FI109795B

FI109795B - Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten 6,7-modifioitujen paklitakseleiden valmistamiseksi

Info

Publication number: FI109795B
Application number: FI935381A
Authority: FI
Inventors: Vittorio Farina; Shu-Hui Chen; Gregory Roth; John Kadow
Original assignee: Squibb Bristol Myers Co
Priority date: 1992-12-04
Filing date: 1993-12-01
Publication date: 2002-10-15
Also published as: FI935381A; FI935381A0; CZ287599B6; EP0600517A1; PT600517E; HUT65640A; DK0600517T3; HU221817B1; AU5212193A; PL301305A1; NO934277L; IL107819A; ATE195939T1; JP3360186B2; CA2109861A1; NZ250343A; EP0600517B1; SG55014A1; ES2149188T3; CN1049433C

Description

109795

Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten 6,7-modifioitu-jen paklitakseleiden valmistamiseksi

Keksinnön alue 5 Tämä keksintö koskee menetelmää yhdisteiden valmis tamiseksi, joilla on kasvainten vastaisia aktiivisuuksia.

Keksinnön taustaa TAXOLr (paklitakseli) eristettiin ensimmäiseksi läntisen marjakuusen, Taxus brevifolian Nut. (Taxaceae), run-10 gon kaarnasta ja sillä on seuraava rakenne (jossa on ilmoitettu (C)2'-, 6-, 7- ja 3-asemat): ?l °*u /9 2«

Ms'ip ft c5 υ \+

^ HO i AC

-0 C0C6H5 20

Se hyväksyttiin hiljattain munasarjasyövän hoitoon; .. ja rinta-, koolon- ja keuhkosyöpiin liittyvistä tutkimuk- * sista on saatu lupaavia tuloksia. Katso: D.K. ja Donehow- ’ ·* er, R.C. Ann. Int. Med. , 1989, 111, s. 273.

» · « l.: · 25 Paklitakseli eroaa muista antimitoottista lääkkeis- i ’.· tä sikäli, että se edistää stabiilien mikrotiehyiden ko- • · · V · koontumista tubuliinista myös muuten epäsuotuisissa olo suhteissa. Lääke sitoutuu mikrotiehyisiin stabiloiden ne depolymerisaatiolta sekoittaen siten tubuliini-mikrotie-.***. 30 hyttasapainon ja niin muodoin inhiboiden mitoosia. Pakli- takselin toimintamekanismia, toksikologiaa, kliinistä te-*' ” hokkuutta jne. on tarkasteltu useissa artikkeleissa kuten

Rowinsky et al.:n artikkelissa Taxol: A Novel Investiga-tional Antimicrotubule Agent, J. Natl. Cancer Inst., 82: ....: 35 s. 1 247 - 1 259 (1990) .

2 109795

Syövän hoidossa merkittävän tehokkuuden toteamisen vuoksi monet laboratoriot ovat aloittaneet ohjelmia pak-litakselianalogien suunnittelemiseksi parempien farmakologisten profiilien etsinnässä. Tällaisista ohjelmista oli 5 tuloksena esimerkiksi TaxotereR:n löytäminen, jolla on kaava 9. H0V/?h f H HO j Se 15 C 0 C 6^ 5

Katso Biologically Active Taxol Analogues with Deleted A-Ring Side Chain Substituents and Variable C-2' Configurations, J. Med. Chem. , 34, s. 1 176 - 1 184 (1991); Rela- 20 tionships between the Structure of Taxol Analogues and . Their Antimitotic Activity, J. Med. Chem., 34, s. 992 - I / 998 (1991) .

'· ·* Tämä keksintö koskee menetelmää rakenteellisesti • · · * uusien paklitakselijohdannaisten valmistamiseksi, joilla • · :.· · 25 on kasvainten vastaisia aktiivisuuksia.

t · I

• ' Keksinnön yhteenveto

Tämän keksinnön mukainen menetelmä tarjoaa paklitakseli johdannaiset, joilla on kaava I

• o

i Ra O

·"·; 30 Λ / Rb k^^Ao.....(V^L i i '···' = \

OH

; ; HO : ÖAC

35 i ÖCOCgHg 3 109795 jossa R1 on -CORz, jossa Rz on RO- tai R; R2 on C^g-alkyyli, C2.6-alkenyyli, C2_6-alkynyyli, C3_6- sykloalkyyli tai radikaali, jolla on kaava -W-Rx, jossa W 5 on sidos, C2_6-alkeenidiyyli tai -(CH2)t-, jossa t on 1 - 6; ja Rx on naftyyli, fenyyli tai heteroaryyli, ja lisäksi Rx voi olla mahdollisesti substituoitu 1-3 samalla tai erilaisella Ci.g-alkyylillä, C-^g-alkoksilla, halogeenilla tai -CF3 - ryhmällä ; 10 Ra on -OCOR, H, OH, -OR, -0S02R, -OCONR°R, -OCONHR, -OCOO-(CH2) tR tai -OCOOR;

Rb ja Rc merkitsevät kumpikin hydroksia tai ne muodostavat yhdessä sidoksen hiiliatomien kanssa, joihin ne ovat kiinnittyneet; ja 15 R ja R° merkitsevät toisistaan riippumatta C-^g-alkyyliä, C2.6-alkenyyliä, C3_6-sykloalkyyliäi C2_6-alkynyyliä tai fe-nyyliä, joka on mahdollisesti substituoitu 1-3 samalla tai erilaisella C1_6-alkyylillä, C^g-alkoksilla, halogeenilla tai -CF3-ryhmällä.

20 Tämän keksinnön mukaisella menetelmällä valmistet- , tuja yhdisteitä voidaan käyttää myös farmaseuttisissa for- mulaatioissa (koostumuksissa) ja menetelmässä nisäkkäiden • · · *· ·’ kasvainten hoitamiseksi.

• · <

Keksinnön yksityiskohtainen kuvaus :.· · 25 Tämän keksinnön mukaisella menetelmällä valmiste- • · ·

j ‘ taan paklitakselijohdannaiset, joilla on kaava I

• · ·

Ra P \ / Rb R1NH O 9¾ / \CHä = pc ? 30 ,λΛ.....hCfT , : ·· OH y\/ Ή/λ/Ο .···. HO ÖAc O]1 ÖCOCgHg 35 « 109795 jossa R1 on -COR*, jossa Rz on RO- tai R; R2 on C^-alkyyli, C2_6-alkenyyli, C2_6-alkynyyli, C3_6-syklo-alkyyli tai radikaali, jolla on kaava -W-Rx, jossa W on 5 sidos, C2_6-alkeenidiyyli tai -(CH2)t-, jossa t on 1 - 6; ja Rx on naftyyli, fenyyli tai heteroaryyli, ja lisäksi Rx voi olla mahdollisesti substituoitu 1-3 samalla tai erilaisella C^g-alkyylillä, C^-alkoksilla, halogeenilla tai -CF3-ryhmällä; 10 Ra on -OCOR, H, OH, -OR, -0S02R, -OCONR°R, -OCONHR, -OCOO-(CH2) tR tai -OCOOR;

Rb ja R° merkitsevät kumpikin hydroksia tai ne muodostavat yhdessä sidoksen hiiliatomien kanssa, joihin ne ovat kiinnittyneet; ja 15 R ja R° merkitsevät toisistaan riippumatta C^-alkyyliä, C2_6-alkenyyliä, C3_6-sykloalkyyliä, C2.6-alkynyyliä tai fe-nyyliä, joka on mahdollisesti substituoitu 1-3 samalla tai erilaisella C^g-alkyylillä, C^-alkoksilla, halogeenilla tai -CF3-ryhmällä.

20 Tässä patenttihakemuksessa alaindeksin numerot sym bolin "C" jälkeen merkitsevät hiiliatomien määrää, jonka kyseessä oleva ryhmä voi sisältää. Esimerkiksi C^-alkyyli ·. .· viittaa haarautumattomiin ja haarautuneisiin alkyyliryh- • miin, joissa on 1 - 6 hiiliatomia, ja tällaisia ryhmiä : | 25 ovat mm. metyyli, etyyli, n-propyyli, isopropyyli, n-but-yyli, t-butyyli, n-pentyyli, n-heksyyli, 3-metyylipentyyli ;‘j‘; tai niiden kaltaiset alkyyliryhmät; C2.6-alkenyyli viittaa haarautumattomiin tai haarautuneisiin alkenyyliryhmiin : kuten vinyyliin, allyyliin, 1-propenyyliin, isopropenyy- I..’ 30 liin, 1-butenyyliin, 2-butenyyliin, 3-butenyyliin, metal- lyyliin, 1,1-dimetyyliallyyliin, 1-heksenyyliin, 2-hekse- ’·· nyyliin tai niiden kaltaisiin ryhmiin; C3_6-sykloalkyyli : : viittaa syklopropyyliin, syklobutyyliin, syklopentyyliin tai sykloheksyyliin; C2.6-alkynyyli viittaa haarautumatto-35 miin tai haarautuneisiin alkynyyliryhmiin kuten etynyy- s 109795 liin, propargyyli-(2-propynyyliin), 1-propynyyliin, 2-bu-tynyyliin, 3-butynyyliin, 1-heksynyyliin, 4-metyyli-2-pen-tynyyliin ja niiden kaltaisiin ryhmiin; C2_6-alkeenidiyyli viittaa ryhmiin kuten etyleeni-1,2-diyyliin (vinyleeniin), 5 2-metyyli-2-buteeni-l,4-diyyliin, 2-hekseeni-l,6-diyyliin ja niiden kaltaisiin ryhmiin; C1.6-alkyylioksi (alkoksi) viittaa haarautumattomiin tai haarautuneisiin alkyylioksi-ryhmiin kuten metoksiin, etoksiin, n-propoksiin, i-propok-siin, n-butoksiin, t-butoksiin (t-butyylioksiin), n-pen-10 tyylioksiin, n-heksyylioksiin tai 3-metyylipentyylioksiin muutamia mainitaksemme; heteroaryyli viittaa viisijäseniseen aromaattiseen renkaaseen, joka sisältää ainakin yhden heteroatomin, joka on valittu ryhmästä, jonka muodostavat rikki, happi ja typpi, mutta enintään 1 rikin, 1 hapen tai 15 4 typpiatomia; heteroaryyli viittaa myös kuusijäseniseen aromaattiseen renkaaseen, joka sisältää 1-4 typpiatomia; ja halogeeni viittaa fluoriin, klooriin, bromiin tai jodiin. Esimerkkejä heteroaryyleistä ovat mm. tienyyli, fur-yyli, pyrrolyyli, imidatsolyyli, pyratsolyyli, tiatsolyy-20 li, isotiatsolyyli, oksatsolyyli, isoksatsolyyli, triat- solyyli, tiadiatsolyyli, oksadiatsolyyli, tetratsolyyli, tiatriatsolyyli, oksatriatsolyyli, pyridyyli, pyrimidyyli, pyratsinyyli, pyridatsinyyli, triatsinyyli, tetratsinyyli • · · • ja niiden kaltaiset renkaat. Atsetidinoni viittaa atseti- : \ j 25 din-2-oniin. Tässä patenttihakemuksessa kaikki symbolit, jotka on kerran määritelty, säilyttävät saman merkityksen, ;‘J’; kunnes ne määritellään uudelleen.

Kaavan I mukaisen yhdisteen synteesi voidaan tote-: uttaa useilla erilaisilla menetelmillä. Seuraavat synteet- 30 tiset menetelmät, kuvaukset ja spesifiset esimerkit on • · tarkoitettu ainoastaan valaisemistarkoitukseen, eikä niitä • '·· tule pitää millään tavalla tämän keksinnön mukaisten yh- : disteiden valmistustapoja muilla menetelmillä rajoittavi- ,·’·. na. Tässä esitettyjä menetelmiä voidaan helposti modifioi- • · · 35 da ja/tai soveltaa muiden kaavan I mukaisten yhdisteiden 6 109795 valmistukseen, joita yhdisteitä ei ole spesifisesti esitetty.

Yhdessä toteutusmuodossa kaavan Ia mukainen yhdiste voidaan valmistaa kaavion I mukaisella menetelmällä. Kun 5 kaaviossa kaavan Ha mukaista yhdistettä käsitellään DAST:lla, voidaan saada kaavan lila mukainen yhdiste. DAST-reaktio voidaan suorittaa useissa erilaisissa liuot-timissa, joita ovat mm. metyleenikloridi, tetrahydrofu-raani (THF), dietyylieetteri, tolueeni ja niiden mikä ta-10 hansa yhdistelmä. Kaavan lila mukaisen yhdisteen lisäksi voidaan saada kaavan IVa ja Va mukaisia yhdisteitä sivutuotteina DAST-reaktiossa. On todettu, että suurin yhdisteen lila suhde yhdisteeseen IVa tai Va saadaan, kun reaktio suoritetaan THF:n ja dietyylieetterin seoksessa. Kun 15 kaavan lila mukaisesta yhdisteestä poistetaan Cbz-ryhmä, saadaan kaavan Ia mukainen yhdiste.

Kaavion II yleisemmässä toteutusmuodossa, kun kaavan Ia mukaista yhdistettä käsitellään esteripelkistimellä kuten tetrabutyyliammoniumboorihydridillä, C-13-sivuket-20 julle tapahtuu pelkistävä lohkeaminen, jolloin saadaan kaavan Via mukainen yhdiste. Kaavan Via mukaiselle yhdis-: : teelle voidaan suorittaa kytkentäreaktio kaavan VII mu- kaisen atsetidinonin kanssa oleellisesti samalla tavalla • · · . ' : kuin kaavion IV vaiheessa (a) (katso edellä), jolloin : 25 saadaan kaavan VIII mukainen yhdiste. Poistamalla hydrok- • 4 · · sin suojaryhmä R3 voidaan saada kaavan I1 mukainen yhdiste.

