ES2640526T3 - Agente para reducir grasa visceral - Google Patents
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Abstract
Un agente reductor de grasa visceral cuyo principio activo incluye cuerpos de bacterias de ácido láctico y/o cultivos de los mismos, en donde las bacterias de ácido láctico pertenecen a Lactobacillus sp., Lactobacillus gasseri o Lactobacillus helveticus, y/o Lactococcus sp. y/o cultivos de los mismos para su uso en la prevención y/o el tratamiento del síndrome metabólico mediante la reducción de grasa visceral.
Description
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DESCRIPCION
Agente para reducir grasa visceral Campo tecnico
La presente invencion se refiere a un agente reductor de grasa visceral cuyo principio activo incluye organismos fungicos de bacterias de acido lactico, especialmente bacterias de acido lactico que pertenecen al Lactobacillus sp. y Lactococcus sp., y/o cultivos de los mismos.
La presente invencion tambien se refiere a una nueva bebida, alimento o pienso que se ha mezclado con el agente reductor de grasa visceral anteriormente mencionado para anadir una accion de reduccion de grasa visceral.
Una acumulacion de grasa visceral se considera que es una causa del slndrome metabolico, que a su vez se cree que puede desencadenar una posible trombosis, resistencia a la insulina, anomalla de sacarometabolismo, hipertension y otras enfermedades circulatorias. Cuando se toma, el agente reductor de grasa visceral conforme a la presente invencion es eficaz reduciendo la grasa visceral acumulada y por tanto previniendo/tratando el slndrome metabolico.
Antecedentes de la tecnica
En los ultimos anos, la poblacion de personas que muestran slntomas de diabetes, hipertension, hiperlipemia, arteriosclerosis y otras enfermedades y afecciones que se denominan como "enfermedades asociadas con habitos de vida de los adultos" ha ido aumentando en Japon como resultado de la occidentalizacion de los habitos de vida tradicionales. En particular, las enfermedades cardiovasculares y cerebrovasculares se elevan a aproximadamente un tercio de todas las muertes, y esta cifra esta aumentando cada ano. Por consiguiente, la adopcion de medidas para abortar estas enfermedades se ha convertido en un desaflo nacional. Con estas enfermedades arterioescleroticas, el riesgo de patogenesis aumenta significativamente cuando se acumula hipertension, hiperlipemia, disfuncion de tolerancia a la glucosa y otros factores de riesgo. La afeccion en la que estos factores de riesgo se han acumulado se denomina "slndrome metabolico", la cual es una afeccion medica ampliamente reconocida.
Segun un estudio de 120.000 japoneses trabajando en empresas, aquellos que tenlan al menos uno de los factores de riesgo "obesidad", "hipertension", "alto azucar en sangre", "enfermedad de altos trigliceridos (grasa neutra) en sangre" y "hipercolesterolemia" se dice que tienen un riesgo cinco veces mas grande de desarrollar enfermedades cardlacas. El riesgo de enfermedades cardlacas aumenta por diez en aquellos que tienen dos factores de riesgo, y se eleva tanto como 31 veces mas en aquellos que tienen tres o cuatro factores de riesgo. Segun un estudio realizado por el Ministerio de Salud, Trabajo y Bienestar del Japon, hay, segun se informa, 39 millones de personas que padecen hipertension, 22 millones de personas que padecen hiperlipemia, 1,62 millones de personas que padecen diabetes (incluidos aquellos que no padecen actualmente diabetes pero presentan mayores riesgos de desarrollarla), y 4,68 personas que padecen obesidad. Las cifras de estos pacientes estan aumentando cada ano.
El slndrome metabolico es un "slndrome de factor de riesgo multiple que tiende a causar arterioesclerosis, caracterizado por la acumulacion de grasa visceral as! como por la asociacion con multiples enfermedades entre las que se incluye resistencia a la insulina, anomalla de sacarometabolismo, trastornos en el metabolismo de grasas e hipertension que resultan de la acumulacion de grasa visceral". Una acumulacion de grasa visceral es la causa mas fundamental del slndrome metabolico. Los tejidos grasos, que son tejidos secretores que cubren el area mas grande en el organismo vivo, producen varios factores endocrinos y tienen un papel en una parte del mantenimiento de la homeostasis en el organismo vivo. Sin embargo, estudios han revelado que una acumulacion excesiva de grasa visceral puede desestabilizar la balanza de secrecion de factores endocrinos y causar varias enfermedades y afecciones. En particular, ciertos factores endocrinos tales como el inhibidor del activador del plasminogeno (PAI-1), el factor de necrosis por tumor (TNF- a), reptina, etc., se secretan en grandes cantidades como acumulaciones de grasa visceral, y unos niveles de secrecion mayores de estos factores endocrinos causan trombosis, resistencia a la insulina, anomalla de sacarometabolismo, hipertension, etcetera.
Mientras tanto, la adiponectina, que se secreta unicamente por los tejidos grasos, esta normalmente presente a una mayor concentracion en el torrente sangulneo. Se conoce que cuando se acumula grasa visceral, el nivel de concentracion de adiponectina disminuye. La adiponectina se conoce por tener varias funciones fisiologicas tales como accion anti-diabetica, accion anti-arteriosclerotica, accion anti-inflamatoria y accion anti-hipertensiva, y por tanto es muy importante promover un aumento en el nivel de adiponectina en el torrente sangulneo, o suprimir una disminucion en el nivel de adiponectina en el torrente sangulneo, para prevenir/tratar el slndrome metabolico.
Se han utilizado tradicionalmente tratamientos farmacologicos para combatir las enfermedades individuales y afecciones causadas por el slndrome metabolico, pero estas terapias presentan problemas en que, entre otros, necesitan prescripciones y tambien van acompanadas de efectos secundarios. Ademas, se ha demostrado que incluso cuando se trata una enfermedad o afeccion, otra enfermedad o condicion puede desarrollarse en un estado grave. Por consiguiente, es necesario ajustar el equilibro de secrecion de factores endocrinos que se derivan de celulas grasas presentes corriente arriba de estas afecciones.
