ES2713482T3 - Derivados de arilmetoxi isoindolina y composiciones que los comprenden y métodos de uso de los mismos - Google Patents

Derivados de arilmetoxi isoindolina y composiciones que los comprenden y métodos de uso de los mismos Download PDF

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Abstract

Un compuesto de fórmula (IV): **Fórmula** o una sal, solvato o estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que: X es N o C; Y es CH2 o C=O R11 y R12 son cada uno independientemente hidrógeno, alquilo (C1-C6); alquil(C1-C6)-cicloalquilo(C3-C6), alcoxi (C1- C6), arilo (C6-C10), CO-alquilo (C1-C6), CO-cicloalquilo (C3-C6), CO-arilo (C6-C10), COO-alquilo (C1-C6), halógeno, hidroxilo, oxo, heterociclo de 3 a 10 miembros, heteroarilo de 6 a 10 miembros, NHCO-alquilo (C1-C6), (CH2)n-fenilo, SO2-alquilo (C1-C6), SO2-cicloalquilo (C3-C6), SO2-arilo (C6-C10) o NR14R15, en el que la porción alquilo, arilo o heteroarilo de cada uno de los grupos puede estar opcionalmente sustituido con uno o más halógeno, hidroxilo o alcoxi (C1-C6). R13 es hidrógeno o alquilo(C1-C6); R14 y R15 son cada uno independientemente hidrógeno o alquilo(C1-C6); y n es 0, 1, 2 o 3.

Description

DESCRIPCION
Derivados de arilmetoxi isoindolina y composiciones que los comprenden y metodos de uso de los mismos
1. Campo
En el presente documento se proporcionan derivados de 4'-arilmetoxi-isoindolina. Tambien se describen composiciones farmaceuticas que comprenden compuestos y metodos para tratar, prevenir y manejar diversos trastornos utilizando los compuestos y composiciones.
2. Antecedentes
2.1 Patobiolog^a del cancer y otras enfermedades
El cancer se caracteriza principalmente por un aumento en el numero de celulas anomalas derivadas de un tejido normal dado, una invasion de tejidos adyacentes por parte de estas celulas anomalas, o la propagacion linfatica o a traves de la sangre de celulas malignas hasta nodulos linfaticos regionales y hasta sitios distantes (metastasis). Los datos clmicos y los estudios de biologfa molecular indican que el cancer es un proceso de multiples etapas que comienza con pequenos cambios preneoplasicos que, bajo ciertas condiciones, avanzan hacia la neoplasia. La lesion neoplasica puede evolucionar clonicamente y desarrollar una mayor capacidad para la invasion, el crecimiento, la metastasis y la heterogeneidad, en especial bajo condiciones en las que las celulas neoplasicas escapan a la vigilancia del sistema inmunologico del huesped. Roitt, I., Brostoff, J y Kale, D., Immunology, 17,1­ 17,12 (3a ed., Mosby, St. Louis, Mo., 1993).
Existe una enorme diversidad de canceres que estan descritos en detalle en la bibliograffa medica. Los ejemplos incluyen cancer de pulmon, colon, recto, prostata, mama, cerebro e intestino. La incidencia del cancer continua aumentando a medida que la poblacion general envejece, a medida que se desarrollan nuevos canceres, y a medida que crecen las poblaciones susceptibles (por ejemplo, personas infectadas por SIDA o excesivamente expuestas a la luz solar). Sin embargo, las opciones para el tratamiento del cancer son limitadas. Por ejemplo, en el caso de canceres de sangre (por ejemplo, mieloma multiple), estan disponibles pocas opciones de tratamiento, especialmente cuando la quimioterapia convencional falla y el trasplante de medula osea no es una opcion. Por lo tanto, existe una tremenda demanda de nuevos metodos y composiciones que puedan utilizarse para tratar pacientes con cancer.
Muchos tipos de canceres estan asociados con la formacion de nuevos vasos sangumeos, un proceso denominado angiogenesis. Se han elucidado varios de los mecanismos implicados en la angiogenesis inducida por tumores. El mecanismo mas directo es la secrecion por las celulas tumorales de citocinas con propiedades angiogenicas. Los ejemplos de estas citocinas incluyen el factor del crecimiento fibroblastico acido y basico (a,b-FGF), la angiogenina, el factor del crecimiento endotelial vascular (VEGF), y el TNF-a. Como alternativa, las celulas tumorales pueden liberar peptidos angiogenicos a traves de la produccion de proteasas y la posterior degradacion de la matriz extracelular, en la que se almacenan algunas citocinas (por ejemplo, b-FGF). La angiogenesis tambien puede inducirse de modo indirecto a traves del reclutamiento de celulas inflamatorias (en particular macrofagos) y la posterior liberacion de sus citocinas angiogenicas (por ejemplo, TNF-a, b-FGF).
Una diversidad de otras enfermedades y trastornos tambien esta asociada o caracterizada por una angiogenesis no deseada. Por ejemplo, una angiogenesis potenciada o no regulada se ha implicado en una serie de enfermedades y trastornos medicos que incluyen, pero sin limitacion, enfermedades neovasculares oculares, enfermedades neovasculares coroidales, enfermedades neovasculares de la retina, rubeosis (neovascularizacion del angulo), enfermedades vmcas, enfermedades geneticas, enfermedades inflamatorias, enfermedades alergicas, y enfermedades autoinmunologicas. Los ejemplos de estas enfermedades y trastornos incluyen, pero sin limitacion, retinopatfa diabetica; retinopatfa de prematuridad; rechazo de injertos corneales; glaucoma neovascular; fibroplastia retrolental; artritis; y vitreorretinopatfa proliferativa.
Por consiguiente, los compuestos que pueden controlar la angiogenesis o inhibir la produccion de ciertas citocinas, incluyendo TNF-a, pueden ser utiles en el tratamiento y la prevencion de diversas enfermedades y trastornos.
2.2 Metodos para tratar el cancer
La terapia del cancer actual puede implicar cirugfa, quimioterapia, terapia hormonal y/o tratamiento con radiacion para erradicar las celulas neoplasicas en un paciente (vease, por ejemplo, Stockdale, 1998, Medicine, vol. 3, Rubenstein y Federman, eds., Capftulo 12, Seccion IV). En fechas recientes, la terapia del cancer tambien puede implicar una terapia biologica o una inmunoterapia. Todas estas estrategias presentan inconvenientes significativos para el paciente. La cirugfa, por ejemplo, puede estar contraindicada debido a la salud del paciente o puede ser inaceptable para el paciente.
Ademas, la cirugfa puede no eliminar completamente el tejido neoplasico. La terapia con radiacion es eficaz solo cuando el tejido neoplasico muestra una mayor sensibilidad a la radiacion que el tejido normal. La terapia con radiacion tambien puede provocar a menudo efectos secundarios graves. La terapia hormonal apenas se administra como unico agente. Aunque la terapia hormonal puede ser eficaz, a menudo se utiliza para prevenir o retrasar la reaparicion del cancer despues de que otros tratamientos hayan eliminado a la mayona de las celulas del cancer. Las terapias biologicas y las inmunoterapias son pocas y pueden producir efectos secundarios, como sarpullidos o hinchamiento, smtomas parecidos a la gripe, incluyendo fiebre, escalofnos y fatiga, problemas en el tracto digestivo o reacciones alergicas.
Con respecto a la quimioterapia, existe una diversidad de agentes quimioterapeuticos disponible para el tratamiento del cancer. La mayona de los productos quimioterapeuticos para el cancer actuan inhibiendo la smtesis de ADN, directa o indirectamente inhibiendo la biosmtesis de precursores del desoxirribonucleotido trifosfato, para evitar la replicacion del ADN y la concomitante division celular Gilman et al., Goodman and Gilman's: The Pharmacological Basis of Therapeutics, Decima Ed. (McGraw Hill, Nueva York).
A pesar de la disponibilidad de una diversidad de agentes quimioterapeuticos, la quimioterapia tiene muchas desventajas. Stockdale, Medicine, vol. 3, Rubenstein y Federman, eds., cap. 12, sec. 10, 1998. Casi todos los agentes quimioterapeuticos son toxicos, y la quimioterapia provoca efectos secundarios significativos y a menudo peligrosos, incluyendo nauseas graves, depresion de la medula osea e inmunosupresion. Ademas, incluso con la administracion de una combinacion de agentes quimioterapeuticos, muchas celulas tumorales son resistentes o desarrollan resistencia a los agentes quimioterapeuticos. De hecho, las celulas que son resistentes a los agentes quimioterapeuticos concretos empleados en el protocolo de tratamiento a menudo demuestran ser resistentes a otros farmacos, incluso si estos agentes actuan a traves de un mecanismo diferente del que tienen los farmacos utilizados en el tratamiento espedfico. Este fenomeno se denomina resistencia a farmacos pleiotropica o a multiples farmacos. Debido a la resistencia a farmacos, muchos canceres demuestran o se vuelven refractarios a los protocolos de tratamiento quimioterapeutico convencionales.
Otras enfermedades o afecciones asociadas o caracterizadas por una angiogenesis no deseada tambien son diffciles de tratar. Sin embargo, se ha propuesto que algunos compuestos, tales como la protamina, la heparina y los esteroides son utiles en el tratamiento de ciertas enfermedades espedficas Taylor et al., Nature 297: 307 (1982); Folkman et al., Science 221: 719 (1983); y Pat. de Estados Unidos N.° 5.001.116 y 4.994.443.
Aun existe una necesidad significativa de metodos seguros y eficaces para el tratamiento, la prevencion y la gestion del cancer y de otras enfermedades y trastornos, incluyendo enfermedades que son refractarias a los tratamientos convencionales, tales como cirugfa, terapia de radiacion, quimioterapia y terapia hormonal, al mismo tiempo que reduzcan o eviten las toxicidades y/o los efectos secundarios asociados con las terapias convencionales.
3. Sumario
Se proporcionan en el presente documento compuestos de 4'-arilmetoxi-isoindolina como se reivindica, y sales, solvatos (por ejemplo, hidratos) farmaceuticamente aceptables, o estereoisomeros de los mismos.
Tambien se proporcionan compuestos o composiciones de la presente invencion para su uso en metodos de tratamiento y manejo de diversas enfermedades o trastornos. Los metodos comprenden administrar a un paciente que necesite tal tratamiento o manejar una cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto proporcionado en el presente documento, o una sal, solvato o estereoisomero farmaceuticamente aceptable del mismo.
Tambien, se proporcionan compuestos o composiciones de la presente invencion para su uso en metodos de prevencion de diversas enfermedades y trastornos, que comprenden administrar a un paciente que necesite tal prevencion una cantidad profilacticamente eficaz de un compuesto proporcionado en el presente documento, o una sal, solvato o estereoisomero farmaceuticamente aceptables del mismo.
Tambien se proporcionan en el presente documento composiciones farmaceuticas, formas de dosificacion unitarias, regfmenes de dosificacion y kits que comprenden un compuesto proporcionado en el presente documento, o una sal, solvato o estereoisomero farmaceuticamente aceptable de los mismos.
4. Descripcion detallada
En una realizacion, se proporcionan compuestos de isoindolina como se reivindica, y sales, solvatos y estereoisomeros farmaceuticamente aceptables de los mismos.
En otra realizacion, se proporcionan compuestos o composiciones de la presente invencion para su uso en metodos de tratamiento, manejo y prevencion de diversas enfermedades y trastornos, que comprenden administrar a un paciente que necesite tal tratamiento o prevenir una cantidad terapeuticamente o profilacticamente eficaz de un compuesto proporcionado en el presente documento, o una sal, solvato o estereoisomero farmaceuticamente aceptable del mismo. Se describen en el presente documento ejemplos de enfermedades y trastornos.
En otras realizaciones, se administra un compuesto proporcionado en el presente documento, o una sal, solvato o estereoisomero farmaceuticamente aceptable del mismo, junto con otro farmaco ("segundo agente activo") o tratamiento. Los segundos agentes activos incluyen moleculas pequenas y moleculas grandes (por ejemplo, protemas y anticuerpos), cuyos ejemplos se proporcionan en el presente documento, asf como celulas madre. Los metodos, o terapias, que se pueden usar en combinacion con la administracion de los compuestos proporcionados en el presente documento incluyen, pero sin limitation, tirug^a, transfusiones de sangre, inmunoterapia, terapia biologica, terapia de radiation y otras terapias basadas en farmacos que se usan actualmente para tratar, prevenir o manejar diversos trastornos descritos en el presente documento.
Tambien se proporcionan composiciones farmaceuticas (por ejemplo, formas de dosificacion unitarias individuales) que pueden usarse en los usos proporcionados en el presente documento. En una realization, las composiciones farmaceuticas comprenden un compuesto proporcionado en el presente documento, o una sal, solvato o estereoisomero farmaceuticamente aceptable del mismo, y opcionalmente un segundo agente activo.
4.1 Compuestos
Se proporciona en el presente documento un compuesto de formula (IV):
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o una sal, solvato o estereoisomero farmaceuticamente aceptable del mismo, en la que:
X es N o C;
Y es CH2 o C=O
R 11 y R 12 son cada uno independientemente hidrogeno, alquilo (C1-C6); alquil(Ci-C6)-cicloalquilo(C3-C6), alcoxi (Ci-C 6 ), arilo (C6-C10), CO-alquilo (C1-C6), CO-cicloalquilo (C3-C6), CO-arilo (C6-C10), CoO-alquilo (C1-C6), halogeno, hidroxilo, oxo, heterociclo de 3 a 10 miembros, heteroarilo de 6 a 10 miembros, NHCO-alquilo (C1-C6), fenilo (CH2)n, SO 2 -alquilo (C 1 -C 6 ), SO 2 -cicloalquilo (C 3 -C 6 ), SO 2 -arilo (C 6 -C 10 ) o NR 14 R 15 , en el que la portion alquilo, arilo o heteroarilo de cada uno de los grupos puede estar opcionalmente sustituido con uno o mas halogeno, hidroxilo o alcoxi (C1-C6).
R 13 es hidrogeno o alquilo(C1-C6);
R 14 y R 15 son cada uno independientemente hidrogeno o alquilo(C1-C6); y
n es 0, 1, 2 o 3.
En una realizacion, X es N. En otra realizacion, X es C.
En una realizacion, Y es CH2. En otra realizacion, Y es C=O.
En una realizacion, R 11 es hidrogeno. En otra realizacion, R 11 es alquilo (C 1 -C 6 ). En otra realizacion, R 11 es alquil(C 1 -C6)-cicloalquilo(C3-C6). En otra realizacion, R 11 es alcoxi (C1-C6). En otra realizacion, R 11 es arilo (C6-C10). En otra realizacion, R 11 es CO-alquilo (C1-C6). En otra realizacion, R 11 es CO-cicloalquilo (C3-C6). En otra realizacion, R 11 es CO-arilo (C 6 -C 10 ). En otra realizacion, R 11 es COO-alquilo (C 1 -C 6 ) En otra realizacion, R 11 es halogeno. En otra realizacion, R 11 es hidroxilo. En otra realizacion, R 11 es oxo. En otra realizacion, R 11 es heterociclo de 3 a 10 miembros. En otra realizacion, R 11 es heteroarilo de 6 a 10 miembros. En otra realizacion, R 11 es NHCO-alquilo (C1-C 6 ). En otra realizacion, R 11 es fenilo (CH 2 )n. En otra realizacion, R 11 es SO 2 -alquilo (C 1 -C 6 ). En otra realizacion, R 11 es SO2-cicloalquilo (C3-C6). En otra realizacion, R 11 es SO2-arilo (C6-C10). En otra realizacion, R 11 es NR 14 R 15 . En otra realizacion, la porcion alquilo, arilo o heteroarilo de R 11 esta sustituida con uno o mas halogeno, hidroxilo y/o alcoxi (C1-C6).
En una realizacion, R 12 es hidrogeno. En otra realizacion, R 12 es alquilo (C1-C6). En otra realizacion, R 12 es alquil(Cr C6)-cicloalquilo(C3-C6). En otra realizacion, R 12 es alcoxi (C1-C6). En otra realizacion, R 12 es arilo (C6-C10). En otra realizacion, R 12 es CO-alquilo (C 1 -C 6 ). En otra realizacion, R 12 es CO-cicloalquilo (C 3 -C 6 ). En otra realizacion, R 12 es CO-arilo (C6-C10). En otra realizacion, R 12 es COO-alquilo (C1-C6) En otra realizacion, R 12 es halogeno. En otra realizacion, R 12 es hidroxilo. En otra realizacion, R 12 es oxo. En otra realizacion, R 12 es heterociclo de 3 a 10 miembros. En otra realizacion, R 12 es heteroarilo de 6 a 10 miembros. En otra realizacion, R 12 es NHCO-alquilo (C 1 -C 6 ). En otra realizacion, R 12 es fenilo (CH2K En otra realizacion, R 12 es SO2-alquilo (C1-C6). En otra realizacion, R 12 es SO 2 -cicloalquilo (C 3 -C 6 ). En otra realizacion, R 12 es SO 2 -arilo (C 6 -C 10 ). En otra realizacion, R 12 es NR 14 R 15 . En otra realizacion, la porcion alquilo, arilo o heteroarilo de R 12 esta sustituida con uno o mas halogeno, hidroxilo y/o alcoxi (C1-C6).
En una realization, R13es hidrogeno. En otra realization, R13 es alquilo(C1-C6).
En una realizacion, R14es hidrogeno. En otra realizacion, R14 es alquilo(C1-C6).
En una realizacion, R15es hidrogeno. En otra realizacion, R15 es alquilo(C1-C6).
En una realizacion, n es 0. En otra realizacion, n es 1. En otra realizacion, n es 2. En otra realizacion, n es 3.
En una realizacion, se proporcionan compuestos en el presente documento que resultan de cualquier combinacion de X, Y, R11-R15y n como se define anteriormente.
En una realizacion, ejemplos espetificos incluyen, pero sin limitation:
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o una sal, solvato o esteroisomero farmaceuticamente aceptable de los mismos.
Tambien se describen en el presente documento los compuestos de formula:
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o una sal, solvato o estereoisomero farmaceuticamente aceptable de los mismos.
Como se usa en el presente documento, y a menos que se indique otra cosa, la expresion "sal farmaceuticamente aceptable" se refiere a sales preparadas a partir de acidos no toxicos farmaceuticamente aceptables, incluyendo acidos inorganicos y acidos organicos. Los acidos no toxicos adecuados incluyen acidos inorganicos y organicos, tales como, pero sin limitacion, acetico, algmico, antranflico, bencenosulfonico, benzoico, canforsulfonico, dtrico, etenesulfonico, formico, fumarico, furoico, gluconico, glutamico, glucuronico, galacturonico, gliddico, bromhidrico, clor^drico, isetionico, lactico, maleico, malico, mandelico, metanosulfonico, mucico, mtrico, pamoico, pantotenico, fenilacetico, propionico, fosforico, salicflico, estearico, sucdnico, sulfanflico, sulfurico, acido tartarico, ptoluenosulfonico y similares. En una realizacion, son adecuados los acidos clorddrico, bromddrico, fosforico, y sulfurico.
Como se usa en el presente documento, y a menos que se indique otra cosa, el termino "solvato" se refiere a un compuesto que incluye adicionalmente una cantidad estequiometrica o no estequiometrica de disolvente unido por fuerzas intermoleculares no covalentes. Cuando el disolvente es agua, el solvato es un hidrato.
Como se usa en el presente documento, y a menos que se especifique lo contrario, el termino "profarmaco" significa un derivado de un compuesto que puede hidrolizarse, oxidarse o reaccionar de otro modo en condiciones biologicas (in vitro o in vivo) para proporcionar el compuesto. Los ejemplos de profarmacos incluyen, pero no se limitan a, compuestos que comprenden restos biohidrolizables como amidas biohidrolizables, esteres biohidrolizables, carbamatos biohidrolizables, carbonatos biohidrolizables, ureidas biohidrolizables y analogos de fosfato biohidrolizables. Otros ejemplos de profarmacos incluyen compuestos que comprenden restos -NO, -NO2, -ONO o -ONO2. Los profarmacos se pueden preparar tfpicamente usando metodos bien conocidos, como aquellos que se describen en Burger's Medicinal Chemistry and Drug Discovery, 172-178, 949-982 (Manfred E. Wolff ed., 5a ed.
1995), y Design of Prodrugs (H Bundgaard ed., Elselvier, Nueva York 1985).
Como se usa en este documento, y a menos que se especifique lo contrario, los terminos "carbamato biohidrolizable", "carbonato biohidrolizable", "ureida biohidrolizable" y "fosfato biohidrolizable" signifcan un carbamato, carbonato, ureido y fosfato, respectivamente, de un compuesto que : 1) no interfiere con la actividad biologica del compuesto, pero puede conferir a ese compuesto propiedades ventajosas in vivo, como la captacion, la duracion de la accion o el inicio de la accion; o 2) es inactivo biologicamente pero in vivo se convierte en el compuesto biologicamente activo. Los ejemplos de carbamatos biohidrolizables incluyen, pero no se limitan a, carbamatos que incluyen alquilamina inferior, etilendiamina sustituida, aminoacido, hidroxialquilamina, amina heterodclica y heteroaromatica, y restos de polieter amina.
Como se usa en el presente documento, y a menos que se indique otra cosa, el termino "estereoisomero" incluye todos los compuestos enantiomerica/estereomericamente puros y enantiomerica/estereomericamente enriquecidos proporcionados en el presente documento.
Como se usa en el presente documento y a menos que se indique otra cosa, la expresion "estereomericamente puro" se refiere a una composicion que comprende un estereoisomero de un compuesto y que esta sustancialmente exenta de otros estereoisomeros de ese compuesto. Por ejemplo, una composicion estereomericamente pura de un compuesto que tenga un centro quiral estara sustancialmente exenta del enantiomero opuesto del compuesto. Una composicion estereomericamente pura de un compuesto que tenga dos centros quirales estara sustancialmente exenta de otros diastereomeros del compuesto. Un compuesto estereomericamente puro tfpico comprende mas de aproximadamente el 80 % en peso de un estereoisomero del compuesto y menos de aproximadamente el 20 % en peso de los demas estereoisomeros del compuesto, mas de aproximadamente el 90 % en peso de un estereoisomero del compuesto y menos de aproximadamente el 10 % en peso de los demas estereoisomeros del compuesto, mas de aproximadamente el 95 % en peso de un estereoisomero del compuesto y menos de aproximadamente el 5 % en peso de los demas estereoisomeros del compuesto, mas de aproximadamente el 97 % en peso de un estereoisomero del compuesto y menos de aproximadamente el 3 % en peso de los demas estereoisomeros del compuesto, mas de aproximadamente el 98 % en peso de un estereoisomero del compuesto y menos de aproximadamente el 2 % en peso de los demas estereoisomeros del compuesto o mas de aproximadamente el 99 % en peso de un estereoisomero del compuesto y menos de aproximadamente el 1 % en peso de los demas estereoisomeros del compuesto.
Como se usa en el presente documento y a menos que se indique otra cosa, la expresion "enriquecido estereomericamente" se refiere a una composicion que comprende mas de aproximadamente el 55 % en peso de un estereoisomero de un compuesto, mas de aproximadamente el 60 % en peso de un estereoisomero de un compuesto, mas de aproximadamente el 70 % en peso, o mas de aproximadamente el 80 % en peso de un estereoisomero de un compuesto.
Como se usa en el presente documento, y a menos que se indique otra cosa, la expresion "enantiomericamente puro" se refiere a una composicion estereomericamente pura de un compuesto que tiene un centro quiral. De forma analoga, la expresion "enantiomericamente enriquecido" se refiere a una composicion estereomericamente enriquecida de un compuesto que tiene un centro quiral.
Como se usa en el presente documento, y a menos que se indique otra cosa, el termino "alquilo" se refiere a un hidrocarburo saturado de cadena lineal o ramificada que tiene varios atomos de carbono como se especifica en el presente documento. En algunas realizaciones, los grupos alquilo tienen de 1 a 15, de 1 a 10, de 1 a 6, o de 1 a 3 atomos de carbono. Los alquilos de cadena lineal saturada representativos incluyen -metilo, -etilo, -n-propilo, -nbutilo, -n-pentilo, y -n-hexilo; mientras que los alquilos saturados y ramificados incluyen -isopropilo, -sec-butilo, -isobutilo, -terc-butilo, -isopentilo, 2-metilbutilo, 3-metilbutilo, 2-metilpentilo, 3-metilpentilo, 4-metilpentilo, 2-metilhexilo, 3-metilhexilo, 4-metilhexilo, 5-metilhexilo, 2,3-dimetilbutilo, y similares. El termino "alquilo" tambien incluye cicloalquilo.
Como se usa en el presente documento, alquenilo se refiere a un hidrocarburo de cadena lineal o ramificada que contiene uno o mas dobles enlaces. Las cadenas alquenil carbono ejemplares contienen de 2 a 20 carbonos, y en ciertas realizaciones, contienen de 1 a 8 dobles enlaces, y las cadenas de alquenil carbono de 2 a 16 carbonos, en ciertas realizaciones, contienen de 1 a 5 dobles enlaces.
Como se usa en el presente documento, alquinilo se refiere a un hidrocarburo de cadena lineal o ramificada que contiene uno o mas triples enlaces. Las cadenas alquinil carbono de 2 a 20 carbonos, en ciertas realizaciones, contienen de 1 a 8 triples enlaces, y las cadenas alquinil carbono de 2 a 16 carbonos, en ciertas realizaciones, contienen de 1 a 5 triples enlaces. Los grupos alquenilo y alquinilo ejemplares en el presente documento incluyen, pero sin limitacion, eteno, propeno, buteno, penteno, acetileno y hexina. Como se usa en el presente documento, alquilo inferior, alquenilo inferior, y alquinilo inferior se refieren a cadenas de carbono que tienen de aproximadamente 1 o aproximadamente 2 carbonos hasta aproximadamente 6 carbonos.
Como se usa en el presente documento, y a menos que se indique otra cosa, el termino "cicloalquilo" significa una especie de alquilo, que es dclico y contiene de 3 a 15, de 3 a 9, de 3 a 6, o de 3 a 5 atomos de carbono, sin alternar o resonar dobles enlaces entre atomos de carbono. Puede contener de 1 a 4 anillos. Los ejemplos de cicloalquilos sin sustituir incluyen, pero sin limitacion, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, y adamantilo. Un cicloalquilo puede estar sustituido con uno o mas sustituyentes. En algunas realizaciones, un cicloalquilo puede ser un cicloalquilo condensado con grupos arilo o heteroarilo.
Como se usa en el presente documento, y a menos que se indique otra cosa, el termino "heterocicloalquilo" se refiere a un cicloalquilo en el que uno o mas atomos de carbono se reemplazan por heteroatomos tales como, pero sin limitacion, N, S y O. En algunas realizaciones, un grupo heterocicloalquilo contiene de 2 a 14, de 2 a 8, de 2 a 7, de 2 a 5, o de 2 a 4 atomos de carbono. En algunas realizaciones, un heterocicloalquilo puede ser un heterocicloalquilo condensado con grupos arilo o heteroarilo.
Como se usa en el presente documento, el termino "arilo" se refiere a un anillo aromatico carbodclico que contiene de 5 a 14 atomos en el anillo. Los atomos en el anillo de un grupo arilo carbodclico son todos atomos de carbono. Las estructuras del anillo de arilo incluyen compuestos que tienen una o mas estructuras anulares tales como compuestos mono, bi, o tridclicos, asf como restos carbodclicos benzo-condensados tal como 5,6,7,8-tetrahidronaftilo y similares. Espedficamente, el grupo arilo puede ser un anillo mono, bi, o tridclico. Los grupos arilo representativos incluyen fenilo, antracenilo, fluorenilo, indenilo, azulenilo, fenantrenilo y naftilo.
Como se usa en el presente documento, "heteroarilo" se refiere a un sistema anular aromatico monodclico o multidclico, en ciertas realizaciones, de aproximadamente 5 a aproximadamente 15 miembros donde uno o mas, en una realizacion 1 a 3, de los atomos en el sistema anular es un heteroatomo, es decir, un elemento distinto de carbono, incluyendo, pero sin limitacion, nitrogeno, oxfgeno o azufre. El grupo heteroarilo puede estar opcionalmente condensado a un anillo benceno. Los grupos heteroarilo incluyen, pero sin limitacion, furilo, imidazolilo, indolinilo, pirrolidinilo, pirimidinilo, tetrazolilo, tienilo, piridilo, pirrolilo, N-metilpirrolilo, quinolinilo e isoquinolinilo.
Como se usa en el presente documento, "heterociclilo" se refiere a un sistema anular monodclico o multidclico no aromatico, en una realizacion de 3 a 10 miembros, en otra realizacion de 4 a 7 miembros, en una realizacion adicional de 5 a 6 miembros, donde uno o mas, en ciertas realizaciones, de 1a 3, de los atomos en el sistema anular es un heteroatomo, es decir, un elemento distinto de carbono, incluyendo, pero sin limitacion, nitrogeno, oxfgeno o azufre. En realizaciones en las que el uno o mas heteroatomos son nitrogeno, el nitrogeno esta opcionalmente sustituido con alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, heteroarilo, aralquilo, heteroaralquilo, cicloalquilo, heterociclilo, cicloalquilalquilo, heterociclilalquilo, acilo, guanidino, o el nitrogeno puede cuaternizarse para formar un grupo amonio donde los sustituyentes se seleccionan como anteriormente.
Como se usa en el presente documento, "aralquilo" se refiere a un grupo alquilo en el que uno de los atomos de hidrogeno del alquilo se reemplaza por un grupo arilo.
Como se usa en el presente documento, "heteroaralquilo" se refiere a un grupo alquilo en el que uno de los atomos de hidrogeno del alquilo se reemplaza por un grupo heteroarilo.
Como se usa en el presente documento, "alquilaminocarbonilo" se refiere a C(O)NHR en la que R es alquilo, incluyendo alquilo inferior. Como se usa en el presente documento, "dialquilaminocarbonilo" se refiere a C(O)NR'R en la que R' y R son independientemente alquilo, incluyendo alquilo inferior; "carboxamida" se refiere a grupos de formula -NR'COR en la que R' y R son independientemente alquilo, incluyendo alquilo inferior.
Como se usa en el presente documento, "arilaminocarbonilo" se refiere a -C(O)NHR en la que R es arilo, incluyendo arilo inferior, tal como fenilo.
Como se usa en el presente documento, "halo", "halogeno" o "haluro" se refiere a F, Cl, Br o I.
Cuando el numero de cualquier sustituyente dado no se especifica (por ejemplo, "haloalquilo"), puede haber uno o mas sustituyentes presentes. Por ejemplo, "haloalquilo" pueden incluir uno o mas de los mismos o diferentes halogenos.
Debe apreciarse que, si existe una discrepancia entre una estructura representada y el nombre dado a dicha estructura, debe concederse mas peso a la estructura representada. Ademas, si la estereoqmmica de una estructura o de una porcion de una estructura no se indica, por ejemplo, con lmeas en negrita o discontinuas, debe interpretarse que la estructura o la porcion de la estructura incluye todos sus estereoisomeros
4.2 Metodos para tratar, preveniry manejar
Se proporcionan en el presente documento compuestos o composiciones de la presente invencion para su uso en metodos para tratar, prevenir, y/o manejar diversas enfermedades o trastornos usando un compuesto proporcionado en el presente documento, o una sal, solvato (por ejemplo, hidrato), o estereoisomero farmaceuticamente aceptable del mismo.
Los ejemplos de enfermedades o trastornos incluyen, pero sin limitacion, cancer, trastornos asociados con la angiogenesis, dolor incluyendo, pero sin limitacion, smdrome de dolor regional complejo ("CRPS"), degeneracion macular ("MD") y smdromes relacionados, enfermedades cutaneas, trastornos pulmonares, trastornos relacionados con el amianto, enfermedades parasitarias, trastornos de inmunodeficiencia, trastornos del SNC, lesion del SNC, aterosclerosis y trastornos relacionados, sueno disfuncional y trastornos relacionados, hemoglobinopatia y trastornos relacionados (por ejemplo, anemia), trastornos relacionados con TNFa y diversas otras enfermedades y trastornos. Como se usa en el presente documento, y a menos que se indique otra cosa, los terminos "tratar", "tratando" y "tratamiento" se refieren a la erradicacion o mejona de una enfermedad o un trastorno, o de uno o mas smtomas asociados con la enfermedad o el trastorno. En algunas realizaciones, los terminos se refieren a minimizar la extension o el empeoramiento de la enfermedad o el trastorno resultantes de la administracion de uno o mas agentes profilacticos o terapeuticos a un sujeto con tal enfermedad o trastorno
Como se usa en el presente documento, a menos que se indique otra cosa, el termino "prevenir" se refiere al tratamiento con o la administracion de un compuesto proporcionado en el presente documento, con o sin otro compuesto activo adicional, antes del inicio de los smtomas, particularmente a pacientes con riesgo de cancer y/u otros trastornos descritos en el presente documento. El termino "prevencion" incluye la inhibicion o reduccion de un smtoma de la enfermedad particular. Los pacientes con antecedentes familiares de una enfermedad en particular son candidatos para regfmenes preventivos en ciertas realizaciones. Ademas, los pacientes que tienen una historia de smtomas recurrentes tambien son candidatos potenciales para la prevencion. A este respecto, el termino "prevencion" puede usarse indistintamente con el termino "tratamiento profilactico".
Como se usa en el presente documento, y a menos que se indique otra cosa, los terminos "gestionar", "gestionando" y "gestion" se refieren a prevenir o a frenar el avance, extension o empeoramiento de una enfermedad o trastorno, o de uno o mas smtomas de sus smtomas. En algunos casos, los efectos beneficiosos que obtiene un sujeto de un agente profilactico o terapeutico, no dan como resultado la curacion de la enfermedad o el trastorno.
Como se usa en el presente documento, y a menos que se indique otra cosa, una "cantidad terapeuticamente eficaz" de un compuesto es una cantidad suficiente para proporcionar un beneficio terapeutico en el tratamiento o control de una enfermedad o trastorno, o para retrasar o minimizar uno o mas smtomas asociados con la enfermedad o trastorno. Una cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto significa una cantidad del agente terapeutico, solo o en combinacion con otras terapias, que proporciona un beneficio terapeutico en el tratamiento o control de la enfermedad o trastorno. La expresion "cantidad terapeuticamente eficaz" puede abarcar una cantidad que mejore la terapia global, reduzca o evite smtomas o causas de enfermedad o trastorno, o potencie la eficacia terapeutica de otro agente terapeutico.
Como se usa en el presente documento, y a menos que se indique otra cosa, una "cantidad profilacticamente eficaz" de un compuesto es una cantidad suficiente para prevenir una enfermedad o trastorno, o prevenir su recafda. Una cantidad profilacticamente eficaz de un compuesto significa una cantidad de agente terapeutico, en solitario o junto con otros agentes, que proporcione un beneficio profilactico en la inhibicion o reduccion de un smtoma de una enfermedad o recidiva de una enfermedad. La expresion "cantidad profilacticamente eficaz" puede abarcar una cantidad que mejore la profilaxis global o potencie la eficacia profilactica de otro agente profilactico.
Los ejemplos de cancer y afecciones precancerosas incluyen, pero sin limitacion, las descritas en la patente de Estados Unidos n°. 6.281.230 y 5.635.517 de Muller et al., en diversas publicaciones de patente de Estados Unidos de Zeldis, incuyendo las publicaciones n.° 2004/0220144A1, publicada el 4 de noviembre de 2004 (Treatment of Myelodysplastic Syndrome); 2004/0029832A1, publicada el 12 de febrero de 2004 (Treatment of Various Types of Cancer); y 2004/0087546, publicada el 6 de mayo de 2004 (Treatment of Myeloproliferative Diseases). Los ejemplos tambien incluyen los descritos en el documento WO 2004/103274, publicado el 2 de diciembre de 2004.
Los ejemplos espedficos de cancer incluyen, pero sin limitacion, canceres de piel, tales como melanoma; canceres de nodulos linfaticos; mama; cuello uterino; utero; tracto gastrointestinal; pulmon; ovario; prostata; colon; recto; boca; cerebro; cabeza y cuello; garganta; testmulo; rinon; pancreas; hueso; bazo; tugado; vejiga; laringe, vfas nasales y relacionados con el SIDA. Los compuestos tambien son utiles para tratar canceres de sangre y medula osea, tales como mieloma multiple y leucemias agudas y cronicas, por ejemplo, leucemias linfoblasticas, mielogena, linfodtica y mielodtica. Los compuestos proporcionados en el presente documento pueden usarse para el tratamiento, prevencion o gestion de tumores primarios o metastasicos.
Otros canceres espedficos incluyen, pero sin limitacion, neoplasia avanzada, amiloidosis, neuroblastoma, meningioma, hemangiopericitoma, metastasis cerebral multiple, glioblastoma multiforme, glioblastoma, glioma del tallo encefalico, tumor cerebral maligno de mal pronostico, glioma maligno, glioma maligno recurrente, astrocitoma anaplasico, oligodendroglioma anaplasico, tumor neuroendocrino, adenocarcinoma rectal, cancer colorrectal C y D de Dukes, carcinoma colorrectal no extirpable, carcinoma hepatocelular metastasico, sarcoma de Kaposi, leucemia mieloblastica aguda cariotfpica, leucemia linfodtica cronica (CLL), linfoma de Hodgkin, linfoma no Hodgkin, linfoma cutaneo de linfocitos T, linfoma cutaneo de linfocitos C, linfoma grande difuso de linfocitos B, linfoma folicular de grado bajo, melanoma metastasico (melanoma localizado, incluyendo, pero sin limitacion, melanoma ocular), mesotelioma maligno, smdrome de mesotelioma maligno con derrame pleural, carcinoma peritoneal, carcinoma seroso papilar, sarcoma ginecologico, sarcoma de tejidos blandos, escleroderma, vasculitis cutanea, histiocitosis de celulas de Langerhans, leiomiosarcoma, fibrodisplasia osificante progresiva, cancer de prostata refractario a hormonas, sarcoma de tejidos blandos de alto riesgo extirpado, carcinoma hepatocelular no extirpable, macroglobulinemia de Waldenstrom, mieloma latente, mieloma indolente, cancer del tubo de Falopio, cancer de prostata independiente de androgenos, cancer de prostata no metastasico en fase IV dependiente de androgenos, cancer de prostata insensible a hormonas, cancer de prostata insensible a quimioterapia, carcinoma tiroideo papilar, carcinoma tiroideo folicular, carcinoma tiroideo medular y leiomioma. En una realizacion espedfica, el cancer es metastasico. En otra realizacion, el cancer es refractario o resistente a quimioterapia o radiacion.
En una realizacion, en el presente documento se proporcionan compuestos o composicions de la presente invencion para su uso en metodos para el tratamiento, prevencion o gestion de diversas formas de leucemias tales como leucemia linfodtica cronica, leucemia mielodtica cronica, leucemia linfoblastica aguda, leucemia mielogena aguda y leucemia mieloblastica aguda, incluyendo leucemias que son recurrentes, refractarias o resistentes, como se describe en la Publicacion de Estados Unidos n.° 2006/0030594, publicada el 9 de febrero de 2006.
El termino "leucemia" se refiere a neoplasmas malignas de los tejidos que forman la sangre. La leucemia incluye, pero sin limitacion, leucemia linfodtica cronica, leucemia mielodtica cronica, leucemia linfoblastica aguda, leucemia mielogena aguda y leucemia mieloblastica aguda. La leucemia puede ser recurrente, refractaria o resistente a la terapia convencional. El termino "recurrente" se refiere a una situacion donde los pacientes, que han tenido una remision de la leucemia despues de la terapia, tienen un retorno de celulas leucemicas en la medula y una disminucion en las celulas sangumeas normales. La expresion "refractaria o resistente" se refiere a una circunstancia donde los pacientes, incluso despues de un tratamiento intensivo, tienen celulas leucemicas residuales en la medula.
En otra realizacion,en el presente documento se proporcionan compuestos o composiciones de la presente invencion para su uso en metodos para el tratamiento, prevencion o gestion de diversos tipos de linfomas, incluyendo linfoma no Hodgkin (NHL). El termino "linfoma" se refiere a un grupo heterogeneo de neoplasmas que surgen en los sistemas linfatico y reticuloendotelial. "NHL" se refiere a la proliferacion monoclonal maligna de celulas linfoides en zonas del sistema inmunitario, incluyendo nodulos linfaticos, medula osea, bazo, hngado y tracto gastrointestinal. Los ejemplos de NHL incluyen, pero sin limitacion, linfoma de celulas del manto (MCL), linfoma linfocftico de diferenciacion intermedia, linfoma linfocftico intermedio (ILL), linfoma linfocftico difuso escasamente diferenciado (PDL), linfoma centrocftico, linfoma difuso de celulas pequenas hendidas (DSCCL), linfoma folicular, y cualquier tipo de linfomas de celulas del manto que pueda observarse al microscopio (linfoma nodular, difuso, blastico y de la zona del manto).
Los ejemplos de enfermedades y trastornos asociados con, o caracterizados por, angiogenesis no deseada incluyen, pero sin limitacion, enfermedades inflamatorias, enfermedades autoinmunes, enfermedades vfticas, enfermedades geneticas, enfermedades alergicas, enfermedades bacterianas, enfermedades neovasculares oculares, enfermedades neovasculares coroidales, enfermedades neovasculares de la retina, y rubeosis (neovascularizacion del angulo). Los ejemplos espedficos de las enfermedades y trastornos asociados con, o caracterizados por, angiogenesis no deseada incluyen, pero sin limitacion, artritis, endometriosis, enfermedad de Crohn, insuficiencia cardiaca, insuficiencia cardiaca avanzada, deterioro renal, endotoxemia, smdrome de choque toxico, osteoartritis, replicacion de retrovirus, agotamiento, meningitis, fibrosis inducida por sflice, fibrosis inducida por amianto, un trastorno veterinario, hipercalcemia asociada a una neoplasia, ictus, choque circulatorio, periodontitis, gingivitis, anemia macrocftica, anemia refractaria y smdrome de delecion de 5q.
Los ejemplos del dolor incluyen, pero sin limitacion, los descritos en la Publicacion de Patente de Estados Unidos n.° 2005/0203142, publicada el 15 de septiembre de 2005. Los tipos espedficos de dolor incluyen, pero sin limitacion, dolor nociceptivo, dolor neuropatico, dolor mixto de dolor nociceptivo y neuropatico, dolor visceral, migrana, cefalea y dolor postoperatorio.
Los ejemplos de dolor nociceptivo incluyen, pero sin limitacion, dolor asociado con quemaduras qmmicas o termicas, cortes en la piel, contusiones en la piel, osteoartritis, artritis reumatoide, tendinitis y dolor miofascial.
Los ejemplos de dolor neuropatico incluyen, pero sin limitacion, CRPS de tipo I y de tipo II, distrofia simpatica-refleja (RSD), distrofia neurovascular refleja, distrofia refleja, smdrome de dolor simpaticamente mantenido, causalgia, atrofia osea de Sudeck, algoneurodistrofia, smdrome hombro-mano, distrofia postraumatica, neuralgia trigeminal, neuralgia postherpetica, dolor relacionado con el cancer, dolor del miembro fantasma, fibromialgia, smdrome de fatiga cronica, dolor por lesion en la medula espinal, dolor central post-ictus, radiculopatfa, neuropatfa diabetica, dolor post-ictus, neuropatfa luetica y otras afecciones neuropaticas doloras tales como las inducidas por farmacos tales como vincristina y velcade.
Como se usa en el presente documento, las expresiones "smdrome de dolor regional complejo", "CRPS" y "CRPS y smdromes relacionados" significan un trastorno cronico caracterizado por uno o mas de los siguientes: dolor, y sea espontaneo o provocado, incluyendo alodinia (respuesta dolorosa a un estfmulo que normalmente no es doloroso) e hiperalgesia (respuesta exagerada a un estfmulo que normalmente solo es medianamente doloroso); dolor que es desproporcionado al episodio incitador (por ejemplo, anos de dolor intenso despues de una torcedura de tobillo); dolor regional no limitado a una distribucion simple de nervios perifericos; desregulacion autonomica (por ejemplo, edema, alteracion en el flujo sangumeo e hiperhidrosis) asociada con cambios troficos de la piel (anomalfas en el crecimiento del cabello y unas y ulceracion cutanea).
Los ejemplos de MD y smdromes relacionados incluyen, pero sin limitacion, los descritos en la Publicacion de Patente de Estados Unidos N.° 2004/0091455, publicada el 13 de mayo de 2004. Los ejemplos espedficos incluyen, pero sin limitacion, MD atrofica (seca), MD exudativa (humeda), maculopatfa relacionada con la edad (ARM), neovascularizacion coroidal (CNVM), desprendimiento del epitelio pigmentario retinal (PED) y atrofia del epitelio pigmentario retinal (RPE).
Los ejemplos de enfermedades de la piel incluyen, pero sin limitacion, las descritas en la Publicacion de Estados Unidos n.° 2005/0214328A1, publicada el 29 de septiembre de 2005. Los ejemplos espedficos incluyen, pero sin limitacion, queratosis y smtomas relacionados, enfermedades o trastornos en la piel caracterizados por un sobrecrecimiento de la epidermis, acne y arrugas.
Como se usa en el presente documento, la expresion "queratosis" se refiere a cualquier lesion de la epidermis marcada por la presencia de sobrecrecimientos circunscritos de la capa cornea, incluyendo, pero sin limitacion, queratosis actmica, queratosis seborreica, queroacantoma, queratosis folicular (enfermedad de Darier), queratosis folicular invertida, queratoderma palmoplantar (PPK, queratosis palmar y plantar), queratosis pilar y queratosis en estuco. La expresion "queratosis actmica" se refiere tambien a queratosis senil, queratosis senilis, verrugas seniles, verruga plana senil, queratosis solar, queratoderma o queratoma. La expresion "queratosis seborreica" tambien se refiere a la verruga seborreica, verruga senil o papiloma de celulas basales. La queratosis se caracteriza por uno o mas de los siguientes smtomas: aspecto aspero, escamoso, papulas eritematosas, placas, espmulas o nodulos sobre superficies expuestas (por ejemplo, cara, manos, orejas, cuello, piernas y torax), excrecencias de queratina denominadas cuernos cutaneos, hiperqueratosis, telangiectasias, elastosis, lentigos pigmentados, acantosis, paraqueratosis, disqueratosis, papilomatosis, hiperpigmentacion de las celulas basales, atipia celular, figuras mitoticas, adhesion anomala celula-celula, infiltrados inflamatorios densos y pequeno predominio de carcinomas de celulas escamosas.
Los ejemplos de enfermedades o trastornos de la piel caracterizados por sobrecrecimientos de la epidermis incluyen, pero sin limitacion, cualquiera de las afecciones, enfermedades o trastornos marcados por la presencia de sobrecrecimiento de la epidermis, incluyendo, pero sin limitacion, infecciones asociadas con papilomavirus, queratosis arsenicales, signo de Leser-Trelat, disqueratoma verrugoso (WD), tricostasis espinulosa (TS), eritroqueratodermia variable (EKV), ictiosis fetal (ictiosis en arlequm), almohadilla de los nudillos, melanoacantoma cutaneo, poroqueratosis, soriasis, carcinoma de celulas escamosas, papilomatosis reticulada y confluente (CRP), acrocordones, cuerno cutaneo, enfermedad de Cowden (smdrome de hamartoma multiple), dermatosis papulosa negra (DPN), smdrome de nevus epidermico (ENS), ictiosis vulgar; molusco contagioso, prurigo nodular y acantosis nigricans (AN).
Los ejemplos de trastornos pulmonares incluyen, pero sin limitacion, los descritos en la Publicacion de Estados Unidos n.° 2005/0239842A1, publicada el 27 de octubre de 2005. Los ejemplos espedficos incluyen hipertension pulmonar y trastornos relacionados. Los ejemplos de hipertension pulmonar y trastornos relacionados incluyen, pero sin limitacion: hipertension pulmonar primaria (PPH); hipertension pulmonar secundaria (SPH); PPH familiar; PPH esporadica; hipertension pulmonar precapilar; hipertension de la arteria pulmonar (PAH); hipertension pulmonar idiopatica; arteriopatfa pulmonar trombotica (TPA); arteriopatfa pulmonar plexogenica; hipertension pulmonar funcional clases I a IV; e hipertension pulmonar asociada con, relacionada con, o secundaria a, disfuncion ventricular izquierda, enfermedad de la valvula mitral, pericarditis constrictiva, estenosis aortica, cardiomiopatfa, fibrosis mediastinal, drenaje venoso pulmonar anomalo, enfermedad venooclusiva pulmonar, enfermedad vascular del colageno, enfermedad cardiaca congenita, infeccion por virus VIH, farmacos y toxinas tales como fenfluraminas, hipertension venosa pulmonar, enfermedad pulmonar obstructiva cronica, enfermedad pulmonar intersticial, respiracion alterada por el sueno, trastorno de hipoventilacion alveolar, exposicion cronica a gran altitud, enfermedad pulmonar neonatal, displasia alveolocapilar, enfermedad de celulas falciformes, otros trastornos de la coagulacion, tromboembolismo cronico, enfermedad del tejido conectivo, lupus, incluyendo lupus sistemico y cutaneo, esquistosomiasis, sarcoidosis o hemangiomatosis capilar pulmonar.
Los ejemplos de trastornos relacionados con el amianto incluyen, pero sin limitacion, los descritos en la Publicacion de Estados Unidos N.° 2005/0100529, publicada el 12 de mayo de 2005. Los ejemplos espedficos incluyen, pero sin limitacion, mesotelioma, asbestosis, derrame pleural maligno, derrame exudativo benigno, placas pleurales, calcificacion pleural, engrosamiento pleural difuso, atelectasia redonda, masas fibroticas y cancer de pulmon.
Los ejemplos de enfermedades parasitarias incluyen, pero sin limitacion, las descritas en la Publicacion de Estados Unidos N.° 2006/0154880, publicada el 13 de julio de 2006. Las enfermedades parasitarias incluyen enfermedades y trastornos producidos por parasitos intracelulares humanos tales como, pero sin limitacion, P. falcifarium, P. ovale, P.
vivax, P. malariae, L. donovari, L. infantum, L. aetiopica, L. major, L. tropica, L. mexicana, L. braziliensis, T. Gondii, B. microti, B. divergens, B. coli, C. parvum, C. cayetanonsis, E. histolytica, I. belli, S. mansonii, S. haematobium, Trypanosoma ssp., Toxoplasma ssp., y O. volvulus. Tambien se incluyen otras enfermedades y trastornos causados por parasitos intracelulares no humanos tales como, pero sin limitacion, Babesia bovis, Babesia canis, Banesia Gibsoni, Besnoitia darlingi, Cytauxzoon felis, Eimeria ssp., Hammondia ssp., y Theileria ssp. Los ejemplos espedficos incluyen, pero sin limitacion, malaria, babesiosis, tripanosomiasis, leishmaniasis, toxoplasmosis, meningoencefalitis, queratitis, amebiasis, giardiasis, criptosporidiosis, isosporiasis, ciclosporiasis, microsporidiosis, ascariasis, tricuriasis, anquilostomiasis, estrongiloidiasis, toxocariasis, triquinosis, filariasis linfatica, oncocerciasis, filariasis, esquitosomiasis y dermatitis provocadas por esquistosomas de animales.
Los ejemplos de trastornos de inmunodeficiencia incluyen, pero sin limitacion, los descritos en la solicitud de Estados Unidos n.° 11/289.723, presentada el 30 de noviembre de 2005. Los ejemplos espedficos incluyen, pero sin limitacion, deficit de adenosina desaminasa, deficit de anticuerpos con Ig normales o elevadas, ataxia-telangiectasia, smdrome de linfocitos desnudos, inmunodeficiencia variable comun, deficit de Ig con hiper-lgM, deleciones de la cadena pesada de Ig, deficit de IgA, inmunodeficiencia con timoma, disgenesia reticular, smdrome de Nezelof, deficit selectivo de la subclase IgG, hipogammaglobulinemia transitoria de la infancia, smdrome de Wistcott-Aldrich, agammaglobulinemia ligada al cromosoma X, inmunodeficiencia combinada grave ligada al cromosoma X.
Los ejemplos de trastornos del SNC incluyen, pero sin limitacion; los descritos en la publicacion de Estados Unidos n.° 2005/0143344, publicada el 30 de junio de 2005. Los ejemplos espedficos incluyen, pero sin limitacion, esclerosis lateral amiotrofica, enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Parkinson, enfermedad de Huntington, esclerosis multiple, otros trastornos neuroinmunologicos tales como el smdrome de Tourette, delirios o perturbaciones en la consciencia que se producen durante un corto periodo de tiempo y trastorno amnesico o deterioros discretos de la memoria que se producen en ausencia de otros deterioros del sistema nervioso central. Los ejemplos de lesiones del SNC y smdromes relacionados incluyen, pero sin limitacion, los descritos en la publicacion de Estados Unidos n.° 2006/0122228, publicada el 8 de junio de 2006. Los ejemplos espedficos incluyen, pero sin limitacion, lesion/dano del SNC y los smdromes relacionados, incluyen, pero sin limitacion, lesion cerebral primaria, lesion cerebral secundaria, lesion cerebral traumatica, lesion cerebral focal, lesion axonal difusa, lesion de cabeza, concusion, smdrome post-concusion, contusion y laceracion cerebral, hematoma subdural, hematoma epidermico, epilepsia postraumatica, estado vegetativo cronico, SCI completa, SCI incompleta, SCI aguda, SCI subaguda, SCI cronica, smdrome medular central, smdrome de Brown-Sequard, smdrome medular anterior, smdrome del cono medular, smdrome del cauda equina, choque neurogenico, choque espinal, nivel alterado de consciencia, cefalea, nauseas, vomitos, perdida de memoria, vertigos, diplopia, vision borrosa, inestabilidad emocional, alteraciones del sueno, irritabilidad, incapacidad para concentrarse, nerviosismo, alteracion del comportamiento, deficit cognitivo y ataques.
Otras enfermedades o trastornos incluyen, pero sin limitacion, enfermedades virales, geneticas, alergicas y autoinmunes. Los ejemplos espedficos incluyen, pero sin limitacion, VIH, hepatitis, smdrome de dificultad respiratoria del adulto, enfermedades de reabsorcion osea, enfermedades inflamatorias pulmonares cronicas, dermatitis, fibrosis qrnstica, choque septico, septicemia, choque endotoxico, choque hemodinamico, smdrome septicemico, lesion por reperfusion post-isquemica, meningitis, soriasis, enfermedad fibrotica, caquexia, enfermedad del injerto contra el huesped, rechazo de injertos, enfermedad autoinmune, espondilitis reumatoide, enfermedad de Crohn, colitis ulcerosa, enfermedad intestinal inflamatoria, esclerosis multiple, lupus eritematoso sistemico, ENL en la lepra, dano por radiacion, cancer, asma o lesion alveolar hiperoxica.
Los ejemplos de ateroesclerosis y afecciones relacionadas incluyen, pero sin limitacion, los descritos en la publicacion de Estados Unidos n.° 2002/0054899, publicada el 9 de mayo de 2002. Los ejemplos espedficos incluyen, pero sin limitacion, todas las formas de afecciones que implican aterosclerosis, incluyendo reestenosis despues de una intervencion vascular tal como angioplastia, implante endoprotesico, aterectoirna e injerto. En el presente documento se contemplan todas las formas de intervencion vascular, incluyendo enfermedades de sistema cardiovascular y renal, tales como, pero sin limitacion, angioplastia renal, intervencion coronaria percutanea (PCI), angioplastia coronaria transluminal percutanea (PTCA), angioplastia transluminal percutanea de la carotida (PTA), injerto de derivacion coronaria, angioplastia con implantacion de endoprotesis, intervencion transluminal percutanea periferica de las arterias ilfaca, femoral o poplftea e intervencion quirurgica usando injertos artificiales impregnados. El siguiente cuadro proporciona una lista de las principales arterias sistemicas que pueden necesitar tratamiento, todas las cuales se contemplan en el presente documento:
Tabla 1
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Los ejemplos de sueno disfuncional y smdromes relacionados incluyen, pero sin limitacion, los desvelados en la publicacion de Estados Unidos n.° 2005/0222209A1, publicada el 6 de octubre de 2005. Los ejemplos espedficos incluyen, pero sin limitacion, ronquidos, apnea del sueno, insomnio, narcolepsia, smdrome de la pierna inquieta, terrores nocturnos, paseos nocturnos, comidas nocturnas y sueno disfuncional asociado con afecciones neurologicas o inflamatorias cronicas. Las afecciones neurologicas o inflamatorias cronicas incluyen, pero sin limitacion, smdrome de dolor regional complejo, lumbago cronico, dolor musculo esqueletico, artritis, radiculopatfa, dolor asociado con cancer, fibromialgia, smdrome de fatiga cronica, dolor visceral, dolor de vejiga, pancreatitis cronica, neuropatfas (diabetica, post-herpetica, traumatica o inflamatoria) y trastornos neurodegenerativos, tales como, enfermedad de Parkinson, enfermedad de Alzheimer, esclerosis lateral amiotrofica, esclerosis multiple, enfermedad de Huntington, bradiquinesia; rigidez muscular; temblor parkinsoniano; andar parkinsoniano; acinesia; depresion; memoria a largo plazo deteriorada, smdrome de Rubinstein-Taybi (RTS); demencia; inestabilidad postural; trastornos hipocineticos; trastornos de la sinuclema; atrofias sistemicas multiples; degeneracion estriatonigral; atrofia olivopontocerebral; smdrome de Shy-Drager; enfermedad de las neuronas motrices con rasgos parkinsonianos; demencia de los cuerpos de Lewy; trastornos patologicos por Tau; paralisis supranuclear progresiva; degeneracion corticobasal, demencia frontotemporal; trastornos patologicos por amiloide; deterioro cognitivo leve; enfermedad de Alzheimer con parkinsonismo; enfermedad de Wilson; enfermedad de Hallervorden-Spatz, enfermedad de Chediak-Hagashi; ataxia espinocerebelar SCA-3; parkinsonismo distonico ligado al cromosoma X; enfermedad prionica; trastornos hipercineticos; corea; balismo; temblor distonico; esclerosis lateral amiotrofica (ALS); traumatismo del SNC y mioclono.
Los ejemplos de hemoglobinopatia y trastornos relacionados incluyen, pero sin limitacion, los descritos en la publicacion de Estados Unidos n.° 2005/0143420A1, publicada el 30 de junio de 2005. Los ejemplos espedficos incluyen, pero sin limitacion, hemoglobinopatfa, anemia de celulas falciformes y cualquier otro trastorno relacionado con la diferenciacion de celulas CD34+.
Los ejemplos de trastornos relacionados con TNFa incluyen, pero sin limitacion, los descritos en el documento WO 98/03502 y el documento WO 98/54170. Los ejemplos espedficos incluyen, pero sin limitacion: endotoxemia o smdrome de choque toxico; caquexia, smdrome de dificultad respiratoria en adulto; enfermedades con reabsorcion osea tales como artritis; hipercalcemia; reaccion del injerto contra el huesped; malaria cerebral; inflamacion; crecimiento de tumores; enfermedades inflamatorias pulmonares cronicas; lesion por reperfusion; infarto de miocardio; ictus; choque circulatorio; artritis reumatoide; enfermedad de Crohn; infeccion por VIH y SIDA; otros trastornos tales como artritis reumatoide; espondilitis reumatoide; osteoartritis, artritis psoriasica y otras afecciones artnticas, choque septico, septicemia, choque endotoxico, enfermedad del injerto contra el huesped, agotamiento, enfermedad de Crohn, colitis ulcerosa, esclerosis multiple, lupus eritematoso sistemico, ENL en la lepra, VIH, SIDA e infecciones oportunistas en el SIDA; trastornos tales como choque septico, septicemia, choque endotoxico, choque hemodinamico y smdrome septicemico, lesion por reperfusion post-isquemica, malaria, infeccion micobacteriana, meningitis, soriasis, insuficiencia cardiaca congestiva, enfermedad fibrotica, caquexia, rechazo de injerto, afecciones oncogenicas o cancerosas, asma, enfermedad autoinmune, dano por radiacion y lesion alveolar hiperoxica; infecciones vmcas, tales como las provocadas por el virus del herpes; conjuntivitis vmica; o dermatitis atopica.
En otras realizaciones, se proporciona en el presente documento el uso de los compuestos en diversas aplicaciones inmunologicas, es decir, el uso de compuestos proporcionados en el presente documento junto con una vacunacion, por ejemplo, como coadyuvante de vacuna. Aunque se contemplan en el presente documento metodos y formas de uso de los compuestos proporcionados en el presente documento junto con una vacuna, un ejemplo no limitativo de tales usos es el uso de compuestos proporcionados en el presente documento como adyuvantes de vacuna, de acuerdo con los regfmenes de administracion desvelados en la Solicitud Provisional de Estados Unidos n.° 60/712.823, presentada el 1 de septiembre de 2005. Estas realizaciones tambien se refieren a los usos de los compuestos proporcionados en el presente documento junto con vacunas para tratar o prevenir el cancer o enfermedades infecciosas, y otros usos diversos de los compuestos proporcionados en el presente documento, tales como, pero sin limitacion, reduccion o desensibilizacion de reacciones alergicas.
Las dosis de un compuesto, o una sal, solvato, o estereoisomero del mismo, farmaceuticamente aceptable, proporcionado en el presente documento, vanan dependiendo de factores tales como: la indicacion espedfica que ha de tratarse, prevenirse o gestionarse; la edad y el estado del paciente y la cantidad usada del segundo agente activo, si existe. Generalmente, un compuesto o una sal, solvato, o estereoisomero del mismo, farmaceuticamente aceptable, proporcionado en el presente documento, puede usarse en una cantidad de aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 500 mg al dfa y puede ajustarse de manera convencional (por ejemplo, la misma cantidad administrada cada dfa del periodo de tratamiento, prevencion o gestion), en ciclos (por ejemplo, una semana si, una semana no) o en una cantidad que aumente o disminuya durante el transcurso del tratamiento, prevencion o gestion. En otras realizaciones, la dosis puede ser de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 300 mg, de aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 150 mg, de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 200 mg, de aproximadamente 10 mg a aproximadamente 100 mg, de aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 50 mg, de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 50 mg, de aproximadamente 10 mg a aproximadamente 50 mg, de aproximadamente 20 mg a aproximadamente 30 mg, o de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 20 mg.
4.3 Segundos agentes activos
En los metodos y composiciones que se proporcionan en el presente documento, un compuesto o una sal, solvato o estereoisomero del mismo, farmaceuticamente aceptable, proporcionado la presente memoria puede combinarse con otros compuestos farmacologicamente activos ("segundos agentes activos"). En el tratamiento de tipos particulares de enfermedades o trastornos y afecciones y smtomas relacionados con tales enfermedades o trastornos deltas combinaciones pueden funcionar sinergicamente. Un compuesto proporcionado en el presente documento o una sal, solvato o estereoisomero del mismo, farmaceuticamente aceptable, tambien puede funcionar para aliviar efectos adversos asociados con algunos segundos agentes activos y viceversa.
En los usos y composiciones que se proporcionan en el presente documento pueden usarse uno o mas segundos ingredientes o agentes activos. Los segundos agentes activos pueden ser moleculas grandes (por ejemplo, protemas) o moleculas pequenas (por ejemplo, moleculas inorganicas sinteticas, organometalicas u organicas).
Los ejemplos de agentes activos de molecula grande incluyen, pero sin limitacion, factores de crecimiento hematopoyeticos, citocinas y anticuerpos monoclonales y policlonales. Los ejemplos espedficos de agentes activos son los anticuerpos monoclonales anti-CD40 (tales como, por ejemplo, SGN-40); inhibidores de histona desacetilasa (tales como, por ejemplo, SAHA y LAQ 824); inhibidores de protema 90 de choque termico (tales como, por ejemplo, 17-AAG); inhibidores de quinasas receptoras del factor de crecimiento 1 similar a insulina; inhibidores de quinasas receptoras del factor de crecimiento endotelial vascular (tales como, por ejemplo, PTK787); inhibidores del receptor del factor de crecimiento insulmico; inhibidores acido lisofosfatidico aciltransferasa; inhibidores de cinasa IkB; inhibidores de p38MAPK; inhibidores de EGFR (tales como, por ejemplo, gefitinib y erlotinib HCL); anticuerpos para HER-2 (tales como, por ejemplo, trastuzumab (Herceptin®) y pertuzumab (Omnitarg™)); anticuerpos para VEGFR (tales como, por ejemplo, bevacizumab (Avastin™)); inhibidores de VEGFR (tales como, por ejemplo, inhibidores de cinasa espedficos de flk-1, SU5416 y ptk787/zk222584); inhibidores de P13K (tales como, por ejemplo, wortmannina); inhibidores de C-Met (tales como, por ejemplo, PHA- 665752); anticuerpos monoclonales (tales como, por ejemplo, rituximab (Rituxan®), tositumomab (Bexxar®), edrecolomab (Panorex®) y G250); y anticuerpos anti-TNF-a. Los ejemplos de agentes activos de molecula pequena, incluyen, pero sin limitacion, agentes anticancerosos y antibioticos (por ejemplo, claritromicina).
Los segundos compuestos activos espedficos que pueden combinarse con los compuestos proporcionados en el presente documento vanan dependiendo de la indicacion espedfica a tratar, prevenir o gestionar.
Por ejemplo, para el tratamiento, prevencion o gestion control del cancer, los segundos agentes activos incluyen, pero sin limitacion: semaxanib; ciclosporina; etanercept; doxiciclina; bortezomib; lapatinib (Tykerb®); acivicina; aclarubicina; clorhidrato de acodazol; acronina; adozelesina; aldesleukin; altretamina; ambomicina; acetato de ametantrona; amsacrina; anastrozol; antramicina asparaginasa; asperlina; azacitidina; azetepa; azotomicina; batimastat; benzodepa; bicalutamida; clorhidrato de bisantreno; dimesilato de bisnafida; bizelesina; sulfato de bleomicina; brequinar sodico; bropirimina; busulfan; cactinomicina; calusterona; caracemida; carbetimer; carboplatino; carmustina; clorhidrato de carubicina; carzelesina; cedefingol; celecoxib; clorambucilo; cirolemicina; cisplatino; cladribina; mesilato de crisnatol; ciclofosfamida; citarabina; dacarbazina; dactinomicina; clorhidrato de daunorubicina; decitabina; dexormaplatino; dezaguanina; mesilato de dezaguanina; diazicuona; docetaxel; doxorubicina; clorhidrato de doxorubicina; droloxifeno; citrato de droloxifeno, propionato de dromostanolona; duazomicina; edatrexato; clorhidrato de eflornitina; elsamitrucina; enloplatino; enpromato; epipropidina; clorhidrato de epirubicina; erbulozol; clorhidrato de esorubicina; estramustina; fosfato sodico de estramustina; etanidazol; etoposido; fosfato de etoposido; etoprina; clorhidrato de fadrozol; fazarabina; fenretinida; floxuridina; fosfato de fludarabina; fluorouracilo; fluorocitabina; fosquidona; fostriecina sodica; gemcitabina; clorhidrato de gemcitabina; hidroxiurea; clorhidrato de idarubicina; ifosfamida; ilmofosina; iproplatino; irinotecan; clorhidrato de irinotecan; acetato de lanreotida; letrozol; acetato de leuprolida; clorhidrato de liarozol; lometrexol sodico; lomustina; clorhidrato de losoxantrona; masoprocol; clorhidrato de maitansina; clorhidrato de mecloretamina; acetato de megestrol; acetato de melengestrol; melfalan; menogaril; mercaptopurina; metotrexato; metotrexato sodico; metoprina; meturedepa; mitindomida; mitocarcina; mitocromina; mitogilina; mitomalcina; mitomicina; mitosper; mitotano; clorhidrato de mitoxantrona; acido micofenolico; nocodazol; nogalamicina; ormaplatino; oxisuran; paclitaxel; pegaspargaso; peliomicina; pentamustina; sulfato de peplomicina; perfosfarnida; pipobroman; piposulfan; clorhidrato de piroxantrona; plicamicina; plomestano; pormifer sodico; porfiromicina; prednimustina; clorhidrato de procarbazina; puromicina; clorhidrato de puromicina; pirazofurina; riboprina; safingol; clorhidrato de safingol; semustina; simtraceno; esparfosato sodico, esparsomicina; clorhidrato de espirogermanio; espiromustina; espiroplatino; estreptonigrina; estreptozocina; sulofenur, talisomicina; tecogalan sodico; taxotere; tegafur; clorhidrato de teloxantrona; temoporfina; teniposido; teroxirona; testolactona; tiamiprina; tioguanina; tiotepa; tiazofurina; tirapazamina; citrato de toremifeno; acetato de trestolona; triciribin fosfato; trimetrexato; glucuronato de trimetrexato; triptorelina; clorhidrato de tubulozol; uramustina; uredepa; vapreotida; verteporfina; sulfato de vinblastina; sulfato de vincristina; vindesina; sulfato de vindesina; sulfato de vinepidina; sulfato de vinglicinato; sulfato de vinleurosina; vinorelbina tartrato; sulfato de vinrosidina; sulfato de vinzolidina; vorozol; zeniplatino; zinostatina y clorhidrato de zorubicina.
Otros segundos agentes incluyen, pero sin limitacion: 20-epi-1,25 dihidroxivitamina D3; 5-etiniluracilo; abiraterona; aclarubicina; acilfulveno; adecipenol; adozelesina; aldesleuquina; antagonistas de ALL-TK; altretamina; ambamustina; amidox; amifostina; acido aminolevulmico; amrubicina; amsacrina; anagrelida; anastrozol; andrografolida; inhibidores de la angiogenesis; antagonista D; antagonista G; antarelix; protema 1 morfogenica antidorsalizante; antiandrogeno; carcinoma prostatico; antiestrogeno; antineoplaston; oligonucleotidos antisentido; glicinato de afidicolina; moduladores de genes de la apoptosis; reguladores de la apoptosis; acido apurmico; ara-CDP-DL-PTBA; arginina desaminasa; asulacrina; atamestano; atrimustina; axinastatina 1; axinastatina 2; axinastatina 3; azasetron; azatoxina; azatirosina; derivados de bacatina III; balanol; batimastat; agonistas de BCR/ABL; benzoclorinas; benzoilestaurosporina; derivados de beta lactama; beta-aletina; betaclamicina B; acido betulmico; inhibidor de bFGF; bicalutamida; bisantreno; bisaziridinilespermina; bisnafida; bistrateno A; bizelesina; breflato; bropirimina; budotitano; butionina sulfoximina; calcipotriol; calfostina C; derivados de camptotecina; capecitabina; carboxamida-amino-triazol; carboxiamidotriazol; CaRest M3; CARN 700; inhibidor derivado de cartflago; carzelesina; inhibidores de casema quinasa (ICOS); castanospermina; cecropin B; cetrorelix; clorinas; cloroquinoxalina sulfonamida; cicaprost; cis-porfirina; cladribina; analogos de clomifeno; clotrimazol; colismicina A; colismicina B; combretastatina A4; analogo de combretastatlna; conagenlna; crambescidina 816; crisnatol; criptoficina 8; derivados de criptoficina A; curaclna A; clclopentantraqulnonas; clcloplatarn cipetnicina; ocfosfato de citarabina; factor citolftico; citostatlna; dacllxlmab; decltablna; deshldrodldemnlna B; deslorelina; dexametasona; desixifosfamida; dexrazoxano; dexverapamllo; dlazlcuona; dldemlna B; dldox; dletilnorespermina; dihidro-5-azacitidina; dihidrotaxol, 9-; dloxamlclna; difenil esplromustlna; docetaxel; docosanol; dolasetron; doxifluridina; doxorubicina; droloxifeno; dronablnol; duocarmlclna SA; ebseleno; ecomustlna; edelfoslna; edrecolomab; eflornitina; elemene; emitefur; epirubicina; eprlsterlda; analogo de estramustlna; agonistas de estrogeno; antagonistas de estrogeno; etanidazol; fosfato de etoposido; exemestano; fadrozol; fazarabina; fenretinida; filgrastim; finasterida; flavopiridol; flezelastina; fluasterona; fludarabina; clorhidrato de fluorodaunorunicina; forfenimex; formestano; fostriecina; fotemustina; texafirina de gadolinio; nitrato de galio; galocitabina; ganirelix; inhibidores de gelatinasa; gemcitabina; inhibidores de glutation; hepsulfam; heregullna; hexametlleno blsacetamida; hipericina; acido ibandronico; idarubicina; idoxifeno; idramantona; ilmofosina; ilomastat; imatinib (Gleevec®), imiquimod; peptidos inmunoestimulantes; inhibidor del receptor del factor 1 de crecimiento similar a insulina; agonistas de interferones, jnterferones; interleucinas; iobenguano; yododoxorubicina; 4-ipomeanol; iroplact; irsogladina; isobengazol; isohomohalicondrina B; itasetron; jasplaquinolida; cahalalida F; triacetato lamelarina-N; lanreotida; leinamicina; lenograstim; sulfato de lentinano; leptolestatina; letrozol; factor inhibidor de leucemia; alfa interferon de leucocitos; leuprolida+estrogeno+progesterona; leuprorelina; levamisol; liarozol; analogo de poliamina lineal; peptido disacarido lipofilo; compuestos de platino lipofilos; lisoclinamida 7; lobaplatino; lombricina; lometrexol; lonidamina; losoxantrona; loxorlbina; lurtotecan; texafirin lutetio; llsoflllna; peptidos ltticos; maitansina; manostatina A; marimastat; masoprocol; maspin; inhibidores de matrilisina; inhibidores de metaloproteinasas de la matriz; menogaril; merbarona; meterelin; metioninasa; metoclopramida; inhibidor de MIF; mifepristona; miltefosina; mirimostim; mitoguazona; mitolactol; analogos de mitomicina; mitonafida; saporina-factor del crecimiento del fibroblasto mitotoxina; mitoxantrona: mofaroteno; molgramostim; Erbitux, gonadotropina corionica humana; monofosforil lfpido A+pared celular de miobacterias sk; mopidamol; agente anticancer de mostaza; micaperoxido B; extracto de la pared celular de Mycobacteria; miriaporona; N-acetildinalina; benzamidas N-sustituidas; nafarelina; nagrestip; naloxona+pentazocina; napavina; nafterpina; nartograstim; nedaplatin; nemorubicina; acido neridronico; nilutamida; nisamicina; moduladores de oxido mtrico; antioxidante nitroxido; nitrulina; oblimersen (Genasense®); O6-bencilguanina; octreotida; ocicenona; oligonucleotidos; onapristona; ondansetron; oracm; inductor oral de citosina oral; ormaplatino; osaterona; oxaliplatino; oxaunomicina; paclitaxel; analogos de paclitaxel, derivados de paclitaxel; palauamina; palmitoilrizoxina; acido pamidronico; panaxitriol; panomifeno; parabactina; pazeliptina; pegaspargaso; peldesina; polisulfato sodico de pentosan; pentostatina; pentrozol; perflubron; perfosfamida; alcohol de perililo; fenazinomicina; fenilacetato; inhibidores de fosfatasa; picibanil; clorhidrato de pilocarpina; pirarubicina; piritrexim; placetin A; placetin B; inhibidor del activador de plasminogeno; complejo de platino; compuestos de platino; complejo de platino triamina; porfimer sodico; porfiromicina; prednisona; propil bis-acridona; prostaglandina J2; inhibidores de proteosoma; modulador inmune basado en la protema A, inhibidores de la protema quinasa C, en microalgas; inhibidores de la protema tirosina fosfatasa; inhibidores de purina nucleosido fosforilasa; purpurinas; pirazoloacridina; conjugado de polioxietileno y hemoglobina piridoxilada; antagonistas de la raf; raltitrexed; ramosetron; inhibidores de la protema farmesil transferasa en los ras; inhibidores de ras; inhibidor de ras-GAP; reteliptina desmetilada; etidronato de renio Re 186; rhizoxina; ribozimas; retinamida RII; rohituquina; romurtida; roquinimex; rubiginona B1; ruboxil; safingol; saintopm; SarCNU; sarcofitol A; sargramostim; mimeticos de Sdj 1; semustina; inhibidor 1 derivado de la senescencia; oligonucleotidos sentido; inhibidores de la transduccion de senales; sizofiran; sobuzoxano; borocaptato sodico; fenilacetato sodico; solverol; protema de union a somatomedina; sonermina; acido esparfosico; espicamicina D; espiromustina; esplenopentina; espongistatina 1; escualamina; estipiamida; inhibidores de estromelisina; sulfinosina; antagonistas superactivos de peptidos intestinales vasoactivos; suradista; suramina; swainsonina; talimustina; tamoxifen metiodida; tauromustina; tazaroteno; tecogalan sodico; tegafur; telurapirilio; inhibidores de telomerasa; temoporflna; teniposido; tetraclorodecaoxido; tetrazomina; taliblastina; tiocoralina; trombopoyetina; mimetico de la trombopoyetina; timalfasina; antagonista del receptor de la timopoyetina; timotrinano; hormona estimulante del tiroides; etiopurpurina de etilo de estano; tirapazamina; bicloruro titanoceno; topsentina; toremifeno; inhibidores de la traduccion; tretinoina; triacetiluridina; triciribina; trimetrexato; triptorelina; tropisetron; turosterida; inhibidores de tirosina quinasa; tirfostinas; inhibidores de la UBC; ubenimex; factor inhibidor del crecimiento derivado del seno urogenital; antagonistas del receptor de uroquinasa; vapreotida; variolin B; velaresol; veramina; verdinas; verteporfina; vinorelbina; vinxaltina; vitaxina; vorozol; zanoterona; zeniplatino; cilascorbo y zinostatina estimalamero.
Los segundos agentes activos espedficos incluyen, pero sin limitacion 2-metoxiestradiol, telomestatina, inductores de la apoptosis en celulas de mieloma multiple (tales como, por ejemplo, TRAIL), estatinas, semaxanib, ciclosporina, etanercept, doxiciclina, bortezomib, oblimersen (Genasense®), remicade, docetaxel, celecoxib, melfalan, dexametasona (Decadron®), esteroides, gemcitabina, cisplatino, temozolomida, etoposido, ciclofosfamida, temodar, carboplatino, procarbazina, gliadel, tamoxifeno, topotecan, metotrexato, Arisa®, taxol, taxotere, fluorouracilo, leucovorina, irinotecan, xeloda, CPT-11, interferon alfa, interferon alfa pegilado (por ejemplo, PEG INTRON-A), capecitabina, cisplatino, tiotepa, fludarabina, carboplatino, daunorubicina liposomica, citarabina, doxetaxol, pacilitaxel, vinblastina, IL-2, GM-CSF, dacarbazina, vinorelbina, acido zoledronico, palmitronato, biaxin, busulfan, prednisona, bisfosfonato, trioxido arsenico, vincristina, doxorubicina (Doxil®), paclitaxel, ganciclovir, adriamicina, fosfato sodico de estramustina (Emcyt®), sulindac y etoposido.
En otra realizacion, pueden encontrarse segundos agentes espedficos de acuerdo con las indicaciones a tratar, prevenir o gestionar en las siguientes referencias: Patentes de Estados Unidos n.° 6.281.230 y 5.635.517; publicaciones de Estados Unidos n.° 2004/0220144, 2004/0190609, 2004/0087546, 2005/0203142, 2004/0091455, 2005/0100529, 2005/0214328, 2005/0239842, 2006/0154880, 2006/0122228, y 2005/0143344; y solicitud provisional de Estados Unidos n.° 60/631.870.
Los ejemplos de segundos agentes activos que pueden usarse para el tratamiento, prevencion y/o gestion del dolor incluyen, pero sin limitacion, agentes terapeuticos convencionales usados para tratar o prevenir dolor, tales como antidepresivos, anticonvulsivos, antihipetensivos, ansiolfticos, bloqueadores de canales de calcio, relajantes musculares, analgesicos no narcoticos, analgesicos opioides, antiinflamatorios, Inhibidores de cox-2, agentes inmunomoduladores, agonistas o antagonistas de receptores alfa-adrenergicos, agentes inmunosupresores, corticoesteroides, ox^geno hiperbarico, ketamina, otros agentes anestesicos, antagonistas de NMDA y otros agentes terapeuticos encontrados, por ejemplo, en Physician's Desk Reference 2003. Los ejemplos espedficos incluyen, pero sin limitacion, acido acetil salidlico (Aspirina®), celecoxib (Celebrex®), Enbrel®, ketamina, gabapentina (Neurontin®), fenitoina (Dilantin®), carbamazepina (regretol®), oxcarbazepina (Trileptal®), acido valproico (Depakene®), sulfato de morfina, hidromorfona, prednisona, griseofulvina, pentonio, alendronato, difenhidramida, guanetidina, ketorolac (Acular®), tirocalcitonina, dimetilsulfoxido (DMSO), clonidina (Catapress®), bretilio, ketanserina, reserpina, droperidol, atropina, fentolamina, bupivacama, lidocama, acetaminofeno, nortriptileno (Pamelor®), amitriptilina (Elavil®), imipramina (Tofranil®), doxepin (Sinequan®), clomipramina (Anafranil®), fluoxetina (Prozac®), sertralina (Zoloft®), naproxeno, nefazodona (Serzone®), venlafaxina (Effexor®), trazodona (Desyrel®), bupropion (Wellbutrin®), mexiletin, nifedipina, propranolol, tramadol, lamotrigina, vioxx, ziconotida, ketamina, dextrometorfan, benzodiacepinas, baclofeno, tizanidina y fenoxibenzamina.
Los ejemplos de segundos agentes activos que pueden usarse para el tratamiento, prevencion y/o gestion de la degeneracion macular y smdromes relacionados incluyen, pero sin limitacion, un esteroide, un fotosensibilizador, una integrina, un antioxidante, un interferon, un derivado de xantina, una hormona del crecimiento, un factor neurotrofico, un regulador de la neovascularizacion, un anticuerpo antl-VEGF, una prostaglandina, un antibiotico, un fitoestrogeno, un compuesto antiinflamatorio o un compuesto antiangiogenico, o una de sus combinaciones. Los ejemplos espedficos incluyen, pero sin limitacion, verteporfina, purlitina, un esteroide angiostatico, rhuFab, interferon-2a, pentoxifillina, etipurpurina de estano, motexaflna, lucentis, lutecio, 9-fluoro-11,21-dihidroxi-16,17-1-metiletilidinbis(oxi)pregna-1,4-dieno-3,20-diona, latanoprost (vease la Patente de Estados Unidos n.° 6.225.348), tetraciclina y sus derivados, rifamicina y sus derivados, macrolidos, metronidazol (Patentes de Estados Unidos n.° 6.218.369 y 6.015.803), genistema, genistina, 6'-O-Mal genistina, 6'-O-Ac genistina, daidzema, daidzina, 6'-O-Mal daidzina, 6'-O-Ac daidzina, glicitema, glicitina, 6'-O-Mal glicitina, biochanina A, formononetina (Patente de Estados Unidos n.° 6.001.368), triamcinolona acetomida, dexametasona (Patente de Estados Unidos n.° 5.770.589), talidomida, glutation (Patente de Estados Unidos n.° 5.632.984), factor de crecimiento fibroblastico basico (bFGF), factor de crecimiento transformante b (TGF-b), factor neurotrofico derivado del cerebro (BDNF), factor activador de plasminogeno de tipo 2 (PAI-2), EYE101 (Eyetech Pharmaceuticals), LY333531 (Eli Lilly), Miravant y el Implante RETISERT (Bausch & Lomb).
Los ejemplos de segundos agentes activos que pueden usarse para el tratamiento o prevencion y/o gestion de enfermedades de la piel incluyen, pero sin limitacion, queratoltticos, retinoides, a-hidroxi acidos, antibioticos, colageno, toxina botulmica, interferon, esteroides y agentes inmunomoduladores. Los ejemplos espedficos incluyen, pero sin limitacion, 5-fluorouracilo, masoprocol, acido tricloroacetico, acido salidlico, acido lactico, lactato amonico, urea, tretinoma, isotretinoma, antibioticos, colageno, toxina botulmica, interferon, corticoesteroides, acido transretinoico y colagenos tales como colageno placentario humano, colageno placentario animal, Dermalogen, AlloDerm, Fascia, Cymetra, Autologen, Zyderm, Zyplast, Resoplast e Isolagen.
Los ejemplos de segundos agente activos que pueden usarse para el tratamiento, prevencion y/o gestion de hipertension pulmonar y trastornos relacionados incluyen, pero sin limitacion, anticoagulantes, diureticos, glucosidos cardfacos, bloqueadores de canales de calcio, vasodilatadores, analogos de prostaciclina, antagonistas de endotelina, inhibidores de fosfodiesterasa (por ejemplo, inhibidores de PDE V), inhibidores de endopeptidasa, agentes hipolipemiantes, inhibidores de tromboxano y otros agentes terapeuticos que se sabe que reducen la presion de la arteria pulmonar. Los ejemplos espedficos incluyen, pero sin limitacion, warfarina (Coumadin®), un diuretico, un glucosido cardfaco, digoxina-oxfgeno, diltiazem, nifedipina, un vasodilatador, tal como prostaciclina (por ejemplo prostaglandina I2 (PGI2), epoprostenol (EPO, Floran®), treprostinilo (Remodulin®), oxido mtrico (NO), bosentano (Tracleer®), amlodipina, epoprostenol (Floran®), treprostinilo (Remodulin®), prostaciclina, tadalafilo (Cialis®), simvastatina (Zocor®), omapatrilat (Vanlev®), irbesartan (Avapro®), pravastatina (Pravachol®), digoxina, L-arginina, iloprost, betaprost y sildenafilo (Viagra®).
Los ejemplos de segundos agentes activos que puede usarse para el tratamiento, prevencion y/o gestion de trastornos relacionados con el amianto incluyen, pero sin limitacion, antraciclina, platino, un agente alquilante, oblimerseno (Genasense®), cisplatino, ciclofosfamida, temodar, carboplatino, procarbazina, gliadel, tamoxifeno, topotecan, metotrexato, taxotere, irinotecan, capecitabina, cisplatino, tiotepa, fludarabina, carboplatino, daunorrubicina liposomica, citarabina, doxetaxol, pacilitaxel, vinblastina, IL-2, CM-CSF, dacarbazina, vinorrelbina, acido zoledronico, palmitronato, biaxina, busulfano, prednisona, bisfosfonato, trioxido arsenico, vincristina, doxorrubicina (Doxil®), paclitaxel, ganciclovir, adriamicina, bleomicina, hialuronidasa, mitomicina C, mepacrina, tiotepa, tetraciclina y gemcitabina.
Los ejemplos de segundos agentes activos que pueden usarse para el tratamiento, prevencion y/o gestion de enfermedades parasitarias incluyen, pero sin limitacion, cloroquina, quinina, quinidina, pirimetamina, sulfadiazina, doxiciclina, clindamicina, mefloquina, halofantrina, primaquina, hidroxicloroquina, proguanilo, atovacuona, azitromicina, suramina, pentamidina, melarsoprol, nifurtimox, benznidazol, amfotericina B, compuestos de antimonio pentavalentes (por ejemplo, estiboglucuronato sodico), interferon gamma, itraconazol, una combinacion de promastigotos muertos y BCG, leucovorina, corticosteroides, sulfonamida, espiramicina, IgG (serologica), trimetoprim y sulfametoxazol.
Los ejemplos de segundos agentes activos que pueden usarse para el tratamiento, prevencion y/o gestion de trastornos de inmunodeficiencia incluyen, pero sin limitacion: antibioticos (terapeuticos o profilacticos) tales como, pero sin limitacion, ampicilina, tetraciclina, penicilina, cefalosporinas, estreptomicina, kanamicina y eritromicina; antivirales tales como, pero sin limitacion, amantadina, rimantadina, aciclovir y ribavirina; inmunoglobulina; pasma; farmacos potenciadores inmunologicos tales como, pero sin limitacion, levamisol e isoprinosina; agentes biologicos tales como, pero sin limitacion, gammaglobulina, factor de transferencia, interleucinas e interferones; hormonas tales como, pero sin limitacion, timicas; y otros agentes inmunologicos tales como, pero sin limitacion, estimulantes de celulas B (por ejemplo, BAFF/BlyS), citocinas (por ejemplo, IL-2, IL-4 e IL-5), factores de crecimiento (por ejemplo, TGF-a), anticuerpos (por ejemplo, anti-CD40 e IgM), oligonucleotidos que contiene motivos CpG no metilados y vacunas (por ejemplo vacunas peptfdicas tumorales y virales).
Los ejemplos de segundos agentes activos que pueden usarse para el tratamiento, prevencion y/o control de trastornos del SNC incluyen, pero sin limitacion: opioides, un agonista o antagonista de dopamina, tal como, pero sin limitacion, levodopa, L-DOPA, cocama, a-metil-tirosina, reserpina, tetrabenazina, benzotropina, pargilina, mesilato de fenodolpam, cabergolina, diclorhidrato de pramipexol, ropinorol, clorhidrato de amantadina, clorhidrato de selegilina, carbidopa, mesilato de pergolida, Sinemet CR y Symmetrel; un inhibidor de MAO, tal como, pero sin limitacion, iproniazida, clorgilina, fenelzina e isocarboxazida; un inhibidor de COMT, tal como, pero sin limitacion, tolcapona y entacapona; un inhibidor de colinesterasa, tal como, pero sin limitacion, salicilato de fisoestigmina, sulfato de fisoestigmina, bromuro de fisoestigmina, bromuro de meoestigmina, metilsulfato de neoestigmina, cloruro de ambenonim, cloruro de edrofonio, tacrina, cloruro de pralidoxima, cloruro de obidoxima, bromuro de trimedoxima, diacetilmonoxima, endrofonio, piridoestigmina y demecario; un agente antiinflamatorio, tal como, pero sin limitacion, naproxeno sodico, diclofenaco sodico, diclofenaco potasico, celecoxib, sulindac, oxaprozina, diflunisal, etodolac, meloxicam, ibuprofeno, ketoprofeno, nabumetona, refecoxib, metotrexato, leflunomida, sulfasalazina, sales de oro, inmunoglobulina Rho-D, micofenilato de mofetilo, ciclosporina, azatioprina, tacrolimus, basiliximab, daclizumab, acido salidlico, acido acetilsalidlico, salicilato de metilo, diflunisal, salsalato, olsalazina, sulfasalazina, acetaminofeno, indometacina, sulindac, acido mefenamico, meclofenamato sodico, tolmetina, ketorolac, diclofenaco, flurbinprofeno, oxaprozina, piroxicam, meloxicam, ampiroxicam, droxicam, pivoxicam, tenoxicam, fenilbutazona, oxifenbutazona, antipirina, aminopirina, apazona, zileuton, aurotioglucosa, tiomalato sodico de oro, auranofina, metotrexato, colchicina, alopurinol, probenecid, sulfinpirazona y benzbromarona o betametasona y otros glucocorticoides; y agentes antiemeticos tales como, pero sin limitacion, metoclopromida, domperidona, proclorperazina, prometazina, clorpromazina, trimetobenzamida, ondansetron, granisetron, hidroxizina, acetileucina monoetanolamina, alizaprida, azasetron, benzquinamida, bietanautina, bromoprida, buclizina, cleboprida, ciclizina, dimenhidrinata, difenidol, dolasetron, meclizina, metalatal, metopimazina, nabilona, oxipemdil, pipamazina, escopolamina, sulpirida, tetrahidrocannabinol, tietilperacina, tioproperazina, tropisetrona, y una mezcla de los mismos.
Los ejemplos de segundos agentes activos que pueden usarse para el tratamiento, prevencion y/o control de lesiones del SNC y smdromes relacionados incluyen, pero sin limitacion, agentes inmunomoduladores, agentes inmunosupresores, antihipertensivos, anticonvulsivos, agentes fribinol (ticos, agentes antiplaquetarios, antipsicoticos, antidepresivos, benzodiazepinas, buspirona, amantadina y otros agentes conocidos o convencionales usados en pacientes con lesion/dano del SNC y smdromes relacionados. Los ejemplos espedficos incluyen, pero sin limitacion: esteroides (por ejemplo, glucocorticoides, tales como, pero sin limitacion, metilprednisolona, dexametasona y betametasona); un agente antiinflamatorio, incluyendo, pero sin limitacion, naproxeno sodico, diclofenaco sodico, diclofenaco potasico, celecoxib, sulindac, oxaprozin, diflunisal, etodolac, meloxicam, ibuprofeno, ketoprofeno, nabumetona, refecoxib, metotrexato, leflunomida, sulfasalazina, sales de oro, inmunoglobulina RHo-D, micofenilato de mofetilo, ciclosporina, azatioprina, tacrolimus, basiliximab, daclizumab, acido salidlico, acido acetilsalidlico, salicilato de metilo, diflunisal, salsalato, olsalazina, sulfasalazina, acetaminofeno, indometacina, sulindac, acido mefenamico, meclofenamato sodico, tolmetina, ketorolac, diclofenaco, flurbinprofeno, oxaprozina, piroxicam, meloxicam, ampiroxicam, droxicam, pivoxicam, tenoxicam, fenilbutazona, oxifenbutazona, antipirina, aminopirina, apazona, zileuton, aurotioglucosa, tiomalato sodico de oro, auranofina, metotrexato, colchicina, alopurinol, probenecid, sulfinpirazona y benzbromarona; un analogo de AMPc incluyendo, pero sin limitacion, AMPcbicatenario; un agente que comprende un farmaco de metilfenidato que comprende, 1-treo-metilfenidato, d-treometilfenidato, dl-treo-metilfenidato, 1-eritro-metilfenidato, d-eritro-metilfenidato, dl-eritro-metilfenidato y una mezcla de los mismos; y un agente diuretico tal como, pero sin limitacion, manitol, furosemida, glicerol y urea.
Los ejemplos de segundo agente activo que pueden usarse para el tratamiento, prevencion y/o gestion del sueno disfuncional y smdromes relacionados incluyen, pero sin limitacion, un agente antidepresivo tridclico, un inhibidor selectivo de la reabsorcion de serotonina, un agente antiepileptico (gabapentina, pregabalina, carbamazepina, oxcarbazepina, levitiracetam, topiramato) un agente antianitmico, un agente bloqueador de canales de sodio, un inhibidor mediador inflamatorio selectivo, un agente opioide, un segundo compuesto inmunomodulador, un agente de combinacion y otros agentes convencionales o conocidos usados en la terapia del sueno. Los ejemplos espedficos incluyen, pero sin limitacion, neurontin, oxicontin, morfina, topiramato, amitriptilina, nortriptilina, carbamazepina, Levodopa, L-DOPA, cocama, a-metil-tirosina, reserpina, tetrabenazina, benzotropina, pargilina, mesilato de fenodolpam, cabergolina, diclorhidrato de pramipexol, ropinorola, clorhidrato de amantadina, clorhidrato de selegilina, carbidopa, mesilato de pergolida, Sinemet CR, Symmetrel, iproniazid, clorgilina, fenelzina, isocarboxazida, tolcapona, entacapona, saliclato de fisoestigmina, sulfato de fisoestigmina, bromuro de fisoestigmina, bromuro de meoestigmina, metilsulfato de neoestigmina, cloruro de ambenonim, cloruro de edrofonio, tacrina, cloruro de pralidoxima, cloruro de obidoxima, bromuro de trimedoxima, monoxim diacetilo, endrofonio, piridostigmina, demecario, naproxeno sodico, diclofenaco sodico, diclofenaco potasico, celecoxib, sulindac, oxaprozin, diflunisal, etodolac, meloxicam, ibuprofeno, ketoprofeno, nabumetona, refecoxib, metotrexato, leflunomida, sulfasalazina, sales de oro, inmunoglobulina RHo-D, micofenilato de mofetilo, ciclosporina, azatioprina, tacrolimus, basiliximab, daclizumab, acido salidlico, acido acetilsalidlico, metil salicilato, diflunisal, salsalato, olsalazina, sulfasalazina, acetaminofeno, indometacina, sulindac, acido mefenamico, meclofenamato sodico, tolmetina, ketorolac, diclofenaco, flurbinprofeno, oxaprozina, piroxicam, meloxicam, ampiroxicam, droxicam, pivoxicam, tenoxicam, fenilbutazona, oxifenbutazona, antipirina, aminopirina, apazona, zileuton, aurotioglucosa, tiomalato sodico de oro, auranofina, metotrexato, colchicina, alopurinol, probenecid, sulfinpirazona, benzbromarona, betametasona y otros glucocorticoides, metoclopromida, domperidona, proclorperazina, prometazina, clorpromazina, trimetobenzamida, ondansetron, granisetron, hidroxizina, acetileucina monoetanolamina, alizaprida, azasetron, benzquinamida, bietanautina, bromoprida, buclizina, cleboprida, ciclizina, dimenhidrinato, difenidol, dolasetron, meclizina, metalatal, metopimazina, nabilona, oxipernidil, pipamazina, escopolamina, sulpirida, tetrahidrocannabinol, tietilperazina, tioproperazina, tropisetron y una mezcla de los mismos.
Los ejemplos de segundos agentes activos que pueden usarse para el tratamiento, prevencion y/o gestion de hemoglobinopatfa y trastornos relacionados incluyen, pero sin limitacion, interleucinas tales como lL-2 (incluyendo IL-II recombinante ("rlL2") y canaripox IL-2), IL-10, IL-12 e IL-18; interferones, tales como interferon alfa-2a, interferon alfa-2b, interferon alfa-n1, interferon alfa-n3, interferon beta-1a e interferon gamma-1b; y G-CSF; hidroxiurea; butiratos o derivados de butirato; oxido nitroso; hidroxi urea; HEMOXIN™ (NIPRISAN™; vease la Patente de Estados Unidos n.° 5.800.819); antagonistas del canal de Gardos tales como clotrimazol y derivados de triaril metano; Deferoxamina; protema C; y transfusiones de sangre, o de un sustituto de la sangre tal como Hemospan™ o Hemospan™ PS (Sangart).
La administracion de un compuesto proporcionado en el presente documento o una sal, solvato, estereoisomero o profarmaco del mismo farmaceuticamente aceptable y el segundo agente activo a un paciente puede producirse simultanea o secuencialmente mediante la misma o diferentes vfas de administracion. La idoneidad de una via de administracion particular empleada para un agente activo particular dependera del propio agente activo (por ejemplo, si puede administrarse por via oral sin descomponerse antes de entrar en la corriente sangumea) y de la enfermedad que vaya a tratarse. Una de la administracion para los compuestos proporcionados en el presente documento es por via oral. Las vfas de administracion para los segundos agentes o ingredientes activos son conocidas por los expertos en la tecnica. Vease, por ejemplo, Physicians' Desk Reference (60a ed., 2006).
En una realizacion, el segundo agente activo se administra por via intravenosa o subcutanea y una o dos veces al dfa en una cantidad de aproximadamente 1 a aproximadamente 1000 mg, de aproximadamente 5 a aproximadamente 500 mg, de aproximadamente 10 a aproximadamente 350 mg, o de aproximadamente 50 a aproximadamente 200 mg. La cantidad espedfica del segundo agente activo dependera del agente espedfico usado, del tipo de enfermedad que vaya a tratarse o a controlarse, de la gravedad y fase de la enfermedad y de la cantidad (o cantidades) de los compuestos proporcionados en el presente documento y cualquiera de los agentes activos adicionales opcionales administrados simultaneamente al paciente.
Como se ha indicado en cualquier parte del presente documento, tambien se incluye un metodo para reducir, tratar y/o prevenir efectos adversos o no deseados asociados con terapia convencional que incluyen, pero sin limitacion, cirugfa, quimioterapia, radioterapia, terapia hormonal terapia biologica e inmunoterapia. Los compuestos proporcionados en el presente documento y otros ingredientes activos pueden administrarse a un paciente antes, durante, o despues de la aparicion del efecto adverso asociado con terapia convencional.
4.4 Terapia dclica
En ciertas realizaciones, los agentes profilacticos o terapeuticos proporcionados en el presente documento se administran dclicamente a un paciente. La terapia dclica implica la administracion de un agente activo durante un periodo de tiempo, seguido por un descanso durante un periodo de tiempo (es decir, discontinuacion de la administracion) y repetir esta administracion secuencial. La terapia dclica puede reducir el desarrollo de resistencia a una o mas de las terapias, evitar o reducir los efectos secundarios de una de las terapias y/o mejorar la eficacia del tratamiento.
Por consiguiente, en una realizacion, un compuesto proporcionado en el presente documento se administra diariamente en una sola dosis o en dosis divididas en un ciclo de cuatro a seis semanas con un periodo de descanso de aproximadamente una semana o dos semanas. La terapia dclica permite ademas aumentar la frecuencia, el numero y la duracion de los ciclos de dosificacion. Por tanto, otra realizacion incluye la administracion de un compuesto proporcionado en el presente documento durante mas ciclos de los que son tipicos cuando se administra solo. En otra realizacion mas, un compuesto proporcionado en el presente documento se administra durante un numero de ciclos mayor del que tfpicamente provocana la toxicidad limitativa de la dosis en un paciente al que no se estuviera administrando el segundo ingrediente activo.
En una realizacion, se proporciona a diario un compuesto y de manera continua durante tres o cuatro semanas a una dosis de aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 500 mg al dfa, seguido de un descanso de una o dos semanas. En otras realizaciones, la dosis puede ser de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 300 mg, de aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 150 mg, de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 200 mg, de aproximadamente 10 mg a aproximadamente 100 mg, de aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 50 mg, de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 50 mg, de aproximadamente 10 mg a aproximadamente 50 mg, de aproximadamente 20 mg a aproximadamente 30 mg, o de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 20 mg, seguido de un descanso.
En una realizacion, un compuesto proporcionado en el presente documento y un segundo ingrediente activo se administran por via oral, produciendose la administracion del compuesto proporcionado en el presente documento 30 a 60 minutos antes del segundo ingrediente activo, durante un ciclo de cuatro a seis semanas. En otra realizacion, la combinacion de un compuesto proporcionado en el presente documento y un segundo ingrediente activo se administra mediante infusion intravenosa durante aproximadamente 90 minutos cada ciclo.
Tfpicamente, el numero de ciclos durante los cuales el tratamiento de combinacion se administra a un paciente sera de aproximadamente uno a aproximadamente 24 ciclos, de aproximadamente dos a aproximadamente 16 ciclos o de aproximadamente cuatro a aproximadamente tres ciclos.
4.5 Composiciones farmaceuticas y formas de dosificacion
Las composiciones farmaceuticas pueden usarse en la preparacion de formas de dosificacion unitaria simples, individuales. Las composiciones farmaceuticas y las formas de dosificacion proporcionadas en el presente documento comprenden un compuesto proporcionado en el presente documento, o una sal, solvato o estereoisomero farmaceuticamente aceptables de las mismas. Las composiciones farmaceuticas y las formas de dosificacion pueden comprender adicionalmente uno o mas excipientes.
Las composiciones farmaceuticas y las formas de dosificacion proporcionadas en el presente documento tambien pueden comprender uno o mas ingredientes activos adicionales. Los ejemplos de ingredientes activos segundos, o adicionales, opcionales se desvelan anteriormente en la Seccion 4.3.
Las formas de dosificacion unitaria simples proporcionadas en el presente documento son adecuadas para la administracion oral, mucosa (por ejemplo, nasal, sublingual, vaginal, bucal o rectal), parenteral (por ejemplo, subcutanea, intravenosa, por inyeccion de bolo, intramuscular o intraarterial), topica (por ejemplo, gotas oculares u otras preparaciones oftalmicas), transdermica o transcutanea a un paciente. Los ejemplos de formas de dosificacion incluyen, pero sin limitacion: comprimidos, comprimidos encapsulados; capsulas, tales como capsulas de gelatina elasticas blandas; sobrecitos; trociscos; pastillas para chupar; dispersiones; supositorios; polvos; aerosoles (por ejemplo, pulverizadores o inhaladores nasales); geles; formas de dosificacion lfquidas adecuadas para administracion oral o mucosa a un paciente, incluyendo suspensiones (por ejemplo, suspensiones lfquidas acuosas o no acuosas, emulsiones de aceite en agua, o emulsiones lfquidas de agua en aceite), soluciones y elixires; formas de dosificacion lfquidas adecuadas para la administracion parenteral a un paciente; gotas oculares u otras preparaciones oftalmicas adecuadas para la administracion topica; y solidos esteriles (por ejemplo, solidos cristalinos o amorfos) que pueden reconstituirse para proporcionar formas de dosificacion lfquidas adecuadas para la administracion parenteral a un paciente.
La composicion, la conformacion y el tipo de las formas de dosificacion variaran tfpicamente dependiendo de su uso. Por ejemplo, una forma de dosificacion usada en el tratamiento agudo de una enfermedad puede contener grandes cantidades de uno o mas de los ingredientes activos que comprende una forma de dosificacion usada en el tratamiento cronico de la misma enfermedad. De forma analoga, una forma de dosificacion parenteral puede contener cantidades mas pequenas de uno o mas de los ingredientes activos que comprende una forma de dosificacion oral usada para tratar la misma enfermedad. Estos y otros modos en los que se usan las formas de dosificacion espedficas variaran entre sf y seran evidentes para los expertos en la tecnica. Vease, por ejemplo, Remington's Pharmaceutical Sciences, 20a ed., Mack Publishing, Easton PA (2000).
En una realizacion, las composiciones farmaceuticas y las formas de dosificacion pueden comprender uno o mas excipientes. Los excipientes adecuados son muy conocidos por los expertos en la tecnica de la farmacia y, en el presente documento, se proporcionan ejemplos no limitantes de excipientes adecuados. Que un excipiente particular sea adecuado para la incorporacion en una composicion farmaceutica o forma de dosificacion depende de una diversidad de factores muy conocidos en la tecnica, incluyendo, pero sin limitacion, el modo en el que la forma de dosificacion se administrara a un paciente. Por ejemplo, formas de dosificacion orales tales como comprimidos pueden contener excipientes no adecuados para el uso en formas de dosificacion parenteral. La idoneidad de un excipiente particular tambien puede depender de los ingredientes activos espedficos de la forma de dosificacion. Por ejemplo, la descomposicion de alguno de los ingredientes activos puede acelerarse mediante algunos excipientes tales como lactosa, o cuando se exponen a agua. Los excipientes activos que comprenden aminas primarias o secundarias son particularmente sensibles a tal descomposicion acelerada. Por consiguiente, se proporcionan composiciones farmaceuticas y formas de dosificacion que contienen poca, si contienen algo de, lactosa u otros mono o disacaridos. Como se usa en el presente documento, la expresion "libre de lactosa" significa que la cantidad de lactosa presente, si existe, es insuficiente para aumentar sustancialmente la velocidad de degradacion de un ingrediente activo.
Las composiciones libres de lactosa pueden comprender excipientes que son muy conocidos en la tecnica y se indican, por ejemplo, en la U.S. Pharmacopeia (USP) 25-NF20 (2002). En general, las composiciones libres de lactosa comprenden ingredientes activos, un aglutinante/carga y un lubricante en cantidades farmaceuticamente compatibles y farmaceuticamente aceptables. En una realizacion, las formas de dosificacion libres de lactosa comprenden ingredientes activos, celulosa microcristalina, almidon pregelatinizado y estearato de magnesio.
Tambien se proporcionan composiciones farmaceuticas anhidras y formas de dosificacion que comprenden ingredientes activos, puesto que el agua puede facilitar la degradacion de algunos compuestos. Por ejemplo, la adicion de agua (por ejemplo, 5 %) es ampliamente aceptada en las tecnicas farmaceuticas como un medio para simular el almacenamiento a largo plazo para determinar caractensticas tales como la vida util o la estabilidad de las formulaciones a lo largo del tiempo. Vease, por ejemplo, Jens T. Carstensen, Drug Stability: Principles & Practice, 2a Ed., Marcel Dekker, NY, NY, 1995, pags. 379-80. En efecto, el agua y calor aceleran la descomposicion de algunos compuestos. Por lo tanto, el efecto del agua sobre una formulacion puede ser de gran significado ya que el vapor y/o la humedad se encuentran normalmente durante la elaboracion, manipulacion, envasado, almacenamiento, transporte y uso de las formulaciones.
Las composiciones farmaceuticas y las formas de dosificacion anhidras pueden prepararse usando ingredientes anhidros o que contienen poca humedad y condiciones de poco vapor o poca humedad. Las composiciones farmaceuticas y las formas de dosificacion que comprenden lactosa y al menos un ingrediente activo que comprende una amina primaria o secundaria son anhidras si se espera un contacto sustancial con vapor y/o humedad durante la fabricacion, envasado y/o almacenamiento.
Cualquier composicion farmaceutica anhidra debe prepararse y almacenarse de tal manera que mantenga su naturaleza anhidra. Por consiguiente, en una realizacion, las composiciones anhidras se envasan usando materiales que se sabe que evitan la exposicion a agua, de tal manera que puedan incluirse en kits de formulacion adecuados. Los ejemplos de envases adecuados incluyen, pero sin limitacion, laminas metalizadas hermeticamente cerradas, plasticos, envases monodosis (por ejemplo, viales), blfsteres y envases en tira.
Tambien se proporcionan composiciones farmaceuticas y formas de dosificacion que comprenden uno o mas compuestos que reducen la velocidad a la que se descompondra un ingrediente activo. Tales compuestos, a los cuales se hara referencia en el presente documento como "estabilizantes" incluyen, pero sin limitacion, antioxidantes tales como acido ascorbico, tampones del pH o tampones salinos.
Al igual que las cantidades y los tipos de excipientes, las cantidades y los tipos espedficos de los ingredientes activos en una forma de dosificacion pueden diferir dependiendo de factores tales como, pero sin limitacion, la via por la cual se administran a los pacientes. En una realizacion, las formas de dosificacion comprenden un compuesto proporcionado en el presente documento en una cantidad de aproximadamente 0,10 a aproximadamente 500 mg. En otras realizaciones, las formas de dosificacion comprenden un compuesto proporcionado en el presente documento en una cantidad de aproximadamente 0,1, 1, 2, 5, 7,5, 10, 12,5, 15, 17,5, 20, 25, 50, 100, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450, o 500 mg.
En otras realizaciones, las formas de dosificacion comprenden el segundo ingrediente activo en una cantidad de 1 a aproximadamente 1000 mg, de aproximadamente 5 a aproximadamente 500 mg, de aproximadamente 10 a aproximadamente 350 mg, o de aproximadamente 50 a aproximadamente 200 mg. Por supuesto, la cantidad espedfica del segundo agente activo dependera del agente espedfico usado, de las enfermedades o trastornos que vayan a tratarse o controlarse y de la cantidad (o cantidades) de un compuesto proporcionado en el presente documento y cualquiera de los agentes activos adicionales administrados simultaneamente al paciente.
4.5.1 Formas de dosificacion oral
Las composiciones farmaceuticas que son adecuadas para la administracion oral pueden presentarse como formas de dosificacion por separado, tales como, pero sin limitacion, comprimidos (por ejemplo, comprimidos masticables), comprimidos oblongos, capsulas y lfquidos (por ejemplo, jarabes aromatizados). Tales formas de dosificacion contienen cantidades predeterminadas de ingredientes activos y pueden prepararse por metodos farmaceuticos bien conocidos por los expertos en la tecnica. Vease, en general, Remington's Pharmaceutical Sciences, 20a ed., Mack Publishing, Easton pA (2000).
Las formas de dosificacion orales proporcionadas en el presente documento se preparan combinado los ingredientes activos en una mezcla mtima con al menos un excipiente de acuerdo con las tecnicas de combinacion farmaceuticas convencionales. Los excipientes pueden adoptar una diversidad de formas dependiendo de la forma de preparacion deseada para la administracion. Por ejemplo, los excipientes adecuados para su uso en formas de dosificacion oral lfquidas o de aerosol incluyen, pero sin limitacion, agua, glicoles, aceites, alcoholes, agentes aromatizantes, conservantes y agentes colorantes. Los ejemplos de excipientes adecuados para su uso en formas de dosificacion oral solidas (por ejemplo, polvos, comprimidos, capsulas y capsulas oblongas) incluyen, pero sin limitacion, almidones, azucares, celulosa microcristalina, diluyentes, agentes de granulacion, lubricantes, aglutinantes y agentes disgregantes.
En una realizacion, las formas de dosificacion oral son comprimidos o capsulas, en cuyo caso que se emplean excipientes solidos. En otra realizacion, los comprimidos se recubren mediante tecnicas acuosas o no acuosas convencionales. Tales formas de dosificacion pueden prepararse mediante cualquiera de los metodos farmaceuticos. En general, las composiciones farmaceuticas y las formas de dosificacion se preparan mezclando uniforme e mtimamente los principios activos con vehmulos lfquidos, vehmulos solidos finamente divididos o ambos y a continuacion conforman el producto en la presentacion deseada, si fuera necesario.
Por ejemplo, un comprimido puede prepararse por compresion o moldeo. Los comprimidos formados por compresion pueden prepararse comprimiendo en una compresora adecuada los ingredientes activos en una forma fluida tal como un polvo o granulos, opcionalmente mezclados con un excipiente. Los comprimidos moldeados pueden elaborarse moldeando en una moldeadora una mezcla del compuesto en polvo humedecido con un diluyente lfquido inerte.
Los ejemplos de excipientes que pueden usarse en las formas de dosificacion orales proporcionadas en el presente documento incluyen, pero sin limitacion, aglutinantes, cargas, disgregantes y lubricantes. Los aglutinantes adecuados para el uso en las composiciones farmaceuticas y las formas de dosificacion incluyen, pero sin limitacion, almidon de mafz, almidon de patata u otros almidones, gelatina, gomas sinteticas y naturales tales como goma arabiga, alginato de sodio, acido algmico, otros alginatos, tragacanto en polvo, goma guar, celulosa y sus derivados (por ejemplo etilcelulosa, acetato de celulosa, carboximetilcelulosa de calcio, carboximetilcelulosa de sodio), polivinilpirrolidona, metilcelulosa, almidon pregeletinizado, hidroxipropilmetilcelulosa (por ejemplo, N.° 2208, 2906, 2910), celulosa microcristalina, y mezclas de los mismos.
Las formas adecuadas de celulosa microcristalina incluyen, pero sin limitacion, los materiales comercializados como AVICEL-PH-101, AVICEL-PH-103 AVICEL RC-581, AVICEL-PH-105 (disponibles en FMC Corporation, American Viscose Division, Avicel Sales, Marcus Hook, PA), y mezclas de los mismos. Un aglutinante espedfico es una mezcla de celulosa microcristalina y carboximetilcelulosa sodica comercializada como AVICEL RC-581. Los excipientes o aditivos anhidros o de baja humedad adecuados incluyen AVICEL-PH-103™ y Almidon 1500 LM. Los ejemplos de cargas adecuadas para su uso en las composiciones farmaceuticas y formas de dosificacion proporcionados en el presente documento incluyen, pero sin limitacion, talco, carbonato de calcio (por ejemplo, granulos o polvo), celulosa microcristalina, celulosa en polvo, dextratos, caolm, manitol, acido silfcico, sorbitol, almidon, almidon pregeletinizado y mezclas de los mismos. El aglutinante o carga en las composiciones farmaceuticas esta presente, en una realizacion, de aproximadamente 50 a aproximadamente 99 por ciento en peso de la composicion farmaceutica o forma de dosificacion.
Los disgregantes pueden usarse en las composiciones para proporcionar comprimidos que se disgregan cuando se exponen a un medio acuoso. Los comprimidos que contiene demasiado disgregante pueden disgregarse en el almacenamiento mientras que aquellos que contienen muy poco pueden no disgregarse a una velocidad deseada o en las condiciones deseadas. Por lo tanto, puede usarse una cantidad suficiente de disgregante que no sea demasiado excesiva ni demasiado escasa para alterar la liberacion del ingrediente activo para formar las formas de dosificacion oral solidas. La cantidad de disgregante usada variara basandose en el tipo de formulacion y es facilmente discernible por un experto habitual en la tecnica. En una realizacion, las composiciones farmaceuticas comprenden de aproximadamente el 0,5 a aproximadamente el 15 por ciento en peso de disgregante, o de aproximadamente el 1 a aproximadamente el 5 por ciento en peso de disgregante.
Los disgregantes que pueden usarse en las composiciones farmaceuticas y las formas de dosificacion incluyen, pero sin limitacion, agar-agar, acido algmico, carbonato de calcio, celulosa microcristalina, croscarmelosa sodica, crospovidona, polacrilina potasica, almidon glicolato sodico, almidon de patata o de tapioca, otros almidones, almidon pregeletinizado, otros almidones, arcillas, otras alginas, otras celulosas, gomas y mezclas de los mismos. Los lubricantes que pueden usarse en las composiciones y formas de dosificacion farmaceuticas incluyen, pero sin limitacion, estearato de calcio, estearato de magnesio, aceite mineral, aceite mineral ligero, glicerina, sorbitol, manitol, polietilenglicol, otros glicoles, acido estearico, laurisulfato sodico, talco, aceite vegetal (por ejemplo aceite de cacahuete, aceite de semillas de algodon, aceite de girasol, aceite de sesamo, aceite de oliva, aceite de mafz y aceite de soja) hidrogenado, estearato de cinc, oleato de etilo, laureato de etilo, agar y mezclas de los mismos. Los lubricantes adicionales incluyen, por ejemplo, un gel de sflice siloideo (AEROSIL200, fabricado por W.R. Grace Co. de Baltimore, MD), un aerosol coagulado de sflice sintetica (comercializado por Degussa Co. de Plano, TX), CAB-O-SIL (un producto de dioxido de silicio pirogenico comercializado por Cabot Co. de Boston, MA) y mezclas de los mismos. Si se usan, los lubricantes pueden usarse en una cantidad de menos de aproximadamente el 1 por ciento en peso de las composiciones farmaceuticas o formas de dosificacion en las que se incorporan.
En una realizacion, una forma de dosificacion oral solida comprende un compuesto proporcionado en el presente documento, lactosa anhidra, celulosa microcristalina, polivinilpirrolidona, acido estearico, s l^ice anhidra coloidal y gelatina.
4.5.2 Formas de dosificacion de liberacion controlada
Los ingredientes activos tales como los compuestos proporcionados en el presente documento pueden administrarse por medios de liberacion controlada o mediante dispositivos de administracion que se conocen bien por los expertos en la tecnica. Los ejemplos incluyen, pero sin limitacion, los descritos en las Patentes de Estados Unidos n.°: 3.845.770; 3.916.899; 3.536.809; 3.598.123; y 4.008.719; 5.674.533; 5.059.595; 5.591.767; 5.120.548; 5.073.543; 5.639.476; 5.354.556; 5.639.480; 5.733.566; 5.739.108; 5.891.474; 5.922.356; 5.972.891; 5.980.945; 5.993.855; 6.045.830; 6.087.324; 6.113.943; 6.197.350; 6.248.363; 6.264.970; 6.267.981; 6.376.461; 6.419.961; 6.589.548; 6.613.358; 6.699.500. Dichas formas de dosificacion pueden usarse para proporcionar una liberacion lenta o controlada de uno o mas ingredientes activos usando, por ejemplo, hidroxipropilmetilcelulosa, otras matrices polimericas, geles, membranas permeables, sistemas osmoticos, recubrimientos multicapa, micropartfculas, liposomas, microesferas o una combinacion de los mismos, para proporcionar el perfil de liberacion deseado en proporciones variables. Las formulaciones de liberacion controlada adecuadas conocidas por los expertos en la tecnica, incluyendo las descritas en el presente documento, pueden seleccionarse facilmente para su uso con los ingredientes activos proporcionados en el presente documento. Por lo tanto, las composiciones proporcionadas abarcan formas de dosificacion unitarias adecuadas para administracion oral tales como, pero sin limitacion, comprimidos, capsulas, capsulas de gelatina y comprimidos encapsulados que estan adaptados para la liberacion controlada.
Todos los productos farmaceuticos de liberacion controlada tienen un objetivo comun para mejorar la terapia farmacologica sobre la alcanzada por sus homologos no controlados. De forma ideal, el uso de una preparacion de liberacion controlada disenada optimamente en el tratamiento medico se caracteriza por un mmimo de sustancia farmacologica empleada para curar o controlar la afeccion en una cantidad minima de tiempo. Las ventajas de las formulaciones de liberacion controlada incluyen una actividad prolongada del farmaco, una frecuencia de dosificacion reducida y una aceptacion del sujeto aumentada. Ademas, las formulaciones de liberacion controlada pueden usarse para influir en el momento de la aparicion de la accion u otras caractensticas, tales como los niveles sangumeos del farmaco, y por tanto pueden influir en la presencia de efectos secundarios (por ejemplo, adversos).
La mayor parte de las formulaciones de liberacion controlada se disenan para liberar inicialmente una cantidad de farmaco (ingrediente activo) que produce inmediatamente el efecto terapeutico deseado y liberar gradualmente y de manera continua las otras cantidades de farmaco para mantener este nivel de efecto terapeutico o profilactico a lo largo de un periodo de tiempo prolongado. Para mantener este nivel constante de farmaco en el cuerpo, el farmaco debe liberarse de la forma de dosificacion a una velocidad que reemplace la cantidad de farmaco que se metaboliza y excreta del cuerpo. La liberacion controlada de un ingrediente activo puede estimularse mediante diversas condiciones que incluyen, pero sin limitacion, el pH, la temperatura, las enzimas, el agua y otras afecciones fisiologicas o compuestos.
En ciertas realizaciones, el farmaco puede administrarse mediante infusion intravenosa, una bomba osmotica implantable, un parche transdermico, liposomas u otros modos de administracion. En una realizacion, se puede utilizar una bomba (vease, Sefton, CRC Crit. Ref. Biomed. Eng. 14: 201 (1987); Buchwald et al., Surgery 88: 507 (1980); Saudek et al., N. Engl. J. Med. 321: 574 (1989)). En otra realizacion se pueden utilizar materiales polimericos. En aun otra realizacion, se puede situar un sistema de liberacion controlada en un sujeto en un sitio apropiado determinado por un medico experto, es decir, por lo tanto, que requiere solamente una fraccion de la dosis sistemica (vease, por ejemplo, Goodson, Medical Applications of Controlled Release, vol. 2, pags. 115-138 (1984)). Se analizan otros sistemas de liberacion controlada en la revision por Langer (Science 249: 1527-1533 (1990)). El ingrediente activo se puede dispersar en una matriz interna solida, por ejemplo, polimetilmetacrilato, polibutilmetacrilato, cloruro de polivinilo plastificado o no plastificado, nylon plastificado, tereftalato de polietileno plastificado, caucho natural, poliisopreno, poliisobutileno, polibutadieno, polietileno, copolfmeros de etileno-acetato de vinilo, cauchos de silicona, polidimetilsiloxanos, copolfmeros de carbonato de silicona, polfmeros hidrofilos tales como hidrogeles de esteres de acido acnlico y metacnlico, colageno, polivinilalcohol reticulado y acetato de polivinilo parcialmente hidrolizado reticulado, que esta rodeado por una membrana polimerica exterior, por ejemplo, polietileno, polipropileno, copolfmeros de etileno/propileno, copolfmeros de etileno/acrilato de etilo, copolfmeros de etileno/acetato de vinilo, cauchos de silicona, polidimetilsiloxanos, caucho de neopreno, polietileno clorado, cloruro de polivinilo, copolfmeros de cloruro de vinilo con acetato de vinilo, cloruro de vinilideno, etileno y propileno, tereftalato de polietileno ionomerico, cauchos de epiclorhidrina de caucho de butilo, copolfmero de etileno/alcohol vimlico, terpolfmero de etileno/acetato de vinilo/alcohol vimlico, y copolfmero de etileno/viniloxietanol, que es insoluble en fluidos corporales. El ingrediente activo se difunde a traves de la membrana polimerica exterior en una etapa de control de velocidad de liberacion. El porcentaje de ingrediente activo en tales composiciones parenterales depende en gran medida de la naturaleza espedfica del mismo, asf como de las necesidades del sujeto.
4.5.3 Formas de dosificacion parenteral
Las formas de dosificacion parenteral pueden administrate a los pacientes mediante diversas v^as, incluyendo, pero sin limitacion, subcutanea, intravenosa (incluyendo inyeccion en bolo), intramuscular e intraarterial. En algunas realizaciones, la administracion de una forma de dosificacion parenteral evita las defensas naturales de los pacientes contra los contaminantes, y, por lo tanto, en estas realizaciones, las formas de dosificacion parenteral son esteriles o pueden esterilizarse antes de la administracion al paciente. Los ejemplos de formas de dosificacion parenteral incluyen, pero sin limitacion, soluciones listas para inyeccion, productos secos listos para disolverse o suspenderse en un vetnculo farmaceuticamente aceptable para inyeccion, suspensiones listas para inyeccion y emulsiones. Los vehfculos adecuados que pueden usarse para proporcionar formas de dosificacion parenteral son muy conocidos por los expertos en la tecnica. Los ejemplos incluyen, pero sin limitacion: Agua para inyeccion USP; vetnculos acuosos tales como, pero sin limitacion, inyeccion de cloruro sodico, inyeccion de Ringer, inyeccion de dextrosa, inyeccion de cloruro sodico y dextrosa e inyeccion de Ringer con lactato; vehfculos miscibles con agua tales como, pero sin limitacion, alcohol etflico, polietilenglicol y polipropilenglicol; y vetnculos no acuosos tales como, pero sin limitacion, aceite de mafz, aceite de semillas de algodon, aceite de cacahuete, aceite de sesamo, oleato de etilo, miristato de isopropilo y benzoato de bencilo.
Los compuestos que aumentan la solubilidad de uno o mas de los ingredientes activos desvelados en el presente documento tambien pueden incorporarse en las formas de dosificacion parenteral. Por ejemplo, pueden usarse ciclodextrina y sus derivados para aumentar la solubilidad de un compuesto proporcionado en el presente documento. Vease, por ejemplo, la Patente de Estados Unidos N.° 5.134.127.
4.5.4 Formas de dosificacion topicas y mucosa
Las formas de dosificacion topica y mucosa proporcionadas en el presente documento, incluyen, pero sin limitacion, pulverizaciones, aerosoles, soluciones, emulsiones, suspensiones, gotas oculares u otras preparaciones oftalmicas, u otras formas conocidas por un experto en la tecnica. Vease, por ejemplo, Remington's Pharmaceutical Sciences, 16a, 18a y 20a eds., Mack Publishing, Easton PA (1980, 1990 y 2000); y Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms, 4a ed., Lea & Febiger, Philadelphia (1985). Las formas de dosificacion adecuadas para tratar tejidos mucosos dentro de la cavidad oral pueden formularse como enjuagues bucales o como geles orales.
Los excipientes adecuados (por ejemplo, vetnculos y diluyentes) y otros materiales que pueden usarse para proporcionar formas de dosificacion topica y mucosa incluidos en el presente documento son muy conocidos por los expertos en las tecnicas farmaceuticas y dependen del tejido particular al cual se aplicara la composicion farmaceutica o forma de dosificacion determinada. En una realizacion, los excipientes incluyen, pero sin limitacion, agua, acetona, etanol, etilenglicol, propilenglicol, butano 1,3-diol, miristato de isopropilo, palmitato de isopropilo, aceite mineral y mezclas de los mismos, para formar soluciones, emulsiones o geles, que son atoxicos y farmaceuticamente aceptables. Tambien pueden anadirse hidratantes o humectantes a las composiciones farmaceuticas y formas de dosificacion. Los ejemplos de ingredientes adicionales son muy conocidos en la tecnica. Vease, por ejemplo, Remington's Pharmaceutical Sciences, 16a, 18a y 20a eds., Mack Publishing, Easton PA (1980, 1990 y 2000).
El pH de una composicion farmaceutica o forma de dosificacion tambien puede ajustarse para mejorar la administracion de uno o mas ingredientes activos. Ademas, la polaridad de un portador disolvente, su fuerza ionica o tonicidad pueden ajustarse para mejorar la administracion. Compuestos tales como estearatos tambien pueden anadirse a las composiciones farmaceuticas o formas de dosificacion para modificar la hidrofilia o lipofilia de uno o mas ingredientes activos para mejorar la administracion. En otras realizaciones, los estearatos pueden servir como un vetnculo lipfdi
potencia la administracion o mejora la penetracion. En otras realizaciones, pueden usarse sales, solvatos, o estereoisomeros de los ingredientes activos para ajustar adicionalmente las propiedades de la composicion resultante.
4.6. Kits
En una realizacion, los ingredientes activos proporcionados en el presente documento no se administran a un paciente al mismo tiempo o mediante la misma via de administracion. En otra realizacion, se proporcionan kits que pueden simplificar la administracion cantidades apropiadas de ingredientes activos.
En una realizacion, un kit comprende una forma de dosificacion de un compuesto proporcionado en el presente documento. Los kits pueden comprender adicionalmente otros ingredientes activos tales como oblimerseno (Genasense®), melfalan, G-CSF, GM-CSF, EPO, topotecan, dacarbazina, irinotecan, taxotere, IFN, inhibidor de COX-2, pentoxifillina, ciprofloxacina, dexametasona, IL2, IL8, IL18, Ara-C, vinorrelbina, isotretinorna, acido 13 cisretinoico o un mutante o uno de sus mutantes o derivados farmacologicamente activos o una combinacion de los mismos. Los ejemplos de ingredientes activos adicionales incluyen, pero sin limitacion, los desvelados en el presente documento (vease, por ejemplo, la seccion 4.3).
En otra realizacion, los kits pueden comprender adicionalmente dispositivos que se usan para administrar los ingredientes activos. Los ejemplos de dichos dispositivos incluyen, pero sin limitation, jeringas, bolsas de goteo, parches e inhaladores.
Los kits tambien pueden comprender celulas o sangre para transplante, asi como vehteulos farmaceuticamente aceptables que pueden usarse para administrar uno o mas ingredientes activos. Por ejemplo, si un ingrediente activo se proporciona en una forma solida que debe reconstituirse para la administration parenteral, el kit puede comprender un envase cerrado de un vehiculo adecuado en donde el ingrediente activo puede disolverse para formar una solution esteril sin particulas que es adecuada para la administracion parenteral. Los ejemplos de vehiculos farmaceuticamente aceptables incluyen, pero sin limitacion: Agua para inyeccion USP; vehiculos acuosos tales como, pero sin limitacion, inyeccion de cloruro sodico, inyeccion de Ringer, inyeccion de dextrosa, inyeccion de cloruro sodico y dextrosa e inyeccion de Ringer con lactato; vehiculos miscibles con agua tales como, pero sin limitacion, alcohol etflico, polietilenglicol y polipropilenglicol; y vehiculos no acuosos tales como, pero sin limitacion, aceite de maiz, aceite de semillas de algodon, aceite de cacahuete, aceite de sesamo, oleato de etilo, miristato de isopropilo y benzoato de bencilo.
5. Ejemplos
Los compuestos de los ejemplos 5.202 a 5.206, 5.208 a 5.213, 5.215 a 5.224, 5.226 a 5.242, 5.244, 5.245, 5.247 a 5.254, 5.256 a 5.259, 5.261 a 5.268, 5.270 a 5.279 y 5.283 a 5.289 a continuation, son compuestos de la presente invention. Otros compuestos descritos en los ejemplos a continuacion son compuestos de referencia.
5.1 ESTER METWCO DEL ACIDO 4-CARBAMOIL-4-(4-HIDROXI-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL)-BU^RICO
Figure imgf000030_0001
5.1.1 Ester metflico del acido 3-hidroxi-2-metil-benzoico
Figure imgf000030_0002
Se anadio acido 3-hidroxi-2-metilbenzoico (105 g, 690 mmol) a MeOH (800 ml) en un matraz de fondo redondo de tres bocas de 2 l equipado con un condensador, un termometro y una barra de agitation seguido de la adicion de MeOH (250 ml). Se anadio H 2 SO 4 (10 ml, 180 mmol) a la solucion anterior. La mezcla de reaction se agito a 62 °C durante 17 horas. El disolvente se retiro al vado. El residuo (200 ml) se anadio lentamente a agua (600 ml) a temperatura ambiente y se formo un solido de color blanco. La suspension se agito en un bano de hielo durante 30 minutos y se filtro. El solido se lavo con agua (5 x 250 ml) y se seco para dar ester metflico del acido 3-hidroxi-2-metil-benzoico en forma de un solido de color blanco (100 g, rendimiento del 87 %). El compuesto se uso en la siguiente etapa sin purification adicional: LCMS MH = 167; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 52,28 (s, 3H, CH 3 ), 3,80 (s, 3H, CH3), 6,96 - 7,03 (m, 1H, Ar), 7,09 (t, J = 7,8 Hz, 1H, Ar), 7,14 -7,24 (m, 1H, Ar), 9,71 (s, 1H, OH).
5.1.2 Ester metflico del acido 3-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-2-metil-benzoico
Figure imgf000030_0003
En un matraz FR de tres bocas de 1 l equipado con una barra de agitacion y un termometro, se anadieron DMF (300 ml), 3-hidroxi-2-metilbenzoato de metilo (90 g, 542 mmol) y imidazol (92 g, 1,354 mmol). Se anadio en porciones TBDMS-C1 (90 g, 596 mmol) a la solucion anterior para controlar la temp. interna entre 15-19 °C durante 20 minutos, y despues de la adicion, la temp. interna cayo por debajo de 1 °C. El bano de hielo se retiro y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 16 horas. La mezcla de reaccion se anadio a hielo-agua (500 ml), y la solucion resultante se dividio en dos porciones (700 ml x 2). Cada portion se extrajo con EtOAc (700 ml). Cada capa organica se lavo con agua fria (350 ml) y salmuera (350 ml). Las capas organicas se combinaron y se secaron por MgSO4. La capa organica combinada se concentro para dar ester metflico del acido 3-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-2-metil-benzoico en forma de un aceite de color pardo claro (160 g, rendimiento en bruto del 100 %). El compuesto se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional: LCMS MH = 281; 1H RMN (DMSO-d6) 5 -0,21 (s, 6H, Ch3, CH3), 0,73 - 0,84 (m, 9H, CH3, CH3, CH3), 2,10 (s, 3H, CH3), 3,60 (s, 3H, CH3), 6,82 (dd, 1H, Ar), 6,97 (t, J = 7,9 Hz, 1H, Ar), 7,13 (dd, J = 1,1,7,7 Hz, 1H, Ar).
5.1.3 Ester metflico del acido 2-bromometil-3-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-benzoico
Figure imgf000031_0001
Se anadio NBS (49,8 g, 280 mmol) a 3-(terc-butil dimetilsililoxi)-2-metilbenzoato de metilo (78,4 g, 280 mmol) en acetato de metilo (500 ml) a temperatura ambiente para dar una suspension de color naranja. La mezcla de reaccion resultante se calento en un bano de aceite a 40 °C y se ilumino por una bombilla de luz solar de 300 W a reflujo durante 4 horas. La mezcla de reaccion se enfrio y se lavo mediante una solucion de Na2SO3 (2 x 600 ml, concentracion saturada al 50 %), agua (500 ml) y salmuera (600 ml). La capa organica se seco por MgSO4 y se decoloro por carbon. La capa organica se concentro para dar ester metflico del acido 2-bromometil-3-(terc-butildimetil-silaniloxi)-benzoico en forma de un aceite de color pardo claro (96 g, rendimiento en bruto al 91 %). El compuesto se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional: LCMS M-Br = 279; 1H RMN (DMSO-d6) 50,05 -0,11 (m, 6H, CH3, CH3), 0,82 (s, 9H, CH3, CH3, CH3), 3,65 (s, 3H, CH3), 4,74 (s, 2H, CH2), 6,94 (dd, J = 1,3, 8,1 Hz, 1H, Ar), 7,10 -7,20 (m, 1H, Ar), 7,21 -7,29 (m, 1H, Ar).
5.1.4 Ester metflico del acido 4-carbamoil-butmco
Figure imgf000031_0002
A una solucion agitada de 2-(bromometil)-3-(terc- butildimetilsililoxi)benzoato de metilo (137,5 g, 325 mmol) en acetonitrilo (1100 ml) en un matraz de fondo redondo de 2 l, se le anadio clorhidrato de 4,5-diamino-5-oxopentanoato de metilo (70,4 g, 358 mmol). A la suspension se le anadio DIPEA (119 ml, 683 mmol) a traves de un embudo de adicion durante 10 minutos y la suspension se agito a temperatura ambiente durante 1 hora antes de calentar la mezcla en un bano de aceite a 40 °C durante 23 horas. La mezcla de reaccion se concentro al vado. El residuo se agito en eter (600 ml), y un solido de color blanco se retiro por precipitacion. La mezcla se filtro y el solido se lavo con eter (400 ml). El filtrado se lavo con HCl (1 N, 200 ml), NaHCO3 (sat. 200 ml) y salmuera (250 ml). La capa de acido acuosa y la capa basica se guardaron por separado. Despues, el solido se lavo adicionalmente con eter (250 ml) y el flquido se lavo con la solucion de acido anterior y la solucion basica. Las dos capas organicas se combinaron y se concentraron al vado para dar ester metflico del acido 4-[4-(terc-Butil-dimetil-silaniloxi)-1-oxo-1,3-dihidroisoindol-2-il]-4-carbamoil-butmco en forma de un aceite de color pardo (152 g, rendimiento en bruto del 115 %, pureza del 77 % por H RMN). El compuesto se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional: LCMS MH = 407.
5.1.5 Ester metflico del acido 4-carbamoil-4-(4-hidroxi-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-butmco
Figure imgf000031_0003
A una solucion fria agitada de 5-amino-4-(4-(terc-butildimetilsililoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (152 g, 288 mmol) en DMF (500 ml) y agua (55 ml), se le anadio en porciones por K2CO3 (19,89 g, 144 mmol) durante 5 minutos. La mezcla de reaccion resultante se agito a temperatura ambiente durante 40 minutos. La mezcla de reaccion se enfrio en un bano de hielo. A la mezcla se le anadio lentamente HCl (12 M, 23,99 ml, 288 mmol).
Despues de la adicion, a la mezcla se le anadio acetonitrilo (280 ml) y se retiro por precipitacion un solido. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 10 minutos y se filtro. El solido se lavo con acetonitrilo (50 ml x 4). El filtrado se concentro a alto vado para dar un aceite de color amarillo (168 g). El aceite se disolvio en acetonitrilo (600 ml) y se agito a temperatura ambiente durante 10 minutos. La mezcla se filtro y el solido se lavo con acetonitrilo (25 ml x 2). El filtrado se concentro a alto vado para dar un aceite de color amarillo (169 g), que se anadio a una mezcla de agua (1200 ml) y eter (1000 ml). La mezcla se agito durante 3 minutos y las capas se separaron. La solucion acuosa se concentro a alto vado y el residuo se agito en acetonitrilo (160 ml) y un solido de color blanco se formo despues de estar durante una noche en agitacion. La mezcla se filtro para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-(4-hidroxi-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-butmco en forma de un solido de color blanco (46 g, rendimiento del 54 %). El filtrado se concentro y el residuo se cristalizo adicionalmente en acetonitrilo (60 ml) para dar mas ester metflico del acido 4-carbamoil-4-(4-hidroxi-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-butmco en forma de un solido de color blanco (11,7 g, rendimiento del 14 %). El filtrado se concentro y el residuo se purifico por cromatografia ISCO para dar mas cantidad de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-(4-hidroxi-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol -2-il)-butmco en forma de un solido de color blanco (13,2 g, rendimiento del 15 %). El producto obtenido total fue de 70,9 g con un rendimiento del 83 %: LCMS MH = 293; 1 H RMN (DMSO-de) 51,95 - 2,34 (m, 4H, CH2, CH2), 3,51 (s, 3H, CH3), 4,32 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,49 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 4,73 (dd, J = 4,7, 10,2 Hz, 1H, CHH), 6,99 (dd, J = 0,8, 7,9 Hz, 1H, Ar), 7,10 -7,23 (m, 2H, Ar, NHH), 7,25 - 7,38 (m, 1H, Ar), 7,58 (s, 1H, NHH), 10,04 (s, 1H, OH).
5.2 3-[4-(4-MORFOLIN-4-ILMETIL-BENCILOXI)-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DIONA
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5.2.1 Procedimiento 1
Etapa 1: A la solucion de 3-(4-hidroxi-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-piperidin-2,6-diona (2,5 g, 8,56 mmol) en THF (60 ml) se le anadio trifenil fosfina (soportada por poflmero 1,6 mmol/g, 12 g, 18,8 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 15 minutos. Se anadio azodicarboxilato de diisopropilo (3,96 ml, 18,8 mmol) a 0 °C, y la mezcla se agito a 0 °C durante 30 minutos. Se anadio (4-morfolin-4-ilmetil-fenil)-metanol (2,62 g, 12,4 mmol) a 0 °C, y la mezcla se dejo calentar a temperatura ambiente y se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se filtro, y el filtrado se concentro. El aceite resultante se purifico sobre columna de gel de sflice eluida con cloruro de metileno y metanol (gradiente, el producto se situo en metanol al 6 %) para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(4-morfolin-4-ilmetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco (2,2 g, rendimiento del 54 %). El producto se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 2: A la solucion en THF (50 ml) de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(4-morfolin-4-ilmetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco (2,2 g, 4,57 mmol) se le anadio terc-butoxido potasico (0,51 g, 4,57 mmol) a 0 °C. La mezcla se agito a 0 °C durante 10 minutos y se inactivo con HCl 1 N (5 ml, 5 mmol) seguido de NaHCO 3 saturado (25 ml). La mezcla se extrajo con EtOAc (2 x 50 ml). La capa organica se lavo con agua (30 ml) y salmuera (30 ml), se seco sobre MgSO 4 y se concentro. Al solido resultante se le anadio EtOAc (10 ml) seguido de hexano (10 ml) en agitacion. La suspension se filtro para dar 3-[4-(4-morfolin-4-ilmetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (1,5 g, rendimiento del 73 %). HPLC: Waters Symmetry C-18, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 95/5 de acetonitrilo/H 3 PO 4 al 0,1 % en 5 min,: tR = 4,78 min (97,5 %); p.f.: 210-212 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,86 - 2,09 (m, 1H, CHH), 2,29 - 2,38 (m, 4H, CH2,CH2), 2,44 (dd, J = 4,3, 13,0 Hz, 1H, CHH), 2,53 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,82 - 2,99 (m, 1H, CHH), 3,46 (s, 2H, CH2), 3,52 - 3,61 (m, 4H, CH2,CH2), 4,18 -4,51 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,0, 13,3 Hz, 1H, NCH), 5,22 (s, 2H, CH2), 7,27 - 7,38 (m, 5H, Ar), 7,40 - 7,53 (m, 3H, Ar), 10,98 (s, 1H, NH) 13 C RMN (DM SO^) 522,36, 31,21, 45,09, 51,58, 53,14, 62,10, 66,17, 69,41, 114,97, 115,23, 127,64, 128,99, 129,81, 129,95, 133,31, 135,29, 137,68, 153,50, 168,01, 170,98, 172,83; LCMS: 465; Anal. calc. para C25H27N 3 O 3 + 0,86 H2O: C, 64,58; H, 6,23; N, 9,04; Observado: C, 64,77; H, 6,24; N, 8,88.
5.2.2 Procedimiento 2
Etapa 1: En un matraz de fondo redondo de 2 l, se cargaron 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (30 g, 103 mmol), 1,4-bis(bromometil)benceno (81 g, 308 mmol) y carbonato potasico (14,19 g, 103 mmol) y acetonitrilo (1,2 l). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 10 minutos y se calento a 50 °C durante 12 horas. La mezcla de reaccion se dejo enfriar a temperatura ambiente. La mezcla se filtro y el filtrado se concentro en un evaporador rotatorio. El solido resultante se disolvio en CH2Cl2 y se cargo sobre 2 columnas de gel de sflice (330 g cada vez) y se eluyo usando CH2Cl2/MeOH para dar ester metflico del acido 4-[4-(4-bromometil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-4-carbamoil-butmco en forma de un solido de color blanco (40 g, rendimiento del 82 %): 1H RMN (DMSO-d6) 51,98 - 2,13 (m, 1H, CHH), 2,14 - 2,23 (m, 1H, CHH), 2,23 - 2,32 (m, 2H, CHH, CHH), 3,50 (s, 3H, CH3), 4,34 - 4,63 (m, 2H, CH2), 4,67 - 4,80 (m, 3H, CH2, NCH), 5,25 (s, 4H, CH2), 7,19 (s, 1H, NHH), 7,24 - 7,34 (m, 2H, Ar), 7,41 - 7,54 (m, 5H, Ar), 7,58 (s a, 1H, NHH).
Etapa 2: A la solucion en CH2Cl2 de 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (36,5 g, 77 mmol), se le anadio morfolina (14,72 ml, 169 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 1 hora. La suspension resultante se filtro, y el filtrado se concentro en un evaporador rotatorio. El aceite resultante se disolvio en 350 ml de EtOAc y se lavo con agua (50 ml x 3). La capa organica se concentro en un evaporador rotatorio para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(4-morfolin-4-ilmetilbenciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco en forma de un solido espumoso (39 g, rendimiento del 100 %): 1H RMN (DMSO-d6) 52,00 - 2,12 (m, 1H, CHH), 2,14 - 2,22 (m, 1H, CHH), 2,22 - 2,29 (m, 2H, CHH,CHH), 2,30 - 2,39 (m, 4H, CH2,CH2), 3,46 (s, 2H, CH2), 3,50 (s, 3H, CH3), 3,53 - 3,63 (m, 4H, CH2,CH2), 4,28 - 4,59 (m, 2H, CH2), 4,73 (dd, J = 4,7, 10,2 Hz, 1H, NCH), 5,22 (s, 2H, CH2), 7,14 - 7,23 (m, 1H, NHH), 7,26 - 7,39 (m, 4H, Ar), 7,41 - 7,51 (m, 3H, Ar), 7,58 (s, 1H, NHH).
Etapa 3: A la solucion en THF de 5-amino-4-(4-(4-(morfolinometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (40 g, 83 mmol), se le anadio en porciones 2-metilpropan-2-oleato potasico (9,80 g, 87 mmol) a 0 °C. La mezcla se agito a esta temperatura durante 30 minutos. A la mezcla de reaccion, se le anadieron 45 ml de una solucion 1 N de HCl seguido de 200 ml de una solucion saturada de NaHCO3. La mezcla se diluyo con 500 ml de EtOAc a 0 °C, se agito durante 5 minutos y se separo. La capa organica se lavo con agua (50 ml x 3) y salmuera (100 ml), y se concentro en un evaporador rotatorio para dar un solido de color blanco, que se agito en eter dietflico (300 ml) para dar una suspension. La suspension se filtro para dar 3-[4-(4-morfolin-4-ilmetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (28,5 g, rendimiento del 72 %): HPLC: Waters Symmetry C-is, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 95/5 de acetonitrilo/H3PO4 al 0,1 % en 5 min,: tR = 4,78 min (98,5 %); p.f.: 209-211 °C; 1H RMN (DMSO-d6) 51,86 - 2,09 (m, 1H, CHH), 2,29 - 2,38 (m, 4H, CH2,CH2), 2,44 (dd, J = 4,3, 13,0 Hz, 1H, CHH), 2,53 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,82 - 2,99 (m, 1H, CHH), 3,46 (s, 2H, CH2), 3,52 - 3,61 (m, 4H, CH2,CH2), 4,18 - 4,51 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,0, 13,3 Hz, 1H, NCH), 5,22 (s, 2H, CH2), 7,27 - 7,38 (m, 5H, Ar), 7,40 - 7,53 (m, 3H, Ar), 10,98 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-de) 522,36, 31,21,45,09, 51,58, 53,14, 62,10, 66,17, 69,41, 114,97, 115,23, 127,64, 128,99, 129,81, 129,95, 133,31, 135,29, 137,68, 153,50, 168,01, 170,98, 172,83; LCMS: 465; Anal calc. para C25H27N3O5 0,86 H2O: C, 64,63; H, 6,22; N, 9,04; Observado: C, 64,39; H, 6,11; N, 8,89; H2O, 3,24.
5.3 3-{4-[4-(2,2,3,3,4,4,5,5,6,6-DECADEUTERO-PIPERIDIN-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000033_0001
Etapa 1: Se anadio perdeutero-piperidina (dn, 98 % de D, 136 mg, 1,42 mmol) a una solucion de 5-amino-2-(4-(4-(clorometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de terc-butilo (450 mg, 0,95 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (0,24 ml, 1,42 mmol) en MeCN seco (9 ml). La mezcla de reaccion se calento hasta 60 °C con agitacion durante 2 horas. La mezcla se dejo enfriar a temperatura ambiente y despues se almaceno a 4 °C durante una noche. Se formo un solido tras la refrigeracion y la suspension se repartio entre EtOAc (150 ml) y NaHCO31 N (40 ml). La capa acuosa se lavo con EtOAc (100 ml) y la capa organica combinada se lavo con salmuera, se seco (Na2sO4), y se concentro al vado para proporcionar ester terc-butflico del acido 4-carbamoil-2-{4-[4-(2,2,3,3,4,4,5,5,6,6-decadeutero-piperidin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-butmco en forma de un solido de color blanco (490 mg, rendimiento del 97 %): Lc Ms MH = 532. El solido se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 2: A una solucion de ester terc-butflico del acido 4-carbamoil-2-{4-[4-(2,2,3,3,4,4,5,5,6,6-decadeuteropiperidin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-butmco (490 mg, 0,92 mmol) en THF (10 ml) a temperatura ambiente, se le anadio en una porcion KO/Bu (109 mg, 0,96 mmol) en forma de un solido. La solucion cambio de color de amarillo palido a amarillo intenso tras la adicion, y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante aproximadamente 30 minutos. Se anadio mas cantidad de KO/Bu (14 mg) a la reaccion y la agitacion continuo durante una noche. Despues de aproximadamente 17 horas, se anadio otra porcion de KO/Bu (28 mg), y la reaccion se dejo en agitacion a temperatura ambiente durante 2 horas mas. La mezcla de reaccion se inactivo con acido acetico (0,158 ml, 2,76 mmol) a 0 °C. La suspension resultante se concentro al vado y el residuo se repartio entre EtOAc (75 ml) y NaHCO 3 1 N (30 ml). La capa acuosa se lavo con mas EtOAc (75 ml). Las capas organicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (Na 2 SO 4 ), y se concentraron al vado para dar un solido de color castano. Se anadio Et 2 O (20 ml) al producto solido en bruto y la suspension se trituro por sonicacion seguido de filtracion y lavado del solido con mas cantidad de Et 2 O. La torta se seco por succion para dar 3-{4-[4-(2,2,3,3,4,4,5,5,6,6-Decadeutero-piperidin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color amarillo palido (205 mg, rendimiento del 49 %): HPLC: Waters Symmetry Ci 8 , 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, grad. del 5 % al 95 % en 5 min, acetonitrilo/H 3 PO4 al 0,1 %, 4,69 min (95,6 %); p.f.: 186-188 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,88 - 2,06 (m, 1H, CHH), 2,37 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,52 - 2,63 (m, 1H, CHH), 2,81 - 3,02 (m, 1H, CHH), 3,41 (s, 2H, CH2), 4,25 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,41 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,0, 13,1 Hz, 1H, CH), 5,22 (s, 2H, CH2), 7,26 - 7,37 (m, 4H, Ar), 7,38 - 7,57 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH);
13 C RMN (DMSO-de) 522,33, 31,18, 45,07, 51,55, 62,42, 69,42, 114,94, 115,19, 127,57, 128,78, 129,78, 129,93, 133,28, 135,00, 138,58, 153,51, 167,99, 170,95, 172,80; No se observan senales de CD 2 de carbono en la 13 C RMN; LCMS MH = 458; Anal calc. para C26H19D10N 3 O4 0,25 H2O: C, 67,58; H, 6,43; N, 9,09, Observado: C, 67,51; H, 6,32; N, 9,16.
5.4 3-{4-[4-(2,2,3,3,5,5,6,6-OCTADEUTERO-MORFOLIN-4-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000034_0001
Etapa 1: A una solucion de 5-amino-2-(4-(4-(clorometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de terc-butilo (450 mg, 0,95 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (0,24 ml, 1,42 mmol) en MeCN (9 ml), se le anadio 2,2,3,3,5,5,6,6-octadeutero-morfolina (de, 98 % de D, 136 mg, 1,42 mmol). La reaccion se agito a 60 °C durante 2,5 horas. La mezcla (una suspension de color blanco) se concentro a sequedad y el residuo solido se repartio entre EtOAc (150 ml) y NaHCO31 N (35 ml). La capa acuosa se lavo con mas cantidad de EtOAc (150 ml). Las capas organicas se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron (Na2SO4), y se concentraron al vado para proporcionar ester tercbutflico del acido 4-carbamoil-2-{4-[4-(2,2,3,3,5,5,6,6-octadeutero-morfolin-4-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidroisoindol-2-il}-butmco en forma de un solido de color blanco (0,5 g, rendimiento del 99 %): LCMS Mh = 532. El solido se uso en la siguiente etapa sin
Etapa 2: A una solucion enfriada de 4-carbamoil-2-{4-[4-(2,2,3,3,5,5,6,6-octadeutero-morfolin-4-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-butmco ester terc-butflico del acido (0,5 g, 0,94 mmol) en THF (10 ml) a 0 °C, se le anadio en una porcion KO/Bu (0,137 g, 1,22 mmol) en forma de un solido. La solucion se volvio de color amarillo intenso. El bano de hielo se elimino inmediatamente y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante aproximadamente 90 minutos. La mezcla se enfrio en un bano de hielo y se inactivo mediante la adicion de acido acetico (0,162 ml, 2,82 mmol).
Los volatiles se retiraron al vado para dar un solido de color blanco que se repartio entre EtOAc (125 ml) y NaHCO3 1 N (30 ml). La capa acuosa se lavo con mas cantidad de EtOAc (aproximadamente 75 ml). Las capas de EtOAc se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron (Na2SO4), y se concentraron al vado para dar 400 mg de un solido. Este solido de color blanco se suspendio en Et2O (25 ml), se agito vorticialmente de forma vigorosa y se soni
5.5 3-[4-(2-MORFOLIN-4-ILMETIL-BENCILOXI)-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000035_0001
Etapa 1: A la solucion en THF (15 ml) de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-(4-hidroxi-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-butmco (0,3 g, 1 mmol), se le anadieron resina de trifenil fosfina (1,38 g, 2,2 mmol/g de carga, 2,2 mmol) y DIAD (0,43 ml, 2,2 mmol) a 0 °C, y se mantuvo durante 10 minutos. A la mezcla se le anadio (2-morfolin-4-ilmetil-fenil)-metanol (0,31 g, 1,5 mmol), y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla se filtro y el filtrado se concentro y se extrajo con EtOAc (30 ml) y Na 2 CO 3 (20 ml). La capa organica se lavo con agua (20 ml) y salmuera (20 ml), y se concentro. El aceite resultante se purifico sobre columna de gel de sflice para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(2-morfolin-4-ilmetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco (0,07 g, rendimiento del 15 %).
Etapa 2: A la solucion en THF (20 ml) de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(2-morfolin-4-ilmetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco (0,07 g, 0,15 mmol), se le anadio t-butoxido potasico (20 mg, 0,18 mmol) a 0 °C. La mezcla se agito durante 15 minutos a 0 °C y se inactivo con 5 ml de una solucion 1 N de HCl, seguido de 15 ml de una solucion saturada de NaHCO 3 . La mezcla se extrajo con EtOAc (20 ml). La capa organica se concentro al vad o. El aceite resultante se purifico sobre columna de gel de sflice eluida con CH 2 Cl 2 y metanol para dar 3-[4-(2-morfolin-4-ilmetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (30 mg, rendimiento del 50 %): p.f.: 188-190 °C; HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometres, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de acetonitrilo/H 3 PO 4 al 0,1 % en H 2 O de 5/95 a 100/0 en 5 min y mantenido a 100/0 durante 5 min: tR = 4,8 min (96 %). 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 5 1,84 - 2,11 (m, 1H, CHH), 2,22 - 2,44 (m, 5H, CHH, CH2CH2), 2,54 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,89 (d, J = 12,5 Hz, 1H, CHH), 3,42 - 3,62 (m, 6H, CH2CH2, CH2), 4,17 - 4,52 (m, 2H, CH2), 5,12 (dd, J = 5,0, 13,1 Hz, 1H, NCH), 5,43 (s, 2H, CH2), 7,17 - 7,40 (m, 5H, Ar), 7,42 - 7,65 (m, 2H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 5 0,03, 22,29, 31,13, 45,05, 51,52, 53,13, 60,10, 66,15, 67,17, 114,77, 115,09, 127,29, 127,54, 127,90, 129,76, 130,08, 133,25, 135,62, 135,75, 153,46, 167,94, 170,91, 172,75; LCMS MH = 450; Anal calc. para C25H27N 3 O 3 + 0,2 H2O: C, 66,27; H, 6,10; N, 9,27; Observado: C, 66,06 % H, 5,85; N, 9,14 %.
5.6 3-[4-(3-MORFOLIN-4-ILMETIL-BENCILOXI)-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000035_0002
Etapa 1: A la solucion en THF (10 ml) de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-(4-hidroxi-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-butmco (1,0 g, 3,42 mmol), se le anadieron resina de trifenil fosfina (2,3 g, 2,2 mmol/g de carga, 6,84 mmol) y DlAD (1,33 ml, 6,84 mmol) a 0 °C y se mantuvo durante 10 minutos. A la mezcla se le anadio (3-morfolin-4-ilmetilfenil)-metanol (1,06 g, 3,42 mmol) y se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla se filtro y el filtrado se concentro y se extrajo con EtOAc (30 ml) y Na 2 CO 3 (20 ml). La capa organica se lavo con agua (20 ml) y salmuera (20 ml), y se concentro. El aceite resultante se purifico sobre columna de gel de sflice para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(3-morfolin-4-ilmetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco (0,50 g, 30 %).
Etapa 2: A la solucion en THF (20 ml) de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(3-morfolin-4-ilmetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco (0,3 g, 0,6 mmol), se le anadio t-butoxido potasico (0,6 ml g, 0,6 mmol) a 0 °C. La mezcla se agito durante 15 minutos a 0 °C y se inactivo con 5 ml de una solucion 1 N de HCl seguido de 15 ml de una solucion saturada de NaHCO 3 . La mezcla se extrajo con EtOAc (20 ml). La capa organica se concentro al vado. El aceite resultante se purifico sobre columna de gel de sflice eluida con CH2O2 y metanol para dar 3-[4-(3-morfolin-4-ilmetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (120 mg, rendimiento del 44 %): p.f.: 247-249 °C; HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometros, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de acetonitrilo/H 3 PO 4 al 0,1 % en H 2 O de 5/95 a 100/0 en 5 min y mantenido a 100/0 durante 5 min: tR = 4,8 min (96 %); 1 H RMN (DMSO-de) 51,93 - 2,03 (m, 1H, CHH), 2,26 - 2,38 (m, 4H, CH2,CH2), 2,40 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,54 - 2,63 (m, 1H, CHH), 2,84 - 2,98 (m, 1H, CHH), 3,48 - 3,59 (m, 4H, CH2, CH2), 4,20 - 4,48 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,4 Hz, 1H, NCH), 5,25 (s, 2H, CH2), 7,24- 7,42 (m, 6H, Ar), 7,44 -7,51 (m, 1H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO^) 522,36, 31,20, 45,10, 51,59, 53,11, 62,21, 66,16, 69,58, 115,20, 115,27, 126,37, 128,09, 128,38, 128,53, 129,79, 129,98, 133,31, 136,54, 138,06, 153,44, 167,99, 170,98, 172,85; LCMS MH = 450; Anal calc. para C25H27N3O5 0,4 H2O: C, 65,75; H, 6,14; N, 9,20; Observado: C, 65,38 % H, 5,95; N, 9,21.
5.7 3-(1-OXO-4-(4-(2-(PIRROLIDIN-1-IL)ETOXI) BENCILOXI)ISOINDOLIN-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000036_0001
Etapa 1: Una mezcla de 4-hidroxibenzalde^do (4,0 g, 32,8 mmol) y Cs 2 CO 3 (26,7 g, 81,9 mmol) en DMF (80 ml) se agito durante 10 minutos a temperatura ambiente. A esta mezcla se le anadio clorhidrato de 1-(2-cloroetil)pirrolidina (6,7 g, 39,3 mmol). La mezcla se calento a 60 °C durante 2 horas y despues a 80 °C durante una noche. La mezcla de reaction se enfrio y se filtro, y el solido se lavo con EtOAc (100 ml). El filtrado se agito con agua fria (200 ml) y la capa acuosa se extrajo con EtOAC (3 x 50 ml). Las soluciones de EtOAc combinadas se lavaron con NaOH 2 N (40 ml), agua (3 x 40 ml) y salmuera (40 ml) y se secaron (K 2 CO 3 ). El disolvente se retiro para dar 4-(2-pirrolidin-1-iletoxi)benzaldehido (5,9 g, rendimiento del 81 %): 1 H RMN (CDCl 3 ) 51,76-1,84 (m, 4H), 2,60-2,65 (m, 4H), 2,91-2,95 (m, 2H), 4,19 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 7,00-7,04 (m, 2H), 7,80-7,95 (m, 2H), 9,88 (s, 1H).
Etapa 2: Una solution de 4-(2-pirrolidin-1-il-etoxi)benzaldetido (5,8 g, 26,5 mmol) en alcohol reactivo (60 ml) se enfrio a -60 °C en un bano de hielo seco/acetona. Se anadio lentamente LiBH4/THF (2 M, 15,9 ml, 31,9 mmol) a -60 °C. La mezcla se agito a -60 °C durante 1 hora. La mezcla de reaccion se inactivo lentamente con agua (20 ml) y despues se calento a temperatura ambiente. La mezcla se concentro y el residuo se agito con EtOAc (80 ml) y NaOH 2 N (20 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 30 ml), y las soluciones de EtOAc combinadas se lavaron con agua (30 ml) y salmuera (30 ml) y se secaron. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO 2 , NH4Oh :CH3OH:CH2CI2 0,5:3:97) para dar 4-[(2-pirrolidin-1-il-etoxi)-fenil]-metanol (2,5 g, rendimiento del 42 %): 1 H RMN (CDCl 3 ) 5 1,74-1,83 (m, 4H), 2,56-2,63 (m, 4H), 2,86 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 4,03 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 4,57 (s, 2H), 6,82-6,87 (m, 2H), 7,23-7,27 (m, 2H).
Etapa 3: Se anadio lentamente azodicarboxilato de diisopropilo (1,1 g, 5,5 mmol) a una suspension agitada de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,8 g, 2,7 mmol), 4-[(2-pirrolidin-1-il-etoxi)-fenil]-metanol (0,9 g, 4,1 mmol) y trifenilfosfina unida a polimero (1,8 g, 5,5 mmol) en THF (60 ml) a 5-8 °C. Despues de la adicion, la mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se filtro y el solido se lavo con CH 2 Cl 2 (30 ml). El filtrado se concentro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO 2 , CH 3 OH:CH 2 Cl 2 = 3:97) para dar 5-amino-5-oxo-4-(1-oxo-4-(4-(2-pirrolidin-1-il)etoxi)benciloxi)isoindolin-2-il)pentanoato de metilo (1,0 g, 77 %).
Etapa 4: Una solucion de KO-t-Bu/THF (1 M, 2,5 ml, 2,5 mmol) se anadio lentamente a una solucion agitada de 5-amino-5-oxo-4-(1-oxo-4-(4-(2-pirrolidin-1-il)etoxi)benciloxi)isoindolin-2-il)pentanoato de metilo (1,0 g, 2,1 mmol) en THF (30 ml) a 5 °C. La mezcla se agito a 5 °C durante 10 minutos y despues se calento a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reaccion se enfrio en un bano de hielo y se inactivo con HCl 4 N (4 ml). La mezcla se agito con EtOAc (40 ml) y Na 2 CO 3 sat. (25 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 40 ml) y la solucion EtOAc combinada se lavo con agua (40 ml) y salmuera (40 ml) y se seco (K 2 CO 3 ). El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, CH 3 OH:CH2Cl2 = 5:95) para dar 3-(1-oxo-4-(4-(2-pirrolidin-1-il)etoxi)-benciloxi)isoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,2 g, rendimiento del 20 %): p.f. 153-155 °C; 1H Rm N (DMSO-d6) 5 1,66-1,69 (m, 4H), 1,94-1,99 (m, 1H), 2,40-2,59 (m, 2H), 2,77 (t, J = 5,7 Hz, 2H), 2,84-2,90 (m, 1H), 4,06 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 4,24 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 4,35 (d, J = 17,7 Hz, 1H), 5,07-5,13 (dd, J = 5,1 y 13,2 Hz, 1H), 5,15 (s, 2H), 6,92­ 6,97 (m, 2H), 7,30-7,50 (m, 5H), 10,96 (s, 1H); 13C RMN (DMSO-d6) 522,33, 23,09, 31,17, 45,06, 51,54, 53,93, 54,24, 66,69, 69,34, 114,35, 115,04, 115,12, 128,42, 129,50, 129,75, 129,95, 133,25, 153,50, 158,33, 168,00, 170,96, 172,81; Calc. para C2eH29N 3 O5 0,5 Et2O: C, 66,65; H, 6,63; N, 8,64, Observado: C, 66,95; H, 6,62; N, 8,71.
5.8 3-[4-(3-CLORO-4-MORFOLIN-4-ILMETIL-BENCILOXI)-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000037_0001
Etapa 1: En un matraz de fondo redondo se cargaron acido 3-cloro-4-metil-benzoico (1,5 g, 9 mmol) y ortoacetato de trimetilo (25 ml). La mezcla se calento a 100 °C durante una noche. La mezcla de reaccion se concentro al vado. El aceite resultante, ester metflico del acido 3-cloro-4-metil-benzoico, se uso en la siguiente etapa sin purificacion.
Etapa 2: A la solucion en CCl 4 (50 ml) de ester metflico del acido 3-cloro-4-metil-benzoico (1,66 g, 0,9 mmol), se le anadio NBS (1,58 g, 9 mol). La suspension se bano a la luz de una lampara solar de 300 W y se calento a 65 °C durante 1 hora. La mezcla se filtro y el filtrado se concentro al vado. El aceite resultante, ester metflico del acido 4-bromometil-3-cloro-benzoico, se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 3: A la solucion en acetonitrilo (30 ml) de ester metflico del acido 4-bromometil-3-clorobenzoico se le anadio morfolina (3 ml). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 0,5 horas y se concentro en un evaporador rotatorio. El aceite resultante se extrajo con EtOAc (30 ml) y agua (20 ml). La capa organica se concentro y se purifico sobre columna de gel de sflice eluida con EtOAc y hexano para dar ester metflico del acido 3-cloro-4-morfolin-4-ilmetil-benzoico (1,0 g, 42 % durante tres etapas) en forma de un aceite de color amarillo.
Etapa 4: A la solucion en THF (30 ml) de ester metflico del acido 3-cloro-4-morfolin-4-ilmetil-benzoico (1,0 g, 3,7 mmol), se le anadio gota a gota LiAlH 4 (3,7 ml, 1 M en THF, 3,7 mmol) a 0 °C. La mezcla se agito a 0 °C durante 30 minutos. La mezcla de reaccion se inactivo con NaHCO3 sat. (5 ml), y despues se diluyo con EtOAc (30 ml) y agua (20 ml). Despues de la extraccion, la capa organica se concentro y se purifico sobre columna de gel de sflice eluida con EtOAc y hexano para dar (3-cloro-4-morfolin-4-ilmetil-fenil)-metanol en forma de un aceite (0,6 g, 70 %).
Etapa 5: A la solucion en THF de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-(4-hidroxi-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-butrnco (0,32 g, 1,1 mmol), se le anadieron resina de trifenil fosfina (1,94 g, 1,6 mmol/g de carga, 2,42 mmol) y DIAD (0,477 ml, 2,42 mmol) a 0 °C. Despues de agitarse a 0 °C durante 10 minutos, a la mezcla se le anadio (3-cloro-4-morfolin-4-ilmetil-fenil)-metanol (0,40 g, 1,66 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla se filtro y el filtrado se concentro y se extrajo con EtOAc (30 ml) y Na2CO3 (20 ml). La capa organica se lavo con agua (20 ml) y salmuera (20 ml), y se concentro. El aceite resultante se purifico sobre columna de gel de sflice para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(3-cloro-4-morfolin-4-ilmetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidroisoindol-2-il]-butmco (0,40 g, 73 %).
