JPH03502329A - 成長ホルモン放出活性を有するポリペプチド化合物類 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 この発明は、動物に投与したとき成長ホルモンの放出を促進する新規なポリペプ チド化合物類に関する。もう一つの態様では、この発明は特定の成長ホルモン放 出ポリペプチド化合物類を動物に投与することによって動物における成長ホルモ ンレベルの放出および上昇を促進するための方法に関する。

〔発明の背景〕

投与によって十分に高められたＧＨレベルが生じる場合には、成長ホルモン（Ｇ Ｈ）放出化合物類の投与による動物内のＧＨレベルの上昇が増体重をもたらしそ して増量した乳生産をもたらしうることが科学文献上明らかにされてきた。さら に、動物における成長ホルモンレベルの上昇は、天然に見い出される成長ホルモ ン放出ホルモンのような既知の成長ホルモン放出剤によって達成されうることが 知られている。

また、動物における成長ホルモンレベルの上昇は、例えば、Ｆ、＾、Ｍｏ５ａｎ ｙによって米国特許第４．２２３．０１９号、同４，２２３．０２０号、同４． ２２３．０２１号、同４，２２４．３１６号、同４，２２６，８５７号、同４． ２２８．１５５号、同４．２２８．１５６号、同４．２２８．１５７号、同４， ２２８．１５８号、同４．４１０．５１２号および同４，４１０．５１３号に既 に記載された幾つかの成長ホルモン放出ペプチドを適用することによっても達成 されうる。

内因性成長ホルモン放出抑制因子、ソマトスタチン（ＳＲＩＰ）に対する抗体も また上昇したＧＨレベルをもたらすのに使用されてきた。後者では、例えば、内 因性ＧＨ放出抑制因子（ＳＲＩＰ）がＧＨの放出を抑制する場合には、それが下 垂体に達する前にそれを除去することによって成長ホルモンレベルが高められる 。

成長ホルモンレベルの上昇を促進するこれらのいずれの方法も、標的動物に投与 するのに十分な純度で合成および／または単離するには高価な物質類を必要とす る。それらは容易にそして安価に製造され、化学的および／もしくは物理的に容 易に変性され、ならびに容易に精製および配合されねばならず、そして優れた輸 送特性を有さねばならないので、成長ホルモンの放出を促進する効能を有する短 鎖で比較的単純なポリペプチド類が好ましいであろう。

〔発明の目的〕

従って、この発明の目的は動物の血液における成長ホルモンレベルの放出および 上昇を促進しうる新規な成長ホルモン放出化合物類を提供することにある。

本発明のもう一つの目的は、動物の血液における成長ホルモンの放出および上昇 レベルを促進するための方法を提供することにある。

本発明のこれらの目的と他の目的は以下の記述および請求の範囲を精査すること で明らかになるであろう。

〔発明の開示〕

本発明に従えば、われわれは、動物における成長ホルモンの放出を促進する数種 の新規なポリペプチド化合物を発見した。これらの新規な成長ホルモン放出化合 物の製造、特性決定および投与を次により詳細に記載するであろう。

〔発明の詳細な記述〕

本発明は、動物の血液における成長ホルモンレベルの放出および上昇を促進する 数種の短鎖（すなわち７から１１個までのアミノ酸残基）ポリペプチド類の発見 に基づく。本発明の範囲内に入るものと考慮されているポリペプチド類は、次の 一般式によって特定される。

Ｘ−ＡＡ２−ＡＡ３−Ｔｒｐ−ＡＡ５−Ｙ−Ｚ上式中、Ｘは、旧５−ＡＡＩ−１ ３（ＮＭｅ）Ｈｉｓ−ＡＡＩ−（すなわち、イミダゾール環が３位でメチル化さ れている）であって、ＡＡＩが天然に見い出されるすべてのし一アミノ酸および ＤＡｌａからなる群より選ばれる基、ＡＡＯ−Ｈｉｓ−ＡＡＩ　、ならびに ＡＡＯ−３（ＮＭｅ）Ｈｉｓ−ＡＡＩであって、＾ＡＯが天然に見い出されるす べてのし一アミノ酸、Ｍｅｔ（０）、　ＤＯＰＡおよびＡｂｕからなる群より選 ばれ、かつＡＡＩが前記定義のとおりである基、からなる群の基から選ばれ、 ＡＡ２は、ＤＰｈｅ、　ＤＴｒｐ、　５−フルオロ−ＤもしくはＤ／Ｌ　Ｔｒｐ 　。

６−フルオロ−ＤもしくはＤ／Ｌ　Ｔｒｐ（すなわち、インドール環が５位もし くは６位でフッ素化されている）、（ホルミル）ＤＴｒｐ　（すなわち、インド ール窒素でホルミル化されているＤＴｒｐ）、”ＸＴｒｐであって、”ＸＴｒｐ はＮ−モノメチル化ＤＴｒｐ異性体類（すなわち、（Ｎ　”　Ｍｅ）　ＤＴｒｐ および（インドールＮＭｅ）ＤＴｒｐ）からなる群より選ばれる基　、Ｄ”Ｎａ ｌならびにＤ’　Ｎａｌからなる群より選ばれ、 ＡＡ３は、Ａｌａ、　ＧｌｙおよびＳｅｒからなる群より選ばれ、ＡＡ５は、Ｄ Ｐｈｅおよび（ＮＭｅ）　ＤＰｈｅからなる群より選ばれ、Ｙは、 （ａ）ＡＡ７（ここで、ＡＡ７はＡｒｇ、　１Ｌｙｓ、　ＬｙｓおよびＯｒｎか らなる群より選ばれる）、ならびに （ｂ　）　−ＡＡ６−ＡＡ７　（ここで、ＡＡ６は天然に見い出されるすべての し一アミノ酸、天然に見い出されるし一アミノ酸のジペプチド類（例えば、Ａｌ ａ−Ａｌａ）　、および次式ＨｔＮ−（ＣＨｚ）　−−ＣＯＪ　（ここで、ｎ　 ＝　１〜１２）で示される化合物からなる群より選ばれ、そしてＡＡ７は前記定 義のとおりである基）、からなる群より選ばれ、そしてＺは、前記ポリペプチド のＣ末端基またはこのＣ末端アミノ酸プラス末尾の基〔ここで、Ｚは−ＣＯＮＨ ｚ　　、　　Ｃ０ＯＨ。

Ｃ０ＯＲ，Ｃ０ＮＨＲ、Ｃ０ＮＲｚ　、　　ＣＨｔＯＨおよび−ＣＨ，ＯＲから なる群より選ばれ（ここで、Ｒは炭素原子１〜６個を有するアルキル基もしくは 炭素原子１２個までを有する芳香環であり）、そしてまた、Ｚは−Ｇｌｙ−Ｚ’ 　＊　−Ｎｅｔ−Ｚ’　、　−Ｌｙｓ−Ｚ’　、　−Ｃｙｓ−Ｚ’　。

−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｚ’および−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ｚ’からなる群より選ばれる （ここで、Ｚ′は−ＣＯＮＨｚ　　、　　Ｃ０ＮＨＲ、Ｃ０ＯＨ，Ｃ０ＯＲ。

Ｃ０ＮＲｚ　　、　　ＣＨｔＯＨおよび−ｃｎｚｏｎからなる群より選ばれ、そ してＲは前記定義のとおりである）〕を表しており、ならびに前記ポリペプチド 類いずれがの有機付加塩または無機付加塩であって、 ここで、使用されているアミノ酸残基の略号は標準的なペプチドの命名法に従う ものであり、 Ｇ１ｕ＝Ｌ−グルタミン酸 Ａｓｐ＝Ｌ−アスパラギン酸 Ｃｙｓ−Ｌ−システィン へｒｇ＝Ｌ−アルギニン Ｇ］ｎ＝Ｌ−グルタミン Ｍｅｔ＝Ｌ−メチオニン ５ｅｔ＝Ｌ−セリン Ａｓｎ＝Ｌ−アスパラギン 旧５＝Ｌ−ヒスチジン Ｔｒｐ＝Ｌ−）リプトファン Ｖａｌ＝Ｌ−バリン ＤＯＰＡ＝　３　、４−ジヒドロキシフェニルアラニンＭｅｔ（０）＝メチオニ ンスルホキシドＡｂｕ　＝α−アミノ酪酸 １Ｌｙｓ−Ｎε−イソプロピル−Ｌ−リジン４−Ａｂｕ−４−アミノ酪酸 ０ｒｎ＝Ｌ−オルニチン ＤαＮａｌ　＝α−ナフチルーＤ−アラニンＤ’Ｎａ１＝β−ナフチル−Ｄ−ア ラニンを意味し、 「Ｄ」によって先導される３文字アミノ酸略号のすべては、そのアミノ酸残基の Ｄ配置を示し、ｒＤ／ＬＪによって先導される略号は指定されたアミノ酸のＤお よびＬ配置を示す。

この開示の目的上、グリシンは「天然に見い出されるし一アミノ酸」の語に包含 されるものと考慮されている。

アミノ酸Ｘ、ＡＡ２．ＡＡ３．ＡＡ５およびＹに対する塩基性、中性または酸性 アミノ酸残基の選択に関連する柔軟性は、所期のペプチドの多様な物理化学的性 質を制御するところのものを提供する。このような柔軟性はいずれか与えられる べき種に対する所期のペプチドの製剤および供給にとって重大な利点を提供する 。さらなる柔軟性は、部分Ｒ，ＺおよびＺ′がさらに変動しうるとの事実によっ て付与されるので、所期の化合物の追加の物理化学的性質の制御を提供する。

本発明の実施に際して使用される好ましい成長ホルモン放出化合物は、次のもの からなる群より選ばれる。

Ｈｉｓ−Ａｌａ−ＡＡ２−Ａｌａ−Ｔｒｐ−ＡＡ５−ＡＡ７−ＮＨｚおよびＨｉ ｓ−Ａｌａ−ＡＡ２−Ａｌａ−Ｔｒｐ−ＡＡ５−ＡＡ６−ＡＡ７−ＮＨｚ　、な らびにこれらのポリペプチド類いずれかの有機付加塩または無機付加塩（これら は場合によってＡＡＯによって先導されていてもよく、そしてＡＡＯ，ＡＡ２． ＡＡ５．ＡＡ６およびＡへ７は前記定義のとおりである）。

これらの合成の容易さ、血清中の成長ホルモンレベルの上昇を促進するに際し効 能を示すのでこれらの化合物が好ましく、その結果として商業規模の製造や利用 に魅力がある。さらに、これらの化合物は、各種の動物種へのこのようなポリペ プチド化合物の効率的な供給に望ましい物理化学的性質を有する点でも有利であ るかも知れない。柔軟性は本発明のポリペプチド化合物の多くの位置におけるい ろいろな置換基によって可能になるため、所期の供給方法に適合するようにこれ らのポリペプチドのＮ末端、Ｃ末端および中心部の極性、中性または無極性を選 ぶことによって広範囲の供給ベヒクルを使用することができる。

最も好ましい態様では、本発明の実施に際して使用される成長ホルモン放出ポリ ペプチドは次の配列を有する。

Ｈｉｓ−Ａｌａ−ＡＡ２−Ａｌａ−Ｔｒｐ−ＡＡ５−ＡＡ７−ＮＨｚまたはこれ らの有機付加塩もしくは無機付加塩（なお、ＡＡ２．　ＡＡ５およびＡＡ７は前 記定義のとおりである）。この最も好ましい群の化合物のうち、特に好ましい構 成員は次の配列を有する。

