RU2264393C2 - Конденсированные производные тиоколхицина и баккатина в качестве противоопухолевых агентов - Google Patents

Конденсированные производные тиоколхицина и баккатина в качестве противоопухолевых агентов Download PDF

Info

Publication number
RU2264393C2
RU2264393C2 RU2002124523/04A RU2002124523A RU2264393C2 RU 2264393 C2 RU2264393 C2 RU 2264393C2 RU 2002124523/04 A RU2002124523/04 A RU 2002124523/04A RU 2002124523 A RU2002124523 A RU 2002124523A RU 2264393 C2 RU2264393 C2 RU 2264393C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
formula
compounds
mol
mmol
baccatin
Prior art date
Application number
RU2002124523/04A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2002124523A (ru
Inventor
Эцио БОМБАРДЕЛЛИ (IT)
Эцио БОМБАРДЕЛЛИ
Алессандро ПОНТИРОЛИ (IT)
Алессандро ПОНТИРОЛИ
Original Assignee
Индена С.П.А.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Индена С.П.А. filed Critical Индена С.П.А.
Publication of RU2002124523A publication Critical patent/RU2002124523A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2264393C2 publication Critical patent/RU2264393C2/ru

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07DHETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D305/00Heterocyclic compounds containing four-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atoms
    • C07D305/14Heterocyclic compounds containing four-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atoms condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33Heterocyclic compounds
    • A61K31/335Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/337Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having four-membered rings, e.g. taxol
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00Antineoplastic agents

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Epoxy Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)

Abstract

Настоящее изобретение относится к производным N-деацетил-тиоколхицина и 10-деацетилбаккатина III формулы (I)
Figure 00000001
где R и n имеют значения, определенные в описании, которые являются ценными противоопухолевыми лекарственными средствами. Изобретение также относится к фармацевтической композиции, обладающей антипролиферативной активностью, на основе соединений формулы 1. Технический результат - получение новых производных 10-деацетилбаккатина 111, обладающих ценным фармацевтическим действием. 3 н. и 2 з.п. ф-лы.