Etapa 6: A la solucion en THF (20 ml) de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(3-cloro-4-morfolin-4-ilmetilbenciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco (0,64 g, 1,2 mmol), se le anadio t-butoxido potasico (0,14 g, 1,2 mmol) a 0 °C. La mezcla se agito durante 15 minutos a 0 °C y se inactivo con 5 ml de una solucion 1 N de HCl, seguido de 15 ml de una solucion saturada de NaHCO 3 . La mezcla se extrajo con EtOAc (20 ml). La capa organica se concentro al vado. El solido resultante se agito en MeOH (5 ml) y se filtro para dar 3-[4-(3-cloro-4-morfolin-4-ilmetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona (300 mg, 50 %) en forma de un solido de color blanco: p.f.: 240-242 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm,5 micrometres, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de acetonitrilo/H 3 PO 4 al 0,1 % en H 2 O de 5/95 a 100/0 en 5 min y mantenido a 100/0 durante 5 min: tR = 4,81 min (96 %); 1 H RMN (DMSO-de) 51,86 - 2,10 (m, 1H, CHH), 2,37 - 2,45 (m, 5H, CH2,CH2,CHH), 2,54 - 2,63 (m, 1H, CHH), 2,84 - 2,99 (m, 1H, CHH), 3,42 - 3,69 (m, 6H, CH2, CH2, CH2), 4,07 - 4,58 (m, 2H, CHH), 4,98 - 5,17 (m, 1H, NCH), 5,25 (s, 2H, CH2), 7,22 - 7,38 (m, 2H, Ar), 7,40 - 7,61 (m, 4H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 522,26, 31,10, 44,99, 51,49, 53,10, 58,68, 66,09, 68,38, 114,86, 115,31, 126,13, 128,22, 129,75, 129,88, 130,91, 133,23, 133,32, 134,85, 137,37, 153,19, 167,86, 170,88, 172,75; LCMS MH = 484; Anal calc. para C25H26N 3 O5Cl: C, 62,05; H, 5,42; N, 8,68; Observado: C, 61,71; H, 5,08; N, 8,62.
5.9 3-(4-(4-(2-MORFOLIN-4-IL-ETOXI)-BENCILOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000037_0002
Etapa 1: Una mezcla de 4-hidroxibenzalde^do (4,0 g, 32,8 mmol) y Cs 2 CO 3 (26,7 g, 81,9 mmol) en DMF (80 ml) se agito a temperatura ambiente durante 10 minutos. A esta mezcla se le anadio clorhidrato de 4-(2-cloroetil)morfolina (7,3 g, 39,3 mmol). La mezcla resultante se calento a 80 °C en un bano de aceite durante una noche. La mezcla de reaction se enfrio a temperatura ambiente y se filtro, y el solido se lavo con EtOAc (100 ml). El filtrado se diluyo con agua fna (200 ml) y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 50 ml). La solution de EtOAc combinada se lavo con NaOH 2 N (25 ml), agua (3 x 40 ml) y salmuera (40 ml), y se seco (K2CO3). El disolvente se retiro para dar 4-(2-morfolin-4-il-etoxi)-benzaldehido (6,2 g, rendimiento del 81 %): 1 H RMN (CDCb) 52,57-2,60 (m, 4H), 2,83 (t, J = 5,7 Hz, 2H), 3,70-3,75 (m, 4H), 4,19 (t, J = 5,7 Hz, 2H), 6,98-7,03 (m, 2H), 7,81-7,85 (m, 2H), 9,88 (s, 1H); 13 C RMN (CDCls) 553,52, 56,73, 65,77, 66,11, 114,93, 129,58, 131,73, 163,40, 191,21.
Etapa 2: Se anadio lentamente UBH4/THF (2 M, 15,9 ml, 31,7 mmol) a una solucion agitada de 4-(2-morfolin-4-iletoxi)-benzaldehido (6,2 g, 26,4 mmol) en alcohol reactivo (60 ml) a -60 °C. La mezcla resultante se agito a -60 °C durante 1 hora y despues se inactivo con agua (20 ml). La mezcla se concentro y el residuo se agito con EtOAc (80 ml) y NaOH 1 N (30 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 30 ml) y la solucion EtOAc combinada se lavo con agua (40 ml) y salmuera (40 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO 2 , NH4OH:c H3OH:CH2CI20,5:3:100) para dar [4-(2-morfolin-4-il-etoxi)-fenil]-metanol (4,2 g, rendimiento del 67 %): 1 H RMN (CDCls) 52,25 (s, 1H), 2,54-2,57 (m, 4H), 2,78 (t, J = 5,7 Hz, 2H), 3,70-3,73 (m, 4H), 4,08 (t, J = 5,7 Hz, 2H), 4,59 (s, 2H), 6,85-6,89 (m, 2H), 7,25-7,29 (m, 2H); 13 C RMN (CDCls) 5 54,06, 57,61, 65,79, 66,85, 114,62, 128,57, 133,52, 158,24.
Etapa 3: Se agito trifenilfosfina unida a poKmero (1,8 g, 5,5 mmol) con CH 2 Cl 2 seco (20 ml) durante 10 minutos. A esta mezcla se le anadio una solucion de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,8 g, 2,7 mmol) y [4-(2-morfolin-4-il-etoxi)-fenil]-metanol (1,0 g, 4,1 mmol) en THF (60 ml). La mezcla resultante se enfrio a 5 °C y se anadio lentamente azodicarboxilato de diisopropilo (1,1 g, 5,5 mmol) a 5-8 °C. Despues de la adicion, la mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se filtro y el solido se lavo con CH 2 Cl 2 (30 ml). El filtrado se concentro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO 2 , C H ^H : CH 2 Cl 2 , 3:97) para dar 5-amino-4-(4-(4-(2-morfolinoetoxi)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxo-pentanoato de metilo (1,0 g, 71 %).
Etapa 4: Una solucion de t-butoxido potasico/THF (1 M, 2,6 ml, 2,6 mmol) se anadio lentamente a 5 °C a una solucion agitada de 5-amino-4-(4-(4-(2-morfolinoetoxi)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1,1 g, 2,1 mmol) en THF (30 ml). La mezcla de reaccion se agito a 5 °C durante 10 minutos y se calento a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reaccion se enfrio en un bano de hielo y se inactivo con HCl 4 N (4 ml). La mezcla se agito con EtOAc (40 ml) y Na2CO3 sat. (25 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 40 ml) y la solucion EtOAc combinada se lavo con agua (40 ml) y salmuera (40 ml), y se seco (K2CO3). El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (AI2O3, CH3OH: CH2CI23:97) para dar 3-(4-(4-(2-morfolinoetoxi)-benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-piperidin-2,6-diona (0,2 g, rendimiento del 16 %): p.f.: 203-205 °C; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,90-2,05 (m, 1H), 2,40-2,70 (m, 8H), 2,84-2,96 (m, 1H), 3,55-3,58 (m, 4H), 4,06-4,10 (m, 2H), 4,24 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 4,35 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 5,07-5,15 (m, 3H), 6,97 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,30-7,50 (m, 5H), 10,96 (s, 1H); 13 C RMN (DMSO-de) 522,32, 31,17, 45,06, 51,55, 53,56, 56,92, 65,29, 66,11,63,31, 114,41, 115,04, 115,11, 128,50, 129,47, 129,74, 129,94, 133,25, 153,49, 158,27, 167,99, 170,94, 172,80; Calc. para C26H29N3O6 0,2 H2O: C, 64,64; H, 6,10; N, 8,70, Observado: C, 64,54; H, 6,06; N, 8,63.
5.10 3-[4-(3-FLUORO-4-MORFOUN-4-ILMETIL-BENCILOXI)-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERON-2,6-DIONA
Figure imgf000038_0001
Etapa 1: A una solucion agitada de ester mefilico del acido 3-fluoro-4-metil-benzoico (5,45 g, 32,4 mmol) en tetracloruro de carbono (30 ml), se le anadio N-bromosuccinimida (5,48 g, 30,8 mmol). La mezcla se calento a 80 °C, con una luz brillante de 300 W. La mezcla se calento durante dos horas y despues se filtro. El filtrado se evaporo para dar ester mefilico del acido 4-bromometil-3-fluoro-benzoico en forma de un aceite de color verde claro (9,1 g, rendimiento en bruto del 113 %).
Etapa 2: Se anadio morfolina (28,3 ml, 324,4 mmol) a una solucion agitada de ester mefilico del acido 4-bromometil-3- fluoro-benzoico (8,01 g, 32,4 mmol) en acetonitrilo (40 ml) a temperatura ambiente. La mezcla se agito durante diez minutos y el disolvente se evaporo. Al residuo se le anadio agua (40 ml), y despues la mezcla se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 ml). Las fases organicas combinadas se evaporaron y se purificaron sobre columna de gel de sflice (gradiente de EtOAc/Hexanos del 10 % al 40 % en 40 min) para dar ester mefilico del acido 3-fluoro-4-morfolin-4- ilmetil-benzoico en forma de un solido de color amarillo (5,58 g, rendimiento del 68 %): 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 52,35 - 2,44 (m, 4H, CH2, CH2), 3,53 - 3,65 (m, 6H, CH2, CH2, CH2), 3,87 (s, 3H, CH3), 7,55 - 7,63 (m, 1H, Ar), 7,63 - 7,70 (m, 1H, Ar), 7,75 - 7,82 (m, 1H, Ar); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 552,36, 52,98, 53,22, 54,64, 65,84, 66,10, 66,35, 115,45, 115,75, 124,97, 129,95, 130,16, 130,44, 130,54, 131,72, 131,78, 158,73, 162,00, 165,09.
Etapa 3: Se anadio hidruro de litio y aluminio (1,0 M en THF, 8,06 ml, 8,06 mmol) a una solucion agitada de ester metflico del acido 3-fluoro-4-morfolin-4-ilmetil-benzoico (1,02 g, 4,03 mmol) en THF (20 ml) a 0 °C. Se agito durante 30 minutos y se inactivo con la adicion gota a gota de bicarbonato sodico saturado. A la mezcla se le anadio agua (30 ml), y la mezcla se extrajo por acetato de etilo (3 x 100 ml). El precipitado resultante se filtro. El filtrado combinado de acetato de etilo se evaporo y se purifico sobre columna de gel de sflice (gradiente de EtOAc/Hexanos del 20 % al 90 % en 35 min) para dar (3-fluoro-4-morfolin-4-ilmetil-fenil)-metanol en forma de un solido oleoso (0,81 g, rendimiento del 89 %): 1 H RMN (DMSO-de) 52,31 - 2,42 (m, 4H, CH2, CH2), 3,46 - 3,50 (m, 2H, CH2), 3,51 - 3,59 (m, 4H, CH2, CH2), 4,49 (s a, 2H, CH2), 5,27 (s a, 1H, OH), 7,04 - 7,14 (m, 2H, Ar), 7,29 - 7,38 (m, 1H, Ar); 13 C RMN (DMSO-de) 552,89, 54,80, 62,02, 66,13, 112,63, 112,93, 121,80, 121,96, 122,17, 131,31, 131,38, 144,40, 144,50, 159,14, 162,38.
Etapa 4: Se anadio trifenilfosfeno soportado con poflmero (1,6 mmol/g, 1,60 g, 2,60 mmol) a una suspension agitada de (3-fluoro-4-morfolin-4-ilmetil-fenil)-metanol (0,39 g, 1,71 mmol) en THF (20 ml) a 0 °C, seguido de la adicion de diazen-1,2-dicarboxilato de diisopropilo (0,37 ml, 1,88 mmol). Despues de agitar durante 30 minutos, se anadio ester metflico del acido 4-carbamoil-4-(4-hidroxi-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-butmco (0,50 g, 1,71 mmol). La mezcla se agito durante tres horas, despues se filtro, se lavo con MeOH (3 x 20 ml) y cloruro de metileno (3 x 20 ml). El filtrado combinado se evaporo al vado para dar un aceite, que se purifico sobre columna de gel de sflice (MeOH/CH 2 Cl 2 gradiente del 1 % al 5 % en 40 min) para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(3-fluoro-4-morfolin-4-ilmetilbenciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco en forma de un aceite transparente (0,54 g, rendimiento del 63 %).
Etapa 5: Se anadio terc-butoxido potasico (0,12 g, 1,08 mmol) a una solucion agitada de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(3-fluoro-4-morfolin-4-ilmetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco (0,54 g, 1,08 mmol) en THF (15 ml) a 0 °C. La mezcla se agito durante ten minutos y se inactivo con Hcl 1 N (3 ml), se neutralizo con bicarbonato sodico saturado (4 ml a pH = 7), y se extrajo rapidamente por acetato de etilo (2 x 30 ml). Las fases de acetato de etilo combinadas se evaporaron y se purificaron sobre columna de gel de sflice (MeOH/CH 2 Cl 2 , gradiente del 1 % al 5 % en 90 min) para dar 3-[4-(3-fluoro-4-morfolin-4-ilmetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,36 g, rendimiento del 72 %): HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 95/5 en 5 min, isocratica a 95/5 en 5 min (acetonitrilo/HsPO4 al 0,1 %), 4,90 min (97,8 %); p.f.: 263-265 °C; 1 H RMN (DMSO-ds) 5 1,91 - 2,05 (m, 1H, CHH), 2,32 - 2,48 (m, 5H, CHH, CH2CH2), 2,54 - 2,65 (m, 1H, CHH), 2,82 - 3,02 (m, 1H, CHH), 3,47 - 3,61 (m, 6H, CH2CH2, CH2), 4,23 - 4,50 (m, 2H, CH2), 5,12 (dd, J = 5,2, 13,3 Hz, 1H, NCH), 5,25 (s, 2H, CH2), 7,25 - 7,56 (m, 6H, Ar), 10,98 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-ds) 522,36, 31,20, 45,09, 51,59, 52,93, 54,74, 66,13, 68,56, 114,09, 114,40, 114,92, 115,39, 123,22, 123,70, 123,89, 129,84, 130,00, 131,69, 131,75, 133,37, 138,16, 138,26, 153,28, 159,08, 162,33, 167,98, 170,96, 172,83; LCMS MH = 468; Anal. Calc. para C25H26N3O5F: C, 64,23; H, 5,61; N, 8,99, Observado: C, 63,95; H, 5,41; N, 8,92.
5.11 3-{4-[4-(2-MORFOLIN-4-IL-ETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000039_0001
Etapa 1: A la solucion en THF de acido 4-(2-bromoetil)benzoico (25 g, 109 mmol) y eterato de trifluoroborano (13,71 ml, 109 mmol), se le anadio gota a gota borano (196 ml, 196 mmol) a traves de un embudo de adicion por goteo a 0 °C durante 2 horas. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche, y se anadio gota a gota MeOH a temperatura ambiente hasta que la suspension turbia se volvio transparente y no se formaron mas burbujas. La solucion transparente se concentro en un evaporador rotatorio y el solido resultante se agito en agua (100 ml) durante 30 minutos a temperatura ambiente. La suspension se filtro para dar acido 4-(2-cloro-etil)-benzoico en forma de un solido de color blanco (25 g, 107 %).
Etapa 2: A la solucion en acetonitrilo de (4-(2-bromoetil)fenil)metanol (25 g, 116 mmol), se le anadio morfolina (25,3 ml, 291 mmol). Se anadio de una vez Nal. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante un fin de semana. La suspension de reaccion se filtro. El filtrado se concentro y se agito en eter (100 ml) a temperatura ambiente durante 30 minutos. La suspension se filtro. El solido resultante se disolvio en HCl 1 N y se extrajo con EtOAc (50 ml x 2). La capa acuosa se neutralizo con NaOH 1 N a pH = 7-8. La suspension resultante se filtro para dar [4-(2-morfolin-4-iletil)-fenil]-metanol en forma de un solido de color blanco (13 g, 60 %).
Etapa 3: A la solucion en THF de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-(4-hidroxi-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-butmco (0,5 g, 1,7 mmol), se le anadieron resina de trifenil fosfina (2,3 g, 1,6 mmol/g de carga, 3,74 mmol) y DIAD (0,73 ml, 3,74 mmol) a 0 °C. Despues de agitarse a 0 °C durante 10 minutos, a la mezcla se le anadio [4-(2-morfolin-4-il-etil)-fenil]-metanol (0,65 g, 2,94 mmol) y se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla se filtro y el filtrado se concentro y se extrajo con EtOAc (30 ml) y Na2CO3 (20 ml). La capa organica se lavo con agua (20 ml) y salmuera (20 ml), y se concentro. El aceite resultante se purifico sobre columna de gel de sflice para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4- {4-[4-(2-morfolin-4-il-etil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-butmco en forma de un solido de color blanco (0,74 g, 88 %).
Etapa 4: A la solucion en THF (20 ml) de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-{4-[4-(2-morfolin-4-il-etil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-butmco (0,74 g, 1,5 mmol) se anadio t-butoxido potasico (0,16 g, 1,5 mmol) a 0 °C. La mezcla se agito durante 15 minutos a 0 °C y se inactivo con 5 ml de una solucion 1 N de HCl seguido de 15 ml de una solucion saturada de NaHCO3. La mezcla se extrajo con EtOAc (20 ml). La capa organica se concentro al vado. El aceite resultante se purifico sobre columna de gel de sflice eluida con CH2Cl2 y metanol para dar 3-{4-[4-(2-morfolin-4-il-etil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (620 mg, rendimiento del 87 %): p.f.: 230-232 °C. HPlC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometres, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de acetonitrilo/H 3 PO 4 al 0,1 % en H 2 O de 5/95 a 100/0 en 5 min y mantenido a 100/0 durante 5 min: tR = 4,86 min (97 %); 1 H RMN (DMSO-de) 5 1,80 - 2,12 (m, 1H, CHH), 2,40-2,44 (m, 4H, CH2,CH2), 2,45 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,55 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,69 - 2,80 (m, 2H, CH2), 2,81 - 3,00 (m, 1H, CHH), 3,52 - 3,61 (m, 4H, CH2, CH2), 4,18 -4,48 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,20 (s, 2H, CH2), 7,19 -7,54 (m, 7H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 522,36, 31,21, 32,04, 45,10, 51,58, 53,21, 59,93, 66,13, 69,47, 114,98, 115,19, 127,80, 128,70, 128,74, 129,79, 129,95, 133,29, 134,08, 140,25, 153,50, 168,01, 170,96, 172,82; LCMS MH = 464; Anal calc. para C26H29N3O5 0,5 H2O: C, 66,09; H, 6,40; N, 8,89; Observado: C, 65,96; H, 6,33; N, 9,07.
5.12 3-[4-(4-IMIDAZOL-1-ILMETIL-BENCILOXI)-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000040_0001
Etapa 1: Se anadio trifenilfosfina soportada por poflmero (1,6 mmol/g, 10 g, 16 mmol) a una suspension agitada de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (2,49 g, 8,52 mmol) en THF (100 ml) a 0 °C, seguido de diazen-1,2-dicarboxilato de diisopropilo (3,36 ml, 17,04 mmol). Despues de agitar durante 30 minutos, se anadio (4-(clorometil)fenil)metanol (2,00 g, 12,78 mmol). La mezcla se agito durante una hora y despues se filtro. La resina se lavo con metanol (3 x 30 ml) y cloruro de metileno (3 x 30 ml). El filtrado combinado se evaporo al vado para dar un aceite, que se purifico sobre columna de gel de sflice (MeOH/CH2Cl2, gradiente del 1 % al 5 % en 30 min) para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(4-clorometil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco en forma de un aceite (3,38 g, rendimiento del 92 %): 1H RMN (DMSO-d6) 51,97 - 2,35 (m, 4H, CH2CH2), 3,50 (s, 3H, CH3), 4,35 - 4,62 (m, 2H, CH2), 4,73 (dd, J = 4,8, 10,3 Hz, 1H, NCH), 4,78 (s, 2H, CH2), 5,26 (s, 2H, CH2), 7,19 (d, 1H, NHH), 7,25 - 7,35 (m, 2H, Ar), 7,41 - 7,54 (m, 5H, Ar), 7,58 (d, J = 0,4 Hz, 1H, NHH).
Etapa 2: Se anadieron imidazol (0,19 g, 2,84 mmol), y diisopropiletilamina (0,24 ml, 1,42 mmol) a una solucion agitada de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(4-clorometil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco (0,61 g, 1,42 mmol) en acetonitrilo (15 ml). La mezcla se calento a 70 °C durante una noche. A la mezcla se le anadio carbonato potasico (0,20 g, 1,48 mmol), y la mezcla se calento a 80 °C durante tres horas. La mezcla se concentro y despues se purifico sobre columna de gel de sflice (MeOH/CH2Cl2 del 1 % al 10 % en 30 minutos) para dar 3-[4-(4-Imidazol-1-ilmetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,12 g, rendimiento del 37 %): HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, isocratica a 18/2 en 10 min (acetonitrilo/HsPO4 al 0,1 %), 2,50 min (96,8 %); p.f.: 248-250 °C; 1H RMN (DMSO^) 5 1,88 - 2,07 (m, 1H, CHH), 2,36 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,63 (m, 1H, CHH), 2,82 - 2,99 (m, 1H, CHH), 4,17 - 4,47 (m, 2H, CH2), 5,10 (dd, J = 5,2, 13,3 Hz, 1H, NCH), 6,92 (s, 1H, Ar), 7,20 (t, J = 1,2 Hz, 1H, Ar), 7,24 - 7,37 (m, 4H, Ar), 7,42 - 7,54 (m, 3H, Ar), 7,78 (s, 1H, Ar), 10,96 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-d6) 522,35, 31,20, 45,08, 49,20, 51,58, 69,19, 114,95, 115,27, 119,56, 127,58, 128,07, 128,54, 129,81, 129,97, 133,31, 136,14, 137,35, 137,59, 153,40, 167,99, 170,96, 172,83; LCMS MH = 431; Anal. Calc. para C24H22N4O4 0,5 H2O: C, 65,59; H, 5,28; N, 12,75, Observado: C, 65,43; H, 5,15; N, 12,64.
5.13 3-{4-[4-(1,1-DIOXO-1-TIOMORFOLIN-4-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000041_0001
Etapa 1: Una suspension de ester terc-butflico del acido 4-carbamoil-4-(4-hidroxi-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-butrnco (1,5 g, 4,49 mmol), N,N-diisopropiletilamina (784 pl, 4,49 mmol), y K2CO3 (620 mg, 4,49 mmol) en DMF (15 ml) se agito durante 5 minutos a temperatura ambiente, seguido de la adicion de (4-clorometil-fenil)-metanol (902 mg, 4,49 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante aproximadamente 15 horas y despues se calento a 70 °C durante 3 horas. Se anadio piperidina (800 pl) a la mezcla para recoger el (4-clorometil-fenil)-metanol sin consumir. La mezcla se agito durante 18 horas mas a 70 °C. La mezcla se diluyo con agua (50 ml) y EtOAc (200 ml). El pH del producto acuoso se ajusto a aproximadamente 4 usando HCl 1 N, y las fases se dividieron en un embudo de decantacion. La capa acuosa se saturo con NaCl y se extrajo con mas cantidad de EtOAc (200 ml). Las capas organicas se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron (Na 2 SO 4 ), y se concentraron en un evaporador rotatorio para dar 3,5 g de un aceite de color castano. Una porcion de este aceite (2,1 g) se purifico en una columna ultrarrapida de SiO 2 (CombiFlash, columna prerrellenada de 80 g de SiO 2 , gradiente de MeOH/diclorometano) para dar ester terc-butflico del acido 4-carbamoil-2-[4-(4-hidroximetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco en forma de una espuma de color blanco (1,1 g, rendimiento del 90 %, en base a la porcion purificada): 1 H RMN (DMSO-de) 5 1,39 (s, 9H, tBu), 2,00 - 2,13 (m, 3H, CHH, CH2), 2,13 - 2,31 (m, 1H, CHH), 4,41 (s, 2H, CH2), 4,50 (d, J = 5,7 Hz, 2H, CH2), 4,69 (dd, J = 4,6, 10,3 Hz, 1H, CH), 5,19 (t, J = 5,7 Hz, 1H, OH), 5,24 (s, 2H, CH2), 6,75 (s a, 1H, NH), 7,22 (s a, 1H, NH), 7,25 - 7,37 (m, 4H, Ar), 7,42 - 7,53 (m, 3H, Ar); 13 C RMN (DMSO-de) 524,69, 27,56, 31,50, 44,78, 54,08, 62,60, 69,45, 81,42, 114,97, 115,18, 126,52, 127,57, 129,71, 130,03, 133,27, 134,86, 142,40, 153,42, 168,12, 169,85, 172,94; LCMS MH = 455.
Etapa 2: A una solucion de ester terc-butflico del acido 4-carbamoil-2-[4-(4-hidroximetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidroisoindol-2-il]-butmco (250 mg, 0,55 mmol) en diclorometano (5 ml), enfriada en un bano de hielo a 0 °C, se le anadio N,N-diisopropiletilamina (115 pl, 0,66 mmol) seguido de cloruro de metanosulfonilo (47 pl, 0,605 mmol). Despues de 5 minutos, la mezcla se dejo calentar hasta la temperatura ambiente. La mezcla se agito durante aproximadamente 45 minutos a temperatura ambiente, y despues se anadio mas cantidad de MsCl (20 pl). La reaccion se completo despues de 10 minutos segun se determino por LCMS. La mezcla en bruto se concentro y el residuo se seco adicionalmente en horno de vado a 40 °C durante una noche para dar el producto en bruto en forma de un solido de color blanco (320 mg). El analisis por LCMS indico que el solido obtenido contema una mezcla aproximadamente 5:1 de ester terc-butflico del acido 4-carbamoil-2-[4-(4-metanosulfoniloximetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butrnco y ester terc-butflico del acido 4-carbamoil-2-[4-(4-clorometil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco (MH = 533 y 473, respectivamente). La mezcla se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional. A una solucion del producto en bruto (293 mg, 0,55 mmol, suponiendo un rendimiento cuantitativo de la etapa anterior) y N,N-diisopropiletilamina (240 pl, 1,375 mmol) en acetonitrilo (5 ml), se le anadio 1,1-dioxido de tiomorfolina (82 mg, 0,605 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante aproximadamente 45 minutos y despues se anadio mas cantidad de 1,1-dioxido de tiomorfolina (82 mg, 0,605 mmol). Despues de 3 horas, la mezcla se calento a reflujo durante aproximadamente 4 horas y despues se agito a temperatura ambiente durante 2 dias. Los volatiles se retiraron al vado y el residuo se repartio entre EtOAc (150 ml) y NaHCO 3 1 N (30 ml). La capa acuosa se lavo con mas cantidad de EtOAc (150 ml). Las capas organicas se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron (Na 2 SO 4 ), y se concentraron en un evaporador rotatorio para dar ester terc-butflico del acido 4-carbamoil-2-{4-[4-(1,1-dioxo-1-tiomorfolin-4-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-butmco en forma de un solido de color blanquecino (340 mg). LCMS MH = 572. El solido se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 3: A una solucion agitada de ester terc-butflico del acido 4-carbamoil-2-{4-[4-(1,1-dioxo-1-tiomorfolin-4-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-butmco (230 mg, 0,40 mmol) en THF (10 ml), se le anadio una solucion 1 M de KOfBu (402 pl, 0,402 mmol). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante aproximadamente 2 horas, y despues se anadio mas cantidad de KOfBu (100 pl). Despues de aproximadamente otras 2,5 horas, la mezcla de reaccion se enfrio en un bano de hielo y despues se transfirio a una solucion acuosa 1 N de HCl. La mezcla se concentro a sequedad y el residuo se disolvio de nuevo en una cantidad minima de DMF y HCl 1 N (1:1) y se filtro. El filtrado que contema el producto en bruto se purifico por inyeccion en una columna para HpLC preparativa C-18. El producto se eluyo con un gradiente de acetonitrilo/agua (acido formico al 0,1 % en ambas fases moviles) y las fracciones se recogieron por activacion de masas. Las fracciones deseadas se combinaron y se concentraron al vado para dar 3-{4-[4-(1,1-Dioxo-1-tiomorfolin-4-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il} piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (113 mg, rendimiento del 56 %): HPLC: Waters Symmetry C 18 , 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 20/80 de acetonitrilo/H 3 PO4 al 0,1 %, 4,91 min (97,5 %); p.f.: 156-158 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,89 - 2,04 (m, 1H, CHH), 2,35 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,52 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,74 - 3,01 (m, 5H, 2CH 2 , CHH), 3,03 - 3,16 (m, 4H, 2CH2), 3,68 (s, 2H, CH2), 4,25 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,42 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,25 - 7,40 (m, 4H, Ar), 7,42 -7,56 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 521,24, 30,06, 43,97, 48,93, 49,12, 50,46, 58,16, 68,23, 113,87, 114,13, 126,60, 127,76, 128,70, 128,83, 132,18, 134,44, 136,40, 152,36, 166,87, 169,84, 171,71; LCMS MH = 498; Anal calc. para C25H27N3O6S: C, 60,35; H, 5,47; N, 8,44; S, 6,44, Observado: C, 55,59; H, 5,24; N, 7,92; S, 5,96.
5.14 ESTER TERC-BUTWCO DEL ACIDO 4-{4-[2-(2,6-DIOXO-PIPERIDIN-3-IL)-1-OXO-2,3-DIHIDRO-1H-ISOINDOL-4-ILOXIMETIL]-BENCIL}-PIPERIDIN-1-CARBOXWCO
Figure imgf000042_0001
Etapa 1: A la solucion en THF de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-(4-hidroxi-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-butrnco (0,45 g, 1,5 mmol), se le anadieron resina de trifenil fosfina (1,75 g, 1,6 mmol/g de carga, 2,86 mmol) y DIAD (0,55 ml, 2,86 mmol) a 0 °C. Despues de agitarse a 0 °C durante 10 minutos, a la mezcla se le anadio ester tercbutflico del acido 4-(4-hidroximetil-bencil)-piperidin-1-carboxflico, y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla se filtro y el filtrado se concentro y se extrajo con EtOAc (30 ml) y Na2CO3 (20 ml). La capa organica se lavo con agua (20 ml) y salmuera (20 ml), y se concentro. El aceite resultante se purifico sobre columna de gel de sflice para dar ester terc-butflico del acido 4-{4-[2-(1-carbamoil-3-metoxicarbonilpropil)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-bencil}-piperidin-1-carboxflico en forma de un aceite (0,85 g, 90 %).
Etapa 2: A la solucion en THF (20 ml) de ester terc-butflico del acido 4-{4-[2-(1-carbamoil-3-metoxicarbonil-propil)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-bencil}-piperidin-1-carboxflico (0,85 g, 1,5 mmol), se le anadio t-butoxido potasico (0,16 g, 1,5 mmol) a 0 °C. La mezcla se agito durante 15 minutos a 0 °C y se inactivo con 5 ml de una solucion 1 N de HCl seguido de 15 ml de una solucion saturada de NaHCO3. La mezcla se extrajo con EtOAc (20 ml). La capa organica se concentro al vado. El aceite resultante se purifico sobre columna de gel de sflice eluida con CH2Cl2 y metanol para dar ester terc-butflico del acido 4-{4-[2-(2,6-dioxo-piperidin-3-il)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-bencil}-piperidin-1-carboxflico en forma de un aceite (660 mg, 80 %). p.f.: 180-182 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometros, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de acetonitrilo/H3PO4 al 0,1 % en H2O de 5/95 a 100/0 en 5 min y mantenido a 100/0 durante 5 min: tR = 7,69 min (98 %).1H RMN (DMSO-d6) 50,92 - 1,12 (m, 2H, CH2), 1,16-1,24 (m, 1H, CHH), 1,38 (s, 9H, CH3, CH3,CH3), 1,46 - 1,58 (m, 2H, CH2), 1,59 - 1,74 (m, 1H, CH), 1,89 - 2,06 (m, 1H, CHH), 2,35 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,56 - 2,71 (m, 4H, CH2, CHH, CHH), 2,79 - 3,01 (m, 1H, CHH), 3,79 - 4,00 (m, 2H, CH2), 4,18 - 4,51 (m, 2H, CH2), 5,01 - 5,16 (m, 1H, NCH), 5,20 (s, 2H, CH2), 7,20 (d, J = 8,1 Hz, 2H, Ar), 7,28 - 7,36 (m, 2H, Ar), 7,32 - 7,32 (m, 1H, Ar), 7,40 (d, J = 8,1 Hz, 2H, Ar), 7,43 - 7,56 (t, J = 8,3 Hz, 1H, Ar), 10,91 - 11,07 (m, 1H, NH). 13C RMN (DMSO^) 522,29, 28,01, 31,13, 31,39, 37,18, 41,74, 45,02, 51,51, 69,40, 78,31, 114,90, 115,13, 127,64, 129,06, 129,74, 129,89, 133,24, 134,00, 139,87, 153,46, 153,74, 167,94, 170,91, 172,76; LCMS MH = 548, Anal calc. para C31H37N3O6+ 0,8 H2O: C, 66,25; H, 6,92; N, 7,48; Observado: C, 66,09; H, 6,83; N, 7,67.
5.15 HIDROGENOCLORURO DE 3-[1-OXO-4-(4-PIPERIDIN-4-ILMETIL-BENCILOXI)-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DIONA
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A la solucion en CH2Cl2 (10 ml) de ester terc-butflico del acido 4-{4-[2-(2,6-dioxo-piperidin-3-il)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-bencil}-piperidin-1-carboxflico (0,5 g, 1,0 mmol), se le anadio hidrogeno cloruro en solucion de eter (2,0 M, 5 ml, 10 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla se filtro. El solido resultante se agito con eter para dar hidrogenocloruro de 3-[1-oxo-4-(4-piperidin-4-ilmetil-benciloxi)-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (194 mg, 50 %). p.f.: 200-202 °C.
HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometros,1 ml/min, 240 nm, gradiente de acetonitrilo/H3PO4 al 0,1 % en H2O de 5/95 a 100/0 en 5 min y mantenido a 100/0 durante 5 min: tR = 4,90 min (96 %). 1H RMN (DMSO-d6) 51,35 (d, J = 11,9 Hz, 2H, CH2), 1,62 - 1,73 (m, 2H, CH2), 1,74 - 1,87 (m, 1H, CH), 1,91 - 2,05 (m, 1H, CHH), 2,33 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,52 - 2,64 (m, 3H, CH2, CHH), 2,77 (d, J = 10,8 Hz, 2H, CH2), 2,84 - 3,01 (m, 1H, CHH), 3.21 (d, J = 12,1 Hz, 2H, CH2), 4,11 - 4,51 (m, 2H, CH2), 5,12 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,21 (s, 2H, CH2), 7.21 (d, J = 8,1 Hz, 2H, Ar), 7,28 - 7,37 (m, 2H, Ar), 7,42 (d, J = 8,1 Hz, 2H, Ar), 7,45 - 7,54 (m, 1H, Ar), 8,50 - 8,75 (m, 1H, HCl), 8,80 - 9,02 (m, 1H, HCl), 10,97 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-d6) 522,31, 28,04, 31,14, 34,82, 41,23, 42,89, 45,01, 51,51,69,34, 114,93, 115,16, 127,71, 129,09, 129,76, 129,87, 133,24, 134,25, 139,25, 153,43, 167,92, 170,91, 172,78; LCMS MH = 448, Anal calc. para C26H29N3O4HCI 1,1 H2O: C, 61,98; H, 6,44; N, 8,34; Cl, 7,04; Observado: C, 61,96; H, 6,63; N, 8,00; Cl, 7,06.
5.16 3-(4-((5-(MORFOLINOMETIL)BENZOFURAN-2-IL)METOXI)-1-OXOSIOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
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Etapa 1: Se anadio en una portion hexametilenotetramina (14,0 g, 100 mmol) en una atmosfera de N2 a una solution agitada de 4-hidroxibenzaldettdo (12,2 g, 100 mmol) en acido trifluoroacetico (100 ml). Despues de la adicion, la mezcla se calento en un bano de aceite a 90 °C durante 24 horas. La reaction se interrumpio con 140 ml de HCl 3 N y se enfrio a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla se extrajo con CH2Cl2 (4 x 100 ml) y la solucion combinada de CH2Cl2 se concentro. Se anadio etanol (15 ml) al residuo a 40 °C y despues se enfrio en un bano de hielo durante 30 minutos. La mezcla se filtro y el solido se lavo con etanol frio (10 ml) para dar 5-formilsalicilaldehido (5,0 g, rendimiento del 33 %): 1H RMN (DMSO-de) 57,16 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,00-8,04 (dd, J = 2,4 y 8,7 Hz, 1H), 8,21 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 9,89 (s, 1H), 10,34 (s, 1H), 11,79 (s, 1H).
Etapa 2: Una mezcla de 5-formilsalicilaldehido (3,9 g, 26,0 mmol), bromoacetato de etilo (4,4 g, 26,0 mmol), carbonato potasico (5,4 g, 39,0 mmol) y tamiz molecular (3,9 g) en DMF (40 ml) se calento en un bano de aceite a 85 °C durante 2 horas y despues a 120 °C durante 5 horas. La mezcla de reaccion se enfrio a temperatura ambiente y se diluyo con EtOAc (100 ml). La mezcla se filtro y el solido se lavo EtOAc (50 ml). El filtrado se lavo con agua (3 x 50 ml) y salmuera (50 ml), y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se agito con eter (20 ml) y hexano (20 ml) para dar 5-formilbenzofuran-2-carboxilato de etilo (3,3 g, rendimiento del 59 %): 1H RMN (DMsO-d6) 51,35 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 4,35-4,42 (c, J = 6,9 Hz, 2H), 7,92-7,95 (m, 2H), 8,03-8,07 (dd, J = 1,5 y 8,7 Hz, 1H), 8,42 (a, 1H), 10,10 (s, 1H).
Etapa 3: Se anadio morfolina (1,2 g, 13,8 mmol) a una solucion agitada de 5-formilbenzofuran-2-carboxilato de etilo (1,5 g, 6,9 mmol) en metanol (60 ml). Se anadio un tamiz molecular (4 A, 1,5 g) seguido de acido acetico (0,4 g, 6,9 mmol) y cianoborohidruro sodico (0,7 g, 10,3 mmol). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reaccion se filtro y el solido se lavo con metanol (40 ml). El filtrado se concentro y el residuo se disolvio en EtOAc (100 ml). La solucion de EtOAc se lavo con NaHCO3 sat. (30 ml) y salmuera (30 ml), y se seco (K2CO3). El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, EtoAc:CH2Cl2, 40:60) para dar ester etflico del acido 5-morfolin-4-ilmetil-benzofuran-2-carboxflico (1,2 g, rendimiento del 61 %): 1H RMN (CDCl3) 51,43 (t, J = 6,9 Hz, 3H), 2,45 (t, J = 4,5 Hz, 4H), 3,58 (s, 2H), 3,71 (t, J = 4,5 Hz, 4H), 4,41-4,48 (c, J = 6,9 Hz, 2H), 7,42­ 7,45 (dd, J = 1,8 y 8,7 Hz, 1H), 7,49 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 7,52 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,61 (d, J = 0,9 Hz, 1H).
Etapa 4: Una solucion de LiAlH4/THF (1 M, 8 ml, 8,0 mmol) en THF (10 ml) se enfrio en un bano de hielo a 5 °C. Una solucion de ester etflico del acido 5-morfolin-4-ilmetil-benzofuran-2-carboxflico (1,8 g, 6,2 mmol) en THF (20 ml) se anadio gota a gota a 5-10 °C. Despues de la adicion, la mezcla se agito en un bano de hielo durante 30 minutos. La mezcla de reaccion se inactivo cuidadosamente con Na2CO3 sat. (50 ml) en un bano de hielo y la mezcla se diluyo con CH2Cl2 (50 ml). La capa ac. se extrajo CH2Cl2 (3 x 40 ml) y la solucion combinada de CH2Cl2 se lavo con NaHCO3 sat. (40 ml) y salmuera (40 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, CH3OH:CH2Cl25:95) para dar (5-morfolin-4-ilmetil-benzofuran-2-il)-metanol (1,3 g, rendimiento del 86 %): 1H RMN (CDCl3) 52,45 (t, J = 4,5 Hz, 4H), 2,70 (a, 1H), 3,55 (s, 2H), 3,71 (t, J = 4,8 Hz, 4H), 4,74 (s, 2H), 6,59 (s, 1H), 7,20-7,24 (dd, J = 1,5 y 8,4 Hz, 1H), 7,32 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,47 (d, J = 1,2 Hz, 1H).
Etapa 5: Se anadio lentamente azodicarboxilato de diisopropilo (0,8 g, 4,1 mmol) a una suspension agitada de trifenilfosfina unida a poflmero (3,5 g, 4,4 mmol) en THF (40 ml) a 3-5 °C. Despues de agitarse a 3 °C durante 10 minutos, se anadio lentamente una solucion de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,8 g, 2,7 mmol) y 5-morfolin-4-ilmetil-benzofuran-2-il)-metanol (0,9 g, 3,6 mmol) en THF (60 ml) a 3-6 °C. Despues de agitarse a 3 °C durante 5 minutos, la mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se filtro y el solido se lavo con CH2Cl2 (40 ml). El filtrado se concentro y el residuo se disolvio en CH2Cl2 (100 ml), se lavo con NaHCO3 sat. (40 ml), agua (2 x 30 ml) y salmuera (30 ml), y se seco (K2CO3). El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, CH3OH:CH2Cl2 5:95) para dar 5-amino-4-(4-((5-morfolinometil)benzofuran-2-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,9 g, rendimiento del 64 %): 1H RMN (CDCl3) 52,13-2,47 (m, 8H), 3,57 (s, 2H), 3,63 (s, 3H), 3,70-3,72 (m, 4H), 4,35 (d, J = 17,7 Hz, 1H), 4,44 (d, J = 17,7 Hz, 1H), 4,86-4,91 (d, J = 5,7 y 8,7 Hz, 1H), 5,24 (s, 2H), 5,36 (a, 1H), 6,30 (a, 1H), 6,77 (s, 1H), 7,17-7,19 (dd, J = 1,8 y 6,9 Hz, 1H), 7,28-7,31 (dd, J = 1,5 y 8,4 Hz, 1H), 7,41-7,48 (m, 3H), 7,52 (d, J = 1,2 Hz, 1H).
Etapa 6: Una solucion de t-butoxido potasico/THF (1 M, 1,9 ml, 1,9 mmol) se anadio lentamente a una solucion agitada de 5-amino-4-(4-((5-morfolinometil)benzofuran-2-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,9 g, 1,7 mmol) en THF (25 ml) a 5 °C. La mezcla de reaccion se agito a 5 °C durante 1 h y despues se inactivo con NH 4 Cl sat. (5 ml). La mezcla se agito con CH 2 Cl 2 (50 ml) y agua (15 ml). La capa acuosa se extrajo con CH 2 Cl 2 (30 ml), y la solucion combinada de solucion de CH2O 2 se lavo con salmuera (30 ml) y se seco (K2CO3). El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, CH3OH:CH2Cl2 5:95) para dar 3-(4-((5-morfolinometil)benzofuran-2-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,2 g, rendimiento del 25 %): p.f. 233­ 235 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,95-2,09 (m, 1H), 2,35-2,59 (m, 6H), 2,89-2,92 (m, 1H), 3,54-3,57 (m, 6H), 4,25 (d, J = 15 Hz, 1H), 4,36 (d, J = 18 Hz, 1H), 5,07-5,13 (dd, J = 6 y 12 Hz, 1H), 5,42 (s, 2H), 7,08 (s, 1H), 7,27-7,57 (m, 6H), 10,96 (s, 1H); 13 C RMN (DMSO-de) 522,28, 31,16, 45,03, 51,56, 53,06, 62,32, 62,52, 66,15, 107,05, 110,80, 115,14, 115,66, 121,61, 126,00, 127,48, 129,81, 129,95, 132,58, 133,41, 152,80, 152,95, 153,82, 167,88, 170,93, 172,79; Calc. para C27H27N3O6 1,0 H2O: C, 63,90; H, 5,76; N, 8,28, Observado: C, 63,97; H, 5,40; N, 8,20.
5.17 3-(4-(4-(((2S,6R)-2,6-DIMETILMORFOLIN)METIL) BENCILOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000044_0001
Etapa 1: En un matraz de FR de 250 ml se suspendieron L-glutamina a-terc-butil ester (7,83 g, 32,8 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (11,46 ml, 65,6 mmol) en acetonitrilo (100 ml) a temperatura ambiente. La suspension se agito durante aproximadamente 10 minutos y despues se anadio gota a gota una solucion de 2-(bromometil)-3-(tercbutildimetilsililoxi)benzoato de metilo (11,4 g, 29,8 mmol) en acetonitrilo (20 ml) durante aproximadamente 10 minutos. La mezcla de reaccion se calento en un bano de aceite a un reflujo lento (80 °C) durante 4 horas. La mezcla de reaccion se dejo enfriar a temperatura ambiente durante aproximadamente 1 hora y despues se anadio una solucion de fluoruro de cesio (4,53 g, 29,8 mmol) en agua (15 ml). La mezcla resultante se agito vigorosamente a temperatura ambiente durante aproximadamente 1 hora momento en el que el analisis por LCMS indico que la destilacion estaba completa. La mezcla de reaccion se diluyo con acetonitrilo y se filtro para retirar los solidos sin disolver. Los solidos se lavaron con mas cantidad de acetonitrilo. El filtrado y los lavados (volumen total 200 ml) se diluyeron adicionalmente con EtOAc (300 ml), se transfirieron a un embudo de decantacion de 1 l, y se lavaron con KH2PO4 acuoso 0,5 N (100 ml, pH ~5). A la capa acuosa se le anadio en porciones HCl 1 N (~20 ml, el pH cambio de pH 7-8 a pH -5 usando papel de pH). Se anadieron NaCl (~10 g) y EtoAc (~200 ml) a la capa acuosa. La mezcla se agito vigorosamente en un embudo de decantacion. Las capas organicas se combinaron, se lavaron con salmuera (50 ml), se secaron (Na2SO4), y se concentraron en un evaporador rotatorio para dar 15 g de un solido de color blanquecino. Este solido que contema el producto en bruto se suspendio en acetonitrilo (200 ml) y la suspension se calento en un bano de aceite a reflujo (85 °C) durante 30 minutos con agitacion. La mezcla se dejo enfriar a temperatura ambiente durante 1 hora y despues se maduro a 4 °C durante 2 horas mas. El solido formado se recogio por filtracion por succion. El solido restante en el matraz se transfirio en un embudo con filtro usando algo de MTBE. La torta se lavo con mas cantidad de MTBE (volumen de filtrado total -300 ml), se seco por succion, y despues se puso en un horno de vado a 40 °C durante varias horas para proporcionar 5-amino-2-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de ferc-butilo en forma de un solido de color blanco (7,3 g rendimiento del 72 %, ajustado para la pureza del material de partida y el producto): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 30/70 de acetonitrilo/H3PO4 al 0,1 %, 2,91 min (96,9 %); p.f.: 198-200 °C; 1H RMN (DMSO-d6) 51,39 (s, 9H, tBu), 1,93 - 2,14 (m, 3H, CH2, CHH), 2,15 - 2,33 (m, 1H, CHH), 4,35 (s, 2H, CH2), 4,61 - 4,83 (m, 1H, CH), 6,76 (s a, 1H, NH), 6,97 - 7,07 (m, 1H, Ar), 7,11 -7,20 (m, 1H, Ar), 7,26 (s a, 1H, NH), 7,29 - 7,36 (m, 1H, Ar), 10,10 (s, 1H, OH); 13C RMN (DMSO-d6) 5 24,81, 27,56, 31,44, 44,71, 54,02, 81,38, 113,72, 117,96, 127,99, 129,36, 133,36, 152,50, 168,36, 169,88, 172,94; LCMS MH = 335; Anal calc. para C17H22N2O5 0,19 H2O: C, 60,45; H, 6,68; N, 8,29, Observado: C, 60,44; H, 6,62; N, 8,27.
Etapa 2: En un matraz de FR de 250 ml se suspendieron 5-amino-2-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de ferc-butilo (3 g, 8,79 mmol) y trifenil fosfina en poliestireno (1,6 mmol/g de resina, 10,99 g, 17,59 mmol) en THF (100 ml, 1220 mmol) a temperatura ambiente. La resina se dejo hinchar con agitacion suave durante 5 minutos y despues la mezcla se enfrio en un bano de hielo a 0 °C. A la mezcla se le anadio DIAD (3,42 ml, 17,59 mmol) usando una jeringa de una manera gota a gota rapida. Despues de 10 minutos, se anadio en una porcion (4-(clorometil)fenil)metanol (2,066 g, 13,19 mmol) en forma de un solido. El bano de hielo se retiro y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 6 horas. La resina se filtro por succion y se aclaro en un embudo con filtro con lavados sucesivos de diclorometano y MeOH (2 x, ~50 ml de lavado cada vez). Los filtrados combinados y los lavados se concentraron al vado para dar un jarabe que se repartio entre EtOAc (~300 ml) y agua (~100 ml). La capa organica se lavo con salmuera, se seco (Na2SO4), y se concentro al vado para dar el producto en bruto en forma de un aceite de color castano (~10 g). El aceite se purifico en una columna ultrarrapida de SiO2 (CombiFlash, columna prerrellenada de 330 g de SiO2, MeOH del 0 % al 5 % en gradiente de diclorometano) para dar 5-amino-2-(4-(4-(clorometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de terc-butilo en forma de una espuma de color blanco que se trituro en un polvo fino (3,6 g, rendimiento del 87 %); 1H RMN (DMSO-d6) 51,39 (s, 9h , tBu), 2,00 -2,14 (m, 3H, CHH, CH2), 2,14 - 2,35 (m, 1H, CHH), 4,43 (s, 2H, CH2), 4,70 (dd, J = 4,7, 10,4 Hz, 1H, CH), 4,78 (s, 2H, CH2), 5,27 (s, 2H, CH2), 6,66 - 6,83 (m, 1H, NH), 7,18 - 7,28 (m, 1H, NH), 7,29 (d, J = 2,3 Hz, 1H, Ar), 7,32 (d, J = 2,6 Hz, 1H, Ar), 7,40 - 7,58 (m, 5H, Ar); 13C RMN (DMSO-d6) 524,69, 27,56, 31,50, 44,78, 45,83, 54,08, 69,13, 81,41, 114,91, 115,26, 127,92, 129,00, 129,73, 130,03, 133,31, 136,78, 137,38, 153,35, 168,09, 169,85, 172,93.
Etapa 3: A una solucion de 5-amino-2-(4-(4-(clorometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de fe/c-butilo (250 mg, 0,529 mmol) en acetonitrilo (10 ml), se le anadieron (2s,6R)-2,6-dimetilmorfolina (183 mg, 1,586 mmol) y DIEA (0,138 ml, 0,793 mmol). La mezcla resultante se agito a 60 °C durante 3 horas. La mezcla de reaccion se concentro al vado y se seco adicionalmente en un horno de vado para dar 5-amino-2-(4-(4-(((2S,6R)-2,6-dimetilmorfolino)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de ferc-butilo en forma de un solido vfireo transparente (360 mg). LCMS Mh = 552. El solido se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional
Etapa 4: Se recogio 5-amino-2-(4-(4-(((2S,6R)-2,6-dimetilmorfolino)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de ferc-butilo (0,528 mmol, se asume un rendimiento teorico de la etapa anterior) en THF seco (5 ml). A la solucion agitada a temperatura ambiente, se anadio gota a gota KOfBu (0,581 ml, 0,581 mmol, 1,0 M en THF). La mezcla resultante (solucion transparente de color amarillo palido) se agito durante 1 hora a temperatura ambiente. Se anadieron 1,1 equiv. de KOfBu (0,581 ml, 0,581 mmol, THF 1,0 M) y la mezcla se agito durante 1 hora mas (el analisis por LCMS indico que la reaccion estaba completa). La mezcla de reaccion se enfrio en hielo y despues se transfirio en porciones en un matraz con acido formico 2 M en MeCN (50 ml). La mezcla de reaccion en bruto se concentro al vado para dar un residuo oleoso que se disolvio en una mezcla de agua mmima/DMF (~2 ml/8 ml) y se filtro, y el filtrado que contema el producto en bruto se purifico por inyeccion en una columna para HPLC preparativa C-18. El producto se eluyo con un gradiente de acetonitrilo/agua (acido formico al 0,1 % en ambas fases moviles, MeCN del 5 al 30 % durante 12 minutos) y las fracciones se recogieron por activacion de masas. Las fracciones deseadas se combinaron y se concentraron al vado para dar 3-(4-(4-(((2S,6R)-2,6-dimetilmorfolino)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (55 mg, rendimiento del 22 % durante la etapa 3 y la etapa 4): HPLC: Waters Symmetry C1s, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, grad. del 5 % al 95 % en 10 min, acetonitrilo/HsPO4 al 0,1 %, 5,84 min (95,6 %); p.f.: 164-166 °C; 1H RMN (DMSO-de) 51,00 (s, 3H, CH3), 1,02 (s, 3H, CH3), 1,52 - 1,74 (m, 2H, CHH, CHH), 1,88 - 2,12 (m, 1H, CHH), 2,32 -2,47 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,62 (m, 1H, CHH), 2,62 - 2,71 (m, 2H, CHH, CHH), 2,83 - 3,03 (m, 1H, CHH), 3,44 (s, 2H, CH2N), 3,48 - 3,63 (m, 2H, 2X CH), 4,25 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 4,42 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CH), 5,23 (s, 2H, C H2O), 7,20 - 7,39 (m, 4H, Ar), 7,39 - 7,59 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-de) 518,93, 22,33, 31,18, 45,06, 51,55, 58,89, 61,66, 69,39, 70,94, 114,96, 115,22, 127,63, 128,95, 129,80, 129,92, 133,30, 135,25, 137,69, 153,49, 167,99, 170,96, 172,81; LCMS MH = 478; Anal calc. para C27H31N3O5 0,34 H2O: C, 67,05; H, 6,60; N, 8,69; H2O, 1,27, Observado: C, 67,20; H, 6,63; N, 8,52; H2O, 1,27.
5.18 3-(1-OXO-4-((5-(PIPERIDIN-1-IL)BENZOFURAN-2-IL)METOXI)ISOINDOLIN-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000045_0001
Etapa 1: Una mezcla de 5-nitrobenzofuran-2-carboxilato de metilo (5,0 g, 21,2 mmol) y Pd al 10 %/C (05, g) en EtOAc (300 ml) se hidrogeno a 50 psi (344,74 kPa) durante una noche. La mezcla de reaccion se filtro a traves de celite y se lavo con EtOAc (100 ml). El filtrado se concentro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, EtOAc:Hexano, 4:6) para dar 5-aminobenzofuran-2-carboxilato de etilo (4,5 g, rendimiento del 100 %): 1H RMN (CDCb) 51,41 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 3,68 (a, 2H), 4,38-4,45 (c, J = 7,2 Hz, 2H), 6,80-6,84 (dd, J = 2,4 y 9,0 Hz, 1H), 6,88 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 7,35-7,36 (d, J = 3,3 Hz, 1H), 7,38 (s, 1H).
Etapa 2: Se anadio N,N-diisopropiletilamina (3,8 g, 29,2 mmol) a una solucion agitada de 5-aminobenzofuran-2-carboxilato de etilo (2,5 g, 12,2 mmol) y 1,5-dibromopentano (5,0 g, 21,9 mmol) en tolueno (40 ml). La mezcla resultante se calento en un bano de aceite a 110 °C durante una noche. La mezcla de reaccion se enfrio a temperatura ambiente, se filtro y el solido se lavo con tolueno (25 ml). El filtrado se concentro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, EtOAc:Hexano, 1:9) para dar 5-piperidin-1-il-benzofuran-2-carboxilato de etilo (3,0 g, 89 %); 1H RMN (CDCb) 51,42 (t, J = 6,2 Hz, 3H), 1,53-1,61 (m, 2H), 1,71-1,79 (m, 4H), 3,09-3,13 (t, J = 5,4 Hz, 4H), 4,394,46 (c, J = 6,9 Hz, 2H), 7,09-7,10 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 7,15-7,19 (dd, J = 2,7 y 9,3 Hz, 1H), 7,42-7,46 (m, 2H).
Etapa 3: Una solution de UAIH4/THF (1 M, 11 ml, 11 mmol) en THF (10 ml) se enfrio a 3 °C. Una solution de 5-piperidin-1-il-benzofuran-2-carboxilato de etilo (2,9 g, 10,7 mmol) en THF (30 ml) se anadio lentamente a 3-10 °C. La mezcla de reaction se agito a 3 °C durante 30 minutos y despues se inactivo con Na 2 CO 3 sat. (50 ml). La mezcla se agito con CH 2 Cl 2 (50 ml) y la capa acuosa se extrajo con c H 2 CI 2 (3 x 40 ml). La solucion combinada de CH 2 Cl 2 se lavo con NaHCO 3 sat. (40 ml) y salmuera (40 ml), y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO 2 , EtOAc:CH 2 Cl 2 3:7) para dar (5-piperidin-1-il-benzofuran-2-il)-metanol (2,4 g, rendimiento del 95 %): 1 H RMN (CDCl 3 ) 51,23-1,27 (m, 2H), 1,54-1,60 (m, 4H), 2,82 (a, 1H), 3,07 (t, J = 6,0 Hz, 4H), 4,68 (s, 2H), 6,45 (s, 1H), 6,95-7,00 (m, 2H), 7,29 (d, J = 9,0 Hz, 1H); 13 C RMN (CDCl 3 ) 524,20, 26,14, 53,10, 58,11, 104,20, 108,83, 111,19, 117,01, 128,53, 149,07, 150,30, 156,94.
Etapa 4: Se anadio lentamente azodicarboxilato de diisopropilo (0,8 g, 4,1 mmol) a una suspension agitada de trifenilfosfina unida a polimero (3,5 g, 4,4 mmol) en THF (40 ml) a 3-6 °C. Despues de agitarse a 3 °C durante 10 minutos, se anadio lentamente una solucion de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,8 g, 2,7 mmol) y (5-piperidin-1-il-benzofuran-2-il)-metanol (0,8 g, 3,6 mmol) en THF (60 ml) a 3-6 °C. Despues de agitarse a 3 °C durante 10 minutos, la mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se filtro y el solido se lavo con CH2CI2 (30 ml). El filtrado se concentro y el residuo se disolvio en CH2CI2 (80 ml) y se lavo con NaHCO 3 sat. (40 ml), agua (2 x 35 ml) y salmuera (35 ml), y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, c H 3 OH:CH2CI23:97) para dar 5-amino-5-oxo-4-(1-oxo-4-((5-piperidin-1-il)benzofuran-2-il)metoxi)isoindolin-2-il)pentanoato de metilo (0,7 g, rendimiento del 51 %): 1 H RMN (CdC| 3 ) 51,55­ 1,59 (m, 2H), 1,72-1,77 (m, 4H), 2,31-2,39 (m, 4H), 3,08-3,11 (m, 4H), 4,40 (d, J = 18 Hz, 1H), 4,44 (d, J = 18 Hz, 1H), 4,87-4,92 (dd, J = 6,0 y 9,0 Hz, 1H), 5,21 (s, 2H), 5,49 (s, 1H), 6,38 (s, 1H), 6,71 (s, 1H), 7,02-7,18 (m, 3H), 7,36-7,46 (m, 2H).
Etapa 5: Una solucion de t-butoxido potasico/THF (1 M, 1,5 ml, 1,5 mmol) se anadio lentamente a una solucion agitada de 5-amino-5-oxo-4-(1-oxo-4-((5-piperidin-1-il)benzofuran-2-il)metoxi)isoindolin-2-il)pentanoato de metilo (0,6 g, 1,2 mmol) en THF (20 ml) a 5 °C, se agito durante 30 minutos y despues se inactivo con NH 4 Cl sat. (5 ml). La mezcla se agito con Ch 2 CI 2 (50 ml) y agua (15 ml). La capa acuosa se extrajo con CH 2 Cl 2 (30 ml) y la solucion combinada de CH 2 Cl 2 se lavo con agua (30 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO 2 , CH 3 OH:CH 2 Cl 2 3:97) para dar 3-(1-oxo-4-((5-(piperidin-1-il)benzofuran-2-il)metoxi)isoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,3 g, rendimiento del 43 %): p.f. 242-244 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,09 (m,2H), 1,50-1,64 (m, 4H), 1,90-2,02 (m, 2H), 2,49-2,51 (m, 2H), 2,80-2,95 (m, 1H), 3,03-3,07 (m, 4H), 4,25 (d, J = 17,7 Hz, 1H), 4,35 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 5,05-5,15 (m, 1H), 5,37 (s, 2H), 6,97-7,09 (m, 3H), 7,35-7,51 (m, 4H), 10,96 (s, 1H); 13 C RMN (DMSO-de) 5 22,28, 23,78, 25,53, 31,16, 45,04, 51,51, 62,61, 107,29, 107,71, 111,12, 115,15, 116,69, 127,96, 129,78, 129,95, 133,40, 148,89, 149,23, 152,57, 152,99, 167,88, 170,93, 172,70; Calc. para C27H27N 3 O 3 + 0,2 H2O: C, 67,97; H, 5,79; N, 8,81, Observado: C, 67,88; H, 5,75; N, 8,62.
5.19 FORMATO DE 4-AMINO-1-{4-[2-(2,6-DIOXO-PIPERIDIN-3-IL)-1-OXO-2,3-DIHIDRO-1H-ISOINDOL-4-ILOXIMETIL]-BENCIL}-PIRIDINIO
Figure imgf000046_0001
Se anadio piridin-4-amina (0,82 g, 8,70 mmol) a una solucion agitada de 5-amino-4-(4-(4-(clorometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,75 g, 1,74 mmol) en DMF (15 ml) a 50 °C durante tres horas. A la mezcla se le anadio carbonato potasico (0,24 g, 1,74 mmol), y la mezcla se calento a 75 °C durante cinco horas. La mezcla se purifico por HPLC preparativa para dar formiato de 4-amino-1-{4-[2-(2,6-dioxo-piperidin-3-il)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-bencil}-piridinio en forma de un solido de color pardo (0,20 g, rendimiento del 26 %); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 95/5 en 5 min, isocratica a 95/5 en 5 min (acetonitrilo/H3PO4 al 0,1 %): 5,00 min (99,1 %); p.f.: 300-302 °C; 1H RMN (DMSO-d6) 5 1,92 - 2,05 (m, 1H, CHH), 2,35 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,54 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,83 - 3,00 (m, 1H, CHH), 4,19 - 4,47 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,26 (s, 2H, NH2 o CH2), 5,36 (s, 2H, CH2 o NH2), 6,86 (d, J = 7,4 Hz, 2H, CH2), 7,27 - 7,58 (m, 7H, Ar), 8,22 - 8,43 (m, 4H, Ar), 11,00 (s a, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-d6) 5 22,35, 31,15, 45,09, 51,58, 59,39, 69,00, 109,56, 115,00, 115,36, 128,12, 128,32, 129,85, 129,94, 133,29, 135,35, 137,21, 142,93, 153,31, 158,57, 158,67, 168,02, 170,89, 172,80; LCMS M = 457; Anal. Calc. para C26H25N4O4 HCOO: C, 64,53; H, 5,22; N, 11,15; Observado: C, 56,18; H, 5,07; N, 10,01.
5.20 3-(1-OXO-4-((5-PIPERIDIN-1-ILMETIL)BENZOFURAN-2-IL)METOXI)ISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000047_0001
Etapa 1: Se anadio piperidina (1,2 g, 14,1 mmol) a una solucion agitada de 5-formilbenzofuran-2-carboxilato de etilo (1,5 g, 6,9 mmol) en metanol (60 ml). Se anadio tamiz molecular (1,5 g) seguido de acido acetico (0,4 g, 6,9 mmol) y cianoborohidruro sodico (0,7 g, 10,3 mmol). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 3 horas. La mezcla se filtro y el solido se lavo con metanol (40 ml). El filtrado se concentro y el residuo se disolvio en EtOAc (100 ml) y se lavo con NaHCO 3 sat. (35 ml) y salmuera (35 ml), y se seco (K 2 CO 3 ). El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO 2 , CH 3 OH:CH 2 Cl 2 3:97) para dar ester etflico del acido 5-piperidin-1-ilmetilbenzofuran-2-carboxflico (1,0 g, rendimiento del 49 %): 1 H RMN (CDCl 3 ) 51,40-1,48 (m, 3H), 1,57-1,64 (m, 4H), 2,44 (a, 1H), 3,60 (s, 2H), 3,97-3,98 (m, 2H), 4,40-4,47 (c, 2H), 7,40-7,63 (m, 4H).
Etapa 2: Una solucion de ester etflico del acido 5-piperidin-1-ilmetil-benzofuran-2-carboxflico (1,0 g, 3,4 mmol) en THF (15 ml) se anadio lentamente a una solucion agitada de UAIH4/THF (1 M, 4,4 ml, 4,4 mmol) en THF (10 ml) a 5­ 8 °C. Despues de la adicion, la mezcla se agito a 5 °C durante 30 minutos y despues se inactivo con Na 2 CO 3 sat. (50 ml). La mezcla se agito con CH 2 Cl 2 (50 ml) y la capa acuosa se extrajo con CH 2 Cl 2 (2 x 30 ml). La solucion combinada de CH 2 Cl 2 se lavo con NaHCO 3 sat. (30 ml) y salmuera (30 ml), y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO 2 , CH 3 OH:CH 2 Cl 2 3:97) para dar (5-piperidin-1-ilmetil-benzofuran-2-il)-metanol (0,5 g, rendimiento del 63 %): 1 H RMN (CDCl 3 ) 51,45-1,46 (m, 2H), 1,55-1,62 (m, 4H), 2,40 (s, 4H), 3,46 (s, 1H), 3,52 (s, 2H), 4,71 (s, 2H), 6,55 (s, 1H), 7,20 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,26 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,45 (s, 1H).
Etapa 3: Se anadio lentamente azodicarboxilato de diisopropilo (0,6 g, 3,1 mmol) a una suspension agitada de trifenilfosfina unida a poflmero (2,5 g, 3,1 mmol) en THF (40 ml) a 3-5 °C. Despues de agitarse a 3 °C durante 10 minutos, se anadio lentamente una solucion de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,6 g, 2,0 mmol) y (5-piperidin-1-ilmetil-benzofuran-2-il)-metanol (0,5 g, 2,0 mmol) en THF (40 ml) a 3-6 °C. La mezcla de reaccion se agito a 3 °C durante 5 minutos y despues se calento a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se filtro y el solido se lavo con Ch2CI2 (40 ml). El filtrado se concentro y el residuo se disolvio en CH 2 Cl 2 (100 ml) y se lavo con NaHCO 3 sat. (30 ml), agua (30 ml) y salmuera (30 ml), y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO 2 , CH 3 OH:CH 2 Cl 2 3:97) para dar 5-amino-5-oxo-4-(1-oxo-4-((5-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-2-il)metoxi)isoindolin-2-il)pentanoato de metilo (0,6 g, rendimiento del 56 %): 1 H RMN (CDCl 3 ) 51,42-1,46 (m, 2H), 1,53-1,60 (m, 4H), 2,12-2,45 (m, 8H), 3,55 (s, 2H), 3,62 (s, 3H), 4,40 (d, J = 17,7 Hz, 1H), 4,44 (d, J = 17,7 Hz, 1H), 4,87-4,92 (dd, J = 5,7 y 8,7 Hz, 1H), 5,23 (s, 2H), 5,47 (s, 1H), 6,40 (s, 1H), 6,77 (s, 1H), 7,15-7,18 (dd, J = 2,1 y 6,6 Hz, 1H), 7,26-7,32 (m, 1H), 7,40-7,51 (m, 4H).
Etapa 4: Una mezcla de 5-amino-5-oxo-4-(1-oxo-4-((5-piperidin-1-ilmetil)benzofuran-2-il)metoxi)isoindolin-2-il)pentanoato de metilo (0,6 g, 1,1 mmol) y K 2 CO 3 (0,2 g, 1,1 mmol) en DMF (10 ml) se calento en un bano de aceite a 80 °C durante 3 horas. La mezcla de reaccion se concentro y el residuo se agito con agua (10 ml) y EtOAc (10 ml). El solido se recogio y se suspendio de nuevo en acetona (10 ml) y hexano (10 ml) para dar 3-(1-oxo-4-((5-piperidin-1-ilmetil)benzofuran-2-il)metoxi)isoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,2 g, rendimiento del 50 %): p.f. 202-204 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,46-1,47 (m, 6H), 1,96-2,00 (m, 1H), 2,31-2,58 (m, 6H), 2,84-2,96 (m, 1H), 3,48 (s, 2H), 4,25 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 4,35 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 5,06-5,13 (dd, J = 5,1 y 13,2 Hz, 1H), 5,41 (s, 2H), 7,07 (s, 1H), 7,23-7,27 (dd, J = 1,5 y 8,4 Hz, 1H), 7,34-7,37 (dd, J = 0,9 y 6,9 Hz, 1H), 7,46-7,53 (m, 4H), 10,96 (s, 1H); 13 C RMN (DMSO-de) 5 22,25, 23,98, 25,50, 31,16, 45,03, 51,55, 53,74, 62,55, 62,70, 107,05, 110,68, 115,13, 115,65, 121,39, 125,89, 127,42, 129,81, 129,94, 133,41, 152,72, 152,97, 153,74, 167,88, 170,93, 172,79; Calc. para C2sH29N 3 O5: C, 68,98; H, 6,00; N, 8,62, Observado: C, 68,67; H, 6,03; N, 8,53.
5.21 4-(4-((2-(2,6-DIOXOPIPERIDIN-3-IL)-1-OXOISOINDOLIN-4-ILOXI)METIL)FENIL) PIPERIDIN-1-CARBOXILATO DE TERC-BUTILO
Figure imgf000047_0002
Etapa 1: Se anadio gota a gota BH3 THF (2,88 ml, 2,88 mmol, 1,0 M en THF) a una solucion de acido 4-(1-(tercbutoxicarbonil)piperidin-4-il)benzoico (800 mg, 2,62 mmol) en THF (10 ml) a 0 °C. Despues de 15 minutos, el bano de hielo se retiro y la solucion transparente se dejo en agitacion durante una noche (~17 horas). La mezcla de reaccion se enfrio en un bano de hielo y se inactivo con H2O (25 ml). Se anadio EtOAc (100 ml) y la mezcla se lavo con NaHCO31 N (~40 ml) y salmuera, se seco (Na2SO4), y se concentro al vado. El residuo oleoso se disolvio en diclorometano, se concentro de nuevo y despues se seco en un horno de vado a 40 °C para dar 4-(4-(hidroximetil)fenil)piperidin-1-carboxilato de terc-butilo en forma de un aceite transparente (707 mg, rendimiento del 93 %). El aceite solidifico despues de un periodo de reposo y se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
LCMS MH = 292, 218; 1 H RMN (CLOROFORMO-d) 51,48 (s, 9H, tBu), 1,56 - 1,72 (m, 3H, CHH, CHH, OH), 1,75 -1,89 (m, 2H, CHH, CHH), 2,53 - 2,71 (m, 1H, CH), 2,73 - 2,92 (m, 2H, CHH, CHH), 4,17 - 4,32 (m, 2H, CHH, CHH), 4,67 (d, J = 5,9 Hz, 2H, CH2), 7,21 (d, J = 8,1 Hz, 2H, Ar), 7,32 (d, J = 8,3 Hz, 2H, Ar); 13 C RMN (CLOROFORMO-d) 5 28,50, 33,22, 42,49, 65,21, 77,22, 79,47, 127,02, 127,34, 138,96, 145,40. No se observo senal de carbamato carbono.
Etapa 2: A una solucion de 5-amino-2-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de terc-butilo (0,7 g, 1,96 mmol) en THF (25 ml), se le anadio trifenil fosfina en poliestireno (1,6 g/mmol, 1,845 g, 2,95 mmol). La resina se dejo hinchar durante varios minutos a temperatura ambiente, y despues la mezcla de reaccion se enfrio en un bano de hielo a 0 °C. Se anadio gota a gota DIAD (0,574 ml, 2,95 mmol) mientras se agitaba. Despues de aproximadamente 15 minutos, se anadio 4-(4-(hidroximetil)fenil)piperidin-1-carboxilato de terc-butilo (0,70 g, 2,40 mmol) en forma de una solucion en THF seco (5 ml). Despues de aproximadamente 10 minutos, el bano de hielo se retiro y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 48 horas. La mezcla de reaccion se filtro con succion y la resina se lavo sucesivamente con diclorometano y despues MeOH (3 x ciclos expansion/retraccion). Despues del lavado final de MeOH, el filtrado combinado se concentro al vado. El residuo oleoso se repartio entre EtOAc (~200 ml) y Na 2 CO 3 (sat. -70 ml). La capa de EtOAc se lavo con salmuera, se seco (Na 2 SO 4 ), y se concentro al vado para dar una espuma que se almaceno en un horno de vado a 40 °C durante una noche para proporcionar 4-(4-((2-(5-amino-1-terc-butoxi-1,5-dioxopentan-2-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)fenil)piperidin-1-carboxilato) de terc-butilo (1,9 g, se asumio un rendimiento teorico). La espuma obtenida se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 3: Se anadio gota a gota KO/Bu (0,722 ml, 0,722 mmol, 1,0 M en THF) a una solucion de 4-(4-((2-(5-amino-1-terc-butoxi-1,5-dioxopentan-2-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)fenil)piperidin-1-carboxilato de terc-butilo (400 mg, 0,408 mmol) en THF seco (5 ml) a temperatura ambiente. Se anadio mas cantidad de KO/Bu (0,722 ml, 0,722 mmol) a la mezcla de reaccion despues de 2,5 horas y la agitacion continuo a temperatura ambiente. Despues de aproximadamente 20 minutos, la mezcla se transfirio a HCl ac. 0,5 N enfriado (~50 ml). Se anadio EtOAc (250 ml) y la mezcla se transfirio a un embudo de decantacion. La capa de EtOAc se lavo con salmuera, se seco (Na 2 SO 4 ), y se concentro al vado y el residuo se seco adicionalmente en un horno de vado para dar 380 mg de un aceite de color castano. El producto en bruto se disolvio en DMF minima (~10 ml) y se purifico por inyeccion sobre una columna para HPLC preparativa C-18. El producto se eluyo con un gradiente de acetonitrilo/agua (acido formico al 0,1 % en ambas fases moviles, MeCN del 30 al 80 % durante 20 minutos) y las fracciones se recogieron por activacion de masas. Las fracciones deseadas se combinaron y se concentraron al vado para dar 4-(4-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)fenil)piperidin-1-carboxilato de terc-butilo en forma de un solido de color blanco (84 mg, rendimiento del 39 % para la etapa 2 y la etapa 3): HPLC: Waters Symmetry C 13 , 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 60/40 de acetonitrilo/H 3 PO 4 al 0,1 %, 4,76 min (98,7 %); p.f.: 214-216 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,29 - 1,44 (m, 9H, tBu), 1,44 - 1,58 (m, 2H, 2 x CHH), 1,72 (s a, 2H, CHH, CHH), 1,87 - 2,08 (m, 1H, CHH), 2,35 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,52 - 2,99 (m, 5H, 5 x CHH), 3,89 - 4,14 (m, 2H, 2 x CHH), 4,24 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,40 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 5,10 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CH), 5,20 (s, 2H, CH2), 7,18 - 7,37 (m, 4H, Ar), 7,37 - 7,55 (m, 3H, Ar), 10,96 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 522,33, 28,07, 31,18, 32,66, 41,35, 43,89, 45,06, 51,55, 69,35, 78,53, 114,90, 115,16, 126,81, 127,95, 129,78, 129,92, 133,28, 134,39, 145,62, 153,48, 153,86, 167,99, 170,97, 172,84; LCMS MH = 534; Anal calc. para C30H35N 3 O6 1,5 H2O: C, 64,27; H, 6,83; N, 7,49, Observado: C, 64,22; H, 6,72; N, 7,36.
5.22 HIDROGENOCLORURO DE 3-(1-OXO-4-(4-(PIPERIDIN-4-IL)BENCILOXI) ISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000048_0001
Se anadio HCl 2 N (10 ml, 20,00 mmol) en Et2O a 4-(4-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)fenil)piperidin-1-carboxilato de terc-butilo (54 mg, 0,101 mmol). El matraz de reaccion se sonico para aflojar el solido que se adhiere en el lado del matraz y la suspension resultante se cerro hermeticamente y se agito a temperatura ambiente. Despues de aproximadamente 4 horas, el analisis por LCMS indico que la reaccion estaba completa. La mezcla de reaccion se diluyo con mas cantidad de Et2O y despues se filtro a traves de un embudo sinterizado con succion. El solido restante en el matraz de reaccion se transfirio a un embudo y se lavo con mas cantidad de Et2O. La torta se seco en horno de vado a 40 °C para proporcionar clorhidrato de 3-(1-oxo-4-(4-(piperidin-4-il)benciloxi)isoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de una sal clorhidrato solida mullida de color blanquecino (47 mg, rendimiento del 99 %): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 20/80 acetonitrilo/H3PO4 al 0,1 %, 3,62 min (96,0 %); p.f.: 280-282 °C; 1H RMN (DMSO-d6) 1,67 - 2,12 (m, 5H, 5 x CHH), 2,32 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,52 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,76 - 3,08 (m, 4H, 4 x CHH), 3,26 - 3,46 (m, 2H, 2 x CHH), 4,24 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,41 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CH), 5,22 (s, 2H, C H2O), 7,26 (d, J = 8,1 Hz, 2H, Ar), 7,33 (d, J = 7,7 Hz, 2H, Ar), 7,40 - 7,54 (m, 3H, Ar), 8,48 - 9,01 (m, 2H, 2 x NH), 10,96 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-d6) 22,34, 29,30, 31,18, 43,48, 45,03, 51,55, 69,28, 114,94, 115,22, 126,61, 128,08, 129,80, 129,92, 133,28, 134,86, 144,42, 153,45, 167,97, 170,96, 172,81. No se observo 1 senal de carbono debido al solapamiento con DMSO-d6; LCMS MH = 434; Anal calc. para C25H27N3O4 2 HCl 1,7 H2O: C, 55,91; H, 6,08; N, 7,82, Observado: C, 55,84; H, 5,82; N, 7,70.
5.23 3-{4-[4-(3-MORFOLIN-4-IL-PROPIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000049_0001
Etapa 1: Se anadio (trifenilfosforanilideno)acetalde^do (500 mg, 1,64 mmol) a la solucion agitada de 4-formilbenzoato de metilo (2,0 g, 12,18 mmol) en tetrahidrofurano (50 ml). La mezcla de reaccion se calento a reflujo durante dos horas antes de anadir (trifenilfosforanilideno)acetalde^do (500 mg, 1,64 mmol) a la mezcla de reaccion. La mezcla de reaccion se mantuvo a reflujo durante 21 horas y despues se anadio (trifenil fosforanilideno)acetaldehido (3,5 g, 11,45 mmol) a la mezcla de reaccion que se mantuvo a reflujo durante 8 horas. La mezcla de reaccion se diluyo por EtOAc (80 ml) y despues se lavo mediante NH4Cl (sat., 40 ml), agua (40 ml) y salmuera (40 ml) respectivamente. La capa organica se seco por MgSO4 y se concentro para dar un solido oscuro. El solido oscuro se suspendio en eter dietflico (50 ml) y se filtro a traves de celite y el solido se lavo mediante eter dietflico (50 ml x 3). El filtrado se concentro y se purifico por cromatografia sobre sflice para dar ester metflico del acido 4-(3-Oxo-propenil)-benzoico en forma de un solido de color blanquecino (1,04 g, rendimiento del 33 %); LCMS MH = 191; 1H RMN (DMSO-de) 53,88 (s, 3H, CH3), 6,97 (dd, J = 7,6, 16,0 Hz, 1H, CH), 7,82 (d, J = 16,1 Hz, 1H, CH), 7,90 (d, J = 8,5 Hz, 2H, Ar), 8,02 (d, J = 8,3 Hz, 2H, Ar), 9,72 (d, J = 7,6 Hz, 1H, CHO).
Etapa 2: Se anadio morfolina (0,715 ml, 8,20 mmol) a la solucion agitada de 4-(3-oxoprop-1-enil)benzoato de (E)-metilo (520 mg, 2,73 mmol). La solucion transparente se anadio mediante tamices moleculares (2,2 g) y acido acetico (0,157 ml, 2,73 mmol). Treinta minutos mas tarde, se anadio cianoborohidruro sodico (258 mg, 4,10 mmol) a la suspension de reaccion de color amarillo anterior. La reaccion se completo en 15 minutos a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion combinada con otro lote de reaccion iniciada con 4-(3-oxoprop-1-enil)benzoato) de (E)-metilo (512 mg) se anadio mediante agua (2 ml) y se agito durante 10 minutos antes de filtrarse a traves de celite. El filtrado se concentro y se purifico por cromatografia ISCO para dar ester mefilico del acido 4-(3-Morfolin-4-il-propenil)-benzoico en forma de un fiquido de color amarillo (550 mg, rendimiento del 39 %); LCMS MH = 262.
Etapa 3: Se anadio paladio sobre carbono (120 mg, 0,056 mmol) a la solucion agitada de 4-(3-morfolinoprop-1-enil)benzoato de (E)-metilo (710 mg, 2,72 mmol) en MeOH (20 ml). El matraz de reaccion se cerro hermeticamente y se sometio a vado. La reaccion cargada con H2 (1 atm) se agito a temperatura ambiente y la reaccion se completo en 1 hora. La mezcla de reaccion combinada con otro lote de reaccion iniciada con 4-(3-morfolinoprop-1-enil)benzoato de (E)-metilo (50 mg) se filtro a traves de celite. Y el solido se lavo mediante MeOH (20 ml x 3). El filtrado se concentro y se purifico por cromatografia ISCO para dar ester mefilico del acido 4-(3-Morfolin-4-il-propil)-benzoico en forma de un solido transparente (690 mg, rendimiento del 90 %) y el compuesto se puso en la siguiente etapa sin purificacion adicional; LCMS MH = 264.
Etapa 4: Se anadio gota a gota LiAlH4 (1,3 ml, 2,62 mmol) en solucion de THF (2 M) a la solucion agitada de 4-(3-morfolinopropil)benzoato de metilo (690 mg, 2,62 mmol) en tetrahidrofurano (25 ml) por debajo de -78 °C. La mezcla de reaccion se agito por debajo de - 78 °C durante 30 minutos y despues se dejo a 0 °C lentamente. Dos horas mas tarde, la mezcla de reaccion se enfrio a -78 °C y se anadieron 1,3 ml de LiAlH4 (2 M en THF) a la mezcla de reaccion. Y el bano de refrigeracion se retiro despues de la adicion y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 1 hora, y la reaccion se completo. A la mezcla de reaccion, se le anadieron NaOH(0,6 ml, 10 N) y agua (0,4 ml). La suspension resultante se agito a temperatura ambiente durante 20 minutos antes de filtrarse a traves de celite. El solido se lavo por EtOAc (40 ml x 4) y se concentro al vado para dar [4-(3-morfolin-4-il-propil)-fenil]-metanol en forma de un aceite transparente (600 mg, rendimiento en bruto del 97 %) que se uso sin purificacion adicional; LCMS MH = 236.
Etapa 5: Se anadio PPh3 unido a pofimero (727 mg, 2,77 mmol, 1,6 mmol/g) a la suspension agitada de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (450 mg, 1,540 mmol) en THF (17 ml) a 0 °C. La mezcla de reaccion se agito a 0 °C durante 20 minutos antes de anadir gota a gota DIAD (0,539 ml, 2,77 mmol). La mezcla de reaccion resultante se agito durante 20 minutos, y se anadio a la mezcla (4-(3-morfolinopropil) fenil)metanol (471 mg, 2,001 mmol) en THF(3 ml). Treinta minutos mas tarde, el bano de hielo se retiro y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 2 horas antes de detener el avance de la reaccion. La mezcla de reaccion combinada con otro lote de reaccion iniciada con 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (100 mg) se filtro y se lavo con diclorometano (25 ml x 6). El filtrado se concentro y se purifico por cromatografia ISCO para dar ester mefilico del acido 4-Carbamoil-4-{4-[4-(3-morfolin-4-il-propil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-bufirico en forma de un solido de tipo vidrio (450 mg, rendimiento del 47 %); LCMS MH = 510; 1H RMN (DMSO-de) d 1,72 (quin, J = 7,5 Hz, 2H, CH2), 2,00 - 2,21 (m, 2H, CHH, CHH), 2,21 - 2,40 (m, 8H, CH2, CH2, CH2, CH2), 2,60 (t, J = 7,6 Hz, 2H, CH2), 3,50 (s, 3H, CH3), 3,52 - 3,62 (m, 4H, CH2, CH2), 4,31 - 4,45 (m, 1H, CHH), 4,45 - 4,61 (m, 1H, CHH), 4,72 (dd, J = 4,7, 10,2 Hz, 1H, CHH), 5,20 (s, 2H, CH2), 7,11 - 7,32 (m, 5H, Ar, NH), 7,35 - 7,49 (m, 3H, Ar), 7,58 (s, 1H, NH).
Etapa 6: A la solution agitada de 5-amino-4-(4-(4-(3-morfolinopropil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (400 mg, 0,785 mmol) en tetrahidrofurano (18 ml) a 0 °C, se le anadio 2-metilpropan-2-olato potasico (88 mg, 0,785 mmol). La mezcla se agito a 0 °C durante 1,5 horas y la reaction se completo. La mezcla de reaction fria se diluyo por EtOAc (30 ml), seguido de la adicion de HCl (ac., 1 N, 1 ml), NaHCO3 (sat. 0,6 ml) y salmuera (3 ml). La mezcla se extrajo y la capa organica se lavo mediante salmuera (5 ml). La capa organica se combino con la capa organica de otro lote de la mezcla de reaccion iniciada con 5-amino-4-(4-(4-(3-morfolinopropil) benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (50 mg). La mezcla se seco por MgSO 4 y se concentro para dar un solido (460 mg). El solido se trituro en eter (15 ml) para dar 3-{4-[4-(3-Morfolin-4-il-propil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (165 mg, rendimiento del 41 %). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 20/80, (acetonitrilo/H3PO 4 al 0,1 %), 4,0 min (97 %); p.f.: 190-192 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 5 1,71 (quin, J = 7,5 Hz, 2H, CH2), 1,91 - 2,04 (m, 1H, CHH), 2,21 -2,36 (m, 6H, M01), 2,39 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,59 (t, J = 7,6 Hz, 3H, CHH, CH2), 2,81 - 3,00 (m, 1H, CHH), 3,50 -3,62 (m, 4H, CH2, CH2), 4,19 - 4,30 (m, 1H, CHH), 4,33 - 4,48 (m, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,0, 13,1 Hz, 1H, CHH), 5,20 (s, 2H, CH2), 7,23 (d, J = 7,9 Hz, 2H, Ar), 7,32 (d, J = 7,7 Hz, 2H, Ar), 7,39 (d, J = 7,9 Hz, 2H, Ar), 7,43 - 7,55 (m, 1H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 522,33, 27,72, 31,16, 32,53, 45,07, 51,56, 53,28, 57,52, 66,17, 69,45, 114,97, 115,16, 127,79, 128,39, 129,77, 129,93, 133,27, 133,87, 141,92, 153,49, 168,00, 170,95, 172,81; LCMS MH = 478; Anal. Calc. para C27H31N3O5 1 H2O 0,26 Eter: C, 65,42; H, 6,97; N, 8,16; Observado: C, 65,41; H, 6,77; N, 8,19.
5.24 3-(1-OXO-4-((6-PIPERIDIN-1-ILMETIL)BENZOFURAN-2-IL)METOXI)ISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000050_0001
Etapa 1: Una mezcla de 2-hidroxi-4-metilbenzaldehido (4,6 g, 33,9 mmol), 2-bromoacetato de etilo (5,7 g, 33,9 mmol), K2CO3 (7,0 g, 50,9 mmol) y tamiz molecular (4,6 g) en DMF (40 ml) se calento a 85 °C durante 2 horas y despues a 120 °C durante 5 horas. La mezcla de reaccion se enfrio y se diluyo con EtOAc (100 ml). La mezcla se filtro, y el filtrado se lavo con agua (3 x 50 ml) y salmuera (50 ml), y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, EtOAc:Hexano = 1:9) para dar 6-metilbenzofuran-2-carboxilato de etilo (3,1 g, rendimiento del 44 %): 1H RMN (DMSO-d6) 5 1,34 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 4,32-4,39 (c, J = 6,9 Hz, 2H), 7,35-7,58 (m, 2H), 7,66-7,70 (m, 2H).
Etapa 2: Se anadio N-bromosuccinimida (5,6 g, 31,5 mmol) a una solucion agitada de 6-metilbenzofuran-2-carboxilato de etilo (3,1 g, 15,0 mmol) en CCl4 (50 ml). La mezcla resultante se calento en un bano de aceite a 70 °C con una bombilla de 300 W que brillaba durante 5 horas. La mezcla de reaccion se enfrio y se filtro. El filtrado se concentro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, EtOAC:Hexano = 1:9) para dar 6-(bromometil)benzofuran-2-carboxilato de etilo (2,8 g, rendimiento del 66 %): 1H RMN (DMSO-d6) 51,34 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 4,38 (c, J = 7,2 Hz, 2H), 4,86 (s, 2H), 7,40-7,45 (m, 1H), 7,76-7,84 (m, 3H).
Etapa 3: Una mezcla de piperidina (1,0 g, 11,3 mmol), K2CO3 (3,6 g, 26 mmol) y 18-corona-6 (cantidad catafitica) en acetona (10 ml) se calento en un bano de aceite a 60 °C. Una solucion de 6-(bromometil)benzofuran-2-carboxilato de etilo (2,0 g, 7,1 mmol) en acetona (10 ml) se anadio gota a gota y la mezcla se agito en un bano de aceite a 60 °C durante 3 horas. La mezcla de reaccion se enfrio y se filtro. El filtrado se concentro y el residuo se disolvio en EtOAc (100 ml) y se lavo con agua (2 x 35 ml) y salmuera (35 ml), y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, CH3OH:CH2Cl23:97) para dar 6-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-2-carboxilato de etilo (1,5 g, rendimiento del 73 %): 1H RMN (CDCb) 5 1,40-1,46 (m, 5H), 1,53-1,61 (m, 4H), 2,37-2,40 (m, 4H), 3,59 (s, 2H), 4,40-4,47 (c, J = 6,9 Hz, 2H), 7,26-7,30 (m, 1H), 7,49 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 7,56-7,60 (m, 2H).
Etapa 4: Una solucion de 6-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-2-carboxilato de etilo (1,5 g, 5,2 mmol) en THF (20 ml) se anadio lentamente a una solucion agitada de LiAlH4/THF (1 M, 6,7 ml, 6,7 mmol) en THF (10 ml) a 3-8 °C. Despues de la adicion, la mezcla se agito a 3 °C durante 30 minutos y despues se inactivo con Na2CO3 sat. (50 ml). La mezcla se diluyo con CH2Cl2 (50 ml) y la capa acuosa se extrajo con CH2Cl2 (3 x 40 ml). La solucion combinada de CH2Cl2 se lavo con salmuera (35 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, CH3OH: CH2O23:97) para dar [6-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-2-il]metanol (0,9 g, rendimiento del 68 %): 1H RMN (CDCb) 51,41-1,46 (m, 2H), 1,54-1,61 (m, 4H), 2,39 (m, 4H), 3,56 (s, 2H), 4,72 (s, 2H), 6,60 (s, 1H), 7,14-7,17 (dd, J = 1,2 y 7,8 Hz, 1H), 7,42-7,47 (m, 2H); 13C RMN (CDCb) 5 24,34, 25,83, 54,42, 57,92, 63,95, 103,88, 111,95, 120,36, 124,36, 127,09, 135,02, 155,38, 156,71.
Etapa 5: azodicarboxilato de diisopropilo (0,8 g, 4,0 mmol) se anadio a una suspension agitada de trifenilfosfina unida a pofimero (3,4 g, 4,3 mmol) en THF (40 ml) a 3-6 °C. Despues de agitarse a 3 °C durante 10 minutos, se anadio lentamente una solution de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,8 g, 2,7 mmol) y [6-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-2-il]metanol (0,9 g, 3,5 mmol) en THF (60 ml) a 3-6 °C. Despues de agitarse a 3 °C durante 5 minutos, la mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaction se filtro y el solido se lavo con CH 2 Cl 2 (30 ml). El filtrado se concentro y el residuo se disolvio en CH 2 Cl 2 (100 ml) y se lavo con NaHCO 3 sat. (40 ml), agua (40 ml) y salmuera (40 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO 2 , CH 3 OH:CH 2 Cl 2 3:97) para dar 5-amino-5-oxo-4-(1-oxo-4-((6-piperidin-1-ilmetil)benzofuran-2-il)metoxi)isoindolin-2-il)pentanoato de metilo (0,9 g, 64 %).
Etapa 6: Una mezcla de 5-amino-5-oxo-4-(1-oxo-4-((6-piperidin-1-ilmetil)benzofuran-2-il)metoxi)isoindolin-2-il)pentanoato de metilo (0,9 g, 1,7 mmol) y K 2 CO 3 (0,2 g, 1,7 mmol) en DMF (10 ml) se calento en un bano de aceite a 80 °C durante 2,5 horas. La mezcla de reaccion se enfrio y se concentro. El residuo se agito con agua (20 ml) y EtOAc (10 ml). El solido se recogio y se suspendio de nuevo con acetona caliente (10 ml) para dar 3-(1-oxo-4-((6-piperidin-1-ilmetil)benzofuran-2-il)metoxi)isoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,19 g, rendimiento del 22 %): p.f. 216­ 218 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,39-1,49 (m, 6H), 1,95-1,99 (m, 1H), 2,33-2,58 (m, 6H), 2,86-2,94 (m, 1H), 3,53 (s, 2H), 4,25 (d, J = 15 Hz, 1H), 4,36 (d, J = 18 Hz, 1H), 5,07-5,13 (dd, J = 6 y 15 Hz, 1H), 5,41 (s, 2H), 7,08 (s, 1H), 7,22 (d, J = 9 Hz, 1H), 7,37 (d, J = 6 Hz, 1H), 7,49-7,59 (m, 4H), 10,96 (s, 1H); 13 C RMN (DMSO-de) 522,28, 23,92, 25,47, 31,16, 45,04, 51,55, 53,74, 62,52, 62,70, 107,01, 111,17, 115,09, 115,63, 120,86, 124,05, 126,34, 129,80, 129,93, 133,41, 135,94, 152,41, 152,97, 154,73, 167,88, 170,92, 172,79; Calc. para C2sH29N 3 O5 0,8 H2O: C, 67,00; H, 6,14; N, 8,37, Observado: C, 66,96, H, 5,96, N, 8,03.
5.25 3-(4-((1-METIL-1H-BENZO[D]IMIDAZOL-2-IL) METOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000051_0001
Etapa 1: Una mezcla de N-metil 1,2-fenilenodiamina (5,4 g, 44,0 mmol) y acido glicolico (5,0 g, 66,0 mmol) en HCl 4 N (50 ml) se calento a reflujo durante 45 minutos y despues se enfrio a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se filtro y el filtrado se diluyo con agua (100 ml). La mezcla se enfrio en un bano de hielo con agitation vigorosa y se neutralizo con bicarbonato sodico solido cuidadosamente. El solido se recogio y se recristalizo en 1,4-dioxano (40 ml) para dar (1-metil-1H-benzo[d]imidazol-2-il)metanol (5,7 g, rendimiento del 80 %): 1H RMN (DMSO-d6) 53,82 (s, 3H, N-CH3), 4,70 (d, J = 5,7 Hz, 2H, CH2O), 5,75 (t, J = 5,7 Hz, 1H, OH), 7,14-7,26 (m, 2H, Ar), 7,50­ 7,57 (m, 2H, Ar); 13C RMN (DMSO-d6) 529,75, 56,39, 109,83, 118,85, 121,28, 122,01, 136,02, 141,77, 153,90.
Etapa 2: Se anadio azodicarboxilato de diisopropilo (1,0 g, 4,9 mmol) a una suspension agitada de 5-amino-2-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,7 g, 2,5 mmol), (1-metil-1H-benzo[d]imidazol-2-il)metanol (0,6 g, 3,7 mmol) y trifenilfosfina unida a pofimero (1,6 g, 4,9 mmol) en THF (150 ml) a temperatura ambiente. Despues de la adicion, la mezcla se agito durante 2 horas. La mezcla de reaccion se filtro y el solido se lavo con cloruro de metileno (30 ml). El filtrado se concentro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, CH3OH: CH2Cl2 3:97) para dar 5-amino-2-(4-((1-metil-1H-benzo[d]imidazol-2-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,7 g, 60 %).
Etapa 3: Se anadio t-butoxido potasico/THF (1 M, 1,5 ml, 1,5 mmol) a una solucion agitada de 5-amino-2-(4-((1-metil-1H-benzo[d]imidazol-2-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,7 g, 1,5 mmol) en THF (30 ml) y DMF (10 ml). Despues de la adicion, la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reaccion se enfrio en un bano de hielo y se inactivo con agua (30 ml). La mezcla se agito con cloruro de metileno (30 ml) y la capa acuosa se extrajo con cloruro de metileno (2 x 35 ml). La solucion organica combinada se lavo con agua (40 ml) y salmuera (40 ml), y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se agito con agua (20 ml). El solido se recogio y se suspendio de nuevo con eter (10 ml) para dar 3-(4-((1-metil-1H-benzo[d]imidazol-2-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,3 g, 42 %) en forma de un solido de color blanco: p.f. 233-235 °C; 1H RMN (DMSO-d6) 51,94-1,99 (m, 1H), 2,39-2,59 (m, 2H), 2,86-2,90 (m, 1H), 3,88 (s, 3H), 4,28 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 4,38 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 5,06-5,13 (dd, J = 5,1 y 13,2 Hz, 1H), 5,57 (s, 2H), 7,22 (dt, J = 1,1 y 7,3 Hz, 1H), 7,30 (dt, J = 1,3 y 8,1 Hz, 1H), 7,36 (t, J = 4,3 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 3,8 Hz, 2H), 7,58 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,65 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 10,96 (s, 1H); 13C RMN (DMSO-d6) 522,29, 30,30, 31,13, 44,99, 51,56, 62,87, 110,26, 115,17, 115,76, 119,29, 121,78, 122,74, 129,83, 129,95, 133,40, 135,98, 141,70, 149,16, 152,91, 167,84, 170,88, 172,79; Calc. para C22H20N4O4 0,1 H2O: C, 65,05; H, 5,01; N, 13,79, Observado: C, 65,01; H, 5,08; N, 13,58.
5.26 ESTER TERC-BUTWCO DEL ACIDO 4-[2-(2,6-DIOXO-PIPERIDIN-3-IL)-1-OXO-2,3-DIHIDRO-1H-ISOINDOL-4-ILOXIMETIL]-PIPERIDIN-1-CARBOXfLICO
Figure imgf000052_0001
Etapa 1: Se anadio trifenilfosfeno soportado con poflmero (1,6 mmol/g, 1,76 g, 2,19 mmol) a una solucion agitada de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-(4-hidroxi-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-butmco (0,29 g, 1,01 mmol) en THF (15 ml) a 0 °C, seguido de la adicion de diazen-1,2-dicarboxilato de diisopropilo (0,44 ml, 2,19 mmol). Despues de agitar durante 30 minutos, se anadio ester terc-butflico del acido 4-hidroximetil-piperidin-1-carboxflico (0,43 g, 2,00 mmol). La mezcla se agito durante una noche a temperatura ambiente, despues se filtro, se lavo con metanol (3 x 10 ml), y despues con cloruro de metileno (3 x 10 ml). El filtrado combinado se evaporo al vado para dar un aceite, que se purifico sobre columna de gel de sflice (MeOH/CH 2 Cl 2 , gradiente del 0 % al 5 % en 60 min) para dar ester tercbutflico del acido 4-[2-(1-carbamoil-3-metoxicarbonil-propil)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-piperidin-1-carboxflico en forma de un aceite transparente (0,27 g, rendimiento del 55 %).
Etapa 2: Se anadio terc-butoxido potasico (0,06 g, 0,55 mmol) a una solucion agitada de ester terc-butflico del acido 4-[2-(1-carbamoil-3-metoxicarbonil-propil)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-piperidin-1-carboxflico (0,27 g, 0,55 mmol) en THF (10 ml) a 0 °C durante 10 minutos. La mezcla se inactivo con HCl 1 N (2 ml) y se neutralizo con bicarbonato sodico saturado (4 ml a pH = 8). La mezcla se lavo con acetato de etilo (3 x 20 ml). Las fases de acetato de etilo combinadas se evaporaron y despues se purificaron sobre columna de gel de sflice (MeOH/CH2Cl2, gradiente del 0 % al 5 % en 40 min) para dar ester terc-butflico del acido 4-[2-(2,6-dioxo-piperidin-3-il)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-piperidin-1-carboxflico en forma de un solido de color blanquecino (0,15 g, rendimiento del 60 %); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, isocratica a 50/50 en 10 min (acetonitrilo/HsPO4 al 0,1 %), 3,81 min (96,5 %); p.f.: 233-235 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,07 - 1,29 (m, 2H, CH2), 1,40 (s, 9H, (CHs)s), 1,71 - 1,83 (m, 2H, CH2), 1,87 - 2,06 (m, 2H, CHH, CHH), 2,36 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,54 -2,64 (m, 1H, CHH), 2,66 - 2,82 (m, 2H, CH2), 2,83 - 3,01 (m, 1H, CHH), 3,92 - 4,07 (m, 4H, CH2CH2), 4,17 - 4,45 (m, 2H, ArCH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 7,23 (d, J = 7,9 Hz, 1H, Ar), 7,30 (d, J = 7,4 Hz, 1H, Ar), 7,43 -7,53 (m, 1H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 522,39, 28,09, 28,14, 31,20, 35,28, 43,11(s a debido a rotamero), 44,94, 51,55, 71,97, 78,50, 114,51, 114,98, 129,74, 129,84, 133,21, 153,73, 153,89, 168,03, 170,99, 172,83; LCMS MH = 358; Anal calc. para C24H31N3O6 0,1 H2O: C, 62,76; H, 6,85; N, 9,15; Observado: C, 62,75; H, 6,92; N, 8,90.
5.27 CLORHIDRATO DE 3-[1-OXO-4-(PIPERIDIN-4-ILMETOXI)-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000052_0002
Etapa 1: Se anadio trifenilfosfeno soportado con poflmero (1,6 mmol/g, 1,76 g, 2,19 mmol) a una solucion agitada de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-(4-hidroxi-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-butmco (0,29 g, 1,01 mmol) en THF (15 ml) a 0 °C, seguido de la adicion de diazen-1,2-dicarboxilato de diisopropilo (0,44 ml, 2,19 mmol). Despues de agitar durante 30 minutos, se anadio ester terc-butflico del acido 4-hidroximetil-piperidin-1-carboxflico (0,43 g, 2,00 mmol). La mezcla se agito durante una noche a temperatura ambiente, despues se filtro, se lavo con metanol (3 x 10 ml), y despues con cloruro de metileno (3 x 10 ml). El filtrado combinado se evaporo al vado para dar un aceite, que se purifico sobre columna de gel de sflice (MeOH/CH 2 Cl 2 , gradiente del 0 % al 5 % en 60 min) para dar ester tercbutflico del acido 4-[2-(1-carbamoil-3-metoxicarbonil-propil)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-piperidin-1-carboxflico en forma de un aceite transparente (0,27 g, rendimiento del 55 %).
Etapa 2: Se anadio terc-butoxido potasico (0.060 g, 0,55 mmol) a una solucion agitada de ester terc-butflico del acido 4-[2-(1-carbamoil-3-metoxicarbonil-propil)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-piperidin-1-carboxflico (0,27 g, 0,55 mmol) en THF (10 ml) a 0 °C durante 10 minutos. La mezcla se inactivo con HCl 1 N (2 ml) y se neutralizo con bicarbonato sodico saturado (4 ml a pH = 8). La mezcla se lavo con acetato de etilo (3 x 20 ml). Las fases de acetato de etilo combinadas se evaporaron y despues se purificaron sobre columna de gel de sflice (MeOH/CH2Cl2, gradiente del 0 % al 5 % en 40 min) para dar ester terc-butflico del acido 4-[2-(2,6-dioxo-piperidin-3-il)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-piperidin-1-carboxflico en forma de un solido de color blanquecino (0,15 g, rendimiento del 60 %); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, isocratica a 50/50 en 10 min (acetonitrilo/H3PO4 al 0,1 %), 3,81 min (96,5 %); p.f.: 233-235 °C; 1 H RMN (DMSO^) 51,07 - 1,29 (m, 2H, CH2), 1,40 (s, 9H, (CH3)s), 1,71 - 1,83 (m, 2H, CH2), 1,87 - 2,06 (m, 2H, CHH, CHH), 2,36 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,54 -2,64 (m, 1H, CHH), 2,66 - 2,82 (m, 2H, CH2), 2,83 - 3,01 (m, 1H, CHH), 3,92 - 4,07 (m, 4H, CH2CH2), 4,17 - 4,45 (m, 2H, ArCH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 7,23 (d, J = 7,9 Hz, 1H, Ar), 7,30 (d, J = 7,4 Hz, 1H, Ar), 7,43 -7,53 (m, 1H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO^) 522,39, 28,09, 28,14, 31,20, 35,28, 43,11(s a debido a rotamero), 44,94, 51,55, 71,97, 78,50, 114,51, 114,98, 129,74, 129,84, 133,21, 153,73, 153,89, 168,03, 170,99, 172,83; LCMS MH = 358; Anal calc. para C24H31N3O6 0,1 H2O: C, 62,76; H, 6,85; N, 9,15; Observado: C, 62,75; H, 6,92; N, 8,90.
Etapa 3: Se anadio HCl 2 M/eter (20 ml) a una solucion agitada de ester terc-butflico del acido 4-[2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-piperidin-1-carboxflico (0,090 g, 0,196 mmol) en diclorometano (3 ml). La mezcla se agito durante tres horas, se filtro y despues se seco para dar clorhidrato de 3-[1-oxo-4-(piperidin-4-ilmetoxi)-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,076 g, rendimiento del 98 %); HpLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, isocratica a 9/91 en 10 min (acetonitrilo/H3PO4 al 0,1 %), 6,22 min (98,0 %); p.f.: 298-300 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,43 - 1,66 (m, 2H, CH2), 1,83 - 2,20 (m, 3H, CH2, CHH), 2,32 - 2,46 (m, 1H, CHH), 2,58 (d, J = 16,8 Hz, 1H, CHH), 2,80 - 3,02 (m, 2H, CH2), 3,19 -3,44 (m, 2H, CH2), 4,02 (d, J = 6,2 Hz, 2H, OCH2), 4,16 -4,48 (m, 2H, ArCH2), 5,13 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 7,26 (d, J = 8,1 Hz, 1H, Ar), 7,32 (d, J = 7,4 Hz, 1H, Ar), 7,42 - 7,55 (m, 1H, Ar), 8,69 (d, J = 3,4 Hz, 2H, NH2Cl), 10,99 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 522,49, 25,00, 31,18, 33,00, 42,60, 44,91, 51,55, 71,39, 114,60, 115,13, 129,72, 129,88, 133,22, 153,60, 168,01, 171,02, 172,85; LCMS MH = 358; Anal calc. para C1gH24N3O4Cl 1,0 H2O: C, 55,41; H, 6,36; N, 10,20; Cl, 8,61; Observado: C, 55,72; H, 6,16; N, 9,82; Cl, 8,69.
5.28 3-[1-OXO-4-(TETRAHIDRO-PIRAN-3-ILMETOXI)-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000053_0001
Etapa 1: Se anadio trifenilfosfina unida a poflmero (1,6 g, 2,06 mmol, 1,25 mmol/g) a la solucion agitada de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-(4-hidroxi-1-oxo-1, 3-dihidro-isoindol-2-il)-bufirico (300 mg, 1,03 mmol) en THF (10 ml) a 0 °C. La mezcla resultante se agito a 0 °C durante 10 minutos seguido de la adicion de DIAD (412 mg, 2,06 mmol). Quince minutos mas tarde, la mezcla se le anadio (tetrahidro-piran-3-il)-metanol (239 mg, 2,06 mmol). La reaccion se agito a temperatura ambiente durante 17 horas y la reaccion se completo. La mezcla de reaccion se filtro y el solido se lavo con diclorometano (6 x 20 ml). El filtrado se concentro y el residuo se purifico por cromatografia ISCO para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[1-oxo-4-(tetrahidro-piran-3-ilmetoxi)-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-bufirico en forma de un aceite transparente (256 mg, rendimiento del 64 %): LCMS MH = 391.
Etapa 2: Se anadio KO/Bu (72 mg, 0,64 mmol) a la solucion agitada de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[1-oxo-4-(tetrahidro-piran-3-ilmetoxi)-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-bufirico (250 mg, 0,0,64 mmol) en tetrahidrofurano (18 ml) a 0 °C. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 1 hora y la reaccion se anadio por HCl (ac., 0,1 N, 6 ml) seguido de la adicion de agua (10 ml). La mezcla se extrajo con diclorometano (2 x 20 ml). Las capas organicas se secaron por MgSO 4 y se concentraron al vado. El residuo se purifico por cromatografia Is Co y Hp Lc prep. para dar 3-[1-oxo-4-(tetrahidro-piran-3-ilmetoxi)-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (36 mg, rendimiento del 16 %). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 30/70, (acetonitrilo/H3PO4 al 0,1 %): tR = 4,5 (100 %); p.f.: 118-120 °C; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 5 1,25 - 1,72 (m, 3H, CH2, CHH), 1,79 - 1,92 (m, 1H, CHH), 1,92 -2,09 (m, 2H, CH2), 2,36-2,48 (m, 1H, CHH), 2,53 -2,64 (m, 1H, CHH), 2,74 -3,10 (m, 1H, CHH), 3,66 - 3,81 (m, 1H, CHH), 3,83 - 4,08 (m, 3H, CH2, CHH), 4,13 - 4,47 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,0, 13,1 Hz, 1H, NCH), 7,23 (d, J = 7,9 Hz, 1H, Ar), 7,31 (d, J = 7,0 Hz, 1H, Ar), 7,43 - 7,53 (m, 1H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH) * dos protones se solapan con un pico Me de DMSO y se confirmo por HMQC; 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 5 22,32, 24,59, 25,42, 31,16, 35,42, 44,90, 51,53, 67,48, 69,26, 69,44, 114,45, 115,00, 129,73, 129,81, 133,07, 153,43, 167,98, 170,99, 172,83; LCMS MH = 359; Anal. Calc. para C19H22N2O5 0,57 H2O 0,015CH 2 Cl 2 + 0,04HCOOH : C, 61,56; H, 6,3; N, 7,53; Encontrado: C, 61,16; H, 5,9; N, 7,35.
5.29 3-(4-((1-METIL-1H-INDAZOL-3-IL)METOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000053_0002
Etapa 1: Se anadio lentamente yodometano (10,9 g, 77,1 mmol) a una mezcla agitada de acido 1H-indazol-3-carboxflico (5,0 g, 30,8 mmol) y carbonato potasico (12,8 g, 92,5 mmol) en DMF (30 ml). La mezcla resultante se calento en un bano de aceite a 50 °C durante 4 horas. La mezcla de reaccion se enfrio y se vertio en hielo agua (200 ml). La mezcla se extrajo con EtOAc (4 x 50 ml) y la solucion de EtOAc combinada se lavo con agua (3 x 40 ml) y salmuera (40 ml), y se seco (MgSO4). El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, EtOAc:Hexano, 2:8) para dar 1-metil-1H-indazol-3-carboxilato de metilo (3,9 g, rendimiento del 66 %): 1H RMN (DMSO-d6) 53,93 (s, 3H), 4,17 (s, 3H), 7,33-7,38 (ddd, J = 1,8, 6,9 y 8,1 Hz, 1H), 7,48-7,53 (ddd, J = 1,1, 6,9 y 8,4 Hz, 1H), 7,77-7,80 (td, J = 0,8 y 8,5 Hz, 1H), 8,06-8,09 (td, J = 1,0 y 8,2 Hz, 1H); 13C RMN (DMSO-d6) 536,26, 51,54, 110,75, 120,99, 122,75, 123,10, 126,61, 133,25, 140,64, 162,28.
Etapa 2: Una solution de 1-metil-1H-indazol-3-carboxilato de metilo (3,8 g, 20,0 mmol) en eter (100 ml) se enfrio a 5 °C. Una solucion de LiBH4/THF (2 M, 15,0 ml, 30 mmol) se anadio lentamente a 5-10 °C. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 2,5 horas y despues se enfrio en un bano de hielo y se inactivo con agua (30 ml). La capa acuosa se extrajo con CH2Cl2 (50 ml) y la solucion organica combinada se lavo con agua (2 x 40 ml) y salmuera (40 ml), y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, EtOAc:Hexano, 4:6) para dar (1-metil-1H-indazol-3-il)-metanol (2,8 g, rendimiento del 86 %): 1H RMN (DMSO-d6) 53,98 (s, 3H), 4,79 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 5,24 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 7,09-7,14 (dt, J = 0,9 y 6,0 Hz, 1H), 7,35-7,40 (dt, J = 1,2 y 6,0 Hz, 1H), 7,54-7,58 (dt, J = 9,0 y 0,6 Hz, 1H), 7,83-7,86 (dt, J = 9,0 y 0,9 Hz, 1H); 13C RMN (DMSO-de) 534,96, 56,43, 109,39, 119,71, 120,72, 121,90, 125,91, 140,58, 144,42.
Etapa 3: Se anadio azodicarboxilato de diisopropilo (1,3 g, 6,4 mmol) a una suspension agitada de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,9 g, 3,2 mmol), (1-metil-1H-indazol-3-il)-metanol (0,8 g, 4,8 mmol), y trifenilfosfina unida a pofimero (2,1 g, 6,4 mmol) en THF (60 ml) a 5-8 °C. Despues de la adicion, la mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaction se filtro y el solido se lavo con CH2Cl2 (30 ml). El filtrado se concentro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, CH3OH:CH2Cl23:97) para dar 5-amino-4-(4-((1-metil-1H-indazol-3-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,5 g, 36 %).
Etapa 4: Una solucion de t-butoxido potasico/THF (1 M, 0,9 ml, 0,9 mmol) se anadio a una solucion agitada de 5-amino-4-(4-((1-metil-1H-indazol-3-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,4 g, 0,9 mmol) en THF (30 ml) a 5 °C. La mezcla de reaccion se agito a 5 °C durante 5 minutos y se calento a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reaccion se enfrio en un bano de hielo y se inactivo con NH4Cl sat. (10 ml). La mezcla se diluyo con CH2Cl2 (50 ml) y agua (20 ml). La capa acuosa se extrajo con CH2Cl2 (30 ml) y la solucion combinada de CH2Cl2 se lavo con agua (40 ml) y salmuera (40 ml), y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, CH3OH:CH2Cl2 3:97) para dar 3-(4-((1-metil-1H-indazol-3-ilmetoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-piperidin-2,6-diona (0,2 g, rendimiento del 51 %): p.f. 14-142 °C; 1H RMN (DMSO-de) 51,93-1,97 (m, 1H), 2,38-2,57 (m, 2H), 2,84-2,88 (m, 1H), 4,05 (s, 3H), 4,21 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 4,31 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 5,04-5,10 (dd, J = 4,8 y 13,2 Hz, 1H), 5,56 (s, 2H), 7,14-7,19 (dt, J = 0,6 y 6,9 Hz, 1H), 7,31-7,34 (dd, J = 3,9 y 4,8 Hz, 1H), 7,30-7,45 (dt, J = 3,9 y 4,8 Hz, 1H), 7,39-7,45 (dt, J = 0,9 y 6,6 Hz, 1H), 7,50-7,52 (m, 2H), 7,63 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,83 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 10,93 (s, 1H); 13C RMN (DMSO-d6) 522,24, 31,15, 35,32, 45,08, 51,56, 63,13, 109,88, 115,10, 115,32, 120,06, 120,67, 122,15, 126,28, 129,78, 129,90, 133,30, 139,14, 140,58, 153,45, 167,92, 170,91, 172,77; Calc. para C22H20N4O4: C, 65,34; H, 4,98; N, 13,85, Observado: C, 64,96; H, 4,96; N, 13,74.
5.30 3-(4-((3-METILBENZOFURAN-2-IL)METOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000054_0001
Etapa 1: Se anadio lentamente borano/THF (1 M, 22,7 ml, 22,7 mmol) a una solucion agitada de acido 3-metilbenzofuran-2-carboxflico (2 g, 11,4 mmol) en THF (30 ml) a 5-7 °C. Despues de la adicion, la mezcla se agito a 5 °C durante 10 minutos y despues se calento a temperatura ambiente durante 5 horas. La mezcla de reaccion se enfrio en un bano de hielo y se inactivo con agua (15 ml) lentamente. La mezcla se diluyo con CH2Cl2 (35 ml) y agua (15 ml) y la capa acuosa se extrajo con CH2Cl2 (2 x 35 ml). La solucion combinada de CH2Cl2 se lavo con NaHCO3 sat. (25 ml), agua (25 ml) y salmuera (25 ml), y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, CH2Cl2) para dar (3-metil-benzofuran-2-il)-metanol (1,4 g, 78 %); 1H RMN (DMSO-d6) 52,21 (s, 3H), 4,56 (d, J = 5,7 Hz, 2H), 5,29 (t, J = 5,7 Hz, 1H), 7,20-7,31 (m, 2H), 7,47-7,56 (m, 2H); 13C RMN (DMSO-d6) 5 7,46, 53,83, 110,71, 111,33, 119,48, 122,20, 124,14, 129,51, 152,98, 153,27.
Etapa 2: Se anadio azodicarboxilato de diisopropilo (1,3 g, 6,2 mmol) a una suspension agitada de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxo-isoindolin-2-il)-5-oxo-pentanoato de metilo (0,9 g, 3,1 mmol), (3-metil-benzofuran-2-il)-metanol (0,8 g, 4,6 mmol) y trifenilfosfina unida a pofimero (2,1 g, 6,2 mmol) en THF (60 ml) a 5-8 °C. Despues de la adicion, la mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se filtro y el solido se lavo con CH2Cl2 (30 ml). El filtrado se concentro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, CH3OH: CH2Cl23:97) para dar 5-amino-4-(4-((3-metil-benzofuran-2-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-oxopentanoato de metilo (1,0 g , 72 %). Etapa 3: Una solucion de t-butoxido potasico/THF (1 M, 2,2 ml, 2,2 mmol) se anadio lentamente a una solucion agitada de 5-amino-4-(4-((3-metil-benzofuran-2-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1,0 g, 2,2 mmol) en THF (30 ml) a 5 °C. La mezcla se agito a 5 °C durante 5 minutos y despues se calento a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reaccion se enfrio en un bano de hielo y se inactivo con HCl 1 N (10 ml). La mezcla se diluyo con CH2Cl2(50 ml) y agua (10 ml). La capa acuosa se extrajo con CH2Cl2 (30 ml) y la solucion combinada de CH2Cl2 se lavo con agua (40 ml) y salmuera (40 ml), y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, CH3OH:CH2Cl23:97) para dar 3-(4-((3-metilbenzofuran-2-il)metoxi)-1-oxoisoindolin2-il)piperidin-2,6-diona (0,5 g, rendimiento del 60 %): p.f. 210-212 °C; 1H RMN (DMSO-d6) 51,96-1,98 (m, 1H), 2,28 (s, 3H), 2,27-2,57 (m, 2H), 2,83-2,90 (m, 1H), 4,23 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 4,33 (d, J = 17,7 Hz, 1H), 5,06-5,12 (dd, J = 5,1 y 13,2 Hz, 1H), 5,40 (s, 2H), 7,25-7,37 (m, 3H), 7,45-7,48 (dd, J = 0,6 y 8,1 Hz, 1H), 7,51-7,56 (dt, J = 0,9 y 8,1 Hz, 2H), 7,61-7,63 (dd, J-0,9 y 7,8 Hz, 1H), 10,94 (s, 1H); 13C RMN (DMSO-de) 57,55, 22,25, 31,16, 45,04, 51,54, 60,93, 111,04, 115,23, 115,64, 119,98, 122,60, 125,08, 128,95, 129,81, 130,00, 133,38, 147,64, 153,17, 153,68, 167,89, 170,82, 170,91, 172,78; Calc. para C23H20N2O5: C, 68,31; H, 4,98; N, 6,93, Observado: C, 68,09; H, 5,00; N, 6,81.
5.31 3-(1-OXO-4-(PIRON-2-ILMETOXI)ISOINDOLIN-2-IL)PIPERON-2,6-DIONA
Figure imgf000055_0001
A una mezcla de trifenilfosfina soportada por poKmero (0,63 g, 1,88 mmol) y 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,25 g, 0,86 mmol) en THF (15 ml) enfriada a 0 °C, se le anadio gota a gota DIAD (0,37 ml, 1,88 mmol). Despues, se anadio 3-piridil carbinol (0,10 ml, 1,03 mmol). La mezcla de reaction se agito a 0 °C durante 1 hora y despues a temperatura ambiente durante una noche. Despues, la mezcla de reaccion se filtro a traves de celite. El celite se lavo con acetato de etilo (100 ml). La fase de acetato de etilo se lavo con agua, se seco con MgSO4, y el disolvente se evaporo. El residuo se purifico por ISCO ultrarrapida (columna de 40 g, gradiente de MeOH/CH2Cl2 de 0/100 a 5/95 en 30 min, producto de elucion a 5/95). El disolvente se evaporo y el producto en bruto se uso en la siguiente etapa.
Al producto en bruto agitado en THF (10 ml) y enfriado a 0 °C se le anadio KO/Bu (0,064 g, 0,57 mmol) y la mezcla de reaccion se agito durante 1 hora y 30 minutos. Se anadio acido acetico (5 gotas) a la mezcla de reaccion. Se anadio acetato de etilo (100 ml) y se lavo con una solution saturada de bicarbonato sodico (2 x 100 ml) y salmuera (100 ml), y se seco (MgSo4). Despues de la filtration del agente de secado, el disolvente se concentro para dar 3-(1-oxo-4-(piridina-2-ilmetoxi)isoindolin-2-il)piperidina 2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,13 g, rendimiento del 43 %): HPLC: Waters XTerra RP18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 25/75 de acetonitrilo/HCOONH4 al 0,1 %, 3,58 min (98,63 %); p.f.: 235-237 °C; 1H RMN (DMSO-d6) 5 1,86 - 2,16 (m, 1H, CHH), 2,18 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,70 (m, 1H, CHH), 2,78 - 3,06 (m, 1H, CHH), 4,16 - 4,35 (m, 1H, CHH), 4,36 -4,52 (m, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,0, 13,1 Hz, 1H, CH), 5,31 (s, 2H, CH2), 7,36 (dd, J = 4,3, 7,7 Hz, 2H, Ar), 7,41 -7,69 (m, 2H, Ar), 7,93 (d, J = 7,7 Hz, 1H, Ar), 8,65 (d, J = 49,3 Hz, 2H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-d6) 5 22,33, 31,16, 45,03, 51,56, 67,25, 114,97, 115,47, 123,62, 129,83, 130,02, 132,25, 133,36, 135,69, 148,94, 149,19, 153,23, 167,93, 170,93, 172,81; LCMS MH = 352; Anal. Calc. para C19H17N3O4 0,4 H2O: C, 63,64; H, 5,00; N, 11,72; Observado: C, 63,34; H, 5,12; N, 11,48.
5.32 3-(4-((2-METILISOINDOUN-5-IL)METOXI)-1-OXOISOINDOUN-2-IL)-PIPERON-2,6-DIONA
Figure imgf000055_0002
Etapa 1: Una solucion de UAIH4/THF (1 M, 24 ml, 24 mmol) se anadio lentamente a una solucion agitada de ester terc-butflico del acido 5-hidroximetil-1,3-dihidro-isoindolo-2-carboxflico (3,0 g, 12,0 mmol) en THF (30 ml) a 5 °C. Despues de la adicion, la mezcla de reaccion se calento lentamente a reflujo durante 2 horas. La mezcla de reaccion se enfrio en un bano de hielo y se inactivo con agua (20 ml). La mezcla se diluyo con EtOAc (25 ml) y se filtro a traves de celite. El filtrado se concentro y el residuo se disolvio en EtOAc (100 ml). La solucion de EtOAc se lavo con agua (2 x 25 ml) y salmuera (25 ml), y se seco. El disolvente se retiro para dar (2-metil-2,3-dihidro-1H-isoindol-5-il)-metanol (1,2 g, rendimiento del 62 %): 1 H RMN (CDCI3) 52,55 (s, 3H), 3,76 (s, 2H), 3,85 (s, 2H), 4,10 (a, 1H), 4,55 (s, 2H), 6,96 (s, 1H), 7,04-7,10 (m, 2H).
Etapa 2: Se anadio lentamente azodicarboxilato de diisopropilo (0,9 g, 4,6 mmol) a una suspension agitada de trifenilfosfina unida a polimero (3,9 g, 4,9 mmol) en THF (40 ml) a 3-5 °C. Despues de agitarse a 3 °C durante 10 minutos, se anadio lentamente una solucion de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,9 g, 3,1 mmol) y (2-metil-2,3-dihidro-1H-isoindol-5-il)-metanol (0,7 g, 4,0 mmol) en THF (60 ml) a 3-6 °C. La mezcla de reaccion se agito a 3 °C durante 5 minutos, despues se calento a temperatura ambiente y se agito durante una noche. La mezcla de reaccion se filtro y el solido se lavo con CH 2 Cl 2 (30 ml). El filtrado se concentro y el residuo se disolvio en CH 2 Cl 2 (100 ml). La solucion de CH 2 Cl 2 se lavo con NaHCO 3 sat. (40 ml), agua (2 x 30 ml), y salmuera (30 ml), y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO 2 , c H3OH:CH2CI2 3:97) para dar 5-amino-4-(4-((2-metilisoindolin-5-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,5 g, rendimiento del 39 %): 1 H RMN (CDCI3) 52,14-2,46 (m, 4H), 2,60 (s, 3H), 3,63 (s, 3H), 3,92 (s, 4H), 4,34-4,48 (m, 2H), 4,88-4,92 (dd, J = 3,3 y 8,7 Hz, 1H), 5,12 (s, 2H), 5,56 (s, 1H), 6,34 (s, 1H), 7,05-7,08 (dd, J = 1,5 y 6,9 Hz, 1H), 7,22-7,26 (m, 3H), 7,36-7,44 (m, 2H).
Etapa 3: Una mezcla de 5-amino-4-(4-((2-metilisoindolin-5-il)metoxi)-1-oxo-isoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,3 g, 0,6 mol) y K 2 CO 3 (0,09 g, 0,6 mmol) en DMF (10 ml) se calento en un bano de aceite a 80 °C durante 3 horas. La mezcla de reaccion se enfrio y se concentro y el residuo se agito con agua (20 ml). El solido se recogio y se suspendio de nuevo con acetona (10 ml) para dar 3-(4-((2-metilisoindolin-5-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,2 g, rendimiento del 66 %): p.f. 262-264 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,97-1,99 (m, 1H), 2,41-2,59 (m, 5H), 2,91 (m, 1H), 3,80 (s, 4H), 4,27 (d, J = 17,7 Hz, 1H), 4,37 (d, J = 17,7 Hz, 1H), 5,07-5,13 (dd, J = 5,1 y 13,2 Hz, 1H), 5,21 (s, 2H), 7,22-7,51 (m, 6H), 10,96 (s, 1H); 13 C RMN (DMSO-de) 522,31, 31,16, 41,83, 45,08, 51,56, 60,01,60,13, 69,65, 115,00, 115,17, 121,54, 122,02, 126,25, 129,77, 129,93, 133,28, 134,96, 140,64, 141,08, 153,46, 167,98, 170,96, 172,81; Calc. para C23H23N3O4 0,4 H2O: C, 66,94; H, 5,81; N, 10,18, Observado: C, 66,80; H, 5,52; N, 10,14.
5.33 3-(4-((4-(MORFOLINOMETIL)TIAZOL-2-IL)METOXI)-1-OXOISOINDOUN-2-IL)PIPERON-2,6-DIONA
Figure imgf000056_0001
Etapa 1: La mezcla de 2-amino-2-tioxoacetato de etilo (2 g, 15,02 mmol) y 1,3-dicloropropan-2-ona (2,193 g, 17,27 mmol) en tolueno (20 ml) se calento a reflujo durante 3 horas. La mezcla se enfrio a temperatura ambiente, se anadio acetato de etilo (50 ml). La mezcla se lavo con NaHCO3 acuoso saturado (30 ml) y salmuera (30 ml), y se seco sobre MgSO4. El disolvente se evaporo y el producto se purifico por ISCO (columna de 120 g de gel de sflice, EtOAc/hexanos, gradiente del 0 % al 20 % en 30 min) para dar 4-(clorometil)tiazol-2-carboxilato de etilo en forma de un aceite de color amarillo (2,07 g, rendimiento del 67 %); 1H RMN (CLOROFORMO-d) 1,45 (t, J = 7,2 Hz, 3H, CH3), 4,50 (c, J = 7,1 Hz, 2H, CH2), 4,78 (s, 2H, CH2), 7,64 (s, 1H, Ar).
Etapa 2: A una solucion de 4-(clorometil)tiazol-2-carboxilato de etilo (1,5 g, 7,29 mmol) en acetonitrilo (30 ml) se le anadieron morfolina (1,27 g, 14,59 mmol) y trietil amina (2,03 ml, 14,59 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. El disolvente se retiro al vado, el residuo se disolvio en acetato de etilo (100 ml), se lavo con bicarbonato sodico acuoso saturado (2 x 20 ml), agua (2 x 50 ml) y salmuera (30 ml), y se seco sobre MgSO4. El disolvente se retiro para dar 4-(morfolinometil)tiazol-2-carboxilato de etilo (1,72 g, rendimiento del 92 %); 1H RMN (CLOROFORMO-d) 51,45 (t, J = 7,1 Hz, 3H, CH3), 2,47 - 2,66 (m, 4H, CH2, CH2), 3,68 - 3,78 (m, 4H, CH2, CH2), 3,80 (s, 2H, CH2), 4,49 (c, J = 7,1 Hz, 2H, CH2), 7,53 (s, 1H, Ar).
Etapa 3: A una solucion de 4-(morfolinometil)tiazol-2-carboxilato de etilo (0,8 g, 3,12 mmol) en THF (10 ml) se le anadio lentamente una solucion de hidruro de diisobutilaluminio (1 M en tolueno, 9,36 ml, 9,36 mmol) a 0 °C. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. Se anadieron una solucion de sal de Rochelle (1,0 M, 50 ml) y acetato de etilo (50 ml). La suspension resultante se agito a temperatura ambiente durante 2 horas. Se consiguio la separacion de fase transparente. La fase organica se separo y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 40 ml). Las capas organicas combinadas se lavaron con NaHCO3 acuoso saturado (5 ml) y salmuera, se secaron sobre MgSO4, y se concentraron para dar (4-(morfolinometil)tiazol-2-il)metanol (600 mg, rendimiento del 90 %); 1H RMN (CLOROFORMO-d) 52,44 - 2,63 (m, 4H, CH2, CH2), 3,64 (s, 2H, CH2), 3,71 - 3,81 (m, 4H, CH2, CH2), 4,95 (s, 2H, CH2), 7,12 (s, 1H, Ar).
Etapa 4: Se anadio trifenilfosfina soportada por poflmero (1,6 mmol/g, 4,13 g, 6,61 mmol) a una suspension agitada de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (966 mg, 3,31 mmol) en THF (40 ml) a 0 °C seguido de azodicarboxilato de diisopropilo (1,34 g, 6,61 mmol). Despues de agitar durante 10 minutos, se anadio (4-(morfolinometil)tiazol-2-il)metanol (850 mg, 3,97 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche y se filtro. La resina se aclaro con diclorometano y metanol (2 x 50 ml cada lavado). Los filtrados combinados y los lavados se concentraron y se purificaron por ISCO (columna de 80 g de gel de sflice, MeOH/CH2Cl2, gradiente del 0 % al 5 % en 40 min) para dar 5-amino-4-(4-((4-(morfolinometil)tiazol-2-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (360 mg, rendimiento del 22 %); 1H Rm N (DMSO-d6) 51,98 - 2,34 (m, 4H, CH2, CH2), 2,34 -2,46 (m, 4H, CH2, CH2), 3,50 (s, 3H, CH3), 3,53 - 3,59 (m, 4H, CH2, CH2), 3,60 (s, 2H, CH2), 4,33 - 4,65 (m, 2H, CH2), 4,74 (d, J = 5,5 Hz, 1H, CH), 5,55 (s, 2H, CH2), 7,20 (s, 1H, NHH), 7,35 (t, J = 7,2 Hz, 2H, Ar), 7,44 - 7,57 (m, 2H, Ar), 7,61 (s, 1H, NHH).
Etapa 5: A una solucion de 5-amino-4-(4-((4-(morfolinometil)tiazol-2-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (320 mg, 0,65 mmol) en THF (10 ml) se le anadio terc-butoxido potasico (73 mg, 0,65 mmol) a 0 °C. La mezcla formada se calento a temperatura ambiente y se agito durante 2 horas. La reaccion se interrumpio con acido acetico (0,5 ml). El disolvente se retiro al vado. El residuo se repartio entre acetato de etilo (20 ml) y bicarbonato sodico acuoso saturado (10 ml). La fase organica se lavo con salmuera y se seco sobre sulfato de magnesio. El disolvente se evaporo y el producto en bruto se suspendio de nuevo con acetonitrilo (4 ml) para dar 3-(4-((4-(morfolinometil)tiazol-2-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2 ,6-diona en forma de un solido de color blanco (200 mg, rendimiento del 67 %); p.f.: 218-220 °C; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,89 -2,05 (m, 1H, CHH), 2,42 (d, J = 4,5 Hz, 4H, CH2), 2,44 - 2,49 (m, 1H, CHH), 2,55 (s a, 1H, CHH), 2,82 - 3,08 (m, 1H, CHH), 3,57 (dd, J = 5,2, 9,7 Hz, 6H, CH2, CH2, CH2), 4,18 - 4,55 (m, 2H, CH2), 5,12 (dd, J = 5,0, 13,1 Hz, 1H, CH), 5,56 (s, 2H, CH2), 7,38 (dd, J = 5,6, 7,5 Hz, 2H, Ar), 7,45 - 7,65 (m, 2H, Ar), 10,98 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 522,31, 31,18, 45,03, 51,62, 52,97, 57,52, 66,10, 66,93, 115,47, 115,99, 118,09, 129,86, 129,99, 133,46, 152,71, 152,88, 165,07, 167,81, 170,93, 172,81; LCMS MH = 457; HPLC: Waters Xterra C-18, 3,9 x 150 mm, 5 |jm, 1 ml/min, 240 nm, Gradiente (CH3CN/HCOONH4 al 0,1 %) de 5/95 a 95/5 en 5 min, 95/510 min: tR = 3,95 (99,07 %); Anal. Calc. para C 22 H 24 N 4 OsS: C, 57,88; H, 5,30; N, 12,27; Observado: C, 57,64; H, 5,36; N, 12,14.
5.34 ACIDO 1-{4-[2-(2,6-DIOXO-PIPERIDIN-3-IL)-1-OXO-2,3-DIHIDRO-1H-ISOINDOL-4-ILOXIMETIL]-BENCIL}-PIRROLIDIN-2-CARBOXWCO
Figure imgf000057_0001
Etapa 1: A la solucion agitada de 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (900 mg, 1,89 mmol) en acetonitrilo (18 ml) se le anadieron pirrolidina-2-carboxilato de (S)-terc-butilo (357 mg, 2,08 mmol) y DIPEA (0,661 ml, 3,79 mmol). La solution de color amarillo resultante se agito a temperatura ambiente durante una noche y la reaction se completo. La mezcla de reaction se concentro y se disolvio en DCM (30 ml). La solucion se lavo por NaHCO 3 (ac., sat., 15 ml). La capa organica se seco por MgSO 4 y se concentro para dar ester terc-butflico del acido 1-{4-[2-(1-Carbamoil-3-metoxicarbonil-propil)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-bencil}-pirrolidina-2-carboxflico en bruto en forma de un aceite de color pardo claro (1,23 g). El compuesto se uso en la siguiente etapa sin purification adicional: LCMS MH = 566.
Etapa 2: A la solucion agitada de 1-(4-((2-(1-amino-5-metoxi-1,5-dioxopentan-2-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)bencil)pirrolidina-2-carboxilato de (2S)-terc-butilo (1,071 g, 1,89 mmol) en Tetrahidrofurano(18 ml) se le anadio en una portion t-butiloxido potasico (0,212 g, 1,89 mmol) a 0 °C. La solucion se volvio de color amarillo inmediatamente. La mezcla se agito a 0 °C durante 10 min y a temperatura ambiente durante 1 h antes de la dilution de la mezcla de reaccion con DCM (70 ml). La mezcla se acidifico por HCl (1 N, ac., 3 ml) y despues se basifico con NaHCO 3 (ac., sat., 3 ml). La mezcla se anadio por salmuera (15 ml) y se extrajo. La capa acuosa se extrajo con DCM (25 ml). Las capas organicas se combinaron y se secaron sobre MgSO 4 . La mezcla se filtro y se concentro para dar un solido de color blanco. El solido de color blanco se agito en DCM (2 ml) y eter (40 ml) durante una noche y se filtro para dar ester terc-butflico del acido 1-{4-[2-(2,6-Dioxo-piperidin-3-il)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-bencil}-pirrolidina -2-carboxflico en forma de un solido de color blanco (700 mg, rendimiento del 69 %). El filtrado se concentro para dar un segundo extracto de ester terc-butflico del acido 1-{4-[2-(2,6-Dioxo-piperidin-3-il)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-bencil}-pirrolidina-2-carboxflico con algunas impurezas en forma de un solido de color blanquecino (301 mg, rendimiento del 30 %): 1 H RMN (DMSO-de) 51,38 (s, 9H, CH 3 , CH 3 , CH 3 ), 1,62 - 1,88 (m, 3H, CHH, CH2), 1,91 - 2,10 (m, 2H, CH2), 2,29 - 2,48 (m, 2H, CHH, CHH), 2,52 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,75 - 3,00 (m, 2H, CHH, CHH), 3,06 - 3,21 (m, 1H, CHH), 3,45 - 3,59 (m, 1H, CHH), 3,89 (d, J = 13,0 Hz, 1H, CHH), 4,18 - 4,48 (m, 2H, CHH, CHH), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CHH), 5,22 (s, 2H, CH2), 7,32 (d, J = 7,6 Hz, 4H, Ar), 7,39 - 7,54 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); LCMS MH = 534.
Etapa 3: A la solucion agitada de 1-(4-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)bencil)pirrolidina-2-carboxilato de (2S)-terc-butilo (620 mg, 1,16 mmol) en DCM (5 ml) se le anadio hidrogenocloruro, 2 M en eter dietflico (5,81 ml, 11,62 mmol). La mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 2 dias y la reaccion se completo.
La mezcla de reaccion se concentro y el residuo se purifico por cromatografia ISCO y HPLC prep. para dar acido 1-{4-[2-(2,6-Dioxo-piperidin-3-il)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloxi metil]-bencil}-pirrolidina-2-carboxflico (170 mg, rendimiento del 31 %) en forma de un solido de color blanquecino: HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 jm , 1 ml/min, 240 nm, 20/80 (CH 3 CN/H 3 PO 4 al 0,1 %): tR = 3,81 (96,0 %); p.f.: 260-262 °C; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 5 1,66 -1,81 (m, 1H, CHH), 1,82 -2,09 (m, 3H, CHH, CHH, CHH), 2,21 (dc, J = 8,5, 12,7 Hz, 1H, CHH), 2,36 -2,50 (m, 1H, CHH), 2,57 - 2,69 (m, 1H, CHH), 2,80 - 3,02 (m, 1H, CHH), 3,24 - 3,38 (m, 1H, CHH), 3,47 - 3,56 (m, 1H, CHH), 4,04 (d, J = 12,8 Hz, 1H, CHH), 4,04 - 4,04 (m, 1H, CHH), 4,21 - 4,36 (m, 2H, CHH, CHH), 4,47 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CHH), 5,28 (s, 2H, CH2), 7,32 - 7,41 (m, 2H, Ar), 7,47 - 7,58 (m, 5H, Ar); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 522,33, 22,72, 28,52, 31,18, 45,10, 51,56, 52,81, 56,90, 65,76, 69,32, 114,99, 115,25, 127,67, 129,38, 129,80, 129,95, 133,30, 135,95, 136,03, 153,45, 167,97, 170,96, 172,35, 172,81; LCMS MH = 478; Anal. Calc. para C 26 H 27 N 3 O 6 +3H 2 O 0,2CH 2 Ch : C, 57,37; H, 6,14; N, 7,66; Observado: C, 57,08; H, 5,74; N, 7,36.
5.35 3-[1-OXO-4-(4-[1,2,3]TRIAZOL-1-ILMETIL-BENCILOXI)-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000058_0001
Etapa 1: A la solucion agitada de 1H-1,2,3-triazol (139 mg, 2,020 mmol) en Acetonitrilo (15 ml) se le anadieron 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (800 mg, 1,683 mmol) y DIPEA (0,588 ml, 3,37 mmol) a temperatura ambiente. La solucion transparente resultante se agito a temperatura ambiente durante 19 h. A la mezcla se le anadio DCM (50 ml). La capa organica se extrajo con NaHCO 3 (sat. ac., 5 ml) y salmuera (10 ml). La capa organica se concentro para la purificacion por ISCO para dar ester metflico del acido 4-Carbamoil-4-[1-oxo-4-(4-[1,2,3]triazol-1-ilmetil-benciloxi)-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco en forma de un solido de color blanco (710 mg, rendimiento del 70 %); LCMS MH = 464; 1 H RMN (DMSO-de) 51,96 - 2,31 (m, 4H, CH2, CH2), 3,50 (s, 3H, CH3), 4,39 (d, J = 17,8 Hz, 1H, CHH), 4,52 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,67 - 4,78 (m, 1H, CHH), 5,23 (s, 2H, CH2), 5,63 (s, 2H, CH2), 7,18 (s, 1H, Ar), 7,23 - 7,37 (m, 4H, Ar), 7,40 - 7,53 (m, 3H, Ar), 7,57 (s, 1H, NHH), 7,75 (d, J = 0,8 Hz, 1H, Ar), 8,20 (d, J = 0,8 Hz, 1H, Ar).
Etapa 2: A la solucion agitada de 4-(4-(4-((1H-1,2,3-triazol-1-il)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-amino-5-oxopentanoato de metilo (710 mg, 1,53 mmol) en Tetrahidrofurano(15 ml) se le anadio KOtBu (200 mg, 1,78 mmol) a 0 °C. La mezcla de reaccion se agito a 0 °C durante 4 h y se anadio KOtBu (40 mg, 0,36 mmol). 30 min mas tarde, la mezcla de reaccion se diluyo por EtOAc (50 ml) y se acidifico por HCl (1 N, ac., 4 ml) seguido de la adicion de NaHCO 3 (sat., ac., 4 ml) y salmuera (15 ml). La mezcla se extrajo y la capa organica se seco sobre MgSO4. La mezcla se filtro y el filtrado se concentro al vado para dar un solido de color blanco. El solido de color blanco se suspendio en eter (30 ml) y se agito durante el fin de semana. La suspension se filtro para dar 3-[1-Oxo-4-(4-[1,2,3]triazol-1-ilmetil-benciloxi)-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (440 mg, rendimiento del 67 %); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 jm , 1 ml/min, 240 nm, 30/70, CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 4,84 min (98,4 %); p.f.: 133-135 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,90 - 2,03 (m, 1H, M01), 2,35 -2,48 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,63 (m, 1H, CHH), 2,81 - 3,00 (m, 1H, CHH), 4,24 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,40 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,10 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CHH), 5,23 (s, 2H, CH2), 5,63 (s, 2H, CH2), 7,26 - 7,37 (m, 4H, Ar), 7,43 - 7,53 (m, 3H, Ar), 7,75 (d, J = 0,8 Hz, 1H, CH), 8,20 (d, J = 0,9 Hz, 1H, CH), 10,96 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 5 22,31, 31,18, 45,06, 51,56, 52,26, 69,12, 114,90, 115,26, 124,94, 127,95, 128,06, 129,78, 129,93, 133,30, 133,52, 135,95, 136,51, 153,36, 167,97, 170,95, 172,81; LCMS MH = 432; Anal. Calc. para C23H21N5O4+07 H2O: C, 62,21; H, 5,08; N, 15,77; Observado: C, 62,07; H, 4,88; N, 15,46.
5.36 3-[4-(4-[1,4]OXAZEPAN-4-ILMETIL-BENCILOXI)-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000058_0002
Etapa 1: A la solucion agitada de 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (600 mg, 1,26 mmol) en Acetonitrilo (10 ml) a temperatura ambiente se le anadieron clorhidrato de 1,4-oxazepano (208 mg, 1,51 mmol) y DIPEA (0,44 ml, 2,52 mmol). La mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante una noche y se diluyo por DCM (50 ml). La mezcla se lavo con NaHCO 3 (ac., sat. 5 ml) y salmuera (15 ml). La capa organica se seco por MgSO 4 y se concentro al vado para dar ester metflico del acido 4-Carbamoil-4-[4-(4-[1,4]oxazepan-4-ilmetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco en bruto en forma de un aceite pegajoso (810 mg). El compuesto se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional; LCMS MH = 496.
Etapa 2: A la suspension agitada de 4-(4-(4-((1,4-oxazepan-4-il)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-amino-5-oxopentanoato de metilo (625 mg, 1,26 mmol) en Tetrahidrofurano(10 ml) a 0 °C se le anadio en una porcion KOtBu (142 mg, 1,26 mmol). La mezcla de reaccion se agito a 0 °C durante 1 hora y se anadio KOtBu (70 mg). 15 minutos mas tarde, la mezcla de reaccion se diluyo por EtOAc (50 ml) y se acidifico por HCl (ac., 1 N, 3 ml) seguido de la adicion de NaHCO 3 (ac., sat., 3 ml) y salmuera (10 ml). La mezcla se extrajo y la capa organica se seco por MgSO4. La mezcla se filtro y el filtrado se concentro para dar un solido de color blanco. El solido se agito en eter dietflico (20 ml) y se filtro para dar 3-[4-(4-[1,4]Oxazepan-4-ilmetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (484 mg, rendimiento del 83 %); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 |jm, 1 ml/min, 240 nm, del 5 al 95 % en 10 min, (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 5,7 min (95,9 %); p.f.: 119-121 °C; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,72 - 1,88 (m, 2H, CH2), 1,92 - 2,04 (m, 1H, CHH), 2,35 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,69 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 2,83 - 2,99 (m, 1H, CHH), 3,54 - 3,65 (m, 4H, CH2, CH2), 3,69 (t, J = 6,0 Hz, 2H, CH2), 4,25 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,42 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CHH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,26 - 7,39 (m, 4H, Ar), 7,40 - 7,54 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 522,34, 29,28, 31,18, 45,07, 51,55, 53,24, 57,10, 60,98, 67,69, 68,33, 69,38, 114,94, 115,22, 127,66, 128,73, 129,78, 129,93, 133,30, 135,24, 139,05, 153,49, 167,99, 170,96, 172,81; LCMS MH = 464; Anal. Calc. para C 2 eH 29 N 3 O 6 +0,5 H2O : C, 66,09; H, 6,40; N, 8,89, Observado: C, 65,83; H, 6,04; N, 8,60.
5.37 3-[1-OXO-4-(4-[1,2,3]TRIAZOL-2-ILMETIL-BENCILOXI)-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000059_0001
Etapa 1. A la solucion agitada de 1H-1,2,3-triazol (139 mg, 2,020 mmol) en Acetonitrilo (15 ml) se le anadieron 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (800 mg, 1,683 mmol) y DIPEA (0,588 ml, 3,37 mmol) a temperatura ambiente. La solucion transparente resultante se agito a temperatura ambiente durante 19 h y se anadio otra mezcla de reaccion igual (escala al 12,5 % de esta) seguido de 1H-1,2,3-triazol (60 mg, 0,87 mmol). La mezcla de reaccion combinada se agito a temperatura ambiente durante una noche y despues se anadio por Dc M (50 ml), NaHCO 3 (sat. ac., 5 ml) y salmuera (10 ml). La mezcla se extrajo y la capa organica se concentro para purificacion por ISCO para dar ester metflico del acido 4-Carbamoil-4-[1-oxo-4-(4-[1,2,3]triazol-2-ilmetil-benciloxi)-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco en forma de un aceite transparente pegajoso (102 mg, rendimiento del 9 %); LCMS MH = 464; 1 H RMN (DMSO-de) 51,97 - 2,31 (m, 4H, CH2, CH2), 3,50 (s, 3H, CH3), 4,39 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,52 (d, J = 17,8 Hz, 1H, CHH), 4,66 - 4,78 (m, 1H, CHH), 5,23 (s, 2H, CH2), 5,67 (s, 2H, CH2), 7,13 -7,22 (m, 1H, NHH), 7,23 - 7,32 (m, 4H, Ar), 7,40 - 7,52 (m, 3H, Ar), 7,58 (s, 1H, NHH), 7,81 (s, 2H, Ar).
Etapa 2. A la solucion agitada de 4-(4-(4-((2H-1,2,3-triazol-2-il)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-amino-5-oxopentanoato de metilo (100 mg, 0,216 mmol) en Tetrahidrofurano (Volumen: 4 ml) a 0 °C se le anadio en una porcion KOtBu (29,1 mg, 0,259 mmol). La mezcla de reaccion se agito a 0 °C durante 1 h. Se anadio KOtBu (30 mg, 0,26 mmol) a la mezcla de reaccion. La mezcla de reaccion se agito a 0 °C durante 30 minutos y despues se diluyo por EtOAc (40 ml). La solucion resultante se acidifico por HCl (ac., 1 N, 2 ml) y despues se basifico por NaHCO 3 (ac., sat., 2 ml), y seguido de la adicion de salmuera (10 ml). La mezcla se extrajo y la capa organica se seco sobre MgSO 4 . La suspension se filtro y se concentro para dar un solido de color blanco. El solido de color blanco se suspendio en eter dietflico (10 ml) y se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla se filtro para dar 3-[1-oxo-4-(4-[1,2,3]triazol-2-ilmetil-benciloxi)-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (56 mg, rendimiento del 32 %); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 40/60, (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 3,71 min (96,8 %); p.f.: N/A; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,90 - 2,04 (m, 1H, CHH), 2,35 -2,47 (m, 1H, CHH), 2,54 - 2,63 (m, 1H, CHH), 2,81 - 3,00 (m, 1H, CHH), 4,24 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,40 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,10 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CHH), 5,23 (s, 2H, CH2), 5,67 (s, 2H, CH2), 7,21 - 7,38 (m, 4H, Ar), 7,41 - 7,54 (m, 3H, Ar), 7,81 (s, 2H, triazol), 10,96 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO^) 522,31, 31,16, 45,04, 51,55, 57,23, 69,14, 114,90, 115,25, 127,95, 129,78, 129,94, 133,19, 134,70, 135,70, 136,39, 152,69, 167,98, 170,93, 172,80; LCMS MH = 432; Anal. Calc. para C23H21N5O4 : C, 64,03; H, 4,91; N, 16,23; Observado: N/A.
5.38 PREPARACION DE 3-(4-((6-(MORFOLINOMETIL) BENZOFURAN-2-IL)METOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000059_0002
Etapa 1: Una mezcla de 2-hidroxi-4-metilbenzaldehido (4,2 g, 31,1 mmol), carbonato potasico (5,6 g, 40,5 mmol) y tamiz molecular (4,0 g) en DMF (40 ml) se calento a 50 °C. Se anadio lentamente bromoacetato de etilo (5,2 g, 31,1 mmol) a 50-55 °C. La mezcla de reaccion se calento a 75 °C durante 20 min despues a 110 °C durante 1 h. La mezcla de reaccion se enfrio a temperatura ambiente y se diluyo con EtOAc (100 ml). La mezcla se filtro y el solido se lavo con EtOAc (50 ml). El filtrado se lavo con agua (3 x 60 ml) y salmuera (60 ml) y se seco. El disolvente se retiro al vado y la mezcla en bruto se purifico por cromatografia (SiO2, CH2Cl2) para dar 6-metilbenzofuran-2-carboxilato de etilo (1 g, 16 %): 1H RMN (CDCls) 51,42 (t, J = 6 Hz, 3H), 2,49 (s, 3H), 4,40-4,47 (c, J = 6 Hz, 2H), 7,11-7,14 (d, J = 9 Hz, 1H), 7,38 (s, 1H), 7,48 (s, 1H), 7,53-7,56 (t, J = 9 Hz, 1H).
Etapa 2: Una mezcla de 6-metilbenzofuran-2-carboxilato de etilo (0,9 g, 4,6 mmol) y N-bromosuccinimida (1 g, 6,0 mmol) en CCl4 (20 ml) se calento a 70 °C en un bano de aceite con una bombilla de 300 W que hada hizo brillar la mezcla de reaccion durante 4 h. La mezcla de reaccion se enfrio y se filtro y el solido se lavo con CH2CI2 (30 ml). El filtrado se concentro al vado y la mezcla en bruto se purifico por cromatograffa (SiO2, EtOAc al 10 %/hexano) para dar 6-(bromometil)benzofuran-2-carboxilato de etilo (1,3 g, 100 %): 1 H RMN (DMSO-da) 81,34 (t, J = 6 Hz, 3H), 4,34­ 4,41 (c, J = 6 Hz, 2H), 4,87 (s, 2H), 7,44-7,53 (m, 1H), 7,76-7,96 (m, 3H).
Etapa 3: Una mezcla de carbonato potasico (3,6 g, 26 mmol), morfolina (1,0 g, 11,3 mmol) y cantidad catafftica de 18-corona-6 en acetona (15 ml) se calento a 60 °C en un bano de aceite. Una solucion de 6-(bromometil)benzofuran-2-carboxilato de etilo (2,0 g, 7,1 mmol) en acetona (15 ml) se anadio lentamente y la mezcla se calento en un bano de aceite a 60 °C durante 3 h. La mezcla de reaccion se enfrio a temperatura ambiente y se filtro. El filtrado se concentro y el residuo se disolvio en EtOAc (100 ml), se lavo con agua (2 x 30 ml) y salmuera (30 ml) y se seco. El disolvente se retiro al vado y el residuo se purifico por cromatograffa (SO2, EtOAc al 30 %/hexano durante 15 min despues al 60 % durante 20 min y mantenimiento durante 15 min) para dar 6-(morfolinometil)benzofuran-2-carboxilato de etilo (1,2 g, 60 %): 1 H RMN (CDCla) 81,43 (t, 6 Hz, 3H), 2,45-2,48 (m, 4H), 3,62 (s, 2H), 3,71-3,73 (m, 4H), 4,41-4,48 (c, J = 6 Hz, 2H), 7,27-7,31 (m, 1H), 7,50 (s, 1H), 7,58-7,62 (m, 2H).
Etapa 4: Una solucion de LiAlH^THF (1 M, 5,4 ml, 5,4 mmol) en THF (10 ml) se enfrio en un bano de hielo a 5 °C. Una solucion de 6-(morfolinometil)benzofuran-2-carboxilato de etilo (1,2 g, 4,2 mmol) en THF (20 ml) se anadio gota a gota a 5-10 °C. La mezcla de reaccion se agito en un bano de hielo durante 30 min y despues se inactivo cuidadosamente con agua (10 ml). La mezcla se diluyo con Na2CO3 sat. (40 ml) y CH2O 2 (50 ml) y la capa ac. se extrajo con CH2O 2 (3 x 30 ml). La solucion combinada de CH2Cl2 se lavo con agua (40 ml) y salmuera (40 ml) y se seco. El disolvente se retiro para dar (6-(morfolinometil)benzofuran-2-il)metanol (0,9 g, 88 %): 1 H RMN (CDCla) 8 2,40(a, 1H), 2,44-2,47 (m, 4H), 3,59 (s, 2H), 3,71-3,72 (m, 4H), 4,75 (s, 2H), 6,63 (s, 1H), 7,18-7,20 (m, 1H), 7,45­ 7,48 (m, 2H).
Etapa 5: Una mezcla de trifenilfosfina unida a poffmero (3,5 g, 4,3 mmol) en THF (40 ml) se enfrio en un bano de hielo a 3 °C. Se anadio lentamente azodicarboxilato de diisopropilo (0,8 g, 4,6 mmol) a 3-5 °C. Despues de agitarse a 3 °C durante 10 min, se anadio una solucion de (6-(morfolinometil)benzofuran-2-il)metanol (0,9 g, 3,6 mmol) y 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,9 g, 3,1 mmol) en THF (60 ml) a 3-8 °C. Despues de agitarse durante 10 min, el bano de hielo se retiro y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se filtro y el solido se lavo con CH2O 2 (30 ml). Los filtrados combinados se concentraron y el residuo resultante se disolvio en CH2O 2 (80 ml), se lavo con NaHCO3 sat. (40 ml), agua (40 ml) y salmuera (40 ml) y se seco. El disolvente se retiro al vado y el residuo se purifico por cromatograffa (SiO2, CH2Cl2 durante 5 min despues en CH3OH al 3 %/CH2Cl2 durante 5 en mantenimiento durante 20 min despues al 5 % durante 5 min y mantenimiento durante 20 min) para dar 5-amino-4-(4-((6-(morfolinometil)benzofuran-2-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1,0 g, 44 %).
Etapa 6: Una mezcla de 5-amino-4-(4-((6-(morfolinometil)benzofuran-2-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1,0 g, 1,9 mmol) y carbonato potasico (0,3 g, 1,9 mmol) en DMF (10 ml) se calento en un bano de aceite a 80 °C durante 3 h. La mezcla de reaccion se enfrio a temperatura ambiente y se diluyo con EtOAc (80 ml). La mezcla se filtro y el filtrado se lavo con agua (3 x 35 ml) y salmuera (35 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatograffa (SiO2, CH2Cl2 durante 5 min despues en CH3OH al 3 %/CH2Cl2 durante 5 min y mantenimiento durante 15 min despues al 5 % durante 5 min y mantenimiento durante 20 min) para dar 3-(4-((6-(morfolinometil)benzufuran-2-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,24 g, 26 %): p.f. 142­ 144 °C; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 81,95-1,99 (m, 1H), 2,35-2,59 (m, 1H), 2,84-2,96 (m, 1H), 3,33 (s, 4H), 3,56 (a, 2H), 4,26 (d, J = 17,7 Hz, 1H), 4,36 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 5,07-5,13 (dd, J = 5,1 y 13,2 Hz, 1H), 5,42 (s, 2H), 7,09 (s, 1H), 7,23 (a, 1H), 7,34-7,37 (dd, J = 0,9 y 6,9 Hz, 1H), 7,46-7,61 (m, 4H), 10,96 (s, 1H); 13 C RMN (DMSO-d6) 822,29, 31,17, 45,04, 51,56, 53,05, 62,50, 66,15, 107,01, 111,38, 115,10, 115,66, 121,02, 124,22, 126,55, 129,81, 129,93, 133,43, 135,00, 152,55, 152,96, 154,67, 167,87, 170,93, 172,80; Calc. para C27H27N3O6 0,5H 2 O: C, 65,06; H, 5,66; N, 8,43, Observado: C, 64,97; H, 5,49; N, 8,39.
5.39 3-(1-OXO-4-(4-(TIOMORFOLINOMETIL)BENCILOXI) ISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000061_0001
Etapa 1.5-Amino-4-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo:
Se suspendio 1,4-bis(Bromometil)benceno (2,71 g, 10,26 mmol) en acetonitrilo seco (40 ml). La suspension se calento hasta 60 °C hasta que se produjo la disolucion ~15 min). La temperatura se redujo a 50 °C y a la solucion se le anadio K 2 CO 3 (0,473 g, 3,42 mmol) en forma de un solido seguido de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1 g, 3,42 mmol, preparation descrita en el presente documento). La suspension de color blanco resultante se agito a 50 °C durante ~3 h, momento en el que el analisis por LCMS indico que el material de partida de fenol se hatia consumido. La mezcla de reaction en bruto se agito y se filtro con suction. El solido restante en matraz y en el embudo con filtro se aclaro con MeCN mmimo (~5 ml). El filtrado se concentro al vado para dar 2,6 g de un solido de color blanco. El solido se disolvio en DCM mmimo y se purifico usando una columna ultrarrapida de SiO 2 (CombiFlash, columna prerrellenada de 40 g de SiO 2 ). La columna se eluyo con DCM al 100 % durante ~15 min, un gradiente de MeOH al 5 % en DCM durante 5 min, y despues se mantuvo en MeOH al 5 % en DCM. Las fracciones se combinaron y se concentraron para dar 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo en forma de un solido de color blanco (1,3 g, rendimiento del 80 %): 1 H RMN (DMSO-de) 51,94 - 2,34 (m, 4H, CH2, CH2), 3,50 (s, 3H, CH3), 4,33 - 4,62 (m, 2H, CH2), 4,72 (s, 2H, CH2,), 5,25 (s, 2H, CH2), 5,27 - 5,36 (m, 1H, CH), 7,19 (s a, 1H, NH), 7,23 - 7,36 (m, 2H, Ar), 7,40 - 7,70 (m, 6H, Ar, NH); LC/MS M+H = 475, 477,
Figure imgf000061_0002
Etapa 2. 3-(4-(4-(Bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona:
Se disolvio 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (2,05 g, 4,31 mmol) en THF (50 ml) y la solucion se enfrio en un bano de hielo seco/acetona a -76 °C. Mientras se agitaba, se anadio en una portion KOfBu solido (0,532 g, 4,74 mmol) a la solucion transparente. La mezcla de reaccion se volvio de color amarillo claro y se agito durante ~90 min a -76 °C. Una solucion enfriada de HCl ac. 1 N (20 ml) se transfirio rapidamente a la mezcla de reaccion, manteniendo la temperatura a -76 °C. La mezcla se volvio inmediatamente de color blanco lechoso y el bano de CO 2 seco/acetona se retiro, permitiendo que la mezcla se calentase mientras se agitaba. La mezcla se concentro en un evaporador rotatorio para retirar la mayor parte de THF (concentrado a un volumen fijo a 160 mbar y bano de agua ~35 °C). Tras la concentracion de la mezcla de reaccion, un solido de color blanco se retiro por precipitacion. La suspension de color blanco se diluyo con mas agua (~80 ml) y despues se filtro por succion. La torta se lavo con mucha cantidad de agua (volumen de filtrado total ~150 ml) y se seco por succion.
La torta se lavo con Et2O (~50 ml), se seco por succion y despues se puso en horno de vado a 40 °C durante una noche para dar 3-(4-(4-(Bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (1,8 g, rendimiento del 94 %): HPLC: Waters Symmetry C-ie, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 50/50 CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 3,70 min (97,9 %); p.f., 123-125 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,89 - 2,05 (m, 1H, CHH), 2,32 -2,48 (m, 1H, CHH), 2,52 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,78 - 3,04 (m, 1H, CHH), 4,26 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,43 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,72 (s, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,0, 13,1 Hz, 1H, CH), 5,25 (s, 2H, CH2), 7,24 - 7,36 (m, 2H, Ar), 7,41 - 7,54 (m, 5H, Ar), 10,83 - 11,07 (m, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 522,33, 31,18, 34,15, 45,06, 51,56, 69,12, 114,94, 115,28, 127,95, 128,33, 129,41, 129,80, 131,93, 133,31, 136,78, 153,36, 167,97, 170,95, 172,81; LC/MS M+H = 443, 445. El solido se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
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Etapa 3. 3-(1-Oxo-4-(4-(tiomorfolinometil)benciloxi)isoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona:
En un vial de reaccion de 20 ml se anadio tiomorfolina (62,8 mg, 0,609 mmol) a una solucion de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (150 mg, 0,338 mmol) en MeCN (5 ml). La mezcla de reaccion transparente se agito a temperatura ambiente durante 2 h. La mezcla de reaccion se enfrio a 0 °C y se inactivo con la adicion de 1,5 ml de acido acetico glacial. Se formo una suspension que se repartio entre EtOAc (100 ml) y NaHCO 3 1 N (30 ml). La capa organica se lavo con salmuera, se seco (Na 2 SO 4 ), y se concentro al vad o para dar un solido vUreo. El solido se trituro con agua y se sonico para dar un solido de flujo libre. Este solido se recogio por filtracion, se seco por succion y despues se seco en horno de vad o a 40 °C para dar 3-(1-oxo-4-(4-(tiomorfolinometil)benciloxi)isoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (127 mg, rendimiento del 81 %): HPLC: Waters Symmetry C1s, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 17/83 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 5,05 min (97,0 %); p.f.: 134-136 °C; 1 H RMN (DMSO^) 51,86 - 2,05 (m, 1H, CHH), 2,32 -2,47 (m, 1H, CHH), 2,60 (s, 9H, 4 x CH2, CHH), 2,80 - 3,00 (m, 1H, CHH), 3,49 (s, 2H, CH2), 4,25 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,42 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 4,8, 12,9 Hz, 1H, CH), 5,22 (s, 2H, CH2), 7,01 - 7,38 (m, 4H, Ar), 7,38 - 7,65 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 522,33, 27,14, 31,16, 45,06, 51,55, 54,36, 62,23, 69,38, 114,94, 115,20, 127,63, 128,84, 129,78, 129,93, 133,28, 135,22, 137,89, 153,48, 167,97, 170,95, 172,81; LC/MS M+H = 466; Anal calc. para C25H27N3O4S 0,25 H2O: C, 63,88; H, 5,90; N, 8,94; S, 6,82, Observado:
C, 63,85; H, 5,93; N, 8,67; S, 6,50.
5.40 3-{1-OXO-4-[4-(1-OXO-TIOMORFOLIN-4-ILMETIL)-BENCILOXI]-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERON-2,6-DIONA
Figure imgf000062_0001
En un vial de reaccion de 20 ml se anadio N,N-diisopropiletilamina (0,197 ml, 1,128 mmol) a una suspension de clorhidrato de 1-oxo-tiomorfolina (97 mg, 0,620 mmol) en MeCN (5 ml). La mezcla se sonico a temperatura ambiente hasta que el solido se descompuso. Tras la disolucion completa, se anadio en una porcion 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (250 mg, 0,564 mmol) a la solucion y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente. Despues de aproximadamente 1 hora, se anadio MeCN (~5 ml) para mejorar la agitacion. La mezcla se agito durante 4 horas mas a temperatura ambiente y despues se diluyo con EtOAc (15 ml). La suspension se agito durante unos pocos minutos y despues se filtro en un embudo con filtro de poro fino con succion. La torta se lavo con una pequena porcion de EtOAc (~5 ml), se seco por succion y despues se seco adicionalmente en horno de vad o a 40 °C para dar 3-{1-oxo-4-[4-(1-oxo-tiomorfolin-4-ilmetil)-benciloxi]-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (110 mg, rendimiento del 40 %):
HPLC: Waters Symmetry C1s, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 15/85 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 4,25 min (98,9 %); p.f.: 170-172 °C, 1 H RMN (DM SO^) 51,90 - 2,05 (m, 1H, CHH), 2,36 -2,47 (m, 1H, CHH), 2,53 -2,66 (m, 3H, CH2, CHH), 2,66 - 2,77 (m, 2H, CH2), 2,79 - 3,01 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 3,57 (s, 2H, CH2), 4,25 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,42 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,26 - 7,39 (m, 4H, Ar), 7,40 - 7,54 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 522,33, 31,16, 43,56, 45,07, 45,51, 51,55, 61,15, 69,36, 114,96, 115,22, 127,67, 128,92, 129,80, 129,95, 133,28, 135,38, 137,67, 153,48, 167,97, 170,96, 172,81; LC/MS M+H = 482; Anal calc. para C25H27N3O5S 1,0 H2O: C, 60,10; H, 5,85; N, 8,41; S, 6,42, Observado:
C, 59,94; H, 5,52; N, 8,26; S, 6,45.
