PL186520B1 - Związk o właściwościach uwalniania hormonu wzrostu, kompozycja farmaceutyczna zawierająca ten związek i jego zastosowanie - Google Patents

Związk o właściwościach uwalniania hormonu wzrostu, kompozycja farmaceutyczna zawierająca ten związek i jego zastosowanie

Info

Publication number
PL186520B1
PL186520B1 PL96324200A PL32420096A PL186520B1 PL 186520 B1 PL186520 B1 PL 186520B1 PL 96324200 A PL96324200 A PL 96324200A PL 32420096 A PL32420096 A PL 32420096A PL 186520 B1 PL186520 B1 PL 186520B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
phe
2nal
salt
tfa
growth hormone
Prior art date
Application number
PL96324200A
Other languages
English (en)
Other versions
PL324200A1 (en
Inventor
Nils L. Johansen
Jesper Lau
Kjeld Madsen
Henning Thoegersen
Behrend F. Lundt
Bernd Peschke
Thomas K. Hansen
Birgit S. Hansen
Original Assignee
Novo Nordisk As
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Novo Nordisk As filed Critical Novo Nordisk As
Publication of PL324200A1 publication Critical patent/PL324200A1/xx
Publication of PL186520B1 publication Critical patent/PL186520B1/pl

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K14/00Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575Hormones
    • C07K14/60Growth hormone-releasing factor [GH-RF], i.e. somatoliberin
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/02Drugs for disorders of the urinary system of urine or of the urinary tract, e.g. urine acidifiers
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00Drugs for disorders of the endocrine system
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/06Drugs for disorders of the endocrine system of the anterior pituitary hormones, e.g. TSH, ACTH, FSH, LH, PRL, GH
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07CACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C237/00Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups
    • C07C237/02Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C237/22Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton having nitrogen atoms of amino groups bound to the carbon skeleton of the acid part, further acylated
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K5/00Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K5/00Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06Dipeptides
    • C07K5/06008Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06078Dipeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K5/00Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08Tripeptides
    • C07K5/0802Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0812Tripeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K5/00Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/10Tetrapeptides
    • C07K5/1002Tetrapeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/1005Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/101Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms, e.g. Val, Ile, Leu
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K7/00Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/02Linear peptides containing at least one abnormal peptide link
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

1. Zwiazek wybrany z grupy obejmujacej: (R)-2-((3-Aminometylobenzoilo)-N-Me-D-2Nal-N-Me)-3-fenylo-propanol, lub jego sól z TFA, 3-{(3-Aminometylobenzoilo))N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-l,l-N,N-dimetyloamino-propan, lub jego sól z TFA, (2R)-2-((3-Aminometylobenzoilo)-N-Me-D-2Nal-N-Me)-3-(2-naftylo)propanol, lub jego sól z TFA, (3-Aminometylobenzoilo)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH2 , lub jego sól z TFA, H-Aib-His-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH2, lub jego sól z TFA, (3-Aminometylobenzoilo)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-Lys-NH2 , H-Aib-Ala-D-2Nal-N-Me-D-Phe-Lys-NH2 , lub jego sól z TFA, H-Aib-His-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH2 , lub jego sól z TFA, 2-((3-Aminometylobenzoilo)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-l-morfolinoetan, (3-AminometyIobenzoilo)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH-Me, 3-((3-Metyloaminometylobenzoilo)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-l-N,N-dimetylo-aminopropan, (3-Aminometylobenzoilo)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-N-Me2 , H-Aib-His-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH2 , lub ich farmaceutycznie dopuszczalne sole. 2. Kompozycja farmaceutyczna, znamienna tym, ze jako skladnik aktywny zawiera zwiazek okreslony w za- strz. 1, lub jego farmaceutycznie dopuszczalne sole, oraz farmaceutycznie dopuszczalny nosnik lub rozcienczalnik. 6. Zwiazek okreslony w zastrz. 1, lub jego farmaceutycznie dopuszczalna sól, do zastosowania jako lek. 7. Zastosowanie zwiazku okreslonego w zastrz. 1, lub jego farmaceutycznie dopuszczalnej soli, do wytwarzania leku do pobudzania uwalniania hormonu wzrostu z przysadki mózgowej. 8. Zastosowanie zwiazku okreslonego w zastrz. 1, lub jego farmaceutycznie dopuszczalnej soli, do wytwarzania srodka farmaceutycznego do podawania zwierzetom w celu zwiekszania tempa i stopnia ich wzrostu, zwiekszania pro- dukcji mleka lub welny, lub do leczenia ich dolegliwosci. PL PL PL PL PL PL PL PL