En vista de lo anterior, se considera mas importante cambiar nuestros habitos de vista diarios tales como ejercicio y
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dieta, en lugar de recurrir a terapias farmacologicas, en la prevencion/tratamiento del slndrome metabolico causado por una acumulacion de grasa metabolica. Por este motivo, farmacos, bebidas, alimentos o piensos que son eficaces en prevenir/tratar el slndrome metabolico causado por una acumulacion de productos de grasa viscerales que pueden tomarse diariamente y por un largo periodo de tiempo sin presentar riesgos de seguridad que se desean.
En cuanto a la solicitud de bacterias de acido lactico como principios activos que actuan sobre la salud humana, la Bibliografla de patente 1 informa sobre una bacteria de acido lactico que pertenece al complejo Lactobacillus acidophilus, que se clasifican como Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus crispatus, Lactobacillus amylovorus, Lactobacillus gasseri, Lactobacillus gallinarum o Lactobacillus johnsonii y tiene afinidad con asialo GM1, as! como extractos de estas bacterias de acido lactico, son efectivos en prevenir la infeccion de patogenos que tienen afinidad con asialo GM1.
Asimismo, la Bibliografla de patente 2 informa que organismos fungicos de Lactobacillus gasseri o productos de fermentacion del mismo son principios activos de farmacos preventivos/de tratamiento para enfermedades de intestino inflamado asf como para el slndrome de intestino irritable. Ademas, la Bibliografla de patente 3 describe un farmaco para prevenir/mejorar/tratar complicaciones diabeticas cuyo principio activo incluye bacterias de acido lactico que pertenece al grupo de Lactobacillus gasseri y cultivos del mismo, as! como bacterias de acido lactico que pertenecen al grupo de Bifidobacterium longum y cultivos del mismo.
Entre los farmacos cuyos principios activos son organismos fungicos y cultivos obtenidos mediante el cultivo de bacterias de acido lactico que pertenecen al grupo Lactobacillus gasseri, se describe un farmaco para suprimir el aumento en el nivel de colesterol en suero en la Bibliografla de patente 4, ademas de lo anterior. Asimismo, la Bibliografla de patente 5 describe un inhibidor osteoclastico, en el que el principio activo incluye organismos fungicos y cultivos de los mismos obtenidos mediante el cultivo de bacterias de acido lactico que pertenecen al grupo Lactobacillus gasseri, junto con una bebida, alimento o pienso que tiene una accion que suprime la absorcion osea. La Bibliografla de patente 6 describe un agente de mejora inmunologica y una bebida o alimento de mejora inmunologica, cada una de las cuales no contiene bacterias de acido lactico que pertenecen solo al grupo Lactobacillus gasseri, sino que en cambio mezcla bacterias de acido lactico que pertenecen al grupo Lactobacillus gasseri, con granos de avena y otros miembros de la familia Gramineae as! como productos procesados fabricados a partir de estos granos, en el que el anteriormente mencionado documento muestra que mezclar estos ingredientes activa macrofagos mas y aumente la produccion de citoquina de un modo sinergico para aumentar el efecto de mejora inmunologica. Sin embargo, no se conoce que los cultivos de Lactobacillus gasseri, u organismos fungicos mismos, tengan una accion reductora de grasa visceral.
Por otra parte, Lactobacillus helveticus, que es una bacteria de acido lactico en la Lactobacillus sp. y se ha usado como un iniciador de bacterias de acido lactico representativo para productos lacteos durante muchos anos, tiene una fuerte actividad de descomposicion de protelnas y en particular, la proteinasa extracelular de Lactobacillus helveticus que muestra una actividad especialmente alta tiene una accion importante sobre la propiedad de fermentacion de la leche. Para ser especlficos, esta proteinasa extracelular descompone la lactoprotelna y produce varios tipos de fragmentos de peptidos. Los peptidos producidos reciben a continuacion acciones de un grupo de peptidasas y cambian ademas ellas mismas en peptidos de pesos moleculares inferiores. Se conoce que algunos de los peptidos producidos en el medio de cultivo debido a las acciones de un grupo de enzimas proteollticas se toman en los cuerpos fungicos de bacterias de acido lactico y se utilizan como fuente de nitrogeno.
Por otra parte, se informa en la Bibliografla no de patente 1 que algunos de los peptidos producidos en el medio de cultivo tienen una actividad para inhibir la enzima convertidora de angiotensina (en lo sucesivo denominada como "ECA") que es una sustancia que causa un aumento en la presion sangulnea. En cuanto a los peptidos destinados para inhibir la actividad enzimatica de ECA y por lo tanto suprimir el aumento de presion sangulnea, se ha informado ya de muchos peptidos eficaces que se producen a partir de productos de descomposicion de la lactoprotelna, protelna de soja o protelna de pescado/carne, etc. Entre otros, se han revelado peptidos con actividad de inhibicion de ECA contenida en leche fermentada fabricada con Lactobacillus helveticus como Val-Pro-Pro y Ile-Pro-Pro, y estos lactotripeptidos han demostrado presentar una fuerte accion hipotensiva en un experimento en el que se uso ratas con hipertension inducida de forma natural (SHR), segun la Bibliografla no de patente 2. Como se acaba de describir, alimentos funcionales que contienen leche acida que se ha fermentado mediante Lactobacillus helveticus tambien han mostrado tener no solo una actividad hipotensiva, sino tambien una accion antiestres, en las Bibliograflas no de patente 7 y 8. Ademas, bacterias de acido lactico tales como Lactobacillus helveticus, Lactobacillus casei, L. delbrueckii subsp. bulgaricus, L. delbrueckii subsp. lactis, etc., han mostrado proporcionar una accion de inmunoestimulacion en la Bibliografla de patente 9.
Sin embargo, no se conoce que los organismos fungicos de estas bacterias de acido lactico mismas, o cultivos de las mismas, tengan una accion reductora de grasa visceral.
Lactococcus lactis o Lactococcus cremoris son bacterias de acido lactico que se usan ampliamente en la fabrication de productos lacteos. Sin embargo, no se conoce mucho sobre las funciones fisiologicos de estas bacterias de acido lactico. Aunque se conoce que las bacterias de acido lactico que pertenecen a Lactococcus sp. producen acido gama Y-aminobutlrico (GABA) y similares a traves de la fermentacion de leche, leche de soja, salmueras, etc., para finalmente demostrar una accion de ajuste de presion sangulnea, etc., no se conoce que estas bacterias de acido lactico contribuyen a la reduction de grasa visceral.