5.41 (S)-2-(3-METIL-2,6-DIOXOPIPERON-3-IL)-4-(4-MORFOUNOMETIL)BENCILOXI)ISOINDOUN-1,3-DIONA
Figure imgf000063_0001
Etapa 1: En un MFR de 250 se suspendieron 3-hidroxiftalato de dimetilo (1 g, 4,76 mmol) y trifenil fosfina en poliestireno (1,6 mmol/g de resina) (2,98 g, 4,76 mmol) en THF (40 ml) a temperatura ambiente. La mezcla se enfrio a 0 °C y se anadio DIAD (1,850 ml, 9,52 mmol) mediante una jeringa, despues de 10 minutos, se anadio (4-(morfolinometil)fenil) metanol (0,986 g, 4,76 mmol) en THF (10 ml), y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se filtro, la resina se aclaro con lavados de DCM y MeOH (2 x 50 ml cada lavado), los filtrados combinados y los lavados se concentraron al vado para dar un jarabe. El residuo se purifico por ISCO (columna de 80 g, MeOH en DCM, gradiente de 0-5 en 50 min, MeOH al 5 % en DCM 20 min) para dar 3-(4-(morfolinometil)benciloxi)ftalato de dimetilo (770 mg, rendimiento del 41 %). 1 H RMN (DMSO-de) 52,29 - 2,40 (m, 4H, CH2, CH2), 3,45 (s, 2H, CH2), 3,53 - 3,60 (m, 4H, CH2, CH2), 3,79 (s, 3H, CH3), 3,82 (s, 3H, CH3), 5,21 (s, 2H, CH2), 7,33 (d, J = 0,9 Hz, 4H, Ar), 7,44 - 7,59 (m, 3H, Ar).
Etapa 2: A una solucion de 3-(4-(morfolinometil)benciloxi) ftalato de dimetilo (770 mg, 1,928 mmol) en EtOH (20 ml, 343 mmol), se le anadio NaOH (3 N, 10 ml, prefabricado de una solucion 12 N). La mezcla se calento a reflujo durante 1 hora. La mezcla de reaccion se evaporo a sequedad al vado. Se anadio HCl (1 N) al residuo y se ajusto el pH a 3, y el precipitado se recogio por filtracion para dar acido 3-(4-(morfolinometil)benciloxi)ftalico en forma de un solido de color blanco (350 mg, rendimiento del 49 %). 1 H RMN (DMSO-ds) 52,27 - 2,43 (m, 4H, CH2, CH2), 3,49 (s, 2H, CH2), 3,53 - 3,65 (m, 4H, CH2, CH2), 5,17 (s, 2H, CH2), 7,16 - 7,63 (m, 7H, Ar).
Etapa 3: La mezcla de acido 3-(4-(morfolinometil)benciloxi)ftalico (300 mg, 0,808 mmol) y bromhidrato de (S)-3-amino-3-metilpiperidin-2,6-diona (198 mg, 0,889 mmol) en piridina (20 ml) se calento a reflujo durante 2 dias y se enfrio a temperatura ambiente. Se destilo piridina de presion reducida, el residuo se repartio entre EtOAc (50 ml) y bicarbonato sodico (10 ml), la capa organica se separo y se lavo con agua (2 x 10 ml) y salmuera (10 ml), y se seco (MgSO 4 ). El disolvente se evaporo a presion reducida, el residuo se purifico por ISCO (columna de 12 g, MeOH en DCM, gradiente del 0-3 % en 25 min) para dar (S)-2-(3-metil-2,6-dioxopiperidin-3-il)-4-(4-(morfolinometil)benciloxi)isoindolin-1,3-diona (100 mg, rendimiento del 26 %). p.f. : 178-180 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 5 1,88 (s, 3H, CH3), 1,98 - 2,12 (m, 1H, CHH), 2,29 - 2,42 (m, 4H, CH2, CH2), 2,52 - 2,83 (m, 3H, CHH, CHH, CHH), 3,47 (s, 2H, CH2), 3,53 - 3,66 (m, 4H, CH2, CH2), 5,31 (s, 2H, CH2), 7,29 - 7,51 (m, 5H, Ar), 7,57 (d, J = 8,5 Hz, 1H, Ar), 7,80 (dd, J = 7,4, 8,5 Hz, 1H, Ar), 10,98 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DM SO^) 520,96, 28,55, 29,03, 53,11, 58,53, 62,06, 66,13, 69,93, 115,09, 116,14, 119,86, 127,35, 129,01, 133,24, 134,74, 136,83, 137,69, 155,33, 166,06, 167,42, 172,10, 172,27; MH = 478; HPLC: Waters Xterra C-18, 3,9 x 150 mm, 5 |jm, 1 ml/min, 240 nm, Gradiente (CH3CN/HCOONH4 al 0,1 %) de 5/95 a 95/5 en 5 min, 95/510 min: tR = 3,72 (100 %); Anal. Calc. para C26H27N3O6 C, 65,40; H, 5,70; N, 8,80; Observado: C 65,28; H 5,67; N 8,60.
5.42 3-[1-OXO-4-(4-[1,2,4]TRIAZOL-1-ILMETIL-BENCILOXI)-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000063_0002
Etapa 1: Preparacion de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[1-oxo-4-(4-[1,2,4]triazol-1-ilmetil-benciloxi)-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco
A una solucion de 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,804 g, 1,691 mmol) en acetonitrilo (20 ml) se le anadieron 1H-1,2,4-triazol (0,350 g, 5,07 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,839 ml, 5,07 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante dos dias, despues se diluyo por cloruro de metileno (50 ml) y se lavo con bicarbonato sodico saturado (10 ml) y salmuera
(10 ml). La capa organica se concentro y se purifico sobre columna de gel de sflice (MeOH/CH2Cl2, gradiente del 1 % al 9 % en 50 min) para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[1-oxo-4-(4-[1,2,4]triazol-1-ilmetil-benciloxi)-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco en forma de un aceite (0,53 g, rendimiento del 67 %); 1H Rm N (DMSO-d6) 51,96 - 2,36 (m, 4H, CHH, CHH, CHH, CHH), 3,50 (s, 3H, CH3), 4,32 - 4,58 (m, 2H, CH2), 4,72 (dd, J = 4,9, 10,4 Hz, 1H, NCH), 5,23 (s, 2H, CH2), 5,37 - 5,50 (m, 2H, CH2), 7,13 - 7,21 (m, 1H, NHH), 7,24 - 7,36 (m, 4H, Ar), 7,40 - 7,53 (m, 3H, Ar), 7,57 (s a, 1H, n Hh ), 7,98 (s, 1H, Ar), 8,66 (s, 1H, Ar). Se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 2: Preparacion de 3-[1-Oxo-4-(4-[1,2,4]triazol-1-ilmetil-benciloxi)-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona A una solucion agitada de 4-(4-(4-((1H-1,2,4-triazol-1-il)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-amino-5-oxopentanoato de metilo (0,49 g, 1,057 mmol) en THF (20 ml) en un bano de hielo se le anadio 2-metilpropan-2-olato potasico (0,119 g, 1,057 mmol). Despues de agitar durante 10 minutos, se anadio HCl 1 N (2 ml), se neutralizo por bicarbonato sodico saturado (3 ml), y se agito con acetato de etilo (50 ml). La fase organica se separo, se lavo con salmuera (10 ml) y se evaporo para dar un solido de color blanco, que se purifico sobre columna de gel de sflice (MeOH/cH 2 Cl 2 , gradiente del 0 % al 4 % en 40 min) para dar 3-[1-Oxo-4-(4-[1,2,4]triazol-1-ilmetil-benciloxi)-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,177 g, rendimiento del 39 %); p.f., 233-235 °C; HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 95/5 en 5 min, isocratica a 95/5 en 5 min (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 5,43 min (96,4 %); 1 H RMN (DMSO-de) 5 1,90 - 2,05 (m, 1H, CHH), 2,36 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,82 - 2,99 (m, 1H, CHH), 4,17 - 4,48 (m, 2H, CH2), 5,10 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,23 (s, 2H, CH2), 5,43 (s, 2H, CH2), 7,25 - 7,37 (m, 4H, Ar), 7,42 - 7,55 (m, 3H, Ar), 7,98 (s, 1H, Ar), 8,67 (s, 1H, Ar), 10,96 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 522,35, 31,20, 45,08, 51,58, 51,78, 69,19, 114,95, 115,27, 128,02, 129,81, 129,97, 133,32, 136,09, 136,35, 144,23, 151,72, 153,40, 167,99, 170,96, 172,82; LC/MS (M+1)+ = 432; Anal calc. para C23H21N5O4 0,2 H2O: C, 63,50; H, 4,96; N, 16,10, Observado: C, 63,11; H, 4,89; N, 16,00.
5.43 ACIDO 1-{4-[2-(2,6-DIOXO-PIPERIDIN-3-IL)-1-OXO-2,3-DIHIDRO-1H-ISOINDOL-4-ILOXIMETIL]-BENCIL}-PIRROLIDIN-2-CARBOXfLICO
Figure imgf000064_0001
Etapa 1: Ester terc-butflico del acido 1-{4-[2-(1-carbamoil-3-metoxicarbonil-propil)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-bencil}-pirrolidina-2-carboxflico
A la mezcla agitada de 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (798 mg, 1,679 mmol) y clorhidrato de pirrolidina-2-carboxilato de (R)-terc-butilo (418 mg, 2,015 mmol) en Acetonitrilo (12 ml) a temperatura ambiente se le anadio por DIPEA (0,586 ml, 3,36 mmol). La solucion resultante se agito a temperatura ambiente durante 19 h antes de diluirse por DCM (50 ml). La solucion se lavo con NaHCO 3 (sat, ac., 5 ml) y salmuera (15 ml). La capa organica se seco por MgSO4 y se concentro al vado. El residuo se purifico por cromatografia ISCO para dar ester terc-butflico del acido 1-{4-[2-(1-Carbamoil-3-metoxicarbonil-propil)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-bencil} -pirrolidina-2-carboxflico en forma de un aceite transparente (840 mg, rendimiento del 88 %) que se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional; LCMS MH = 566; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,38 (s, 9H, CH3, CH3), 1,64 - 1,86 (m, 3H, CH, CH2), 1,93 -2,12 (m, 2H, CH2), 2,13 -2,22 (m, 1H, CHH), 2,22 -2,30 (m, 2H, CH2), 2,36 (c, J = 7,7 Hz, 1H, CHH), 2,77 -2,92 (m, 1H, CHH), 3,13 (dd, J = 5,0, 8,8 Hz, 1H, CHH), 3,44 - 3,59 (m, 4H, CHH, CH3), 3,88 (d, J = 13,2 Hz, 1H, CHH), 4,39 (d, J = 17,8 Hz, 1H, CHH), 4,53 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,72 (dd, J = 4,7, 10,2 Hz, 1H, CHH), 5,21 (s, 2H, CH2), 7,18 (s, 1H, NHH), 7,24 - 7,37 (m, 4H, Ar), 7,39 -7,53 (m, 3H, Ar), 7,58 (s, 1H, NHH).
Ester terc-butflico del acido 1-{4-[2-(2,6-dioxo-piperidin-3-il)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-bencil}-pirrolidina-2-carboxflico
A la solucion agitada de 1-(4-((2-(1-amino-5-metoxi-1,5-dioxopentan-2-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)bencil)pirrolidina-2-carboxilato de (2R)-terc-butilo (840 mg, 1,485 mmol) en tetrahidrofurano(13 ml) a 0 °C se le anadio KOtBu (167 mg, 1,485 mmol). La mezcla de reaccion se agito a 0 °C durante 20 min antes de diluirse por EtOAc (50 ml). La mezcla se acidifico por HCl (1 N, ac., 3 ml) seguido de la adicion de NaHCO 3 (ac. sat., 3 ml) y salmuera (15 ml). La mezcla se extrajo y la capa organica se lavo con NaCl (10 ml de salmuera 10 ml de agua). La capa organica se seco por MgSO 4 y se concentro al vado para dar ester terc-butflico del acido 1-{4-[2-(2,6-Dioxopiperidin-3-il)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-bencil}-pirrolidina-2-carboxflico en forma de un aceite transparente pegajoso (810 mg, rendimiento en bruto del 102 %) que se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional; LCMS MH = 534.
Etapa 3: Acido 1-{4-[2-(2,6-dioxo-piperidin-3-il)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-bencil}-pirrolidina-2-carboxflico
A la solucion de 1-(4-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)bencil)pirrolidina-2-carboxilato de (2R)-terc-butilo (0,795 g, 1,489 mmol) en DCM (Volumen: 5 ml) se le anadio HCl, 2 M en eter dietflico (11,17 ml, 22,34 mmol) a temperatura ambiente durante 4 dias y la mezcla de reaccion se concentro al vado y despues se anadio HCl 2 M reden preparado (eter, 15 ml). La suspension se agito a temperatura ambiente durante a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se concentro al vado y el residuo se agito en acetonitrilo (15 ml) durante 4 h. La mezcla se filtro para dar acido 1-{4-[2-(2,6-Dioxo-piperidin-3-il)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-bencil}-pirrolidina-2-carboxflico en forma de un solido de color blanquecino (420 mg, rendimiento del 57,5 %); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 pm, 1 ml/min, 240 nm, 18/82, (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 4,84 min (96,67 %); p.f.: 233-235 °C; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,75 - 2,06 (m, 4H, CHH, CHH, CH2), 2,45 (d, J = 13,4 Hz, 2H, CHH, CHH), 2,54 - 2,65 (m, 1H, CHH), 2,83 - 3,02 (m, 1H, CHH), 3,11 - 3,27 (m, 1H, CHH), 3,32 - 3,46 (m, 1H, CHH), 4,18 - 4,34 (m, 3H, CHH, CHH, CHH), 4,39 - 4,52 (m, 2H, CHH, CHH), 5,12 (dd, J = 5,0, 13,1 Hz, 1H, CHH), 5,29 (s, 2H, CH2), 7,33 (dd, J = 4,9, 7,7 Hz, 2H, Ar), 7,45 - 7,53 (m, 1H, Ar), 7,56 (s, 4H, Ar), 10,98 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 521,95, 22,36, 27,90, 31,18, 45,06, 51,58, 54,00, 56,96, 65,32, 69,01, 115,00, 115,36, 127,79, 129,81, 129,95, 130,78, 130,95, 133,34, 137,83, 153,33, 167,94, 169,95, 170,96, 172,83; LCMS MH = 478; Anal. Calc. para C26H27N3O60,95HCl 1 ,2H 2 O: C, 58,51; H, 5,73; N, 7,87; Cl, 6,31; Observado: C, 58,57; H, 5,46; N, 7,89; Cl, 6,14.
5.443-[1-OXO-4-(4-[1,2,4]TRIAZOL-4-ILMETIL-BENCILOXI)-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000065_0001
Etapa 1: Preparacion de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[1-oxo-4-(4-[1,2,4]triazol-4-ilmetil-benciloxi)-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco
A una solucion de 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,804 g, 1,691 mmol) en acetonitrilo (20 ml) se le anadieron 1H-1,2,4-triazol (0,350 g, 5,07 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,839 ml, 5,07 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante dos dias, despues se diluyo por cloruro de metileno (50 ml) y se lavo con bicarbonato sodico saturado (10 ml) y salmuera (10 ml). La capa organica se concentro y se purifico sobre columna de gel de sflice (MeOH/CH 2 Cl 2 , gradiente del 1 % al 9 % en 50 min) para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[1-oxo-4-(4-[1,2,4]triazol-4-ilmetil-benciloxi)-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco en forma de un aceite (0,25 g, rendimiento del 32 %); 1 H Rm N (DMSO-de) 51,98 - 2,33 (m, 4H, CHH, CHH, CHH, CHH), 3,50 (s, 3H, CH3), 4,34 - 4,58 (m, 2H, CH2), 4,72 (dd, J = 4,9, 10,4 Hz, 1H, NCH), 5,26 (d, J = 17,9 Hz, 4H, CH2, CH2), 7,18 (s a, 1H, NHH), 7,22 - 7,38 (m, 4H, Ar), 7,39 - 7,53 (m, 3H, Ar), 7,58 (s a, 1H, NHH), 8,62 (s, 2H, Ar). Se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 2: Preparacion de 3-[1-Oxo-4-(4-[1,2,4]triazol-4-ilmetil-benciloxi)-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona
A una solucion agitada de 4-(4-(4-((4H-1,2,4-triazol-4-il)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-amino-5-oxopentanoato de metilo (0,23 g, 0,496 mmol) en THF (15 ml) en un bano de hielo se le anadio 2-metilpropan-2-olato potasico (0,134 g, 1,19 mmol). La mezcla se agito durante 10 minutos y se anadio HCl 1 N (2 ml a pH = 2), despues se neutralizo por bicarbonato sodico saturado (3 ml a pH = 7). Se anadio acetato de etilo (40 ml) a la mezcla y se agito durante cinco minutos. La fase organica se separo, se lavo con salmuera (10 ml), y se evaporo para dar un solido de color blanco, que se purifico sobre columna de gel de sflice (MeOH/CH 2 Cl 2 del 0 % al 10 % en 30 min) para dar 3-[1-Oxo-4-(4-[1,2,4]triazol-4-ilmetil-benciloxi)-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (58 mg, rendimiento del 27 %); p.f. 173-175 °C; HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 pm, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 95/5 en 5 min, isocratica a 95/5 en 5 min (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 5,05 min (95,2 %); 1 H RMN (DMSO-ds) 51,91 -2,04 (m, 1H, CHH), 2,35 -2,48 (m, 1H, CHH), 2,53 -2,65 (m, 1H, CHH), 2,83 -2,99 (m, 1H, CHH), 4,18 - 4,46 (m, 2H, CH2), 5,10 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,23 (s, 2H, CH2), 5,29 (s, 2H, CH2), 7,26 - 7,38 (m, 4H, Ar), 7,43 - 7,54 (m, 3H, Ar), 8,62 (s, 2H, 2NH), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-ds) 5 22,35, 31,20, 45,08, 47,26, 51,59, 69,13, 114,97, 115,29, 127,81, 128,18, 129,81, 129,97, 133,32, 136,53, 143,22, 153,37, 167,98, 170,96, 172,83, LC/MS (M+1)+ = 432; Anal calc. para C23H21N5O4C, 64,03; H, 4,91; N, 16,23, Observado: C, 61,85; H, 5,06; N, 14,92.
5.453-(4-((4-((2-METIL-1H-IMIDAZOL-1-IL)METIL)BENCIL) OXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000065_0002
A la suspension de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,5 g, 1,128 mmol) y 2-metil-1H-imidazol (0,108 g, 1,315 mmol) en acetonitrilo (5 ml) se le anadio DIEA (0,22 ml, 1,260 mmol) a temperatura ambiente. La suspension se agito a temperatura ambiente durante una noche. A la suspension se le anadio agua (15 ml). La suspension se agito a temperatura ambiente durante 15 min. La suspension se filtro y se lavo con agua (3 x 10 ml) para dar un solido. El solido se purifico con HPLC prep. (Xbridge C18, 10 ^m, 50 x 250 mm, 143 ml/min, 240 nM, 2/98/2 min, gradiente a 95/5 de acido formico al 0,1 % en C^CN/acido formico al 0,1 % en H2O en 13 min), y las fracciones deseadas se recogieron. El disolvente se retiro al vado para dar un aceite. Al aceite se le anadio EtOAc (20 ml) para dar un solido y la suspension se agito a temperatura ambiente durante 30 min. La suspension se filtro y se lavo con EtOAc (10 ml) y eter (10 ml) para dar 3-(4-((4-((2-metil-1H-imidazol-1-il)metil)bencil)oxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (43 mg, rendimiento del 8,6 %): HPLC: (Waters Symmetry C 18 , 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 20/80 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %): TR = 3,18 min (99,4 %); p.f.: 275-277 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 5 1,86 - 2,07 (m, 1H, CHH), 2,22 (s, 3H, CH3), 2,33 - 2,49 (m, 1H, CHH), 2,52 - 2,63 (m, 1H, CHH), 2,79 - 3,03 (m, 1H, CHH), 4,16 - 4,30 (m, 1H, CHH), 4,33 - 4,46 (m, 1H, CHH), 5,10 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,15 (s, 2H, CH2), 5,22 (s, 2H, CH2), 6,76 (s a, 1H, Ar), 7,08 - 7,20 (m, 3H, Ar), 7,26 - 7,36 (m, 2H, Ar), 7,43 - 7,52 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 5 12,70, 22,31, 31,16, 45,04, 48,31, 51,53, 69,16, 114,93, 115,25, 120,23, 126,46, 127,04, 128,06, 129,78, 129,95, 133,28, 135,88, 137,34, 153,39, 167,97, 170,95, 172,81; LCMS: MH = 445; Anal. Calc. para C25H24N4O4 0,3 H2O: C, 66,74; H, 5,51; N, 12,45; Observado: C, 66,69; H, 5,24; N, 12,23.
5.46 3-{4-[4-(2,3-DIHIDRO-INDOL-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000066_0001
Etapa 1 Preparation de ester metflico del acido 4-[4-(4-Bromometil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-4-carbamoil-butrnco
En un MFR de 1000 ml se cargaron 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (9,76 g, 33,4 mmol), 1,4-bis(bromometil)benceno (26,4 g, 100 mmol) y carbonato potasico (4,61 g, 33,4 mmol), y se anadieron 500 ml de CH3CN. La mezcla se agito a 50 °C durante cinco horas, se filtro y se aclaro con CH3CN (20 ml). El filtrado se evaporo para dar un solido de color blanco, que se purifico por columna de gel de sflice (MeOH/CH2Cl2) para dar ester metflico del acido 4-[4-(4-Bromometil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-4-carbamoil-butrnco en forma de un solido de color blanco (13,4 g, rendimiento del 84 %). 1H RMN (DMSO-d6) 51,97 -2,13 (m, 1H, CHH), 2,13 - 2,35 (m, 3H, CH2,CHH), 3,50 (s, 3H, CH2), 4,32 - 4,63 (m, 2H, CH2), 4,65 - 4,84 (m, 3H, CH2, NCH), 5,25 (s, 2H, CH2), 7,19 (s, 1H, NHH), 7,23 - 7,36 (m, 2H, Ar), 7,38 - 7,52 (m, 5H, Ar), 7,58 (s a, 1H, NHH).
Etapa 2: Preparacion de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-{4-[4-(2,3-dihidro-indol-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-butmco
A la solution en CH3CN de 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,5 g, 1,052 mmol) se le anadieron indolina (0,142 ml, 1,262 mmol) y DIPEA (0,220 ml, 1,262 mmol). La mezcla se agito durante una noche. La mezcla se concentro y se extrajo con agua (15 ml) y EtOAc (20 ml). La capa organica se lavo con NaHCO3 (sat. 15 ml) y salmuera (15 ml) y se concentro en un evaporador rotatorio para dar ester metflico del acido 4-Carbamoil-4-{4-[4-(2,3-dihidro-indol-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-butmco en forma de un solido (0,5 g, 93 %). Se uso en la siguiente etapa directamente.
Etapa 3: Preparacion de 3-{4-[4-(1,3-Dihidro-isoindol-2-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro--isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona
A la solucion en THF de 5-amino-4-(4-(4-(indolin-1-ilmetil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,5 g, 0,974 mmol) se le anadio KOtBu (0,131 g, 1,168 mmol) a 0 °C. Despues de agitar a 0 °C durante 15 min, a la mezcla se le anadieron 2 ml de HCl 1 N seguido de 10 ml de NaHCO3 sat. y 25 ml de EtOAc. La mezcla se separo y la capa organica se lavo con agua (10 ml) y salmuera (10 ml) y se concentro. El solido de color blanco resultante se purifico sobre columna de gel de sflice eluida con DCM y MeOH para dar 3-{4-[4-(1,3-Dihidro-isoindol-2-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro--isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (200 mg, 43 %). Punto de fusion: 173-175 °C. LC-MS m/e = 482, HPLC Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometres, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 5/95 a 5/95 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 % en H2O durante 5 min y mantenimiento a 95/5 durante 5 min: 7,58 min (93 %). 1H RMN (DMSO^) 5 1,90 - 2,04 (m, 1H, CHH), 2,33 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,56 -2,65 (m, 1H, CHH), 2,79 - 3,02 (m, 4H, CH2, CHH), 3,13 - 3,30 (m, 2H, CH2), 3,32 (s, 3H, CH2), 4,10 - 4,59 (m, 4H, CH2, CH2), 4,99 - 5,18 (m, 1H, NCH), 5,23 (s, 2H, CH2), 6,49 - 6,65 (m, 2H, Ar), 6,82 - 7,16 (m, 2H, Ar), 7,25 - 7,43 (m, 4H, Ar), 7,42 - 7,62 (m, 3H, Ar), 10,96 (s, 1H, NH). 13C RMN (DMSO-d6) 522,35, 27,92, 31,20, 45,09, 51,58, 52,15, 52,76, 69,39, 106,89, 114,98, 115,24, 117,20, 124,24, 127,04, 127,85, 128,07, 129,47, 129,81, 129,97, 133,31, 135,30, 138,16, 152,16, 153,48, 168,01, 170,96, 172,83, Anal calc. para C27H29N3O4: % de C: 72,33, % de H: 5,65, % de N: 8,73, Observado: % de C: 72,14, % de H: 5,51, % de N: 8,47.
5.47 3-(4-((3-(MORFOUNOMETIL)-1,2,4-OXADIAZOL-5-IL)METOXI)-1-OXOISOINDOUN-2-IL)PIPERON-2,6-DIONA
Figure imgf000067_0001
Etapa 1: Se anadio borohidruro sodico (179 mg, 4,72 mmol) a la solucion de 3-(clorometil)-1,2,4-oxadiazol-5-carboxilato de etilo (900 mg, 4,72 mmol) en etanol (10 ml) a 0 °C. La mezcla se agito a 0 °C durante 1 hora, y despues se inactivo con HCl (1 N, 5 ml). El disolvente se evaporo, el residuo se repartio entre acetato de etilo (30 ml) y agua (10 ml), la capa organica se lavo con salmuera, se seco sobre sulfato de magnesio, y el disolvente se evaporo para dar 510 mg de (3-(clorometil)-1,2,4-oxadiazol-5-il)metanol, y el producto en bruto se uso en la siguiente etapa sin purification adicional.
Etapa 2: Se anadio trifenilfosfina soportada por polimero (1,6 mmol/g, 3,16 g, 5,05 mmol) a una suspension agitada de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (984 mg, 3,37 mmol) en THF (30 ml) a 0 °C, seguido de azodicarboxilato de diisopropilo (1,02 g, 5,05 mmol), despues de agitar durante 10 minutos, se anadio (3-(clorometil)-1,2,4-oxadiazol-5-il)metanol (500 mg, 3,37 mmol), la mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche y se filtro. La resina se lavo con acetato de etilo (10 x 20 ml). El filtrado combinado se evaporo a sequedad. El producto en bruto se purifico por ISCO (columna de 80 g, MeOH/CH 2 Cl 2 , gradiente del 0 % al 5 % en 40 min) para dar 5-amino-4-(4-((3-(clorometil)-1,2,4-oxadiazol-5-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (480 mg, rendimiento del 34 %). 1 H RMN (DMSO-de) 51,20 (d, J = 7,0 Hz, 2H, CH2), 1,95 - 2,22 (m, 2H, CH2), 3,50 (s, 3H, CH3), 4,38 - 4,62 (m, 2H, CH2), 4,73 (d, J = 5,7 Hz, 1H, CH), 4,94 (s, 2H, CH2), 5,72 (s, 2H, CH2), 7,21 (s a, 1H, NHH), 7,32 - 7,41 (m, 2H, Ar), 7,49 (d, J = 7,7 Hz, 1H, Ar), 7,61 (s a, 1H, NHH).
Etapa 3: A una solucion de 5-amino-4-(4-((3-(clorometil)-1,2,4-oxadiazol-5-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (460 mg, 1,088 mmol) en acetonitrilo (10 ml) se le anadieron morfolina (0,114 ml, 1,306 mmol) y trietil amina (0,182 ml, 1,306 mmol). La mezcla formada se agito a temperatura ambiente durante una noche. El disolvente se evaporo hasta sequedad, el producto en bruto se repartio entre acetato de etilo (50 ml) y agua (10 ml), la capa organica se separo y se lavo con salmuera y se seco sobre sulfato de magnesio. El disolvente se evaporo para dar 5-amino-4-(4-((3-(morfolinometil)-1,2,4-oxadiazol-5-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (410 mg, rendimiento del 80 %). 1 H Rm N (DMsO-d 6 ) 51,18 (d, J = 5,3 Hz, 2H, CH 2 ), 1,96 -2,23 (m, 2H, CH2), 2,42 - 2,50 (m, 4H, CH2, CH2), 3,50 (s, 3H, CH3), 3,53 - 3,62 (m, 4H, CH2, CH2), 3,68 (s, 2H, CH2), 4,30 - 4,65 (m, 2H, CH2), 4,67 - 4,83 (m, 1H, CH), 5,68 (s, 2H, CH2), 7,21 (s a, 1H, NHH), 7,28 - 7,42 (m, 2H, Ar), 7.48 (d, J = 7,7 Hz, 1H, Ar), 7,61 (s a, 1H, NHH).
Etapa 4: A una solucion de 5-amino-4-(4-((3-(morfolinometil)-1,2,4-oxadiazol-5-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (350 mg, 0,739 mmol) en THF se le anadio terc-butoxido potasico (83 mg, 0,739 mmol) a 0 °C. La mezcla se agito a 0 °C durante 1 hora, se anadio mas cantidad de terc-butoxido potasico (20 mg, 0,27 mmol), y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 1 hora mas. La reaction se interrumpio con acido acetico (1 ml), el disolvente se evaporo a sequedad, el residuo se repartio entre acetato de etilo (50 ml) y bicarbonato sodico saturado (10 ml). La capa organica se separo y se lavo con salmuera, se seco sobre sulfato de magnesio, el disolvente se evaporo al vado, y el producto en bruto se purifico por ISCO (columna de 40 g, MeOH/CH 2 Cl 2 , gradiente del 0 % al 5 % en 40 min) para dar 3-(4-((3-(morfolinometil)-1,2,4-oxadiazol-5-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (230 mg, rendimiento del 70 %). p.f.: 150-152 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,90 - 2,08 (m, 1H, CHH), 2,31 - 2,44 (m, 1H, CHH), 2,44 - 2,49 (m, 4H, CH2, CH2), 2,53 (s a, 1H, CHH), 2,79 - 3,05 (m, 1H, CHH), 3,48 - 3,63 (m, 4H, CH2, CH2), 3,69 (s, 2H, CH2), 4,21 - 4,52 (m, 2H, CH2), 5,12 (dd, J = 5,0, 13,3 Hz, 1H, CH), 5,69 (s, 2H, CH2), 7,38 (dd, J = 7,6, 11,0 Hz, 2H, Ar), 7,47 - 7,66 (m, 1H, Ar); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 522,28, 31,18, 45,00, 51,62, 51,93, 52,58, 61,11,65,95, 115,25, 116,41, 129,90, 130,00, 133,58, 152,43, 166,98, 167,69, 170,92, 172,81, 174,88; HPLC: Waters Xterra C-18, 3,9 x 150 mm, 5 |jm, 1 ml/min, 240 nm, 20/80 de CH3CN/HCOONH4 al 0,1 % tR = 4,65 (100 %); Anal. Calc. para C21H23N5O6 C, 57,14; H, 5,26; N, 15,86; Observado: C, 56,99; H, 4,95; N, 15,90.
5.48 3-{4-[3-(4-ISOPROPIL-PIPERIDIN-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000068_0001
A la solucion en CH3CN (15 ml) de 3-(4-(3-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,43 g, 0,970 mmol) se le anadieron 4-isopropilpiperidina (0,160 g, 1,261 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,321 ml, 1,940 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla turbia se agito a temperatura ambiente durante 2 horas. La suspension de color blanco se evaporo al vado para eliminar CH3CN. El solido de color blanco resultante se agito en agua (50 ml) y se extrajo con cloruro de metileno (3 x 80 ml). Las fases combinadas de cloruro de metileno se lavaron por bicarbonato sodico saturado (2 x 50 ml), se secaron sobre sulfato sodico y se concentraron para dar en forma de un solido de color blanquecino (72 mg, rendimiento del 50 %); p.f., 153-155 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 95/5 en 5 min, isocratica a 95/5 en 5 min (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 4,74 min (96,3 %). 1H RMN (DMSO-de) 50,83 (d, J = 6,8 Hz, 6H, 2CH3), 0,89 - 1,02 (m, 1H, CH), 1,14 (cd, J = 3,9, 12,2 Hz, 2H, CH2), 1,37 (dc, J = 6,6, 13,2 Hz, 1H, CH), 1,55 (dd, J = 1,4, 10,9 Hz, 2H, CH2), I , 75 - 1,91 (m, 2H, CH2), 1,92 - 2,05 (m, 1H, CHH), 2,34 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,80 (d, J = I I , 5 Hz, 2H, CH2), 2,84 - 3,00 (m, 1H, CHH), 3,43 (s, 2H, CH2), 4,20 - 4,47 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,25 (s, 2H, CH2), 7,20 - 7,28 (m, 1H, Ar), 7,28 - 7,41 (m, 5H, Ar), 7,43 - 7,53 (m, 1H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH).13C RMN (DMSO-de) 5 19,68, 22,39, 28,89, 31,21, 31,95, 41,85, 45,09, 51,59, 53,62, 62,25, 69,63, 115,17, 115,26, 126,13, 127,87, 128,29, 129,78, 129,95, 133,31, 136,44, 139,01, 153,46, 167,99, 170,95, 172,80, LC/MS (M+1)+ = 490; Anal calc. para C29H35N3O4 0,2 H2O: C, 70,62; H, 7,23; N, 8,52; Observado: C, 70,41; H, 7,26; N, 8,44.
5.49 3-{1-OXO-4-[3-(4-FENIL-PIPERIDIN-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000068_0002
A la solucion en CH3CN (15 ml) de 3-(4-(3-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,442 g, 0,997 mmol) se le anadieron 4-fenilpiperidina (0,209 g, 1,296 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,330 ml, 1,994 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla turbia se agito a temperatura ambiente durante una noche. El disolvente se evaporo al vado para dar un solido de color blanquecino, que se agito en agua (50 ml) y se extrajo con cloruro de metileno (3 x 50 ml). Las fases combinadas de cloruro de metileno se retrolavaron con agua (50 ml) y salmuera (50 ml), se secaron sobre sulfato sodico y se evaporaron para dar un solido de color blanquecino (~0,5 g), que se agito en acetonitrilo (10 ml) en un bano de aceite de 50 °C durante 10 minutos, despues se filtro y se seco en un horno de vado para dar 3-{1-Oxo-4-[3-(4-fenil-piperidin-1-ilmetil)-benciloxi]-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,36 g, rendimiento del 69 %); p.f., 226-228 °C. HpLc : Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 95/5 en 5 min, isocratica a 95/5 en 5 min (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 4,79 min, 96,0 %. 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,53 - 1,79 (m, 4H, 2CH2), 1,89 -2,11 (m, 3H, CHH, CH2), 2,33 - 2,47 (m, 2H, CHH, CHH), 2,53 - 2,62 (m, 1H, CHH), 2,80 - 2,99 (m, 3H, CH2, CHH), 3,51 (s, 2H, CH2), 4,21 - 4,49 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,27 (s, 2H, CH2), 7,12 - 7,53 (m, 12H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO^) 522,36, 31,20, 33,05, 41,81, 45,13, 51,59, 53,57, 62,23, 69,63, 115,19, 115,26, 125,94, 126,24, 126,67, 128,04, 128,29, 128,45, 129,78, 129,97, 133,32, 136,49, 138,82, 146,21, 153,46, 167,99, 170,95, 172,80, LC/MS (M+1)+ = 524; Anal calc. para C32H33N3O4 0,3 H2O: C, 72,65; H, 6,40; N, 7,94, Observado: C, 72,48; H, 6,33; N, 7,78.
5.50 AMIDA DEL ACIDO 1-{4-[2-(2,6-DIOXO-PIPERIDIN-3-IL)-1-OXO-2,3-DIHIDRO-1H-ISOINDOL-4-ILOXIMETIL]-BENCIL}-1H-[1,2,3]TRIAZOL-4-CARBOXWCO
Figure imgf000068_0003
E tapa 1: E s te r m e tflico de l a c ido 4 -[4 -(4 -A z id o m e til-b e n c ilo x i)-1 -o x o -1 ,3 -d ih id ro - is o in d o l-2 - il]-4 -c a rb a m o il-b u tm c o A la mezcla de azida sodica (0,226 g, 3,47 mmol) en etanol (40 ml) a temperatura ambiente se le anadio 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1,5 g, 3,16 mmol). La suspension resultante se calento a reflujo durante 4 h antes de enfriarse y anadirse agua (50 ml) y EtOAc (200 ml). La mezcla se extrajo y la capa organica se lavo con salmuera (50 ml). La capa organica se seco por MgSO4 y se concentro al vado para dar ester metflico del acido 4-[4-(4-Azidometil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-4-carbamoilbutrnco en forma de un solido pegajoso de color amarillo (1,5 g, rendimiento en bruto del 109 %)). El compuesto se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional; LCMS Mh = 439.
Etapa 2: Amida del acido propinoico
Se anadio gota a gota propiolato de etilo (2 g, 20,39 mmol) al amoniaco acuoso agitado (5,99 g, 102 mmol) a -78 °C durante 7 min. La mezcla resultante se agito por debajo de -78 °C durante 1 h y se dejo a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se concentro a alto vado para dar amida del acido propinoico en forma de un aceite de color amarillo (1,41 g, rendimiento en bruto del 100 %). El compuesto se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional; 1H RMN (DMSO-de) 54,07 (s, 1H, CH), 7,62 (s a, 1H, NHH), 8,07 (s a, 1H, NHH); 13C RMN (DMSO-de) 5 75,37, 78,51, 153,23.
Etapa 3: Ester metflico del acido 4-carbamoil-4-{4-[4-(4-carbamoil-[1,2,3]triazol-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidroisoindol-2-il}-butmco
En un vial para microondas se anadieron 5-amino-4-(4-(4-(azidometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (300 mg, 0,69 mmol) y propiolamida (81 mg, 1,17 mmol) en Etanol (2 ml). La mezcla se calento en un horno microondas durante 15 min a 150 °C. La mezcla de reaccion se concentro y se agito en EtOAc (20 ml). La mezcla se filtro para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-{4-[4-(4-carbamoil-[1,2,3]triazol-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-butmco en forma de un solido (255 mg, rendimiento en bruto del 73 %); LCMS m H = 507.
Etapa 4: Amida del acido 1-{4-[2-(2,6-dioxo-piperidin-3-il)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-il oximetil]-bencil}-1H-[1,2,3]triazol-4-carboxflico
A la suspension agitada de 5-amino-4-(4-(4-((4-carbamoil-1H-1,2,3-triazol-1-il)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (250 mg, 0,49 mmol) en tetrahidrofurano (15 ml) a temperatura ambiente se le anadio tercbutoxido potasico (55,4 mg, 0,49 mmol). La suspension resultante se agito a temperatura ambiente durante dos h y se mantuvo en el frigorifico durante una noche. A la mezcla de reaccion se le anadio en dos porciones terc-butoxido potasico (110 mg, 1,0 mmol) y se agito a temperatura ambiente durante 1 h antes de diluirse por EtOAc (30 ml). La suspension se anadio por HCl (ac., 1 N, 4 ml) y se filtro. El filtrado se extrajo y la capa organica se seco por MgSO4 y se concentro al vado. El residuo se purifico por cromatografia ISCO y el producto se agito en CH3CN (5 ml). La mezcla se filtro para dar amida del acido 1-{4-[2-(2,6-Dioxo-piperidin-3-il)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-bencil}-1H-[1,2,3]triazol-4-carboxflico
En forma de un solido de color blanco (21 mg, rendimiento del 9 %); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 |jm, 1 ml/min, 240 nm, 30/70, (CH3CN/HsPO4 al 0,1 %), 3,5 min (97,4 %); p.f.: N/A; 1H RMN (DMSO-de) 51,90 - 2,03 (m, 1H, CHH), 2,44 (dd, J = 4,3, 13,2 Hz, 1H, CHH), 2,54 -2,63 (m, 1H, CHH), 2,82 -2,98 (m, 1H, CHH), 4,24 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 4,40 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,10 (dd, J = 5,0, 13,3 Hz, 1H, CHH), 5,24 (s, 2H, CH2), 5,66 (s, 2H, CH2), 7,25 - 7,41 (m, 4H, Ar), 7,42 - 7,57 (m, 4H, NHH, Ar), 7,85 (s, 1H, NHH), 8,61 (s, 1H, triazol), 10,96 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-d6) 5 22,32, 31,19, 45,07, 51,57, 52,75, 69,12, 114,94, 115,29, 126,66, 128,15, 129,82, 129,97, 133,32, 135,45, 136,73, 143,12, 153,38, 161,39, 167,99, 170,97, 172,83; LCMS MH = 475; Anal. Calc. para C24H22N6Oe : C, 60,75; H, 4,67; N, 17,71; Observado: N/A.
5.51 AMIDA DEL ACIDO 3-{4-[2-(2,6-DIOXO-PIPERIDIN-3-IL)-1-OXO-2,3-DIHIDRO-1H-ISOINDOL-4-ILOXIMETIL]-BENCIL}-3H-[1,2,3]TRIAZOL-4-CARBOXfLICO
Figure imgf000069_0001
Etapa 1: Ester metflico del acido 4-[4-(4-Azidometil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-4-carbamoil-butmco A la mezcla de azida sodica (0,226 g, 3,47 mmol) en etanol (40 ml) a temperatura ambiente se le anadio 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1,5 g, 3,16 mmol). La suspension resultante se calento a reflujo durante 4 h antes de enfriarse y anadirse agua (50 ml) y EtOAc (200 ml). La mezcla se extrajo y la capa organica se lavo con salmuera (50 ml). La capa organica se seco por MgSO4 y se concentro al vado para dar ester metflico del acido 4-[4-(4-Azidometil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-4-carbamoilbutrnco en forma de un solido pegajoso de color amarillo (1,5 g, rendimiento en bruto del 109 %)). El compuesto se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional; LCMS MH = 439.
Etapa 2: Amida del acido propinoico
Se anadio gota a gota propiolato de etilo (2 g, 20,39 mmol) al amoniaco acuoso agitado (5,99 g, 102 mmol) a -78 °C durante 7 min. La mezcla resultante se agito por debajo de -78 °C durante 1 h y se dejo a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se concentro a alto vado para dar amida del acido propinoico en forma de un aceite de color amarillo (1,41 g, rendimiento en bruto del 100 %). El compuesto se puso en la siguiente etapa sin purificacion adicional; 1H RMN (DMSO-d6) 54,07 (s, 1H, CH), 7,62 (s a, 1H, NHH), 8,07 (s a, 1H, NHH); 13C RMN (DMSO-d6) 5 75,37, 78,51, 153,23.
Etapa 3: Ester metflico del acido 4-carbamoil-4-{4-[4-(5-carbamoil-[1,2,3]triazol-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidroisoindol-2-il}-butmco
En un vial para microondas se anadieron 5-amino-4-(4-(4-(azidometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (300 mg, 0.686 mmol) y propiolamida (81 mg, 1.166 mmol) en Etanol (2 ml). La mezcla se calento en un horno microondas durante 15 min a 150 °C. La mezcla de reaccion se concentro y se agito en EtOAc (20 ml). La mezcla se filtro y el filtrado se concentro al vado y el residuo se purifico por cromatografia ISCO para dar ester metflico del acido 4-Carbamoil-4-{4-[4-(5-carbamoil-[1,2,3]triazol-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-butrnco en forma de un solido (50 mg, rendimiento del 14 %); LCMS MH = 507.
Etapa 4: Amida del acido 3-{4-[2-(2,6-Dioxo-piperidin-3-il)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-il oximetil]-bencil}-3H-[1,2,3]triazol-4-carboxflico
A la solucion agitada de 5-amino-4-(4-(4-((5-carbamoil-1H-1,2,3-triazol-1-il)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (50,0 mg, 0,099 mmol) en tetrahidrofurano (10 ml) a temperatura ambiente se le anadio 2-metilpropan-2-olato potasico (41,00 mg, 0,37 mmol). La mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 2 h antes de anadirse por EtOAc (15 ml) seguido de la adicion de HCl (1 N, ac., 2 ml). La mezcla se extrajo y la capa organica se lavo con NaHCO3 (ac., sat., 5 ml) y salmuera (5 ml). La capa organica se seco por MgSO4 y se concentro al vado para dar un solido de color blanco. El solido de color blanco se agito en CH3CN (4 ml) y eter (15 ml). La mezcla se filtro para dar amida del acido 3-{4-[2-(2,6-Dioxo-piperidin-3-il)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-il oximetil]-bencil}-3H-[1,2,3]triazol-4-carboxflico en forma de un solido de color blanco (40 mg, rendimiento del 85 %); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 30/70, (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 3,88 min (95,7 %); p.f.: 280-282 °C; 1H RMN (DMSO-d6) 51,89 - 2,03 (m, 1H, CHH), 2,34 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,59 (s a, 1H, CHH), 2,81 - 2,99 (m, 1H, CHH), 4,23 (d, J = 17,6 Hz, 1H, NHH), 4,40 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,10 (dd, J = 5,0, 13,1 Hz, 1H, CHH), 5,21 (s, 2H, CH2), 5,94 (s, 2H, CH2), 7,24 (d, J = 8,1 Hz, 2H, M01), 7,31 (dd, J = 4,2, 7,6 Hz, 2H, Ar), 7,41 - 7,53 (m, 3H, Ar), 7,81 (s, 1H, NHH), 8,23 (s, 1H, NHH), 8,26 (s, 1H, triazol), 10,96 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-d6) 5 22,30, 31,16, 45,04, 51,53, 51,65, 69,14, 114,85, 115,25, 127,69, 127,98, 129,78, 129,93, 130,34, 133,28, 134,67, 136,10, 136,27, 153,39, 158,90, 167,97, 170,93, 172,81; LCMS MH = 475; Anal. Calc. para C24H22NeO6+0,5H2O: C, 59,62; H, 4,80; N, 17,38; Observado: C, 59,82; H, 4,65; N, 17,09.
5.52 (R)-3-[4-(4-MORFOLIN-4-ILMETIL-BENCILOXI)-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000070_0001
Etapa 1: Ester metflico del acido 3-hidroxi-2-metil-benzoico
Se anadio acido 3-hidroxi-2-metilbenzoico (105 g, 690 mmol) a MeOH (800 ml) en un matraz FR de tres bocas de 2 l con un condensador, un termometro y una barra de agitacion seguido de la adicion de MeOH (250 ml). Y se anadio H2SO4 (10 ml, 180 mmol) a la solucion anterior. La mezcla de reaccion se agito a 62 °C durante 17 h antes de concentrarse. El residuo (200 ml) se anadio a agua (600 ml) lentamente a temperatura ambiente y se formo un solido de color blanco. La suspension se agito en un bano de hielo durante 30 min y se filtro. El solido se lavo por agua (5 x 250 ml) y se seco para dar ester metflico del acido 3-Hidroxi-2-metil-benzoico en forma de un solido de color blanco (100 g, rendimiento del 87 %). El compuesto se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional: LCMS MH = 167;
1 H RMN (DMSO-de) 52,28 (s, 3H, CH3), 3,80 (s, 3H, CH3), 6,96 - 7,03 (m, 1H, Ar), 7,09 (t, J = 7,8 Hz, 1H, Ar), 7,14 -7,24 (m, 1H, Ar), 9,71 (s, 1H, OH).
Etapa 2: Ester metflico del acido 3-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-2-metil-benzoico
En un matraz FR de tres bocas de 1 l equipado con una barra de agitacion y un termometro se anadieron DMF (300 ml), 3-hidroxi-2-metilbenzoato de metilo (90 g, 542 mmol) e imidazol (92 g, 1354 mmol). Se anadio en porciones TBDMS-Cl (90 g, 596 mmol) a la solucion anterior para controlar la temp. interna entre 15-19 °C durante 20 min y despues de la adicion, la temp. interna cayo por debajo de 10 °C. El bano de hielo se retiro y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 16 h. La mezcla de reaccion se anadio a hielo-agua (500 ml) y la solucion resultante se dividio en dos porciones (700 ml x 2). Cada porcion se extrajo con EtOAc (700 ml). Y cada capa organica se lavo con agua fna (350 ml) y salmuera (350 ml). Las capas organicas se combinaron y se secaron por MgSO4. La capa organica se concentro para dar ester medico del acido 3-(terc-Butil-dimetil-silaniloxi)-2-metilbenzoico en forma de un aceite de color pardo claro (160 g, rendimiento en bruto del 100 %). El compuesto se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional: LCMS MH = 281; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 8 -0,21 (s, 6H, CH3, CH3), 0,73 - 0,84 (m, 9H, CH3, CH3, CH3), 2,10 (s, 3H, CH3), 3,60 (s, 3H, CH3), 6,82 (dd, 1H, Ar), 6,97 (t, J = 7,9 Hz, 1 H, Ar), 7,13 (dd, J = 1,1, 7,7 Hz, 1 H, Ar)
Etapa 3: Ester medico del acido 2-bromometil-3-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-benzoico
Se anadio NBS (49,8 g, 280 mmol) a 3-(terc-butil dimetilsililoxi)-2-metilbenzoato de metilo (78,4 g, 280 mmol) en acetato de metilo (500 ml) a temperatura ambiente para dar una suspension de color naranja. La mezcla de reaccion resultante se calento en un bano de aceite a 40 °C y se ilumino por una bombilla de luz solar de 300 W a reflujo durante 4 h. La mezcla de reaccion se enfrio y se lavo por una solucion de Na2SO32 x (600 ml, concentracion saturada al 50 %), agua (500 ml) y salmuera (600 ml). La capa organica se seco por MgSO4 y se decoloro por carbon. La capa organica se concentro para dar ester medico del acido 2-bromometil-3-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-benzoico en forma de un aceite de color pardo claro (96 g, rendimiento en bruto al 91 %). El compuesto se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional: LCMS M-Br = 279; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 80,05 - 0,11 (m, 6H, CH3, CH3), 0,82 (s, 9H, CH3, CH3, CH3), 3,65 (s, 3H, CH3), 4,74 (s, 2H, CH2), 6,94 (dd, J = 1,3, 8,1 Hz, 1H, Ar), 7,10 - 7,20 (m, 1H, Ar), 7,21 - 7,29 (m, 1H, Ar); LCMS
Etapa 4: Ester bendlico del acido (R) 4-[4-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-4-carbamoilbutmco
A la solucion agitada de 2-(bromometil)-3-(terc-butildimetilsililoxi)benzoato de metilo (15,32 g, 36,7 mmol) en Acetonitrilo (130 ml) se le anadio clorhidrato de 4,5-diamino-5-oxopentanoato de (R)-bencilo (10 g, 36,7 mmol) a temperatura ambiente. La suspension resultante se anadio por DIPEA (13,45 ml, 77 mmol) a traves de un embudo de adicion durante 5 min y la suspension se volvio una solucion transparente. La mezcla de reaccion se calento a 40 °C durante 31 h y a temperatura ambiente 18 h antes de concentrarse al vado. El residuo se agito en eter diedico (120 ml) y se formo un solido de color blanco. La mezcla se filtro y el solido se lavo con eter diedico (80 ml x 4). Los filtrados se lavaron con HCl (1 N ac., 80 ml) y NaHCO3 (ac., sat., 80 ml) consecutivamente antes de concentrarse al vado. El residuo se purifico por cromatograffa ISCO para dar ester bendlico del acido (R) 4-[4-(terc-Butil-dimetilsilaniloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il] -4-carbamoil-butmco en forma de un solido pegajoso de color amarillo claro (15,0 g, rendimiento en bruto del 101 %). El compuesto uso en la siguiente etapa .sin purificacion adicional; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 80,00 (s, 3H, CH3), 0,01 (s, 3H, CH3), 0,75 (s, 9H, CH3, CH3, CH3), 1,73 - 2,16 (m, 4H, CH2, CH2), 4,03 -4,35 (m, 2H, CHH, CHH), 4,53 (dd, J = 5,1, 10,4 Hz, 1H, CHH), 4,64 - 4,82 (m, 2H, CH2), 6,77 - 6,89 (m, 1H, Ar), 6,97 (s, 1H, NHH), 7,01 - 7,23 (m, 7H, Ar), 7,37 (s, 1H, NHH); LCMS MH = 483.
Etapa 5: Ester bendlico del acido (R) 4-carbamoil-4-(4-hidroxi-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-butmco
A la solucion agitada de 5-amino-4-(4-(terc-butildimetilsililoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de (R)-bencilo (8,37 g, 17,3 mmol) en DMF (40 ml) y agua (4,4 ml) a ~15 °C se le anadio en una porcion carbonato potasico (1,20 g, 8,7 mmol). La suspension de color amarillo claro resultante se agito a temperatura ambiente durante 1 h antes de anadirse acetonitrilo (50 ml) seguido de la adicion de hidrogenocloruro (ac., 12 N, 1,7 ml, 20,8 mmol) y se formo un solido de color blanco. La mezcla se filtro y el filtrado se concentro al vado. El residuo se purifico por ISCO para dar ester bendlico del acido (R) 4-carbamoil-4-(4-hidroxi-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-butmco en forma de un solido pegajoso de tipo vidrio (5,75 g, rendimiento del 90 %). 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 82,01 - 2,39 (m, 4H, CH2, CH2), 4,34 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 4,49 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 4,75 (dd, J = 5,0, 10,3 Hz, 1H, CHH), 4,96 (d, J = 12,5 Hz, 1H, CHH), 5,03 (d, J = 12,5 Hz, 1H, CHH), 6,99 (d, J = 7,7 Hz, 1H, Ar), 7,10 - 7,24 (m, 2H, NHH, Ar), 7,25 - 7,41 (m, 6H, Ar), 7,58 (s, 1H, NHH), 10,03 (s, 1H, OH); LCMS: MH = 369.
Etapa 6: Ester bendlico del acido (R) 4-[4-(4-Bromometil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-4-carbamoilbutmco
A la solucion agitada de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de (R)-bencilo (1 g, 2,71 mmol) en Acetonitrilo (35 ml) a temperatura ambiente se le anadieron 1,4-bis(bromometil)benceno (2,15 g, 8,1 mmol) y CARBONATO POTASlCO (0,375 g, 2,7 mmol). La suspension resultante se agito a 50 °C durante 1 h y a temperatura ambiente durante una noche antes de filtrarse. El filtrado se concentro y el residuo se purifico por ISCO para dar ester bendlico del acido (R) 4-[4-(4-Bromometil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-4-carbamoilbutmco en forma de un solido pegajoso transparente (1,18 g, rendimiento del 78 %); 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 82,04 -2,42 (m, 4H, CH2, CH2), 4,44 (d, J = 17,8 Hz, 1H, CHH), 4,55 (d, J = 17,8 Hz, 1H, CHH), 4,68 - 4,80 (m, 3H, CHH, CH2), 4,96 (d, J = 12,5 Hz, 1H, CHH), 5,03 (d, J = 12,5 Hz, 1H, CHH), 5,25 (s, 2H, CH2), 7,20 (s, 1H, NHH), 7,24 -7,38 (m, 7H, Ar), 7,40 - 7,52 (m, 5H, Ar), 7,58 (s, 1H, NHH); LCMS MH = 551, 553
E tapa 7: E s te r b e n d lic o del ac ido (R ) 4 -ca rb a m o il-4 -[4 -(4 -m o rfo lin -4 - ilm e til-b e n c ilo x i)-1 -o x o -1 ,3 -d ih id ro - is o in d o l-2 - il]butrnco
A la solution de 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de (R)-bencilo (395 mg, 0,716 mmol) en Acetonitrilo (10 ml) se le anadio MORFOLINA (0,187 ml, 2,1 mmol) a temperatura ambiente. La solucion resultante se agito a temperatura ambiente durante 2,5 h y la reaction se completo. A la mezcla de reaction se le anadieron EtOAc (50 ml) y NaHCO3 (sat. ac., 15 ml). La mezcla se extrajo y la capa organica se seco por MgSO4 y se concentro para dar ester bentilico del acido (R) 4-Carbamoil-4-[4-(4-morfolin-4-ilmetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco en forma de un solido pegajoso (350 mg, rendimiento en bruto del 88 %). El producto se uso en la siguiente etapa sin purification adicional. 1H RMN (DMSO-d6) 52,01 - 2,40 (m, 8H, CH2, CH2, CH2, CH2), 3,46 (s, 2H, CH2), 3,56 (t, J = 4,5 Hz, 4H, CH2, CH2), 4,42 (d, J = 17,8 Hz, 1H, CHH), 4,54 (d, J = 17,8 Hz, 1H, CHH), 4,75 (dd, J = 5,0, 10,5 Hz, 1H, CHH), 4,95 (d, J = 12,5 Hz, 1H, CHH), 5,02 (d, J = 12,5 Hz, 1H, CHH), 5,22 (s, 2H, CH2), 7,19 (s, 1H, NHH), 7,26 - 7,38 (m, 9H, Ar), 7,41 - 7,50 (m, 3H, Ar), 7,59 (s, 1H, NHH); LCMS MH = 558.
Etapa 8: (R)-3-[4-(4-Morfolin-4-ilmetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona
A la solucion agitada de 5-amino-4-(4-(4-(morfolinometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de (R)-bencilo (350 mg, 0,6 mmol) en Tetrahidrofurano (10 ml) a 0 °C se le anadio TERC-BUToX iDO POTASICO (70,4 mg, 0,6 mmol). La mezcla se agito a 0 °C durante 1 h y se anadio KOtBu (10 mg). Y la reaccion se completo en 1 hora mas. La mezcla de reaccion se diluyo por EtOAc (40 ml), se acidifico por HCl (2 ml, 1 N) y se neutralizo por NaHCO3 (sat. ac., 5 ml. La mezcla se anadio por salmuera (10 ml) y se extrajo. La capa organica se seco por MgSO4 y se concentro al vatio. El solido de color blanco pegajoso que se agito en eter (40 ml) para dar (R) 3-[4-(4-morfolin -4-ilmetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (252 mg, rendimiento del 89 %). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 pm, 1 ml/min, 240 nm, 15/85, (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 5,41 min (99,7 %); p.f.: 141-143 °C; 1H RMN (DMSO-de) 5 1,89 - 2,06 (m, 1H, CHH), 2,25 - 2,47 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 2,53 - 2,65 (m, 1H, CHH), 2,81 - 3,02 (m, 1H, CHH), 3,46 (s, 2H, CH2), 3,50 - 3,62 (m, 4H, CH2, CH2), 4,25 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 4,41 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 4,9, 13,2 Hz, 1H, CHH), 5,22 (s, 2H, CH2), 7,33 (d, J = 7,6 Hz, 4H, Ar), 7,39 - 7,54 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-d6) 522,33, 31,16, 45,06, 51,55, 53,11, 62,07, 66,14, 69,38, 114,94, 115,20, 127,61, 128,97, 129,78, 129,93, 133,28, 135,27, 137,66, 153,48, 167,99, 170,96, 172,81; LCMS MH = 450; Anal. Calc. para C25H27N3Oe+0,3H2O: C, 66,01; H, 6,12; N, 9,24; Observado: C, 66,00; H, 6,03; N, 9,12; HPLC quiral AGP, 4 x 150 mm, 5 pm, 0,8 ml, 240 nm, 5/95 de iPOH/NH4OAc 10 mM; isomero R = 92 % de e.e.
5.53 3-(4-((5-MORFOLINOMETIL)BENZO[D]TIAZOL-2-IL)METOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
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Etapa 1: Se anadio cloruro de 2,3-Dicloro-5H-1,2,3-ditiazolio (6,7 g, 32,2 mmol) a una solucion agitada de 2-bromo-5-metilanilina (6,0 g, 32,2 mmol) en CH2Cl2 (130 ml) y se agito durante 2 h. Se anadio piridina (5,1 g, 64,5 mmol) y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 2 h. La mezcla de reaccion se lavo con agua (2 x 40 ml) y salmuera (40 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se agito con eter (20 ml) y hexano (20 ml) para dar (Z)-2-bromo-N-(4-cloro-5H-1,2,3-ditiazol-5-ilideno)-5-metilanilina (7,9 g, 76 %): 1H RMN (CDCl3) 52,33 (s, 3H), 6,90=6,92 (m, 2H), 7,53-7,56 (d, J = 9 Hz, 1H).
Etapa 2: Una mezcla de (Z)-2-bromo-N-(4-cloro-5H-1,2,3-ditiazol-5-ilideno)-5-metilanilina (7,9 g, 24,6 mmol) y yoduro de cobre (I) (5,2 g, 27,1 mmol) en piridina (100 ml) se calento a reflujo durante 2 h. La mezcla de reaccion se enfrio y se concentro. El residuo se disolvio en EtOAc (150 ml) y agua (100 ml). La capa de EtOAc se lavo con agua (3 x 50 ml) y salmuera (50 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, 4/6 de hexano/CH2Cl2 durante 20 min y despues a 2/8 durante 15 min) para dar 5-metilbenzo[d]tiazol-2-carbonitrilo (3,1 g, 71 %): 1H RMN (CDCl3) 52,56 (s, 3H), 7,44-7,48 (dd, J = 3 y 9 Hz, 1H), 7,84-7,87 (d, J = 9 Hz, 1H), 8,01 (s, 1H).
Etapa 3: Una mezcla de 5-metilbenzo[d]tiazol-2-carbonitrilo (3,0 g, 17,2 mmol) en metanol (100 ml) se enfrio en bano de hielo. Se anadio lentamente una solucion de metoxido sodico/metanol (25 % en peso, 13 ml) y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla de reaccion se enfrio en bano de hielo y se inactivo con HCl 6 N (15 ml). La mezcla se concentro y el residuo se disolvio en CH2Cl2 (100 ml) y se lavo con agua (2 x 35 ml) y salmuera (35 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, 2/8 de hexano/CH2Cl2 durante 15 min despues a CH2Cl2 durante 10 min y mantenimiento durante 10 min) para dar 5-metilbenzo[d]tiazol-2-carboxilato de metilo (3,2 g, 88 %): 1H RMN (CDCl3) 52,54 (s, 3H), 4,08 (s, 3H), 7,36-7,39 (dd, J = 3 y 9 Hz, 1H), 7,83-7,86 (d, J = 9 Hz, 1H), 8,02 (s, 1H).
Etapa 4: Una mezcla de 5-metilbenzo[d]tiazol-2-carboxilato de metilo (3,1 g, 15,1 mmol) y N-bromosuccinimida (3,0 g, 16,6 mmol) en acetato de metilo (50 ml) se calento en un bano de aceite a 60 °C con una bombilla de 300 W que hizo brillar la mezcla de reaccion durante 3 h. La mezcla de reaccion se enfrio a temperatura ambiente y se diluyo con EtOAc (50 ml). La mezcla se lavo con agua (2 x 40 ml) y salmuera (40 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, 2/8 de CH2Cl2/hexano durante 15 min despues a CH2Cl2 durante 15 min) para dar 5-(bromometil)benzo[d]tiazol-2-carboxilato de metilo (2,8 g, 65 %): 1H RMN (CDCl3) 54,09 (s, 3H), 4,66 (s, 2H), 7,59-7,62 (dd, J = 3 y 9 Hz, 1H), 7,95-7,98 (d, J = 9 Hz, 1H), 8,22-8,23 (d, J = 3 Hz, 1H).
Etapa 5: Una solution de 5-(bromometil)benzo[d]tiazol-2-carboxilato de metilo (2,8 g, 9,8 mmol) en acetona (30 ml) se anadio lentamente a una suspension agitada de morfolina (1,3 g, 14,7 mmol) y carbonato potasico (4,7 g, 34,2 mmol) y cantidad catafitica de 18-corona-6 en acetona (20 ml) en un bano de aceite a 60 °C. La mezcla de reaction se agito a 60 °C en un bano de aceite durante 3 h, despues se enfrio y se filtro. El filtrado se concentro y el residuo se disolvio en EtOAc (100 ml), se lavo con agua (2 x 40 ml) y salmuera (40 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, CH2Cl2 durante 10 min despues a CH3OH al 3 %/CH2Cl2 durante 5 min y mantenimiento durante 15 min despues al 5 % durante 5 min y mantenimiento durante 20 min) para dar 5-(morfolinometil)benzo[d]tiazol-2-carboxilato de metilo (2,3 g, 80 %): 1H RMN (CDCl3) 52,47-2,50 (m, 4h), 3,67-3,73 (m, 6H), 4,09 (s, 3H), 7,57-7,60 (dd, J = 3 y 9 Hz, 1H), 7,91-7,94 (d, J = 9 Hz, 1H), 8,19 (s, 1H).
Etapa 6: Una solucion de 5-(morfolinometil)benzo[d]tiazol-2-carboxilato de metilo (2,2 g, 2,5 mmol) en THF (50 ml) se anadio lentamente a una solucion agitada de LiAlH(t-BuO)3/THF (1 M, 15,3 ml, 15,3 mmol) en THF (20 ml) y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla de reaccion se enfrio y se inactivo con agua (20 ml) cuidadosamente. La mezcla se diluyo con EtOAc (150 ml) y agua (35 ml). La capa organica se lavo con agua (40 ml) y salmuera (40 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, CH2O 2 durante 10 min despues a CH3OH al 3 %/CH2Cl2 durante 5 min y mantenimiento durante 15 min despues al 5 % durante 5 min y mantenimiento durante 20 min) para dar (5-(morfolinometil)benzo[d]tiazol-2-il)metanol (1,8 g, 90 %): 1H RMN (CDCl3) 52,46-2,49 (m, 4H), 3,63 (s, 2H), 3,71-3,73 (m, 4H), 3,94 (a, 1H), 5,04 (s, 2H), 7,37-7,41 (dd, J = 3 y 9 Hz, 1H), 7,81-7,83 (d, J = 9 Hz, 1H), 7,91 (s, 1H); 13C RMN (CDCl3) 553,56, 62,56, 63,16, 66,98, 121,55, 123,14, 126,38, 133,51, 136,31, 153,13, 173,12.
Etapa 7: Una mezcla de suspension de trifenilfosfina unida a pofimero (4,1 g, 4,9 mmol) en THF (40 ml) se enfrio a 3 °C. Se anadio lentamente azodicarboxilato de diisopropilo (0,9 g, 4,6 mmol) a 3-5 °C. Despues de agitarse a 3 °C durante 10 min, se anadio lentamente una solucion de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1,0 g, 3,4 mmol) y (5-(morfolinometil)benzo[d]tiazol-2-il)metanol (1,1 g, 4,1 mmol) en THF (60 ml) a 3-8 °C. La mezcla de reaccion se agito a 3 °C durante 10, despues se calento a temperatura ambiente y se agito durante una noche. La mezcla de reaccion se filtro y el filtrado se concentro. El residuo se disolvio en CH2Cl2 (80 ml), se lavo con NaHCO3 sat. (30 ml), agua (30 ml) y salmuera (30 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, CH2Cl2 durante 10 min despues a CH3OH al 3 %/CH2Cl2 durante 5 min y mantenimiento durante 15 min despues al 5 % durante 5 min y mantenimiento durante 20 min) para dar 5-amino-4-(4-((5-(morfolinometil)benzo[d]tiazol-2-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,95 g, 52 %); 1H rMn (CDCl3) 52,23 (m, 1H), 2,35-2,50 (m, 7H), 3,64-3,74 (m, 6H), 4,46-4,52 (d, J = 18 Hz, 1H), 4,57-4,63 (d, J = 18 Hz, 1H), 4,92-4,95 (, 1H), 5,30 (s, 3H), 5,58 (s, 2H), 5,65 (a, 1H0, 6,53 (a, 1H), 7,11-7,14 (d, J = 9 Hz, 1H), 7,40-7,48 (m, 2H), 7,81-7,87 (m, 2H), 7,99 (s, 1H).
Etapa 8: Se anadio lentamente terc-butoxido potasico/THF (1 M, 1,7 ml, 1,7 mmol) a una solucion agitada de .5-amino-4-(4-((5-(morfolinometil)benzo[d]tiazol-2-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,9 g, 1,7 mmol) en THF (25 ml) a 5 °C. La mezcla de reaccion se agito a 5 °C durante 1 h y despues se inactivo con NH4Cl sat. (5 ml). La mezcla se diluyo con CH2Cl2 (50 ml) y agua (15 ml). La capa ac. se extrajo con CH2Cl2 (30 ml) y la solucion combinada de CH2Cl2 se lavo con salmuera (40 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se recristalizo en acetona para dar 3-(4-((5-(morfolinometil)benzo[d]tiazol-2-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,4 g, 55 %): p.f. 228-230 °C; 1H RMN (DMSO-de) 52,00-2,04 (m, 1H), 2,37-2,63 (m, 6H), 2,88-2,94 (m, 1H), 3,56-3,62 (m, 6H), 4,32-4,38 (d, J = 18 Hz, 1H), 4,47-4,53 (d, J = 18 Hz, 1H), 5,11-5,17 (dd, J = 3 y 12 Hz, 1H), 5,75 (s, 2H), 7,38-7,52 (m, 4H), 7,94 (s, 1H), 8,04-8,07 (d, J = 9 Hz, 1H), 11,00 (s, 1H); 13C RMN (DMSO-de) 522,33, 31,18, 45,00, 51,63, 53,08, 62,00, 66,17, 67,41, 115,29, 116,12, 122,00, 122,74, 126,50, 129,96, 132,95, 133,52, 136,61, 152,60, 152,68, 167,80, 168,03, 170,96, 172,83; Calc. para C26H26N4O5S+0,35H2O: C, 60,89; H, 5,25; N, 10,92; S, 6,25, Observado: C, 60,59; H, 5,11; N, 10,85; S, 6,30.
5.54 3-(4-((4-((4,5-DIMETIL-1H-IMIDAZOL-1-IL)METIL)BENCIL)OXI)-1-OXOISOINDOUN-2-IL)PIPERON-2,6-DIONA
Figure imgf000073_0001
A una mezcla de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,40 g, 0,90 mmol) y 4,5-dimetil-1H-imidazol (0,24 g, 2,49 mmol) en acetonitrilo (10 ml) se le anadio N,N-diisopropiletil amina (0,16 ml, 0,90 mmol) a temperatura ambiente. La solucion se agito a temperatura ambiente durante 24 h. A la suspension se le anadio tampon fosfato 0,2 M a pH 7,4 (50 ml) para dar una suspension. A la suspension se le anadio EtOAc (30 ml) y la suspension se agito durante 10 min. Parte del disolvente se retiro para dar una suspension. La suspension se filtro y se lavo con agua para dar un solido. El solido se purifico por HPLC prep. (Xbridge C18, 10 |jm, 50 x 250 mm, 143 ml/min, 240 nM, 2/98/2 min, gradiente a 98/2 de c H3CN acido formico al 0,1 %/H2O acido formico al 0,1 % en 13 min) para dar un aceite. Al aceite se le anadieron eter (10 ml) y EtOAc (10 ml) para dar una suspension. La suspension se filtro y se lavo con eter (10 ml) para dar 3-(4-((4-((4,5-dimetil-1H-imidazol-1-il)metil)bencil)oxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (110 mg, rendimiento del 27 %): HPLC: Waters Symmetry C 13 , 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 5/95 a 95/5 en 5 min CH 3 CN/H 3 PO 4 al 0,1 %, 4,91 (97,5 %); p.f.: 180-182 °C; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,87 -2,09 (m, 7H, CHH, CH 3 , CH 3 ), 2,31 -2,48 (m, 1H, CHH), 2,52 - 2,65 (m, 1H, CHH), 2,81 - 3,02 (m, 1H, CHH), 4,14 -4,30 (m, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,40 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,01 - 5,17 (m, 3H, CH2, NCH), 5,22 (s, 2H, CH2), 7,12 (d, J = 8,1 Hz, 2H, Ar), 7,25 - 7,38 (m, 2H, Ar), 7,41 - 7,54 (m, 3H, Ar), 7,56 (s, 1H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 58,05, 12,67, 22,31, 31,16, 45,03, 47,19, 51,53, 69,17, 114,93, 115,25, 121,69, 126,87, 128,04, 129,78, 129,95, 132,92, 133,28, 135,54, 135,79, 137,53, 153,39, 167,97, 170,95, 172,81; LCMS MH = 459; Anal. Calc. para C26H26N4O4 0,5 H2O: C, 66,80; H, 5,82; N, 11,98; Observado: C, 66,81; H, 5,66; N, 11,91.
5.553-(4-((3-(MORFOLINOMETIL)ISOXAZOL-5-IL)METOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000074_0001
Etapa 1: (3-((Tetrahidro-2H-piran-2-iloxi)metil)isoxazol-5-il)metanol
Una solucion de 3-((tetrahidro-2H-piran-2-iloxi)metil)isoxazol-5-carboxilato de etilo (3,7 g, 14,49 mmol) en THF (100 ml) se enfrio a 0 °C, y despues se anadio gota a gota una solucion 1 M de DIBAlH en tolueno (43,5 ml) durante 30 min, y despues la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 16 h. La mezcla se inactivo una solucion acuosa 1 M de tartrato sodico potasico (100 ml) y despues se extrajo con EtOAc (3 x 100 ml). Las capas organicas combinadas se lavaron con agua (150 ml) y salmuera (150 ml), se secaron (MgSO 4 ) y se evaporaron, proporcionando 2,5 g del producto en forma de un aceite de color naranja, en rendimiento del 81 %; 1 H RMN (CDCl 3 ) 5 1,56 - 1,86 (m, 6H), 2,31 (a, 1H), 3,50 - 3,61 (m, 1H), 3,83 - 3,95 (m, 1H), 4,61 (d, J = 12,8 Hz, 1H), 4,68 - 4,83 (m, 4H), 6,32 (s, 1H).
Etapa 2: 5-amino-5-oxo-4-(1-oxo-4-((3-((tetrahidro-2H-piran-2-iloxi)metil)-isoxazol-5-il)metoxi)isoindolin-2-il)pentanoato de (4S)-metilo
Una mezcla de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-4-metil-5-oxopentanoato de (S)-metilo (3,4 g, 11,7 mmol), (3-((tetrahidro-2H-piran-2-iloxi)metil)isoxazol-5-il)metanol (2,5 g, 11,7 mmol), y trifenilfosfina, unida a polimero, 3 mmol/g (7,8 g, 23 mmol) en Th F (200 ml) se enfrio a 0 °C, y se anadio DiAd (4,6 ml, 23,5 mmol). Despues de 60 min, el bano de hielo se retiro, y la mezcla se agito durante 16 h a temperatura ambiente. Despues, la mezcla se filtro y el filtrado se evaporo. El residuo se sometio a cromatografia en gradiente de cloruro de metileno-metanol. El producto eluyo en MeOH al 2 %, 3,4 g, en rendimiento del 60 %; 1 H RMN (CDCl 3 ) 51,51 - 1,87 (m, 6H), 2,09 - 2,51 (m, 4H), 3,46 - 3,60 (m, 1H), 3,64 (s, 3H), 3,81 - 3,94 (m, 1H), 4,31 - 4,57 (m, 2H), 4,59 - 4,66 (m, 1H), 4,67 - 4,85 (m, 2H), 4,87 - 4,98 (m, 1H), 5,12 - 5,32 (m, 2H), 5,52 (s a, 1H), 6,30 - 6,53 (m, 2H), 7,08 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,35 - 7,52 (m, 2H).
Etapa 3: 3-(4-((3-(Hidroximetil)isoxazol-5-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona
Una solucion de 5-amino-5-oxo-4-(1-oxo-4-((3-((tetrahidro-2H-piran-2-iloxi)metil)isoxazol-5-il)metoxi)isoindolin-2-il)pentanoato de (4S)-metilo (2,75 g, 5,64 mmol) se enfrio a 0 °C, y se anadio terc-butoxido potasico (0,633 g, 5,64 mmol). Despues de 30 min, se anadieron AcOH (100 ml) y agua (25 ml), y la mezcla se calento a 45 °C. La mezcla se agito a esta temperatura durante 24 h, y despues se evaporo al vado. Una porcion del intermedio seco (1,86 g, 5,0 mmol) se disolvio en acetonitrilo (100 ml) y se trato con cloruro de metanosulfonilo (0,389 ml, 5,00 mmol) y TEA (0,730 ml, 5,25 mmol). Despues de 2 h de agitacion a temperatura ambiente, se anadieron de nuevo cloruro de metanosulfonilo (0,438 ml, 5,64 mmol) y TEA (0,823 ml, 5,92 mmol). Despues de 1 h mas, la mezcla se inactivo con AcOH (1 ml) y se evaporo al vado. El residuo se repartio entre EtOAc (100 ml) y NaHCO 3 acuoso saturado (100 ml), y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (50 ml). Las fases organicas combinadas se lavaron con NaHCO 3 acuoso saturado (100 ml), agua (100 ml), y se secaron (MgSO 4 ). La mezcla se evaporo y se sometio a cromatografia usando un gradiente de cloruro de metileno-metanol. El producto eluyo en MeOH al ~2 %. El rendimiento despues del secado fue de 1,6 g (71 %); 1 H RMN (DMSO-de) 51,93 - 2,05 (m, 1H), 2,35 - 2,48 (m, 1H), 2,55 - 2,63 (m, 1H), 2,83 - 3,00 (m, 1H), 3,33 (s, 3H), 4,19 - 4,30 (m, 1H), 4,35 - 4,48 (m, 1H), 5,11 (dd, J = 4,9, 13,2 Hz, 1H), 5,38 (s, 2H), 5,49 (s, 2H), 6,84 (s, 1H), 7,40 (t, J = 8,0 Hz, 2H), 7,48 - 7,57 (m, 1H).
E tapa 4: 3 -(4 -((3 -(m o rfo lin o m e til) is o x a z o l-5 - il)m e to x i)-1 -o x o is o in d o lin -2 - il)p ip e r id in -2 ,6 -d io n a
Una mezcla de metanosulfonato de (5-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)isoxazol-3-il)metilo (0,5 g, 1,113 mmol) en acetonitrilo (10 ml) se enfrio a 0 °C. Se anadieron morfolina (0,116 ml, 1,335 mmol) y DIEA (0,252 ml, 1,446 mmol), y la mezcla se agito a esa temperatura. Despues de 16 h, la suspension resultante se filtro, y el solido se seco al vado. El producto se obtuvo en forma de un solido de color blanco, 0,4 g en rendimiento del 82 %; p.f. 228-230 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 90/10 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 % en 10 min: 4,38 (99,82 %). 1 H RMN (DMSO-de) 51,82 - 2,12 (m, 1H), 2,22 - 2,48 (m, 5H), 2,54 - 2,67 (m, 1H), 2,79 - 3,05 (m, 1H), 3,55 (a, 6H), 4,16 - 4,49 (m, 2H), 5,11 (dd, J = 4,9, 13,2 Hz, 1H), 5,43 (s, 2H), 6,64 (s, 1H), 7,32 - 7,46 (m, 2H), 7,46 -7,61 (m, 1H), 10,98 (s, 1H). 13 C RMN (DMSO-de) 522,30, 31,16, 45,00, 51,58, 52,51, 52,87, 60,67, 65,98, 104,55, 115,09, 115,96, 129,84, 129,96, 133,49, 152,63, 167,26, 167,80, 170,92, 172,81 Anal. Calc. para C22H24N4O6: C, 59,99 %; H, 5,49 %; N, 12,72 %; Observado: C, 59,69 %; H, 5,43 %; N, 12,66 %.
5.56 3-{4-[4-(4-TERC-BUTIL-[1,2,3]TRIAZOL-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000075_0001
Etapa 1: Ester metflico del acido 4-[4-(4-Azidometil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-4-carbamoil-butmco
A la mezcla de azida sodica (0,226 g, 3,47 mmol) en etanol (40 ml) a temperatura ambiente se le anadio 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1,5 g, 3,16 mmol). La suspension resultante se calento a reflujo durante 4 h antes de enfriarse y anadirse agua (50 ml) y EtOAc (200 ml). La mezcla se extrajo y la capa organica se lavo con salmuera (50 ml). La capa organica se seco por MgSO4 y se concentro al vado para dar ester metflico del acido 4-[4-(4-Azidometil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-4-carbamoilbutrnco en forma de un solido pegajoso de color amarillo (1,5 g, rendimiento en bruto del 109 %)). El compuesto se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional; LCMS MH = 439.
Etapa 2: Ester metflico del acido 4-{4-[4-(4-terc-Butil-[1,2,3]triazol-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-4-carbamoil-butmco
Se cerraron hermeticamente 3,3-dimetilbut-1-ina (752 mg, 9,2 mmol), 5-amino-4-(4-(4-(azidometil) benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (400 mg, 0,9 mmol) y Tolueno (4 ml) en un vial para microondas y se calento en un horno microondas a 125 °C durante 3 h. La mezcla de reaccion se concentro y el residuo se purifico por ISCO dio ester metflico del acido 4-{4-[4-(4-terc-Butil-[1,2,3]triazol-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-4-carbamoil-butmco en forma de un solido de tipo vidrio claro (160 mg, rendimiento del 34 %). El compuesto se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional; LCMS MH = 520.
Etapa 3: 3-{4-[4-(4-terc-Butil-[1,2,3]triazol-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona
A la solucion agitada de 5-amino-4-(4-(4-((4-terc-butil-1H-1,2,3-triazol-1-il)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (160 mg, 0,3 mmol) en Tetrahidrofurano(5 ml) a 0 °C se le anadio terc-butoxido potasico (34,6 mg, 0,3 mmol). La solucion resultante se agito a 0 °C durante 10 min y la reaccion se completo. La mezcla de reaccion se diluyo por EtOAC (30 ml) y despues se acidifico por HCl (1 N, ac., 2 ml). A la mezcla resultante se le anadio NaHCO3 (ac., sat., 2 ml) y salmuera (5 ml). La mezcla se extrajo y la capa organica se seco por MgSO4 y se concentro. El residuo se purifico por ISCO y HPLC prep. para dar 3-{4-[4-(4-terc-Butil-[1,2,3]triazol-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (15 mg, rendimiento del 10 %). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 45/55, (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 3,67 min (97,5 %); p.f.: N/A; 1H RMN (DM SO^) 51,26 (s, 9H, CH3, CH3, CH3), 1,86 - 2,04 (m, 1H, CHH), 2,33 -2,45 (m, 1H, CHH), 2,54 -2,66 (m, 1H, CHH), 2,79 - 3,02 (m, 1H, CHH), 4,24 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,41 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,10 (dd, J = 5,0, 13,1 Hz, 1H, CHH), 5,23 (s, 2H, CH2), 5,53 (s, 2H, CH2), 7,24 - 7,40 (m, 4H, Ar), 7,41 - 7,56 (m, 3H, Ar), 7,92 (s, 1H, triazol H), 10,96 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO^) 522,31, 30,24, 31,16, 45,06, 51,55, 52,33, 69,12, 114,88, 115,25, 119,84, 128,04, 129,78, 129,93, 133,30, 136,01, 136,45, 153,38, 156,50, 167,96, 170,95, 172,81; LCMS MH = 488.
5.57 FORMATO DE 3-(1-OXO-4-((4-((2,4,5-TRIMETIL-1H-IMIDAZOL-1-IL) METIL)BENCIL)OXI)ISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000076_0001
Etapa 1: 2,4,5-TrimetiMH-imidazol
Se anadieron acetaldeddo (0,32 ml, 5,8 mmol) a la mezcla de biacetilo (0,51 ml, 5,8 mmol), acetato amonico (4,03 g, 52,3 mmol) y acido acetico (8 ml) en un vial para microondas (20 ml). El vial se cerro hermeticamente y se puso en el horno microondas durante 5 min a 180 °C. La mezcla de reaccion se anadio lentamente a la mezcla de hielo y NH 4 OH ac. (30 ml) y la solucion de color pardo resultante se diluyo con agua (50 ml) y la mezcla se extrajo con EtOAC (3 x 35 ml). La capa organica se seco por MgSO 4 y se concentro al vado para dar 2,4,5-Trimetil-1H-imidazol en forma de un aceite de color pardo (460 mg, rendimiento en bruto del 77 %). El compuesto se uso en la siguiente etapa sin purification adicional; 1 H RMN (DMSO-de) 51,75 (s, 3H, CH3), 1,96 (s, 3H, CH3), 2,12 (s, 3H, CH3), 11,10 (s a, 1H, NH).
Etapa 2: Formiato de 3-(1-oxo-4-((4-((2,4,5-trimetil-1H-imidazol-1-il)metil)bencil)oxi) isoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona
A la solucion agitada de 2,4,5-trimetil-1H-imidazol (447 mg, 4,1 mmol) en Acetonitrilo (8 ml) se le anadieron 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (400 mg, 0,9 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,482 ml, 2,7 mmol). La solucion resultante se agito a temperatura ambiente 18 h antes de anadirse EtOAC (70 ml) y NaHCO3 (ac. sat., 25 ml). Se formo parte de un solido y se filtro. El filtrado se extrajo y la capa organica se concentro. El residuo combinado con el solido se purifico por HPLC prep. para dar un solido de color pardo claro que se purifico adicionalmente agitandose en CH3CN (4 ml) y eter dietflico (30 ml) para dar 3- formiato de (1-oxo-4-((4-((2,4,5-trimetil-1H-imidazol-1-il)metil)bencil)oxi)isoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanquecino (93 mg, rendimiento del 20 %). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 20/80, (CH3CN/H3PO 4 al 0,1 %), 6,09 min (99,8 %); 254-256 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,98 (d, J = 9,1 Hz, 7H, CHH, CH3, CH3), 2,18 (s, 3H, CH3), 2,34 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,60 (s a, 1H, CHH), 2,82 - 3,00 (m, 1H, CHH), 4,24 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,40 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,99 - 5,16 (m, 3H, CHH, CH2), 5,22 (s, 2H, CH2), 7,00 (d, J = 8,1 Hz, 2H, Ar), 7,25 - 7,38 (m, 2H, Ar), 7,46 (d, J = 8,3 Hz, 3H, Ar), 8,20 (s, 1H, HCOOH), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 512,31, 12,78, 22,33, 31,16, 45,03, 45,89, 51,53, 69,16, 114,91, 115,23, 121,53, 126,10, 128,11, 129,78, 129,93, 130,18, 133,28, 135,60, 137,32, 141,81, 153,41, 163,55, 167,97, 170,95, 172,81; LCMS MH = 473; Anal. Calc. para C27H2sN 4 O 4 HCOOH+ 1H2O : C, 62,68; H, 6,01; N, 10,44; Observado: C, 62,54; H, 5,63; N, 10,35.
5.58 3-(4-((5-METIL-1,3,4-OXADIAZOL-2-IL)METOXI)-1-OXOISOINDOUN-2-IL)PIPERON-2,6-
Figure imgf000076_0002
Etapa 1: A una solucion de 2-(clorometil)-5-metil-1,3,4-oxadiazol (500 mg, 3,77 mmol) en DMF (10 ml) se le anadieron 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1103 mg, 3,77 mmol) y K2CO3 (573 mg, 4,15 mmol), la mezcla formada se agito a temperatura ambiente durante una noche. El disolvente se evaporo al vado, el residuo se repartio entre agua (10 ml) y acetato de etilo (100 ml), la capa organica se lavo con carbonato sodico saturado (10 ml) y salmuera, se seco sobre sulfato de magnesio, y el disolvente se evaporo a sequedad. El residuo se purifico por ISCO (columna de 80 g, MeOH/CH2Cl2 gradiente del 0 % al 5 % en 50 min) para dar 5-amino-4-(4-((5-metil-1,3,4-oxadiazol-2-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (860 mg, rendimiento del 59 %); 1 H RMN (DMSO^) 52,25 (d, J = 6,8 Hz, 4H, CH2, CH2), 2,53 (s, 3H, CH3), 3,49 (s, 3H, CH3), 4,29 - 4,61 (m, 2H, CH2), 4,68 - 4,80 (m, 1H, CH), 5,52 (s, 2H, CH2), 7,20 (s, 1H, NHH), 7,31 - 7,45 (m, 2H, Ar), 7,49 (d, J = 7,7 Hz, 1H, Ar), 7,59 (s, 1H, NHH)
Etapa 2: A una mezcla de 5-amino-4-(4-((5-metil-1,3,4-oxadiazol-2-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (422 mg, 1,087 mmol) en THF (20 ml) se le anadio terc-butoxido potasico (146 mg, 1,304 mmol) a 0 °C. La mezcla formada se calento a temperatura ambiente y se agito a temperatura ambiente durante 2 horas. La reaccion se interrumpio con HCl acuoso (1 N, 1,5 ml), el disolvente se evaporo, el residuo se repartio entre bicarbonato sodico acuoso saturado (10 ml) y acetato de etilo (50 ml). La capa organica se lavo con salmuera, se seco sobre sulfato de magnesio. El disolvente se evaporo al vado y el producto en bruto se suspendio de nuevo con acetonitrilo (5 ml) y se filtro para dar 3-(4-((5-metil-1,3,4-oxadiazol-2-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (250 mg, rendimiento del 33 %). p.f.: 206-208 °C; 1 H RMN (DMSO^) 51,99 (s, 1H, CHH), 2,34 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,53 (s, 3H, CH3), 2,55 - 2,68 (m, 1H, CHH), 2,79 - 3,04 (m, 1H, CHH), 4,17 - 4,49 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,0, 13,3 Hz, 1H, CH), 5,53 (s, 2H, CH2), 7,33 - 7,48 (m, 2H, Ar), 7,49 -7,61 (m, 1H, Ar), 10,98 (s a, 1H, NH); 13 C RMN (DM SO^) 510,46, 22,30, 31,16, 44,96, 51,59, 59,78, 115,29, 116,30, 129,90, 129,97, 133,53, 152,47, 162,12, 164,82, 167,71, 170,93, 172,80; HPLC: Waters Xterra C-18, 3,9 x 150 mm, 5 pm, 1 ml/min, 240 nm, 20/80 de CH3CN/HCOONH4 al 0,1 % tR = 3,08 (100 %); Anal. Calc. para C17H16N4O5 0,2 H2O C, 56,73; H, 4,59; N, 15,57; Observado: C, 56,88; H, 4,52; N, 15,31.
5.59 3-{4-[4-(1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO--ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000077_0001
A la solution en THF de 5-amino-4-(4-(4-(isoindolin-2-ilmetil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,5 g, 0,974 mmol) se le anadio terc-butoxido potasico (0,131 g, 1,168 mmol) a 0 °C. La mezcla se agito durante 30 min y se anadieron 2 ml de HCl 1 N seguido de 10 ml de NaHCO 3 sat. y 25 ml de EtOAc. La mezcla se extrajo y la capa organica se concentro y el solido resultante se purifico sobre columna de gel de sflice eluida con DCM y MeOH para dar un solido. El solido se recristalizo en 2 ml de CH3CN para dar 3-{4-[4-(1,3-dihidro-isoindol-2-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro--isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona (60 mg, .13 %). p.f.: 153-155 °C. LC-MS m/e = 482, HPLC Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometros,1 ml/min, 240 nm, gradiente de 5/95 a 5/95 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 % en H 2 O durante 5 min y mantenimiento a 95/5 durante 5 min: 4,99 min (95 %); 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 5 1,89 - 2,04 (m, 1H, CHH), 2,35 - 2,45 (m, 1H, CHH), 2,54 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,82 - 3,00 (m, 1H, CHH), 3,83 (s, 4H, CH2, CH2), 3,87 (s, 2H, CH2), 4,19 -4,50 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,0, 13,1 Hz, 1H, NCH), 5,25 (s, 2H, CH2), 7,10 - 7,25 (m, 4H, Ar), 7,27 - 7,54 (m, 8H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO): 522,32, 31,17, 45,08, 49,30, 51,54, 58,16, 69,32, 114,89, 115,24, 122,29, 122,84, 123,50, 127,78, 127,82, 127,89, 129,94, 131,38, 133,50, 136,30, 137,50, 170,96, 172,82, Anal calc. para C29H27N3O4: % de C 72,33, % de H 5,65, % de N 8,73, Observado: % de C 70,89, % de H 5,31, % de N 8,37.
5.60 3-{4-[4-(4-TERC-BUTIL-IMIDAZOL-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERON-2,6-DIONA
Figure imgf000077_0002
Etapa 1: 5-terc-Butil-1H-imidazol
Se mezclaron 1-bromo-3,3-dimetilbutan-2-ona (2,0 g, 11,2 mmol) y formamida (1,11 g, 24,6 mmol) en un vial para microondas y se calento a 147 °C en el tubo sellado durante 5,5 h. La mezcla de reaction se enfrio y se diluyo por agua (40 ml). La mezcla se extrajo con heptano (50 ml). A la capa ac. se le anadio K 2 CO 3 (10 % en peso, ac., ~25 ml) a pH 10. La solucion resultante se extrajo con dCm (3 x 50 ml). La capa organica se seco por MgSO 4 y se concentro para dar 5-terc-Butil-1H-imidazol en forma de un aceite de color amarillo pegajoso (560 mg, rendimiento del 40 %). El compuesto se uso en la siguiente etapa sin purification adicional; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 5 1,21 (s, 9H, CH3, CH3, CH3), 6,66 (s, 1H, Ar), 7,47 (d, J = 0,9 Hz, 1H, Ar), 11,70 (s a, 1H, NH).
Etapa 2: Ester metflico del acido 4-{4-[4-(4-terc-Butil-imidazol-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-4-carbamoil-butrnco
A la solucion agitada de 4-terc-butil-1H-imidazol (549 mg, 4,4 mmol) en Acetonitrilo (10 ml) se le anadio 5-amino-4-(4-(4-(bromometil) benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (600 mg, 1,3 mmol) y DIPEA (0,66 ml, 3,8 mmol). La solucion resultante se agito a temperatura ambiente durante 2 dias. La mezcla de reaccion se diluyo por EtOAc (60 ml) y la mezcla se lavo con NaHCO 3 (ac., sat., 20 ml) y salmuera (20 ml). La capa organica se seco por MgSO4 y se concentro. El residuo se purifico por ISCO para dar ester metflico del acido 4-{4-[4-(4-terc-Butilimidazol-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-4-carbamoil-butmco en forma de un solido de color blanco (540 mg, rendimiento del 82 %). 1 H RMN (DMSO-de) 51,17 (s, 9H, CH3, CH3, CH3), 1,95 - 2,33 (m, 4H, CH2, CH2), 3,49 (s, 3H, CH3), 4,31 - 4,58 (m, 2H, CHH, CHH), 4,72 (dd, J = 4,5, 10,2 Hz, 1H, CHH), 5,11 (s, 2H, CH2), 5,23 (s, 2H, CH2), 6,83 (d, J = 1,3 Hz, 1H, Ar), 7,18 (s, 1H, NHH), 7,24 - 7,35 (m, 4H, Ar), 7,38 - 7,53 (m, 3H, Ar), 7,53 - 7,64 (m, 2H, NHH, Ar); LCMS MH = 519.
Etapa 3: 3-{4-[4-(4-terc-Butil-imidazol-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona
A la solution agitada de 5-amino-4-(4-(4-((4-terc-butil-1H-imidazol-1-il)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (540 mg, 1,0 mmol) en Tetrahidrofurano (15 ml) a 0 °C. La mezcla de reaction se agito a 0 °C durante 25 min antes de diluirse por EtOAc (50 ml) y despues se acidifico por HCl (1 N, ac., 4 ml) seguido de la adicion de NaHCO 3 (ac. sat., 10 ml). La mezcla se extrajo y la capa organica se lavo con salmuera (20 ml). La capa organica se seco por MgSO 4 y se concentro para dar un solido de color blanco. El solido se purifico agitandose en acetonitrilo (5 ml) y eter dietflico (30 ml) para dar 3-{4-[4-(4-terc-Butil-imidazol-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidroisoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (327, rendimiento del 64 %). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 pm, 1 ml/min, 240 nm, 25/75, (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 3,71 min (97,9 %); 227-229 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,17 (s, 9H, CH3, CH3, CH3), 1,88 - 2,04 (m, 1H, CHH), 2,33 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,53 -2,64 (m, 1H, CHH), 2,82 - 3,00 (m, 1H, CHH), 4,24 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,40 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,11 (s, 3H, CHH, CH2), 5,22 (s, 2H, CH2), 6,83 (d, J =1,3 Hz, 1H, imidazol H), 7,31 (t, J = 7,4 Hz, 4H, Ar), 7,48 (d, J = 8,1 Hz, 3H, Ar), 7,60 (d, J = 1,1 Hz, 1H, imidazol H), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 522,24, 30,10, 31,11, 31,34, 44,99, 49,04, 51,48, 69,11, 112,48, 114,83, 115,17, 127,65, 127,97, 129,72, 129,86, 133,23, 135,97, 136,21, 137,62, 151,40, 153,32, 167,90, 170,88, 172,74; LCMS MH = 487; Anal. Calc. para C28H30N4O4: C, 69,12; H, 6,21; N, 11,51; Observado: C, 69,02; H, 6,05; N, 11,45, La estructura del compuesto se confirmo por NOSEY.
5.61 (S)-3-[4-(4-MORFOLIN-4-ILMETIL-BENCILOXI)-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000078_0001
Etapa 1: Preparation de ester metflico del acido (S)-4-[4-(4-bromometil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-4-carbamoil-butrnco
En un matraz de fondo redondo de 2 l se cargo con 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (30 g, 103 mmol), 1,4-bis(bromometil)benceno (81 g, 308 mmol) y carbonato potasico (14,19 g, 103 mmol) y acetonitrilo (1,2 l). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 10 min y se calento a 50 °C durante 12 horas. La mezcla de reaccion se dejo enfriar a temperatura ambiente. La mezcla se filtro y el filtrado se concentro en un evaporador rotatorio. El solido resultante se disolvio en CH2Cl2 y se cargo en 2 columnas de gel de sflice (330 g cada una) eluidas usando CH2Cl2/MeOH para dar ester metflico del acido 4-[4-(4-bromometil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidroisoindol-2-il]-4-carbamoil-butmco en forma de un solido de color blanco (40 g, 82 %). 1H RMN (DMSO-d6) 5 1,98 -2,13 (m, 1H, CHH), 2,14 - 2,23 (m, 1H, CHH), 2,23 - 2,32 (m, 2H, CHH, CHH), 3,50 (s, 3H, CH3), 4,34 - 4,63 (m, 2H, CH2), 4,67 - 4,80 (m, 3H, CH2, NCH), 5,25 (s, 4H, CH2), 7,19 (s, 1H, NHH), 7,24 - 7,34 (m, 2H, Ar), 7,41 - 7,54 (m, 5H, Ar), 7,58 (s a, 1H, NHH)
Etapa 2: Preparacion de ester metflico del acido (S)-4-carbamoil-4-[4-(4-morfolin-4-ilmetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco
A la solucion en CH2Cl2 de 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (36,5 g, 77 mmol) se le anadio morfolina (14,72 ml, 169 mmol) a 0 °C. La mezcla se agito a 0 °C durante 1 h. A la mezcla se le anadieron 200 ml de CH2Cl2, se lavo con agua (100 ml x 2) y salmuera (100 ml), se seco en Na2SO4y se concentro para dar ester metflico del acido (S)-4-carbamoil-4-[4-(4-morfolin-4-ilmetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidroisoindol-2-il]-butmco en forma de una espuma de color blanco (39 g, 100 %). P.f. 66-68 °C; Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometres, 1 ml/min, 240 nm, isocratico 15/85 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 % en H2O: 7,92 min (99 %). 1H RMN (DMSO-d6) 52,00 - 2,12 (m, 1H, CHH), 2,14 -2,22 (m, 1H, CHH), 2,22 -2,29 (m, 2H, CHH,CHH), 2,30 -2,39 (m, 4H, CH2,CH2), 3,46 (s, 2H, CH2), 3,50 (s, 3H, CH3), 3,53 - 3,63 (m, 4H, CH2,CH2), 4,28 - 4,59 (m, 2H, CH2), 4,73 (dd, J = 4,7, 10,2 Hz, 1H, NCH), 5,22 (s, 2H, CH2), 7,14 -7,23 (m, 1H, NHH), 7,26 - 7,39 (m, 4H, Ar), 7,41 -7,51 (m, 3H, Ar), 7,58 (s, 1H, NHH). 13C RMN (DM SO^) 524,82, 30,33, 44,78, 51,24, 53,12, 53,38, 62,09, 66,14, 69,35, 114,66, 115,12, 127,60, 129,00, 129,55, 130,18, 133,43, 135,31, 137,66, 153,42, 167,84, 171,73, 172,46; Anal calc. para C26H31NsO6+0,3 H2O: % de C 64,13; % de H 6,54; % de N 8,63; Observado: % de C 63,89; % de H 6,39; % de N 8,56.
Etapa 3: Preparacion de (S)-3-[4-(4-morfolin-4-ilmetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona
A la solucion en THF de 5-amino-4-(4-(4-(morfolinometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de (S)-metilo (45 g, 93 mmol) se le anadio en porciones 2-metilpropan-2-olato potasico (10,49 g, 93 mmol) (2 g X5) a -78 °C. La mezcla se agito a esta temperatura durante 30 min y despues se anadieron 250 ml de una solucion 1 N de HCl seguido de 200 ml de una solucion saturada de NaHCO3. La mezcla se extrajo con CH2O2 (150 ml x 2). La capa organica se lavo con agua (50 ml x 3) y salmuera (100 ml), se concentro en un evaporador rotatorio para dar un solido de color blanco, que despues se recristalizo en CH 3 CN (100 ml) para dar (S)-3-[4-(4-morfolin-4-ilmetilbenciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (32 g, 76 %). p.f.: 140-142 °C. LC-MS m/e = 450, HPLC: Waters Symmetry C 18 , 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 24o nm, isocratico 15/85 de CH 3 CN/H 3 PO 4 al 0,1 % en 5 min,: tR = 5,61 min (99,5 %); AGP quiral C 18 4,0 x 150 mm, 5 ^m 10/90 de ipropanol/NH 4 Ac 10 mM en 20 min,: tR = 10,07 min (99,5 %); 1 H RMN (DMSO-de) 52,28 - 2,38 (m, 4H, CH2,CH2), 2,44 (dd, J = 4,2, 13,1 Hz, 1H, CHH), 2,53-2,63 (m, 1H, CHH), 2,79 - 3,02 (m, 1H, CHH), 3,49 - 3,69 (m, 4H, CH2,CH2), 4,11 -4,52 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,22 (s, 2H, CH2), 7,33 (d, J = 7,7 Hz, 4H, Ar), 7,40 - 7,52 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-de) 522,33, 31,18, 45,06, 51,55, 53,11, 62,07, 66,14, 69,38, 114,96, 115,20, 127,61, 128,97, 129,78, 129,93, 133,28, 135,27, 137,67, 153,48, 167,97, 170,95, 172,80, LC-MS: 465; Anal calc. para C25H27N 3 O 3 C: 66,80 %; H: 6,05 %; N: 9,35 %. Observado: C: 66,59 %; H: 5,79 %; N: 9,26 %.
5.62 3-(1-OXO-4-((4-(((S)-2-(TRIFLUOROMETIL)PIRROLON-1-IL)METIL)BENCIL)OXI)ISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000079_0001
Etapa 1: Se anadio (S)-2-(trifluorometil)pirrolidina (198 mg, 1,420 mmol) en forma de un solido a una solucion de 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (450 mg, 0,947 mmol) en acetonitrilo (5 ml). La solucion resultante se agito durante 4 h a temperatura ambiente y despues durante 24 h a 70 °C. Se cargaron porciones adicionales de DIEA (0,165 ml, 0,947 mmol) y (S)-2-(trifluorometil)pirrolidina (60 mg, 0,43 mmol) y la mezcla resultante se agito a 70 °C durante ~16 h mas. La mezcla se enfrio y despues se concentro al vado. El residuo se repartio entre EtOAc (50 ml) y NaHCO31 N (30 ml) y la capa acuosa se lavo con mas cantidad de EtOAc (50 ml). La capa organica combinada se lavo con salmuera, se seco (Na2SO4), y se concentro al vado para dar 5-amino-5-oxo-4-(1-oxo-4-((4-(((S)-2-(trifluorometil)pirrolidin-1-il)metil)bencil)oxi)isoindolin-2-il)pentanoato de metilo en forma de un solido vrtreo de color amarillo (500 mg, rendimiento del 99 %). El producto en bruto se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional: LCMS: MH = 534.
Etapa 2: A una solucion de 5-amino-5-oxo-4-(1-oxo-4-(4-(((S)-2-(trifluorometil)pirrolidin-1-il)metil)benciloxi)isoindolin-2-il)pentanoato de metilo (500 mg, 0,937 mmol) en dMf (5 ml), se le anadio carbonato potasico anhidro (155 mg, 1,125 mmol) y la mezcla se agito a 85 °C durante ~17 h. La mezcla de reaccion se enfrio a temperatura ambiente, se diluyo con EtOAc (~150 ml), y se lavo con NaHCO3 ac. 1 N (30 ml). La capa organica se lavo con agua (30 ml) y salmuera, se seco (Na2SO4), y se concentro al vado para dar un aceite de color castano. El aceite se disolvio en DMF (6 ml) y se purifico usando HPLC preparativa de fase inversa. El producto se eluyo con un gradiente de acetonitrilo/agua (acido formico al 0,1 % en ambas fases moviles, MeCN del 5 al 80 % durante 30 minutos) y las fracciones se recogieron por activacion de masas. Las fracciones deseadas se combinaron y despues se concentraron al vado para dar un solido de color blanco. El secado adicional de este solido en un horno de vado proporciono 3-(1-oxo-4-((4-(((S)-2-(trifluorometil)pirrolidin-1-il)metil)bencil)oxi)isoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (275 mg, rendimiento del 58 %): HPLC: Waters Symmetry C1s, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 45/55 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 5,80 min (99,6 %); p.f.: 178-180 °C; 1H RMN (DM SO^) 5 1,57 - 1,91 (m, 3H, CHH, CHH, CHH), 1,92 - 2,15 (m, 2H, CHH, CHH), 2,31 - 2,48 (m, 2H, CHH, CHH), 2,53 - 2,65 (m, 1H, CHH), 2,75 - 3,03 (m, 2H, CHH, CHH), 3,44 - 3,60 (m, 1H, CHH), 3,65 (d, J = 13,6 Hz, 1H, CHH), 4,07 (d, J = 13,6 Hz, 1H, CHH), 4,25 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,42 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,33 (d, J = 7,7 Hz, 4H, Ar), 7,40 - 7,54 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO^) 5 22,33, 24,12, 25,84, 31,18, 45,04, 51,55, 53,56, 59,08, 62,79 (c, J = 27,5 Hz, CCF3), 69,38, 114,94, 115,20, 127,66 (c, J = 280,6 Hz, CF3), 127,71, 128,27, 129,78, 129,95, 133,28, 135,24, 139,00, 153,48, 167,99, 170,96, 172,81; LCMS: MH = 502; Anal calc. para C26H26F3N3O4: C, 62,27; H, 5,23; N, 8,38; F, 11,36; Observado: C, 61,99; H, 5,17; N, 8,32; F, 11,37.
5.63 (S)-3-METIL-3-(4-((4-(MORFOLINOMETIL)BENCIL)OXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000080_0001
Etapa 1: (S)-3-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-3-metilpiperidin-2,6-diona
A una mezcla de 2-(bromometil)-3-(terc-butildimetilsililoxi)benzoato de metilo (4,31 g, 12 mmol) y bromuro de (S)-3-metil-2,6-dioxopiperidin-3-aminio (2,68 g, 12,00 mmol) en acetonitrilo (100 ml) se le anadio DIEA (3,4 g, 26,4 mmol). La mezcla se calento a 60 °C durante 48 h. Despues, se anadieron 50 ml de AcOH, y la mezcla se calento a 80 °C, Despues de 15 min, la mezcla se evaporo para retirar el acetonitrilo, y la solucion de acido acetico restante se calento entonces a reflujo. Despues de 1 h, la mezcla se enfrio a temperatura ambiente y se filtro, y el filtro se aclaro con acido acetico (30 ml) y agua (50 ml), y se seco al vado, proporcionando 2,6 g (79 %) en forma de un solido de color blanco. 1 H RMN (DMSO-de) 51,68 (s, 3H), 1,81 - 1,97 (m, 1H), 2,51 - 2,84 (m, 3H), 4,48 (d, J = 17,2 Hz, 1H), 4,59 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 7,00 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,09 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,31 (t J = 7,7 Hz, 1H), 10,13 (s, 1H), 10,85 (s, 1H).
Etapa 2: (S)-3-(4-((4-(bromometil)bencil)oxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-3-metilpiperidin-2,6-diona
Una mezcla de (S)-3-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-3-metilpiperidin-2,6-diona (0,3 g, 1,094 mmol), 1,4-bis(bromometil)benceno (0,866 g, 3,28 mmol), y carbonato sodico (0,116 g, 1,094 mmol) en DMF (10 ml) se agitaron a temperatura ambiente en una atmosfera de nitrogeno durante 16 h. La mezcla se repartio entre agua (75 ml) y acetato de etilo (75 ml), y la fase organica se evaporo al vado. El residuo se sometio a cromatografia usando un gradiente de cloruro de metileno-metanol. El producto eluyo en MeOH al 2 %. Despues del secado, el rendimiento fue de 190 mg, rendimiento del (38 %). 1 H RMN (DMSO-de) 5 1,69 (s, 3H), 1,82 - 1,94 (m, 1H), 2,52 - 2,76 (m, 3H), 4,50 - 4,76 (m, 4H), 5,27 (s, 2H), 7,26 (dd, J = 7,8, 18,2 Hz, 2H), 7,39 - 7,59 (m, 5H), 10,84 (s, 1H).
Etapa 3: (S)-3-metil-3-(4-((4-(morfolinometil)bencil)oxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona
Se disolvio (S)-3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-3-metilpiperidin-2,6-diona (100 mg, 0,219 mmol) en acetonitrilo (5 ml), y se anadieron morfolina (0,021 ml, 0,241 mmol) y DlEA (0,046 ml, 0,262 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 16 h. Despues, la mezcla se repartio entre EtOAc (50 ml) y agua (50 ml) y la fase organica se lavo con agua (50 ml), y despues se extrajo con HCl 1 N (2 x 50 ml). Los extractos acuosos acidos combinados se lavaron con EtOAc (2 x 50 ml) y despues se hicieron basicos mediante la adicion de carbonato sodico solido, y despues se extrajeron con EtOAc (2 x 50 ml). Los extractos organicos combinados se secaron (MgSO4) y se evaporaron, proporcionando 90 mg en forma de un solido de color blanco, con un rendimiento del 89 %; p.f. 178-180 °C. HPLC: Waters X-Terra, 3,9 x 150 mm, 5 |jm, 1 ml/min, 240 nm, 5/95 a 95/5 de CH3CN-NH4(HCO2) al 0,1 % durante 5 min despues durante 10 min a 95/5 de CHsCN-NH4(HCO2) al 0,1 %: 4,63 (96,34 %).
1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,68 (s, 3H), 1,83 - 1,93 (m, 1H), 2,28 - 2,40 (m, 4H), 2,52 - 2,80 (m, 3H), 3,46 (s, 2H), 3,51 -3,62 (m, 4H), 4,55 (d, J = 17,8 Hz, 1H), 4,68 (d, J = 17,8 Hz, 1H), 5,24 (s, 2H), 7,22 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,27 - 7,38 (m, 3H), 7,40 - 7,50 (m, 3H), 10,85 (s, 1H). 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 520,68, 27,77, 29,01, 45,60, 53,15, 57,19, 62,10, 66,17, 69,39, 114,79, 127,71, 129,01, 129,74, 129,98, 133,91, 135,28, 137,72, 153,35, 167,00, 172,47, 173,53, Anal. Calc. para C26H29N3O5 2,0 H2O: C, 62,51 %; H, 6,66 %; N, 8,41 %; Observado: C, 62,52 %; H, 6,29 %; N, 8,19 %.
5.64 3-(4-((1,5-DIMETIL-1H-PIRAZOL-3-IL)METOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000080_0002
Etapa 1: A la solucion de 1,5-dimetil-1H-pirazol-3-carboxilato de metilo (1 g, 6,49 mmol) en THF (20 ml) se le anadio dibal-H (1 M en tolueno, 19,46 ml, 19,46 mmol) a 0 °C, la mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. Se anadio una solucion de sal de Rochelle (1,0 M, 50 ml) seguido de acetato de etilo (50 ml), la suspension resultante se agito a temperatura ambiente hasta que se consiguio la separacion de fase transparente, la fase organica se separo y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 40 ml). Las capas organicas combinadas se lavaron con NaHCO 3 acuoso saturado (5 ml) y salmuera, se secaron sobre MgSO 4 , y se concentraron para dar (1,5-dimetil-1H-pirazol-3-il)metanol (700 mg, rendimiento del 86 %); 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 52,20 (s, 3H, CH3), 3,63 (s, 3H, CH3), 4,29 (d, J = 5,9 Hz, 2H, CH2), 4,84 (t, J = 5,8 Hz, 1H, OH), 5,93 (s, 1H, Ar)
Etapa 2: Se anadio trifenilfosfina soportada por polimero (1,6 mmol/g, 3,96 g, 6,34 mmol) a una suspension agitada de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (927 mg, 3,17 mmol) en THF (30 ml) a 0 °C, seguido de azodicarboxilato de diisopropilo (1,28 g, 6,34 mmol), despues de la agitacion durante 10 minutos, se anadio (1,5-dimetil-1H-pirazol-3-il)metanol (400 mg, 3,17 mmol), la mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche y se filtro. La resina se lavo con acetato de etilo (10 x 20 ml). El filtrado combinado se evaporo a sequedad, el residuo se purifico por ISCO (columna 40 g, MeOH/CH2Cl2 gradiente del 0 % al 5 % en 40 min) para dar 5-amino-4-(4-((1,5-dimetil-1H-pirazol-3-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (340 mg rendimiento del 27 %); 1H RMN (DMSO-d6) 5 1,99 - 2,29 (m, 7H, CH2, CH2, CH3), 3,50 (s, 3H, CH3), 3,70 (s, 2H, CH3), 4,26 -4,57 (m, 2H, CH2), 4,70 (s, 1H, CH), 5,06 (s, 2H, CH2), 6,14 (s, 1H, Ar), 7,18 (s a, 1H, NHH), 7,27 (d, J = 7.2 Hz, 1H, Ar), 7,32 - 7,40 (m, 1H, Ar), 7,41 - 7,50 (m, 1H, Ar), 7,57 (s, 1H, NHH)
Etapa 3: A una solucion de 5-amino-4-(4-((1,5-dimetil-1H-pirazol-3-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (340 mg, 0,849 mmol) en THF (20 ml) se le anadio terc-butoxido potasico (105 mg, 0,934 mmol) a 0 °C. La mezcla se calento hasta la temperatura ambiente y se agito a temperatura ambiente durante 1 hora. Se anadio HCl (1 N, 1,5 ml) para interrumpir la reaccion, el disolvente se evaporo, el residuo se repartio entre acetato de etilo (50 ml) y bicarbonato sodico acuoso saturado (5 ml). La capa organica se separo, se lavo con salmuera, se seco sobre sulfato de magnesio, el disolvente se retiro al vado, el residuo se disolvio en acetato de etilo (3 ml), se anadio gota a gota hexanos (5 ml), el precipitado formado se recogio por filtracion para dar 3-(4-((1,5-dimetil-1H-pirazol-3-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (150 mg, rendimiento del 48 %); p.f.: 214-216 °C; 1H RMN (DMSO-de) 5 1,89 - 2,04 (m, 1H, CHH), 2,22 (s, 3H, CH3), 2,34 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,67 (m, 1H, CHH), 2,80 - 3,01 (m, 1H, CHH), 3,70 (s, 3H, CH3), 4,11 - 4,43 (m, 2H, CH2), 5,00 - 5,18 (m, 3H, CH, CH2), 6,13 (s, 1H, Ar), 7,31 (d, J = 7.2 Hz, 1H, Ar), 7,35 - 7,43 (m, 1H, Ar), 7,43 - 7,59 (m, 1H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-d6) 5 10,62, 22,31, 31,19, 35,78, 45,07, 51,55, 64,00, 104,81, 114,93, 115,07, 129,73, 129,84, 133,21, 139,29, 145,31, 153,46, 168,00, 170,96, 172,81; HPLC: Waters Xterra C-18, 3,9 x 150 mm, 5 pm, 1 ml/min, 240 nm, 25/75 de CH3CN/HCOONH4 al 0,1 % tR = 4,51 (98,77 %); Anal. Calc. para C19H20N4O4 0,2 H2O C, 61,35; H, 5,53; N, 15,06; Observado: C, 61,29; H, 5,30; N, 14,86.
5.65 2-(2,6-DIOXOPIPERIDIN-3-IL)-4-((4-(TIOMORFOLINOMETIL)BENCIL)OXI) ISOINDOLIN-1,3-DIONA
Figure imgf000081_0001
Etapa 1: 3-((4-(hidroximetil)bencil)oxi)ftalato de dimetilo
Se disolvieron 3-hidroxiftalato de dimetilo (10 g, 47,6 mmol) y (4-(clorometil)fenil)metanol (7,82 g, 50,0 mmol) se disolvieron en DMF seca (60 ml). A la solucion se le anadio K2c O3 (6,90 g, 50,0 mmol) y la mezcla se agito a 80 °C durante 16 h. La DMF se retiro al vado y el residuo se repartio entre EtOAc (300 ml) y agua (100 ml). La capa organica se lavo con mas cantidad de agua (100 ml) y salmuera, se seco (Na2SO4), y se concentro al vado para dar 3-((4-(hidroximetil)bencil)oxi)-ftalato de dimetilo en forma de un aceite de color ambar viscoso (19 g): LCMS: MH = 331; El producto en bruto se uso en la siguiente etapa sin purification adicional
Etapa 2: Acido 3-((4-(Hidroximetil)bencil)oxi)ftalico
Se disolvio 3-(4-(hidroximetil)benciloxi)ftalato de dimetilo (19 g de peso real, 15,72 g, 47,6 mmol, suponiendo un rendimiento cuantitativo de la etapa previa) se disolvio en THF (30 ml). A la solucion se le anadio agua (30 ml). Se anadio NaOH acuoso (10 N, 25 ml, 250 mmol) y la mezcla se agito vigorosamente a 70 °C durante 2,5 h. La mezcla se dejo enfriar a ta, se concentro al vado para dar un jarabe, y despues se transfirio a un matraz que contema HCl 6 N (45 ml) sobre hielo. Inmediatamente, el solido se elimino por precipitation y la suspension se diluyo con agua (~60 ml). La mezcla se filtro en un embudo sinterizado medio con suction. La torta se lavo con mas cantidad de agua (~60 ml), se seco por succion, y despues se puso en un horno de vado a 60 °C durante 4 h para dar acido 3-((4-(hidroximetil)bencil)oxi)ftalico en forma de un solido de color amarillo palido (13,9 g, rendimiento del 97 % de 3-hidroxiftalato de dimetilo): 1H RMN (DMSO-d6) 54,41 - 4,58 (m, 2H, CH2), 5,17 (s, 3H, CH2, OH), 7,20 - 7,64 (m, 7H, Ar), 13,02 (s a, 2H, 2 x COOH); 13C RMN (DMSO-d6) 562,63, 69,73, 117,03, 121,56, 126,46, 126,88, 127,13, 128,91, 129,57, 134,87, 142,19, 154,50, 166,45, 167,71; LCMS: MH = 303, 94 % de area a 240 nm. El solido se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 3: 2-(2,6-Dioxopiperidin-3-il)-4-((4-(hidroximetil)bencil)oxi)isoindolin-1,3-diona
Se anadio clorhidrato de 3-aminopiperidin-2,6-diona (0,915 g, 5,56 mmol) a una solucion de acido 3-(4-(hidroximetil)benciloxi)ftalico (1,4 g, 4,63 mmol) en piridina seca (15 ml) y la mezcla se calento a 118 °C en un bano de aceite durante 16 h. La mezcla de reaccion de color oscuro se dejo enfriar a temperatura ambiente y se acidifico con la adicion lenta de HCl 1 N (~25 ml). La mezcla se diluyo adicionalmente con agua (~170 ml) y despues se sonico durante ~30 minutos para facilitar la ruptura de los agregados solidos. La suspension de color oscuro resultante se filtro en un embudo sinterizado de poro medio y el solido de color oscuro se lavo con mas cantidad de agua (70 ml). La torta se seco por succion y despues se puso en un horno de vado a 60 °C durante 2,5 h para dar 1,6 g de un solido de color azul oscuro. El solido se disolvio en una mezcla de DCM, MeCN, y MeOH (~100 ml cada uno) y se trato con carbon decolorante. La mezcla se agito y despues se filtro por gravedad usando papel de filtro. El filtrado/lavado (color ambar oscuro) se trato una vez mas con carbon decolorante y despues se filtro en un lecho de celite. El filtrado transparente se concentro al vado a sequedad para dar un solido que se trituro con agua y se filtro con succion. La torta se lavo con mas cantidad de agua (~100 ml), se seco con succion, y despues se puso en un horno de vado a 60 °C durante 4 h para dar 2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-4-((4-(hidroximetil)bencil)oxi)isoindolin-1,3-diona en forma de un solido de color blanquecino (1,2 g, rendimiento del 68 %): HPLC: Waters Symmetry C 18 , 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 15/85 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 5,08 min (99,9 %); p.f.: 250-252; 1 H RMN (DMSO-de) 5 1,95 - 2,07 (m, 1H, CHH), 2,41 - 2,67 (m, 2H, CHH, CHH), 2,78 - 3,00 (m, 1H, CHH), 4,50 (d, J = 5,1 Hz, 2H, CH2OH), 5,09 (dd, J = 5,4, 12,7 Hz, 1H, CH), 5,19 (t, J = 5,6 Hz, 1H, OH), 5,36 (s, 2H, CH2O), 7,24 - 7,40 (m, 2H, Ar), 7,41 - 7,53 (m, 3H, Ar), 7,59 (d, J = 8,5 Hz, 1H, Ar), 7,82 (dd, J = 7,4, 8,5 Hz, 1H, Ar), 11,11 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 5 21,88, 30,83, 48,67, 62,53, 69,91, 115,40, 116,52, 120,18, 126,44, 127,09, 133,17, 134,31, 136,86, 142,32, 155,42, 165,21, 166,68, 169,81, 172,66, LCMS: M+Na = 417; MH no se observa en el modo de ionizacion positiva; Anal calc. para C21H18N2O6: C, 63,96; H, 4,60; N, 7,10; Observado: C, 63,77; H, 4,52; N, 7,32.
Etapa 4: 4-((4-(Bromometil)bencil)oxi)-2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)isoindolin-1,3-diona
Una suspension de 2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-4-(4-(hidroximetil)benciloxi)isoindolin-1,3-diona (1,05 g, 2,66 mmol) en una mezcla de DCM y MeCN (25 ml, 10 ml) se agito en un bano de hielo. A la mezcla se le anadio en una porcion PBr 3 (0,502 ml, 5,32 mmol). Despues de 5 min, el bano de hielo se retiro y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante ~20 h. A la mezcla de reaccion se le anadieron NaBr (0,822 g, 7,99 mmol) y bromuro de tetrabutilamonio (0,077 g, 0,240 mmol) y la agitacion se continuo durante 14 h mas a temperatura ambiente. La reaccion se concentro al vado para dar un solido de color blanquecino y el solido se suspendio de nuevo en agua con agitacion vigorosa y despues se filtro (embudo sinterizado medio). La torta se lavo con abundante agua (~250 ml, volumen total de filtrado y lavados) y despues se seco en un horno de vado a 50 °C para dar 4-((4-(bromometil)bencil)-oxi)-2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)isoindolin-1,3-diona en forma de un solido de color blanco (1,21 g, rendimiento del 99 %): Hp Lc : Waters Symmetry C1s, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 50/50 CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 4,85 min (99,5 %); 1 H RMN (DMSO^) 5 1,94 - 2,15 (m, 1H, CHH), 2,42 - 2,70 (m, 2H, CHH, CHH), 2,79 -2,99 (m, 1H, CHH), 4,72 (s, 2H, CH2), 5,10 (dd, J = 5,4, 12,9 Hz, 1H, CH), 5,38 (s, 2H, CH2), 7,38 - 7,54 (m, 5H, Ar), 7,59 (d, J = 8,5 Hz, 1H, Ar), 7,83 (dd, J = 7,3, 8,4 Hz, 1H, Ar), 11,11 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO^) 521,95, 30,91, 34,12, 48,75, 69,64, 115,57, 116,62, 120,18, 127,48, 129,42, 133,26, 136,33, 136,99, 137,72, 155,37, 165,27, 166,73, 169,87, 172,72; LCMS: M+Na = 479, 481; MH no se observa.
Etapa 5: 2-(2,6-Dioxopiperidin-3-il)-4-((4-(tiomorfolinometil)bencil) oxi)isoindolin-1,3-diona
A una suspension de 4-(4-(bromometil)benciloxi)-2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)isoindolin-1,3-diona (250 mg, 0,547 mmol) en MeCN (10 ml), se le anadio tiomorfolina (62,1 mg, 0,601 mmol) seguido de DIEA (0,143 ml, 0,820 mmol). La suspension resultante se agito a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se volvio transparente despues de ~15 min de agitacion y despues, gradualmente, los solidos se eliminaron por precipitation de la solution. Despues de ~2 h, la mezcla de reaccion se trato con mas cantidad de DIEA (0,143 ml, 0,820 mmol) y la suspension se calento a 80 °C con agitacion constante durante ~1 h. La mezcla se dejo enfriar a temperatura ambiente lentamente con agitacion suave. Despues de 2 h, la suspension se filtro en un embudo sinterizado medio con succion. El solido residual en el vial de reaccion se aclaro en el embudo con MeCN mmimo (1 ml). La torta se lavo con agua (3 x 10 ml). El solido restante se seco en un horno de vado a 60 °C durante 4 h para dar 2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-4-((4-(tiomorfolinometil)-bencil)oxi)isoindolin-1,3-diona en forma de un solido de color blanco (225 mg, 86 %): Hp Lc : Waters Symmetry C18, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 18/82 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 6,96 min (99,3 %); p.f.: 221-223 °C; 1 H RMN (DM SO^) 51,96 -2,10 (m, 1H, CHH), 2,41 -2,66 (m, 11H, 4 x CH2, 3 x CHH), 2,80 -2,97 (m, 1H, CHH), 3,50 (s, 2H, CH2N), 5,09 (dd, J = 5,3, 12,8 Hz, 1H, CH), 5,35 (s, 2H, CH2O), 7,26 - 7,40 (m, 2H, Ar), 7,42 - 7,53 (m, 2H, Ar), 7,60 (d, J = 8,5 Hz, 1H, Ar), 7,83 (dd, J = 7,4, 8,5 Hz, 1H, Ar), 11, 11 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 5 21,21 , 26,38, 30,16, 47,99, 53,65, 61,49, 69,19, 114,75, 115,82, 119,45, 126,52, 128,12, 132,51, 134,00, 136,23, 137,16, 154,78, 164,55, 166,00, 169,13, 171,98; LCMS: MH = 480; Anal calc. para C25H25N3O5S 0,28 H2O: C, 61,96; H, 5,32; N, 8,67; S, 6,62; Observado: C, 61,97; H, 5,12; N, 8,63; S, 6,55.
5.66 3-(4-((6-(MORFOUNOMETIL)IMIDAZO[1,2-A]PIRON-2-IL)METOXI)-1-OXOISOINDOUN-2-IL)PIPERON-2,6-DIONA
Etapa 1: Se anadio 3-bromo-2-oxopropanoato de etilo (9,0 g, 46,2 mmol) a una solucion agitada de 5-metilpiridin-2-amina (5,0 g, 46,2 mmol) en etanol (50 ml). La mezcla resultante se calento a reflujo durante 18 h. La mezcla de reaccion se enfrio y se concentro. El residuo se disolvio en CH2Cl2 (100 ml) y se lavo con NaHCO3 sat. (40 ml), agua (40 ml) y salmuera (40 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatograffa (SiO2, EtOAc al 20 %/CH2Cl2 durante 20 min despues EtOAc al 100 % durante 30 min) para dar 6-metilimidazo[1,2-a]piridina-2-carboxilato de etilo (3,8 g, 40 %): 1 H RMN (CDCl3) 81,44 (t, J = 6 Hz, 3H), 2,33 (s, 3H), 4,42-4,49 (c, J = 6 Hz, 2H), 7.07- 7,11 (dd, J = 3 y 12 Hz, 1H), 7,56-7,59 (d, J = 9 Hz, 1H), 7,90-7,91 (d, J = 3 Hz, 1H), 8,10 (s, 1H).
Etapa 2: Una mezcla de 6-metilimidazo[1,2-a]piridina-2-carboxilato de etilo (3,7 g, 18,2 mmol) y N-bromosuccinimida (3,2 g, 18,2 mmol) en acetato de metilo (50 ml) se calento en un bano de aceite a 60 °C con una bombilla de 300 W que brillo en la mezcla de reaccion durante 3 h. La mezcla de reaccion se enfrio, se diluyo con EtOAc (50 ml) y se lavo con agua (2 x 35 ml) y salmuera (35 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatograffa (SiO2, EtOAc al 20 %/CH2Cl2 durante 25 min) para dar 3-bromo-6-metilimidazo[1,2-a]piridina-2-carboxilato de etilo (4,7 g, 90 %): 1 H RMN (CDCla) 81,46 (t, J = 6 Hz, 3H), 2,41 (s, 3H), 4,45-4,52 (c, J = 6 Hz, 2H), 7,16-7,19 (dd, J = 3 y 9 Hz, 1H), 7,58-7,61 (d, J = 9 Hz, 1H), 7,98 (s, 1H); 13 C RMN (CDCla) 814,41, 18,45, 61,35, 99,75, 118,46, 121,90, 124,57, 129,95, 133,55, 144,27, 162,45.
Etapa 3: Una mezcla de 3-bromo-6-metilimidazo[1,2-a]piridina-2-carboxilato de etilo (4,5 g, 15,8 mmol), N-bromosuccinimida (2,8 g, 17,8 mmol) y 2,2'-azobisisobutironitrilo (0,6 g) en CCU (75 ml) se calento en un bano de aceite a 75 °C con una bombilla de 300 W que brillo en la mezcla de reaccion durante 3 h. La mezcla de reaccion se enfrio, se filtro y el solido se lavo con CH2Ch (40 ml). El filtrado se concentro y el residuo se disolvio en CH2Ch (100 ml) y se lavo con agua (2 x 30 ml) y salmuera (30 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatograffa (SiO2, CH2O 2 durante 5 min despues a EtOAc al 10 %/CH2Cl2 durante 5 min y mantenimiento durante 15 min despues al 20 % durante 5 min y mantenimiento durante 15 min) para dar 3-bromo-6-(bromometil)imidazo[1,2-a]piridina-2-carboxilato de etilo (2,5 g, 44 %); 1 H RMN (CDCls) 81,47(t, J = 6 Hz, 3H), 4,46­ 4,52 (c, J = 6 Hz, 2H), 4,54 (s, 2H), 7,35-7,39 (dd, J = 3 y 9 Hz, 1H), 7,68-7,71 (d, J = 9 Hz, 1H), 8,23 (s, 1H); 13 C RMN (CDCls) 814,35, 29,60, 61,54, 100,79, 119,60, 123,28, 125,38, 128,28, 134,56, 144,45, 162,09.
Etapa 4: Una solucion de 3-bromo-6-(bromometil)imidazo[1,2-a]piridina-2-carboxilato de etilo (2,4 g, 6,7 mmol) en acetona (50 ml) y DMF (40 ml) se anadio a una mezcla agitada de morfolina (0,9 g, 10,1 mol), carbonato potasico (3,3 g, 23,6 mmol) y cantidad catalftica de 18-corona-6 en acetona (50 ml) en un bano de aceite a 60 °C. La mezcla de reaccion se agito en un bano de aceite a 60 °C durante 3 h. La mezcla de reaccion se enfrio y se filtro. El filtrado se concentro y el residuo se disolvio en EtOAC (100 ml) y se lavo con agua (2 x 35 ml) y salmuera (35 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo solido se agito con eter para dar 3-bromo-6-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridina-2-carboxilato de etilo (1,4 g, 55 %): 1 H RMN (CDCls) 81,47 (t, J = 6 Hz, 3H), 2,48-2,51 (m, 4H), 3,55 (s, 2H), 3,72­ 3,75 (m, 4H), 4,46-4,53 (c, J = 6 Hz, 2H), 7,39-7,42 (d, J = 9 Hz, 1H), 7,63-7,66 (d, J = 9 Hz, 1H), 8,12 (s, 1H).
Etapa 5: Se anadio lentamente LiAlH4/THF (1 M, 3,9 ml, 3,9 mmol) a una solucion agitada de 3-bromo-6-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridina-2-carboxilato de etilo (1,2 g, 3,3 mmol) en THF (40 ml) a 0-5 °C. La mezcla de reaccion se agito a 0 °C durante 1 h. La mezcla de reaccion se inactivo con agua (1 ml), NaOH 2 N (1 ml), agua (4 ml). La mezcla se filtro y se lavo el solido con CH2O 2 (40 ml). El filtrado se lavo con salmuera (35 ml) y se seco. El disolvente se retiro para dar (6-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridina-2-il)metanol (0,6 g, 75 %): 1 H RMN (CDCh) 8 2,45-2,50 (m, 4H), 3,46 (s, 2H), 3,70-3,74 (m, 4H), 4,84 (s, 2H), 7,19-7,22 (dd, J = 3 y 9 Hz, 1H), 7,47-7,52 (m, 2H), 8,02 (s, 1H).
Etapa 6: La trifenilfosfina unida a polfmero (2,5 g, 3,4 mmol) en THF (30 ml) se enfrio en un bano de hielo a 3 °C. Se anadio lentamente azadicarboxilato de diisopropilo (0,6 g, 3,2 mmol) a 3-5 °C. Despues de agitarse a 3 °C durante 10 min, se anadio lentamente una solucion de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,7 g, 2,3 mmol) y (6-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridina-2-il)metanol (0,6 g, 2,3 mmol) en THF (70 ml) a 5-10 °C. Despues de agitarse durante 5 min, el bano de hielo se retiro y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se filtro y el filtrado se concentro. El residuo se disolvio en CH2Ch (100 ml) y se lavo con NaHCO3 sat. (35 ml), agua (35 ml) y salmuera (35 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatograffa (SiO2, CH2O 2 durante 5 min despues a CH3OH al 3 %/CH2Cl2 durante 5 min y mantenimiento durante 15 min despues al 5 % durante 5 min y mantenimiento durante 15 min despues al 10 % durante 5 min y mantenimiento durante 10 min) para dar 5-amino-4-(4-((6-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridina-2-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,5 g, 43 %).
Etapa 7: Una solucion de 5-amino-4-(4-((-6-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridina-2-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,5 g, 0,9 mmol) en THF (15 ml) se enfrio en un bano de hielo seco/acetona durante 5 min. Se anadio una solucion de terc-butoxido potasico/THF (1 M, 1,0 ml, 1,0 mmol). La mezcla de reaccion se agito en un bano a -78 °C durante 1 h. La mezcla de reaccion se inactivo con HCl 1 N (3 ml) y se calento a temperatura ambiente. Se anadio agua (20 ml) y se basifico con NaHCO3 sat. (8 ml) a pH = 8 La mezcla se extrajo con CH2Cl2 (3 x 30 ml) y la solucion organica combinada se lavo con salmuera (25 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se precipito con eter para dar 3-(4-((6-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridin-2il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,4 g, 83 %): p.f. 155-157 °C; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 81,97-2,01 (m, 1H), 2,36-2,39 (m, 4H), 2,39-2,60 (m, 2H), 2,85-2,96 (m, 1H), 3,44 (s, 2H), 3,55-3,58 (m, 4H), 4,20-4,26 (d, J = 18 Hz, 1H), 4,36-4,41 (d, J = 18 Hz, 1H), 5.08- 5,14 (dd, J = 6 y 12 Hz, 1H), 5,34 (s, 2H), 7,21-7,24 (m, 1H), 7,31-7,33 (d, J = 9 Hz, 1H), 7,46-7,51 (m, 3H), 8,02 (s, 1H), 8,43 (s, 1H), 10,98 (s, 1H); 13C RMN (DMSO-d6) 522,36, 31,18, 45,06, 51,55, 52,97, 59,13, 64,61, 66,13, 111,89, 115,03, 115,18, 116,24, 122,06, 125,67, 126,91, 129,77, 133,27, 141,58, 143,90, 153,45, 167,99, 170,96, 172,81; Calc. para C26H27N5O5+0,2CH2Cl2: C, 62,13; H, 5,45; N, 13,83, Observado: C, 62,16; H, 5,74; N, 13,13.
5.67 3-{4-[4-(3,4-DIHIDRO-1H-ISOQUINOLIN-2-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000084_0001
Etapa 1 Preparation de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-{4-[4-(3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-butmco
A la solution en CH3CN de 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,37 g, 0,778 mmol) se le anadieron 1,2,3,4-tetrahidroisoquinolina (0,124 g, 0,934 mmol) y DIPEA (0,272 ml, 1,557 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reaction se concentro y despues se extrajo con CH2Cl2 y agua. La capa organica se concentro y dio ester metflico del acido 4-carbamoil-4-{4-[4-(3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-butmco en forma de un solido de color blanco (0,4 g, 97 %). Se uso en la siguiente etapa directamente.
Etapa 2 Preparacion de 3-{4-[4-(3,4-Dihidro-1H-isoquinolin-2-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona
A la solucion en CH3CN de 5-amino-4-(4-(4-((3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-il)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,4 g, 0,758 mmol) se le anadio terc-butoxido potasico (0,094 g, 0,834 mmol) a 0 °C. La mezcla se agito a 0 °C durante 1 hora. La reaccion se interrumpio anadiendo 5 ml de HCl 1 N seguido de NaHCO3 (sat., 5 ml). A la mezcla se le anadieron CH2Cl2 (20 ml), agua (20 ml) y se extrajo. La capa organica se concentro y dio un solido de color blanco. El solido se recristalizo en 4 ml de CH3Cn para dar un solido de color blanco 170 mg (45 %). p.f.: 173-175 °C. LC-MS m/e = 496, HPLC Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometros,1 ml/min, 240 nm, gradiente de 5/95 a 5/95 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 % en H2O durante 5 min y mantenimiento a 95/5 durante 5 min: 6,43 min (97 %). 1H RMN (DMSO-de) 51,86 - 2,11 (m, 1H, CHH), 2,35 - 2,48 (m, J = 4,4, 13,3 Hz, 1H, CHH), 2,52 - 2,62 (m, 1H, CHH), 2,63 - 2,74 (m, 2H, CH2), 2,74 - 2,84 (m, 2H, CH2), 2,84 - 3,02 (m, 1H, CHH), 3,54 (s, 2H, CH2), 3,65 (s, 2H, CH2), 4,13 -4,54 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,0, 13,1 Hz, 1H, NCH), 5,24 (s, 2H, CH2), 6,82 -7,20 (m, 4H, Ar), 7,26 - 7,68 (m, 7H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH).13C RMN (DMSO-de) 522,36, 28,64, 31,20, 45,10, 50,16, 51,58, 55,40, 61,48, 69,44, 114,98, 115,23, 125,43, 125,94, 126,32, 127,72, 128,41, 128,82, 129,82, 129,95, 134,05, 134,69, 135,29, 138,10, 153,51, 170,98, 172,83, Anal calc. para C30H29N3O4 0,3 H2O; % de C 71,92; % de H 5,96;
% de N 8,39; Observado:% de C 71,55; % de H 5,72; % de N 8,22.
5.68 3-{4-[4-(2,3-DIHIDRO-BENZO[1,4]OXAZIN-4-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000084_0002
A la solucion agitada de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (350 mg, 0,79 mmol) en Acetonitrilo (8 ml) se le anadio una solucion de 3,4-dihidro-2H-benzo[b][1,4]oxazina (128 mg, 0,9 mmol) en acetonitrilo (2 ml) y DIPEA (0,21 ml, 1,2 mmol) a temperatura ambiente. La solucion de color amarillo claro resultante se agito a temperatura ambiente durante 18 y se agito a 40 °C durante 24 h. El producto se purifico por HPLC prep. para dar 3-{4-[4-(2,3-Dihidro-benzo[1,4]oxazin-4-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (208 mg, rendimiento del 53 %). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 pm, 1 ml/min, 240 nm, 55/45, (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 4,50 min (99,0 %); p.f.: 145-147 °C; 1 H RMN (DM SO^) 5 1,91 - 2,04 (m, 1H, CHH), 2,33 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,65 (m, 1H, CHH), 2,80 - 3,01 (m, 1H, CHH), 3,35 - 3,43 (m, 2H, CH2), 4,14 - 4,45 (m, 4H, CHH, CHH, CH2), 4,47 (s, 2H, CH2), 5,10 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CHH), 5,21 (s, 2H, CH2), 6,44 - 6,56 (m, 1H, Ar), 6,57 - 6,76 (m, 3H, Ar), 7,22 - 7,39 (m, 4H, Ar), 7,39 - 7,59 (m, 3H, Ar), 10,96 (s, 1H, NHH); 13 C RMN (DMSO^) 522,31, 31,16, 45,06, 47,06, 51,55, 53,57, 64,03, 69,32, 112,27, 114,91, 115,20, 115,77, 116,91, 121,24, 127,20, 127,96, 129,78, 129,95, 133,28, 135,17, 135,21, 138,23, 143,46, 153,45, 167,99, 170,95, 172,81; LCMS MH = 498; Anal. Calc. para C29H27NsO5+0,3H2O : C, 69,25; H, 5,53; N, 8,35; Observado: C, 69,01; H, 5,29; N, 8,25.
5.69 3-{4-[4-(2,3-DIHIDRO-5H-BENZO[F][1,4]OXAZEPIN-4-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000085_0001
A la solucion agitada de 2,3,4,5-tetrahidrobenzo[f][1,4]oxazepina (141 mg, 0,9 mmol) en Acetonitrilo (8 ml) se le anadieron 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (350 mg, 0,79 mmol) y DlPEA (0,21 ml, 1,1 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 3,5 h antes de anadir 3-(4-(4-(bromometil)bencilo oxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (30 mg, 0,07 mmol). La mezcla de reaccion resultante se agito a temperatura ambiente durante 17 h y la mezcla se purifico por HPLC prep. para dar 3-{4-[4-(2,3-Dihidro-5H-benzo[f][1,4]oxazepin-4-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (216 mg, rendimiento del 54 %); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 |jm, 1 ml/min, 240 nm, 23/77, (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 4,16 min (99,7 %); p.f.: 148-150 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 5 1,90 - 2,04 (m, 1H, CHH), 2,34 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,57 (d, J = 17,8 Hz, 1H, CHH), 2,81 - 3,04 (m, 3H, CH2, CHH), 3,62 (s, 2H, CH2), 3,75 (s, 2H, CH2), 3,95 - 4,06 (m, 2H, CH2), 4,26 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,42 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,03 - 5,17 (m, 1H, CHH), 5,24 (s, 2H, CH2), 6,91 - 7,09 (m, 3H, Ar), 7,13 - 7,25 (m, 1H, Ar), 7,33 (d, J = 7,2 Hz, 4H, Ar), 7,39 - 7,54 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 522,33, 31,16, 45,07, 51,55, 57,28, 57,73, 57,87, 69,41,69,87, 115,00, 115,22, 120,38, 123,08, 127,66, 128,36, 128,68, 129,78, 129,95, 130,53, 131,62, 133,30, 135,25, 138,62, 153,48, 159,60, 167,99, 170,96, 172,81; LCMS MH = 512; Anal. Calc. para C 30 H 29 N 3 O 5 +0,4H 2 O : C, 69,46; H, 5,79; N, 8,10; Observado: C, 69,25; H, 5,53; N, 8,35.
5.70 2-(2,6-DIOXOPIPERIDIN-3-IL)-4-((4-(MORFOLINOMETIL)TIAZOL-2-IL)METOXI)ISOINDOLIN-1,3-DIONA
Figure imgf000085_0002
Etapa 1: Se anadio trifenilfosfina soportada por polimero (1,6 mmol/g, 3,5 g, 5,6 mmol) a una solucion agitada de 3­ hidroxiftalato de dimetilo (647 mg, 3,08 mmol) en THF (30 ml) a 0 °C, seguido de azodicarboxilato de diisopropilo (1,13 g, 5,6 mmol), despues de la agitacion durante 10 minutos, se anadio (4-(morfolinometil)tiazol-2-il)metanol (600 mg, 2,80 mmol), la mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche y se filtro. La resina se lavo con acetato de etilo (10 x 30 ml). Las capas organicas combinadas se evaporaron al vado. El residuo se purifico por ISCO (columna de 40 g, MeOH/CH 2 Cl 2 gradiente del 0 % al 5 % en 50 min) para dar 3-((4-(morfolinometil)tiazol-2-il)metoxi)ftalato de dimetilo (800 mg, rendimiento del 70 %).
Etapa 2: La mezcla de 3-((4-(morfolinometil)tiazol-2-il)metoxi)ftalato de dimetilo (320 mg, 0,787 mmol) e hidroxido sodico (10 ml, 30,0 mmol) en etanol (20 ml) se calento a reflujo durante 1 hora. La mezcla de reaccion se evaporo a sequedad al vado, se anadio agua (20 ml), la mezcla se extrajo con acetato de etilo (2 x 10 ml), la capa acuosa se separo y se acidifico con HCl (3 N, 15 ml), despues se evaporo al vado a sequedad. El producto en bruto se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 3: La mezcla de acido 3-((4-(morfolinometil)tiazol-2-il)metoxi)ftalico (298 mg, 0,787 mmol) y clorhidrato de 3-aminopiperidin-2,6-diona (155 mg, 0,944 mmol) en piridina (20 ml) se calento a reflujo durante una noche. La piridina se evaporo a sequedad al vado, el residuo se repartio entre bicarbonato sodico saturado (20 ml) y acetato de etilo
(50 ml), la capa organica se separo, se lavo con salmuera, se seco sobre sulfato de magnesio, el disolvente se evaporo y el producto se purifico por HPLC prep. (condicion de gradiente: acetonitrilo al 0-20 % en agua, acido formico al 0,1 % en 15 min) para dar 2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-4-((4-(morfolinometil)tiazol-2-il)metoxi)isoindolin-1,3-diona (39 mg, rendimiento del 11 %); p.f.: 210-212 °C; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,92 - 2,14 (m, 1H, CHH), 2,42 (d, J = 4,2 Hz, 5H, CHH, CH2, CH2), 2,55 - 2,65 (m, 1H, CHH), 2,77 - 3,02 (m, 1H, CHH), 3,49 - 3,58 (m, 4H, CH2, CH2), 3,60 (s, 2H, CH2), 4,95 - 5,22 (m, 1H, CH), 5,66 (s, 2H, CH2), 7,44 - 7,58 (m, 2H, Ar), 7,65 (d, J = 8,5 Hz, 1H, Ar), 7,83 (d, J = 7,7 Hz, 1H, Ar), 11,11 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO^) 521,93, 30,90, 48,78, 52,99, 57,52, 66,11, 67,56, 116,18, 116,82, 118,28, 120,45, 133,26, 136,97, 152,88, 154,60, 164,44, 165,07, 166,64, 169,84, 172,72;
HPLC: Waters Xterra C-18, 3,9 x 150 mm, 5 jm , 1 ml/min, 240 nm, 25/75 de CH3CN/HCOONH4 al 0,1 % tR = 4,34 (99,30 %); Anal. Calc. para C23H24N4O8S C, 53,48; H, 4,68; N, 10,85; Observado: C, 49,86; H, 4,42; N, 10,50.
5.71 3-(4-((1-METIL-5-(MORFOUNOMETIL)-1H-PIRAZOL-3-IL)METOXI)-1-OXOISOINDOUN-2-IL)PIPERON-2,6-DIONA
Figure imgf000086_0001
Etapa 1: Un matraz de fondo redondo de 250 ml se cargo con 1,5-dimetil-1H-pirazol-3-carboxilato de metilo (2 g, 12,97 mmol), NBS (2,309 g, 12,97 mmol), AIBN (0,213 g, 1,297 mmol), asi como CCl4 (40 ml, 415 mmol). La mezcla se calento a reflujo en una atmosfera de nitrogeno durante una noche. La mezcla de reaccion se enfrio, el solido se retiro por filtracion, el filtrado se evaporo a sequedad, el residuo se purifico por ISCO (columna de 120 g, acetato de etilo/hexanos gradiente del 0 % al 30 % en 50 min, 30%, 30 min) para dar 5-(bromometil)-1-metil-1H-pirazol-3-carboxilato de metilo (500 mg, rendimiento del 17 %); 1 H RMN (CLOROFORMO-d) 53,93 (s, 3H, CH3), 3,99 (s, 3H, CH3), 4,47 (s, 2H, CH2), 6,83 (s, 1H, Ar).
Etapa 2: A una solucion de 5-(bromometil)-1-metil-1H-pirazol-3-carboxilato de metilo (500 mg, 2,145 mmol) en acetonitrilo (30 ml) se le anadieron morfolina (0,280 ml, 3,22 mmol) y trietil amina (0,449 ml, 3,22 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 7 horas. El disolvente se evaporo a sequedad, el residuo se repartio entre acetato de etilo (50 ml) y bicarbonato sodico acuoso saturado (20 ml), la capa organica se lavo con salmuera, se seco sobre sulfato de magnesio, el disolvente se evaporo para dar 1-metil-5-(morfolinometil)-1H-pirazol-3-carboxilato de metilo (450 mg, rendimiento del 88 %); 1 H RMN (CLOROFORMO-d) 52,45 (s a, 4H, CH2, CH2), 3,52 (s a, 2H, CH2), 3,70 (s a, 4H, CH2, CH2), 3,93 (s, 3H, CH3), 4,00 (s, 3H, CH3), 6,54 - 6,87 (m, 1H, Ar).
Etapa 3: A la mezcla de 1-metil-5-(morfolinometil)-1H-pirazol-3-carboxilato de metilo (450 mg, 1,881 mmol) en THF (15 ml) se le anadio Dibal-H (5,64 ml, 5,64 mmol) a 0 °C. La mezcla formada se agito a temperatura ambiente durante una noche. El disolvente se evaporo al vado, el residuo se repartio entre sal de Rochelle (1,0 M, 10 ml) y acetato de etilo (50 ml), la fase organica se separo y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 20 ml). Las capas organicas combinadas se lavaron con bicarbonato sodico acuoso saturado (5 ml) y salmuera, se secaron (MgSO 4 ), y se concentraron para dar (1-metil-5-(morfolinometil)-1H-pirazol-3-il)metanol (300 mg, rendimiento del 76 %); 1 H RMN (CLOROFORMO-d) 52,47 (s a, 4H, CH2, CH2), 3,52 (s a, 2H, CH2), 3,72 (d, J = 2,1 Hz, 4H, CH2, CH2), 3,90 (s, 3H, CH3), 4,65 (s, 2H, CH2), 6,17 (s a, 1H, Ar).
Etapa 4: Se anadio trifenilfosfina soportada por polimero (1,6 mmol/g, 1,78 g, 2,84 mmol) a una suspension agitada de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (415 mg, 1,420 mmol) en THF (30 ml) a 0 °C, seguido de DlAD (574 mg, 2,84 mmol), despues de la agitacion durante 10 min, se anadio la solucion de (1-metil-5-(morfolinometil)-1H-pirazol-3-il)metanol (300 mg, 1,420 mmol) en THF (10 ml), la mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La resina se filtro y se lavo con acetato de etilo (10 x 30 ml). El filtrado combinado se evaporo a sequedad, el residuo se purifico por iSCO (columna 40 g, MeOH en DCM gradiente de 0-5 % en 40 min) para dar 5-amino-4-(4-((1-metil-5-(morfolinometil)-1H-pirazol-3-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (270 mg, rendimiento del 39 %); 1 H RMN (DMSO-de) 51,92 - 2,30 (m, 4H, CH2, CH2), 2,30 - 2,42 (m, 4H, CH2, CH2), 3,49 (s, 5H, CH2, CH3), 3,52 - 3,63 (m, 4H, CH2, CH2), 3,80 (s, 3H, CH3), 4,25 - 4,57 (m, 2H, CH2), 4,25 - 4,57 (m, 2H, CH2), 4,71 (dd, J = 4,7, 10,2 Hz, 1H, CH), 5,09 (s, 2H, CH2), 5,02 - 5,19 (m, 2H, CH2), 6,27 (s, 1H, Ar), 7,18 (s, 1H, NHH), 7,28 (d, J = 7,2 Hz, 1H, Ar), 7,32 - 7,40 (m, 1H, Ar), 7,40 - 7,51 (m, 1H, Ar), 7,57 (s, 1H, NHH).
Etapa 5: A una solucion de 5-amino-4-(4-((1-metil-5-(morfolinometil)-1H-pirazol-3-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (250 mg, 0,515 mmol) en THF se le anadio terc-butoxido potasico (63,6 mg, 0,566 mmol) a 0 °C, la mezcla formada se agito a temperatura ambiente durante 1 hora. La reaccion se interrumpio anadiendo HCl acuoso (1 N, 1,5 ml). El disolvente se retiro al vado, el residuo se repartio entre bicarbonato sodico saturado (5 ml) y acetato de etilo (30 ml), la capa organica se separo y se lavo con salmuera, se seco sobre sulfato de magnesio y se filtro, el filtrado se evaporo a sequedad, el solido se suspendio de nuevo con eter (10 ml) y se filtro para dar 3-(4-((1-metil-5-(morfolinometil)-1H-pirazol-3-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (130 mg, rendimiento del 56 %); p.f.: 125-127 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 5 1,99 (d, 1H, CHH), 2,35 (d, J = 4,0 Hz, 4H, CH2, CH2), 2,46 (s a, 1H, CHH), 2,52 - 2,65 (m, 1H, CHH), 2,82 - 3,02 (m, 1H, CHH), 3,49 (s, 2H, CH3), 3,51 - 3,62 (m, 4H, CH2, CH2), 3,80 (s, 3H, CH3), 4,12 -4,43 (m, 2H, CH2), 5,03 -5,17 (m, 3H, CH2, CH), 6,26 (s, 1H, Ar), 7,31 (d, J = 7,4 Hz, 1H, Ar), 7,35 -7,43 (m, 1H, Ar), 7,43 - 7,55 (m, 1H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 522,31, 30,38, 31,18, 36,41, 45,07, 51,55, 52,23, 52,93, 64,00, 66,08, 106,66, 115,07, 115,18, 129,74, 129,89, 133,24, 139,35, 145,27, 153,46, 167,97, 170,96, 172,81; HPLC: Waters Xterra C-18, 3,9 x 150 mm, 5 |jm, 1 ml/min, 240 nm, 25/75 de CH3CN/HCOONH4 al 0,1 % tR = 3,31 (97,56 %); Anal. Calc. para C23H27N5O5 0,4 EtOAc C, 60,45; H, 6,23; N, 14,33; Observado: C, 60,10; H, 6,04; N, 14,70.
5.72 4-((4-((7,8-DIHIDRO-1,6-NAFTIRON-6(5H)-IL)METIL)BENCIL)OXI)-2-(2,6-DIOXOPIPERON-3-IL)ISOINDOLIN-1,3-DIONA
Figure imgf000087_0001
A una mezcla de 4-(4-(bromometil)benciloxi)-2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)isoindolin-1,3-diona (250 mg, 0,547 mmol) y 5,6,7,8-tetrahidro-1,6-naftiridina (81 mg, 0,60l mmol) en MeCN seco (10 ml), se le anadio DIEA (0,334 ml, 1,9l4 mmol). La suspension resultante se agito a temperatura ambiente durante 17 h. La mezcla de reaccion se calento a 80 °C con el tapon del vial quitado. La mayor parte de los solidos se disolvieron y la mezcla se concentro hasta ~1/2 del volumen original. Despues de ~2,5 h, la mezcla se dejo enfriar a temperatura ambiente con agitacion suave. Se formo una suspension espesa que se maduro a 4 °C durante una noche. La suspension se trato con DIEA (250 ^l) y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 30 min. Despues, la suspension se filtro en un embudo sinterizado medio con succion y la torta se lavo con agua (~30 ml). El solido recogido se seco por succion y despues se seco adicionalmente en un horno de vado a 50 °C durante 6 h para dar 4-((4-((7,8-dihidro-1,6-naftiridin-6(5H)-il)metil)bencil)oxi)-2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)isoindolin-1,3-diona en forma de un solido de color blanquecino (275 mg, 99 %): HPLC: Waters Symmetry C-is, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 15/85 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 5,08 min (99,9 %); p.f.: 165-167 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,93 - 2,15 (m, 1H, CHH), 2,38 - 2,65 (m, 2H, CHH, CHH), 2,73 - 3,01 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 3,58 (s, 2H, CH2), 3,70 (s, 2H, CH2), 5,09 (dd, J = 5,4, 12,7 Hz, 1H, CH), 5,37 (s, 2H, CH2O), 7,12 (dd, J = 4,7, 7,7 Hz, 1H, Ar), 7,34 - 7,54 (m, 6H, Ar), 7,61 (d, J = 8,3 Hz, 1H, Ar), 7,83 (dd, J = 7,4, 8,5 Hz, 1H, Ar), 8,33 (dd, J = 1,7, 4,7 Hz, 1H, Ar), 11,11 (s, 1H, NH; 13 C RMN (DMSO-de) 521,95, 30,90, 31,89, 48,73, 50,02, 54,26, 61,13, 69,95, 115,50, 116,58, 120,19, 120,95, 127,36, 128,84, 129,81, 133,26, 134,17, 134,87, 136,99, 138,05, 147,15, 154,38, 155,53, 165,29, 166,75, 169,87, 172,72; LCMS: MH = 511; Anal calc. para C 29 H 26 N 4 O 5 +0,6 H2O: C, 66,81; H, 5,26; N, 10,57; Observado: C, 66,75; H, 5,28; N, 10,84.
5.73 3-{1-OXO-4-[4-(4-FENIL-IMIDAZOL-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000087_0002
A la solucion agitada de 4-fenil-1H-imidazol (179 mg, 1,2 mmol) en Acetonitrilo (15 ml) se le anadieron 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (500 mg, 1,1 mmol) y DIp Ea (0,30 ml, 1,7 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 19 h y se calento a 40 °C durante 7 h antes de anadirse EtOAc (60 ml), agua (15 ml) y salmuera (15 ml). Despues, se anadio acetonitrilo (20 ml) para disolver el solido. La solucion resultante se extrajo y la capa organica se concentro al vado. El residuo se purifico por ISCO para dar 3-{1-Oxo-4-[4-(4-fenil-imidazol-1-ilmetil)-benciloxi]-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (190 mg, rendimiento del 33 %). ROESY confirmo la estructura isomerica del producto. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 25/75, (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 4,84 min (99,9 %); p.f.: 246-248 °C; 1 H RMN (DMSO^) 51,99 (s a, 1H, CHH), 2,33 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,53 -2,60 (m, 1H, CHH), 2,81 - 2,99 (m, 1H, CHH), 4,23 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,39 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,09 (dd, J = 5,0, 13,1 Hz, 1H, CHH), 5,23 (s, 4H, CH2, CH2), 7,12 - 7,23 (m, 1H, Ar), 7,23 - 7,39 (m, 6H, Ar), 7,39 - 7,54 (m, 3H, Ar), 7,68 (d, J = 1,3 Hz, 1H, imidazol H), 7,70 - 7,78 (m, 2H, Ar), 7,83 (d, J = 1,3 Hz, 1H, imidazol H), 10,95 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 522,30, 31,15, 45,04, 49,45, 51,53, 69,17, 114,90, 115,23, 115,79, 124,11, 126,17, 127,63, 128,12, 128,40, 129,78, 129,93, 133,28, 134,44, 136,17, 137,45, 137,94, 140,90, 153,38, 167,96, 170,93, 172,80; LCMS MH = 507; Anal. Calc. para C 30 H 26 N 4 O 4 +0,1 H 2 O : C, 70,88; H, 5,19; N, 11,00; Observado: C, 70,66; H, 4,87; N, 10,83.
5.74 3-(4-((3-((4-METILPIPERIDIN-1-IL)METIL)ISOXAZOL-5-IL)METOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000088_0001
Una mezcla de metanosulfonato de (5-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)isoxazol-3-il)metilo (0,25 g, 0,556 mmol) en acetonitrilo (10 ml) se enfrio a 0 °C. Se anadieron 4-metilpiperidina (0,066 g, 0,668 mmol) y TEA (0,073 g, 0,719 mmol), el bano de hielo se retiro, y la mezcla se agito durante 16 h. La mezcla se repartio entre EtOAc (100 ml) y agua (l00 ml), y la fase organica se lavo con agua (100 ml). Despues, la fase organica se extrajo con HCl ac. al 1 % (100 ml), y este extracto se hizo basico con Na2CO3 ac. al 5 % (50 ml) y se extrajo en EtOAc (2 x 75 ml). Los extractos organicos combinados se lavaron con agua (100 ml), se secaron (MgSO4), y se evaporaron, proporcionando 180 mg (72 %), en forma de un solido de color blanco; p.f. 168-170 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 90/10 de CH 3 CN/H 3 PO 4 al 0,1 % en 10 min: 4,95 (97,98 %). 1 H RMN (DMSO-de) 50,87 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 1,01 - 1,19 (m, 2H), 1,21 - 1,38 (m, 1H), 1,49 - 1,65 (m, 2H), 1,88 - 2,04 (m, 3H), 2,36 - 2,47 (m, 1H), 2,54 - 2,62 (m, 1H), 2,68 - 2,80 (m, 2H), 2,83 - 2,99 (m, 1H), 3,50 (s, 2H), 4,24 (d, J = 17,6 Hz, 1H), 4,41 (d, J = 17,6 Hz, 1H), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H), 5,42 (s, 2H), 6,60 (s, 1H), 7.33 - 7,44 (m, 2H), 7,46 - 7,57 (m, 1H), 10,97 (s, 1H). 13 C RMN (DMSO-de) 521,73, 22,33, 29,97, 31,20, 33,79, 45,05, 51,61, 52,64, 53,14, 60,72, 104,53, 115,10, 115,97, 129,85, 129,98, 133,51, 152,67, 161,56, 167,06, 167,82, 170,94, 172,82, Anal. Calc. para C24H28N4O5 H2O: C, 61,26 %; H, 6,43 %; N, 11,91 %; Observado: C, 61,41 %; H, 6.33 %; N, 12,10 %.
5.75 3-(4-((3-(MORFOUNOMETIL)IMIDAZO[1,2-A]PIRIDIN-6-IL)METOXI)-1-OXOISOINDOUN-2-IL)PIPERON-2,6-DIONA
Figure imgf000088_0002
Etapa 1: Una mezcla de 6-aminonictinato de etilo (8,3 g, 49,9 mmol) y cloroacetaldehido (50 % en agua, 15,7 g, 99,9 mmol) en CH3CN (200 ml) se calento a reflujo durante 17 h. La mezcla de reaction se enfrio y se concentro. El residuo se agito con CH2Cl2 (100 ml) y se basifico con NaHCO3 sat. (120 ml). La capa ac. se extrajo con CH2Cl2 (2 x 40 ml) y la solution combinada de Ch2CI2 se lavo con agua (50 ml) y salmuera (50 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, CH2Cl2 durante 5 min despues a CH3OH al 3 %/CH2Cl2 durante 5 min y mantenimiento durante 15 min despues al 5 % durante 5 min y mantenimiento durante 15 min) para dar imidazo[1,2-a]piridina-6-carboxilato de etilo (8,3 g, 87 %): 1H RMN (CDCl3) 51,42 (t, J = 6 Hz, 3H), 4,38-4,45 (c, J = 6 Hz, 2H), 7,61-7,75 (m, 4H), 8,93 (s, 1H); 13C RMN (CDCl3) 5 14,33, 61,48, 113,49, 116,89, 117,13, 124,09, 130,02, 135,33, 145,93, 164,87.
Etapa 2: Una mezcla de imidazo[1,2-a]piridina-6-carboxilato de etilo (2,9 g, 15,4 mmol), formaldehido ac. al 37 % (1,3 g, 15,4 mmol) y morfolina (1,4 g, 15,4 mmol) en acido acetico glacial (5 ml) se calento a 50 °C durante 3 h y despues se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se diluyo con CH2Cl2 (40 ml) y se basifico con NaOH 2 N a pH = 8. La capa ac. se extrajo con CH2Cl2 (2 x 40 ml) y la solucion combinada de CH2Cl2 se lavo con salmuera (40 ml) y se seco. El disolvente se retiro para dar 3-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridina-6-carboxilato de etilo (4,1 g, 92 %): 1H RMN (CDCl3) 51,36 (t, J = 6 Hz, 3H), 2,37-2,40 (m, 4H), 3,54-3,57 (m, 4H), 3,92 (s, 2H), 4,33-4,40 (c, J = 6 Hz, 2H), 7,63-7,65 (m, 3H), 9,18-9,19 (d, J = 3 Hz, 1H); 13C RMN (CDCl3) 5 14,07, 51,06, 52,81,60,99, 66,18, 115,12, 116,58, 121,62, 122,95, 129,67, 134,98, 145,71, 164,47.
Etapa 3: Una solucion de 3-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridina-6-carboxilato de etilo (4,1 g, 14,2 mmol) en THF (50 ml) se enfrio en bano de hielo. Se anadio lentamente una solucion de hidruro de litio y tri-terc-butoxialuminio/THF (1 M, 29 ml, 29 mmol). Despues de agitarse durante 5 min, el bano de hielo se retiro y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 2 h. La mezcla de reaccion se enfrio y se inactivo con agua (1,5 ml), NaOH 2 N (1,5 ml) y agua (4,5 ml). La mezcla se filtro y el filtro se lavo con CH2Cl2 (100 ml). El filtrado se lavo con NaHCO3 sat. (40 ml) y salmuera (40 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, CH3OH al 3 %/CH2Cl2 durante 10 min despues al 10 % durante 10 min y mantenimiento durante 30 min) para dar (3-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridina-6-il)metanol (1,5 g, 42 %): 1H RMN (CDCl3) 52,42-2,45 (m, 4H), 3,64-3,67 (m, 4H), 3,78 (s, 2H), 4,75 (s, 2H), 7,18-7,22 (dd, J = 3 y 9 Hz, 1H), 7,48 (s, 1H), 7,53-7,56 (d, J = 9 Hz, 1H), 8,33 (s, 1H).
Etapa 4: Una mezcla de trifenilfosfina unida a polimero (6,2 g, 8,7 mmol) en THF (40 ml) se enfrio en bano de hielo a 3 °C. Se anadio lentamente azadicarboxilato de diisopropilo (1,5 g, 7,6 mmol) a 3-5 °C. Despues de agitarse a 3 °C durante 10 min, se anadio lentamente una solucion de (3-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridina-6-il)metanol (1,4 g, 5,8 mmol) y 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1,7 g, 5,8 mmol) en THF (120 ml) a 5-8 °C. Despues de agitarse durante 10 min, el bano de hielo se retiro y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se filtro y el filtrado se concentro. El residuo se disolvio en CH 2 Cl 2 (120 ml) y se lavo con NaHCO 3 sat. (40 ml), agua (40 ml) y salmuera (40 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO 2 , CH 2 Cl 2 durante 5 min despues a CH 3 OH al 3 %/CH 2 Cl 2 durante 5 min y mantenimiento durante 10 min despues al 5 % durante 5 min y mantenimiento durante 20 min) para dar 5-amino-4-(4-((3-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridina-6-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1,3 g, 43 %):
1 H RMN (CDCl3) 52,17-2,18 (m, 1H), 2,37-3,45 (m, 7H), 3,62-3,65 (m, 7H), 3,82 (s, 2H), 4,38-4,43 (d, J = 15 Hz, 1H), 4,51-4,57 (d, J = 18 Hz, 1H), 4,94-4,96 (m, 1H), 5,18 (s, 2H), 5,68 (a, 1H), 6,51 (a, 1H), 7,13-7,16 (dd, J = 6 y 9 Hz, 1H), 7,26-7,28 (m, 1H), 7,42-7,47 (m, 2H), 7,54 (s, 1H), 7,65-7,68 (d, J = 9 Hz, 1H), 8,44 (s, 1H); 13 C RMN (CDCls) 524,24, 30,45, 45,22, 51,80, 52,61, 53,36, 53,89, 66,93, 68,07, 114,09, 116,25, 118,08, 120,30, 120,59, 123,97, 124,45, 129,92, 130,23, 133,65, 134,44, 146,03, 163,47, 169,14, 171,55, 172,83.