Description

Przedmiotem wynalazku jest związek wybrany z grupy obejmującej:
(R)-2-((3-Aminometylobenzoilo)-N-Me-D-2Nal-N-Me)-3-fenylopropanol, lub jego sól z TFA,
3-((3-Aminometylobenzoilo))N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-l,l-N,N-dimetyloaminopropan, lub jego sól z TFA, (2R)-2-((3-Aminometylobenzoilo)-N-Me-D-2Nal-N-Me)-3-(2-naftylo)propanol, lub jego sól z TFA, (3-Aminometylobenzoilo)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH2, lub jego sól z TFA,
H-Aib-His-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH2, lub jego sól z TFA, (3-Aminometylobenzoilo)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-Lys-NH2,
H-Aib-Ala-D-2Nal-N-Me-D-Phe-Lys-NH2, lub jego sól z TFA,
H-Aib-His-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH2, lub jego sól z TFA,
2- ((3-Aminometylobenzoilo)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-l-morfolinoetan, (3-Aminometylobenzoilo)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH-Me,
3- ((3-Metyloaminometylobenzoilo)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-l-N,N-dimetyloaminopropan, (3-Aminometylobenzoilo)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-N-Me2,
H-Aib-His-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH2,
3-(((3R)-3-Piperydynokarbonylo)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-lNT)-l-N,N-dimetyloaminopropan, lub jego sól z TFA,
2- (((3R)-3-Piperydynokarbonylo)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-(l-metylo-2-pirolidynylo)etan, lub jego sól z TFA,
H-Aib-His-D-2Nal-N-Me-D-Phe-Ser-NH2, lub jego sól z TFA, (3-Aminometylobenzoilo)-D-2Nal-N-Me-D-Phe-Lys-NH2, lub jego sól z TFA, (4-Piperydynokarbonylo)-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH2, lub jego sól z TFA, ((3R)-3-Piperydynokarbonylo)-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH2 lub jego sól z TFA, (3-Aminometylobenzoilo)-D-Phe-N-Me-D-Phe-NH2, lub jego sól z TFA, (3-Aminometylobenzoilo)-N-Me-D-Phe-N-Me-D-Phe-Lys-NH2, lub jego sól z TFA, ((3R)-3-Piperydynokarbonylo)-N-Me-D-Phe-N-Me-D-Phe-Lys-NH2, lub jego sól z TFA,
H-Aib-His-N-Me-D-Phe-N-Me-D-Phe-Lys-NH2, lub jego sól z TFA, ((3R)-3-Piperydynokarbonylo)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH2, lub jego sól z TFA,
3- ((3-Aminometylobenzoilo)-N-Me-D-Phe-NH)-l-N,N-dimetyloaminopropan,
3-Aminometyloberzoilo-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH-CH3, lub jego sól z TFA,
186 520
3-metyloaminometylobenzoilo-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH-CH3, lub jego sól z TFA,
H-Aib-His-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH-Me lub jego sól z HC1, oraz
N-((1R)-1 -(N-(( 1 R)-2-(4-jodofenylo)-1 -(metylokarbamoilo)etylo)-N-metylokarbamoilo)2-(2-naftyio)etylo)-N-metyloamid kwasu piperydyno-4-karboksylowego, lub ich farmaceutycznie dopuszczalne sole.
Przedmiotem wynalazku jest również kompozycja farmaceutyczna, charakteryzująca się tym, że zawiera określony wyżej związek lub jego farmaceutycznie dopuszczalną sól jako składnik aktywny, oraz farmaceutycznie dopuszczalny nośnik lub rozcieńczalnik.
Korzystnie kompozycja ma postać dawki jednostkowej zawierającej od około 10 do około 200 mg określonego wyżej związku lub jego farmaceutycznie dopuszczalnej soli.
Korzystnie kompozycja jest przeznaczona do pobudzania uwalniania hormonu wzrostu z przysadki mózgowej.
Korzystnie kompozycja ma postać odpowiednią do podawania doustnego, przezskómego, do nosa, do płuc lub pozajelitowego.
Przedmiotem wynalazku jest także określony wyżej związek lub jego farmaceutycznie dopuszczalna sól, do zastosowania jako lek.
Przedmiotem wynalazku jest też zastosowanie określonego wyżej związku lub jego farmaceutycznie dopuszczalnej soli, do wytwarzania leku do pobudzania uwalniania hormonu wzrostu z przysadki mózgowej.
Korzystnie związek powyższy lub jego farmaceutycznie dopuszczalna sól ma zastosowanie do wytwarzania środka farmaceutycznego do podawania zwierzętom w celu zwiększania tempa i stopnia ich wzrostu, zwiększania produkcji mleka lub wełny, lub do leczenia ich dolegliwości.
Przykładami określonych związków według wynalazku są: (2R)-2-[(3-Aminometylobenzoilo)]-N-Me-D-2Nal-N-Me)-3-(2-naftylopropanol)
(3-Aminometylobenzoilo)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH2:
CH, O
186 520
3-[(3-Aminometylobenzoilo)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-N,N-dimetyloaminopropan
H-Aib-His-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH2
(3-aminometylobenzoilo)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-Lys-NH2
H-Aib-Ala-D-2Nal-N-Me-D-Phe-Lys-NH2
H-Aib-His-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH2 [(3 -aminometyłobenzoiło) -N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH] -1 -morfolinoetan
186 520 (3-aminometylobenzoilo)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH-Me
3[(3-metyloaminometylobenzoilo)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-PheNH]-N,N-dimetyloaminopropan
3-aminometylobenzoilo)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-N-Me
H-Aib-His-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NHMe
186 520
3-metyloamimometylo-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NHI-CH3
NH(U<)-l-(N-[(lR)-2-(4-jodofenylo)-l-(metylokarbtmio-ilo)-etylo)-N-metylokarbamoilo)-2(2-naftylo)etylo-N-metyloamid kwasu piperydyno-karboksylowego
Struktury nie-naturalnych reszt aminokwasowych są następujące
3Pyal Alb
Skrót stosowany dla podstawiania wiązania peptydowego:
-N-McO
ch3
186 520
Związki o wzorze I można otrzymać standardowymi metodami syntezy peptydów w roztworze lub w fazie stałej. Przykładowo syntezę w fazie stałej można prowadzić zasadniczo w sposób opisany przez Stewarda:Younga, Solid Phase Peptide Synthesis, 2nd Ed.Rockford, Illinois, USA, 1976. Syntezy w fazie roztworu mogą być prowadzone jak opisano przez Bondasky i innych. Peptide Synthesis, 2nd Ed, Nowy Jork, Nowy Jork USA, 1976 r.
Aminometylen jako podstawienie wiązania amidowego można wprowadzić zgodnie ze sposobem opisanym przez YSasaki i D.H.Coy, Peptides 8(1) 1987 str. 119-121. Pochodne peptydów zawierające grupy aminowe wyprowadzone od mono- lub diheksapiranozy można otrzymać zasadniczo przez przegrupowanie Amadoriego metodą opisaną przez R.Alberta i in. Life Science 53,1993 str. 517-525. Przykładami odpowiednich mono- lub heksapiranoz są glukoza, galaktoza, maltoza, laktoza lub cellobioza.
Pochodne stosowane jako materiały wyjściowe w syntezie mogą być otrzymane komercjalnie i w razie potrzeby mogą być wyposażone w grupy zabezpieczające, lub materiały wyjściowe stosowane do przygotowania fragmentu A ogólnego wzoru I można otrzymać dobrze znanymi metodami i ewentualnie zabezpieczyć znanymi sposobami.
Skróty stosowane dla grup zabezpieczających:
Farmacautycznie dopuszczalne sole addycyjne związków o wzorze I obejmują sole utworzone w reakcjii peptydów z kwasami nieorganicznymi lub organicznymi, takimi jak kwas chlorowodorowy, bromowodorowy, siarkowy, octowy, fosforowy, mlekowy, maleinowy, ftalowy, cytrynowy, glutarowy, glukonowy, metanosulfonowy, salicylowy, bursztynowy, winowy, szczawiowy, toluenosulfonowy, trifluoroctowy, sulfamowy i fumarowy; W innym aspekcie wynalazek obecny dotyczy kompozycji farmaceutycznej zawierającej jako składnik aktywny, związek o wzorze I lub jego farmaceutycznie dopuszczalne sole, oraz farmaceutycznie dopuszczalny nośnik lub rozcieńczalnik. Kompozycje farmaceutyczne zawierające związek według wynalazku można otrzymać standardowymi technikami, na przykład takimi jak opisano w Remingtons Pharamceutical Sciences, 1985. Kompozycje mogą występować w standardowych postaciach przykładowo kapsułki, tabletki, aerozole, roztwory, zawiesiny, plastry lub zastosowania lokalne. Zastosowanym farmaceutycznym nośnikiem lub rozcieńczalnikiem może być konwencjonalny nośnik stały lub ciekły. Przykładami stałych nośników są: laktoza, kaolin, sacharoza, cyklodekstryna, talk, żelatyna, agar, pektyna, guma arabska, stearynian magnezu, kwas stearynowy lub niższe etery alkilowe celulozy.
Przykładami ciekłych nośników są: syropy, olej orzechowy, olej z oliwek, fosfolipidy, kwasy tłuszczowe, aminokwasy tłuszczowe, polioksyetylen i woda. Podobnie nośnik lub rozcieńczalnik może obejmować każdy materiał o przedłużonym uwalnianiu znany w stanie techniki, takie jak monostearynian glicerylu lub distearynian glicerylu sam lub zmieszany z woskiem. Jeśli stały nośnik stosuje się do podawania doustnego, preparat może być tabletkowany, umieszczony w twardej kapsułce żelatynowej w postaci proszku lub peletki lub też może mieć postać kołaczyka albo pastylki do ssania. Ilość stałego nośnika będzie znacznie zmieniać się, ale zwykle będzie wynosić od około 25mg do około lg.
Typowa tabletka, która może być otrzymana standardowymi technikami tabletkowania, może zawierać:
186 520
Rdzeń:
związek aktywny (jako wolny związek lub jego sól) - 100 mg żel krzemionkowy (Aerosil) 1,,5 mg celuloza mikrokrystaliczna (Avicel) 70 mg żywica celulozy modyfikowanej (Ac-Di-Sól) 7,:5 mg stearynian magnezu
Powłoka:
HPMC w przybliżeniu 9 mg *Mywacett 9-40T w przybliżeniu 0,9 mg *acylowany monogliceryd stosowany jako plastyfikator do błony powłokowej
Jeśli stosowany jest ciekły nośnik, preparat może być w postaci syropu, emulsji, miękkiej kapsułki żelatynowej lub cieczy sterylnej do injekcji, takiej jak wodne lub niewodne ciekłe zawiesiny lub roztwory.
Do podawania do nosa lub do płuc preparat może zawierać związek o wzorze I rozpuszczony lub zawieszony w ciekłym nośniku, zwłaszcza wodnym nośniku do podawania w aerozolu. Nośnik może zawierać środki dodatkowo takie jak środki solubilizujące, na przykład glikol propylenowy, środki powierzchniowo czynne takie jak sole kwasów żółciowych, glikol polietylenowy, glikol polipropylenowy lub eter polioksyetylenowy wyższych alkoholi, środki podnoszące absorbcję takie jak lecytyna (fosfatydylocholina) lub cyklodekstryna lub środki konserwujące jak parabeny
Preparat do podawania przez skórę może mieć formę odpowiednią do plastrów lub jontoforezy. Ogólnie związki według wynalazku są przygotowane w formie dawki jednostkowej zawierającej 0,001-100 mg składnika aktywnego wraz z farmaceutycznie dopuszczalnym nośnikiem.
Dawka związków według wynalazku wynosi odpowiednio 1-500 mg/dzień t.j. około 100 mg na dozę, podawana jako lek pacjentom np. ludziom.
Związki o wzorze I według wynalazku posiadają zdolność uwalniania endogennego hormonu wzrostu in vivo. Związki te mogą być stosowane w leczeniu przypadków, które wymagają zwiększonego poziomu hormonu, tak jak w niedoborze hormonu wzrostu u ludzi, lub u starszych pacjentów lub zwierząt domowych.
Tak więc w szczególnym aspekcie obecny wynalazek dotyczy kompozycji farmaceutycznej do stymulowania uwalniania hormonu wzrostu z przysadki, kompozycji zawierającej jako składnik aktywny, związek o wzorze I, lub jego farmaceutycznie dopuszczalną sól wraz z farmaceutycznie dopuszczalnym nośnikiem lub rozcieńczalnikiem.
W następnym aspekcie, obecny wynalazek dotyczy stymulowania uwalniania hormonu wzrostu z przysadki, sposobu obejmującego podawanie osobnikowi potrzebującemu tego, efektywnej ilości związku o ogólnym wzorze I lub jego farmaceutycznie dopuszczalnej soli.