Ｈｉｓ−Ａｌａ−ＤＴｒｐ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−ＤＰｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨｚならび にこれらの有機付加塩もしくは無機付加塩。

現在のところ、これらの化合物が最も好ましい、なぜかならば、これらのより短 い鎖のポリペプチドは合成に経費がかからず、かつこれらの具体的な化合物類は 血清中の成長ホルモンレベルの上昇を促進する上で高レベルの力価を有すること が見い出されたからである。

この発明の化合物類を使用して、動物の血中ＧＨレベルを上昇し、乳牛の産乳を 増加し、哺乳類（例えば、ヒト、ヤギ、ウシおよびブタ）ならびに魚、家禽、他 のを推動物および甲殻類動物のような動物の身体の成長を促進し、動物の毛およ び／または毛皮の生産を増大されることができるであろう。

身体成長の総量は、動物種の性および年齢、投与される成長ホルモン放出化合物 の量および本質ならびに投与経路などに依存する。

この発明の新規なポリペプチド化合物類は、普通の溶液ペプチド化学および固相 ペプチド化学の方法または当該技術分野で既知の古典的な方法によって合成する ことができる。固和合或はペプチドＣ末端から開始される。適当な出発原料は、 例えば、クロロメチル化樹脂、ヒドロキシメチル樹脂、ベンズヒドリルアミン（ ＢＨＡ）樹脂またはバラ−メチルベンズヒドリルアミン（ｐ−ＭｅＢＨＡ）樹脂 に必要な保護がされたα−アミノ酸を結合することによって調製することができ る。このようなりロロメチル化樹脂の１つは、Ｂｉｏ　Ｒａｄ　Ｌａｂｏｒａｔ ｏｒｉｅｓ（Ｒｉｃｈｍｏｎｄ、　Ｃａ１ｉｆ）によってＢＩＯＢＥＡＤＳ　Ｓ χ−１の商標の下で販売されている。ヒドロキシメチル樹脂の調製は、Ｂｏｄａ ｎｓｋｙらによってＣｈｅｍ、Ｉｎｄ、（Ｌｏｎｄｏｎ）３８．１５９７（１９ ６６）に記載されている。ＢＨＡ樹脂は、ＰｉｅｔｔａおよびＭａｒｓｈａｌｌ によってｑ恒」工Ｃｏｍ＋ｓ、、　６５０（１９７０）に記載されており、そし てＰｅｎ１ｎｓｕｌａＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、　Ｉｎｃ、、　（Ｂｅｌｓｏ ｎｔ、　Ｃａ１ｉｆｏｒｎｉａ）から市販されている。

最初の結合後、室温で有機溶媒中、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）溶液または塩化 水素酸（ＨＣ／り溶液を含む酸試薬の選択によってα−アミノ保護基を除去する ことができる。このα−アミノ保護基の除去後、残りの保護されたアミノ酸を所 定の順で段階的にカップルさせることができる。それぞれの保護されたアミノ酸 は、一般に約３倍過剰量で、例えば塩化メチレン（ＣＨｚＣｌ　ｔ）もしくはジ メチルホルムアミド（ＤＭＦ）およびそれらの混合液中のジシクロへキシルカル ボジイミド（ＤＣＣ）またはジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）　ｉ液の ようなカルボキシル基活性剤を使用して反応させることができる。

所期のアミノ酸配列が完成した後、樹脂支持体から目的のペプチドを開裂するだ けでなく、また通常使用されている側鎖の保護基の殆どを開裂するフッ化水素（ ＨＦ）のような試薬で処理することによって、前記樹脂から目的のペプチドを開 裂することができる。クロロメチル樹脂またはヒドロキシメチル樹脂が使用され る場合、ＨＦ処理はフリーのペプチド酸の製品をもたらす、ＢＨＡまたはｐ−Ｍ ｅ−ＢＨＡ樹脂が使用される場合、ＨＦ処理は直接的にフリーのペプチドアミド 類をもたらす。

前述の固相法は、当該技術分野で周知であり、ＳｔｅｗａｒｔおよびＹｏｕｎｇ によって、釦旦り力ｙｌ力上山鼠ｍ止競ｎ：第２版（Ｐｉｅｒｃｅ　Ｃｈｅｍｉ ｃａｌ　Ｃｏ、、　Ｒｏｃｋｆｏｒｄ、　ｌｔ、　１９８４）に記載されている 。

本発明のペプチド部分を合成するのに使用することができる周知の溶液法のいく つかは、Ｂｏｄａｎｓｋｙらによって、ガ１山棟鉦−■亘、第２版（Ｊｏｈｎ　 Ｗｉｌｅｙ　＆　５ｏｎｓ、　Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ、　Ｎ、Ｙ。

１９７６）に示されている。

本発明の他の態様に従えば、動物の血中の成長ホルモンレベルの放出および／ま たは上昇を促進するための方法が提供される。この方法は、前記ポリペプチド類 の少なくとも１種の有効量を動物に投与することを含んでなる。

この発明の化合物類は、経口、非経口〔筋肉（ｉ、園、〕注射、腹腔内（ｉ、ｐ 、）注射、静脈（ｉ、ｖ、）注射もしくは皮下（ｓ、ｃ、）注射〕、鼻孔、腟、 直腸または舌下経路の投与によって投与することができ、各経路の投与に適する 投与剤形に裂開化することができる。

経口投与のための固形投与製剤としては、カプセル、錠剤、ピル、散剤および顆 粒剤が挙げられる。このような固形投与製剤では、活性化合物がシュクロース、 ラクトースまたは澱粉のような不活性希釈剤なくとも１種と混合される。このよ うな投与製剤はまた、普通に使用される状態で不活性希釈剤、例えばステアリン 酸マグネシウムのような滑剤以外の追加の物質を含めることもできる。カプセル 、錠剤およびピルの場合には、これらの投与製剤は緩衝剤を含んでもよい、さら に錠剤およびピルは腸用被覆剤として調製することができる。

経口投与のための液状投与製剤としては、水のような当該技術分野で通常使用さ れる不活性希釈剤を含有する乳剤、溶液、懸濁液、シロップおよびエリキシルが 挙げられる。このような希釈剤に加え、組成物はまた、湿潤剤、乳化剤、懸濁剤 、甘味剤、香味剤および芳香剤のような補助剤を含むことができる。

この発明の非経口投与製剤としては、滅菌の水性もしくは非水性溶液、懸濁液ま たは乳化液が挙げられる。非水性溶媒またはベヒクルの例としては、プロピレン グリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油およびコーン油のような植物 油、ゼラチンならびにオレイン酸エチルのような注射可能な有機エステル類が挙 げられる。このような投与製剤もまた、保存側、湿潤剤、乳化剤および分散剤の ような補助剤を含んでもよい。これらは、例えば、細菌残存性フィルターを通す 濾過によって、組成物へ滅菌剤を組み入れることによらて、組成物を照射するこ とによって、または組成物を加熱することによって滅菌してもよい、これらはま た、使用直前に滅菌水または他の特定の滅菌注射可能な媒体で調製してもよい。

引用することによって本明細書の内容となる、われわれの同時係属出願第８６１ 　、９６８号および同３７，２７５号で示唆するように、本発明の新規化合物類 もまた、成長ホルモン放出ホルモン（すなわち、天然に見い出される成長ホルモ ン放出ホルモンならびにその類縁体および機能等個物）との組み合わせ、ならび に成長ホルモンの放出を促進する他の化合物類、例えば、成長ホルモン放出ペプ チド類との組み合わせで投与される場合にも有用である０組み合わされたものは 組み合わされたものの各成分に対する個別の応答の加算によって予期されるもの より遥かに大きな成長ホルモンの放出を促進する、すなわち、組み合わされたも のは個々の成分に比し相乗的な応答を示すので、前記のような組み合わされたも のが本発明の成長ホルモン放出ペプチド類の投与にとって特に好ましい手段であ る。成長ホルモン放出ペプチド類の組み合わせ投与に対するさらなる詳細につい て、当業者は前記引用の特許出願を参照されたい。

投与される本発明のポリペプチド類またはポリペプチド類の組み合わされたもの の量は、多数の因子、例えば、処置される具体的な動物、その年齢および性別、 望まれる治療効果、ならびにポリペプチド類またはポリペプチド類の組み合わさ れたものが使用される投与経路に応じて変動するであろう。

しかしながら、すべての場合に、処置動物の血中の成長ホルモンレベルの放出お よび上昇を促進するために有効な量が使用される０通常、この用量レベルは、体 重ｌ）Ｃａ当たり総ペプチドが０．１Ｒから１０■までの範囲内にある。一般に 、組み合わされたものの相乗作用に起因し、成長ホルモン放出ペプチド類の組み 合わされたものの投与は、同様の応答を得るのに個々の成長ホルモン放出化合物 に要求される用量レベルに比し、個々の成長ホルモン放出化合物類のより少ない 用量を使用することが可能であろう。

前述のポリペプチド類およびそれらの組み合わされたものの有機付加塩および無 機付加塩を活性成分として含んでなる組成物、場合によって担体、希釈剤、徐放 性マトリックスもしくは被覆剤と組み合わされたものも本発明の範囲内に包含さ れる。

本発明の範囲内に入ることが予期されている前記成長ホルモン放出化合物類およ びそれらの組み合わされたものの有機付加塩または無機付加塩には、アセテート 、トリフルオロアセテート、オキザレート、バレレート、オレエート、ラウレー ト、ベンゾエート、ラクテート、トシレート、シトレート、マレエート、フマレ ート、スクシネート、タータレートおよびナフタレートなどの有機部分、ならび に第１族（すなわち、アルカリ金属塩）、第■族（すなわち、アルカリ土類金属 塩）、アンモニウムおよびプロタミン塩、亜鉛、鉄ならびにクロライド、ブロマ イド、フルフェートおよびホスフェートなど、ならびに前記有機部分のようなカ ウンターイオンを有するような無機部分の塩が包含される。

ヒト被験者への投与が予期される場合には、製薬上許容されうる塩類が好ましい 。このような塩としては、当該技術分野で周知の方法によって調製されるナトリ ウム塩、カリウム塩、リチウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、バリウム塩 、アンモニウム塩およびプロタミン塩を初めとする製薬工業で普通に使用される 無毒性アルカリ金属、アルカリ土類金属およびアンモニウム塩が挙げられる。そ の語にはまた、適当な有機酸または無機酸と本発明の化合物との反応によって一 般的に調製される無毒性の酸付加塩も包含される。代表的な塩類としては、塩化 水素酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、吉草酸塩、 オレイン酸塩、ラウリン酸塩、ホウ酸塩、安息香酸塩、乳酸塩、リン酸塩、Ｐ− トルエンスルホン酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、 酒石酸塩およびナフタレート（２−ナフタレンスルホン酸塩）などが挙げられる 。

さらに、本発明は何れも限定するものでない以下の例を引用することによってよ り詳細に記載されるであろう。

貫−上−ホルモン　　ペプチドツム 市販の自動ペプチド合成器の反応器中にＰ−メチルベンズヒドリルアミン塩酸塩 （ｐＭｅ−ＢＨＡ−ＨＣｌ　）樹脂を入れた。この樹脂を１ｇ当たり約５ミリモ ルが荷重されるまで遊離アミンで置換した。前記化合物は、Ｎ、Ｎ’−ジシクロ へキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）のような適当な活性化剤を使用し、ペプチド 配列のカルボキシ末端で開始する個々のアミノ酸のカプリングによって調製した 。個々のアミノ酸のα−アミンを、例えばｔ−ブチルオキシカルボニル誘導（ｔ −Ｂｏｃ）で保護し、反応性側鎖の官能基を第１表に概説するように保護した。

