HU213395B - Process for producing bile-acid derivatives and pharmaceutical compositions containing the same - Google Patents

Process for producing bile-acid derivatives and pharmaceutical compositions containing the same Download PDF

Info

Publication number
HU213395B
HU213395B HU905893A HU589390A HU213395B HU 213395 B HU213395 B HU 213395B HU 905893 A HU905893 A HU 905893A HU 589390 A HU589390 A HU 589390A HU 213395 B HU213395 B HU 213395B
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
mixture
solution
mmol
compound
mol
Prior art date
Application number
HU905893A
Other languages
German (de)
English (en)
Other versions
HU905893D0 (en
HUT56115A (en
Inventor
Werner Kramer
Guenther Wess
Original Assignee
Hoechst Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hoechst Ag filed Critical Hoechst Ag
Publication of HU905893D0 publication Critical patent/HU905893D0/hu
Publication of HUT56115A publication Critical patent/HUT56115A/hu
Publication of HU213395B publication Critical patent/HU213395B/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/78—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms, with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D213/81—Amides; Imides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J9/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of more than two carbon atoms, e.g. cholane, cholestane, coprostane
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/24—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D213/26—Radicals substituted by halogen atoms or nitro radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/24—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D213/54—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D213/56—Amides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J17/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen, having an oxygen-containing hetero ring not condensed with the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J31/00—Normal steroids containing one or more sulfur atoms not belonging to a hetero ring
    • C07J31/006—Normal steroids containing one or more sulfur atoms not belonging to a hetero ring not covered by C07J31/003
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J41/00—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring
    • C07J41/0005—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring the nitrogen atom being directly linked to the cyclopenta(a)hydro phenanthrene skeleton
    • C07J41/0011—Unsubstituted amino radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J41/00—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring
    • C07J41/0005—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring the nitrogen atom being directly linked to the cyclopenta(a)hydro phenanthrene skeleton
    • C07J41/0027—Azides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J41/00—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring
    • C07J41/0033—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring not covered by C07J41/0005
    • C07J41/0055—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring not covered by C07J41/0005 the 17-beta position being substituted by an uninterrupted chain of at least three carbon atoms which may or may not be branched, e.g. cholane or cholestane derivatives, optionally cyclised, e.g. 17-beta-phenyl or 17-beta-furyl derivatives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J41/00—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring
    • C07J41/0033—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring not covered by C07J41/0005
    • C07J41/0055—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring not covered by C07J41/0005 the 17-beta position being substituted by an uninterrupted chain of at least three carbon atoms which may or may not be branched, e.g. cholane or cholestane derivatives, optionally cyclised, e.g. 17-beta-phenyl or 17-beta-furyl derivatives
    • C07J41/0061—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring not covered by C07J41/0005 the 17-beta position being substituted by an uninterrupted chain of at least three carbon atoms which may or may not be branched, e.g. cholane or cholestane derivatives, optionally cyclised, e.g. 17-beta-phenyl or 17-beta-furyl derivatives one of the carbon atoms being part of an amide group
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J41/00—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring
    • C07J41/0033—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring not covered by C07J41/0005
    • C07J41/0088—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring not covered by C07J41/0005 containing unsubstituted amino radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J43/00—Normal steroids having a nitrogen-containing hetero ring spiro-condensed or not condensed with the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton
    • C07J43/003—Normal steroids having a nitrogen-containing hetero ring spiro-condensed or not condensed with the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton not condensed
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J51/00—Normal steroids with unmodified cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton not provided for in groups C07J1/00 - C07J43/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J9/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of more than two carbon atoms, e.g. cholane, cholestane, coprostane
    • C07J9/005—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of more than two carbon atoms, e.g. cholane, cholestane, coprostane containing a carboxylic function directly attached or attached by a chain containing only carbon atoms to the cyclopenta[a]hydrophenanthrene skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06026—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atom, i.e. Gly or Ala
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Pyrrole Compounds (AREA)
  • Lubricants (AREA)
  • Vessels, Lead-In Wires, Accessory Apparatuses For Cathode-Ray Tubes (AREA)
  • Control Of Heat Treatment Processes (AREA)

