ES2296347T3

ES2296347T3 - Inhibidores aminotiazol de quinasas dependientes de ciclina.

Info

Publication number: ES2296347T3
Application number: ES98956431T
Authority: ES
Inventors: Kyoung S. Kim; S. David Kimball; Michael A. Poss; Raj N. Misra; Zhen-Wei Cai; David B. Rawlins; Kevin Webster; John T. Hunt; Wen-Ching Han
Original assignee: Bristol Myers Squibb Co
Current assignee: Bristol Myers Squibb Co
Priority date: 1997-11-12
Filing date: 1998-11-02
Publication date: 2008-04-16
Anticipated expiration: 2018-11-02
Also published as: MY120779A; CZ20001744A3; CA2309551C; HUP0004559A1; NZ503828A; ID23983A; ATE374771T1; KR100454426B1; AU730607B2; WO1999024416A1; PT1042307E; BR9814124A; HUP0004559A3; DE69838515D1; CA2309551A1; PL204642B1; NO316773B1; TR200001344T2; CY1107509T1; EP1042307A1

Abstract

Un compuesto de la fórmula y sus sales farmacéuticamente aceptables, en la que: R1 y R2 son de forma independiente hidrógeno, flúor o alquilo; R3 es donde Y es oxígeno, azufre o NR9 R4 es alquilo, cicloalquilo, arilo, cicloalquilalquilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo.

Description

Inhibidores aminotiazol de quinasas dependientes de ciclina.

La presente invención está dirigida a compuestos de la fórmula

1

y a sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. Como se usa en la fórmula I y a lo largo de la memoria, los símbolos tienen los significados siguientes:

R_{1} y R_{2} son de forma independiente hidrógeno, flúor o alquilo;

R_{3} es 2

donde Y es oxígeno, azufre o NR_{9}

R_{4} es alquilo, cicloalquilo, arilo, cicloalquilalquilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo; o

CO-alquilo, CO-cicloalquilo, CO-arilo, CO-alquil-cicloalquilo, CO-alquil-arilo, CO-heteroarilo, CO-alquil-heteroarilo, CO-heterocicloalquilo, CO-alquil-heterocicloalquilo; o

CONH-alquilo, CONH-cicloalquilo, CONH-arilo, CONH-alquil-cicloalquilo, CONH-alquil-arilo, CONH-heteroarilo, CONH-alquil-heteroarilo, CONH-heterocicloalquilo, CONH-alquil-heterocicloalquilo; o

COO-alquilo, COO-cicloalquilo, COO-arilo, COO-alquil-cicloalquilo, COO-alquil-arilo, COO-heteroarilo, COO-alquil-heteroarilo, COO-heterocicloalquilo, COO-alquil-heterocicloalquilo; o SO_{2}-cicloalquilo, SO_{2}-arilo, SO_{2}-alquil-cicloalquilo, SO_{2}-alquil-arilo, SO_{2}-heteroarilo, SO_{2}-alquil-heteroarilo, SO_{2}-heterocicloalquilo, SO_{2}-alquilo-heterocicloalquilo; o C(NCN)NH-alquilo, C(NCN)NH-cicloalquilo, C(NCN)NH-arilo, C(NCN)NH-alquil-cicloalquilo, C(NCN)NH-alquil-arilo, C(NCN)NH-heteroarilo, C(NCN)NH-alquil-heteroarilo, C(NCN)NH-heterocicloalquilo, C(NCN)NH-alquil-heterocicloalquilo; o C(NNO_{2})NH-alquilo, C(NNO_{2})NH-cicloalquilo, C(NNO_{2})NH-arilo, C(NNO_{2})NH-alquil-cicloalquilo, C(NNO_{2})NH-alquil-arilo, C(NNO_{2})NH-heteroarilo, C(NNO_{2})NH-alquil-heteroarilo, C(NNO_{2})NH-heterocicloalquilo, C(NNO_{2})NH-alquil-heterocicloalquilo; o C(NH)NH-alquilo, C(NH)NH-cicloalquilo, C(NH)NH-arilo, C(NH)NH-alquil-cicloalquilo, C(NH)NH-alquil-arilo, C(NH)NH-heteroarilo, C(NH)NH-alquil-heteroarilo, C(NH)NH-heterocicloalquilo, C(NH)NH-alquil-heterocicloalquilo; o C(NH)NHCO-alquilo, C(NH)NHCO-cicloalquilo, C(NH)NHCO-arilo, C(NH)NHCO-alquil-cicloalquilo, C(NH)NHCO-alquil-arilo, C(NH)NHCO-heteroarilo, C(NH)NHCO-alquil-heteroarilo, C(NH)NHCO-heterocicloalquilo, C(NH)NHCO-alquil-heterocicloalquilo; o

C(NOR_{6})NH-alquilo, C(NOR_{6})NH-cicloalquilo, C(NOR_{6})NH-arilo, C(NOR_{6})NH-alquil-cicloalquilo, C(NOR_{6})NH-alquil-arilo, C(NOR_{6})NH-heteroarilo, C(NOR_{6})NH-alquil-heteroarilo, C(NOR_{6})NH-heterocicloalquilo, C(NOR_{6})NH-alquil-heterocicloalquilo;

R_{5} es hidrógeno o alquilo;

R_{6} es hidrógeno, alquilo, cicloalquilo, arilo, cicloalquilalquilo, arilalquilo. Heteroarilo, heteroarilalquilo. Heterocicloalquilo o heterocicloalquilalquilo;

R_{7} y R_{8} son, de forma independiente, hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, cicloalquilo. Arilo, arilo sustituido, cicloalquilalquilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilo sustituido, heteroarilalquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo;

R_{9} es hidrógeno, alquilo, cicloalquilo, arilo, alquilcicloalquilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, heterocicloalquilo o heterocicloalquilalquilo

m es un número entero de 0 a 2; y

n es un número entero de 1 a 3.

Los compuestos de fórmula I son inhibidores de la proteína quinasa y son útiles en el tratamiento y la prevención de enfermedades proliferativas, por ejemplo cáncer, inflamación y artritis. También pueden ser útiles en el tratamiento de enfermedades neurodegenerativas tales como la enfermedad de Alzheimer, enfermedades cardiovasculares, enfermedades víricas y enfermedades fúngicas.

El documento EP-A-0275312 se refiere a derivados de tiazol que poseen un sustituyente parafenólico unido a través de un grupo imino, un átomo de oxígeno o de azufre, un sulfinilo, sulfonilo o un grupo alquileno C_{1-6} a la posición 2 de la fracción tiazol. Dichos derivados de tiazol que poseen actividad inhibidora de la angiogénesis son útiles para tratar tumores malignos, retinitis o psoriasis.

La presente invención proporciona compuestos de fórmula I_{x} y composiciones farmacéuticas que emplean tales compuestos.

A continuación se presenta un listado de definiciones de varios términos utilizados para describir los compuestos de la presente invención. Estas definiciones se aplican a los términos tal y como se usan en la memoria descriptiva (a menos que se indique lo contrario en casos específicos) bien individualmente bien como parte de un grupo más grande.

Cabe destacar que se supone que cualquier heteroátomo con valencias no satisfechas posee un átomo de hidrógeno para satisfacer las valencias.

Anión carboxilato se refiere a un grupo -COO^{-} cargado negativamente.

El término "alquilo" o "alc" se refiere a un radical derivado de alcano monovalente (hidrocarburo) que contiene de 1 a 12 átomos de carbono, a menos que se defina otra cosa. Un grupo alquilo es un grupo hidrocarburo lineal, ramificado o cíclico opcionalmente sustituido. Cuando los grupos alquilo sustituidos se pueden sustituir con hasta cuatro grupos sustituyentes, R se define en cualquier punto de unión disponible. Cuando se dice que el grupo alquilo está sustituido con un grupo alquilo, esto se usa de forma intercambiable con "grupo alquilo ramificado". Entre los ejemplos de tales grupos insustituidos se incluyen metilo, etilo, propilo, isopropilo, n-butilo, t-butilo, isobutilo, pentilo, hexilo, isohexilo, heptilo, 4,4-dimetilpentilo, octilo, 2,2,4-trimetilpentilo, nonilo, decilo, undecilo, dodecilo y similares. Los sustituyentes opcionales incluyen uno o más de los grupos siguientes: halo (tal como F, Cl, Br, I), haloalquilo (tal como CCl_{3} o CF_{3}), alcoxi, alquiltio, hidroxi, carboxi (-COOH), alquiloxicarbonilo (-C(O)R), alquilcarboniloxi
(-OCOR), amino (-NH_{2}), carbamoíl (-NHCOOR- o -OCONHR-), urea, (-NHCONHR-) o tiol (-SH). Los grupos alquilo tal y como se han definido también pueden comprender uno o más dobles enlaces entre carbonos o uno o más enlaces triples entre carbonos.

El término "alquenilo" se refiere a un radical de hidrocarburo lineal, ramificado o cíclico con de 2 a 12 átomos de carbono y al menos un enlace doble entre carbonos.

El término "alquinilo" se refiere a un radical de hidrocarburo lineal, ramificado o cíclico que contiene de 2 a 12 átomos de carbono y al menos un triple enlace entre carbonos.

Cicloalquilo es una especie de alquilo que contiene de 3 a 15 átomos de carbono sin alternar o resonar los dobles enlaces entre los átomos de carbono. Puede contener de 1 a 4 anillos. Ejemplos de tales grupos insustituidos incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, adamantilo, etc. Los sustituyentes opcionales incluyen uno o más de los grupos siguientes: halógeno, alquilo, alcoxi, hidroxi, amino, nitro, ciano, tiol y/o alquiltio.

Los términos "alcoxi" o "alquiltio", como se usan en el presente documento, indican grupo de alquilo como se ha descrito antes unido a través de un puente de oxígeno (-O-) o un puente de azufre (-S-), respectivamente.

El término "alquiloxicarbonilo", como se usa en la presente memoria descriptiva, indica un grupo alcoxi unido a través de un grupo carbonilo. Un radical alcoxicarbonilo se representa mediante la fórmula: -C(O)OR, donde el grupo R es un grupo alquilo C_{1-6} lineal o ramificado.

El término "alquilcarbonilo" se refiere a un grupo alquilo unido a través de un grupo carbonilo.

El término "alquilcarboniloxi", como se usa en la presente memoria descriptiva, indica un grupo alquilcarbonilo que está unido a través de un enlace de oxígeno.

El término "arilalquilo" como se usa en la presente memoria descriptiva, indica un anillo aromático unido a un grupo alquilo tal y como se ha descrito antes.

El término "arilo" se refiere a anillos aromáticos monocíclicos o bicíclicos, por ejemplo fenilo, fenilo sustituido y similares, así como grupos que están condensados, por ejemplo naftilo, fenantrenilo y similares. Por tanto, un grupo arilo contiene al menos un anillo que posee al menos 6 átomos, de los que hasta cinco de tales anillos presentes contienen hasta 22 átomos, con dobles enlaces alternantes (resonantes) entre átomos de carbono adyacentes o heteroátomos adecuados. Los grupos arilo pueden, opcionalmente, estar sustituidos con uno o más grupos, incluidos halógeno, alquilo, alcoxi, hidroxi, carboxi, carbamoílo, alquiloxicarbonilo, nitro, trifluorometilo, amino, cicloalquilo, ciano, alquil S(O)_{m} (m= 0, 1, 2) o tiol.

El término "heteroarilo" se refiere a un grupo hidrocarburo aromático monocíclico que posee 5 ó 6 átomos de anillo o un grupo aromático bicíclico que posee de 8 a 10 átomos, que contienen al menos un heteroátomo O, S o N, en el que un átomo de carbono o de nitrógeno es el punto de unión y en el que uno o dos átomos de carbono adicionales están opcionalmente reemplazados por un heteroátomo seleccionado de O o S, y en el que de 1 a 3 átomos de carbono adicionales están reemplazados opcionalmente por heteroátomos de nitrógeno, estando dicho grupo heteroarilo opcionalmente sustituido tal y como se describe en la presente memoria descriptiva.

