имеющей от 2 до около 10 атомов углерода;
A2 представляет собой DTrp, DβNal;
А5 представляет собой A3-A4-A5', A3-A5', A4-A5', или A5', где
(а) А3 является Ala, Gly, DAla, Pro или des Ala;
(b) А4 является Ala, Gly, DAla, Pro, (линейный низший алкил) аминокарбоновой кислотой, или des Ala;
(с) А5 представляет собой Lys (ε-R1, R2)-Z, Orn(δ-R1→ R2)-L, NH(CH2)XN(R3, R4), и, если А1 не является His, то А5 может быть также Lys-Z, Orn-Z, или Arg-Z, где R1 представляет собой линейную низшую алкильную группу или атом Н, R2 представляет собой низшую алкильную группу или атом Н, но, если R1 является Н, то R2 не является Н, а, если R2 является Н, то R1 не является Н, R3 представляет собой линейную низшую алкильную группу или атом Н; R4 представляет собой линейную низшую алкильную группу или атом Н; Z представляет собой N4 (линейную низшую алкильную группу), N (линейную низшую алкильную группу)2, О-(линейную С1-С3алкильную группу), NH2 или ОН, где линейная низшая алкильная группа является такой, как она определена выше, Х представляет собой число от 2 до 15,
C1 представляет собой Ala,
С2 представляет собой Trp, Phe или ChxAla,
С3 представляет собой DРhe, DРal или DchxAla,
или органические или неорганические аддитивные соли указанного пептида.
2. Пептид по п.1, где А1 представляет собой Gly, DAla или His.
3. Пептид по п.1, где А1 представляет собой DAla.
4. Пептид по п.1, где А2 представляет собой DTrp или DβNal.
5. Пептид по п.1, где А2 представляет собой DβNal.
6. Пептид по п.1, где А5 представляет собой А3-А4-А5'.
5. Пептид по п.1, где А2 представляет собой DβNal.
6. Пептид по п.1, где А5 представляет собой А3-А4-А5'.
7. Пептид по п.1, где А5 представляет собой А3-А5'.
8. Пептид по п.1, где А5 представляет собой А4-А5'.
9. Пептид по пп.1, 2, 3, 4 или 5, где А5 представляет собой А5'.
10. Пептиды по пп.1, 2, 3, 4 или 5, где C2 представляет собой Trp или Phe.
11. Пептиды по пп. 1, 2, 3, 4, 5, 9 или 10, где С3 представляет собой DPhe.
12. Пептиды по п.10, где С2 представляет собой Trp.
13. Пептиды по п.12, гле С3 представляет собой DРhe.
14. Пептид по п. 1, имеющий формулы: DAla-DβNal-Ala-Trp-DРhe-LysNH2, DAla-DβNal-Ala-Trp-DРhe-Lys(ε-iPr)NH DAla-DTrp-Ala-Trp-DРhe-Lys(ε-iPr)NH2, DAla-DTrp-Ala-Trp-DРhe-LysNH2, DAla-DβNal-Ala-Trp-DРhe-NH(CH2)5NH2, NH2(CH2)5CО-Dβ-Nal-Ala-Trp-DРhe-NH(CH2)5NH2, N2IMA-DβNal-Ala-Phe-DPhe-LysNH2, α,γABL-DβNal-Ala-Phe-DРhe-LysNH2, DAla-DРhe-Ala-Phe-DРhe-LysNH2, βAla-His-DβNal-Ala-Phe-DРhe-LysNH2, N2IMA-DβNal-Ala-Phe-DРhe-NH-CHX-NH2, α,γABU-DβNal--Ala-Phe-DРhe-NH-CHXNH2, DAla-DβNal-Ala-Phe-DРhe-LysNH2, DAla-DβNal-Ala-Trp-DРhe-ArgNH2, DAla-DβNal-Ala-Phe-DРhe-Arg-NH2, DAla-DβNal-Ala-chxAla-DРhe-LysNH2, DAla-DβNal-Ala-Рhe-DChxAla-LysNH2 или DAla-DβNal-Ala-ChxAla-DChxAlaLysNH2
или их органические или неорганические аддитивные соли.