W jeszcze jednym aspekcie obecny wynalazek dotyczy zastosowania związku o wzorze ogólnym I lub jego farmaceutycznie dopuszczalnej soli do otrzymywania leku stymulującego uwalnianie hormonu wzrostu z przysadki. Specjalistom w tej dziedzinie znany jest fakt, że obecne i potencjalne zastosowanie hormonu wzrostu u ludzi jest różne i złożone. Tak więc, związki o wzorze I można podawać dla stymulowania uwalniania hormonu wzrostu z przysadki i uzyskiwać wyniki podobne do otrzymywanych po podawaniu samego hormonu wzrostu. Zestawienie zastosowań hormonu wzrostu obejmuje: stymulowanie uwalniania hormonu wzrostu u osób starszych; zapobieganie katabolicznym efektom ubocznym glikokortykoidów, leczenie osteoporozy, stymulowanie systemu odpornościowego, leczenie opóźnienia, przyspieszenie gojenia ran, przyspieszenie zrastania złamanych kości, leczenie opóźnienia wzrostu, leczenie uszkodzeń nerek lub ich niedoczynności spowodowanej opóźnieniem wzrostu, leczenie przypadków z fizjologicznie niskim wzrostem, w tym dzieci z niedoborem hormonu wzrostu i przypadków niskiego wzrostu związanych z chronicznymi chorobami, leczenie otyłości i opóźnienia wzrostu związanego z otyłościią, leczenie opóźnienia wzrostu związanego z zespołem Pradefa-Willfego i zespołem Tumer'a; przyspieszenie procesu zdrowienia i ograniczenie czasu hospitalizowania u pacjentów z poparzeniami; leczenie wewnątrzmacicznego opóźnienia wzrostu, szkieletowej dysplazji, hiperkortyzolizmu (ang. hypercortisolism) i zespołu Cushing'a; wywołanie tętniącego uwalniania hormonu wzrostu; zastąpienie hormonu wzrostu u pacjentów w stresie, leczenie osteochondrodysplacji, zespołu Noonan'a, schizofrenii, depresji, choroby Alzheimer'a, usuwanie opóźnię186 520 nia w gojeniu ran i usuwanie psychoz, -nczenin zaburzenia w oddychaniu i napowietrzania, zmniejszenie katabolicznych odpowiedzi po poważnych interwencjach chirurgicznych, zmniejszenie wyniszczenia organizmu i utraty białka wywołanych przewlekłymi chorobami, takimi jak, nowotwór lub AIDS; lncznnie zwiększonego wydzielania insuliny, obejmujące nesidioblastozę, wspinrąjącn lnczenin przy wywoływaniu jajeczkowania; stymulowanie rozwoju grasicy i zapobieganie związanemu z winkinm spadkowi funkcji grasicy, -ncznnin pacjentów immunosupresyjnych, poprawianie siły mięśni, ruchliwości, utrzymywanie grubości skóry, homeostaza metaboliczna, homeostaza nerkowa u osób starszych, stymulacja bstnbb-aI stów, odbudowa kości i wzrost chrząstek, stymulowanie układu immunologicznego u zwierząt hodowlanych, lncznnin skutków starzenia u zwierząt hodowlanych, promocja wzrostu u żywego inwentarza oraz stymulowanie wzrostu wełny u owiec.
Dla powyższych wskazań dawka może zmieniać się zależnie od użytego związku o wzorze I, od sposobu podawania i od pożądanej terapii. Generalnie mogą być podawane dawki między 0,001 i 100 mg/kg ciała dziennie ludziom i zwierzętom w celu uzyskania efektywnego uwalniania endogennego hormonu wzrostu. Zwykle postaci dawek odpowiednie do podawania doustnego i do nosa obejmują od około 0,0001 mg do około 100 mg, korzystnie od około 0,001 mg do około 50 mg związku o wzorze I, zmieszanego z farmaceutycznie dopuszczalnym nośnikiem lub rozcieńczalnikiem.
Związki o wzorze I mogą być podawane w postaci soli addycyjnych z farmaceutycznie dopuszczalnym kwasem lub jeśli to właściwe, jako sole z metalem alkalicznym lub ziem alkabcznych albo niższe sole alkiloamonibwe. Przypuszcza się, że postaci takich soli wykazują w przybliżeniu taki sam rząd aktywności jak formy wolnej zasady.
Kompozycje farmaceutyczne według wynalazku mogą ewentualnie obejmować związek o wzorze I w połączeniu z jednym lub większą ilością związków wykazujących różną aktywność np. antybiotyki lub inna farmakologicznie aktywna substancja. Mogą to być inne środki pobudzające wydzielanie takie jak GHRP (1 lub 6) lub GHRH, albo ich analogi, hormon wzrostu lub jego analog, albo somatomedyna taka jak IGF-1 lub IGF— Droga podawania może być każdą drogą, która efektywnie przenosi związek aktywny do miejsca, gdzie powinien zadziałać, takie jak droga doustna, do nosa, do płuc, przez skórę lub pozajelitowa, przy czym preferuje się drogę doustną. Oprócz użycia farmaceutycznego, związki o wzorze I mogą być użytecznymi in vitro narzędziami do badania regulowania uwalniania hormonu wzrostu. Mogą one również być użytecznymi narzędziami in vivo do oceny zdolności uwalniania hormonu wzrostu z przysadki. Na przykład próbki surowicy wzięte przed i po podaniu tych związków pocjentom mogą być testowane na hormon wzrostu. Porównanie hormonu wzrostu w każdej próbce surowicy determinowałoby bezpośrednio zdolności przysadki pacjentów do uwalniania hormonu wzrostu.
Związki o wzorze I mogą być podawane zwierzętom istotnym ze względów handlowych w celu podwyższenia ich kategorii i zwiększenia wzrostu oraz zwiększania produkcji mleka.
Metody farmakologiczne.
Związki o wzorze I bada się in vitro na ich skuteczność i moc działania, pod kątem uwalniania hormonu wzrostu w pierwotnych somatotrofach szczura.
Pierwotne somatotrofy szczura preparuje się sposobem opisanym w literaturze (Chen 1jego współpracownicy, Endocrinology 1991, 129, 3-37-3342; i Chen i jego współpracownicy, Endocrinology 1989, 124, 2791-2798). Szczury zabija się przez dekapitację. Szybko usuwa się przysadkę. Przysadki trawi się w 0,2% kollagenazie i 0,2% hyaluronidazie w zrównoważonym solą roztworze Hanks'a. Komórki ponownie zawiesza się w modyfikowanym podłożu Du^-cco, zawierającym 0,37% wodorowęglanu sodowego, 10% surowicy końskiej, 2,5% płodowej surowicy cielęcej, 1% niezasadniczych aminokwasów, 1% glutaminy i 1% penicyliny/streptomycyny, po czym stężenie doprowadza do wartości 1,5x10 komórek/ml. Jeden ml takiej zawiesiny umieszcza się w każdej studzience, 24-studzinnkowej tacy i pozostawia w to czasie 2-3 dni przed przeprowadzeniem doświadczenia z uwalnianiem.
W dniu doświadczenia, komórki dwukrotnie przemywa się wymienionym powyżej podłożem zawierającym 25 milimoli HEPES, o wartości pH 7,4. Uwalnianie hormonu wzrostu inicjuje się za pomocą dodania podłoża zawierającego 25 milimoli HEPES i badany zwią12
186 520 zek. Inkubowanie przeprowadza się w czasie 15 minut w temperaturze 37°C. Po inkubowaniu, uwolniony do podłoża hormon wzrostu oznacza się standartową metodą RIA.
Skuteczność uwalniania hormonu wzrostu przez związki o wzorze I oznacza się w próbach in vivo na znieczulonych pentobarbitalem samicach szczurów, sposobem opisanym w literaturze (Bercu i -ego współpracownicy, Endocrieology 1991, 129, 2592-2598). Dorosłe samce szczurów rasy Sprague-Dawley znieczula się pentobarbitalem, podając dootrzewnowo 70 mg/kg. Po pełnym znieczuleniu, szczurom wszczepia się kaniulę do tchawicy i katetery do tętnicy szyjnej i żyły szyjnej. Po czasie 15 minut pobiera się próbki krwi o czasie 0. Dożylnie poda-e się środki pobudzające wydzielanie, pobiera próbki krwi z tętnicy i umieszcza -e w lodzie w czasie 15 minut, po czym poddaje wirowaniu w czasie 2 minut przy szybkości 12000 x g. Surowicę dekantuje się i staidardową metodą RIA oznacza ilość hormonu wzrostu.
Wynalazek zilustrowano w przykładach podanych niżej, które w żadnym razie nie ograniczają zakresu wynalazku podanego w zastrzeżeniach. Związki otrzymane w tych przykładach wydzielono w postaci soli z kwasem trifluorooctowym (TFA).
Przykład 1
Otrzymywanie 2-R))2)-(3-amieomftylobeezoilo)-N-Me-D)2Na()N)Me]3-0enylopropanolu
165,7 mg Boc-N-Me-D-2Nal-ON l 165,2 mg lR)-metyΊoomino-3-feny3oofepan-llOlu (otrzymanego z H-N)Me-D-Phf-OH według M^T^^ennona, A.J. Meyersa, J.Org.Chem, 1993, 58, 3g)68)71) i 68,1 mg HOAt rozpuszczono w mieszaninie 2 ml DMF z 4 ml DCM w temperaturze 0°C. Następnie do mieszaniny 115 mg EDAC i mieszano 1 godzinę w temperaturze 0°C i 18 godzin w temperaturze pokojowej. Następnie z mieszaniny usunięto DCM za pomocą strumienia azotu i dodano 50 ml EtOAc. Otrzymaną mieszaninę ekstrahowano kolejno za pomocą 100 ml 5% wodnego roztworu NaHCÓ3, 100 ml H2O, 100 ml 5% wodnego roztworu KHSO( i 100 ml H2O. Uzyskaną Oazę organiczną suszono za pomocą NćbSCL i zatężano pod próżnią w wyparce obrotowej do uzyskania oleju.
502,6 mg kwmsu 3-Boc-amίnomoieloOfnzoesoezdfo roe.goszczono w 10 ml DCO( przMM dodanie 2 kropli DMP i przekształcono w symetryczny bezwodnik przez mieszanie z 191,6 mg EDAC przez 10 min.
Do tej mieszaniny dodano roztwór powyższego liofilizowanego 2(R)-(H)N)Mf)D2NBl) N)Mf))3)Oeeylopropanolu i 342 jil DIEA w 5 ml DCM i prowadzono rakcję przez 20 godzin w temperaturze pokojowej. Mieszaninę reakcyjną zatężono do uzyskania oleju i ponownie rozpuszczono w 50 ml EtOAc. Roztwór ekstrahowano kole-eo za pomocą 100 ml 5% wodnego roztworu NaHCOą, 100 ml H20, 100 ml 5% wodnego roztworu KHSO4 i 100 ml H2O. Otrzymaną Oazę organiczną suszono za pomocą NajSCL i zatężano pod próżnią w wyparce obrotowej do uzyskania dle-u. Olej ten rozpuszczono w 4 ml DCM/TFA 1:1 i mieszano. Po 10 min. mieszaninę zatężano w strumieniu azotu, a uzyskany olej ponownie rozpuszczono w 20 ml 70% CH3Cn/0,03 M HC1 i dodano 480 ml H2O. Surowy produkt oczyszczano drogą półpreparatywee- HPLC w siedmiu przebiegach na kolumnie 25mm x 150mm wypełnionej 7μ żelem krzemionkowym C-18, którą równowagowano 28% acetoni^y-lem w 0,05 M (NUróSCL, doprowadzonym do pH 2,5 za pomocą 4M H2SO4. Kolumnę eluowano w gradiencie stężeń 28-38% acetonitrylu w 0,05M (NNH4)2S04 pH 2,5 w czasie 47 minut w temperaturze 40°C i zbierano frakcje zawierające peptydy, rozcieńczono trzema objętościami H20i podano na kasetę Sep-Pak C18 (Waterspart # 51910), którą równowagowano 0,1% TFA. Peptydy eluowano z kasety za pomocą 70% CHaCn 0,1% TFA i wydzielano z eluatu przez liofilizację po rozcieńczeniu wodą. Otrzymany produkt końcowy charakteryzowano za pomocą wysokoci186 520 śnieniowej chromatografii cieczowej RP-HPLC (czas retencji) oraz spektrometrii nasowej (masa cząsteczkowa). Masa cząsteczkowa była zgodna z oczekiwaną strukturą z doświadczalnym błędem metody (spektrometria masowa ±0,9 amu).
Analizę RP-HPLC prowadzono przy użyciu detektora UV przy 214 nm z kolumną Vydac 218TP54 4,6 mm x 250 mm 5|x z żelem krzemionkowym C-18 (The Separations Group, Hesperia) eluując z szybkością 1 ml/min w temperaturze 42°C. Stosowano dwa oznaczenia w różnych warunkach eluowania:
Al - kolumnę równowagowano 5% CH3CN w buforze zawierającym 0,1M (NlLf^SO^ który doprowadzono do pH 2,5 za pomocą 4M H2SO4 i eluowano w gradiencie stężeń 5%-60% CH3CN w tym samym buforze w czasie 50 min.
Bl - kolumnę równowagowano 5% CH3CN/0,1% TFA/H2O i eluowano w gradiencie stężeń 5% CH3CN/0,1% TFA/H20 do 60% CH3CN/0,1% TFA/H2C) w czasie 50 min. Uzyskano czas retencji stosowany w warunkach eluowania Al i Bl odpowiednio 29,90 min i 31,52 min.
Synteza kwasu 3-Boc-aminometylobenzoesowego
25g kwasu 3-cyjnobenzoesowego rozpuszczono w 70ml 25% NH3/H2O i 200 ml H2O oraz dodano 5g 10% Pd/C w atmosferze azotu. Mieszaninę uwodorniano pod ciśnieniem atmosferycznym w temperaturze pokojowej i doprowadzając w sposób ciągły pH mieszaniny do 10,5 dodając 12% H2SO4. Po absorpcji około 4 1 H2 w czasie 18 godzin zatrzymano reakcję i usunięto katalizator przez filtrację. Filtrat zatężono pod próżnią do 20 ml, usunięto nieprzereagowany substrat przez ekstrakcję octanem etylu po zakwaszeniu za pomocą 200 ml 1,5M kwasu chlorowodorowego. Fazę wodną zatężano do suchej pozostałości i ponownie rozpuszczono w 400 ml THF i 343 ml lM NaOH. Dodano roztwór 30g bezwodnika Boc w 100 ml THF i mieszaninę poddano mieszaniu całą noc. Następnie mieszaninę reakcyjną zakwaszono do pH 3 za pomocą lN HC1 i ekstrahowano trzykrotnie po 300 ml EtOAC. Fazę organiczną odparowano do uzyskania pianki. Otrzymano 22g produktu.
Oznaczenie skrótów:
EBAC - chlorowodorek N-etylo-N'(3-dimetyloaminopropylo)karbooimidu
EtOAc - octan etylu
Boc - t-butyloksykarbonyl
N-Me-D-2Nal-N-metylo-D2-nafyloamina
DCM - dichlorometan
DIEA - diizopropyloetyloamina
DMF - N,N-dimetyloformamid
HOAt - l-hydroksy-7-azabenzotriazol
N-Me-D-Phe-d-N-metylo-D-fenyloalaninol
TFA - kwas trifluorooctowy
THF - tetrahydrofuran
Przykład 2