Entre los ejemplos de grupos heteroarilo se incluyen los siguientes: tienilo, furilo, pirrolilo, piridinilo, imidazolilo, pirrolidinilo, piperidinilo, tiazolilo, oxazolilo, triazolilo, pirazolilo, isoxazolilo, isotiazolilo, pirazinilo, piridazinilo, pirimidinal, triazinilaxepinilo, indolilo, isoindolilo, quinolinilo, isoquinolinilo, benzotiazolilo, benzoxazolilo, bencimidazolilo, benzoxadiazolilo, benzofurazanilo y tetrahidropiranilo. Entre los sustituyentes opcionales se incluyen uno o más de los siguientes: halógeno, alquilo, alcoxi, hidroxi, carboxi, carbamoílo, alquiloxicarbonilo, trifluorometilo, cicloalquilo, nitro, ciano, amino, alquilS(O)_{m} (m= 0, 1, 2) o tiol.

El término "heteroarilium" se refiere a grupos heteroarilo que llevan un átomo de nitrógeno cuaternario y, por tanto, una carga positiva.

El término "heterocicloalquilo" se refiere a un grupo cicloalquilo (no aromático) en el que uno de los átomos de carbono del anillo está reemplazado por un heteroátomo seleccionado de O, S o N, y en el que hasta tres átomos de carbono adicionales se pueden reemplazar por dichos heteroátomos.

El término "nitrógeno cuaternario" se refiere a un átomo de nitrógeno tetravalente cargado positivamente, incluido, por ejemplo, el nitrógeno cargado positivamente en un grupo tetraalquilamonio (por ejemplo, tetrametilamonio, N-metilpiridinio), el nitrógeno cargado positivamente en especies de amonio protonadas (por ejemplo, trimetilhidroamonio, N-hidropiridinio), el nitrógeno cargado positivamente en N-óxidos de amina (por ejemplo, N-metil-morfolina-N-óxido, piridina-N-óxido) y el nitrógeno cargado positivamente en un grupo N-amino-amonio (por ejemplo, N-aminopiridinio).

El término "heteroátomo" significa O, S o N, seleccionados de forma independiente.

El término "halógeno" o "halo" se refiere a cloro, bromo, flúor o yodo.

Cuando un grupo funcional se califica de "protegido", significa que el grupo se encuentra en forma modificada para impedir reacciones adversas no deseadas en el sitio protegido. A partir de la presente solicitud se reconocerán grupos protectores adecuados para los compuestos de la presente invención, teniendo en cuenta el nivel de experiencia en la técnica y en relación con los libros de texto convencionales, tales como Greene, T. W. y cols., Protective Groups in Organic Synthesis, Wiley, N.Y. (1991).

Ejemplos adecuados de sales de los compuestos de acuerdo con la invención con ácidos inorgánicos u orgánicos son clorhidrato, bromhidrato, sulfato, fosfato. También Sales que no son adecuadas para usos farmacéuticos pero que se pueden emplear, por ejemplo, para el aislamiento o purificación de compuestos libres I o sus sales farmacéuticamente aceptables.

Se contemplan todos los estereoisómeros de los compuestos de la presente invención, bien en mezcla o en forma puro o sustancialmente pura. La definición de los compuestos de acuerdo con la invención abarca todos los estereoisómeros posibles y sus mezclas. Muy particularmente, abarca las formas racémicas y los isómeros ópticos aislados con la actividad específico. Las formas racémicas se pueden resolver mediante procedimientos físicos, tales como, por ejemplo, cristalización fraccional, separación o cristalización de derivados diastereoméricos o separación mediante cromatografía en columna quiral. Los isómeros óticos individuales se pueden obtener a partir de racematos mediante procedimientos convencionales tales como, por ejemplo, formación de sal con un ácido ópticamente activo seguido por cristalización.

Debe entenderse que los solvatos (por ejemplo, hidratos) de los compuestos de fórmula I también se encuentran dentro del alcance de la presente invención. Generalmente, los procedimientos de solvatación se conocen en la técnica. En consecuencia, los compuestos de la presente invención pueden estar en forma libre o en forma hidratada y pueden obtenerse mediante procedimientos cuyos ejemplos se indican en los esquemas siguientes.

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Esquema 1

3

Como se ilustra en el Esquema 1, los compuestos de fórmula I donde X es S se preparan mediante la reacción de 2-aminotiazol (II) con bromo en presencia de tiocianato de sodio o de potasio para obtener un aminotiazol tiocianado, específicamente 5-tiocianatoaminotiazol (III).

A continuación, el compuesto III se hace reaccionar con R_{4}-L, donde L es un grupo saliente tal como halógeno, en presencia de una base tal como trietilamina para proporcionar un producto intermedio 5-tiocianatotiazol (IV), donde R_{4} es tal y como se define en la memoria descriptiva. El producto intermedio (IV) se reduce después a un tiol (V) utilizando agentes reductores tales como ditiotreitol (DTT), borohidrato de sodio, cinc u otros agentes reductores conocidos. A continuación, el compuesto (V) se hace reaccionar con haluros de alquilo, arilo o heteroarilo, tales como R_{3} (CR_{1}R_{2})_{n}-L, donde L es un grupo saliente tal como un halógeno, en presencia de una base tal como carbonato de potasio para obtener compuestos de fórmula I. Las etapas de reducción del producto intermedio de tiocianotiazol (IV) al tiol (V) y la reacción del tiol reducido (V) para proporcionar compuestos de fórmula I, donde X es S, pueden llevarse a cabo secuencialmente sin purificación.

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Esquema 2

4

En el esquema 2, el 5-tioacetil-2-acetilaminotiazol de estructura VI se hace reaccionar con un alcóxido tal como t-butóxido de potasio en alcohol o disolvente THF y el tiol resultante se hace reaccionar in situ con un grupo de fórmula R_{3}(CR_{1}R_{2})_{n}-L (donde L es un grupo saliente, tal como un halógeno) tal como 2-halometiloxazol (VII) para proporcionar un compuesto tal como la fórmula VIII, en la que R_{1} y R_{2} son hidrógeno y R_{3} es acetilo. Los compuestos de 2-halometiloxazol de fórmula VII se pueden preparar usando varías vías sintéticas conocidas en la técnica. Chem. Pharm. Bull. 30, 1865 (1982); Bull. Chem. Soc. Japan (52, 3597 (1979); JCS Chem. Comm. 322 (1981); Comprehensive Heterocyclic Chemistry, vol. 6, 177, editado por A. Katritzky y C.W. Rees, Pergamon Press (1984).

Los compuestos de fórmula VIII (un compuesto de fórmula I en la que R_{4} es acetilo y X es azufre) se pueden hidrolizar en presencia de una base tal como hidróxido sódico para proporcionar un compuesto de fórmula IX. A continuación, se puede hacer reaccionar un compuesto de fórmula IX con R_{4}-L en presencia de una base tal como trietilamina, donde L es un grupo saliente tal como un halógeno, para dar compuestos de fórmula I, en la que X es azufre. De este modo, los compuestos de fórmula IX, que es un compuesto de fórmula I en la que R_{4} es hidrógeno, se pueden tratar con agentes tales como isotiocianatos, haluros, haluros de acilo, cloroformiatos, isocianatos o cloruros de sulfonilo para proporcionar tioureas, aminas, amidas, carbamatos, ureas o sulfonamidas. Los procedimientos del esquema 2 ilustran específicamente un grupo metiloxazol, pero en general son para todos los grupos R_{3}(CR_{1}R_{2})_{n} especificados por la fórmula I.

Como alternativa, los compuestos de fórmula VII, en la que L es bromo, se pueden preparar mediante halogenación de 2-metiloxazol usando N-bromosuccinimida en presencia de dinbenzoilperóxido.

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Esquema 3

5

El esquema 3 ilustra un procedimiento alternativo de preparar el compuesto VII, que es un compuesto de fórmula R_{3}(CR_{1}R_{2})_{n}-L, en la que L es cloro y n es el número entero 1. En este esquema, el compuesto VII se prepara mediante la reacción de un compuesto de fórmula X y de fórmula XI en presencia de una base tal como trietilamina para proporcionar compuestos de fórmula XII. El compuesto XII se puede oxidar mediante un oxidante tal como oxalilcloruro/DMSO en presencia de una base tal como trietilamina para proporcionar un compuesto de fórmula XIII que puede ciclarse mediante un agente tal como oxicloruro de fósforo para proporcionar compuestos de fórmula VII, en la que L es cloro. Como alternativa, se pueden preparar los compuestos de fórmula XIII mediante la reacción de la amino cetona correspondiente a X con un cloruro ácido tal como XI.

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Esquema 4

6

Compuestos de fórmula VII, en los que L es cloro, también se pueden preparar a partir de la reacción de diazocetonas tal y como se ilustra en la fórmula XIV en el esquema 4 con cloronitrilos, tal como se indica con la fórmula XV, en presencia de eterato de BF_{3} para proporcionar compuestos de fórmula VII, en la que L es cloro.

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Esquema 5

7

En el esquema 5, el compuesto XVI de partida indica un soporte de alcohol bencílico unido a resina usado para la síntesis en fase sólida que se preparar a partir de una resina Merrifield indicada como 200 y 2-metoxi-4-hidroxibenzaldehído, seguido por la reducción con agentes reductores tales como NaBH_{4}. En la etapa 1, el compuesto de partida XVI se trata con trifosgeno y trifenilfosfina (PPh_{3}) en diclorometano para dar la resina de clorobencilo de fórmula XVII. En la etapa 2, una trifluoroacetamida de tiocianato (XVIII) se alquila con el cloruro de bencilo unido a la resina (XVII) en presencia de diisopropieletilamina (DIPEA) para formar un tiocianato unido a resina (XIX). El compuesto trifluoroacetamida de tiocianato de fórmula XVII se preparar mediante la reacción de 5-tiocianatoaminotiazol de fórmula III (Esquema I) con anhídrido trifluoroacético utilizando una base tal como 2,6-lutidina.

A continuación, el tiocianato unido a la resina (XIX) se reduce a un tiol unido a resina (XX) en la etapa 3 con un agente reductor tal como ditiotreitol (DTT) en tetrahidrofurano (THF) y metanol. El tiol unido a resina resultante (XX) se hace reaccionar con R_{3}(CR_{1}R_{2})_{n}-L, donde L es un grupo saliente en presencia de una base tal como 1,8-diazabiciclo[5,4,0]undec-7-eno (DBU) a 80ºC en dimetilformamida (DMF) para formar compuestos de fórmula XXI (etapa 4). La desprotección del grupo trifluoroacetilo del compuesto XXI se realiza en la etapa 5 usando borohidruro de sodio para proporcionar un compuesto de fórmula XXII. En la etapa 6, el compuesto desprotegido XXII se hace reaccionar con R_{6}X, donde X es un grupo saliente, en presencia de una base tal como diisopropiletilamina para proporcionar compuestos de fórmula XXIII. A continuación, el producto se escinde de la resina en fase sólida en la etapa 7 con ácido trifluoroacético (TFA) para dar compuestos de fórmula I, en la que X es azufre. Los compuestos de fórmula I, en la que X es S(O)_{m} y m es 1 ó 2, pueden prepararse a partir de compuestos de fórmula I, en la que m es m es 0 mediante oxidación con un oxidante tal como peryodato sódico, ácido metacloroperbenzoico u oxona.

Los compuestos de partida de los esquemas 1-5 están disponibles comercialmente o pueden prepararse mediante procedimientos conocidos para un experto habitual en la técnica.

Todos los compuestos de fórmula I se pueden preparar mediante modificación de los procedimientos que se describen en la presente memoria descriptiva.