Description

Данное изобретение относится к производным N-деацетил-тиоколхицина и 10-дезацетилбаккатина III формулы (I)
Figure 00000003
где:
n представляет целое число от 0 до 8;
R представляет остаток формулы а), b), с), d) или е):
Figure 00000004
Figure 00000005
где
R1 и R2, которые могут быть одинаковыми или различными, представляют водород или группу формулы:
Figure 00000006
n предпочтительно целое число от 1 до 7, более предпочтительно 1.
Колхицины и тиоколхицины являются известными препятствующими росту соединениями, способными дестабилизировать микроканалы благодаря взаимодействию с тубулином.
Колхицин в настоящее время применяют в терапии подагры и родственных воспалительных заболеваний, но его применение ограничено острыми фазами из-за его высокой желудочно-кишечной токсичности.
Изучено большое число производных колхицина или тиоколхицина с точки зрения их возможного использования в качестве противоопухолевых медикаментов, но попытки исследований до сих пор были безуспешными, вследствие очень ограниченных терапевтических показателей таких соединений.
Только одно производное колхицина, демеколцин, применяли в прошлом в клинике для лечения лейкемии, но со слабым успехом.
Антипролиферативная активность производных таксана (паклитаксела и его производных) также относится к способности необратимого связывания альфа и бета-форм тубулина в микроканалах. Оксетановая и фенильная группы в изосериновой боковой цепи, как подтверждено, необходимы в отношении активности: баккатин фактически, при отсутствии изосериновой цепи, по существу не обладает антипролиферативной активностью в противоположность паклитакселу и другим С13-эфирам изосерина, которые могут образовывать связи с двумя различными сайтами микроканалов, предотвращая деполимеризацию и, следовательно, сдерживая активность митотических веретенообразных структур.
Неожиданно обнаружено, что соединения формулы (I) оказывают антипролиферативное действие несмотря на отсутствие сродства к тубулину как в совокупности микроканалов, так и в несовокупных факторах.
Активность соединений формулы (I) таким образом вызвана неожиданным механизмом действия, который не может быть очевидным из современных знаний в области антитубулиновых лекарств.
Соединения изобретения обладают сильной антимитотической активностью и характеризуются благопрятным терапевтическим показателем, что делает их подходящими при терапевтическом лечении различных форм опухолей, также как и дегенеративного ревматоидного артрита, заболевания, характеризующегося избыточной пролиферацией и аномальной миграцией лейкоцитов.
Соединения (I) имеют цитотоксичность, сравнимую с таковой наиболее эффективных противоопухолевых лекарственных средств, в то же время имея заметно более широкий спектр действия, в частности, против клеток, резистентных к известным лекарствам.
Соединения (I) получают реакцией N-деацетилтиоколхицина с реакционноспособными производными дикарбоновых кислот в сухих растворителях в таких условиях, которые применяют для получения продукта N-моноацилирования, который в последующем реагирует с производным баккатина III, возможно защищенным в положениях 7, 13 или 10, в зависимости от желаемого соединения, в присутствии подходящего конденсирующего агента, такого как дициклогексилкарбодиимид (ДЦГК). Для непосредственного получения соединений (I) любые необязательно присутствующие защитные группы удаляют и/или гидроксигруппы остатка баккатина III селективно ацилируют.