3-|(3-aminometylobenzoilo)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NI I]-N,N-dimetyloaminopropan
CH,
CH,
279 mg Boc-N-Me-D-Phe-OH rozpuszczono w 14 ml DMF i mieszano 10 min z 168 mg HOBt i 230 mg EDAC, po czym dodano 188 jal 3-dimetyloamino-l-propyloaminy i mieszano
186 520 godzin w temperaturze pokojowej. Następnie dodano 50 ml 5% wodny roztwór kwaśnego węglanu sodu i otrzymaną mieszaninę ekstrahowano za pomocą 50 ml EtOAc. Fazę organiczną suszono nad Na2SO4 i zatężono pod próżnią do uzyskania oleju. Olej ten mieszano 10 min w temperaturze pokojowej z 6 ml tFa/DCM 1:1, po czym odparowano TFA/DCM w strumieniu azotu i otrzymany olej rozpuszczono w mieszaninie 10 ml 70% CHsCn, 3ml IN HC1 i 37 ml wody, zaś otrzymaną mieszaninę natychmiast zamrożono i liofilizowano.
Liofilizowany produkt rozpuszczono w 6 ml DMF i 12 ml DCM. Do tej mieszaniny dodano 494 mg Boc-N-Me-D-2Nal-OH, 204 mg MOAt, 171 jj.1 DIEA mieszając i po ochłodzeniu do 0°C dodano 288 mg EDAC. Po 18 godzinach mieszania w temperaturze pokojowej odparowano DCM strumieniem azotu i dodano 100 ml EtOAc. Mieszaninę tę ekstrahowano dwa razy 100 ml 5% wodnym roztworem kwaśnego węglanu sodu i 100 ml wody, po czym suszono nad roztworem kwaśnego węglanu sodu i 100 ml wody, po czym suszono nad Na2S04 i zatężano pod próżnią uzyskuje 480 mg oleju. Otrzymany olej mieszano 10 min. w temperaturze pokojowej z 6 ml TFA/DCM 1:1, po czym odparowano TFA/DCM strumieniem azotu i uzyskany olej rozpuszczono w 10 ml 70% CH3CN. Następnie dodano 1 ml IN HC1 i 47 ml wody i otrzymaną mieszaninę szybko zamrożono i liofilizowano do uzyskania oleju [2HC1, H-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH-(CH2)3-N-(CH3)2]. Połowę powyższego oleju (2HC1, H-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH-(CH2)3-N(cH3}2] rozpuszczono w 9 ml DCM i dodano 2 krople DMF i 342 f.1 DIEA. Roztwór ten do roztworu 5(03 mig Boc3AMB-OH i 192 mg EDAC w 5 ml DCM, który mieszano przez 15 min w temperaturze pokojowej. Po 20 godzinach mieszania mieszaninę reakcyjną zatężono do otrzymania oleju za pomocą strumienia azotu. Olej mieszano przeez 15 min za 100 ml 5% wodnym roztworem kwaśnego węglanu sodu. Następnie dodano 50 ml EtOAc, oddzielono fazę organiczną i ekstrahowano ją ze 100 ml 5% roztworu kwaśnego węglanu sodu i 100 ml wody, po czym suszono nad Na2S0>4 i zatężano pod próżnią do uzysknia 340 mg oleju. Olej ten mieszano 10 min z 6 ml TFA/DCM. 1:1, po czym TFA/DCM odparowano strumieniem azotu i otrzymany olej rozpuszczono w 10 ml 70% CH3CN i rozcieńczono wodą do objętości 50 ml. Surowy produkt oczyszczano za pomocą półpreparatywnej HPLC w ośmiu przebiegach i liofilizowano stosując podobne procedury jak opisano w przykładzie 1. Otrzymany produkt końcowy analizowano metodą RP-HPLC (czas retencji) i spektroskopii masowej (masa cząsteczkowa). Otrzymano masę cząsteczkową (MH*: 608,2 amu) była zgodna z oczekiwaną strukturą (teoretyczna MH+: 608,8 amu) z eksperymentalnym błędem metody.
Otrzymany czas retencji RP-HPLC przy zastosowaniu warunków eluowania Al i BI jak opisano w przykładzie 1 wynosił odpowiednio 25,23 min i 25,58 min.
Przykład 3 ([(3 R)-3 ^pą7e3>'d\noyću^l^c^nyar^)oN-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phc-NH ] -1 -N,NldNletyloammOl propan
Połowę ilości 2H,HlNlMelDl2NallNlMe-DlPhe-NHl(CH2)3-N-(CH3)2 otrzymanego jako olej w przykładzie 2 rozpuszczono w 9 ml DCM i dodano 2 krople DMF. Roztwór ten wprowadzono do roztworu 459 g kwasu Boc-(R)-nipekotynowego i 192 mg EDAC w 5 ml DCM, który mieszano przez 15 min w temperaturze pokojowej. Po 20 godzinach mieszania mieszaninę reakcyjną zatężano do oleju strumieniem azotu i mieszano 15 min ze 100 ml 5% wodnego roztworu kwaśnego węglanu sodu. Następnie dodano 50 ml EtOAc, fazę organiczną oddzielono i ekstrahowano 100 ml 5% wodnego roztworu kwaśnego węglanu sodu i 100 ml wody, po czym suszono nad Na2S04 i zatężano pod próżnią do uzyskania oleju. Olej ten mieszano 10 min w temperaturze pokojowej z 6 ml TFA/DCM, po czym TFA/DCM odparowano
186 520 strumieniem azotu i uzyskany olej rozpuszczono w 10 ml 70% CH3CN i rozcieńczono wodą do objętości 50 ml. Surowy produkt oczyszczano metodą półpreparatywnej HPLC w pięciu przebiegach i liofilizowano stosując podobne procedury jak w przykładzie 1. Uzyskany produkt końcowy charakteryzowano za pomocą RP-HPLC (czas retencji) i spektrometrii masowej (masa cząsteczkowa). Otrzymana masa cząsteczkowa (MH+: 586,3 amu) była zgodna z oczekiwaną strukturą (teoretycznie masa cząsteczkowa (MH+: 585,8 amu) z doświadczalnym błędem metody. Uzyskano czas retencji stosując warunki eluowania Al i Bl jak opisano w przykładzie odpowiednio 25,33 min i 26,35 min.
Przykład 4
2-([(3R)-3-piperydynylokarbonylo]-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-l-(l-metylo-2-pirolidynylo)etan
279 mg Boc-N-Me-D-Phe-OH rozpuszczono w 10 ml DMF i mieszano 10 min ze 168 mg HOBt i 384 mg EDAC. Następnie dodano 290 jil 2-(aminoetylo)-l-metylopirolidyny i 171 pJ DlEA, po czym całość mieszano w temperaturze pokojowej w ciągu 20 godzin. Mieszaninę zatężono do oleju, który rozpuszczono w 50 ml wody i podano na kasetę Sep-Pak C18 (Waterspart # 43345), którą równowagowano 0,03 N kwasem chlorowodorowym. Produkt eluowano z kasety z 70% CH3CN w 0,03N kwasie chlorowodorowym i wydzielano z eluatu przez liofilizację po rozcieńczaniu wodą. Otrzymany produkt mieszano 10 min w temperaturze pokojowej z 6 ml TFA/DCM, po czym odparowano TFA/DCM strumieniem azotu i uzyskany olej rozpuszczono w 10 ml 70% CH3CN, po czym dodano 2 ml lN kwas chlorowodorowy. Produkt wydzielano przez liofilizację po rozcieńczeniu 50 ml wody.
286 mg liofilizowanego produktu rozpuszczono w 15 ml DCM i 171 pl DlEA. Roztwór ten dodano do roztworu 459 mg kwasu Boc-(R)-nipekotynowego i 192 mg EDAC w 10 ml DCM, który mieszano przez 25 min w temperaturze pokojowej. Po 20 godzinach mieszania mieszaninę reakcyjną zatężano do uzyskania oleju strumieniem azotu, po czym ponownie rozpuszczono w 100 ml EtOAc i ekstrahowano 50 ml wodnego roztworu kwaśnego węglanu sodu, 50 ml 5% wodnego roztworu kwaśnego siarczanu potasu i 50 ml wody. Fazę organiczną suszono siarczanem sodu i zatężano pod próżnią do oleju. Olej ten mieszano przez 10 min w temperaturze pokojowej z 6 ml TFA/DCM 1:1, po czym odparowano TFA/DCM strumieniem azotu i uzyskany olej rozpuszczono w 10 ml 70% CH3CN i rozcieńczono wodą do końcowej objętości 50 ml.
Surowy produkt oczyszczano za pomocą półpreparatywnej HPLC w trzech przebiegach i liofilizowano stosując procedury jak opisano w przykładzie 1. Otrzymany produkt końcowy charakteryzowano za pomocą RP-HPLC (czas retencji) i spektroskopii masowej (masa cząsteczkowa). Otrzymana masa cząsteczkowa (MH+: 612,2 amu) była zgodna z oczekiwaną strukturą (teoretycznie MH+: 612,39 amu) z błędem doświadczalnym metody. Czas retencji uzyskany przy zastosowaniu warunków eluowania Al jak opisano w przykładzie 1 wyniósł 25,80 min.
Przykład 5 (2R)-2-[(3-Aminometylobenzoilo)-N-Me-D-2Nal-N-Me]-3-(2-naftylo)propanol
186 520 ester metylowy kwasu (R)-2-(N-tert-butoksykarbonylo-N-metyloamino)-3-(2-naftylo)propionowego
5,0 g (16,g mmola) kwasu (R')-2 -tert-2utoksbk<tfbonyloammo-3-(2-naftylonpropionoweoo rozpuszczono w 50 ml bezwodnego DMF. 6,2 ml (98,4 mmola) jodometanu i 13,3g (57,4 mmola) tlenku srebra (I) dodano do powyższego roztworu i całość mieszano całą noc. Mieszaninę reakcyjną filtrowano i filtrat ekstrahowano 200 ml chlorku metylenu. Fazę przemywano dwukrotnie 50 nil 5% cyjanku potasu i 3 razy 75 ml wody. Fazę organiczną suszono MgSC>4 i rozpuszczalnik usunięto pod próżnią. Pozostałość chromatografowano (krzemionka, 5x40 cm) stosując octan etylu i heptan (1:2) jako eluent w celu uzyskania estru metylowego kwasu (R)2-(Nsterts butoksykarbooylo-Nsmetyloamioo)s3-(2-oaftylo)nropiooowego.
‘HNMR(CDC1a); 1.30, 1.35 (dwa S, 9H), 2.71, 2.75 (dwa S, 3H); 3.19, 3.47 (dwa m, 2H); 3.74,3.77 (dwa S, 3H); 4.65, 5.05 (dwa dd, 1H); 7.29-7.82 (m, 7H) (Mieszanina rotamerów) kwas (R)s2s(N-tertsbutoksykarbooyio-N-metyloammo)-3-(2-naftyio)pronio2owy
21,73g; (65,57 mmola) estru metylowego kwasu (RS-2-tNstert-butoksykarbonylo-Nsmetylos amioo)s3-(2-nafłylo)nropionowego rozpuszczono w 200 ml 1,4-dioksanu i dodano 20 ml wody. Mieszaninę reakcyjną ochłodzono na łaźni z lodem i dodano l,73g (72,13 mmola) wodorotlenku litu. Po 15 minutach dodano 140 ml wody i mieszano przez dodatkowe 3 godziny w temperaturze pokojowej. Następnie dodano 400 ml octanu etylu i 300 ml wody doprowadzając pH do 2,5 za pomocą 110 ml IM kwaśnego siarczanu sodu. Po rozdzieleniu faz ekstrahowano fazę wodną za pomocą 200 ml octanu etylu. Połączone fazy organiczne przemywano 300 ml wody, suszono MgSCb i usunięto rozpuszczalnik pod próżnią utrzymując 20,lg kwasu (R)s2s(N-tertsbutoksykarbonylosN-metyloamino)-3s(2soaftylo)sproniooowego.
'H NMR (DMSO) : 1.18; 1.21 (dwa S, 9H); 2.62, 2.66 (dwa S, 3H); 3,11-3.58 (m, 2H); 4.75, 4.90 (dwa dd, 1H); 7.48 - 7.88 (m, 74); 1.85 [s(br), 1H] (mieszanina rotamerów)
Kwas (RS2sformyioammo-as(2-naftylo)pronionowy
Αν*
H O
18,11 g (84.14 mmola) kwasu (R)-2sammos3-(2-naftylo)propiooowego rozpuszczono w 204 ml kwasu mrówkowego i wkroplono 70 ml bezwodnika kwasu octowego. Mieszaninę reakcyjną ogrzano do 55°C i mieszano 3,5 godziny w temperaturze pokojowej. Następnie wkroplono 70 ml lodowato zimnej wody i mieszano w temperaturze 0°Ć w ciągu 20 min. Mieszaninę przefiltrowano i przemyto 20 ml lodowato zimnej wody otrzymując 20,26 g kwasu (R)2-formyloamioos3-(2soaftylo)nroniooowego.
186 520 ‘HNMR (DSMO) : 3,05(dd, 1H), 3.27 (dd, 1H); 4.64 (m, 1H); 7.48-7.87 (m, 7H); 7.95 (s, 1H); 8.45 (d, 1H); 12,9 (s (br); 1H).
(R)-metyloamino-3-(2-naftylo)propano-1 -ol
I
4,37g (18 mmoli) kwasu (R)-2Iformy-oamιino-3-(2-naftylo- propionowego rozpuszczono w 100 ml bezwodnego tetrahydrofuranu i dodano 1,6 g (43,2 mmola) borowodorku sodu. 4,57 g (18 mmoli) jodu rozpuszczono w 40 ml suchego tetrahydrofuranu i wkroplono do mieszaniny reakcyjnej w temperaturze poniżej 40°C. Następnie mieszaninę reakcyjną ogrzewano w temperaturze wrzenia w ciągu 12 godzin, po czym dodano 50 ml 20% wodorotlenku potasu. Fazę wodną ekstrahowano eterem metylowo-tert-butylowym czterokrotnie po 50 ml. Połączone fazy organiczne przemyto nasyconym roztworem chlorku sodu w ilości 150 ml, suszono MgSC4 i rozpuszczalnik usunięto pod próżnią. Pozostałość poddano chromatografii (krzemionka, 5 x 40 cm) używając DCM (metanol/amoniak (100:10:1) i uzyskano 18 lg (R) mntyloamino-3(2-nafiylo)prop^an-lIol ‘HNMR(CDCl3): 2,43 (s, 3H); 2.88-3.05 (m, 3H); 3.10 [(br), 2H); 3,42 (dd, 1H), 3,69 (dd, 1H); 7.30-7,82 (m,7H)
Ester tert-butylowy kwasu NI((-R)-I-|N[((1RI-2-hyd)okyy-I-((2-nfflyιlo)metylo)etylo--NI mntylokarbamoilo]-2I(2Inafylo-etylo)-N-metylokarbaminowego
0,55g (1,67 mmola) kwasu (R)-(NItertIbutoksykarbonylo-N-metyloamino--3I(2Inaftylo)proI pionowego i 0,3 8g (2,00 mola) (R)-mnty4oanino-3-(2-nafylo)prop£al-l-olu rozpuszczono w 15 ml chlorku metylenu i 7,5 ml dimetyloformamidu. Mieszaninę reakcyjną ochłodzono w łaźni z lodem, po czym dodano 0,24g (2,09 mmola) -IhydroksyI7-azabenzotriazolu i 0,38 g (2,00 mmola) chlorowodorku N-(3-dimetylbaminopropylo)-N'-etylokarbodiimidu. Mieszaninę reakcyjną mieszano 12 godzin w temperaturze pokojowej, następnie zatężano pod próżnią i dodano 200 ml octanu etylu i organiczny roztwór przemyto 100 ml wody, 75 ml kwaśnego węglanu sodu/węglanu sodu (pH 9), 75 ml 10% roztworu kwaśnego siarczanu sodu, 100 ml wody i suszono MgS04. Rozpuszczalnik usunięto pod próżnią i pozostałość poddano chromatografii (krzemionka, 2 x 45 cm) z zastosowaniem octanu etylu, uzyskując 0,25g —((1R)-1-(— [(1 R-I2-hydroksy-1 -((2-nafylo-mntyIo)etyΊo)-—mntyΊokarbamoilojI2I(2Inafylo-etylb)-—mety-okarbaminianu tert-butylowego.