Los compuestos preferidos de fórmula I son aquéllos en los que:

R_{1} y R_{2} son de forma independiente hidrógeno, flúor o alquilo;

R_{3} es 2

donde Y es oxígeno, azufre o NR_{9};

R_{4} es hidrógeno, alquilo, cicloalquilo, arilo, cicloalquilalquilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo; o

CO-alquilo, CO-cicloalquilo, CO-arilo, CO-alquil-cicloalquilo, CO-alquil-arilo, CO-heteroarilo, CO-alquil-heteroarilo, CO-heterocicloalquilo, CO-alquil-heterocicloquilo; o

CONH-alquilo, CONH-cicloalquilo, CONH-arilo, CONH-alquil-cicloalquilo, CONH-alquil-arilo, CONH-heteroarilo, CONH-alquil-heteroarilo, CONH-heterocicloalquilo, CONH-alquil-heterocicloalquilo; o COO-alquilo, COO-cicloalquilo, COO-arilo, COO-alquil-cicloalquilo, COO-alquil-arilo, COO-heteroarilo, COO-alquil-heteroarilo, COO-heterocicloalquilo, COO-alquil-heterocicloalquilo; o SO_{2}-alquilo, SO_{2}-cicloalquilo, SO_{2}-arilo, SO_{2}-alquil-cicloalquilo, SO_{2}-alquil-arilo, SO_{2}-heteroarilo, SO_{2}-alquil-heteroarilo, SO_{2}-heterocicloalquilo, SO_{2}-alquil-heterocicloalquilo; o

C(NCN)NH-alquilo, C(NCN)NH-cicloalquilo, C(NCN)NH-arilo, C(NCN)NH-alquil-cicloalquilo, C(NCN)NH-alquil-arilo, C(NCN)NH-heteroarilo, C(NCN)NH-alquil-heteroarilo, C(NCN)NH-heterocicloalquilo, C(NCN)NH-alquil-heterocicloalquilo; C(NNO_{2})NH-alquilo, C(NNO_{2})NH-cicloalquilo, C(NNO_{2})NH-arilo, C(NNO_{2})NH-alquil-cicloalquilo, C(NNO_{2})NH-alquil-arilo, C(NNO_{2})NH-heteroarilo, C(NNO_{2})NH-alquil-heteroarilo, C(NNO_{2})NH-heterocicloalquilo, C(NNO_{2})NH-alquil-heterocicloalquilo; O

C(NH)NH-alquilo, C(NH)NH-cicloalquilo, C(NH)NH-arilo, C(NH)NH-alquil-cicloalquilo, C(NH)NH-alquil-arilo, C(NH)NH-heteroarilo, C(NH)NH-alquil-heteroarilo, C(NH)NH-heterocicloalquilo, C(NH)NH-alquil-heterociclo-
alquilo; o C(NH)NHCO-alquilo, C(NH)NHCO-alquil-cicloalquilo, C(NH)NHCO-alquil-arilo, C(NH)NHCO-heteroarilo, C(NH)NHCO-alquil-heteroarilo, C(NH)NHCO-heterocicloalquilo, C(NH)NHCO-alquilo-heterocicloalquilo; o C(NOR_{6})NH-alquilo, C(NOR_{6})NH-cicloalquilo, C(NOR_{6})NH-arilo, C(NOR_{6})NH-alquil-cicloalquilo, C(NOR_{6})NH-alquil-arilo, C(NOR_{6})NH-heteroarilo, C(NOR_{6})NH-alquil-heteroarilo, C(NOR_{6})NH-heterocicloalquilo, C(NOR_{6})NH-alquil-heterocicloalquilo;

R_{5} es hidrógeno; y

R_{6} es hidrógeno, alquilo, cicloalquilo, arilo, cicloalquilalquilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, heterocicloalquilo o heterocicloalquilalquilo;

R_{7} y R_{8} son de forma independiente hidrógeno, alquilo, cicloalquilo, arilo, alquilcicloalquilo, alquilarilo, heteroarilo, alquilheteroarilo, heterocicloalquilo, alquilheterocicloalquilo o halógeno;

R_{9} es H o alquilo;

m es el número entero 0; y

n es el número entero 1.

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Los compuestos más preferidos de fórmula I son aquéllos en los que:

R_{1} es hidrógeno;

R_{2} es hidrógeno, flúor o alquilo;

R_{3} es un oxazol sustituido que posee la configuración:

8

R_{4} es CO-alquilo, CO-alquil-arilo, CO-cicloalquilo, CO-alquil-heteroarilo, CO-alquil-heteroalquilo, CO-alquil-heterocicloalquilo, CONH-alquilo, CONH-alquil-arilo, CONH-cicloalquilo o CONH-alquil-heterocicloalquilo;

R_{5} es hidrógeno;

R_{7} es hidrógeno;

R_{8} es un grupo alquilo, tal como terc-butilo;

m es el número entero 0; y

n es el número entero 1.

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Los compuestos de acuerdo con la invención poseen propiedades farmacológicas; en particular, los compuestos de fórmula I son inhibidores de las proteína quinasas tales como las quinasa dependientes de ciclina (cdks), por ejemplo cdc2 (cdk1), cdk2 y cdk4. Cabe esperar que los nuevos compuestos de fórmula I sean útiles en el tratamiento de enfermedades proliferativas tales como cáncer, enfermedades autoinmunitarias, enfermedades víricas, enfermedades fúngicas, trastornos neurodegenerativos y enfermedad cardiovascular.

Más específicamente, los compuestos de fórmula I son útiles en el tratamiento de una variedad de tipos de cáncer, incluidos (entre otros) los siguientes:

-: carcinoma, incluidos los de vejiga urinaria, mama, colon, riñón, hígado, pulmón, incluido el cáncer pulmonar de células pequeñas, esófago, de vesícula biliar, ovario, páncreas, estómago, cuello uterino, tiroides, próstata y piel, incluido el carcinoma de células escamosas;

-: tumores hematopoyéticos de linaje linfoide, incluidos leucemia, leucemia linfocítica aguda, leucemia linfoblástica aguda, linfoma de células B, linfoma de células T, linfoma de Hodgkin, linfoma no Hodgkin, linfoma de células peludas y linfoma de Burkett;

-: tumores hematopoyéticos de linaje mieloide, incluidos leucemias mielógenas agudas y crónicas, síndrome mielodisplásico y leucemia promielocítica;

-: tumores de origen mesenquimatoso, incluidos fibrosarcoma y rabdomiosarcoma;

-: tumores del sistema nervioso central y periférico, incluidos astrocitoma neuroblastoma, glioma y schwanomas; y

-: otros tumores, incluidos melanoma, seminoma, teratocarcinoma, osteosarcoma, xenoderoma pigmentoso, queratoacantoma, cáncer tiroideo folicular y sarcoma de Kaposi.

Debido al papel clave de las cdks en la regulación de la proliferación celular en general, los inhibidores podrían actuar como agentes cistostáticos reversibles que pueden ser útiles en el tratamiento de cualquier proceso patológico que caracteriza la proliferación celular anormal, por ejemplo hiperplasia prostática benigna, poliposis adenomatosa familiar, neurofibromatosis, aterosclerosis, fibrosis pulmonar, artritis, psoriasis, glomerulonefritis, reestenosis tras angioplastia o cirugía vascular, formación de cicatrices hipertróficas, enfermedad intestinal inflamatoria, rechazo de trasplante, shock endotóxico e infecciones fúngicas.

Los compuestos de fórmula I también pueden ser útiles en el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer, como sugiere el reciente hallazgo de que la cdk5 está implicada en la fosforilación de la proteína tau (J. Biochem., 117, 741-749 (1995)):

Los compuestos de fórmula I puede inducir o inhibir la apoptosis. La respuesta apoptótica es aberrante en una variedad de enfermedades humanas. Los compuestos de fórmula I, como moduladores de la apoptosis, serán útiles en el tratamiento del cáncer (incluidos, entre otros, los tipos mencionados anteriormente en la presente memoria descriptiva), infecciones víricas (incluidas, entre otras, herpesvirus, poxvirus, virus de Epstein-Barr, virus Sindbis y adenovirus), prevención del desarrollo del SIDA en individuos infectados por el VIH, enfermedades autoinmunitarias (incluidas, entre otras, lupus eritematoso sistémico, glomerulonefritis autoinmunitaria, artritis reumatoide, psoriasis, enfermedad intestinal inflamatoria y diabetes mellitus autoinmunitaria), trastornos neurodegenerativos (incluidos, entre otros, la enfermedad de Alzheimer, demencia relacionada con SIDA, enfermedad de Parkinson, esclerosis lateral amiotrófica, retinitis pigmentosa, atrofia muscular espinal y degeneración cerebelosa), síndromes mielodisplásicos, anemia aplásica, lesiones isquémicas asociadas con infartos de miocardio, ictus y lesiones por reperfusión, arritmia, aterosclerosis, hepatopatías inducidas por toxina o relacionadas con el consumo de alcohol, enfermedades hematológicas (incluidas, entre otras, anemia crónica y anemia aplásica), enfermedades degenerativas del sistema musculoesquelético (incluidas, entre otras, osteoporosis y artritis), rinosinusitis sensible a ácido acetilsalicílico, fibrosis quística, esclerosis múltiple, nefropatías y dolor por cáncer.

Los compuestos de fórmula I, como inhibidores de las cdks, pueden modular el nivel de síntesis celular de ARN y ADN. Estos agentes serían, por tanto. Útiles en el tratamiento de las infecciones víricas (incluidas, entre otras, VIH, virus del papiloma humano, herpesvirus, poxvirus, virus de Epstein-Barr, virus Sindbis y adenovirus).

Los compuestos de fórmula I también pueden ser útiles en la quimioprevención del cáncer. Se define quimioprevención como la inhibición del desarrollo de cáncer invasivo mediante el bloqueo del acontecimiento mutagénico iniciador o el bloqueo de la progresión de las células pre-malignas que ya han sufrido una agresión o la inhibición de la recaída del tumor.

Los compuestos de fórmula I también pueden ser útiles en la inhibición de la angiogénesis tumoral y la metástasis.

Los compuestos de fórmula I también pueden actuar como inhibidores de otras proteína quinasas, por ejemplo proteína quinasa C, her2, raf1, MEK1, MAP quinasa, receptor de EGF, receptor de PDGF, receptor de IGF, PI3 quinasa, wee1 quinasa, Src., Abl y, por tanto, son eficaces en el tratamiento de enfermedades asociadas con otras proteínas quinasas.

Los compuestos de esta invención también pueden ser útiles en combinación (administrados juntos o secuencialmente) con tratamientos anticancerosos conocidos, tales como radioterapia o con agentes citostáticos o citotóxicos, tales como, por ejemplo, entre otros, agentes interactivos con ADN, como cisplatino o doxorrubicina; inhibidores de la topoisomerasa II, tales como etopósido; inhibidores de la topoisomerasa I tales como CPT-11 o topotecán; agentes de interacción con tubulina, tales como paclitaxel, docetaxel o las epotilonas; agentes hormonales, tales como tamoxifeno; inhibidores de la timidilato sintasa, tales como 5-fluorouracilo; y anti-metabolitos, tales como metotrexato.

Si se formulan como dosis fija, tales productos de combinación emplean los compuestos de esta invención dentro del intervalo de dosificación que se describe más adelante y el otro agente o tratamiento farmacéuticamente activo dentro de su intervalo de dosificación aprobado. Por ejemplo, se ha descubierto que el inhibidor de la cdc2 olomucina actúa de forma sinérgica con agentes citotóxicos conocidos en la inducción de la apoptosis (J. Cell Sci., 108, 2897 (1995)).

Los compuestos de fórmula I también se pueden administrar secuencialmente con agentes anticancerosos o citotóxicos conocidos cuando una formulación de combinación es inadecuada. La invención no está limitada por la secuencia de administración; los compuestos de fórmula I se pueden administrar antes o después de la administración del agente anticanceroso o citotóxico conocido. Por ejemplo, la secuencia de administración con agentes anticancerosos afecta a la actividad citotóxica del inhibidor de la quinasa dependiente de ciclina flavopiridol. Cancer Research, 57, 3375 (1997).