】−」−一表 固相ペプチド合成に適する側鎖の保護基アルギニン：　　　　　Ｎ１−）ジル アスパラギン酸：　　Ｏ−ベンジル システィン：　　　　Ｓ−パラ−メチルベンジルグルタミン酸二　　　〇−ベン ジル ヒスチジン：　　　　　Ｎ　１　”−トシルリジン二　　　　　　Ｎε−２，４ −ジクロロベンジルオキシカルボニル メチオニン：　　　　Ｓ−スルホキシドセリン：　　　　　　０−ベンジル スレオニン二　　　　〇−ベンジル トリプトファン：　　Ｎｉ−ホルミル チロシン：　　　　　　０−２．６−ジクロロベンジル最初のアミノ酸を組み入 れる前に、樹脂を、ジクロロメタン（ＣＨ，Ｃｆ□　；約１０−／樹脂ｇ）で３ 度（それぞれ約１分）撹拌し、ジクロロメタン中Ｎ、Ｎ−ジイソプロピルエチル アミン（ＤＩＥＡ）　（９０：　１０　；約１０ｄ／樹脂ｇ）の３度（それぞれ 約２分）撹拌で中和し、次いでジクロロメタン（約１０ｄ／樹脂ｇ）で３度（そ れぞれ約１分）撹拌した。最初のアミノ酸およびそれに続くアミノ酸類は、適当 量のジクロロメタン中、樹脂の結合能の総量の約３．０倍の適切に保護されたア ミノ酸と樹脂の結合能の総量の約１．５倍のＤＣＣを使用して予め形成された対 称酸無水物を使用して樹脂に連結した。低ジクロロメタン溶解性のアミノ酸類に ついては、Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）を加えて均質溶液とした。

一般に、対称酸無水物は反応器に導入する前３０分以内に室温以下の温度で調製 した。対称酸無水物の調製によって生成するジシクロへキシルウレアは、反応器 中への溶液の重力濾過によって除去した。樹脂へのアミノ酸のカプリングの進行 は、通常、第一アミンおよび第二アミンと反応するニンヒドリンのような試薬を 使用する呈色試験によってモニターした。樹脂への保護されたアミノ酸のカプリ ングが終了（〉９９％）すると、そのα−アミン保護基を酸試薬で処理すること によって除去した。

通常使用される試薬は、ジクロロメタン中トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）およびア ニソール（５３：４５：２）からなる。この樹脂上へのそれぞれ個々のアミノ酸 残基を組み入れる全体の手順は第２表に概説する。

】−」Ｌ−麦 樹脂上への個々のアミノ酸の組み入れ手順数−一１　　　　　　　　　道−挫　 互皿Ｚ遺挫１、　ジクロロメタン　　　　　　　　　　３　　１　分２、　　Ｔ ＦＡ、アニソール、ジクロロメタン　１　　２　分（４５：　２　：　５３） ３、　　ＴＦＡ、アニソール、ジクロロメタン　１　　２０　分（４５：　２　 ：　５３） ４、　ジクロロメタン　　　　　　　　　　３　　１　分５、　　ＤＩＥＡ、ジ クロロメタン（１０：９０）　　　３　　　２　　分６、　ジクロロメタン　　 　　　　　　　　３　　１　分７、　予備形成された対称酸無水物　　　　１　 　１５−１２０分９８、　ジクロロメタン　　　　　　　　　　３　　１　分９ 、　１ｓｏ−プロパツール　　　　　　　　３　　１　分１０、ジクロロメタン 　　　　　　　　　　３　　１　分１１、カプリング反応の進行のモニター１１ １２、それぞれ個々のアミノ酸について工程１〜１２を繰り返す ０力プリング時間は個々のアミノ酸に依存する。

Ｏカプリングの程度は、一般に呈色試験によってモニターることができる。カプ リングが終了したならば次のアミノ酸をカプリングすることができる。

ペプチド合成のこの方法を使用することによって、次式％式％ のごとき新規な樹脂結合ポリペプチド類が得られた〔上式中、Ｘ、ＭＡ２．ＭＡ ３．ＭＡ５およびＹは前記定義のとおりであり、■はポリマー樹脂でありそして 構成アミノ酸類は必要な場合には適当な保護基で保護されている〕。前記一般式 に従い、各種のペプチド生成反応を使用して製造することができる具体的な配列 （適当に保護された状態）としては次のものが挙げられる。

Ｈｉｓ−Ａｌａ−ＤＴｒｐ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−ＤＰｈｅ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−■。

Ａｌａ−ＤＴｒｐ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−ＤＰｈｅ−＾１ａ−Ｌｙｓ−■。

Ｈｉｓ−Ａｌａ−ＤＴｒｐ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−ＤＰｈｅ−Ｌｙｓ−■、およびＡ ｌａ−ＤＴｒｐ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−ＤＰｈｅ−Ｌｙｓ−■。

貫り一亀−一・・　トの　　　　ＧＨ 未未熟ススプラーク−ダウレイＳｐｒａｑｕｅ−Ｄａｕｌｅｙ）ラットは、Ｃｈ ａｒｌｅｓ　Ｒｉｖｅｒ　Ｌａｖｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ、 　ＭＡ）から入手した。

到着後それらを２５°Ｃで１４　：　１０時間の明：暗サイクルにて飼育した。

ウォターネズミおよびプリナラットの餌は随意に与え５０■／ｋｇで腹膜内麻酔 した２０分後にペプチドでｉ、ｖ、処置した。

０．１％ゼラチンを有する正常の生理食塩水がペプチドの静脈（ｉ、ｖ、）注射 のためのベヒクルであった０体重５５〜６５ｇの麻酔ラットに、第３表に示され る成長ホルモン放出化合物の量を静脈注射した。注射は頚静脈内への溶液０．１ 　ｄとして行った。

すべての動物を、最終の試験注射（第３表参照）１０分後断頭によって殺した。

血中ＧＨレベルの測定のための体幹血液を話頭後に集めた。血液を凝固させた後 、それを遠心し、凝塊から血清を分離した。下記のようなＮａｔｉｏｎａｌ　Ｉ ｎ５ｔｉｔｕｔｅｏｆ　Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ、　Ｄｉａｂｅｔｅｓ　ａｎｄ　Ｄ ｉｇｅｓｔｉｖｅ　ａｎｄ　Ｋｉｄｎｅｙ　Ｄｉｓｅａｓｅ（ＮＩＡＤＤＫ）の 開発した方法に従って成長ホルモンレベルのラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）測 定についてサンプリングする日まで血清を凍結保存した。

一般に、次の順序で冷却温度（約４°Ｃ）にて単−設置のＲＩＡ分析チューブに 試薬を加えた。

（ａ）緩衝液 （ｂ）「コールド」　（すなわち、無放射能）標準または分析すべき未知血清試 料 （Ｃ）放射性ヨウ素化成長ホルモン抗原、ならびに、（ｄ）成長ホルモン抗血清 。

試薬の添加は、一般に最終ＲＩＡチューブ希釈が約１＝３０．０００　（抗血清 対総液体量：容量：容量）を達成するように行った。

次に、混合試薬を一般に室温（約２５°Ｃ）で約２４時間インキュベートした後 、複合化した成長ホルモン抗血清に結合しそして沈殿を起こす第二の抗体（例え ば、ヤギまたはラビット抗モンキーガンマグロブリン血清）を添加した。次に、 ＲＩＡチューブの沈殿含有物を、ガンマシンチレーションカウンターにより時間 の特定期間内のカウント数について分析した。

標準曲線を成長ホルモン（ＧＨ）レベルに対する放射能のカウント数をプロット することによって作成した０次に、未知の（１，Ｈレベルを標準曲線を参照する ことによって測定した。

血清ＧＨは、Ｎａｔｉｏｎａｌ　Ｈｏｒ＋＋＋ｏｎｅ　ａｎｄ　Ｐｔｔｕｉｔａ ｒｙ　Ｐｒｏｇｒａ＋ｉによって提供される試薬を用いるＲＩＡで測定した。

第３表の血清レベルは、０．６１国際単位／■（ＩＵ／■）のラッ）ＧＨ積標準 表すｎｇ／Ｉ１１で記録した。データは平均の標準誤差（ＳＥＭ）の平均値を＋ ／−とじて記録する。統計解析は、スチューデント（Ｓｔｕｄｅｎｔ）のｔ分布 を用いて行った。第３表に示した結果は、６匹のラットによる試験の平均である 。

星−主一表 ベントバルビタール麻酔ラットの成長ホルモン放出ヒム　によ　て　准　れる　 　　ＧＨｎ　　ｒｄｔ（動物は最終注射後１０分目に犠牲にした）１比較ベブチ ド 】−」し−表（続き） 第３表では、本発明の化合物類は、それらの化合物が投与されたラットの血中の 成長ホルモンレベルの放出および上昇を促進することを示す。

ラットをベンドパルビタールで予備処理することなくそれらを麻酔しなかったこ と、およびペプチド類の組み合わされたものをラットに投与したことを除き例２ の方法を繰り返した。投与された化合物類、用量レベルおよび結果を第４表に示 す。

】−」Ｌ−表 グループ１′″および　またはグループ３１　Ａ　をる　　のヒ４　の　　　− ・トにお番る　　　　　ｔｌ　した　ＡＨ＋１　　　　　　されたＧＨＸＷ１対 照　　　　　　　　１２±３ 発明化合物、１０　　　　　　　　　　　１１１±２６比較化合物、１０　　　 　　　　　　　　２０４±５１グループ１の化合物、３工３１±５０ 発明＋グループ１　　　　　　　　　　１９７６±７１４比較＋グループ１　　 　　　　　　　　２５２５±４５３グループ３の化合物、１０７９±２９ 発明＋グループ３　　　　　　　　　　１２７１±３９４比較士グループ３　　 　　　　　　　　１５９７±３８７発明＋グループ１＋グループ３　　　　４６ ２２±５１７比較十グループ１＋グループ３　　　　４３４４±３７４９グルー プｌとグループ３の化合物は、引用することによって本明細書の内容となった出 願第８６１，９６８号および同３７．２７５号明細書に詳細に記載されている。

これらの試験で使用された化合物のすべては次の配列を有する。

発明化合物− Ｈｌｓ−Ａｌａ−ＤＴｒｐ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−ＤＰｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨｚ　；比 較化合物 Ｈｉｓ−ＤＴｒｐ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−ＤＰｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨｚ　；グループ１ の化合物− Ｔｙｒ−Ａ　ｌａ−Ａｓｐ−Ａ　１　ａ−１１ｅ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−５ ｅｒ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｖａ　１−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｇ　Ｉｎ−Ｌｅｕ −Ｓｅｒ−Ａ　Ｉａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ａｓｐ−１１ ｅ−Ｎｌｅ−５ｅｒ−Ａｒｇ−ＮＨｚ　；グループ３の化合物− Ｔｙｒ−ＤＡｒｇ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−ＮＨｚ第４表の結果は、発明の化合物が模 範的なグループ１および／またはグループ３の化合物と組み合わされて投与され た場合、比較化合物（既に相乗的応答を与えることが明らかにされている）によ って得られるのと同等の相乗的応答を示すことを明らかにする。