» 4 .‘j·. Tässä käytettyinä hydroksin suojaryhmiä ovat ryh mät, joita voidaan käyttää hydroksifunktionaalisuuden sal-. . paamiseen tai suojaamiseen, ja alan ammattimiehet tuntevat 30 ne hyvin. Edullisesti mainittuja ryhmiä ovat ryhmät, jotka • · *;’ voidaan poistaa menetelmillä, jotka eivät aiheuta molekyy- j Iin loppuosan oleellista vahingoittumista. Esimerkkejä tällaisista helposti poistettavissa olevista hydroksin Λ suojaryhmistä ovat mm. klooriasetyyli, metoksimetyyli, » f · ‘ 35 2,2,2-trikloorietyylioksimetyyli, 2,2,2-trikloorietyyliok- v 109795 sikarbonyyli, tetrahydropyranyyli, tetrahydrofuranyyli, t-butyyli, bentsyyli, p-nitrobentsyyli, p-metoksibentsyyli, difenyylimetyyli, tri-C^g-alkyylisilyyli, trifenyylisilyy-li, 1-etoksietyyli ja niiden kaltaiset. Edullisia suoja-5 ryhmiä paklitakselin ja sen johdannaisen 2'-hydroksiryhmälle ovat 1-etoksietyyli, trietyylisilyyli, 2,2,2-tri- kloorietyylioksikarbonyyli ja bentsyylioksikarbonyyli; vielä edullisempi ryhmä on bentsyylioksikarbonyyli, joka voidaan poistaa sopivasti katalyyttisellä hydrogenolyysil-10 lä. Muita sopivia suojaryhmiä, joita voidaan käyttää, on kappaleessa 2 julkaisussa "Protecting Groups in Organic Synthesis", toinen painos, Theodora W. Greene ja Peter G. M. Wuts (1991, John Wiley & Sons).

Toisessa yleisessä toteutusmuodossa kaavan II mu-15 kainen yhdiste voidaan saattaa reagoimaan DAST:n kanssa kuten kaavion I vaiheessa (a), jolloin saadaan kaavan III mukainen yhdiste. Kaavio III. Tässä käytettynä Rj on -OCOR, H, -OR, -OR3, -0S02R, -OCONR°R, -OCONHR, -OCOO(CH2)tR tai -OCOOR. Poistamalla hydroksin suojaryhmä(t) R3 saadaan kaa- 20 van I2 mukainen yhdiste.

Monet yhdisteet, jotka kuvataan kaavalla II, ovat ’ * jo alalla tunnettuja ja ne voidaan saada helposti käyttäen ·.'!·' tunnettuja menetelmiä pienillä muutoksilla tai niitä il- » man. Esimerkiksi kaavan II mukainen yhdiste, jossa Rj on ; : : 25 vety, voidaan valmistaa yleisillä menetelmillä, jotka on kuvattu PCT-hakemuksessa WO 93/06 093, julkaistu 1. huhti-.”·. kuuta 1993.

t · ·

Asian valaisemiseksi edelleen kaavan II mukaiset . . yhdisteet voidaan valmistaa helposti kaavion IV menetel- !..* 30 mällä. Kaavion vaiheessa (a) atsetidinoni VII saatetaan reagoimaan kaavan X mukaisen yhdisteen (bakkatiini-III-: *.· johdannaisen) kanssa, jossa R4 on hydroksin suojaryhmä.

Kaavan VII mukaisten atsetidinonien yleinen ryhmä tunne-taan hyvin. Niiden synteeseistä tai niiden prekursorien * l l 35 synteeseistä ovat raportoineet esimerkiksi Holton EP-pa- 8 109795 tenttihakemuksessa O 400 971 A2 , julkaistu 5. joulukuuta 1990; Holton EP-patenttihakemuksissa 0 534 709 AI, 0 534 708 AI ja 0 534 707 AI, jotka on kaikki julkaistu 31. maaliskuuta 1993; myös Holton PCT-patenttihakemuksessa 5 WO 93/06079, julkaistu 1. huhtikuuta 1993; Ojima et ai. julkaisussa Tetrahedron, 48., nro 34, s. 6 985 - 7 012 (1992); Journal of Organic Chemistry, 56, s. 1 681 - 1 683 (1991); ja Tetrahedron Letters, 33., nro 39, s. 5 737 -5 740 (1992); Brieva et ai. julkaisussa J. Org. Chem. , 58., 10 s. 1 068 - 1 075; Palomo et ai. julkaisussa Tetrahedron

Letters, 21/ nro 44, s. 6 429 - 6 432 (1990); EP-patentti-hakemuksessa 552 041, julkaistu 21. heinäkuuta 1993; ja samanaikaisesti vireillä olevassa US-patenttihakemukses-samme sarjanro 092 170, tehty 14. heinäkuuta 1993. Mene-15 telmät, joita voidaan helposti soveltaa muunnelmiin muiden kaavan VII piiriin kuuluvien atsetidinonien valmistamiseksi, joita ei kuitenkaan ole spesifisesti tässä tai edellä mainituissa kahdessatoista viittauksessa esitetty tai muualla raportoitu, ovat kenelle tahansa alan ammattimiehelle 20 ilmeisiä.

EP-patenttihakemuksissa 0 400 971 A2, 0 534 709 AI, * : 0 534 708 AI ja 0 534 707 AI; ja julkaisuissa Tetrahedron, 48., nro 34, s. 6 985 - 7 012 (1992) ja Tetrahedron Let- . ' I ters, 34., nro 26, s. 4 149 - 4 152 (1993) kuvataan myös ; 25 menetelmiä, joilla kaavan VII mukaisten atsetidinonien • « · · "·*. ryhmä saatetaan reagoimaan bakkatiini-III - j ohdannaisten .”·. tai niiden metallialkoksidien (C)13-hydroksiryhmän kanssa, * · · jolloin saadaan paklitakselianalogeja, joissa on erilaisia . . (C)13-ketjuja. Kaavion IV vaiheessa (a) on edullista muut- » § · 30 taa (C)13-hiilen hydroksiryhmä metallialkoksidiksi ennen * · ·;·’ kytkentäreaktiota . Mainitun metallialkoksidin metallikati- : '.. oni valitaan edullisesti ryhmän Ia tai Ha metalleista.

Halutun metallialkoksidin muodostus voidaan toteuttaa saattamalla kaavan II mukainen yhdiste reagoimaan vahvan ' *, 35 metalliemäksen kuten litiumdi-isopropyyliamidin, C^g-alkyy- 9 109795 lilitiumin, litiumbis(trimetyylisilyyli)amidin, fenyylili-tiumin, natriumhydridin, kaliumhydridin, litiumhydridin tai niiden kaltaisen emäksen kanssa. Esimerkiksi kun halutaan saada litiumalkoksidi, kaavan II mukainen yhdiste 5 voidaan saattaa reagoimaan n-butyylilitiumin kanssa iner-tissä liuottimessa kuten tetrahydrofuraanissa.

Kaavan X mukainen yhdiste on joko alalla tunnettu tai se voidaan saada helposti tunnetuilla menetelmillä pienillä muutoksilla tai ilman niitä. Esimerkiksi kaavan X 10 mukainen yhdiste, jossa R4 on trietyylisilyyli ja Rj on asetyylioksi, on esitetty US-patentissa nro 4 924 Oli, myönnetty Denis et ai:lie 8. toukokuuta 1990. Lisäksi kuten kaaviossa V kun kaavan IX mukainen yhdiste saatetaan reagoimaan yhdisteen RL, RC(=0)L, R(CH2) cOC(=0)L, R0C(=0)L, 15 LS02R, LC0NR°R, LCONHR, 0=C=N-R tai niiden anhydridijohdannaisen kanssa, jossa L on tavallinen poistuva ryhmä kuten kloori, bromi, mesyyli, trifluorimetaanisulfonyyli tai tosyyli, voidaan saada kaavan X1 mukainen yhdiste, joka kuuluu kaavan X piiriin. Tässä käytettynä Rm on -OR, -OCOR, 20 -0S02R, -OCONR°R, -OCONHR, -OCOO (CH2) tR tai -OCOOR. Kaavion V menetelmässä tarvitaan tavallisesti emäs aluksi deproto-: * noimaan C-10-hydroksiryhmän protoni. Erityisen käyttökel- poinen emäs vaiheessa (a) on vahva emäs kuten C-^g-alkyyli-. litium, litiumbis(trimetyylisilyyli)amidi tai niiden kal- • 25 täinen emäs, jota käytetään noin 1,1 ekvivalentin määränä.

Deprotonointi emäksellä suoritetaan edullisesti aprootti- • sessa liuottimessa kuten tetrahydrofuraanissa alhaisessa lämpötilassa tavallisesti välillä -40 °C - 0 °C. Kaavan IX . . mukaisen yhdisteen synteesi, jossa kaavassa R4 on trietyy- 30 lisilyyli, on kuvattu US-patentissa nro 4 924 011, myön-·;·* netty Denis et ai:lie 8. toukokuuta 1990. Kaavan IX mukai- : set yhdisteet, joissa R4 on muu kuin trialkyylisilyyli, ovat joko tunnettuja tai ne voidaan valmistaa helposti menetelmillä, jotka ovat kenelle tahansa alan ammattimie- li· ' 35 helle ilmeisiä.

tili» 10 109795

Kuten kaaviossa VI on valaistu, kaavan I3 mukainen yhdiste voidaan valmistaa saattamalla kaavan XIII mukainen yhdiste reagoimaan osmiumtetraoksidin ja 4-metyylimorfo-liini-N-oksidin (NMO:n) kanssa ja seuraavaksi poistamalla 5 hydroksin suojaryhmä R3 kaavan XII mukaisesta yhdisteestä.

I I

f · * · t I « » u 109795

Kaavio I

c «* OAc o

3 Jl \ / OH

ΡΙΓ^Η o c^3 ) Vaihe (a)

<v<^N^S>···/ VYL jI

5 I \_/ 'CHj/N^X dast OCbZ /Ύ/ *· :\/0 HO : ; = OAc OCOCgHs 10 j? <^c O I OAC o 15 OCbz '—7\// h :\^° ÖCbz '—T^°y o Π° j ÖAc HO 1 L· ÖCOCgHj ÖCOCgHj IVa

Ilia 20 0 1 °\ / ? : ”: ph'^'NH o C\^__/ \ ...../

' *, ·. OCbz y\7 H^/O

! :* ”° j ä>Ac • · 25 ϊ • · Va OCOCgHs , * ’ j? °AC o rH 's—/ ch.

Ilia Vaihe <b> Γ Ph f f \L/\K, :. ‘1: o...../ YJLJv

.,, oft i \_/ V

* : ου oh yr\/ & V° HO ! ^ ! " 0COC6H5 ;”’: la ’ !: 35

Kaavio II

12 109795 X \c ° 5 CVY^NH 0 CHa y-fCJ, Γ jl ®^5 : \ / WN^\ -► ÖH “A>. / H iV/° „ ., , .

J \/ ;V^ Vaihe (a) H° £ =.

: OAc OCOCgHj 10 Ia OAC o r5°^ ./*

CH, > (CH, ΓΊ VH

15 v^Y^S

7==\. ch, il o R

HO / X JL Jl--► ' 7\ / H i\_/° Vaihe <b) Η° : Ä.

ÖCOCgHg 20

Via

:*" * OAc O

R1 NH O ^ / VrAsj.

.. . ^ W ^ Vaihe(c) , ! R i ° \ / R3:n poisto : 25 ör3 y’V/ h

HO : =A

; · ; : OAc ;*·*: öcocgHs * VIII : * > .•‘.30 OAc o * * * pu ^-$ CH3 * ζ \J^A^ *.. · ’ ÖH &i\/0 HO : = ; : ; ; oac 35 öcoCjJh5 i1

Kaavio 111 13 109795 oi p

K \ / OH

R’NH O C^3 ) \C^jT

N— ^^1 Vaihe (a)

- , '-/. X*Yh^\\ DAST

OR3 /\7 H -- V/O

HO : 0Ac 10 ÖCOC^Hs

II

Rj 9 R1 NH O C^3 χ R2/\/®\0 / \yn, vaihe (b) OR3 ' R3:n poisto HO : OAc 20 ÖCOCgHg ...: m • t «t · * • · * * · • «

Li’: 25 Ra o : R^H^^O^ S^3

OH

:' ·, i ho : OAc

30 I

\ * ÖCOCgHj !'·;· t * I · I * * » I » ' » I * »

Kaavio IV

14 109795 5 Λ P ^ CHj )-fCHM' HO.../ J ^°\ Λ, VI1 : OAc .--- ÖCOCgHs Vaihe (a)

X

ί O ^ 1 c \ Z' OR4 15 J^NH O CBj /- R!,-kJL / X/Nl n ' Οΐ“··( Vf I I 4 &R3 V/ ,QVtvA - :n poisto 7\ / H .0 ! ~

Ho η; z\^ Vaihe (t>) : ÖAc 20 ÖCOCgHg

XI

> 1 « » » I $ ( · • ‘ V Rj o

r . \ // OH

: ; i 25 S^3 ^ ·' Ör3 '~~7<\/h1V/0 ho : i 1 l ÖAc 30 =οαχ1 'm.1 11

> t I I I

1 | I i |

» I

Kaavio V

15 109795 c OH O or4 ö chj V-f<*yr H0"”'\__/^chi R°RNC(=0)L, /\y H jV° RC(=OJL, ROC(=0) L, RS02L,

! OAc R(CH2) tOC(-=0)L, R-N-=C=0, tai RL

000¾¾ *" 10

IX

Rm \ /? OH4 en, )—f 15 Ηλ | H0"" \ /“< Jk/l HO : = ÖAc ÖCOCgHj 20 • 4 · · « · · 1 • · *

Kaavio VI

109795 16

Ra O

5 R1 2NH O Cy> ^ R2/\/^0llll./ OsQ4/NMO ^

ÖR3 '—7\ / h \ JD

h/^V Vaihe (a)

: ÖAC

10 ÖCOCgHs

XIII

Ra O

15 \ /?

4 CH N-ff CH, „.OH

R1 NH O y» / \Ts?C,.>' OH

r2/i^°.....OvIA " OR3 /\y R Vaihe (b) HO : Ξ = OAc 20 : :..: ocoCgHg ;·.·. xii 25 i*::. R* o

Cu \-/ CH, ,,ιΟΗ

R1 NH O V_/ ,,£>H

R2/y o.....

