SK286849B6

SK286849B6 - Kondenzačné deriváty tiokolchicínu a bakatínu, farmaceutický prostriedok s ich obsahom a ich použitie

Info

Publication number: SK286849B6
Application number: SK1311-2002A
Authority: SK
Inventors: Ezio Bombardelli; Alessandro Pontiroli
Original assignee: Indena S.P.A.
Priority date: 2000-03-17
Filing date: 2001-03-12
Publication date: 2009-06-05
Also published as: IT1319168B1; NO20024353L; US6683109B2; ITMI20000553A1; WO2001068089A1; US20030073734A1; JP2003526665A; CA2403168A1; HK1051973A1; KR100766161B1; CA2403168C; AU5037701A; CN1204886C; NO329422B1; AU2001250377B2; RU2002124523A; PL357376A1; HUP0300198A2; NO20024353D0; HUP0300198A3

Abstract

Opísané sú kondenzačné deriváty N-deacetyltiokolchicínu a 10-deacetylbakatínu III všeobecného vzorca (I), ktoré sú cenné protinádorové lieky.

Description

Oblasť techniky

Predkladaný vynález sa vzťahuje na deriváty A-deacetyltiokolchicínu a 10-deacetylbakatínu III, farmaceutický prostriedok s ich obsahom a ich použitie ako protirakovinových činidiel.

Doterajší stav techniky

Kolchicíny a tiokolchicíny sú známe antiblastické zlúčeniny, ktoré sú schopné destabilizovať mikrotubuly prostredníctvom reakcie s tubulínom.

V súčasnosti sa kolchicín používa na liečenie dny a príbuzných zápalových stavov, ale jeho použitie je kvôli jeho vysokej gastrointestinálnej toxicite obmedzené na kritické štádiá.

Bolo skúmaných veľa kolchicínových alebo tiokolchicínových derivátov, vzhľadom na ich možné použitie ako protinádorové liečivá, ale výsledky výskumov neboli úspešné kvôli často veľmi obmedzenému terapeutickému indexu týchto zlúčenín.

Len jeden kolchicínový derivát, demekolcín, sa v minulosti použil v klinickej praxi na liečenie leukémie, ale s chabým úspechom.

Antiproliferačný účinok taxánových derivátov (paclitaxel a deriváty) taktiež súvisí so schopnosťou ireverzibilné sa viazať na alfa a beta formy tubulínu v mikrotubule. Oxetánová skupina a fenylová skupina na izoserínovom bočnom reťazci sa ukazujú byť najpodstatnejšími, čo sa týka účinku: bakatin, ktorý fakticky nemá izoserínový reťazec, nemá v podstate nijaký antiproliferačný účinok, na rozdiel od paclitaxelu a iných C_n esterov izoserínu, ktoré môžu tvoriť väzbu s dvoma rôznymi miestami mikrotubulu, čím sa zabráni depolymerizácii, a tým sa zabrzdí účinok mitotického deliaceho vretienka.

Teraz sa prekvapujúco zistilo, že zlúčeniny všeobecného vzorca (I), hoci im chýba afinita k tubulínu, majú v krokoch zostavovania a rozkladu mikrotubulov antiproliferačný účinok.

Účinok zlúčenín všeobecného vzorca (I) je preto následkom neočakávaného mechanizmu pôsobenia, ktorý nemohol byť zrejmý zo súčasných znalosti v oblasti protitubulínových liekov.

Podstata vynálezu

Podstatou vynálezu sú deriváty N-deacetyltiokolchicínu a 10-deacetyl-bakatinu ΙΠ všeobecného vzorca (I)

O

R

sch₃ kde n je celé číslo od 0 do 8;

Rje zvyšok všeobecného vzorca a), b), c), d) alebo e)

OAc O OH

a),

SK 286849 Β6

R²-O

^e), kde

R¹ a R², ktoré môžu byť rovnaké alebo rozdielne, sú vodík alebo skupina vzorca

n je výhodne celé číslo od 1 do 7, výhodnejšie 1.