Description

A találmány tárgya eljárás epesavszármazékok és az azokat tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására.
Az orális adagolás a gyógyszerek leggyakoribb, legkényelmesebb beadási módja. Ahhoz, hogy a hatóanyag a vérkeringésbe kerüljön, a hatóanyagnak a gyomorbél-csatomában fel kell szívódnia. Ezt követően fajlagos tulajdonságainak megfelelően oszlik el a hatóanyag a testben. Számos hatóanyag azonban csak igen rosszul vagy gyakorlatilag egyáltalán nem szívódik fel, ezért orális adagolásuk nem lehetséges.
Ismert, hogy bizonyos fel nem szívódó gyógyászati hatóanyagok, ha B12-vitaminhoz kötik felszívódhatóvá válik [Proceed. Symp. Control. Rel. Bioact. Mater. 15 /1988/ Controlled Release Society Inc.,
PCT/AU86/0299).
Ennek a felvételi úrnak a kis kapacitása miatt a B12vitamin segítségével azonban csak igen kis mennyiségű hatóanyagot lehet a testbe juttatni.
Olyan epesavszármazékokat találtunk, amelyekkel nehezen vagy egyáltalán nem felszívódó hatóanyagok felszívódhatóvá tehetők, így az anyagok orális adagolás még nagy dózisok mellett is biztosított. Ezen túlmenően bizonyos hatóanyagok az új epesavszármazékokkal együtt a májra hatnak fajlagosan.
Az új epesavszármazékok az (I) általános képletnek felelnek meg, amelyben G jelentése epesavmaradék, W jelentése hatóanyag és X jelentése az epesavmaradék és a hatóanyag közötti összekapcsoló híd.
Az (I) általános képletben a G epesavmaradék, mégpedig (II) általános képletü csoport, amelyben Y jelentése 1-4 szénatomos alkoxicsoport, hidroxilcsoport, -NH-(CH2)n-SO3H vagy -NH-(CH2)n COOH csoport vagy sói, ahol n értéke 1,2,3 vagy 4,
W jelentése 2-20 tagú oligopeptid, amely Gly, Alá, Val, Leu és/vagy Ile aminosavakból épül fel, vagy (P8), (P65), (P69), (P70), (P71), (P73), (P75), (Pl23) vagy (Pl24) képletü csoport, és
Xjelentése -CO-NH-(CH2)n-O- (ahol n jelentése a fenti), -(CH2)m-CO-NH- (m = 1-6), amely 1 vagy 20H-csoportot hordoz, -NH-(CH2)n-O- (ahol n jelentése a fenti) vagy -(CH2)n-COOAz (I) általános képletü vegyületeket a találmány értelmében az 1. igénypontban rögzített módon állítjuk elő.
G-X-et és W-X-et ismert, vagy az alábbiakban részletesebben leírt eljárások szerint állítunk elő.
Az epesavszármazék mind védett, mind szabad formában kerülhet alkalmazásra.
A találmány szerinti eljárás egy előnyös megvalósítási módja szerint W reakcióképes formáját X-G reakcióképes formájával reagáltatjuk. Ezt követően a védőcsoportokat lehasíthatjuk, és a C-24 karboxilcsoportot átalakíthatjuk.
Az eljárás definiálásakor összefoglaljuk, hogy „G-Xet és W-X-et ismert, vagy az alábbiakban részletesebben leírt eljárások szerint állítunk elő.”
A reakcióképes epesavszármazékok előállítását az 1—4. reakcióvázlaton a kólsav példáján mutatjuk be. Az
1. reakcióvázlaton X-G-t védőcsoport nélkül, a 2. reakcióvázlaton védőcsoporttal (tetrahidropiranil-csoporttal) mutatjuk be. A 3. reakcióvázlat a t-BuMe2Si-védőcsoportot mutatja, míg a 4. reakcióvázlaton 3-as helyzetben α-konfigurációjú epesavszármazék látható.
A 3-OH-csoportok dióira [HO(CH2)n OH) történő lecserélése a megfelelő mezilát és a megfelelő diói reagáltatásával lehetséges, aminek során a dióit előnyösen feleslegben alkalmazzuk, bázis, így piridin, lutidin vagy trietilamin mellett.
A (IV) és (XI) általános képletü vegyületek primer OH-csoportja ismert eljárásokkal tovább alakíthatók; így pl. a (XI) képletü vegyületeket oxidálószerrel a megfelelő (XVI) képletü karbonsavvá alakíthatók (a képletszámokat lásd a reakcióvázlatokon), amikor is oxidálószerként előnyösen króm(VI)-vegyületet vagy káliumpermanganáton alapuló rendszert alkalmazunk. A (XVI) képletü vegyületben a védőcsoport lehet benzil-, t-BuMe2Si-, benzoxikarbonil vagy acetil-csoport is.
A (VII), (XIII) és (XV) általános képletü aminok borostyánkősavval alkalmas oldószerben, előnyösen diklórmetánban, toluolban vagy piridinben (XVII) általános képletü karbonsavvá alakíthatók. A (XVII) képletü karbonsavakban R(10) lehet hidrogénatom, THP, t-BuMe2Si, acetil-, benzil- vagy benziloxikarbonilcsoport.
A 4. reakcióvázlat 3a-konfigurációjú epesavszármazékok előállítását mutatja. A (XVIII) képletü vegyület hidroborozására különböző boránok jöhetnek számításba, így BH3, texilborán, 9-BBN. A XVIII. képletü vegyületet vagy a 4. reakcióvázlatban ábrázolt formában, szabad alkoholcsoportokkal, vagy THP, acetil-, benzil- stb. védőcsoporttal védve vihetjük reakcióba.
Gyógyszerkénti alkalmazás
Az epesavaknak fontos fiziológiai szerepe van a lipidek emésztésében. Az epesavak a májból származnak, az epehólyagon keresztül kerülnek a bélbe, ahol részt vesznek a lipidek emésztésében. A kiválasztott epesavak legnagyobb része a belső máj körfolyamat révén visszakerül; a vékonybél mezenteriális vénákon és a kapuérrendszeren keresztül az epesavak visszajutnak a májba. A bélben lejátszódó felszívódásuk során mind aktív, mind passzív transzport folyamatnak van szerepe. A belső májkörfolyamatban az epesavak vagy szabad savak, vagy glicin- és taurin-konjugátum alakjában fordulnak elő.
Azt találtuk, hogy az (I) általános képletü vegyületek felszívódnak és a vérkeringésbe jutnak. Ez lehetőséget nyit arra, hogy az epesavak természetes felszívódásának természetes mechanizmusát kihasználva nehezen vagy egyáltalán nem felszívódó hatóanyagok felszívódásán javítsunk.
Ezen túlmenően a leirt rendszernek egy további fontos tulajdonsága van: mind a felszívódó, mind a fel nem szívódó gyógyszerek esetén szervre szelektív hatást lehet elérni, mégpedig szelektív olyan szervekre nézve, amelyek epesav transzport-mechanizmussal rendelkeznek (pl. a belső májkörfolyamat szövetei) (pl. hepatotróp hatás). Ezzel gyógyszerhatóanyagok egész sorának a
HU 213 395 Β mellékhatásai csökkenthetők vagy akár ki is küszöbölhetek.
Gyógyászati hatóanyagok egész sora esetében kívánatos a jobb felszívódás, illetve a jobb szelektivitás; ilyenek például a peptidek, antibiotikumok, vírus elleni anyagok, rák elleni hatóanyagok, májprotektiv anyagok, hiperlipidaemia elleni hatóanyagok, diuretikumok, vérnyomáscsökkentő anyagok, reningátlók, prolilhidroxilázgátlók, cukorbaj elleni anyagok.
A gyógyászatilag hatásos molekulák hatásukat különbözőképpen fejthetik ki:
- a találmány szerint összekapcsolt formában
W-X-G,
- az összekötő híddal együtt, miután az epesavesoport lehasadt,
- szabad formában (X és G nélkül)
- mind a három formában egyszerre.
Az (I) általános képletű vegyületek különböző adagolási formában adagolhatjuk, az orális adagolás, így tabletták, kapszulák, folyadékok formájában azonban preferált. A napi dózis a beteg testtömegétől és állapotától függően 3 mg és 5000 mg között, előnyösen 10 mg és 500 mg között van. Az (I) általános képletű vegyületek alkalmas oldószerekben oldva vagy szuszpendálva kerülhetnek alkalmazásra. Alkalmas oldó és hígítószerek például: gyógyászatilag elviselhető szerves oldószerek, pl. egy- vagy többértékű alkoholok, így etanol vagy glicerin, továbbá triacetin, olajok, így napraforgóolaj, csukamájolaj, éterek, így dietilénglikol-dimetiléter vagy poliéterek, pl. polívinilpirrolidon, valamint egyéb, gyógyászatilag elviselhető adalékanyagok, például keményítő, ciklodextrin, poliszacharidok. A találmány szerint előállított vegyületek egyéb gyógyhatású anyagokkal együtt kombináltan is adagolhatok.
A (XXII). általános képletű közbenső termékek is újak. A (XXII) általános képletben SG jelentése hidrogénatom vagy védőcsoport, például tetrahidropiranil-, benzil-, tBuMe2Si-, benziloxikarbonil-, acetilcsoport és
G és X jelentése a fenti.
Ezeket a vegyületeket a találmány szerinti eljárás során leggyakrabban szabad NH2- vagy OH-csoporttal visszük a W—X-G képletű vegyületekhez vezető reakcióba.
Az SG védőcsoport általában az (I) és a (XXII) általános képletű vegyületek szintézise során van jelen; a XXII. képletű vegyület (I) általános képletű vegyületté alakítása előtt az SG védőcsoportot általában hidrogénatommá cseréljük. Az SG-X-G általános képletű közbenső termékek mind az (I) általános képletű vegyületek előállításában, mind egyéb végtermékek, például vinilacetáttal alkotott, az -X-G csoportot tartalmazó kopolimerek szintézisében fontos szerepet játszanak.
PÉLDÁK:
1. példa (P-l -reakció) g (51 mmol) dezoxikólsav 50 ml dioxán és 20 ml piridin elegyével készített elegyéhez szobahőmérsékleten 30 ml ecetsavanhidridet adunk. Három nappal később az elegyet bepároljuk és a maradékot 300 ml etil—
-acetátban feloldjuk. Oxidálószerként 14 g káliumkromát 60 ml vízzel készített oldatát adagoljuk. Az elegyet szobahőmérsékleten 3 napon át állni hagyjuk, majd liter vízzel hígítjuk és éterrel háromszorosan extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat vízmentes nátrium-szulfáttal szárítjuk, majd bepároljuk. A maradékot 200 ml vizes kálium-hidroxid-oldatban feloldjuk. 24 óra elteltével a terméket In sósavval kicsapjuk és kovagélen ciklohexán, etil-acetát és ecetsav 40 : 100 : 1 tf-arányú elegyével kromatografáljuk. 14,0 g (35,9 mmol; 70%) (Pl) képletű terméket kapunk.
2. példa (P-2-reakció)
14,0 g (35,9 mmol) 1. példa szerinti vegyület 100 ml dioxánnal készített oldatához 8,3 ml tri-n-butilamint adunk. 3,75 ml klórhangyasav-etilészterhozzácsepegtetése után az elegyet 30 percen át szobahőmérsékleten állni hagyjuk, utána 4,75 g taurin 38 ml In nátrium-hidroxid-oldattal készített oldatát adjuk hozzá. Az elegyet szobahőmérsékleten 24 órán át keverjük, utána bepároljuk, és a maradékot 400 ml In sósav és éter között megosztjuk. A vizes fázist éterrel háromszor extraháljuk. Az egyesített szerves fázist bepároljuk és a maradékot forró etanolban oldjuk. Szűrés és betöményítés után a termék kristályosodik. 9,5 g (P-2) képletű vegyületet kapunk.
3. példa
500 mg klórambucil 25 ml dioxánnal készített oldatához 1,5 ml oxalil-kloridot adunk, és 2 g 4A° pórusméretű molekulaszűrő adagolása után az elegyet szobahőmérsékleten 24 órán át állni hagyjuk. Bepárlás után a maradékot 15 ml száraz dioxánban oldjuk, és az oldatot nitrogéngáz alatt 30 perc alatt 900 mg 2. példa szerinti vegyület (P-2) 60 ml dioxánnal készített oldatához csepegtetjük. Az elegyet visszafolyató hűtő alkalmazásával órán át forraljuk, utána bepároljuk és a maradékot kovagélen kloroform, metanol és ecetsav 12 : 1 ^tfarányú elegyével kromatografáljuk. Hozam: 250 mg 3. példa szerinti vegyület (R-3).
4. példa (Ρ-4-reakció) (oltalmi körön kívüli)
A 3. példában leírtak szerint 500 mg klórambucil savkloridjának oldatát készítjük és 400 mg dezoxitauro-kólsawal reagáltatjuk. A terméket kovagélen etil-acetát, ciklohexán és ecetsav 100 : 90 : 1 tf-arányú elegyével, majd kloroform és metanol 5 : 1 tf-arányú elegyével végzett kromatográfiás tisztítás után 350 ml 4. példa szerinti vegyületet (P-4) nyerünk.
5. példa (Ρ-5-reakció) mg 3. példa szerinti vegyület 150 μΐ dioxán és 15 μΐ 100 mmólos 7,4 pH-jú nátriumfoszfátpuffer elegyében feloldunk, és az oldatot 100 mCi Na[3H]BH4-hez (11,8 Ci/mmol) adjuk. Az oldatot szobahőmérsékleten 2 órán át állni hagyjuk, majd 5 μΐ 5 n sósavat adagolunk. Preparativ vékonyréteg kromatográfiásan (0,5 mm vastagságú HPTLC-DC-lemez, butanol, ecetsav és víz 9:1:2 tf-arányú elegye) 2mCi 5. példa szerinti vegyületet (P—5) kapunk.
HU 213 395 Β
6. példa (Ρ-6-reakció)
a) 43,6 g (89,6 mmol) 10. példa szerinti vegyület 1 liter vízmentes dimetilformamiddal készített oldatához 6,2 g (95,4 mmol) nátrium-azidot adunk, és az elegyet 130 °C-on 45 percen keresztül keveijük. Lehűlés után az elegyet jégre öntjük és dietil-éterrel háromszor extraháljuk. A szerves fázist magnézium-szulfáttal szárítjuk, majd bepároljuk.
b) A 11b. példa szerint végezzük az észterezést. Kovagélen ciklohexán és etil-acetát 1 : 1 tf-arányú elegyével végzett kromatografálás 18,9 g (42,2 mmol, 47%) 6. példa szerinti azidot (P-6) eredményez.
C25H4,N3O4 (447), MS (FAB, 3-NBA/LiCl): 454 = = M+Li+)
7. példa (Ρ-7-reakció)
3,0 g (6,7 mmol) 6. példa szerinti vegyület 100 ml metanollal készített oldatát 2 g palládium csontszén jelenlétében szobahőmérsékleten és légköri nyomáson hidrogénezzük. A katalizátort kiszűrjük és a szűrletet bepároljuk. Kovagélen metanol és trietilamin 95 : 5 tfarányú elegyével végzett kromatográfiás tisztítás 1,6 g (3,8 mmol, 57%) 7. példa szerinti amint (P-7) eredményez.
C25H63NO4 (421) MS (FAB): 422 (M+H+)
8. példa (P-8-reakció)
500 mg (1,19 mmol) 7. példa szerinti vegyület, 10 ml trietilamin, 200 mg (1,61 mmol) 4-dimetilamino-piridin és 520 g (1,20 mmol) 125. példa szerinti lakton (előállítását lásd 38 23 045 sz. NSZK-beli közrebocsátási irat, valamint 4 925 852 sz. amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás) 25 ml vízmentes tetrahidrofüránnal készített elegyét visszafolyató hűtő alkalmazásával 24 órán át forraljuk. Az oldószert elpárologtatjuk, és a maradékot kovagélen kromatografáljuk kloroform és metanol 91 tf-arányú elegyével. 520 mg (0,61 mmol, 51%) 8. példa szerinti (P-8) vegyületet kapunk (W = (P8 képletű csoport).
C52 H69 FN2O7 (852), MS (FAB, 3-NBA/LiCl): 859 (M+Li)
9. példa (Ρ-9-reakció)
A 79-88. példákban leírtak szerint eljárva állítjuk elő a (P—9) képletű vegyületet.
C5iH67FN2O7 (880), MS (FAB, 3-NBA/LiCl): 847(M+Li+)
10. példa (P-10 reakciója)
100 g (0,245 mól) kólsav 500 ml piridinnel készített elegyéhez 0 °C-on 23,1 ml (0,294 mól) metánszulfonsavkloridot csepegtetünk. Az elegyet 0 °C-on 30 percen át, szobahőmérsékleten 2 órán át keverjük. Utána az elegyet 3000 ml víz és 400 ml tömény kénsav elegyére öntjük és etilacetáttal háromszor extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat magnézium-szulfáttal szárítjuk, majd bepároljuk. Kovagélen etil-acetát, ciklohexán és ecetsav 5:5:1 tf-arányú elegyével kromatografálva kvantitatív hozammal kapjuk a (P-10) képletű vegyületet. Preparatív célokra további tisztítás nem szükséges.
11. példa (P-l 1 reakció)
a) 119 g (0,245 mól) 10. példa szerinti vegyületet 500 ml etilénglikol és 100 ml piridin elegyében 2 órán át 100 °C-on tartunk, majd 1500 ml víz és 100 ml tömény kénsav elegyébe öntjük és etil-acetáttal háromszor extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat magnézium-szulfáttal szárítjuk, majd bepároljuk.
b) Eszterezés céljából a maradékot 1100 ml metanolos sósavban (előállítva 100 ml acetilklorid 1000 ml metanolba való csepegtetése útján) feloldjuk, és az oldatot szobahőmérsékleten egy éjszakán át keverjük. Az oldatot 2000 ml vízbe öntjük és éterrel háromszor extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat telített vizes Na HCO3-oldattal mossuk, majd magnézium-szulfáttal szárítjuk. Az oldószer élpárologtatása és kovagélen végzett flashkromatografálás (először etil-acetát, utána etil-acetát és metanol 10 : 1 arányú elegye) 37,1 g (0,08 mól, 33%) (P-l 1) képletű vegyületet eredményez.
C27H46O6 (466), MS (FAB, 3-NBA/LiJ): 473 (M+Li+)
A termék akár 10% 3a-izomert tartalmaz, amelyet adott esetben megfelelő származékképzés után elválaszthatunk.
All. példában leírtak szerint az alábbi 1. táblázatban szereplő vegyületeket is állítjuk elő (kisebb mennyiségű α-izomer mellett túlnyomó részben β-izomert kaptunk).
1. táblázat
A táblázat olyan (II) általános képletű csoportot tartalmazó vegyületeket ismertet, amelyekben Y = OCH3, 4α = H
Példa 3 β-csoport MS (FAB, 3-ΝΒΑΛ.ίΙ vagy LiCl)
12 lICMCHib O- C28H48O6 (480); 487 ÍM-Li4)
13 HO-(CH2)4-O- C29H30O6 (494); 501 (M+Li4)
14 HO-(CH2)5-O- C30H52O6 (508); 515 (M+Li4)
15 HO-- C31H54O6 (522); 529 (M+Li4)
16 HO-(CH2)io-0- C35H62O6 (578); 585 (M+Li4)
17 HO-(CH2)2-0-(CH2)2-O- C29H50O7 (510); 517 (M+Li4)
18 H3C-CH-CH2O- Íh C28H48O6 (480); 487 (M+Li+)
19. példa (P-l9 reakció)
37,1 g (0,08 mól) 11. példa szerinti vegyület 150 ml piridinnel készített elegyéhez 0 °C-on 6,6 g (0,084 mól) metánszulfonsavkloridot csepegtetünk. Az elegyet 15 percen át 0 °C-on, majd 1 órán át szobahőmérsékleten keverjük, utána 500 ml vízbe öntjük és etil-acetáttal háromszor extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat magnéziumszulfáttal szárítjuk, az oldószert elpárologtatjuk és a maradékot kovagélen ecetsav és ciklohexán 3 : 1 tf-arányú elegyével kromatografáljuk. 37,7 g (0,07 mól, 87%) (P-l 9), képletű mezilátot kapunk.
C28H48O8S (544), MS (FAB, 3-NAB/LiJ): 551 (M+Li+)
20. példa (P-20 reakció)
HU 213 395 Β
37,7 g (0,07 mól) 19. példa szerinti mezilát és 4,95 g (0,076 mól) nátrium-azid 150 ml vízmentes dimetil-szulfoxiddal készített elegyét 70 °C-on 2 órán át keverjük, utána vízre öntjük és etil-acetáttal háromszor extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat magnéziumszulfáttal szárítjuk és bepároljuk, a maradékot toluolban oldjuk. A toluolt rtációs bepárlóban elpárologtatjuk (2x). Hozam: 34,5 g (P-20) képletű vegyület (kvantitatív hozam). Az azidot közbenső tisztítás nélkül továbbreagáltatjuk.
21. példa
31,1 g (0,063 mól) 20. példa szerint előállított azid (P-21) 500 ml etil-acetáttal készített oldatát 20 g 10%-os palládium csontszén katalizátor jelenlétében szobahőmérsékleten és légköri nyomáson hidrogénezzük. A katalizátort kiszűrjük és a szűrletet bepároljuk. A maradékot kovagélen etil-acetát, metanol és trietilamin 5:1:1 tf-arányú elegyével kromatografálva 21,0 g (0,045 mól, 71%) (P—21) képletű amint kapunk.
C27H47NO5 (465), MS (FAB, 3-NAB/LiJ): 472 (M+Li+)
A 19-21. példához analóg módon az alábbi 2. táblázatban összefoglalt vegyületeket állítjuk elő.
A 2. táblázat olyan (II) általános képletű csoportot tartalmazó vegyületeket ismertet, amelyekben Y = = OCH3, 4α = H
2. táblázat
Példa 22 3 β-csoport H2N-ÍCHÜ1-O- MS (FAB, 3-NBA/LiJ) C28H49NO5 (479); 486 (M+I.f)
23 H2N-(CH2)4-O C29H5,NO5 (493); 500 (M+Li4)
24 H2N-(CH2)s-O- C30H53NO5 (507); 507 (M+Li+)
25 H2N-(CH2)6-O- C31H55NO3 (521); 528 (M+Li+)
26 H2N-(CH2),O-O- C35H63NO5 (577); 584 (M+Lf)
Példa 3 β-csoport MS (FAB, 3-NBA/Li))
27 H2N-(CH2)2-O-(CH2)2-O- C29H5iNO5 (509); 516 (M+Li4)
28 H2,C-CH-CH2O- -nh2 C28H49NO5 (479);486 (M+Li4)
A kólsavhoz hasonlóan más epesavakat is reagáltatunk a 10-28. példákban leírtak szerint. A 3. táblázatban feltüntetett vegyületeket állítjuk elő.
a) dezoxikólsavból kiindulva
A 3. táblázat olyan (II) általános képletű csoportokat tartalmazó vegyületeket mutat, amelyekben Y = OCH3, 4a = H
3. táblázat
Példa 29 3 β-csoport HO-(CH2)2-O- MS (FAB, 3-NBA/Li) C27H46O5 (450); 457 (M+LÍ+)
30 HO-(CH2)3-O- C28H48O5 (464); 471 (M+Li4)
31 HO-(CH2)5-O- C30H52O5 (492); 499 (M+Li4)
32 HO-(CH2)io-0- C35H62O5 (562); 569 (M+Li+)
33 H2N-(CH2)2-O- CrH4iNO4 (449); 456 (M+l.i’)
34 H2N-(CH2)5-O- C30H53NO4 (491); 498 (M+Li4)
b) kenodezoxikólsavból kiindulva a 4. táblázatban összefoglalt vegyületeket állítjuk elő; ezek olyan (II) általános képletű csoportokat tartalmazó vegyületek, melyekben Y = OCH3,4α = H.
4. táblázat
Példa 35 3 β-csoport HCKCH2)2-O- MS ( FAB, 3-NBA/Li) C27H46O5 (450); 457 (M+Lf)
36 HO-(CH2)3-O- C28H48O5 (464); 471 (M+Lf)
37 HO-(CH2)5-O- C30H52O5 (492); 499 (M+Lf)
38 HO-(CH2)i0-O- C35H62O5 (562); 569 (M+Li4)
39 H?N-(CH?)?-O- C77H47NO4 (449); 456 (M+Lf)
40 H2N-(CHi)5-O- C30H53NO4 (491); 498 (M+Li4)
c) litokólsavból kiindulva az 5. táblázatban összefoglalt vegyületeket állítjuk elő; ezek olyan (II) általános képletű csoportokat tartalmazó vegyületek, amelyekben Y = OCH3, és 4a szintén H.
5. táblázat
Példa 41 3 β-csoport HO-(CH7)7-O— MS ( FAB, 3-NBA/Li) C^HjaOj (4341; 441 ÍM+Li4)
42 HO-(CH2)3-O- C28H48O4 (448); 455 (M+Li4)
43 HCHCH2)5-O- C30H52O4 (476); 483 (M+Li4)
44 HO-(CH;)i,X> C3sH62O4 (546); 653 (M+Li4)
45 H+N-tCH+VO- C77H47NO7 (443); 440 (M+Li4)
46 H2N-(CH2)5-O- C30H53NO3 (475); 482 (M+Li4)
47. példa (P-47 reakció)
47a) (R10 = H)
2,0 g (4,3 mmol) 21. példa szerinti vegyület 25 ml tetrahidrofürán és 5ml trietil-amin elegyével készített oldatához 430 mg (4,3 mmol) borostyánkősavanhidridet adunk, az elegyet szobahőmérsékleten 30 percen keresztül keverjük, utána 2n sósavra öntjük és etil-acetáttal háromszor extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat magnéziumszulfáttal szárítjuk és az oldószert ledesztilláljuk. 2,4 g (4,2 mmol, 98%) R(10) helyén hidrogénatomot tartalmazó (P—47) sz. vegyületet kapunk.
C3iH5iNO8 (565): MS = FAB, 3-NBA/LiJ): 578 (M+2LY-H)
47b) (R10 = t-BuMe2Si)
A 47a) példához analóg módon az 58. példa szerinti vegyületből állítjuk elő.
47c) (R10 = tetrahidropiranilcsoport = THP)
A 47a) példához analóg módon az 55. példa szerinti vegyületből állítjuk elő.
48. példa (P-48 reakció)
100 g (0,237 mól) kólsav-metilészter 750 ml piridinnel készített elegyéhez 0 °C-on 20,3 ml (0,284 mól) acetilkloridot csepegtetünk. Az elegyet szobahőmérsékleten 2 órán át keverjük, utána jeges vízre öntjük és etilacetáttal háromszor extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat magnéziumszulfáttal szárítjuk, majd bepároljuk. A maradékot kovagélen ciklohexán és etil-acetát
1,5 : 1 tf-arányú elegyével kromatografáljuk. 95,8 g (0,206 mól, 87%) (P—48) képletű monoacetátot kapunk.
49példa (P-49 reakció)
HU 213 395 Β
50,0 g (0,148 mól) 48. példa szerinti monoacetát 250 ml diklór-metán és 250 ml dihidropirán elegyével készített oldatához szobahőmérsékleten 10,0 g piridinium-(toluol-4-szulfonát)-ot adunk, és az elegyet szobahőmérsékleten két napon keresztül keveijük. Utána 1500 ml dietil-étert adagolunk és a szerves fázist félig telített konyhasó-oldattal mossuk. A szerves fázist magnéziumszulfáttal szárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. 75 g (kvantitatív hozam) (P—49) képletű bisz-THP-étert kapunk, amelyet tisztítás nélkül tovább reagáltatunk.
50. példa
46,6 g (kb. 0,055 mól) 49. példa szerinti bisz-éter 300 ml vízmentes metanollal készített oldatához szobahőmérsékleten 37,8 g (0,275 mól) kálium-karbonátot adunk, és az elegyet 3 órán át keveijük. Az oldószer legnagyobb részét ledesztilláljuk, és a maradékot 2n sósav és toluol keverékére öntjük. A vizes fázist toluollal kétszer extraháljuk, és az egyesített szerves fázisokat először vízzel, majd kétszer telített vizes NaHCOj-oldattal mossuk, utána magnéziumszulfáttal szárítjuk és az oldószert eltávolítjuk. A maradékot kovagélen ciklohexán és etil-acetát 3 : 2 tf-arányú elegyével kromatografálva 28,8 g (0,049 mmol, 89%) (P-50) képletű vegyületet kapunk.
C35 H58O7 (590), MS (FAB, 3-NAB/LiJ): 597 (M+Li+)
51. példa (P—51 reakció)
28,8 g (0,048 mól) 14. példa szerinti vegyületből a 10. példa szerint eljárva állítjuk elő a (P—51) képletű mezilátot. Hozam: 30,3 g (0,045 mól, 94%).
52. példa (P-52 reakció)
a) 46,0 g (0,068 mól) 51. példa szerinti mezilát, 300 ml etilénglikol és 75 ml trietil-amin elegyét visszafolyató hűtő alkalmazásával 2,5 órán át forraljuk. Az elegyet In sósavra öntjük és dietil-éterrel kétszer extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat egyszer vízzel, kétszer telített vizes NaHCO3-oldattal mossuk, magnéziumszulfáttal szárítjuk és az oldószert eltávolítjuk. A maradékot toluolban oldjuk és kétszer bepároljuk
b) A maradék 500 ml vízmentes metanollal készített oldatához 40,0 g kálium-karbonátot adunk, és az elegyet szobahőmérsékleten két órán át keveijük. Utána a metanol legnagyobb részét vákuumban eltávolítjuk, és a maradékot 2n sósav és toluol keverékére öntjük. A vizes fázist kétszer toluollal extraháljuk, az egyesített szerves fázisokat telített vizes NaHCO3-oldattal mossuk, magnéziumszulfáttal szárítjuk és bepároljuk. Kovagélen ciklohexán és etilacetát 2 : 1 tf-arányú elegyével végzett flash kromatográfiás tisztítás 25,6 g (0,040 mól, 60%) (P-52) képletű terméket ad.
C37H62O8 (634), MS (FAB, 3-NBA/LiJ): 641 (M+Li+)
53. példa (P—53 reakció)
A 19. példa szerint eljárva állítjuk elő a (P-53) képletű vegyületet.
54. példa
A 20. példa szerint eljárva a (P-54) képletű vegyületet állítjuk elő.
55. példa
A 21. példában leírtak szerint állítjuk elő a (P-55) képletű vegyületet.
C37H63NO7 (633), MS (FAB, 3-NBA/LiJ): 640 (M+Li+)
56. példa (P-56 reakció)
24,5 g (0,045 mól) 19. példa szerinti vegyület és
26,4 ml (0,227 mól) 2,6-dimetil-piridin 150 ml doklórmetánnal készített oldatához 0 °C-on 31,2 ml (0,136 mól) terc-butildimetil-szililtriflátot csepegtetünk. Az elegyet 15 percen át 0 °C-on, majd 2 órán át szobahőmérsékleten keverjük, utána telített vizes NaHCO3-oldatra öntjük és diklór-metánnal háromszor extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat magnéziumszulfáttal szárítjuk, majd bepároljuk. Kovagélen etilacetát és ciklohexán 1 : 3 tf-arányú elegyével végzett flash kromatográfiás tisztítás 23,5 g (0,03 mól, 67%) (P-56) képletű terméket ad.
C4oH7608SÍ2S (772), MS (FAB, 3-NBA/LiJ): 779 (M+Li+)
57. példa
23,4 g (0,03 mól) 56. példa szerinti vegyületből a
22. példa szerint eljárva állítjuk elő a (P—57) képletű terméket. A hozam kvantitatív.
58. példa (P-58 reakció)