Las propiedades farmacológicas de los compuestos de esta invención pueden confirmarse mediante una serie de ensayos farmacológicos. Los siguientes ensayos farmacológicos de ejemplo se han llevado a cabo con los compuestos de acuerdo con la invención y sus sales. Los compuestos de los ejemplos 1 a 8 mostraron actividad quinasa cdc2/ciclina B1, con valores de CI_{50} inferiores a 50 \muM. Los compuestos de los ejemplos 1 a 8 mostraron actividad quinasa cdk2/ciclina E con valores de CI_{50} inferiores a 50 \muM. Los compuestos de los ejemplos 1 a 8 mostraron actividad quinasa cdk4/ciclina D1 con valores de CI_{50} inferiores a 50 \muM.

Ensayo de actividad quinasa cdc2/ciclina B1

La actividad quinasa cdc2/ciclina B1 se determinó mediante monitorización de la incorporación de ^{32}P en la histona H1. La reacción consistió en 50 ng de GST-cdc2 expresados en baculovirus, 75 ng de GST-ciclina B1 expresados en baculovirus, 1 \mug de histona H1 (Boehringer Mannheim), 0,2 mCi de ^{32}P g-ATP y ATP 25 mM en tampón quinasa (Tris 50 mM, pH 8,0, MgCl_{2} 10 mM, EGTA 1 mM, DTT 0,5 mM). La reacción se incubó a 30ºC durante 30 min y después se detuvo mediante la adición de ácido tricloroacético frío (TCA) hasta una concentración final del 15% y se incubó en hielo durante 20 minutos. La reacción se recolectó en placas uniflitro GF/C (Packard) usando un cosechador Packard Filtermate Universal y los filtros se contaron en un contador de centelleo líquido Packard TopCount de 96 pocillos (Marshak, D.R., Vanderberg, M.T., Bae, Y.S., Yu, I.J., J. of Cellular Biochemistry, 45, 391-400 (1991), incorporado por referencia en la presente memoria descriptiva.)

Ensayo de actividad quinasa cdk2/ciclina E

La actividad quinasa cdk2/ciclina E se determinó mediante monitorización de la incorporación de ^{32}P en la proteína de retinoblastoma. La reacción consistió en 2,5 ng de GST-cdk2/ciclina E expresados en baculovirus, 500 ng de GST-proteína de retinoblastoma producidos bacterialmente (aa 776-928), 0,2 mCi de ^{32}P g-ATP y ATP 25 mM en tampón quinasa (Hepes 50 mM, pH 8,0, MgCl_{2} 10 mM, EGTA 5 mM, DTT 2 mM). La reacción se incubó a 30ºC durante 30 min y después se detuvo mediante la adición de ácido tricloroacético frío (TCA) hasta una concentración final del 15% y se incubó en hielo durante 20 minutos. La reacción se recolectó en placas uniflitro GF/C (Packard) usando un cosechador Packard Filtermate Universal y los filtros se contaron en un contador de centelleo líquido Packard TopCount de 96 pocillos.

Ensayo de actividad quinasa cdk4/ciclina D1

La actividad quinasa cdk4/ciclina D1 se determinó mediante monitorización de la incorporación de ^{32}P en la proteína de retinoblastoma. La reacción consistió en 165 ng de GST-cdk4 expresados en baculovirus, 282 ng de ciclina marcada con S expresada en bacterias, 500 mg de GST-proteína de retinoblastoma producidos bacterialmente (aa 776-928), 0,2 mCi de ^{32}P \gamma-ATP y ATP 25 mM en tampón quinasa (Hepes 50 mM, pH 8,0, MgCl_{2} 10 mM, EGTA 5 mM, DTT 2 mM). La reacción se incubó a 30ºC durante 1 hora y después se detuvo mediante la adición de ácido tricloroacético frío (TCA) hasta una concentración final del 15% y se incubó en hielo durante 20 minutos. La reacción se recolectó en placas uniflitro GF/C (Packard) usando un cosechador Packard Filtermate Universal y los filtros se contaron en un contador de centelleo líquido Packard TopCount de 96 pocillos (Coleman, K.G., Wautlet, B.S., Morissey, D., Mulheron, J. G., Sedman, S., Brinkley, P., Price, S., Wedster, K.R. (1997). Identification of CDK4 Sequences envolved in cyclin D and p16 binding. J. Biol. Chem. 272, 30: 18869-18874, incorporado por referencia en la presente memoria descriptiva).

Posterior materia sujeto de la invención también incluye productos farmacéuticos para usar como se ha descrito antes, incluidos el control del cáncer, inflamación u artritis, que contienen al menos un compuesto de la fórmula I tal y como se ha definido anteriormente o al menos uno de sus sales de adición de ácido farmacológicamente aceptables, y el uso de un compuesto de la fórmula I como se ha definido anteriormente para la preparación de un producto farmacéutico que posea actividad contra enfermedades proliferativas tales como las descritas previamente, incluido contra cáncer, inflamación y/o artritis.

Los siguientes ejemplos y preparaciones describen el modo y el procedimiento de preparar y usar la invención y son ilustrativos y no limitantes.

Ejemplo 1 N-[5-[[(5-etil-2-oxazolil)metil]tio]-2-tiazolil]acetamida

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A. Preparación de 1-benciloxicarbonilamino-2-butanol

Una mezcla de 1-amino-2-butanol (5,5 g, 61,8 mmol), cloroformiato bencílico (11,5 g, 67,6 mmol) y carbonato sódico (7,16 g. 67,7 mmol) en agua (50 ml) se agitó a 0ºC durante 3 h. A la mezcla de reacción se añadió agua (50 ml) y el producto se extrajo con cloruro de metileno (3x 20 ml). El extracto de cloruro de metileno se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró. El residuo se pasó a través de una columna corta (SiO_{2}, hexanos:acetato de etilo/10:1; después acetato de etilo) para dar 1-benciloxicarbonilamino-2-butanol (13,9 g, 100%) como líquido.

^{1}HRNM (CDCl_{3}) \delta 7,30 (m, 5H), 5,45 (s, 1H), 5,06 (s, 2H), 3,57 (s, 1H), 3,31 (m, 1H), 3,04 (m, 1H), 2.91 (m, 1H), 1,43 (m, 2H), 0,91 (t, J= 7,6 Hz, 3H).

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B. Preparación de 1-benciloxicarbonilamino-2-butanona

A cloruro de metileno (60 ml) a -78ºC en argón se añadió cloruro de oxalilo (37 ml de solución 2M en cloruro de metileno, 74 mmol), seguido por DMSO (7,8 g, 100 mmol). La mezcla se agitó a -78ºC durante 20 min y a esta mezcla se añadió una solución de 1-benciloxicarbonilamino-2-butanol (13,9 g, 61,8 mmol) en cloruro de metileno (40 ml). La mezcla se agitó a -78ºC durante 1 h y a la mezcla se añadió trietilamina (21 ml). Se calentó hasta la temperatura ambiente (ta) y se lavó sucesivamente con ácido clorhídrico 1N y una solución acuosa de bicarbonato sódico. La solución de cloruro de metileno se secó sobre MgSO_{4} y se concentró para dar 1-benciloxicarbonilamino-2-butanona (11,2 g, 82%) en forma de sólido, que fue lo bastante puro para la siguiente reacción.

^{1}HRNM (CDCl_{3}) \delta 7,32 (m, 5H), 5,50 (s, 1H), 5,06 (s, 2H), 4,07 (s, 2H), 2,43 (c, J= 7,6 Hz, 2H), 1,06 (t, J= 7,6 Hz, 3H).

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C. Preparación de 1-amino-2-butanona

Una solución de 1-benciloxicarbonilamino-2-butanona (9,30 mg, 42 mmol) en etanol (50 ml) y ácido clorhídrico 1N (46 ml) se agitó en atmósfera de hidrógeno en presencia de Pd/C (1,5 g, 10%) a ta durante 4 h. La mezcla se filtró a través de un lecho de celite y la solución del filtrado se concentró. El residuo se trituró con éter etílico para dar 1-amino-2-butanona (5,3 g, 102%) en forma de una sal de clorhidrato.

^{1}HRNM (CD_{3}DO) \delta 3,97 (s, 2H), 2,60 ( c, J= 7,6 Hz, 2H), 1,08 (t, J= 7,6 Hz, 3H).

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D. Preparación de 2-amino-5-tiocianatotiazol

El compuesto 2-aminotiazol (41 g, 410 mM) y tiocianato de sodio (60 g, 740 mM, secado en horno de vacío a 130ºC durante la noche) se disolvió en 450 ml de metanol anhidro y la solución se enfrió en un baño de agua fría. Aquí se añadió bromo (23 ml, 445 mM) gota a gota con fuerte agitación. Tras la adición se agitó durante 4 h a ta. A la mezcla se añadieron 500 ml de agua y se agitó durante 5 minutos, se filtró a través de un lecho de celite y el lecho se lavó con agua. El pH de la solución filtrada fue de alrededor de 1. La mayor parte del metanol se eliminó bajo presión reducida y el pH de la solución se ajustó a alrededor de 7 mediante adición lenta con agitación de carbonato sódico ac. El sólido precipitado se filtró y se lavó con agua para obtener 37 g (57%) del producto deseado de color marrón oscuro tras el secado, pf 140-143ºC.

^{1}HRNM (CD_{3}DO) \delta 7,33 (s, 1H), EM (CI/NH_{3}) m/e 179 (M + Na)^{+}, 158 (M + H)^{+}.

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E. Preparación de 2-acetilamino-5-tiocianatotiazol

A una mezcla de 2-amino-5-tiocianatotiazol (15,7 g, 0,1 mol) y piridina (12 g, 0,15 mol) en cloruro de metileno (100 ml) se añadió anhídrido acético (1,2 g, 0,12 mol) a ta: La mezcla se agitó a ta durante 6 h. La mezcla se concentró hasta sequedad y se añadió al residuo MeOH (50 ml). Los precipitados se recogieron y se lavaron con agua. El sólido se secó y recristalizó a partir de MeOH para dar 2-acetilamino-5-tiocianatotiazol (15,2 g, 76%) en forma de sólido, pf 212ºC.

^{1}HRNM (CD_{3}DO) \delta 7,79 (s, 1H), 2,23 (s, 3H).

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F. Preparación de éster 1,1-dimetiletílico de ácido [[2-(acetilamino)-5-tiazolil]tio]acético

A una mezcla de 2-acetamino-5-tiocianatotiazol (5,97 g, 30 mol) en MeOH (360 ml) en argón se añadió ditiotreitol (9,26 g, 6 mmol) a ta. La mezcla se agitó a ta durante 2 h y se concentró para dar un producto sólido reducido. Este producto sólido se disolvió en DMF (30 ml) y a esta solución se añadieron bromoacetato de terc-butilo (5,85 g, 30 mmol) y carbonato potásico (5,0 g, 36 mmol). La mezcla se agitó a ta durante 2 h y a la mezcla se añadió agua (200 ml). Los precipitados se recogieron, lavaron con agua y se secaron. El sólido se disolvió en cloruro de metileno (100 ml) y MeOH (10 ml) y se filtró a través de una lámina de gel de sílice. La solución filtrada se concentró para dar el producto deseado (7,5 g, 87%) en forma de un sólido, pf 162-163ºC.

^{1}HRNM (CDCl_{3}) \delta 12,2 (s, 1H), 7,48 (s, 1H), 3,37 (s, 2H), 2,32 (s, 3H), 1,45 (s, 9H); EM m/e 289 (M + H)^{+}, 287 (M - H)^{-}.