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Bibliografla de patente 1: Patente japonesa abierta a inspection publica N.° 8-268899
Bibliografla de patente 2: Patente japonesa abierta a inspeccion publica N.° 2003-95963
Bibliografla de patente 3: Patente japonesa abierta a inspeccion publica N.° 2003-252770
Bibliografla de patente 4: Patente japonesa abierta a inspeccion publica N.° 2003-306436
Bibliografla de patente 5: Patente japonesa abierta a inspeccion publica N.° 2004-315477
Bibliografla de patente 6: Patente japonesa abierta a inspeccion publica N.° 2006-69993
Bibliografla de patente 7: Patente japonesa abierta a inspeccion publica N.° 10-45610
Bibliografla de patente 8: Patente japonesa abierta a inspeccion publica N.° 11-98978
Bibliografla de patente 9: Patente japonesa abierta a inspeccion publica N.° 2006-76961
Bibliografla no de patente 1: J. Dairy Sci., 78: 777-783 (1995)
Bibliografla no de patente 2: J. Dairy Sci., 78: 1253-1257 (1995)
Sumario de la invencion
Problemas que deben resolverse por la invencion
La presente invencion tiene por objetivo proporcionar un agente reductor de grasa visceral que pueda tomarse diariamente y que cuando se toma, reduce la grasa visceral y es por tanto eficaz previniendo/tratando el slndrome metabolico, as! como una bebida, un alimento o un pienso al cual se ha anadido la funcion del agente anteriormente mencionado.
Medios para resolver los problemas
Los inventores de la presente invencion han trabajado encarecidamente para explorar ingredientes que pudiesen reducir la grasa visceral, la cual se cree que es una causa del slndrome metabolico, a partir de entre los constituyentes de la leche. Como resultado, los inventores de la presente invencion encontraron que las bacterias de acido lactico, especialmente las bacterias de acido lactico que pertenecen a Lactobacillus sp. y Lactococcus sp., presentan una action reductora de grasa visceral extremadamente alta, y por consiguiente cumplieron la presente invencion.
Las bacterias de acido lactico anteriormente mencionadas que pertenecen a Lactobacillus sp. y Lactococcus sp. se usan en la fabrication de varios alimentos fermentados tales como leches fermentadas, quesos, salmueras, etc. Estas bacterias de acido lactico se alslan de las bacterias de acido lactico usadas en la production lactica o de bacterias intestinales en los tractos digestivos humanos, y se conoce que no solo tiene una accion reguladora del intestino, sino tambien muchas funciones fisiologicas tales como actividad inmunorreguladora, accion de reduction de colesterol en suero, accion de prevention de enfermedades infecciosas, entre otros. La presente invencion proporciona un agente reductor de grasa visceral cuyo principio activo incluye organismos fungicos de estas bacterias de acido lactico que pertenecen a Lactobacillus sp. y Lactococcus sp. y/o cultivos de los mismos, as! como una bebida, alimento o pienso al cual se ha anadido la funcion del agente anteriormente mencionado.
El agente reductor de grasa visceral anteriormente mencionado puede usarse en un comprimido, polvo, capsula u otra forma. Las aplicaciones potenciales de este agente reductor de grasa visceral incluyen leches fermentadas, alimentation sana, quesos y otras bebidas o alimentos, y piensos.
La presente invencion basicamente comprende los siguientes constituyentes:
(1) Un agente reductor de grasa visceral cuyo principio activo incluye organismos fungicos de bacterias de acido lactico y/o cultivos del mismo.
(2) Un agente reductor de grasa visceral de acuerdo a (1) anterior, caracterizado por que su principio activo incluye bacterias de acido lactico que pertenecen a Lactobacillus sp. y Lactococcus sp. y/o cultivos de los mismos.
(3) Un agente reductor de grasa visceral de acuerdo a (2) anterior, caracterizado por que su principio activo consiste en organismos fungicos de uno o mas Lactobacillus gasseri, Lactobacillus helveticus, Lactococcus lactis y Lactococcus cremoris y/o cultivos de los mismos.
(4) Un comprimido, polvo, capsula, bebida, alimento o pienso con efecto reductor de grasa visceral, caracterizado por que se mezcla con los organismos fungicos de bacterias de acido lactico y/o cultivos de los mismos segun uno cualquiera (1) a (3) anterior.
(5) Una bebida o alimento segun (4) anterior, caracterizado por que dichos bebida o alimento son una leche fermentada, un producto sanitario o un queso, etc.
Efectos de la invencion
Un agente reductor de grasa visceral cuyo principio activo incluye organismos fungicos de bacterias de acido lactico y/o cultivos de los mismos, as! como una bebida, un alimento o un pienso al cual se ha anadido una accion reductora de grasa visceral mediante dicho agente reductor de grasa visceral contenido en el, cada uno de los cuales conforme a la presente invencion, es efectivo en prevenir/tratar el slndrome metabolico el cual se dice que se desencadena por una acumulacion de grasa visceral.
Ademas, un agente reductor de grasa visceral as! como una bebida, un alimento o un pienso al cual se ha anadido
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una accion reductora de grasa visceral, cada uno de los cuales conforme a la presente invencion, usa cultivos de bacterias de acido lactico que pertenecen a Lactobacillus sp. y bacterias de acido lactico que pertenecen a Lactococcus sp., o especialmente Lactobacillus gasseri, Lactobacillus helveticus, Lactococcus lactis o Lactococcus cremoris, o los organismos fungicos mismos, y por tanto pueden suministrarse en grandes cantidades a costes relativamente bajos y tambien son extremadamente seguros.
Mejor modo de realizar la invencion
Ejemplos de bacterias de acido lactico usados con la presente invencion para incluir bacterias de acido lactico que pertenecen Lactobacillus sp. y bacterias de acido lactico que pertenecen a Lactococcus sp., o especialmente Lactobacillus gasseri, Lactobacillus helveticus, Lactococcus lactis o Lactococcus cremoris.