１−　　　　　ホルモン　　− ６匹の経度産乳ホルスタインキ（平均体重５７５ｋｇ　＞を牛小屋で飼育した。

この牛の飼料は、コーンサイレージとしてフォーレージ乾物７０％とアルファル ファ乾草として３０％による濃度比５０　：　５０のフォーレージからなる。前 記飼料の濃厚部分は、完全な混合飼料を提供するために適当量のコーンミールお よび大豆ミールを含ませた。この飼料は、中乳汁分泌（ｍｉｄ−１ａｃｔａｔｉ ｏｎ）初期の乳牛の栄養要求量（すなわち、乾物、タンパク賞、エネルギー、粗 繊維、ミネラルおよびビタミン）に合致するようにＮＰＣガイドラインに従って 調整した。ウシには１日２度飼料を与えた。

カテーテルが血液試料を抜き取るために頚静脈に挿入され、次いでペプチド類が 静脈注射（ｉ、ｖ、）された。血液の抜き取り後毎にそのカテーテルを通して生 理食塩水中４ｄを補填した。

血液試料６ｄは、試験日毎に約１２　：　２０ｐｍと４ｐｍ＋（７）間チー４０ ゜−２０，−１０，Ｏ、＋５　、　＋１０．　＋１５．　＋２０．　＋３０．　 ＋４０゜＋６０　、　＋８０　、　＋１００　　、　＋１４０　、および＋１６ ０分に集めた。常態の生理食塩水または生理食塩水中に溶解したペプチド類を、 麻酔していない牛に対して０時にカテーテルを介して静脈注射した。生理食塩水 ／ペプチドは不溶性の小塊（ｂｏｌｕｓ）が存在した（容量５．０ｄ）。血液は ＥＤＴＡ処理チューブに集め、遠心してペレットから血清を分離した。血清は、 成長ホルモンのラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）についてサンプリングする日ま で凍結保存した。血清のＧＨはＮＩＡＤＤＫより提供された試薬を用いるＲＩＡ によって測定した。このＧＨレベルは、３．２ＩＵ／ｍｇに等価である標品ＮＩ Ｂ−ＧＨ−Ｂ１Ｂに基づくウシＧＨのｎｇ／ｄ表示で報告する。データは平均の 標準誤差（ＳＥＭ）の平均値を＋／−として記録する。統計的な解析はＳ　ｔｕ ｄｅｎ　ｔのｔ試験によって行った。結果を第５表に示す。

】−」Ｌ−表 ”　ＧＨＡＵＣはポラス（ｂｏｌｕｓ）の１．Ｖ、注射後１８０分間の曲線下の ＧＨ面積であり、ＣＨ値のすべては各化合物の分子量の相違について補整した。

第５表によれば、発明の化合物は、その化合物が投与された産乳中の乳牛の血液 における成長ホルモンレベルの放出および上昇を促進することを示す。観察され た成長ホルモン放出レベルは、既に開示した新規成長ホルモン放出ペプチド類で 観察されたそのレベルと同等であるかより大きい。

本発明は、それらの好ましい実施態様を具体的に引用して詳細に記載してきたが 、変動および変更を本発明の精神および範囲内で成し遂げることができるものと 理解されるであろ補正書の翻訳文提出書 （特許法第１８４条の８） 平成２年７月２７日 特許庁長官　植　松　　　敏　殿 １　特許出願の表示 ＰＣＴ／ＵＳ８９１００２０１ 、発明の名称 成長ホルモン放出活性を有するポリペプチド化合物類、３　特許出願人 住　所　アメリカ合衆国、ニューヨーク１４６５０゜ロチニスター。ステイト　 ストリート３４３名称　　イーストマン　コダック　カンパニー４代理人 ｒＡＡ３は、Ａｌａ、　ＧｌｙおよびＳｅｒからなる群より選ばれ、ＡＡ５は、 ＤＰｈｅおよび（ＮＭｅ）　ＤＰｈｅからなる群より選ばれ、Ｙは、（ａ）ＡＡ ７であって、ＡＡ７はＡｒｇ、　１ＬＶｓｌ　ＬｙｓおよびＯｒｎからなる群よ り選ばれる基、ならびに（ｂ　）−ＡＡ６−ＡＡ７であって、ＡＡ６は天然に見 い出されるすべてのし一アミノ酸、天然に見い出されるし一アミノ酸のジペプチ ド類（例えば、Ａｌａ−Ａｌａ）　、および次式ＨＪ−（ＣＨｚ）、−ＣＯＪ（ ここで、ｎ＝２〜１２）で示される化合物からなる群より選ばれ、そしてＡＡ７ は前記定義のとおりである基、からなる群より選ばれ、そしてＺは、前記ポリペ プチドのＣ末端基またはこのＣ末端アミノ酸プラス末端基であって、Ｚは−ＣＯ ＮＨｚ　　、　　Ｃ００ｔｌ　、　　Ｃ０ＯＲ。

Ｃ０ＮＨＲ、Ｃ０ＮＲ２、ＣＢ！ＯＲおよび−ｃｎｚｏｕからなる群より選ばれ る基（ここで、Ｒは炭素原子１〜６個を有するアルキル基もしくは炭素原子１２ 個までの芳香環であり）、そしてまた、Ｚは−Ｇｌｙ−Ｚ’　、　−Ｎｅｔ−Ｚ ’　、　−Ｌｙｓ−Ｚ’　、　−Ｃｙｓ−Ｚ’　、　−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｚ’お よび−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ｚ’からなる群より選ばれる基（ここで、Ｚ′は−ＣＯ ＮＨｚ　　、　　Ｃ０ＮＨＲ、Ｃｏｏｎ、　　Ｃ０ＯＲ，ＣＯＮＲｇ。

−ＣＨ，ＯＨおよび−ＣＨ！ＯＲからなる群より選ばれ、そしてＲは前記定義の とおりである）１ ＦＡＡ２は、ＤＰｈｅ、　ＤＴｒｐ、　５−フルオロ−ＤもしくはＤ／Ｌ　Ｔｒ ｐ　。

６−フルオロ−ＤもしくはＤ／Ｌ　Ｔｒｐ（すなわち、インドール環が５位もし くは６位でフッ素化されている）、（ホルミル）ＤＴｒｐ　（すなわち、インド ール窒素でホルミル化されているＤＴｒｐ）、”ＸＴｒｐであって、”ＸＴｒｐ はＮ−モノメチル化ＤＴｒｐ異性体類（すなわち、（Ｎ　”　）ｌｅ）　ＤＴｒ ｐおよび（インドールＮＭｅ）ＤＴｒｐ）からなる群より選ばれる基〕、（１” ＮａｌならびにＤ’Ｎａｌからなる群より選ばれ、 ＡＡ３は、Ａｌａ、　ＧｌｙおよびＳｅｒからなる群より選ばれ、ＡＡ５は、Ｄ Ｐｈｅおよび（ＮＭｅ）　ＤＰｈｅからなる群より選ばれ、Ｙは、（ａ）ＡＡ７ であって、ＡＡ７はＡｒｇ、　１Ｌｙｓ、　ＬｙｓおよびＯｒｎからなる群より 選ばれる基、ならびに（ｂ　）−ＡＡ６−ＡＡ７であって、ＡＡ６は天然に見い 出されるすべてのし一アミノ酸、天然に見い出されるし一アミノ酸のジペプチド 類（例えば、Ａｌａ−Ａｌａ）　、および次式ＨｚＮ−（ＣＢｚ）−−ＣＯＪ（ ここで、ｎ　＝　２〜１２）で示される化合物からなる群より選ばれ、そしてＡ Ａ７は前記定義のとおりでｒ　”ＸＴｒｐであって、”ＸＴｒｐはＮ−モノメチ ル化ＤＴｒｐ異性体類（すなわち、（ＮｃｔＭｅ）ＤＴｒｐおよび（インドール ＮＭｅ）ＤＴｒｐ）からなる群より選ばれる基　、Ｄ”ＮａｌならびにＤ’　Ｎ ａｌからなる群より選ばれ、 ＡＡ３は、Ａｌａ、　ＧｌｙおよびＳｅｒからなる群より選ばれ、ＡＡ５は、Ｄ Ｐｈｅおよび（ＮＭｅ）　ＤＰｈｅからなる群より選ばれ、Ｙは、（ａ）ＡＡ７ であって、ＡＡ７はＡｒｇ、　１Ｌｙｓ、　ＬｙｓおよびＯｒｎからなる群より 選ばれる基、ならびに（ｂ　）−ＡＡ６−ＡＡ７であって、ＡＡ６は天然に見い 出されるすべてのし一アミノ酸、天然に見い出されるし一アミノ酸のジペプチド 類（例えば、Ａｌａ−Ａｌａ）　、および次式Ｈ２Ｎ−（ＣＨｚ）　、、−ＣＯ ｚＨ（ここで、ｎ＝２〜１２）で示される化合物からなる群より選ばれ、そして ＡＡ７は前記定義のとおりである基、からなる群より選ばれ、そしてＺは、前記 ポリペプチドのＣ末端基またはこのＣ末端アミノ酸プラス末端基であって、Ｚは −ＣＯＮＨｚ　　、　　Ｃｏｏｌ　、　　Ｃ０ＯＲ。

Ｃ０ＮＨＲ、Ｃ０ＮＲｚ　、ＣＨｚＯＨおよび−ＣＬＯＲからなる群より選ばれ る基（ここで、Ｒは炭素原子１〜６個を有するアルキル基もしくは炭素原子１２ 個までの芳香環であり）、そしてまた、Ｚは−Ｇｌｙ−Ｚ’　、　−Ｍｅｔ−Ｚ ’　、　−Ｌｙｓ−Ｚ’　、　Ｊ国際調査報告 島−「トーー門門ｌ−書−ｎａ＋＾１−−ｃａｌ＋＠ＲＮ・ＰＣＴ／υ５８９１ ００２Ｃ１１国際調査報告 ＵＳ　８９００２０１ ＳＡ　　　　２６９０７

Claims (24)