или их органические или неорганические аддитивные соли.
15. Способ стимулирования высвобождения гормона роста у животных и увеличения его содержания в крови путем введения активного вещества, отличающийся тем, что указанному животному вводят один из пептидов по пп.1, 9 - 12 или 14 в количестве 0,1 - 1200 мкг/кг веса.
16. Фармацевтическая композиция, стимулирующая высвобождение гормона роста, включающая активный ингредиент и фармацевтически приемлемый носитель, отличающаяся тем, что в качестве активного вещества содержит соединение по п.1 в количестве 0,1-1200 мкг/кг веса.
17. Фармацевтическая композиция по п.16, отличающаяся тем, что фармацевтически приемлемый носитель представляет собой изотенический раствор.
18. Способ стимулирования высвобождения гормона роста и увеличения его содержания в крови путем введения активного вещества, отличающийся тем, что вводят пептид по п.1 вместе с природным фактором высвобождения гормона роста и его функциональными эквивалентами или с соединением, которое стимулирует высвобождение гормона роста.
19. Способ получения соединений формулы I по п.1, отличающийся тем, что осуществляют твердофазный синтез указанных пептидов путем присоединения аминокислот или производных аминокислот, входящих в состав этих пептидов.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US07/748,350 US5663146A (en) | 1991-08-22 | 1991-08-22 | Polypeptide analogues having growth hormone releasing activity |
US748350 | 1991-08-22 | ||
PCT/US1992/007026 WO1993004081A1 (en) | 1991-08-22 | 1992-08-20 | Peptides having growth hormone releasing activity |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU94016393A RU94016393A (ru) | 1995-09-10 |
RU2126014C1 true RU2126014C1 (ru) | 1999-02-10 |
Family
ID=25009088
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU94016393A RU2126014C1 (ru) | 1991-08-22 | 1992-08-20 | Пептид или его органические или неорганические соли, способ получения, фармацевтическая композиция, способы стимулирования высвобождения гормона роста и увеличения его содержания в крови |
Country Status (26)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US5663146A (ru) |
EP (1) | EP0605484B1 (ru) |
JP (1) | JP3179489B2 (ru) |
KR (1) | KR100247212B1 (ru) |
CN (1) | CN1035256C (ru) |
AT (1) | ATE172742T1 (ru) |
AU (1) | AU666673B2 (ru) |
BG (1) | BG62655B1 (ru) |
BR (2) | BR9206398A (ru) |
CA (1) | CA2116120C (ru) |
CZ (1) | CZ293281B6 (ru) |
DE (1) | DE69227462T2 (ru) |
DK (1) | DK0605484T3 (ru) |
ES (1) | ES2124263T3 (ru) |
FI (2) | FI120095B (ru) |
HU (1) | HU223664B1 (ru) |
IL (1) | IL102848A (ru) |
MX (1) | MX9204861A (ru) |
NO (1) | NO314695B1 (ru) |
NZ (1) | NZ244034A (ru) |
PL (1) | PL169562B1 (ru) |
RO (1) | RO112507B1 (ru) |
RU (1) | RU2126014C1 (ru) |
SK (1) | SK282895B6 (ru) |
WO (1) | WO1993004081A1 (ru) |
ZA (1) | ZA926337B (ru) |
Families Citing this family (105)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1994026723A2 (en) | 1993-05-14 | 1994-11-24 | Genentech, Inc. | ras FARNESYL TRANSFERASE INHIBITORS |
DE69427650T2 (de) * | 1993-12-23 | 2001-11-22 | Novo Nordisk A/S, Bagsvaerd | Verbindungen mit wachstumshormon-freisetzenden eigenschaften |
SK281963B6 (sk) * | 1993-12-23 | 2001-09-11 | Novo Nordisk A/S | Zlúčeniny ovplyvňujúce uvoľňovanie rastového hormónu, farmaceutické prostriedky s ich obsahom a ich použitie |
US20020111461A1 (en) * | 1999-05-21 | 2002-08-15 | Todd C. Somers | Low molecular weight peptidomimetic growth hormone secretagogues |