Entre las bacterias de acido lactico que pertenecen al grupo Lactobacillus gasseri, la cepa SBT 2055 de Lactobacillus gasseri, la cepa JCM 1131 de Lactobacillus gasseri, y la cepa ATCC 19992 de Lactobacillus gasseri podrlan seleccionarse. Ademas, la cepa SBT 2055 se ha donado, con Recibo de donacion N.° FERM ABP-10953, al Depositario del Organismo de Patentes Internacional (IPOD) del Instituto Nacional de Ciencia y Tecnologla Industrial Avanzada (AIST) (6 Chuo, 1-1-1 Higashi, Tsukuba-shi, Ibaragi-ken; recibido el 26 de febrero de 2008). La cepa JCM 1131 es una cepa disponible para el publico del Instituto de Investigacion Flsica y Qulmica (RIKEN), mientras que la cepa ATCC 19992 es una cepa disponible para el publico a partir de la Coleccion de Cultivos Tipo de EE.UU.
Tambien entre las bacterias de acido lactico que pertenecen al grupo Lactobacillus helveticus, la cepa SBT 2171 de Lactobacillus helveticus, la cepa ATCC 10386 de Lactobacillus helveticus, y la cepa ATCC 10797 de Lactobacillus helveticus podrlan seleccionarse.
Ademas, la cepa SBT 2171 se ha donado, con Recibo de donacion N.° FERM BP-5445, al Depositario del Organismo de Patentes Internacional (IPOD) del Instituto Nacional de Ciencia y Tecnologla Industrial Avanzada (AIST) (6 Chuo, 1-1-1 Higashi, Tsukuba-shi, Ibaragi-ken; recibido el miercoles, 6 de marzo de 1996). Asimismo, la cepa ATCC 10386 y la cepa ATCC 10797 son cepas disponibles al publico a partir de la Coleccion de Cultivos Tipo de EE.UU.
Ademas, entre las bacterias de acido lactico que pertenecen al grupo Lactococcus lactis, la cepa JCM 1107 de Lactococcus lactis y la cepa JCM 1107 de Lactococcus lactis podrla seleccionarse. Ademas, la cepa JCM 1107 de Lactococcus lactis es una cepa disponible al publico a partir del Instituto de Investigacion Flsica y Qulmica (RIKEN).
Ademas, entre las bacterias de acido lactico que pertenecen al grupo de Lactococcus cremoris, la cepa ATCC 11602 de Lactococcus cremoris, la cepa ATCC 14365 de Lactococcus cremoris y la cepa ATCC 19257 de Lactococcus cremoris podrlan seleccionarse. Ademas, la cepa ATCC 11602, la cepa ATCC 14365 y las cepas ATCC 19257 son cepas disponibles al publico a partir de la Coleccion de Cultivos Tipo de EE.UU.
Cabe destacar que, en la seleccion de bacterias de acido lactico, aquellas bacterias de acido lactico que son mas adecuadas para la presente invencion pueden seleccionarse si la seleccion se centra en cepas de bacterias que exhiben una alta resistencia al acido gastrico, buen crecimiento en una condicion de bajo pH, alta estabilidad en tractos intestinales humanos, afinidad a celulas en los tractos intestinales humanos, resistencia a la bilis, habilidad de permanecer estables en los tractos intestinales, alta supervivencia cuando se aplican a alimentos, y excelente sabor y propiedades flsicas.
En particular, la cepa SBT 2055 de Lactobacillus gasseri (FERM ABP-10953) mostro una alta afinidad a las celulas en los tractos intestinales humanos, fueron capaces de sobrevivir y alcanzar los tractos intestinales cuando se administraron oralmente, y pudieron permanecer en los tractos intestinales durante un largo periodo de tiempo, done crecieron las bacterias en los tractos intestinales y actuaron sobre el hospedador, exhibiendo por lo tanto una alta actividad incluyendo un efecto reductor de grasa visceral. No se ha conocido nunca que las bacterias de acido lactico que pertenecen al grupo Lactobacillus gasseri y que se administran fuera del cuerpo pudieran permanecer estables en los intestinos y mostrar los anteriormente mencionados efectos fisiologicos, y esto ha sido revelado por primera vez por los inventores de la presente invencion.
Ademas, la presente invencion puede usar no solo las cepas anteriormente mencionadas, sino tambien Lactobacillus gasseri aislada del cuerpo humano o leche fermentada, independientemente de si los organismos fungicos estan vivos o muertos, siempre y cuando los organismos fungicos exhiban las acciones anteriormente mencionadas. La presente invencion tambien usa cepas variantes de Lactobacillus gasseri siempre y cuando exhiban las acciones anteriormente mencionadas.
Ademas del anteriormente mencionado tipo de Lactobacillus gasseri de bacterias de acido lactico, un efecto reductor de grasa visceral similar se demuestra mediante, entre otros, el uso de bacterias de acido lactico para producir leche, tal como Lactobacillus crispatus que pertenece al mismo grupo Lactobacillus acidophilus que incluye Lactobacillus gasseri, o Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus que es una bacteria del tipo hola de alta temperatura, as! como Lactobacillus plantarum y Lactobacillus casei que son bacterias de acido lactico del tipo homo de temperatura media.
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El medio de cultivo empleado para cultivar Lactobacillus gasseri, el cual es una bacteria de acido lactico usada con la presente invencion, puede ser un medio de cultivo que contiene un medio de cultivo lactico o constituyentes lacticos, o cualquiera de los diversos medios de cultivo semi-sinteticos que no contienen ningun medio de cultivo lactico o constituyentes lacticos. Ejemplos de estos medios de cultivo incluyen un medio de cultivo de leche desnatada reducida que se ha producido mediante la reduccion de leche desnatada y a continuacion calentando y esterilizando la leche desnatada reducida.
En cuanto al metodo de cultivo, estas bacterias de acido lactico que pertenecen a Lactobacillus sp. y Lactococcus sp. se cultivan mediante medios de cultivo estacionario, o mediante cultivo neutral en el que el nivel de pH se controla a un nivel constante. Sin embargo, el metodo de cultivo no se limita especlficamente siempre y cuando las condiciones permitan a las bacterias crecer de un modo favorable. En cuanto a los organismos fungicos, pueden cultivarse bacterias de acido lactico segun un metodo normal usado para cultivar bacterias de acido lactico, donde los organismos fungicos pueden aislarse del cultivo obtenido mediante separacion centrlfuga o mediante otro medio para recolectar bacterias y los organismos fungicos aislados pueden usarse directamente como un principio activo conforme a la presente invencion.