Etapa 5: Una solucion de 5-amino-4-(4-((3-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridin-6-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1,2 g, 2,4 mmol) en THF (30 ml) se enfrio en un bano de hielo seco/acetona durante 15 min. Se anadio lentamente una solucion de terc-butoxido potasico/THF (1 M, 2,6 ml, 2,6 mmol). La mezcla de reaccion se agito en un bano a -78 °C durante 1 h y despues se calento a 0 °C durante 1 h. La mezcla de reaccion se inactivo con HCl 1 N (5 ml) y se anadio agua (20 ml). La mezcla se basifico con NaHCO 3 sat. a pH = 8 y se extrajo con CH 2 Cl 2 (3 x 30 ml). La solucion combinada de CH 2 Cl 2 se lavo con salmuera (30 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO 2 , CH 2 Cl 2 durante 5 min despues a CH 3 OH al 3 %/CH2Cl2 durante 5 min y mantenimiento durante 10 min despues al 5 % durante 5 min y mantenimiento durante 15 min) para dar 3-(4-((3-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridin-6-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,8 g, 69 %): p.f. 170-172 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,96-2,01 (m, 1H), 2,36-2,60 (m, 6H), 2,85-2,93 (m, 1H), 3,33-3,49 (m, 4H), 4,29 (d, J = 18 Hz, 1H), 4,40 (d, J = 18 Hz, 1H), 5,09-5,15 (dd, J = 6 y 12 Hz, 1H), 5,33 (s, 2H), 7,35-7,62 (m, 6H), 8,63 (s, 1H), 10,98 (s, 1H); 13 C RMN (DMSO-de) 522,39, 31,16, 44,98, 51,04, 52,79, 66,07, 67,25, 115,04, 115,44, 116,92, 120,45, 120,58, 124,43, 124,77, 129,83, 133,34, 133,79, 144,80, 153,20, 167,94, 170,93, 172,80; Calc. para C 26 H 27 N 5 O 5 +0,2Et 2 O+0,1CH 2 Cl 2 : C, 63,00; H, 5,74; N, 13,66, Observado: C, 62,94; H, 5,98; N, 13,50.
5.76 3-(4-((4-(MORFOLINOMETIL)FURAN-2-IL)METOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000089_0001
Etapa 1: La morfolina destilada de nuevo (3,81 ml, 43,7 mmol) se disolvio en THF (300 ml) y se enfrio a -78 °C en condiciones de gas nitrogeno. A esta solucion se la anadio gota a gota n-butil litio (27,3 ml, 43,7 mmol) (1,6 M en hexanos) y la solucion resultante se agito durante 20 min mas, posteriormente se anadio lentamente furan-3-carbaldehido (4 g, 41,6 mmol) en THF (8 ml), despues de 20 min mas, se anadio gota a gota sec-butil litio (31,2 ml, 43,7 mmol) (1,4 M en ciclohexano), y la mezcla resultante se agito -78 °C durante 2,5 h. Se introdujo lentamente cloroformiato de metilo (4,33 g, 45,8 mmol) disuelto en THF (8 ml) y la mezcla de reaccion se agito durante 45 min a -78 °C y 20 min mas a temperatura ambiente, la solucion se vertio en HCl al 10 % enfriado con hielo (400 ml, 2,87 M). Las capas se separaron y la fase acuosa se extrajo con eter (4 x 100 ml), las capas organicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron a presion reducida a sequedad, el producto en bruto se purifico por ISCO (columna de 330 g, EtOAc/hexanos gradiente del 0 % al 20 % en 60 min, 20 % durante 20 min) para dar 4-formilfuran-2-carboxilato de metilo (1,5 g, rendimiento del 23 %); 1H RMN (CLOROFORMO-d) 53,89 (s, 3H, CH3), 7,09 - 7,30 (m, 2H, Ar), 9,75 (s, 1H, CHO).
Etapa 2: A una solucion de 4-formilfuran-2-carboxilato de metilo (800 mg, 5,19 mmol) en diclorometano (30 ml) se le anadieron morfolina (1,357 ml, 15,57 mmol) y acido acetico (1,783 ml, 31,1 mmol). La mezcla de reaccion se agito durante 10 min, se anadio triacetoxiborohidruro sodico (3300 mg, 15,57 mmol), la mezcla se agito durante una noche. La mezcla de reaccion se diluyo con diclorometano (50 ml) y se lavo con agua (2 x 30 ml), bicarbonato sodico saturado (30 ml) y salmuera (30 ml) y se seco sobre sulfato de magnesio, despues de la filtracion, el disolvente se evaporo al vado para dar 4-(morfolinometil)furan-2-carboxilato de metilo; 1H rMn (CLOROFORMO-d) 52,46 - 2,59 (m, 4H, CH2, CH2), 3,62 (s, 2H, CH2), 3,69 - 3,79 (m, 4H, CH2, CH2), 3,89 (s, 3H, CH3), 6,37 (d, J = 3,2 Hz, 1H, Ar), 7,14 (d, J = 3,4 Hz, 1H, Ar).
Etapa 3: A la solucion de 4-(morfolinometil)furan-2-carboxilato de metilo (1,12 g, 4,97 mmol) en THF (30 ml) se le anadio Dibal-H (14,92 ml, 14,92 mmol) en tolueno a 0 °C. La mezcla formada se agito a temperatura ambiente durante una noche. Se anadio una solucion de sal de Rochelle (1,0 M, 50 ml) seguido de acetato de etilo (50 ml), la suspension resultante se agito a temperatura ambiente. La fase organica se separo y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 40 ml). Las capas organicas combinadas se lavaron con bicarbonato sodico acuoso saturado (5 ml) y salmuera, se secaron (MgSO4), y se concentraron para dar (4-(morfolinometil)furan-2-il)metanol; 1H rMN (CLOROFORMO-d) 52,43 - 2,65 (m, 4H, CH2, CH2), 3,57 (s, 2H, CH2), 3,68 - 3,85 (m, 4H, CH2, CH2), 4,61 (s, 2H, CH2), 6,17 -6,30 (m, 2H, Ar).
Etapa 4: Se anadio trifenilfosfina soportada por poflmero (1,6 mmol/g, 1,98 g, 3,16 mmol) a una suspension agitada de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (615 mg, 2,104 mmol) en THF (50 ml) a 0 °C seguido de DlAD (638 mg, 3,16 mmol), despues de la agitacion durante 10 minutos, se anadio (4-(morfolinometil)furan-2-il)metanol (415 mg, 2,104 mmol) en THF (10 ml), la mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla se filtro, la resina se lavo con acetato de etilo (10 x 20 ml), metanol (5 x 10 ml), la fase organica combinada se evaporo a sequedad, el producto en bruto se purifico por ISCO (columna de 80 g, MeOH en DCM gradiente del 0-5 % en 45 min) para dar 5-amino-4-(4-((4-(morfolinometil)furan-2-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (440 mg, rendimiento del 44 %); 1 H RMN (DMsO-d 6 ) 52,24 (d, J = 6,6 Hz, 4H, CH 2 , CH2), 2,32 - 2,40 (m, 4H, CH2), 3,46 - 3,52 (m, 5H, CH2, CH3), 3,52 - 3,57 (m, 4H, CH2, CH2), 4,26 - 4,55 (m, 2H, CH2), 4,71 (d, J = 5,5 Hz, 1H, CHH), 5,18 (s, 2H, CH2), 6,29 (d, J = 3,0 Hz, 1H, Ar), 6,56 (d, J = 3.2 Hz, 1H, Ar), 7,18 (s, 1H, NHH), 7,30 (d, J = 7,4 Hz, 1H, Ar), 7,35 - 7,42 (m, 1H, Ar), 7,46 (d, J = 7,7 Hz, 1H, Ar), 7,57 (s, 1H, NHH).
Etapa 5: A una solucion de 5-amino-4-(4-((4-(morfolinometil)furan-2-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (440 mg, 0,933 mmol) en THF (20 ml) se le anadio terc-butoxido potasico (126 mg, 1,120 mmol) a 0 °C, la mezcla se agito a 0 °C durante 1 hora, se anadio mas cantidad de terc-butoxido potasico (20 mg, 0,27 mmol), la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 1 hora. La reaccion se interrumpio anadiendo HCl acuoso (1 N, 3 ml). El disolvente se retiro al vado, el residuo se repartio entre bicarbonato sodico saturado (10 ml) y acetato de etilo (50 ml), la capa organica se separo y se lavo con salmuera, se seco sobre sulfato de magnesio y se filtro, el filtrado se evaporo a sequedad para dar un solido, el solido se suspendio de nuevo en acetonitrilo (4 ml) y se filtro para dar 3-(4-((4-(morfolinometil)furan-2-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (160 mg, rendimiento del 39 %); p.f.: 168-170 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,85 -2,05 (m, 1H, CHH), 2,17 -2,50 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 2,54 -2,65 (m, 1H, CHH), 2,88 (d, J = 12,3 Hz, 1H, CHH), 3,32 (s a, 2H, CH2), 3,56 (s a, 4H, CH2, CH2), 4,13 - 4,42 (m, 2H, CH2), 5,10 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CHH), 5,20 (s, 2H, CH2), 6,09 - 6,52 (m, 1H, Ar), 6,58 (s a, 1H, Ar), 7,34 (d, J = 7,2 Hz, 1H, Ar), 7,38 - 7,46 (m, 1H, Ar), 7,46 - 7,56 (m, 1H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 522,31, 31,18, 45,06, 51,55, 52,44, 54,08, 62,16, 65,81, 109,72, 111,65, 115,42, 115,54, 129,73, 129,99, 133,34, 149,29, 152,31, 152,98, 167,90, 170,95, 172,81; HPLC: Waters Xterra C-18, 3,9 x 150 mm, 5 pm, 1 ml/min, 240 nm, 30/70 de CH3CN/HCOONH4 al 0,1 % tR = 3,13 (96,19 %); Anal. Calc. para C23H25N3O6 0,5 H2O C, 61,60; H, 5,84; N, 9,37; Observado: C, 61,28; H, 5,79; N, 9,31.
5.77 3-{4-[4-(1-ISOPROPIL-PIPERIDIN-4-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000090_0001
Etapa 1: Preparation de ester terc-butflico del acido 4-{4-[2-(1-carbamoil-3-metoxicarbonil-propil)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-bencil}-piperidin-1-carboxflico
Se anadio trifenil fosfeno (soportado por poflmero, 1,6 mmol/g, 3,3 g) a una suspension de color blanco agitada de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (2,444 g, 8,36 mmol) en THF (100 ml) a 0 °C. Despues de diez minutos, se anadio diazen-1,2-dicarboxilato de diisopropilo (2,470 ml, 12,54 mmol) y se agito durante 40 minutos y despues se anadio 4-(4-(hidroximetil)bencil)piperidin-1-carboxilato de terc-butilo (3,32 g, 10,87 mmol) en THF (20 ml). La mezcla se agito a 0 °C y se calento hasta la temperatura ambiente durante una noche. La suspension se filtro, se aclaro con MeOH (2 x 20 ml), CH2Cl2 (2 x 30 ml), y el filtrado se evaporo para dar un aceite, que se disolvio en CH2Cl2 (80 ml), se lavo con NaHCO3 sat. (50 ml), se concentro y despues se purifico por columna de gel de sflice para dar ester terc-butflico del acido 4-{4-[2-(1-carbamoil-3-metoxicarbonil-propil)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-bencil}-piperidin-1-carboxflico en forma de un aceite espumoso (2,2 g, rendimiento del 45 %). Se uso en la siguiente etapa sin purification adicional.
Etapa 2: Preparacion de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[1-oxo-4-(4-piperidin-4-ilmetil-benciloxi)-1,3-dihidroisoindol-2-il]-butmco
A una solution agitada de 4-(4-((2-(1-amino-5-metoxi-1,5-dioxopentan-2-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)bencil)piperidin-1-carboxilato de terc-butilo (2,2 g, 3,80 mmol) en CH2Cl2 (10 ml) a temperatura ambiente se le anadio hidrogenocloruro (2 M en eter) (10 ml, 38,0 mmol). Despues de cuatro horas, la suspension se filtro, se aclaro con eter y el solido de color amarillo resultante se seco para dar 2,02 g, rendimiento en bruto del 111 % (sal HCl). El producto se uso posteriormente en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 3: Preparacion de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-{4-[4-(1-isopropil-piperidin-4-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-butmco
A una solucion agitada de clorhidrato de 5-amino-5-oxo-4-(1-oxo-4-(4-(piperidin-4-ilmetil) benciloxi) isoindolin-2-il)pentanoato de metilo (1,24 g, 2,403 mmol) en MeOH (15 ml) se le anadieron N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,397 ml, 2,403 mmol), propan-2-ona (1,252 ml, 16,82 mmol), acido acetico (0,069 ml, 1,201 mmol), y cianoborohidruro sodico (0,302 g, 4,81 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. Se vertio hielo-agua (30 ml) en la mezcla, un precipitado formado, que se extrajo con acetato de etilo (100 ml), se lavo con bicarbonato sodico saturado (2 x 40 ml) y salmuera (30 ml), se seco y se concentro para dar un aceite espumoso de color pardo (1,11 g, rendimiento en bruto del 89 %). Se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 4: Preparacion de 3-{4-[4-(1-Isopropil-piperidin-4-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona
A una solucion agitada de 5-amino-4-(4-(4-((1-isopropilpiperidin-4-il) metil) benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1,09 g, 2,090 mmol) en tetrahidrofurano (12 ml) en un bano de hielo (0 °C) se le anadio 2-metilpropan-2-olato potasico (0,246 g, 2,194 mmol). La mezcla se agito a 0 °C durante 10 minutos. A la mezcla se le anadio HCl 1 N (a pH = 1), despues se neutralizo con bicarbonato sodico saturado (a pH = 7), se extrajo con acetato de etilo (3 x 30 ml), se lavo con salmuera (20 ml), se seco sobre sulfato sodico, y se concentro para dar un solido espumoso, que se purifico por columna de gel de sflice (MeOH/CH 2 Cl 2 ) para dar 3-{4-[4-(1 -Isopropil-piperidin-4-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido espumoso de color blanquecino (0,33 g, rendimiento del 32 %); p.f., 182-184 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 70/30 en 5 min, isocratica a 70/30 durante 5 min (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 5,19 min (97,4 %). 1 H RMN (DMSO-de) 50,92 (d, J = 6,4 Hz, 6H, CH3, CH3), 1,03 - 1,22 (m, 2H, CH2), 1,35 - 1,60 (m, 3H, CH, CH2), 1,90 - 2,10 (m, 3H, CHH, CH2), 2,34 - 2,48 (m, 2H, CHH, CH), 2,53 - 2,57 (m, 1H, CHH), 2,57 - 2,78 (m, 4H, CH2, CH2), 2,83 -3,00 (m, 1H, CHH), 4,19 -4,47 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,20 (s, 2H, CH2), 7,17 (d, J = 8,1 Hz, 2H, Ar), 7,36 (dd, J = 7,9, 18,9 Hz, 4H, Ar), 7,44 - 7,54 (m, 1H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH).
13 C RMN (DMSO-de) 517,94, 22,36, 31,21, 32,13, 37,77, 42,14, 45,09, 48,18, 51,56, 53,78, 69,49, 114,95, 115,19, 127,67, 129,05, 129,81, 129,94, 133,29, 133,91, 140,32, 153,54, 168,01, 170,96, 172,83, LC/MS m/e = 490, Anal calc. para C29H35N3O4 (+0,3H 2 O): C, 70,36; H, 7,26; N, 8,49, Observado: C, 70,18; H, 7,06; N, 8,36.
5.78 3-{4-[4-(1-METIL-1H-BENZOIMIDAZOL-2-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000091_0001
Etapa 1 ester terc-butflico del acido: (4-bromometil-fenil)-acetico
La solucion agitada de acido 2-(4-(bromometil)fenil)acetico (2,6 g, 11,35 mmol) en cloruro de tionilo (20 ml, 274 mmol) se calento a reflujo durante 2,5 h. La mezcla de reaccion se concentro al vado para dar un solido de color blanquecino. El solido de color blanco se anadio a la solucion agitada de 2-metilpropan-2-ol (20 ml, 213 mmol) en DCM (2 ml) en un bano de hielo/agua. Y la mezcla se agito en un bano de hielo/agua durante 2 h y a temperatura ambiente durante 18 h. La mezcla de reaccion se anadio a CH2Cl2 (40 ml). La fase organica se lavo sucesivamente con H2O (20 ml), NaHCO3 (sat., ac., 20 ml), y salmuera (25 ml) y se seco sobre MgSO4. La capa organica se concentro al vado para dar ester terc-butflico del acido (4-bromo metil-fenil)-acetico en forma de un flquido de color amarillo claro (2,4 g, rendimiento en bruto del 74 %). 1H RMN (DMSO-d6): 1,39 (s, 9H, tBu), 3,54 (s, 2H, CH2CO2), 4,69 (s, 2H, CH2Br), 7,23, 7,39 (m, 4H, debido a impurezas).
Etapa 2: Ester metflico del acido 4-[4-(4-terc-butoxicarbonilmetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidroisoindol-2-il]-4-carbamoilbutmco
A la mezcla agitada de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1,5 g, 5,13 mmol) y 2-(4-(bromometil)fenil)acetato de terc-butilo (2,2 g, 7,7 mmol) en Acetonitrilo (30 ml) se le anadio CARBONATO Po tASICO (1,42 g, 10,3 mmol). La mezcla de reaccion resultante se agito a 50 °C durante 27 h y se anadio en 2 porciones 2-(4-(bromometil) fenil)acetato de terc-butilo (800 mg, 2,9 mmol). La mezcla de reaccion se filtro y el solido de color pardo claro se lavo con acetonitrilo (2 x 20 ml). El filtrado se concentro al vado y el residuo se purifico por ISCO para dar ester metflico del acido 4-[4-(4-terc-Butoxicarbonilmetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-4-carbamoilbutrnco en forma de un solido pegajoso de color amarillo claro (2,1 g, rendimiento en bruto del 82 %) LCMS MH = 497.
Etapa 3: Ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(4-carboximetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidroisoindol-2-il]-butmco A la solucion agitada de 5-amino-4-(4-(4-(2-terc-butoxi-2-oxoetil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (2,1 g, 4,2 mmol) en DCM (20 ml) a temperatura ambiente se le anadio AGUA (0,38 ml, 21,1 mmol) seguido de la adicion lentamente de TFA (1,63 ml, 21,1 mmol). La solucion resultante se agito a temperatura ambiente durante 5 h y se anadieron TFA (3,2 ml) y agua (0,15 ml). La mezcla se mantuvo en el frigorifico durante una noche y la mezcla de reaccion se concentro al vado para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(4-carboxi metilbenciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco en forma de un solido de color blanquecino (2,3 g, rendimiento en bruto del 123 %). 1 H RMN (DMSO-de) 51,97 - 2,31 (m, 4H, CH2, CH2), 3,50 (s, 3H, CH3), 3,58 (s, 2H, CH2), 4,41 (d, J = 17,8 Hz, 1H, CHH), 4,53 (d, J = 17,8 Hz, 1H, CHH), 4,72 (dd, J = 4,6, 10,3 Hz, 1H, CHH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,18 (s a, 1H, NHH), 7,24 - 7,34 (m, 4H, Ar), 7,40 - 7,50 (m, 3H, Ar), 7,57 (s a, 1H, NHH); LCMS MH = 441.
Etapa 4: Ester metflico del acido 4-carbamoil-4-{4-[4-(1-metil-1H-benzoimidazol-2-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidroisoindol-2-il}-butmco
La mezcla de acido 2-(4-((2-(1-amino-5-metoxi-1,5-dioxopentan-2-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)fenil)acetico (500 mg, 1,1 mmol) y CDI (166 mg, 1,0 mmol) en THF ( 3 ml). La mezcla se agito a 50 °C durante 25 min antes de anadir N1-metilbenceno-1,2-diamina (125 mg, 1,022 mmol) en THF (6 ml). La solucion de color pardo resultante se agito a 50 °C durante 21 h y la mezcla de reaccion se diluyo por EtOAc (40 ml) y se lavo con NH 4 OH (ac., 10 % en peso, 2 x 20 ml). La capa organica se concentro al vado y el residuo se purifico por ISCO para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-{4-[4-(1-metil-1H-benzoimidazol-2-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-butmco en forma de un solido de color rosa (185 mg, rendimiento del 31 %); 1 H RMN (DMSO-de) 51,96 - 2,34 (m, 4H, CH 2 , CH 2 ), 3,49 (s, 3H, CH3), 3,71 (s, 3H, CH3), 4,25 - 4,58 (m, 4H, CHH, CHH, CH2), 4,65 - 4,78 (m, 1H, CHH), 5,21 (s, 2H, CH2), 7,09 -7,24 (m, J = 1,3, 7,4, 7,4, 7,4, 7,4 Hz, 3H, Ar), 7,25 - 7,37 (m, 4H, Ar, NHH), 7,39 - 7,51 (m, 4H, Ar, NHH), 7,52 - 7,62 (m, 2H, Ar); LCMS MH = 527.
Etapa 5: 3-4-[4-(1-Metil-1H-benzoimidazol-2-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona
A la solucion agitada de 5-amino-4-(4-(4-((1-metil-1H-benzo[d]imidazol-2-il)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (660 mg, 1,25 mmol) en Tetrahidrofurano (15 ml) a 0 °C (bano de agua/hielo) se le anadio en una porcion TERC-BUTOXIDO POTASIc O (155 mg, 1,4 mmol). La mezcla resultante se agito a 0 °C durante 1 h y la mezcla de reaccion se diluyo por DCM (100 ml) seguido de la adicion de HCl (ac., 1 N, 5 ml). La mezcla se agito y se le anadio NaHCO 3 (ac., sat., 20 ml). La mezcla se extrajo y la capa ac. se extrajo por DCM (20 ml). Las capas organicas se combinaron y se lavaron con salmuera (2 x 25 ml). La capa organica se seco por MgSO 4 y se concentro por purificacion ISCO para dar un solido de color blanco. El solido de color blanco se purifico adicionalmente agitandose en acetonitrilo (5 ml) para dar 3-{4-[4-(1-Metil-1H-benzoimidazol-2-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (328 mg, rendimiento del 34 %). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 |jm, 1 ml/min, 240 nm, 20/80, (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 7,80 min (99,2 %); Mp: 240-242 °C; 1H RMN (DMSO-ds) 5 1,88 - 2,03 (m, 1H, CHH), 2,35 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,53 -2,64 (m, 1H, CHH), 2,80 - 2,99 (m, 1H, CHH), 3,71 (s, 3H, CH3), 4,15 - 4,45 (m, 4H, CHH, CHH, CHH, CHH), 5,09 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CHH), 5,21 (s, 2H, CH2), 7,10 -7,24 (m, J = 1,4, 7,4, 7,4, 7,4, 7,4 Hz, 2H, Ar), 7,32 (d, J = 7,4 Hz, 4H, Ar), 7,40 - 7,53 (m, 4H, Ar), 7,53 - 7,60 (m, 1H, Ar), 10,95 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-ds) 522,30, 29,75, 31,16, 32,65, 45,06, 51,53, 69,35, 109,81, 114,91, 115,20, 118,41, 121,24, 121,59, 128,06, 128,84, 129,78, 129,93, 133,27, 134,83, 135,81, 136,74, 142,19, 153,46, 153,59, 167,99, 170,95, 172,80; LCMS MH = 495; Anal. Calc. para C29H26N4O4 : C, 70,43; H, 6,30; N, 11,33; Observado: C, 70,16; H, 5,03; N, 11,31.
5.79 3-(4-((2-(MORFOLINOMETIL)IMIDAZO[1,2-A]PIRON-6-IL)METOXI)-1-OXOISOINDOUN-2-IL)PIPERON-2,6-DIONA
Figure imgf000092_0001
Etapa 1: Una mezcla de 6-aminonicotinato de etilo (5,0 g, 30,1 mmol) y 1,3-dicloropropan-2-ona (5,7 g, 45,1 mmol) en acetonitrilo (100 ml) se calento a reflujo durante 17 h. La mezcla se concentro y el residuo se agito con CH2Cl2(100 ml) y NaHCO3 sat. (35 ml). La capa organica se lavo con salmuera (40 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, EtOAc al 30 %/CH2Cl2 durante 25 min despues a EtOAc al 100 % durante 15 min) para dar 2-(clorometil)imidazo[1,2-a]piridina-6-carboxilato de etilo (4,7 g, 65 %):1H RMN (CDCb) 51,42 (t, J = 6 Hz, 3H), 4,38-4,45 (c, J = 6 Hz, 2H), 4,77 (s, 2H), 7,56-7,59 (d, J = 9 Hz, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,74-7,77 (dd, J = 3 y 9 Hz, 1H), 8,86-8,87 (d, J = 3 Hz, 1H).
Etapa 2: Se anadio lentamente hidruro de diisobutilaluminio/Tolueno (1 M, 22,0 ml, 22,0 mmol) a una solucion agitada de 2-(clorometil)imidazo[1,2-a]piridina-6-carboxilato de etilo (2,1 g, 8,8 mmol) en THF (60 ml) a 0 °C. La mezcla de reaccion se agito a 0 °C durante 4 h y despues se inactivo con metanol (5 ml). Se anadieron CH2Cl2 (70 ml) y NaHCO3 sat. (40 ml) y la mezcla se calento a temperatura ambiente. La capa ac. se extrajo con CH2Cl2 (60 ml) y la solucion combinada de CH2Cl2 se lavo con salmuera (40 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se agito con eter (25 ml) para dar (2-(clorometil)imidazo[1,2-a]piridina-6-il)metanol (1,1 g, 65 %): 1H Rm N (DMSO-d6) 5 4,60 (s, 2H), 4,75 (s, 2H), 5,22 (a, 1H), 7,19-7,22 (dd, J = 3 y 9 Hz, 1H), 7,44-7,47 (d, J = 9 Hz, 1H), 7,75 (s, 1H), 8.24 (s, 1H).
Etapa 3: Una mezcla de suspension de (2-(clorometil)imidazo[1,2-a]piridina-6-il)metanol (1,5 g, 7,4 mmol), morfolina (1,0 g, 11,1 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (1,4 g, 11,1 mmol) en acetonitrilo (30 ml) se calento en un bano de aceite a 70 °C durante 20 min. La mezcla de reaccion se concentro y el residuo se disolvio en CH2Cl2 (80 ml), se lavo con salmuera (30 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, CH3OH al 3 %/CH2Cl2 durante 10 min despues al 10 % durante 10 min y mantenimiento durante 40 min) para dar (2-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridin-6-il)metanol (1,0 g, 54 %): 1H RMN (CDCl3) 52,54-2,57 (m, 4H), 3,66-3,74 (m, 6H), 4,40 (a, 1H), 4,67 (s, 2H), 7,05-7,09 (dd, J = 3 y 9 Hz, 1H), 7,30-7,44 (m, 2H), 8,02 (s, 1H).
Etapa 4: Una mezcla de trifenilfosfina unida a poflmero (4,3 g, 6,1 mmol) en THF (40 ml) se enfrio en bano de hielo a 3 °C. Se anadio lentamente azadicarboxilato de diisopropilo (1,1 g, 5,3 mmol) a 3-5 °C. Despues de agitarse a 3 °C durante 10 min, se anadio lentamente una solucion de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1,2 g, 4,0 mmol) y (2-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridina-6-il)metanol (1,1 g, 4,0 mmol) en t Hf (80 ml) a 5­ 8 °C. Despues de agitarse a 3 °C durante 5 min, el bano de hielo se retiro y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se filtro y se lavo el solido con CH2Cl2 (60 ml). El filtrado se concentro y el residuo se disolvio en CH2Cl2 (120 ml), se lavo con NaHCO3 sat. (35 ml), agua (35 ml) y salmuera (35 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, Ch2CI2 durante 5 min despues a CH3OH al 3 %/CH2Cl2 durante 5 min y mantenimiento durante 15 min despues al 5 % durante 5 min y mantenimiento durante 15 min) para dar 5-amino-4-(4-((2-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridin-6-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1,2 g, 57 %): 1H RMN (CDCI3) 52,18-2,44 (m, 4H), 2,57-2,60 (m, 4H), 3,63 (s, 3H), 3,72-3,76 (m, 6H), 4,38-4,44 (d, J = 18 Hz, 1H), 4,49-4,55 (d, J = 18 Hz, 1H), 4,90-4,95 (dd, J = 6 y 9 Hz, 1H), 5,14 (s, 2H), 5,50 (a, 1H), 6,38 (a, 1H), 7,12-7,20 (m, 2H), 7,42-7,47 (m, 2H), 7,50-7,63 (m, 2H), 8,18 (s, 1H); 13C RMN (CDCI3) 5 24,12, 30,45, 45,21, 51,83, 53,82, 53,90, 57,00, 66,98, 67,75, 111,50, 114,32, 116,64, 117,79, 120,97, 124,13, 124,26, 129,99, 130,20, 133,65, 144,40, 144,75, 153,35, 169,17, 171,46, 172,87.
Etapa 5: Una solucion de 5-amino-4-(4-((2-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridin-6-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1,2 g, 2,2 mmol) en THF (30 ml) se enfrio en bano de hielo durante 15 min. Se anadio lentamente una solucion de terc-butoxido potasico/THF (1 M, 2,5 ml, 2,5 mmol) y la mezcla se agito en bano de hielo durante 2 h. La mezcla de reaccion se inactivo con HCl 1 N (5 ml) y la mezcla se diluyo con CH2CI2 (30 ml) y agua (20 ml). La mezcla se basifico con NaHCO3 sat. (7 ml) a pH = 8. La capa ac. se extrajo con CH2CI2 (3 x 30 ml) y la solucion combinada de CH2CI2 se lavo con salmuera (30 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se cristalizo en acetona (10 ml) para dar 3-(4-((2-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridin-6-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,6 g, 53 %): p.f. 278-280 °C; 1H RMN (DMSO-de) 51,97-2,01 (m, 1H), 2,40-2,61 (m, 6H), 2,90­ 2,95 (m, 1H), 3,55-3,59 (m, 6H), 4,29 (d, J = 18 Hz, 1H), 4,39 (d, J = 15 Hz, 1H), 5,08-5,14 (dd, J = 6 y 15 Hz, 1H), 5.25 (s, 2H), 7,30-7,41 (m, 3H), 7,49-7,51 (m, 2H), 7,83 (s, 1H), 8,66 (s, 1H), 10,98 (s, 1H); 13C RMN (DMSO-de) 5 22,36, 31,16, 45,04, 51,56, 53,19, 56,27, 66,18, 67,31, 111,68, 115,09, 115,44, 116,34, 120,69, 124,87, 125,69, 129,83, 130,02, 133,34, 134,51, 134,58, 153,26, 167,96, 170,95, 172,80; Calc. para C26H27N5O5: C, 63,79; H, 5,56; N, 14,31, Observado: C, 63,38; H, 5,64; N, 14,09.
5.80 3-{4-[4-(1H-BENZOIMIDAZOL-2-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000093_0001
Etapa 1: Ester terc-butflico del acido (4-bromometil-fenil)-acetico
La solucion agitada de acido 2-(4-(bromometil)fenil)acetico (2,6 g, 11,35 mmol) en cloruro de tionilo (20 ml, 274 mmol) se calento a reflujo durante 2,5 h. La mezcla de reaccion se concentro al vado para dar un solido de color blanquecino. El solido de color blanco se anadio a la solucion agitada de 2-metilpropan-2-ol (20 ml, 213 mmol) en DCM (2 ml) en un bano de hielo/agua. Y la mezcla se agito en un bano de hielo/agua durante 2 h y a temperatura ambiente durante 18 h. La mezcla de reaccion se anadio a CH2Cl2 (40 ml). La fase organica se lavo sucesivamente con H2O (20 ml), NaHCO3 (sat., ac., 20 ml), y salmuera (25 ml) y se seco sobre MgSO4. La capa organica se concentro al vado para dar ester terc-butflico del acido (4-bromo metil-fenil)-acetico en forma de un flquido de color amarillo claro (2,4 g, rendimiento en bruto del 74 %). 1H RMN (DMSO-d6): 1,39 (s, 9H, tBu), 3,54 (s, 2H, CH2CO2), 4,69 (s, 2H, CH2Br), 7,23, 7,39 (m, 4H, debido a impurezas).
Etapa 2: 4-[4-(4-terc-Butoxicarbonilmetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidroisoindol-2-il]-4-carbamoil-butmco ester metflico del acido
A la mezcla agitada de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1,5 g, 5,13 mmol) y 2-(4-(bromometil)fenil)acetato de terc-butilo (2,2 g, 7,7 mmol) en Acetonitrilo (30 ml) se le anadio CARBONATO Po tASICO (1,42 g, 10,3 mmol). La mezcla de reaccion resultante se agito a 50 °C durante 27 h y en entre medias se anadio en 2 porciones 2-(4-(bromometil) fenil)acetato de terc-butilo (800 mg, 2,9 mmol). La mezcla de reaccion se filtro y el solido de color pardo claro se lavo con acetonitrilo (2 x 20 ml). El filtrado se concentro al vado y el residuo se purifico por ISCO ester metflico del acido 4-[4-(4-terc-Butoxicarbonilmetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-4-carbamoilbutmco en forma de un solido pegajoso de color amarillo claro (2,1 g, rendimiento en bruto del 82 %) LCMS MH = 497.
Etapa 3: ester metflico del acido 4-Carbamoil-4-[4-(4-carboximetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidroisoindol-2-il]-butmco A la solucion agitada de 5-amino-4-(4-(4-(2-terc-butoxi-2-oxoetil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (2,1 g, 4,2 mmol) en DCM (20 ml) a temperatura ambiente se le anadio AGUA (0,38 ml, 21,1 mmol) seguido de la adicion lentamente de TFA (1,63 ml, 21,1 mmol). La solucion resultante se agito a temperatura ambiente durante 5 h y entre medias se anadieron TFA (3,2 ml) y agua (0,15 ml). La mezcla se mantuvo en el frigonfico durante una noche y la mezcla de reaccion se concentro al vado para dar ester metflico del acido 4-Carbamoil-4-[4-(4-carboxi metil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco en forma de un solido de color blanquecino (2,3 g, rendimiento en bruto del 123 %). 1 H RMN (DMSO-de) 51,97 - 2,31 (m, 4H, CH2, CH2), 3,50 (s, 3H, CH3), 3,58 (s, 2H, CH2), 4,41 (d, J = 17,8 Hz, 1H, CHH), 4,53 (d, J = 17,8 Hz, 1H, CHH), 4,72 (dd, J = 4,6, 10,3 Hz, 1H, CHH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,18 (s a, 1H, NHH), 7,24 -7,34 (m, 4H, Ar), 7,40 -7,50 (m, 3H, Ar), 7,57 (s a, 1H, NHH); LCMS MH = 441. Etapa 4: ester metflico del acido 4-{4-[4-(1H-Benzoimidazol-2-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-4-carbamoil-butrnco
A la solucion de acido 2-(4-((2-(1-amino-5-metoxi-1,5-dioxopentan-2-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)fenil)acetico (621 mg, 1,4 mmol) en THF (4 ml) se anadio en una porcion CDI (208 mg, 1,28 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 3 h y a 50 °C durante 1 h antes de anadirse la solucion de benceno-1,2-diamina (139 mg, 1,28 mmol) en THF (6 ml). La mezcla de reaccion se agito a 50 °C durante 20 h y despues se agito a 65 °C durante 30 h. La mezcla de reaccion se diluyo por EtOAc (40 ml) y se lavo con NH 4 OH (ac., 10 % en peso, 2 x 20 ml). La capa organica se concentro al vado y el residuo se purifico por ISCO para dar ester metflico del acido 4-{4-[4-(1H-Benzoimidazol-2-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidroisoindol-2-il}-4-carbamoil-butmco en forma de un solido de color amarillo (266 mg, rendimiento del 40 %). 1 H RMN (DMSO-de) 51,96 - 2,32 (m, 4H, CH2, CH2), 3,42 - 3,57 (m, 3H, CH3), 4,18 (s, 2H, CH2), 4,30 - 4,58 (m, 2H, CHH, CHH), 4,71 (dd, J = 4,7, 10,2 Hz, 1H, CHH), 5,21 (s, 2H, CH2), 7,05 - 7,22 (m, 3H, NHH, Ar), 7,22 - 7,32 (m, 2H, Ar), 7,32 - 7,49 (m, 6H, Ar), 7,49 - 7,62 (m, 2H, Ar, NHH), 12,26 (s, 1H, NH); LCMS MH = 513.
Etapa 5: 3-{4-[4-(1H-Benzoimidazol-2-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona
A la solucion agitada de 4-(4-(4-((1H-benzo[d]imidazol-2-il)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-amino-5-oxopentanoato de metilo (260 mg, 0,5 mmol) en Tetrahidrofurano(10 ml) a 0 °C se le anadio TERC-BUTOXIDO POTASICO (62,6 mg, 0,56 mmol). La mezcla resultante se agito a 0 °C durante 2 h y entre medias se anadio en dos porciones KOtBu (50 mg, 0,4 mmol). La mezcla de reaccion resultante se diluyo por EtOAc (50 ml) y seguido de la adicion de HCl (ac., 1 N, 3 ml). A la mezcla resultante se le anadio NaHCO3 (sat., ac., 20 ml) y se extrajo. La capa organica se concentro al vado y el residuo se purifico por ISCO para dar un solido de color blanquecino (110 mg). El solido de color blanquecino se purifico calentandose en EtOAc (10 ml) a reflujo para dar 3-{4-[4-(1H-Benzoimidazol-2-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (33 mg, rendimiento del 14 %); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 20/80, (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 6,03 min (99,3 %); p.f.: 203-205 °C; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,86 - 2,04 (m, 1H, CHH), 2,33 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,63 (m, 1H, CHH), 2,81 - 2,99 (m, 1H, CHH), 4,11 - 4,44 (m, 4H, CHH, CHH, CH2), 5,09 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CHH), 5,20 (s, 2H, CH2), 6,99 - 7,21 (m, 2H, Ar), 7,26 - 7,60 (m, 9H, Ar), 10,94 (s, 1H, NH), 12,27 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO^) 522,28, 31,16, 34,62, 45,06, 51,55, 69,35, 110,84, 114,90, 115,18, 118,22, 120,89, 121,58, 128,02, 128,88, 129,77, 129,93, 133,27, 134,82, 137,50, 153,38, 153,45, 167,97, 170,93, 172,78; LCMS MH = 481; Anal. Calc. para C28H24N4O4: C, 69,99; H, 5,03; N, 11,66; Observado: C, 69,97; H, 4,70; N, 11,58.
5.81 3-{4-[4-(OCTAHIDRO-ISOINDOL-2-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000094_0001
A la solucion en CH3CN (10 ml) de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,357 g, 0,805 mmol) se le anadieron clorhidrato de Cis-Octa hidroisoindol (0,195 g, 1,208 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,466 ml, 2,82 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. El disolvente se evaporo y el solido de color blanquecino resultante se agito en cloruro de metileno (100 ml), se lavo con bicarbonato sodico saturado (2 x 80 ml) y salmuera (50 ml), se seco y se concentro para dar un solido de color blanquecino, que se purifico por columna de gel de sflice (MeOH/CH 2 Cl 2 ) para dar 3-{4-[4-(Octahidro-isoindol-2-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (20 mg, rendimiento del 5 %); p.f., no determinado. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 70/30 durante 5 min, isocratica a 70/30 durante 5 min (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 5,17 min (97,7 %). 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,18 - 1,34 (m, 2H, CH2), 1,35 - 1,62 (m, 6H, CH2, CH2, CH2), 1,92 - 2,03 (m, 1H, CHH), 2,04 - 2,22 (m, 2H, CH2), 2,36 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,80 (m, 4H, CH2, CH, CHH), 2,83 - 3,00 (m, 1H, CHH), 3,58 - 3,86 (m, 2H, CH2), 4,17 - 4,49 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,22 (s, 2H, CH2), 7,26 -7,54 (m, 7H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-de) 522,27, 22,36, 31,21, 36,52, 45,10, 51,59, 57,64, 69,41, 114,98, 115,23, 127,67, 129,81, 129,95, 133,32, 153,50, 168,01, 170,96, 172,82, LC/MS m/e = 488, Anal calc. para C29H33N3O4: C, 71,44; H, 6,82; N, 8,62.
5.82 3-(4-((4-((7,8-DIHIDRO-1,6-NAFTIRON-6(5H)-IL)METIL)BENCIL)OXI)-1-OXOISOINDOUN-2-IL)PIPERON-2,6-DIONA
Figure imgf000095_0001
Etapa 1: 5-Amino-4-(4-((4-(bromometil)bencil)oxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de (S)-metilo
Se suspendio 1,4-bis(Bromometil)benceno (2,71 g, 10,26 mmol) en acetonitrilo seco (40 ml). La suspension se calento hasta 60 °C hasta que se produjo la disolucion completa (~15 min). La temperatura se redujo a 50 °C y a la solucion se le anadio K2c03 (0,473 g, 3,42 mmol) en forma de un solido seguido de (S)-5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1 g, 3,42 mmol, preparacion descrita en el presente documento). La suspension de color blanco resultante se agito a 50 °C durante ~3 h, momento en el que el analisis por LCMS indico que el material de partida de fenol se hada consumido. La mezcla de reaccion en bruto se agito y se filtro con succion. El solido restante en el matraz y en el embudo de filtro se aclaro con MeCM mmimo (~5 ml). El filtrado se concentro al vado para dar 2,6 g de un solido de color blanco. El solido se disolvio en DCM mmimo y se purifico usando una columna ultrarrapida de SiO 2 (CombiFlash, columna prerrellenada de 40 g de SiO 2 ). La columna se eluyo con DCM al 100 % durante ~15 min, un gradiente en MeOH al 5 % en DCM durante 5 min, y despues se mantuvo en MeOH al 5 % en DCM. Las fracciones se combinaron y se concentraron para dar (S) 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo en forma de un solido de color blanco (1,3 g, rendimiento del 80 %): 1 H RMN (DMSO-de) 51,94 - 2,34 (m, 4H, CH2, CH2), 3,50 (s, 3H, CH3), 4,33 - 4,62 (m, 2H, CH2), 4,72 (s, 2H, CH2,), 5,25 (s, 2H, CH2), 5,27 - 5,36 (m, 1H, CH), 7,19 (s a, 1H, NH), 7,23 - 7,36 (m, 2H, Ar), 7,40 -7,70 (m, 6H, Ar, NH); LCMS: MH = 475, 477.
Etapa 2: (S)-3-(4-(4-(Bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona
Se disolvio 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de (S)-metilo (2,05 g, 4,31 mmol) en THF (50 ml) y la solucion se enfrio en un bano de hielo seco/acetona a -76 °C. Mientras se agitaba, se anadio en una porcion KOfBu solido (0,532 g, 4,74 mmol) a la solucion transparente. La mezcla de reaccion se volvio de color amarillo palido y se agito durante ~90 min a -76 °C. Se transfirio rapidamente una solucion enfriada de HCl ac. 1 N (20 ml) a la mezcla de reaccion, manteniendo la temperatura a -76 °C. La mezcla se volvio inmediatamente de color blanco lechoso y el bano de CO 2 seco/acetona se retiro, permitiendo que la mezcla se calentase mientras estaba en agitacion. La mezcla se concentro en un evaporador rotatorio para retirar la mayor parte de THF (concentrado a un volumen fijo a 160 mbar y bano de agua -35 °C). Tras la concentracion de la mezcla de reaccion, un solido de color blanco se retiro por precipitacion. La suspension de color blanco se diluyo con mas agua (~80 ml) y despues se filtro por succion. La torta se lavo con mucha cantidad de agua (volumen de filtrado total ~150 ml) y se seco por succion. La torta se lavo con Et 2 O (~50 ml), se seco por succion y despues se puso en un horno de vad o a 40 °C durante una noche para dar (S)-3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (1,8 g, rendimiento del 94 %): HPLC: Waters Symmetry C1s, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 50/50 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 3,70 min (97,9 %); p.f.: 123-125 °C; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,89 -2,05 (m, 1H, CHH), 2,32 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,52 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,78 - 3,04 (m, 1H, CHH), 4,26 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,43 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,72 (s, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,0, 13,1 Hz, 1H, CH), 5,25 (s, 2H, CH2), 7,24 - 7,36 (m, 2H, Ar), 7,41 - 7,54 (m, 5H, Ar), 10,83 - 11,07 (m, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO^) 522,33, 31,18, 34.15, 45,06, 51,56, 69,12, 114,94, 115,28, 127,95, 128,33, 129,41, 129,80, 131,93, 133,31, 136,78, 153,36, 167,97, 170,95, 172,81; LCMS: MH = 443, 445. El solido se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional. La estereoqdmica del producto de bromuro de bencilo se deduce a partir del rendimiento estereoqdmico de los productos derivados de este.
Etapa 3: 3-(4-((4-((7,8-Dihidro-1,6-naftiridin-6(5H)-il)metil)bencil)oxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona
En un vial de centelleo de 20 ml se anadio MeCN (5 ml, 96 mmol) a una mezcla de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (200 mg, 0,451 mmol) y 5,6,7,8-tetrahidro-1,6-naftiridina (72,6 mg, 0,541 mmol). A la mezcla se le anadio DIEA (0,236 ml, 1,354 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 1 h. La suspension se filtro. El solido se lavo con Et2O y se seco en un horno de vado para dar 3-(4-((4-((7,8-dihidro-1,6-naftiridin-6(5H)-il)metil)bencil)oxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (198 mg, rendimiento del 88 %): p.f.: 163-165 °C; HPLC: Waters Symmetry C-ie, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 15/85 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 3,66 min (99,2 %); 1H RMN (DMSO-de) 51,90 -2,05 (m, 1H, CHH), 2,34 -2,48 (m, 1H, CHH), 2,52 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,70 - 2,82 (m, 2H, CH2), 2,82 - 3,04 (m, 3H, CHH, CH2), 3,57 (s, 2H, CH2), 3,69 (s, 2H, CH2), 4,26 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 4,42 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CH), 5,24 (s, 2H, CH2O), 7,12 (dd, J = 4,8, 7,6 Hz, 1H, Ar), 7,27 - 7,36 (m, 2H, Ar), 7,37 - 7,58 (m, 6H, Ar), 8,33 (dd, J = 1,5, 4,7 Hz, 1H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-de) 522,33, 31,18, 31,92, 45,07, 50,00, 51,56, 54,27, 61,14, 69,41, 114,97, 115,22, 120,95, 127,73, 128,79, 129,80, 129,83, 129,93, 133,30, 134,16, 135,35, 138,10, 147.15, 153,49, 154,40, 167,99, 170,96, 172,80; LCMS: MH = 497; Anal calc. para C29H28N4O4 1,14 H2O: C, 67,36; H, 5,90; N, 10,83; Observado: C, 67,36; H, 5,93; N, 10,68.
5.83 3-(1-OXO-4-((4-((2-(TRIFLUOROMETIL)-5,6-DIHIDRO-[1,2,4]TRIAZOLO[1,5-A]PIRAZIN-7(8H)-IL)METIL)BENCIL)OXI)ISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000096_0001
Etapa 1: 3-[4-(4-Hidroximetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona
En un matraz de fondo redondo cargado con 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (5 g, 17,11 mmol), (4-(clorometil)fenil)metanol (2,81 g, 17,96 mmol), y carbonato potasico anhidro (2,60 g, 18,82 mmol), se anadio DMF (50 ml). La mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente y el avance de la reaccion estaba seguido de LCMS. Despues de ~3 h, se anadio DIEA (3,29 ml, 18,82 mmol) y la reaccion se agito durante una noche. Despues de ~18 h, se anadio KI solido (1,6 g, 9,64 mmol) y la mezcla se calento a 40 °C y se agito durante ~2 dias. La mezcla de reaccion, que contema una mezcla del producto deseado y precursor de glutarimida sin ciclar, se calento adicionalmente a 80 °C durante ~30 h. La mezcla de reaccion en bruto se enfrio a ta, se filtro en un embudo sinterizado, y los solidos eliminados se lavaron con MeCN mmimo. El filtrado y los lavados combinados se concentraron en un evaporador rotatorio hasta que la DMF comenzo a destilarse. La mezcla concentrada se diluyo con HCl acuoso 1 N (~150 ml) y agua (~700 ml) y se extrajo con EtOAc (2 x 700 ml). La capa organica combinada se lavo con HCl 1 N (200 ml), Na2CO31 N (2 x 300 ml), y salmuera. La solucion se seco (Na2SO4) y se concentro al vado hasta ~400 ml. Se anadio carbon activado (~11 g) y la suspension se agito durante ~15 min y se filtro en un lecho de Celite en un embudo sinterizado medio con succion. El filtrado transparente se concentro al vado para dar un solido de color blanquecino (4,1 g). El solido se suspendio en MeCN (60 ml) con la ayuda de sonicacion y calentamiento suave. La mezcla se calento durante ~30 min a 60 °C con agitacion y despues se dejo enfriar a temperatura ambiente. Se anadio Et2O (~30 ml) y la suspension se agito con sonicacion intermitente. El solido se recogio por filtracion en un embudo sinterizado medio y la torta se lavo con mas cantidad de Et2O y despues se seco por succion. El solido restante se seco en un horno de vado a 40 °C para dar 3-[4-(4-hidroximetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (3,4 g, rendimiento del 52 %): 1H RMN (DMSO-d6) 51,90 - 2,04 (m, 1H, CHH), 2,34 -2,49 (m, 1H, CHH), 2,57 (d, J = 18,1 Hz, 1H, CHH), 2,81 -3,01 (m, 1H, CHH), 4,25 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,41 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 4,50 (d, J = 5,9 Hz, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,0 Hz, 1H, CH), 5,18 (t, J = 5,8 Hz, 1H, OH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,28 - 7,39 (m, 4H, Ar), 7,41 - 7,56 (m, 3H, Ar), 10,96 (s, 1H, NH); LCMS: MH = 381.
Etapa 2: 3-[4-(4-Bromometil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona
A una suspension bien agitada de 3-(4-(4-(hidroximetil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (2,4 g, 6,31 mmol) en MeCN seco (40 ml) a 0 °C, se le anadio PBr3 (1,19 ml, 12,6 mmol) mediante una jeringa. A la mezcla agitada se le anadio bromuro de tetrabutil amonio (0,203 g, 0,631 mmol). Despues de ~5 min, el bano de hielo se retiro y la mezcla de reaction se dejo en agitation a temperatura ambiente durante ~4,5 h. La mezcla de reaction se vertio en un matraz con agua (200 ml) sobre hielo. La suspension espesa resultante se filtro en un embudo sinterizado medio con succion. El solido residual en el matraz se transfirio al embudo con filtro con mas cantidad de agua. La torta se lavo con abundante agua y hexanos (~150 ml) y despues se seco por succion. El solido se suspendio con Et2O (~50 ml), se agito durante 10 min y despues se recogio por filtration por succion. La torta se lavo con mas cantidad de Et2O (~50 ml) y despues se seco en un horno de vatio a 40 °C durante una noche para dar 3-[4-(4-bromometil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (2,61 g, 93 %): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 50/50 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 3,78 min (96,6 %); 1H RMN (MeCN-d3) 52,08 - 2,22 (m, J = 2,5, 5,2, 5,2, 12,8 Hz, 1H, CHH), 2,45 (cd, J = 4,9, 13,1 Hz, 1H, CHH), 2,62 - 2,94 (m, 2H, CHH, CHH), 4,31 (d, J = 17,0 Hz, 1H, CHH), 4,41 (d, J = 17,2 Hz, 1H, CHH), 4,62 (s, 2H, CH2), 5,09 (dd, J = 5,1, 13,4 Hz, 1H, CH), 5,24 (s, 2H, CH2), 7,24 (d, J = 8,1 Hz, 1H, Ar), 7,38 (d, J = 7,0 Hz, 1H, Ar), 7,42 - 7,55 (m, 5H, Ar), 8,83 (s a, 1H, NH); 13C RMN (MeCN-d3) 522,37, 30,89, 33,02, 44,83, 51,64, 69,26, 114,62, 115,21, 127,79, 129,01, 129,55, 130,12, 133,27, 136,87, 137,98, 153,52, 168,29, 170,13, 171,79; LCMS: MH = 443, 445.
Etapa 3: 3-(1-Oxo-4-((4-((2-(trifluorometil)-5,6-dihidro-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirazin-7(8H)-il)metil)bencil)oxi)isoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona
A una suspension de (3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (200 mg, 0,451 mmol)) y 2-(trifluorometil)-5,6,7,8-tetrahidro-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirazina (95 mg, 0,496 mmol) en MeCN seco (5 ml, 96 mmol), se le anadio DlEA (0,197 ml, 1,128 mmol) y la suspension de color blanco resultante se agito a temperatura ambiente durante 2 h y se calento a 40 °C durante 4 horas mas. La mezcla se enfrio a 0 °C. La suspension se filtro. El solido se lavo con agua (~50 ml) y se seco en un horno de vatio a 50 °C para dar 3-(1-oxo-4-((4-((2-(trifluorometil)-5,6-dihidro-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirazin-7(8H)-il)metil)bencil)oxi)isoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (135 mg, rendimiento del 54 %): HPLC: Waters Symmetry C13, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 40/60 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 6,33 min (98,2 %); p.f.: 139-142 °C; 1H RMN (DMSO-de) 5 1,89 - 2,05 (m, 1H, CHH), 2,34 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,57 (d, J = 19,1 Hz, 1H, CHH), 2,82 - 2,98 (m, 1H, CHH), 3,02 (t, J = 5,5 Hz, 2H, CH2), 3,80 (s, 2H, CH2), 3,82 (s, 2H, CH2), 4,20 - 4,31 (m, 3H, CHH, CH2), 4,42 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CH), 5,25 (s, 2H, CH2), 7,30 - 7,36 (m, 2H, Ar), 7,38 - 7,44 (m, 2H, Ar), 7,45 - 7,54 (m, 3H, Ar), 10,96 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-de) 522,34, 31,16, 45,07, 46,54, 47,73, 49,17, 51,56, 59,42, 69,35, 114,99, 115,23, 127,80, 128,92, 129,80, 129,95, 133,30, 135,73, 137,05, 152,82, 153,46, 167,97, 170,95, 172,80; No se observaron dos senales de carbono (probablemente debido a la division de CF3, y CCF3); LCMS: MH = 555; Anal calc. para C27H25F3N6O4 0,5 H2O: C, 57,55; H, 4,65; N, 14,91; F, 10,11; Observado: C, 57,42; H, 4,32; N, 14,60; F, 9,92.
5.84 3-{4-[4-(6-METOXI-3,4-DIHIDRO-1H-ISOQUINOLIN-2-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
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A la solution en CH3CN (10 ml) de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,365 g, 0,823 mmol) se le anadieron clorhidrato de 6-metoxi-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolina (0,247 g, 1,235 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,408 ml, 2,470 mmol) a temperatura ambiente durante una noche. El disolvente se evaporo y el residuo se agito en CH2Cl2 (100 ml), se lavo con NaHCO3 sat. (2 x 30 ml) y salmuera (20 ml) y se evaporo para dar un aceite, que se purifico por columna de gel de sflice (MeOH/CH2Cl2) para dar 3-{4-[4-(6-Metoxi-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona (0,26 g, rendimiento del 60 %); p.f., 169-171 °C,. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 70/30 en 5 min, isocratica a 70/30 durante 5 min (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 4,72 min (98,3 %). 1H RMN (DMSO-d6) 51,90 - 2,06 (m, 1H, CHH), 2,32 - 2,46 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,71 (m, 3H, CH2, CHH), 2,71 - 2,83 (m, 2H, CH2), 2,83 - 3,02 (m, 1H, CHH), 3,46 (s a, 2H, CH2), 3,55 - 3,81 (m, 5H, CH2, CH3), 4,18 - 4,50 (m, 2H, CH2), 5,12 (dd, J = 5,2, 13,3 Hz, 1H, NCH), 5,23 (s a, 2H, CH2), 6,58 -6,74 (m, 2H, Ar), 6,89 (d, J = 9,1 Hz, 1H, Ar), 7,24 -7,62 (m, 7H, Ar), 10,98 (s a, 1H, NH). 13C RMN (DMSO-d6) 522,36, 28,94, 31,21, 45,10, 50,12, 51,58, 54,92, 61,51, 69,45, 111,91, 112,93, 114,97, 115,24, 126,73, 127,26, 127,72, 128,82, 129,81, 129,94, 131,81, 133,31, 135,22, 138,28, 153,51, 157,45, 168,01, 169,07, 170,96, 172,83, LC/MS m/e = 526, Anal calc. para C31H31N3O3 (+1,1 H2O): C, 68,27; H, 6,14; N, 7,70, Observado: C, 68,08; H, 5,92; N, 7,47.
5.85 3-(4-((3-((4-ISOPROPILPIPERIDIN-1-IL)METIL)ISOXAZOL-5-IL)METOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000098_0001
Una mezcla de metanosulfonato de (5-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)isoxazol-3-il)metilo (0,28 g, 0,623 mmol) en acetonitrilo (l0 ml) se agito a temperatura ambiente. Se anadieron 4-isopropilpiperidina (0,095 g, 0,748 mmol) y DIEA (0,11 g, 0,810 mmol), y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 3 h. Despues, la mezcla se evaporo al vado. El residuo se repartio entre EtOAc (75 ml) y agua (75 ml), y la fase organica se lavo con agua (75 ml). Despues, la fase organica se extrajo con HCl 1 N (2 x 50 ml). Los extractos acuosos combinados se lavaron con EtOAc (75 ml) y despues se hicieron basicos con carbonato sodico solido, y la mezcla resultante se extrajo con EtOAc (2 x 50 ml). Los extractos organicos combinados se lavaron con agua (75 ml), se secaron (MgSO 4 ) y se evaporaron, proporcionando 180 mg (60 %) en forma de un solido de color blanco; p.f. 173­ 175 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 90/10 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 % en 10 min: 5,65 (96,83 %). 1 H RMN (DMSO-de) 50,83 (d, J = 6,6 Hz, 6H), 0,97 (s a, 1H), 1,09 - 1,24 (m, 2H), 1,30 - 1,46 (m, 1H), 1,58 (d, J = 11,9 Hz, 2H), 1,80 - 2,06 (m, 3H), 2,36 - 2,47 (m, 1H), 2,52 -2,64 (m, 1H), 2,72 -3,01 (m, 3H), 3,41 -3,63 (m, 2H), 4,25 (d, J = 17,6 Hz, 1H), 4,41 (d, J = 17,6 Hz, 1H), 5,11 (dd, J = 5,0, 13,1 Hz, 1H), 5,43 (s, 2H), 6,62 (s, 1H), 7,39 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 7,46 - 7,57 (m, 1H), 10,97 (s, 1H). 13 C RMN (DMSO-de) 5 19,62, 22,35, 28,69, 31,21, 31,85, 41,46, 45,05, 51,61, 52,58, 53,49, 60,72, 104,57, 115,11, 115,99, 129,85, 129,98, 133,51, 152,67, 161,50, 167,12, 167,82, 170,92, 172,80, Anal. Calc. para C26H32N4O5 0,2 H2O: C, 64,50 %; H, 6,75 %; N, 11,57 %; Observado: C, 64,48 %; H, 6,73 %; N, 11,31 %.
5.86 3-{4-[4-(2-METIL-4-FENIL-IMIDAZOL-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000098_0002
A la solucion agitada de 2-metil-4-fenil-1H-imidazol (157 mg, 0,99 mmol) en Acetonitrilo (15 ml) se le anadieron 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin -2-il)piperidin-2,6-diona (400 mg, 0,9 mmol) y DIPEA (0,24 ml, 1,35 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 4 dias antes de que la mezcla de reaccion se diluyera por EtOAc (40 ml) y NaHCO 3 (ac., sat., 20 ml). La mezcla se extrajo. Se formo parte del solido y la mezcla se filtro. Y el solido se disolvio en DCM (20 ml) y MeOH (5 ml). Todas las capas organicas se combinaron, se secaron por MgSO 4 y se concentraron. El residuo se purifico por iScO para dar 3-{4-[4-(2-Metil-4-fenil-imidazol-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (310 mg, rendimiento del 66 %). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 25/75, (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 5,26 min (99,6 %); p.f.: 270-272 °C; 1 H RMN (DMSO^) 51,91 - 2,03 (m, 1H, CHH), 2,30 (s, 3H, CH3), 2,43 (dd, J = 4,3, 13,0 Hz, 1H, CHH), 2,53 - 2,63 (m, 1H, CHH), 2,82 - 2,97 (m, 1H, CHH), 4,23 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,39 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,04 - 5,16 (m, 1H, CHH), 5,18 (s, 2H, CH2), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,10 - 7,20 (m, 1H, Ar), 7,20 - 7,26 (m, J = 8,1 Hz, 2H, Ar), 7,26 - 7,36 (m, 4H, Ar), 7,42 - 7,54 (m, 3H, Ar), 7,62 (s, 1H, NH), 7,64 - 7,75 (m, 2H, Ar), 10,96 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 5 12,76, 22,31, 31,16, 45,04, 48,59, 51,55, 69,17, 114,93, 115,25, 116,49, 123,92, 125,88, 127,15, 128,14, 128,36, 129,78, 129,95, 133,30, 134,58, 135,98, 137,15, 138,50, 144,57, 153,39, 167,97, 170,93, 172,80; LCMS MH = 521; Anal. Calc. para C 31 H 28 N 4 O 4 +0,3 H 2 O : C, 70,79; H, 5,48; N, 10,65; Observado: C, 70,68; H, 5,21; N, 10,52. La estructura regioisomerica se confirmo por ROESY.
5.87 2-{4-[2-(2,6-DIOXO-PIPERIDIN-3-IL)-1-OXO-2,3-DIHIDRO-1H-ISOINDOL-4-ILOXIMETIL]-BENCIL}-1,2,3,4-TETRAHIDROISOQUINOLIN-7-CARBONITRILO
Figure imgf000098_0003
A la solucion en CH3CN (10 ml) de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,358 g, 0,808 mmol) se le anadio 1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-7-carbonitrilo (0,192 g, 1,211 mmol), y se formo una suspension. Despues, se anadio N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,267 ml, 1,615 mmol), que se convirtio en una solucion transparente. Se volvio turbia de nuevo en 10 minutos. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. El disolvente se evaporo, al solido resultante se le anadio eter (30 ml), se agito, se filtro, y el filtro se purifico por columna de gel de sflice (MeOH/CH 2 Cl 2 ) para dar 2-{4-[2-(2,6-Dioxo-piperidin-3-il)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-bencil}-1,2,3,4-tetrahidro-isoquinolin-7-carbonitrilo (0,324 g, rendimiento del 77 %); p.f., 145-147 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 90/10 en 5 min, isocratica a 90/10 durante 5 min (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 4,62 min (95,8 %). 1 H RMN (DMSO-de) 51,92 - 2,06 (m, 1H, CHH), 2,35 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,64 - 2,75 (m, 2H, CH2), 2,82 - 3,00 (m, 3H, CHH, CH2), 3,58 (s, 2H, CH2), 3,67 (s, 2H, CH2), 4,20 - 4,48 (m, 2H, CH2), 5,12 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,24 (s, 2H, CH2), 7,26 - 7,42 (m, 5H, Ar), 7,43 - 7,61 (m, 5H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-de) 528,88, 31,20, 45,09, 49,39, 61,14, 69,42, 108,23, 114,98, 115,24, 119,01, 127,77, 128,80, 129,49, 129,69, 129,82, 129,94, 130,32, 133,31, 135,38, 136,40, 137,99, 140,51, 153,51, 168,01, 170,98, 172,83, LC/MS m/e = 521, Anal calc. para C31H28N4O4 (+0,8 H2O): C, 69,60; H, 5,58; N, 10,47, Observado: C, 69,21; H, 5,21; N, 10,22.
5.88 3-(4-((5-(MORFOUNOMETIL)PIRON-2-IL)METOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERON-2,6-DIONA
Figure imgf000099_0001
Etapa 1: Se anadio una solucion de 5-(clorometil)picolinato de metilo (3,00 g, 16,14 mmol) en acetonitrilo (30 ml) a morfolina (4,5 ml, 51,7 mmol). La solucion oscura resultante se agito a temperatura ambiente durante 3 h. La mezcla de reaccion se diluyo con Et2O (~100 ml) y el solido que se formo se retiro por filtracion. El filtrado se concentro y el residuo oleoso se repartio entre EtOAc (125 ml) y NaHCO31 N (50 ml). La capa acuosa se lavo con mas EtOAc (~100 ml). Las capas organicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (Na2SO4), y se concentraron al vado para dar 5-(morfolinometil)picolinato de metilo en forma de un aceite de color oscuro (3,4 g, rendimiento del 89 %). 1H RMN (DMSO-d6) 52,29 - 2,42 (m, 4H, CH2, CH2), 3,54 - 3,61 (m, 6H, CH2, CH2, CH2), 3,88 (s, 3H, CH3), 7,91 (dd, J = 2,2, 8,0 Hz, 1H, Pir), 8,03 (d, J = 8,5 Hz, 1H, Pir), 8,64 (d, J = 1,5 Hz, 1H, Pir); 13C RMN (DMSO-d6) 552,28, 53,02, 59,03, 66,08, 124,51, 137,47, 137,57, 146,28, 150,08, 165,11. El producto se uso en la siguiente etapa sin purification adicional.
Etapa 2: A una solucion bien agitada de 5-(morfolinometil)picolinato de metilo (3,4 g, 14,39 mmol) en THF (30 ml) a 2 °C (en bano de hielo), se anadio una solucion 1 M de hidruro de litio y aluminio (15,83 ml, 15,83 mmol) en THF mediante una jeringa. Se desprendio gas y la mezcla de reaccion cambiada se agito a ~ 2 °C durante ~1 h. La reaccion se interrumpio mediante la adicion lenta de NaHCO31 N (20 ml) a 0 °C y despues se diluyo con EtOAc (~300 ml) y H2O (100 ml). La mezcla se agito y despues se anadio una solucion ac. 1 N de sal de Rochelle para descomponer la emulsion. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (300 ml). La capa acuosa se saturo con NaCl solido y se extrajo una vez mas con EtOAc. La capa organica combinada se lavo con salmuera minima, se seco (Na2SO4) y se concentro al vado para dar el (5-(morfolinometil)piridin-2-il)metanol en bruto en forma de un aceite de color naranja (1,7 g, rendimiento en bruto del 56 %). El producto en bruto se uso en la siguiente etapa sin purificacion. 1H RMN (DMSO-d6) 52,30 - 2,38 (m, 4H, CH2, CH2), 3,47 (s, 2H, CH2), 3,51 - 3,63 (m, 4H, CH2, CH2), 4,54 (d, J = 5,5 Hz, 2H, CH2OH), 5,36 (t, J = 5,8 Hz, 1H, OH), 7,42 (d, J = 7,9 Hz, 1H, Pir), 7,70 (dd, J = 2,2, 8,0 Hz, 1H, Pir), 8,38 (d, J = 1,7 Hz, 1H, Pir).
Etapa 3: Se suspendieron 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1,0 g, 3,42 mmol) y trifenil fosfina en poliestireno (1,6 mmol/g de resina) (4,28 g, 6,84 mmol) en THF (30 ml) a temperatura ambiente. La resina se dejo hinchar con agitation suave durante aproximadamente 5 minutos, despues la mezcla se enfrio en bano de hielo a 0 °C y se anadio DIAD (1,330 ml, 6,84 mmol) usando una jeringa de manera rapida gota a gota. Despues de aproximadamente 10 minutos, se anadio (5-(morfolinometil)piridin-2-il)metanol (1,069 g, 5,13 mmol) en THF (5 ml). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente. Despues de aproximadamente 1,5 h, la resina se filtro en un embudo sinterizado grueso y la resina se aclaro 3 veces con ciclos sucesivos de expansion/retraccion (lavados de DCM/MeOH). El filtrado (color ambar) se concentro al vado para dar el 5-amino-4-(4-((5-(morfolinometil)piridin-2-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo en bruto en forma de un aceite de color pardo (3,3 g). El producto en bruto se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 4: A una solucion agitada de 5-amino-4-(4-((5-(morfolinometil)piridin-2-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5oxopentanoato de metilo en bruto (1 g, 1,036 mmol) en THF seco (10 ml) a 0 °C (bano de hielo) se le anadio tercbutoxido potasico (0,233 g, 2,072 mmol). La mezcla resultante se agito a 0 °C durante ~10 min, despues se dejo calentar hasta ta. Despues de ~3 h, la mezcla de reaction se transfirio a una solution enfriada de AcOH al 20 % en MeCN (~50 ml) sobre hielo. La solucion resultante se concentro a sequedad y el residuo oleoso de color pardo se repartio entre EtOAc (150 ml) y NaHCO 3 1 N (35 ml). La capa acuosa se extrajo con mas cantidad de EtoAc (~150 ml). La capa organica combinada se lavo con salmuera, se seco (Na2SO4), y se concentro a sequedad para dar un solido vfireo. El solido se recristalizo en MeCN/Et2O, se filtro y se lavo con mas cantidad de Et2O para dar 3-(4-((5-(morfolinometil)piridin-2-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color castano claro (78 mg, rendimiento del 17 %): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 10/90 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 6,45 min (97,3 %); p.f.: 194-196 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,91 - 2,05 (m, 1H, CHH), 2,30 -2,41 (m, 4H, CH2, CH2), 2,40 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,55 - 2,67 (m, 1H, CHH), 2,82 - 3,01 (m, 1H, CHH), 3,51 (s a, 2H, CH2N), 3,53 - 3,70 (m, 4H, CH2, CH2), 4,30 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,46 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,12 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CH), 5,31 (s, 2H, CH2O), 7,25 - 7,39 (m, 2H, Ar), 7,43 - 7,52 (m, 1H, Ar), 7,55 (d, J = 7,9 Hz, 1H, Ar), 7,76 (d, J = 7,6 Hz, 1H, Ar), 8,50 (s, 1H, Ar), 10,98 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 522,36, 31,16, 45,06, 51,56, 52,96, 59,16, 66,08, 70,37, 114,96, 115,41, 121,31, 129,84, 129,92, 132,53, 133,34, 137,50, 149,56, 153,27, 155,02, 167,94, 170,96, 172,83; LCMS: MH = 451; Anal. calc. para: C24H26N4O5: C, 63,99; H, 5,82; N, 12,44; Observado: C, 58,77; H, 5,34; N, 11,46; Cl, 1,10.
5.89 ACIDO FORMICO DE ESTER METWCO DEL ACIDO 4-CARBAMOIL-4-(4-HIDROXI-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL)-BU^RICO
Figure imgf000100_0001
Etapa 1: Preparacion de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(4-morfolin-4-ilmetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidroisoindol-2-il]-bufirico
Se anadio trifenilfosfeno soportado con pofimero (1,6 mmol/g, 3,0 g, 3,78 mmol) a una solucion agitada de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-(4-hidroxi-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-bufirico (0,50 g, 1,72 mmol) en THF (30 ml) a 0 °C. Despues de 5 minutos, se anadio diazen-1,2-dicarboxilato de diisopropilo (0,75 ml, 3,78 mmol). Despues de 30 minutos, se anadio (4-morfolin-4-ilmetil-fenil)-metanol (0,71 g, 3,43 mmol). La mezcla se agito durante una noche a temperatura ambiente, despues se filtro, se lavo con MeOH (10 ml), cloruro de metileno (10 ml), y se repitio tres veces mas con MeOH (10 ml), cloruro de metileno (10 ml). El filtrado combinado se evaporo al vatio para dar un aceite, que se purifico por cromatografia ISCO en columna ultrarrapida (120 g, gradiente de MeOH/CH 2 Cl 2 del 0 % al 5 % en 60 min) para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(4-morfolin-4-ilmetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidroisoindol-2-ilj-butmco en forma de un solido de color blanco espumoso (0,62 g, rendimiento del 75 %). Se uso en la siguiente etapa sin purification adicional.
Etapa 2: Preparacion de 3-[4-(4-Morfolin-4-ilmetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona
Se anadio terc-butoxido potasico (0,14 g, 1,25 mmol) a una solucion agitada de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(4-morfolin-4-ilmetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-bufirico (0,60 g, 1,25 mmol) en THF (15 ml) a 0 °C durante 10 minutos. La mezcla se inactivo con un par de pipetas de HCl 1 N y se neutralizo con bicarbonato sodico saturado a pH = 8. La mezcla era acetato de etilo (3 x 20 ml). Las fases de acetato de etilo combinadas se evaporaron y despues se purificaron por cromatografia en columna ultrarrapida ISCO (40 g, gradiente de MeOH/CH 2 Cl 2 del 0 % al 5 % en 40 min) para dar 3-[4-(4-Morfolin-4-ilmetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanquecino (0,13 g, rendimiento del 23 %); p.f., 208-210 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, isocratica a 15/85 en 10 min (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %): tR = 3,86 min (98,1 %). LC/MS (Acquity UPLC BEH C18, 2,1 x 50 mm, 0,8 ml/min, 1,7 ^m, gradiente de 5/95 a 85/15 en 5 min, isocratica a 85/15 durante 1 min (CH3CN/HCOOH al 0,1 %: agua/HCOOH al 0,1 %)): m/e = 450. 1 H RMN (DMSO-d 6 ) d 1,90 - 2,05 (m, 1H, CH), 2,28 - 2,40 (m, 4H, 2CH2), 2,40 - 2,46 (m, 1H, CH), 2,54 - 2,65 (m, 1H, CH), 2,82 - 3,00 (m, 1H, CH), 3,46 (s, 2H, CH2), 3,51 - 3,65 (m, 4H, 2CH2), 4,20 - 4,48 (m, 2H, ArCH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,23 (s, 2H, ArCH2O), 7,33 (d, J = 7,6 Hz, 4H, Arh), 7,39 - 7,55 (m, 3H, ArH), 10,97 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO^) d 22,36, 31,20, 45,09, 51,58, 53,14, 62,10, 66,17, 69,41, 114,98, 115,24, 127,65, 128,99, 129,82, 129,95, 133,32, 135,30, 137,70, 153,50, 167,99, 170,98, 172,83, Anal calc. para C25H27N3O5, C, 66,80; H, 6,05; N, 9,35, Observado: C, 66,49; H, 5,90; N, 9,29.
Etapa 3: Preparacion de acido formico de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-(4-hidroxi-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-bufirico
Se anadio peroxido de hidrogeno (10,24 g, 90,2 mmol) a una solucion agitada de 3-(4-(4-(morfolinometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,507 g, 1,128 mmol) en acetonitrilo (30 ml) y agua (10 ml) a temperatura ambiente. La solucion se agito a temperatura ambiente durante una noche. El disolvente se evaporo y el residuo se purifico por HPLC preparativa (MeCN/agua, con HCOOH al 0,1 %) para dar acido formico de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-(4-hidroxi-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-butmco (0,23 g, rendimiento del 44 %); p.f., 154-156 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 90/10 en 5 min, isocratica a 90/10 durante 5 min (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 4,35 min (98,7 %). 1 H RMN (DMSO-de) 51,91 - 2,05 (m, 1H, CHH), 2,35 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,65 (m, 1H, CHH), 2,83 - 2,99 (m, 1H, CHH), 3,04 (d, J = 12,3 Hz, 2H, CH2), 3,54 (td, J = 3,8, 11,8 Hz, 2H, CH2), 3,71 - 3,82 (m, 2H, CH2), 3,92 - 4,07 (m, 2H, CH2), 4,22 - 4,49 (m, 2H, CH2), 4,63 (s, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,2, 13,3 Hz, 1H, NCH), 5,28 (s, 2H, CH2), 7,29 - 7,38 (m, 2H, Ar), 7,44 - 7,66 (m, 5H, Ar), 11,02 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-de) 522,38, 31,20, 45,08, 51,59, 60,67, 62,05, 69,15, 71,81, 114,95, 115,33, 127,21, 128,77, 129,84, 129,97, 133,12, 133,35, 137,87, 153,40, 164,93, 167,98, 170,98, 172,83, LC/MS m/e = 466, Anal calc. para C 25 H 27 N 3 O 6 ((+1,0HCOOH, 1,3H 2 O): C, 58,38; H, 5,95; N, 7,85, Observado: C, 58,21; H, 6,30; N, 7,81.
5.90 3-(4-((5-(MORFOLINOMETIL)ISOXAZOL-3-IL)METOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000101_0001
Etapa 1: Se disolvio 5-(hidroximetil)isoxazol-3-carboxilato de etilo (2 g, 11,69 mmol) en DCM (30 ml) y se anadieron trifenilfosfina (3,37 g, 12,85 mmol) y CBr 4 (3,68 g, 11,10 mmol) a 0 °C La mezcla se agito durante 2 horas a 0 °C. La mezcla se concentro al vado, el residuo se purifico por ISCO (columna de 80 g, acetato de etilo en hexanos gradiente de 0-20 % en 40 min) para dar 5-(bromometil)isoxazol-3-carboxilato de etilo (2,5 g, rendimiento del 91 %);
1 H RMN (CLOROFORMO-d) 51,43 (t, J = 7,1 Hz, 3H, CH3), 4,46 (c, J = 7,2 Hz, 2H, CH2), 4,50 (s, 2H, CH2), 6,74 (s, 1H, Ar).
Etapa 2: La mezcla de 5-(bromometil)isoxazol-3-carboxilato de etilo (2,3 g, 9,83 mmol), morfolina (1,284 ml, 14,74 mmol) y trietil amina (2,055 ml, 14,74 mmol) en acetonitrilo se agito a temperatura ambiente durante una noche. El disolvente se evaporo a sequedad al vado, el residuo se repartio entre acetato de etilo (100 ml) y bicarbonato sodico saturado (30 ml), la capa organica se separo, se lavo con salmuera, se seco sobre MgSO 4 , el disolvente se retiro a presion reducida para dar 5-(morfolinometil)isoxazol-3-carboxilato de etilo (2,3 g, rendimiento del 95 %); 1 H RMN (CLOROFORMO-d) 5 1,43 (t, J = 7,2 Hz, 3H, CH3), 2,45 - 2,64 (m, 4H, CH2, CH2), 3,67 - 3,81 (m, 6H, CH2, CH2, CH2), 4,45 (c, J = 7,2 Hz, 2H, CH2), 6,65 (s, 1H, Ar).
Etapa 3: A la solucion de 5-(morfolinometil)isoxazol-3-carboxilato de etilo (2,3 g, 9,57 mmol) en THF (50 ml) se le anadio Dibal-H (28,7 ml, 28,7 mmol) a 0 °C. La mezcla formada se calento hasta la temperatura ambiente y se agito a temperatura ambiente. La mezcla se inactivo con sal de Rochelle 1 M y se extrajo con EtOAc (3 x 50) ml, la capa organica combinada se lavo con bicarbonato sodico saturado y salmuera y se seco sobre sulfato de magnesio. El disolvente organico se evaporo para dar (5-(morfolinometil)isoxazol-3-il)metanol (1,48 g, rendimiento del 78 %); 1 H RMN (CLOROFORMO-d) 52,50 - 2,66 (m, 4H, CH2), 3,70 (s, 2H, CH2), 3,72 - 3,82 (m, 4H, CH2, CH2), 4,76 (s a, 2H, CH2), 6,29 (s, 1H, Ar).
Etapa 3: Una mezcla de (5-(morfolinometil)isoxazol-3-il)metanol (740 mg, 3,73 mmol), 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1091 mg, 3,73 mmol) y trifenilfosfina soportada con polimero (1,86 g, 5,6 mmol, 3 mmol/g) en THF (100 ml) se enfrio a 0 °C, y se anadio DlAD (1132 mg, 5,6 mmol). La mezcla formada se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se filtro a traves de celite, la resina se lavo con acetato de etilo (5 x 200 ml), la capa organica combinada se evaporo a sequedad, el residuo se purifico por ISCO (columna de 80 g, MeOH en Dc M gradiente del 0-5 % en 50 min) para dar 5-amino-4-(4-((5-(morfolinometil)isoxazol-3-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (600 mg, rendimiento del 34 %);
1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,98 - 2,32 (m, 4H, CH2,CH2), 2,36 - 2,45 (m, 4H, CH2,CH2), 3,50 (s, 3H, CH3), 3,53 - 3,62 (m, 4H, CH2,CH2), 3,69 (s, 2H, CH2), 4,29 - 4,60 (m, 2H, CH2), 4,66 - 4,82 (m, 1H, CH), 5,33 (s, 2H, CH2), 6,59 (s, 1H, Ar), 7,19 (s, 1H, NHH), 7,33 (dd, J = 4,2, 7,6 Hz, 2H, Ar), 7,47 (d, J = 7,6 Hz, 1H, Ar), 7,59 (s, 1H, NHH
Etapa 4: A una mezcla de 5-amino-4-(4-((5-(morfolinometil)isoxazol-3-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (580 mg, 1,228 mmol) en t Hf (30 ml) se le anadio terc-butoxido potasico (152 mg, 1,350 mmol) a 0 °C. La mezcla formada se agito a 0 °C durante 0,5 horas y se calento hasta la temperatura ambiente en 0,5 horas. La reaccion se interrumpio con HCl (1 N, 3 ml), se evaporo al vado THF, se anadio bicarbonato sodico saturado (20 ml), el precipitado formado se recogio por filtracion y se suspendio de nuevo en acetonitrilo (7 ml) para dar 3-(4-((5-(morfolinometil)isoxazol-3-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (325 mg, rendimiento del 60); p.f. 218-220 °C. HPLC: (Waters Xterra C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 25/75 de CH3CN/HCOONH al 0,1 %): 3,45 (98,98 %). 1 H RMN (DMSO^) 5 1,86 - 2,08 (m, 1H), 2,31 - 2,48 (m, 5H), 2,52 -2,68 (m, 1H), 2,81 -3,01 (m, 1H), 3,48 -3,64 (m, 4H), 3,69 (s, 2H), 4,26 (d, J = 17,6 Hz, 1H), 4,34 -4,53 (m, J = 17,6 Hz, 1H), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H), 5,34 (s, 2H), 6,57 (s, 1H), 7,25 - 7,43 (m, 2H), 7,44 - 7,59 (m, 1H), 10,98 (s, 1H). 13 C RMN (DMSO^) 522,38, 31,20, 45,03, 51,61, 52,51, 52,73, 61,62, 66,03, 103,25, 115,13, 115,83, 129,87, 130,01, 133,42, 152,95, 160,09, 167,86, 169,84, 170,94, 172,82, Anal. Calc. para C22H24^ O 6:C, 59,99 %; H, 5,49 %; N, 12,72 %; Observado: C, 59,00 %; H, 5,03 %; N, 12,14 %.
5.91 3-(4-((3-METILISOXAZOL-5-IL)METOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000102_0001
Etapa 1: Una mezcla de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1 g, 3,42 mmol) y (3-metilisoxazol-5-il)metanol (0,387 g, 3,42 mmol) en THF (50 ml) se enfrio a 0 °C. Se anadio trifenilfosfina, unida a poKmero, 3 mmol/g (2,3 g, 6,84 mmol) seguido de DIAD (1,347 ml, 6,84 mmol). El bano de hielo se dejo derretir y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 16 h. La mezcla se evaporo a sequedad y el residuo se cargo en seco directamente sobre una columna de gel de sflice, realizando un gradiente de hexanos-EtOAc. El producto eluyo en EtOAc al 100 %, y el rendimiento de la mezcla en bruto obtenida de este modo fue de 0,75 g (57 %).
Etapa 2: El residuo de la etapa 1 se disolvio en THF (50 ml) y se enfrio a 0 °C. Despues, se anadio terc-butoxido potasico (0,230 g, 2,053 mmol). Despues de 30 min, la reaccion se interrumpio mediante la adicion de AcOH (0,5 ml) y la mezcla se evaporo al vado. Despues, la mezcla se suspendio en una mezcla de EtOAc (100 ml) y una solucion acuosa al 10 % de carbonato sodico (100 ml), y esta mezcla bifasica se agito durante 1 h, y despues se filtro, y el filtro se lavo con agua (50 ml) y acetato de etilo (50 ml). Despues del secado al vado, el producto se obtuvo en forma de un solido de color blanco, 510 mg, en rendimiento del 42 %; p.f. 278 -280 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 |jm, 1 ml/min, 240 nm, 30/70 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %: 3,27 (96,63 %). 1 H RMN (DMSO-de) 5 1.91 - 2,07 (m, 1H), 2,24 (s, 3H), 2,34 - 2,48 (m, 1H), 2,52 - 2,68 (m, 1H), 2,80 - 3,01 (m, 1H), 4,24 (d, J = 17,6 Hz, 1H), 4,33 - 4,47 (m, J = 17,6 Hz, 1H), 5,10 (dd, J = 4,9, 13,0 Hz, 1H), 5,40 (s, 2H), 6,54 (s, 1H), 7,28 - 7,45 (m, 2H), 7,46 - 7,60 (m, 1H), 10,99 (s, 1H). 13 C RMN (DMSO-de) 510,89, 22,39, 31,24, 45,00, 51,64, 60,65, 105,05, 115,03, 115,93, 129,85, 129,95, 133,51, 152,68, 159,68, 166,88, 167,83, 171,05, 172,96, Anal. Calc. para C18H17N3O5 0,3 CH2Cl2: C, 57,72 %; H, 4,66 %; N, 11,03 %; Observado: C, 57,61 %; H, 4,47 %; N, 10,70 %.
5.92 3-(1-OXO-4-((4-((3-(TRIFLUOROMETIL)-5,6-DIHIDRO-[1,2,4]TRIAZOLO[4,3-A]PIRAZIN-7(8H)-IL)METIL)BENCIL)OXI)ISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000102_0002
A una mezcla de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (200 mg, 0,451 mmol) y clorhidrato de 3-(trifluorometil)-5,6,7,8-tetrahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina (113 mg, 0,496 mmol) en MeCN seco (5 ml, 96 mmol), se le anadio DIEA (0,276 ml, 1,579 mmol) a temperatura ambiente y despues la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante una noche. A la mezcla se le anadio bromuro de tetrabutilamonio (10,18 mg, 0,032 mmol) y se elevo la temp. a 40 °C durante un fin de semana. La mezcla de reaccion se transfirio en porciones con agitacion a un matraz con agua (~50 ml). La suspension resultante se agito a temperatura ambiente con sonicacion intermitente para descomponer los agregados solidos. Despues de ~1 h de agitacion, el solido se filtro y se lavo con una pequena porcion de agua. La mezcla en bruto se purifico por HPLC prep. para dar 3-(1-oxo-4-((4-((3-(trifluorometil)-5,6-dihidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-7(8H)-il)metil)bencil)oxi)isoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanquecino (120 mg, rendimiento del 48 %): HPLC: Waters Symmetry C1s, 5 jm , 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 35/65 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 4,86 min (97,7 %); p.f.: 142-144 °C; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 5 1,91 - 2,04 (m, 0H, CHH), 2,45 (dd, J = 4,3, 13,0 Hz, 0H, CHH), 2,57 (dd, J = 2,3, 15,5 Hz, 0H, CHH), 2,81 -2,99 (m, 3H, CH2, CHH), 3,78 (s, 2H, CH2), 3,84 (s, 2H, CH2), 4,15 (t, J = 5,4 Hz, 2H, CH2), 4,26 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,42 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CH), 5,25 (s, 2H, CH2), 7,33 (d, J = 7,6 Hz, 2H, Ar), 7,38 - 7,44 (m, 2H, Ar), 7,45 - 7,58 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 522,34, 31,16, 43,03, 45,06, 47,30, 48,09, 51,56, 59,51, 69,35, 114,99, 115,23, 116,80 (c, J = 269,6 Hz, M10), 127,79, 128,94, 129,78, 129,93, 133,30, 135,75, 136,99, 142,31 (c, J = 38,5 Hz, M24), 152,28, 153,46, 167,97, 170,95, 172,80; LCMS: MH = 555; Anal calc. para C27H25F3N6O4 0,75 H2O: C, 57,09; H, 4,70; N, 14,79; F, 10,03; Observado: C, 57,09; H, 4,55; N, 14,74; F, 9,76.
5.93 FORMIATO DE 1'-{4-[2-(2,6-DIOXO-PIPERIDIN-3-IL)-1-OXO-2,3-DIHIDRO-1H-ISOINDOL-4-ILOXIMETIL]-BENCIL}-[2,4,]BIPIRIDINIL-1,-IO
Figure imgf000103_0001
A la solucion en CH 2 C 2 (10 ml) de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,52 g, 1,173 mmol) se le anadieron 2,4'-bipiridina (0,220 g, 1,408 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,388 ml, 2,346 mmol). Era una solucion transparente de color verde claro y se agito a temperatura ambiente durante una noche. El solido oleoso/aceite se agito en agua (20 ml) y CH 2 Cl 2 (25 ml) durante una hora. La fase ac. se separo y se lavo ademas con CH 2 Cl 2 (2 x 30 ml). Las fases de CH 2 Cl 2 combinadas se extrajeron con agua (2 x 10 ml). Las fases acuosas combinadas se evaporaron en un bano de agua a 50 °C para dar un solido de color blanquecino, que se purifico por HPLC preparativa (MeCN/agua en HCOOH al 0,1 %) para dar formiato de 1'-{4-[2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-bencil}-[2,4']bipiridinil-1'-io (0,213 g, rendimiento del 35 %); p.f., 132-134 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 pm, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 90/10 en 5 min, isocratica a 90/10 en 5 min (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 4,58 min (96,3 %). 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,92 - 2,05 (m, 1H, CHH), 2,33 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,65 (m, 1H, CHH), 2,83 - 3,00 (m, 1H, CHH), 4,17 - 4,48 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,28 (s, 2H, CH2), 5,91 (s, 2H, CH2), 7,27 - 7,37 (m, 2H, Ar), 7,43 - 7,52 (m, 1H, Ar), 7,54 - 7,64 (m, 4H, Ar), 7,64 - 7,72 (m, 1H, Ar), 8,08 - 8,18 (m, 1H, Ar), 8,39 - 8,50 (m, 2H, Ar), 8,77 -8,92 (m, 3H, Ar), 9,33 (d, J = 6,8 Hz, 2H, Ar), 10,99 (s a, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-de) 522,38, 31,18, 45,03, 51,58, 62,47, 68,94, 114,97, 115,36, 123,50, 124,75, 126,66, 128,41, 128,92, 129,82, 129,94, 133,34, 134,04, 137,93, 138,21, 145,31, 149,68, 150,64, 153,22, 153,30, 164,91, 167,93, 170,95, 172,82, LC/MS m/e = 519, 520, Anal calc. para C31H27N4O4+.HCOO-: C, 68,08; H, 5,00; N, 9,92, Observado: C, 61,92; H, 5,05; N, 8,98.
5.94 2-(2,6-DIOXOPIPERIDIN-3-IL)-4-((4-((2-(TRIFLUOROMETIL)-5,6-DIHIDROIMIDAZO[1,2-A]PIRAZIN-7(8H)-IL)METIL)BENCIL)OXI)ISOINDOLIN-1,3-DIONA
Figure imgf000103_0002
A una mezcla de 4-(4-(bromometil)benciloxi)-2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)isoindolin-1,3-diona (250 mg, 0,547 mmol) y clorhidrato de 2-(trifluorometil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2-a]pirazina (137 mg, 0,601 mmol) en MeCN seco (10 ml), se le anadio DiEa (0,334 ml, 1,914 mmol) y la suspension resultante se agito a temperatura ambiente durante 3 dias. Se anadio en porciones agua (~35 ml en total) para formar un precipitado. La mezcla se sonico extensamente con calentamiento suave y despues se agito durante varias horas a temperatura ambiente hasta que se obtuvo un solido dispersado finamente. La mezcla se filtro en un embudo sinterizado medio y la torta se lavo con mas cantidad de agua (~50 ml), se seco por succion, y se puso en un horno de vado a 50 °C durante una noche para dar para dar 2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-4-((4-((2-(trifluorometil)-5,6-dihidroimidazo[1,2-a]pirazin-7(8H)-il)metil)bencil)-oxi)isoindolin-1,3-diona en forma de un solido de color castano claro (275 mg, rendimiento del 89 %): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 pm, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 30/70 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 4,44 min (97,2 %); p.f.: 178-180 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 5 1,95 - 2,14 (m, 1H, CHH), 2,42 - 2,66 (m, 2H, CHH, CHH), 2,80 - 2,99 (m, 3H, CH2, CHH), 3,62 (s, 2H, CH2), 3,74 (s, 2H, CH2), 4,02 (t, J = 5,4 Hz, 2H, CH2), 5,09 (dd, J = 5,3, 12,8 Hz, 1H, CH), 5,37 (s, 2H, CH2), 7,35 - 7,44 (m, 2H, Ar), 7,49 (t, 3H, Ar), 7,61 (d, J = 8,5 Hz, 1H, Ar), 7,73 (d, J = 1,1 Hz, 1H, Ar), 7,83 (dd, J = 7,4, 8,5 Hz, 1H, Ar), 11,11 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 521,95, 30,90, 44,10, 48,37, 48,73, 50,63, 60,16, 69,89, 115,51, 116,58, 119,35, 119,40, 120,19, 123,98, 127,38, 128,92, 133,24, 135,15, 136,99, 137,31, 144,00, 155,49, 165,27, 166,75, 169,87, 172,72. No todas las senales de Ar carbono se observan debido a la separation con fluor; LCMS: MH = 568; Anal calc. para C28H24F3N5O5 0,2 H2O: C, 58,89; H, 4,31; N, 12,26; F, 9,98; Observado: C, 58,91; H, 3,99; N, 11,91; F, 9,37.
5.95 3-(1-OXO-4-((4-((2-(TRIFLUOROMETIL)-5,6-DIHIDROIMIDAZO [1,2-A]PIRAZIN-7(8H)-IL)METIL)BENCIL)OXI)ISOINDOLIN-2-IL)PIPERON-2,6-DIONA
Figure imgf000104_0001
A una suspension de (S)-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (200 mg, 0,451 mmol) y clorhidrato de 2-(trifluorometil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2-a]pirazina (113 mg, 0,496 mmol) en MeCN seco (5 ml), se le anadio DIEA (0,276 ml, 1,579 mmol). La solucion resultante se agito durante 3 dias a temperatura ambiente y despues se calento a 50 °C durante 16 h. La mezcla de reaccion se diluyo con agua (~35 ml) y el solido precipitado se sonico extensamente a 50 °C para facilitar la descomposicion de los agregados solidos. La suspension resultante se filtro y el solido se lavo con mas cantidad de agua (~50 ml) y Et2O (~50 ml). El solido se lavo de nuevo con agua (~75 ml) y Et2O (~30 ml) y despues se seco en un horno de vado a 50 °C durante una noche para dar 3-(1-oxo-4-((4-((2-(trifluorometil)-5,6-dihidroimidazo[1,2-a]pirazin-7(8H)-il)metil)bencil)oxi)isoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color castano (189 mg, rendimiento del 76 %): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 25/75 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 6,99 min (95,8 %); p.f.: 148-150 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 5 1,89 - 2,09 (m, 1H, CHH), 2,35 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,65 (m, 1H, CHH), 2,80 - 3,06 (m, 3H, CH2, CHH), 3,61 (s, 2H, CH2), 3,73 (s, 2H, CH2), 4,02 (t, J = 5,4 Hz, 2H, CH2), 4,26 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 4,44 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CH), 5,25 (s, 2H, CH2), 7,30 - 7,37 (m, 2H, Ar), 7,37 - 7,45 (m, 2H, Ar), 7,45 - 7,56 (m, 3H, Ar), 7,73 (d, J = 1,3 Hz, 1H, Imidazol), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 522,33, 31,16, 44,10, 45,07, 48,44, 50,55, 51,55, 60,18, 69,36, 114,96, 115,23, 123,98 (c, J = 266,3 Hz, CF3), 119,37 (c, J = 4,4 Hz, CCF3), 127,79, 128,93 (c, J = 37,4 Hz, CCF3), 128,90, 129,80, 129,93, 133,30, 135,63, 137,31, 143,99, 153,48, 167,97, 170,96, 172,81. Los cuadrupletes a 119,37 y 127,79 estan incompletos; LCMS: MH = 554; Anal calc. para C28H26F3N5O4 0,58 H2O: C, 59,63; H, 4,85; N, 12,42; F, 10,11; Observado: C, 59,25; H, 4,46; N, 12,41; F, 10,85.
5.96 CLORHIDRATO DE 3-(1-OXO-4-((4-((3-PROPOXIAZETIDIN-1-IL)METIL)BENCIL)OXI)ISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000104_0002
A una solucion de (S)-3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (200 mg, 0,451 mmol) en MeCN seco (5 ml), se le anadieron clorhidrato de 3-propoxiazetidina (75 mg, 0,496 mmol) y DIEA (0,276 ml, 1,579 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 3 h y el analisis por LCMS indico que el material de partida de bromuro de bencilo se hada consumido. La mezcla se calento a 50 °C durante ~30 min, se enfrio lentamente a ta, y despues se almaceno a 4 °C durante una noche. La mezcla que contema el producto en bruto se concentro al vado y el residuo se disolvio en DMF minima (~5 ml) para la purificacion por HPLC prep. El producto se eluyo con un gradiente de acetonitrilo/agua (acido formico al 0,1 % en ambas fases moviles, MeCN del 5 % al 60 % durante 20 minutos) y las fracciones se recogieron por activacion de masas. Las fracciones deseadas se combinaron y se concentraron al vado para dar un residuo vrtreo transparente. Se anadio HCl 1 N (2-3 ml) y la mezcla se concentro al vado a sequedad. Este proceso se repitio dos veces para obtener la sal HCl. Al residuo transparente, se le anadieron en porciones MeCN y Et2O y la mezcla se sonico hasta que se obtuvo un solido de color blanco. La suspension se concentro al vado a sequedad y se evaporo dos veces en Et2O (porciones de 3-4 ml) hasta que se obtuvo un solido de color blanco de flujo libre. El solido se seco en un horno de vado durante una noche para dar clorhidrato de 3-(1-oxo-4-((4-((3-propoxiazetidin-1-il)metil)bencil)oxi)isoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (52 mg , 22 %): HPLC: Waters Symmetry C 18 , 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 20/80 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 6,60 min (99,8 %); p.f.: 142-144 °C; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 50,87 (t, J = 7,4 Hz, 3H, CH3), 1,40 - 1,59 (m, 2H, CH2), 1,91 - 2,06 (m, 1H, CHH), 2,35 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,65 (m, 1H, CHH), 2,84 - 3,01 (m, 1H, CHH), 3,28 - 3,39 (m, 2H, CH2O, solapado con DMSO), 3,89 (s a, 2H, CH2), 4,06 - 4,23 (m, 2H, CH2), 4,23 -4,32 (m, 2H, CHH, CHH), 4,36 (s, 2H, CH2), 4,44 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,12 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CH), 5,28 (s, 2H, CH2), 7,27 - 7,38 (m, 2H, Ar), 7,44 - 7,53 (m, 1H, Ar), 7,55 (s, 4H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH), 11,09 (s a, 1H, HCl);
13 C RMN (DMSO-de) 5 -0,01, 12,34, 24,22, 32,97, 47,32, 53,70, 62,70, 63,30, 69,33, 71,21, 71,67, 117,13, 117,29, 129,67, 130,77, 131,82, 131,96, 134,99, 137,66, 138,23, 155,27, 170,35, 172,81, 174,98; LCMS: MH = 478; Anal calc. para C27H31N3O5 3,2 H2O 1,3 HCl: C, 55,66; H, 6,70; N, 7,21; Cl, 7,91; H2O, 9,89; Observado: C, 53,73; H, 6,33; N, 6,90; Cl, 7,63; H 2 O, 9,62.
5.97 CLORHIDRATO DE ((S)-3-(4-((4-(((3S,5S)-3,5-DIMETILMORFOUN)METIL)BENCIL)OXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000105_0001
A una suspension de (S)-3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (250 mg, 0,564 mmol) en MeCN (5 ml), se le anadio (3S,5S)-3,5-dimetilmorfolina (71,4 mg, 0,620 mmol). La mezcla se agito y se sonico brevemente para dar una solucion transparente y despues se anadio inmediatamente DIEA (0,197 ml, 1,128 mmol) y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 2 dias. La mezcla de reaccion se concentro al vado y el residuo oleoso se repartio entre EtOAc (150 ml) y NaHCO31 N (30 ml). La capa organica se lavo con salmuera, se seco (Na 2 SO 4 ), y se concentro al vado para dar un solido de color blanco. El solido se disolvio en DMF (8 ml) y se purifico usando HPLC preparativa de fase inversa. El producto se eluyo con un gradiente de acetonitrilo/agua (acido formico al 0,1 % en ambas fases moviles, MeCN del 5 % al 50 % durante 20 minutos) y las fracciones se recogieron por activacion de masas. Las fracciones deseadas se combinaron y se concentraron al vado. Se anadio HCl 1 N (8 ml) al concentrado y todos los disolventes se evaporaron para dar un solido gomoso. El solido se disolvio de nuevo en agua minima, se congelo y se liofilizo para dar clorhidrato de ((S)-3-(4-((4-(((3S,5S)-3,5-dimetilmorfolino)metil)bencil)oxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido esponjoso de color blanco (160 mg, rendimiento del 55 %): HPLC: Waters Symmetry C1s, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, grad. del 5 % al 95 % en 10 min, CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 5,89 min (97,0 %); p.f.: 230-232; 1 H RMN (DMSO-de) 51,28 (d, J = 6,8 Hz, 3H, CH3), 1,38 (d, J = 6,2 Hz, 3H, CH3), 1,86 - 2,08 (m, 1H, CHH), 2,36 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,58 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 2,80 - 3,01 (m, 1H, CHH), 3,03 - 3,22 (m, 1H, CH), 3,48 - 3,84 (m, 3H, CH2, CH), 3,91 (dd, J = 3,2, 12,3 Hz, 1H, CHH), 3,98 - 4,18 (m, 2H, CHH, CHH), 4,29 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 4,45 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,72 (dd, J = 3,8, 13,6 Hz, 1H, CHH), 5,12 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CH), 5,29 (s, 2H, CH2), 7,28 - 7,41 (m, 2H, Ar), 7,45 - 7,54 (m, 1H, Ar), 7,58 (d, J = 8,1 Hz, 2H, Ar), 7,83 (d, J = 8,1 Hz, 2H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH), 11,40 (dd, J = 1,2, 3,1 Hz, 1H, HCl); 13 C RMN (DM SO^) 59,35, 11,92, 22,27, 31,09, 44,99, 51,38, 51,49, 53,34, 67,65, 67,88, 68,90, 114,89, 115,30, 127,81, 129,25, 129,75, 129,89, 130,93, 133,27, 137,63, 153,29, 167,87, 170,89, 172,76; LCMS: MH = 478; Anal calc. para C27H31N3O5 1,3 H2O 2 HCl: C, 56,46; H, 6,25; N, 7,31; Observado: C, 56,55; H, 5,93; N, 7,33.
5.98 3-{4-[4-(2-OXA-6-AZA-ESPIRO[3,3]HEPT-6-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000105_0002
A la suspension en diclorometano (10 ml) de oxalato de 2-oxa-6-azaespiro[3,3]heptano (0,124 g, 0,857 mmol) se le anadio N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,425 ml, 2,57 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 5 min. Despues, se anadio 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,380 g, 0,857 mmol), que aun era una suspension. Se anadieron aproximadamente 3 ml de acetonitrilo y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla se purifico por HPLC preparativa (MeCN/agua en HCOOH al 0,1 %) para dar 3-{4-[4-(2-Oxa-6-aza-espiro[3,3]hept-6-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona (39 mg, rendimiento del 10 %); p.f., sin determinar. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 90/10 en 5 min, isocratica a 90/10 en 5 min (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 4,32 min (95,2 %). 1 H RMN (DMSO^) 51,93 - 2,04 (m, 1H, CHH), 2,36 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,84 -2,99 (m, 1H, CHH), 3,30 (s, 3H, CH2CH2), 3,51 (s, 1H, CH2), 4,20 - 4,47 (m, 2H, CH2), 4,59 (s, 3H, CH2CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,22 (s, 1H, CH2), 7,23 - 7,36 (m, 4H, Ar), 7,38 - 7,53 (m, 3H, Ar), 10,97 (s a, 1H, NH). 13C RMN (DMSO-d6) 522,39, 31,21, 38,54, 45,13, 51,66, 61,97, 62,85, 69,47, 79,96, 115,05, 115,26, 127,62, 128,35, 129,79, 130,00, 133,35, 135,23, 137,96, 153,51, 167,99, 170,92, 172,76, LC/MS m/e = 462.
5.99 3-(1-OXO-4-{4-[2-(TETRAHIDRO-PIRAN-4-IL)-ETIL]-BENCILOXI}-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000106_0001
Etapa 1: Preparation de ester metflico del acido 4-[2-(tetrahidro-piran-4-il)-vinil]-benzoico
Se anadio hidruro sodico (al 60 % en aceite) (0,378 g, 9,46 mmol) en una solution agitada de DMSO anhidro (50 ml). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 20 min. Se anadio bromuro de (4-metoxicarbonilbencil)trifenilfosfonio (4,65 g, 9,46 mmol) (polvo de color blanco) a la mezcla en un bano de agua fria a 5~12 °C. Despues de dos horas, se anadio tetrahidro-2H-piran-4-carbaldehido (0,9 g, 7,88 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante dos dias. A la mezcla se le anadio agua (50 ml), se extrajo con acetato de etilo (2 x 30 ml), se lavo con salmuera (50 ml), se seco y se concentro para dar un solido oleoso, que se purifico por columna de gel de sflice (EtOAc/Hexanos) para dar ester metflico del acido 4-[2-(tetrahidro-piran-4-il)-vinil]-benzoico en forma de un solido de color blanco (1,2 g, rendimiento del 61 %). LC/MS m/e = 247. El producto se uso en la siguiente etapa sin purification adicional.
Etapa 2: Preparacion de ester metflico del acido 4-[2-(tetrahidro-piran-4-il)-etil]-benzoico
Una mezcla de ester metflico del acido 4-[2-(tetrahidro-piran-4-il)-vinil]-benzoico (1,36 g, 5,52 mmol) y paladio sobre carbono activado al 10 % en peso (humedo al 50 %) (0,21 g, 8,92 mmol) en metanol (50 ml) se hidrogeno con un globo de hidrogeno a temperatura ambiente durante una noche. La suspension de color negro se filtro a traves de Celite, el filtrado se evaporo para dar ester metflico del acido 4-[2-(tetrahidro-piran-4-il)-etil]-benzoico en forma de un solido de color blanco (1,33 g, rendimiento del 97 %). LC/MS m/e = 217. Se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 3: Preparacion de {4-[2-(tetrahidro-piran-4-il)-etil]-fenil}-metanol
Se anadio gota a gota hidruro de litio y aluminio (2,0 M en THF) (2,29 ml, 4,58 mmol) a una solucion agitada de ester metflico del acido 4-[2-(tetrahidro-piran-4-il)-etil]-benzoico (0,64 g, 2,58 mmol) en tetrahidrofurano (8 ml) en un bano de hielo a 0 °C. La mezcla se agito a 0 °C durante 30 min, la solucion se enfrio en un bano de hielo y se anadio gota a gota agua para formar un gel de color blanco, y se desprendio gas. Se anadio mas cantidad de agua (30 ml). Se extrajo con EtOAc (3 x 30 ml) y se separaron las dos fases anadiendo una "solucion 1 N de sal de Rochelle". La fase organica se evaporo para dar {4-[2-(tetrahidro-piran-4-il)-etil]-fenil}-metanol en forma de un solido de color blanco (0,58 g, rendimiento en bruto del 102 %). LC/MS m/e = 203. Se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional. Etapa 4: Preparacion de 4-[2-(4-Bromometil-fenil)-etil]-tetrahidro-pirano
A una suspension agitada de (4-(2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)fenil)metanol (0,57 g, 2,59 mmol) en MeCN seco (8 ml) a 0 °C, se le anadio tribromofosfina (0,466 ml, 4,94 mmol). La mezcla resultante se agito a 0 °C durante 20 minutos, despues se dejo calentar hasta la temperatura ambiente. La suspension turbia se inactivo con agua (~5 ml) en un bano de hielo, se anadio mas agua (20 ml), se extrajo con acetato de etilo (2 x 30 ml). Las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera (20 ml), se secaron sobre sulfato sodico y se concentraron para dar 4-[2-(4-Bromometil-fenil)-etil]-tetrahidro-pirano en forma de un aceite (0,74 g, rendimiento en bruto del 101 %). Se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 5: Preparacion de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-(1-oxo-4-{4-[2-(tetrahidro-piran-4-il)-etil]-benciloxi}-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-butmco
Una suspension de color blanco de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,764 g, 2,61 mmol), 4-(4-(bromometil)fenetil)tetrahidro-2H-pirano (0,74 g, 2,61 mmol), y carbonato potasico (0,361 g, 2,61 mmol) en acetonitrilo (15 ml) se agito en un bano de aceite a 50 °C durante una noche. La suspension de color blanco se filtro, y el filtrado se evaporo para dar un solido de color blanco, que se purifico por columna de gel de sflice (MeOH/CH2Cl2) para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-(1-oxo-4-{4-[2-(tetrahidro-piran-4-il)-etil]-benciloxi}-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-butmco en forma de un solido de color blanco (0,96 g, rendimiento del 74 %). LC/MS m/e = 495. Se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 6: Preparacion de 3-(1-Oxo-4-{4-[2-(tetrahidro-piran-4-il)-etil]-benciloxi}-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-piperidin-2,6-diona
A una solution agitada de 5-amino-5-oxo-4-(1-oxo-4-(4-(2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)benciloxi)isoindolin-2-il)pentanoato de metilo (0,96 g, 1,941 mmol) en tetrahidrofurano (l0 ml) a 0 °C en un bano de hielo se le anadio 2-metilpropan-2-olato potasico (0,218 g, 1,941 mmol). La mezcla se agito durante diez minutos, despues se inactivo con Hcl 1 N (a pH = 1), se neutralizo con bicarbonato sodico saturado a pH = 7, se extrajo con cloruro de metileno (3 x 30 ml). Las fases combinadas de cloruro de metileno se lavaron con (2 x 20 ml), se secaron y se concentraron para dar un solido de color blanco. Se agito en eter (20 ml) durante un par de horas, y se filtro para dar 3-(1-Oxo-4-{4-[2-(tetrahidro-piran-4-il)-etil]-benciloxi}-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,64 g, rendimiento del 71 %); p.f., 254-256 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 90/10 en 5 min, isocratica a 90/10 en 5 min (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 7,18 min (96,7 %). 1 H RMN (DMSO-de) 51,13 - 1,28 (m, 2H, CH2), 1,45 - 1,54 (m, 3H, CH2,CH), 1,61 (d, J = 13,0 Hz, 2H, CH2), 1,87 - 2,09 (m, 1H, CHH), 2,33 - 2,44 (m, 1H, CHH), 2,60 (t, J = 7,6 Hz, 3H, CH2, CHH), 2,91 (s a, 1H, CHH), 3,24 (td, J = 1,7, 11,6 Hz, 2H, CH2), 3,82 (dd, J = 3,0, 11,1 Hz, 2H, CH2), 4,14 - 4,48 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,20 (s, 2H, CH2), 7,22 (d, J = 8,1 Hz, 2H, Ar), 7,31 - 7,67 (m, 5H, Ar), 10,96 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-de) 5 22,36, 31,21, 31,63, 32,64, 33,89, 38,24, 45,10, 51,59, 67,03, 69,49, 115,01, 115,20, 127,85, 128,34, 129,79, 129,97, 133,31, 133,86, 142,20, 153,53, 168,01, 170,96, 172,82, LC/MS m/e = 463, Anal calc. para C27H30N2O5 (+0,1 H2O): C, 69,84; H, 6,56; N, 6,03, Observado: C, 69,57; H, 6,64; N, 5,93.
5.100 2-(2,6-DIOXOPIPERON-3-IL)-4-((6-(MORFOLINOMETIL)IMIDAZO[1,2-A]PIRON-2-IL)METOXI)ISOINDOLIN-1,3-DIONA
Figure imgf000107_0001
Etapa 1: Una mezcla de anhidrido 3-hidroxiftalico (1,6 g, 9,8 mmol) en metanol (25 ml) se calento a reflujo durante 3 h. La mezcla se enfrio y se concentro. Se agitaron el residuo y NaHCO3 (2,3 g, 27,3 mmol) en DMF (20 ml). Se anadio yodometano (3,3 g, 23,4 mmol) y la mezcla de reaction se calento un bano de aceite a 50 °C durante 3 h. La mezcla de reaccion se enfrio y se diluyo con EtOAc (80 ml) y agua (40 ml). La mezcla se acidifico con HCl 4 N y la capa ac. se extrajo con EtOAc (2 x 40 ml). La solucion de EtOAc combinada se lavo con agua (2 x 40 ml) y salmuera (40 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, EtOAc al 10 %/hexano durante 15 min despues al 20 % durante 5 min y mantenimiento durante 15 min despues al 30 % durante 5 min y mantenimiento durante 15 min) para dar 3-hidroxiftalato de dimetilo (1,8 g, 89 %): 1H RMN (CDCb) 53,89 (s, 3H), 3,92 (s, 3H), 6,95-6,98 (dd, J = 3 y 9 Hz, 1H), 7,06-7,10 (dd, J = 3 y 9 Hz, 1H), 7,41-7,48 (t, J = 9 Hz, 1H), 10,55 (s, 1H); 13C RMN (CDCb) 552,64, 52,90, 110,19, 119,11, 119,83, 134,58, 135,46, 161,08, 169,33, 169,39.
Etapa 2: Una mezcla de 6-aminonicotinato de etilo (5,0 g, 30,1 mmol) y 1,3-dicloropropan-2-ona (5,7 g, 45,1 mmol) en acetonitrilo (100 ml) se calento a reflujo durante 17 h. La mezcla se concentro y el residuo se agito con CH2Cl2 (100 ml) y NaHCO3 sat. (35 ml). La capa organica se lavo con salmuera (40 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, EtOAc al 30 %/CH2Cl2 durante 25 min despues en EtOAc al 100 % durante 15 min) para dar 2-(clorometil)imidazo[1,2-a]piridin-6-carboxilato de etilo (4,7 g, 65 %): 1H RMN (CDCb) 5 1,42 (t, J = 6 Hz, 3H), 4,38-4,45 (c, J = 6 Hz, 2H), 4,77 (s, 2H), 7,56-7,59 (d, J = 9 Hz, 1H), 7,74-7,77 (dd, J = 3 y 9 Hz, 1H), 8,86-8,87 (d, J = 3 Hz, 1H).
Etapa 3: Una solucion de 2-(clorometil)imidazo[1,2-a]piridin-6-carboxilato de etilo (2,1 g, 8,8 mmol) en CH2Cl2 anhidro (60 ml) se enfrio en un bano de hielo seco/acetona. Se anadio lentamente una solucion de hidruro de diisobutilaluminio/CH2Cl2 (1 M, 26,4 ml, 26,4 mmol) a -70 °C. Despues de la adicion, mezcla de reaccion se agito a -70 °C durante 1,5 h despues se inactivo con metanol (5 ml). La mezcla se diluyo con CH2Cl2 (40 ml), y NaHCO3 sat. (40 ml) y se calento a temperatura ambiente. La mezcla se filtro y se lavo el solido con CH2Cl2 (50 ml). Las capas se separaron y la capa organica se lavo con agua (35 ml) y salmuera (35 ml) y se seco. El disolvente se retiro para dar 2-(clorometil)imidazo[1,2-a]piridin-6-carboaldehido (1,5 g, 89 %), que se uso en la siguiente etapa sin purification.
Etapa 4: Una solucion de 2-(clorometil)imidazo[1,2-a]piridin-6-carboaldehido (1,5 g, 7,9 mmol), morfolina (0,7 g, 7,9 mmol) y acido acetico (0,6 g, 9,4 mmol) en Th F (60 ml) se agito a temperatura ambiente durante 15 min. Se anadio triacetoxiborohidruro sodico (3,3 g, 15,7 mmol) y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla de reaccion se diluyo con CH2Cl2 (50 ml), se enfrio en bano de hielo y se inactivo con NaHCO3 sat. (40 ml). La capa organica se lavo con salmuera (30 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, CH2Cl2 durante 5 min despues a CH3OH al 3 %/CH2Cl2 durante 5 min y mantenimiento durante 15 min despues al 5 % durante 5 min y mantenimiento durante 15 min) para dar 4-((2-(clorometil)imidazo[1,2-a]piridin-6-il)metil)morfolina (1,1 g, 53 %): 1H RMN (CDCb) 52,45-2,49 (m, 4H), 3,47(s, 2H), 3,70-3,73 (m, 4H), 4,76 (s, 2H), 7,22-7,25 (dd, J = 3 y 9 Hz, 1H), 7,53-7,57 (m, 2H), 8,03 (s, 1H).
Etapa 5: Una mezcla de 4-((2-(clorometil)imidazo[1,2-a]piridin-6-il)metil)morfolina (1,1 g, 4,2 mmol), 3-hidroxiftalato de dimetilo (0,9 g, 4,2 mmol) y carbonato potasico (0,6 g, 4,2 mmol) en DMF (20 ml) se calento en un bano de aceite a 55 °C durante 7 h. La mezcla de reaccion se enfrio, se diluyo con EtOAc (100 ml), se lavo con agua (3 x 30 ml) y salmuera (30 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, CH2Cl2 durante 5 min despues a c H3OH al 3 %/CH2Cl2 durante 5 min y mantenimiento durante 15 min despues al 5 % durante 5 min y mantenimiento durante 15 min) para dar 3-((6-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridin-2-il)metoxi)ftalato de dimetilo (0,6 g, 32 %): 1H RMN (CDCl3) 52,43-2,45 (m, 4H), 3,45 (s, 2H), 3,70-3,73 (m, 4H), 3,89 (s, 3H), 3,91 (s, 3H), 5,39 (s, 2H), 7,19 (m, 1H), 7,30-7,38 (m, 2H), 7,45-7,61 (m, 3H), 8,01 (s, 1H).
Etapa 6: Se anadio hidroxido sodico (0,3 g, 6,5 mmol) a una solucion agitada de 3-((6-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridin-2-il)metoxi)ftalato de dimetilo (1,0 g, 2,3 mmol) en etanol (20 ml). La mezcla resultante se calento a reflujo durante 1 h, despues se enfrio y se neutralizo con acido acetico (0,5 g, 8,3 mmol). La mezcla se concentro y el residuo se disolvio en piridina (30 ml). A esta solucion se le anadio clorhidrato de a-aminoglutarimida (0,4 g, 2,3 mmol) y la mezcla resultante se calento a reflujo durante 5 h. La mezcla de reaccion se enfrio y se concentro. El residuo se agito con EtOAc (50 ml) y agua (30 ml). La mezcla se filtro y el solido se lavo con EtOAc (20 ml). Las capas se separaron y la capa ac. se extrajo con EtOAc (2 x 40 ml). La solucion de EtOAc combinada se lavo con agua (2 x 30 ml) y salmuera (30 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, CH2Cl2 durante 5 min despues a CH3OH al 3 %/CH2Cl2 durante 5 min y mantenimiento durante 10 min despues al 5 % durante 5 min y mantenimiento durante 15 min) para dar 2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-4-((6-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]piridin-2-il)metoxi)isoindolin-1,3-diona (0,12 g, 10 %): p.f. 255-257 °C; 1H RMN (Dm So -de) 51,99-2,05 (m, 1H), 2,36-2,39 (m, 4H), 2,54-2,61 (m, 2H), 2,85-2,89 (m, 1H), 3,44-3,58 (m, 6H), 5,05-5,11 (dd, J = 6 y 15 Hz, 1H), 5,46 (s, 2H), 7,22-7,25 (dd, J = 3 y 6 Hz, 1H), 7,45-7,49 (m, 2H), 7,73-7,82 (m, 2H), 8,01 (s, 1H), 8,47 (s, 1H), 11,11 (s, 1H); 13C RMN (DMSO-d6) 521,95, 30,89, 48,72, 52,97, 59,11, 65,32, 66,13, 111,95, 115,41, 116,24, 115,40, 120,31, 122,31, 125,79, 127,03, 133,21, 136,87, 141,13, 143,91, 155,55, 165,24, 166,76, 169,87, 172,74; Calc. para C26H25N5O6+0,9H2O: C, 60,09; H, 5,20; N, 13,47, Observado: C, 60,05; H, 5,01; N, 13,22.
5.101 3-{4-[4-(1,4-DIHIDRO-QUINAZOLIN-2-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
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Etapa 1: Ester terc-butflico del acido (4-bromometil-fenil)-acetico
La solucion agitada de acido 2-(4-(bromometil)fenil)acetico (2,6 g, 11,35 mmol) en cloruro de tionilo (20 ml, 274 mmol) se calento a reflujo durante 2,5 h. La mezcla de reaccion se concentro al vado para dar un solido de color blanquecino. El solido de color blanco se anadio a la solucion agitada de 2-metilpropan-2-ol (20 ml, 213 mmol) en DCM (2 ml) en un bano de hielo/agua. Y la mezcla se agito en un bano de hielo/agua durante 2 h y a temperatura ambiente durante 18 h. La mezcla de reaccion se anadio a CH2Cl2 (40 ml). La fase organica se lavo sucesivamente con H2O (20 ml), NaHCO3 (sat., ac., 20 ml), y salmuera (25 ml) y se seco sobre MgSO4. La capa organica se concentro al vado para dar ester terc-butflico del acido (4-bromo metil-fenil)-acetico en forma de un flquido de color amarillo claro (2,4 g, rendimiento en bruto del 74 %). 1H RMN (DMSO-d6): 1,39 (s, 9H, tBu), 3,54 (s, 2H, CH2CO2), 4,69 (s, 2H, CH2Br), 7,23, 7,39 (m, 4H, debido a impurezas).
Etapa 2: Ester metflico del acido 4-[4-(4-terc-butoxicarbonilmetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-4-carbamoil-butrnco
A la mezcla agitada de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1,5 g, 5,13 mmol) y 2-(4-(bromometil)fenil)acetato de terc-butilo (2,2 g, 7,7 mmol) en Acetonitrilo (30 ml) se le anadio CARBONATO Po tASICO (1,42 g, 10,3 mmol). La mezcla de reaccion resultante se agito a 50 °C durante 27 h y entre medias se anadio en 2 porciones de 2-(4-(bromometil) fenil)acetato de terc-butilo (800 mg, 2,9 mmol). La mezcla de reaccion se filtro y el solido de color pardo claro se lavo con acetonitrilo (2 x 20 ml). El filtrado se concentro al vado y el residuo se purifico por ISCO para dar ester metflico del acido 4-[4-(4-terc-Butoxicarbonilmetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidroisoindol-2-il]-4-carbamoil-butmco en forma de un solido pegajoso de color amarillo claro (2,1 g, rendimiento en bruto del 82 %) LCMS MH = 497.
Etapa 3: Ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(4-carboximetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco
A la solucion agitada de 5-amino-4-(4-(4-(2-terc-butoxi-2-oxoetil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (2,1 g, 4,2 mmol) en DCM (20 ml) a temperatura ambiente se le anadio AGUA (0,38 ml, 21,1 mmol) seguido de la adicion lenta de TFA (1,63 ml, 21,1 mmol). La solucion resultante se agito a temperatura ambiente durante 5 h y entre medias se anadieron TFA (3,2 ml) y agua (0,15 ml). La mezcla se mantuvo en el frigorifico durante una noche y la mezcla de reaccion se concentro al vado para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(4-carboxi metilbenciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco en forma de un solido de color blanquecino (2,3 g, rendimiento en bruto del 123 %). 1H RMN (DMSO-d6) 51,97 - 2,31 (m, 4H, CH2, CH2), 3,50 (s, 3H, CH3), 3,58 (s, 2H, CH2), 4,41 (d, J = 17,8 Hz, 1H, CHH), 4,53 (d, J = 17,8 Hz, 1H, CHH), 4,72 (dd, J = 4,6, 10,3 Hz, 1H, CHH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,18 (s a, 1H, NHH), 7,24 - 7,34 (m, 4H, Ar), 7,40 - 7,50 (m, 3H, Ar), 7,57 (s a, 1H, NHH); LCMS MH = 441.
Etapa 4: 5-amino-4-(4-(4-(2-(2-aminobencilamino)-2-oxoetil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato
A la solucion agitada de acido 2-(4-((2-(1-amino-5-metoxi-1,5-dioxopentan-2-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)fenil)acetico (820 mg, 1,9 mmol) en DMF (10 ml) a temperatura ambiente se le anadio HOBT (285 mg, 1,9 mmol). Un minuto mas tarde, se anadieron 2-(aminometil)anilina (227 mg, 1,9 mmol), EDC (357 mg, 1,9 mmol) y DIEA (0,81 ml, 4,65 mmol).
La solucion resultante se agito a temperatura ambiente durante 17 h antes de anadirse agua (40 ml) y EtOAc (60 ml). La mezcla se extrajo y la capa ac. se extrajo con EtOAc (50 ml). Las capas organicas se combinaron, se secaron por MgSO4 y se concentraron al vado. El residuo se purifico por ISCO para dar 5-amino-4-(4-(4-(2-(2-amino bencilamino)-2-oxoetil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato en forma de un aceite pegajoso (300 mg, rendimiento del 30 %). El compuesto se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional. LCMS MH = 545.
Etapa 5: 5-Amino-4-(4-((4-(2-((2-aminobencil)amino)-2-oxoetil)bencil)oxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo
La solucion de 5-amino-4-(4-(4-(2-(2-aminobencilamino)-2-oxoetil)bencilo oxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (300 mg, 0,55 mmol) en ACIDO ACETICO (4 ml, 69,9 mmol) se calento en un horno microondas a 125 °C durante 10 min. La mezcla de reaccion se anadio lentamente a NaHCO3 (ac. sat., 50 ml) para controlar la formacion de CO2. La mezcla resultante se extrajo con DCM (100 ml). La capa organica se lavo con NaHCO3 (ac. sat., 15 ml) y salmuera (20 ml). La capa organica se seco por MgSO4 y se concentro al vado para dar 5-amino-4-(4-((4-(2-((2-aminobencil)amino)-2-oxoetil)bencil)oxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo en forma de un solido de color pardo claro (240 mg, rendimiento del 83 %); 1H RMN (DMSO-d6) 52,00 - 2,31 (m, 4H, CH2, CH2), 3,46 (s, 2H, CH2), 3,49 (s, 3H, CH3), 4,33 - 4,57 (m, 4H, CHH, CHH, CH2), 4,71 (dd, J = 4,8, 10,3 Hz, 1H, CHH), 5,21 (s, 2H, CH2), 6,75 (d, J = 7,7 Hz, 1H, Ar), 6,88 (d, J = 4,2 Hz, 2H, Ar), 7,00 - 7,13 (m, 1H, Ar), 7,13 - 7,23 (m, 1H, NHH), 7,23 - 7,33 (m, 2H, Ar), 7,33 - 7,49 (m, 6H, Ar), 7,57 (s, 1H, NHH); LCMS MH = 527.
Etapa 6: 3-{4-[4-(1,4-Dihidro-quinazolin-2-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona A la suspension agitada de 5-amino-4-(4-(4-((1,4-dihidroquinazolin-2-il)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (240 mg, 0,46 mmol) en Tetrahidrofurano (10 ml) a 0 °C (bano de hielo/agua) se le anadio Te Rc -BUTOXIDO POTASICO (56,3 mg, 0,5 mmol). La mezcla resultante se agito a 0 °C durante 2 y se anadio KOtBu (37 mg, 0,33 mmol) a la mezcla de reaccion para una reaccion adicional a 0 °C. 1,5 h mas tarde, la mezcla de reaccion se diluyo por DCM (50 ml) seguido de la adicion de HCl (2 ml, 1 N, ac.). La mezcla se agito durante 1 min y se anadio NaHCO3 (ac., sat., 20 ml). La mezcla se filtro para conseguir algo de solido de color amarillo. El filtrado se extrajo y la capa ac. se extrajo con DCM (30 ml). Las capas organicas combinadas se secaron por MgSO4 y se filtraron. El filtrado se concentro y el residuo se purifico por ISCO para dar 3-{4-[4-(1,4-Dihidro-quinazolin-2-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (25 mg, rendimiento del 11 %); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 23/77, (CH3c N/H3PO4 al 0,1 %), 3,90 min (96,3 %); p.f.: 153-155 °C (en el laboratorio); 1H RMN (DMSO-de) 51,98 (s a, 1H, CHH), 2,35 -2,46 (m, 1H, CHH), 2,54 - 2,62 (m, 1H, CHH), 2,87 (dd, J = 4,7, 12,8 Hz, 1H, CHH), 3,45 (s, 2H, CH2), 4,23 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,40 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,48 (s, 2H, CH2), 5,09 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CHH), 5,20 (s, 2H, CH2), 6,74 (d, J = 7,7 Hz, 1H, Ar), 6,88 (d, J = 4,2 Hz, 2H, Ar), 6,99 - 7,10 (m, 1H, Ar), 7,25 - 7,56 (m, 8H, Ar, NH), 10,95 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-de) 522,23, 31,09, 40,98, 45,02, 51,48, 69,32, 114,83, 115,11, 122,98, 125,44, 127,34, 127,78, 127,88, 128,75, 129,10, 129,72, 129,88, 133,22, 134,62, 137,18, 153,41, 167,92, 170,86, 172,73; LCMS MH = 495; Anal. Calc. para C2sH25N4O4 : C, 70,43; H, 5,30; N, 11,33; Observado: N/A.
5.102 3-(1-OXO-4-{4-[2-(TETRAHIDRO-PIRAN-4-IL)-ETIL]-BENCILOXI}-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000109_0001
Etapa 1: Preparation de ester metflico del acido 4-(tetrahidro-piran-4-ilidenometil)-benzoico
Se anadio hidruro sodico hidruro (al 60 % en aceite) (0,240 g, 5,99 mmol) en una solucion agitada de DMSO anhidro (50 ml). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 20 minutos. A la mezcla se le anadio bromuro de (4-metoxicarbonilbencil)trifenilfosfonio (2,94 g, 5,99 mmol) (polvo de color blanco) en un bano de agua fria a 5~12 °C. Despues de dos horas, se anadio dihidro-2H-piran-4(3H)-ona (0,5 g, 4,99 mmol) en DMSO (3 ml). La mezcla se agito a temperature ambiente durante una noche, despues se diluyo con agua (80 ml) lentamente y se extrajo con acetato de etilo (3 x 80 ml). Las fases combinadas de acetato de etilo se lavaron adicionalmente con agua (2 x 100 ml). La fase de acetato de etilo se evaporo para dar un solido de color blanquecino y se purifico por columna de gel de sflice (EtOAc/Hexanos) para dar ester metilico del acido 4-(tetrahidro-piran-4-ilidenometil)-benzoico en forma de un aceite (0,74 g, rendimiento del 63 %). El analisis por H RMN mostro una pureza del 72 %. El producto se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 2: Preparacion de ester metflico del acido 4-(tetrahidro-piran-4-ilmetil)-benzoico
Una mezcla de ester metflico del acido 4-(tetrahidro-piran-4-ilidenometil)-benzoico (0,743 g, 3,20 mmol) y paladio sobre carbono activado al 10 % en peso (humedo al 50 %) (0,14 g, 69,4 mmol) en metanol (30 ml) se hidrogeno con dos globos de hidrogeno durante tres horas. La suspension se filtro a traves de una capa de Celite, el filtrado se evaporo para dar ester metflico del acido 4-(tetrahidro-piran-4-ilmetil)-benzoico en forma de un solido oleoso (0,71 g, rendimiento del 95 %). La H RMN mostro una pureza del 70 %. Se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 3: Preparacion de [4-(Tetrahidro-piran-4-ilmetil)-fenil]-metanol
Se anadio gota a gota hidruro de lirio y aluminio (2,0 M en THF) (1,494 ml, 2,99 mmol) a una solucion agitada de ester metflico del acido 4-(tetrahidro-piran-4-ilmetil)-benzoico (0,7 g, 2,99 mmol) en tetrahidrofurano (8 ml) en un bano de hielo a 0 °C. La mezcla se agito durante 20 minutos. La solucion se enfrio en un bano de hielo y se anadio gota a gota agua (30 ml) para formar un gel de color blanco, y se desprendio gas. Se extrajo con EtOAc (2 x 40 ml) y las dos fases se separaron anadiendo una "solucion 1 N de sal de Rochelle". La fase organica se evaporo y se purifico por columna de gel de sflice (EtOAc/Hexanos) para dar [4-(Tetrahidro-piran-4-ilmetil)-fenil]-metanol en forma de un aceite (0,16 g, rendimiento del 26 %). Se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 4: Preparacion de 4-(4-Bromometil-bencil)-tetrahidro-pirano
A una suspension agitada de (4-((tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)fenil)metanol (0,16 g, 0,776 mmol) en acetonitrilo (anhidro) (8 ml, 0,776 mmol) a 0 °C, se le anadio tribromofosfina (0,110 ml, 1,163 mmol). La mezcla resultante se agito a 0 °C durante 10 minutos. La suspension se inactivo con agua (25 ml) en un bano de hielo, se extrajo con acetato de etilo (2 x 30 ml). Las fases org. combinadas se lavaron con salmuera (20 ml), se secaron sobre sulfato sodico y se concentraron para dar 4-(4-Bromometil-bencil)-tetrahidro-pirano en forma de un aceite (0,206 g, rendimiento en bruto del 99 %). Se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 5: Preparacion de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-{1-oxo-4-[4-(tetrahidro-piran-4-ilmetil)-benciloxi]-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-butmco
Una suspension de color blanco de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,195 g, 0,669 mmol), 4-(4-(bromometil)bencil)tetrahidro-2H-pirano (0,18 g, 0,669 mmol), y carbonato potasico (0,092 g, 0,669 mmol) en acetonitrilo (10 ml) se agito en un bano de aceite a 50 °C durante una noche. La suspension se filtro y el filtrado se evaporo para dar un aceite, que se purifico por columna de gel de sflice (MeOH/CH2Ch) para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-{1-oxo-4-[4-(tetrahidro-piran-4-ilmetil)-benciloxi]-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-butmco en forma de un aceite (~0,15 g, rendimiento del 46 %). Se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 6: Preparacion de 3-{1-Oxo-4-[4-(tetrahidro-piran-4-ilmetil)-benciloxi]-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona
A una solucion agitada de 5-amino-5-oxo-4-(1-oxo-4-(4-((tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)benciloxi)isoindolin-2-il)pentanoato de metilo (0,15 g, 0,312 mmol) en tetrahidrofurano (8 ml) a 0 °C en un bano de hielo se le anadio 2-metilpropan-2-olato potasico (0,035 g, 0,312 mmol). La solucion se agito durante diez minutos, se inactivo con HCl 1 N a pH = 1, despues se neutralizo con bicarbonato sodico saturado a pH = 7, y se extrajo con acetato de etilo (2 x 30 ml). Las fases de EtOAc se lavaron con agua (20 ml) y salmuera (20 ml), se secaron y se concentraron para dar un aceite, que se purifico por columna de gel de sflice (40 g, MeOH/CH2Ch) para dar 3-(1-Oxo-4-{4-[2-(tetrahidro-piran-4-il)-etil]-benciloxi}-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (64 mg, rendimiento del 46 %); p.f., 172-174 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 pm, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 90/10 en 5 min, isocratica a 90/10 en 5 min (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 6,88(96,1 %). 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 81,12 - 1,29 (m, 2H, CH2), 1,39 - 1,53 (m, 2H, CH2), 1,61 - 1,82 (m, 1H, CH), 1,91 - 2,04 (m, 1H, CHH), 2,35 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,83 - 3,00 (m, 1H, CHH), 3,16 - 3,28 (m, 0H, CH2), 3,75 - 3,87 (m, J = 0,9, 0,9, 4,7, 11,4 Hz, 0H, CH2), 4,18 - 4,47 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,20 (s, 2H, CH2), 7,20 (d, J = 7,9 Hz, 2H, Ar), 7,32 (d, J = 7,7 Hz, 2H, Ar), 7,40 (d, J = 8,1 Hz, 2H, Ar), 7,44 - 7,54 (m, 1H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 822,36, 31,20, 32,46, 36,36, 42,28, 45,09, 51,58, 66,91, 69,48, 114,97, 115,20, 127,68, 129,11, 129,81, 129,94, 133,29, 134,04, 139,81, 153,53, 168,01, 170,96, 172,82, LC/MS m/e = 449, Anal calc. para C26H28N2O5 (+0,4 H2O): C, 68,53; H, 6,37; N, 6,15, Observado: C, 68,35; H, 6,44; N, 6,03.
5.103 3-{1-OXO-4-[4-(3-FENOXI-AZETIDIN-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
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A la solucion en CH3CN (10 ml) de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,36 g, 0,812 mmol) se le anadieron 3-fenoxiazetidina (0,158 g, 1,056 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,268 ml, 1,624 mmol). La solucion se agito a temperatura ambiente durante una hora. El disolvente se evaporo y se mezclo con cloruro de metileno (80 ml). Se lavo con agua (2 x 40 ml), se seco y se concentro para dar un aceite, que se purifico por columna de gel de sflice (MeOH/CH 2 Cl 2 ) para dar 3-{1-Oxo-4-[4-(3-fenoxi-azetidin-1-ilmetil)-benciloxi]-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,237 g, rendimiento del 57 %); p.f., 150-152 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 90/10 en 5 min, isocratica a 90/10 durante 5 min (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 4,83 min (96,0 %). 1 H RMN (DMSO-de) 51,91 -2,06 (m, 1H, CHH), 2,36 -2,48 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,83 -2,98 (m, 1H, CHH), 3,04 (ddd, J = 1,8, 5,3, 6,9 Hz, 2H, CH2), 3,65 (s, 2H, CH2), 3,68 - 3,79 (m, 2H, CH2), 4,19 - 4,48 (m, 2H, CH2), 4,80 (quin, J = 5,7 Hz, 1H, CH), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,22 (s, 2H, CH2), 6,82 (dd, J = 1,0, 8,8 Hz, 2H, Ar), 6,89 - 6,98 (m, 1H, Ar), 7,22 - 7,37 (m, 5H, Ar), 7,40 - 7,53 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-de) 522,36, 31,21, 45,10, 51,59, 60,56, 62,35, 66,23, 69,41, 114,49, 114,98, 115,23, 120,89, 127,68, 128,39, 129,60, 129,81, 129,95, 133,32, 135,23, 138,05, 153,50, 156,68, 168,01, 170,96, 172,82, LC/MS m/e = 512, Anal calc. para C30H29N3O5 (+0,9 H2O): C, 68,27; H, 5,88; N, 7,96, Observado: C, 67,93; H, 5,69; N, 7,84.
5.104 FORMIATO DE 3-(4-{4-[3-(4-FLUORO-FENOXI)-AZETON-1-ILMETIL]-BENCILOXI}-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DIONA
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En un vial de reaccion de 20 ml cargado con 3-(4-((4-(bromometil)bencil)oxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (300 mg, 0,677 mmol) y clorhidrato de 3-(4-fluorofenoxi)azetidina (145 mg, 0,711 mmol), se anadio MeCN seco (10 ml) seguido de DIEA (0,355 ml, 2,0 mmol). La suspension resultante se calento a 50 °C para dar una solucion transparente. Despues de -30 min, la temperatura se elevo adicionalmente a 70 °C y la mezcla de reaccion se agito durante ~16 h a 70 °C. La mezcla de reaccion se enfrio a temperatura ambiente y despues se concentro al vado. El residuo se diluyo en EtOAc (~100 ml) y despues se extrajo con NaHCO 3 1 N (2 x 35 ml) y salmuera. El secado (Na 2 SO 4 ) y la concentracion en un evaporador rotatorio dieron un solido vrtreo. Se anadio Et 2 O (~15 ml) al vidrio en pequenas porciones y con sonicacion intermitente hasta que se formo un solido bien disperso. La suspension se agito vigorosamente y despues se filtro en un embudo sinterizado fino de 15 ml. El solido se disolvio en DMF (7 ml) y se purifico usando HPLC preparativa de fase inversa. El producto se eluyo con un gradiente de acetonitrilo/agua (acido formico al 0,1 % en ambas fases moviles, MeCN del 5 % al 95 % durante 20 minutos) y las fracciones se recogieron por activacion de masas. Las fracciones deseadas se combinaron y se concentraron al vado para dar formiato de 3-(4-{4-[3-(4-fluoro-fenoxi)-azetidin-1-ilmetil]-benciloxi}-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (204 mg, rendimiento del 52 %): HPLC: Waters Symmetry C1s, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 27/73 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 3,62 min (98,4 %); p.f.: 166-168 °C; 1 H RMN (DM SO^) 5 1,88 - 2,04 (m, 1H, CHH), 2,36 - 2,49 (m, 1H, CHH), 2,52 - 2,63 (m, 1H, CHH), 2,91 (ddd, J = 5,3, 13,5, 17,4 Hz, 1H, CHH), 3,03 (dd, J = 5,6, 8,2 Hz, 2H, CHH, CHH), 3,64 (s, 2H, CH2N), 3,71 (dd, J = 6,2, 8,3 Hz, 2H, CHH, CHH), 4,25 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 4,41 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,77 (quin, J = 5,7 Hz, 1H, OCH), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CH), 5,22 (s, 2H, CH2), 6,75 - 6,91 (m, 2H, Ar), 7,00 - 7,21 (m, 2H, Ar), 7,28 - 7,38 (m, 4H, Ar), 7,39 - 7,62 (m, 3H, Ar), 8,16 (s, 1H, HCOOH), 10,97 (s, 1H, NH). Se observan ~1,8 equiv. de HCOOH a 8,16 ppm. 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 522,33, 31,18, 45,07, 51,56, 60,41,62,29, 66,70, 69,36, 114,97, 115,20, 115,70, 115,80, 116,09, 127,66, 128,39, 129,78, 129,93, 133,30, 135,24, 137,98, 153,23 (d, J = 35,2 Hz, CF), 158,22, 163,15, 167,97, 170,95, 172,80; LCMS: MH = 530; Anal calc. para C30H28FN3O5 1,8 HCOOH 1,25 H2O: C, 60,16; H, 5,41; N, 6,62; Observado: C, 60,08; H, 5,05; N, 6,56.
5.105 3-{4-[4-(3,3-DIFLUORO-AZETIDIN-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000112_0001
En un vial de reaction de 20 ml cargado con 3-(4-((4-(bromometil)bencil)oxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (300 mg, 0,677 mmol) y clorhidrato de 3,3-difluoroazetidina (92 mg, 0,711 mmol), se anadio MeCN seco (10 ml) seguido de DIEA (0,355 ml, 2,0 mmol). La suspension resultante se calento a 50 °C. Despues de ~30 min, la temperatura se elevo adicionalmente a 70 °C y la mezcla de reaccion se volvio transparente. La agitation se continuo durante ~16 h a 70 °C. La mezcla de reaccion se enfrio a temperatura ambiente y despues se concentro al vatio. El residuo se diluyo en EtOAc (~100 ml) y despues se extrajo con NaHCO31 N (2 x 35 ml) y salmuera. El secado (Na 2 SO 4 ) y la concentration en un evaporador rotatorio dieron un solido vUreo. Se anadio Et 2 O (~20 ml) al vidrio en pequenas porciones y con sonicacion intermitente hasta que se formo un solido bien disperso. La suspension se agito vigorosamente y despues se filtro en un embudo sinterizado medio de 15 ml. La torta se lavo con mas cantidad de Et 2 O (~50 ml) y despues con agua (~50 ml). El solido restante se seco por suction y despues se seco adicionalmente en un horno de vatio a 60 °C durante varias horas para dar 3-{4-[4-(3,3-difluoro-azetidin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanquecino (187 mg, rendimiento del 61 %): HPLC: Waters Symmetry C 18 , 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 18/82 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 4,20 min (99,1 %); p.f.: 175-177 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 5 1,89 - 2,06 (m, 1H, CHH), 2,34 -2,49 (m, 1H, CHH), 2,52 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,81 - 3,04 (m, 1H, CHH), 3,59 (t, J = 12,5 Hz, 4H, CH2CF2, CH2CF2), 3,72 (s, 2H, CH2), 4,25 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 4,42 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,25 - 7,39 (m, 4H, Ar), 7,41 - 7,59 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 5 22,33, 31,16, 45,06, 51,56, 61,30, 63,55 (t, J = 22,0 Hz, CF2(CH2)2), 69,31, 117,29 (t, J = 275,1 Hz, CF2), 114,96, 115,22, 127,71, 128,36, 129,78, 129,93, 133,30, 135,49, 137,59, 153,45, 167,97, 170,95, 172,80; LCMS: MH = 456; Anal calc. para C24H23F2N3O4 0,65 H2O: C, 61,70; H, 5,24; N, 8,99; Observado: C, 61,70; H, 5,01; N, 8,77.
5.106 3-{4-[4-(3-METIL-3-FENOXI-AZETIDIN-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000112_0002
A la solution en CH2Cl2 de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,35 g, 0,790 mmol) se le anadio 3-metil-3-fenoxiazetidina (0,142 g, 0,869 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,336 ml, 1,974 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. A la mezcla de reaccion se le anadieron agua (10 ml) y CH 2 Cl 2 (10 ml) y despues se extrajo. La capa organica se concentro y se purifico sobre columna de gel de sflice para dar 3-{4-[4-(3-metil-3-fenoxi-azetidin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (250 mg, 60 %). Punto de fusion: 127-129 °C. LC-MS m/e = 526, HPLC Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometres, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 5/95 a 5/95 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 % en H 2 O durante 5 min y mantenimiento a 95/5 durante 5 min: 6,82 min (94 %); 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,58 (s, 3H, CH3), 1,87 - 2,14 (m, 1H, CHH), 2,36 - 2,44 (m, 0H, CHH), 2,54 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,82 -3,01 (m, 1H, CHH), 3,17 (d, J = 7,6 Hz, 2H, CH2), 3,49 (d, J = 7,9 Hz, 2H, CH2), 3,64 (s, 2H, CH2), 4,16 -4,50 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,22 (s, 2H, CH2), 6,71 (d, J = 7,7 Hz, 2H, Ar), 6,84 - 7,00 (m, 1H, Ar), 7,18 - 7,29 (m, 2H, Ar), 7,29 - 7,37 (m, 4H, Ar), 7,39 - 7,60 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO^) 5 21,57, 22,33, 31,16, 45,06, 51,55, 62,12, 65,47, 69,36, 73,05, 114,94, 115,20, 116,40, 120,69, 127,67, 128,41, 129,48, 129,78, 129,93, 133,28, 135,21, 138,05, 153,46, 154,73, 167,97, 170,95, 172,80; Anal calc. para C31H31N3O5 + 0,5 H2O: C: 69,65 %; H: 6,03 %; N:7,83 %; Observado: C: 69,52 %; H: 5,87 %; N: 7,80 %.
5.107 3-{4-[4-(3,3-DIFLUORO-PIRROLON-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000113_0001
A la mezcla agitada de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (350 mg, 0,8 mmol) y clorhidrato de 3,3-difluoropirrolidina (136 mg, 0,8 mmol) en DCM (10 ml) se le anadio DIPEA (0,28 ml, 1,6 mmol). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 22 h y la mezcla de reaction se diluyo por DCM (30 ml). La mezcla se lavo con agua (20 ml) y salmuera (20 ml). La capa organica se seco por MgSO 4 y se concentro. El residuo se purifico por ISCO para dar 3-{4-[4-(3,3-Difluoro-pirrolidin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (256 mg, rendimiento del 69 %. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 |jm, 1 ml/min, 240 nm, 20/80, (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 3,59 min (98,6 %); p.f.: 126-128 °C;
1 H RMN (DMSO-de) 5 1,91 - 2,04 (m, 1H, CHH), 2,15 - 2,34 (m, 2H, CH2), 2,35 - 2,44 (m, 1H, CHH), 2,60 (s a, 1H, CHH), 2,69 (t, J = 7,0 Hz, 2H, CH2), 2,76 - 3,01 (m, 3H, CHH, CH2), 3,62 (s, 2H, CH2), 4,20 - 4,32 (m, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,42 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CHH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,22 - 7,37 (m, 4H, Ar), 7,39 - 7,63 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 522,33, 31,16, 34,92, 35,55(t, Jc-f = 22,50 Hz), 51,30, 51,56, 58,24, 60,99(t, Jc-f = 27,57 Hz), 69,35, 114,97, 115,22, 127,69, 128,62, 129,78, 129,93, 130,38, 133,30, 135,44, 137,63, 153,46, 167,97, 170,95, 172,80; LCMS MH = 470; Anal. Calc. para C 25 H 25 F 2 N 3 O 4 +0,2H 2 O : C, 63,47; H, 5,41; N, 8,88; Observado: C, 63,41; H, 5,46; N, 8,78.
5.108 3-{4-[4-(7-FLUORO-3,4-DIHIDRO-1H-ISOQUINOLIN-2-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000113_0002
A la solution en CH3CN (10 ml) de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,36 g, 0,812 mmol) se le anadieron clorhidrato de 7-fluoro-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolina (0,198 g, 1,056 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,403 ml, 2,436 mmol). La solucion resultante se agito a temperatura ambiente durante una noche. El disolvente se evaporo, y se anadio cloruro de metileno (100 ml). La mezcla se lavo con agua (2 x 50 ml) y salmuera (50 ml), se seco y se concentro para dar un solido espumoso, que se purifico por columna de gel de sflice (MeOH/cH2Cl2) para dar 3-{4-[4-(7-Fluoro-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,205 g, rendimiento del 49 %); p.f., 132-134 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 jm , 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 90/10 en 5 min, isocratica a 90/10 durante 5 min (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 4,75 min (95,6 %). 1H RMN (DMSO^) 51,90 - 2,08 (m, 1H, CHH), 2,36 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,63 (m, 1H, CHH), 2,63 - 2,72 (m, 2H, CH2), 2,73 - 2,82 (m, 2H, CH2), 2,83 - 3,00 (m, 1H, CHH), 3,54 (s, 2H, CH2), 3,65 (s, 2H, CH2), 4,21 -4,49 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,24 (s, 2H, CH2), 6,84 - 7,00 (m, 2H, Ar), 7,09 - 7,17 (m, 1H, Ar), 7,29 - 7,42 (m, 4H, Ar), 7,43 - 7,54 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH). 13C RMN (DMSO-d6) 522,36, 27,90, 31,20, 45,10, 50,02, 51,59, 55,13, 61,21, 69,44, 112,49, 112,78, 113,07, 115,00, 115,24, 127,74, 128,80, 129,82, 129,93 (d, Jc-f=18), 130,19, 133,32, 135,33, 136,95 (d, Jc-f=8), 138,13, 153,51, 160,20 (d, Jc-f=240), 168,01, 170,96, 172,82,). LC/MS m/e = 514, Anal calc. para C30H28N3O4F (+0,2 H2O): C, 69,67; H, 5,54; N, 8,12, Observado: C, 69,34; H, 5,57; N, 7,96.
5.109 3-{4-[4-(4,7-DIHIDRO-5H-TIENO[2,3-C]PIRIDIN-6-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000113_0003
A la solution en CH 3 CN (10 ml) de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,359 g, 0,810 mmol) se le anadieron clorhidrato de 4,5,6,7-tetrahidrotieno[2,3-c]piridina (0,171 g, 0,972 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,402 ml, 2,430 mmol). Se convirtio en una solucion transparente despues de anadir DiPeA .. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. El disolvente se evaporo y al residuo se le anadio cloruro de metileno (80 ml). La mezcla se lavo con agua (2 x 60 ml) y salmuera (50 ml), se seco y se concentro para dar un solido de color blanquecino, que se purifico por columna de gel de sflice (MeOH/CH 2 Cl 2 ) para dar 3-{4-[4-(4,7-Dihidro-5H-tieno[2,3-c]piridin-6-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,304 g, rendimiento del 74 %). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 pm, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 90/10 en 5 min, isocratica a 90/10 durante 5 min (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 4,61 min (98,1 %). 1 H RMN (DMSO-de) 51,89 - 2,08 (m, 1H, CHH), 2,35 -2,48 (m, 1H, CHH), 2,53 -2,68 (m, 3H, CHH, CH2), 2,68 - 2,77 (m, 2H, CH2), 2,82 - 3,00 (m, 1H, CHH), 3,59 (s, 2H, CH2), 3,68 (s, 2H, CH2), 4,20 - 4,48 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,2, 13,3 Hz, 1H, NCH), 5,24 (s, 2H, CH2), 6,82 (d, J = 5,1 Hz, 1H, Ar), 7,28 (d, J = 5,1 Hz, 1H, Ar), 7,31 - 7,42 (m, 4H, Ar), 7,43 - 7,56 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-de) 522,36, 25,12, 31,20, 45,10, 49,59, 51,36, 51,59, 60,50, 69,45, 115,00, 115,24, 122,61, 126,99, 127,72, 128,83, 129,81, 129,95, 132,46, 133,32, 133,47, 135,35, 138,29, 153,53, 168,01, 170,96, 172,82, LC/MS m/e = 502, Anal calc. para C28H27N3O4S (+0,5 H2O): C, 65,86; H, 5,53; N, 8,23, Observado: C, 65,64; H, 5,44; N, 8,04.
5.110 3-{4-[4-(6,7-DIHIDRO-4H-TIENO[3,2-C]PIRIDIN-5-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000114_0001
A la suspension en CH3CN (10 ml) de 4,5,6,7-tetrahidrotieno[3,2-c]piridina (0,145 g, 1,038 mmol) se le anadieron 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,354 g, 0,799 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,264 ml, 1,597 mmol). Se convirtio en una solucion transparente despues de anadir DIPEA. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante dos horas. El disolvente se evaporo, y se anadio cloruro de metileno (80 ml). La mezcla se lavo con agua (2 x 50 ml) y salmuera (50 ml), se seco y se concentro para dar un aceite, que se purifico por columna de gel de sflice (MeOH/CH2Ch) para dar 3-{4-[4-(6,7-Dihidro-4H-tieno[3,2-c]piridin-5-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,312 g, rendimiento del 78 %); p.f., 143-145 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 pm, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 90/10 en 5 min, isocratica a 90/10 durante 5 min (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 4,51 min (97,0 %).
1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,89 - 2,06 (m, 1H, CHH), 2,35 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,68 - 2,83 (m, 4H, CH2, CH2), 2,84 - 3,00 (m, 1H, CHH), 3,42 - 3,49 (m, 2H, CH2), 3,68 (s, 2H, CH2), 4,20 - 4,48 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,24 (s, 2H, CH2), 6,76 (d, J = 5,1 Hz, 1H, Ar), 7,25 (d, J = 5,1 Hz, 1H, Ar), 7,30 -7,41 (m, 4H, Ar), 7,43 - 7,53 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO^) 522,36, 24,99, 31,20, 45,10, 50,18, 51,59, 52,42, 60,91,69,45, 115,00, 115,24, 122,91, 125,42, 127,72, 128,82, 129,82, 129,95, 132,77, 133,32, 133,96, 135,30, 138,38, 153,53, 168,01, 170,96, 172,83, LC/MS m/e = 502, Anal calc. para C28H27N3O4S (+0,4 H2O): C, 66,10; H, 5,51; N, 8,26, Observado: C, 65,92; H, 5,45; N, 8,00.
5.111 3-{1-OXO-4-[4-(3,3,4,4-TETRAFLUORO-PIRROLON-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000114_0002
A la solucion en CH 2 Cl 2 de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,35 g, 0,790 mmol) se le anadieron clorhidrato de 3,3,4,4-tetrafluoropirrolidina (0,142 g, 0,79 mmol), y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (336 pl, 1,974 mmol). La mezcla se calento a 70 °C durante 3 dias. La mezcla de reaction se concentro y el solido resultante se recogio en CH2O 2 (20 ml) y se extrajo con agua (20 ml). La capa organica se concentro y se purifico sobre columna de gel de sflice eluida con CH2Cl2 y MeOH para dar 3-{1-Oxo-4-[4-(3,3,4,4-tetrafluoropirrolidin-1-ilmetil)-benciloxi]-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (120 mg, 30 %). Punto de fusion: 164-166 °C. LC-MS m/e = 506. HPLC Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometros,1 ml/min, 240 nm, gradiente de 5/95 a 5/95 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 % en H 2 O durante 5 min y mantenimiento a 95/5 durante 5 min: 6,67 min (96 %). 1 H RMN (DMSO^) 51,86 - 2,09 (m, 1H, CHH), 2,34 - 2,44 (m, 1H, CHH), 2,55 - 2,67 (m, 1H, CHH), 2,81 - 3,03 (m, 1H, CHH), 3,15 (t, J = 13,4 Hz, 4H, CH2, CH2), 3,72 (s, 2H, CH2), 4,19 -4,48 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,24 (s, 2H, CH2), 7,26 - 7,39 (m, 4H, Ar), 7,43 -7,58 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 522,33, 31,16, 45,06, 51,56, 57,01, 57,47, 57,82, 58,15, 69,29, 114,97, 115,25, 119,39, 122,84, 127,80, 128,75, 129,80, 129,95, 133,30, 135,88, 136,13, 153,45, 167,97, 170,95, 172,80; Anal calc. para C25H23F4N3O4 0,4 H2O: C; 58,57 %; H: 4,67 %; N: 8,20 %; Observado: C; 58,46 %; H: 4,35 %; N: 8,08 %.
5.112 3-(4-{4-[2-(4-FUJORO-FENIL)-2-METIL-MORFOUN-4-ILMETIL]-BENCILOXI}-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000115_0001
A la solution en CH2CI2 de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,35 g, 0,790 mmol) se le anadieron 2-(4-fluorofenil)-2-metilmorfolina (0,170 g, 0,869 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,336 ml, 1,974 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. A la mezcla se le anadio agua y despues se extrajo con CH 2 Cl 2 . La capa organica se concentro y se purifico sobre columna de gel de sflice eluida con CH 2 Cl 2 y MeOH para dar 3-(4-{4-[2-(4-fluoro-fenil)-2-metil-morfolin-4-ilmetil]-benciloxi}-1-oxo-1,3-dihidroisoindol-2-il)-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,27 g, 61 %). Punto de fusion: 118-120 °C. LC-MS m/e = 558, HPLC Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometros, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 5/95 a 5/95 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 % en H 2 O durante 5 min y mantenimiento a 95/5 durante 5 min: 6,90 min (94 %); 1 H RMN (DMSO-de) 5 1,32 (s, 3H, CH3), 1,87 - 2,09 (m, 1H, CHH), 2,22 - 2,46 (m, 4H, CHH, CH2,CHH), 2,57 (d, J = 18,5 Hz, 1H, CHH), 2,93 (s a, 2H, CHH, CHH), 3,35 - 3,55 (m, J = 1,9 Hz, 3H, CH2, CHH), 3,57 - 3,76 (m, 1H, CHH), 4,16 - 4,54 (m, 2H, CH2), 5,00 - 5,19 (m, 1H, NCH), 5,24 (s, 2H, CH2), 7,12 (td, J = 1,5, 8,9 Hz, 2H, Ar), 7,27 - 7,41 (m, 6H, Ar), 7,41 - 7,56 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 522,33, 27,95, 31,16, 45,06, 51,56, 52,70, 60,63, 61,07, 61,77, 69,39, 74,52, 114,40, 114,68, 115,00, 115,22, 127,57, 127,76, 127,86, 128,98, 129,77, 129,95, 133,30, 135,37, 137,59, 141,20, 153,46, 159,21, 162,42, 167,97, 170,93, 172,80, Anal calc. para C32H32FN3O5: C: 68,93 %; H: 5,78 %; N:7,54 %; Observado: C: 67,20 %; H: 5,26 %; N: 7,17 %.
5.113 3-{4-[4-(6-FLUORO-3,4-DIHIDRO-1H-ISOQUINOLIN-2-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000115_0002
Al CH 2 Cl 2 de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,35 g, 0,790 mmol) se le anadieron clorhidrato de 6-fluoro-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolina (0,163 g, 0,869 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,336 ml, 1,974 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. A la mezcla se le anadieron agua y CH 2 Cl 2 y se extrajo. La capa organica se concentro para dar un solido. El solido se agito con eter y la suspension se filtro para dar 3-{4-[4-(6-Fluoro-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidroisoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,28 g, 69 %). Punto de fusion: 123-125 °C. LC-MS m/e = 514. HPLC Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometres, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 5/95 a 5/95 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 % en H2O durante 5 min y mantenimiento a 95/5 durante 5 min: 6,6 min (94 %). 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,88 - 2,06 (m, 1H, CHH), 2,34 -2,48 (m, J = 13,4 Hz, 1H, CHH), 2,57 (d, J = 18,3 Hz, 1H, CHH), 2,62 - 2,71 (m, 2H, CH2), 2,76 - 3,00 (m, 3H, CH2, CHH), 3,51 (s, 2H, CH2), 3,65 (s, 2H, CH2), 4,11 - 4,49 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,24 (s, 2H, CH2), 6,93 (d, J = 9,3 Hz, 2H, Ar), 6,99 - 7,12 (m, 1H, Ar), 7,28 - 7,43 (m, 4H, Ar), 7,43 - 7,56 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 522,33, 28,70, 31,16, 45,07, 49,65, 51,55, 54,75, 61,33, 69,42, 112,29, 112,57, 114,36, 114,64, 114,97, 115,22, 127,70, 128,02, 128,14, 128,78, 129,78, 129,93, 130,78, 133,30, 135,30, 136,51, 136,61, 138,17, 153,49, 158,83, 162,04, 167,97, 170,95, 172,80; Anal calc. para C30H28FN3O4 0,5 H2O: C: 68,95 %; H: 5,59 %; N: 8,04 %. Observado: C: 68,68 %; H: 5,31 %; N: 7,89 %.
5.114 3-{1-OXO-4-[4-(3-FENIL-5,6-DIHIDRO-8H-IMIDAZO[1,2-A]PIRAZIN-7-ILMETIL)-BENCILOXI]-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000116_0001
La mezcla de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (350 mg, 0,8 mmol) y 3-fenil-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2-a]pirazina (157 mg, 0,8 mmol) en dCM (10 ml) se le anadio DIPEA (0,28 ml, 1,6 mmol). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 23 h y despues se anadieron 3-fenil-5,6,7,8-tetrahidro imidazo[1,2-a]pirazina (94 mg, 0,45 mmol) y DIPEA (0,1 ml, 0,6 mmol). La mezcla se concentro y se agito en acetonitrilo (7 ml), DCM (2 ml) y DIPEA (0,2 ml) a 60 °C durante 16 h. La mezcla de reaction se diluyo por DCM (30 ml) y se lavo con agua (20 ml) y salmuera (20 ml). La capa organica se seco por MgSO 4 y se concentro. El residuo se purifico por ISCO para dar 3-{1-Oxo-4-[4-(3-fenil-5,6-dihidro-8H-imidazo[1,2-a]pirazin-7-ilmetil)-benciloxi]-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color amarillo claro (82 mg, rendimiento del 18 %). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 27/73, (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 4,89 min (98,3 %); p.f.: 131-133 °C (en laboratorio); 1 H RMN (DMSO-de) 51,92 -2,05 (m, 1H, CHH), 2,36 -2,47 (m, 1H, CHH), 2,54 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,84 (t, J = 5,4 Hz, 2H, CH2), 2,88 - 2,99 (m, 1H, CHH), 3,64 (s, 2H, CH2), 3,74 (s, 2H, CH2), 4,03 (t, J = 5,2 Hz, 2H, CH2), 4,26 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,43 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 4,9, 13,2 Hz, 1H, CHH), 5,26 (s, 2H, CH2), 7,02 (s, 1H, Ar), 7,29 - 7,38 (m, 3H, Ar), 7,39 - 7,46 (m, 4H, Ar), 7,46 - 7,54 (m, 5H, Ar), 10,98 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 521,43, 30,26, 42,58, 44,17, 48,31, 50,64, 59,57, 68,52, 114,13, 114,33, 125,24, 126,26, 126,33, 126,87, 127,83, 128,04, 128,83, 128,90, 129,06, 130,23, 132,40, 134,69, 136,60, 142,49, 152,59, 167,08, 170,04, 171,90; LCMS MH = 562; Anal. Calc. para C 33 H 31 NeO 4 +0,8H 2 O 0,31 CH2O 2 : C, 66,42; H, 5,56; N, 11,63; Observado: C, 66,10; H, 5,25; N, 11,49.
5.115 3-{1-OXO-4-[4-(4-TRIFLUOROMETIL-IMIDAZOL-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000116_0002
A la solution en CH3CN de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,35 g, 0,790 mmol) se le anadieron 4-(trifluorometil)-1H-imidazol (0,118 g, 0,869 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,336 ml, 1,974 mmol). La mezcla se calento a 70 °C durante 2 dias. Despues, la mezcla de reaccion se le anadio CH 2 Cl 2 y agua y se extrajo. La capa organica se concentro y el aceite resultante se purifico sobre columna de gel de sflice eluida con CH2Cl2 y MeOH para dar 3-{1-Oxo-4-[4-(4-trifluorometil-imidazol-1-ilmetil)-benciloxi]-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (80 mg, 20 %). Punto de fusion: 148-150 °C. LC-MS m/e = 499. HPLC Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometres, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 5/95 a 5/95 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 % en H2O durante 5 min y mantenimiento a 95/5 durante 5 min: 8,89 min (96 %). 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,90 - 2,05 (m, 1H, CHH), 2,33 - 2,48 (m, J = 4,3, 13,0 Hz, 1H, CHH), 2,57 (d, J = 17,9 Hz, 1H, CHH), 2,80 - 2,99 (m, 1H, CHH), 4,18 - 4,47 (m, 2H, CH2), 5,10 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,23 (s, 2H, CH2), 5,27 (s, 2H, CH2), 7,25 - 7,41 (m, 4H, Ar), 7,43 - 7,57 (m, 3H, Ar), 7,91 (d, J = 1,1 Hz, 1H, Ar), 8,00 (s, 1H, Ar), 10,96 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO^) 5 22,31, 31,16, 45,04, 49,62, 51,55, 69,10, 114,91, 115,26, 120,53, 127,83, 128,14, 129,78, 129,95, 133,30, 136,49, 136,64, 139,07, 153,36, 167,96, 170,93, 172,80, Anal calc. para C25H21F3N4O4 0,5 H2O: C; 59,17 %; H, 4,37 %; N, 11,04 %. Observado: C; 59,21 %; H, 4,11 %; N, 10,90 %.
5.116 3-(4-{3-[4-(4-FLUORO-FENIL)-PIPERIDIN-1-ILMETIL]-BENCILOXI}-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000117_0001
A la solucion en CH3CN (10 ml) de 3-(4-(3-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,31 g, 0,699 mmol) se le anadieron clorhidrato de 4-(4-fluorofenil)piperidina (0,181 g, 0,839 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,347 ml, 2,098 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla turbia se agito a temperatura ambiente durante una hora. El disolvente se evaporo y el residuo resultante se purifico por columna de gel de sflice (MeOH/CH 2 Cl 2 ) para dar 3-(4-{3-[4-(4-Fluorofenil)-piperidin-1-ilmetil]-benciloxi}-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,176 g, rendimiento del 47 %); p.f., 139-141 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 90/10 en 5 min, isocratica a 90/10 durante 5 min (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 4,95 min (95,5 %). 1 H RMN (DMSO-de) 5 1,49 - 1,77 (m, 4H, CH2, CH2), 1,89 - 2,09 (m, 3H, CH2, CHH), 2,35 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,62 (m, 1H, CHH), 2,81 - 2,99 (m, 3H, CH2, CHH), 3,51 (s, 2H, CH2), 4,20 - 4,49 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,27 (s, 2H, CH2), 7,04 -7,15 (m, 2H, Ar), 7,21 - 7,53 (m, 9H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-de) 515,14, 22,36, 31,18, 33,13, 41,01, 45,12, 51,59, 53,50, 62,18, 69,63, 114,75, 115,01, 115,20, 115,26, 126,22, 128,00, 128,34, 128,44, 129,76, 129,98, 133,31, 136,47, 138,79, 142,35, 153,44, 160,58 (d, Jc-f=242 Hz), 167,99, 170,95, 172,79, LC/MS m/e = 542, Anal calc. para C32H32N3O4F (+0,2 H2O):C, 70,49; H, 5,99; N, 7,71, Observado: C, 70,24; H, 6,14; N, 7,58.