Zlúčeniny podľa predkladaného vynálezu majú silný antimitotický účinok a sú charakterizované vhodným terapeutickým indexom, čo spôsobuje, že sú vhodnými na terapeutickú liečbu rôznych foriem nádorov, takisto ako aj degeneratívnej reumatickej artritídy, na liečbu choroby charakterizovanej nadmernou proliferá10 ciou a abnormálnou migráciou leukocytov.

SK 286849 Β6

Zlúčeniny všeobecného vzorca (I) majú cytotoxicitu porovnateľnú s cytotoxicitou najúčinnejších protinádorových liekov, pričom majú významne širšie spektrum pôsobenia, obzvlášť proti bunkám, rezistentným na známe lieky.

Zlúčeniny všeobecného vzorca (I) sa pripravia reakciou .V-deacetyltiokolchicínu s reaktívnymi derivátmi dikarboxylovej kyseliny v suchých rozpúšťadlách za takých podmienok, aby sa získal TV-monoacylačný produkt, ktorý následne reaguje s derivátom bakatínu III, voliteľne chráneného v polohách 7, 13 a 10, v závislosti od požadovanej zlúčeniny, v prítomnosti vhodného kondenzačného činidla, akým je napríklad dicyklohexylkarbodiimid. Akékoľvek voliteľne prítomné ochranné skupiny sa odstránia a/alebo hydroxylové skupiny na zvyšku bakatínu ΙΠ sa selektívne acylujú, čo priamo poskytne zlúčeniny všeobecného vzorca (I).

Keď v zlúčenine všeobecného vzorca (I) je R skupina vzorca c), môže byť vďaka reaktivite hydroxylovej skupiny v izoserínovom reťazci reakcia uskutočňovaná bez predchádzajúceho chránenia iných hydroxylových skupín, ktoré sú prítomné v taxánovej zlúčenine.

Príklady vhodných reaktívnych derivátov dikarboxylovej kyseliny zahrnujú acylhalogenidy, chloridy kyselín, reaktívne anhydridy alebo estery.

Alternatívne, taxánové deriváty môžu byť taktiež acylované s dikarboxylovou kyselinou a výsledný produkt môže byť kondenzovaný s N-deacetyltiokolchicínom.

Zlúčeniny podľa predkladaného vynálezu sú užitočné na liečenie proliferačných chorôb a obzvlášť nádorov rôzneho pôvodu, reumatickej artritídy alebo iných degeneratívnych chorôb, pri ktorých je požadované antiproliferačné a protizápalové pôsobenie.

Na tento účel budú zlúčeniny všeobecného vzorca (I) podávané vo forme farmaceutických prostriedkov, vhodných na orálne, parenterálne, epikutánne alebo transdermálne podanie. Dávka zlúčeniny všeobecného vzorca (I) sa bude pohybovať v rozmedzí od 1 do 100 mg/m² telesnej plochy, v závislosti od spôsobu podania. Zlúčeniny budú výhodne podávané orálne.

Príklady farmaceutických prostriedkov zahrnujú kapsuly, tabletky, ampuly, krémy, roztoky, granuláty.

Nasledujúce príklady ilustrujú vynález detailnejšie.

Použité skratky:

Ac - acetyl Bz - benzyl Boe - terc-butyloxykarbonyl Ph - fenyl

Príklady uskutočnenia vynálezu

Príklad 1

a) 100 mg deacetyltiokolchicínu (0,268 mmol, molekulová hmotnosť 373 g/mol) sa rozpustilo v 5 ml suchého dioxánu a potom sa pridalo 27 mg anhydridu kyseliny jantárovej (0,268 mmol, molekulová hmotnosť 100 g/mol) a reakčná zmes sa ohriala na 60 °C počas 5 hodín, TLC kontrola: AcOEt/MeOH 4:1. Dioxán sa odparil a produkt sa bez čistenia použil na následnú reakciu. Získalo sa 130 mg produktu.