US5798337A (en) * | 1994-11-16 | 1998-08-25 | Genentech, Inc. | Low molecular weight peptidomimetic growth hormone secretagogues |
PL186520B1 (pl) * | 1995-06-22 | 2004-01-30 | Novo Nordisk As | Związk o właściwościach uwalniania hormonu wzrostu, kompozycja farmaceutyczna zawierająca ten związek i jego zastosowanie |
AU722421B2 (en) * | 1996-04-24 | 2000-08-03 | Novo Nordisk A/S | Compounds with growth hormone releasing properties |
US6127341A (en) * | 1997-06-20 | 2000-10-03 | Novo Nordisk A/S | Compounds with growth hormone releasing properties |
JP4116097B2 (ja) | 1997-06-20 | 2008-07-09 | ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ | 成長ホルモン放出特性をもつ化合物 |
US6329342B1 (en) | 1997-08-19 | 2001-12-11 | Eli Lilly And Company | Treatment of congestive heart failure with growth hormone secretagogues |
ZA987383B (en) * | 1997-08-19 | 2000-02-17 | Lilly Co Eli | Treatment of congestive heart failure with growth hormone secretagogues. |
EP1047709B1 (en) | 1998-01-16 | 2004-11-03 | Novo Nordisk A/S | Compounds with growth hormone releasing properties |
WO1999039730A1 (fr) * | 1998-02-09 | 1999-08-12 | Kaken Pharmaceutical Co., Ltd. | Preparation a administration orale contenant des peptides favorisant la secretion d'hormone de croissance |
US6919315B1 (en) | 1998-06-30 | 2005-07-19 | Novo Nordisk A/S | Compounds with growth hormone releasing properties |
US6682908B1 (en) | 1998-07-10 | 2004-01-27 | Merck & Co., Inc. | Mouse growth hormone secretagogue receptor |
WO2000002919A1 (en) | 1998-07-13 | 2000-01-20 | Merck & Co., Inc. | Growth hormone secretagogue related receptors and nucleic acids |
US6645726B1 (en) | 1998-08-10 | 2003-11-11 | Merck & Co., Inc. | Canine growth hormone secretagogue receptor |
WO2000009537A2 (en) * | 1998-08-14 | 2000-02-24 | Administrators Of The Tulane Educational Fund | Compounds having growth hormone releasing activity |
US6639076B1 (en) | 1998-08-18 | 2003-10-28 | Eli Lilly And Company | Growth hormone secretagogues |
US6696063B1 (en) * | 1998-12-30 | 2004-02-24 | Applied Research Systems Ars Holding N.V. | Treatment of HIV-associated dysmorphia/dysmetabolic syndrome (HADDS) with or without lipodystrophy |
WO2000048623A1 (en) * | 1999-02-18 | 2000-08-24 | Kaken Pharmaceutical Co., Ltd. | Novel amide derivatives as growth hormone secretagogues |
US7022677B1 (en) | 1999-02-18 | 2006-04-04 | Kaken Pharmaceutical Co., Ltd. | Amide derivatives as growth hormone secretagogues |
US6828331B1 (en) * | 1999-02-19 | 2004-12-07 | Eli Lilly And Company | Growth hormone secretagogues |
AU772752B2 (en) * | 1999-07-26 | 2004-05-06 | Baylor College Of Medicine | Super-active porcine growth hormone releasing hormone analog |
US20040192593A1 (en) * | 1999-07-26 | 2004-09-30 | Baylor College Of Medicine | Protease resistant ti-growth hormone releasing hormone |
AU7685200A (en) * | 1999-10-12 | 2001-04-23 | Kaken Pharmaceutical Co., Ltd. | Powdery inhalational preparations and process for producing the same |
UA73530C2 (ru) | 1999-11-10 | 2005-08-15 | Ново Нордіск А/С | Соединение со свойствами освобождения гормона роста |
JP3498041B2 (ja) * | 2000-05-29 | 2004-02-16 | 科研製薬株式会社 | プラルモレリン含有点鼻用製剤 |
DE60140285D1 (de) | 2000-05-31 | 2009-12-10 | Pfizer Prod Inc | Verwendung von Wachstumshormonsekretagoga zur Förderung der Beweglichkeit des Verdauungstrakts |