No solo pueden usarse organismos fungicos puros que se han aislado, sino tambien cultivos, suspensiones y otras sustancias que contienen los organismos fungicos o el citoplasma o fracciones de pared celular obtenidos mediante el procesamiento de los organismos fungicos usando una enzima u otro medio flsico, tambien. Ademas, no solo pueden usarse organismos fungicos vivos, sino tambien organismos fungicos muertos.
Un agente reductos de grasa visceral conforme a la presente invencion contiene, como su principio activo, cultivos de bacterias de acido lactico que pertenecen a Lactobacillus sp. y Lactococcus sp. y/o sus organismos fungicos mismos. Ademas, este agente puede prepararse en formulaciones farmaceuticas anadiendo, si se considera adecuado, agentes diluyentes, estabilizantes, agentes saborizantes y otros aditivos permitidos para su uso en formulaciones farmaceuticas, tras la cual la mezcla puede condensarse, criodesecarse o calentarse y secarte para matar los organismos fungicos. La presente invencion tambien comprende formas secas, concentrados o pastas de mezclas obtenidas como se ha descrito anteriormente. Asimismo, agentes diluyentes, aglutinantes, disgregantes, lubricantes, agentes saborizantes/aromaticos, agentes en suspension, agentes de recubrimiento y otros agentes qulmicos deseados pueden mezclarse en estas formulaciones farmaceuticas. En cuanto a formas de dosificacion pueden considerarse, comprimido, plldora, capsula, granulo, polvo, polvo fino, jarabe, etc., y es deseable que las formulaciones obtenidas que tengan estas formas de dosificacion se administren oralmente.
La presente invencion tambien proporciona una bebida, alimento o pienso al cual se ha anadido una funcion reductora de grasa visceral y cuyo principio activo incluye cultivos de bacterias de acido lactico que pertenecen a Lactobacillus sp. y bacterias de acido lactico que pertenecen a Lactococcus sp., o especialmente Lactobacillus gasseri, Lactobacillus helveticus, Lactococcus lactis o Lactococcus cremoris, o sus organismos fungicos mismos. Una bebida, alimento o pienso al cual se ha anadido una accion reductora de grasa visceral, conforme a la presente invencion, puede constituirse mediante cultivos de bacterias de acido lactico que pertenecen a Lactobacillus sp. y bacterias de acido lactico que pertenecen a Lactococcus sp., o especialmente Lactobacillus gasseri, Lactobacillus helveticus, Lactococcus lactis o Lactococcus cremoris, o sus organismos fungicos mismos, o tal bebida/alimento puede prepararse mezclando los organismos fungicos anteriormente mencionados o cultivos directamente. Entre las formas favorables de cultivos se incluye yogur, queso y otros productos fermentados.
Los organismos fungicos y cultivos que pueden mezclarse en cualquier bebida o alimento, o que pueden anadirse a materias usado en procesos de fabricacion de bebidas y alimentos. Ejemplos de bebidas y alimentos aplicables incluyen bebidas lacteas, leches fermentadas, bebidas de fruta, gelatinas, golosinas, productos lacteos, mayonesas y otros productos de huevo procesados, pasteles de mantequilla y otros dulces y panes, y similares. Otros objetivos de mezcla incluyen diversas leches en polvo y otras composiciones nutricionales destinadas para bebes, ninos y bebes con bajo peso al nacer, etc. Si se usan organismos fungicos vivos, pueden usarse organismos fungicos de bacterias de acido lactico que pertenecen a Lactobacillus sp. y bacterias de acido lactico que pertenecen a Lactococcus sp., o especialmente Lactobacillus gasseri, Lactobacillus helveticus, Lactococcus lactis o Lactococcus cremoris, o leches fermentadas o quesos obtenidos mediante la fermentacion de los organismos fungicos de las bacterias de acido lactico anteriormente mencionadas pueden usarse como materias para fabricar panes, aperitivos, pasteles, pudines y otros productos con efecto reductor de grasa visceral. Estas bacterias de acido lactico pueden tomarse diariamente y demostrar una accion reductora de grasa visceral, y por lo tanto son eficaces en prevenir/tratar el slndrome metabolico.
Ademas, la presente invencion proporciona un alimento al cual se ha anadido una accion reductora de grasa visceral, en la que su principio activo incluye cultivos de bacterias de acido lactico que pertenecen a Lactobacillus sp. y bacterias de acido lactico que pertenecen a Lactococcus sp., o especialmente Lactobacillus gasseri, Lactobacillus helveticus, Lactococcus lactis o Lactococcus cremoris, o sus organismos fungicos mismos. Como es el caso de las bebidas y alimentos mencionados anteriormente, estos organismos fungicos y cultivos tambien pueden mezclarse en cualquier pienso para la ganaderla o anadirse a materias usadas en los procesos de fabricacion para piensos.
Mediante la presente invencion, para realzar la accion reductora de grasa visceral, es suficiente ajustar, entre otros, la cantidad de mezcla de cultivos de bacterias de acido lactico que pertenecen a Lactobacillus sp. y bacterias de acido lactico que pertenecen a Lactococcus sp., o especialmente Lactobacillus gasseri, Lactobacillus helveticus,
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Lactococcus lactis o Lactococcus cremoris, o sus organismos fungicos mismos, de modo que pueden tomarse de 10 a 200 g al dia en el caso de cultivos, o de 0,1 a 5.000 mg al dia en el caso de organismos fungicos. La relacion del contenido de bacterias de acido lactico no esta especificamente limitada y puede ajustarse segun se considere aProPiado de acuerdo a la facilidad de fabricaci6n, dosis deseada al dm, y similares. a la forma de dosificacion es Kquida, por ejemplo, es deseable que la concentracion de bacterias de acido lacticos se ajuste al intervalo de 1 x 10 celulas/ml a 1 x 1010 celulas/ml. I la forma de dosificacion es solida, por otro lado, la concentracion de bacterias de acido lacticos se encuentra en el intervalo de 1 x 105 celulas/g a 1 x 1010 celulas/g. Si se administran bacterias vivas, el efecto deseado de la presente invencion puede realizarse mediante la administracion de 108 a 1012 ufc al dia por adulto. Cuando se tomas bacterias de acido lactico de este modo, permaneceran estables en los tractos intestinales y demostraran los efectos deseados.