Если в соединении (I) R означает группу формулы с), благодаря реактивности гидроксигруппы в изосериновой цепи реакция может быть проведена без предварительной защиты других гидроксигрупп, присутствующих в таксановом соединении.
Примерами подходящих реакционноспособных производных дикарбоновых кислот являются ацилгалогениды, хлорангидриды кислот, реакционноспособные ангидриды или сложные эфиры.
Альтернативно, производное таксана может также быть ацилировано дикарбоновой кислотой и полученный продукт может быть сконденсирован с N-деацетилтиоколхицином.
Соединения изобретения применимы для лечения пролиферативных патологий, в частности опухолей различных органов, ревматоидного артрита или других дегенеративных патологий, где показаны антипролиферативное и противовоспалительное действия.
Для указанной цели соединения (I) вводят в форме фармацевтических композиций, пригодных для перорального, парентерального, подкожного или чрескожного введения. Дозы соединений (I) находятся в интервале от 1 до 100 мг/м2 площади тела в зависимости от пути введения. Соединения предпочтительно вводят перорально.
Примерами композиций являются капсулы, таблетки, ампулы, кремы, растворы, грануляты.
Следующие примеры более детально иллюстрируют изобретение.
ПРИМЕР 1
a) 100 мг Деацетилтиоколхицина (0,268 ммоля, мол. вес 373 г/моль) растворяют в 5 мл сухого диоксана, затем объединяют с 27 мг янтарного ангидрида (0,268 ммоля, мол. вес 100 г/моль) и реакционную смесь нагревают до 60°С за 5 часов. Контроль ТСХ:
AcOEt/MeOH 4:1. Диоксан упаривают и продукт используют без очистки для следующей реакции. Получено 130 мг продукта.
b) 126 мг продукта со стадии а) (0,268 ммоля, мол. вес 473 г/моль)растворяют в 8 мл сухого толуола. Прибавляют 187 мг 7-триэтилсилил(Tes)-баккатина (0,268 ммоля, мол.вес 700 г/моль), 66 мг ДЦГК (0,321 ммоля. мол. вес 206 г/моль) и 13 мг ДМАП (диметиламинопиридина) (0,1 ммоля, мол. вес 122 г/моль). Смесь перемешивают при комнатной температуре около 12 часов до исчезновения исходного продукта. Контроль ТСХ: АсОН/МеОН 4:1. Смесь фильтруют через целит и упаривают досуха. Сырой продукт очищают на колонке (силикагель), используя AcOEt/гексан 9:1 в качестве элюента и получая 120 мг защищенного продукта конденсации и 80 мг продукта, уже со снятой защитой в 7-положении.
с) 120 мг продукта со стадии b) (0,103 ммоля, мол. вес 1155 г/моль) растворяют в 5 мл МеОН/AcCl (5 мл метанола и 35 мкл AcCl). Реакция заканчивается за 15 минут. Смесь объединяют с бикарбонатом и экстрагируют AcOEt, получая 100 мг продукта формулы (I), где n равно 1 и R означает остаток формулы а).
ПРИМЕР 2
a)100 мг 10-О-сукцинил-7-триэтилсилил-баккатина III (мол. вес 699 г/моль, 0,14 ммоля) и 54 мг N-деацетилтиоколхицина (мол. вес 373 г/моль, 0,14 ммоля) растворяют в 5 мл сухого толуола, соединяют с 2 мл метиленхлорида, 31 мг ДЦГК (мол. вес 206 г/моль, 0,15 ммоля) и 8,5 мг ДМАП (мол. вес 122 г/моль, 0,07 ммоля) при комнатной температуре. Через один день реакционную массу фильтруют через целит, промывают толуолом и упаривают досуха. Очистка на флэш-колонне (силикагель, элюент СН2Cl2; МеОН=25:1) дает 70 мг продукта.
b) 200 мг продукта со стадии а) (0,213 ммоля) растворяют в 14 мл сухого толуола. Прибавляют 183 мг производного оксазолидина формулы:
Figure 00000007
обозначаемого в дальнейшем как SHA-9 (0,426 ммоля), 88 мг ДЦГК (0,426 ммоля) и 26 мг ДМАП (0,213 ммоля) и смесь перемешивают при комнатной температуре. Контроль ТСХ: СН2Cl2; МеОН=25:1. Через 4 часа реакционную смесь фильтруют через целит и очищают колоночной хроматографией, получая 240 мг продукта.