A 57. példa szerint előállított azidot a 21. példa szerint hidrogénezzük. Kromatográfiás tisztítás után (kovagél, etil-acetát, metanol és trietilamin 18:1:1 tf-arányú elegye) 10,0 g (P-58) képletű vegyületet kapunk (0,014 mmol, 48%, a 0,03 mól 56. példa szerinti vegyületre vonatkoztatva).
C39H75NO2SÍ2 (693), MS (FAB, 3-NBA/LiJ): 700 (M+Li+)
59. példa (P-59 reakció) (Bn = benzilcsoport)
500 mg (1,07 mmol) 21. példa szerinti vegyület, valamint 76 mg (0,33 mmol) tetraetil-ortotitanát 10 ml vízmentes benzilalkohollal készített elegyét 100 °C-on 8 órán át keverjük. Lehűlés után az elegyet 100 ml etil-acetáttal hígítjuk, n sósavval, majd 8%-os NaHCO3-oldattal kirázzuk, a szerves fázist magnéziumszulfáttal szárítjuk, majd bepároljuk. A maradékot kovagélen etil-acetát, metanol és trietilamin 5:1:1 tf-arányú elegyével kromatografálva 360 mg (6,64 mmol, 62%) (P-59) képletű benzilésztert kapunk.
C33H5iNO5 (541, MS (FAB, 3-NBA/LiJ): 542 (M+Li+).
60. példa (P-60) képletű vegyület
a) A (P-60a) képletű vegyület előállítása 42 g (0,09 mól) 11. példa szerinti vegyület és 61,5 g (0,36 mól) benzil-bromid 270 ml N-etil-diizopropilaminnal készített elegyét 100 °C-on (fürdőhőmérséklet) 3 órán át keveijük. Utána az elegyet 1,8 liter víz és
HU 213 395 Β
180 ml tömény kénsav elegyébe öntjük és etilacetáttal háromszor extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat In sósavval, majd vízzel, végül telített vizes NaHCO3oldattal mossuk, magnéziumszulfáttal szárítjuk, majd bepároljuk. A maradékot kovagélen etil-acetát és ciklohexán 1 : 1 tf-arányú elegyével kromatografálva 14,54 g (0,026 mól, 29,0%) (P-60a) képletű vegyületet kapunk.
C34H52O6 (556), MS (FAB, 3-NBA/LiJ): 536 (M+Li+).
b) A (P-60b) képletű vegyület előállítása 16,14 g (0,029 mól) 60a. szerinti vegyület 450 ml metanollal készített oldatát 37 ml (0,037 mól) In vizes nátriumhidroxid-oldat adagolása után visszafolyató hűtő alkalmazásával 8 órán át forraljuk. A metanolt rotációs bepárlón eltávolítjuk, a maradékot 320 ml vízben oldjuk és az oldathoz 37 ml (0,037 mól) In vizes sósavat adunk. A savas elegyet és etilacetáttal kétszer extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat vízzel kétszer mossuk, magnéziumszulfáttal szárítjuk, majd bepároljuk. A kristályos maradékot 150 ml diizopropiléterrel eldörzsöljük, leszívatjuk és vákuumban szárítjuk. 13,85 g (0,025 mól, 88,0%) (P-60b) képletű vegyületet nyerünk, amely 144-146 °C-on olvad.
C33H50O6 (542), MS (FAB, 3-NBA/TFA): 565 (M+Na+).
c) A (P-60c) képletű vegyület előállítása
a) Anhidridképzés
13,8 g (0,0254 mól) 60b. példa szerinti vegyület és 7,69 g (0,0762 mól) trietil-amin 250 ml vízmentes tetrahidrofuránnal készített oldatához szobahőmérsékleten 6,28 g (0,03 mól) 2,6-diklór-benzoilkloridot csepegtetünk és az elegyet visszafolyatóhűtő alkalmazásával 3 órán át forraljuk.
b) Észterképzés
Az a) szerint előállított anhidrid-oldatot 10 °C-ra hütjük és egymás után 28,12 g (0,38 mól) terc-butanolt és
3,1 g (0,0254 mól) 4-dimetilamino-piridint adagolunk. Az elegyet 1 óra alatt forrásig melegítjük, majd visszafolyató hűtő alatt 4 órán át forraljuk. A tetrahidrofurán legnagyobb részét vákuumban eltávolítjuk. A maradékot etil-acetátban oldjuk, az oldatot vízzel háromszor mossuk, majd magnéziumszulfáttal szárítjuk és bepároljuk. A maradékot kovagélen etil-acetát és ciklohexán 1 : 1 tf-arányú elegyével kromatografálva 6,85 g (0,0114 mól, 45,0%) (P-60c). Képletű vegyületet kapunk, amely 79-80 °C-on olvad.
d) A (P-60d) képletű vegyület előállítása (P-60d reakció)
7,14 g (0,0119 mól) (P-60c) példa szerinti vegyület 250 ml etil-acetáttal készített oldatát 1,5 g 10%-os palládium csontszén katalizátor jelenlétében szobahőmérsékleten és légköri nyomáson hidrogénezzük. A hidrogénfelvétel megszűnése után a katalizátort kiszűrjük és a szürletet bepároljuk. 6,0 g (0,0117 mól, 98,9%) (P-60d) képletű vegyületet kapunk.
C30H52O6 (508), MS (FAB, 3-NBA/LiJ): 515 (M+Li+)
e) A (P-60e) képletű vegyületet a (60-d) képletű vegyületből a 19-28. példákban leírtak szerint állítjuk elő.
C3oH52N05 (507); MS (FAB, 3-NBA/LiJ): 514 (M+Li+)
61. példa (P-61 reakció)
42,2 g (0,1 mól) kólsav-metilészter, 300 ml (1,8 mól) N-etil-diizopropil-amin és 10 ml (0,12 mól) allil-bromid elegyét visszafolyató hűtő alatt 8 órán át keveijük. Minden eltelt óra után újabb 5 ml allil-bromidot adunk az elegyhez. (DC-ellenőrzés, ciklohexán és etil-acetát 1 : 1 tf-arányú elegyével). A reakcióelegyet 400 ml tömény kénsav és 2000 ml víz elegyébe öntjük, és etilacetáttal háromszor extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat n sósavval, vízzel, majd telített NaHCO3-oldattal mossuk, magnéziumszulfáttal szárítjuk és az oldószert eltávolítjuk. A maradékot kovagélen n-heptán és etil-acetát 4 : 1, 3 : 1, majd 2 : 1 tf-arányú elegyével kromatografálva 21,91 g (0,047 mól, 47%) (P-61) képletű vegyületet nyerünk.
C28H46O5 (462), MS (FAB, 3-NBA/LiJ): 469 (M+Li+)
62. példa (P-62 reakció) (1) Texilborán előállítása
Argon légkör alatt 0 °C-on 85 ml 1 mólos BH3*THFoldathoz (THF) 85 ml 1 mólos 2,3-dimetil-butén-oldatot (THF) csepegtetünk, és az elegyet 0 °C-on keverjük.
(2) Hidrobórázás
Az (1) szerint készített oldathoz 0 °C-on 8,6 g (18,59 mmol) 61. példa szerinti telítetlen vegyület 25 ml tetrahidrofuránnal készített oldatát csepegtetjük. Az elegyet 3 órán át 0 °C-on tartjuk (vékonyréteg kromatográfiás ellenőrzés), utána szobahőmérsékletre hagyjuk melegedni, és ezen a hőmérsékleten 16 órán át tartjuk. Ezt követően frissen készített texilbrán-oldatot (THF) adagolunk cseppenként, és az elegyet szobahőmérsékleten tovább keveijük. Amikor kiindulási anyag már nem mutatható ki, a reakcióelegyet argon légkör alatt óvatosan, intenzív keverés mellett vizes nátrium-hidroxid-oldatba öntjük (1 egyenérték boránra számítva 1 egyenérték NaOH felhasználásával). Utána jeges hűtés mellett 30%os hidrogénperoxid-oldatot csepegtetünk az elegyhez (2 egyenértéket egy egyenérték boránra). Az elegyet 20 percen át 0 °C-on, majd 30 percen át 50 °C-on tartjuk, fázis szétválasztás megkönnyítése céljából telített konyhasóoldatot adunk az elegyhez. A vizes fázist etilacetáttal kétszer extraháljuk, és az egyesített szerves fázisokat telített nátrium-hidrogén-szulfit-oldattal kétszer, majd nátriumklorid-oldattal egyszer mossuk, magnéziumszulfáttal szárítjuk és az oldószert eltávolítjuk.
A maradékot kovagélen etil-acetáttól etil-acetát és metanol 20 : 1 tf-arányú elegyéig változó gradienssel kromatografálva 5,0 g (10,4 mmol, 56%) (P-62) képletű vegyületet kapunk. Rf (etil-acetát): 0,18
C28H48O6 (480); MS (FAB, 3-NBA/LiCl): 487 (M+Li+)
Emellett 1,0 g szekunder alkoholt is kapunk.
Rf (etil-acetát): 0,27
HU 213 395 Β
63. példa
A 19-28. példákban leírtak szerint a 62. példa szerinti vegyületből állítjuk elő a (P—63) képletű vegyületet (amely az X - G képletnek felel meg, és a 3-C szénatomon a-konfigurációjú).
C28H49NO5 (479); MS (FAB, 3-NBA/LiJ): 486 (M+Li+)
64. példa (P-64 reakció)
a) lépés (P-64a reakció) g (0,161 mól) 11. példa szerinti vegyület, 21,6 g (0,177 mól) 4-dimetilamino-piridin és 26,7 g (0,177 mól) terc-butil-dimetilszilil-klorid 400 ml vízmentes diklórmetánnal készített elegyét szobahőmérsékleten 4 órán át keverjük, majd vízre öntjük és etilacetáttal háromszor extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat magnéziumszulfáttal szárítjuk, majd bepároljuk. 93,6 g (kvantitatív hozam) (P-64a) képletű szililétert kapunk, amelyet preparatív célokra tovább tisztítani nem kell.
C33H60O6Si (580); MS (FAB, 3-NBA/LiJ): 587 (M+Li+)
b) lépés (P-64b reakció) g (0,0172 mól) a) szerint kapott szililéter és 5,3 g (0,043 mól) 4-dimetilamino-piridin 100 ml vízmentes piridinnel készített elegyéhez 0 °C-on 4,1 ml (0,043 mól) ecetsavanhidridet csepegtetünk, és az elegyet szobahőmérsékleten 4 órán át keverjük. Utána az elegyet vízre öntjük és etilacetáttal háromszor extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat telített vizes Na CO3-oldattal mossuk, majd magnézium-szulfáttal szárítjuk, és az oldószert elpárologtatjuk. A maradékot kovagélen etil-acetát és ciklohexán 1 : 3 tf-arányú elegyével kromatografálva 10 g (0,015 mól, 87,7%) (P-64b) képletű diacetátot kapunk.
GnHMOgSi (664); MS (FAB, 3-NBA/L1C1): 671 (M+L1+)
c) lépés (P-64c reakció) g (0,015 mól) b) szerint kapott diacetát és 5,2 g (0,015 mól) tetrabutilammóniumfluorid-trihidrát 100 ml tetrahidrofuránnal készített elegyét szobahőmérsékleten 1 órán át keverjük. A reakcióelegyet vízre öntjük és etilacetáttal háromszor extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat magnéziumszulfáttal szárítjuk és bepároljuk. A (P-64c) képletű alkohol hozama kvantitatív. Preparatív célokra további tisztítás nem szükséges.
C31H50O8 (550); MS (FAB, 3-NBA/LiJ): 557 (M+Li+)
d) lépés (P-64d reakció)
7,35 g (0,0133 mól) c) lépés szerint nyert alkohol és 50 g (0,133 mól) piridinium-dikromát 150 ml vízmentes dimetil-formamiddal készített elegyét szobahőmérsékleten 24 órán át keverjük, utána vízre öntjük és dietiléterrel háromszor extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat magnéziumszulfáttal szárítjuk és bepároljuk.
A maradékot kovagélen etil-acetát és ciklohexán 9 : 1 tf-arányú elegyével kromatografálva 5,1 g (0,009 mól, 58%) (P-64d) képletű vegyületet kapunk.
C3,H48O9 (564); MS (FAB, 3-NBA/LiJ): 571 (M+Li+)
W-X-G, X = összekötő híd
65. példa (P-65 reakció)
1,96 g (6,44 mmol) klórambucil (Sigma) 100 ml tetrahidrofürán és 20 ml trietilamin elegyével készített oldatához 0 °C-on 0,62 ml (6,44 mmol) klórhangyasav-etilésztert csepegtetünk, és az elegyet 15 percen át keverjük. Ezt követően 0 °C-on 3,0 g (6,44 mmol) 21. példa szerinti vegyület tetrahidrofurános oldatát adagoljuk, és az elegyet szobahőmérsékleten 30 percen át keverjük. A reakcióelegyet vízre öntjük, és etilacetáttal háromszor extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat magnéziumszulfáttal szárítjuk, majd bepároljuk.
A maradékot kovagélen etil-acetát és metanol 9:1 tfarányú elegy ével kromatografálva 3,9 g (5,2 mmol, 81%) (P-65) képletű vegyületet kapunk.
C41H64C12N2O6 (750) MS (FAB, 3-NBA/LiJ): 751 (M+Li+)
66. példa (P-66 reakció)
1,96 g (2,6 mmol) 65. példa szerinti vegyület 20 ml etanollal készített oldatához 5 ml In vizes nátriumhidroxid-oldatot csepegtetünk, és az elegyet szobahőmérsékleten 3 órán át keverjük. Újabb 5 ml lúg adagolása után további 3 órán át keverjük az elegyet, utána 200 ml vízre öntjük, n sósavval semlegesítjük és etilacetáttal háromszor extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat magnéziumszulfáttal szárítjuk, majd bepároljuk.
Hozam: 1,91 g (2,6 mmol, kvantitatív) (P-66) képletű vegyület op.: 60-70 °C
C40H62Cl2N2O6 (736) MS (FAB, 3-NBA/LiJ): 743 (M+LE) 'H-NMR (CDCI3) : δ = 7,05 (d, 2H); 6,62 (d, 2H), 5,84 (m, 1H), 3,38—4,02 (m, 15H), 1,10-2,60 (m, 33H), 1,00 (d, 3H), 0,90 (s, 3H), 0,71 (s, 3H).
67. példa (P-67 reakció)
1,5 g (2,03 mmol) 66. példa szerinti vegyület és 0,97 ml (4,06 mmol) tri-(n-butil-amin) 10 ml dioxánnal készített oldatához 0 °C-on 0,2 ml (2,03 mmol) klórhangyasav-etilésztert csepegtetünk, és az elegyet 0 °C-on 15 percen át keverjük. Ezt követően 0 °C-on 0,508 g (4,06 mmol) taurin 4 ml vizes nátrium-hidroxid-oldattal készített oldatát adagoljuk. Az elegyet szobahőmérsékleten 1 órán át keveijük, 200 ml vízre öntjük, In sósavval semlegesítjük és kevés metanolt tartalmazó etil-acetáttal háromszor extraháljuk.
Az egyesített szerves fázisokat magnéziumszulfáttal szárítjuk, majd bepároljuk. Kovagélen etil-acetát és metanol 4:1, majd 2 : 1 tf-arányú elegyével végzett flash kromatográfiai tisztítás után 1,59 g (1,89 mmol, 93%) (P-67) képletű vegyületet kapunk, amely 130-140 °Con olvad.
C42H67C12 N3O8S (843), MS (FAB, 3-NBA/LiJ): 856 (M+LE) 'H-NMR (CDC13) : δ =11,8 (s), 6,45-7,08 (m), 2,90-4,00 (m); 0,70-2,65 (m).
HU 213 395 Β
68. példa (P-68 reakció)
1,5 g (2,03 mmol) 66. példa szerinti vegyület és 0,97 ml (4,06 mmol) tri-(n-butil)-amin 10 ml dioxánnal készített oldatához 0 °C-on 0,2 ml (2,03 mmol) klórhangyasav-etilésztert csepegtetünk, és az elegyet 0 °C-on 15 percen át keveqük. Ezt követően 0,305 g (4,06 mmol) glicin 4,0 ml In vizes nátrium-hidroxid-oldattal készített oldatát adagoljuk az elegyhez. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten 4 órán át keverjük, utána 200 ml vízre öntjük, In sósavval semlegesítjük és etilacetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat magnéziumszulfáttal szárítjuk, bepároljuk és kovagélen ecetsav és metanol 2 : 1 tf-arányú elegyével flash kromatografáljuk.
Hozam 1,15 g (1,45 mmol, 71%) (P—58) képletű vegyület op.: 75-85 °C
C42H65C12N3O7 (793) MS (FAB, 3-NBA/LiJ): 806 (M+2 Li+-H) 'H-NMR (CDCIj): δ = 6,58-7,08 (m, 5H),
5,95-6,02 (m, 1H),
3,35-4,05 (m), 0,94-2,60 (m), 0,89 (s, 3H), 0,69 (s, 3H).
69-78. példák
A (P-69/-78) reakció vázlat általánosan mutatja a reakciót, az alábbi példák a W és T csoport jelentésében különböznek.
69. példa
750 mg (1,61 mg) 21. példa szerinti vegyület, 5 ml trietilamin, 200 mg (1,61 mmol) dimetilamoni-piridin és 651 mg (1,61 mmol) mevinolin 25 ml vízmentes tetrahidrofuránnal készített elegyét visszafolyató hűtő alatt 48 órán át forraljuk. Az oldószert ledesztilláljuk és a maradékot kovagélen etil-acetát és metanol 19 : 1 tfarányú elegyével kromatografáljuk.
Hozam: 900 mg (1,03 mmol, 64%) olyan (P—69/—78) képletű vegyület, ahol W = (P-69) képletű csoport és T = -(CH2)2-csoport.
op.: 78-80 °C
C5iH83NOio (869) MS (FAB, 3-NBA/LiJ): 876 (M+Li+)
70. példa
A 69. példában leírtak szerint eljárva a 21. példa szerinti vegyületből olyan (P-69/-78) képletű vegyületet állítunk elő, amelyben W jelentése a (P-70) képletű csoport és T = -(CH2)2-csoport.
Op.: 70-75 °C
C53H75F2NO2 (891); MS (FAB, 3-NBA/LiJ): 898 (M+Li+) (A laktonkomponens előállítását lásd 37 22 807 sz. NSZK-beli közrebocsátási irat; Tetrahedron Letters 29, 929-930 /1988/, ahol az F melletti metilcsoport nélküli vegyületek szerepelnek.)
71. példa
A 69. példában leírtak szerint eljárva a 21. példa szerinti vegyületből olyan (P-69/-78) képletű vegyületet állítunk elő, amelyben W jelentése a (P—71) sz. képletű csoport, T = -(CH2)2Op.: 65-70 °C
C5iH76FNO9 (865), MS (FAB, 3-NBA/LiJ): 872 (M+Li+) (A laktonkomponens előállítását lásd a 38 19 999 sz. NSZK-beli közrebocsátási irat 1. példájában; lásd példák a hatástani adatok előtt.)
72. példa
A 69. példában leírtak szerint eljárva a 22. példa szerinti vegyületből olyan (P-69/-78) képletű vegyületet állítunk elő, amelyben W jelentése a (P—71) sz. képletű csoport, T = —(CH2)3—.
C52H78FNO9 (879), MS (FAB, 3-NBA/LiJ): 886 (M+Li+)
73. példa
A 69. példában leírtak szerint eljárva a 21. példa szerinti vegyületből olyan (P-69/-78) képletű vegyületet állítunk elő, amelyben W jelentése a (P-73) sz. képletű csoport, T = -(CH2)2C54H73F2NO9S (949), MS (FAB, 3-NBA/LiCl): 956 (M+Li+) (A laktonkomponens előállítását lásd 39 29 913. sz. NSZK-beli szabadalmi leírás).
74. példa
A 69. példában leírtak szerint eljárva a 22. példa szerinti vegyületből olyan (P-69/-78) képletű vegyületet állítunk elő, amelyben W jelentése a (P73) sz. képletű, csoport, T = -(CH2)3C55H75F2NO9S (963) MS (FAB, 3-NBA/LiCl): 970 (M+Li+)
75. példa
A 69. példában leírtak szerint eljárva a 21. példa szerinti vegyületből olyan (P-69/-78) képletű vegyületet állítunk elő, amelyben W jelentése a (P—75) sz. képletű csoport, T = -(CH2)2op.: 74-76 °C
C54H73FN2O8 (896), MS (FAB, 3-NBA/LiJ): 903 (M+Li+)
76. példa
A 69. példában leírtak szerint eljárva a 22. példa szerinti vegyületből olyan (P-69/-78) képletű vegyületet állítunk elő, amelyben W jelentése a (P—75) sz. képletű csoport, T = -(CH2)3C55H75FN2O8 (910), MS (FAB, 3-NBA/LiCl); 917 (M+Li+)
77. példa
A 69. példában leírtak szerint eljárva a 63. példa szerinti vegyületből állítjuk elő a (P-77) képletű vegyületet.
C55H75FN2O8 (910), MS (FAB, 3-NBA/LiCl): 917 (M+Li+)
78. példa
A 69. példában leírtak szerint eljárva a 28. példa szerinti vegyületből olyan (P-69/-78) képletű vegyületet
HU 213 395 Β állítunk elő, amelyben W jelentése a (P—8) sz. képletű csoport,
T = -CH-CH2 I ch3
C55H75FN2O8 (910) MS (FAB, 3-NBA/LiCl): 917 (M+Li+)
79-88. példák
A 79-88. példa szerinti vegyületeket mind A), mind a B) eljárás szerint állíthatjuk elő; lásd (P-79/-88-A), illetve (P-79/-88-B) reakcióvázlat.
79. példa
250 mg (0,29 mmol) 69. példa szerinti vegyület 5 ml etanollal készített oldatához 2,0 ml In vizes nátriumhidroxid-oldatot adunk, és az elegyet szobahőmérsékleten 6 órán át keverjük. Utána az oldatot In sósavval semlegesítjük és etilacetáttal háromszor extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat magnéziumszulfáttal szárítjuk, majd bepároljuk. Hozam: 230 mg (0,27 mmol, 94%) olyan (P-79/-88-A) képletű vegyület, amelyben W és T jelentése a (P-79) sz. képletrajzban megadott.
C5oH8,NOio (855), MS (FAB, 3-NBA/LiJ): 862 (M+Lf) ’H-NMR (CDC13) δ = 5,38-6,45 (m, 5H), 3,40-4,27 (m, 9H), 0,84-2,50 (m, 64H), 0,70 (s, 3H).
80. példa
a) 400 mg (0,45 mmol) 70. példa szerinti vegyület és egy p-toluolszulfonsav-kristály aceton és dimetoxipropán 1 : 1 tf-arányú elegyének 20 ml-jével készített oldatát szobahőmérsékleten 15 percig keverjük, majd az oldószert eltávolítjuk és a maradékot kovagélen kloroform és metanol 19 : 2 tf-arányú elegyével kroma5 tografáljuk.
Hozam: 390 mg (0,42 mmol, 93%) olyan (P-79/-88-A) képletű acetonid, amelyben W és T jelentése a (P-80) sz. képletrajzban megadott.
C56H79F2NO8 (931), MS (FAB, 3-NBA/LiJ): 938 10 (M+Li+)
b) 390 mg (0,42 mmol) acetonid 20 ml etanollal készített oldatához 5 ml n vizes nátrium-hidroxid-oldatot adunk, az elegyet szobahőmérsékleten 5 órán keresztül keverjük, majd 2n sósavval semlegesítjük és etilacetáttal háromszor extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat magnéziumszulfáttal szárítjuk, majd bepároljuk. A nyers terméket közbenső tisztítás nélkül továbbreagáltatjuk.
c) A b) alatt kapott nyersterméket 20 ml tetrahidrofuránban oldjuk, és 5 ml 2n sósav adagolása után az oldatot 2 órán át keveijük, 100 ml vízzel hígítjuk és etilacetáttal háromszor extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat magnéziumszulfáttal szárítjuk, majd bepároljuk. A maradékot kovagélen diklór-metán és metanol 9 : 1 tf-arányú elegyével flash-kromatografálva 250 mg
0,29 mmol (68%), P-79/-88-B képletrajzon, a c) lépéssel nyert terméket kapunk.
C52H73F2NO8 (877) MS (FAB, 3-NBA/LiCl): 884 (M+Li+) ’H-NMR (CDC13) δ = 6,82-6,99 (m), 5,49-6,31 (m),
3,41—4,33 (m), 0,98-2,88 (m).
A 81-88. példák szerinti vegyületeket analóg módon a 71-78. példák szerinti vegyületekből állítjuk elő. Adataikat az alábbi 6. táblázatban foglaljuk össze.
6. táblázat
Példa W T Kiindulási anyag példa MS (FAB 3 NBA/LiJ vagy LiCl
81 (P81Q) -CH2CH^ 71 C50H74FNO9 (851) 858 (M+Li*)
82 (P81Q) -CH2CH2CH2- 72 C51H76FNO9 (865) 872 (M+Li+)
83 (P83Q) -CH2CH2- 73 C53H7iF2NO9 S 935 936 (Μ+Η+)
84 (P83Q) -CH2CH2CH2- 74 C54H7jF2NO9 S 949 956 (M+Li+)
85 (P85Q) -ch2ch2 75 C53H71FN2O3 9(882) (M+Lri)
86 (P85Q) -CH2CH2CH2- 76 C54H73FN2OS (896) 903 (M+Li+)
87 (P87) képletű vegyület C54H73FN2Os (896) 903 (M+Li+)
88 (P88Q) -CH-CH2- 1 CHj 78 C54H73FN2O8 (896) 903 (M+LÉ’
HU 213 395 Β
Az előző példák magrezonanciás adatai, ’H-NMRCCDCb) δ
81 82 85 86. példa
6,34-7,51 (m) 6,55-7,55 (m) 8,08-8,13 (m) 8,07-8,15 (m)
3,82-4,20 (m) 3,26-4,60 (m) 6,17-7,50 (m) 7,03-7,50 (m)
3,27-3,58 (m) 2,82-2,97 (m) 5,32-5,45 (m) 6,02-6,18 (m)
1,12-2,97 (m) 1,08-2,47 (m) 3,45-4,47 (m) 5,32-5,42 (m)
1,02 (d) 1,01 (d) 1,08-2,52 (m) 3,33-3,47 (m)
0,71 (s) 0,93 (s) 0,71 (s) 1,00 (d) 0,92 (s) 0,70 (s) 1,10-2,47 (m) 1,00 (d) 0,92 (s) 0,70 (s)
89. példa
150 mg (0,175 mmol) 79. példa szerinti vegyület 10 ml etanollal készített oldatához 1,75 ml 0,ln vizes nátriumhidroxid-oldatot adunk, és az elegyet szobahőmérsékleten 10 percen keresztül keverjük. Utána az oldószert elpárologtatjuk. Hozam: 150 mg (kvantitatív) nátriumsó (W = (P-89Q) képi., T = -CH2CH2-)
Azonos módon a 90-98. példa szerinti nátriumsókat állítjuk elő. Adataikat a 7. táblázatban foglaltuk össze.
7. táblázat
Példa W T Kiindulási anyag
90 (P90Q) -CH2CH2- 80
91 (P91Q) -CH2CH2- 81
92 (P92Q) -CH2CH2CH2- 82
93 (P93Q) -CH2CH2- 83
94 (P94Q) -CH2CH2CH2- 84
95 (P95Q) -CH2CH2- 85
96 (P96Q) -CH2CH2CH2- 86
97 (P97) képletű vegyület 87
98 (P98Q) -CHCH2 1 ch3 88
99-108. példák
A 99-108. példák szerinti vegyületeket a (P—99/108) reakcióvázlat szerint állítjuk elő.
99. példa
400 mg (0,45 mmol) acetonid (a 69. példa szerinti termékből a 79-88. példa B) változata szerint készül) 40 ml vízmentes tetrahidrofürannal készített oldatához 0,12 ml (0,90 mmol) trietilamint adunk, és az elegyet 0 °C-ra hütjük. 0,07 ml (0,68 mól) klórhangyasav-etilészter adagolása után az elegyet 15 percen keresztül keverjük. Ezt követően 100 mg (1,3 mmol) glicin 12 ml 0,1 n vizes nátrium-hidroxid-oldatot adagolunk. Az szobahőmérsékletre melegített elegyet még egy órán át keverjük, utána vízre öntjük, 2n sósavval megsavanyítjuk és etil-acetáttal háromszor extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat magnéziumszulfáttal szárítjuk, majd bepároljuk. A maradékot 50 ml tetrahidrofüránban oldjuk, az oldatot 10 ml In sósavval savanyítjuk és szobahőmérsékleten 4 órán át keveqük. Az elegyet vízre öntjük, és etilacetáttal háromszor extraháljuk, az egyesített szerves fázisokat magnéziumszulfáttal szárítjuk, majd bepároljuk. Kovagélen kloroform és metanol 7 : 3 tfarányú elegyével végzett flash kromatográfiás tisztítás után 230 mg (0,25 mmol, 56%) olyan vegyületet kapunk, amelyben W jelentése (P-99Q) képletű csoport és T jelentése etiléncsoport.
CjzHjmNzOjj (912), MS (FAB, 3-NBA/LiCl): 919 (M+Li+)
A 100-108. példák szerinti vegyületeket a 99. példában leírtak szerint állítjuk össze. Adataikat a 8. táblázatban foglaljuk össze.
8. táblázat
Példa w T Kiindulási ace- tonid MS (FAB, 3NBA/LiCl vagy LiJ)
100 (P100Q) -CH2CH2 70 C54H76F2N2O9 (934) 941 (M+Li4)
101 (P101Q) -CH2CH2 71 C55H77FN2O10 (908) 935 (M+Na*)
102 (P102Q) -CH2CH2CH2- 72 C53H79FN2O10 (922) 929 (M+Li4)
103 (P103Q) -CH2CH2- 73 C55H74F2N2O10S (992) 1015 (M+Na4)
104 (P103Q) CH2CH2CH2- 74 C56H76F2N2O10S (1006) 1029 (M+Na4)
105 (P105Q) -CH2CH2- 75 C55H74FN3O9 (939) 946 (M+Li+)
106 (P106Q) -CH2CH2CH2- 76 C56H70FN3O9 (953) 960 (M+Li4)
107 (Pl 07) képletű vegyület 77 C56H76FN]O9 (953) 960 (M+Li4)
108 (P108Q) -CH3CH-CH2960 (M+Li*) 78 C50H70FN3O9 (953) 960 (M+Li+)
A 101. példa '-NMR-színképe, (CDC13), δ = 6,72-7,52 (m), 4,35-5,48 (m), 3,30-4,17 (m),
2,83-2,97 (m), 0,93-2,50 (m), 0,90 (s), 0,69 (s).
A 89-98. példákkal analóg módon a 100-108. példák szerinti vegyületekből is előállítjuk a nátrium-sókat.
109-118. példák
A 109-118. példák szerinti reakciót a (P109/118) sz. reakcióvázlat szemlélteti.
109. példa
400 mg (0,45 mmol) acetonid (a 69. példa szerinti termékből 79-88. példa B) változata szerint készült) 40 ml vízmentes tetrahidrofüránnal készített oldatához 0,12 ml (0,90 mmol) trietilamint adunk, és az oldatot 0 °Cra hűtjük. 0,07 ml (0,68 mmol) klórhangyasav-etilészter adagolása után az elegyet 15 percen át keverjük, majd 160 mg (1,3 mmol) taurin 12 ml 0,1 n vizes nátrium-hidroxid-oldattal készített oldatát adagoljuk. Az elegyet szobahőmérsékletre melegítjük és egy órán át keverjük, utána vízre öntjük, 2n sósavval megsavanyítjuk és etilacetáttal háromszor extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat magnéziumszulfáttal szárítjuk, majd bepároljuk. A maradékot 50 ml tetrahidrofüránban oldjuk, az oldathoz 10 ml In sósavat adunk, és az elegyet szobahőmérsékleten 4 órán át keverjük. A reakcióelegyet vízre öntjük, és etilacetáttal háromszor extraháljuk, az
HU 213 395 Β egyesített szerves fázisokat magnéziumszulfáttal szárítjuk, majd bepároljuk. Kovagélen diklórmetán és metanol 7 : 3 tf-arányú elegyével flash kromatografálva 270 mg (0,28 mmol, 62%) W helyén (P109Q) képletű csoportot és T helyén etiléncsoportot tartalmazó vegyületet kapunk.
C52H86N2O,2S (962) MS (FAB, 3-NBA/LiCl); 969 (M+Li+)
A fentiek szerint az alábbi 8. táblázatban részletezett 110-118. példa szerinti vegyületeket állítjuk elő.
8. táblázat
Példa w T Kiindulási acetonid* MS(FAB, 3NBA/LiCI vagy LiJ)
110 (P110Q) -CH2CH2- 70 C51H78F2N2O10S (984) 991 (M+Li+)
111 (P111Q) ch2ch^ 71 C51H79FN2O11S (958) 981 (M+Na*)
112 (P112Q) -(CHzh- 72 C53H81FN2O11S (972) 995 (M+Nafi
113 (P113Q) -CH2CH2- 73 C55H76F2N2OllS2(1042) 1065 (M+NaÜ
114 (PU4Q) (CH;);- 74 C36H78F2N2O|lS2(1056) 1079 (M+Na4)
115 (P115Q) -CH2CH2- 75 C35H76FN3O10S (989) 996 (Μ+Ι.Γ)
116 (Pl 16Q) -(CH2)3- 76 C56H78FN30,oS(1003) 1010(M+Li+)
117 (Ρ117) képletű vegyület 77 C55H76FN3O10S (1003) 1010(M+Li+)
118 (P118Q) -CHCH2 1 78 c56H78FN30|oS (1003) 1010 (M+Li*)
CH;
* kiindulási acetonid: a megadott példa szerinti termékből a 79-88. példa B) változata szerint készítjük az acetonidot.