HO Ξ

: : OAC

ococ6h5 3 2 • * 35 17 109795

Spesifisten toteutusmuotojen kuvaus Tässä patenttihakemuksessa kuvattujen rakennekaavojen uskotaan parhaiten kuvaavan tämän keksinnön mukaisella menetelmällä valmistettujen yhdisteiden rakentei-5 ta. Kuitenkin jotkut yhdisteet, jotka kuuluvat keksinnön piiriin, voivat esiintyä muina tautomeerisina muotoina, joissa vetyatomit ovat siirtyneet molekyylien muihin osiin ja molekyylien atomien väliset kemialliset sidokset ovat siten muuttuneet. Pitäisi ymmärtää, että rakennekaavat 10 edustavat kaikkia tautomeerisia muotoja, mikäli niitä voi esiintyä.

Seuraavat spesifiset esimerkit valaisevat tämän keksinnön mukaisten esimerkkiyhdisteiden synteesiä eikä niitä tule pitää keksinnön aluetta tai piiriä rajoittavi-15 na. Menetelmiä voidaan soveltaa muunnelmille sellaisten yhdisteiden valmistamiseksi, jotka sisältyvät tähän keksintöön mutta joita ei ole spesifisesti esitetty. Edelleen menetelmien muunnelmat samojen yhdisteiden valmistamiseksi hiukan eri tavalla ovat alan ammattimiehelle ilmeisiä.

20 Kaikkien lämpötilojen on ymmärrettävä olevan Cel- :··· sius-asteina (°C) ellei toisin ole ilmoitettu. Ydinmag- neettisen resonanssi (NMR:n) spektrien tunnusomaiset arvot ··,·. viittaavat kemiallisiin siirtymiin (ö) ilmaistuna miljoo- . nasosina (ppm) vertailustandardina olevaan tetrametyylisi- * * *.* 25 lääniin (TMS) nähden. Protoni-NMR-spektrituloksissa eri * ·’ siirtymille ilmoitettu suhteellinen ala vastaa tietyn '·' ' funktionaalisen tyypin vetyatomien lukumäärää molekyylis sä. Siirtymien luonne, mitä tulee kerrannaisuuteen, on ilmoitettu leveänä singlettinä (bs) , leveänä duplettina ‘ : 30 (bd), leveänä triplettinä (bt), leveänä kvartettina (bq), singlettinä (s) , multiplettinä (m) , duplettina (d) , kvar-*... tettina (q) , triplettinä (t) , dupletin duplettina (dd) , *!* tripletin duplettina (dt) ja kvartetin duplettina (dq) .

* » NMR-spektrien ottamiseen käytetyt liuottimet ovat DMSO-d6 35 (perdeuterodimetyylisulfoksidi) , D20 (deuteroitu vesi) , CDC13 (deuterokloroformi) ja muut tavanomaiset deuteroidut 18 109795 liuottimet. Infrapuna- (IR-) spektrikuvaus käsittää ainoastaan absorptioaallonpituudet (cm11), joilla on funktionaalisen ryhmän identifiointiarvo.

Celite on Johns-Manvilie Products Corporationin 5 rekisteröity kauppanimi piimaalle.

Tässä käytetyt lyhennykset ovat alalla yleisesti käytettyjä tavanomaisia lyhennyksiä. Joitakin niistä ovat: MS : massaspektrometria HRMS : korkean erotuskyvyn omaava massaspektrometria 10 DAST : dietyyliaminorikkitrifluoridi

Ac : asetyyli

Ph : fenyyli

Ar : aryyli DCI : desorptio, kemiallinen ionisaatio 15 Y : saanto v/v : tilavuus/tilavuus FAB : nopea atomipommitus ΝΟΒΑ : m-nitrobentsyylialkoholi min : minuutti(a) 20 h : tunti(a) ...j tBu : tertiaaributyyli . . Cbz : bentsyylioksikarbonyyli ; Bz : bentsoyyli TES : trietyylisilyyli • · · • » · · 19 109795

Esimerkki 1 2'-O-(bentsyylioksikarbonyyli)paklitakseli (Ila) 5 A °ic // C i H Vii

10 1 AC

C=0 C0C6Ks ( 15 C H2C eH 5

Liuokseen, jota sekoitettiin ja joka oli huoneenlämpötilassa ja jonka muodostivat paklitakseli (150 mg, 0,176 mmol) ja N,N-di-isopropyylietyyliamiini (93 μΐ, 20 0,534 mmol, 3 ekv. ) vedettömässä CH2Cl2:ssa (4 ml), li- :·*: sättiin bentsyyliklooriformaattia (75 μΐ, 0,525 mmol, 3 ekv. ) huoneenlämpötilassa. Reaktioseosta sekoitettiin ·.·. huoneenlämpötilassa 3 tuntia. Reaktioseos väkevöitiin : 2 ml:n tilavuuteen ja tuote puhdistettiin silikageelipyl- j-V 25 väällä käyttäen 1:1-suhteista Et0Ac:n ja heksaanien seosta eluenttina, jolloin saatiin 150 mg (0,152 mmol, Y: 86 %) otsikon yhdistettä, Ila, valkoisena jauheena; sp. 140 -150 °C (hajoaminen); [a]D20 -53,5° (c = 0,2, 95 % EtOH); NMR (300 MHz, asetoni-d6) δ ppm: 1,18 (3H, s, 17-H3), 1,92 30 (3H, s, I6-H3), 1,66 (3H, s, 19-H3), 1,96 (3H, s, 18-H3), ;·! 2,16 (3H, s, 10-OAc), 2,5 (3H, s, 4-OAc), 3,53 (1H, d, J = ,···, 5,89 Hz, 7-OH, vaihtunut D20:n kanssa), 3,85 (1H, d, J = » · 7,19 Hz, 3-H), 3,9 (1H, s, 1-OH, vaihtunut D20:n kanssa), :.V 4,17 (2H, ABq, 20-Hz), 4,25 (1H, m, 7-H), 4,97 (1H, d, J = : '· 35 9,56 Hz, 5-H), 5,19 (2H, ABq, OCH2C6H5), 5,54 (1H, d, J = 20 109795 5,5 Hz, 2’-H), 5,68 (1H, d, J = 7,13 Hz, 2-H), 6,01 (1H, dd, J = 5,5, 9,05 Hz, 3'-H), 6,17 (1H, bt, J = 9,0 Hz, 13-H), 6,42 (1H, s, 10-H), 7,28 - 7,69 (16H, m), 7,87 (2H, "d", J = 8 Hz, 3' -NHCOPh), 8,14 (2H, "d", J - 8 Hz, 2- 5 CO,Ph), 8,55 (1H, d, J = 9,06 Hz, NH, vaihtunut D20:n kanssa); MS (FAB-NOBA/Nal+KI) m/e: 988 (M+H) + , 1010 (M+Na)\ 1026 (M+K)*; IR (KBr) nu max: 3448, 1748 (C=0), 1726 (CONH), 1250 (C-O) cm'1; UV (Me0H:H20, 1:1) lambda max: 198 (epsilon 7,3 x 104), 230 nm (epsilon 2,7 x 104); HRMS, las-10 kettu yhdisteelle C55H58N016 (MH+): 988,3756, todettu: 988,3766.

Analyysi, laskettu yhdisteelle C55H57N016·H20: C 65,67; H 5,92; N 1,40. Todettu: C 65,99; H 5,64; N 1,33.

Esimerkki 2 15 21 -0-bentsyylioksikarbonyyli-6,7-dehydropaklitakse- 11 (Ula) 1 °^c a0 20 Ph^^H 0 <hj ;;j: Ph‘^''Y<>........\

Lii ^bz «0 ί Ac 25 0 C 0 C 6H 5 . . 2'-0-(bentsyylloksikarbonyyli)paklitakseli (Ha) • * · ; / (514 mg, 0,521 mmol) liuotettiin THF:iin (3 ml) ja ...* 30 Et20:iin (6 ml). Tämä liuos jäähdytettiin -78 °C:siin ja lisättiin tipoittain DASTra (0,134 ml, 1,040 mmol). Reak- • tioseosta sekoitettiin -78 °C:ssa 3 tuntia ja sitten jä-tettiin huoneenlämpötilaan yön ajaksi. Kun reaktio oli • · » * täydellinen, liuotin poistettiin osittain tyhjössä ja 35 jäännös kromatografoltiin käyttäen 30 - 40-%:ista EtOAc:a 21 109795 heksaanissa, jolloin saatiin 73 mg (Y: 14,5 %) haluttua tuotetta; XH-NMR (CDC13/ 300 MHz) 6 ppm: 8,15 (d, J = 7,1 Hz, 2H), 7,71 (d, J = 7,1 Hz, 2H), 7,63 - 7,24 (m, 16H), 6,90 (d, vaiht., J = 9,3 Hz, 1H), 6,25 (bt, 1H), 5 6,21 (s, 1H), 6,05 (dd, J1 = 9,9 Hz, J2 = 5,6 Hz, 1H), 5,96 (dd, Jx = 9,9 Hz, J2 = 2,7 Hz, 1H), 5,86 - 5,82 (m, 2H), 5,42 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 5,18 - 5,09 (m, 3H), 4,27 (ABq, J = 8,2 Hz, 2H), 4,00 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 2,48 - 1,12 (m, 21H, mukaan luettuna s kohdissa 2,44, 3H; 2,18, 3H; 1,86, 10 3H; 1,84, 3H; 1,23 3H; 1,13, 3H); 13C-NMR (CDC13, 75 MHz) 6 ppm: 205,5, 169,5, 169,1, 167,8, 167,1, 167,0, 154,1, 141,9, 139,9, 136,8, 134,3, 133,7, 133,5, 132,0, 130,2, 129.2, 129,1, 128,9, 128,7, 128,4, 127,2, 126,6, 126,2, 81.2, 81,1, 78,8, 76,9, 76,3, 75,9, 75,7, 71,9, 70,7, 15 55,4, 52,7, 43,1, 41,4, 35,8, 26,4, 22,8, 22,1, 21,0, 20,8, 20,5, 14,5.

Esimerkki 3 6,7-dehydropaklitakseli (Ia) 20 ?, OAc 0 A Λ CHi /—W3 PIT |H 0 \1_/ ·';· P h '"'"γΌ.....Ogi-Λ 25 h un I 0 : .· H HO = Ac :7: C0C6H5 i ’· "> 2'-O-bentsyylioksikarbonyyli-6,7-dehydropaklitak- ...* 30 sell (Ilia) (19,6 mg, 0,020 mmol) liuotettiin EtOAc:iin (0,5 ml). Edellä mainittuun liuokseen lisättiin katalyyt-.*·*. tinen määrä Pd/C:tä (6,4 mg, 10 %, 0,006 mmol) ja reakti olle suoritettiin hydrogenolyysi ilmakehän paineessa. 4 tunnin kuluttua seos suodatettiin, suodos haihdutettiin ja : 35 raakatuote puhdistettiin kromatografiällä (eluoitiin 22 109795 60-%:isella EtOAc:lla heksaanissa), jolloin saatiin 16.7 mg Y: 98,8%) haluttua yhdistettä Ia; 1H-NMR (CDC13, 300 MHz) δ ppm: 8,14 (d, J - 8,7 Hz, 2H), 7,73 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 7,71 - 7,24 (m, UH), 7,00 (d, vaiht., J = 5 9,0 Hz, 1H), 6,18 (m, 2H), 6,04 (dd, J3 = 9,9 Hz, J2 = 5,6 Hz, 1H), 5,86 - 5,76 (m, 3H), 5,07 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 4,75 (m, 1H), 4,35 (ABq, J = 8,2 Hz, 2H), 3,97 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 3,53 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 2,37 - 1,12 (m, 21H, mukaan luettuna s kohdissa 1,36, 3H; 2,21, 3H; 1,85, 10 3H, 1,71, 3H, 1,22, 3H; 1,13, 3H); 13C-NMR (CDC13, 75 MHz): 6 ppm: 205,3, 172,5, 169,7, 169,6, 167,9, 141,1, 139,9, 138,0, 133,9, 133,8, 133,7, 132,0, 130,2, 129,2, 129,0, 128,7, 2, 128,7, 128,3, 127,0, 126,9, 126,3, 81,2, 78,6, 77,2, 76,4, 75,8, 75,5, 73,2, 72,2, 55,5, 54,8, 43,0, 15 41,6, 35,9, 26,4, 22,7, 21,6, 20,8, 20,3, 14,6; MS (FAB): 836 (MH).

Esimerkki 4 6,7-dehydrobakkatiini-III (Via) 20 ...: OAc o .. »O— • · HO···/ jL 1 ::v 25 &K/° : · : HO : = i OAc

Iti « ÖCOCeHg » · ·. *: Liuosta, jonka muodosti 6,7-dehydropaklitakseli 30 (1,13 g, 1,35 mmol) dikloorimetaanissa/2-%:isessa metano- lissa (60 ml), käsiteltiin tetrabutyyliammoniumboorihydri-,···. dillä (694 mg, 2,70 mmol) ja saadun liuoksen annettiin ·’ sekoittua ympäristön lämpötilassa 5 tuntia. Reaktio pysäy- tettiin lisäämällä kylläistä vesipitoista ammoniumkloridia :35 (10 ml) ja orgaaninen fraktio kuivattiin (MgS04) ja väke- 23 109795 vöitiin. Raakatuote kromatografoltiin silikageelillä (elu-oitiin 10-%:isella etyyliasetaatilla heksaaneissa), jolloin saatiin valkoinen kiinteä aine, joka sitten uudel-leenkiteytettiin metanolista (630 mg, Y: 82 %); sp. 224 -5 230 eC (haj.); XH-NMR (300 MHz, CDC13): δ 8,15 - 8,09 (m, 2H), 7,64 - 7,58 (m, 1H), 7,51 - 7,45 (m, 2H), 6,46 (s, 1H), 6,05 (dd, 1H, J - 6,0, 9,0 Hz), 5,86 (d, 1H, 12,0 Hz), 5,79 (d, 1H, J = 6,0 Hz), 5,11 (d, 1H, J = 6,0 Hz), 4,89 - 4,82 (m, 1H), 4,35 (ABq, 2H, J = 6,0, 36,0 Hz), 10 4,09 (d, 1H, J « 6,0 Hz), 2,35 - 2,18 (m, 10H, mukaan lu ettuna singletit kohdissa 2,26, 2,21), 2,01 (s, 3H), 1,83 (s, 3H), 1,10 - 1,07 (m, 6H); 13C-NMR (75,6 MHz, CDC13): δ 205,4, 170,2, 169,5, 166,8, 145,3, 139,7, 133,5, 132,4, 129,9, 129,2, 128,5, 126,1, 81,1, 80,9, 78,9, 78,6, 76,3, 15 76,2, 75,3, 67,7, 55,4, 44,1, 42,5, 41,6, 38,9, 26,2, 22,6, 20,9, 20,7, 20,1, 14,8, 14,5.