b) 126 mg produktu z kroku a) (0,268 mmol, molekulová hmotnosť 473 g/mol) sa rozpustilo v 8 ml suchého toluénu. Pridalo sa 187 mg 7-tes-bakatínu (0,268 mmol, molekulová hmotnosť 700 g/mol), 66 mg DCC (0,321 mmol, molekulová hmotnosť 206 g/mol) a 13 mg DMAP (0,1 mmol, molekulová hmotnosť 122 g/mol). Zmes sa premiešavala pri teplote miestnosti približne 12 hodín, až pokiaľ nevymizli východiskové produkty. TLC kontrola: AcOEt/MeÓH 4:1. Zmes sa prefiltrovala cez Celíte a odparila sa do sucha. Surový produkt sa čistil na stĺpci (silikagél), s použitím zmesi AcOEt/hexán 9 : 1 ako eluenta, čím sa získalo 120 mg kondenzačného produktu s ochrannými skupinami a 80 mg produktu, už zbaveného ochranných skupín v polohe 7.

c) 120 mg produktu z kroku b) (0,103 mmol, molekulová hmotnosť 1 155 g/mol) sa rozpustilo v 5 ml zmesi MeOH/AcCl (5 ml metanolu a 35 μΐ AcCl). Reakcia sa ukončila v priebehu 15 minút. K zmesi sa pridal hydrogenuhličitan a zmes sa extrahovala s AcOEt, čím sa získalo 100 mg produktu všeobecného vzorca (I), kde n je 1 a R je zvyšok vzorca a).

Príklad 2

a) 100 mg 10-O-sukcinyl-7-tes-bakatínu III (0,14 mmol, molekulová hmotnosť 699 g/mol) a 54 mg N-deacetyltíokolchicínu (0,14 mmol, molekulová hmotnosť 373 g/mol) sa rozpustilo v 5 ml suchého toluénu s prídavkom 2 ml metylénchloridu. Pri teplote miestnosti sa pridalo 31 mg DCC (0,15 mmol, molekulová hmotnosť 206 g/mol) a 8,5 mg DMAP (0,07 mmol, molekulová hmotnosť 122 g/mol). Po jednom dni sa reakčná zmes prefiltrovala cez Celíte, premyla sa toluénom a odparila do sucha. Čistenie bleskovou chromatografiou na stĺpci (silikagél, eluent: CH₂Cl₂/MeOH 25 :1) poskytla 70 mg produktu.

SK 286849 Β6

b) 200 mg produktu z kroku a) (0,213 mmol) sa rozpustilo v 14 ml suchého toluénu. Pridalo sa 183 mg oxazolidínového derivátu vzorca

v ďalšom texte označovaného ako SHA-9 (0,426 mmol), 88 mg DCC (0,426 mmol) a 26 mg DMAP (0,213 mmol) a zmes sa premiešavala pri teplote miestnosti. TLC kontrola: CH₂Cl₂/MeOH 25 : 1. Po 4 hodinách sa reakčná zmes prefiltrovala cez Celíte a čistila sa stĺpcovou chromatografiou, čím sa získalo 240 mg produktu.

c) 160 mg produktu z kroku b) (0,12 mmol, molekulová hmotnosť 1338 g/mol) sa rozpustilo v 3,2 ml roztoku, získaného rozpustením 70 μΐ AcCl v 10 ml MeOH. Po pol hodine sa k reakčnej zmesi pridal 5%-ný NaHCO₃, extrahovala sa s CH₂C1₂, vysušila sa a rozpúšťadlo sa odparilo. Čistenie bleskovou chromatografiou poskytlo 97 mg zlúčeniny všeobecného vzorca (I), kde n je 1 a Rje zvyšok vzorca b).