HPLC (Columna: YMC S3 ODS 4,6 x 150 mm; caudal: 2,5 ml/min; sistema de disolvente: 0-100% B en 8 min. Disolvente A: 10% de MEOH - 90% de agua - 0,2% de H_{3}PO_{4}; Disolvente B: 90% de MEOH - 10% de agua - 0,2% de H_{3}PO_{4}; UV: 220 nm): tiempo de retención 6,44 min.

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G. Preparación de ácido [[2-(acetilamino)-5-tiazolil]tio]acético

Una solución de éster 1,1-dimetiletílico de ácido [[2-(acetilamino)-5-tiazolil]tio]acético (4,32 g, 15 mmol) en cloruro de metileno (30 ml) y ácido tricloroacético (20 ml) se agitó a ta durante la noche y se concentró al vacío. Al residuo se añadió éter etílico (50 ml). El sólido precipitado se recogió, se lavó con éter etílico y se secó para dar el producto deseado (3,38 g, 97%) en forma de un sólido, pf 210ºC.

^{1}HRNM (CDC_{3}DO) \delta 7,48 (s, 1H), 3,47 (s, 2H), 2,20 (s, 3H), ppm; EM m/e 231 (M - H)^{-}. HPLC (Columna: Zorbax de rápida resolución C-18; caudal: 2,5 ml/min; sistema de disolvente: 0-100% B en 8 min. Disolvente A: 10% de MEOH - 90% de agua - 0,2% de H_{3}PO_{4}; Disolvente B: 90% de MEOH - 10% de agua - 0,2% de H_{3}PO_{4}; UV: 254 nm): tiempo de retención 4,32 min.

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H. Preparación de [[2-(acetilamino)-5-tiazolil]tio]-N-(2-oxobutil)acetamida

Una mezcla de ácido [[2-(acetilamino)-5-tiazolil]tio]acético (9,0 g, 38,8 mmol), HOBT (5,94 g, 38,8 mmol) y sal clorhidrato de etildimetilaminopropilcarbodiimida (11,16 g, 58,2 mmol) en DMF (50 ml) se agitó a 0ºC durante 0,5 h. A esta mezcla se añadió 1-amino-2-butanona clorhidrato (5,27 g, 42,7 mmol) seguido de trietilamina (15 ml, 107,5 mmol). La mezcla se agitó a 0ºC durante 0,5 h y a ta durante 1 h. A la mezcla se añadió agua (200 ml) y el producto se extrajo con cloruro de metileno con 10% de MeOH (5x 100 ml). El extracto de cloruro de metileno se extrajo sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró. El residuo se trituró con agua y el producto sólido precipitado se recogió mediante filtración. Se secó para obtener el producto deseado (10,5 g, 90%), pf 195-196ºC.

^{1}HRNM (CDCl_{3}) \delta 7,53 (s, 1H), 4,14 (s, 2H), 3,46 (s, 2H), 2,50 (c, J= 7,6 Hz, 2H), 2,25 (s, 3H), 1,12 (t, J= 7,6 Hz, 3H); EM m/e 302 (M + H)^{+}. HPLC (Columna: Zorbax de rápida resolución C-18; caudal: 2,5 ml/min; sistema de disolvente: 0-100% B en 8 min. Disolvente A: 10% de MEOH - 90% de agua - 0,2% de H_{3}PO_{4}; Disolvente B: 90% de MEOH - 10% de agua - 0,2% de H_{3}PO_{4}; UV: 254 nm): tiempo de retención 4,36 min.

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I. Preparación de N-[5-[[5-etil-2-oxazolil)metil]tio]-2-tiazolil]acetamida

A una solución de [[2-(acetilamino)-5-tiazolil]tio]-N-(2-oxobutil)acetamida (10,5 g, 34,8 mmol) en anhídrido acético (100 ml) se añadió ácido sulfúrico conc. (10 ml). La mezcla se agitó a 55-60ºC durante 2 h y a la mezcla se añadió acetato sódico (15 g, 0,18 mol). La mezcla se concentró al vacío. Al residuo se añadió agua fría (100 ml). El sólido precipitado se recogió, se lavó con agua y se secó. Se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida (SiO2; cloruro de metileno:MeOH/100:5) para dar N-[5-[[5-etil-2-oxazolil)metil]tio]-2-tiazolil]acetamida (4,2 g, 43%) en forma de un sólido, pf 147-148ºC.

^{1}HRNM (CDCl_{3}) \delta 12,47 (s, 1H), 7,29 (s, 1H), 6,61 (s, 1H), 3,91 (s, 2H), 2,64 (c, J= 7,6 Hz, 2H), 2,25 (s, 3H), 1,21 (t, J= 7,6 Hz, 3H); EM m/e 284 (M + H)^{+};

HPLC (Columna: Zorbax de rápida resolución C-18; caudal: 2,5 ml/min; sistema de disolvente: 0-100% B en 8 min. Disolvente A: 10% de MEOH - 90% de agua - 0,2% de H_{3}PO_{4}; Disolvente B: 90% de MEOH - 10% de agua - 0,2% de H_{3}PO_{4}; UV: 254 nm): tiempo de retención 6,50 min.

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Ejemplo 2 N-[5-[[5-etil-2-oxazolil)metil]tio]-2-tiazolil]benzamida

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A. Preparación de 2-amino-5-[[(5-etil-2-oxazolil)metil]tio]-tiazol

Una solución de N-[5-[[5-etil-2-oxazolil)metil]tio]-2-tiazolil]acetamida (1,3 g. 4,6 mmol) en ácido clorhídrico 1N (15 ml) se agitó a 80-90ºC durante 3 h. Se enfrió hasta la ta y el pH de la solución se ajustó a 7 con carbonato sódico. El producto se extrajo con cloruro de metileno (3x10 ml). El extracto combinado se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró. El residuo se trituró con éter etílico y se recogió el sólido precipitado para dar -amino-5-[[(5-etil-2-oxazolil)metil]tio]-tiazol (610 mg, 55%) en forma de un sólido, pf 119-120ºC.

^{1}HRNM (CDCl_{3}) \delta 6,93 (s, 1H), 6,61 (s, 1H), 5,41 (s, 2H), 3,82 (s, 3H), 2,62 (c, J= 7,6 Hz, 2H), 1,18 (t, J= 7,6 Hz, 3H); EM m/e 242 (M + H)^{+};

HPLC (Columna: Zorbax de rápida resolución C-18; caudal: 2,5 ml/min; sistema de disolvente: 0-100% B en 8 min. Disolvente A: 10% de MEOH - 90% de agua - 0,2% de H_{3}PO_{4}; Disolvente B: 90% de MEOH - 10% de agua - 0,2% de H_{3}PO_{4}; UV: 254 nm): tiempo de retención 3,96 min.

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B. Preparación de N-[5-[[5-etil-2-oxazolil)metil]tio]-2-tiazolil]benzamida

Una mezcla de 2-amino-5-[[(5-etil-2-oxazolil)metil]tio]-tiazol (48,2 mg, 0,2 mmol), cloruro de benzoílo (24,4 mg, 0,21 mmol) y trietilamina (35 mg, 0,35 mmol) en cloruro de metileno (0,5 ml) se agitó a ta durante 10 min. La solución orgánica se lavó con agua y se concentró. El residuo se purificó mediante columna ultra rápida (SiO_{2}; hexanos: acetato de etilo/2:1) para dar N-[5-[[5-etil-2-oxazolil)metil]tio]-2-tiazolil]benzamida (41 mg, 59%) en forma de un sólido, pf 122-123ºC.

^{1}HRNM (CDCl_{3}) \delta 12,65 (s, 1H), 7,96 (m, 2H), 7,61 (m, 1H), 7,49 (m, 2H), 6,88 (s, 1H); 6,56 (s, 1H), 3,93 (s, 2H), 2,61 (c, J= 7,6 Hz, 2H), 1,20 (t, J= 7,6 Hz, 3H); EM m/e 356 (M + H)^{+};

HPLC (Columna: Zorbax de rápida resolución C-18; caudal: 2,5 ml/min; sistema de disolvente: 0-100% B en 8 min. Disolvente A: 10% de MEOH - 90% de agua - 0,2% de H_{3}PO_{4}; Disolvente B: 90% de MeOH - 10% de agua - 0,2% de H_{3}PO_{4}; UV: 254 nm): tiempo de retención 7,94 min.

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Ejemplo 3 N-[5-[[5-etil-2-oxazolil)metil]tio]-2-tiazolil]benzosulfonamida

11

Una mezcla de 2-amino-5-[[(5-etil-2-oxazolil)metil]tio]-tiazol (24,1 mg, 0,1 mmol), cloruro de bencenosulfonilo (19,4 mg, 0,11 mmol) y trietilamina (22 mg, 0,21 mmol) en cloruro de metileno (0,3 ml) se agitó a ta durante 10 h. El producto de la mezcla de reacción se purificó mediante HPLC preparativa (columna: YMC pack ODSA S3 20x100 mm; método: gradiente de 0% B a 100% B en 20 min y caudal de 20 ml/min: UV: 254 nm; disolvente A: 10% de MeOH - 90% de agua - 0,1% de TFA; Disolvente B: 90% de MeOH - 10% de agua - 0,1% de TFA) para obtener N-[5-[[5-etil-2-oxazolil)metil]tio]-2-tiazolil]benzosulfonamida (2,5 mg) en forma de un sólido tras secar mediante liofilización.

^{1}HRNM (CDCl_{3}) \delta 7,88 (d, J= 8,0 Hz, 1H), (s, 2H), 7,49 (m, 3H), 6,89 (s, 1H), 6,64 (s, 1H), 4,01 (s, 2H); 2,68 (c, J= 7,4 Hz, 2H), 1,27 (t, J= 7,4 Hz, 3H); EM m/e 382 (M + H)^{+};

HPLC (Columna: Zorbax de rápida resolución C-18; caudal: 2,5 ml/min; sistema de disolvente: 0-100% B en 8 min. Disolvente A: 10% de MEOH - 90% de agua - 0,2% de H_{3}PO_{4}; Disolvente B: 90% de MeOH - 10% de agua - 0,2% de H_{3}PO_{4}; UV: 254 nm): tiempo de retención 6,84 min.

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Ejemplo 4 N-[5-[[(4,5-dimetil-2-oxazolil)metil]tio]-2-tiazolil]acetamida

12

A. Preparación de 2-(bromometil)-4,5-dimetiloxazol

Una mezcla de 2,4,5-trimetiloxazol (0,50 ml, 4,3 mmol), N-bromosuccinimida (0,77 g, 4,3 mmol) y peróxido de benzoílo (0,21 g, 0,86 mmol) en tetracloruro de carbono (4 ml) se calentó a 76ºC en atmósfera de nitrógeno durante 3 horas. Tras enfriar hasta la ta, el sólido se eliminó mediante filtración. La solución filtrada se lavó con NaHCO_{3} acuoso saturado (20 ml) y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida (SiO_{2}, hexanos:acetato de etilo/4:1) para dar 2-(bromometil)4,5-dimetiloxazol (64 mg) en forma de un aceite amarillo.

^{1}HRNM (CDCl_{3}) \delta 4,4 (s, 2H), 2,25 (s, 3H), 2,05 (s, 3H).

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B. Preparación de N-[5-[[(4,5-dimetil-2-oxazolil)metil]tio]-2-tiazolil]acetamida

N-[5-(acetiltio)-2-tiazolil]acetamida (0,050 g, 0,23 mmol) se disolvió en THF seco (10 ml) y a la mezcla se añadió terc-butóxido potásico (solución 1,0 M en THF, 0,25 ml, 0,25 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 15 min y a esta mezcla se añadió 2-(bromometil)-4,5-dimetiloxazol (0,064 g, 0,34 mmol). La mezcla de reacción se agitó a ta durante 3 h y a la mezcla se añadió NaHCO_{3} acuoso saturado (20 ml). Se separó la capa orgánica y la capa acuosa se extrajo con diclorometano (3 x 20ml). Se combinaron las capas orgánicas combinadas. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida (SiO_{2}; metanol:diclorometano/1:20) para dar N-[5-[[(4,5-dimetil-2-oxazolil)metil]tio]-2-tiazolil]acetamida (15 mg, 23%) en forma de un sólido amarillo.

