HU204202B - Process for producing new, local pharmaceutical compositions - Google Patents

Process for producing new, local pharmaceutical compositions Download PDF

Info

Publication number
HU204202B
HU204202B HU861402A HU140286A HU204202B HU 204202 B HU204202 B HU 204202B HU 861402 A HU861402 A HU 861402A HU 140286 A HU140286 A HU 140286A HU 204202 B HU204202 B HU 204202B
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
hyaluronic acid
salt
solution
molecular weight
acid
Prior art date
Application number
HU861402A
Other languages
English (en)
Other versions
HUT40579A (en
Inventor
Silvana Lorenzi
Aurelio Romeo
Valle Francesco Della
Original Assignee
Fidia Spa
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=36694284&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=HU204202(B) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Priority claimed from IT48980/85A external-priority patent/IT1184675B/it
Application filed by Fidia Spa filed Critical Fidia Spa
Priority to HU891006A priority Critical patent/HU208833B/hu
Publication of HUT40579A publication Critical patent/HUT40579A/hu
Publication of HU204202B publication Critical patent/HU204202B/hu

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
    • A61K38/1808—Epidermal growth factor [EGF] urogastrone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/61—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule the organic macromolecular compound being a polysaccharide or a derivative thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0048—Eye, e.g. artificial tears
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/02—Drugs for disorders of the nervous system for peripheral neuropathies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/0006—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid
    • C08B37/0024—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid beta-D-Glucans; (beta-1,3)-D-Glucans, e.g. paramylon, coriolan, sclerotan, pachyman, callose, scleroglucan, schizophyllan, laminaran, lentinan or curdlan; (beta-1,6)-D-Glucans, e.g. pustulan; (beta-1,4)-D-Glucans; (beta-1,3)(beta-1,4)-D-Glucans, e.g. lichenan; Derivatives thereof
    • C08B37/0027—2-Acetamido-2-deoxy-beta-glucans; Derivatives thereof
    • C08B37/003—Chitin, i.e. 2-acetamido-2-deoxy-(beta-1,4)-D-glucan or N-acetyl-beta-1,4-D-glucosamine; Chitosan, i.e. deacetylated product of chitin or (beta-1,4)-D-glucosamine; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
    • C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
    • C08B37/0072—Hyaluronic acid, i.e. HA or hyaluronan; Derivatives thereof, e.g. crosslinked hyaluronic acid (hylan) or hyaluronates

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)