【特許請求の範囲】
1. １．被験動物の血液における成長ホルモンレベルの放出および上昇を促進するこ とができるポリペプチドであって、そのポリペプチドが次の一般式 Ｘ−ＡＡ２−ＡＡ３−Ｔｒｐ−ＡＡ５−Ｙ−Ｚ〔上式中、Ｘは、Ｈｉｓ−ＡＡ１ −，３（ＮＭｅ）Ｈｉｓ−ＡＡ１−（すなわち、イミダゾール環が３位でメチル 化されている）であって、ＡＡ１が天然に見い出されるすべてのＬ−アミノ酸お よびＤＡＩａからなる群より選ばれる基、ＡＡＯ−Ｈｉｓ−ＡＡ１、ならびにＡ Ａ０−３（ＮＭｅ）Ｈｉｓ−ＡＡ１であって、ＡＡ０が天然に見い出されるすべ てのＬ−アミノ酸、Ｍｅｔ（Ｏ），ＤＯＰＡおよびＡｂｕからなる群より選ばれ 、かつＡＡ１が前記定義のとおりである基、からなる群の基から選ばれ、 ＡＡ２は、ＤＰｈｅ，ＤＴｒｐ、５−フルオロ−ＤもしくはＤ／ＬＴｒｐ、６− フルオロ−ＤもしくはＤ／ＬＴｒｐ（すなわち、インドール環が５位もしくは６ 位でフッ素化されている）、（ホルミル）ＤＴｒｐ（すなわち、インドール窒素 でホルミル化されているＤＴｒｐ）、＊ＸＴｒｐであって、＊ＸＴｒｐはＮ−モ ノメチル化ＤＴｒｐ異性体類（すなわち、（ＮαＭｅ）ＤＴｒｐおよび（インド ールＮＭｅ）ＤＴｒｐ）からなる群より選ばれる基、ＤαＮａｌならびにＤβＮ ａｌからなる群より選ばれ、 ＡＡ３は、Ａｌａ，ＧｌｙおよびＳｅｒからなる群より選ばれ、ＡＡ５は、ＤＰ ｈｅおよび（ＮＭｅ）ＤＰｈｅからなる群より選ばれ、Ｙは、（ａ）ＡＡ７であ って、ＡＡ７はＡｒｇ，ｉＬｙｓ，ＬｙｓおよびＯｒｎからなる群より選ばれる 基、ならびに（ｂ）−ＡＡ６−ＡＡ７であって、ＡＡ６は天然に見い出されるす べてのＬ−アミノ酸、天然に見い出されるＬ−アミノ酸のジペプチド類（例えば 、Ａｌａ−Ａｌａ）、および次式Ｈ２Ｎ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯ２Ｈ（ここで、ｎ ＝１〜１２）で示される化合物からなる群より選ばれ、そしてＡＡ７は前記定義 のとおりである基、からなる群より選ばれ、そしてＺは、前記ポリペプチドのＣ 末端基またはこのＣ末端アミノ酸プラス末端基であって、Ｚは−ＣＯＮＨ２，− ＣＯＯＨ，−ＣＯＯＲ，−ＣＯＮＨＲ，−ＣＯＮＲ２，−ＣＨ２ＯＨおよび−Ｃ Ｈ２ＯＲからなる群より選ばれる基（ここで、Ｒは炭素原子１〜６個を有するア ルキル基もしくは炭素原子１２個までの芳香環であり）、そしてまた、Ｚは−Ｇ ｌｙ−Ｚ′，−Ｍｅｔ−Ｚ′，−Ｌｙｓ−Ｚ′，−Ｃｙｓ−Ｚ′，一Ｇｌｙ−Ｔ ｙｒ−Ｚ′および−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ｚ′からなる群より選ばれる基（ここで、 Ｚ′は−ＣＯＮＨ２，−ＣＯＮＨＲ，−ＣＯＯＨ，−ＣＯＯＲ，−ＣＯＮＲ２， −ＣＨ２ＯＨおよび−ＣＨ２ＯＲからなる群より選ばれ、そしてＲは前記定義の とおりである）を表す〕で特定されるポリペプチド類、ならびにそれらのいずれ かの有機付加塩または無機付加塩から選ばれるものであり、ここで、使用されて いるアミノ酸残基の略号は標準的なペプチドの命名法に従い、 Ｇｌｙ＝グリシン Ｔｙｒ＝Ｌ−チロシン ＩＬｅ＝Ｌ−イソロイシン Ｇｌｕ＝Ｌ−グルタミン酸 Ｔｈｒ＝Ｌ−スレオニン Ｐｈｅ＝Ｌ−フェニルアラニン Ａｌａ＝Ｌ−アラニン Ｌｙｓ＝Ｌ−リジン Ａｓｐ＝Ｌ−アスパラギン酸 Ｃｙｓ＝Ｌ−システイン Ａｒｇ＝Ｌ−アルギニン Ｇｌｎ＝Ｌ−グルタミン Ｐｒｏ＝Ｌ−プロリン Ｌｅｕ＝Ｌ−ロイシン Ｍｅｔ＝Ｌ−メチオニン Ｓｅｒ＝Ｌ−セリン Ａｓｎ＝Ｌ−アスパラギン Ｈｉｓ＝Ｌ−ヒスチジン Ｔｒｐ＝Ｌ−トリプトファン Ｖａｌ＝Ｌ−バリン ＤＯＰＡ＝３，４−ジヒドロキシフェニルアラニンＭｅｔ（Ｏ）＝メチオニンス ルホキシドＡｂｕ＝α−アミノ酪酸 ｉＬｙｓ＝Ｎε−イソプロピル−Ｌ−リジン４−Ａｂｕ＝４−アミノ酪酸 Ｏｒｎ＝Ｌ−オルニチン ＤαＮａｌ＝α−ナフチル−Ｄ−アラニンＤβＮａ１＝β−ナフチル−Ｄ−アラ ニンを意味し、 「Ｄ」によって先導される３文字アミノ酸略号のすべては、そのアミノ酸残基の Ｄ配置を示し、「Ｄ／Ｌ」によって先導される略号は指定されたアミノ酸のＤお よびＬ配置を示し、そしてグリシンは「天然に見い出されるＬ−アミノ酸」の語 に包含される。
2. ２．前記ポリペプチドが、 Ｈｉｓ−ＡＩａ−ＡＡ２−Ａｌａ−Ｔｒｐ−ＡＡ５−ＡＡ７−ＮＨ２およびＨｉ ｓ−Ａｌａ−ＡＡ２−Ａｌａ−Ｔｒｐ−ＡＡ５−ＡＡ６−ＡＡ７−ＮＨ２ならび にそれらのいずれかの有機付加塩または無機付加塩からなる群より選ばれ、ＡＡ ２，ＡＡ５，ＡＡ６およびＡＡ７が前記定義のとおりである請求項１記載のポリ ペプチド。
3. ３．前記ポリペプチドが、配列 Ｈｉｓ−Ａｌａ−ＡＡ２−Ｔｒｐ−ＡＡ５−ＡＡ７−ＮＨ２を有するか、あるい はそれらの有機付加塩または無機付加塩であり、ＡＡ２，ＡＡ５およびＡＡ７が 前記定義のとおりである請求項１記載のポリペプチド。
4. ４．前記ポリペプチドが、配列 Ｈｉｓ−Ａｌａ−ＤＴｒｐ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−ＤＰｈｅ−Ｌｙｓ−ＮＨ２を有す るか、あるいはそれらの有機付加塩または無機付加塩である請求項１記載のポリ ペプチド。
5. ５．請求項１に示されるポリペプチド類少なくとも１種の有効量を動物に投与す ることによってその血液の成長ホルモンレベルの放出および上昇を促進する方法 。
6. ６．請求項２に示されるポリペプチド類少なくとも１種の有効量を動物に投与す ることによってその血液の成長ホルモンレベルの放出および上昇を促進する方法 。
7. ７．請求項３に示されるポリペプチド類少なくとも１種の有効量を動物に投与す ることによってその血液の成長ホルモンレベルの放出および上昇を促進する方法 。
8. ８．請求項４に示されるポリペプチド類少なくとも１種の有効量を動物に投与す ることによってその血液の成長ホルモンレベルの放出および上昇を促進する方法 。
9. ９．次式 Ｘ−ＡＡ２−ＡＡ３−Ｔｒｐ−ＡＡ５−Ｙ−（Ｒ）〔上式中、Ｘは、Ｈｉｓ−Ａ Ａ１−（すなわち、イミダゾール環が３位でメチル化されている）であって、Ａ Ａ１がいずれかのアミノ酸（天然に見い出されるアミノ酸ならびに非天然アミノ 酸）であり、そしてＡＡ０−Ｈｉｓ−ＡＡ１およびＡＡ０−３（ＮＭｅ）Ｈｉｓ −ＡＡ１であって、ＡＡ０がすべての天然に見い出されるＬ−アミノ酸である基 、からなる群より選ばれ、 ＡＡ２は、ＤＰｈｅ，ＤＴｒｐ、５−フルオロ−ＤもしくはＤ／ＬＴｒｐ、６− フルオロ−ＤもしくはＤ／ＬＴｒｐ（すなわち、インドール環が５位もしくは６ 位でフッ素化されている）、（ホルミル）ＤＴｒｐ（すなわち、インドール窒素 でホルミル化されているＤＴｒｐ）、＊ＸＴｒｐであって、＊ＸＴｒｐはＮ−モ ノメチル化ＤＴｒｐ異性体類（すなわち、（ＮαＭｅ）ＤＴｒｐおよび（インド −ルＮＭｅ）ＤＴｒｐ）からなる群より選ばれる基、ＤαＮａｌならびにＤβＮ ａ１からなる群より選ばれ、 ＡＡ３は、Ａｌａ，ＧｌｙおよびＳｅｒからなる群より選ばれ、ＡＡ５は、ＤＰ ｈｅおよび（ＮＭｅ）ＤＰｈｅからなる群より選ばれ、Ｙは、（ａ）ＡＡ７であ って、ＡＡ７はＡｒｇ，ｉＬｙｓ，ＬｙｓおよびＯｒｎからなる群より選ばれる 基、ならびに（ｂ）−ＡＡ６−ＡＡ７であって、ＡＡ６は天然に見い出されるす べてのＬ−アミノ酸、天然に見い出されるＬ−アミノ酸のジペプチド類（例えば 、Ａｌａ−Ａｌａ）、および次式Ｈ２Ｎ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯ２Ｈ（ここで、ｎ ＝１〜１２）で示される化合物からなる群より選ばれ、そしてＡＡ７は前記定義 のとおりである基、からなる群より選ばれ、そして（Ｒ）は、ポリマー樹脂であ り、そして構成アミノ酸の官能基は必要により適当な保護基で保護されている〕 で示される化合物。
10. １０．次式 Ｈｉｓ−Ａｌａ−ＤＴｒｐ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−ＤＰｈｅ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−（Ｒ ）（上式中、（Ｒ）は、ポリマー樹脂であり、そして構成アミノ酸の官能基は必 要により適当な保護基で保護されている）で示される化合物。
11. １１．次式 Ａｌａ−ＤＴｒｐ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−ＤＰｈｅ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−（Ｒ）（上式 中、（Ｒ）はポリマー樹脂であり、そして構成アミノ酸の官能基は必要により適 当な保護基で保護されている）で示される化合物。
12. １２．次式 Ｈｉｓ−Ａｌａ−ＤＴｒｐ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−ＤＰｈｅ−Ｌｙｓ−（Ｒ）（上式 中、（Ｒ）はポリマー樹脂であり、そして構成アミノ酸の官能基は必要により適 当な保護基で保護されている）で示される化合物。
13. １３．次式 ３（ＮＭｅ）Ｈｉｓ−Ａｌａ−ＤＴｒｐ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−ＤＰｈｅ−Ｌｙｓ− （Ｒ）（上式中、（Ｒ）は、ポリマー樹脂であり、そして構成アミノ酸の官能基 は必要により適当な保護基で保護されている）で示される化合物。
14. １４．次式 Ａｌａ−ＤＴｒｐ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−ＤＰｈｅ−Ｌｙｓ−（Ｒ）（上式中、（Ｒ ）はポリマー樹脂であり、そして構成アミノ酸の官能基は必要により適当な保護 基で保護されている）で示される化合物。