US7645898B2 (en) | 2000-08-24 | 2010-01-12 | University Of Tennessee Research Foundation | Selective androgen receptor modulators and method of use thereof |
US7919647B2 (en) | 2000-08-24 | 2011-04-05 | University Of Tennessee Research Foundation | Selective androgen receptor modulators and methods of use thereof |
US7622503B2 (en) | 2000-08-24 | 2009-11-24 | University Of Tennessee Research Foundation | Selective androgen receptor modulators and methods of use thereof |
US7855229B2 (en) | 2000-08-24 | 2010-12-21 | University Of Tennessee Research Foundation | Treating wasting disorders with selective androgen receptor modulators |
EP1355941A2 (en) | 2001-02-02 | 2003-10-29 | ConjuChem, Inc. | Long lasting growth hormone releasing factor derivatives |
US7125840B2 (en) * | 2001-10-09 | 2006-10-24 | Eli Lilly And Company | Substituted dipeptides as growth hormone secretagogues |
WO2003038112A2 (en) | 2001-10-26 | 2003-05-08 | Baylor College Of Medicine | A composition and method to alter lean body mass and bone properties in a subject |
US8853266B2 (en) | 2001-12-06 | 2014-10-07 | University Of Tennessee Research Foundation | Selective androgen receptor modulators for treating diabetes |
US6831102B2 (en) | 2001-12-07 | 2004-12-14 | Bristol-Myers Squibb Company | Phenyl naphthol ligands for thyroid hormone receptor |
AR037778A1 (es) | 2001-12-11 | 2004-12-01 | Advisys Inc | Suplementacion mediada por plasmido para el tratamiento de sujetos cronicamente enfermos |
US7015219B2 (en) | 2001-12-19 | 2006-03-21 | Bristol-Myers Squibb Company | 3-aryl-hydroxybenzoxazines and 3, 4-dihydro-3-aryl-hydroxybenzoxazines as selective estrogen receptor beta modulators |
MXPA04007638A (es) * | 2002-02-07 | 2004-12-06 | Baylor College Medicine | Desarrollo modificado de la glandula pituitaria en productos de madres animales prenadas, tratadas con terapia de hormona liberadora de hormona del crecimiento. |
US7772433B2 (en) | 2002-02-28 | 2010-08-10 | University Of Tennessee Research Foundation | SARMS and method of use thereof |
US7381730B2 (en) | 2002-03-15 | 2008-06-03 | Bristol-Myers Squibb Company | 3-arylquinazoline derivatives as selective estrogen receptor beta modulators |
US20060167268A1 (en) * | 2002-04-09 | 2006-07-27 | Eli Lilly And Company, Patent Division, | Growth hormone secretagogues |
ES2271557T3 (es) * | 2002-04-09 | 2007-04-16 | Eli Lilly And Company | Secretagogos dipeptidicos de la hormona del crecimiento. |
US6747048B2 (en) | 2002-05-08 | 2004-06-08 | Bristol-Myers Squibb Company | Pyridine-based thyroid receptor ligands |
US7405234B2 (en) | 2002-05-17 | 2008-07-29 | Bristol-Myers Squibb Company | Bicyclic modulators of androgen receptor function |
US7785567B2 (en) | 2002-08-23 | 2010-08-31 | Valorisation-Recherche, Société en Commandite | Growth hormone-releasing peptides in the treatment or prevention of atherosclerosis and hypercholesterolemia |
US7632858B2 (en) | 2002-11-15 | 2009-12-15 | Bristol-Myers Squibb Company | Open chain prolyl urea-related modulators of androgen receptor function |
US8309603B2 (en) | 2004-06-07 | 2012-11-13 | University Of Tennessee Research Foundation | SARMs and method of use thereof |
TW200504021A (en) | 2003-01-24 | 2005-02-01 | Bristol Myers Squibb Co | Substituted anilide ligands for the thyroid receptor |
CA2513743C (en) * | 2003-01-28 | 2013-06-25 | Advisys, Inc. | Reducing culling in herd animals growth hormone releasing hormone (ghrh) |