^{1}HRNM (CDCl_{3}) \delta 11,78 (s, 1H), 7,38 (s, 1H), 3,90 (s, 2H), 2,30 (s, 3H), 2,22 (s, 3H), 2,05 (s, 3H); EM m/e 284 (M + H)^{+};

HPLC (Columna: Zorbax de rápida resolución C-18; caudal: 2,5 ml/min; sistema de disolvente: 0-100% B en 8 min. Disolvente A: 10% de CH_{3}OH/90% de H_{2}O/0,2% de H_{3}PO_{4}; Disolvente B: 90% de CH_{3}OH/10% de H_{2}O/0,2% de H_{3}PO_{4}; UV: 254 nm): tiempo de retención 5,87 min.

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Ejemplo 5 N-[5-[[(5-t-butil-2-oxazolil)metil]tio]-2-tiazolil]acetamida

13

A. Preparación de diazometano

A una mezcla de 15 ml de 40% de solución de KOH acuoso y 50 ml de éter dietílico a 0ºC se añadieron 5 g (68 mmol) de N-metil-N'-nitro-N-nitrosoguanidina en porciones con agitación. La mezcla resultante se agitó a 0ºC durante 0.5 h. La fase orgánica se decantó en un matraz seco y se secó en esferas de KOH sólidas para dar 50 ml de solución de diazometano (aprox. 0,5M, mediante titulación con ácido acético).

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B. Preparación de 1-diazo-3,3-dimetil-2-butanona

A la solución de diazometano a 0ºC se añadió una solución de 1,23 ml (1,21 g, 10 mml. Aldrich) de cloruro de trimetilacetilo en 1 ml de éter dietílico, gota a gota y con agitación. La mezcla resultante se guardó a 0 ºC durante 16 h. La solución se agitó con argón para eliminar el exceso de diazometano y se eliminó el éter dietílico se eliminó a presión reducida para dar 1,33 g (10 mmol, 100%) de 1-diazo-3,3-dimetil-2-butanona bruta en forma de un líquido amarillo.

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C. Preparación de 2-clorometil-5-t-butiloxazol

A una solución de 2 ml (2,3 g, 16 mmol) de eterato de trifluoruro de boro en 20 ml de cloroacetonitrilo a 0ºC se añadió una solución de 1,33 g (10 mmol) de 1-diazo-3,3-dimetil-2-butanona en 5 ml de cloroacetonitrilo, gota a gota. La solución resultante se agitó a 0ºC durante 0,5 h. La mezcla de reacción se añadió a una solución de bicarbonato sódico acuoso para neutralizar el ácido y el producto se extrajo tres veces con diclorometano. Los extractos combinados se secaron (sulfato sódico), se concentraron y se purificaron mediante cromatografía de columna ultrarrápida (Merck silica, 25 x 200 mm, diclorometano) para dar 1,1 h de 2-(clorometil)-5-t-butiloxazol en forma de un líquido amarillo (6,4 mmol, 64% en total del cloruro ácido).

^{1}HRNM (CDCl_{3}) \delta 1,30 (s, 9H), 4,58 (s, 2H), 6,68 (s, 1H); EM 174 (M + H)^{+}; TLC: R_{f} (gel de sílice, diclorometano)= 0,33;

HPLC: t_{R}(YMC S-3 ODS 4,6X 50 mm de rápida resolución; 2,5 ml/min; gradiente 0-100% B en 8 min. Disolvente A: 10% de CH_{3}OH/90% de H_{2}O/0,2% de H_{3}PO_{4}; Disolvente B: 90% de CH_{3}OH/10% de H_{2}O/0,2% de H_{3}PO_{4}; UV: 254 nm)= 6,5 min.

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D. Preparación de N-[5-[[(5-t-butil-2-oxazolil)metil]tio]-2-tiazolil]acetamida

A una solución de 50 mg (0,23 mmol, Applied Chemical Laboratory) de N-[5-(acetiltio)-2-tiazolil]acetamida en 10 ml de THF se añadieron 0,25 ml de solución de terc-butóxido potásico (solución 1M, 0,25 mmol) a ta en argón. La suspensión resultante se agitó durante 15 min a ta, después se añadió una solución de 59 mg de 2-(clorometil)-5-t-butiloxazol (0,34 mmol) en 1 ml de THF. La mezcla resultante se agitó a ta durante 16 h, se concentró a presión reducida y se purificó mediante cromatografía de columna ultrarrápida (gel de sílice, 25 x 200 mm, 1:1 EtOAc/hexanos, seguido por 100% de EtOAc) para dar 44 mg (0,14 mmol, 61%) de N-[5-[[(5-t-butil-2-oxazolil)metil]tio]-2-tiazolil]acetamida en forma de un sólido blanco.

^{1}HRNM (CDCl_{3}) \delta 1,27 (s, 9H), 2,27 (s, 3H), 3,95 (s, 2H), 6,59 (s, 1H), 7,31 (s, 1H), 11,03 (s ancho, 1H); EM 312 (M + H)^{+};

TCL: R_{f} (gel de sílice, acetato de etilo)= 0,53, UV;

HPLC: tiempo de retención (YMC S-3 ODS 4,6x50 mm de rápida resolución; 2,5 ml/min; gradiente 0-100% B en 8 min. Disolvente A: 10% de CH_{3}OH/90% de H_{2}O/0,2% de H_{3}PO_{4}; Disolvente B: 90% de CH_{3}OH/10% de H_{2}O/0,2% de H_{3}PO_{4}; UV: 254 nm): 6,8 min.

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Ejemplo 6 N-[5-[[(5-t-butil-2-oxazolil)metil]tio]-2-tiazolil]trimetilacetamida

14

A. Preparación de N-[(5-tiocianato)-2-tiazolil]trifluoroacetamida (XVIII)

A una mezcla de 5-tiocianato-2-aminotiazol (30 mmol) y 2,6-lutidina (35 mmol) en tetrahidrofurano (25 ml) y diclorometano (50 ml) a -78ºC en argón se añadió lentamente trifluoroacetinanhídrido (33 mmol). Tras la adición, se dejó calentar la mezcla hasta la ta y se agitó durante la noche. La mezcla se diluyó con diclorometano (100 ml) y la solución orgánica se lavó con ácido cítrico acuoso al 5%, seguido por salmuera, se secó sobre sulfato magnésico y se pasó a través de una lámina de gel de sílice. El producto con el eluente se concentró para dar 5,3 g de sólido de color marrón claro.

^{1}HRNM (CDCl_{3}) \delta 12,4 (a, 1H), 7,83 (s, 1H).

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B. Preparación de 4-hidroximetil-3-metoxifeniloxi Resina de Merrifield (XVI)

A la suspensión de hidruro sódico (11,7 g, 60% en aceite mineral, 293 mmol) en dimetilformamida (30 ml) a 0ºC en argón se añadió lentamente una solución de 4-hidroxi-3-metoxibenzildehído (44,5 g, 292,5 mmol) en dimetilformamida (100 ml). A la mezcla resultante se añadieron resina Merrifield (1% DVB, de Advanced Chemtech, de carga 1,24 mmol/g, 50 g, 62 mmol) y una cantidad catalítica de yoduro de tetra-n-butilamonio y se calentó a 65ºC durante un día. La resina se filtró, lavó con agua (2x), 50% de dimetilformamida en agua (3x), dimetilformamida (2x) y metanol (5x) y se secó al vacío. La resina seca (15 g) se trató con borohidruro sódico (3,4 g, 90 mmol) en tetrahidrofurano (50 ml) y etanol (50 ml) durante la noche. La resina se filtró, lavó con 50% de dimetilformamida en agua (3x), dimetilformamida (2x), metanol (2x) y diclorometano (5x) y se secó al vacío.

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C. Preparación de 4-clorometil-3-metoxifeniloxi Resina Merrifield (XVII)

A una solución de trifenilfosfina (17 g, 65 mmol) en diclorometano (200 ml) a 0ºC se añadió lentamente trifosgeno (9,2 g, 31 mmol) en porciones durante un periodo de 30 minutos. Tras la adición, la mezcla de reacción se agitó a 0ºC durante 10 minutos. El disolvente se eliminó al vacío y el residuo se redisolvió en diclorometano (200 ml). A esta mezcla se añadió 4-hidroximetil-3-metoxifeniloxi resina Merrifield (12 g). La mezcla resultante se agitó durante 4 h. La resina se lavó con diclorometano seco (6x) y se secó al vacío.

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D. Preparación de 4-[N-[(5-tiocianato)-2-tiazoliltrifluoroacetamido]metil]-3-metoxifeniloxi Resina Merrifield (XIX)

Una mezcla de 4-clorometil-3-metoxifeniloxi resina Merrifield (15 g), [N-[(5-tiocianato)-2-tiazolil]trifluoroacetamida (14 g, 55,3 mmol) y diisopropilmetilamina (7,8 ml, 45 mmol) en dimetilformamida (50 ml) y diclorometano (100 ml) se agitó durante la noche. La resina se lavó con dimetilformamida (2x), metanol (2x), diclorometano (4x) y se secó al vacío.

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E. Preparación de 4-[[N-[(5-mercapto)-2-tiazolil]trifluoroacetamido]metil]-3-metoxifeniloxi Resina Merrifield (XX)

Una mezcla de 4-[N-[(5-tiocianato)-2-tiazoliltrifluoroacetamido]metil]-3-metoxifeniloxi Resina Merrifield (XIX, 18,5 g) y ditiotreitol (12 g, 78 mmol) en tetrahidrofurano (100 ml) y metanol (100 ml) se agitó durante la noche. La resina se lavó con dimetillformamida (2x), metanol (2x), diclorometano (4x) y se secó al vacío y se almacenó en argón a -20ºC.

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F. Preparación de 4-N-[5[[[5-t-butil-2-oxazolil)-metil]tio]-2-tiazolil]trifluoroacetamido]metil]-3-metoxifeniloxi Resina Merrifield (XXI)

Una corriente de argón se burbujeó a través de una mezcla de 4-[[N-[(5-mercapto)-2-tiazolil]trifluoroacetamido]metil]-3-metoxifeniloxi resina Merrifield (XX, 500 mg), haluro (2,0 mmol) y 1,8-diazabiciclo[5,4,0]undec-7-ene (DBU, 1,5 mmol) en dimetilformamida (3 ml) durante 5 min y la mezcla se calentó a 80ºC durante 2 h. La resina se lavó con dimetillformamida (2x), metanol (2x), diclorometano (4x) y se secó al vacío.

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G. Preparación de 4-N-[5-[[(5-t-butil-2-oxazolil)-metil]tio]-2-tiazolil]metil-3-metoxifeniloxi Resina Merrifield (XXII)

Una mezcla de 4-N-[5[[[5-t-butil-2-oxazolil)-metil]tio]-2-tiazolil]trifluoroacetamido]metil]-3-metoxifeniloxi resina Merrifield (XXI, 500 mg) y borohidruro sódico (4 mmol) en tetrahidrofurano (2 ml) y etanol (2 ml) se agitó durante la noche. La resina se lavó con dimetillformamida al 50% en agua (2x), dimetillformamida (2x), metanol (2x), diclorometano (4x) y se secó al vacío.

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H. Preparación de 4-N-[5[[[5-t-butil-2-oxazolil)-metil]tio]-2-tiazolil]trimetilcetamido]metil]-3-metoxifeniloxi Resina Merrifield (XXIII)

Una mezcla de 4-N-[5-[[(5-t-butil-2-oxazolil)-metil]tio]-2-tiazolil]metil-3-metoxifeniloxi resina Merrifield (XXII, 100 mg), diisopropiletilamina (1,2 mmol) y cloruro de trimetilacetilo (1 mmol) en diclorometano (2 ml) en un tubo de polipropileno provisto de una frita de polietileno y una llave de paso luer se agitó durante la noche. y borohidruro sódico (4 mmol) en tetrahidrofurano (2 ml) y etanol (2 ml) se agitó durante la noche. La resina se lavó con dimetilformamida (2x), metanol (2x), diclorometano (4x) y se usó en la siguiente etapa sin secar.