Description

A leírás terjedelme: 24 oldal
HU 204202 Β forduló fertőző gennyes-váladékos kötőhártyagyulladás vagy a főleg szarvasmarhákat, juhokat (birkákat) és kecskéket megtámadó kötőhártya-fertőzés kezelésekor. Valószínűleg ezen három fajtának közös specifikus etológiái faktorai vannak. Nevezetesen úgy tűnik, hogy a szarvasmarhában lévő fő mikroorganizmus a Moraxella bovis (még ha egyéb vírusos eredetű mikroorganizmus, mint amilyen a Rhinotracheitis vírus, a Micoplasma, a juh esetében a Rickettsia és Chlamydia, a kecske esetében a Rickettsia sem zárható ki).
Maga a betegség heveny (akut) formában nyilvánul meg és gyors terjedésre hajlamos. Kezdeti szakaszokban a tünettant szemhéjgörcs és túlzott könnyezés, majd gennyes váladék, kötőhártyagyulladás és szaruhártyagyulladás jellemzi, melyet gyakran láz, csökkent étvágy és tejképződés kísér. A szanihártya károsodásai különösen komolyak és a végső szakaszokban még magában a szaruhártyában is okozhatnak perforálást. A klinikai folyamat néhány naptól néhány hétig tart Ά kemoterápiás szerek végtelen nagy sorozatát használták kezelésre, melyeket mind helyileg (gyakran gyulladásgátló szteroidokkal együtt), mind a szervezetbe juttatva alkalmazták. Ilyen szerek lehetnek többek között az alábbiakban felsoroltak: tetraciklinek, mint amilyen az oxitetraciklin, penicillinek, mint amilyen a kloxacillin és a benzil-penicillin, szulfamidok, polimixin B (mikonazollal és prednizolonnal együtt), klóramfenikol, tilozin és kloromicetin. A betegség helyi kezelése, látszólagos egyszerűsége ellenére, még megoldatlan problémát jelent, mivel egy és más okból mind a mai napig lehetetlennek bizonyult szemészetben használatos, az antibiotikumokat és a szulfamidokat olyan koncentrációban tartalmazó gyógyszerkészítményhez jutni, amely a könny váladékban fejt ki győgyhatást Ez teljesen érthető az oldatok esetében, figyelembe véve azt, hogy ezen állatok feje általában leginkább lehajtott helyzetben van. Azonban a nehézség fennáll a félig szilárd gyógyszerek esetében is, mivel a bennük szokásosan használt hordozóanyagok nem rendelkeznek olyan tulajdonságokkal, melyek szükségesek ahhoz, hogy a szaruhártya felületére tapadjanak, minthogy rendszerint nem rendelkeznek elegendő nagy hatóanyagkoncentrációval és nem érhetik el a tökéletes eloszlást (azaz eloszlásesés van jelen).
A szemészetben használt hagyományos szemcseppek (szemvizek) hátrányairól Slatter és munkatársai számoltak be az Austr. vet. J. 59, (3), 69-72. (1982)ben,
A jelen találmány egyik előnye, hogy a szemcsepp olyan tökéletesített új típusai használatát teszi lehetővé, amelyek a fenti hátrányokat kiküszöbölik. A találmány szerinti szemészeti gyógyszerkészítményekben hordozóanyagként a hialuronsav alkalmazása lehetővé teszi olyan kiváló készítmények foimulálását (kikészítését), amelyekben a hatóanyagnak nincs koncentrációesése, így tökéletesen homogén és átlátszó, valamint tökéletesen tapad a szaruhártya felhámjához, nincs szenzibizáIő (érzékennyé tevő) hatása, továbbá a hatóanyaggal kiváló összekeverhetőséget és lehetséges retard (késleltetett) hatást biztosít
A találmány tárgya eljárás új, helyi alkalmazású gyógyszerkészítmények előállítására, közelebbről olyan gyógyszerkészítmények előállítására, amelyek az alábbi komponenseket tartalmazzák:
1. valamilyen gyógyhatású anyagot vagy gyógyhatá- 5 sú anyagok keverékét amelyek helyi kezelésre alkalmasak, és
2. valamilyen hordozóanyagot, amely hialuronsavból vagy a hialuronsav egy molekulafrakciójából, vagy a hialuronsav valamilyen alkálifémmel, alkáliföld- 10 fémmel, magnéziummal, alumíniummal, ammóninmmal vagy más gyógyhatású anyaggal alkotott sójából és adott esetben a helyi alkalmazású gyógyszerkészítményeknél szokásos további kötőanyagból (adalékanyagból) áll. 15
A helyi alkalmazású gyógyszerkészítmények különösen a bőrgyógyászatban, általában a nyálkahártyák, és főképpen a száj és az orrűregek nyálkahártyáinak megbetegedésében, a fülkagyló megbetegedéseiben, és különösen a szem külső felületének megbetegedései- 20 ben jelenthetnek előnyt A helyi alkalmazású gyógyszerkészítmények használata különösen ajánlatos a gyermekgyógyászatban és az állatgyógyászati területen.
A találmány szerinti eljárással előállított gyógyszer- 25 rejlenek, hogy a gyógyszerkészítmény hatékonyabb hordozóanyagot tartalmaz, ezt a hatékonyságot elősegíti a hialuronsav hordozóanyag savas poliszacharidja, így a hatóanyag jobb biológiai hasznosíthatósággal 30 rendelkezik, mint amelyet az egyéb ismert gyógyászati kiszerelési eljárásokkal el lehet érni. A találmány szerinti új gyógyszerkészítmények továbbá különös jelentőséggel bírnak a szemészetben használatos gyógyszerkészítményekként, mivel az előzőekben említett tulaj- 35 donságaihoz a szaruhártya felhámjával kapcsolatos különleges hozzáférhetőség járul, és ennek következtében igen magas szintű tűrőképességgel rendelkeznek szenzibizálő (érzékennyé tevő) hatások nélkül. Abban az esetben, ha a gyógyszereket elasztikus (rugalmas) visz- 40 kőzus tulajdonságú tömeg oldat formájában vagy szilárd formában alkalmazzuk kezelésre, lehetőség nyílik arra, hogy a szaruhártya felhámján olyan filmek képződjenek, melyek homogének, stabilak, teljesen átlátszóak, jól tapadnak, s ezáltal biztosítják a gyógyszer 45 tartós biológiai használhatóságát, így kiváló tartós hatású gyógyszerkészítményekkénthasználhatók.
Az ilyen szemgyógyászati készítmények, különösen az állatgyógyászat területén, kivételes jelentőséggel bírnak, figyelembe véve például azt, hogy az állatgyó- 50 gyászaiban jelenleg nincsenek olyan szemészeti gyógyszerkészítmények, amelyek kemoterápiás szereket tartalmaznak. A gyakorlatban rendszerint a humángyógyászatban alkalmazott készítményeket használják és ezek nem mindig garantálják sem a specifikus hatás- 55 területet, sem nem tesznek eleget azon különleges feltételeknek, melyek között a kezelésnek hatásosnak kell lennie.
Hyen speciális eset áll elő például a fertőző szaruhártya- és kőtőhártya-gyulladás, a főleg lovaknál elő2
HU 204202 Β
A találmány szerinti új gyógyászati készítmény fent említett előnyös tulajdonságai természetesen a szemészeten kívül más területen is hasznosíthatók. Amint azt már említettük, a találmány szerinti gyógyászati készítmény alkalmazható a bőrgyógyászatban, valamint olyan betegségekben, amelyek megtámadják a nyálkahártyát, így a szájban lévő nyálkahártyát, tehát alkalmazható például a fogászatban.
A találmány lényeges jelentősége abban áll, hogy gyógyászati hordozóanyagként hialuronsavat valamilyen gyógyhatású anyaggal együtt alkalmazva lehetővé válik egy javított gyógyszerleadási rendszer kialakítása. A találmány szerinti új gyógyászati készítmény alapvetően két lényeges komponensből áll:
1. komponens: valamilyen gyógyhatású anyag, beleértve az alábbiakban részletesebben kifejtett különböző ilyen anyagok keverékét is.
2. komponens: hialuronsav, beleértve az alábbiakban részletesebben kifejtett hialuronsav kisebb molekulatömegű molekulafrakcióit, a hialuronsav vagy a hialuronsav kisebb molekulatömegű molekulafrakcióinak különböző sóit is.
Az 1. komponenst, a gyógyhatású anyagot mindenekelőtt osztályozni kell abból a szempontból, hogy a gyógyászat mely területén használják, figyelembe véve a humán- és az állatgyógyászat között fennálló különbséget, majd közelebbről meg kell határozni az alkalmazás különféle területeit, tekintettel az egyes szervezetekre vagy kezelendő szövetekre, így például különbségeiken tenni a szemészet, bőrgyógyászat, orr-, fül-, gégegyógyászat, szülészet, értan, ideggyógyászat terén, vagy a belső szervek megbetegedésebiek helyileg kezelhető eseteiben történő alkalmazások között A találmány szerinti készítmény egyik különösen előnyös alkalmazási területe az, amikor az 1. komponensként használt gyógyhatású anyagot elsősorban és legfőképpen szemészeti kezelésre használják. Egy másik kritérium szerint különbséget kell tenni az 1. komponensként használt gyógyhatású anyagok hatása alapján is, így például ezek az anyagok érzéstelenítőszerként fájdalomcsillapító szerként érszűkítő szerként baktériumellenes szerként vírusellenes szélként vagy gyulladásgátló szerként használhatók. A szemészet területén különösen javallottak például a pupillaszűkítő, gyulladásgáüó, sebhegesztő és mikrobaellenes hatások.
A találmány értelmében az 1. komponens egy vagy több hatóanyag keveréke is lehet. így például a szemészetben valamilyen antibiotikum egy gyulladáscsökkentővel és egy érszűkítővei, néhány antibiotikum egy vagy több gyulladáscsökkentővel, vagy egy vagy több antibiotikum egy pupillatágítóval, egy pupillaszűkítőveí, egy sebhegesztővel vagy egy allergiaellenes szerrel is lehet együtt Ennek következtében a szemészeti gyógyszerkészítmények például a következő hatóanyag-kombinációkat tartalmazhatják:
a) kanamicin + fenilefrin + dexametazon-foszfát,
b) kanamicin + betametazon-foszfát + fenilefrin, vagy a szemészetben használatos egyéb antibiotikumokkal - mint amilyen a rolitetraciklin, neomicin, gentamicin és a tetraciklin - alkotott hasonló kombinációk.
A bőrgyógyászatban az 1. komponensként alkalmazhatunk egyetlen hatóanyagot vagy például különféle antibiotikumok, mint amilyenek az eritromicin, gentamicin, neomicin, gramicidin, polimixin B keverékét, vagy ezen antibiotikumok gyulladásgátló szerekkel, például kortikosztercidokkal alkotott keverékeit Ezek a keverékek például a következők lehetnek:
a) hidrokortizon + neomicin;
b) hidrokortizon + neomicin + polimixin B + gramicidin;
c) dexametazon + neomicin;
d) fluorometolon + neomicin;
e) prednizolon + neomicin;
f) triamcinolon + neomicin + gramicidin + nisztaün, vagy bármilyen egyéb keverék, amelyet a bőrgyógyászati készítményekben hagyományosan alkalmaznak,
A találmány szerinti szemgyógyászati készítményekben 1. komponensként alkalmazott gyógyhatású anyagok például a következők lehetnek: bázisos és nem-bázisos antibiotikumok, például az aminoglükozidok, makrolidok, a tetraciklin és a peptidek, mint amilyen például a gentamicin, neomicin, sztreptomicin, dihidro-sztreptomicin, kanamicin, amikacin, tobramicin, szpektinomicm, eritromicin, oleandomicin, karbomicin, szpiramicin, oxítetraciklin, rolitetraciklin, bacitracin, polimixin B, gramicidin, kolisztin, klóramfenikol, linkomicin, vankomicin, novobiocin, ristocetín, klindamicin, amfotericin B, grizeofulvin, nisztatin és lehetséges sóik, mint amilyenek a szulfátok vagy a nitrátok, vagy ezeknek egyéb, az alábbiakban említésre kerülő hatóanyagokkal alkotott keverékei.
A jelen találmány értelmében előnyösen alkalmazhatók egyéb, a szemészetben használatos gyógyhatású anyagok, így egyéb fertőzésellenes szerek, mint amilyen a dietilkaibamazin, mebendazol, szulfamidok, mint amilyen a szulfacetamid, szulfadiazin, szulfizoxazol, vírusellenes és daganatgátló szerek, mint amilyen a jóddeoxiuridin, adenin-arabinozid, trifluor-timidin, aciklovir, etil-deoxiuridin, brómvinil-deoxiuridin, 5jód-5’-amino-2’,5’-dideoxi-uridin; szteroid gyulladásgátló szerek, mint amilyen a dexametazon, hidrokortizon, prednizolon, fluormetolon, medrizon és ezek lehetséges észterei, például a foszforsav-észterek; nemszteroid gyulladásgátló szerek, például az indometacin, oxifenbutazon, flurbiprofen; sebbegesztő (sebgyógyító) szerek, mint amilyen a bőmövekedési faktor; helyi érzéstelenítők, mint amilyen a benoxinát, proparakain és ezek lehetséges sói; kolinerg agonista (az acetilkolin termelést előmozdító) szerek, mint amilyen a pilokarpin, metakolin, karbailokolin, aceklidin, fiziosztigmin, neosztigmin, demekárium és lehetséges sóik; kolinerg antagonista szerek,'mint amilyen az atropin és sói; adrenerg agonista szerek, mint amilyenek a noradrenalin, adrenalin, nafazolin, metoxamin és lehetséges sóik; és az adrenerg antagonista szerek, mint amilyen a propranolol, timolol, pindolol, bupranolol, atenolol, metoprolol, pindolol, oxprenolol, praktolol, butoxamin, sotalolol, budarin, labetalol és lehetséges sóik.
Amint azt már fent említettük, az 1. komponens egy vagy több hatóanyag keverékéből is állhat Azok a
HU 204202 Β hatóanyagok, amelyek egyrészt önmagukban, másrészt egymással vagy egyéb, a bőrgyógyászatban alkalmazott hatóanyagokkal összekeverve az 1. komponensként a találmány szerinti készítményben alkalmazhatók, a következők lehetnek: gyógyhatású szerek, mint amilyen a fertőzésellenes, antibiotikus, mikrobaeUenes, gyulladásgátló, a sejtosztódást gátló, a sejtekre -mérgező hatású, vírusellenes, érzéstelenítő hatású szerek és a megelőzésre szolgáló szerek, mint amilyenek a napvédők, szagtalanítók (dezodorok), a csíraölő (antiszeptikus) szerek és a fertőtlenítőszerek. Az antibiotikumok közül- az alábbiakat említhetjük: eritromicin, bacitracin, gentamicin, neomicin, aureomicin, gramicidin és ezek keverékei, a baktériumellenes szerek és a fertőtlenítőszerek közül pedig az alábbiakat említhetjük: nitrofurazon, mafenid, klórhexidin, valamint a 8hidroxi-kinolin-szánnazékok és ezek lehetséges sói; a gyulladásgátló szerek közül szinte valamennyi kortikoszteroid, mint amilyen- a prednizolon, dexametazon, flumetazon, klobetazol, triamcinolon-acetonid, betanletazon vagy ezek észterei, mint amilyenek a valerátok, benzoátok, dipropionátok; a sejtekre mérgező hatású (citotoxikus) szerek közül a bluorouracil, metotrexát, podofiHin; az érzéstelenítőszerek közűi a dibukain, Kdokain, benzokain.
A fenti felsorolás azonban csak szemléltető jellegű, bármely, az irodalomban leírt egyéb gyógyhatású szer használható a találmány szerinti készítményben 1. komponensként
A szemészeti célokra és a bőrgyógyászati célokra alkalmazható példák alapján analóg módon következtethetünk arra, melyek azok a találmány szerinti gyógyszerkészítmények, amelyeket a gyógyászat elődául az orr-, fül-, gégegyőgyászatban vagy a fogászatban, vagy a belgyógyászatban, például az endokrinológiában (belső elválasztású mirigyekkel foglalkozó orvostudomány), ahol a kezeléseket olyan készítményekkel lehet hatásossá tenni, amelyek a bőiben felszívódnak. vagy a bőrön át savódnak fel, így például az orron belül szívódnak fel, ilyenek például az orr-sprayk (permetek) vagy a szájüregbe vagy a garatba történő belélegzésre alkalmas készítmények (inhaláciők).
A 2. komponens a hialuronsav gyógyszervivő anyag. Amint azt már az előzőekben említettük, a találmány szerinti gyógyászati készítmény 2. komponensként hialuronsavat annak kisebb molekulatömegű molekulafiakcióit vagy különféle sóit tartalmazza. A hialuronsav természetes heteropoliszacharid, amely Dglükuronsav és N-acetil-D-glükózamin váltakozó ma- > radékaiből áll. A hialuronsav jelen van a sejtek körüli gélekben, a kötőszövetek alapvető sejten kívüli anyagában, a gerinces szervezetekben, az ízületek savős nedvében, a szemben lévő csamokvízben, az emberi köldökszövetben, a kakastaiéjban és néhány baktéri- í umban. Molekulatömege körülbelül 8-10 millió.
A hialuronsavra vonatkozó első kutatást E. A. Balázs végezte (lásd 4141973 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás), aki olyan hialuronsavfrakciót különített el, mely képes volt helyettesíteni a ( t bulbáris kötőhártyán belüli folyadékokat és alkalmas volt egyéb gyógyászati alkalmazásra. A hialuronsav és kisebb molekulatömegű molekulafrakciői a valóságban széles körben hasznosnak bizonyultak a gyógyászatt 5 bán, és hasznosságuk a kozmetikai használatban is figyelemre méltó (lásd például Balázs és munkatársai: í Cosmetics and Toiletries, Italian Edition No. 5/84). Gyógyhatású szerként különösen az ízületi bániaknak kezelésében, így például az állatgyógyászat területén a lovak ízületi gyulladásának kezelésében, használták (Acta Vet Scand. 167,379 [1976]).
A hialuronsavat és molekulafrakcióit a szemsebészetben is használták a természetes szervek és szövetek gyógyászati, kiegészítő és helyettesítő szereiként (lásd például Balázs E. A. és munkatársai: Modem Problems in Ophtamology, 10, 3 [1970], E. B. Strieff, S. Karger, eds. Basel and Balázs és munkatársai: Viscosuigeiy and the Use of Sodium Hyaluronate During Intraocular Lens Implantation, Paper presented at the International
Congress and First Film Festival on Intraocular Implantation, Cannes, 1979).
Az 1984. október 10-én benyújtott 138572 számú nyilvánosságra hozott európai szabadalmi bejelentésben ismertetésre került a hialuronsav egy molekula25 frakciója, amelyet mind intraokuláris (szemen belüli), mind intraartikuláris (ízületen belüli) injekciókhoz alkalmaztak, valamint alkalmasnak bizonyultak a szemben lévő bulbáris kötőhártyán belüli folyadékok helyettesítésére és az ízületi bántalmak kezelésére.
Ellentétben a hialuronsav ezen gyógyászati alkalmazásával, vagy mind a sebészetben, mind a kozmetikában képlékeny segédanyagként való felhasználásával, a jelen találmány célkitűzése a hialuronsav és molekulafrakciói gyógyászati vivőanyagként történő felhaszná35 lása abból a célból, hogy gyógyhatású anyagokat helyi alkalmazásra tegyen lehetővé.
A felhasználandó gyógyászati vivőanyagként alkalmazott találmány szerinti 2. komponens bármilyen eredetű hialuronsav lehet, így például olyan savak is, 40 amelyeket bármely, az előzőekben említett természetes kiindulási anyagokból, beleértve a kakastaréjt is, extrahálással állítottak elő. Az ilyen savak előállítása kezdetleges extrakcióval ismertetésre kerültmár a szakirodalomban. Előnyösen tisztított hialuronsavat haszná45 lünk. A találmány szerint a teljes hialuronsav helyett, amelyet szerves anyagok közvetlen extrakciója útján állítottak elő, lehetséges olyan hialuronsav molekulafrakciók használata, amelyek molekulatömege széles körben változhat így például 13 milliós molekulatö50 megű teljes sav molekulatömegének körülbelül: 12%ától (molekulatömeg: 1500000) egészen 0,15%-áig (molekulatömeg: 20 000), előnyös azonban a teljes sav molekulatömegének 5% és 0,23% közötti molekulatömegű frakció használata. Ilyen molekulatömegű frakci55 ókat különböző eljárásokkal állíthatunk elő, például hidrolízissel, oxidálással, vagy enzimatikus kémiai szerekkel, fizikai eljárásokkal, például mechanikai úton vagy besugárzással, ennélfogva ezek a frakciók gyakran az elsődleges extraktumok azonos tisztítási eljárá60 sai során képződnek (lásd például Balázs és mnnkatár4
HU 204202 Β sai: Cosmetics and Toiletries, előzőekben említett helyen). A fentiek szerint kapott molekulafrakciók elkülönítése és tisztítása például molekulaszűréssel valósítható meg.
A találmány értelmében a 2. komponensként különösen előnyösen alkalmazható gyógyászati vivőanyag két olyan tisztított frakció, melyeket kakastaréjból származó hialuronsavból állíthatunk elő, ezek hialasztinként és hialektinként váltak ismertté. A hialasztinnak nevezett frakció átlagos molekulatömege körülbelül 50 000 és 100 000 között van. A hialektinnek nevezett frakció átlagos molekulatömege körülbelül 250 000 és körülbelül 350 000 között van. Ezen egyesített frakciókat a megfelelő kiindulási anyagból előállított teljes hialuronsavra vonatkoztatva 80%-os kitermeléssel állíthatjuk elő, ezen belül a hialektint 30%-os, a hialasztint pedig 50%-os kitermeléssel állíthatjuk elő a kiindulási hialuronsavra vonatkoztatva. (Ezen frakciók előállítását a későbbiekben a 20-22. példákban írjuk le részletesen).
így az előnyösen alkalmazandó hialuronsav molekulafrakciójának molekulatömege széles körben változhat, nevezetesen körülbelül 20 OOO-től körülbelül 1500000-ig, előnyösen körülbelül 30000-tól körülbelül 730 000-ig. A legelőnyösebben olyan hialuronsav frakciót használhatunk, amelynek molekulatömege körülbelül 50 000 és körülbelül 1(X) 000 közé esik, vagy körülbelül 500 000 és körülbelül 730000 közé esik, vagy egy olyan kombinált frakciót, amelynek molekulatömege körülbelül 250 000 és körülbelül 350 000 közé esik. Előnyös, ha ezek a molekulafrakciók mentesek a 30000-nél alacsonyabb molekulatömegű hialuronsav frakcióktól, hogy így alkalmazásukkor mentesek legyenek a gyulladásos mellékreakcióktól. (A továbbiakban, ha hialuronsavat említünk a találmányi leírás szövegében, akkor ezalatt, ahol ez a speciális szövegöszszefüggéssel megegyezik, mind a hialuronsav, mind pedig annak molekulafrakciói értendők).
A találmány szerinti gyógyszerkészítmény 2. komponenseként alkalmazott hialuronsav, valamint ennek molekulafrakciói helyett lehetséges ezek szervetlen bázisokkal, mint amilyenek az alkálifémek, így a nátrium, kálium, lítium, alkáliföldfémek, így a kalcium, bárium, stroncium, a magnézium vagy az alumínium, alkotott sóinak alkalmazása is. Ezek a sók sztöchiometrikusan semlegesek abban az értelemben, hogy valamennyi savfunkció sóvá alakított, vagy részleges sók, illetve savak, olyan értelemben, hogy csak egy bizonyos számú savfunkció van sóvá alakítva a fent említett fémekkel. Az ilyen sókat például egyszerűen úgy állíthatjuk elő, hogy a hialuronsavat vagy a fentiekben említett frakcióit számított mennyiségű bázissal reagáltatjuk, és az is lehetséges, hogy különböző bázisokból származó vegyes (kevert) sókat használunk.
Az előzőekben említett sókon túlmenően olyan sókat is használhatunk, amelyeket a hialuronsavból és egy olyan vegyületből képezünk, amelyeket a tágabb értelemben ammónium-szárraazékként vagy helyettesített arnmőnium-származékként, azaz aminként nevezhetünk, így például a mono-, di-, tri- és tetra-alkilammóniumsók, ahol az alkilcsoport előnyösen 1-18 szénatomot tartalmaz, vagy aralkilcsoportokat tartalmaz, ahol az alifás rész szénatomjainak száma megegyezik az előbbiekben az alkilcsoportnál említett szénatomszámokkal és az aril például fenilcsoportot jelenthet, mely adott esetben 1-3 metilcsoporttal, halogénatommal vagy hidroxilcsoporttal helyettesítve lehet A hialuronsav ezen ammónium- vagy helyettesített ammóniumsóit úgy állíthatjuk elő, hogy a hialuronsavat valamely olyan vegyülettel, amely primer, szekunder vagy tercier amint vagy ammónium-hidroxidot tartalmaz, vagy egy gyógyhatású anyaggal, mint amilyen például a találmány szerinti 1. komponens, kémiai reakcióba hozunk.
Az alábbiakban a találmány szerinti 1. és 2. komponens kombinálásával előállított gyógyászati készítmények elkészítését ismertetjük.
A találmány szerinti gyógyszerkészítmény előállításának különféle lehetőségei vannak, amelyek magukban foglalják például az alábbiakat
a) 1, komponensként valamilyen semleges vagy savas kémhatású hatóanyagot használunk, amelyet hialuronsavval vagy annak egy moiekulafrakciójával vagy ezek fémsóival keverünk össze;
b) a hialuronsavnak az 1. komponensként valamilyen bázisos kémhatású hatóanyaggal alkotott részleges sóit használjuk, és a hialuronsav fennmaradó savcsoportjait hagyjuk vagy az előzőekben említett fémekkel vagy bázisokkal semlegesítjük;
c) a hialuronsavnak az 1. komponensként alkalmazott bázisos hatóanyaggal alkotott sztöchiometrikusan semleges sóit használjuk a hialuronsav vagy annak részleges vagy teljesen semleges fémsója hozzáadása mellett;
d) az 1. komponensként alkalmazott bázisos hatóanyag és a hialuronsav sztöchiometrikusan semleges sóit használjuk további mennyiségű 1. komponens hozzáadása mellett; és
e) az alábbiakban részletezett sók és keverékek tetszés szerinti elegyeit használjuk.
4 A találmány szerinti gyógyszerkészítmény egyik lehetséges változatát úgy készítjük, hogy valamely 1, komponensként használt hatóanyagot, ha ez a hatóanyag bázisos természetű, mint amilyenek például a bázisos antibiotikumok, a hialuronsavval vagy annak molekulafrakcióival összekeverjük. Ebben az esetben a 2. komponensként alkalmazott hialuronsav és az 1. komponensként alkalmazott hatóanyag együtt sztöchiometrikusan részleges sókat képeznek, vagy savas sókat képeznek, ahol a 2. komponensként alkalmazott hialuronsav savcsoportjainak egy aliquot része az 1. komponensként alkalmazott hatóanyag bázisos csoportjaival sót képez; vagy sztöchiometrikusan semleges sókat képeznek, ahol a 2. komponensként alkalmazott hialuronsav valamennyi sav csoportja sóvá van alakítva, vagy ezen semleges sók és további, az 1. komponensként alkalmazott bázisos hatóanyag keverékei is lehetnek.
így a találmány értelmében, ha 1. komponensként
HU 204202 Β nens keverékét helyettesíthetjük a fent említett savak sóival vagy olyan sókkal, amelyek sztöchiometrikusan semlegesek, vagy természetesen ezen sóknak mind az 1. komponenssel, mind pedig a 2. komponenssel alkotottkeverékeivel.
A találmány értelmében 1. komponensként alkalmazott hatóanyagként a gyógyszereket önmagukkal, illetve kívánt esetben egyéb alkotórészekkel alkotott keverékei formájában is használhatjuk. Ha 1. komponensként az egyetlen hatóanyag helyett hatóanyagok keverékeit használjuk, mint ahogyan az előzőekben említettük, a bázisos hatóanyag hialuronsavval és ennek molekulafiakcióival képezett sói egy- vagy több-bázisos anyaggal képezett kevert sók lehetnek, vagy az ilyen típusú kevert sók együtt lehetnek bizonyos számú egyéb hialmonsav poliszachariddal, melyek savas csoportjai a fent említett bázisokkal vagy fémekkel sóvá alakított formában vannak. így például lehetséges a hialuronsav vagy egyik molekulafiakciója, a hialasztin vagy a hialektin olyan sóinak elkészítése, amelyek bizonyos százalékban olyan savcsoportokat tartalmaznak, amelyek az antibiotikus hatású kanamicinnel, egy másik százalékos mennyiségben az érszükítő hatású fenilefrinnel képeznek sőt, míg a savcsoportok fennmaradó százaléka szabad formában van, vagy nátriummal vagy a fent említett fémekkel sóvá alakított formában van. Az is lehetséges, hogy az ilyen típusú kevert sókat a hialuronsav vagy annak molekulafrakciói vagy ezek fémekkel alkotott sói további mennyiségével keverünk össze, mint ahogyan azt az előzőekben azoknál a gyógyászati készítményeknél említettük, amelyek csak egyetlen hatóanyagot tartalmaztak a fent említett savas poliszacharidokkal együtt.