NMR (DMSO): 0,80-1,99 (kilka s, 9H); 2,45-4,20 (m, 12H); 4.70-5,12 (m. 2H); (wybrane piki, mieszanina rotamerów) (2R--—((lR)-2-hydroksy-l-((2-naftylo-metylo-etylo)I—mntyloI2-metyloaminoI3I(2Inaftylo-propionamid.
186 520
0,25g (0,475 mmoli) estru tert-butylowego kwasu N-((lR)-l-N-[( lR)-2-liydroksy-l-((2naftylo)rnetylo)etylo)-N-metylokarbauoilo]-2-(2-naftylo)etylo)--N-metylok;arbaminowego rozpuszczono w 3 ml DCM i dodano 1 ml kwasu trifluorooctowego, po czym mieszano całość w ciągu 20 min. Usunięto pod próżnią rozpuszczalnik, po czym dodano 5 ml DCM usunięto pod próżnią i powtórzono zabieg. Pozostałość rozpuszczono w 5 ml metanolu, dodano 5 ml kwaśnego węglanu sodu/węglanu sodu o pH 9 i roztwór eksrahowano dwukrotnie po 10 ml octanu etylu. Fazę organiczną suszono MgSCU, usunięto rozpuszczalnik otrzymując 0,22 g (2R)-N-((lR)2-hydroksy-l-((2nafylo)metylo)metylo)-N-metylo-2-metyloamino-3-[2-naftylo)propionamidu.
'HNMR (CDCI3): 1.70, 2.37, 3.45, 2.93 (cztery S, 6H) ; 2.56-3.05 (m, wH); 3.52 - 3.85 (m, 7H); 4.25, 4.97 (dwa m, 1H); 6.86 - 7.78 (m, 14H) (wybrane piki, mieszanina rotamerów.).
[2R)-2-([3-aminometylobenzoilo)-N-Me-D-2Nal-N-Me)-3-(2-naftylo)propanol
502,6 mg kwasu 3-Boc-aminomnΐylonenzoesowrgo rozpusoczonz w6ml DCM i prMkształcono do symetrycznego bezwodnika przez mieszanie ze 191,6 mg EDAC w ciągu 15 min.
Roztwór 200 mg (2R)-N-((lR)-2-hy'droksy-l-([2-6aftylo)metylo)etylo)-N-metylr-2metyloamino^-^-nafitylojpropionamidu w 50 ml DCM dodano do powyższej mieszaniny i prowadzono reakcję przez 20 godzin w temperaturze pokojowej. Mieszaninę reakcyjną zatężono do postaci oleju i powtórnie rozpuszczono w 100 ml EtOAc. Roztwór ekstrahowano kolejno 5% wodnym roztworem NaHCCL (2 x 50 ml), 5% roztworem wodnym KHSO4 (2 x 50 ml) i wodą (2 x 50 ml). Otrzymaną fazę organiczną suszono Na2S04 i zatężano pod próżnią w wyparce obrotowej do postaci oleju, który potem rozpuszczono w 6 ml DCM/TFA 1:1 i mieszano. Po 10 minutach mieszaninę zatężano strumieniem azotu, uzyskany olej ponownie rozpuszczono w 5 ml 70% CHsCN/CfD/o TFA i rozcieńczono wodę do objętości 100 ml. Surowy produkt oczyszczano za pomocą półpreparatywnej HPLĆ w dwóch przebiegach i liofilizowano stosując podobne procedury jak opisane w przykładzie 1. Otrzymany końcowy produkt charakteryzowano za pomocą RP-HPLC (czas retencji) i spektroskopii masowej (masa cząsteczkowa). Uzyskana masa cząsteczkowa (MH+ : 559,5 amu) była zgodna z oczekiwaną strukturą (teoretyczna MH: 560,72 amu) z eksperymentalnym błędem metody. Uzyskano czas reakcji RP-HPLC z zastosowaniem warunków eluowania Ali Bl określonych w przykładzie 1, odpowiednio 33,07 min i 34, 63 min.
Przykład 6
H-Aib-His-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH2
186 520
Peptyd syntetyzowano zgodnie z procedurą Fmoc na syntetyzatorze peptydowym Applied Biosystems 431A w skali 0,22 mmola stosując urządzenie zapisujące UV FastMoc, w której używa sią pośrednich sprzężeń HBTU w NMP i kontrolowanie UV odłączanie grup zabezpieczających Fmoc.
Jako wyjściową żywicę zastosowano w syntezie cat # D-1675 produkcji Bachem Feinchemikalien AG, Bubendorf, Switzerland (427)mg, którą jest Fmoc-2,4-dimetoksy4 (kiuboksymetyloksyj-benzhydryłoamina z żywicą aminometylopolistyrenową za pośrednictwem wiązania amidowego. Zdolność podstawienia wynosiła 0,55 mmola/g. Zastosowanymi zabezpieczonymi pochodnymi aminokwasów były Fmoc-N-Me-D-Phe-OH, FmocD-2Nal-OH-Fmoc-His(Trt) i Fmoc-Aib-OH. Szczepienie Fmoc-N-Me-D-Phe-OH prowadzono jako podwójne szczepienie. Po zsyntetyzowaniu peptydu poddano go rozkładowi z 750 mg żywicy peptydowej przez mieszanie przez 180 min w temperaturze pokojowej z mieszaniną 8 ml TFA, 600 mg fenolu, 200 pl etanoditiolu, 400 pl tioanizolu i 400 pl H2O. Uzyskaną mieszaninę filtrowano i filtrat zatężano do około 2 ml strumieniem azotu. Surowy peptyd wytrącano z oleju za pomocą 50 ml eteru dietylowego, przemywano dwukrotnie po 50 ml eteru dietylowego. Surowy peptyd suszono i oczyszczano za pomocą półpreparatywnej HPLC w jednym przejściu i liofilizowano z zastosowaniem tych samych procedur jak w przykładzie 1. Otrzymany produkt końcowy charakteryzowano za pomocą RP-HPLC (czas retencji) i spektrometrii masowej (masa cząsteczkowa). Otrzymana masa cząsteczkowa (MH+: 598,5 amu) była zgodna z oczekiwaną strukturą (teoretyczne MH* : 598,73 amu) z eksperymentalnym błędem metody. Otrzymany czas retencji RP-HPLC z zastosowaniem warunków retencji Al i BI jak określono w przykładzie 1 wynosił odpowiednio 24,68 min i 25,58 min.
Przykład 7
H-Aib-HIs-D-2Nal-N-Me-D-Phe-Ser-NH2
Związek ten otrzymano stosując podane procedury jak opisano w przykładzie 6. Otrzymany produkt końcowy charakteryzowano za pomocą RP-HPLc (czas retencji) i spektroskopii masowej (masa cząsteczkowa). Otrzymana masa cząsteczkowa (MH+ : 685,6 amu) była zgodna z oczekiwaną strukturą (teoretyczna MH+ : 685,81 amu) z eksperymentalnym błędem metody.
Otrzymany czas retencji PR-HPLC z zastosowaniem warunków eluowania Al i BI opisanym w przykładzie 1 wynosił odpowiednio 24,42 min i 25,92 min.
Przykład 8 (3 aminometylobenzoilo)-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH2
186 520
Związek ten syntetyzowano stosując podobne procedury jak opisano w przykładzie 6. Jedyną różnicą było to, że połączenie FmocsD-2NalsPH był prowadzony z zastosowaniem HATU jako czynnika aktywującego H-N-M-De-Phe-żywica, 23 mmola) w obecności 2 mmoli DIEA. Otrzymany finalny produkt charakteryzowano za pomocą RP-HPLC (czas retencji) i spektrografii (masa cząsteczkowa). Otrzymana masa cząsteczkowa (MH+ : 509,6 amu) z eksperymentalnym błędem metody. Otrzymany czas retencji i RP-HPLC z zastosowaniem warunków eluowania Al i Bl opisanych w przykładzie 1 wynosiło odpowiednio 30,73 min i 32,47 min.
Przykład 9 t4spiperydynokarbooylo)-Ds2Nal-NsMesD-PhesNH2
Związek ten syntezowano stosując podobne procedury jak w przykładzie 8. Otrzymany związek końcowy charakteryzowano za pomocą RP-HPLC (czas retencji) oraz spektroskopii masowej (masa cząsteczkowa). Znaleziona masa cząsteczkowa (MH+: 486,8 amu) była zgodna z oczekiwaną strukturą (teoretyczna MH+: 4887,6 amu) z eksperymentalnym błędem metody.
Uzyskany czas retencji RP-HPLC z zastosowaniem warunków eluowania Al i BI jak opisano w przykładzie 1, wyniósł odpowiednio 27,03 min i 28,48 min.
Przykład 10 ((aR)sasninerydy2okarbonylo)sDs2Na^N-MesD-Phe-NH2
Związek ten syntezowano stosując podobne procedury jak opisano w przykładzie 8. Otrzymany produkt końcowy charakteryzowano za pomocą RP-HPLC (czas retencji) oraz spektroskopii masowej.
Uzyskano masę cząsteczkową (MH+: 486,9 amu) zgodną z oczekiwaną strukturą (teoretyczna MH+: 487,6 amu) z eksperymentalnym błędem metody.
186 520
Uzyskany czas retencji RP-HPLC z zastosowaniem warunków eluowania Al i Bl jak opisano w przykładzie 1 wynosi odpowiednio 28,03 min i 29,50 min.
Przykład 11 (3-aminometylobenzoilo)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH2
Związek ten syntetyzowano stosując podobne procedury, jak opisano to w przykładzie 8 z wyjątkiem tego, że ostatnią resztę wprowadzono przez zastosowanie połączenia symetrycznego bezwodnika. Kwas Boc-3-aminometylobenzoesowy (251 mg) mieszano przez 15 min z 96 mg EDAC. Następnie dodano 429 żywicy i mieszanie kontynuowano przez 18 godzin. Uzyskany produkt charakteryzowano za pomocą RP-HPLC (czas retencji) oraz spektroskopii masowej (masa cząsteczkowa). Otrzymana masa cząsteczkowa (MIL : 522,9 amu) była zgodna z oczekiwaną strukturą (teoretyczne MH+ : 523,6 amu) z eksperymentalnym błędem metody. Uzyskany czas retencji RP-HPLC z zachowaniem warunków eluowania Ali Bl jak opisano w przykładzie 1 wynosił odpowiednio 28,83 min i 30,13 min.
Przykład 12
H-Aib-His-N-Me-D-2Nal-N-Me-Phe-NH2
Związek ten syntetyzowano stosując podobne procedury jak opisano w przykładzie 8, gdzie Fmoc-N-Me-D-2Nal-OH i Fmoc-His (Trt) łączono stosując HATU, a czas stosowany do rozszczepienia z żywicy peptydu zredukowano do 60 min. Otrzymany produkt końcowy charakteryzowano za pomocą RP-KPLC (czas retencji) i spektrometrii masowej (masa cząsteczkkowa). Uzyskana masa cząsteczkowa (MH+: 612,3 amu) była zgodna z oczekiwaną strukturą (teoretyczna MH+: 612,8 amu) z eksperymentalnym błędem metody. Uzyskany czas retencji z zastosowaniem warunków eluowania Al i Bl jak opisano w pryzkładzie 1 wynosił odpowiednio 24,33 min i 26,20 min.
Przykład 13 (3-aminometylobenzoilo)-D-Phe-N-Me-D-Phe-Lys-NH2
186 520
Związek ten zsyntetyzowano stosując podobne procedury jak opisana w .przykładzie 8. Otrzymany produkt końcowy charakteryzowano za pomocą RP-HPLC (czas retencji) oraz spektrometrii masowej (masa cząsteczkowa). Uzyskana masa cząsteczkowa (MH : 587,2 amu) była zgodna z oczekiwaną strukturą (teoretyczna MH+: 586,74 amu) z eksperymentalnym błędem metody. Uzyskany czas retencji RP-HPLC z zastosowaniem warunków eluowania Al i BI jak opisano w przykładzie 1 wynosił odpowiednio 21,13 min i 22,60 min.
Przykład 14 (3-aminometylobe2zoilo)-N-Me-DsPhesNsMesDsPhesLyssNH2
Związek ten syntetyzowano stosując podobne procedury jak opisano w przykładzie 11. Otrzymany produkt końcowy był charakteryzowany za pomocą RP-HPLC (czas retencji) oraz spektrometrii masowej (masa cząsteczkowa). Uzyskana masa cząsteczkowa (MH+: 601,77 amu) z eksperymentalnym błędem metody. Uzyskany czas retencji z zastosowaniem warunków eluowania Al i BI jak przedstawione w przykładzie 1 wynosi odpowiednio 20,40 mm i 21,70 min.
Przykład 15 ((3R)s3spinerydy2okarbooylo)sN-MesDsPhe-NsMesD-Phe-Lys-NH2
Związek ten syntetyzowano stosując podobne procedury jak opisano w przykładzie 11. Otrzymany produkt końcowy charakteryzowano za pomocą RP-HPLC (czas retencji) oraz spektrometrii masowej (masa cząsteczkowa). Uzyskana masa cząsteczkowa (MH+: 579,4 amu) była zgodna z oczekiwaną strukturą (teoretyczna MH+: 579,8 amu) z eksperymentalnym błędem metody. Otrzymany czas retencji RP-HPLC z zastosowaniem warunków eluowania jak przedstawiono w przykładzie 1 wynosił odpowiednio 19,88 min i 21,20 min.
Przykład 16
H-Aib-His-N-Me-D-Phe-N-Me-D-Phe-Lys-NH2
i
186 520
Związek ten syntetyzowano stosując podobne procedury jak opisano w przykładzie 12. Otrzymany produkt końcowy charakteryzowano za pomocą P-HPLC (czas retencji) i spektrometrii masowej (masa cząsteczkowa). Uzyskana masa cząsteczkowa (MH+ : 690,6 amu) była zgodna z oczekiwaną strukturą (tedroftyczea MH+: 690,9 amu) z eksperymentalnym błędem metody. Uzyskany czas retencji RP-HPLC z zastosowaniem warunków eluowania Al i BI jak przedstawiono w przykładzie 1, wynosił odpowiednio 15,71 min i 17,82 min.
Przykład 17 ((3R))3)piperydynokarbonylo)-N-Me-D)2Nal)N)Me)D-Phe-NH2
Związek ten syntetyzowano stosując podobne procedury jak opisano w przykładzie 11 używając Fmoc-N-Me-D)Phe-OH FmoC)N)Me)D)2Nal)OH i kwas BoC)(R))Nipekj)tynowy, przy czym Fmoc-N)Me-D)2Nal-OH i kwas BoC)(R)-eipekotyeowy sprzęgano stosując HATU. Otrzymany produkt końcowy charakteryzowano za pomocą RP-HPLC (czas retencji) oraz spektrometrii masowej (masa cząsteczkowa) z eksperymentalnym błędem metody. Uzyskany czas retencji RP-HPLC z zastosowaniem warunków eluowania Al i BI jak przedstawiono w przykładzie 1, wynosił odpowiednio 28,18 min i 29,55 min.
Przykład 18
H)Aib-Ala-D)2Nαl)N-Mf)D-Phe)Lys-NH2
Związek ten syntetyzowano stosując podobne procedury jak opisano w przykładzie 6. Otrzymany produkt końcowy charakteryzowano za pomocą RP-HPLC (czas retencji) i spektrometrii masowej (masa cząsteczkowa). Uzyskana masa cząsteczkowa (MH+: 660,7 amu) była zgodna z oczekiwaną strukturą (MH+: 660,8 amu) z eksperymentalnym błędem metody. Uzyskany czas retencji z zastosowaniem warunków eluowania Al i BI jak opisano w przykładzie 1, wynosił odpowiednio 26,63 min i 26,75 min.