WO2004069793A2 (en) | 2003-01-28 | 2004-08-19 | Bristol-Myers Squibb Company | Novel 2-substituted cyclic amines as calcium sensing receptor modulators |
US7205322B2 (en) | 2003-02-12 | 2007-04-17 | Bristol-Myers Squibb Company | Thiazolidine compounds as calcium sensing receptor modulators |
US7557143B2 (en) | 2003-04-18 | 2009-07-07 | Bristol-Myers Squibb Company | Thyroid receptor ligands |
TW200424214A (en) * | 2003-04-21 | 2004-11-16 | Advisys Inc | Plasmid mediated GHRH supplementation for renal failures |
US7459460B2 (en) | 2003-05-28 | 2008-12-02 | Bristol-Myers Squibb Company | Trisubstituted heteroaromatic compounds as calcium sensing receptor modulators |
US7265145B2 (en) | 2003-05-28 | 2007-09-04 | Bristol-Myers Squibb Company | Substituted piperidines and pyrrolidines as calcium sensing receptor modulators and method |
US7476653B2 (en) | 2003-06-18 | 2009-01-13 | Tranzyme Pharma, Inc. | Macrocyclic modulators of the ghrelin receptor |
EP1660530A2 (en) * | 2003-08-04 | 2006-05-31 | Advisys, Inc. | Canine specific growth hormone releasing hormone |
US7399826B1 (en) | 2003-10-02 | 2008-07-15 | Ali Sadat M | Peptide for promoting healing of fractures |
WO2005065722A2 (en) | 2003-12-31 | 2005-07-21 | Advisys, Inc. | Reducing arthritis and lameness in subjects by growth hormone releasing hormone (ghrh) supplementation |
DE602005027661D1 (de) * | 2004-01-20 | 2011-06-09 | VGX Pharmaceuticals LLC | Isetzendem hormon (ghrh) aus muskelzellen durch speziesspezifisches signalpeptid |
US20050164952A1 (en) * | 2004-01-23 | 2005-07-28 | Vital Pharmaceuticals, Inc. | Delivery system for growth hormone releasing peptides |
US7820702B2 (en) | 2004-02-04 | 2010-10-26 | Bristol-Myers Squibb Company | Sulfonylpyrrolidine modulators of androgen receptor function and method |
US7378426B2 (en) | 2004-03-01 | 2008-05-27 | Bristol-Myers Squibb Company | Fused heterotricyclic compounds as inhibitors of 17β-hydroxysteroid dehydrogenase 3 |
US7625923B2 (en) | 2004-03-04 | 2009-12-01 | Bristol-Myers Squibb Company | Bicyclic modulators of androgen receptor function |
US7696241B2 (en) | 2004-03-04 | 2010-04-13 | Bristol-Myers Squibb Company | Bicyclic compounds as modulators of androgen receptor function and method |
US9884038B2 (en) | 2004-06-07 | 2018-02-06 | University Of Tennessee Research Foundation | Selective androgen receptor modulator and methods of use thereof |
US9889110B2 (en) | 2004-06-07 | 2018-02-13 | University Of Tennessee Research Foundation | Selective androgen receptor modulator for treating hormone-related conditions |
MX2007000893A (es) * | 2004-07-23 | 2007-04-18 | Advisys Inc | La hormona liberadora de hormona de crecimiento mejora la respuesta inmune inducida por la vacunacion. |
CA2576915A1 (en) | 2004-08-18 | 2006-03-02 | Elixir Pharmaceuticals, Inc. | Growth-hormone secretagogues |
US7456188B1 (en) | 2005-04-28 | 2008-11-25 | Bristol-Myers Squibb Company | C-5 substituted quinazolinone derivatives as selective estrogen receptor beta modulators |
EA200800710A1 (ru) | 2005-08-31 | 2008-06-30 | Юниверсити Оф Теннесси Рисерч Фаундейшн | Лечение почечной недостаточности, ожогов, ран и повреждений спинного мозга селективными модуляторами андрогенового рецептора |
CU23558A1 (es) | 2006-02-28 | 2010-07-20 | Ct Ingenieria Genetica Biotech | Compuestos análogos a los secretagogos peptidicos de la hormona de crecimiento |
US8058253B2 (en) * | 2006-07-06 | 2011-11-15 | Vgx Pharmaceuticals, Inc. | Growth hormone releasing hormone treatment to decrease cholesterol levels |