A találmány egyik különleges megvalósítási módja szerint a fent említett sókat elkülönítés, és lehetőleg tisztítás után szilárd, vízmentes állapotban amorf porként is alkalmazhatjuk. Amikor ez a por kapcsolatba kerül a kezelendő szövettel, a por kocsonyás jellegű, viszkózus konzisztenciájú, mgalmas tulajdonságú tömény vizes oldatot képez. Ezek a tulajdonságok erősebb hígításban is megmaradnak, így az előbb említett vízmentes sók helyett különféle töménységű vizes oldatok vagy sóoldatok, amelyek egyéb gyógyászatilag elfogadható kötőanyagokat vagy alkotórészeket mint amilyenek az ásványi sók, amelyek a pH-t és az ozmózisnyomást szabályozzák, is tartalmazhatnak. Természetesen a sók felhasználásával gélek, a kötőhártyazsákba helyezhető kis műanyag tasakok (inszertek), krémek vagy kenőcsök is készíthetők, melyekben egyéb, az ilyen gyógyászati készítmények hagyományos formulálásainál (kikészítésénél) szokásos hordozóanyagokat vagy alkotórészeket is tartalmaznak. A találmány egyik különleges kiviteli módja értelmében azok az előnyösen alkalmazható gyógyászati készítmények, amelyekben a hialuronsav, illetve ennek molekulafrakciói vagy ezek ásványi sói, vagy az 1. komponensként alkalmazott bázisos hatóanyaggal képezett részleges vagy semleges sói csupán egyetlen gyógyászati vivőanyagként (a víz mint oldószer lehet az egyetlen kivétel) szerepelnek, ι
Az 1. és 2. komponens kvantitatív tömegaránya a találmány értelmében tág határok között változhat és természetesen függ a két komponens minőségétől, és elsősorban a hatóanyag minőségétől. így például a hia5 luronsav és az aktív komponens tömegaránya célszerűen: 100:0,5 és 100 : 500 között lehet
A találmány szerinti gyógyszerkészítmények szilárd formájúak is lehetnek, például fagyasztva-szárított porok, melyek csupán a két komponenst tartalmazzák keverék formájában vagy külön-külön csomagolásban.
Atalálmány szerinti szilárd formájú gyógyszerkészítntények a kezelendő felhámmal érintkezve többé vagy kevésbé tömény oldatotképeznek, attól függően, hogyan viszonyul a megfelelő felhám természete, in vitro, az előző15 lég elkészített oldatok azonos tulajdonságaihoz, amely a jelen találmánynak egy különlegesen fontos szempontját képezi. Az ilyen oldatok előnyös képviselői a desztillált vízzel vagy steril sóoldattal készített oldatok, amelyek előnyösen semmilyen más gyógyászati vivőanyagot nem tartalmaznak, csak a hialuronsavat vagy sóit Az ilyen oldatok töménysége szintén széles körben változhat, például 0,01% és 75% között mozoghat mindkét komponensre nézve külön-külön, illetve azok keverékeire vagy sóira. Ezen oldatoknál különösen előnyös azok kifejezett rugai25 mas-viszkőz jellege, amely például akkor következik be, ha a gyógyszerkészítmény vagy az egyes komponensek mennyisége 10% és 90% közé esik. Az ilyen típusú gyógyszerkészítmények különösen jelentősek mind vízmentes formájukban (fagyasztva-szárított porok), mind tömény oldatok vagy vízzel vagy sóoldattal hígított oldatok formájában, melyek adalékanyagokat és segédanyagokat is tartalmazhatnak, ezek különösen fertőtlenítőszerek lehelnek vagy ásványi sók, melyek pufféiként hatnak vagy egyéb, szemészetben használatos szerek.
A találmány szerinti gyógyszerkészítmények közül az esettól függően különösen azokat célszerű választani, amelyek savassági foka megfelel az alkalmazás helyének, azaz fiziológiailag elviselhető pH-val rendelkeznek. A hialuronsav bázisos hatóanyaggal képezett sói esetén például a pH beállítását úgy végezhetjük, hogy megfelelő módon szabályozzuk a poliszacharid vagy sóik és magának a bázisos hatóanyagnak a mennyiségét így például, ha a hialuronsav bázisos hatóanyaggal képezett sójának a savassága túl nagy, a szabad savcsoportok fölöslegét a fentiekben említett szervetlen bázisokkal, például nátrium-, kálium- vagy . ammónium-hidroxiddal semlegesítjük.
Az alábbi formulálási példák a találmány szerinti olyan gyógyszerkészítményeket szemléltetik kőzeiebb50 ről, amelyekben 1. komponensként valamilyen gyógyhatású anyag és 2. komponensként hiaiuronsavból álló gyógyászati vivőanyag van együtt
I. formulálási példa
Felhámnövekedési faktort tartalmazó gél, amelynek 100 g-ja az alábbi komponenseket tartalmazza:
- 55 g hialuronsav nátriumsó (hialasztin frakció),
- 30 g hialuronsav nátriumsó (hialektin frakció),
- 0,5 g felhám növekedési faktor,
- 23,5 g kétszer desztillált víz.
HU 204202 Β
2. formulálási példa
Pilokarpin-nitrát tartalmú, a kötőhártyazsákba helyezhető kis műanyag tasak (inszert) 100 mg-ja az alábbi komponenseket tartalmazza:
- 100 mg hialnronsav nátriumsó (hialasztin frakció),
- 2 mg pilokaxpin-nitrát.
3. formulálási példa
Sztreptomicint tartalmazó helyi alkalmazásra való poralakú készítmény, melynek 100 g-ja az alábbi komponenseket tartalmazza:
- 70 g hialuronsav nátriumsó (hialasztin frakció),
- 28,5 g hialuronsav nátriumsó (hialektin frakció),
- 1,5 g sztreptomicm.
4. formulálási példa
Pilokarpin tartalmú, a kötőhártyazsákba helyezhető kis műanyag tasak (inszert), melynek 100 mg-ja az alábbi komponenseket tartalmazza:
- 100 mg, a hialuronsav pilokarpinnal és nátriummal képezett kevert sója (lásd 18. előállítási példa).
5. formulálási példa
Gentamicint és nafazolint tartalmazó szemcsepp, melynek 100 ml-e az alábbi komponenseket tartalmazza:
- 2,910 g, a hialuronsav gentamicinnel, nafazolinnal és nátriummal képezett kevert sója (lásd 16. előállítási példa),
- 0,050 g propil-oxibenzoát,
- 1,500 g nátrium-foszfát,
- desztillált vízzel 100 ml-re kiegészítve.
6. formulálási példa
Klóramfenikolt, neomicint, fenilefrint, nitrofurazont tartalmazó szemcsepp, melynek 100 ml-e az alábbi komponenseket tartalmazza:
- 2,890 g, a hialuronsav neomicinnel, fenilefrinnel és nátriummal képezett kevert sója (lásd 17. előállítási példa),
- 0,500 g klóramfenikol,
- 0,02 g nitrofurazon,
- desztillált vízzel 100 ml-re kiegészítve.
7. formulálási példa
Dexameíazon-foszfátot, kanamicint és fenilefrint tartalmazó szemcsepp, melynek 100 ml-e az alábbi komponenseket tartalmazza:
- 3,060 g, a hialuronsav kanamicinnel és fenilefrinnel képezett kevert sója (lásd 15. előállítási példa),
- 0,100 g dexametazon-foszfát nátriumsó,
- 0,060 g metil-(p-hidroxi-benzoát),
- desztillált vízzel 100 ml-re kiegészítve.
Előállítási eljárások:
A találmány szerinti készítményekben alkalmazható sók előállítását ismert módon úgy végezhetjük el, hogy az 1. és 2. komponens, és kívánt esetben bázisok vagy a fent említett alkálifémmel, alkáliföldfémmel, magnéziummal, alumíniummal vagy ammóniummal képezett bázisos sók, vízzel vagy valamilyen szerves oldószerrel képzett oldatait vagy szuszpenzióit reagáltatjuk egymással, majd a sókat amorf, vízmentes formában ismert műveletek alkalmazásával elkülönítjük. Az is lehetséges például, hogy először mind az 1., mind a 2. komponens vizes oldatát elkészítjük, miközben ezeket a komponenseket megszabadítjuk mind a savakkal képezett sóik, mind pedig fémsóik, például az 1. komponens esetében a szulfátok és a 2. komponens esetében a nátriumsók vizes oldataitól oly módon, hogy azokat relatív ioncserélőkkel kezeljük, majd a két oldatot alacsony hőmérsékleten, például 0 °C és 20 °C között elegyítjük. Ha az így kapott só könnyen oldódik vízben, fagyasztva szárítjuk, míg azokat a sókat, amelyek nehezen oldódnak, centrifugálással, szűréssel vagy dekantálással különítjük el és ezt követően, szükséges esetben, szárítjuk.
A következő példák a találmány szerinti A) módszer közelebbi szemléltetésére szolgálnak anélkül, hogy a találmány szerinti eljárást azokra korlátoznánk.
1. példa
Hialuronsav sztreptomicinnel képezett sójának előállítása
2,43 g (10 milliekvivalens) sztreptomicin-szulfátot 25 ml desztillált vízben oldunk. Az oldatot 15 ml hidroxil-formában lévő kvaterner ammónium gyantából (Dowex 1x8) álló 5 °C hőmérsékletre teimosztált oszlopon eluáljuk. A szulfátmentes eluátumot 5 °C hőmérsékletre teimosztált edénybe gyűjtjük. 4,0 g, 255 000es molekulatömegű hialuronsav (ez megfelel 10 milliekvívalens monomer egységnek) náíriumsót 400 ml desztillált vízben oldunk. Az oldatot ezután 15 ml proton formában lévő szulfonsav gyantából (Dowex 50x8) álló 5 °C hőmérsékletre teimosztált oszlopon eluáljuk. A nátriummentes eluátumot összegyűjtjük, majd keverés közben a sztreptomicin bázis oldatához adjuk. Az így kapott oldatot hűtjük és azonnal fagyasztva szárítjuk, Az így előállított sóban a hialuronsav valamennyi savcsoportja a sztreptomicin bázisos funkcióival sóvá alakított formában van.
Termelés: 5,5 g.
A sztreptomicin bázis tartalom Bacillus subtilis ATCC. 6633-on végzett mikrobiológiai meghatározással standard sztreptomicinnel összehasonlítva 33,8 tömegbe, amely megfelel az elméletileg számítottnak.
A hialuronsav tartalom a poliszacharidban kötött glükuronsav Bittér és munkatársai (Anal. Biochem. 4, 330 [1962]) módszere szerint végzett koloiimetriás meghatározással 66,2 tömeg% (az elméleti: 66,0%).
2. példa
Hialuronsav eritromicinnel képezett sójának előállítása
4,0 g 77000-es molekulatömegű hialuronsav (ez 10 milliekvivalens monomer egységnek felel meg) nátriumsóját 400 ml desztillált vízben oldunk. Eztkövető7
HU 204202 Β en az oldatot 15 ml proton formában lévő szulfonsav gyantából (Dowex 50x8) álló 5 °C hőmérsékletre termosztált oszlopon eluáljuk. Az eluátumot amely már nátriummentes, 5 °C hőmérsékleten állni hagyjuk. 7,34 g (10 milliekvivalens) eritromicin bázist keverés 5 közben 5 °C hőmérsékleten az előzőekben előkészített hialuronsav oldathoz adunk és a keverést addig folytatjuk, míg az oldódás teljessé válik. Az így kapott oldatot bűtjük és fagyasztva szárítjuk. Az így előállított sóban a hialuronsav valamennyi savcsoportja az eritromicin- 10 nel sóvá alakított formában van.
Termelés: 10,8 g.
Az eritromicin bázis tartalom Staphylococcus aureus ATCC 6538p-n végzett mikrobiológiai meghatározással standard eritromicinnel összehasonlítva 66,0 tő- 15 meg%, mely megfelel az elméleti értéknek.
A hialuronsav tartalom a poliszacharidban kötött glükuronsav Bittér és munkatársai módszere szerint végzett kolorimetriás meghatározással 34,0 tömeg%, mely megfelel az elméletileg számítottnak. 20
3. példa
Hialuronsav kanamicinnel képezett sójának előállítása
1,46 g (10 milliekvivalens) dikanamicin-szulfátot 25 25 ml desztillált vízben oldunk. Az oldatot hidroxil fonnában lévő 15 ml kvatemer ammónium gyantából (Dowex 1x8) álló 5 °C hőmérsékletre temaosztált oszlopon eluáljuk. A szulfátoktól mentes eluátumot 5 °C hőmérsékletté temaosztált edénybe gyűjtjük. 4,0 g 30 165000-es molekulatőmegű hialuronsav (ez megfelel 10 milliekvivalens monomer egységnek) nátriumsőt 400 ml desztillált vízben oldunk. Az oldatot ezután 15 ml proton formában lévő szulfonsav gyantából (Dowex 50x8) álló 5 °C hőmérsékletre temaosztált oszlo- 35 pon eluáljuk. A nátriummentes eluátumot összegyűjtjük és örvénykeverő (Vortex) alkalmazása mellett a kanamicin bázis oldatába adagoljuk. Az így kapott oldatot azonnal hűtjük és fagyasztva szárítjuk.
Termelés: 4,8 g. 40
Az így előállított sóban a hialuronsav valamennyi savcsoportja a kanamicinnel sóvá alakított formában van.
A kanamicin bázis tartalom Bacillus subtilis ATCC 6633-on végzett mikrobiológiai meghatározással stan- 45 dard kanamicinnel összehasonlítva 24,2 tőmeg%, mely megfelel az elméletileg számított értéknek.
A hialuronsav tartalom a poliszacharidban kötött glükuronsav Bittér és munkatársai módszere szerint végzett kolorimetriás meghatározással 75,8 tömeg%, 50 mely megfelel az elméleti mennyiségnek.
4. példa
Hialuronsav neomicinnelképezellsójának előállítása 55
1,52 g (10 milliekvivalens) neomicin-szulfátot 20 ml desztillált vízben oldunk és az oldatot 15 ml hidroxil fonnában lévő kvatemer ammónium gyantából (Dowex 1x8) álló 5 °C hőmérsékletre termosztált oszlopon eluáljuk. A szulfátoktól mentes eluátumot 60
5°C hőmérsékletre termosztált edényben gyűjtjük.
4,0 g 170000-es molekulasúlyú hialuronsav (ez megfelel 10 milliekvivalens monomer egységnek) nátriumsót 400 ml desztillált vízben oldunk és az oldatot 15 ml proton fonnában lévő szulfonsav gyantából (Dowex 50x8) álló 5 °C hőmérsékletre teimosztált oszlopon eluáljuk. A nátriummentes eluátumot keverés közben a neomiciu bázist tartalmazó oldatba gyűjtjük. A képződött viszko-elasztikus csapadékot dekantálással elkülönítjük és fagyasztva szárítjuk.
Termelés: 4,76 g.
Az így előállított sóban a hialuronsav valamennyi savcsoportja a neomicinnel sóvá alakított formában van.
A neonácin bázis tartalom Staphylococcus aureus ATCC 6538p-n végzett kvantitatív mikrobiológiai meghatározással standard neomicinnel összehasonlítva 21,2 tömeg%, amely megfelel az elméletileg számított értéknek.
A hialuronsav tartalom a poliszacharidban kötött glükuronsav Bittér és munkatársai módszere szerint végzett kolorimetriás meghatározással 78,8 tőmeg%.
5. példa
Hialuronsav gentamicinnel képezett sójának előállítása 6
1,45 g (10 milliekvivalens) gentamicin-szulfátot 25 ml desztillált vízben oldunk. Az oldatot 15 ml hidroxil formában lévő kvatemer ammónium gyantából (Dowex 1x8) álló 5 °C hőmérsékletre termosztált oszlopon eluáljuk. A szulfátoktól mentes eluátumot 5 °C hőmérsékletre termosztált edényben gyűjtjük. 4,0 g 170 000-es molekulatömegű hialuronsav (ez megfelel 10 milliekvivalens monomer egységnek) nátriumsót 400 ml desztillált vízben oldunk. Az oldatot ezután proton formában lévő szulfonsav gyantából (Dowex 50x8) álló 5 °C hőmérsékletre termosztált oszlopon eluáljuk. A nátriummentes eluátumot őrvénykeverő (Vortex) alkalmazása mellett a gentamicin bázis oldatába gyűjtjük. A képződött sűrű, nagyon viszkózus csapadékot dekantálással elkülönítjük és fagyasztva szárítjuk.
Termelés: 4,65 g.
Az így előállított sóban a hialuronsav valamennyi savcsoportja gentamicinnel sóvá alakított formában van.
A gentamicin bázis tartalom Staphylococcus epidermidus ATCC 12228-on végzett kvantitatív mikrobiológiai meghatározással standard gentamicinnel Összehasonlítva 20,0 tömeg%, mely megfelel az elméleti tartalomnak.
A hialuronsav tartalom a poliszacharidban kötött glükuronsav Bittér és munkatársai módszere szerint végzett kolorimetriás meghatározással 80,0%.
ő. példa
Hialuronsav amikacinnal képezett sójának előállítása
1,47 g (10 milliekvivalens) amikacin bázist 500 °C hőmérsékleten 100 ml desztillált vízben oldunk. 4,0 g
HU 204202 Β
170 000-es molekulatőmegű hialuronsav (ez megfelel 10 milliekvivalens monomer egységnek) nátriumsót 4000 ml desztillált vízben oldunk. Az oldatot ezután 15 ml proton formában lévő szulfonsav gyantából (Dowex 50x8) 5 °C hőmérsékletre termosztált oszlopon eluáljuk. A nátriummentes eluátumot örvénykeverő (Vortex) alkalmazása mellett az amikacin bázist tartalmazó oldatba gyűjtjük. A képződött sűrű és rendkívül viszkózus csapadékot dekantálással különítjük el és fagyasztva szárítjuk.
Termelés: 5,16 g.
Az így előállított sóban a hialuronsav valamennyi savcsoportja amikacinnal sóvá alakított formában van.
Az amikacin bázis tartalom Staphylococcus aureus ATCC 29737-en végzett kvantitatív mikrobiológiai meghatározással standard amikacinnal összehasonlítva 27,7 tömeg%, amely megfelel az elméleti tartalomnak.
A hialuronsav tartalom a poliszacharidban kötött glükuronsav Bittér és munkatársai módszere szerint végzett kolorimetriás meghatározással 72,3 tömeg%.
7. példa
Hialuronsav rolitetraciklinnel képezett sójának előállítása
4,0 g 170 000-es molekulatömegű hialuronsav (ez megfelel 10 milliekvivalens monomer egységnek) nátriumsót 400 ml desztillált vízben oldunk. Az oldatot ezután 15 ml proton fonnában lévő szulfonsav gyantából (Dowex 50x8) álló 5 °C hőmérsékletre termosztált oszlopon eluáljuk. A nátriummentes eluátumot 5 °C hőmérsékleten tartjuk. 5,3 g (10 milliekvivalens) rolitetraciklin bázist keverés közben a fénytől távol tartva a hialuronsav oldathoz adagolunk és a keverést a teljes oldódásig folytatjuk. Az így kapott oldatot azonnal hűtjük és fagyasztva szárítjuk.
Termelés: 8,9 g.
Az így előállított sóban a hialuronsav valamennyi savcsoportja rolitetraciklinnel sóvá alakított formában van.
A rolitetraciklin bázis tartalom Bacillus pumilus ATCC 14884-en végzett mikrobiológiai meghatározással standard rolitetraciklinnel összehasonlítva 58,2 tömeg%, amely megfelel az elméleti értéknek.
A hialuronsav tartalom a poliszacharidban kötött glükuronsav Bittér és munkatársai módszere szerint végzett kolorimetriás meghatározással 41,8 tömeg%.
8. példa
Hialuronsav polimixin B-vel képezett sójának előállítása
2,4 g (10 milliekvivalens) polimixin B bázist 5 °C hőmérsékleten 100 ml desztillált vízben szuszpendálunk. 4,0 g 170 000-es molekulatőmegű hialuronsav (ez megfelel 10 milliekvivalens monomer egységnek) nátriumsót 400 ml desztillált vízben oldunk. Az oldatot ezután 15 ml proton fonnában lévő szulfonsav gyantából (Dowex 50x8) álló 5 c 2 hőmérsékletre termosztált oszlopon eluáljuk. Anátrii .'nmentes eluátumot intenzív keverés mellett 5 °C hőm-;'sékleten a polimixin B bázis szuszpenziójába gyűh ük. Kezdeti időszak után, amikor az oldat élessé válik, nehezen oldható tennék fokozatos képződése kezdődik el, amely tennék csak ötszörös térfogatmennyiségű aceton hozzáadásával válik teljessé. A kivált anyagot szűréssel különítjük el, acetonban mossuk, majd vákuumban szárítjuk.
Termelés: 6,05 g.
Az így előállított sóban a hialuronsav valamennyi savcsoportja polimixin B-vel sóvá alakított fonnában van.
A polimixin B bázis tartalom Bacillus bronchiseptica ATCC 4617-en végzett kvantitatív mikrobiológiai meghatározással standard polimixin B-vel összehasonlítva 38,7 tömeg%, amely megfelel az elméleti értéknek.
A hialuronsav tartalom a poliszacharidban kötött glükuronsav Bittér és munkatársai módszere szerint végzett kolorimetriás meghatározással 61,3%.
9. példa
Hialuronsav gramicidin S-sel képezett sójának előállítása
6,7 g (10 milliekvivalens) gramicidin S-hidrogénkloridsót 200 ml etanol-víz 80:20 arányú elegyében szuszpendálunk. Az oldatot ezután 15 ml hidroxil formában lévő kvatemer ammónium gyantából (Dowex 1x8) álló 5 °C hőmérsékletre termosztált oszlopon eluáljuk. 4,0 g 165 000-es molekulatömegű hialuronsav (ez megfelel 10 milliekvivalens monomer egységnek) nátriumsót 400 ml desztillált vízben oldunk. Az oldatot ezután 15 ml proton formában lévő szulfonsav gyantából (Dowex 50x8) álló 5 °C hőmérsékletre termosztált oszlopon eluáljuk.
A nátriummentes eluátumhoz 200 ml dimetil-szulfoxidot adunk és az elegyet 5 °C hőmérsékleten keverjük. Ehhez az elegyhez adjuk lassú ütemben a gramicidin bázis oldatát Az így kapott oldathoz 10-szeres térfogatmennyiségű acetont adunk, mire megindul az anyagkiválás. A kivált anyagot szűréssel elkülönítjük, acetonnal mossuk és vákuumban szárítjuk.
Termelés: 9,55 g.
Az így előállított sóban a hialuronsav valamennyi savcsoportja gramicidin S-sel sóvá alakított formában van.
A gramicidin S bázis tartalom Staphylococcus faecium ATCC 10 541-en végzett kvantitatív mikrobiológiai meghatározással standard gramicidin S-sel összehasonlítva 60,0 tömeg%, amely megfelel az elméleti értéknek.
A hialuronsav tartalom a poliszacharidban kötött glükuronsav Bittér és munkatársai módszere szerint végzett kolorimetriás meghatározással 40,0%.
10. példa
Hialuronsav nafazolinnal képezett sójának előállítása
Tiszta nafazolin bázist a következő módon készítünk. 4,94 g (20 millimól) nafazolin-hidrogénkloridot 5 °C hőmérsékleten 100 ml desztillált vízben oldunk. Az oldathoz 20 ml 5 mólos vizes ammónium-hidroxid oldatot adunk, majd kétszer 100 ml etil-acetáttal extra9
HU 204202 Β hálunk. A szerves rétegeket külön-külön kétszer 50 ml vízzel extraháljuk, majd a szerves rétegeket egyesítjük és szilárd vízmentes nátrium-szulfáttal szárítjuk. A szűrés nfán kapott oldatot körülbelül 50 ml térfogatra töményítjük és jégszekrénybe helyezzük a kristályosodás 5 elősegítése céljából. Akiváltkristályos terméket ezután szűrjük, etil-acetáttal mossuk, és vákuumban szárítjuk. Termelés: 4,0 g tiszta nafazolin bázis.
4,0 g 625000-es molekulatömegű hialuronsav (ez megfelel 10 milliekvivalens monomer egységnek) nát- 10 riumsőt 400 ml desztillált vízben oldunk és az oldatot 15 ml proton formában lévő szulfonsav gyantából (Dowex 50x8) álló 5 °C hőmérsékletre termosztált oszlopon eluálunk. A nátriummentes eluátumot 5 °C hőmérsékleten tartjuk. Ehhez a hialuronsav oldathoz 2,1 g 15 (10 milliekvivalens) nafazolin bázist adunk és az elegyet 5 °C hőmérsékleten addig keveqük, míg teljes oldódás következik be. Az így kapott elegyet azonnal hűtjük és fagyasztva szárítjuk.
Termelés: 5,72 g. 20
Az így előállított sóban a hialuronsav valamennyi savcsoportja nafazolinnal sóvá alakított formában van.
A nafazolin bázis tartalom kvantitatív spektrofotometriás meghatározással, amelyet az amerikai egyesült államokbeli gyógysze±önyvi nafazolin standarddal 25 összehasonlítva vizsgáltunk, 35,7 tömeg%, amely megfelel az elméleti értéknek.
A hialuronsav tartalom a poliszacharidban kötött glükuronsav Bittér és munkatársai módszere szerint végzett kolorimetriás meghatározással 64,3 %. 30
11. példa
Hialuronsav fenilefrinnel képezett sójának előállítása
2,04 g (10 milliekvivalens) L-fenilefrin-hidrogén- 35 kloridot 25 ml desztillált vízben oldunk. Az oldatot 15 ml hidroxil formában lévő kvaterner ammónium gyantából (Dowex 1x8) álló 5 °C hőmérsékletre termosztált oszlopon eluáljuk.
A kloridoktől mentes eluátumot 5 °C hőmérsékletre 40 termosztált edénybe gyűjtjük. 4,0 g 820000-es molekulatömegűhialuronsav (ez 10 milliekvivalens monomeregységnek felel meg) nátriumsót 400 ml desztillált, vízben oldunk. Az oldatot 15 ml proton formában lévő szulfonsav gyantából (Dowex 50x8) álló 5 °C hőmér- 45 sékletre termosztált oszlopon eluáljuk. A nátriummentes eluátumot keverés közben a fenilefrin bázist tartalmazó oldatba gyűjtjük. Az így kapott elegyet azonnal hűtjük és fagyasztva szárítjuk.
Termelés: 5,25 g. 50
Az így előállított sóban a hialuronsav valamennyi savcsoporíja fenilefrinnel sóvá alakított formában van.
A fenilefiin tartalom ultraibolya spektrofotometriás meghatározással, az amerikai egyesült államokbeli gyógyszerkönyv standard addíciós módszerét alkal- 55 mazva 30,6 tőmeg%, amely megegyezik az elméleti tartalommal.
A hialuronsav tartalom a poliszacharidban kötött glükuronsav Bittér és munkatársai módszere szerint végzett kolorimetriás meghatározással 69,4%. 60 j
12. példa
Hialuronsav atropinnal képezett sójának előállítása 4,0 g 1300000-es molekulatömegű hialuronsav (ez megfelel 10 milliekvivalens monomer egységnek) nát5 riumsót 400 ml desztillált vízben oldunk. Az oldatot ezután 15 ml proton formában lévő szulfonsav gyantából (Dowex 50x8) álló 5 °C hőmérsékletre termosztált oszlopon eluáljuk. A nátriummentes eluátumot 5 °C hőmérsékleten tartjuk. A hialuronsav oldathoz 2,89 g 10 (10 milliekvivalens) atropin bázist adunk és az elegyet 5 °C hőmérsékleten keveqük. Az így kapott elegyet hűtjük és fagyasztva szárítjuk.
Termelés: 65 g.
Az így kapott sóban a hialuronsav valamennyi sav15 csoportja atropinnal sóvá alakított formában van.
Az atropin bázis tartalom az amerikai egyesült államokbeli gyógyszerkönyv szerint végzett kvantitatív gázkromatográfiás meghatározással, standard atropinnal összehasonlítva 43,3%, amely megfelel az elméleti 20 értéknek.
A hialuronsav tartalom a poliszacharidban kötött glükuronsav Bittér és munkatársai módszere szerint végzett kolorimetriás meghatározással 56,7%.
13. példa
Hialuronsav pilokarpinnal képezett sójának előállítása
2,45 g (10 milliekvivalens) pilokarpin-hidrogén-kloridot 50 ml desztillált vízben oldunk. Az oldatot 15 ml 30 hidroxil formában lévő kvaterner ammónium gyantából (Dowex 1x8) álló 5 °C hőmérsékletre termosztált oszlopon eluálunk. A kloridoktől mentes eluátumot 5 °C hőmérsékletre termosztált edénybe gyűjtjük. 4,0 g 170 000-es molekulatömegű hialuronsav (ez megfelel 35 10 milliekvivalens monomer egységnek) nátriumsót 400 ml desztillált vízben oldunk. Az oldatot ezután 15 ml proton formában lévő szulfonsav gyantából (Dowex 50x8) álló 5 °C hőmérsékletre termosztált oszlopon eluálunk. A nátriummentes eluátumotkeveiés köz40 ben a pilokaipin bázist tartalmazó oldatba gyűjtjük. Az így kapott oldatot azonnal hűtjük és fagyasztva szárítjuk.
Termelés: 5,25 g.
Az így előállított sóban a hialuronsav valamennyi 45 savcsoportja pilokarpinnal sóvá alakított formában van.
A pilokarpin bázis tartalom az amerikai egyesült államokbeli gyógyszerkönyv szerinti kvantitatív gázkromatográfiás meghatározással, standard atropinnal 50 összehasonlítva 43,3%, amely megfelel az elméleti értéknek.
A hialuronsav tartalom a poliszacharidban kötött glükuronsav Bittér és munkatársai módszere szerint végzett kolorimetriás meghatározással 56,7%.
14. példa
Hialuronsav pilokarpinnal képezett sójának előállítása
2,45 g (610 milliekvivalens) pilokaipin-hidrogénkloridot50ml desztillált vízben oldunk. Az oldatot 15 ml
HU 204202 Β hidroxil formában lévő kvatemer ammónium gyantából (Dowex 1x8) álló 5 °C hőmérsékletre teimosztált oszlopon eluáljuk. A kloridoktól mentes eluátumot 5 °C hőmérsékletre teimosztált edénybe gyűjtjük.
4,0 g 170000-es molekulatömegű hialuronsav (ez megfelel 10 milliekvivalens monomer egységnek) nátriumsót 400 ml desztillált vízben oldunk. Az oldatot ezután 15 ml proton formában lévő szulfonsav gyantából (Dowex 50x8) álló 5 °C hőmérsékletre teimosztált oszlopon eluáljuk. A nátriummentes eluátumot keverés közben a pilokarpint tartalmazó oldatba gyűjtjük. Az így kapott oldatot azonnal hűtjük és fagyasztva szárítjuk.
Termelés: 5,25 g.
Az így előállított sóban a hialuronsav valamennyi savcsoportja pilokarpinnal sóvá alakított formában van.
A pilokarpin bázis tartalom az amerikai egyesült államokbeli gyógyszerkönyv szerinti spektrofotometriás meghatározással, standard pilokarpinnal összehasonlítva 35,1 tömeg%, amely megfelel az elméleti értéknek.
A hialuronsav tartalom a poliszacharidban kötött glükuronsav Bittér és munkatársai módszere szerint végzett kolorimetriás meghatározással 64,6%.
15. példa
Hialuronsav neomicinnel és polimixin B-vel képezett sójának előállítása