Przykład 19
H)3)ammomftylobfnzoilO'N-Me)D-2Nal)N)Me-DlPhe-NH)CH3
186 520
115 mg (0,458 mmola) Boc-3AMB-OH, 62 mg (0,458 mmola) l-hydroksy^azabenzotriazolu i 97 mg (0,504 mmola) chlorowodorku l-etylo-3l(3ldimetyloaminopropyl lo)karbodiimidu rozpuszczono w 8 ml DCM i 1 ml DMF po czym mieszano przez 15 min. Następnie dodano 185 mg (0,458 mmola) N-metylOl2lmetyloamino-N-N-((lR.)-l-(metyl lokarbamoilo)-2lfenyloetylo)c3l(2-naftylo)-propionamidu rozpuszczonego w 5 ml DCM, po czym dodano 80 ml 0,458 mmola) diizopropyloetyloaminy i całość mieszano w ciągu 20 godzin. Fazę organiczną przemywano 50 ml 5% kwaśnego węglanu sodu, 50 ml wody i 50 ml nasyconego roztworu NaCl/IfrO, po czym suszono za pomocą siarczanu sodu i odparowano pod próżnią. Pozostałość rozpuszczonow 2 ml DCM i traktowano 2 ml TFA przez 10 min. Substancje lotne odpędzono strumieniem azotu. Pozostałość rozpuszczono w 50 ml 20% MeCN i rozcieńczono wodą do objętości 500 ml.
Półpreparatywna HPLC lOml/min, 5 przejść, 30“40%Me CN/0,1M(NH4)2SO4, pH 2,5 m
Detekcja 267 nm, Sep-Pals, 70% MeCN/0,1% TTA, liofilizacja
PD-MS teoretyczna - 536,7 otrzymana - 535,7 ± 1
HPLC Al rt 31,20 min BI rt 36,35 min
Przykład 20
H-Aib-His-NlMe-Dl2NallNlMe-DlPhelNHMe
1,54 g (2,48 mmola) FmoClL-His(trityl)-OH (BACHEM B - 1570) i 338 mg (2,48 mmola)
1-hychoksycazabenzotriazolu rozpuszczono w 9 ml DMF, ochłodzono do 0-4°C i dodano 475 mg (2,48 mmola chlorowodorku lletylOl3-(3-diimetyloaminspropylo)karbodiimidu i całość mieszano w ciągu 15 min w temperaturze 0-4°C. 500 mg (1,12-4 mmola) Nlmetylo-2lmetyloaminOlNl((R.)-ll (metylskarbamoilo)-2lfenylsetylo)l3l(2lnaftylo)propionamidu rozpuszczono w 18 ml chlorku metylenu, ochłodzono do temperatury 0-4°C, dodano do mieszaniny reakcyjnej i mieszano 1 go186 520 dzinę w temperaturze 0-4°C, po czym dodano 0,425 ml (2,48 mmola) diizopropylonty-baminy. Temperaturę mieszaniny powoli podniesiono do pokojowej i mieszano dalej przez 72 godziny. Następnie odparowano DCM strumieniem azotu i do pozostałości dodano 100 ml octanu etylu, przemyto dwukrotnie po 100 ml 5% kwaśnego węglanu sodu i 100 ml 5% kwaśnego siarczanu potasu. Fazy rozdzielono i fazę organiczną suszono za pomocą siarczanu sodu i odparowano pod próżnią. Pozostałość rozpuszczono w 8 ml DMF i potraktowano piperydyną w ciągu 15 minut, rozcieńczono 100 ml wody i przerwano reakcję dodając 1,5 ml kwasu octowego. Następnie dodano acetonitryl i mieszaninę rozcieńczono wodą do objętości 250 ml. Klarowny roztwór podano do 10 g „Seppaks” # Water, przemyto roztworem H^^/0,03 m HC1 i eluowano za pomocą 50 ml 35% MnCN/-,03 M HC1, po czym rozcieńczono wodą do 200 ml i liofilizowano. 756 mg (3,72 mmola) kwasu Boc-a-aminoizomasłowego, 506 mg (3,72 mmola) hydratu 1-hydroksy<ozabenzotriazolu i 713 mg (3,72 mmola) chlorowodorku ł-etylo3(3-dimetyloaminopropylo)karbodiimidu rozpuszczono w 6 ml DMF i po 15 min. dodano HL-His(tritylo)INMnD2NalINMeDhhnINHCH-, 2HCL rozpuszczony w 12 ml DCM, po czym dodano 0,637 ml diizopropyloetyloaminy i mieszano w ciągu 72 godzin. DCM odparowano w strumieniu azotu, dodano 100 ml octanu etylu i przemyto dwukrotnie po 50 ml 5% kwaśnego węglanu sodu i 50 ml 5% kwaśnego siarczanu potasu. Rozdzielono fazy i fazę organiczną suszono siarczanem sodu i odparowano pod próżnią. Pozostałość rozpuszczono w 6 ml DCM, ochłodzono do temperatury 0-4°C i traktowano 6 ml TFA w ciągu 10 min. w temperaturze 0-4°C. Lotne składniki odpędzono w strumieniu wody. Oleistą pozostałość rozpuszczono w 35 ml 70% acetonitrylu rozcieńczonego wodą do 50 ml i dodano 10 ml stężonego (12 molowego)kwasu chlorowodorowego i mieszano przez 72 godziny. Mieszaninę rozcieńczono wodą do 200 ml i neutralizowano stałym węglanem sodu, rozcieńczając w końcu wodą do objętości 400 ml.
Półpreparatywna HPLC
PD-MA teoretyczna - 550,7 otrzymana - 550,1
HPLC Al rt 31,75 min
BI rt 36,15 min Przykład 21
3Imetyloaminometylobenzoilo-NIMe-DI2Nal-N-Me-D-PheINH-CH-
658 mg (2,41 mmola) BocINMe3AMBIOH, 338 mg (2,48 mmola) hydratu 1-hydroksyazabnnzzbtriazolu i 475 mg (2,48 mmola) chlorowodorku |IetylbI3-(3Idimntyloaminopropylo)karbodiimidu rozpuszczono w 6 ml DMF i mieszano 15 minut. Następnie dodano 500 mg ((1,24 mmola-N-mntylo-2-meΐyloamino-N-((1 R--l-(mntylokarbamoilo--2Ifenyloetylo)-3 -—naflylo-propibnamidu rozpuszczonego w 12 ml chlorku metylenu, po czym dodano 0,425 ml (2,48 mmola) diizopropylonty-oaminy. Całość mieszano 20 godzin, po czym odparowano DMF w strumieniu azotu i do mieszaniny dodano 75 ml octanu etylu i przemyto dwukrotnie po 50 ml 5% kwaśnego węglanu sodu i 50 ml 5% kwaśnego siarczanu potasu. Odseparowano fazy i fazę organiczną suszono siarczanem sodu i odparowano pod próżnią. Pozostałość rozpuszczono w 25 ml 70% M-CN/0,1% TFA i rozcieńczono wodą do 600 ml.
186 520
Półpreparatywna HPLC
Duża kolumna, przepływ 40 ml/min, 8 przejść 28-40 i Pl 1 (NIHUSCU, 276 nM. Seppak, liofilizacja
PD-MS teoretyczna - 550,7 otrzymana - 550,1
HPLC Al rt 31,75 min Bl rt 36, 15 min
Przykład 22
N-((lR)-l-(N-((l R--2[44jrodofenylo)ll-(melylokarbamoilo)etylo)-N-metyl0karbamoilo)2-(2-naftylo)etylo)-N-metyloamid kwasu piperydyno-4-karboksylowego
kwas (2R)-2-(N-tert-butoksykarbo6ylr-N-metyloami6o)-3-(4-jodofe6ylo)propio6owy
CH, O o
Otrzymano według Can. J.Chem (1977), 55, 906 ‘H NMR: (CDC13) d 1,34 (s, 4.5H); 1.38 (S, 4.5H); 2,70 (s, 1.5H); 2.75 (S, 1.5H); 2.853.10 (m, IH); 3.2-3.4 (m, IH); 4.4-4.6 (m, 0,5H); 6.9-7.0 (m, 2H); 7.62 (d. J=10Hz, 2Hz); 9.5-10 (bs, IH)
Oster tertnouwedwy kCvasu N-heiR^-^odofenyloj-l-imetylokarbamoilojetyloj-N-metylokarbammowego
Pr
CH, O ’ CH, O
2,00 g (4,9 mmofo) mwasu (2R)-2-(N-ter[-butoksykorbonylo-N-metylonminr)-ai60-jodofe6ylr)pio6owego rozpuszczono w 20 ml chlorku metylenu. Następnie dodano 0,67g (4.9 mmola) hydratu hydroksybenzotriazou i 0,99 g (4,9 mmola) chlorowodorku l-etylo-3-(3dimetyloaminopropylo)-karbodiimidu i całość mieszano przez 15 minut. Dodano jeszcze 0,38g (4.9 mmola) 40% metanolowego roztworu metyloaminy i całość mieszano całą noc. Następnie dodano 40 ml chlorku metylenu i mieszaninę przemyto 50 ml nasyconego wodnego
186 520 roztworu kwaśnego węglanu sodu oraz 50 ml 10% roztworu kwaśnego siarczanu sodu. Fazę organiczną suszono (MgSOą) i rozpuszczalnik odpędzono pod próżnią. Pozostałość chromatografowano na żelu krzemionkowym (2,5 x 50 cm) stosując octan etylu/heptan 2:1 jako rozpuszczalnik. Otrzymano l,77g tert-butylowego estru kwasu N-UlRb-ż-ty-jodofenyloj-Hmetylokarbamoilo)-N -metylokarbaminowego.
'Η nMr : (CDCI3) (wybrane piki dla głównego rotameru) d 1.39 (s, 9H); 2.75 (s, 3H), 2.80 (d.3H); 3,29 (dd, 1HJ); 4.88 (t, 1H) (2R)-3-(4-jodofenylo)-N-metylo-2-(metyloamino)propionamid
O
1,7 g (4,0 mmola) estru tert-butylowego kwasu N-((lR)-2-(4-jodofenylo)-l-(metylokarbomoilo)etylo)-N-metylokarbaminowego rozpuszczono w 10 ml chlorku metylenu i dodano 5 ml kwasu trifluorooctowego. Całość mieszano przez 1 godzinę, po czym dodano 30 ml chlorku metylenu i 30 ml wody. Następnie wprowadzono stały kwaśny węglan sodu doprowadzając pH do 8. Oddzielono fazę organiczną, suszono (MgSCfl) i odparowano pod próżnią otrzymującl,22g (2R)-3-(4-jodofenylo)-N-metylo-2-metyloamino)propionamidu.
H-NMR: (CDC13) d.2.28 (s, 3H); 2.68(dd, 1H); 2.81(d, 3H); 3.08-3.19(m, 2H), 6,95(d, 2H); 7,63 (d, 2H)
Ester tert-butylowy kwasu N-metylo-N-((lR)-i-(N-metylo-N-((iR.)-l-(metyiokarbamoilo)-2-(4-jodofenylo)etylo)karbamoilo)-^2-^(2-^^a^;^l^o)(^^,^l^^)^arbaminowego
1.10 g (3,3g mm0la) kwasu (2R)-2(2R-t2rtNutoksykorbonylo-N-me-Nloamino)-3i(2nafylo)propionowego rozpuszczono w 10 ml chlorku metylenu i dodano 0,45g (3,1 mmola) HOAt i 0,66 g (3,5 mmola) EDAC. Po wymieszaniu w ciągu 15 minut dodano 1,0 g (3,1 mmola) (2R)-3-(4-jodofenylo)tN-metylot2t(metylotammo) propionamidu i 0,45 g (3,4 mmola) lzoprepyleetyloaminy i całość mieszano przez całą noc. Następnie dodano 30 ml chlorku metylenu, mieszaninę przemyto 30 ml nasyconego wodnego roztworu kwaśnego węglanu sodu i 30 ml 10%o kwaśnego siarczan sodu. Fazę organiczną suszono (MgS0ą) i rozpuszczalnik odparowano pod próżnią. Pozostałość chromatografowano na żelu krzemionkowym (2,5 x 20 cm) stosując octan etylu/heptan (2:1) jako eluent, otrzymując l,77g estru tert-butylowego kwasu N-metylo-N-ty 1 Ryb^-metylo-N-^ 1R)-1 tmetylokarbamoilo)-2-(4t-odofe-nylo) etyio)karbameilo)-2-(2tnaftylo)etyio)karbamlnowego.
'H NmR: (CDCI3) (wybrane piki dla głównego rotameru) d 1.38(s, H); 2.18(d, 3H); 2.45(s, 3H); 2.75(s, 3H); 5.05(m, 1H); 5,42(m, 1H) (2R)-N-((lR)-2t(4-jodofenylo)ti-(metyiokarbamolio)etyio)-Ntmetyio-2-metyk)aa^lno-3(2tnafyie)proplonamld
186 520
Ester tert-butylowy kwasu N-metylo-N-((lR)-l-(N-metylo-N-((lR)-l-(metylokarbamoilo)-2-(4-jodofenylo)etylo)karbamoilo)-2-(2-naftylo)etylo)karbaminowego rozpuszczono w mieszaninie chlorku metylenu i kwasu trifluorooctowego, po czym mieszano przez 15 minut. Następnie dodano 20 ml chlorku metylenu i 30 ml wody'. Dodając stałego kwaśnego węglanu sodu doprowadzono pH do 8. Fazę organiczną oddzielono, suszono (MgSOj) i odparowano pod próżnią uzyskując 1,40 g (2R)-N-((lR)-2-(4-jodofenylo)-l-(metylokarbamoiio)etylo)-N-metylo-2-metyloamino-3-(2-naftylo)propionamidu.
'H NMR: (CDCL) (wybrane piki dla głównego rotameru) d l,79(s, 3H); 2,02(d, 3H); 2.55(S, 3H); 3,78(dd, 1H) 5,44(dd, 1H).
Ester tert-butylowy kwasu 4-(N-((lR)-l-(N-((lR)22-(4jjodofenylo)-l-(metylokarbamoiio)etylo)-N-nαtyiokarbamoiio)-2-('2-naftyio(etyio)-N-metylokarbamoilo)piperydyno-l-karboksylowego
143 g (0,66 mmola) kwasu l-tert-butoksykarbonylopiperydyno-4-kaΓbok.syiowfgo rozpuszczono w 10 ml chlorku metylenu i dodano 90 mg (0,66 mmola) HOAt i 140 mg (0,73 mmola) EDAC. Po 15 minutach mieszania dodano 350 mg (0,66 mmola) (2R))N-((iR)-2-('4-jodoffnyio))i(metylokarbamoilo0enylo))N)metyio-2)mftyiO)aminO)3-(2-na0ylo)propionamidu i 85 mg (0,66 mmola) diizopropyloetyloaminy i całość mieszano w ciągu nocy. Następnie dodano 20 ml chlorku metylenu i przemyto 20 ml nasyconego roztworu wodnego kwaśnego węglanu sodu i 20 ml 10% kwaśnego siarczanu sodu. Fazę organiczną suszono (MgSO* i rozpuszczalnik usunięto pod próżnią. Pozostałość chromatografowano na żelu krzemionkowym stosując octan etylu jako eluent, otrzymując 412 mg estru tert-butylowego kwasu 4)(N)--iR))|)(N) (iR)-2-(4-jodofenylo)-l(metylokarbamoίlϋ)etylo)-N-:mftyiokarbamllikl)-2)-2)naftyio)ftyio)) N-metylokarbamoilo^iperydyno-1 -karboksylowego
186 520
412 mg (0,56 mmola) estru tert-butylowego kwasu 4-(1^-((1^-1-(^1-((111)-2-(4jodofenylo)sl((metyiokarb<m^oiio)etyio)-N-metyiokarbamolio)-2-(2-nlaftylo)etylo)-N-metylos karbamoilo^iperydyno-l-karboksylowego rozpuszczono w mieszaninie 5 ml chlorku metylenu i 5 ml kwasu trifluorooctowego i mieszano przez 5 min. Następnie dodano 20 ml chlorku metylenu i 20 ml nasyconego roztworu wodnego kwaśnego węglanu sodu. Stałym kwaśnym węglanem sodu doprowadzono pH do 8. Rozdzielono fazy i fazę organiczną, suszono (MgSOo) i odparowano do otrzymania 255 mg tytułowego związku.
'HNMR: (CDCI3) (wybrane piki dla głównego rotameru) d 2.32 (d,3H); 2.58(s,3H); 2.68(s, 3H); 5.33(m, 1H); 5.84 (t, 1H)
HPLC: r- = 33,35 min (Al)
PDMS: m/ z 640,0 (M+H)+
Skróty oznaczeń:
HBTU = sześcioHuanofosfonanOiabenzotriazo 1- Ni 1ο--1,ζ X 4-letrametylouroniowy
NMP = N-metylopirolidon
HATU o= eześeiofluonofosforća^ 0-(7-aiaZe2rlzotriszo3-i3ilo)-l,k3,3-lebrtnιetylouroniowy
Trt = tr-yd
HOBT - hydral 7-h-dlroksobenzotriozolu
3-AMB = 3^^l^kiίn^c^k^^-2/e^^3^m5^(ril
NsMe-a-AMB = 3-metyloaminomctylobenzoil
186 520
Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 50 egz. Cena 4,00 zł.