с) 160 мг продукта со стадии b) (0.12 ммоля, мол. вес 1338) растворяют в 3,2 мл раствора, полученного растворением 70 мкл AcCl в 10 мл МеОН. Через полчаса реакционную смесь соединяют с 5% NaHCO3, экстрагируют СН2Cl2, сушат и растворитель упаривают. Очистка флэш-хроматографией дает 97мг соединения (I), где n равно 1 и R означает остаток формулы b).
ПРИМЕР 3
70 мг паклитаксела (0,038 ммоля, мол. вес 1824) растворяют в 5 мл сухого диоксана. Прибавляют ДЦГК (1,5 экв.), ДМАП (5% в молях) и продукт примера 1а. Смесь перемешивают при 110°С 2 ч, затем прибавляют еще 10 мг продукта примера 1а и 11 мг ДЦГК. После этого реакционную массу оставляют при комнатной температуре на 48 часов, затем нагревают при 110°С следующие 24 часа. Растворитель упаривают и остаток очищают флэш-хроматографией (AcOEt:МеОН=99:1), получая 21 мг соединения (I), где n равно 1 и R означает остаток формулы с).
ПРИМЕР 4
а) Раствор 7-сукцинил,10,13-ди-триэтилсилил-баккатина III (390 мг, 0,479 ммоля, мол. вес 814) в 10 мл ТГФ соединяют с раствором TBAF (тетрабутиламмоний фторида) (1М в ТГФ, 0,96 ммоля) при 0°С. Смесь оставляют на 1 ч 30 мин при 0°С, затем на 2 ч при комнатной температуре. После этого добавляют 1 экв. TBAF и реакцию продолжают до полного отщепления защитных групп. Реакционную смесь соединяют с водой и экстрагируют AcOEt; водную фазу подкисляют 1н. HCl и экстрагируют AcOEt, получая 350 мг продукта.
b) Соединение со стадии а) (0,479 ммоля) реагирует с TIO-NH2 (0,479 ммоля), ДЦГК (1,5 экв.) и ДМАП (50% в молях) в толуоле-ТГФ 1 час. Реакционную смесь фильтруют через целит и очищают колоночной хроматографией (CH2Cl2:MeOH=25:1), получая соединение (I), где n равно 1 и R означает остаток формулы d).
ПРИМЕР 5
200 мг соединения примера 4 (0,206 ммоля) растворяют в 14 мл толуола-сухого ТГФ. Прибавляют 177 мг SHA-9 (2 экв.), 84 мг ДЦГК (2 экв.) и 26 мг ДМАП (0,206 ммоля), смесь перемешивают при комнатной температуре. Контроль ТСХ: CH2Cl2:MeOH=25:1. Через 4 часа реакционную смесь фильтруют через целит и очищают на хроматографической колонке. Полученный продукт растворяют в 4,8 мл раствора 70 мкл AcCl в 10 мл МеОН. Через полчаса реакционную массу объединяют с 5% NaHCO3 и экстрагируют СН2Cl2. Экстракт сушат и растворитель упаривают. Остаток очищают флэш-хроматографией, получая 110 мг соединения (I), где n равно 1, R означает остаток формулы е), где R1 и R2 являются группами формулы
Figure 00000008
ХАРАКТЕРИСТИКИ СОЕДИНЕНИЙ
Соединение формулы (I), имеющее следующую структурную формулу
Figure 00000009
было полностью охарактеризовано обычными спектроскопическими методами. Его FAB - масс-спектр показал псевдомолекулярный ион при 1263,4952 Da, в значительном соответствии с молекулярной формулой C67H79N2O20S) ([М+Н]+; расчетн. 1263,4947).
1H-ЯМР спектр был достаточно сложным, но, тем не менее, можно было легко различить сигналы двух структурных доменов молекулы и ограничивающего сукцинилового линкера. Диагностические сигналы оксиметинов баккатина были обнаружены при δ 6,50 (s) (ацилированный H-C(10)), 6,17 (ацилированный Н-С(13)) и 4,59 (Н-С(7)). Химический сдвиг Н-С(2') и Н-С(3') боковой цепи фенилизосерина (соответственно δ 4,65 и δ 5,27) был совершенно аналогичен величинам, наблюдавшимся у паклитаксела6). Все сигналы тиоколхициновой части можно было определить при сравнении с данными литературы [17], при мультиплете при δ 4,62 для Н-С(7"), ясно указывающем на замещение ацилом экзоциклического атома N. Наконец, присутствие сукцинилового линкера было подтверждено сложными мультиплетами в области между 2,78 и 2,46, показывая корреляцию HMQC с двумя метиленовыми атомами С при δ 30,0 и 30,3.