4,0 g 170 000-es molekulatömegű hialuronsav (ez megfelel 10 milliekvivalens monomer egységnek) nátriumsót 400 ml desztillált vízben oldunk. Az oldatot 15 ml proton formában lévő szulfonsav gyantából (Dowex 50x8) álló 5 °C hőmérsékletre teimosztált oszlopon eluáljuk. A nátriummentes eluátumot 5 °C hőmérsékletre teimosztált edénybe gyűjtjük. Ehhez a hialuronsavat tartalmazó oldathoz 0,150 g (0,63 milliekvivalens) polimixin B bázist adunk erős keverés mellett 1,425 g (9,37 milliekvivalens) neomicin-szulfátot 25 ml desztillált vízben oldunk. Az oldatot 15 ml hidroxil formában lévő kvatemer ammónium gyantából (Dowex 1x8) álló 5 °C hőmérsékletre teimosztált oszlopon eluáljuk. A szulfátoktól mentes eluátumot erőteljes keverés közben a hialuronsavat és a polimixin B-t tartalmazó oldatba gyűjtjük. A képződött csapadékot centrifugálással elkülönítjük és vákuumban szárítjuk; a centrifugálás után visszamaradó oldatban semmilyen termékveszteség nincs.
Termelés: 4,85 g.
Ezen termék 17,25 mg-ja 5,0 mg neomicin-szulfátnak megfelelő mennyiségű neomícint és 0,03 mg (körülbelül 5000 immunizáló [védő] egység) polimixin B-szulfátnak megfelelő mennyiségű polimixin B-t tartalmaz. Ezeket a meghatározásokat a két hatóanyag nagynyomású folyadékkromatográfiával végzett elkülönítése után végeztük.
16. példa
Hialuronsav kanamicinnel ésfenilefrinnel képezett kevert sójának előállítása
4,0 g 65 000-es molekulatömegű hiali onsav (ez megfelel 10 milliekvivalens monomer egységnek) nátű riumsót 400 ml desztillált vízben oldunk.
Az oldatot 15 ml proton formában lévő szulfonsav gyantából (Dowex 50x8) álló 5 °C hőmérsékletre termosztált oszlopon eluáljuk. A nátriummentes eluátumot 5 °C hőmérsékletre teimosztált edénybe gyűjtjük. 0,85 g (5,82 milliekvivalens) kanamicin-szulfátot 10 ml desztillált vízben oldunk. Az oldatot 10 ml hidroxil formában lévő kvatemer ammónium gyantából (Dowex 1x8) álló 5 °C hőmérsékletre teimosztált oszlopon eluáljuk.
A szulfátoktól mentes eluátumot 5 °C hőmérsékletre teimosztált edénybe gyűjtjük. A fenilefrin bázist úgy állítjuk elő, hogy fenilefrin-hidrogén-kloridot 5 °C hőmérsékleten oldunk úgy, hogy a koncentráció 100 mg/ml legyen, majd az oldathoz addig adagolunk 6 n vizes ammónium-hidroxid oldatot, míg a csapadékkiválás teljessé nem válik. Akivált anyagot szűréssel elkülönítjük, desztillált vízzel addig mossuk, amíg a mosóvíz kloridmentes lesz, majd vákuumban szárítjuk, A hialuronsavat és a kanamicin bázisokat tartalmazó oldatokat elegyítjük, és az elegyet 5 °C hőmérsékleten tartva keverés közben 699 mg (4,18 milliekvivalens) fenilefrin bázist adunk hozzá és az elegyet ezen a hőmérsékleten addig keverjük, amíg valamennyi szilárd anyag fel nem oldódik. Az így kapott oldatot hűtjük és fagyasztva szárítjuk.
Termelés: 5,1 g.
A kanamicin bázis tartalom Bacillus subtilis ATCC 6633-on végzett mikrobiológiai meghatározással standard kanamicinnel összehasonlítva 13,55 tömeg%.
A fenilefrin bázis tartalom ultraibolya spektrofotometriás meghatározással az amerikai egyesült államokbeli gyógyszerkönyv standard addíció módszerét alkalmazva 13,45 tömeg%.
A hialuronsav tartalom a poliszacharidban kötött glükuronsav Bittér és munkatársai módszere szerint végzett kolorimetriás meghatározással 73,0%.
17. példa
Hialuronsav gentamicinnel, nafazolinnal és nátriummal képezett kevert sójának előállítása 4,0 g 50 000-es molekulatömegű hialuronsav (ez megfelel 10 milliekvivalens monomer egységnek) nátriumsót 400 ml desztillált vízben oldunk. Az oldatot 15 ml proton formában lévő szulfonsav gyantából (Dowex 50x8) álló 5 °C hőmérsékletre teimosztált oszlopon eluálunk. A nátriummentes eluátumot 5 °C hőmérsékletre teimosztált edénybe gyűjtjük.
1,245 g (8,59 milliekvivalens) gentamicin-szulfátot 25 ml desztillált vízben oldunk. Az oldatot 12 ml hidroxil formában lévő kvatemer ammónium gyantából (Dowex 1x8) álló 5 °C hőmérsékletre teimosztált oszlopon eluáljuk. A szulfátoktól mentes eluátumot 5 °C hőmérsékletre teimosztált edénybe gyűjtjük.
A tiszta nafazolin bázist úgy állítjuk elő, hogy nafazolin-hidrogénkloridot 5 °C hőmérsékleten desztillált vízben oldunk úgy, hogy az oldat koncentrációja 50 mg/ml legyen, majd az oldathoz addig adagolunk 5 mólos vizes ammónium-hidroxid oldatot, amíg az
HU 204202 Β elegy pH-ja a 12-t el nem éri, majd az oldatot kétszer etil-acetáttal extraháljuk. A szerves rétegeket vízzel mossuk, majd sziláid, vízmentes nátrium-szulfáttal szárítjuk. A terméket jégszekrénybe helyezzük és kristályosodni hagyjuk, majd a kristályokat szűq'ük, etilacetáttal mossuk és vákuumban szárítjuk.
1,41 milliekvivalens hialuronsav oldathoz 2,5 g hialuronsav nátriumsőtés 0,297 g nafazolin bázist adunk és az elegyet teljes oldódásig keveq'ük. Az oldathoz ezután hozzáadjuk a gentamicin bázis oldatát az elegyet homogenizáljuk, majd hűtjük és fagyasztva szántjuk.
Termelés: 7,35 g.
A gentamicin bázis tartalom Bacillus epidermidus ATCC 12228-on végzett kvantitatív mikrobiológiai meghatározással standard gentamicinnel összehasonlítva 11,1 tömeg%.
A nafazolin bázis tartalom kvantitatív spektrofotometriás meghatározással, az amerikai egyesült államokbeli gyógyszerkönyv szerinti standard nafazolinnal összehasonlítva 4,0%.
A hialuronsav tartalom a poliszacharidban kötött glükuronsav Bittér és munkatársai módszere szerint végzett kolorimetriás meghatározással 83,0%.
18. példa
Hialuronsav neomicinnel, fenilefrinnel és nátriummal képezett kevert sójának előállítása 4,0 g 65000-es molekulatömegű hialuronsav (ez megfelel 10 milliekvivalens monomer egységnek) nátriumsót 400 ml desztillált vízben oldunk. Az oldatot ezután 15 ml proton formában lévő szulfonsav gyantából (Dowex 50x8) álló 5 °C hőmérsékletre termosztált oszlopon eluáljuk. A nátriummentes eluátumot 5 °C hőmérsékletre termosztált edénybe gyűjtjük.
1,28 g (8,42 milliekvivalens) neomicin-szulfátot 25 ml desztillált vízben oldunk. Az oldatot 12 ml hidroxil formában lévő kvatemer ammónium gyantából (Dowex 1x8) álló 5 °C hőmérsékletre termosztált oszlopon eluáljuk. A szulfátoktól mentes eluátumot 5 °C hőmérsékletre termosztált edénybe gyűjtjük.
Afenilefrin bázist úgy állítjuk elő, hogy fenilefrin-hidrogén-kloridot5 °C hőmérsékleten annyi desztillált vízben oldunk, hogy az oldat koncentrációja 100 mg/ml legyen, és addig adagolunk az oldathoz 6 n vizes ammőnium-hidroxid oldatok amíg a csapadékkiválás teljessé nem válik. Akivált anyagot szűréssel elkülönítjük és addig mossuk desztillált vízzel, míg a mosóvíz kloridmentes lesz, majd vákuumban szárítjuk.
A hialuronsav oldathoz 2,5 g hialuronsav nátriumsót és 0,266 g (1,58 milliekvivalens) fenilefiin bázist adunk és az elegyet teljes oldódásig keveq'ük. Az oldathoz ezután hozzáadjuk a neomicin bázis oldatát és homogenizálás után az elegyet hűtjük, majd fagyasztva szárítjuk.
Termelés: 7,35 g. I
A fenilefiin bázis tartalom ultraibolya spektrofotometriás meghatározással az amerikai egyesült államokbeli gyógysze&önyv szerinti standard addíciós módszert alkalmazva 3,75 tőmeg%.
A neomicin bázis tartalom Bacillus aureus ATCC <
* 6538p-n végzett kvantitatív mikrobiológiai meghatárol zással standard neomicinnel összehasonlítva 11,64 tömeg%.
A hialuronsav tartalom a poliszacharidban kötött 5 glükuronsav Bittér és munkatársai módszere szerint végzett kolorimetriás meghatározással 82,8%.
19. példa
Hialuronsav pilokarpinnal és nátriummal képezett 10 sójának előállítása
98,31 g 170 000-es molekulatömegű hialuronsav (ez megfelel 245 milliekvivalens monomer egységnek) nátriumsót 8,5 1 desztillált vízben oldunk. Az oldatot ezután 300 ml proton formában lévő szulfonsav gyan15 tából (Dowex 50x8) álló 5 °C hőmérsékletre termosztált oszlopon eluáljuk. A nátriummentes eluátumot 5 °C hőmérsékletre termosztált edénybe gyűjtjük.
2,34 g (9,6 milliekvivalens) pilokaipin-hidrogénkloridot 50 ml desztillált vízben oldunk. Az oldatot 20 ezután 15 ml hidroxil formában lévő kvatemer ammónium gyantából (Dowex 1x8) álló 5 °C hőmérsékletre termosztált oszlopon eluáljuk.
A kloridoktól mentes eluátumot keverés közben a hialuronsavat tartalmazó oldatba gyűjtjük. Ehhez az 25 elegyhez keverés közben lassú ütemben 235,4 ml 1 mólos vizes nátrium-hidroxid oldatot adagolunk. Az így kapott oldatot azonnal hűtjük és fagyasztva szárítjuk.
Termelés: 99,8 g.
A termék 100 mg-ja 2 mg pilokaipint tartalmaz bázisként
20. példa
Hialuronsav sztreptomicinnel és nátriummal képe35 zett sójának előállítása
98,68 g 255 000-es molekulatömegű hialuronsav (ez megfelel 246 milliekvivalens monomer egységnek) nátriumsót 8,5 1 desztillált vízben oldunk. Az oldatot ezután 300 ml proton formában lévő szulfonsav gyan40 tából (Dowex 50x8) álló 5 °C hőmérsékletre termosziáit oszlopon eluáljuk. A nátriummentes oldatot 5 °C hőmérsékletre termosztált edénybe gyűjtjük.
1,88 g (7,74 milliekvivalens) sztreptomicin-szulfátot 20 ml desztillált vízben oldunk. Az oldatot ezután 45 12 ml hidroxil formában lévő kvatemer ammónium gyantából (Dowex 1x8) álló 5 °C hőmérsékletre ter. mosztált oszlopon eluáljuk.
A szulfátoktól mentes eluátumot keverés közben a hialuronsav oldatba gyűjtjük. Az elegyhez keverés köz50 ben lassú ütemben 238,3 ml 1 mólos vizes nátriumhidroxid oldatot adagolunk és a kapott oldatot azonnal hűtjük és fagyasztva szárítjuk.
Termelés: 99,8 g.
100 g tennék 1,5 g sztreptomicin bázist tartalmaz.
21. példa
Gyulladásgátló hatással nem rendelkező hialasztin és hialektinfrakciók elegy ének kinyerése 3000 g friss vagy fagyasztott kakastaréjt hússze60 letelőn felszeletelünk, majd egy mechanikus homoge12
HU 204202 Β nizálóban a felszeletelt kakastaréjt homogenizáljuk. Az így kapott pasztát rozsdamentes acél edényben (Amerikai Vas és Acél Intézet, azaz AISI 316) vagy üvegedényben 10-szeres térfogatmennyiségű vízmentes acetonnal kezeljük. Az egész elegyet ezután 6 órán át 50 fordulat/perc sebességgel keveqük. Ezt követően az elegyet 12 órán át hagyjuk elkülönülni, majd az acetont leszívatjuk és elvetjük. Az acetonos extrakciót addig ismételjük, amíg az elvetett aceton a Karl-Fischer módszer szerint mérve a helyes nedvességtartalmat nem mutatja. Az edényben lévő elegyet ezután centrifugáljuk és 5-8 órán át megfelelő hőmérséldeten vákuumban szárítjuk.
így körülbelül 500-600 g száraz kakastaréjport állítunk elő.
300 g száraz kakastaréjport 0,2 g papainnal enzimatikus emésztésnek vetünk alá vizes körülmények között és az elegy pH-ját foszfát-puffenel szabályozzuk, megfelelő mennyiségű cisztein-hidrogén-klorid jelenlétében.
Az így kapott elegyet 24 órán át 60 fordulat/perc sebességgel 60-65 °C hőmérséldeten keverjük. Az elegyet ezután 25 °C hőmérsékletre hűtjük, 60 g celitet adunk hozzá és a keverést még egy órán át folytatjuk. Az így kapott elegyet addig szűquk, míg éles folyadékot nem kapunk. Az így kapott éles folyadékot ezután molekuláris ultraszűrésnek vetjük alá, amikor is olyan membránokat használunk, amelyeknek a molekulatömeg kizáró felső határa 30000, így a membránon visszamaradnak azok a molekulák, amelyek molekulatömege nagyobb, mint 30 000.
A terméket ultraszűrésnek vetjük alá az eredeti térfogatának 5-6-szorosáig, miközben az ultraszűrési eljárás alatt a termékhez folyamatosan desztillált vizet adagolunk. A víz adagolását, valamint az ultraszűrést akkor hagyjuk abba, amikor a térfogat az eredeti térfogat 1/3-ára csökken. Amaradék folyadékot 0,1 mólosra állítjuk nátrium-klorid hozzáadásával és a hőmérsékletet 50 °C-ra emeljük. A folyadékhoz ezután 60 fordulat/perccel végzett keverés közben 45 g cetil-piridínium-kloridot adunk. Az oldatot 60 percen át keveqük, majd 50 g celitet adunk hozzá. A keverés közben az egész elegy hőmérsékletét 25 °C-ra hűtjük és a képződött csapadékot centrifugálással elkülönítjük. Az elkülönített csapadékot 5 1 0,05% cetil-piridínium-kloridot tartalmazó 0,01 mólos vizes nátrium-klorid oldatban szuszpendáljuk. Az így kapott szuszpenziót 50 °C hőmérsékleten 60 percen keresztül keveqük. A hőmérsékletet ezután 25 °C-ra csökkentjük és a képződött csapadékot centrifugálással elkülönítjük. A mosó műveletet háromszor megismételjük, majd a csapadékot egy 3 literes, 0,05 mólos vizes, 0,05% cetil-piridínium-kloridot tartalmazó nátrium-klorid oldatba gyűjtjük. Az elegyet 60 percen keresztül 60 fordulat/perc sebességgel keveqük, miközben a hőmérsékletet 2 órán át állandóan 25 °C-on tartjuk. A feli J úszót centrifugálással eltávolítjuk. Az eljárást 0,0. ¾ cetil-piridínium-kloridot tartalmazó 0,1 mólos vize*. nátrium-klorid oldattal néhányszor megismételjük. / „z elegyet centrifugáljuk és a felülúszót elvetjük. A c, padékot 3 liter 0,30 mólos
0,05% cetil-piridínium-kloridot tartalmazó vizes nátrium-klorid oldatban diszpergáljuk. Az elegyet ezután keveqük és mind a csapadékot, mind pedig az éles folyadékot az elkülönítés után megtartjuk. A csapadék extrakcióját még háromszor megismételjük úgy, hogy minden egyes esetben 0,5 litert használunk ugyanabból a vizes oldatból.
Végül a maradék csapadékot elvetjük és az éles folyadékokat egyetlen edénybe öntjük. A folyadék hőmérsékletét állandó keverés mellett 50 °C-ra emeljük. A folyadékot ezután nátrium-kloriddal 0,23 mólosra állítjuk. A folyadékhoz 1 g cetil-piridínium-kloridot adunk, majd 12 órán át keveqük. Az elegyet ezután 25 °C hőmérsékletre hűtjük, majd először egy celit-kötegen, ezt követően szűrőn át szűq'ük. Ezután ismételten molekula-ultraszűrést végzünk egy olyan membránon, amelynek a molekulatömeg felső határa 30 000, az ultraszűrést a kezdeti térfogat háromszorosáig végezzük 0,33 mólos vizes nátrium-klorid egyidejű hozzáadásával. A nátrium-klorid oldat hozzáadását befejezzük és a térfogatot a kezdeti térfogat 1/4-ére csökkentjük. Az így betöményített oldathoz 60 fordulat/perc sebességű keverés közben 25 °C hőmérsékleten háromszoros térfogatmennyiségű 95%-os etanolt adunk, amire csapadékképződés indul meg. A csapadékot centrifugálással tömörítjük és a felülúszót elvetjük. A csapadékot 1 liter 0,1 mólos vizes nátrium-klorid oldatban oldjuk és a kicsapást háromszoros térfogat-mennyiségű 95%-os etanollal megismételjük. A csapadékot összegyűjtjük és először háromszor 75%os etanollal, háromszor vízmentes etanollal, végül háromszor vízmentes acetonnal mossuk. Az így kapott termék, mely hialasztinból és hialektin frakciókból áll, átlagos molekulatömege 250 000 és 350000 közé esik.
A hialuronsav termelés az eredeti friss szövet 0,6 tömeg%-a.
22. példa
Hialasztin kinyerése a 20. példában leírt módon kapott keverékből
A 20. példában leírt módon kapott keveréket kétszer desztillált baktériummentes vízben oldjuk úgy, hogy 1 mg termékre 1 ml víz jusson. A kapott oldatot molekulaszűrésnek vetjük alá olyan membránon keresztül, amelynek a molekulasúly kizáró határa 200 000, ezt a membránon víz hozzáadása nélküli töményítés követi. A 200 000-es molekulatömeg kizáró határral rendelkező membránon keresztül végzett ultraszűrési eljárás alatt azok a molekulák, amelyek molekulatömege nagyobb mint 200 000, nem mennek át a membránon, míg a kisebb molekulasúlyú molekulák a vízzel együtt keresztülmennek a membránon. A szűrési eljárás alatt nem adunk vizet a rendszerhez, amelynek eredménye az, hogy a térfogat csökken és ennek következtében a 200 000-nél nagyobb molekulatömegű molekulák töménysége megnövekszik. A termék ultraszűrését addig végezzük, amíg a membrán tetején lévő térfogat a kezdeti térfogatnak a 10%-a lesz. Kétszeres térfogatmennyiségű baktériummentes, kétszer desztillált vizet
HU 204202 Β áriunk hozzá, majd ismét ultraszűrést végzünk addig, amíg a térfogat 1/3-ára csökken. A műveletet még kétszer megismételjük. A membránon átmenő oldatot nátrium-kloriddal 0,1 mólosra állítjuk, majd négyszeres térfogatmennyiségű 95%-os etanollal kicsapjuk. A 5 kivált csapadékot háromszor mossuk 75%-os etanollal, majd vákuumban szárítjuk.
Az így kapott tennék a hialasztin frakció, amelynek átlagos molekulatömege 50 000 és 100 000 közé esik.
A hialuronsav termelés az eredeti friss szövet 0,4 tö- 10 meg%-a.
23. példa
Hiáléktin frakció kinyerése
A21. példában az ultraszűréstkövetóen az edényben 15 a 200 000-es molekulatömegű kizáró határú membrán tetején összegyűlt tömény oldatot vízzel addig hígítjuk, noíg az oldatban a hialuronsav koncentráció 5 mg/ml lesz, eztglükuronsav egységen alapuló kvantitatív analízissel határozzuk meg. Az oldatot ezután vizes nátri- 20 um-klorid oldattal 0,1 mólosra állítjuk, majd négyszeres mennyiségű 95%-os etanollal kicsapjuk. A csapadékot háromszor 75%-os etanollal mossuk, majd vákuumban szárítjuk.
Az így kapott tennék a hialektin frakció, amelynek 25 molekulatömege 500000 és 730000 közé esik. Ez megfelel egy olyan specifikus hialuronsav frakciónak, amely meghatározott molekula lánchosszal rendelkezik, és körülbelül 2500-3500 szacharid egységből áll és nagyon nagy tisztaságú. 30
A hialuronsav termelés az eredeti friss állati szövet 0,2 tőmeg%-a.
24. példa
A hialuronsav pilokarpinsójának előállítása 35
24,5 g (0,1 milliekviv.) pilokarpin-hidrokloridot 5 ml desztillált vízben szolubilizálunk. Az oldatot egy 2,5 ml Dowex 1x8 OH alakban lévő kvaterner ammónium gyantát tartalmazó, 5 °C hőmérsékleten tartott oszlopra visszük, és ugyanezen a hőmérsékleten eluál- 40 juk. Akloridmeníes eluátumot 5 °C hőmérsékleten tartott Erlenmeyer-lombikba gyűjtjük.
mg 20000 molekulatömegű hialuronsav (ez megfelel 0,1 milliekv. monomer egységnek) nátriumsót 4 ml desztillált vízben oldunk. Az oldatot 2,5 ml 45 proton-alakban lévő Dowex 50x8 szulfonsavgyantát tartalmazó, 5 °C hőmérsékleten tartott oszlopra viszszűk, és ugyanezen a hőmérsékleten eluáljuk. A nátriummentes eluátumot keverés közben a pilokarpin bázist tartalmazó oldatba gyűjtjük. 50
Az így kapott oldatot azután 3,96 g (9,9 milliekv.)
000 molekulatőmegű hialuronsav-nátriumsó 400 ml desztillált vízzel készített oldatával keveqük össze.
Akapott oldatot lehűtjük és fagyasztva szárítjuk.
Termelés: 5,0 g. 55
A pilokarpin bázis tartalom az amerikai egyesült államokbeli gyógyszerkönyv szerinti kvantitatív gázkromatográfiás meghatározással, standard pilokarpinnal összehasonlítva 0,35 tőmeg%, amely megfelel az elméleti értéknek. 60
A hialuronsav tartalom a poliszacharidban kötött glükuronsav Bittér és munkatársai módszere szerint végzett kolorimetriás meghatározással 99%.
25. példa
A hialuronsav pitokarpinsójának előállítása
2,45 g (10 milliekv.) pilokarpin-hidrokloridot 50 ml desztillált vízben szolubilizálunk. Az oldatot egy 15 ml Dowex 1x8 OH alakban kvaterner ammónium gyantát tartalmazó, 5 °C hőmérsékleten tartott oszlopra viszszük, és ugyanezen a hőmérsékleten eluáljuk. Akloridmentes eluátumot 5 °C hőmérsékleten tartott Erlenmeyer-lombikba gyűjtjük.
g/1, 150000 molekulatömegű hialuronsav (ez megfelel 10 milliekv. monomer egységnek) nátriumsót 1400 ml desztillált vízben oldunk. Az oldatot 2,5 ml proton-alakban lévő Dowex 50x8 szulfonsavgyantát tartalmazó, 5 °C hőmérsékleten tartott oszlopra vrszszük, és ugyanezen a hőmérsékleten eluáljuk. A nátriummentes eluátumot keverés közben a pilokarpin bázist tartalmazó oldatba gyűjtjük.
Az így kapott oldatot azután 3,96 g (9,9 milliekv.) 20 000 molekulatömegű hialuronsav nátriumsó 400 ml desztillált vízzel készített oldatával keveqük össze.
A kapott oldatot azonnal lehűtjük és fagyasztva szárítjuk.
Termelés: 5,25 g.
A pilokarpin bázis tartalom az amerikai egyesült államokbeli gyógyszerkönyv szerinti kvantitatív gázkromatográfiás meghatározással, standard pilokarpinnal összehasonlítva 35,1 tömeg%, amely megfelel az elméleti értéknek.
A hialuronsav tartalom a poliszacharidban kötött glükuronsav Bittér és munkatársai módszere szerint végzett kolorimetriás meghatározással 64,6 tőmeg%.
Az alábbiakban ismertetjük a farmakológiai vizsgálati eredményeinket
A találmány szerinti új gyógyszerkészítmények gyakorlati hatását házinyúl szemén végzett in vivő kísérletekkel szemléltetjük, ezek a kísérletek világosan mutatják a találmány szerinti gyógyszerkészítmény előnyös hatását azokkal a készítményekkel szemben, amelyekben az 1. komponenst a hagyományos úton formulálták. Az alábbiakban például olyan kísérleteket ismertetünk, amelyekben a hialuronsav sztreptomicin, eritromicin, neomicin és gentamicin antibiotikumokkal képezett sóit vizsgáltuk. Ezek a sók teljes sók, amelyekben a hialuronsav valamennyi savcsoportja az egyes antibiotikum bázisos csoportjával sóvá alakított formában van, és ezen sók előállítása az 1., 2., 4. és 5. eljárási példákban kerültek ismertetésre. Ezen sókat desztillált vízzel készült oldataik formájában alkalmazzuk, mely oldatok töménységei az antibiotikum tartalomra vonatkoztatva az alábbiak:
hialuronsav + sztreptomicin 33,8% hialuronsav+ eritromicin 66,0% hialuronsav + neomicin 21,2% hialuronsav + gentamicin 20,0%
HU 204202 Β
Ezen találmány szerinti sók hatását olyan készítményekkel hasonlítottuk össze, melyekben ugyanezen antibiotikumokat foszfát pufferben oldottuk fel úgy, hogy az oldatban az antibiotikum koncentrációja ugyanolyan legyen, mint a fenti, találmány szerinti hialuronsavval 5 képezett sóoldat koncentrációja. A két csoport anyagainak a hatását azon az alapon vizsgáltuk, hogy melyik mennyi idő alatt szünteti meg a nyúl szemében baktériummal kiváltott száraz gyulladást Közelebbről, a száraz gyulladást úgy váltottuk ki, hogy 24 nyúl mindkét szemébe az alábbi baktériumcsoportok egyikéből készített meghatározott titeru szuszpenziót injektáltunk intraokulárisan: Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Salmonella typhi (0,1 ml).
Az antibiotikumok találmány szerinti különféle sói- 15 ból a házinyulak jobb szemébe 6 óránként 3 cseppet adtunk, míg a bal szemükbe ugyanolyan mennyiségben és időközben adtuk a megfelelő antibiotikumok foszfát-puffeirel készített oldatát A.kezelést a baktérium szuszpenzió injektálását követően azonnal megkezdtük 20 és addig folytattuk, amíg a gyulladás el nem tűnt
Minden egyes nyúl mindkét szemét olyan fényforrással rendelkező lámpával figyeltük meg, mely nagy intenzitású keskeny fénysugárral és mikroszkóppal vagy két szemlencsés nagyítóval van ellátva és alkalmas az élő szem különböző részei, különösen a belső részletek láthatóvá tételére. Különösen az alábbiakat vizsgáltuk: a kötőhártya és a szaruhártya állapota, az elülső szemcsarnok (a lyndall-jelenség megléte) és a szem hátsó szegmensében lévő szivárványhártya állapota. A szem hátulsó részének az állapotát Goldman lencsékkel vizsgáltuk. A gyulladás jeleit (vérbőség, váladékok, a folyadékok homályossága stb.) feljegyeztük. A gyulladás semmilyen jelét nem mutató szemek %-os arányát számítottuk.
A kísérletek eredményét az 1. táblázatban tüntetjük fel, amelynek alapján megfigyelhető, hogy a találmány szerinti sószármazékok beadását követően a gyulladás sokkal gyorsabban gyógyult, mint abban az esetben, amikor az antibiotikumokat nem hialuronsavval képezett sóik formájában adtuk be.
1. táblázat
A hiularonsav antibiotikumokkal képezett sóival végzett hatása a házinyúl szem száraz gyulladásos megbetegedésének gyógyulásában
Kezelés A gyulladás kezdetétől számított napok száma
1 2 3 4 5 6 7 8
sztreptomicin (6)+ 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 16,6 50,0 100,0
sztreptomicin + hialuronsav (6)+ 0,0 0,0 16,6 16,6 50,0 100,0 100,0 100,0
eritromicin (6)++ 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0, 16,6 33,3
eritromicin + hialuronsav (6)++ 0,0 0,0 0,0 0,0 16,6 16,6 33,3 50,0
neomicin (6)+++ 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,fr 16,6 33,3
neomicin + hialuronsav (6)+++ 0,0 0,0 0,0 16,6 16,6 33,3 33,3 50,0
gentamicin (6)+ 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 33,3 50,0 100,0
gentamicin + hialuronsav (6)+ 0,0 0,0 0,0 16,6 33,3 50,0 100,0 100,0
A táblázatban szereplő értékek %-os értékek, hogy az összes kezelt szemek számához képest hány szemben következett be a gyulladás gyógyulása (a zárójelben lévő számok a kezelt szemek számát jelentik).
+ Pseudomonas aeruginosával kiváltott gyulladás n- Staphylococcus aureusszal kiváltott gyulladás +++ Salmonella typhivel kiváltott gyulladás
A találmány szerinti gyógyászati készítmény gyakorlati hasznosságát az alábbiakban szemléltetjük úgy, hogy bemutatjuk azok pupillaszűkítő, gyulladásgátló, sebgyógyító, sebhegesztő és mikrobaellenes hatását
I. A pilokarpin-nitrátból és hialuronsav vivőanyagból álló gyógyszerkészítmény pupillaszűkítő hatása Anyagok
A készítményekben az alább felsorolt anyagokat próbáltuk ki a pilokarpin vivőanyagaként a különböző pilokarpin-nitrát tartalmú gyógyszerkészítmények formulálásához:
- hialuronsav nátriumsó, hialasztin frakció, molekulasúly: körülbelül 100000, 10 mg/ml és 20 mg/ml koncentrációkban;
- hialuronsav nátriumsó, hialektin frakció, molekulatömeg: 500000-730000, 10 mg/ml és 20 mg/ml koncentrációkban;
- 5%-os polivinil-alkohol szemgyógyászati vivőanyagként összehasonlításul.
A pilokarpin-nitráttal különféle 2%-os formulálásokat (szemcsepp vagy gél) készítettünk úgy, hogy a hialuronsav nátriumsó két különböző frakcióját adtuk hozzá 10 mg/ml és 20 mg/ml koncentrációkban. így az alábbi oldatokat készítettük el:
HU 204202 Β
1. készítmény: 2%-os pilokarpin-nitrát sóoldat, melyet összehasonlításképpen használtunk;
2. készítmény: 2%-os pilokarpin-nitrát oldat, amelyet vivőanyagként 5%-os polivinil-alkohollal elegyítettünk és szintén összehasonlításra használtunk;
3. készítmény: 2%-os pilokarpin-nitrát oldat, mely vivóanyagként 10 mg/ml töménységű hialasztin frakció nátriumsóval van elegyítve;
4. készítmény: 2%-os pilokarpin-nitrát oldat, amely vivőanyagként 20 mg/ml töménységű hialasztin frakció nátriumsóval van elegyítve;
5. készítmény: 2%-os pilokarpin-nitrát oldat, amely vivőanyagként 10 mg/ml töménységű hxalektin frakció nátriumsóval van elegyítve;
6. készítmény: 2%-os pilokarpin-nitrát oldat, amely vivőanyagként 20 mg/ml töménységű hialektin frakció nátriumsóval van elegyítve.
Módszer