A 89-98 sz. példák szerint a 109-118. példa szerinti termékekből sót készítünk.
W-X-G, ahol W = modellpeptid (D-alanil-peptidek)
Epesawal kondenzálható modellpeptid előállítása A 21. példa szerinti vegyülettel kondenzált, Nterminálisan (pl. z-benziloxikarbonil- vagy terc-butoxikarbonil-Boc csoporttal) védett D-alanil-peptidek, illetve aktívészterei a peptidkémiában szokásos módszerekkel (Houben-Weyl, 15/1 és 15/2 sz. köt.) állítjuk elő, illetve azonosítjuk.
Az N-terminálisan védett oligo-D-alanil-peptideket vagy aktivészter, így N-hidroxi-szukcinimid (OSu-) vagy 1 -hidroxibenzotriazol (OBt) észter alakjában, vagy a kondenzálást elősegítő vegyszerek, például diciklohexilkarbodiimid segítségével, racémálódás-gátló reagens, például N-hidroxi-szukcinimid (HOSu) vagy 1-hidroxi-benzotriazol (HOBt) jelenlétében az epesav aminocsoportjával kondenzáljuk.
Ezt követően a peptid védőcsoportjait, valamint az epesavszármazék metilészter-csoportját eltávolítjuk; ennek során az alkalmazott ortogonális védőcsoport-stratégiának köszönhetően - az N-terminális védőcsoportot például hidrogénezéssel (Z), vagy acidolitikusan (Boc) lehasíthatjuk, míg az epesavszármazék metilészter-csoportját elszappanosítjuk - részlegesen védett epesav-peptid-konjugátumok előállítása is lehetséges.
A közbenső termékeket, valamint a végterméket általában oszlopkromatográfiásan tisztítjuk és vékonyréteg kromatográfiásan, valamint az ’H-NMR színképelemzés segítségével azonosítjuk.
119-121. példa: a (Pl 19/121) képletű vegyület előállítása
119. példa
Z-D-Ala-D-Ala-NH-(CH2)z-GS-OCH3 (GS = epesavrész), (Z = benzil-oxi-karbonil-csoport).
485 mg (1,04 mmol) 21. példa szerinti vegyület és 467 mg (1,14 mmol) Z-D-Ala-D-Ala-OSu(Su = szuksz-cinimido) 10 ml dimetil-formamiddal készített oldatát szobahőmérsékleten 1,5 órán át keverjük, és az oldószert vákuumban eltávolítjuk. A kapott szilárd maradékot (930 mg) kovagél-oszlopon (50x2 cm, Matrex Silicagél, 70-200 pm) diklór-metán, metanol és ecetsav 85 : 10 : 5 tf-arányú elegyével kromatografáljuk.
A kívánt termék a 3. és 4. frakcióban van. A 4. frakció emellett még az N-hidroxi-szukcinimidet is tartalmazza; úgy távolíthatjuk el, hogy az oldószer eltávolítása után a maradékot vízzel ill. nagyon híg sósavval eldörzsöljük.
A két frakció egyesítése után 450 mg (57%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag alakjában.
Rf (CH2Cl2/CH3OH/ecetsav 85 : 10 : 5) = 0,76
Rf (n-butanol/ecetsav/víz 40:40: 10) = 0,89
120. példa
H-D-Ala-D-Ala-NH-(CH2)2-GS-OCH3
280 mg (0,37 mmol) Z-D-Ala-D-Ala-NH-(CH2)2-GS-OCH3 5 ml metanollal oldata felett a reakcióedényét többször védőgázzal öblítjük, majd az oldathoz 28 mg hidrogénező katalizátort adunk (10%-os palládium csontszén) és az oldatot szobahőmérsékleten 3 órán át hidrogénezzük. Ez idő elteltével vékonyrétegkromatográfiásan kiindulási anyag már nem mutatható ki (diklór-metán, metanol, ecetsav 85 : 10 : 5). A reakcióelegyet membránszűrőn (Schleicher u. Schuell, RC 58, 0,2 pm) szüljük, a szűrletet rotációs bepárlón bepároljuk, a maradékhoz kétszer dietil-étert adunk, majd újból elpároljuk. 225 mg (98%) fehér-sárgás port kapunk, amelyet metanolban felveszünk és csontszén jelenlétében szobahőmérsékleten 30 percen át keverünk. Szűrés, az oldószer vákuumban történő eltávolítása és szárítás után 190 mg (83%) cím szerinti terméket kapunk fehér por alakjában.
Rf (n-butanol/ecetsav/víz 40 : 40 : 10): 0,55.
121. példa
H-D-A la-D-A la-NH-(CH2)^GS-OH
120 mg (0,19 mmol) H-D-Ala-D-Ala-NH-(CH2)2-GS-OCH3 2 ml metanollal készített oldatához szobahőmérsékleten 2 ml 0,1 n vizes nátrium-hidroxid-oldatot csepegtetünk, és az elegyet 4 órán át keverjük. Utána az elegyet 2n vizes sósavval pH 3-ra savanyítjuk és rotációs bepárlóban szárazra pároljuk.
HU 213 395 Β
A maradékot kevés etanollal eldörzsöljük, és az oldhatatlan részt kiszűrjük. A szűrletet bepároljuk és a maradékot először éterrel, utána pentánnal eldörzsöljük, szűrjük, megszárítjuk. 107 mg cím szerinti vegyületet kapunk fehér szilárd anyag alakjában (kb. 10% NaCl-t tartalmaz).
Hozam: 85%
Rf (n-butanol/ecetsav/víz 40:40: 10) = 0,54
122. példa
Z-D-Ala-D-Ala-NH-(CH2)r-GS-OH (Z = benziloxi-karbonil)
A 121. példa szerint eljárva állítjuk elő a cím szerinti vegyületet.
123. példa
A (P123) sz. reakcióvázlat végtermékének előállítása a) 500 mg (2,23 mmol) savklorid (a megfelelő karbonsav és tionilklorid katalitikus mennyiségű dimetilformamid jelenlétében végzett reagáltatása útján állítjuk elő kétórás visszafolyatásos forralással) 25 ml diklórmetánnal készített oldatához 20 °C-on 1,04 g (2,23 mmol) 21. példa szerinti vegyület 5 ml diklór-metán és 1 ml trietilamin elegyével készített oldatát csepegtetjük. Az egyesített szerves fázisokat telített NaHCC>3oldattal mossuk, magnéziumszulfáttal szárítjuk az oldószert eltávolítjuk és a maradékot kovagélen etil-acetát és metanol 15 : 1 tf-arányú elegyével kromatografáljuk. 314 mg terméket kapunk.
b) 100 mg a) pont szerinti termék 20 ml etanollal készített oldatához 4 ml n nátrium-hidroxid-oldatot adunk és az elegyet egy éjszakán át keverjük. Utána a reakcióelegyet 4 ml sósavval semlegesítjük, majd etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat telített Na Cl-oldattal mossuk, magnéziumszulfáttal szárítjuk és az oldószert eltávolítjuk. 89,1 mg cím szerinti terméket kapunk.
C36H55N3O8 (657); MS (FAB, 3-NBA/LiJ): 664 (M+Li+)
124. példa
A (Pl 24) sz. vázlat végtermékének előállítása
A 123. példa szerint állítjuk elő a cím szerinti terméket.
C33H48N2O8 (600); MS (FAB, 3-NBA/LiCl): 607 (M+3Li-2H)+H
A 71. példa laktonkomponensének előállítása (a 38 19 999 sz. NSZK-beli szabadalmi leírás nyomán)
4(R)-Hidroxi-6(S)-[(2,4-diizopropil-6-pf-luor-fenil)fenoxi-metil]-tetrahidro-2H-pirán-2-on
1. lépés
2,4-Diizopropil-fenol
145 g (0,65 mól) 3,5-diizopropil-2-hidroxi-benzoesav 540 ml (588 g, 4,55 mól) kinolin és 7,5 g (0,024 mól) rézkromit (2CuO.Cr2O3) elegyét 190 °C-on (225 °C külső hőmérsékleten) 2 órán át keverjük, majd mintegy 10 °C-ra hütjük, és további hűtés mellett az elegyet kb. 1 liter féltömény sósavval pH 1-2 értékre savanyítjuk. Ezt követően az elegyet toluollal extraháljuk, az extraktumot 2n sósavval, majd vízzel és végül NaHCO3-oldattal mossuk. Az oldat szárítása, szűrése, bepárlása és a maradék nagyvákuumban végzett desztillálása után 105 g cím szerinti terméket kapunk világossárga olaj alakjában. Fp.: 81-84 °C/26,5 Pa. 'H-NMR(CDC13): δ 1.20 (6H, d); 1,25 (6H, d); 3,00 (2H, 2*hept.); 4,10 (IH, s, széles); 6,50-7,00 (3H,m).
2. lépés
2,4-Diizopropil- 6-bröm-fenol
102,3 g (0,57 mól) 2,4-diizopropil-fenol 900 ml jégecettel készített és 95 °C-ra felmelegített oldatához 1 g vasport és utána cseppenként, 90 perc alatt 101 g (32,2 ml, 0,63 mól) brómot adunk. Az elegyet 100 °C-on egy órán át keverjük és lehűtés után toluol és víz között megosztjuk. A toluolos fázist NaHCO3-oldattal mossuk, utána szárítjuk, szűrjük, betöményítjük, és a maradékot nagyvákuumban desztilláljuk. 125 g cím szerinti terméket kapunk világossárga olaj alakjában. Fp.: 85 °C/20 Pa ‘H-NMR(CDC13): δ 1.20 (6H, d); 1,25 (6H, d); 2,80 (IH, hept.); 3,25 (IH, hept.); 5,33 (IH, s); 6,87-7, 20 (2H, m)
MS (70 eV): m/e = 256/258 (M+), 241/243 (M+ - CH3)
3. lépés l-Benziloxi-2,4-dnzopropil-6-bróm-benzol
166,5 g (1,2 mól) kálium-karbonát 124 g (0,48 mól)
2. lépés szerinti brómfenollal készített szuszpenzióját 91,52 g (0,72 mól) benzilkloriddal és 2 liter 2-butanonnal együtt 24 órán át visszafolyató hűtő alkalmazásával forraljuk. Lehűlés után a szervetlen szilárd anyagot kiszűrjük, a szűrletet vákuumban bepároljuk és a maradékot toluol és víz között megosztjuk. A toluolos fázist telített NaCl-oldattal mossuk, szűrjük, majd bepároljuk. A maradékot kovagélen ciklohexán és toluol 9 : 1 tf-arányú elegyével kromatografáljuk. 155 g cím szerinti terméket kapunk színtelen olaj alakjában. A benzilklorid csekély nyomait nagyvákuumban eltávolítjuk. A tisztítás nagyvákuumban végzett desztillálás útján is történhet (fp.: 150 °C/20 Pa) *H-NMR(CDC13): δ 1.18 (6H, d); 1,22 (6H, d); 280 (IH, hept.); 3,32 (IH, hept.); 4,90 (IH, s); 6,93-7,60 (7H, m),
MS (70 eV): m/e = 346/348 (M+), 267,254/256, 91
4. lépés l-Benziloxi-2,4-diizopropil-6-(p-fluor-fenil)-benzol 48,62 g (0,14 mól) 3. lépés szerinti bromidból és
3,53 g (0,147 mól) magnéziumforgácsból 120 ml vízmentes tetrahidrofuránban előállítjuk a Grignard-vegyületet (kb. 60 °C 1 óra). Ezt a Grignard-oldatot gyorsan 31,08 g (0,14 mól) 4-fluoqódbenzol és 3,23 g (2,8 mmol) tetrakisz(trifenilfoszfin)palládium 140 ml vízmentes tetrahidrofuránnal készített oldatához adjuk. A belső hőmérséklet 15 percen belül 55-60 °C-ra emelkedik, 7 perc elteltével csapadék képződik. Az elegyet 50-58 °C-on 1 órán át keverjük, később szobahőmérsékleten egy éjszakán át állni hagyjuk, majd éter és In sósav
HU 213 395 Β között megosztjuk. Az éteres fázist In sósavval, majd vízzel, majd telített NaHC03-oldattal mossuk, utána szárítjuk, szűrjük és bepároljuk. Szükség esetén a termék kovagélen ciklohexán és toluol 4 : 1 tf-arányú elegyével kromatográfiásan, vagy pedig desztillálással (fp.: 180 °C/30 Pa) tisztítható. 49,3 g cím szerinti terméket kapunk szilárd színtelen anyag alakjában. Op.: 65-67 °C 'H-NMR(CDC13): δ 1.30 (12H, d); 2,95 (1H, hept.);
3,45 (1, hept.); 4,40 (2H, s); 6,90-7,80 (11H, m)
MS (Cl): m/e = 363 (M+), 362 (M+), 285, 263
5. lépés
2,4-Diizopropil-6-(p-fluor-fenil)-fenol
49,3 g (0,136 mól) 4. lépés szerint kapott benziléter liter etil-acetát és 100 ml jégecet elegyével készített oldatához 4 g 10%-os palládium csontszén katalizátort adunk és az elegyet hidrogénlégkörben 20 percen át rázzuk (élénk oxigénfelvétel). A katalizátort kiszűrjük, a szürletet betöményítjük, a maradékot toluolban oldjuk és az oldatot vákuumban bepároljuk. Ezt többszörösen ismételjük. 34,4 g cím szerinti terméket kapunk színtelen olaj alakjában. Fp.: 115 °C/13,3 Pa ’H-NMR(CDC13): δ 1.25 (6H, d); 1,29 (6H, d); 287 (1H, hept.); 3,31 (1H, hept.); 4,95 (1H, s, széles); 6,88 (1H, d); 7,08 (1H, d), 7,18 (2H, m) 7,45 (2H, m)
MS (70 eV): m/e = 272 (M+), 257 (M+-CH3)
6. lépés
6(S)-{[2,4-Diizopropil-6-(p-fluor-feml)]-fenoxi-metil}-3,4,5,6-tetrahidro-2(R,S)-metoxi-4(R)-(terc-butil·
-difenil-szililoxi)-2H-pirán
27,6 g (0,2 mól) kálium-karbonát és egy csipetnyi hidrokinon 250 ml vízmentes dimetil-szulfoxiddal készített szuszpenziójához 27,2 g (0,1 mól) 5. lépés szerinti fenol-származékot adunk. Az elegyet szobahőmérsékleten 1 órán át keverjük, majd 56 g (0,11 mól) 6(S)-jódmetil-3,4,5,6-tetrahidro-2(R,S)-metoxi-4(R)-(terc-butil-difenil-szililoxi)-2H-pirán (előállítását lásd a 0 216 127 sz. európai szabadalmi leírásban, R7 = tercbutil-difenil-szilil) 250 ml vízmentes dimetil-szulfoxiddal készített oldatát adjuk hozzá. Az elegyet 50-55° belső hőmérséklet mellett 4 órán át keverjük. A vékonyréteg kromatográfiás vizsgálat (1. fejlesztés ciklohexán és etil-acetát 9 : 1 tf-arányú elegyével, 2. fejlesztés ciklohexán és etil-acetát 15:1 tf-arányú elegyével) a jodid teljes átalakulását (Rf 0,5), a kiindulási fenol maradékát (Rf 0,7) és főleg a cím szerinti terméket (Rf 0,6) mutat. Lehűlés után az elegyet éter és félig telített NaCloldat között megosztjuk. A vizes fázist még egyszer éterrel extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat NaCl-oldattal mossuk, magnéziumszulfáttal szárítjuk, szűrjük, majd bepároljuk. A nyers terméket kovagélen toluol és ciklohexán 2 : 1 tf-arányú elegyével, utána 100%-os toluollal, végül toluol és etil-acetát 30 : 1 tfarányú elegyével kromatografáljuk. 51 g cím szerinti terméket kapunk színtelen gyanta alakjában. 'H-NMR(CDC13): δ 1.10(9H,s); l,28(12H,d), 1,4-2,2 (4H, m) 2,93 (2H, 2xhept.); 3,40 (2H, m); 3,52 (3H, s); 3,97-4,40 (2H, qui+m); 4,87 (1H, dd); 6,87 -7,90(16H,m)
MS (Cl): m/e = 654 (M+), 597 (M+-terc-bu), 539, 519, 323, 283,135, 127
7. lépés
6(S)-{[2,4-Diizopropil-6-(p-fluor-fenil)]-fenoxi-metil}-3,4,5,6-tetrahidro-2(R,S)-hidroxi-4(R)-(terc-butil-difenil-szilil-oxi)-2H-pirán
40,2 g (61,4 mmol) 6. lépés szerinti laktoléter 3 liter tetrahidrofurán, 3 liter víz és 1 liter jégecet elegyével készített oldatát 80-85 °C külső hőmérséklet mellett 24 órán át keverjük, utána az oldószereket vákuumban eltávolítjuk, és a maradék felett háromszor toluolt párologtatunk el vákuumban. 2 liter kovagélen ciklohexán és etil-acetát 12:1 tf-arányú elegyével végzett kromatográfiás tisztítás után 33,4 g (8%) cím szerinti terméket kapunk színtelen amorf por alakjában.
MS(FAB): m/e= 640(M+), 519,367,323,283,271,257
8. lépés
6(S)-{[2,4-Diizopropil-6-(p-fluor-fenil)]-fenoximetil}-3,4,5,6-tetrahidro-4(R)-(terc-butil-difenil-szililoxi-2H-pirán-2-on
33,4 g (52,1 mmol) 7. példa szerinti laktol és 19,25 g (52,1 mmol) tetrabutil-ammónium-jodid 2,5 liter vízmentes diklór-metánnal készített oldatához keverés és hűtés mellett 46,9 g (208,4 mmol) N-jód-szukcinimidet adunk. Az elegyet a fény kizárása mellett nitrogénlégkörben 10 °C-on 1 órán át, szobahőmérsékleten 20 órán át keverjük, utána vízzel, 2><NaHCO3-oldattal, utána telített NaCl-oldattal mossuk, szűrjük, majd betöményítjük. A maradékot kevés diklór-metánban oldjuk, és az oldatot kovagélen ciklohexán és etil-acetát 92 : 8 tf-arányú elegyével kromatografáljuk.
lH-NMR(CDCl3): δ 1.06 (9H, s); 1,23 (6H, d), 1,26 (6H, d) 1,59 (2H, m); 2,41 (1H, dd); 2,59 (1H, dm); 2,90 (1H, hept); 3,36 (1H, hept); 3,48 (2H, AB ABX-ból); 4,29 (lH,qui); 4,80 (1H, m); 6,96 (1H, d); 7,03 (2H, m); 7,10 (1H, d); 7,36-7,52 (8H, m); 7,58-7,73 (4H, m)
MS (70 eV, 70 °C) m/e = 638 (M+), 581 (M+-terc-bu), 539, (581 - propén), 283, 199.
9. lépés
4(R)-Hidroxi-6(S)-[(2,4-diizopropil-6-/p-fluor-fenil)-fenoxi-metil]-tetrahidro-2H-pirém-2-on
31,0 g (48,5 mmol) 8. lépés szerinti szililvegyület
1,5 liter (bázikus alumíniumoxidon keresztül szűrt) tetrahidrofuránnal készített oldatához 11,65 g (194 mmol) jégecetet, majd 45,92 g (145,5 mól) tetrabutil-ammónium-fluorid-trihidrátot adunk, és az elegyet szobahőmérsékleten 20 órán át keverjük. Az oldószert vákuumban eltávolítjuk, és a maradékot azonnal éter és víz között megosztjuk. A vizes fázist éterrel még kétszer extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat
HU 213 395 Β telített NaCl-oldattal mossuk, magnéziumszulfáttal szárítjuk, szűrjük, majd betöményítjük. A maradékot toluolban feloldjuk és az oldatot vákuumban bepároljuk. A nyers terméket 2 kg kovagélen át szűrjük ciklohexán és etil-acetát 1 : 1 tf-arányú elegyében. 15,7 g (81%) cím szerinti terméket kapunk színtelen szilárd halmazállapotú anyag alakjában. Op.: 145-147 °C ’H-NMR(CDC1327OMHz)), δ 1,25 és l,27(12H,2*d);
1,67 (1H, s, széles) 1,76 (1H, ddd); 2,69 (1H, ddd); 2,69 (1H, dd); 2,91 (1H, hept); 3,39 (1H, hept); 3,54 (2H, AB ABX-ból); 4,38 (lH,m); 6,97 (1H, d); 7,10 (3H, d+m); 7,51 (2H, m)
MS (FAB): m/e = 400 (M+), 257
A 73. példa laktonkomponensének előállítása (a 39 29 913 sz. NSZK-beli szabadalmi leírás nyomán)
1. lépés
2-Bróm-6-izopropil-fenol
470 g nátrium-hidroxid 2 liter vízzel készített oldatához -5 °C és 0 °C közötti hőmérsékleten 198,1 ml (3,85 mól) brómot csepegtetünk. Az elegyet a megadott hőmérsékleten még 10 percen át keverjük, és a kapott nátrium-hipobromid-oldatot -5 °C és 0 °C közötti hőmérsékleten 464 g (4,11 mól) 40%-os vizes dimetilamin-oldat 50 ml vízzel készített oldatához csepegtetjük. Az elegyet még 30 percen át keverjük, ezt követően a szerves fázist elválasztjuk, és a vizes fázist 750 ml diklór-metánnal 2* extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat röviden magnéziumszulfáttal szárítjuk, majd szűrjük. A szűrletet -10 °C-on 500 g (3,67 mól) ortoizopropilfenol 900 ml diklór-metánnal készített oldatához csepegtetjük. Miután a szürlet 2/3 részét már adagoltuk, az elegy - kivált csapadék következtében viszkózussá, nehezen keverhetővé válik. -10 °C-on 500 ml diklór-metánt adunk az elegyhez, amelyet egy további órán át keverjük. A szilárd anyagot leszívatjuk, kevés hideg diklór-metánnal mossuk, 1,5 liter 2n kénsavban szuszpendáljuk és a szuszpenziót szobahőmérsékleten addig keverjük, míg az összes szilárd anyag olajjá nem vált. A szerves fázist elválasztjuk és a vizes fázist metilén-kloriddal extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat NaCl-oldattal mossuk, szárítjuk és az oldószert vákuumban eltávolítjuk. A maradékot vízsugárszivattyús vákuumban 30 cm hosszú Vigreux kolonnán át desztilláljuk. 391,7 g (1,82 mól) terméket kapunk színtelen olaj alakjában.
Fp.: 122-124 °C/4.103 Pa
NMR (60 MHz): δ = 1,20 (d, 6H, CH3), 3,23 (sept., 1H, CH), 5,42 (s, 1H, OH), 6,4-7,2 (m, 3H, arom. H)
2. lépés
2-(p-Fluor-fenil)-6-izopropil-fenol
a) 18,7 g (0,77 mól) magnéziumforgácshoz 3 jódkristályt adunk, és az adagolás helyét meleg levegővel addig melegítjük, míg a lombikban jódgőzt nem látunk.
Szobahőmérsékletre való lehűtés után 20 ml vízmentes tetrahidrofuránt adagolunk. 131,3 g (0,75 mól) p-bróm-fluor-benzolt 500 ml térfogatú adagoló tölcsérbe töltünk, ebből kb. 2 ml-t engedünk a lombikba. A reakcióelegy barna színe gyorsan eltűnik, az elegy annyira felmelegszik, hogy a reflux beindul. A reakcióelegyhez további 50 ml vízmentes tetrahidrofuránt adunk, és az adagoló tölcsérben lévő p-bróm-fluor-benzol-oldatot 200 ml tetrahidrofuránnal hígítjuk. A hígított oldatot olyan ütemben csepegtetjük a lombikba, hogy a reflux gyenge, de állandó legyen. Ezt követően az elegyet visszafolyató hűtő alatt még 1 órám át forraljuk, utána 50 °C-ra hütjük.
b) Másik lombikban 52,0 g (0,24 mól) 2-bróm-6-izopropil-fenol 150 ml vízmentes tetrahidrofuránnal készített oldatából 20 percen keresztül nitrogént keresztülvezetve eltávolítjuk az oldott oxigént, utána a levegő kizárása mellett 1,7 g (1,5 mmol) tetrakisz(trifenil-foszfin)-palládiumot adagolunk.
Az a) pont szerint készített Grignard oldatot injekciós készülék („RFlex-Needle”, Aldrich cég) segítségével nitrogén nyomás alatt az oldatba juttatjuk; az elegy melegszik. Az adagolás sebességét úgy választjuk meg, hogy a hőfejlődés a refluxot éppen fenntartja. Adagolás után az elegyet visszafolyató hűtő alatt még 6 órán át forraljuk. Utána az elegyet lehűtjük, 500 g jég és 100 ml tömény sósav keverékére öntjük, a szerves fázist elválasztjuk, a vizes fázist 3*100 ml éterrel extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat 100 ml telített NaCl-oldattal mossuk, szárítjuk, és az oldószert eltávolítjuk. A maradékot vízsugárszivattyús vákuumban 30 cm hosszú Vigreux kolonnán keresztül desztilláljuk. Előfrakció után (30-65°/26,5 Pa) átdesztillál a tiszta termék (107-109 °C/66 Pa) színtelen olaj alakjában, amely az előtétben, sőt részben már a desztilláló készülékben kristályosodik (op.: 44-46 °C). Az emiatti dugulás megakadályozására a készülék végét kb. 50 °C-ra melegítjük. 37,8 g (164 mmol, az elméleti hozam 68,4%-a cím szerinti terméket kapunk, amelynek gázkromatográfiásán mért retenciós ideje (30 m fused silica oszlop DB-5 „poli-difenil-dimetil-sziloxán”, rétegvastagság 0,25 pm, belső átmérő 0,32 mm, 180 °C, inj. 240 °C, H2 nyomás 105 Pa): 4,46 perc; tisztasága; 99,9%.
NMR (270 MHz): δ = 1,28 (d, 6H, CH3); 3,32 (sept., 1H, CH) 5,08 (s, 1H, OH); 6,9-7,5 (m, 7H, arom. H)
MS (DCI, izobután): m/e = 231 (M+H+), 230 (M+), 215 (M+-CH3)
3. lépés
2-(p-Fluor-feml)-4-tiocianáto-6-izopropil-fenol 70,6 g (838 mmol, 5,0 egyenérték) nátriumtiocianát
200 ml metanollal készített szuszpenzióját szobahőmérsékleten 20 percen keresztül keverjük. 40,0 g (173,8 mmol, 1,0 egyenérték) 2-(p-fluor-fenil)-6-izopropil-fenol adagolása után az elegyet még 20 percen át keverjük, majd 15-20 °C-on 14,32 ml (277,8 mmol,
1,6 egyenérték) bróm 50 ml metanollal készített oldatát (az oldódás exoterm) adagoljuk 20 perc alatt. A reakcióelegy sárgára színeződik, és a fenol-származék teljesen
HU 213 395 Β oldatba megy. Az elegyet 30 percen át keverjük. Vékonyréteg kromatográfiásan (toluol/ciklohexán 1 : 1) a kiindulási anyag (Rf = 0,54) teljes konvertálása mutatható ki. A cím szerinti vegyület (Rf = 0,32) mellett szennyeződésként csak kis mennyiségű para-bróm-vegyület keletkezik; ennek az Rf-értéke a kiindulási anyagéval egyezik (0,54), de más színreakció alapján a két vegyület megkülönböztethető. A reakcióelegyet 400 g jég és 400 ml 2n sósav keverékére öntjük és 4x200 ml toluollal extraháljuk. Az extraktumot vizes nátrium-szulfit-oldattal mossuk, szűrjük, a szürletet telített NaCloldattal mossuk, szárítjuk és vákuumban bepároljuk.
A sárga maradékot 500 ml forró ciklohexánban oldjuk, és 5 g aktív szén adagolása után az oldatot visszafolyató hűtő alkalmazásával 5 percen át forraljuk. A forró szuszpenziót vákuumban szűrjük. A kiszűrt aktívszenet 20 ml forró ciklohexánnal mossuk. A majdnem színtelen szürletet lehűlése után meg 12 órán át 10 °C-on tartjuk.
A színtelen kristályokat leszívatjuk és vákuumban szárítjuk. 47,6 g (165,7 mmol; az elméleti hozam 95,3%-a) op.: 94,5-96 °C
NMR (60 MHz): δ = 1,26 (d, 6H, CH3), 3,32 (sept., 1H, CH) 5,46 (s, 1H, OH); 7,0-7,6 (m, 6H, arom. H)
MS (DCI, izobután): m/e = 288 (M+H+), 272 (M+-CH3)
4. lépés
2-(p-Fluor-fenil)-4-(p-fluor-fenil-tio)-6-izopropil-fenol
3,11 g (128 mmol) magnéziumból és 22,0 g (13,8 ml,
126 mmol) p-bróm-fluorbenzolból a 2. lépés szerint előállított p-fluor-fenil-magnéziumbromid tetrahidrofűrános (100 ml) oldatához 50 °C-on 6,04 g (21 mmol) 3. lépés szerinti 2-(p-fluorfenil)-4-tiocianáto-6-izopropil-fenol 50 ml tetrahidrofuránnal készített oldatát csepegtetjük, és az elegyet 40-50 °C-on 2 órán át keverjük. Utána 3x200 ml éterrel extraháljuk. Az egyesített extraktumokat NaCl-oldattal mossuk, szárítjuk, és az oldószert vákuumban eltávolítjuk,
7,5 g (21 mmo 1,100%) cím szerinti terméket kapunk, amely ciklohexán és etil-acetát 9 : 1 tf-arányú elegyével végzett vékonyréteg kromatográfiás vizsgálat és ’H-NMR szerint tiszta.
NMR (60 MHz): δ = 1,25 (d, 6H, CH3); 3,31 (sept., 1H, CH) 5,22 (s, 1H, OH); 6,8-7,8 (m, 10H, arom. H)
MS (DCI, izobután): m/e = 357 (M+H+), 356 (M+)
5. lépés (3R, 5S) -6-Metil-szulfoniToxi-3,5-O-izopropilidén-3,5-dihidroxi-hexémsav-terc-butilészter
175,7 g (676 mmol) (3R,55)-6-hidroxi-3,5-O-izo-propilidén-3,5-dihidroxithexánsav-terc-butilészter (lásd 0 319 847 sz. európai szabadalmi leírás) 1,71 vízmentes diklór-metán és 1,7 1 vízmentes piridin elegyével készített oldatához 0-5 °C-on 116,2 g (1,01 mól, 1,5 egyenérték) metánszulfonsavkloridot csepegtetünk. Az elegyet jeges hűtés mellett 90 percen keresztül keverjük, utána 30 °C-on vákuumban betöményítjük, és a maradékot toluollal megint bepárolva a piridin zömét eltávolítjuk. A maradékot toluolban oldjuk és kétszer vízzel, egyszer telített NaHCO3-oldattal és egyszer telített NaCl-oldattal mossuk, szárítjuk, szüljük és vákuumban bepároljuk. A visszamaradó olaj szobahőmérsékleten néhány perc alatt gyakorlatilag teljesen kristályosodik. A kristályokat leszívatjuk, üvegszűrőn aprítjuk, hideg petroléterrel mossuk és vákuumban szárítjuk.
192 g (568 mmol) színtelen szilárd anyagot kapunk, amely 75-76 °C-on olvad. A szűrletet bepárolva, kristályokat szűrve és kevés hideg petroléterrel mosva további 34,8 g (103 mmol) enyhén szennyezett terméket ad, amely 69-73 °C-on olvad. Az összhozam 226,8 g (99,3%) NMR (270 MHz, CD2C12): δ = 1,18-1,33 (m, 1H,CH2, axiális) 1,36 (s, 3H, CH3), 1,42 (s, 9H, terc-bu),
1,46 (s, 3H, CH3) 1,56 (dt, 1H, CH2, aquat.),
2,36 (az ABX-rendszer AB-része 2H, CH2), 3,03 (s, 3H, CH3-SO2), 4,09-4,37 (m, 3H, OCH2 és O-CH), 4,24-4,37 (m, 1H ,OCH).
MS (DCI, izobután): m/e= 283 (M+H+- > =)
6. lépés (2,2-Ditimetil-4(S)-{[(2-p-fluorfenil-4-p-fluorfenilti o-6-izopropil)-fenoxi-metil]-6(R)-terc-butoxi-karbonil-metil}-! ,3-dioxolém
4,0 g (11,2 mmol) 2-(p-fluor-fenil)-4-(p-fluor-fenil-tio)-6-izopropil-fenol (4. lépés) 25 ml vízmentes hexametil-foszforsavtriamiddal (HMPT) készített oldatához 2,02 g (14,6 mmol, 1,3 egyenérték) porított kálium-karbonátot és kb. 10 mg 18-Kovona-6-étert (Aldrich cég) adunk. A szuszpenziót szobahőmérsékleten 20 percen át keveq'ük, utána 4,55 g (13,5 mmol, 1,2 egyenérték)
5. lépés szerinti (3R,5S)-6-metil-szulfonil-oxi-3,5-O-izopropilidén-3,5 -dihidroxi-hexánsav-terc-butilésztert adagolunk, és az elegyet 75-80 °C-on 2 napon át keverjük. A reakcióelegy sötétre elszíneződik és sűrűbb lesz; 200 ml vizes nátrium-dihidrogénfoszfát-oldatba öntjük és az elegyet többszörösen éterrel extraháljuk. Az egyesített extraktumokat telített NaCl-oldattal mossuk, szárítjuk és vákuumban bepároljuk. 8,46 g barnás olajat kapunk. Ciklohexán és etil-acetát 10:1 tf-arányú, 1 ezrelék trietilamint tartalmazó elegyével végzett oszlopkromatográfiás feldolgozás után 4,96 g (8,28 mmol, 74,0%) cím szerinti vegyületet kapunk halványsárga, sűrű olaj alakjában.