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I. Preparación de N-[5-[[(5-t-butil-2-oxazolil)metil]tio]-2-tiazolil]trimetilacetamida

El compuesto 4-N-[5[[[5-t-butil-2-oxazolil)-metil]tio]-2-tiazolil]trimetilcetamido]metil]-3-metoxifeniloxi resina Merrifield (XXIII) se trató con ácido trifluoroacético al 60% en diclorometano (2 ml) en un tubo de polipropileno provisto de una frita de polietileno y una llave de paso luer durante 4 horas. La solución se decantó en un tubo y la resina se lavó con diclorometano. La solución orgánica combinada se concentró en Speed Vac. El residuo se purificó mediante HPLC preparativa para dar 11,3 mg del producto deseado.

EM m/e 354 (M + H)^{+}

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Ejemplo 7 N-[5-[[(4-etil-2-oxazolil)metil]tio]-2-tiazolil]acetamida

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15

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A. Preparación de 2-(2-cloroacetamido)-1-butanol

A una mezcla de 2-amino-1-butanol (5,0 ml, 53 mmol) y trietilamina (15,0 ml, 111 mmol) en diclorometano (20 ml) a -70ºC se añadió cloruro de cloroacetilo (4,6 ml, 58 mml) gota a gota. La mezcla de reacción se agitó a -70ºC durante 15 min y después se dejó calentar hasta ta. Se diluyó con EtAc (50 ml) y la reacción se inactivó mediante adición de agua (50 ml). Se separó la capa orgánica y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 30 ml). Las capas orgánicas combinadas se concentraron para dar 2-(2-cloroacetamido)-1-butanol (8,6 g, 98%) en forma de un sólido marrón.

^{1}HRNM (CDCl_{3}) \delta 6,75 (bs, 1H), 4,10 (s, 1H), 4,08 (dd, 1H), 3,90 (m, 1H), 3,68 (n, 2H), 2,98 (bs, 1H), 1,60 (m, 2H), 0,97 (t, 3H).

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B. Preparación de 2-(2-cloroacetamido)-1-butiraldehído

A una solución de cloruro de oxalilo (14,5 ml, 29,0 mmol) en diclorometano (30 ml) a -78ºC se añadió gota a gota DMSO (2,75 ml, 38,8 mmol) en 5 min. Tras agitar durante 10 min a -78ºC, se añadió gota a gota una solución de 2-(2-cloroacetamida)-1-butanol (4,0 g, 24 mmol) en 20 ml de diclorometano en 15 min. La mezcla de reacción se agitó durante 40 min a -78ºC y se añadió gota a gota trietilamina (9,4 ml, 68 mmol) en 5 min y la mezcla de reacción se dejó calentar hasta la temperatura ambiente y se agitó durante 2 h. El sólido se eliminó mediante filtración y se lavó con EtOAc. La fase orgánica se lavó con HCl 1N (2x, 100 ml), NaHCO_{3} acuoso saturado (1 x 10 ml) y se concentró para dar 2-(2-cloroacetamida)-1-butiraldehído (3,7 g, 95%) en forma de aceite marrón.

^{1}HRNM (CDCl_{3}) \delta 9,60 (s, 1H), 4,52 (c, 1H), 4,12 (s, 2H), 2,05 (m, 1H), 1,80 (m, 1H), 0,97 (m, 1H), 0,97 (t, 3H).

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C. Preparación de 2-clorometil-4-etiloxazol

A una solución de 2-(2-cloroacetamido)-1-butiraldehído (3,7 g, 23 mmol) en tolueno (10 ml) se añadió POCl_{3} (6,3 ml, 68 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 90ºC durante 1 h en nitrógeno. Tras enfriar la mezcla de reacción hasta la temperatura ambiente, se vertió en agua helada (10 ml) y el pH de la solución se ajustó a 7 con NaOH 5N. Se separó la capa de tolueno y la capa acuosa se lavó con diclorometano (3x 20 ml). La solución orgánica combinada se concentró y destiló para dar 2-clorometil-4-etiloxazol (1,1 g, 31%) en forma de un líquido incoloro.

^{1}HRNM (CDCl_{3}) \delta 7,30 (s, 1H), 4,22 (s, 2H), 2,50 (c, 2H), 1,22 (t, 3H).

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D. Preparación de N-[5-[[4-etil-2-oxazolil)metil]tio]2-tiazolil]acetamida

A una solución de 2-acetilamino-5-tiazoliltiol (0,010 g, 0,050 mmol) en THF seco (5 ml) se añadió terc-butóxido potásico (solución 1,0 M en THF, 0,060 ml, 0,060 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 15 min y se añadió 2-clorometil-4-etiloxazol (0,015 g, 0,10 mmol). Tras 3 h, a la mezcla se añadió una solución de NaHCO_{3} acuosa saturada. Se separó la capa orgánica y la capa acuosa se lavó con diclorometano (3 x 10 ml). Las capas orgánicas combinadas se concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida (SiO_{2}; metanol:diclorometano/1:20) para dar N-[5-[[(4-etil-2-oxazolil)metil]tio]-2-tiazolil]acetamida (5 mg, 36%) en forma de un sólido blanco.

^{1}HRNM (CDCl_{3}) \delta 11,25 (s, 1H), 7,34 (s, 1H), 7,31 (s, 1H), 3,95 (s, 2H), 2,50 (c, 2H), 2,27 (s, 3H), 1,19 (t, 3H); EM m/e 284 (M+H)^{+}; HPLC (Columna: Zorbax de rápida resolución C-18; caudal: 2,5 ml/min; sistema de disolvente: 0-100% B en 8 min. Disolvente A: 10% de CH_{3}OH/90% de H_{2}O/0,2% de H_{3}PO_{4}; Disolvente B: 90% de CH_{3}OH/10% de H_{2}O/0,2% de H_{3}PO_{4}; UV: 254 nm): tiempo de retención 6,14 min.

Usando los procedimientos descritos en la presente memoria descriptiva o mediante modificación de los procedimientos descritos en la presente memoria descriptiva conocidos para un experto convencional en la técnica, se han preparado los siguientes compuestos adicionales y se han revelado en la Tabla 1:

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(Tabla pasa a página siguiente)

TABLA 1

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Ejemplo 636 Preparación de N-[5-[[(5-t-butil-2-oxazolil)metil]tio]-2-tiazolil]-N'-ciano-N''-(2,6-difluorofenil)guanidina

90

Una solución de 100 mg de N-[5-[[(5-t-butil-2-oxazolil)metil]tio]-2-aminotiazol y 68 mg de isotiocianato de 2,6-difluorofenilo se calentó a 65ºC durante 16 horas en argón. La solución se evaporó hasta sequedad y el residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida para dar 91 mg de la tiourea intermedia.

A una solución de 30 mg de N-[5-[[(5-t-butil-2-oxazolil)metil]tio]-2-tiazolil]-N''-(2,6-difluorofenil)tiourea, 52 mg de clorhidrato de etil-3(3-dimetilamino)propil carbodiimida y 48 \mul de diisopropiletilamina en 0,5 ml de cloruro de metileno se añadió una solución de 29 mg de cianamida en 0,1 ml de tetrahidrofurano. Tras agiotar durante 1 hora, el disolvente se eliminó y el material bruto se purificó mediante HPLC para dar 8 mg del compuesto del Ejemplo 636.

EM: (M+H)^{+} 449^{+}

^{1}H RMN (400 MHz, CDCl_{3}): d 1,27 (9H, s), 4,19 (2H,s), 6,69 (1H, s), 7,03 (2H, m), 7,35 (1H, m), 8,74 (1H, s).

Ejemplo 637 Preparación de N-[5-[[(5-isopropil-2-oxazolil)fluorometil]tio]-2-tiazolil]-acetamida

91

A una mezcla agitada de acetato de 2-acetamido-5-tiazol tiol (141 mg) en 3 ml de THF seco en argón se añadió t-BuOK 1N en THF (0,72 ml). Esta mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 25 min y se añadió una solución de 5-isopropil-(2-(clorofluorometil))oxazol (116 mg) en 2 ml de THF seco. La mezcla de reacción se agitó a 60ºC durante 18 h, se diluyó con 150 ml de EtOAc y se lavó con solución de NH_{4}Cl saturado (2x25 ml), solución de NaHCO_{3} saturada (1x25 ml) y salmuera (1x25 ml). Se secó la capa orgánica (MgSO_{4}), se filtró y se concentró al vacío para dar el compuesto del Ejemplo 637.

EM: (M+H)^{+} 316

HPLC Tiempo de retención 3,52 min. (Columna; YMC ODS S05 columna de 4,6 X 50 mm, 0% a 100% gradiente B en 4 min: Disolvente A: 10% de CH_{3}OH/90% DE H_{2}O/0,2% de H_{3}PO_{4}; Disolvente B: 90% de CH_{3}OH/10% de H_{2}O/0,2% de H_{3}PO_{4}; UV: 220 nM).

Claims

1. Un compuesto de la fórmula

92

y sus sales farmacéuticamente aceptables, en la que:

R_{1} y R_{2} son de forma independiente hidrógeno, flúor o alquilo;

R_{3} es 93

donde Y es oxígeno, azufre o NR_{9}

COO-alquilo, COO-cicloalquilo, COO-arilo, COO-alquil-cicloalquilo, COO-alquil-arilo, COO-heteroarilo, COO-alquil-heteroarilo, COO-heterocicloalquilo, COO-alquil-heterocicloalquilo; o

SO_{2}-cicloalquilo, SO_{2}-arilo, SO_{2}-alquil-cicloalquilo, SO_{2}-alquil-arilo, SO_{2}-heteroarilo, SO_{2}-alquil-heteroarilo,
SO_{2}-heterocicloalquilo, SO_{2}-alquilo-heterocicloalquilo; o C(NCN)NH-alquilo, C(NCN)NH-cicloalquilo, C(NCN)NH-arilo, C(NCN)NH-alquil-cicloalquilo, C(NCN)NH-alquil-arilo, C(NCN)NH-heteroarilo, C(NCN)NH-alquil-heteroarilo, C(NCN)NH-heterocicloalquilo, C(NCN)NH-alquil-heterocicloalquilo; o C(NNO_{2})NH-alquilo, C(NNO_{2})NH-cicloalquilo, C(NNO_{2})NH-arilo, C(NNO_{2})NH-alquil-cicloalquilo, C(NNO_{2})NH-alquil-arilo, C(NNO_{2})NH-heteroarilo, C(NNO_{2})NH-alquil-heteroarilo, C(NNO_{2})NH-heterocicloalquilo, C(NNO_{2})NH-alquil-heterocicloalquilo; o

C(NH)NH-alquilo, C(NH)NH-cicloalquilo, C(NH)NH-arilo, C(NH)NH-alquil-cicloalquilo, C(NH)NH-alquil-arilo, C(NH)NH-heteroarilo, C(NH)NH-alquil-heteroarilo, C(NH)NH-heterocicloalquilo, C(NH)NH-alquil-heterociclo-
alquilo; o C(NH)NHCO-alquilo, C(NH)NHCO-cicloalquilo, C(NH)NHCO-arilo, C(NH)NHCO-alquil-cicloalquilo, C(NH)NHCO-alquil-arilo, C(NH)NHCO-heteroarilo, C(NH)NHCO-alquil-heteroarilo, C(NH)NHCO-heterocicloalquilo, C(NH)NHCO-alquil-heterocicloalquilo; o

R_{5} es hidrógeno o alquilo;

R_{7} y R_{8} son, de forma independiente, hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, cicloalquilo, arilo, arilo sustituido, cicloalquilalquilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilo sustituido, heteroarilalquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo;

R_{9} es hidrógeno, alquilo, cicloalquilo, arilo, alquilcicloalquilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, heterocicloalquilo o heterocicloalquilalquilo;

m es un número entero de 0 a 2; y

n es un número entero de 1 a 3, y en el que:

El término "alquilo" se refiere a un radical derivado de alcano monovalente (hidrocarburo) que contiene de 1 a 12 átomos de carbono opcionalmente sustituidos con uno o más grupos seleccionados de halógeno, haloalquilo, alcoxi, alquiltio, hidroxi, carboxi, alquiloxicarbonilo, alquilcarboniloxi, amino, carbamoílo, urea y tiol;

El término "cicloalquilo" se refiere a una especie de alquilo que posee de 3 a 15 átomos de carbono opcionalmente sustituidos con uno más grupos seleccionados de halógeno, alquilo, alcoxi, hidroxi, amino, nitro, ciano, tiol y alquiltio.