PL2038252T3 (pl) | 2006-07-12 | 2017-03-31 | University Of Tennessee Research Foundation | Podstawione acyloanilidy i sposoby ich zastosowania |
RS54542B1 (en) | 2006-08-02 | 2016-06-30 | Cytokinetics, Inc. | CERTAIN CHEMICAL ENTITIES, COMPOSITIONS AND METHODS INCLUDING IMIDAZOPYRIMIDINE |
US8299248B2 (en) | 2006-08-02 | 2012-10-30 | Cytokinetics, Incorporated | Certain 1H-imidazo[4,5-b]pyrazin-2(3H)-ones and 1H-imidazo[4,5-b]pyrazin-2-ols and methods for their use |
EA016853B1 (ru) | 2006-08-24 | 2012-08-30 | Юниверсити Оф Теннесси Рисерч Фаундейшн | Замещенные ациланилиды и их применение |
US9844528B2 (en) | 2006-08-24 | 2017-12-19 | University Of Tennessee Research Foundation | SARMs and method of use thereof |
US10010521B2 (en) | 2006-08-24 | 2018-07-03 | University Of Tennessee Research Foundation | SARMs and method of use thereof |
US9730908B2 (en) | 2006-08-24 | 2017-08-15 | University Of Tennessee Research Foundation | SARMs and method of use thereof |
EA200901077A1 (ru) | 2007-02-09 | 2010-04-30 | Транзим Фарма, Инк. | Макроциклические модуляторы грелинового рецептора и их применение |
EP2155769B1 (en) | 2007-05-04 | 2012-06-27 | Katholieke Universiteit Leuven KU Leuven Research & Development | Tissue degeneration protection |
US7968603B2 (en) | 2007-09-11 | 2011-06-28 | University Of Tennessee Research Foundation | Solid forms of selective androgen receptor modulators |
US8003689B2 (en) | 2008-06-20 | 2011-08-23 | Gtx, Inc. | Metabolites of selective androgen receptor modulators and methods of use thereof |
AR081626A1 (es) | 2010-04-23 | 2012-10-10 | Cytokinetics Inc | Compuestos amino-piridazinicos, composiciones farmaceuticas que los contienen y uso de los mismos para tratar trastornos musculares cardiacos y esqueleticos |
AR081331A1 (es) | 2010-04-23 | 2012-08-08 | Cytokinetics Inc | Amino- pirimidinas composiciones de las mismas y metodos para el uso de los mismos |
US9133123B2 (en) | 2010-04-23 | 2015-09-15 | Cytokinetics, Inc. | Certain amino-pyridines and amino-triazines, compositions thereof, and methods for their use |
WO2013190520A2 (en) | 2012-06-22 | 2013-12-27 | The General Hospital Corporation | Gh-releasing agents in the treatment of vascular stenosis and associated conditions |
US9744149B2 (en) | 2012-07-13 | 2017-08-29 | Gtx, Inc. | Method of treating androgen receptor (AR)-positive breast cancers with selective androgen receptor modulator (SARMs) |
US9969683B2 (en) | 2012-07-13 | 2018-05-15 | Gtx, Inc. | Method of treating estrogen receptor (ER)-positive breast cancers with selective androgen receptor modulator (SARMS) |
US10314807B2 (en) | 2012-07-13 | 2019-06-11 | Gtx, Inc. | Method of treating HER2-positive breast cancers with selective androgen receptor modulators (SARMS) |
EP3733170A1 (en) | 2012-07-13 | 2020-11-04 | Oncternal Therapeutics, Inc. | A method of treating androgen receptor (ar) -positive breast cancers with selective androgen receptor modulator (sarms) |
US10258596B2 (en) | 2012-07-13 | 2019-04-16 | Gtx, Inc. | Method of treating HER2-positive breast cancers with selective androgen receptor modulators (SARMS) |
US9622992B2 (en) | 2012-07-13 | 2017-04-18 | Gtx, Inc. | Method of treating androgen receptor (AR)-positive breast cancers with selective androgen receptor modulator (SARMs) |
US10987334B2 (en) | 2012-07-13 | 2021-04-27 | University Of Tennessee Research Foundation | Method of treating ER mutant expressing breast cancers with selective androgen receptor modulators (SARMs) |