NMR (270 MHz, C6D6): δ = 0,98-1,07 (m, 2H, CH2), 1,19+1,20 (2 χ d, 6H, CH3)2,1,3 8 (s, 9H, terc-bu), 1,39+1,41 (2xs, 6H, OC(CH3)2), 2,12 (dd, 1H, CH2COO), 2,42 (dd, 1H CH2COO), 3,27 (dd, 1H, O-CH2), 3,37 (dd, 1H, O-CH2), 3,65 (sept., 1H, £H(CH3)2), 3,65-3,76 (m, 1H, O-CH3) 4,10-4,21 (m, 1H, O-CH), 6,60+6,82 (AA, BB,-rendszer,4H arom. H), 7,12-7,18 (m, 2H, arom. H), 7,22-7,29 (m, 3H, arom.H), 7,45 (d, 1H, arom.H)
MS (DCI, izobután): m/e = 598 (M+), 543 (M+H+ - > =), 485
7. lépés
3(R),5(S)-Dihidroxi-6-[2-p-fluor-fenil-4-(p-fluor-fenil-tio)-6-izopropil]-fenoxi]-hexánsav-terc-butilészter
HU 213 395 Β
4,47 g (7,47 mmol) 6. lépés szerinti acetonid, 50 ml tetrahidrofurán, 50 ml etanol és 5 ml 2n sósav elegyét szobahőmérsékleten 16 órán át keverjük. A ciklohexán és eti-acetát 1 : 1 arányú elegyével végzett vékonyréteg kromatográfiás vizsgálat a kiindulási anyag (Rf = 0,78) majdnem kvantitatív átalakulását mutatja végtermékké (Rf = 0,59). A reakcióelegyet vizes NaHCO3-oldatra öntjük, majd éterrel többszörösen extraháljuk. Az extraktumokat telített NaCl-oldattal mossuk, szárítjuk és vákuumban betöményítjük. A maradékot (4,46 g barnás olaj) oszlopkromatográfiásan ciklohexán és etil-acetát 2 : 1 tf-arányú elegyével tisztítjuk. 3,37 g (6,03 mmol, 80,8%) cím szerinti terméket kapunk színtelen olaj alakjában.
NMR (270 MHz, C6D6): δ = 1,1 - ca. 1,4 (m, erős színgulettek által részlegesen fedett, 2H, CH2), 1,18 (d, 6H, CH(CH3)2) 1,31 (s, 9H, terc-bu), 2,00 (dd, 1H, Ch2-COO), 2,13 (dd, 1H, CH2COO), 3,15 (s, széles, 1H, OH), 3,36 (ABX-rendszerek AB-része, 2H, OCH2), 3,52 (s, széles, 1H, OH) 3,56 (sept., 1H, CH(CH3)2, 3,76-3,96 (m, 2H, 2*CHOH). 6,61+6,79 (ΑΑ,-ΒΒ,-rendszer, 4H, arom.H), 7,14-7,27 (m, 5H, arom.H), 7,45 (d, 1H, arom.H)
MS (FAB,3-NBA): m/e=558 (M+) 519,503 (ΜΉ+-> =), 356 a fenolrész (M+)-a
8. lépés (R)-Hidroxi-6 (S)-[2-p-fluor-fenil-4-(p-fluor-fenil-tio)-6-izopropil-fenoxi-metil}-3,4,5,6-tetrahidro-2H-pirán-2-on
5,59 g (10,0 mmol) 7. lépés szerinti terc-butilészter ml diklór-metánnal készített oldatához 5 ml trifluorecetsavat csepegtetünk, és az elegyet szobahőmérsékleten 2 órán át keverjük. A ciklohexán és etilacetát 1 : 1 arányú elegyével végzett vékonyréteg kromatográfiás vizsgálat a kiindulási terc-butilészter (Rf = 0,37) majdnem kvantitatív átalakulását mutatja laktonná (Rf= 0,12), valamint csekély mennyiségű nempoláros szennyeződéssé. A reakcióelegyhez NaHCO3 port adagolunk, utána NaCO3-porral semlegesítjük, vízbe öntjük és éterrel többször extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat először NaHCO3-oldattal, utána NaCl-oldattal mossuk, szárítjuk, szűrjük és bepároljuk. A maradékot kovagélen ciklohexán és etil-acetát 1 : 1 tf-arányú elegyével kromatografálva 3,88 g (8,0 mmol, 80%) cím szerinti terméket kapunk színtelen szilárd anyag alakjában.
Op.: 170-172 °C.
NMR (270 MHz): δ = 1,30+1,32 (2*d, 6H, CHfCH^ 1,72-1,94 (m, 3H, CH2 és OH), 2,67 (ABX-rendszer AB-része, 2H, CH2COO), 3,47 (sept., 1H, CH(CH3)2), 3,59 (ABX-rendszer AB-része, 2H, OCH2), 4,40 (m, 1H, £H-OH), 4,72 (m, 1H, CH-OCO), 6,80-7,55 (m, 10H, arom.H).
MS (DCI, izobután): m/e = 484 (M+), 467 (M+-OH)
125. példa
5,45 g (10 mmol) 19. példa szerinti vegyület 100 ml acetonnal készített oldatát 15 g (0,1 mól) nátrium-jodid jelenlétében visszafolyatú hűtő alatt 5 órán át forraljuk. Lehűlés után az elegyet 300 ml vízzel hígítjuk és 3 * 300 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal majd vízzel mossuk, vízmentes nátrium-szulfáttal szárítjuk és vákuumban bepároljuk. A maradékot kovasavgélen kromatografálva 4,96 g (8,6 mmol, 86%) „125. példa” szerinti vegyületet kapunk.
C27H45IO5 (576), MS (FAB, LiCl): 583 (M+Li+). 'H-NMR (CDC13): δ = 3,83-4,03 (m, 2H), 3,22-3,68 (m, 8H), 1,12-2,45 (m, 26H), 0,99 (d, 3H), 0,93 (s, 3H), 0,71 (s, 3H).
126. példa
577 mg (1,0 mmol) 125. példa szerinti vegyület 5 ml tetrahidrofurán és a ml etanol elegyével készített oldatához 126 mg (1,0 mmol) nátrium-szulfit 0,4 ml vízzel készített oldatát adjuk, és az elegyet visszafolyató hűtő alatt 8 órán át forraljuk. Lehűlés után toluollal többszörösen vákuumban bepároljuk a maradékot, utána kovasavgélen ecetsav és etilacetát 1 : 2 arányú elegyével kromatografáljuk. 472 mg (0,85 mmol, 85%) „126. példa” szerinti vegyületet kapunk.
C27H45NaSO8 (552), MS (FAB, LiCl); 575 (M+Na+) 'H-NMR (dH6H-DMSO): δ = 4,35^f,20 (m, 10H), 1,10-2,70 (m, H) 0,93 (d, 3H), 0,82 (s, 3H), 0,60 (s,
3H).
127. példa mg (0,1 mmol) „126. példa” szerinti vegyület 1 ml aceton és 1 ml szulfolán elegyével készített oldatához 0,73 ml foszforoxikloridot, majd 50 pl N,N'-dimetil-acetamidot adunk, és az elegyet 70 °C-on 1 órán át keverjük. Ezt követően az elegyet jeges fürdőben hűtjük, 5 ml cseppenként adagolt vízzel hígítjuk, még 10 percen át keveijük, és végül 3*10 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat vízmentes nátrium-szulfáttal szárítjuk, majd vákuumban bepároljuk. A maradékot kovasavgélen ciklohexán és etil-acetát 1 : 1 arányú elegyével kromatografálva 23 mg (0,042 mmol, 42%) „127. példa” szerinti vegyülethez jutunk. C27H45C1SO4 (548), MS (3. NBA, LiCl): 519 (M-2H2O +Li+)
Farmakolögiai adatok
A hatóanyag-epesav-konjugátum szerv-szelektivitása
A 4-[4-(([bisz-N-(2',-klór-etil)-amino)-fenil]-vajsav (klór-ambucil) rosszindulatú daganatok kezelésére alkalmazott citostatikum. A klórambucil főleg a vesén keresztül választódik ki. A klórambucil-epesav-konjugátum fajlagos hatást fejt ki a májra, ahogy az alábbi kísérletek mutatják.
1. A klórambucil-epesav-konjugátum és epesav kötésére fajlagos kötőproteinek kölcsönhatása a májsejtekben
Az epesavakat a máj parenchima sejtjei a kapuéren keresztül folyó vérből felveszik és újból az epébe ürítik. Az epesavak transzportja - a máj vér- és epeoldalán lévő membránokon keresztül, a különböző sejtszervekbe, pl. mitokondriumokba, endoplazmás retikulumba, transzportja a májsejt citoplazmáján keresztül - különböző,
HU 213 395 Β fajlagos, az epesavat magukhoz kötő kötőproteinek segítségével történik. Az epesavak szabályozó proteinekhez és az epesav metabolizmusának enzimjeihez is kötődnek.
Az epesavakat szelektíven kötő kötőproteineket a fotoaffmitásjelzés módszerével molekuláris szinten azonosítottuk és jellemeztük. A módszer azon alapul, hogy olyan epesav-származék, amely fotoreaktív, és radioaktívjelzést visel, ugyanúgy kötődik a fiziológiai kötőproteinekhez, mint a természetes epesav. Ha a kalózepesavat UV-fénnyel besugározzuk, fotoreaktivitása következtében igen reakcióképes kémiai közbenső formák, így karbének, nitrének vagy gyökök keletkeznek, és nagy reakcióképességüknél fogva kettőskötések feltörése vagy egyszeres kötésbe való belépés útján azonnal reakcióba lépnek a kötőproteinekkel, és kovalens kötés kialakulása közben kötődnek hozzájuk. Miután a radioaktív epesav a kötőproteinhez kötődik, maga a kötőprotein radioaktív jelzést visel; miután a májsejtek különböző proteineket pl. elektroforézissel szétválasztottuk, a jelzett proteinek azonosíthatók, molltömegük meghatározható.
Ha a fotóaffinitás jelölést olyan X1 anyag jelenlétében végezzük, amely szintén hajlamos az epesavkötő kötőproteinekkel kölcsönhatásba lépni, az X' anyag konkurálni fog a radioaktív epesav-származékkal a meglévő kötőhelyekért; az X' anyag jelenlétében a kötőprotein radioaktív jelzése kisebb lesz tehát. Ha X' olyan anyag, amely nem kötődik az epesavak kötésére alkalmas proteinekhez, akkor a kötőproteinek radioaktív jelzése X' jelenlétében nem fog csökkeni.
3,6.106, patkánymájból frissen izolált hepatoicitát (kb. 3 mg proteint) 1,5 ml I-es pufferben (118 mM NaCl, 4,74 mM KC1, 0,59 mM KH2PO4, 0,59 mM Na2HPO4 x 2H2O, 1,185 mM MgCl2 * 6 H2O, 24,87 mM NaHCO3, 1,25 mM CaCl2, 5,5 mM D-glükóz, pH 7,35; ezt a puffért 1 órán keresztül karbogéngázzal - O2 és CO2 95 : 5 - telítettük) 37 °C-on sötétben, 1,25 μΜ (25 pCi) (7,7-azo-3a, 12a-dihidroxi-5 β [3 P-3H]kolán24-oil)-2-aminoetán-szulfonsav és 250 μΜ 3. példa szerinti vegyület jelenlétében (illetve a 3. példa szerinti vegyület távollétében) inkubálunk. Ezt követően a sejteket Rayonet RPR-100 típusú fotoreaktorban 16 RPR 3500 lámpákkal 350 nm-es UV-fénnyel 5 percen keresztül besugározzuk. Utána a sejtszuszpenziót 10 ml jéghideg I-es pufferrel hígítjuk, és a sejteket 3 perces centrifúgálással (1000 * g) leülepítjük. A sejteket 10 ml pufferben újból szuszpendáljuk és újból centrifugáljuk, utána 600 μΐ trisz-pufferben [pH 6,8; 2% nátrium-dodecilszulfát SDS, 5% 2-merkaptoetanol, 10% glicerin, 0,001% brómfenol-kék] felvesszük. A szuszpenziót 5 percen át 90 °C-on tartjuk, utána 20 percen át 40000*g gyorsulás mellett centrifugáljuk. A tiszta felülúszó az oldatba ment proteineket tartalmazza, ezt feldolgozzuk. 100-100 μΐ (azaz 500 pg protein) felülúszót nem folyamatos SDS-gél-lemezre helyezünk (200*170*2,7 mm, az akrilamid összkoncentrációja 12%), és a proteineket 50 V feszültség mellett végzett elektroforézissel szétválasztjuk. Az elektroforézis után a géleket 12,5%-os triklórecetsav-oldatban rögzítettük és Serva Blau R 250 etanol, ecetsav és víz 25:8:67 tf-arányú elegyével készített 0, ,08%-os oldatával festjük.
Színtelenítés után a géleket 70%-os metanollal készített 1 mólos nátriumszalicilát-oldattal 20 percen át kezeljük, utána szárítjuk. A radioaktív jelzést hordozó proteinek eloszlását fluorográfiás módszerrel (a szárított gél Kodak-X-Omat röntgenfilmre helyezve, majd -80 °C-on 14d mellett exponálva). A megfeketedett filmeket denziometriásan kiértékeljük. Az alábbi táblázatban az epesav-kötő proteinek radioaktivitásának a 3. példa szerinti vegyület jelenlétében bekövetkezett csökkenését a kontrolihoz viszonyítva százalékban fejezzük ki.
Az epesav-kötő protein %-os
Az epesav-kötő májsejt gátlása 250 μΜ protein móltömege 3. példa szerinti vegyület esetén
67 000 (albumin) 90,5
54 000 (a membrán transzport proteinje) 89,6
48 000 (a membrán transzport proteinje) 88,8
43 000 (cito vázprotein) 88,1
36 000 (citoplazma transzport proteinje) 98,1
33 000 (mitokondriák kötőproteinje) 93,2
2. Máj sejtek proteinjeinek 5. példa szerinti vegyülettel végzett alkilezése
2* 106 frissen izolált májsejt 2 ml pufferrel készített szuszpenzióját 37 °C-on 30, pCi 5. példa szerinti vegyülettel inkubáljuk. 10, 30, 40, illetve 60 perc elteltével 500-500 μΐ sejtszuszpenziót (500 pg proteint) kivesszük és 10 ml jéghideg pufferrel hígítjuk. 1000 * g gyorsulással 3 percen át végzett centrifúgálás után a csapadékot újból 10 ml I-es pufferben szuszpendáljuk és újból centrifugáljuk. A sejt csapadékokat 100-100 pl 62,5 mM trisz/HCl-pufferben [pH 6,8, 2% SDS, 5% 2-merkapto-etanol, 10% glicerin, 0,001% brómfenol-kék] feloldjuk, az oldatot 48000 g mellett 30 percen át centrifugáljuk, és a tiszta felülúszókat nem folyamatos SDS-gél-lemezekre (200*170*2,7 mm) visszük. Elektroforetikus szétválasztás után a géleket rögzítjük és festjük. A radioaktivitás eloszlásának meghatározására a gélcsíkokat 2 mm-es darabokra vágjuk, a proteineket 0,5 ml Biolute S jelenlétében végzett inkubálással emésztjük, és 5 ml szcintillátor Quickszint 5 01 adagolása után a mintákat folyadék-szcintillációs mérőműszerben kiértékeljük.
Inkubálási idő A jelzett májprotein
(perc) móltömege (kDa) és radioaktivitása (cpm)
0 / <30
10 48 408
67 102
30 122 1065
54 1811
48 1375
42 1777
33 1116
28 2190
40 122 1549
60 997
54 2385
48 2420
42 2650
33 1474
28 2682
HU 213 395 Β
Inkubálási idő A jelzett májprotein (perc) móltömege (kDa) és radioaktivitása (cpm)
122
X 997
Az 5. példa szerinti vegyület képes a májsejtek proteinjeit radioaktív jelzéssel ellátni, mind a membránokban, mind a citoplazmában és a sejtszervekben. Az ismert epesavkötő proteinek (54, 48, 33 kDa) mellett a májsejt egyéb proteinjeit (pl. 122, 35, 28 kDa) is jelzi.
A fenti kísérletek azt mutatják, hogy a farmakológiai hatás szempontjából fontos alkilező hatás a klórambucil epesav-származékhoz történő kapcsolása után megmaradt. A talált radioaktív jelölés a proteinek ép klórambucil-epesav-konjugátummal való jelölésére vezethető vissza, mert a radioaktív jelölés az epesav-részben helyezkedik el.
A találmány szerint előállítható W-X-G általános képletű vegyületet a máj sejtek felveszik; a vegyület képes proteinek alkilezésére. így tehát a klórambucil tulajdonsága (alkilező hatás) és az epesav molekula tulajdonsága (meghatározott transzport-utak alkalmazása) a WX-G képletű vegyületekben egyesítve van.
3. Az 5. példa szerinti vegyület metaboilizálása frissen izolált máj sejtekben
1,8* 106 frissen izolált máj sejt 750 μ 1 I-es pufferrel készített szuszpenzióját 5,5 pCi 5. példa szerinti vegyülettel 37 °C-on inkubáljuk. 10,20,30,40, illetve 60 perc elteltével 100-100 μΐ szuszpenziót kiveszünk, 10 ml jéghideg pufferrel hígítjuk és 5 percen át 1000 g gyorsulással centrifugáljuk. A sejtcsapadékot az epesav extrahálás céljából kétszer 100*100 ml kloroform/metanol 1 : 1 tf-arányú elegyével felvesszük. A szerves extraktumokat nitrogéngáz áramban bepároljuk, a maradékot 20 μΐ dioxánban felvesszük és az oldatot HPTLC-lemezre adjuk. Futtató elegyként n-butanol, ecetsav és víz 9:1:1 tf-arányú elegyét alkalmazzuk. A kromatogramot megszárítjuk, nátrium-szalicilát metanollal készített 1 M oldatával bepermetezzük, majd megszáradás után Kodak-X-Omat AR röntgenfilmre helyezzük. -80 °C-on végzett egy hetes exponálás után a filmet előhívjuk és a radioaktivitás eloszlását denziometriásan meghatározzuk. Az alábbi táblázatban százalékban megadjuk, hogyan oszlik el a radioaktivitás az egyes metaboliták között.
Inkubálási idő, perc 5. példa szerinti vegyület 0,49 1. 0,32 2. 0,36 3. metabolit 0,21 (Rf)
10 31,34 33,79 38,03 5,62
20 26,51 29,49 32,25 11,74
30 23,76 29,88 34,18 12,16
40 13,78 33,52 40,73 11,75
60 11,00 33,7 45,7 10,3
1. metabolit: (3a, 12p-dihidroxi-5p[12a-3H]kolan-24-oil)-2-amino-etánszulfonsav
2. metabolit: (3a,12a-dihidroxi-5p[12a-3H]kolan-24-oil)-2-amino-etánszulfonsav
3. metabolit: nem azonosított
Az 5. példa szerinti vegyületet a májsejtek felveszik, és a sejt belsejében a sejten belüli anyagcsere helyeire kerül. A klórambucil-epesav-konjugátum hidrolitikus hasítása gyorsan következik be, a klórambucil felszabadul. A konjugátum tehát szállítási feladatot lát el, az epesav-transzportrendszert használj a fel a hatóanyag célba jutására.
A fentiek szerint epesavakhoz kötött citostatikum alkalmas olyan sejtek rákjainak, ezek áttételeiknek kezelésére, amelyek képesek az epesavak felvételére.
4. Epesavszármazékok és terminális vékonybél intestinális epesav-transzport-rendszere közötti kölcsönhatás
4.1 Kefeszegélyes membránvezikulumok kipreparálása házinyúl ileumából
A kefeszegélyes membránvezikulumokat az un.
Mg2+-kicsapásos módszerrel preparáltuk ki. Hímnemü új-zélandi házinyulakat (22,5 kg testtömeg) 0,5 ml T-61R intravénás beadásával megöltünk. A vékonybelet kivettük és jéghideg fiziológiai konyhasó-oldattal öblítettük. A vékonybél terminális 3/10 részét (orális-rektális irányban mérve, azaz a terminális ileumot, amely az aktív, Na+-függő epesavtranszport-rendszert tartalmazza) használtuk. A beleket műanyag szatyorban -80 “’Con befagyasztottuk nitrogén alatt. A membránvezikulumok kipreparálására a fagyasztott beleket 30 °C-os vízfürdőn felolvasztattuk. A mukózát lekapartuk és 60 ml jéghideg 12 mM trisz/HCl-pufferben (pH 7,1) (300 mM mannit 5 mM EGTA, 10 mg/1 fenilmetilszulfonilfluorid, 1 mg/1 tripszin inhibitor /szójababból, 32 U/mg/, 0,5 mg/1 tripszin inhibitor /marhatüdőből, 193 U/mg/, 5 mg/1 bacitracin) szuszpendáljuk. A szuszpenziót 300 ml jéghideg desztillált vízzel hígítjuk, majd turmixban (18 rúd, IKA cég Staufen, NSZK) a maximális teljesítmény 75%-a mellett 3 percen át jeges hűtés mellett homogenizáljuk. 3 ml 1 M MgCE-oldat adagolása után (10 mM végkoncentráció) az oldatot pont egy percen át 0 °C-on állni hagyjuk. Az Mg2+ hatására a sejtmembránok összetapadnak és kicsapódnak, kivéve a kefeperemes membránokat. A csapadékot 15 percen át centrifugáljuk 3000 g mellett (5000 perc1, SS-34-rotor), utána a kefeperemes membránokat tartalmazó felülúszót elválasztjuk és további 30 percen át 26700 g mellett (15000 perc'1, SS-34-rotor) centrifugáljuk. A felülúszó részt kiöntjük, és a csapadékot 60 ml 12 mM trisz/HCl pufferben (pH 7,1, 60 mM mannit, 5 mM EGTA) Potter Elvejhem homogenizátor (Braun, Melsungen, 900 perc-1, 10 löket) homogenizáljuk. 0,1 ml 1M MgCE-oldat adagolása után az oldatot 0 °C-on inkubáljuk, utána újabb 15 percen keresztül 3000 g mellett centrifugáljuk. A csapadékot 30 ml 10 mM trisz/hepes-pufferben (pH 7,4, 300 mM mannit) felvesszük és a Potter Elvejhem homogenizátor 20 löketével újra szuszpenzióba visszük. A szuszpenziót 48000 g mellett 30 percen át centrifugáljuk (20000 perc'1, SS-34- rotor), a csapadékot 0,5-2 ml
HU 213 395 Β trisz/hepes-pufferben (pH 7,4 280 mM mannit/végkoncentráció 20 mg/ml/) felvesszük és tuberkulin-fecskendő, valamint Gauge-tű segítségével újból szuszpenzióba visszük. A vezikulumokat részben transzport vizsgálatokhoz használjuk fel, részben -196 °C-on 4 mg-os adagokban folyékony nitrogénben tároljuk.
4.2 A Na+-függő [3H]taurokolát-felvétel az ileum kefeperemes membránvezikulumaiban
A szubsztrátumoknak a kefeperemes membránvezikulumokba való felvételét az un. membránszűrés technikája segítségével határoztuk meg. 10 μΐ vezikulum-szuszpenziót (100 pg protein) cseppkéntpolisztirolból készült inkubációs csövecske (11 *70) falára helyezünk; a csövecskében a megfelelő ligandumokat tartalmazó inkubációs közeg van (90 μ 1). Az inkubációs közeg az alábbiakat tartalmazza: 0,75 μΐ = 0,75 pCi [3H(G)]-taurokolát (fajlagos aktivitása: 2,1 Ci/mmol), 0,5 μ 1 10 mM taurokolát, 8,75 μΐ nátrium-transzportpuffer (10 mM trisz/hepes, pH 7,4), 100 mM mannit, 100 mM NaCl(Na-T-P), illetve 8,75 μΐ kálium-transzportpuffer (10 mM trisz/hepes-puffer (pH 7,4), 100 mM mannit, 100 mM KCl(K-T-P) és 80 μ 1 az adott inhibitor-oldatból, a kísérlettől függően Na-T-pufferben vagy K-T-pufferben oldva. Az inkubációs közeget polivinilidén-fluorid-membránszűrőn (SYHV LO 4NS, 0,45 pm, 4 mm φ, millipore, Eschbom, NSZK) szüljük. A vezikulumokat az inkubációs közeggel összekeverve a transzport mérést beindítjuk. Az elegy taurokolát koncentrációja 50 μΜ volt. A szokásos inkubációs idő (általában egy perc) elteltével a transzportot 1 ml jéghideg stop-oldattal (10 mM trisz/hepes, pH 7,4; 150 mM KC1) megszakítjuk. Az elegyet azonnal 2500-3500 Pa vákuum mellett cellulóz-nitrát szűrőn (ME 25, 0,45 pm, 25 mm átmérő, Schleicher & Schuell, Dassell, NSZK) leszívatjuk. A szűrőt 5 ml jéghideg stop-oldattal kimossuk.
A radioaktívan jelzett taurokolát felvett mennyiségének a mérése céljából a membránszűrőt 4 ml Quickszint 361 szcintillátor folyadékban (Zinsser Analytik GmbH, Frankfurt, NSZK) feloldjuk és a radioaktivitást folyadék-szcintillációs méréssel határozzuk meg TriCarb 2500 (Canberra Packard GmbH, Frankfurt, NSZK) műszerrel. A mért értékeket etalon minták segítségével végzett hitelesítés, valamint esetleg meglévő kemoluminiszcenc korrigálása után dpm (decompositions per minute) alakjában kapjuk.
A kontrol értékeket Na-Τ-, illetve K-T-pufferben határozzuk meg. Az Na-T-pufferben és a K-T-pufferben mért felvétel közötti különbség az Na+-függő transzportrészt adja. ICsoNa+-nak azt az inhibitor-koncentrációt nevezzük, amelynél az Na+-függő transzportrész a kontrolhoz viszonyítva 50%-kal csökkent; az IC25 és IC75 értékekre értelemszerűen ugyanez érvényes. Az eredményeket az I. táblázatban adjuk meg.
I. táblázat
Epesavszármazékok befolyása az Na+-függő taurokolátfelvételre
Tesztanyagok 1C25 IC50 IC75 μΜ
természetes epesavak
származékai
taurokolát 48
taurokenodezoxikolát 23
taurolitokolát 12
taurolitokolát-3 -sulfat 245
klórambucil nincs gátlás
Klórambucil
66. példa 60 86,5 148
HMG-CoA -reduktáz-gátlók
68. példa 60 89 250
67. példa 24 47,5 270
Peptidek
119. példa 48 134
120. példa 38 87 178
121. példa 30 84 172
122. példa 19 107 237
125. példa 12 46 104
85. példa 18 43 64
105. példa 11 22,5 45
115. példa (Na-só) 12 28 44
87. példa 16 56 70
81. példa 15 38 64
82. példa (Na-só 17 48 80
101. példa 19 40 68
86. példa 14 62 87
111. példa 10 24 39
94. példa 4,5 13 24
93. példa 3,2 8 23
90. példa 3,8 12 27
5. A máj epesav-felvétele a kapuér véréből, kiválasztás az epébe
Az epesav-származékok szelektív felvétele, hepatotróp hatásuk kimutatására altatott patkányoknak a vizsgálni kívánt vegyületeket boluszként fecskendeztük a mezenteriális vénába; a származékok, a hatóanyagok, illetve a hatóanyag metabolitok epében történő kiválasztását elemezzük.
5.1 In vivő perfundált máj
Hímnemű, 300-500 g testtömegű Spraque Dawley patkányokat éheztettünk, vizet tetszés szerinti mennyiségben ihattak. Az uretánnal altatott (5 ml/kg i.m. uretán 30%) állatoknak légcsőmetszés után felvágtuk a hasát, a gyomorzárt lekötöttük, az epejáratba 0,05 mm-es polietilén csövet toltunk egészen a májig, és az epét váladék-elvezetéssel láttuk el. A váladék térfogatát 15 perces időközönként mértük. 60 perces ürés mérés után a vizsgálni kívánt anyagokat (1 mM, 0,9%-os NaCl-oldattal készített 0,5 ml oldat) 30 mp alatt mezenteriális vénába juttatjuk, és az epefolyadékot 2,4, 6, 8, 10, 15,20 perc, majd onnan minden további 10 perc elteltével mérjük;
HU 213 395 Β az utolsó mérés a 120. percben történik. Először az epesavszármazékot, 2 órával később a megfelelő hatóanyagot adagoljuk. A kísérleti anyag beadása után 120 perccel a húgyhólyag térfogatát méijük, a vizeletet szintén összegyűjtjük. Az epe- és vizelet-mintákat a kísérlet alatt jégen tároljuk, utána mélyfagyasztjuk.
5.2 Az epefolyadékban lévő epesav-származékok elemzése
10-10 μΐ epemintát Microcaps (Drummond cég, Broomall, USA) segítségével vékonyréteg kromatográfiás lemezekre (10 χ 20 cm, Kieselgel 60, rétegvastagság 0,25 mm, a Riedel-de-Haen NSZK-beli cég 37581. sz. cikke) viszünk, +s a lemezeket 20 percen át a levegőn szárítjuk.
Az alábbi futtató elegyeket alkalmazzuk:
Anyag oldószerek tf-arány
klórambucil kloroform/metanol 10:1
67. példa butanol/j égecet/víz 9:2:1
125. példa K-sója butanol/jégecet/víz 9:2:1
85. példa butanol/jégecet/víz 9:2:1
Anyag oldószerek tf-arány
87. példa kloroform/metanol 3 : 1
86. példa kloroform/metanol 3:1
A futtató elegyek alkotóinak beszerzése során a lehető legtisztább anyagokat vásároltuk. A lemezek kifejlesztése, majd szárítása után a hatóanyagok és epesavszármazékok, illetve metabolitjaik eloszlását denziometriásan (Densiometer CD 50, DESAGA; Heidelberg) mérjük. A detektálás visszaverődő fény-üzemmódban történt 252 nm-en (klórambucil, klórambucilkonjugátum), illetve 260 nm (a többi anyag esetén) végzett lineáris letapogatással.
A kromatogramok kiértékelésére az epesav-származékok, a hatóanyagok, illetve a hatóanyag-metabolitok relatív intenzitását adjuk meg a kromatogram felületegységeiben.
Η/A. Táblázat
W (klórambucil), W-X-G (67. példa szerinti vegyület), valamint W-metabolitok koncentrációja felületegységekben
W esetén W-X-G esetén
IDŐ perc W vagy Wmetabol. koncentrá- ciója (1) W vagy Wmetabol. (2) W-X-G Σ(1)+(2) konc.
1 1012 0 1207 1207
4 885 0 17803 17803
6 1044 0 21762 21762
8 1160 0 27280 27280
10 810 0 27346 27346
15 689 0 16673 16673
20 1481 0 10748 10748
30 704 0 5375 5375
40 511 0 1273 1273
50 0 828 828
60 620 0 633 633
70 1769 0 826 826
80 501 0 635 635
90 813 0 638 638
100 523 0 559 559
110 604 0 408 408
120 531 0 383 383
H/B. táblázat:
W = 125. példa szerinti vegyület káliumsója Wp = W poláros metabolitja Hatóanyag X: 85. példa szerinti vegyület
W esetén W-X-G esetén
Idő w Wp W+Wp Wp W-X-G Wp+W-X-G
2 960 760 1720 3240 2440 5680
4 1320 1200 2520 3440 3680 7120
6 1480 2400 3880 4160 4600 8760
8 1440 2200 3640 4920 4240 9160
10 3741 2658 6399 6000 3640 9640
15 5212 2277 7489 6040 2680 8720
20 8747 2782 11529 6200 2400 8600
30 10171 2757 12928 4160 1960 6120
40 5482 2007 8840 3560 1920 5480
50 4320 2302 6622 2920
60 3157 2891 6048 2520
70 2134 2059 4193 2440
80 1409 2233 3642
90 1053 2042 3095
100 1276 2005 3281
110 1523 1935 3458
120 1554 2441 3955
A Π/Β. táblázat folytatása
X = 86., ill. 87. példa szerinti vegyületek esetében
86. példa 87. példa
Idő Wp W-X-G Wp+W-X-G WP W-X-G Wp+W-X-G
2 1040 120 1160 5 60 720 1280
4 1120 1440 2560 600 1000 1600
6 1720 3240 4960 640 1680 2320
8 2880 3680 6560 720 2280 3000
10 4080 3480 7560 1000 2440 3440
15 5160 1920 7080 1040 2240 3280
20 4880 720 5600 1640 2080 3720
30 4160 320 4480 1600 1480 3080
40 3080 <50 <3130 1520 920 2440
50 2960 <50 <3010 1840 520 2360
60 2560 <50 <2610 2000 400 2400
70 2120 <50 <2170 1520 360 1880
80 1920 <50 <1970 1680
90 1680 <50 <1730 1600
100 1440 <50 <1490 1440
110 1280 <50 <1330 1440
120 1040 <50 <1090
A denziométer lineáris üzemmódjában felvett koncentrációs adatok