Príklad 3 mg paclitaxelu (0,038 mmol, molekulová hmotnosť 1824 g/mol) sa rozpustilo v 5 ml suchého dioxánu. Pridal sa DCC (1,5 ekvivalentov), DMAP (5 % mol.) a produkt z príkladu la). Zmes sa premiešavala 2 hodiny pri teplote 110 °C, potom sa pridalo ďalších 10 mg produktu z príkladu la) a 11 mg DCC. Nato sa reakčná zmes ponechala 48 hodín pri teplote miestnosti, potom sa ohrievala pri teplote 110 °C ďalších 24 hodín. Rozpúšťadlo sa odparilo a zvyšok sa čistil bleskovou chromatografiou (AcOEt/MeOH 99 : 1), čím sa získalo 21 mg zlúčeniny všeobecného vzorca (I), kde n je 1 a Rje zvyšok vzorca c).

Príklad 4

a) K roztoku 7-sukcinyl-10,13-di-tes-bakatínu III (390 mg, 0,479 mmol, molekulová hmotnosť 814 g/mol) v 10 ml THF sa pridal roztok TBAF (IM v THF, 0,96 mmol) pri teplote 0 °C. Zmes sa 1 hodinu a 30 minút ponechala stáť pri teplote 0 °C, potom pri teplote miestnosti 2 hodiny. Potom sa pridal 1 ekvivalent TBAF a reakcia pokračovala, pokiaľ sa neukončila eliminácia ochranných skupín. K reakčnej zmesi sa pridala voda a extrahovala sa s AcOEt; vodná fáza sa okyslila IN HC1 a extrahovala AcOEt, čím sa získalo 350 mg produktu.

b) Zlúčenina z kroku a) (0,479 mmol) sa nechala reagovať s TIO-NH₂ (0,479 mmol), DCC (1,5 ekvivalentov) a DMAP (50 % mol.) v zmesi toluén-THF v priebehu 1 hodiny. Reakčná zmes sa prefiltrovala cez Celíte a čistila sa pomocou stĺpcovej chromatografie (CH₂Cl₂/MeOH 25 : 1), čím sa získala zlúčenina všeobecného vzorca (I), kde n je 1 a R je zvyšok vzorca d).

Príklad 5

200 mg zlúčeniny z príkladu 4 (0,206 mmol) sa rozpustilo v 14 ml zmesi toluén-suchý THF. K zmesi, ktorá sa premiešavala pri teplote miestnosti, sa pridalo 177 mg SHA-9 (2 ekvivalenty), 84 mg DCC (2 ekvivalenty) a 26 mg DMAP (0,206 mmol). TLC kontrola: CH₂Cl₂/MeOH 25 : 1. Po 4 hodinách sa reakčná zmes prefiltrovala cez Celíte a čistila sa na chromatografickom stĺpci. Výsledný produkt sa rozpustil v 4,8 ml roztoku 70 μΐ AcCl v 10 ml MeOH. Po pol hodine sa k reakčnej zmesi pridal 5 %-ný NaHCO₃ a zmes sa extrahovala CH₂C1₂. Extrakt sa vysušil a rozpúšťadlo sa odparilo. Zvyšok sa čistil pomocou bleskovej chromatografie, čím sa získalo 110 mg zlúčeniny všeobecného vzorca (I), kde n je 1, Rje zvyšok vzorca e), kde R¹ a R² sú skupiny vzorca

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Kondenzačné deriváty tiokolchicínu a bakatínu všeobecného vzorca (I)

SCHj

O,

5 kde n je celé číslo od 0 do 8;

R je zvyšok všeobecného vzorca a), b), c), d) alebo e)

SK 286849 Β6 ^β>, kde

R¹ a R², ktoré môžu byť rovnaké alebo rozdielne, sú vodík alebo skupina vzorca

5
2. Kondenzačné deriváty tiokolchicínu a bakatínu podľa nároku 1, kde n je celé číslo od 1 do 7.
3. Kondenzačné deriváty tiokolchicínu a bakatínu podľa nároku 2, kde n je 1.
4. Farmaceutický prostriedok, vyznačujúci sa tým, že obsahuje kondenzačný derivát tiokolchicínu a bakatínu podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 3 v zmesi s vhodným nosičom.
5. Použitie kondenzačných derivátov tiokolchicínu a bakatínu podľa nároku 1 na výrobu lieku s antiproli10 feračným účinkom.