El término "arilo" se refiere a anillos aromáticos monocíclicos, bicíclicos o policíclicos que poseen de 6 a 22 átomos de carbono opcionalmente sustituidos con uno o más grupos seleccionados de halógeno, alquilo, alcoxi, hidroxi, carboxi, carbamoílo, alquiloxicarbonilo, nitro, trifluorometilo, amino, cicloalquilo, ciano, alquilS(O)_{m} (m= 0. 1, 2) y tiol;

El término "heteroarilo" se refiere a un anillo aromático monocíclico que posee 5 ó 6 átomos y a un anillo aromático bicíclico que posee de 8 a 10 átomos de anillo, que contienen al menos un heteroátomo y que están opcionalmente sustituidos con uno o más grupos seleccionados de halógeno, alquilo, alcoxi, hidroxi, carboxi, carbamoílo, alquiloxicarbonilo, nitro, trifluorometilo, amino, cicloalquilo, ciano, alquilS(O)_{m} (m= 0. 1, 2) y tiol;

El término "heterocicloalquilo" se refiere a un grupo cicloalquilo en el que al menos uno de los átomos de carbono del anillo está reemplazado por un heteroátomo seleccionado de O, S y N.

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2. Los compuestos según se menciona en la reivindicación 1, en los que

R_{1} y R_{2} son de forma independiente hidrógeno, flúor o alquilo;

R_{3} es 94

donde Y es oxígeno;

R_{5} es hidrógeno;

m es un número entero de 0 a 2; y

n es un número entero de 1 a 3, y en el que los términos "alquilo", "cicloalquilo", "arilo", "heteroarilo" y "heterocicloalquilo" son como se define en la reivindicación 1.

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3. Los compuestos según se menciona en la reivindicación 1, en los que

R_{1} y R_{2} son de forma independiente hidrógeno, flúor o alquilo;

R_{3} es 95

donde Y es azufre.

R_{5} es hidrógeno;

m es un número entero de 0 a 2; y

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4. Los compuestos según se menciona en la reivindicación 1, en los que

R_{1} y R_{2} son de forma independiente hidrógeno, flúor o alquilo;

R_{3} es 96

donde Y es NR_{9};

R_{5} es hidrógeno;

R_{6} es hidrógeno, alquilo, cicloalquilo, arilo, cicloalquilarilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, heterocicloalquilo o heterocicloalquilalquilo;

R_{7} y R_{8} son, de forma independiente, hidrógeno, alquilo sustituido, cicloalquilo, arilo, arilo sustituido, cicloalquilalquilo, arilalquilamino, heteroarilo, heteroarilo sustituido, heteroarilalquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo;

m es un número entero de 0 a 2; y

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5. Los compuestos según se menciona en la reivindicación 1, en los que

R_{1} y R_{2} son de forma independiente hidrógeno, flúor o alquilo;

R_{3} es 97

donde Y es oxígeno;

R_{4} es CO-alquilo, CO-alquil-arilo, CO-cicloalquilo, CO-alquil-heteroarilo, CO-alquil-heterocicloalquilo, CO-alquil-heterocicloalquilo, CONH-alquilo, CONH-alquil-arilo, CONH-cicloalquilo o CONH-alquilo-heterocicloalquilo;

R_{5} es hidrógeno;

R_{7} y R_{8} son hidrógeno;

m es el número entero 0; y

n es el número entero 1, y en el que los términos "alquilo", "cicloalquilo", "arilo", "heteroarilo" y "heterocicloalquilo" son como se define en la reivindicación 1.

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6. Los compuestos según se menciona en la reivindicación 1, en los que

R_{1} y R_{2} son de forma independiente hidrógeno, flúor o alquilo;

R_{3} es 98

donde Y es oxígeno;

R_{4} es CO-alquilo, CO-alquil-arilo, CO-alquil-heteroarilo, CO-cicloalquilo, CO-alquil-heterocicloalquilo, CO-alquil-heteroarilo, CONH-alquilo, CONH-alquil-arilo, CONH-cicloalquilo o CONH-alquilo-heterocicloalquilo;

R_{5} es hidrógeno;

R_{7} y R_{8} son alquilo;

m es el número entero 0; y

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7. Los compuestos según se menciona en la reivindicación 1, en los que

R_{1} y R_{2} son de forma independiente hidrógeno, flúor o alquilo;

R_{3} es 99

donde Y es oxígeno;

R_{4} es CO-alquilo, CO-alquil-arilo, CO-alquil-heteroalquilo, CO-cicloalquilo, CO-alquil-heterocicloalquilo, CO-alquil-heteroarilo, CONH-alquilo, CONH-alquil-arilo, CONH-cicloalquilo o CONH-alquilo-heterocicloalquilo;

R_{5} es hidrógeno;

R_{7} es hidrógeno;

R_{8} es alquilo;

m es el número entero 0; y

\newpage

8. Los compuestos según se menciona en la reivindicación 1, en los que

R_{1} y R_{2} son de forma independiente hidrógeno, flúor o alquilo;

R_{3} es 100

donde Y es oxígeno;

R_{5} es hidrógeno;

R_{7} es alquilo;

R_{8} es hidrógeno;

m es el número entero 0; y

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9. Los compuestos según se menciona en la reivindicación 1, en los que

R_{1} y R_{2} son de forma independiente hidrógeno, flúor o alquilo;

R_{3} es 101

donde Y es azufre;

R_{5} es hidrógeno;

R_{7} es hidrógeno;

R_{8} es alquilo;

m es el número entero 0; y

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10. Los compuestos según se menciona en la reivindicación 1, en los que

R_{1} y R_{2} son de forma independiente hidrógeno, flúor o alquilo;

R_{3} es 102

donde Y es azufre;

R_{5} es hidrógeno;

R_{7} es alquilo;

R_{8} es hidrógeno;

m es el número entero 0; y

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11. Los compuestos según se menciona en la reivindicación 1, en los que

R_{1} y R_{2} son de forma independiente hidrógeno, flúor o alquilo;

R_{3} es 103

donde Y es NR_{9};

R_{5} es hidrógeno;

R_{7} es hidrógeno;

R_{8} es alquilo;

R_{9} es hidrógeno, alquilo, cicloalquilo, arilo, alquil-cicloalquilo, alquil-arilo, heteroarilo, alquil-heteroarilo, heterocicloalquilo o alquil-heterocicloalquilo;

m es el número entero 0; y

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12. Los compuestos según se menciona en la reivindicación 1, en los que

R_{1} y R_{2} son de forma independiente hidrógeno, flúor o alquilo;

R_{3} es 104

donde Y es NR_{9};

R_{5} es hidrógeno;

R_{7} es alquilo;

R_{8} es hidrógeno;

R_{9} es alquilo;

m es el número entero 0; y

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13. Los compuestos según se menciona en la reivindicación 1, en los que

R_{1} y R_{2} son de forma independiente hidrógeno, flúor o alquilo;

R_{3} es 105

donde Y es NR_{9};

R_{5} es hidrógeno;

R_{7} es alquilo;

R_{8} es hidrógeno;

R_{9} es hidrógeno;

m es el número entero 0; y

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14. El compuesto según se menciona en la reivindicación 1, que es

N-[5-[[(5-etil-2-oxazolil)metil]tio]-2-tiazolil]acetamida;

N-[5-[[(5-etil-2-oxazolil)metil]tio]-2-tiazolil]benzamida;

N-[5-[[(5-etil-2-oxazolil)metil]tio]-2-tiazolil]bencenosulfonamida;

N-[5-[[(4,5-dimetil-2-oxazolil)metil]tio]-2-tiazolil]acetamida;

N-[5-[[(5-t-butil-2-oxazolil)metil]tio]-2-tiazolil]acetamida;

N-[5-[[(5-t-butil-2-oxazolil)metil]tio]-2-tiazolil]trimetilacetamida;

N-[5-[[(4-etil-2-oxazolil)metil]tio]-2-tiazolil]acetamida; o una de sus sales farmacéuticamente aceptables.

15. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la reivindicación 1 y un transportador farmacéuticamente aceptable.

16. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la reivindicación 1, en combinación con un transportador farmacéuticamente aceptable y un agente anticanceroso formulado en forma de dosis fija.

17. Una composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 15, que comprende un compuesto de la reivindicación 1 en combinación con un transportador farmacéuticamente aceptable para la administración secuencial por separado a un paciente sometido o que será sometido a tratamiento con un agente anticanceroso o a un paciente sometido o que será sometido a un tratamiento anticanceroso.

18. La composición farmacéutica de la reivindicación 17, en la que dicha combinación que comprende dicho compuesto de la reivindicación 1 y dicho transportador farmacéuticamente aceptable, se administra antes de la administración de dicho tratamiento anticanceroso o agente anticanceroso.

19. La composición farmacéutica de la reivindicación 17, en la que dicha combinación que comprende dicho compuesto de la reivindicación 1 y dicho transportador farmacéuticamente aceptable, se administra después de la administración de dicho tratamiento anticanceroso o agente anticanceroso.

20. Uso de un compuesto de la reivindicación 1 para la preparación de una composición farmacéutica para inhibir las proteína quinasas de una especie de mamífero.

21. Uso de acuerdo con la reivindicación 20, en el que las proteínas quinasas son quinasas dependientes de ciclina.

22. Uso de acuerdo con la reivindicación 21, en el que la quinasa dependiente de ciclina es cdc2 (cdk1), cdk2, cdk3, cdk4, cdk5, cdk6, cdk7 o cdk8.

23. Uso de una composición farmacéutica de las reivindicaciones 15, 16 ó 17 para la fabricación de un medicamento para tratar enfermedades proliferativas en una especie de mamífero.

24. Uso de una composición farmacéutica de las reivindicaciones 15, 16 ó 17 para la fabricación de un medicamento para tratar el cáncer en una especie de mamífero.

25. Uso de una composición farmacéutica de la reivindicación 15 para la fabricación de un medicamento para tratar la inflamación, la enfermedad intestinal inflamatoria o el rechazo a trasplantes en una especie de mamífero.

26. Uso de una composición farmacéutica de la reivindicación 15 para tratar la artritis en una especie de mamífero.

27. Uso de una composición farmacéutica de la reivindicación 15 para tratar la infección por VIH o para tratar y prevenir el desarrollo del SIDA en una especie de mamífero.

28. Uso de una composición farmacéutica de la reivindicación 15 para tratar infecciones víricas en una especie de mamífero.

29. Uso de una composición farmacéutica de la reivindicación 15 para tratar infecciones fúngicas en una especie de mamífero.

30. Uso de una composición farmacéutica de la reivindicación 15, 16 ó 17 para la fabricación de un medicamento para prevenir el desarrollo de cáncer o la recidiva de un tumor en una especie de mamífero.

31. Uso de una composición farmacéutica de la reivindicación 15 para tratar enfermedades neurodegenerativas en una especie de mamífero.