Соединение формулы (I), имеющее следующую структурную формулу
Figure 00000010
характеризовалось молекулярной формулой (HR-FAB-MS (C71H77N2O30S): m/z 1309,4805; расчетн. 1309,4790), но его 1H-ЯМР спектр показал отчетливые сдвиги для сигналов Н-С(2'), смещался вниз по полю к δ 6,04 (d, J = 10,2) от типичной области δ 4,65-4,70, и Н-С(7) сдвинулся вверх по полю при δ 4,42 в обычную область Н-С(7)-ОН незамещенные баккатины. Остающиеся сигналы тарпеноидной и тиоколхициновой частей были по существу идентичны сигналам их материнских соединений.
Соединение формулы (I), имеющее следующую структурную формулу
Figure 00000011
представляет собой аморфное твердое вещество, Rf (гексан/AcOEt 1:1) 0,3. 1H-ЯМР (CDCl3, 400 МГц): 8,09 (д, J=7,6, o-H); 7,65 (д, J=7,6, HN-C(7')); 7,58 (т, J=7,6, p-H); 7,47 (т, J=7,6, m-H); 7,40 (с, Н-С(8')); 7,31 (д, J=9,5, H-C(12')); 7,07 (д, J=9,5, H-С(11')); 6,55 (с, Н-С(4')); 5,57 (д, J=7,4, H-C(2)); 5,50 (дд, J=10,5, 6,6, Н-С(7)); 5,24 (с, Н-С(10)); 4,93-4,78 (м, Н-С(13)); 4,92 (д, J=9,3, H-C(5)); 4,83-4,70 (м, Н-С(7')); 4,29 (д, J=8,3, На-С(20)); 4,15 (д, J=8,3, Нb-С(20)); 4,01 (д, J=7,4, Н-С(3)); 3,93 (с, МеО); 3,91 (с, МеО); 3,66 (с, МеО); 2,75-2,20 (м, янтарный CH2, СН2(5'), Нn-С(6), Нn-С(6'), СН2(14)); 2,42 (с, MeS);,25 (с, ОСОМе); 2,02-1,75 (м, Нb-С(6), Нb-С(6')); 2,01 (с, Ме(18)); 1,76 (с, Ме(19)); 1,02 (с, Ме(17)); 0,95 (с, Ме(16)). 13C-ЯМР (CDCl3, 100 МГц; величины со звездочками могут быть взаимозаменяемыми): 205,4 (С(9)); 182,4 (С(9')); 171,7, 171,1 (янтарный СО); 170,7 (ОСОМе); 166,9 (COPh); 158,2 (C(10')); 153,6 (С(3')); 151,6 (С(7'а)); 151,2 (С(1')); 142,6 (С(12)); 141,6 (С(2')); 138,5 (С(12'а)); 134,8 (С(12')); 134,4 (С(4'а), С(11)); 133,9 (р-С); 130,1 (2 о-С); 129,5 (C(Ph)); 128,6 (2 m-С), С(8')); 126,8 (С(11')); 125,6 (С(1'а)); 107,4 (С(4')); 83,8 (С(5)); 80,4 (С(4)); 78,8 (С(1)); 76,5 (С(20)); 75,0 (С(10)); 74,8 (С(2)); 72,1 (С(7)); 67,7 (С(13)); 61,8 (МеО); 61,4 (МеО); 56,2 (С(8)); 56,1 (МеО); 52,1 (С(7')); 46,7 (С(3)); 42,5 (С(15)); 38,7 (С(14)); 36,8 (С(6')); 33,3 (С(6)); 30,0*, 29,0* (С(5'), янтарный СН2); 26,6 (С(17)); 22,5 (ОСОМе); 19,6 (С(16)); 15,1 (MeS); 14,8 (С(18)); 10,7 (C(19)); CI-MS: 1000 ([М+Н]+).
Соединение формулы (I), имеющее следующую структурную формулу
Figure 00000012
представляет собой аморфное твердое вещество, Rf (гексан/AcOEt 7:3) 0,25. [α]D2=-94 (EtOH, c=0,30). 1H-ЯМР (CDCl3, 400 МГц): 8,12 (д, J=7,6, o-H); 7,62 (т, J=7,6, p-H); 7,51 (т, J=7,6, m-Н); 7,40 (м, о-Н'), m-Н'); 7,33 (м, p-H'); 7,29 (с, Н-С(8")); 7,28 (д, J=10,4, Н-С(12")); 7,05 (д, J=10,4, H-C(11'')); 6,54 (с, Н-С(4")); 6,40 (с, Н-С(10)); 6,22 (т, J=9,0, H-C(13)); 5,72 (д, J=6,5, H-C(2)); 5,58 (дд, J=10,0, 7,0, Н-С(7)); 5,26 (м, Н-С(3')); 4,92 (д, J=9,2, Н-С(5)); 4,65 (м, Н-С(7")); 4,64 (м, Н-С(2'); 4,31 (д, J=8,4, Ha-C(20)); 4,20 (д, J=8,4, Нb-С(20)); 3,94 (с, МеО); 3,93 (д, J=6,5, Н-С(3)); 3,91 (с, МеО); 3,65 (с, МеО); 2,58 (м, 1Н, янтарный СН2), 2,54 (м, На-С(6)), 2,50 (м, янтарный CH2), На-С(5''), 2,42 (с, MeS); 2,42 (м, 1Н, янтарный СН2), 2,37 (с, МеСОО-С(4)); 2,34 (м, СН2(14)); 2,27 (м, Нb-С(5''), 2,23 (м, Нb-С(6''); 1,92 (с, Me (18)); 1,85 (м, Нb-С(6)); 1,83 (с, Ме(19)); 1,76 (м, Нb-С(6"); 1,48, 1,37 (2с, Ме3С); 1,29 (с, Ме(16)); 1,26 (с, Ме(17)). 