Claims (1)

  1. SZABADALMI IGÉNYPONTOK
    1. Eljárás (I) általános képletü epesav-származékok és sói előállítására - az (I) általános képletben G jelentése (II) általános képletü epesav-maradék, amelyben Y jelentése 1-4 szénatomos alkoxicsoport, hidroxilcsoport, -NH-(CH2)„-SO3H vagy -NH—(CH2)n COOH csoport (vagy sói), ahol n értéke 1,2, 3 vagy 4,
    W jelentése 2-20 tagú oligopeptidből leszármaztatható csoport, amely Gly, Alá, Val, Leu és/vagy Ile aminosavakból épül fel, vagy (P8), (P65), (P69), (P70), (P71), (P73), (P75), (Pl23) vagy (P124) képletü csoport, és
    Xjelentése -CO-NH-{CH2)n-O- (ahol n jelentése a fenti), -(CH2)m-CO-NH- (m = 1-6), amely 1 vagy 2 OH-csoportot hordoz,
    HU 213 395 Β
    -NH-(CH2)n-O- (ahol n jelentése a fenti) vagy
    -(CH2)n-COO-csoport azzal jellemezve, hogy
    a) egy GR2 képletű vegyületet - ahol R2-OH- vagy -NH2 vagy -O-(CH2)n-NH2 képletű csoportot jelent - egy R'W képletű vegyülettel - e képletben R* jelentése R2 acilezésére képes és azt követően R2-vel X-et alkotó csoport - reagáltatunk, amikor is W oligopeptid-csoport jelentés esetén annak Nterminális csoportja védett állapotban van és a védőcsoportot a reakció végén eltávolítjuk, vagy
    b) olyan G-X-W-molekuláról, amelyben X jelentése két vicinális OH-csoportot tartalmazó -(CH2)mCO-NH képletű csoport, amelyben az OH-csoportok alkiléncsoporttal éter formájában vannak védve, a védőcsoportot eltávolítjuk, vagy
    c) G 12-es helyzetében = O-t tartalmazó W-X-G-vegyületet 12-es helyzetben OH-csoportot tartalmazó vegyületté redukálunk, és az a), b) vagy c) szerint előállított vegyületben kívánt 5 esetben i) egy, Y helyén lévő alkoxicsoportot OH-csoporttá hidrolizáunk vagy ii) egy Y helyén lévő hidroxilcsoportot HOSO2(CH2)n-NH- csoporttá vagy H0C0(CH2)n-NH- csoporttá alakítunk vagy iii) az (I) általános képletű vegyületből sót képezünk.
    10 2. Eljárás gyógyászati készítmények előállítására, azzal jellemezve, hogy egy, az 1. igénypont szerint előállított (I) általános képletű vegyületet - e képletben W, X és G jelentése az 1. igénypontban megadott - a gyógyszergyártásban szokásos hordozó és/vagy egyéb segéd15 anyagokkal összekeverünk és gyógyszerkészítménnyé alakítunk.
HU905893A 1989-09-14 1990-09-13 Process for producing bile-acid derivatives and pharmaceutical compositions containing the same HU213395B (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE3930696A DE3930696A1 (de) 1989-09-14 1989-09-14 Gallensaeurederivate, verfahren zu ihrer herstellung, verwendung als arzneimittel