Esimerkki 5 6,7-dehydro-2 1 -0-trietyylisilyyli-3' - (2-furyyli) -3' -N-debent soyy 1 i -N-1-butoks ikarbonyy lipakl i taksel i 20 (Villa) Ϊ ?Ac o ; V tBuO^^IH 0 CH3 \-/cR, m : Qs& HO : : OAc 1 ÖCOCgHg 30

Liuosta, jonka muodosti 6,7-dehydrobakkatiini-III

» .···. (42 mg, 0,074 mmol) kuivassa tetrahydrofuraanissa (5 ml), • » käsiteltiin inertillä atmosfäärillä ja jäähdytettiin '· · -55 °C:seen hiilihappojää/asetonihauteessa. Tähän liuok-

35 seen lisättiin litiumheksametyylidisilatsaania (0,5 M

109795 24 liuos THF:ssa, 0,24 ml, 0,8 mmol) tipoittain ruiskun kautta. Saadun vaaleankeltaisen liuoksen annettiin sekoittua 5 minuuttia, sitten lisättiin raseemisen N-t-butoksikarbo-nyyli-4-(2-furyyli)atsetidinonin (Vila) (130,8 mg, 0,35 5 mmol) liuos tetrahydrofuraanissa (2 ml) 5 minuutin aikana. Sen jälkeen jäähdytyshaude korvattiin jää/suolaliuoshau-teella ja saadun liuoksen annettiin sekoittua 0 °C:ssa 1 tunnin ajan. Reaktio pysäytettiin lisäämällä kylläistä NH4Cl-liuosta (2 ml), sitten laimennettiin etyyliasetaa-10 tiliä (25 ml) ja pestiin vedellä (2 x 10 ml). Orgaaninen fraktio kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin, jolloin saatiin haluttu tuote raakatuotteena olevana värittömänä öljynä. Raakatuote puhdistettiin silikageelillä käyttäen heksaani-en ja etyyliasetaatin seosta (7:3) eluenttina. Tällä mene-15 telmällä saatiin haluttu tuote värittömänä lasimaisena aineena (59,5 mg, Y: 86 %); ^-NMR (300 MHz, CDC13): δ 8,14 (d, 2H, J = 9,0 Hz), 7,60 - 7,37 (m, 3H), 6,35 - 6,33 (m, 1H), 6,24 - 6,20 (m, 3H), 6,06 (dd, 1H, J = 6,0, 9,0 Hz), 5,87 - 5,84 (m, 2H), 5,30 (d, 2H, J = 6,0 Hz), 5,11 (d, 20 1H, J = 3,0 Hz), 4,75 (s, 1H), 4,36 (ABq, 2H, J = 6,0, 39,0 Hz), 4,04 (d, 1H, J = 6,0 Hz), 2,47 (s, 3H), 2,45 -. . 2,25 (m, 2H), 2,22 (s, 3H), 1,90 - 1,14 (m, 23H, mukaan ; luettuna singletit kohdissa 1,86, 1,82, 1,34, 1,25, 1,14), ‘ 0,87 - 0,73 (m, 9H), 0,55 - 0,37 (m, 6H); 13C-NMR (75,6 : 25 MHz, CDC13): δ 2,5,5, 171,1, 169,5, 166,9, 155,3, 152,0, : V 142,0, 141,8, 139,9, 133,6, 133,4, 130,1, 129,1, 128,6, 0': 126,1, 110,6, 107,2, 81,2, 80,9, 80,1, 78,6, 76,5, 76,3, 75,9, 75,6, 72,3, 71,9, 55,4, 52,7, 43,0, 41,3, 35,6, 28,1, 26,0, 22,8, 21,9, 20,7, 20,3, 14,5, 6,4, 4,2.

» · 1 » » 25 109795

Esimerkki 6 6,7-dehydro-3 ’ - (2-furyyli) -3 ' -N-debentsoyyli-N-t-butoksikarbonyylipaklitakseli (Ib) 5 X r o tBuO^NjH 0 CHj \-/CH3

HO

10 /\/ H £V" HO : z : OAc OCOCgHg

Liuosta, jonka muodosti 2'-O-silyylisuojattu subst-15 raatti Villa (59,5 mg, 0,063 mmol) asetonitriilissä (2 ml), jäähdytettiin 0 °C:seen jää/suolaliuoshauteessa. Tähän liuokseen lisättiin 1 N HCl:a (0,5 ml, 6 ekv. ) ja reaktioseoksen annettiin sekoittua 1 tunti tässä lämpötilassa. Sen jälkeen liuotin haihdutettiin tyhjössä ja 20 jäännöstä jakouutettiin etyyliasetaatilla (25 ml) ja ve-;··· dellä (10 ml). Orgaaninen fraktio kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin, jolloin saatiin valkoinen vaahto. Raakatuote ··,·, puhdistettiin silikageelillä käyttäen 10-%:ista Ch3CN:a • · . CH2Cl2:ssa eluenttina. Haluttu tuote eristettiin valkoisena :;γ 25 vaahtona (46 mg, Y: 88 %); 1H-NMR (300 MHz, CDC13): 6 8,14 f · · :,t;' (d, 2H, J = 6,0 Hz), 7,62 - 7,46 (m, 3H), 6,37 - 6,30 (m, 5·: *’ 2H), 6,31 - 6,20 (m, 2H), 6,06 (dd, 1H, J = 6,0, 12,0 Hz), 5,87 - 5,83 (m, 2H), 5,35 - 5,23 (m, 2H), 5,10 (d; 1H, J = :. j 6,0 Hz), 4,70 (s, 1H), 4,37 (ABq, 2H, J = 9,0, 42,0 Hz), •’X 30 4,02 (d, 1H, J = 6,0 Hz), 3,31 (bs, 1H), 2,40 - 1,15 (m, 31H, mukaan luettuna singletit kohdissa 2,40, 2,23, 1,85, Y. 1,79, 1,35, 1,25, 1,15); 13C-NMR (75,6 MHz, CDC13): 6 205,2, 169.4, 166,9, 142,3, 141,3, 139,7, 133,5, 130,0, 129,0, 128.5, 126,1, 110,5, 107,2, 81,1, 80,9, 78,5, 76,2, 75,7, : ί 35 75,4, 72,2, 71,6, 55,3, 51,5, 42,9, 41,4, 35,5, 28,0, 26 109795 26,0, 2,5, 21,6, 20,6, 20,1, 14,4; HRMS, laskettu MH* yhdisteelle C43H52N015: 822,3337; Todettu: 822,3364.

Esimerkki 7 6,7-dehydro-3'-(2-furyyli)paklitakseli (Ie)

5 O

X v o

Ptr^NH 0 CHg \-/cHa HO : Ξ z OAc ÖCOCgHg

Liuosta, jonka muodosti 6,7-dehydrobakkatiini-III 15 (Via) (191,4 mg, 0,33 mmol) kuivassa tetrahydrofuraanlssa (5 ml), käsiteltiin lnertlllä atmosfäärillä ja jäähdytettiin -55 °C:seen hiillhappojää/asetonlhauteessa. Tähän liuokseen lisättiin litiumheksametyylidisilatsaania (IM liuos heksaanissa, 0,4 ml, 0,4 mmol) tipoittain ruiskulla. 20 Saadun vaaleankeltaisen liuoksen annettiin sekoittua 5 minuuttia, sitten lisättiin (3R,4S)-N-bentsoyyli-4-(2-fur-yyli)atsetidinonin (Vila') (150,0 mg, 0,4 mmol) liuos tet-··,·, rahydrofuraanissa (2 ml) 5 minuutin aikana. Sen jälkeen . jäähdytyshaude korvattiin jää/suolaliuoshauteella ja saa- 25 dun liuoksen annettiin sekoittua 0 °C:ssa 1 tunnin ajan. Reaktio pysäytettiin lisäämällä kylläistä NH4Cl-liuosta ' (2 ml), sitten laimennettiin etyyliasetaatilla (25 ml) ja pestiin vedellä (2 x 10 ml). Orgaaninen fraktio kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin, jolloin saatiin 6,7-dehydro-2' -0-’,,,: 30 trietyylisilyyli-3'-(2-furyyli)paklitakseliraakatuotteena olevana värittömänä öljynä.

> . Liuosta, jonka muodosti raakatuotteena oleva 6,7- dehydro-2'-0-trietyylisilyyli-3' - (2-furyyli )paklitakseli \v (189 mg) asetonitriilissä (2 ml), jäähdytettiin 0 °C:seen

"·’ 35 jää/suolaliuoshauteessa. Tähän liuokseen lisättiin 1 N

27 109795 HCl:a (0,5 ml) ja reaktloseoksen annettiin sekoittua 1 tunti tässä lämpötilassa. Sen jälkeen liuotin haihdutettiin tyhjössä ja jäännöstä jakouutettiin etyyliasetaatilla (25 ml) ja vedellä (10 ml). Orgaaninen fraktio kuivattiin 5 (MgS04) ja väkevöitiin, jolloin saatiin valkoinen vaahto.

Raakatuote puhdistettiin sillkageelillä käyttäen 20-%:ista CH3CN:a CH2Cl2:ssa eluenttina. Otsikon tuote eristettiin valkoisena vaahtona (140 mg, Y: 51 %); 1H-NMR (300 MHz, CDC13) 6 8,15 (d, 2H, J = 9,0 Hz), 7,73 (d, 2H, J = 9,0 10 Hz), 7,61 - 7,37 (m, 6H), 6,92 (d, 1H, J = 9,0 Hz), 6,38 (d, 2H, J - 1,3 Hz), 6,21 (s, 2H), 6,06 (dd, 1H, J = 6,0, 9.0 Hz), 5,89 - 5,84 (m, 2H), 5,10 (d, 1H, J = 6,0 Hz), 4,80 (dd, 1H, J = 3,0, 6,0 Hz), 4,36 (ABq, 2H, J = 9,0, 36.0 Hz), 4,01 (d, 1H, J = 6,0 Hz), 3,58 (d, 1H, J = 6,0

15 Hz), 2,43 - 1,74 (m, 17H, mukaan luettuna singletit kohdissa 2,42, 2,22, 1,99, 1,86, 1,76), 1,23 - 1,10 (ra, 6H, mukaan luettuna singletit kohdissa 1,23, 1,14); 13C-NMR

(75,6 MHz, CDCI3) 6 205,1, 172,0, 169,6, 169,4, 166,9, 166,8, 150,7, 142,5, 141,0, 139,7, 133,8, 133,6, 133,2, 20 131,9, 130,0, 129,1, 128,5, 126,9, 126,1, 110,6, 107,8, 81,1, 81,0, 78,4, 76,3, 75,7, 75,4, 72,1, 71,5, 55,3, 50,0, 42,9, 41,5, 35,7, 26,9, 26,2, 22,5, 21,5, 20,6, V. 20,2, 14,4.

Esimerkki 8 ”V 25 6,7-dehydro-2'-0-trietyylisilyyli-3,-(2-tienyyli)- * · 3' -N-debentsoyyli-N-t-butoksikarbonyylipaklitakseli (Vlllb) ] f °*c o 30 tBucrNjH 0 CH*/—0¾.

: H0 ' L· :-! 35 I 0A° OCOCjHs 28 109795

Otsikon yhdiste valmistettiin samalla tavalla kuin yhdiste Villa esimerkissä 5; ^-NMR (300 MHz, CDC13) 6 8,14 (d, 2H, J - 9,0 Hz), 7,63 - 7,58 (m, 1H), 7,49 (t, 2H, J = 9,0 Hz), 7,26 - 7,23 (m, 1H), 6,99 - 6,93 (m, 2H), 6,23 -5 6,19 (m, 2H), 6,06 (dd, 1H, J = 3,0, 9,0 Hz), 5,87 - 5,84 (m, 2H), 5,52 - 5,40 (m, 2H), 5,10 (d, 1H, J = 6,0 Hz), 4,55 (d, 1H, J - 1,8 Hz), 4,38 (ABq, 2H, J = 9,0, 42,0 Hz), 4,03 (d, 1H, J - 6,0 Hz), 2,47 - 2,20 (m, 8H, mukaan luettuna singletit kohdissa 2,42, 2,22), 1,88 - 1,73 (m, 10 7H, mukaan luettuna singletit kohdissa 1,86, 1,81), 1,43 - 1,14 (m, 15H, mukaan luettuna singletit kohdissa 1,32, 1,26, 1,14), 0,90 - 0,81 (m, 9H), 0,59 - 0,42 (m, 6H); 13C-NMR (75,6 MHz, CDC13): 6 205,4, 171,0, 169,5, 169,2, 166,9, 141,9, 139,9, 133,6, 133,4, 130,1, 129,1, 128,6, 126,8, 15 126,1, 124,6, 124,5, 81,2, 81,0, 80,1, 78,7, 76,2, 75,8, 75,7, 75,2, 71,2, 55,3, 53,7, 43,0, 41,3, 35,7, 28,1, 26,1, 22,9, 22,0, 20,7, 20,4, 14,5, 6,5, 4,4.