13С-ЯМР (CDCl3, 100 МГц; величины со звездочками могут быть взаимозаменяемыми): 200,5 (С (9)); 182,5 (С(9")); 172,7, 171,2 (янтарный СО); 172,6 (C(1')); 170,2 (ОСОМе); 167,0 (COPh); 158,4 (С (10")); 155,4, 155,3 (COOtBu); 153,7 (С(3''); 151,4 (С(1")); 150,8 (С(7"а)); 142,0 (С(2")); 141,5 (С(12)); 138,5 (2С) (C(Ph')); 138,3 (С(12"а)); 134,3 (С(12"), (С(4"а), 133,7 (р-С); 132,4 С(11)); 130,2 (2 о-С); 129,3 (C(Ph)); 128,9 (2 m-С), 128,7 (2 о-С', С (8"), 2 m-С'); 128,1 (2р-С'); 126,9 (C(11')); 125,8 (С(1"а)); 107,8 (С(4'')); 83,9 (С(5)); 81,2 (С(4)); 80,2 (2 Ме3С); 78,8 (С(1)); 76,7 (С(2'), (С(10)); 76,5 (С(20)); 74,6 (С(2)); 73,7 (С(7)); 72,3 (С(13)); 61,6 (МеО); 61,3 (МеО); 56,5 (С(8)); 56,2 (МеО); 52,1 (СО'), (С(7")); 47,0 (С(3)); 43,4 (С(15)); 36,8 (С(6")); 35,6 (С (14)); 33,4 (С(6)); 30,8*, 29,9* (янтарный СН2); 30,0 (С(5'')), 28,3 (2 Ме3С); 26,6 (С(17)); 22,5 (ОСОМе); 21,3 (С(16)); 15,1 (MeS); 14,6 (С(18)); 11,0 (C(19)); HR-FAB-MS: 1526,6130 ([C81H95N3O24S+H]+; расчет. 1526,6104).
Цитотоксичность в отношении клеток рака молочной железы MCF7. Ингибирующие эффекты соединений на рост клеток опухоли молочной железы человека оценивали сульфородамином В (SRB) (Sigma Chemical Company), анализом на основе красителя, который косвенно определяет количество клеток измерением связанных с мембранами белков, как описано в публикации Р. Skehan, R. Storeng, D. Scudiero et al., J. Natl. Canaer Inst., 1990, 82, 1113. Линии клеток рака молочной железы MCF7, полученные от Frederick, MD из Отделения лечения рака хранилища опухолей Национального института рака. Линии клеток культивировали при 37°, в 5% С02 в среде RPMI 1640 с добавлением 5% Nu-сыворотки, 5% фетальной бычьей сыворотки (Atlanta Biological, Atlanta, GA), 10 мМ HEPES и 2 мМ L-глутамина (Life Technologies, Grand Island, NY). Вкратце, 1х105 экспоненциально пролиферирующих клеток высевали на 96-луночный титрационный микропланшет в полной ростовой среде и инкубировали при 37° в течение 15-18 ч для обеспечения возможности клеткам прикрепиться к субстрату перед добавлением соединений. Для каждого испытуемого соединения параллельно исследовали 5 96-луночных титрационных микропланшетов. Опухолевые клетки контактировали с 10-12 различными концентрациями каждого препарата, охватывая диапазон концентраций от 5 до 6 логарифмов при 37°, в 5% С02. MCF7 контактировали с препаратами в течение 72 ч (примерно 3,3 клеточных удвоений). Клетки фиксировали in situ в течение 1 ч при 4° с ледяным 50% CCl3СООН. Затем планшеты промывали 6 раз Н20 и 150 мкл 0,4% SRB добавляли в каждую лунку. После 5-минутной инкубации при комнатной температуре планшеты споласкивали 0,1% АсОН и сушили воздухом. Связанные SRB солюбилизировали добавлением 100 мкл Tris основания (рН 10,5) на лунку и давали возможность стоять при комнатной температуре в течение 5 мин. Оптическую плотность (OD) каждой лунки измеряли при 570 нм. В указанных условиях количество клеток пропорционально OD. Авторы определяли концентрацию каждого препарата, которая ингибировала 50% клеточного роста (ED50), при эмпирически определенных концентрациях препаратов от 10 мкМ до 30 пкМ. ED50 получали нанесением на график кривой зависимости эффекта от концентрации, как описано в публикации М.R.Vredenburg, I.Ojima, J.Veith, P.Pera, К.Kee et al., J.Natl. Canaer Inst., 2001, 93, 1234. Минимум 3 отдельных эксперимента использовали для получения представленных величин ED50. Рассчитывали соотношение между ED50 таксола и соединений.