2-2,5 kg tömegű új-zélandi albínó nyulakat használtunk. A vizsgálandó készítményt egy mikro injekciós fecskendővel (10 mikioliter) az egyes nyulak egyik szemébe csepegtettük. A nyulak másik szemét referenciaként használtuk. Apupiüa átmérőjét minden esetben megfelelő időintervallumokban mértük. Minden egyes oldatot legalább 8 nyúlon vizsgáltunk. Minden egyes szemet legfeljebb három alkalommal kezeltünk és az egyes kezelések között legalább egy hét nyugalmi időt hagytunk.
Paraméterek
A pupillák átmérőjét különböző időintervallumokban mértük abból a célból, hogy meghatározzuk a pupillaszűkítő hatás időbeli lefutását. A pupillaszűkülés-idő grafikonból az alábbi hatásparamétereket számítottuk:
Kmas - a pupillaáímérőben megmutatkozó maximális külöbség, mely a kezelt szem és a referenciaszem között fennáll;
a maximális csúcs időpontja = az az idő, amely ahhoz kell, hogy K^-ot elérjük;
időtartam=az alapállapotokhoz (kezelés előtti) való visszatéréshez szükséges idő;
periódus = az abszolút pupillaszűkítő hatás időszaka;
GAT = a pupillaszűkülés-idő görbe alatti terület. Eredmények
A vizsgálat eredményeit a 2. táblázatban adjuk meg. Az összes oldat esetén a pupillaszűkítő hatás idő függvényében felvett görbéjéből meghatározott különféle paraméterek adataiból látható, hogy a hialuronsav hozzáadás a 2%-os pilokarpin-nitrát oldatokhoz a gyógyszerkészítmény pupillaszűkítő hatásának megnövekedését eredményezi. A gyógyszerkészítmény biológiai hasznosíthatósága valóban 2,7-szer nagyobb, mint a 2%-os pilokarpin-nitrát vizes oldatáé (1. készítmény).
Fontos megjegyeznünk, hogy abban az esetben, ha a hialuronsav hialektin frakcióját használjuk, akár 10 mg/ml, akár 20 mg/ml töménységben (5. készítmény és 6. készítmény), a hatás statisztikusan szignifikáns módon megnő ahhoz az esethez képest, amikor a pilokarpin-nitrát oldatokat polivinil-alkohollal, mint vivőanyaggal keveqük Össze (2. készítmény). A hialuronsav vivőanyagként való alkalmazása különösen érdekes abból a szempontból, hogy a pilokarpin-nitrát pupillaszűkítő hatása hosszabb ideig tart akkor, ha vivőanyagként ezt az anyagot alkalmazzuk. Ez azt jelenti, hogy azoknál a készítményeknél, amelyek vivőanyagként hialuronsavat tartalmaznak, az az idő, amely ahhoz szükséges, hogy a pupilla áömérője visszayáltozzék az eredeti értékre több mint 160 perc (6. készítmény), szemben apilokarpin sóoldat önmagában történő alkalmazásával, amikor is ez az érték 110 perc (1. készítmény).
2. táblázat
2%-os pilokarpin-nitrát oldatot hialuronsav vivőanyaggal együtt tartalmazó szemgyőgyászati készítmény biológiai hatása4
A készítmény száma Vivőanyag mm (+95% FL) Maximális csúcs időpontja perc Időtartam perc Periódus perc GAT, cm2 (±95% FL) Relatív GAT
1 só l,93±0,35 20 110 - 117±28 1
2 5%-os polivinil-alkohol 2,33±0,28 20 140 - 192+32 1,64
3 hialasztin (10 mg/ml) 2,50±0,42 20 120 - 240+40 2,05
4 hialasztin (20 mg/ml) 2,58±0,38 30 150 - 208±41 1,78
5 hialektin (10 mg/ml) 2,50+0,38 15 170 - 242+48 2,06
6 hialektin (20 mg/ml) 2,70+0,38 20 190 45 320+45 2,73
+A közölt értékek a 8 kísérlet átlag értékei
FL - fiduciális limit (a számolt átlagra vonatkozó megbízhatóság)
HU 204202 Β
IL A pilokarpin hialuronsawal.képezett sójának pupillaszűkítő hatása Anyagok
A pilokarpin sóképzéséhez a különböző készítmények számára az alábbi anyagokat használtuk:
- kis molekulatömegű hialuronsav (hialasztin, amelynek molekulasúlya 100 000);
- nagy molekulatömegű hialuronsav nátriumsó (hialektin, amelynek molekulatömege 500000 és 730000 közé esik) 10 mg/ml és 20 mg/ml töménységben;
- 5%-os polivinil-alkohol, mint szemgyógyászati vivőanyag, ez szolgált összehasonlító készítményként
Az így elkészített különböző gyógyszerkészítmények az alábbiak:
1. készítmény: 2%-os pilokarpin-nitrát sóoldat (összehasonlításra szolgáló készítmény);
2. készítmény: 2%-os pilokarpin-nitrát oldat melyet 5%-os polivinil-alkohol vivőanyaggal elegyítünk (összehasonlításra szolgáló készítmény);
3. készítmény: a pilokarpin bázis kis molekulatömegű híaluronsavval, a hialasztinnal képezett sójának vizes oldata, amelyben a pilokarpin bázis tartalom 2%;
4. készítmény: pilokarpinsó és kis molekulatömegű hialuronsav (hialasztin) oldata, amely vivőanyagként 10 mg/ml töménységben nagy molekulatömegű hialuronsav (hialektin) nátriumsót tartalmaz. Apilokaipin bázis tartalom: 2%;
5. készítmény: pilokarpin só és kis molekulatömegű hialuronsav (hialasztin) oldata, mely vivőanyagként nagy molekulatömegű hialuronsav ! (hialektin) nátriumsót tartalmaz 20 mg/ml töménységben. Apilokarpin bázis tartalom: 2%;
6. készítmény: nagy molekulatömegű hialuronsav (hialektin) nátriumsóból álló, a kötőhártyazsákba helyezhető kis műanyag tasak (inszert), mely pilokarpin bázisból és kis molekulatömegű hialuronsavból (hialasztinból) képezett sót tartalmaz. Apilokarpin bázis tartalom· 6,25%.
Módszer
2-2,5 kg tömegű új-zélandi albínó nyulakat használtunk. A vizsgálandó készítményt egy mikro injekciós fecskendővel (10 mikroliter) az egyes nyulak egyik szemébe csepegtettük. A nyulak másik szemét referenciaként használtuk. A két műanyag tasakot (inszertet) a kötőhártyazsákba helyeztük megfelelő csipesz segítségével. A pupilla átmérőjét minden esetben megfelelő időintervallumokban mértük. Minden egyes oldatot legalább 8 nyúlon vizsgáltunk. Minden egyes szemet legfeljebb három alkalommmal kezeltünk, és az egyes kezelések között legalább egy hét nyugalmi időt hagytunk.
Paraméterek
A pupillák átmérőjét különböző időintervallumokban mértük abból a célból, hogy meghatározzuk a pupillaszűkítő hatás időbeli lefutását. A pupillaszűkülés-idő grafikonból az alábbi hatásparamétereket számítottuk:
Kmax = a pupillaátmérőben megmutatkozó maximális különbség, amely a kezelt szem és a referenciaszem között fennáll;
a maximális csúcs időpontja = az az idő, amely ahhoz kell, hogy a K^-ot eléijük;
időtartam = az alapállapotokhoz (kezelés előtti) való visszatéréshez szükséges idő;
periódus « az abszolút pupillaszűkítő hatás időszaka;
GAT = a pupillaszűkülés-idő görbe alatti terület
Eredmények
Amint az a 3. táblázatból, ahol valamennyi megvizsgált oldatra nézve a pupillaszűkítő hatás - idő görbéből feljegyzett különféle paraméterek értékei szerepelnek, világosan kitűnik, hogy a 2%-os pilokarpin hialuronsavval képezett sója a gyógyszerkészítmény hatásának megnövekedését okozta, mely hatás körülbelül kétszeresét éri el annak a hatásnak, amelyet a 2%-os pilokarpin-nitrát vizes oldata (1. készítmény) okozott.
A hatás statisztikusan szignifikáns növekedése figyelhető meg akkor, ha vivőanyagként nagy molekulasúlyú hialuronsavat használunk akár 10 mg/ml, akár 20 mg/ml koncentrációban (4. készítmény és 5. készítmény).
A híaluronsavval képezett só különleges érdeklődésre tarthat számot olyan értelemben, hogy az ilyen vivőanyagot tartalmazó gyógyászati készítmények beadása után a pilokarpin pupillaszűkítő hatásának időtartama megnövekszik, tehát az az idő, amely ahhoz szükséges, hogy a pupilla az eredeti körülményeknek megfelelő normál átmérőjét visszanyerje, a 3. készítmény alkalmazása esetén eléri a 160 percet, míg a pilokarpint önmagában tartalmazó 1. készítmény esetében ez az idő 110 perc.
3. táblázat
A hialuronsavat tartalmazó szemgyógyászati •vivőanyagok biológiai hatásparaméterei
A készítmény száma Vivóanyag ^niax’ mm (±95% FL) Maxi- mális csúcs idő- pontja perc Idő- tar- tam perc Periódus perc GAT, cm2 (±95% FL)
1 1,93+0,35 20 110 - 117+28 1,00
2 2,33+0,28 20 140 - 192+32 1,64
3 '2,25+0,28 20 160 20 212+32 1,81
4 2,70+0,43 30 180 40 280+48 2,39
5 2,80+0,20 15 200 45 361+40 3,08
6 3,70+0,30 40 230 - 442+70 3,78
HU 204202 Β
III. Hialuronsavból és pilokarpin-származékokból álló szaruhártyafilmek stabilitása
Az alábbi kísérletek célja az volt, hogy felbecsüljük a pilokarpin és hialuronsav között végbement sóképzés útján előállított származékok tapadó és filmszerű tulaj- 5 donságait, melyek lehetővé teszik alkalmazásukat az állatok szemének szaiuhártyáján.
Módszer
A vizsgálat abból áll, hogy vizuálisan megbecsüljük 10 a gyógyszerkészítmények által a szaruhártyán képződött film kialakulását, stabilitását és időtartamát Ebből a célból a szemgyógyászati készítményekhez 0,1 % fluoreszcein-nátriumot adunk és a szemet becsepegtetés után ultraibolya fényben 366 nm-en vizsgáljuk 15
A vizsgálatokhoz 12 db, egyenként 2-2,5 kg tömegű mindkét nembéli új-zélandi albínó nyulat használtunk.
A készítményekből egy cseppet (50 mikroliter) cseppentettünk az egyes nyulak egyik szemébe, a másik szemüket kontrollnak hagytuk meg. 20
Az alkalmazott oldatok:
1. 2%-os pilokarpin-nitrát sóoldat;
2. 2%-os pilokarpin-nitrát oldat vivőanyagként 5% polivinü-alkohollal (Wacker Chemie, PVA 25 W 48/20);
3. pilokarpin bázis kis molekulatőmegű hialuronsavval (hialasztinnal) képezett sójának oldata. A pilokarpin bázis tartalom: 2%;
4. pilokarpin bázis kis molekulatömegű hialuron- 30 savval (hialasztinnal) képezett sóját és vivőanyagként 10 mg/ml töménységben nagy molekulatőmegű hialuronsav (híalektin) nátriumsőt tartalmazó oldat A pilokarpin bázis tartalom:
2%; 35
5. pilokarpin bázis kis molekulatömegű hialuronsavval (hialasztinnal) képezett sóját vivőanyagként nagy molekulatömegű hialuronsav (hialektin) nátriumsót 20 mg/ml töménységben tartalmazó oldat Apilokarpin bázis tartalom: 2%; 40
Valamennyi oldat 0,1% fluoreszcein-nátriumot tartalmazott Az összes esetben az oldat pH-ja 5,8 körüli érték volt
Eredmények 45
A fluoreszcencia jelenséggel kapcsolatos paraméterek
a) a szaruháitya egészén kialakult film időtartama;
b) a fluoreszcencia jelenség időtartama (az az idő, amely ahhoz szükséges, hogy a fluoreszkálás a szemből teljesen eltűnjék); 50
c) az orrban megjelenő fluoreszcencia jelenség (az az idő, amely ahhoz kell, hogy az oldat beadása után a fluoreszcencia jelenség megjelenjék az orr szintjén) az alábbi 4. táblázatban kerülnek ismertetésre. 55
A hialuronsav pilokarpinnal képezett származékai stabil, több mint két órán át tartó filmet alkotnak a szaruhártyán. Ezért az, hogy a pilokarpin mennyire képes áthatolni a szaruhártyán, úgy tűnik, a hialuronsav azon képességétől függ, hogy mennyire alkalmas 60 vivőanyag olyan gyógyszerkészítmény előállítására, amely a szaruhártyán homogén és stabil filmet képez.
4. táblázat
Oldat A teljes film meglétének időtartama (perc) A fluoreszcencia időtartama (perc) A fluoreszcencia feltűnése az orrban (pere)
1 30 100 2-3
2 80 150 10-15
3 100 150 5
4 120 180 15-20
5 140 210 50
IV. Hialuronsav vivffanyaggal elegyített triamcinolon gyulladásgátló hatása
Anyag
Az alábbi anyagokat használtuk:
- hialuronsav (hialektin frakció, molekulatömeg: 500000 és 730000 között) nátriumsó 10 mg/kg töménységben sóoldatban;
- 10%-os triamcinolon-foszfátsóoldatban.
A kísérleteket 1,6 kg áflagos tömegű hím új-zélandi nyulakon végeztük. 5 napos adaptációs periódus (alkalmazkodási időtartam) után az állatokban intraokuláris (szemen belüli) gyulladást váltottunk ki úgy, hogy 0,1 ml 10%-os dextrán oldatot injektáltunk az elülső szemcsamokba. Agyulladás kiváltásátmindkét szemen elvégeztük azzal a feltétellel, hogy 4%-os novezinnel helyi érzéstelenítést végeztünk oly módon, hogy az injekciós fecskendő tűjét az elülső szemcsamok szaruhártyájának szélétől 2 mm távolságba helyeztük be.
A vizsgálatot 10 állaton végeztük el.
A kezelést úgy végeztük el, hogy 6 napon át minden nap háromszor 3 csepp alábbi készítményt csepegtettünk be minden egyes állat jobb és bal szemébe:
- 10%-os triamcinolon-foszfát sóoldatot a bal szembe (BS);
- 10 mg/ml töménységű hialuronsav (hialektin frakció) nátriumsó és 10%-os triamcinolon-foszfát oldat elegyét a jobb szembe (JS).
A készítmények gyulladásgátló hatását a dextrán által kiváltott gyulladással szemben úgy becsültük meg, hogy a szemet egy olyan fényforrással rendelkező lámpával figyeltük meg, mely nagy intenzitású keskeny fénysugárral és mikroszkóppal vagy két szemlencsés nagyítóval van ellátva. A megfigyeléseket az alábbi intervallumokban végeztük: 0 perc, 1 óra, 3 óra, 24 óra, 48 óra, 3 nap, 4 nap, 5 nap, 6 nap.
Ezekben az időintervallumokban az alábbiakat figyeltük meg:
- a kötőhártya és a szaruhártya állapota, vérbőség, ödéma lehetséges jelenlétének felfedezése és különösen a szivárványhártya megfigyelése, amely általában érzékeny a gyulladásos folyamatokra a gyulladást okozó szerek elülső szemcsamokba történt injektálását követően;
- Ttyndall-jelenség, amikor is a különböző intenzi18
HU 204202 Β tású homályosság (nubecula, azaz apró fehér folt a szaruhártyán) következtetni enged korpuszkuláris (gyulladást okozó) elemek jelenlétére az elülső szemcsamokban.
A megfigyelések eredményeit a megfigyelt hatás 5 függvényében szubjektív módon 0 és 3 közé eső pontértékkel láttuk el és az 5. táblázatban tüntettük fel.
Amint az az 5, táblázatból látható, a triamcinolon beadása a szivárványhártyán gyulladáscsökkentő hatásúnak bizonyult és a homályosság (Tyndall-jelenség) eltűnését eredményezte az elülső szemesamokból. Az 1-3. órától a szemmel látható gyulladásos folyamat a 3-4. napra fokozatosan eltűnik és majdnem visszatér a normál pontértékre, mely a szem teljes tisztaságát jelenti a 6. napnak megfelelően. Másfelől a triamcino- 15 Ion-foszfát hialuronsav (hialektin frakció) nátriumsóval történő együttes beadása csökkenti a fent említett időszakban megfigyelt intraokuláris (szemen belüli) gyulladást összehasonlítva azzal a hatással, melyet a triamcinolon-foszfát önmagában történő beadása okozott. Ez azt jelenti, hogy a hialektin nátriumsóval történt együttes alkalmazása következtében a szivárványhártyában lévő gyulladásos folyamat és az elülső szemcsamokban lévő homályosság már 24 óra múlva csökkenni kezd, erőteljes a csökkenés 48 óra múlva és a 4. naptól kezdve a gyulladásos folyamat teljesen megszűnik.
Sem a kötőhártyában, sem a szaruhártyában alapvetően semmilyen gyulladásos reakciót nem észleltünk akkor, ha az elülső szemcsamokba további dextrán oldatot injektáltunk.
Következésképpen a triamcinolon-foszfát hialuronsav frakcióval történő együttes beadása a gyógyszerkészítmény hatásnövekedését eredményezi, amely azzal mutatható ki, hogy a nyúl szemében a vérbőség gyorsabban szűnik meg.
5. táblázat
A hialuronsav és triamcinolon-foszfát kombináció hatása a dextránnal kiváltott intraokuláris (szemen belüli) gyulladásra
Megfigyelési idők
Operc 1 óra 3 óra 24 óra 48 óra 3 nap 4 nap 5 nap 6 nap
Kötőhártya 0,0 0,0 0,2 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0
Szaruhártya 0,0 0,0 1,0 0,2 0,0 0,7 0,1 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0
Tyndall-jelenség 0,0 0,0 1,0 0,2 3,0 3,0 3,0 2,1 3,0 1,2 3,0 0,2 2,2 0,0 1,2 0,0 0,4 0,0
Szivárványhártya 0,0 0,0 0,5 0,7 2,7 2,7 3,0 2,5 3,0 1,2 3,0 0,4 2,4 0,0 1,5 0,0 0,5 0,0
BS JS BS JS BS JS BS JS BS JS BS JS BS JS BS JS BS JS
BS » bal szem, amelyet triamcinolon-foszfáttal kezeltünk
JS - jobb szem, amelyet triamícinolon-foszfáttal és hialektinnel kezeltünk (Minden egyes érték 7 állaton végzett 7 megfigyelés átlagértéke és szubjektív módon 0 és 3 közé eső pontértékekben vannak kifejezve a megfigyelt hatás fokozatosságának függvényében.)
V. Hialuronsav vivőanyaggal elegyített felhám nőve- 40 kedési faktor gyógyító (sebhegesztő) hatása
A kővetkező anyagokat használtuk:
A) készítmény: 0,5 mg/kg töménységű sóoldatban oldott felhám-növekedési faktor, 45
B) készítmény: 10 mg/ml töménységű hialuronsav (hialasztin frakció, molekulatömeg: 100 000) nátriumsó oldatban oldva.
Módszer 50
A kísérleteket 1,8 kg átlagos tömegű hím új-zélandi albínó nyulakon végeztük. Körülbelül 5 napos adaptációs periódus (alkalmazkodási időtartam) után az állatokat szaruhártyafelhám-sérülésnek vetettük alá 4%-os novezin helyi érzéstelenítő megfelelő alkalmazásával 55 egyidejűleg.
A sérülés az egyik szem látózónájában egy kör alakú területen monokuláris bemetszésből állt, amelyet egy 0,3 mm-es éles szélű homorú üveghengerrel végeztünk. 60
Kezelés
Az állatokat két csoportra osztottuk, minden egyes csoport 5 állatból állt, ezeket az alábbi táblázatban közölt kötőhártyába történő becsepegtetéses gyógykezelésnek vetettük alá:
Csoport Kezelés
1.' csoport (kontroll) sóoldat
2. csoport felhám növekedési faktor oldat [A) készítmény]
3. csoport hialuronsav (hialasztin frakció) nátriumsó és felhám növekedési faktor oldat együth azaz C) készítmény, amely az A) készítmény és a B) készítmény 1:1 arányú kombinációja
A kezelést a jobb szemen végeztük úgy, hogy összesen három alkalommal 8 óránként 2 csepp készítményt csepegtettünk be a kötőbártyába.
HU 204202 Β
Paraméterek
A szaruhártyafelhám sebhegedését a szem figyelésével becsültük meg és egy olyan fényforrással rendelkező lámpával, amely nagy intenzitású keskeny fénysugárral és mikroszkóppal, vagy két szemlencsés nagyi- 5 tóval van ellátva. Az alább felsorolt különböző időintervallumokban fotódokumentációt végeztünk: 0 óra, óra, 16 óra, 24 óra, 32 óra, 40 óra, 48 óra.
VI. Hialuronsav vivöanyaggal elegyített gentamicin mikrobaellenes hatása
Anyagok
A következő anyagokat használtuk:
- 50 mg/ml töménységű gentamicin sóoldatban oldva;
- 2 mg/ml töménységű hialuronsav (hialektin frakció) nátriumsó oldat
Eredmények 10
A 6. táblázatban összefoglalt szemvizsgálat azt mutatja, hogy az 1. csoportban (kontroll) a teljes gyógyulás (sebhegedés) (5/5 állat) a sérülést követően 48 óra múlva következik be. A 2. csoportban lévő állatoknál, amelyek felhám-növekedési faktorral lettek kezelve, ez 15 a folyamat a bemetszést kővetőén 24 óra múlva jelentős eredményt mutatott (4/5 állat). A 3. csoportba tartozó állatok, amelyek a C) készítménnyel, azaz a hialuronsav (hialasztin frakció) nátriumső és a felhám-növekedési faktor kombinációjából álló készítménnyel let- 20 tek kezelve, a sebhegedési folyamat valamennyi állatnál a bemetszést követően 16 óra múlva tökéletes volt (5/5 állat).
Ezek az eredmények azt mutatják, hogy a hialuronsav frakció, a hialasztin, a felhám-növekedési faktor 25 vivőanyagaként alkalmazva meggyorsítja a sebhegedési folyamatot azáltal, hogy előmozdítja a szarahártyasérülés gyorsabb és hatásosabb gyógyulását
6. táblázat
A szarahártya felhámsérülések gyógyulása
Csoport Kezelés A bemetszés után eltelt idő (óra)
0 s 16 24 48
1 sóoldat + + -
+ + + + -
+ + + -
+ + -
+ + + + -
2 felhámnövekedési faktor [A) készítmény] + + - -
+ + + - -
4 + - -
+ + + -
+ + + - -
2 hialuronsav nátriumső és felhám nővekedési faktor [C) készítmény] + - - -
+ - - -
+ + - - -
- - -
+ + - - -
+ - gyógyulaflan szem
--gyógyult szem
Módszer házinyúl mindkét szemében szeptikus (vérméigezéses) gyulladást váltottunk ki Pseudomonas aeruginosa 0,1 ml meghatározott titerű szuszpenziójának intraokuláris (szemen belüli) injektálásával. Azoknak a nyulaknak, amelyek szeme szeptikus (vérmérgezéses) gyulladást mutatott, hialuronsav (hialektin frakció) és gentamicin kombinációt csepegtettünk a jobb szemükbe, és gentamicint foszfátső vivőanyaggal csepegtettünk a bal szemükbe. A kezelést, amely 6 óránként 3 csepp becseppentéséből állt, a fertőző szer injektálását követően azonnal megkezdtük és addig folytattuk, amíg a fertőzés el nem tűnt A nyulak szemét egy olyan fényforrással rendelkező lámpával figyeltük meg, mely nagy intenzitású keskeny fénysugárral és mikroszkóppal vagy két szemlencsés nagyítóval van ellátva és alkalmas az élő szem különböző részei, különösen a belső részletek láthatóvá tételére.
Eredmények
A gentamicin és hialuronsav kombinációjával végzett kezelés a szeptikus (vérmérgezéses) fertőzés gyorsabb megszűnését eredményezte, mint amikor az antibiotikummal önmagában végeztük a kezelést A következtetések világosan levonhatók az alábbi 7. táblázat adataiból.
7. táblázat
A gentamicin hialuronsav hialektin frakciójával, mint vivőanyaggal készített elegyének hatása a szeptikus intraokuláris (vérmérgezéses szemen belüli) gyulladások kezelésében
Kezelés A gyulladás kezdetétől számított napok
1 2 3 4 5 6 7
Gentamicin és sóoldat, mint vivőanyag 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 36,3 100
Gentamicin és hialektin fiakció, mint vivőanyag 0,0 0,0 9,0+ 72,7+ 72,7+ 100 100
A táblázatban szereplő értékek százalékos értékben fejezik ki a gyógyult szemek számát a kezelt szemek számához viszonyítva.
+ szignifikáns különbséget jelent a foszfát vivőanyag alkalmazásával elért hatáshoz képest (-di 0,05, T 60 test B Fischer).
HU 204202 Β
Az előzőekben ismertettük a találmányt, azonban nyilvánvaló, hogy a találmány tárgya még nagyon sokféleképpen variálható. Ezek a variációk semmiképpen sem tekinthetők a találmány körén kívül esőknek, és valamennyi modifikáció szakember számára nyilvánvaló megoldásnak és a találmány oltalmi körén belülinek tekintendő.
VII. Bőrgyógyászati készítmények előállítása
Bőrgyógyászati helyi kezelés céljaira szolgáló, hialuronsav és valamely antibiotikum kombinációját tartalmazó gyógyszerkészítményeket a találmány szerint például hialuronsav és neonácin, hialuronsav és amikacin vagy hialuronsav és tetraciklin kombinációjával állíthatunk elő. Ilyen készítmények összetételét és baktériumellenes hatását az alábbiakban ismertetjük:
1. Hialuronsav és neonácin kombinációja
A készítményt az alábbi összetételben állítjuk elő:
hialuronsav nátriumsó 0,21% neomicin-szulfát 0,51% etilén-glikol és polietílén-glikol palmitoil-sztearátja 12,01% vazelin-olaj 6,01% para-oxi-benzoesav-meíilészter 0,11% iontalanított vízzel feltöltve 100,0 t%-ra
A készítmény baktériumellenes aktivitását az agardiffúziós módszerrel értékeltük. Vízzel az alábbi 8. táblázatban megadott antibiotikum-koncentrációra hígított minták hatását vizsgáltuk különböző mikroorganizmusokkal szemben, értékelve a kapott gátió zónák átmérőjét (mm-ben).
Staphylococcus aureus ATCC 6538P (Gram +)
Streptococcus faecalis ATCC 10 541 (Gram -)
Escherichia coli ATCC 8739 (Gram -)
Klebsiella pneumoniae 370V (Gram -)
Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027 (Gram-)
A kapott eredményeket az alábbi 8. táblázatban foglaltuk össze:
8. táblázat
A gátlás! zóna átmérője (mm)
Neomicin szulfát pg/ml St. aureus Strep. faec. E. coli Kleb. pn. Ps. aerug
72 19,1 13,1 15,8 16,3 11,3
24 16,7 11,3 11,9 12,9 nyom
8 13,2 - - - -
2. Hialuronsav és amikacin kombinációja A készítményt az alábbi összetételben állítjuk elő:
hialuronsav nátriumsó 0,21% amikacin-szulfát 0,51% etilén-glikol és polietilén-glikol palmitoil-sztearátja 12,01% vazelinolaj 6,01% para-oxi-benzoesav-metilészter 0,11% iontalanított vízzel feltöltve 100,0 t%-ra
A készítmény baktériumellenes aktivitását az agardiffuziós módszerrel értékeltük. Vízzel az alábbi 9. táblázatban megadott antibiotikum-koncentrációra hígított minták hatását vizsgáltuk különböző mikroorganizmusokkal szemben, értékelve a kapott gátló zónák átrmérőjét (mm-ben).
Staphylococcus aureus ATCC 6538P (Gram +)
Streptococcus faecalis ATCC 10 541 (Gram +)
Escherichia coli ATCC 8739 (Gram -)
Klebsiella pneumoniae 370V (Gram -)
Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027 (Gram -)
Az eredményeket az alábbi 9. táblázatban foglaltuk össze:
9. táblázat
A gátlási zóna átmérője (mm)
Amikacin szulfát pg/ml St. aureus Strep. faec. E. coli Kleb. pn. Ps. aerug
45 17,8 11,3 13,5 14,7 12,1
15 14,9 10,2 11,1 12,3 10,1
5 12,7 - - - nyom
3. Hialuronsav és tetraciklin kombinációja A készítményt az alábbi összetételben állítjuk elő:
hialuronsav nátriumsó 0,21% tetraciklin-hidroklorid 3,01% etilén-glikol és polietilén-glikol palmitoil-sztearátja 12,01% vazelinolaj 6,01% para-oxi-benzoesav-metilészter 0,11% iontalanított vízzel feltöltve 100,0 t%-ra
A készítmény baktériumellenes aktivitását az agardiffúziós módszenei értékeltük. Vízzel az alábbi 10. táblázatban megadott antibiotikum-koncentrációra hígított minták hatását vizsgáltuk különböző mikroorganizmusokkal szemben, értékelve a kapott gátló zónák átmérőjét (mm-ben).
Staphylococcus areus ATCC 6538P (Gram +)
Streptococcus faecalis ATCC 10 541 (Gram +)
Escherichia coli ATCC 8739 (Gram -)
Klebsiella pneumoniae 370V (Gram -)
Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027 (Gram -)
Az eredményeket az alábbi 10. táblázatban fogaltok össze:
HU 204202 Β
10. táblázat
A gátlási zóna átmérője (mm)
12. táblázat
A gátlási zóna átmérője (mm)
Tetracik- lin-hid- roHorid ggtal Sl aureus Strep. faec. E.coli Kleb. pn. Ps. aerug
72 22,4 15,7 17,6 18,5 19,3
24 19,4 13,2 14,4 15,3 16,6
8 15,8 10,2 10,4 nyom 11,2
Amikacin (szulfátra számítva) (Ig/ml Staph. aureus Strep. faec. E. coli Kleb. pn. Bs. aerug
45 18,1 11,9 14,1 15,0 12,8
15 15,2 10,9 11,5 12,9 10,6
5 13,3 - - - nyom
A követező két példában a hatóanyagot a hialuronsav nátriumső és amikadn-szulfát egyszerű keveréke 15 helyett a hialuronsav amikacinsója alakjában (és az 5. példában további hialuronsav nátriumső kíséretében) tartalmazó készítmények összetételét és hatását ismertetjük összehasonlításul..
4. ESaluronsav-amikacrnsót tartalmazó készítmény 20
Akészítményt az alábbi összetételben állítjuk elő:
hialuronsav-amikacxnsó (ekvivalens 0,51% amikacin-szulfáttal) 1,351% para-oxi-benzoesav-xnetilészter 0,101% 25 iontalanított vízzel feltöltve 100,00 t%-ra
A készítmény baktériumellenes aktivitását az előző három példában leírttal azonos módon, ugyanazokkal a mikroorganizmusokkal szemben értékeltük. A kapott 30 eredményeket az alábbi 11. táblázatban foglaltak öszsze:
11. táblázat
Agáűási zóna átmérője (mm) 35
Amikacin (szulfátra számítva) Jíg/ml St. aureus Strep. faec. E. coli Kleb.pn. Ps. aerug
45 17,9 11,8 13,6 14,6 12,5
15 15,0 10,6 11,3 12,6 10,3
5 13,1 - - - nyom
5. Hialuronsav-amikacinsőt további hialuronsavnátriumsó kíséretében tartalmazó készítmény
Akészítményt az alábbi összetételben állítjuk elő:
híaluronsav-amikacinsó (ekvivalens 0,5t% amikacin-szulfáttal) 1,351% hialuronsav nátriumsó 0,201% para-oxi-benzoesav-metilészter 0,101% iontalanított vízzel feltöltve 100,00 t%-ra
A készítmény baktériumellenes aktivitását az előzőekben leírttal azonos módszenei, ugyanazokkal a mikroorganizmusokkal szemben értékeltük. A kapott eredményeket az alábbi 12. táblázatban foglaltak össze: 60