Claims (16)

  1. Zastrzeżenia patentowe
    1. Związek wybrany z grupy obejmującej:
    (R)-2-((3-Aminometylobenzoilo)-N-Me-D-2Nal-N-Me)-3-fenylo-propanol, lub jego sól z TFA,
    3-((3-Aminometylobenzoilo))N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-l,l-N,N-dimetyloaminopropan, lub jego sól z TFA, (2R)-2-((3-Aminometylobenzoilo)-N-Me-D-2Nal-N-Me)-3-(2-naftylo)propanol, lub jego sól z TFA, (3-Aminometylobenzoilo)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH2, lub jego sól z TFA,
    H-Aib-His-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH2, lub jego sól z TFA, (3-Ammometylobenzoilo)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-Lys-NH2,
    H-Aib-Ala-D-2Nal-N-Me-D-Phe-Lys-NH2, lub jego sól z TFA,
    H-Aib-His-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH2, lub jego sól z TFA,
  2. 2- ((3-Aminometylobenzoilo)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-l-morfolinoetan, (3-Aminometylobenzoilo)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH-Me,
  3. 3 -((3 -Metyloaminometylobenzoilo)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-1 -N,N-dimetyloaminopropan, (3-Aminometylobenzoilo)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-N-Me2,
    H-Aib-His-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH2, lub ich farmaceutycznie dopuszczalne sole.
    2. Kompozycja farmaceutyczna, znamienna tym, że jako składnik aktywny zawiera związek określony w zastrz. 1, lub jego farmaceutycznie dopuszczalne sole, oraz farmaceutycznie dopuszczalny nośnik lub rozcieńczalnik.
    3. Kompozycja według zastrz. 2, znamienna tym, że ma postać dawki jednostkowej zawierającej od około 10 do około 200 mg związku określonego w zastrz. 1, lub jego farmaceutycznie dopuszczalne sole.
  4. 4. Kompozycja farmaceutyczna według zastrz. 2 lub 3, znamienna tym, że jest przeznaczona do pobudzania uwalniania hormonu wzrostu z przysadki mózgowej.
  5. 5. Kompozycja farmaceutyczna według zastrz. 2 albo 3, znamienna tym, że ma postać odpowiednią do podawania doustnego, przezskómego, do nosa, do płuc lub pozajelitowego.
  6. 6. Związek określony w zastrz. 1, lub jego farmaceutycznie dopuszczalna sól, do zastosowania jako lek.
  7. 7. Zastosowanie związku określonego w zastrz. 1, lub jego farmaceutycznie dopuszczalnej soli, do wytwarzania leku do pobudzania uwalniania hormonu wzrostu z przysadki mózgowej.
  8. 8. Zastosowanie związku określonego w zastrz. 1, lub jego farmaceutycznie dopuszczalnej soli, do wytwarzania środka farmaceutycznego do podawania zwierzętom w celu zwiększania tempa i stopnia ich wzrostu, zwiększania produkcji mleka lub wełny, lub do leczenia ich dolegliwości.
  9. 9. Związek wybrany z grupy obejmującej:
    3- (((3R)-3-Piperydynokartxinylo)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-l-N,N-dimetyloaminopropan, lub jego sól z TFa,
    2-(((3R)-3-Piperydynokarbonylo)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH)-(l-metylo-2-pirolidynylo)etan, lub jego sól z TFA,
    H-Aib-His-D-2Nal-N-Me-D-Phe-Ser-NH2, lub jego sól z TFA, (3-Aminometylobenzoilo)-D-2Nal-N-Me-D-Phe-Lys-NH2, lub jego sól z TFA, (4-Piperydynokarbonylo)-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH2, lub jego sól z TFA, ((3R)-3-Piperydynokarbonylo)-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH2 lub jego sól z TFA,
    186 520 (3-Aminometylobenzoilo)-D-Phe-N-Me-D-Phe-NH2, lub jego sól z TFA, (3-Aminometylobenzoilo)-N-Me-D-Phe-N-Me-D-Phe-Lys-NH2, lub jego sól z TFA, ((3R)-3-Piperydynokarbonylo)-N-Me-D-Phe-N-Me-D-Phe-Lys-NH2, lub jego sól z TFA,
    H-Aib-His-N-Me-D-Phe-N-Me-D-Phe-Lys-NH2, lub jego sól z TFA, ((3R)-3-Piperydynokarbonylo)-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH2, lub jego sól z TFA,
    3 -((3 -Aminometylobenzoilo)-N-Me-D-Phe-NH)-1 -N,N-dimetyloaminopropan,
    3-Aminometylobenzoilo-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH-CH3, lub jego sól z TFA,
    3-metyloaminometylobenzoilo-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH-CH3, lub jego sól z TFA,
    H-Aib-His-N-Me-D-2Nal-N-Me-D-Phe-NH-Me lub jego sól z HC1, oraz
    N-((lR)-l-(N-((lR)-2-(4-jodofenylo)-l-(metylokarbamoilo)etylo)-N-metylokarbamoilo)2-(2-naftylo)etylo)-N-metyloamid kwasu piperydyno-4-karboksylowego, lub ich farmaceutycznie dopuszczalne sole.
  10. 10. Kompozycja farmaceutyczna, znamienna tym, że jako składnik aktywny zawiera związek określony w zastrz. 9, lub jego farmaceutycznie dopuszczalne sole, oraz farmaceutycznie dopuszczalny nośnik lub rozcieńczalnik.
  11. 11. Kompozycja według zastrz. 10, znamienna tym, że ma postać dawki jednostkowej zawierającej od około 10 do około 200 mg związku określonego w zastrz. 9, lub jego farmaceutycznie dopuszczalne sole.
  12. 12. Kompozycja farmaceutyczna według zastrz. 10 lub 11, znamienna tym, że jest przeznaczona do pobudzania uwalniania hormonu wzrostu z przysadki mózgowej.
  13. 13. Kompozycja farmaceutyczna według zastrz. 10 albo 11, znamienna tym, że ma postać odpowiednią do podawania doustnego, przezskómego, do nosa, do płuc lub pozajelitowego.
  14. 14. Związek określony w zastrz. 9, lub jego farmaceutycznie dopuszczalna sól, do zastosowania jako lek.
  15. 15. Zastosowanie związku określonego w zastrz. 9, lub jego farmaceutycznie dopuszczalnej soli, do wytwarzania leku do pobudzania uwalniania hormonu wzrostu z przysadki mózgowej.
  16. 16. Zastosowanie związku określonego w zastrz. 9, lub jego farmaceutycznie dopuszczalnej soli, do wytwarzania środka farmaceutycznego do podawania zwierzętom w celu zwiększania tempa i stopnia ich wzrostu, zwiększania produkcji mleka lub wełny, lub do leczenia ich dolegliwości.
    Przedmiotem niniejszego wynalazku są nowe związki stanowiące pochodne peptydowe i zawierające je farmaceutyczne kompozycje, oraz zastosowanie tych związków jako leków do zwalczania chorób wywołanych niedoborem hormonu wzrostu.
    Hormon wzrostu jest hormonem, który stymuluje wzrost wszystkich tkanek zdolnych do wzrastania. Ponadto hormon wzrostu znany jest jako czynnik wywierający liczne działania na procesy metaboliczne, przykładowo stymuluje syntezę białek i mobilizację wolnego kwasu tłuszczowego oraz powoduje przełączenie metabolizmu energetycznego z węglowodanów na kwasy tłuszczowe. Z tego powodu niedobór hormonu wzrostu może powodować liczne, poważne choroby, na przykład karłowatość.
    Hormor wzrostu uwalniany jest z przysadki mózgowej. Uwalnianie to znajduje się pod ścisłą, bezpośrednią i pośrednią kontrolą licznych hormonów i neuroprzenośników. Uwalnianie hormonu wzrostu może być stymulowane przez hormon uwalniający hormon wzrostu (GHRH, ang. growth hormone releasing hormone) i hamowane przez somatostatyne. W obu przypadkach hormony uwalniane są z podwzgórza, lecz w ich działaniu przede wszystkim pośredniczą specyficzne receptory umieszczone w przysadce mózgowej. Opisano również inne związki stymulujące uwalnianie hormonu wzrostu z przysadki mózgowej, przykładowo arginina, L-3,4-dihydroksyfenyloalanina (L-Dopa), glukagon, wazoprezyna, pAcAp (aktywujący peptyd adenylilocyklazy, z przysadki mózgowej, ang. pituitary adenylyl cyclase ac4
    186 520 tivating peptide), agoniści receptora muskarynowego i syntetyczne heksapeptydy, GHRP (peptyd uwalniający hormon wzrostu) uwalniający endogenny hormon wzrostu zarówno przez bezpośrednie działanie na przysadkę mózgową lub przez wpływ na uwalnianie GHRH i/lub somatostatyny z podwzgórza.
    W przypadkach chorób, w których leczeniu konieczne jest zwiększenie poziomów hormonu wzrostu, podaje się hormon wzrostu o budowie białka, lecz podawanie pozajelitowe jest nieodpowiednie. Ponadto, inne bezpośrednio działające znane czynniki pobudzające wydzielanie, na przykład, GHRH, GHRP i PACAP również są długimi peptydami i z tego powodu podawanie ich doustnie jest nieodpowiednie. Jednak, liczne pośrednio działające związki można podawać doustnie, na przykład, L-Dopę i agonistów receptorów muskarynowych, jednak ich stosowanie ograniczają wywoływane przez nie działania uboczne.
    Zastosowanie krótszych peptydów do podwyższania poziomu hormonu wzrostu u ssaków przedstawiono wcześniej przykładowo w EP 18072, EP 83864, WO 89/07110, WO 89/01711, WO 89/10933, WO 88/9780, WO 83/02272, WO 91/18016, WO 92/01711 i WO 93/04081.
    Struktura peptydów uwalniających hormon wzrostu lub ich pochodnych jest istotna dla siły uwalniającej hormon wzrostu jak również ich biodostępność. Jest to przedmiotem obecnego wynalazku, który dostarcza nowych peptydów o właściwościach uwalniania hormonu wzrostu, ulepszonych w odniesieniu do znanych peptydów tego typu.
    Streszczenie wynalazku
PL96324200A 1995-06-22 1996-06-19 Związk o właściwościach uwalniania hormonu wzrostu, kompozycja farmaceutyczna zawierająca ten związek i jego zastosowanie PL186520B1 (pl)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DK71995 1995-06-22
DK137195 1995-12-04
PCT/DK1996/000266 WO1997000894A1 (en) 1995-06-22 1996-06-19 Compounds with growth hormone releasing properties