Claims (5)

1. Конденсированные производные тиоколхицина и баккатина общей формулы (I)
Figure 00000013
где n представляет собой целое число от 0 до 8;
R представляет собой остаток формулы а), b), c), d) или е):
Figure 00000014
Figure 00000015
где R1 и R2, которые могут быть одинаковыми или различными, представляют собой водород или группу формулы
Figure 00000016
2. Соединение по п.1, где n представляет собой целое число от 1 до 7.
3. Соединение по п.2, где n равно 1.
4. Соединение по любому из пп.1-3 в качестве активного ингредиента лекарственного средства, обладающего антипролиферативной активностью.
5. Фармацевтическая композиция, обладающая антипролиферативной активностью, содержащая соединение по любому из пп.1-3 в смеси с подходящим носителем.
RU2002124523/04A 2000-03-17 2001-03-12 Конденсированные производные тиоколхицина и баккатина в качестве противоопухолевых агентов RU2264393C2 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
ITMI2000A000553 2000-03-17
IT2000MI000553A IT1319168B1 (it) 2000-03-17 2000-03-17 Derivati di condensazione ad attivita' antitumorale, loro metodo dipreparazione e formulazioni che li contengono.

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2002124523A RU2002124523A (ru) 2004-01-10
RU2264393C2 true RU2264393C2 (ru) 2005-11-20

Family

ID=11444500

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2002124523/04A RU2264393C2 (ru) 2000-03-17 2001-03-12 Конденсированные производные тиоколхицина и баккатина в качестве противоопухолевых агентов

Country Status (21)

Country Link
US (1) US6683109B2 (ru)
EP (1) EP1263431B1 (ru)
JP (1) JP2003526665A (ru)
KR (1) KR100766161B1 (ru)
CN (1) CN1204886C (ru)
AU (2) AU5037701A (ru)
CA (1) CA2403168C (ru)
CZ (1) CZ301626B6 (ru)
DK (1) DK1263431T3 (ru)
ES (1) ES2305067T3 (ru)
HK (1) HK1051973A1 (ru)
HU (1) HU229257B1 (ru)
IL (1) IL151714A0 (ru)
IT (1) IT1319168B1 (ru)
NO (1) NO329422B1 (ru)
PL (1) PL357376A1 (ru)
PT (1) PT1263431E (ru)
RU (1) RU2264393C2 (ru)
SI (1) SI1263431T1 (ru)
SK (1) SK286849B6 (ru)
WO (1) WO2001068089A1 (ru)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6649632B2 (en) 2000-02-02 2003-11-18 Fsu Research Foundation, Inc. C10 ester substituted taxanes
AR030188A1 (es) 2000-02-02 2003-08-13 Univ Florida State Res Found Compuestos de taxano sustituidos con esteres en el c7; composiciones farmaceuticas que los contienen y proceso para tratar un sujeto mamifero que sufre de una condicion que responde a los taxanos
CA2354471A1 (en) * 2001-07-31 2003-01-31 Florida State University Research Foundation, Inc. C10 ester substituted taxanes
US6825236B2 (en) * 2003-04-14 2004-11-30 California Pacific Medical Center Colchicine derivatives
PE20050693A1 (es) 2004-02-13 2005-09-27 Univ Florida State Res Found Taxanos sustituidos con esteres de ciclopentilo en c10
JP2007527432A (ja) 2004-03-05 2007-09-27 フロリダ・ステイト・ユニバーシティ・リサーチ・ファウンデイション・インコーポレイテッド C7ラクチルオキシ置換タキサン
JP2011517455A (ja) 2008-03-31 2011-06-09 フロリダ・ステイト・ユニバーシティ・リサーチ・ファウンデイション・インコーポレイテッド C(10)エチルエステルおよびc(10)シクロプロピルエステル置換タキサン

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2678930B1 (fr) * 1991-07-10 1995-01-13 Rhone Poulenc Rorer Sa Procede de preparation de derives de la baccatine iii et de la desacetyl-10 baccatine iii.
AU2400692A (en) * 1991-07-19 1993-02-23 Hybritech Incorporated Trifunctional compounds having specificity for multi-drug resistant cells
EP0643706A1 (en) * 1991-11-27 1995-03-22 Zynaxis Inc. Compounds, compositions and methods for binding bio-affecting substances to surface membranes of bio-particles
US5426224A (en) * 1993-03-18 1995-06-20 The University Of North Carolina At Chapel Hill Mammalian DNA topoisomerase II inhibitor and method
WO1997024459A1 (en) * 1995-12-29 1997-07-10 Phanos Technologoes, Inc. Method for reducing unwanted cellular adhesions
KR20000010861A (ko) * 1996-05-08 2000-02-25 로렌스 티. 마이젠헬더 탁솔의 제조 방법