Claims (5)

  1. SZABADALMI IGÉNYPONTOK
    1. Eljárás szemgyógyászati, bőrgyógyászati és egyéb helyi alkalmazásokra szolgáló gyógyszerkészítmények előállítására, azzal jellemezve, hogy
    a) hialuronsavat, előnyösen alkálifémsó alakjában, valamely szemészeti, bőrgyógyászati vagy egyéb helyi kezelésre alkalmas, gyógyászatilag aktív anyaggal keverünk össze, a hialuronsavat és az aktív komponenst célszerűen 100 : 0,5 -100 : 500 tömegarányban alkalmazva, ami mellett célszerűen olyan hialuronsav-fiakciót alkalmazunk, amelynek átlagos molekulatömege 20000 és 1500000 között előnyösen 50000 és 100000 között vagy 250 000 és 350 000 között vagy 500 000 és 730 000 között van, és amely előnyösen mentes a 30 000 alatti molekulatömegű hialuronsavtól; vagy
    b) hialuronsavat valamely bázisos jellegű szemészeti, bőrgyógyászati vagy egyéb helyi kezelésre alkalmas, gyógyászatilag aktív anyaggal való reagáltatás útján a hialuronsavnak az említett bázisos, gyógyászatilag aktív anyaggal képezett sójává alakítjuk, mimellett erre a célra adott esetben valamely hialuronsav-alkálifémsó ioncserélővel való kezelése útján kapott hialuronsavat alkalmazunk és/vagy gyógyászatilag aktív bázisos anyagként adott esetben az illető bázisos anyag szulfátjának ioncserélővel való kezelése útján kapott bázist alkalmazzuk; hialuronsavként célszerűen olyan hialuronsav-frakciót használunk, amelynek átlagos molekulatömege 20 000 és 1500 000 között, előnyösen 50 000 és . 100000 között vagy 250000 és 350000 között vagy 500000 és 730000 között van, és amely előnyösen mentes a 30000 alatti molekulatömegű hialuronsavtól;
    és kívánt esetben a fenti módon kapott hatóanyag-kombinációhoz hígítószert és/vagy egyéb gyógyszerészeti segédanyagot keverünk.
  2. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy bázisos jellegű, gyógyászatilag aktív anyagként sztreptomicint, entromicint, neomicint, gentamicint, pilokarpint vagy epidermális növekedési faktort (EGF) alkalmazunk.
  3. 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a hialuronsav sztőchiometrikusan semleges sóját állítjuk elő, a hialuronsav és a bázisos jellegű, gyógyászatilag aktív anyag sztőchiometrikusan ekvivalens mennyiségeinek alkalmazásával.
    HU 204202 Β
  4. 4. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a hialuronsavat a bázisos jellegű, gyógyászatiig aktív anyagnak a sztöchiometrikusan ekvivalens mennyiségénél kisebb mennyiségével reagáltatjuk és így a győgyászatilag aktív anyaggal csak részle- 5 gesen sóvá alakított hialuronsavat képezünk, amelynek a szabad kaxboxilcsoportjait kívánt esetben valamely bázisos alkálifémvegyülettel alkálifémsóvá alakítjuk.
  5. 5. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzaljellemezve, hogy 50000 és 100000 molekulatö6. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy 500000 és 730000 közötti molekulatömegű hialuronsavat alkalmazunk.
HU861402A 1985-04-05 1986-04-03 Process for producing new, local pharmaceutical compositions HU204202B (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
HU891006A HU208833B (en) 1985-12-23 1986-04-03 Process for producing hyaluronic acid salts and pharmaceutical preparatives containing them