Los solicitantes de la presenta solicitud de patenten han presentado con anterioridad una solicitud de patente que involucraba un agente para suprimir la acumulacion de grasa visceral cuyo principio activo incluye organismos fungicos de bacterias de acido lactico que pertenecen a Lactobacillus sp. y cultivos de la misma, asi como una bebida o alimento a la cual se ha anadido una accion para suprimir la acumulacion de grasa visceral (Toku-Gan 2006-239290). Sin embargo, la anterior solicitud de patente estaba dirigida para suprimir la acumulacion de grasa visceral misma y no desvelaba ninguna accion para reducir la acumulacion metabolica, que es lo que la presente invencion desvela.
Asimismo, la presente invencion se caracteriza por que no solo mejora las enfermedades y afecciones individuales asociadas con el sindrome metabolico mas rapidamente y eficazmente, sino que tambien encuentra su principio activo en organismos fungicos de bacterias de acido lactico que pertenecen a Lactococcus sp. asi como cultivos del mismo.
A continuacion de presente ejemplos y ejemplos de prueba para explicar la presente invencion en mayor detalle. Ejemplo 1
(Preparacion de polvo de cultivo de Lactobacillus gasseri 1)
Un medio de cultivo de leche desnatada reducida (conteniendo leche desnatada en un 13 por ciento en peso y extracto de levadora en un 0,5 por ciento en peso) se esterilizo durante 30 minutos a 95 °C, tras el c ual la cepa SBT 2055 de Lactobacillus gasseri (FERM ABP-10953) se inoculo y cultivo durante 16 horas a 37 °C y a continuacion el cultivo obtenido se criodeseco para obtener un polvo de cultivo de la cepa SBT 2055 de Lactobacillus gasseri (FERM ABP-10953). Este polvo puede usarse directamente como un agente reductor de grasa visceral conforme a la presente invencion.
Ejemplo 2
(Preparacion de polvo de cultivo de Lactobacillus gasseri 2)
Un medio de cultivo de leche desnatada reducida (conteniendo leche desnatada en un 13 por ciento en peso y extracto de levadora en un 0,5 por ciento en peso) se esterilizo durante 30 minutos a 95 °C, tras el c ual la cepa JCM 1131 de Lactobacillus gasseri se inoculo y cultivo durante 16 horas a 37 °C y a continuacion el cultivo obtenido se criodeseco para obtener un polvo de cultivo de la cepa JCM 1131 de Lactobacillus gasseri. Este polvo puede usarse directamente como un agente reductor de grasa visceral conforme a la presente invencion.
Ejemplo 3
(Fabricacion de comprimidos)
Un cultivo liquido de la cepa SBT 2055 de Lactobacillus gasseri (FERM ABP-10953) se separo centrifugamente durante 15 minutos a una velocidad de 7.000 rpm a 4 °C, tras el cual se repitio un proceso de lavado del cultivo con agua esterilizada y a continuacion de separacion de forma centrifuga tres veces para obtener los organismos fungicos lavados. Estos organismos fungicos se criodesecaron para obtener un polvo de organismo fungico. A continuacion, una parte de este polvo de organismo fungico se mezclo con cuatro partes de leche desnatada y la mezcla de polvo obtenida se comprimio y sello por 1 g en un tiempo usando una maquina de comprimidos de acuerdo con un metodo normal para preparar comprimidos, cada uno conteniendo 200 mg de organismos fungicos de la cepa SBT 2055 de Lactobacillus gasseri (FERM ABP-10953) conforme a la presente invencion.
Ejemplo 4
(Fabricacion de leche fermentada)
La cepa SBT 2055 de Lactobacillus gasseri (FERM ABP-10953) se cultivo en un medio de cultivo liquido MRS (nombre del producto: Lactobacilli MRS Broth, fabricado por Difco). Un uno por ciento en peso de cada liquido de cultivo en el periodo de crecimiento logaritmico se inoculo al 10 por ciento en peso de una leche desnatada reducida
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(115 °C, esterilizada durante 20 minutos) a la cual se anadio un 0,3 por ciento en peso de un extracto de levadura, para preparar un cultivo madre. El cultivo madre se mezclo a continuacion con un 10 por ciento en peso de la leche desnatada reducida, despues de la cual un 2,5 por ciento en peso de la mezcla resultante se anadio a una mezcla de yogur que se habla calentado durante 10 minutos a 100 °C. La mezcla final se fermento a 37 °C y cua ndo la acidez lactica alcanzo 0,85, la mezcla se enfrio para terminar la fermentacion, para obtener leche fermentada con un efecto reductor de grasa visceral conforme a la presente invencion.
Ejemplo 5
(Fabricacion de polvo)
La cepa SBT 2055 de Lactobacillus gasseri (FERM ABP-10953) se inoculo a 5 L de un medio de cultivo llquido MRS (nombre del producto Lactobacilli MRS Broth, fabricado por Difco), despues del cual el medio de cultivo se mantuvo estacionario durante 18 horas a 37 °C para cultivar las bacterias. Al final del cultivo, el medio de cultivo se separo centrlfugamente durante 15 minutos a una velocidad de 7.000 rpm para obtener un concentrado de organismo fungico de una quinta parte del volumen del medio de cultivo. A continuacion, el concentrado de organismo fungico se mezclo con la misma cantidad de un medio de dispersion que contenla un 10 por ciento en peso de leche desnatada y un 1 por ciento en peso de glutamato monosodico para ajustar el nivel de pH a 7 y a continuacion el concentrado de pH ajustado se criodeseco. El sustrato criodesecado obtenido se puso a traves de un tamiz de malla 60 para analizar los granos para producir polvo criodesecado. Segun con las especificaciones proporcionadas en "Polvos" en la 13a Revision del Manual de Farmacopea Japonesa: General Rules on Pharmaceutical Formulations, 1 g de este polvo fungico criodesecado se mezclo con 400 g de lactosa (Farmacopea Japonesa) y 600 g de fecula de patata (Farmacopea Japonesa), y los ingredientes se mezclaron uniformemente para obtener un polvo con un efecto reductor de grasa visceral conforme a la presente invencion.