5.117 2-(2,6-DIOXO-PIPERIDIN-3-IL)-4-[4-(2-TRIFLUOROMETIL-5,6,8,8A-TETRAHIDRO-1H-[1,2,4]TRIAZOLO[1,5-A]PIRAZIN-7-ILMETIL)-BENCILOXI]-ISOINDOL-1,3-DIONA
Figure imgf000117_0002
Etapa 1: Preparacion de 3-((4-(hidroximetil)bencil)oxi)ftalato de dimetilo
Se disolvieron 3-hidroxiftalato de dimetilo (10 g, 47,6 mmol) y (4-(clorometil)fenil)metanol (7,82 g, 50,0 mmol) en DMF seca (60 ml). A la solucion se le anadio K 2 CO 3 (6,90 g, 50,0 mmol) y la mezcla se agito a 80 °C durante 16 h. La DMF se retiro al vado y el residuo se repartio entre EtOAc (300 ml) y agua (100 ml). La capa organica se lavo con mas cantidad de agua (100 ml) y salmuera, se seco (Na 2 SO 4 ), y se concentro al vado para dar 3-((4-(hidroximetil)bencil)oxi)-ftalato de dimetilo en forma de un aceite de color ambar viscoso (19 g): LCMS: MH = 331; El producto en bruto se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional
Etapa 2: Preparacion de acido 3-((4-(Hidroximetil)bencil)oxi)ftalico
Se disolvio 3-(4-(hidroximetil)benciloxi)ftalato de dimetilo (19 g de peso real, 15,72 g, 47,6 mmol, suponiendo un rendimiento cuantitativo de la etapa anterior) en THF (30 ml). A la solucion se le anadio agua (30 ml). Se anadio NaOH acuoso (10 N, 25 ml, 250 mmol) y la mezcla se agito vigorosamente a 70 °C durante 2,5 h. La mezcla se dejo enfriar a ta, se concentro al vado para dar un jarabe, y despues se transfirio a un matraz que contema HCl 6 N (45 ml) sobre hielo. Inmediatamente, precipito un solido y la suspension se diluyo con agua (~60 ml). La mezcla se filtro en un embudo sinterizado medio con succion. La torta se lavo con mas cantidad de agua (~60 ml), se seco por succion, y despues se puso en un horno de vado a 60 °C durante 4 h para dar acido 3-((4-(hidroximetil)bencil)oxi)ftalico en forma de un solido de color amarillo palido (13,9 g, rendimiento del 97 % de 3-hidroxiftalato de dimetilo): 1 H RMN (DMSO-ds) 54,41 - 4,58 (m, 2H, CH2), 5,17 (s, 3H, CH2, OH), 7,20 - 7,64 (m, 7H, Ar), 13,02 (s a, 2H, 2 x COOH); 13 C RMN (DMSO-ds) 562,63, 69,73, 117,03, 121,56, 126,46, 126,88, 127,13, 128,91, 129,57, 134,87, 142,19, 154,50, 166,45, 167,71; LCMS: MH = 303, 94 % de area a 240 nm. El solido se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 3: Preparacion de 2-(2,6-Dioxopiperidin-3-il)-4-((4-(hidroximetil)bencil) oxi)isoindolin-1,3-diona
Se anadio clorhidrato de 3-aminopiperidin-2,6-diona (0,915 g, 5,56 mmol) a una solucion de acido 3-(4-(hidroximetil)benciloxi)ftalico (1,4 g, 4,63 mmol) en piridina seca (15 ml) y la mezcla se calento a 118 °C en un bano de aceite durante 16 h. La mezcla de reaccion de color oscuro se dejo enfriar a temperatura ambiente y se acidifico con la adicion lenta de HCl 1 N (~25 ml). La mezcla se diluyo adicionalmente con agua (~170 ml) y despues se sonico durante ~30 minutos para facilitar la descomposicion de los agregados solidos. La suspension de color oscuro resultante se filtro en un embudo sinterizado de poro medio y el solido de color oscuro se lavo con mas cantidad de agua (70 ml). La torta se seco por succion y despues se puso en un horno de vado a 60 °C durante 2,5 h para dar 1,6 g de un solido de color azul oscuro. El solido se disolvio en una mezcla de DCM, MeCN, y MeOH (~100 ml cada uno) y se trato con carbon decolorante. La mezcla se arremolino y despues se filtro por gravedad usando papel de filtro. El filtrado/lavado (de color ambar oscuro) se trato de nuevo con carbon decolorante y despues se filtro sobre un lecho de celite. El filtrado transparente se concentro al vado a sequedad para dar un solido que se trituro con agua y se filtro con succion. La torta se lavo con mas cantidad de agua (~100 ml), se seco por succion, y despues se puso en un horno de vado a 60 °C durante 4 h para dar 2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-4-((4-(hidroximetil)bencil)oxi)isoindolin-1,3-diona en forma de un solido de color blanquecino (1,2 g, rendimiento del 68 %): HPLC: Waters Symmetry C-ie, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 15/85 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 5,08 min (99,9 %); p.f.: 250-252; 1 H RMN (DMSO-de) 51,95 - 2,07 (m, 1H, CHH), 2,41 - 2,67 (m, 2H, CHH, CHH), 2,78 - 3,00 (m, 1H, CHH), 4,50 (d, J = 5,1 Hz, 2H, CH2OH), 5,09 (dd, J = 5,4, 12,7 Hz, 1H, CH), 5,19 (t, J = 5,6 Hz, 1H, OH), 5,36 (s, 2H, CH2O), 7,24 - 7,40 (m, 2H, Ar), 7,41 - 7,53 (m, 3H, Ar), 7,59 (d, J = 8,5 Hz, 1H, Ar), 7,82 (dd, J = 7,4, 8,5 Hz, 1H, Ar), 11,11 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 521,88, 30,83, 48,67, 62,53, 69,91, 115,40, 116,52, 120,18, 126,44, 127,09, 133,17, 134,31, 136,86, 142,32, 155,42, 165,21, 166,68, 169,81, 172,66, LCMS: M+Na = 417; MH no se observa en el modo de ionizacion positiva; Anal calc. para C21H18N2O6: C, 63,96; H, 4,60; N, 7,10; Observado: C, 63,77; H, 4,52; N, 7,32.
Etapa 4 Preparacion de 4-((4-(Bromometil)bencil)oxi)-2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)isoindolin-1,3-diona
Una suspension de 2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-4-(4-(hidroximetil)benciloxi)isoindolin-1,3-diona (1,05 g, 2,66 mmol) en una mezcla de DCM y MeCN (25 ml, 10 ml) se agito en un bano de hielo. A la mezcla se le anadio en una porcion PBr 3 (0,502 ml, 5,32 mmol). Despues de 5 min, el bano de hielo se retiro y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante ~20 h. A la mezcla de reaccion se le anadieron NaBr (0,822 g, 7,99 mmol) y bromuro de tetrabutilamonio (0,077 g, 0,240 mmol) y la agitacion se continuo durante 14 h a temperatura ambiente. La reaccion se concentro al vado para dar un solido de color blanquecino y el solido se suspendio de nuevo en agua con agitacion vigorosa y despues se filtro (embudo sinterizado medio). La torta se lavo con abundante agua (~250 ml, volumen total del filtrado y los lavados) y despues se seco en un horno de vado a 50 °C para dar 4-((4-(bromometil)bencil)-oxi)-2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)isoindolin-1,3-diona en forma de un solido de color blanco (1,21 g, rendimiento del 99 %): HpLC: Waters Symmetry C1s, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 50/50 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 4,85 min (99,5 %); 1 H RMN (DMSO^) 5 1,94 - 2,15 (m, 1H, CHH), 2,42 - 2,70 (m, 2H, CHH, CHH), 2,79 - 2,99 (m, 1H, CHH), 4,72 (s, 2H, CH2), 5,10 (dd, J = 5,4, 12,9 Hz, 1H, CH), 5,38 (s, 2H, CH2), 7,38 - 7,54 (m, 5H, Ar), 7,59 (d, J = 8,5 Hz, 1H, Ar), 7,83 (dd, J = 7,3, 8,4 Hz, 1H, Ar), 11,11 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 521,95, 30,91, 34,12, 48,75, 69,64, 115,57, 116,62, 120,18, 127,48, 129,42, 133,26, 136,33, 136,99, 137,72, 155,37, 165,27, 166,73, 169,87, 172,72; LCMS: M+Na = 479, 481; MH no se observa.
Etapa 5: Preparacion de 2-(2,6-dioxo-piperidin-3-il)-4-[4-(2-trifluorometil-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirazin-7-ilmetil)-benciloxi]-isoindolo-1,3-diona
A la solucion en CH 2 Cl 2 de 4-(4-(bromometil)benciloxi)-2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)isoindolin-1,3-diona (0,13 g, 0,284 mmol) se le anadieron 2-(trifluorometil)-5,6,7,8-tetrahidro-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirazina (0,060 g, 0,313 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,152 ml, 0,853 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. A la mezcla de reaccion se le anadieron agua (10 ml) y CH 2 Cl 2 (10 ml) y se extrajo. La capa organica se concentro y el aceite resultante se purifico sobre columna de gel de sflice eluida con MeOH y CH 2 Cl 2 para dar 2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-4-[4-(2-trifluorometil-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirazin-7-ilmetil)-benciloxi]-isoindolo-1,3-diona en forma de un solido de color blanco (120 mg, 74 %). Punto de fusion: 128-130 °C. LC-Ms m/e = 569, HPLC Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometros,1 ml/min, 240 nm, isocratico 50/50 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 % en H2O :tR = 3,64 min (99 %); 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,94 -2,12 (m, 1H, CHH), 2,41 -2,47 (m, 1H, CHH), 2,54 -2,67 (m, 1H, CHH), 2,77 - 2,95 (m, 1H, CHH), 3,01 (t, J = 5,4 Hz, 2H, CH2), 3,81 (d, J = 7,6 Hz, 4H, CH2,CH2), 4,24 (t, J = 5,1 Hz, 2H, CH2), 5,09 (dd, J = 5,4, 12,7 Hz, 1H, NCH), 5,37 (s, 2H, CH2), 7,37 - 7,55 (m, 5H, Ar), 7,61 (d, J = 8,5 Hz, 1H, Ar), 7,76 - 7,88 (m, 1H, Ar), 11,11 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DM SO^) 521,95, 30,90, 46,54, 47,67, 48,73, 49,21, 59,42, 69,89, 115,53, 116,59, 120,21, 127,42, 128,95, 133,26, 135,25, 136,99, 137,06, 152,84, 155,50, 165,29, 166,75, 169,87, 172,71, Anal calc. para C27H23F3N6O5 0,5 H2O 0,2 Et2O: C: 56,37 %; H: 4,42 %; N: 14,19 %; Observado C: 56,27 %; H: 4,20 %; N: 14,05 %.
5.118 CLORHIDRATO DE 3-(4-((4-(((3R,5S)-3,5-DIMETILMORFOLINO)METIL)BENCIL)OXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000118_0001
Etapa 1: A una suspension de 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (250 mg, 0,526 mmol) en acetonitrilo (5 ml) se le anadio (3R,5S)-3,5-dimetilmorfolina (79 mg, 0,684 mmol) en forma de un solido. La mezcla se agito con sonicacion intermitente para dar una solucion transparente y despues se anadio DIEA (0,197 ml, 1,128 mmol). La solucion transparente resultante se agito a temperatura ambiente. Despues de aproximadamente 24 h, se anadio mas cantidad de (3R,5S)-3,5-dimetilmorfolina (79 mg, 0,526 mmol) y la mezcla se dejo en agitacion durante 24 h mas a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se concentro al vado para dar 5-amino-4-(4-((4-(((3R,5S)-3,5-dimetilmorfolino)metil)bencil)oxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de (S)-metilo en forma de un residuo oleoso (268 mg). El producto en bruto se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional, LCMS: MH = 510.
Etapa 2: El aceite obtenido en la etapa 1, metil 5-amino-4-(4-(4-(((3R,5S)-3,5-dimetilmorfolino)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxipentanoato de metilo (268 mg, 0,526 mmol, suponiendo un rendimiento cuantitativo de la etapa anterior) se disolvio en DMF (5 ml). A la solucion se le anadio carbonato potasico anhidro (189 mg, 1,367 mmol) y la mezcla se agito a 85 °C durante aproximadamente 6 h. El calentamiento se interrumpio durante el fin de semana (muestra almacenada a 4 °C) y despues se reanudo de nuevo durante 24 h mas. La mezcla de reaccion enfriada se diluyo con EtOAc (~100 ml) y despues se lavo con NaHCO 3 ac. 1 N (30 ml) y salmuera. La capa organica se seco sobre Na 2 SO 4 y despues se concentro al vado para dar un aceite de color castano. El aceite se disolvio en DMF (8 ml) y se purifico usando HPLC preparativa de fase inversa. El producto se eluyo con un gradiente de acetonitrilo/agua (acido formico al 0,1 % en ambas fases moviles, MeCN del 5 al 50 % durante 20 minutos) y las fracciones se recogieron por activacion de masas. Las fracciones deseadas se combinaron, se trataron con HCl 1 N (3 ml), y despues se concentraron al vado para dar un solido vrtreo. El solido se trato con HCl 2 N en Et 2 O (1 ml) y se concentro al vado. El solido resultante se puso en un horno de vado a 60 °C durante varias horas para dar clorhidrato de 3-(4-((4-(((3R,5S)-3,5-dimetilmorfolino)metil)bencil) oxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (130 mg, rendimiento del 48 %): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, grad. del 5 % al 95 % en 10 min, CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 5,90 min (96,2 %); p.f.: 235-237 °C;
1 H RMN (DMSO-de con D2O) 50,89 (d, J = 6,2 Hz, 6H, CH3, CH3), 1,96 - 2,15 (m, 1H, CHH), 2,41 - 2,53 (m, 3H, CHH, CH, CH), 2,58 - 2,70 (m, 1H, CHH), 2,80 - 2,98 (m, 1H, CHH), 3,00 - 3,19 (m, 2H, CHH morf., CHH), 3,65 (dd, J = 2,9, 11,2 Hz, 2H, CHH morf., CHH), 3,78 (s a, 2H, CH2), 4,31 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,45 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,09 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,29 - 7,58 (m, 7H, Ar); 13 C RMN (DMSO-de) 517,73, 24,16, 32,97, 47,23, 50,90, 53,61, 55,17, 56,71, 71,34, 74,46, 117,03, 117,20, 129,39, 129,90, 131,81, 131,90, 134,99, 136,37, 142,45, 155,36, 170,27, 172,80, 174,91; LCMS: MH = 478; Anal calc. para C27H31N3O5 0,95 HCl: C, 63,31; H, 6,29; N, 8,20; Observado: C, 63,51; H, 6,20; N, 7,91.
5.119 3-(1-OXO-4-((3-((2-(TRIFLUOROMETIL)-5,6-DIHIDRO-[1,2,4]TRIAZOLO[1,5-A]PIRAZIN-7(8H)-IL)METIL)BENCIL)OXI)ISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000119_0001
A la solucion agitada de 3-(4-(3-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (500 mg, 1,13 mmol) en DCM (10 ml) se le anadieron 2-(trifluorometil)-5,6,7,8-tetrahidro-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirazina (238 mg, 1,24 mmol) y DIPEA (0,59 ml, 3,38 mmol). La solucion resultante se agito a 40 °C durante 27 h. A la mezcla de reaccion se le anadieron DCM (30 ml) y salmuera (20 ml). La mezcla se extrajo y la capa organica se seco por MgSO 4 y se concentro. El residuo se purifico para dar un solido tipo vrtreo. El solido se agito en EtOAc (5 ml) y se agito en eter dietflico (40 ml) para dar 3-(1-oxo-4-((3-((2-(trifluorometil)-5,6-dihidro-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirazin-7(8H)-il)metil) bencil)oxi)isoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (391 mg, rendimiento del 62 %); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 50/50, (CH3CN/H 3 PO 4 al 0,1 %), 3,25 min (95,7 %); p.f.: 213-215 °C; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,92 - 2,06 (m, 1H, CHH), 2,34 -2,47 (m, 1H, CHH), 2,53 -2,64 (m, 1H, CHH), 2,82 - 3,07 (m, 3H, CHH, CH2), 3,81 (s, 4H, CH2, CH2), 4,17 - 4,49 (m, 4H, CHH, CHH, CH2), 5,05 - 5,16 (m, 1H, CHH), 5,27 (s, 2H, CH2), 7,28 - 7,54 (m, 7H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 522,33, 31,16, 45,09, 46,52, 47,73, 49,14, 51,58, 59,55, 69,55, 115,13, 115,28, 126,72, 128,06, 128,44, 128,59, 129,77, 129,96, 133,30, 136,81, 137,47, 152,82, 153,45, 167,96, 170,95, 172,78; LCMS MH = 555; Anal. Calc. para C27H25F3N6O4 C, 58,48; H, 4,54; N, 15,16; Observado: C, 58,53; H, 4,21; N, 14,89.
5.120 3-{1-OXO-4-[3-(4-TRIFLUOROMETANOSULFONILO-PIPERAZIN-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000120_0001
A la solucion agitada de 3-(4-(3-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (500 mg, 1,13 mmol) en DCM (10 ml) se le anadieron 1-(trifluorometilsulfonil)piperazina (320 mg, 1,47 mmol) y DlPEA (0,59 ml, 3,38 mmol). La solucion resultante se agito a 40 °C durante 22 h. A la mezcla de reaccion se le anadieron DCM (30 ml) y salmuera (20 ml). La mezcla se extrajo y la capa organica se seco por MgSO 4 y se concentro. El residuo se purifico por ISCO para dar un solido de tipo vUreo. El solido se agito en EtOAc (5 ml) y eter dietflico (40 ml) para dar 3-{1-Oxo-4-[3-(4-trifluorometanosulfonil-piperazin-1-ilmetil)-benciloxi]-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (257 mg, rendimiento del 39 %); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 27/73, (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 4,82 min (99,9 %); p.f.: 150-152 °C; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 5 1,92 -2,05 (m, 1H, CHH), 2,35 - 2,48 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 2,52 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,83 - 3,00 (m, 1H, CHH), 3,41 -3,53 (m, 4H, CH2, CH2), 3,57 (s, 2H, CH2), 4,26 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 4,42 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,0, 13,3 Hz, 1H, CHH), 5,25 (s, 2H, CH2), 7,25 - 7,35 (m, 3H, Ar), 7,35 - 7,43 (m, 3H, Ar), 7,44 - 7,53 (m, 1H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 522,33, 31,16, 45,06, 46,36, 51,56, 51,81, 61,11, 69,54, 115,13, 115,26, 126,49, 128,04, 128,46, 129,77, 129,95, 133,30, 136,64, 137,67, 153,43, 167,96, 170,93, 172,78; LCMS MH = 581; Anal. Calc. para C26H27F3N4O6S 0,1 EtOAC 0,1 Et2O : C, 53,94; H, 4,86; N, 9,39; Observado: C, 54,05; H, 4,77; N, 9,16.
5.121 3-(1-OXO-4-{3-[4-(2,2,2-TRIFUJORO-ETIL)-PIPERAZIN-1-ILMETIL]-BENCILOXI}-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000120_0002
A la solucion en CH3CN (10 ml) de 3-(4-(3-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,495 g, 1,117 mmol) (de hecho 0,55 g pero deducido THF al 10 % en peso) se le anadieron diclorhidrato de 1-(2,2,2-trifluoroetil)piperazina (0,323 g, 1,340 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,738 ml, 4,47 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla turbia se volvio transparente en cuanto se anadio DIPEA. La solucion se agito durante 15 minutos y se evaporo al vad o para eliminar el CH3CN. El residuo resultante se purifico por columna de gel de sflice (MeOH/CH2Cl2) para dar 3-(1-Oxo-4-{3-[4-(2,2,2-trifluoro-etil)-piperazin-1-ilmetil]-benciloxi}-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,485 g, rendimiento del 82 %); p.f., 112-114 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, isocratica a 20/80 durante 10 minutos, (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 5,64 min (99,9 %). 1 H RMN (DMSO-de) 5 1,92 - 2,06 (m, 1H, CHH), 2,28 - 2,48 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 2,53 - 2,66 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 2,83 - 3,00 (m, 1H, CHH), 3,12 (c, J = 10,3 Hz, 2H, CH2), 3,47 (s, 2H, CH2), 4,21 - 4,48 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,25 (s, 2H, CH2), 7,20 - 7,28 (m, 1H, Ar), 7,28 - 7,41 (m, 5H, Ar), 7,44 - 7,52 (m, 1H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 522,38, 31,20, 45,10, 51,59, 52,42, 53,09, 56,27, 56,65, 57,04, 57,42, 61,67, 69,58, 115,17, 115,26, 124,09, 126,27, 127,81, 127,93, 128,35, 129,78, 129,97, 133,32, 136,53, 138,37, 153,44, 167,99, 170,95, 172,80, LCMS: m/e = 531, Anal calc. para C27H29N4O4F3 (+0,1 H2O, 0,1 EtOAc): C, 60,81; H, 5,59; N, 10,35, Observado: C, 60,72; H, 5,65; N, 10,09.
5.122 3-{4-[3-(3,4-DIHIDRO-1H-ISOQUINOLIN-2-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000120_0003
A la solucion en CH3CN (10 ml) de 3-(4-(3-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,222 g, 0,501 mmol) se le anadieron clorhidrato de 1,2,3,4-tetrahidroisoquinolina (0,102 g, 0,601 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,207 ml, 1,253 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla turbia se agito a temperatura ambiente durante 40 minutos y se evaporo al vado para eliminar el CH3CN. El residuo resultante se purifico por columna de gel de sflice (MeOH/CH 2 Cl 2 ) para dar 3-{4-[3-(3,4-Dihidro-1H-isoquinolin-2-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanquecino (0,198 g, rendimiento del 80 %); p.f., 117-119 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, isocratica a 20/80 durante 10 minutos, (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 6,88 min (99,9 %). 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,90 - 1,99 (m, 1H, CHH), 2,32 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,62 (m, 1H, CHH), 2,63 - 2,71 (m, 2H, CH2), 2,75 - 2,83 (m, 2H, CH2), 2,84 - 2,98 (m, 1H, CHH), 3,53 (s, 2H, CH2), 3,67 (s, 2H, CH2), 4,20 - 4,45 (m, 2H, CH2), 5,10 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,26 (s, 2H, CH2), 6,94 - 7,15 (m, 4H, Ar), 7,28 - 7,53 (m, 7H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-de) 514,07, 22,35, 28,64, 31,21, 45,09, 50,15, 51,59, 55,38, 61,58, 69,63, 115,14, 115,26, 125,43, 125,93, 126,29, 126,35, 127,88, 128,34, 128,42, 129,79, 129,95, 133,32, 134,05, 134,74, 136,62, 138,70, 153,47, 167,99, 170,95, 172,80, LC/MS m/e = 496, Anal calc. para C30H29N3O4 (+0,3 H2O, 0,3 EtOAc): C, 71,05; H, 6,12; N, 7,97, Observado: C, 71,00; H, 6,14; N, 7,91.
5.123 3-(4-((3-((4-(4-CLOROFENIL)PIPERON-1-IL)METIL)BENCIL)OXI)-1-OXOISOINDOUN-2-IL)PIPERON-2,6-DIONA
Figure imgf000121_0001
A la solution en CH 2 Cl 2 de 3-(4-(3-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,5 g, 1,128 mmol) se le anadieron 4-(4-clorofenil)piperidina (0,232 g, 1,184 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,602 ml, 3,38 mmol). La solucion se agito a temperatura ambiente durante una noche. A la mezcla se le anadieron agua (10 ml), CH2Cl2 (15 ml) y se extrajo. La capa organica se concentro y despues se purifico sobre columna de gel de sflice eluida con CH2Cl2 y MeOH para dar 3-(4-((3-((4-(4-clorofenil)piperidin-1-il)metil)bencil)oxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (340 mg, 54 %). Punto de fusion: 180-182 °C. LC-MS m/e = 558, 560, HPLC Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometros,1 ml/min, 240 nm, isocratico 30/70 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 % en H2O: 4,34 min (99 %). 1 H RMN (DMSO-de) 5 1,49 - 1,78 (m, 4H, CH2, CH2), 1,89 - 2,10
(m, 3H, CHH, CH2), 2,33 - 2,47 (m, 2H, CHH, CH), 2,53 - 2,61 (m, J = 13,8 Hz, 1H, CHH), 2,79 - 2,98 (m, J = 11,5 Hz, 3H, CH2, CHH), 3,51 (s, 2H, CH2), 4,20 - 4,50 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,0, 13,1 Hz, 1H, NCH), 5,27 (s, 2H, CH2), 7,19 - 7,53 (m, 11H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 522,34, 31,16, 32,85, 41,09, 45,09, 51,55, 53,40, 62,13, 69,58, 115,16, 115,23, 126,20, 127,95, 128,17, 128,30, 128,40, 128,56, 129,74, 129,96, 130,41, 133,30, 136,46, 138,75, 145,17, 153,42, 167,97, 170,93, 172,78, Anal calc. para C32H32ClN3O4: % de C:68,87; % de H:5,78; % de N:7,53; Observado: % de C: 68,59; % de H: 5,83; % de N: 7,39.
5.124 4-((4-((3,4-DIHIDROISOQUINOLIN-2(1H)-IL)METIL)BENCIL)OXI)-2-(2,6-DIOXOPIPERIDIN-3-IL)ISOINDOLIN-1,3-DIONA
Figure imgf000121_0002
A la suspension en CH 2 Cl 2 de 4-(4-(bromometil)benciloxi)-2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)isoindolin-1,3-diona (0,25 g, 0,547 mmol) se le anadieron 1,2,3,4-tetrahidroisoquinolina (0,080 g, 0,601 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,212 g, 1,640 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. A la mezcla se le anadieron CH 2 Cl 2 y agua y se extrajo. La capa organica se concentro y se purifico sobre columna de gel de sflice eluida con CH 2 Cl 2 y MeOH para dar un solido. El solido se recristalizo en CH3CN (3 ml) para dar 4-((4-((3,4-dihidroisoquinolin-2(1H)-il)metil)bencil)oxi)-2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)isoindolin-1,3-diona en forma de un solido de color amarillo (90 mg, 32 %). Punto de fusion (determinado en el laboratorio): 124-126 °C. LC-MS m/e = 510, HPLC Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometres, 1 ml/min, 240 nm, isocratico 30/70 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 % en H2O: 3,52 min (98,5 %). 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 5 1,97 - 2,11 (m, 1H, CHH), 2,42 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,54-2,62 (m, 3H, CHH, CH2), 2,64 - 2,71 (m, 2H, CH2), 2,76 - 2,98 (m, 3H, CHH, CH2), 3,54 (s, 2H, CH2), 3,66 (s, 2H, CH2), 5,03 - 5,16 (m, 1H, NCH), 5,37 (s, 2H, CH2), 6,94 - 7,12 (m, 3H, Ar), 7,37 - 7,44 (m, 2H, Ar), 7,45 - 7,53 (m, 3H, Ar), 7,61 (d, J = 8,3 Hz, 1H, Ar), 7,83 (dd, J = 7,5, 8,4 Hz, 1H, Ar), 11,11 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-de) 521,09, 27,77, 30,06, 47,89, 49,30, 54,57, 60,62, 69,13, 114,65, 119,38, 124,57, 125,06, 125,46, 126,48, 127,54, 127,95, 132,41, 133,21, 133,87, 133,94, 136,13, 137,43, 154,69, 164,45, 165,90, 169,02, 171,87, Anal calc. para C30H27N3O5 C: 70,71 %; H: 5,34 %; N: 8,25 %. Observado: C: 67,07 %; H: 5,12 %; N: 7,81 %.
5.125 3-(4-((3-((4-(2,4-DIFLUOROFENIL)PIPERIDIN-1-IL)METIL)BENCIL)OXI)-1-OXOISOINDOUN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000122_0001
A la solution en CH 2 Cl 2 de 3-(4-(3-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,45 g, 1,015 mmol) se le anadieron 4-(2,4-difluorofenil)piperidina (0,210 g, 1,066 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,542 ml, 3,05 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. A la mezcla se le anadieron agua y CH2G 2, se extrajo y se purifico sobre columna de gel de sflice eluida con MeOH y CH2Cl2 para dar 3-(4-((3-((4-(2,4-difluorofenil)piperidin-1-il)metil)bencil)oxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (250 mg, 44 %). Punto de fusion: 211-213 °C. LC-MS m/e = 560, HPLC: Waters Symmetry C18, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, isocratico 30/70 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %: 4,68 min (97,6 %). 1 H RMN (DMSO-de) 5 1,66 (s a, 4H, CH2, CH2), 1,89 - 2,07 (m, 3H, CH2, CHH), 2,43 (dd, J = 4,3, 13,0 Hz, 1H, CHH), 2,53 - 2,61 (m, J = 19,3 Hz, 1H, CHH), 2,73 (quin, J = 7,5 Hz, 1H, CH), 2,82 - 3,03 (m, 3H, CH2, CHH), 3,51 (s, 2H, CH2), 4,11 -4,52 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,27 (s, 2H, CH2), 7,02 (td, J = 2,2, 8,5 Hz, 1H, Ar), 7,10 - 7,21 (m, 1H, Ar), 7,24 - 7,54 (m, 8H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 522,34, 31,16, 31,61, 34,62, 51,58, 53,43, 62,12, 69,60, 103,20, 103,54, 103,90, 111,21, 111,49, 115,16, 115,25, 126,21, 127,96, 128,31, 128,41, 128,62, 128,68, 128,87, 128,98, 129,07, 129,74, 129,96, 133,30, 136,48, 138,74, 153,43, 158,17, 158,33, 158,84, 159,02, 161,42, 161,58, 162,08, 162,26, 167,97, 170,93, 172,77, Anal calc. para C32H31F2N3O4: % de C:68,68; % de H:5,58; % de N:7,51, Observado: % de C: 68,57; % de H: 5,52; % de N: 7,60.
5.126 3-{1-OXO-4-[4-(2-TRIFLUOROMETIL-5,6-DIHIDRO-8H-[1,2,4]TRIAZOLO[1,5-A]PIRAZIN-7-ILMETIL)-BENCILOXI]-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000122_0002
A la mezcla agitada de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (1,0 g, 2,256 mmol) y 2-(trifluorometil)-5,6,7,8-tetrahidro-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirazina (0,477 g, 2,481 mmol) en MeCN (15 ml) se le anadio DlPEA (1,0 ml, 5,6 mmol). La mezcla resultante se calento a 50 °C durante 16 h se concentro hasta aproximadamente 3 ml seguido de la adicion de Et 2 O (40 ml). La mezcla se agito a temperatura ambiente y se formo un solido. El solido se purifico agitandose en CH 3 CN (17 ml) a reflujo para dar 3-{1-Oxo-4-[4-(2-trifluorometil-5,6-dihidro-8H-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pirazin-7-ilmetil)-benciloxi]-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (580 mg, rendimiento del 46 %). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 40/60, (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 6,32 min (99,8 %); p.f.: 215-217 °C; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 5 1,92 -2,05 (m, 1H, CHH), 2,35 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,63 (m, 1H, CHH), 2,83 - 2,98 (m, 1H, CHH), 3,02 (t, J = 5,4 Hz, 2H, CH2), 3,81 (d, J = 5,3 Hz, 4H, CH2, CH2), 4,19 - 4,32 (m, 3H, CHH, CH2), 4,42 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CHH), 5,25 (s, 2H, CH2), 7,29 - 7,37 (m, 2H, Ar), 7,37 - 7,44 (m, 2H, Ar), 7,45 - 7,53 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 522,29, 31,11,45,02, 46,49, 47,67, 49,12, 51,52, 59,38, 69,29, 114,93, 115,19, 127,75, 128,87, 129,75, 129,89, 133,26, 135,69, 136,99, 152,77, 153,42, 167,92, 170,89, 172,74; LCMS MH = 555; Anal. Calc. para C27H25F3N6O4: C, 58,48; H, 4,54; N, 15,16,\; Observado: C, 58,50; H, 4,23; N, 15,08; HPLC quiral: AGP quiral/C18, 4,0 x 150 mm, 5 ^m, 0,8 ml/min, UV 240 nm, fase movil A: MeOH, fase movil B: NH4OAc 10 mM), 20/80, a 8,78 min (1,37 %) y 11,51 min ( 93,56 %); % de e.e. = (93,56-1,37)/( 93,56+1,37)*100 % = 97 %.
5.127 2-(2,6-DIOXO-PIPERIDIN-3-IL)-4-(4-MORFOUN-4-ILMETIL-BENCILOXI)-ISOINDOL-1,3-DIONA
Figure imgf000123_0001
Etapa 1: A una solucion de 3-hidroxiftalato de dimetilo (1,0 g, 4,76 mmol) en THF (40 ml, 488 mmol), se le anadio trifenil fosfina sobre resina de poliestireno (1,6 g/mmol, 4,76 g, 7,61 mmol). Despues de dejar que la resina se hinchase durante varios minutos a temperatura ambiente, la mezcla de reaccion se enfrio en un bano de hielo a 0 °C. A la mezcla agitada se le anadio DIAD (1,48 ml, 7,61 mmol). Despues de aproximadamente 10 minutos, se anadio en una porcion (4-(morfolinometil)fenil)metanol (1,48 g, 7,14 mmol). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 20 min. La resina se retiro por filtracion y se aclaro en un embudo sinterizado con succion usando lavados alternos de MeOH y DCM dos veces. El filtrado combinado se concentro al vado para dar el producto en bruto en forma de un aceite de color amarillo (4 g). El aceite se repartio entre EtOAc (200 ml) y HCl 0,25 N (150 ml). La capa organica se lavo con 100 ml mas de HCl 0,25 N. La capa acuosa, que contema el producto, se concentro en un evaporador rotatorio para dar un jarabe (aproximadamente 10 ml). El jarabe se repartio entre EtOAc (300 ml) y NaOH 1 N (100 ml). La capa acuosa se lavo con otra porcion de EtOAc (aproximadamente 200 ml). Las capas organicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (Na 2 SO 4 ), se concentraron al vado, y se secaron en un horno de vado a 40 °C durante una noche para dar ester dimetflico del acido 3-(4-morfolin-4-ilmetil-benciloxi)-ftalico en forma de un aceite de color amarillo palido (2,6 g). El producto en bruto se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 2: A una solucion de 3-(4-(morfolinometil)benciloxi)ftalato de dimetilo (1,9 g, 4,76 mmol) en THF (20 ml, 244 mmol), se le anadio agua (0,180 ml, 9,99 mmol). Con agitacion a ta, se anadio gota a gota KOfBu (9,99 ml, 9,99 mmol, 1 M en THF). Despues de aproximadamente 24 h, se anadio agua (1 ml) y la mezcla se calento hasta 45 °C. Despues de aproximadamente 22 h, la mezcla se diluyo con Et 2 O (100 ml) y se filtro a traves de un embudo sinterizado. El solido se acidifico con HCl acuoso 1 N (10 ml) y la mezcla resultante se concentro a sequedad en un evaporador rotatorio para dar un solido de color blanco (2,2 g) que se determino por LCMS como una mezcla ~1:3 de 1-metil ester del acido 3-(4-morfolin-4-ilmetil-benciloxi)-ftalico y acido 3-(4-morfolin-4-ilmetil-benciloxi)-ftalico, respectivamente. La mezcla se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 3: A una suspension de 1-metil ester del acido 3-(4-morfolin-4-ilmetil-benciloxi)-ftalico y acido 3-(4-morfolin-4-ilmetil-benciloxi)-ftalico (1,7 g, 3,75 mmol, suponiendo un 82 % en peso) en piridina (30 ml), se le anadio clorhidrato de 3-aminopiperidin-2,6-diona rac. (0,803 g, 4,88 mmol) en forma de un solido. Se puso un condensador de reflujo en un MFR y la mezcla resultante se calento en un bano de aceite a 118 °C durante aproximadamente 24 h. La mezcla de reaccion se dejo enfriar a ta y despues se concentro al vado para retirar la mayor parte de la piridina. El residuo solido de color oscuro restante se suspendio en EtOAc (aproximadamente 100 ml), se agito durante una noche a temperatura ambiente, y despues se filtro en un embudo sinterizado medio. El solido se lavo con abundante EtOAc y despues se seco por succion. El solido restante se transfirio a un matraz con EtOAc (400 ml) y NaHCO 3 ac.
0,5 N (100 ml). La mezcla se agito vigorosamente durante una noche. Las fases se separaron y la capa acuosa se extrajo con mas cantidad de EtOAc (~300 ml). Las capas organicas combinadas se lavaron con salmuera y despues se trataron con Na 2 SO 4 y carbon decolorante. La suspension se mezclo y despues se filtro en un lecho de Supercell. El filtrado transparente se concentro al vado y la espuma de color blanco resultante se disolvio en MeCN mmimo (~3 ml). A la solucion se le anadio Et 2 O en pequenas porciones (aproximadamente 25 ml, total), dando como resultado un precipitado de color blanco. La suspension se sonico para descomponer todos los agregados solidos en una suspension bien dispersa. Despues, la suspension se filtro y la torta se lavo con varias porciones pequenas de Et 2 O (~50 ml, total). La torta se seco por succion y despues se seco adicionalmente en un horno de vado a 55 °C para dar 2-(2,6-dioxo-piperidin-3-il)-4-(4-morfolin-4-ilmetil-benciloxi)-isoindolo-1,3-diona en forma de un solido de color blanco (950 mg, rendimiento del 55 % en la Etapa 1-3): HPLC: Waters Symmetry C 13 , 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 17/83 de CH 3 CN/H 3 PO 4 al 0,1 %, 5,34 min (99,8 %); p.f.: 205-207 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,92 - 2,14 (m, 1H, CHH), 2,28 - 2,42 (m, 4H, CH2, CH2), 2,43 - 2,66 (m, 2H, CHH, CHH), 2,78 - 3,00 (m, 1H, CHH), 3,46 (s, 2H, CH2), 3,52 - 3,64 (m, 4H, CH2, CH2), 5,09 (dd, J = 5,4, 12,9 Hz, 1H, CH), 5,35 (s, 2H, CH2), 7,29 - 7,39 (m, 2H, Ar), 7,42 - 7,52 (m, 3H, Ar), 7,60 (d, J = 8,5 Hz, 1H, Ar), 7,82 (dd, J = 7,4, 8,5 Hz, 1H, Ar), 11,11 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 5 21,88, 30,84, 48,67, 53,06, 62,01, 66,08, 69,85, 115,42, 116,50, 120,11, 127,18, 128,93, 133,18, 134,72, 136,91, 137,61, 155,44, 165,21, 166,68, 169,80, 172,66; LCMS: MH = 464; Anal calc. para C25H25N3O6 0,06 H2O: C, 64,64; H, 5,45; N, 9,04; H2O, 0,23; Observado: C, 64,75; H, 5,13; N, 8,91; H2O, 0,23.
5.128 3-[1-OXO-4-(4-FENOXIMETIL-BENCILOXI)-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000124_0001
Etapa 1: Preparation de 5-amino-5-oxo-4-(1-oxo-4-(4-(fenoximetil) benciloxi)isoindolin-2-il)pentanoato de metilo A la solution en acetonitrilo de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,5 g, 1,711 mmol) se le anadieron 1-(bromometil)-4-(fenoximetil)benceno (0,474 g, 1,711 mmol) y carbonato potasico (0,236 g, 1,711 mmol). La mezcla se agito a 50 °C durante 3 d^as. La mezcla se enfrio a temperatura ambiente, se concentro y se purifico sobre columna de gel de sflice eluida con CH 2 Cl 2 y MeOH para dar 5-amino-5-oxo-4-(1-oxo-4-(4-(fenoximetil)benciloxi)isoindolin-2-il)pentanoato de metilo en forma de un solido de color blanco (0,8 g, 47 %).
Etapa 2: Preparacion de 3-[1-Oxo-4-(4-fenoximetil-benciloxi)-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona
A la solucion en THF de 5-amino-5-oxo-4-(1-oxo-4-(4-(fenoximetil)benciloxi)isoindolin-2-il)pentanoato de metilo (0,8 g, 1,638 mmol) se le anadio terc-butoxido potasico (0,202 g, 1,801 mmol) a -78 °C. La mezcla se agito a esta temperatura durante 1 h y despues se anadio agua y CH 2 Cl 2 . Despues de la extraction, la capa organica se concentro para dar 3-[1-Oxo-4-(4-fenoximetil-benciloxi)-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,70 g, 94 %). Punto de fusion determinado en el laboratorio: 110-112 °C. LC-MS m/e = 457. HPLC Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometres, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 5/95 a 5/95 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 % en H 2 O durante 5 min y mantenimiento a 95/5 durante 5 min: 10,48 min (96 %). 1 H RMN (DMSO-de) 51,90 -2,04 (m, 1H, CHH), 2,31 -2,48 (m, J = 4,3, 13,2 Hz, 1H, CHH), 2,52 -2,65 (m, 1H, CHH), 2,80 -3,01 (m, 1H, CHH), 4,16 - 4,50 (m, 2H, CH2), 5,03 - 5,16 (m, 3H, NCH, CH2), 5,26 (s, 2H, CH2), 6,88 - 7,05 (m, 3H, Ar), 7,21 - 7,37 (m, 4H, Ar), 7,42 - 7,56 (m, 5H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); C RMN (DMSO-d6): 5 15,11, 22,33, 31,17, 45,077, 51,57, 68,72, 69,28, 114,73, 114,97, 115,25, 120,68, 127,76, 129,45, 129,79, 129,96, 133,31, 136,16, 136,94, 153,41, 158,22, 167,98, 170,94, 170,94, 172,80, Anal calc. para C27H24N2O5+ 0,3 H2O, C 71,04 %, H 5,30 %, N 6,14 %.Observado: C 69,89 %, H 5,48 %, N 5,82 %.
5.129 5-((2-(2,6-DIOXOPIPERIDIN-3-IL)-1-OXOISOINDOLIN-4-ILOXI)METIL)ISOINDOLIN-2-CARBOXILATO DE TERC-BUTILO
Figure imgf000124_0002
Etapa 1: Se anadio hidruro sodico (60 %, 3,6 g, 90,5 mmol) a una solucion agitada de N-BOC-propargilamina (10,8 g, 69,6 mmol) en THF (80 ml). La suspension resultante se agito a temperatura ambiente durante 30 minutos y se anadio gota a gota (jligera exotermia!) una solucion de bromuro de propargilo/tolueno (80 %, 16,6 g, 111,3 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 3 horas. La mezcla de reaction se concentro y el residuo se disolvio en EtOAc (150 ml) y se lavo con agua (4 x 40 ml) y salmuera (40 ml), y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, EtOAc:Hexano, 30:70 a 80:20) para dar N-BOC-diprop-2-inil-amina (8,5 g, rendimiento del 63 %): 1H RMN (CDCb) 51,48 (s, 9H), 2,22 (s, 2H), 4,17 (a, 4H).
Etapa 2: Se anadio gota a gota alcohol propargflico alcohol (7,3 g, 144,9 mmol) a una solucion agitada de N-BOC-diprop-2-inil-amina (7,0 g, 36,2 mmol) en etanol absoluto (150 ml) a 3 °C. Se anadio en una portion dicloruro de tris(trifenilfosfina)rodio (1,0 g). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se concentro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, EtOAc:Hexano, 10:90 a 40:60) para dar ester terc-bufilico del acido 5-hidroximetil-1,3-dihidro-isoindolo-2-carboxflico (5,2 g, rendimiento del 57 %): 1H RMN (CDCb) 51,51 (s, 9H), 2,07 (a, 1H), 4,62 (s, 4H), 4,68 (d, J = 5,7 Hz, 2H), 7,20-7,27 (m, 3H).
Etapa 3: Se anadio azodicarboxilato de diisopropilo (1,0 g, 5,0 mmol) a una suspension agitada de trifenilfosfina unida a pofimero (4,3 g, 5,3 mmol) en THF (40 ml) a 3-5 °C. La mezcla se agito a 3 °C durante 10 minutos y una solucion de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1,0 g, 3,3 mmol) y ester tercbufilico del acido 5-hidroximetil-1,3-dihidro-isoindolo-2-carboxflico (1,1 g, 4,3 mmol) en THF (60 ml) a 3-6 °C. Despues de agitarse a 3 °C durante 5 minutos, la mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaction se filtro y el solido se lavo con CH 2 Cl 2 (30 ml). El filtrado se concentro y el residuo se disolvio en CH 2 Cl 2 (80 ml) y se lavo con NaHCO 3 sat. (25 ml), agua (2 x 25 ml), y salmuera (25 ml), y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO 2 , CH 3 OH:CH 2 Cl 2 , 3:97) para dar 5-((2-(1-amino-5-metoxi-1,5-dioxopentan-2-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)isoindolin-2-carboxilato de terc-butilo (1,3 g, rendimiento del 73 %): 1 H RMN (CDCl 3 ) 51,52 (s, 9H), 2,17-2,41 (m, 4H), 3,64 (s, 3H), 4,36-4,46 (dd, J = 17,7 y 29,4 Hz, 2H), 4,67-4,71 (m, 4H), 4,91 (m, 1H), 5,15 (s, 2H), 5,43 (s, 1H), 6,35 (s, 1H), 7,05-7,08 (m, 1H), 7,26-7,32 (m, 3H), 7,40-7,45 (m, 2H);
13 C RMN (CDCl 3 ) 524,04, 28,55, 30,45, 45,28, 51,82, 52,27, 53,89, 70,02, 70,16, 79,81, 114,44, 116,18, 121,59, 121,98, 122,93, 123,08, 126,64, 129,90, 133,43, 135,50, 137,69, 153,70, 154,51, 169,36, 171,49, 172,88.
Etapa 4: Una solution de t-butoxido potasico/THF (1 M, 2,4 ml, 2,4 mmol) se anadio lentamente a una solution agitada de 5-((2-(1-amino-5-metoxi-1,5-dioxopentan-2-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)isoindolin-2-carboxilato de tercbutilo (1,3 g, 2,4 mmol) en THF (20 ml) a 5 °C. La mezcla de reaccion se agito a 5 °C durante 30 minutos y despues se inactivo con NH 4 Cl sat. (5 ml). La mezcla se agito con CH 2 Cl 2 (50 ml) y agua (15 ml) y la capa acuosa se extrajo con CH 2 Cl 2 (30 ml). La solucion combinada de CH 2 Cl 2 se lavo con NaHCO 3 sat. (30 ml), agua (2 x 30 ml), y salmuera (30 ml), y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO 2 , CH 3 OH:CH 2 Cl 2 , 3:. 97) para dar 5-((2-(2,6-dioxo-piperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)isoindolin-2-carboxilato de terc-butilo (0,6 g, rendimiento del 50 %): p.f. 178-180 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,45 (s, 9H), 1,96-2,02 (m, 1H), 2,41-2,60 (m, 2H), 2,86-2,91 (m, 1H), 4,28 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 4,38 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 4,59 (a, 4H), 5,07-5,14 (dd, J = 5,1 y 13,5 Hz, 1H), 5,24 (s, 2H), 7,31-7,51 (m, 6H), 10,97 (s, 1H); 13 C RMN (DMSO-de) 522,34, 28,12,31,18, 45,08, 51,48, 51,65, 69,42, 78,80, 115,01, 115,25, 122,15, 122,88, 126,94, 129,79, 129,95, 133,30, 135,82, 136,41, 136,96, 137,44, 138,40, 167,97, 170,96, 172,82; Calc. para C27H2sN 3 O6: C, 65,98; H, 5,95; N, 8,55, Observado: C, 65,76; H, 6,10; N, 8,33.
5.130 3-(4-(BENZO[B]TIOFEN-3-ILMETOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000125_0001
Etapa 1: Se anadio azodicarboxilato de diisopropilo (1,1 g, 5,5 mmol) a una suspension agitada de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,8 g, 2,7 mmol), 1-benzotiofen-3-ilmetanol (0,7 g, 4,1 mmol) y trifenilfosfina unida a pofimero (1,8 g, 5,5 mmol) en t Hf (60 ml) a 5-8 °C. Despues de la adicion, la mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se filtro y el solido se lavo con CH2Cl2 (30 ml). El filtrado se concentro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, CH3OH:CH2Cl2, 3:97) para dar 5-amino-4-(4-(benzo[b]tiofen-3-ilmetoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1 g, 77 %).
Etapa 2: Se anadio una solucion de t-butoxido potasico/THF (1 M, 2,3 ml, 2,3 mmol) a una solucion agitada de 5-amino-4-(4-(benzo[b]tiofen-3-ilmetoxi)-1-oxoisoindolin-2-il]-5-oxopentanoato de metilo (1,0 g, 2,3 mmol) en THF (30 ml) a 5 °C. La mezcla se agito a 5 °C durante 10 minutos y despues se calento a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reaccion se enfrio en un bano de hielo y se inactivo con HCl 1 N (10 ml). La mezcla se agito con CH2Cl2 (50 ml) y agua (10 ml) y la capa acuosa se extrajo con CH2Cl2 (30 ml). La solucion combinada de CH2Cl2 se lavo con agua (2 x 40 ml) y salmuera (40 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, CH3o H:CH2CI2, 3:97) para dar 3-(4-benzo[b]tiofen-3-ilmetoxi)-1-oxoisoindolin-2il)-piperidin-2,6-diona (0,3 g, rendimiento del 32 %): p.f.: 231-233 °C ; 1H RMN (DMSO-d6) 5 1,94-1,98 (m, 1H), 2,28-2,58 (m, 2H), 2,85-2,95 (m, 1H), 4,24 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 4,34 (d, J = 17,7 Hz, 1H), 5,06-5,12 (dd, J = 5,1 y 13,2 Hz, 1H), 5,52 (s, 2H), 7,33-7,52 (m, 5H), 7,92-8,03 (m, 3H), 10,94 (s, 1H); 13C RMN (DMSO-d6) 522,28, 31,13, 45,04, 51,52, 64,29, 115,05, 115,31, 122,11, 122,96, 124,04, 124,64, 126,79, 129,80, 129,93, 131,36, 133,31, 137,71, 139,76, 153,34, 167,94, 170,94, 172,78; Calc. para C22H18N2O4S 0,5 H2O: C, 63,30; H, 4,61; N, 6,74; S, 7,72, Observado: C, 63,85; H, 4,41; N, 6,75; S, 7,96.
5.131 3-[4-(2,3-DIHIDRO-BENZOFURAN-2-ILMETOXI)-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000125_0002
Etapa 1: Se anadio trifenilfosfina unida a polimero (1,6 g, 2,06 mmol, 1,25 mmol/g) a la solucion agitada de ester mefilico del acido 4-carbamoil-4-(4-hidroxi-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-bufirico (300 mg, 1,03 mmol) en THF (10 ml) a 0 °C. La mezcla resultante se agito a 0 °C durante 10 minutos seguido de la adicion de DIAD (412 mg, 2,06 mmol). Diez minutos mas tarde, se anadio a la mezcla (2,3-Dihidro-benzofuran-2-il)-metanol (250 mg, 1,66 mmol). La reaccion se agito a temperatura ambiente durante 7,5 horas y la reaccion se completo. La mezcla de reaccion se filtro, y el solido se lavo con diclorometano (7 x 20 ml). El filtrado se concentro y el residuo se purifico por cromatografia ISCO para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(2,3-dihidro-benzofuran-2-ilmetoxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-bufirico en forma de un aceite (380 mg, rendimiento del 87 %): LCMS MH = 425.
Etapa 2: Se anadio KO/Bu (100,5 mg, 0,89 mmol) a la solution agitada de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(2,3-dihidro-benzofuran-2-ilmetoxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-bufirico (380 mg, 0,89 mmol) en tetrahidrofurano (18 ml) a 0 °C. La mezcla se agito a 0 °C durante 0,5 horas y la reaction se completo. A la mezcla de reaction fria se le anadio HCl (ac. 0,1 N, 10 ml), seguido de la adicion de diclorometano (25 ml) y salmuera (10 ml). La mezcla se extrajo y la capa organica se seco por MgSO4 y se concentro al vatio. El residuo se purifico por cromatografia ISCO para dar 3-[4-(2,3-dihidro-benzofuran-2-ilmetoxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (243 mg, rendimiento del 70 %). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 40/60 (acetonitrilo/H 3 PO4 al 0,1 %): tR = 4,32 (98 %); p.f.: 258-260 °C; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,90 -2,05 (m, 1H, CHH), 2,28 - 2,46 (m, 1H, CHH), 2,54 - 2,66 (m, 1H, CHH), 2,82 - 2,99 (m, 1H, CHH), 3,04 - 3,20 (m, 1H, CHH), 3,35 - 3,43 (m, 1H, CHH), 3,97 - 4,45 (m, 4H, CHH, CHH, CHH, CHH), 5,03 - 5,22 (m, 2H, CNH, COH), 6,75 (d, J = 7,9 Hz, 1H, Ar), 6,79 - 6,88 (m, 1H, Ar), 7,02 - 7,13 (m, 1H, Ar), 7,19 - 7,37 (m, 3H, Ar), 7,42 - 7,55 (m, 1H, Ar), 10,98 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 522,39, 44,75, 51,52, 70,33, 80,31, 108,89, 114,88, 115,36, 120,29, 124,94, 126,61, 127,74, 127,79, 129,72, 129,76, 129,84, 133,24, 153,54, 159,08, 167,93, 170,96, 172,81; LCMS MH = 393; Anal. Calc. para C22H20N2O5 0,3 H2O : C, 66,42; H, 5,22; N, 7,04, Observado: C, 66,28; H, 5,12; N, 7,34.
5.132 3-(4-(IMIDAZO[1,2-A]PIRIDIN-2-ILMETOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000126_0001
Etapa 1: Se anadio azodicarboxilato de diisopropilo (1,1 g, 5,5 mmol) a una suspension agitada de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,8 g, 2,7 mmol), imidazo[1,2-a]piridin-2-ilmetanol (0,6 g, 4,1 mmol) y trifenilfosfina unida a poflmero (1,8 g, 5,5 mmol) en THF (100 ml) a 5-8 °C. Despues de la adicion, la mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se filtro y el solido se lavo con cloruro de metileno (30 ml). El filtrado se concentro y el residuo se purifico por cromatografia (columna de amina, CH 3 OH:CH 2 Cl 2 , 3:97) para dar 5-amino-4-(4-(imidazo[1,2-a]piridin-2-ilmetoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,5 g, rendimiento del 41 %): 1 H RMN (DMSO-de) 51,99-2,28 (m, 4H), 3,50 (s, 3H), 4,41 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 4,51 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 4,71-4,75 (m, 1H), 5,35 (s, 2H), 6,89 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 7,18-7,30 (m, 3H), 7,41-7,58 (m, 4H), 8,05 (s. 1H), 8,55 (d, J = 6,0 Hz, 1H).
Etapa 2: Se anadio t-butoxido potasico/THF (1 M, 1,1 ml, 1,1 mmol) a una solucion agitada de 5-amino-2-(4-(imidazo[1,2-a]piridin-2-ilmetoxi)-1-oxoisoindolin- 2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,4 g, 1,1 mmol) en THF (30 ml) y DMF (20 ml). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reaccion se enfrio en un bano de hielo y se inactivo con agua (30 ml). La mezcla se agito con cloruro de metileno (40 ml) y la capa acuosa se extrajo con cloruro de metileno (2 x 40 ml). La solucion organica combinada se lavo con agua (40 ml) y salmuera (40 ml), y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se agito con agua (20 ml). La mezcla se filtro y el solido se suspendio de nuevo con cloruro de metileno (15 ml) para dar 3-(4-(imidazo[1,2-a]piridin-2-ilmetoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,1 g, 28 %) en forma de un solido de color blanco: p.f. 222-224 °C; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,96-2,01 (m, 1H), 2,35-2,51 (m, 2H), 2,58-2,91 (m, 1H), 4,26 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 4,36 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 5,08-5,14 (dd, J = 5,1 y 13,5 Hz, 1H), 5,36 (s, 2H), 6,87-6,91 (dt, J = 0,9 y 6,6 Hz, 1H), 7,21-7,55 (m, 5H), 8,03 (s, 1H), 8,51-8,53 (dd, J = 0,9 y 6,6 Hz, 1H), 10,97 (s, 1H); 13 C RMN (DM SO^) 522,35, 31,17, 45,06, 51,54, 64,63, 111,79, 112,14, 115,01, 115,18, 116,65, 124,90, 126,95, 129,78, 129,84, 133,26, 141,54, 144,28, 153,45, 167,98, 170,96, 172,81; Calc. para C21H18N4O4 0,25 H2O: C, 63,87, H, 4,72; N, 14,19, Observado: C, 63,99, H, 4,60; N, 14,20.
5.133 3-(4-(IMIDAZO[1,2-A]PIRIDIN-6-ILMETOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000126_0002
Etapa 1: Se anadio azodicarboxilato de diisopropilo (1,3 g, 6,2 mmol) a una suspension agitada de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxo-isoindolin-2-il)-5-oxo-pentanonato de metilo (0,9 g, 3,1 mmol), imidazo[1,2-a]piridin-6-ilmetanol (0,7 g, 4,6 mmol) y trifenilfosfina unida a pofimero (2,1 g, 6,2 mmol) en THF (70 ml) a 5-8 °C. Despues de la adicion, la mezcla se agito a 5 °C durante 5 minutos y despues se calento a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se filtro y el solido se lavo con CH2Cl2 (30 ml). El filtrado se concentro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, CH3OH:CH2Cl2, 3:97) para dar 5-amino-4-(4-(imidazo[1,2-a]piridin-6-ilmetoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,8 g, 65 %).
Etapa 2: Una solution de t-butoxido potasico/THF (1 M, 2,0 ml, 2,0 mmol) se anadio a una solution agitada de 5-amino-4-(4-(imidazo[1,2-a]piridin-6-ilmetoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,8 g, 2,0 mmol) en THF (50 ml) a 5 °C. La mezcla se agito a 5 °C durante 10 minutos y despues se calento a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reaction se enfrio en un bano de hielo y se inactivo con agua (30 ml). La mezcla se extrajo con CH2Cl2 (3 x 30 ml) y la solucion combinada de CH2Cl2 se lavo con salmuera (40 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, CH3OH:CH2Cl2, 3:97) para dar 3-(4-(imidazo[1,2-a]piridin-6-ilmetoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-piperidin-2,6-diona (0,25 g, rendimiento del 32 %): p.f. 270-272 °C; 1H Rm N (DMSO-d6) 52,00 (m, 1H), 2,26-2,53 (m, 2H), 2,85-2,97 (m, 1H), 4,29 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 4,39 (d, J = 17,7 Hz, 1H), 5,08-5,14 (dd, J = 5,1 y 13,2 Hz, 1H), 5,26 (s, 2H), 7,28-7,41 (m, 3H), 7,51 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,5 8-7,61 (m, 2H), 7,97 (s, 1H), 8,72 (s, 1H), 10,97 (s, 1H); 13C RMN (DMSO-de) 522,35, 31,15, 45,04, 51,54, 67,26, 113,45, 115,07, 115,45, 116,84, 120,99, 125,10, 125,95, 129,83, 130,01, 133,34, 133,44, 144,01, 153,26, 167,94, 170,94, 172,80; Calc. para C21H18N4O4 0,15 H2O: C, 64,19; H, 4,69; N, 14,25, Observado: C, 64,10; H, 4,60; N, 14,32.
5.134 3-(4-(BENZO[B]TIOFEN-3-ILMETOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000127_0001
Etapa 1: Se anadio azodicarboxilato de diisopropilo (1,1 g, 5,47 mmol) a una solucion agitada de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,8 g, 2,7 mmol), 1-benzotiofen-5-ilmetanol (0,7 g, 4,1 mmol) y trifenilfosfina unida a poKmero (1,8 g, 5,5 mmol) en t Hf (60 ml) a 5-8 °C. Despues de la adicion, la mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se filtro y el solido se lavo con CH 2 Cl 2 (30 ml). El filtrado se concentro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO 2 , CH 3 OH:CH 2 Cl 2 , 3:97) para dar 5-amino-4-(4-(benzo[b]tiofen-5-ilmetoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,8 g, 56 %).
Etapa 2: Una solucion de t-butoxido potasico/THF (1 M, 2,3 ml, 2,3 mmol) se anadio a una solucion agitada de 5-amino-4-(4-(benzo[b]tiofen-5-ilmetoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1,0 g, 2,3 mmol) en THF (30 ml) a 5 °C. La mezcla se agito a 5 °C durante 10 minutos y despues se calento a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reaccion se enfrio en un bano de hielo y se inactivo con HCl 1 N (10 ml). La mezcla se diluyo con CH 2 Cl 2 (50 ml) y agua (10 ml). La capa acuosa se extrajo con CH 2 Cl 2 (30 ml) y la solucion combinada de CH 2 Cl 2 se lavo con agua (2 x 40 ml) y salmuera (40 ml), y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO 2 , CH3OH:Ch2CI2, 3:97) para dar 3-(4-benzo[b]tiofen-5-ilmetoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-piperidin-2,6-diona (0,4 g, rendimiento del 36 %): p.f. 213-215 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 5 1,95-2,01 (m, 1H), 2,36-2,52 (m, 2H), 2,85-2,95 (m, 1H), 4,30 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 4,40 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 5,08-5,14 (dd, J = 5,1 y 13,5 Hz, 1H), 5,37 (s, 2H), 7,31-7,37 (2d, J = 8,1 y 7,5 Hz, 2H), 7,46-7,51 (m, 3H), 7,79 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 8,00-8,04 (m, 2H), 10,97 (s, 1H); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 5 22,33, 31,17, 45,09, 51,57, 69,67, 115,05, 115,23, 122,68, 122,77, 123,89, 124,11, 128,09, 129,79, 129,97, 132,84, 133,31, 138,75, 139,50, 153,46, 167,98, 170,95, 172,80; Calc. para C22H18N2O4S: C, 65,01; H, 4,46; N, 6,89; S, 7,89, Observado: C, 64,66; H, 4,07; N, 6,76; S, 7,87.
5.135 3-(1-OXO-4-(QUINOLIN-6-ILMETOXI)-ISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000127_0002
Etapa 1: Se anadio lentamente DIBAL/tolueno (1 M, 16 ml, 16 mmol) a una solucion agitada de quinolin-6-carboxilato de metilo (1,0 g, 5,3 mmol) en THF (30 ml) a -60 °C. La solucion resultante se agito a -20 °C durante 1,5 horas y despues se inactivo cuidadosamente con agua (15 ml). La mezcla se concentro y el residuo se agito en EtOAc (80 ml) y NaHCO3 sat. (20 ml). La mezcla se filtro y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 30 ml). La solucion de EtoAc combinada se lavo con agua (30 ml) y salmuera (30 ml) y se seco (MgSO4). El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, EtOAc:CH2Cl21:1) para dar quinolin-6-il-metanol (0,5 g, rendimiento del 62 %): 1H RMN (DMSO^) 54,69 (d, J = 5,1 Hz, 2H), 5,42 (t, J = 5,4 Hz, 1H), 7,49-7,53 (dd, J = 4,5 y 8,4 Hz, 1H), 7,69-7,72 (dd, J = 1,8 y 8,7 Hz, 1H), 7,88 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 7,96 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 8,32-8,36 (dd, J = 0,9 y 8,4 Hz, 1H), 8,85-8,87 (dd, J = 1,8 y 4,2 Hz, 1H).
Etapa 2: Se anadio azodicarboxilato de diisopropilo (0,7 g, 3,6 mmol) a una suspension agitada de trifenilfosfina unida a polimero (3 g, 3,8 mmol) en THF (40 ml) a 3-6 °C. Despues de agitarse durante 10 minutos a 3 °C, se anadio lentamente una solucion de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,7 g, 2,4 mmol) y quinolin-6-il-metanol (0,5 g, 3,1 mmol) en THF (40 ml) a 3-7 °C. La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se filtro y el solido se lavo con CH2Cl2 (30 ml). El filtrado se concentro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, CH3OH: CH2Cl2, 5:95) para dar 5-amino-5-oxo-4-(1-oxo-4-(quinolin-6-ilmetoxi)-isoindolin-2-il)pentanoato de metilo (0,5 g, 46 %).
Etapa 3: Se anadio lentamente KO-t-Bu/THF (1 M, 1,1 ml, 1,1 mmol) a una solution agitada de 5-amino-5-oxo-4-(1-oxo-4-(quinolin-6-ilmetoxi)isoindolin-2-il)pentanoato de metilo (0,5 g, 1,1 mmol) a 5 °C. La mezcla de reaction se agito 30 minutos a 5 °C y despues se inactivo con NH4Cl sat. (5 ml). La mezcla se agito con CH2Cl2 (50 ml) y NaHCO3 sat. (15 ml). La capa acuosa se extrajo con CH2Cl2 (30 ml) y la solucion combinada de CH2Cl2 se lavo con agua (20 ml) y salmuera (30 ml), y se seco (MgSO4). El disolvente se retiro y el residuo se agito con CH2Cl2 (3 ml) y eter (3 ml). El solido se recogio para dar 3-(1-oxo-4-(quinolin-6-ilmetoxi)isoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,3 g, rendimiento del 60 %): p.f. 267-269 °C; 1H RMN (DMSO-d6) 5 1,97-2,02 (m, 1H), 2,42-2,62 (m, 2H), 2,86-2,92 (m, 1H), 4,35 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 4,45 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 5,10-5,16 (dd, J = 5,1 y 13,2 Hz, 1H), 5,47 (s, 2H), 7,33-7,37 (m, 2H), 7,47-7,57 (m, 2H), 7,86-7,89 (dd, J = 1,8 y 8,7 Hz, 1H), 8,04-8,09 (m, 2H), 8,38-8,41 (dd, J = 0,9 y 8,4 Hz, 1H), 8,90-8,92 (dd, J = 1,8 y 4,2 Hz, 1H), 10,98 (s, 1H); 13C RMN (DMSO-de) 522,36, 31,17, 45,10, 51,58, 69,27, 115,08, 115,39, 121,74, 126,41, 127,60, 129,02, 129,22, 129,84, 120,02, 133,37, 134,96, 136,01, 147,36, 150,71, 153,40, 167,97, 170,98, 172,82; Calc. para C23H19N3O4 0,2 H2O: C, 68,21; H, 4,83; N, 10,37, Observado: C, 68,04; H, 4,78; N, 10,10.
5.136 3-(4-(NAFTALEN-2-ILMETOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000128_0001
Etapa 1: Se anadio lentamente azodicarboxilato de diisopropilo (0,8 g, 4,1 mmol) a una suspension agitada de trifenilfosfina unida a pofimero (3,0 g, 4,5 mmol) en THF (40 ml) a 3-6 °C. Despues de agitarse a 3 °C durante 10 minutos, se anadio una solucion de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,8 g, 2,7 mmol), 2-naftaleno-metanol (0,7 g, 4,1 mmol) y trietilamina (0,4 g, 4,1 mmol) en THF (40 ml) a 3-6 °C. Despues de la adicion, la mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se filtro y el solido se lavo con CH 2 Cl 2 (30 ml). El filtrado se concentro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO 2 , CH 3 OH:CH 2 Cl 2 , 3:97) para dar 5-amino-4-(4-(naftalen-2-ilmetoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,6 g, 50 %).
Etapa 2: Se anadio lentamente una solucion de t-butoxido potasico/THF (1 M, 1,4 mmol) a una solucion agitada de 5-amino-4-(4-(naftalen-2-ilmetoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,6 g, 1,4 mmol) en THF (20 ml) a 5 °C. La solucion resultante se agito a 5 °C durante 30 minutos y despues se inactivo con NH 4 Cl sat. (5 ml). La mezcla se agito con CH 2 Cl 2 (40 ml) y agua (15 ml). La capa acuosa se extrajo con CH 2 Cl 2 (40 ml) y la solucion combinada de CH 2 Cl 2 se lavo con agua (20 ml) y salmuera (20 ml), y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, CH3Oh :CH2CI2, 3:97) para dar 3-(4-(naftalen-2-ilmetoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-piperidin-2,6-diona (0,2 g, rendimiento del 36 %): p.f. 277-279 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,97-2,02 (m, 1H), 2,42-2,61 (m, 2H), 2,85-2,95 (m, 1H), 4,33 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 4,43 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 5,09-5,15 (dd, J = 5,1 y 13,2 Hz, 1H), 5,42 (s, 2H), 7,32-7,39 (m, 2H), 7,46-7,56 (m, 3H), 7,60-7,64 (m, 1H), 7,91-7,96 (m, 3H), 8,02 (s, 1H), 10,979s, 1H);
13 C RMN (DMSO-d 6 ) 522,34, 31,17, 45,11, 51,58, 69,67, 115,08, 115,29, 125,58, 126,18, 126,31, 127,57, 127,77, 128,12, 129,81, 130,00, 132,57, 132,71, 133,34, 134,21, 153,47, 167,98, 170,96, 172,81; Calc. para C24H20N2O4: C, 71,99; H, 5,03; N, 7,00, Observado: C, 71,71; H, 5,09; N, 6,93.
5.137 3-(4-((2,3-DIHIDRO-1H-INDAN-5-IL)METOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000128_0002
Etapa 1: Se anadio azodicarboxilato de diisopropilo (0,8 g, 4,1 mmol) a una suspension agitada de trifenilfosfina unida a pofimero (3,5 g, 4,4 mmol) en THF (40 ml) a 3-5 °C. Despues de agitarse a 3 °C durante 10 minutos, se anadio lentamente una solucion de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,8 g, 2,7 mmol) y 5-hidroximetilindano (0,5 g, 3,6 mmol) en THF (40 ml) a 3-5 °C. La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se filtro y el solido se lavo con CH 2 Cl 2 (30 ml). El filtrado se concentro y el residuo se disolvio en CH 2 Cl 2 (80 ml) y se lavo con NaHCO 3 sat. (30 ml), agua (2 x 30 ml) y salmuera (30 ml), y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO 2 , CH3Oh :CH2CI2, 3:97) para dar 5-amino-4-(4-((2,3-dihidro-1H-indan-5-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,7 g, rendimiento del 60 %): 1 H RMN (CDCI3) 52,05-2,45 (m, 6H), 2,89-2,96 (m, 4H), 3,64 (s, 3H), 4,35-4,49 (dd, J = 17,4 y 26,4 Hz, 2H), 4,87-4,92 (dd, J = 6,0 y 8,7 Hz, 1H), 5,10 (s, 2H), 5,37 (s, 1H), 6,33 (s, 1H), 7,08-7,28 (m, 4H), 7,37­ 7,44 (m, 2H).
Etapa 2: Una solucion de t-butoxido potasico/THF (1 M, 1,5 ml, 1,5 mmol) se anadio lentamente a una solucion agitada de 5-amino-4-(4-((2,3-dihidro-1H-indan-5-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,6 g, 1,5 mmol) en THF (20 ml) a 5 °C. La solucion resultante se agito a 5 °C durante 30 minutos y despues se inactivo con NH 4 Cl sat. (5 ml). La mezcla se agito con CH 2 Cl 2 (50 ml) y agua (15 ml) y la capa acuosa se extrajo con CH 2 Cl 2 (30 ml). La solution combinada de CH2Cl2 se lavo con agua (20 ml) y salmuera (20 ml), y se seco. El disolvente se retiro y el residuo solido se agito con acetona (10 ml) para dar 3-(4-((2,3-dihidro-1H-indan-5-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,3 g, rendimiento del 58 %): p.f. 216-218 °C; 1H RMN (DMSO-d6) 51,96-2,08 (m, 3H), 2,41-2,60 (m, 2H), 2,82-2,96 (m, 5H), 4,26 (d, J = 17,7 Hz, 1H), 4,36 (d, J = 17,7 Hz, 1H), 5,07-5,13 (dd, J = 5,1 y 13,5 Hz, 1H), 5,19 (s, 2H), 7,23-7,25 (m, 2H), 7,30-7,33 (m, 3H), 7,47 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 10,86 (s, 1H); 13C RMN (DMSO-de) 522,31, 25,05, 31,17, 32,00, 32,17, 45,08, 51,56, 69,76, 114,98, 115,11, 123,77, 124,15, 125,84, 129,76, 129,92, 133,26, 134,32, 143,60, 143,98, 153,50, 167,99, 170,96, 172,81; Calc. para C23H22N2O4 0,3 H2O: C, 69,79; H, 5,75; N, 7,08, Observado: C, 69,72; H, 5,67; N, 6,91.
5.138 3-(4-(BENZO[D]OXAZOL-5-ILMETOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000129_0001
Etapa 1: Una mezcla de 5-metilbenzo[d]oxazol (2 g, 15 mmol), NBS (2,67 g, 15 mmol) y peroxido de benzoflo (50 mg, 0,21 mmol) se calento a reflujo en CCl4 (50 ml) durante una noche. La mezcla se enfrio a temperatura ambiente, y el precipitado resultante se retiro por filtration. El filtrado se concentro a presion reducida y el residuo se purifico por ISCO (columna 40 g, gradiente de EtOAc/hexanos del 0 % al 20 % en 40 min) para dar 5-(bromometil)benzo[d]oxazol (1,6 g, rendimiento del 50 %); 1H RMN (DMSO-de) : 4,88 (s, 2H, CH2), 7,55 (dd, J = 1,7, 8,5 Hz, 1H, Ar), 7,77 (d, J = 8,5 Hz, 1H, Ar), 7,91 (d, J = 1,5 Hz, 1H, Ar), 8,79 (s, 1H, Ar).
Etapa 2: A una suspension de carbonato potasico (189 mg, 1,37 mmol) en DMF (5 ml), se le anadieron 5-(bromometil)benzo[d]oxazol (261 mg, 1,23 mmol) y 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (400 mg, 1,37 mmol). La mezcla formada se agito a temperatura ambiente durante un fin de semana. Se anadio mas cantidad de 5-(bromometil)benzo[d]oxazol (87 mg, 0,41 mmol), y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La reaction se interrumpio con agua (40 ml) a 0 °C, el producto se extrajo con acetato de etilo (3 x 30 ml), y las capas organicas combinadas se lavaron con agua (20 ml) y salmuera (20 ml). El disolvente se evaporo al vatio y el producto se purifico con ISCO (columna 40 g, gradiente de MeOH/CH2Cl2 del 0 % al 5 % en 40 min) para dar 5-amino-4-(4-(benzo[d]oxazol-5-ilmetoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (440 mg, rendimiento del 76 %); 1H RMN (DMSO-d6) : 1,82 - 2,37 (m, 4H, CH2, CH2), 3,50 (s, 3H, CH3), 4,34 - 4,64 (m, 2H, CH2), 4,67 - 4,83 (m, 1H, CH), 5,38 (s, 2H, CH2), 7,18 (s, 1H, NHH), 7,26 - 7,41 (m, 2H, Ar), 7,45 (d, J = 7,7 Hz, 1H, Ar), 7,59 (dd, J = 1,4, 8,4 Hz, 2H, Ar), 7,81 (d, J = 8,3 Hz, 1H, Ar), 7,96 (d, J = 0,9 Hz, 1H, NHH), 8,78 (s, 1H, Ar).
Etapa 3: A una mezcla de 5-amino-4-(4-(benzo[d]oxazol-5-ilmetoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (450 mg, 1,06 mmol) en THF (20 ml), se le anadio terc-butoxido potasico (119 mg, 1,06 mmol) a 0 °C. La mezcla formada se calento hasta la temperatura ambiente y se agito durante una noche. Se anadio mas cantidad de tercbutoxido potasico (48 mg, 0,43 mmol), y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 3 horas. La reaccion se interrumpio con acido acetico (1 ml) a 0 °C, el disolvente se evaporo a sequedad, el residuo se recogio en acetonitrilo (5 ml), y se anadio gota a gota agua (10 ml), despues se anadio bicarbonato sodico saturado para ajustar el pH a 7. La mezcla se agito durante una noche, el solido resultante se filtro y se suspendio de nuevo con acetonitrilo (3 ml) para dar 3-(4-(benzo[d]oxazol-5-ilmetoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (180 mg, rendimiento del 43 %); p.f.: 209-211 °C; 1H RMN (DMSO-d6): 1,89-2,07 (m, 1H, CHH), 2,35 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,60 (s a, 1H, CHH), 2,82 - 3,02 (m, 1H, CHH), 4,22 - 4,54 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CH), 5,38 (s, 2H, CH2), 7,35 (dd, J = 7,6, 10,6 Hz, 2H, Ar), 7,44 - 7,55 (m, 1H, Ar), 7,58 (dd, J = 1,5, 8,5 Hz, 1H, Ar), 7,80 (d, J = 8,5 Hz, 1H, Ar), 7,95 (d, J = 0,9 Hz, 1H, Ar), 8,78 (s, 1H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-d6) : 22,33, 31,16, 45,10, 51,58, 69,32, 111,09, 115,03, 115,29, 119,48, 125,56, 129,78, 130,02, 133,33, 133,40, 139,83, 149,05, 153,35, 154,75, 167,99, 170,95, 172,81; LCMS MH = 392; HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 25/75 de acetonitrilo/H3PO4 al 0,1 % tR = 4,59 (98,54 %); Anal. Calc. para C21H17N3O5 0,3 H2O: C, 63,57; H, 4,47; N, 10,59; Observado: C, 63,54; H, 4,31; N, 10,58.
5.139 CLORHIDRATO DE 3-(4-(ISOINDOLIN-5-IL)METOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000129_0002
Una solucion de 5-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)isoindolin-2-carboxilato de terc-butilo (0,6 g, 1,3 mmol) en THF (20 ml) se trato con HCl/eter (2 M, 1,9 ml, 3,8 mmol) y se agito a temperatura ambiente durante 8 horas. Se anadio eter (10 ml) y el solido se recogio. El solido se suspendio de nuevo con CH2O2 (15 ml) para dar clorhidrato de 3-(4-(isoindolin-5-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,5 g, rendimiento del 88 %): p.f.: 270-272 °C; 1H RMN (DMSO-d6) 51,97-2,00 (m, 1H), 2,41-2,61 (m, 2H), 2,87-2,93 (m, 1H), 4,28 (d, J = 15 Hz, 1H), 4,39 (d, J = 18 Hz, 1H), 4,50 (s, 4H), 5,08-5,14 (dd, J = 6 y 15 Hz, 1H), 5,28 (s, 2H), 7,32-7,52 (m, 6H), 10,01 (s, 2H), 10,98 (s, 1H); 13C RMN (DMSO-de) 5 22,35, 31,18, 45,08, 49,73, 49,79, 51,57, 69,19, 115,01, 115,33, 122,14, 123,01, 127,77, 129,81, 129,93, 133,32, 134,89, 135,47, 136,95, 153,31, 167,95, 170,96, 172,83; Calc. para C22H23N3O4G 0,5 H2O: C, 60,48; H, 5,31; N, 9,62; Cl, 8,11, Observado: C, 60,11; H, 5,21; N, 9,38; Cl, 8,27.
5.140 HIDROGENOCLORURO DE 3-(4-((1H-BENZO[D]IMIDAZOL-2-IL)METOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000130_0001
Etapa 1: A una solucion agitada de 2-(clorometil)-1H-benzo[d]imidazol (1 g, 6,00 mmol) en DMF (10 ml, 129 mmol), se le anadio dicarbonato de di-terc-butilo (1,375 g, 6,30 mmol) a temperatura ambiente. Despues de aproximadamente 10 minutos, se anadieron cantidades cat. de DMAP (0,05 g, 0,409 mmol) a la mezcla de reaccion. La solucion resultante se agito durante 5 minutos mas a temperatura ambiente (el analisis por LCMS indico que la reaccion se hada completado) y la mezcla se incubo a 4 °C durante una noche. La mezcla de reaccion se concentro al vado para dar un aceite que se diluyo con EtOAc (~200 ml), se transfirio a un embudo de decantacion, y se lavo con KH 2 PO 4 acuoso 1 M (pH ~5, 2 x 50 ml). La capa organica se lavo con salmuera, se seco (Na 2 sO 4 ), y se concentro al vado. El residuo se seco en un horno de vado para dar 2-(clorometil)-1H-benzo[d]imidazol-1-carboxilato de terc-butilo en forma de un aceite de color ambar (1,6 g, rendimiento del 97 %). El aceite se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional. 1 H RMN (DMSO-de) 5 1,59 - 1,76 (m, 9H, tBu), 5,13 (s, 2H, CH 2 ), 7,33 -7,51 (m, 2H, Ar), 7,62 - 7,84 (m, 1H, Ar), 7,87 - 8,10 (m, 1H, Ar); 13 C RMN (DMSO-ds) 527,36, 86,28, 114,88, 119,99, 124,52, 125,61, 132,77, 141,16, 147,47, 150,23; No se observo una senal de carbono (CH2Cl) debido al solapamiento con DMSO-de; confirmado por HMQC; LCMS MH = 267, 269 (vease principalmente la fragmentacion Boc).
Etapa 2: Se suspendieron 5-amino-2-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de terc-butilo (500 mg, 1,495 mmol) y carbonato potasico (227 mg, 1,645 mmol) en DMF (7 ml) a temperatura ambiente. A la mezcla agitada a temperatura ambiente, se le anadio 2-(clorometil)-1H-benzo[d]imidazol-1-carboxilato de ferc-butilo (439 mg, 1,645 mmol) en forma de una solucion en DMF (3 ml). La suspension resultante se agito a temperatura ambiente durante aproximadamente 15 horas. La mezcla de reaccion en bruto se repartio entre EtOAc (150 ml) y agua (~50 ml). La capa organica se lavo con salmuera (50 ml), se seco (Na 2 SO 4 ), y se concentro al vado. El residuo oleoso se diluyo con diclorometano (~10 ml), se concentro a sequedad (2 x en diclorometano) y el aceite resultante se puso en un horno de vado a 40 °C durante varias horas para proporcionar 2-((2-(5-amino-1-terc-butoxi-1,5-dioxopentan-2-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)-1H-benzo[d]imidazol-1-carboxilato de /ferc-butilo (1 g) en forma de un aceite de color castano, que se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional. LCMS m H (-Boc) = 465.
Etapa 3: Se disolvio 2-((2-(5-amino-1-terc-butoxi-1,5-dioxopentan-2-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)-1H-benzo[d]imidazol-1-carboxilato de /ferc-butilo (844 mg, 1,495) en THF (10 ml, 122 mmol). A la solucion agitada a temperatura ambiente, se le anadio KO/Bu (2 ml, 2,0 mmol, 1,0 M en THF) de una manera rapida gota a gota mediante una jeringa y el avance de la reaccion se controlo estrechamente por LCMS. Despues de aproximadamente 50 minutos, se anadio mas cantidad de KO/Bu (1 ml, 1 mmol), y la agitacion de la mezcla continuo a temperatura ambiente durante aproximadamente 15 minutos. La mezcla de reaccion se almaceno a -20 °C durante una noche. A la manana siguiente, se anadio mas cantidad de KO/Bu (0,5 ml, 5 mmol) seguido de otro tratamiento de KO/Bu (0,5 ml, 0,5 mmol) despues de 3 horas. Despues de aproximadamente 80 minutos, la mezcla de reaccion se transfirio a una solucion 2 N de HCl en Et2O (50 ml). La suspension de color amarillo palido resultante se agito a temperatura ambiente. Despues de aproximadamente 1 hora, la suspension se filtro y el solido se lavo con mas cantidad de Et 2 O y despues se seco por succion en un embudo de filtro. El secado al horno dio ~1 g de producto en bruto en forma de un solido de color castano. El solido se disolvio en DMF/agua (10 ml/ 3 ml), se sonico y despues se filtro. El filtrado se purifico por inyeccion en una columna para HPLC preparativa C-18. El producto se eluyo con un gradiente de acetonitrilo/agua (acido formico al 0,1 % en ambas fases moviles, MeCN del 5 % al 30 % durante 12 minutos) y las fracciones se recogieron por activacion de masas. Las fracciones deseadas se combinaron y se concentraron al vado para dar un residuo solido que se disolvio de nuevo en HCl 1 N/acetonitrilo (~1:1, 40 ml). La mezcla se concentro al vado y el solido se transfirio a un vial de centelleo. La suspension se congelo y se liofilizo para dar un solido de color blanquecino (145 mg). Este solido se suspendio en agua (5 ml), y la mezcla se agito durante varias horas y despues se filtro. El solido se seco por succion y despues se almaceno en un horno de vado durante una noche para dar clorhidrato de 3-(4-((1H-benzo[d]imidazol-2-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (90 mg, rendimiento del 15 %). HPLC: Waters Symmetry C1e, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 13/87 de acetonitrilo/HsPO 4 al 0,1 %, 4,01 min (96,6 %); p.f.: 229-231 °C; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,91-2,12 (m, 1H, CHH), 2,32 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,54 - 2,70 (m, 1H, CHH), 2,84 - 3,04 (m, 1H, CHH), 4,41 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,55 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,16 (dd, J = 5,0, 13,3 Hz, 1H, CH), 5,73 (s, 2H, CH2), 7,29 - 7,65 (m, 5H, Ar), 7,68 - 7,85 (m, 2H, Ar), 11,02 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DM SO^) 522,49, 31,18, 45,13, 51,58, 62,19, 114,56, 114,93, 116,34, 124,67, 129,97, 130,21, 133,50, 133,55, 149,24, 152,50, 167,74, 170,99, 172,81; LCMS MH = 391; Anal calc. para C21H18N4O4 0,76 HCl 3,4 H2O: C, 52,62; H, 5,37; N, 11,69; Cl, 5,62, Observado: C, 52,72; H, 4,98; N, 11,33; Cl, 5,45.
5.141 3-(4-(BENZO[D]TIAZOL-2-ILMETOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000131_0001
Etapa 1: Se anadio azodicarboxilato de diisopropilo (1,3 g, 6,2 mmol) a una suspension agitada de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,9 g, 3,1 mmol), 1,3-benzotiazol-2-metanol (0,8 g, 4,7 mmol) y trifenilfosfina unida a poKmero (2,1 g, 6,2 mmol) en t Hf (80 ml) a 5-8 °C. Despues de la adicion, la mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaction se filtro y el solido se lavo con cloruro de metileno (20 ml). El filtrado se concentro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO 2 , CH 3 OH:CH 2 Cl 2 , 3:97) para dar 5-amino-4-(4-benzo[d]tiazol-2-ilmetoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,6 g, 42 %).
Etapa 2: Se anadio t-butoxido potasico (0,2 g, 1,4 mmol) a una solution agitada de 5-amino-4-(4-benzo[d]tiazol-2-ilmetoxi)1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,6 g, 1,4 mmol) en THF (40 ml) a 5 °C. La mezcla se agito a 5 °C durante 10 minutos y despues se calento a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reaccion se enfrio en un bano de hielo y se inactivo con HCl 4 N (3 ml). La mezcla se diluyo con CH 2 Cl 2 (80 ml) y se lavo con agua (20 ml) y salmuera (20 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se agito con CH 2 Cl 2 (10 ml) para dar 0,4 g de solido. El solido se suspendio de nuevo con metanol caliente (15 ml) para dar 3-(4-(benzo[d]tiazol-2-ilmetoxi)-1-osoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,35 g, rendimiento del 63 %): p.f. 253-255 °C; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 5 1,99-2,04 (m, 1H), 2,45-2,62 (m, 2H), 2,86-2,94 (m, 1H), 4,39 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 4,47 (d, J = 17,7 Hz, 1H), 5,11­ 5,17 (dd, J = 5,1 y 13,2 Hz, 1H), 5,76 (s, 2H), 7,32-7,75 (m, 5H), 8,02- 8,05 (dd, J = 0,6 y 8,1 Hz, 1H), 8,11-8,14 (dd, J = 0,6 y 7,8 Hz, 1H), 11,00 (s, 1H); 13 C RMN (DMSO-de) 5 22,44, 31,28, 45,10, 51,73, 67,53, 115,41, 116,24, 122,48, 122,86, 125,52, 126,47, 130,07, 133,63, 134,47, 152,58, 152,72, 167,89, 171,07, 172,94; Calc. para C21H17N3O4S: C, 61,91; H, 4,21; N, 10,31; S, 7,87, Observado: C, 61,76; H, 4,01; N, 10,24; S, 7,85.
5.142 3-(4-(BENZOFURAN-5-ILMETOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,-6-DIONA
Figure imgf000131_0002
Etapa 1: Una solucion de acido 1-benzofuran-5-carboxflico (1,0 g, 6,2 mmol) y borato de trimetilo (5 ml) en THF (20 ml) se agito durante 10 minutos. Se anadio gota a gota BH3(CH3)2S/THF (2 M, 3,7 ml, 7,4 mmol). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se inactivo con metanol (5 ml) y se concentro. El residuo se disolvio en cloruro de metileno (75 ml), se lavo con agua (25 ml) y salmuera (25 ml) y se seco. El disolvente se retiro para dar benzofuran-5-metanol (2,6 g, 95 %).
Etapa 2: Se anadio azodicarboxilato de diisopropilo (1,4 g, 6,8 mmol) a una suspension agitada de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1,0 g, 3,4 mmol), benzofuran-5-metanol (0,8 g, 5,1 mmol) y trifenilfosfina unida a polimero (2,3 g, 6,8 mmol) en THF (80 ml) a 3-6 °C. Despues de la adicion, mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se filtro y el solido se lavo con cloruro de metileno (20 ml). El filtrado se concentro y el residuo se purifico por cromatografia (SO2, CH3OH:CH2Cl2, 3:97) para dar 5-amino-4-(4-(benzofuran-5-ilmetoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,9 g, rendimiento del 63 %): 1H RMN (DMSO-d6) 51,09-1,30 (m, 1H), 2,08-2,25 (m, 3H), 3,49 (s, 3H), 4,43 (d, J = 17,7 Hz, 1H), 4,50 (d, J = 17,6 Hz, 1H), 4,71-4,75 (dd, J = 5,0 y 10,4 Hz, 1H), 5,33 (s, 2H), 6,98-6,99 (dd, J = 1,0 y 2,2 Hz, 1H), 7,18 (s, 1H), 7,27-7,35 (m, 2H), 7,43-7,48 (m, 2H), 7,58-7,79 (m, 2H), 8,01 (s, 1H), 8,02 (s, 1H).
Etapa 3: Se anadio t-butoxido potasico (0,3 g, 2,1 mmol) a una solucion agitada de 5-amino-4-(4-benzofuran-5-ilmetoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,9 g, 2,1 mmol) en THF (40 ml) a 5 °C. La mezcla de reaccion se agito a 5 °C durante 10 minutos y se calento a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reaccion se enfrio en un bano de hielo y se inactivo con HCl 4 N (3 ml). La mezcla se diluyo con cloruro de metileno (80 ml) y se lavo con agua (20 ml) y salmuera (20 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, CH3o H:CH2CI2, 3:97) para dar 3-(4-(benzofuran-5-ilmetoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,5 g, 57 %) en forma de un solido de color blanco: p.f. 168-170 °C; 1H RMN (DMSO-d6) 51,97-2,00 (m, 1H), 2,42-2,59 (m, 2H), 2,90-2,91 (m, 1H), 4,28 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 4,39 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 5,08-5,14 (dd, J = 5,4 y 13,5 Hz, 1H), 5,33 (s, 2H), 6,97-6,98 (dd, J = 0,9 y 2,1 Hz, 1H), 7,31-7,51 (m, 4H), 7,60 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,79 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 8,0 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 10,97 (s, 1H); 13C RMN (DMSO^) 522,32, 31,16, 45,09, 51,56, 69,75, 106,70, 111,23, 115,03, 115,18, 120,79, 124,40, 127,28, 129,78, 129,95, 131,25, 133,28, 146,55, 153,49, 153,99, 168,00, 170,96, 172,81; Calc. para C22H18N2O5 0,2 H2O: C, 67,07; H, 4,71; N, 7,1 1, Observado: C, 67,05; H, 4,57; N, 6,97.
5.143 3-(1-OXO-4-(QUINOLIN-2-ILMETOXI)ISOINDOUN-2-IL)PIPERON-2,6-DIONA
Figure imgf000132_0001
Etapa 1: Una solution de 2-quinolina carboxalde^do (1,0 g, 6,4 mmol) en alcohol reactivo (40 ml) se enfrio en un bano de hielo seco/acetona a -60 °C. Se anadio gota a gota UBH4/THF (2 M, 3,8 ml, 7,6 mmol) a -60 °C. La mezcla de reaction se agito a -60 °C durante 1 hora despues se inactivo con agua (10 ml). La mezcla se concentro y el residuo se disolvio en EtOAc (60 ml). La solucion de EtOAc se lavo con salmuera (35 ml) y se seco. El disolvente se retiro para dar quinolin-2-ilmetanol (0,9 g, 89 %).
Etapa 2: Se anadio azodicarboxilato de diisopropilo (1,4 g, 6,8 mmol) a una suspension agitada de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1,0 g, 3,4 mmol), quinolin-2-ilmetanol(0,9 g, 5,7 mmol) y trifenilfosfina unida a pofimero (2,3 g, 6,8 mmol) en THF (80 ml) a 5-8 °C. Despues de la adicion, la mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se filtro y el solido se lavo con cloruro de metileno (25 ml). El filtrado se concentro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO 2 , CH3OH: CH 2 Cl 2 , 3:97) para dar 5-amino-5-oxo-4-(1-oxo-4(quinolin-2-ilmetoxi)isoindolin-2-il)pentanoato de metilo (0,7 g, rendimiento del 47 %): 1 H RMN (DMSO-de) 52,08-2,31 (m, 4H), 3,51 (s, 3H), 4,54 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 4,61 (d, J = 17,6 Hz, 1H), 4,73-4,78 (dd, J = 5,0 y 10,4 Hz, 1H), 5,52 (s, 2H), 7,21 (s, 1H), 7,29-7,32 (m, 2H), 7,45 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,60-7,65 (m, 2H), 7,73­ 7,82 (m, 2H), 7,99-8,05 (t, J = 8,4 Hz, 2H), 8,42 (d, J = 8,5 Hz, 1H); 13 C RMN (DMSO-de) 524,83, 30,34, 44,82, 51,25, 53,42, 71,05, 114,79, 115,44, 119,44, 126,63, 127,21, 127,94, 128,51, 129,63, 129,90, 130,29, 133,54, 137,16, 146,90, 153,23, 157,13, 167,81, 171,74, 172,48.
Etapa 3: Se anadio t-butoxido potasico (0,2 g, 1,6 mmol) a una solucion agitada de 5-amino-5-oxo-4-(1-oxo-4-(quinolin-2-ilmetoxi)isoindolin-2-il)pentanoato de metilo (0,7 g, 1,6 mmol) en THF (50 ml) a 5 °C. La mezcla de reaccion se agito a 5 °C durante 10 minutos y se calento a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reaccion se enfrio en un bano de hielo y se inactivo con HCl 4 N (3 ml). La mezcla se diluyo con cloruro de metileno (80 ml) y se lavo con NaHCO 3 saturado (25 ml). La capa organica se lavo con agua (40 ml) y salmuera (40 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo solido se suspendio con CH 2 Cl 2 (20 ml) para dar 3-(1-oxo-4-(quinolin-2-ilmetoxi)isoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,2 g, 26 %) en forma de un solido de color blanco: p.f. 269-271 °C; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,99-2,04 (m, 1H), 2,44-2,63 (m, 2H), 2,88-2,93 (m, 1H), 4,39 (d, J = 17,5 Hz, 1H), 4,50 (d, J = 17,5 Hz, 1H), 5,11-5,17 (dd, J = 5,1 y 13,3 Hz, 1H), 5,25 (s, 2H), 7,32-7,36 (dd, J = 2,6 y 6,9 Hz, 2H), 7,48 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,60-7,65 (dt, J = 1,2 y 6,9 Hz,1H), 7,72-7,82 (m, 2H), 7,99-8,04 (t, J = 8,0 Hz, 2H), 8,41 -8,44 (d, J = 8,5 Hz, 1 H), 10,99 (s,1 H); 13 C RMN (DMSO^) 5 22,37, 31,17, 45,12, 51,60, 71,05, 115,05, 115,52, 119,44, 126,64, 127,20, 127,93, 128,51, 129,87, 129,91, 130,03, 133,40, 137,11, 146,89, 153,29, 157,09, 167,94, 170,97, 172,83; Calc. para C23H19N3O4: C, 68,82; H, 4,77; N, 10,47, Observado: C, 68,66; H, 4,49; N, 10,24.
5.144 3-(1-OXO-4-(QUINOLIN-3-ILMETOXI)ISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000132_0002
Etapa 1: Una solucion de 3-quinolinacarboxaldehido (1,2 g, 7,6 mmol) en alcohol reactivo (60 ml) se enfrio en un bano de hielo seco/acetona a -40 °C. Se anadio gota a gota UBH4/THF (2 M, 4,6 ml, 9,2 mmol) de -40 a -60 °C. La mezcla de reaccion se agito a -60 °C durante 1 hora y despues se inactivo con agua (10 ml). La mezcla se concentro y el residuo se disolvio en EtOAc (90 ml). La solucion de EtOAc se lavo con NaHCO3 saturado (30 ml) y salmuera (30 ml) y se seco. El disolvente se retiro para dar quinolin-3-ilmetanol (1,2 g, 100 %).
Etapa 2: Se anadio azodicarboxilato de diisopropilo (1,6 g, 7,7 mmol) a una suspension agitada de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1,1 g, 3,8 mmol), quinolin-3-ilmetanol(1,2 g, 7,9 mmol) y trifenilfosfina unida a pofimero (2,6 g, 7,7 mmol) en THF (80 ml) a 5-8 °C. Despues de la adicion, la mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se filtro y el solido se lavo con cloruro de metileno (25 ml). El filtrado se concentro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, CH3OH:CH2Cl2, 3:97) para dar 5-amino-5-oxo-4-(1-oxo-4-(quinolin-3-ilmetoxi)isoindolin-2-il)pentanoato de metilo (1,0 g, 24 %).
Etapa 3: Se anadio t-butoxido potasico (0,3 g, 2,4 mmol) a una solucion agitada de 5-amino-5-oxo-4-(1-oxo-4-(quinolin-3-ilmetoxi)isoindolin-2-il)pentanoato de metilo (1,0 g, 2,4 mmol) en THF (50 ml) a 5 °C. La mezcla de reaccion se agito a 5 °C durante 10 minutos y se calento a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reaccion se enfrio en un bano de hielo y se inactivo con HCl 4 N (4 ml). La mezcla se diluyo con cloruro de metileno (80 ml), se lavo con NaHCO 3 saturado (30 ml) y agua (40 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el solido se suspendio con metanol caliente (10 ml) para dar 3-(1-oxo-4-(quinolin-3-ilmetoxi)isoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,1 g, 47 %) en forma de un solido de color blanco: p.f. 270- 273 °C; 1 H RMN (DMSO-d6) 51,99-2,01 (m, 1H), 2,43-2,60 (m, 2H), 2,91(m, 1H), 4,33 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 4,40 (d, J = 17,7 Hz, 1H), 5,09-5,15 (dd, J = 5,1 y 13,2 Hz, 1H), 5,49 (s, 2H), 7,37 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,52 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,64 (dt, J = 1,0 y 8,0 Hz, 1H), 7,79 (dt, J = 1,5 y 6,9 Hz, 1H), 8,03 (t, J = 8,5 Hz, 2H), 8,48 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 9,04 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 10,98 (s, 1H); 13 C RMN (DMSO-de) 5 22,33, 31,16, 45,08, 51,57, 67,52, 115,07, 115,51, 126,94, 127,24, 128,09, 128,72, 129,68, 129,72, 129,87, 130,06, 133,38, 134,68, 147,22, 150,52, 153,28, 167,95, 170,94, 172,81; Calc. para C23H19N3O4 0,2 H2O: C, 68,21; H, 4,83; N, 10,37, Observado: C, 68,29; H, 4,87; N, 10,15.
5.145 3-[4-(CROMAN-3-ILMETOXI)-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000133_0001
Etapa 1: Se anadio trifenilfosfina unida a poflmero (1,6 g, 2,04 mmol, 1,25 mmol/g) a la solucion agitada de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-(4-hidroxi-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-bufirico (300 mg, 1,02 mmol) en THF (10 ml) a 0 °C. La mezcla resultante se agito a 0 °C durante 10 minutos seguido de la adicion de DIAD (412 mg, 2,04 mmol). Diez minutos mas tarde, a la mezcla se le anadio croman-3-il-metanol (336 mg, 2,04 mmol). La reaccion se agito a temperatura ambiente durante 16 horas y la reaccion se completo. La mezcla de reaccion se filtro y el solido se lavo con diclorometano (5 x 20 ml). El filtrado se concentro y el residuo se purifico por cromatografia ISCO para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(croman-3-flmetoxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-bufirico en forma de un solido tipo vidrio de color amarillo (400 mg, rendimiento del 90 %): LCMS MH = 439.
Etapa 2: Se anadio KO/Bu (102,4 mg, 0,91 mmol) a la solucion agitada de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(croman-3-ilmetoxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-bufirico (400 mg, 0,91 mmol) en tetrahidrofurano (20 ml) a 0 °C.
La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 5 horas seguido de la adicion de HCl (ac., 1 N, 1,3 ml) y despues agua (10 ml). La mezcla se extrajo con diclorometano (2 x 25 ml). Las capas organicas se secaron por MgSO 4 y se concentraron al vado. El residuo se purifico por cromatografia ISCO y HPLC prep. para dar 3-[4-(croman-3-ilmetoxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (30 mg, rendimiento del 7,9 %). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 40/60 (acetonitrilo/H 3 PO 4 al 0,1 %): tR = 7,07(100 %); p.f.: 258-260 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 5 1,92 - 2,08 (m, 1H, CHH), 2,34 - 2,45 (m, 1H, CHH), 2,54 - 2,65 (m, 2H, CH2), 2,66 - 2,81 (m, 1H, CHH), 2,82 - 3,02 (m, 2H, CH2), 3,97 - 4,48 (m, 6H, CH2, CH2, CH2), 5,04 - 5,19 (m, 1H, CHN), 6,70 - 6,89 (m, 2H, Ar), 7,01 - 7,15 (m, 2H, Ar), 7,29 (dd, J = 7,7, 18,1 Hz, 2H, Ar), 7,42 - 7,52 (m, 1H, Ar), 10,99 (s, 1H, NH). *un proton se solapo con DMSO, que se probo por HMQC; 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 5 22,37, 26,66, 31,15, 31,72, 31,75, 44,89, 51,52, 66,88, 68,18, 114,48, 115,18, 116,14, 120,26, 121,02, 127,07, 129,86, 129,99, 133,20, 153,52, 154,11, 167,99, 170,97, 172,83; LCMS MH = 407.
5.146
Figure imgf000133_0002
3-[4-(4-BENZOTRIAZOL-1-ILMETIL-BENCILOXI)-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000133_0003
Etapa 1: A una solucion de 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,683 g, 1,43 mmol) en acetonitrilo (10 ml) se le anadieron 1H-benzo[d][1,2,3]triazol (0,205 g, 1,72 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,285 ml, 1,724 mmol). La mezcla se agito durante una noche y despues se concentro para dar 4-(4-(4-((1H-benzo[d][1,2,3]triazol-1-il)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-amino-5-oxopentanoato de metilo en bruto en forma de un solido espumoso de color blanco (1,30 g). Se uso en la siguiente etapa sin purification adicional.
Etapa 2: A una suspension de color blanco agitada de 4-(4-(4-((1H-benzo[d][1,2,3]triazol-1-il)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-amino-5-oxopentanoato de metilo (0,73 g, 1,43 mmol) en THF (12 ml) en un bano de hielo se le anadio 2-metilpropan-2-olato potasico (0,46 g, 4,11 mmol). La mezcla se agito durante 15 minutos, se inactivo con HCl 1 N (~3 ml) y despues se neutralizo con bicarbonato sodico saturado (6 ml a pH = 7). La mezcla se agito con acetato de etilo (20 ml), y despues se filtro para dar un solido de color blanco. Se purifico sobre una columna de gel de sflice (MeOH/CH 2 Cl 2 , gradiente del 1 % al 5 % en 30 min) para dar 3-[4-(4-benzotriazol-1-ilmetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un polvo de color blanco (340 mg, rendimiento del 49 %); p.f., 228-230 °C; HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 pm, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 95/5 en 5 min, isocratica a 95/5 en 5 min (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 6,44 min (98,2 %); 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,89 - 2,03 (m, 1H, CH), 2,33 - 2,47 (m, 1H, CH), 2,52 - 2,62 (m, 1H, CH), 2,81 - 2,98 (m, 1H, CH), 4,14 - 4,45 (m, 2H, CH2), 5,09 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,20 (s, 2H, CH2), 6,00 (s, 2H, CH2), 7,26 - 7,58 (m, 11H, ArH), 7,86 (d, J = 8,5 Hz, 1H, ArH), 8,06 (d, J = 8,3 Hz, 1H, ArH), 10,95 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 522,33, 31,20, 45,06, 50,64, 51,55, 69,12, 110,65, 114,89, 115,27, 119,22, 124,04, 127,45, 127,88, 128,15, 129,79, 129,94, 132,64, 133,31, 135,65, 136,53, 145,31, 153,37, 167,98, 170,94, 172,82. LC/MS MH = 482; Anal calc. para C27H23N5O4 0,7 H2O: C, 65,63; H, 4,98; N, 14,17, Observado: C, 65,39; H, 4,79; N, 13,96.
5.147 3-(4-(2-CLOROBENCILOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000134_0001
A una suspension de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (200 mg, 0,684 mmol,) y Cs2CO3 (233 mg, 0,677 mmol) en DMF seca (5 ml), se le anadio 1-cloro-2-clorometil-benceno (820 pl, solucion al 10 % en DMF, 0,650 mmol). La mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente y el avance se controlo por LCMS. Despues de 2 horas, se anadio N,N-diisopropiletilamina (120 pl, 0,684 mmol), y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. Despues de 14 horas, la mezcla se calento en un bano de aceite a 80 °C y se agito durante 8 horas. La mezcla de reaccion en bruto se enfrio en un bano de hielo y despues se transfirio en pequenas porciones a una solucion acuosa 0,5 N de HCl (40 ml). Un solido de color blanco formado se recogio por filtracion, se lavo con mas cantidad de agua en un embudo de filtro, y se seco en un horno de vado para dar 220 mg de producto en bruto. El solido se disolvio en DMF minima y se purifico por inyeccion en una columna para HPLC preparativa C-18. El producto se eluyo con un gradiente de acetonitrilo/agua (acido formico al 0,1 % en ambas fases moviles, acetonitrilo del 30 % al 75 % durante 20 min) y las fracciones se recogieron por activacion de masas. Las fracciones deseadas se combinaron y se concentraron al vado para dar 3-(4-(2-clorobenciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (175 mg, rendimiento del 70 %): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 pm, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 50/50 de acetonitrilo/H3PO4 al 0,1 %, 4,08 min (98,7 %); p.f.: 213-215 °C; 1H RMN (DMSO-d6) 5 1,87 - 2,05 (m, 1H, CHH), 2,32 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,65 (m, 1H, CHH), 2,82 - 3,00 (m, 1H, CHH), 4,26 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,46 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,0, 13,1 Hz, 1H, CH), 5,31 (s, 2H, CH2), 7,27 - 7,46 (m, 4H, Ar), 7,48 - 7,59 (m, 2H, Ar), 7,62 - 7,72 (m, 1H, Ar), 10,96 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-d6) 522,30, 31,16, 45,03, 51,55, 67,25, 114,93, 115,51, 127,38, 129,42, 129,90, 129,95, 130,03, 130,22, 132,72, 133,37, 133,85, 153,26, 167,91, 170,96, 172,80; LCMS MH = 385, 387; Anal. Calc. para C20H17ClN2O4 0,35 H2O: C, 61,42; H, 4,56; N, 7,16; Cl, 9,06, Observado: C, 61,26; H, 4,32; N, 7,19; Cl, 9,18.
5.148 3-(1-OXO-4-(2,4,6-TRICLOROBENCILOXI)ISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000134_0002
Etapa 1: Una solucion de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,50 g, 1,7 mmol) y 2,4,6-triclorobencil alcohol (0,72 g, 3,4 mmol) en THF (30 ml) se enfrio a 0 °C. Se anadio trifenilfosfina unida a polimero (3 mmol/g de carga, 1,2 g, 3,7 mmol) seguido de DIAD (0,76 g, 3,7 mmol). Despues de una hora, el bano de refrigeration se retiro, y la mezcla se agito en una atmosfera de nitrogeno durante 20 horas. La mezcla se filtro, y el filtro se aclaro con acetato de etilo (50 ml). El filtrado se diluyo con mas cantidad de acetato de etilo (50 ml), se lavo con salmuera (3 x 100 ml) y se evaporo. El residuo se sometio a cromatografia en un gradiente de cloruro de metileno-metanol, eluyendo el producto en metanol al 5 %. Se obtuvo 5-amino-5-oxo-4-(1-oxo-4-(2,4,6-triclorobenciloxi)isoindolin-2-il)pentanoato de metilo en bruto (1,15 g (>100 %)) en forma de un pegamento.
Etapa 2: El material en bruto obtenido en la Etapa 1 se disolvio en THF (25 ml) y se enfrio a 0 °C. Despues, se anadio terc-butoxido potasico (0,19 g, 1,7 mmol), y la mezcla se agito en una atmosfera de nitrogeno durante 3 horas. La mezcla se inactivo mediante la adicion de 5 gotas acido acetico. La mezcla resultante se diluyo con acetato de etilo (75 ml), se lavo con una solucion acuosa saturada de bicarbonato sodico (75 ml) y se evaporo al vado. El residuo se sometio a cromatografia en un gradiente de cloruro de metileno-metanol, eluyendo el producto en metanol al 5 %. Despues de la evaporacion de las fracciones apropiadas, el residuo se suspendio en eter (15 ml) durante 1 hora, se filtro y se seco al vado, proporcionando el producto en forma de un solido de color blanco, 0,53 g, con un rendimiento del 68 % en dos etapas; HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 50/50 (acetonitrilo/HsPO4 al 0,1 %): tR = 6,94 (97,86 %); p.f. 138-140 °C; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 5 1,88 - 2,02 (m, 1H, CHH), 2,33 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,62 (m, 1H, CHH), 2,79 - 2,98 (m, 1H, CHH), 4,16 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,32 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,09 (dd, J = 5,0, 13,1 Hz, 1H, CH), 5,33 (d, J = 10,6 Hz, 1H, CHH), 5,39 (d, J = 10,8 Hz, 1H, CHH), 7,39 (d, J = 7,2 Hz, 1H, Ar), 7,45 - 7,61 (m, 2H, Ar), 7,81 (s, 2H, Ar), 10,94 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 5 22,26, 31,18, 44,99, 51,58, 65,00, 115,07, 115,89, 128,58, 129,90, 130,03, 130,62, 133,44, 135,09, 136,85, 153,40, 167,83, 170,95, 172,79; LCMS MH = 453/455/457; Anal. Calc. para C20H15Cl 3 N2O4 • 0,4 Et2O: C, 53,67; H, 3,96; N, 5,80; Observado: C, 53,65; H, 3,89; N, 5,71.
5.149 3-[4-(2,5-DICLORO-BENCILOXI)-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000135_0001
Etapa 1: A la solucion de 3-(4-hidroxi-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-piperidin-2,6-diona (0,5 g, 1,7 mmol) en THF (30 ml), se le anadio trifenil fosfina (soportada con poflmero 2,2 mmol/g, 1,64 g, 3,74 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 15 minutos. Se anadio azodicarboxilato de diisopropilo (0,76 ml, 3,74 mmol) a 0 °C y la mezcla se agito a 0 °C durante 30 minutos. Se anadio 2,5-dicloro fenilmetanol (0,45 g, 2,57 mmol) a 0 °C, y la mezcla se dejo calentar a temperatura ambiente y se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se filtro y el filtrado se concentro. El aceite resultante se purifico sobre una columna de gel de sflice eluida con cloruro de metileno y metanol (gradiente, el producto se situo en metanol al 6 %) para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(2,5-dicloro-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco (0,7 g, 92 %).
Etapa 2: A la solucion en THF (30 ml) de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(2,5-dicloro-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco (0,7 g, 1,5 mmol) se le anadio terc-butoxido potasico (0,17 g, 1,7 mmol) a 0 °C. La mezcla se agito a 0 °C durante 10 minutos y se inactivo con HCl 1 N (5 ml, 5 mmol), seguido de NaHCO 3 saturado (25 ml). La mezcla se extrajo con EtOAc (50 ml x 2). La capa organica se lavo con agua (30 ml) y salmuera (30 ml), se seco sobre MgSO 4 y se concentro. Al solido resultante se le anadio EtOAc (10 ml) seguido de hexano (10 ml) en agitacion. La suspension se filtro para dar 3-[4-(2,5-Dicloro-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,26 g, 37 %). p.f.: 256-258 °C; HPLC: Waters Symmetry C 13 , 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 95/5 de acetonitrilo/H 3 PO 4 al 0,1 % en 5 min,: tR = 6,87 min (96,5 %); 1 H RMN (DMSO-de) 51,67 - 2,16 (m, 1H, CHH), 2,36 - 2,46 (m, J = 4,2 Hz, 1H, CHH), 2,53 - 2,65 (m, J = 19,5 Hz, 1H, CHH), 2,76 - 3,09 (m, 1H, CHH), 4,13 - 4,60 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,0, 13,1 Hz, 1H, NCH), 5,29 (s, 2H, CH2), 7,34 -7,43 (m, 2H, Ar), 7,46 -7,63 (m, 3H, Ar), 7,73 (d, J = 2,5 Hz, 1H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO^) 5 22,27, 31,14, 45,02, 51,56, 66,75, 114,95, 115,68, 129,66, 129,78, 129,88, 129,94, 131,11, 131,37, 131,91, 133,41, 136,01, 153,05, 167,83, 170,91, 172,76; LCMS: 465; Anal calc. para C26H16Cl2N2O4 0,2 H2O: C, 56,81; H, 3,91; N, 6,62; Observado: C, 56,75; H, 4,19; N, 6,70.
5.150 3-[4-(3-METIL-BENCILOXI)-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000135_0002
Etapa 1: Se anadio trifenilfosfeno soportado con poflmero (1,6 mmol/g, 2,40 g, 3,80 mmol) a una solucion agitada de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,50 g, 1,71 mmol) en THF (10 ml) a 0 °C seguido de la adicion de diazen-1,2-dicarboxilato de diisopropilo (0,75 ml, 3,80 mmol). Despues de agitar durante 30 minutos, se anadio (2,3-dicloro-fenil)-metanol (0,45 g, 2,60 mmol). La mezcla se agito durante una hora, despues se filtro, se lavo con metanol (3 x 10 ml), cloruro de metileno (3 x 10 ml). El filtrado combinado se evaporo al vado para dar un aceite, que se purifico sobre una columna de gel de sflice (gradiente de EtOAc/Hexanos del 20 % al 100 % en 90 min) para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(2,3-dicloro-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butrnco en forma de un solido de color blanco (0,35 g, rendimiento del 45 %).
Etapa 2: Se anadio terc-butoxido potasico (0,17 g, 1,50 mmol) a una suspension agitada de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(2,3-dicloro-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco (0,34 g, 0,75 mmol) en THF (20 ml) a 0 °C. La mezcla se agito durante ten minutos, se inactivo con HCl 1 N (3 ml), se neutralizo con bicarbonato sodico saturado (4 ml a pH = 7), y se extrajo rapidamente por acetato de etilo (2 x 30 ml). Las fases de acetato de etilo combinadas se evaporaron y se purificaron sobre una columna de gel de sflice (MeOH/CH2Cl2, gradiente de 1 % al 9 % en 60 min) para dar 3-[4-(2,3-dicloro-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,03 g, rendimiento del 9 %); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, isocratica a 50/50 en 10 min (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 5,84 min (96,1 %); p.f.: 272-274 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,90 - 2,05 (m, 1H, CHH), 2,37 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,65 (m, 1H, CHH), 2,83 - 3,01 (m, 1H, CHH), 4,22 -4,50 (m, 2H, CH2), 5,12 (dd, J = 5,2, 13,1 Hz, 1H, NCH), 5,35 (s, 2H, CH2), 7,32 - 7,73 (m, 6H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH);
13 C RMN (DMSO-de) 522,35, 31,20, 45,05, 51,59, 67,56, 114,97, 115,68, 128,41, 128,51, 129,95, 130,30, 130,60, 131,98, 133,44, 136,57, 153,09, 167,90, 170,96, 172,83; LCMS MH = 419, 421; Anal calc. para C20H16N2O4Cl2: C, 57,30; H, 3,85; N, 6,68; Cl, 16,91; Observado: C, 57,31; H, 3,86; N, 6,46; Cl, 17,02.
5.151 3-(4-(3,4-DIMETOXIBENCILOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000136_0001
Etapa 1: Se anadio azodicarboxilato de diisopropilo (1,3 g, 6,1 mmol) a una suspension agitada de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,9 g, 3,1 mmol), 3,4-dimetoxibencil alcohol (0,8 g, 4,6 mmol) y trifenilfosfina unida a poflmero (2,1 g, 6,2 mmol) en THF (80 ml) a 5-8 °C. Despues de la adicion, la mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se filtro y el solido se lavo con cloruro de metileno (30 ml). El filtrado se concentro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, CH3OH:CH2Cl2, 3:97) para dar 5-amino-4-(4-(3,4-dimetoxibenciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,5 g, 3,8 %).
Etapa 2: Una solucion de t-butoxido potasico en THF (1 M, 1,2 ml, 1,2 mmol), se anadio a una solucion agitada de 5-amino-4-(4-(3,4-dimetoxibenciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,5 g, 1,2 mmol) en THF (30 ml) a 5 °C. La mezcla se agito a 5 °C durante 10 minutos y despues se calento a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reaccion se enfrio en un bano de hielo y se inactivo con HCl 4 N (4 ml). La mezcla se diluyo con cloruro de metileno (70 ml) y agua (20 ml). La capa organica se lavo con salmuera (40 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, CH3OH:CH2Cl2, 3:97) para dar 3-(4-(3,4-dimetoxibenciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,2 g, 32 %) en forma de un solido de color blanco: p.f. 205-207 °C; 1H RMN (DMSO- d6) 51,96-2,00 (m, 1H), 2,41-2,60 (m, 2H), 2,91 (m, IH), 3,76 (s, 6H), 4,26 (d, J = 17,7 Hz, 1H), 4,37 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 5,07-5,13 (m, 3H), 6,94-7,09 (m, 3H), 7,31-7,35 (m, 2H), 7,48(t, J = 7,8 Hz, IH), 10,96(s, 1H); 13C RMN (DMSO-d6) 5 22,30, 31,17; 45,11, 51,56, 55,47, 69,67, 111,59, 111,90, 115,07, 115,12, 120,51, 128,80, 129,75, 129,96, 133,24, 148,65, 153,51, 168,00, 170,96, 172,82; Calc. para C22H22N2O6: C, 64,38; H, 5,40; N, 6,83, Observado: C, 64,36; H, 5,25; N, 6,85.
5.152 3-[4-(3-CLORO-BENCILOXI)-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000136_0002
Etapa 1: A la solucion en THF de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-(4-hidroxi-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-butrnco (1,0 g, 3,42 mmol), se le anadieron resina de trifenil fosfina (2,3 g, 2,2 mmol/g de carga, 6,84 mmol) y DIAD (1,33 ml, 6,84 mmol) a 0 °C. Despues de agitarse a 0 °C durante 10 minutos, a la mezcla se le anadio (3-cloro-4-ilmetil-fenil)-metanol (0,61 ml, 5,13 mmol) y se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla se filtro y el filtrado se concentro y se extrajo con EtOAc (30 ml) y Na2CO3 (20 ml). La capa organica se lavo con agua (20 ml) y salmuera (20 ml), y se concentro. El aceite resultante se purifico sobre una columna de gel de sflice para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(3-cloro-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco en forma de un aceite (0,24 g, 20 %).
Etapa 2: A la solucion en THF (20 ml) de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(3-cloro-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco (0,24 g, 0,57 mmol), se le anadio t-butoxido potasico (0,57 ml g, 0,57 mmol) a 0 °C. La mezcla se agito durante 15 minutos a 0 °C y se inactivo con 5 ml de una solucion 1 N de HCl seguido de 15 ml de una solution saturada de NaHCO 3 . La mezcla se extrajo con EtOAc (20 ml). La capa organica se concentro al vatio. El aceite resultante se purifico sobre una columna de gel de sflice eluida con CH 2 Cl 2 y metanol para dar 3-[4-(4-Cloro-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (60 mg, 27 %). p.f.: 224-226 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometros,1 ml/min, 240 nm, gradiente de acetonitrilo/H 3 PO 4 al 0,1 % en H 2 O de 5/95 a 100/0 en 5 min y mantenido a 100/0 durante 5 min: tR = 4,9 min (97 %).
1 H RMN (DMSO-de) 51,88 -2,05 (m, J = 1,9 Hz, 1H, CHH), 2,34 -2,46 (m, 1H, CHH), 2,57 -2,65 (m, J = 3,6 Hz, 1H, CHH), 2,79- 3,02 (m, 1H, CHH), 4,16 -4,61 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,2, 13,1 Hz, 1H, NCH), 5,27 (s, 2H, CH2), 7,19 - 7,38 (m, 2H, Ar), 7,38 - 7,54 (m, 4H, Ar), 7,56 (s, 1H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-de) 522,36, 31,21, 45,09, 51,61,68,59, 114,95, 115,43, 126,19, 127,33, 127,91, 129,84, 129,98, 130,42, 133,13, 133,39, 139,20, 153,24, 167,95, 170,99, 172,87; LCMS MH = 385. Anal calc. para C20H17N2O4CL C, 62,42; H, 4,45; N, 7,28; Observado: C, 61,51 % H, 4,04; N, 7,12.
5.153 3-(4-(3-(2-(DIMETILAMINO)ETOXI)-4-METOXIBENCILOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000137_0001
Etapa 1: Una mezcla de 3-hidroxi-4-metoxibenzaldehido (4,2 g, 27,3 mmol) y Cs2CO3 (22,2 g, 68,2 mmol) en DMF (80 ml) se agito durante 10 minutos. A esta mezcla se le anadio clorhidrato de cloruro de dimetilaminoetilo (4,7 g, 32,7 mmol). La mezcla de reaction se agito en un bano de aceite a 50 °C durante 18 horas. La mezcla de reaction se enfrio y se filtro. El filtrado se diluyo con agua (200 ml) y se extrajo con EtOAc (4 x 50 ml). La solucion de EtOAc combinada se lavo con agua (3 x 50 ml) y salmuera (50 ml), y se seco. El disolvente se retiro para dar 3-(2-(dimetilamino)etoxi)-4-metoxibenzaldehido (3,8 g, 62 %).
Etapa 2: Una solucion de 3-(2-(dimetilamino)etoxi)-4-metoxibenzaldehido (3,8 g, 16,8 mmol) en THF (20 ml) se anadio a una solucion agitada de UBH4/THF (2,0 M, 10,1 ml) en THF (20 ml) a 6-10 °C. Despues de la adicion, la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla de reaccion se enfrio en un bano de hielo y se inactivo con agua (15 ml). La mezcla se extrajo con EtOAc (3 x 50 ml) y la solucion EtOAc combinada se lavo con agua (40 ml) y salmuera (40 ml), y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, EtOAc:CH2Cl2, 3:7) para dar 3-(2-(dimetilamino)etoxi-4-metoxifenil)metanol (3,6 g, rendimiento del 94 %): 1H RMN (DMSO-d6) 52,62 (s, 6H). 3,13 (t, J = 5,4 Hz, 2H), 3,73 (s, 3H), 4,31 (t, J = 5,4 Hz, 2H), 4,42 (d, J = 5,7 Hz, 2H), 5,08 (t, J = 5,7 Hz, 1H), 6,84-6,97 (m, 3H); 13C RMN (DMSO-d6) 551,74, 55,70, 61,89, 62,63, 64,07, 111,91, 112,38, 119,38, 135,12, 147,15, 147,97.
Etapa 3: Se anadio azodicarboxilato de diisopropilo (0,9 g, 4,4 mmol) a una suspension agitada de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,7 g, 2,2 mmol), 3-(2-(dimetilamino)etoxi-4-metoxifenil)metanol (0,8 g, 3,3 mmol) y trifenilfosfina unida a polimero (1,5 g, 4,4 mmol) en THF (80 ml) a 5-8 °C. Despues de la adicion, la mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se filtro y el solido se lavo con cloruro de metileno (30 ml). El filtrado se concentro, y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, CH3OH:CH2Cl2, 3:97) para dar 5-amino-4-(4-(3-(2-(dimetilamino)etoxi)-4-metoxibenciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,6 g, 54 %).
Etapa 4: Se anadio t-butoxido potasico/THF (1 M, 1,3 ml, 1,3 mmol) a una solucion agitada de 5-amino-4-(4-(3-(2-(dimetilamino)etoxi)-4-metoxibenciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,6 g, 1,3 mmol) en THF (20 ml) a 5 °C. La mezcla se agito a 5 °C durante 10 minutos y despues se calento a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reaccion se enfrio en un bano de hielo y se inactivo con NH4Cl saturado (6 ml). La mezcla se diluyo con cloruro de metileno (70 ml) y NaHCO3 saturado (20 ml). La capa organica se lavo con agua (40 ml) y salmuera (40 ml), y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, CH3OH:CH2Cl2, 3:97) para dar 3-(4-(3-(2-(dimetilamino)etoxi)-4-metoxibenciloxi)-1-oxoisoindolin-2- il)piperidin-2,6-diona (0,2 g, 39 %) en forma de un solido de color blanco: p.f. 201-203 °C; 1H RMN (DMSO- d6) 51,95-2,00 (m, 1H), 2,40-2,52 (m, 2H), 2,61 (s, 6H), 2,84-2,95 (m, 1H), 3,1 1-3,17 (m, 2H), 3,76 (s. 3H), 4,26 (d, J = 17,7 Hz, 1H), 4,34 (t, J = 5,4 Hz, 2H), 4,37 (d, J = 17,7 Hz, 1H), 5,07-5,13 (dd, J = 5,1 y 13,2 Hz, 1H), 5,15 (s, 2H), 7,00 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,05- 7,08 (dd, J = 1,8 y 8,1 Hz, 1H), 7,16 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 7,31-7,35 (m, 2H), 7,48 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 10,96 (s, 1H); 13C RMN (DMSO-d6) 522,33, 31,16, 45,09, 51,54, 51,73, 55,67, 61,76, 64,10, 69,55, 112,01, 113,75, 115,09, 115,16, 121,31, 128,89, 129,77, 129,96, 133,25, 147,25, 149,00, 153,50, 168,00, 170,95, 172,80; Calc. para C25H29N3O6 0,1 H2O: C, 61,84; H, 6,44; N, 8,65; Observado: C, 62,02; H, 6,67; N, 8,58.
5.154 3 -(4 -(4 -(2 -(D IM E T IL A M IN O )E T O X I)-3 -M E T O X IB E N C IL O X I)-1 -O X O IS O IN D O L IN -2 -IL )P IP E R ID IN -2 ,6 -D IO N A
Figure imgf000138_0001
Etapa 1: Una mezcla de vainillina (2 g. 27,3 mmol) y Cs 2 CO 3 (22,2 g, 68,2 mmol) en DMF (80 ml) se agito durante 10 minutos. A esta mezcla se le anadio cloruro de dimetilaminoetilo (4,7 g, 32,7 mmol). La mezcla se agito en un bano de aceite a 50 °C durante 18 horas. La mezcla de reaction se filtro. El filtrado se diluyo con agua (100 ml) y se extrajo con EtOAc (4 x 50 ml). La solution de EtOAc se lavo con agua (3 x 50 ml) y salmuera (50 ml), y se seco. El disolvente se retiro para dar 4-(2-(dimetilamino)etoxi)-3-metoxibenzalde^do (2,1 g, 34 %).
Etapa 2: Se anadio una solucion de 4-(2-(dimetilamino)etoxi)-3-metoxibenzalde^do (1,8 g, 8,1 mmol) en THF (15 ml) a una solucion agitada de UBH4/THF (2 M, 4,8 ml, 9,7 mmol) en THF (15 ml) de 8 a 10 °C. Despues de la adicion, la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla de reaccion se enfrio en un bano de hielo y se inactivo con agua (10 ml). La mezcla se agito con NaHCO3 saturado (25 ml) y EtOAc (50 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 30 ml). La solucion de EtOAc combinada se lavo con salmuera (40 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO 2 , EtOAc:CH 2 Cl 2 , 3:7) para dar (4-(2-(dimetilamino)etoxi)-3-metoxifenil)metanol (2,6 g, rendimiento del 93 %): 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 52,61 (s, 6H), 3,11 (t, J = 5,4 Hz, 2H), 3,75 (s, 3H), 4,30 (t, J = 5,4 Hz, 2H), 4,41 (d, J = 5,7 Hz, 2H), 5,09 (t, J = 5,7 Hz, 1H), 6,81-6,96 (m, 3H); 13 C RMN (DMSO-de) 551,69, 55,48, 61,85, 62,69, 64,29, 110,81, 113,61, 118,51, 136,02, 146,11, 149,01.
Etapa 3: Se anadio azodicarboxilato de diisopropilo (1,4 g, 6,8 mmol) a una suspension agitada de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1,0 g, 3,4 mmol), (4-(2-(dimetilamino)etoxi)-3-metoxifenil)metanol (1,2 g, 5,1 mmol) y tifenilfosfina unida a pofimero (2,3 g, 6,8 mmol) en THF (80 ml) a 5-8 °C. Despues de la adicion, la mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se filtro y el solido se lavo con cloruro de metileno (30 ml). El filtrado se concentro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO 2 , CH 3 OH:CH 2 Cl 2 , 3:97) para dar 5-amino-4-(4-(4-(2-dimetilamino)etoxi)-3-metoxibenciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1,4 g, 81 %).
Etapa 4: Se anadio una solucion de t-butoxido potasico/THF (1 M, 3,0 ml, 3,0 mmol) a una solucion agitada de 5-amino-4-(4-(4-(2-(dimetilamino)etoxi)-3-metoxibenciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1,5 g, 3,0 mmol) en THF (30 ml) a 5 °C. La mezcla se agito a 5 °C durante 10 minutos y despues se calento a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reaccion se enfrio en un bano de hielo y se inactivo con NH4Cl saturado (10 ml). La mezcla se diluyo con CH2O 2 (50 ml) y NaHCO 3 saturado (25 ml). La capa acuosa se extrajo con CH2O 2 (2 x 30 ml) y la solucion combinada de CH 2 Cl 2 se lavo con salmuera (40 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO 2 , CH 3 OH:CH 2 Cl 2 , 3:97) para dar 3-(4-(4-(2-(dimetilamino)etoxi)-3-metoxibenciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,6 g, 39 %) en forma de un solido de color blanco: p.f. 190-192 °C; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,95-2,00 (m, 1H), 2,41-2,55 (m, 2H), 2,61 (s, 6H), 2,84-2,91 (m, 1H), 3,13 (t, J = 5,4 Hz, 2H), 3,77(s, 3H), 4,27 (d, J = 17,5 Hz, 1H), 4,33 (t, J = 5,4 Hz, 2H), 4,37 (d, J = 17,5 Hz, 1H), 5,07-5,13 (dd, J = 5,1 y 13,2 Hz, 1H), 5,16 (s, 2H), 7,02 (m, 2H), 7,12 (a, 1H),7,31-7,35 (m, 2H), 7,48 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 10,96 (s, 1H); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 522,31, 31,17, 45,11, 51,56, 51,72, 55,67, 61,77, 64,14, 69,59, 112,24, 113,42, 115,05, 115,16, 120,50, 129,77, 129,95, 133,25, 147,22, 149,06, 153,50, 168,00, 170,96, 172,82; Calc. para C25H29N 3 O6 1,0 H2O: C, 6134; H, 6,44; N, 8,65, Observado: C, 61,98; H, 6,84; N, 8,67.
5.1553-[4-(4-CLORO-BENCILOXI)-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000138_0002
Etapa 1: A la solucion en THF de ester mefilico del acido 4-carbamoil-4-(4-hidroxi-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-bufirico (1,0 g, 3,42 mmol), se le anadieron resina de trifenil fosfina (2,3 g, 2,2 mmol/g de carga, 6,84 mmol) y DIAD (1,33 ml, 6,84 mmol) a 0 °C. Despues de agitarse a 0 °C durante 10 minutos, a la mezcla se le anadio (4-cloro-4-ilmetil-fenil)-metanol (0,73 g, 5,13 mmol) y se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla se filtro y el filtrado se concentro y se extrajo con EtOAc (30 ml) y Na2CO3 (20 ml). La capa organica se lavo con agua (20 ml) y salmuera (20 ml), y se concentro. El aceite resultante se purifico sobre una columna de gel de sflice para dar ester mefilico del acido 4-carbamoil-4-[4-(4-cloro-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidroisoindol-2-il]-bufirico (0,13 g, 13 %).
Etapa 2: A la solucion en THF (20 ml) de ester mefilico del acido 4-carbamoil-4-[4-(3-morfolin-4-ilmetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-bufirico (0,18 g, 0,43 mmol), se le anadio t-butoxido potasico (0,6 ml g, 0,6 mmol) a 0 °C. La mezcla se agito durante 15 minutos a 0 °C y se inactivo con 5 ml de una solucion 1 N de HCl seguido de 15 ml de una solucion saturada de NaHCO3. La mezcla se extrajo con EtOAc (20 ml). La capa organica se concentro al vad o. El aceite resultante se purifico sobre una columna de gel de sflice eluida con CH 2 Cl 2 y metanol para dar 3-[4-(4-doro-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (70 mg, 42 %). p.f.: 238-240 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometros, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de acetonitrilo/H 3 PO 4 al 0,1 % en H 2 O de 5/95 a 100/0 en 5 min y mantenido a 100/0 durante 5 min: tR = 3,9 min (97 %). 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,81 -2,08 (m, 1H, CHH), 2,34 -2,48 (m, 1H, CHH), 2,53 -2,65 (m, 1H, CHH), 2,80-3,01 (m, 1H, CHH), 4,15 -4,51 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,26 (s, 2H, CH2), 7,13 -7,39 (m, 2H, Ar), 7,41 - 7,58 (m, 5H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-de) 522,38, 31,20, 45,06, 51,58, 68,65, 115,00, 115,38, 128,47, 129,47, 129,82, 129,97, 132,55, 133,35, 135,70, 153,27, 167,96, 170,98, 172,83; LCMS MH = 385. Anal calc. para C20H17ClN2O 4 + 0,1 H2O: C, 62,13; H, 4,48; N, 7,25; Observado: C, 61,76 % H, 4,45; N, 7,28.
5.156 3-[4-(3-METOXI-BENCILOXI)-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000139_0001
Etapa 1: Se anadio trifenilfosfeno soportado con poflmero (1,6 mmol/g, 3,84 g, 4,78 mmol) a una solucion agitada de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-(4-hidroxi-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-butmco (0,78 g, 2,66 mmol) en THF (15 ml) a 0 °C, seguido de la adicion de diazen-1,2-dicarboxilato de diisopropilo (0,95 ml, 4,78 mmol). Despues de agitar durante 30 minutos, se anadio (3-metoxi-fenil)-metanol (0,56 ml, 4,52 mmol). La mezcla se agito durante una hora, despues se filtro y se lavo con metanol (3 x 10 ml) y despues cloruro de metileno (3 x 10 ml). El filtrado combinado se evaporo al vado para dar un aceite, que se purifico sobre una columna de gel de sflice (gradiente de MeOH/CH2Cl2 del 0 % al 5 % en 60 min) para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(3-metoxi-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco en forma de un aceite (0,32 g, rendimiento del 36 %).
Etapa 2: Se anadio terc-butoxido potasico (0,10 g, 0,92 mmol) a una solucion agitada de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(3-metoxi-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco (1,13 g, 2,60 mmol) en THF (10 ml) a 0 °C durante 10 minutos. La mezcla se inactivo con HCl 1 N (2 ml) y se neutralizo con bicarbonato sodico saturado (4 ml a pH = 8). La mezcla se extrajo con acetato de etilo (3 x 20 ml). Las fases de acetato de etilo combinadas se evaporaron y despues se purificaron sobre una columna de gel de sflice (gradiente de MeOH/CH2Cl2 del 0 % al 5 % en 40 min) para dar 3-[4-(3-metoxi-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,23 g, rendimiento del 65 %); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, isocratica a 40/60 en 10 min (acetonitrilo/H3PO4 al 0,1 %), 5,32 min (98,9 %); p.f.: 225-227 °C; 1H RMN (DMSO-de) 51,88 - 2,09 (m, 1H, CHH), 2,37 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,65 (m, 1H, CHH), 2,82 - 3,00 (m, 1H, CHH), 3,76 (s, 3H, CH3), 4,20 -4,52 (m, 2H, ArCH2N), 5,11 (dd, J = 5,0, 13,1 Hz, 1H, NCH), 5,23 (s, 2H, ArC H2O), 6,91 (dd, J = 1,7, 8,1 Hz, 1H, Ar), 7,00 - 7,12 (m, 2H, Ar), 7,23 - 7,38 (m, 3H, Ar), 7,43 - 7,55 (m, 1H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-d6) 522,35, 31,21,45,12, 51,61, 55,05, 69,38, 113,26, 115,00, 115,26, 119,68, 129,59, 129,79, 129,97, 133,32, 138,19, 153,41, 159,35, 167,99, 170,98, 172,83 (falta un carbono aromatico debido al solapamiento, confirmado por HMQC); LCMS MH = 381; Anal. Calc. para C21H20N2O5 0,1 H2O: C, 65,99; H, 5,33; N, 7,33, Observado: C, 65,71; H, 5,36; N, 7,25.
5.157 3-[4-(3-METIL-BENCILOXI)-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000139_0002
Etapa 1: Se anadio trifenilfosfeno soportado con poflmero (1,6 mmol/g, 3,76 g, 4,68 mmol) a una solucion agitada de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-(4-hidroxi-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-butmco (0,75 g, 2,60 mmol) en THF (15 ml) a 0 °C, seguido de la adicion de diazen-1,2-dicarboxilato de diisopropilo (0,93 ml, 4,68 mmol). Despues de agitar durante 30 minutos, se anadio m-tolil-metanol (0,53 ml, 4,40 mmol). La mezcla se agito durante una hora, despues se filtro, se lavo con metanol (3 x 10 ml), y despues cloruro de metileno (3 x 10 ml). El filtrado combinado se evaporo al vado para dar un aceite, que se purifico sobre una columna de gel de sflice (gradiente de MeOH/CH2Cl2 del 0 % al 5 % en 60 min) para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(3-metil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidroisoindol-2-il]-butmco en forma de un aceite (1,13 g, rendimiento en bruto del 137 %).
Etapa 2: Se anadio terc-butoxido potasico (0,30 g, 2,60 mmol) a una solucion agitada de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(3-metil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco (1,13 g, 2,60 mmol) en THF (10 ml) a 0 °C durante 10 minutos. La mezcla se inactivo con HCl 1 N (2 ml) y se neutralizo con bicarbonato sodico saturado (4 ml a pH = 8). La mezcla se extrajo con acetato de etilo (3 x 20 ml). Las fases de acetato de etilo combinadas se evaporaron y se purificaron sobre una columna de gel de sflice (gradiente de MeOH/CH2Cl2 del 0 % al 5 % en 40 min) para dar 3-[4-(3-metil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,21 g, rendimiento del 29 % en dos etapas); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, isocratica a 40/60 en 10 min (acetonitrilo/H 3 PO4 al 0,1 %), 7,89 min (99,4 %); p.f.: 244-246 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,90 - 2,06 (m, 1H, CHH), 2,32 (s, 3H, CH3), 2,36 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,81 - 3,00 (m, 1H, CHH), 4,19 -4,49 (m, 2H, ArCH2N), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,21 (s, 2H, ArC H2O), 7,11 - 7,20 (m, 1H, Ar), 7,23 - 7,37 (m, 5H, Ar), 7,43 - 7,55 (m, 1H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 5 20,99, 22,36, 31,21, 45,12, 51,59, 69,61, 114,98, 115,23, 124,78, 128,25, 128,38, 128,61, 129,81, 129,94, 133,32, 136,53, 137,64, 153,50, 168,01, 170,98, 172,83; LCMS MH = 365; Anal. Calc. para C21H20N2O4 0,2 H2O: C, 68,54; H, 5,59; N, 7,61, Observado: C, 68,18; H, 5,49; N, 7,52.
5.158 3-(4-(3-METOXI-4-(2-PIRROUDIN-1-IL)ETOXI)-BENCILOXI)-1-OXO-ISOINDOUN-2-IL)-PIPERON-2,6-DIONA
Figure imgf000140_0001
Etapa 1: Una mezcla de vainillina (4,2 g, 27,3 mmol) y Cs2CO3 (22,2 g, 68,3 mmol) en DMF (80 ml) se agito durante 10 minutos a temperatura ambiente. A esta mezcla se le anadio clorhidrato de 1-(2-cloroetil)pirrolidina (5,6 g, 32,7 mmol). La mezcla se calento a 50 °C durante una noche. La mezcla de reaction se enfrio, se filtro y el solido se lavo con EtOAc (100 ml). El filtrado se diluyo con agua (200 ml) y la capa acuosa se extrajo con EtoAc (3 x 50 ml). La solution de EtOAc combinada se lavo con agua (2 x 50 ml) y salmuera (50 ml), y se seco. El disolvente se retiro para dar 3-metoxi-4-(2-pirrolidin-1-il-etoxi)benzaldehido (6,2 g, rendimiento del 91 %): 1H RMN (DMSO-d6) 51,65-1,71 (m, 4H), 2,50-2,55 (m, 4H), 2,81 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 4,17 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 7,20 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,40 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 7,52-7,55 (dd, J = 1,8 y 8,1 Hz, 1H), 9,84 (s, 1H).
Etapa 2: Una solucion de UBH4/THF (2,0 M, 14,7 ml, 29,4 mmol) en THF (20 ml) se enfrio en un bano de hielo a 5 °C. Una solucion de 3-metoxi-4-(2-pirrolidin-1-il-etoxi)benzaldehido (6,1 g, 24,5 mmol) en THF (20 ml) se anadio lentamente a 5-8 °C. Despues de la adicion, la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla de reaccion se enfrio en un bano de hielo y se inactivo con agua (15 ml). La mezcla se agito con EtOAc (50 ml) y NaHCO3 sat. (25 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 40 ml) y la solucion EtOAc combinada se lavo con agua (40 ml) y salmuera (40 ml), y se seco (MgSO4). El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, EtOAc:CH2Cl22:8) para dar [3-metoxi-4-(2-pirrolidin-1-il-etoxi)-fenil]-metanol (4,8 g, rendimiento del 77 %): 1H RMN (DMSO-d6) 51,85-2,01 (m, 4H), 2,96-3,08 (m, 4H), 3,12 (t, J = 5,7 Hz, 2H), 3,74 (s, 3H), 4,34 (t, J = 5,7 Hz, 2H), 4,41 (d, J = 5,6 Hz, 2H), 5,07 (t, J = 5,7 Hz, 1H), 6,80-6,84 (dd, J = 1,8 y 8,1 Hz, 1H), 6,94 (d, J = 8,1 Hz, 2H); 13C RMN (DMSO-d6) 522,28, 55,48, 61,34, 62,58, 62,70, 64,65, 110,78, 113,26, 118,52, 135,84, 146,23, 148,91.
Etapa 3: Se anadio lentamente azodicarboxilato de diisopropilo (1,1 g, 5,5 mmol) a una suspension agitada de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,8 g, 2,7 mmol), [3-metoxi-4-(2-pirrolidina-1-iletoxi)-fenil]-metanol (1,0 g, 4,1 mmol) y trifenilfosfina unida a pofimero (1,8 g, 5,5 mmol) en THF (60 ml) a 5-7 °C. Despues de la adicion, la mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se filtro y el solido se lavo con CH2Cl2 (30 ml). El filtrado se concentro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, CH3OH:CH2Cl2, 3:97) para dar 5-amino-4-(4-(3-metoxi-4-(2-(pirrolidin-1-il)etoxi)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,9 g, 59 %).
Etapa 4: Una solucion de t-butoxido potasico/THF (1 M, 1,6 ml, 1,6 mmol) se anadio lentamente a una solucion agitada de 5-amino-4-(4-(3-metoxi-4-(2-(pirrolidin-1-il)etoxi)benzoiloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,8 g, 1,6 mmol) en t Hf (30 ml) a 5 °C. La mezcla se agito a 5 °C durante 10 minutos y despues se calento a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reaccion se enfrio en un bano de hielo y se inactivo con HCl 4 N (3 ml). La mezcla se agito con CH2Cl2 (40 ml) y NaHCO3 sat. (25 ml). La capa acuosa se extrajo con CH2Cl2 (40 ml) y la solucion combinada de CH2Cl2 se lavo con agua (2 x 25 ml) y salmuera (25 ml), y se seco (MgSO4). El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, CH3OH:CH2Cl2, 3:97) para dar 3-(4-(3-metoxi-4-(2-(pirrolidin-1-il)etoxi)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-piperidin-2,6-diona (0,4 g, rendimiento del 49 %): p.f. 160-162 °C; 1H RMN (DMSO-d6) 51,96-2,01 (m, 5H), 2,42-2,59 (m, 2H), 2,95-3,16 (m, 7H), 3,76 (s, 3H), 4,27 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 4,35-4,42 (m, 3H), 5,07-5,13 (dd, J = 5,4 y 13,5 Hz, 1H), 5,16 (s, 2H), 6,98-7,02 (m, 2H), 7,11 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 7,30-7,35 (m, 2H), 7,48 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 10,96 (s, 1H); 13C RMN (DMSO-d6) 522,27, 31,17, 45,12, 51,56, 55,57, 55,67, 60,48, 61,38, 64,55, 69,62, 112,24, 113,14, 115,05, 115,15, 120,54, 129,53, 129,77, 129,95, 133,25, 147,34, 149,00, 153,52, 168,00, 170,96, 172,81; Calc. para C27H31N3O6 BH3: C, 63,91; H, 6,75; N, 8,28, Observado: C, 63,90; H, 6,76; N, 8,17.
5.159 3 - [4 -(3 ,5 -D IC L O R O -B E N C IL O X I)-1 -O X O -1 ,3 -D IH ID R O -IS O IN D O L -2 -IL ]-P IP E R ID IN -2 ,6 -D IO N A
Figure imgf000141_0001
Etapa 1: Se anadio trifenilfosfina unida a poflmero (1,6 g, 1,92 mmol) a la solucion agitada de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-(4-hidroxi-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-bufirico (300 mg, 1,03 mmol) en THF (10 ml) a 0 °C. La mezcla resultante se agito a 0 °C durante 10 minutos seguido de la adicion de DIAD (412 mg, 2,06 mmol). Diez minutos mas tarde, a la mezcla se le anadio (3,5-dicloro-fenil)-metanol (364,7 mg, 2,06 mmol). La reaccion se agito a temperatura ambiente durante 1 hora y la reaccion se completo. La mezcla de reaccion se filtro y el solido se lavo con diclorometano (5 x 25 ml). El filtrado se concentro y el residuo se purifico por cromatografia ISCO para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(3,5-dicloro-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-bufirico en forma de un solido de color blanco (410 mg, rendimiento del 88 %): Lc Ms MH = 451.453.
Etapa 2: Se anadio KO/Bu (102 mg, 0,91 mmol) a la solucion agitada de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(3,5-dicloro-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-bufirico (410 mg, 0,91 mmol) en THF (20 ml) a 0 °C. La mezcla resultante se agito a 0 °C durante 5 minutos y la reaccion se completo. A la mezcla de reaccion se le anadio HCl (0,1 N ac., 14 ml), y la mezcla se extrajo con diclorometano (25 ml x 2). La capa organica se seco por MgSO 4 y se concentro al vado. El residuo se purifico por cromatografia ISCO para dar un solido. El solido se trituro con eter dietflico (15 ml) para dar 3-[4-(3,5-Dicloro-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (230 mg, rendimiento del 60 %); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 60/40 (acetonitrilo/HsPO 4 al 0,1 %): tR = 3,5(98 %); p.f.: 271-273 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 5 1,92 -2,07 (m, 1H, CHH), 2,37 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,54 - 2,66 (m, 1H, CHH), 2,81 - 3,02 (m, 1H, CHH), 4,22 - 4,56 (m, 2H, CHH, CHH), 5,12 (dd, J = 5,1, 13,0 Hz, 1H, NCH), 5,27 (s, 2H, CH2), 7,29 (d, J = 7,9 Hz, 1H, Ar), 7,35 (d, J = 7,2 Hz, 1H, Ar), 7,46 - 7,54 (m, 1H, Ar), 7,57 (d, 2H, Ar), 7,58 - 7,63 (m, 1H, Ar), 10,98 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 5 22,33, 31,18, 45,09, 51,60, 67,92, 114,88, 115,57, 126,15, 127,57, 129,83, 129,99, 133,43, 134,14, 140,97, 153,03, 167,90, 170,95, 172,81; LCMS MH = 419, 421; Anal. Calc. para C20H16Cl2N2O 4 + 0,045 CH2Cl2 0,06 MeOH: C, 56,82; H, 3,87; N, 6,59; Cl, 17,43; Observado: C, 56,58; H,3,86; N, 6,52; Cl, 17,15.
5.160 3-[4-(4-METANOSULFONILO-BENCILOXI)-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000141_0002
Etapa 1: Se anadio trifenilfosfina unida a poflmero (1,5 g, 1,92 mmol) a la solucion agitada de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-(4-hidroxi-1-oxo-1, 3-dihidro-isoindol-2-il)-bufirico (280 mg, 0,96 mmol) en THF (10 ml) a 0 °C. La mezcla resultante se agito a 0 °C durante 15 minutos seguido de la adicion de DIAD (388 mg, 1,92 mmol). Cinco minutos mas tarde, a la mezcla anterior se le anadio (4-metanosulfonil-fenil)-metanol (357 mg, 1,92 mmol). La mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 4 horas y despues a 0 °C durante una noche, y la reaccion se completo. La mezcla de reaccion se filtro y el solido se lavo con diclorometano (20 ml x 5). El filtrado se concentro y el residuo se purifico por cromatografia ISCO para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(4-metanosulfonil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-bufirico en forma de un solido de color blanco (310 mg, rendimiento del 70 %): LCMS MH = 461.
Etapa 2: Se anadio KO/Bu (75,2 mg, 0,67 mmol) a la solucion agitada de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(4-metanosulfonil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-bufirico (310 mg, 0,67 mmol) en THF (18 ml) a 0 °C. La mezcla resultante se agito a 0 °C durante 1,5 horas y a la mezcla de reaccion se le anadio KO/Bu (35 mg, 0,31 mmol). La reaccion se detuvo en 30 minutos. A la mezcla de reaccion se le anadio HCl (1 N ac., 10 ml) y la mezcla se extrajo con diclorometano (30 ml x 2). La capa organica se seco por MgSO 4 y se concentro al vado. El residuo se purifico por cromatografia ISCO para dar un solido. El solido se trituro con eter dietflico (30 ml) para dar 3-[4-(4-etanosulfonil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (195 mg, rendimiento del 68 %): HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 30/70 (acetonitrilo/HsPO 4 al 0,1 %): tR = 3,98(98 %); p.f.: 248-250 °C; 1 H RMN DMSO-d 6 ) 51,90 - 2,08 (m, 1H, CHH), 2,35 -2,47 (m, 1H, CHH), 2,54 - 2,66 (m, 1H, CHH), 2,81 - 3,04 (m, 1H, CHH), 3,22 (s, 3H, CH3), 4,20 - 4,57 (m, 2H, CHH, CHH), 5,13 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,40 (s, 2H, CH2), 7,26 - 7,39 (m, 2H, Ar), 7,48 (d, 1H, Ar), 7,76 (d, J = 8,3 Hz, 2H, Ar), 7,96 (d, J = 8,3 Hz, 2H, Ar), 10,98 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DM SO^) 522,37, 31,16, 43,45, 45,04, 51,58, 68,52, 114,94, 115,51, 127,16, 128,05, 129,86, 129,97, 133,40, 140,27, 142,62, 153,13, 167,91, 170,95, 172,81; LCMS MH = 429; Anal. Calc. para C21H20N2O6S: C, 58,87; H, 4,71; N, 6,54; Observado: C, 58,98; H, 4,97 ; N, 6,21.
5.161 3-[1-OXO-4-(4-PIRROLIDIN-1-ILMETIL-BENCILOXI)-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERON-2,6-DIONA
Figure imgf000142_0001
Etapa 1: Se anadio trifenilfosfeno soportado con poflmero (1,6 mmol/g, 1,83 g, 2,30 mmol) a una solucion agitada de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-(4-hidroxi-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-butmco (0,31 g, 1,04 mmol) en THF (20 ml) a 0 °C, seguido de la adicion de diazen-1,2-dicarboxilato de diisopropilo (0,46 ml, 2,30 mmol). Despues de agitar durante 30 minutos, se anadio (4-pirrolidin-1-ilmetil-fenil)-metanol (0,40 g, 2,09 mmol). La mezcla se agito durante una hora, despues se filtro, se lavo con metanol (3 x 10 ml), despues cloruro de metileno (3 x 10 ml). El filtrado combinado se evaporo al vado para dar un aceite, que se purifico por HPLC preparativa para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[1-oxo-4-(4-pirrolidin-1-ilmetil-benciloxi)-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco en forma de un aceite transparente (0,17 g, rendimiento del 35 %).
Etapa 2: Se anadio terc-butoxido potasico (0,08 g, 0,74 mmol) a una solucion agitada de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[1-oxo-4-(4-pirrolidin-1-ilmetil-benciloxi)-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco (0,17 g, 0,37 mmol) en THF (10 ml) a 0 °C. La mezcla se agito durante diez minutos y se inactivo con HCl 1 N (3 ml), se neutralizo con bicarbonato sodico saturado (6 ml a pH = 7), y se extrajo rapidamente por acetato de etilo (2 x 15 ml). Las fases de acetato de etilo combinadas se evaporaron para dar un aceite espumoso de color verde claro, que se agito en agua (15 ml) durante una hora, se filtro y se seco para dar 3-[1-oxo-4-(4-pirrolidin-1-ilmetil-benciloxi)-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanquecino (0,033 g, rendimiento del 20 %); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 pm, 1 ml/min, 240 nm, isocratica a 15/85 en 10 min (acetonitrilo/H 3 PO4 al 0,1 %), 5,51 min (98,2 %); p.f.: N/A debido a una disponibilidad de muestras limitada; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,64 - 1,84 (m, 4H, CH2CH2), 1,97 - 2,12 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,72 (m, 6H, CHH, CHH, CH2CH2), 2,85 - 3,09 (m, 1H, CHH), 3,63 (s, 2H, CH2), 4,24 - 4,56 (m, 2H, CH2), 5,17 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,28 (s, 2H, CH2), 7,30 - 7,62 (m, 7H, Ar), 11,03 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 522,36, 23,10, 31,21, 45,10, 51,58, 53,47, 59,29, 69,45, 115,00, 115,21, 127,61, 128,51, 129,81, 129,95, 133,31, 135,00, 139,36, 153,51, 168,01, 170,98, 172,83; LCMS MH = 434.
5.162 3-(4-(3-NITROBENCILOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000142_0002
A una mezcla de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (600 mg, 2,05 mmol,) y N,N-diisopropiletilamina (358 pl, 2,05 mmol) en DMF anhidra (10 ml), se le anadio 1-(bromometil)-3-nitrobenceno (421 mg, 1,95 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 16 horas y despues se calento a 80 °C durante 24 horas. La mezcla de reaccion se enfrio en un bano de hielo y despues se transfirio a una solucion enfriada 0,5 N de HCl (~120 ml). Se recogio un solido formado por filtracion y se seco en un horno de vado para dar 720 mg de producto en bruto. Una porcion del producto en bruto se purifico por inyeccion en una columna por HPLC preparativa C-18. El producto se eluyo con un gradiente de acetonitrilo/agua (acido formico al 0,1 % en ambas fases moviles) y las fracciones se recogieron por activacion de masas. Las fracciones deseadas se combinaron y se concentraron al vado para dar 3-(4-(3-nitrobenciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (60 mg, rendimiento del 37 % en base a la porcion purificada): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 pm, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 40/60 de acetonitrilo/H3PO4 al 0,1 %, 4,20 min (99,0 %); p.f.: 237-240 °C; 1H RMN (DMSO-d6) 5 1,86 -2,05 (m, 1H, CHH), 2,35 -2,48 (m, 1H, CHH), 2,53 -2,67 (m, 1H, CHH), 2,82 -3,01 (m, 1H, CHH), 4,30 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,46 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CH), 5,12 (dd, J = 5,0, 13,1 Hz, 1H, CH), 5,42 (s, 2H, Ar), 7,23 - 7,45 (m, 2H, Ar), 7,45-7,59 (m, 1H, Ar), 7,66 - 7,84 (m, 1H, Ar), 7,98 (d, J = 7,7 Hz, 1H, Ar), 8,15 - 8,29 (m, 1H, Ar), 8,29 -8,43 (m, 1H, Ar), 10,98 (s a, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-d6) 522,38, 31,20, 45,10, 51,62, 68,33, 115,08, 115,61, 122,18, 122,90, 129,90, 130,00, 130,14, 133,45, 134,14, 139,01, 147,86, 153,15, 167,92, 170,96, 172,83; LCMS MH = 396; Anal. Calc. para C20H17N3O6 0,9 H2O: C, 58,36; H, 4,60; N, 10,21, Observado: C, 58,30; H, 4,21; N, 10,05.
5.163 4 -((2 -(2 ,6 -D IO X O P IP E R ID IN -3 -IL )-1 -O X O IS O IN D O L IN -4 -IL O X I)M E T IL )B E N Z A M ID A
Figure imgf000143_0001
Etapa 1: En un matraz de FR de 250 ml, L-glutamina a-terc-butil ester (7,83 g, 32,8 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (11,46 ml, 65,6 mmol) se suspendieron en acetonitrilo (100 ml) a temperatura ambiente. La suspension se agito durante aproximadamente 10 minutos y despues se anadio gota a gota una solucion de 2-(bromometil)-3-(tercbutildimetilsililoxi)benzoato de metilo (11,4 g, 29,8 mmol,) en acetonitrilo (20 ml) durante 10 minutos. La mezcla de reaccion se calento en un bano de aceite a reflujo lento (~80 °C) durante 4 horas. La mezcla de reaccion se dejo enfriar a temperatura ambiente durante aproximadamente 1 hora y despues se anadio una solucion de fluoruro de cesio (4,53 g, 29,8 mmol) en agua (15 ml). La mezcla resultante se agito vigorosamente a temperatura ambiente durante 1 hora momento en el que el analisis por LCMS indico que la desililacion se hada completado. La mezcla de reaccion se diluyo con acetonitrilo y se filtro para retirar los solidos sin disolver. Los solidos se lavaron con mas cantidad de acetonitrilo. El filtrado y los lavados (volumen total 200 ml) se diluyeron adicionalmente con EtOAc (300 ml), se transfirieron a un embudo de decantacion de 1 l, y se lavaron con KH 2 PO 4 acuoso 0,5 N (100 ml, pH ~5). A la capa acuosa se le anadio en porciones HCl 1 N (~20 ml, el pH cambio de pH 7-8 a pH -5 usando papel de pH). Se anadieron NaCl (~10 g) y EtOAc (~200 ml) a la capa acuosa. La mezcla se agito vigorosamente en un embudo de decantacion. Las capas organicas se combinaron, se lavaron con salmuera (50 ml), se secaron (Na2SO 4 ), y se concentraron en un evaporador rotatorio para dar 15 g de un solido de color blanquecino. Este solido que contema el producto en bruto se suspendio en acetonitrilo (200 ml) y la suspension se calento en un bano de aceite a reflujo (~85 °C) durante aproximadamente 30 minutos con agitacion. La mezcla se dejo enfriar a temperatura ambiente durante 1 hora y despues se maduro a 4 °C durante 2 horas mas. El solido formado se recogio por filtracion por succion. El solido restante en el matraz se transfirio en un embudo con filtro usando algo de MTBE. La torta se lavo con mas cantidad de MTBE (volumen de filtrado total ~300 ml), se seco por succion, y despues se puso en un horno de vado a 40 °C durante varias horas para proporcionar 5-amino-2-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de ferc-butilo en forma de un solido de color blanco (7,3 g rendimiento del 72 %, ajustado para la pureza del material de partida y el producto): p.f.: 198-200 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 5 1,39 (s, 9H, tBu), 1,93 - 2,14 (m, 3H, CH2, CHH), 2,15 -2,33 (m, 1H, CHH), 4,35 (s, 2H, CH2), 4,61 -4,83 (m, 1H, CH), 6,76 (s a, 1H, NH), 6,97 -7,07 (m, 1H, Ar), 7,11 - 7,20 (m, 1H, Ar), 7,26 (s a, 1H, NH), 7,29 - 7,36 (m, 1H, Ar), 10,10 (s, 1H, OH); 13 C RMN (DMSO-de) 524,81,27,56, 31,44, 44,71, 54,02, 81,38, 113,72, 117,96, 127,99, 129,36, 133,36, 152,50, 168,36, 169,88, 172,94; LCMS MH = 335; Anal calc. para C17H22N2O5 0,19 H2O: C, 60,45; H, 6,68; N, 8,29, Observado: C, 60,44; H, 6,62; N, 8,27.
Etapa 2: Se suspendieron 5-amino-2-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de ferc-butilo (300 mg, 0,897 mmol), N,N-diisopropiletilamina (157 pl, 0,897 mmol), y K 2 CO 3 (124 mg, 0,897 mmol) en DMF (5 ml). Despues de 10 minutos, se anadio 4-(bromometil)benzamida (192 mg, 0,897 mmol) y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 2 dias. La elimination de dMf al vado dio un residuo que se repartio entre EtOAc y HCl acuoso 0,2 N. La capa acuosa se saturo con NaCl y se lavo con mas cantidad de EtOAc. Las capas organicas se combinaron (volumen total ~400 ml), se lavaron con salmuera, se secaron (Na 2 SO 4 ), y se concentraron al vado para dar 400 mg de 5-amino-2-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de ferc-butilo en forma de un aceite. LCMS MH = 420. El aceite se uso en la siguiente etapa sin purification adicional.
Etapa 3: A una solucion de 5-amino-2-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de ferc-butilo (400 mg) en diclorometano (5 ml) se le anadio TFA (1,5 ml) y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 3,5 horas (el analisis por LCMS indico que la desproteccion se hada completado). La mezcla de reaccion se concentro al vado y las trazas volatiles se capturaron con una pequena portion de diclorometano (2 x) y se concentraron de nuevo para dar 400 mg de acido 4-carbamoil-2-[4-(4-carbamoil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco en forma de un solido de color blanco. Este material se uso sin purificacion adicional. Se disolvio acido 4-carbamoil-2-[4-(4-carbamoil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco (369 mg, 0,897 mmol, suponiendo el rendimiento teorico de la etapa anterior) se disolvio en DMF (10 ml). A la solucion se le anadio CDI (167 mg, 1,03 mmol), y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 12 horas y despues se calento a 80 °C durante 6 horas. La mezcla de reaccion se enfrio en un bano de hielo y se anadio lentamente una solucion 0,1 N de HCl hasta que se obtuvo un precipitado de color blanco. El solido se filtro y se lavo con una cantidad minima de agua y despues se seco en un horno de vado para dar 150 mg de producto en bruto. El producto en bruto se disolvio en dMf y se purifico por inyeccion en una columna para HPLC preparativa C-18. El producto se eluyo con un gradiente de acetonitrilo/agua (acido formico al 0,1 % en ambas fases moviles, acetonitrilo del 5 % al 60 % durante 30 minutos) y las fracciones se recogieron por activation de masas. Las fracciones deseadas se combinaron y se concentraron al vado para dar 4-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)benzamida en forma de un solido de color blanco (85 mg, rendimiento del 24 % combinado para la etapa 2 y la etapa 3): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 pm, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 25/75 de acetonitrilo/H 3 PO 4 al 0,1 %, 3,41 min (98,8 %); p.f.: 278-280 °C; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,89 -2,05 (m, 1H, CHH), 2,34 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,52 - 2,68 (m, 1H, CHH), 2,83 -3,01 (m, 1H, CHH), 4,29 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 4,45 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 5,12 (dd, J = 5,0, 13,1 Hz, 1H, CH), 5,32 (s, 2H, CH2), 7,19 - 7,41 (m, 3H, Ar, NH), 7,43 - 7,52 (m, 1H, Ar), 7,56 (d, J = 8,1 Hz, 2H, Ar), 7,89 (d, J = 8,3 Hz, 2H, Ar), 7,97 (s a, 1H, NH), 10,98 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-d6) 521,27, 30,11,44,00, 50,50, 67,88, 113,91, 114,26, 126,08, 126,53, 128,72, 128,91, 132,26, 132,79, 138,72, 152,21, 166,42, 166,87, 169,88, 171,73; LCMS MH = 394; Anal. Calc. para C21H19N3O5 0,8 H2O 0,28 acetonitrilo 1,1 HCOOH: C, 57,57; H, 4,68; N, 9,95, Observado: C, 57,92; H, 5,07; N, 9,78.
5.1643-(4-(4-CLORO-3-METILBENCILOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000144_0001
Etapa 1: A una solucion de acido 4-cloro-3-metilbenzoico (1 g, 5,86 mmol) en THF (10 ml), se le anadio lentamente la solucion de borano en THF (1 M, 8,79 ml, 8,79 mmol), y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La reaccion se interrumpio anadiendo gota a gota agua (1 ml), y despues se anadieron 30 ml de agua. La mezcla se saturo con exceso de carbonato potasico, se extrajo con acetato de etilo (2 x 50 ml), las capas organicas combinadas se secaron sobre MgSO 4 , y el disolvente se evaporo al vado para dar (4-cloro-3-metilfenil)metanol (900 mg, rendimiento del 98 %). 1 H RMN (DMSO-de) 52,32 (s, 3H, CH3), 4,45 (d, J = 5,7 Hz, 2H, CH2), 5,22 (t, J = 5,7 Hz, 1H, OH), 7,15 (dd, J = 1,6, 8,2 Hz, 1H, Ar), 7,28 (s, 1H, Ar), 7,34 (d, J = 8,1 Hz, 1H, Ar).
Etapa 2: Se anadio trifenilfosfina soportada por polimero (3 mmol/g, 0,69 g, 2,06 mmol) a una suspension agitada de
5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-pentanoato de metilo (300 mg, 1,03 mmol) en THF (10 ml) a 0 °C, seguido de azodicarboxilato de diisopropilo (416 mg, 2,06 mmol). Despues de agitar durante 10 minutos, se anadio
(4-cloro-3-metilfenil)metanol (322 mg, 1,03 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche y se filtro. La resina se lavo con acetato de etilo (7 x 10 ml). El filtrado combinado se lavo con agua y salmuera, el disolvente se evaporo, y el producto en bruto se purifico por ISCO (columna 40 g, MeOH/CH 2 Cl 2 , gradiente del 0 % al 3 % en 40 min) para dar 5-amino-4-(4-(4-cloro-3-metilbenciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (430 mg, rendimiento del 97 %). 1 H RMN (DMSO-de) 52,25 (d, 4H, CH2, CH2), 2,35 (s, 3H, CH3), 3,50 (s, 3H, CH3), 4,33 - 4,63 (m, 2H, CH2), 4,69 - 4,78 (m, 1H, CH), 5,21 (s, 2H, CH2), 7,19 (s, 1H, NH), 7,24 - 7,39 (m, 3H, Ar), 7,39 -7,51 (m, 3H, Ar), 7,59 (s a, 1H, NH).