Esimerkki 9 6,7-dehydro-3'-(2-tienyyli)-3'-N-debentsoyyli-N-t-20 butoksikarbonyylipaklitakseli (Id)

« · · I

! °SC o tBuCTTJH 0 CH, \-f CHs HO : § : OAc : OCOCgHj 30

Otsikon yhdiste saatiin samalla tavalla kuin yh-diste Ib esimerkissä 6; ^-NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,13 (d, ‘ 2H, J = 6,0 Hz), 7,63 - 7,58 (m, 1H), 7,49 (t, 2H, J = 0/ 6,0 Hz), 7,26 - 7,24 (m, 1H), 7,06 (d, 1H, J = 6,0 Hz), : : 35 6,99 - 6,96 (m, 1H), 6,22 - 6,19 (m, 2H), 6,04 (dd, 1H, 29 109795 J = 3,0, 10,0 Hz), 5,86 - 5,81 (m, 2H), 5,47 - 5,37 (m, 2H), 5,08 (d, 1H, J = 6,0 Hz), 4,61 (dd, 1H, J = 2,1, 5,4 Hz), 4,35 (ABq, 2H, J = 8,1, 39,0 Hz), 4,00 (d, 1H, J = 6,0 Hz), 3,56 - 3,53 (m, 1H), 2,37 - 2,20 (m, 8H, mukaan 5 luettuna singletit kohdissa 2,37, 2,22), 1,98 - 1,72 (m, 7H, mukaan luettuna singletit kohdissa 1,96, 1,86, 1,75), 1,39 - 1,14 (m, 15H, mukaan luettuna singletit kohdissa 1,33, 1,24, 1,14); 13C-NMR (75,6 MHz, CDC13): δ 205,2, 169,5, 169,4, 166,9, 154,9, 141,3, 139,8, 133,7, 133,6, 10 133,5, 130,1, 129,9, 129,1, 128,6, 126,9, 126,2, 125,3, 125,2, 81,1, 81,0, 80,3, 78,5, 76,3, 75,8, 75,5, 73,3, 72,3, 55,4, 52,7, 43,0, 41,5, 35,6, 28,1, 26,2, 22,6, 21,6, 20,7, 20,2, 14,4.

Esimerkki 10 15 Hydrobentsamidin, PhCH(-N=CHPh)2:n, valmistus 3 litran 3-kaulaiseen kolviin, joka oli varustettu mekaanisella sekoittimella ja lämpömittarilla, lisättiin 1 1 väkevää NH40H:a (n. 30 %) (14,8 moolia). Lisättiin liuos, jonka muodosti bentsaldehydi (265 g, 2,50 mol) 500 20 ml:ssa 2-propanolia, yhtenä annoksena. Seosta sekoitettiin . voimakkaasti n. 22 °C:ssa 43 tuntia. Saatu liete suodatet- • · ,, tiin ja suodatuskakku pestiin vedellä (1 1). Kuivattiin i * · ; tyhjössä, minkä jälkeen saatiin 242,4 g hydrobentsamidia valkoisena kiinteänä aineena (sp. 100 - 102 °C) 97,4 %:n : 25 saannolla.

«I · • V Edellä esitettyä menettelyä voidaan noudattaa bis- ' imiinien valmistamiseksi, joilla on yleinen kaava R2CH(-N=CHR2)2: so. hydrofuramidin (R2 = 2-furyyli), hydros’',* tienamidin (R2 = 2-tienyyli) valmistamiseksi.

• I I

I I ·

* I

I < · • « » ? · I · II.

I » I

• I ·

* I

111(1 I > 30 109795

Esimerkki 11 (±)-cis-3-asetyylioksi-l-[(fenyyli)(bentsylideeni-imino)metyyli]-4-fenyyliatsetidin-2-oni (XlVa) 5 CH3C(0)0 Ph o CH—N=CHPh

Ph 10 1 litran 3-kaulaiseen pyöreäpohjäiseen kolviin, joka oli varustettu lämpömittarilla, magneettisekoitta-jalla ja tiputussuppilolla, lisättiin hydrobentsamidia (30,00 g, 100,5 mmol) ja etyyliasetaattia (150 ml). Sa-15 maila, kun reaktioseosta sekoitettiin ja pidettiin argon-kerroksen alla, se jäähdytettiin 5 °C:seen ja lisättiin trietyyliamiinia (16,8 ml, 121 mmol). Sen jälkeen lisättiin asetoksiasetyylikloridin (12,4 ml, 116 mmol) liuos etyyliasetaatissa (300 ml) tipoittain 90 minuutin aikana. 20 Sen jälkeen, kun reaktioseosta oli pidetty 16 tuntia tässä :"i lämpötilassa, sen annettiin lämmetä 20 °C:seen (1,5 h) ja *·!» se siirrettiin erotussuppiloon. Orgaaninen kerros pestiin • · jV. peräkkäin vesipitoisella NH4Cl:lla (kyll.) (150 ml, 100 : ml), vesipitoisella NaHC03:lla (kylläinen) (120 ml) ja suo- » t · !!'.* 25 laliuoksella (120 ml). Karakterisointia varten otsikon i t t ' 7 • · *.,! yhdiste voidaan eristää tässä vaiheessa kuivaamalla orgaa- » » » * ninen faasi MgS04:lla, suodattamalla ja poistamalla liuotin tyhjössä. Näin saatiin haluttu tuote kvantitatiivisella * · · raakatuotesaannolla punaisena lasimaisena aineena.

f t r ’,,,· 30 HPLC-puhtaus (ala): 87,9 % (l:l-suhteinen diastereomeerien seos); ^-NMR (CDC13, 200 MHz): δ 8,45 (s, 1H, N=CH), ,’··, 7,80 - 7,85 (m, 1H, Ph), 7,60 - 7,65 (m, 1H, Ph), 7,26 - • · 7,50 (m, 9H, Ph), 7,00 - 7,10 (m, 4H, Ph), 6,28 (s, 0,5H, f » vV NCHN), 6,23 (s, 0,5, NCHN), 5,81 (d, J = 4,8 Hz, 0,5H, H- :35 3), 5,76 (d, J = 4,8 Hz, 0,5H, H-3), 5,30 (d, J = 4,8 Hz, 31 109795 0,5H, H-4), 4,75 (d, J = 4,8 Hz, 0,5H, H-4), 1,63 (s, 3H, CH3CO); IR (KBr): nu (cm-1) = 1763 (C=0), 1641 (C=N); UV (metanoll): lambda max (nm) = 216, 252.

Esimerkki 12 5 (±)-cis-3-asetyylioksi-4-fenyyliatsetidin-2-oni (XVa)

CHgqojo^ Ph J—NH

10 (f

Liuos, jonka muodosti edellä esitetty esimerkin 11 yhdiste etyyliasetaatissa (500 ml), siirrettiin varovasti argonvirrassa 2,0 litran Parr-kolviin, joka sisälsi 10 % 15 palladiumia aktivoidulla puuhiilellä (6,00 g). Tätä seosta käsiteltiin vedyllä [405 kPa (4 atm)] 20 tuntia, minkä jälkeen katalyytti poistettiin suodattamalla Celite-ker-roksen läpi. Suodatuskakkku lietettiin etyyliasetaattiin (200 ml), sekoitettiin (10 min) ja suodatettiin. Suoda-20 tuskakku huuhdottiin etyyliasetaatilla (100 ml) ja suo-:··; dokset yhdistettiin. Orgaaninen kerros pestiin 10-%:isella HClrlla (300 ml) ja molemmat kerrokset suodatettiin sint-·.·. terilasisuodattimen läpi valkoisen sakan (dibentsyyliamii- . ! ni*HCl) poistamiseksi, joka sakka huuhdottiin etyyliase- 25 taatilla (100 ml). Faasit erotettiin ja orgaaninen kerros • pestiin toisella erällä 10-%:ista HCl:a (200 ml). Yhdis-

I t I

’ tettyjä 10-%:isiä HCl-pesuliuoksia uutettiin uudelleen etyyliasetaatilla (200 ml) ja yhdistetyt orgaaniset ker-rokset pestiin vesipitoisella NaHC03:lla (kylläinen) ' : 30 (300 ml) ja suolaliuoksella (250 ml). Orgaaninen kerros :·' kuivattiin MgS04:lla, suodatettiin ja väkevöitiin tyhjössä 75 ml:n lopulliseen tilavuuteen. Tämä seos jäähdytettiin 4 °C:seen ja saostunut tuote eristettiin suodattamalla.

·’ Suodatuskakku pestiin heksaanilla (200 ml), jolloin saa- 32 109795 tiin 16,12 g (78,1 % kokonaissaanto hydrobentsamidista) otsikon yhdistettä valkoisina neuloina.

Sp. = 150 - 151 °C; HPLC-puhtaus (ala): 99,8 %; 1H-NMR (CDC13, 200 MHz): 6 - 7,30 - 7,38 (m, 5H, Ph), 6,54 (bs, 5 vaihtuva, 1H, NH), 5,87 (dd, J = 2,7, 4,7 Hz, 1H, H-3), 5,04 (d, J = 4,7 Hz, 1H, H-4), 1,67 (s, 3H, CH3CO); IR (KBr): nu (cm-1) = 3210 (N-H), 1755, 1720 (C=0); KF: 0,17 %.

Analyysi, laskettu yhdisteelle CUHX1N03: C 64,38; H 5,40; N 10 6,83. Todettu: C 64,07; H 5,34; N 6,77.

Esimerkki 13 (±) -cis-3-asetyylioksi-l- [ (2-furyyli) - (2-furyyli-metyleeni-imino)metyyli]-4-(2-furyyli)atsetidin-2-onl (XlVb) 15 J—\ r\ 20 O CH—N=CH—\ } . Otsikon yhdiste valmistettiin esimerkissä 11 kuva- 25 tun menetelmän mukaisesti, paitsi että hydrobentsamidin * sijasta käytettiin hydrofuramidia ja reaktio suoritettiin ' 18,6 mmol:n (100 mmol:n sijasta) mittakaavalla. Siten hydrofuramidista (5,00 g, 18,6 mmol), trietyyliämiinista • _'·I (3,11 ml, 22,3 mmol) ja asetoksiasetyylikloridista 30 (2,30 ml, 21,4 mmol) saatiin 6,192 g (Y: 90,4 %) otsikon .·* yhdistettä vaaleanpunaisena siirappimaisena aineena.

Saatiin 1:1-suhteisena diastereoisomeerien seoksena; XH-NMR (CDC13; 200 MHz): δ 8,211 (s, 0,5H, N=CH), 8,208 (s, :V; 0,5H, N=CH), 7,14 - 7,59 (m, 3H, furyyli), 6,90 (d, J = :·! 35 3,5 Hz, 0,5H, furyyli), 6,83 (d, J = 3,5 Hz, 0,5H, furyy- 33 109795 li), 6,10 - 6,53 (m, 6H, furyyli, NCHN), 5,90 (d, J * 4,9 Hz, O,5H, H-3), 5,86 (d, J = 4,8 Hz, 0,5H, H-3), 5,35 (d, J = 4,8 Hz, 0,5H, H-4), 4,90 (d, J = 4,9 Hz, 0,5H, H-

4), 1,91 (S, 1,5H, CH3C0), 1,88 (s, 1,5H, CH3CO); IR

5 (kalvo): nu (cm*x) = 1778, 1753 (C=0), 1642 (C=N); UV (me-tanoli): lambda max (nm) = 220, 278.

Esimerkki 14 (±)-cis-3-(asetyylioksi)-4-(2-furyyli)atsetidin-2-oni (XVb) 10 V? 0^"

Otsikon yhdiste valmistettiin esimerkissä 12 kuvatun menetelmän mukaisesti, paitsi että tuote eristettiin preparatiivisella TLC:llä ja reaktio suoritettiin 20 2,7 mmol:n mittakaavalla hydrofuramidin alkuperäisestä määrästä laskettuna. Siten esimerkin 13 raakatuote .. (1,00 g) liuotettiin uudelleen etyyliasetaattiin (50 ml) .! * ja lisättiin 10-%:iseen palladiumiin aktivoidulla puuhii lellä (150 mg). Kiinteä raakatuote puhdistettiin prepara-· 25 tiivisella TLC:llä (2 mm silikageeli, eluoitiin l:l-suh- : teisellä etyyliasetaatin ja heksaanin seoksella), jolloin .· : saatiin 386 mg (65,8 % korjattu kokonaissaanto hydrofura- midista) otsikon yhdistettä keltaisena kiinteänä äineena.

: Tämä uudelleenkiteytettiin etyyliasetaatin ja heksaanin ·"; 30 seoksesta.

Sp. = 118 - 119 °C; HPLC-puhtaus (ala): 99,4 %; ^-NMR

(CDCI3, 200 MHz): 6 7,44 (t, J = 1,3 Hz, 2H, furyyli), 6,39 (d, J = 1,3 Hz, 1H, furyyli), 6,21 (bs, vaihtuva, 1H, NH), :Y; 5,88 (dd, J = 2,2, 4,6 Hz, 1H, H-3), 5,05 (d, J = 4,6 Hz, : 35 1H, H-4), 1,92 (s, 3H, CH3C0); IR (KBr): nu (cm*1) = 3203 34 109795 (N-H), 1756, 1726 (OO); UV (metanoli): lambda max (nm) = 222.

Esimerkki 15 (±) -cis-3-asetyylioksi-l- [ (2-tienyyli) - (2-tienyy-5 limetyleeni-imino)metyyli]-4-(2-tienyyli)atsetidin- 2-oni (XIVc)

Ac° vrs ΓΛ O CH—N=CH—3 Ö ‘ 15

Otsikon yhdiste valmistettiin esimerkissä 11 kuvatun menetelmän mukaisesti, paitsi että hydrobentsamidin sijasta käytettiin hydrotienamidia. Siten hydrotienami-dista (30 g, 94,7 mmol), trietyyliamiinista (15,84 ml, 20 114 mmol) ja asetoksiasetyylikloridista (11,6 ml, 108 mmol) saatiin otsikon yhdiste viskoosina öljynä. Saatu * · ·. tuote sisälsi diastereomeerien seoksen. 1H-NMR (CDC13): 6 8,52 (s, 1H), 8,502 (s, 1H), 7,51 (d, J = 4,9 Hz, 1H), ! 7,45 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 7,41 (d, J = 3,1 Hz, 1H), 7,37 · 25 (d, 1H), 7,30 (m, 3H), 7,16 (m, 1H), 7,16 (m, 3H), 7,09 '·: (m, 2H), 6,94 (m, 1H), 6,89 (m, 1H), 6,81 - 6,74 (m, 4H), V : 6,48 (s, 1H), 6,43 (S, 1H), 5,85 (m, 2H), 5,59 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 5,17 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 1,87 (s, 3H), 1,86 ’ (s, 3H).