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
IT8547924A IT1229075B (it) 1985-04-05 1985-04-05 Medicamenti per uso topico, ottenuti tramite l'impiego dell'acido ialuronico
CN85102921A CN85102921B (zh) 1985-04-05 1985-04-09 制备具有药物作用的透明质酸组份及含该组份的药物的方法
IT48980/85A IT1184675B (it) 1985-12-23 1985-12-23 Procedimento per la preparazione di sali dell'acido ialuronico

Publications (2)

Publication Number Publication Date
HUT40579A HUT40579A (en) 1987-01-28
HU204202B true HU204202B (en) 1991-12-30

Family

ID=36694284

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU861402A HU204202B (en) 1985-04-05 1986-04-03 Process for producing new, local pharmaceutical compositions

Country Status (27)

Country Link
US (1) US4736024A (hu)
EP (2) EP0197718B2 (hu)
JP (2) JP2585216B2 (hu)
KR (1) KR910006810B1 (hu)
CN (1) CN85102921B (hu)
AR (1) AR245369A1 (hu)
AT (1) ATE98495T1 (hu)
AU (1) AU592077B2 (hu)
BE (1) BE904547A (hu)
CA (2) CA1340825C (hu)
CH (1) CH672886A5 (hu)
DE (1) DE3689384T3 (hu)
DK (1) DK149886A (hu)
ES (1) ES8800055A1 (hu)
FI (1) FI83966C (hu)
FR (1) FR2579895B1 (hu)
HU (1) HU204202B (hu)
IE (1) IE64440B1 (hu)
IL (1) IL78263A0 (hu)
IN (1) IN165867B (hu)
IT (1) IT1229075B (hu)
LU (1) LU86386A1 (hu)
NO (1) NO174277C (hu)
NZ (1) NZ215676A (hu)
PH (1) PH29979A (hu)
PT (1) PT82342B (hu)
ZA (1) ZA862463B (hu)