Etapa 3: A una solucion de 5-amino-4-(4-(4-cloro-3-metilbenciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo en THF (10 ml), se le anadio terc-butoxido potasico (112 mg, 1 mmol) a 0 °C, y la mezcla se agito a 0 °C durante 10 minutos, se calento hasta la temperatura ambiente, y se agito durante 3 horas. La reaccion se interrumpio anadiendo HCl acuoso (1 N, 2 ml). La mezcla se diluyo con agua (30 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 ml). Las capas organicas combinadas se lavaron con salmuera (20 ml), se secaron sobre MgSO 4 , el disolvente se evaporo al vado, y el producto en bruto se suspendio de nuevo en acetonitrilo (5 ml) durante 2 horas y se filtro para dar 3-(4-(4-cloro-3-metilbenciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (180 mg, rendimiento del 45 %); p.f.: 217-219 °C; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 52,35 (s, 3H, CH3), 2,48 (s a, 1H, CHH), 2,61 (s a, 1H, CHH), 2,80 -3,03 (m, 1H, CHH), 4,19 -4,52 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CHH), 5,21 (s, 2H, CH2), 7,25 - 7,39 (m, 3H, Ar), 7,39 - 7,57 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO^) 519,56, 22,34, 31,16, 45,07, 51,58, 68,77, 114,97, 115,32, 126,87, 128,88, 129,80, 129,95, 130,43, 132,77, 133,33, 135,52, 135,66, 153,32, 167,96, 170,96, 172,81; LCMS MH = 399; HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 50/50 de acetonitrilo/H 3 PO 4 al 0,1 % tR = 5,29 (99,50 %); Anal. Calc. para C 21 H1gClN 2 O4: c , 63,24; H, 4,80; N, 7,02; Observado:
C, 62,99; H, 4,94; N, 6,86.
5.165 3-(1-OXO-4-(4-(TRIFLUOROMETIL)BENCILOXI)ISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000144_0002
A una mezcla de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,10 g, 0,34 mmol) y K2CO3 (0,05 g, 0,34 mmol) en Dm F (10 ml), se le anadio lentamente bromuro de 4-(trifluorometil)bencilo (0,07 g, 0,31 mmol). La mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante una noche. Se anadio mas cantidad de bromuro de 4-(trifluorometil)bencilo (0,008 g, 0,03 mmol), y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante una noche. Se anadio mas cantidad de K 2 CO 3 (0,05 g, 0,34 mmol), y la mezcla de reaccion se calento a 80
°C durante 24 horas. A la mezcla de reaccion se le anadio acido acetico (5 gotas). El disolvente se evaporo y se anadio acetato de etilo (100 ml) a la mezcla de reaccion. Despues se lavo con una solucion saturada de bicarbonato sodico (2 x 100 ml) y salmuera (100 ml), y se seco (MgSO4). Despues de la filtracion del agente de secado, el disolvente se concentro y el residuo se purifico por cromatografia ultrarrapida ISCO (columna 40 g, gradiente de metanol/cloruro de metileno, 0/100 a 5/95 en 20 min, producto de elucion a 5/95). El disolvente se evaporo. El residuo se agito en eter, y el solido se filtro y se seco para dar 3-(1-oxo-4-(4-(trifluorometil)benciloxi)isoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,09 g, rendimiento del 72 %). Este experimento se repitio con 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato (0,30 g, 1,03 mmol) para dar 3-(1-oxo-4-(4-(trifluorometil)benciloxi)isoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,12 g) y otra vez con 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato (0, 10 g, 0,34 mmol) para dar 3-(1-oxo-4-(4-(trifluorometil)benciloxi)isoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,05 g). Los 3 lotes se combinaron. Los solidos se disolvieron en acetato de etilo (20 ml). El disolvente se evaporo. El residuo se agito en eter, y el solido se filtro y se seco para dar 3-(1-oxo-4-(4-(trifluorometil)benciloxi)isoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,24 g): HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 pm, 1 ml/min, 240 nm, acetonitrilo/H3PO4 al 0,1 %: gradiente de 10/90 a 90/10 en 15 min; 5 min a 90/10: 12,68 min (98,97 %); p.f.: 241-243 °C; 1H RMN (DMSO-d6) 1,17 (t, J = 7,1 Hz, 1H, acetato de etilo (5 %)), 1,82 - 2,18 (m, 1H, CHH), 2,29 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,58 (d, J = 19,1 Hz, 1H, CHH), 2,79 -3,12 (m, 1H, CHH), 4,03 (d, J = 7,2 Hz, 1H, Acetato de etilo (5 %)), 4,17 - 4,39 (m, 1H, CHH), 4,38 - 4,69 (m, 1H, CHH), 5,13 (dd, J = 5,0, 13,1 Hz, 1H, CH), 5,38 (s, 2H, CH2), 7,33 (dd, J = 7,8, 10,5 Hz, 2H, Ar), 7,41 - 7,59 (m, 1H, Ar), 7,75 (c, J = 8,3 Hz, 4H, Ar), 10,99 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-d6) 22,37, 31,16, 45,03, 51,56, 68,58, 114,94, 115,47, 124,16 (c, J = 270,8 Hz), 125,33 (c, J = 3,8 Hz), 128,01, 128,41 (c, J = 31,5 Hz), 129,84, 129,96, 133,39, 141,52, 153,17, 167,91, 170,96, 172,81; LCMS MH = 419; Anal calc. para C21H17N2O4F3 0,2 H2O: C, 59,77, H, 4,16, N, 6,64; Observado: C, 59,66, H, 4,12, N, 6,52.
5.166 3-[4-(3-BROMO-BENCILOXI)-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000145_0001
Etapa 1: Se suspendieron 5-amino-2-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de ferc-butilo (300 mg, 0,897 mmol,), N,N-diisopropiletilamina (157 pl, 0,897 mmol), y K2CO3 (124 mg, 0,897 mmol) en DMF (5 ml). Despues de 10 minutos, se anadio 1-bromo-3-bromometil-benceno (224 mg, 0,897 mmol) y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 2 dias. La eliminacion de DMF al vado dio un residuo que se repartio entre EtOAc y HCl acuoso 0,2 N. La capa de EtOAc se lavo con salmuera, se seco (Na2SO4), y se concentro al vado para dar 450 mg de ester terc-butflico del acido 2-[4-(3-bromo-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-4-carbamoil-butmco en forma de un aceite de color castano. LCMS MH = 503, 505. El aceite se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 2: A una solucion de ester terc-butflico del acido 2-[4-(3-bromo-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-4-carbamoil-butrnco (450 mg) en diclorometano (5 ml), se le anadio TFA (1,5 ml), y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 4 horas (el analisis por LCMS indico que la desproteccion se habia completado). La mezcla de reaccion se concentro al vado y el solido resultante, trituro con Et2O y despues se recogio por filtracion. El secado del solido al vado proporciono 400 mg de acido 2-[4-(3-bromo-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-4-carbamoil-butrnco en forma de un solido de color castano. Este material se uso sin purificacion adicional.
Etapa 3: A una solucion de acido 2-[4-(3-bromo-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-4-carbamoil-butmco (400 mg, 0,897 mmol, suponiendo un rendimiento teorico de la etapa anterior) en DMF (5 ml), se le anadio CDI (145 mg, 0,897 mmol). La mezcla de reaccion se calento a 70 °C y se agito durante una noche. Despues de 21 horas, se anadio DMAP catafltico seguido de otro equivalente de c Di. La mezcla se agito a 80 °C durante 15 horas mas. La mezcla de reaccion se enfrio en un bano de hielo y el producto en bruto se precipito mediante la adicion de HCl acuoso 0,2 N. El solido se recogio por filtracion, se lavo con agua abundante, y se seco al vado para dar 150 mg de producto en bruto. El producto en bruto se disolvio en DMF y se purifico por inyeccion en una columna para HPLC preparativa C-18. El producto se eluyo con un gradiente de acetonitrilo/agua (acido formico al 0,1 % en ambas fases moviles) y las fracciones se recogieron por activacion de masas. Las fracciones deseadas se combinaron y se concentraron al vado para dar 3-[4-(3-bromo-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (80 mg, rendimiento combinado del 21 % para la etapa 1 y la etapa 2): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 pm, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 50/50 de acetonitrilo/H3PO4 al 0,1 %, 4,59 min (95,5 %); p.f.: 238-240 °C; 1H RMN (DMSO-de) 51,89-2,05 (m, 1H, CHH), 2,36 -2,48 (m, 1H, CHH), 2,53 -2,65 (m, 1H, CHH), 2,81 - 3,02 (m, 1H, CHH), 4,28 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 4,45 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CH), 5,26 (s, 2H, CH2), 7,25 - 7,42 (m, 3H, Ar), 7,45 - 7,59 (m, 3H, Ar), 7,70 (d, J = 1,7 Hz, 1H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-de) 5 22,26, 31,09, 45,00, 51,51, 68,48, 114,87, 115,34, 121,61, 126,52, 129,75, 129,88, 130,15, 130,61, 130,74, 133,30, 139,36, 153,15, 167,86, 170,88, 172,74; LCMS MH = 429, 431; Anal calc. para C20H17N2O4 0,8 H2O: C, 54,14; H, 4,23; N, 6,31; Br, 18,01, Observado: C, 53,92; H, 3,88; N, 6,32; Br, 18,16.
5.167 4-((2-(2,6-DIOXOPIPERIDIN-3-IL)-1-OXOISOINDOLIN-4-ILOXI)METIL)-N,N-DIMETILBENCENO SULFONAMIDA
Figure imgf000146_0001
Etapa 1: A una solucion de acido 4-(N,N-dimetilsulfamoil)benzoico (1 g, 4,36 mmol) en THF (10 ml), se le anadio lentamente la solucion de borano en THF (1 M, 8,72 ml, 8,72 mmol), y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La reaccion se interrumpio anadiendo gota a gota agua (1 ml), y despues se anadieron 30 ml de agua. La mezcla se saturo con exceso de carbonato potasico y se extrajo con acetato de etilo (3 x 40 ml), y las capas organicas combinadas se secaron sobre MgSO4. El disolvente se evaporo al vado para dar 4-(hidroximetil)-N,N-dimetilbencenosulfonamida (700 mg, rendimiento del 75 %). 1H RMN (DMsO-d6) 52,59 (s, 6H, CH3, CH3), 4,61 (d, J = 5,9 Hz, 2H, CH2), 5,44 (s, 1H, OH), 7,54 - 7,62 (m, 2H, Ar), 7,67 - 7,75 (m, 2H, Ar).
Etapa 2: Se anadio trifenilfosfina soportada por polimero (3 mmol/g, 0,69 g, 2,06 mmol) a una suspension agitada de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-opentanoato de metilo (300 mg, 1,03 mmol) en THF (10 ml) a 0 °C seguido de azodicarboxilato de diisopropilo (416 mg, 2,06 mmol). Despues de agitar durante 10 minutos, se anadio 4-(hidroximetil)-N,N-dimetilbencenosulfonamida (443 mg, 2,06 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche y se filtro. La resina se lavo con acetato de etilo (7 x 10 ml). El filtrado combinado se lavo con agua y salmuera, el disolvente se evaporo, y el producto en bruto se purifico por ISCO (columna 40 g, MeOH/CH2Cl2, gradiente del 0 % al 4 % en 40 min) para dar 5-amino-4-(4-(4-(N,N-dimetilsulfamoil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (340 mg, rendimiento del 68 %). 1H RMN (DMSO-d6) 5 1,93-2,36 (m, 4H, CH2, CH2), 2,62 (s, 6H, CH3, CH3), 3,50 (s, 3H, CH3), 4,40 - 4,66 (m, 2H, CH2), 4,75 (dd, J = 4,7, 10,2 Hz, 1H, CHH), 5,39 (s, 2H, CH2), 7,21 (s, 1H, NHH), 7,27 - 7,36 (m, 2H, Ar), 7,43 - 7,53 (m, 1H, Ar), 7,60 (s, 1H, NHH), 7,73 -7,85 (m, 4H, Ar).
Etapa 3: A una solucion de 5-amino-4-(4-(4-(N,N-dimetilsulfamoil)bencilox-y)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (573 mg, 1,17 mmol) en THF (20 ml), se le anadio terc-butoxido potasico (131 mg, 1 mmol) a 0 °C. La mezcla se agito a 0 °C durante 10 minutos, se calento hasta la temperatura ambiente y se agito durante 4 horas. Se anadio mas cantidad de t-butoxido potasico (40 mg, 0,4 mmol), y la mezcla se mantuvo en agitacion durante 2 horas. La reaccion se interrumpio anadiendo HCl acuoso (1 N, 2 ml), y se anadio gota a gota agua (50 ml). El precipitado formado se corrigio por filtracion, y el producto en bruto se suspendio de nuevo con acetonitrilo (10 ml) para dar 4-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)-N,N-dimetilbencenosulfonamida en forma de un solido de color blanco (260 mg, rendimiento del 48 %); p.f.: 261-263 °C; 1H RMN (DMSO-de) 51,90 -2,10 (m, 1H, CHH), 2,34 -2,48 (m, 1H, CHH), 2,56 (d, J = 3,4 Hz, 1H, CHH), 2,62 (s, 6H, CH3, CH3), 2,82 - 3,03 (m, 1H, CHH), 4,25 - 4,56 (m, 2H, CH2), 5,13 (dd, J = 4,9, 13,2 Hz, 1H, CHH), 5,39 (s, 2H, CH2), 7,28 - 7,41 (m, 2H, Ar), 7,45 - 7,57 (m, 1H, Ar), 7,73 - 7,83 (m, 4H, Ar), 10,99 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-de) 522,37, 31,15, 37,51, 45,04, 51,56, 68,56, 114,99, 115,54, 127,71, 127,95, 129,87, 129,96, 133,37, 134,20, 142,02, 153,19, 167,94, 170,96, 172,84; LCMS MH = 458; HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 40/60 de acetonitrilo/H3PO4 al 0,1 % tR = 3,61 (98,56 %); Anal. Calc. para C22H2sN3O6S 0,5 H2O: C, 56,64; H, 5,19; N, 9,01; Observado: C, 56,62; H, 5,18; N, 8,89.
5.168 3-[4-(3-AMINO-BENCILOXI)-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000146_0002
A una suspension de 3-(4-(3-nitrobenciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (300 mg, 0,759 mmol) en etanol (10 ml), se le anadio una solucion de ditionita sodica (661 mg, 3,79 mmol) en agua (5 ml). La mezcla se agito durante 20 minutos a temperatura ambiente y despues se concentro al vado. El residuo se disolvio en DMF, la solucion se paso a traves de un filtro de jeringa, y el filtrado se inyecto en una columna para HPLC preparativa C-18. El producto se eluyo con un gradiente de acetonitrilo/agua (acido formico al 0,1 % en ambas fases moviles, acetonitrilo del 5 % al 60 % durante 20 min) y las fracciones se recogieron por activacion de masas. Las fracciones deseadas se combinaron y se concentraron al vado para dar 3-[4-(3-amino-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona (10 mg, rendimiento del 3 %) en forma de un solido de color blanco: HPLC: Waters Symmetry C-18, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 15/85 de acetonitrilo/H3PO4 al 0,1 %, 4,17 min (95,6 %); p.f.: 109-113 °C; 1H RMN (DM SO^) 51,87 - 2,07 (m, 1H, CHH), 2,36 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,65 (m, 1H, CHH), 2,81 - 3,02 (m, 1H, CHH), 4,25 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,41 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 5,00 - 5,20 (m, 5H, CH2, NH2, CH), 6,46 - 6,55 (m, 1H, Ar), 6,59 (d, J = 7,6 Hz, 1H, Ar), 6,62 - 6,70 (m, 1H, Ar), 7,01 (t, J = 7,7 Hz, 1H, Ar), 7,30 (dd, J = 7,6, 9,8 Hz, 2H, Ar), 7,41 - 7,53 (m, 1H, Ar), 10,94 (s a, 1H, NH); 13C RMN (DM SO^) 522,38, 31,21,45,10, 51,58, 69,95, 112,74, 113,49, 114,84, 114,98, 115,08, 128,93, 129,78, 129,87, 133,26, 137,14, 148,80, 153,60, 168,02, 170,99, 172,83; LCMS MH = 366; Anal calc. para C20H19N3O4: C, 65,74; H, 5,24 N, 11,50, Observado: C, 58,81; H, 5,20; N, 9,99.
5.169 3-[4-(3,4-DIFLUORO-BENCILOXI)-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000147_0001
Etapa 1: Se anadio una solucion de ester metflico del acido 3-acetoxi-2-bromometil-benzoico (1,0 g, 3,48 mmol) en acetonitrilo (10 ml) a una suspension agitada de clorhidrato de 4,5-diamino-5-oxopentanoato de terc-butilo y N, N-diisopropiletilamina (1,4 ml, 7,66 mmol) en acetonitrilo (20 ml). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 3,5 horas a temperatura ambiente. Se anadio acido acetico (0,5 ml) y la temperatura se elevo a 60 °C. Despues de 3 dias, se anadio a la mezcla de reaccion agua (2 ml), la temperatura se elevo a 80 °C, y la mezcla se agito durante 3 dias mas. La mezcla de reaccion se enfrio a temperatura ambiente. Se anadio piperidina (1 ml), y la agitacion continuo durante 6 horas mas a temperatura ambiente. La mezcla se concentro al vado para retirar la mayor parte de los volatiles. El aceite viscoso resultante se repartio entre EtOAc (200 ml) y HCl 0,2 N (50 ml). La capa acuosa se extrajo con mas cantidad de EtOAc (150 ml). Las capas de EtOAc se combinaron, se secaron (Na2SO4), y se concentraron en un evaporador rotatorio para dar 1,16 g de producto en bruto en forma de una espuma de color blanquecino. La purification de esta espuma en una columna ultrarrapida de SiO 2 (CombiFlash, columna prerrellenada de 40 g de SiO 2 , gradiente de EtOAc/Hexanos) produjo ester terc-butflico del acido 4-carbamoil-4-(4-hidroxi-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-butmco en forma de una espuma de color blanco (740 mg , rendimiento del 63 %). LCMS MH = 335, 1 H RMN (DMSO-de) 51,24 - 1,37 (m, 9H, tBu), 1,81 - 2,06 (m, 3H, CHH, CH2), 2,08 - 2,27 (m, 1H, CHH), 4,32 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 4,49 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 4,71 (dd, J = 4,1, 10,1 Hz, 1H, CH), 6,88 -7,04 (m, 1H, Ar), 7,08 - 7,23 (m, 2H, Ar, NH), 7,26 -7,40 (m, 1H, Ar), 7,55 (s a, 1H, NH), 10,02 (s, 1H, OH).
Etapa 2: Una suspension de ester terc-butflico del acido 4-carbamoil-4-(4-hidroxi-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-butrnco (250 mg, 0,748 mmol), N,N-diisopropiletilamina (130 pl, 0,748 mmol), y Cs2CO3 (244 mg, 0,748 mmol) en DMF (5 ml) se agito durante 10 minutos a temperatura ambiente seguido de la adicion de 4-clorometil-1,2-difluorobenceno (122 mg, 0,748 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 15 horas y despues se concentro al vado para dar ester terc-butflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(3,4-difluoro-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidroisoindol-2-il]-butmco en bruto en forma de un solido de color castano (344 mg). Este solido se recogio en THF seco (5 ml), y se anadio en una portion KOtBu solido (84 mg, 0,747 mmol) con agitacion. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 40 minutos, y despues la reaccion se interrumpio mediante la adicion de HCl acuoso 1 N (15 ml). La suspension resultante se diluyo adicionalmente con agua, y el solido se recogio por filtration, se lavo con mas cantidad de agua, y se seco por suction en un embudo de filtro. El solido se disolvio en DMF minima y se purifico por inyeccion en una columna para HPLC preparativa C-18. El producto se eluyo con un gradiente de acetonitrilo/agua (acido formico al 0,1 % en ambas fases moviles) y las fracciones se recogieron por activation de masas. Las fracciones deseadas se combinaron y se concentraron al vado para dar 3-[4-(3,4-difluoro-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona (140 mg, rendimiento del 48 %) en forma de un solido de color blanco: HPLC: Waters Symmetry C1s, 5 pm, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 40/60 de acetonitrilo/H 3 PO 4 al 0,1 %, 5,53 min (97,9 %); p.f.: 228-230 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,90-2,08 (m, 1H, CHH), 2,32 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,52 -2,67 (m, 1H, CHH), 2,81 - 3,00 (m, 1H, CHH), 4,28 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,45 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CH), 5,24 (s, 2H, CH2), 7,23 -7,41 (m, 3H, Ar), 7,41 - 7,54 (m, 2H, Ar), 7,59 (ddd, J = 1,9, 8,0, 11,4 Hz, 1H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 522,34, 31,16, 45,04, 51,56, 68,17, 114,93, 115,44, 116,76 (d, Jc-f = 17,6 Hz), 117,52 (d, Jc-f = 17,6 Hz), 124,52 (dd, Jc-f = 3,3, 6,6 Hz), 129,81, 130,00, 133,36, 134,42 (dd, Jc-f = 3,3, 5,5 Hz), 149,12 (dd, Jc-f = 23,2, 245,3 Hz), 149,44 (dd, Jc-f = 23,2, 245,8 Hz), 153,14, 167,93, 170,95, 172,81; LCMS MH = 387; Anal calc. para C20H16F2N2O4 0,7 H2O: C, 60,21; H, 4,39; N, 7,00; F, 9,52, Observado: C, 60,13; H, 4,09; N, 6,91; F, 9,45.
5.170 3-(4-(4-ETILBENCILOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000147_0002
A una mezcla de trifenilfosfina soportada por poflmero (0,75 g, 2,26 mmol) y 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,30 g, 1,03 mmol) en THF (20 ml) enfriada a 0 °C, se le anadio gota a gota DIAD (0,45 ml, 2,26 mmol). Despues, se le anadio 4-etilbencil alcohol (0,16 ml, 1,23 mmol). La mezcla de reaccion se agito a 0 °C durante 1 hora y despues a temperatura ambiente durante una noche. Despues, la mezcla de reaccion se filtro a traves de celite. El celite se lavo con acetato de etilo (100 ml). La fase de acetato de etilo se lavo con agua, se seco con MgSO4, y el disolvente se evaporo. El residuo se purifico por ISCO ultrarrapida (columna 40 g, gradiente de EtOAc/Hexanos, 50/50 a 100/0 en 20 min, producto de elucion a 100/0). El disolvente se evaporo y se obtuvo 5-amino-4-(4-(4-etilbenciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo en forma de un solido transparente y pegajoso (0,20 g, rendimiento del 48 %). Al solido agitado en THF (10 ml) y enfriado a 0 °C, se le anadio KO/Bu (0,05 g, 0,46 mmol), y la mezcla de reaccion se agito durante 3 horas. A la mezcla de reaccion se le anadio acido acetico (1 ml). Se anadio acetato de etilo (100 ml), y se lavo con una solucion saturada de bicarbonato sodico (2 x 100 ml) y salmuera (100 ml), y se seco (MgSO4). Despues de la filtracion del agente de secado, el disolvente se concentro para dar 3-(4-(4-etilbenciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,12 g, rendimiento del 69 %): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 pm, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, gradiente: acetonitrilo/H3PO4 al 0,1 %, 10/90 a 90/10 en 15 min, 90/10 durante 5 min, 12,96 min (98,16 %); p.f.: 158-160 °C; 1H RMN (DMSO-d6) 51,17 (t, J = 7,6 Hz, 3H, CH3), 1,82-2,13 (m, 1H, CHH), 2,31 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,72 (m, 3H, CHH, CH2), 2,78 - 3,10 (m, 1H, CHH), 4,24 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 4,40 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 4,9, 13,2 Hz, 1H, CH), 5,20 (s, 2H, CH2), 6,83 - 7,95 (m, 7H, Ar), 10,97 (s, 4H, NH); 13C RMN (DMSO-d6) 5 15,58, 22,33, 27,85, 31,18, 45,06, 51,55, 69,44, 114,96, 115,15, 127,82, 127,86, 129,77, 129,93, 133,27, 133,82, 143,59, 153,48, 167,99, 170,96, 172,81; LCMS MH = 379; Anal. Calc. para C22H22N2O4 0,7 H2O: C, 67,57; H, 6,03; N, 7,16; Observado: C, 67,40; H, 5,87; N, 7,12.
5.171 3-[4-(4-HIDROXIMETIL-BENCILOXI)-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000148_0001
Etapa 1: Una suspension de ester terc-butflico del acido 4-carbamoil-4-(4-hidroxi-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-butrnco (1,5 g, 4,49 mmol), N,N-diisopropiletilamina (784 pl, 4,49 mmol), y K 2 CO 3 (620 mg, 4,49 mmol) en DMF (15 ml) se agito durante 5 minutos a temperatura ambiente seguido de la adicion de (4-clorometil-fenil)-metanol (902 mg, 4,49 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 15 horas y despues se calento a 70 °C durante 3 horas. Se anadio piperidina (800 pl) a la mezcla para recoger el (4-clorometil-fenil)-metanol sin consumir. La mezcla se agito durante 18 horas mas a 70 °C. La mezcla se diluyo con agua (50 ml) y EtOAc (200 ml). El pH del producto acuoso se ajusto a 4 usando HCl 1 N, y las fases se dividieron en un embudo de decantacion. La capa acuosa se saturo con NaCl y se extrajo con mas cantidad de EtOAc (200 ml). Las capas organicas se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron (Na 2 SO 4 ), y se concentraron en un evaporador rotatorio para dar 3,5 g de un aceite de color castano. Una porcion de este aceite (2,1 g) se purifico en una columna ultrarrapida de SiO2 (CombiFlash, columna prerrellenada de 80 g de SiO2, gradiente de MeOH/diclorometano) para dar ester terc-butflico del acido 4-carbamoil-2-[4-(4-hidroximetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco en forma de una espuma de color blanco (1,1 g, rendimiento del 90 %, en base a la porcion purificada): 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,39 (s, 9H, tBu), 2,00 -2,13 (m, 3H, CHH, CH2), 2,13 - 2,31 (m, 1H, CHH), 4,41 (s, 2H, CH2), 4,50 (d, J = 5,7 Hz, 2H, CH2), 4,69 (dd, J = 4,6, 10,3 Hz, 1H, CH), 5,19 (t, J = 5,7 Hz, 1H, OH), 5,24 (s, 2H, CH2), 6,75 (s a, 1H, NH), 7,22 (s a, 1H, NH), 7,25-7,37 (m, 4H, Ar), 7,42 - 7,53 (m, 3H, Ar); 13 C RMN (DMSO-de) 524,69, 27,56, 31,50, 44,78, 54,08, 62,60, 69,45, 81,42, 114,97, 115,18, 126,52, 127,57, 129,71, 130,03, 133,27, 134,86, 142,40, 153,42, 168,12, 169,85, 172,94; LCMS MH = 455.
Etapa 2: Se anadio KO/Bu (1,1 ml, 1,1 mmol, 1 M en THF) mediante una jeringa a una mezcla agitada de ester tercbutflico del acido 4-carbamoil-2-[4-(4-hidroximetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco (500 mg, 1,1 mmol) en TNF (20 ml). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 1 hora y despues se anadieron 100 pl mas de Ko/Bu. Despues de 6 horas, la mezcla de reaccion se inactivo transfiriendola a una solucion acuosa 1 N de HCl (10 ml). La mezcla se diluyo con EtOAc (150 ml) y NaHCO 3 1 N (35 ml). La capa acuosa se lavo con mas cantidad de EtOAc (100 ml). Las capas organicas se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron (Na2SO 4 ), y se concentraron en un evaporador rotatorio para dar el producto en bruto en forma de un solido (300 mg). Una porcion del solido (~127 mg) se disolvio en DMF minima y se purifico por inyeccion en una columna para HPLC preparativa C-18. El producto se eluyo con un gradiente de acetonitrilo/agua (acido formico al 0,1 % en ambas fases moviles, acetonitrilo del 5 % al 60 % durante 20 min) y las fracciones se recogieron por activacion de masas. Las fracciones deseadas se combinaron, se concentraron al vado, y el agua residual se liofilizo para dar 3-[4-(4-hidroximetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (115 mg, rendimiento del 55 %, en base a la porcion purificada): HPLC: Waters Symmetry C1s, 5 pm, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 30/70 de acetonitrilo/H 3 PO 4 al 0,1 %, 3,30 min (97,2 %); p.f.: 220-222 °C; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,91 - 2,04 (m, 1H, CHH), 2,34 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,52 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,81 - 2,99 (m, 1H, CHH), 4,25 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,41 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,50 (d, J = 5,5 Hz, 2H, CH2), 5,10 (dd, J = 5,2, 13,1 Hz, 1H, CH), 5,18 (t, J = 5,8 Hz, 1H, OH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,25 - 7,38 (m, 4H, Ar), 7,39 - 7,53 (m, 3H, Ar), 10,96 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 522,31,31,18, 45,07, 51,56, 62,60, 69,42, 115,01, 115,18, 126,49, 127,52, 129,76, 129,96, 133,28, 134,87, 142,38, 153,43, 167,99, 170,96, 172,81, LCMS MH = 381; Anal calc. para C21H20N2O5 0,3 H2O: C, 65,38; H, 5,38; N, 7,26, Observado: C, 65,44; H, 5,43; N, 7,29.
5.172 SAL DEL ACIDO 3-[4-(4-DIETILAMINOMETIL-BENCILOXI)-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DIONA FORMICO
Figure imgf000149_0001
A una solucion agitada de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,50 g, 1,72 mmol) en DMF (10 ml), se le anadieron carbonato potasico (0,24 g, 1,72 mmol) y (4-bromometil-bencil)-dietil-amina (0,88 g, 2,42 mmol) en DMF (3 ml). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche y se calento a 70 °C durante tres horas. La mezcla se purifico por HPLC preparativa para dar sal del acido 3-[4-(4-dietilaminometilbenciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona formico en forma de un solido de color blanquecino (0,15 g, rendimiento del 20 %); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, isocratica a 15/85 en 10 min (acetonitrilo/HsPO4 al 0,1 %), 7,31 min (95,5 %); p.f.: 210-212 °C; 1H RMN (DMSO-d6) 50,98 (t, J = 7,1 Hz, 6H, 2CH3), 1,92 - 2,04 (m, 1H, CHH), 2,41 - 2,49 (m, 5H, 2CH2, CH), 2,53 - 2,63 (m, 1H, CHH), 2,83 - 2,98 (m, 1H, CHH), 3,56 (s, 2H, CH2), 4,21 -4,47 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,22 (s, 2H, CH2), 7,29 - 7,39 (m, 4H, Ar), 7,40 - 7,53 (m, 3H, Ar), 10,97 (s a, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-d6) 511,95, 22,83, 31,68, 45,59, 46,52, 52,06, 56,93, 69,93, 115,46, 115,70, 128,07, 129,14, 130,29, 130,42, 133,77, 135,48, 139,85, 153,98, 168,49, 171,45, 173,31; LCMS MH = 436; Anal. Calc. para C25H29N3O4 2,5HCOOH.: C, 59,99; H, 6,22; N, 7,63; Observado: C, 51,24; H, 5,88; N, 6,38.
5.173 CLORHIDRATO DE 3-[4-(4-ETILAMINOMETIL-BENCILOXI)-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000149_0002
Se anadio etil amina (4,24 ml, 8,48 mmol, 2,0 M en THF) a una solucion agitada de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(4-clorometil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco (0,73 g, 1,70 mmol) en acetonitrilo (15 ml) a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla se concentro y se cambio a DMF (10 ml). A la solucion se le anadio carbonato potasico (0,23 g, 1,70 mmol), y la mezcla se calento a 80 °C durante tres horas. El disolvente se evaporo y despues se agito en HCl 2 M en eter (5 ml) durante una hora, se filtro y se agito en cloruro de metileno (8 ml) durante dos horas, se filtro de nuevo y se seco en un horno de vado para dar clorhidrato de 3-[4-(4-etilaminometil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,126 g, rendimiento del 29 %); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 95/5 en 5 min, isocratica a 95/5 en 5 min (acetonitrilo/H3PO4 al 0,1 %), 4,89 min (93,2 %); p.f.: 273-275 °C; 1H RMN (DMSO-d6) 51,93 - 2,05 (m, 1H, CHH), 2,36 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,54 - 2,66 (m, 1H, CHH), 2,83 - 3,01 (m, 3H, CH2, CHH), 4,11 (t, J = 5,9 Hz, 2H, CH2), 4,22 - 4,51 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,29 (s, 2H, CH2), 7,27 - 7,38 (m, 2H, Ar), 7,43 - 7,63 (m, 5H, Ar), 9,20 (s a, 2H, NH2Cl), 10,98 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-d6) 5 10,83, 22,38, 31,21, 41,63, 45,12, 49,11, 51,62, 69,01, 115,03, 115,33, 127,80, 129,81, 130,00, 130,10, 131,83, 133,35, 137,37, 153,30, 167,98, 170,98, 172,85; LCMS MH = 408; Anal. Calc. para C23H25N3O4 HCl 0,5 H2O: C, 60,99; H, 6,01; N, 9,28; Cl, 7,83, Observado: C, 60,65; H, 6,01; N, 9,12; Cl, 7,66.
5.174 CLORHIDRATO DE 3-(4-(4-((CLOROAMINO)METIL)BENCILOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000149_0003
Etapa 1: A una mezcla de trifenilfosfina soportada con polimero (0,93 g, 3,54 mmol) y 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,47 g, 1,61 mmol) en THF (20 ml) enfriada a 0 °C, se le anadio gota a gota DIAD (0,70 ml, 3,54 mmol). Despues, se anadio ester terc-butflico del acido 4-hidroximetil-bencil)-carbamico (0,46 g, 1,93 mmol). La mezcla de reaccion se agito a 0 °C durante 1 hora y despues a temperatura ambiente durante una noche. Despues, la mezcla de reaccion se filtro a traves de celite. El celite se lavo con acetato de etilo (100 ml). El disolvente se evaporo. El residuo se purifico por ISCO ultrarrapida (columna 40 g, gradiente de EtOAc/Hexanos, 50/50 a 100/0 en 30 min, producto de elucion a 80/20). El disolvente se evaporo y se obtuvo 5-amino-4-(4-(4-((ferc-butoxicarbonilamino)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo en forma de un solido transparente pegajoso (0,34 g, rendimiento del 41 %). Al solido agitado en THF (15 ml) y enfriado a 0 °C, se le anadio KO/Bu (0,07 g, 0,65 mmol) y la mezcla de reaccion se agito durante 1,5 horas. A la mezcla de reaccion se le anadio acido acetico (1 ml). Se anadio acetato de etilo (100 ml), y se lavo con una solucion saturada de bicarbonato sodico (2 x 100 ml) y salmuera (100 ml), y se seco (MgSO 4 ). Despues de la filtracion del agente de secado, el disolvente se concentro para dar 4-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)bencilcarbamato de ferc-butilo en forma de un solido de color rosa claro (0,25 g, rendimiento del 81 %): HPLC: Waters Symmetry C 18 , 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, gradiente: acetonitrilo/H 3 PO 4 al 0,1 %, 10/90 a 90/10 en 15 min, 90/10 durante 5 min, 12,06 min (98,12 %).
Etapa 2: En una solucion de 4-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)bencilcarbamato de ferc-butilo (0,10 g, 0,2 mmol) en THF (40 ml), se burbujeo gas HCl durante 15 minutos. Despues, el disolvente se evaporo. Se anadio agua (10 ml) al residuo, y se filtro. El filtrado se concentro, y el residuo se agito en eter durante una noche. Despues, el solido se filtro y se seco en un horno a 40 °C para dar clorhidrato de 3-(4-(4-((cloroamino)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,08 g, rendimiento del 94 %); p.f.: 198-200 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,86 - 2,12 (m, 1H, CHH), 2,34 - 2,49 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,69 (m, 1H, CHH), 2,81 - 3,05 (m, 1H, CHH), 4,02 (c, J = 5,6 Hz, 2H, CH2), 4,27 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,43 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CH), 5,28 (s, 2H, CH2), 7,21 - 7,40 (m, 2H, Ar), 7,40 -7,73 (m, 4H, Ar), 8,45 (s a, 3H, NH 3 Cl), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 522,33, 31,18, 41,85, 45,09, 51,59, 69,01, 115,00, 115,28, 127,77, 129,06, 129,77, 129,97, 133,33, 133,75, 136,87, 153,26, 167,96, 170,96, 172,83; LCMS MH = 380; Anal. Calc. para C21H22N 3 O 4 Cl 1,5 H2O: C, 56,95; H, 5,69; N, 9,49; Observado: C, 56,81; H, 5,61; N, 9,37.
5.175 FORMIATO DE 3-(4-(4-((2-METOXIETILAMINO)METIL)BENCILOXI)-1-OXOISOINDOUN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000150_0001
Etapa 1: A una solucion de 5-amino-2-(4-(4-(clorometil) benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de terc-butilo (250 mg, 0,529 mmol) en acetonitrilo (10 ml), se le anadieron 2-metoxietanamina (0,068 ml, 0,793 mmol) y DIEA (0,138 ml, 0,793 mmol). La mezcla resultante se agito a 50 °C durante 1,5 horas, y despues se anadio mas cantidad de 2-metoxietanamina (150 ^l). La temperatura se elevo a 60 °C y la mezcla se agito durante 2,5 horas mas. La mezcla de reaccion se concentro al vado usando un evaporador rotatorio para dar 5-amino-2-(4-(4-((2-metoxietilamino)metil) benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de terc-butilo en forma de una espuma de color blanco (295 mg, se asume un rendimiento teorico). LCMS MH = 512. El solido se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 2: Se recogio 5-amino-2-(4-(4-((2-metoxietilamino)metil) benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de terc-butilo (0,528 mmol, se asume un rendimiento teorico de la etapa anterior) en THF seco (5 ml). A la suspension agitada a temperatura ambiente se le anadio gota a gota KO/Bu (0,581 ml, 0,581 mmol, 1,0 M en THF). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 2 horas y despues se anadio mas cantidad de KO/Bu (176 ^l). La mezcla se agito durante una noche a temperatura ambiente, despues se trato con mas cantidad de KO/Bu (176 ^l). Despues de 6 horas, se anadio una porcion final de KO/Bu, y la mezcla se agito durante 2 horas. La mezcla de reaccion se inactivo por transferencia a una solucion 2 M de acido formico en MeCN en un bano de hielo. La mezcla se concentro al vado usando un evaporador rotatorio para dar un aceite que se disolvio en DMF minima y se purifico por inyeccion en una columna para HPLC preparativa C-18. El producto se eluyo con un gradiente de acetonitrilo/agua (acido formico al 0,1 % en ambas fases moviles, MeCN del 5 % al 30 % durante 12 minutos) y las fracciones se recogieron por activacion de masas. Las fracciones deseadas se combinaron y se concentraron al vado, y el agua residual se liofilizo para dar 3-(4-(4-((2-metoxietilamino)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona formiato en forma de un solido de color blanco (80 mg, rendimiento del 35 %): HPLC: Waters Symmetry C-18, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, grad. del 5 % al 95 % en 10 min, acetonitrilo/H3PO4 al 0,1 %, 5,64 min (95,6 %); p.f.: 200-202 °C; 1H RMN (DMSO^) 51,89 - 2,06 (m, 1H, CHH), 2,35 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,52 - 2,62 (m, 1H, CHH), 2,65 (t, J = 5,6 Hz, 2H, CH2), 2,82 - 3,01 (m, 1H, CHH), 3,23 (s, 3H, OCH3), 3,40 (t, J = 5,7 Hz, 2H, CH2O), 3,73 (s, 2H, CH2N), 4,28 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,42 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 5,01 - 5,16 (m, 1H, CH), 5,22 (s, 2H, CH2O), 7,23-7,39 (m, 4H, Ar), 7,40 - 7,55 (m, 3H, Ar), 8,07 - 8,55 (m, 1H, HCOOH), 10,39 - 11,40 (m, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 5 22,31, 31,18, 45,07, 47,62, 51,56, 52,33, 57,95, 69,41, 71,33, 114,97, 115,18, 127,61, 128,09, 129,77, 129,95, 133,28, 134,92, 140,17, 153,45, 167,99, 170,95, 172,81; LCMS MH = 438; Anal calc. para C24H27N3O5 HCOOH 2,8 H2O: C, 56,24; H, 6,53; N, 7,87, Observado: C, 56,13; H, 6,18; N, 7,75.
5.176 3-(4-{4-[(METIL-FENIL-AMINO)-METIL]-BENCILOXI}-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000151_0001
Se anadio N-metilanilina (0,55 ml, 5,00 mmol) a una solucion agitada de 5-amino-4-(4-(4-(clorometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,72 g, 1,67 mmol) en DMF (15 ml). La mezcla se agito a 50 °C durante dos d^as. A la mezcla se le anadio carbonato potasico (0,23 g, 1,67 mmol), y la mezcla se calento a 70 °C durante una noche. La mezcla de reaccion se concentro al vado y el residuo se purifico sobre una columna de gel de sflice (gradiente de CH2Cl2/EtOAc de EtOAc al 5 % en CH2Cl2 al 50 %) para dar 3-(4-{4-[(Metil-fenil-amino)-metil]-benciloxi}-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,29 g, rendimiento del 37 %); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 pm, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 95/5 en 5 min, isocratica a 95/5 en 5 min (acetonitrilo/H3PO4 al 0,1 %): 6,20 min (98,4 %); p.f.: 201-203 °C. 1H RMN (DMSO-d6) 5 1,91 - 1,98 (m, 1H, CHH), 2,35 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,62 (m, 1H, CHH), 2,82-2,97 (m, 1H, CHH), 3,01 (s, 3H, CH3), 4,19 - 4,45 (m, 2H, CH2), 4,57 (s, 2H, CH2), 5,10 (dd, J = 5,2, 13,3 Hz, 1H, NCH), 5,20 (s, 2H, CH2), 6,60 (t, J = 7,3 Hz, 1H, Ar), 6,70 (dd, J = 0,9, 8,9 Hz, 2H, Ar), 7,09 - 7,18 (m, 2H, Ar), 7,22 (d, J = 8,1 Hz, 2H, Ar), 7,29 - 7,36 (m, 2H, Ar), 7,39 - 7,53 (m, 3H, Ar), 10,96 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-d6) 522,33, 31,20, 38,60, 45,09, 51,56, 55,05, 69,36, 111,99, 114,92, 115,21, 115,84, 126,85, 127,97, 128,95, 129,81, 129,95, 133,29, 134,95, 139,02, 148,97, 153,48, 168,01, 170,96, 172,83; LCMS MH = 470; Anal. Calc. para C28H27N3O4 0,3 H2O: C, 70,81; H, 5,86; N, 8,85; Observado: C, 70,51; H, 5,66; N, 8,71.
5.177 3-(4-(4-((BIS(2-METOXIETIL)AMINO)METIL)BENCILOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000151_0002
Etapa 1: A una solucion de 5-amino-2-(4-(4-(clorometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de terc-butilo (250 mg, 0,529 mmol) en acetonitrilo (10 ml), se le anadieron bis(2-metoxietil)amina (106 mg, 0,793 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (0,138 ml, 0,793 mmol). La mezcla resultante se agito a 60 °C durante 2 dias. La mezcla se concentro al vado usando un evaporador rotatorio y se seco adicionalmente en un horno de vado durante una noche para dar 5-amino-2-(4-(4-((bis(2-metoxietil)amino)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de terc-butilo en forma de un aceite de color ambar (320 mg). El aceite se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 2: Se recogio 5-amino-2-(4-(4-((bis(2-metoxietil)amino)metil) benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de terc-butilo (0,528 mmol, se asume un rendimiento teorico de la etapa anterior) en THF seco (5 ml). A la suspension agitada a temperatura ambiente, se anadio gota a gota KO/Bu (0,581 ml, 0,581 mmol, 1,0 M en THF). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 48 horas, despues se anadio mas cantidad de KO/Bu (200 pl, 0,2 mmol) a la reaccion, y la mezcla se agito durante 3 horas. Se anadio otra porcion de KO/Bu (400 pl, 0,4 mmol) (utilizado un total de 1,18 mmol de KO/Bu). Despues de aproximadamente 15 minutos, el analisis por LCMS indico que la ciclacion estaba completa. La mezcla de reaccion se enfrio a 0 °C y se inactivo con acido formico (500 pl) y se concentro usando un evaporador rotatorio para dar un residuo oleoso, que se disolvio en H2O y DMF (2 ml/6 ml) y se filtro en un filtro de jeringa (0,2 pl de polipropileno). El filtrado se purifico por inyeccion en una columna para HPLC preparativa C-18. El producto se eluyo con un gradiente de acetonitrilo/agua (acido formico al 0,1 % en ambas fases moviles, MeCN del 5 % al 30 % durante 12 minutos) y las fracciones se recogieron por activacion de masas. Las fracciones deseadas se combinaron y se concentraron al vado y el agua residual se liofilizo para dar 3-(4-(4-((bis(2-metoxietil)amino)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanquecino (110 mg, rendimiento del 42 % para la etapa 1 y la etapa 2): HPLC: Waters Symmetry C13, 5 pm, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 20/80 de acetonitrilo/H3PO4 al 0,1 %, 3,22 min (95,4 %); p.f.: 105-107 °C; 1H RMN (DMSO-de) 51,89-2,05 (m, 1H, CHH), 2,35 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,52 - 2,60 (m, 1H, CHH), 2,62 (t, J = 6,1 Hz, 4H, 2 x CH2), 2,80 - 2,99 (m, 1H, CHH), 3,20 (s, 6H, 2 x CH3), 3,39 (t, J = 6,1 Hz, 4H, 2 x CH2), 3,62 (s, 2H, CH2), 4,25 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,42 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,2, 13,1 Hz, 1H, CHH), 5,22 (s, 2H, CH2O), 7,28 -7,37 (m, 4H, Ar), 7,38 - 7,53 (m, 3H, Ar), 10,97 (s a, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-de) 522,33, 31,18, 45,07, 51,55, 52.99, 57,98, 58,52, 69,44, 70,57, 114,97, 115,18, 127,55, 128,52, 129,77, 129,93, 133,27, 134,95, 139,67, 153,48, 167.99, 170,95, 172,81; Anal calc. para C27H33NsO6- 0,7 HCOOH 2 H2O: C, 59,01; H, 6,86; N, 7,45, Observado: C, 58,72; H, 6,49; N, 7,32.
5.178 3-(DIETILAMINO)PROPIL(4-((2-(2,6-DIOXOPIPERIDIN-3-IL)-1-OXOISOINDOLIN-4-ILOXI)METIL)BENCIL)CARBAMATO DE VERC-BUTILO
Figure imgf000152_0001
Etapa 1: En un matraz de fondo redondo se anadio 5-amino-4-(4-(4-(clorometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1,0 g, 2,321 mmol) en acetonitrilo (Volumen: 30 ml) para dar una solution incolora. Se anadio N1,N1-dietilpropano-1,3-diamina (0,907 g, 6,96 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante el fin de semana. La reaction se concentro en un evaporador rotatorio. El aceite resultante se uso en la siguiente etapa sin purification.
Etapa 2: A la solucion en CH 2 Cl 2 (30 ml) de 5-amino-4-(4-(4-((3-(dietilamino)propilamino)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1,218 g, 2,32 mmol), se le anadio BoC 2 O (2,70 ml, 11,61 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reaccion se concentro y se purifico sobre una columna de gel de sflice eluida con cloruro de metileno y metanol para dar 5-amino-4-(4-(4-((tercbutoxicarbonil(3-(dietilamino)propil)amino)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo en forma de un aceite transparente (500 mg, 35 %).
Etapa 3: A la solucion en THF (20 ml) de 5-amino-4-(4-(4-((terc-butoxicarbonil(3-(dietilamino)propil)amino)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,5 g, 0,80 mmol), se le anadio terc-butoxido potasico (0,090 g, 0,80 mmol). La mezcla se agito a 0 °C durante 10 minutos y se inactivo anadiendo HCl 1 N (2 ml) seguido de NaHCO 3 saturado (15 ml) y EtOAc (30 ml). La mezcla se extrajo y se separo. La capa organica se lavo con salmuera y se concentro en un evaporador rotatorio. El aceite resultante se purifico sobre una columna de gel de sflice y se eluyo con CH 2 Cl 2 /MeOH para dar 3-(dietilamino)propil(4-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)bencil)carbamato de terc-butilo en forma de un solido de color blanco se obtuvo (0,23 g, 49 %). p.f.: 140-142 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometros,1 ml/min, 240 nm, gradiente de acetonitrilo/H3PO4 al 0,1 % en H2O de 5/95 a 100/0 en 5 min y mantenido a 100/0 durante 5 min: tR = 5,15 min (95 %). 1 H RMN (DMSO-de) 50,89 (t, J = 7,2 Hz, 6H, CH3, CH3), 1,29 - 1,47 (m, 9H, CH3, CH3, CH3), 1,48 - 1,62 (m, 2H, CH2), 1,89 - 2,06 (m, 1H, CHH), 2,29 (t, J = 7,0 Hz, 2H, CH2), 2,37 (c, J = 7,2 Hz, 4H, CH2, CH2), 2,42 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,54 - 2,63 (m, 1H, CHH), 2,80 - 2,98 (m, 1H, CHH), 3,00 - 3,23 (m, 2H, CH2), 4,03 -4,61 (m, 4H, CH2,CH2), 4,95 - 5,18 (m, 1H, NCH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,12 - 7,38 (m, 4H, Ar), 7,39 - 7,65 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 5 11,52, 28,01, 31,16, 45,06, 46,01, 49,58, 51,55, 69,29, 78,64, 114,94, 115,20, 127,29, 127,83, 129,77, 129,93, 133,28, 135,30, 138,66, 153,42, 167,99, 170,95, 172,81; LCMS MH = 593. Anal calc. para C33H44N4O6 0,1 H2O: C, 66,87; H, 7,49; N, 9,42; Observado: C, 66,40; H, 7,43; N, 9,27.
5.179 ESTER TERC-BUTWCO DEL ACIDO [{4-[2-(2,6-DIOXO-PIPERIDIN-3-IL)-1-OXO-2,3-DIHIDRO-1H-ISOINDOL-4-ILOXIMETIL]-BENCIL}-2-MORFOLIN-4-IL-ETIL)-AMINO]-ACETICO
Figure imgf000152_0002
Etapa 1: A una solucion incolora agitada de 5-amino-4-(4-(4-(clorometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1,18 g, 2,75 mmol) en acetonitrilo (15 ml), se le anadio 2-morfolinoetanamina (1,08 ml, 8,24 mmol). La mezcla de reaccion se volvio inmediatamente una solucion de color verde claro. La reaccion se agito a temperatura ambiente durante una noche. La solution se evaporo para dar un aceite de color verde claro, que no se caracterizo adicionalmente y se uso en la siguiente etapa sin purification.
Etapa 2: A una solucion agitada de 5-amino-4-(4-(4-((2-morfolinoetilamino)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1,442 g, 2,75 mmol) en diclorometano (15 ml), se le anadio dicarbonato de di-terc-butilo (1,80 g, 8,25 mmol). El peso del MP limitante se asumio en 1,44 g, que era el rendimiento teorico de la etapa anterior. El aceite se purifico sobre una columna de gel de sflice (MeOH/CH 2 Cl 2 , gradiente del 1 % al 9 % en 50 min) para dar ester metflico del acido 4-[4-(4-{[terc-Butoxicarbonilmetil-(2-morfolin-4-il-etil)-amino]-metil}-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-4-carbamoil-butmco en forma de un solido oleoso (0,88 g, 51 % en dos etapas).
Etapa 3: A una solucion agitada de 5-amino-4-(4-(4-((terc-butoxicarbonil(2-morfolinoetil)amino)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,36 g, 0,58 mmol) en THF (10 ml) a 0 °C, se le anadio 2-metilpropan-2-olato potasico (0,07 g, 0,58 mmol). La mezcla de reaction se agito durante diez minutos y se inactivo con HCl 1 N (2 ml) para dar una solucion incolora transparente. Se neutralizo con bicarbonato sodico saturado (a pH = 7) para dar una mezcla turbia, que se extrajo con acetato de etilo (2 x 20 ml). La fase de acetato de etilo se concentro y se purifico sobre una columna de gel de sflice (MeOH/CH 2 Cl 2 , gradiente del 1 % al 5 % en 30 min) para dar ester tercbutflico del acido [{4-[2-(2,6-Dioxo-piperidin-3-il)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-bencil}-(2-morfolin-4-iletil)-amino]-acetico en forma de un solido de color blanco espumoso (0,21 g, rendimiento del 62 %); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 95/5 en 5 min, isocratica a 95/5 en 5 min (acetonitrilo/HsPO4 al 0,1 %), 5,38 min (97,4 %); p.f.: 110-112 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 5 1,29 - 1,49 (m, 9H, 3CHs), 1,92 -2,05 (m, 1H, CHH), 2,25 - 2,39 (m, 6H, 3CH2), 2,44 (dd, J = 4,5, 13,0 Hz, 1H, CHH), 2,53 -2,64 (m, 1H, CHH), 2,83 - 3,00 (m, 1H, CHH), 3,15 - 3,29 (m, 2H, CH2), 3,52 (t, J = 4,6 Hz, 4H, 2CH2), 4,19-4,49 (m, 4H, CH2, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,23 - 7,37 (m, 4H, Ar), 7,41 - 7,53 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 5 22,36, 28,02, 31,21, 43,30, 45,09, 49,37, 50,05, 51,58, 53,33, 55,95, 56,39, 66,17, 69,32, 78,84, 115,00, 115,23, 127,39, 127,83, 129,78, 129,97, 133,31, 135,30, 138,56, 153,43, 155,02, 168,01, 170,96, 172,83 (2 picos adicionales en la region alquilo posiblemente de los dos atomos alquilo cercanos al atomo de nitrogeno de amida debido al rotamero); LCMS MH = 593; Anal. Calc. para C3 2 H4oN 4 O 7 + 0,1 H 2 O: C, 64,65; H, 6,82; N, 9,42, Observado: C, 64,31; H, 6,82; N, 9,24.
5.180 N-{4-[2-(2,6-DIOXO-PIPERIDIN-3-IL)-1-OXO-2,3-DIHIDRO-1H-ISOINDOL-4-ILOXIMETIL]-BENCIL}-N-(2-MORFOLIN-4-IL-ETIL)-FORMAMIDA
Figure imgf000153_0001
Etapa 1: A una solucion incolora agitada de 5-amino-4-(4-(4-(clorometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1,18 g, 2,75 mmol) en acetonitrilo (15 ml), se le anadio 2-morfolinoetanamina (1,08 ml, 8,24 mmol). La mezcla de reaccion se volvio inmediatamente una solucion de color verde claro. La reaccion se agito a temperatura ambiente durante una noche. La solucion de reaccion se evaporo para dar un aceite de color verde claro, que no se caracterizo adicionalmente y se uso en la siguiente etapa sin purificacion.
Etapa 2: A una solucion agitada de 5-amino-4-(4-(4-((2-morfolinoetilamino)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1,442 g, 2,75 mmol) en diclorometano (15 ml), se le anadio dicarbonato de di-terc-butilo (1,80 g, 8,25 mmol). El peso del MP limitante se asumio en 1,44 g, que era el rendimiento teorico de la etapa anterior. El aceite se purifico sobre una columna de gel de sflice (MeOH/CH 2 Cl 2 , gradiente del 1 % al 9 % en 50 min) para dar ester metflico del acido 4-[4-(4-{[terc-Butoxicarbonilmetil-(2-morfolin-4-il-etil)-amino]-metil}-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-4-carbamoil-butmco en forma de un solido oleoso (0,88 g, rendimiento del 51 % en dos etapas).
Etapa 3: A una solucion agitada de 5-amino-4-(4-(4-((terc-butoxicarbonil(2-morfolinoetil)amino)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,36 g, 0,58 mmol) en THF (10 ml) a 0 °C, se le anadio 2-metilpropan-2-olato potasico (0,07 g, 0,58 mmol). La mezcla de reaccion se agito durante diez minutos y se inactivo con HCl 1 N (2 ml) para dar una solucion incolora transparente. Se neutralizo con bicarbonato sodico saturado (4 ml a pH = 7) para dar una mezcla turbia, que se extrajo con acetato de etilo (2 x 20 ml). La fase de acetato de etilo se concentro y se purifico sobre una columna de gel de sflice (MeOH/CH 2 Cl 2 , gradiente del 1 % al 5 % en 30 min) para dar ester terc-butflico del acido [{4-[2-(2,6-Dioxo-piperidin-3-il)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-bencil}-(2-morfolin-4-il-etil)-amino]-acetico en forma de un solido espumoso (0,213 g, rendimiento del 62 %); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 95/5 en 5 min, isocratica a 95/5 en 5 min (acetonitrilo/HsPO 4 al 0,1 %), 5,38 min (97,4 %); p.f.: 110-112 °C; 1 H RMN (DMSO^) 5 1,29 - 1,49 (m, 9H, 3CHs), 1,92 - 2,05 (m, 1H, CHH), 2,25 - 2,39 (m, 6H, 3CH2), 2,44 (dd, J = 4,5, 13,0 Hz, 1H, CHH), 2,53 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,83 - 3,00 (m, 1H, CHH), 3,15 - 3,29 (m, 2H, CH2), 3,52 (t, J = 4,6 Hz, 4H, 2CH2), 4,19 - 4,49 (m, 4H, CH2, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,23 - 7,37 (m, 4H, Ar), 7,41 -7,53 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 5 22,36, 28,02, 31,21, 43,30, 45,09, 49,37, 50,05, 51,58, 53,33, 55,95, 56,39, 66,17, 69,32, 78,84, 115,00, 115,23, 127,39, 127,83, 129,78, 129,97, 133,31, 135,30, 138,56, 153,43, 155,02, 168,01, 170,96, 172,83 (2 picos adicionales en la region alquilo posiblemente de los dos atomos alquilo cercanos al atomo de nitrogeno de amida debido al rotamero); LCMS Mh = 593; Anal. Calc. para C3 2 H 40 N 4 O 7 + 0,1 H 2 O: C, 64,65; H, 6,82; N, 9,42, Observado: C, 64,31; H, 6,82; N, 9,24.
Etapa 5: A una solution agitada de 4-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)bencil(2-morfolinoetil)carbamato de terc-butilo (0,42 g, 0,71 mmol) en diclorometano (5 ml), se le anadio HCl 2 M/eter (4 ml). Se formo casi inmediatamente un precipitado de color blanco. La suspension se agito durante una noche y se filtro para dar un solido de color blanco, que se purifico por HPLC prep. para dar un aceite transparente (0,22 g, rendimiento del 58 %). Se encontro que era una mezcla del producto deseado (16 % por H RMN) y la amida en el bencil NH con acido formico (84 % por H RMN).
Etapa 6: A una mezcla agitada de 3-(4-(4-((2-morfolinoetilamino)metil) benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,04 g, 0,08 mmol) en diclorometano (3 ml) a temperatura ambiente, se le anadio formiato de etilo (6,04 pl, 0,075 mmol). Se agito durante una hora, y se anadieron 0,12 ml de formiato de etilo y se agito durante seis horas. La mezcla se evaporo para dar un solido de color blanco, al que se le anadio eter dietflico (5 ml), se agito y se evaporo de nuevo para dar un solido de color blanco. Se agito en acetato de etilo (2 ml) y se evaporo. Se repitio dos veces mas (anadiendo 2 ml de EtOAc y despues se evaporo). El solido de color blanco resultante se seco en un horno de vatio durante una noche para dar N-{4-[2-(2,6-dioxo-piperidin-3-il)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-bencil}-N-(2-morfolin-4-il-etil)-formamida en forma de un solido de color blanco (0,16 g, rendimiento del 79 %); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 pm, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 95/5 en 5 min, isocratica a 95/5 en 5 min (acetonitrilo/HsPO 4 al 0,1 %), 5,23 min (95,4 %); p.f.: 216-218 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,91 - 2,05 (m, 1H, CH), 2,23 - 2,36 (m, 6H, CH2, CH2, CH2), 2,36 - 2,47 (m, 1H, CH), 2,53 - 2,66 (m, 1H, CH), 2,83 - 3,00 (m, 1H, CH), 3,20 (t, J = 6,6 Hz, 1H, CH), 3,27 (t, J = 6,0 Hz, 1H, CH), 3,51 (t, J = 4,6 Hz, 4H, ch2, ch2), 4,20 - 4,46 (m, 2H, CH2), 4,50 (d, J = 5,1 Hz, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,2, 13,3 Hz, 1H, NCH), 5,24 (d, J = 6,8 Hz, 2H, CH2), 7,24-7,37 (m, 4H, ArH), 7,41 - 7,54 (m, 3H, ArH), 8,15 (s, 0,5H, HCON, debido al rotamero), 8,29 (s, 0,5H, HCON, debido al rotamero), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 5 22,36, 31,20, 38,09, 43,31, 44,74, 45,08, 50,21, 51,58, 53,14, 55,02, 56,11,66,11,66,17, 69,29, 115,01, 115,24, 127,78, 127,85, 127,99, 129,79, 129,97, 133,31, 135,47, 136,05, 137,11, 137,36, 153,41, 163,00, 163,31, 167,99, 170,96, 172,83 (4 picos adicionales en la region aromatica y 6 picos adicionales en la region alquilo debido al rotamero); LCMS MH = 521; Anal. Calc. para C2eH3 2 N 4 O 6 + 0,6 H 2 O: C, 63,29; H, 6,30; N, 10,54, Observado: C, 63,06; H, 6,24; N, 10,35.
5.181 4-((2-(2,6-DIOXOPIPERON-3-IL)-1-OXOISOINDOLIN-4-ILOXI)METIL)-N-METIL-N-(2-MORFOLINOETIL)BENZAMIDA
Figure imgf000154_0001
Etapa 1: Se anadio cloruro de 4-(clorometil)benzoflo (655 mg, 3,47 mmol) a la solucion agitada de N-metil-2-morfolinoetanamina (500 mg, 3,47 mmol) en acetonitrilo (20 ml). La mezcla de reaction se agito a temperatura ambiente durante 15 minutos y la reaccion se completo. A la mezcla de reaccion se le anadio NaHCO3 (ac. sat. 30 ml). La solucion se extrajo con EtOAc (40 ml x 3). Las capas organicas se combinaron y se secaron por MgSO4. La mezcla se filtro y se concentro para dar 4-clorometil-N-metil-N-(2-morfolin-4-il-etil)-benzamida en forma de un aceite de color pardo claro (1,0 g, rendimiento en bruto del 97 %): LCMS MH = 297; 1H RMN (DMSO-d6) d 2,07 - 2,25 (m, 2H, CH2), 2,32 - 2,47 (m, 2H, CH2), 2,82 - 3,01 (m, 3H, CH2), 3,31 (s, 3H, CH3), 3,39 - 3,67 (m, 5H, CH2), 4,80 (s, 2H, CH2), 7,39 (d, J = 8,1 Hz, 2H, Ar), 7,49 (d, J = 8,1 Hz, 2H, Ar).
Etapa 2: A la mezcla agitada de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (400 mg, 1,369 mmol), 4-(clorometil)-N-metil-N-(2-morfolino etil)benzamida (406 mg, 1,369 mmol) y K2CO3 (189 mg, 1,369 mmol) en DMF (10 ml), se le anadio DIPEA (0,239 ml, 1,369 mmol). La mezcla de reaccion resultante se agito a temperatura ambiente durante 3 dias y despues se calento a 50 °C durante 24 horas antes de anadirse K2CO3 (100 mg, 0,82 mmol) y se calento a 80 °C durante 3,5 horas. La mezcla de reaccion combinada con otro lote de reaccion con 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (100 mg, 0,34 mmol) se concentro y se purifico por cromatografia ISCO para dar 4-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)-N-metil-N-(2-morfolinoetil)benzamida en forma de un solido de color blanco (135 mg, rendimiento del 15 %): HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 pm, 1 ml/min, 240 nm, 20/80, (acetonitrilo/H3PO4 al 0,1 %), 2,11 min (98 %); p.f.: 120-122 °C; 1H RMN (DMSO^) 51,96-2,09 (m, 1H, CHH), 2,28 - 2,37 (m, 4H, CH2, CH2), 2,39 - 2,46 (m, 1H, CHH), 2,44 - 2,52 (m, 2H, CH2), 2,54 - 2,66 (m, 1H, CHH), 2,79 - 2,91 (m, 1H, CHH), 2,94 (s, 3H, CH3), 3,44 (t, J = 6,4 Hz, 2H, CH2), 3,52 (t, J = 4,7 Hz, 4H, CH2, CH2), 4,32 (d, J = 17,2 Hz, 1H, CHH), 4,43 (d, J = 17,2 Hz, 1H, CHH), 5,04 (dd, J = 5,3, 13,0 Hz, 1H, CHH), 5,28 (s, 2H, CH2), 7,24 - 7,57 (m, 7H, Ar), 10,62 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO^) 5 22,36, 31,16, 37,28, 43,50, 45,06, 51,56, 53,28, 55,04, 66,16, 69,03, 114,99, 115,32, 126,87, 127,29, 129,78, 129,96, 133,33, 136,39, 137,66, 153,32, 167,96, 170,95, 172,81; LCMS MH = 521; Anal. Calc. para C2sH32N4O6 1,3 H2O: C, 61,82; H, 6,41; N, 10,30; Observado: C,61,73 ; H,6,29; N,10,11.
5.182 4-((2-(2,6-DIOXOPIPERON-3-IL)-1-OXOISOINDOLIN-4-ILOXI)METIL)-N-(2-(PIPERON-1-IL)ETIL)BENZAMIDA
Figure imgf000155_0001
Etapa 1: Se anadio cloruro de 4-(clorometil)benzoflo (1,474 g, 7,80 mmol) a la solution agitada de 2-(piperidin-1-il)etanamina (1 g, 7,80 mmol) en acetonitrilo (20 ml) a temperatura ambiente. La solucion transparente resultante se agito a temperatura ambiente durante 20 minutos y la reaction se completo. La mezcla de reaction se diluyo con EtOAc (50 ml) y se extrajo con NaHCO 3 (ac. sat. 30 ml). La capa acuosa se extrajo de nuevo con EtOAc (2 x 25 ml). Las capas organicas se combinaron y se secaron por MgSO 4 . La mezcla se filtro y se concentro para dar 4-clorometil-N-(2-piperidin-1-il-etil)-benzamida en forma de un solido de color pardo claro (2,46 g, rendimiento en bruto del 109 %): LCMS MH = 281; 1 H RMN (DMSO-de) 5 1,29 - 1,57 (m, 6H, CH2, CH2, CH2), 2,30 - 2,46 (m, 6H, CH2, CH2, CH2), 3,26 - 3,45 (m, 2H, CH2), 4,80 (s, 2H, CH2), 7,51 (d, J = 8,3 Hz, 2H, Ar), 7,82 (d, J = 8,3 Hz, 2H, Ar), 8,40 (t, J = 5,5 Hz, 1H, NH).
Etapa 2: Se anadio K 2 CO 3 (284 mg, 2,053 mmol) a la solucion agitada de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (600 mg, 2,053 mmol) y 4-(clorometil)-N-(2-(piperidin-1-il)etil)benzamida (576 mg, 2,053 mmol) en DMF (12 ml), seguido de la adicion de DIPEA (0,359 ml, 2,053 mmol) a temperatura ambiente. La suspension de reaccion resultante se agito a temperatura ambiente durante 2 dias y se calento a 50 °C durante 1 dia antes de anadir K 2 CO 3 (120 mg, 0,87 mmol) a la reaccion. La mezcla de reaccion resultante se calento a 80 °C durante 3 h y la reaccion se completo. La mezcla de reaccion se acidifico por HCl (1 N, 8 ml) a pH = 3, A la solucion transparente se le anadio NaHCO 3 (ac., sat., 8 ml) a pH = 8 antes de anadir diclorometano (40 ml) y salmuera (10 ml). La mezcla se extrajo y la capa acuosa se extrajo de nuevo con diclorometano (30 ml x 2). Las capas organicas se combinaron y se secaron por MgSO 4 . La mezcla se filtro y el filtrado se concentro. El residuo se purifico por cromatografia iScO para dar un solido de color blanco (220 mg). El solido se disolvio en diclorometano (2 ml) y se elimino por precipitation en EtOAC (10 ml). El solido se filtro y se seco para dar 4-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)-N-(2-(piperidin-1-il)etil)benzamida en forma de un solido de color blanco (205 mg, rendimiento del 19,8 %): HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 20/80, (acetonitrilo/H 3 PO 4 al 0,1 %), 2,91 min (97,6 %); p.f.: 220-222 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 5 1,31 - 1,42 (m, 2H, CH2), 1,43 - 1,56 (m, 4H, CH2, CH2), 1,92 - 2,06 (m, 1H, CHH), 2,30 - 2,47 (m, 7H, CHH, CH2, CH2, CH2), 2,58 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 2,82 - 3,00 (m, 1H, CHH), 3,34 - 3,40 (m, 2H, CH2), 4,28 (d, 1H, CHH), 4,45 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,12 (dd, J = 5,0, 13,1 Hz, 1H, CHH), 5,32 (s, 2H, CH2), 7,26 - 7,37 (m, 2H, Ar), 7,42 - 7,52 (m, 1H, Ar), 7,56 (d, J = 8,3 Hz, 2H, Ar), 7,84 (d, J = 8,3 Hz, 2H, Ar), 8,38 (t, J = 5,6 Hz, 1H, NH), 10,98 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 522,34, 23,97, 25,53, 31,18, 36,92, 45,07, 51,58, 54,02, 54,93, 57,61, 68,97, 115,01, 115,35, 127,23, 129,78, 129,97, 133,34, 134,19, 139,64, 153,27, 165,73, 167,97, 170,96, 172,81; LCMS MH = 505; C 2 sH 32 N 4 O 5 + 0,1 H2O 0,42CH2Cl2: C, 62,92; H, 6,14; N, 10,34; Observado: C,62,85 ; H,6,26; N, 10,17.
5.183 4-[2-(2,6-DIOXO-PIPERON-3-IL)-1-OXO-2,3-DIHIDRO-1H-ISOINDOL-4-ILOXIMETIL]-N-(3-MORFOLIN-4-IL-PROPIL)-BENZAMIDA
Figure imgf000155_0002
Etapa 1: Se anadio cloruro de 4-(clorometil)benzoflo (1,311 g, 6,93 mmol) a la solucion agitada de 3-morfolinopropan-1-amina (1 g, 6,93 mmol) en acetonitrilo (20 ml) a temperatura ambiente. La solucion de reaccion resultante se agito a temperatura ambiente durante 2 horas y la reaccion se completo. La mezcla de reaccion se diluyo con EtOAc (50 ml) y la solucion se extrajo con NaHCO 3 (ac. sat., 40 ml). La capa acuosa se extrajo de nuevo con EtOAc (2 x 20 ml). Las capas organicas se combinaron y se secaron por MgSO 4 . La mezcla se filtro y se concentro para dar 4-clorometil-N-(3-morfolin-4-il-propil)-benzamida en forma de un liquido transparente de color rojo claro (2,23 g, rendimiento en bruto del 117 %) que se uso en la siguiente etapa sin purification adicional: LCMS MH = 297; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 5 1,68 (quin, J = 7,1 Hz, 2H, CH2), 2,24 - 2,41 (m, 6H, CH2, CH2, CH2), 3,19 - 3,39 (m, 2H, CH2), 3,48 - 3,64 (m, 4H, CH2, CH2), 4,81 (s, 2H, M01), 7,52 (d, J = 8,1 Hz, 2H, Ar), 7,83 (d, J = 8,3 Hz, 2H, Ar), 8,51 (t, J = 5,4 Hz, 1H, NH).
Etapa 2: Se anadio DIPEA (0,359 ml, 2,053 mmol) a la mezcla agitada de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (600 mg, 2,053 mmol), 4-(clorometil)-N-(3-morfolinopropil)benzamida (640 mg, 2,155 mmol) y K 2 CO 3 (284 mg, 2,053 mmol) en DMF (12 ml) a temperatura ambiente. La mezcla resultante se hizo reaccionar a 50 °C durante 8 horas y a temperatura ambiente durante 2 dias antes de anadirse K 2 CO 3 (100 mg, 0,72 mmol). La mezcla se calento a 80 °C durante 9 horas antes de detener el avance de la reaction. La mezcla de reaction se filtro y el filtrado se diluyo con diclorometano (50 ml). La solution resultante se extrajo con salmuera (15 ml). La capa acuosa se extrajo de nuevo con diclorometano (25 ml). Las capas organicas se combinaron y se secaron con MgSO 4 . La mezcla se filtro y el filtrado se concentro. El residuo se purifico por cromatografia ISCO para dar un solido transparente (480 mg), que se trituro en EtOAC (15 ml) y se filtro para dar 4-[2-(2,6-dioxo-piperidin-3-il)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloxim etil]-N-(3-morfolin-4-il-propil)-benzamida en forma de un solido de color blanco (426 mg, rendimiento del 82 %): HPLC: Waters Symmetry C-l8, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 15/85, (acetonitrilo/HsPO4 al 0,1 %), 6,63 min (99,9 %); p.f.: 160-162 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,67 (quin, J = 7,0 Hz, 2H, CH2), 1,93 - 2,06 (m, 1H, CH2), 2,28 - 2,38 (m, 6H, CH2, CH2, CH2), 2,39 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,54 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,83 - 3,00 (m, 1H, CHH), 3,23 - 3,31 (m, 2H, CH2), 3,56 (t, J = 4,7 Hz, 4H, CH2, CH2), 4,28 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,45 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,12 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CHH), 5,32 (s, 2H, CH2), 7,32 (dd, J = 7,6, 8,3 Hz, 2H, Ar), 7,48 (t, J = 7,7 Hz, 1H, Ar), 7,56 (d, J = 8,1 Hz, 2H, Ar), 7,85 (d, J = 8,3 Hz, 2H, Ar), 8,48 (t, J = 5,5 Hz, 1H, NH), 10,98 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 522,34, 25,91, 31,18, 37,71,45,07, 51,58, 53,31, 56,02, 66,17, 68,98, 115,03, 115,35, 127,22, 127,28, 129,78, 129,97, 133,34, 134,22, 139,60, 153,27, 165,76, 167,94, 170,96, 172,81; LCMS MH = 521; Anal. Calc. para C28H32N4O6 1,0 H2O: C, 62,44; H, 6,36; N, 10,40; Observado: C, 62,29 ;
H,6,41; N, 10,26.
5.184 3-{4-[4-(ISOPROPILAMINO-METIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000156_0001
Etapa 1: A la solucion en acetonitrilo de 5-amino-4-(4-(4-(clorometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,5 g, 1,160 mmol), se le anadio gota a gota propan-2-amina (0,593 ml, 6,96 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla se concentro en un evaporador rotatorio y el aceite resultante se uso en la siguiente etapa directamente.
Etapa 2: A la suspension en THF de 5-amino-4-(4-(4-((isopropilamino)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,45 g, 0,992 mmol), se le anadio terc-butoxido potasico (0,223 g, 1,984 mmol) a 0 °C. La mezcla se agito durante 5 minutos y se inactivo anadiendo 2 ml de HCl 1 N seguido de 10 ml de NaHCO 3 sat. y 20 ml de CH 2 Cl 2 . La mezcla se extrajo y se separo. La capa organica se concentro en un evaporador rotatorio y el aceite resultante se agito con eter (20 ml) para dar 3-{4-[4-(isopropilaminometil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color amarillo (150 mg, 31 %). p.f.: 165-167 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometros,1 ml/min, 240 nm, gradiente de acetonitrilo/H 3 PO 4 al 0,1 % en H 2 O de 5/95 a 100/0 en 5 min y mantenido a 100/0 durante 5 min: tR = 4,56 min (96 %). 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 50,98 (d, J = 6,2 Hz, 6H, CH 3 ,CH 3 ), 1,88 - 2,05 (m, 1H, CHH), 2,35 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,62 (m, 1H, CHH), 2,63 - 2,74 (m, 1H, CH), 2,80 - 2,99 (m, 1H, CH), 3,68 (s, 2H, CH2), 4,15 - 4,51 (m, 2H, CH2), 5,10 (dd, J = 5,0, 13,1 Hz, 1H, NCH), 5,22 (s, 2H, CH2), 7,24 - 7,62 (m, 7H, Ar),11,00-11,10 (ancho, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 522,37, 22,73, 31,21, 45,06, 47,08, 50,10, 51,57, 114,97, 115,16, 127,55, 127,92, 129,76, 129,94, 133,30, 134,56, 141,36, 153,46, 167,98, 171,08, 172,96, LCMS MH = 422. Anal calc. para C24H27N 3 O4 0,9 H2O: C, 65,86; H, 6,63; N, 9,60; Observado: C, 66,02; H, 6,46; N, 9,25.
5.185 3-[4-(4-CICLOHEXILAMINOMETIL-BENCILOXI)-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000156_0002
Etapa 1: A la solucion en acetonitrilo (10 ml) de 5-amino-4-(4-(4-(clorometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,5 g, 1,160 mmol), se le anadio gota a gota ciclohexanamina (0,798 ml, 6,96 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche y se concentro en un evaporador rotatorio. La mezcla resultante se uso en la siguiente etapa directamente.
Etapa 2: A la solucion en THF (20 ml) de 5-amino-4-(4-(4-((ciclohexilamino)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,4 g, 0,810 mmol), se le anadio 2-metilpropan-2-olato potasico (0,136 g, 1,216 mmol) a 0
°C. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 5 minutos. A la mezcla se le anadieron 2 ml de HCl 1 N seguido de 10 ml de NaHCO3 sat. y 20 ml de CH2O 2. La mezcla se extrajo y se separo. La capa organica se concentro en un evaporador rotatorio y el solido resultante se agito con eter (20 ml) para dar 3-[4-(4-cidohexilaminometil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (250 mg, 47 %). p.f.: 175-177 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometros, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de acetonitrilo/H 3 PO 4 al 0,1 % en H 2 O de 5/95 a 100/0 en 5 min y mantenido a 100/0 durante 5 min: tR = 4,80 min (95 %). 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 50,94 - 1,20 (m, 4H, CH2, CH2,CHH), 1,42 - 1,58 (m, 1H, CHH), 1,58 - 1,73 (m, 2H, CH2), 1,80-1,84 (m, 2H, CH2), 1,91 - 2,06 (m, 1H, CHH), 2,27 - 2,40 (m, 1H, CH), 2,40 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,79 - 3,04 (m, 1H, CHH), 3,71 (s, 2H, CH2), 4,10 - 4,60 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,22 (s, 2H, CH2), 7,24 - 7,63 (m, 7H, Ar). 13 C RMN (DMSO-de) 522,29, 24,34, 25,84, 31,14, 32,81, 45,04, 49,51, 51,53, 55,05, 69,43, 114,94, 115,12, 127,51, 127,83, 129,71, 129,90, 133,24, 134,50, 141,46, 153,43, 167,94, 170,90, 172,75 ; LCMS MH = 462. Anal calc. para C27H31N3O4 0,4 H2O: C, 69,18; H, 6,84; N, 8,96; Observado: C, 69,02; H, 7,11; N, 8,79.
5.186 3-(4-(4-((METIL(2-MORFOUNOETIL)AMINO)METIL)BENCILOXI)-1-OXOISOINDOUN-2-IL)PIPERON-2,6-DIONA
Figure imgf000157_0001
Etapa 1: A la solution en acetonitrilo (10 ml) de 5-amino-4-(4-(4-(clorometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,5 g, 1,160 mmol), se le anadio N-metil-2-morfolinoetanamina (0,201 g, 1,392 mmol) seguido de DIPEA (0,243 ml, 1,392 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaction se concentro y se extrajo con CH 2 Cl 2 (30 ml) y agua (30 ml). La capa organica se concentro en un evaporador rotatorio para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(4-{[metil-(2-morfolin-4-il-etil)-amino]-metil}-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco en forma de un solido espumoso. Se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 2: A la solucion en THF (20 ml) de 5-amino-4-(4-(4-((metil(2-morfolinoetil)amino)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,6 g, 1,114 mmol), se le anadio terc-butoxido potasico (0,150 g, 1,337 mmol). La mezcla se agito a 0 °C durante 5 minutos. La mezcla de reaccion se anadio HCl 1 N (2 ml), seguido de NaHCO 3 sat. (10 ml) y CH 2 Cl 2 (30 ml). La mezcla se extrajo y se separo. La capa organica se seco sobre Na 2 SO 4 y se concentro. El solido espumoso resultante se purifico sobre una columna de gel de sflice y se eluyo con CH 2 Cl 2 /MeOH para dar 3-(4-(4-((metil(2-morfolinoetil)amino)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,34 g, 60 %). p.f.: 193-195 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometres, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de acetonitrilo/H 3 PO 4 al 0,1 % en H 2 O de 5/95 a 100/0 en 5 min y mantenido a 100/0 durante 5 min: tR 4,25 min (98 %). 1 H RMN (DMSO-de) 51,94 - 2,05 (m, 1H, CHH), 2,14 (s, 3H, CH3), 2,30-2,38 (s a, 4H, CH2, CH2), 2,38-2,49 (s a, 5H, CH2, CH2, CHH), 2,54-2,60 (m., 1H, CHH), 2,89 (m, 1H, CHH), 3,43 - 3,63 (m, 6H, CH2, CH2, CH2), 4,22 - 4,45 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 4,9, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,31-7,51 (m, 6H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO^) 522,36, 31,21, 42,19, 45,10, 51,58, 53,63, 53,88, 56,11, 61,43, 66,16, 69,44, 115,01, 115,23, 127,58, 128,77, 129,79, 129,95, 133,31, 135,13, 139,01, 153,50, 168,01, 170,96, 172,83. Anal calc. para C2sH3 4 N 4 O5 0,4 H2O: C, 65,45; H, 6,83; N, 10,90; Observado: C, 65,71; H, 7,11; N, 10,95.
5.187 BIS CLORHIDRATO DE 3-(4-{4-[(2-MORFOLIN-4-IL-ETILAMINO)-METIL]-BENCILOXI}-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000157_0002
Etapa 1: A una solucion agitada de 5-amino-4-(4-(4-(clorometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1,18 g, 2,75 mmol) en acetonitrilo (15 ml), se le anadio 2-morfolinoetanamina (1,08 ml, 8,24 mmol). La mezcla de reaccion se volvio inmediatamente una solucion de color verde claro. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche y despues se evaporo para dar un aceite de color verde claro, que no se caracterizo adicionalmente y se uso en la siguiente etapa sin purification.
Etapa 2: A una solucion agitada de 5-amino-4-(4-(4-((2-morfolinoetilamino)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1,44 g, 2,75 mmol) en diclorometano (15 ml), se le anadio dicarbonato de di-terc-butilo (1,80 g, 8,25 mmol). El peso del MP limitante se asumio en 1,44 g, que era el rendimiento teorico de la etapa anterior. El aceite se purifico sobre una columna de gel de sflice (MeOH/CH 2 Cl 2 , gradiente del 1 % al 9 % en 50 min) para dar ester metflico del acido 4-[4-(4-{[terc-butoxicarbonilmetil-(2-morfolin-4-il-etil)-amino]-metil}-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-4-carbamoil-butmco en forma de un solido oleoso (0,88 g, rendimiento del 51 % en dos etapas).
Etapa 3: A una solucion agitada de 5-amino-4-(4-(4-((terc-butoxicarbonil(2-morfolinoetil)amino)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,36 g, 0,58 mmol) en THF (10 ml) a 0 °C, se le anadio 2-metilpropan-2-olato potasico (0,07 g, 0,58 mmol). La mezcla de reaccion se agito durante diez minutos y se inactivo con HCl 1 N (2 ml) para dar una solucion incolora transparente. Se neutralizo con bicarbonato sodico saturado (4 ml a pH = 8) para dar una mezcla turbia, que se extrajo con acetato de etilo (2 x 20 ml). La fase de acetato de etilo se concentro y se purifico sobre una columna de gel de sflice (MeOH/CH 2 Cl 2 , gradiente del 1 % al 5 % en 30 min) para dar ester terc-butflico del acido [{4-[2-(2,6-dioxo-piperidin-3-il)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-bencil}-(2-morfolin-4-iletil)-amino]-acetico en forma de un solido espumoso (0,21 g, rendimiento del 62 %); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 95/5 en 5 min, isocratica a 95/5 en 5 min (acetonitrilo/HsPO4 al 0,1 %), 5,38 min (97,4 %); p.f.: 110-112 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 5 1,29 - 1,49 (m, 9H, 3CHs), 1,92 - 2,05 (m, 1H, CHH), 2,25 - 2,39 (m, 6H, 3CH2), 2,44 (dd, J = 4,5, 13,0 Hz, 1H, CHH), 2,53 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,83 - 3,00 (m, 1H, CHH), 3,15 - 3,29 (m, 2H, CH2), 3,52 (t, J = 4,6 Hz, 4H, 2CH2), 4,19 - 4,49 (m, 4H, CH2, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,23 - 7,37 (m, 4H, Ar), 7,41 -7,53 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 5 22,36, 28,02, 31,21, 43,30, 45,09, 49,37, 50,05, 51,58, 53,33, 55,95, 56,39, 66,17, 69,32, 78,84, 115,00, 115,23, 127,39, 127,83, 129,78, 129,97, 133,31, 135,30, 138,56, 153,43, 155,02, 168,01, 170,96, 172,83 (2 picos adicionales en la region alquilo posiblemente de los dos atomos alquilo cercanos al atomo de nitrogeno de amida debido al rotamero); LCMS Mh = 593; Anal. Calc. para C3 2 H4 0 N 4 O 7 + 0,1 H 2 O: C, 64,65; H, 6,82; N, 9,42, Observado: C, 64,31; H, 6,82; N, 9,24.
Etapa 4: A una solucion agitada de 4-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)bencil(2-morfolinoetil)carbamato de terc-butilo (0,27 g, 0,45 mmol) en diclorometano (3 ml) se le anadio HCl 2 M/eter (2,5 ml). Se formo casi inmediatamente un precipitado de color blanco. Se agito a temperatura ambiente durante una noche y despues se filtro para dar dos clorhidrato de 3-(4-{4-[(2-Morfolin-4-il-etilamino)-metil]-benciloxi}-1-oxo-1,3-dihidroisoindol-2-il)-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color amarillo (176 mg, rendimiento del 74 %); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 5/95 a 95/5 en 5 min, isocratica a 95/5 en 5 min (acetonitrilo/HsPO 4 al 0,1 %), 4,89 min (95,4 %); p.f.: 258-260 °C; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,94 - 2,06 (m, 1H, CHH), 2,36 - 2,44 (m, 1H, CHH), 2,55 - 2,66 (m, 1H, CHH), 2,83 - 3,00 (m, 1H, CHH), 3,03 - 3,23 (m, 2H, CH2), 3,47 (s a, 6H, CH2, CH2, CH2), 3,80 (s a, 2H, CH2), 3,92 - 4,10 (m, 2H, CH2), 4,15 - 4,51 (m, 4H, CH2, CH2), 5,12 (dd, J = 5,2, 13,1 Hz, 1H, NCH), 5,30 (s, 2H, CH2), 7,27 - 7,38 (m, 2H, Ar), 7,44 - 7,52 (m, 1H, Ar), 7,53 - 7,65 (m, 4H, ArH), 9,43 - 9,67 (s a, 1,3H, NH o HCl), 10,97 (s, 1H, NH), 11,06 - 11,23 (s a, 0,6H, NH o HCl); 13 C RMN (DMSO^) 5 22,36, 31,22, 40,67, 45,15, 49,89, 51,62, 52,06, 54,93, 63,28, 69,03, 115,01, 115,33, 127,78, 129,81, 130,00, 130,17, 131,44, 133,35, 137,48, 153,30, 167,98, 170,96, 172,85; LCMS MH = 493; Anal. Calc. para C27H32N4O5.2HCL 1,1 H2O, 0,1CH 2 Cl 2 : C, 54,82; H, 6,18; N, 9,44; Cl, 13,13; Observado: C, 54,56; H, 6,04; N, 9,31; Cl, 12,82.
5.188 3-(4-{4-[(2-HIDROXI-ETILAMINO)-METIL]-BENCILOXI}-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DIONA
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Etapa 1: A una solucion agitada de 5-amino-4-(4-(4-(clorometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,52 g, 1,21 mmol) en acetonitrilo (10 ml) a temperatura ambiente, se le anadieron 2-aminoetanol (0,15 ml, 2,41 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,60 ml, 3,62 mmol). La mezcla de reaccion se calento a 40 °C durante una noche y se evaporo al vado para dar un aceite, que se mezclo con cloruro de metileno (40 ml), se lavo con agua (3 x 20 ml) y se evaporo para dar un aceite transparente (0,61 g, rendimiento en bruto del 111 %). Se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 2: A una mezcla agitada de 5-amino-4-(4-(4-((2-hidroxietilamino)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,61 g, 1,34 mmol) en THF (15 ml) en un bano de hielo, se le anadio 2-metilpropan-2-olato potasico (0,65 g, 4,91 mmol), y la mezcla se agito durante ten minutos. La mezcla se inactivo rapidamente con HCl 1 N (~3 ml) y se neutralizo con bicarbonato sodico saturado (6 ml a pH = 7), y despues se extrajo con cloruro de metileno (3 x 30 ml). Las fases organicas se combinaron, se lavaron con salmuera (20 ml) y se concentraron para dar un solido espumoso de color blanquecino (0,31 g, rendimiento del 54 %). Se agito en agua (15 ml) y se extrajo con cloruro de metileno (4 x 20 ml). La fase acuosa se congelo rapidamente mediante una mezcla de acetona/hielo seco y se liofilizo durante una noche. El peso del solido mullido de color blanco despues de la liofilizacion fue de 83 mg. Se mezclo con cloruro de metileno (2 ml, parcialmente disuelto), se anadio HCl 2 M/eter (1,2 ml, 6 equiv.) y se agito durante una noche. La suspension se filtro y se aclaro con eter dietflico. El solido de color blanquecino filtrado se seco en un horno de vado para dar 3-(4-{4-[(2-hidroxi-etilamino)-metil]-benciloxi}-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-piperidin-2,6-diona (57 mg, rendimiento del l0 % en dos etapas); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 95/5 en 5 min, isocratica a 95/5 en 5 min (acetonitrilo/H 3 PO 4 al 0,1 %), 5,13 min (92,2 %); p.f.: 251-253 °C; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,92 -2,06 (m, 1H, CHH), 2,37 -2,47 (m, 1H, CHH), 2,54 -2,65 (m, 1H, CHH), 2,83 - 3,00 (m, 3H, CH2, CHH), 3,68 (t, J = 5,4 Hz, 2H, CH2), 4,11 - 4,20 (m, 2H, CH2), 4,23 -4,50 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,29 (s, 2H, CH2), 7,29 - 7,37 (m, 2H, Ar), 7,43 - 7,64 (m, 5H, Ar), 9,18 - 9,41 (m, 2H, HCINH), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 522,36, 31,21, 45,13, 48,40, 49,49, 51,62, 56,30, 69,07, 115,01, 115,32, 127,74, 129,81, 130,00, 130,33, 131,65, 133,35, 137,30, 153,34, 167,98, 170,98, 172,85; LCMS MH = 424; Anal calc. para C23H25N3O5.HCI: C, 60,06; H, 5,70; N, 9,14; Cl, 7,71, Observado: C, 48,95; H, 5,00; N, 7,28; Cl, 14,92.
5.189 4-((2-(2,6-DIOXOPIPERON-3-IL)-1-OXOISOINDOLIN-4-ILOXI)METIL)-N-(2-HIDROXI-2METILPROPIL)BENZAMIDA
Figure imgf000159_0001
A una solucion de 4-(clorometil)-N-(2-hidroxi-2-metilpropil)benzamida (0,73 g, 3,02 mmol) y 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,839 g, 2,87 mmol) en DMF (10 ml), se le anadio DIEA (0,527 ml, 3,02 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La solucion se calento a 40 °C. A la mezcla se le anadio K2CO3 (0,417 g, 3,02 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 4 dias. La mezcla de reaccion se calento a 35 °C durante 1 dia. La mezcla se calento a 80 °C durante una noche. La mezcla se enfrio a temperatura ambiente. La suspension se filtro y se lavo con acetonitrilo (15 ml). El filtrado se acidifico con HCOOH (2 ml). La solucion se purifico con HPLC prep., (Xbridge C18, 10 ^m, 50 x 250 mm, 143 ml/min, 240 nM, 2/98/2 min, gradiente de 95/5 de acetonitrilo y FA al 0,1 %/H2O acido formico al 0,1 % en 30 min) para dar 4-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)-N-(2-hidroxi-2-metilpropil)benzamida en forma de un solido de color blanco (0,18 g, rendimiento del 12,8 %): HPLC: (Waters Symmetry C18, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 25/75 de acetonitrilo/H 3 PO4 al 0,1 %) 4,72 (95,2 %); p.f.: 165-167 °C; 1H RMN (DMSO-d6) 5 1,10 (s, 6H, CH3, CH3), 1,87 - 2,11 (m, 1H, CHH), 2,36 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,77 - 3,04 (m, 1H, CHH), 3,25 (d, J = 6,0 Hz, 2H, CH2), 4,31 (s, 1H, CHH), 4,42 (s, 1H, CHH), 4,55 (s, 1H, OH), 5,00 - 5,20 (m, 1H, NCH), 5,33 (s, 2H, CH2), 7,33 (dd, J = 5,7, 7,0 Hz, 2H, Ar), 7,48 (t, J = 7,7 Hz, 1H, Ar), 7,57 (d, J = 8,3 Hz, 2H, Ar), 7,88 (d, J = 8,3 Hz, 2H, Ar), 8,24 (t, J = 6,1 Hz, 1H, NH), 10,98 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-d6) 522,27, 27,28, 31,11, 45,01, 50,12, 51,52, 68,92, 69,72, 114,96, 115,28, 127,15, 127,40, 129,73, 129,92, 133,28, 134,27, 139,59, 153,21, 166,30, 167,87, 170,89, 172,74; LCMS MH = 466; Anal. Calc. para C25H27N3O6 1 H2O: C, 62,10; H, 6,05; N, 8,69; Observado: C, 62,00; H, 5,74; N, 8,65.
5.190 3-(4-{4-[(DNSOPROPILAMINO)-METIL]-BENCILOXI}-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL)-PIPERON-2,6-DIONA
Figure imgf000159_0002
Etapa 1: A una solucion incolora agitada de 5-amino-4-(4-(4-(clorometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1,00 g, 2,32 mmol) en acetonitrilo (10 ml) a temperatura ambiente, se le anadio diisopropilamina (2,95 ml, 20,88 mmol). La mezcla se agito a 100 °C durante dos dias. La reaccion no pudo completarse y la mezcla se uso en la siguiente etapa cambiando un disolvente por DMF sin purification alguna.
Etapa 2: Una mezcla de 5-amino-4-(4-(4-((diisopropilamino)metil) benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1,15 g, 2,32 mmol) y carbonato potasico (0,32 g, 2,32 mmol) en d Mf (15 ml) se calento a 80 °C durante una noche. La suspension se filtro y se aclaro con DMF para dar un filtrado de color pardo y un solido de color blanquecino. El filtrado se evaporo para dar un aceite y se purifico sobre una columna de gel de sflice (MeOH/CH 2 Cl 2 , gradiente del 1 % al 9 % en 50 min) para dar 3-(4-{4-[(Diisopropilamino)-metil]-benciloxi}-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (38 mg, rendimiento del 7 %); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 95/5 en 5 min, isocratica a 95/5 en 5 min (acetonitrilo/H 3 PO4 al 0,1 %), 5,35 min (95,8 %); p.f.: 201-203 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 50,98 (d, J = 6,6 Hz, 12H, 4CHs), 1,90 - 2,05 (m, 1H, CHH), 2,35 - 2,46 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,65 (m, 2H, CHH, CHH), 2,82 - 3,05 (m, 2H, CHH, CHH), 3,61 (s, 2H, CH2), 4,18 - 4,49 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,20 (s, 2H, CH2), 7,26 - 7,55 (m, 7H, Ar), 10,96 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO^) 520,60, 22,35, 31,21, 45,10, 47,35, 48,03, 51,58, 69,52, 114,95, 115,19, 127,56, 127,64, 129,81, 129,95, 133,29, 134,39, 142,81, 153,56, 168,02, 170,96, 172,83; LCMS MH = 464; Anal. Calc. para C27H33N3O4 1,1 H2O: C, 67,09; H, 7,34; N, 8,69, Observado: C, 66,73; H, 6,99; N, 8,56.
5.191 3-(1-OXO-4-{4-[(TETRAHIDRO-PIRAN-4-ILAMINO)-METIL]-BENCILOXI}-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000160_0001
Etapa 1: A una solucion de 5-amino-4-(4-(4-(clorometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,5 g, 1,16 mmol) en THF (10 ml), se le anadio tetrahidro-2H-piran-4-amina (0,29 g, 2,90 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche y despues se calento a 45 °C durante tres horas. La mezcla de reaccion se filtro para eliminar el solido. El filtrado se concentro y se extrajo con agua y diclorometano. La capa organica se concentro para dar un solido espumoso de color amarillo (0,50 g, rendimiento del 87 %), que se purifico sobre gel de sflice (MeOH/CH 2 Cl 2 , gradiente del 1 % al 10 % en 30 min) para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-(1-oxo-4-{4-[(tetrahidro-piran-4-ilamino)-metil]-benciloxi}-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-butmco en forma de un aceite (0,40 g, rendimiento del 70 %). Se uso en la siguiente etapa sin purification adicional.
Etapa 2: A una solucion agitada de 5-amino-5-oxo-4-(1-oxo-4-(4-((tetrahidro-2H-piran-4-ilamino)metil)benciloxi)isoindolin-2-il)pentanoato de metilo (0,40 g, 0,81 mmol) en THF (15 ml) en un bano de hielo, se le anadio 2-metilpropan-2-olato potasico (0,10 g, 0,90 mmol). La mezcla se agito durante diez minutos y despues se inactivo con HCl 1 N (2 ml) y se neutralizo con bicarbonato sodico saturado (3 ml a pH = 7). La mezcla se agito con acetato de etilo (30 ml) y se separo. La fase organica se lavo con salmuera (20 ml) y se concentro para dar un solido de color blanquecino, que se purifico sobre una columna de gel de sflice (MeOH/CH 2 Cl 2 , gradiente del 1 % al 10 % en 30 min) para dar 3-(1-oxo-4-{4-[(tetrahidro-piran-4-ilamino)-metil]-benciloxi}-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (80,8 mg, rendimiento del 22 %); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 pm, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 95/5 en 5 min, isocratica a 95/5 en 5 min (acetonitrilo/H3PO4 al 0,1 %), 4,89 min (98,7 %); p.f.: 231-233 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,19-1,32(m, 3H, NH, CH2), 1,74-1,79(m, 2H, CH2), 1,96-2,00 (m, 1H, CHH), 2,37-2,47 (m, 1H, CHH), 2,51-2,60 (m, 2H, 2CH), 2,85-2,97 (m, 1H, CHH), 3,20-3,28 (m, 2H,CH 2 ), 3,73 (s, 2H, CH2), 3,78-3,84 (m, 2H, CH2), 4,22 - 4,44 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,22 (s, 2H, CH2), 7,31 - 7,51 (m, 7H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 522,32, 31,17, 33,10, 45,08, 49,08, 51,56, 52,36, 65,76, 69,45, 115,00, 115,18, 127,57, 127,94, 129,77, 129,95, 133,28, 134,64, 141,20, 153,46, 167,99, 170,95, 172,81; LCMS MH = 464; Anal. Calc. para C 26 H 29 N 3 Oe(0,5 H2O): C, 66,09; H, 6,40; N, 8,89, Observado: C, 65,90; H, 6,21; N, 8,62.
5.192 4-[2-(2,6-DIOXO-PIPERIDIN-3-IL)-1-OXO-2,3-DIHIDRO-1H-ISOINDOL-4-ILOXIMETIL]-N-(3-PIPERON-1-IL-PROPIL)-BENZAMIDA
Figure imgf000160_0002
Etapa 1: Se anadio 3-(piperidin-1-il)propan-1-amina (411 mg, 2,89 mmol) a una solucion agitada de cloruro de 4-(clorometil)benzoflo (546 mg, 2,89 mmol) en acetonitrilo (10 ml) a traves de una jeringa. Despues de la adicion de la solucion se agito a temperatura ambiente durante 20 minutos y la reaccion se completo. A la mezcla de reaccion se le anadio NaHCO 3 (ac. sat., 20 ml). La solucion transparente se extrajo de nuevo con EtOAc (3 x 25 ml). Las capas organicas se combinaron y se secaron por MgSO 4 . La mezcla se filtro y se concentro al vado para dar 4-clorometil-N-(3-piperidin-1-il-propil)-benzamida en forma de un aceite de color pardo claro (700 mg, 82 %). El compuesto se uso en la siguiente etapa tal cual: 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,37 (d, J = 5,1 Hz, 2H, CH2), 1,42 - 1,54 (m, 4H, CH2, CH2), 1,66 (t, J = 7,0 Hz, 2H, CH2), 2,23 - 2,39 (m, 6H, CH2, CH2, CH2), 3,19 - 3,31 (m, 2H, CH2), 4,80 (s, 2H, CH2), 7,51 (d, J = 8,1 Hz, 2H, Ar), 7,83 (d, J = 8,1 Hz, 2H, Ar), 8,53 (t, J = 5,4 Hz, 1H, NH); LCMS MH = 295.
Etapa 2: A la mezcla de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (694 mg, 2,374 mmol), 4-(clorometil)-N-(3-(piperidin-1-il)propil)benzamida (700 mg, 2,374 mmol) y K 2 CO 3 (328 mg, 2,374 mmol), se le anadio DMF (10 ml). La mezcla de reaccion se agito a 50 °C durante una noche y se anadio K 2 CO 3 (150 mg, 1,08 mmol). La mezcla resultante se calento a 80 °C durante 2 horas. La mezcla de reaccion se acidifico por HCl (1 N, ac.
8 ml) seguido de la adicion de NaHCO 3 (ac. sat. 8 ml) y salmuera (10 ml). La capa acuosa se extrajo de nuevo con diclorometano (3 x 35 ml). Las capas organicas se combinaron y se secaron por MgSO 4 . La mezcla se filtro y se concentro. El residuo se purifico por cromatografia ISCO para dar un solido de color blanco. El solido se trituro en diclorometano (1 ml) y eter (15 ml) para dar 4-[2-(2,6-dioxo-piperidin-3-il)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]N-(3-piperidin-1-il-propil)-benzamida en forma de un solido de color blanco (84 mg, rendimiento del 6,8 %): HPLC:
Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 jm , 1 ml/min, 240 nm, 18/82, (acetonitrilo/H 3 PO4 al 0,1 %), 4,54 min (98,5 %); p.f.: 183-185 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,37 (d, J = 5,1 Hz, 2H, CH2), 1,43 - 1,54 (m, 4H, CH2, CH2), 1,67 (quin, J = 7,0 Hz, 2H, CH2), 1,93 - 2,07 (m, 1H, CHH), 2,31 (d, J = 5,7 Hz, 5H, CH2, CH2), 2,40 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,53 -2,66 (m, 1H, CHH), 2,83 - 3,01 (m, 1H, CHH), 3,21 - 3,37 (m, 3H, CH2, CHH), 4,28 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,45 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 5,12 (dd, J = 5,0, 13,1 Hz, 1H, CHH), 5,32 (s, 2H, CH2), 7,32 (dd, J = 7,6, 8,3 Hz, 2H, Ar), 7,48 (t, J = 7,7 Hz, 1H, Ar), 7,56 (d, J = 8,3 Hz, 2H, Ar), 7,84 (d, J = 8,1 Hz, 2H, Ar), 8,50 (t, J = 5,4 Hz, 1H, NH), 10,98 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 5 22,34, 24,05, 25,52, 26,19, 31,18, 37,97, 45,07, 51,59, 54,01, 56,43, 68,98, 115,03, 115,35, 127,25, 127,21, 129,78, 129,97, 133,34, 134,29, 139,58, 153,29, 165,73, 167,91, 170,96, 172,81; LCMS MH = 519; Anal. Calc. para C29H34N4O5 0,4 H2O: C, 66,24; H, 6,67; N, 10,66; Observado: C, 66,17;
H, 6,43; N, 10,53.
5.193 ACIDO 2-{4-[2-(2,6-DIOXO-PIPERIDIN-3-IL)-1-OXO-2,3-DIHIDRO-1H-ISOINDOL-4-ILOXIMETIL]-BENZILAMINO}-2-METIL-PROPIONICO
Figure imgf000161_0001
Etapa 1: Ester metflico del acido 4-(4-{4-[(1-terc-butoxicarbonil-1-metil-etilamino)-metil]-benciloxi}-1-oxo-1,3-dihidroisoindol-2-il)-4-carbamoil-butmco
A la solucion agitada de 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (600 mg, 1,262 mmol) en Acetonitrilo (10 ml) a temperatura ambiente se le anadieron clorhidrato de 2-amino-2-metilpropanoato de terc-butilo (272 mg, 1,389 mmol) y DIPEA (0,551 ml, 3,16 mmol). La reaccion se agito a temperatura ambiente durante una noche durante 5 dias y se anadieron EtOAc(50 ml), NaHCO3 (ac. sat., 5 ml) y salmuera (15 ml). La mezcla se extrajo y la capa organica se concentro al vado. El residuo se purifico por cromatografia ISCO para dar ester metflico del acido 4-(4-{4-[(1-terc-Butoxicarbonil-1-metil-etilamino)-metil]-benciloxi}-1-oxo -1,3-dihidro-isoindol-2-il)-4-carbamoil-butmco en forma de un solido pegajoso transparente (470 mg, rendimiento del 67 %); LCMS MH = 554; 1H RMN (DMSO^) 51,21 (s, 6H, CH3, CH3), 1,44 (s, 9H, CH3, CH3, CH3), 1,97 - 2,32 (m, 4H, CH2, CH2, CH), 3,50 (s, 3H, CH3), 3,58 (d, J = 5,7 Hz, 2H, CH2), 4,39 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,52 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,72 (dd, J = 4,6, 10,1 Hz, 1H, CHH), 5,22 (s, 2H, CH2), 7,18 (s, 1H, NHH), 7,25 -7,32 (m, 2H, Ar), 7,32 - 7,39 (m, 2H, Ar), 7,40 - 7,49 (m, 3H, Ar), 7,58 (s, 1H, NHH).
Etapa 2: Ester terc-butflico del acido 2-{4-[2-(2,6-Dioxo-piperidin-3-il)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-bencilamino}-2-metil-propionico
A la solucion agitada de 5-amino-4-(4-(4-((1-terc-butoxi-2-metil-1-oxopropan-2-ilamino)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (470 mg, 0,849 mmol) en Tetrahidrofurano (Volumen: 10 ml) a 0 °C se le anadio en una porcion terc-butoxido potasico (95 mg, 0,849 mmol). La mezcla se agito a 0 °C durante 15 min. La mezcla de reaccion se diluyo por EtOAc (50 ml) y se inactivo por HCl (1 N, ac., 3 ml) seguido de la adicion de NaHCO3 (ac., sat., 3 ml) y salmuera (15 ml). La mezcla se extrajo y la capa organica se seco por MgSO4. La mezcla se filtro y se concentro al vado para dar ester terc-butflico del acido 2-{4-[2-(2,6-Dioxo-piperidin-3-il)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-bencilamino}-2-metil-propionico en forma de un solido de color blanco (460 mg, rendimiento en bruto del 104 %). El compuesto se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional; Lc Ms MH = 522.
Etapa 3: Acido 2-{4-[2-(2,6-dioxo-piperidin-3-il)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-bencilamino}-2-metilpropionico
A la suspension de 2-(4-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)bencilamino)-2-metilpropanoato de terc-butilo (360 mg, 0,690 mmol) en DCM (2 ml) se le anadio hidrogenocloruro, 2 M en eter (8 ml, 16,00 mmol). La suspension resultante se agito a temperatura ambiente durante 5 dias antes de concentrarse al vado. El residuo se purifico por HPLC prep. para dar acido 2-{4-[2-(2,6-Dioxo-piperidin-3-il)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-bencilamino}-2-metil-propionico en forma de un solido de color blanco (125 mg, 39 %); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 |jm, 1 ml/min, 240 nm, 5-95 % en 10 min, (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 5,96 min (98,4 %); p.f.: 271­ 272 °C; 1H RMN (DMSO^) 51,32 (s, 6H, CH3, CH3), 1,93 - 2,05 (m, 1H, CHH), 2,35 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,54 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,88 (d, J = 18,5 Hz, 1H, CHH), 3,89 (s, 2H, CH2), 4,25 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,42 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,0, 13,1 Hz, 1H, CHH), 5,27 (s, 2H, CH2), 7,26 -7,37 (m, 2H, Ar), 7,40 -7,58 (m, 5H, Ar), 10,98 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO^) 522,33, 23,26, 23,33, 31,18, 45,07, 46,38, 51,58, 61,65, 69,26, 115,16, 115,29, 127,66, 129,41, 129,77, 130,03, 133,30, 135,37, 136,33, 153,33, 167,97, 170,99, 172,81, 173,07; LCMS MH = 466;
Anal. Calc. para C25H27N3O6+1,9 H2O: C, 60,09; H, 6,21; N, 8,41; Observado: C, 60,01; H, 5,98; N, 8,23.
5.194 FORMIATO DE 3-(4-(4-((METIL(TETRAHIDRO-2H-PIRAN-4-IL)AMINO)METIL)BENCILOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000162_0001
Se suspendio (3-(4-(4-(Bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (150 mg, 0,338 mmol)) en MeCN (5 ml). A la mezcla se le anadio N-metiltetrahidro-2H-piran-4-amina (136 mg, 1,184 mmol) y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante ~15 min. La mezcla de reaccion se diluyo con EtOAc (100 ml) y NaHCO 3 1 N (30 ml). La capa organica turbia se concentro al vado y el residuo restante se trituro con agua (100 ml) y Et 2 O (~100 ml). El solido se recogio por filtracion y se seco por succion en un embudo de filtro y despues se puso en un horno de vado a 40 °C durante una noche para dar 125 mg de solido de color blanco. El solido se disolvio en DMF/HCl 1 N (12 ml/1 ml) y se purifico por inyeccion sobre una columna para HPLC preparativa C-18. El producto se eluyo con un gradiente de acetonitrilo/agua (acido formico al 0,1 % en ambas fases moviles, MeCN del 5 % al 50 % durante 20 minutos) y las fracciones se recogieron por activacion de masas. Las fracciones deseadas se combinaron y se concentraron al vado para dar formiato de 3-(4-(4-((metil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (25 mg, rendimiento del 15 %) en forma de un solido de color blanco: HPLC: Waters Symmetry C 13 , 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 17/83 CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 4,48 min (98,1 %); 1 H RMN (DMSO-de) 5 1,43 - 1,59 (m, 2H, CHH, CHH), 1,62 - 1,76 (m, 2H, CHH, CHH), 1,92 - 2,04 (m, 1H, CHH), 2,09 (s, 3H, CH3), 2,35 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,52 - 2,71 (m, 2H, CHH, CH), 2,82 - 2,99 (m, 1H, CHH), 3,18 - 3,32 (m, 2H, CHH, CHH), 3,55 (s, 2H, CH2), 3,90 (dd, J = 3,8, 11,1 Hz, 2H, CHH, CHH), 4,25 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,42 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,2, 13,1 Hz, 1H, CH), 5,22 (s, 2H, CH2), 7,26 - 7,37 (m, 4H, Ar), 7,37 - 7,55 (m, 3H, Ar), 10,96 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 522,33, 28,89, 31,18, 37,14, 45,07, 51,55, 56,77, 59,08, 66,61, 69,45, 114,99, 115,19, 127,60, 128,47, 129,78, 129,95, 133,28, 134,92, 139,93, 153,49, 167,99, 170,96, 172,81; LC/MS M+H = 478.
5.195 3-{4-[4-(TERC-BUTILAMINO-METIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERON-2,6-DIONA
Figure imgf000162_0002
Etapa 1: Preparacion de ester metflico del acido 4-{4-[4-(terc-Butilamino-metil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-4-carbamoil-butmco
A una solucion agitada de 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,611 g, 1,285 mmol) en acetonitrilo (15 ml) se le anadio 2-metilpropan-2-amina (0,406 ml, 3,86 mmol). La mezcla se agito durante seis horas y despues el disolvente se evaporo para dar un aceite, que se agito en agua (20 ml) y cloruro de metileno (30 ml). La suspension de color blanco resultante se filtro para dar ester metflico del acido 4-{4-[4-(terc-Butilamino-metil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-4-carbamoil-butmco en forma de un solido de color blanco (0,523 g, rendimiento del 87 %); 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 5 1,37 (s, 9H, 3CHs), 1,97 - 2,34 (m, 4H, CH2, CH2), 3,50 (s, 3H, CH3), 4,06 - 4,22 (m, 2H, CH2), 4,35 - 4,61 (m, 2H, CH2), 4,74 (dd, J = 5,0, 10,3 Hz, 1H, NCH), 5,24 -5,37 (m, 2H, CH2), 7,19 (s a, 1H, NHH), 7,25 - 7,35 (m, 2H, Ar), 7,41 -7,50 (m, 1H, Ar), 7,52 -7,70 (m, 5H, NHH, Ar), 8,61 (s a, 2H, NHHCl); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 524,96, 25,17, 30,36, 44,32, 44,77, 51,30, 53,40, 56,96, 69,01, 114,72, 115,24, 127,99, 129,59, 130,26, 132,17, 133,48, 137,55, 153,22, 167,80, 171,75, 172,51. Se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 2: Preparacion de 3-{4-[4-(terc-Butilamino-metil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona
A una solucion agitada de 5-amino-4-(4-(4-((terc-butilamino)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,5 g, 1,069 mmol) en THF (20 ml) en un bano de hielo se le anadio 2-metilpropan-2-olato potasico (0,240 g, 2,14 mmol). La mezcla se agito durante diez minutos, se anadio HCl 1 N (3 ml) y se neutralizo mediante bicarbonato sodico saturado (6 ml) a pH = 7. Se anadio acetato de etilo (50 ml) a la mezcla y se agito durante 5 min. La fase organica se separo, se lavo con salmuera (10 ml) y se evaporo para dar un solido espumoso de color blanco (0,38 g). Se agito en eter (20 ml) durante una hora y despues se filtro para dar 3-{4-[4-(terc-Butilamino-metil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,279 g, rendimiento del 60 %); p.f. 194-196 °C; HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 95/5 en 5 min, isocratica a 95/5 en 5 min (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 4,42 min (95,4 %); 1 H RMN (DMSO^) 51,04 1,21 (m, 9H, 3CH), 1,92 - 2,06 (m, 1H, CHH), 2,36 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,65 (m, 1H, CHH), 2,83 - 2,99 (m, 1H, CHH), 3,68 (s a, 2H, CH2), 4,18 - 4,47 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,22 (s, 2H, CH2), 7,27 - 7,53 (m, 7H, Ar), 10,88 - 11,20 (debil, 0H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 522,36, 28,62, 31,21, 45,10, 45,88, 51,59, 69,45, 115,04, 115,19, 127,55, 128,19, 129,78, 129,97, 133,31, 134,69, 153,46, 168,01, 170,96, 172,82; LC/MS (M+1)+ = 436; Anal calc. para C25H29N3O4 0,2 H2O: C, 68,38; H, 6,75; N, 9,57, Observado: C, 68,16; H, 6,62; N, 9,52.
5.196 CLORHIDRATO DE 3-{1-OXO-4-[4-(PIPERAZIN-1-CARBONIL)-BENCILOXI]-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000163_0001
Etapa 1: A una solucion agitada de cloruro de 4-(clorometil)benzoflo (1,890 g, 10 mmol) en MeCN (30 ml) a temperatura ambiente, se le anadio piperazin-1-carboxilato de terc-butilo (1,9 g, 10,20 mmol) y N-metilmorfolina (1,1 ml, 10,01 mmol). La mezcla se agito durante 5 min. La mezcla de reaccion se almaceno a -20 °C durante una noche durante la cual se formo un solido. La mezcla se diluyo con un volumen igual de agua (aproximadamente 30 ml) y el solido se recogio por filtracion por succion y se lavo con otra porcion de agua (aproximadamente 20 ml). El solido restante en el filtro se seco en un horno de vado para dar un solido de color blanco (1,93 g). Se formo un segundo extracto de solido en el filtrado/lavado combinado, se recogio por filtracion y se seco para dar ester terc-butflico del acido 4-(4-clorometil-benzoil)-piperazin-1-carboxflico en forma de un solido de color blanco (917 mg, rendimiento del 27 %). El analisis por LCMS indico que el segundo extracto era de mayor pureza y se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional. 1 H RMN (DMSO-de) 5 1,41 (s, 9H, ‘Bu), 3,11 - 3,72 (m, 8H, 4 x CH2), 4,80 (s, 2H, CH2), 7,42 (d, J = 8,3 Hz, 2H, Ar), 7,51 (d, J = 8,1 Hz, 2H, Ar); 13 C RMN (DMSO^) 527,97, 43,35, 45,48, 79,15, 127,32, 128,81, 135,56, 139,00, 153,76, 168,70; LCMS: MH = 339, 341.
Etapa 2: A una solucion de 5-amino-2-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,400 g, 1,369 mmol) en DMF (5,01 ml), se le anadieron DIEA (0,239 ml, 1,369 mmol), y carbonato potasico (0,189 g, 1,369 mmol). Despues de agitar a temperatura ambiente durante aproximadamente 5 min, se anadio ester terc-butflico del acido 4-(4-clorometil-benzoil)-piperazin-1-carboxflico (0,455 g, 1,342 mmol) y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. Despues de aproximadamente 17 h, la mezcla se calento a 50 °C durante 3 h y despues a 60 °C durante 22 h. La mezcla se calento adicionalmente a 80 °C durante aproximadamente 24 h. La mezcla en bruto se transfirio a un vaso de precicpitados con una solucion al 10 % de AcOH en H 2 O (50 ml). Inmediatamente, se formo un solido de color blanco tras la transferencia. La suspension se agito vigorosamente, se sonico durante 5 minutos y despues se filtro en un embudo de filtro sinterizado de poro medio. El solido se lavo con abundante agua (volumen de filtrado total aproximadamente 220 ml) y se seco por succion para dar un solido de color blanquecino que se purifico por gel de sflice cromatografia ultrarrapida (columna de 80 g ISCO, eluida con un gradiente de MeCN en DCM) para dar ester terc-butflico del acido 4-{4-[2-(2,6-dioxo-piperidin-3-il)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetilj-benzoil}-piperazin-1-carboxflico en forma de un solido de color blanco (350 mg, rendimiento del 46 %). LCMS: MH = 563. El solido se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 3: A una solucion agitada de ester terc-butflico del acido 4-{4-[2-(2,6-dioxo-piperidin-3-il)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-il-oximetil]-benzoil}-piperazin-1-carboxflico (350 mg, 0,622 mmol) en DCM (3 ml) a temperatura ambiente, se le anadio HCl (2 ml, 4,00 mmol, 2 N en Et 2 O). La mezcla se volvio cada vez mas turbia con formacion de solido significativa. La suspension espesa se sonico brevemente y despues se agito a temperatura ambiente durante 26 h. La suspension se diluyo con Et 2 O (~40 ml) y despues se filtro. El solido de color blanco recogido se seco por succion y despues se lavo en un embudo de filtro con EtOAc (50 ml) seguido de MeCN (~50 ml). El solido restante se seco por succion en un embudo de filtro, despues se seco en un horno de vado para dar clorhidrato de 3-{1-oxo-4-[4-(piperazin-1-carbonil)-benciloxi]-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (300 mg, rendimiento del 97 %): HPLC: Waters Symmetry C1s, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 15/85 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 4,73 min (96,7 %); p.f.: 285-287 °C; 1 H RMN (DMSO^) 5 1,92 - 2,05 (m, 1H, CHH), 2,33 -2,46 (m, 1H, CHH), 2,54 - 2,65 (m, 1H, CHH), 2,83 - 3,02 (m, 1H, CHH), 3,02 - 3,24 (m, 4H, CH2, CH2), 3,50 - 4,03 (m, 4H, CH2, CH2), 4,28 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,45 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,13 (dd, J = 5,0, 13,3 Hz, 1H, CH), 5,32 (s, 2H, CH2), 7,21 -7,39 (m, 2H, Ar), 7,42 - 7,62 (m, 5H, Ar), 9,11 (s a, 2H, sal NH2), 10,98 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 524,11, 32,89, 46,57, 47,35, 53,72, 70,93, 117,11, 117,41, 128,97, 129,46, 131,79, 132,02, 134,89, 137,07, 139,91, 155,13, 171,08, 172,79, 175,11, 179,00; LCMS: MH = 463; Anal calc. para C25H26N4O5-HC! 0,6 H2O: C, 58,90; H, 5,58; N, 10,99; Observado: C, 58,91; H, 5,58; N, 10,78.
5.197 3-{4-[4-(MORFOLIN-4-SULFONIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
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Etapa 1: 4-(4-Bromometil-bencenosulfonil)-morfolina
A la solucion agitada de morfolina (0,30 ml, 3,4 mmol) y TRIETILAMINA (0,53 ml, 3,8 mmol) en eter (5 ml) a 0 °C se le anadio gota a gota una solucion de cloruro de 4-(bromometil)benceno-1-sulfonilo (0,928 g, 3,4 mmol) en eter (5 ml). La suspension resultante se agito a temperatura ambiente durante 17,5 h antes de disolverse en acetonitrilo (80 ml) y EtOAC (20 ml). La mezcla se lavo con salmuera (20 ml). La capa organica se seco por MgSO4 y se concentro al vado. El residuo se purifico por ISCO para dar 4-(4-Bromometil-bencenosulfonil)-morfolina en forma de un solido de color blanco (800 mg, 73 %). El compuesto se puso en la siguiente etapa sin purification adicional. 1H RMN (DMSO-d6) 52,77 - 2,94 (m, 4H, CH2, CH2), 3,54 - 3,70 (m, 4H, CH2, CH2), 4,81 (s, 2H, CH2), 7,74 (s, 4H, Ar); LCMS MH = 320, 322.
Etapa 2: Ester metflico del acido 4-carbamoil-4-{4-[4-(morfolina-4-sulfonil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-butrnco
Se mezclaron 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (350 mg, 1,2 mmol), 4-(4-(bromometil)fenilsulfonil)morfolina (498 mg, 1,6 mmol) y K2Co 3 (165 mg, 1,2 mmol) en acetonitrilo (15 ml) a temperatura ambiente. La mezcla resultante se agito a 50 °C durante 16 h y se anadio K2CO3 (15 mg, 0,1 mmol). La mezcla de reaction se agito a 50 °C durante 3,5 h. La mezcla de reaction se filtro y el solido se lavo con DCM (2 x 20 ml). El filtrado se concentro y el residuo se purifico por ISCO para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-{4-[4-(morfolina-4-sulfonil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-butmco en forma de un solido de color blanco (560 mg, rendimiento del 88 %); 1H RMN (DMSO-d6) 52,01 - 2,33 (m, 4H, CH2, CH2), 2,82 - 2,93 (m, 4H, CH2, CH2), 3,50 (s, 3H, CH3), 3,59 -3,68 (m, 4H, CH2, CH2), 4,47 (d, J = 17,8 Hz, 1H, CHH), 4,60 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,75 (dd, J = 4,7, 10,2 Hz, 1H, CHH), 5,41 (s, 2H, CH2), 7,20 (s, 1H, NHH), 7,26 - 7,36 (m, 2H, Ar), 7,42 - 7,52 (m, 1H, Ar), 7,60 (s, 1H, NHH), 7,79 (s, 4H, Ar); LCMS MH = 532.
Etapa 3: 3-{4-[4-(Morfolin-4-sulfonil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona
A la suspension agitada de 5-amino-4-(4-(4-(morfolinosulfonil)bencilo oxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (560 mg, 1,1 mmol) en tetrahidrofurano (15 ml) a 0 °C se le anadio TERC-BUTOXIDO POTASiCO (130 mg, 1,2 mmol). La mezcla de reaccion se agito durante 1 h y se anadio TERC-BUTOXIDO POTASICO (30 mg, 0,28 mmol). La mezcla de reaccion se agito a 0 °C durante 15 min y despues se anadio MeOH (20 ml) seguido de la adicion de HCl (ac., 1 N, 5 ml). A la mezcla se le anadieron salmuera (15 ml) y EtOAc (25 ml). La mezcla se filtro y el filtrado se concentro hasta que el solido se elimino por precipitation. La mezcla se filtro y el solido se purifico por agitation en disolventes mixtos de MeOH (5 ml), DCM (15 ml) y EtOAc (15 ml) para dar 3-{4-[4-(Morfolin-4-sulfonil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (209 mg, rendimiento del 39 %). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 35/65, (CH3Cn/H3PO4 al 0,1 %), 5,06 min (95,4 %); p.f.: 308-310 °C; 1H RMN (DMSO-de) 51,93 - 2,09 (m, 1H, CHH), 2,35 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,54 - 2,67 (m, 1H, CHH), 2,80 - 3,03 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 3,55 - 3,69 (m, 4H, CH2, CH2), 4,32 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,48 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 5,13 (dd, J = 4,9, 13,2 Hz, 1H, CHH), 5,41 (s, 2H, CH2), 7,34 (dd, J = 7,7, 10,0 Hz, 2H, Ar), 7,43 - 7,56 (m, 1H, Ar), 7,78 (s, 4H, Ar), 10,99 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-de) 522,39, 31,16, 45,01, 45,85, 51,56, 65,22, 68,55, 114,97, 115,54, 127,87, 128,04, 129,87, 129,96, 133,40, 133,82, 142,44, 153,19, 167,91, 170,96, 172,83; LCMS MH = 500; Anal. Calc. para C24H25N3O7S 0,5H2O: C, 56,68; H, 5,15; N, 8,26; Observado: C, 56,71; H, 5,00; N, 8,16.
5.198 3-{4-[4-(4-ISOPROPIL-PIPERIDIN-1-SULFONIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
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Etapa 1: 1-(4-Bromometil-bencenosulfonil)-4-isopropil-piperidina
A la solucion agitada de 4-isopropilpiperidina (0,22 g, 1,7 mmol) y TRIETIL AMINA (0,26 ml, 1,9 mmol) en eter (5 ml) a 0 °C se le anadio gota a gota una solution de cloruro de 4-(bromometil)benceno-1-sulfonilo (0,466 g, 1,7 mmol) en eter (5 ml). Despues de la adicion, la mezcla de reaction se agito a 0 °C durante 3 h. La mezcla de reaction se lavo con agua (15 ml) y salmuera (20 ml). La capa organica se seco por MgSO4 y se concentro al vatio para dar 1-(4-Bromometil-bencenosulfonil)-4-isopropil-piperidina en forma de un solido de color blanco (580 mg, rendimiento del 93 %). El compuesto se uso en la siguiente etapa sin purification adicional. 1H RMN(DMsO-d6) 50,78 (d, J = 6,8 Hz, 6H, CH3, CH3), 0,89 - 1,04 (m, 1H, CH), 1,06 - 1,25 (m, 2H, CH2), 1,28 - 1,46 (m, 1H, CH), 1,55 - 1,73 (m, 2H, CH2), 2,16 (td, J = 2,2, 11,9 Hz, 2H, CH2), 3,68 (d, J = 11,7 Hz, 2H, CH2), 4,79 (s, 2H, CH2), 7,71 (d, J = 2,6 Hz, 4H, Ar); LCMS MH = 360, 362.
Etapa 2: Ester metflico del acido 4-carbamoil-4-{4-[4-(4-isopropil-piperidin-1-sulfonil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidroisoindol-2-il}-butmco
Se mezclaron 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (360 mg, 1,2 mmol), 1-(4-(bromometil)fenilsulfonil)-4-isopropilpiperidina (577 mg, 1,6 mmol) y CARBONATO PoTASICO (187 mg, 1,4 mmol) en Acetonitrilo (15 ml) a temperatura ambiente. La mezcla resultante se agito a 50 °C durante 8 h y se anadio K2CO3 (30 mg, 0,2 mmol) a la mezcla de reaccion. La mezcla resultante se calento a 50 °C durante 2 h antes de anadir a la mezcla de reaccion EtOAc (60 ml) y agua (20 ml). La mezcla se extrajo y la capa organica se lavo con salmuera (20 ml) y se seco con MgSO4. La capa organica se concentro y el residuo se purifico por ISCO para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-{4-[4-(4-isopropil-piperidin-1-sulfonil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-butmco en forma de un solido de color blanco (700 mg, rendimiento del 99 %). 1H RMN (DMSO-d6) 50,78 (d, J = 6,8 Hz, 6H, CH3, CH3), 0,88 - 1,04 (m, 1H, CH), 1,07 - 1,25 (m, 2H, CH2), 1,29 - 1,43 (m, 1H, CH), 1,57 - 1,73 (m, 2H, CH2), 2,02 - 2,32 (m, 6H, CH2, CH2, CH2), 3,50 (s, 3H, CH3), 3,69 (d, J = 11,7 Hz, 2H, CH2), 4,46 (d, J = 17,8 Hz, 1H, CHH), 4,59 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,75 (dd, J = 4,7, 10,2 Hz, 1H, CHH), 5,38 (s, 2H, CH2), 7,20 (s, 1H, NHH), 7,26 -7,35 (m, 2H, Ar), 7,42 - 7,52 (m, 1H, Ar), 7,60 (s, 1H, NHH), 7,71 - 7,83 (m, 4H, Ar); LCMS MH = 572.
Etapa 3: 3-{4-[4-(4-Isopropil-piperidin-1-sulfonil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona
A la solucion agitada de 5-amino-4-(4-(4-(4-isopropilpiperidin-1-ilsulfonil) benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (700 mg, 1,2 mmol) en Tetrahidrofurano (12 ml) a 0 °C se le anadio en una portion TERC-BUTOXIDO POTASICO (151 mg, 1,3 mmol). La solucion se agito a 0 °C durante 30 min. La mezcla de reaccion se diluyo por EtOAc (80 ml) y se anadio HCl (1 N, ac., 3 ml). A la mezcla se le anadio NaHCO3 (sat. ac., 15 ml) y se extrajo. La capa organica se lavo con salmuera (30 ml) y se seco por MgSO4. La capa organica se concentro y el solido de color blanco resultante se purifico agitandose en EtOAc (10 ml) y Acetonitrilo (10 ml) para dar 3-{4-[4-(4-Isopropil-piperidin-1-sulfonil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (386 mg, rendimiento del 58 %). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 55/45, (CHsCN/HsPO4 al 0,1 %), 5,76 min (96,6 %); p.f.: 245-247 °C; 1H RMN (DMSO-de) 50,78 (d, J = 6,8 Hz, 6H, CH3, CH3), 0,97 (dd, J = 5,5, 11,7 Hz, 1H, CH), 1,06 - 1,27 (m, 2H, CH2), 1,36 (dc, J = 6,5, 13,1 Hz, 1H, CH), 1,57 -1,71 (m, 2H, CH2), 1,93 -2,08 (m, 1H, CHH), 2,06 - 2,24 (m, 2H, CH2), 2,36 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,54 -2,65 (m, 1H, CHH), 2,83 - 3,01 (m, 1H, CHH), 3,62 - 3,78 (m, 2H, CH2), 4,31 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 4,47 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,13 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CHH), 5,38 (s, 2H, CH2), 7,25 - 7,42 (m, 2H, Ar), 7,43 - 7,58 (m, 1H, Ar), 7,68 -7,86 (m, 4H, Ar), 10,99 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-de) 519,28, 22,30, 27,75, 31,08, 31,39, 44,92, 46,29, 51,43, 68,45, 114,86, 115,44, 127,56, 127,89, 129,80, 129,86, 133,30, 134,91, 141,89, 153,10, 167,84, 170,92, 172,79; LCMS MH = 540; Anal. Calc. para C28H33N3O6S 0,3H2O: C, 61,70; H, 6,21; N, 7,71; Observado: C, 61,78; H, 6,00; N, 7,68.
5.199 3-{1-OXO-4-[4-(4-FENIL-PIPERAZIN-1-SULFONIL)-BENCILOXI]-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000165_0001
Etapa 1: 1-(4-Bromometil-bencenosulfonil)-4-fenil-piperazina
A la solucion agitada de 1-fenilpiperazina (0,51 g, 3,14 mmol) y TRIETIL AMINA (0,482 ml, 3,46 mmol) en eter dietflico (10 ml) a 0 °C se le anadio gota a gota una solucion de cloruro de 4-(bromometil)benceno-1-sulfonilo (0,847 g, 3,14 mmol) en eter (5 ml). La suspension resultante se agito a 0 °C durante 1,5 h. A la mezcla de reaccion se le anadieron acetonitrilo (30 ml) y EtoAC (100 ml) seguido de la adicion de agua (30 ml). La mezcla se filtro para dar un solido de color blanco. El filtrado se extrajo. La capa organica se seco por MgSO4 y se concentro al vatio. El residuo combinado con el solido de color blanco se purifico por ISCO para dar 1-(4-Bromometil-bencenosulfonil)-4fenil-piperazina en forma de un solido de color blanco (760 mg, rendimiento del 61 %). 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 52,95 -3,08 (m, 4H, CH2, CH2), 3,13 -3,25 (m, 4H, CH2, CH2), 4,80 (s, 2H, CH2), 6,75 - 6,85 (m, 1H, Ar), 6,90 (d, J = 7,9 Hz, 2H, Ar), 7,10-7,29 (m, 2H, Ar), 7,57 - 7,90 (m, 4H, Ar); LCMS MH = 395, 397.
Etapa 2: Ester metflico del acido 4-carbamoil-4-{1-oxo-4-[4-(4-fenil-piperazin-1-sulfonil)-benciloxi]-1,3-dihidroisoindol-2-il}-butmco
Se mezclaron 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (360 mg, 1,2 mmol), 1-(4-(bromometil)fenilsulfonil)-4-fenilpiperazina (584 mg, 1,5 mmol) y CARBONATO POTASICO (204 mg, 1,5 mmol) en Acetonitrilo (15 ml) a temperatura ambiente. La mezcla resultante se agito a 50 °C durante 20 h y se anadio K 2 CO 3 (15 mg, 0,1 mmol) a la mezcla de reaccion. La mezcla resultante se agito a 50 °C durante 1,5 h antes de anadirse EtOAc (50 ml) y agua (20 ml). La mezcla resultante se extrajo y la capa organica se lavo con salmuera (20 ml). La capa organica se concentro al vado y el residuo se purifico por ISCO para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-{1-oxo-4-[4-(4-fenil-piperazin-1-sulfonil)-benciloxi]-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-butmco en forma de un solido de color blanco (730 mg, rendimiento del 98 %); 1 H RMN (DMSO-de) 52,01 - 2,33 (m, 4H, CH2, CH2), 2,96 - 3,09 (m, 4H, CH2, CH2), 3,14 - 3,26 (m, 4H, CH2, CH2), 3,50 (s, 3H, CH3), 4,46 (d, J = 17,8 Hz, 1H, CHH), 4,59 (d, J = 17,8 Hz, 1H, CHH), 4,74 (dd, J = 4,7, 10,2 Hz, 1H, CHH), 5,40 (s, 2H, CH2), 6,80 (t, J = 7,3 Hz, 1H, Ar), 6,90 (d, J = 7,9 Hz, 2H, Ar), 7,15 - 7,24 (m, 3H, Ar, NH), 7,25 - 7,35 (m, 2H, Ar), 7,40 - 7,51 (m, 1H, Ar), 7,59 (s, 1H, NHH), 7,74 - 7,89 (m, 4H, Ar); LCMS MH = 607.
Etapa 3: 3-{1-Oxo-4-[4-(4-fenil-piperazin-1-sulfonil)-benciloxi]-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona
A la solucion agitada de 5-amino-5-oxo-4-(1-oxo-4-(4-(4-fenilpiperazin-1-ilsulfonil)benciloxi)isoindolin-2-il)pentanoato de metilo (730 mg, 1,2 mmol) en Tetrahidrofurano (15 ml) a 0 °C se le anadio en una porcion terc-butoxido potasico (127 mg, 1,3 mmol). La mezcla se agito a 0 °C durante 10 min antes de anadirse HCl (1 N, ac., 3 ml) a 0 °C seguido de la adicion de dCm (50 ml) y NaHCO 3 (sat. ac., 15 ml). El solido de color blanco se elimino por precipitation. La mezcla se filtro y el filtrado se extrajo. La capa organica se concentro al vado. El residuo combinado con el solido se purifico agitandose en un disolvente mixto de THF (3 ml) y DCM (25 ml) seguido de la trituration en DMF (5 ml) a 80 °C para dar 3-{1-Oxo-4-[4-(4-fenil-piperazin-1-sulfonil)-benciloxi]-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (256 mg, rendimiento del 37 %). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 50/50, (CH 3 CN/H 3 PO4 al 0,1 %), 5,15 min (98,9 %); p.f.: 302-304 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,93 -2,06 (m, 1H, CHH), 2,35 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,65 (m, 1H, CHH), 2,83 - 3,08 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 3,14 -3,26 (m, 4H, CH2, CH2), 4,30 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,47 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,12 (dd, J = 5,0, 13,3 Hz, 1H, CHH), 5,40 (s, 2H, CH2), 6,80 (t, J = 7,3 Hz, 1H, Ar), 6,90 (d, J = 7,9 Hz, 2H, Ar), 7,20 (dd, J = 7,3, 8,6 Hz, 2H, Ar), 7,27 - 7,40 (m, 2H, Ar), 7,44 - 7,56 (m, 1H, Ar), 7,72 - 7,85 (m, 4H, Ar), 10,98 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO^) 5 22,30, 31,08, 44,95, 45,70, 47,82, 51,46, 68,46, 114,87, 115,46, 116,04, 119,58, 127,79, 127,98, 128,86, 129,79, 129,88, 133,32, 133,96, 142,34, 150,22, 153,10, 167,83, 170,88, 172,74; LCMS MH = 575; Anal. Calc. para CacH ^ N ^ S 0,3H 2 O: C, 62,12; H, 5,32; N, 9,66; Observado: C, 62,05; H, 5,18; N, 9,63.
5.200 2-(2,6-DIOXOPIPERIDIN-3-IL)-4-((4-(HIDROXIMETIL)BENCIL)OXI)ISOINDOLIN-1,3-DIONA
Figure imgf000166_0001
Se anadio clorhidrato de 3-aminopiperidin-2,6-diona (0,915 g, 5,56 mmol) a una solucion de acido 3-(4-(hidroximetil)benciloxi)ftalico (1,4 g, 4,63 mmol) en piridina seca (15 ml) y la mezcla se calento a 118 °C en un bano de aceite durante 16 h. La mezcla de reaccion de color oscuro se dejo enfriar a temperatura ambiente y se acidifico con la adicion lenta de HCl 1 N (~25 ml). La mezcla se diluyo adicionalmente con agua (~170 ml) y despues se sonico durante ~30 minutos para facilitar la descomposicion de los agregados solidos. La suspension de color oscuro resultante se filtro en un embudo sinterizado de poro medio y el solido de color oscuro se lavo con mas cantidad de agua (70 ml). La torta se seco por suction y despues se puso en un horno de vado a 60 °C durante 2,5 h para dar 1,6 g de un solido de color azul oscuro. El solido se disolvio en una mezcla de DCM, MeCN, y MeOH (~100 ml cada uno) y se trato con carbon decolorante. La mezcla se arremolino y despues se filtro por gravedad usando papel de filtro. El filtrado/lavado (de color ambar oscuro) se trato de nuevo con carbon decolorante y despues se filtro en un lecho de celite. El filtrado transparente se concentro al vado a sequedad para dar un solido que se trituro con agua y se filtro con succion. La torta se lavo con mas cantidad de agua (~100 ml), se seco por succion, y despues se puso en un horno de vado a 60 °C durante 4 h para dar 2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-4-((4-(hidroximetil)bencil)oxi)isoindolin-1,3-diona en forma de un solido de color blanquecino (1,2 g, rendimiento del 68 %): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 15/85 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 5,08 min (99,9 %); p.f.: 250-252; 1H RMN (DMSO-d6) 51,95 - 2,07 (m, 1H, CHH), 2,41 - 2,67 (m, 2H, CHH, CHH), 2,78 - 3,00 (m, 1H, CHH), 4,50 (d, J = 5,1 Hz, 2H, CH2OH), 5,09 (dd, J = 5,4, 12,7 Hz, 1H, CH), 5,19 (t, J = 5,6 Hz, 1H, OH), 5,36 (s, 2H, CH2O), 7,24 - 7,40 (m, 2H, Ar), 7,41 - 7,53 (m, 3H, Ar), 7,59 (d, J = 8,5 Hz, 1H, Ar), 7,82 (dd, J = 7,4, 8,5 Hz, 1H, Ar), 11,11 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-d6) 521,88, 30,83, 48,67, 62,53, 69,91, 115,40, 116,52, 120,18, 126,44, 127,09, 133,17, 134,31, 136,86, 142,32, 155,42, 165,21, 166,68, 169,81, 172,66, LCMS: M+Na = 417; MH no se observa en el modo de ionizacion positiva; Anal calc. para C21H13N2O6: C, 63,96; H, 4,60; N, 7,10; Observado:
C, 63,77; H, 4,52; N, 7,32.
5.201 CLORHIDRATO DE 3-(4-((4-(4-METILPIPERAZIN-1-CARBONIL)BENCIL)OXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000167_0001
A una suspension agitada de clorhidrato de 3-(1-oxo-4-(4-(piperazin-1-carbonil)benciloxi)isoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (100 mg, 0,200 mmol) en DMF (2 ml), se le anadio bicarbonato sodico ac. 1 N (0,441 ml, 0,441 mmol) seguido de yodometano (0,014 ml, 0,220 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente. Despues de aproximadamente 24 h, se cargaron 5 ^l mas de yodometano y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 3 dias. La mezcla de reaccion se concentro al vado y el residuo se repartio entre EtOAc (100 ml) y NaHCO 3 ac. 1 N (10 ml). La capa organica se lavo con mas cantidad de agua (40 ml) y salmuera, despues se seco sobre Na2SO4, y se concentro al vado. El producto en bruto se purifico por HpLC prep. y el producto se eluyo con un gradiente de acetonitrilo/agua (acido formico al 0,1 % en ambas fases moviles, MeCN del 5 % al 30 % durante 20 minutos) y las fracciones se recogieron por activacion de masas. Las fracciones deseadas se combinaron y se trataron con HCl 1 N (4 ml). La solucion se concentro a sequedad y el residuo se trato con HCl 2 N en Et 2 O (0,5 ml). Los volatiles se concentraron de nuevo hasta sequedad y el solido restante se seco en un horno de vado para dar clorhidrato de 3-(4-((4-(4-metilpiperazin-1-carbonil)bencil)oxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2 ,6-diona en forma de un solido de color blanquecino (41 mg, 39 %): HpLC: Waters Symmetry C 13 , 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 15/85 de CH3Cn/H3PO4 al 0,1 %, 4,88 min (95,7 %): HPLC: Waters Symmetry C 13 , 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 15/85 de CH 3 CN/H 3 PO4 al 0,1 %, 4,88 min (95,7 %); p.f.: 360-362 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 5 1,88 - 2,09 (m, 1H, CHH), 2,33 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,67 (m, 1H, CHH), 2,67 - 2,83 (m, 3H, CH 3 ), 2,83 - 3,00 (m, 1H, CHH), 3,02 -3,22 (m, 2H, CH2), 3,23 - 3,64 (m, 4H, CH2, CH2), 4,28 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,45 (d, J = 17,6 Hz, 1 H, CHH), 4,98 - 5,21 (m, 1H, CH), 5,32 (s, 2H, CH2), 7,22 - 7,42 (m, 2H, Ar), 7,46 - 7,55 (m, 3H, Ar), 7,56 - 7,63 (m, 2H, Ar), 10,98 (s, 1H, NH), 11,31 - 11,77 (m, 1H, HCl); 13 C RMN (DMSO-de) 524,21, 33,00, 43,95, 47,07, 53,53, 53,79, 70,87, 73,78, 116,96, 117,34, 129,26, 129,44, 131,81, 135,14, 136,04, 140,55, 155,19, 170,00, 170,91, 172,79, 174,75; LCMS: MH = 477; Anal calc. para C26H2sN4O5-HCl: C, 60,88; H, 5,70; N, 10,92; Observado: C, 37,90; H, 4,33; N, 6,65.
5.202 3-{4-[4-(4-ACETIL-PIPERAZIN-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000167_0002
Etapa 1: A una solucion agitada de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(4-clorometil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco (600 mg, 1,392 mmol) en acetonitrilo (10 ml), se le anadieron 1-(piperazin-1-il)etanona (178 mg, 1,392 mmol) y DlpEA (0,608 ml, 3,48 mmol). La reaccion se agito a temperatura ambiente durante 20 horas, a 40 °C durante 2,5 horas y a 50 °C durante 3 horas antes de detener el avance de la reaccion. La mezcla de reaccion se diluyo mediante diclorometano (40 ml) y se lavo con agua (15 ml) y salmuera (15 ml). La capa organica se seco por MgSO4 y se concentro para dar ester metflico del acido 4-{4-[4-(4-Acetil-piperazin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-4-carbamoil-butmco en forma de un aceite transparente (840 mg, rendimiento en bruto del 115 %). El compuesto se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional; LCMS MH = 523.
Etapa 2: Se anadio KO/Bu (156 mg, 1,393 mmol) a la solucion agitada de 4-(4-(4-((4-acetilpiperazin-1-il)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-amino-5-oxopentanoato de metilo (728 mg, 1,393 mmol) en tetrahidrofurano (10 ml) a 0 °C. La mezcla de reaccion se agito a 0 °C durante 1 hora antes de anadir KO/Bu (30 mg, 0,27 mmol). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 10 minutos y la reaction se completo. La mezcla de reaction se diluyo por diclorometano (50 ml) y se acidifico con HCl (ac. 1 N, 4 ml). La mezcla se extrajo con NaHCO 3 (10 ml) y salmuera (10 ml). La capa acuosa se extrajo de nuevo con diclorometano (2 x 15 ml). Las capas organicas se combinaron y se secaron por MgSO 4 . La mezcla se filtro y se concentro para dar un solido de color blanco. El solido se trituro en eter dietflico (30 ml) y se filtro para dar 3-{4-[4-(4-acetil-piperazin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (500 mg, rendimiento del 67,5 %): HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 15/85, (acetonitrilo/H 3 PO 4 al 0,1 %), 4,03 min (99,4 %); p.f.: 208-210 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,90 - 2,05 (m, 4H, CH3, CHH), 2,23 - 2,40 (m, 4H, CH2, CH2), 2,40 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,80 - 3,00 (m, 1H, CHH), 3,36 - 3,46 (m, 4H, CH2, CH2), 3,49 (s, 2H, CH2), 4,26 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,42 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CHH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,33 (d, J = 7,6 Hz, 4H, Ar), 7,37 - 7,61 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 521,12, 22,33, 31,18, 40,77, 45,06, 45,60, 51,55, 52,19, 52,74, 61,49, 69,36, 114,96, 115,22, 127,64, 128,94, 129,80, 129,93, 133,28, 135,33, 137,70, 153,48, 167,97, 168,03, 170,96, 172,81; LCMS MH = 491; Anal. Calc. para C27H30N 4 Oe 0,3 H2O: C, 65,39; H, 6,22; N, 11,30; Observado: C, 65,31; H, 6,34; N, 11,32.
5.203 3-{4-[4-(4-CICLOPROPANOCARBONIL-PIPERAZIN-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000168_0001
Etapa 1: A una solution agitada de 5-amino-4-(4-(4-(clorometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin -2-il)-5-oxopentanoato de metilo (600 mg, 1,392 mmol) en acetonitrilo (10 ml) a temperatura ambiente, se le anadieron ciclopropil(piperazin-1-il)metanona (0,257 ml, 1,810 mmol) y DIPEA (0,608 ml, 3,48 mmol). La solucion de color verde claro resultante se agito a temperatura ambiente durante 3 dias y la reaccion se completo. La mezcla de reaccion se diluyo por diclorometano (40 ml) y se extrajo con agua (15 ml) y salmuera (15 ml). La capa organica se seco por MgSO4. La mezcla se concentro para dar ester metflico del acido 4-carbamoii-4-{4-[4-(4-ciclopropanocarbonil-piperazin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-butmco en forma de un aceite transparente (900 mg, rendimiento en bruto del 118 %). El compuesto se uso en la siguiente etapa sin purification adicional: LCMS MH = 549.
Etapa 2: Se anadio KO/Bu (203 mg, 1,810 mmol) a una solucion agitada de ester metflico del acido 5-4-carbamoil-4-{4-[4-(4-ciclopropanocarbonil-piperazin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-butmco (764 mg, 1,392 mmol) en tetrahidrofurano (10 ml) a 0 °C. La solucion de color amarillo resultante se agito a 0 °C durante 30 minutos y la reaccion se completo. La reaccion se diluyo por diclorometano (60 ml) y se inactivo a 0 °C con HCl (1 N, ac., 3 ml) a pH = 2. A la mezcla se le anadieron NaHCO3 (ac. sat., 10 ml) y salmuera (15 ml). La mezcla se extrajo y la capa acuosa se extrajo de nuevo con diclorometano (2 x 25 ml). Las capas organicas se combinaron y se secaron por MgSO4. La mezcla se filtro y se concentro. El residuo se trituro en eter dietflico (50 ml) y se filtro para dar 3-{4-[4-(4-ciclopropanocarbonil-piperazin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (578 mg, rendimiento del 80 %): HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 15/85, (acetonitrilo/H3PO4 al 0,1 %), 7,29 min (99,8 %); p.f.: 233-235 °C; 1H RMN (DM SO^) 50,60 - 0,77 (m, 4H, CH2, CH2), 1,87 - 2,08 (m, 2H, CH2), 2,24 - 2,48 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 2,54 - 2,63 (m, 1H, CHH), 2,82 - 3,00 (m, 1H, CHH), 3,39 - 3,55 (m, 4H, CH2, CH2), 3,57 - 3,74 (m, 2H, CH2), 4,26 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 4,42 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CHH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,28 - 7,39 (m, 4H, Ar), 7,41 - 7,54 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-d6) 56,83, 10,05, 22,27, 31,11, 41,46, 44,70, 44,99, 51,48, 52,20, 52,87, 61,44, 69,30, 114,89, 115,15, 127,57, 128,89, 129,73, 129,86, 133,23, 135,26, 137,65, 153,41, 167,92, 170,78, 170,89, 172,74; LCMS MH = 517; Anal. Calc. para C2sH32N4O5 0,2 H2O: C, 66,96; H, 6,28; N, 10,77; Observado: C, 66,90; H, 6,41; N, 10,71.
5.204 3-{4-[4-(4-FLUORO-PIPERIDIN-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000168_0002
Etapa 1: A la solucion agitada de 5-amino-4-(4-(4-(clorometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (600 mg, 1,392 mmol) y clorhidrato de 4-fluoropiperidina (233 mg, 1,671 mmol) en acetonitrilo (10 ml) en una atmosfera de N2, se le anadio DIPEA (0,608 ml, 3,48 mmol). La solucion resultante se agito a temperatura ambiente durante 2 horas y a 70 °C durante 3 horas antes de anadir K 2 CO 3 (192 mg, 1,392 mmol) a la mezcla de reaccion. La mezcla resultante se calento a 50 °C durante una noche. Se anadieron K 2 CO 3 (40 mg, 0,29 mmol) y clorhidrato de 4-fluoropiperidina (35 mg, 0,25 mmol) a la mezcla de reaccion, que se agito a 60 °C durante 7 horas. La mezcla de reaccion se diluyo por diclorometano (50 ml) y se extrajo con salmuera (20 ml). La capa organica se seco por MgSO 4 y se concentro para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-{4-[4-(4-fluoro-piperidin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-butmco en forma de un aceite pegajoso de color verde claro (760 mg, rendimiento en bruto del 110 %). El compuesto se puso en la siguiente etapa tal cual: LCMS MH = 498.
Etapa 2: Se anadio KO/Bu (203 mg, 1,810 mmol) a la solucion agitada de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-{4-[4-(4-fluoro-piperidin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-butmco (693 mg, 1,392 mmol) en tetrahidrofurano (10 ml) a 0 °C en una atmosfera de N2. La mezcla de reaccion se agito a 0 °C durante 30 minutos y la reaccion se completo. La mezcla de reaccion se diluyo por diclorometano (50 ml) y se anadio HCl (1 N, ac., 4 ml) a pH = 1. La mezcla se extrajo con una mezcla de NaHCO3 (ac., sat., 10 ml) y salmuera (15 ml). La capa acuosa se extrajo de nuevo con diclorometano (2 x 25 ml). Las capas organicas se combinaron y se secaron MgsO4. La mezcla se filtro y se concentro. El residuo se purifico por cromatografia ISCO para dar 3-{4-[4-(4-fluoro-piperidin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (215 mg, rendimiento del 33 %): HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 18/82, acetonitrilo/H3PO4 al 0,1 %), 4,02 min (98,9 %); p.f.: 141-143 °C; 1H RMN (DMSO-d6) 5 1,57 - 2,06 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 2,19 - 2,34 (m, 2H, CH2), 2,35 - 2,55 (m, 3H, CH2, CHH), 2,54 - 2,63 (m, 1H, CHH), 2,82 - 3,01 (m, 1H, CHH), 3,47 (s, 2H, CH2), 4,25 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,42 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,52 - 4,82 (m, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CHH), 5,22 (s, 2H, CH2), 7,26 - 7,37 (m, 4H, Ar), 7,40 -7,56 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-de) 522,29, 31,09 (d, J = 19,8 Hz, M19), 31,10, 45,00, 48,92 (d, Jc-f = 6,6 Hz), 51,49, 61,43, 69,34, 88,43 (d, J = 168,4 Hz, M14), 114,87, 115,15, 127,56, 28,74, 129,73, 129,87, 133,23, 135,12, 138,21, 153,44, 167,93, 170,90, 172,76; LCMS MH = 466; Anal. Calc. para C26H2sFN 3 O 4 + 0,2 H2O: C, 66,57; H, 6,10; N, 8,96; Observado: C, 66,35; H, 6,29; N, 8,79.
5.205 3-{4-[4-(4,4-DIFLUORO-PIPERIDIN-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000169_0001
Etapa 1: A la solucion agitada de 5-amino-4-(4-(4-(clorometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (500 mg, 1,160 mmol) y clorhidrato de 4,4-difluoropiperidina (274 mg, 1,741 mmol) en acetonitrilo (10 ml) en una atmosfera de N 2 , se le anadieron Na 2 CO 3 (160 mg, 1,160 mmol) y DIPEA (0,507 ml, 2,90 mmol). La solucion resultante se agito a 50 °C durante 8 horas y la reaccion se detuvo. La mezcla de reaccion se diluyo por diclorometano (50 ml) y se extrajo con salmuera (20 ml). La capa organica se seco por MgSO 4 y se concentro al vado para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-{4-[4-(4,4-difluoro-piperidin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-butmco en forma de un solido de color blanquecino (630 mg, rendimiento en bruto del 105 %). El producto se puso en la siguiente etapa tal cual: LCMS MH = 516.
Etapa 2: A la solucion agitada de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-{4-[4-(4,4-difluoro-piperidin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-butmco (630 mg, 1,222 mmol) en THF (10 ml) a 0 °C, se le anadio KO/Bu (151 mg, 1,344 mmol). La mezcla se agito a 0 °C durante 5 minutos y la reaccion se completo. La mezcla de reaccion se diluyo por diclorometano (50 ml) y se acidifico por HCl (1 N, ac. 3 ml) a pH = 2. La mezcla se extrajo con la mezcla de NaHCO 3 (ac. sat., 5 ml) y salmuera (10 ml). La capa organica se seco por MgSO 4 y se concentro. El residuo se agito en eter (50 ml) y la mezcla se filtro para dar el solido de color blanco. El solido se trituro en EtOAc (5 ml) y se filtro para dar 3-{4-[4-(4,4-difluoro-piperidin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (215 mg, 36 %): HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 18/82 (acetonitrilo/H 3 PO 4 al 0,1 %): tR = 4,17 (99,4 %); p.f.: 193-195 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,84 -2,09 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 2,34 - 2,49 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 2,54 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,81 - 3,02 (m, 1H, CHH), 3,55 (s, 2H, CH2), 4,25 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,42 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CHH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,33 (d, 4H, M01), 7,40 - 7,54 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO^) 5 22,29, 31,12, 33,25 (t, Jc-f = 20,9 Hz), 45,00, 49,12, 51,51,60,40, 69,29, 114,89, 115,16, 122,68 (t, Jc-f = 239,9 Hz), 127,60, 128,84, 129,73, 129,88, 133,24, 135,32, 137,72, 153,42, 167,93, 170,91, 172,76; LCMS MH = 484; Anal. Calc. para C26H27F2N 3 O5 1 H2O: C, 62,27; H, 5,83; N, 8,39, Observado: C, 62,09; H, 5,73; N, 8,17.
5.206 N-(1-{4-[2-(2,6-DIOXO-PIPERIDIN-3-IL)-1-OXO-2,3-DIHIDRO-1H-ISOINDOL-4-ILOXIMETIL]-BENCIL}-PIPERIDIN-4-IL)-ACETAMIDA
Figure imgf000170_0001
Etapa 1: A la solution agitada de 5-amino-4-(4-(4-(clorometil) benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (500 mg, 1,160 mmol) en acetonitrilo (10 ml), se le anadieron N-(piperidin-4-il)acetamida (215 mg, 1,509 mmol), N-etil-N-isopropil propan-2-amina (0,405 ml, 2,321 mmol) y K 2 CO 3 (160 mg, 1,160 mmol). La mezcla de reaction resultante se agito a 50 °C durante 2 horas y a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaction se diluyo por diclorometano (70 ml) y se extrajo con salmuera (20 ml). La capa organica se seco por MgSO 4 y se concentro para dar ester metflico del acido 4-{4-[4-(4-acetilamino-piperidin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidroisoindol-2-il} -4-carbamoil-butmco en forma de un aceite pegajoso (705 mg, rendimiento en bruto del 113 %). El compuesto se uso tal cual: LCMS MH = 537.
Etapa 2: Se anadio KO/Bu (130 mg, 1,160 mmol) a la suspension de ester metflico del acido 4-{4-[4-(4-acetilaminopiperidin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-4-carbamoil-butmco (622 mg, 1,16 mmol) en tetrahidrofurano (10 ml) a 0 °C. La mezcla de color amarillo resultante se agito a temperatura ambiente durante 7 horas y se anadio KO/Bu (60 mg, 0,46 mmol) a la mezcla de reaccion a temperatura ambiente. La reaccion se completo en 10 minutos. La mezcla de reaccion se diluyo por diclorometano (30 ml) y se acidifico por HCl (1 N, ac. 4 ml) y despues se neutralizo por NaHCO 3 (sat., ac. 5 ml). La mezcla se extrajo con salmuera (10 ml). La capa organica se seco por MgSO 4 y se concentro para dar un solido de color blanco que se trituro por eter (30 ml). La mezcla se filtro para dar N-(1-{4-[2-(2,6-dioxo-piperidin-3-il)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-bencil}-piperidin-4-il)-acetamida en forma de un solido de color blanco (293 mg, rendimiento del 50 %): HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 15/85, (acetonitrilo/H 3 PO 4 al 0,1 %), 4,85 min (99,1 %); p.f.: 270-272 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,26 - 1,44 (m, 2H, CH2), 1,62 - 1,73 (m, 2H, CH2), 1,77 (s, 3H, CH 3 ), 1,89 - 2,05 (m, 3H, CHH, CH2), 2,34 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,54 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,65 - 2,79 (m, 2H, CH2), 2,81 - 2,99 (m, 1H, CHH), 3,40 - 3,57 (m, 3H, CH2, CHH), 4,25 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,42 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CHH), 5,22 (s, 2H, CH2), 7,24 - 7,38 (m, 4H, Ar), 7,38 - 7,56 (m, 3H, Ar), 7,74 (d, J = 7,7 Hz, 1H, NH), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 522,33, 22,69, 31,18, 31,60, 45,07, 45,86, 51,55, 51,94, 61,80, 69,41, 114,94, 115,20, 127,61, 128,78, 129,80, 129,93, 133,28, 135,12, 138,50, 153,49, 167,99, 168,23, 170,96, 172,81; LCMS MH = 505; Anal. Calc. para C2sH32N 4 O5 0,5 H2O: C, 65,48; H, 6,48; N, 10,91; Observado: C, 65,58; H, 6,40; N, 10,76.
5.207 3-(4-(4-((2,6-DIMETILPIPERIDIN-1-IL)METIL)BENCILOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000170_0002
Etapa 1: A la solucion en CNCH3 de 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,5 g, 1,052 mmol), se le anadio Cis-2,6-dimetilpiperidina (0,354 ml, 2,63 mmol). La mezcla se agito a 50 °C durante una noche. La mezcla de reaccion se filtro. El filtrado se concentro en un evaporador rotatorio para dar 5-amino-4-(4-(4-((2,6-dimetilpiperidin-1-il)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo en forma de un solido (0,6 g, 112 %). Se uso en la siguiente etapa sin purification adicional.
Etapa 2: A la solucion en THF de 5-amino-4-(4-(4-((2,6-dimetilpiperidin-1-il)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,6 g, 1,182 mmol) a 0 °C, se le anadio terc-butoxido potasico (0,133 g, 1,182 mmol). La mezcla se agito a 0 °C durante 10 minutos. La mezcla se inactivo con una solucion 1 N de HCl (2 ml) seguido de 20 ml de NaHCO3 (saturado) y EtOAc (20 ml). Despues de la extraction, la capa organica se lavo con 20 ml de agua, despues con salmuera (10 ml), y se concentro para dar 3-(4-(4-((2,6-dimetilpiperidin-1-il)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,33 g, 59 %). p.f.: 205-207 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometres, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de acetonitrilo/H3PO4 al 0,1 % en H2O de 5/95 a 100/0 en 5 min y mantenido a 100/0 durante 5 min: tR = 4,74 min (96 %). 1H RMN (DMSO-d6) 50,94 (d, J = 6,2 Hz, 6H, CH3, CH3), 1,14 - 1,38 (m, 3H, CHH, CH2), 1,42 - 1,74 (m, 3H, CH2, CHH), 1,87 - 2,06 (m, 1H, CHH), 2,34 - 2,47 (m, 3H, CH2, CHH), 2,53 - 2,65 (m, 1H, CHH), 2,81 - 3,02 (m, 1H, CHH), 3,70 (s, 2H, CH2), 4,19 -4,48 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,0, 13,1 Hz, 1H, NCH), 5,20 (s, 2H, CH2), 7,33 (dd, J = 2,6, 7,7 Hz, 2H, Ar), 7,39 (s, 4H, Ar), 7,43 - 7,56 (m, 1H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH).13C RMN (DMSO^) 21,98, 22,31, 23,66, 31,15, 34,04, 45,03, 51,51, 53,56, 57,41,69,50, 114,88, 115,13, 127,26, 127,41, 129,75, 129,90, 133,24, 134,00, 142,84, 153,52, 167,96, 170,91, 172,76; LCMS: 476; Anal calc. para C28H33N3O4+0,4 H2O: C, 69,66; H, 7,06; N, 8,70; Observado: C, 69,46; H, 7,10; N, 8,41.
5.208 3-{1-OXO-4-[4-(4-FENIL-PIPERIDIN-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERON-2,6-DIONA
Figure imgf000171_0001
Etapa 1: A una solution agitada de 5-amino-4-(4-(4-(clorometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,60 g, 1,39 mmol) en acetonitrilo (15 ml) a temperatura ambiente, se le anadieron 4-fenilpiperidina (0,27 g, 1,67 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,28 ml, 1,67 mmol). La mezcla se agito a 50 °C durante un par de horas y se evaporo para dar un aceite (1,20 g, rendimiento en bruto del 86 %).
Etapa 2: A una solucion agitada de 5-amino-5-oxo-4-(1-oxo-4-(4-((4-fenilpiperidin-1-il)metil)benciloxi)isoindolin-2-il)pentanoato de metilo (0,77 g, 1,39 mmol) en THF (15 ml) en un bano de hielo, se le anadio 2-metilpropan-2-olato potasico (0,31 g, 2,79 mmol), y la mezcla se agito durante diez minutos. La mezcla se inactivo rapidamente por HCl 1 N (4 ml) y se neutralizo inmediatamente por bicarbonato sodico saturado (5,5 ml a pH = 7). Despues, la mezcla se agito con acetato de etilo (25 ml). La fase organica se separo, se lavo con salmuera (15 ml), y se concentro para dar un solido de color amarillo claro, que se purifico sobre una columna de gel de sflice (MeOH/CH 2 Cl 2 , gradiente del 1 % al 7 % en 20 min) para dar 3-{1-Oxo-4-[4-(4-fenil-piperidin-1-ilmetil)-benciloxi]-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,42 g, rendimiento del 58 %); HpLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 95/5 en 5 min, isocratica a 95/5 en 5 min (acetonitrilo/H 3 PO 4 al 0,1 %), 4,80 min (96,3 %); p.f.: 220-222 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 50,08-0,10 (d, 2H, CH2), 1,64-1,72 (m, 4H, CH2, CH2), 1,96-2,07 (m, 3H, CH, CH2), 2,39-2,42 (m, 1H, CHH), 2,51-2,60 (m, 1H, CHH), 2,85-2,97 (3H, CHH, CH2), 3,52 (s a, 2H, CH2), 4,23 -4,45 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,24 (s, 2H, CH2), 7,15 -7,52 (m, 12H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 522,34, 31,18, 32,94, 41,69, 45,07, 51,55, 53,52, 62,05, 69,40, 114,96, 115,22, 125,97, 126,64, 127,64, 128,29, 129,00, 129,81, 129,94, 133,30, 135,21, 138,37, 146,19, 153,50, 167,99, 170,97, 172,82; LCMS MH = 524; Anal. Calc. para C32H33N3O4: (+ 0,50 H2O): C, 72,16; H, 6,43; N, 7,89, Observado:
C, 71,83; H, 6,31; N, 7,80.
5.209 3-{4-[4-(4-CICLOPROPILMETIL-PIPERAZIN-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000171_0002
Etapa 1: A una solucion de 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,50 g, 1,06 mmol) en acetonitrilo (50 ml), se le anadio 1-(ciclopropilmetil)piperazina (0,35 ml, 2,33 mmol). La mezcla se agito durante una hora y media y despues se concentro para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-{4-[4-(4-ciclopropilmetil-piperazin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-butmco en forma de un solido espumoso de color blanco (0,83 g, rendimiento en bruto del 146 %). Se uso en la siguiente etapa sin purification adicional.
Etapa 2: A una solucion agitada de 5-amino-4-(4-(4-((4-(ciclopropilmetil)piperazin-1-il)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,57 g, 1,06 mmol) en THF (15 ml) en un bano de hielo se le anadio 2-metilpropan-2-olato potasico (0,29 g, 2,57 mmol). La mezcla se agito durante 15 minutos y se inactivo con HCl 1 N (~3 ml) y se neutralizo por bicarbonato sodico saturado (6 ml a pH = 7). La mezcla se agito con acetato de etilo (20 ml), y despues la fase organica se lavo con salmuera (15 ml), se separo y se concentro para dar un solido espumoso de color blanquecino. Se purifico por columna de gel de sflice (MeOH/CH 2 Cl 2 , gradiente del 1 % al 9 % en 70 min) para dar 3-{4-[4-(4-ciclopropilmetil-piperazin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un polvo de color blanco (270 mg, rendimiento del 51 %); p.f.: 176-178 °C; HPlC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 95/5 en 5 min, isocratica a 95/5 en 5 min (acetonitrilo/H 3 PO 4 al 0,1 %), 4,05 min (97,0 %); 1 H RMN (DMSO^) 50,08- 0,10 (d, 2H, CH2), 0,45- 0,47 (d, 2H, CH2), 0,80-0,83 (m, 1H, CHH), 1,96-2,00 (m, 1H, CHH), 2,27-2,60 (picos multiples solapados, 12H, CH2, CH2, CH2, CH2, CH2, CHH, CHH), 2,85-2,97 (m, 1H, CHH), 3,48 (s, 2H, CH2), 4,22 - 4,44 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,22 (s, 2H, CH2), 7,30 - 7,34 (m, 4H, Ar), 7,45 - 7,51 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 5 3,69, 7,75, 22,34, 31,18, 45,07, 51,55, 52,03, 52,37, 61,54, 62,36, 69,40, 114,96, 115,22, 127,63, 128,89, 129,80, 129,93, 133,29, 135,24, 137,92, 153,49, 167,99, 170,96, 172,82; LCMS MH = 503; Anal. Calc. para C29H3 4 N 4 O 4 : (+ 1,0 H2O): C, 66,90; H, 6,97; N, 10,76, Observado: C, 66,67; H, 6,63; N, 10,42.