Publications (3)

Publication Number Publication Date
HU905893D0 HU905893D0 (en) 1991-03-28
HUT56115A HUT56115A (en) 1991-07-29
HU213395B true HU213395B (en) 1997-06-30

Family

ID=6389405

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU905893A HU213395B (en) 1989-09-14 1990-09-13 Process for producing bile-acid derivatives and pharmaceutical compositions containing the same

Country Status (21)

Country Link
US (3) US5462933A (hu)
EP (1) EP0417725B1 (hu)
JP (3) JP2568306B2 (hu)
KR (1) KR0166962B1 (hu)
AT (1) ATE152117T1 (hu)
AU (1) AU637822B2 (hu)
CA (1) CA2025294C (hu)
CY (1) CY2112B1 (hu)
DE (2) DE3930696A1 (hu)
DK (1) DK0417725T3 (hu)
ES (1) ES2100858T3 (hu)
FI (1) FI105155B (hu)
GR (1) GR3024095T3 (hu)
HU (1) HU213395B (hu)
IE (1) IE903329A1 (hu)
IL (1) IL95668A (hu)
NO (1) NO303450B1 (hu)
NZ (1) NZ235285A (hu)
PT (1) PT95299B (hu)
TW (1) TW199097B (hu)
ZA (1) ZA907300B (hu)