Families Citing this family (158)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IT1186772B (it) * 1985-10-10 1987-12-16 Crinos Industria Farmaco Composto ad attivita' pilostimolante
EP0259485A4 (en) * 1986-03-14 1988-07-29 Bio Technology General Corp HEAVY METAL SALTS OF HYALURONIC ACID FOR USE AS AN ANTIMICROBIAL AGENT.
US5668116A (en) * 1987-03-19 1997-09-16 Anthropharm Pty. Limited Anti-inflammatory compounds and compositions
CA1327354C (en) * 1987-03-19 1994-03-01 David Cullis-Hill Anti-inflamatory compounds and compositions
EP0292220B1 (en) * 1987-05-20 1991-08-14 Kabushiki Kaisha Ueno Seiyaku Oyo Kenkyujo Condom
DE3883645T2 (de) * 1987-07-01 1994-02-03 Genentech Inc Therapeutische Zusamensetzungen und Verfahren zur Verhinderung von Fibrinablagerung und Adhäsionen.
US5055298A (en) * 1987-12-01 1991-10-08 Chemisches Laboratorium Dr. Kurt Richter Gmbh Cosmetic composition comprising an extracellular connective tissue matrix
JPH01213227A (ja) * 1988-02-23 1989-08-28 Tadashi Koyake 軟膏剤及び液剤
IT1219587B (it) * 1988-05-13 1990-05-18 Fidia Farmaceutici Polisaccaridi carbossiilici autoreticolati
US4981955A (en) * 1988-06-28 1991-01-01 Lopez Lorenzo L Depolymerization method of heparin
JPH0232013A (ja) * 1988-07-20 1990-02-01 Denki Kagaku Kogyo Kk 点鼻剤
JPH02200624A (ja) * 1989-01-30 1990-08-08 Nippon Kayaku Co Ltd 歯科用包帯剤
US6458774B1 (en) * 1989-02-24 2002-10-01 Richter Gedeon Vegyeszeti Gyar Rt. Compositions containing hyaluronic acid associates and a process for preparing same
HU203372B (en) * 1989-02-24 1991-07-29 Richter Gedeon Vegyeszet Process for producing hyaluronic associates and pharmaceutical compositions and cosmetics comprising such active ingredient
US5472950A (en) * 1989-02-24 1995-12-05 Richter Gedeon Vegyeszeti Gyar Rt. Compositions containing cobalt hyaluronic acid complex
CA1340994C (en) * 1989-09-21 2000-05-16 Rudolf Edgar Dr. Falk Treatment of conditions and disease
JP2945993B2 (ja) * 1989-12-05 1999-09-06 武田薬品工業株式会社 外用剤
US5141928B1 (en) * 1989-12-20 1995-11-14 Brujo Inc Ophthalmic medication
NL8903155A (nl) * 1989-12-23 1991-07-16 Stamicarbon Harssamenstelling op basis van een polyesterhars, een aminohars en een epoxyhars.
WO1991011992A1 (en) * 1990-02-13 1991-08-22 Zerega Gere S Di Peritoneal induced medicaments
IT1240316B (it) * 1990-02-21 1993-12-07 Ricerca Di Schiena Del Dr. Michele G. Di Schiema & C. Composizioni a base di acido ialuronico ad alto peso molecolare somministrabili per via topica per il trattamento di infiammazioni del cavo orale ,per la cosmetica e l'igiene del cavo orale
US5910489A (en) * 1990-09-18 1999-06-08 Hyal Pharmaceutical Corporation Topical composition containing hyaluronic acid and NSAIDS
US5639738A (en) * 1992-02-20 1997-06-17 Hyal Pharmaceutical Corporation Treatment of basal cell carcinoma and actinic keratosis employing hyaluronic acid and NSAIDs
US5990096A (en) * 1990-09-18 1999-11-23 Hyal Pharmaceutical Corporation Formulations containing hyaluronic acid
CA2061703C (en) * 1992-02-20 2002-07-02 Rudolf E. Falk Formulations containing hyaluronic acid
US5824658A (en) * 1990-09-18 1998-10-20 Hyal Pharmaceutical Corporation Topical composition containing hyaluronic acid and NSAIDS
CA2061566C (en) * 1992-02-20 2002-07-09 Rudolf E. Falk Treatment of disease employing hyaluronic acid and nsaids
IT1243435B (it) * 1990-10-05 1994-06-10 Altergon Sa Composizioni farmaceutiche per uso topico comprendenti acido ialuronico sale sodico e sostanze disinfettanti
US5492936A (en) * 1990-11-30 1996-02-20 Allergan, Inc. Bimodal molecular weight hyaluronate formulations and methods for using same
US5234914A (en) * 1991-06-11 1993-08-10 Patent Biopharmaceutics, Inc. Methods of treating hemorrhoids and anorecial disease
US5817644A (en) * 1991-07-03 1998-10-06 Hyal Pharmaceutical Corporation Targeting of dosages of medicine and therapeutic agents
US5792753A (en) * 1991-07-03 1998-08-11 Hyal Pharmaceutical Corporation Compositions comprising hyaluronic acid and prostaglandin-synthesis-inhibiting drugs
US5990095A (en) * 1991-07-03 1999-11-23 Hyal Pharmaceutical Corporation Use of hyaluronic acid and forms to prevent arterial restenosis
US6022866A (en) * 1991-07-03 2000-02-08 Hyal Pharmaceutical Corporation Use of hyaluronic acid and forms to prevent arterial restenosis
US6103704A (en) * 1991-07-03 2000-08-15 Hyal Pharmaceutical Corporation Therapeutic methods using hyaluronic acid
US5834444A (en) * 1991-07-03 1998-11-10 Hyal Pharmaceutical Corporation Hyaluronic acid and salts thereof inhibit arterial restenosis
WO1994007505A1 (en) * 1991-07-03 1994-04-14 Norpharmco Inc. Use of hyaluronic acid and forms to prevent arterial restenosis
US5977088A (en) * 1991-07-03 1999-11-02 Hyal Pharmaceutical Corporation Formulations containing hyaluronic acid
ATE241366T1 (de) * 1992-02-10 2003-06-15 Advanced Medical Optics Inc Zusammensetzungen von hyaluronat mit bimodalem molekulargewicht und verfahren zu deren verwendung
US6218373B1 (en) 1992-02-20 2001-04-17 Hyal Pharmaceutical Corporation Formulations containing hyaluronic acid
CA2061567C (en) * 1992-02-20 1998-02-03 Rudolf E. Falk Use of hyaluronic acid to repair ischemia reperfusion damage
US5942498A (en) * 1992-02-20 1999-08-24 Hyal Pharmaceutical Corporation Formulations containing hyaluronic acid
US5767106A (en) * 1992-02-21 1998-06-16 Hyal Pharmaceutical Corporation Treatment of disease and conditions associated with macrophage infiltration
CA2130762C (en) * 1994-08-24 1999-07-06 Eva Anne Turley Treatment of disease and conditions associated with macrophage infiltration
US6114314A (en) * 1992-02-21 2000-09-05 Hyal Pharmaceutical Corp. Formulations containing hyaluronic acid
ES2079994B1 (es) * 1992-10-07 1996-08-01 Cusi Lab Formulacion farmaceutica a base de polimixina-trimetoprim y un agente antiinflamatorio para su utilizacion topica oftalmica y otica.
IT1263144B (it) * 1993-02-04 1996-08-01 Lanfranco Callegaro Composizioni farmaceutiche comprendenti materiale spugnoso costituito da derivati esterei dell'acido ialuronico in associazione con altre sostanze farmacologicamente attive
IL108808A (en) * 1993-03-04 1996-09-12 Genzyme Ltd Controlled lowering of molecular weight of polymers
US5616568A (en) * 1993-11-30 1997-04-01 The Research Foundation Of State University Of New York Functionalized derivatives of hyaluronic acid
JP4010574B2 (ja) * 1994-12-05 2007-11-21 電気化学工業株式会社 皮膚外用剤
US5972326A (en) * 1995-04-18 1999-10-26 Galin; Miles A. Controlled release of pharmaceuticals in the anterior chamber of the eye
CA2154103C (en) * 1995-07-18 1998-02-24 Samuel Simon Asculai Treatment of mucous membrane disease, trauma or condition and for the relief of pain
ZA966579B (en) * 1995-08-04 1998-02-02 Wakamoto Pharma Co Ltd O/W emulsion composition for eye drops.
IT1287227B1 (it) * 1996-04-04 1998-08-04 Fidia Spa In Amministrazione S Acido ialuronico quale componente del liquido di conservazione della cornea
US5939047A (en) * 1996-04-16 1999-08-17 Jernberg; Gary R. Local delivery of chemotherapeutic agents for treatment of periodontal disease
US6451326B2 (en) 1996-05-02 2002-09-17 Burt D. Ensley Cosmetic compositions
HU225991B1 (en) * 1997-04-29 2008-02-28 Richter Gedeon Nyrt Use of the zinc hyaluronate associate (complex) for the preparation of pharmaceutical compositions for oral use against peptic ulcer
IT1287967B1 (it) * 1996-10-17 1998-09-10 Fidia Spa In Amministrazione S Preparazioni farmaceutiche per uso anestetico locale
US5843186A (en) * 1996-12-20 1998-12-01 Implemed, Inc. Intraocular lens with antimicrobial activity
US20050090662A1 (en) * 1997-01-15 2005-04-28 Beavers Ellington M. Method of making free acids from polysaccharide salts
US5789571A (en) * 1997-01-15 1998-08-04 Biocoat Incorporated Method of making free acids from polysaccharide salts
US6294170B1 (en) 1997-08-08 2001-09-25 Amgen Inc. Composition and method for treating inflammatory diseases
DE69809892T2 (de) * 1997-04-04 2003-08-28 Fidia Advanced Biopolymers S.R.L., Brindisi N-sulfatierte hyaluronsäureverbindungen, ihre derivate und verfahren zu ihrer herstellung
US6123957A (en) * 1997-07-16 2000-09-26 Jernberg; Gary R. Delivery of agents and method for regeneration of periodontal tissues
US6060454A (en) * 1997-08-08 2000-05-09 Duke University Compositions, apparatus and methods for facilitating surgical procedures
US6711436B1 (en) 1997-08-08 2004-03-23 Duke University Compositions, apparatus and methods for facilitating surgical procedures
US6514983B1 (en) 1997-09-03 2003-02-04 Guilford Pharmaceuticals Inc. Compounds, methods and pharmaceutical compositions for treating neural or cardiovascular tissue damage
US6426415B1 (en) 1997-09-03 2002-07-30 Guilford Pharmaceuticals Inc. Alkoxy-substituted compounds, methods and compositions for inhibiting parp activity
US6291425B1 (en) 1999-09-01 2001-09-18 Guilford Pharmaceuticals Inc. Compounds, methods and pharmaceutical compositions for treating cellular damage, such as neural or cardiovascular tissue damage
US6197785B1 (en) 1997-09-03 2001-03-06 Guilford Pharmaceuticals Inc. Alkoxy-substituted compounds, methods, and compositions for inhibiting PARP activity
US6346536B1 (en) 1997-09-03 2002-02-12 Guilford Pharmaceuticals Inc. Poly(ADP-ribose) polymerase inhibitors and method for treating neural or cardiovascular tissue damage using the same
US6635642B1 (en) 1997-09-03 2003-10-21 Guilford Pharmaceuticals Inc. PARP inhibitors, pharmaceutical compositions comprising same, and methods of using same
US6391336B1 (en) 1997-09-22 2002-05-21 Royer Biomedical, Inc. Inorganic-polymer complexes for the controlled release of compounds including medicinals
US6395749B1 (en) 1998-05-15 2002-05-28 Guilford Pharmaceuticals Inc. Carboxamide compounds, methods, and compositions for inhibiting PARP activity
JP2002193830A (ja) * 1998-10-19 2002-07-10 High Chem Co Ltd 経鼻投与用医薬製剤
DK172900B1 (da) * 1998-12-18 1999-09-27 Per Julius Nielsen Præparat samt kit til brug ved intraoculære operationer
US6387902B1 (en) 1998-12-31 2002-05-14 Guilford Pharmaceuticals, Inc. Phenazine compounds, methods and pharmaceutical compositions for inhibiting PARP
DE60036915T2 (de) 1999-01-13 2008-08-07 Alchemia Oncology Pty Ltd., Hawthorn Verwendung von hyaluronan zur herstellung eines medikaments zur erhöhung der wirksamkeit von zytotoxischen arzneimitteln
AU2745700A (en) * 1999-02-01 2000-08-18 Dermal Research Laboratories, Inc. A pharmaceutical composition of complex carbohydrates and essential oils and methods of using the same
US6723733B2 (en) 2000-05-19 2004-04-20 Guilford Pharmaceuticals, Inc. Sulfonamide and carbamide derivatives of 6(5H)phenanthridinones and their uses
WO2001091796A2 (en) 2000-06-01 2001-12-06 Guilford Pharmaceuticals Inc. Methods, compounds and compositions for treating gout
US6726918B1 (en) 2000-07-05 2004-04-27 Oculex Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating inflammation-mediated conditions of the eye
AUPQ879500A0 (en) * 2000-07-14 2000-08-10 Meditech Research Limited Hyaluronan as cytotoxic agent, drug presensitizer and chemo-sensitizer in the treatment of disease
US9066919B2 (en) * 2000-07-14 2015-06-30 Alchemia Oncology Pty Limited Hyaluronan as a chemo-sensitizer in the treatment of cancer
US6828308B2 (en) * 2000-07-28 2004-12-07 Sinclair Pharmaceuticals, Ltd. Compositions and methods for the treatment or prevention of inflammation
US7879824B2 (en) * 2001-07-31 2011-02-01 Dermal Research Laboratories, Inc. Methods of preventing or treating diseases and conditions using complex carbohydrates
US6576226B1 (en) 2000-11-17 2003-06-10 Gary R. Jernberg Local delivery of agents for disruption and inhibition of bacterial biofilm for treatment of periodontal disease
US6726898B2 (en) 2000-11-17 2004-04-27 Gary R. Jernberg Local delivery of agents for disruption and inhibition of bacterial biofilm for treatment of periodontal disease
US6699493B2 (en) 2000-11-29 2004-03-02 Oculex Pharmaceuticals, Inc. Method for reducing or preventing transplant rejection in the eye and intraocular implants for use therefor
ITMI20010708A1 (it) * 2001-04-03 2002-10-03 Alessandro Randazzo Trattamento farmacologico degli aloni notturni e delle immagini fantasma con parasimpaticomimetici diluiti aceclidina/pilocarpina dopo inter
AR034371A1 (es) * 2001-06-08 2004-02-18 Novartis Ag Composiciones farmaceuticas
CA2458856C (en) * 2001-08-27 2011-02-15 Meditech Research Limited Improved therapeutic protocols
DK1429807T3 (da) * 2001-09-19 2007-06-18 Altana Pharma Ag Kombination af et NSAID og en PDE4-inhibitor
ITMI20021666A1 (it) 2002-07-26 2004-01-26 Jasper Ltd Liability Co Derivati dell'acido ialuronico
US20050048099A1 (en) 2003-01-09 2005-03-03 Allergan, Inc. Ocular implant made by a double extrusion process
WO2005016386A1 (en) * 2003-08-19 2005-02-24 Meditech Research Limited Improved therapeutic protocols
US20050043251A1 (en) * 2003-08-20 2005-02-24 Fairfield Clinical Trials, Llc Method of treatment of otitis externa
US20070224278A1 (en) 2003-11-12 2007-09-27 Lyons Robert T Low immunogenicity corticosteroid compositions
US20050101582A1 (en) 2003-11-12 2005-05-12 Allergan, Inc. Compositions and methods for treating a posterior segment of an eye
US7625581B2 (en) * 2003-12-19 2009-12-01 Ethicon, Inc. Tissue scaffolds for use in muscoloskeletal repairs
US20050147570A1 (en) * 2004-01-06 2005-07-07 Nordsiek Michael T. Methods of administering diclofenac compositions for treating photodamaged skin, rosacea and/or acne
EP1706095B1 (en) 2004-01-20 2008-12-24 Allergan, Inc. Compositions for localized therapy of the eye, comprising preferably triamcinolone acetonide and hyaluronic acid
FR2865651B1 (fr) * 2004-01-29 2007-09-28 Fabre Pierre Dermo Cosmetique Compositions topiques associant des fragments de hyaluronate de sodium et un retinoide utiles en dermatologie cosmetique et medicale
US8119154B2 (en) 2004-04-30 2012-02-21 Allergan, Inc. Sustained release intraocular implants and related methods
US8147865B2 (en) 2004-04-30 2012-04-03 Allergan, Inc. Steroid-containing sustained release intraocular implants and related methods
US20050244469A1 (en) 2004-04-30 2005-11-03 Allergan, Inc. Extended therapeutic effect ocular implant treatments
GB0416397D0 (en) * 2004-07-22 2004-08-25 Glaxo Group Ltd Pharmaceutical formulations
SE0402272D0 (sv) 2004-09-21 2004-09-21 Amo Groningen Bv Methods of treating a body site with a viscoelastic preparation
JP2008520546A (ja) * 2004-09-21 2008-06-19 アドバンスト メディカル オプティクス， インコーポレーテッド 粘弾性溶液またはゲル製剤およびそれを使って身体部位を処置する方法
EP1721602A1 (en) * 2005-05-11 2006-11-15 The Jordanian Pharmaceutical Manufacturing Co. Controlled release oral drug delivery system
FR2888752B1 (fr) * 2005-07-22 2007-10-05 Fabre Pierre Dermo Cosmetique Complexe d'association intermoleculaire d'un transporteur et d'un principe actif
CA2616607C (en) * 2005-07-27 2015-06-02 Alchemia Oncology Pty Limited Therapeutic protocols using hyaluronan
WO2007028196A1 (en) * 2005-09-07 2007-03-15 Alchemia Oncology Pty Limited Therapeutic compositions comprising hyaluronan and therapeutic antibodies as well as methods of treatment
WO2007038252A2 (en) * 2005-09-22 2007-04-05 Key Douglas J Methods and compositions for treating skin lines and wrinkles and improving skin quality
JP4555232B2 (ja) * 2006-01-25 2010-09-29 Ｈｏｙａ株式会社 組織の蛍光染色方法
US8668676B2 (en) 2006-06-19 2014-03-11 Allergan, Inc. Apparatus and methods for implanting particulate ocular implants
US8802128B2 (en) 2006-06-23 2014-08-12 Allergan, Inc. Steroid-containing sustained release intraocular implants and related methods
WO2008000260A1 (en) * 2006-06-28 2008-01-03 Novozymes Biopolymer A/S Compositions with several hyaluronic acid fractions for cosmetic and medical uses
WO2008003321A2 (en) * 2006-07-07 2008-01-10 Novozymes Biopolymer A/S Compositions with several hyaluronic acid fractions for cosmetic use
US9039761B2 (en) 2006-08-04 2015-05-26 Allergan, Inc. Ocular implant delivery assemblies with distal caps
EP2063859B1 (en) 2006-09-13 2017-01-18 Enhance Skin Products Inc. Cosmetic composition for the treatment of skin and methods thereof
AU2008210557B2 (en) 2007-01-30 2013-08-01 Cypress Pharmaceutical, Inc. Hyaluronate compositions
US20090068122A1 (en) * 2007-09-06 2009-03-12 Shira Pilch Dentifrice Compositions for Treating Xerostomia
SI2818184T1 (sl) 2007-11-16 2019-03-29 Aclaris Therapeutics, Inc. Sestava in postopki za zdravljenje purpure
WO2009158144A1 (en) * 2008-05-30 2009-12-30 Fairfield Clinical Trials Llc Method and composition for dermatoses
WO2010003797A1 (en) * 2008-07-09 2010-01-14 Novozymes Biopharma Dk A/S Hyaluronic acid for corneal wound healing
EP2337536B1 (en) 2008-10-02 2020-08-12 L.R. R & D Ltd. Interface layer wound dressing
CN101385874B (zh) * 2008-10-23 2012-11-28 武汉大学 一种含有高分子透明质酸的生物滑液的制备方法
US8545554B2 (en) 2009-01-16 2013-10-01 Allergan, Inc. Intraocular injector
EP2429532A4 (en) * 2009-05-11 2015-05-27 Yissum Res Dev Co LIPID / POLYMER CONJUGATES, THEIR PREPARATION AND USES THEREOF
TWI383796B (zh) 2009-08-14 2013-02-01 Holy Stone Healthcare Co Ltd Use of hyaluronic acid mixture for the treatment and prevention of peptic ulcer and duodenal ulcer
TWI516269B (zh) 2009-08-14 2016-01-11 禾伸堂生技股份有限公司 使用於炎症性腸疾病（ｉｂｄ）治療和預防之透明質酸混合物
US8575130B2 (en) 2010-01-04 2013-11-05 Holy Stone Healthcare Co., Ltd. Mixture of hyaluronic acid for treating and preventing inflammatory bowel disease
US8722644B2 (en) 2010-01-04 2014-05-13 Holy Stone Healthcare Co., Ltd. Mixture of hyaluronic acid for treating and preventing peptic ulcer and duodenal ulcer
US9114188B2 (en) 2010-01-13 2015-08-25 Allergan, Industrie, S.A.S. Stable hydrogel compositions including additives
US20110172180A1 (en) 2010-01-13 2011-07-14 Allergan Industrie. Sas Heat stable hyaluronic acid compositions for dermatological use
US9029347B2 (en) 2010-08-05 2015-05-12 Holy Stone Healthcare Co., Ltd. Method and mixture for treating and preventing inflammatory bowel disease
IT1407283B1 (it) * 2010-12-06 2014-04-04 Paoli Ambrosi De Nuovo composto di carnosina
CZ303548B6 (cs) 2011-01-05 2012-11-28 Contipro Pharma A.S. Zdravotní prípravek tvorící jód, zpusob jeho prípravy a bandáž, která jej obsahuje
CZ22394U1 (cs) 2011-03-11 2011-06-20 Contipro C, A.S. Antimikrobiální smes a kryt pro podporu hojení ran s antimikrobiálním úcinkem
EP2543357B1 (en) 2011-07-07 2018-03-21 Holy Stone Healthcare Co.,Ltd. Composition for use in treating and preventing inflammation related disorder
ES2665254T3 (es) 2011-07-12 2018-04-25 Holy Stone Healthcare Co., Ltd. Composiciones que comprenden ácido hialurónico para tratamiento y prevención de enfermedades relacionadas con las mucosas
ITMI20111747A1 (it) 2011-09-28 2013-03-29 Fidia Farmaceutici Composizioni farmaceutiche topiche comprendenti aciclovir
ITPD20120173A1 (it) 2012-05-31 2013-12-01 Fidia Farmaceutici "nuovo sistema di rilascio di proteine idrofobiche"
JP2014141475A (ja) * 2012-12-27 2014-08-07 Daiichi Sankyo Co Ltd 新規美白剤
KR101412776B1 (ko) 2013-03-11 2014-07-01 가톨릭대학교 산학협력단 각결막염 치료용 점안제 조성물 및 이의 제조 방법
CN103319627A (zh) * 2013-07-10 2013-09-25 南宁中诺生物工程有限责任公司 一种对透明质酸钠进行分子量分级的方法
US9089562B2 (en) * 2013-08-28 2015-07-28 Presbyopia Therapies Llc Compositions and methods for the treatment of presbyopia
EP3104851A1 (en) * 2014-02-11 2016-12-21 Orasis Pharmaceuticals Ltd. Pharmacological ophthalmic composition for use in the correction of presbyopia and its administration
EP2910255A1 (en) * 2014-02-19 2015-08-26 MedSkin Solutions Dr. Suwelack AG Methods for the production of biopolymers with defined average molecular weight
US9603867B2 (en) * 2015-03-03 2017-03-28 Yung Shin Pharm. Ind. Co., Ltd. Pharmaceutical composition for improving wound healing or prophylactically preventing or inhibiting scar formation
ITUB20152542A1 (it) * 2015-07-28 2017-01-28 Altergon Sa Formulati oftalmici a base di complessi cooperativi di acido ialuronico a basso e alto peso molecolare
CN108603115A (zh) * 2016-02-12 2018-09-28 来姆有限公司 神经生长促进剂及其制造方法、内服剂、培养基用添加剂、细胞稀释液用添加剂、培养基、细胞稀释液、抗氧化剂及其制造方法、外用剂、以及伤口治疗剂及其制造方法
CA3031370A1 (en) 2016-08-19 2018-02-22 Orasis Pharmaceuticals Ltd. Ophthalmic pharmaceutical compositions and uses relating thereto
CN106727246A (zh) * 2017-02-08 2017-05-31 上海元茵生物科技有限公司 小牛血清细胞营养液
CN107802597B (zh) * 2017-12-08 2020-07-31 北京诺康达医药科技股份有限公司 一种玻璃酸钠组合物及其制备方法和应用
EP3740191B1 (en) * 2018-01-18 2021-04-28 Faes Farma, S.A. Ophthalmic compositions comprising bilastine, a beta-cyclodextrin and at least one gelling agent
FR3086865B1 (fr) * 2018-10-04 2023-04-28 Matthieu Leconte Preparation ophtalmique et lentille d'orthokeratologie pour l'inhibition, la prevention et/ou la limitation de la progression de la myopie

Family Cites Families (33)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2583096A (en) * 1949-01-15 1952-01-22 Searle & Co Process for the production of high viscosity hyaluronic acid
DE1047380B (de) * 1954-08-18 1958-12-24 American Home Prod Verfahren zur Herstellung einer hyaluronidasefreien, teilweise depolymerisierte Hyaluronsaeure enthaltenden waessrigen Traegerloesung fuer Arzneimittel
GB818336A (en) * 1956-06-22 1959-08-12 Erba Carlo Spa A new acid aminopolysaccharide and a process for the production thereof
FR1425265A (fr) * 1962-05-14 1966-01-24 Parke Davis & Co Procédé de préparation d'un nouveau polysaccharide et de ses sels
FR3715M (fr) * 1964-06-11 1965-11-29 Lucien Nouvel Antithermiques et antirhumatismaux améliorés.
US3887703A (en) * 1967-03-24 1975-06-03 Oreal Mucopolysaccharides, their preparation and use in cosmetic and pharmaceutical compositions
US3792164A (en) * 1970-03-31 1974-02-12 Chemway Corp Ophthalmic composition comprising water-soluble alkaloid salts of polyuronic acids
GB1283892A (en) * 1970-06-08 1972-08-02 Irwin Irville Lubowe Improvements in and relating to medicinal compositions for application to the skin and/or hair
DE2364373A1 (de) * 1973-12-22 1975-07-10 Hahn Carl Dr Gmbh Pharmazeutische und kosmetische praeparate zur aeusserlichen anwendung
US3936081A (en) * 1974-02-27 1976-02-03 R & G Sloane Manufacturing Co., Inc. Pipe joint and method of making same
US4141973A (en) * 1975-10-17 1979-02-27 Biotrics, Inc. Ultrapure hyaluronic acid and the use thereof
HU172937B (hu) * 1975-12-18 1979-01-28 Chinoin Gyogyszer Es Vegyeszet Sposob poluchenija novykh proizvodnykh khondroitin-sernoj kisloty s mestno anestezirujuhhim ehffektom
SE7901565L (sv) * 1979-02-21 1980-08-22 Pharmacia Ab Medel for immunisering
JPS55153711A (en) * 1979-05-19 1980-11-29 Pola Chem Ind Inc Cosmetic lotion
HU185926B (en) * 1979-09-27 1985-04-28 Agostne Kahan Process for preparing water soluble derivatives of non-steroid antiinflammatory compositions and pharmaceutical compositins containing such derivatives
US4272522A (en) * 1979-10-15 1981-06-09 Balazs Endre A Method for stimulating phagocytic activity and synergistic compositions therefor
US4303676A (en) * 1980-03-21 1981-12-01 Balazs Endre A Hyaluronate based compositions and cosmetic formulations containing same
JPS5885813A (ja) * 1981-11-17 1983-05-23 Toyo Jozo Co Ltd 吸収性良好な製剤
JPS57183707A (en) * 1981-05-02 1982-11-12 Shiseido Co Ltd Cosmetic
US4359458A (en) * 1981-09-28 1982-11-16 American Cyanamid Company O-β. -D (and O-α.. -D) Multigalactopyranosyl, xylopyranosyl and glucopyranosyl sulfate salts
JPS591405A (ja) * 1982-06-28 1984-01-06 Shiseido Co Ltd 乳化組成物
JPS597106A (ja) * 1982-07-06 1984-01-14 Shiseido Co Ltd 乳化組成物
JPS5920212A (ja) * 1982-07-27 1984-02-01 Shiseido Co Ltd 乳化組成物
JPS5939338A (ja) * 1982-08-30 1984-03-03 Shiseido Co Ltd 乳化組成物
IT1212892B (it) * 1983-10-11 1989-11-30 Della Valle Francesco Acido ialuronico ottenuto per mezzodi filtrazione molecolare sprovvisto di attivita' infiammatoria e sua utilizzazione terapeutica
JPS59219209A (ja) * 1983-05-28 1984-12-10 Kanebo Ltd 皮膚化粧料
AU555747B2 (en) * 1983-08-09 1986-10-09 Cilco Inc. Chondroitin sulfate and sodium hyaluronate composition
EP0138752B1 (de) * 1983-08-12 1986-11-12 Ciba-Geigy Ag Monokline Bleichromatpigmente
DE3334595A1 (de) * 1983-09-24 1985-04-18 B. Braun Melsungen Ag, 3508 Melsungen Wirkstoffdepot
IN163192B (hu) * 1983-10-11 1988-08-20 Fidia Spa
JPS61180723A (ja) * 1985-02-06 1986-08-13 Sanwa Kagaku Kenkyusho:Kk 易吸収性カリジノゲナ−ゼ製剤用組成物
US5095037B1 (en) * 1989-12-21 1995-12-19 Nissho Kk Combined anti-inflammatory agent
WO1991011992A1 (en) * 1990-02-13 1991-08-22 Zerega Gere S Di Peritoneal induced medicaments

Also Published As

Publication number Publication date
PT82342A (en) 1986-05-01
AU592077B2 (en) 1990-01-04
NO174277B (no) 1994-01-03
JP2585216B2 (ja) 1997-02-26
AR245369A1 (es) 1994-01-31
KR860008202A (ko) 1986-11-12
PH29979A (en) 1996-10-29
IE860847L (en) 1986-10-05
IL78263A0 (en) 1986-07-31
PT82342B (pt) 1988-03-03
ES8800055A1 (es) 1987-11-16
EP0197718A2 (en) 1986-10-15
EP0197718B1 (en) 1993-12-15
FI83966B (fi) 1991-06-14
FI861395A0 (fi) 1986-04-01
ES553714A0 (es) 1987-11-16
NO861331L (no) 1986-10-06
EP0197718B2 (en) 2001-07-25
DE3689384D1 (de) 1994-01-27
IN165867B (hu) 1990-02-03
IT1229075B (it) 1991-07-17
DE3689384T2 (de) 1994-07-07
DE3689384T3 (de) 2003-05-15
US4736024A (en) 1988-04-05
DK149886A (da) 1986-10-06
JPS61236732A (ja) 1986-10-22
NO174277C (no) 1994-04-13
IE64440B1 (en) 1995-08-09
JPH09169667A (ja) 1997-06-30
DK149886D0 (da) 1986-04-02
FR2579895A1 (hu) 1986-10-10
FR2579895B1 (hu) 1990-11-23
ATE98495T1 (de) 1994-01-15
CA1340825C (en) 1999-11-23
BE904547A (fr) 1986-10-03
AU5566286A (en) 1986-10-16
CN85102921A (zh) 1986-10-08
FI83966C (fi) 1991-09-25
EP0555898A3 (en) 1993-10-20
EP0197718A3 (en) 1987-09-09
JP2677778B2 (ja) 1997-11-17
ZA862463B (en) 1987-12-30
KR910006810B1 (ko) 1991-09-02
IT8547924A0 (it) 1985-04-05
FI861395A (fi) 1986-10-06
CN85102921B (zh) 1988-06-08
LU86386A1 (fr) 1986-09-02
HUT40579A (en) 1987-01-28
CA1341418C (en) 2003-01-21
NZ215676A (en) 1989-08-29
CH672886A5 (hu) 1990-01-15
EP0555898A2 (en) 1993-08-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HU204202B (en) Process for producing new, local pharmaceutical compositions
US5166331A (en) Hyaluronics acid fractions, methods for the preparation thereof, and pharmaceutical compositions containing same
DK175661B1 (da) Polysaccharidestere
HU204858B (en) Process for producing bridge bonded esters of hyaluronic acid
CA1338235C (en) Esters of alginic acid
JP2958373B2 (ja) 新規多糖類エステル
JP2611159B2 (ja) ヒアルロン酸薬理活性画分、その製造方法および医薬組成物
JPH02504163A (ja) 架橋したカルボキシ多糖類
KR20060048401A (ko) 하이드로카르빌 설톤 화합물에 의해 화학적으로 변형된폴리아미노사카라이드
ZA200307718B (en) Pharmaceutical composition based on macrolides for topical application in ophthalmology.
JP3050898B2 (ja) 水性医薬製剤
CA1341087C (en) Medicaments including hyaluronic acid as a drug delivery system
RU2481835C2 (ru) Ранозаживляющее средство для местного применения
JP2585216C (hu)