35 109795

Esimerkki 16 (±) -cis-3- ( ase tyyli oksi) -4- (2-tienyyli) atsetidin-2-oni (XVc)

J-L

o 10 Etikkahapon 70-%:inen vesiliuos (0,35 ml jääetikkaa ja 0,15 ml vettä) lisättiin yhtenä annoksena liuokseen, jota sekoitettiin ja jonka muodosti yhdiste XIVc (0,431 g, 1,03 mmol) dikloorimetaanissa (2,93 ml) 25 °C:ssa. Reak-tioseosta refluksoitiin ja sekoitettiin 2,5 tuntia. Reak-15 tioseos laimennettiin 50 ml:11a dikloorimetaania ja sitten pestiin kahdella 75 ml:n erällä kylläistä vesipitoista natriumbikarbonaattia ja sitten yhdellä 50 ml:n erällä kylläistä suolaliuosta. Orgaaninen uute väkevöitiin tyhjössä ruskeaksi öljyksi, liuotettiin mahdollisimman pie-20 neen määrään dikloorimetaania ja laitettiin sitten silika-geelipylvääseen, jonka mitat olivat 10,1 cm ja 1,3 cm (4 tuumaa ja 0,5 tuumaa). Eluoitiin käyttäen Et0Ac:n gradi-··.·. enttia heksaanissa 10-%:ista 60 %:iin, jolloin saatiin vä- . ! hemmän polaariset sivutuotteet sitten otsikon yhdiste • · φ

25 (0,154 g, Y: 75 %) valkoisena kiinteänä aineena. 1H-NMR

• (CDC13): 6 7,32 (dd, J = 4,7, 1,5 Hz, 1H), 7,03 (m, 2H), V : 6,75 (bs, 1H), 5,86 (dd, J = 4,6, 2,7 Hz, 1H), 5,27 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 1,83 (s, 3H); 13C-NMR (CDC13): δ 169,3, 0·ί 165,5, 138,4, 127,1, 127,07, 126,2, 78,3, 54,0, 20,0.

» » t » 1 » e · • · > 1 · * » · » · t · · I » 36 109795

Esimerkki 17 (±)-cie-3-trietyylisilyylioksi-4-(2-furyyli)atset-idin-2-oni (XVIa) 5 Γλ A,/

O

10 Asetoksilaktaamia XVb (3,78 g, 19,4 mmol), joka oli 60 ml:ssa metanolia, sekoitettiin K2C03:n (20 mg, 0,14 mmol) kanssa 90 minuuttia ja liuos neutraloitiin Dowex 50W-X8:lla ja suodatettiin. Suodos väkevöitiin ja jäännös liuotettiin 80 mitään vedetöntä THFta ja sekoitettiin 15 0 °C:ssa imidatsolin (1,44 g, 21,2 mmol) ja TESCltn (tri- etyylisilyylikloridin, 3,4 ml, 20,2 mmol) kanssa 30 minuuttia. Liuos laimennettiin etyyliasetaatilla ja pestiin suolaliuoksella, kuivattiin MgS04:lla ja väkevöitiin. Jäännös kromatografoitiin silikageelillä (eluoitiin 3:l-suh-20 teisellä heksaanin ja etyyliasetaatin seoksella), jolloin saatiin 4,47 g (Y: 86 %) otsikon yhdistettä värittömänä .... öljynä; IR (kalvo) 3276 (leveä), 1768, 1184, 732 cm'1; XH- NMR (CDC13, 300 MHz) δ 7,38 (s, 1H), 6,39 (bs, 1H), 6,35 (s, 2H), 5,05 (dd, J = 4,6, 2,3 Hz, 1H), 4,78 (d, J = : 25 4,6 Hz, 1H), 0,82 (t, J = 8,5 Hz, 6H), 0,50 (dq, J = 8,5, : V 1,8 Hz, 9H); 13C-NMR (CDC13, 75,5 MHz) 6 169,6, 150,4, V : 142,6, 110,5, 109,1, 79,6, 53,2, 6,4, 4,4; FABMS (DCI) M+H, laskettu yhdisteelle C31H21N03Si: 268, todettu; 268.

• » • » · 1 » * t 1 » • ti I I I • » · · 37 109795

Esimerkki 18 (±) -cis-3-trietyylisilyylioksi-4- (2-furyyli)-N-t-butoksikarbonyyliatsetidin-2-oni (Vila)

J—NBoc O

10 Atsetidinonia XVIa (2,05 g, 7,7 mmol), joka oli 30 ml:ssa dikloorimetaania, sekoitettiin 0 °C:ssa di-iso-propyylietyyliamiinin (1,5 ml, 8,6 mmol) ja di-t-butyyli-dikarbonaatin (2,0 g, 9,2 mmol) kanssa dimetyyliaminopyri-diinin (DMAPrn) katalyyttisen määrän lisäksi. Liuos lai-15 mennettiin dikloorimetaanilla ja pestiin suolaliuoksella, kuivattiin MgS04:lla ja väkevöitiin. Jäännös kromatogra-foitiin silikageelillä (eluoitiin 8:1-suhteisella heksaa-nin ja etyyliasetaatin seoksella), jolloin saatiin 2,0 g (Y: 70 %) otsikon yhdistettä vahamaisena kiinteänä ainee-20 na; IR (KBr) 1822, 1806, 1712, 1370, 1348, 1016 cm·1; *H-NMR (CDC13, 300 MHz) δ 7,38 (m, 1H), 6,34 (m, 2H), 5,04 :··: (ABq, J = 12,4, 5,5 Hz, 2H), 1,39 (s, 9H), 0,82 (t, 9H), 0,50 (m, 6H); 13C-NMR (CDC13, 75,5 Hz) δ 165,7, 148,0, 147,7, 142,8, 110,5, 109,7, 83,4, 77,4, 56,0, 27,8, 6,3, : 25 4,4; DCIMS M+H, laskettu yhdisteelle C18H29N05Si: 368, to- dettu: 368.

Esimerkki 19 (±)-cis-3-trietyylisilyylioksi-4-(2-tienyyli)atse-tidin-2-oni (XVIb) 30 i!;:; tcsvA) 1 )

J—NH O

i i s ; t 35 38 109795

Liuos, jonka muodosti 3-asetoksilaktaami XVc (2,5 g, 11,8 mmol), liuotettiin metanoliin (10 ml) ja käsiteltiin kylläisellä vesipitoisella natriumbikarbonaatilla (10 ml) ja saadun lietteen annettiin sekoittua ym-5 päristön lämpötilassa 3 tuntia. Sen jälkeen reaktioseos laimennettiin etyyliasetaatilla (20 ml) ja pestiin vedellä (15 ml). Vesipitoista fraktiota palautusuutettiin useita kertoja etyyliasetaatilla ja yhdistetyt orgaaniset fraktion kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin, jolloin saatiin 10 keltainen kiinteä aine (Y: 1,7 g). Raaka-aine liuotettiin kuivaan tetrahydrofuraaniin (20 ml) ja liuos jäähdytettiin 5 °C:seen jää/vesihauteessa. Sen jälkeen lisättiin imidat-solia (752 mg, 1,1 ekv.). Sekoitettiin 5 minuuttia, minkä jälkeen lisättiin tipoittain trietyylikloorisilaania 15 (1,85 ml, 1,1 ekv.). Saadun suspension annettiin sekoittua 3 tuntia tässä lämpötilassa; sen jälkeen kiinteä aine poistettiin suodattamalla. Orgaaninen fraktio pestiin vedellä (2 x 20 ml), sitten kuivattiin (MgS04) ja väkevöitiin. Raakatuote puhdistettiin silikageelipylväskromato-20 grafiällä (eluoitiin heksaanien ja etyyliasetaatin seok sella, 7:3), jolloin saatiin haluttu tuote värittömänä kiinteänä aineena (1,5 g, Y: 45 %). Sp. 70 - 71 °C; ^-NMR (300 MHz, CDC13): 6 7,32 - 7,30 (m, 1H); 7,05 - 6,98 (m, * * 1 ♦ 2H), 5,06 - 5,05 (m, 2H), 0,82 (t, 9H, J = 8 Hz), 0,55 - j j'| 25 0,46 (m, 6H); 13C-NMR (75,6 MHz, CDC13): δ 169,1, 139,7, 126,5, 126,4, 125,8, 79,4, 55,1, 6,3, 4,4.

;' ·'; Vaihtoehtoinen suoritus:

Asetoksilaktaamia XVc (2,0 g, 9,37 mmol), joka oli ·, ; 40 ml:ssa metanolia, sekoitettiin K2C03:n (60 mg, 0,43 1 · 1 30 mmol) kanssa 30 minuuttia ja liuos neutraloitiin Dowex 50W-X8:lla ja suodatettiin. Suodos väkevöitiin ja jäännös liuotettiin 50 ml:aan vedetöntä THF:a ja sekoitettiin : i 0 °C:ssa imidatsolin (0,85 g, 11,3 mmol) ja TESCl:n (1,9 ml, 12,5 mmol) kanssa 30 minuuttia. Liuos laimennet-35 tiin etyyliasetaatilla ja pestiin suolaliuoksella, kuivat- 39 109795 tiin MgS04:lla ja väkevöitiin. Jäännös kromatografoltiin silikageelillä (eluoitiin 3:1-suhteisella heksaanin ja etyyliasetaatin seoksella), jolloin saatiin 2,13 g (Y: 86 %) otsikon tuotetta värittömänä öljynä.

5 Esimerkki 20 (±)-cis-3-trietyylisilyylioksi-4-(2-tienyyli)-N-t-butoksikarbonyyliatsetidin-2-oni (Vllb) ΓΛ 10 TESO^

J—NBoc O

Silyyliatsetidinonin XVIb (425,7 mg, 1,48 mmol) 15 liuos liuotettiin dikloorimetaaniin (10 ml) ja jäähdytettiin 5 °C:seen jää/vesihauteessa. Reaktioseosta käsiteltiin katalyyttisellä määrällä DMAP:a ja sen jälkeen TESCl:lla (0,25 ml, 1,0 ekv.) ja sitten di-t-butyylidikar-bonaatilla (388,4 mg, 1,2 ekv.). Sekoitettiin 2 tuntia 20 tässä lämpötilassa, minkä jälkeen reaktio pysäytettiin kylläisellä vesipitoisella natriumbikarbonaatilla (5 ml) ja orgaaninen fraktio pestiin vedellä (5 ml), sitten kui-. vattiin (MgS04), vietiin lyhyen silikageelitulpan läpi ja väkevöitiin, jolloin saatiin haluttu tuote värittömänä : 25 öljynä (525,3 mg, Y: 93 %); 1H-NMR (300 MHz, CDC13): δ ;·!·'. 7,31 - 7,29 (m, 1H), 7,08 - 7,07 (m, 1H), 7,00 - 6,58 (m, 1H), 5,31 (d, 1H, J = 6 Hz), 5,03 (d, 1H, J = 6 Hz), 1,40 (s, 9H), 0,83 (t, 9H, J = 8 Hz), 0,56 - 0,47 (m, 6H); 13C-NMR (75,6 MHz, CDC13): δ 165,5, 147,5, 136,4, 127,6, 126,2, ; / 30 126,1, 83,3, 77,3, 57,9, 27,7, 6,2, 4,3.

I i » I > 4° 109795

Esimerkki 21

Tyypillinen esimerkki 10-desasetyylibakkatiini-I- II: n C-10-aseman derivati soimi seksi selektiivisesti 10-bentsoyyli-10-desasetyyli-7-trietyylisilyyli-5 bakkatiini-III (Xxa)

Argonatmosfaarissa oleva kaavan IX mukainen bakka-tiinijohdannainen, jossa R4 vastaa ryhmää SiEt3 (43,5 mg, 0,066 mmol), liuotettiin kuivaan tetrahydrofuraaniin (1,0 ml). Liuos jäähdytettiin -40 eC:seen ja lisättiin 10 hitaasti n-BuLi:a (0,050 ml, 0,82 mmol, 1,6 M liuos). Kun oli sekoitettu 5 minuuttia, lisättiin bentsoyylikloridia (0,030 ml, 0,26 mmol) ja reaktioseos lämmitettiin 0 °C:seen. Reaktioseosta sekoitettiin 1,5 tuntia ennen kuin reaktio pysäytettiin kylläisellä ammoniumkloridili-15 uoksella (2 ml). Vesipitoista väliainetta uutettiin etyyliasetaatilla (2 x 5 ml), kuivattiin (magnesiumsulfaatilla) ja haihdutettiin, jolloin saatiin öljy. Suoritettiin flash-silikageelikromatografia (eluoitiin 50-%:isella etyyliasetaatilla heksaaneissa), jolloin saatiin otsikon 20 yhdiste (30 mg, Y: 60 %, kaavan X1 mukainen yhdiste, jossa R4 = Si( Et )3, R" = OCOC6H5) vaahtona; 1H-NMR (CDC13): δ 8,17 - 8,05 (m, 4H), 7,64 - 7,42 (m, 6H), 6,67 (s, 1H), . 5,67 (d, 1H), 4,95 (d, 1H), 4,81 (ra, 1H), 4,56 (dd, 1H), • '/ 4,30 (d, 1H), 4,14 (d, 1H), 3,92 (d, 1H), 2,50 (m, 1H), |25 2,30 - 2,0 (m, 18H), 1,92 - 1,80 (m, 1H), 1,72 - 1,62 (bs, 4H), 1,30 (s, 3H), 1,00 (s, 3H), 0,89 (t, 3H), 0,56 (q, :'i‘: 6H); HRMS (FAB/NOBA): Laskettu yhdisteelle C^H^O^Si (MH+): 762,3435. Todettu: 762,3427.