5.210 3-{4-[4-(4,4-DIMETIL-PIPERON-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERON-2,6-DIONA
Figure imgf000172_0001
Etapa 1: A una solution agitada de 5-amino-4-(4-(4-(clorometil) benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,55 g, 1,28 mmol) en acetonitrilo (15 ml) a temperatura ambiente, se le anadieron clorhidrato de 4,4-dimetilpiperidina (0,23 g, 1,53 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,46 ml, 2,81 mmol). La mezcla se agito durante una noche y despues se concentro para dar un aceite, que se purifico sobre una columna de gel de sflice (MeOH/CH 2 Cl 2 , gradiente del 1 % al 9 % en 60 min) para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-{4-[4-(4,4-dimetilpiperidin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il} -butrnco en forma de un solido de color amarillo claro (0,60 g, rendimiento del 92 %). Se uso en la siguiente etapa sin purification adicional.
Etapa 2: A una solucion agitada de 5-amino-4-(4-(4-((4,4-dimetilpiperidin-1-il)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,59 g, 1,16 mmol) en THF (15 ml) en un bano de hielo, se le anadio 2-metilpropan-2-olato potasico (0,33 g, 2,94 mmol). La mezcla se agito durante diez minutos, se inactivo rapidamente por HCl 1 N (4 ml) y se neutralizo inmediatamente por bicarbonato sodico saturado (5,5 ml a pH = 7). Despues, la mezcla se agito con acetato de etilo (25 ml). La fase organica se separo, se lavo con salmuera (15 ml), y se concentro para dar un solido de color blanquecino, que se purifico sobre una columna de gel de sflice (MeOH/CH 2 Cl 2 , gradiente del 1 % al 9 % en 40 min) para dar 3-{4-[4-(4,4-dimetil-piperidin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un polvo fino de color blanco (150 mg, rendimiento del 27 %); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 95/5 en 5 min, isocratica a 95/5 en 5 min (acetonitrilo/H 3 PO4 al 0,1 %), 4,64 min (96,2 %); p.f.: 168-170 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 50,95(s, 6H, 2CH 3 ), 1,49 (s a, 4H, CH2, CH2), 1,96­ 2,00 (m, 1H, CHH), 2,37-2,43 (m, 1H, CHH), 2,51-2,60 (m, 1H, CHH), 2,86-2,98 (3H, CHH, CH2), 3,50 (s a, 2H, CH2), 4,23 - 4,45 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,25 (s, 2H, CH2), 7,31 - 7,51 (m, 7H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 522,35, 27,94, 31,18, 37,16, 45,06, 48,91, 51,56, 69,28, 114,97, 115,26, 127,69, 129,80, 129,94, 133,31, 153,44, 167,98, 170,97, 172,82; LCMS MH = 476; Anal. Calc. para C2sH 33 N 3 O4: C, 70,71; H, 6,99; N, 8,84, Observado: C, 66,15; H, 6,50; N, 8,02.
5.211 3-(4-(4-((4-ETILPIPERIDIN-1-IL)METIL)BENCILOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000172_0002
Etapa 1: A la solucion en acetonitrilo de 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,64 g, 1,346 mmol), se le anadio 4-etilpiperidina (0,34 g, 3,00 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche y se concentro en un evaporador rotatorio. El solido resultante se extrajo con CH2Cl2 (25 ml) y agua (25 ml). La capa organica se lavo con agua (10 ml) despues con salmuera (10 ml), se seco sobre Na2SO4, y se concentro para dar 5-amino-4-(4-(4-((4-etilpiperidin-1-il)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo en forma de un solido espumoso de color blanquecino (0,67 g, 98 %). El solido se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 2: A la solucion en THF de 5-amino-4-(4-(4-((4-etilpiperidin-1-il)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,67 g, 1,320 mmol) se le anadio 2-metilpropan-2-olato potasico (0,148 g, 1,320 mmol) a 0 °C. La reaction se interrumpio anadiendo NaHCO3 sat. (5 ml) despues de la agitation a 0 °C durante 1,5 horas. La mezcla se diluyo con EtoAc (20 ml) y 10 ml de agua, se extrajo y se lavo con salmuera. La capa organica se concentro en un evaporador rotatorio para dar un solido de color amarillo. El solido se disolvio parcialmente en CH2Cl2 (10 ml), y se anadio eter (5 ml). La mezcla se agito y se filtro para dar 3-(4-(4-((4-etilpiperidin-1-il)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido (250 mg, 40 %). p.f.: 180-182 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometres, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de acetonitrilo/H3PO4 al 0,1 % en H2O de 5/95 a 100/0 en 5 min y mantenido a 100/0 durante 5 min: tR = 4,85 min (96 %). 1H RMN (DMSO-d6) 50,66 - 0,94 (m, 3H, CH3), 0,99 - 1,14 (m, 3H, CH, CH2), 1,15 - 1,29 (m, 2H, CH2), 1,47 - 1,71 (m, 2H, CH2), 1,78 - 1,92 (m, 2H, CH2), 1,93 -2,06 (m, 1H, CH), 2,36 -2,48 (m, 1H, CHH), 2,53 -2,65 (m1H, CHH), 2,77 (d, J = 10,8 Hz, 2H, CH2), 2,83 - 3,03 (m, 1H, CHH), 3,43 (s, 2H, CH2), 4,13 - 4,50 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 4,9, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,22 (s, 2H, CH2), 7,21 - 7,38 (m, 4H, Ar), 7,39 - 7,55 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH). 13C RMN (DMSO^) 5 11,18, 22,36, 28,76, 31,21, 31,65, 36,97, 45,09, 51,58, 53,37, 62,19, 69,47, 114,97, 115,21, 127,61, 128,79, 129,81, 129,95, 133,31, 135,06, 138,66, 153,53, 168,01, 170,96, 172,82; LCMS: 476; Anal calc. para C28H38N3O4+ 0,8 H2O: C, 68,63; H, 7,12; N, 8,58; Observado: C, 68,66; H, 6,83; N, 8,44.
5.212 3-(4-(4-((4-ISOPROPILPIPERON-1-IL)METIL)BENCILOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERON-2,6-DIONA
Figure imgf000173_0001
Etapa 1: A la solution en acetonitrilo de 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,5 g, 1,052 mmol), se le anadio 4-isopropilpiperidina (0,294 g, 2,314 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaction se concentro en un evaporador rotatorio. El aceite resultante se recogio en EtOAc (15 ml) y se extrajo con agua (20 ml). La capa organica se lavo con salmuera (10 ml), se seco sobre Na 2 SO 4 y se concentro para dar 5-amino-4-(4-(4-((4-isopropilpiperidin-1-il)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo en forma de un aceite. La mezcla se uso sin purification adicional en la siguiente etapa.
Etapa 2: A la solucion en THF de 5-amino-4-(4-(4-((4-isopropilpiperidin-1-il)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,548 g, 1,05 mmol), se anadio 2-metilpropan-2-olato potasico (0,12 g, 1,069 mmol) a 0 °C. La mezcla se agito a 0 °C durante 30 minutos. La reaccion se interrumpio anadiendo 2 ml de HCl (1 N) y 5 ml de NaHCO3 (saturado) seguido de 20 ml de EtOAc y 10 ml de agua. La mezcla se extrajo y la capa organica se lavo con agua (10 ml) y salmuera (10 ml), y se concentro. El solido resultante se purifico sobre una columna ISCO para dar 3-(4-(4-((4-isopropilpiperidin-1-il)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (65 mg, 13 %). p.f.: 124-126 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometres, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de acetonitrilo/H 3 PO 4 al 0,1 % en H 2 O de 5/95 a 100/0 en 5 min y mantenido a 100/0 durante 5 min: tR = 4,98 min (96,2 %). 1 H RMN (DMSO-de) 50,83 (d, J = 6,8 Hz, 6H, CH3, CH3), 0,90 - 1,06 (m, 1H, CH), 1,07 -1,25 (m, 2H, CH2), 1,31 - 1,47 (m, 1H, CH), 1,51 - 1,63 (m, 2H, CH2), 1,76 - 1,92 (m, 2H, CH2), 1,93 - 2,04 (m, 1H, CHH), 2,36 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,63 (m, 1H, CHH), 2,74 - 2,88 (m, 2H, CH2), 2,88 - 3,00 (m, 1H, CHH), 3,40­ 3,46 (s a, 2H, CH2), 4,19 - 4,47 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,22 (s, 2H, CH2), 7,25 - 7,37 (m, 4H, Ar), 7,38 - 7,54 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-de) 519,66, 22,36, 28,88, 31,21, 31,94, 41,84, 45,09, 51,58, 53,63, 62,13, 69,45, 114,97, 115,21, 127,61, 128,80, 129,81, 129,95, 133,31, 135,04, 153,51, 168,01, 170,96, 172,82; LCMS: 490; Anal calc. para C2sH35N3O4+0,4 H2O: C, 70,11; H, 7,26; N, 8,46; Observado: C, 70,10; H, 7,37; N, 8,36.
5.213 3-{4-[4-(4-METOXI-PIPERIDIN-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERON-2,6-DIONA
Figure imgf000173_0002
Etapa 1: A la solucion en acetonitrilo de 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,5 g, 1,052 mmol), se le anadieron 4-metoxipiperidina (0,133 g, 1,157 mmol) y DIPeA (0,276 ml, 1,578 mmol). Despues de agitarse a temperatura ambiente durante una noche, la mezcla de reaccion se concentro en un evaporador rotatorio, dando ester metflico del acido 4-carbamoil-4-{4-[4-(4-metoxi-piperidin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-butmco en forma de un aceite. Se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 2: A la solucion en THF de 5-amino-4-(4-(4-((4-metoxipiperidin-1-il)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,536 g, 1,052 mmol), se le anadio 2-metilpropan-2-olato potasico (0,236 g, 2,104 mmol) a 0 °C. La mezcla se agito a esta temperatura durante 15 minutos. La reaccion se interrumpio anadiendo 10 ml de HCl 1 N seguido de 25 ml de NaHCO3 (sat). La mezcla se extrajo con EtOAc (30 ml). La capa organica se concentro para dar un solido de color amarillento. El solido se agito con eter durante una noche. La suspension resultante se filtro para dar 3-{4-[4-(4-metoxi-piperidin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,34 g, 71 %). p.f.: 149-151 °C. HPLC: Waters Symmetry C18, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 95/5 de acetonitrilo/H3PO4 al 0,1 % en 5 min,: tR = 4,60 min (96 %); ; 1H RMN (DMSO-d6) 5 1,28 - 1,51 (m, 2H, CH2), 1,70 - 1,87 (m, 2H, CH2), 1,90 - 2,15 (m, 3H, CHH, CH2), 2,34 - 2,45 (m, 1H, CHH), 2,56 - 2,69 (m, 3H, CHH, CH2), 2,80 - 3,01 (m, 1H, CHH), 3,08 - 3,19 (m, 1H, CH), 3,21 (s, 3H, OCH3), 3,44 (s, 2H, CH2), 4,18 - 4,53 (m, 2H, CH2), 5,03 - 5,16 (m, 1H, NCH), 5,22 (s, 2H, CH2), 7,23 - 7,38 (m, 4H, Ar), 7,39 - 7,57 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 522,36, 30,63, 31,21, 50,48, 51,58, 54,77, 61,72, 69,44, 75,68, 114,95, 115,21, 127,62, 128,79, 128,83, 129,81, 129,95, 133,31, 135,12, 138,51, 153,51, 168,01, 170,96, 172,83; LCMS: 478; Anal calc. para C27H31N3O5 0,1 H2O: C, 67,40; H, 6,58; N, 8,73; Observado: C, 67,32; H, 6,39; N, 8,52.
5.214 3-{4-[4-(3,3-DIFLUORO-PIPERIDIN-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000174_0001
Etapa 1: A la solution agitada de 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (600 mg, 1,262 mmol) en acetonitrilo (10 ml), se le anadieron clorhidrato de 3,3-difluoropiperidina (199 mg, 1,262 mmol) y DIPEA (0,441 ml, 2,52 mmol). La solucion resultante se agito a temperatura ambiente durante dos dias. La mezcla se concentro y se disolvio en diclorometano (30 ml) y se extrajo de nuevo con NaHCO 3 (ac., sat. 15 ml). La capa organica se concentro para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-{4-[4-(3,3-difluoro-piperidin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-butmco en forma de un solido de color blanquecino (651 mg, rendimiento en bruto del 100 %). El solido se uso en la siguiente etapa sin purification adicional: LCMS MH = 516.
Etapa 2: Se anadio KO/Bu (142 mg, 1,262 mmol) a una solucion agitada de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-4-[4-(3,3-difluoro-piperidin-1-ilmetil)-bencilo oxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-butmco (651 mg, 1,262 mmol) en tetrahidrofurano (10 ml) a 0 °C. La mezcla de reaction resultante se agito a 0 °C durante 30 minutos antes de diluirse con diclorometano (20 ml). La mezcla se acidifico con HCl (1 N, 2 ml, ac.) y se neutralizo con NaHCO3 (sat. ac. 2 ml) seguido de la adicion de salmuera (8 ml) y diclorometano (30 ml). La mezcla se extrajo y la capa acuosa se extrajo de nuevo con diclorometano (2 x 40 ml). Las capas organicas se combinaron y se secaron con MgSO 4 . La mezcla se filtro y el filtrado se concentro. El residuo se trituro en eter dietflico (50 ml) y se filtro para dar 3-{4-[4-(3,3-difluoropiperidin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (540 mg, rendimiento del 77 %): HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 18/82, (acetonitrilo/H3PO 4 al 0,1 %), 4,44 min (99,9 %); p.f.: 140-142 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 5 1,57 - 1,71 (m, 2H, CH2), 1,76 - 2,08 (m, 3H, CH2, CHH), 2,34 - 2,45 (m, 2H, CH2), 2,45 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,68 (m, 3H, CH2, CHH), 2,81 - 3,01 (m, 1H, CHH), 3,57 (s, 2H, CH2), 4,20 - 4,32 (m, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,42 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CHH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,28 - 7,38 (m, 4H, Ar), 7,41 -7,54 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DM SO^) 521,38 - 21,71,22,33, 31,18, 31,61 (t, Jc -f =23,1 Hz), 45,07, 51,12, 51,55, 57,48 (t, Jc-f = 27,5 Hz), 60,56, 69,38, 114,94, 115,22, 121,05 (t, Jc -f = 241,0 Hz), 127,67, 128,82, 129,78, 129,93, 133,30, 135,40, 137,34, 153,49, 167,99, 170,96, 172,81 ; LCMS MH = 484; Anal. Calc. para C26H27F2N3O4 1,3 H2O: C, 61,6; H, 5,89; N, 8,29; Observado: C, 61,39; H, 5,61; N, 8,00.
5.215 3-(4-(4-((4-(METILSULFONIL)PIPERAZIN-1-IL)METIL)BENCILOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000174_0002
A una solucion agitada de 5-amino-4-(4-(4-(clorometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,455 g, 1,056 mmol) en acetonitrilo (10 ml), se le anadieron 1-(metilsulfonil)piperazina (0,225 g, 1,373 mmol) y DlPEA (0,436 ml, 2,64 mmol). La mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 5,5 dias. La mezcla de reaccion se diluyo por diclorometano (40 ml) y se lavo con agua (20 ml) y salmuera (20 ml). Despues, la capa organica se seco (MgSO4) y despues de la filtration del agente de secado, el disolvente se concentro para dar 5-amino-4-(4-(4-((4-(metilsulfonil)piperazin-1-il)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo. El producto en bruto se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Se anadio terc-butoxido potasico (0,154 g, 1,373 mmol) a la solucion agitada de 5-amino-4-(4-(4-((4-(metilsulfonil)piperazin-1-il)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,590 g, 1,056 mmol) en THF (20 ml) a 0 °C. La mezcla de reaccion se agito a 0 °C durante 1 hora. Despues, la mezcla de reaccion se diluyo por diclorometano (50 ml) y se acidifico con HCl (ac. 1 N 4 ml). La mezcla se lavo con NaHCO3 (20 ml) y salmuera (20 ml). La capa acuosa se extrajo de nuevo con diclorometano (2 x 30 ml). Las capas organicas combinadas se secaron con MgSO4. Despues de la filtracion del agente de secado, el disolvente se evaporo. El residuo se agito en una mezcla de metanol/diclorometano: 50/50. El filtrado se purifico por Isco Flash (carga en seco, gradiente, Metanol/diclorometano: 0/100 a 5/95 en 30 min), producto de elucion a 5/95. Despues, el disolvente se evaporo y el residuo se agito en eter. El solido se filtro y se seco para dar 3-(4-(4-((4-(metilsulfonil)piperazin-1-il)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,32 g, 2 etapas, rendimiento del 58 %); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, acetonitrilo/H3pO4 al 0,1 %: gradiente de 10/90 a 90/10 en 15 min; 5 min a 90/10: 6,23 min (97,27 %), 8,02 min (2,25 %); p.f.: 158-160 °C; 1H RMN (DMSO-d6) 51,87 -2,08 (m, 1H, CHH), 2,31 -2,48 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 2,53 - 2,69 (m, 1H, CHH), 2,86 (s, 3H, CH3), 2,89 - 3,02 (m, 1H, CHH), 3,02 - 3,20 (m, 4H, CH2, CH2), 3,53 (s, 2H, CH2), 4,16 - 4,33 (m, 1H, CHH), 4,34 - 4,53 (m, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,25 - 7,40 (m, 4H, Ar), 7,40 - 7,55 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-d6) 5 22,34, 31,18, 33,55, 45,06, 45,41, 51,55, 51,71, 61,14, 69,35, 114,96, 115,22, 127,66, 128,90, 129,80, 129,93, 133,28, 135,38, 137,69, 153,46, 167,97, 170,96, 172,81; Anal calc. para C26H30N4O6S 0,2 H2O: C, 58,90, H, 5,78, N, 10,57; Observado: C, 58,62, H, 5,51, N, 10,40.
5.2163-[1-OXO-4-(4-PIPERIDIN-1-ILMETIL-BENCILOXI)-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000175_0001
Etapa 1: Se anadio trifenilfosfeno soportado con poflmero (1~1,5 mmol/g, 2,10 g, 2,63 mmol) a una solucion agitada de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-(4-hidroxi-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-butmco en THF (20 ml) a 0 °C, seguido de la adicion de azodicarboxilato de diisopropilo (0,52 ml, 2,63 mmol). Despues de agitar durante 15 minutos, se anadio (4-piperidin-1-ilmetil-fenil)-metanol (0,49 g, 2,39 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche y despues se filtro. El filtrado se evaporo y se purifico sobre una columna de gel de sflice para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[1-oxo-4-(4-piperidin-1-ilmetil-benciloxi)-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butrnco en forma de un aceite (0,51 g, rendimiento del 88 %).
Etapa 2: Se anadio terc-butoxido potasico (0,12 g, 1,06 mmol) a una solucion agitada de ester metflico del acido 4­ carbamoil-4-[1-oxo-4-(4-piperidin-1-ilmetil-benciloxi)-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco (0,51 g, 1,06 mmol) en THF (8 ml) a 0 °C durante 10 minutos. La mezcla se inactivo con HCl 1 N (2 ml) y se neutralizo con bicarbonato sodico saturado (4 ml a pH = 8). La mezcla se lavo con acetato de etilo (3 x 20 ml). Las fases de acetato de etilo combinadas se evaporaron y se purificaron por HPLC PREP. para dar 3-[1-oxo-4-(4-piperidin-1-ilmetil-benciloxi)-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,07 g, rendimiento del 15 %); HPLC: Waters Symmetry C 13 , 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 17/83 de acetonitrilo/H 3 PO4 al 0,1 %, 4,88 min (98,8 %); p.f.: 186-188 °C; 1 H RMN (DMSO-de) d, 1,30 - 1,60 (m, 6H, 3CH2), 1,91 - 2,05 (m, 1H, CHH), 2,22 - 2,36 (m, 4H, 2CH2), 2,37 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,63 (m, 1H, CHH), 2,83 - 2,99 (m, 1H, CHH), 3,41 (s, 2H, CH2), 4,19 - 4,48 (m, 2H, ArCH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,22 (s, 2H, CH2), 7,26 - 7,37 (m, 4H, Ar), 7,39 - 7,53 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) d 22,36, 23,99, 25,55, 31,21,45,10, 51,58, 53,88, 62,54, 69,45, 114,97, 115,21, 127,59, 128,80, 129,81, 129,95, 133,31, 135,03, 138,58, 153,51, 168,01, 170,96, 172,83; LCMS MH = 448; Anal. Calc. para C26H29N 3 O4.: C, 69,78; H, 6,53; N, 9,39, Observado: C, 66,86; H, 6,15; N, 8,99.
5.217 3-{4-[4-(4-METIL-PIPERAZIN-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000175_0002
Etapa 1: Se anadio trifenilfosfeno soportado con poflmero (1,6 mmol/g, 1,36 g, 1,85 mmol) a una solucion agitada de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-(4-hidroxi-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-butmco (0,45 g, 1,54 mmol) en THF (20 ml) a 0 °C, seguido de la adicion de diazen-1,2-dicarboxilato de diisopropilo (0,37 ml, 1,88 mmol). Despues de agitar durante 30 minutos, se anadio [4-(4-metil-piperazin-1-ilmetil)-fenil]-metanol (0,41 g, 1,85 mmol). La mezcla se agito durante tres horas, despues se filtro, se lavo con metanol (3 x 10 ml) y cloruro de metileno (3 x 10 ml). El filtrado combinado se evaporo al vado para dar un aceite, que se purifico sobre una columna de gel de sflice (columna de amina, MeOH/CH2Cl2, gradiente del 0 % al 2 % en 60 min) para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-{4-[4-(4-metil-piperazin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-butmco en forma de un aceite transparente (0,50 g, rendimiento del 66 %).
Etapa 2: Se anadio terc-butoxido potasico (0,11 g, 1,01 mmol) a una solucion agitada de ester metflico del acido 4carbamoil-4-{4-[4-(4-metil-piperazin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-butmco (0,50 g, 1,01 mmol) en THF (15 ml) a 0 °C. La mezcla se agito durante diez minutos y se inactivo con HCl 1 N (3 ml), se neutralizo con bicarbonato sodico saturado (4 ml a pH = 7), y se extrajo rapidamente por acetato de etilo (2 x 30 ml). Las fases de acetato de etilo combinadas se evaporaron para dar un solido de color blanquecino, que se agito en acetato de etilo (10 ml) durante una hora. La suspension se filtro para dar 3-{4-[4-(4-metil-piperazin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanquecino (0,12 g, rendimiento del 26 %): HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, isocratica a 10/90 en 15 min (acetonitrilo/HsPO4 al 0,1 %), 9,82 min (99,7 %); p.f.: 188-190 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 5 1,90 - 2,04 (m, 1H, CHH), 2,14 (s, 3H, CH 3 ), 2,20 - 2,46 (m, 9H, CHH, CH2CH2, CH2CH2), 2,55 - 2,66 (m, 1H, CHH), 2,80 - 3,05 (m, 1H, CHH), 3,45 (s, 2H, CH2), 4,17 - 4,50 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,2, 13,1 Hz, 1H, NCH), 5,22 (s, 2H, CH2), 7,23 - 7,56 (m, 7H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 522,36, 31,21, 45,09, 45,72, 51,58, 52,52, 54,71, 61,74, 69,44, 114,98, 115,23, 127,62, 128,88, 129,81, 129,95, 133,31, 135,17, 138,18, 153,51, 168,01, 170,96, 172,82; LCMS MH = 463; Anal. Calc. para C26H30N4O4: C, 67,51; H, 6,54; N, 12,11; Observado: C, 67,23; H, 6,67; N, 11,78.
5.218 ESTER TERC-BUTWCO DEL ACIDO 4-{4-[2-(2,6-DlOXO-PIPERIDIN-3-IL)-1-OXO-2,3-DIHIDRO-1H-ISOINDOL-4-ILOXIMETIL]-BENCIL}-PIPERAZIN-1-CARBOXWCO
Figure imgf000176_0001
Etapa 1: A la solucion en acetonitrilo de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(4-clorometil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco (0,8 g, 1,8 mmol), se le anadieron piperazin-carboxilato de t-butilo (0,86 g, 4,6 mmol) y DIPEA (0,62 ml, 4,6 mmol). Despues de agitarse a temperatura ambiente durante una noche, la mezcla se concentro y se concentro con EtOAc (30 ml) y Na 2 CO 3 (20 ml). La capa organica se lavo con agua (20 ml) y salmuera (20 ml), se concentro para dar ester terc-butflico del acido 4-{4-[2-(1-carbamoil-3-metoxicarbonil-propil)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-bencil}-piperazin-1-carboxflico en forma de un aceite, que se uso en la siguiente etapa sin purification.
Etapa 2: A la solucion en THF (20 ml) de ester terc-butflico del acido 4-{4-[2-(1-carbamoil-3-metoxicarbonil-propil)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-bencil}-piperazin-1-carboxflico (1,04 g, 1,8 mmol), se le anadio t-butoxido potasico (0,3 g, 2,7 mmol) a 0 °C. La mezcla se agito durante 15 minutos a 0 °C y se inactivo con 5 ml de una solucion 1 N de HCl seguido de 15 ml de una solucion saturada de NaHCO 3 . La mezcla se extrajo con EtOAc (20 ml). La capa organica se concentro al vado. El aceite resultante se purifico sobre una columna de gel de sflice eluida con CH 2 Cl 2 y metanol para dar ester terc-butflico del acido 4-4-[2-(2,6-Dioxo-piperidin-3-il)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-bencil}-piperazin-1-carboxflico en forma de un aceite (170 mg, 18 %). p.f.: 180-182 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometres, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de acetonitrilo/H 3 PO4 al 0,1 % en H2O de 5/95 a 100/0 en 5 min y mantenido a 100/0 durante 5 min: tR = 5,03 min (94 %); LCMS MH = 549, 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,38 (s, 9H, CH 3 , CH 3 ,CH 3 ), 1,87 - 2,13 (m, 1H, CHH), 2,30 (t, J = 4,8 Hz, 4H, CH2,CH2), 2,40 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,81 - 3,00 (m, 1H, CHH), 3,30 (s a, 4H, CH2, CH2), 3,48 (s, 2H, CH2), 4,14 -4,57 (m, 2H, CH2), 5,00 - 5,17 (m, 1H, NCH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,33 (d, J = 7,7 Hz, 4H, Ar), 7,45 (d, J = 8,7 Hz, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 522,29, 27,96, 31,13, 45,02, 51,51, 52,28, 61,55, 69,33, 78,64, 114,91, 115,18, 127,58, 128,90, 129,76, 129,89, 133,25, 135,25, 137,70, 153,43, 153,71, 167,92, 170,91, 172,76; Anal calc. para C30H36N4O6 0,2 H2O: C, 65,25; H, 6,64; N, 10,15; Observado: C, 64,96; H, 6,51; N, 10,11.
5.219 3-[1-OXO-4-(4-PIPERAZIN-1-ILMETIL-BENCILOXI)-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000176_0002
Etapa 1: A la solucion en acetonitrilo de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(4-clorometil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco (0,8 g, 1,8 mmol), se le anadieron t-butil-piperazin-carboxilato (0,86 g, 4,6 mmol) y DIPEA (0,62 ml, 4,6 mmol). Despues de agitarse a temperatura ambiente durante una noche, la mezcla se concentro y se concentro con EtOAc (30 ml) y Na 2 CO 3 (20 ml). La capa organica se lavo con agua (20 ml) y salmuera (20 ml), y se concentro para dar ester terc-butflico del acido 4-{4-[2-(1-Carbamoil-3-metoxicarbonil-propil)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-bencil}-piperazin-1-carboxflico en forma de un aceite, que se uso en la siguiente etapa sin purification.
Etapa 3: A la solution en THF (20 ml) de ester terc-butflico del acido 4-{4-[2-(1-carbamoil-3-metoxicarbonil-propil)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-bencil}-piperazin-1-carboxflico (1,04 g, 1,8 mmol), se le anadio t-butoxido potasico (0,3 g, 2,7 mmol) a 0 °C. La mezcla se agito durante 15 minutos a 0 °C y se inactivo con 5 ml de una solucion 1 N de HCl seguido de 15 ml de una solucion saturada de NaHCO 3 . La mezcla se extrajo con EtOAc (20 ml). La capa organica se concentro al vatio. El aceite resultante se purifico sobre una columna de gel de sflice eluida con CH2Cl2 y metanol para dar ester terc-butflico del acido 4-{4-[2-(2,6-Dioxo-piperidin-3-il)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-bencil}-piperazin-1-carboxflico en forma de un aceite (170 mg, 18 %). p.f.: 180-182 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometros, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de acetonitrilo/H 3 PO4 al 0,1 % en H 2 O de 5/95 a 100/0 en 5 min y mantenido a 100/0 durante 5 min: tR = 5,03 min (94 %); LCMS MH = 549, 1 H RMN (DMSO-de) 51,38 (s, 9H, CH 3 , CH 3 ,CH 3 ), 1,87 - 2,13 (m, 1H, CHH), 2,30 (t, J = 4,8 Hz, 4H, CH2,CH2), 2,40 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,81 - 3,00 (m, 1H, CHH), 3,30 (s a, 4H, CH2, CH2), 3,48 (s, 2H, CH2), 4,14 -4,57 (m, 2H, CH2), 5,00 - 5,17 (m, 1H, NCH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,33 (d, J = 7,7 Hz, 4H, Ar), 7,45 (d, J = 8,7 Hz, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 522,29, 27,96, 31,13, 45,02, 51,51, 52,28, 61,55, 69,33, 78,64, 114,91, 115,18, 127,58, 128,90, 129,76, 129,89, 133,25, 135,25, 137,70, 153,43, 153,71, 167,92, 170,91, 172,76. Anal calc. para C ^ H ^ O s 0,2H 2 O: C, 65,25; H, 6,64; N, 10,15; Observado: C, 64,96; H, 6,51; N, 10,11.
Etapa 4: A la solucion en CH 2 Cl 2 (10 ml) de ester terc-butflico del acido 4-{4-[2-(2,6-dioxo-piperidin-3-il)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-bencil}-piperazin-1-carboxflico (0,37 g, 0,675 mmol), se le anadio hidrogenocloruro en una solucion de eter (2,0 M, 1,6 ml, 8 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla se filtro. El solido resultante se agito con eter para dar 3-[1-oxo-4-(4-piperazin-1-ilmetil-benciloxi)-1,3-dihidroisoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (240 mg, 69 %). p.f.: 196-198 °C; HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometros,1 ml/min, 240 nm, gradiente de acetonitrilo/H 3 PO 4 al 0,1 % en H2O de 5/95 a 100/0 en 5 min y mantenido a 100/0 durante 5 min: tR = 5,10 min (96 %); 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,90 -2,07 (m, 1H, CHH), 2,35 - 2,45 (m, 1H, CHH), 2,59 (d, J = 15,7 Hz, 1H, CHH), 2,84 - 3,02 (m, 1H, CHH), 3,09 - 3,32 (a, 2H, CH2), 3,41-3,51 (a, 4H, CH2,CH2), 4,22 - 4,53 (m, 4H, CH2, CH2), 5,12 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,29 (s, 7H, CH2), 7,28 - 7,38 (m, 7H, Ar), 7,43 - 7,54 (m, 4H, Ar), 7,55 - 7,71 (m, 14H, Ar), 10,98 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-da) 5 15,05, 22,32, 31,13, 45,02, 47,29, 51,52, 68,94, 114,90, 115,31, 127,79, 129,78, 129,90, 131,44, 133,30, 153,30, 167,89, 170,91, 172,76; LCMS MH = 449. Anal calc. para C25H28N4O42,1HCl+ 1 H2O: C, 55,29; H, 5,96; N, 10,32; Cl, 13,71 %. Observado: C, 55,39; H, 6,13; N, 10,19; Cl: 13,61.
5.220 3-{4-[4-(4-METIL-PIPERIDIN-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERON-2,6-DIONA
Figure imgf000177_0001
Se anadio 4-metilpiperidina (0,49 g, 4,94 mmol) a una solucion agitada de 5-amino-4-(4-(4-(clorometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,71 g, 1,65 mmol) en DMF (15 ml) a 50 °C durante una noche. A la mezcla se le anadio carbonato potasico (0,23 g, 1,65 mmol), y la mezcla se calento a 90 °C durante una noche. La mezcla se concentro para dar un aceite, que se agito en acetato de etilo (10 ml) durante una noche. La suspension se filtro para dar un filtrado de color pardo, que se evaporo y se purifico sobre una columna de gel de sflice con MeOH (disolvente B)/diclorometano (disolvente A) como eluyentes para dar 3-{4-[4-(4-Metil-piperidin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,22 g, rendimiento del 30 % durante 3 etapas); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 95/5 en 5 min, isocratica a 95/5 en 5 min (acetonitrilo/H3PO4 al 0,1 %), 5,16 min (98,1 %); p.f.: 189-191 °C; 1H RMN (DMSO-d6) 50,88 (d, J = 6,4 Hz, 3H, CH3), 1,04 - 1,20 (m, 2H, CHH), 1,23 - 1,41 (m, 1H, CHH), 1,49 - 1,63 (m, 2H, CH2), 1,81 - 2,04 (m, 3H, CH, CH2), 2,36 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,63 (m, 1H, CHH), 2,69 - 2,82 (m, 2H, CH2), 2,83 - 2,99 (m, 1H, CHH), 3,38 - 3,52 (m, 2H, CH2), 4,19 - 4,47 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,22 (s, 2H, CH2), 7,26 - 7,37 (m, 4H, Ar), 7,39 - 7,53 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-d6) 521,79, 22,36, 30,23, 31,21, 33,89, 45,10, 51,58, 53,22, 62,10, 69,44, 114,97, 115,23, 127,61, 128,86, 129,81, 129,94, 133,31, 135,12, 153,51, 168,01, 170,96, 172,83; LCMS MH = 462; Anal. Calc. para C27H31N3O4 0,1 H2O: C, 69,99; H, 6,79; N, 9,07, Observado: C, 69,84; H, 6,81; N, 9,12.
5.221 3-{4-[4-(4-TERC-BUTIL-PIPERIDIN-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000178_0001
Etapa 1: Se anadio ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(4-clorometil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butrnco (0,63 g, 1,46 mmol) a una solution agitada de clorhidrato de 4-terc-butilpiperidina (0,78 g, 4,37 mmol) y diisopropiletilamina (0,96 ml, 5,83 mmol) en DMF (15 ml) a 70 °C. La mezcla se calento durante 5 horas, despues se evaporo y se purifico sobre una columna de gel de sflice (MeOH/CH2Cl2, gradiente del 1 % al 9 % en 50 min) para dar ester metflico del acido 4-{4-[4-(4-terc-Butil-piperidin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-4-carbamoil-butrnco en forma de un solido oleoso de color pardo claro (1,23 g), que se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 2: A una solucion agitada de ester metflico del acido 4-{4-[4-(4-terc-Butil-piperidin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1.3- dihidro-isoindol-2-il}-4-carbamoil-butmco en THF (15 ml) a temperatura ambiente se le anadio terc-butoxido potasico (0,33 g, 2,90 mmol). La mezcla se agito durante 30 minutos o hasta que el LCMS no mostro material de partida. La mezcla se inactivo con HCl 1 N (2 ml) para dar una solucion de color pardo transparente y despues se neutralizo con bicarbonato sodico saturado (4 ml a pH = 7). La mezcla se extrajo con acetato de etilo (2 x 30 ml), se lavo con salmuera y se concentro hasta un solido de color pardo. Se purifico sobre una columna de gel de sflice (MeOH/CH2Cl2, gradiente del 1 % al 9 % en 50 min) para dar 3-{4-[4-(4-terc-Butil-piperidin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1.3- dihidro-isoindol-2-il} -piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color pardo claro (0,56 g, rendimiento del 76 %); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 95/5 en 5 min, isocratica a 95/5 en 5 min (acetonitrilo/H3PO4 al 0,1 %), 5,62 min (96,6 %); p.f.: 208-210 °C; 1H RMN (DMSO-d6) 5 0,82 (s, 9H, 3CH), 0,88 - 1,05 (m, 1H, CHH), 1,09 - 1,31 (m, 2H, CH2), 1,49 - 1,65 (m, 2H, CH2), 1,83 (t, J = 11,5 Hz, 2H, CH2), 1,92 - 2,06 (m, 1H, CHH), 2,34 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,54 - 2,65 (m, 1H, CHH), 2,79 - 3,00 (m, 3H, CH, CH2), 3,38 - 3,47 (m, 2H, CH2), 4,20 - 4,47 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,22 (s, 2H, CH2), 7,25 - 7,37 (m, 4H, Ar), 7,39 - 7,55 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-de) 522,36, 26,4427,19, 31,21, 31,84, 45,09, 45,94, 51,58, 53,98, 62,09, 69,45, 114,97, 115,21, 127,61, 128,77, 129,81, 129,94, 133,31, 135,04, 138,64, 153,51, 168,01, 170,96, 172,82; LCMS MH = 504; Anal. Calc. para C30H37N3O4 0,1 H2O: C, 71,29; H, 7,42; N, 8,31, Observado: C, 70,96; H, 7,63; N, 8,32.
5.222 3-{4-[4-(4-HIDROXI-PIPERIDIN-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERON-2,6-DIONA
Figure imgf000178_0002
Etapa 1: A una solucion incolora agitada de 5-amino-4-(4-(4-(clorometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,51 g, 1,19 mmol) en acetonitrilo (15 ml) se le anadieron clorhidrato de piperidin-4-ol (0,16 g, 1,19 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,49 ml, 2,98 mmol). Se agito a temperatura ambiente durante una noche. A la mezcla se le anadieron clorhidrato de piperidin-4-ol (0,09 g) y DIPEA (0,4 ml) y se calento a 50 °C durante una noche. La mezcla se purifico sobre una columna de gel de sflice (MeOH/CH2Cl2, gradiente del 1 % al 9 % en 50 minutos) para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-{4-[4-(4-hidroxi-piperidin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-butmco en forma de un solido de color blanquecino (0,75 g, rendimiento del 78 %).
Etapa 2: A una solucion agitada de 5-amino-4-(4-(4-((4-hidroxipiperidin-1-il)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,67 g, 1,35 mmol) en THF (30 ml) a temperatura ambiente, se le anadio 2-metilpropan-2-olato potasico (0,61 g, 5,41 mmol). Se agito durante diez minutos y despues se inactivo con HCl 1 N (2 ml), y se neutralizo por bicarbonato sodico saturado (4 ml a pH = 7). La mezcla se extrajo con acetato de etilo (2 x 20 ml). Las fases de acetato de etilo combinadas se purificaron sobre una columna de gel de sflice (MeOH/CH2Cl2, gradiente del 1 % al 9 % en 50 min) para dar 3-{4-[4-(4-Hidroxi-piperidin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,24 g, rendimiento del 38 %); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 95/5 en 5 min, isocratica a 95/5 en 5 min (acetonitrilo/H3PO4 al 0,1 %), 5,16 min (97,3 %); p.f.: 204-206 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 5 1,28 - 1,48 (m, 2H, CH2), 1,58-1,79 (m, 2H, CH2), 1,89- 2,15 (m, 3H, CHH, CH2), 2,37 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,71 (m, 4H, CH2, CHH, CHH), 2,83 - 2,99 (m, 1H, CHH), 3,39 - 3,49 (m, 3H, CH2, CHH), 4,21 - 4,47 (m, 2H, CH2), 4,53 (d, J = 4,2 Hz, 1H, OH), 5,11 (dd, J = 5,0, 13,1 Hz, 1 H, NCH), 5,22 (s, 2H, CH2), 7,26 - 7,37 (m, 4H, Ar), 7,39 - 7,53 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO^) 522,36, 31,21, 34,37, 45,10, 50,82, 51,58, 61,77, 66,26, 69,44, 114,97, 115,21, 127,62, 128,80, 129,81, 129,95, 133,31, 135,10, 138,58, 153,51, 168,01, 170,98, 172,83; LCMS MH = 464; Anal. Calc. para C26H29N3O5 0,5 H2O: C, 66,09; H, 6,40; N, 8,89, Observado: C, 65,95; H, 6,31; N, 8,74.
5.223 3-{4-[4-(4-ETOXIMETIL-PIPERON-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000179_0001
Etapa 1: A una solucion agitada de 5-amino-4-(4-(4-(clorometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,67 g, 1,54 mmol) en acetonitrilo (15 ml) en un bano de hielo, se le anadio 4-(etoximetil)piperidina (0,44 g, 3,09 mmol). Se agito a temperatura ambiente durante media una hora seguido de la adicion de un equivalente de DIPEA (0,26 ml), y la solucion se agito a temperatura ambiente durante una noche. A la mezcla de reaccion se anadieron 0,17 g de 4-(etoximetil)piperidina y 0,30 ml de DIPE. La mezcla se calento a 70 °C durante tres horas y despues se enfrio a temperatura ambiente. La solucion se evaporo para dar un aceite, que se purifico sobre una columna de gel de sflice (MeOH/CH2Cl2, gradiente del 1 % al 9 % en 50 min) para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-{4-[4-(4-etoximetil-piperidin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-butmco en forma de un solido espumoso, que se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 2: A una solucion agitada de 5-amino-4-(4-(4-((4-(etoximetil)piperidin-1-il)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,83 g, 1,54 mmol) en t Hf (10 ml) en un bano de hielo, se le anadio 2-metilpropan-2-olato potasico (0,52 g, 6,18 mmol). La mezcla se agito durante diez minutos y se inactivo con HCl 1 N (4 ml) para formar una solucion transparente y despues se neutralizo con bicarbonato sodico saturado (7 ml a pH = 8). La mezcla resultante se extrajo con acetato de etilo (2 x 20 ml) y se purifico sobre una columna de gel de sflice (MeOH/CH2Cl2, gradiente del 1 % al 9 % en 50 min) para dar 3-{4-[4-(4-etoximetil-piperidin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo 1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,45 g, rendimiento del 58 %); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 95/5 en 5 min, isocratica a 95/5 en 5 min (acetonitrilo/H3PO4 al 0,1 %), 5,38 min (96,7 %); p.f.: 168-170 °C; 1H RMN (DMSO-d6) 5 1,08 (t, J = 7,0 Hz, 3H, CH3), 1,12 - 1,23 (m, 2H, CH2), 1,40 - 1,54 (m, 1H, CHH), 1,55 - 1,67 (m, 2H, CH2), 1,81 -2,04 (m, 3H, CHH, CH2), 2,36 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,72 - 2,82 (m, 2H, CH2), 2,84 - 2,99 (m, 1H, CHH), 3,19 (d, J = 6,2 Hz, 2H, CH2), 3,34 - 3,48 (m, 4H, CH2, CH2), 4,19 - 4,47 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,2, 13,3 Hz, 1H, NCH), 5,22 (s, 2H, CH2), 7,26 - 7,37 (m, 4H, Ar), 7,39 - 7,54 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-de) 5 15,10, 22,36, 28,92, 31,20, 35,80, 45,10, 51,58, 52,93, 62,19, 65,44, 69,45, 74,83, 114,97, 115,23, 127,61, 128,80, 129,81, 129,95, 133,31, 135,07, 138,64, 153,53, 168,01, 170,98, 172,83; LCMS MH = 506; Anal. Calc. para C29H35N3O5 0,5 H2O: C, 67,68; H, 7,05; N, 8,17, Observado: C, 67,42; H, 7,20; N, 8,05.
5.224 3-(1-OXO-4-(4-((4-(TRIFLUOROMETIL)PIPERON-1-IL)METIL)BENCILOXI)ISOINDOUN-2-IL)PIPERON-2,6-DIONA
Figure imgf000179_0002
Etapa 1: 5-Amino-5-oxo-2-(1-oxo-4-(4-((4-(trifluorometil)piperidin-1-il)metil)benciloxi)isoindolin-2-il)pentanoato de terc-butilo
A una solucion de 5-amino-2-(4-(4-(clorometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de terc-butilo (450 mg, 0,95 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (0,42 ml, 2,38 mmol) en MeCN (9 ml), se le anadio clorhidrato de 4-(trifluorometil)piperidina (271 mg, 1,43 mmol). La mezcla se agito durante 5 h a 60 °C. La mezcla en bruto se repartio entre EtOAc (150 ml) y NaHCO31 N (30 ml). La capa ac. basica se lavo con mas cantidad de EtOAc (~100 ml). Las capas organicas se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron (Na2SO4), y se concentraron al vado para dar 5-amino-5-oxo-2-(1-oxo-4-(4-((4-(trifluorometil)piperidin-1-il)metil)benciloxi)isoindolin-2-il)pentanoato de terc-butilo en forma de un aceite (570 mg). LC/MS M+H = 590. El producto en bruto se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 2: 3-(1-Oxo-4-(4-((4-(trifluorometil)piperidin-1-il)metil)benciloxi) isoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona
A una solucion enfriada de 5-amino-5-oxo-2-(1-oxo-4-(4-((4-(trifluorometil)piperidin-1-il)metil)benciloxi)isoindolin-2-il)pentanoato de terc-butilo (561 mg, 0,95 mmol) en THF (10 ml) en un bano de hielo, se le anadio en una porcion KOfBu (128 mg, 1,14 mmol) en forma de un solido. El bano de hielo se retiro y la mezcla de reaccion se agito durante ~2 h a temperatura ambiente. Se anadio mas cantidad de KOfBu (28 mg) y la mezcla de reaccion se agito durante ~2 h. La mezcla de reaccion se enfrio en un bano de hielo y se inactivo con acido acetico (0,163 ml, 2,85 mmol). La mezcla se concentro al vado y el solido resultante se repartio entre EtOAc (100 ml) y NaHCO31 N (30 ml). La capa ac. se extrajo con EtOAc (50 ml), y la capa organica combinada se lavo con salmuera, se seco (Na 2 SO 4 ), y se concentro al vado para dar un solido de color blanco (~400 mg). El solido se trituro con Et 2 O (40 ml) con la ayuda de sonicacion, se recogio por filtracion, y se lavo con mas cantidad de Et 2 O. El solido se seco por succion y se realizo una segunda trituracion usando agua (120 ml). El solido restante se seco por succion y despues se seco en un horno de vado a 40 °C durante una noche para dar 3-(1-oxo-4-(4-((4-(trifluorometil)piperidin-1-il)metil)benciloxi)isoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (328 mg, rendimiento del 67 %): h PlC: Waters Symmetry Ci 8 , 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 20/80 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 6,16 min (96,5 %); p.f.: 178-180 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,34 - 1,55 (m, 2H, CHH, CHH), 1,66 - 1,82 (m, 2H, CHH, CHH), 1,87 - 2,05 (m, 3H, CHH, CHH, CHH), 2,14 -2,35 (m, 1H, CHH), 2,35 -2,48 (m, 1H, CHH), 2,52 - 2,65 (m, 1H, CHH), 2,78 - 3,00 (m, 3H, CHH, CHH, CHH), 3,48 (s, 2H, CH2), 4,25 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,42 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,0, 13,3 Hz, 1H, CHH), 5,17 -5,28 (m, 2H, CH2), 7,21 - 7,39 (m, 4H, Ar), 7,39 - 7,55 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 5 22,33, 24,19, 31,18, 38,35, 39,07, 45,06, 51,39, 51,55, 61,59, 69,39, 114,96, 115,20, 127,64, 127,82 (c, J = 278 Hz, CF3), 128,79, 129,80, 129,93, 133,30, 135,22, 138,11, 153,49, 167,99, 170,96, 172,81; Parte del cuadruplete (2 senales) que surgen de CF3C se enmascaran por pico de DMSO en torno a 540 ppm. LC/MS M+H = 516; Anal calc. para C27H28F3N3O4 0,35 H2O: C, 62,15; H, 5,54; N, 8,05; F, 10,92, Observado: C, 62,13; H, 5,48; N, 8,06; F, 9,84.
5.225 3-(4-(4-(((2R,6S)-2,6-DIMETILPIPERAZIN-1-IL)METIL)BENCILOXI)-1-OXOISOINDOUN-2-IL)PIPERON-2,6-DIONA
Figure imgf000180_0001
Etapa 1: A una solucion de 5-amino-2-(4-(4-(clorometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de terc-butilo (400 mg, 0,846 mmol) en acetonitrilo (10 ml) se le anadieron 3,5-dimetilpiperazin-1-carboxilato de (3R,5S)-terc-butilo (236 mg, 1,099 mmol), N,N-Diisopropiletilamina (328 mg, 2,54 mmol) y yoduro sodico (25 mg, 0,17 mmol). La mezcla formada se calento a 70 °C durante 2 dias. La mezcla de reaccion se concentro, el residuo se repartio entre acetato de etilo (50 ml) y bicarbonato sodico acuoso saturado (10 ml), la capa organica se lavo con agua y salmuera y se seco sobre MgSO 4 , y el disolvente se evaporo al vado, el residuo se purifico por ISCO (columna 40 g, gradiente de MeOH/CH 2 Cl 2 del 0 % al 5 % en 50 min) para dar 4-(4-((2-(5-amino-1-terc-butoxi-1,5-dioxopentan-2-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)bencil)-3,5-dimetilpiperazin-1-carboxilato de (3R,5S)-terc-butilo (480 mg, rendimiento del 87 %).
Etapa 2: A una mezcla de 4-(4-((2-(5-amino-1-terc-butoxi-1,5-dioxopentan-2-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)bencil)-3.5- dimetilpiperazin-1-carboxilato de (3R,5S)-terc-butilo (480 mg, 0,738 mmol) en THF se le anadio terc-butoxido potasico (83 mg, 0,738 mmol) a 0 °C. La mezcla se agito a 0 °C durante 10 minutos, se calento hasta la temperatura ambiente y se agito durante 4 horas. Se anadio mas cantidad de terc-butoxido potasico (25 mg, 0,22 mmol) y la mezcla se agito durante 2 horas mas. La reaccion se interrumpio con acido acetico (0,2 ml), se evaporo THF, y el residuo se repartio entre acetato de etilo (100 ml) y bicarbonato sodico acuoso saturado (10 ml). La fase organica se lavo con salmuera, se seco sobre MgSO 4 . El disolvente se retiro y el residuo se purifico por ISCO (columna 40 g, gradiente de MeOH/CH 2 Cl 2 del 0 % al 5 % en 50 min) para dar 4-(4-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)bencil)-3,5-dimetilpiperazin-1-carboxilato de (3R,5S)-terc-butilo (120 mg, rendimiento del 28 %); 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 50,94 (d, J = 6,0 Hz, 6H, CH3, CH3), 1,38 (s, 9H, CH3, CH3, CH3), 1,84 - 2,11 (m, 1H, CHH), 2,36 - 2,49 (m, 3H, CHH, CH2), 2,52 - 2,75 (m, 3H, CHH, CH2), 2,81 - 3,06 (m, 1H, CHH), 3,62 - 3,80 (m, 4H, CH2, CH, CH), 4,18 - 4,51 (m, 2H, CH2), 5,06 - 5,16 (m, 1H, CH), 5,18 - 5,26 (m, 2H, CH2), 7,29 - 7,52 (m, 7H, Ar), 10,84 - 11,10 (m, 1H, NH).
Etapa 3: A la mezcla de 4-(4-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)bencil)-3,5-dimetilpiperazin-1-carboxilato de (3R,5S)-terc-butilo (120 mg, 0,208 mmol) en diclorometano (40 ml) se le anadio una solucion de HCl en eter (2 N, 5 ml, 10 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 2 dias. El precipitado formado se separo por filtracion para dar 3-(4-(4-(((2R,6S)-2,6-dimetilpiperazin-1-il)metil)-benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2.6- diona en forma de un solido de color blanco (80 mg, rendimiento del 75 %); p.f.: 253-255 °C; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 5 1,16 - 1,40 (m, 6H, CH3, CH3), 1,97 (d, J = 5,3 Hz, 1H.CHH), 2,24 - 2,43 (m, 1H, CHH), 2,58 (d, J = 2,1 Hz, 1H, CHH), 2,71 - 3,06 (m, 3H, CH2, CHH), 3,07 - 3,59 (m, 4H, CH2, CH, CH), 4,04 - 4,54 (m, 4H, CH2, CH2), 5,02 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CH), 5,22 (s, 2H, CH2), 7,21 - 7,34 (m, 2H, Ar), 7,38 - 7,56 (m, 5H, Ar); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 5 15,82, 22,27, 31,03, 38,23, 45,25, 45,90, 50,32, 51,69, 68,96, 115,10, 115,39, 127,82, 129,70, 129,86, 129,97, 133,11, 136,86, 153,24, 168,25, 170,87, 172,94; LCMS MH-2HCl = 477; HPLC: Waters Xterra C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, Gradiente (CH3CN/HCOONH4 al 0,1 %) de 5/95 a 95/5 en 5 min, 95/510 min: tR = 4,21 (100 %); Anal. Calc. para C27H34N4O4Cl2 0,9 H2O: C, 57,33; H, 6,38; N, 9,90; Observado: C, 57,36; H, 6,36; N, 9,80.
5.226 3-(1-OXO-4-(4-((3-OXOPIPERAZIN-1-IL)METIL)BENCILOXI) ISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000181_0001
A una suspension de 5-amino-2-(4-(4-(clorometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de terc-butilo (450 mg, 0,951 mmol, preparacion descrita en el presente documento) en MeCN (9 ml) se le anadieron piperazin-2-ona (191 mg, 1,903 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (0,249 ml, 1,427 mmol). La mezcla se calento hasta 60 °C, se agito durante ~18 h y despues se dejo enfriar a temperatura ambiente. Se formo un solido tras la refrigeracion que se disperso mediante la adicion de DMF (3 ml) y sonicacion. La mezcla se enfrio en bano de hielo y se anadio en una porcion de KOfBu solido (299 mg, 2,66 mmol). Se anadio THF seco (2 ml) y el bano de hielo se retiro. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla se enfrio a 0 °C en un bano de hielo y despues se inactivo con acido acetico (254 pl, 4,44 mmol). La mezcla se concentro al vado y el residuo oleoso se repartio entre EtOAc (200 ml) y NaHCO 3 1 N (40 ml). El producto se repartio tanto en capas acuosas como organicas. Todas las capas se combinaron, se acidificaron con HCl, y se concentraron para dar un solido. El solido se trituro con abundante DMF, la mezcla se filtro, y los solidos sin disolver se lavaron con mas cantidad de DMF (volumen de filtrado total ~150 ml). El filtrado se concentro para dar un residuo oleoso que se disolvio de nuevo en DMF/HCl 1 N (6 ml/4 ml) y despues se purifico por inyeccion sobre una columna para HPLC preparativa C-18. El producto se eluyo con un gradiente de acetonitrilo/agua (acido formico al 0,1 % en ambas fases moviles, MeCN del 5 % al 30 % durante 20 minutos) y las fracciones se recogieron por activacion de masas. Las fracciones deseadas se combinaron y se concentraron al vado para dar 3-(1-oxo-4-(4-((3-oxopiperazin-1-il)metil)benciloxi)isoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanquecino (177 mg, rendimiento del 43 %): HPLC: Waters Symmetry C 18 , 5 pm, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 15/85 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 4,58 min (98,3 %); p.f.: 245-247 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,91 - 2,04 (m, 1H, CHH), 2,35 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,51 - 2,63 (m, 3H, CHH, CH2), 2,80 - 2,99 (m, 3H, CHH, CH2), 3,06 - 3,23 (m, 2H, CH2), 3,54 (s, 2H, CH2), 4,25 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,42 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CH), 5,24 (s, 2H, CH2), 7,21 -7,39 (m, 4H, Ar), 7,41 -7,56 (m, 3H, Ar), 7,74 (s, 1H, NH), 10,96 (s a, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 522,33, 31,16, 45,07, 48,35, 51,55, 56,62, 60,40, 69,38, 114,97, 115,22, 127,70, 128,91, 129,80, 129,95, 133,30, 135,49, 137,28, 153,48, 167,56, 167,99, 170,96, 172,81; LC/MS M+H = 463; Anal calc. para C25H26N4O5: C, 64,92; H, 5,67; N, 12,11, Observado: C, 61,40; H, 5,38; N, 11,45.
5.227 3-{4-[4-(4-DIMETILAMINO-PIPERIDIN-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000181_0002
Etapa 1: Preparacion de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-{4-[4-(4-isopropil-piperazin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-butmco
A una solucion de 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,674 g, 1,418 mmol) en acetonitrilo (15 ml) a temperatura ambiente se le anadio N,N-dimetilpiperidin-4-amina (0,545 g, 4,25 mmol). La mezcla se agito durante diez minutos y se evaporo para dar un aceite. Se agito en cloruro de metileno (30 ml) y agua (10 ml). La fase de cloruro de metileno se separo y se evaporo para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-{4-[4-(4-isopropil-piperazin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-butmco en forma de un aceite (0,76 g, rendimiento en bruto del 103 %). Se uso en la siguiente etapa sin purification adicional.
Etapa 2: Preparacion de 3-{4-[4-(4-Dimetilamino-piperidin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona
A una solucion agitada de 5-amino-4-(4-(4-((4-(dimetilamino)piperidin-1-il)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,76 g, 1,454 mmol) en THF (20 ml) en un bano de hielo se le anadio 2-metilpropan-2-olato potasico (0,32 g, 2,90 mmol). La mezcla se agito durante diez minutos, se anadio HCl 1 N (2 ml a pH = 3) y despues se neutralizo por bicarbonato sodico saturado (4 ml a pH = 7). La mezcla se agito con acetato de etilo (50 ml). La fase organica se separo y se lavo con salmuera (20 ml) y se concentro para dar un solido de color blanquecino. Se agito en acetonitrilo (4 ml) a 70 °C durante media hora y se filtro para dar 3-{4-[4-(4-Dimetilamino-piperidin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,18 g, rendimiento del 25 %); p.f. 209-211 °C; 1 H RMN(DMSO-d 6 ) 51,35 (cd, J = 3,8, 11,8 Hz, 2H, CH2), 1,61 - 1,76 (m, 2H, CH2), 1,82 - 2,08 (m, 4H, CH2, CHH, CH), 2,14 (s, 6H, 2CH3), 2,34 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,74 - 3,01 (m, 3H, CH2, CHH), 3,43 (s, 2H, CH2), 4,19 - 4,49 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,22 (s, 2H, CH2), 7,27 - 7,37 (m, 4H, Ar), 7,39 - 7,54 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-d6) 522,36, 28,05, 31,21, 41,49, 45,09, 51,58, 52,41, 61,61, 61,80, 69,45, 114,97, 115,21, 127,62, 128,77, 129,81, 129,95, 133,31, 135,09, 138,58, 153,51, 168,01, 170,96, 172,82. LC/MS (M+1)+ = 491; Anal calc. para C28H34N4O4 0,2H2O: C, 68,05; H, 7,02; N, 11,34, Observado: C, 67,88; H, 6,88; N, 11,19.
5.228 3-{4-[4-(4-ISOPROPIL-PIPERAZIN-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000182_0001
A la solucion en acetonitrilo de la mezcla (~1:1) de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,25 g, 0,564 mmol) y 3-(4-(4-(dorometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,225 g, 0,564 mmol) se le anadio N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,292 g, 2,256 mmol) seguido de 1-isopropilpiperazina (0,174 g, 1,354 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla turbia se agito a temperatura ambiente durante una noche. La suspension de color blanco se evaporo al vado para eliminar el acetonitrilo. El solido de color blanco resultante se agito en agua (40 ml) y cloruro de metileno (2 x 40 ml). Las fases combinadas de cloruro de metileno se lavaron de nuevo con agua (50 ml) y despues se evaporo al vado para dar un solido oleoso de color blanco, que se agito en eter dietflico (25 ml) durante una noche. La suspension se filtro para dar un solido de color blanquecino, que se mezclo con acetonitrilo (4 ml) y se agito en un bano de aceite a 50 °C durante media hora y despues la suspension se filtro para dar 3-{4-[4-(4-Isopropil-piperazin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,187 g, rendimiento del 34 %); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 95/5 en 5 min, isocratica a 95/5 en 5 min (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 3,94 min (95,8 %); p.f., 193-195 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 50,94 (d, J = 6,4 Hz, 6H, 2CH3), 1,91 -2,04 (m, 1H, CHH), 2,21 - 2,48 (m, 9H, 4CH2, CH), 2,53 - 2,67 (m, 2H, CHH, CHH), 2,82 - 2,99 (m, 1H, CHH), 3,44 (s, 2H, CH2), 4,20 -4,47 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,2, 13,1 Hz, 1H, NCH), 5,22 (s, 2H, CH2), 7,26 - 7,36 (m, 4H, Ar), 7,38 - 7,54 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN(DMSO-de) 5 18,22, 22,36, 31,21, 45,09, 47,95, 51,58, 53,04, 53,55, 61,81, 69,44, 114,97, 115,23, 127,62, 128,86, 129,81, 129,95, 133,31, 135,13, 138,24, 153,51, 168,01, 170,98, 172,83. Anal calc. para C28H34N4O4 0,1H 2 O: C, 68,30; H, 7,00; N, 11,38, Observado: C, 68,21; H, 6,61; N, 11,19.
5.229 3-{1-OXO-4-[4-(4-FENIL-PIPERAZIN-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000182_0002
A la solucion en CH3CN (15 ml) de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,50 g, 1,13 mmol) se le anadio N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,373 ml, 2,256 mmol) seguido de 1-fenilpiperazina (0,257 ml, 1,692 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla turbia se agito a temperatura ambiente durante una noche. El disolvente se evaporo y el solido de color blanco resultante se agito en agua (50 ml) y se extrajo con cloruro de metileno (2 x 80 ml). Las fases combinadas de cloruro de metileno se lavaron de nuevo con agua (50 ml) y salmuera (30 ml), se evaporaron para dar un solido de color blanco que se agito en acetonitrilo (8 ml) a 50 °C durante una hora, despues se filtro y se seco en un horno de vado para dar 3-{1-Oxo-4-[4-(4-fenil-piperazin-1-ilmetil)-benciloxi]-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,316 g, rendimiento del 53 %); p.f., 195-197 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 95/5 en 5 min, isocratica a 95/5 en 5 min (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 4,70 min (95,43 %). 1 H RMN (DMSO-de) 51,92 - 2,06 (m, 1H, CHH), 2,36 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,65 (m, 2H, CHH, CHH), 2,83 - 2,99 (m, 1H, CHH), 3,12 (t, J = 5,1 Hz, 4H, CH2, CH2), 3,50 - 3,62 (m, 2H, CH2), 4,20 - 4,48 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,20 -5,30 (m, 2H, CH2), 6,76 (t, J = 7,3 Hz, 1H, Ar), 6,91 (d, J = 7,9 Hz, 2H, Ar), 7,15 - 7,25 (m, 2H, Ar), 7,28 - 7,41 (m, 4H, Ar), 7,42 - 7,55 (m, 3H, Ar), 10,98 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 522,36, 31,21, 45,09, 48,18, 51,58, 52,52, 61,71, 69,41, 114,97, 115,24, 115,35, 118,76, 127,68, 128,86, 129,01, 129,82, 129,95, 133,32, 135,30, 137,93, 150,98, 153,50, 168,01, 170,98, 172,83. LC/MS (M+1)+ = 525; Anal calc. para C31H32N4O4: C, 70,97; H, 6,15; N, 10,68, Observado: C, 70,69; H, 6,01; N, 10,49.
5.230 3-{4-[4-(4-CICLOPROPANOSULFONIL-PIPERAZIN-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000183_0001
Etapa 1: Ester terc-butflico del acido 4-cidopropanosulfonil-piperazin-1-carboxflico
A la solution agitada de piperazin-1-carboxilato de terc-butilo (1,3 g, 6,98 mmol) en DCM anhidro (10 ml) se le anadieron TEA (1,167 ml, 8,38 mmol) y cloruro de ciclopropanosulfonilo (1,079 g, 7,68 mmol) a temperatura ambiente. Se formo un solido de color blanco y la mezcla se agito durante 2 h. La mezcla de reaction se diluyo por DCM (40 ml) y se lavo con agua (25 ml). La capa organica se seco por MgSO4 y se concentro para dar ester tercbutflico del acido 4-ciclopropanosulfonil-piperazin-1-carboxflico en forma de un solido de color blanco (2,3 g, rendimiento en bruto del 113 %). El compuesto se uso en la siguiente etapa sin purification adicional. LCMS MH = 291.
Etapa 2: Clorhidrato de 1-(ciclopropilsulfonil)piperazina
A la solucion agitada de 4-(ciclopropilsulfonil)piperazin-1-carboxilato de terc-butilo (2,3 g, 7,92 mmol) en DCM (Volumen: 10 ml) a temperatura ambiente se le anadio HCl en eter (11,88 ml, 23,76 mmol). La mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 22 h y se formo un solido durante la reaccion. La suspension se anadio por eter dietflico (20 ml) y se agito durante 10 min antes de filtrarse. El solido de color blanco se lavo con eter dietflico (2 x 15 ml) y se seco por suction para dar clorhidrato de 1-(ciclopropilsulfonil)piperazina en forma de un solido (1,51 g, rendimiento del 84 %); LCMS MH = 191; 1H RMN (DMSO-de) 50,85 - 1,09 (m, 4H, CH2, CH2), 2,63 - 2,81 (m, 1H, CH), 3,06 - 3,23 (m, 4H, CH2, CH2), 3,33 - 3,57 (m, 4H, CH2, CH2), 9,54 (s a, 2H, NH2Cl).
Etapa 3: 3-{4-[4-(4-Ciclopropanosulfonil-piperazin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona
A la suspension agitada de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (300 mg, 0,677 mmol) y clorhidrato de 1-(ciclopropilsulfonil)piperazina (230 mg, 1,015 mmol) en Acetonitrilo (Volumen: 10 ml) a temperatura ambiente se le anadio DIPEA (0,355 ml, 2,030 mmol). La suspension se volvio transparente y la mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante una reaccion adicional. La mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 20 h antes de anadirse EtOAc (50 ml) y NaHCO3 (ac. sat., 20 ml). La mezcla se extrajo y la capa organica se seco por MgSO4. La capa organica se concentro y el residuo se purifico por cromatografia sobre gel de sflice para dar 3-{4-[4-(4-Ciclopropanosulfonil-piperazin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (227 mg, rendimiento del 61 %); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 20/80, CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 4,09 min (99,9 %); p.f. 145-147 °C; 1H RMN (DMSO-de) 50,86 - 1,05 (m, 4H, CH2, CH2), 1,91 -2,04 (m, 1H, CHH), 2,34 -2,47 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 2,53 - 2,66 (m, 2H, CHH, CH), 2,81 - 3,01 (m, 1H, CHH), 3,11 - 3,24 (m, 4H, CH2, CH2), 3,52 (s, 2H, CH2), 4,25 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,42 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CHH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,27 - 7,38 (m, 4H, Ar), 7,40 - 7,56 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-d6) 5 3,75, 22,34, 24,46, 31,16, 45,06, 45,80, 51,55, 51,85, 61,20, 69,35, 114,94, 115,22, 127,67, 128,90, 129,80, 129,93, 133,28, 135,37, 137,69, 153,46, 167,97, 170,96, 172,81; LCMS MH = 553; Anal. Calc. para C28H32N4O6S 0,5H2O 0,15CH2Cl2: C, 58,86; H, 5,84; N, 9,75; Observado: C, 58,53; H, 5,47; N, 9,57.
5.231 3-{4-[4-(4-CICLOHEXANOSULFONIL-PIPERAZIN-1-ILMETIL) -BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000183_0002
Etapa 1: Ester terc-butflico del acido 4-ciclohexanosulfonil-piperazin-1-carboxflico
A la solucion agitada de piperazin-1-carboxilato de terc-butilo (450 mg, 2,416 mmol) en DCM anhidro (10 ml) se le anadieron cloruro de ciclohexanosulfonilo (485 mg, 2,66 mmol) y trietilamina (0,370 ml, 2,66 mmol). La solucion resultante se agito a temperatura ambiente durante 20 min y la reaccion se completo. La reaccion estaba completa. La mezcla de reaccion se diluyo por DCM (40 ml) y la mezcla se lavo por agua (20 ml) y salmuera (20 ml). La mezcla se extrajo y la capa organica se seco por MgSO4 y se concentro al vado para dar ester terc-butflico del acido 4-ciclohexanosulfonil-piperazin-1-carboxflico en forma de un solido de color blanquecino (750 mg, rendimiento en bruto del 93 %). El compuesto se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional; LCMS Mh (sin grupo boc) = 233.
Etapa 2: Clorhidrato de 1-ciclohexanosulfonil-piperazina
A la solucion de 4-(ciclohexilsulfonil)piperazin-1-carboxilato de terc-butilo (750 mg, 2,256 mmol) en DCM (5 ml) se le anadieron HCl (2 M en eter, 5 ml, 10,00 mmol) y eter dietflico (5,0 ml). La solucion resultante se agito a temperatura ambiente durante 4 dias y se concentro al vado. Al residuo se le anadio HCl (2 M en eter, 15 ml) y la suspension resultante se agito a temperatura ambiente durante una noche y la reaccion se completo. La mezcla de reaccion se filtro y el solido se lavo con eter (2 x 15 ml) para dar clorhidrato de 1-ciclohexanosulfonil-piperazina en forma de un solido de color blanquecino (450 mg, rendimiento del 74 %). El analisis por H RMN se ensayo para determinar el compuesto. 1H RMN (DMSO-de) 5 1,03 - 1,45 (m, 5H, CH2, CH2, CH), 1,54 - 1,69 (m, 1H, CH), 1,70 - 1,84 (m, 2H, CH2), 1,90 - 2,05 (m, 2H, CH2), 3,03 - 3,16 (m, 4H, CH2, CH2), 3,17 - 3,28 (m, 1H, CHH), 3,41 - 3,57 (m, 4H, CH2, CH2), 9,42 (s a, 2H, NH2CO; LCMS MH = 233.
Etapa 3: 3-{4-[4-(4-Ciclohexanosulfonil-piperazin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona
A la suspension agitada de clorhidrato de 1-(ciclohexilsulfonil)piperazina (273 mg, 1,01 mmol) en Acetonitrilo (8 ml) a temperatura ambiente se le anadio DIPEA (0,36 ml, 2,03 mmol). La suspension se volvio una solucion transparente inmediatamente. Y a la solucion transparente se le anadio 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (300 mg, 0,68 mmol). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 20 h. A la mezcla de reaccion se le anadieron EtOAc (50 ml) y NaHCO3 (sat. ac. 20 ml). La mezcla se extrajo y la capa organica se seco por MgSO4. La capa organica se concentro y el residuo se purifico por ISCO para dar 3-{4-[4-(4-Ciclohexanosulfonil-piperazin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (150 mg, rendimiento del 37 %); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 25/75, CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 5,03 min (99,9 %); p.f.: 245-247 °C; 1H RMN (DMSO-de) 51,03 -I , 21 (m, 1H, CHH), 1,21 - 1,45 (m, 4H, CH2, CH2), 1,59 (s a, 1H, CHH), 1,78 (s a, 2H, CH2), 1,97 (d, J = 7,6 Hz, 3H, CHH, CH2), 2,32 - 2,47 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 2,53 - 2,65 (m, 1H, CHH), 2,82 - 3,00 (m, 1H, CHH), 3,09 (t, J = I I , 4 Hz, 1H, CH), 3,17 -3,28 (m, 4H, CH2, CH2), 3,51 (s, 2H, CH2), 4,18 -4,32 (m, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,42 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CHH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,33 (d, J = 7,6 Hz, 4H, Ar), 7,40 -7,56 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-d6) 522,34, 24,43, 24,75, 26,18, 31,16, 45,06, 45,52, 51,55, 52,54, 59,29, 61,31, 69,35, 114,96, 115,22, 127,64, 128,92, 129,80, 129,93, 133,28, 135,35, 137,64, 153,48, 167,97, 170,96, 172,81; LCMS MH = 595; Anal. Calc. para C31H38N4O6S: C, 62,61; H, 6,44; N, 9,42; Observado: C, 62,63; H, 6,21; N, 9,56.
5.232 3-(4-((4-((4-(METILSULFONIL)PIPERIDIN-1-IL)METIL)BENCIL)OXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000184_0001
A una solucion transparente de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (200 mg, 0,451 mmol) en ACETONITRILO (5 ml, 96 mmol), se le anadio 4-(metilsulfonil)piperidina (110 mg, 0,677 mmol) y la suspension resultante se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se diluyo con EtOAc (10 ml), se agito durante 5 min y despues se filtro. El solido se lavo con EtOAc (2 ml) y agua (2 ml) y se seco adicionalmente en un horno de vado a 50 °C para dar 3-(4-((4-((4-(metilsulfonil)piperidin-1-il)metil)bencil)oxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (140 mg, rendimiento del 59 %): HPLC: Waters Symmetry C1s , 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 17/83 de CH 3 CN/H 3 PO 4 al 0,1 %, 3,92 min (98,2 %); p.f.: 173-175 °C; 1 H RMN (DM SO^) 51,47 - 1,69 (m, 2H, CHH, CHH), 1,84 - 2,07 (m, 5H, CHH, CHH, CHH, CHH, CHH), 2,35 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,63 (m, 1H, CHH), 2,83 - 2,97 (m, 6H, CHH, CHH, CHH, CH3), 2,98 - 3,11 (m, 1H, CH), 3,49 (s, 2H, CH2), 4,25 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 4,42 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,0, 13,1 Hz, 1H, CH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,33 (d, J = 7,2 Hz, 4H, Ar), 7,41 - 7,55 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 522,26, 24,34, 31,09, 37,25, 44,99, 51,38, 51,48, 58,64, 61,29, 69,31, 114,90, 115,15, 127,57, 128,71, 129,73, 129,86, 133,23, 135,17, 138,03, 153,41, 167,90, 170,89, 172,74; LCMS: MH = 526; Anal calc. para C27H31N 3 O6S 0,4 H2O: C, 60,86; H, 6,02; N, 7,89; S, 6,02; Observado: C, 60,79; H, 5,77; N, 7,78; S, 5,82.
5.233 3-{4-[4-(4-CICLOHEXANOCARBONIL-PIPERAZIN-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000185_0001
Etapa 1: Ester terc-butflico del acido 4-cidohexanocarbonil-piperazin-1-carboxflico
A la solucion agitada de piperazin-1-carboxilato de terc-butilo (1,207 g, 6,48 mmol) en DCM (Volumen: 15 ml) se le anadieron cloruro de ciclohexanocarbonilo (1 g, 6,82 mmol) y DIPEA (1,187 ml, 6,82 mmol). La solucion resultante se agito a temperatura ambiente durante 1,5 h antes de diluirse por DCM (20 ml). La mezcla se lavo con agua (20 ml) y salmuera (20 ml) respectivamente. La capa organica se seco por MgSO 4 y se concentro al vado para dar ester terc-butflico del acido 4-ciclohexanocarbonil-piperazin-1-carboxflico en forma de un solido de color blanco (1,92 g, rendimiento en bruto del 95 %); LCMS MH = 296.
Etapa 2: Clorhidrato de ciclohexil(piperazin-1-il)metanona
La suspension de 4-(ciclohexanocarbonil)piperazin-1-carboxilato de terc-butilo (1,92 g, 6,48 mmol) en HCl (2 M en eter, 25 ml) se agito a temperatura ambiente durante el fin de semana y se filtro. El solido de color blanco se lavo con eter dietflico (15 ml x 2) y se seco por succion para dar clorhidrato de ciclohexil(piperazin-1-il)metanona (1,5 g, rendimiento en bruto del 99 %). 1 H RMN (DMSO-de) 50,99 - 1,46 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 1,52 - 1,82 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 2,54 - 2,68 (m, 1H, CHH), 2,85 - 3,19 (m, 4H, CH2, CH2), 3,53 - 3,94 (m, 4H, CH2, CH2), 9,52 (s a, 2H, NHHCl); LCMS MH = 197.
Etapa 3: 3-{4-[4-(4-Ciclohexanocarbonil-piperazin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona
A la mezcla agitada de clorhidrato de ciclohexil(piperazin-1-il)metanona (239 mg, 1,03 mmol) en Acetonitrilo (10 ml) se le anadio DIPEA (0,345 ml, 1,97 mmol) seguido de la adicion de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (350 mg, 0,79 mmol) y se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se diluyo por EtOAc (70 ml) y se lavo con NaHCO3 (ac., sat. 25 ml) y salmuera (15 ml). La capa organica se seco por MgSO 4 y se filtro. El filtrado se concentro al vado y el residuo se purifico por cromatografia ISCO para dar 3-{4-[4-(4-Ciclohexanocarbonil-piperazin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (271 mg, rendimiento del 61 %); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 |jm, 1 ml/min, 240 nm, 25/75, (CH3CN/HsPO 4 al 0,1 %), 3,18 min (98,9 %); p.f.: 215-217 °C ; 1 H RMN (DMSO-de) 5 1,05 - 1,41 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 1,52 - 1,76 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 1,91 - 2,05 (m, 1H, CHH), 2,21 - 2,40 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 2,60 (s a, 2H, CHH, CHH), 2,82 - 3,01 (m, 1H, CHH), 3,37 - 3,54 (m, 6H, CH2, CH2, CH2), 4,26 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 4,42 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CHH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,33 (d, J = 7,4 Hz, 4H, Ar), 7,38 - 7,55 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 522,34, 25,10, 25,52, 29,08, 31,18, 44,74, 45,06, 51,55, 52,36, 53,18, 61,50, 69,36, 114,94, 115,20, 127,63, 128,97, 129,78, 129,93, 133,28, 135,31, 137,70, 153,46, 167,97, 170,96, 172,81, 173,22; LCMS MH = 559; Anal. Calc. para C 32 H 3 sN 4 O 5 +0,2H 2 O: C, 68,36; H, 6,88; N, 9,96; Observado: C, 68,39; H, 6,75; N, 9,89.
5.234 3-{4-[4-(4-BENZOIL-PIPERAZIN-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000185_0002
A una solucion agitada de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,422 g, 0,952 mmol) en acetonitrilo (10 ml) a temperatura ambiente se le anadieron clorhidrato de fenil(piperazin-1-il)metanona (0,324 g, 1,428 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,472 ml, 2,86 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. El disolvente se evaporo y el solido resultante se agito en agua (30 ml) y cloruro de metileno (50 ml). La fase org. se lavo con bicarbonato sodico saturado (2 x 20 ml) y salmuera (20 ml), se seco, se concentro para dar un solido espumoso de color amarillo claro (0,55 g) y se agito en eter dietflico (15 ml) a temperatura ambiente durante una noche. La suspension de eter se filtro, se agito en acetonitrilo (8 ml) a 55 °C durante una hora, despues se enfrio y se filtro para dar 3-{4-[4-(4-Benzoil-piperazin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3 dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,258 g, rendimiento del 49 %); p.f., 194-196 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 95/5 en 5 min, isocratica a 95/5 en 5 min (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 4,67 min (95,3 %). 1 H RMN (DMSO-de) 5 1,90 - 2,05 (m, 1H, CHH), 2,23 - 2,48 (m, 5H, 2CH2, CHH), 2,57 (d, J = 14,9 Hz, 1H, CHH), 2,81 - 3,01 (m, 1H, CHH), 3,18 - 3,44 (m, 3H, CH2, CH), 3,55 - 3,77 (m, 1H, CH), 4,18 - 4,48 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,2, 13,3 Hz, 1H, NCH), 5,17 - 5,28 (m, 2H, CH2), 7,25 - 7,54 (m, 12H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-de) 522,36, 31,20, 45,09, 41,53, 47,14, 51,58, 52,58, 61,51,69,38, 114,97, 115,23, 126,85, 127,68, 127,90, 128,38, 128,98, 129,44, 129,81, 129,94, 133,31, 135,36, 135,89, 137,68, 153,50, 167,99, 168,87, 170,87, 170,98, 172,73, 172,83. LC/MS (M+1)+ = 553; Anal calc. para C32H32N4O5 0,6 H2O: C, 68,22; H, 5,94; N, 9,94, Observado: C, 67,95; H, 5,68; N, 9,84.
5.235 3-{4-[4-(4-BENCIL-PIPERIDIN-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERON-2,6-DIONA
Figure imgf000186_0001
A una solucion agitada de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,44 g, 0,993 mmol) en acetonitrilo (10 ml) a temperatura ambiente se le anadieron 4-bencilpiperidina (0,230 ml, 1,290 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,328 ml, 1,985 mmol). La mezcla se volvio turbia en un par de minutos. Se agito a temperatura ambiente durante una noche. El disolvente se evaporo para dar un solido de color blanco, que se agito en agua (30 ml) y cloruro de metileno (50 ml). La fase org. se lavo con bicarbonato sodico saturado (2 x 20 ml) y salmuera (20 ml), se seco y se concentro para dar un solido de color amarillo claro (0,5 g). El solido se agito en acetonitrilo (8 ml) a 55 °C durante una hora y despues se filtro para dar 3-{4-[4-(4-Bencil-piperidin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanquecino (0,245 g, rendimiento del 46 %); p.f., 169-171 °C. Hp LC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 95/5 en 5 min, isocratica a 95/5 en 5 min (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 5,15 min (94,1 %). 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,08 - 1,29 (m, 2H, CH2), 1,38 - 1,62 (m, 3H, CH2, CH), 1,77 - 1,91 (m, 2H, CH2), 1,92 - 2,05 (m, 1H, CHH), 2,35 - 2,48 (m, 2H, CHH, CH), 2,57 (dd, J = 1,3, 11,7 Hz, 1H, CHH), 2,69 - 2,81 (m, 2H, CH2), 2,83 - 3,01 (m, 1H, CHH), 3,41 (s, 2H, CH2), 4,19 -4,49 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,21 (s, 2H, CH2), 7,10 -7,20 (m, 3H, Ar), 7,21 - 7,37 (m, 7H, Ar), 7,38 - 7,53 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 522,36, 31,21, 31,72, 37,32, 42,36, 45,09, 51,56, 53,18, 62,09, 69,45, 114,97, 115,21, 125,68, 127,62, 128,07, 128,73, 128,93, 129,81, 129,94, 133,31, 135,03, 138,66, 140,32, 153,51, 168,01, 170,98, 172,83. LC/MS (M+1)+ = 538; Anal calc. para C33H35N3O4: C, 73,72; H, 6,56; N, 7,82, Observado: C, 72,17; H, 6,08; N, 7,53.
5.236 3-{4-[4-(4-ETANOSULFONIL-PIPERAZIN-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000186_0002
Etapa 1: Ester terc-butflico del acido 4-etanosulfonil-piperazin-1-carboxflico
A la solucion agitada de piperazin-1-carboxilato de terc-butilo (1,0 g, 5,37 mmol) en DCM anhidro (10 ml) a temperatura ambiente se le anadieron cloruro de etanosulfonilo (0,56 ml, 5,91 mmol) y TEA (0,898 ml, 6,44 mmol). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 22,5 h antes de diluirse por dCm (40 ml). La mezcla se lavo con agua (20 ml) y salmuera (20 ml). La capa organica se concentro al vado para dar ester terc-butflico del acido 4-etano sulfonil-piperazin-1-carboxflico en forma de un aceite de color amarillo claro (1,7 g, rendimiento en bruto del 114 %). LCMS MH (sin boc) = 179.
Etapa 2: Clorhidrato de 1-(etilsulfonil)piperazina
A la solucion agitada de 4-(etilsulfonil)piperazin-1-carboxilato de terc-butilo (1,7 g, 6,11 mmol) en DCM (5 ml) se le anadio HCl (2 M en eter dietflico, 30 ml, 60,0 mmol). La mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 22,5 h y se filtro. El solido de color blanco se lavo con eter dietflico (2 x 15 ml) y se seco por succion para dar clorhidrato de 1-(etilsulfonil)piperazina en forma de un solido de color blanco (1,03 g , rendimiento del 79 %). El producto se uso en la siguiente etapa sin purification adicional. Datos espectrales de H RMN 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 5 1,21 (t, J = 7,4 Hz, 3H, CH3), 3,04 - 3,25 (m, 6H, CH2, CH2, CH2), 3,33 - 3,54 (m, 4H, CH2, CH2), 9,50 (s a, 2H, NHHCl); LCMS MH = 179
Etapa 3: 3-{4-[4-(4-Etanosulfonil-piperazin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona
A la suspension agitada de clorhidrato de 1-(etilsulfonil)piperazina (203 mg, 0,947 mmol) en Acetonitrilo (10 ml) se le anadio DIPEA (0,414 ml, 2,369 mmol) seguido de la adicion de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (350 mg, 0,790 mmol). La solucion transparente resultante se agito a temperatura ambiente durante una reaccion adicional. La mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 16 h antes de diluirse por EtOAc (70 ml) y NaHCO 3 (sat., ac., 20 ml). Se formo parte del solido en la mezcla. La mezcla se filtro y el filtrado se extrajo. La capa organica se seco por MgSO 4 y se filtro. El filtrado combinado con el solido se concentro y el residuo se purifico por cromatografia ISCO para dar 3-{4-[4-(4-Etanosulfonil-piperazin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (240 mg, rendimiento del 56 %).
HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 20/80, (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 3,82 min (99,9 %); p.f.: 135-137 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,20 (t, J = 7,4 Hz, 3H, CH3), 1,90 - 2,06 (m, 1H, CHH), 2,32 -2,48 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 2,60 (s a, 1H, CHH), 2,82 - 2,99 (m, 1H, CHH), 3,04 (c, J = 7,4 Hz, 2H, CH2), 3,11 - 3,21 (m, 4H, CH2, CH2), 3,52 (s, 2H, CH2), 4,25 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 4,42 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CHH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,26 - 7,38 (m, 4H, Ar), 7,40 - 7,55 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 5 7,40, 22,34, 31,16, 42,16, 45,06, 45,22, 51,55, 52,07, 61,23, 69,35, 114,96, 115,22, 127,66, 128,92, 129,80, 129,93, 133,30, 135,37, 137,64, 153,48, 167,97, 170,96, 172,81; LCMS MH = 541; Anal. Calc. para C27H32N4O6S: C, 59,98; H, 5,97; N, 10,36; Observado: C, 59,67; H, 5,93; N, 10,21.
5.237 3-(1-OXO-4-{4-[4-(PROPANO-2-SULFONIL)-PIPERAZIN-1-ILMETIL]-BENCILOXI}-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000187_0001
Etapa 1: Ester terc-butflico del acido 4-(propano-2-sulfonil)-piperazin-1-carboxflico
A la solucion agitada de piperazin-1-carboxilato de terc-butilo (1,0 g, 5,4 mmol) en DCM anhidro (10 ml) a temperatura ambiente se le anadieron cloruro de propano-2-sulfonilo (0,7 ml, 5,9 mmol) y TEA (0,89 ml, 6,44 mmol).
La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 16 h antes de diluirse por DCM (40 ml), que se lavo con agua (20 ml) y salmuera (20 ml). La capa organica se concentro al vado para dar ester terc-butflico del acido 4-(Propano-2-sulfonil)-piperazin-1-carboxflico en forma de un solido de color pardo claro (1,63 g, rendimiento en bruto del 104 %). El producto en bruto se uso en la siguiente etapa sin purification adicional; LCMS MH = 293.
Etapa 2: Clorhidrato de 1-(isopropilsulfonil)piperazina
A la solucion agitada de 4-(isopropilsulfonil)piperazin-1-carboxilato de terc-butilo (1,63 g, 5,6 mmol) en DCM (5 ml) se le anadio HCl (2 M en eter dietflico, 30 ml, 60,0 mmol). La mezcla de reaccion resultante se agito a temperatura ambiente durante 21 h antes de filtrarse. El solido de color blanco se lavo con eter dietflico (2 x 15 ml) y se seco por suction para dar clorhidrato de 1-(isopropilsulfonil)piperazina en forma de un solido de color blanco (0,84 g, rendimiento en bruto del 66 %). El producto se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional; 1H RMN (DMSO-d6) 5 1,23 (d, J = 6,8 Hz, 6H, CH3, CH3), 2,99 - 3,21 (m, 4H, CH2, CH2), 3,28 - 3,57 (m, 5H, CH, CH2, CH2), 9,35 -9,66 (m, 2H, NHHCl); LCMS MH = 179.
Etapa 3: 3-(1-Oxo-4-{4-[4-(propano-2-sulfonil)-piperazin-1-ilmetil]-benciloxi}-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-piperidin-2,6-diona
A la suspension agitada de clorhidrato de 1-(isopropilsulfonil)piperazina (217 mg, 0,9 mmol) en Acetonitrilo (10 ml) se le anadio DIPEA (0,4 ml, 2,4 mmol) seguido de la adicion de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (350 mg, 0,8 mmol). La solucion transparente resultante se agito a temperatura ambiente durante 17 h antes de anadirse EtOAc (70 ml) y NaHCO3 (sat., ac., 20 ml). Se formo parte del solido en la mezcla.
La mezcla se filtro y el filtrado se extrajo. La capa organica se seco por MgSO4 y se filtro. El filtrado combinado con el solido se concentro y el residuo se purifico por ISCO para dar 3-(1-Oxo-4-{4-[4-(propano-2-sulfonil)-piperazin-1-ilmetil]-benciloxi}-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (249 mg, rendimiento del 57 %). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 20/80, (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 5,03 min (99,2 %); p.f.: 233-235 °C;
1H RMN (DMSO-d6) 51,21 (d, J = 6,8 Hz, 6H, CH3, CH3), 1,91 - 2,06 (m, 1H, CHH), 2,34 - 2,48 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 2,54 (s a, 1H, CHH), 2,82 - 3,00 (m, 1H, CHH), 3,17 - 3,28 (m, 4H, CH2, CH2), 3,28 - 3,37 (m, 1H, CH), 3,52 (s, 2H, CH2), 4,25 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,42 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CHH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,33 (d, J = 7,6 Hz, 4H, Ar), 7,39 - 7,54 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 5 16,41, 22,34, 31,16, 45,06, 45,60, 51,55, 51,62, 52,52, 61,33, 69,35, 114,94, 115,22, 127,64, 128,94, 129,80, 129,93, 133,28, 135,37, 137,60, 153,48, 167,97, 170,96, 172,81; LCMS MH = 555; Anal. Calc. para C28H34N4O6S: C, 60,63; H, 6,18; N, 10,10; Observado: C, 60,41; H, 6,03; N, 9,94.
5.238 3-(4-{4-{4-(1-HIDROXM-METIL-ETIL)-PIPERON-1-ILMETIL]-BENCILOXI}-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000188_0001
A la solution en CH3CN de la mezcla 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,50 g, I , 12 mmol) se le anadio DIPEA (0,394 ml, 2,256 mmol) seguido de 2-(piperidin-4-il)propan-2-ol (0,194 g, 1,354 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaction se concentro y despues se extrajo usando agua (20 ml) y DCM (20 ml). La capa organica se concentro y el solido resultante se cristalizo en 2 ml de CH3CN para dar 3-(4-{4-[4-(1-Hidroxi-1-metil-etil)-piperidin-1-ilmetil]-benciloxi}-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-piperidin-2,6-diona (240 mg ,42 %). p.f.: 160-162 °C. LC-MS m/e = 506. HPLC Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometros, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 5/95 a 5/95 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 % en H 2 O durante 5 min y mantenimiento a 95/5 durante 5 min: 4,78 min (95,2 %). 1 H RMN (DMSO-de) 50,94 - 1,06 (m, 6H, CH3, CH3), 1,07 - 1,33 (m, 3H, CH, CH2), 1,62 (d, J = 10,8 Hz, 2H, CH2), 1,82 (t, J = 10,9 Hz, 2H, CH2), 1,91 - 2,07 (m, 1H, CHH), 2,35 -2,47 (m, 1H, CHH), 2,57 (d, J = 18,3 Hz, 1H, CHH), 2,84 (d, J = I I , 7 Hz, 2H, CH2), 2,89 - 2,99 (m, 1H, CHH), 3,42 (s, 2H, CH2), 4,02 (s, 1H, OH), 4,18 - 4,47 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,0, 13,1 Hz, 1H, NCH), 5,22 (s, 2H, CH2), 7,23 - 7,38 (m, 4H, Ar), 7,39 - 7,58 (m, 3H, Ar), 10,96 (s, 1H, Ar) 13 C RMN (DMSO-de) 5 22,33, 26,54, 26,86, 31,18, 45,07, 46,94, 51,55, 53,82, 62,10, 69,44, 70,19, 114,96, 115,19, 127,58, 128,75, 129,78, 129,93, 133,28, 135,00, 138,71, 153,51, 167,99, 170,96, 172,81; Anal calc. para C 29 H 35 N 3 O 5 +0,2 H2O % de C: 68,40; % de H: 7,01; % de N: 8,25; Observado: % de C: 68,20; % de H: 7,05; % de N: 8,12.
5.239 3-{1-OXO-4-[4-(3,4,5,6-TETRAHIDRO-2H-[4,4']BIPIRONIL-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000188_0002
A la solucion en CH3CN de mezcla de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,36 g, 0,82 mmol) se le anadieron N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,284 ml, 1,624 mmol) y 4-(piperidin-4-il)piridina (0,158 g, 0,975 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche y despues se concentro en un evaporador rotatorio. El solido resultante se anadio agua 30 ml y se agito a temperatura ambiente durante 2 horas. La suspension se filtro y despues se recristalizo en CH3CN (3 ml) para dar 3-{1-Oxo-4-[4-(3,4,5,6-tetrahidro-2H-[4,4']bipiridinil-1-ilmetil)-benciloxi]-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco. p.f.: 198-200 °C. LC-MS m/e = 525. HPLC Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometres, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 5/95 a 5/95 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 % en H 2 O durante 5 min y mantenimiento a 95/5 durante 5 min: 4,36 min (96 %). 1 H RMN (DMSO^) 51,48 - 1,86 (m, 4H, CH2, CH2), 1,90 -2,17 (m, 3H, CH2, CHH), 2,32 -2,44 (m, 0H, CHH), 2,51 - 2,65 (m, 2H, CHH, CH), 2,80 - 3,08 (m, 3H, CHH, CH2), 3,41 - 3,63 (m, 2H, CH2), 4,15 - 4,57 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,0, 13,1 Hz, 1H, NCH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,12 - 7,70 (m, 9H, Ar), 8,45 (dd, J = 1,5, 4,5 Hz, 2H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 522,36, 31,20, 31,98, 40,86, 45,09, 51,58, 53,21, 69,42, 114,98, 115,23, 122,31, 127,65, 129,01, 129,82, 129,95, 133,32, 135,25, 149,56, 153,51, 168,01, 170,98, 172,83; Anal calc. para C 31 H 32 N 4 O 4 +0,3H 2 O % de C: 70,25; % de H: 6,20; % de N: 10,57; % observado de C: 70,05; % de H: 5,92; % de N: 10,25.
5.240 3-{4-[4-(4-BENCENOSULFONIL-PIPERAZIN-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000189_0001
Etapa 1: Ester terc-butflico del acido 4-bencenosulfonil-piperazin-1-carboxflico
A la solution agitada de piperazin-1-carboxilato de terc-butilo (1,0 g, 5,4 mmol) en DCM anhidro (10 ml) a temperatura ambiente se le anadieron cloruro de bencenosulfonilo (0,75 ml, 5,9 mmol) y TEA (0,90 ml, 6,4 mmol). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 18 h antes de diluirse por EtOAc (40 ml) y NaHCO3 (ac. sat., 15 ml). La mezcla se extrajo y la capa organica se lavo con salmuera (20 ml) y se seco por MgSO4. La capa organica se concentro al vatio para dar ester terc-butflico del acido 4-bencenosulfonil-piperazin-1-carboxflico en forma de un solido de color blanco (2,0 g, rendimiento en bruto del 114 %). Se uso en la siguiente etapa sin purification adicional; LCMS MH (226, perdida del grupo BOC durante el analisis por LCMS).
Etapa 2: Clorhidrato de 1-(fenilsulfonil)piperazina
A la solucion agitada de 4-(fenilsulfonil)piperazin-1-carboxilato de terc-butilo (en bruto) (1,75 g, 5,4 mmol) en DCM (4 5 ml) se le anadio HCl (2 M en eter dietflico) (20 ml, 40,0 mmol). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 3 dias antes de filtrarse y el solido de color blanco se lavo con eter (2 x 30 ml) y se seco por suction para dar clorhidrato de 1-(fenilsulfonil)piperazina en forma de un solido de color blanco (1,4 g , rendimiento en bruto del 100 %). El compuesto se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional. 1H Rm N (DMSO-d6) 53,16 (s, 8H, CH2, CH2, CH2, CH2), 7,61 - 7,84 (m, 5H, Ar), 9,42 (s a, 2H, NHHCl); LCMS MH = 227.
Etapa 3: 3-{4-[4-(4-Bencenosulfonil-piperazin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona
A la suspension agitada de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (360 mg, 0,8 mmol) en Acetonitrilo (10 ml) se le anadieron DIPEA (0,43 ml, 2,4 mmol) y clorhidrato de 1-(fenilsulfonil)piperazina (256 mg, 0,98 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 21 h antes de anadirse EtOAc (50 ml) y NaHCO3 (sat., ac., 20 ml). La mezcla se extrajo y la capa organica se seco por MgSO4. La capa organica se concentro y el residuo se purifico por ISCO. El producto solido se purifico adicionalmente agitandose en DCM (5 ml) y eter dietflico (30 ml) para dar 3-{4-[4-(4-bencenosulfonil-piperazin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (392 mg, rendimiento del 82 %). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 |jm, 1 ml/min, 240 nm, 25/75, (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 3,79 min (99,0 %); p.f.: 220-222 °C; 1H RMN (DMSO-d6) 51,90 - 2,04 (m, 1H, CHH), 2,33 -2,47 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 2,54 - 2,63 (m, 1H, CHH), 2,80 - 2,94 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 3,46 (s, 2H, CH2), 4,23 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,40 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,0, 13,3 Hz, 1H, CHH), 5,20 (s, 2H, CH2), 7,14 -7,54 (m, 7H, Ar), 7,56 - 7,86 (m, 5H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-de) 522,33, 31,16, 45,04, 45,92, 51,37, 51,53, 60,98, 69,32, 114,93, 115,20, 127,51, 127,63, 128,78, 129,36, 129,78, 129,90, 133,23, 133,28, 134,68, 135,33, 137,53, 153,45, 167,97, 170,95, 172,81; LCMS MH = 589; Anal. Calc. para C31H32N4OeS 0,4H2O: C, 62,49; H, 5,55; N, 9,40; Observado: C, 62,59; H, 5,40; N, 9,33.
5.241 3-{4-[4-(4-HIDROXI-4-FENIL-PIPERIDIN-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000189_0002
A la solucion en CH3CN (10 ml) de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,28 g, 0,62 mmol) se le anadio N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,22 ml, 1,24 mmol) seguido de 4-fenilpiperidin-4-ol (0,13 g, 0,76 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se concentro en un evaporador rotatorio y el solido resultante se extrajo usando CH 2 Cl 2 y agua. La capa organica se concentro para dar un solido que se recristalizo en CH3CN (3 ml) para dar 3-{4-[4-(4-Hidroxi-4-fenil-piperidin-1-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (154 mg, 44 %). Punto de fusion: 140-142 °C. LC-MS m/e = 540. HPLC Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometros, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 5/95 a 5/95 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 % en H 2 O durante 5 min y mantenimiento a 95/5 durante 5 min: 5,02 min (95 %). 1 H RMN (DMSO-de) 51,58 (d, J = 13,0 Hz, 2H, CH2), 1,80 -2,10 (m, 3H, CH2,CHH), 2,32 - 2,43 (m, 3H, CHH" CH2), 2,60 (s a, 3H, CHH, CH2), 2,79 - 3,06 (m, 1H, CHH), 3,57 (s a, 2H, CH2), 4,04 - 4,56 (m, 2H, CHH), 4,80 (s a, 1H, OH), 5,11 (d, J = 8,1 Hz, 1H, NCH), 5,24 (s, 2H, CH2), 7,06 - 7,66 (m, 12H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-de) 522,33, 31,18, 31,25, 45,06, 48,89, 51,55, 69,41, 114,94, 115,20, 124,71, 126,13, 127.63, 127,77, 129,80, 129,93, 133,28, 153,49, 161,07, 167,99, 170,96, 172,81. Anal calc. para C 32 H 33 N 3 O 5 +0,6H 2 O % de C: 69,64; % de H: 5,70; % de N: 7,27; % observado de C: 69,83; % de H: 6,26; % de N: 7.63.
5.242 2-(2,6-DIOXOPIPERIDIN-3-IL)-4-((4-((4-ISOPROPILPIPERIDIN-1-IL)METIL)BENCIL)OXI)ISOINDOLIN-1,3-DIONA
Figure imgf000190_0001
Se suspendio 4-(4-(bromometil)benciloxi)-2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)isoindolin-1,3-diona (250 mg, 0,547 mmol) en MeCN seco (10 ml). A la suspension se le anadio 4-isopropilpiperidina (139 mg, 1,093 mmol) y la mezcla se agito a temperatura ambiente dando como resultado una solucion transparente en varios minutos. Despues de ~1 h, se formo un precipitado espeso. Los volatiles se retiraron al vado y el residuo se repartio entre NaHCO3 ac. 1 N (40 ml) y EtOAc (~100 ml). La capa acuosa se saturo con Na2CO3 solido y despues se extrajo una vez mas con EtOAc (~50 ml). La capa organica combinada se lavo con salmuera, se seco (Na2SO4), y se concentro al vado para dar un solido de color amarillento. El solido se trituro con agua, se filtro y se lavo con mas cantidad de agua (~200 ml, total). El solido restante se lavo con hexanos (~1500 l, total), se seco por succion, y despues se seco adicionalmente en un horno de vado a 60 °C para dar 2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-4-((4-((4-isopropilpiperidin-1-il)metil)bencil)-oxi)isoindolin-1,3-diona en forma de un solido de color amarillo palido (220 mg, 80 %): HPLC: Waters Symmetry C1s, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 25/75 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 6,86 min (96,4 %). p.f.: 220-222 °C; 1H RMN (DMSO-d6) 50,82 (s, 3H, CH3), 0,85 (s, 3H, CH3), 0,89 - 1,06 (m, 1H, CHH), 1,08 - 1,26 (m, 2H, CHH, CHH, CHH), 1,31 -I, 46 (m, 1H, CHH), 1,48 - 1,66 (m, 2H, CH2), 1,85 (t, J = 10,7 Hz, 2H, CH2), 1,95 -2,13 (m, 1H, CHH), 2,52 -2,66 (m, 2H, CHH, CHH), 2,72 - 3,00 (m, 3H, CHH, CHH, CHH), 3,42 (s, 2H, CH2), 5,09 (dd, J = 5,5, 12,8 Hz, 1H, CH), 5,35 (s, 2H, CH2), 7,25 - 7,38 (m, 2H, Ar), 7,40 - 7,52 (m, 3H, Ar), 7,60 (d, J = 8,5 Hz, 1H, Ar), 7,74 - 7,92 (m, 1H, Ar), I I , 09 (s a, 1H, NH); 13C RMN (DMSO^) 5 19,64, 21,93, 28,86, 30,90, 31,92, 41,84, 48,73, 53,65, 62,15, 69,98, 115,48, 116,56, 120,21, 127,20, 128,78, 133,26, 134,52, 136,97, 138,65, 155,53, 165,29, 166,75, 169,87, 172,71; LCMS: MH = 504; Anal calc. para C29H33N3O5 0,16 H2O; C, 68,77; H, 6,63; N, 8,30; Observado: C, 68,77; H, 6,88; N, 8,22.
5.243 3-{4-[4-(1-BENCIL-PIPERIDIN-4-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000190_0002
Etapa 1: Preparacion de ester terc-butflico del acido 4-{4-[2-(1-carbamoil-3-metoxicarbonil-propil)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-bencil}-piperidin-1-carboxflico
Se anadio trifenil fosfeno (soportado con polimero, 1,6 mmol/g, 3,3 g) a una suspension de color blanco agitada de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (2,444 g, 8,36 mmol) en THF (100 ml) a 0 °C.
Despues de diez minutos, se anadio diazen-1,2-dicarboxilato de diisopropilo (2,470 ml, 12,54 mmol) y se agito durante 40 minutos y despues se anadio 4-(4-(hidroximetil)bencil)piperidin-1-carboxilato de terc-butilo (3,32 g, 10,87 mmol) en THF (20 ml). La mezcla se agito a 0 °C y se calento hasta la temperatura ambiente durante una noche. La suspension se filtro, se aclaro con MeOH (2 x 20 ml), CH 2 Cl 2 (2 x 30 ml), y el filtrado se evaporo para dar un aceite, que se disolvio en CH 2 Cl 2 (80 ml), se lavo con NaHCO 3 sat. (50 ml), se concentro y se purifico por columna de gel de sflice para dar ester terc-butflico del acido 4-{4-[2-(1-Carbamoil-3-metoxicarbonil-propil)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-bencil}-piperidin-1-carboxflico en forma de un aceite espumoso (2,2 g, rendimiento del 45 %). Se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 2: Preparation de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[1-oxo-4-(4-piperidin-4-ilmetil-benciloxi)-1,3-dihidroisoindol-2-il]-butmco
A una solution agitada de 4-(4-((2-(1-amino-5-metoxi-1,5-dioxopentan-2-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)bencil)piperidin-1-carboxilato de terc-butilo (2,2 g, 3,80 mmol) en CH 2 Cl 2 (l0 ml) a temperatura ambiente se le anadio hidrogenocloruro (2 M en eter) (10 ml, 38,0 mmol). Despues de cuatro horas, la suspension se filtro, se aclaro con eter y el solido de color amarillo resultante se seco para dar 2,02 g, rendimiento en bruto del 111 % (sal HCl). El producto se uso mas tarde en la siguiente etapa sin purification adicional.
Etapa 3: Preparacion de ester metflico del acido 4-{4-[4-(1-bencil-piperidin-4-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidroisoindol-2-il}-4-carbamoil-butmco
A una mezcla agitada de clorhidrato de 5-amino-5-oxo-4-(1-oxo-4-(4-(piperidin-4-ilmetil)benciloxi)isoindolin-2-il)pentanoato de metilo (0,321 g, 0,622 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,411 ml, 2,488 mmol) en acetonitrilo (10 ml) se le anadio (bromometil)benceno (0,074 ml, 0,622 mmol). Despues de 15 minutos, el disolvente se evaporo para dar un aceite, que se agito en agua (20 ml), NaHCO 3 sat. (10 ml), y acetato de etilo (30 ml). La fase org. se seco y se evaporo para dar un aceite (0,33 g, rendimiento del 93 %). Se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 4: Preparacion de 3-{4-[4-(1-Bencil-piperidin-4-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il} -piperidin-2,6-diona
A una solucion agitada de 5-amino-4-(4-(4-((1-bencilpiperidin-4-il)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,33 g, 0,579 mmol) en THF (8 ml) en un bano de hielo-agua se le anadio 2-metilpropan-2-olato potasico (0,065 g, 0,579 mmol). Despues de diez minutos, la mezcla se inactivo con HCl 1 N (a pH = 1~2), se neutralizo con NaHCO 3 sat. (a pH = 7~8), y se agito en agua (10 ml) y CH 2 Cl 2 (30 ml). La fase organica se lavo con agua (20 ml) y salmuera (20 ml), se seco sobre Na 2 SO 4 y se concentro para dar un aceite, que se purifico sobre una columna de gel de sflice para dar 3-{4-[4-(1-Bencil-piperidin-4-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanquecino (121 mg, rendimiento del 39 %); p.f., 110-112 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, isocratica a 27/73 en 10 min (CH 3 CN/H 3 PO 4 al 0,1 %): 5,48 min (96,8 %). 1 H RMN (DMSO-de) 51,10 - 1,30 (m, 2H, CH2), 1,39 - 1,60 (m, 3H, CH2, CHH), 1,84 (t, J = 11,4 Hz, 2H, CH2), 1,92 - 2,03 (m, 1H, CHH), 2,35 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,57 (d, J = 10,8 Hz, 1H, CHH), 2,69 -2,81 (m, 2H, CH2), 2,82 - 3,00 (m, 1H, CHH), 3,40 (s, 2H, CH2), 4,18 - 4,46 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,19 (s, 2H, CH2), 7,13 - 7,35 (m, 9H, Ar), 7,38 (d, J = 8,1 Hz, 2H, Ar), 7,44 - 7,52 (m, 1H, Ar), 10,96 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-de) 5 22,36, 31,20, 31,72, 37,30, 42,04, 45,09, 51,56, 53,17, 62,39, 69,49, 114,95, 115,19, 126,72, 127,68, 128,06, 128,61, 129,06, 129,81, 129,94, 133,29, 133,95, 138,72, 140,26, 153,54, 168,01, 170,96, 172,82. LC/MS m/e = 538. Anal calc. para C 33 H3eN 3 O 4 (+0,6 H2O): C, 72,27; H, 6,65; N, 7,66, Observado: C, 72,10; H, 6,38; N, 7,49.
5.244 2-(2,6-DIOXOPIPERIDIN-3-IL)-4-((4-((4-FENILPIPERIDIN-1-IL)METIL)BENCIL)OXI)ISOINDOLIN-1,3-DIONA
Figure imgf000191_0001
A una mezcla de 4-(4-(bromometil)benciloxi)-2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)isoindolin-1,3-diona (250 mg, 0,547 mmol) y 4-fenilpiperidina (93 mg, 0,574 mmol) en MeCN seco (10 ml), se le anadio DIEA (0,143 ml, 0,820 mmol) y la suspension resultante se agito a temperatura ambiente. Despues de ~20 h mas se anadio 4-fenilpiperidina (10 mg, 0,06 mmol) y la agitacion continuo durante 1 dia. Para empujar a la reaccion a finalizar, se anadio mas cantidad de DIEA (100 ^l) y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion en bruto se trato con mas cantidad de DIEA (0,143 ml) y despues se calento a 80 °C durante ~1 h. La mezcla se dejo enfriar lentamente con agitacion suave. Despues de 2 h, la suspension se filtro en un embudo sinterizado medio con succion. El solido residual el vial de reaccion se aclaro en un embudo con MeCN mmimo (~1 ml). La torta solida en el embudo se lavo con agua (3 x 10 ml). El solido restante se seco por succion, despues se seco adicionalmente en un horno de vado a 60 °C durante 4 h para dar 2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-4-((4-((4-fenilpiperidin-1-il)metil)bencil)-oxi)isoindolin-1,3-diona en forma de un solido de color blanco (254 mg, 86 %): Hp LC: Waters Symmetry C18, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 30/70 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 3,34 min (99,6 %); p.f.: 142-144 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,52 - 1,83 (m, 4H, CHH, CHH, CHH, CHH), 1,93 - 2,17 (m, 3H, CHH, CHH, CHH), 2,39 - 2,68 (m, 3H, CHH, CHH, CHH), 2,77 - 3,02 (m, 3H, CHH, CHH, CHH), 3,51 (s, 2H, CH2N), 5,09 (dd, J = 5,4, 12,7 Hz, 1H, CH), 5,36 (s, 2H, CH2), 7,08 - 7,33 (m, 5H, Ar), 7,33 - 7,42 (m, 2H, Ar), 7,47 (d, J = 7,9 Hz, 3H, Ar), 7,61 (d, J = 8,5 Hz, 1H, Ar), 7, 83 (dd, J = 7,4, 8,5 Hz, 1H, Ar), 11,11 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 521,95, 30,90, 33,06, 41,81, 48,73, 53,60, 62,10, 69,98, 115,48, 116,56, 120,21, 125,92, 126,66, 127,23, 128,25, 128,92, 133,26, 134,63, 136,99, 138,45, 146,23, 155,55, 165,29, 166,75, 169,87, 172,72; LCMS: MH = 538; Anal calc. para C32H31N3O5 0,5 H2O: C, 70,31; H, 5,90; N, 7,69; Observado: C, 70,39; H, 5,71; N, 7,65.
5.245 2-(2,6-DIOXOPIPERON-3-IL)-4-((4-((4-(METILSULFONIL)PIPERON-1-IL)METIL)BENCIL)OXI)ISOINDOUN-1,3-DIONA
Figure imgf000192_0001
A una mezcla de 4-(4-(bromometil)benciloxi)-2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)isoindolin-1,3-diona (250 mg, 0,547 mmol) y 4-(metilsulfonil)piperidina (98 mg, 0,601 mmol) en MeCN (10 ml, 191 mmol) se le anadio DiEa (0,143 ml, 0,820 mmol) y la mezcla resultante (suspension de color blanco) se agito a temperatura ambiente. A la mezcla de reaccion se le anadio DIEA (0,143 ml, 0,820 mmol) y la suspension se calento a 80 °C, se mantuvo a esa temperatura durante ~1 h, y despues se dejo enfriar a temperatura ambiente lentamente con agitacion suave. Despues de 2 h, la suspension se filtro. La torta solida en el embudo se lavo con agua (3 x 10 ml). El solido restante se seco por succion, despues se seco adicionalmente en un horno de vado a 60 °C durante 4 h para dar 2-(2,6-Dioxopiperidin-3-il)-4-((4-((4-(metilsulfonil)piperidin-1-il)metil)bencil)oxi)isoindolin-1,3-diona en forma de un solido de color blanco (270 mg, rendimiento del 92 %): HPlC: Waters Symmetry C1s, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 18/82 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 4,85 min (98,9 %); p.f.: 204-206; °C 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,60 (cd, J = 4,0, 12,6 Hz, 2H, CHH, CHH), 1,88 - 2,12 (m, 4H, CHH, CHH, CHH, CHH), 2,41 - 2,66 (m, 3H, CHH, CHH, CHH), 2,81 - 2,97 (m, 6H, CH3, CHH, CHH, CHH), 2,98 - 3,13 (m, 1H, CH), 3,49 (s, 2H, CH2), 5,09 (dd, J = 5,4, 12,7 Hz, 1H, CH), 5,35 (s, 2H, CH2), 7,34 (d, J = 8,1 Hz, 2H, Ar), 7,47 (dd, J = 2,0, 7,6 Hz, 3H, Ar), 7,60 (d, J = 8,5 Hz, 1H, Ar), 7,83 (dd, J = 7,4, 8,3 Hz, 1H, Ar), 11,11 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 521,95, 24,43, 30,90, 37,30, 48,73, 51,43, 58,73, 61,36, 69,95, 115,50, 116,56, 120,19, 127,29, 128,82, 133,26, 134,76, 136,97, 138,07, 155,53, 165,29, 166,75, 169,87, 172,72; LCMS: MH = 540; Anal calc. para C27H29N3O7S 0,6 H2O 0,3 MeCN: C, 58,91; H, 5,57; N, 8,21; S, 5,70; Observado: C, 58,93; H, 5,41; N, 8,11; S,5,61.
5.246 3-{4-[4-(1-CICLOPROPILMETIL-PIPERIDIN-4-ILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000192_0002
Etapa 1: Preparacion de ester terc-butflico del acido 4-{4-[2-(1-carbamoil-3-metoxicarbonil-propil)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-bencil}-piperidin-1-carboxflico
Se anadio trifenilfosfeno (soportado con polimero, 1,6 mmol/g, 3,3 g) a una suspension de color blanco agitada de 5amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (2,444 g, 8,36 mmol) en THF (100 ml) a 0 °C. Despues de diez minutos, se anadio diazen-1,2-dicarboxilato de diisopropilo (2,470 ml, 12,54 mmol) y se agito durante 40 minutos y despues se anadio 4-(4-(hidroximetil)bencil)piperidin-1-carboxilato de terc-butilo (3,32 g, 10,87 mmol) en THF (20 ml). La mezcla se agito a 0 °C y se calento hasta la temperatura ambiente durante una noche. La suspension se filtro, se aclaro con MeOH (2 x 20 ml), CH2Cl2 (2 x 30 ml), y el filtrado se evaporo para dar un aceite, que se disolvio en CH2Cl2 (80 ml), se lavo con NaHCO3 sat. (50 ml), se concentro y despues se purifico por columna de gel de sflice para dar ester terc-butflico del acido 4-{4-[2-(1-Carbamoil-3-metoxicarbonil-propil)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-bencil}-piperidin-1-carboxflico en forma de un aceite espumoso (2,2 g, rendimiento del 45 %). Se uso en la siguiente etapa sin purification adicional.
Etapa 2: Preparation de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[1-oxo-4-(4-piperidin-4-ilmetil-benciloxi)-1,3-dihidroisoindol-2-il]-butmco
A una solution agitada de 4-(4-((2-(1-amino-5-metoxi-1,5-dioxopentan-2-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)bencil)piperidin-1-carboxilato de terc-butilo (2,2 g, 3,80 mmol) en CH2Cl2 (l0 ml) a temperatura ambiente se le anadio hidrogenocloruro (2 M en eter) (10 ml, 38,0 mmol). Despues de cuatro horas, la suspension se filtro, se aclaro con eter y el solido de color amarillo resultante se seco para dar 2,02 g, rendimiento en bruto del 111 % (sal HCl). El producto se uso mas tarde en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 3: Preparacion de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-{4-[4-(1-ciclopropilmetil-piperidin-4-ilmetil)-benciloxi]-1- oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-butmco
A una mezcla agitada de clorhidrato de metil 5-amino-5-oxo-4-(1-oxo-4-(4-(piperidin-4-ilmetil)benciloxi)isoindolin-2-il)pentanoato de metilo (0,325 g, 0,630 mmol)) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,416 ml, 2,52 mmol) en acetonitrilo (10 ml) se le anadio (bromometil)ciclopropano (0,061 ml, 0,630 mmol)). La mezcla se calento a 55 °C durante 5 horas y despues a temperatura ambiente durante una noche. El disolvente se evaporo para dar un aceite, que se agito en agua (20 ml), NaHCO3 sat. (10 ml), y acetato de etilo (40 ml). La fase organica se lavo con agua (20 ml) y salmuera (20 ml), se seco y se evaporo para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-{4-[4-(1-ciclopropilmetilpiperidin-4-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-butmco en forma de un aceite (0,28 g, rendimiento del 83 %). Se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 4: Preparacion de 3-{4-[4-(1-Ciclopropilmetil-piperidin-4-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona
A una solucion agitada de 5-amino-4-(4-(4-((1-(ciclopropilmetil)piperidin-4-il)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,28 g, 0,525 mmol) en THF (10 ml) en un bano de hielo-agua se le anadio 2-metilpropan-2- olato potasico (0,059 g, 0,525 mmol) y se agito durante 10 minutos. A la mezcla se le anadio HCl 1 N (a pH = 1) y despues se neutralizo con NaHCO3 sat. (a pH = 7). Se anadio agua (10 ml) y CH2Cl2 (20 ml) y la mezcla se lavo con agua (15 ml) y salmuera (10 ml), se seco sobre Na2SO4 y se concentro para dar un aceite de color pardo, que se purifico por columna de gel de sflice para dar 3-{4-[4-(1-Ciclopropilmetil-piperidin-4-ilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido espumoso (20 mg, rendimiento del 8 %); p.f., N/A. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 95/5 en 5 min, isocratica a 95/5 en 5 min (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 4,62 min (98,7 %). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, isocratica a 27/73 en 10 min (c H3CN/H3PO4 al 0,1 %): 4,58 min (95,4 %). 1H RMN (DMSO-de) 50,05 - 0,14 (m, 2H, CH2), 0,44 - 0,57 (m, 2H, CH2), 0,78 - 0,96 (m, 1H, CH), 1,28 - 1,46 (m, 2H, CH2), 1,47 - 1,58 (m, 1H, CH), 1,59 - 1,72 (m, 2H, CH2), 1,86 - 2,01 (m, 2H, CH2), 2,12 - 2,43 (m, 4H, CH2CH2), 2,57 (d, J = 6,6 Hz, 2H, CH2), 2,73 - 2,96 (m, 2H, CH2), 3,09 (dt, J = 3,1, 11,8 Hz, 2H, CH2), 4,21 - 4,55 (m, 2H, CH2), 5,10 (s, 2H, CH2), 5,21 (dd, J = 5,3, 13,2 Hz, 1H, NCH), 7,06 - 7,21 (m, 3H, Ar), 7,31 (d, J = 7,9 Hz, 2H, Ar), 7,38 - 7,56 (m, 2H, Ar). (El proton NH apenas se vio). 13C RMN (CLOROFORMO-d) 5 0,03, 4,05, 8,18, 23,49, 31,64, 31,72, 37,75, 42,79, 45,15, 51,86, 53,75, 63,90, 70,30, 114,61, 116,40, 127,58, 129,55, 129,90, 130,12, 133,17, 133,68, 140,88, 153,91, 169,39, 169,74, 171,41. LC/MS m/e = 502.
5.247 3-(4-{4-[4-(4-FLUORO-FENIL)-PIPERIDIN-1-ILMETIL]-BENCILOXI}-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000193_0001
A la solucion en CH3CN (10 ml) de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,513 g, 1,157 mmol) se le anadieron clorhidrato de 4-(4-fluorofenil)piperidina (0,311 g, 1,736 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,574 ml, 3,47 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla turbia se agito a temperatura ambiente empezando durante dos horas. El disolvente de CH3CN se evaporo, y al residuo se le anadieron agua (20 ml) y cloruro de metileno (40 ml). Se lavo con bicarbonato sodico saturado (2 x 15 ml), agua (20 ml) y salmuera (20 ml), se seco sobre Na 2 SO 4 y se concentro para dar un aceite, que se purifico por columna de gel de sflice (MeOH/EtOAc) para dar 3-(4-{4-[4-(4-Fluoro-fenil)-piperidin-1-ilmetil]-benciloxi}-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,315 g, rendimiento del 50 %); p.f., 180-182 °C. HPLC:
Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 95/5 en 5 min, isocratica a 95/5 en 5 min (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 4,79 min (95,7 %). 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 5 1,51 - 1,80 (m, 4H, CH2CH2), 1,89 -2,12 (m, 3H, CH, CH2), 2,35 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,63 (m, 2H, CH, CHH), 2,83 - 2,99 (m, 3H, CHH, CH2), 3,50 (s, 2H, CH2), 4,19 - 4,48 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,2, 13,3 Hz, 1H, NCH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,04 - 7,15 (m, 2H, Ar), 7,22 - 7,39 (m, 6H, Ar), 7,41 - 7,53 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-de) 522,36, 31,21, 33,16, 41,02, 45,09, 51,58, 53,55, 62,10, 69,45, 114,75, 115,03, 115,23, 127,62, 128,35, 128,45, 128,92, 129,82, 129,95, 133,31, 135,14, 138,44, 142,35, 153,51, 159,00, 162,19, 168,01, 170,98, 172,83. LC/MS m/e+ = 542. Anal calc. para C32H32N3O4F: C, 70,96; H, 5,96; N, 7,76; F, 3,51, Observado: C, 70,68; H, 5,90; N, 7,64; F, 3,54.
5.248 3-(4-{4-[4-(4-FLUORO-BENCIL)-PIPERON-1-ILMETIL]-BENCILOXI}-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000194_0001
A la solution en CH3CN (10 ml) de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,528 g, 1,191 mmol) se le anadieron 4-(4-fluorobencil)piperidina (0,345 g, 1,787 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,394 ml, 2,382 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla turbia se agito a temperatura ambiente comenzando durante dos horas. El disolvente de CH3CN se evaporo, y el residuo se agito en una mezcla de agua (20 ml), bicarbonato sodico saturado (10 ml) y cloruro de metileno (50 ml). La mezcla se lavo con agua (2 x 20 ml) y salmuera (10 ml), se seco sobre sulfato sodico y se concentro para dar un solido de color blanco, que se purifico por columna de gel de sflice (MeOH/CH2Ch) para dar 3-(4-{4-[4-(4-Fluoro-bencil)-piperidin-1-ilmetil]-benciloxi}-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-piperidin-2,6-diona en forma de un solido espumoso de color blanco (0,224 g, rendimiento del 34 %); p.f., 148-150 °C. Hp LC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 90/10 en 5 min, isocratica a 90/10 en 5 min (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 4,86 min (95,8 %). 1 H RMN (DMSO-de) 51,08 -1,27 (m, 2H, CH2), 1,36 - 1,59 (m, 3H, CHH, CH2), 1,77 - 1,91 (m, 2H, CH2), 1,93 - 2,04 (m, 1H, CHH), 2,35 - 2,48 (m, 2H, CHH, CHH), 2,53 - 2,63 (m, 1H, CHH), 2,70 - 2,81 (m, 2H, CH2), 2,83 - 3,00 (m, 1H, CHH), 3,41 (s, 2H, CH2), 4,18 -4,47 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,21 (s, 2H, CH2), 7,02 - 7,12 (m, 2H, Ar), 7,13 -7,22 (m, 2H, Ar), 7,25 - 7,36 (m, 4H, Ar), 7,38 - 7,53 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 522,36, 31,21, 31,60, 37,32, 41,37, 45,09, 51,58, 53,15, 62,07, 69,45, 114,57, 114,85, 114,97, 115,21, 127,61, 128,73, 129,81, 129,94, 130,55, 130,65, 133,31, 135,04, 136,46, 138,66, 153,51, 158,98, 162,17, 168,01, 170,98, 172,83. LC/MS m/e+ = 556. Anal calc. para C33H34N3O4F: C, 71,33; H, 6,17; N, 7,56, Observado: C, 71,02; H, 5,84; N, 7,47.
5.249 3-(4-{4-[4-(3-FLUORO-FENIL)-PIPERIDIN-1-ILMETIL]-BENCILOXI}-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000194_0002
A la solucion en CH2Cl2 de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,5 g, 1,128 mmol) se le anadieron 4-(3-fluorofenil)piperidina (0,101 g, 0,564 mmol) y DIPEA (0,146 g, 1,13 mmol). La solucion resultante se agito a temperatura ambiente durante 2 horas. A la mezcla se le anadio agua (15 ml) y se extrajo. La capa organica se concentro y se purifico sobre una columna de gel de sflice eluida con CH2O 2 y MeOH. El solido resultante se recristalizo en CH3CN (5 ml) para dar 3-(4-{4-[4-(3-fluoro-fenil)-piperidin-1-ilmetil]-benciloxi}-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-piperidin-2,6-diona (430 mg, 70 %). Punto de fusion: 200-202 °C. LC-MS m/e = 542. HPLC Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometros,1 ml/min, 240 nm, gradiente de 5/95 a 5/95 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 % en H 2 O durante 5 min y mantenimiento a 95/5 durante 5 min:6,95 min (94,75 %). 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,38 - 1,80 (m, 4H, CH2, CH2), 1,86 - 2,15 (m, 3H, CHH, CH2), 2,30 - 2,45 (m, J = 4,2 Hz, 1H, CHH), 2,55 - 2,68 (m, 1H, CHH), 2,76 - 3,05 (m, 3H, CHH, CH2), 3,50 (s, 2H, CH2), 4,09 - 4,53 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,23 (s, 2H, CH2), 6,79 - 7,19 (m, 3H, Ar), 7,24 - 7,60 (m, 8H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 5 22,38, 31,21, 32,80, 41,50, 45,09, 51,58, 53,46, 62,07, 69,45, 112,53, 112,81, 113,30, 113,58, 114,97, 115,23, 122,84, 127,62, 128,93, 129,82, 129,95, 130,06, 130,16, 133,32, 135,16, 138,41, 149,26, 149,34, 153,51, 160,69, 163,89, 168,01, 170,98, 172,83. Anal calc. para C32H32FN3O4, C, 70,96 %; H, 5,96 %; N, 7,76 %.Observado: C, 70,57 %; H, 6,01 %; N, 7,67 %.
5.250 2-(2,6-DIOXOPIPERON-3-IL)-4-((4-((4-(TRIFUJOROMETIL)PIPERON-1-IL)MEm)BENCIL)-OXI)ISOINDOLIN-1,3-DIONA
Figure imgf000195_0001
A una mezcla de 4-(4-(bromometil)benciloxi)-2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)isoindolin-1,3-diona (250 mg, 0,547 mmol) y clorhidrato de 4-(trifluorometil)piperidina (114 mg, 0,601 mmol) en MeCN (10 ml), se le anadio DIEA (0,334 ml, 1,914 mmol) y la suspension resultante se agito a temperatura ambiente durante ~ 15 h. El tapon del vial de reaccion se retiro y la mezcla se calento a 80 °C durante ~ 4,5 h. La mezcla de reaccion concentrada (~5 ml) se repartio entre EtOAc (~150 ml) y agua (~30 ml). La capa organica se lavo con NaHCO 3 1 N (2 x 30 ml). y salmuera, se seco (Na 2 SO 4 ), y se concentro al vado para dar un residuo solido. Se anadieron MeCN (~3 ml) y agua ((~25 ml) y el solido se sonico a temperatura ambiente con agitacion hasta que se obtuvo una suspension finamente dispersa. El solido se recogio en un embudo sinterizado medio y se seco en un horno de vado a 60 °C para dar 2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-4-((4-((4-(trifluorometil)piperidin-1-il)metil)bencil)-oxi)isoindolin-1,3-diona en forma de un solido de color blanquecino (243 mg, rendimiento del 84 %): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 25/75 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 3,53 min (99,2 %); p.f.: 190-192 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,36 - 1,55 (m, 2H, CHH, CHH), 1,66 - 1,83 (m, 2H, CHH, CHH), 1,87 - 2,14 (m, 3H, CHH, CHH, CHH), 2,15 - 2,38 (m, 1H, CH), 2,40 -2,68 (m, 2H, CHH, CHH), 2,77 - 3,00 (m, 3H, CHH, CHH, CHH), 3,48 (s, 2H, CH2N), 5,09 (dd, J = 5,5, 12,8 Hz, 1H, CH), 5,35 (s, 2H, CH2O), 7,25 - 7,40 (m, 2H, Ar), 7,44 - 7,53 (m, 3H, Ar), 7,60 (d, J = 8,5 Hz, 1H, Ar), 7,83 (dd, J = 7,4, 8,5 Hz, 1H, Ar), 11,11 (s, 1H, NH); EtOAc residual (~ 0,07 equiv.); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 521,95, 24,19, 30,90, 39,07, 48,73, 51,39, 61,61, 69,95, 115,50, 116,56, 120,19, 127,29, 128,84, 133,26, 134,73, 136,99, 138,12, 155,53, 165,29, 166,75, 169,87, 172,72; senal para CF3 y CCF3 se enmascara parcialmente por DMSO-d 6 ; 19 F RMN (DMSO-d 6 ) 5 -72,35; LCMS: MH = 530; Anal calc. para C27H26F3N3O5 0,1 H2O 0,07 EtOAc: C, 60,96; H, 5,02; N, 7,82; F, 10,60: Observado: C, 61,17; H, 4,98; N, 7,46; F, 10,24.
5.251 2-(2,6-DIOXOPIPERIDIN-3-IL)-4-((4-(PIPERIDIN-1-ILMETIL)BENCIL)OXI)ISOINDOLIN-1,3-DIONA
Figure imgf000195_0002
A una suspension de 4-(4-(bromometil)benciloxi)-2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)isoindolin-1,3-diona (230 mg, 0,503 mmol) y piperidina (0,055 ml, 0,553 mmol) en MeCN seco (15 ml, 287 mmol), se le anadio DIEA (0,307 ml, 1,760 mmol) y la suspension resultante se agito a temperatura ambiente durante 2,5 h. La mezcla de reaccion se concentro al vado para dar un solido vrtreo. La trituracion del solido con una solucion de ~ 1:1 de MeCN/Et2O (~10 ml) produjo una suspension bien dispersa. El solido se filtro y se lavo con mas cantidad de Et2O (40 ml). El producto resultante se repartio entre EtOAc (~150 ml) y Na2CO31 N (~30 ml). La capa organica se lavo con mas cantidad de Na2CO31 N (~30 ml) y salmuera, despues se seco (Na 2 SO 4 ) y se concentro al vado para dar un solido vUreo. El solido se trituro con sonicacion extensa en una solucion de MeCN (~2 ml) y Et 2 O (~20 ml) hasta que se formo un solido finamente disperso. El solido se recogio en un embudo sinterizado medio con succion, y despues se lavo con mas cantidad de Et 2 O (~20 ml). La torta se seco en un horno de vado durante una noche a 50 °C para dar 2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-4-((4-(piperidin-1-ilmetil)bencil)oxi)isoindolin-1,3-diona en forma de un solido de color castano (110 mg, 47 %): h PlC: Waters Symmetry C 18 , 5 jm , 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 20/80 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 4,47 min (98,9 %); p.f.: 153-155 °C; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,38 (d, J = 4,7 Hz, 2H, CH2), 1,43 - 1,59 (m, 4H, CH2, CH2), 1,94 -2,13 (m, 1H, CHH), 2,19 - 2,40 (m, 4H, CH2, CH2), 2,42 - 2,67 (m, 2H, CHH, CHH), 2,77 - 2,99 (m, 1H, CHH), 3,42 (s, 2H, CH2N), 5,09 (dd, J = 5,4, 12,9 Hz, 1H, CH), 5,35 (s, 2H, CH2O), 7,26 - 7,37 (m, 2H, Ar), 7,40 - 7,53 (m, 3H, Ar), 7,60 (d, J = 8,5 Hz, 1H, Ar), 7,82 (dd, J = 7,4, 8,3 Hz, 1H, Ar), 11,11 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 521,95, 23,96, 25,51, 30,90, 48,73, 53,85, 62,50, 69,98, 115,47, 116,56, 120,19, 127,19, 128,82, 133,24, 134,54, 136,97, 138,52, 155,53, 165,27, 166,75, 169,87, 172,71; LCMS: MH = 462; Anal calc. para C26H27N3O5 0,18 H2O: C, 67,19; H, 5,93; N, 9,04; Observado: C, 67,18; H, 5,78; N, 8,84.
5.252 4-((4-((4,4-DIMETILPIPERON-1-IL)METIL)BENCIL)OXI)-2-(2,6-DIOXOPIPERON-3-IL)ISOINDOUN-1,3-DIONA
Figure imgf000196_0001
A una mezcla de 4-(4-(bromometil)benciloxi)-2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)isoindolin-1,3-diona (250 mg, 0,547 mmol) y clorhidrato de 4,4-dimetilpiperidina (90 mg, 0,601 mmol) en MeCN seco (10 ml), se le anadio DIEA (0,334 ml, 1,914 mmol). La suspension resultante se agito a temperatura ambiente durante 17 h despues el tapon del vial se retiro y la mezcla se calento hasta 75 °C. Despues de ~2,5 h, quedo ~1/2 del volumen en forma de una suspension espesa. La mezcla se enfrio con agitacion suave y despues se maduro a 4 °C durante una noche. A la mezcla se le anadio DIEA (250 jl) con agitacion durante 30 min. La suspension se filtro en un embudo sinterizado medio con succion y la torta se lavo con agua (~30 ml). El solido recogido se seco por succion y despues se seco adicionalmente en un horno de vado a 50 °C durante 6 h para dar 4-((4-((4,4-dimetilpiperidin-1-il)metil)bencil)oxi)-2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)isoindolin-1,3-diona en forma de un solido de color blanquecino (230 mg, 86 %): HPLC: Waters Symmetry C-ie, 5 |jm, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 25/75 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 3,88 min (97,8 %); p.f.: 208-210 °C: 1 H RMN (DMSO-de) 50,89 (s, 6H, CH3, CH3), 1,19 - 1,41 (m, 4H, CH2, CH2), 1,95 - 2,15 (m, 1H, CHH), 2,20 - 2,42 (m, 4H, CH2, CH2), 2,42 - 2,66 (m, 2H, CHH, CHH), 2,79 - 2,98 (m, 1H, CHH), 3,46 (s, 2H, CH2), 5,09 (dd, J = 5,5, 12,8 Hz, 1H, CH), 5,34 (s, 2H, CH2O), 7,28 - 7,39 (m, 2H, Ar), 7,39 - 7,52 (m, 3H, Ar), 7,60 (d, J = 8,5 Hz, 1H, Ar), 7,82 (dd, J = 7,4, 8,5 Hz, 1H, Ar), 11,11 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 521,95, 28,04, 28,14, 30,90, 38,25, 48,73, 49,32, 62,03, 69,98, 115,48, 116,56, 120,19, 127,20, 128,81, 133,24, 134,57, 136,97, 138,68, 155,53, 165,27, 166,75, 169,87, 172,72; LCMS: MH = 490; Anal calc. para C28H31N3O5 0,3 H2O: C, 67,94; H, 6,43; N, 8,49; Observado: C, 67,91; H, 6,42; N, 8,60.
5.253 3-[4-(4-BROMOMETIL-BENCILOXI)-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000196_0002
A la solucion en CH3CN (10 ml) de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,486 g, 1,096 mmol) se le anadieron diclorhidrato de 1,4'-bipiperidina (0,397 g, 1,645 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,725 ml, 4,39 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla turbia se agito a temperatura ambiente durante dos horas. El disolvente se evaporo para dar un solido de color blanco, que se agito en agua (20 ml) y cloruro de metileno (40 ml). Se lavo con bicarbonato sodico saturado (2 x 80 ml) y salmuera (50 ml), se seco sobre sulfato sodico y se concentro para dar un solido espumoso de color blanco (0,5 g), que se purifico por HPLC preparativa (acetonitrilo/agua en acido formico al 0,1 %) para dar 3-[4-(4-Bromometil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanquecino (0,25 g, rendimiento del 43 %); p.f., 202-204 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 70/30 en 5 min, isocratica a 70/30 en 5 min (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 3,64 min (98,5 %). 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 5 1,29 - 1,40 (m, 3H, CH2, CH), 1,41 - 1,51 (m, 5H, CH2, CH2, CH), 1,63 (dd, J = 3,3, 12,0 Hz, 2H, CH2), 1,81 - 1,93 (m, 2H, CH2), 1,94 -2,04 (m, 1H, CHH), 2,08 - 2,21 (m, 1H, CH), 2,35 - 2,48 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 2,53 - 2,63 (m, 1H, CHH), 2,75 -2,99 (m, 3H, CHH, CH2), 3,42 (s, 2H, CH2), 4,19 - 4,48 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,22 (s, 2H, CH2), 7,26 - 7,36 (m, 3H, Ar), 7,39 - 7,53 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-de) 522,36, 24,58, 26,08, 27,54, 31,21, 45,09, 49,70, 51,56, 52,85, 61,84, 61,99, 69,44, 114,95, 115,21, 127,61, 128,82, 129,81, 129,94, 133,31, 135,09, 138,56, 153,51, 168,01, 170,98, 172,83. LC/MS m/e = 531. Anal calc. para C31H38N4O4 (+0,7 H2O): C, 68,54; H, 7,31; N, 10,31, Observado: C, 68,29; H, 7,49; N, 10,16.
5.254 3-(4-{4-[4-(3-CLORO-FENIL)-PIPERIDIN-1-ILMETIL]-BENCILOXI}-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000197_0001
A la solution en CH3CN (10 ml) de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,354 g, 0,799 mmol) se le anadieron clorhidrato de 4-(3-clorofenil)piperidina (0,278 g, 1,198 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,396 ml, 2,396 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla turbia se agito a temperatura ambiente durante una noche. El disolvente se evaporo y el residuo se agito en cloruro de metileno (120 ml), se lavo con bicarbonato sodico saturado (2 x 50 ml) y salmuera (50 ml), se seco sobre sulfato sodico, se concentro y se purifico por columna sobre gel de sflice (MeOH/CH2Ch) para dar 3-(4-{4-[4-(3-Cloro-fenil)-piperidin-1-ilmetil]-benciloxi}-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,246 g, rendimiento del 55 %); p.f., 218-220 °C. Hp LC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 70/30 en 5 min, isocratica a 70/30 en 5 min (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 5,63 min (95,9 %). 1 H RMN (DMSO-de) 5 1,54 - 1,80 (m, 4H, CH2, CH2), 1,92 - 2,11 (m, 3H, CHH, CH2), 2,36 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,53 -2,64 (m, 1H, CHH), 2,83 - 2,99 (m, 3H, CHH, CH2), 3,50 (s, 2H, CH2), 4,21 - 4,49 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,18 - 7,26 (m, 2H, Ar), 7,27 - 7,39 (m, 6H, Ar), 7,42 - 7,54 (m, 3H, Ar), 10,96 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO^) 522,38, 31,21, 32,78, 41,44, 45,10, 51,59, 53,43, 62,03, 69,45, 114,98, 115,23, 125,43, 125,96, 126,70, 127,62, 128,93, 129,82, 129,95, 130,16, 132,97, 133,32, 135,16, 138,41, 148,83, 153,53, 168,01, 170,96, 172,82. LC/MS m/e = 558, 560. Anal calc. para C32H32^ O 4Cl (+0,3 H2O): C, 68,21; H, 5,83; N, 7,46, Observado: C, 67,93; H, 5,64; N, 7,29.
5.255 3-{1-OXO-4-[4-(4-M-TOUL-PIPERON-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERON-2,6-DIONA
Figure imgf000197_0002
A la solucion en CH3CN (10 ml) de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,352 g, 0,794 mmol) se le anadieron 4-m-tolilpiperidina (0,209 g, 1,191 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,394 ml, 2,382 mmol) a temperatura ambiente. La solucion se volvio turbia en ~5 minutos y se agito a temperatura ambiente durante una noche. El disolvente se evaporo para dar un solido de color blanquecino, que se agito en cloruro de metileno (120 ml), se lavo con bicarbonato sodico saturado (2 x 50 ml) y salmuera (50 ml), se seco y se concentro para dar un solido de color blanquecino. Se purifico por columna de gel de sflice (MeOH/CH 2 Cl 2 ) para dar 3-{1-Oxo-4-[4-(4-m-tolil-piperidin-1-ilmetil)-benciloxi]-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,272 g, rendimiento del 63 %); p.f., 227-229 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 70/30 en 5 min, isocratica a 70/30 durante 5 min (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 5,45 min (98,6 %). 1 H RMN (DMSO^) 51,54 - 1,78 (m, 4H, CH2, CH2), 1,92 - 2,11 (m, 3H, CHH, CH2), 2,27 (s, 3H, CH3), 2,36 - 2,48 (m, 2H, CHH, CH), 2,53 - 2,63 (m, 1H, CHH), 2,83 - 2,99 (m, 3H, CHH, CH2), 3,50 (s, 2H, CH2), 4,20 - 4,47 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,23 (s, 2H, CH2), 6,95 - 7,07 (m, 3H, Ar), 7,12 - 7,20 (m, 1H, Ar), 7,29 - 7,39 (m, 4H, Ar), 7,41 - 7,54 (m, 3H, Ar), 10,96 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 521,06, 22,36, 31,21, 33,12, 41,79, 45,10, 51,59, 53,65, 62,12, 69,47, 114,98, 115,23, 123,69, 126,59, 127,40, 127,64, 128,18, 128,90, 129,82, 129,95, 133,32, 135,13, 137,23, 138,53, 146,17, 153,53, 168,01, 170,96, 172,82. LC/MS m/e = 538. Anal calc. para C33H35N3O4: C, 73,72; H, 6,56; N, 7,82, Observado: C, 73,37; H, 5,53; N, 7,52.
5.256 3-{1-OXO-4-[4-(4-M-TOUL-PIPERIDIN-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERON-2,6-DIONA
Figure imgf000198_0001
A la solution en CH3CN (10 ml) de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,354 g, 0,799 mmol) se le anadieron 4-(4-metoxifenil)piperidina (0,229 g, 1,198 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,396 ml, 2,396 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. El disolvente se evaporo y el solido de color blanquecino resultante se agito en cloruro de metileno (100 ml), se lavo con bicarbonato sodico saturado (2 x 80 ml) y salmuera (50 ml), se seco y se concentro para dar un solido de color blanquecino, que se purifico por columna de gel de sflice (MeOH/CH 2 Cl 2 ) para dar 3-{1-Oxo-4-[4-(4-m-tolil-piperidin-1-ilmetil)-benciloxi]-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,34 g, rendimiento del 77 %); p.f., 189-191 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 70/30 en 5 min, isocratica a 70/30 durante 5 min (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 5,42 min (98,2 %).
1 H RMN (DMSO-de) 51,51 - 1,77 (m, 4H, CH2, CH2), 1,92 - 2,11 (m, 3H, CHH, CH2), 2,34 - 2,48 (m, 2H, CHH, CH), 2,53 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,82 - 3,01 (m, 3H, CHH, CH2), 3,44 - 3,55 (m, 2H, CH2), 3,71 (s, 3H, CH3), 4,20 - 4,49 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,23 (s, 2H, CH2), 6,78 - 6,90 (m, 2H, Ar), 7,09 - 7,19 (m, 2H, Ar), 7,28 - 7,39 (m, 4H, Ar), 7,41 - 7,55 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-de) 522,36, 31,21, 33,34, 40,93, 45,10, 51,59, 53,68, 54,96, 62,15, 69,47, 113,68, 114,97, 115,23, 127,52, 127,62, 128,90, 129,82, 129,95, 133,32, 135,13, 138,24, 138,51, 153,53, 157,49, 168,01, 170,96, 172,82. LC/MS m/e = 554. Anal calc. para C33H35N3O5: C, 71,59; H, 6,37; N, 7,59, Observado: C, 71,29; H, 6,30; N, 7,57.
5.257 3-(4-{4-[4-(4-CLORO-FENIL)-PIPERIDIN-1-ILMETIL]-BENCILOXI}-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000198_0002
A la solucion en CH3CN (10 ml) de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,354 g, 0,799 mmol) se le anadieron clorhidrato de 4-(4-clorofenil)piperidina (0,278 g, 1,198 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,396 ml, 2,396 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. El disolvente se evaporo para dar un solido de color blanquecino, que se agito en cloruro de metileno (100 ml), se lavo con bicarbonato sodico saturado (2 x 80 ml) y salmuera (80 ml), se seco y se concentro para dar un solido de color blanquecino, que se purifico por columna de gel de sflice (MeOH/CH 2 Cl 2 ) para dar 3-(4-{4-[4-(4-Cloro-fenil)-piperidin-1-ilmetil]-benciloxi}-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,286 g, rendimiento del 52 %); p.f., 198-200 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 70/30 en 5 min, isocratica a 70/30 durante 5 min (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 5,63 min (98,9 %). 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 5 1,52 - 1,78 (m, 4H, CH2, CH2), 1,92 - 2,11 (m, 3H, CHH, CH2), 2,36 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,82 - 3,00 (m, 3H, CHH, CH2), 3,50 (s, 2H, CH2), 4,20 -4,49 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,22 - 7,39 (m, 8H, Ar), 7,41 -7,54 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO^) 522,38, 31,21, 32,93, 41,12, 45,10, 51,58, 53,47, 62,07, 69,45, 114,98, 115,23, 127,62, 128,19, 128,60, 128,90, 129,82, 129,95, 130,45, 133,32, 135,14, 138,44, 145,20, 153,53, 168,01, 170,96, 172,82. LC/MS m/e = 558, 560. Anal calc. para C32H32N3O4Cl (+0,1 H2O): C, 68,65; H, 5,80; N, 7,51, Observado: C, 68,44; H, 5,73; N, 7,41.
5.258 (S)-3-(4-((4-((4-ISOPROPILPIPERIDIN-1-IL)METIL)BENCIL)OXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)-3-METILPIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000199_0001
Se disolvio (S)-3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-3-metilpiperidin-2,6-diona (500 mg, 0,765 mmol) en acetonitrilo (5 ml), y se anadieron 4-isopropilpiperidina (107 mg, 0,842 mmol) y DIEA (0,160 ml, 0,918 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 16 h. Despues, la mezcla se repartio entre agua (75 ml) y EtOAc (75 ml), y la fase organica se lavo con agua (75 ml) y se extrajo con HCl 1 N (2 x 75 ml). Los extractos acuosos combinados se lavaron con EtOAc (2 x 75 ml), se hicieron basicos (Na 2 CO 3 solido) y despues se extrajeron en EtOAc (2 x 75 ml). Los extractos combinados se lavaron con agua (75 ml), se secaron (MgSO 4 ), proporcionando el producto en forma de un solido de color blanco, 230 mg rendimiento del (60 %); p.f. 160-162 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 90/10 de CH 3 CN/H 3 PO 4 al 0,1 % en 10 min: 6,05 (96,32 %). 1 H RMN (DMSO-de) 50,84 (d, J = 6,6 Hz, 6H), 0,91 - 1,07 (m, 1H), 1,13 - 1,26 (m, 2H), 1,31 -1,46 (m, 1H), 1,49 - 1,63 (m, 2H), 1,68 (s, 3H), 1,76 - 1,97 (m, 3H), 2,52 -2,91 (m, 5H), 3,43 (s, 2H), 4,55 (d, J = 17,6 Hz, 1H), 4,67 (d, J = 17,6 Hz, 1H), 5,24 (s, 2H), 7,22 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,26 - 7,37 (m, 3H), 7,39 - 7,52 (m, 3H), 10,84 (s, 1H). 13 C RMN (DMSO-de) 5 19,66, 20,70, 27,77, 28,86, 29,01, 31,94, 41,82, 45,59, 53,65, 57,18, 62,13, 69,45, 114,79, 127,67, 128,82, 129,74, 129,97, 133,91, 135,06, 138,6, 138,7, 153,38, 167,00, 172,41, 173,49, Anal. Calc. para C30H37N 3 O 4 : C, 71,54 %; H, 7,40 %; N, 8,34 %; Observado: C, 71,23 %; H, 7,61 %; N, 8,12 %.
5.259 3-{1-OXO-4-[4-(4-TRIFLUOROMETANOSULFONIL-PIPERAZIN-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000199_0002
Etapa 1: Ester terc-butflico del acido 4-trifluorometanosulfonil-piperazin-1-carboxflico
A la solucion agitada de piperazin-1-carboxilato de terc-butilo (4,6 g, 24,7 mmol) y trietilamina (4,1 ml, 29,6 mmol) en THF (50 ml) se le anadio cloruro de trifluorometanosulfonilo (3,1 ml, 29,6 mmol) a 0 °C a traves de una jeringa. La suspension resultante se agito a 0 °C durante 2 h. La mezcla de reaccion se diluyo por EtOAc (100 ml) y se lavo con agua (50 ml), HCl (1 N, ac., 50 ml), NaHCO3 (ac. sat., 50 ml) y salmuera (50 ml). La capa organica se seco por MgSO4 y se concentro al vado para dar ester terc-butflico del acido 4-trifluorometanosulfonil-piperazin-1-carboxflico en forma de un aceite transparente (5,9 g, rendimiento en bruto del 87 %). El compuesto se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional; lCm S MH = 319.
Etapa 2: 1-Trifluorometanosulfonil-piperazina
A la solucion agitada de 4-(trifluorometilsulfonil)piperazin-1-carboxilato de terc-butilo (5,9 g, 18,54 mmol) en DCM (20 ml) se le anadio TFA (10,00 ml, 130 mmol) a temperatura ambiente. Las burbujas se desprendieron inmediatamente y la mezcla de reaccion se enfrio en bano de hielo/agua. La mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 17 h y la mezcla de reaccion se anadio mediante eter dietflico (100 ml) y se agito a temperatura ambiente durante 30 min. La suspension se filtro y el solido de color blanco se lavo con eter dietflico (2 x 25 ml). Al solido (5,5 g) se le anadieron NaHCO3 (ac. sat., 35 ml) y EtOAC (80 ml). La mezcla se extrajo y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (80 ml). Las capas organicas se combinaron y se secaron por MgSO4. La capa organica se concentro al vado para dar 1-Trifluoro metanosulfonil-piperazina en forma de un aceite de color pardo claro (1,9 g, rendimiento del 47 %). 1H RMN (DMSO-d6) 52,76 (t, J = 5,0 Hz, 4H, CH2, CH2), 3,36 (s a, 4H, CH2, CH2); LCMS MH = 219.
Etapa 3: 3-{1-Oxo-4-[4-(4-trifluorometanosulfonil-piperazin-1-ilmetil)-benciloxi]-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona
A la solucion agitada de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (1 g, 2,2 mmol) en DCM (10 ml) a bano de hielo/agua se le anadio una solucion de 1-(trifluorometilsulfonil)piperazina (0,640 g, 2,9 mmol) en DCM (10 ml) seguido de la adicion de DIPEA (0,79 ml, 4,5 mmol). La solucion resultante se mantuvo en el frigorifico durante dos dias y a la mezcla de reaccion se le anadieron dCm (80 ml) y agua (30 ml). La mezcla se extrajo y la capa organica se seco por MgSO4 y se concentro al vado. El residuo se purifico por ISCO para dar un solido de color blanco. El solido se purifico agitandose en eter dietflico (20 ml) para dar 3-{1-Oxo-4-[4-(4 trifluorometano sulfonil-piperazin-1-ilmetil)-benciloxi]-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (700 mg, rendimiento del 53 %). p.f.: 135-137 °C; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,91 - 2,04 (m, 1H, CHH), 2,34 - 2,48 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 2,54 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,82 - 3,01 (m, 1H, CHH), 3,40 - 3,52 (m, 4H, CH2, CH2), 3,55 (s, 2H, CH2), 4,25 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,42 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CHH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,27 - 7,41 (m, 4H, Ar), 7,41 - 7,56 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 522,29, 31,11, 45,00, 46,33, 51,51, 51,80, 60,95, 69,28, 118,06 (c, J = 324,6 Hz, CF3), 114,90, 115,22, 127,62, 128,90, 129,73, 129,88, 133,24, 135,45, 137,25, 153,41, 167,92, 170,89, 172,74; LCMS MH = 581.
Etapa 4: Clorhidrato de 3-(1-oxo-4-((4-((4-((trifluorometil)sulfonil)piperazin-1-il)metil)bencil)oxi) isoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona
A la mezcla agitada de 3-(1-oxo-4-(4-((4-(trifluorometilsulfonil)piperazin-1-il) metil)benciloxi)isoindolin-2-il)piperidin-2.6- diona (680 mg, 1,17 mmol) en Acetonitrilo (10 ml) se le anadio HCl en eter dietflico (2 M, 1,7 ml, 3,5 mmol). La suspension resultante se agito a temperatura ambiente durante 7 h y la mezcla se filtro. El solido de color blanco se lavo con acetonitrilo (2 x 10 ml) y se seco en un horno de vado para dar clorhidrato de 3-(1-oxo-4-((4-((4-((trifluorometil)sulfonil)piperazin-1-il)metil)bencil)oxi)isoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (650 mg, rendimiento del 90 %); HPlC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 25/75, (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 6,53 min (99,9 %); p.f.: 228-230 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,93 - 2,05 (m, 1H, CHH), 2,41 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,54 - 2,65 (m, 1H, CHH), 2,82 - 3,02 (m, 1H, CHH), 3,12 - 3,42 (m, 4H, CH2, CH2), 3,67 -4,09 (m, 4H, CH2, CH2), 4,22 - 4,50 (m, 4H, CHH, CHH, CH2), 5,12 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CHH), 5,29 (s, 2H, CH2), 7,34 (d, J = 7,6 Hz, 2H, Ar), 7,50 (t, J = 7,9 Hz, 1H, Ar), 7,58 (d, J = 7,9 Hz, 2H, Ar), 7,66 (d, J = 8,1 Hz, 2H, Ar), 10,98 (s, 1H, CHH), 11,83 (s, a, 1H, HCl); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 522,30, 31,11, 43,11, 45,00, 49,90, 51,52, 58,21, 68,90, 114,86, 115,29, 119,34 (c, J = 321 Hz, CF3), 127,82, 128,95, 129,77, 129,89, 131,43, 133,27, 138,00, 153,28, 167,90, 170,90, 172,77; LCMS MH = 581; Anal. Calc. para C26H27F3N4O6S HCl 2H 2 O:C, 47,82; H, 4,94; N, 8,58; Cl, 5,43; Observado: C, 47,51; H, 5,01; N, 8,37; Cl, 5,24.
5.260 3-{1-OXO-4-[4-(4-P-TOUL-PIPERON-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERON-2.6- DIONA
Figure imgf000200_0001
A la solucion en CH3CN (10 ml) de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,352 g, 0,794 mmol) se le anadieron 4-p-tolilpiperidina (0,209 g, 1,191 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,394 ml, 2,382 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. El disolvente se evaporo y el solido de color blanquecino resultante se agito en cloruro de metileno (100 ml), se lavo con bicarbonato sodico saturado (2 x 80 ml) y salmuera (50 ml), se seco y se concentro para dar un solido de color blanquecino, que se purifico por columna de gel de sflice (MeOH/CH 2 Cl 2 ) para dar 3-{1-Oxo-4-[4-(4-p-tolil-piperidin-1-ilmetil)-benciloxi]-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,144 g, rendimiento del 33 %); p.f., 208-210 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 70/30 en 5 min, isocratica a 70/30 durante 5 min (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 5,60 min (96,6 %).
1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,52 - 1,77 (m, 4H, CH2CH2), 1,91 -2,10 (m, 3H, CHH, CH2), 2,25 (s, 3H, CH3), 2,36 -2,48 (m, 2H, CHH, CH), 2,53 - 2,63 (m, 1H, CHH), 2,82 - 3,00 (m, 3H, CHH, CH2), 3,49 (s, 2H, CH2), 4,20 - 4,48 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,04 - 7,15 (m, 4H, Ar), 7,30 - 7,39 (m, 4H, Ar), 7,41 - 7,54 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 520,57, 22,36, 31,21, 33,18, 41,39, 45,10, 51,58, 53,65, 62,13, 69,47, 114,98, 115,23, 126,50, 127,64, 128,83, 128,90, 129,82, 129,95, 133,32, 134,81, 135,13, 138,51, 143,19, 153,53, 168,01, 170,98, 172,82. LC/MS m/e = 538. Anal calc. para C33H35N3O4 (+0,2 H2O): C, 73,23; H, 6,59; N, 7,76, Observado: C, 73,01; H, 6,38; N, 7,54.
5.261 3-{1-OXO-4-[4-(3',4',5',6'-TETRAHIDRO-2'H-[3,4']BIPIRIDINIL-1'-ILMETIL)-BENCILOXI]-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000201_0001
A la solucion en CH 2 Cl 2 de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,5 g, 1,128 mmol) se le anadio 3-(piperidin-4-il)piridina (0,192 g, 1,184 mmol) seguido de DIPEA (0,591 ml, 3,38 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 5 horas y despues se anadio agua (15 ml). Despues de la extraction, la capa organica se concentro para dar un solido de color amarillo. El solido se recristalizo en CH3CN (5 ml) para dar 3-{1-Oxo-4-[4-(3',4',5',6'-tetrahidro-2'H-[3,4']bipiridinil-1'-ilmetil)-benciloxi]-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido (200 mg, 34 %). p.f.: 161-163 °C. LC-MS m/e = 525. HPLC Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometros, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 5/95 a 5/95 de CH 3 CN/H 3 PO 4 al 0,1 % en H 2 O durante 5 min y mantenimiento a 95/5 durante 5 min: 5,11 min (94 %). 1 H RMN (DMSO-de) 51,57 - 1,80 (m, 5H, CH2, CH2, CH), 1,89 - 2,15 (m, 3H, CH2, CHH), 2,43-2,50 (m., 1H, CHH), 2,55 - 2,65 (m, 1H, CHH), 2,80 - 3,04 (m, 3H, CHH, CH2), 3,51 (s, 2H, CH2), 4,12 - 4,48 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,23 - 7,39 (m, 5H, Ar), 7,40 - 7,54 (m, 3H, Ar), 7,67 (dt, J = 1,9, 7,7 Hz, 1H, Ar), 8,40 (dd, J = 1,5, 4,7 Hz, 1H, Ar), 8,47 (d, J = 1,9 Hz, 1H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-de) 5 14,09, 21,30, 30,15, 31,60, 44,03, 50,52, 52,38, 61,01, 68,38, 113,93, 114,17, 122,41, 126,58, 127,89, 128,77, 128,90, 132,27, 133,06, 134,12, 137,34, 140,29, 146,32, 147,48, 152,46, 166,96, 169,93, 171,78. Anal calc. para C31H32N 4 O 4 :% de C 70,97 % de H 6,15 % de N 10,68, Observado, % de C 68,36 % de H 5,89 % de N 10,08.
5.262 (S)-3-METIL-3-(1-OXO-4-((4-((4-(TRIFLUOROMETIL)PIPERIDIN-1-IL)METIL)BENCIL)OXI)ISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000201_0002
Etapa 1: (S)-3-(4-((4-(hidroximetil)bencil)oxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-3-metilpiperidin-2,6-diona
Una mezcla de (S)-3-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-3-metilpiperidin-2,6-diona (1,9 g, 6,93 mmol), (4-(clorometil)fenil)metanol (1,085 g, 6,93 mmol), yoduro potasico (0,115 g, 0,693 mmol) y carbonato potasico (1,053 g, 7,62 mmol) en DMF (50 ml) se agito a temperatura ambiente durante 9 dias. La mezcla se evaporo al vado. Al residuo se le anadieron agua (150 ml) y EtOAc (150 ml), y la suspension resultante se agito durante 16 h. La suspension se filtro, y el filtro se aclaro con agua (50 ml) y EtOAc (2 x 50 ml). La fase organica se lavo con una solucion acuosa al 10 % de carbonato sodico (2 x 75 ml), HCl 1 N (100 ml), y salmuera (100 ml), se seco (MgSO4) y se evaporo. El residuo se combino con el precipitado solido que se habia retirado por filtration, para proporcionar un total de 2,09 g de un producto en bruto.
Etapa 2: metanosulfonato de (S)-4-(((2-(3-metil-2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-4-il)oxi)metil)bencilo
El residuo se suspendio en 50 ml de acetonitrilo y la mezcla se enfrio a 0 °C. Se anadieron cloruro de metanosulfonilo (0,538 ml, 6,93 mmol) y DIEA (1,448 ml, 8,31 mmol), y la mezcla se agito a 0 °C durante 30 min. Despues, la mezcla se inactivo mediante la adicion de AcOH (0,5 ml) y despues agua (5 ml), y se evaporo. El residuo se repartio entre EtOAc (125 ml) y salmuera (125 ml). Un solido que no se disolvio en ninguna fase se retiro por filtracion, y las fases se separaron. El solido se combino con la capa organica y se evaporo. El residuo se sometio a cromatografia usando un gradiente de cloruro de metileno-acetonitrilo. El producto eluyo en ACN ~40 %. El rendimiento despues del secado fue de 1,3 g (40 % durante las dos etapas); 1H Rm N (DMSO-d6) 51,69 (s, 3H), 1,82 - 1,95 (m, 1H), 2,52 - 2,83 (m, 3H), 3,24 (s, 3H), 5,27 (s, 2H), 5,30 (s, 2H), 7,17 - 7,35 (m, 2H), 7,39 - 7,62 (m, 5H), 10,85 (s, 1H).
Etapa 3: (S)-3-metil-3-(1-oxo-4-((4-((4-(trifluorometil)piperidin-1-il)metil)bencil)oxi)isoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona Una mezcla de metanosulfonato de (S)-4-((2-(3-metil-2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)bencilo (0,40 g, 0,847 mmol) y clorhidrato de 4-(trifluorometil)piperidina (0,161 g, 0,847 mmol) se enfrio a 0 °C, y despues se anadio DIEA (0,310 ml, 1,778 mmol). Despues de 6 h, la reaccion se evaporo al vado, y el residuo se disolvio se repartio entre EtOAc (50 ml) y agua (50 ml), y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (50 ml). Las fracciones organicas combinadas se extrajeron con HCl 1 N (2 x 50 ml). Los extractos acuosos combinados se lavaron con EtOAc (50 ml), y despues se hicieron basicos usando carbonato sodico acuoso al 10 %. Despues, esta mezcla se extrajo con EtOAc (2 x 50 ml), y los extractos combinados se lavaron con salmuera (100 ml), se secaron (MgSO 4 ), y se evaporaron al vado, proporcionando 0,39 g en forma de un solido de color blanco, con un rendimiento del 87 %; p.f. 168-170 °C. HPLC: Waters X-Terra, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 5/95 a 95/5 de CH 3 CN-NH 4 (HCO 2 ) al 0,1 % durante 5 min y despues durante 10 min 95/5 de CH3CN-NH4OHCO2) al 0,1 %: 5,73 (100 %). 1 H RMN (DMSO-de) 5 1,33 -1,54 (m, 2H), 1,68 (s, 3H), 1,73 - 1,81 (m, 2H), 1,83 - 2,04 (m, 3H), 2,16 - 2,35 (m, 1H), 2,51 - 2,80 (m, 3H), 2,81 -2,95 (m, 2H), 3,48 (s, 2H), 4,56 (d, J = 17,6 Hz, 1H), 4,68 (d, J = 17,6 Hz, 1H), 5,24 (s, 2H), 7,23 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,27 - 7,37 (m, 3H), 7,40 - 7,52 (m, 3H), 10,85 (s, 1H). 13 C RMN (DMSO-de) 520,68, 24,24, 27,77, 28,99, 38,93, (c, J = 38,9 Hz), 45,59, 51,43, 57,18, 61,62, 69,41, 114,79, 114,81, 127,71, 127,87 (c, J = 278 Hz), 128,82, 129,74, 129,97, 133,91, 135,22, 138,18, 153,38, 167,00, 172,39, 173,47, Anal. Calc. para C2sH30F3N3O 4 + 0,3 H2O: C, 62,87 %; H, 5,77 %; N, 7,85 %; Observado: C, 62,87 %; H, 5,67 %; N, 7,86 %.
5.263 (S)-3-(4-((4-((4,4-DIMETILPIPERIDIN-1-IL)METIL)BENCILOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)-3-METILPIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000202_0001
Una mezcla de metanosulfonato de (S)-4-((2-(3-metil-2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)bencilo (0,33 g, 0,698 mmol) y clorhidrato de 4,4-dimetilpiperidina (0,105 g, 0,698 mmol) se enfrio a 0 °C, y despues se anadio DIEA (0,255 ml, 1,467 mmol). Despues de 16 h, la mezcla se evaporo al vado. El residuo se repartio entre EtOAc (100 ml) y agua (100 ml), y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (100 ml). Las fases organicas combinadas se extrajeron con HCl 1 N (2 x 75 ml), y los extractos combinados se lavaron con EtOAc (100 ml) y despues se hicieron basicos usando carbonato sodico solido. Despues, la mezcla acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 75 ml), y los extractos combinados se lavaron con agua (100 ml), se secaron (MgSO 4 ), y se evaporaron, proporcionando el producto en forma de un solido de color blanco, 250 mg, con un rendimiento del 73 %; p.f. 158-160 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 90/10 de CH3CN/H 3 PO 4 al 0,1 % en 10 min y despues 90/10 de CH3CN/H3PO 4 al 0,1 % durante 5 min: 5,79 (95,52 %). 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 50,89 (s, 6H), 1,20 - 1,38 (m, 4H), 1,68 (s, 3H), 1,81 - 1,94 (m, 1H), 2,22 - 2,41 (m, 4H), 2,53 - 2,83 (m, 3H), 3,46 (s, 2H), 4,56 (d, J = 17,6 Hz, 1H), 4,61 - 4,75 (m, J = 17,8 Hz, 1H), 5,23 (s, 2H), 7,22 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,26 - 7,37 (m, 3H), 7,38 - 7,50 (m, 3H), 10,85 (s, 1H). 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 520,68, 27,77, 28,04, 28,18, 28,99, 38,32, 45,59, 49,38, 57,18, 62,09, 69,45, 114,78, 114,79, 127,67, 128,79, 129,72, 129,97, 133,89, 135,03, 138,76, 153,38, 167,00, 172,39, 173,47, Anal. Calc. para C2sH35N3O 4 + 0,3 H2O: C, 70,36 %; H, 7,25 %; N, 8,49 %; Observado: C, 70,41 %; H, 7,18 %; N, 8,41 %.