Families Citing this family (80)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3930696A1 (de) * 1989-09-14 1991-03-28 Hoechst Ag Gallensaeurederivate, verfahren zu ihrer herstellung, verwendung als arzneimittel
WO1992001730A1 (en) * 1990-07-26 1992-02-06 Monsanto Company Novel polyamines and method for preparation thereof
US5693769A (en) * 1991-12-13 1997-12-02 Transcell Technologies, Inc. Glycosylated steroid derivatives for transport across biological membranes and process for making and using same
US5338837A (en) * 1991-12-13 1994-08-16 The Trustees Of Princeton University Glycosylated steroid derivatives for transport across biological membranes and process for making same
US5795870A (en) * 1991-12-13 1998-08-18 Trustees Of Princeton University Compositions and methods for cell transformation
NZ245504A (en) * 1991-12-20 1995-08-28 Hoechst Ag Bile acid derivatives containing an ethylenically unsaturated grouping
EP0549967B1 (de) * 1991-12-20 1996-03-13 Hoechst Aktiengesellschaft Polymere und Oligomere von Gallensäurederivaten, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
US5639866A (en) * 1993-02-23 1997-06-17 Princeton University Single-step formation of multiple glycosidic linkages
JPH08511234A (ja) * 1993-02-23 1996-11-26 ザ トラスティーズ オブ プリンストン ユニヴァーシティー グリコシド結合の溶液及び固相形成
TW289020B (hu) * 1993-05-08 1996-10-21 Hoechst Sktiengesellschaft
TW289021B (hu) * 1993-05-08 1996-10-21 Hoechst Ag
TW289757B (hu) * 1993-05-08 1996-11-01 Hoechst Ag
IT1269839B (it) * 1994-05-26 1997-04-15 Bracco Spa Coniugati di acidi biliari, loro derivati con complessi metallici e relativi usi
US5585470A (en) * 1994-06-23 1996-12-17 Transcell Technologies, Inc. Process for the manufacture of 3-amino-substituted glycosylated bile acids
US6107494A (en) * 1994-09-13 2000-08-22 G.D. Searle And Company Substituted 5-aryl-benzothiepines having activity as inhibitors of ileal bile acid transport and taurocholate uptake
US6268392B1 (en) 1994-09-13 2001-07-31 G. D. Searle & Co. Combination therapy employing ileal bile acid transport inhibiting benzothiepines and HMG Co-A reductase inhibitors
US6262277B1 (en) 1994-09-13 2001-07-17 G.D. Searle And Company Intermediates and processes for the preparation of benzothiepines having activity as inhibitors of ileal bile acid transport and taurocholate uptake
US6642268B2 (en) 1994-09-13 2003-11-04 G.D. Searle & Co. Combination therapy employing ileal bile acid transport inhibiting benzothipines and HMG Co-A reductase inhibitors
US5994391A (en) * 1994-09-13 1999-11-30 G.D. Searle And Company Benzothiepines having activity as inhibitors of ileal bile acid transport and taurocholate uptake
DE4432708A1 (de) * 1994-09-14 1996-03-21 Hoechst Ag Modifizierte Gallensäuren, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung
IL123998A (en) * 1998-04-08 2004-09-27 Galmed Int Ltd Conjugates of bile salts and pharmaceutical preparations containing them
IL142650A (en) * 1998-04-08 2007-06-03 Galmed Int Ltd Use of bile acid conjugates or bile salts and fatty acids or fatty acids in the preparation of pharmaceuticals for lowering cholesterol, for the treatment of fatty liver and for the treatment of hyperglycemia and diabetes
IL139241A0 (en) * 1998-05-13 2001-11-25 Novo Nordisk As Meiosis regulating compounds
US6569905B1 (en) 1998-12-23 2003-05-27 G.D. Searle, Llc Combinations of cholesteryl ester transfer protein inhibitors and bile acid sequestering agents for cardiovascular indications
EA009466B1 (ru) 1998-12-23 2007-12-28 Джи.Ди. Сирл Ллс Ингибитор белка, переносящего эфир холестерила
JP2002533414A (ja) 1998-12-23 2002-10-08 ジー．ディー．サール エルエルシー 心臓血管に適用するための回腸胆汁酸輸送阻害剤および胆汁酸隔離剤の組み合わせ
DE69907960T2 (de) 1998-12-23 2004-02-26 G.D. Searle Llc, Chicago Kombinationen von ileumgallensäuretransports inhibitoren und fibronsäure derivaten für kardiovaskuläre indikationen
IT1304501B1 (it) * 1998-12-23 2001-03-19 Bracco Spa Uso di derivati di acidi biliari coniugati con complessi metallicicome "blood pool agents" per l'indagine diagnostica tramite risonanza
WO2000038721A1 (en) 1998-12-23 2000-07-06 G.D. Searle Llc Combinations of cholesteryl ester transfer protein inhibitors and nicotinic acid derivatives for cardiovascular indications
AU2157400A (en) 1998-12-23 2000-07-31 G.D. Searle & Co. Combinations of cholesteryl ester transfer protein inhibitors and hmg coa reductase inhibitors for cardiovascular indications
ES2200587T3 (es) 1998-12-23 2004-03-01 G.D. Searle Llc Combinaciones de inhibidors del transporte de acidos biliares del ileon e inhibidores de la proteina de transferencia de colesteril ester para indicaciones cardiovasculares.
GB9907048D0 (en) * 1999-03-27 1999-05-19 Karobio Ab Novel glucocorticoid receptor ligands for the treatment of meta bolic disorders
GB2355009A (en) * 1999-07-30 2001-04-11 Univ Glasgow Peptides conjugated to bile acids/salts
US7413536B1 (en) 1999-09-14 2008-08-19 Xenoport, Inc. Substrates and screening methods for transport proteins
DE19950686B4 (de) * 1999-10-21 2006-06-29 Martin-Luther-Universität Halle-Wittenberg Multifunktionelle Spacer
EP1286984A2 (en) 2000-03-10 2003-03-05 Pharmacia Corporation Method for the preparation of tetrahydrobenzothiepines
US6900192B2 (en) * 2000-10-06 2005-05-31 Xenoport, Inc. Bile-acid conjugates for providing sustained systemic concentrations of drugs
AU2002243204A1 (en) 2000-10-06 2002-06-11 Xenoport, Inc. Bile-acid derived compounds for enhancing oral absorption and systemic bioavailability of drugs
AU2002211863A1 (en) * 2000-10-06 2002-04-15 Xenoport, Inc. Bile-acid derived compounds for providing sustained systemic concentrations of drugs after oral administration
US8975246B2 (en) 2001-04-17 2015-03-10 Galmed Research And Development Ltd. Bile acid or bile salt fatty acid conjugates
US7053076B2 (en) * 2001-08-29 2006-05-30 Xenoport, Inc. Bile-acid derived compounds for enhancing oral absorption and systemic bioavailability of drugs
US6740663B2 (en) 2001-11-02 2004-05-25 G.D. Searle, Llc Mono- and di-fluorinated benzothiepine compounds as inhibitors of apical sodium co-dependent bile acid transport (ASBT) and taurocholate uptake
US6852753B2 (en) 2002-01-17 2005-02-08 Pharmacia Corporation Alkyl/aryl hydroxy or keto thiepine compounds as inhibitors of apical sodium co-dependent bile acid transport (ASBT) and taurocholate uptake
US7141559B2 (en) 2002-06-19 2006-11-28 Karo Bio Ab Glucocorticoid receptor ligands for the treatment of metabolic disorders
CA2488535C (en) * 2002-06-19 2012-02-07 Karo Bio Ab Glucocorticoid receptor ligands for the treatment of metabolic disorders
WO2004052841A1 (en) 2002-12-06 2004-06-24 Xenoport, Inc. Carbidopa prodrugs and uses thereof
ATE435035T1 (de) * 2003-01-13 2009-07-15 Bracco Imaging Spa Verbesserte linker für radiopharmazeutische verbindungen
GB0307918D0 (en) 2003-04-05 2003-05-14 Astrazeneca Ab Therapeutic use
WO2005066150A1 (en) * 2004-01-02 2005-07-21 Hetero Drugs Limited A novel process for the preparation of simvastatin
JP4896870B2 (ja) * 2004-04-08 2012-03-14 ヤード・テヒノロギース・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツング 細胞膜ラフトと相互作用する構造を含む三者複合体およびその使用
US20080317767A1 (en) * 2004-04-08 2008-12-25 Tobias Braxmeier Tripartitle Raftophilic Strutures and their Use
EP1765406A4 (en) * 2004-05-21 2012-11-28 Mediplex Corp ADDITIVES FOR IMPROVED MUCOSAL ABSORPTION OF THERAPEUTIC AGENTS
US20060003976A1 (en) * 2004-06-04 2006-01-05 Yuehua Zhang Cholesterol/bile acid/bile acid derivative-modified therapeutic drug compounds
US7323585B2 (en) * 2004-06-04 2008-01-29 Xenoport, Inc. Levodopa prodrugs, and compositions and uses thereof
JP4781352B2 (ja) * 2004-06-04 2011-09-28 ゼノポート，インコーポレーテッド レボドパプロドラッグおよびその組成物ならびにその使用
ES2391575T3 (es) 2005-12-05 2012-11-27 Xenoport, Inc. Mesilato de profármaco de Levodopa, sus composiciones y sus usos
CA2673336A1 (en) 2006-12-21 2008-06-26 Xenoport, Inc. Levodopa dimethyl-substituted diester prodrugs, compositions, and methods of use
WO2008079387A1 (en) * 2006-12-21 2008-07-03 Xenoport, Inc. Catechol protected levodopa diester prodrugs, compositions, and methods of use
CN101367859B (zh) * 2007-08-17 2011-05-11 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 脂肪酸胆汁酸偶合物及其医药用途
KR101239008B1 (ko) * 2008-03-31 2013-03-04 한양대학교 산학협력단 바일산 유도체 및 그의 응용
JP5977945B2 (ja) * 2008-08-06 2016-08-24 ノヴォ・ノルディスク・ヘルス・ケア・アーゲー 長期のインビボ有効性を有するコンジュゲートタンパク質
US8399513B2 (en) * 2008-10-20 2013-03-19 Xenoport, Inc. Levodopa prodrug mesylate hydrate
JP2012505885A (ja) * 2008-10-20 2012-03-08 ゼノポート，インコーポレーテッド レボドパエステルプロドラッグを合成する方法
CN102292349B (zh) 2009-01-22 2016-04-13 诺沃—诺迪斯克保健股份有限公司 稳定的生长激素化合物
JP6086528B2 (ja) 2009-08-06 2017-03-01 ノヴォ・ノルディスク・ヘルス・ケア・アーゲー 長期のインビボ有効性を有する成長ホルモン
AU2010315892B2 (en) 2009-11-09 2014-09-18 Xenoport, Inc. Pharmaceutical compositions and oral dosage forms of a levodopa prodrug and methods of use
RU2012134974A (ru) 2010-01-22 2014-02-27 Ново Нордиск Хелс Кеа Аг Стабилизированное соединение гормона роста
AU2011208625C1 (en) 2010-01-22 2022-08-18 Novo Nordisk Health Care Ag Growth hormones with prolonged in-vivo efficacy
WO2011150286A2 (en) 2010-05-26 2011-12-01 Satiogen Pharmaceuticals,Inc. Bile acid recycling inhibitors and satiogens for treatment of diabetes, obesity, and inflammatory gastrointestinal conditions
CN104023718B (zh) 2011-10-28 2017-04-05 鲁美纳医药公司 用于治疗高胆血症和胆汁淤积性肝病的胆汁酸再循环抑制剂
CN104023727B (zh) 2011-10-28 2017-04-05 鲁美纳医药公司 用于治疗小儿胆汁淤积性肝病的胆汁酸再循环抑制剂
AU2014228850A1 (en) 2013-03-15 2015-10-29 Lumena Pharmaceuticals Llc Bile acid recycling inhibitors for treatment of primary sclerosing cholangitis and inflammatory bowel disease
AU2014229050A1 (en) 2013-03-15 2015-10-22 Lumena Pharmaceuticals Llc Bile acid recycling inhibitors for treatment of Barrett's esophagus and gastroesophageal reflux disease
CN105120887A (zh) 2013-04-05 2015-12-02 诺和诺德保健股份有限公司 生长激素化合物制剂
CN104693264B (zh) * 2015-02-09 2016-09-21 华南理工大学 一种化合物及其制备方法和应用
CN106046101B (zh) * 2016-05-25 2018-01-05 华南理工大学 一种糖原磷酸化酶抑制剂及其制备方法和应用
JP7036805B2 (ja) 2016-05-29 2022-03-15 深▲じぇん▼市▲絵▼云生物科技有限公司 肝疾患関連バイオマーカーおよびその使用方法
CN106496300B (zh) * 2016-10-19 2018-05-18 上海博志研新药物技术有限公司 花生胆酸及其中间体的制备方法
JP2022520121A (ja) 2019-02-12 2022-03-28 ミルム ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド 胆汁うっ滞を治療する方法
WO2023105494A1 (en) 2021-12-10 2023-06-15 Universidade Do Porto Cationic steroid compounds, method of obtaining thereof, formulations comprising thereof and their uses

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2441129A (en) * 1942-05-23 1948-05-11 Berczeller Arpad Bile acid derivatives of aryl sulfonamides
US3937815A (en) * 1975-12-05 1976-02-10 SPA--Societa Prodotti Antibiotici S.p.A. Lysozyme derivatives
FR2457302A1 (fr) * 1979-05-23 1980-12-19 Roussel Uclaf Nouveau procede de purification de l'acide ursodesoxycholique
JPS5754151A (en) * 1980-09-18 1982-03-31 Takeda Chem Ind Ltd Physiologically active substance b-52653 and its preparation
JPS57131735A (en) * 1981-02-09 1982-08-14 Takeda Chem Ind Ltd Preparation of quinones
US4418059A (en) * 1981-07-20 1983-11-29 Montefiore Medical Center Nucleoside ester compositions
US4499020A (en) * 1981-07-21 1985-02-12 Montefiore Hospital And Medical Center, Inc. Mixed anhydrides and processes thereof
FR2511007A1 (fr) * 1981-08-07 1983-02-11 Roussel Uclaf Procede de preparation de l'acide ursodesoxycholique a partir de l'acide 3a, 7b, 12a-trihydroxycholanique et produit intermediaire utilises
NL8201492A (nl) * 1982-04-07 1983-11-01 Rijksuniversiteit Werkwijze ter bereiding van een op de 4-plaats equatoriaal gesubstitueerde symmetrisch-polycycloethyleenverbinding; op de 4-plaats equatoriaal gesubstitueerde symmetrisch-polycycloethyleenverbinding alsmede een op basis van de verbinding bereid thermochemiluminescerend merkmateriaal of thermochemiluminescerend sondeermateriaal.
EP0105404A1 (en) * 1982-09-30 1984-04-18 Merck & Co. Inc. Derivatives of steroid compounds linked to cyotoxic agents and process for their preparation
DE3432094A1 (de) * 1984-08-31 1986-03-06 Hoechst Ag, 6230 Frankfurt Ester der pyridin-2,4- und -2,5- dicarbonsaeure als arzneimittel zur inhibierung der prolin- und lysinhydroxylase
JPS62175497A (ja) * 1986-01-28 1987-08-01 Wakunaga Pharmaceut Co Ltd 胆汁酸誘導体およびその製造法
US5238948A (en) * 1987-02-10 1993-08-24 Hoechst Aktiengesellschaft Pyridine-2,4- and -2,5-dicarboxylic acid derivatives and medicaments based on these compounds
ATE132496T1 (de) * 1987-07-10 1996-01-15 Hoechst Ag 3-desmethyl-mevalonsäurederivate, verfahren zu ihrer herstellung, pharmazeutische präparate auf basis dieser verbindungen, ihre verwendung sowie zwischenprodukte
US4968790A (en) * 1988-08-12 1990-11-06 American Cyanamid Company Antidiabetic phosphates
DE3930696A1 (de) * 1989-09-14 1991-03-28 Hoechst Ag Gallensaeurederivate, verfahren zu ihrer herstellung, verwendung als arzneimittel
DE3931432A1 (de) * 1989-09-21 1991-04-04 Hoechst Ag Pyrimidin-4,6-dicarbonsaeurediamide, verfahren zu deren herstellung sowie verwendung derselben sowie arzneimittel auf basis dieser verbindungen

Also Published As

Publication number Publication date
NO903999L (no) 1991-03-15
IL95668A (en) 1995-03-30
JPH0892277A (ja) 1996-04-09
GR3024095T3 (en) 1997-10-31
IL95668A0 (en) 1991-06-30
EP0417725B1 (de) 1997-04-23
JP2642090B2 (ja) 1997-08-20
TW199097B (hu) 1993-02-01
KR910006319A (ko) 1991-04-29
AU637822B2 (en) 1993-06-10
PT95299B (pt) 1997-06-30
EP0417725A3 (en) 1992-03-18
NO903999D0 (no) 1990-09-13
JPH03109396A (ja) 1991-05-09
JP2642089B2 (ja) 1997-08-20
FI904497A0 (fi) 1990-09-12
CY2112B1 (en) 2002-04-26
ATE152117T1 (de) 1997-05-15
CA2025294A1 (en) 1991-03-15
JP2568306B2 (ja) 1997-01-08
NZ235285A (en) 1993-05-26
AU6244190A (en) 1991-03-21
DK0417725T3 (da) 1997-11-03
IE903329A1 (en) 1991-04-10
ZA907300B (en) 1991-06-26
US5668126A (en) 1997-09-16
FI105155B (fi) 2000-06-30
KR0166962B1 (ko) 1999-01-15
US5646272A (en) 1997-07-08
DE3930696A1 (de) 1991-03-28
HU905893D0 (en) 1991-03-28
JPH0892276A (ja) 1996-04-09
NO303450B1 (no) 1998-07-13
EP0417725A2 (de) 1991-03-20
US5462933A (en) 1995-10-31
HUT56115A (en) 1991-07-29
ES2100858T3 (es) 1997-07-01
CA2025294C (en) 2001-11-27
DE59010706D1 (de) 1997-05-28
PT95299A (pt) 1991-05-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HU213395B (en) Process for producing bile-acid derivatives and pharmaceutical compositions containing the same
JP3237882B2 (ja) 胆汁酸誘導体、その製法および医薬としてのこれらの化合物の使用
KR100333150B1 (ko) 노르-담즙산유도체및이를포함하는약제
JP3403218B2 (ja) 胆汁酸誘導体、その製造方法およびそれを含有する抗脂血剤
CZ289515B6 (cs) Tetrazolové deriváty ľlučových kyselin a léčivo tyto deriváty obsahující
JPS6256458A (ja) 新規なアミノ酸誘導体
AU2008258133A1 (en) New corticosteroids
Lebeau et al. Synthesis of New Phospholipids Linked to Steroid‐Hormone Derivatives Designed for Two‐Dimensional Crystallization of Proteins
US10273263B2 (en) Pro-drug forming compounds
RU2159249C2 (ru) Производные пролина, пригодные в качестве ингибиторов эластазы лейкоцитов человека
EP0646592A1 (en) Estradiol derivative-alkylating agent conjugate
US7053076B2 (en) Bile-acid derived compounds for enhancing oral absorption and systemic bioavailability of drugs
MXPA06007852A (es) Profarmacos di-esteroidales de estradiol.
CA2346085A1 (en) Propanolamine derivatives linked with bile acid used for treating disorders of the lipid metabolism
RU2264393C2 (ru) Конденсированные производные тиоколхицина и баккатина в качестве противоопухолевых агентов
GOTO et al. Synthesis of disulfates of unconjugated and conjugated bile acids
AU5359894A (en) Prodrugs of antiinflammatory 3-acyl-2-oxindole-1-carboxamides
Ionescu et al. Synthesis of an amphiphilic compound derived from malonic acid for bone targeting
JPS6363698A (ja) 胆汁酸誘導体およびその塩ならびにその製造法
CA2193733A1 (en) Process for the manufacture of 3-amino-substituted glycosylated bile acids
FI114708B (fi) 17-desoksikortikosteroidi-21-[O]-karboksyylihappoestereitä, menetelmä niiden valmistamiseksi ja niitä sisältäviä lääkkeitä
CN117736201A (zh) 靶向组蛋白去乙酰化酶8蛋白水解嵌合体、制备方法及其应用
Ballard I. Development of an inexpensive carbohydrate derivative used as a chiral auxiliary in the synthesis of a α-hydroxy carboxylic acids. II. Synthesis of a potential carrier for copper ions designed to be transported by P-glycoprotein
MXPA01003207A (en) Propanolamine derivatives linked with bile acid used for treating disorders of the lipid metabolism