Ejemplo 6
(Fabricacion de alimentos sanitarios tipo barrita)
El polvo de cultivo de la cepa SBT 2055 de Lactobacillus gasseri (FERM ABP-10953) se tomo por 30 g y se mezclo con 40 g de una mezcla que contenla cantidades iguales de vitamina C y acido cltrico, 100 g de azucar granulado y 60 g de una mezcla que contenla cantidades iguales de almidon de malz y azucar lacteo, y los ingredientes se mezclaron. La mezcla obtenida se puso en sobrecitos con forma de barrita para producir un alimento sanitario del tipo barrita con un efecto reductor de grasa visceral conforme a la presente invencion.
Ejemplo 7
(Fabricacion de queso natural)
Un material leche cuya relacion de grasa se ajusto se calento y esterilizo durante 15 segundos a 75 °C usando placas, despues del cual el material leche se enfrio a 30 °C y a continuacion se mezclo con un 0,01 po r ciento en peso de cloruro calcico. A continuacion, el material leche se mezclo con un 0,7 por ciento en peso de un iniciados de bacterias de acido lactico comercial (fabricado por Christian Hansen) y un 1 por ciento en peso de cepa SBT 2055 de Lactobacillus gasseri (FERM ABP-10953), despues del cual se anadio un 0,003 por ciento en peso de cuajo para solidificar la leche y a continuacion la mezcla solidificada se corto y agito hasta que el nivel de pH descendio en un intervalo de 6,2 a 6,1, sobre el cual se retiro el suero para obtener granos de cuajada. Estos granos de cuajada se colocaron en un molde y se compactaron, despues de lo cual se anadio sal para producir un queso natural con un efecto reductor de grasa visceral conforme a la presente invencion.
Ejemplo 8
(Fabricacion de capsulas)
El material se mezclo basandose en la mezcla de ingredientes que se muestra en la Tabla 1 y se trituro en microgranulos, despues de lo cual los microgranulos se cargaron en capsulas para producir capsular con un efecto reductor de grasa visceral conforme a la presente invencion.
_______________________[Tabla 11_______________________
SBT2055 (FERM ABP-10953)
Polvo de cultivo (Ejemplo 1) 20,0 (en porcentaje en peso)
Lactosa 24,5
Almidon soluble 55,0
Estearato de magnesio_______0,5________________________
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Ejemplo 9
(Fabricacion de bebida)
El material se mezclo basandose en la mezcla de ingredientes que se muestra en la Tabla 2 y se cargo en recipientes, despues de lo cual los contenidos se calentaron y esterilizaron para producir una bebida con un efecto reductor de grasa visceral conforme a la presente invencion.
- [Tabla 21
- SBT2055 (FERM ABP-10953)
- Polvo de cultivo (Ejemplo 2)
- 2,5 (en porcentaje en peso)
- Azucar
- 7,5
- Acido citrico
- 0,6
- Zumo de manzana
- 10,0
- Agua
- 79,4
Ejemplo 10
(Fabricacion de queso curado natural bajo en grasa)
Se fabricaron varios tipos de quesos curados naturales bajos en grasa usando material leche cuya relacion de grasa en queso se ajusto a un intervalo del 12 al 30 por ciento en peso. Para ser especlficos, un material leche cuya relacion de grasa se ajusto, se calento y esterilizo durante 15 segundos a 75 °C usando placas, despues del cual el material leche se enfrio a 30 °C y a continuacion se mezclo con un 0,01 por ciento en peso de cloruro calcico. A continuacion, el material leche se mezclo con un 0,7 por ciento en peso de un iniciador de bacterias de acido lactico comercial (fabricado por Christian Hansen) y un 1 por ciento en peso de la cepa SBT 2171 de Lactobacillus helveticus (FERM BP-5445), despues de lo cual se anadio un 0,003 por ciento en peso de cuajo para solidificar la leche y a continuacion la mezcla solidificada se corto y agito hasta que el nivel de pH descendio en el intervalo de 6,2 a 6,1, sobre el cual se retiro el suero para obtener granos de cuajada. Estos granos de cuajada se colocaron en un molde y se compactaron, despues de lo cual se anadio sal para producir queso del tipo gouda, queso curado natural, bajo en grasa con un efecto reductor en grasa visceral conforme a la presente invencion.
Ejemplo 11
(Fabricacion de leche fermentada)
Se fabrico una leche fermentada usando la cepa SBT 2171 de Lactobacillus helveticus (FERM BP-5445). Para ser especlficos, la cepa SBT 2171 de Lactobacillus helveticus (FERM BP-5445) se cultivo durante 12 horas a 37 °C usando 100 g de leche desnatada, y el cultivo obtenido se inoculo a 3 kg de un medio de cultivo identico pero recien preparado y se cultivo durante 12 horas a 37 °C. Al final del cultivo, la cantidad complete de leche se uso como iniciador para fermentar 100 kg de leche desnatada durante 20 horas a 32 °C para obtener una leche fermentada con un efecto reductor de grasa visceral conforme a la presente invencion. El recuento de celulas viables en esta leche fermentada producida a partir de la cepa SBT 2171 de Lactobacillus helveticus (FERM BP-5445) era de 8,2 x 108 celulas/g.
Ejemplo 12
(Fabricacion de bebida de yogur)
La leche fermentada obtenida en el Ejemplo 11 se tomo por 43 kg y se mezclo con 4 kg de azucar granulado, 3 kg de agua y 0,15 kg de pectina, despues de lo cual los ingredientes se homogeneizaron para obtener 50 kg de una bebida de yogur. Esta bebida de yogur tenia un sabor gustoso suave y un pH de 3,6 y el recuento de celulas viables en la bebida de yogur producida a partir de la cepa SBT 2171 de Lactobacillus helveticus (FERM BP-5445) era de 4,6 x 108 celulas/g.
Ejemplo 13
Un producto fermentado obtenido del mismo modo que se describe en el Ejemplo 11 se tomo por 5 kg y se mezclo con una cantidad igual de agua, despues de lo cual la mezcla se separo centrlfugamente en una centrlfuga continua durante 20 minutos a una velocidad de 3.500 x G para separar y recoger solo organismos fungicos. Para retirar los componentes de organismos no fungicos del sedimento, se anadio 1 kg de agua y a continuacion la mezcla se separo centrlfugamente de nuevo y este proceso se repitio tres veces. Finalmente, se recogieron 20 g de organismos fungicos de la cepa SBT 2171 de Lactobacillus helveticus (FERM BP-5445).