15. １５．動物の血液における成長ホルモンレベルの放出および上昇を引き起こすの に有効な組み合わされたものであって、この組み合わされたものがグループ１の ポリペプチド類、グループ２のポリペプチド類またはグループ３のポリペプチド 類の少なくとも２種の異るグループから選ばれるポリペプチド類の有効量を含ん でなり、 前記グループ１のポリペプチド類がいずれかの天然に見い出される成長ホルモン 放出ホルモン類およびそれらの機能の等価なものから選ばれ、かつこれらのポリ ペプチド類が哺乳類および他の脊椎動物ならびに甲殻類の成長ホルモン放出ホル モン受容体で作用するものであり、 前記グループ２のポリペプチド類が、次式Ｘ−ＡＡ２−ＡＡ３−Ｔｒｐ−ＡＡ５ −Ｙ−Ｚ〔上式中、Ｘは、Ｈｉｓ−ＡＡ１−，３（ＮＭｅ）Ｈｉｓ−ＡＡ１−（ すなわち、イミダゾール環が３位でメチル化されている）であって、ＡＡ１が天 然に見い出されるすべてのＬ−アミノ酸およびＤＡｌａからなる群より選ばれる 基、ＡＡ０−Ｈｉｓ−ＡＡ１、ならびにＡＡ０−３（ＮＭｅ）Ｈｉｓ−ＡＡ１で あって、ＡＡ０が天然に見い出されるすべてのＬ−アミノ酸、Ｍｅｔ（Ｏ），Ｄ ＯＰＡおよびＡｂｕからなる群より選ばれ、かつＡＡ１が前記定義のとおりであ る基、からなる群の基から選ばれ、 ＡＡ２は、ＤＰｈｅ，ＤＴｒｐ、５−フルオロ−ＤもしくはＤ／ＬＴｒｐ、６− フルオロ−ＤもしくはＤ／ＬＴｒｐ（すなわち、インドール環が５位もしくは６ 位でフッ素化されている）、（ホルミル）ＤＴｒｐ（すなわち、インドール窒素 でホルミル化されているＤＴｒｐ）、＊ＸＴｒｐであって、＊ＸＴｒｐはＮ−モ ノメチル化ＤＴｒｐ異性体類（すなわち、（ＮαＭｅ）ＤＴｒｐおよび（インド ールＮＭｅ）ＤＴｒｐ）からなる群より選ばれる基、ＤαＮａｌならびにＤβＮ ａｌからなる群より選ばれ、 ＡＡ３は、Ａｌａ，ＧｌｙおよびＳｅｒからなる群より選ばれ、ＡＡ５は、ＤＰ ｈｅおよび（ＮＭｅ）ＤＰｈｅからなる群より選ばれ、Ｙは、（ａ）ＡＡ７であ って、ＡＡ７はＡｒｇ，ｉＬｙｓ，ＬｙｓおよびＯｒｎからなる群より選ばれる 基、ならびに（ｂ）−ＡＡ６−ＡＡ７であって、ＡＡ６は天然に見い出されるす べてのＬ−アミノ酸、天然に見い出されるＬ−アミノ酸のジペプチド類（例えば 、Ａｌａ−Ａｌａ）、および次式Ｈ２Ｎ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯ２Ｈ（ここで、ｎ ＝１〜１２）で示される化合物からなる群より選ばれ、そしてＡＡ７は前記定義 のとおりである基、からなる群より選ばれ、そしてＺは、前記ポリペプチドのＣ 末端基またはこのＣ末端アミノ酸プラス末端基であって、Ｚは−ＣＯＮＨ２，− ＣＯＯＨ，−ＣＯＯＲ，−ＣＯＮＨＲ，−ＣＯＮＲ２，−ＣＨ２ＯＨおよび−Ｃ Ｈ２ＯＲからなる群より選ばれる基（ここで、Ｒは炭素原子１〜６個を有するア ルキル基もしくは炭素原子１２個までの芳香環であり）、そしてまた、Ｚは−Ｇ ｌｙ−Ｚ′，−Ｍｅｔ−Ｚ′，−Ｌｙｓ−Ｚ′，−Ｃｙｓ−Ｚ′，−Ｇｌｙ−Ｔ ｙｒ−Ｚ′および−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ｚ′からなる群より選ばれる基（ここで、 Ｚ′は−ＣＯＮＨ２，−ＣＯＮＨＲ，−ＣＯＯＨ，−ＣＯＯＲ，−ＣＯＮＲ２， −ＣＨ２ＯＨおよび−ＣＨ２ＯＲからなる群より選ばれ、そしてＲは前記定義の とおりである）を表す〕で特定されるポリペプチド類、ならびにそれらのいずれ かの有機付加塩または無機付加塩から選ばれるものであり、ここで使用されてい るアミノ酸残基の略号は標準的なペプチドの命名法に従い、 Ｇｌｙ＝グリシン Ｔｙｒ＝Ｌ−チロシン Ｉｌｅ＝Ｌ−イソロイシン Ｇｌｕ＝Ｌ−グルタミン酸 Ｔｈｒ＝Ｌ−スレオニン Ｐｈｅ＝Ｌ−フェニルアラニン Ａｌａ＝Ｌ−アラニン Ｌｙｓ＝Ｌ−リジン Ａｓｐ＝Ｌ−アスパラギン酸 Ｃｙ＝Ｌ−システイン Ａｒｇ＝Ｌ−アルギニン Ｇｌｎ＝Ｌ−グルタミン Ｐｒｏ＝Ｌ−プロリン Ｌｅｕ＝Ｌ−ロイシン Ｍｅｔ＝Ｌ−メチオニン Ｓｅｒ＝Ｌ−セリン Ａｓｎ＝Ｌ−アスパラギン Ｈｉｓ＝Ｌ−ヒスチジン Ｔｒｐ＝Ｌ−トリプトファン Ｖａｌ＝Ｌ−バリン Ａｂｕ＝α−アミノ酪酸 Ｓａｒ＝サルコシン Ｓａｒ−ｏｌ＝サルコシンアルコール ＤＯＰＡ＝３，４−ジヒドロキシフェニルアラニンＧｌｙ−ｏｌ＝２−アミノエ タノール Ｈｙｐ＝トランス−４−ヒドロキシ−Ｌ−プロリンＭｅｔ（Ｏ）＝メチオニンス ルホキシドＭｅｔ（Ｏ）−ｏｌ＝メチオニンスルホキシドアルコールＴｈｚ＝Ｌ −チアゾリジン−４−カルボン酸ｉＬｙＳ＝Ｎε−イソプロピル−Ｌ−リジン４ −Ａｂｕ＝４−アミノ酪酸 Ｏｒｎ＝Ｌ−オルニチン ＤαＮａｌ＝α−ナフチル−Ｄ−アラニンＤβＮａｌ＝β−ナフチル−Ｄ−アラ ニンを意味し、そして 「Ｄ」によって先導される３文字アミノ酸略号のすべては、そのアミノ酸残基の Ｄ配置を示し、「Ｄ／Ｌ」によって先導される略号は指定されたアミノ酸のＤお よびＬ配置を示し、そしてグリシンは「天然に見い出されるＬ−アミノ酸」の語 に包含されることを意味し、 前記グループ３のポリペプチド類が、次の各式Ｔｙｒ−ＤＡｒｇ−Ｐｈｅ−ＮＨ ２； Ｔｙｒ−ＤＡｌａ−Ｐｈｅ−ＮＨ２； Ｔｙｒ−ＤＡｒｇ（ＮＯ２）−Ｐｈｅ−ＮＨ２；Ｔｙｒ−ＤＨｅｔ（Ｏ）−Ｐｈ ｅ−ＮＨ２；Ｔｙｒ−ＤＡｌａ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−ＮＨ２：Ｔｙｒ−ＤＡｒｇ− Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−ＮＨ２；Ｔｙｒ−ＤＴｈｒ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−ＮＨ２；Ｐｈｅ −ＤＡｒｇ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−ＮＨ２；Ｔｙｒ−ＤＡｒｇ−Ｐｈｅ−Ｓａｒ； Ｔｙｒ−ＤＡｌａ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−ＮＨ２；Ｔｙｒ−ＤＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ｔｒ ｐ−ＮＨ２；Ｔｙｒ−ｎＡｒｇ（ＮＯ２）−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−ＮＨ２；Ｔｙｒ− ＤＭｅｔ（Ｏ）−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−ＮＨ２；（ＮＭｅ）Ｔｙｒ−ＤＡｒｇ−Ｐｈ ｅ−Ｓａｒ−ＮＨ２；Ｔｙｒ−ＤＡｒｇ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−ｏｌ；Ｔｙｒ−ＤＡ ｒｇ−Ｇｌｙ−（ＮＭｅ）Ｐｈｅ−ＮＨ２；Ｔｙｒ−ＤＡｒｇ−Ｐｈｅ−Ｓａｒ −ｏｌＴｙｒ−ＤＡｌａ−Ｐｈｅ−Ｓａｒ−ｏｌＴｙｒ−ＤＡｌａ−Ｐｈｅ−Ｇ ｌｙ−Ｔｙｒ−ＮＨ２：Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−ＤＡｒｇ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−ＮＨ２； Ｔｙｒ−ＤＴｈｒ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｔｈｚ−ＮＨ２；Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−ＤＡｌ ａ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−ＮＨ２；Ｔｙｒ−ＤＡｌａ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−ｏｌ；Ｔｙ ｒ−ＤＡｌａ−Ｇｌｙ−（ＮＭｅ）Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−ｏｌ；Ｔｙｒ−ＤＡｒｇ− Ｐｈｅ−Ｓａｒ−ＮＨ２；Ｔｙｒ−ＤＡｌａ−Ｐｈｅ−Ｓａｒ−ＮＨ２；Ｔｙｒ −ＤＡｌａ−Ｐｈｅ−Ｓａｒ； Ｔｙｒ−ＤＡｌａ−Ｇｌｙ−（ＮＭｅ）Ｐｈｅ−ＮＨ２；Ｓａｒ−Ｔｙｒ−ＤＡ ｒｇ−Ｐｈｅ−Ｓａｒ−ＮＨ８；Ｔｙｒ−ＤＣｙｓ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−ＤＣｙｓ −ＮＨ２（環状ジスルフィド）Ｔｙｒ−ＤＣｙｓ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−ＤＣｙｓ− ＮＨ２（フリージチオール）Ｔｙｒ−ＤＣｙｓ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−ＤＣｙｓ−Ｎ Ｈ２（環状ジスルフィド）Ｔｙｒ−ＤＣｙｓ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−ＤＣｙｓ−ＮＨ ２（フリージチオール）Ｔｙｒ−ＤＡｌａ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ− Ｓｅｒ−ＮＨ２；Ｔｙｒ−ＤＡｌａ−Ｐｈｅ−Ｓａｒ−Ｔｙｔ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ −ＮＨ２；Ｔｙｒ−ＤＡｌａ−Ｐｈｅ−Ｓａｒ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−ＮＨ ２；Ｔｙｒ−ＤＡｌａ−Ｐｈｅ−ＧＩｙ−Ｔｙｒ−Ｈｙｐ−Ｓｅｒ−ＮＨ２；Ｔ ｙｒ−ＤＡｌａ−Ｐｈｅ−Ｓａｒ−Ｔｙｒ−Ｈｙｐ−Ｓｅｒ−ＮＨ２；Ｔｙｒ− ＤＡｌａ−Ｐｈｅ−Ｓａｒ−Ｐｈｅ−Ｈｙｐ−Ｓｅｒ−ＮＨ２；Ｔｙｒ−ＤＡｒ ｇ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｈｙｐ−Ｓｅｒ−ＮＨ２；Ｔｙｒ−ＤＡｒｇ−Ｐ ｈｅ−Ｓａｒ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−ＮＨ２；Ｔｙｒ−ＤＡｒｇ−Ｐｈｅ− Ｓａｒ−Ｔｙｒ−Ｈｙｐ−Ｓｅｒ−ＮＨ２およびＴｙｒ−ＤＡｒｇ−Ｐｈｅ−Ｇ ｌｙ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−ＮＨ２で表わされるポリペプチド類、ならびに これらグループ３のポリペプチド類いずれかの有機付加塩または無機付加塩から 選ばれ、かつ、前記の組み合わせたものが前記のような動物の血液における成長 ホルモンの相乗的な放出および上昇を起こすのに有効であるような割合で投与さ れる前記組み合わされたもの。