Also Published As

Publication number Publication date
IT1319168B1 (it) 2003-09-26
NO20024353L (no) 2002-09-12
US6683109B2 (en) 2004-01-27
ITMI20000553A1 (it) 2001-09-17
WO2001068089A1 (en) 2001-09-20
US20030073734A1 (en) 2003-04-17
JP2003526665A (ja) 2003-09-09
CA2403168A1 (en) 2001-09-20
HK1051973A1 (en) 2003-08-29
SK286849B6 (sk) 2009-06-05
KR100766161B1 (ko) 2007-10-10
CA2403168C (en) 2010-06-15
AU5037701A (en) 2001-09-24
CN1204886C (zh) 2005-06-08
NO329422B1 (no) 2010-10-18
AU2001250377B2 (en) 2004-09-16
RU2002124523A (ru) 2004-01-10
PL357376A1 (en) 2004-07-26
HUP0300198A2 (hu) 2003-06-28
NO20024353D0 (no) 2002-09-12
HUP0300198A3 (en) 2005-02-28
PT1263431E (pt) 2008-08-04
EP1263431A1 (en) 2002-12-11
EP1263431B1 (en) 2008-05-28
KR20020081432A (ko) 2002-10-26
IL151714A0 (en) 2003-04-10
CN1416342A (zh) 2003-05-07
HU229257B1 (en) 2013-10-28
CZ301626B6 (cs) 2010-05-05
SI1263431T1 (sl) 2008-08-31
ES2305067T3 (es) 2008-11-01
SK13112002A3 (sk) 2003-02-04
DK1263431T3 (da) 2008-09-29
ITMI20000553A0 (it) 2000-03-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR100514809B1 (ko) 신규 택산 유도체
FI109795B (fi) Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten 6,7-modifioitujen paklitakseleiden valmistamiseksi
CA2208841C (en) High molecular weight polymer-based prodrugs
RU2134688C1 (ru) Полусинтетический таксан, промежуточные соединения, способы получения и фармацевтическая композиция
Du et al. Synthesis and evaluation of water-soluble docetaxel prodrugs-docetaxel esters of malic acid
IL106023A (en) Peklitaxel's history is related to polymers, their preparation and pharmaceutical preparations that contain them
HU213395B (en) Process for producing bile-acid derivatives and pharmaceutical compositions containing the same
CA2441484A1 (en) Molecular conjugates for use in treatment of cancer
AU2014324634A1 (en) Methods and compositions for treating and/or preventing mucositis
KR19990044409A (ko) 가수분해를 촉진시키는 소수성 탁산 유도체
RU2264393C2 (ru) Конденсированные производные тиоколхицина и баккатина в качестве противоопухолевых агентов
KR19980703031A (ko) 10-데아세틸바카틴III과 10-데아세틸-14 β-하이드록시바카틴III 유도체, 그들의 제조방법 및 그들을 함유한 약제학적 조성물
AU696366B2 (en) 10-deacetyl-14beta-hydroxybaccatine III derivatives, a process for the preparation thereof and formulations containing them
RU2245882C2 (ru) Производные таксана, способы их получения и фармацевтическая композиция
RU2697519C1 (ru) Средство пептидной природы, включающее псма-связывающий лиганд на основе производного мочевины, способ его получения и применение для получения конъюгата с лекарственным и диагностическим агентом
Rao et al. Synthesis and evaluation of [14C]-labelled and fluorescent-tagged paclitaxel derivatives as new biological probes
RU2257379C2 (ru) Производные n-деацетилтиоколхицина и содержащие их фармацевтические композиции
EP1105379A1 (en) Water soluble analogs and prodrugs of paclitaxel
AU2001250377A1 (en) Condensation derivatives of thiocolchicine and baccatin as antitumor agents
CN114539110B (zh) 含有ras/raf蛋白干扰基团的hdac抑制剂及其制备方法
CN114437046B (zh) 5-氟尿嘧啶拼接4-苯胺喹唑啉类化合物及其制备方法与应用
CN104610247A (zh) 一种半合成紫杉烷衍生物及其制备方法和应用

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20150313