, \ : Tätä menettelyä käyttäen voidaan valmistaa C-10-

* i I

,< >·] 30 karbonaatit, -sulfonaatit, -karbamaatit, -eetterit, jne.

Saannot saadaan paremmiksi, kun käytetään litiumheksame-: '*· tyylidisilatsaania.

I i s f i > > » » * 4i 109795

Esimerkki 22 2' -0-bentsyylioksikarbonyyli-6a-hydroksi-7a-hydrok-sipaklitakseli (Xlla)

5 O

I QAc 9

dl/'x CK> )-\ CH» ,iiOH

Ph NH O ..>|OH

ph/^Y^o,,,,\ 10 öcbz y\/ F* \^°

H0 : jL

: OAC

OCOCgHg

Liuos, jonka muodosti 2'-O-bentsyylioksikarbonyyli- 15 6,7-dehydropaklitakseli (100 mg, 0,1 mmol) kuivassa tetra- hydrofuraanissa (3 ml), jäähdytettiin 5 eC:seen jää/vesi- hauteessa. Liuosta käsiteltiin pyridiinillä (24 μΐ, 0,3 mmol) ja 4-metyylimorfoliini-N-oksidilla (12 mg, 0,1 mmol). Kun oli saatu täydellinen liuos, lisättiin kata- 20 lyyttinen määrä osmiumtetroksidia (2,5 mg, 0,01 mmol) ja saatu keltainen liuos laitettiin jääkaappiin 96 tunniksi.

. Saatu liuos laimennettiin etyyliasetaatilla (10 ml) ja *. pestiin kylläisellä natriumbikarbonaatilla (5 ml), sitten • · \ vedellä (10 ml). Orgaaninen fraktio kuivattiin (MgS04) ja 1 t * j(* · 25 väkevöitiin, jolloin saatiin raakatuote värittömänä vaah- 1 ( · ’· ·’ tona. Tuote puhdistettiin kromatografiällä silikageelillä < < · ·,*· (eluoitiin 20-%:isella CH3CN:lla CH2Cl2:ssa), jolloin saa tiin haluttu tuote valkoisena vaahtona (47 mg, Y: 47 %); 1H-NMR (CDCI3, 300 MHz): δ 8,12 (d, 2H, J = 6,0 Hz), 7,68 · 30 (d, 2H, J = 6,0 Hz), 7,60 - 7,29 (m, 16H), 6,93 (d, 1H, J * 9,0 Hz), 6,80 (s, 1H), 6,24 (t, 1H, J = 9,0 Hz), 5,99 • t (dd, 1H, J = 3,0, 9,0 Hz), 5,71 (d, 1H, J = 6,0 Hz), 5,45 (d, 1H, J = 3,0 Hz), 5,27 - 5,13 (m, 2H), 4,67 - 4,63 (m, :V: 2H), 4,33 (s, 2H), 4,16 - 4,12 (m, 1H), 3,85 (d, 1H, J = » » ·:··· 35 6,0 Hz), 3,65 (dd, 1H, J = 3,0, 12,0 Hz), 2,878 - 2,84 (m, 42 109795 1H), 2,52 (s, 3H), 2,42 - 2,33 (m, 1H), 2,20 - 2,12 (m, 4H), 2,01 (s, 1H), 1,89 (s, 3H), 1,61 (s, 3H), 1,16 (s, 3H), 1,11 (s, 3H); 13C-NMR (CDC13, 75,6 MHz): 6 205,9, 172,3, 169,3, 167,6, 167,1, 166,9, 154,0, 140,5, 136,6, 5 134,2, 133,7, 133,4, 132,9, 132,0, 130,2, 129,1, 128,9, 128.8, 128,7, 128,6, 128,5, 128,4, 127,1, 126,4, 91,5, 84,1, 79,1, 77,9, 77,7, 77,6, 76,8, 76,6, 74,8, 72,0, 71.8, 70,7, 60,4, 57,6, 52,6, 42,6, 39,7, 36,0, 25,9, 22,5, 21,4, 21,0, 20,8, 15,4, 14,7, 14,1; HRMS, laskettu 10 yhdisteelle C25HseN017: 1004,3705, todettu: 1004,3691. Esimerkki 23 6a-hydroksi-7a-hydroksipaklitakseli (Ie) 15 1 ^ /

......\>>XA

ÖH V/'v\/ Η \/°

HO : I

20 : OAc .... OCOCeHs • · • ·

Liuos, jonka muodosti 2'-O-bentsyylioksikarbonyyli-6a-hydroksi-7a-hydroksipaklitakseli (47 mg, 0,047 mmol) :.: : 25 etyyliasetaatissa (3 ml), laitettiin Parr-pulloon ja puh- • distettiin argonilla. Lisättiin palladiumia hiilellä ::: (20 mg) ja saatua suspensiota ravisteltiin 276 kPa:n (40 psi:n) vetypaineessa. 3 tunnin kuluttua reaktio oli loppunut ja suspensio suodatettiin lyhyen Celite-tulpan * · .···, 30 läpi, minkä jälkeen väkevöitiin. Raakatuote puhdistettiin silikageelikromatografialla (eluoitiin 20-%:isella : " CH3CN:lla CH2Cl2:ssa), jolloin saatiin haluttu tuote valkoi- ·...· sena vaahtona (20,2 mg, Y: 99 % talteenotetusta lähtöai- neesta); 1H-NMR (CDC13, 300 MHz): δ 8,15 (dd, 2H, J = 0,9, 35 8,0 Hz), 7,72 (dd, 2H, J = 0,9, 9,0 Hz), 7,76 - 7,26 (m, 43 109795 UH), 7,02 (d, 1H, J = 9 Hz), 6,79 (s, 1H), 6,23 (t, 1H, J = 9,0 Hz), 5,80 (dd, 1H, J = 2,1, 8,7 Hz), 5,73 (d, 1H, J = 7,2 Hz), 4,82 - 4,79 (m, 1H), 4,68 - 4,64 (m, 2H), 4,34 (s, 2H), 4,15 (ilmeinen t, 1H, J = 5,4 Hz), 3,85 (d, 5 1H, J = 9,0 Hz), 3,69 - 3,60 (m, 2H), 2,83 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 2,50 (s, 3H), 2,43 - 2,35 (m, 1H), 2,28 - 2,23 (m, 1H), 2,19 (s, 3H), 2,00 (s, 1H), 1,80 (s, 3H), 1,63 (S, 3H), 1,19 (s, 3H), 1,13 (s, 3H); 13C-NMR (CDC13, 75,6 MHz): δ 205,6, 172,6, 172,5, 139,9, 137,8, 133,6, 133,1, 10 131,8, 130,1, 128,9, 128,7, 128,5, 128,2, 126,9, 126,7, 91.4, 83,9, 78,9, 77,7, 77,5, 74,6, 73,0, 72,0, 71,8, 57.5, 54,7, 42,5, 39,5, 36,0, 25,9, 22,4, 21,1, 20,7, 15,2, 14,6.

Esimerkki 24 15 Seuraavat kaavan I2 mukaiset spesifiset paklitakse- lijohdannaiset voidaan syntetisoida tässä patenttihakemuksessa kuvattujen menetelmien ja esimerkkien mukaisesti:

K P

20 Rlf | T3 ) R2/VvV^O...../ . 2

= \ / WTV'· I

. ÖH /V/^-v0 ··.·. HO ^ ÖAc : 25 bcoc^ * ·

Yhdiste R2 R1 Ra

If 2-furyyli COC6H5 00H3

Ig 2-tienyyli COC6H5 0CH3 • · 30 Ih 2-furyyli COC6H5 0S02CH3 li 2-tienyyli COC6H5 0S02CH3 : ” Ij 2-furyyli COC6H5 OCOCH2CH2CH3

Ik 2-furyyli COC6H5 0S02-(4-me- tyylife- ·.·,· 35 nyyli) .. 109795 44

Yhdiste R2 R1 Ra

Il 2-tienyyli COC6H5 0S02-(4-bro- mifenyyli)

Im 2-furyyli COC6H5 0C02CH2C6H5 5 In 2-tienyyli COC6H5 0C02CH2C6H5

Io 2-furyyli COC6H5 OCOC6H5 lp 2-tienyyli COC6H5 OCOC6H5

Iq 2-furyyli CH3CH (CH3) CH2OCO OAc

Ir 2-tienyyli CH3CH(CH3)CH2OCO OAc 10 Is fenyyli CH3CH(CH3)CH2OCO OAc

It 2-tienyyli (CH3)2CHOCO OAc

Iu fenyyli (CH3)2CHOCO OAc lv 2-furyyli CH2=CHCH2OCO OAc

Iw 2-tienyyli CH2=CHCH2OCO OAc 15 Ix fenyyli CH2=CHCH2OCO OAc ly 2-furyyli sykloheksyyli-OCO OAc

Iz 2-tienyyli sykloheksyyli-OCO OAc laa fenyyli sykloheksyyli-OCO OAc

Iab 4-oksatso- (CH3)2CHOCO OAc 20 lyyli

Iac 2-metyyli- (CH3)2CHOCO OAc 4-oksatsolyyli : : Iad 4-oksatso- (CH3)3COCO OAc lyyli ··,·. 25 Iae 2-metyyli- (CH3)3COCO OAc 4-oksatsolyyli : Iaf 4-oksatso- COC6H5 OAc lyyli . lag 2-metyyli- COC6H5 OAc '·' 30 4-oksatsolyyli

Iah 2-furyyli (CH3)3COCO OCON(CH3)2

Iai 2-tienyyli (CH3)3COCO OCON(CH3)2 \ J Iaj 2-furyyli 0C06H5 OCON(CH3)2 ;·. Iak 2-tienyyli COC6H5 OCON(CH3)2 35 lal 4-oksatso- (CH3)3COCO OCON(CH3)2 lyyli 45 109795

Yhdiste R2 R1 Ra

Iam 2-me tyyli- (CH3)3COCO OCON(CH3)2 4-oksatsol-yyli 5 Iän 4-oksatso- COC6H5 OCON(CH3)2 lyyli

Iao 2-me tyyli- COC6H5 OCON(CH3)2 oksatsol-yyli 10 lap 2-tienyyli COC6H5 OCOCH2CH2CH3

Iaq fenyyli (CH3)3COCO OCON(CH3)2

Iar 2-tienyyli COC6H5 OCON(CH3)2

Esimerkki 25 15 Seuraavat kaavan I3 mukaiset spesifiset paklitakse- li johdannaiset voidaan syntetisoida tässä patenttihakemuksessa kuvattujen menetelmien ja esimerkkien mukaisesti:

Ra 0

Γμ \ / OH

20 R1 NH O CvH3 / OH

,ΛΛ.....hCo

:··: 0H

HO : ÖA(T

25 ÖCOC6H5

Yhdiste R2 R1 Ra las 2-furyyli COC6H5 OCH3 Iät 2-tienyyli COC6H5 0CH3 30 Iau 2-furyyli COC6H5 0S02CH3 ·· Iav 2-tienyyli COC6H5 0S02CH3 law 2-furyyli COC6H5 OCOCH2CH2CH3 ·/. Iax 2-furyyli COC6H5 0S02-(4-metyy- lifenyyli) '...· 35 lay 2-tienyyli COC6H5 0S02-(4-bromi- fenyyli)

Iaz 2-furyyli COC6H5 0C02CH2C6H5 46 1 0 9 7 9 5

Yhdiste R2 R1 Ra

Iba 2-tienyyli COC6H5 0C02CH2C6H5

Ibb 2-furyyli COC6H5 OCOC6H5

Ibc 2-tienyyli COC6H5 OCOC6H5 5 Ibd 2-furyyli CH3CH( CH3 )CH2OCO OAc

Ibe 2-tienyyli CH3CH(CH3 )CH2OCO OAc

Ibf fenyyli CH3CH(CH3)CH2OCO OAc

Ibg 2-tienyyli (CH3)2CHOCO OAc

Ibh fenyyli (CH3)2CHOCO OAc 10 Ibi 2-furyyli CH2=CHCH2OCO OAc

Ibj 2-tienyyli CH2=CHCH2OCO OAc

Ibk fenyyli CH2=CHCH2OCO OAc

Ibl 2-furyyli sykloheksyyli-OCO OAc

Ibm 2-tienyyli sykloheksyyli-OCO OAc 15 Ibn fenyyli sykloheksyyli-OCO OAc

Ibo 4-oksatso- (CH3)2CHOCO OAc lyyli

Ibp 2-metyyli- (CH3)2CHOCO OAc 4-oksatsolyyli 20 Ibq 4-oksatso- (CH3)3COCO OAc lyyli

Ibr 2-metyyli- (CH3)3COCO OAc :··· 4-oksatsolyyli

Ibs 4-oksatso- COC6H5 OAc | 25 lyyli

Ibt 2-metyyli- COC6H5 OAc 4-oksatsolyyli

Ibu 2-furyyli (CH3)3COCO OCON(CH3)2

Ibv 2-tienyyli (CH3)3COCO OCON(CH3)2 30 Ibw 2-furyyli 0C06H5 OCON(CH3)2 . . Ibx 2-tienyyli COC6H5 OCON(CH3)2

Iby 4-oksatso- (CH3)3COCO OCON(CH3)2 lyyli :·*. Ibz 2-metyyli- (CH3)3COCO OCON(CH3)2 : 35 4-oksatsolyyli

Ica 4-oksatso- COC6H5 OCON(CH3)2 Λ iyyii 47 109795

Yhdiste R2 R1 R“

Icb 2-metyyli- COC6H5 OCON(CH3)2 4-oksatsolyyli

Icc 2-tienyyli COC6H5 OCOCH2CH2CH3 5 led fenyyli (CH3)3COCO OCON(CH3)2

Ice 2-tienyyli COC6H5 OCON(CH3)2

Esimerkki 26 Biologiset tulokset 10 Hiirten Ml09-malli

Balb/c x DBA/2 F^hydridihiiriin implantoitiin vatsakalvon sisään, kuten William Rose on kuvannut julkaisussa Evaluation of Madison 109 Lung Carcinoma as a Model for Screening Antitumor Drugs, Cancer Treatment Re-15 ports, 65, nro 3-4 (1981), 0,5 ml 2-%:ista (paino/til-avuus) M109-keuhkosyöpäsolukkoa.