16. １６．前記グループ１のポリペプチド類が、（ａ）１〜４４位（Ｎ末端からＣ末 端までの番号付け）において、 （＃１４４）【配列があります】， （＃１４５）【配列があります】， （＃１４６）【配列があります】， （＃１４８）【配列があります】および（＃１４９）【配列があります】 で示され、ならびにそれらの機能 的に等価なもののアミノ酸配列を有するものであって、これらの式中、Ｃ末端ア ミノ酸が、次式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （上式中、それぞれＲ′は独立して特定のアミノ酸の置換基、例えば、水素、ア ルキル、アリール、アミノまたは酸置換基を表す）で示される両端が切断された 基を有し、ＸがＣ末端の末尾の基を表しそして−ＣＯＮＨ２，−ＣＯＯＨ，−Ｃ ＯＯＲ，−ＣＯＮＲＲ，−ＣＨ２ＯＨおよび−ＣＨ２ＯＲ（ここでＲは炭素原子 １〜６個を有するアルキル基および炭素原子１２個までを有する芳香族環である ）から選ばれ、かつ、使用されるアミノ酸残基の略号が、標準的なペプチド命名 法、 Ｇ＝Ｇｌｙ（グリシン）、 Ｙ＝Ｔｙｒ（Ｌ−チロシン）、 Ｉ＝Ｉｌｅ（Ｌ−イソロイシン）、 Ｅ＝Ｇｌｈ（Ｌ−グルタミン酸）、 Ｔ＝ＴＬｒ（Ｌ−スレオニン）、 Ｆ＝Ｐｈｅ（Ｌ−フェニルアラニン）、Ａ＝Ａｌａ（Ｌ−アラニン）、 Ｋ＝Ｌｙｓ（Ｌ−リジン）、 Ｄ＝Ａｓｐ（Ｌ−アスパラギン酸）、 Ｃ＝Ｃｙｓ（Ｌ−システイン）、 Ｒ＝Ａｒｇ（Ｌ−アルギニン）、 Ｑ＝Ｇｌｎ（Ｌ−グルタミン）、 Ｐ＝Ｐｒｏ（Ｌ−プロリン）、 Ｌ＝Ｌｅｕ（Ｌ−ロイシン）、 Ｍ＝Ｍｅｔ（Ｌ−メチオニン）、 Ｓ＝Ｓｅｒ（Ｌ−セリン）、 Ｎ＝Ａｓｎ（Ｌ−アスパラギン）、 Ｈ＝Ｈｉｓ（Ｌ−ヒスチジン）、 Ｗ＝Ｔｒｐ（Ｌ−トリプトファン）、およびＶ＝Ｖａｌ（Ｌ−バリン）； Ｎｌｅ＝ノルロイシン Ｓａｒ＝サルコシン Ｓａｒ−ｏｌ＝サルコシンアルコール Ｇｌｙ−ｏｌ＝２−アミノエタノール Ｍｅｔ（Ｏ）＝メチオニンスルホキシドに従うものであり、 （ｂ）前記（ａ）のポリペプチド類のいずれか１つであって、 （＃１４４〜＃１４８）の１位がＤＴｙｒもしくはＨｉｓの、（＃１４９）の１ 位がＴｙｒもしくはＤＨｉｓの、（＃１４４〜＃１４９）の２位が（ＮＭｅ）Ｄ ＡｌａもしくはＡｉｂもしくはＤＡｌａの、 （＃１４４〜＃１４９）の３位がＤＡｓｐの、（＃１４４〜＃１４９）の４位が ＤＡｌａの、そして（＃１４４〜＃１４９）の１位＋２位がＤＴｙｒ１＋ＤＡｌ ａ２、ＤＴｙｒ１＋（ＮＭｅ）ＤＡｌａ２もしくはＤＴｙｒ１＋Ａｉｂ２のアミ ノ酸置換基を有するもの、 （ｃ）前記（ａ）もしくは（ｂ）のポリペプチド類のいずれか１つであって、２ ７位のＭｅｔに対しＮｌｅの置換基を有するもの、 （ｄ）前記（ａ），（ｂ）もしくは（ｃ）のポリペプチド類のいずれか１つであ って、Ｎ末端−ＮＨ２が−ＮＨＣＯＲ（Ｒは炭素原子１〜６個を有するアルキル 基または炭素原子１２個までを有する芳香族環である）で置換されているもの、 （ｅ）前記（ａ），（ｂ），（ｃ）もしくは（ｄ）のポリペプチド類のいずれか １つのフラグメントであって、１〜２９位のアミノ酸残基を少なくとも含むもの 、 （ｆ）１〜２９位（Ｎ末端からＣ末端までの番号付け）における特定のアミノ酸 配列、 【配列があります】， 【配列があります】， 【配列があります】， 【配列があります】， 【配列があります】， 【配列があります】 （線状ジチオール）、および 【配列があります】（環状ジスルフィド）；を有するものであって、 ここでＣ末端アミノ酸とＸは前記定義のとおりであり、そしてこれらのグループ （ｆ）の化合物のいずれか１つの変性は前記（ｂ），（ｃ）および（ｄ）で示し た変性に従うもの、ならびに （ｇ）グループ１の前記（ａ），（ｂ），（ｃ），（ｄ），（ｅ）もしくは（ｆ ）のポリペプチド類いずれかの有機付加塩または無機付加塩。
17. １７．グループ１のポリペプチド類およびグループ２のポリペプチド類のそれぞ れに由来する１の化合物を含んでなる請求項１５記載の組み合わされたもの。
18. １８．グループ２のポリペプチド類およびグループ３のポリペプチド類のそれぞ れに由来する１の化合物を含んでなる請求項１５記載の組み合わされたもの。
19. １９．グループ１のポリペプチド類、グループ２のポリペプチド類およびグルー プ３のポリペプチド類のそれぞれに由来する１の化合物を含んでなる請求項１５ 記載の組み合わされたもの。
20. ２０．グループ１のポリペプチド類、グループ２のポリペプチド類またはグルー プ３のポリペプチド類少なくとも２つの異るグループから選ばれるポリペプチド 類を含んでなる組み合わされたものの有効量を投与することからなる、動物の血 液における成長ホルモンレベルの放出および上昇を引き起こす方法であって、 前記グループ１のポリペプチド類が、いずれかの天然に見い出される成長ホルモ ン放出ホルモンおよびそれらの機能的に等価なものであって、それらのポリペプ チド類が哺乳類および他の脊椎動物ならびに甲殻類の成長ホルモン放出ホルモン 受容体で作用するものであり、 前記グループ２のポリペプチド類が、次式Ｘ−ＡＡ２−ＡＡ３−Ｔｒｐ−ＡＡ５ −Ｙ−Ｚ〔上式中、Ｘは、Ｈｉｓ−ＡＡ１−，３（ＮＭｅ）Ｈｉｓ−ＡＡ１−（ すなわち、イミダゾール環が３位でメチル化されている）であって、ＡＡ１が天 然に見い出されるすべてのＬ−アミノ酸およびＤＡｌａからなる群より選ばれる 基、ＡＡＯ−Ｈｉｓ−ＡＡ１、ならびにＡＡ０−３（ＮＭｅ）Ｈｉｓ−ＡＡ１で あって、ＡＡ０が天然に見い出されるすべてのＬ−アミノ酸、Ｍｅｔ（Ｏ），Ｄ ＯＰＡおよびＡｂｕからなる群より選ばれ、かつＡＡ１が前記定義のとおりであ る基からなる群の基から選ばれ、 ＡＡ２は、ＤＰｈｅ，ＤＴｒｐ、５−フルオロ−ＤもしくはＤ／ＬＴｒｐ、６− フルオロ−ＤもしくはＤ／ＬＴｒｐ（すなわち、インドール環が５位もしくは６ 位でフッ素化されている）、（ホルミル）ＤＴｒｐ（すなわち、インドール窒素 でホルミル化されているＤＴｒｐ）、＊ＸＴｒｐであって、＊ＸＴｒｐはＮ−モ ノメチル化ＤＴｒｐ異性体類（すなわち、（ＮαＭｅ）ＤＴｒｐおよび（インド ールＮＭｅ）ＤＴｒｐ）からなる群より選ばれる基、ＤαＮａｌならびにＤβＮ ａｌからなる群より選ばれ、 ＡＡ３は、Ａｌａ，ＧｌｙおよびＳｅｒからなる群より選ばれ、ＡＡ５は、ＤＰ ｈｅおよび（ＮＭｅ）ＤＰｈｅからなる群より選ばれ、Ｙは、（ａ）ＡＡ７であ って、ＡＡ７はＡｒｇ，ｉＬｙｓ，ＬｙｓおよびＯｒｎからなる群より選ばれる 基、ならびに（ｂ）−ＡＡ６−ＡＡ７であって、ＡＡ６は天然に見い出されるす べてのＬ−アミノ酸、天然に見い出されるＬ−アミノ酸のジペプチド類（例えば 、Ａｌａ−Ａｌａ）、および次式Ｈ２Ｎ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯ２Ｈ（ここで、ｎ ＝１〜１２）で示される化合物からなる群より選ばれ、そしてＡＡ７は前記定義 のとおりである基、からなる群より選ばれ、そしてＺは、前記ポリペプチドのＣ 末端基またはこのＣ末端アミノ酸プラス末端基であって、Ｚは−ＣＯＮＨ２，− ＣＯＯＨ，−ＣＯＯＲ，−ＣＯＮＨＲ，−ＣＯＮＲ２，−ＣＨ２ＯＨおよび−Ｃ Ｈ２ＯＲからなる群より選ばれる基（ここで、Ｒは炭素原子１〜６個を有するア ルキル基もしくは炭素原子１２個までの芳香環であり）、そしてまた、Ｚは−Ｇ ｌｙ−Ｚ′，−Ｍｅｔ−Ｚ′，−Ｌｙｓ−Ｚ′，−Ｃｙｓ−Ｚ′，−Ｇｌｙ−Ｔ ｙｒ−Ｚ′および−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ｚ′からなる群より選ばれる基（ここで、 Ｚ′は−ＣＯＮＨ２，−ＣＯＮＨＲ，−ＣＯＯＨ，−ＣＯＯＲ，−ＣＯＮＲ２， −ＣＨ２ＯＨおよび−ＣＨ２ＯＲからなる群より選ばれ、そしてＲは前記定義の とおりである）を表す〕で特定されるポリペプチド類、ならびにそれらのいずれ かの有機付加塩または無機付加塩から選ばれるものであり、ここで、使用されて いるアミノ酸残基の略号は標準的なペプチドの命名法に従い、 Ｇｌｙ＝グリシン Ｔｙｒ＝Ｌ−チロシン Ｉｌｅ＝Ｌ−イソロイシン Ｇｌｕ＝Ｌ−グルタミン酸 Ｔｈｒ＝Ｌ−スレオニン Ｐｈｅ＝Ｌ−フェニルアラニン Ａｌａ＝Ｌ−アラニン Ｌｙｓ＝Ｌ−リジン Ａｓｐ＝Ｌ−アスパラギン酸 Ｃｙｓ＝Ｌ−システイン Ａｒｇ＝Ｌ−アルギニン Ｇｌｎ＝Ｌ−グルタミン Ｐｒｏ＝Ｌ−プロリン Ｌｅｕ＝Ｌ−ロイシン Ｍｅｔ＝Ｌ−メチオニン Ｓｅｒ＝Ｌ−セリン Ａｓｎ＝Ｌ−アスパラギン Ｈｉｓ＝Ｌ−ヒスチジン Ｔｒｐ＝Ｌ−トリプトファン Ｖａ１＝Ｌ−バリン ＤＯＰＡ＝３，４−ジヒドロキシフェニルアラニンＭｅｔ（Ｏ）＝メチオニンス ルホキシドＡｂｕ＝α−アミノ酪酸 ｉＬｙｓ＝Ｎε−イソプロピル−Ｌ−リジン４−Ａｂｕ＝４−アミノ酪酸 Ｏｒｎ＝Ｌ−オルニチン Ｓａｒ＝サルコシン Ｓａｒ−ｏｌ＝サルコシンアルコール ＤαＮａｌ＝α−ナフチル−Ｄ−アラニンＤβＮａｌ＝β−ナフチル−Ｄ−アラ ニンを意味し、 「Ｄ」によって先導される３文字アミノ酸略号のすべては、そのアミノ酸残基の Ｄ配置を示し、「Ｄ／Ｌ」によって先導される略号は指定されたアミノ酸のＤお よびＬ配置を示し、そしてグリシンは「天然に見い出されるＬ−アミノ酸」の語 に包含されることを意味するものであり、前記グループ３のポリペプチド類が、 