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL324200A1 PL324200A1 (en) 1998-05-11
PL186520B1 true PL186520B1 (pl) 2004-01-30

Family

ID=26064522

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL96324200A PL186520B1 (pl) 1995-06-22 1996-06-19 Związk o właściwościach uwalniania hormonu wzrostu, kompozycja farmaceutyczna zawierająca ten związek i jego zastosowanie

Country Status (12)

Country Link
EP (1) EP0833845A1 (pl)
KR (1) KR19990028303A (pl)
AU (1) AU711104B2 (pl)
BR (1) BR9608909A (pl)
CA (1) CA2224434A1 (pl)
CZ (1) CZ287948B6 (pl)
HU (1) HUP9802821A3 (pl)
IL (1) IL122371A0 (pl)
NO (1) NO975992L (pl)
PL (1) PL186520B1 (pl)
TW (1) TW458958B (pl)
WO (1) WO1997000894A1 (pl)

Families Citing this family (26)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1998008492A1 (en) * 1996-08-29 1998-03-05 Novo Nordisk A/S Transdermal delivery of peptides
JP4116097B2 (ja) 1997-06-20 2008-07-09 ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ 成長ホルモン放出特性をもつ化合物
US6127341A (en) * 1997-06-20 2000-10-03 Novo Nordisk A/S Compounds with growth hormone releasing properties
CA2301566A1 (en) 1997-08-22 1999-03-04 Kaken Pharmaceutical Co., Ltd. N-acylated lipophilic amino acid derivatives
EP1047709B1 (en) 1998-01-16 2004-11-03 Novo Nordisk A/S Compounds with growth hormone releasing properties
US6528529B1 (en) 1998-03-31 2003-03-04 Acadia Pharmaceuticals Inc. Compounds with activity on muscarinic receptors
EA003860B1 (ru) * 1998-05-12 2003-10-30 Варнер-Ламберт Компани КОМБИНАЦИИ ИНГИБИТОРОВ ПРОТЕИН ФАРНЕЗИЛТРАНСФЕРАЗЫ И HMG KoA РЕДУКТАЗЫ И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ РАКА
US6919315B1 (en) 1998-06-30 2005-07-19 Novo Nordisk A/S Compounds with growth hormone releasing properties
AU771644B2 (en) * 1998-06-30 2004-04-01 Helsinn Healthcare Sa Compounds with growth hormone releasing properties
WO2000009537A2 (en) 1998-08-14 2000-02-24 Administrators Of The Tulane Educational Fund Compounds having growth hormone releasing activity
WO2000048623A1 (en) 1999-02-18 2000-08-24 Kaken Pharmaceutical Co., Ltd. Novel amide derivatives as growth hormone secretagogues
DE60140285D1 (de) 2000-05-31 2009-12-10 Pfizer Prod Inc Verwendung von Wachstumshormonsekretagoga zur Förderung der Beweglichkeit des Verdauungstrakts
EP1343751A2 (en) 2000-12-20 2003-09-17 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic derivatives as modulators of chemokine receptor activity
HUP0303540A2 (hu) 2000-12-20 2004-01-28 Bristol-Myers Squibb Pharma Co. Diaminok mint kemokin receptor aktivitás modulátorai, ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények és alkalmazásuk
TWI331922B (en) 2002-08-09 2010-10-21 Ipsen Pharma Sas Growth hormone releasing peptides
US7476653B2 (en) 2003-06-18 2009-01-13 Tranzyme Pharma, Inc. Macrocyclic modulators of the ghrelin receptor
EP2258359A3 (en) 2005-08-26 2011-04-06 Braincells, Inc. Neurogenesis by muscarinic receptor modulation with sabcomelin
EP2275095A3 (en) 2005-08-26 2011-08-17 Braincells, Inc. Neurogenesis by muscarinic receptor modulation
CU23558A1 (es) 2006-02-28 2010-07-20 Ct Ingenieria Genetica Biotech Compuestos análogos a los secretagogos peptidicos de la hormona de crecimiento
EA200901077A1 (ru) 2007-02-09 2010-04-30 Транзим Фарма, Инк. Макроциклические модуляторы грелинового рецептора и их применение
WO2009079797A1 (en) 2007-12-26 2009-07-02 Critical Outcome Technologies, Inc. Compounds and method for treatment of cancer
WO2010006438A1 (en) 2008-07-17 2010-01-21 Critical Outcome Technologies Inc. Thiosemicarbazone inhibitor compounds and cancer treatment methods
US8987272B2 (en) 2010-04-01 2015-03-24 Critical Outcome Technologies Inc. Compounds and method for treatment of HIV
WO2013190520A2 (en) 2012-06-22 2013-12-27 The General Hospital Corporation Gh-releasing agents in the treatment of vascular stenosis and associated conditions
US9119832B2 (en) 2014-02-05 2015-09-01 The Regents Of The University Of California Methods of treating mild brain injury
US20170121385A1 (en) 2015-10-28 2017-05-04 Oxeia Biopharmaceuticals, Inc. Methods of treating neurodegenerative conditions

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5663146A (en) * 1991-08-22 1997-09-02 Administrators Of The Tulane Educational Fund Polypeptide analogues having growth hormone releasing activity
SK281963B6 (sk) * 1993-12-23 2001-09-11 Novo Nordisk A/S Zlúčeniny ovplyvňujúce uvoľňovanie rastového hormónu, farmaceutické prostriedky s ich obsahom a ich použitie
US5798337A (en) * 1994-11-16 1998-08-25 Genentech, Inc. Low molecular weight peptidomimetic growth hormone secretagogues

Also Published As

Publication number Publication date
KR19990028303A (ko) 1999-04-15
IL122371A0 (en) 1998-06-15
JPH11507928A (ja) 1999-07-13
JP4173541B2 (ja) 2008-10-29
PL324200A1 (en) 1998-05-11
BR9608909A (pt) 1999-03-02
AU6188296A (en) 1997-01-22
NO975992L (no) 1998-02-20
AU711104B2 (en) 1999-10-07
TW458958B (en) 2001-10-11
MX9710377A (es) 1998-03-29
CA2224434A1 (en) 1997-01-09
HUP9802821A3 (en) 2000-03-28
NO975992D0 (no) 1997-12-19
HUP9802821A2 (hu) 1999-03-29
CZ287948B6 (cs) 2001-03-14
CZ408197A3 (cs) 1998-05-13
EP0833845A1 (en) 1998-04-08
WO1997000894A1 (en) 1997-01-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
PL186520B1 (pl) Związk o właściwościach uwalniania hormonu wzrostu, kompozycja farmaceutyczna zawierająca ten związek i jego zastosowanie
US5773441A (en) 2-acylaminopropanamides as growth hormone secretagogues
JP4932132B2 (ja) 成長ホルモン分泌促進薬
JP2013523599A (ja) 新規なオピオイドのジカルボン酸結合アミノ酸及びペプチドプロドラッグ並びにその用途
CZ2001253A3 (cs) Peptidové analogy PACAP
AU2017246706B2 (en) Neuropeptide s receptor (NPSR) agonists
UA73530C2 (uk) Сполука з властивостями вивільнювати гормон росту
KR20010043422A (ko) 성장호르몬 방출성을 가진 화합물
JP4359859B2 (ja) 成長ホルモン放出特性を有する化合物
JP2002505677A (ja) 成長ホルモン放出特性をもつ化合物
US7250399B2 (en) Compounds having growth hormone releasing activity
HUT77979A (hu) Peptidek, előállításuk és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények
DE60010711T2 (de) Amido-spiropiperidine promovieren die freisetzung von wachstumshormonen
EP0663834A1 (en) Growth hormone releasing peptides
DE3850818T2 (de) Fluor enthaltende Renin-Inhibitoren.
JP4481502B2 (ja) 成長ホルモン放出特性を有する化合物
JP4173541B6 (ja) 成長ホルモン放出特性を有する化合物
JP3204266B2 (ja) 成長ホルモン分泌促進剤の多形形態
US20050143318A1 (en) Growth hormone secretagogues
JPH08504779A (ja) 新規な非環式、硫黄含有ペプチド
MXPA97010377A (en) Compounds with releasing properties of growth hormone
MXPA98003351A (en) ot. POLYMORPHIC FORMS OF A GROWTH HORMONE SECRETAGOGUE
MXPA00008576A (es) Nuevas formas salinas de la n-metil-n-( (1r)-1-(n-metil-n- ( (1r)-1-(metilcarbamoil)- 2-feniletil)carbamoil)-2- (2-naftil)etil)amida del acido (2e)-5-metilhex- 2-enoico