5
10
15
20
25
30
Ejemplo 14
Se mezclo un material basandose en la mezcla de ingredientes que se muestran en la Tabla 3 para producir un pienso con un efecto reductor de grasa visceral conforme a la presente invencion.
_____________________________[Tabla 31_____________________________
organismos fungicos SBT 2171 (FERM BP-5445) 2,5 (en porcentaje en peso)
Leche desnatada 13,5
Lodo de soja 12,0
Aceite de soja 4,0
Aceite de malz 2,0
Aceite de palma 27,0
Almidon de malz 14,0
Harina 9,0
Salvado 2,0
Mezcla de vitaminas 9,0
Mezcla de minerales 2,0
Celulosa_________________________________3,0
[Ejemplo de prueba 11
(Confirmacion de accion reductora de grasa visceral)
Se usaron diversas bacterias de acido lactico para confirmar la accion reductora de grasa visceral. La cepa 3T3-L1 de celulas grasas de ratones se cultivo hasta la confluencia en un medio de cultivo Eagle que contiene un 10 % de suero de feto bovino conforme al metodo de Dulbecco modificado, despues de lo cual el cultivo se proceso con tripsina para separar las celulas de las paredes plasticas y las celulas separas se recogieron en un tubo centrlfugo. Las celulas se recogieron a traves de separacion centrlfuga (1.000 x G durante 10 minutos), despues de lo cual las celulas recogidas se dispersaron, a una concentracion de 2 x 107 celulas/ml, en una solucion tampon de acido fosforico (PBS, pH 7,2) que contenla un 0,9 por ciento en peso de sal. Las celulas 3T3-L1 separadas se trasplantaron por 1 x 107 celulas (0,5 ml) en un momento dentro de tejidos grasos mesenterios de ratones de 3 semanas de edad 56 Balb/c. Los ratones se alimentaron con un pienso estandar general CE2 durante cuatro semanas y la cantidad de grasa visceral se medio cada semana usando un aparato micro CT para ensayar con animales para confirmar una acumulacion de suficiente grasa visceral. Los ratones se alimentaron a continuation durante cuatro semanas con piensos CE2 que contenlan un 0,1 por ciento de varias bacterias de acido lactico y a continuacion se diseccionaron para medir la cantidad de grasa visceral para su evaluation. En esta prueba con animales, un grupo consistla en cuatro ratos.
Los resultados se muestran en la tabla 4. Es evidente que las cantidades de grasa visceral en los ratones que tomaron piensos mezclados con bacterias de acido lactico Lactobacillus y bacterias de acido lactico Lactococcus son significativamente inferiores que las cantidades de grasa visceral en ratones que no tomaron ninguna bacteria de acido lactico o en ratones que tomaron bacterias Streptococcus thermophilis.
[Tabla 41
____________Cantidad de grasa visceral (g)
- Lactobacillus gasseri
- cepa SBT 2055 (FERM ABP-10953)
- 1,05 ± 0,67
- cepa JCM 1131
- 1,12 ± 0,49
- cepa ATCC 19992
- 1,58 ± 0,62
- Lactobacillus helveticus
- cepa SBT 2171 (FERM BP-5445)
- 1,22 ± 0,55
- cepa ATCC 10386
- 1,41 ± 0,39
- cepa ATCC 10797
- 1,32 ± 0,42
- Lactococcus lactis
- cepa JCM 1107
- 1,31 ± 0,31
- Lactococcus cremoris
- cepa ATCC 11602
- 1,58 ± 0,56
- cepa ATCC 14365
- 1,38 ± 0,21
- cepa ATCC 19257
- 1,44 ± 0,44
- Streptococcus thermophilus
- cepa ATCC 14485 de Streptococcus thermophilus
- 2,55 ± 0,33
- Grupo de control
- No se ha dado ninguna bacteria de acido lactico
- 2,64 ± 0,62
- Media ± Desviacion estandar (n = 4)
Claims (7)
- 510152025REIVINDICACIONES1. Un agente reductor de grasa visceral cuyo principio activo incluye cuerpos de bacterias de acido lactico y/o cultivos de los mismos, en donde las bacterias de acido lactico pertenecen a Lactobacillus sp., Lactobacillus gasseri o Lactobacillus helveticus, y/o Lactococcus sp. y/o cultivos de los mismos para su uso en la prevencion y/o el tratamiento del slndrome metabolico mediante la reduccion de grasa visceral.
- 2. El agente reductor de grasa visceral para el uso de acuerdo con la reivindicacion 1, caracterizado por que los organismos de bacterias de acido lactico que pertenecen a Lactococcus sp. y/o cultivos del mismo son uno o mas de Lactococcus lactis y Lactococcus cremoris, y/o cultivos del mismo.
- 3. Una formulacion farmaceutica que comprende las bacterias de acido lactico y/o cultivos del mismo como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 o 2 para su uso en la prevencion y/o el tratamiento del slndrome metabolico mediante la reduccion de grasa visceral.
- 4. La formulacion farmaceutica para el uso de acuerdo con la reivindicacion 3 para administration oral.
- 5. La formulacion farmaceutica para el uso de acuerdo con las reivindicaciones 3 o 4 que comprende unaconcentration de bacterias de acido lactico en un intervalo de 1 x 105 celulas/ml a 1 x 1010 celulas/ml, si la forma dedosificacion es llquida, o 1 x 105 celulas/g a 1 x 1010 celulas/g, si la forma de dosificacion es solida.
- 6. Un agente reductor de grasa visceral en un comprimido, un polvo o una forma de capsula, o una bebida, unalimento o un pienso con efecto reductor de grasa visceral, caracterizado por que esta mezclado con cuerpos debacterias de acido lactico y/o cultivos de los mismos como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 o 2 para su uso en la prevencion y/o el tratamiento del slndrome metabolico mediante la reduccion de grasa visceral.
- 7. Una bebida o un alimento para el uso de acuerdo con la reivindicacion 6, caracterizados por que dichos bebida o alimento son una leche fermentada, un producto sanitario o un queso.
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