次の各式Ｔｙｒ−ＤＡｒｇ−Ｐｈｅ−ＮＨ２： Ｔｙｒ−ＤＡｌａ−Ｐｈｅ−ＮＨ２； Ｔｙｒ−ＤＡｒｇ（ＮＯｔ）−Ｐｈｅ−ＮＨ２；Ｔｙｒ−ＤＭｅｔ（Ｏ）−Ｐｈ ｅ−ＮＨ２；Ｔｙｒ−ＤＡｌａ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−ＮＨ２；Ｔｙｒ−ＤＡｒｇ− Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−ＮＨ２；Ｔｙｒ−ＤＴｈｒ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−ＮＨ２；Ｐｈｅ −ＤＡｒｇ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−ＮＨ２；Ｔｙｒ−ＤＡｒｇ−Ｐｈｅ−Ｓａｒ； Ｔｙｒ−ＤＡｌａ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−ＮＨ２；Ｔｙｒ−ＤＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ｔｒ ｐ−ＮＨ２；Ｔｙｒ−ＤＡｒｇ（ＮＯ２）−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−ＮＨ２；Ｔｙｒ− ＤＭｅｔ（Ｏ）−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−ＮＨ２；（ＮＭｅ）Ｔｙｒ−ＤＡｒｇ−Ｐｈ ｅ−Ｓａｒ−ＮＨ２；Ｔｙｒ−ＤＡｒｇ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−ｏｌ；Ｔｙｒ−ＤＡ ｒｇ−Ｇｌｙ−（ＮＭｅ）Ｐｈｅ−ＮＨ２；Ｔｙｒ−ＤＡｒｇ−Ｐｈｅ−Ｓａｒ −ｏｌＴｙｒ−ＤＡｌａ−Ｐｈｅ−Ｓａｒ−ｏｌＴｙｒ−ＤＡｌａ−Ｐｈｅ−Ｇ ｌｙ−Ｔｙｒ−ＮＨ２；Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−ＤＡｒｇ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−ＮＨ２； Ｔｙｒ−ＤＴｈｒ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｔｈｚ−ＮＨ２；Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−ＤＡｌ ａ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−ＮＨ２；Ｔｙｒ−ＤＡｌａ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−ｏｌ；Ｔｙ ｒ−ＤＡｌａ−Ｇｌｙ−（ＮＭｅ）Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−ｏｌ；Ｔｙｒ−ＤＡｒｇ− Ｐｈｅ−Ｓａｒ−ＮＨ２：Ｔｙｒ−ＤＡｌａ−Ｐｈｅ−Ｓａｒ−ＮＨ２；Ｔｙｒ −ＤＡｌａ−Ｐｈｅ−Ｓａｒ； Ｔｙｒ−ＤＡｌａ−Ｇｌｙ−（ＮＭｅ）Ｐｈｅ−ＮＨ２；Ｓａｒ−Ｔｙｒ−ＤＡ ｒｇ−Ｐｈｅ−Ｓａｒ−ＮＨ２；Ｔｙｒ−ＤＣｙｓ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−ＤＣｙｓ −ＮＨ２（環状ジスルフィド）Ｔｙｒ−ＤＣｙｓ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−ＤＣｙｓ− ＮＨ２（フリージチオール）Ｔｙｒ−ＤＣｙｓ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−ＤＣｙｓ−Ｎ Ｈ２（環状ジスルフィド）Ｔｙｒ−ＤＣｙｓ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−ＤＣｙｓ−ＮＨ ２（フリージチオール）Ｔｙｒ−ＤＡｌａ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ− Ｓｅｒ−ＮＨ２；Ｔｙｒ−ＤＡｌａ−Ｐｈｅ−Ｓａｒ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ −ＮＨ２：Ｔｙｒ−ＤＡｌａ−Ｐｈｅ−Ｓａｒ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−ＮＨ ２；Ｔｙｒ−ＤＡｌａ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｈｙｐ−Ｓｅｒ−ＮＨ２；Ｔ ｙｒ−ＤＡｌａ−Ｐｈｅ−Ｓａｒ−Ｔｙｒ−Ｈｙｐ−Ｓｅｒ−ＮＨ２；Ｔｙｒ− ＤＡｌａ−Ｐｈｅ−Ｓａｒ−Ｐｈｅ−Ｈｙｐ−Ｓｅｒ−ＮＨ２；Ｔｙｒ−ＤＡｒ ｇ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｈｙｐ−Ｓｅｒ−ＮＨ２；Ｔｙｒ−ＤＡｒｇ−Ｐ ｈｅ−Ｓａｒ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−ＮＨ２；Ｔｙｒ−ＤＡｒｇ−Ｐｈｅ− Ｓａｒ−Ｔｙｒ−Ｈｙｐ−Ｓｅｒ−ＮＨ２およびＴｙｒ−ＤＡｒｇ−Ｐｈｅ−Ｇ ｌｙ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−ＮＨ２で表わされるポリペプチド類、ならびに これらグループ３のポリペプチド類いずれかの有機付加塩または無機付加塩から 選ばれるものである、前記方法。
21. ２１．前記グループ１のポリペプチド類が、（ａ）１〜４４位（Ｎ末端からＣ末 端までの番号付け）において、 （＃１４４）【配列があります】， （＃１４５）【配列があります】， （＃１４６）【配列があります】， （＃１４８）【配列があります】および（＃１４９）【配列があります】で示さ れならびにそれらの機能的に等価なもののアミノ酸配列を有するものであって、 これらの式中、Ｃ末端アミノ酸が、次式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （上式中、それぞれＲ′は独立して特定のアミノ酸の置換基、例えば、水素、ア ルキル、アリール、アミノまたは酸置換基を表す）で示される両端が切断された 基を有し、ＸがＣ末端の末尾の基を表しそして−ＣＯＮＨ２，−ＣＯＯＨ，−Ｃ ＯＯＲ，−ＣＯＮＲＲ，−ＣＨ２ＯＨおよび−ＣＨ２ＯＲ（ここでＲは炭素原子 １〜６個を有するアルキル基および炭素原子１２個までを有する芳香族環である ）から選ばれ、かつ、使用されるアミノ酸残基の略号が、標準的なペプチド命名 法、 Ｇ＝Ｇｌｙ（グリシン）、 Ｙ＝Ｔｙｒ（Ｌ−チロシン）、 Ｉ＝Ｉｌｅ（Ｌ−イソロイシン）、 Ｅ＝Ｇｌｕ（Ｌ−グルタミン酸）、 Ｔ＝Ｔｈｒ（Ｌ−スレオニン）、 Ｆ＝Ｐｈｅ（Ｌ−フェニルアラニン）、Ａ＝Ａｌａ（Ｌ−アラニン）、 Ｋ＝Ｌｙｓ（Ｌ−リジン）、 Ｄ＝Ａｓｐ（Ｌ−アスパラギン酸）、 Ｃ＝Ｃｙｓ（Ｌ−システイン）、 Ｒ＝Ａｒｇ（Ｌ−アルギニン）、 Ｑ＝Ｇｌｎ（Ｌ−グルタミン）、 Ｐ＝Ｐｒｏ（Ｌ−プロリン）、 Ｌ＝Ｌｅｕ（Ｌ−ロイシン）、 Ｍ＝Ｍｅｔ（Ｌ−メチオニン）、 Ｓ＝Ｓｅｒ（Ｌ−セリン）、 Ｎ＝Ａｓｎ（Ｌ−アスパラギン）、 Ｈ＝Ｈｉｓ（Ｌ−ヒスチジン）、 Ｗ＝Ｔｒｐ（Ｌ−トリプトファン）、およびＶ＝Ｖａｌ（Ｌ−バリン）； Ａｉｂ＝α−アミノイソ酪酸 Ｎｌｅ＝ノルロイシン （ＮＭｅ）ＤＡｌａ＝Ｎ−メチル−Ｄ−アラニンに従うもの、 （ｂ）前記（ａ）のポリペプチド類のいずれか１つであって、 （＃１４４〜＃１４８）の１位がＤＴｙｒもしくはＨｉｓの、（＃１４９）の１ 位がＴｙｒもしくはＤＨｉｓの、（＃１４４〜＃１４９）の２位が（ＮＭｅ）Ｄ ＡｌａもしくはＡｉｂもしくはＤＡｌａの、 （＃１４４〜＃１４９）の３位がＤＡｓｐの、（＃１４４〜＃１４９）の４位が ＤＡｌａの、そして（＃１４４〜＃１４９）の１位＋２位がＤＴｙｒ１＋Ｄａｌ ａ２、ＯＴｙｒ１＋（ＮＭｅ）ＤＡｌａ２もしくはＤＴｙｒ１＋Ａｉｂ２のアミ ノ酸置換基を有するもの、 （ｃ）前記（ａ）もしくは（ｂ）のポリペプチド類のいずれか１つであって、２ ７位のＭｅｔに対しＮｌｅの置換基を有するもの、 （ｄ）前記（ａ），（ｂ）もしくは（ｃ）のポリペプチド類のいずれか１つであ って、Ｎ末端−ＮＨ２が−ＮＨＣＯＲ（Ｒは炭素原子１〜６個を有するアルキル 基または炭素原子１２個までを有する芳香族環である）で置換されているもの、 （ｅ）前記（ａ），（ｂ），（ｃ）もしくは（ｄ）のポリペプチド類のいずれか １つのフラグメントであって、１〜２９位のアミノ酸残基を少なくとも含むもの 、 （ｆ）１〜２９位（Ｎ末端からＣ末端までの番号付け）における特定のアミノ酸 配列、 【配列があります】， 【配列があります】， 【配列があります】， 【配列があります】， 【配列があります】， 【配列があります】 （線状ジチオール）、および 【配列があります】（環状ジスルフィド）；を有するものであって、 ここでＣ末端アミノ酸とＸは前記定義のとおりであり、そしてこれらのグループ （ｆ）の化合物のいずれか１つの変性は前記（ｂ），（ｃ）および（ｄ）で示し た変性に従うもの、ならびに （ｇ）グループ１の前記（ａ），（ｂ），（ｃ），（ｄ），（ｅ）もしくは（ｆ ）のポリペプチド類いずれかの有機付加塩または無機付加塩、のいずれかから選 ばれる請求項２０記載の方法。
22. ２２．前記組み合わされたものがグループ１のポリペプチド類およびグループ２ のポリペプチド類のそれぞれに由来する１の化合物を含んでなる請求項２０記載 の方法。
23. ２３．前記組み合わされたものがグループ２のポリペプチド類およびグループ３ のポリペプチド類のそれぞれに由来する１の化合物を含んでなる請求項２０記載 の方法。
24. ２４．前記組み合わされたものがグループ１のポリペプチド類、グループ２のポ リペプチド類およびグループ３のポリペプチド類のそれぞれに由来する１の化合 物を含んでなる請求項２０記載の方法。