5.264 3-(4-((4-((4-ETIL-3-OXOPIPERAZIN-1-IL)METIL)BENCIL)OXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000202_0002
Una solucion de clorhidrato de 1-etilpiperazin-2-ona (83 mg, 0,496 mmol) y DIEA (0,276 ml, 1,579 mmol) en MeCN seco (5 ml, 96 mmol) se anadio a 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (200 mg, 0,451 mmol). La solucion resultante (de color ambar palido) se agito a 40 °C durante 1 h. La mezcla se extrajo con acetato de etilo y NaHCO 3 1 N. La capa organica se lavo con salmuera, se seco (Na 2 SO 4 ), se filtro y se concentro al vado para dar 3-(4-((4-((4-etil-3-oxopiperazin-1-il)metil)bencil)oxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (169 mg, rendimiento del 76 %): HPLC: Waters Symmetry C 18 , 5 jm, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 15/85 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 7,41 min (99,5 %); p.f.: 163-165 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,01 (t, J = 7,2 Hz, 3H, CH3), 1,87 - 2,08 (m, 1H, CHH), 2,34 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,52 - 2,68 (m, 3H, CH2, CHH), 2,81 - 3,02
(m, 1H, CHH), 2,94 (s, 2H, CH2), 3,17 - 3,31 (m, 4H, CH2, CH2), 3,53 (s, 2H, CH2), 4,25 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 4,42 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CH), 5,24 (s, 2H, CH2), 7,24 - 7,40 (m, 4H, Ar), 7,41 -7,61 (m, 3H, Ar), 10,96 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-de) 511,89, 22,33, 31,16, 45,07, 45,17, 48,86, 51,56, 56,81, 60,27, 69,36, 114,97, 115,22, 127,70, 128,95, 129,78, 129,93, 133,28, 135,52, 137,15, 153,48, 165,23, 167,97, 170,93, 172,78; Una senal de carbono se solapa con DMSO; LCMS: MH = 491; Anal calc. para C 27 H 30 N 4 O5 0,35 H2O: C, 65,27; H, 6,23; N, 11,28; Observado: C, 65,27; H, 6,25; N, 11,06.
5.265
Figure imgf000203_0001
3-(4-((4-((4-BUTIL-3-OXOPIPERAZIN-1-IL)METIL)BENCIL)OXI)-1-OXOISOINDOUN-2-IL)PIPERON-2,6-DIONA
Figure imgf000203_0002
A una solucion de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (200 mg, 0,451 mmol) en MeCN seco (5 ml, 96 mmol), se le anadieron 1-butilpiperazin-2-ona (82 mg, 0,496 mmol) y DIEA (0,158 ml, 0,902 mmol). La solucion transparente de color amarillento se agito a temperatura ambiente durante 3 h. La mezcla en bruto en acetato de etilo se extrajo con NaHCO31 N y despues con salmuera. La capa organica se seco (Na2SO4), se filtro y se concentro al vado para dar 3-(4-((4-((4-butil-3-oxopiperazin-1-il)metil)bencil)oxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (160 mg, rendimiento del 68 %): HpLC: Waters Symmetry C18, 5 |jm, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 20/80 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 6,52 min (99,5 %); p.f.: 138-140 °C; 1H RMN (DMSO-d6) 50,88 (t, J = 7,2 Hz, 3H, CH3), 1,14 - 1,33 (m, 2H, CH2), 1,36 - 1,55 (m, 2H, CH2), 1,88 - 2,05 (m, 1H, CHH), 2,34 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,52 - 2,68 (m, 3H, CH2, CHH), 2,80 - 3,01 (m, 3H, CH2, CHH), 3,17 - 3,29 (m, 4H, CH2, CH2), 3,53 (s, 2H, CH2), 4,25 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,42 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CH), 5,24 (s, 2H, CH2), 7,25 - 7,41 (m, 4H, Ar), 7,42 - 7,57 (m, 3H, Ar), 10,96 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-d6) 5 13,64, 19,44, 22,33, 28,41, 31,16, 44,85, 45,07, 45,73, 48,88, 51,56, 56,81, 60,27, 69,36, 114,97, 115,22, 127,70, 128,95, 129,78, 129,95, 133,30, 135,53, 137,13, 153,48, 165,48, 167,97, 170,95, 172,80; LCMS: MH
= 519; Anal calc. para C27H30N4O3 0,6 H2O: C, 65,79; H, 6,70; N, 10,58; Observado: C, 65,76; H, 6,59; N, 10,56.
5.266 3-(1-OXO-4-((4-((4-(PIRIMIDIN-2-IL)PIPERAZIN-1-IL)METIL)BENCIL)OXI)ISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000203_0003
Una mezcla de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (205 mg, 0,462 mmol) en MeCN
(8 ml) se agito a temperatura ambiente. A la solucion se le anadio 2-(piperazin-1-il)pirimidina (81 mg, 0,495 mmol), seguido de DIEA (0,145 ml, 0,832 mmol). La mezcla se mantuvo a temperatura ambiente durante 4 h. La mezcla de reaccion en bruto se diluyo con EtOAc. La capa organica se lavo con NaHCO31 N (2 x 25 ml) y salmuera y se seco sobre Na 2 SO 4 . El disolvente se retiro al vado para dar 3-(1-oxo-4-((4-((4-(pirimidin-2-il)piperazin-1-il)metil)bencil)oxi)isoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (244 mg, rendimiento del 100 %): HPLC: Waters Symmetry C 18 , 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 20/80 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 4,26 min (97,3 %), p.f.: 142-144 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,89 - 2,06 (m, 1H, CHH), 2,41 (t, J = 4,9 Hz, 4H, CH2, CH2), 2,47 (s a, 1H, CHH), 2,53 - 2,63 (m, 1H, CHH), 2,83 - 2,99 (m, 1H, CHH), 3,52 (s, 2H, CH2), 3,72 (t, J = 4,7 Hz, 4H, CH2, CH2), 4,26 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,43 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,2, 13,1 Hz, 1H, CH), 5,24 (s, 2H, CH2), 6,61 (t, J = 4,7 Hz, 1H, Pir), 7,27 - 7,39 (m, 4H, Ar), 7,42 - 7,55 (m, 3H, Ar), 8,34 (d, J = 4,7 Hz, 2H, Pir), 10,97 (s, 1H, NH). Vease ~0,15 equiv. de EtOAc en H RMN. 13 C RMN (DMSO-de) 5 22,33, 31,16, 43,26, 45,07, 51,56, 52,35, 61,72, 69,39, 110,01, 114,96, 115,20, 127,64, 128,94, 129,78, 129,93, 133,30, 135,30, 137,89, 153,49, 157,82, 161,16, 167,97, 170,95, 172,80; LCMS: MH = 527; Anal calc. para C29H30N6O4 0,49 H2O 0,15 EtOAc: C, 64,80; H, 5,91; N, 15,32; Observado: C, 64,80; H, 5,75; N, 15,32.
5.267 3-(1-OXO-4-((4-((3-OXO-4-(PIRON-2-IL)PIPERAZIN-1-IL)METIL)BENCIL)OXI)ISOINDOLIN-2-IL)PIPERON-2,6-DIONA
Figure imgf000204_0001
A una suspension de (S)-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (200 mg, 0,451 mmol) y diclorhidrato de 1-(piridin-2-il)piperazin-2-ona (124 mg, 0,496 mmol) en MeCN seco (5 ml), se le anadio DIEA (0,276 ml, 1,579 mmol). Los solidos se disolvieron con agitacion para dar una solucion de color amarillo que se calento hasta 40 °C durante 3 dias. La mezcla de reaccion se diluyo con EtOAc (~150 ml) y se lavo con NaHCO31 N (2 x 30 ml) y salmuera. La capa organica transparente se seco sobre Na2SO4, se filtro y se concentro al vad o para dar un residuo vUreo. El residuo se trato con agua (30 ml) y la mezcla se sonico extensamente para dar un solido bien disperso que se recogio por filtracion y se lavo con mas cantidad de agua (~45 ml). La torta se suspendio en Et2O, se trituro con la ayuda de una espatula, y despues se filtro. Este proceso se repitio 4 veces (volumen de filtrado total de Et 2 O ~125 ml). La torta se seco por succion y despues se seco en un horno de vad o para dar un solido de color blanquecino (143 mg). El solido se disolvio en Dm F (10 ml) y se purifico usando HPLC preparativa de fase inversa. El producto se eluyo con un gradiente de acetonitrilo/agua (acido formico al 0,1 % en ambas fases moviles, MeCN del 5 % al 80 % durante 20 minutos) y las fracciones se recogieron por activacion de masas. Las fracciones deseadas se combinaron y se concentraron al vad o y el residuo se trato con agua y se sonico para dar una suspension de color blanco. El solido se filtro y despues se seco en un horno de vad o a 50 °C durante una noche para dar 3-(1-oxo-4-((4-((3-oxo-4-(piridin-2-il)piperazin-1-il)metil)bencil)oxi)isoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (72 mg, rendimiento del 30 %): HPLC: Waters Symmetry C1s, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 20/80 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 4,98 min (97,9 %); p.f.: 224-226 °C; 1 H RMN (DM SO^) 51,85 -2,05 (m, 1H, CHH), 2,35 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,57 (d, J = 18,3 Hz, 1H, CHH), 2,80 (t, J = 5,0 Hz, 2H, CH2), 2,84 -3.00 (m, 1H, CHH), 3,23 (s, 2H, CH2), 3,64 (s, 2H, CH2), 3,87 (t, J = 5,4 Hz, 2H, CH2), 4,26 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,43 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,2, 13,1 Hz, 1H, CH), 5,25 (s, 2H, CH2), 7,22 (ddd, J = 2,3, 4,9, 6.0 Hz, 1H, Ar), 7,33 (dd, J = 1,6, 7,8 Hz, 2H, Ar), 7,37 - 7,44 (m, 2H, Ar), 7,44 - 7,55 (m, 3H, Ar), 7,74 - 7,88 (m, 2H, Ar), 8,44 (dt, J = 1,4, 4,7 Hz, 1H, Ar), 10,96 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 522,33, 31,16, 45,07, 46,11, 48,89, 51,56, 57,64, 60,09, 69,38, 114,99, 115,23, 119,62, 120,83, 127,74, 129,01, 129,80, 129,95, 133,30, 135,62, 136,99, 137,31, 147,70, 153,07, 153,48, 166,92, 167,97, 170,95, 172,80,; LCMS: MH = 540; Anal calc. para C30H29N5O 0,49 H2O 0,15 EtOAc: C, 64,80; H, 5,91; N, 15,31; Observado: C, 64,80; H, 5,75; N, 15,32.
5.268 3-(1-OXO-4-((4-((4-(2,2,2-TRIFLUOROETIL)PIPERAZIN-1-IL)METIL)BENCIL)OXI)ISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000205_0001
Un vial de reaccion de 20 ml se cargo con (S)-3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (307 mg, 0,693 mmol), 1-(2,2,2-trifluoroetil)piperazina (170 mg, 0,706 mmol), y bromuro de tetrabutilamonio catalUico (22,33 mg, 0,069 mmol). A la mezcla se le anadio MeCN seco (5 ml) seguido de DIEA (0,423 ml, 2,424 mmol). La agitacion dio como resultado una solucion de color amarillo transparente que se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla en bruto se repartio entre EtOAc (~150 ml) y NaHCO31 N (~50 ml). La capa organica se lavo dos veces mas con NaHCO31 N (2 x 35 ml) y salmuera, se seco (Na2SO4), y se concentro al vado para dar un solido vrtreo. Se anadio Et2O (~30 ml) y la mezcla se sonico extensamente hasta que se obtuvo una suspension bien dispersa. A la mezcla se le anadieron n-hexanos (~30 ml) con sonicacion intermitente para descomponer adicionalmente los agregados solidos restantes. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche y despues se filtro en un embudo sinterizado medio con succion. El solido residual en el matraz se transfirio a un embudo con mas n-hexanos (~30 ml). El solido se seco por succion y despues se trituro con H 2 O (20 ml). El solido restante se recogio en un embudo de filtro y la torta se lavo con agua (~250 ml), se seco por succion, y despues se seco adicionalmente en un horno de vado a 50 °C para dar 3-(1-oxo-4-((4-((4-(2,2,2-trifluoroetil)piperazin-1-il)metil)bencil)oxi)isoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color amarillo palido (262 mg, rendimiento del 71 %): HPlC: Waters Symmetry C 18 , 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 22/78 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 4,49 min (94,7 %); p.f.: 133-135 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,88 - 2,05 (m, 1H, CHH), 2,22 -2,48 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 2,52 - 2,71 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 2,82 - 3,02 (m, 1H, CHH), 3,13 (c, J = 10,3 Hz, 2H, CH2CF3), 3,46 (s, 2H, CH2N), 4,25 (d, J = 17,4 Hz, 1H, lactama CHH), 4,42 (d, J = 17,6 Hz, 1H, lactama CHH), 5,11 (dd, J = 4,9, 13,2 Hz, 1H, alfa-CH), 5,22 (s, 2H, CH2O), 7,26 - 7,39 (m, 4H, Ar), 7,40 - 7,56 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 522,33, 31,16, 45,06, 51,55, 52,42, 53,06, 56,81 (c, J = 29,7 Hz, CCF3), 61,56, 69,39, 114.96, 115,20, 125,90 (c, J = 280,6 Hz, CF3), 127,58, 128,85, 129,78, 129,93, 133,28, 135,21, 137,95, 153,49, 167.97, 170,95, 172,80. Las senales exteriores del cuadruplete a 125,90 son demasiado debiles para observarse. LCMS: MH = 531; Anal calc. para C27H29F3N4O4 0,24 H2O: C, 60,63; H, 5,56; N, 10,47; F, 10,66; Observado: C, 60,64; H, 5,49; N, 10,20; F, 9,56.
5.269 3-(1-OXO-4-((4-(((S)-2-(TRIFLUOROMETIL)PIPERIDIN-1-IL)METIL)BENCIL)OXI)ISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000205_0002
En un vial de reaccion de 20 ml se disolvio (S)-3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (350 mg, 0,790 mmol) en MeCN seco (5 m). A la solucion se le anadio (S)-2-(trifluorometil)piperidina (140 mg, 0,916 mmol) seguido de DIEA (0,345 ml, 1,974 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 15 h y despues a 70 °C durante 8 h durante una noche. La mezcla de reaccion se repartio entre EtOAc (~100 ml) y agua (~25 ml). La capa organica se lavo con NaHCO 3 1 N (~75 ml) y salmuera, se seco (Na 2 SO 4 ), y se concentro al vad o para dar un solido de color blanco. El solido se disolvio en DMF (8 ml), se paso a traves de un filtro de jeringa, y el filtrado se inyecto sobre HPLC preparativa de fase inversa. El producto se eluyo con un gradiente de acetonitrilo/agua (acido formico al 0,1 % en ambas fases moviles, MeCN del 5 % al 95 % durante 20 minutos) y las fracciones se recogieron por activacion de masas. Las fracciones deseadas se combinaron y se concentraron al vad o para retirar todo el MeCN y la mayor parte del agua, produciendo una suspension de color blanco (~20 ml). El solido se recogio por filtracion, la torta se seco por succion, y despues se seco en un horno de vad o a 50 °C durante 5 h para dar 3-(1-oxo-4-((4-(((S)-2-(trifluorometil)piperidin-1-il)metil)bencil)oxi)isoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (506 mg, rendimiento del 51 %): HPLC: Waters Symmetry C1s, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 45/55 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 3,46 min (97,6 %); p.f.: 120-122; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 5 1,38 - 1,63 (m, 4H, CH2, CH2), 1,67 - 1,90 (m, 2H, CH2), 1,91 - 2,05 (m, 1H, CHH), 2,36 - 2,48 (m, 2H, CHH, CHH), 2,53 - 2,62 (m, 1H, CHH), 2,64 - 2,78 (m, 1H, CHH), 2,82 - 2,99 (m, 1H, CHH), 3,46 (ct, J = 4,9, 9,5 Hz, 1H, CHCF3), 3,84 (s, 2H, CH2), 4,25 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 4,42 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,2, 13,1 Hz, 1H, CH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,29 - 7,39 (m, 4H, Ar), 7,41 - 7,54 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 519,64, 22,31,22,94, 31,16, 45,06, 46,15, 51,55, 58,03 (c, J = 24,2 Hz, CCF3), 57,84, 69,39, 114,94, 115,20, 126,02, 127,70, 128,14, 129,78, 129,87, 129,95, 133,28, 135,25, 139,12, 153,49, 167,97, 170,95, 172,80. El cuadruplete de CF3 no esta asignado. No se observa una senal de carbono en la region alifatica; posiblemente solapada con otra senal; LCMS: MH = 516; Anal calc. para C27H28F3N3O4 0,5 H2O: C, 61,83; H, 5,57; N, 8,01; F, 10,87; Observado: C, 61,92; H, 5,48; N, 7,94; F, 10,08.
5.270 3-(4-{4-[4-(3,5-DIFLUORO-FENIL)-PIPERIDIN-1-ILMETIL]-BENCILOXI}-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DIONA, CLORHIDRATO
Figure imgf000206_0001
A la solution en CH 2 Cl 2 de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (350 mg, 0,790 mmol) se le anadieron DIPEA (0,414 ml, 2,369 mmol) y 4-(3,5-difluorofenil)piperidina (156 mg, 0,790 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche, se anadio agua (20 ml) y se extrajo. La capa organica se concentro y el solido resultante se purifico sobre una columna de gel de sflice eluida con CH 2 Cl 2 /MeOH para dar un solido de color blanco. El solido se disolvio en CH 2 Cl 2 (20 ml) y a este se le anadieron 3 ml de HCl (2,0 M en eter). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 1 hora. La suspension resultante se filtro para dar 3-(4-{4-[4-(3,5-difluoro-fenil)-piperidin-1-ilmetil]-benciloxi}-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-piperidin-2,6-diona, clorhidrato en forma de un solido de color blanco (0,27 g, 61 %). Punto de fusion: 281-283 °C. LC-MS m/e = 560. HPLC Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometres, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 5/95 a 5/95 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 % en H 2 O durante 5 min y mantenimiento a 95/5 durante 5 min: 7,05 min (98,6 %). 1 H RMN (DMSO-de) 51,89 - 2,14 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 2,36 - 2,45 (m, 1H, CHH), 2,55 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,79 - 2,95 (m, 2H, CHH), 2,95 - 3,10 (m, J = 18,5 Hz, 2H, CH2), 3,42 (d, J = 11,9 Hz, 2H, CH2), 4,22 - 4,50 (m, 4H, CH2, CH2), 5,12 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,31 (s, 2H, CH2), 6,96 (dd, J = 2,1, 8,9 Hz, 2H, Ar), 7,04 - 7,16 (m, 1H, Ar), 7,29 - 7,38 (m, 2H, Ar), 7,43 - 7,54 (m, 1H, Ar), 7,55 - 7,69 (m, 4H, Ar), 10,66 (s a, 1H, HCl), 10,97 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-de) 522,40, 29,02, 31,21, 38,24, 45,09, 51,30, 51,61, 58,65, 69,03, 101,73, 102,06, 102,40, 109,69, 109.79, 109,91, 110,01, 115,00, 115,39, 127,85, 128,03, 129,36, 129,85, 129,98, 131,09, 131,63, 133,38, 138,07, 148.79, 148,91, 153,37, 160,92, 164,00, 164,17, 167,96, 170,98, 172,83; Anal calc. para C 32 H 31 F 2 N 3 O 4 HCl+1,3 H2O, C: 62,04; H: 5,63 %; N: 6,78 %; Observado: C: 61,73; H: 5,56 %; N: 6,72 %.
5.271 CLORHIDRATO DE 3-(4-{4-[4-(2,4-DIFLUORO-FENIL)-PIPERON-1-ILMETIL]-BENCILOXI}-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000206_0002
A la solucion en CH2O 2 de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (350 mg, 0,790 mmol) y 4-(2,4-difluorofenil)piperidina (171 mg, 0,869 mmol) se anadio N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,422 ml, 2,369 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 4 horas. Se anadio agua (15 ml) a la mezcla de reaction y se extrajo. La capa organica se concentro y el solido se disolvio en CH 2 Cl 2 . A la solucion se le anadio HCl (2 ml, 2,0 M en eter) y se agito durante 1 horas. La suspension se filtro para dar clorhidrato de 3-(4-{4-[4-(2,4-Difluoro-fenil)-piperidin-1-ilmetil]-benciloxi}-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,18 g, 40 %). Punto de fusion: 274-276 °C. LC-MS m/e = 560. HPLC Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometros, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 5/95 a 5/95 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 % en H 2 O durante 5 min y mantenimiento a 95/5 durante 5 min:7,03 min (94 %). 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,81 - 2,21 (m, 5H, CH 2 , CH 2 , CH), 2,35 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,66 (m, 1H, CHH), 2,82 - 2,99 (m, 1H, CHH), 3,09 (d, J = 10,0 Hz, 3H, CH2, CHH), 3,42 (d, J = 11,7 Hz, 2H, CH2), 4,22 -4,50 (m, 4H, CH2,CH2), 5,12 (dd, J = 4,9, 13,2 Hz, 1H, CHN), 5,31 (s, 2H, CH2), 7,04 - 7,15 (m, 1H, Ar), 7,16 - 7,27 (m, 1H, Ar), 7,27 - 7,37 (m, 2H, Ar), 7,44 - 7,54 (m, 1H, Ar), 7,56 - 7,67 (m, 3H, Ar), 10,52 (s a, 1H, HCl), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 522,40, 28,37, 31,21, 32,04, 45,09, 51,48, 51,61, 58,84, 69,03, 103,60, 103,95, 104,30, 111,58, 111,83, 115,00, 115,39, 127,85, 128,73, 128,85, 128,93, 129,36, 129,85, 129,98, 131,62, 133,38, 138,09, 153,37, 161,62, 167,96, 170,98, 172,83; Anal calc. para C32H31F2N3O4 HCl+0,8 H2O; C: 62,96 %; H: 5,55 %; N: 6,88 %; Observado: C: 62,83 %, H: 5,38 %; N: 6,87 %.
5.272 3-(1-OXO-4-{4-[4-(2,2,2-TRIFLUORO-ACETIL)-PIPERAZIN-1-ILMETIL]-BENCILOXI}-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000207_0001
A la solucion agitada de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (300 mg, 0,68 mmol) en DCM (7 ml) a temperatura ambiente se le anadio la solucion de 2,2,2-trifluoro-1-(piperazin-1-il)etanona (185 mg, 1,0 mmol) en DCM (1 ml) seguido de la adicion de DIPEA (0,236 ml, 1,4 mmol). La solucion resultante se agito a temperatura ambiente durante 7,5 h y la reaccion se completo en su mayor parte. A la mezcla de reaccion se le anadieron DCM (30 ml) y agua (20 ml). La mezcla se extrajo. La capa organica se seco por MgSO 4 y se concentro al vado. El residuo se purifico por ISCO para dar un solido de color blanco que se purifico adicionalmente agitandose en EtOAc (3 ml) para dar 3-(1-Oxo-4-{4-[4-(2,2,2-trifluoro-acetil)-piperazin-1-ilmetil]-benciloxi}-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (180 mg, rendimiento del 49 %). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 pm, 1 ml/min, 240 nm, 20/80, (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 5,21 min (99,9 %); p.f.:
125-127 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,91 -2,05 (m, 1H, CHH), 2,38 -2,48 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 2,53 -2,65 (m, 1H, CHH), 2,85 -3,01 (m, 1H, CHH), 3,47 - 3,70 (m, 6H, CH2, CH2, CH2), 4,17 -4,55 (m, 2H, CHH, CHH), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CHH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,33 (dd, J = 4,1, 7,8 Hz, 4H, Ar), 7,40 - 7,56 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 521,82, 30,65, 42,42, 44,54, 44,81, 51,02, 51,14, 51,81, 60,57, 68,81, 114,43, 114,70, 127,15, 128,45, 129,28, 129,41, 132,78, 134,93, 136,90, 152,96, 167,46, 170,44, 172,29; LCMS MH = 545; Anal.
Calc. para C 27 H 27 F 3 N 4 Oe+0,3H 2 O: C, 58,97; H, 5,06; N, 10,19; Observado: C, 58,85; H, 4,82; N, 10,03.
5.273 3-(4-{4-[4-(4-FLUORO-FENIL)-PIPERAZIN-1-ILMETIL]-BENCILOXI}-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DIONA, DICLORHIDRATO
Figure imgf000207_0002
A la solucion en CH 2 Cl 2 de 3-(4-(4-((4-(4-fluorofenil)piperazin-1-il)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,23 g, 0,424 mmol) y 1-(4-fluorofenil)piperazina (142 mg, 0,790 mmol) se le anadio N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (422 pl, 2,369 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. A la mezcla de reaccion se le anadio agua (15 ml) y se extrajo. La capa organica se concentro y el solido resultante se disolvio en CH2Cl2 (35 ml) y se anadio gota a gota HCl 2 M en eter. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 2 horas.
La suspension se filtro para dar 3-(4-{4-[4-(4-fluoro-fenil)-piperazin-1-ilmetil]-benciloxi}-1-oxo-1, 3-dihidro-isoindol-2-il)-piperidin-2,6-diona, diclorhidrato en forma de un solido de color blanco (230 mg, 54 %). Punto de fusion: 191-193 °C. Lc -MS m/e = 543. HPLC Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometros,1 ml/min, 240 nm, gradiente de 5/95 a 5/95 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 % en H2O durante 5 min y mantenimiento a 95/5 durante 5 min: 6,67 min (96 %).
1 H RMN (DMSO-d 6 ) 5 1,80 - 2,09 (m, 1H, CHH), 2,36 - 2,45 (m, J = 4,3 Hz, 1H, CHH), 2,58 (d, J = 18,5 Hz, 1H, CHH), 2,81 - 3,00 (m, 1H, CHH), 3,16 (d, J = 8,9 Hz, 4H, CH2,CH2), 3,34 (d, J = 8,1 Hz, 2H, CH2), 3,63 - 3,80 (m, 2H, CH2), 4,15 - 4,62 (m, 4H, CH2, CH2), 5,12 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CHN), 5,30 (s, 2H, CH2), 6,89 - 7,06 (m, 2H, Ar), 7,04 - 7,16 (m, 2H, Ar), 7,26 - 7,42 (m, 2H, Ar), 7,42 - 7,55 (m, 1H, Ar), 7,54 - 7,64 (m, 2H, Ar), 7,64 - 7,79 (m, 2H, Ar), 10,97 (s, 1H, nh), 11,46 (s a, 1H, HCl); 13 C RMN (DMSO-de) 522,39, 31,21, 45,10, 45,91, 50,16, 51,61, 58,05, 69,03, 114,98, 115,36, 115,65, 117,78, 117,88, 127,85, 129,24, 129,85, 130,00, 131,69, 133,37, 138,06, 146,34, 153,37, 154,99, 158,12, 167,98, 170,96, 172,83; Anal calc. para C31H31FN4O4 1,8 HCl 2H2O: C: 57,79 %; H: 5,76 %; N: 8,70 %; Cl: 9,90 %; Observado: C: 57,61 %, H: 5,64 %; N: 8,60 %, Cl: 9,54 %.
5.274 3-(4-{4-[4-(4-FLUORO-BENCIL)-PIPERAZIN-1-ILMETIL]-BENCILOXI}-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000208_0001
A la solucion en CH3CN (10 ml) de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,40 g, 0,902 mmol) se le anadieron 1-(4-fluorobencil)piperazina (0,193 g, 0,993 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,298 ml, 1,805 mmol). La solucion se agito a temperatura ambiente durante dos horas. Se anadio agua (20 ml) a la solucion de reaccion y se extrajo con cloruro de metileno (2 x 30 ml), se lavo con salmuera, se evaporo y el solido blanquecino se purifico por columna de gel de sflice (MeOH/CH 2 Cl 2 ) para dar 3-(4-{4-[4-(4-Fluoro-bencil)-piperazin-1-ilmetil]-benciloxi}-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,336 g, rendimiento del 66,9 %); p.f., 222-224 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 95/05 en 5 min, isocratica a 95/05 durante 5 min (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 4,67 min (97,01 %).
1 H RMN (DMSO-de) 51,92 - 2,04 (m, 1H, CHH), 2,20 - 2,47 (m, 8H, 2CHH, 3CH2), 2,55 - 2,66 (m, 1H, CHH), 2,82 -3,01 (m, 1H, CHH), 3,30 - 3,35 (m, 2H, CH2), 3,45 (s, 2H, CH2), 4,19 - 4,47 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,22 (s, 2H, CH2), 7,07 - 7,17 (m, 2H, Ar), 7,26 - 7,37 (m, 6H, Ar), 7,40 - 7,53 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 522,36, 31,21, 45,10, 51,59, 52,48, 52,58, 61,08, 61,71, 69,44, 114,68, 114,95, 115,23, 127,62, 128,86, 129,81, 129,95, 130,55 (d, Jc-f=10), 133,31, 134,37, 135,19, 138,12, 153,51, 161,17(d, Jc-f = 250), 168,01, 170,96, 172,82. LC/MS m/e = 557. Anal calc. para C32H33N4O4F: C, 69,05; H, 5,98; N, 10,07, Observado: C, 68,93; H, 5,99; N, 10,01.
5.275 3-(1-OXO-4-{4-[4-(2,2,2-TRIFLUORO-ETANOSULFONIL)-PIPERAZIN-1-ILMETIL]-BENCILOXI}-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000208_0002
Etapa 1: Ester terc-butflico del acido 4-(2,2,2-trifluoro-etanosulfonil)-piperazin-1-carboxflico
A la solucion agitada de piperazin-1-carboxilato de terc-butilo (0,850 g, 4,56 mmol) y TEA (0,76 ml, 5,48 mmol) en THF (10 ml) a 0 °C se le anadio cloruro de 2,2,2-trifluoroetano sulfonilo (1,0 g, 5,48 mmol) en THF (0,5 ml). La suspension resultante se agito a 0 °C durante 1,5 h y la mezcla de reaccion se diluyo por EtOAC (30 ml). La mezcla se lavo con agua (15 ml), HCl (1 N, ac., 15 ml) y NaHCO3 (15 ml) y salmuera (20 ml). La capa organica se seco por MgSO4 y se concentro al vatio para dar ester terc-butflico del acido 4-(2,2,2-Trifluoro-etanosulfonil)-piperazin-1-carboxflico en forma de un solido de color blanco (1,3 g, rendimiento del 86 %). El compuesto se uso en la siguiente etapa sin purification adicional. 1H RMN (DMSO-d6) 51,41 (s, 9H, tButilo), 3,12 - 3,26 (m, 4H, CH2, CH2), 3,36 - 3,48 (m, 4H, CH2, CH2), 4,52 (c, J = 10,1 Hz, 2H, CH2); LCMS MH (sin boc) = 233.
Etapa 2: 1-(2,2,2-Trifluoro-etanosulfonil)-piperazina
A la solucion agitada de 4-(2,2,2-trifluoroetilsulfonil)piperazin-1-carboxilato de terc-butilo (1,3 g, 3,9 mmol) en DCM
(20 ml) a temperatura ambiente se le anadio TFA (3,0 ml, 39,1 mmol). La solucion resultante se agito a temperatura ambiente 15 h y la mezcla de reaccion se diluyo por DCM (30 ml) y se anadio lentamente NaHCO3 (sat., ac., 15 ml) para controlar la emision de gas. La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 10 min y se repartio.
La capa organica se lavo con NaHCO3 (sat., ac., 5 ml) y salmuera (20 ml). La capa acuosa combinada se extrajo con DCM (4 x 40 ml). Las capas combinadas se secaron por MgSO4 y se concentraron al vado para dar 1-(2,2,2-Trifluoroetanosulfonil)-piperazina en forma de un solido de color blanco (930 mg, rendimiento en bruto del 102 %). 1H RMN (DMSO-d6) 52,41 (s a, 1H, NH), 2,64 - 2,85 (m, 4H, CH2, CH2), 3,02 - 3,20 (m, 4H, CH2, CH2), 4,46 (c, J = 10,2 Hz, 2H, CH2); LCMS MH = 233.
Etapa 3: 3-(1-Oxo-4-{4-[4-(2,2,2-trifluoro-etanosulfonil)-piperazin-1-ilmetil]-benciloxi}-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-piperidin-2,6-diona
A la mezcla agitada de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (350 mg, 0,79 mmol) y 1-(2,2,2-trifluoroetilsulfonil) piperazina (183 mg, 0,79 mmol) en DCM (10 ml) se le anadio DIPEA (0,28 ml, 1,56 mmol). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 3 dias. La mezcla de reaccion se diluyo por DCM (30 ml) y la solucion se lavo con agua (20 ml) y salmuera (20 ml). La capa organica se seco por MgSO 4 y se concentro al vado. El residuo se purifico por ISCO para dar un solido tipo vidrio. El solido se purifico adicionalmente agitandose en acetonitrilo (2 ml) y eter dietflico (30 ml) para dar 3-(1-Oxo-4-{4-[4-(2,2,2-trifluoro-etanosulfonil)-piperazin-1 -ilmetil]-benciloxi}-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (277 mg, rendimiento del 59 %). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 25/75, (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 3,10 min (99,2 %); 213-215 °C (en el laboratorio); 1 H RMN (DMSO-de) 51,91 - 2,05 (m, 1H, CHH), 2,45 (d, J = 8,7 Hz, 5H, CH2, CH2, CHH), 2,53 - 2,63 (m, 1H, CHH), 2,83 - 2,99 (m, 1H, CHH), 3,17 - 3,27 (m, 4H, CH2, CH2), 3,53 (s, 2H, CH2), 4,25 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 4,36 - 4,58 (m, 3H, CH2, CHH), 5,11 (dd, J = 5,0, 13,1 Hz, 1H, CHH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,33 (d, J = 7,6 Hz, 4H, Ar), 7,39 - 7,53 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 5 22,34, 31,18, 45,06, 45,15, 50,02 (c, J = 29,2 Hz, CF3), 51,56, 51,81, 61,10, 69,36, 114,97, 115,22, 123,22 (c, J = 275,2 Hz, CF3), 127,67, 128,91, 129,80, 129,93, 133,30, 135,43, 137,57, 153,48, 167,97, 170,96, 172,81; LCMS MH = 595; Anal. Calc. para C27H29F3N4O6S 0,5H 2 O: C, 53,73; H, 5,01; N, 9,28; Observado: C, 53,67; H, 5,03; N, 9,17.
5.276 3-(4-{4-[4-(4-FLUORO-BENCENOSULFONIL)-PIPERAZIN-1-ILMETIL]-BENCILOXI}-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000209_0001
A la solucion agitada de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (330 mg, 0,7 mmol) en DCM (10 ml) se le anadieron 1-(4-fluoro fenilsulfonil)piperazina (236 mg, 0,97 mmol) y DIPEA (0,26 ml, 1,5 mmol). La solucion resultante se agito a temperatura ambiente durante 20 h y despues se anadieron dCm (20 ml) y agua (20 ml). La mezcla se extrajo y la capa organica se lavo con salmuera (20 ml). La capa organica se seco por MgSO4 y se concentro al vado. El residuo se purifico por ISCO para dar un solido de color blanco. El solido se purifico adicionalmente agitandose en acetonitrilo y eter dietflico para dar 3-(4-{4-[4-(4-Fluoro-benceno sulfonil)-piperazin-1-ilmetil]-benciloxi}-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (245 mg, rendimiento del 54 %). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 25/75, (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 4,70 min (98,9 %); p.f.:192-194 °C; 1 H RMN (DMSO^) 5 1,91 - 2,04 (m, 1H, CHH), 2,34 - 2,47 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 2,53 - 2,63 (m, 1H, CHH), 2,82 - 3,01 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 3,47 (s, 2H, CH2), 4,24 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,40 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,08 (dd, J = 4,9, 8,1 Hz, 1H, CHH), 5,21 (s, 2H, CH2), 7,25 (d, 2H, Ar), 7,29 - 7,34 (m, 2H, Ar), 7,40 (d, J = 7,9 Hz, 2H, Ar), 7,44 - 7,56 (m, 3H, Ar), 7,73 - 7,87 (m, 2H, Ar), 10,96 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO^) 522,33, 31,16, 45,04, 45,90, 51,33, 51,53, 60,95, 69,31, 114,93, 115,20, 116,60 (d, J = 23,25 Hz, Ar), 127,63, 128,79, 129,78, 129,90, 130,60 (d, J = 9,75 Hz, Ar), 131,17, 133,27, 135,34, 137,51, 153,45, 162,62 (d, J = 249,75 Hz, Ar), 167,97, 170,96, 172,81; LCMS MH = 607; Anal. Calc. para C31H31FN4O6S 0,6H 2 O:C, 60,30; H, 5,26; N, 9,07; Observado: C, 60,18; H, 5,18; N, 9,09.
5.277 3-(4-{4-[4-(3,4-DIFLUORO-BENCENOSULFONIL)-PIPERAZIN-1-ILMETIL]-BENCILOXI}-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000210_0001
A la mezcla agitada de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (350 mg, 0,79 mmol) y 1-(3,4-difluorofenilsulfonil) piperazina (269 mg, 1,0 mmol) en DCM (10 ml) se le anadio DIPEA (0,25 ml, 1,6 mmol). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 3 dias. La mezcla de reaccion se diluyo por DCM (30 ml) y la solucion se lavo con agua (20 ml) y salmuera (2 x 20 ml). La capa organica se seco por MgSO 4 y se filtro. El filtrado se concentro al vado. Y el residuo se purifico por ISCO para dar un solido de color blanco. El solido se purifico adicionalmente agitandose en acetonitrilo y eter dietflico para dar 3-(4-{4-[4-(3,4-Difluoro-bencenosulfonil)-piperazin-1-ilmetil]-benciloxi}-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (296 mg, rendimiento del 60 %). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 25/75, (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 6,70 min (99,9 %); p.f.: 225-227 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,91 - 2,04 (m, 1H, CHH), 2,35 -2,47 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 2,53 - 2,63 (m, 1H, CHH), 2,82 - 3,02 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 3,48 (s, 2H, CH2), 4,24 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 4,40 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CHH), 5,21 (s, 2H, CH2), 7,26 (d, J = 7,9 Hz, 2H, Ar), 7,30 (d, J = 3,0 Hz, 1H, Ar), 7,33 (d, J = 2,1 Hz, 1H, Ar), 7,41 (d, J = 8,1 Hz, 2H, Ar), 7,48 (t, J = 7,7 Hz, 1H, Ar), 7,62 (dd, J = 2,0, 4,1 Hz, 1H, Ar), 7,73 (dd, J = 7,7, 10,2 Hz, 1H, Ar), 7,84 (ddd, J = 2,1, 7,5, 9,7 Hz, 1H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 522,34, 31,16, 45,03, 45,90, 51,30, 51,53, 60,92, 69,31, 114,93, 115,20, 17,45 (d, J = 19,5, CF), 118,84(d, J = 17,2, CF), 125,43, 127,63, 128,81, 129,78, 129,90, 132,11, 133,28, 135,35, 137,50, 149,25 (dd, J = 228,0 Hz, J = 12,0 Hz), 152,60 (dd, J = 230,2 Hz, J = 13,5 Hz), 153,43, 167,97, 170,96, 172,83; LCMS MH = 625; Anal. Calc. para C31H30F2N4O6S: C, 59,61; H, 4,84; N, 8,97; Observado: C, 59,34; H, 4,72; N, 8,88.
5.278 (S)-3-(1-OXO-4-((4-((4-(TRIFLUOROMETIL)PIPERIDIN-1-IL)METIL)BENCIL)OXI)ISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000210_0002
A una suspension de (S)-3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (1 g, 2,256 mmol) en MeCN (20 ml) a 0 °C, se le anadio clorhidrato de 4-(trifluorometil)piperidina (0,470 g, 2,481 mmol). Se anadio inmediatamente DIEA (0,788 ml, 4,51 mmol) y la mezcla resultante se agito a 0 °C durante 3 h. Se anadio bromuro de tetrabutilamonio (0,036 g, 0,113 mmol) a la mezcla de reaccion y la agitacion continuo durante 1 h a 0 °C despues a temperatura ambiente durante ~18 h. La suspension de reaccion se concentro a sequedad al vado para dar ~1,2 g de un solido de color amarillo. Este solido se repartio entre EtOAc (~250 ml) y NaHCO 3 ac. 1 N (~100 ml). La capa organica se lavo con 100 ml mas de NaHCO 3 1 N, agua (~25 ml), y salmuera (~50 ml). La solucion se seco sobre Na 2 SO 4 , se filtro y se concentro en un evaporador rotatorio para dar un volumen minimo de EtOAc (~5-7 ml) a 40 °C al primer signo de turbidez. El matraz se retiro del evaporador rotatorio y se dejo en reposo a temperatura ambiente. Se formaron mas solidos despues de un periodo de reposo.
Se anadio un volumen igual de MTBE (5-7 ml) a la suspension. La mezcla se agito y despues se filtro en un embudo sinterizado fino de 30 ml con succion. Se uso mas cantidad de MTBE para lavar la torta y transferir el solido residual del matraz (~25 ml). La torta se seco por succion y despues se puso en un horno de vado durante una noche a 50 °C para dar 850 mg (rendimiento del 73 %) de un solido de color blanco a crema claro. Para eliminar los disolventes residuales no deseados (EtOAc y MTBE), se realizo una segunda recristalizacion en MeCN caliente/agua. El solido se recogio en un embudo sinterizado fino, se lavo con agua (~25 ml), y la torta se seco en un horno de vado a 60 °C durante una noche para dar (S)-3-(1-oxo-4-((4-((4-(trifluorometil)piperidin-1-il)metil)bencil)oxi)isoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (485 mg, recuperacion al 61 %): HPLC: Waters Symmetry C1s, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 20/80 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 6,33 min (99,0 %); HPLC quiral: Chiral Technologies, columna analUica AGP, 99 % de e.e. por comparacion con una muestra racemica sintetizada previamente; p.f.: 158-160 °C; 1 H RMN (DMSO^) 5 1,33 - 1,56 (m, 2H, CHH, CHH), 1,67 - 1,84 (m, 2H, CHH, CHH), 1,86 - 2,09 (m, 3H, CHH, CH2), 2,14 - 2,34 (m, 1H, CH), 2,35 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,78 - 3,00 (m, 3H, CH2, CHH), 3,48 (s a, 2H, CH2), 4,25 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 4,42 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,0, 13,3 Hz, 1H, CH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,25 - 7,39 (m, 4H, Ar), 7,40 - 7,55 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 522,34, 24,21, 31,18, 45,06, 51,37, 51,56, 61,59, 69,38, 114,96, 115,22, 127,72 (c, J = 280,6 Hz, CF3), 127,64, 128,81, 129,78, 129,93, 133,30, 135,22, 138,12, 153,48, 167,97, 170,95, 172,80. CF3C se solapa con DMSO y no se observa; LCMS: MH = 516; Anal calc. para C 27 H28F3N3O 4 + 0,5 H 2 O: C, 61,83; H, 5,57; N, 8,01; F, 10,87; Observado: C, 61,81; H, 5,40; N, 8,06; F, 10,51.
5.279 3-{1-OXO-4-[4-(4-PIRIDIN-2-IL-PIPERAZIN-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000211_0001
A una suspension de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (300 mg, 0,677 mmol) en MeCN seco (10 ml), se le anadio 1-(piridin-2-il)piperazina (116 mg, 0,711 mmol) seguido de DIEA (0,236 ml, 1,354 mmol). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 16 h. Despues, la suspension espesa se calento a 50 °C, dando como resultado una solucion de color amarillo transparente. Despues de ~7 h a 50 °C, el calor se retiro y la solucion se agito suavemente durante aproximadamente 1 h y despues se dejo en reposo a temperatura ambiente durante una noche. La suspension resultante se agito suavemente y despues se filtro en un embudo sinterizado medio de 30 ml con succion. El solido residual que quedaba en el vial de reaccion se transfirio a un embudo con mas cantidad de MeCN (~2 ml). La torta se lavo con varias porciones de Et 2 O (volumen total ~70 ml), despues se suspendio en agua y despues se seco por succion. El solido se lavo con pequenas porciones de agua (volumen total ~50 ml). El solido de color blanco restante se suspendio de nuevo en agua en un embudo y despues se seco por succion. El solido se lavo con mas cantidad de agua (volumen total ~50 ml) y despues se puso en un horno de vado a 60 °C durante una noche para dar 3-{1-oxo-4-[4-(4-piridin-2-il-piperazin-1-ilmetil)-benciloxi]-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (260 mg, rendimiento del 73 %): HPLC: Waters Symmetry C-is, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 13/87 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 5,11 min (99,2 %); p.f.: 165-167 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,89 -2,07 (m, 1H, CHH), 2,34 -2,49 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 2,57 (d, J = 18,7 Hz, 1H, CHH), 2,81 - 3,03 (m, 1H, CHH), 3,38 -3,51 (m, 4H, CH2, CH2), 3,53 (s a, 2H, CH2), 4,26 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 4,43 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,0, 13,1 Hz, 1H, CH), 5,24 (s, 2H, CH2), 6,63 (dd, J = 5,1, 6,8 Hz, 1H, Ar), 6,79 (d, J = 8,7 Hz, 1H, Ar), 7,25 - 7,42 (m, 4H, Ar), 7,42 - 7,66 (m, 4H, Ar), 8,09 (dd, J = 1,4, 4,8 Hz, 1H, Pir), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 522,34, 31,18, 44,53, 45,07, 51,55, 52,29, 61,69, 69,36, 107,01, 112,94, 114,96, 115,22, 127,66, 129,03, 129,80, 129,93, 133,30, 135,33, 137,44, 137,86, 147,49, 153,48, 158,95, 167,99, 170,96, 172,83; LCMS: MH = 526; Anal calc. para C30H31N5O4 1,2 H2O: C, 65,87; H, 6,15; N, 12,80; Observado: C, 65,87; H, 5,93; N, 12,68.
5.280 3-(1-OXO-4-{4-[4-(5-TRIFLUOROMETIL-[1,3,4]TIADIAZOL-2-IL)-PIPERAZIN-1-ILMETIL]-BENCILOXI}-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL)-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000212_0001
A una suspension de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (300 mg, 0,677 mmol) en MeCN seco (10 ml), se le anadio 2-(piperazin-1-il)-5-(trifluorometil)-1,3,4-tiadiazol (169 mg, 0,711 mmol) seguido de DIEA (0,236 ml, 1,354 mmol). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 16 h. La mezcla se calento a 50 °C durante 8 h y despues a 80 °C durante 1 h. La mezcla de reaccion se dejo en reposo durante una noche a temperatura ambiente y despues se agito suavemente para suspender de nuevo los solidos en el fondo del vial. El solido se recogio en un embudo sinterizado medio de 30 ml con succion. El solido residual en el vial se transfirio en un embudo con mas cantidad de MeCN (~1 ml). La torta de color blanco se lavo con varias porciones de Et 2 O (volumen total ~30 ml). El solido de color blanco restante se suspendio de nuevo en agua en un embudo y despues se seco por succion. El solido se lavo con mas cantidad de agua (volumen total ~50 ml) y despues se puso en un horno de vado a 60 °C durante una noche para dar 3-(1-oxo-4-{4-[4-(5-trifluorometil-[1,3,4]tiadiazol-2-il)-piperazin-1-ilmetil]-benciloxi}-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (332 mg, rendimiento del 82 %): HPLC: Waters Symmetry C18, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 22/78 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 7,89 min (99,9 %); p.f.: 160-162 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,90 - 2,08 (m, 1H, CHH), 2,36 -2,47 (m, 1H, CHH), 2,50 - 2,63 (m, 5H, CHH, pip CH2, CH2), 2,82 - 3,04 (m, 1H, CHH), 3,44 - 3,70 (m, 6H, CH2, pip CH2, CH2), 4,26 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,42 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,0, 13,1 Hz, 1H, CH), 5,24 (s, 2H, CH2), 7,35 (t, J = 8,3 Hz, 4H, Ar), 7,43 - 7,54 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 522,34, 31,18, 45,06, 49,58, 51,27, 51,55, 61,29, 69,35, 114,97, 115,23, 121,36, 127,69, 129,00, 129,80, 129,95, 133,30, 135,47, 137,48, 153,48, 167,99, 170,96, 172,81, 173,95. Falta una senal de carbono, posiblemente debido a la separation de CF3; LCMS: MH = 601; Anal calc. para C28H27F3N6O4S 0,9 H2O: C, 54,52; H, 4,71; N, 13,62; F, 9,24; Observado: C, 54,50; H, 4,57; N, 13,52; F, 9,24.
5.281 3-(4-((4-((4-(2-METIL-6-(TRIFLUOROMETIL)PIRIMIDIN-4-IL)PIPERAZIN-1-IL)METIL)BENCIL)OXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000212_0002
A una suspension de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (300 mg, 0,677 mmol) en MeCN seco (10 ml), se le anadio 2-metil-4-(piperazin-1-il)-6-(trifluorometil)pirimidina (175 mg, 0,711 mmol) seguido de DIEA (0,236 ml, 1,354 mmol). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 16 h. La mezcla se calento a 50 °C hasta que se convirtio en una solution transparente y despues se dejo enfriar a temperatura ambiente con agitation suave durante una noche. Se formo un solido de color blanco despues de un periodo de reposo. La mezcla se agito y el solido se recogio en un embudo sinterizado fino de 15 ml con succion. El solido se lavo con MeCN mmimo (~1 ml) y varias porciones de Et2O (volumen total ~35 ml). El solido de color blanco se seco por succion y despues se puso en un horno de vado a 60 °C durante una noche para dar 3-(4-((4-((4-(2-metil-6-(trifluorometil)pirimidin-4-il)piperazin-1-il)metil)bencil)oxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (276 mg, rendimiento del 67 %): HPLC: Waters Symmetry C 18 , 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 22/78 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 7,59 min (99,7 %); p.f.: 165-167 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,89 - 2,07 (m, 1H, CHH), 2,38 - 2,48 (m, 8H, CH2, CH2, CHH. CH3), 2,53 - 2,65 (m, 1H, CHH), 2,79 - 2,99 (m, 1H, CHH), 3,53 (s, 2H, CH2), 3,59 - 3,91 (m, 4H, CH2, CH2), 4,26 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 4,43 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CH), 5,24 (s, 2H, CH2), 7,05 (s, 1H, Pir), 7,28 - 7,40 (m, 4H, Ar), 7,42 - 7,55 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 522,34, 25,65, 31,18, 43,53, 45,07, 51,56, 52,06, 61,43, 69,38, 96,73 (c, J = 3,3 Hz, CCCF3), 114,97, 115,22, 121,18 (c, J = 275,1 Hz, CF3), 127,66, 128,97, 129,78, 129,95, 133,30, 135,38, 137,66, 153,26 (c, J = 34,1 Hz, CCF3), 153,49, 161,75, 167,64, 167,99, 170,96, 172,81. Se observa un cuadruplete de CF3 a 121,18 ppm como un doblete (faltan las senales exteriores); LCMS: MH = 609; Anal calc. para C3 1 H3 1 F3N 6 O 4 + 0,4 H2O: C, 60,46; H, 5,20; N, 13,65; F, 9,25; Observado: C, 60,51; H, 5,13; N, 13,61; F, 8,97.
5.282 3-{1-OXO-4-[4-(4-FENOXI-PIPERIDIN-1-ILMETIL)-BENCILOXI]-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERON-2,6-DIONA
Figure imgf000213_0001
En un vial de reaccion de 20 ml cargado con 3-(4-((4-(bromometil)bencil)oxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (300 mg, 0,677 mmol) y 4-fenoxipiperidina (126 mg, 0,711 mmol), se le anadio MeCN seco (10 ml) seguido de DIEA (0,236 ml, 1,35 mmol). La suspension resultante se calento a 50 °C para dar una solucion transparente. Despues de ~30 min, la temperatura se elevo adicionalmente a 70 °C y la mezcla de reaccion se agito durante ~16 h a 70 °C. La mezcla se dejo enfriar a temperatura ambiente y despues se puso a 4 °C durante una noche formando un solido de color blanco. La suspension se agito suavemente y el solido se recogio en un embudo sinterizado medio de 15 ml con succion. La torta se lavo con Et 2 O (~50 ml) y se seco por succion para dar un solido de color castano. El solido se trituro y se lavo con agua (~50 ml), se seco por succion, y despues se seco adicionalmente en un horno de vado a 50 °C para dar 3-{1-oxo-4-[4-(4-fenoxi-piperidin-1-ilmetil)-benciloxi]-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color castano claro (254 mg, rendimiento del 70 %): HPLC: Waters Symmetry C1s, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 27/73 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 4,54 min (99,0 %); p.f.: 180-182 °C; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,49 - 1,71 (m, 2H, CH2), 1,82 - 2,07 (m, 3H, CHH, CH2), 2,15 - 2,31 (m, 2H, CH2), 2,36 - 2,49 (m, 1H, CHH), 2,52 -2,62 (m, 1H, CHH), 2,63 -2,75 (m, 2H, CH2), 2,81 - 3,00 (m, 1H, CHH), 3,49 (s, 2H, CH2), 4,25 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 4,32 - 4,49 (m, 2H, CHH, CHO), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CH), 5,23 (s, 2H, CH2), 6,78 - 7,04 (m, 3H, Ar), 7,19 - 7,30 (m, 2H, Ar), 7,33 (dd, J = 1,7, 7,7 Hz, 4H, Ar), 7,42 - 7,62 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 522,33, 30,62, 31,16, 45,07, 50,10, 51,55, 61,64, 69,41,72,13, 114,96, 115,20, 115,76, 120,42, 127,61, 128,81, 129,46, 129,78, 129,93, 133,28, 135,15, 138,40, 153,49, 157,04, 167,97, 170,95, 172,80; LCMS: MH = 540; Anal calc. para C32H33N3O5 0,5 H2O: C, 70,06; H, 6,25; N, 7,66; Observado: C, 70,11; H, 5,97; N, 7,62.
5.283 2-(2,6-DIOXO-PIPERIDIN-3-IL)-4-{4-[4-(4-FLUORO-FENIL)-PIPERIDIN-1-ILMETIL]-BENCILOXI}-ISOINDOL-1,3-DIONA
Figure imgf000213_0002
A la suspension en CH 2 Cl 2 de 2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-4-(4-((4-(4-fluorofenil)piperidin-1-il)metil)benciloxi)isoindolin-1,3-diona (170 mg, 0,306 mmol, rendimiento del 56,0 %) se le anadieron clorhidrato de 4-(4-fluorofenil)piperidina (130 mg, 0,601 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,292 ml, 1,640 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. A la mezcla se le anadieron CH 2 Cl 2 y agua y se extrajo. La capa organica se concentro. El solido resultante se agito en CH 2 Cl 2 (5 ml) y la suspension se filtro para dar un solido de color blanco (170 mg, 56 %). Punto de fusion: 155-157 °C. LC-MS m/e = 556. HPLC Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometros, 1 ml/min, 240 nm, isocratico 25/75 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 % en H 2 O: tR = 4,06 min (98,5 %); 1 H RMN (DMSO-de) 51,53 - 1,76 (m, 4H, CH2, CH2), 2,03 (t, J = 11,3 Hz, 3H, CHH, CH2), 2,41 - 2,46 (m, 1H, CHH), 2,54 -2,65 (m, 2H, CHH. CH), 2,80 - 2,99 (m, 4H, CHH, CH2), 3,50 (s, 2H, CH2), 5,09 (dd, J = 4,2, 13,4 Hz, 1H, CNH), 5,35 (s, 2H, CH2), 7,03 - 7,16 (m, 2H, Ar), 7,22 - 7,31 (m, 2H, Ar), 7,32 - 7,40 (m, 2H, Ar), 7,43 - 7,50 (m, 3H, Ar), 7,54 -7,68 (m, 1H, Ar), 7,81 (d, J = 7,2 Hz, 1H, Ar), 11,10 (s a, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-de) 521,95, 30,90, 33,13, 38,66, 41,00, 48,73, 53,51,62,06, 69,99, 114,71, 114,99, 115,48, 116,58, 120,19, 127,23, 128,33, 128,43, 128,92, 133,26, 134,63, 136,97, 138,42, 142,34, 155,53, 158,96, 162,17, 165,27, 166,75, 169,85, 172,71; Anal calc. para C32H30FN3O5 0,6 CH2O 2: C: 64,55 %; H: 5,10 %; N: 6,93 %. Observado: C: 64,49 %; H: 4,89 %; N: 7,03 %.
5.284 2-(2,6-DIOXO-PIPERIDIN-3-IL)-4-{4-[4-(2,2,2-TRIFLUORO-ETIL)-PIPERAZIN-1-ILMETIL]-BENCILOXI}-ISOINDOL-1,3-DIONA
Figure imgf000214_0001
A la solution en CH 2 Cl 2 de 4-(4-(bromometil)benciloxi)-2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)isoindolin-1,3-diona (250 mg, 0,547 mmol) se le anadieron clorhidrato de 1-(2,2,2-trifluoroetil)piperazina (123 mg, 0,601 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (292 pl, 1,640 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. A la mezcla de reaction se le anadieron CH 2 Cl 2 (15 ml) y agua (10 ml) y se extrajo. La capa organica se concentro y se purifico sobre una columna de gel de sflice eluida con MeOH y CH 2 Cl 2 para dar 2-(2,6-dioxo-piperidin-3-il)-4-{4-[4-(2,2,2-trifluoro-etil)-piperazin-1-ilmetil]-benciloxi}-isoindolo-1,3-diona en forma de un solido de color blanco (170 mg, 57 %). Punto de fusion: 163-165 °C. LC-MS m/e = 545. HPLC Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometros, ml/min, 240 nm, isocratico 25/75 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 % en H2O:tR = 5,40 min (99 %); 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,96 - 2,10 (m, 1H, CHH), 2,37 (s a, 4H, CH2,CH2), 2,43 - 2,47 (m, 0H, CHH), 2,52 - 2,66 (m, J = 4,5 Hz, 6H, CH2,CH2,CH2,CH), 2,79 - 2,97 (m, 1H, CHH), 3,14 (d, J = 10,2 Hz, 2H, CH2), 3,46 (s, 2H, CH2), 5,09 (dd, J = 5,4, 12,7 Hz, 1H, NCH), 5,35 (s, 2H, CH2), 7,33 (d, J = 8,1 Hz, 2H, Ar), 7,46 (dd, J = 4,1, 7,6 Hz, 3H, Ar), 7,60 (d, J = 8,5 Hz, 1H, Ar), 7,83 (dd, J = 7,4, 8,5 Hz, 1H, Ar), 11,11 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO^) 521,93, 30,90, 48,73, 52,45, 53,06, 56,23, 56,62, 57,39, 57,01, 61,58, 69,95, 115,48, 116,58, 120,19, 127,23, 127,80, 128,87, 133,26, 134,71, 136,96, 137,98, 155,52, 165,27, 166,75, 169,85, 172,71. Anal calc. para C27H27F3N4O5, C: 59,56 %; H: 5,00 %; N: 10,29 %. Observado: C: 59,44 %; H: 4,87 %; N: 10,23 %.
5.285 3-(4-((4-((4-(2,4-DIFLUOROFENIL)PIPERAZIN-1-IL)METIL)BENCIL)OXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000214_0002
A la solucion en CH 2 Cl 2 de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,5 g, 1,128 mmol) se le anadieron 1-(2,4-difluorofenil)piperazina (0,235 g, 1,184 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,602 ml, 3,38 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. A la mezcla de reaccion se le anadio agua (15 ml), se extrajo y se concentro para dar un solido de color amarillento. El solido se recristalizo en CH3CN (10 ml) para dar 3-(4-((4-((4-(2,4-difluorofenil)piperazin-1-il)metil)bencil)oxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (330 mg, 52 %). Punto de fusion (determinado en el laboratorio): 207-209 °C. LC-MS m/e = 561. HPLC Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometros, 1 ml/min, 240 nm, isocratico 25/75 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 % en H2O: 6,80 min (98,8 %). 1 H RMN (DMSO-de) 51,90 - 2,06 (m, 1H, CHH), 2,36 - 2,45 (m, J = 4,2 Hz, 1H, CHH), 2,53-2,59 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 2,83 - 3,01 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 3,54 (s, 2H, CH2), 4,05 - 4,58 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,0, 13,1 Hz, 1H, NCH), 5,24 (s, 2H, CH2), 6,89 - 7,12 (m, 2H, Ar), 7,17 (ddd, J = 2,8, 9,2, 12,4 Hz, 1H, Ar), 7,27 - 7,41 (m, 4H, Ar), 7,41 - 7,51 (m, 3H, Ar), 10,97 (s, 1H, Ar). 13 C RMN (DMSO-de) 5 22,33, 31,16, 45,07, 50,44, 51,55, 52,52, 61,64, 69,39, 104,18, 104,52, 104,87, 110,80, 111,03, 114,96, 115,22, 119,86, 119,91, 127,63, 128,98, 129,80, 129,95, 133,30, 135,28, 137,88, 153,49, 167,99, 170,95, 172,80. Anal calc. para C31H30F2N4O4: % de C: 66,42, % de H: 5,39, % de N: 9,99, Observado: % de C:65,08, % de H:5,02, % de N:9,66.
5.286 4-((4-((4-(2,4-DIFLUOROFENIL)PIPERON-1-IL)METIL)BENCIL)OXI)-2-(2,6-DIOXOPIPERON-3-IL)ISOINDOLIN-1,3-DIONA
Figure imgf000215_0001
A la suspension en CH 2 Cl 2 de 4-(4-(bromometil)benciloxi)-2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)isoindolin-1,3-diona (0,5 g, 1,093 mmol) se le anadieron 4-(2,4-difluorofenil)piperidina (0,216 g, 1,093 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,584 ml, 3,28 mmol). La suspension se agito a temperatura ambiente durante una noche. A la mezcla se le anadieron agua (10 ml), Ch2CI2 (10 ml), se extrajeron y se concentraron. El aceite resultante se purifico sobre una columna de gel de sflice eluida con MeOH y CH 2 Cl 2 para dar un solido que se agito con CH 2 Cl 2 (3 ml) y se filtro para dar 4-((4-((4-(2,4-difluorofenil)piperidin-1-il)metil)bencil)oxi)-2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)isoindolin-1,3-diona en forma de un solido de color blanco (50 mg, 8 %). Punto de fusion: 153-155 °C. LC-MS m/e = 574. HPLC Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometros, 1 ml/min, 240 nm, isocratico 30/70 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 % en H 2 O: 4,69 min (97,6 %). 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,55 - 1,75 (m, 4H, CH2,CH2), 2,05 (d, J = 2,1 Hz, 3H, CH2, CHH), 2,43 -2,48 (m, 1H, CHH), 2,55 - 2,67 (m, 2H, CHH), 2,68 - 2,86 (m, 2H, CHH, CH), 2,82 - 2,82 (m, 0H, M01), 2,86 - 2,99 (m, 3H, CHH,CH2), 3,51 (s, 2H, CH2), 4,89 -5,18 (m, 1H, NCH), 5,36 (s, 2H, CH2), 6,91 -7,08 (m, 1H, Ar), 7,09 - 7,23 (m, 1H, Ar), 7,27 -7,54 (m, 7H, Ar), 7,61 (d, J = 8,3 Hz, 1H, Ar), 7,74 - 7,95 (m, 1H, Ar), 11,10 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 521,93, 30,90, 31,63, 34,63, 48,73, 53,47, 62,01, 69,98, 103,20, 103,57, 103,90, 115,48, 116,58, 120,21, 127,25, 128,91, 129,09, 133,26, 134,65, 136,97, 138,40, 138,53, 155,53, 165,29, 166,75, 169,87, 172,71.
5.287 4-((4-((4-(4-CLOROFENIL)PIPERIDIN-1-IL)METIL)BENCIL)OXI)-2-(2,6-DIOXOPIPERIDIN-3-IL)ISOINDOLIN-1,3-DIONA
Figure imgf000215_0002
A la suspension en CH 2 Cl 2 de 4-(4-(bromometil)benciloxi)-2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)isoindolin-1,3-diona (0,35 g, 0,765 mmol) se le anadieron 4-(4-clorofenil)piperidina (0,157 g, 0,804 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,409 ml, 2,296 mmol). La suspension se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaction se cargo en la columna de gel de sflice y se eluyo con MeOH y CH 2 Cl 2 para dar 4-((4-((4-(4-clorofenil)piperidin-1-il)metil)bencil)oxi)-2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)isoindolin-1,3-diona en forma de un solido de color blanco (320 mg, 73 %). Punto de fusion: 236-238 °C. LC-MS m/e = 572, 574. HPLC Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometros, 1 ml/min, 240 nm, isocratico 30/70 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 % en H 2 O: 6,17 min (98,4 %). 1 H RMN (DMSO-de) 5 1,50 - 1,79 (m, 4H, CH2, CH2), 1,96 - 2,11 (m, 3H, CHH, CH2), 2,46 - 2,66 (m, 3H, CH, CHH, CHH), 2,79 -2,99 (m, 3H, CH2, CHH), 3,50 (s, 2H, CH2), 5,09 (dd, J = 5,4, 12,7 Hz, 1H, NCH), 5,36 (s, 2H, CH2), 7,19 -7,40 (m, 6H, Ar), 7,42 - 7,52 (m, 3H, Ar), 7,61 (d, J = 8,5 Hz, 1H, Ar), 7,74 - 7,96 (m, 1H, Ar), 11,11 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-de) 521,95, 30,90, 32,88, 41,11,48,73, 53,44, 62,03, 69,98, 115,48, 116,58, 120,19, 127,23, 128,15, 128,57, 128,91, 130,40, 133,26, 134,63, 136,97, 138,40, 145,21, 155,53, 165,27, 166,75, 169,85, 172,70. Anal calc. para C32H30ClN3Oe: % de C:67,19; % de H:5,29; % de N:7,35, Observado: % de C:66,83; % de H:5,31; % de N:7,13.
5.288 2-(2,6-DIOXOPIPERIDIN-3-IL)-4-((4-((4-((TRIFLUOROMETIL)SULFONIL)PIPERAZIN-1-IL)METIL)BENCIL)OXI) ISOINDOLIN-1,3-DIONA
Figure imgf000216_0001
A la solution en CH 2 Cl 2 de 4-(4-(bromometil)benciloxi)-2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)isoindolin-1,3-diona (0,25 g, 0,547 mmol) se le anadieron 1-(trifluorometilsulfonil)piperazina (0,143 g, 0,656 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,212 g, 1,640 mmol). La suspension se agito a temperatura ambiente durante una noche. A la mezcla se le anadieron agua (15 ml), CH2Cl2 (20 ml), se extrajo y se concentro y el aceite resultante se purifico sobre una columna de gel de sflice para dar un solido. El solido se purifico en HPLC prep. para dar 2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-4-((4-((4-((trifluorometil)sulfonil)piperazin-1-il)metil)bencil)oxi)isoindolin-1,3-diona solida (80 mg, 25 %). Punto de fusion: 229-231 °C. LC-MS m/e = 595. HPLC Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometres, 1 ml/min, 240 nm, isocratico 30/70 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 % en H2O: 3,79 (97 %). 1 H RMN (DMSO^) 5 1,94 - 2,12 (m, 1H, CHH), 2,35 - 2,45 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,67 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 2,80 - 2,98 (m, 1H, CHH), 3,48 (s a, 4H, CH2, CH2), 3,56 (s, 2H, CH2), 5,09 (dd, J = 5,4, 12,7 Hz, 1H, NCH), 5,35 (s, 2H, CH2), 7,27 - 7,42 (m, 2H, Ar), 7,48 (d, J = 6,8 Hz, 3H, Ar), 7,60 (d, J = 8,5 Hz, 1H, Ar), 7,83 (dd, J = 7,4, 8,3 Hz, 1H, Ar), 11,11 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO^) 5 21,95, 30,89, 46,38, 48,73, 51,87, 61,01, 69,90, 115,50, 120,18, 127,35, 128,97, 133,26, 133,75, 134,99, 136,97, 137,34, 155,50, 165,29, 166,79, 169,85, 172,71. Anal calc. para C26H25F3N4O7S 1,1 H2O: % de C:51,17; % de H:4,30; % de N:9,12, Observado: % de C:50,83; % de H:4,46; % de N:8,74.
5.289 2-(2,6-DIOXO-PIPERIDIN-3-IL)-4-{4-[4-(4-FLUORO-FENIL)-PIPERAZIN-1-ILMETIL]-BENCILOXI}-ISOINDOL-1,3-DIONA
Figure imgf000216_0002
A la suspension en CH 2 Cl 2 de 4-(4-(bromometil)benciloxi)-2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)isoindolin-1,3-diona (0,25 g, 0,547 mmol) se le anadieron 1-(4-fluorofenil)piperazina (0,108 g, 0,601 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,212 g, 1,640 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. A la mezcla de reaction se le anadieron agua (10 ml) y CH 2 Cl 2 (15 ml) y se extrajeron. La capa organica se concentro y despues se purifico sobre una columna de gel de sflice eluida con CHCl 2 y MeOH para dar 2-(2,6-dioxo-piperidin-3-il)-4-{4-[4-(4-fluoro-fenil)-piperazin-1-ilmetil]-benciloxi}-isoindolo-1,3-diona en forma de un solido de color amarillento (0,24 g, 79 %). Punto de fusion: 135-137 °C. LC-MS m/e = 557. HPLC Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometros, 1 ml/min, 240 nm, isocratico 25/75 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 % en H2O:tR = 7,07 min (99 %); 1 H RMN (DMSO-de) 51,92 - 2,13 (m, 1H, CHH), 2,41 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,54 - 2,67 (m, 5H, CHH,CH2,CH2), 2,79 - 2,97 (m, 1H, CHH), 2,98 - 3,19 (m, 4H, CH2, CH2), 3,53 (s, 2H, CH2), 5,09 (dd, J = 5,4, 12,7 Hz, 1H, NCH), 5,36 (s, 2H, CH2), 6,80 - 6,97 (m, 2H, Ar), 6,97 - 7,15 (m, 2H, Ar), 7,29 - 7,41 (m, 2H, Ar), 7,42 - 7,55 (m, 3H, Ar), 7,61 (d, J = 8,5 Hz, 1H, Ar), 7,83 (dd, J = 7,4, 8,5 Hz, 1H, Ar), 11,11 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-de) 521,95, 30,90, 48,75, 48,97, 52,51, 61,65, 69,96, 115,03, 115,31, 115,50, 116,98, 117,09, 120,21, 127,28, 129,00, 133,26, 134,79, 136,97, 137,94, 147,92, 154,35, 155,53, 157,47, 165,29, 166,75, 169,87, 172,71; Anal calc. para C31H29FN4O5 0,2 H2O: C: 66,47 %; H: 5,29 %; N: 10,00 %; Observado: C: 66,16 %; H: 5,17 %; N: 9,93 %.
5.290 3-(4-BENZO[D]TIAZOL-2-ILOXI-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000217_0001
Etapa 1: Se anadio carbonato de cesio (4,6 g, 14,1 mmol) a una solution agitada de 3- hidroxi-2-metilbenzoato de metilo (2,0 g, 12,0 mmol) y 2-clorobenzotiazol (3,1 g, 18,1 mmol) en acetonitrilo (50 ml). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se filtro y se lavo con acetonitrilo (25 ml), el filtrado se concentro, y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, EtOAc:Hexano, 1:9) para dar 3-(benzo[d]tiazol-2-iloxi)-2-metilbenzoato de metilo (3,4 g, rendimiento del 93 %): 1 H RMN (CDCb) 52,52 (s, 3H, CH3), 3,92 (s, 3H, OCH3), 7,23-7,43 (m, 4H, Ar), 7,63-7,75 (m, 2H, Ar), 7,86 (dd, J = 1,2 y 7,8 Hz, 1H, Ar).
Etapa 2: Se anadio N-bromosuccinimida (2,2 g, 12,1 mmol) a una solucion agitada de 3-(benzo[d]tiazol-2-iloxi)-2-metilbenzoato de metilo (3,3 g, 11,0 mmol) en CCl 4 (70 ml). La mezcla resultante se calento en un bano de aceite a 70 °C con una bombilla de 300 W que brillo en la mezcla de reaccion durante 2 horas. La mezcla de reaccion se enfrio y se filtro. El filtrado se lavo con agua (2 x 40 ml) y salmuera (40 ml), y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO 2 , EtOAc:Hexano, 1:9) para dar 3-(benzo[d]tiazol-2-iloxi)-2-(bromometil)benzoato de metilo (3,4 g, rendimiento del 81 %): 1 H RMN (DMSO-d6) 53,92 (s, 3H, CH3), 4,98 (s, 2H, CH2), 7,21-7,50 (m, 2H, Ar), 7,56-7,76 (m, 2H), 7,79-7,93 (m, 2H,Ar), 7,99 (d, J = 7,2 Hz, 1H,Ar).
Etapa 3: Se anadio trietilamina (2,0 g, 19,8 mmol) a una suspension agitada de 3-(benzo[d]tiazol-2-iloxi)-2-(bromometil)benzoato de metilo (3,0 g, 7,9 mmol) y clorhidrato de a-aminoglutarimida (1,3 g, 7,9 mmol) en acetonitrilo (100 ml). Despues de la adicion, la mezcla se calento a 45 °C durante 3 horas y despues se calento a 85 °C durante una noche. La mezcla de reaccion se enfrio y se concentro. El residuo se agito con agua (50 ml) para dar un solido, que se suspendio de nuevo con acetona (20 ml) para dar un solido de color azul claro (1,5 g, 46 %) de 3-(4- benzo[d] tiazol-2-iloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona. El color se retiro por disolucion en acetona, mediante tratamiento con carbono decolorante, y filtration a traves de Millpole (0,45 pM): p.f. 258-260 °C; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,90-2,04 (m, 1H), 2,31-2,45 (m, 1H), 2,57 (a, 1H), 2,78-2,99 (m, IH), 4,33 (d, J = 17,7 Hz, 1H), 4,48 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 5,12 (dd, J = 5,1 y 13,2 Hz, 1H), 7,30-7,49 (m, 2H), 7,64-7,84 (m, 4H), 7,99 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 10,96 (s, 1H); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 522,15, 31,07, 45,10, 51,66, 121,29, 121,43, 122,33, 124,42, 124,44, 126,56, 130,40, 131,94, 133,22, 134,39, 148,20, 148,92, 167,03, 170,52, 170,75, 172,73; Calc. para C20H15N3O4S: C, 61,06: H, 3,84; N, 10,68; S, 8,15, Observado: C, 61,00; H, 3,72; N, 10,59; S, 8,20.
5.291 3-[4-(4-METIL-CICLOHEXILMETOXI)-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000217_0002
Etapa 1: Se anadio trifenilfosfeno soportado con polimero (1,6 mmol/g, 1,90 g, 2,36 mmol) a una solucion agitada de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-(4-hidroxi-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-butmco (0,31 g, 1,07 mmol) en THF (20 ml) a 0 °C, seguido de la adicion de diazen-1,2-dicarboxilato de diisopropilo (0,27 ml, 2,14 mmol). Despues de agitar durante 30 minutos, se anadio (4-metil-ciclohexil)-metanol (mezcla cis y trans, 0,41 g, 1,85 mmol). La mezcla se agito durante una noche a temperatura ambiente, despues se filtro, se lavo con metanol (3 x 10 ml), y despues con cloruro de metileno (3 x 10 ml). El filtrado combinado se evaporo al vado para dar un aceite, que se purifico sobre una columna de gel de sflice (MeOH/CH 2 Cl 2 , gradiente del 0 % al 9 % en 60 min) para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(4-metil-ciclohexilmetoxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco en forma de un aceite transparente (0,35 g, rendimiento del 81 %). El analisis 1 H RMN mostro una relacion del 61 % al 39 %. Se uso en la siguiente etapa sin purification adicional.
Etapa 2: Se anadio terc-butoxido potasico (0,10 g, 0,87 mmol) a una solution agitada de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(4-metil-ciclohexilmetoxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco (0,35 g, 0,87 mmol) en THF (10 ml) a 0 °C. La mezcla se agito durante diez minutos y se inactivo con HCl 1 N (3 ml), se neutralizo con bicarbonato sodico saturado (4 ml a pH = 7), y se extrajo rapidamente por acetato de etilo (2 x 30 ml). Las fases de acetato de etilo combinadas se evaporaron para dar un solido de color blanquecino, que se purifico por HPLC preparativa (acido formico al 0,1 %/agua, y acido formico al 0,1 %/acetonitrilo) para dar 3-[4-(4-metil-ciclohexilmetoxi)-1-oxo-1,3-dihidroisoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanquecino (0,03 g, rendimiento del 10 %); HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, isocratica a 40/60 en 10 min (acetonitrilo/H 3 PO 4 al 0,1 %), 4,68 min (60,2 %), 5,07 min (37,3 %); p.f.: N/A debido a una disponibilidad de muestras limitada; 1 H RMN (DMSO-de) 50,78 - 2,08 (m, 15H, CH3, 5CH2, CH, CHH), 2,38 - 2,46 (m, 1H, CHH), 2,54 - 2,65 (m, 1H, CHH), 2,80 -3,01 (m, 1H, CHH), 3,87 - 4,08 (m, 2H, CH 2 (62 % al 38 %)), 4,15 - 4,46 (m, 2H, A1CH2), 5,11 (dd, 1H, NCH), 7,16 -7,34 (m, 2H, Ar), 7,41 - 7,54 (m, 1H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 519,94, 22,35, 22,57, 24,87, 29,04, 29,39, 30,10, 31,20, 32,23, 34,10, 34,51, 36,82, 44,99, 51,58, 70,85, 73,02, 114,43, 114,54, 114,84, 129,71, 129,84, 133,18, 153,91, 168,08, 171,02, 172,85; LCMS MH = 371.
5.292 3-[4-(2-BENZOFURAN-2-IL-ETOXI)-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000218_0001
Etapa 1: A la suspension de 2-yodo fenilo (0,22 g, 1 mmol) en agua (3 ml), se le anadio s-prolinol (0,29 ml, 3 mmol) seguido de Pd sobre carbono (70 mg, 0,03 mmol), trifenilfosfina (35 mg, 0,13 mmol), y yoduro de cobre (13 mg, 0,07 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 1 hora. Se anadio 3-butin-1-ol (0,23 ml, 3 mmol) y la mezcla se agito a 80 °C durante 3 horas. La mezcla se enfrio a temperatura ambiente y se concentro en un evaporador rotatorio. La mezcla resultante se purifico sobre una columna de gel de sflice eluida con acetato de etilo y hexano (gradiente, el producto se situo en metanol al 6 %) para dar 2-benzofuran-2-il-etanol (0,1 g, 62 %).
Etapa 2: A la solucion en THF (10 ml) de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-(4-hidroxi-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-butmco (0,54 g, 1,85 mmol), se le anadieron resina de trifenil fosfina (2,4 g, 1,5 mmol/g de carga, 3,7 mmol) y DiAd (0,72 ml, 3,7 mmol) a 0 °C. Despues de agitarse a 0 °C durante 10 minutos, a la mezcla se le anadio 2-benzofuran-2-il-etanol (0,36 g, 2,2 mmol) y se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla se filtro, y el filtrado se concentro y se extrajo con EtOAc (30 ml) y Na2CO3 (20 ml). La capa organica se lavo con agua (20 ml) y salmuera (20 ml), y se concentro. El aceite resultante se purifico sobre una columna de gel de sflice para dar ester metflico del acido 4-[4-(2-benzofuran-2-il-etoxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-4-carbamoil-butmco (0,20 g, 21 %).
Etapa 3: A la solucion en THF (10 ml) de ester metflico del acido 4-[4-(2-benzofuran-2-il-etoxi)-1-oxo-1,3-dihidroisoindol-2-il]-4-carbamoil-butmco (0,7 g, 1,5 mmol), se le anadio terc-butoxido potasico (0,45 ml, 0,45 mmol) a 0 °C. La mezcla se agito a 0 °C durante 10 minutos y se inactivo con HCl 1 N (5 ml, 5 mmol), seguido de NaHCO3 saturado (25 ml). La mezcla se extrajo con EtOAc (50 ml x 2). La capa organica se lavo con agua (30 ml) y salmuera (30 ml), se seco sobre MgSO4, y se concentro. El solido resultante se purifico sobre una columna de gel de sflice eluida con CH2Cl2/MeOH para dar 3-[4-(2-benzofuran-2-il-etoxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,15 g, 83 %). p.f.: 160-162 °C; HPLC: Waters Symmetry C1s, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 95/5 de acetonitrilo/H3PO4 al 0,1 % en 5 min,: tR = 5,01 min (99 %); 1H RMN (DMSO-d6) 51,87 - 1,98 (m, 1H, CHH), 2,37 (cd, J = 4,5, 13,2 Hz, 1H, CHH), 2,59 (d, J = 1,9 Hz, 1H, CHH), 2,80 -2,97 (m, 1H, CHH), 3,29 (t, J = 6,2 Hz, 2H, CH2), 4,10 - 4,36 (m, 2H, CH2), 4,49 (t, J = 6,3 Hz, 2H, CH2), 5,09 (dd, J = 5,1, 13,4 Hz, 1H, NCH), 6,74 (s, 1H, Ar), 7,11 - 7,29 (m, 2H, Ar), 7,29 - 7,40 (m, 2H, Ar), 7,44 - 7,62 (m, 3H, Ar), 10,96 (s, 1H, NH). 13C RMN (DM SO^) 522,33, 28,11, 31,18, 44,97, 51,56, 65,86, 103,43, 110,70, 115,01, 115,36, 120,52, 122,66, 123,52, 128,42, 129,84, 129,91, 133,31, 153,44, 153,99, 155,72, 167,95, 170,96, 172,80; LCMS: 405; Anal calc. para C23H2qN205 0,06 EtOAc: C, 68,13; H, 5,04; N, 6,84; Observado: C, 67,73; H, 5,16; N, 6,75.
5.293 4-((2-(2,6-DIOXOPIPERIDIN-3-IL)-1-OXOISOINDOLIN-4-ILOXI)METIL)BENZONITRILO
Figure imgf000219_0001
A una mezcla de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,25 g, 0,86 mmol) y K2CO3 (0,38 g, 2,74 mmol) en DMF (40 ml), se le anadio lentamente 4-(bromometil)benzonitrilo (0,48 ml, 2,46 mmol). La mezcla de reaction se agito a temperatura ambiente durante una noche. Se anadio mas cantidad de K2CO3 (0,38 g, 2,74 mmol) y la mezcla de reaccion se calento a 80 °C durante una noche. Se anadio acido acetico (5 gotas) a la mezcla de reaccion. El disolvente se evaporo y el residuo se repartio entre acetato de etilo (100 ml) y una solution saturada de bicarbonato sodico (100 ml). El solido que no se uso en la solucion se filtro y se agito en metanol (400 ml). Despues el solido se filtro, se lavo con metanol (100 ml) y se seco para dar 4-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)benzonitrilo en forma de un solido de color blanco (0,31 g, rendimiento del 66 %): HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, acetonitrilo/H3PO4 al 0,1 %: gradiente 10/90 a 90/10 en 15 min; 5 min a 90/10: 10,45 min (98,49 %); p.f.: 290-292 °C; 1H RMN (DMSO-d6) 51,85 - 2,12 (m, 1H, CHH), 2,34 -2,47 (m, 1H, CHH), 2,54 -2,70 (m, 1H, CHH), 2,78 -3,07 (m, 1H, CHH), 4,13 -4,39 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,47 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,12 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CH), 5,37 (s, 2H, CH2), 7,32 (dd, J = 7,6, 16,7 Hz, 2H, Ar), 7,41 - 7,57 (m, 1H, Ar), 7,69 (d, J = 8,1 Hz, 2H, Ar), 7,88 (d, J = 8,3 Hz, 2H, Ar), 10,98 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-d6) 522,37, 31,16, 45,03, 51,58, 68,49, 110,60, 114,93, 115,53, 118,67, 128,01, 129,83, 129,97, 132,41, 133,40, 142,41, 153,07, 167,90, 170,95, 172,81; LCMS MH = 376; Anal calc. para C21H17N3O4 0,1 H2O: C, 66,87, H, 4,60, N, 11,14; Observado: C, 66,43, H, 4,47, N, 11,05.
5.294 3-[4-(4-HEXILAMINOMETIL-BENCILOXI)-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000219_0002
Etapa 1: A la solucion en acetonitrilo (20 ml) de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(4-clorometil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco (0,7 g, 1,62 mmol), se le anadio hexil amina (1,07 ml, 8,1 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se concentro y el aceite resultante se uso en la siguiente etapa sin purificacion.
Etapa 2: A la solucion en DMF (10 ml) de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[4-(4-hexilaminometil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco (0,8 g, 1,62 mmol), se le anadio carbonato potasico (0,22 g, 1,62 mmol). La mezcla se agito a 70 °C durante 9 horas. La mezcla se filtro. El filtrado se concentro en un evaporador rotatorio. La mezcla resultante se purifico sobre una columna de gel de sflice y se eluyo con CH 2 Cl 2 /MeOH para dar 3-[4-(4-hexilaminometil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (84 mg, 12 %). p.f.: 155-157 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometros, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de acetonitrilo/H 3 PO 4 al 0,1 % en H2O de 5/95 a 100/0 en 5 min y mantenido a 100/0 durante 5 min: tR = 5,09 min (96 %). 1 H RMN (DMSO-de) 50,65 - 0,98 (m, 3H, CH 3 ), 1,11 - 1,33 (m, 6H, CH2,CH2,CH2), 1,41 (d, J = 6,8 Hz, 2H, CH2), 1,86 - 2,07 (m, 1H, CHH), 2,35 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,54 - 2,66 (m, 1H, CHH), 2,78 - 3,09 (m, 1H, CHH), 3,71 (s, 2H, CH2), 4,17 - 4,53 (m, 2H, CH2), 5,10 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,22 (s, 2H, CH2), 7,12 -7,63 (m, 7H, Ar). 13 C RMN (DMSO-de) 513,84, 21,99, 22,30, 26,35, 28,87, 31,13, 45,04, 48,35, 51,53, 52,28, 69,36, 114,94, 115,15, 127,56, 128,15, 129,73, 129,90, 133,24, 134,95, 139,89, 153,40, 167,94, 170,91, 172,7; LCMS MH = 464. Anal calc. para C27H 33 N 3 O4: c , 69,96; H, 7,18; N, 9,06; Observado: C, 61,67; H, 6,22; N, 7,96.
5.295 4-[2-(2,6-DIOXO-PIPERIDIN-3-IL)-1-OXO-2,3-DIHIDRO-1H-ISOINDOL-4-ILOXIMETIL]-N-(2-MORFOLIN-4-IL-ETIL)-BENZAMIDA
Figure imgf000219_0003
Etapa 1: Se anadio cloruro de 4-(clorometil)benzoflo (1,452 g, 7,68 mmol) a una solucion agitada de 2-morfolinoetanamina (1 g, 7,68 mmol) en acetonitrilo (25 ml). La solucion resultante se agito durante 2 horas y la reaccion se completo. La mezcla de reaccion se concentro y se purifico con ISCO para dar 4-clorometil-N-(2morfolin-4-il-etil)-benzamida en forma de un solido de color blanco (1,7 g, rendimiento del 78 %); LCMS MH = 283, 285, 1 H RMN (DMSO-d 6 ) d 2,43 (d, J = 14,5 Hz, 6H, CH2, CH2, CH2), 3,35 - 3,44 (m, 2H, CH2), 3,50 - 3,63 (m, 4H, CH2, CH2), 4,81 (s, 2H, CH2), 7,52 (d, J = 8,1 Hz, 2H, Ar), 7,83 (d, J = 8,3 Hz, 2H, Ar), 8,34 - 8,49 (m, 1H, NH).
Etapa 2: A una solution agitada de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (400 mg, 1,36 mmol), 4-(clorometil)-N-(2-morfolinoetil)benzamida (387 mg, 1,36 mmol) y K 2 CO 3 (189 mg, 1,36 mmol) en DMF (10 ml), se le anadio DIPEA (0,24 ml, 1,36 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reaction resultante se agito a temperatura ambiente durante 21 horas y se calento a 50 °C durante 4 dias. Despues, la mezcla se calento a 80 °C durante una noche y se concentro para purification con ISCO para dar un solido de color blanco, que se trituro en acetonitrilo (3 ml) para dar 4-[2-(2,6-dioxo-piperidin-3-il)-1-oxo-2,3-dihidro-1H-isoindol-4-iloximetil]-N-(2-morfolin-4-iletil)-benzamida en forma de un solido de color blanco (123 mg, rendimiento del 17,7 %). HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente al 5-50 % en 10 min (acetonitrilo/H 3 PO 4 al 0,1 %), 7,28 min (97,4 %); p.f.: 193-195 °C. 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 5 1,91 - 2,10 (m, 1H, CHH), 2,36 - 2,48 (m, 7H, CHH, CH2, CH2, CH2), 2,54 - 2,65 (m, 1H, CHH), 2,83 - 3,02 (m, 1H, CHH), 3,34 - 3,44 (m, 2H, CH2), 3,51 - 3,62 (m, 4H, CH2, CH2), 4,22 - 4,53 (m, 2H, CHH, CHH), 5,05 - 5,18 (m, 1H, CHN), 5,32 (s, 2H, CH2), 7,27 - 7,37 (m, 2H, Ar), 7,44 - 7,52 (m, 1H, Ar), 7,57 (d, J = 8,3 Hz, 2H, Ar), 7,85 (d, J = 8,3 Hz, 2H, Ar), 8,40 (s, 1H, NH), 10,98 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 522,34, 31,18, 36,51, 45,07, 51,58, 53,25, 57,29, 66,16, 68,97, 115,01, 115,35, 127,23, 127,29, 129,78, 129,97, 133,34, 134,16, 139,67, 153,27, 165,78, 167,94, 170,96, 172,81, LCMS MH = 507, Anal. Calc. para C27H30N4Oe 1,2 H2O: C, 61,40; H, 6,18; N, 10,61; Observado: C, 61,10; H, 6,11; N, 10,26.
5.296 3-(4-((6-((DIETILAMINO)METIL)BENZOFURAN-2-IL)METOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000220_0001
Etapa 1: Una mezcla de 5-formilbenzofuran-2-carboxilato de etilo (1,1 g, 4,8 mmol), dietilamina (0,4 g, 5,3 mmol) y acido acetico (0,3 g, 5,5 mmol) en THF (45 ml) se agito a temperatura ambiente durante 30 minutos. Se anadio triacetoxiborohidruro sodico (2,0 g, 9,6 mmol) y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se diluyo con EtOAc (70 ml) y agua (40 ml) y se basifico con NH 4 OH a pH~11. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (40 ml). La solucion de EtOAc combinada se seco y se concentro. El residuo se purifico por cromatografia (SiO 2 , Ch3o H:CH2CI2, 3:97) para dar 5-(dietilaminometil)benzofuran-2-carboxilato de etilo (0,9 g, rendimiento del 70 %): 1 H RMN (CDCl 3 ) 51,05 (t, J = 6,9 Hz, 6H), 1,42 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 2,50-2,75 (c, J = 7,2 Hz, 4H), 3,64 (s, 2H), 4,40-4,47 (c, J = 7,2 Hz, 2H), 7,42-7,53 (m, 3H), 7,62 (d, J = 0,9 Hz, 1H).
Etapa 2: Una solucion de 5-(dietilaminometil)-benzofuran-2-carboxilato de etilo (0,9 g, 3,3 mmol) en THF (15 ml) se anadio lentamente a una solucion agitada de UAIH4/THF (1 M, 4,3 ml, 4,3 mmol) en THF (10 ml) a 5 °C. La mezcla de reaccion se agito a 5 °C durante 30 minutos y despues se inactivo con Na 2 CO 3 sat. (30 ml). La mezcla se agito con CH 2 Cl 2 (50 ml) y la capa acuosa se extrajo con CH 2 Cl 2 (3 x 40 ml). La solucion combinada de CH 2 Cl 2 se lavo con salmuera (40 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO 2 , CH 3 OH:CH 2 Cl 2 , 3:97) para dar [5-(dietilaminometil)benzofuran-2-il]metanol (0,6 g, 87 %); 1 H RMN (CDCl 3 ) 51,05 (t, J = 7,2 Hz, 6H), 2,50-2,57 (c, J = 7,2 Hz, 4H), 2,93 (a, 1H), 3,62 (s, 2H), 4,71 (s, 2H), 6,56 (d, J = 0,3 Hz, 1H), 7,21­ 7,24 (dd, J = 1,8 y 8,4 Hz, 1H), 7,32 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,47 (d, J = 1,2 Hz, 1H).
Etapa 3: Se anadio azodicarboxilato de diisopropilo (0,8 g, 4,2 mmol) a una suspension agitada de trifenilfosfina unida a pofimero (3,5 g, 4,4 mmol) en THF (40 ml) a 3-5 °C. Despues de agitarse a 3 °C durante 10 minutos, se anadio una solucion de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,8 g, 2,8 mmol) y [5-(dietilaminometil)benzofuran-2-il]metanol (0,7 g, 2,8 mmol) en THF (60 ml) a 3-6 °C. Despues de agitarse a 3 °C durante 5 minutos, la mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se filtro y el solido se lavo con CH 2 Cl 2 (40 ml). El filtrado se concentro y el residuo se disolvio en CH 2 Cl 2 (100 ml) y se lavo con NaHCO 3 sat. (40 ml), agua (40 ml),y salmuera (40 ml), y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO 2 , CH3o H:CH2CI2, 3:97) para dar 5-amino-4-(4-((5-((dietilamino)metil)benzofuran-2-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,7, rendimiento del 47 %): 1 H RMN (CDCl 3 ) 51,05 (t, J = 7,2 Hz, 6H), 2,12-2,44 (m, 4H), 2,50-2,57 (c, J = 7,2 Hz, 4H), 3,62-3,64 (m, 5H), 4,40 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 4,45 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 4,87-4,92 (dd, J = 5,7 y 8,7 Hz, 1H), 5,23 (s, 2H), 5,49 (s, 1H), 6,40 (s, 1H), 6,77 (s, 1H), 7,15-7,18 (dd, J = 2,4 y 6,6 Hz, 1H), 7,22-7,29 (m, 1H), 7,39-7,46 (m, 3H), 7,53 (d, J = 0,9 Hz, 1H).
Etapa 4: Una mezcla de 5-amino-4-(4-((5-((dietilamino)metil) benzofuran-2-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,7 g, 1,3 mmol) y K2cO3 (0,2 g, 1,3 mmol) en DMF (10 ml) se calento en un bano de aceite a 80 °C durante 6 horas. La mezcla de reaccion se enfrio y se concentro. El residuo se agito con EtOAc (10 ml) y agua (20 ml). El solido se recogio y se purifico por cromatografia (SiO 2 , CH 3 OH: CH 2 Cl 2 , 3:97 a 5:95) para dar 3-(4-((6-dietilamino)metil)benzofuran-2-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,3 g, rendimiento del 51 %): p.f. 193-195 °C; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 50,97 (t, J = 6,9 Hz, 6H), 1,94-1,98 (m, 1H), 2,39-2,58 (m, 6H), 2,84-2,94 (m, 1H), 3,59 (s, 2H), 4,25 (d, J = 17,7 Hz, 1H), 4,35 (d, J = 17,7 Hz, 1H), 5,07-5,13 (dd, J = 5,1 y 13,2 Hz, 1H), 5,41 (s, 2H), 7,07 (s, 1H), 7,26-7,29 (dd, J = 1,2 y 8,4 Hz, 1H), 7,34-7,37 (dd, J = 0,9 y 6,9 Hz, 1H), 7,46-7,56 (m, 4H), 10,96 (s, 1H); 13 C RMN (DMSO-de) 511,59, 22,28, 31,16, 45,03, 45,96, 51,55, 56,73, 62,55, 107,05, 110,68, 115,11, 115,64, 121,08, 125,66, 127,40, 129,81, 129,94, 133,42, 134,69, 152,67, 152,98, 153,68, 167,88, 170,93, 172,79; Calc. para C27H29N3O5 0,2 H2O: C, 67,68; H, 6,18; N, 8,77, Observado: C, 67,70; H, 5,94; N, 8,63.
5.297 3-(4-((6-((DIETILAMINO)METIL)BENZO[B]TIOFEN-2-IL)METOXI)-1-OXOISOINDOUN-2-IL)PIPERON-2,6-DIONA
Figure imgf000221_0001
Etapa 1: Una mezcla en suspension de rodanina (6,0 g, 45 mmol) y acetato sodico (11,3 g, 137 mmol) en acido acetico glacial (60 ml) se calento en un bano de aceite a 75 °C. Se anadio lentamente p-tolualdehido (5,8 g, 47,9 mmol) y la mezcla se calento a 120 °C durante 1 hora. La mezcla se enfrio a temperatura ambiente y se vertio en hielo agua (400 ml). Despues de agitarse durante 30 minutos, la mezcla se filtro para dar 14 g de un solido de color naranja. El solido se disolvio en NaOH al 5 % (200 ml), se calento en un bano de aceite a 80 °C durante 1 hora y despues se enfrio a temperatura ambiente. La mezcla se acidifico con HCl concentrado y el solido se recogio para dar acido 2-mercapto-3-p-tolilacrilico (6,4 g, rendimiento del 73 %): 1H RMN (DMSO-d6) 52,34 (s, 3H), 7,28-7,31 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,57-7,60 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,71 (s, 1H).
Etapa 2: Una mezcla de acido 2-mercapto-3-p-tolilacrilico (1,5 g, 7,7 mmol) e I2 (2,9 g, 11,6 mmol) en 1,4-dioxano (12 ml) se irradio en microondas a 160 °C durante 12 minutos. La mezcla se enfrio a temperatura ambiente y se vertio en bisulfito sodico sat. (300 ml). El solido se recogio y se seco para dar acido 6-metilbenzo[b]tiofeno-2-carboxflico (1,8 g, 100 %). El compuesto se uso en la siguiente reaction sin purification adicional.
Etapa 3: Se anadio H2SO4 concentrado (5 ml) a una mezcla agitada de acido 6-metilbenzo[b]tiofeno-2-carboxflico (4,4 g, 23,2 mmol) en metanol (100 ml). La mezcla resultante se calento a reflujo durante 3 horas. La mezcla se enfrio y se concentro. El residuo se disolvio en CH2Cl2 (150 ml) y se lavo con NaOH 2 N (40 ml), agua (2 x 40 ml), y salmuera (40 ml), y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, EtOAc:Hexano, 1:9) para dar 6-metilbenzo[b]tiofeno-2.carboxilato de metilo (2,9 g, rendimiento del 60 %): 1H RMN (CDCl3) 52,49 (s, 3H), 3,93 (s, 3H), 7,20-7,26 (m, 1H), 7,65 (s, 1H), 7,74 (d, J = 6 Hz, 1H), 8,01 (s, 1H).
Etapa 4: Se anadio N-bromosuccinimida (4,0 g, 22,5 mmol) a una solution agitada de 6-metilbenzo[b]tiofen-2-carboxilato de metilo (3,6 g, 17,4 mmol) en CCl4 (55 ml). La mezcla de reaccion se calento en un bano de aceite a 75 °C con una bombilla de 300 W que brillo durante 17 horas. La mezcla de reaccion se enfrio, se filtro y el filtrado se lavo con agua (2 x 40 ml) y salmuera (40 ml), y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, EtOAc:Hexano, 1:9) para dar 6-(bromometil)benzo[b]tiofeno-2-carboxilato de metilo (2,2 g, rendimiento del 44 %): 1H RMN (CDCla) 53,90 (s, 3H), 4,40 (s, 2H), 7,39-7,44 (m, 4H).
Etapa 5: Una mezcla de dietilamina (1,0 g, 13,7 mmol), K2CO3 (3,5 g, 25,3 mmol) y 18-corona-6 (cantidad catafitica) en acetona (15 ml) se calento en un bano de aceite a 35 °C. Se anadio una solucion de 6-(bromometil)benzo[b]tiofeno-2-carboxilato de metilo (1,6 g, 5,6 mmol) en acetona (15 ml). La mezcla de reaccion se agito en un bano de aceite a 45 °C durante 3 horas y despues se enfrio a temperatura ambiente. La mezcla se filtro y el filtrado se concentro. El residuo se disolvio en EtOAc (70 ml), se lavo con agua (2 x 30 ml) y salmuera (30 ml), y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, CH3OH:CH2Cl2, 3:97) para dar 6-[(dietilamino)metil]benzo[b]tiofeno-2-carboxilato de metilo (1,3 g, rendimiento del 84 %): 1H RMN (CDCl3) 51,06 (t, J = 6,9 Hz, 6H), 2,52-2,59 (c, J = 7,2 Hz, 4H), 3,68 (s, 2H), 3,93 (s, 3H), 7,38-7,41 (dd, J = 1,2 y 8,4 Hz, 1H), 7,78-7,84 (m, 2H), 8,03 (s, 1H).
Etapa 6: Se anadio lentamente una solucion de 6-[(dietilamino)metil]benzo[b]tiofeno-2-carboxilato de metilo (1,3 g, 4,7 mmol) en THF (20 ml) a una solucion agitada de LiAlH4/THF (1 M, 6 ml, 6 mmol) en THF (10 ml) a 3-6 °C. La solucion resultante se agito a 3 °C durante 30 minutos y despues se inactivo con agua (5 ml). La mezcla se agito con CH2Cl2 (40 ml) y NaHCO3 sat. (20 ml). La capa acuosa se extrajo con CH2Cl2 (2 x 30 ml) y la solucion combinada de CH2Cl2 se lavo con agua (30 ml) y salmuera (30 ml), y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, CH3OH:CH2Cl2, 3:97) para dar [6-[(dietilamino)metil]benzo[b]tiofen-2-il]metanol (1,0 g, rendimiento del 84 %): 1H RMN (CDCls) 5 1,05 (t, J = 6 Hz, 6H), 2,51-2,58 (c, J = 6 Hz, 4H), 2,72 (a, 1H), 3,65 (s, 2H), 4,87 (s, 2H), 7,13 (d, J = 3 Hz, 1H), 7,29-7,32 (d, J = 9 Hz, 1H), 7,61 (d, J = 9 Hz, 1H), 7,77 (s, 1H).
Etapa 7: Se anadio azodicarboxilato de diisopropilo (0,9 g, 4,3 mmol) a una suspension agitada de trifenilfosfina unida a pofimero (3,4 g, 5,4 mmol) en THF (40 ml) a 3-5 °C. Despues de agitarse a 3 °C durante 10 minutos, se anadio lentamente una solucion de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1,1 g, 3,6 mmol) y [6-[(dietilamino)metil] benzo[b]tiofen-2-il]metanol (0,9 g, 3,6 mmol) en THF (80 ml) a 3-6 °C. La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla se filtro y el solido se lavo con CH 2 Cl 2 (40 ml). El filtrado se concentro y el residuo se disolvio en CH 2 Cl 2 (100 ml) y se lavo con NaHCO 3 sat. (30 ml), agua (30 ml), y salmuera (30 ml), y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO 2 , c H3OH:CH2CI2, 3:97) para dar 5-amino-4-(4-((6-((dietilamino)metil)benzo[b]tiofen-2-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,7 g, rendimiento del 35 %).
Etapa 8: Una mezcla de 5-amino-4-(4-((6-((dietilamino)metil) benzo[b]tiofen-2-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,7 g, 1,2 mmol) y K 2 CO 3 (0,2 g, 1,2 mmol) en DMF (10 ml) se calento en un bano de aceite a 80 °C durante 3 horas. La mezcla de reaccion se enfrio y se diluyo con EtOAc (80 ml) y se lavo con agua (3 x 35 ml) y salmuera (35 ml), y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se cristalizo en EtoAc caliente (10 ml) para dar 3-(4-((6-((dietilamino)metil) benzo[b]tiofen-2-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,3 g, rendimiento del 44 %): p.f. 190-192 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 50,98 (t, J = 6 Hz, 6H), 1,96-2,02 (m, 1H), 2,43-2,60 (m, 6H), 2,90­ 2,93 (m, 1H), 3,32 (s, 2H), 4,29 (d, J = 18 Hz, 1H), 4,38 (d, J = 18 Hz, 1H), 5,08-5,14 (dd, J = 3 y 12 Hz, 1H), 5,57 (s, 2H), 7,73-7,53 (m, 5H), 7,75-7,85 (m, 2H), 10,97 (s, 1H); 13 C RMN (DMSO-de) 511,60, 22,31, 31,18, 45,04, 46,11, 51,59, 56,82, 65,28, 115,26, 115,62, 121,94, 123,35, 123,52, 125,56, 129,79, 130,05, 133,40, 137,83, 139,42, 152,87, 167,89, 170,95, 172,80; Calc. para C27H2sN 3 O 4 S 0,2 H2O: C, 65,49; H, 5,98; N, 8,49; S, 6,48, Observado: C, 65,25; H, 5,82; N, 8,38; S, 6,63.
5.298 3-(4-(4-(8-OXA-3-AZABICICLO[3.2.1]OCTAN-3-ILMETIL)BENCILOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERON-2,6-DIONA
Figure imgf000222_0001
Etapa 1: Se anadio trifenilfosfina soportada por poKmero (1,6 mmol/g, 14,2 g, 22,73 mmol) a una suspension agitada de 5-amino-2-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de terc-butilo (3,8 g, 11,36 mmol) en THF (140 ml) a 0 °C, seguido de azodicarboxilato de diisopropilo (4,6 g, 22,73 mmol). Despues de agitar durante 10 minutos, se anadio (4-(clorometil)fenil)metanol (2,67 g, 17,05 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche y se filtro. La resina se lavo con diclorometano (2 x 70 ml). Los filtrados combinados se concentraron al vado para dar un jarabe que se repartio entre EtOAc (300 ml) y agua (100 ml). La capa organica se lavo con salmuera, se seco (Na2SO4) y se concentro al vado para dar un producto en bruto en forma de un aceite de color amarillo. El producto en bruto se purifico por ISCO (columna de 330 g, gradiente de MeOH/CH2Cl2 del 0 % al 5 % en 50 min) para dar 5-amino-2-(4-(4-(clorometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de terc-butilo (4 g, rendimiento del 74 %); 1H RMN (DMSO-d6) 51,39 (s, 9H, CH3, CH3, CH3), 2,07 (d, J = 1,1 Hz, 4H, CH2,CH2), 4,43 (s, 2H, CH2), 4,64 - 4,75 (m, 1H, CH), 4,78 (s, 2H, CH2), 5,27 (s, 2H, CH2), 6,67 - 6,86 (m, 1H, NHH), 7,17 - 7,27 (m, 1H, NHH), 7,32 (d, J = 2,6 Hz, 2H, Ar), 7,49 (d, J = 5,1 Hz, 5H, Ar).
Etapa 2: A una solucion de 5-amino-2-(4-(4-(clorometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de terc-butilo (500 mg, 1,06 mmol) en acetonitrilo (10 ml), se le anadieron clorhidrato de 8-oxa-3-azabiciclo[3.2.1]octano (190 mg, 1,27 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (410 mg, 3,17 mmol). La mezcla formada se agito a temperatura ambiente durante una noche. El disolvente se evaporo al vado. El residuo se recogio en acetato de etilo (100 ml), se lavo con agua (10 ml) y salmuera, y se seco sobre MgSO4. El disolvente se evaporo para dar 2-(4-(4-(8-oxa-3-azabiciclo[3.2.1]octan-3-ilmetil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-amino-5-oxopentanoato de terc-butilo (560 mg, rendimiento del 96 %). 1H RMN (DMSO^) 51,39 (s, 9H, CH3, CH3, CH3), 1,66 - 1,78 (m, 2H, CH2), 1,82 - 1,92 (m, 2H, CH2), 1,97 - 2,30 (m, 6H, CH2, CH2, CH2), 3,44 (s, 2H, CH2), 4,13 - 4,28 (m, 2H, CH, CH), 4,42 (s, 2H, CH2), 4,63 - 4,80 (m, 1H, CH), 5,23 (s, 2H, CH2), 6,65 - 6,87 (m, 1H, NHH), 7,15 - 7,27 (m, 1H, NHH), 7,33 (d, J = 9,3 Hz, 4H, Ar), 7,41 - 7,54 (m, 3H, Ar).
Etapa 3: A una suspension de 2-(4-(4-(8-oxa-3-azabiciclo[3.2.1]octan-3-ilmetil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-amino-5-oxopentanoato de terc-butilo (560 mg, 1,019 mmol) en THF (20 ml), se le anadio terc-butoxido potasico (137 mg, 1,223 mmol) a 0 °C. La mezcla se agito a 0 °C durante 10 minutos, se calento hasta la temperatura ambiente y se agito durante una noche. La reaccion se interrumpio con acido acetico (3 ml), se retiro THF al vado, y el residuo se repartio entre acetato de etilo (70 ml) y bicarbonato sodico saturado (10 ml). El precipitado formado se filtro y el filtrado se lavo con salmuera y se seco sobre sulfato de magnesio. El disolvente se evaporo y el producto en bruto se purifico por HPLC prep. para dar 3-(4-(4-(8-oxa-3-azabiciclo[3.2.1]octan-3-ilmetil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (80 mg, rendimiento del 17 %); p.f.: 228-230 °C; 1H RMN (DMSO-d6) 51,58 - 2,31 (m, 6H, 6 x CHH), 2,31 - 2,50 (m, 2H, CHH, CHH), 2,58 (d, J = 18,3 Hz, 2H, CHH, CHH), 2,82 - 3,03 (m, 1H, CHH), 3,12 (s a, 1H, CHH), 3,39 - 3,60 (m, 2H, CH2), 3,92 - 4,76 (m, 4H, CH2, CH, CH), 5,11 (dd, J = 5,0, 13,1 Hz, 1H, CH), 5,25 (s a, 2H, CH2), 7,12 - 7,84 (m, 7H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO^) 5 22,34, 27,94, 31,16, 45,06, 51,56, 58,19, 60,95, 69,25, 73,58, 114,94, 115,26, 127,64, 129,80, 129,93, 133,30, 137,72, 153,43, 157,78, 158,20, 162,96, 167,97, 170,96, 172,81; LCMS MH = 476; HPLC: Waters Xterra C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, Gradiente (acetonitrilo/HCOONH4 al 0,1 %) 5/95 a 95/5 en 5 min, 95/510 min: tR = 5,26 (100 %).
5.299 3-(4-(4-(8-OXA-3-AZABICICLO[3.2.1]OCTAN-3-ILMETIL)BENCILOXI)-1-OXOISOINDOUN-2-IL)PIPERON-2,6-DIONA
Figure imgf000223_0001
Etapa 1: A una solucion de 5-amino-2-(4-(4-(clorometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de terc-butilo (500 mg, 1,06 mmol) en acetonitrilo (10 ml) se le anadieron clorhidrato de 8-oxa-3-azabiciclo[3.2.1]octano (190 mg, 1,27 mmol) y N,N-Diisopropiletil-amina (410 mg, 3,17 mmol). La mezcla formada se agito a temperatura ambiente durante una noche. El disolvente se evaporo al vado. El residuo se recogio en acetato de etilo (100 ml), se lavo con agua (10 ml) y salmuera, se seco sobre MgSO4, el disolvente se evaporo para dar 2-(4-(4-(8-oxa-3-azabiciclo[3.2.1]octan-3-ilmetil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-amino-5-oxopentanoato de terc-butilo (560 mg, rendimiento del 96 %). 1H RMN (DMSO-de) 51,39 (s, 9H, CH3, CH3, CH3), 1,66 - 1,78 (m, 2H, CH2), 1,82 - 1,92 (m, 2H, CH2), 1,97 - 2,30 (m, 6H, CH2, CH2, CH2), 3,44 (s, 2H, CH2), 4,13 - 4,28 (m, 2H, CH, CH), 4,42 (s, 2H, CH2), 4,63 - 4,80 (m, 1H, CH), 5,23 (s, 2H, CH2), 6,65 - 6,87 (m, 1H, NHH), 7,15 - 7,27 (m, 1H, NHH), 7,33 (d, J = 9,3 Hz, 4H, Ar), 7,41 - 7,54 (m, 3H, Ar).
Etapa 2: A una suspension de 2-(4-(4-(8-oxa-3-azabiciclo[3.2.1]octan-3-ilmetil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-amino-5-oxopentanoato de terc-butilo (560 mg, 1,019 mmol) en THF (20 ml) se le anadio terc-butoxido potasico (137 mg, 1,223 mmol) a 0 °C. La mezcla se agito a 0 °C durante 10 minutos, se calento hasta la temperatura ambiente y se agito durante una noche. La reaccion se interrumpio con acido acetico (3 ml), se retiro THF al vado, el residuo se repartio entre acetato de etilo (70 ml) y bicarbonato sodico saturado (10 ml), el precipitado formado se filtro para dar acido 2-((4-(8-oxa-3-azabiciclo[3.2.1]octan-3-ilmetil)bencil)oxi)-6-((2,6-dioxopiperidin-3-il)carbamoil)benzoico (210 mg, rendimiento del 38 %). 1H RMN (DMSO-de) 51,65 - 1,79 (m, 2H, CHH, CHH), 1,81 - 1,90 (m, 2H, CHH, CHH), 1,97 (d, J = 3,4 Hz, 1H, CHH), 2,04 (s a, 1H, CHH), 2,16 (d, J = 1,7 Hz, 1H, CHH), 2,20 (d, J = 1,7 Hz, 1H, CHH), 2,41 - 2,50 (m, 2H, CHH, CHH), 2,57 (s a, 1H, CHH), 2,77 (s, 1H, CHH), 3,42 (s, 2H, CH2), 4,19 (dd, J = 2,0, 4,2 Hz, 2H, CH, CH), 4,70 (s, 1H, CH), 5,16 (s, 2H, CH2), 7,17 - 7,35 (m, 4H, Ar), 7,35 - 7,53 (m, 3H, Ar), 8,72 (d, J = 8,5 Hz, 1H, NH), 10,85 (s, 1H, NH).
Etapa 3: La mezcla de acido 2-(4-(8-oxa-3-azabiciclo[3.2.1]octan-3-ilmetil)benciloxi)-6-(2,6-dioxopiperidin-3-ilcarbamoil)benzoico (210 mg, 0,41 mmol) y trietil amina (83 mg, 0,82 mmol) en acido acetico (5 ml) se calento a reflujo durante una noche. La mezcla se enfrio a temperatura ambiente, acido acetico se retiro al vado, el residuo se repartio entre EtOAc (50 ml) y NaHCO3 saturado, la capa organica se lavo con agua y salmuera, se seco (MgSO4) y se concentro al vado para dar un producto en bruto. El producto en bruto se suspendio de nuevo en eter (2 x 5 ml) y se filtro para dar 4-(4-(8-oxa-3-azabiciclo[3.2.1]octan-3-ilmetil)benciloxi)-2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)isoindolin-1,3-diona (120 mg, rendimiento del 78 %); p.f.: 196-198 °C; 1H RMN (DMSO-d6) 51,56 - 1,76 (m, 2H, CHH, CHH), 1,76 - 1,87 (m, 2H, CHH, CHH), 1,88 - 2,05 (m, 1H, CHH), 2,12 (d, J = 10,6 Hz, 2H, CHH, CHH), 2,41 (s a, 2H, CHH, CHH), 2,45 - 2,63 (m, 2H, CHH, CHH), 2,79 (d, J = 11,7 Hz, 1H, CHH), 3,37 (s, 2H, CH2), 4,12 (d, J = 1,7 Hz, 2H, CH, CH), 5,02 (dd, J = 5,4, 12,7 Hz, 1H, CH), 5,28 (s, 2H, CH2), 7,27 (d, J = 7,9 Hz, 2H, Ar), 7,40 (dd, J = 3,1, 7,6 Hz, 3H, Ar), 7,53 (d, J = 8,5 Hz, 1H, Ar), 7,69 - 7,85 (m, 1H, Ar), 11,04 (s, 1H, NH); 13C RMN (DMSO-d6) 521,95, 28,29, 30,90, 48,73, 58,06, 61,11, 69,95, 73,69, 115,48, 16,56, 120,19, 127,28, 128,56, 133,24, 134,68, 136,97, 155,53, 165,29, 166,75, 169,87, 172,71; HPLC: Waters Xterra C-18, 3,9 x 150 mm, 5 |jm, 1 ml/min, 240 nm, 25/75 de CH3CN/HCOONH al 0,1 % tR = 3,97 (100 %); Anal. Calc. para C27H27N3O7 0,1 H2O; C, 66,00; H, 5,58; N, 8,55; Observado: C, 65,96; H, 5,68; N, 8,27.
5.300 3-(4-(4-(3-OXA-8-AZABICICLO[3.2.1]OCTAN-8-ILMETIL)BENCILOXI)-1-OXOISOINDOUN-2-IL)PIPERON-2,6-DIONA
Figure imgf000223_0002
Etapa 1: 2-(4-(4-(3-oxa-8-azabiciclo[3.2.1]octan-8-ilmetil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-amino-5-oxopentanoato de terc-butilo
A una suspension de 5-amino-2-(4-(4-(clorometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de terc-butilo (500 mg, 1,06 mmol) en MeCN (10 ml), se le anadieron clorhidrato de (1R,5S)-3-oxa-8-azabiciclo[3.2.1]octano (316 mg, 2,114 mmol) y A/,H-diisopropiletilamina (0,41 ml, 2,33 mmol). La mezcla se calento hasta 60 °C y se agito durante una noche. Despues de ~15 h, la mezcla de reaccion se concentro a sequedad y el residuo solido se repartio entre EtOAc (150 ml) y NaHCO 3 1 N (30 ml). La capa acuosa se lavo con mas cantidad de EtOAc (150 ml). Las capas organicas se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron (Na 2 SO 4 ), se concentraron al vado y despues se secaron en un horno de vado a 60 °C para proporcionar 2-(4-(4-(3-oxa-8-azabiciclo[3.2.1]octan-8-ilmetil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-amino-5-oxopentanoato de terc-butilo en forma de un solido de color blanco (580 mg, rendimiento del 100 %); LC/MS M+H = 550. El solido se uso en la siguiente etapa sin purification adicional.
Etapa 2: 2-(4-(4-(3-oxa-8-azabiciclo[3.2.1]octan-8-ilmetil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-amino-5-oxopentanoato de ferc-butilo
A una solution enfriada de 2-(4-(4-(3-oxa-8-azabiciclo[3.2.1]octan-8-ilmetil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-amino-5-oxopentanoato de terc-butilo (580 mg, 1,06 mmol) en THF (10 ml) en un bano de hielo, se anadio en una portion KOfBu (154 mg, 1,38 mmol) en forma de un solido. El bano de hielo se elimino inmediatamente y la mezcla de reaction se agito a temperatura ambiente durante 90 min. La mezcla de reaction se enfrio en un bano de hielo y se inactivo mediante la adicion de acido acetico (0,162 ml, 2,82 mmol). Los volatiles se retiraron al vado para dar un solido de color blanco que se repartio entre EtOAc (125 ml) y NaHCO 3 1 N (30 ml). La capa acuosa se extrajo con mas cantidad de EtOAc (~75 ml). La capa organica combinada se lavo con salmuera, se seco (Na 2 SO 4 ), y se concentro al vado para dar un solido de color blanquecino (400 mg, rendimiento en bruto). El solido se trituro con Et 2 O (40 ml) con la ayuda de sonicacion, se recogio en un embudo de filtro y se lavo con mas cantidad de Et 2 O. Una trituration similar se realizo con agua (35 ml) y el solido se recogio en un embudo de filtro, se seco por succion, despues se puso en un horno de vado a 60 °C durante varias horas para dar 2-(4-(4-(3-oxa-8-azabiciclo[3.2.1]octan-8-ilmetil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-amino-5-oxopentanoato de terc-butilo en forma de un solido de color blanco (305 mg, rendimiento del 61 %): HPLC: Waters Symmetry C 13 , 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 15/85 de CH 3 CN/H 3 PO4 al 0,1 %, 6,81 min (95,0 %); p.f.: 243-245 °C; 1 H RMN (DMSO-de) 51,69 - 1,81 (m, 2H, CH2), 1,86 -2,06 (m, 3H, 3 x CHH), 2,33 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,52 - 2,64 (m, 1H, CHH), 2,81 - 3,02 (m, 3H, 3 x CHH), 3,35 - 3,46 (m, 4H, CH2, CHH, CHH), 3,48 - 3,59 (m, 2H, CHH, CHH), 4,25 (d, J = 17,4 Hz, 1H, CHH), 4,42 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CH), 5,22 (s, 2H, CH2), 7,27 - 7,55 (m, 7H, Ar), 10,97 (s, 1H, Ar); 13 C RMN (DMSO-de) 522,33, 24,56, 31,18, 45,06, 51,55, 56,42, 59,89, 69,41,72,51, 114,94, 115,19, 127,61, 128,60, 129,78, 129,93, 133,28, 134,99, 139,32, 153,49, 167,99, 170,96, 172,81; LC/MS M+H = 476; Anal calc. para C27H2sN 3 O5 0,17 H2O 0,26 EtOAc: C, 67,15; H, 6,31; N, 8,38, Observado: C, 67,15; H, 6,23; N, 8,49.
5.301 3-[5-CLORO-4-(4-MORFOLIN-4-ILMETIL-BENCILOXI)-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERON-2,6-DIONA
Figure imgf000224_0001
Etapa 1: Preparation de ester metflico del acido 4-cloro-3-hidroxi-2-metil-benzoico
A la solucion agitada de acido 4-cloro-3-hidroxi-2-metilbenzoico (2,5 g, 13,40 mmol) en MeOH (20 ml) se le anadio acido sulfurico (0,263 g, 2,68 mmol). La solucion resultante se hizo reaccionar a 62 °C durante dos dias. La mezcla de reaccion se concentro para dar una solucion de color pardo (30 ml), a la que se le anadio agua (80 ml). La mezcla se agito y el solido de color pardo claro se elimino por precipitation. La mezcla se extrajo con EtOAc (100 ml). La capa organica se concentro y se purifico por columna de gel de sflice (120 g de EtOAc/Hexanos) para dar ester metflico del acido 4-Cloro-3-hidroxi-2-metil-benzoico en forma de un solido de color blanco (6,9 g, rendimiento del 74 %). Se uso en la siguiente etapa sin trabajo o purificacion adicional.
Etapa 2: Preparacion de ester metflico del acido 3-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-4-cloro-2-metilbenzoico
A una solucion agitada de 4-cloro-3-hidroxi-2-metilbenzoato de metilo (6,34 g, 31,6 mmol) y 1H-imidazol (5,38 g, 79 mmol) en DMF (60 ml) en un MFR de 250 ml en un bano de hielo se anadio terc-butilclorodimetilsilano (5,24 g, 34,8 mmol). Despues de 20 minutos, el bano de hielo se retiro y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 2 horas. A la mezcla se le anadio hielo-agua (50 ml), el precipitado resultante se extrajo con acetato de etilo (2 x 40 ml). Las fases de EtOAc combinadas se lavaron con agua (40 ml) y salmuera (40 ml), y se concentro para dar un aceite (14,08 g), que se purifico por columna de gel de sflice para dar ester metflico del acido 3-(terc-Butil-dimetilsilaniloxi)-4-cloro-2-metil-benzoico en forma de un aceite, 8,38 g, rendimiento del 84 %. El producto se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 3: Preparacion de ester metflico del acido 2-bromometil-3-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-4-cloro-benzoico A una solucion de 3-(terc-butildimetilsililoxi)-4-cloro-2-metilbenzoato de metilo (8,38 g, 26,6 mmol) en acetato de metilo (50 ml, 26,6 mmol) se le anadio 1-bromopirrolidina-2,5-diona (4,74 g, 26,6 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se calento a 50 °C durante una hora. La mezcla de reaccion se enfrio a temperatura ambiente y se lavo con sulfito sodico al 50 % (Na2SO3, 50 ml), agua (50 ml) y salmuera (50 ml). La fase organica se seco en MgSO4 y se concentro para dar un aceite, que se purifico por columna de gel de sflice (120 g, EtOAc al 1 % en gradiente de Hex al 5 % en 18 minutos) para dar ester metilico del acido 2-bromometil-3-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-4-cloro-benzoico en forma de un aceite (9,53 g, rendimiento del 91 %). El producto se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 4: Preparacion de ester metflico del acido 4-[4-(terc-Butil-dimetil-silaniloxi)-5-cloro-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-4-carbamoil-butmco
A una solucion agitada de 2-(bromometil)-3-(terc-butildimetilsililoxi)-4-clorobenzoato de metilo (9,5 g, 24,13 mmol) en acetonitrilo (90 ml) a temperatura ambiente se le anadio clorhidrato de 4,5-diamino-5-oxopentanoato de (S)-metilo (5,22 g, 26,5 mmol). A la suspension se le anadio lentamente N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (8,37 ml, 50,7 mmol). La suspension se calento a 40 °C durante 24 horas. El disolvente se evaporo para dar un aceite de color amarillo, que se agito en eter (150 ml) durante una noche. La suspension se filtro y se aclaro con extra eter dietflico (50 ml) para dar un solido de color amarillo claro y el filtrado. El filtrado se lavo con HCl 1 N (50 ml), bicarbonato sodico saturado (80 ml) y salmuera (50 ml). La fase de eter se evaporo para dar ester metflico del acido 4-[4-(terc-Butildimetil-silaniloxi)-5-cloro-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-4-carbamoil-butmco en forma de un aceite, 8,18 g, rendimiento en bruto del 76 %. Se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 5: Preparacion de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-(5-cloro-4-hidroxi-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-butmco
A una solucion agitada de 5-amino-4-(4-(terc-butildimetilsililoxi)-5-cloro-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de (S)-metilo (8,16 g, 18,50 mmol) en DMF (25 ml) y agua (10 ml) en un bano de hielo se le anadio carbonato potasico (1,279 g, 9,25 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una hora. A la mezcla de color pardo se le anadio acetonitrilo (15 ml) y se agito a temperatura ambiente durante 10 minutos. El disolvente se evaporo. El aceite resultante se purifico por columna de gel de sflice (MeOH/CH2Cl2, gradiente del 0,5 % al 8 % en 60 min) para dar ester metflico del acido 4-carbamoil-4-(5-cloro-4-hidroxi-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il)-butmco en forma de un solido de color blanquecino (4,62 g, rendimiento del 76 %). Se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 6: Preparacion de ester metflico del acido 4-[4-(4-bromometil-benciloxi)-5-cloro-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-4-carbamoil-butmco
Una mezcla de 5-amino-4-(5-cloro-4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (4,6 g, 14,08 mmol), 1,4-bis(bromometil)benceno (11,15 g, 42,2 mmol) y carbonato potasico (1,946 g, 14,08 mmol) en acetonitrilo (70 ml) se agito a temperatura ambiente durante 10 min y despues calento a 50 °C durante 5 horas. La mezcla de reaccion se enfrio a temperatura ambiente, se filtro y se aclaro con acetonitrilo para dar un solido de color blanco tipo gel. El filtrado se purifico por columna de gel de sflice (MeOH/CH2Ch) para dar un solido de color blanco (1,17 g, rendimiento del 16 %). Se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 7: Preparacion de ester metflico del acido 4-carbamoil-4-[5-cloro-4-(4-morfolin-4-ilmetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-butmco
A una suspension agitada de 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-5-cloro-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,436 g, 0,855 mmol) en acetonitrilo (10 ml) a temperatura ambiente se le anadio morfolina (0,745 ml, 8,55 mmol) y se agito durante una hora. El disolvente se evaporo para dar un aceite, que se agito en agua (15 ml) y EtOAc (20 ml). La mezcla se lavo con agua (2 x 30 ml) y salmuera (15 ml), se seco y se concentro para dar un aceite transparente (0,46 g, rendimiento en bruto del 104 %). Se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional.
Etapa 8: Preparacion de 3-[5-Cloro-4-(4-morfolin-4-ilmetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona
A una solucion agitada de 5-amino-4-(5-cloro-4-(4-(morfolinometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,44 g, 0,853 mmol) en THF (10 ml) en un bano de hielo a 0 °C se le anadio 2-metilpropan-2-olato potasico (0,192 g, 1,706 mmol) y se agito durante 10 minutos. La reaccion se inactivo rapidamente con HCl 1 N a pH ~4, y se neutralizo con NaHCO3 saturado a pH ~7 La mezcla se extrajo con EtOAc (2 x 30 ml), se seco y se evaporo para dar un solido de color blanco, que se purifico por columna de gel de sflice para dar 3-[5-Cloro-4-(4-morfolin-4-ilmetilbenciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (72 mg, rendimiento del 17 %); p.f., 224-226 °C. Hp LC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 pm, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 95/5 en 5 min, isocratica a 95/5 en 5 min (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 4,62 min (98,7 %). 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 81,92 - 2,05 (m, 1H, CHH), 2,26 - 2,46 (m, 5H, CHH, CH2, CH2), 2,55 - 2,67 (m, 1H, CHH), 2,83 - 3,01 (m, 1H, CHH), 3,47 (s, 2H, CH2), 3,52 - 3,62 (m, 4H, CH2, CH2), 4,39 -4,66 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,21 (s, 2H, CH2), 7,29 - 7,39 (m, 2H, Ar), 7,41 - 7,53 (m, 3H, Ar), 7,66 (d, J = 8,1 Hz, 1H, Ar), 11,02 (s, 1H, NH). 1H RMN (DMSO-d6) 13C RMN (DMSO-d6) 522,30, 31,11,45,79, 51,68, 53,14, 62,07, 66,17, 73,52, 118,96, 128,10, 128,95, 130,65, 132,74, 133,96, 135,16, 138,06, 149,42, 166,80, 170,69, 172,80. LC/MS (M+1)+ = 484; Anal calc. para C25H26N3O5Cl: C, 62,05; H, 5,42; N, 8,68; Cl, 7,33, Observado: C, 61,93; H, 5,42; N, 8,61; Cl, 7,22.
5.302 3-[5-METIL-4-(4-MORFOUN-4-ILMETIL-BENCILOXI)-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000226_0001
Una mezcla de 3-(5-doro-4-(4-(morfolinometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,2 g, 0,413 mmol), tetraquis(trifenilfosfina)paladio (0) (0,096 g, 0,083 mmol) se lavo abundantemente con nitrogeno, y se anadio tetrametilestannano (0,114 ml, 0,827 mmol) en Tolueno (3 ml) y DMF (1 ml). Se calento en un vial para microondas de 2-5 ml a 130 °C desde 12:20 pm durante 2 horas. La mezcla se purifico por HPLC preparativa (Agua/MeCN, todo con HCOOH al 0,1 %) para dar 3-[5-Metil-4-(4-morfolin-4-ilmetil-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (66 mg, rendimiento del 20 %); p.f., 232-234 °C. HPLC: Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 70/30 en 5 min, isocratica a 70/30 en 5 min (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 4,78 min (96,3 %). 1 H RMN (DMSO-de) 51,90 - 2,07 (m, 1H, CHH), 2,23 - 2,48 (m, 8H, CHH, CH2CH2, CH3), 2,55 - 2,67 (m, 1H, CHH), 2,83 - 3,02 (m, 1H, CHH), 3,42 - 3,50 (m, 2H, CH2), 3,52 - 3,66 (m, 4H, CH2CH2), 4,35 - 4,64 (m, 2H, CH2), 5,01 - 5,19 (m, 3H, NCH, CH2), 7,26 - 7,52 (m, 6H, Ar), 11,00 (s, 1H, NH).
13 C RMN (DMSO-de) 5 16,47, 22,42, 31,18, 45,77, 51,55, 53,15, 62,13, 66,20, 72,82, 117,80, 127,97, 128,98, 131,30, 131,89, 133,74, 135,93, 137,80, 151,86, 167,74, 170,95, 172,90. LC/MS m/e = 464. Anal calc. para C26H29N3O5: C, 67,37; H, 6,31; N, 9,07, Observado: C, 67,07; H, 6,24; N, 9,04.
5.3033-(4-((3-((METILAMINO)METIL)ISOXAZOL-5-IL) METOXI)-1-OXOISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000226_0002
Etapa 1: (5-(((terc-Butildimetilsilil)oxi)metil)isoxazol-3-il)metanol
Se anadio borohidruro sodico (0,596 g, 15,77 mmol) a una mezcla agitada de 5-((tercbutildimetilsililoxi)metil)isoxazol-3-carboxilato de etilo (4,5 g, 15,77 mmol) en etanol (25 ml), y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 4 h. Se anadio agua (50 ml) y la mezcla se evaporo para retirar el etanol. El producto acuoso restante se extrajo con EtOAc (2 x 75 ml), y las capas organicas combinadas se lavaron con salmuera (100 ml), se secaron (MgSO4), y se evaporaron, proporcionando 3,67 g en forma de un aceite incoloro; 1H RMN (CDCl3) 5 0,12 (s, 6H), 0,92 (s, 9H), 4,70 - 4,82 (m, 4H), 6,25 (s, 1H).
Etapa 2: 3-(Bromometil)-5-(((terc-butildimetilsilil)oxi)metil)isoxazol
Una solucion de (5-((terc-butildimetilsililoxi)metil)isoxazol-3-il)metanol (3,47 g, 14,26 mmol) en diclorometano (25 ml) se enfrio a 0 °C, y se anadieron trifenilfosfina (4,11 g, 15,68 mmol) y tetrabromuro de carbono (4,49 g, 13,54 mmol). Despues de 2 h, la mezcla se evaporo al vado y el residuo se cargo directamente sobre una columna de gel de sflice, realizandose con un gradiente de hexanos-acetato de etilo, y eluyendo el producto en EtOAc al 5 %. El producto se obtuvo en forma de un aceite incoloro, 3,7 g, con un rendimiento del 85 %; 1H RMN (CDCl3) 50,13 (s, 6H), 0,93 (s, 9H), 4,41 (s, 2H), 4,77 (s, 2H), 6,29 (s, 1H).
Etapa 3: ((5-(Hidroximetil)isoxazol-3-il)metil)metil) carbamato de terc-butilo
Se disolvio 3-(bromometil)-5-((terc-butildimetilsililoxi)metil)isoxazol (3,7 g, 12,08 mmol) en Metilamina, solucion al 33 % en peso en etanol absoluto (100 ml, 12,08 mmol) (100 ml), y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 1 h, y despues se evaporo a sequedad. El residuo se disolvio en THF, y se anadieron dicarbonato de di-terc butilo (5,80 g, 26,6 mmol) y DIEA (6,94 ml, 39,9 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 16 h. Despues, se anadieron 5 ml de solution de tampon a pH 7, y se anadieron TBAF 1 M en THF (20 ml), y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 3 h. Despues, la mezcla se evaporo al vatio. El residuo se repartio entre EtOAc (75 ml) y agua (100 ml). La fase acuosa se extrajo con EtOAc (75 ml), y las capas organicas combinadas se lavaron con agua (2 x 100 ml) y salmuera (100 ml), se secaron (MgSO 4 ), y se evaporaron. Este producto en bruto se uso directamente tal cual en la siguiente etapa, sin caracterizacion o purification adicional.
Etapa 4: 5-Amino-4-(4-((3-(((terc-butoxicarbonil)metilamino) metil)isoxazol-5-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo
Una mezcla de 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (1,206 g, 4,13 mmol) y (5-(hidroximetil)isoxazol-3-il)metil(metil)carbamato de terc-butilo (1 g, 4,13 mmol) se enfrio a 0 °C. Se anadio trifenilfosfina, unida a poKmero, 3 mmol/g (2,75 g, 8,26 mmol) seguido de DIAD (1,625 ml, 8,26 mmol). El bano de hielo se dejo fundirse, y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 16 h. La mezcla se filtro y el filtrado se evaporo. El residuo se disolvio en EtOAc (100 ml) y se lavo con Na 2 CO 3 acuoso al 10 % (2 x 100 ml) y agua (2 x 100 ml), y se evaporo. El residuo se sometio a cromatografia usando un gradiente de cloruro de metileno-acetonitrilo, eluyendo el producto en acetonitrilo al 70-80 %, y se obtuvieron 0,50 g en forma de un aceite, con un rendimiento del 24 %.
Etapa 5: 3-(4-((3-((Metilamino)metil)isoxazol-5-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona
Una solucion de 5-amino-4-(4-((3-((terc-butoxicarbonil(metil)amino) metil)isoxazol-5-il)metoxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (0,5 g, 0,968 mmol) en THF (100 ml) se enfrio a 0 °C, y se anadio terc-butoxido potasico (0,109 g, 0,968 mmol). La reaction avanzo a esta temperatura, comenzando en t = 2:00 PM. Despues de 30 min, la mezcla se inactivo con AcOH (5 ml) y despues se repartio entre NaHCO 3 acuoso saturado (100 ml) y EtOAc (100 ml), y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (100 ml). La fases organicas combinadas se lavaron con NaHCO 3 acuoso saturado (100 ml), agua (100 ml), y salmuera (100 ml), se secaron (MgSO 4 ) y se evaporaron, proporcionando 0,39 g en forma de un aceite. El residuo se disolvio en CH 2 Cl 2 (20 ml) con agitation a ta, y se anadio Hcl 2 M en Et 2 O (4 ml). La mezcla se agito a temperatura ambiente, durante 16 h. Despues, la mezcla se repartio entre agua (50 ml) y CH 2 Cl 2 (50 ml), y la fase acuosa se hizo basica usando una solucion acuosa al 10 % de carbonato sodico. La mezcla se extrajo en EtOAc (3 x 50 ml), y los extractos combinados se secaron (MgSO 4 ) y se evaporaron. Despues del secado, se obtuvieron 160 mg en forma de un solido de color blanco, con un rendimiento del 43 %; p.f. 220-222 °C. HPLC: Waters X-Terra, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, 5/95 a 95/5 de CH 3 CN-NH 4 (HCO 2 ) al 0,1 % durante 5 min y despues durante 10 min 95/5 de CH 3 CN-NH4(HCO2) al 0,1 %: 3,70 (100 %). 1 H RMN (DMSO-de) 5 1,94 -2,04 (m, 1H), 2,26 (s, 3H), 2,35 - 2,47 (m, 1H), 2,58 (d, J = 17,8 Hz, 1H), 2,82 - 3,00 (m, 1H), 3,70 (s, 2H), 4,24 (d, J = 17,6 Hz, 1H), 4,34 -4,47 (m, J = 17,6 Hz, 1H), 5,11 (dd, J = 5,0, 13,1 Hz, 1H), 5,44 (s, 2H), 6,64 (s, 1H), 7,30 -7,44 (m, 2H), 7,46 - 7,58 (m, 1H), 10,98 (s, 1H). 13 C RMN (DMSO-de) 522,33, 31,20, 35,23, 45,02, 45,54, 51,62, 60,72, 103,86, 115,07, 115,96, 129,87, 129,94, 133,50, 152,68, 162,90, 166,98, 167,82, 170,94, 172,80, Anal. Calc. para C19H20N 4 O5 0,5 H2O: C, 58,01 %; H, 5,38 %; N, 14,24 %; Observado: C, 58,00 %; H, 5,20 %; N, 13,90 %.
5.304 3-(1-OXO-4-((4-((4-(5-(2-OXOHEXAHIDRO-1H-TIENO[3,4-D]IMIDAZOL-4-IL)PENTANOIL)PIPERAZIN-1-IL)METIL)BENCIL)OXI)ISOINDOLIN-2-IL)PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000227_0001
Etapa 1: Se anadieron piperazin-1-carboxilato de terc-butilo (0,6 g, 3,2 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (9,6 ml, 3,2 mmol) a una solucion agitada de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,7 g, 1,6 mmol) en CH2Cl2 (60 ml). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se lavo con agua (2 x 35 ml) y salmuera (35 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO2, CH3OH al 3 %/CH2Cl2 durante 15 min despues al 5 % durante 5 min y mantenimiento durante 15 min despues al 10 % durante 5 min y mantenimiento durante 15 min) para dar 4-(4-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)bencil)piperazin-1-carboxilato de terc-butilo (0,7 g, 83 %): 1H rMn (DMsO-d6) 5 1,38 (s, 9H), 1,96-2,00 (m, 1H), 2,28-2,32 (m, 4H), 2,54-2,60 (m, 2H), 2,87-2,93 (m, 1H), 3,29-3,32 (m, 4H), 3,48 (s, 2H), 4,22-4,28 (d, J = 18 Hz, 1H), 4,39-4,45 (d, J = 18 Hz, 1H), 5,08-5,14 (dd, J = 6 y 12 Hz, 1H), 5,23 (s, 2H), 7,31-7,51 (m, 7H), 10,97 (s, 1H); 13C RMN (DMSO-d6) 522,33, 28,00, 31,16, 45,06, 51,55, 52,30, 61,59, 69,36, 78,68, 114,94, 115,20, 127,63, 128,94, 129,78, 129,92, 133,27, 135,28, 137,72, 153,46, 153,74, 167,99, 170,95, 172,81.
Etapa 2: Se anadio HCl 4 M/dioxano (1,7 ml, 6,8 mmol) a una solucion agitada de 4-(4-((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-4-iloxi)metil)bencil) piperazin-1-carboxilato de terc-butilo (0,7 g, 1,3 mmol) en 1,4-dioxano (10 ml) y CH2Cl2 (10 ml). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante una noche. Se anadio HCl 4 M/dioxano (1 ml) y la mezcla se agito durante una noche. Se anadio eter (20 ml) y el solido se recogio por filtration y se seco para dar 3-(1-oxo-4-(4-(piperazin-1-ilmetil)benciloxi)isoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,7 g, 100 %): 1H RMN (DMSO-d 6 ) 5 1,97-2,01 (m, 1H), 2,42-2,62 (m, 2H), 2,86-2,98 (m, 1H), 3,35-3,37 (m, 8H), 4,25-4,48 (m, 4H), 5,09­ 5,15 (dd, J = 6 y 12 Hz, 1H), 5,29 (s, 2H), 7,35-7,68 (m, 7H), 9,62 (a, 2H), 10,98 (s, 1H); 13 C RMN (DMSO-de) 5 22,36, 31,16, 45,06, 47,35, 51,58, 59,00, 66,30, 69,00, 114,96, 115,35, 127,83, 129,83, 129,95, 131,50, 133,34, 139,00, 153,35, 167,94, 170,96, 172,81.
Etapa 3: Se disolvio 3-(1-Oxo-4-(4-(piperazin-1-ilmetil)benciloxi)isoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,7 g, 1,3 mmol) en DMF (10 ml). A esta solucion se le anadieron trietilamina (0,4 g, 4,0 mmol) y biotina N-hidroxisuccinimida ester (0,4 g, 1,3 mmol). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se concentro al vado y el residuo se disolvio en CH2O 2 (120 ml). Se lavo una solucion de CH2Cl2 con agua (2 x 40 ml) y salmuera (40 ml) y se seco. El disolvente se retiro y el residuo se purifico por cromatografia (SiO 2 , CH3OH al 3 %/CH 2 Cl 2 durante 10 min despues al 10 % durante 10 min y mantenimiento durante 10 min y despues al 15 % durante 5 min y mantenimiento durante 15 min) para dar 3-(1-oxo-4-((4-((4-(5-(2-oxohexahidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il)pentanoil)piperazin-1-il)metil)bencil)oxi)isoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,5 g, 55 %): p.f. 168-170 °C;
1 H RMN (DMSO-de) 51,35-1,63 (m, 5H), 1,98-2,09 (m, 1H), 2,25-2,60 (m, 9H), 2,82-2,85 (m, 2H), 3,05-3,15 (m, 1H), 3,37-3,49 (m, 7H), 4,11-4,45 (m, 4H), 5,08-5,14 (dd, J = 6 y 15 Hz, 1H), 5,23 (s, 2H), 6,35 (s, 1H), 6,42 (s, 1H), 7,32­ 7,51 (m, 7H), 10,97 (s, 1H); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 522,33, 24,82, 28,06, 28,23, 31,16, 32,04, 40,93, 45,07, 51,56, 52,50, 52,90, 55,41, 59,13, 60,98, 61,52, 69,36, 114,97, 115,22, 127,64, 128,95, 129,93, 133,28, 135,33, 137,72, 153,48, 162,63, 167,99, 170,44, 170,96, 172,83; Calc. para Cs 5 H 42 N 6 O 6 S+1,0H 2 O; C, 60,68; H, 6,40; N, 12,13, S, 4,68, Observado: C, 60,32; H, 6,16; N, 11,68; S, 5,28.
5.305 3-(4-((4-((BIS(3,3,3-TRIFLUOROPROPIL)AMINO)METIL)BENCIL)OXI)-1-OXOISOINDOUN-2-IL)PIPERON-2,6-DIONA
Figure imgf000228_0001
Etapa 1: 5-amino-4-(4-((4-((bis(3,3,3-trifluoropropil)amino)metil) bencil)oxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo
A una solucion de 5-amino-4-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (182 mg, 0,383 mmol) en MeCN (5 ml), se le anadieron bis(3,3,3-trifluoropropil)amina (80 mg, 0,383 mmol) y DIEA (0,100 ml, 0,574 mmol). La solucion transparente se agito a temperatura ambiente durante 2 h y despues a 70 °C durante una noche. Despues de 24 h, la reaccion se enfrio a temperatura ambiente y se concentro al vado para dar 5-amino-4-(4-((4-((bis(3,3,3-trifluoropropil)amino)metil)bencil)oxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo
5-amino-4-(4-((4-((bis(3,3,3-trifluoropropil)amino)metil)bencil)oxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo en forma de un aceite. El producto en bruto se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional, suponiendo una conversion cuantitativa. LCMS: MH = 604, ~95 % de area a 240 nm.
Etapa 2: 3-(4-((4-((Bis(3,3,3-trifluoropropil)amino)metil)bencil)oxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona
El producto en bruto obtenido en la etapa 1, 5-amino-4-(4-(4-((bis(3,3,3-trifluoropropil)amino)metil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (231 mg, 0,383 mmol), se disolvio en DMF (5 ml). A la solucion se le anadio K2CO3 anhidro (159 mg, 1,148 mmol). La mezcla se agito durante 20 h a 85 °C y despues se dejo en reposo a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se diluyo con EtOAc (~150 ml) y se lavo con NaHCO3 ac. 1 N (30 ml). La capa organica se lavo con agua (30 ml) y salmuera, se seco sobre Na2SO4, y se concentro al vado para dar un aceite de color castano. El aceite se disolvio en DMF (7 ml) y se purifico usando HPLC preparativa de fase inversa. El producto se eluyo con un gradiente de acetonitrilo/agua (acido formico al 0,1 % en ambas fases moviles, MeCN del 30 al 95 % durante 20 minutos) y las fracciones se recogieron por activacion de masas. Las fracciones deseadas se combinaron y se concentraron al vado hasta que se obtuvo una suspension espesa. El solido se recogio en un embudo sinterizado, se lavo con mas cantidad de agua, y se seco por succion. El secado adicional del solido en un horno de vado a 60 °C proporciono 3-(4-((4-((bis(3,3,3-trifluoropropil)amino)metil)bencil)oxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (57 mg, rendimiento del 26 %): HpLC: Waters Symmetry C1s, 5 ^m, 3,9 x 150 mm, 1 ml/min, 240 nm, 50/50 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 %, 3,77 min (99,9 %); p.f.: 107-109 °C; 1 H RMN (DMSO-d 6 ) 5 1,88 - 2,06 (m, 1H, CHH), 2,34 -2,49 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 2,53 - 2,76 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 2,82 - 3,03 (m, 1H, CHH), 3,63 (s a, 2H, CH2), 4,26 (d, J = 17,6 Hz, 1H, CHH), 4,43 (d, J =17,4 Hz, 1H, CHH), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, CH), 5,24 (s, 2H, CH2), 7,26 - 7,41 (m, 4H, Ar), 7,41 - 7,60 (m, 3H, Ar), 10,96 (s, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 522,33, 30,17 (c, J = 20,9 Hz, M02), 31,16, 45,07, 45,39, 51,58, 56,40, 69,35, 115,01, 115,22, 127,58, 128,62, 128,68, 128,92, 129,76, 129,96, 133,30, 153,46, 167,97, 170,93, 172,80. CCF3 a 30,17 ppm aparece como doblete. CF3 no se detecta, posiblemente debido a la separation; LCMS: MH = 572; Anal calc. para C 27 H 27 F 6 N3O4 0,6 H 2 O: C, 55,69; H, 4,88;
N, 7,22; Observado: C, 55,72; H, 4,83; N, 7,16.
5.306 3-{4-[4-(1H-BENZOIMIDAZOL-2-ILSULFANILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000229_0001
A la solution en CH2Cl2 de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,35 g, 0,790 mmol) se le anadieron 1H-benzo[d]imidazol-2-tiol (0,119 g, 0,790 mmol) y DIPEA (0,276 ml, 1,579 mmol). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaction 7545-071-B mostro producto y MP. A la mezcla se le anadieron agua y CH 2 Cl 2 y despues se extrajo. La capa organica se purifico sobre una columna de gel de sflice eluida con CH 2 Cl 2 y MeOH para dar 3-{4-[4-(1H-benzoimidazol-2-ilsulfanilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidroisoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,2 g, 49 %). Punto de fusion: 160-162 °C.
LC-MS m/e = 513. HPLC Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 micrometros, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 5/95 a 5/95 de CH3CN/H3PO4 al 0,1 % en H 2 O durante 5 min y mantenimiento a 95/5 durante 5 min:7,02 min (97 %). 1 H RMN (DMSO-de) 51,81 - 2,03 (m, 1H, CHH), 2,26 - 2,47 (m, 1H, CHH), 2,53 - 2,63 (m, 1H, CHH), 2,82 - 3,00 (m, 1H, CHH), 4,13 - 4,47 (m, 2H, CH2), 4,58 (s, 2H, CH2), 5,09 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,20 (s, 2H, CH2), 7,04 -7,18 (m, 2H, Ar), 7,26 - 7,34 (m, 2H, AR), 7,37 - 7,63 (m, 7H, Ar), 10,95 (s, 1H, NH), 12,56 (s a, 1H, NH); 13 C RMN (DMSO-de) 5 22,30, 31,16, 34,75, 45,06, 51,55, 69,22, 114,88, 115,22, 127,86, 128,92, 129,77, 129,95, 133,28, 135,66, 137,57, 149,59, 153,41, 167,97, 170,92, 172,80. Anal calc. para C28H24N4O4S, C: 63,27 %; H: 4,55 %;
N:10,54 %; Observado, C: 62,94 %; H: 4,59 %; N:10,40 %.
5.307 3-[4-(4-{[ETIL-(2-FENOXI-ETIL)-AMINO]-METIL}-BENCILOXI)-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL]-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000229_0002
A la solucion en CH3CN (10 ml) de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (0,358 g, 0,808 mmol) a temperatura ambiente se le anadieron N-etil-2-fenoxietanamina (0,160 g, 0,969 mmol) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,267 ml, 1,615 mmol). La solucion resultante se agito a temperatura ambiente durante cuatro horas. El disolvente se evaporo y al residuo se le anadio cloruro de metileno (80 ml). La mezcla se lavo con agua (2 x 50 ml) y salmuera (50 ml), se seco y se concentro para dar un aceite, que se purifico por columna de gel de sflice (MeOH/CH 2 Cl 2 ) para dar 3-[4-(4-{[Etil-(2-fenoxi-etil)-amino]-metil}-benciloxi)-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il]-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanco (0,334 g, rendimiento del 78 %); p.f., 94-96 °C. HPLC:
Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, gradiente de 10/90 a 90/10 en 5 min, isocratica a 90/10 durante 5 min (CH3CN/H3PO4 al 0,1 %), 4,72 min (96,2 %).
1 H RMN (DMSO-d 6 ) 51,01 (t, J = 7,0 Hz, 3H, CH3), 1,91 -2,05 (m, 1H, CHH), 2,35 - 2,48 (m, 1H, CHH), 2,52 - 2,64 (m, 3H, CHH, CH2), 2,80 (t, J = 6,1 Hz, 2H, CH2), 2,84 - 2,99 (m, 1H, CHH), 3,66 (s, 2H, CH2), 4,03 (t, J = 6,1 Hz, 2H, CH2), 4,19 -4,47 (m, 2H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,1, 13,2 Hz, 1H, NCH), 5,22 (s, 2H, CH2), 6,84 -6,95 (m, 3H, Ar), 7,21 -7,29 (m, 2H, Ar), 7,30 - 7,53 (m, 7H, Ar), 10,97 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-d 6 ) 511,81,22,36, 31,20, 45,09, 47,42, 51,37, 51,58, 57,50, 65,95, 69,47, 114,38, 114,97, 115,20, 120,39, 127,59, 128,61, 129,40, 129,79, 129,94, 133,29, 135,00, 139,65, 153,51, 158,40, 168,01, 170,95, 172,82. LC/MS MH = 528. Anal calc. para C31H33N3O5 (+0,1 H2O):
C, 70,33; H, 6,32; N, 7,94, Observado: C, 70,10; H, 6,22; N, 7,83.
5.308 3-{4-[4-(2-DIETILAMINO-ETILSULFANILMETIL)-BENCILOXI]-1-OXO-1,3-DIHIDRO-ISOINDOL-2-IL}-PIPERIDIN-2,6-DIONA
Figure imgf000230_0001
En un vial de centelleo de 20 ml se anadio clorhidrato de 2-(dietilamino)etanotiol (100 mg, 0,590 mmol) a una solution de 3-(4-(4-(bromometil)benciloxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidin-2,6-diona (200 mg, 0,451 mmol) en acetonitrilo (5 ml, 96 mmol). Todos los solidos se disolvieron con agitation. A la mezcla se le anadio N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,197 ml, 1,128 mmol), bromuro de tetrabutilamonio (29 mg, 0,09 mmol) y la solucion de color amarillento se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla en bruto se evaporo para dar un aceite, que se purifico por HPLC preparativa para dar 3-{4-[4-(2-Dietilamino-etilsulfanilmetil)-benciloxi]-1-oxo-1,3-dihidro-isoindol-2-il}-piperidin-2,6-diona en forma de un solido de color blanquecino (69 mg, rendimiento del 30 %); p.f., 135-137 °C. HPLC (Waters Symmetry C-18, 3,9 x 150 mm, 5 ^m, 1 ml/min, 240 nm, isocratica a 23 %/MeCN al 77 %/HsPO4 al 0,1 %): 3,99 min (96,4 %). HPLC (LC5 grad):4,69 min(95,5 %). 1 H RMN (DMSO-de) 50,92 (t, J = 7,2 Hz, 6H, 2CH3), 1,91 - 2,06 (m, 1H, CHH), 2,40 - 2,48 (m, 5H, CH2, CH2, CHH), 2,52 - 2,64 (m, 3H, CHH, CH2), 2,83 -3.01 (m, 1H, CHH), 3,76 (s, 2H, CH2), 4,21 - 4,47 (m, 3H, CH2), 5,11 (dd, J = 5,2, 13,3 Hz, 1H, NCH), 5,23 (s, 2H, CH2), 7,29 - 7,38 (m, 4H, Ar), 7,41 - 7,53 (m, 3H, Ar), 8,21 (s, 1H, NH). 13 C RMN (DMSO-d6) 511,53, 22,38, 28,21, 31,20, 34,96, 45,09, 46,17, 51,58, 52,12, 69,33, 115,00, 115,23, 127,77, 128,90, 129,78, 129,95, 133,31, 135,10, 138,67, 153,46, 163,65 (de HCOOH), 167,99, 170,95, 172,82. LC/MS m/e = 496. Anal calc. para C27H33N3O4S: C, 65,43; H, 6,71; N, 8,48.
5.309 ENSAYOS
5.309.1 Ensayo de inhibition de TNFa en hPMBC
Se obtienen celulas mononucleares de sangre periferica humana (hPBMC) de donantes normales mediante centrifugation por densidad de Ficoll Hypaque (Pharmacia, Piscataway, NJ, Estados Unidos). Las celulas se cultivan en RPMI 1640 (Life Technologies, Grand Island, NY, Estados Unidos) complementado con suero humano AB+ (Gemini Bio-products, Woodland, CA, Estados Unidos) al 10%, L-glutamina 2 mM, penicilina 100 U/ml y estreptomicina 100 pg/ml (Life Technologies).
Las PBMC (2 x 10 5 celulas) se cultivan en placas en placas de cultivo tisular Costar de fondo plano de 96 pocillos (Corning, nY, Estados Unidos) por triplicado. Las celulas se estimulan con LPS (procedente de Salmonella abortus equi, Sigma cat. N.° L-1887, St. Louis, MO, Estados Unidos) a 1 ng/ml final en ausencia o presencia de compuestos. Los compuestos proporcionados en el presente documento se disuelven en DMSO (Sigma) y se realizan diluciones adicionales en medio de cultivo inmediatamente antes del uso. La concentration final de DMSO en todos los ensayos puede ser aproximadamente el 0,25 %. Los compuestos se anaden a las celulas 1 hora antes de la estimulacion con LPS. Despues, las celulas se incuban durante 18-20 horas a 37 °C en CO 2 al 5 %, y los sobrenadantes se recogen despues, se diluyen con medio de cultivo y se someten a ensayo con respecto a los niveles de TNFa mediante ELISA (Endogen, Boston, MA, Estados Unidos). Las CI50 se calcularon usando respuesta a la dosis sigmoidal de regresion no lineal, que restringe el maximo a 100 % y el mmimo al 0 %, permitiendo una pendiente variable (GraphPad Prism v 3.02).
5.309.2 Production de IL-2 y MIP-3a por linfocitos T
Las PBMC se privan de monocitos adherentes colocando 1 x 10 8 de PBMC en 10 ml de medio completo (RPMI 1640 complementado con suero bovino fetal al 10 % inactivado termicamente, L-glutamina 2 mM, 100 U/ml de penicilina y 100 pg/ml de estreptomicina) por placa de cultivo tisular de 10 cm, en una incubadora a 37 °C, CO 2 al 5 %, durante 30-60 minutos. La placa se aclara con medio para eliminar todas las PBMC no adherentes. Los linfocitos T se purifican por selection negativa usando la siguiente mezcla de anticuerpos (Pharmingen) y Dynabead (Dynal) para cada 1 x 10 8 de PBMC no adherentes: 0,3 ml de perlas de IgG anti-raton de oveja, 15 ^l de anti-CD16, 15 ^l de anti-CD33, 15 ^l de anti-CD56, 0,23 ml de perlas anti-CD 19, 0,23 ml de perlas anti-HLA de clase II, y 56 ^l de perlas anti-CD14. Las celulas y la mezcla de perlas/anticuerpos se hacen girar por completo verticalmente durante 30-60 minutos a 4 °C. Los linfocitos T purificados se retiran de las perlas usando un iman Dynal. El rendimiento tipico es de aproximadamente el 50 % de linfocitos T, 87-95 % de CD3+ por citometria de flujo.
Las placas de cultivo tisular de fondo plano de 96 pocillos se recubren con anticuerpo anti-CD3 OKT3 a 5 ^g/ml en PBS, 100 ^l por pocillo, se incuban a 37 °C durante 3-6 horas y despues se lavan cuatro veces con medio completo, 100 ^l/pocillo, justo antes de anadir los linfocitos T. Los compuestos se diluyen hasta 20 veces del final en una placa de cultivo tisular de fondo redondo de 96 pocillos. Las concentraciones finales son de aproximadamente de 10 ^M a aproximadamente 0,00064 ^M. Una reserva 10 mM de compuestos proporcionados en el presente documento se diluye 1:50 al completo para la primera dilution de 20 veces de 200 ^M en DMSO al 2 % y se diluye en serie 1:5 en DMSO al 2 %. El compuesto se anade en 10 ^l por 200 ^l de cultivo, para dar una concentracion final de DMSO del 0,1 %. Los cultivos se incuban a 37 °C, CO2 al 5%, durante 2-3 dfas y los sobrenadantes se analizan con respecto a IL-2 y MIP-3a por ELISA (R&D Systems). Los niveles de IL-2 y MIP-3a se normalizan hasta la cantidad producida en presencia de una cantidad de un compuesto proporcionado en el presente documento, y los valores de CE50 se calculan usando respuesta a la dosis sigmoidal de regresion no lineal, que restringe el maximo al 100 % y el mmimo al 0 %, permitiendo una pendiente variable (GraphPad Prism v 3.02).
5.309.3 Ensayo de proliferacion celular
Se obtienen lmeas celulares (por ejemplo, Namalwa, MUTZ-5, UT-7 y diversas lmeas celulares NHL) del Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH (Braunschweig, Alemania). La lmea celular KG-1 se obtiene de la coleccion americana de cultivos tipo (Manassas, VA, Estados Unidos). La proliferacion celular, indicada por la incorporacion de 3 H-timidina, se mide en todas las lmeas celulares de la siguiente manera.
Las celulas se ponen en placas de 96 pocillos a 6000 celulas por pocillo de medio. Las celulas se trataron previamente con compuestos a aproximadamente 100, 10, 1, 0,1, 0,01, 0,001, 0,0001 y 0 pM en una concentracion final de aproximadamente el 0,25 % de DMSO por triplicado a 37 °C en una incubadora humidificada, con CO2 al 5 % durante 72 horas. Despues, a cada pocillo, se le anade un microcurio de 3 H-timidina (Amersham) y las celulas se incuban de nuevo a 37 °C en una incubadora humidificada, con CO2 al 5 % durante 6 horas. Las celulas se recogen sobre placas de filtro UniFilter GF/C (Perkin Elmer) usando un recogedor de celulas (Tomtec) y las placas se dejan secar durante la noche. Se anade Microscint 20 (Packard) (25 pl/pocillo), y las placas se analizan en TopCount NXT (Packard). Cada pocillo se cuenta durante un minuto. El porcentaje de inhibicion de la proliferacion celular se calcula promediando todos los triplicados y normalizando hasta el control de DMSO (0 % de inhibicion). Cada compuesto se sometio a ensayo en cada lmea celular en tres experimentos separados. Las CI50 se calcularon usando respuesta a la dosis sigmoidal de regresion no lineal, que restringe el maximo a 100 % y el mmimo al 0 %, permitiendo una pendiente variable. (GraphPad Prism v 3.02).
5.309.4 Inmunoprecipitacion e inmunotransferencia
Las celulas (por ejemplo, diversas lmeas celulares NHL) se tratan con DMSO a una cantidad de un compuesto proporcionado en el presente documento durante 1 hora y despues se estimulan con 10 U/ml de Epo (R&D Systems) durante 30 minutos. Se preparan lisados celulares y se inmunoprecipitan con Ab receptor de Epo o se separan inmediatamente por SDS-PAGE. Las inmunotransferencias se sondan con Abs Akt, fosfo-Akt (Ser473 o Thr308), fosfo-Gab1 (Y627), Gab1, IRS2, actina e IRF-I y se analizaron en un Storm 860 Imager usando un programa informatico ImageQuant (Molecular Dynamics).
5.309.5 Analisis del ciclo celular
Las celulas se tratan con DMSO o una cantidad de un compuesto proporcionado en el presente documento durante la noche. Se realiza tincion con yoduro de propidio para el ciclo celular usando CycleTEST PLUS (Becton Dickinson) de acuerdo con el protocolo del fabricante. Despues de la tincion, las celulas se analizan por citometna de flujo mediante un FACSCalibur usando el programa informatico ModFit LT (Becton Dickinson).
5.309.6 Analisis de apoptosis
Las celulas se tratan con DMSO a una cantidad de un compuesto proporcionado en el presente documento en diversos puntos temporales y despues se lavan con tampon de lavado de anexina-V (BD Biosciences). Las celulas se incuban con protema de union a anexina-V y yoduro de propidio (BD Biosciences) durante 10 minutos. Las muestran se analizaron usando citometna de flujo.
5.309.7 Ensayo de luciferasa
Las celulas Namalwa se transfectan con 4 pg de AP1-luciferasa (Stratagene) por 1 x 10 6 celulas y 3 pl de reactivo Lipofectamine 2000 (Invitrogen) de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Seis horas despues de la transfeccion, las celulas se tratan con DMSO o una cantidad de un compuesto proporcionado en el presente documento. La actividad de luciferasa se somete a ensayo usando tampon de lisis de luciferasa y sustrato (Promega) y se mide usando un luminometro (Turner Designs).
5.309.8 Inhibicion de TNFa
Usando procedimientos sustancialmente similares a los proporcionados en la Seccion 5.309.1 anterior, se determinaron los valores de CI50 para algunos de los compuestos proporcionados en el presente documento para la inhibicion de TNFa. Los compuestos ensayados incluyen los compuestos de los Ejemplos 5.224, 5.226 a 5.242, 5.244, 5.245, 5.247 a 5.254, 5.256 a 5.259, 5.261 a 5.268, 5.270 a 5.279 y 5.283 a 5.289.
Los valores de CI50 determinados variaron de aproximadamente 0,02 nM a aproximadamente 2 pM. Estos resultados muestran que los compuestos proporcionados en el presente documento son utiles como inhibidores de TNFa. 5.309.9 Produccion de IL-2
Usando procedimientos sustancialmente similares a los descritos en la Seccion 5.309.2. anterior, se determinaron tambien los valores de CE50 de ciertos compuestos proporcionados en el presente documento para la produccion de IL-2. Los compuestos ensayados incluyen los compuestos de los Ejemplos 5.216 a 5.224, 5.226 a 5.242, 5.244, 5.245, 5.247 a 5.254, 5.256 a 5.259, 5.261 a 5.268, 5.270 a 5.279 y 5.283 a 5.289.
Los valores de CE50 determinados variaron de aproximadamente 0,01 nM a aproximadamente 1,4 pM. Estos resultados muestran que los compuestos proporcionados en el presente documento son utiles como estimuladores de la produccion de IL-2.

Claims (9)

REIVINDICACIONES
1. Un compuesto de formula (IV):
Figure imgf000233_0001
o una sal, solvato o estereoisomero farmaceuticamente aceptable del mismo, en la que:
X es N o C;
Y es CH2 o C=O
R11 y R12 son cada uno independientemente hidrogeno, alquilo (C1-C6); alquil(Ci-C6)-cicloalquilo(C3-C6), alcoxi (Ci-C6), arilo (C6-C10), CO-alquilo (C1-C6), CO-cicloalquilo (C3-C6), CO-arilo (C6-C10), COO-alquilo (C1-C6), halogeno, hidroxilo, oxo, heterociclo de 3 a 10 miembros, heteroarilo de 6 a 10 miembros, NHCO-alquilo (C1-C6), (CHVfenilo, SO2-alquilo (C1-C6), SO2-cicloalquilo (C3-C6), SO2-arilo (C6-C10) o NR14R15, en el que la porcion alquilo, arilo o heteroarilo de cada uno de los grupos puede estar opcionalmente sustituido con uno o mas halogeno, hidroxilo o alcoxi (C1-C6).
R13 es hidrogeno o alquilo(C1-C6);
R14 y R15 son cada uno independientemente hidrogeno o alquilo(C1-C6); y
n es 0, 1, 2 o 3.
2. El compuesto de la reivindicacion 1, en el que X es N.
3. El compuesto de la reivindicacion 1, en el que Y es CH2.
4. El compuesto de la reivindicacion 1, que es:
Figure imgf000233_0002
Figure imgf000234_0001
Figure imgf000235_0001
Figure imgf000236_0001
Figure imgf000237_0001
Figure imgf000238_0001
Figure imgf000239_0001
o una sal, solvato o estereoisomero farmaceuticamente aceptable de los mismos.
5. El compuesto de la reivindicacion 4, que es:
Figure imgf000239_0002
o una sal o estereoisomero farmaceuticamente aceptable del mismo.
6. Una composition farmaceutica que comprende el compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1-4, o una sal, solvato o estereoisomero farmaceuticamente aceptable del mismo.
7. Una composicion farmaceutica que comprende el compuesto de la reivindicacion 5, o una sal, o estereoisomero farmaceuticamente aceptable del mismo.
8. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, o una sal, solvato o estereoisomero farmaceuticamente aceptable del mismo, o la composicion farmaceutica de la reivindicacion 6 para su uso en un metodo de tratamiento, gestion o prevention de una enfermedad o trastorno, en el que la enfermedad o trastorno es cancer, un trastorno asociado con la angiogenesis, dolor, degeneration macular o un smdrome relacionado, una enfermedad cutanea, un trastorno pulmonar, un trastorno relacionado con el asbesto, una enfermedad parasitaria, un transtorno inmunodeficiente, un transtorno del SNC, una lesion del SNC, ateroesclerosis o un transtorno relacionado, sueno disfuncional o un trastorno relacionado, una enfermedad infecciosa, hemoglobinopatia o un trastorno relacionado, o un trastorno relacionado con TNFa.
9. El compuesto de la reivindicacion 5, o una sal o estereoisomero farmaceuticamente aceptable del mismo, o la composicion farmaceutica de la reivindicacion 7 para su uso en un metodo para tratar, manejar o prevenir una enfermedad o trastorno, en el que la enfermedad o trastorno es cancer, un trastorno asociado con angiogenesis, dolor, degeneracion macular o un smdrome relacionado, una enfermedad cutanea, un trastorno pulmonar, un trastorno relacionado con el asbesto, una enfermedad parasitaria, un trastorno de inmunodeficiencia, un trastorno del SNC, una lesion del SNC, aterosclerosis o un trastorno relacionado, sueno disfuncional o un trastorno relacionado, una enfermedad infecciosa, hemoglobinopatia o un trastorno relacionado, o un trastorno relacionado con TNFa.
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