WO2014065341A1 (ja) | 2012-10-24 | 2014-05-01 | 第一三共株式会社 | 筋萎縮性側索硬化症治療剤 |
EP2983694B1 (en) | 2013-04-08 | 2022-06-22 | President and Fellows of Harvard College | Compositions for rejuvenating skeletal muscle stem cells |
US9119832B2 (en) | 2014-02-05 | 2015-09-01 | The Regents Of The University Of California | Methods of treating mild brain injury |
KR20160147007A (ko) | 2014-05-30 | 2016-12-21 | 화이자 인코포레이티드 | 선택적인 안드로겐 수용체 조절제로서의 카보니트릴 유도체 |
US20170121385A1 (en) | 2015-10-28 | 2017-05-04 | Oxeia Biopharmaceuticals, Inc. | Methods of treating neurodegenerative conditions |
KR20220079512A (ko) | 2019-06-27 | 2022-06-13 | 싸이토키네틱스, 인코포레이티드 | 1-(2-((((트랜스)-3-플루오로-1-(3-플루오로피리딘-2-일)시클로부틸)메틸)아미노)피리미딘-5-일)-1h-피르롤-3-카르복사미드의 다형체들 |
WO2023275715A1 (en) | 2021-06-30 | 2023-01-05 | Pfizer Inc. | Metabolites of selective androgen receptor modulators |
Family Cites Families (22)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4228156A (en) * | 1979-03-30 | 1980-10-14 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
US4223021A (en) * | 1979-03-30 | 1980-09-16 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
CA1175810A (en) * | 1979-03-30 | 1984-10-09 | Frank A. Momany | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
US4224316A (en) * | 1979-03-30 | 1980-09-23 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
US4228155A (en) * | 1979-03-30 | 1980-10-14 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
US4223019A (en) * | 1979-03-30 | 1980-09-16 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
US4228158A (en) * | 1979-03-30 | 1980-10-14 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
US4223020A (en) * | 1979-03-30 | 1980-09-16 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
US4228157A (en) * | 1979-03-30 | 1980-10-14 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
US4226857A (en) * | 1979-03-30 | 1980-10-07 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
US4410512A (en) * | 1981-12-28 | 1983-10-18 | Beckman Instruments, Inc. | Combinations having synergistic pituitary growth hormone releasing activity |
US4410513A (en) * | 1981-12-28 | 1983-10-18 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
BR8208035A (pt) * | 1981-12-28 | 1983-11-22 | Beckman Instruments Inc | Peptideos sinteticos tendo atividade liberadora de hormonio do crescimento da pituitaria |
US4880778A (en) * | 1986-05-12 | 1989-11-14 | Eastman Kodak Company | Combinations having synergistic growth hormone releasing activity and methods for use thereof |
US4839344A (en) * | 1987-06-12 | 1989-06-13 | Eastman Kodak Company | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity |
US4880777A (en) * | 1987-09-01 | 1989-11-14 | Eastman Kodak Company | Synthetic peptides having growth hormone releasing activity |
EP0398961B1 (en) * | 1988-01-28 | 1994-11-02 | Polygen Holding Corporation | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity |
EP0400051B1 (en) * | 1988-01-28 | 1995-05-10 | Polygen Holding Corporation | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity |
JPH03504245A (ja) * | 1988-05-11 | 1991-09-19 | ポリゲン ホールディング コーポレイション | 成長ホルモン放出活性を有するポリペプチド化合物類 |
EP0540626A1 (en) | 1990-07-24 | 1993-05-12 | Eastman Chemical Company | Process for synthesizing peptides |
US5486505A (en) * | 1990-07-24 | 1996-01-23 | Polygen Holding Corporation | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity |
IL98910A0 (en) * | 1990-07-24 | 1992-07-15 | Polygen Holding Corp | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity and pharmaceutical compositions containing them |
-
1991
- 1991-08-22 US US07/748,350 patent/US5663146A/en not_active Expired - Lifetime
-
1992
- 1992-08-18 IL IL102848A patent/IL102848A/en not_active IP Right Cessation
- 1992-08-20 RO RO94-00256A patent/RO112507B1/ro unknown
- 1992-08-20 JP JP50458593A patent/JP3179489B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1992-08-20 PL PL92302434A patent/PL169562B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1992-08-20 KR KR1019940700542A patent/KR100247212B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1992-08-20 CZ CZ1994400A patent/CZ293281B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1992-08-20 SK SK204-94A patent/SK282895B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1992-08-20 DK DK92919262T patent/DK0605484T3/da active
- 1992-08-20 DE DE69227462T patent/DE69227462T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1992-08-20 NZ NZ244034A patent/NZ244034A/en not_active IP Right Cessation
- 1992-08-20 WO PCT/US1992/007026 patent/WO1993004081A1/en active Application Filing
- 1992-08-20 ES ES92919262T patent/ES2124263T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1992-08-20 BR BR9206398A patent/BR9206398A/pt not_active Application Discontinuation
- 1992-08-20 US US07/932,494 patent/US5776901A/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-08-20 AT AT92919262T patent/ATE172742T1/de active
- 1992-08-20 CA CA002116120A patent/CA2116120C/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-08-20 HU HU9400495A patent/HU223664B1/hu not_active IP Right Cessation
- 1992-08-20 RU RU94016393A patent/RU2126014C1/ru not_active IP Right Cessation
- 1992-08-20 EP EP92919262A patent/EP0605484B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-08-20 AU AU25416/92A patent/AU666673B2/en not_active Ceased
- 1992-08-21 ZA ZA926337A patent/ZA926337B/xx unknown
- 1992-08-21 MX MX9204861A patent/MX9204861A/es unknown
- 1992-08-22 CN CN92110868A patent/CN1035256C/zh not_active Expired - Fee Related
-
1994
- 1994-02-18 BG BG98489A patent/BG62655B1/bg unknown
- 1994-02-21 NO NO19940592A patent/NO314695B1/no not_active IP Right Cessation
- 1994-02-21 FI FI940807A patent/FI120095B/fi not_active IP Right Cessation
-
1997
- 1997-04-22 BR BR1100309-0A patent/BR1100309A/pt active IP Right Grant
-
2005
- 2005-05-02 FI FI20050467A patent/FI120691B/fi not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2126014C1 (ru) | Пептид или его органические или неорганические соли, способ получения, фармацевтическая композиция, способы стимулирования высвобождения гормона роста и увеличения его содержания в крови | |
US5486505A (en) | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity | |
EP0540676B1 (en) | Peptide compounds having growth hormone releasing activity | |
US7250399B2 (en) | Compounds having growth hormone releasing activity | |
DK171682B1 (da) | Væksthormon-frigørende peptid og pharmaceutisk acceptable salte deraf, sammensætning med indhold deraf samt fremgangsmåde til fremstilling af peptider | |
KR20010101079A (ko) | Igf-ⅰ 및 -ⅱ를 억제하는 gh-rh의 길항 유사체 | |
AU3730789A (en) | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity | |
EP0541654A1 (en) | Bombesin antagonists |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20110821 |