Hiiret käsiteltiin yhdisteellä tutkimuksen aikana niin, että ne saivat vatsakalvon sisäisinä injektioina erilaisia annoksia joko vuorokausina 1, 5 ja 9 kasvain-20 siirron jälkeen tai päivinä 5 ja 8 siirron jälkeen. Hiirien elossapysymistä seurattiin päivittäin, kunnes oli ku-:··· lunut suunnilleen 75 - 90 vuorokautta kasvainsiirrosta.

Yksi hiiriryhmä koetta kohti jätettiin käsittelemättä ja ··.·. se toimi vertailuryhmänä.

• i 25 Yhdisteellä käsiteltyjen (T) hiirten mediaanielos- !!'.* sapysymisaikoja verrattiin vertailuna (C) toimineiden i a hiirten mediaanielossapysymisaikaan. Näiden kahden arvon • » · suhde jokaiselle yhdisteellä käsitellylle hiiriryhmälle kerrottiin 100:11a ja on ilmaistu prosentteina (so. % T/C) 30 taulukossa I esimerkkiyhdisteelle.

Taulukko I

(IP M109 tulokset) t » % T/C (annos yksikkönä mg/kg/injektio; 35 Yhdiste aikataulu)

Ia 161 % (60 mg/kg/inj; vrk 5 & 8) 48 109795 Tämän keksinnön mukaisilla yhdisteillä on kasvaimia inhiboivia aktiivisuuksia nisäkkäissä. Siten tämän keksinnön toinen aspekti koskee menetelmää kaavan I mukaiselle yhdisteelle herkkien nisäkäskasvainten inhiboimiseksi.

5 Tämä keksintö tarjoaa myös farmaseuttiset formu- laatiot (koostumukset), jotka sisältävät kaavan I mukaista yhdistettä yhdessä yhden tai useamman farmaseuttisesti hyväksyttävän inertin tai fysiologisesti aktiivisen kantajan, täyteaineen, laimentimen tai adjuvantin kanssa. 10 Esimerkkejä paklitakselin tai sen läheisen johdannaisen formuloimisesta (mukaanlukien mahdollisen annostuksen) on kuvattu lukuisissa kirjallisuuslähteissä, esimerkiksi US-patenteissa nrot 4 960 790 ja 4 814 470, ja tällaisia menetelmiä voidaan noudattaa formuloitaessa tämän keksinnön 15 mukaisia yhdisteitä. Uudet yhdisteet ovat esimerkiksi annettavissa tablettien, pillerien, jauheseosten, kapselien, injektioiden, liuosten, peräpuikkojen, emulsioiden, dispersioiden, ravintoesiseosten muodossa ja muissa sopivissa muodoissa. Farmaseuttista valmistetta, joka sisältää yh-20 distettä, sekoitetaan sopivasti ei-toksisen farmaseuttisen orgaanisen kantajan tai ei-toksisen farmaseuttisen epäor-“'· gaanisen kantajan kanssa tavallisesti noin 0,01 - 2 500 mg tai enemmän annostusyksikköä kohti, edullisesti 50 - 500 '.*·*: mg. Tavallisia farmaseuttisesti hyväksyttäviä kantajia • 25 ovat esimerkiksi mannitoli, urea, dekstraanit, laktoosi, |·.·. peruna- ja maissitärkkelykset, magnesiumstearaatti, talk- ki, kasviöljyt, polyalkyleeniglykolit, etyyliselluloosa, * · · poly(vinyylipyrrolidoni), kalsiumkarbonaatti, etyyliole-, . aatti, isopropyylimyristaatti, bentsyylibentsoaatti, nat- 30 riumkarbonaatti, gelatiini, kaliumkarbonaatti, piihappo ja * · muut tavallisesti käytetyt hyväksyttävät kantajat. Farma-: ·,, seuttinen valmiste voi myös sisältää ei-toksisia apuainei- ta kuten emulgointi-, säilöntä-, kostutusaineita ja niiden kaltaisia, esimerkiksi sorbitaanimonolauraattia, trietano-* *t 35 liamiinioleaattia, polyoksietyleenimonostearaattia, gly- [ ) 49 109795 seryylitripalmitaattia, dioktyylinatriumsulfosukkinaattia ja niiden kaltaisia.

Keksinnön mukaiset yhdisteet voidaan myös pakas-tuskuivata ja haluttaessa yhdistää muiden farmaseuttisesti 5 hyväksyttävien täyteaineiden kanssa parenteraalisella injektiolla antamista varten sopivien formulaatioiden valmistamiseksi. Tällaista antamista varten formulaatio voidaan saattaa käyttömuotoon veteen (normaali, suolaliuos) tai veden ja orgaanisen liuottimen kuten propyleeni-10 glykolin, etanolin ja niiden kaltaisten seokseen.

Tämän keksinnön mukaisia yhdisteitä voidaan käyttää paklitakselina nisäkkäiden kasvainten hoitamiseen. Pakli-takselin antamisen tapaa, annostusta ja aikataulua ih-missyöpäpotilaissa on tutkittu laajalti. Katso esimerkiksi 15 Ann. Int. Med., 111, s. 273 - 279 (1989). Tämän keksinnön mukaisilla yhdisteillä annettava annos, joko yksittäisan-nos, moniannos tai vuorokausiannos, luonnollisesti vaih-telee riippuen kyseessä olevasta käytettävästä yhdisteestä yhdisteen vaihtelevan tehokkuuden vuoksi, valitusta anto-20 tavasta, saajan koosta ja potilaan tilan luonteesta. Annettavalla annoksella ei ole määrättyjä rajoja, mutta se on tavallisesti tehokas määrä tai moolimäärän perusteella • · ekvivalenttinen määrä farmakologisesti aktiivista vapaata !*·*: muotoa, joka saadaan annostusformulaatiosta, kun aktiivi- | 25 nen lääke vapautuu metabolisesti, sen haluttujen farmako- logisten ja fysiologisten vaikutusten aikaansaamiseen. Annettava annostus on yleensä välillä 0,8-8 mg/kg kehon • · · painosta tai noin 50 - 275 mg/m2 potilaasta. Syövän hoidon , . alan ammattionkologisti pystyy selvittämään ilman liial- ’;]· 30 lista kokeilua sopivat menettelyt tämän keksinnön mukais-> · ···’ ten yhdisteiden tehokkaalle antamiselle esimerkiksi viita- I'·,. ten paklitakselin ja sen johdannaisten aikaisempiin tutki- * muksiin.

> i » • * » 1

1 I M * I

Claims

109795

1. Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisen yhdisteen valmistamiseksi, jolla on kaava I 5 R’NH O / \CK? r χ 1 MrS" I I (I) io HO j OAcT ÖCOCeMs jossa

15 R1 on -CORz, jossa Rz on RO- tai R; R2 on C^g-alkyyli, C2_6-alkenyyli, C2_6-alkynyyli, C3.6-syklo-alkyyli tai radikaali, jolla on kaava -W-Rx, jossa W on sidos, C2 6-alkeenidiyyli tai -(CH2)t-, jossa t on 1 - 6; ja Rx on naftyyli, fenyyli tai heteroaryyli, ja lisäksi Rx voi 20 olla mahdollisesti substituoitu 1-3 samalla tai erilai sella C^g-alkyylillä, C^-alkoksilla, halogeenilla tai ;··· -CF3-ryhmällä ; Ra on -OCOR, H, OH, -OR, -0S02R, -OCONR°R, -OCONHR, ··.·, -OCOO (CH2) tR tai -OCOOR; . !25 Rb ja Rc merkitsevät kumpikin hydroksia tai ne muodostavat • I I HV yhdessä sidoksen hiiliatomien kanssa, joihin ne ovat kiin- I I | nittyneet; ja • · · '·’ * R ja R° merkitsevät toisistaan riippumatta C^g-alkyyliä, C2_6-alkenyyliä, C3_6-sykloalkyyliä, C2_6-alkynyyliä tai fe-:,’··Β0 nyyliä, joka on mahdollisesti substituoitu 1-3 samalla *it>: tai erilaisella C^g-alkyylillä, C1_6-alkoksilla, halogeenil- la tai -CF3-ryhmällä, edellyttäen, että kaavan I mukainen yhdiste ei ole N-debentsoyyli-N-{ [ (2,2,2-trikloorietyy-li) oksi]-karbonyyli}-7-deoksi-A6,7-taksoli tai 10-deasetyy-:.’·,·35 li-13- (N-Boc-P-fenyylisoserinyyli) -7-deoksi-A6,7-bakkatiini, 51 109795 tunnettu siitä, että (a) yhdiste, jolla on kaava Ha ? ^ i OH 5 po^Sh 9 c^V^o...../ IIa ÖCbz V_/\/ Fl HO i OAc 10 ÖCOCgHg jossa Cbz on bentsyy1ioksikarbonyyli, saatetaan reagoimaan dietyyliaminorikkitrifluoridin kanssa, jolloin saadaan yhdiste, jolla on kaava lila 15 O OAc o P"1H jj Cy1 ^ <JL / VyCH, lila ; CJY Y o.....\ tai 20 ocbz Y7\y ^ =V° H0 I ÖAc ...j ÖCOCeHs • · .) 1 (b) yhdiste, jolla on kaava Via :1;äs i.i i OAc o r v CK \— ho·"-/ VN Ί \ / VTp) :’·,30 7\/ H VIa HO : IV ’ : i OAc ÖCOCgHs « · · l · '.··1 saatetaan reagoimaan yhdisteen kanssa, jolla on kaava VII i · 1 I f » IKI • I 52 109795 R3°', / Π VH

2. O CHg ^-(ch3 Λ;: HO.....VIa ' ! k- 25 ^ ; öac • 1 Φ · “ F\: ÖCOCgHg • · t • · · • · · tunnettu siitä, että kaavan Ia mukainen yhdiste 30. ii >^c ° ·;·' nh o CH3 y—(f**3 O 0.....KO Ia ÖH f1 \^°

35 HO j OAc ÖCOCeHj 55 109795 saatetaan reagoimaan esteripelkistimen kanssa ja eristetään yhdiste Via.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä kaavan » * 'I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa kaavassa R1 on I '·· bentsoyyli tai t-butoksikarbonyyli; R2 on fenyyli, furyyli tai tienyyli; Ra on asetyylioksi; ja Rb ja Rc muodostavat yhdessä sidoksen hiiliatomien kanssa, joihin ne ovat kiin- » I * t[t[l 35 nittyneet. » · 54 109795

3. Patenttivaatimuksen 2 mukainen menetelmä 6,7-dehydropaklitakselin valmistamiseksi.

4. Patenttivaatimuksen 2 mukainen menetelmä 6,7-dehydro-31 -(2-furyyli)-3'-N-debentsoyyli-N-t-butoksikar- 5 bonyylipaklitakselin valmistamiseksi.

5. Patenttivaatimuksen 2 mukainen menetelmä, joka on 6,7-dehydro-3'-(2-furyyli)paklitakseli.

5. V jossa R3 on hydroksin suojaryhmä, jolloin saadaan yhdiste, jolla on kaava VIII 10 OAc 0 R1 NH O χι m r^i .....( ν°Ί· L I Ξ \ / OtAS/v yj t t . tai OR3 '“A /hA/ Vlli '

15 HO ; Ökc ÖCOCgHg (c) yhdiste, jolla on kaava II 20 :*·: ^ f OH R1 NH O Sh3 / Π H ; * r2/^<^o.....( VCHaL J 2 i 25 \ / 'ch,/N/\ 0R3 /x/h-a/0 : HO : ÖAc « · · * I · - ÖCOCeHg • » • i · ' 30 jossa RJ on -OCOR, H, -OR, -OR3, -0S02R, -OCONR°R, -OCONHR, -0C02(CH2)tR tai -OC02R, saatetaan reagoimaan dietyyliamino-! *·· rikkitrifluoridin kanssa, jolloin saadaan yhdiste, jolla : on kaava III M l * 2 » » 53 109795 R* P R1 -H M T3 ^ \ ...../ VCH3 . "1 c : \ / ^/= 111 / . . 5 ÖR3 ^~/^y R /ν'0 tai HO : ÖAc ÖCOCgHg (d) yhdiste, jolla on kaava XIII 10 ΓΗ )-K CH3 R1NH O Y__/ V/L ...../ ^C^]C ^ 15 ^R3 SOCO XI11 HO ; OAc bCOCgHg saatetaan reagoimaan 0s04:n kanssa, jolloin saadaan yh-20 diste, jolla on kaava XII .... ^ P OH f R1 NH O C^3 ) CpHs? λΟΗ : 25 ...../ V™. J i;;> έκ3 SQ>1X)o x:i HO OAc f » · Z OCOCgHg 1 * « % * * t ·

6. Patenttivaatimuksen 2 mukainen menetelmä, joka on 6,7-dehydro-3'-(2-tienyyli)-3'-N-debentsoyyli-N-t-bu- 10 toksikarbonyylipaklitakseli.

7. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa kaavassa R1 on bentsoyyli tai t-butoksikarbonyyli; R2 on fenyyli, furyyli tai tienyyli; Ra on asetyylioksi; ja Rb ja Rc merkitsevät 15 hydroksia.

8. Patenttivaatimuksen 7 mukainen menetelmä 6a-hydroksi-7a-hydroksipaklitakselin valmistamiseksi.

9. Menetelmä yhdisteen valmistamiseksi, jolla on kaava

10. Patenttivaatimuksen 9 mukainen menetelmä, jossa esteripelkistin on tetrabutyyliammoniumboorihydridi. 1 · 56 109795